特許 6283371 ２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸の小型化結晶、その微粉化物及びこれらを含有する固形製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6283371

(24)【登録日】2018年2月2日

(45)【発行日】2018年2月21日

(54)【発明の名称】２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸の小型化結晶、その微粉化物及びこれらを含有する固形製剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 277/56 20060101AFI20180208BHJP

   A61K 9/14 20060101ALN20180208BHJP

   A61K 9/20 20060101ALN20180208BHJP

   A61K 31/426 20060101ALN20180208BHJP

   A61P 19/06 20060101ALN20180208BHJP

【ＦＩ】

   C07D277/56CSP

   !A61K9/14

   !A61K9/20

   !A61K31/426

   !A61P19/06

【請求項の数】1

【全頁数】53

(21)【出願番号】特願2015-544611(P2015-544611)

(86)(22)【出願日】2014年10月22日

(86)【国際出願番号】IB2014002195

(87)【国際公開番号】WO2015063561

(87)【国際公開日】20150507

【審査請求日】2015年7月17日

【審判番号】不服2017-6508(P2017-6508/J1)

【審判請求日】2017年5月8日

(31)【優先権主張番号】特願2013-219602(P2013-219602)

(32)【優先日】2013年10月22日

(33)【優先権主張国】JP

【早期審理対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】000228590

【氏名又は名称】日本ケミファ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100106909

【弁理士】

【氏名又は名称】棚井 澄雄

(74)【代理人】

【識別番号】100173048

【弁理士】

【氏名又は名称】小椋 正幸

(74)【代理人】

【識別番号】100147267

【弁理士】

【氏名又は名称】大槻 真紀子

(74)【代理人】

【識別番号】100124822

【弁理士】

【氏名又は名称】千草 新一

(74)【代理人】

【識別番号】100146259

【弁理士】

【氏名又は名称】橋本 諭志

(72)【発明者】

【氏名】天童 温

(72)【発明者】

【氏名】望月 信孝

(72)【発明者】

【氏名】小松 博

(72)【発明者】

【氏名】野村 豊

(72)【発明者】

【氏名】畑田 康

(72)【発明者】

【氏名】熊谷 英治

(72)【発明者】

【氏名】柳本 剛

【合議体】

【審判長】 中田 とし子

【審判官】 瀬下 浩一

【審判官】 冨永 保

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第０３／０８２２７９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第９９／６５８８５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ ＆ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１２年，Ｖｏｌ． ５１， Ｎｏ． ３９，ｐｐ． １２８１４−１２８２０

【文献】 川上 亘作監修，難水溶性薬物の物性評価と製剤設計の新展開，２０１０年 １月２９日，第１刷，第１４１〜１５０頁

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

C07D277/56

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

長径の長さが１００μｍ以下の結晶のみからなり、かつＡ晶、Ｂ晶、Ｄ晶、Ｇ晶及び非晶質体の含有量が７重量％以下である２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸（フェブキソスタット）のＣ晶の微粉化物の製造方法であって、アセトニトリルからフェブキソスタットのＣ晶を晶出させる工程、及びジェットミル粉砕により長径の長さが１００μｍ以下となるように微粉化する工程を含む製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、高い安定性、溶出性、嵩密度、タップ密度及びハンドリング性を有する２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸の微粉化結晶、並びに、これを有効成分として含む、痛風、高尿酸血症及び慢性腎臓病の予防及び又は治療のために用いる安定性及び溶出性に優れた固形製剤に関する。

【背景技術】

【0002】

下記式で示される２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸（一般名：フェブキソスタット：ｆｅｂｕｘｏｓｔａｔ、国際公開ＷＯ９２／９２７９）は非プリン型のキサンチンオキシダーゼ阻害薬であり、日本国においては、帝人ファーマ株式会社から「フェブリク（登録商標）錠」の商品名で２０１１年より痛風及び高尿酸血症の治療薬として錠剤の形態で製造及び販売されて臨床使用されている（以下、２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸を「フェブキソスタット」という。以下、フェブリク（登録商標）錠を「Ｆ錠」ともいう。）。

【化1】

【0003】

フェブキソスタットに関しては結晶多形の存在が知られており、特許第３５４７７０７号公報にはＡ晶、Ｂ晶およびＣ晶、メタノール和物であるＤ晶、水和物であるＧ晶（ＢＨ晶ともいう）として特定される５種類の結晶物質、並びに非晶質体（後述の特許第４０８４３０９号公報においてはＥ晶ともいう）が開示されている。それらのうち、長期保存による晶形維持の観点からＡ晶、Ｃ晶、及びＧ晶（ＢＨ晶）が有用であることが上記刊行物に具体的に示されており（同公報の実施例１０）、工業的優位性からはＡ晶が好ましいとされている（同公報の第９頁３〜５行）。この理由から、Ａ晶についてはいくつかの選択的製造方法が報告されている（特開２００３−２６１５４８号公報、特開２０１１−２０９５０号公報、及び国際公開ＷＯ２００７／１４８７８７）。

【0004】

フェブキソスタットの製剤化に関しては、特許第４０８４３０９号公報の参考例１に、これらの結晶形の中で、Ａ晶、Ｃ晶及びＧ晶が最も物理的安定性に優れることが記載されており、また、同公報の実施例１及び実施例３において、フェブキソスタットのＡ晶を湿式造粒して得られる錠剤は、ばらつきが少なく均一な溶出プロファイルを示すことを確認して、平均粒子径が１２．９μｍ以上２６．２μｍ以下のＡ晶、乳糖及び部分アルファー化デンプンから選ばれる賦形剤、結合剤であるヒドロキシプロピルセルロース、及び崩壊剤を含有する錠剤を提案している（特許第４０８４３０９号公報の請求項１）。一方で、同公報の比較例１及び比較例６において、フェブキソスタットのＣ晶を同様に湿式造粒して得られる錠剤は、溶出が遅いうえにばらつきが大きく不均一な溶出プロファイルを示すことが記載されている（特許第４０８４３０９号公報の第３頁１〜４行を参照）。
なお、同公報において錠剤の製造に用いているＡ晶は、衝撃式粉砕機であるサンプルミル又はインパクトミルを用いた粉砕物である（同特許公報の表７の粒子２及び３、並びに表３）。

【0005】

一方、Ｃ晶については、長期保存による晶形維持の観点から有用であることが具体的に示されており（特許第３５４７７０７号公報の実施例１０）、さらに同公報の図１のＩ領域での通常の操作範囲では安定な結晶であり、通常の保管条件（７５％相対湿度、２５℃など）では長期に保持され、かつ化学的にも安定であると説明されている（同公報第８頁４１〜４３行）。このＣ晶は特許第３５４７７０７号公報に示された図４の粉末Ｘ線回折図及び同公報に開示された２θのピーク位置（６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°、１６．７４°、１７．４０°、１８．００°、１８．７０°、２０．１６°、２０．６２°、２１．９０°、２３．５０°、２４．７８°、２５．１８°、３４．０８°、３６．７２°、及び３８．０４°）、同公報の図１５の赤外吸収スペクトル、固体^１５Ｎ−ＮＭＲのピーク位置（２１０ｐｐｍ及び２８２ｐｐｍの鋭いシングルピーク）及び固体^１３Ｃ−ＮＭＲの２０ｐｐｍの位置に現れるほぼ等価なトリプレットピーク（特許第４０８４３０９号公報の参考例３）から当業者が容易に特定可能な物質である。

【0006】

このＣ晶は、特許第３５４７７０７号公報の一般的説明によれば、溶媒媒介転移を用いて、通常はメタノール／水の混合溶液に溶解度以上の任意の結晶を懸濁させ、これに少量のＣ晶を添加して加熱攪拌することにより製造できるとされている（特許第３５４７７０７号公報第７頁３９行〜第８頁１行）。そして、同公報の８頁３７行〜３９行に記載されているとおり「この晶形への溶媒媒介転移は、条件にもよるが通常数日を要し、このままではＣ晶を工業的に再現性よく製造することは難しい」ため、同公報の実施例２には種晶としてＣ晶を添加する方法が示されている。しかしながら、種晶として用いるＣ晶をどのような手段で入手したのかは同公報には全く教示ないし示唆がない。従って、Ｃ晶は上記公報に物質としては明確に特定されているものの、種晶として用いるＣ晶が入手できない状態にあっては当業者といえども同明細書に開示された方法のみからはＣ晶を製造することは不可能である。

【0007】

一方、非特許文献１〜８には、Ａ晶、Ｂ晶、Ｃ晶、Ｄ晶およびＢＨ晶（特許３５４７７０７号のＧ晶と同じ）の中でＣ晶が最も安定であることが繰り返し述べられており（例えば非特許文献４の１１５６頁右欄最下行）、Ａ晶、Ｄ晶、ＢＨ晶のいずれからもＣ晶に転移しうることが記載されている。また、非特許文献１〜８においては、溶媒媒介転移によって、Ｃ晶の種晶を加えずにＣ晶を作製する方法の詳細な条件が記載されており、メタノールと水の体積比が７：３の溶媒中で絶対温度３２３度（４９．８５℃）に設定することによって、２〜３日以内にＡ晶からＣ晶が得られることが記載されている（例えば、非特許文献１の段落１．３及び２．３、ならびに、非特許文献２の段落２．３および６８２頁左欄７行〜２５行）。したがって、非特許文献１〜８に記載の方法に基づけば、２〜３日以内に、溶媒媒介転移によって、Ｃ晶の種晶を用いずにＣ晶を作製することが可能である。

【0008】

さらに、国際公開ＷＯ２０１２／１３１５９０（特許文献７）においては、メタノール又はエタノールなどの低級アルコール存在下に、２−（３−ホルミル−４−イソブトキシフェニル）−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸エチルエステルに炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸ナトリウムなどの炭酸アルカリ金属を作用させることによりエステル結合を加水分解して２−（３−ホルミル−４−イソブトキシフェニル）−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸を製造し、続いてギ酸の中で、ギ酸ナトリウム及びヒドロキシルアミン塩酸塩を作用させて得た反応生成物に６０℃以上の水を加えた後に室温まで冷却することにより、工業的に再現性良くフェブキソスタットのＣ晶を得ることのできる方法を開示しているので、国際公開ＷＯ２０１２／１３１５９０の記載に基づけば、Ｃ晶の種晶を用いずにＣ晶を作製することが可能である（国際公開ＷＯ２０１２／１３１５９０のＣｌａｉｍ ４及びＥｘａｍｐｌｅ ４を参照）。

【0009】

また、Ｃ晶の種晶は、北京連本医薬化学技術有限公司（Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｉａｎｂｅｎ Ｐｈａｒｍ−ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｔｅｃｈ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）から購入可能であり、非特許文献１〜８の著者である北村光孝氏、特許文献１の出願人である帝人株式会社、特許文献７の出願人であるサンド社および本願の出願人である日本ケミファ株式会社において保有していることからも明らかなとおり、本願の出願時点においては容易に入手可能となっている。

【0010】

また、各結晶形の日本薬局方の崩壊試験用の第２液への溶解速度を比較するとＥ晶（つまり非晶質）＞Ａ晶＞Ｂ晶＞Ｄ晶＞Ｇ晶＞Ｃ晶の順であり、溶解速度の点でＣ晶が最も劣ること、及びＣ晶の溶解速度（０．０６９４ｍｇ／ｃｍ^２／ｍｉｎ）はＡ晶（０．１４３４ｍｇ／ｃｍ^２／ｍｉｎ）の１／２以下であることが報告されている（特許第４０８４３０９号公報の参考例２）。

【0011】

ところで、特許第４０８４３０９号公報には、ＷＯ１９９９／０６５８８５号公報（特許３５４７７０７号）の方法によってＣ晶を作製した旨が記載されており、ＷＯ１９９９／０６５８８５号公報（特許３５４７７０７号）の方法は、メタノールと水の混合溶媒中から晶出してＣ晶を作製する方法のみが開示されていることから、特許第４０８４３０９号ではメタノールと水の混合溶媒中から晶出したＣ晶を用いていると考えられる。また、特許第４０８４３０９号の出願日以前には、メタノールと水の混合溶媒中から晶出する方法以外のＣ晶の製造方法は知られていない。

【0012】

特許第４０８４３０９号公報の比較例１によれば、同公報で用いているメタノールと水の混合溶媒中から晶出して作製したＣ晶を用いて湿式造粒法によって製造した錠剤を固体^１３Ｃ−ＮＭＲで測定すると２０ｐｐｍの位置に鈍いピークを示したことから非晶質体（Ｅ晶）を含有しているとの考察がなされている。この製剤を４０℃／７５％ＲＨで保管すると非晶質体（Ｅ晶）の一部がＧ晶に転移すると述べられるとともに（同公報の比較例５）、ｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎｅ緩衝液に対する溶出率が低下し、溶出率のばらつきが若干上昇したことも報告されている（同公報の表４）。このように、特許第４０８４３０９号公報で用いているメタノールと水の混合溶媒中から晶出させて作製したＣ晶を用いて錠剤を製造した場合には、非晶質体化及び非晶質体化を介した結晶形の転移が懸念される。

【0013】

なお、ＷＯ１９９２／００９２７９号公報（特許２７２５８８６号）の実施例７６にも、フェブキソスタットをエタノール中で再結晶させる方法が記載されているが、得られた結晶の結晶形は記載されていない。

【0014】

なお、フェブキソスタットの結晶多形及び多形の相互転移などについては北村らによる一連の詳細な報告がある（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｊａｐａｎ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１１，ｐｐ．１１１６−１１２２，２００２（非特許文献１）；Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ，Ｖｏｌ．２３６，ｐｐ．６７６−６８６，２００２（非特許文献２）；Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ，Ｖｏｌ．２５７，ｐｐ．１７７−１８４，２００３（非特許文献３）；Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｖｏｌ．４，Ｎｏ．６，ｐｐ．１１５３−１１５９，２００４（非特許文献４）；Ｐｕｒｅ Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．７７，Ｎｏ．３，ｐｐ．５８１−５９１，２００５（非特許文献５）；Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｖｏｌ．６，Ｎｏ．５，ｐｐ．１２１４−１２１８，２００６（非特許文献６）；Ｃｒｙｓｔ．Ｅｎｇ．Ｃｏｍｍ．，Ｖｏｌ．１１，ｐｐ．９４９−９６４，２００９（非特許文献７）；及び「多形現象のメカニズムと多形制御」北村光孝，株式会社アイピーシー，２０１０年，第６章，第８章，第９章（非特許文献８））。Ｃ晶についてはＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｊａｐａｎ，３５，Ｎｏ．１１，ｐｐ．１１１６−１１２２，２００２（非特許文献１）の「２．３．Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ」の項やＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ，Ｖｏｌ．２３６，ｐｐ．６７６−６８６，２００２（非特許文献２）に結晶化の具体的方法が開示されており、Ｃ晶が安定形であり、Ａ晶が準安定形であるとの教示もある。

【0015】

ただし、これらの文献に記載されたフェブキソスタットのＣ晶は、非特許文献８の第９章に記載されているもの以外は、すべて、メタノールと水の混合溶媒から晶出させたか、他の結晶形から転移させて得られたものである。これらの方法で得られたフェブキソスタットのＣ晶の嵩密度、タップ密度、安息角、ハンドリング性については報告されていない。

【0016】

なお、一般に、非晶質体は結晶に比べて不安定であり、他の結晶形への転移も生じやすいことから、非晶質体の生成は避けるべきであるので、非晶質体の標品として用いることのできる実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットが求められている。この点、特許３５４７７０７号の実施例９には、「Ｄ晶を８０℃、２ｍｍＨｇにて４時間加熱減圧乾燥」することによるフェブキソスタットの非晶質体の製造方法が記載されているが、「非晶質体の標品として用いることのできる実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタット」であることは記載されていない。したがって、実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットの具体的な製造方法が求められている。さらに、一般に非晶質体の含有割合を定量することは困難であり、フェブキソスタット原薬中の非晶質体の割合の定量方法は知られていない。

【0017】

また、特許第３５４７７０７号公報においてＧ晶と呼ばれる結晶形は、上記の非特許文献においてはＢＨ晶と呼ばれており、ＢＨ晶からメタノールと水の混合溶媒中での結晶転移により調製したＣ晶は長軸の長さが２００μｍを超え、数μｍの横幅を有する柱状晶であることが明らかにされている（非特許文献２のＦｉｇ．６（ｃ））。また、特許第４０８４３０９号公報には、Ｃ晶は安定形であるものの（同公報の表１）、原薬の溶解速度および錠剤からの溶出速度が遅いことが記載されている（同公報の表２および表４）。

【0018】

上記の他、フェブキソスタットのＣ晶をアセトニトリルから晶出させる方法は、非特許文献８の第９章及び非特許文献１０に記載されてはいるものの、同文献には、得られたＣ晶の大きさ、形状、嵩密度、安息角、他の結晶形や非晶質の混入の有無、並びに、原薬の溶解特性もしくは製剤からの溶出特性は記載されていない。さらに、非特許文献８の第９章の図９−５には、アセトニトリル溶媒中から２５℃でＣ晶を析出させたことが記載されている。同文献には、同文献に記載されたＣ晶の示差熱分析スペクトルは、「融解と考えられる大きな吸熱ピークの前に、吸熱ピークと小さな発熱ピークが観察される」ものであり、「吸熱ピークと小さな発熱ピーク」は「まずＣ型が融解し、その融液中からＡ型が析出し、さらに温度が上昇することによりＡ型が融解する」ことによる「融液媒介転移」と考えられると考察されているように、非特許文献８に記載されたＣ晶は依然として結晶転移しうる不安定なものであると考えられる。

【0019】

さらに、フェブキソスタットのＣ晶の粉砕方法、粉砕条件及び粉砕物の性質を検討した先行技術は知られていない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0020】

【特許文献1】国際公開ＷＯ９２／９２７９

【特許文献2】特許第３５４７７０７号公報

【特許文献3】特開２００３−２６１５４８号公報

【特許文献4】特開２０１１−２０９５０号公報

【特許文献5】国際公開ＷＯ２００７／１４８７８７

【特許文献6】特許第４０８４３０９号公報

【特許文献7】国際公開ＷＯ２０１２／１３１５９０

【非特許文献】

【0021】

【非特許文献1】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｊａｐａｎ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１１，ｐｐ．１１１６−１１２２，２００２

【非特許文献2】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ，Ｖｏｌ．２３６，ｐｐ．６７６−６８６，２００２

【非特許文献3】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ，Ｖｏｌ．２５７，ｐｐ．１７７−１８４，２００３

【非特許文献4】Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｖｏｌ．４，Ｎｏ．６，ｐｐ．１１５３−１１５９，２００４

【非特許文献5】Ｐｕｒｅ Ａｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．，Ｖｏｌ．７７，Ｎｏ．３，ｐｐ．５８１−５９１，２００５

【非特許文献6】Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｖｏｌ．６，Ｎｏ．５，ｐｐ．１２１４−１２１８，２００６

【非特許文献7】Ｃｒｙｓｔ．Ｅｎｇ．Ｃｏｍｍ．，Ｖｏｌ．１１，ｐｐ．９４９−９６４，２００９

【非特許文献8】多形現象のメカニズムと多形制御」北村光孝，株式会社アイピーシー，２０１０年，第６章，第８章及び第９章

【非特許文献9】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．２７８，Ｎｏ．３，１８４８−１８５５，２００３

【非特許文献10】Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ ＆ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．５１，Ｉｓｓｕｅ ３９，１２８１４−１２８２０，２０１

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0022】

本発明の課題は、高い安定性と高い溶出性を兼ね備えるフェブキソスタットの結晶を提供することである。具体的には、溶出試験液もしくは崩壊試験液（例えば、日本薬局方の溶出試験第２液もしくは崩壊試験第２液）に対して、より溶解速度の速いフェブキソスタットの結晶の製造方法を提供することが本発明の課題である。

【0023】

また、本発明の課題は、非晶質体を含有しないフェブキソスタットの結晶を提供することである。本発明の課題は、小さい粒子サイズで狭い範囲に分布する良好な粒度分布を有するフェブキソスタットの結晶を提供することである。

【0024】

さらに、本発明の課題は、溶媒残量が医薬品製造上の問題にならない程度に十分低いフェブキソスタットの結晶を提供することである。

【0025】

さらにまた、本発明の課題は、高い嵩密度と高いタップ密度を有するフェブキソスタットの結晶を提供することである。

【0026】

加えて、本発明の課題は、綿状とならず、低い安息角を有し、ハンドリングに優れるフェブキソスタットの結晶を提供することである。

【0027】

そして、本発明の課題は、これらの性質の一又は二以上を有するフェブキソスタットの結晶を有効成分として含む、痛風、高尿酸血症及び慢性腎臓病の予防及び又は治療のための安定性及び溶出性に優れた固形製剤を提供することである。

【0028】

さらに、本発明の課題は、フェブキソスタットの結晶を有効成分として含む痛風及び高尿酸血症の予防及び又は治療のために用いる固形製剤であって、安定性に優れ、溶出速度が十分に速く、かつ溶出特性のばらつきが少ない固形製剤を提供することにある。

【0029】

したがって、本発明の最終的な課題は、高い安定性と高い溶出性を兼ね備えるのみならず、非晶質体を含有せず、小さい粒子サイズで狭い範囲に分布する良好な粒度分布を有し、溶媒残量が医薬品製造上の問題にならない程度に十分低く、高い嵩密度と高いタップ密度を有し、綿状とならず、低い安息角を有し、ハンドリングに優れるという性質の一又は二以上を備えた、フェブキソスタットの小型化結晶及び／又はこれらの微粉化物、並びに、これを有効成分として含む、痛風、高尿酸血症及び慢性腎臓病の予防及び又は治療のための固形製剤であって、安定性に優れ、溶出速度が十分に速く、かつ溶出特性のばらつきが少ない固形製剤を提供することである。

【0030】

本発明の発明者は、上記課題解決のために、最も安定な結晶形であると考えられているものの、原薬としての溶解性及び錠剤からの溶出性が悪く、製造に時間がかかるために再現性良く工業的に生産することには適さないと考えられてきたフェブキソスタットのＣ晶に着目して、これを克服するために種々検討する過程で、メタノールと水の混合溶媒中から晶出する従来の方法で製造した粉砕していないフェブキソスタットのＣ晶（以下、「メタノール水Ｃ晶」ともいう。）は、綿状の粉体であり、医薬品の原薬として用いるには、安息角が測定不能なほど流動性が悪く、嵩密度も測定不能なほど低く、タップ密度も低すぎるという課題を見出した。

【0031】

また、本発明の発明者は、メタノールと水の混合溶媒中から晶出して得たフェブキソスタットのＣ晶の欠点を克服するために、アセトニトリルから晶出させて製造したフェブキソスタットのＣ晶の性質を検討する過程で、アセトニトリルから晶出させて製造したフェブキソスタットのＣ晶（以下、「アセトニトリルＣ晶」ともいう。）は、そのままでは、依然として溶解性が不十分であり、嵩密度が低い水準であり、ハンドリングも不十分であり、アセトニトリルの残留溶媒が高めであるという解決すべき課題を見出した。

【0032】

さらに、アセトニトリルから晶出させて製造したフェブキソスタットのＣ晶の粉砕方法及び粉砕条件を種々検討する過程で、アセトニトリルから晶出させたＣ晶を、乳鉢粉砕、ボールミル粉砕、サンプルミル粉砕すると、非晶質体化または結晶転移が生じるとともに、粒子径が大きくなり、粒度分布も広くなるという問題点を見出した。

【0033】

なお、１９９８年に厚生省から通知された「医薬品の残留溶媒ガイドラインについて」においては、「医薬品中の残留量を規制すべき溶媒」であるクラス２の溶媒に分類されており、その濃度限度値は４１０ｐｐｍとされていることから、アセトニトリルの残留濃度が４１０ｐｐｍよりも十分に低いフェブキソスタットのＣ晶の製造方法を確立することが課題とされている。

【0034】

したがって、本発明の課題は、高い溶出性と高い安定性を有するのみならず、非晶質体を含有せず、小さい粒子サイズで狭い範囲に分布する良好な粒度分布を有し、溶媒残量が医薬品製造上の問題にならない程度に十分低く、高い嵩密度と高いタップ密度を有し、綿状とならず、低い安息角を有し、ハンドリングに優れるという性質の一又は二以上を備えた、フェブキソスタットの結晶、可能であれば、並びに、これを有効成分として含む、痛風、高尿酸血症及び慢性腎臓病の予防及び又は治療のための、安定性に優れ、溶出速度が十分に速く、かつ溶出特性のばらつきが少ない固形製剤を提供することである。

【0035】

また、本発明の課題は、実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタット、及びその製造方法、並びに、フェブキソスタットの非晶質体の定量方法を提供することである。実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットは、溶出性に優れていることが知られており、製剤上の工夫によって、安定な固形製剤の製造に用いることができる可能性がある。また、一般的には非晶質体の生成は望ましくないとされていることから、フェブキソスタットの非晶質体の定量方法を提供することが望まれている。

【課題を解決するための手段】

【0036】

本発明者らは、試行錯誤を重ねて鋭意検討した結果、フェブキソスタットをアセトニトリルから晶出させてＣ晶を製造すること、及び、アセトニトリルから晶出させたＣ晶をジェットミル粉砕することによって、上記の課題を解決できることを見出した。

【0037】

すなわち、本発明者らは、上記の課題を解決するため、まず、北村らの方法（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｊａｐａｎ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１１，ｐｐ．１１１６−１１２２，２００２の「２．３．Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ」の項に記載された結晶化方法）および非特許文献８の第９章に記載された方法に従って工業的に安定にＣ晶を製造できるか否かを検討したところ、意外にも、フェブキソスタットをアセトニトリルから晶出させることにより、加熱攪拌などの操作を行うことなく、極めて再現性よく効率的に純粋なＣ晶を製造できることを見出した（以下、アセトニトリルから晶出させて得た未粉砕のＣ晶を「未粉砕のアセトニトリルＣ晶」という。）。この方法においては、Ｃ晶の種晶を添加しなくてもＣ晶を製造できるが、Ｃ晶の種晶を添加すれば、より再現性良くＣ晶を製造することができる。

【0038】

上記のＣ晶の製造方法はＣ晶を安定に大量生産するための工業的製法として利用可能であり、さらにＣ晶は安定性に優れる結晶形である（特許第３５４７７０７号公報第８頁４１〜４３行）。

【0039】

また、本発明者らは、アセトニトリルから晶出させたＣ晶は、他の結晶形や非晶質体への転移が極めて生じにくい安定な産物であることを見出した。
また、メタノールと水の混合溶媒から晶出させたＣ晶よりも柱状晶の長軸の長さが少なくとも５分の１以下である、より小さな結晶であることを見出した。すなわち、従来知られていたメタノールと水の混合溶媒中から晶出したＣ晶は、長軸の長さが１０００μｍを超える柱状結晶であるのに対して（図１１、図１７〜図１９）、驚くべきことに、アセトニトリルから晶出させたＣ晶は、平均粒径２０．４８３μｍ、２００μｍ以下の粒度分布に収まる柱状結晶からなることがわかった（図１２、図２０〜図２２）。一般に、同じ体積の立体を縮尺Ｎ分の１の小さい立体に分けた場合の表面積がＮ倍になることを考えれば、アセトニトリルから晶出させたＣ晶の長さは、メタノールと水の混合溶媒中から晶出したＣ晶の長さの少なくとも５分の１以下であることから、その比表面積は５倍以上であると考えられるので、単純に考えれば少なくとも５倍以上の溶出速度を有することが期待できる。

【0040】

さらに、アセトニトリルから晶出させたＣ晶は、メタノールと水の混合溶媒から晶出させたＣ晶の３倍以上のタップ密度を有する充填性の改善された結晶であることを見出した。

【0041】

しかしながら、本発明者らは、アセトニトリルから晶出させたＣ晶をもってしても、依然として嵩密度は不十分な水準の充填性であり、また、アセトニトリル残量が医薬品としての許容量の約２分の１の水準であるので余裕が少なく、さらに錠剤化した場合の溶出速度及び平衡化後の溶出率が不十分であるという問題を有していることをも併せて見出した。

【0042】

そこで、本発明者らは、アセトニトリルＣ晶を微粉化する方法を種々検討し、上記の問題を解決できないか試行錯誤を行った。その結果、乳鉢による粉砕、ハンマーミルによる粉砕、サンプルミルによる粉砕などの機械的な衝撃による粉砕方法では、微粉化の程度に限界があり、大きい粒子サイズで広い範囲に分布する望ましくない粒度分布を示すとともに、非晶質化及び／又は結晶転移が生じることを見出した一方で、アセトニトリルＣ晶をジェットミル粉砕することにより、約３．３６５μｍの平均粒子径、及び／又は、長径が約２０μｍ以下の粒度分布に収まる粒状物からなるＣ晶が得られることを見出した（図１３、図２３〜図２５；以下、ジェットミル粉砕したアセトニトリルＣ晶を「アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物」という。）。

【0043】

これは、従来技術のメタノール水Ｃ晶（非特許文献２のＦｉｇ．６（ｃ）；本願の図１７〜図１９）が、長軸の長さが１０００μｍを超える柱状晶であることに比べると、著しく微粉化されたＣ晶である。また、未粉砕のアセトニトリルＣ晶が平均粒径２０．４８３μｍ、２００μｍ以下の粒度分布に収まる柱状結晶であることに比べても、やはり優れて微粉化されたＣ晶である。一般に、同じ体積の立体を縮尺Ｎ分の１の小さい立体に分けた場合の表面積がＮ倍になることを考えれば、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は、その長径が、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の平均６．１分の１以下の長さであるから、その比表面積は６．１倍であると考えられるので、単純に考えれば６．１倍の溶出速度を有することが期待できる。

【0044】

実際、ｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎ緩衝液、ｐＨ６．８の溶出試験第２液、水のいずれに対しても、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は、未粉砕のアセトニトリルＣ晶よりも高い溶出率を示した（図２６）。これらに溶液に対する、未粉砕のアセトニトリルＣ晶、及び、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の溶出率は、市販のＡ晶と同等以上に、ばらつきが少なかった。

【0045】

また、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は実質的に非晶質体を含有せず、他の結晶形や非晶質体への転移が極めて生じにくい安定な物質であることが、粉末Ｘ線回折スペクトル、赤外吸収スペクトル及び示差操作熱量スペクトルによって確認された。

【0046】

さらに、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を有効成分として用いた錠剤は、未粉砕のアセトニトリルＣ晶に比べて、ｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎ緩衝液への溶出速度が顕著に改善し、かつ、溶出特性にばらつきを生じない固形製剤を提供できることを見出した（図２７）。フェブキソスタットのアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を有効成分として用いた錠剤のｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎ緩衝液への溶出速度は、臨床使用されているフェブリク錠（登録商標）よりも早く、かつ、６０分後には約９５％が溶出する優れた固形製剤である。

【0047】

また、本発明の課題は、実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタット、及びその製造方法、並びに、フェブキソスタットの非晶質体の定量方法を提供することである。実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットは、溶出性に優れていることが知られており、製剤上の工夫によって、安定な固形製剤の製造に用いることができる可能性がある。また、一般的には非晶質体の生成は望ましくないとされていることから、フェブキソスタットの非晶質体の定量方法を提供することが望まれている。

【発明の効果】

【0048】

本発明により、高い安定性と高い溶出性を兼ね備えたフェブキソスタットの小型化結晶及びその微粉化物が提供される。本発明により提供されるフェブキソスタットの小型化結晶及びその微粉化物は、非晶質体を含有せず、したがって、非晶質体を経由した他の結晶形態への転移も生じないので長期にわたって安定に保たれる。また、本発明により、溶媒残量が医薬品製造上の問題にならない程度に十分低い、フェブキソスタットの小型化結晶の微粉化物が提供される。また、本発明により、高い嵩密度及び／またはタップ密度を有するフェブキソスタットの小型化結晶及びその微粉化物が提供される。さらに、本発明により、小さい粒子サイズで狭い範囲に分布する良好な粒度分布を有するフェブキソスタットの小型化結晶及びその微粉化物が提供される。さらにまた、本発明により、小さな安息角及び／又は優れたハンドリング性を有するフェブキソスタットの小型化結晶及びその微粉化物が提供される。さらに、驚くべきことに、アセトニトリルから晶出させた小型化Ｃ晶を用いれば、原薬の粉砕工程を経ずに、直接製剤化することもできる。そして、本発明により、前記の優れた性質の一又は二以上を備えたフェブキソスタットの小型化結晶及びその微粉化物を有効成分として含有する、痛風、高尿酸血症、慢性腎臓病の予防及び又は治療のための、安定性及び溶出性に優れ、かつ溶出特性のばらつきが少ない固形製剤を提供することができる。

【0049】

加えて、本発明により、実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタット、及びその製造方法、並びに、フェブキソスタットの非晶質体の定量方法を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0050】

【図1】例２で得たＧ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルである。６．８６°、８．３６°、９．６０°、１１．７６°、１５．９４°の回折角に強いピークを有する、Ｇ晶に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルが得られた（例６）。

【図2】例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルである。６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°、２５．１８°の回折角に強いピークを有する、Ｃ晶に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルが得られた（例６）。

【図3】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルである。６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°、２５．１８°の回折角に強いピークを有する、Ｃ晶に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルが得られた（例６）。

【図4】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の粉末Ｘ線回折スペクトルである。６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°、２５．１８°の回折角に強いピークを有する、Ｃ晶に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルが得られた（例６）。

【図5】例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶の赤外吸収スペクトルである。１７０３ｃｍ^−１付近及び２２４０ｃｍ^−１付近にピークを有する、Ｃ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた（例７）。

【図6】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の赤外吸収スペクトルである。１７０３ｃｍ^−１付近及び２２４０ｃｍ^−１付近にピークを有する、Ｃ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた（例７）。

【図7】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の赤外吸収スペクトルである。１７０３ｃｍ^−１付近及び２２４０ｃｍ^−１付近にピークを有する、Ｃ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた（例７）。

【0051】

【図8】例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶の示差走査熱量測定スペクトルである。約２０１℃〜約２０２℃付近にのみ単一のピークを有する、純粋なＣ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた（例８）。

【図9】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の示差走査熱量測定スペクトルである。約２０１℃〜約２０２℃付近にのみ単一のピークを有する、純粋なＣ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた（例８）。

【図10】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の示差走査熱量測定スペクトルである。約２０１℃〜約２０２℃付近にのみ単一のピークを有する、純粋なＣ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた（例８）。

【図11】例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶の粒度分布を示す図５０よびデータである。未粉砕のメタノール水Ｃ晶のＤ５０は３６．８１９μｍ、Ｄ９０は１３３．３４８μｍであった（例９）。

【図12】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の粒度分布を示す図およびデータである。未粉砕のアセトニトリルＣ晶のＤ５０は２０．４８３μｍ、Ｄ９０は７３．７５５μｍであった（例９）。

【図13】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）の粒度分布を示す図Ｘおよびデータである。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物のＤ５０は３．６３７μｍ、Ｄ９０は７．３４６μｍであり、０．４μｍ〜２０μｍの粒子径範囲にほぼすべての粒子が収まるシャープな粒度分布を示した（例９）。

【図14】例１１で得たアセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（６０分間粉砕物）の粉末Ｘ線回折スペクトルである。非晶質体に特徴的な平坦化した粉末Ｘ線回折スペクトルが得られた。

【0052】

【図15】例１１で得たアセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（６０分間粉砕物）の赤外吸収スペクトルである。１６８８ｃｍ^−１付近及び２２３０ｃｍ^−１付近にピークを有する非晶質体に特徴的な赤外吸収スペクトルが得られた。

【図16】例１１で得たアセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（６０分間粉砕物）の示差走査熱量測定スペクトルである。ボールミル粉砕によって約２０１℃〜約２０２℃の吸熱ピークが消失するとともに、約２１０℃の強い吸熱ピークと約８４．６℃近辺の発熱ピークが現れた。

【図17】例４で得たメタノール水Ｃ晶（未粉砕）のＣ晶の走査電子顕微鏡写真（倍率１００倍）である。写真の下の横棒の全長が１０００μｍ（１ｍｍ）の長さを示し、横棒の目盛が１００μｍの長さを示す。柱径約２０μｍ前後、長さ１０００μｍ以上の柱状晶が観察された（例１４）。

【図18】例４で得たメタノール水Ｃ晶（未粉砕）の走査電子顕微鏡写真（倍率８０倍）である。写真の下の横棒の全長が１０００μｍ（１ｍｍ）の長さを示し、横棒の目盛が１００μｍの長さを示す。柱径約２０μｍ前後、長さ１０００μｍ以上の柱状晶が観察された（例１４）。

【図19】例４で得たメタノール水Ｃ晶（未粉砕）の走査電子顕微鏡写真（倍率８０倍）である。写真の下の横棒の全長が１０００μｍ（１ｍｍ）の長さを示し、横棒の目盛が１００μｍの長さを示す。柱径約２０μｍ前後、長さ１０００μｍ以上の柱状晶が観察された（例１４）。

【0053】

【図20】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の走査電子顕微鏡写真（倍率５００倍）である。写真の下の横棒の全長が２００μｍの長さを示し、横棒の目盛が２０μｍの長さを示す。柱径約６μｍ前後、長さ約２０μｍ前後の柱状晶が観察された（例１４）。

【図21】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の走査電子顕微鏡写真（倍率５００倍）である。写真の下の横棒の全長が２００μｍの長さを示し、横棒の目盛が２０μｍの長さを示す。柱径約６μｍ前後、長さ約２０μｍ前後の柱状晶が観察された（例１４）。

【図22】例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の走査電子顕微鏡写真（倍率５００倍）である。写真の下の横棒の全長が２００μｍの長さを示し、横棒の目盛が２０μｍの長さを示す。柱径約６μｍ前後、長さ約２０μｍ前後の柱状晶が観察された（例１４）。

【図23】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の走査電子顕微鏡写真（倍率４０００倍）である。写真の下の横棒の全長が２０μｍの長さを示し、横棒の目盛が２μｍの長さを示す。もはや柱状晶の形状を維持しておらず、多少は短径と長径の長さの差はあっても、概ね１．５μｍ〜６．５μｍの径を有する粒状物であった（例１４）。

【図24】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の走査電子顕微鏡写真（倍率４０００倍）である。写真の下の横棒の全長が２０μｍの長さを示し、横棒の目盛が２μｍの長さを示す。もはや柱状晶の形状を維持しておらず、多少は短径と長径の長さの差はあっても、概ね１．５μｍ〜６．５μｍの径を有する粒状物であった（例１４）。

【0054】

【図25】例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の走査電子顕微鏡写真（倍率４０００倍）である。写真の下の横棒の全長が２０μｍの長さを示し、横棒の目盛が２μｍの長さを示す。もはや柱状晶の形状を維持しておらず、多少は短径と長径の長さの差はあっても、概ね１．５μｍ〜６．５μｍの径を有する粒状物であった（例１４）。

【図26】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）の各種試験液（溶出試験第１液（ｐＨ１．２）、ｐＨ５．５のＭｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液、溶出試験第２液（ｐＨ６．８）、及び水）への溶解速度を測定し、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の溶解速度、及び市販のＡ晶の溶解速度と対比した図である。いずれの試験液に対しても、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は、Ａ晶と同等かＡ晶以上の溶出速度を示す優れた原薬であることがわかった。（例１７）

【図27】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を有効成分として含有する錠剤の、Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液（ｐＨ５．５）に対する溶出速度を測定し、未粉砕のアセトニトリルＣ晶を含む錠剤、市販のＡ晶を含む錠剤、Ｆ錠、フィルムコーティング剥離したＦ錠の溶出速度と対比した図である。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を含む錠剤は、Ｃ晶であるにもかかわらず、いずれの錠剤よりも速い溶出速度を示し、６０分後の時点では、Ａ晶を含む錠剤、Ｆ錠（登録商標）及びフィルムコーティング剥離したＦ錠（登録商標）のいずれとも同等の約９５％の溶出率を示す優れた錠剤であることが確認できた（例１８）。

【図28】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を、褐色ガラス瓶に入れて蓋をするか、ポリエチレン袋に入れて口を閉じて、長期保存条件下においた場合に、６ヶ月まで不純物の量が増加しないことを確認した図である。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は優れた保存安定性を有することが確認できた（例１９参照）。

【図29】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を、褐色ガラス瓶に入れて蓋をするか、ポリエチレン袋に入れて口を閉じて、加速条件下においた場合に６ヶ月まで不純物の量が増加しないことを確認した図である。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は優れた保存安定性を有することが確認できた（例１９参照）。

【図30】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を、褐色ガラス瓶に入れて蓋をするか、ポリエチレン袋に入れて口を閉じて、長期保存条件下または加速条件下においた場合に３ヶ月の時点で結晶転移が生じていないことを確認した図である。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は優れた保存安定性を有することが確認できた（例１９参照）。

【図31】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて製造した試作錠（素錠およびフィルムコーティング錠）、及びＦ錠を、褐色ガラス瓶に入れて蓋をするか、ポリエチレン袋に入れて口を閉じて、加速条件下においた場合に３ヶ月まで不純物の量が増加しないことを確認した図である。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて製造した試作錠は、Ｆ錠と同等の保存安定性を有することが確認された（例２０参照）。

【図32】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて製造した試作錠（素錠およびフィルムコーティング錠）、及びＦ錠を、褐色ガラス瓶に入れて蓋をするか、ポリエチレン袋に入れて口を閉じて、苛酷条件下においた場合に３ヶ月まで不純物の量が増加しないことを確認した図である。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて製造した試作錠は、Ｆ錠と同等の保存安定性を有することが確認された（例２０参照）。

【図33】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて製造した試作錠（フィルムコーティング錠）及びＦ錠（２０ｍｇ錠）の日本薬局方の溶出試験第１液（ｐＨ１．２）：図３３左上、ＭｃＩｌｖａｉｎ緩衝液（ｐＨ５．０）：図３３右下、溶出試験第２液（ｐＨ６．８）：図３３左下、精製水：図３３右上に対する溶出性を示した図である。いずれの条件においても、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）の試験液への溶出率は、Ｆ錠（２０ｍｇ錠）の溶出率とほぼ同じか若干上回っており、良好な溶出特性を示した。

【図34】未粉砕のメタノール水Ｃ晶の性状を示す外観写真である。未粉砕のメタノール水Ｃ晶（例２３参照）は、ふわふわした綿毛状の嵩高い塊であり、未粉砕のＡ晶よりも大きな１ｍｍを超えるサイズの針状晶が目視で確認できた（例２３参照）。未粉砕のメタノール水Ｃ晶の安息角の測定は困難であることが一目で理解できる。

【図35】未粉砕のアセトニトリルＣ晶の性状を示す外観写真である。未粉砕のアセトニトリルＣ晶（例２３参照）は、やや嵩高い塊を形成する傾向があるが、未粉砕のメタノール水Ｃ晶よりも小さく、かつ、未粉砕のメタノール水Ｃ晶よりも密度の高い塊であった。未粉砕のアセトニトリルＣ晶の塊の周囲を良く目を凝らして見ると、小さな針状晶らしきものが確認できた。

【図36】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の性状を示す外観写真である（例２３参照）。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図３６）も、塊を形成する傾向があった。写真では塊が見えるが、スパーテル等で突つくと軽く崩れるきめ細かい粉である。

【図37】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物をプラスチックスプーンで均した図である。容易に平らになり、きめ細かな微粒子が寄り集まっていることがわかった（例２３参照）。

【図38】アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物の性状を示す外観写真である（例２３参照）。アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（図３８）も、塊を形成する傾向があったが、針状晶らしき構造は見えず、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物と同様にプラスチックスプーンで均すと、容易に平らになり、崩れやすいきめ細かな微粒子が寄り集まっていることがわかった。 アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図３６）とアセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（図３８）は、写真では塊を形成してはいるが、とても崩れやすい塊であり、スパーテルで掬い取った際の粉の動きはコーンスターチ（図３９）や片栗粉（図４０）の粉の動きにとてもよく似ていた。

【図39】コーンスターチの性状を示す外観写真である（例２３参照）。

【図40】片栗粉の性状を示す外観写真である（例２３参照）。

【図41】Ｃ晶原体及びＣ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートである。Ａ晶原体及びＡ晶製剤には存在せず、Ｃ晶原体及びＣ晶製剤には共通して存在するいくつかの特徴的なピークがあることがわかる。

【図42】ラマン分析によってＣ晶を、Ａ晶及び各添加剤と区別できることを示すスペクトル図である。Ｃ晶は約１６９５ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１のピークによって、Ａ晶及び添加物と区別できることが確認できた。

【図43】ラマン分析によってＣ晶を、Ａ晶及び各添加剤と区別できることを示すスペクトル図。Ｃ晶は約１６９５ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１のピークによって、Ａ晶及び各添加剤と区別でき、Ａ晶は、約１４５０ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１、約１３３０ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１のピークによって、Ｃ晶及び各添加剤と区別できることが確認できた。

【図44】Ｃ晶のラマンイメージングの画像である。直径１０μｍ以下のＣ晶の粒子が無数に確認できた。

【図45】Ｃ晶のラマンイメージングの粒子解析の結果である。原点から横軸の２０の目盛まで順に４本の棒があるのは左から順に０〜５μｍのＣ晶の数、５〜１０μｍのＣ晶の数、１０〜１５μｍのＣ晶の数、１５〜２０μｍのＣ晶の数をそれぞれ示す。Ｃ晶の粒子の大半が５μｍ以下であることが確認できた。

【図46】未粉砕のメタノール水Ｃ晶の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真である。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。未粉砕のメタノール水Ｃ晶には１ｍｍを超えるサイズの結晶も多数みられた。

【図47】未粉砕のアセトニトリルＣ晶の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。長軸の長さが約１０μｍ〜２０μｍの針状晶が多数蛍光観察された。

【図48】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。図２３〜図２５の走査電子顕微鏡写真と同様に直径３μｍ前後の粒子が多数寄り集まっていることが確認できた。

【図49】アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。丸みを帯びた様々な大きさの蛍光粒子が観察された。

【図50】プラセボ錠の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。蛍光は観察されなかった。

【図51】未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いて作製した試作錠の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。多数の直径５μｍ前後の蛍光を発する粒子が観察されたことは、未粉砕のアセトニトリルＣ晶が際立って大きい比表面積を有することとも符合する。未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いた固形製剤は、良好な溶出特性を具えていることが理解できる。

【図52】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作錠の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。直径２〜３μｍ前後のほぼ均一な大きさの蛍光を発する粒子が観察された。

【図53】アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作錠の共焦点レーザー蛍光顕微鏡写真。右側の図は同じ視野の微分干渉撮影写真である。直径２〜３μｍ前後のほぼ均一な大きさの蛍光を発する粒子が観察された。

【発明を実施するための形態】

【0055】

フェブキソスタットのＣ晶（本明細書では特許第３５４７７０７号公報の開示に合わせてこの結晶を「Ｃ晶」と呼ぶが、「Ｃ形結晶」などと呼ばれる場合もある）は、例えばＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｊａｐａｎ，Ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．１１，ｐｐ．１１１６−１１２２，２００２の「２．３．Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ」の項に記載された結晶化方法に従って製造することができる。得られた結晶がＣ晶であることは、特許第３５４７７０７号公報に示された図４の粉末Ｘ線回折図から当業者が容易に同定可能である。同定のためには、必要に応じて同公報に開示された２θのピーク位置（Ｃｕを線源とする１．５４オングストロームの波長のＣｕＫα放射線を用いた場合の回折角で６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°、１６．７４°、１７．４０°、１８．００°、１８．７０°、２０．１６°、２０．６２°、２１．９０°、２３．５０°、２４．７８°、２５．１８°、３４．０８°、３６．７２°、及び３８．０４°のうちのいずれか１つ又は２つ以上、好ましくは同公報の図４に示される高強度のピークとして１３．３６°及び／又は１５．５２°のピーク位置）、及び同公報の図９の赤外吸収スペクトルを参照することもできる。

【0056】

フェブキソスタットのＣ晶は、１．５４オングストロームの波長のＣｕＫα放射線（放射光）を用いた粉末Ｘ線回折において、好ましくは６．６２°の回折角にピークを有し１２．８°の回折角にピークを有さない結晶として特定され、より好ましくは６．６２°、１３．３６°及び１５．５２°の回折角にピークを有する結晶として特定され、さらにこのましくは、６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°及び２５．１８°の回折角にピークを有する結晶として特定され、もっとも好ましくは６．６２°、１０．８２°、１３．３６°、１５．５２°、１６．７４°、１７．４０°、１８．００°、１８．７０°、２０．１６°、２０．６２°、２１．９０°、２３．５０°、２４．７８°、２５．１８°、３４．０８°、３６．７２°、及び３８．０４°の回折角にピークを有する結晶として特定される。

【0057】

この場合の回折角の誤差範囲は、粉末Ｘ線回折測定装置が適正に構成されていることを条件として、±０．２°以内である。
また、回折角２θは照射する放射光の波長λによって変わるが、放射光の波長λと回折角２θの間には、ブラッグの式（ｎλ＝２ｄｓｉｎ（θ））の関係が成立する。なお、ここで、ｄは結晶面の間隔、θは結晶面とＸ線が成す角度、λはＸ線の波長、ｎは整数である。したがって、放射光の波長λと回折角２θは一対一に対応し、相互に一意に変換可能である。すなわち、ある放射光の波長λ１を照射したときにＡ１の回折角が観察されるのであれば、異なる波長の波長λ２を照射したときに観察されるべき回折角Ａ２を計算で求めることができる。

【0058】

したがって、本発明において、粉末Ｘ線回折測定装置よって結晶形を同定する手段は、ＣｕＫα放射線を用いて測定した粉末Ｘ線回折による回折角の同定に限定されず、異なる波長の放射光を用いても良い。例えば、サイクロトロン等を用いた場合には、波長０．７５オングストロームの放射光や波長１．０オングストロームの放射光を用いることもできる。その場合、ブラッグの式を用いて変換された回折角を、ブラッグの式を用いて変換された誤差範囲内に同定することによって、結晶形を同定することができる。

【0059】

あるいは、フェブキソスタットのＣ晶は、特許第３５４７７０７号公報の図９の赤外吸収スペクトル、あるいは、非特許文献２のＦｉｇ．３のＦＴ−ＩＲスペクトルから当業者が容易に特定可能な物質である。具体的には、フェブキソスタットのＣ晶は、赤外吸収スペクトルにおいて、１２１９ｃｍ^−１付近、１２６９ｃｍ^−１付近、１２９６ｃｍ^−１付近、１７０３ｃｍ^−１付近、２２４０ｃｍ^−１付近に特徴的なピークを有する。
また、あるいは、フェブキソスタットのＣ晶は、固体^１５Ｎ−ＮＭＲにおいて、２１０ｐｐｍ及び２８２ｐｐｍに鋭いシングルピークを有する結晶形として、または、固体^１３Ｃ−ＮＭＲにおいて、約２０ｐｐｍにほぼ等価なトリプレットピークを有する結晶形として当業者が容易に特定可能な物質である（特許第４０８４３０９号公報の参考例３を参照）。

【0060】

特許第３５４７７０７号公報に開示されるように、フェブキソスタットについては、Ａ晶、Ｂ晶、Ｃ晶、Ｄ晶、及びＧ晶（ＢＨ晶）の存在が知られている。同公報におけるこれらの結晶について開示の全てを参照により本明細書の開示として含める。一般的には、Ａ晶については同公報の図２に示される粉末Ｘ線回折チャートにおける２本の高強度ピークの２θのいずれか又は両方（１２．８０°及び／又は７．１８°）、Ｂ晶については同公報の図３に示される粉末Ｘ線回折チャートにおける２本の高強度ピークの２θのいずれか又は両方（１１．５０°及び／又は１５．７６°）、Ｄ晶については同公報の図５に示される粉末Ｘ線回折チャートにおける４本の高強度ピークの２θのいずれか１つ又は２つ以上（８．３２°、９．６８°、１２．９２°及び１７．３４°）、Ｇ晶については同公報の図６に示される粉末Ｘ線回折チャートにおける５本の高強度ピークの２θのいずれか１つ又は２つ以上（６．８６°、８．３６°、９．６０°、１１．７６°及び／又は１５．９４°）をそれぞれ特徴的ピークとして利用することができる。一般的には、Ａ晶、Ｂ晶、Ｄ晶、及びＧ晶についての上記の高強度ピークのいずれの位置にもピークが検出されず、１３．３６°及び／又は１５．５２°の位置に高強度のピークが検出される場合にはＣ晶として同定することができる。なお、粉末Ｘ線回折チャートにおける２θの測定誤差は一般的には０．２°以下程度である。

【0061】

フェブキソスタットのＣ晶は示差走査熱量測定（ＤＳＣ）で約２０１℃〜約２０２℃に単一の吸熱ピークを示すが、Ｃ晶に非晶質体が含まれている場合には示差走査熱量測定における加熱により非晶質体が他の結晶形、例えばＡ晶などに変化して約２０１℃〜約２０２℃と異なる吸熱ピークを与える場合がある。例えば、示差走査熱量測定で約２０１℃〜約２０２℃に単一の吸熱ピークを与えるＣ晶をメノウ乳鉢で粉砕して示差走査熱量測定を行うと２１０℃に小さなピークが発生する場合があり、粉砕の程度に比例して２１０℃のピークが強くなり、８０℃付近に発熱ピークが認められる場合がある。

【0062】

北村の報告（Ｃｒｙｓｔａｌ Ｇｒｏｗｔｈ ＆ Ｄｅｓｉｇｎ，４，ｐｐ．１１５３−１１５９，２００４（非特許文献４））において、フェブキソスタットのＣ晶では複数のピークを与えるとされているが（ｐ．１１５５のＦｉｇ．４ｂの「ｃ ｆｏｒｍ」）、これはメノウ乳鉢で粉砕することによりＣ晶の一部が非晶質体化し、示差走査熱量測定の加熱条件でこの非晶質体からＡ晶などの他の結晶形を生成したり、他の結晶形への熱転移を起こすことが理由であると考えられ、本来、Ｃ晶は約２０１℃〜約２０２℃に単一の吸熱ピークを与える結晶であると理解される。

【0063】

本発明のフェブキソスタットのＣ晶の製造方法によれば、好ましくは約２００℃〜約２０３℃、より好ましくは約２０１℃〜約２０２℃にのみ単一のピークを有する示差走査熱量測定スペクトルを示すＣ晶を製造することができる（図９及び図１０）。つまり、本発明の方法によれば、融液媒介転移を示さない純粋なフェブキソスタットのＣ晶を得ることができる。

【0064】

上記の観点から、フェブキソスタットのＣ晶から他の結晶形への転移を生じさせないために、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶、及びフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物は実質的に非晶質体を含まないことが好ましい。

【0065】

一般的には、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶、及びその微粉化物に含まれる非晶質体、Ａ晶、Ｂ晶、Ｄ晶又はＧ晶の割合は約７質量％以下、好ましくは約５質量％以下、より好ましくは約３質量％以下、さらに好ましくは約１％以下、さらにより好ましくは約０．１％以下、もっとも好ましくは実質的に０％である。なお、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶、及びその微粉化物に他の結晶形（Ａ晶、Ｂ晶、Ｄ晶、及びＧ晶）が混入していないことは、例えば、Ｃ晶粉砕物の粉末Ｘ線回折チャートにおいて上記に説明したＡ晶、Ｂ晶、Ｄ晶、及びＧ晶の上記の高強度ピークがいずれも検出されないことにより確認することができる。

【0066】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の長軸の長さは、約２００μｍ以下、好ましくは約１００μｍ以下、より好ましくは約５０μｍ以下、さらに好ましくは約３０μｍ以下、さらにより好ましくは約２０μｍ以下、もっとも好ましくは約１０μｍ以下である。

【0067】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の粒度は、積算粒度分布（体積基準）が５０％となる粒径（Ｄ５０またはメディアン径）が約１００μｍ以下、好ましくは約５０μｍ以下、より好ましくは約２０μｍ以下、さらに好ましくは約１０μｍ以下、よりさらに好ましくは約５μｍ以下、もっとも好ましくは約３．６μｍ以下であり、積算粒度分布（体積基準）が９０％となる粒径（Ｄ９０）が約２００μｍ以下、好ましくは約１００μｍ以下、より好ましくは約５０μｍ以下、さらに好ましくは約２０μｍ以下、もっとも好ましくは約１０μｍ以下である。

【0068】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶は、積算粒度分布（体積基準）が５０％となる粒径（Ｄ５０またはメディアン径）が約２１μｍ以下、及び／又は、積算粒度分布（体積基準）が９０％となる粒径（Ｄ９０）が７４μｍ以下の小型化Ｃ晶が得られるのであれば特に限定されず、いかなる手段を採用しても良いが、上記のとおり、粉砕後のＣ晶粉砕物が実質的に非晶質体を含まない粉砕物であることが好ましいことから、粉砕に際してＣ晶を実質的に非晶質体化しない手段を採用することが好ましい。

【0069】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の定容量法による嵩密度は、好ましくは約０．１５ｇ／ｍｌ以上であり、より好ましくは約０．２０ｇ／ｍｌ以上であり、さらに好ましくは約０．２５ｇ／ｍｌ以上である。本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の定容量法によるタップ密度は、好ましくは約０．２０ｇ／ｍｌ以上であり、より好ましくは約０．２５ｇ／ｍｌ以上であり、さらに好ましくは約０．３０ｇ／ｍｌ以上であり、最も好ましくは約０．３４ｇ／ｍｌ以上である。

【0070】

このようなフェブキソスタットの小型化Ｃ晶を得るための方法としては、メタノールと混合溶媒以外の溶媒から晶出させることができるが、アセトニトリルまたはアセトニトリルとプロパノール等との混合溶媒から晶出させることが望ましく、フェブキソスタットをアセトニトリル中に懸濁して室温で撹拌することがより望ましい。晶出させるための撹拌時間としては約４時間〜約１６時間が望ましい。本発明の、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶は、Ｃ晶の種晶を加えなくても製造できるが、短時間で確実に製造するためには種晶を加えることが望ましい。Ｃ晶の種晶は背景技術で述べた公知の方法により製造することができ、また、試験研究用に種々の原薬メーカー等から入手することもできる。

【0071】

さらに別の観点からは、本発明により、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の製造方法であって、Ｇ晶を原料としてアセトニトリルからＣ晶を晶出させる工程を含む方法、及びフェブキソスタットの小型化Ｃ晶であって、Ｇ晶を原料としてをアセトニトリルからＣ晶を晶出させる工程により得ることができるＣ晶が提供される。この発明の好ましい態様によれば、示差走査熱量測定で好ましく約２００℃〜約２０３℃、より好ましくは約２０１℃〜約２０２℃に単一の吸熱ピークを有する上記の小型化Ｃ晶が提供される。

【0072】

フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の日本薬局方第２液に対する溶解速度は、例えば、特許第４０８４３０９号の参考例２、又は本明細書の例１７に記載した方法に従って測定することができ、約０．１０ｍｇ／ｃｍ^２／ｍｉｎ、好ましくは約０．１４ｍｇ／ｃｍ^２／ｍｉｎ以上である。あるいは、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の日本薬局方第２液に対する溶解速度は、約０．５ｍｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上、好ましくは、約０．６ｍｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上である。または、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶のｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎｅ緩衝液に対する溶解速度は、約１３μｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上、好ましくは、約１４μｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上である。また、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の質量当たりの表面積がメタノールと水の混合溶媒から析出したＣ晶の質量当たりの表面積に比べて、５倍以上増加していることが好ましい。

【0073】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物の長径は、約１００μｍ以下、好ましくは約５０μｍ以下、より好ましくは約２０μｍ以下、さらに好ましくは約１０μｍ以下、よりさらに好ましくは約５μｍ以下、もっとも好ましくは約２μｍ以下である。

【0074】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物は、好ましくは結晶全体の約８０％以上、さらに好ましくは約９０％以上、さらに好ましくは約９５％以上、もっとも好ましくは実質的に１００％の結晶において長軸の長さが約２０μｍ以下となるような粉砕物として得ることができる。

【0075】

また、本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶微粉化物は、その長径が約１００μｍ以下、好ましくは約５０μｍ以下、より好ましくは約３０μｍ以下、さらに好ましくは約２０μｍ以下、よりさらに好ましくは約１０μｍ以下、もっとも好ましくは約５μｍ以下である。

【0076】

フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物の積算粒度分布（体積基準）が５０％となる粒径（Ｄ５０）は、約２５μｍ以下、好ましくは約１０μｍ以下、より好ましくは約７μｍ以下、さらに好ましくは約５μｍ以下、よりさらに好ましくは約４μｍ以下、もっとも好ましくは約３μｍ以下であり、積算粒度分布（体積基準）が９０％となる粒径（Ｄ９０）が５０μｍ以下、好ましくは約２０μｍ以下、より好ましくは約１０μｍ以下、さらに好ましくは約８μｍ以下、よりさらに好ましくは約７μｍ以下、もっとも好ましくは約６μｍ以下である。

【0077】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物の定容量法による嵩密度は、好ましくは約０．２０ｇ／ｍｌ以上であり、より好ましくは０．３０ｇ／ｍｌ以上であり、さらに好ましくは０．４０ｇ／ｍｌ以上である。本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物の定容量法によるタップ密度は、好ましくは約０．３０ｇ／ｍｌ以上であり、より好ましくは０．４０ｇ／ｍｌ以上であり、さらに好ましくは０．５０ｇ／ｍｌ以上であり、最も好ましくは０．６０ｇ／ｍｌ以上である。

【0078】

本発明のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物を得るための粉砕手段としては、積算粒度分布（体積基準）が５０％となる粒径（Ｄ５０またはメディアン径）が４μｍ以下、及び／又は、積算粒度分布（体積基準）が９０％となる粒径（Ｄ９０）が８μｍ以下の小型化Ｃ晶が得られるのであれば特に限定されず、いかなる手段を採用しても良いが、上記のとおり、粉砕後のＣ晶粉砕物が実質的に非晶質体を含まない粉砕物であることが好ましいことから、粉砕に際してＣ晶を実質的に非晶質体化しない手段を採用することが好ましい。

【0079】

このような粉砕手段としては、例えば、流体式粉砕（気流式粉砕）または溶媒中における湿式粉砕を採用することができ、流体式粉砕に先立って粗粉砕工程を採用することもでき、乾式粉砕と組み合わせることも可能である。また、積算粒度分布（体積基準）が５０％となる粒径（Ｄ５０またはメディアン径）が４μｍ以下、及び／又は、積算粒度分布（体積基準）が９０％となる粒径（Ｄ９０）が８μｍ以下の小型化Ｃ晶が得られるのであれば、粉砕手段は不要である。流体式粉砕としては、ジェットミル粉砕またはツインインペラ対向気流乾式粉砕が望ましく、ジェットミル粉砕がより望ましい。

【0080】

湿式粉砕とは、貧溶媒中に懸濁した結晶に衝撃を加えて粉砕する方法であり、例えば、湿式ボールミル（ビーズミル）では、ジルコニア製容器に材料、液体、ジルコニアボール等の粉砕メディアを入れて、粉砕メディアの衝突によって材料の粉砕を行うことができる。溶媒中で粉砕することから、熱の発生を抑えつつ微粉砕可能である点で優れている粉砕方法であるので、本発明の粉砕手段として用いることができる。

【0081】

ジェットミル粉砕とは、粉砕したい物を高速気流に乗せて密閉空間に送り込み、気流ごと互いに衝突させることにより微粉砕する粉砕方法である。ジェットミル粉砕は、発熱を抑えつつ瞬時に微粉化できるので、工業生産に適している。ツインインペラ対向気流乾式粉砕（ドライバースト粉砕）とは、密閉された空間内において、近接して向かい合う歯車状の構造物である一対のインペラを互いに逆方向に高速回転させた状態で、一方のインペラの側から粉砕したい物を投入して他方のインペラの側へ送り込み、他方のインペラを通過した後に回収することにより、一対のインペラの間で発生する高速な対向気流中での衝突によって粉砕する装置であり、シャープな粒度分布で微粉砕することができる。これらの流体式粉砕（気流式粉砕）は、安定した粒度分布を与えること、及びＣ晶粉砕物に非晶質体が混入しない点で本発明において好ましい粉砕手段である。

【0082】

気流式粉砕又は湿式粉砕は、通常は室温下で行うことができ、ジェットミルを用いる場合には粉砕圧力を例えば０．５〜５ｋｇｆ、好ましくは１〜３ｋｇｆ、供給圧力を１〜６ｋｇｆ、好ましくは２〜４ｋｇｆ程度で行えばよい。

【0083】

粉砕手段として、例えば摩砕を伴う乳鉢やボールミルなどのタンブラー式粉砕機（媒体式）を用いることもできるが、微粉化に限界があり、長時間操作すると粒度分布が悪化し、非晶質体が混入する場合がある。また、ハンマーの高速回転を基本原理とするハンマーミルなどの衝撃式粉砕機（高速回転式）や、その一種であるサンプルミルを使用することもできるが、粉砕を長時間行うと粒度分布が悪化し、非晶質体化及び／又は結晶転移が生じる場合があるので、好ましくなく、衝撃式粉砕機（高速回転式）を用いる場合には短時間に粉砕を完了することが望ましい。

【0084】

フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物の日本薬局方第２液に対する溶出速度は、例えば、特許第４０８４３０９号の参考例２、又は本明細書の例１７に記載した方法に従って測定することができ、約０．１０ｍｇ／ｃｍ^２／ｍｉｎ、好ましくは約０．１４ｍｇ／ｃｍ^２／ｍｉｎ以上である。あるいは、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物の日本薬局方第２液に対する溶解速度は、約０．５ｍｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上、好ましくは、約０．６ｍｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上である。または、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物のｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎｅ緩衝液に対する溶解速度は、約１３μｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上、好ましくは、約１４μｇ／ｍｌ／ｍｉｎ以上である。また、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の質量当たりの表面積がメタノールと水の混合溶媒から析出したＣ晶の質量当たりの表面積に比べて、５倍以上増加していることが好ましい。

【0085】

別の観点からは、本発明により、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物の製造方法であって、柱状晶であるＣ晶の長軸の長さが約１００μｍ以下、好ましくは約５０μｍ以下、さらに好ましくは約２０μｍ以下、もっとも好ましくは約１０μｍ以下となるように粉砕してフェブキソスタットのＣ晶の微粉化物を調製する工程を含む方法が提供される。

【0086】

なお、本発明においては、フェブキソスタットのＣ晶は柱状晶として得られ、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物は柱状晶の晶癖をとどめない粒状物であることから、以下、柱状晶の長軸も含めて最も長い径を長径と呼び、柱状晶の端部の短径も含めて最も短い径を短径と呼ぶ。

【0087】

これらの条件を満足するフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の微粉化物を本発明の固形製剤において特に好ましく使用することができる。
このようにして得たフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を固形成分の有効成分として用いることにより、長期にわたり安定で、かつ溶出速度が顕著に改善し、溶出特性にばらつきを生じない固形製剤を提供することができる。

【0088】

本発明の固形製剤は、小型化Ｃ晶又はＣ晶の微粉化物を、有効成分である２−［３−シアノ−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸（すなわちフェブキソスタット）の総量の少なくとも３０％以上、好ましくは５０％以上、より好ましくは７０％以上、さらに好ましくは９０％以上、よりさらに好ましくは９５％以上、もっとも好ましくは好ましくは９９％以上の含有量で含有することにより、長期にわたり安定で、かつ溶出速度が顕著に改善し、溶出特性にばらつきを生じない固形製剤を提供することができる。
なお、フェブキソスタットの含有量は、重量で特定することができるが、粒子の重量は粒子の体積または粒子数に応じて定まることから、フェブキソスタット粒子の体積または粒子数で特定しても良い。フェブキソスタット粒子の体積及び粒子数は蛍光顕微鏡写真や顕微ラマン画像から算出することができる。したがって、小型化Ｃ晶又はＣ晶の微粉化物の含有量は、蛍光顕微鏡写真や顕微ラマン画像から算出して決定することができる。

【0089】

好ましい態様によれば、本発明により、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物が実質的にＡ晶を含まない上記の固形製剤；フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物が実質的にＧ晶を含まない上記の固形製剤；フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物が実質的に非晶質体を含まない上記の固形製剤；フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物に含まれる非晶質体が７重量％以下である上記の固形製剤；Ｇ晶を原料としてアセトニトリルから晶出させて製造したフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を含有する上記の固形製剤；示差走査熱量測定で好ましく約２００℃〜約２０３℃、より好ましくは約２０１℃〜約２０２℃に単一の吸熱ピークを有するフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を含有する上記の固形製剤；及び、錠剤の形態である上記の固形製剤が提供される。

【0090】

別の観点からは、本発明により、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を有効成分として含む固形製剤の製造方法であって、長径が約２００μｍ以下、好ましくは約１００μｍ以下、より好ましくは約５０μｍ以下、さらに好ましくは約３０μｍ以下または約２０μｍ以下、さらにより好ましくは約１０μｍ以下、もっとも好ましくは約５μｍ以下となるようフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を調製する工程を含む方法が提供される。

【0091】

また別の観点からは、本発明により、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を有効成分として含む固形製剤の製造方法であって、アセトニトリルから晶出したＣ晶をそのまま原薬として用い、強い負荷のかかる造粒手段を用いて造粒することによって、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を有効成分として含む固形製剤の製造方法が提供される。具体的には、湿式造粒、乾式造粒または手造粒のような機械的負荷のかかる造粒方法を用いて、繰り返し造粒するか、または通常の造粒時間よりも長時間かけて造粒することによって、造粒と同時に、フェブキソスタットのＣ晶を小型化又は微粉化し、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を有効成分として含む固形製剤を製造することができる。

【0092】

また、本発明により、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を有効成分として含む固形製剤の製造方法であって、長径が約１００μｍ以下、好ましくは約５０μｍ以下、より好ましくは約２０μｍ以下、さらに好ましくは約１０μｍ以下、さらにより好ましくは約５μｍ以下となるようフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を有効成分として含有する固形製剤の製造のための上記のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物の使用も本発明により提供される。

【0093】

本発明の形製剤において好ましく使用することができるフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物の質量当たりの表面積は、粉砕前のフェブキソスタットの小型化Ｃ晶の質量当たりの表面積に比べて少なくとも約３倍以上、好ましくは約６倍以上、より好ましくは約１０倍以上、よりさらに好ましくは約３０倍以上増加していることが好ましい。

【0094】

フェブキソスタットの小型化Ｃ晶、及びその微粉化物の走査電子顕微鏡写真の一例をそれぞれ図２０〜図２２及び図２３〜図２５に示した。フェブキソスタットの小型化Ｃ晶、及びその微粉化物は、たとえ、固形製剤中に含まれていたとしても顕微鏡下で観察する手法などの画像解析法により、その形状及び大きさを容易に観測することができる。この手法は例えば錠剤を圧縮成型した後の錠剤中に含まれるＣ晶粉砕物の様子を観察するために用いることもでき、例えば蛍光顕微鏡下において結晶の長軸の長さや平均長を測定することができる。具体的には、非特許文献９の中ではＴＥＩ−６７２０と呼ばれているフェブキソスタットの蛍光観察については、励起波長３１４ｎｍ、蛍光波長３９０ｎｍで蛍光観察できることが同文献の１８４９頁右欄最下行に記載されていることから、共焦点蛍光顕微鏡を用いて、励起波長３１４ｎｍ、蛍光波長３９０ｎｍで観察することにより錠剤中に含まれるフェブキソスタットの結晶の大きさを測定することができ、その結晶がＣ晶であることは、粉末Ｘ線回折スペクトル、固体^１５Ｎ−ＮＭＲ、顕微ラマンを測定することによって決定することができる。

【0095】

本発明の固形製剤に含まれるフェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物の含有量は、一般的には固形製剤１００重量部に対して１重量部から５０重量部程度の範囲である。フェブキソスタットの結晶を含む固形製剤の製造方法は特許第４０８４３０９号公報の第３頁３４行〜第５頁９行に具体的に説明されている。上記公報の該当部分の開示を参照により本明細書の開示として含める。

【0096】

一般的に医薬の製剤化において当業界で汎用される製剤用添加物を１種又は２種以上使用することができる。例えば、乳糖、無水乳糖、結晶セルロース、トウモロコシデンプン、アルファー化デンプン、部分アルファー化デンプン、Ｄ−マンニトール、又はリン酸水素カルシウムなどの賦形剤、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、又はクロスポビドンなどの崩壊剤、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、またはポリビニルピロリドンなどの結合剤を用いることができる。賦形剤の使用量は、例えば固形製剤１００重量部に対して５０〜９８重量部程度であり、崩壊剤の使用量は、例えば固形製剤１００重量部に対して１〜２５重量部程度であり、結合剤の使用量は、例えば固形製剤１００重量部に対して０．５〜２５重量部程度であるが、これらの量に限定されることはない。必要に応じて、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、可塑剤、希釈剤、着色剤、保存剤、防腐剤、又は嬌臭剤等の製剤用添加物を１種又は２種以上用いてもよい。

【0097】

本発明の固形製剤の形態は特に限定されないが、錠剤の形態が好ましい。錠剤は、一般的にはＣ晶粉砕物に賦形剤及び崩壊剤を添加した混合物を圧縮成形することにより製造することができる。例えば、フェブキソスタットの小型化Ｃ晶又はその微粉化物を含む上記混合物を直接打錠することにより錠剤を製造することができ、あるいはスラッグマシンやローラーコンパクターなどを用いた乾式造粒により錠剤用顆粒を製造した後にて圧縮成型する方法、又は水やエタノールを用い、必要に応じて結合剤の溶液を用いて湿式造粒により錠剤用顆粒を製造した後に圧縮成型する方法などを採用してもよい。錠剤には必要に応じて糖衣や腸溶コーティングなどのコーティングを施すこともできる。

【0098】

本発明の固形製剤は、一般的には一日量として０．８〜５０ｍｇとなるように一日あたり１〜３回程度の頻度で投与されるように単位投与形態として提供されることが好ましい。本発明の固形製剤は、キサンチンオキシターゼ阻害剤、尿酸低下剤、痛風治療剤、高尿酸血症治療剤、及び慢性腎疾患治療剤として用いることができ、痛風、高尿酸血症、及び慢性腎疾患の予防及び／又は治療に使用することができる。

【0099】

また、本発明により、ボールミル粉砕によるフェブキソスタットの非晶質体の製造方法、及び、実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットが提供される。

【0100】

本発明において、実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットとは、９０％以上、好ましくは９５％以上、より好ましくは９９％以上、もっとも好ましくは１００％非晶質体のみからなるフェブキソスタットである。

【0101】

本発明の実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットの製造方法は、結晶を含有するフェブキソスタット原薬をボールミル粉砕することによって製造することができる。ここで、ボールミル粉砕は、遊星ボールミルを用いることが好ましく、粉砕条件は４００ｒｐｍ以上で行うことが好ましい。また、粉砕時間は６０分以上行うことが好ましい。これらの方法により、本発明の、ほぼ実質的に非晶質体のみからなるフェブキソスタットが提供される。

【0102】

また、フェブキソスタットではメタノール溶媒和物であるＤ晶を加熱・減圧乾燥するか、あるいは粉砕することによって非晶質体を調製できることから、Ｃ晶をボールミルで長時間粉砕した粉砕品を標準品として示差走査熱量スペクトル上のピーク面積比により非晶質体を定量することができる。具体的には、示差走査熱量スペクトル上の１５０℃以下の発熱ピークの面積比を指標としてＣ晶に混入する非晶質体の含量を定量することができ、この方法を実施例に具体的に示した。

【0103】

また、本願の発明者は、示差走査熱量測定において、１５０℃以下の領域に現れる発熱ピークの発熱ピーク量（Ｊ／ｇ）と非晶質体のフェブキソスタットの量とが正比例の関係にあることを見出したことから、１５０℃以下の領域に現れる発熱ピークの発熱ピーク量（Ｊ／ｇ）に基づいて、フェブキソスタット試料中の非晶質体の含有率を測定する方法の発明が提供される。

【0104】

フェブキソスタット原薬中の非晶質体の含有率を測定する方法の発明は、例えば、次の工程によって提供される。
（１）フェブキソスタット試料を示差走査熱量測定する工程、
（２）１５０℃以下の領域に現れる発熱ピークの発熱ピーク量（Ｊ／ｇ）を定量する工程、
（３）次式：ｙ＝６．０６７５ｘのｘに前記工程（２）で得られた値を代入してフェブキソスタット試料中の非晶質体の含有率ｙを算出する工程、
ただし、ここで、式中、ｘは示差走査熱量測定における１５０℃以下の発熱ピーク量（Ｊ／ｇ）を表し、ｙは非晶質体の含有率（質量％）を表す。
本発明のフェブキソスタット試料中の非晶質体の含有率を測定する方法で用いられる式における定数は、測定条件及び定量方法によって適宜変更して用いることができる。

【実施例】

【0105】

以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定されることはない。

【0106】

例１：フェブキソスタットエチルエステルの製造
２−［３−ホルミル−４−（２−メチルプロポキシ）フェニル］−４−メチルチアゾール−５−カルボン酸エチル（１０．０ｇ，２８．８ｍｍｏｌ）を９０％ギ酸（７０ｍｌ）に懸濁後、塩酸ヒドロキシルアミン（２．４１ｇ，３４．７ｍｍｏｌ）及びギ酸ナトリウム（３．１４ｇ，４６．２ｍｍｏｌ）を加え、４時間加熱還流した。水を加え、析出した結晶をろ取後、水で洗浄し、表題化合物の粗結晶（ウェット状態）を得た。この粗結晶をメタノールに懸濁させ、室温で撹拌後、結晶をろ取し、メタノールで洗浄した。更に得られた結晶をジクロロメタンに溶出し、不溶物をろ過後、メタノールを加え撹拌した。析出した結晶をろ取し、メタノールで洗浄後、室温で減圧乾燥して表題化合物（８．３１ｇ，収率８３．９％）を白色結晶性粉末として得た。

【0107】

下記の高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）条件における原料化合物及び表題化合物の保持時間はそれぞれ約９．７ｍｉｎ、約１３ｍｉｎであった。
検出器：紫外線吸光光度計（測定波長：３２０ｎｍ）
カラム：Ｌ−ｃｏｌｕｍｎ ＯＤＳ ４．６×２５０ｍｍ
移動相：５０ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４／アセトニトリル＝１／３
流量：１ｍｌ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃

【0108】

例２：フェブキソスタットのＧ晶の製造
例１で得たフェブキソスタットエチルエステル（８．００ｇ，２３．２ｍｍｏｌ）をエタノール（３２ｍｌ）及びテトラヒドロフラン（３２ｍｌ）の混合溶液に懸濁後、水酸化カリウム（１．８４ｇ，２７．９ｍｍｏｌ）の水（１．８４ｍｌ）／エタノール（１６ｍｌ）溶液を加え、５０℃で３．５時間加熱撹拌した。水を加え、不溶物をろ過後、ろ液に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えた。析出した結晶をろ取し、水で洗浄後、４０℃で一晩減圧乾燥した。表題化合物の湿結晶７．９０ｇ（理論収量７．７７ｇ）を得た。粉末Ｘ線回折スペクトルを測定して、この結晶がＧ晶であることを確認した（図１）。

【0109】

例３：アセトニトリルを用いた、フェブキソスタットのＣ晶の製造。
上述のＧ晶の一部を採取して、これにＣ晶の種晶（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｊａｐａｎ，３５，ｐｐ．１１１６−１１２２，２００２の「２．３．Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ」の項に記載された結晶化方法により製造して粉末Ｘ線回折スペクトル及び赤外吸収スペクトルにより同定したもの、１９．５ｍｇ）を添加し、アセトニトリル（１１７ｍｌ）を加え、更にＣ晶の種晶（１９．５ｍｇ）を追加した。室温で一晩撹拌後、結晶をろ取し、アセトニトリルで洗浄した。得られた結晶を一晩風乾後、８０℃で４８時間減圧乾燥して表題化合物のＣ晶（６．６９ｇ，収率９１％）を白色結晶性粉末として得た（以下、このＣ晶を「アセトニトリルＣ晶」と呼ぶ）。

【0110】

得られた白色結晶性粉末に含まれる不純物は上記（ａ）のＨＰＬＣ条件のピーク面積比において個々の不純物の最大で０．１以下、総量で０．５％以下であり、白色結晶性粉末のピーク面積比は９９．８％であった。

【0111】

例４：メタノールと水の混合溶媒を用いた、フェブキソスタットのＣ晶の製造。
フェブキソスタットのＧ晶（２０．０ｇ）をメタノール／水（１０５０ｍｌ／４５０ｍｌ）に懸濁後、フェブキソスタットのＣ晶の種晶（５０ｍｇ）を加え、５０℃で１２時間加熱撹拌した。室温まで放冷後、析出物を濾過し、８０℃で１６時間減圧乾燥した。得られた粉末は粉末Ｘ線回折スペクトル、赤外分光スペクトルよりフェブキソスタットのＣ晶であることを確認した（以下、このＣ晶を「メタノール水Ｃ晶」と呼ぶ）。

【0112】

例５
例３で得たアセトニトリルＣ晶（１９０ｇ）をジェットミル（１００型／パウレック社製）で粉砕した。粉砕圧力１ｋｇｆ・供給圧力２ｋｇｆ、粉砕圧力２ｋｇｆ・供給圧力３ｋｇｆ及び粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆのいずれの条件でも良好に微粉化された。

【0113】

これらのアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物中のアセトニトリル残留量を測定したところ、いずれも約１００ｐｐｍであり、粉砕前のアセトニトリル残留量（２００ｐｐｍ）に比べてアセトニトリルの残留濃度が約２分の１に減少した。なお、１９９８年に厚生省から通知された「医薬品の残留溶媒ガイドラインについて」におけるアセトニトリル残留量の許容濃度は４１０ｐｐｍであるので、２００ｐｐｍのアセトニトリルが残留している場合には、許容濃度の２分の１のアセトニトリル濃度であるので許容濃度ぎりぎりであるが、約１００ｐｐｍの残留アセトニトリル濃度であれば、許容濃度の４分の１の濃度であるので、許容限度を超えるリスクがかなり低くなる点で、大きなメリットがある。

【0114】

例６：粉末Ｘ線回折スペクトルの測定
試料約１００ｍｇを標準的試料ホルダーに緩く詰め込み、スライドガラスで平滑にし、ブルカーエイエックスエス（Ｂｒｕｋｅｒ ＡＸＳ）卓上型Ｘ線回折装置Ｄ２ ＰＨＡＳＥＲ（ＣｕＫα放射線）を用いて回折パターンを測定した。回折パターンを管電圧＝３０ｋＶ、管電流＝１０ｍＡ、ロックドカップル走査（ｌｏｃｋｅｄ−ｃｏｕｐｌｅ ｓｃａｎ）、スリット０．６ｍｍ、スキャッター０．５ｍｍ、２θ範囲＝４から４０°、ステップサイズ＝０．０２°、及びステップ時間＝０．５秒として収集した。ＤＩＦＦＲＡＣ．ＳＵＩＴＥ ｖｅｒｓｉｏｎ２ ２．２．５９．０及びＤＵＦＦＲＡＣ．ＥＶＡ ｖｅｒｓｉｏｎ ２．１の各ソフトウェアをデータ収集及び分析のために用いた。

【0115】

粉末Ｘ線回折スペクトルを測定した結果を図１〜４に示す。例２で得たＧ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを図１に、例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを図２に、例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを図３に、例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ、供給圧力４ｋｇｆ）の粉末Ｘ線回折スペクトルを図４に夫々示す。未粉砕のアセトニトリルＣ晶（図３）及びアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図４）は、いずれも、６．６２°、１３．３６°、１５．５２°の回折角にピークを有するＣ晶に特徴的な粉末Ｘ線回折スペクトルを示し、他の結晶形や非晶質体の混入は認められなかった。なお、例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶についても、同様に、６．６２°、１３．３６°、１５．５２°の回折角にピークを有するＣ晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示し、他の結晶形や非晶質体の混入は認められなかった。

【0116】

例７：赤外吸収スペクトルの測定
試料約２ｍｇをメノウ鉢で粉末とし、これに赤外吸収スペクトル用臭化カリウム０．２０ｇを加え、速やかにすり混ぜた後、錠剤成型器に入れて加圧製錠し、堀場（ＨＯＲＩＢＡ）フーリエ変換赤外分光光度計ＦＴ−７２０を用いて赤外吸収スペクトルを測定した。スペクトルはスキャン回数＝１０、走査速度＝２．５、分解能＝４、測定範囲＝４００から４０００ｃｍ^−１として収集した。ＨＯＲＩＢＡ ＦＴ−ＩＲ ｆｏｒ Ｗｉｎｄｏｗｓ（登録商標）ｖｅｒｓｉｏｎ ４．０７ソフトウェアをデータ収集及び分析のために用いた。

【0117】

赤外吸収スペクトルを測定した結果を図５、図６及び図７に示す。例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶（図５）、例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶（図６）、例５で得たジェットミル粉砕（粉砕圧力３ｋｇｆ、供給圧力４ｋｇｆ）後のアセトニトリルＣ晶（図７）のいずれも、１７０３ｃｍ^−１付近及び２２４０ｃｍ^−１付近にピークを有する、Ｃ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルを示し、他の結晶形や非晶質体の混入は認められなかった。例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶についても同様に、Ｃ晶に特徴的な赤外吸収スペクトルを示し、他の結晶形や非晶質体の混入は認められなかった。

【0118】

例８：示差走査熱量スペクトルの測定
試料約２ｍｇを試料容器（アルミニウム製、φ５×２．５ｍｍ、５０μＬ）に充てんし、リガク（Ｒｉｇａｋｕ）Ｔｈｅｒｍ ｐｌｕｓ ＥＶＯシリーズ高感度示差走査熱量計ＤＳＣ８２３０を用いて、加熱速度１０℃／分、大気圧下で示差走査熱量（ＤＳＣ）を測定した。Ｒｉｇａｋｕ Ｔｈｅｒｍｏ ｐｌｕｓ ＥＶＯ ｖｅｒｓｉｏｎ １．００６−６ソフトウェアをデータ収集及び分析のために用いた。
示差走査熱量スペクトルを測定した結果を図９、図８及び図１０に示す。例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶（図８）、例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶（図９）、例５で得たジェットミル粉砕（粉砕圧力３ｋｇｆ、供給圧力４ｋｇｆ）後のアセトニトリルＣ晶（図１０）のいずれも、約２０１℃〜約２０２℃に単一ピークを示したことから、他の結晶形や非晶質体の混入は認められなかった。例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶についても同様に、約２０１℃〜約２０２℃に単一ピークを示し、他の結晶形や非晶質体の混入は認められなかった。

【0119】

同様に、例５においてジェットミル粉砕の条件を変えて得られたアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の示差走査熱量の測定結果のまとめを表１に示す。ジェットミル粉砕条件は、粉砕圧力１ｋｇｆ・供給圧力２ｋｇｆ、粉砕圧力２ｋｇｆ・供給圧力３ｋｇｆ及び粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆの３条件である。いずれの条件で粉砕しても、約２０１℃〜約２０２℃に単一の吸熱ピークを示したことから、非晶質体や他の結晶形を含まない純粋なＣ晶であることが確認できた。

【0120】

【表1】

【0121】

例９：粒度分布の測定
試料約２ｍｇを０．２％ Ａｅｒｏｓｏｌ ＯＴを含むｎ−ヘキサンに添加し、３０秒間超音波を照射して分散した。この分散液を用いて、島津（Ｓｈｉｍａｄｚｕ）レーザ回折式粒子径分布測定装置ＳＡＬＤ−２２００により粒度分布（Ｄ５０及びＤ９０）を測定した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ ＷｉｎｇＳＡＬＤ−２２００ ｖｅｒｓｉｏｎ １．０２ソフトウェアをデータ収集及び分析のために用いた。
図１１は、未粉砕のメタノール水Ｃ晶の粒度分布を示す図およびデータである。未粉砕のアセトニトリルＣ晶のＤ５０は３６．８１９μｍ、Ｄ９０は１３３．３４８μｍであった。
図１２は、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の粒度分布を示す図およびデータである。未粉砕のアセトニトリルＣ晶のＤ５０は２０．４８３μｍ、Ｄ９０は７３．７５５μｍであった。

【0122】

図１３は、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）の粒度分布を示す図およびデータである。粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆでジェットミル粉砕したアセトニトリルＣ晶のＤ５０は３．６３７μｍ、Ｄ９０は７．３４６μｍであった。これらの結果から、未粉砕のアセトニトリルＣ晶に比べて５分の１以下のＤ５０、及び、１０分の１以下のＤ９０を示すこと、並びに、１μｍ〜１０μｍの粒子径の間に９０％以上の粒子が分布するより均一な粒度分布を示すことがわかった。

【0123】

同様に、例５においてジェットミル粉砕の条件を変えて得られたアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の粒度分布の測定結果のまとめを表２に示す。ジェットミル粉砕条件は、粉砕圧力１ｋｇｆ・供給圧力２ｋｇｆ、粉砕圧力２ｋｇｆ・供給圧力３ｋｇｆ及び粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆの３条件である。いずれの条件で粉砕しても、Ｄ９０が１０μｍ未満である十分に小さい粒度を示したが、これら３条件の中では、粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆの条件でジェットミル粉砕した場合に最も小さい粒子径の粉砕物が得られることが確認できた。

【0124】

【表2】

【0125】

例１０：乳鉢による粉砕
例３で得られたアセトニトリルＣ晶の未粉砕物（５ｇ）を磁製乳鉢（直径１３ｃｍ）、磁製乳棒（長さ１５ｃｍ、重量１５４ｇ）で強く粉砕し、経時的に粉砕物のサンプリングを行い、示差走査熱量測定および粒度分布を測定した（表３）。
示差走査熱量測定の結果、乳鉢で粉砕すると、１０分後には約２１０℃に吸熱ピークが現れることから、Ｃ晶以外の結晶形への転移が認められた。また、３０分後には、１５０℃以下に発熱ピークが現れたことから、非晶質体の混入も確認された。さらに、３０分間にわたって乳鉢粉砕したアセトニトリルＣ晶の粒度は、１０分間にわたって乳鉢粉砕したアセトニトリルＣ晶の粒度に比べて、明らかに粒子径が増大していた。メノウ乳鉢およびメノウ乳棒によって粉砕を行っても同様の結果が得られた。

【0126】

【表3】

【0127】

例１１：ボールミルによる粉砕
例３で得られたアセトニトリルＣ晶の未粉砕物（１５ｇ）を遊星ボールミル（ＰＭ１００／Ｒｅｔｓｃｈ社製：１２５ｍｌ容器／２０ｍｍボール６個／回転数４００ｒｐｍ）で粉砕し、経時的に粉砕物のサンプリングを行い、示差走査熱量測定および粒度分布を測定した（表４）。
示差走査熱量測定の結果、ボールミル粉砕すると約２１０℃の吸熱ピークは３０分後〜６０分後で最大になったこと、及び、１５０℃以下に現れる発熱ピークは６０分間の間、ボールミルによる粉砕時間に依存して増え続けたこと、及び、６０分後にはＣ晶に特徴的な約２０１℃〜約２０２℃付近に現れる吸熱ピークが消失することから、ボールミル粉砕によって、Ｃ晶が消失して非晶質体化したことが確認できた。さらに、粒度分布もボールミルによる粉砕時間に依存して増大し続けたことがわかった。なお、以下、６０分間ボールミルで粉砕したアセトニトリルＣ晶を「アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物」ということにする。

【0128】

【表4】

【0129】

また、アセトニトリルＣ晶を６０分間ボールミル粉砕した後の粉砕物の粉末Ｘ線回折スペクトル（図１４）、赤外分光スペクトル（図１５）、示差走査熱量測定スペクトル（図１６）を示す。
アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物の示差走査熱量測定スペクトル（表４、図１６）では、Ｃ晶に特徴的な約２０１℃〜約２０３℃の吸熱ピークが消失しているとともに、８４．５℃付近に発熱ピークがあることから、Ｃ晶が消失していること及び非晶質が生じていることがわかった。また、粉末Ｘ線回折スペクトル（図１４）は明らかに平坦化した非晶質体に特徴的なスペクトルを示していた。これらの結果から、アセトニトリルＣ晶を６０分間ボールミル粉砕した粉砕物の粉末は、実質的に非晶質体のみからなると考えられた。

【0130】

アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物の赤外分光スペクトル（図１５）は、非晶質体に特徴的な位置にピークが現れていた（特許３５４７７０７号の図１６を参照）。さらに、示差走査熱量測定スペクトル（図１６）では、未粉砕のアセトニトリルＣ晶では約２０１℃〜約２０２℃にのみ単一の吸熱ピークを有していたのに対して、ボールミル粉砕によって約２０１℃〜約２０２℃の吸熱ピークが消失するとともに、アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物では、約２１０℃に強い吸熱ピークが現れるとともに、１５０℃以下の位置、具体的には、図１６の約８４．６℃近辺の位置に発熱ピークが現れていた。

【0131】

例１２：サンプルミルによる粉砕、および、ハンマーミルによる粉砕
実施例１のＣ晶（１５ｇ）を、ハンマーの高速回転による衝撃で粉砕を行うサンプルミル（ＳＭ−１／アズワン社製）で粉砕し、経時的に粉砕物のサンプリングを行い、示差走査熱量測定および粒度分布を測定した（表５）。
示差走査熱量測定の結果、サンプルミル粉砕によって１５０℃以下の発熱ピークは生じなかったものの、アセトニトリルＣ晶が有さない約２１０℃の吸熱ピークは粉砕時間に依存して増大し続け２４０分後には−４４．１０６Ｊ／ｇに達したことから、サンプルミル粉砕によって、他の結晶形への転移が進行したことがわかった。さらに、粒度分布も、未粉砕のアセトニトリルＣ晶のＤ５０（２０．４８３μｍ）及びＤ９０（７３．７５５μｍ）に比べて細かくはなったものの、サンプルミル粉砕を２４０分間行った後の粒度分布は、Ｄ５０で１１．２８１μｍ、Ｄ９０で２９．７６８μｍに過ぎず、Ｄ５０が６０分後、１２０分後、２４０分後でほぼ同じであったことから、サンプルミル粉砕による微粉化の程度には限界があることがわかった。

【0132】

【表5】

【0133】

市販のＡ晶（Ｄ５０ １９μｍ；北京連本医薬化学技術有限公司／Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｉａｎｂｅｎ Ｐｈａｒｍ−ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｔｅｃｈ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入したもの）をハンマーミル（大徳薬機製、ＤＦ−１５）を用いて１２０００ｒｐｍの回転数で瞬時に粉砕した。ハンマーミルで粉砕したＡ晶（以下、「Ａ晶のハンマーミル粉砕物」という。）は、例２２の比表面積の測定に用いた。

【0134】

例１３：示差走査熱量測定による非晶質体の定量法の確立
非晶質体の定量法の確立のためのフェブキソスタットの非晶質体の標品として、例１１でアセトニトリルＣ晶をボールミルで６０分間粉砕して得られたものを用いた。
アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）に、１、２．５、５、１０、２５、及び５０％相当量の非晶質体（Ｃ晶を遊星ボールミルで６０分間粉砕して調製したもの）を添加して総量約２００ｍｇとし、袋混合した調製物について示差走査熱量測定における挙動変化を測定した。

【0135】

非晶質体の混合物は１％以上の非晶質体が存在すると２１０℃付近に吸熱ピークを示し、非晶質体混合割合の増加とともに増大した。一方、Ｃ晶に特徴的な約２０１℃〜約２０２℃に現れる吸熱ピークは、非晶質体混合割合の増加とともに減少し、非晶質体混合割合が１００％になると消失した。非晶質体の混合割合と２００℃以上の吸熱及び発熱ピークのピーク強度との間に線形性は認められなかった。一方、１５０℃以下の再結晶化に伴う発熱ピーク量（Ｊ／ｇ）は非晶質体の含有割合に応じて直線的に増加することが確認され、非晶質体の含有割合の定量が可能であった。Ｃ晶及び非晶質体の混合物の示差走査熱量測定結果のまとめを表６に示す。約１５０℃以下に現れる発熱ピークの発熱ピーク量（Ｊ／ｇ）をｘ、非晶質体の割合をｙとしたときの直線回帰式は、［ｙ＝６．０６７５ｘ］であり、相関係数（ｒ）は０．９９５であった。

【0136】

【表6】

【0137】

例１４：走査電子顕微鏡による結晶の観察
日立製の電子顕微鏡（ＴＭ３０００ Ｍｉｎｉｓｃｏｐｅ／ＨＩＴＡＣＨＩ）を用いて例３、例４、例５で得た各結晶の走査電子顕微鏡写真を撮影した。
例４で得たメタノール水Ｃ晶（未粉砕）の走査電子顕微鏡写真を撮影したところ、柱状晶であり、柱の柱径は約２０μｍ前後、柱の長さは１０００μｍを超えることが確認できた。その代表的な写真を図１７〜図１９に示す。一部の結晶は、より細い柱状晶が寄り添っているように観察されることから、裂けやすい柱状晶であることが窺える。なお、図１７の写真の倍率は１００倍、図１８及び図１９の写真の倍率は８０倍である。図１７〜図１９の電子顕微鏡写真の下の横棒は１ｍｍ（１０００μｍ）の縮尺を示し、横棒の上の目盛は０．１ｍｍ（１００μｍ）の間隔を示す。

【0138】

例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶を走査電子顕微鏡写真で観察したところ、メタノール水Ｃ晶よりも短く、かつ、柱の柱径に対する柱の長さの比が小さい柱状晶であり、柱の柱径が６μｍ前後、柱の長さが２０μｍ前後であることが確認できた。その代表的な写真を図２０〜図２２に示す。図２０〜図２２の写真の倍率は５００倍である。図２０〜図２２の写真の下の横棒は２００μｍの縮尺を示し、横棒の上の目盛は２０μｍの間隔を示す。

【0139】

例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を走査電子顕微鏡写真で観察したところ、さらに小さく粉砕されており、もはや、柱状晶の形状を維持しておらず、多少は短径と長径の長さの差はあっても、概ね１．５μｍ〜６．５μｍの径を有する粒状であることが確認できた。その代表的な写真を図２３〜図２５に示す。図２３〜図２５の写真の下の横棒は２０μｍの縮尺を示し、横棒の上の目盛は２μｍの間隔を示す。

【0140】

例１５：走査電子顕微鏡写真に写った結晶の大きさの測定
未粉砕のアセトニトリルＣ晶、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）の夫々について、走査電子顕微鏡写真に写っている結晶の長さを測定した。未粉砕のアセトニトリルＣ晶は柱状晶であるので、柱の長さを測定した。一方、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は粒状であるので、長径の長さを測定した。測定した結晶の数は、各群４３０個である。その結果を表７に示す。未粉砕のアセトニトリルＣ晶の長径の長さの平均値は１７．３２μｍであるのに対して、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の長径の平均値は２．９６μｍであり、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の長径の長さの平均値の約１７％の長さになっていた。なお、粉砕していないメタノール水Ｃ晶の長径の長さについては、統計解析可能な個数の結晶の長さを測定してはいないものの、図１７〜図１９の電子顕微鏡写真には１ｍｍを超える長さの柱状晶が多数観察されることから、少なくとも、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の長さの５倍以上、おそらくは１０倍以上の平均長を有することは明らかと考えられた。

【0141】

【表7】

【0142】

例１６：かさ密度及びタップ密度の測定
例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶、例４で得たメタノール水Ｃ晶、例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）、市販のＡ晶（Ｄ５０ １９μｍ；北京連本医薬化学技術有限公司／Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｉａｎｂｅｎ Ｐｈａｒｍ−ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｔｅｃｈ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入したもの）、前記の市販のＡ晶を例１２と同様にハンマーミル（大徳薬機製、ＤＦ−１５）で粉砕した試料の夫々について、定容量法によって、かさ密度及びタップ密度を測定した。かさ密度及びタップ密度は以下の方法で求めた。

【0143】

＜定容量法による嵩密度の測定法＞
定容量法による嵩密度は、次式により計算した。
定容量法による嵩密度（ｇ／ｍｌ）＝（ＭＴ１−Ｍ０）／Ｖ
ここで、式の右辺の変数は、次のとおりである。
ＭＴ１： タップ前の紛体と測定用容器の合計質量（ｇ）
Ｍ０： 測定用容器の質量（ｇ）
Ｖ： 測定用容器の容量（ｍｌ）

【0144】

＜定容量法によるタップ密度の測定法＞
定容量法によるタップ密度は、次式により計算した。
定容量法によるタップ密度（ｇ／ｍｌ）＝（ＭＴ２−Ｍ０）／Ｖ
ここで、式の右辺の変数は、次のとおりである。
ＭＴ２： タップ後の紛体と測定用容器の合計質量（ｇ）
Ｍ０： 測定用容器の質量（ｇ）
Ｖ： 測定用容器の容量（ｍｌ）

【0145】

右辺の変数は、次のように測定した。
かさ比重測定器（容量２５ｍｌ、ＪＩＳ Ｚ ２５０４／筒井理化学器械）の重量（Ｍ０）を測定後、測定器の上部から、測定器内にあふれるまで結晶を入れ、測定器内が結晶で十分に満たされたのを確認後、測定器上部に堆積した過剰量の結晶をスパーテルで擦りきり、全体の重量（ＭＴ１）を量った。
この測定器を手で３０回程度タッピングし、再び測定器上部からあふれるまで結晶を入れる。この工程を数回繰り返し、測定器内が結晶で十分に満たされたのを確認後、スパーテルで擦りきり、全体の質量（ＭＴ２）を量った。
これらの変数を上記の式に与えて定容量法による嵩密度及び定容量法によるタップ密度を算出した（表８）。

【0146】

例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶及び市販のＡ晶については、紛体が綿状であるために、容器内に大きな空隙ができてしまうとともに、容器の上に盛り上げってしまうため、定容量法による嵩密度は測定できなかった。
例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶のタップ密度は、例４で得た未粉砕のメタノール水Ｃ晶のタップ密度と比べて３．１倍高かった。また、例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶のタップ密度は、市販のＡ晶のタップ密度と比べて２．４倍高かった。

【0147】

【表8】

【0148】

例１７：アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の溶解速度
例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）の溶解速度を例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶及び市販のＡ晶（Ｄ５０＝１９μｍ；Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｉａｎｂｅｎ Ｐｈａｒｍ−ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｔｅｃｈ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．／北京連本医薬化学技術有限公司より購入）と比較した。なお、例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶は、目開き１６メッシュの篩過品を用いた。試料１００ｍｇ及びマグネット撹拌子（スターラーバー）を２００ｍｌのコニカルビーカーに入れ、溶出試験第１液（ｐＨ１．２）、ｐＨ５．５のＭｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液、溶出試験第２液（ｐＨ６．８）、及び水をそれぞれ１００ｍｌを加え、ヤマト科学（Ｙａｍａｔｏ）製マグミキサーＭ−４１を用い、毎分５００回転で撹拌した。経時的に試験液の一部を採取し、フィルターでろ過して試料溶液とし、標準溶液に対して吸光度測定法（測定波長３１７ｎｍ）により試験した。

【0149】

試験結果を図２６に示す。溶出試験第１液（ｐＨ１．２）に対する、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の３分後及び５分後の溶解速度は、Ａ晶よりも速かった。また、水に対する、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の１分後〜１０分後の溶解速度は、Ａ晶よりも未粉砕のアセトニトリルＣ晶よりも速かった。さらに、ｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎｅ緩衝液及び溶出試験第２液（ｐＨ６．８）に対する、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の溶解速度および溶解量は、未粉砕のアセトニトリルＣ晶と比較して高値を示し、市販のＡ晶と同等であった。
これらの結果から、溶出試験第１液（ｐＨ１．２）、ｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎｅ緩衝液、溶出試験第２液（ｐＨ６．８）、及び水のいずれに対しても、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は、市販のＡ晶と同等か市販のＡ晶以上の溶解速度を示す優れた原薬であることがわかった。

【0150】

例１８：アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を含む錠剤の溶出速度
例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）を用いて特許４０８４３０９号明細書の実施例１の処方に従って錠剤を製造した。例３で得た未粉砕Ｃ晶（目開き１６メッシュの篩過品）又はＡ晶（Ｄ５０＝１９μｍ，Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｉａｎｂｅｎ Ｐｈａｒｍ−ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｔｅｃｈ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．／北京連本医薬化学技術有限公司より購入）を用いて同様に錠剤を製造して溶出プロファイルを比較した。各結晶５０．０ｇ、乳糖水和物（ＳｕｐｅｒＴａｂ １１ＳＤ、ＤＦＥ Ｐｈａｒｍａ製）１８３．８ｇ、部分アルファー化デンプン（ＰＣ−１０、旭化成ケミカルズ製）３７．５ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ−ＳＬ、日本曹達製）７．５ｇ、クロスカルメロースナトリウム（ＮＤ−２００、旭化成ケミカルズ製）３１．３ｇを乳鉢を使用して混合した。精製水９３ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を８号メッシュで整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒を２２号メッシュで整粒した後、篩過顆粒２９０ｇにステアリン酸マグネシウム（太平化学産業製）９．４ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ^２）で打錠し７ｍｍ径の錠剤を得た。

【0151】

試験液としてｐＨ５．５のＭｃＩｌｖａｉｎｅ緩衝液９００ｍｌを用い、パドル法により毎分６０回転で富山産業（Ｔｏｙａｍａ）恒温水槽式溶出試験器ＮＴＲ−６２００Ａを用いて撹拌した。５分間、１０分間、１５分間、３０分間、４５分間、６０分間の各時間攪拌後に試験液をフィルターでろ過して試料溶液とし、標準溶液に対して吸光度測定法（測定波長３１７ｎｍ）によりフェブキソスタットの濃度を測定した。例５で得られたアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を含む錠剤は、全ての撹拌時間において、未粉砕のアセトニトリルＣ晶を含む錠剤よりも早い溶出を示し、６０分攪拌後には、未粉砕のアセトニトリルＣ晶と比較して約２０％高い溶出率を示した。また、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を含む錠剤は、撹拌開始から５分後、１０分後及び１５分後の時点において、Ａ晶を含む錠剤、Ｆ錠、フィルムコーティング剥離したＦ錠のいずれと比較しても、より速い溶出速度を示し、最終的にこれらのＡ晶を含有する錠剤と同等の約９５％の溶出率を示した（図２７）。

【0152】

例１９：アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の安定性試験
例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ、供給圧力４ｋｇｆ）を褐色ガラス瓶（蓋はポリエチレンの中蓋が付いたポリプロピレン製。）または厚さ０．０４ｍｍのポリエチレン袋に入れて密封し、長期保存試験（２５℃±２℃／６０％ＲＨ±５％）、および、加速試験（４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％）の各条件下での安定性を検討した。 安定性の測定は、乾燥減量、ＨＰＬＣによる純度試験および粉末Ｘ線回折を測定することにより行った。

【0153】

アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の乾燥減量：
乾燥減量とは、文字通り、乾燥による重量変化の試験である。乾燥減量の測定は、アセトニトリルＣ晶１グラムを長期保存試験条件で３ヶ月保存した場合と、加速試験条件で１ヶ月および３ヶ月保存した場合の夫々について、その乾燥減量測定した。測定は、乾燥機（ＩＫＥＤＡ ＲＩＫＡ ＡＵＴＯＭＡＴＩＣ ＯＶＥＮ ＤＥＫ）を用いて１０５℃で２時間乾燥させたときの質量を天秤にて測定することにより行った。
表９に示すように、３ヶ月までの加速試験と長期保存試験において、問題となるレベルの乾燥減量は観察されなかった。

【0154】

【表9】

【0155】

アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の純度試験：
ＨＰＬＣによる純度試験は、長期保存試験条件で３ヶ月および６ヶ月保存した場合と、加速試験条件で１ヶ月、３ヶ月および６ヶ月保存した場合について測定した。
まず、測定試料１０ｍｇを移動相２５ｍＬに溶かし、試料溶液とした。この試料溶液を１ｍＬ分取し、移動相を加えて２００ｍＬとし、標準溶液とした。試料溶液及び標準溶液、１０μＬずつを正確とり、次の条件で液体クロマトグラフィーにより試験を行った。試料溶液中のフェブキソスタットのピーク面積と、類縁物質のピーク面積の比により純度を算出した。長期保存条件下においても（図２８）、加速条件下においても（図２９）、６ヶ月の保存期間中、不純物の総量はフェブキソスタットの約０．０５％で一定しており、不純物の総量の変化は見られなかった。同様に、個々の不純物の中で最もピーク面積の大きな不純物（保持時間２．６ｍｉｎ）は、長期保存条件下においても、加速条件下においても、６ヶ月の保存期間中、約０．０３５％で一定しており、最も多く含まれる不純物の量に変化は見られなかった。このように、長期保存条件および加速条件の夫々において、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物中に不純物の増加は認められなかった。

【0156】

試験条件
検出器：紫外吸光光度計（測定波長：３２０ｎｍ）
カラム：内径４．６ｍｍ、長さ１５ｃｍのステンレス管に粒子径５μｍのオクタデシルシリル化シリカゲルが充填された市販のカラムを用いた。
カラム温度：４０℃
移動相：アセトニトリル／ｐＨ２．０の０．１ｍｏｌ／Ｌリン酸二水素カリウム液を２倍に希釈した液＝１３／７
流量：フェブキソスタットの保持時間が約５分になるように調整する（約１ｍＬ／ｍｉｎ）。
面積測定範囲：フェブキソスタットの保持時間の約６倍の範囲

【0157】

測定機器
ＳＨＩＭＡＤＺＵ 高速液体クロマトグラフ装置
ポンプ ：ＬＣ−２０ＡＤ
オートサンプラー ：ＳＩＬ−２０ＡＣＨＴ
ＵＶ検出器 ：ＳＰＤ−Ｍ２０Ａ
カラムオーブン ：ＣＴＯ−２０ＡＣ
デガッサ ：ＤＧＵ−２０Ａ３Ｒ

【0158】

アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の粉末Ｘ線回折：
粉末Ｘ線回折は、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物をポリエチレン袋中に密封した試料、および、同じ試料を褐色ガラス瓶に入れた試料の夫々について、長期保存試験条件と加速試験条件の夫々について３ヶ月保存したサンプルを測定した。測定方法は、例６と同様であった。
図３０に示すように、ポリエチレン袋中に密封して加速条件下で３ヶ月保存した場合、褐色ガラス瓶に入れて加速条件下で３ヶ月保存した場合、ポリエチレン袋中に密封して長期保存下で３ヶ月保存した場合、褐色ガラス瓶に入れて長期保存条件下で３ヶ月保存した場合、のいずれも、粉末Ｘ線回折チャートにおけるピークの位置及び強度に変化はないことから、保存期間中に結晶形に変化はなかったことが確認できた。

【0159】

例２０：アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いた試作錠の安定性
例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ、供給圧力４ｋｇｆ）を用いて２０ｍｇのフェブキソスタットを含有する素錠（以下、「試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）」という。）とフィルムコーティング錠（以下、「試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）」という。）を作製し、夫々について、加速試験（４０℃±２℃／７５％ＲＨ±５％）、および、苛酷試験（６０℃±２℃／湿度コントロールなし）の各条件下での安定性を検討した。測定項目としては、硬度、重量、溶出性及び純度を測定した。なお、比較のため、ＦＣ錠である市販のＦ錠（１０ｍｇ錠：ロット番号５０５１及び５０４９、２０ｍｇ錠：ロット番号６０６２及び６０５６、４０ｍｇ錠：ロット番号８０１６）についても同じ測定を行った。

【0160】

素錠の作製は、以下のように行った。まず、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物７０．０ｇ、乳糖水和物２６３．９ｇ、部分アルファー化デンプン６４．８ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース１０．５ｇ、を撹拌混合造粒装置（ＶＧ−５、パウレック製）を使用して混合した。次に、精製水１０２ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ４．７５ｍｍを使用して整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ１．１ｍｍで整粒した後、篩過顆粒１８５ｇにクロスカルメロースナトリウム１１．９ｇをポリ袋にて混合した後、ステアリン酸マグネシウム１ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ２）で打錠し７ｍｍ径の素錠（重量１２５ｍｇ）を得た。

【0161】

フィルムコーティング錠の作製は、以下のように行った。まず、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物７０．０ｇ、乳糖水和物２６３．９ｇ、部分アルファー化デンプン６４．８ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース１０．５ｇを撹拌混合造粒装置（ＶＧ−５、パウレック製）を使用して混合した。次に、精製水１０２ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ４．７５ｍｍを使用して整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ１．１ｍｍで整粒した後、篩過顆粒１８５ｇにクロスカルメロースナトリウム１１．９ｇをポリ袋にて混合した後、ステアリン酸マグネシウム１ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ２）で打錠し７ｍｍ径の素錠（重量１２５ｍｇ）を得た。次に、ヒプロメロース２５．２ｇ、２．８ｇのマクロゴール６０００を精製水２８９．６ｇに溶解し、コーティング液を作製した。得られた素錠に、調製したコーティング液を自動コーティング装置を用いて、給気７０℃にて７ｍｇ／錠の被覆を行い、フィルムコート錠を得た。

【0162】

試作錠の硬度試験：
試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、Ｆ錠（１０ｍｇ錠、２０ｍｇ錠、４０ｍｇ錠）の夫々について、長期保存条件（３ヶ月、６ヶ月）、加速条件（１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月）及び苛酷条件（１ヶ月、３ヶ月）で保存した後の硬度をＯＫＡＤＡ ＳＥＩＫＯ ＰＣ−３０を用いて測定し、測定開始時の硬度と比較した（表１０）。ただし、表中、「−」と表示されている条件での測定は行っていない。試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）も、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）も、Ｆ錠に対して遜色ない十分な硬度を有し、保存による硬度の低下は見られなかった。

【0163】

【表10】

※ 硬度の単位はニュートン（Ｎ）である。

【0164】

試作錠の重量変化：
試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、Ｆ錠（１０ｍｇ錠、２０ｍｇ錠、４０ｍｇ錠）の夫々について、長期保存条件（３ヶ月、６ヶ月）、加速条件（１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月）及び苛酷条件（１ヶ月、３ヶ月）で保存した後の重量の変化を測定し、測定開始時の重量と比較した（表１１）。ただし、表中、「−」と表示されている条件での測定は行っていない。試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）も、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）も、Ｆ錠と同様に、重量の変化は３％未満であり、保存期間中を通じて問題となるレベルの重量変化は認められなかった。

【0165】

【表11】

※ 重量の単位はミリグラム（ｍｇ）である。

【0166】

試作錠の溶出性：
試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、Ｆ錠（１０ｍｇ錠、２０ｍｇ錠、４０ｍｇ錠）の夫々について、長期保存条件（３ヶ月、６ヶ月）、加速条件（１ヶ月、３ヶ月、６ヶ月）及び苛酷条件（１ヶ月、３ヶ月）で保存した後に、日本薬局方の溶出試験第２液（ｐＨ６．８）中でパドル速度５０ｒｐｍで３０分間撹拌した後の溶出率を、紫外可視分光光度計を用いて測定し、測定開始時の溶出率と比較した（表１２）。ただし、表中、「−」と表示されている条件での測定は行っていない。試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）も、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）も、Ｆ錠と同様に、９４％以上の溶出率が保たれており、保存期間中を通じて問題となるレベルの溶出率の変化は認められなかった。

【0167】

【表12】

※ 溶出率の単位はパーセント（％）である。

【0168】

試作錠の純度試験：
試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）、Ｆ錠（１０ｍｇ錠、２０ｍｇ錠、４０ｍｇ錠）の夫々について、加速条件（１ヶ月、３ヶ月）及び苛酷条件（１ヶ月、３ヶ月）で保存した後に、例１９の純度試験と同様の方法で不純物の量を経時的に測定した（図３１、図３２）。ただし、Ｆ錠（１０ｍｇ錠、２０ｍｇ錠、４０ｍｇ錠）については、加速条件下でのみ６ヶ月まで測定した。なお、錠剤からの抽出は、１錠を取り原薬１０ｍｇに対して移動相２５ｍＬ相当量に溶解分散し、試料溶液とした。この試料溶液を１ｍＬ分取し、移動相を加えて２００ｍＬとし、標準溶液とした．加速条件下においても（図３１）、苛酷条件下においても（図３２）、試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）、試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）ともに、Ｆ錠と同様に、３ヶ月の保存期間中、不純物の総量はフェブキソスタットの総量の０．１％以下であり、不純物の総量の変化は見られなかった。同様に、個々の不純物の中で最もピーク面積の大きな不純物（保持時間２．６ｍｉｎ）は、加速条件下においても、苛酷条件下においても、３ヶ月の保存期間中、０．０４０％未満の水準で一定しており、最も多く含まれる不純物の量に変化は見られなかった。このように、加速条件および苛酷条件の夫々において、試作素錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）及び試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）に含まれる不純物の増加は認められなかった。

【0169】

例２１：試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）の溶出試験
例２０で作製した試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）について、日本薬局方の溶出試験第１液（ｐＨ１．２）、ＭｃＩｌｖａｉｎ緩衝液（ｐＨ５．０）、溶出試験第２液（ｐＨ６．８）、精製水に対する溶出試験を行って、Ｆ錠（２０ｍｇ錠）の溶出特性と対比した（図３３）。なお、溶出試験方法は例１８と同様の方法で行った。
いずれの条件においても、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）の試験液への溶出率は、Ｆ錠（２０ｍｇ錠）の溶出率とほぼ同じか若干上回っており、良好な溶出特性を示した（図３３）。

【0170】

例２２：比表面積の測定
例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶、例４で得たメタノール水Ｃ晶、例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）、例１２で調製したＡ晶のハンマーミル粉砕物の夫々について、ＢＥＴ多点法を用いて比表面積を測定した。ＢＥＴ法は、低温において窒素やクリプトンなどの気体を固体の表面に単分子層で吸着させ、その吸着気体量を測定して夫々の分子の占める面積から固体の表面積を求める方法である。

【0171】

ＢＥＴ多点法による比表面積測定の測定機器及び測定条件は次のとおりであった。
測定機器： ４連式比表面積・細孔分布測定装置 ＮＯＶＡ−４２００ｅ型（Ｑｕａｎｔａｃｈｒｏｍｅ社製）
使用ガス： 窒素ガス
冷媒（温度）： 液体窒素（７７．３５Ｋ）
前処理条件： １１０℃、６Ｈｒ以上真空脱気
測定相対圧力： ０．０５＜Ｐ／Ｐ０＜０．３

【0172】

【表13】

【0173】

表１３に示すように、未粉砕のメタノール水Ｃ晶の表面積は０．１７２ｍ^２／ｇに過ぎなかったものが、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の表面積は５．７５７ｍ^２／ｇに増加し、３３．５倍に面積が増加していた。未粉砕のメタノール水Ｃ晶は、日本薬局方への崩壊試験用第２液への溶解速度がＡ晶の１／２以下であることが問題であったが、未粉砕のアセトニトリルＣ晶は未粉砕のメタノール水Ｃ晶の３３．５倍も大きな表面積を有するので、溶出性に優れることが容易に理解できる。
そして、さらにこれをジェットミル粉砕することにより、表面積は９．００１ｍ^２／ｇに増加し、未粉砕のアセトニトリルＣ晶の表面積の１．６倍に表面積が増加した。未粉砕のメタノール水Ｃ晶とアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の表面積を対比すると、表面積は実に５２．３倍に表面積が増加していた。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物の表面積は、市販のＡ晶をハンマーミルで粉砕した試料の表面積の約１．２倍あることからわかるように、大きな表面積を有することが確認できた。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は未粉砕のメタノール水Ｃ晶の５２．３倍も大きな表面積を有するので、とても溶出性に優れることが容易に理解できる。

【0174】

例２３：原薬の外観
例３で得た未粉砕のアセトニトリルＣ晶、例４で得たメタノール水Ｃ晶、例５で得たアセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（粉砕圧力３ｋｇｆ・供給圧力４ｋｇｆ）、アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物、未粉砕のＡ晶（例１２および例１６を参照）の夫々について、安息角の測定を試みたが、安息角が測定できないほどに流動性の悪い紛体であった。
そこで、安息角を測定する代わりに、各試料を肉眼視したときの外観を撮影した。

【0175】

未粉砕のメタノール水Ｃ晶（図３４）は、ふわふわした綿毛状の嵩高い塊であり、未粉砕のＡ晶よりも大きな１ｍｍを超えるサイズの針状晶が目視で確認できた。
未粉砕のアセトニトリルＣ晶（図３５）は、やや嵩高い塊を形成する傾向があるが、未粉砕のメタノール水Ｃ晶よりも小さく、かつ、未粉砕のメタノール水Ｃ晶よりも密度の高い塊であった。未粉砕のアセトニトリルＣ晶の塊の周囲を良く目を凝らして見ると、小さな針状晶らしきものが確認できた。

【0176】

アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図３６）も、塊を形成する傾向があったが、針状晶らしき構造は見えず、プラスチックスプーンで均すと、容易に平らになり、きめ細かな微粒子が寄り集まっていることがわかった（図３７）。
アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（図３８）も、塊を形成する傾向があったが、針状晶らしき構造は見えず、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物と同様にプラスチックスプーンで均すと、容易に平らになり、崩れやすいきめ細かな微粒子が寄り集まっていることがわかった。
アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図３６）とアセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（図３８）は、写真では塊を形成してはいるが、とても崩れやすい塊であり、スパーテルで掬い取った際の粉の動きはコーンスターチ（図３９）や片栗粉（図４０）の粉の動きにとてもよく似ていた。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物は、優れたハンドリング性を有することが確認できた。

【0177】

例２４：^１３Ｃ固体ＮＭＲによる結晶形の同定
Ａ晶を含有する製剤は（以下、「Ａ晶製剤」という。）、及び、例２０で作製した未粉砕のアセトニトリルＣ晶を含有する素錠（以下、「Ｃ晶製剤」という。）の^１３Ｃ固体ＮＭＲを測定するとともに、例１２で調製したＡ晶のハンマーミル粉砕物（以下、「Ａ晶原体」という。）、及び、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（以下、「Ｃ晶原体」という。）の^１３Ｃ固体ＮＭＲを測定して対比し、製剤中に含まれるフェブキソスタット原薬の結晶形を確認した。
なお、Ａ晶を含有する製剤、及び、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を含有する素錠については、ラップでくるんで軽く小槌で数回たたいて粉砕した試料を測定に用いた。
また、Ａ晶製剤は、次のように作製した。まず、市販のＡ晶（Ｄ５０ １９μｍ；北京連本医薬化学技術有限公司／Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｌｉａｎｂｅｎ Ｐｈａｒｍ−ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｔｅｃｈ．Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入したもの）２０．０ｇ、乳糖水和物７５．４ｇ、部分α化デンプン１８．５ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース３．０ｇを乳鉢を使用して混合した。次に、精製水３６．６ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を１４号メッシュで整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒を２０号メッシュで整粒した後、篩過顆粒１１６．９ｇにクロスカルメロースナトリウム７．５ｇ、ステアリン酸マグネシウム０．６ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ２）で打錠し、重量１２５ｍｇ、７ｍｍ径の素錠を得た。
固体ＮＭＲの測定は、^１３Ｃ（１００．５ＭＨｚ）の核種を用い、各試料約４９μｌを直径３．２ｍｍの固体ＮＭＲ試料管に詰めて、室温で、１５ｋＨｚの回転速度で測定した。測定機器及び測定条件は下記のとおりであった。

【0178】

測定機器： ＪＮＭ−ＥＣＡ６００ＩＩ
測定プローブ： ３．２ｍｍ ＣＰＭＡＳプローブ
^１３Ｃ−ＣＰＭＡＳ測定条件：
・測定モード ｃｐｍａｓ＿ｔｏｓｓ．ｊｘｐ コンタクトタイム ２ｍｓ
・取込時間 ３３．９ｍｓ 待ち時間 ３．５ｓｅｃ 積算回数 ２２００回（原薬）および８８００回（製剤）
・ウィンドウ関数 ＥＸＰモード ＢＦ＝２０Ｈｚ
（Ｔｏｓｓモードを使用してＳＳＢを消去）
＊化学シフトの基準はアダマンタンの信号（１３Ｃ＝２９．５ｐｐｍ）でシムＺ０を調整した。

【0179】

図４１に示すように、Ｃ晶原体及びＣ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートでは、約２０ｐｐｍにほぼ等価なトリプレットピーク（特許第４０８４３０９号公報の参考例３を参照）を有する一方で、Ａ晶原体及びＡ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートには、これらのピークが存在しなかったので、Ｃ晶の原薬を用いて湿式造粒して製造した錠剤中の結晶形がＣ晶のまま、結晶転移を生じていないことを、^１３Ｃ固体ＮＭＲによって確認することができた。また、Ａ晶原体及びＡ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートでは、約１９ｐｐｍにほぼ等価なダブルピークを有する一方で、Ｃ晶原体及びＣ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートには、これらのピークが存在しなかったので、Ａ晶の原薬を用いて製造した錠剤中の結晶形がＡ晶のまま、結晶転移を生じていないことを、^１３Ｃ固体ＮＭＲによって確認することができた。

【0180】

なお、同様に、図４１のチャートから、Ａ晶原体及びＡ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートには存在せずに、Ｃ晶原体及びＣ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートには存在するＣ晶に特徴的なピークとして、約２８．５ｐｐｍのシングルピーク（Ａ晶原体及びＡ晶製剤ではダブルピークとなっている）、約１００ｐｐｍのシングルピーク、約１１４ｐｐｍのシングルピーク（Ａ晶原体及びＡ晶製剤ではダブルピークとなっている）、約１２５ｐｐｍのシングルピーク、約１３１ｐｐｍのシングルピーク（Ａ晶原体及びＡ晶製剤ではダブルピークとなっている）、約１３５ｐｐｍのシングルピーク、及び、約１５９ｐｐｍのシングルピーク、約１６７ｐｐｍのシングルピークが存在するので、これらのピークを手がかりとして、錠剤中のＣ晶を容易に同定することが可能である。

【0181】

さらに、図４１のチャートから、Ｃ晶原体及びＣ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートには存在せずに、Ａ晶原体及びＡ晶製剤の^１３Ｃ固体ＮＭＲチャートには存在するＡ晶に特徴的なピークとして、約１９ｐｐｍのダブルピーク、約１０２ｐｐｍのシングルピーク、約１２０ｐｐｍのダブルピーク、約１２６ｐｐｍのダブルピーク、約１３０ｐｐｍ〜約１３２ｐｐｍのダブルピーク、約１３４ｐｐｍのダブルピーク、約１６２ｐｐｍのシングルピーク、約１６８．５ｐｐｍのシングルピーク（右側に肩を伴う）、が存在するので、これらのピークを手がかりとして、錠剤中のＡ晶を同定することも容易である。

【0182】

例２５：ラマン顕微鏡による観察
錠剤中のフェブキソスタットのＣ晶の結晶形、形態及び大きさをラマン顕微鏡を用いて観察した。
事前に、Ｒｅｎｉｓｈａｗ社のｉｎＶｉａ Ｒｅｆｌｅｘ／ＳｔｒｅａｍＬｉｎｅを用いて、フェブキソスタットのＡ晶及び試作錠（ＭｅＣＮ）の製造に用いた各成分のラマンスペクトルを確認した。その結果、Ｃ晶は約１６９５ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１のピークによって、Ａ晶及び各添加剤と区別できることがわかった（図４２及び図４３）。また、Ａ晶は、約１４５０ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１、約１３３０ｓｈｉｆｔ／ｃｍ−１のピークによって、Ｃ晶及び各添加剤と区別できることがわかった（図４２及び図４３）。
ラマン顕微鏡はＲｅｎｉｓｈａｗ社の顕微レーザーラマン分光装置ｉｎＶｉａ Ｒｅｆｌｅｘ／ＳｔｒｅａｍＬｉｎｅを用い、ラマンイメージングを測定した。
測定条件は、下記のとおりであった。
励起波長 ７８５ｎｍ ＳＴｌｉｎｅ
レーザー出力 ５０％（４５ｍＷ／ｌｉｎｅ）
露光時間 ０．８８ｓｅｃ／ｌｉｎｅ
グレーティング １２００ｌ／ｍｍ
マッピングエリア １０００×１０００ｕｍ（１．２ｕｍｓｔｅｐ）
取得スペクトル ６９５５５６（５ｈ４５ｍ）
対物レンズ Ｘ５０
例２０で作製した試作ＦＣ錠（ＭｅＣＮ粉砕）（２０ｍｇ錠）の表面を切削し観察した。

【0183】

Ｃ晶のラマンイメージングの画像及び粒子解析の結果を夫々図４４と図４５に示す。顕微鏡画像（図４４）から、少なくとも直径１０μｍ未満のＣ晶の微細な粒子が多数確認できた。また、粒子解析の結果（図４５）から、直径５μｍ以下の粒子（図４５の左端のＸ軸の隣の棒）が大多数であることが確認できた。Ｃ晶の粒子が多数密集している場合には、画像だけでは、大きな粒子のように見えてしまうことは容易に想定できるので、ほとんどのＣ晶の粒子は直径５μｍ以下であると考えられた。走査型電子顕微鏡型の顕微ラマン装置（例えばＲｅｎｉｓｈａｗ社の「ラマン複合システム ＳＥＭ ラマン」）を用いれば、密集している粒子を峻別して観察確認可能であろうと考えられた。

【0184】

例２６：共焦点レーザー蛍光顕微鏡による観察
フェブキソスタットは、励起波長３１４ｎｍ、蛍光波長３９０ｎｍで蛍光観察できることが非特許文献９に記載されていることから、実際に、錠剤中に含まれるフェブキソスタット原薬の形態及び大きさを観察することが可能かどうかを検証した。
共焦点レーザー蛍光顕微鏡は、Ｌｅｉｃａ社製のＴＣＳ−ＳＰ５を用いた。試料は紫外光で励起すると蛍光を発することが予備実験で分かっていたので、４０５ｎｍの励起光を用いて蛍光を観察した。ＴＣＳ−ＳＰ５では、４０５ｎｍの単一波長の励起光を半導体レーザーを用いて発生させるため、励起フィルターは不要である。今回の観察では、ＣＯＨＥＲＥＮＴ社製の小型ダイオードレーザモジュールを用いて４０５ｎｍの励起光を発生させた。また、ＴＣＳ−ＳＰ５では、ダイクロイックミラーの機能を果たすものとして、ＳＰ５専用に設計されたライカ製ビームスプリッターを用いた。ＴＣＳ−ＳＰ５は、蛍光波長をプリズムと可動式のスライダーを用いて分光してスキャンするため５ｎｍ単位で蛍光波長の自由な設定ができる。

【0185】

なお、フェブキソスタットについて非特許文献９に記載されている励起波長３１４ｎｍ、蛍光波長３９０ｎｍは、いずれも、レンズを透過しにくい４００ｎｍ以下の紫外波長域に属するため、蛍光顕微鏡観察を行うためには、より可視波長域の光で観察することが望ましい。
そして、一般に、ある物質の励起波長と蛍光波長は、一定の幅を有していることが多いため、蛍光顕微鏡観察を行うに先立つ予備検討として、まず、各結晶を可視波長域ぎりぎりの４０５ｎｍの光で励起したときの蛍光スペクトル特性を確認した。

【0186】

なお、蛍光スペクトル特性の確認は、ＴＣＳ−ＳＰ５を用いたλスキャンにより、単一の光学断層像について、４０５ｎｍの励起光（出力レベルが１５、２５、あるいは３５％）を照射し、蛍光を４１０ｎｍから７８１．７ｎｍの範囲で、スリット幅５ｎｍで、５．９ｎｍ間隔で検出した。画像フォーマットは、５１２ ｘ ５１２ｐｉｘｅｌ、スキャン速度は４００Ｈｚ、シグナルの平均化はラインモード２で行った。

【0187】

その結果、未粉砕のメタノール水Ｃ晶、未粉砕のアセトニトリルＣ晶、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物、アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物のいずれの試料についても、４０５ｎｍ（出力レベルが１５％あるいは２０％）の励起波長に対して４２０ｎｍ〜６００ｎｍの波長域に強い蛍光を発することを確認したので、以後の蛍光顕微鏡観察は励起波長４０５ｎｍ、蛍光波長４２０ｎｍ〜６００ｎｍで観察を行うことにした。

【0188】

なお、比較のため緑色蛍光および赤色蛍光も測定した。緑色蛍光に関しては、励起波長は４８８ｎｍ（出力レベル１０％）、蛍光は５００−５５０ｎｍの波長域で取得し、赤色蛍光に関しては、励起波長は５４３ｎｍ（出力レベル４０％）、蛍光は５５５−６２０ｎｍの波長域で取得した。蛍光検出器は高感度蛍光検出器ＨｙＤを用いた。検出感度については、青色蛍光、緑色蛍光、赤色蛍光のいずれの場合も、ＨｙＤの取得ゲインは１００％とした。Ｚ−ｓｔａｃｋは、対物レンズが２０倍、２５倍、６３倍、１００倍の場合に、光学断層像の間隔をそれぞれ２．５μｍ、１μｍ、０．５μｍ、あるいは０．５μｍとして観察し、最大投影法で行った。スキャン速度は２００Ｈｚ、シグナルの平均化はラインモード３で行った。画像フォーマットは、５１２ ｘ ５１２ｐｉｘｅｌあるいは１０２４ ｘ １０２４ｐｉｘｅｌとした。Ｐｈｏｔｏｎ ｃｏｕｎｔｉｎｇ ｍｏｄｅでは、スキャン速度は１０Ｈｚ、シグナルの平均化はラインモード１で行った。
その結果、緑色蛍光および赤色蛍光では、ほとんど蛍光はみられないことを確認した。

【0189】

共焦点レーザー蛍光顕微鏡観察は、（１）未粉砕のメタノール水Ｃ晶、（２）未粉砕のアセトニトリルＣ晶、（３）アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物、（４）アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物、（５）未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いて作製した試作錠、（６）アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作錠、（７）プラセボ錠、（８）乳糖水和物、（９）部分α化デンプン、（１０）ヒドロキシプロピルセルロース、（１１）クロスカルメロースナトリウム、（１２）ステアリン酸マグネシウム、（１３）ヒプロメロース、（１４）マクロゴール６０００の夫々について行った。

【0190】

未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いて作製した試作錠（以下、「ＭｅＣＮ−Ｃ素錠」という。）は、次のようにして作製した。
まず、未粉砕のアセトニトリルＣ晶５０．０ｇ、乳糖水和物１８３．８ｇ、部分アルファー化デンプン３７．５ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース７．５ｇ、クロスカルメロースナトリウム３１．３ｇを乳鉢を使用して混合した。次に精製水９３ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を８号メッシュで整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒を２２号メッシュで整粒した後、篩過顆粒２９０ｇにステアリン酸マグネシウム９．４ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ２）で打錠し７ｍｍ径のＭｅＣＮ−Ｃ素錠を得た。ＭｅＣＮ−Ｃ素錠の重量は１２８ｍｇであった。

【0191】

アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作錠（以下、「粉砕ＭｅＣＮ−Ｃ素錠」という。）は、次のようにして作製した。
まず、アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物７０．０ｇ、乳糖水和物２６３．９ｇ、部分アルファー化デンプン６４．８ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース１０．５ｇを撹拌混合造粒装置（ＶＧ−５、パウレック製）を使用して混合した。次に精製水１０２ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ４．７５ｍｍを使用して整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ１．１ｍｍで整粒した後、篩過顆粒１８５ｇにクロスカルメロースナトリウム１１．９ｇをポリ袋にて混合した後、ステアリン酸マグネシウム１ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ２）で打錠し７ｍｍ径の粉砕ＭｅＣＮ−Ｃ素錠を得た。粉砕ＭｅＣＮ−Ｃ素錠の重量は１２５ｍｇであった。

【0192】

プラセボ錠は、次のようにして作製した。
まず、乳糖水和物３３３．９ｇ、部分α化デンプン６４．８ｇ、ヒドロキシプロピルセルロース１０．５ｇ、を撹拌混合造粒装置（ＶＧ−５、パウレック製）を使用して混合した。次に精製水１０２ｇを混合末に加えて練合した。得られた湿潤顆粒を湿式乾式整粒機（ＱＣ−１９７ｓ、パウレック製）φ４．７５ｍｍを使用して整粒した後、５０℃で通風乾燥させ、顆粒を得た。得られた顆粒をφ１．１ｍｍを使用して整粒した後、篩過顆粒１８５ｇにクロスカルメロースナトリウム１１．９ｇをポリ袋にて混合した後、ステアリン酸マグネシウム１ｇをポリ袋にて混合し、打錠用顆粒を得た。この打錠用顆粒をロータリー式打錠機（ＶＥＬＡ５、菊水製作所製、打錠圧２５００ｋｇｆ／ｃｍ２）で打錠し７ｍｍ径のプラセボ錠を得た。プラセボ錠の重量は１２５ｍｇであった。

【0193】

ＭｅＣＮ−Ｃ素錠、粉砕ＭｅＣＮ−Ｃ素錠、プラセボ錠の処方を表１４に記載する。

【表14】

※ 表中の単位はミリグラム（ｍｇ）である。

【0194】

各結晶および添加剤についてはそのまま実験に使用した。一方、錠剤試料は、薬包紙に包んだ状態で、木槌で数回（５から７回）強打して、錠剤を粉砕し、粗粉砕物として実験に使用した。
観察は、各結晶、添加剤、および、錠剤の粗粉砕物を微量、スライドガラス（ＭＡＴＳＵＮＡＭＩ製）にのせ、共焦点レーザー蛍光顕微鏡（Ｌｅｉｃａ社製、ＴＣＳ ＳＰ５）により観察を行った。

【0195】

その結果、以下の観察結果を得た。図４６〜図５３はすべて白黒であるが、これらの図の右側の画像において、白い部分は、青い蛍光を発している。
（１）未粉砕のメタノール水Ｃ晶（図４６）
未粉砕のメタノール水Ｃ晶については、図１７〜図１９の走査電子顕微鏡写真と同様の形状及び大きさの蛍光画像および微分干渉画像が観察された（図４６）。図４６の結晶は長軸の長さが約６７０μｍの針状晶であるが、１ｍｍを超える長さの針状晶も多数蛍光観察された。なお、針状晶の端部で特に蛍光が強かった。また、蛍光画像からもささくれ立った針状晶であることがわかった。長軸の中央部で蛍光の強い小さな点が観察されているのは、

【0196】

（２）未粉砕のアセトニトリルＣ晶（図４７）
未粉砕のアセトニトリルＣ晶についても、図２０〜図２２の走査電子顕微鏡写真と同様の形状及び大きさの蛍光画像および微分干渉画像が観察された（図４７）。図４７左の図の右上の結晶は長軸の長さが約８２μｍの針状晶であるが、これは形状を判りやすく示すために大きめの結晶を選んで撮影したためであり、実際には、図４７左の図の中央付近の結晶のように、長軸の長さが約１０μｍ〜２０μｍの針状晶が多数蛍光観察された。なお、針状晶の端部で特に蛍光が強かった。また、蛍光画像からもささくれ立った針状晶であることがわかった。

【0197】

（３）アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図４８）
アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物についても、図２３〜図２５の走査電子顕微鏡写真と同様の形状及び大きさの蛍光画像および微分干渉画像が観察された（図４８）。矢印の先に直径３μｍ前後の蛍光を発する粒子が確認できた。図４８左の蛍光画像の中央付近に、直径約１７μｍの蛍光体が観察されるが、実際には、直径３μｍ前後の蛍光を発する粒子が多数寄り集まっている構造物である。図２３〜図２５の走査電子顕微鏡写真において直径３μｍ前後の粒子が多数寄り集まっていることと同様の画像である。蛍光を発しているために輪郭がぼやけて直径約１７μｍの蛍光体のように見えているが、共焦点レーザー蛍光顕微鏡では、画面手前から奥に向かって多数の断層画像を取得しており、これらの断層画像を追ってゆくと、直径約１７μｍの蛍光体は実際には直径３μｍ前後の蛍光を発する粒子であることが確認できた。

【0198】

（４）アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物（図４９）
アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物については、直径約１μｍ〜約４０μｍに渡る様々な大きさの球状粒子の蛍光が観察された（図４９左）。アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物（図４８左）と異なるのは、アセトニトリルＣ晶のボールミル粉砕物の蛍光粒子は丸みを帯びていることと、粒子の大きさが実際に様々であることであった。

【0199】

（５）プラセボ錠（図５０）
プラセボ錠では青色の蛍光は観察されなかった（図５０左）。
（６）未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いて作製した試作錠
未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いて作製した試作錠については、多数の直径５μｍ前後の蛍光を発する粒子が観察された（図５１左）。微分干渉画像と対比すると、添加物と思われる蛍光を発しない直径２０μｍ〜５０μｍ程度の物体の周囲に付着した状態で直径５μｍ前後の蛍光を発する粒子が観察されたことがわかった。蛍光を発しない直径２０μｍ〜５０μｍ程度の物体の周囲に直径５μｍ前後の蛍光を発する粒子が多数付着しているために、画像によっては、直径２０μｍ〜５０μｍ程度の一つの蛍光体のように観察される画像もあったが、画面手前から画像奥に向かって多数の断層画像をを追ってゆくと、実際には直径５μｍ前後の蛍光を発する粒子が蛍光を発しない物体に周囲に多数付着していたことがわかった。未粉砕のアセトニトリルＣ晶を用いて作製した試作錠は、造粒過程で未粉砕のアセトニトリルＣ晶が粉砕されたと考えられた。このように、未粉砕のアセトニトリルＣ晶は、造粒によって、十分に小さなな粒子粉砕され得るので、良好な保存安定性と溶出性を兼ね備えた製剤に適している優れた結晶であることが確認された。

【0200】

（７）アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作錠（図５２、図５３）
アセトニトリルＣ晶のジェットミル粉砕物を用いて作製した試作錠については、多数の直径２〜３μｍ前後のほぼ均一な大きさの蛍光を発する粒子が観察された（図５２左、図５３左）。微分干渉画像と対比すると、短径直径２０μｍ〜３０μｍ、長径５０μｍ〜１００μｍ程度の添加物と思われる蛍光を発しない物体の周囲に付着した状態で直径２〜３μｍ前後の蛍光を発する粒子が観察されたことがわかった。蛍光を発しない程度の物体の周囲に直径２〜３μｍ前後の蛍光を発する粒子が多数付着しているために、画像によっては、大きな一つの蛍光体のように観察される画像もあったが、画面手前から画像奥に向かって多数の断層画像をを追ってゆくと、実際には直径２〜３μｍ前後の蛍光を発する粒子が蛍光を発しない物体に周囲に多数付着していたことがわかった。

【0201】

添加剤
（７）プラセボ錠、（８）乳糖水和物、（９）部分α化デンプン、（１０）ヒドロキシプロピルセルロース、（１１）クロスカルメロースナトリウム、（１２）ステアリン酸マグネシウム、（１３）ヒプロメロース、（１４）マクロゴール６０００、の夫々についても、個々に、共焦点レーザー蛍光顕微鏡による観察を行ったが、いずれの添加剤も、４０５ｎｍの励起光に対して蛍光は発しないことを確認した。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】

【図40】

【図41】

【図42】

【図43】

【図44】

【図45】

【図46】

【図47】

【図48】

【図49】

【図50】

【図51】

【図52】

【図53】