特許 6292568 ウレア誘導体化合物、これを含有する放射性医薬

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6292568

(24)【登録日】2018年2月23日

(45)【発行日】2018年3月14日

(54)【発明の名称】ウレア誘導体化合物、これを含有する放射性医薬

(51)【国際特許分類】

   C07D 207/416 20060101AFI20180305BHJP

   A61K 51/04 20060101ALI20180305BHJP

【ＦＩ】

   C07D207/416CSP

   A61K51/04 200

【請求項の数】7

【全頁数】23

(21)【出願番号】特願2013-230229(P2013-230229)

(22)【出願日】2013年11月6日

(65)【公開番号】特開2015-89881(P2015-89881A)

(43)【公開日】2015年5月11日

【審査請求日】2016年10月18日

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 第５３回日本核医学会学術総会２０１３年９月３０日発行一般社団法人日本核医学会 目次，第１９７頁に発表

【国等の委託研究の成果に係る記載事項】（出願人による申告）平成２４〜２５年度「（独）新エネルギー・産業技術総合開発機構 がん超早期診断・治療機器の総合研究開発／超早期高精度診断システムの研究開発：画像診断システムの研究開発／がんの性状をとらえる分子プローブ等の研究開発（がんの特性識別型分子プローブ）」の委託研究、産業技術力強化法第１９条の適用を受ける特許出願

(73)【特許権者】

【識別番号】504132272

【氏名又は名称】国立大学法人京都大学

(73)【特許権者】

【識別番号】000230250

【氏名又は名称】日本メジフィジックス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100131613

【弁理士】

【氏名又は名称】大塚 章宏

(74)【代理人】

【識別番号】100168848

【弁理士】

【氏名又は名称】黒崎 文枝

(72)【発明者】

【氏名】佐治 英郎

(72)【発明者】

【氏名】木村 寛之

(72)【発明者】

【氏名】松本 博樹

【審査官】 安藤 倫世

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１１−５２９９１９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１４−０５１４４２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 HARADA, N. ET AL，Preparation of Asymmetric Urea Derivatives that Target Prostate-Specific Membrane Antigen for SPECT Imaging，Journal of Medicinal Chemistry，２０１３年 ９月２４日，56(20)，7890-7901

【文献】 World Molecular Imaging Congress ウェブサイト，２０１２年 ８月２７日，http://wmis2012.omnibooksonline.com/data/papers/P654.htm

【文献】 CHEN. Y. ET AL，Radiohalogenated Prostate-Specific Membrane Antigen (PSMA)-Based Ureas as Imaging Agents for Prostate Cancer，Journal of Medicinal Chemistry，２００８年，51(24)，7933-7943

【文献】 CAI, W. ET AL，A thiol-reactive 18F-labeling agent, N-[2-(4-18F-fluorobenzamido)ethyl]maleimide, and synthesis of RGD peptide-based tracer for PET imaging of αvβ3 integrin expression，Journal of Nuclear Medicine，２００６年，47(7)，1172-1180

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記式（１）：

【化1】

（式（１）中、ｍは０又は１、ｎは４の整数、Ｒはカルボキシル基、Ｆは放射性フッ素を示す。）
で表わされるウレア誘導体化合物又はその塩。

【請求項2】

前記式（１）中、ｍが０を示す、請求項１に記載のウレア誘導体化合物又はその塩。

【請求項3】

前記式（１）中、ｍが１を示す、請求項１に記載のウレア誘導体化合物又はその塩。

【請求項4】

前記式（１）で表される化合物が、
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−カルボキシ−５−（４−［^１８Ｆ］フルオロベンズアミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸；又は、
・２−（３−（（１−カルボキシ−２−（（１−（５−カルボキシ−５−（５−（４−［^１８Ｆ］フルオロベンズアミド）ペンタミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸
である、請求項１に記載のウレア誘導体化合物又はその塩。

【請求項5】

請求項１乃至４いずれか一項に記載のウレア誘導体化合物又はその塩を含有する、放射性医薬。

【請求項6】

請求項１乃至４いずれか一項に記載のウレア誘導体化合物又はその塩を有効成分として含有する、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）の放射性イメージング剤。

【請求項7】

下記式（２）：

【化2】

（式（２）中、ｍは０又は１、ｎは４の整数、Ｒはカルボキシル基を示す。）
で表される化合物と、Ｎ−スクシンイミジル ［^１８Ｆ］フルオロベンゾエートとを反応させる第１工程と、
前記第１工程で得られる反応生成物と、２−［３−［１−カルボキシ‐２−メルカプトエチル］ウレイド ペンタン二酸とを反応させて、下記式（１）：

【化3】

（式（１）中、ｍは０又は１、ｎは４の整数、Ｒはカルボキシル基、Ｆは^１８Ｆを示す。）
で表されるウレア誘導体化合物を得る第２工程と、
を含む、ウレア誘導体化合物の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）に親和性を有するウレア誘導体化合物、及び、該化合物を含有する放射性医薬に関する。

【背景技術】

【0002】

前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）は、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼII（ＧＣＰＩＩ）として知られている酵素(EC 3.4.17.21)である。ＰＳＭＡは、N-アセチル-L-アスパルチル-L-グルタマーテペプチダーゼI(ＮＡＡＬＡＤａｓｅ I)、又は葉酸ヒドロラーゼとも呼ばれることがある。

【0003】

従来、米国では、ＰＳＭＡを標的としたモノクローナル抗体をIn-111で標識したProstataScintなる商標のイメージング剤が臨床で使用されているが、この抗体はＰＳＭＡの膜内に位置するエピトープを認識するものであり、死滅または乾燥した前立腺癌細胞にしか結合しないと考えられており、広く普及するには至っていない（非特許文献１）。また、ＰＳＭＡの膜外領域に結合するモノクローナル抗体をIn-111で標識したものも開発され、前立腺癌を移植したマウスに集積したことが報告されている（非特許文献２）。しかし、これらのモノクローナル抗体を利用したイメージング剤は、循環血漿中の半減期が長く、抗体の体内動態が遅く、固体腫瘍、特に骨転移部への浸透性が低く、In-111による画像が不鮮明になるなどの欠点を有している。

【0004】

そこで、ＰＳＭＡに親和性の低分子化合物をＰＳＭＡプローブとして用いたイメージング剤が既に幾つか提案されている（特許文献1及び２）。本発明者も、チオールとマレイミドとの間の求核共役付加反応を利用して合成したウレア誘導体をＩ-123標識したＰＳＭＡプローブが、合成の容易さとＰＳＭＡに対する親和性の点で有望であることを見出している（非特許文献３）。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0005】

【非特許文献1】Ponsky L. et al., Prostate Cancer Prostatic Dis., 5, 132-135 (2002).

【非特許文献2】Liu H. et al., Cancer Res., 57, 3629-3634 (1997).

【非特許文献3】Harada N. et al., J. Med. Chem., 56 (20), 7890-7901 (2013).

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】国際公開２０１３／０２８６６４号公報

【特許文献2】国際公開２０１０／０１４９３３号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

しかし、Ｉ-123で標識したＰＳＭＡプローブの場合、シングル・フォト・エミッションＣＴ（ＳＰＥＣＴ）で撮像することになるため、空間分解能や定量性の点で限界があり、ポジトロン・エミッション・トモグラフィー（ＰＥＴ）で撮像できるＰＳＭＡプローブが望まれている。

【0008】

本発明は、フッ素基を有しつつ、ＰＳＭＡへの親和性が維持又は向上された、ウレア誘導体化合物を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明は、一局面によれば、下記式（１）：

【化1】

（式（１）中、ｍは０又は１、ｎは１〜４の整数、Ｒは水素又はカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す。）
で表わされるウレア誘導体化合物又はその塩を提供する。

【0010】

また、本発明は、他の局面によれば、上記のウレア誘導体化合物又はその塩を含有する、放射性医薬を提供する。

【0011】

また、本発明は、他の局面によれば、上記のウレア誘導体化合物又はその塩を有効成分として含有する、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）の放射性イメージング剤を提供する。

【0012】

さらに、本発明は、下記式（２）：

【化2】

（式（２）中、ｍは０又は１、ｎは１〜４の整数、Ｒは水素又はカルボキシル基を示す。）
で表される化合物と、Ｎ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートとを反応させる第１工程と、
前記第１工程で得られる反応生成物と、２−［３−［１−カルボキシ‐２−メルカプトエチル］ウレイド ペンタン二酸とを反応させて、上記式（１）で表されるウレア誘導体化合物を得る第２工程と、
を含む、ウレア誘導体化合物の製造方法を提供する。

【発明の効果】

【0013】

本発明によれば、フッ素基を有しつつ、ＰＳＭＡへの親和性が維持又は向上された、ウレア誘導体化合物が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】上記式（１）の化合物（但し、ｍ＝０）の代表的化合物の合成経路を示すスキームである。

【図2】上記式（１）の化合物（但し、ｍ＝１）の代表的化合物の合成経路を示すスキームである。

【図3】上記式（１）の化合物（但し、ｍ＝０）の代表的化合物の別の合成経路を示すスキームである。

【図4】上記式（１）の化合物（但し、ｍ＝１）の代表的化合物の別の合成経路を示すスキームである。

【図5】実施例１３のインビボブロッキング評価結果を示すグラフである。

【図6】実施例１４において（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（４−［^１８Ｆ］フルオロベンズアミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（化合物［^１８Ｆ］８ａ）を用いた場合のマウスのPET/CT画像であり、左パネルは矢状面画像であり、右パネルは冠状面画像である。

【図7】実施例１４において（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（５−（４−［^１８Ｆ］フルオロベンズアミド）ペンタアミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（化合物［^１８Ｆ］１２ｃ）を用いた場合のマウスのＰＥＴ／ＣＴ画像であり、左パネルは矢状面画像であり、右パネルは冠状面画像である。

【図8】実施例１４において２−（ホスホノメチル）ペンタン二酸（２−ＰＭＰＡ）と（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（４−［^１８Ｆ］フルオロベンズアミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（化合物［^１８Ｆ］８ａ）を同時投与した場合のマウスのPET/CT画像であり、左パネルは矢状面画像であり、右パネルは冠状面画像である。

【発明を実施するための形態】

【0015】

（本発明の化合物またはその塩）
本発明の化合物は、上記式（１）で表される化合物である。式（１）中、ｍは０又は１を示すが、ＰＳＭＡに対する親和性が高く、かつ、非特異的吸着が少ない観点から、ｍ＝０が好ましい。

【0016】

また、式（１）中、ｎは１〜４の整数を示すが、ＰＳＭＡに対する親和性が高い観点から、ｎは４の整数が好ましい。

【0017】

また、式（１）中、Ｒは水素又はカルボキシル基（ＣＯＯＨ基）であるが、ＰＳＭＡに対する親和性が高い観点から、カルボキシル基が好ましい。

【0018】

式（１）中、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す。本明細書において、非放射性フッ素はフッ素−１９であり、放射性フッ素とはフッ素の放射性同位体である。Ｆは放射性フッ素が好ましく、ＰＥＴプローブとしてＰＳＭＡの非侵襲的画像化が可能になる観点から、フッ素−１８がより好ましい。

【0019】

本発明に係るウレア標識化合物は、ＰＳＭＡに対する親和性が向上する観点から光学異性体であることが好ましい。具体的には、下記式（３）で表される化合物が好ましい。

【化3】

（式（３）中、ｍは０又は１、ｎは１〜４の整数、Ｒは水素又はカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す。）

【0020】

本発明の化合物として、具体的には、以下のウレア誘導体化合物が挙げられる。
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−カルボキシ−５−（４−フルオロベンズアミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（１）中、ｍは０、Ｒはカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（１）中、ｍは０、Ｒは水素、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−カルボキシ−５−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（１）中、ｍは１、ｎは１、Ｒはカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（１）中、ｍは１、ｎは１、Ｒは水素、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−カルボキシ−５−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンタミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（１）中、ｍは１、ｎは４、Ｒはカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・２−（３−（１−カルボキシ−２−（（１−（５−（５−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（１）中、ｍは１、ｎは４、Ｒは水素、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）。

【0021】

ＰＳＭＡに対する親和性が向上する観点からは、下記のウレア誘導体化合物が好ましい。
・（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（４−フルオロベンズアミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（３）中、ｍは０、Ｒはカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（３）中、ｍは０、Ｒは水素、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（３）中、ｍは１、ｎは１、Ｒはカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（５−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（３）中、ｍは１、ｎは１、Ｒは水素、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）
・（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンタミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（３）中、ｍは１、ｎは４、Ｒはカルボキシル基、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）；
・（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（５−（５−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（式（３）中、ｍは１、ｎは４、Ｒは水素、Ｆは非放射性フッ素又は放射性フッ素を示す化合物）。

【0022】

本発明のウレア誘導体化合物は、上記式（１）の化合物が、塩の形態であってもよい。
上記一般式（１）で表される化合物が塩基である場合、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、又は、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸（グルクロン酸、ガラクツロン酸など）、α‐ヒドロキシ酸（クエン酸、酒石酸など）、アミノ酸（アスパラギン酸、グルタミン酸など）、芳香族酸（安息香酸、ケイ皮酸など）、スルホン酸（ｐ‐トルエンスルホン酸、エタンスルホン酸など）などの有機酸から誘導される塩にすることができる。

【0023】

また、上記式（１）で表される化合物が酸である場合、例えば、アミノ酸（グリシン、アルギニンなど）、アンモニア、第一級、第二級及び第三級アミン及び環状アミン（ピペリジン、モルホリン、ピペラジンなど）などの有機塩基、又は、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、水酸化マグネシウム、水酸化マンガン、水酸化鉄、水酸化銅、水酸化亜鉛、水酸化アルミニウム、水酸化リチウムなどの無機塩基から誘導される塩にすることができる。

【0024】

（本発明の化合物またはその塩の製造方法）
本発明のウレア誘導体化合物の製造方法は、上記式（２）で表される化合物と、Ｎ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートとを反応させる工程（第１工程）と、第１工程で得られる反応生成物と、２−［３−［１−カルボキシ‐２−メルカプトエチル］ウレイド ペンタン二酸（Ｃｙｓ−ＣＯ−Ｇｌｕ）とを反応させて、上記式（１）で表されるウレア誘導体化合物を得る工程（第２工程）とを含むものである。

【0025】

上記式（２）で表される化合物は、アミニウム基を有するが、カウンターアニオンとしては、例えば、塩化物イオン、臭化物イオン、又はヨウ化物イオンといったハロゲンイオン、硫酸イオン、硝酸イオン、リン酸イオン、酢酸イオンなどの無機イオン；トリフルオロ酢酸イオン、マレイン酸イオン、コハク酸イオン、マンデル酸イオン、フマル酸イオン、マロン酸イオン、ピルビン酸イオン、シュウ酸イオン、グリコール酸イオン、サリチル酸イオン、ピラノシジル酸イオン（グルクロン酸イオン、ガラクツロン酸イオンなど）、α‐ヒドロキシ酸イオン（クエン酸イオン、酒石酸イオンなど）、スルホン酸イオン（ｐ‐トルエンスルホン酸イオン、エタンスルホン酸イオンなど）などの有機酸イオンが挙げられる。

【0026】

第１工程は、例えば、アセトニトリルなどの非プロトン性極性溶媒中、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンなどの三級アミンを存在下に実行することができる。これにより、一方の末端にフルオロフェニル基を備え、他方の末端にマレイミド基を備える化合物を得ることができる。

【0027】

第２工程は、第１工程の後に、Ｃｙｓ−ＣＯ−Ｇｌｕをそのまま加えればよいが、このとき、Ｃｙｓ−ＣＯ−Ｇｌｕの水溶液を添加すると好ましい。これにより、チオールとマレイミドとの間の求核共役付加反応を生起させることができる。その後、固相カートリッジや高速液体クロマトグラフィーなどの、通常の精製法を採用することにより、上記式（１）で表されるウレア誘導体化合物を得ることができる。

【0028】

以下、図１、３、４を例に取りつつ、具体的に説明する。
上記式（１）中、ｍ＝０の化合物は、例えば、図１、３のスキームに従って製造することができる。上記式（２）（ただし、ｍ＝０）の化合物は、まず、プトレシンまたはオルニチンなどのジアミンのα炭素位のアミノ基をBoc基等のアミノ酸保護基で保護し、Ｎ−カルボキシマレイミドと反応させた後、上記アミノ酸保護基を脱保護し、２−アミノ−６−（２，５−ジヒドロ−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール）−１‐へキサン酸の酸性塩（上記式（２）中、ｍは０、Ｒはカルボキシル基の化合物）、又は、Ｎ−（５−アミノペンチル）マレイミド酸性塩の（上記式（２）中、ｍは０、Ｒは水素の化合物）を得ることができる。これらの化合物の具体的な製造方法は、既報（非特許文献３等）に記載されている。一方、Ｎ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートは、フルオロ安息香酸とＮ‐ヒドロキシスクシンイミドを反応させることにより得ることができる。これらの化合物の具体的な製造方法は、既報（Nat Protoc. 2006;1:1655-1661）に記載されている。

【0029】

そして、式（２）で表される化合物のアミニウム基と、Ｎ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートとの間にアミド結合を形成させることにより、一方の末端にフルオロフェニル基を備え、他方の末端にマレイミド基を備える化合物を得る（第１工程）。そして、マレイミド基に、Ｃｙｓ−ＣＯ−Ｇｌｕを作用させて、チオールとマレイミドとの間の求核共役付加反応を生起させることにより、上記式（１）の化合物（ただし、ｍ＝０）を製造することができる（第２工程）。

【0030】

上記式（１）の化合物（ただし、ｍ＝１）は、図４のスキームに従って製造することができる。具体的には、アミノ吉草酸のような脂肪族アミノカルボン酸のα位のアミノ基をBoc基等のアミノ酸保護基で保護し、これとＮ−ヒドロキシスクシンイミドを反応させて２，５−ジオキソピロリジン−１−イル ５−アミノペンタノエートのアミノ保護体を得る。そして、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル ５−アミノペンタノエートのアミノ保護体と、２−アミノ−６−（２，５−ジヒドロ−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール）−１‐へキサン酸又はＮ−（５−アミノペンチル）マレイミドとを反応させた後、アミノ基の保護基を脱保護し、５−（（１−カルボキシ−５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ−５−オキソペンタン−１−アミニウム（上記式（２）中、ｍは１、ｎは１、Ｒはカルボキシル基の化合物）や、５−（（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ）−５−オキソペンタン−１−アミニウム（上記式（２）中、ｍは１、ｎは１、Ｒは水素の化合物）を得る。そして、これら式（２）で表される化合物と、Ｎ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートとを反応させた後（第１工程）、Ｃｙｓ−ＣＯ−Ｇｌｕを混合して反応条件を与えて、チオールとマレイミドとの間の求核共役付加反応を生起させることにより、上記式（１）の化合物（ただし、ｍ＝１）を製造することができる（第２工程）。

【0031】

なお、図１、３、４ではＮ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートとしてＮ−スクシンイミジル ４−フルオロベンゾエートを用いた例が示されているが、Ｎ−スクシンイミジル ２−フルオロベンゾエートまたはＮ−スクシンイミジル ３−フルオロベンゾエートを使用することにより、これに対応してフェニル基の２位又は３位にフッ素原子が結合した式（１）の化合物を得ることができる。

【0032】

また、上記式（１）中、Ｆが放射性フッ素のウレア誘導体化合物又はその塩を得るときは、第１工程において、Ｎ−スクシンイミジル フルオロベンゾエートとして、Ｎ−スクシンイミジル［^１８Ｆ］フルオロベンゾエートを用いればよい。中でも、Ｎ−スクシンイミジル ４−［^１８Ｆ］フルオロベンゾエートを用いることが好ましい。Ｎ−スクシンイミジル ４−［^１８Ｆ］フルオロベンゾエートの具体的な製造方法は、既報（Nat Protoc. 2006;1:1655-1661）に記載されている。

【0033】

（本発明の放射性医薬）
本発明の放射性医薬は、式（１）中、Ｆが放射性フッ素のウレア誘導体化合物又はその塩を含有するものである。この放射性医薬は、他の一般に知られている放射性医薬と同様に、上記式（１）の化合物を所望により適当なｐＨに調整された水又は生理食塩水若しくはリンゲル液等に配合させた液として調製することができる。この場合における上記式（１）の化合物の濃度は、配合された当該化合物の安定性が得られる濃度以下とする必要がある。上記式（１）の化合物の投与量は、薬効を示すために十分な濃度であれば特に限定されない。上記式（１）の化合物は、被験者の状態に応じた必要量を、静脈投与又は局所投与して使用することができる。

【0034】

（本発明の放射性イメージング剤）
本発明の放射性イメージング剤は、式（１）中、Ｆが放射性フッ素のウレア誘導体化合物又はその塩を含有するものである。上記式（１）の化合物はＰＳＭＡに特異的に集積するので、該化合物を有効成分として含有する本発明の放射性イメージング剤は、例えば、ＰＥＴ用プローブとして有効であり、ＰＳＭＡが多量に発現する前立腺癌細胞を特異的に検出できるだけでなく、ＰＳＭＡの発現を伴う各種疾患の診断に使用することができる。

【実施例】

【0035】

以下、実施例により、本発明を更に具体的に説明するが、本発明は下記の実施例のみに限定されるものではない。

【0036】

なお、以下の実施例において、実験材料及び操作は下記のとおり行った。
（Ｓ）−２−［３−［（Ｒ）−１−カルボキシ−２−メルカプトエチル］ウレイド−ペンタン二酸（化合物１）、（２Ｓ）−２−アミノ−６−（２，５−ジヒドロ−２，５−ジオキソ−１Ｈ−ピロール）−１‐へキサン酸・塩酸塩（化合物５ａ）及びＮ−（５−アミノペンチル）マレイミド・塩酸塩（化合物５ｂ）は、既報（非特許文文献３）の記載に従って調製した化合物を使用した。Ｎ−スクシンイミジル ４−フルオロベンゾエート（化合物６）及びＮ−（４−フルオロベンゾイル）−グリシン（化合物９ａ）は既報（J Labelled Compd RAD, 53(4), 186-191; 2010）の記載に従って調製した化合物を使用した。 中圧分取液体クロマトグラフにはＷ−Ｐｒｅｐ ２ＸＹ（ＹＡＭＡＺＥＮ社製）を使用した。
分取薄層クロマトグラフィー（ＰＴＬＣ）には、ＰＬＣ Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ６０ Ｆ_２５４，０．５ｍｍ（メルク社製）を使用した。
実施例中使用した水は、ＭＱ Ｉｎｔｅｇｒａ１５（日本ミリポア社製）で調製した。
逆相高速液体クロマトグラフィー（逆相ＨＰＬＣ）は、ＬＣ−２０ＡＤ（島津製作所社製）、ＳＰＤ−２０Ａ ＵＶ検出器（波長２２０ｎｍ及び２５４ｎｍ）（島津製作所社製）、放射線検出器（ＮＤＷ−３５１（日立アロカメディカル社製）、カラムとしてＹＭＣ Ｐａｃｋ−ＯＤＳ ＡＱ（２０×２５０ｍｍ）を使用し、移動相はメタノールと水（共に０．１体積％トリフルオロ酢酸を含有）を用い、流速５ｍＬ／ｍｉｎ、メタノール濃度のグラディエントは３０体積％‐８０体積％（６０分）とした。
^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、ＬＮＭ−ＡＬ５００（ＪＥＯＬ社製）を用いて測定した。溶媒としては、重クロロホルム（ＣＤＣｌ_３）、ジメチルスルホキシド−ｄ６（ＤＭＳＯ−ｄ６），重メタノール（ＣＤ_３ＯＤ），重水（Ｄ_２Ｏ）を用い、テトラメチルシラン（Ｅｕｒｉｓｏ−ｔｏｐ社製）を内部標準とした。
マススペクトルは、ＬＣＭＳ−２０１０ ＥＶ（島津製作所社製），ＧＣＭＳ−ＱＰ２０１０ Ｐｌｕｓ（島津製作所社製），又はＪＭＳ−ＳＸ １０２Ａ ＱＱ（ＪＥＯＬ社製）を使用した。
ヒト前立腺がん細胞：ＬＮＣａＰ（ＰＳＭＡ陽性）、及び、ＰＣ−３は、ＤＳファーマバイオメディカル社から購入し、１０％ウシ胎児血清、グルタミン、抗体（ペニシリン／ストレプトマイシン）ロスウェルパーク記念研究所１６４０培地（ＲＰＭＩ培地）で、高湿度ＣＯ_２インキュベーター（３７℃／５％二酸化炭素）内にて培養した。
Ｃ．Ｂ．−１７／Ｉｃｒ ＋／＋ Ｊｃｌマウス、及び、Ｃ．Ｂ．−１７／Ｉｃｒ ｓｃｉｄ／ｓｃｉｄ Ｊｃｌマウス（いずれも雄性）は、日本クレア社から購入したものを使用した。
腫瘍移植マウスとしては、上記培養したヒト前立腺がん細胞を２．５ｇ／Ｌトリプシン／１ｍｍｏｌ／Ｌエチレンジアミンテトラ酢酸で処理し、リン酸バッファー生理食塩液で再懸濁したものと、ＢＤマトリゲル^ＴＭ基底膜マトリックスとの混合物（１：１、１００μＬ）を１〜５×１０^６細胞／匹ずつ、５週齢のＣ．Ｂ．−１７／Ｉｃｒ ｓｃｉｄ／ｓｃｉｄ Ｊｃｌマウスに移植（右脚にＰＣ−３、左脚にＬＮＣａＰ）して、腫瘍の大きさが約５〜１０ｍｍになるまで飼育したものを使用した。

【0037】

実施例１：（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ））−５−カルボキシ−５−（４−フルオロベンズアミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）ウレイド）ペンタン二酸（８ａ）の調製
図１のスキームに従い、下記（１）〜（２）の手順で調製した。

【0038】

（１）（Ｓ）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−（４−フルオロベンズアミド）ヘキサン酸（７ａ）の調製
化合物６（４５ｍｇ）のアセトニトリル溶液（１ｍＬ）に化合物５ａ（５０ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４９ｍｇ）を加えて、室温（２５℃）下６時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。ＰＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝１０：１（体積比））で粗精製を行い、その後に逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物７ａ（７．５ｍｇ，収率１１％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：５２分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ：１．３９−１．４６（ｍ，２Ｈ），１．４７−１．６９（ｍ，２Ｈ），１．８１−２．０３（ｍ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），６．７７（ｓ，２Ｈ），７．１９（ｍ，２Ｈ），７．９０（ｍ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：３４９［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0039】

（２）化合物（８ａ）の調製
化合物７ａ（７．５ｍｇ）のアセトニトリル溶液（０．１ｍＬ）に化合物１（６．３ｍｇ）の水溶液（０．７ｍＬ）を加え、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ７にした。室温（２５℃）下２時間撹拌した後、逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物８ａ（７．３ｍｇ，収率５２％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：４３分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：１．２０−１．３４（ｍ，２Ｈ），１．４５−１．５６（ｍ，２Ｈ），１．７０−２．０８（ｍ，４Ｈ），２．３７（ｄｔ，Ｊ＝４．０１，７．４５Ｈｚ，２Ｈ），２．４６（ｍ，１Ｈ），２．７７−３．１７（ｍ，３Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，２Ｈ），３．８６（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），４．３５−４．４３（ｍ，２Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｄｄ，Ｊ＝８．５９，５．７３Ｈｚ，２Ｈ）。
ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：６４３［Ｍ＋Ｈ^＋］。
ＨＲＦＡＢ^＋−ＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ_２６Ｈ_３２Ｎ_４Ｏ_１２ＦＳ，６４３．１７２５［Ｍ＋Ｈ^＋］；ｆｏｕｎｄ ６４３．１７２１。

【0040】

実施例２： （２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（８ｂ）の調製
図１のスキームに従い、下記（１）〜（２）の手順で調製した。

【0041】

（１）Ｎ−（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル−４−フルオロベンズアミド（７ｂ）の調製
化合物６（５４ｍｇ）のアセトニトリル溶液（１．５ｍＬ）に化合物５ｂ（５０ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３０ｍｇ）を加えて、室温（２５℃）下４時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。中圧分取液体クロマトグラフ（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１（体積比））で精製し、化合物７ｂ（５４ｍｇ，収率７７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，５００ＭＨｚ）δ：１．３７（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，４Ｈ），３．４４（ｄｔ，Ｊ＝６．３０，５．７３Ｈｚ，２Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），６．０９（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），６．６７（ｓ，２Ｈ），７．１１（ｍ，２Ｈ），７．７８（ｍ，２Ｈ）。
ＥＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：３０４［Ｍ］^＋，１２３（１００），９５（２５）。

【0042】

（２）化合物（８ｂ）の調製
化合物７ｂ（６．２ｍｇ）のアセトニトリル溶液（０．１５ｍＬ）に化合物１（６．０ｍｇ）の水溶液（０．７５ｍＬ）を加え、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ７にした。室温（２５℃）下４時間撹拌した後、逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物８ｂ（５．５ｍｇ，収率４５％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：４８分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：１．１９（ｔｔ，Ｊ＝８．０２，７．４５Ｈｚ，２Ｈ），１．４９（ｍ，４Ｈ），１．８４７（ｍ，１Ｈ），２．０４（ｍ，１Ｈ），２．３８（ｍ，２Ｈ），２．４８（ｍ，１Ｈ），２．８０−３．１６（ｍ，３Ｈ），３．２４（ｔ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ，２Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．５９Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｍ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｄｄ，Ｊ＝６．８７，５．１６Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．５９，５．１６Ｈｚ，２Ｈ）。
ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：５９９［Ｍ＋Ｈ^＋］。
ＨＲＦＡＢ^＋−ＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ_２５Ｈ_３２Ｎ_４Ｏ_１０ＦＳ，５９９．１８２８［Ｍ＋Ｈ^＋］；ｆｏｕｎｄ ５９９．１８２３。

【0043】

実施例３：（２Ｓ）−２−（３−（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（１２ａ）の調製
図２のスキームに従い、下記（１）〜（３）の手順で調製した。

【0044】

（１）Ｎ−［２−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−２−オキソエチル］−４−フルオロベンズアミド（１０ａ）の調製
化合物９ａ（２００ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（３ｍＬ）にＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１１７ｍｇ）と水溶性カルボジイミド塩酸塩（１９４ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下１時間撹拌した。反応溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。生じた沈殿を濾取し、クロロホルムで洗浄した。（１２７ｍｇ, 収率４３％）
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ：２．８１（ｓ，４Ｈ），４．４３（ｄ，Ｊ＝５．７３Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．９５（ｍ，２Ｈ），９．２０（ｔ，Ｊ＝５．７３Ｈｚ，１Ｈ）。

【0045】

（２）（Ｓ）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ヘキサン酸（１１ａ）の調製
化合物１０ａ（７４ｍｇ）のアセトニトリル溶液（２．５ｍＬ）に化合物５ａ（６６ ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６５ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下６時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。ＰＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝１０：１（体積比））で粗精製を行い、その後に逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物１１ａ（３３ｍｇ，収率３３％）を得た。
ＨＰＬＣ保持時間：４８分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ：１．２６（ｍ，２Ｈ），１．４８（ｍ，２Ｈ），１．５９（ｍ，１Ｈ），１．７２（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｄ，Ｊ＝５．７３Ｈｚ，２Ｈ），３．９３（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｍ，１Ｈ），６．９９（ｓ，２Ｈ），７．３１（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．９４（ｍ，２Ｈ），８．１４（ｄ，Ｊ＝８．０２Ｈｚ，１Ｈ），８．７０（ｔ，Ｊ＝５．７３Ｈｚ，１Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：４０６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0046】

（３）化合物（１２ａ）の調製
化合物１１ａ（１３．８ｍｇ）のアセトニトリル溶液（０．３ｍＬ）に化合物１（１０ｍｇ）の水溶液（０．７５ｍＬ）を加え、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ７にした。室温（２５℃）下３時間撹拌し、逆相ＨＰＬＣで精製して、化合物１２ａ（９．０ｍｇ，収率３９％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：４１分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：１．２３（ｍ，２Ｈ），１．４９（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，１Ｈ），１．８４（ｍ，２Ｈ），２．０６（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，２Ｈ），２．５６（ｍ，１Ｈ），２．９５−３．２６（ｍ，３Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｍ，１Ｈ），４．０３（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｍ，１Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．７７（ｍ，２Ｈ）。
ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：７００［Ｍ＋Ｈ^＋］。
ＨＲＦＡＢ^＋−ＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ_２８Ｈ_３５Ｎ_５Ｏ_１３ＦＳ，７００．１９４２［Ｍ＋Ｈ^＋］；ｆｏｕｎｄ ７００．１９３６。

【0047】

実施例４：（２Ｓ）−２−（３−（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（５−（２−（４−フルオロベンズアミド）アセタミド）ペンチル−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（１２ｂ）の調製
図２のスキームに従い、下記（１）〜（２）の手順で調製した。

【0048】

（１）Ｎ−（２−（（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ−２−オキソエチル）−４−フルオロベンズアミド（１１ｂ）の調製
実施例３（１）と同じ方法で合成した化合物１０ａ（５０ｍｇ）のアセトニトリル溶液（２ｍＬ）に化合物５ｂ（３７ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４４ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下３時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。飽和食塩水で有機相を洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、中圧分取液体クロマトグラフ（クロロホルム：メタノール＝１０：１（体積比））で精製し、化合物１１ｂ（３７ｍｇ，収率６０％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，５００ＭＨｚ）δ：１．３１（ｍ，２Ｈ），１．５９（ｍ，４Ｈ），３．３０（ｍ，２Ｈ），３．５２（ｔ，Ｊ＝７．１６Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ｄ，Ｊ＝５．１６Ｈｚ，２Ｈ），６．１０（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），６．６９（ｓ，２Ｈ），６．９８（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），７．１３（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．８５（ｍ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：３６２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0049】

（２）化合物（１２ｂ）の調製
化合物１１ｂ（８．６ｍｇ）のアセトニトリル溶液（０．１５ｍＬ）に化合物１（７．０ｍｇ）の水溶液（０．７５ｍＬ）を加え、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ７にした。室温（２５℃）下２時間撹拌した。逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物１２ｂ（６．０ｍｇ，収率３８％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：４４分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：１．１５（ｍ，２Ｈ），１．４３（ｍ，４Ｈ），１．８５（ｍ，１Ｈ），２．０６（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，２Ｈ），２．５８（ｍ，１Ｈ），２．９５−３．２４（ｍ，６Ｈ），３．３９（ｔ，Ｊ＝７．１６Ｈｚ，２Ｈ），３．９４（ｓ，２Ｈ），４．１６（ｄｄ，Ｊ＝５．１６，９．１６Ｈｚ，１Ｈ），４．４２（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．７７（ｍ，２Ｈ）。
ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：６５６［Ｍ＋Ｈ^＋］。
ＨＲＦＡＢ^＋−ＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ_２７Ｈ_３４Ｎ_５Ｏ_１１ＦＳ，６５６．２０４０［Ｍ＋Ｈ^＋］；ｆｏｕｎｄ ６５６．２０３８。

【0050】

実施例５： （２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（（Ｓ）−５−カルボキシ−５−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンタミド）ペンチル）−２，５−ジオキサピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（１２ｃ）の調製
図２のスキームに従い、下記（１）〜（４）の手順で調製した。

【0051】

（１）５−［（４−フルオロベンゾイル）アミノ］ペンタン酸（９ｂ）の調製
化合物６（４６０ｍｇ）のアセトニトリル溶液（５ｍＬ）に５−アミノ吉草酸（２５０ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２７５ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下４時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。生じた沈殿を濾取してクロロホルムで洗浄した。（２９８ｍｇ，収率６４％）
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ:１．６７（ｍ，４Ｈ），２．３５（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），３．３９（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ）， ７．８６（ｍ，２Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ）.
ＥＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：２３８［Ｍ］^＋，１８０（１３）,１６６（４），１５２（８），１２３（１００），９５（２８）。

【0052】

（２）Ｎ−［５−［（２，５−ジオキソ−１−ピロリジニル）オキシ］−５−オキソペンチル］−４−フルオロベンズアミド（１０ｂ）の調製
化合物９ｂ（２９７ｍｇ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド溶液（７ｍＬ）にＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１４３ｍｇ）とＮ，Ｎ´−ジイソプロピルカルボジイミド（１５７ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下一晩撹拌した。反応溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）で精製して化合物１０ｂを得た（２１１ｍｇ，収率５０％）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，５００ＭＨｚ）δ：１．７６（ｍ，２Ｈ），１．８７（ｍ，２Ｈ），２．６９（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），２．８５（ｓ，４Ｈ），３．５０（ｄｄ，Ｊ＝６．８７，１２．６Ｈｚ），７．１０（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｍ，２Ｈ）．
ＥＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：３３６［Ｍ］^＋，３３３（４），１８０（９），１２３（１００），９５（１９）．

【0053】

（３）（Ｓ）−６−（２，５−ジオキソ−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）−２−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンタミド）ヘキサン酸（１１ｃ）の調製
化合物１０ｂ（８０ｍｇ）のアセトニトリル溶液（２ｍＬ）に化合物５ａ（６２ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６１ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下４時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下溶媒を留去した。ＰＴＬＣ（クロロホルム：メタノール＝１０：１（体積比））で粗精製を行い、その後に逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物１１ｃ（４０ｍｇ，収率３７％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：５３分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ：１．３７（ｍ，２Ｈ），１．５３−１．８９（ｍ，８Ｈ），２．２９（ｔ，Ｊ＝７．１６Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｍ，２Ｈ），３．４７（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），４．３３（ｄｔ，Ｊ＝４．５８，９．１６Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｓ，２Ｈ），７．１６（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．８６（ｍ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：４４８［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0054】

（４）化合物（１２ｃ）の調製
化合物１１ｃ（１０ｍｇ）のアセトニトリル溶液（０．２ｍＬ）に化合物１（６．６ｍｇ）の水溶液（０．８ｍＬ）を加え、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ７にした。室温（２５℃）下２時間撹拌した。逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物１２ｃ（９．０ｍｇ，収率５５％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：４６分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：１．２０（ｍ，２Ｈ），１．４３（ｍ，２Ｈ），１．５２−１．６５（ｍ，５Ｈ），１．７４−１．９０（ｍ，２Ｈ），２．０７（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），２．３９（ｍ，２Ｈ），２．４１−２．５３（ｍ，３Ｈ），２．９４−３．１８（ｍ，３Ｈ），３．９２（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，２Ｈ），４．４５（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．６８（ｍ，２Ｈ）。
ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ：７４２［Ｍ＋Ｈ^＋］。
ＨＲＦＡＢ^＋−ＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ_３１Ｈ_４１Ｎ_５Ｏ_１３ＦＳ，７４２．２４１３［Ｍ＋Ｈ^＋］；ｆｏｕｎｄ ７４２．２４０６。

【0055】

実施例６：（２Ｓ）−２−（３−（（１Ｒ）−１−カルボキシ−２−（（１−（５−（５−（４−フルオロベンズアミド）ペンタミド）ペンチル）−２，５−ジオキソピロリジン−３−イル）チオ）エチル）ウレイド）ペンタン二酸（１２ｄ）の調製
図２のスキームに従い、下記（１）〜（２）の手順で調製した。

【0056】

（１）Ｎ−（５−（（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ）−５−オキソペンチル）−４−フルオロベンズアミド（１１ｄ）の調製
実施例５（１）〜（２）の方法で合成した化合物１０ｂ（５０ｍｇ）のアセトニトリル溶液（１．３ｍＬ）に化合物５ｂ（３３ｍｇ）、及び、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３８ｍｇ）を加えて室温（２５℃）下３時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ込み、酢酸エチルで抽出した。飽和食塩水で有機相を洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、中圧分取液体クロマトグラフ（クロロホルム：メタノール＝１０：１（体積比））で精製し、化合物１１ｄ（５６ｍｇ，収率９３％）。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３，５００ＭＨｚ）δ：１．３０（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．６９（ｍ，６Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），２．２５（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），３．４６（ｍ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝７．１６Ｈｚ，２Ｈ），５．６２（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），６．６８（ｓ，２Ｈ），６．７４（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），７．１０（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．８４（ｍ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：４０４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0057】

（２）化合物（１２ｄ）の調製
化合物１１ｄ（８．３ｍｇ）のアセトニトリル溶液（０．１５ｍＬ）に化合物１（６．０ｍｇ）の水溶液（１．０ｍＬ）を加え、２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ７にした。室温（２５℃）下２時間撹拌した。逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物１２ｄ（５．７ｍｇ，収率４０％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：４９分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：１．１２（ｍ，２Ｈ），１．３７（ｍ，４Ｈ），１．５３（ｍ，４Ｈ），１．８６（ｍ，１Ｈ），２．０５（ｍ，１Ｈ），２．１６（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），２．３９（ｄｄ，Ｊ＝４．５８，６．８７Ｈｚ，２Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），２．９３−３．１７（ｍ，５Ｈ），３．２９（ｍ，４Ｈ），３．９１（ｍ，１Ｈ），４．１６（ｄｄ，Ｊ＝５．１６，８．５９Ｈｚ，１Ｈ），４．４３（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．６７（ｍ，２Ｈ）。
ＦＡＢ−ＭＳ ｍ／ｚ： ６９８［Ｍ＋Ｈ^＋］。
ＨＲＦＡＢ^＋−ＭＳ：ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ_３０Ｈ_４１Ｎ_５Ｏ_１１ＦＳ，６９８．２５０４［Ｍ＋Ｈ^＋］；ｆｏｕｎｄ ６９８．２５０７。

【0058】

実施例７：（Ｓ）−５−（（１−カルボキシ−５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ−５−オキソペンタン−１−アミニウム塩化物（１５ａ）の調製
図４のスキームに従い、下記（１）〜（３）の手順で調製した。

【0059】

（１）２，５−ジオキソピロリジン−１−イル ５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタノエート（１３）の調製
５−アミノ吉草酸の１，４−ジオキサン溶液（３３３ｍｇ，３ｍＬ）に、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．７５ｇ）と２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（０．２３ｇ，３ｍＬ）を０℃で加えた。室温（２５℃）で１６時間撹拌し、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸と酢酸エチルで抽出し、有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。減圧下溶媒を留去し、得られた無色の油状物質をジメチルホルムアミド（６ｍＬ）に溶解させた。Ｎ，Ｎ′−ジイソプロピルカルボジイミド（０．３５ｇ）とＮ−ヒドロキシスクシンイミド（０．３２ｇ）を加えて室温下１６時間撹拌した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と酢酸エチルで抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル＝１／１（体積比））で精製し、化合物１３（０．４８ｇ，収率５４％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６，５００ＭＨｚ）δ：６．８２（ｔ，Ｊ＝５．１６Ｈｚ，１Ｈ），２．９３（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｓ，４Ｈ），２．６６（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，２Ｈ），１．５９（ｔｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，７．４５Ｈｚ，２Ｈ），１．４６（ｔｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，７．４５Ｈｚ，２Ｈ）。

【0060】

（２）（Ｓ）−２−（５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ペンタナミド）−６−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ヘキサン酸（１４ａ）の調製
化合物１３のアセトニトリル溶液（１２６ｍｇ／４ｍＬ）に化合物５ａ（１０５ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０３ｍｇ）を加えて室温（２５℃）で６時間撹拌した。飽和塩化ナトリウム水溶液と酢酸エチルで抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、ＰＴＬＣ（クロロホルム／メタノール＝９／１（体積比））で精製し、化合物１４ａ（３５ｍｇ，収率２１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ：６．７９（ｓ，２Ｈ），４．１３（ｓ，１Ｈ），３．４９（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），３．０５（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，２Ｈ），２．２５（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，２Ｈ），１．８６（ｍ，１Ｈ），１．６４（ｍ，５Ｈ），１．４９（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．３６（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：４２６［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0061】

（３）化合物（１５ａ）の調製
化合物１４ａ（３５ｍｇ）に４ｍｏｌ／Ｌ塩酸の酢酸エチル溶液（４ｍＬ）を加えて、室温（２５℃）下で容器を振とうさせた。生じた白色沈殿を濾取して酢酸エチルで洗浄した後、逆相ＨＰＬＣで精製し、化合物１５ａ（２２ｍｇ，収率７４％）を得た。ＨＰＬＣ保持時間：２５分。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：６．７１（ｓ，２Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），３．３６（ｍ，２Ｈ），２．８９（ｍ，２Ｈ），２．２３（ｍ，２Ｈ），１．７６（ｍ，２Ｈ），１．４４−１．５５（ｍ，６Ｈ），１．２３（ｍ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：３２６［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0062】

実施例８：５−（（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ）−５−オキソペンタン−１−アミニウム塩化物（１５ｂ）の調製
図４のスキームに従い、下記（１）〜（２）の手順で調製した。

【0063】

（１）ｔｅｒｔ−ブチル（５−（（５−（２，５−ジオキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）ペンチル）アミノ）−５−オキソペンチル）カルバメート（１４ｂ）の調製
実施例７（１）で得られた化合物１３のアセトニトリル溶液（８０ｍｇ／２．５ｍＬ）に化合物５ｂ（５６ｍｇ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６６ｍｇ）を加えて室温（２５℃）で５時間撹拌した。飽和塩化ナトリウム水溶液と酢酸エチルで抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１０／１（体積比））で精製し、化合物１４ｂ（９２ｍｇ，収率９５％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ_３ＯＤ，５００ＭＨｚ）δ：７．９０（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），６．８０（ｓ，２Ｈ），６．５８（ｂｒｏａｄ ｓ，１Ｈ），３．４９（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），３．１４（ｍ，２Ｈ），３．０４（ｍ，２Ｈ），２．１７（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，２Ｈ），１．４５-１．６３（ｍ，６Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ），１．２９（ｍ，２Ｈ）。
ＥＳＩ−ＭＳ ｍ／ｚ：３８２［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0064】

（２）化合物（１５ｂ）の調製
化合物１４ｂ（７０ｍｇ）に４ｍｏｌ／Ｌ塩酸の酢酸エチル溶液（１０ｍＬ）を加えて、室温（２５℃）下で容器を振とうさせた。生じた白色沈殿を濾取して酢酸エチルで洗浄し、化合物１５ｂ（２２ｍｇ，収率３８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ_２Ｏ，５００ＭＨｚ）δ：６．７４（ｓ，２Ｈ），３．４０（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），３．０６（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），２．９１（ｔ，Ｊ＝６．３０Ｈｚ，２Ｈ），２．１７（ｔ，Ｊ＝６．８７Ｈｚ，２Ｈ），１．３８−１．５６（ｍ，８Ｈ），１．１８（ｍ，２Ｈ）。

【0065】

実施例９：放射化学合成
前駆体として化合物５ａ，化合物５ｂ，化合物１５ａ，化合物１５ｂを用い、図３及び図４のスキームに従い、下記の通り、それぞれに対応する［^１８Ｆ］フッ素標識化合物；［^１８Ｆ］８ａ，［^１８Ｆ］８ｂ，［^１８Ｆ］１２ｃ，［^１８Ｆ］１２ｄを調製した。まず、Ｎ−スクシンイミジル ４−［^１８Ｆ］フルオロベンゾエートを、既報（Nat Protoc. 2006;1:1655-1661）記載の方法を用いて合成した。各前駆体０．５ｍｇにＮ−スクシンイミジル ４−［^１８Ｆ］フルオロベンゾエートのアセトニトリル溶液（６−６００ＭＢｑ、５０μＬ）とＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０μＬ）を加えて室温（２５℃）で５分反応させた。反応溶液に化合物１（１．２ｍｇ）の水溶液（１００μＬ）を加えて室温で５分反応させた。反応後に１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を５０μＬ加えて逆相ＨＰＬＣで精製した。精製後はＳｅｐ−Ｐａｋ Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅに吸着させて水１ｍＬで洗浄、メタノールで抽出した。窒素ガス気流下メタノールを除去し、生理食塩水に溶解させて各実験にて使用した。いずれの［^１８Ｆ］フッ素標識化合物も放射化学的純度９５％以上で得た。各［^１８Ｆ］フッ素標識化合物の放射化学的収率（ＲＣＹ，減衰補正）とＨＰＬＣ保持時間（ｔ_Ｒ）を以下の表１に示す。
なお、保持時間（ｔ_Ｒ）は、下記条件の保持時間である。
カラム：ＣＯＳＭＯＣＩＬ ５Ｃ１８ ＡＲ−ＩＩ ４．６×１５０ｍｍ（ナカライテスク社製）。
流速：１ｍｌ/ｍｉｎ
移動相：水、メタノール（共に０．１％トリフルオロ酢酸を含む）。
グラディエント：メタノール３０％−８０％（６０ｍｉｎ）。
各［^１８Ｆ］フッ素標識化合物は１−オクタノールと０．１ｍｍｏｌ／Ｌリン酸バッファー（ｐＨ７．４）を用いて分配計数（ｌｏｇ Ｄ）を算出した。結果は以下の表１に併せて表記した。

【0066】

【表1】

【0067】

実施例１０：親和性評価
ヒト前立腺がん細胞（ＬＮＣａＰ）を用いた結合阻害実験にて、実施例１〜６で得られた６つのウレア誘導体化合物；８ａ，８ｂ，１２ａ，１２ｂ，１２ｃ，１２ｄの親和性を評価した。ポジティブコントロールとして、２−（ホスホノメチル）ペンタン二酸（２−ＰＭＰＡ、Ｔｏｃｒｉｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社製、以下同じ）の親和性を評価した。Ｎ−［Ｎ−［（Ｓ）−１，３−ジカルボキシプロピル］カルバモイル］−Ｓ−３−ヨード−Ｌ−チロシン（［^１２５Ｉ］ＤＣＩＴ、非特許文献３と同じ方法で調製）を放射性リガンドとして用いた。１２ウェルプレート（４×１０^５細胞／ウェル）に播種したＬＮＣａＰ細胞を５％二酸化炭素雰囲気下、３７℃で４８時間インキュベートした。培地を取り去り、それぞれのウェルを５００μＬアッセイ培地（０．５％ウシ血清アルブミンが付加されたＲＰＭＩ１６４０培地）で２度洗浄した。［^１２５Ｉ］ＤＣＩＴのアッセイ培地溶液（２９．６ｋＢｑ／ｍＬ）を５００μＬ／ｍＬと、各ウレア誘導体化合物を加え、３７℃で１時間インキュベートした。非特異的結合は、２−ＰＭＰＡを０．５ｍｍｏｌ／Ｌを加えることによって評価した。インキュベーションした後、各ウェルは５００μＬの上記アッセイ培地で二度洗浄し、細胞を０．２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液に溶解した。細胞に結合した放射能は、γカウンターで測定した。ＩＣ５０値をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ５プログラム（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社製）で計算し、Ｋｉ値をＣｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いて計算した。６つのウレア誘導体化合物の親和性は以下の表２に示す通りとなった。

【0068】

【表2】

【0069】

実施例１１：血漿中安定性
実施例９に示す方法で調製した［^１８Ｆ］フッ素標識化合物；［^１８Ｆ］８ａ，［^１８Ｆ］８ｂ，［^１８Ｆ］１２ｃ，［^１８Ｆ］１２ｄのインビトロでの安定性を、マウス血漿を用いて評価した。マウス血漿は、Ｃ．Ｂ．−１７／Ｉｃｒ ＋／＋ Ｊｃｌ雄性マウス（２０〜２２ｇ）をイソフルランで麻酔し、心臓から血液を収集して遠心分離（１５００×ｇ）にかけ、上澄みを‐８０℃で保存したものを使用した。［^１８Ｆ］フッ素標識化合物（２０μＬ、０．６−１．５ＭＢｑ）をそれぞれマウス血漿１００μＬに加え、３７℃で１時間インキュベートした。インキュベーション後、メタノール（１５０μＬ）を加え、遠心分離（５０００×ｇ）にかけた。上澄みを回収し、コスモナイスフィルター（Ｓ）（０．４５μｍ、４ｍｍ）でろ過して、ろ液の分析を高速液体クロマトグラフィーで行った。このときの分析条件は、実施例９で示したものを用いた。その結果、各［^１８Ｆ］フッ素標識化合物；［^１８Ｆ］８ａ，［^１８Ｆ］８ｂ，［^１８Ｆ］１２ｃ，［^１８Ｆ］１２ｄはいずれも、分解物を認めず９５％以上が安定に存在した。

【0070】

実施例１２：体内分布実験
実施例９に示す方法で調製した［^１８Ｆ］フッ素標識化合物［^１８Ｆ］８ａ，［^１８Ｆ］８ｂ，［^１８Ｆ］１２ｃ，［^１８Ｆ］１２ｄの生体内分布を、ヒト前立腺がん細胞（ＬＮＣａＰ，ＰＣ−３）を前述の方法で移植した腫瘍移植マウス（２２〜２５ｇ）を用いて評価した。生理食塩水に溶解させた各［^１８Ｆ］フッ素標識化合物（１００μＬ、３７ｋＢｑ）をマウス（ｎ＝４）に尾静脈投与して、投与後２，１５，６０分後の各組織における放射能量を組織摘出法にて評価した。各［^１８Ｆ］フッ素標識化合物の生体内分布は以下の表３−１及び表３−２に示す通りとなった。表３−１及び表３−２の数値は平均±標準偏差として表記、単位は％ＩＤ／ｇとして示した（胃のみ％ＩＤ）。何れもＬＮＣａＰに集積し、中でも［^１８Ｆ］８ａが最も高い集積を示した。ＰＳＭＡ非発現腫瘍（ＰＣ−３）への集積は認められなかった。

【0071】

【表3-1】

【0072】

【表3-2】

【0073】

実施例１３： インビボブロッキング評価
最も高い腫瘍集積（ＬＮＣａＰ）を認めた化合物［^１８Ｆ］８ａ（１００μＬ、３７ｋＢｑ）と２−ＰＭＰＡ（５０ｍｇ／ｋｇ）を、腫瘍移植マウス（２２−２４ｇ）に同時に尾静脈投与し、３０分後に断頭して、実施例１２の結果に対する腫瘍集積の変化を評価した。結果を図５に示す。図５から明らかなように、２−ＰＭＰＡと同時投与を行った場合、ＬＮＣａＰと血中放射能量の比は０．９５となり、［^１８Ｆ］８ａ単独投与の場合の値１６．９よりも有意に低下した。

【0074】

実施例１４：ＰＥＴ撮像
放射性フッ素標識化合物［^１８Ｆ］８ａと放射性フッ素標識化合物［^１８Ｆ］１２ｃのＰＥＴ／ＣＴ撮像を行った。ＰＥＴ／ＣＴ装置は、Gamma Medica-Ideas, Inc.製のものを用いた。腫瘍移植マウス（２０〜２５ｇ）を２．５％イソフルラン／空気で麻酔し、温熱パッドに置いて体温を維持した。各放射性フッ素標識化合物（３．７−１１．１ＭＢｑ）を尾静脈投与した。競合実験は、［^１８Ｆ］８ａと、２−ＰＭＰＡ（５０ｍｇ／ｋｇ）とを含む生理食塩液（０．１０ｍＬ）を尾静脈投与することにより行った。ＣＴスキャンの後、ＰＥＴスキャンを３０〜６４分収集した。
結果を図６及び図７に示す。図６、７中、矢印で指す部位がＬＮＣａＰの移植部位であり、破線で囲んだ部分がＰＣ−３の移植部位である。図６及び図７から明らかなように、いずれのプローブもＬＮＣａＰを明瞭に描出した。放射性化合物［^１８Ｆ］８ａは肝臓から速やかに消失し、投与１時間後（６０〜６５分）には腎臓、膀胱、ＬＮＣａＰに高い集積を認めた。一方、放射性化合物［^１８Ｆ］１２ｃは投与１時間後においても肝臓に放射能の集積を認めた。
２−ＰＭＰＡと放射性化合物［^１８Ｆ］８ａを同時に投与した結果を図８に示す。この場合、図８から明らかなように、腎臓とＬＮＣａＰにおける集積が阻害され、投与１時間後にはほぼ全ての放射能が膀胱に移行した。

【産業上の利用可能性】

【0075】

本発明の化合物は、ＰＳＭＡへ特異的に集積するので、ＰＳＭＡの発現が関与する各種疾患の診断に有用であり、放射性画像診断薬の分野で広く利用できる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】