特許 6387220 フィラグリン発現促進剤およびそれを用いた化粧品、皮膚外用剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6387220

(24)【登録日】2018年8月17日

(45)【発行日】2018年9月5日

(54)【発明の名称】フィラグリン発現促進剤およびそれを用いた化粧品、皮膚外用剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/67 20060101AFI20180827BHJP

   A61K 31/355 20060101ALI20180827BHJP

   A61P 17/16 20060101ALI20180827BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20180827BHJP

【ＦＩ】

   A61K8/67

   A61K31/355

   A61P17/16

   A61Q19/00

【請求項の数】1

【全頁数】9

(21)【出願番号】特願2013-39015(P2013-39015)

(22)【出願日】2013年2月28日

(65)【公開番号】特開2014-166964(P2014-166964A)

(43)【公開日】2014年9月11日

【審査請求日】2015年12月29日

【審判番号】不服2017-15088(P2017-15088/J1)

【審判請求日】2017年10月10日

(73)【特許権者】

【識別番号】391045554

【氏名又は名称】株式会社クラブコスメチックス

(74)【代理人】

【識別番号】110001195

【氏名又は名称】特許業務法人深見特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】石田 喬裕

(72)【発明者】

【氏名】坂口 育代

【合議体】

【審判長】 關 政立

【審判官】 井上 明子

【審判官】 冨永 みどり

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第０２／０５３１２７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２００３−１４６８８６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１０−１８４９０８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 フレグランスジャーナル臨時増刊 Ｎｏ．１５，１９９６年 ３月 １日，ｐ．１６９−１７８

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

A61K8/00-8/99

A61Q1/00-90/00

ＪＳＴＰｌｕｓ、ＪＳＴ７５８０（以上ＪＤｒｅａｍＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

２〜３重量％のｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種を有効成分として含有するフィラグリン発現促進剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、トコフェロールを有効成分として含有するフィラグリン発現促進剤に関する。本発明はまた、本発明のフィラグリン発現促進剤を含む化粧品、皮膚外用剤に関する。

【背景技術】

【0002】

皮膚の水分保持において角質層は重要な役割を果たしている。その役割を担う因子の１つとして、遊離アミノ酸などから構成される天然保湿因子ｎａｔｕｒａｌ ｍｏｉｓｔｕｒｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ（ＮＭＦ）がある（たとえば、Ｅｌｅｏｎｏｒａ Ｃａｎｄｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｔｈｅ Ｃｏｒｎｉｆｉｅｄ Ｅｎｖｅｌｏｐｅ：Ａ Ｍｏｄｅｌ Ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｉｎ Ｔｈｅ Ｓｋｉｎ」，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，６（４）：３２８−３４０，２００５（非特許文献１）を参照。）。このＮＭＦ中の遊離アミノ酸は表皮顆粒層に発現しているフィラグリンが前駆物質であり、フィラグリンが正常に発現および分解されることで適切に供給される（たとえば、Ｎｏｒｉａｋｉ Ｎａｋａｇａｗａ ｅｔ ａｌ．，「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ Ｂｅｔｗｅｅｎ ＮＭＦ（Ｌａｃｔａｔｅ ａｎｄ Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ） Ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｒａｔｕｍ Ｃｏｒｎｅｕｍ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｓｕｂｊｅｃｔｓ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１２２（３）：７５５−７６３，２００４（非特許文献２）を参照。）。ＮＭＦは角層に水分を与えるため、角層に柔軟性を与え、また落屑に関与する酵素の働きも正常化する（たとえば、山本明美、皮膚アレルギーフロンティア、８（１）：１３−１７、２０１０（非特許文献３）を参照。）。

【0003】

フィラグリンは角質水分量を保持するＮＭＦの前駆物質として重要な役割を果たすだけでなく、角質細胞の形成に際して、ケラチン線維同士を凝集させて細胞全体を扁平化させ、また、その一部はトランスグルタミナーゼによって他のタンパクに架橋され、細胞膜上での辺縁帯形成に寄与している（たとえば、須賀康、「表皮保湿因子とその機能；とくにフィラグリンを中心に」、日本香粧品学会誌、３４（１）：１９−２３、２０１０（非特許文献４）を参照。）。

【0004】

角層中の遊離アミノ酸の低下は、乾燥肌および角層バリア機能の低下を誘導し、尋常性魚鱗癬およびアトピー性皮膚炎などの病態形成に深く関わり、これら疾患の乾燥した皮膚ではフィラグリン発現の低下が認められる（たとえば、Ｉ．Ｈｏｒｉｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｈｙｄｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｘｅｒｏｔｉｃ ｓｋｉｎ」，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１２１（５）：５８７−５９２，１９８９（非特許文献５）およびＡｌａｎ Ｄ．Ｉｒｖｉｎｅ ｅｔ ａｌ．，「Ｂｒｅａｋｉｎｇ ｔｈｅ （Ｕｎ）Ｓｏｕｎｄ Ｂａｒｒｉｅｒ：Ｆｉｌａｇｇｒｉｎ Ｉｓ ａ Ｍａｊｏｒ Ｇｅｎｅ ｆｏｒ Ａｔｏｐｉｃ Ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１２６（６）：１２００−１２０２，２００６（非特許文献６）を参照。）。また、アトピー性皮膚炎では角層ｐＨが弱酸性（正常）から中性に上昇し（たとえば、Ｋｎｏｒ Ｔ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｈｙｄｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｋｉｎ ｓｕｒｆａｃｅ ｐＨ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ」、Ａｃｔａ Ｄｅｒｍａｔｏｖｅｎｅｒｏｌ Ｃｒｏａｔ，１９（４）：２４２−２４７，２０１１（非特許文献７）を参照。）、角質層キモトリプシン酵素（ＳＣＣＥ）などの角層プロテアーゼの至適ｐＨとなり、バリア機能が低下することも報告されている（たとえば、Ａｋｉｈａｒｕ Ｋｕｂｏ ｅｔ ａｌ．，「Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｂａｒｒｉｅｒ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ａｔｏｐｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１２２（２）：４４０−４４７，２０１２（非特許文献８）を参照。）。さらに、老人性乾皮症の角層ではその重症度に応じて遊離アミノ酸量が低下し、それにはフィラグリンの発現低下によるＮＭＦ、すなわち、遊離アミノ酸の不足が示されている（たとえば、上述した非特許文献５、Ｔｏｎｙ Ｍ Ｊａｃｏｂｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，「Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ａｇｉｎｇ ａｎｄ Ｘｅｒｏｓｉｓ ｏｎ ｔｈｅ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，９５（３）：２９６−３００，１９９０（非特許文献９）を参照。）。これらの報告からも、フィラグリンが角質層の水分保持および角層バリア機能に関っていることが分かる。

【0005】

フィラグリンは皮膚の保水機能に関わるだけでなく、さらなる多面的な機能を有することが報告されている（たとえば、上述した非特許文献４を参照。）。

【0006】

フィラグリンは角層においてアミノ酸にまで分解された後に、その一部はウロカニン酸に代謝され、皮膚の紫外線障害を防御する役割も担っていると考えられている（たとえば、Ｃａｔｅｒｉｎａ Ｂａｒｒｅｓｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅｍｉｃ Ｍｉｃｅ ｔｏ ＵＶＢ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｓｕｇｇｅｓｔｓ ａ Ｃｒｕｃｉａｌ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ Ｕｒｏｃａｎｉｃ Ａｃｉｄ ｉｎ Ｐｈｏｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１３１（１）：１８８−１９４，２０１１（非特許文献１０）、Ｉａｎ Ｒ．Ｓｃｏｔｔ，「Ｆａｃｔｏｒｓ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ ａｍｍｏｎｉａ−ｌｙａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｒｏｃａｎｉｃ ａｃｉｄ」，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，１９４（３）：８８４−８８６，１９９５（非特許文献１１）を参照。）。フィラグリンは天然のサンスクリーン作用を示すウロカニン酸の供給源でもある。

【0007】

また、フィラグリンが１０〜１２個つながった構造を有するプロフィラグリンに存在するＮ末端ドメインは、酵素によって切り離された後に核移行して、表皮の最終角化過程、すなわち、角化に伴う脱核現象（アポトーシス）に寄与することが示唆されている（たとえば、Ｄａｖｉｄ Ｊ．Ｐｅａｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，「Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｒｏｆｉｌａｇｇｒｉｎ Ｎ−Ｔｅｒｍｉｎａｌ Ｐｅｐｔｉｄｅ：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｏｍａｉｎｓ ｔｈａｔ Ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｄ Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１１９（３）：６６１−６６９，２００２（非特許文献１２）を参照。）。

【0008】

以上のことから、表皮顆粒層で発現するフィラグリンの発現促進を通じて、角質層の水分保持を高めるとともに紫外線から皮膚を守り、角化を促進させて、皮膚を健康な状態に保つことができると考えられる。

【0009】

これまで、フィラグリン発現促進剤として、たとえばカンゾウ抽出物（たとえば特開２００２−３６３０５４号公報（特許文献１）を参照。）、天然植物中に含まれるフラバノン配糖体リクイリチン（たとえば特開２００３−１４６８８６号公報（特許文献２）を参照。）、ワイルドタイム抽出物、チョウジ抽出物、サルビア抽出物、ローヤルゼリー抽出物、シイタケ抽出物、ジオウ抽出物、カミツレ抽出物、アルニカ抽出物、アロエ抽出物、オウゴン抽出物またはオウバク抽出物（たとえば特開２００６−１６３３７号公報（特許文献３）を参照。）、シラカンバ抽出物（たとえば特開２００７−２１７３２５号公報（特許文献４）を参照。）、ヒトリシズカ抽出物（たとえば特開２００８−８８０７５号公報（特許文献５）を参照。）、ロスマリン酸およびエリオジクチオール（たとえば特開２０１０−９００３７号公報（特許文献６）を参照。）、クラゲ液化物（たとえば特開２０１１−１１６６７２号公報（特許文献７）を参照。）、ダビジゲニン（たとえば特開２０１２−１０２０４０号公報（特許文献８）を参照。）、サクランボ抽出物（たとえば特開２０１２−１７６０４８号公報（特許文献９）を参照。）、ハッカ抽出物（たとえば特開２０１２−１８８３９９号公報（特許文献１０）を参照。）などが知られている。

【0010】

一方、ｄｌ−α−トコフェロールに関しては、抗酸化作用を中心に血流促進、抗炎症、抗動脈作用などが報告されている（たとえば、Ｊｏａｎ Ｍ．Ｃｏｏｋ−Ｍｉｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，「Ｉｓｏｆｏｒｍｓ ｏｆ Ｖｉｔａｍｉｎｅ Ｅ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ Ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ」，Ｅｎｄｏｒ Ｍｅｔａｂ Ｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｏｒｄ Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ，１０（４）：３４８−３６６，２０１０（非特許文献１３）を参照。）。皮膚に関しては、（たとえばＳｌｏｂｏｄａｎｋａ Ｔａｍｂｕｒｉｃ ｅｔ ａｌ．，「Ｍｏｉｓｔｕｒｉｚｉｎｇ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｄ−α−Ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ」，Ａｌｌｕｒｅｄ’ｓ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ ＆ Ｔｏｉｌｅｔｒｉｅｓ ｍａｇａｚｉｎｅ．１１４（５）：７３−８２，１９９９（非特許文献１４）を参照。）ｄｌ−α−トコフェロールによる抗酸化作用を介した作用ではあるものの、ｄｌ−α−トコフェロールによる紫外線防御、シワ防止、老化予防、保湿に関する報告がある。

【0011】

近年では、α−、β−などの各種トコフェロールがヒト表皮角化細胞のｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ（ＰＰＡＲｓ）−γの発現を高め、そのターゲット遺伝子であるトランスグルタミナーゼ−１の発現を増加させることを示した報告がなされている（たとえば、Ｍ．Ｃｌａｒａ Ｄｅ Ｐａｓｃａｌｅ ｅｔ ａｌ．，「Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ−１ ａｎｄ ＰＰＡＲγ ａｆｔｅｒ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ」，Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ，４４７：９７−１０６，２００６（非特許文献１５）を参照。）。これに関連して、ＰＰＡＲ−γの発現増加および活性化は転写因子ＡＰ−１、ＭＡＰキナーゼの１種ｐ３８の活性を高め、インボルクリンの発現を増加させることも報告されている（たとえば、Ｘｉｕｊｕ Ｄａｉ ｅｔ ａｌ．，「ＰＰＡＲγ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ １α，２５−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｖｉｔａｍｉｎ Ｄ３−ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｖｏｌｕｃｒｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， ５０：５３−６０，２００８（非特許文献１６）を参照。）。

【0012】

しかしながら、ｄｌ−α−トコフェロールによるフィラグリン発現の促進作用、ＮＭＦ産生促進、角層アミノ酸増加に関しては未だ報告されていない。また、皮膚外用剤の有効成分として、安全性などの観点から、生体に存在している成分によるフィラグリン発現を促進させる成分の開発が望まれていた。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0013】

【特許文献1】特開２００２−３６３０５４号公報

【特許文献2】特開２００３−１４６８８６号公報

【特許文献3】特開２００６−１６３３７号公報

【特許文献4】特開２００７−２１７３２５号公報

【特許文献5】特開２００８−８８０７５号公報

【特許文献6】特開２０１０−９００３７号公報

【特許文献7】特開２０１１−１１６６７２号公報

【特許文献8】特開２０１２−１０２０４０号公報

【特許文献9】特開２０１２−１７６０４８号公報

【特許文献10】特開２０１２−１８８３９９号公報

【非特許文献】

【0014】

【非特許文献1】Ｅｌｅｏｎｏｒａ Ｃａｎｄｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｔｈｅ Ｃｏｒｎｉｆｉｅｄ Ｅｎｖｅｌｏｐｅ：Ａ Ｍｏｄｅｌ Ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｉｎ Ｔｈｅ Ｓｋｉｎ」，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，６（４）：３２８−３４０，２００５

【非特許文献2】Ｎｏｒｉａｋｉ Ｎａｋａｇａｗａ ｅｔ ａｌ．，「Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ Ｂｅｔｗｅｅｎ ＮＭＦ（Ｌａｃｔａｔｅ ａｎｄ Ｐｏｔａｓｓｉｕｍ） Ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｔｒａｔｕｍ Ｃｏｒｎｅｕｍ ｉｎ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｓｕｂｊｅｃｔｓ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１２２（３）：７５５−７６３，２００４

【非特許文献3】山本明美、皮膚アレルギーフロンティア、８（１）：１３−１７、２０１０

【非特許文献4】須賀康、「表皮保湿因子とその機能；とくにフィラグリンを中心に」、日本香粧品学会誌、３４（１）：１９−２３、２０１０

【非特許文献5】Ｉ．Ｈｏｒｉｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｈｙｄｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｉｎ ｘｅｒｏｔｉｃ ｓｋｉｎ」，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１２１（５）：５８７−５９２，１９８９

【非特許文献6】Ａｌａｎ Ｄ．Ｉｒｖｉｎｅ ｅｔ ａｌ．，「Ｂｒｅａｋｉｎｇ ｔｈｅ （Ｕｎ）Ｓｏｕｎｄ Ｂａｒｒｉｅｒ：Ｆｉｌａｇｇｒｉｎ Ｉｓ ａ Ｍａｊｏｒ Ｇｅｎｅ ｆｏｒ Ａｔｏｐｉｃ Ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１２６（６）：１２００−１２０２，２００６

【非特許文献7】Ｋｎｏｒ Ｔ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｔｒａｔｕｍ ｃｏｒｎｅｕｍ ｈｙｄｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｋｉｎ ｓｕｒｆａｃｅ ｐＨ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｔｏｐｉｃ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ」、Ａｃｔａ Ｄｅｒｍａｔｏｖｅｎｅｒｏｌ Ｃｒｏａｔ，１９（４）：２４２−２４７，２０１１

【非特許文献8】Ａｋｉｈａｒｕ Ｋｕｂｏ ｅｔ ａｌ．，「Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｂａｒｒｉｅｒ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ ｉｎ ａｔｏｐｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ，１２２（２）：４４０−４４７，２０１２

【非特許文献9】Ｔｏｎｙ Ｍ Ｊａｃｏｂｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，「Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ａｇｉｎｇ ａｎｄ Ｘｅｒｏｓｉｓ ｏｎ ｔｈｅ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，９５（３）：２９６−３００，１９９０

【非特許文献10】Ｃａｔｅｒｉｎａ Ｂａｒｒｅｓｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｈｉｓｔｉｄｉｎｅｍｉｃ Ｍｉｃｅ ｔｏ ＵＶＢ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｓｕｇｇｅｓｔｓ ａ Ｃｒｕｃｉａｌ Ｒｏｌｅ ｏｆ Ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ Ｕｒｏｃａｎｉｃ Ａｃｉｄ ｉｎ Ｐｈｏｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１３１（１）：１８８−１９４，２０１１

【非特許文献11】Ｉａｎ Ｒ．Ｓｃｏｔｔ，「Ｆａｃｔｏｒｓ ｃｏｎｔｒｏｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｉｓｔｉｄｉｎｅ ａｍｍｏｎｉａ−ｌｙａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｕｒｏｃａｎｉｃ ａｃｉｄ」，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，１９４（３）：８８４−８８６，１９９５

【非特許文献12】Ｄａｖｉｄ Ｊ．Ｐｅａｒｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，「Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｐｒｏｆｉｌａｇｇｒｉｎ Ｎ−Ｔｅｒｍｉｎａｌ Ｐｅｐｔｉｄｅ：Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｏｍａｉｎｓ ｔｈａｔ Ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｎｕｃｌｅａｒ ａｎｄ Ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ」，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，１１９（３）：６６１−６６９，２００２

【非特許文献13】Ｊｏａｎ Ｍ．Ｃｏｏｋ−Ｍｉｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，「Ｉｓｏｆｏｒｍｓ ｏｆ Ｖｉｔａｍｉｎｅ Ｅ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ Ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ」，Ｅｎｄｏｒ Ｍｅｔａｂ Ｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｏｒｄ Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔｓ，１０（４）：３４８−３６６，２０１０

【非特許文献14】Ｓｌｏｂｏｄａｎｋａ Ｔａｍｂｕｒｉｃ ｅｔ ａｌ．，「Ｍｏｉｓｔｕｒｉｚｉｎｇ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｄ−α−Ｔｏｃｏｐｈｅｒｏｌ」，Ａｌｌｕｒｅｄ’ｓ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ ＆ Ｔｏｉｌｅｔｒｉｅｓ ｍａｇａｚｉｎｅ．１１４（５）：７３−８２，１９９９

【非特許文献15】Ｍ．Ｃｌａｒａ Ｄｅ Ｐａｓｃａｌｅ ｅｔ ａｌ．，「Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｇｌｕｔａｍｉｎａｓｅ−１ ａｎｄ ＰＰＡＲγ ａｆｔｅｒ ｖｉｔａｍｉｎ Ｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ」，Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃｓ，４４７：９７−１０６，２００６

【非特許文献16】Ｘｉｕｊｕ Ｄａｉ ｅｔ ａｌ．，「ＰＰＡＲγ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ １α，２５−ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｖｉｔａｍｉｎ Ｄ３−ｉｎｄｕｃｅｄ ｉｎｖｏｌｕｃｒｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ， ５０：５３−６０，２００８

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

本発明は、上記課題を解決するためになされたものであって、その目的とするところは、生体に存在している成分によるフィラグリン発現を促進させる成分を用いた新規なフィラグリン発現促進剤、ならびに、それを適用した化粧品、皮膚外用剤を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0016】

本発明のフィラグリン発現促進剤は、トコフェロールを有効成分として含有することを特徴とする。

【0017】

本発明のフィラグリン発現促進剤におけるトコフェロールは、ｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種であることが好ましい。

【0018】

本発明のフィラグリン発現促進剤は、ｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種の含有量が１〜３％であることが好ましい。

【0019】

本発明はまた、上述した本発明のフィラグリン発現促進剤を含む化粧品についても提供する。

【0020】

本発明はさらに、上述した本発明のフィラグリン発現促進剤を含む皮膚外用剤についても提供する。

【発明の効果】

【0021】

本発明のフィラグリン発現促進剤およびそれを用いた化粧品、皮膚外用剤によれば、生体にも存在しているトコフェロールを用いているため、高い安全性で、フィラグリン発現の促進作用、ＮＭＦ産生促進、角層アミノ酸増加などの効果が奏される。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】実験例１の結果を示すグラフであり、縦軸は発現比（％）である。

【図2】実験例２の結果を示すグラフであり、縦軸は発現比（％）である。

【発明を実施するための形態】

【0023】

本発明のフィラグリン発現促進剤は、トコフェロールを有効成分として含有することを特徴とする。後述する実験例において立証するように、本発明者らは、ヒト培養皮膚三次元モデルにｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロールを添加して、フィラグリン蛋白の発現を検討した結果、コントロールに対してｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロールを添加するとフィラグリン蛋白の発現が有意に増加することを見出した。これにより、生体に存在しているトコフェロールを用いることで高い安全性を有しながら、フィラグリン発現の促進作用、ＮＭＦ産生促進、角層アミノ酸増加などの効果が奏される。

【0024】

本発明において、トコフェロールとしては、たとえばｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール、コハク酸トコフェロールなどから選ばれる少なくとも１種を特に制限なく用いることができる。中でも、ｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種が好ましい。なお、本発明におけるトコフェロールは、たとえばｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールの混合物であっても勿論よい。

【0025】

本発明のフィラグリン発現促進剤において、ｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種の含有量は、特に制限されるものはないが、重量％で、１〜３％の範囲内であることが好ましい。ｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種の含有量が１％未満である場合には、フィラグリン発現促進作用が十分に得られずに主に抗酸化作用が発揮される傾向にあるためであり、また、ｄｌ−α−トコフェロールおよび酢酸ｄｌ−α−トコフェロールから選ばれる少なくとも１種の含有量が３％を超えたとしても、フィラグリン発現がさらに増加する傾向はない。

【0026】

本発明のフィラグリン発現促進剤は、トコフェロールを有効成分とするのであれば、それ以外の成分については特に制限はなく、本発明の効果を阻害しない範囲で、水、油分、保湿剤、界面活性剤、植物抽出エキス、酸化防止剤、防腐剤、殺菌剤、粉末成分、増粘性高分子、色素、ｐＨ調整剤、香料などの公知の添加剤を含有していても勿論よい。

【0027】

本発明は、上述した本発明のフィラグリン発現促進剤を含む化粧品、皮膚外用剤についても提供する。本発明の化粧品は、従来公知の適宜の形態の化粧品であってよく、特に制限されるものではない。また、本発明の皮膚外用剤としても、たとえば軟膏、クリーム、ローションなど皮膚に適用するための外用剤として従来公知の適宜の形態を採用することができ、特に制限されるものではない。

【0028】

＜実験例１＞
〔１〕フィラグリン蛋白の発現
ヒト三次元培養表皮ＬａｂＣｙｔｅ ＥＰＩ−ＭＯＤＥＬ（株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製）にアッセイ培地（株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製）を添加して培養後、１％、２％または３％の濃度のｄｌ−α−トコフェロールを添加し、培養した。ｄｌ−α−トコフェロール添加後の表皮モデルを３、６時間後に回収し、ホルマリン固定、パラフィン包埋後、４μｍの組織切片を作製した。その組織切片を、抗ヒトｆｉｌａｇｇｒｉｎ ｍＡｂ−ＩｇＧマウス抗体（一次抗体）（Ａｂｃａｍ製）、ペルオキシダーゼ標識抗マウスＩｇＧ／ＨＲＰ抗体（二次抗体）（Ｄａｋｏ製）で処理し、フィラグリン蛋白の免疫染色を実施した。組織像は、高感度ＣＣＤカメラにて撮影し、フィラグリン蛋白発現は解析ソフトを用いて計測した。

【0029】

図１は、実験例１の結果を示すグラフであり、縦軸は発現比（％）である。図１に示した様に、ｄｌ−α−トコフェロールを添加するとコントロールと比較してフィラグリン蛋白の発現が増加し、特に添加濃度２％以上で発現が高まった。

【0030】

＜実験例２＞
ヒト三次元培養表皮ＬａｂＣｙｔｅ ＥＰＩ−ＭＯＤＥＬ（株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製）にアッセイ培地（株式会社ジャパン・ティッシュ・エンジニアリング製）を添加して培養後、２％の濃度の酢酸ｄｌ−α−トコフェロールを添加し、培養した。酢酸ｄｌ−α−トコフェロール添加後の表皮モデルを３、６時間後に回収し、ホルマリン固定、パラフィン包埋後、４μｍの組織切片を作製した。その組織切片を、抗ヒトｆｉｌａｇｇｒｉｎ ｍＡｂ−ＩｇＧマウス抗体（一次抗体）（Ａｂｃａｍ製）、ペルオキシダーゼ標識抗マウスＩｇＧ／ＨＲＰ抗体（二次抗体）（Ｄａｋｏ製）で処理し、フィラグリン蛋白の免疫染色を実施した。組織像は、高感度ＣＣＤカメラにて撮影し、フィラグリン蛋白発現は解析ソフトを用いて計測した。

【0031】

図２は、実験例２の結果を示すグラフであり、縦軸は発現比（％）である。図２に示した様に、酢酸ｄｌ−α−トコフェロールを添加するとコントロールと比較してフィラグリン蛋白の発現が増加した。

【0032】

今回開示された実施形態および実験例はすべての点で例示であって制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は上記した説明ではなくて特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と均等の意味および範囲内でのすべての変更が含まれることが意図される。

【図1】

【図2】