特許 6388162 抗トリパノソ−マ原虫活性物質アクチノアロライド類及びその製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6388162

(24)【登録日】2018年8月24日

(45)【発行日】2018年9月12日

(54)【発明の名称】抗トリパノソ−マ原虫活性物質アクチノアロライド類及びその製造方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 493/08 20060101AFI20180903BHJP

   A61K 31/365 20060101ALI20180903BHJP

   A61P 33/00 20060101ALI20180903BHJP

   C12P 17/18 20060101ALI20180903BHJP

   C12N 1/20 20060101ALI20180903BHJP

【ＦＩ】

   C07D493/08 CCSP

   A61K31/365

   A61P33/00

   C12P17/18 D

   C12N1/20 A

【請求項の数】14

【全頁数】28

(21)【出願番号】特願2014-557416(P2014-557416)

(86)(22)【出願日】2014年1月17日

(86)【国際出願番号】JP2014000229

(87)【国際公開番号】WO2014112387

(87)【国際公開日】20140724

【審査請求日】2017年1月16日

(31)【優先権主張番号】特願2013-7684(P2013-7684)

(32)【優先日】2013年1月18日

(33)【優先権主張国】JP

【微生物の受託番号】NPMD  NITE BP-01208

(73)【特許権者】

【識別番号】598041566

【氏名又は名称】学校法人北里研究所

(73)【特許権者】

【識別番号】513014765

【氏名又は名称】マヒドン大学

(74)【代理人】

【識別番号】100120293

【弁理士】

【氏名又は名称】中谷 智子

(72)【発明者】

【氏名】大村 智

(72)【発明者】

【氏名】高橋 洋子

(72)【発明者】

【氏名】乙黒 一彦

(72)【発明者】

【氏名】稲橋 佑起

(72)【発明者】

【氏名】岩月 正人

(72)【発明者】

【氏名】松本 厚子

(72)【発明者】

【氏名】パンバングレド， ワタナライ

【審査官】 小金井 悟

(56)【参考文献】

【文献】 特開２０１１−１７８７３８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１０−０１８５６２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 J. Antibiot.，２０１２年 ４月，Vol.65, No.4，p.197-202

【文献】 J. Antibiot.，２０１１年 ４月，Vol.64, No.4，p.303-307

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ１２Ｐ １／００−４１／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＢＩＯＳＩＳ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記式Ｉで表される化合物。

【化1】

【請求項2】

下記式ＩＩで表される化合物。

【化2】

【請求項3】

下記式ＩＩＩで表される化合物。

【化3】

【請求項4】

下記式ＩＶで表される化合物。

【化4】

【請求項5】

下記式Ｖで表される化合物。

【化5】

【請求項6】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を生産する能力を有するアクチノアロムラス属の放線菌に属する微生物を培地で培養し、培養物中請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を蓄積せしめ、該培養物から請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の製造方法。

【請求項7】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を生産する能力を有する放線菌に属する微生物が、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６（受領番号 ＮＩＴＥ ＡＢＰ−１２０８）株である請求項６記載の製造方法。

【請求項8】

アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６（受領番号 ＮＩＴＥ ＡＢＰ−１２０８）株。

【請求項9】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を有効成分として含有するトリパノソ−マ原虫の増殖阻害活性剤。

【請求項10】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を有効成分として含有するトリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療薬又は予防薬。

【請求項11】

トリパノソ−マ原虫がヒト感染性トリパノソ−マ原虫である請求項１０に記載の治療薬又は予防薬。

【請求項12】

ヒト感染性トリパノソ−マ原虫がガンビアトリパノソ−マ原虫、ロ−デシアトリパノソ−マ原虫及び亜属のトリパノソ−マ・クル−ジ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ）、トリパノソ−マ・ブルセイ（Ｔ． ｂｒｕｃｅｉ）、トリパノソ−マ・コンゴレンス（Ｔ． ｃｏｎｇｏｌｅｎｓｅ）、トリパノソ−マ・バイバックス（Ｔ． ｖｉｖａｘ）、トリパノソ−マ・エバンシ（Ｔ． ｅｖａｎｓｉ）、トリパノソ−マ・タイレリ（Ｔ． ｔｈｅｉｌｅｒｉ）又はトリパノソ−マ・エキパ−ダム（Ｔ． ｅｑｕｉｐｅｒｄｕｍ）である、請求項１１に記載の治療薬又は予防薬。

【請求項13】

トリパノソ−マ原虫が家畜感染性トリパノソ−マ原虫である請求項１０に記載の治療薬又は予防薬。

【請求項14】

家畜感染性トリパノソ−マ原虫がＴ． ｂｒｕｃｅｉ ｂｒｕｃｅｉ（ナガナ病起因原虫）、Ｔ． ｖｉｖａｘ ｖｉｖａｘ（ズ−マ病起因原虫）、Ｔ． ｅｖａｎｓｉ（ス−ラ病起因原虫）、又はＴ． ｅｑｕｉｐｅｒｄｕｍ（媾疫病起因原虫）である請求項１３に記載の治療薬又は予防薬。

【発明の詳細な説明】

【クロスリファレンス】

【0001】

本願は、２０１３年１月１８日に日本国特許庁に対して出願された、特願２０１３−００７６８４号からの優先権を主張するものである。特願２０１３−００７６８４号に記載の内容は全て参照によりそのまま本願に組み込まれる。また、本願全体を通して引用される全文献は参照によりそのまま本願に組み込まれる。

【技術分野】

【0002】

本発明は、トリパノソ−マ原虫の増殖阻害の分野に属する。具体的には、本発明は、動物薬、医薬品として有効なトリパノソ−マ原虫の増殖阻害活性を有する化合物、その製造法、及びその利用に関する。特に本発明は、本発明の化合物を有効成分として含有するトリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療薬又は予防薬（本明細書において、「抗トリパノソ−マ薬」と呼ぶことがある）に関する。

【背景技術】

【0003】

トリパノソ−マ症にはアフリカ地域で流行しているアフリカ睡眠病（ヒトアフリカトリパノソ−マ症）と南米地域で流行しているシャ−ガス病がある。アフリカ睡眠病は、再興原虫感染症であり、感染リスクが７，０００万人、年間死亡者が約５万人に及ぶとされている。特にヒトに寄生するトリパノソ−マ原虫類はガンビアトリパノソ−マ原虫（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ ｇａｍｂｉｅｎｓｅ）及びロ−デシアトリパノソ−マ原虫（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓ）の２種類に分類され、前者は慢性睡眠病、後者は急性睡眠病を引き起こす。感染末期には中枢神経系に原虫が移行し、トリパノソ−マ原虫感染者の８０％以上が昏睡状態に陥り、死に至るという死亡率の高い感染症である。これらのトリパノソ−マ原虫はアフリカにのみ生息するツェツェバエによって媒介される。

【0004】

さらに、ガンビアトリパノソ−マ原虫及びロ−デシアトリパノソ−マ原虫は人畜共通寄生虫であり、ウシ、ウマ、ヒツジ等の家畜及びガゼルやヌ−等の野生動物にも寄生する。これらの動物は保有宿主となるが発症しない。またヒトには寄生せず、家畜動物に寄生する他種類のトリパノソ−マ原虫も存在する。Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ亜属の原虫であるＴ． ｂｒｕｃｅｉ ｂｒｕｃｅｉ（ナガナ病起因原虫）、Ｄｕｔｔｏｎｅｌｌａ亜属の原虫であるＴ． ｖｉｖａｘ ｖｉｖａｘ（ズ−マ病起因原虫）等があり、これらの原虫が感染すると動物種によっては致死的な感染経過をたどる。これらもツェツェバエによって媒介される。

【0005】

ツェツェバエが生息する地域はアフリカ大陸のサハラ砂漠以南の東海岸から西海岸の３６カ国１０００万平方ｋｍに及ぶ広範地域で、１億５０００万頭以上の家畜動物が多様なトリパノソ−マ症の脅威に曝されている現状である。さらに、アブ、サシバエ等の吸血昆虫の機械的伝搬等により動物に感染するツェツェバエ非媒介性トリパノソ−マ原虫類として、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ亜属の原虫であるＴ． ｅｖａｎｓｉ（ス−ラ病起因原虫）、Ｔ． ｅｑｕｉｐｅｒｄｕｍ（媾疫病起因原虫）等がある。特にス−ラ病はアフリカ、中南米、東南アジア、中国、中近東、インド等世界的流行がみられる。近年さらに流行が拡大傾向にあり、日本への侵入を最も警戒すべき動物トリパノソ−マ症である。

【0006】

これらのトリパノソ−マ原虫類に対する既存のヒトの抗トリパノソ−マ原虫薬としては、過去半世紀の間、スラミン（１９２３年開発）、ペンタミジン（１９３９年開発）、メラルソプロ−ル（１９５３年開発）等の古典的薬剤及びエフロニチン（１９７８年開発）等の化学合成医薬品が長く用いられていた。スラミンは、ガンビアトリパノソ−マ原虫及びロ−デシアトリパノソ−マ原虫の感染初期に有効であるが腎毒性がある。

【0007】

ペンタミジンは、ガンビアトリパノソ−マ原虫の感染初期に有効であるがロ−デシアトリパノソ−マ原虫には無効であり、血圧低下や血糖減少の副作用がある。砒素剤のメラルソプロ−ルは血液脳関門を通過することにより、ガンビアトリパノソ−マ原虫及びロ−デシアトリパノソ−マ原虫の感染末期（中枢神経症）に有効であるが、中枢神経系への副作用が強く脳症を起こす。また、メラルソプロ−ルに対する耐性原虫株も出現している。

【0008】

エフロニチンは血液脳関門を通過することにより、メラルソプロ−ルが効かない耐性のガンビアトリパノソ−マ原虫の感染末期に有効であるが、ロ−デシアトリパノソ−マ原虫には無効である。これらの薬剤は古く、その有効性は徐々に低下している。また、動物のトリパノソ−マ症の治療にはジミナゼン、スラミン、イソメタジウム、変異原性物質のホミジウム等が使用されてきた。特にこれらの薬剤が長期間大量に使用されてきたために、現在、薬剤耐性原虫が各地で出現し、これらの抗トリパノソ−マ原虫薬としての有用性は著しく低下しており、大きな問題となっている。

【0009】

シャ−ガス病またはヒトアメリカトリパノソ−マ症は、年間推定感染者が１，０００万人以上で年間死亡者が約１万人に及ぶ原虫感染症でクル−ズトリパノソ−マ原虫（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ）が吸血性昆虫であるサシガメによって媒介されることで引き起こされる。急性期は発熱、びまん性リンパ節症、脾腫が見られる。大半の奨励では自然寛解するが一部は数年から数十年の無症状期間を経て慢性期に移行する。慢性期の症状は狭心症様の前胸部痛、不整脈、心不全などの心臓障害もしくは巨大臓器症であり、有効な治療法はなく、予後は極めて重篤である。

【0010】

既存のシャ−ガス病治療薬としては、過去半世紀の間、ニフルチモックス（１９６４年開発）、ベンズニダゾ−ル（１９６６年開発）等の化学合成医薬品が長く用いられていた。ニフルチモックスは慢性期に無効であり、振戦、不眠、神経炎、貧血などの重篤な副作用が見られる。ベンズニダゾ−ルも慢性期に無効であり、光過敏症、神経炎などの副作用が見られる。またいずれの薬剤も長期投与が必要である。

【0011】

アフリカ睡眠病およびシャ−ガス病では新規な薬剤の開発の遅れから、古典的な副作用の強い既存薬剤が治療に用いられているのが現状であり、いずれも世界規模で有効な新規な薬剤等の開発が求められている。既存のアフリカ睡眠病治療薬は原虫の種類及び感染のステ−ジによって有効性が異なるものや薬剤耐性原虫株の出現がみられるものがある。このため原虫の種類及び感染のステ−ジを問わず有効な薬剤、ロ−デシアトリパノソ−マ原虫や感染末期（中枢神経症）に有効な薬剤でしかも副作用の少ない新規な骨格を持ったアフリカ睡眠病治療薬の開発が地球規模で望まれている。一方、既存のシャ−ガス病治療薬は慢性期に無効で重篤な副作用がみられる。このため慢性期の患者にも有効かつ副作用の少ない新規な骨格を持ったシャ−ガス病治療薬の開発が地球規模で望まれている。

【0012】

これまでにこのような問題を解決すべくトリパノソ−マ症の治療を目的とした治療薬が報告されているが、未だ効果的な化合物は見出されていなかった（特許文献１参照）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0013】

【特許文献1】国際公開公報ＷＯ２００９／００４８９９

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0014】

アフリカ睡眠病およびシャ−ガス病などのトリパノソ−マ症はトリパノソ−マ原虫が宿主内で増殖することによって引き起こされる。トリパノソ−マ原虫の増殖を阻害する物質はトリパノソ−マ症の発症を抑えるもしくは症状を緩和する抗トリパノソ−マ薬として期待される。よって、本発明は、上述の従来技術の問題を解決するために新規の抗トリパノソ−マ薬を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0015】

そこで本発明者らは、微生物培養物中からトリパノソ−マ原虫の増殖阻害する物質の探索を続けた結果、放線菌ＭＫ１０−０３６株の生産する新規化合物であるアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質がその阻害活性を有することを見出し、この知見に基づいて本発明を完成するに至った。

【0016】

本発明はかかる知見に基づいて完成されたものであって、それぞれ下記式Ｉ〜Ｖで表される新規化合物であるアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を提供するものである。

【0017】

（アクチノアロライドＡ物質）
本明細書において、アクチノアロライドＡ物質とは、下記式Ｉで表わされる化合物である。

【0018】

【化1】

【0019】

また、本明細書におけるアクチノアロライドＡ物質として好ましくは、以下の立体構造を有する化合物である。

【0020】

【化2】

【0021】

（アクチノアロライドＢ物質）
本明細書において、アクチノアロライドＢ物質とは、下記式ＩＩで表わされる化合物である。

【0022】

【化3】

【0023】

また、本明細書におけるアクチノアロライドＢ物質として好ましくは、以下の立体構造を有する化合物である。

【0024】

【化4】

【0025】

（アクチノアロライドＣ物質）
本明細書において、アクチノアロライドＣ物質とは、下記式ＩＩＩで表わされる化合物である。

【0026】

【化5】

【0027】

また、本明細書におけるアクチノアロライドＣ物質として好ましくは、以下の立体構造を有する化合物である。

【0028】

【化6】

【0029】

（アクチノアロライドＤ物質）
本明細書において、アクチノアロライドＤ物質とは、下記式ＩＶで表わされる化合物である。

【0030】

【化7】

【0031】

また、本明細書におけるアクチノアロライドＤ物質として好ましくは、以下の立体構造を有する化合物である。

【0032】

【化8】

【0033】

（アクチノアロライドＥ物質）
本明細書において、アクチノアロライドＥ物質とは、下記式Ｖで表わされる化合物である。

【0034】

【化9】

【0035】

また、本明細書におけるアクチノアロライドＥ物質として好ましくは、以下の立体構造を有する化合物である。

【0036】

【化10】

【0037】

（製造方法）
本発明はまた、前記アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物を培地で培養し、培養物中にアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を蓄積せしめ、該培養物からアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を採取することを備える、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の製造方法に関する。該製造方法において、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物として、好ましくは、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６（受領番号 ＮＩＴＥ ＡＢＰ−１２０８）株である。

【0038】

（微生物）
別の態様において、本発明は更に、新規放線菌である、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株に関する。

【0039】

本明細書において、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株とは、本発明者等によってタイ王国の植物より新たに分離された微生物であり、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株として、２０１２年１月２４日付にて独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センタ−（千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８）に寄託された菌株のことである（受領番号 ＮＩＴＥ ＡＢＰ−１２０８）。本発明のアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株は、本明細書実施例１に記載の菌学的性状を有する。

【0040】

（医薬組成物）
また、本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質は医薬組成物として使用することができる。よって、更にまた別の態様において、本発明は、前記アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を有効成分として含有する医薬組成物に関する。具体的には、本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質はトリパノソ−マ原虫の増殖抑制作用を有することから、トリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療薬又は予防薬（抗トリパノソ−マ薬）として用いることができる。また、別の態様において、本発明は、トリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療又は予防に使用するためのアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質に関する。あるいは、本発明は、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の有効量をそれを必要とする患者に投与することを備える、トリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療方法又は予防方法に関する。

【0041】

本明細書において「トリパノソ−マ原虫」とは、ガンビアトリパノソ−マ原虫、ロ−デシアトリパノソ−マ原虫及びトリパノソ−マ原虫の亜属のトリパノソ−マ・クル−ジ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ）、トリパノソ−マ・ブルセイ（Ｔ． ｂｒｕｃｅｉ）、トリパノソ−マ・コンゴレンス（Ｔ． ｃｏｎｇｏｌｅｎｓｅ）、トリパノソ−マ・バイバックス（Ｔ． ｖｉｖａｘ）、トリパノソ−マ・エバンシ（Ｔ． ｅｖａｎｓｉ）、トリパノソ−マ・タイレリ（Ｔ． ｔｈｅｉｌｅｒｉ）、トリパノソ−マ・エキパ−ダム（Ｔ． ｅｑｕｉｐｅｒｄｕｍ）を含む。

【0042】

また、本明細書において、トリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患とは、前記トリパノソ−マ原虫が感染したことにより発症し又は増悪化する疾患又は傷害のことであり、例えば、一般に「トリパノソ−マ症」として知られる疾患が含まれ、例えば、アフリカトリパノソ−マ症、シャ−ガス病、ナガナ病、ス−ラ病等が含まれる。本発明の医薬組成物は、既存の薬剤における副作用や薬剤耐性の問題を解決するものであることから、これらの疾患の慢性期の治療薬として用いることもできる。

【発明の効果】

【0043】

本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質は、トリパノソ−マ原虫の増殖を阻害することができることから、新規の抗トリパノソ−マ薬となる。また、本発明のアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株は、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を産生することから、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の製造に利用することができる。

【発明を実施するための形態】

【0044】

本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質は、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物を培地で培養し、培養物中アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を蓄積せしめ、該培養物からアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥを採取（分離・抽出・精製）することにより製造することができる。

【0045】

本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の製造方法において、「アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物」は、放線菌に属する菌であって、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥＥ物質を生産する能力を有する微生物であれば特に限定されない。本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の製造方法に用いることのできる菌株には、上記菌株の他、その変異株をはじめ、放線菌に属するアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する菌のすべてが含まれる。微生物が「アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物」であるか否かは、例えば、以下の方法により決定することができる。酵母エキス〔オリエンタル酵母工業（株）製〕１％、グルコ−ス１％からなる液体培地（ｐＨ ６．０）５０００ｍＬを含む７０００ｍＬ容ジャ−ファ−メンタ−に、液体培地で培養した被験微生物１００ｍＬを植菌し、２７℃で１０日間振盪培養後、得られた種培養液を、酵母エキス〔オリエンタル酵母工業（株）製〕１％、グルコ−ス１％からなる液体培地（ｐＨ ６．０）が５０００ｍＬ入った７０００ｍＬ容ジャ−ファ−メンタ−、２基に各１００ｍＬずつ植菌し、２７℃、通気量０．２ＭＭＶ、撹拌２００ｒｐｍで１０日間撹拌培養することにより得られた培養物の中に、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質が存在すれば当該微生物はアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物であると決定することができる。好ましくは、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物は、上述のアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株である。

【0046】

本明細書において、「変異株」とは、人工的又は自然界における変異誘発刺激によりアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株とは異なる菌学的性状又は遺伝子を有する株のことであり、このような変異株にはアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株から派生した菌株の他、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株を派生させた元の菌株も含まれる。本明細書において、変異株は実際の派生の痕跡の有無を問うものではなく、例えば、レアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株遺伝子（例えば、１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子）と高い相同性（例えば、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上など）を有する遺伝子を有する菌株もまた変異株に含まれる。また、このような変異株は、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の産生能を維持している限り、人工的に作製したものであるか、天然から採取したものであるかを問わない。

【0047】

アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物を培養するための培地には、栄養源として、放線菌の栄養源として使用し得るものを含有することができる。例えば、市販のペプトン、肉エキス、コ−ン・スティ−プ・リカ−、綿実粉、落花生粉、大豆粉、酵母エキス、ＮＺ−アミン、カゼインの水和物、硝酸ソ−ダ、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム等の窒素源、グリセリン、スタ−チ、グルコ−ス、ガラクト−ス、マンノ−ス等の炭水化物、あるいは脂肪等の炭素源、及び食塩、リン酸塩、炭酸カルシウム、硫酸マグネシウム等の無機塩を単独あるいは組み合わせて使用することができる。その他、培地には、必要に応じて微量の金属塩、消泡剤として動・植・鉱物油等を添加することもできる。これらのものは生産菌を利用したアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の生産の役だつものであればよく、公知の放線菌の培養材料はすべて用いることができる。

【0048】

また、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産する能力を有する放線菌に属する微生物の培養は、生産菌が発育しアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質を生産できる温度範囲（例えば、１０−４０℃、好ましくは、２５−３０℃）で数日〜２週間振盪培養することにより行うことができる。培養条件は、本明細書の記載を参照しながら、使用するアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の生産菌の性質に応じて適宜選択して行なうことができる。

【0049】

アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の採取は、培養液より酢酸エチル等の水不混和性の有機溶媒を用いて抽出することにより行うことができる。本抽出法に加え、脂溶性物質の採取に用いられる公知の方法、例えば吸着クロマトグラフィ−、分配クロマトグラフィ−、ゲル濾過クロマトグラフィ−、薄層クロマトグラフィ−よりのかき取り、遠心向流分配クロマトグラフィ−、高速液体クロマトグラフィ−等を適宜組合せるか、あるいは繰返すことによって純粋になるまで精製することができる。

【0050】

本発明のトリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療薬又は予防薬は、経口投与形態、又は注射剤、点滴剤等の非経口投与形態で用いることができる。本化合物を哺乳動物等に投与する場合、錠剤、散剤、顆粒剤、シロップ剤等として経口投与してもよいし、又は、注射剤、点滴剤として非経口的に投与してもよい。よって、本発明は、別の態様においては、アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の有効量をそれを必要とする患者に投与することを含む、トリパノソ−マ原虫の感染に由来する疾患の治療方法又は予防方法に関する。アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及び／又はＥ物質の投与量は症状の程度、年齢、疾患の種類等により異なるが、通常成人１日当たり５０−５００ｍｇを１日１〜数回に分けて投与する。

【0051】

本発明の医薬組成物は、通常の薬学的に許容される担体を用いて、常法により製剤化することができる。経口用固形製剤を調製する場合は、主薬に賦形剤、更に必要に応じて、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えた後、常法により溶剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等とする。注射剤を調製する場合には、主薬に必要によりｐＨ調整剤、緩衝剤、安定化剤、可溶化剤等を添加し、常法により皮下又は静脈内用注射剤とすることができる。

【実施例】

【0052】

以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。なお、本願全体を通して引用される全文献は参照によりそのまま本願に組み込まれる。

【0053】

（実施例１） アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株の菌学的性状
本発明者等によってタイ王国の植物より新たに、アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株を分離した。アクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６株の菌学的性状は以下の通りであった。
（Ｉ）形態的性質
本菌株は、スタ−チ・無機塩寒天、酵母エキス・麦芽エキス寒天、酵母エキス・スタ−チ寒天などで良好に生育し、スタ−チ・無機塩寒天で胞子の着生がみられた。胞子は大きさ約１μｍ×０．５μｍであり、気菌糸より６〜８個の胞子が連なり、短い螺旋状の胞子鎖を形成していた。
（ＩＩ）各種培地上での性状
イ−・ビ−・シャ−リング（Ｅ．Ｂ．Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）とデ−・ゴットリ−ブ（Ｄ．Ｇｏｔｔｌｉｅｂ）の方法（インタ−ナショナル・ジャ−ナル・オブ・システィマティック・バクテリオロジ−、１６巻、３１３頁、１９６６年）によって調べた本生産菌の培養性状を表１に示す。色調は標準色として、カラ−・ハ−モニ−・マニュアル第４版（コンテナ−・コ−ポレ−ション・オブ・アメリカ・シカゴ、１９５８年）を用いて決定し、色票名とともに括弧内にそのコ−ドを併せて記した。以下は特記しない限り、２７℃、３週間目の各培地における観察の結果である。

【0054】

【表1】

【0055】

（ＩＩＩ）生理学的諸性質
（１）メラニン色素の生成
（イ）チロシン寒天 ：陰性
（ロ）グルコ−ス・ペプトン・ゼラチン培地 ：陰性
（２）硝酸塩の還元 ：陽性
（３）ゼラチンの液化（２０℃） ：陰性
（グルコ−ス・ペプトン・ゼラチン培地）
（４）スタ−チの加水分解 ：陰性
（５）脱脂乳の凝固（３７℃） ：陰性
（６）脱脂乳のペプトン化（３７℃） ：陰性
（７）生育温度範囲 ：１９〜４０℃
（８）炭素源の利用性（プリドハム・ゴトリ−ブ寒天培地）
利用する：Ｄ−グルコ−ス、Ｄ−キシロ−ス、Ｄ−マンニト−ル、Ｄ−フルクト−ス、ラフィノ−ス
Ｌ−ラムノ−ス、ｍｙｏ−イノシト−ル、メリビオ−ス、Ｄ−ガラクト−ス
利用しない：Ｌ−アラビノ−ス、ダルシト−ル、マルト−ス、Ｄ−ソルビト−ル、スクロ−ス
（９）セルロ−スの分解 ：陰性

【0056】

（ＩＶ）細胞の化学組成
細胞壁中にメソ型のジアミノピメリン酸、アラニン、グルタミン酸、リシンを含み、全菌体糖としてマジュロ−スを含む。主要メナキノンはＭＫ−９（Ｈ_６）とＭＫ−９（Ｈ_８）で、主要脂肪酸はｉｓｏ−Ｃ１６：０，１０−ｍｅｔｈｙｌＣ１７：０，Ｃ１６：１およびａｎｔｅｉｓｏ−１７：０である。細胞壁ムラミン酸はアセチル型である。ミコ−ル酸は含まれない。
（Ｖ）１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子解析
１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子のうち約１４００塩基の配列を決定し、ＤＮＡデ−タベ−スに登録され公開されているアクチノアロムラス属に属する菌株およびその他の放線菌のデ−タを用い近隣結合法による系統解析の結果、本菌株はアクチノアロムラス属に分類することが妥当であり、アクチノアロムラス フルブス（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｆｕｌｖｕｓ）およびアクチノアロムラス アマミエンシス（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ａｍａｍｉｅｎｓｉｓ） に近縁な一菌株である。

【0057】

（ＶＩ）結論
以上、本菌の菌学的性状を要約すると次のとおりである。細胞壁にメソ型のジアミノピメリン酸およびリシンを有する。全菌体糖にはマジュロ−スを含む。細胞壁ムラミン酸はアセチル型で、主要メナキノンはＭＫ−９（Ｈ_６）とＭＫ−９（Ｈ_８）である。ミコ−ル酸を含有しない。気菌糸より短い螺旋状の胞子鎖を形成する。コロニ−は白色の色調を呈し、メラニン色素は産生しない。
これらの結果および１６Ｓ ｒＲＮＡ遺伝子の解析結果から、アクチノアロムラス属に属する１菌種であると判断された。なお、本菌株はアクチノアロムラス（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．）ＭＫ１０−０３６として、２０１２年１月２４日付にて独立行政法人製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センタ−に寄託されている（受領番号 ＮＩＴＥ ＡＢＰ−１２０８）。

【0058】

（実施例２） アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質の取得
酵母エキス〔オリエンタル酵母工業（株）製〕１％、グルコ−ス１％からなる液体培地（ｐＨ ６．０）１００ｍＬを含む５００ｍＬ容三角フラスコに、液体培地で培養したアクチノアロムラス・エスピ−（Ａｃｔｉｎｏａｌｌｏｍｕｒｕｓ ｓｐ．） ＭＫ１０−０３６（受領番号 ＮＩＴＥ ＡＢＰ−１２０８）を２本に各１ｍｌ植菌し、２７℃で７日間振盪培養した。得られた種培養液を酵母エキス〔オリエンタル酵母工業（株）製〕１％、グルコ−ス１％からなる液体培地（ｐＨ ６．０）５，０００ｍＬを含む７，０００ｍＬ容ジャ−ファ−メンタ−、２基に各１００ｍＬずつ植菌し、２７℃、通気量０．２ＭＭＶ、撹拌２００ｒｐｍで１０日間撹拌培養した。

【0059】

培養液１０Ｌを３０００ｒｐｍ、１５分間遠心分離し、上清と菌体に分けた。上清を５Ｌの酢酸エチルで２回抽出を行い、酢酸エチル層を減圧下乾固して５７６ｍｇの粗物質１を得た。一方、菌体に２Ｌのアセトンを加え、１時間撹拌して菌体成分の抽出を行った後に、３０００ｒｐｍ、１５分間遠心分離した。得られた上清からアセトンを留去後、１Ｌの酢酸エチルで２回抽出を行い、酢酸エチル層を減圧下乾固して１７０ｍｇの粗物質２を得た。粗物質１および２を混合しクロロホルムで充填したシリカゲルカラム（φ４０×４５ｍｍ）にのせ、クロロホルム−メタノ−ル（１００：１）および（１００：２）でそれぞれ溶出し、減圧濃縮により粗物質３（２０５ｍｇ）および粗物質４（１６１ｍｇ）を得た。

【0060】

粗物質３をメタノ−ルに溶解し、高速液体クロマトグラフィ−にて逆相カラム（Ｐｅｇａｓｉｌ ＯＤＳ ＳＰ−１００、φ２０×２５０ｍｍ、センシュ−科学（株）製、日本国）に注入し、アセトニトリル−水（６０：４０）、流速８ｍＬ／分、ＵＶ ２１０ｎｍ検出の条件で溶出した。保持時間１７．７分、２６．８分、３０．７分および３３．６分のピ−クを分取し、減圧下乾固することでアクチノアロライドＥ物質（１．８ｍｇ）、アクチノアロライドＡ物質（８１．７ｍｇ）、アクチノアロライドＤ物質（２．７ｍｇ）およびアクチノアロライドＣ物質（４．４ｍｇ）を得た。

【0061】

粗物質４をメタノ−ルに溶解し、ＯＤＳ（φ１５×２０ｍｍ、富士シリシア化学（株）製、日本国）オ−プンカラムクロマトグラフィ−を用いて、アセトニトリル−水溶媒系で段階溶出（６０：４０、７０：３０、８０：２０、９０：１０、１００：０）し、アセトニトリル−水（６０：４０）を減圧下乾固することで粗物質５を得た。粗物質５を高速液体クロマトグラフィ−にて逆相カラム（Ｐｅｇａｓｉｌ ＯＤＳ ＳＰ−１００、φ２０×２５０ｍｍ、センシュ−科学（株）製）に注入し、アセトニトリル−水（６０：４０）、流速８ｍＬ／分、ＵＶ ２１０ｎｍ検出の条件で溶出した。保持時間２４．５分のピ−クを分取し、減圧下乾固することでアクチノアロライドＢ物質（５．９ｍｇ）を得た。
得られたアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質の理化学的性状を測定した。

【0062】

アクチノアロライドＡ物質の理化学的性状は次の通りであった。
（１）性状：シラップ状
（２）分子量：５６４
（３）分子式：Ｃ_３２Ｈ_５２Ｏ_８
（４）高速原子衝突イオン化による［Ｍ＋Ｎａ］^＋理論値（ｍ／ｚ）５８７．３５６０、実測値（ｍ／ｚ）５８７．３５７０
（５）比旋光度：［α］_Ｄ^２５＝１０５．２°（ｃ＝０．１、メタノ−ル）
（６）紫外部吸収極大λ（メタノ−ル中）：末端吸収
（７）赤外部吸収極大ν_ｍａｘ（ＫＢｒ錠）：３４３５，２９６８，２９２７，２８６４，１７４９，１７０９，１６３０，１４５８，１３７１，１３１７，１１４７，１１１５，１０５７，１０２２，９７８ｃｍ^−１に極大吸収を有する。
（８）^１Ｈ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：５．４０（１Ｈ，ｄｔ），５．１３（１Ｈ，ｔ），４．８８（１Ｈ，ｄ），３．６４（１Ｈ，ｄｄ），３．２６（１Ｈ，ｄｄ），２．９１（１Ｈ，ｄ），２．８３（１Ｈ，ｄｄ），２．７７（１Ｈ，ｄ），２．６７（１Ｈ，ｄｑ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．４７（１Ｈ，ｍ），２．４５（１Ｈ，ｍ），２．３５（１Ｈ，ｄ），２．３４（１Ｈ，ｍ），２．３０（１Ｈ，ｄ），２．１３（１Ｈ，ｄ），１．８４（１Ｈ，ｍ），１．８１（１Ｈ，ｍ），１．７９（１Ｈ，ｄ），１．７８（１Ｈ，ｍ），１．６３（３Ｈ，ｂｒｄ），１．６１（１Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｓ），１．３４（３Ｈ，ｓ），１．１４（３Ｈ，ｔ），１．０７（３Ｈ，ｄ），１．０５（３Ｈ，ｄ），１．０４（３Ｈ，ｔ），１．０１（３Ｈ，ｄ），０．８８（３Ｈ，ｄ）
（９）^１３Ｃ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：２１７．６，２１７．３，１７０．２，１３３．７，１３１．７，１２８．８，１２６．５，１０２．３，８２．２，７６．５，７４．９，７３．６，５３．１，４８．９，４７．５，４６．７，４０．５，３８．８，３６．０，３４．８，３２．２，２９．９，２６．８，１８．４，１７．９，１７．２，１６．９，１６．１，１２．１，１０．３，９．４，７．７
（１０）溶剤に対する溶解性：クロロホルム、アセトン、メタノ−ル、ジメチルスルホキシドに易溶。ノルマルヘキサン、水に難溶。

【0063】

アクチノアロライドＡ物質の各種理化学的性状やスペクトルデ−タを検討した結果、アクチノアロライドＡ物質は下記式Ｉで表される構造であることが決定された。

【0064】

【化11】

【0065】

アクチノアロライドＢ物質の理化学的性状は次の通りであった。
（１）性状：シラップ状
（２）分子量：５６６
（３）分子式：Ｃ_３２Ｈ_５４Ｏ_８
（４）エロクトロスプレ−イオン化による［Ｍ＋Ｎａ］^＋理論値（ｍ／ｚ）５８９．３７１６、実測値（ｍ／ｚ）５８９．３７１３
（５）比旋光度：［α］_Ｄ^２５＝１０２．７°（ｃ＝０．１、メタノ−ル）
（６）紫外部吸収極大λ（メタノ−ル中）：末端吸収
（７）赤外部吸収極大ν_ｍａｘ（ＫＢｒ錠）： ３４３７，２９７２，１７５１，１７１２，１６２８，１４５４，１３７９，１３１９，１２４８，１１４９，１１０９，１０５９，９７４ｃｍ^−１に極大吸収を有する。
（８）^１Ｈ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：５．３８（１Ｈ，ｄｔ），５．１３（１Ｈ，ｔ），４．８８（１Ｈ，ｄ），３．７０（１Ｈ，ｄｄｄ），３．５１（１Ｈ，ｄｄ），３．２６（１Ｈ，ｄｄ），２．９１（１Ｈ，ｄ），２．８２（１Ｈ，ｄｄ），２．７５（１Ｈ，ｄ），２．５２（１Ｈ，ｍ），２．５２（１Ｈ，ｍ），２．３２（２Ｈ，ｍ），２．３２（１Ｈ，ｍ），２．１２（１Ｈ，ｄ），１．８２（１Ｈ，ｍ），１．８０（１Ｈ，ｍ），１．７８（１Ｈ，ｍ），１．７７（１Ｈ，ｄ），１．６５（１Ｈ，ｍ），１．６２（３Ｈ，ｂｒｄ），１．５９（１Ｈ，ｍ），１．５２（１Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｂｒｄ），１．４２（１Ｈ，ｍ），１．３４（３Ｈ，ｓ），１．１３（３Ｈ，ｔ），１．０３（３Ｈ，ｄ），１．００（３Ｈ，ｄ），０．９０（３Ｈ，ｔ），０．８８（３Ｈ，ｄ），０．８４（３Ｈ，ｄ）
（９）^１３Ｃ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：２１７．８，１７０．１，１３３．２，１３１．７，１２９．１，１２６．５，１０２．３，８２．１，８２．０，７９．３，７６．６，７３．６，５３．３，４８．９，４６．６，４０．６，３８．７，３７．８，３６．８，３２．４，２９．８，２８．１，２６．８，１８．４，１７．９，１７．２，１７．０，１６．２，１２．１，１０．４，１０．３，４．２
（１０）溶剤に対する溶解性：クロロホルム、アセトン、メタノ−ル、ジメチルスルホキシドに易溶。ノルマルヘキサン、水に難溶。

【0066】

アクチノアロライドＢ物質の各種理化学的性状やスペクトルデ−タを検討した結果、アクチノアロライドＢ物質は下記式ＩＩで表される構造であることが決定された。

【0067】

【化12】

【0068】

アクチノアロライドＣ物質の理化学的性状は次の通りであった。
（１）性状：シラップ状
（２）分子量：５４６
（３）分子式：Ｃ_３２Ｈ_５０Ｏ_７
（４）エレクトロスプレ−イオン化による［Ｍ＋Ｎａ］^＋ 理論値（ｍ／ｚ）５６９．３４５４、実測値（ｍ／ｚ）５６９．３４４４
（５）比旋光度：［α］_Ｄ^２５＝１９０．０°（ｃ＝０．１、メタノ−ル）
（６）紫外部吸収極大λ（メタノ−ル中）：２７８．５ｎｍ（ε値：９，７７３）
（７）赤外部吸収極大ν_ｍａｘ（ＫＢｒ錠）：３４３７，２９７２，２９２７，１７２６，１６９７，１６２０，１４５４，１３９２，１２７７，１２１３，１１１１，１０５７，９８４ｃｍ^−１に極大吸収を有する。
（８）^１Ｈ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：５．２７（１Ｈ，ｄｔ），５．１６（１Ｈ，ｔ），４．８８（１Ｈ，ｄ），３．６４（１Ｈ，ｄｄ），３．６３（１Ｈ，ｄ），３．３１（１Ｈ，ｄ），３．２７（１Ｈ，ｄｄ），２．６７（１Ｈ，ｄｑ），２．４８（１Ｈ，ｍ），２．４６（２Ｈ，ｍ），２．４５（２Ｈ，ｄ），２．４４（１Ｈ，ｍ），２．３０（１Ｈ，ｍ），２．１９（２Ｈ，ｑ），２．１３（１Ｈ，ｄ），１．８２（１Ｈ，ｍ），１．８０（１Ｈ，ｍ），１．７９（１Ｈ，ｍ），１．６３（３Ｈ，ｂｒｄ），１．４３（３Ｈ，ｓ），１．４１（３Ｈ，ｓ），１．０７（３Ｈ，ｄ），１．０５（３Ｈ，ｄ），１．０４（３Ｈ，ｔ），１．０４（３Ｈ，ｔ），１．００（３Ｈ，ｄ），０．８９（３Ｈ，ｄ）
（９）^１３Ｃ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：２１７．２，２０６．４，１７７．４，１６８．３，１３３．７，１３１．０，１２８．８，１２６．２，１１９．０，８７．６，７６．６，７６．０，７４．９，４７．９，４７．５，４１．１，３８．９，３７．５，３５．９，３４．７，３２．２，２９．９，２２．２，１７．９，１７．０，１７．０，１６．１，１４．９，１２．３，１０．３，９．４，７．７
（１０）溶剤に対する溶解性：クロロホルム、アセトン、メタノ−ル、ジメチルスルホキシドに易溶。ノルマルヘキサン、水に難溶。

【0069】

アクチノアロライドＣ物質の各種理化学的性状やスペクトルデ−タを検討した結果、アクチノアロライドＣ物質は下記式ＩＩＩで表される構造であることが決定された。

【0070】

【化13】

【0071】

アクチノアロライドＤ物質の理化学的性状は次の通りであった。
（１）性状：シラップ状
（２）分子量：５４８
（３）分子式：Ｃ_３２Ｈ_５２Ｏ_７
（４）高速原子衝突イオン化による［Ｍ＋Ｈ］^＋ 理論値（ｍ／ｚ）５４９．３７９１、実測値（ｍ／ｚ）５４９．３７９２
（５）比旋光度：［α］_Ｄ^２５＝１６７．７°（ｃ＝０．１、メタノ−ル）
（６）紫外部吸収極大λ（メタノ−ル中）：２７８．５ｎｍ（ε値：９，３１６）
（７）赤外部吸収極大ν_ｍａｘ（ＫＢｒ錠）：３４３８，２９７２，２８７５，１７２６，１６８９，１６２０，１４５４，１３９２，１２７９，１２１３，１０５７，９６８ｃｍ^−１に極大吸収を有する。
（８）^１Ｈ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：５．２７（１Ｈ，ｄｔ），５．１７（１Ｈ，ｔ），４．８８（１Ｈ，ｄ），３．７０（１Ｈ，ｄｔ），３．６３（１Ｈ，ｄ），３．５２（１Ｈ，ｄｄ），３．３１（１Ｈ，ｄ），３．２７（１Ｈ，ｄｄ），２．５０（１Ｈ，ｍ），２．４８（１Ｈ，ｍ），２．４５（２Ｈ，ｄ），２．２８（１Ｈ，ｑ），２．２８（１Ｈ，ｍ），２．１９（１Ｈ，ｑ），２．１１（２Ｈ，ｄ），１．８２（１Ｈ，ｍ），１．８０（１Ｈ，ｍ），１．７８（１Ｈ，ｍ），１．６６（１Ｈ，ｍ），１．６３（３Ｈ，ｂｒｄ），１．５０（１Ｈ，ｍ），１．４３（３Ｈ，ｓ），１．４１（３Ｈ，ｓ），１．４０（１Ｈ，ｍ），１．０５（３Ｈ，ｔ），１．０４（３Ｈ，ｄ），１．００（３Ｈ，ｄ），０．９０（３Ｈ，ｔ），０．８９（３Ｈ，ｄ），０．８４（１Ｈ，ｄ）
（９）^１３Ｃ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：２０６．４，１７７．４，１６８．３，１３３．２，１３０．９，１２９．１，１２６．２，１１９．０，８７．６，８２．０，７９．３，７６．９，７６．０，４７．９，４１．１，３８．８，３７．８，３７．５，３６．８，３２．３，２９．９，２８．１，２２．２，１７．９，１７．１，１７．０，１６．２，１４．９，１２．３，１０．４，１０．４，４．２
（１０）溶剤に対する溶解性：クロロホルム、アセトン、メタノ−ル、ジメチルスルホキシドに易溶。ノルマルヘキサン、水に難溶。

【0072】

アクチノアロライドＤ物質の各種理化学的性状やスペクトルデ−タを検討した結果、アクチノアロライドＤ物質は下記式ＩＶで表される構造であることが決定された。

【0073】

【化14】

アクチノアロライドＤ物質

【0074】

アクチノアロライドＥ物質の理化学的性状は次の通りであった。
（１）性状：シラップ状
（２）分子量：５４６
（３）分子式：Ｃ_３２Ｈ_５０Ｏ_７
（４）高速原子衝突イオン化による［Ｍ＋Ｈ］^＋ 理論値（ｍ／ｚ）５４７．３６３５、実測値（ｍ／ｚ）５４７．３６４１
（５）比旋光度：［α］_Ｄ^２５＝１２０．１°（ｃ＝０．１、メタノ−ル）
（６）紫外部吸収極大λ（メタノ−ル中）：２７４．５ｎｍ（ε値：８，６２７）
（７）赤外部吸収極大ν_ｍａｘ（ＫＢｒ錠）：３４３７，２９７４，２９３９，２８７９，１７３０，１６９７，１６２６，１４５４，１３９０，１２５５，１０９９，１０５７，９８７ｃｍ^−１に極大吸収を有する。
（８）^１Ｈ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：５．２２（１Ｈ，ｔ），４．９７（１Ｈ，ｄｄ），４．８１（１Ｈ，ｄ），３．８２（１Ｈ，ｄ），３．６４（１Ｈ，ｄｄ），３．２６（１Ｈ，ｄｄ），３．２６（１Ｈ，ｄ），２．６６（１Ｈ，ｄｑ），２．６４（１Ｈ，ｍ），２．６２（１Ｈ，ｄ），２．５４（１Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．４７（１Ｈ，ｄ），２．４６（１Ｈ，ｍ），２．３０（１Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｍ），２．２２（１Ｈ，ｍ），２．１２（１Ｈ，ｄｄ），１．９６（１Ｈ，ｍ），１．９１（１Ｈ，ｍ），１．６８（１Ｈ，ｄｄ），１．６２（３Ｈ，ｂｒｄ），１．５３（１Ｈ，ｍ），１．５３（３Ｈ，ｓ），１．３６（３Ｈ，ｓ），１．１１（３Ｈ，ｔ），１．０９（３Ｈ，ｄ），１．０６（３Ｈ，ｔ），１．０４（３Ｈ，ｄ），０．９４（３Ｈ，ｄ），０．８１（３Ｈ，ｄ）
（９）^１３Ｃ ＮＭＲ（重クロロホルム中）δ ｐｐｍ：２１７．３，２０７．０，１７７．６，１６６．７，１３２．９，１３０．７，１２９．４，１２６．６，１１７．６，８８．２，８１．４，７４．８，７２．７，４７．５，４６．４，４０．２，３９．４，３５．９，３５．８，３５．２，３４．８，３１．６，２４．９，１７．９，１７．７，１６．５，１５．９，１５．６，１３．１，９．５，８．１，７．７
（１０）溶剤に対する溶解性：クロロホルム、アセトン、メタノ−ル、ジメチルスルホキシドに易溶。ノルマルヘキサン、水に難溶。

【0075】

アクチノアロライドＥ物質の各種理化学的性状やスペクトルデ−タを検討した結果、アクチノアロライドＥ物質は下記式Ｖで表される構造であることが決定された。

【0076】

【化15】

【0077】

（実施例３）アクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質のｉｎ ｖｉｔｒｏにおけるトリパノソ−マ原虫増殖阻害活性（Ｔ．ｂ．ｂｒｕｃｅｉ ＧＵＴａｔ３．１株）
本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質のｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ．ｂ．ｂｒｕｃｅｉ ＧＵＴａｔ３．１株トリパノソ−マ原虫の増殖を阻害する活性を以下の通り調べた。
試験原虫として、トリパノソ−マ原虫のナガナ病の起因原虫Ｔ．ｂ．ｂｒｕｃｅｉ ＧＵＴａｔ３．１株（名古屋市立大学医学部藪義貞講師より分与可能）を用いた。原虫の維持継代は藪らの方法［Ｙａｂｕ Ｙ， Ｋｏｉｄｅ Ｔ， Ｏｈｏｔａ Ｎ， Ｎｏｓｅ Ｍ， Ｏｇｉｈａｒａ Ｙ． Ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ｂｌｏｏｄｓｔｒｅａｍ ｆｏｒｍｓ ｏｆ Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ ｂｒｕｃｅｉ ｉｎ ａｘｅｎｉｃ ｃｕｌｔｕｒｅ ｓｙｓｔｅｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ａ ｌｏｗ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｕｍ． Ｓｏｕｔｈｅａｓｔ Ａｓｉａｎ Ｊ． Ｔｒｏｐ． Ｍｅｄ． Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ，２９：５９１−５９５（１９９８）］を若干改変して行った。すなわち、２４穴プレ−トの各ウェル内で、１０％非動化牛胎児血清（ＦＢＳ）、抗生物質及び種々の補給剤添加イスコフ改変ダルベッコ（ＩＭＤＭ）培地を用い、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で培養を行い、１〜３日毎に培地交換して連続培養を行った。

【0078】

Ｉｎ ｖｉｔｒｏでの本化合物の抗トリパノソ−マ原虫活性の測定は、乙黒らの方法［Ｏｔｏｇｕｒｏ Ｋ，Ｉｓｈｉｙａｍａ Ａ， Ｎａｍａｔａｍｅ Ｍ， Ｎｉｓｈｉｈａｒａ Ａ， Ｆｕｒｕｓａｗａ Ｔ， Ｍａｓｕｍａ Ｒ， Ｔａｋａｈａｓｈｉ Ｙ， Ｓｈｉｏｍｉ Ｋ， Ｙａｍａｄａ Ｈ， Ｏｍｕｒａ Ｓ． Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ Ｐｏｔｅｎｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｔｉｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｅｎ ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ． Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ， ６１：３７２−３７８（２００８）］に従って行った。すなわち、９６穴プレ−トの各ウェルに前培養された原虫浮遊液（原虫数２．０−２．５×１０^４個／ｍＬに調整）９５ｍＬと化合物溶液（５０％エタノ−ル水溶液） ５ｍＬを添加し、混和後、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で７２時間培養を行った。

【0079】

培養終了後、原虫増殖の測定は９６穴プレ−トの各ウェルにＡｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ試薬（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｏｒｉｃｈ社製、米国）１０μＬを添加、混和し、３７℃にて５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で３−６時間培養後、原虫の酸化還元電位を蛍光マイクロプレ−トリ−ダ−（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ社製、米国）にて励起波長５２８／２０ｎｍ、蛍光波長５９０／３５ｎｍでの蛍光強度を測定することにより、原虫の増殖の有無を比色定量した。本化合物の５０％原虫増殖阻止濃度（ＩＣ_５０値）は蛍光マイクロプレ−トリ−ダ−付属ソフトウェアのＫＣ−４（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ社製、米国）の化合物濃度作用曲線より求めた。

【0080】

比較対象として培養トリパノソ−マ原虫に対する効果を測定した既知の抗トリパノソ−マ原虫薬として、ペンタミジン、スラミン及びエフロニチン［（Ｐｒｏｆ．Ｒ．Ｂｒｕｎ，Ｓｗｉｓｓ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂａｓｅｌ，スイス国） より分与］を用いた。

【0081】

本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質と既知の抗トリパノソ−マ原虫薬の培養トリパノソ−マ原虫（Ｔ．ｂ．ｂｒｕｃｅｉ ＧＵＴａｔ３．１株）に対する抗トリパノソ−マ原虫活性は以下の表２に示す通りであった。

【0082】

【表2】

【0083】

本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質のＴ．ｂ．ｂｒｕｃｅｉ ＧＵＴａｔ３．１株に対する抗トリパノソ−マ原虫活性（ＩＣ_５０値）は各々０．００４９，１．０１，０．１１，０．７７および０．１３ μｇ／ｍＬであり、アクチノアロライドＡ物質が最も優れた抗トリパノソ−マ原虫活性を示した。アクチノアロライドＡ物質は既存の抗トリパノソ−マ原虫薬と比較すると、ペンタミジンと同程度、スラミンおよびエフロニチンの３２２および４６３倍強い抗トリパノソ−マ原虫活性であった。アクチノアロライドＢ，Ｃ，ＤおよびＥ物質は既存の抗トリパノソ−マ原虫薬と比較するとスラミンおよびエフロニチンの２−１４倍強い抗トリパノソ−マ原虫活性であった。

【0084】

（実施例４）アクチノアロライドＡ物質のｉｎ ｖｉｔｒｏにおけるトリパノソ−マ原虫増殖阻害活性（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｎｓｉｅｎｓｅ ＳＴＩＢ９００株）
本発明のアクチノアロライドＡ物質のｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ．ｂ．ｒｈｏｄｅｎｓｉｅｎｓｅ ＳＴＩＢ９００株トリパノソ−マ原虫の増殖を阻害する活性を以下の通り調べた。
試験原虫として、ロ−デシアアフリカ睡眠病の起因原虫Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｎｓｉｅｎｓｅ ＳＴＩＢ９００株［（Ｐｒｏｆ．Ｒ．Ｂｒｕｎ，Ｓｗｉｓｓ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂａｓｅｌ，スイス国）より分与］のトリポマスチゴ−ト体を用いた。２４穴プレ−トの各ウェル内で、ＭＥＭ培地に１５％非動化牛胎児血清（ＦＢＳ）、２５ｍＭ Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、０．１％（ｗ／ｗ）グルコ−ス、１％ ＭＥＭ非必須アミノ酸、０．２ｍＭ ２−メルカプトエタノ−ル、２ｍＭ ピルビン酸ナトリウム、０．１ｍＭヒポキサンチンを添加した培地を用い、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で培養を行い、数日毎に培地交換して連続培養を行った。

【0085】

Ｉｎ ｖｉｔｒｏでの本化合物の抗トリパノソ−マ原虫活性の測定は、９６穴プレ−トの各ウェルに前培養された原虫浮遊液（最終の原虫数８×１０^３個／μＬ）および所定の濃度の化合物溶液（ＤＭＳＯ溶液）を最終体積１００μＬになるように添加し、混和後、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で７２時間培養を行った。

【0086】

培養終了後、原虫増殖の測定は９６穴プレ−トの各ウェルにＡｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ試薬（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｏｒｉｃｈ社製、米国）１０μＬを添加、混和し、３７℃にて５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で２時間培養後、原虫の酸化還元電位を蛍光マイクロプレ−トリ−ダ−（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ社製、米国）にて励起波長５２８／２０ｎｍ、蛍光波長５９０／３５ｎｍでの蛍光強度を測定することにより、原虫の増殖の有無を比色定量した。本化合物の５０％原虫増殖阻止濃度（ＩＣ_５０値）は蛍光マイクロプレ−トリ−ダ−付属ソフトウェアのＫＣ−４（Ｂｉｏ−Ｔｅｋ社製、米国）の化合物濃度作用曲線より求めた。

【0087】

比較対象として培養トリパノソ−マ原虫に対する効果を測定した既知の抗トリパノソ−マ原虫薬として、メラルソプロ−ル［（Ｐｒｏｆ． Ｒ． Ｂｒｕｎ， Ｓｗｉｓｓ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ， Ｂａｓｅｌ， スイス国） より分与］を用いた。

【0088】

本発明のアクチノアロライドＡ物質と既知の抗トリパノソ−マ原虫薬の培養トリパノソ−マ原虫（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｎｓｉｅｎｓｅ ＳＴＩＢ９００株）に対する抗トリパノソ−マ原虫活性は以下の表３に示す通りであった。

【0089】

【表3】

【0090】

本発明のアクチノアロライドＡ物質のＴ．ｂ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ ＳＴＩＢ９００株に対する抗トリパノソ−マ原虫活性（ＩＣ_５０値）は０．０８６ μｇ／ｍＬであり優れた抗トリパノソ−マ原虫活性を示した。アクチノアロライドＡ物質は既存の抗トリパノソ−マ原虫薬と比較すると、メラルソプロ−ルの１／４３倍の抗トリパノソ−マ原虫活性であった。この結果より、アクチノアロライドＡ物質はロ−デシア型アフリカ睡眠病の薬剤開発に繋がることが期待される。

【0091】

（実施例５）アクチノアロライドＡ物質のｉｎ ｖｉｔｒｏにおけるアメリカトリパノソ−マ原虫増殖阻害活性（Ｔ．ｃｒｕｚｉ Ｔｕｌａｈｕｅｎ Ｃ４Ｃ８株）
本発明のアクチノアロライドＡ物質のｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ．ｃｒｕｚｉ Ｔｕｌａｈｕｅｎ Ｃ４Ｃ８株トリパノソ−マ原虫の増殖を阻害する活性を以下の通り調べた。
試験原虫として、シャ−ガス病の起因原虫Ｔ．ｃｒｕｚｉ Ｔｕｌａｈｕｅｎ Ｃ４Ｃ８株［（Ｐｒｏｆ．Ｒ．Ｂｒｕｎ，Ｓｗｉｓｓ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｂａｓｅｌ，スイス国）より分与］のラットＬ６細胞に感染したアマスチゴ−ト体およびトリポマスチゴ−ト体を用いた。２４穴プレ−トの各ウェル内で、Ｌ６細胞を含むＲＰＭＩ１６４０培地に、１０％非動化牛胎児血清（ＦＢＳ）、１％ Ｌ−グルタミンを添加した培地を用い、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で培養を行い、数日毎に培地交換して連続培養を行った。
Ｉｎ ｖｉｔｒｏでの本化合物の抗トリパノソ−マ原虫活性の測定は、９６穴プレ−トの各ウェルに原虫浮遊液（最終の原虫数５×１０^３個／ウェル）を添加後、４８時間培養を行った。培地交換後、所定の濃度の化合物溶液（ＤＭＳＯ溶液）を添加し、混和後、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で９６時間培養を行った。
培養終了後、原虫増殖の測定は９６穴プレ−トの各ウェルにＣＰＲＧ／Ｎｏｎｉｄｅｔを５０μＬ添加した。更に２−６時間静置後、吸光マイクロプレ−トリ−ダ−（Ｌａｂｏｓｙｓｔｅｍｓ社製、フィンランド国）にて５４０ｎｍの吸光度を測定し、本化合物の５０％原虫増殖阻止濃度を化合物濃度作用曲線より求めた。
比較対象として培養トリパノソ−マ原虫に対する効果を測定した既知のシャ−ガス病治療薬として、ベンズニダゾ−ルを用いた。

【0092】

本発明のアクチノアロライドＡ物質と既知の抗トリパノソ−マ原虫薬の培養トリパノソ−マ原虫（Ｔ．ｃｒｕｚｉ Ｔｕｌａｈｕｅｎ Ｃ４Ｃ８株）に対する抗トリパノソ−マ原虫活性は以下の表４に示す通りであった。

【0093】

【表4】

【0094】

本発明のアクチノアロライドＡ物質のＴ．ｃｒｕｚｉ Ｔｕｌａｈｕｅｎ Ｃ４Ｃ８株に対する抗トリパノソ−マ原虫活性（ＩＣ_５０値）は０．２２６μｇ／ｍＬであり優れた抗トリパノソ−マ原虫活性を示した。アクチノアロライドＡ物質は既存のシャ−ガス病治療薬と比較すると、ベンズニダゾ−ルの約２倍優れた抗トリパノソ−マ原虫活性であった。この結果より、アクチノアロライドＡ物質がシャ−ガス病の薬剤開発に繋がることが期待される。

【0095】

（実施例６） 細胞毒性試験
本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質の細胞毒性試験は乙黒らの方法［Ｏｔｏｇｕｒｏ Ｋ， Ｋｏｈａｎａ Ａ， Ｍａｎａｂｅ Ｃ， Ｉｓｈｉｙａｍａ Ａ， Ｕｉ Ｈ， Ｓｈｉｏｍｉ Ｋ， Ｙａｍａｄａ Ｈ， Ｏｍｕｒａ Ｓ． Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｔｉｍａｌａｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｐｏｌｙｅｔｈｅｒ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ， Ｘ−２０６． Ｊ． Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，５４：６５８−６６３，（２００１）］に準じて行った。すなわち、宿主細胞のモデルとしてヒト胎児肺由来正常繊維芽細胞ＭＲＣ−５細胞［Ｄｒ． Ｌ． Ｍａｅｓ（Ｔｉｂｏｔｅｃ ＮＶ，Ｍｅｃｈｅｌｅｎ，ベルギ−国）より分与可能］を１０％牛胎児血清（ＦＣＳ）及び抗生物質添加ＭＥＭ培地にて維持、継代培養を行ったものを用いた。

【0096】

ヒト胎児肺由来正常繊維芽細胞ＭＲＣ−５細胞を１０％ＦＣＳ−ＭＥＭにて１×１０^３ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように浮遊液を調整し、９６穴プレ−トに該浮遊液を１００μＬ添加し混和後、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で２４時間培養を行った。その後、各ウェルに１０％ＦＣＳ−ＭＥＭ ９０μＬと本化合物の溶液（５０％エタノ−ル水溶液）１０μＬを添加し、混和後、３７℃、５％ＣＯ_２−９５％ ａｉｒ下で７日間培養を行った。ＭＲＣ−５細胞の増殖の有無はＭＴＴ法にて比色定量することにより測定した。本化合物の５０％細胞増殖阻止濃度（ＩＣ_５０値）を化合物濃度作用曲線より求めた。また、選択毒性比（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｉｎｄｅｘ：ＳＩ）は、（細胞毒性のＩＣ_５０値）／（抗トリパノソ−マ原虫活性のＩＣ_５０値）により計算して求めた。

【0097】

ＩＣ_５０と選択毒性比について計算した結果を下記の表５に示す。

【0098】

【表5】

【0099】

本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質のヒト胎児肺由来正常繊維芽細胞ＭＲＣ−５細胞に対する細胞毒性（ＩＣ_５０値）は各々順に＞１００、 ５１．８３、３２．４４、１６．４５および４．７１μｇ／ｍＬであり、抗トリパノソ−マ原虫活性（Ｔ．ｂ．ｂ． ＧＵＴａｔ３．１株）との選択毒性比（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ Ｉｎｄｅｘ：ＳＩ）は各々順に＞２０，４０８、５１．３、２９５、２１．４および３６．２であった。このうちアクチノアロライドＡ物質のＳＩは既存の抗トリパノソ−マ原虫薬と比較すると、ペンタミジンの＞５．４倍の選択毒性を示した。またアクチノアロライドＡ物質のその他のトリパノソ−マ原虫に対する活性（Ｔ．ｂ．ｒ． ＳＴＩＢ９００株およびＴ．Ｃｒｕｚｉ Ｔｕｌａｈｕｅｎ Ｃ４Ｃ８株）とのＳＩは＞１１６３および＞４４２と優れた高い選択毒性を示した。

【0100】

（実施例７） 抗菌活性
本発明のアクチノアロライドＡ物質の抗菌活性は以下の方法で測定した。濾紙円板（アドバンテック社製、直径６ｍｍ）にアクチノアロライドＡ物質の１ｍｇ／ｍＬのメタノ−ル溶液をそれぞれ１０μＬ浸漬し、一定時間風乾して溶媒を除去後、表６に記載の試験菌含菌寒天平板に張り付け、３７℃または２７℃で２４時間培養後、濾紙円板の周りにできた生育阻止円の直径を測定した。

【0101】

アクチノアロライドＡ物質の試験菌に対する抗菌として測定した生育阻止円の直径を表６に示す。

【0102】

【表6】

＊ −：生育阻止円が観測されない

【0103】

本発明のアクチノアロライドＡ物質は、表７に列挙された微生物に対してほとんど抗菌活性を示さなかった。よって、本発明のアクチノアロライドＡ物質はトリパノソ−マ原虫に特異的な作用機序を有すると考えることができる。

【0104】

以上の結果から本発明のアクチノアロライドＡ，Ｂ，Ｃ，Ｄ及びＥ物質は、トリパノソ−マ原虫の増殖を阻害する効果を有する一方、細胞毒性が低く、また他の微生物に対しては増殖抑制作用を示さないことから、抗トリパノソ−マ原虫薬として非常に優れた効果を有することが示された。