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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6392768
(24)【登録日】2018年8月31日
(45)【発行日】2018年9月19日
(54)【発明の名称】肝臓補助システム
(51)【国際特許分類】
A61M 1/18 20060101AFI20180910BHJP
A61M 1/36 20060101ALI20180910BHJP
【ＦＩ】
A61M1/18 520
A61M1/36 165
【請求項の数】12
【全頁数】29
(21)【出願番号】特願2015-543371(P2015-543371)
(86)(22)【出願日】2013年11月5日
(65)【公表番号】特表2016-501576(P2016-501576A)
(43)【公表日】2016年1月21日
(86)【国際出願番号】EP2013073058
(87)【国際公開番号】WO2014079681
(87)【国際公開日】20140530
【審査請求日】2016年6月8日
(31)【優先権主張番号】12194166.0
(32)【優先日】2012年11月26日
(33)【優先権主張国】EP
(73)【特許権者】
【識別番号】515138654
【氏名又は名称】ガンブロ ルンディア アクチエボラグ
【氏名又は名称原語表記】Ｇａｍｂｒｏ Ｌｕｎｄｉａ ＡＢ
(74)【代理人】
【識別番号】110001302
【氏名又は名称】特許業務法人北青山インターナショナル
(72)【発明者】
【氏名】フリーグ，ラルフ
(72)【発明者】
【氏名】アルディンガー，シュテッフェン
(72)【発明者】
【氏名】シュトル，マルクス
(72)【発明者】
【氏名】クラウゼ，ベルント
【審査官】
宮崎 敏長
(56)【参考文献】
【文献】
特表２００８−５２９６９２（ＪＰ，Ａ）
【文献】
米国特許出願公開第２０１２／０２２６２５８（ＵＳ，Ａ１）
【文献】
特開昭５０−１４９１８１（ＪＰ，Ａ）
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ａ６１Ｍ １／１４ − Ａ６１Ｍ １／３８
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
肝不全に罹患している患者に血液浄化を実施するための肝臓補助装置において、
（ａ）実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容しない、且つ前記患者の血液（６）で灌流される第１の中空糸膜ダイアライザー（１）であって、透析液溶液（９）がろ液スペース（４ａ）を中空糸（３ａ）内の血液の流れと逆方向に連続流で通過する、第１の中空糸膜ダイアライザー（１）と、
（ｂ）実質的な量のアルブミンが中空糸膜（３ｂ）の膜壁を通過することを許容する第２の中空糸膜ダイアライザー（２）であって、ろ液スペース（４ｂ）が前記中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断されており、且ついかなる透析溶液によっても灌流されない、第２の中空糸膜ダイアライザー（２）と、
（ｃ）前記中空糸膜ダイアライザー（２）の前記ろ液スペースに占在する粒子状材料（５）であって、少なくとも１つの吸着剤を含む粒子状材料と
を含むことを特徴とする、肝臓補助装置。
（ａ）実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容しない、且つ前記患者の血液（６）で灌流される第１の中空糸膜ダイアライザー（１）であって、透析液溶液（９）がろ液スペース（４ａ）を中空糸（３ａ）内の血液の流れと逆方向に連続流で通過する、第１の中空糸膜ダイアライザー（１）と、
（ｂ）実質的な量のアルブミンが中空糸膜（３ｂ）の膜壁を通過することを許容する第２の中空糸膜ダイアライザー（２）であって、ろ液スペース（４ｂ）が前記中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断されており、且ついかなる透析溶液によっても灌流されない、第２の中空糸膜ダイアライザー（２）と、
（ｃ）前記中空糸膜ダイアライザー（２）の前記ろ液スペースに占在する粒子状材料（５）であって、少なくとも１つの吸着剤を含む粒子状材料と
を含むことを特徴とする、肝臓補助装置。
【請求項2】
ダイアライザー（２）の前記中空糸膜（３ｂ）が、デキストランふるい係数基準で１７０〜３２０ｋＤの水中でのカットオフ分子量、及びデキストランふるい係数基準で１０〜２０ｋＤの水中での保持開始分子量を有することを特徴とする、請求項１に記載の肝臓補助装置。
【請求項3】
前記中空糸膜（３ｂ）が、デキストランふるい係数基準で２５〜６５ｋＤの水中でのカットオフ分子量、及びデキストランふるい係数基準で５〜１０ｋＤの水中での保持開始分子量を有することを特徴とする、請求項１又は２に記載の肝臓補助装置。
【請求項4】
前記中空糸膜（３ｂ）が少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含み、前記疎水性ポリマーが、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスルホン（ＰＳＵ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリテトラフルオロエチレン（ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｅｔｈｙｌｅｎｅ）（ＰＴＦＥ）又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、且つ前記少なくとも１つの親水性ポリマーが、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、及びポリプロピレンオキシドとポリエチレンオキシドの共重合体（ＰＰＯ−ＰＥＯ）からなる群から選択されるか、又はアクリロニトリルとメタリルスルホン酸ナトリウムの共重合体を含むことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか一項に記載の肝臓補助装置。
【請求項5】
前記中空糸膜（３ｂ）が少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含み、前記疎水性ポリマーが、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスルホン（ＰＳＵ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリテトラフルオロエチレン（ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｅｔｈｙｌｅｎｅ）（ＰＴＦＥ）又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、且つ前記少なくとも１つの親水性ポリマーが、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、及びポリプロピレンオキシドとポリエチレンオキシドの共重合体（ＰＰＯ−ＰＥＯ）からなる群から選択されることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか一項に記載の肝臓補助装置。
【請求項6】
前記中空糸膜（３ｂ）が、全血中で計測されるふるい係数が０．１〜１．０で最大４５ｋＤの分子量を有する物質の通過を許容することを特徴とする、請求項１〜５のいずれか一項に記載の肝臓補助装置。
【請求項7】
前記中空糸膜（３ｂ）が、デキストランふるい係数基準で１７０〜３２０ｋＤの水中でのカットオフ分子量、及びデキストランふるい係数基準で１５〜２０ｋＤの水中での保持開始分子量を有することを特徴とする、請求項１〜６のいずれか一項に記載の肝臓補助装置。
【請求項8】
中空糸膜ダイアライザー（２）が中空糸膜ダイアライザー（１）の下流に位置することを特徴とする、請求項１〜７のいずれか一項に記載の肝臓補助装置。
【請求項9】
前記粒子状材料（５）が疎水性及び／又は親水性であり、酸素含有吸着剤、炭素系吸着剤及びポリマー系吸着剤又はそれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１〜８のいずれか一項に記載の肝臓補助装置。
【請求項10】
前記疎水性粒子状材料が、活性炭、カーボンナノチューブ、疎水性シリカ、スチレン系ポリマー、ポリジビニルベンゼンポリマー及びスチレン−ジビニルベンゼン共重合体からなる群から選択されることを特徴とする、請求項９に記載の肝臓補助装置。
【請求項11】
前記親水性粒子状材料が、少なくとも１つの活性炭と、いかなる官能基も含まない少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体と、トリメチルベンジルアンモニウム官能基を有する少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体との組み合わせを含むか、又はいかなる官能基も含まない少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体と、トリメチルベンジルアンモニウム官能基を有する少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体との組み合わせを含むことを特徴とする、請求項１０に記載の肝臓補助装置。
【請求項12】
前記中空糸膜（３ｂ）が、ウシ血漿（タンパク質レベル６０ｇ／ｌ）、３７℃、ＱＢ最大（２００〜５００ｍｌ／分）及びＵＦ ２０％でＩＳＯ８６３７に従い計測したふるい係数が０．１〜０．３でアルブミンの通過を許容することを特徴とする、請求項１に記載の肝臓補助装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は、肝不全に罹患している患者に血液透析を実施するための肝臓透析装置を含む肝臓置換及び／又は肝臓補助のための人工体外システムに関し、この肝臓透析装置は、実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容しない、且つ患者の血液で灌流される第１の標準中空糸膜ダイアライザーと、実質的であるが規定された量のアルブミンが膜壁を通過することを許容する、且つ第１の標準ヘモダイアライザーの血液を受け取る第２の中空糸膜ダイアライザーであって、ろ液スペースが中空糸のルーメンスペースから遮断されており、且つ１つ以上の異なる吸着剤を含み得る吸着剤材料により占在されている第２の中空糸膜ダイアライザーとを含むことを特徴とする。本システムは急性肝不全及び慢性肝不全急性憎悪の治療に使用することができる。
【背景技術】
【0002】
境界域肝機能患者をその肝臓が再生するまで、或いは移植のためドナー肝が入手されるまで補助するために使用される肝臓置換及び／又は肝臓補助用人工システム及び装置を開発又は改良することが必要とされている。現在、先行技術においてこの目的を果たすいくつかのシステムが公知である。原理上、かかる肝臓補助（多くの場合に肝臓透析とも称される）は解毒処置であり、様々な肝障害、例えば、肝腎症候群、非代償性慢性肝疾患、急性肝不全、肝移植後の移植片機能不全、肝臓手術後の肝不全、二次性肝不全、多臓器不全又は胆汁うっ滞における難治性掻痒症などの患者に使用される。肝臓補助は血液透析と同様であり、同じ原理に基づく。バイオ人工肝臓装置と同様、肝臓補助は人工体外肝臓補助の形態である。
【0003】
いわゆる肝腎症候群（ＨＲＳ）は、肝硬変又は重度肝不全の罹患者における腎機能の急速な悪化からなる生命を脅かす医学的状態である。ＨＲＳは通常、肝移植が行われない限り致死的であるが、透析などの種々の治療によって病態の進行を防ぐことができる。
【0004】
ＨＲＳは、肝硬変（原因に依らず）、重症アルコール性肝炎、又は重度肝不全の罹患者に発症し得るもので、通常、感染症、胃腸管の出血、又は利尿薬の過用などの急性損傷が原因で肝機能が急速に悪化するときに起こる。ＨＲＳは肝硬変に比較的よく見られる合併症であり、肝硬変患者の１８％がその診断から１年以内に発症し、肝硬変患者の３９％がその診断から５年以内に発症する。肝機能の悪化が腸に供給する循環の変化を引き起こし、腎臓における血流及び血管緊張が変質すると考えられている。ＨＲＳの腎不全は、腎臓の直接的な損傷というよりむしろ、こうした血流変化の帰結である。２つの形態の肝腎症候群が定義されている：１型ＨＲＳは急速に進行する腎機能低下を伴い、一方、２型ＨＲＳには、標準的な利尿薬では改善しない腹水（腹部の体液貯留）が付随する。
【0005】
例えば、肝腎症候群の死亡リスクは極めて高い；１型ＨＲＳ罹患者の死亡率は短期間で５０％を超える。この病態に対する唯一の長期治療の選択肢は肝移植である。移植前の短期治療の選択肢として、肝臓透析がこの患者にとって極めて重要であるということになり得る。
【0006】
肝不全の臨床的症候群の重大な問題は、不全の肝臓で排泄されない毒素の蓄積である。この仮説に基づけば、親油性のアルブミン結合物質、例えば、ビリルビン、胆汁酸、芳香族アミノ酸の代謝産物、中鎖脂肪酸及びサイトカインの除去が肝不全における患者の臨床経過に有益であるはずである。
【0007】
ＭＡＲＳ（登録商標）システムなどの肝臓透析システムでは、腎臓透析及び肝臓透析の両方の組み合わせである体外回路において血液が浄化される。腎臓透析は水溶性毒素しか除去しないため、腎臓透析単独の確立された方法を肝不全に適用することはできない。通常、肝臓はアルブミン結合毒素を除去する。アルブミンは血中に見られるタンパク質であり、毒素を含め水不溶性物質を運ぶ。このため、ＭＡＲＳ（登録商標）システムのようなシステムは外因性ヒトアルブミンを利用して血液を浄化し、なぜならこのアルブミンが、非抱合型ビリルビン、胆汁酸、疎水性アミノ酸及び脂肪酸などの、腎臓透析の水溶液が除去できない血中で内因性アルブミンに結合する毒素を除去するためである。毒素のかなりの割合が低分子量乃至中間分子量の水溶性分子であり、肝不全及び腎不全によってその濃度が増加し得る。これらの分子は血液透析で有効に除去することができる。従ってＭＡＲＳ（登録商標）システムは、水溶性毒素及びアルブミン結合毒素に関する肝臓の解毒機能を代替すると考えられる。このシステムの原理は欧州特許第０ ６１５ ７８０ Ａ１号明細書に既に開示されている。
【0008】
現行のＭＡＲＳ（登録商標）システムでは、患者の血液は中空糸膜ヘモダイアライザーの中に通される。このダイアライザーの透析液側は、透析液として働く清浄なヒトアルブミンを提供する。患者の血液が膜に沿って進むに従い、血液中の水溶性毒素及びタンパク質結合毒素が膜を通って他方の側の透析液アルブミン溶液へと運び込まれる。この膜はアルブミン並びに他の有用なタンパク質、例えばホルモン及び凝固因子に対しては不透過性であり、それらは患者の循環中に残される。次に浄化された血液が患者に戻る。その間、毒素を含むアルブミン溶液が、初めにローフラックスダイアライザーを通過することにより再生処理される。この過程でアルブミン溶液から水溶性物質が除去される。次にアルブミンは活性炭吸収材を通過し、炭素粒子を除去するフィルターを通った後、アルブミンに結合した毒素を除去する陰イオン交換体を通過する。再生処理されたアルブミンは、次に再びダイアライザーに入り、再び毒素に結合することができ、このようにして毒素が患者の血液から除去され得る。ＭＡＲＳ（登録商標）システムは有効ではあるが比較的複雑であり、システムに外因性アルブミンを供給する必要があるためシステムが比較的高価にもなる。
【0009】
別の公知の肝臓補助システム、Ｐｒｏｍｅｔｈｅｕｓ（登録商標）システム（ＦＰＳＡ、分画血漿分離吸着（ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄ ｐｌａｓｍａ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ））は、血液回路におけるアルブミン透過性フィルター（ＡｌｂｕＦｌｏｗ（登録商標））を通じた分画血漿分離及びハイフラックス透析に基づく。このシステムはいわゆるＡｌｂｕＦｌｏｗ（登録商標）膜を利用し、この膜はアルブミンなどの大型のタンパク質に対して透過性である。このシステムでは、初めに血液が圧送されてＡｌｂｕＦｌｏｗ（登録商標）フィルターに通され、フィルターは血液細胞及び巨大タンパク質分子を保持する。次に、血液の液体分、即ち血漿がアルブミン及び小型タンパク質分子と共に２つの吸収材に通して送り込まれ、吸収材が毒素をアルブミンから分離させて結合する。吸着後、解毒されたアルブミンを含む血漿が、ＡｌｂｕＦｌｏｗフィルターにより保持される血液細胞と一緒に合わされる。最後に、血液が透析されることにより残りの水溶性毒素が除去され、次にろ過された血液が再び患者に導入される。このシステムは、内因性アルブミンがＡｌｂｕＦｌｏｗ（登録商標）膜を介して二次回路に入るため、二次回路に外因性アルブミンは不要である。それでもなお、Ｐｒｏｍｅｔｈｅｕｓ（登録商標）システムは血漿分画が必要であり、またいくつかの構成要素も包含するため、このシステムは比較的複雑となる。
【0010】
「ＳＥＰＥＴ」と称される別の手法は選択的な血漿ろ過に基づき、これは、患者の血液から、特定の分子量範囲内の物質（毒性物質を含む）を含有する特定の血漿画分を除去することを含む。この方法は、例えば国際公開第２００４／０１４３１５（Ａ２）号パンフレットに記載されている。
【0011】
それぞれの既存のシステムの複雑性を低減し、及び／又は肝臓毒の除去効率を、特に非抱合型ビリルビン、胆汁酸及び／又はＩＬ−６などの特定の望ましくない分子の排除に関して改善することが、極めて望ましいといえる。特に、タンパク質結合肝臓毒の効率的な除去を可能にする方法又は装置を考案することが重要であるといえる。現行のシステムには、非抱合型ビリルビンなどの強く結合した毒素に関するその排除性能の点で限界があることが知られている。また、急性肝不全における炎症誘発性サイトカインの蓄積が高い死亡率と関連付けられている。ＩＬ−６、ＩＬ−１β及びＴＮＦは、肝組織の広範な壊死性炎症を引き起こすことが知られている。
【0012】
ここで本出願者らは、単純で、且つ血漿分画、外因性アルブミン及び余計な構成要素、例えば吸収材カートリッジをなしで済ませることができると同時に、種々の肝臓毒に関する排除性能の大幅な改善を実現する肝不全治療装置を開発した。第１のステップでは、患者の血液が標準的なヘモダイアライザー、例えば当該技術分野において公知のとおりのハイフラックスダイアライザーなどに通して灌流される。この第１のステップは、原理上は第２のステップとしてもまた実施され得るものであって、水溶性毒素を除去する働きをし、これが既に血中の毒素負荷を低減した後、その血液が、標準的な血液透析では効率的に除去されない毒素の吸着に重点が置かれる第２のダイアライザーに通して灌流される。第２のステップでは、場合によりまた第１のステップでも、第１のダイアライザーを出た浄化された血液が第２のフィルター装置の中空糸に入り、第２のフィルター装置は、実質的な、しかし限られた量のアルブミンが膜壁を通過することを許容する膜を含む。アルブミンは、それに結合した毒素及びハイフラックスダイアライザーでは除去できなかったより小型の血液成分と共にダイアライザーのろ液スペースに運び込まれ、そこで特定の吸着剤と接触する。この吸着剤は装置のろ液スペースに占在しており、且つタンパク質結合毒素、疎水性毒素及び水溶性毒素（これらは全て総称的に「肝臓毒」と称することができる）を除去する働きをする。ろ液スペースは中空糸のルーメンスペースとのみ流体連通している。従って、ろ液スペースの粒子状材料により吸着又は結合されなかった成分は全て、再び中空糸のルーメンスペースに入り、ダイアライザーを血液と共に離れ、患者に直接戻され得る。
【0013】
従ってこの新規肝臓透析装置は、公知のシステムの前述の構成要素のいくつかの機能を組み合わせる。同時に、この新規装置は、システムの解毒効率を大幅に改善することが可能である。詳細には、強くアルブミンが結合した肝臓毒、例えば非抱合型ビリルビン、胆汁酸及び炎症性サイトカイン、例えばインターロイキン６（ＩＬ−６）が一層高い効率で除去される。本装置はさらに、いかなる特別に適合された透析機も必要としない。従って本発明は、肝不全治療用の体外肝臓補助システムにおける血液からの肝臓毒、特にアルブミン結合肝臓毒の除去に、改良された、同時に複雑性の低いシステムを提供する。
【0014】
ろ液側に粒子状材料を含む中空糸フィルターモジュールが当該技術分野において公知である。この原理を使用している装置の例は、例えば米国特許出願公開第２０１１／０２１８５１２ Ａ１号明細書に記載され、この特許出願公開は、血液又は血漿をレクチン親和性血液透析装置に通過させることを含む抗ウイルス療法に関するものである。この装置では、血液が中空糸膜のルーメンを通過し、ここではウイルスを受け入れて固定化するカートリッジのルーメン外スペースにレクチンが位置する。米国特許出願公開第２００９／０３０４６７７ Ａ１号明細書は、エキソソームなどの微小胞粒子を血液から除去する方法に関し、ここでは、具体的な一実施形態において、中空糸カートリッジを使用する体外循環回路中に血液が流される。しかしながら、これまでのところ、一方で規定量のアルブミンが膜壁を通過することを可能にする特定の中空糸膜と、他方で膜のろ液側における活性の粒子状材料とを組み合わせる、従って本来であれば数種の装置を提供しなければならない数種の機能を１つの装置に組み合わせるようなフィルター装置は公知となっていない。
【0015】
また、肝不全と密接な関係がある特定の毒素を除去する働きをするある種の肝臓透析システムが当該技術分野において公知であるが、標準的なハイフラックスダイアライザーを前述したような統合型のダイアライザーとインラインで組み合わせる、両方が血液回路に位置するようなシステムは公知となっていない。本発明はかかる装置を初めて記載し、また、肝臓補助療法におけるその使用も記載する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0016】
本発明は、新規の改良された肝不全治療用肝臓補助システムに関する。この肝臓補助システムは、肝不全に罹患している患者に血液透析を実施するための構成要素を含む体外システムであり、実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容しない、且つ患者の血液で灌流される第１の標準中空糸膜ダイアライザー（１）と、ある規定量のアルブミンが膜壁を通過することを許容する第２の中空糸膜ダイアライザー（２）であって、ろ液スペースが中空糸のルーメンスペースから遮断されており、且つ１つ以上の異なる吸着剤を含む粒子状材料により占在されている第２の中空糸膜ダイアライザー（２）とを含むことを特徴とする。
【0017】
本発明はまた、血液又は血液製剤（別段指示されない限り、本明細書では総称的に且つ共通して「血液」と称される）の体外治療用中空糸膜ダイアライザー（２）（図１及び図２を参照）にも関し、これは、円筒形フィルターハウジングと、直線状であっても又は波状のうねりを有してもよい、且つハウジング内に長手方向に分布した略平行中空糸膜（３ｂ）の束と、中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断された、且つ場合により入口手段（１０ｂ）及び場合により出口手段（１１ｂ）と流体連通しているろ液スペース（４ｂ）とを含む。ろ液スペース（４ｂ）には、中空糸膜壁を通過した透過液から肝不全の発生において蓄積する毒素を結合又は吸着する働きをする１つ以上の吸着剤を含む粒子状材料（５）が占在している。ダイアライザーは、患者又はヘモダイアライザー（１）から中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースに受け入れられ得る血液を送り込むための入口手段（７ｂ）と、中空糸膜（３）のルーメンから処理済みの血液（これは次には患者に戻されるか又はダイアライザー（１）に渡される）を取り出すための出口手段（８ｂ）とをさらに含む。
【0018】
本発明はまた、本発明に係る肝臓補助システムによって肝不全が発生している血液からの望ましくない化合物の排除を改良することにも関する。これは、中空糸膜ダイアライザー（２）に、デキストランふるい係数基準で１７０〜３２０ｋＤの水中でのカットオフ分子量、及びデキストランふるい係数基準で１０〜２０ｋＤの水中での保持開始分子量（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇｈｔ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｏｎｓｅｔ）を特徴とする膜（３ｂ）を組み込むことにより達成される。かかる膜は、十分な量のアルブミン及びそれに結合していてもよい任意の毒素が膜壁を通過し、ダイアライザーのろ液スペース（４ｂ）に占在する粒子状材料（５）と接触することを可能にし得る。浄化された透過液、例えば実質的に毒素が結合していないアルブミンを含む透過液は、中空糸膜のルーメンスペースに再び入ることによりろ液スペースを離れることができ、ルーメンスペースから出口手段（８ｂ）を通ってダイアライザー（２）を離れることができ、患者に戻ることができる。
【0019】
本発明はまた、中空糸膜ダイアライザー（２）にも関し、ここで膜は、全血中でＩＳＯ ８６３７に従い計測したふるい係数が０．１〜１．０で最大４５ｋＤの分子量を有する物質の通過を許容する。膜は、ウシ血漿（６０ｇ／ｌ）、３７℃、ＱＢ最大及びＵＦ２０％でＩＳＯ８６３７に従い０．１〜０．３のふるい係数で約６８ｋＤの分子量を有するアルブミンの通過を許容する。本発明の一実施形態によれば、アルブミンふるい係数は約０．２である。
【0020】
本発明はまた、中空糸膜ダイアライザー（２）にも関し、ここで膜は、ウシ血漿（６０ｇ／ｌ）、３７℃、ＱＢ最大及びＵＦ２０％でＩＳＯ８６３７に従い０．０５〜０．２のアルブミンふるい係数を有する。
【0021】
本発明はまた、中空糸膜ダイアライザー（２）にも関し、ここで中空糸膜（３ｂ）は、２００〜５００ｍｌ／分の血流量で０．８〜１．２時間処理した後にダイアライザー（２）の血液側とろ液側との間でアルブミンの濃度が実質的に同等になることを可能にする。これに関連して用語「実質的」は、かかる濃度の同等化がダイアライザーの一部、即ちダイアライザーの中央約三分の一においてのみ達成され得るということを指す。
【0022】
本発明はまた、中空糸膜ダイアライザー（２）にも関し、ここでろ液スペース（４ｂ）中の１つ以上の吸着剤は、荷電、親水性及び非荷電、疎水性粒子状材料からなる群から選択される。荷電材料には、イオン交換粒子、例えば陰イオン交換又は陽イオン交換材料などが含まれる。疎水性材料には、活性炭、カーボンナノチューブ、疎水性シリカ、スチレン系ポリマー、ポリジビニルベンゼンポリマー及びスチレン−ジビニルベンゼン共重合体が含まれる。ろ液スペース中の粒子状材料は、１つ以上の親水性荷電吸着剤又は１つ以上の非荷電疎水性吸着剤からなってもよく、又は１つ以上の親水性吸着剤と１つ以上の疎水性吸着剤との混合物からなってもよい。
【0023】
本発明はまた、体外療法において体液から肝臓毒を除去するための本発明に係る肝臓補助システムの使用にも関する。
【図面の簡単な説明】
【0024】
【図1】本発明の肝臓補助システムの実質的な部分の概略図を示し、ここで（２）は、実質的であるが限られた量のアルブミンが通過して、１つ以上の吸着剤（５）が占在しているろ液スペース（４ｂ）に入ることを許容する中空糸膜（３ｂ）を含む中空糸膜ダイアライザーを指す。明確にするため、この図には１つの膜糸のみを概略的に示す。ろ液スペースは中空糸のルーメンスペースから遮断されている。入口（７ｂ）からダイアライザーに入る血液（６）（実線の矢印として図示される）は第１の標準ヘモダイアライザー（１）の保持液であり、第１の標準ヘモダイアライザー（１）は、より低分子量の化合物を除去するための標準ハイフラックス血液透析膜を含み、従って透析溶液（９）（破線矢印として図示される）で灌流され、透析溶液（９）は入口（１０ａ）を通ってろ液スペースに入り、中空糸（３ａ）のルーメンスペース内の血液の流れ方向と逆方向に流れた後、ダイアライザーを出口ポート（１１ａ）から離れる。処理済みの血液はダイアライザー（１）を出口（８ａ）から離れ、続いてダイアライザー（２）に入る。ろ液側で吸着剤により捕捉しようとするアルブミン及びアルブミンに結合した水溶性の肝臓毒を含むより小型の化合物は、ダイアライザー（２）の膜を通過することができる。浄化済みの透過液は中空糸膜のルーメン側に再び入り、血液と共に出口（８ｂ）を通って装置を離れ得る。任意選択の入口（１０ｂ）及び任意選択の出口（１１ｂ）は、この図では閉鎖されている。中空糸ダイアライザー（１）は、入口ポート（１０ａ）からフィルターに入り出口ポート（１１ａ）からそこを離れる透析流体（９）によってろ液側で灌流される標準ダイアライザーである。ダイアライザー（１）の中空糸膜（３ａ）（ここでは単一の膜糸として表される）は実質的な量のアルブミンの通過を許容しないが、血液（６）から水溶性成分を除去する働きをし、それらの水溶性成分はまた、腎不全患者の治療用ダイアライザーを使用するときに血液から除去されるものでもある。
【図2】本発明の体外肝臓補助システムの構成要素である中空糸膜ダイアライザー（２）の別の概略図を示す。この中空糸膜ダイアライザー（２）は、円筒形フィルターハウジング（２ｂ）と、前記ハウジング（２ｂ）内で長手方向に分布した実質的に平行な中空糸（３ｂ）の束とを含み、ここで中空糸の開放している端部は入口手段（７ｂ）及び出口手段（８ｂ）と流体連通し、及びこれらの端部はシーリング化合物（２ｃ）の中に、中空糸（３ｂ）の開放端部がシーリング化合物（２ｃ）を貫通して延在するように埋設される。ダイアライザーはろ液スペース（４ｂ）をさらに含み、これは中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断されている。ろ液スペース（４ｂ）は、場合により、透過液をハウジング（２ｂ）から除去するため入口手段（１０ｂ）及び出口手段（１１ｂ）と流体連通していてもよいが、概して閉鎖されている。ろ液スペース（４ｂ）には、透過液の成分、例えばアルブミンに結合していなくても又は結合していてもよい肝臓毒との相互作用能を有する粒子状吸着剤材料（５）が一様に占在している。この図では、患者から誘導される血液（６）が入口（７ｂ）からダイアライザー（２）に入り、出口（８ｂ）からダイアライザー（２）を離れる。任意選択の入口（１０ｂ）及び出口（１１ｂ）は閉鎖されている。
【図3】本発明の肝臓補助システムの極めて概略的な図を示す。血液が患者（１２）からその体外治療のため引き込まれる。この図では、血液は初めにダイアライザー（１）に入り、その後ダイアライザー（２）を灌流する。中空糸膜ダイアライザー（１）及び（２）については図１にさらに詳細に示される。このシステム内で使用される透析機は（１３）として表示される。
【図4】本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）の中に吸着剤材料を充填するために使用され得る充填装置（１４）を示す。ダイアライザーを装置の取付台（１７）に位置決めすることができ、取付台（１７）は、フィルターモジュールの出口ポート（１１ｂ）及び場合によりまた入口ポート（１０ｂ）も受け入れるスロット（１８）を有し得る。取付台（１７）は旋回ユニット（１５）に固定され、旋回ユニット（１５）は空気圧式直線振動器（１６）と連通している。振動器（１６）はスロット（１６ａ）及び（１６ｂ）内を往復して動くことができ、それにより旋回ユニット（１５）及び取付台（１７）の角変位が調整され得る。旋回ユニット（１５）は取付台（１７）と併せて、実質的にモジュールの長手方向軸の周りで往復して動くことのできる可動要素として設計される。充填装置（１４）は、充填方法（乾燥又は懸濁液）及び吸着剤の特性に応じて、充填する間のフィルターモジュールの直立位置（９０°）（図５Ｂ）又はフィルターモジュールの傾斜（図５Ａ）を可能にするように設計されてもよい。
【図5】フィルターモジュールに対する粒子状材料の懸濁液式充填方法の概略図を示し、ここではフィルター（２）が直立（９０°）位置に保持され、粒子状材料の懸濁液が出口ポート（１１ｂ）からろ液スペースに導入される。打撃器（２０）及び振動器（１６）が動作可能にされる。懸濁液が、スターラ（２４）を備えた供給タンク（２１）からポンプで送り込まれる（ＱＲｅｚ）。溶媒は膜壁を通過した後に入口ポート（８ｂ）からモジュールを離れる一方、粒子状材料はろ液スペース内に残り、溶媒はポンプで送られて（ＱＢｏｕｔ）受液タンク（２２）に入る。溶媒は充填プロセスを補助するためポンプで（ＱＢｉｎ）入口ポート（７ｂ）からモジュールに戻されてもよく、ここでは真空ポンプ（１９ｂ）と連通している脱気ユニット（２３）を使用して気泡の混入が回避される。入口ポート（１０ｂ）は閉鎖されている。
【図6】本発明に係る肝臓補助システムのインビトロ試験のセットアップを示す。このセットアップは再循環式であり、例えば、ＰｒｉｓｍａｆｌｅＸ（登録商標）（Ｇａｍｂｒｏ Ｌｕｎｄｉａ ＡＢ、スウェーデン）透析機（２５）と、血液加温器ユニット（３０）（３８℃に設定されている）とを含む。ｏＸｉｒｉｓ（登録商標）セットを使用してダイアライザー（１）が提供され、ダイアライザー（１）は実施例２に係るプロトタイプ（ダイアライザー（２））に接続されている。このシステムは、抱合型及び非抱合型ビリルビン、ケノデオキシコール酸、クレアチニン及び塩化アンモニウム（実施例３を参照）を補足したヒト血漿からなる、水浴（２７）中で加熱器（２９）により約３７℃に加温されている試液プール（２６）をさらに含む。このプールはマグネチックスターラ（２８）の助けにより撹拌される。試料をＢｉｎ、Ｂｚｗ又はＢｏｕｔで採取して、ダイアライザーを通過する前、通過中及び通過した後の試験物質の濃度を計測することができる。
【図7】実施例３において図６に係る試験セットアップで得られたクレアチニン除去の結果を示す。図７Ａは、４、８及び１０時間後のクレアチニン除去総量（ｍｇ単位）を図示する。図７Ｂは、クレアチニンのクリアランスデータ（ｍｌ／分単位）を示す。システムの経時的なクリアランス特性を示すため、様々な時間ウィンドウが示される。
【図8】実施例３において図６に係る試験セットアップで得られたアンモニウム除去の結果を示す。図８Ａは、４、８及び１０時間後のアンモニウム除去総量（ｍｇ単位）を図示する。図８Ｂは、クレアチニンのクリアランスデータ（ｍｌ／分単位）を示す。アンモニウムに関するシステムの経時的なクリアランス特性を示すため、様々な時間ウィンドウが示される。
【発明を実施するための形態】
【0025】
本発明は、肝不全に罹患している患者の治療用肝臓補助システム（図３）に関し、これは、実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容しない、且つ入口ポート（７ａ）からダイアライザーに入る患者の血液（６）で灌流される第１の中空糸膜ダイアライザー（１）であって、透析液溶液（９）がろ液スペース（４ａ）を中空糸（３ａ）内の血液の流れと逆方向に連続流で通過する、第１の中空糸膜ダイアライザー（１）と、所定量のアルブミンが膜壁を通過することを許容する、且つ患者（１２）又は第１のダイアライザー（１）から入口ポート（７ｂ）を通じて処理済みの血液（６）を受け取る第２の中空糸膜ダイアライザー（２）であって、ろ液スペース（４ｂ）が中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断されており、いかなる透析溶液によっても灌流されず、且つ親水性材料及び／又は疎水性材料を含む粒子状材料（５）が中空糸膜ダイアライザー（２）のろ液スペースに占在している、第２の中空糸膜ダイアライザー（２）とを血液回路に含むことを特徴とする。原理上、血液を初めに中空糸膜ダイアライザー（２）に通し、その後中空糸膜ダイアライザー（１）に通すことが可能である。しかしながら、初めに標準的な血液透析により水溶性毒素を除去し、そのようにして血液がダイアライザー（２）に入る前に血液の毒素負荷を低減することが有利であり得る。ダイアライザー（２）は、主として、肝不全状況で典型的に現れる毒素、特に親油性（疎水性）であるタンパク質結合（アルブミン結合）毒素であって、且つ腎臓透析に利用可能な透析システム及び標準的な尿毒症毒素の除去では除去することのできない毒素を除去する働きをする。
【0026】
本発明との関連において、表現「実質的な量のアルブミン」又は「所定量のアルブミン」は、ダイアライザー（２）の中空糸膜が、ウシ血漿（タンパク質レベル６０ｇ／ｌ）、３７℃、ＱＢ最大（概して２００〜５００ｍｌ／分）及びＵＦ ２０％でＩＳＯ８６３７に従い計測したふるい係数が０．１〜０．３でアルブミンの通過を許容することを意味する。従って、アルブミンが、それに結合していてもよい肝臓毒と共に、ろ液スペース中の粒子状材料と接触することになり、それにより前記結合した及び未結合の毒素が有効に除去され得る。同時に、ダイアライザー（２）で使用される特別な中空糸膜（３ｂ）が、さらに大型のタンパク質、例えばフィブリノゲンなどの凝固因子及び実質的に患者の血中に保持されていなければならない他の成分の通過を阻止する。ダイアライザー（１）は実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容せず、これは、ウシ血漿（タンパク質レベル６０ｇ／ｌ）、３７℃でＩＳＯ８６３７に従い計測したときのアルブミンふるい係数が、ＱＢ最大及びＵＦ２０％で０．０１を下回ることを意味する。
【0027】
本発明に係る肝臓補助システムで使用される中空糸膜ダイアライザー（１）は、現在腎臓透析患者の体外治療で血液透析、血液ろ過又は血液透析ろ過に使用されているとおりのダイアライザーであってよい。本発明の一態様によれば、中空糸膜ダイアライザー（１）で使用することのできる中空糸膜はいわゆるローフラックス膜であり、しかしながらさらに後述するハイフラックス膜ダイアライザーの方がより好ましい。ローフラックスダイアライザーは、概して、ハイフラックス膜と比較して低い透過性を特徴とする。ローフラックス膜は、１５ｍＬ／時間／ｍｍ Ｈｇ未満のＵＦ係数及び１０ｍｌ／分未満のβ２−ミクログロブリンクリアランスを有することを特徴とし得る。デキストランふるい係数基準では、ローフラックス膜はさらに、１０〜２０の分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）（ｋｇ／ｍｏｌ）及び２〜４ｋＤの保持開始分子量（ＭＷＲＯ）を特徴とし得る。ＭＷＲＯは、ふるい係数が０．９となる最小の分子量として定義される。ローフラックス膜の水透過性は、概して２〜５・１０−４ｃｍ／（バール・秒）の範囲（３７±１℃で０．９ｗｔ．−％ＮａＣｌ及びＱＢ１００〜５００ｍｌ／分で）である。
【0028】
本発明の一実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）で使用することのできる中空糸膜は、いわゆるハイフラックス膜である。用語「ハイフラックス」は時に不明瞭に用いられる。ハイフラックス膜は、概して、ローフラックス膜と比較して、約１．４ｋＤの分子量を有するビタミンＢ１２などのある種のマーカー分子のインビトロクリアランスを増加させるその高い透過性を特徴とする。ハイフラックス膜はまた、β２−ミクログロブリン（１１．８ｋＤ）などのより高い分子量の溶質を除去するその能力も特徴とする。本発明との関連において、用語「ハイフラックス」及び「ハイフラックス膜」は、それぞれ、＞１５ｍＬ／時間／ｍｍ ＨｇのＵＦ係数を有する膜を指し、ここでＵＦ係数は、単位時間当たりの所与の容積の限外ろ過液、従来のＨＤにおいて膜面積約１．７〜２．１ｍ２についてＱＢ３００〜４００ｍｌ／分及びＱＤ５００ｍｌ／分で計測するとき＞２０ｍＬ／分、好ましくは２０〜４０ｍＬ／分のβ２−ミクログロブリンクリアランス、及び＞４５０ｍＬ／分の物質移動係数（ＫｏＡ）を生じさせるために透析膜を横切って及ぼさなければならない圧力の量（膜間差圧）を決定する。本発明との関連においてハイフラックス膜は、さらに、４０〜９０・１０−４ｃｍ／（バール・秒）の膜の水透過性（３７±１℃で０．９ｗｔ．−％ＮａＣｌ及びＱＢ１００〜５００ｍｌ／分で）により定義される。本発明との関連においてハイフラックス膜のアルブミン損失は、従来のＨＤ、４時間後並びにＱＢ２５０ｍｌ／分及びＱＤ５００ｍｌ／分で＜０．５ｇである。ハイフラックス膜は、例えば米国特許出願第１３／４７７４７３号明細書に記載されるとおり決定されるデキストランふるい係数基準として、約２〜３ｎｍの細孔半径を有するローフラックス膜及び細孔半径８〜１２ｎｍを有する高カットオフ膜と比較して約３．５〜５．５ｎｍの細孔半径をさらに特徴とする。前記デキストランふるい係数基準では、ハイフラックス膜は、２５〜６５の分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）（ｋｇ／ｍｏｌ）及び５〜１０ｋＤの保持開始分子量（ＭＷＲＯ）をさらに特徴とし得る。
【0029】
ハイフラックス及びローフラックスダイアライザーは、セルロース系材料及び合成材料を含む様々な材料で作製され得る。本発明の一実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（１）の膜は、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含む。本発明の一実施形態によれば、疎水性ポリマーは、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスルホン（ＰＳＵ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリテトラフルオロエチレン（ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｅｔｈｙｌｅｎｅ）（ＰＴＦＥ）又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、及び少なくとも１つの親水性ポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、及びポリプロピレンオキシドとポリエチレンオキシドの共重合体（ＰＰＯ−ＰＥＯ）からなる群から選択される。本発明のさらに別の実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（１）で使用されるハイフラックス膜は、アクリロニトリルとメタリルスルホン酸ナトリウムの共重合体を含み、場合によりその表面がポリエチレンイミン（ＰＥＩ）、好ましくは高分子量ＰＥＩでコーティングされ、さらに場合によりその上にグラフト化されたヘパリンを有し得る。
【0030】
本発明の一実施形態によれば、ダイアライザー（１）は、ポリエーテルスルホン、ポリアミド、及びポリビニルピロリドンをベースとした、非対称３層構造を有し且つ約５×１０−４ｃｍ／バールの水力学的透過率（Ｌｐ）を示す膜を含む。かかる膜は、例えば、Ｇａｍｂｒｏ Ｌｕｎｄｉａ ＡＢにより商標名Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｐ２１Ｌで販売されるフィルターに含まれている。本発明に係るダイアライザー（１）で使用することのできる膜糸の別の例は、ポリエーテルスルホン、ポリアミド、及びポリビニルピロリドンを含む、非対称３層構造を有し且つ約８０×１０−４ｃｍ／バールの水力学的透過率Ｌｐを示す膜である。かかる膜は、例えば、Ｇａｍｂｒｏ Ｌｕｎｄｉａ ＡＢにより商標名Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｐ２１０Ｈで販売されるフィルターに含まれている。本発明に係るダイアライザー（１）で使用することのできる膜糸の別の例は、ポリアリールエーテルスルホン及びポリビニルピロリドンを含む、非対称３層構造を有し且つ約８０×１０−４ｃｍ／バールの水力学的透過率（Ｌｐ）を示す膜である。かかる膜は、例えば、Ｇａｍｂｒｏ Ｌｕｎｄｉａ ＡＢにより商標名Ｐｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）Ｒｅｖａｃｌｅａｒで販売されるフィルターに含まれている。本発明の別の実施形態によれば、本発明の肝臓補助システムは、ダイアライザー（１）として、同様にＧａｍｂｒｏから入手可能な、均質なゲル構造を有し且つポリエチレンイミン及びヘパリンでコーティングされている、アクリロニトリルとメタリルスルホン酸ナトリウムの共重合体をベースとする膜を含むｏＸｉｒｉｓ（商標）ダイアライザーを含む。本発明のさらに別の実施形態によれば、本発明の装置で使用することのできる膜は、同様にアクリロニトリルとメタリルスルホン酸ナトリウムの共重合体で作られた、均質なゲル構造を有し、且つ商標名Ｆｉｌｔｒａｌ（商標）（Ｇａｍｂｒｏ）で販売されるフィルターに含まれている膜である。本発明のさらに別の実施形態によれば、本発明の肝臓補助システムは、ダイアライザー（１）として、同様にＧａｍｂｒｏから入手可能な、アクリロニトリルとメタリルスルホン酸ナトリウムの共重合体をベースとする膜を含むＮｅｐｈｒａｌ（商標）ＳＴダイアライザーを含む。本発明のさらに別の実施形態によれば、本発明の肝臓補助システムは、ダイアライザー（１）として、同様にＧａｍｂｒｏから入手可能な、均質なゲル構造を有し且つポリエチレンイミン及びヘパリンでコーティングされている、アクリロニトリルとメタリルスルホン酸ナトリウムの共重合体をベースとする膜を含むＥｖｏｄｉａｌ（登録商標）ダイアライザーを含む。本発明のさらに別の実施形態によれば、本発明の肝臓補助システムは、ダイアライザー（１）として、Ｆｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｍｅｄｉｃａｌ ＣａｒｅによりＦＸ ８０及びＦＸ １００として販売されるダイアライザー（両方ともにいわゆるＨｅｌｉｘｏｎｅ（登録商標）膜を含む）、又はＯｐｔｉｆｌｕｘ（登録商標）ダイアライザーＦ１８０ＮＲ又はＦ２００ＮＲ、Ｂａｘｔｅｒ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによりＸｅｎｉｕｍ ＸＰＨ ２１０又はＸｅｎｉｕｍ ＸＰＨ １９０として販売されるダイアライザー、又は旭化成メディカル株式会社によりＲｅｘｅｅｄ−１８Ｓ及びＲｅｘｅｅｄ−２１Ｓとして販売されるダイアライザーを含むことができる。
【0031】
本発明に係る肝臓補助システムで使用される中空糸膜ダイアライザー（２）は、それが、円筒形フィルターハウジングと、ハウジング内に長手方向に分布した略平行中空糸膜（３ｂ）の束と、中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断された、且つダイアライザーの中空糸（３ｂ）のルーメンスペースに血液を送り込むための入口手段（７ｂ）及び中空糸（３ｂ）のルーメンから処理済みの血液を除去するための出口手段（８ｂ）と流体連通しているろ液スペース（４ｂ）であって、少なくとも１つの吸着剤を含む粒子状材料（５）が占在しているダイアライザー（２）のろ液スペース（４ｂ）とを含むことを特徴とする。ダイアライザー（２）の中空糸膜は、それが、概してハイフラックス膜などの従来の膜タイプと比べて膜の選択的な層上により大きい平均細孔径を有し、且つそれに関係して、より大きい分子に対してより高いふるい係数を有することを特徴とし得るいわゆる高カットオフ膜であることを特徴とする。膜の平均細孔径は膜表面上の細孔の中央値又は平均サイズの指標となる。平均細孔径は半径又は直径を指し得る。平均細孔径はまた、膜が排除する又は通過させることが可能な粒度も示す。膜細孔はむしろ非均一である傾向があり、従って形状及び容積のいかなる前提も、主として数学的モデリング及び解釈を目的とするものである。しかしながら、平均細孔径は、膜がある種の状況下でどのように挙動するかの正確な記述及び定量的分析を提供し得る。本発明との関連において高カットオフ膜は、Ａｉｍａｒ ｅｔ ａｌ．：“Ａ ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｔｏ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅｓ ｉｎｔｏ ｐｏｒｅ ｓｉｚｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｓｉｅｖｉｎｇ ｍｅｍｂｒａｎｅｓ”．Ｊ．Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ｓｃｉ．５４（１９９０）３３９−３５４から引用する以下の式［１］α＝０．３３（ＭＭ）０．４６［１］
に従い決定するとき、及び例えば米国特許出願第１３／４７７４７３号明細書、実施例３に記載されるとおり決定されるデキストランふるい係数基準で、７ｎｍより大きい、一般には８〜１２ｎｍの選択的な層上の平均細孔径により定義される膜を指す。
【0032】
本明細書で使用されるとき、用語「ふるい係数（Ｓ）」は、特定の分子量の分子を排除する又は通過させる膜の物理的特性を指す。全血中、血漿中又は水中におけるふるい係数は、規格ＩＳＯ８ ６３７、２０１０年版に従い決定することができる。簡単に言えば、膜のふるい係数は、タンパク質溶液（例えばウシ又はヒト血漿）を限定条件（ＱＢ、ＴＭＰ及びろ過速度）下で膜束を通じてポンプで圧送し、供給液中、保持液中及びろ液中のタンパク質の濃度を求めることにより決定される。ろ液中のタンパク質の濃度がゼロである場合、０％のふるい係数が得られる。ろ液中のタンパク質の濃度が供給液及び保持液中のタンパク質の濃度に等しい場合、１００％のふるい係数が得られる。
【0033】
本発明の一態様によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜は、少なくとも１つの疎水性ポリマーと少なくとも１つの親水性ポリマーとを含む。本発明の一実施形態によれば、疎水性ポリマーは、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリスルホン（ＰＳＵ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリアクリロニトリル（ＰＡＮ）、ポリアミド（ＰＡ）、ポリテトラフルオロエチレン（ｐｏｌｙｔｅｔｒａｆｌｕｏｒｅｔｈｙｌｅｎｅ）（ＰＴＦＥ）又はそれらの組み合わせからなる群から選択され、及び少なくとも１つの親水性ポリマーは、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、及びポリプロピレンオキシドとポリエチレンオキシドの共重合体（ＰＰＯ−ＰＥＯ）からなる群から選択される。本発明の別の実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜は、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）及びポリスルホン（ＰＳＵ）からなる群から選択される疎水性ポリマーと、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びポリビニルアルコール（ＰＶＡ）からなる群から選択される親水性ポリマーとを含む。本発明のさらに別の実施形態において、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜は、ポリアリールエーテルスルホン（ＰＡＥＳ）及びポリスルホン（ＰＳＵ）からなる群から選択される疎水性ポリマーと、親水性ポリマーポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）とを含む。
【0034】
本発明の別の態様によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜は、デキストランふるい係数基準で１７０〜３２０ｋＤの水中でのカットオフ分子量、及びデキストランふるい係数基準で１０〜２０ｋＤの水中での保持開始分子量を特徴とする。本発明の別の実施形態によれば、膜は、デキストランふるい係数基準で９０〜２００ｋＤの水中でのカットオフ分子量を有する。本発明のさらに別の実施形態によれば、膜は、デキストランふるい係数基準で１２０〜１７０ｋＤの水中でのカットオフ分子量を有する。
【0035】
ダイアライザー（２）の中空糸膜は、ある十分な量のアルブミンが膜壁を通過し、ダイアライザーのろ液スペース（４ｂ）に占在する粒子状材料（５）と接触することを許容する。アルブミンは、本発明との関連では、それに結合した肝臓毒を有してもよく、肝臓毒はろ液スペース中の粒子状材料（５）に接触して少なくとも段階的に除去されることになる。他の肝臓毒もまた膜壁を通過し、粒子状材料（５）によって吸着され得るか又はそれに結合し得ることは明らかである。実質的に毒素が結合していないアルブミンを含む浄化済みの透過液は、中空糸膜のルーメンスペースに再び入ることによりろ液スペースを離れることができ、ルーメンスペースから出口手段（８ｂ）を通ってダイアライザー（２）を離れることができる。所与の分子、例えばアルブミンは、それがダイアライザー（２）を通過する間、当然ながら膜壁を２回以上通過し得るため、従って粒子状材料（５）に接触する（それにより結合した毒素が除去され得る）機会を２回以上有し得る。
【0036】
本発明の別の実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜は、それが、ＩＳＯ ８６３７に従い０．１〜１．０の全血中で計測されるふるい係数で最大４５ｋＤの分子量を有する物質の通過を許容することを特徴とする。本発明の別の実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜は、ウシ血漿中で計測して、ＱＢ最大及びＵＦ２０％、３７℃、血漿中タンパク質含量６０ｇ／ｌでＩＳＯ ８６３７に従い０．０５〜０．３のアルブミンふるい係数を有し、及び全血中で計測して、３７℃、タンパク質レベル６０ｇ／ｌ、ＱＢ最大及びＵＦ２０％でＩＳＯ ８６３７に従い０．１〜０．３のアルブミンふるい係数を有する。
【0037】
中空糸膜ダイアライザー（２）を調製するための膜の製造は転相法に従い、ここではポリマー又はポリマー混合物を溶媒中に溶解してポリマー溶液が形成される。この溶液を脱気してろ過し、その後高温に保つ。続いて、２つの同心開口を有するノズルの外側環状スリットからポリマー溶液を押し出す。同時に、ノズルの内側開口から中心流体を押し出す。回転ノズルの出口で中心流体がポリマー溶液と接触するようになり、この時点で沈殿が初期化される。この沈殿過程は、ポリマー溶液からの溶媒と中心流体の非溶媒との交換である。この交換によってポリマー溶液はその相が液相から固相に反転する。固相では、溶媒／非溶媒交換の動力学により細孔構造、即ち非対称性及び細孔径分布が生じる。この過程は、ポリマー溶液の粘度に影響を与える特定の温度で働く。回転ノズルの温度並びにポリマー溶液及び中心流体の温度は３０〜８０℃である。粘度が溶媒と非溶媒との交換による細孔形成過程の動力学を決定する。続いて膜を好ましくは洗浄し、乾燥させる。沈殿条件、例えば中心流体の組成、温度及び速度を選択することにより、所定量の親水性末端基が細孔の表面に位置して親水性ドメインを作り出すような形で疎水性及び親水性ポリマーが「凍結」される。疎水性ポリマーは他のドメインを構築する。タンパク質の吸着を回避するため、細孔表面積に所定量の親水性ドメインが必要である。親水性ドメインのサイズは、好ましくは２０〜５０ｎｍの範囲内でなければならない。膜表面からアルブミンをはじくためには、親水性ドメインはまた、互いが所定距離の範囲内になければならない。アルブミンが膜表面からはじかれることにより、アルブミンと疎水性ポリマーとの直接の接触、結果的にアルブミンの吸収が回避される。膜の調製に使用されるポリマー溶液は、好ましくは１０〜２０ｗｔ．−％の疎水性ポリマー及び２〜１１ｗｔ．−％の親水性ポリマーを含む。中心流体は、概して水、グリセロール及び他のアルコール類から選択される４５〜６０ｗｔ．−％の沈殿媒体、及び４０〜５５ｗｔ．−％の溶媒を含む。換言すれば、中心流体は親水性ポリマーを一切含まない。一実施形態において、外側スリット開口を通って出てくるポリマー溶液は、沈殿する膜糸の外側で湿り蒸気／空気混合物に曝露される。好ましくは、湿り蒸気／空気混合物は最低１５℃、より好ましくは最低３０℃、且つ７５℃以下、より好ましくは６０℃以下の温度を有する。好ましくは、湿り蒸気／空気混合物の相対湿度は６０〜１００％である。さらに、外側スリット開口から現れるポリマー溶液の周りの外気中の湿り蒸気は、好ましくは溶媒を含む。湿り蒸気／空気混合物中の溶媒含量は、好ましくは０．５〜５．０ｗｔ−％であり、含水量に関係する。温度制御された蒸気雰囲気中の溶媒の効果は、膜糸の沈殿速度を制御することである。用いられる溶媒が少ないと、外表面はより密な表面となり、使用される溶媒が多いと、外表面はより開放した構造を有することになる。
【0038】
押出し前、ポリマー溶液に好適な添加剤が添加されてもよい。添加剤を使用すると適切な細孔構造が形成され、膜透過性、水力学的透過率及び拡散透過率、並びにふるい特性が最適となる。好ましい実施形態において、ポリマー溶液は、好ましくは、水、グリセロール及び他のアルコール類を含む群から選択される０．５〜７．５ｗｔ．−％の好適な添加剤を含有する。溶媒は、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ブチロラクトン及び前記溶媒の混合物を含む群から選択され得る。好適な膜の作製方法は、例えば、国際公開第２００４／０５６４６０ Ａ１号パンフレット又は米国特許出願第１３／４７７４７３号明細書に開示される。
【0039】
本発明の一実施形態によれば、本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）の調製に使用することのできる中空糸膜は、当該技術分野において公知の、且つＧａｍｂｒｏ Ｌｕｎｄｉａ ＡＢから商標名ＨＣＯ１１００（登録商標）又はＴｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）で市販されているダイアライザーで現在使用されている膜である。例えば、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）膜は、ポリエーテルスルホン及びＰＶＰから調製され、５０μｍの壁厚及び２１５μｍの内径を有する。６０ｇ／ｌのタンパク質レベル（アルブミンレベル２０〜３０ｇ／ｌ）を有する３７℃のウシ血漿で、且つＱＢ＝２５０ｍｌ／分、ＱＤ＝５００ｍｌ／分及びＵＦ＝０ｍｌ／分では、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）ダイアライザーに使用されているとおりの膜に関して最初の４時間のアルブミン損失は最大約２８ｇであり、４時間後の平均毎時アルブミン損失（±２０％）は約７ｇである。
【0040】
本発明の別の実施形態によれば、ダイアライザー（２）内の膜糸充填密度又は膜糸割当て（ｆｉｂｅｒ ａｌｌｏｃａｔｉｏｎ）は２０％〜５０％の範囲である。本発明のさらに別の実施形態によれば、ダイアライザー（２）の総膜面積は１．０〜２．１ｍ２の範囲である。ダイアライザーにおいて膜糸は、好ましくはフィルターモジュールの円筒形ハウジングの長さにわたり一様に分布し、これは、単一の膜糸間の距離がそれらの膜糸の全長にわたり実質的に同じまま保たれることを意味する。本発明の別の実施形態において、膜糸割当ては２５％〜５５％である。本発明のさらに別の実施形態において、膜糸割当ては２５％〜４５％である。
【0041】
本発明に係るモジュールの作製に使用することのできる膜糸は直線状又はクリンプ状であってもよく、ここでクリンプ状膜糸は、所定の波状のうねり（ｏｎｄｕｌａｔｉｏｎ）を有する膜糸であり、この波状のうねりは膜糸の長さにわたり実質的に正弦波状であるが、かかる正弦波状のうねりから逸脱していてもよく、即ち１つの単一の膜糸の又は２つ以上の膜糸間でクリンプの波長及び／又は振幅が異なっていてもよい。波状のうねりを有する膜糸及び膜糸に波状のうねりを付与する方法は当該技術分野において公知であり、例えば、欧州特許第１ ２５７ ３３３ Ａ１号明細書に記載されている。１つの装置において直線状膜糸とクリンプ状膜糸とを組み合わせることが可能である。本発明の一実施形態では、フィルターモジュールの全ての膜糸が波状のうねりを有する。本発明の別の実施形態によれば、フィルターモジュールの全ての膜糸が直線状膜糸である。本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）に関しては、０．１ｍｍ〜０．９ｍｍの振幅及び３．５ｍｍ〜１１．５ｍｍの波長の波状のうねりを有する膜糸を使用することが有利であり得る。例えば、Ｔｈｅｒａｌｉｔｅ（登録商標）ダイアライザーで使用されている標準的な中空糸は、０．６ｍｍの振幅及び約７．３ｍｍの波長を有する。
【0042】
本発明の別の実施形態によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）の膜表面積は１．０〜２．１ｍ２の範囲である。概して、本発明に係るダイアライザー（２）で肝臓毒の有効な除去を可能にするために、１．３〜１．８ｍ２の膜表面積が十分である。本発明のさらに別の実施形態によれば、膜糸の寸法は１８０〜２５０μｍ（内径）及び３５〜８０μｍ（壁厚）の範囲である。
【0043】
本発明の一態様によれば、本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）は、先述のとおりの微細孔中空糸膜の束を含み、さらに、モジュールのろ液スペースに、中空糸膜ダイアライザー（２）のろ液スペースに占在する粒子状材料（５）を含み、ここで粒子状材料（５）は、中空糸膜を通過した肝臓毒を固定化又は吸着することができる。粒子状材料は疎水性及び／又は親水性材料からなってもよく、酸素含有吸着剤、炭素系吸着剤及びポリマー系吸着剤又はそれらの組み合わせからなる群から選択される。表現「吸着」は、それが本明細書で使用されるとき、物質が液相から固体基材（粒子状材料）の表面上へと選択的に分配されることを指す。物理吸着は、主に、吸着質分子と吸着剤表面を構成する原子との間のファンデルワールス力及び静電力により引き起こされる。従って吸着剤は、第一に表面積及び極性などの表面特性を特徴とする。非極性吸着剤は概して「疎水性」と称される。炭素質吸着剤、ポリマー吸着剤及びシリカライトは、典型的な非極性吸着剤である。
【0044】
表現「粒子状材料」は、本明細書で使用されるとき、中空糸膜モジュール又はフィルターのろ液スペースの中に充填されて占在する材料を指す。粒子状材料は概して、この記載全体を通して、特定の平均直径を有する粒子からなることを指す。前記粒子は、簡単にするため凸形状を有するものと見なされ、その直径は、その境界の接線をなす２つの対向する平行線の間に形成し得る最大の距離であると定義され、及び幅は、最小のかかる距離であると定義される。一般に粒子は事実上略球形であると仮定され、これは直径及び幅が同じであることを意味する。本発明の別の実施形態によれば、粒子状材料は１μｍ〜３００μｍの直径を有する粒子からなる。
【0045】
本発明のさらに別の実施形態によれば、ろ液スペースには粒子状材料が、使用される粒子状材料、ハウジング内における充填密度及びろ液スペースの利用可能な容積を含めたハウジングそれ自体の幾何学的形状に適合される所定の充填比で一様に占在している。表現「一様」は、本明細書で使用されるとき、粒子状材料、即ちそれを構成する粒子がろ液スペースにわたり均等に分布していることを意味する。これは、容積当たり、例えばｃｍ３当たりの平均粒子数がその空間にわたり実質的に同じであることを意味する。１ｃｍ３の平均粒子数に関連して使用される表現「実質的に同じ」は、所与の１ｃｍ３容積範囲にある粒子の数が第２の１ｃｍ３容積範囲にある粒子の数と最大２０％まで、好ましくは１０％までの差であり得ることを意味する。
【0046】
表現「充填比」は、本明細書で使用されるとき、それぞれその乾燥形態又は湿潤形態で、所与の中空糸膜モジュールのろ液スペースに収容することのできる最大量の粒子状材料のｍｌ単位での容積（ＶＰＭ）と、前記モジュールのろ液スペースのｍｌ単位での利用可能な容積（ＶＦＳ）との比を指す：【0047】
従ってＶＰＭ（ｍｌ）は、装置のろ液スペースに収容することのできる粒子状材料の容積を表す。ＶＦＳ（ｍｌ）は利用可能なろ液スペースを表し、これは所与の中空糸膜フィルターモジュールについて既知であるか、又は容易に決定することができる。従って比が１．０であれば、それはろ液スペースの利用可能な全容積が粒子状材料で占拠されていることを意味する。比が低いほど、モジュールのろ液スペースに存在する粒子状材料は少なくなる。充填比は常に、実質的にモジュールの利用可能な全容積が使い尽くされているモジュールを参照する。「使い尽くされた」は、本発明との関連では、それ以上粒子状材料を装置に充填できないことを意味する。ＶＰＭ（ｍｌ）は、所与の方法でモジュールに充填することのできるｇ単位の粒子状材料の総量をその材料のかさ密度（ｇ／ｍｌ）で除して計算することができる。粒子状材料のかさ密度は、粒子が占有する総容積当たりの材料の粒子の質量として定義される。粒子状材料のかさ密度は材料の処理の仕方に応じて変化し得ることに留意しなければならない。例えば、単純にシリンダに流し込まれた粒子状材料は、あるかさ密度を有し得る（「かさ密度」）。そのシリンダが撹拌される場合、粒子は動き、通常互いに近付いて沈降するため、かさ密度は高くなる。このため、本発明に従い調製されたフィルターにおける粒子状材料のかさ密度は「タップ密度」（ρ）と称され、これは原理的には、粒子状材料を圧密化した後のかさ密度を指す。所与の材料について、ρはＤＩＮ ＩＳＯ ３９５３に従い決定することができる。それ以上材料の圧密化が起こらないとき、最大かさ密度（「タップ密度」）に達する。従って、所与の中空糸膜モジュールのろ液スペースに収容することのできる粒子状材料の容積ＶＰＭ（ｍｌ）は、以下のとおり計算することができる：【0048】
ｍＰＭは、モジュールのろ液スペースに収容し得る粒子状材料の量を表す。ｍＰＭは、例えば、初めの（乾燥）粒子状材料の分量から残りの粒子状材料（ろ去され乾燥させたもの、材料を懸濁液としてモジュールに充填した場合）の量を減じることにより決定することができる。本発明の一態様によれば、ダイアライザー（２）は０．６〜１．０の範囲の充填比を提供する。本発明の別の態様によれば、ダイアライザー（２）は０．４〜０．７の範囲の充填比を提供する。本発明のさらに別の態様によれば、ダイアライザー（２）は０．３〜０．５の範囲の充填比を提供する。
【0049】
肝臓毒を結合及び／又は吸着するための、本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）のろ液スペースに占在する非荷電又は非極性疎水性材料は、概して当該技術分野において公知の様々な材料から選択され得る。本発明の一態様によれば、疎水性粒子状材料は、活性炭、カーボンナノチューブ、疎水性シリカ、スチレン系ポリマー、ポリジビニルベンゼンポリマー及びスチレン−ジビニルベンゼン共重合体からなる群から選択される。活性炭は、例えば粒子状の形態で、平均直径が０．００１〜０．１５ｍｍの１．０ｍｍ未満のサイズの粉末又は細顆粒として、又は粉末状の活性炭と比べて比較的大きい粒度を有する顆粒状活性炭として使用することができる。顆粒状活性炭には、取り扱いがより簡単で、且つろ液スペースにおけるその保持の点で安全性がより高いという利点がある。本発明に係るダイアライザー（２）で使用し得る活性炭は、酸洗浄された顆粒状活性炭粒子であってもよい。本発明の一態様によれば、顆粒状活性炭の粒度は＞１０メッシュ（２．０ｍｍ）及び＜４０メッシュ（０．４２０ｍｍ）の範囲である。本発明の別の態様によれば、活性炭の粒度は約０．２００ｍｍの範囲である。本発明により有利に用いられ得る活性炭の総表面積は６００ｍ２／ｇ〜１２００ｍ２／ｇの範囲である。かかる活性炭は、例えば、Ｎｏｒｉｔ（登録商標）ＧＡＣ １２４０ ＰＬＵＳ Ａ（Ｎｏｒｉｔ Ｎｅｄｅｒｌａｎｄ ＢＶ）として購入することができる。使用し得るポリマー疎水性材料の例は、例えば、スチレン系ポリマー、例えば、ＤＯＷＥＸ（商標）ＯＰＴＩＰＯＲＥ（商標）Ｌ４９３及びＶ４９３、又はＡｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＸＡＤ（登録商標）−２、ポリジビニルベンゼンポリマー又はスチレン−ジビニルベンゼン共重合体（例えばＡｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＸＡＤ４又はＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍ（商標）ＣＧ１６１）、ポリ（１−フェニルエテン−１，２−ジイル）（Ｔｈｅｒｍｏｃｏｌｅ）、又は表面に化学的に結合した疎水性基を有するシリカである疎水性シリカ、又はそれらの組み合わせである。疎水性シリカはヒュームドシリカ及び沈降シリカの両方から作製され得る。使用することのできる別の疎水性材料は、いかなる官能基も含まないスチレンとジビニルベンゼンの共重合体であるＵｊｏｔｉｔとして知られ、Ｕｊｏｔｉｔ ＰＡ−３０、Ｕｊｏｔｉｔ ＰＡ−４０又はＵｊｏｔｉｔ ＰＡ−２０として入手可能である。本発明の一実施形態によれば、ダイアライザー（２）のろ液スペース中の粒子状材料は、Ｕｊｏｔｉｔ ＰＡ−３０などの、いかなる官能基も含まないスチレンとジビニルベンゼンの共重合体を含む。Ｕｊｏｔｉｔ ＰＡ−３０粒子又はビーズは８０〜２００μｍの平均直径及び７５０〜８５０ｍ２／ｇの比表面積を有する。本発明の別の実施形態によれば、ダイアライザー（２）のろ液スペース中の粒子状材料は、活性炭、例えばＮｏｒｉｔ（登録商標）ＧＡＣ １２４０ ＰＬＵＳ Ａ（Ｎｏｒｉｔ Ｎｅｄｅｒｌａｎｄ ＢＶ）などを含む。本発明のさらに別の実施形態によれば、ダイアライザー（２）のろ液スペース中の粒子状材料は、非荷電疎水性材料として、少なくとも１つの活性炭と、少なくとも１つの、いかなる官能基も含まないスチレンとジビニルベンゼンの共重合体との組み合わせを含む。
【0050】
肝臓毒を結合及び／又は吸着するための、本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）のろ液スペースに占在する荷電又は極性親水性材料は、当該技術分野において公知の様々な材料から選択され得る。本発明の別の態様によれば、粒子状材料は、さらなる修飾なしに使用され得る陽イオン交換粒子からなり得る。かかる陽イオン交換材料は、概して、アガロース、セルロース、デキストラン、メタクリル酸塩、ポリスチレン又はポリアクリル酸のマトリックスをベースとする。かかる材料は概して公知であり、例えば、それぞれ、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）ＣＭ、Ｓｅｐｈａｄｅｘ、Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ（登録商標）、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）、Ｄｉａｉｏｎ（商標）、Ｐｕｒｏｌｉｔｅ（登録商標）、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）及びＤｕｏｌｉｔｅ（登録商標）ＳＯ３Ｈなどの商標名で市販されている。
【0051】
本発明の別の態様によれば、粒子状材料は、さらなる修飾なしに使用することのできる陰イオン交換材料からなり得る。かかる陰イオン交換材料は、ポリスチレン又はスチレン−ジビニルベンゼンであって、スルホン酸、ポリアミン又は第４級若しくは第３級アミンで修飾されていなくても又は修飾されていてもよいものをベースとし得る。本発明の一態様によれば、粒子は、活性基、例えば、第４級アンモニウム基、ジメチルエタノールアミン基、ジメチルエタノールベンジルアンモニウム基、ベンジルトリアルキルアンモニウム基、ベンジルジメチル（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム及び／又はトリメチルベンジルアンモニウム官能基を有するスチレンとジビニルベンゼンの共重合体をベースとする。本発明の具体的な態様によれば、使用される粒子は、第４級アンモニウム基を有するスチレンとジビニルベンゼンの共重合体をベースとする。本発明の一態様によれば、スチレンとジビニルベンゼンの共重合体はトリメチルベンジルアンモニウム官能基を有し、コレスチラミン（Ｃｈｏｌｅｓｔｙｒａｍｉｎｅ）、クエミド（Ｃｕｅｍｉｄ）、ＭＫ−１３５，コルバール（Ｃｈｏｌｂａｒ）、コルバール（Ｃｈｏｌｂａｒ）、クエストラン（Ｑｕｅｓｔｒａｎ）、カンタラン（Ｑｕａｎｔａｌａｎ）、コレスチラミン（Ｃｏｌｅｓｔｙｒａｍｉｎｅ）又はＤｏｗｅｘ（登録商標）１ｘ２−Ｃｌとも称される。使用することのできるかかる陰イオン交換媒体は、例えば商標名Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）で知られている。Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）は、例えば、第４級アンモニウム基、ベンジルジメチル（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム基又はジメチルエタノールアミン基などの活性基又は官能基を有するスチレン−ジビニルベンゼンで形成されるマトリックスを含む。使用することのできる他の陰イオン交換媒体は、例えば商標名Ｄｏｗｅｘ（登録商標）で知られている。Ｄｏｗｅｘ（登録商標）は、例えば、トリメチルベンジルアンモニウムなどの活性基又は官能基を有し得るスチレン−ジビニルベンゼンで形成されるマトリックスを含む。本発明の一実施形態によれば、ダイアライザー（２）のろ液スペース中の粒子状材料は、トリメチルベンジルアンモニウム官能基、例えば、コレスチラミン（Ｃｈｏｌｅｓｔｙｒａｍｉｎｅ）、クエミド（Ｃｕｅｍｉｄ）、ＭＫ−１３５，コルバール（Ｃｈｏｌｂａｒ）、コルバール（Ｃｈｏｌｂａｒ）、クエストラン（Ｑｕｅｓｔｒａｎ）、カンタラン（Ｑｕａｎｔａｌａｎ）、コレスチラミン（Ｃｏｌｅｓｔｙｒａｍｉｎｅ）、Ｐｕｒｏｌｉｔｅ（登録商標）又はＤｏｗｅｘ（登録商標）１ｘ２−Ｃｌなどを有する少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体を含む。
【0052】
本発明のさらに別の実施形態によれば、ダイアライザー（２）のろ液スペース中の粒子状材料は、少なくとも１つの活性炭と、いかなる官能基も含まない少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体と、トリメチルベンジルアンモニウム官能基を有する少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体との組み合わせを含む。それぞれの成分の間の可能な比は、１：１：１〜１０：５：１の範囲である。本発明のさらに別の実施形態によれば、ダイアライザー（２）のろ液スペース中の粒子状材料は、いかなる官能基も含まない少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体と、トリメチルベンジルアンモニウム官能基を有する少なくとも１つのスチレンとジビニルベンゼンの共重合体との組み合わせを含む。それぞれの成分の間の可能な比は、１０：１〜１：１の範囲である。
【0053】
本発明の一実施形態によれば、ポリマー粒子状材料がビーズの形態で使用され、ビーズはサイズ及び組成が異なってもよい小型の略球形の粒子であり、１００ｎｍ〜５ｍｍの範囲、特に３μｍ〜３００μｍの範囲の平均直径を有し得る。
【0054】
本発明に係る中空糸膜ダイアライザー（２）の調製には、粒子状材料は好ましくは、ろ液スペース（４ｂ）内における粒子状材料（５）の均質な分布を可能にする方法でろ液スペースに導入される。粒子状材料（５）は乾燥形態でろ液スペースに充填することができ、ここで材料は入口ポート（１０ｂ）を介して上から下に充填される。この場合、フィルターモジュールが傾斜した位置を取らなければならない。粒子状材料はまた、例えば水中にある懸濁液としてろ液スペースに充填されてもよい。乾燥粒子状材料又は材料の懸濁液もまた、ろ液スペースに入口ポート（１０ｂ）を介して上から下に導入され得る。代替として、懸濁液はろ液スペースに出口ポート（１１ｂ）を介して下から上に導入されてもよく、ここでフィルターモジュールは、垂直位置又は傾斜した位置、好ましくは垂直位置に保持される。本発明との関連において、表現「入口ポート」及び「出口ポート」は、材料をろ液スペースに導入し又はそこから除去するためのその実際の使用とは無関係に、（１０ｂ）及び（１１ｂ）などの特定のポートに割り当てられる。例えば、出口ポート（１１ｂ）のような「出口ポート」は、原理上、流体を装置からろ液スペースから除去するために使用することができ、従って「出口」として働き得るが、また材料を装置に導入するためにも使用することができ、従って「入口」としても働き得る。しかしながら、二重の割当てを回避するため、それぞれのポートは、それらのポートを特定の使用に限定しようとするものではないが、「入口」ポート又は「出口」ポートのいずれかと命名されている。
【0055】
本発明に係るモジュールは、ろ液スペースに疎水性材料が一様に占在する方法で調製されなければならない。同時に、装置の能力を向上させるため、高い充填比が有利である。従って、０．６〜１．０の高い充填比が望ましいが、しかしながらそれより低い充填比であっても極めて良好な結果を達成するには十分であり得る。ひいてはより低い比が好ましいこともある。このように、モジュールは、標的肝臓毒を含む処理しようとする流体中に存在する物質がモジュールのろ液スペースに入ると、その物質が活性粒子状材料全体にわたり均等に分布し、吸着又は結合され、従って高効率で除去されるように流れの最適化された透過を提供するように設計される。先述のとおり、充填プロセスは、例えば、モジュールをその長手方向軸に対して特定の傾斜角、好ましくは４５°〜９０℃で位置決めすることを可能にするように設計された充填装置で達成され得る。かかる充填装置（図４Ａ及び図４Ｂ）は、中空糸フィルターモジュールを最小総角変位（θ）を約１０°としてその長手方向軸の周りに素早く連続して時計回りと反時計回りとに交互に回転させることにより充填プロセスを最適化するように設計することができる。ろ液スペースを充填する間のモジュールの回転運動は、場合により乾燥材料の特定の傾斜角と組み合わさって、ハウジングの利用可能な全スペースにわたる中空糸間への粒子状材料の分布及び堆積の向上を可能にする。好ましくは、充填過程におけるモジュールは、さらに、打叩手段の助けによりモジュールの長手方向軸と垂直に加えられる力に曝される。充填中のフィルターモジュールに対するかかる押叩又は打叩の衝撃は、ろ液スペース中の粒子状材料の一様な分布及び堆積をさらに向上させる。押叩力又は打叩力は、例えば、図４Ａ及び図４Ｂに示されるとおり充填装置に空気圧式断続打撃器を補足することにより実現し得る。これにより、モジュールのろ液スペースに一様に堆積させることのできる粒子状材料の総量がさらに増加する。本発明の一実施形態によれば、充填プロセスは粒子状材料をその湿潤形態でろ液スペースに充填することにより達成される（図４Ｂ）。本発明に係るモジュールの調製に適用することのできる充填方法の詳細な説明は、本出願者によって本願と同日に出願された、且つ参照により本明細書に援用される「Ｆｉｌｔｅｒ ｄｅｖｉｃｅ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ ｂｅａｄｓ ａｎｄ ｆｉｂｅｒｓ」と題される欧州特許出願に記載されている。しかしながら、処理しようとする流体からの標的肝臓毒の効率的な除去を実現するのに十分な材料の存在及び均質な分布を可能にする形で粒子がろ液スペース内に分布する限り、疎水性粒子をろ液スペースに導入するため任意の手段又は方法を用いることができる。
【0056】
本発明に係るモジュールの調製には、当該技術分野においてヘモダイアライザー、ヘモダイアフィルター又はプラズマフィルター用のハウジングとして知られるものを含め、様々な種類のハウジングを使用することができる。透析フィルターハウジングは様々なプラスチック材料で、射出成形など様々な方法によって作製され得る。例えば、ポリカーボネート及びポリプロピレンが様々な成形及び押出し適用において広く使用されており、ここに開示するモジュールにもまた使用することができる。例えば、本来標準的な透析フィルターに使用されるハウジング、例えばＰｏｌｙｆｌｕｘ（登録商標）２１０Ｈハウジングを使用することが可能である。しかしながら、本発明の趣旨から逸脱することなく異なる寸法を有する他のハウジングを使用し得ることは明らかである。
【0057】
本発明の一態様によれば、中空糸膜ダイアライザー（２）は、アルブミン結合肝臓毒を含めた肝臓毒を血液から除去するための体外肝臓補助システム又は装置の一部である。かかる肝臓補助システムは、肝不全の病態の治療に使用される。治療は好ましくは、患者の血液からのタンパク質結合毒素を含む肝臓毒の排除にある。本発明との関連においては、肝不全の経過中に特異的に蓄積し及び／又は患者に悪影響を及ぼすことが示されている物質であって、且つ肝臓補助システムにより除去する必要がある物質を、「肝臓毒」と称する。従って本記載の意味における肝臓毒には、限定なしに、アンモニア、メルカプタン、フェノール、ビリルビン、胆汁酸（例えばケノデオキシコール酸）、特定の血管拡張薬（例えばアルドステロン、ノルエピネフリン、バソプレシン（ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｏｎ）、血漿レニン）、芳香族アミノ酸、乳酸、尿素、尿酸、中鎖脂肪酸の代謝産物並びに炎症誘発性及び抗炎症性サイトカイン（例えばＩＬ６、ＩＬ８、ＩＬ１０、ＴＮＦａ、ｓＴＮＦａＲ１）、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、ＴＧＦ−β１などの肝細胞成長阻害因子及び肝損傷又は肝不全を引き起こし得る薬物（例えばジアゼパム、アセトアミノフェン、フェニルブタゾン）が含まれる。例えば、疎水性胆汁酸は高濃度では細胞毒性であり、肝細胞内でのその蓄積はアポトーシス又は壊死をもたらし得る。炎症誘発性サイトカインは、肝炎、肝細胞のアポトーシス及び壊死、胆汁うっ滞、及び線維症を媒介すると考えられている（例えば、Ｓｔａｕｂｅｒ ｅｔ ａｌ（２０１０）：慢性肝不全急性憎悪におけるＭＡＲＳ及びＰｒｏｍｅｔｈｅｕｓ：毒素排除及び転帰（ＭＡＲＳ ａｎｄ Ｐｒｏｍｅｔｈｅｕｓ ｉｎ Ａｃｕｔｅ−ｏｎ−Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｌｉｖｅｒ Ｆａｉｌｕｒｅ：Ｔｏｘｉｎ Ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｏｕｔｃｏｍｅ）、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｓｍｅｄｉｚｉｎ ２２：３３３−３３８を参照）。肝不全に罹患している患者を本発明に係る肝臓補助装置で治療することにより、かかる肝臓毒の血中濃度の低下が得られる。ここで、概して標準的な腎血液透析の間に除去されるような、且つ「腎」毒素又は「尿毒症」毒素（尿素等）とも称することのできる毒素もまた、この肝臓補助システムにより中空糸膜ダイアライザー（１）によって除去され得ることに留意しなければならない。本発明との関連において、表現「肝臓毒」は、概してかかる尿毒症毒素を包含する。
【0058】
用語「肝不全」は、本発明との関連では、肝臓が正常な生理の一部としてのその正常な合成及び代謝機能を果たすことができないことを指す。従って肝不全は、例えば不十分なアルブミン解毒をもたらし、それに続いてアルブミンの結合能が枯渇し、他の場合にアルブミンに結合した毒素、例えば非抱合型ビリルビンが高濃度化する。治療は例えば＞１０ｍｇ／ｄＬのビリルビン濃度で適応される。しかしながら、肝臓透析治療が適応されるもののビリルビン値の上昇を特徴としない肝障害がある。本発明で使用されるとおりの表現「肝不全」に関連する障害としては、限定はされないが、肝腎症候群、非代償性慢性肝疾患、急性肝不全、肝移植後の移植片機能不全、肝臓手術後の肝不全、二次性肝不全、多臓器不全、外因性中毒症又は胆汁うっ滞における難治性掻痒症等が挙げられる。
【0059】
本発明に係る肝臓透析は、患者（１２）の血液を第１のダイアライザー（１）に送り込むことにより実施され得る（図３）。ダイアライザー（１）は、入口ポート（７ａ）からダイアライザーに入る患者の血液（６）で灌流され、及び入口ポート（１０ａ）からダイアライザー（１）に入る透析液溶液（９）が、ろ液スペース（４ａ）を中空糸（３ａ）内の血液の流れと逆方向に連続流で通過する。ダイアライザー（１）は、腎機能障害患者に提供される腎臓の血液透析治療でもまた除去されるとおりの尿毒症毒素と称され得る小型の分子を有効に除去するものと思われる。従って、ダイアライザー（１）は実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容しない。処理済みの血液は出口ポート（８ａ）からダイアライザー（１）を離れ、入口ポート（７ｂ）を通ってダイアライザー（２）に入る。第２の中空糸膜ダイアライザー（２）は、実質的な量のアルブミンが膜壁を通過することを許容するものであって、且つ第１のダイアライザー（１）の血液（６）を入口ポート（７ｂ）から受け取るものであり、中空糸膜（３ｂ）のルーメンスペースから遮断されているろ液スペース（４ｂ）を有する。ろ液スペースはいかなる透析溶液によっても灌流されないが、肝臓毒を結合又は吸着することが可能な１つ又はいくつかの材料で構成される粒子状材料（５）が占在している。
【0060】
本発明に係る治療を実施するために追加的な又は特別に適合された透析機は必要ないことが、本肝臓補助システムの別の利点である。慢性又は急性腎疾患に罹患している患者の血液透析治療に現在使用されている透析機を、本肝臓補助システムにも使用することができる。使用し得る透析モニタの例は、例えば、ＰｒｉｓｍａｆｌｅＸ（登録商標）又はＡｒｔｉｓ（商標）透析機（いずれもＧａｍｂｒｏ）、又はＦｒｅｓｅｎｉｕｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃａｒｅの２００８、４００８及び５００８透析機シリーズである。概して、本発明に係る肝臓補助システムは、ＣＶＶＨＤ又はＣＶＶＨＤＦなどの標準的なＣＲＲＴモードで実行することができる。
【0061】
本発明に係る肝臓補助システムで使用される流量は、所定の範囲にわたり異なることもあり、当業者は周知している。標準的な流量は、例えば、１００〜５００ｍｌ／分、好ましくは１５０〜２５０ｍｌ／分のＱＢ（血流）、ＩＣユニット（例えばＰｒｉｓｍａｆｌｅｘ（登録商標））について１００〜８００ｍｌ／分のＱＤ、及び標準的な慢性透析ユニットについて３００〜８００ｍｌ／分のＱＤである。治療時間は所与の患者について異なり得る。しかしながら、治療時間は、通常は８〜１０時間の範囲である。
【0062】
アルブミンは、ある程度までは、ダイアライザー（２）のろ液スペースに存在する吸着剤に吸着され得ることが分かっている。アルブミンは肝臓においてのみ合成される。健康なヒトにおける血漿中のアルブミン濃度は、通常は３３〜５２ｇ／ｌの範囲である。正常なアルブミン合成速度は１日体重１ｋｇ当たり約０．２ｇであり、アルブミン合成と代謝との間には定常状態が存在する。１日に代謝されるアルブミンの量は血漿濃度に比例すると考えられ、これは血漿アルブミン含有量の約１０％の一定の割合が１日当たりに代謝されることを意味する。アルブミンの半減期は血漿アルブミン濃度に反比例し、即ちアルブミン含有量が低下すると半減期の増加がもたらされる一方、アルブミン濃度が増加すると最大５０％の代謝率の増加が引き起こされる（Ｂｏｌｄｔ，Ｂｒ．Ｊ．Ａｎａｅｓｔｈ．（２０１０）１０４（３）：２７６−２８４）。従って、本発明に係る肝臓補助システムによる治療の間に吸着剤により吸着され得るアルブミンの置換は不要であり得る。しかしながら、アルブミン置換は、特に突発性細菌性腹膜炎（ＳＢＰ）、肝腎症候群（ＨＲＳ）、及び穿刺後症候群（ＰＰＳ）の場合に、肝臓が重度に障害されているということに起因して適応され得る。置換は当該分野の技術水準に従い、ほとんどは輸液により行うことができる。従って、本発明の一態様によれば、本発明に係る肝臓補助又は透析治療は、血清アルブミン値を３０ｇ／ｌより高く維持するため治療の間に吸着されたアルブミンの置換が続いて行われ得る。
【0063】
当業者には、本明細書に開示される本発明に対し、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく様々な代替及び変更を行い得ることは容易に明らかであろう。ここで、本発明の理解をさらに促進するため、本発明を好ましい実施形態の非限定的な例として示す。
【実施例】
【0064】
実施例１ダイアライザーモジュール（２）で使用される中空糸膜の調製
膜の形成には２つの溶液、Ｎ−メチルピロリドン中に溶解した疎水性及び親水性ポリマー成分（２１ｗｔ−％）からなるポリマー溶液と、Ｎ−メチルピロリドンと水との混合物である中心溶液とを使用する。ポリマー溶液はポリエーテルスルホン（ＰＥＳ １４．０ｗｔ−％）及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ ７．０ｗｔ−％）を膜構築成分として含む。この溶液はＮＭＰ（７７．０ｗｔ−％）及び水（２．０ｗｔ−％）をさらに含む。中心溶液は水（５３．０ｗｔ−％）及びＮＭＰ（４７．０ｗｔ−％）を含む。膜形成プロセスの間、ポリマー溶液と中心溶液とをスピナレット又はジェットで接触させて膜を沈殿させる。スピナレット、ポリマー溶液及び中心溶液の規定の一定温度（５８℃）を用いてこのプロセスを補助する。沈殿した中空糸は、蒸気が充満した加湿シャフト（１００％相対湿度、５４℃）を通り抜けて落ち、凝固／洗浄浴（２０℃、約４ｗｔ−％ＮＭＰ）に入る。膜を２つのさらなる水浴（７０℃〜９０℃）中において向流（２５０ｌ／ｈ）でさらに洗浄する。膜の乾燥をオンラインで実施し、ここで残留水が除去され、膜糸束の形成後、束をハウジングに注封する。
【0065】
実施例２中空糸及びろ液スペースにおける粒子状材料を含む中空糸膜ダイアライザー（２）の調製（懸濁充填）
実施例１に従い調製した標準的な中空糸を使用して、モジュールのろ液側に活性粒子状材料を含むフィルターモジュールを調製した。使用したハウジングはＩＳＯ ８６３７：２００４に従い血液側及びろ液側にコネクタを有した。膜糸は、内径が２１５μｍ及び壁厚が５０μｍであった。膜糸は、表Ｉに示すとおり、深さ０．６ｍｍ又は０．８の僅かなクリンプを有した。総膜表面積は、表Ｉに示すとおり、１．９ｍ２又は１．７ｍ２のいずれかであった。ハウジングは直径が４８ｍｍ及び全長（有効膜糸長さ）が２７０ｍｍであった。注封材料はポリウレタンからなった。
【0066】
【0067】
図４に示すとおりの充填セットアップに従い、及び表ＩＩに指示するとおり、７つのフィルターに表Ｉに示すとおり粒子状材料を充填した。使用した粒子状材料は、平均直径が８０〜２００μｍ及び比表面積が７５０〜８５０ｍ２／ｇのＵｊｏｔｉｔ ＰＡ−３０粒子（Ｄｒ．Ｆｅｌｇｅｎｔｒａｅｇｅｒ ＆ Ｃｏ．−Ｏｅｋｏ−ｃｈｅｍ．ｕｎｄ Ｐｈａｒｍａ ＧｍｂＨ、Ｄｅｓｓａｕ−Ｒｏｓｓｌａｕ、ドイツ）、コレスチラミン（ｃｈｏｌｅｓｔｙｒａｍｉｎ）（Ｐｕｒｏｌｉｔｅ ＧｍｂＨ、Ｒａｔｉｎｇｅｎ、ドイツからのＰｕｒｏｌｉｔｅ（登録商標）Ａ４３０ＭＲ）及び活性炭（Ｎｏｒｉｔ（登録商標）ＧＡＣ １２４０ ＰＬＵＳ Ａ、Ｎｏｒｉｔ Ｎｅｄｅｒｌａｎｄ ＢＶ、オランダ）であった。
【0068】
【0069】
【0070】
フィルターを秤量してフィルターの初期質量を特定した。次にフィルターを充填装置（１４）の取付台（１８）に装着し、空気圧式断続打撃器（Ｎｅｔｔｅｒ Ｄｒｕｃｋｌｕｆｔ−Ｉｎｔｅｒｖａｌｌｋｌｏｐｆｅｒ ＰＫＬ １９０、Ｎｅｔｔｅｒ ＧｍｂＨ、ドイツ）をフィルターモジュールに取り付けた（図５）。必要に応じて取付台（１８）を７０°の傾斜に設定した。出口ポート（１０ｂ）及び（１１ｂ）は閉鎖し、入口ポート（７ｂ）は開放した。出口ポート（８ｂ）もまた開放した。空気圧式直線振動器（Ｎｅｔｔｅｒ Ｄｒｕｃｋｌｕｆｔ−Ｋｏｌｂｅｎｖｉｂｒａｔｏｒ ＮＴＫ １５ｘ、Ｎｅｔｔｅｒ ＧｍｂＨ、ドイツ）をこのシステムに接続し、５．５バールに設定した。第１のステップにおいて、フィルターの血液側及びろ液側に、気泡を避けながら脱気ＲＯ水を充填した。空気圧式断続打撃器並びに空気圧式直線振動器を圧縮空気に接続し、ポンプを１００ｍｌ／分の流量で始動させた。ビーズを装置の下部からろ液スペースに送り込み、速やかに装置の上部に沈降させて、続いてろ液スペースが完全に充填されるまで、ビーズをモジュールに上部から徐々に充填した。ろ液スペースが完全に充填されてシステム内の圧力が上昇した時点でこのプロセスを終了し、供給タンクに残る未使用のビーズを乾燥させて秤量した。ろ液スペースに導入された粒子状材料の総量を示す結果は表Ｉを参照することができる。表Ｉに示す材料のタップ密度（Ｕｊｏｔｉｔ ＰＡ−３０；コレスチラミン；活性炭）を使用して、ＤＩＮ ＩＳＯ ３９５３に従いモジュールの充填比を計算することができる。
【0071】
実施例３肝臓毒の除去
本発明に係る肝臓補助システム（図１を参照）を、ＰｒｉｓｍａｆｌｅＸ（登録商標）機械（Ｇａｍｂｒｏ）にダイアライザー（２）として実施例２のプロトタイプを含み、且つダイアライザー（１）としてｏＸｉｒｉｓ（登録商標）フィルター（Ｇａｍｂｒｏ）を含む再循環試験セットアップ（図６）において試験した。３０００ｍｌの試験プールは、約３７℃に保たれているＯｃｔａｐｌａｓ（登録商標）ＬＧヒト血漿（血液型Ｏ、Ｏｃｔａｐｈａｒｍａから）中に、７５又は３７５ｍｇ／ｌ抱合型ビリルビン（Ｓｉｇｍａ）、２５又は１２５ｍｇ／ｌ非抱合型ビリルビン ＭＷ８４２．９（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）、１００又は１０００ｍｇ／ｌケノデオキシコール酸（ＣＤＣＡ）（Ｓｉｇｍａ）、１０００ｍｇ／ｌクレアチニン無水物（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）及び２０ｍｇ／ｌ塩化アンモニウム＞９９．５％（Ｒｏｔｈ）を含有した。プロトタイプ６、７及び９にはそれぞれの高い方の濃度を使用した（図７〜図１０を参照）。このプールは５ｍｌヘパリン（Ｈｅｐａｒｉｎ−Ｎａｔｒｉｕｍ−２５０００−ｒａｔｉｏｐｈａｒｍ）をさらに含有した。６０ｍｌ ０．１Ｍ ＨＣｌを添加して中性ｐＨにした。プールは常に光から保護した。ダイアライザーを所定のとおり機械に接続し、ＣＶＶＨＤＦモードで実行した。ｏＸｉｒｉｓ（登録商標）ダイアライザー（１）は下から上に実行した。血液加温器（ＰｒｉｓｍａＴｈｅｒｍ（登録商標）ＩＩ）を下流に接続し、３８℃に設定した。システムを、５０００ＩＵ／ｌヘパリンを含む２×２ｌ ＮａＣｌ ０．９％でフラッシュした。ＱＢ＝２００ｍｌ／分、ＱＤ＝１．５ｌ／時間及び補液１ｌ／ｈ（合計：２．５ｌ／ｈ）。ＵＦ＝０ｌ／ｈ。このシステムを１０時間運転させた。その後フィルター及び血液ラインをＮａＣｌ ０．９％でフラッシュした。３×１．５ｍｌの試料を０分、１０分、３０分、６０分、９０分、１２０分、２時間、３時間、４時間、４．２５時間、５時間、６時間、７時間、８時間、８．２５時間、９時間及び１０時間後にそれぞれＢｉｎ、ＢＺＷ、及びＢｏｕｔで採取した。６０分後に１ｍｌヘパリンを添加し、その後は２時間毎に添加した。４時間後及び８時間後、１８．７５ｍｇ抱合型ビリルビン、６．２５ｍｇ非抱合型ビリルビン、２５ｍｇケノデオキシコール酸、２５０ｍｇクレアチニン及び６０ｍｇ塩化アンモニウムを含有する血漿溶液（１００ｍｌ）を添加した。この「スパイク」は、図に指示するとおり場合によっては省いた。使用した透析溶液はＰｒｉｓｍａｓｏｌ（登録商標）２（Ｇａｍｂｒｏ）であった。
【0072】
試験の間に得られた試料を分析した。ビリルビン試料を、抱合型ビリルビンについてはＤｉａＳｙｓ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ ＧｍｂＨ、ドイツからのＢｉｌｉｒｕｂｉｎ Ａｕｔｏ Ｄｉｒｅｃｔ ＦＳ検査キットで評価し、総ビリルビンについてはＨＯＲＩＢＡ ＡＢＸ ＳＡＳ、フランスからのＡＢＸ Ｐｅｎｔｒａ Ｂｉｌｉｒｕｂｉｎ Ｔｏｔａｌ ＣＰ検査キットで評価した。Ｔｒｉｎｉｔｙ Ｂｉｏｔｅｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、米国）からの胆汁酸キットの助けによりＣＤＣＡ濃度を決定した。ｓｃｉｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ（Ｖｉｅｒｎｈｅｉｍ、ドイツ）からのＥｎｚｙｔｅｃ（登録商標）流体アンモニア検査キットで塩化アンモニウム濃度を決定した。Ｄｉａｌａｂ（Ｓａｓｂａｃｈ ａ．Ｋ．、ドイツ）からのクレアチニン酵素的ＰＡＰキットの助けによりクレアチニン濃度を決定した。
【0073】
クレアチニン除去総量（ｍｇ単位）の結果を図７Ａに示す。クレアチニンクリアランスを図７Ｂに示す。アンモニウム除去総量（ｍｇ単位）の結果を図８Ａに示す。アンモニウムクリアランスを図８Ｂに示す。ＣＤＣＡ除去総量（ｍｇ単位）の結果を図９Ａに示す。ＣＤＣＡクリアランスを図９Ｂに示す。最後に、図１０Ａは非抱合型ビリルビンの除去総量（ｍｇ単位）を示し；図１０Ｂは抱合型ビリルビン（ｍｇ単位）の除去総量（ｍｇ単位）を示す。図１０Ｃはビリルビン（非抱合型及び抱合型）の総除去量（ｍｇ単位）を示す。非抱合型及び抱合型のクリアランス並びに総ビリルビン（非抱合型及び抱合型）のクリアランスをそれぞれ図１０Ｄ、図１０Ｅ及び図１０Ｆに示す。