特許 6392783 糖尿病性腎症の予防又は治療剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6392783

(24)【登録日】2018年8月31日

(45)【発行日】2018年9月19日

(54)【発明の名称】糖尿病性腎症の予防又は治療剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/085 20060101AFI20180910BHJP

   A61K 31/222 20060101ALI20180910BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20180910BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20180910BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20180910BHJP

   A61K 31/4178 20060101ALI20180910BHJP

   A61K 31/41 20060101ALI20180910BHJP

   A61K 31/4184 20060101ALI20180910BHJP

   A61K 31/4245 20060101ALI20180910BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20180910BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/085

   A61K31/222

   A61P3/10

   A61P13/12

   A61P43/00 121

   A61K31/4178

   A61K31/41

   A61K31/4184

   A61K31/4245

   A61K45/00

【請求項の数】4

【全頁数】14

(21)【出願番号】特願2015-553610(P2015-553610)

(86)(22)【出願日】2014年12月18日

(86)【国際出願番号】JP2014083606

(87)【国際公開番号】WO2015093579

(87)【国際公開日】20150625

【審査請求日】2017年11月9日

(31)【優先権主張番号】特願2013-263841(P2013-263841)

(32)【優先日】2013年12月20日

(33)【優先権主張国】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】000152952

【氏名又は名称】株式会社日本ハイポックス

(74)【代理人】

【識別番号】100081271

【弁理士】

【氏名又は名称】吉田 芳春

(74)【代理人】

【識別番号】100162189

【弁理士】

【氏名又は名称】堀越 真弓

(72)【発明者】

【氏名】杉山 理

(72)【発明者】

【氏名】三木 徳太郎

(72)【発明者】

【氏名】西川 洋史

(72)【発明者】

【氏名】下村 ▲吉▼治

【審査官】 山村 祥子

(56)【参考文献】

【文献】 特開平５−９１１４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特許第５１９８８２７（ＪＰ，Ｂ２）

【文献】 特許第４６３０９１４（ＪＰ，Ｂ２）

【文献】 HANG L. et al.，Attenuation of Glomerular Injury in Diabetic Mice with Tert-Butylhydroquinone through Nuclear Factor，American Journal of Nephrology，２０１１年，Vol.33，p.289-297

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／０８５

Ａ６１Ｋ ３１／２２２

Ａ６１Ｋ ４５／００

Ａ６１Ｐ ３／１０

Ａ６１Ｐ １３／１２

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

一般式

【化1】

（式中、Ｒ^１は炭素数４〜８のアルキル基を示し、Ｒ^２は水素原子、炭素数２〜６のアルキルカルボニル基または炭素数２〜６のアルコキシカルボニル基を示す。）で表されるハイドロキノン誘導体を有効成分として含むことを特徴とする糖尿病性腎症の予防又は治療剤。

【請求項2】

前記ハイドロキノン誘導体が、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルまたは２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル ４−アセテートであることを特徴とする請求項１に記載の糖尿病性腎症の予防又は治療剤。

【請求項3】

さらに、アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬を含むことを特徴とする請求項１又は２に記載の糖尿病性腎症の予防又は治療剤。

【請求項4】

前記アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬が、ロサルタン、エプロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、イルベサルタン、テルミサルタン、オルメサルタン及びアジルサルタンからなる群から選ばれる少なくとも１種であることを特徴とする請求項３に記載の糖尿病性腎症の予防又は治療剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は特定のハイドロキノン誘導体を有効成分とする糖尿病性腎症の予防剤又は糖尿病性腎症の治療剤に関する。

【背景技術】

【0002】

近年、生活習慣や社会環境の変化とともに糖尿病の患者数は増加の一途をたどっている。国際糖尿病連合の発表によれば、世界における成人（２０〜７９歳）の糖尿病有病者数は、２０１３年１１月時点で３億８２００万人、有病率８．３％であり、有効な対策を施さなければ２０３０年までに５億９２００万人に増加すると予測されている。また、２０１３年の糖尿病による経済的損失は、総支出の１１％に相当する５４８０億ドルに達すると推計されている。

【0003】

日本では、成人の約３割弱が糖尿病又はその予備群であり、そのうちの約４割は治療を受けていないといわれている。糖尿病を治療せずに放置したままにしていると、病状が進行して様々な合併症を併発し、早期に治療を開始した場合に比べて治療が困難な状態になっていく。したがって、早期の発見と治療が肝要である。

【0004】

糖尿病性腎症とは、糖尿病の合併症である細小血管障害の一つである。糖尿病性腎症は、糖尿病を発病して慢性的な高血糖状態が長期間（たとえば１０年以上）持続することにより発症し、腎糸球体が硬化して最終的には腎不全に至る。腎不全に至った場合の治療法は血液透析若しくは腹膜透析又は腎移植のいずれかとなるが、新規に透析療法を導入する患者は毎年約１万人にのぼり、１９９８年以降、糖尿病性腎症は我が国における透析導入原因疾患の第１位、透析導入患者の約４５％を占めており、医療費増大の主要な原因の１つとなっている。

【0005】

糖尿病性腎症の治療にあたっては、慢性的な高血糖状態による細胞や組織の障害が本疾病の根本原因であることから、まずは種々の経口血糖降下薬による厳格な血糖コントロールが行われる。

【0006】

また、糖尿病性腎症には、高血糖による細胞や腎組織の障害に関連する様々な機序が関与しているといわれている。非特許文献１では、関与の可能性のある機序として、細胞内の代謝レベルにおいてはポリオール代謝経路、ヘキソサミン経路、プロテインキナーゼＣ経路、酸化ストレス及び終末糖化産物などが報告されており、腎組織内においてはレニンアンジオテンシン系（ＲＡＳ）、ＴＧＦ−β等が報告されている。このように、さまざまな機序や因子が関連して糖尿病性腎症の病態を形成していることから、糖尿病性腎症の治療にあたり、これらの機序又は因子が治療ターゲットとなる可能性があると考えられる。たとえば、特許文献１には、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）が糖尿病性腎症に関与することが記載され、抗血管新生作用を有する組成物が糖尿病性腎症の治療に有効であることが記載されている。また、特許文献２には、活性酸素が糖尿病性腎症の増悪因子として関与することが記載され、活性酸素産生酵素であるキサンチンオキシダーゼを阻害する組成物が糖尿病性腎症の治療に有効であることが記載されている。同様に、特許文献３にはコレステロール低下作用を有する陰イオン交換樹脂が、特許文献４にはペルオキシソーム増殖活性化受容体（ＰＰＡＲ）γ作動作用を有する組成物が、それぞれ糖尿病性腎症の治療に有効であることが記載されている。

【0007】

他方、特許文献５〜特許文献８には、下記一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体が記載されている。このハイドロキノン誘導体は、動脈硬化治療用組成物（特許文献６）、神経変性疾患治療薬（特許文献７）及び肝線維化抑制剤（特許文献８）として用いられることが記載されている。

【0008】

【化1】

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】特開２００６−２６５１４５号公報

【特許文献2】国際公開第２００７／０４３４５７号

【特許文献3】国際公開第２００７／１４５３０８号

【特許文献4】国際公開第２０１０／０４７３６９号

【特許文献5】特開平５−３０１８３６号公報

【特許文献6】特開２００２−２４１３６６号公報

【特許文献7】特開２００９−１０２２６２号公報

【特許文献8】特開２００９−２５６２２６号公報

【非特許文献】

【0010】

【非特許文献1】小寺亮ほか、「糖尿病性腎症の最新治療戦略」、医学のあゆみ，医歯薬出版株式会社，２０１１年８月，第２３８巻，第９号，ｐ．８５１−８５６

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0011】

しかしながら、非特許文献１にも記載されているように、糖尿病性腎症に関与すると考えられる多様な機序又は因子を治療ターゲットとすることは、いまだ検討されている段階であり、現状ではＲＡＳ阻害薬以外には有効性が十分に証明された治療剤はない。

【0012】

他方、特許文献５〜８に記載されたハイドロキノン誘導体については、各特許文献中に動脈硬化、神経変性疾患及び肝線維化疾患の治療剤として用いられることは記載されているが、糖尿病性腎症の予防や治療に関する検討はなされておらず、その有効性は不明であった。

【0013】

本発明は上述した点に鑑み案出されたもので、その目的は、糖尿病性腎症の予防又は治療に有効な新たな薬剤を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0014】

本発明者らはかかる実情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、上述したハイドロキノン誘導体が、１型糖尿病モデル動物の腎障害を抑制する作用及び、２型糖尿病モデル動物の尿中アルブミン／クレアチニン比の上昇を抑制する作用を有することを見出し、本発明を完成させた。

【0015】

上記課題を解決するため、本発明の糖尿病性腎症の予防又は治療剤は、 一般式（１）

【0016】

【化2】

（式中、Ｒ^１は炭素数４〜８のアルキル基を示し、Ｒ^２は水素原子、炭素数２〜６のアルキルカルボニル基または炭素数２〜６のアルコキシカルボニル基を示す。）で表されるハイドロキノン誘導体を有効成分として含む。

【0017】

また、このハイドロキノン誘導体が、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルまたは２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル ４−アセテートであることも好ましい。これにより、薬理活性及び生体適合性に優れ、特に有効に用いることのできる組成物が選択される。

【0018】

また、本発明の糖尿病性腎症の予防又は治療剤はさらに、アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬を含むことが好ましい。これにより、糖尿病性腎症の予防又は治療にさらに有効な組成物を得ることができる。上述のハイドロキノン誘導体とアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬との組合せにより、各構成成分が低濃度であっても、向上した糖尿病性腎症の予防又は治療効果が得られる。また、上述のハイドロキノン誘導体はアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬による降圧作用を阻害しないため、降圧効果も有する。

【0019】

また、本発明の糖尿病性腎症の予防又は治療剤は、このアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬が、ロサルタン、エプロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、イルベサルタン、テルミサルタン、オルメサルタン及びアジルサルタンからなる群から選ばれる少なくとも１種であることも好ましい。これにより、好適に用いられるアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬が選択される。

【発明の効果】

【0020】

本発明によれば、以下のような優れた効果を有する糖尿病性腎症の予防又は治療剤を提供することができる。
（１）高血糖状態の暴露による腎組織への障害を軽減し、アルブミン尿の発生を抑制することができるため、糖尿病性腎症の予防又は治療に有効である。
（２）安全性の高い物質から構成されているため、糖尿病性腎症の予防又は治療に有効に用いることができる。
（３）２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルまたは２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル ４−アセテートを選択することにより、薬理活性及び生体適合性に優れ、特に有効に用いることができる糖尿病性腎症の予防剤又は治療剤を得ることができる。
（４）アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬と組合せることにより、各構成成分が低濃度であっても、より向上した糖尿病性腎症の予防又は治療効果が得られ、降圧作用も維持される。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】実施例２における１型糖尿病モデルラットの尿アルブミン／クレアチニン比を示すグラフである。

【図2】実施例３における２型糖尿病モデルマウスの非絶食時の血糖値を示すグラフである。

【図3】実施例３における２型糖尿病モデルマウスの尿中アルブミン／クレアチニン比を示すグラフである。

【図4】実施例５における２型糖尿病モデルラットの尿中アルブミン／クレアチニン比を示すグラフである。

【図5】実施例６におけるマウスの尿アルブミン／クレアチニン比を示すグラフである。

【図6】実施例６におけるマウスの収縮期血圧の変動を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0022】

以下、本発明を詳細に説明する。

【0023】

上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体において、Ｒ^１で示される炭素数４〜８のアルキル基は直鎖状、分岐状、環状のいずれであってもよく、その例としては各種ブチル基、各種ペンチル基、各種ヘキシル基、各種ヘプチル基、各種オクチル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロオクチル基などを挙げることができる。このアルキル基としては、薬理活性の面から、炭素数４〜７の直鎖状のものが好ましく、特にｎ−ヘキシル基が好適である。

【0024】

また、Ｒ^２のうちの炭素数２〜６のアルキルカルボニル基は直鎖状、分岐状のいずれであってもよく、例えばアセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基などが挙げられる。さらに、Ｒ^２のうちの炭素数２〜６のアルコキシカルボニル基は直鎖状、分岐状のいずれであってもよく、例えばメトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基などが挙げられる。

【0025】

この一般式（１）で表わされる化合物のうち、特に薬理活性の点から好ましい化合物としては、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ブチルエーテル、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルおよび２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル ４−アセテートを挙げることができる。

【0026】

上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体はたとえば特許文献５又は特許文献６に記載の方法で製造することができる。

【0027】

本発明の糖尿病性腎症の予防剤又は糖尿病性腎症の治療剤は、前述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体を有効成分として含むものであって、これにより、高血糖状態の暴露による腎組織への障害を軽減し、アルブミン尿の発生を抑制する作用を有する。本発明の糖尿病性腎症の予防又は治療剤の投与量は、目標とする治療効果、投与方法、年齢、体重などによって変化するので一概には規定できないが、通常一日の非経口的な投与量は、上述のハイドロキノン誘導体として約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、好ましくは約０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重である。経口的には約０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ体重であり、好ましくは約０．５〜２００ｍｇ／ｋｇ体重であり、これを１〜３回に分割して投与すればよい。

【0028】

さらに、本発明の糖尿病性腎症の予防剤又は糖尿病性腎症の治療剤には、前述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体に加えて、アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬を含有させることができる。これにより、より向上した糖尿病性腎症の予防又は治療効果が得られる。アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬としては、一例として、ロサルタン、エプロサルタン、バルサルタン、カンデサルタン、イルベサルタン、テルミサルタン、オルメサルタン又はアジルサルタン等が挙げられ、特にロサルタンが好ましい。これらのアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬は降圧作用を有しているところ、上述のハイドロキノン誘導体はこの降圧作用を阻害しない。それゆえ、上述のハイドロキノン誘導体とアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬とを組み合わせることにより、向上した糖尿病性腎症の予防又は治療効果だけでなく、降圧作用も得られる。

【0029】

上述のハイドロキノン誘導体とアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬とを組み合わせた際のアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬としての投与量は、目標とする治療効果、投与方法、年齢、体重などによって変化するので一概には規定できないが、通常一日の非経口的な投与量は、約０．００１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重であり、好ましくは約０．００５〜１０ｍｇ／ｋｇ体重である。経口的には約０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、好ましくは約０．０５〜５０ｍｇ／ｋｇ体重であり、これを１〜３回に分割して投与すればよい。

【0030】

上述のハイドロキノン誘導体と上述のアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬とを組み合わせてなる本発明の糖尿病性腎症の予防・治療剤は、これらの有効成分を別々に、又は同時に、医薬組成物として経口的又は非経口的に投与することができる。なお、有効成分であるハイドロキノン誘導体とアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬とを別々に製剤化した場合、別々に製剤化したものを使用時に混合して投与することができるほか、別々に製剤化したものを、別々に、あるいは同時に、または時間差をおいて同一対象に投与してもよい。

【0031】

本発明の糖尿病性腎症の予防剤又は糖尿病性腎症の治療剤は、従来慣用されている方法により種々の形態に調製することができる。この場合、通常製剤用の担体や賦形剤など、医薬品の添加剤として許容されている添加剤を用いて製剤化することができる。また、本化合物のバイオアベイラビリティーや安定性を向上させるために、マイクロカプセル、微粉末化、シクロデキストリン等を用いた包接化などの製剤技術を含むドラッグデリバリーシステムを用いることもできる。

【0032】

上記組成物を経口投与製剤として用いる場合には、錠剤、顆粒剤、カプセル剤又は内服用液剤等の形態で用いることができるが、消化管からの吸収に適した形態で用いることが好ましい。また、流通性、保存性などの理由により所望される形態での製剤を提供する場合にも従来の製剤技術を用いることができる。また、非経口投与剤として用いる場合には、注射剤、坐剤およびテープ、パップなどの経皮吸収剤等の形態とすることができるが、流通性、保存性などの理由から固形製剤を使用時に適当な溶剤で溶解してから用いることもでき、液剤および半固形剤の形態で提供することも従来の製剤技術により可能である。

【0033】

次に、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明は、これらの実施例によってなんら限定されるものではない。

【実施例】

【0034】

［実施例１］
１．ストレプトゾトシン誘発糖尿病ラット（１型糖尿病モデル）に対する作用の検討（１）
上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体を１型糖尿病モデルであるストレプトゾトシン糖尿病誘発ラットに投与し、その作用効果を調べた。ストレプトゾトシン糖尿病誘発ラットは、７週齢のＷｉｓｔａｒ系雄ラットに、生理食塩水に溶解させた６ｍｇ／ｍＬのストレプトゾトシン溶液を１０ｍＬ／ｋｇ体重ずつ腹腔内投与することにより作製した。作製した糖尿病誘発ラットを３匹ずつ４つの試験群と対照群とに分け、試験群に対し、３％のＴｗｅｅｎ８０水溶液に溶解させた本発明のハイドロキノン誘導体溶解液を経口投与した。投与は、ストレプトゾトシンを投与した翌日より５週間、剖検日前日まで１日１回行った。ハイドロキノン誘導体としては、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルを用いた。各試験群の１日あたりの投与用量は３ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ／ｋｇ体重、３０ｍｇ／ｋｇ体重及び１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、対照群には溶媒として使用した３％Ｔｗｅｅｎ８０水溶液を投与した。いずれの試験群及び対照群とも、ラットへの経口投与量が１０ｍＬ／ｋｇ体重となるように、ハイドロキノン誘導体の濃度を調整した。ストレプトゾトシンを投与して５週間後に採血、屠殺してＧＯＴ、ＧＰＴ、尿素窒素、クレアチニン、総コレステロール及び空腹時の血糖値を測定した。

【0035】

測定項目のうち、ＧＯＴ、尿素窒素及び空腹時血糖値について、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルによる、用量依存的な抑制効果が認められた。また、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルを１０ｍｇ／ｋｇ体重以上投与した試験群において、尿素窒素の有意な抑制作用が認められた。これらのことより、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体は、１型糖尿病モデル動物において腎障害を軽減する作用を有することがわかった。

【0036】

［実施例２］
２．ストレプトゾトシン誘発糖尿病ラット（１型糖尿病モデル）に対する作用の検討（２）
ストレプトゾトシン糖尿病誘発ラットは、５週齢のＷｉｓｔａｒ系雄ラットに、生理食塩水に溶解させた６ｍｇ／ｍＬのストレプトゾトシン溶液を１０ｍＬ／ｋｇ体重ずつ腹腔内投与することにより作製した。作製した糖尿病誘発ラットは溶媒対照群３匹と、本発明のハイドロキノン誘導体試験群として、５０ｍｇ／ｋｇ体重投与群３匹と、１００ｍｇ／ｋｇ体重投与群６匹とに分け、無処置群としてストレプトゾトシンを投与しなかったＷｉｓｔａｒ系雄ラットを２匹準備した。ストレプトゾトシンの投与から１週間後に、各試験群に対し、ハイドロキノン誘導体溶液を毎日１回２１週間に亘り経口投与した。本実施例におけるハイドロキノン誘導体としては、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル（ＨＴＨＱ）を用い、３％のＴｗｅｅｎ８０に懸濁させて試験群に経口投与した。各試験群の１日あたりの投与用量は５０ｍｇ／ｋｇ体重及び１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、溶媒対照群には溶媒として使用した３％Ｔｗｅｅｎ８０水溶液を投与した。いずれの試験群及び溶媒対照群とも、ラットへの経口投与量が１０ｍＬ／ｋｇ体重となるように行った。

【0037】

ＨＴＨＱを投与して１５週目及び２１週目経過後に、試験群（ＨＴＨＱ）、溶媒対照群（Ｖｅｈｉｃｌｅ）及び無処置群（Ｎｏｒｍａｌ）の個体について随時尿にて尿中アルブミン及びクレアチニン濃度を測定し、尿中アルブミン／クレアチニン比を算出した。尿中アルブミンはラット尿中アルブミン定量用キットNephrat II（エクソセル社製品）を用いて、クレアチニンは尿中クレアチニン定量用キットCreatinine Companion（エクソセル社製品）を用いて測定した。

【0038】

本実施例の結果を図１に示す。２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル（ＨＴＨＱ）の投与により、用量依存的な尿アルブミン／クレアチニン比の抑制効果が認められた。これらのことより、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体は、１型糖尿病モデル動物において糖尿病性腎障害の治療や予防に有効であることがわかった。

【0039】

［実施例３］
３．ＫＫ−Ａ^ｙ雄マウス（２型糖尿病モデル）に対する作用の検討（１）
上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体を２型糖尿病モデルマウスであるＫＫ−Ａ^ｙマウスに投与し、その作用効果を調べた。５週齢のＫＫ−Ａ^ｙ雄マウスを３０匹準備し、１０匹ずつ対照群と２つの試験群とに分けた。全てのマウスに対し、１３週間にわたり高脂肪食を給餌すると共に、試験群のマウスに対しては上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体を投与した。ハイドロキノン誘導体としては、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルを用いた。ハイドロキノン誘導体の投与にあたっては、１日あたりの投与用量がおよそ７５ｍｇ／ｋｇ体重（試験群；低用量群）又は１５０ｍｇ／ｋｇ体重（試験群；高用量群）となるように、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルを２％Ｔｗｅｅｎ８０水溶液に溶解させた溶解液を給水ビンに入れ、マウスのケージに取り付けて自由に摂取させた。なお、対照群のマウスに対しては、２％Ｔｗｅｅｎ８０水溶液を給水ビンに入れて同様に与えた。

【0040】

試験（投与）開始から、４週間間隔で非絶食時のマウスの血糖値及び尿糖を測定した。血糖値はグルコース分析装置（株式会社アスター電機製品）を用いて、尿糖は、エームス尿検査試験紙（シーメンスヘルスケア・ダイアグノスティクス製品）を用いて測定した。

【0041】

また、投与１０週から投与１２週まで毎週、マウスの尿中アルブミン及びクレアチニン濃度を測定し、尿中アルブミン／クレアチニン比を算出した。尿中アルブミンはマウス尿中アルブミン定量用キットAlbuwell Ｍ（エクソセル社製品）を用いて、クレアチニンは尿中クレアチニン定量用キットCreatinine Companion（エクソセル社製品）を用いて測定した。

【0042】

尿糖の測定結果を以下表１に示す。また、非絶食時の血糖値を図２に、尿中アルブミン／クレアチニン比を図３に示す。

【0043】

【表1】

【0044】

図２に示すように、本発明のハイドロキノン誘導体の投与により、非絶食時の血糖値が低減される傾向が見られたものの、統計学的な有意差は投与４週における高用量群において認められたのみであった。しかしながら、尿糖に関しては、表１に示すように、低用量群では投与４週に対照群と比較して有意な低下が認められ、高用量群では投与開始後すべての検査時期において、対照群と比べて有意に低下した値を示した。さらに、図３に示すように、尿中アルブミン／クレアチニン比については、低用量群、高用量群ともに対照群の約４０〜６０％まで低下することがわかった。したがって、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体の投与により、持続的な高血糖状態に起因する腎組織の障害が抑制されることがわかった。

【0045】

［実施例４］
４．ＫＫ−Ａ^ｙ雄マウス（２型糖尿病モデル）に対する作用の検討（２）
実施例３における対照群マウス６匹とＨＴＨＱの投与用量が７５ｍｇ／ｋｇ体重（低用量群）の試験群マウス６匹について、投与１２週後（生後１７週齢）に屠殺し、腎臓を摘出して組織標本を作成した。この組織標本について以下表２に示す所見に関する病理検査を行った。結果を表２に示す。なお、病理検査の内容及び判定基準は以下の通りである。

【0046】

（１）皮質尿細管上皮の退行変性：着色の変化、空胞形成、膿胞形成、細胞脱落及び修復を含むその他の変化による生存率の減少の有無を観察する。「軽度」：病変は容易に確認されるが、限定的である。
（２）皮質尿細管拡張：尿細管に、比較的正常であるか僅かに平坦化された上皮による内側を覆う内腔の拡張の有無、尿細管腔のサイズの拡大の有無を観察する。「軽度」：病変は、確認されるが、限定的である。
（３）糸球体間質の硬化：外側皮質内における小好酸性硬化糸球体の有無を観察する。通常はほとんどみつかることがない。「軽微」：硬化糸球体の発生頻度は低い。
（４）皮質尿細管の好塩基性化：好塩基性細胞質を有する尿細管上皮細胞の有無を観察する。「軽微」：細管に２、３の病変を有する。「軽度」：病変は容易に確認されるが、限定的である。「中等度」：病変が明瞭だが、さらに拡大する可能性がある。
（５）皮質尿細管の硝子円柱：同種の好酸球内容物を含む尿細管腔の有無を観察する。「軽度」：病変は容易に確認されるが、限定的である。

【0047】

【表2】

【0048】

病理検査を行った個体は週齢が低く、糖尿病性腎症に特徴的な病態形成が不完全であったが、「特記すべき異常なし」と判断された個体が、試験群では６匹中３匹であったのに対し、対照群は６匹中１匹であった。また、「皮質尿細管の好塩基性化」が軽微〜軽度に認められた個体が試験群では２匹であったのに対し、対照群では５匹であった。これらのことから、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体は、糖尿病性腎症の病態形成を有意に抑制することが示された。

【0049】

［実施例５］
５．ＯＬＥＴＦラット（２型糖尿病モデル）に対する作用の検討
上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体を２型糖尿病モデルラットであるＯＬＥＴＦラットに投与し、その作用効果を調べた。６週齢のＯＬＥＴＦラットを１６匹、６週齢のＬＥＴＯラット（対照ラット）を４匹準備した。ＯＬＥＴＦラットは８匹ずつ試験群と対照群に分けた。全てのラットに対し、実験動物用飼料（CLEA Rodent Diet CE-2粉末状、日本クレア株式会社製品）を自由摂取させて飼育した。試験群のラットに対しては上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体を投与し、ハイドロキノン誘導体としては、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル（ＨＴＨＱ）を用いた。ハイドロキノン誘導体の投与にあたっては、１日あたりの投与用量がおよそ１００ｍｇ／ｋｇ体重となるように、ＨＴＨＱを上述の実験動物用飼料に混合した。なお、ＨＴＨＱの飼料中の混合比率は、０．１６７％であり、試験期間中の各個体の予想平均飼料摂取量（３０ｇ）及び予想平均体重（５００ｇ）より算出した。

【0050】

ラットの週齢が２４週齢になってから投与を開始し、投与開始から４週間目に代謝ケージにより３時間採尿し、尿中アルブミン及びクレアチニン濃度を測定し、尿中アルブミン／クレアチニン比を算出した。尿中アルブミンはラット尿中アルブミン定量用キットNephrat II（エクソセル社製品）を用いて、クレアチニンは尿中クレアチニン定量用キットCreatinine Companion（エクソセル社製品）を用いて測定した。

【0051】

本実施例の結果を図４に示す。２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル（ＨＴＨＱ）の投与により、尿アルブミン／クレアチニン比の抑制効果が認められた。これらのことより、２型糖尿病モデル動物に対しても、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体は、糖尿病性腎障害の治療や予防に有効であることがわかった。

【0052】

上述した実施例の結果より、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体は、１型糖尿病又は２型糖尿病のいずれにおいても、持続的な高血糖状態により引き起こされる腎組織の障害を抑制することができることがわかった。この結果により、本発明の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体は、糖尿病性腎症における腎障害の予防又は治療のために有用であることが示された。

【0053】

［実施例６］
６．ハイドロキノン誘導体とアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬との組合せによる作用の検討
上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体及びアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬を２型糖尿病モデルマウスであるＫＫ−Ａ^ｙマウスに投与し、その作用効果を調べた。４週齢のＫＫ−Ａ^ｙ雄マウスを５０匹準備し、１０匹ずつ対照群と４つの試験群とに分け、１週間高脂肪食を給餌させて馴化させた。その後、全てのマウスに対して高脂肪食を給餌すると共に、以下表３に示すように、給水ビンに各種成分を含有させた試験組成物を入れ、試験期間中自由摂取させた。ハイドロキノン誘導体としては、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル（ＨＴＨＱ）を用い、アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬としてはロサルタンカリウム（ＬＫ）を用いた。なお、ロサルタンカリウムは、優れた降圧効果を有する物質であり、主に降圧剤として使用されるが、近年、高血圧とタンパク尿を伴った２型糖尿病性腎症の治療薬としても用いられている。

【0054】

【表3】

【0055】

投与開始から、試験個体の給水ビンからの飲水量を毎週測定し、対照群及び各試験群における各種試験成分の平均摂取量を求めた。また、２週間間隔で投与１２週まで随時尿にて尿中アルブミン及びクレアチニン濃度を測定し、尿中アルブミン／クレアチニン比を算出した。尿中アルブミンはマウス尿中アルブミン定量用キットAlbuwell Ｍ（エクソセル社製品）を用いて、クレアチニンは尿中クレアチニン定量用キットCreatinine Companion（エクソセル社製品）を用いて測定した。さらに、投与１週目から４週間間隔で投与１３週まで、実験動物用非観血式自動血圧測定装置（株式会社ソフトロン社製品、型番：ＢＰ−９８Ａ−Ｌ）を用いて試験個体の血圧を測定した。

【0056】

対照群及び各試験群の平均飲水量、各種試験成分の平均投与用量を以下表４に示す。また、尿中アルブミン／クレアチニン比を図５に、収縮期血圧を図６に示す。

【0057】

【表4】

【0058】

図５のグラフで明らかなように、２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテル（ＨＴＨＱ）又はロサルタンカリウム（ＬＫ）の単独投与群では、尿アルブミン／クレアチニン比の有意な抑制効果が認められた。さらに、これらの併用投与群（ＨＴＨＱ＋ＬＫ）では、投与初期から顕著な尿アルブミン／クレアチニン比の上昇抑制効果があることがわかった。また、表４に示されるように、併用投与群では単独投与群よりも飲水量が少なくなる傾向があり、それゆえ、併用投与群の各構成成分であるＨＴＨＱ及びロサルタンカリウムの一日投与量は単独投与群の投与量よりも少なかった。特に併用投与群のロサルタンカリウムの一日投与量は、単独投与群の約５６％であった。これらのことから、併用投与群（ＨＴＨＱ＋ＬＫ）では、各構成成分が低濃度であっても、投与初期から顕著な尿アルブミン／クレアチニン比の上昇抑制効果があることがわかった。

【0059】

また、図６のグラフに示されるように、ロサルタンカリウムは優れた降圧効果を示すところ、ロサルタンカリウムと２，３，５−トリメチルハイドロキノン−１−ヘキシルエーテルとの併用投与群（ＨＴＨＱ＋ＬＫ）では、この降圧効果は維持されており、ＨＴＨＱはロサルタンカリウムの降圧効果を阻害しないことが示された。また、上述したように、併用投与群のロサルタンカリウムの一日投与量は、単独投与群の約５６％と少ないところ、単独投与群と同程度〜それ以上の降圧効果がみられていることから、併用投与群（ＨＴＨＱ＋ＬＫ）では、各構成成分が低濃度であっても、優れた降圧効果も示すことが示された。

【0060】

このことより、糖尿病性腎症に対し、上述の一般式（１）で表されるハイドロキノン誘導体とアンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬とを併用することにより、より有効な治療又は予防効果が得られることが示された。

【0061】

本発明は、上記の実施形態又は実施例に限定されるものでなく、特許請求の範囲に記載された発明の要旨を逸脱しない範囲内での種々、設計変更した形態も技術的範囲に含まれるものである。

【産業上の利用可能性】

【0062】

本発明は、糖尿病の合併症として引き起こされる糖尿病性腎症による腎障害を抑制することができ、糖尿病性腎症の予防又は治療のために有用である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】