特許 6408993 タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体と選択的Ｂｃｌ−２インヒビターの併用療法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6408993

(24)【登録日】2018年9月28日

(45)【発行日】2018年10月17日

(54)【発明の名称】タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体と選択的Ｂｃｌ−２インヒビターの併用療法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20181004BHJP

   A61K 31/496 20060101ALI20181004BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20181004BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20181004BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20181004BHJP

【ＦＩ】

   A61K39/395 NZMD

   A61K31/496

   A61P35/00

   A61K39/395 D

   A61P35/02

   A61P43/00 121

   A61P43/00ZNA

【請求項の数】21

【全頁数】36

(21)【出願番号】特願2015-531246(P2015-531246)

(86)(22)【出願日】2013年9月6日

(65)【公表番号】特表2015-529225(P2015-529225A)

(43)【公表日】2015年10月5日

(86)【国際出願番号】US2013058557

(87)【国際公開番号】WO2014039855

(87)【国際公開日】20140313

【審査請求日】2016年9月5日

(31)【優先権主張番号】61/698,379

(32)【優先日】2012年9月7日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】509012625

【氏名又は名称】ジェネンテック， インコーポレイテッド

(73)【特許権者】

【識別番号】501205108

【氏名又は名称】エフ ホフマン−ラ ロッシュ アクチェン ゲゼルシャフト

(74)【代理人】

【識別番号】110001173

【氏名又は名称】特許業務法人川口國際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】サンパス，ディーパーク

(72)【発明者】

【氏名】クライン，クリスチャン

(72)【発明者】

【氏名】フェアブラザー，ウェイン・ジョン

【審査官】 馬場 亮人

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１１−５００５２１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 JOURNAL OF CLINICAL ONCOLOGY，２０１２年，vol.30, no.25，p.3127-3135

【文献】 MACAULEY D，AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH (AACR) 103RD ANNUAL MEETING 以下省略，DRUGS OF THE FUTURE，PROUS SCIENCE ESP，２０１２年 ６月，V37 N6，P451-455

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３９／３９５

Ａ６１Ｋ ３１／４９６

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｐ ３５／０２

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

治療を要するヒトにおいてがんを治療するための医薬組成物であって、前記組成物は、ＧＡ１０１抗体、及び／または２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミド（ＧＤＣ−０１９９）またはその医薬的に許容され得る塩を含み、前記治療は、有効量の前記ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩を複数の投与期間中ヒトに共投与した後、ＧＡ１０１抗体の非存在下でＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩の有効量のみを１つ以上の投与期間中前記ヒトに投与することを含む、前記医薬組成物。

【請求項2】

治療を要するヒトにおいてがんを治療するための医薬組成物であって、前記組成物は、ＧＡ１０１抗体、及び／または２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミド（ＧＤＣ−０１９９）またはその医薬的に許容され得る塩を含み、前記治療は、有効量の前記ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩を複数の投与期間中ヒトに共投与した後、ＧＡ１０１抗体の非存在下でＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩のみを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４日間前記ヒトに投与することを含む、前記医薬組成物。

【請求項3】

前記複数の投与期間の各投与期間が４週間を含み、前記ＧＡ１０１抗体が投与期間毎に１回投与され、及び、前記ＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩が前記複数の投与期間中毎日投与される、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項4】

前記治療が、有効量の前記ＧＡ１０１抗体を投与期間毎に１回、及び、前記ＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中１日１、２または３回共投与した後、有効量の前記ＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩のみを１、２、３、４、５または６つの投与期間中１日１、２または３回投与することを含む請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記ＧＡ１０１抗体の有効量は約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇであり、前記ＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩の有効量は約２０ｍｇ〜約５００ｍｇである請求項２〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項6】

前記ＧＡ１０１抗体の有効量は８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００または１５００ｍｇであり、前記ＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩の有効量は５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０または３００ｍｇである請求項２〜４のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項7】

前記治療が、前記ＧＡ１０１抗体及び前記ＧＤＣ−０１９９またはその医薬的に許容され得る塩を各投与期間中順次共投与することを含み、各投与期間は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４日間である請求項１〜６のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項8】

前記ＧＡ１０１抗体は配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２、及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗ヒトＣＤ２０抗体である請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記ＧＡ１０１抗体は更に配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む請求項８に記載の医薬組成物。

【請求項10】

前記ＧＡ１０１抗体は配列番号９のアミノ酸配列及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む請求項１〜７のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記ＧＡ１０１抗体はオビヌツズマブである請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記ＧＡ１０１抗体は配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項13】

前記がんはＣＤ２０発現がんである請求項１〜１２のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項14】

前記がんは非固形腫瘍である請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項15】

前記がんはリンパ腫または白血病である請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記がんは白血病であり、前記白血病は慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）である請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項17】

前記ヒトは再発性、難治性または未治療の慢性リンパ球性白血病を患っている請求項１６に記載の医薬組成物。

【請求項18】

前記がんは非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項19】

前記がんは急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項20】

前記がんは濾胞性リンパ腫である請求項１３に記載の医薬組成物。

【請求項21】

前記がんは大細胞リンパ腫であり、当該大細胞リンパ腫がＢ細胞びまん性大細胞リンパ腫である請求項１３に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、癌、特にＣＤ２０発現癌を患っている患者を治療するためのタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを伴う併用療法に関する。

【背景技術】

【0002】

ＣＤ２０分子（ヒトＢリンパ球限定分化抗原またはＢｐ３５とも称される）はプレＢ及び成熟Ｂリンパ球上に位置する約３５ｋＤの分子量を有する疎水性膜貫通タンパク質である（Ｖａｌｅｎｔｉｎｅ，Ｍ．Ａ．ら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４（１９）（１９８９）１１２８２−１１２８７；及びＥｉｎｆｉｅｌｄ，Ｄ．Ａ．ら，ＥＭＢＯ Ｊ．，７（３）（１９８８）７１１−７１７）。ＣＤ２０は末梢血またはリンパ系器官由来のＢ細胞の９０％以上の表面上に存在し、初期プレＢ細胞発生中に発現し、プラズマ細胞分化まで残る。ＣＤ２０は正常Ｂ細胞及び悪性Ｂ細胞の両方上に存在している。特に、ＣＤ２０はＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の９０％以上で発現している（Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｋ．Ｃ．ら，Ｂｌｏｏｄ，６３（６）（１９８４）１４２４−１４３３）が、造血幹細胞、プロＢ細胞、正常プラズマ細胞または他の正常組織上には存在していない（Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．ら，Ｊ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３５（２）（１９８５）９７３−９７９）。

【0003】

ＣＤ２０タンパク質の８５アミノ酸カルボキシ末端領域は細胞質内に位置している。この領域の長さは他のＢ細胞特異的表面構造、例えばそれぞれ３、３、２８、１５及び１６アミノ酸の比較的短い細胞質内領域を有するＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＧ重鎖、または組織適合性抗原クラスＩ１ａまたはβ細胞の長さと対照的である（Ｋｏｍａｒｏｍｙ，Ｍ．ら，ＮＡＲ，１１（１９８３）６７７５−６７８５）。最後の６１個のカルボキシル末端アミノ酸のうち、２１個は酸性残基であるのに対して、２個しか塩基性でなく、この領域が強い正味陰電荷を有していることを示している。ＧｅｎＢａｎｋ受託番号はＮＰ−６９０６０５である。ＣＤ２０はＢ細胞の活性化及び分化プロセスの初期段階の調節に関与しており（Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６（１９８６）８８１−８８７）、カルシウムイオンチャネルとして機能し得ると考えられている（Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．ら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１４Ｄ（１９９０）１９５）。

【0004】

抗ＣＤ２０抗体には、ＣＤ２０結合のモード及び生物学的活性の点で大きく異なる２つの異なるタイプがある（Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１０３（２００４）２７３８−２７４３；及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１０１（２００３）１０４５−１０５２）。タイブＩ抗体、例えばリツキシマブは補体媒介細胞傷害性の点で強力であるのに対して、タイプＩＩ抗体、例えばトシツモマブ（Ｂ１）、１１Ｂ８、ＡＴ８０またはヒト化Ｂ−Ｌｙ１抗体はホスファチジルセリン暴露を伴ってカスパーゼ非依存性アポトーシスを介して標的細胞死を効果的に開始させる。

【0005】

タイプＩ及びタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の共通する一般的特徴を下表１に要約する。

【0006】

【表1】

【0007】

タンパク質のＢｃｌ−２ファミリーは、複数のストレスシグナルに応答して発生刺激によりトリガーされるプログラム細胞死を調節する（Ｃｏｒｙ，Ｓ．，ａｎｄ Ａｄａｍｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ，２（２００２）６４７−６５６；Ａｄａｍｓ，Ｇｅｎｅｓ ｕｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１７（２００３）２４８１−２４９５；Ｄａｎｉａｌ，Ｎ．Ｎ．，ａｎｄ Ｋｏｒｓｍｅｙｅｒ，Ｓ．Ｊ．，Ｃｅｌｌ，１１６（２００４）２０５−２１９）。細胞生存はＢｃｌ−２それ自体、及び３または４個の保存Ｂｃｌ−２ホモロジー（ＢＨ）領域を持つ幾つかの近親物（Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｂｃｌ−Ｗ、Ｍｃｌ−１及びＡｌ）により促進されるのに対して、アポトーシスは２つの他のサブファミリーにより動かされる。細胞死の初期シグナルは、Ｂａｄ、Ｂｉｄ、Ｂｉｍ、Ｐｕｍａ及びＮｏｘａを含めて共通して小さなＢＨ３相互作用ドメインのみを有しているＢＨ３オンリータンパク質の多様群により伝達される（Ｈｕａｎｇ ａｎｄ Ｓｔｒａｓｓｅｒ，Ｃｅ１１，１０３（２０００）８３９−８４２）。しかしながら、細胞死への関与のためにはＢＨ１〜ＢＨ３を含有しているＢａｘまたはＢａｋマルチドメインタンパク質が必要である（Ｃｈｅｎｇら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ，８（２００１）７０５−７１１；Ｗｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９２（２００１）７２７−７３０；Ｚｏｎｇ，Ｗ．Ｘ．ら，Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１５，１４８（２００１）１−１４８６）。活性化されると、これらのタンパク質はミトコンドリアの外膜を透過処理し、細胞を壊すカスパーゼを活性化するために必要であるプロアポトーシス誘導因子（例えば、シトクロムＣ）を放出し得る（Ｗａｎｇ，Ｋ．，Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１５（２００１）２９２２−２９３３；（上褐のＡｄａｍｓ，２００３）；Ｇｒｅｅｎ，Ｄ．Ｒ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０５（２００４）６２６−６２９）。

【0008】

Ｂｃｌ−２ファミリーのこれらの３つの因子のメンバー間の相互作用により、細胞が生きるか死ぬかどうかが決まる。ＢＨ３オンリータンパク質が例えばＤＮＡ損傷に応答して活性化されると、これらはそのＢＨ３ドメインを介して生存促進性関連物上のグローブに結合し得る（Ｓａｔｔｌｅｒら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５（１９９７）９８３−９８６）。しかしながら、どのようにＢＨ３オンリー及びＢｃｌ−２様タンパク質がＢａｘ及びＢａｋの活性化をコントロールするかは余り理解されていない（上褐のＡｄａｍｓ，２００３）。多くの注目がＢａｘに向けられている。この可溶性モノマータンパク質（Ｈｓｕ，Ｙ．Ｔ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７２（１９９７）１３２８９−１３８３４；Ｗｏｌｔｅｒ，Ｋ．Ｇ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１３９（１９９７）１２８１−９２）は通常、多分その細胞質ゾル局在化のためにそのグローブに挿入されたその膜標的化ドメインを有している（Ｎｅｃｈｕｓｈｔａｎ，Ａ．ら，ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ，１８（１９９９）２３３０−２３４１；Ｓｕｚｕｋｉら，Ｃｅｌｌ，１０３（２０００）６４５−６５４；Ｓｃｈｉｎｚｅｌ，Ａ．ら，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ１，１６４（２００４）１０２１−１０３２）。Ｌｕｃｋｅｎ−Ａｒｄｊｏｍａｎｄｅ，Ｓ．，ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎｏｕ，Ｊ．Ｃ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．，１１８（２００５）４７３−４８３で概説されているように幾つかの非関連ペプチド／タンパク質がＢａｘ活性をモジュレートするために提案されてきたが、この生理学的関連性はまだ確立されていない。また、Ｂａｘは特定のＢＨ３オンリータンパク質による直接関与により活性化され得（上褐のＬｕｃｋｅｎ−Ａｒｄｊｏｍａｎｄｅ，Ｓ．，ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎｏｕ，Ｊ．Ｃ，２００５）、最も良く立証されているのはＢｉｄの切頭形態のｔＢｉｄである（Ｗｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｇｅｎｅｓ ｕｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１４（２０００）２０６０−２０７１；Ｋｕｗａｎａ，Ｔ．ら，Ｃｅｌｌ，１１１（２００２）３３１−３４２；Ｒｏｕｃｏｕ，Ｘ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，３６８（２００２）９１５−９２１；Ｃａｒｔｒｏｎ，Ｐ．Ｆ．ら，Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ，１６（２００４）８０７−８１８）。他でも検討されているように（上褐のＡｄａｍｓ，２００３）、Ｂｃｌ−２が直接Ｂａｘに関与する最も古いモデル（Ｏｌｔｖａｉ，Ｚ．Ｎ．ら，Ｃｅｌｌ，７４（１９９３）６０９−６１９）は、Ｂａｘが細胞質ゾルである間Ｂｃｌ−結合しており、その相互作用が細胞溶解のために使用される洗浄剤に十分に依存しているようなので、問題となった（上褐のＨｓｕ，Ｙ．Ｔ．，ａｎｄ Ｙｏｕｌｅ，１９９７）。にもかかわらず、ＢａｘのＢＨ３領域がＢｃｌ−２との結合を媒介し得ること（Ｚｈａ，Ｈ．，ａｎｄ Ｒｅｅｄ，Ｊ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７２（１９９７）３１４８２−８８；Ｗａｎｇ，Ｋ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｕｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１８（１９９８）６０８３−６０８９）、及びヘテロダイマーが全く検出されないにもかかわらずＢｃｌ−２がＢａｘのオリゴマー化を防止することが十分確立されている（Ｍｉｋｈａｉｌｏｖ，Ｖ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６（２００１）１８３６１−１８３７４）。よって、生存促進性タンパク質が直接または間接的にＢａｘ活性化を制限するかどうかは不確かなままである。

【0009】

Ｂａｘ及びＢａｋは多くの環境において機能的に同等であるようである（Ｌｉｎｄｓｔｅｎ，Ｔ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ，６（２０００）１３８９−１３９９；上褐のＷｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，２００１）が、その調節での実質的な差は健康な細胞におけるはっきりした局在化から予想される。大部分細胞質であるＢａｘとは異なり、Ｂａｋはミトコンドリアの外膜及び健康細胞の小胞体上の複合体中にある（上褐のＷｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，２０００；Ｚｏｎｇ，Ｗ．Ｘ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅ１１ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１６２（２００３）５９−６９）。にもかかわらず、細胞傷害シグナルを受け取ると、Ｂａｘ及びＢａｋはいずれもコンフォメーションを変化させ、Ｂａｘは細胞小器官膜に転移し、その後Ｂａｘ及びＢａｋは結合して膜透過化をもたらし得るホモオリゴマーを形成する（Ｈｓｕ，Ｙ．Ｔ．ら，ＰＮＡＳ，９４（１９９７）３６６８−３６７２；上褐のＷｏｌｔｅｒ，Ｋ．Ｇ．ら，１９９７；Ａｎｔｏｎｓｓｏｎ，Ｂ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６（２００１）１１６１５−１１６２３；Ｎｅｃｈｕｓｈｔａｎ，Ａ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１５３（２００１）１２６５−１２７６；上褐のＷｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，２００１；Ｍｉｋｈａｉｌｏｖ，Ｖ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７８（２００３）５３６７−５３７６）。

【0010】

いずれもタンパク質のＢｃｌ−２ファミリーの生存促進性メンバーを抑制する同一性質を有しており、従って癌を治療するための有望な候補者である各種Ｂｃｌ−２インヒビターが存在している。前記したＢｃｌ−２インヒビターは、例えばオブリメルセン、ＳＰＣ−２９９６、ＲＴＡ−４０２、ゴシポール、ＡＴ−１０１、オバトクラックスメシレート、Ａ−３７１１９１、Ａ−３８５３５８、Ａ−４３８７４４、ＡＢＴ−７３７、ＡＢＴ−２６３、ＡＴ−１０１、ＢＬ−１１、ＢＬ−１９３、ＧＸ−１５−００３、２−メトキシアンチマイシンＡ_３、ＨＡ−１４−１、ＫＦ−６７５４４、プルプロガリン、ＴＰ−ＴＷ−３７、ＹＣ−１３７及びＺ−２４であり、例えばＺｈａｉ，Ｄ．ら，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ，１３（２００６）１４１９−１４２１に記載されている。

【0011】

Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｒ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，３（１２）（２００４）１６９３−１６９９；及びＲａｍａｎａｒａｙａｎａｎ，Ｊ．ら，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１２７（５）（２００４）５１９−５３０は、タイプＩ抗ＣＤ２０抗体（リツキシマブ）とアンチセンスＢｃｌ−２オリゴヌクレオチド（オブリメルセン）の併用を言及している。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0012】

【非特許文献1】Ｖａｌｅｎｔｉｎｅ，Ｍ．Ａ．ら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６４（１９）（１９８９）１１２８２−１１２８７

【非特許文献2】Ｅｉｎｆｉｅｌｄ，Ｄ．Ａ．ら，ＥＭＢＯ Ｊ．，７（３）（１９８８）７１１−７１７

【非特許文献3】Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｋ．Ｃ．ら，Ｂｌｏｏｄ，６３（６）（１９８４）１４２４−１４３３

【非特許文献4】Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．ら，Ｊ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３５（２）（１９８５）９７３−９７９

【非特許文献5】Ｋｏｍａｒｏｍｙ，Ｍ．ら，ＮＡＲ，１１（１９８３）６７７５−６７８５

【非特許文献6】Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．ら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６（１９８６）８８１−８８７

【非特許文献7】Ｔｅｄｄｅｒ，Ｔ．Ｆ．ら，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１４Ｄ（１９９０）１９５

【非特許文献8】Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１０３（２００４）２７３８−２７４３

【非特許文献9】Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１０１（２００３）１０４５−１０５２

【非特許文献10】Ｃｏｒｙ，Ｓ．，ａｎｄ Ａｄａｍｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ，２（２００２）６４７−６５６

【非特許文献11】Ａｄａｍｓ，Ｇｅｎｅｓ ｕｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１７（２００３）２４８１−２４９５

【非特許文献12】Ｄａｎｉａｌ，Ｎ．Ｎ．，ａｎｄ Ｋｏｒｓｍｅｙｅｒ，Ｓ．Ｊ．，Ｃｅｌｌ，１１６（２００４）２０５−２１９

【非特許文献13】Ｈｕａｎｇ ａｎｄ Ｓｔｒａｓｓｅｒ，Ｃｅ１１，１０３（２０００）８３９−８４２

【非特許文献14】Ｃｈｅｎｇら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ，８（２００１）７０５−７１１

【非特許文献15】Ｗｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９２（２００１）７２７−７３０

【非特許文献16】Ｚｏｎｇ，Ｗ．Ｘ．ら，Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１５，１４８（２００１）１−１４８６

【非特許文献17】Ｗａｎｇ，Ｋ．，Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１５（２００１）２９２２−２９３３

【非特許文献18】Ｇｒｅｅｎ，Ｄ．Ｒ．，ａｎｄ Ｋｒｏｅｍｅｒ，Ｇ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３０５（２００４）６２６−６２９

【非特許文献19】Ｓａｔｔｌｅｒら，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７５（１９９７）９８３−９８６

【非特許文献20】Ｈｓｕ，Ｙ．Ｔ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７２（１９９７）１３２８９−１３８３４

【非特許文献21】Ｗｏｌｔｅｒ，Ｋ．Ｇ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１３９（１９９７）１２８１−９２

【非特許文献22】Ｎｅｃｈｕｓｈｔａｎ，Ａ．ら，ＥＭＢＯ Ｊｏｕｒｎａｌ，１８（１９９９）２３３０−２３４１

【非特許文献23】Ｓｕｚｕｋｉら，Ｃｅｌｌ，１０３（２０００）６４５−６５４

【非特許文献24】Ｓｃｈｉｎｚｅｌ，Ａ．ら，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ１，１６４（２００４）１０２１−１０３２

【非特許文献25】Ｌｕｃｋｅｎ−Ａｒｄｊｏｍａｎｄｅ，Ｓ．，ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎｏｕ，Ｊ．Ｃ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．，１１８（２００５）４７３−４８３

【非特許文献26】Ｗｅｉ，Ｍ．Ｃ．ら，Ｇｅｎｅｓ ｕｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１４（２０００）２０６０−２０７１

【非特許文献27】Ｋｕｗａｎａ，Ｔ．ら，Ｃｅｌｌ，１１１（２００２）３３１−３４２

【非特許文献28】Ｒｏｕｃｏｕ，Ｘ．ら，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ，３６８（２００２）９１５−９２１

【非特許文献29】Ｃａｒｔｒｏｎ，Ｐ．Ｆ．ら，Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ，１６（２００４）８０７−８１８

【非特許文献30】Ｏｌｔｖａｉ，Ｚ．Ｎ．ら，Ｃｅｌｌ，７４（１９９３）６０９−６１９

【非特許文献31】Ｚｈａ，Ｈ．，ａｎｄ Ｒｅｅｄ，Ｊ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７２（１９９７）３１４８２−８８

【非特許文献32】Ｗａｎｇ，Ｋ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｕｎｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１８（１９９８）６０８３−６０８９

【非特許文献33】Ｍｉｋｈａｉｌｏｖ，Ｖ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６（２００１）１８３６１−１８３７４

【非特許文献34】Ｌｉｎｄｓｔｅｎ，Ｔ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ，６（２０００）１３８９−１３９９

【非特許文献35】Ｚｏｎｇ，Ｗ．Ｘ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅ１１ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１６２（２００３）５９−６９

【非特許文献36】Ｈｓｕ，Ｙ．Ｔ．ら，ＰＮＡＳ，９４（１９９７）３６６８−３６７２

【非特許文献37】Ａｎｔｏｎｓｓｏｎ，Ｂ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７６（２００１）１１６１５−１１６２３

【非特許文献38】Ｎｅｃｈｕｓｈｔａｎ，Ａ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１５３（２００１）１２６５−１２７６

【非特許文献39】Ｍｉｋｈａｉｌｏｖ，Ｖ．ら，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７８（２００３）５３６７−５３７６

【非特許文献40】Ｚｈａｉ，Ｄ．ら，Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ ａｎｄ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ，１３（２００６）１４１９−１４２１

【非特許文献41】Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｒ．ら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，３（１２）（２００４）１６９３−１６９９

【非特許文献42】Ｒａｍａｎａｒａｙａｎａｎ，Ｊ．ら，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ，１２７（５）（２００４）５１９−５３０

【発明の概要】

【0013】

本発明では、治療を要する患者に対してタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを共投与することを含む癌を患っている患者の治療方法を提供する。共投与は同時投与であっても、任意の順序での順次投与であってもよい。

【0014】

本発明において使用するためのタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の例はＧＡ１０１抗体である。

【0015】

実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は高い抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を有している。

【0016】

実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体のＦｃ領域のオリゴ糖の少なくとも４０％はフコシル化されていない。

【0017】

実施形態では、選択的Ｂｃｌ−２インヒビターはＧＤＣ−０１９９（ＡＢＴ−１９９としても公知）またはその医薬的に許容され得る塩である。

【0018】

実施形態では、癌は非固形腫瘍である。

【0019】

ある実施形態では、治療を要するヒトに対してＧＡ１０１抗体及び／またはＧＤＣ−０１９９を複数の投与サイクルで投与することを含む前記ヒトにおける癌の治療方法が提供される。実施形態では、複数の投与サイクルの各投与サイクルは少なくとも１週間である。実施形態では、複数の投与サイクルの各投与サイクルは少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも４週間、少なくとも５週間、または少なくとも６週間である。

【0020】

ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９をヒトに対して複数の投与サイクルで投与する実施形態では、ＧＡ１０１抗体は複数の投与サイクルの１つ以上の投与サイクル中に１投与サイクルあたり１回投与し得る。１回で投与されるＧＡ１０１の量は、例えば約３００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約３０００ｍｇ、または約５００ｍｇ〜約１２００ｍｇの範囲であり得る。

【0021】

ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９をヒトに対して複数の投与サイクルで投与する実施形態では、ＧＤＣ−０１９９は例えば複数の投与サイクルの１つ以上の投与サイクル中に１投与サイクルあたり毎日投与し得る。実施形態では、ＧＤＣ−０１９９は初期投与サイクルの全ての日数よりも少ない日数投与され、初期投与サイクルに続く複数の投与サイクルの投与サイクルでは毎日投与する。１日あたりに投与されるＧＤＣ−０１９９の量は約１０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約５００ｍｇ、または約５０ｍｇ〜約３００ｍｇの範囲であり得る。

【0022】

実施形態では、ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９を患者に対して複数の投与サイクルの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、または８を超える投与サイクルで投与する。

【0023】

治療を要するヒトに対してＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９の両方を複数の投与サイクルの最後の投与サイクル後複数の投与サイクルで投与することを含む前記ヒトにおいて癌を治療するために提供されている方法のある実施形態では、ＧＡ１０１抗体の非存在下でＧＤＣ−０１９９のみをヒトに対して投与しても、ＧＤＣ−０１９９の非存在下でＧＡ１０１抗体のみを患者に対して投与してもよい。例えば、（例えば、ＧＤＣ−０１９９及びＧＡ１０１抗体の両方をヒトに対して投与する複数の投与サイクルの最後のサイクルの後に）ＧＤＣ−０１９９のみをヒトに対して投与する場合、ＧＤＣ−０１９９をヒトに対して少なくとも３、４、５、６、７、８または９日間、または１０日間以上、２０日間以上、または３０日間以上投与し得る。

【0024】

ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９を患者に対して複数の投与サイクルで投与する提供されている方法の更に別の実施形態では、複数の投与サイクルはＧＤＣ−０１９９を患者対して段階的投与サイクルの間、漸増１日用量で投与する段階的投与サイクルを含む。

【0025】

本発明では、癌の治療用薬剤を製造するためのＧＤＣ−０１９９とＧＡ１０１抗体との併用を提供する。本発明では、癌の治療用薬剤を製造するためのＧＡ１０１抗体とＧＤＣ−０１９９の併用をも提供する。

【0026】

別の態様で、本発明では、ヒトにおいて癌を治療するためのＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９の組合せを提供する。この組合せは例えばヒトに対して下記に記載する投与スケジュールに従って投与され得る。

【図面の簡単な説明】

【0027】

【図1】タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体（ＧＡ１０１抗体、この場合オビヌツズマブ）とＢｃｌ−２インヒビター（ＡＢＴ−１９９，ＧＤＣ−０１９９としても公知）の併用療法の抗腫瘍活性。ｘ軸の下の矢印及び線はそれぞれＧＡ１０１及びＧＤＣ−０１９９の投与の日を示す。

【図2】ＧＤＣ−１９９をオビヌツズマブと共に投与するための例示的投与スケジュール。

【図3】ＧＤＣ−１９９をオビヌツズマブと共に投与するための例示的投与スケジュール。

【図4】単独でまたはＧＤＣ−０１９９と一緒に使用されるタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体(オビヌツズマブ，ＲＯ５０７２７５９としても公知）、及び単独でまたはＧＤＣ−０１９９と一緒に使用されるタイプＩ抗ＣＤ２０抗体（リツキシマブ）のヒトＺ１３８マントル細胞リンパ腫細胞に対する抗腫瘍活性。

【図5】ＧＤＣ−０１９９とタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体（ＧＡ１０１抗体、この場合オビヌツズマブ）を併用後のＧＤＣ−０１９９を用いる単剤治療が腫瘍再増殖を遅らすことを立証する侵襲性リンパ腫の異種移植片モデルからの結果。

【0028】

本発明は上記に記載した方法に関する。

【0029】

本発明は、治療を要するヒトに対して有効量のＧＡ１０１抗体、または２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中投与した後、有効量のＧＡ１０１抗体及び２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中共投与することを含む前記ヒトの治療方法にも関する。

【0030】

本発明は、治療を要するヒトに対して有効量のＧＡ１０１抗体または２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドを０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４日間を投与した後、有効量のＧＡ１０１抗体及び２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中共投与することを含む前記ヒトの治療方法にも関する。

【0031】

本発明は、有効量のＧＡ１０１抗体を１、２、３、４、５、６または７日間投与した後、有効量のＧＡ１０１抗体及び２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中共投与することを含むその必要があるヒトの治療方法にも関する。

【0032】

本発明は、有効量の２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１、２、３、４、５、６または７日間投与した後、有効量のＧＡ１０１抗体及び２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中共投与することを含む治療を要するヒトの治療方法にも関する。

【0033】

本発明は、有効量のＧＡ１０１抗体を１、２、３、４、５または６つのサイクル中投与期間毎に１回投与した後、有効量のＧＡ１０１抗体を投与期間毎に１回、２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中１日１〜３回共投与することを含むその必要があるヒトの治療方法にも関する。

【0034】

本発明は、有効量の２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１、２、３、４、５または６つの投与期間中１日１〜３回投与した後、有効量のＧＡ１０１抗体を投与期間毎に１回、２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を１つ以上の投与期間中１日１〜３回共投与することを含むその必要があるヒトの治療方法にも関する。

【0035】

本発明は、ＧＡ１０１抗体の有効量が５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、２０００、２１００、２２００、２３００、２４００、２５００、２６００、２７００、２８００、２９００または３０００ｍｇであり、２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩の有効量が１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０、８００、８１０、８２０、８３０、８４０、８５０、８６０、８７０、８８０、８９０、９００、９１０、９２０、９３０、９４０、９５０、９６０、９７０、９８０、９９０または１０００ｍｇである上記に記載した方法のいずれか１つにも関する。

【0036】

本発明は、ＧＡ１０１抗体の有効量が８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００または１５００ｍｇであり、２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩の有効量が５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０または３００ｍｇである上記に記載した方法のいずれか１つにも関する。

【0037】

本発明は、癌がＮＨＬであり、ＧＡ１０１抗体の有効量が８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００または１５００ｍｇであり、２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩の有効量が５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０及び８００ｍｇである上記に記載した方法のいずれか１つにも関する。

【0038】

本発明は、癌がＡＭＬであり、ＧＡ１０１抗体の有効量が８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００または１５００ｍｇであり、２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩の有効量が５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、３１０、３２０、３３０、３４０、３５０、３６０、３７０、３８０、３９０、４００、４１０、４２０、４３０、４４０、４５０、４６０、４７０、４８０、４９０、５００、５１０、５２０、５３０、５４０、５５０、５６０、５７０、５８０、５９０、６００、６１０、６２０、６３０、６４０、６５０、６６０、６７０、６８０、６９０、７００、７１０、７２０、７３０、７４０、７５０、７６０、７７０、７８０、７９０及び８００ｍｇである上記に記載した方法のいずれか１つにも関する。

【0039】

本発明は、ＧＡ１０１抗体及び２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミドまたはその医薬的に許容され得る塩を各投与期間中順次共投与し、各投与期間は５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４日間である上記に記載した方法のいずれか１つにも関する。

【0040】

用語「抗体」は本明細書中で広義に使用されており、各種抗体構造が包含され、これらには、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体(例えば、二重特異性抗体)、及び所望の抗原結合活性を発揮する限り抗体断片が含まれる。

【0041】

本明細書中で使用されている用語「モノクローナル抗体」は、実質的に均質の抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち天然に存在する変異を含んでいるかまたはモノクローナル抗体調製物の作成中に生ずる考えられる変異抗体を除いて、集団を構成する個々の抗体は同一であり及び／または同一エピトープに結合し、前記変異体は通常少量存在している。典型的には各種決定基（エピトープ）に対する各種抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は抗原上の１つの決定基に向いている。よって、修飾語「モノクローナル」は、抗体の実質的に均質の集団から得られる抗体の特徴を指し、特定の方法による抗体の作成を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用しようとするモノクローナル抗体は各種技術により作成され得、これらにはハイブリドーマ方法、組換えＤＮＡ方法、ファージディスプレー方法、及びヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含んでいるトランスジェニック動物を利用する方法が含まれるが、これらに限定されない。モノクローナル抗体を作成するためのこれらの方法及び他の例示的方法は本明細書中に記載されている。

【0042】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体はモノクローナル抗体である。

【0043】

用語「キメラ抗体」は、通常組換えＤＮＡ技術により作成される１つのソースまたは種由来の可変領域、すなわち結合領域及び異なるソースまたは種から誘導される定常領域の少なくとも一部を含むモノクローナル抗体を指す。マウス可変領域及びヒト定常領域を含むキメラ抗体が特に好ましい。前記したマウス／ヒトキメラ抗体はマウス免疫グロブリン可変領域をコードするＤＮＡセグメント及びヒト免疫グロブリン定常領域をコードするＤＮＡセグメントを含む発現免疫グロブリン遺伝子の産物である。本発明に包含される他の形態の「キメラ抗体」は、クラスまたはサブクラスが元の抗体の形態のものから修飾または改変されているものである。「キメラ抗体」は「クラススイッチ抗体」とも称される。キメラ抗体を作成する方法は当業界で公知の慣用の組換えＤＮＡ及び遺伝子トランスフェクション技術を含む。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．ら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１（１９８４）６８５１−６８５５；ＵＳ ５，２０２，２３８及びＵＳ ５，２０４，２４４を参照されたい。

【0044】

用語「ヒト化抗体」は、フレームワークまたは「相補性決定領域」（ＣＤＲ）が親免疫グロブリンと比較して異なる特異性を有する免疫グロブリンのＣＤＲを含むように修飾されている抗体を指す。好ましい実施形態では、「ヒト化抗体」を作成するためにマウスＣＤＲがヒト抗体のフレームワーク領域にグラフト化されている。例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，Ｌ．ら，Ｎａｔｕｒｅ，３３２（１９８８）３２３−３２７；及びＮｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｎａｔｕｒｅ，３１４（１９８５）２６８−２７０を参照されたい。特に好ましいＣＤＲは、キメラ及び二官能性抗体について上述した抗原を認識する配列を示すＣＤＲに相当する。

【0045】

本明細書中で使用されている用語「ヒト抗体」は、ヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有する抗体を含むと意図される。ヒト抗体は当業界で公知である（ｖａｎ Ｄｉｊｋ，Ｍ．Ａ．，ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｊ．Ｇ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５（２００１）３６８−３７４）。前記テクノロジーに基づいて、多種多様の標的に対するヒト抗体を作成し得る。ヒト抗体の例は、例えばＫｅｌｌｅｒｍａｎｎ，Ｓ．Ａ．ら，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１３（２００２）５９３−５９７に記載されている。

【0046】

本明細書中で使用されている用語「組換えヒト抗体」は、組換え手段により産生、発現、作成または単離されるすべてのヒト抗体、例えば宿主細胞（例えば、ＮＳ０またはＣＨＯ細胞）またはヒト免疫グロブリン遺伝子に対してトランスジェニックな動物（例えば、マウス）から単離した抗体、または宿主細胞にトランスフェクトした組換え発現ベクターを用いて発現させた抗体を含むと意図される。組換えヒト抗体は再配列形態のヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変及び定常領域を有している。本発明に従う組換えヒト抗体はインビボ体細胞超変異を受けている。よって、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、これらに関連しているが、インビボでヒト抗体生殖細胞系列レパートリー内に本来存在していないことがある配列である。

【0047】

本明細書中で使用されている「特異的に結合する」または「に対して特異的に結合する」は、望ましくないまたは非特異的な標的（例えば、ヒトＣＤ２０に特異的に結合する抗体）に対する結合から区別されるように標的に対して十分選択的である結合を指す。１つの実施形態では、本発明のＧＡ１０１抗体はヒトＣＤ２０に対して≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭまたは≦０．００１ｎＭ（例えば、１０^−８Ｍ以下、例えば１０^−８Ｍ〜１０^−１３Ｍ、例えば１０^−９Ｍ〜１０^−１３Ｍ）の結合親和性（Ｋｄ）を有している。更に別の実施形態では、ＫＤは１０^−１０ｍｏｌ／ｌ以下（例えば、１０^−１２ｍｏｌ／ｌ）である。結合親和性は標準結合アッセイ、例えばＣＤ２０発現細胞でのスキャッチャードプロット分析で調べられる。

【0048】

本明細書中で使用されている用語「核酸分子」は、ＤＮＡ分子及びＲＮＡ分子を含むと意図される。核酸分子は一本鎖または二本鎖であり得る。１つの実施形態では、核酸分子は二本鎖ＤＮＡである。

【0049】

「定常ドメイン」は、抗体の抗原への結合に直接に関与しないが、エフェクター機能（ＡＤＣＣ、補体結合及びＣＤＣ）に関与している。

【0050】

用語「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の抗原への結合に関与する抗体重鎖または軽鎖のドメインを指す。自然抗体の重鎖及び軽鎖の可変ドメイン（それぞれ、ＶＨ及びＶＬ）は通常類似の構造を有しており、各ドメインは４つの保存フレームワーク領域（ＦＲ）及び３つの超可変領域（ＨＶＲ）を含む（例えば、Ｋｉｎｄｔら，Ｋｕｂｙ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，６^ｔｈ ｅｄ．，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏ．，ｐ．９１（２００７）を参照されたい）。

【0051】

本明細書中で使用されている用語「超可変領域」または「ＨＶＲ」は、配列が超可変であり（「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」）、及び／または構造的に規定されているループ（「超可変ループ」）を形成し、及び／または抗原含有残基（「抗原コンタクト」）を含有している抗体可変ドメインの領域の各々を指す。通常、抗体は６つのＨＶＲを含み、すなわちＶＨ中に３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）のＨＶＲ、ＶＬ中に３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）のＨＶＲを含む。本発明におけるＨＶＲの例には、
（ａ）アミノ酸残基２６−３２（Ｌ１）、５０−５２（Ｌ２）、９１−９６（Ｌ３）、２６−３２（Ｈ１）、５３−５５（Ｈ２）及び９６−１０１（Ｈ３）に存在する超可変ループ（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１−９１７（１９８７））；
（ｂ）アミノ酸残基２４−３４（Ｌ１）、５０−５６（Ｌ２）、８９−９７（Ｌ３）、３１−３５ｂ（Ｈ１）、５０−６５（Ｈ２）及び９５−１０２（Ｈ３）に存在するＣＤＲ（Ｋａｂａｔら，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（１９９１））；
（ｃ）アミノ酸残基２７ｃ−３６（Ｌ１）、４６−５５（Ｌ２）、８９−９６（Ｌ３）、３０−３５ｂ（Ｈ１）、４７−５８（Ｈ２）及び９３−１０１（Ｈ３）に存在する抗原コンタクト（ＭａｃＣａｌｌｕｍら，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２６２：７３２−７４５（１９９６））；及び
（ｄ）ＨＶＲアミノ酸残基４６−５６（Ｌ２）、４７−５６（Ｌ２）、４８−５６（Ｌ２）、４９−５６（Ｌ２）、２６−３５（Ｈ１）、２６−３５ｂ（Ｈ１）、４９−６５（Ｈ２）、９３−１０２（Ｈ３）及び９４−１０２（Ｈ３）を含めた（ａ）、（ｂ）及び／または（ｃ）の組合せ；
が含まれる。

【0052】

当業界で認識されているＣＤ２０の同義語には、Ｂリンパ球抗原ＣＤ２０、Ｂリンパ球表面抗原Ｂ１、Ｌｅｕ−１６、Ｂｐ３５、ＢＭ５及びＬＦ５が含まれる。

【0053】

本発明に従う用語「抗ＣＤ２０抗体」はＣＤ２０抗原に特異的に結合する抗体である。抗ＣＤ２０抗体のＣＤ２０抗原に対する結合特性及び生物学的活性に応じて、２つのタイプの抗ＣＤ２０抗体（タイプＩ及びタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体）がＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１０３（２００４）２７３８−２７４３；及びＣｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．ら，Ｂｌｏｏｄ，１０１（２００３）１０４５−１０５２に従って区別され得る（表２を参照されたい）。

【0054】

【表2】

【0055】

タイプＩ及びタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の１つの特性はその結合モードである。タイプＩ及びタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は、ラージ細胞（ＡＴＣＣ−Ｎｏ．ＣＣＬ−８６）上のＣＤ２０に対する結合能をリツキシマブと比較した抗ＣＤ２０抗体の比により分類され得る。

【0056】

タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は、０．３〜０．６、１つの実施形態では０．３５〜０．５５、別の実施形態では０．４〜０．５のラージ細胞（ＡＴＣＣ−Ｎｏ．ＣＣＬ−８６）上のＣＤ２０に対する結合能をリツキシマブと比較した抗ＣＤ２０抗体の比を有している。タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の例には、例えばトシツモマブ（Ｂ１ ＩｇＧ２ａ）、ＧＡ１０１抗体ＩｇＧ１（ＷＯ ２００５／０４４８５９に開示されているキメラヒト化ＩｇＧ１抗体）、１１Ｂ８ ＩｇＧ１（ＷＯ ２００４／０３５６０７に開示されている）及びＡＴ８０ ＩｇＧ１が含まれる。１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体（ＷＯ ２００５／０４４８５９に開示されている）はＧＡ１０１抗体と同一のエピトープに結合しているモノクローナル抗体である。

【0057】

「ラージ細胞（ＡＴＣＣ−Ｎｏ．ＣＣＬ−８６）上のＣＤ２０に対する結合能をリツキシマブと比較した抗ＣＤ２０抗体の比」は、実施例２に記載されているようにラージ細胞（ＡＴＣＣ−Ｎｏ．ＣＣＬ−８６）を用いるＦＡＣＳＡｒｒａｙ（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）においてＣｙ５とコンジュゲートした抗ＣＤ２０抗体及びＣｙ５とコンジュゲートしたリツキシマブを用いて直接免疫蛍光測定（平均蛍光強度（ＭＦＩ）を測定する）により調べ、以下のように計算する：

【0058】

【数1】

【0059】

ＭＦＩは平均蛍光強度を意味する。本明細書中で使用されている「Ｃｙ５標識比」は分子抗体あたりのＣｙ５標識分子の数を意味する。

【0060】

典型的には、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は、０．３〜０．６、１つの実施形態では０．３５〜０．５５、更に別の実施形態では０．４〜０．５のラージ細胞（ＡＴＣＣ−Ｎｏ．ＣＣＬ−８６）上のＣＤ２０に対する結合能をリツキシマブと比較した第２抗ＣＤ２０抗体の比を有している。

【0061】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体、例えばＧＡ１０１抗体は高い抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を有している。

【0062】

「高い抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を有する抗体」とは、当業者に公知の適当な方法により測定して高いＡＤＣＣを有している抗体を意味し、抗体の用語は本明細書中に規定されている。１つの認められているインビトロＡＤＣＣアッセイは次の通りである：
１）アッセイは、抗体の抗原結合領域により認識される標的抗原を発現することが公知の標的細胞を使用する；
２）アッセイは、ランダムに選択した健康なドナーの血液から単離したヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）をエフェクター細胞として使用する；
３）アッセイは以下のプロトコルに従って実施する：
ｉ）ＰＢＭＣを標準の密度遠心手順を用いて単離し、ＲＰＭＩ細胞培地中に５×１０^６細胞／ｍｌで懸濁させる；
ｉｉ）標的細胞を標準組織培養方法により増殖させ、９０％を超える生存度で指数的増殖期から収集し、ＲＰＭＩ細胞培地で洗浄し、１００マイクロキューリーの^５１Ｃｒで標識し、細胞培地で２回洗浄し、細胞培地に１０^５細胞／ｍｌの密度で再懸濁させる；
ｉｉｉ）１００μｌの上記最終標的細胞懸濁液を９６ウェルのマイクロタイタープレートの各ウェルに移す；
ｉｖ）抗体を細胞培地で４０００ｎｇ／ｍｌから０．０４ｎｇ／ｍｌに連続希釈し、５０μｌの生じた抗体溶液を９６ウェルのマイクロタイタープレート中の標的細胞に添加し、上記に記載した全濃度範囲をカバーする各種抗体濃度で３回試験する；
ｖ）最大放出（ＭＲ）対照のために、標識標的細胞を収容しているプレート中の３つの追加ウェルに抗体溶液（上のポイントｉｖ）の代わりに５０μｌの非イオン性洗剤（Ｎｏｎｉｄｅｔ，セントルイスに所在のＳｉｇｍａ）の２％（ＶＮ）水溶液を入れる；
ｖｉ）自然放出（ＳＲ）対照のために、標識標的細胞を収容しているプレート中の３つの追加ウェルに抗体溶液（上のポイントｉｖ）の代わりに５０μｌのＲＰＭＩ細胞培地を入れる；
ｖｉｉ）次いで、９６ウェルのマイクロタイタープレートを５０×ｇで１分間遠心し、４℃で１時間インキュベートする；
ｖｉｉｉ）２５：１のエフェクター：標的細胞比を生ずるように各ウェルに５０μｌのＰＢＭＣ懸濁液（上のポイントｉ）を添加し、プレートをインキュベータ中に５％ ＣＯ_２雰囲気下３７℃で４時間置く；
ｉｘ）各ウェルからの無細胞上清を収集し、実験的に放出させた放射能（ＥＲ）をガンマカウンターを用いて定量化する；
ｘ）抗体濃度毎に特異的溶解のパーセンテージを式（ＥＲ−ＭＲ）／（ＭＲ−ＳＲ）×１００に従って計算する。ここで、ＥＲはその抗体濃度について定量した平均放射能（上のポイントｉｘを参照されたい）であり、ＭＲはＭＲ対照（上のポイントＶを参照されたい）について定量した平均放射能（上のポイントｉｘを参照されたい）であり、ＳＲはＳＲ対照（上のポイントｖｉを参照されたい）について定量した平均放射能（上のポイントｉｘを参照されたい）である。
４）「高いＡＤＣＣ」は、上で試験した抗体濃度範囲内で観察された特異的溶解の最大パーセンテージの増加、及び／または上で試験した抗体濃度範囲内で観察された特異的溶解の最大パーセンテージの半分を達成するのに必要な抗体の濃度の減少として定義される。１つの実施形態では、ＡＤＣＣの増加は、コンパレーター抗体（高いＡＤＣＣを欠く）をＧｎＴＩＩＩを過剰発現するように工学処理した及び／またはフコシルトランスフェラーゼ８（ＦＵＴ８）遺伝子からの低い発現を有するように工学処理した（例えば、ＦＵＴ８ノックアウトについて工学処理したものを含む）宿主細胞より産生されなかったことを除いて、当業者に公知の同一の標準産生、精製、処方及び保存方法を用いて上記アッセイで調べ、同一抗体により媒介され、同一タイプの宿主細胞により産生されたＡＤＣＣに対している。

【0063】

「高いＡＤＣＣ」は、例えば前記抗体を突然変異させる及び／または糖鎖工学処理することにより得られ得る。１つの実施形態では、抗体を、例えばＷＯ ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ−Ｍａｉｒｅｔら）；ＵＳ特許Ｎｏ．６，６０２，６８４（Ｕｍａｎａら）；ＵＳ ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａら）；Ｕｍａｎａ，Ｐ．ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１７（１９９９）１７６−１８０においてＧｌｃＮＡｃにより二分される抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖を有するように糖鎖工学処理する。別の実施形態では、抗体をタンパク質フコシル化を欠く宿主細胞（例えば、Ｌｅｃ１３ ＣＨＯ細胞またはα−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子（ＦＵＴ８）欠失またはＦＵＴ遺伝子発現ノックダウンを有する細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉら，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．，８７：６１４（２００４）；Ｋａｎｄａ，Ｙ．ら，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，９４（４）：６８０−６８８（２００６）；及びＷＯ ２００３／０８５１０７を参照されたい）において抗体を発現させることによりＦｃ領域に結合させた炭水化物上にフルコースを欠くように糖鎖工学処理する。更に別の実施形態では、抗体配列をそのＦｃ領域においてＡＤＣＣを強化するように工学処理されている（例えば、１つの実施形態では、前記工学処理した抗体バリアントはＦｃ領域の２９８、３３３及び／または３３４（残基のＥＵナンパリング）に１つ以上のアミノ酸置換を有しているＦｃ領域を含む）。

【0064】

用語「補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）」は、補体の存在下での本発明に従う抗体によるヒト腫瘍標的細胞の溶解を指す。ＣＤＣは、ＣＤ２０発現細胞の調製物を補体の存在下で本発明に従う抗ＣＤ２０抗体を用いて処理することにより調べられ得る。抗体が１００ｎＭの濃度で４時間後腫瘍細胞の２０％以上の溶解（細胞死）を誘発するならば、ＣＤＣが見られる。１つの実施形態では、アッセイは^５１ＣｒまたはＥｕ標識腫瘍細胞を用いて実施され。放出された^５１ＣｒまたはＥｕを測定する。対照は補体を含むが、抗体を含まない腫瘍標的細胞のインキュベーションを含む。

【0065】

本明細書中で使用されている用語「ＧＡ１０１抗体」は、ヒトＣＤ２０に結合する以下の抗体：（１）配列番号１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ１、配列番号２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ２、配列番号３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｈ３、配列番号４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ１、配列番号５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ２及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ−Ｌ３を含む抗体；（２）配列番号７のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む抗体；（３）配列番号９のアミノ酸配列及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む抗体；（４）オビヌツズマブとして公知の抗体；または（５）配列番号９のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、配列番号１０のアミノ酸配列と少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む抗体；のいずれか１つを指す。１つの実施形態では、ＧＡ１０１抗体はＩｇＧ１イソタイプ抗体である。

【0066】

オリゴ糖成分は、治療用糖タンパク質の効果に関連する特性、例えば物理的安定性、プロテアーゼ攻撃に対する耐性、免疫系との相互作用、薬物動態及び具体的生理学的活性に大きく影響を及ぼし得る。前記特性はオリゴ糖の存在または不在だけでなく、オリゴ糖の特殊構造に依存し得る。オリゴ糖構造と糖タンパク質間で幾つかの普遍化がなされ得る。例えば、あるオリゴ糖構造は特定の炭水化物結合タンパク質との相互作用による血流からの糖タンパク質の急速クリアランスを媒介するが、他のオリゴ糖構造は抗体により結合し、望ましくない免疫反応をトリガーし得る（Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｎ．，ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１４（１９９６）９７５−９８１）。

【0067】

哺乳動物細胞は、ヒト適用のために最も適合性の形態でタンパク質をグリコシル化する能力のために治療用糖タンパク質の製造のための好ましい宿主である（Ｃｕｍｍｉｎｇ，Ｄ．Ａ．，ら，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，１（１９９１）１１５−１３０；Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｎ．，ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１４（１９９６）９７５−９８１）。細菌は非常にまれにしかタンパク質をグリコシル化せず、酵母、糸状菌、昆虫及び植物細胞のような類似の他のタイプの宿主は血流からの迅速クリアランス、望ましくない免疫相互作用、幾つかの特定の場合の低い生物学的活性に関連するグリコシル化パターンを生ずる。哺乳動物細胞の中で、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞が最近２０年の間最も一般的に使用されている。適当なグリコシル化パターンを与えることに加えて、これらの細胞により、遺伝的に安定で高い産生性のクローン細胞株が常に作成される。これらは無血清培地を用いて簡単なバイオリタクターで高密度まで培養され得、安全且つ再現性あるバイオプロセスを開発することができる。他の通常使用される動物細胞には、ベビーハムスター腎（ＢＨＫ）細胞、ＮＳＯ−及びＳＰ２／０−マウスミエローマ細胞が含まれる。より最近では、トランスジェニック動物からの産生も試験されている（Ｊｅｎｋｉｎｓ，Ｎ．ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１４（１９９６）９７５−９８１）。

【0068】

すべての抗体が重鎖定常領域中の保存位置に炭水化物構造を含んでおり、各イソタイプはタンパク質集合、分泌または機能活性に不定に影響を与えるＮ結合炭水化物構造の別個のアレーを有している（Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ａｎｄ Ｍｏｎｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１５（１９９７）２６−３２）。結合しているＮ結合炭水化物の構造はプロセッシングの程度に応じて大きく異なり、高マンノース、多分岐及び二分岐複合オリゴ糖が含まれ得る（Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ．，１５（１９９７）２６−３２）。典型的には、モノクローナル抗体が複数の糖型として存在するように特定のグリコシル化部位で結合しているコアオリゴ糖構造の不均一プロセッシングがある。同様に、細胞株間で抗体グリコシル化に大きな違いがあり、異なる培養条件下で増殖させた所与の細胞株で小さな差も見られることが判明している（Ｌｉｆｅｌｙ，Ｍ．Ｒ．ら，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，５（１９９５）８１３−８２２）。

【0069】

簡単な産生方法を維持し、重要な望ましくない副作用を潜在的に避けながら、効力を大きく増加させるための１つの方法は、Ｕｍａｎａ，Ｐ．，ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１７（１９９９）１７６−１８０及びＵＳ ６，６０２，６８４に記載されているようにオリゴ糖成分を工学処理することによりモノクローナル抗体の天然細胞媒介エフェクター機能を強化することである。癌免疫療法において最も一般的に使用されている抗体であるＩｇＧ１タイプ抗体は各ＣＨ２ドメイン中のＡｓｎ２９７に保存Ｎ結合グリコシル化部位を有している糖タンパク質である。Ａｓｎ２９７に結合している２つの複合型二分岐オリゴ糖はＣＨ２ドメイン間で埋められて、ポリペフーチド骨格を有する広いコンタクトを形成し、その存在は抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）のようなエフェクター機能を媒介するために抗体にとって必須である（Ｌｉｆｅｌｙ，Ｍ．Ｒ．ら，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ，５（１９９５）８１３−８２２；Ｊｅｆｆｅｒｉｓ，Ｒ．ら，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．，１６３（１９９８）５９−７６；Ｗｒｉｇｈｔ，Ａ．，ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１５（１９９７）２６−３２）。

【0070】

チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞において二分オリゴ糖の形成を触媒するグリコシルトランスフェラーゼであるβ（１，４）−Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＩＩＩ（”ＧｎＴＩＩＩ）を過剰発現させると、工学処理したＣＨＯ細胞により産生される抗神経芽腫キメラモノクローナル抗体（ｃｈＣＥ７）のインビトロＡＤＣＣ活性が大きく増加することは既に判明していた（全文を参照により本明細書に組み入れるＵｍａｎａ，Ｐ．ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１７（１９９９）１７６−１８０；及びＷＯ ９９／１５４３４２を参照されたい）。抗体ｃｈＣＥ７は、高い腫瘍親和性及び特異性を有するが、ＧｎＴＩＩＩ酵素を欠く標準の産業細胞株において産生したとき臨床的に有用である可能性が少ないコンジュゲートされていないモノクローナル抗体の大きなクラスに属している（Ｕｍａｎａ，Ｐ．ら，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，１７（１９９９）１７６−１８０）。この研究は、まずＡＤＣＣ活性の大きな増加がＧｎＴＩＩＩを発現するように抗体産生細胞を工学処理することにより得られ得、二分非フコシル化オリゴ糖を含めた定常領域（Ｆｃ）に関連する二分オリゴ糖の割合を天然に存在する抗体で見られるレベル以上に増加させる。

【0071】

１つの実施形態では、本発明のＧＡ１０１抗体を含む組成物は高いＡＤＣＣ活性を有するように工学処理したＧＡ１０１抗体を含む。

【0072】

本明細書中で使用されている用語「Ｂｃｌ−２」は、タンパク質のＢｃｌ−２ファミリーのメンバーであるＢｃｌ−２タンパク質（Ｓｗｉｓｓ Ｐｒｏｔ ＩＤ Ｎｏ．Ｐ１０４１５）を指す（Ｃｏｒｙ，Ｓ．，ａｎｄ Ａｄａｍｓ，Ｊ．Ｍ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｃａｎｃｅｒ，２（２００２）６４７−６５６；Ａｄａｍｓ，Ｇｅｎｅｓ ｕｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１７（２００３）２４８１−２４９５；Ｄａｎｉａｌ，Ｎ．Ｎ．，ａｎｄ Ｋｏｒｓｍｅｙｅｒ，Ｓ．Ｊ．，Ｃｅｌｌ，１１６（２００４）２０５−２１９；Ｐｅｔｒｏｓ、Ａ．Ｍ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ，１６４４（２００４）８３−９４）。

【0073】

本明細書中で使用されている用語「選択的Ｂｃｌ−２インヒビター」は、参照により本明細書に組み入れる国際公開ＷＯ２０１０／１３８５８８及び米国特許公開ＮＯ．ＵＳ２０１０／０３０５１２２に記載されている式ＩのＢｃｌ−２インヒビターである２−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）−４−（４−（（２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチルシクロヘキサ−１−エニル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（３−ニトロ−４−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）メチルアミノ）フェニルスルホニル）ベンズアミド（ＡＢＴ−１９９またはＧＤＣ−０１９９としても公知）を指す。

【0074】

【化1】

【0075】

用語「ＣＤ２０抗原の発現」は、細胞、例えばＴまたはＢ細胞におけるＣＤ２０抗原の有意なレベルの発現を示すと意図される。１つの実施形態では、本発明の方法に従って治療しようとする患者はＢ細胞腫瘍または癌上のＣＤ２０を有意なレベルで発現する。「ＣＤ２０発現癌」を有している患者は当業界で公知の標準アッセイにより調べられ得る。例えば、ＣＤ２０抗原発現は免疫組織化学的（ＩＨＣ）検出、ＦＡＣＳを用いて、または対応するｍＲＮＡのＰＣＲベース検出により調べられ得る。

【0076】

本明細書中で使用されている用語「ＣＤ２０発現癌」は、癌細胞がＣＤ２０抗原の発現を示す全ての癌を指す。ＣＤ２０発現癌は、例えばリンパ腫、リンパ球性白血病、肺癌、非小細胞性肺（ＮＳＣＬ）癌、細気管支肺胞性細胞肺癌、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚または眼内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、胃癌、結腸癌、乳癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸部癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟組織の肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、膀胱癌、腎臓または尿管の癌、腎細胞癌、腎盂癌、中皮腫、肝細胞癌、胆道癌、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍、脊髄軸の腫瘍、脳幹グリオーマ、多形性膠芽細胞腫、星状膠細胞腫、神経鞘腫、上衣腫、髄芽腫、髄膜腫、扁平上皮癌、下垂体腺腫であり得、上記癌のいずれかの難治性のもの、或いは１つ以上の上記癌の組合せが含まれる。

【0077】

１つの実施形態では、本明細書中で使用されているＣＤ２０発現癌は、リンパ腫（例えば、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ））及びリンパ球性白血病を指す。リンパ腫及びリンパ球性白血病には、他のタイプのリンパ腫及びリンパ球性白血病の中で、例えばａ）濾胞性リンパ腫、ｂ）小型非切れ込み核細胞リンパ腫／バーキットリンパ腫（地方病性バーキットリンパ腫、散発性バーキットリンパ腫及び非バーキットリンパ腫を含む）、ｃ）辺縁帯リンパ腫（節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（粘膜関連リンパ組織リンパ腫，ＭＡＬＴ）、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫及び脾臓辺縁帯リンパ腫を含む）、ｄ）マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ｅ）大細胞リンパ腫（Ｂ細胞びまん性大細胞リンパ腫（ＤＬＣＬ）、びまん性混合細胞リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、血管中心性リンパ腫−肺Ｂ細胞リンパ腫を含む）、ｆ）ヘアリーセル白血病、ｇ）リンパ球性リンパ腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症、ｈ）急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）／小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、ｉ）プラズマ細胞腫瘍、プラズマ細胞ミエローマ、多発性骨髄腫、プラズマ細胞腫、ｊ）ホジキン病、ｋ）急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）が含まれる。

【0078】

１つの実施形態では、ＣＤ２０発現癌はＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である。別の実施形態では、ＣＤ２０発現癌はマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞びまん性大細胞リンパ腫（ＤＬＣＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、バーキットリンパ腫、ヘアリーセル白血病、濾胞性リンパ腫、多発性骨髄腫、辺縁帯リンパ腫、移植後リンパ球増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、ＨＩＶ関連リンパ腫、ワルデンストレームマクログロブリン血症または原発性ＣＮＳリンパ腫である。

【0079】

本明細書中で使用されている「再発性または難治性」ＣＬＬには、少なくとも１つの事前の化学療法含有治療レジメンを受けたＣＬＬ患者が含まれる。再発性患者は、通常事前の化学療法含有治療レジメンに応答した後発現した進行性疾患を有している。難治性患者は通常６ヶ月以内に最後の事前の化学療法含有レジメンに対して応答しなかったか、または再発した。

【0080】

本明細書中で使用されている「未治療の」ＣＬＬには、ＣＬＬと診断されたが、通常事前の化学療法または免疫療法を受けていない患者が含まれる。救急、局所限局放射線療法（例えば、圧迫サインまたは症状を軽減するために）、またはコルチコステロイドの病歴を有する患者はまだ治療を受けていないとみなされ得る。

【0081】

本明細書中で使用されている用語「治療する」は、別の指示がない限り、患者において腫瘍の増殖、腫瘍転移、または他の発癌性または腫瘍性細胞の進行を部分的または完全に逆転、緩和、抑制すること、或いはそれらを部分的または完全に防止することを意味する。本明細書中で使用されている用語「治療」は、別の指示がない限り、治療行為を指す。

【0082】

例えば癌に対して適用される場合、用語「治療方法」またはその均等用語は、患者の癌細胞の数を減少させるか除去するか、或いは癌の症状を緩和することを意図している作用の手順または過程を指す。癌または別の増殖性疾患の「治療方法」は、必ずしも癌細胞または他の疾患が実際に除去されること、細胞の数または疾患が実際に減ること、または癌または他の疾患が実際緩和されることを意味しない。多くの場合、癌の治療方法は成功の可能性が低くても実施されるが、患者の病歴及び推定平均余命を考えれば作用の全体的に有利な過程を誘導すると見なされている。用語「共投与」または「共投与する」は、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを２つの別々の製剤として投与することを指す。共投与は同時でも、いずれかの順序での順次でもよい。１つの更なる実施形態では、両方（または、全ての）活性物質が同時にその生物学的活性を発揮している期間がある。タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを同時にまたは順次静脈内（ｉ．ｖ．）により共投与する（例えば、連続注入中（抗体に対して、最終的にはＢｃｌ−２インヒビターに対して；またはＢｃｌ−２インヒビターは経口投与する）。両治療薬を順次共投与する場合、これらの治療薬を「特定期間」あけて２つの別々の投与で投与する。用語「特定期間」は１時間〜１５日間を意味する。例えば、治療薬の１つを他の治療薬の投与から約１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１日、または２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１時間以内に投与し得、１つの実施形態では特定期間は１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１日間、または２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２または１時間である。

【0083】

用語「同時に」は、同時に、または短期間内、通常１時間未満内を意味する。

【0084】

本明細書中で使用されている投与期間は、各治療薬を少なくとも１回投与する期間を意味する。投与サイクルは通常約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０日間であり、１つの実施形態では６、７、８、９、１０、１１、１２、１３または１４日間、例えば７または１４日間である。

【0085】

ある実施形態では、投与期間は投与サイクルである。

【0086】

抗体を患者に対して研究者、獣医、医師または他の臨床医が求めている組織、系、動物またはヒトの生物学的または医学的応答を引き出す各化合物または組合せの量である「治療有効量」（または、単に「有効量」）で投与することは自明である。有効量の治療薬の投与は１回投与または分割用量投与であり得る。「分割用量投与」は、有効量を複数の用量に、好ましくは２つに分割し、好ましくは１または２日以内に投与することを意味する。例えば、１００ｍｇの選択的ＢＣＬ−２インヒビターが有効であると見なされたならば、１００ｍｇを１回投与しても、５０ｍｇを２回投与してもよい。副作用を減らすために分割用量を投与期間の始めに投与することが時々望ましい。有効用量を分割用量で投与する場合でも、有効量の１回投与も考えられる。例えば、１００ｍｇが選択的Ｂｃｌ−２インヒビターの有効量であり、ある期間にわたり、例えば２日間にわたって５０ｍｇ用量を２回投与する場合、有効量を期間中に１回しか投与しない。

【0087】

タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビターの共投与の量及び共投与のタイミングは、治療対象の患者のタイプ（種、性別、年齢、体重等）及び状態、及び治療対象の疾患または状態の重症度に依存する。適当には、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビターを患者に対して１回で、または一連の治療にわたって共投与する。疾患のタイプ及び重症度に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ（例えば、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ）のタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び０．１ｍｇ／ｋｇ〜２００ｍｇ／ｋｇ（例えば、１０〜１５０ｍｇ／ｋｇ）の選択的Ｂｃｌ−２インヒビターが患者に対して両薬物を共投与するための初期候補用量である。投与が静脈内であるならば、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体またはＢｃｌ−２インヒビターの初期注入時間はその後の注入時間より長くてもよく、例えば初期注入では約９０分、その後の注入では約３０分である（初期注入が十分に耐えられるならば）。

【0088】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の好ましい用量は約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇの範囲であり、または５００ｍｇ〜３０００ｍｇ均一用量である。よって、約０．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇまたは３０ｍｇ／ｋｇの１つ以上の用量、或いは５００ｍｇ〜３０００ｍｇ均一用量（または、その組合せ）を患者に対して共投与し得る。Ｂｃｌ−２インヒビターの好ましい用量は２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。患者のタイプ（種、性別、年齢、体重等）及び状態、並びに抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビターのタイプに応じて、抗ＣＤ２０抗体の用量及び投与スケジュールはＢｃｌ−２インヒビターの用量とは異なり得る。例えば、抗ＣＤ２０抗体を例えば１〜３週間毎に１回、Ｂｃｌ−２インヒビターを毎日または２〜７日毎に投与し得る。最初に高い負荷量、次いで１つ以上のより低い用量を投与してもよい。

【0089】

本発明は、一部、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを含む組成物に関する。

【0090】

好ましい実施形態では、本発明の組成物はＣＤ２０発現癌を患っている患者における転移または更なる播種を予防または抑制するために有用である。この組成物は前記患者の生存期間の延長、前記患者の無憎悪生存期間の延長、応答期間の延長のために有用であり、その結果生存期間、無憎悪生存期間、応答率または応答期間により調べて治療患者の統計的に有意であり且つ臨床的に有意義な改善が生ずる。好ましい実施形態では、組成物は患者群の応答を高めるために有用である。

【0091】

本発明では、ＣＤ２０発現癌のタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビター併用療法において前記物質（例えば、サイトカイン）の効果を高める追加の細胞傷害剤、化学療法剤または抗癌剤または化合物を使用し得る。好適には、前記分子は意図する目的のために有効である量で組み合わせて存在させる。好ましくは、前記物質の効果を高める追加の細胞傷害剤、化学療法剤または抗癌剤または化合物なしで、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビター併用療法を使用する。

【0092】

前記物質には、例えばアルキル化作用を有するアルキル化剤、例えばシクロホスファミド（ＣＴＸ；例えばシトキサン（Ｒ））、クロラムブシル（ＣＨＬ；例えばロイケラン（Ｒ））、シスプラチン（ＣｉｓＰ；例えばプラチノール（Ｒ））、ブスルファン（例えば、マイレラン（Ｒ））、メルファラン、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ストレプトゾトシン、トリエチレンメラミン（ＴＥＭ）、マイトマイシンＣ等；代謝拮抗薬、例えばメトトレキサート（ＭＴＸ）、エトポシド（ＶＰ１６；例えばベペシド（Ｒ））、６−メルカプトプリン（６ＭＰ）、６−チオグアニン（６ＴＧ）、シタラビン（Ａｒａ−Ｃ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、カペシタビン（例えばゼローダ（Ｒ））、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）等；抗生物質、例えばアクチノマイシンＤ、ドキソルビシン（ＤＸＲ；例えばアドリアマイシン（Ｒ））、ダウノルビシン（ダウノマイシン）、ブレオマイシン、ミトラマイシン等；アルカロイド、例えばビンクリスチン（ＶＣＲ）、ビンブラスチン等のようなビンアルカロイド；及び他の抗腫瘍剤、例えばパクリタキセル（例えばタキソール（Ｒ））及びパクリタキセル誘導体、細胞増殖抑制剤、グルココルチコイド（例えば、デキサメタゾン（ＤＥＸ；例えばデカドロン（Ｒ）））及びコルチコステロイド（例えば、プレドニゾン）、ヌクレオシド酵素阻害剤（例えば、ヒドロキシ尿素）、アミノ酸枯渇酵素（例えば、アスパラギナーゼ）、ロイコボリン及び他の葉酸誘導体、並びに類似の各種抗腫瘍剤が含まれる。追加物質として、アミホスチン（例えばエチヨル（Ｒ））、ダクチノマイシン、メクロレタミン（ニトロジェンマスタード）、ストレプトゾシン、シクロホスファミド、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、ドキソルビシンリポ（例えばドキシル（Ｒ））、ゲムシタビン（例えばジェムザール（Ｒ））、ダウノルビシンリポ（例えばダウノキソーム（Ｒ））、プロカルバジン、マイトマイシン、ドセタキセル（例えばタキソテレ（Ｒ））、アルデスロイキン、カルボプラチン、オキサリプラチン、クラドリビン、カンプトテシン、ＣＰＴ １１（イリノテカン）、１０−ヒドロキシ７−エチル−カンプトテシン（ＳＮ３８）、フロクスウリジン、フルダラビン、イホスファミド、イダルビシン、メスナ、インターフェロンβ、インターフェロンα、ミトキサントロン、トポテカン、ロイプロリド、メゲストロール、メルファラン、メルカプトプリン、プリカマイシン、ミトタン、ペグアスパラガーゼ、ペントスタチン、ピポブロマン、プリカマイシン、タモキシフェン、テニポシド、テストラクトン、チオグアニン、チオテパ、ウラシルマスタード、ビノレルビン、クロラムブシルも使用し得る。好ましくは、前記追加物質なしでタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビター併用療法を使用する。

【0093】

化学療法レジメンにおける上記に記載した細胞傷害剤及び抗癌剤、並びにタンパク質キナーゼ阻害剤のような抗増殖性標的特異的抗癌剤の使用は通常癌治療業界で十分に特徴づけられており、本発明でのその使用は若干の調節はあるが、耐性及び有効性をモニターするため及び投与ルート及び用量をコントロールするために同様に考慮される。例えば、細胞傷害剤の実際の用量は、組織培養方法を用いて調べられる患者の培養細胞応答に依存して異なり得る。通常、用量は追加の他の物質の非存在下で使用される量に比して低減される。

【0094】

有効な細胞傷害剤の典型的な用量は製造業者が推奨している範囲であり得、動物モデルでの１つ以上のインビドロ応答が示されている場合には最高約１桁の濃度または量まで低減され得る。よって、実際の用量は医師の判断、患者の状態、及び初代培養した悪性細胞または組織培養した組織サンプルのインビトロ応答性または適切な動物モデルで観察される応答に基づく治療方法の有効性に依存している。

【0095】

本発明では、ＣＤ２０発現癌のタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビター併用療法に加えて、有効量の電離放射線を実施し得及び／または放射性医薬品を使用し得る。放射線源は治療対象の患者の外部または内部のいずれでもよい。放射線源が患者の外部の場合には、治療は体外放射線療法（ＥＢＲＴ）として公知である。放射線源が患者の内部の場合には、治療は小線源治療（ＢＴ）と呼ばれている。本発明で使用するための放射性原子は、非限定的にラジウム、セシウム１３７、イリジウム１９２、アメリシウム２４１、金１９８、コバルト５７、銅６７、テクネチウム９９、ヨウ素１２３、ヨウ素１３１及びインジウム１１１を含む群から選択され得る。抗体を放射性同位元素で標識することも可能である。電離放射線なしでタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビター併用療法を使用することが好ましい。

【0096】

放射線療法は、切除不能または手術不能な腫瘍及び／または腫瘍転移をコントロールするための標準治療である。放射線療法を化学療法と併用すると、向上した結果が見られた。放射線療法は、高量の放射線を標的エリアにデリバリーすると腫瘍及び正常組織の両方中の生殖細胞が死亡するという原理に基づいている。放射線投与レジメンは通常放射線吸収用量（Ｇｙ）、時間及び分割の点で規定されており、腫瘍医により注意深く規定されなければならない。患者が受ける放射線の量は各種の考慮すべき要件に依存するが、２つの最も重要なことは身体の他の重要な構造または臓器に対する腫瘍の位置、及び腫瘍が広がっている程度である。放射線療法を受けている患者に対する典型的な治療コースは１〜６週間にわたる治療スケジュールであり、患者に対して１０〜８０Ｇｙの範囲の全量を約１．８〜２．０Ｇｙの１回の１日分量で１週間に５日投与する。本発明の好ましい実施形態では、ヒト患者の腫瘍を本発明の併用療法と放射線で治療するときに相乗的である。換言すると、本発明の組合せを含む物質を用いる腫瘍増殖の抑制が放射線、場合により追加の化学療法剤または抗癌剤と組み合わせたときに増強される。アジュバント放射線療法のパラメーターは、例えばＷＯ ９９／６００２３に含まれている。

【0097】

タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は患者に対して公知方法に従って、ボーラスとして静脈内投与により、長期間にわたる連続注入により、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内または髄腔内ルートにより投与される。抗体の静脈内または皮下投与が好ましい。

【0098】

Ｂｃｌ−２インヒビターは患者に対して公知方法に従って、例えばボーラスとして静脈内投与により、長期間にわたる連続注入により、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内または経口ルートにより投与される。Ｂｃｌ−２インヒビターの静脈内、皮下または経口投与が好ましい。

【0099】

本発明は、ＣＤ２０発現癌を患っている患者の併用療法のためのタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを含むキットにも関する。

【0100】

本発明の実施形態では、キットは更に医薬的に許容され得る担体を含む。キットは更に、好ましくは別の追加容器中に保存されている滅菌希釈剤を含み得る。キットは更に、
ＣＤ２０発現癌疾患、好ましくはＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）に対する方法としての併用療法の使用に関する添付文書を含み得る。

【0101】

用語「添付文書」は、医薬品の使用に関する適応症、使用法、用量、投与、禁忌及び／または警告についての情報を含み得る医薬品の市販の箱の中に通常入っている指示書を指す。

【0102】

好ましい実施形態では、製品容器は更に医薬的に許容され得る担体を含み得る。製品は更に、好ましくは別の追加容器中に保存されている滅菌希釈剤を含み得る。

【0103】

本明細書中で使用されている「医薬的に許容され得る担体」は、医薬投与に適合している全ての材料、例えば溶媒、分散媒体、コーティング、抗細菌及び抗真菌剤、等張・吸収遅延剤、並びに医薬投与に適合している他の材料及び化合物を含むと意図される。慣用の媒体または物質が活性化合物と適合性でない限りを除いて、本発明の組成物中でのその使用も考えられる。補助の活性化合物を組成物中に配合してもよい。

【0104】

医薬組成物及び方法
医薬組成物は、本発明に従うタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体または抗Ｂｃｌ−２活性物質を医薬的に許容され得る無機または有機担体を用いて加工することにより得られ得る。錠剤、コーティング錠、糖衣錠及び硬ゼラチンカプセル剤用の担体として、例えばラクートース、トウモロコシ澱粉またはその誘導体、タルク、ステアリン酸またはその塩等が使用され得る。軟ゼラチンカプセル剤用の適当な担体は、例えば植物油、ワックス、脂肪、半固体及び液体ポリオール等である。しかしながら、軟ゼラチンカプセル剤の場合活性物質の種類に応じて担体は通常必要でない。溶液剤及びシロップ剤を製造するための適当な担体は、例えば水、ポリオール、グリセロール、植物油等である。座剤用の適当な担体は、例えば天然または硬化油、ワックス、脂肪、半液体または液体ポリオール等である。

【0105】

医薬組成物は更に保存剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、着色料、着香料、浸透圧を変化させるための塩、緩衝剤、マスキング剤または抗酸化剤を含有し得る。医薬組成物は更に他の治療上有用な物質をも含有し得る。

【0106】

医薬組成物は更に１つ以上の医薬的に許容され得る担体を含み得る。

【0107】

本発明は更に、（ｉ）有効な第１量のタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体または（ｉｉ）有効な第２量の選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを含む特に癌に使用するための医薬組成物を提供する。前記組成物は場合により医薬的に許容され得る担体及び／または賦形剤を含む。

【0108】

本発明に従って単独で使用されるタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の医薬組成物は、凍結乾燥製剤または水溶液剤の場合には保存のために所望の純度を有する抗体を任意の医薬的に許容され得る担体、賦形剤または安定化剤と混合することにより製造される（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版，Ｏｓｏｌ、Ａ．Ｅｄ．（１９８０））。許容され得る担体、賦形剤または安定化剤は使用される用量及び濃度でレシピエントにとって非毒性であり、その中には緩衝剤、例えばリン酸塩、クエン酸塩及び他の有機酸；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸及びメチオニン；保存剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、ヘキサメトニウムクロリド；ベンザルコニウムクロリド、ベンゼトニウムクロリド；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えばメチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンまたはリシン；単糖、二糖及び他の炭水化物、例えばグルコース、マンノースまたはデキストリン；キレート化剤、例えばＥＤＴＡ；糖、例えばスクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩形成性対イオン、例えばナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎ−タンパク質複合体）；及び／または非イオン性界面活性剤、例えばトゥイーン（ＴＭ）、プルロニックス（ＴＭ）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。

【0109】

抗Ｂｃｌ−２活性物質単独、例えばＢｃｌ−２インヒビターの医薬組成物はその医薬特性に依存する。例えば、ＡＢＴ−７３７、ＡＢＴ−１９９またはＡＢＴ−２６３のような小化合物の場合、１つの処方物は例えば以下のものであり得る。

【0110】

ａ）錠剤処方物（湿式造粒）：

【0111】

【表3】

【0112】

製造手順：
１．品目１、２、３及び４を混合し、精製水を用いて造粒する；
２．顆粒を５０℃で乾燥する；
３．顆粒を適当な粉砕装置に通す；
４．品目５を添加し、３分間混合し、適当なプレスを用いて圧縮する。

【0113】

ｂ）カプセル処方物：

【0114】

【表4】

【0115】

製造手順：
１．品目１、２及び３を適当なミキサーを用いて３０分間混合する；
２．品目４及び５を添加し、３分間混合する；
３．適当なカプセルに充填する。

【0116】

本発明の１つの更なる実施形態では、本発明に従う医薬組成物はタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＢｃｌ−２インヒビターに対する２つの別々の製剤である。

【0117】

活性成分は例えばコアセルベーション技術により、または界面重合により製造されるマイクロカプセル、例えばそれぞれヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−ミクロカプセル及びポリ−（メチルメタクリレート）ミクロカプセル中に、コロイド状ドラッグデリバリーシステム（例えば、リポソーム、アルブミンミクロスフェア、ミクロエマルジョン、ナノ粒子及びナノカプセル）中に、またはマクロエマルジョン中にも閉じ込められ得る。前記技術はＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，第１６版，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。

【0118】

徐放性製剤を製造してもよい。徐放性製剤の適当な例には、抗体を含有している固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、前記マトリックスはフィルムまたはミクロカプセルのような成形品の形態である。徐放性マトリクスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（ＵＳ ３，７７３，９１９）、Ｌ−グルタミン酸及びγ−エチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン−酢酸ビニル、リュープロン・デポット（ＴＭ）（乳酸−グリコール酸コポリマー及び酢酸リュープロリドから構成される注射用ミクロスフェア）のような分解性乳酸−グリコール酸コポリマー、及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が含まれる。

【0119】

インビボ投与のために使用される製剤は無菌でなければならない。これは、滅菌濾過膜を介して濾過することにより容易に達成される。

【0120】

ある実施形態では、癌を治療するために有効量のＧＡ−１０１抗体を有効量のＧＤＣ−０１９９と一緒に製造される製造方法が提供される。

【0121】

幾つかの実施形態では、癌を治療するために有効量のＧＤＣ−０１９９を有効量のＧＡ−１０１抗体と一緒に製造される製造方法が提供される。

【0122】

提供される製造方法では、製造されるＧＡ−１０１抗体の有効量は例えば５００ｍｇ〜１ｇの範囲であり得、または例えば上欄で検討されている有効量であり得る。提供される製造方法では、ＧＤＣ−０１９９の有効量は例えば２０ｍｇ〜１ｇの範囲であり得、または例えば上欄で検討されている有効量であり得る。治療しようとする癌は、例えば本明細書中の他のところで検討されている癌であり得る。

【0123】

本発明は一部、治療を要する癌、特にＣＤ２０発現癌を患っている患者に対してタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを共投与することを含む前記患者の治療方法に関する。タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び抗Ｂｃｌ−２活性物質を有効量で投与する。

【0124】

ある実施形態では、投与サイクルは２８日間である。

【0125】

本発明において提供される患者の癌を治療する方法のある実施形態では、この方法は患者に対してタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２を１つ以上の投与サイクル中に投与することを含む。１つの実施形態では、１つ以上の投与サイクルの各々は少なくとも１週間続く。別の実施形態では、１つ以上の投与サイクルの各々は少なくとも２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、または１０週間以上である。１つの実施形態では、各投与サイクルは４週間である。

【0126】

１つの実施形態では、治療薬を患者に対して１つの投与サイクル中に投与する。

【0127】

別の実施形態では、治療薬を患者に対して２つ以上の投与サイクル中、例えば２、３、４、５、６、７、または８つ以上の投与サイクル中に投与する。一例として、投与サイクルが４週間であり、患者に対して片方または両方の治療薬を６つの投与サイクルにわたって投与する場合、治療レジメンは図３に示す投与スキームに例示されているように２４週間である。

【0128】

ある実施形態では、治療を要するヒトに対してＧＡ１０１抗体及び／またはＧＤＣ−０１９９を複数の投与サイクルで投与することを含む前記患者における癌の治療方法が提供される。

【0129】

ある実施形態では、ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−１９９の両方を患者に対して複数の投与サイクルの１つ以上の投与サイクルで投与し、ＧＡ１０１抗体及びＧＤＣ−０１９９の一方を複数の投与サイクルの１つ以上の投与サイクルで投与する。

【0130】

本発明において提供される治療方法のある実施形態では、治療薬を患者に対して２または３つの治療相を含む投与スキームで投与し、各治療相は他の治療相の投与サイクルとは異なる少なくとも１つの投与サイクルを含む。例えば、投与サイクルが４週間である１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を患者に対して第１投与サイクル（例えば、第１治療相）の２週間以上の間１週間に１回投与し、第１投与サイクルに続く投与サイクル（例えば、第２治療相）では１投与サイクルあたり１回投与し得る。

【0131】

本発明において提供される治療方法のある実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を患者に対して投与サイクルの少なくとも１週間の間１週間に１回投与する。幾つかの実施形態では、投与サイクルが２週間以上の場合、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を患者に対して１投与サイクルあたり１回投与する。

【0132】

本発明において提供される治療方法のある実施形態では、ＧＤＣ−０１９９を投与サイクル中に１日１回投与する。

【0133】

ＧＤＣ−０１９９及びタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の両方を例えば患者に対して投与サイクルで投与し得る。ある投与サイクルでは、１つの治療薬のみを患者に対して投与する。

【0134】

治療薬を患者に対して複数の投与サイクルを含む投与スキームで投与する本発明において提供される方法のある実施形態では、複数の投与サイクルは投与サイクルを有する第１治療相を含み、各投与サイクルではタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を１投与サイクルあたり１回投与し、ＧＤＣ−０１９９を投与サイクル中毎日投与する。第１治療相における投与サイクルの各々は、例えば４週間であり得る。幾つかの実施形態では、複数の投与サイクルは更に、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体のみを患者に対して投与するか、またはＧＤＣ−０１９９のみを患者に対して投与する第２治療相（例えば、維持相）を含み得る。

【0135】

タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及びＧＤＣ−０１９９の両方を患者に対して１つ以上の投与サイクル中に（例えば、治療相において）投与する本発明において提供される方法の幾つかの実施形態では、その後患者に対してＧＤＣ−０１９９のみを（例えば、維持相において）投与し得る。

【0136】

併用療法後ＧＤＣ−０１９９のみを患者に対して投与するある実施形態では、ＧＤＣ−０１９９を患者に対して例えば１日１回、１日おきに１回、３日、４日、５日または６日毎に１回、または１週間に１回投与し得る。

【0137】

併用療法後タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体のみを患者に対して投与するある実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を患者に対して例えば１週間に１回、２週間毎に１回、または１ヶ月に１回投与し得る。

【0138】

本発明において提供される治療方法のある実施形態では、患者に対して投与される１回投与あたりのＧＤＣ−０１９９の量を第１投与サイクル中増加させる。例えば、第１投与サイクルにおいて患者に対して投与されるＧＤＣ−０１９９の量を第１週の５０ｍｇ用量から、第２週に１００ｍｇ用量まで、第３週に３００ｍｇ用量まで漸増させる例示的投与スキームについて図２を参照されたい。

【0139】

ある実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を投与する前に、漸増用量のＧＤＣ−０１９９を患者に対して投与する。他の実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を患者に対して投与した後に、漸増用量のＧＤＣ−０１９９を患者に対して投与する。

【0140】

本発明において提供される治療方法の幾つかの実施形態では、患者に対して投与される１回投与あたりのＧＤＣ−０１９９の量を第１投与サイクル中に１０ｍｇ〜８０ｍｇの範囲の初期用量から１９０ｍｇ〜４００ｍｇの範囲の最終用量まで増加させる。ある実施形態では、患者に対して投与される１回投与あたりのＧＤＣ−０１９９の初期量は５０ｍｇまたは１００ｍｇであり、１回投与あたり３００ｍｇまで増加させる。幾つかの実施形態では、患者に対してＧＤＣ−０１９９の初期量は、例えば２０ｍｇ〜６０ｍｇの範囲（例えば２０ｍｇ、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇまたは６０ｍｇ用量）であり、その後１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇまたはそれ以上のＧＤＣ−０１９９であり得る。

【0141】

本発明において提供される方法のある実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の第１投与の前に、ＧＤＣ−０１９９の用量を患者に対して増加量で投与する。幾つかの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の第１投与の後に、ＧＤＣ−０１９９の用量を患者に対して増加量で投与する。

【0142】

本明細書中で使用されている用語「患者」は、典型的にはいずれかの目的でタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体での治療を要するヒト（例えば、ＣＤ２０発現癌を患っている患者）を指し、１つの実施形態では前記癌、或いは前癌状態または病巣を治療するために該治療を要するヒトを指す。しかしながら、用語「患者」は、非ヒト動物、好ましくは哺乳動物、例えば特にイヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ及び非ヒト霊長類をも指し得る。

【0143】

本発明は更に、ＣＤ２０発現癌を治療するために選択的Ｂｃｌ−２インヒビターと共にタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を含む。

【0144】

本発明は更に、ＣＤ２０発現癌を患っている患者を治療するために選択的Ｂｃｌ−２インヒビターと共にタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体を含む。

【0145】

本発明は更に、ＣＤ２０発現癌の治療に使用するためにタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを含む。

【0146】

本発明は更に、ＣＤ２０発現癌を患っている患者の治療に使用するためにタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体及び選択的Ｂｃｌ−２インヒビターを含む。

【0147】

１つの実施形態では、選択的Ｂｃｌ−２インヒビターはＡＢＴ−１９９である。

【0148】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は、０．３〜０．６、１つの実施形態では０．３５〜０．５５、別の実施形態では０．４〜０．５のラージ細胞（ＡＴＣＣ−Ｎｏ．ＣＣＬ−８６）上のＣＤ２０に対する結合能をリツキシマブと比較したタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体の比を有している。

【0149】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体はＧＡ１０１抗体である。

【0150】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体は高い抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）を有している。

【0151】

本発明において提供される患者における癌の治療方法のある実施形態では、癌は非固形腫瘍である。１つの実施形態では、非固形腫瘍はＣＤ２０発現非固形腫瘍である。本発明において提供される方法で治療され得る非固形腫瘍の例には、例えば白血病またはリンパ腫が含まれる。１つの実施形態では、非固形腫瘍はＢ細胞リンパ腫である。

【0152】

１つの実施形態では、ＣＤ２０発現癌はＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）である。

【0153】

１つの実施形態では、タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体はモノクローナル抗体である。

【0154】

以下の実施例、配列表及び図面は本発明の理解を助けるために提示されており、その真の範囲は添付されている特許請求の範囲に記載されている。記載されている手順に本発明の趣旨を逸脱することなく改変を加え得ることと理解されたい。

【実施例】

【0155】

［実施例１］ リンパ腫のＧＤＣ−０１９９及びオビヌツズマブの組合せを用いる治療
非臨床データから、ＧＤＣ−０１９９及びＧＡ１０１（この場合、オビヌツズマブ）の組合せが各薬物を単独で投与したときよりも高い抗腫瘍活性を示すという仮説が裏付けられる。本研究は、侵襲性リンパ腫の非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）異種移植片モデル、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）由来細胞株ＳＵ．ＤＨＬ−４を使用した。オビヌツズマブを１ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回、３週間ＩＶ投与し、腫瘍静止後増殖の遅延が見られた。ＧＤＣ−０１９９を１００ｍｇ／ｋｇ ＱＤで２１日間投与し、同様に腫瘍静止後増殖の遅延が見られた。しかしながら、ＧＤＣ−０１９９及びオビヌツズマブの組合せは相加効果を超える効果を誘導して、腫瘍が退縮した（８例のうち５例で部分退縮（ＰＲ）；図１を参照されたい）。３週間の併用療法により、単剤投与で７６％（ＧＡ１０１）及び８０％（ＧＤＣ ０１９９）の腫瘍増殖抑制（ＴＧＩ）が観察されたのに比して高いＴＧＩ（１１８％ ＴＧＩ）が生じた（図１を参照されたい）。ＧＡ１０１をＧＤＣ ０１９９と組み合わせたときには、単剤投与に比して高い腫瘍退縮（５ＰＲ）も観察された。加えて、３１日目（投与終了から１０日後）に単剤としてのＧＡ１０１で３０％ ＴＧＩ、ＧＤＣ ０１９９で２５％ ＴＧＩであったのに対して１１６％ ＴＧＩが観察されたので、併用療法群ではＴＧＩが治療を２１日目に終了させた後持続された。要するに、ＮＨＬ異種移植片モデルにおいて各剤を別々に投与したときに比してＧＡ１０１をＧＤＣ ０１９９と組み合わせると高いＴＧＩ及び腫瘍退縮が生じた。

【0156】

本研究では、ＧＡ−１０１及びＧＤＣ−０１９９のためのビヒクルはそれぞれ生理食塩水及び６０％ フォーサルであった。図１には、ＧＤＣ−０１９９の用量を遊離塩基当量としてｍｇ／ｋｇ体重で表示している。結果は、各治療群についての線型混合効果モデリングにより測定した近似腫瘍体積対時間（日）として表示されている。０日は治療の第１日である。

【0157】

［実施例２］ 再発性、難治性または未治療の慢性リンパ球性白血病を患っている患者におけるＧＤＣ−０１９９及びオビヌツズマブの相Ｉｂ多施設研究
２つのスケジュールを評価する：スケジュールＡ（図２）では最初のオビヌツズマブ注入前にＧＤＣ−０１９９を漸増用量で３週間投与し、スケジュールＢ（図３）ではまずオビヌツズマブを投与した後漸増用量レベルのＧＤＣ−０１９９を投与した。スケジュールＡ及びスケジュールＢのコホート１は平行して登録する。加えて、用量設定段階は、最初のオビヌツズマブ注入前にＧＤＣ−０１９９を投与する（スケジュールＡ）と注入反応の頻度が低下し、それによりオビヌツズマブ及びコルチコステロイドの前投薬の分割用量の必要性が減らせるかどうかを評価する。

【0158】

拡大段階は、各々２０人の患者（再発性／難治性及び未治療のＣＬＬ）の２つの拡大コホートを含め、選択した併用用量及びスケジュールの安全性及び予備有効性を評価する。

【0159】

スケジュールＡでは、ＧＤＣ−０１９９及びオビヌツズマブの併用療法を全部で各２８日の７サイクル中に投与し、全部で８回のオビヌツズマブ注入及びＧＤＣ−０１９９ ＱＤを含む。

【0160】

スケジュールＢでは、ＧＤＣ−０１９９及びオビヌツズマブの併用療法を全部で各２８日の６つのサイクル中に投与し、全部で９回のオビヌツズマブ注入（８回投与；第１用量を２つの注入に分割する）及びＧＤＣ−０１９９ ＱＤを含む。

【0161】

(例えば、許容できる毒性を有し、最大の臨床応答（すなわち、少なくとも２ヶ月間未だ安定していない担腫瘍の継続している改善／減少を有している）が未だ得られていないならば）ＧＤＣ−０１９９単剤療法を患者において上記に記載した併用療法の６〜７サイクルを超えて継続し得る。前記患者は、最大応答が得られるか、または最後の患者が参加してから最長１年のいずれか早い方までＧＤＣ−０１９９単剤両方を継続し得る。

【0162】

［実施例３］ ＧＤＣ−０１９９及びタイプＩ抗ＣＤ２０抗体（リツキシマブ）の併用療法と比較したＧＤＣ−０１９９及びタイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体（オビヌツズマブ）の併用療法の抗腫瘍活性

【0163】

試験物質：
タイプＩＩ抗ＣＤ２０抗体はＧＡ１０１抗体ＩｇＧ１（ＷＯ ２００５／０４４８５９に開示されているキメラヒト化ＩｇＧ１抗体（ここでは、Ｂ−ＨＨ６−Ｂ−ＫＶ１ ＧＥと称されており、オビヌツズマブまたはＲＯ５０７２７５９としても公知）であり、スイス国シュリーレンのＲｏｃｈｅ ＧｌｙｃＡｒｔからストック溶液（濃度９．４ｍｇ／ｍｌ）として提供された。抗体バッファーはヒスチジン、トレハロース及びポリソルベート２０を含んでいた。注入前に抗体溶液をストックからＰＢＳで適切に希釈した。ＧＤＣ−０１９９は米国カリフォルニア州のＧｅｎｅｎｔｅｃｈ Ｉｎｃ．から入手した。

【0164】

細胞株及び培養条件：
ヒトＺ１３８マントル細胞リンパ腫細胞株を１０％ ウシ胎児血清（オーストリアのＰＡＡ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）及び２ｍＭ Ｌ−グルタミンを補充したＤＭＥＭにおいて３７℃、５％ ＣＯ_２で水飽和雰囲気中でルーチン通りに培養する。細胞をＭＡＴＲＩＧＥＬと共注射した。

【0165】

動物：
到着時（ドイツ国ズルツフェルトのＣｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒから購入）５〜６週令の雌ＳＣＩＤベージュマウスを関係しているガイドライン（ＧＶ−Ｓｏｌａｓ；Ｆｅｌａｓａ；ＴｉｅｒｓｃｈＧ）に従って１２時間の明暗の１日周期で特別の病原体を含まない条件下で維持した。実験研究プロトコルを再検討し、地方自治体（Ｒｅｇｉｅｒｕｎｇ ｖｏｎ Ｏｂｅｒｂａｙｅｒｎ；登録番号５５．２−１−５４−２５３１．２−２６−０９）により容認された。到着後、新しい環境に慣らし、観察のために、動物を動物施設の隔離部分で１週間維持した。継続的健康モニタリングを定期的に実施した。餌（英国Ａｌｔｒｏｍｉｎ Ｓｐｅｚｉａｌｆｕｔｔｅｒ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ．）及び（濾過した）水は自由に与えた。

【0166】

モニタリング：
臨床症状及び副作用の検出のために動物を毎日管理した。実験を通してモニターするために、動物の体重を１週間に２回記録し、腫瘍体積をステージング後カリバスにより測定した。

【0167】

動物の治療：
動物治療を腫瘍細胞接種から１８日後にランダム化の日に開始した。ＲＯ５０７２７５９またはリツキシマブを単剤として１ｍｇ／ｋｇの用量で１週間に１回（１８、２５、３２日目）、３週間ｉ．ｐ．投与した。対応するビヒクルは同日に投与した。ＧＣＤ−０１９９を１００ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回、１７日間にわたり（１８日目から３４日目まで）ｐ．ｏ．投与した。併用療法群では、抗体及びＧＤＣ−０１９９を同一用量で同日に投与した。

【0168】

インビボでの腫瘍増殖抑制研究：
治療の腫瘍体積拡大に対する結果を図４に示す。腫瘍細胞接種から３５日目に、リツキシマブ、ＧＤＣ−０１９９、ＲＯ５０７２７５９、ＧＤＣ−０１９９＋リツキシマブの組合せ、またはＧＤＣ−０１９９＋ＲＯ５０７２７５９の組合せを投与された動物において対照群と比較してそれぞれ３２％、５９％、７３％、９６％または１０６％の腫瘍増殖抑制が観察された。

【0169】

［実施例４］ オビヌツズマブとの併用投与後、単剤としてＧＤＣ−０１９９の投与により腫瘍再増殖の有意な遅延が生じる
本実施例は上記実施例１に検討したＤＬＢＣＬ ＳＵ−ＤＨＬ−４異種移植片モデルを用いて結果を記載する。最初、ＧＤＣ−０１９９を１ｍｇ／ｋｇのＧＡ１０１（この例では、オビヌツズマブ）と一緒に連続２１日間、３週間経口投与した。後者により、各々の薬剤のみで観察された５４％（ＧＡ１０１）及び２４％（ＧＤＣ−０１９９） ＴＧＩと比較して高いＴＧＩ（９１％）が生じた（図５）。２２日目に、併用コホートの担腫瘍マウスにＧＤＣ−０１９９のみを１００ｍｇ／ｋｇで更に２４日間投与し続けた。後者により、ＧＡ１０１及びＧＤＣ−０１９９の組合せで２１日間治療したマウスと比較して腫瘍再増殖の有意な遅延が生じた（併用コホートの腫瘍進行までの時間＝３８日対ＧＤＣ−０１９９での継続治療＝４５日（図５）。よって、ＧＡ１０１との併用後のＧＤＣ−０１９９での単剤治療はインビボで有効性を持続している。これらの結果により、ＧＤＣ−０１９９での維持治療に対するベネフィットが裏付けられる。

【0170】

図５には、対照はＧＡ１０１に対する生理食塩水ビヒクル＋ＧＤＣ−０１９９に対する６０％ フォーサルビヒクルである。ＧＡ１０１を１週間に１回（ＱＷ）、３週間静脈内投与し、ＧＤＣ−０１９９は単剤または組合せで毎日（ＱＤ）、２１日間（ＱＤ×２１）経口投与した。上で説明したように、担腫瘍マウスのコホートには併用療法を２１日目に終了した後ＧＤＣ−０１９９のみを更に２４日間投与した（ＱＤ×４５）。ｘ軸の下に、治療期間は併用コホートに対して黒実線

【0171】

【化2】

により示し、継続単剤ＧＤＣ−０１９９治療は黒破線

【0172】

【化3】

で示す。

【0173】

本明細書中で引用されている刊行物及び特許文献はすべて、各個々の刊行物または特許文献が具体的に個別に参照により組み入れられていると示されているように本明細書に参照により組み入れられる。上述した発明は理解を明瞭にする目的で例及び実例として少し詳しく記載してきたが、本発明の教示にてらして添付されている特許請求の範囲の趣旨または範囲を逸脱することなくある改変及び修飾を加え得ることは当業者には容易に明白であろう。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]