特許 6416106 ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドに結合することによりポリペプチドの流体力学的体積を増加させる方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6416106

(24)【登録日】2018年10月12日

(45)【発行日】2018年10月31日

(54)【発明の名称】ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドに結合することによりポリペプチドの流体力学的体積を増加させる方法

(51)【国際特許分類】

   C07K 19/00 20060101AFI20181022BHJP

   C12N 15/62 20060101ALN20181022BHJP

   C07K 14/745 20060101ALN20181022BHJP

   C07K 14/59 20060101ALN20181022BHJP

【ＦＩ】

   C07K19/00ZNA

   !C12N15/62 Z

   !C07K14/745

   !C07K14/59

【請求項の数】16

【全頁数】91

(21)【出願番号】特願2015-542413(P2015-542413)

(86)(22)【出願日】2013年11月20日

(65)【公表番号】特表2016-501198(P2016-501198A)

(43)【公表日】2016年1月18日

(86)【国際出願番号】IL2013050960

(87)【国際公開番号】WO2014080401

(87)【国際公開日】20140530

【審査請求日】2016年11月21日

(31)【優先権主張番号】61/728,662

(32)【優先日】2012年11月20日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】508233526

【氏名又は名称】オプコ バイオロジクス リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001379

【氏名又は名称】特許業務法人 大島特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ヘルショコビッツ、オレン

(72)【発明者】

【氏名】バルイラン、アフヴァ

【審査官】 小金井 悟

(56)【参考文献】

【文献】 Curr. Opin. Biotechnol.，２０１１年１２月，Vol.22, No.6，p.868-876

【文献】 Endocrinology，２０１０年 ９月，Vol.151, No.9，p.4410-4417

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ１２Ｎ １５／００−１５／９０

Ｇｏｏｇｌｅ Ｓｃｈｏｌａｒ

ＰｕｂＭｅｄ

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

目的の組換え体ポリペプチドの流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法であって、
前記目的の組換え体ポリペプチドは、組換え体の活性化凝固因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）であり、前記方法は、
（ａ）前記活性化凝固因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）のカルボキシ末端（Ｃ末端）に３個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）単位を組換えにより結合させるステップで、前記活性化凝固因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）のアミノ末端（Ｎ末端）にはＣＴＰは結合しない、該ステップと、
（ｂ）宿主細胞において前記目的の組換え体ポリペプチドであるＣＴＰ改変ＦＶＩＩａを発現させるステップであって、前記ＣＴＰ単位をグリコシル化するステップを含む、該ステップとを含み、
前記ＣＴＰ改変ＦＶＩＩａは、選択に応じて、前記ＣＴＰ改変ＦＶＩＩａのアミノ末端に結合されたシグナルペプチドを含み、
前記ＣＴＰ単位がグリコシル化された前記ＣＴＰ改変ＦＶＩＩａは、グリコシル化ＣＴＰ単位が１個結合されるごとに、前記ＣＴＰ改変ＦＶＩＩａの流体力学的サイズが約４３〜５３ｋＤａ大きくなることを特徴とする方法。

【請求項2】

前記グリコシル化が、Ｏ−グリコシル化であり、
前記Ｏ−グリコシル化が、α−グリコシド結合によるタンパク質鎖内のセリン（Ｓｅｒ）またはスレオニン（Ｔｈｒ）へのＧａｌＮＡｃ結合であることを特徴とする請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記グリコシル化が、Ｏ−グリコシル化であり、
前記Ｏ−グリコシル化が、コア１グリコシル化、Ｏ−フコシル化、Ｏ−マンノシル化、またはＯ−グリコシル化であることを特徴とする請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記グリコシル化が、Ｏ−グリコシル化であり、
前記Ｏ−グリコシル化に続いて、１〜６０個のガラクトース分子の付加が行われるか、または１〜１２０個のシアル酸分子の付加が行われるか、あるいはそれらの組合せが行われることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記流体力学的サイズまたは体積の増加が、前記目的の組換え体ポリペプチドの生物学的利用能を増加させることを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

前記ＣＴＰのうちの少なくとも１つのＣＴＰのアミノ酸配列が、配列番号１および配列番号２からなる群から選択されることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記ＣＴＰ単位のうちの少なくとも１つが、切断され、配列番号３の１番目から１０番目のアミノ酸配列（ＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳ）を含むことを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記ＣＴＰ単位のうちの少なくとも１つが、前記目的の組換えポリペプチドにリンカーを介して結合されていることを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記リンカーが、ペプチド結合であることを特徴とする請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記ＣＴＰ改変ＦＶＩＩａは、前駆体のＣＴＰ改変活性化凝固因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）を含み、そのアミノ酸配列は、配列番号５２のアミノ酸配列または、配列番号５２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列であることを特徴とする請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記ＣＴＰ改変ＦＶＩＩａは、成熟したＣＴＰ改変活性化凝固因子ＶＩＩａ（ＦＶＩＩａ）を含み、そのアミノ酸配列は、配列番号５２の３９番目から５２８番目のアミノ酸配列または、配列番号５２の２７番目から３０１番目のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列であることを特徴とする請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記ＦＶＩＩａをコードするＤＮＡが、ＣＴＰペプチドをコードするＤＮＡ配列にライゲーションされることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記ＦＶＩＩａをコードするＤＮＡが、配列番号４５のアミノ酸配列をコードすることを特徴とする請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記宿主細胞が、ＣＨＯ細胞であることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

ポリペプチドの見掛けの分子量を増加させる方法であって、
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の前記流体力学的体積を増加させる前記ステップを含むことを特徴とする方法。

【請求項16】

ポリペプチドの血中半減期を延長させる方法であって、
請求項１〜１４のいずれか一項に記載の前記ポリペプチドの流体力学的体積を増加させる前記ステップを含む前記方法によって、前記血中半減期を延長させることを特徴とする方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を増加させるための、絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

バイオテクノロジー産物は、モノクローナル抗体、ワクチン、増殖因子、ホルモン、サイトカイン、凝固因子、融合タンパク質、酵素および他のタンパク質を含む全ての治療薬において、それが占める比率を増加させている。モノクローナル抗体およびワクチンを除き、この列挙の中の多くは、５０ｋＤａ未満の分子量および数分から数時間の範囲の短い終末相半減期を有する。

【0003】

タンパク質治療の有効性は、分布および排出に影響を与える、血漿内半減期を含むそれらの薬物速度論的特性によって強く決定付けられる。小型は組織透過性を促進するが、これらの分子はしばしば、血行から急速にクリアランスされる。このことから、長い期間に亘って治療有効濃度を維持するために、点滴または頻回投与が行われ、あるいは、血流中へのゆっくりとした吸収を利用して薬剤が局所領域的にまたは皮下に適用される。小型タンパク質薬剤のこれらの制限は、血液中のこれらの組換え抗体の循環を延長させることで投与並びに薬物動態学的および薬力学的特性を向上させるための、半減期延長戦略の開発および実行に繋がった。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】米国特許第７，５５３，９４０号明細書

【特許文献2】米国特許第５，７１２，１２２号明細書

【特許文献3】米国特許第５，１１８，６６６号明細書

【特許文献4】米国特許第６，８９７，０３９号明細書

【特許文献5】米国特許第４，８７３，３１６号明細書

【特許文献6】欧州特許出願公開第２６４，１６６号公報

【特許文献7】米国特許第５，９３２，４４７号明細書

【特許文献8】米国特許第５，４６４，７６４号明細書

【特許文献9】米国特許第５，４８７，９９２号明細書

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本発明は、特定の要因により目的のタンパク質またはその断片（例えば、ペプチド）の流体力学的サイズまたは体積を増加させ、それによりその投与、薬物動態学的特性並びに薬力学的特性を向上させるために、そのような戦略を使用する。この流体力学的体積の増加は、タンパク質およびペプチドの血中半減期を延長させるためのペプチドに基づく科学技術を利用することにより達成される。この科学技術は、ｈＣＧに所望の寿命を与えて妊娠を維持する天然ペプチド、ヒト絨毛性ゴナドトロピン（ｈＣＧ）のβ鎖のＣ末端ペプチド（ＣＴＰ）の使用に基づいている。排卵を引き起こす生殖ホルモンである黄体形成ホルモン（ＬＨ）のβ鎖は、ｈＣＧとほぼ同一であるが、ＣＴＰを含んでいない。結果として、ＬＨは有意により短い血中半減期を有する。所定数のＣＴＰの目的タンパク質またはペプチドへの結合は、特定の要因によりその流体力学的体積を増加させ、その結果、目的のタンパク質またはペプチドの血中半減期の延長および作用強度の増強を含む、特性の向上をもたらす。

【課題を解決するための手段】

【0006】

一実施形態では、本発明、１〜１０個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）を前記ポリペプチドまたはその断片に結合させることを含み、前記１〜１０個のＣＴＰペプチドの前記ポリペプチドまたはその断片への結合により前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が各ＣＴＰの結合毎に約２８〜５３ｋＤａ増加し、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる、目的のポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法に関する。

【0007】

別の実施形態では、本発明は、１〜１０個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）を前記ポリペプチドまたはその断片に結合することを含み、前記１〜１０個のＣＴＰの前記ポリペプチドまたはその断片への結合により前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が、ＣＴＰが結合している特定のポリペプチドまたはその断片に依存する量だけ増加し、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法に関する。

【0008】

本発明の他の特徴および利点は、以下の発明を実施するための形態、実施例および図面から明らかになる。しかしながら、本発明の精神および範囲内の種々の変更および修正がこの発明を実施するための形態から当業者には明らかとなることから、発明を実施するための形態および特定の実施例が、好ましい本発明の実施形態を示しつつも単なる例示として与えられていることは、理解されるべきである。

【0009】

以下の図面は、本明細書の一部を形成しており、本開示のある特定の態様をさらに示すために含まれており、本発明は、本明細書に示される特定の実施形態の発明を実施するための形態と併せてこれらの図面のうちの一つまたは複数を参照することによりより深く理解することができる。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】６種の異なる精製ＣＴＰ修飾タンパク質およびそれらの対応する未修飾タンパク質のＳＤＳ−ＰＡＧＥ解析を示している。１．ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰ（ＭＯＤ−４０２３）、２．Ｂｉｏｔｒｏｐｉｎ（ｒｈＧＨ）、３．サイズマーカー、４．ＣＴＰ−ＥＰＯ−ＣＴＰ−ＣＴＰ、５．ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＥＰＯ、６．ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＥＰＯ−ＣＴＰ−ＣＴＰ、７．ＥＰＲＥＸ（登録商標）（ｒＥＰＯ）、８．サイズマーカー、９．ＡＰＯ−Ａ１、１０．サイズマーカー、１１．Ａｐｏ−ＣＴＰ、１２．Ａｐｏ−ＣＴＰ−ＣＴＰ、１３．サイズマーカー。

【図2】５種の異なる精製ＣＴＰ修飾タンパク質およびそれらの対応する未修飾タンパク質のＳＤＳ−ＰＡＧＥ解析を示している。１．ＦＩＸ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ ２．サイズマーカー ３．ＦＩＸ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ ４．ＦＩＸ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ ５．Ｍｏｎｏｎｉｎｅ（登録商標）（ｒＦＩＸ） ６．サイズマーカー ７．ＦＶＩＩａ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ ８．ＦＶＩＩａ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ ９．サイズマーカー。

【図3A】ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦで測定された、非グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の両方の１コピーのＣＴＰの分子量（ｋＤａ）の増加を示している。

【図3B】ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦで測定された、グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の両方の１コピーのＣＴＰの分子量（ｋＤａ）の増加を示している。

【図4A】ＳＥＣ−ＨＰＬＣで測定された、グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の、それらの対応する未修飾タンパク質と比較した、流体力学的サイズの増加を示している。図４Ａは流体力学的サイズの合計増加量を示している。

【図4B】ＳＥＣ−ＨＰＬＣで測定された、グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の、それらの対応する未修飾タンパク質と比較した、流体力学的サイズの増加を示している。図４Ｂはグリコシル化ＣＴＰの１コピー当たりの算出増加量を示している。

【図5A】ＳＥＣ−ＨＰＬＣカラムで測定された、非グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の、それらの対応する未修飾タンパク質と比較した、流体力学的サイズの増加を示している。図５Ａは流体力学的サイズの合計増加量を示している。

【図5B】ＳＥＣ−ＨＰＬＣカラムで測定された、非グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の、それらの対応する未修飾タンパク質と比較した、流体力学的サイズの増加を示している。図５Ｂは非グリコシル化ＣＴＰの１コピー当たりの算出増加量を示している。

【発明を実施するための形態】

【0011】

一実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積または流体力学的サイズを増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記ポリペプチドまたはその断片を、前記ポリペプチドまたはその断片のＮ末端またはＣ末端上で、少なくとも１つの絨毛性ゴナドトロピンＣ末端ペプチド（ＣＴＰ）に融合するステップを含む。

【0012】

一実施形態では、用語「タンパク質」および「ポリペプチド」は、本明細書においては同義的に用いられる。別の実施形態では、用語「目的ポリペプチドまたはその断片」、または「目的タンパク質またはその断片」は、未修飾ポリペプチド（分解生成物、合成ポリペプチドまたは組換えポリペプチド）およびペプチド模倣薬（典型的には、合成ポリペプチド）、並びにポリペプチド類似体であるペプトイドおよびセミペプトイド（ｓｅｍｉｐｅｐｔｏｉｄ）を包含し、これらは、別の実施形態では、本明細書で提供される修飾ポリペプチドを体内においてさらに安定させる、または細胞への透過をより可能にする修飾を有する。さらに、前記用語には、目的ペプチドも含まれる。別の実施形態では、本明細書で提供される少なくとも１つのＣＴＰペプチドは、本明細書で提供される、目的ポリペプチドもしくはその断片、または目的ペプチドに結合される。別の実施形態では、用語「その断片」は、タンパク質またはポリペプチドに関しての場合、目的ペプチドを含む目的タンパク質または目的ポリペプチドの切断型を包含する。

【0013】

別の実施形態では、タンパク質またはポリペプチドの「その断片」という用語は、機能性フラグメントを指す（例えば、親ポリペプチドと比べて、親ポリペプチドが実行するまたは増強するの同程度の、生物活性を有する断片）。その断片の例には、ポリペプチドの変異体、または親ポリペプチド由来のペプチドが含まれ得る。従って、タンパク質またはポリペプチドの「その断片」という用語、および「ペプチド」という用語が本明細書においては同義的に用いられ得ることを理解されたい。

【0014】

一実施形態では、目的のポリペプチドまたはその断片の流体力学的なサイズまたは体積を少なくとも約２８ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、前記ポリペプチドまたはその断片を、前記ポリペプチドまたはその断片のＮ末端またはＣ末端上で、少なくとも１つの絨毛性ゴナドトロピンＣ末端ペプチド（ＣＴＰ）に融合するステップを含む。

【0015】

一実施形態では、目的のポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）を前記ポリペプチドまたはその断片に結合させることを含み、前記１〜１０個のＣＴＰペプチドの前記ポリペプチドまたはその断片への結合は、前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加をもたらす。別の実施形態では、前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積は、前記ポリペプチドまたはその断片への各グリコシル化ＣＴＰの結合毎に約２８〜５３ｋＤａ増加され、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が増加される。別の実施形態では、前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積は、前記ポリペプチドまたはその断片への各非グリコシル化ＣＴＰの結合毎に約８．０〜２２ｋＤａ増加され、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が増加される。別の実施形態では、前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積は、前記ポリペプチドまたはその断片への各非グリコシル化ＣＴＰの結合毎に約８．１〜２１．６ｋＤａ増加し、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が増加する。

【0016】

別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）を前記ポリペプチドまたはその断片に結合することを含み、前記１〜１０個のＣＴＰの前記ポリペプチドまたはその断片への結合により前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積は、ＣＴＰが結合している特定のポリペプチドまたはその断片に依存する量だけ増加し、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が増加する。

【0017】

一実施形態では、前記１〜１０個のＣＴＰは前記ポリペプチドのＮ末端に結合される。別の実施形態では、前記１〜１０個のＣＴＰは前記ポリペプチドのＣ末端に結合される。別の実施形態では、前記１〜１０個のＣＴＰは前記ポリペプチドのＮ末端およびＣ末端の両方に結合される。別の実施形態では、１つのＣＴＰが前記ポリペプチドのＮ末端に結合され、２つのＣＴＰが前記ポリペプチドの前記Ｃ末端に結合される。別の実施形態では、２つのＣＴＰが前記ポリペプチドのＮ末端に結合され、２つのＣＴＰが前記ポリペプチドの前記Ｃ末端に結合される。

【0018】

一実施形態では、用語「流体力学的サイズ」または「流体力学的体積」は、本明細書においては同義的に用いられ、それぞれ、水溶液中への分子の拡散に基づく分子（例えば、タンパク質分子）の見掛けのサイズを指す。溶液中へのタンパク質の拡散または挙動を処理することで、タンパク質の見掛けのサイズを得ることができ、ここで、サイズはタンパク質粒子の「ストークス半径」または「流体力学的半径」により与えられる。タンパク質の「流体力学的サイズ」は、質量および形（高次構造）の両方に依存するため、同一の分子量を有する２つのタンパク質は、タンパク質の全体的な高次構造に基づいて、異なる流体力学的サイズを有する場合がある。

【0019】

別の実施形態では、グリコシル化の種類はＯ−グリコシル化である。別の実施形態では、Ｏ−グリコシル化の種類は、ａ−グリコシド結合による、タンパク質鎖内のセリン（Ｓｅｒ）またはスレオニン（Ｔｈｒ）へのＧａｌＮＡｃ結合である。別の実施形態では、Ｏ−グリコシル化の種類は、タンパク質鎖内のＳｅｒまたはＴｈｒ残基へのＮ−アセチルグリコサミンアミン（Ｎ−ａｃｅｔｙｌｇｌｙｃｏｓａｍｉｎｅ：ＧｌｃＮａｃ）結合である。別の実施形態では、Ｏ−グリコシル化の種類は、Ｏ−フコシル化、Ｏ−マンノシル化、コア１Ｏ−グリコシル化、コア２Ｏ−グリコシル化またはＯ−グルコシル化である。別の実施形態では、Ｏ−グリコシル化はムチン型Ｏ−グリコシル化である。別の実施形態では、Ｏ−グリコシル化は、セリン、スレオニン、チロシン、ヒドロキシリジン、またはヒドロキシプロリン側鎖のヒドロキシ酸素（ｈｙｄｒｏｘｙ ｏｘｙｇｅｎ）への、Ｏ結合型グリカンの結合を含む。別の実施形態では、Ｏ−グリコシル化に続いて、ガラクトースおよび／またはシアル酸の付加が行われ、他の実施形態では、Ｏ−グリコシル化の後に、目的タンパク質に、少なくとも１つのガラクトース分子が付加され、および／または、少なくとも１つのシアル酸分子が付加される。別の実施形態では、約１〜３個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約１〜３個のシアル酸分子が付加される。別の実施形態では、約１〜５個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約１〜５個のシアル酸分子が付加される。別の実施形態では、約１〜１０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約１〜２０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約２１〜３０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約３１〜４０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約４１〜５０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約５１〜６０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約６１〜７０個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、約１〜１０個のシアル酸分子が付加される。別の実施形態では、付加された各ガラクトース分子当たり２個のシアル酸分子が付加される。別の実施形態では、各ＣＴＰ当たり約１〜５個のガラクトース分子が付加される。別の実施形態では、各ＣＴＰ当たり約１〜１０個のシアル酸分子が付加される。別の実施形態では、それぞれのＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片につき、合計で、約１〜６０個のガラクトース分子が付加され、約１〜１２０個のシアル酸分子が付加される。

【0020】

別の実施形態では、本明細書で提供されるグリコシル化の種類はＮ−グリコシル化である。別の実施形態では、Ｎ結合型グリカンが、アスパラギン側鎖またはアルギニン側鎖の窒素に結合される。Ｎ結合型アミノ酸コンセンサス配列は、Ａｓｎ−任意のアミノ酸−ＳｅｒまたはＴｈｒであり、ここで任意のアミノ酸はプロリンにはなり得ない。

【0021】

別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、少なくとも１つの非グリコシル化絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）を目的ポリペプチドまたはその断片のN末端またはC末端に結合することを含み、少なくとも１つのＣＴＰの前記ポリペプチドまたはその断片への結合により前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積は、ＣＴＰが結合している特定のポリペプチドまたはその断片に依存する量だけ増加し、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が増加する。

【0022】

一実施形態では、グリコシル化ＣＴＰは、それが結合または融合したタンパク質の流体力学的体積を増加させる。別の実施形態では、非グリコシル化ＣＴＰは、それが結合または融合したタンパク質の流体力学的体積を増加させる。

【0023】

一実施形態では、タンパク質の非変性部位にグリカンを含有するＣＴＰ修飾タンパク質は、１コピーのグリコシル化ＣＴＰの流体力学的体積に対しより大きな増加を寄与し、例えば、本明細書における実施例３／表５は、タンパク質の非変性部位にグリカンを含有するＦＩＸおよびＦＶＩＩａ−ＣＴＰ修飾タンパク質が、グリコシル化ＣＴＰの１コピーの流体力学的体積により大きな増加を寄与することを示している。

【0024】

本発明の明細書により手引きされた場合、グリコシル化ＣＴＰおよび非グリコシル化ＣＴＰの組み合わせが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは体積を増加させるために用いられ得ることは、当業者には明らかである。そのような操作は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を最適なまたは所望のレベルまで増加させるために実行され得る。一実施形態では、そのような、流体力学的体積における最適なまたは所望のレベルの増加は、目的ポリペプチドまたはその断片の、対象内での滞留時間の延長、対象からの低いクリアランス速度、および生物活性の増強を伴う。一実施形態では、１〜５個のグリコシル化ＣＴＰおよび１〜５個の非グリコシル化ＣＴＰが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片に同時に結合される。別の実施形態では、グリコシル化または非グリコシル化ＣＴＰペプチドは、Ｎ末端もしくはＣ末端上で直列に結合されるか、またはＮ末端およびＣ末端の両方にランダムに結合される。グリコシル化ＣＴＰペプチドおよび非グリコシル化ＣＴＰペプチドの追加の組み合わせが用いられ得、従って本発明に包含されることは、当業者には明らかである。

【0025】

一実施形態では、用語「結合した」およびその文法上の変異形は、あるタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドの、別のタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドへの結合を指す。別の実施形態では、そのような結合は、目的のタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドの、本明細書で提供される少なくとも１つのＣＴＰペプチドへの結合を指す。別の実施形態では、そのような結合は、目的のタンパク質、ポリペプチドまたはペプチドの、本明細書で提供される１〜１０個のＣＴＰペプチドへの結合を指す。そのような結合は多数の手段によって達成され得、例えば、限定はされないが、共有結合、水素結合、イオン結合、金属結合、極性共有結合、非共有結合（ファン・デル・ワールス相互作用、疎水性相互作用、水素結合等）、リンカーの使用による結合等が挙げられる。

【0026】

別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、少なくとも１つの非グリコシル化絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）を目的ポリペプチドまたはその断片のN末端またはC末端に結合することを含み、少なくとも１つのＣＴＰの前記ポリペプチドまたはその断片への結合により前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積は、ＣＴＰが結合している特定のポリペプチドまたはその断片に依存する量だけ増加し、それにより前記ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積が増加する。

【0027】

別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰは、酵素に基づく糖鎖除去を含むがこれに限定されない、当該技術分野において公知の方法を用いて脱グリコシル化される。

【0028】

用語「非グリコシル化」および「糖鎖除去」並びにそれらの文法上の変異形が本明細書において同義的に用いられることは、当業者には明らかである。

【0029】

別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の、本明細書でさらに提供される、ｉｎ−ｖｉｖｏ生物活性を増加させる、血中半減期を延長させる、生物学的利用能を増加させる、作用強度を増加させる、または曲線下面積（ＡＵＣ）を拡張する等の方法が本明細書で提供され、前記方法は、少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰペプチドをポリペプチドまたはその断片に融合するステップを含み、グリコシル化ＣＴＰペプチドのポリペプチドまたはその断片への融合は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を、無修飾ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積と比較して、少なくとも約２８ｋＤａ増加させる。

【0030】

別の実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドはより低いｉｎ−ｖｉｔｒｏ生物活性を有するが、このより低い活性は、延長された半減期によって補われる。別の実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドは、増加したｉｎ−ｖｉｔｒｏ生物活性を有する。

【0031】

別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積の増加は、ポリペプチドまたはその断片の投与頻度を減少させる。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積の増加はまた、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を増加させる。

【0032】

一実施形態では、見掛けの分子量は、当該技術分野において周知の方法を用いて決定され、例えば、限定はされないが、分子ふるいクロマトグラフィー（ＳＥＣ）、動的光散乱法（ＤＬＳ）、沈降速度、沈降平衡遠心分離および分光光度検出が挙げられる。別の実施形態では、理論分子量は、当該技術分野において利用可能なプロテオミクスソフトウェアを用いて決定される。そのようなソフトウェアとしては、限定はされないが、Ｅｘｐａｓｙ ｐｏｒｔａｌ、ＰｒｏｔｅｏＩＱ、Ｓｃａｆｆｏｌｄ ３等が挙げられる。別の実施形態では、実際の分子量は、当該技術分野において周知の方法を用いて決定され、例えば、限定はされないが、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦが挙げられる。

【0033】

別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を少なくとも２８ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約１〜１４ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約１５〜２７ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約２８〜４０．０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約２８〜５５．０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約２８〜７０．０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約２８〜８０．０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約２８〜９０．０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約２８〜１００．０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰペプチドを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約４１．０〜５０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰペプチドを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約５１．０〜６０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片に少なくとも１つのＣＴＰペプチドを結合することを含む、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を約６１．０〜７０ｋＤａ増加させる方法が本明細書で提供される。別の実施形態では、ＣＴＰはグリコシル化されている。別の実施形態では、ＣＴＰは非グリコシル化ＣＴＰである。

【0034】

一実施形態では、本明細書で提供される方法は、予想外にも、目的のポリペプチドまたはその断片へのグリコシル化ＣＴＰペプチドの後の付加は、目的のポリペプチドまたはその断片へのＣＴＰペプチドの先の付加とおよそ同一の見掛けの分子量を直線的に寄与することを示している（表４参照）。

【0035】

別の実施形態では、少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰは、目的タンパク質への各グリコシル化ＣＴＰ当たり約２８〜４０ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰは、付加されるＣＴＰの数に関わらず、目的タンパク質への各グリコシル化ＣＴＰ当たり約２８〜５５ｋＤａを寄与する。

【0036】

一実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約２倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約３〜５倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、少なくとも１つのＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約６〜１０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約１１〜２０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約２１〜３０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含み、少なくとも１つのＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約３１〜４０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約４１〜５０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、少なくとも１つのＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約５１〜６０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約６１−７０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量をポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約７１〜８０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約８１〜９０倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の見掛けの分子量を前記ポリペプチドまたはその断片の理論分子量の約９１〜１００倍に増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、１〜１０個のＣＴＰペプチドを前記ポリペプチドまたはその断片に結合させるステップを含む。別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰペプチドが前記ポリペプチドまたはその断片に結合される。別の実施形態では、１〜５個のＣＴＰペプチドが前記ポリペプチドまたはその断片に結合される。別の実施形態では、１〜１５個のＣＴＰペプチドが前記ポリペプチドまたはその断片に結合される。別の実施形態では、１〜２０個のＣＴＰペプチドが前記ポリペプチドまたはその断片に結合される。別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰペプチドがグリコシル化されている。別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰペプチドが非グリコシル化ＣＴＰペプチドである。

【0037】

別の実施形態では、目的ポリペプチドもしくはその断片または目的ペプチドの生物活性、血中半減期、生物学的利用能、作用強度等を増加させる方法は、目的ポリペプチドまたはその断片の総流体力学的体積を、前記ポリペプチドまたはその断片にグリコシル化ＣＴＰを結合させることにより、無修飾ポリペプチドまたはその断片と比較して、約２８ｋＤａ増加させることを含む。別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の生物活性、血中半減期、生物学的利用能等を増加させる方法は、前記ポリペプチドまたはその断片に本明細書で提供されるＣＴＰを結合させることにより、無修飾の目的ポリペプチドまたはその断片と比較して、ポリペプチドまたはその断片の総流体力学的体積を約１〜１０ｋＤａ、１１〜２０ｋＤａ、２１〜３０ｋＤａ、３１〜４０ｋＤａ、４１〜５０ｋＤａ、５１〜６０ｋＤａ、６１〜７０ｋＤａ、７１〜８０ｋＤａ、８１〜９０ｋＤａ、９１〜１００ｋＤａ、１００〜１５０ｋＤａ、１５１〜２００ｋＤａ、２０１〜４００ｋＤａ、４０１〜１０００ｋＤａ、または１００１〜５０００ｋＤａ増加させることを含む。

【0038】

別の実施形態では、本明細書で提供される方法において、少なくとも１つのＣＴＰがグリコシル化されている。別の実施形態では、本明細書で提供される方法において、少なくとも１つのＣＴＰは、本明細書でまた提供されるポリペプチドまたはその断片への各ＣＴＰ当たり、流体力学的体積に約２８．３〜３８．７ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、グリコシル化ＣＴＰは、それがどのポリペプチドまたはその断片に結合するかに関わらず、各ＣＴＰ当たり２８．３〜３８．７ｋＤａを寄与する（本明細書の実施例３を参照）。別の実施形態では、グリコシル化ＣＴＰは、ポリペプチドに結合されるＣＴＰペプチドの数に関わらず、各ＣＴＰ当たり２８．３〜３８．７ｋＤａを寄与する（本明細書の実施例３を参照）。別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰの寄与は少なくとも２０ｋＤａである。別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰの寄与は少なくとも約２０ｋＤａ〜２７．９ｋＤａである。別の実施形態では、１つのＣＴＰの寄与は少なくとも２８ｋＤａである。別の実施形態では、１つのＣＴＰの寄与は約２８ｋＤａ〜４０ｋＤａである。別の実施形態では、１つのＣＴＰの寄与は約４１ｋＤａ〜５０ｋＤａである。別の実施形態では、１つのＣＴＰの寄与は約５１ｋＤａ〜６０ｋＤａである。

【0039】

別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の、血中半減期を延長させるまたは作用強度を増強する方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を、無修飾ポリペプチドまたはその断片と比較して、約８４ｋＤａ増加させることを含む。別の実施形態では、約８４ｋＤａの流体力学的体積の増加は、本明細書で提供される方法による、３つのグリコシル化ＣＴＰペプチドの結合により修飾されているポリペプチドまたはその断片に相当する。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片に結合された３つのグリコシル化ＣＴＰペプチドのうち、１つのグリコシル化ＣＴＰペプチドはポリペプチドまたはその断片のＮ末端に結合され、２つのグリコシル化ＣＴＰペプチドはポリペプチドまたはその断片のＣ末端に直列に結合される。

【0040】

一実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の血中半減期を増加させるまたは生物活性を増強する方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、無修飾ポリペプチドまたはその断片と比較して、約８４〜１５９ｋＤａ増加させることを含む。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約５６〜１１０ｋＤａの増加は、２個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約８４〜１６２ｋＤａの増加は、３個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約１１２〜２３０ｋＤａの増加は、４個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約１４０〜２８０ｋＤａの増加は、５個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約１６８〜３３０ｋＤａの増加は、６個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約１９６〜３９０ｋＤａの増加は、７個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約２２４〜４２５ｋＤａの増加は、８個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約２５２〜４８０ｋＤａの増加は、９個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。別の実施形態では、流体力学的サイズまたは流体力学的体積の約２８０〜３３０ｋＤａの増加は、１０個のグリコシル化ＣＴＰペプチドを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することにより達成される。

【0041】

一実施形態では、本明細書で提供される方法は、非グリコシル化ＣＴＰを目的ポリペプチドまたはその断片に結合することも含む。グリコシル化ＣＴＰおよび／または非グリコシル化ＣＴＰを用いて目的ポリペプチド（polyptide）またはその断片を修飾する様々な方法が実行され得ることを理解されたい。一実施形態では、目的のポリペプチドまたはその断片は、少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰのみ、または少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰのみを用いて修飾される。別の実施形態では、目的のポリペプチドまたはその断片は、少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰおよび少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰを用いて修飾される。別の実施形態では、グリコシル化ＣＴＰおよび／または非グリコシル化ＣＴＰの両方の切断型が、本明細書で提供される方法のために使用される。

【0042】

別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を特定の量だけ増加させることにより、目的ポリペプチドまたはその断片の生物活性、血中半減期、生物学的利用能、作用強度等を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、少なくとも１つの絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）をポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に結合することを含み、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰペプチドの目的ポリペプチドまたはその断片への結合は、ポリペプチドまたはその断片の未修飾形態と比較した場合に、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加をもたらし、前記特定の量は、非グリコシル化ＣＴＰが結合している目的ポリペプチドまたはその断片に依存する。別の実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰが目的ポリペプチドまたはその断片に結合される場合、非グリコシル化ＣＴＰが結合している目的ポリペプチドは、見掛けの分子量または流体力学的体積における増加量に影響する。別の実施形態では、１つの非グリコシル化ＣＴＰがｈＧＨに結合される場合、非グリコシル化ＣＴＰは、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）の流体力学的サイズまたは流体力学的体積に約８ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、１つの非グリコシル化ＣＴＰがエリスロポエチン（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｅｉｔｉｎ）（ＥＰＯ）に結合される場合、非グリコシル化ＣＴＰは、ＥＰＯの流体力学的サイズまたは流体力学的体積に約１６ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、１つの非グリコシル化ＣＴＰがアポリポタンパク質−Ａ１（ＡＰＯ−Ａ１）に結合される場合、非グリコシル化ＣＴＰは、ＡＰＯ−Ａ１の流体力学的サイズまたは流体力学的体積に約２１ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、１つの非グリコシル化ＣＴＰが第ＩＸ因子（ＦＩＸ）に結合される場合、非グリコシル化ＣＴＰは、ＦＩＸの流体力学的サイズまたは流体力学的体積に約２０ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、１つの非グリコシル化ＣＴＰが活性化第ＶＩＩ因子（ＦＶＩＩａ）に結合される場合、非グリコシル化ＣＴＰは、ＦＩＸの流体力学的サイズまたは流体力学的体積に約２０ｋＤａを寄与する。

【0043】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を増加させる方法は、ポリペプチドまたはその断片の生物学的利用能を増強する。

【0044】

別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を増加させる方法は、目的ポリペプチドまたはその断片の投与頻度を減少させる。

【0045】

一実施形態では、本明細書で提供される方法によって修飾されるポリペプチドは、サイトカイン、モノクローナル抗体、増殖因子、ホルモン、サイトカイン、凝固因子、酵素等である。

【0046】

別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰペプチドが結合するポリペプチドは、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、アポリポタンパク質Ａ１（ＡＰＯ−Ａ１）、第ＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）、第ＩＸ因子（ＦＩＸ）またはオキシントモジュリン（ＯＸＭ）である。

【0047】

一実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰはＥＰＯに約１６ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰは、ＥＰＯに結合された場合、ＥＰＯの見掛けの分子量に約１６ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰは、ｈＧＨに約８ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰは、ｈＧＨに結合された場合、ｈＧＨの見掛けの分子量に約８ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰは、ＡＰＯ−Ａ１に約２１ｋＤａを寄与する。別の実施形態では、少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰは、ＡＰＯ−Ａ１に結合された場合、ＡＰＯ−Ａ１の見掛けの分子量に約２１ｋＤａを寄与する。

【0048】

一実施形態では、非グリコシル化ＣＴＰは、非グリコシル化ＣＴＰが連結している各ポリペプチドに異なる流体力学的体積を寄与する。別の実施形態では、この差異は、非グリコシル化ＣＴＰが結合しているポリペプチドまたはその断片に依存する（本明細書の実施例３を参照）。別の実施形態では、非グリコシル化ＣＴＰは、予想外にも、それぞれの特定のポリペプチドに対し、ポリペプチドに結合している非グリコシル化ＣＴＰペプチドの数に関わらず、各ＣＴＰ当たり同一の流体力学的サイズを寄与する（本明細書の実施例３を参照）。

【0049】

一実施形態では、ｈＧＨの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ｈＧＨと比較して約２８〜４０ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約５６〜８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約２個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約８４〜１２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約３個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１１２〜１６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約４個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４０〜２００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約５個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６８〜２４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約６個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１９６〜２８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約７個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２２４〜３２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約８個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２５２〜３６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約９個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２８０〜４００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、約１０個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、１〜１０個の切断型または部分的なＣＴＰペプチドが目的ポリペプチドまたはその断片に結合される。

【0050】

一実施形態では、ＥＰＯの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＥＰＯと比較して約２８〜４０ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約５６〜８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約８４〜１２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１１２〜１６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４０〜２００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６８〜２４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１９６〜２８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２２４〜３２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２５２〜３６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２８０〜４００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。

【0051】

一実施形態では、ＡＰＯ−Ａ１の血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＡＰＯ−Ａ１と比較して約２８〜４０ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約５６〜８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約８４〜１２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１１２〜１６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４０〜２００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６８〜２４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１９６〜２８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約２２４〜３２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約２５２〜３６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約２８０〜４００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。

【0052】

一実施形態では、ＦＩＸの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＦＩＸと比較して約４８〜５３ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約９６〜１０６ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４４〜１５９ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１９２〜２１２ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２４０〜２６５ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２８８〜３１８ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約３３６〜３７１ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約３８４〜４２４ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約４３２〜５３０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約４８０〜５３０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。

【0053】

一実施形態では、ＦＶＩＩａの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＦＶＩＩａと比較して約４３〜５０ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約８６〜１００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１２９〜１５０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１７２〜２００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２１５〜２５０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２５８〜３００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約３０１〜３５０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約３４４〜４００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約３８７〜４５０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約４３０〜５００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個のグリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。

【0054】

一実施形態では、ｈＧＨの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ｈＧＨと比較して約８ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約１６ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２４ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約３２ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約４８ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約５６ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約６４ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約７２ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。別の実施形態では、約８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをｈＧＨに結合することにより達成される。

【0055】

一実施形態では、ＥＰＯの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＥＰＯと比較して約１６ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約３２ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約４８ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約９６ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１１２ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１２８ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４４ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＥＰＯに結合することにより達成される。

【0056】

一実施形態では、ＡＰＯ−Ａ１の血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＡＰＯ−Ａ１と比較して約２１ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約４２ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約６３〜１２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約８４ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１０５ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１２６ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４７ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６８ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約１８９ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。別の実施形態では、約２１０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＡＰＯ−Ａ１に結合することにより達成される。

【0057】

一実施形態では、ＦＩＸの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＦＩＸと比較して約２０ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＩＸに結合することにより達成される。

【0058】

一実施形態では、ＦＶＩＩａの血中半減期を延長させるまたは生物活性を増加させる方法が本明細書で提供され、前記方法は、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズまたは流体力学的体積を、未修飾ＦＶＩＩａと比較して約２０ｋＤａ増加させるステップを含む。別の実施形態では、約４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、２個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、３個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、４個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、５個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１２０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、６個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１４０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、７個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１６０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、８個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約１８０ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、９個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。別の実施形態では、約２００ｋＤａの流体力学的サイズまたは流体力学的体積の増加は、１０個の非グリコシル化ＣＴＰペプチドをＦＶＩＩａに結合することにより達成される。

【0059】

一実施形態では、流体力学的体積は、生物試料中の目的タンパク質の滞留時間を延長させる。別の実施形態では、流体力学的体積は、生物試料中の目的タンパク質の曲線下面積（ＡＵＣ）を拡張する。別の実施形態では、生物試料は、血液、標的組織（例えば、連結部（ｊｏｉｎ）、ＣＮＳ）、脳脊髄液（ＣＳＦ）、リンパ液、または血清である。

【0060】

別の実施形態では、流体力学的体積の増加は、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片の生物学的利用能を増加させる。別の実施形態では、ポリペプチドの流体力学的体積の増加はまた、ポリペプチドまたはその断片の血中半減期を延長させる。

【0061】

別の実施形態では、流体力学的体積の増加は、ポリペプチドの生理活性を増加させる。

【0062】

別の実施形態では、用語「ＣＴＰペプチド」、「カルボキシ末端ペプチド」および「ＣＴＰ配列」は、本明細書においては同義的に用いられる。別の実施形態では、カルボキシ末端ペプチドは完全長ＣＴＰである。別の実施形態では、カルボキシ末端ペプチドは切断型ＣＴＰである。それぞれの可能性は本発明の別々の実施形態を表す。

【0063】

別の実施形態では、米国特許第７，５５３，９４０号明細書（特許文献１）（この特許の全体は参照することによって本明細書に組み込まれる）に記載されているように、シグナルペプチドがＣＴＰのアミノ末端に結合される。

【0064】

別の実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰがリンカーを介してポリペプチドに結合される。別の実施形態では、リンカーはペプチド結合である。別の実施形態では、融合タンパク質はＣＴＰ−修飾ポリペプチドを形成する。一実施形態では、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的体積を増加させる方法は、ポリペプチドまたはその断片のアミノ末端またはカルボキシル末端上で、ポリペプチドまたはその断片を少なくとも１つのＣＴＰペプチドに融合させることを含む。別の実施形態では、ＣＴＰはポリペプチドまたはその断片に組換えによって融合される。別の実施形態では、ＣＴＰはポリペプチドまたはその断片に化学的に結合される。

【0065】

一実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドは、５０個未満のアミノ酸を含むペプチドおよび前記ペプチドのＮ−（アミノ）またはＣ−（カルボキシ）末端に結合された少なくとも１つの絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドを含む。

【0066】

一実施形態では、Ｎ末端および／またはＣ末端に結合された少なくとも単一のＣＴＰを含む本発明の目的改変ポリペプチドは、生物活性の点で、目的の非ＣＴＰ修飾ポリペプチドと少なくとも同等である。他の実施形態では、Ｎ末端および／またはＣ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰを含む本発明の目的改変ポリペプチドは、薬物動態学および薬力学等の薬理学的基準の面で、目的の非ＣＴＰ修飾ポリペプチドと少なくとも同等である。

【0067】

一実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ配列は以下を含む：ＤＰＲＦＱＤＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬ（配列番号１）。別の実施形態では、ＣＴＰ配列は以下を含む：ＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号２）。別の実施形態では、ＣＴＰ配列は、配列番号１および配列番号２に記載の配列から選択されるアミノ酸配列を含む。さらに別の実施形態では、ＣＴＰ配列は、配列番号１および配列番号２からなる群から選択される。

【0068】

一実施形態では、本発明のカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）ペプチドは、ヒト絨毛性ゴナドトロピンのアミノ酸１１２から１４５位までのアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、本発明のＣＴＰ配列は、配列番号２に記載される、ヒト絨毛性ゴナドトロピンのアミノ酸１１８から１４５位までのアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、ＣＴＰ配列はまた、ヒト絨毛性ゴナドトロピンの１１２〜１１８位の任意の位置から開始され、１４５位で終結する。別の実施形態では、ＣＴＰ配列ペプチドは、２８、２９、３０、３１、３２、３３または３４アミノ酸長であり、ＣＴＰアミノ酸配列の１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、１１７または１１８位で開始する。

【0069】

一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号３の最初の１０個のアミノ酸を含む。別の実施形態では、配列番号３は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰ。

【0070】

一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２の最初の１１個のアミノ酸を含む。一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２の最初の１２個のアミノ酸を含む。一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２または配列番号３の最初の８個のアミノ酸を含む。一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２の最初の１３個のアミノ酸を含む。一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２の最初の１４個のアミノ酸を含む。一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２または配列番号３の最初の６個のアミノ酸を含む。一実施形態では、切断型ＣＴＰは、配列番号２または配列番号３の最初の５個のアミノ酸を含む。

【0071】

別の実施形態では、ＣＴＰペプチドは、米国特許第５，７１２，１２２号明細書（特許文献２）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている、１〜５個の保存的アミノ酸置換により天然ＣＴＰと異なる絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰの変異体である。別の実施形態では、１個の保存的アミノ酸置換により天然ＣＴＰと異なる絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰの変異体である。別の実施形態では、ＣＴＰペプチドは、２個の保存的アミノ酸置換により天然ＣＴＰと異なる絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰの変異体である。別の実施形態では、ＣＴＰペプチドは、３個の保存的アミノ酸置換により天然ＣＴＰと異なる絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰの変異体である。別の実施形態では、ＣＴＰペプチドは、４個の保存的アミノ酸置換により天然ＣＴＰと異なる絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰの変異体である。別の実施形態では、ＣＴＰペプチドは、５個の保存的アミノ酸置換により天然ＣＴＰと異なる絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰの変異体である。

【0072】

別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも４０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも５０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも６０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも７０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも８０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも９０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも９５％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドアミノ酸配列は、天然ＣＴＰアミノ酸配列またはそのペプチドと少なくとも９８％相同である。

【0073】

別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドをコードするポリヌクレオチドは、天然ヒトＣＴＰのＤＮＡ配列またはそのペプチドと少なくとも７０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドをコードするポリヌクレオチドは、天然ヒトＣＴＰのＤＮＡ配列またはそのペプチドと少なくとも80％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドをコードするポリヌクレオチドは、天然ＣＴＰのＤＮＡ配列またはそのペプチドと少なくとも９０％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドをコードするポリヌクレオチドは、天然ＣＴＰのＤＮＡ配列またはそのペプチドと少なくとも９５％相同である。別の実施形態では、本発明のＣＴＰペプチドをコードするポリヌクレオチドは、天然ＣＴＰのＤＮＡ配列またはそのペプチドと少なくとも９８％相同である。

【0074】

一実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち少なくとも１つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列の両方が切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち２つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち３つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち４つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち５つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち６つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち７つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち８つが切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち２つ以上が切断されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列の全てが切断されている。

【0075】

一実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰペプチドは、リンカーを介して本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片に結合される。一実施形態では、１〜１０個のＣＴＰペプチドがリンカーを介して本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片に結合される。一実施形態では、少なくとも１つのＣＴＰがリンカーを介して本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片に結合される。別の実施形態では、リンカーはペプチド結合である。

【0076】

一実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち少なくとも１つがグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列の両方がグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち２つがグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち３つがグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち４つがグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち５つがグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち２つ以上がグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列の全てがグリコシル化されている。

【0077】

一実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち少なくとも１つがグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列の両方がグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち２つがグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち３つがグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち４つがグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち５つがグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち２つ以上がグリコシル化されていない。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列の全てがグリコシル化されていない。

【0078】

一実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、少なくとも１つの糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、２個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、３個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、４個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、５個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、６個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、７個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のグリコシル化ＣＴＰ配列は、８個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のＣＴＰ配列は、１〜４個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のＣＴＰ配列は、４〜９個の糖鎖付加部位を含む。別の実施形態では、本発明のＣＴＰ配列は、６〜１２個の糖鎖付加部位を含む。

【0079】

一実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち少なくとも１つが完全にグリコシル化されている。別の実施形態では、絨毛性ゴナドトロピンＣＴＰアミノ酸配列のうち少なくとも１つが部分的にグリコシル化されている。一実施形態では、部分的にグリコシル化されたとは、ＣＴＰ糖鎖付加部位の少なくとも１つがグリコシル化されていることを表す。別の実施形態では、糖鎖付加部位はＯ−糖鎖付加部位である。別の実施形態では、糖鎖付加部位はＮ−糖鎖付加部位である。

【0080】

一実施形態では、ＣＴＰ配列修飾は、目的のポリペプチド、薬剤、または作用剤に結合された場合のより低量の投与の使用を可能にすることにおいて有利である。別の実施形態では、ＣＴＰ配列修飾は、目的のポリペプチド、薬剤、または作用剤の、より少ない回数の投与の使用を可能にすることにおいて有利である。別の実施形態では、ＣＴＰ配列修飾は、目的のＣＴＰ−修飾ポリペプチド、薬剤、または作用剤を投与する場合に、安全な長時間作用性の効果を可能にすることにおいて有利である。

【0081】

別の実施形態では、目的ポリペプチドおよび本明細書におけるＣＴＰペプチドへの修飾としては、限定はされないが、Ｃ末端修飾、ポリペプチド結合修飾、例えば、限定はされないが、ＣＨ２−ＮＨ、ＣＨ２−Ｓ、ＣＨ２−Ｓ＝Ｏ、Ｏ＝Ｃ−ＮＨ、ＣＨ２−Ｏ、ＣＨ２−ＣＨ２、Ｓ＝Ｃ−ＮＨ、ＣＨ＝ＣＨまたはＣＦ＝ＣＨ、骨格修飾、および残基修飾が挙げられる。ペプチド模倣化合物を調製するための方法は当該技術分野において周知であり、例えば、Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ， Ｃ．Ａ． Ｒａｍｓｄｅｎ Ｇｄ．， Ｃｈａｐｔｅｒ １７．２， Ｆ． Ｃｈｏｐｌｉｎ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ （１９９２）（本明細書に完全に記載されているかの如く参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されている。この点におけるさらなる詳細は、本明細書における下記で提供される。

【0082】

別の実施形態では、ポリペプチド内のポリペプチド結合（−ＣＯ−ＮＨ−）は置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合はＮ−メチル化結合（−Ｎ（ＣＨ３）−ＣＯ−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合はエステル結合（−Ｃ（Ｒ）Ｈ−Ｃ−Ｏ−Ｏ−Ｃ（Ｒ）−Ｎ−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合はケトメチレン（ｋｅｔｏｍｅｔｈｙｌｅｎ）結合（−ＣＯ−ＣＨ２−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合は、α−アザ結合（−ＮＨ−Ｎ（Ｒ）−ＣＯ−）によって置換されており、式中、Ｒはあらゆるアルキル、例えば、メチル、カルバ（ｃａｒｂａ）結合（−ＣＨ２−ＮＨ−）である。別の実施形態では、ポリペプチド結合は、ヒドロキシエチレン結合（−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合は、チオアミド結合（−ＣＳ−ＮＨ−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合は、オレフィン二重結合（−ＣＨ＝ＣＨ−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合は、レトロアミド結合（−ＮＨ−ＣＯ−）によって置換されている。別の実施形態では、ポリペプチド結合は、ポリペプチド誘導体（−Ｎ（Ｒ）−ＣＨ２−ＣＯ−）によって置換されており、式中、Ｒは炭素原子上に天然に提示される「通常の」側鎖である。別の実施形態では、これらの修飾は、ポリペプチド鎖上の結合のいずれにおいてにも発生し、一実施形態では、いくつかの（２〜３個の結合）において同時に発生する。

【0083】

一実施形態では、Ｔｒｐ、ＴｙｒおよびＰｈｅ等のポリペプチドの天然芳香族アミノ酸は、フェニルグリシン、ＴＩＣ、ナフチルエラニン（ｎａｐｈｔｈｙｌｅｌａｎｉｎｅ）（Ｎｏｌ）、Ｐｈｅの環メチル化誘導体、Ｐｈｅのハロゲン化誘導体またはｏ−メチル−Ｔｙｒ等の合成非天然酸に置換されている。別の実施形態では、本発明のポリペプチドには、一つもしくは複数の修飾アミノ酸または一つもしくは複数の非アミノ酸単量体（例えば、脂肪酸、複合糖質等）が含まれる。

【0084】

一実施形態では、「アミノ酸」または「アミノ酸配列」は、２０種の自然発生的なアミノ酸；しばしばインビボにおいて翻訳後修飾されるアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、ホスホセリンおよびホスホトレオニン；並びに他の通常のものではないアミノ酸、例えば、限定はされないが、２−アミノアジピン酸、ヒドロキシリジン、イソデスモシン、ノルバリン、ノルロイシンおよびオルニチンを含むものと理解される。一実施形態では、「アミノ酸」には、Ｄ−アミノ酸およびＬ−アミノ酸の両方が含まれる。

【0085】

別の実施形態では、本発明の改変されたポリペプチドまたはペプチドは、標準的な固相法の使用等により生化学的に合成される。別の実施形態では、これらの生化学的手法には、排他的な固相合成、部分的な固相合成、フラグメント縮合、または古典的な溶液合成が含まれる。

【0086】

一実施形態では、タンパク質組換え技術が、本発明の目的の改変ポリペプチドまたはその断片を生成するのに用いられる。別の実施形態では、組換え技術は、Ｂｉｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ．， （１９８７） Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ． １５３：５１６−５４４， Ｓｔｕｄｉｅｒ ｅｔ ａｌ． （１９９０） Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ． １８５：６０−８９， Ｂｒｉｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ． （１９８４） Ｎａｔｕｒｅ ３１０：５１１−５１４， Ｔａｋａｍａｔｓｕ ｅｔ ａｌ． （１９８７） ＥＭＢＯ Ｊ． ６：３０７−３１１， Ｃｏｒｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ． （１９８４） ＥＭＢＯ Ｊ． ３：１６７１−１６８０およびＢｒｏｇｌｉ ｅｔ ａｌ．， （１９８４） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２４：８３８−８４３， Ｇｕｒｌｅｙ ｅｔ ａｌ． （１９８６） Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． ６：５５９−５６５およびＷｅｉｓｓｂａｃｈ ＆ Ｗｅｉｓｓｂａｃｈ， １９８８， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， ＮＹ， Ｓｅｃｔｉｏｎ ＶＩＩＩ， ｐｐ ４２１−４６３（これらの全体は参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されている。

【0087】

別の実施形態では、目的のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、５０未満のアミノ酸を含むペプチド並びにポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に結合された少なくとも１つのグリコシル化および／または非グリコシル化絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドを含む。一実施形態では、本明細書において提供される目的のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、40未満のアミノ酸を含むペプチド並びにポリペプチドのＮ末端またはＣ末端に結合された少なくとも１つのグリコシル絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドを含む。別の実施形態では、本明細書において提供される目的のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、３０未満、２０未満、または１０未満のアミノ酸を含むペプチドを含む。一実施形態では、５０未満のアミノ酸を含む目的ポリペプチドまたはその断片には、本明細書で提供されるペプチドが含まれる。別の実施形態では、５０未満のアミノ酸を含むペプチドは、ｈＧＨ、ＯＸＭ、ＥＰＯ、アポリポタンパク質Ａ１（ＡＰＯ−Ａ１）、インターフェロン、サイトカインまたは凝固因子である。

【0088】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＥＰＯである。一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＡＰＯである。一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＦＶＩＩａである。一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＦＩＸである。一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はインターフェロンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はｈＧＨである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＯＸＭである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＧＬＰ−１である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はインスリンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はエンケファリンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＡＣＴＨである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はグルカゴンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はインスリン様増殖因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は上皮増殖因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は酸性または塩基性線維芽細胞増殖因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は血小板由来増殖因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は顆粒球−ＣＳＦである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はマクロファージ−ＣＳＦである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＩＬ−２である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＩＬ−３である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は腫瘍壊死因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＬＨＲＨである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はＬＨＲＨ類似体である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はソマトスタチンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は成長ホルモン放出因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はエンドルフィンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は肺胞サーファクタントタンパク質である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はナトリウム利尿因子である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はアドヘシンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はアンジオスタチンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はエンドスタチンである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は受容体ペプチドである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は受容体結合リガンドである。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は抗体である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は抗体断片である。別の実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は、あらゆる改変形態を含むペプチドまたはタンパク質である。

【0089】

別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片は、Ｎ末端上に結合された少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよび／またはＣ末端上に結合された１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドをさらに含む。別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片は、以下の列挙から選択される：インスリン、Ａｌｂｕｔｅｉｎ／アルブミン、Ａｃｔｉｖａｓｅアルテプラーゼ（ａｌｔｉｐｌａｓｅ）／ｔＰＡ、アデノシンデアミナーゼ、免疫グロブリン、グルコセレブロシダーゼ、Ｌｅｕｋｉｎｅ−サルグラモスチム／ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、Ｖｅｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ−Ｓ／ＩｇＧ、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎアルデスロイキン、デオキシリボヌクレアーゼ、第ＶＩＩＩ因子、Ｈｅｌｉｘａｔｅ、Ｌ−アスパラギナーゼ、ＷｉｎＲｈｏ ＳＤＦ Ｒｈ Ｉ、Ｒｅｔａｖａｓｅレテプラーゼ（ｒｅｔａｐｌａｓｅ）／ｔＰＡ、第ＩＸ因子、ＦＳＨ、グロブリン、フィブリン、インターロイキン−１１、ベカプレルミン／ＰＤＧＦ、レピルジン／ヒルジン（ｈｅｒｕｄｉｎ）、ＴＮＦ、Ｔｈｙｍｏｇｌｏｂｕｌｉｎ、活性化第ＶＩＩ因子、インターフェロンα−２ａ、インターフェロンα ｎ−１、インターフェロンα−Ｎ３、インターフェロンβ−１ｂ、インターフェロンγ−１ｂ、インターロイキン−２、ｈＧＨ、またはモノクローナル抗体。

【0090】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は、シグナルペプチドをさらに含む。別の実施形態では、目的ポリペプチドまたはその断片は成長ホルモンである。別の実施形態では、成長ホルモンはシグナルペプチドをさらに含む。別の実施形態では、発現および分泌の後、シグナルペプチドが改変ペプチド／ポリペプチドの前駆物質から切断され、その結果、成熟した改変ペプチド／ポリペプチドが得られる。別の実施形態では、シグナル配列には、限定はされないが、内在性シグナル配列が含まれる。

【0091】

別の実施形態では、本発明のポリペプチドおよび方法は、以下のアミノ酸配列を含むシグナルペプチドを追加で有する成長ホルモンを提供する：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡ（配列番号４）。

【0092】

別の実施形態では、本発明のＣＴＰ修飾または複合型成長ホルモンは、未修飾成長ホルモンとして同様に用いられる。別の実施形態では、本発明の複合型成長ホルモンは、インビボにおいて、延長された循環血液中半減期および血漿中滞留時間、減少されたクリアランス、並びに増加された臨床活性を有する。別の実施形態では、本明細書に記載の複合型成長ホルモンの特性が向上されることから、これらの複合型は、未修飾成長ホルモンよりもより少ない頻度で投与される。別の実施形態では、本明細書に記載の複合型成長ホルモンは、週１回から２週間に１回投与される。別の実施形態では、本明細書に記載の複合型成長ホルモンは、２週間に１回から３週間に１回投与される。別の実施形態では、本明細書に記載の複合型成長ホルモンは、１日１回から週３回投与される。別の実施形態では、投与頻度の減少は、患者の服薬遵守の改善をもたらし、治療成績の向上、および患者の生活の質の向上に繋がる。別の実施形態では、従来の、ポリ（エチレングリコール）に連結された成長ホルモンの複合体と比較した場合、本発明の複合体の分子量およびリンカー構造を有する成長ホルモンＣＴＰ複合体が、向上した作用強度、向上した安定性、増加した曲線下面積（ＡＵＣ）レベル、および延長された循環血液中半減期を有することが分かっている。別の実施形態では、従来の、ポリ（エチレングリコール）に連結された成長ホルモンの複合体と比較した場合、本発明の複合体の分子量およびリンカー構造を有する成長ホルモンＣＴＰが、向上した作用強度、向上した安定性、増加したＡＵＣレベル、および延長された循環血液中半減期を有することが分かっている。別の実施形態では、従来の、ポリ（エチレングリコール）に連結された成長ホルモンの複合体と比較した場合、本発明の複合体の最適な流体力学的体積を有する成長ホルモンＣＴＰが、向上した作用強度、向上した安定性、増加したＡＵＣレベル、および延長された循環血液中半減期を有することが分かっている。別の実施形態では、複合型成長ホルモンの治療有効量は、インビボにおける測定可能な期待される生物活性に必要な、複合型の量である。別の実施形態では、本発明の教示に従って利用される成長ホルモンは、増加された作用強度を示す。別の実施形態では、成長ホルモンのＮ末端およびＣ末端の両方へのＣＴＰ配列の結合は、延長されたインビボ活性をもたらす。

【0093】

別の実施形態では、成長ホルモンは当業者に公知のあらゆる成長ホルモンである。別の実施形態では、成長ホルモンはヒト成長ホルモンである。別の実施形態では、成長ホルモンのヌクレオチド配列および／またはアミノ酸配列は、遺伝子バンクデータベースにおいて入手可能である。別の実施形態では、成長ホルモンは、本明細書で提供される成長ホルモンの相同体および／または遺伝子バンクデータベースで提供される成長ホルモンの相同体である。別の実施形態では、相同体はまた、その欠失、挿入、または置換変異体（例えば、アミノ酸置換）および生物学的に活性なそのポリペプチド断片を指す。

【0094】

別の実施形態では、成長ホルモンは、エクソン２、３、４、またはそのあらゆる組み合わせが欠損したｈＧＨの変異体である。別の実施形態では、成長ホルモンはシグナルペプチドを含む。別の実施形態では、成長ホルモンはシグナル切断部位を含む。別の実施形態では、本発明のＣＴＰで修飾されたＧＨを含むポリペプチドは、組換えＧＨを含む。

【0095】

別の実施形態では、本明細書に記載の成長ホルモンは、成長ホルモン（ＧＨ）様サイトカインのスーパーファミリーのメンバーである。別の実施形態では、本明細書に記載の成長ホルモンはヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）である。別の実施形態では、ヒト成長ホルモンは以下のアミノ酸配列（ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１）を含む：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦ（配列番号５）。

【0096】

別の実施形態では、ヒト成長ホルモンは以下のアミノ酸配列を含む：ＭＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦ（配列番号６）。別の実施形態では、ヒト成長ホルモンは以下のアミノ酸配列を含む：ＭＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡ（配列番号７）。別の実施形態では、ｈＧＨは以下のアミノ酸配列を含む：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＶＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦ（配列番号８）。別の実施形態では、ｈＧＨは、ｈＧＨの６５位のグルタミンがバリンによって置換されている置換変異体である。

【0097】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＡＡＡ７２２６０を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＡＡＫ６９７０８を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＣＡＡ０１４３５を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＣＡＡ０１３２９を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＣＡＡ００３８０を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＡＡＡ７２５５５を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＮＰ＿０００５０６．２を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＮＰ＿０７２０５３．１を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＮＰ＿０７２０５４．１を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＮＰ＿０７２０５５．１を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、受託番号ＮＰ＿０７２０５６．１を有する遺伝子バンクアミノ酸供託配列を含む。

【0098】

別の実施形態では、本明細書に記載の成長ホルモンをコードする核酸分子は、当業者に公知の成長ホルモンのあらゆるアミノ酸配列をコードする。別の実施形態では、本明細書に記載の成長ホルモンをコードする核酸分子はｈＧＨをコードする。別の実施形態では、成長ホルモンをコードする核酸分子は、受託番号ＮＭ＿０００５１５．３を有する遺伝子バンク核酸供託配列を含む。別の実施形態では、成長ホルモンをコードする核酸分子は、受託番号ＮＭ＿０２２５５９．２を有する遺伝子バンク核酸供託配列を含む。別の実施形態では、成長ホルモンをコードする核酸分子は、受託番号ＮＭ＿０２２５６０．２を有する遺伝子バンク核酸供託配列を含む。別の実施形態では、成長ホルモンをコードする核酸分子は、受託番号ＮＭ＿０２２５６１．２を有する遺伝子バンク核酸供託配列を含む。別の実施形態では、成長ホルモンをコードする核酸分子は、受託番号ＮＭ＿０２２５６２．２を有する遺伝子バンク核酸供託配列を含む。

【0099】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンを含むポリペプチドは、成長ホルモンのＣ末端に結合された１つのＣＴＰを含み（ｈＧＨ−ＣＴＰ）、以下のアミノ酸配列を有する：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号９）。

【0100】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンを含むポリペプチドは、成長ホルモンのＣ末端に結合された２つのＣＴＰを直列に含み（ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰ）、以下のアミノ酸配列を有する：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号１０）。

【0101】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンを含むポリペプチドは、成長ホルモンのＣ末端に直列に結合された２つのＣＴＰおよび成長ホルモンのＮ末端に結合された１つのＣＴＰを含み（ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰ）、以下のアミノ酸配列を有する：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号１１）。

【0102】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンを含むポリペプチドは、成長ホルモンのＣ末端に直列に結合された２つのＣＴＰを含み、２つのＣＴＰのうち一方のＣＴＰは切断されており、もう一方のＣＴＰは成長ホルモンのＮ末端に結合されており（ｔＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰ）、以下のアミノ酸配列を有する：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号１２）。

【0103】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンを含むポリペプチドは、成長ホルモンのＣ末端に結合された１つのＣＴＰおよび成長ホルモンのＮ末端に結合された１つのＣＴＰを含み（ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ）、以下のアミノ酸配列を有する：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号１３）。

【0104】

別の実施形態では、成長ホルモンおよび１つのＣＴＰを含むポリペプチドは以下のアミノ酸配列を含む：ＭＡＴＧＳＲＴＳＬＬＬＡＦＧＬＬＣＬＰＷＬＱＥＧＳＡＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＦＰＴＩＰＬＳＲＬＦＤＮＡＭＬＲＡＨＲＬＨＱＬＡＦＤＴＹＱＥＦＥＥＡＹＩＰＫＥＱＫＹＳＦＬＱＮＰＱＴＳＬＣＦＳＥＳＩＰＴＰＳＮＲＥＥＴＱＱＫＳＮＬＥＬＬＲＩＳＬＬＬＩＱＳＷＬＥＰＶＱＦＬＲＳＶＦＡＮＳＬＶＹＧＡＳＤＳＮＶＹＤＬＬＫＤＬＥＥＧＩＱＴＬＭＧＲＬＥＤＧＳＰＲＴＧＱＩＦＫＱＴＹＳＫＦＤＴＮＳＨＮＤＤＡＬＬＫＮＹＧＬＬＹＣＦＲＫＤＭＤＫＶＥＴＦＬＲＩＶＱＣＲＳＶＥＧＳＣＧＦ（配列番号１４）。

【0105】

別の実施形態では、ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰを有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド分子は、以下の核酸配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇｇｃｃａｃｃｇｇｃａｇｃａｇｇａｃｃａｇｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｇｃｃｔｔｃｇｇｃｃｔｇｃｔｇｔｇｃｃｔｇｃｃａｔｇｇｃｔｇｃａｇｇａｇｇｇｃａｇｃｇｃｃａｇｃｔｃｔｔｃｔｔｃｔａａｇｇｃｔｃｃａｃｃｃｃｃａｔｃｔｃｔｇｃｃｃａｇｃｃｃｃａｇｃａｇａｃｔｇｃｃｇｇｇｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｃａｃｃｃａｔｔｃｔｇｃｃｃｃａｇｔｔｃｃｃｃａｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｇａｇｃａｇｇｃｔｇｔｔｃｇａｃａａｃｇｃｃａｔｇｃｔｇａｇｇｇｃｔｃａｃａｇｇｃｔｇｃａｃｃａｇｃｔｇｇｃｃｔｔｔｇａｃａｃｃｔａｃｃａｇｇａｇｔｔｃｇａｇｇａａｇｃｃｔａｃａｔｃｃｃｃａａｇｇａｇｃａｇａａｇｔａｃａｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａａｃｃｃｃｃａｇａｃｃｔｃｃｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃｇａｇａｇｃａｔｃｃｃｃａｃｃｃｃｃａｇｃａａｃａｇａｇａｇｇａｇａｃｃｃａｇｃａｇａａｇａｇｃａａｃｃｔｇｇａｇｃｔｇｃｔｇａｇｇａｔｃｔｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇａｔｃｃａｇａｇｃｔｇｇｃｔｇｇａｇｃｃｃｇｔｇｃａｇｔｔｃｃｔｇａｇａａｇｃｇｔｇｔｔｃｇｃｃａａｃａｇｃｃｔｇｇｔｇｔａｃｇｇｃｇｃｃａｇｃｇａｃａｇｃａａｃｇｔｇｔａｃｇａｃｃｔｇｃｔｇａａｇｇａｃｃｔｇｇａｇｇａｇｇｇｃａｔｃｃａｇａｃｃｃｔｇａｔｇｇｇｃｃｇｇｃｔｇｇａｇｇａｃｇｇｃａｇｃｃｃｃａｇｇａｃｃｇｇｃｃａｇａｔｃｔｔｃａａｇｃａｇａｃｃｔａｃａｇｃａａｇｔｔｃｇａｃａｃｃａａｃａｇｃｃａｃａａｃｇａｃｇａｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇａａｇａａｃｔａｃｇｇｇｃｔｇｃｔｇｔａｃｔｇｃｔｔｃａｇａａａｇｇａｃａｔｇｇａｃａａｇｇｔｇｇａｇａｃｃｔｔｃｃｔｇａｇｇａｔｃｇｔｇｃａｇｔｇｃａｇａａｇｃｇｔｇｇａｇｇｇｃａｇｃｔｇｃｇｇｃｔｔｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｃｃｃｇａｇｃｃｔｇｃｃｃｔｃｃｃｃａａｇｃａｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｃｃｔｇｃｃｔｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号１５）。

【0106】

別の実施形態では、ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰを有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド分子は、以下の核酸配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇｇｃｃａｃｃｇｇｃａｇｃａｇｇａｃｃａｇｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｇｃｃｔｔｃｇｇｃｃｔｇｃｔｇｔｇｃｃｔｇｃｃａｔｇｇｃｔｇｃａｇｇａｇｇｇｃａｇｃｇｃｃａｇｃｔｃｔｔｃｔｔｃｔａａｇｇｃｔｃｃａｃｃｃｃｃａｔｃｔｃｔｇｃｃｃａｇｃｃｃｃａｇｃａｇａｃｔｇｃｃｇｇｇｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｃａｃｃｃａｔｔｃｔｇｃｃｃｃａｇｔｔｃｃｃｃａｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｇａｇｃａｇｇｃｔｇｔｔｃｇａｃａａｃｇｃｃａｔｇｃｔｇａｇｇｇｃｔｃａｃａｇｇｃｔｇｃａｃｃａｇｃｔｇｇｃｃｔｔｔｇａｃａｃｃｔａｃｃａｇｇａｇｔｔｃｇａｇｇａａｇｃｃｔａｃａｔｃｃｃｃａａｇｇａｇｃａｇａａｇｔａｃａｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａａｃｃｃｃｃａｇａｃｃｔｃｃｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃｇａｇａｇｃａｔｃｃｃｃａｃｃｃｃｃａｇｃａａｃａｇａｇａｇｇａｇａｃｃｃａｇｃａｇａａｇａｇｃａａｃｃｔｇｇａｇｃｔｇｃｔｇａｇｇａｔｃｔｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇａｔｃｃａｇａｇｃｔｇｇｃｔｇｇａｇｃｃｃｇｔｇｃａｇｔｔｃｃｔｇａｇａａｇｃｇｔｇｔｔｃｇｃｃａａｃａｇｃｃｔｇｇｔｇｔａｃｇｇｃｇｃｃａｇｃｇａｃａｇｃａａｃｇｔｇｔａｃｇａｃｃｔｇｃｔｇａａｇｇａｃｃｔｇｇａｇｇａｇｇｇｃａｔｃｃａｇａｃｃｃｔｇａｔｇｇｇｃｃｇｇｃｔｇｇａｇｇａｃｇｇｃａｇｃｃｃｃａｇｇａｃｃｇｇｃｃａｇａｔｃｔｔｃａａｇｃａｇａｃｃｔａｃａｇｃａａｇｔｔｃｇａｃａｃｃａａｃａｇｃｃａｃａａｃｇａｃｇａｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇａａｇａａｃｔａｃｇｇｇｃｔｇｃｔｇｔａｃｔｇｃｔｔｃａｇａａａｇｇａｃａｔｇｇａｃａａｇｇｔｇｇａｇａｃｃｔｔｃｃｔｇａｇｇａｔｃｇｔｇｃａｇｔｇｃａｇａａｇｃｇｔｇｇａｇｇｇｃａｇｃｔｇｃｇｇｃｔｔｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｃｃｃｇａｇｃｃｔｇｃｃｃｔｃｃｃｃａａｇｃａｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｃｃｔｇｃｃａｃａｇａｇｃａｇｃｔｃｃｔｃｔａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｔｃｃａｔｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｃｃｃｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｃｃｃｃｔｃｔｇａｃａｃｃｃｃｔａｔｃｃｔｇｃｃｔｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号１６）。

【0107】

別の実施形態では、ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰを有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド分子は、以下の核酸配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇｇｃｃａｃｃｇｇｃａｇｃａｇｇａｃｃａｇｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｇｃｃｔｔｃｇｇｃｃｔｇｃｔｇｔｇｃｃｔｇｃｃａｔｇｇｃｔｇｃａｇｇａｇｇｇｃａｇｃｇｃｃａｇｃｔｃｔｔｃｔｔｃｔａａｇｇｃｔｃｃａｃｃｃｃｃｇａｇｃｃｔｇｃｃｃｔｔｃｃｃｃａｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｇａｇｃａｇｇｃｔｇｔｔｃｇａｃａａｃｇｃｃａｔｇｃｔｇａｇｇｇｃｔｃａｃａｇｇｃｔｇｃａｃｃａｇｃｔｇｇｃｃｔｔｔｇａｃａｃｃｔａｃｃａｇｇａｇｔｔｃｇａｇｇａａｇｃｃｔａｃａｔｃｃｃｃａａｇｇａｇｃａｇａａｇｔａｃａｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａａｃｃｃｃｃａｇａｃｃｔｃｃｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃｇａｇａｇｃａｔｃｃｃｃａｃｃｃｃｃａｇｃａａｃａｇａｇａｇｇａｇａｃｃｃａｇｃａｇａａｇａｇｃａａｃｃｔｇｇａｇｃｔｇｃｔｇａｇｇａｔｃｔｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇａｔｃｃａｇａｇｃｔｇｇｃｔｇｇａｇｃｃｃｇｔｇｃａｇｔｔｃｃｔｇａｇａａｇｃｇｔｇｔｔｃｇｃｃａａｃａｇｃｃｔｇｇｔｇｔａｃｇｇｃｇｃｃａｇｃｇａｃａｇｃａａｃｇｔｇｔａｃｇａｃｃｔｇｃｔｇａａｇｇａｃｃｔｇｇａｇｇａｇｇｇｃａｔｃｃａｇａｃｃｃｔｇａｔｇｇｇｃｃｇｇｃｔｇｇａｇｇａｃｇｇｃａｇｃｃｃｃａｇｇａｃｃｇｇｃｃａｇａｔｃｔｔｃａａｇｃａｇａｃｃｔａｃａｇｃａａｇｔｔｃｇａｃａｃｃａａｃａｇｃｃａｃａａｃｇａｃｇａｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇａａｇａａｃｔａｃｇｇｇｃｔｇｃｔｇｔａｃｔｇｃｔｔｃａｇａａａｇｇａｃａｔｇｇａｃａａｇｇｔｇｇａｇａｃｃｔｔｃｃｔｇａｇｇａｔｃｇｔｇｃａｇｔｇｃａｇａａｇｃｇｔｇｇａｇｇｇｃａｇｃｔｇｃｇｇｃｔｔｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｃｃｃｇａｇｃｃｔｇｃｃｃｔｃｃｃｃａａｇｃａｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｃｃｔｇｃｃａｃａｇａｇｃａｇｃｔｃｃｔｃｔａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｔｃｃａｔｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｃｃｃｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｃｃｃｃｔｃｔｇａｃａｃｃｃｃｔａｔｃｃｔｇｃｃｔｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号１７）。

【0108】

別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、は、成長ホルモンの公知配列と相同である。別の実施形態では、本発明の成長ホルモンは、本明細書に記載される成長ホルモン配列と相同である。別の実施形態では、本発明による相同性には、その欠失、挿入、または置換変異体（例えば、アミノ酸置換）およびその生物学的に活性なポリペプチド断片も包含される。一実施形態では、置換変異体はｈＧＨの６５位のグルタミンがバリンで置換されているものである［Ｇｅｌｌｅｒｆｏｒｓ ｅｔ ａｌ．， Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｂｉｏｍｅｄ Ａｎａｌ １９８９， ７：１７３−８３］。

【0109】

一実施形態では、成句「ヒト成長ホルモン」（ｈＧＨ）とは、ｈＧＨ活性（すなわち、成長の刺激）を示す、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載されるもの等のポリペプチドを指す。

【0110】

一実施形態では、「ヒト成長ホルモン」（ｈＧＨ）とは、ｈＧＨ活性（すなわち、成長の刺激）を示す、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載されるもの等のポリペプチドを指す。一実施形態では、本発明のｈＧＨは相同体も指す。一実施形態では、本発明のｈＧＨアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載のｈＧＨ配列と少なくとも５０％相同である。一実施形態では、本発明のｈＧＨアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載のｈＧＨ配列と少なくとも６０％相同である。一実施形態では、本発明のｈＧＨアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載のｈＧＨ配列と少なくとも７０％相同である。一実施形態では、本発明のｈＧＨアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載のｈＧＨ配列と少なくとも８０％相同である。一実施形態では、本発明のｈＧＨアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載のｈＧＨ配列と少なくとも９０％相同である。一実施形態では、本発明のｈＧＨアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号Ｐ０１２４１に記載のｈＧＨ配列と少なくとも９５％相同である。

【0111】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ペプチドはオキシントモジュリンである。別の実施形態では、オキシントモジュリン（ＯＸＭ）は以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＨＳＱＧＴＦＴＳＤＹＳＫＹＬＤＳＲＲＡＱＤＦＶＱＷＬＭＮＴＫＲＮＲＮＮＩＡ（配列番号１８）。別の実施形態では、ＯＸＭは、配列番号１８のアミノ酸配列から成る。別の実施形態では、ＯＸＭは、ＣＡＳ登録番号６２３４０−２９−８に記載のアミノ酸配列を含むか、そのアミノ酸配列から成る。

【0112】

一実施形態では、オキシントモジュリンという用語にはさらに、公知のオキシントモジュリンの相同体も含まれる。一実施形態では、相同体は機能的相同体である。別の実施形態では、用語「機能的」とは、本明細書で提供される相同体、ポリペプチドまたはその断片が食欲を抑制するために有する能力を指す。前記用語はまた、本明細書で提供される相同体、ポリペプチドまたはその断片が別のタンパク質またはペプチドの生物学的半減期を延長させるために有する能力を指す。別の実施形態では、本明細書で提供されるタンパク質、ペプチドまたは相同体の生物学的半減期（Ｔ^１／_２）は、前記タンパク質、ペプチドまたは相同体の半分量が、分解されるのに要する時間、または対象内の生体媒質中に存在しなくなるのに要する時間を指す。別の実施形態では、生体媒質は、血清、脳脊髄液、組織、粘膜等である。

【0113】

別の実施形態では、ＯＸＭは、ヒトＯＸＭまたはあらゆる哺乳動物ＯＸＭである。別の実施形態では、ＯＸＭは、グルカゴン−３７または生理活性エンテログルカゴンとも称される。別の実施形態では、ＯＸＭは、二重ポリペプチド（ｄｕａｌ Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ）またはその断片である。別の実施形態では、ＯＸＭは、ＯＸＭの生物学的に活性な断片である。別の実施形態では、生物学的に活性なＯＸＭは、配列番号１８のアミノ酸３０からアミノ酸３７にわたる。別の実施形態では、生物学的に活性なＯＸＭは、配列番号１８のアミノ酸１９からアミノ酸３７にわたる。別の実施形態では、本発明のＯＸＭは、２つのＣ末端アミノ酸が欠失しているオクタペプチドに一致する。別の実施形態では、本発明のＯＸＭは、本明細書に記載のＯＸＭ活性を保持する配列番号１８のあらゆる断片に一致する。別の実施形態では、本発明は、相同体、例えば、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定される、オキシントモジュリンと少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８７％、少なくとも８９％、少なくとも９１％、少なくとも９３％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％相同であるポリペプチドも包含する。

【0114】

他の実施形態では、改変オキシントモジュリンという用語とは、成熟オキシントモジュリンのアミノ酸配列を指す。他の実施形態では、改変オキシントモジュリンという用語は、オキシントモジュリンのシグナル配列またはシグナルペプチドを含むオキシントモジュリンのアミノ酸配列を指す。

【0115】

別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片は、シグナルペプチドまたはシグナル配列を含む。

【0116】

別の実施形態では、「シグナル配列」および「シグナルペプチド」は、本明細書においては同義的に用いられる。別の実施形態では、ポリヌクレオチド分子に関する場合の「配列」とは、コーディング部分を指し得る。それぞれの可能性は本発明の別々の実施形態を表す。

【0117】

一実施形態では、本明細書で提供される目的のポリペプチドはペプチドはエリスロポエチン（ＥＰＯ）である。別の実施形態では、用語「エリスロポエチン」とは、哺乳類エリスロポエチンを指す。一実施形態では、「エリスロポエチン」とは、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載されるもの等のヒトエリスロポエチンを指す。

【0118】

一実施形態では、本発明のエリスロポエチンまたはＥＰＯ配列とは、相同体も指す。一実施形態では、本発明のエリスロポエチンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載のエリスロポエチン配列と少なくとも５０％相同である。一実施形態では、本発明のエリスロポエチンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載のエリスロポエチン配列と少なくとも６０％相同である。一実施形態では、本発明のエリスロポエチンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載のエリスロポエチン配列と少なくとも７０％相同である。一実施形態では、本発明のエリスロポエチンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載のエリスロポエチン配列と少なくとも８０％相同である。一実施形態では、本発明のエリスロポエチンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載のエリスロポエチン配列と少なくとも９０％相同である。一実施形態では、本発明のエリスロポエチンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＡＡＡ５２４００に記載のエリスロポエチン配列と少なくとも９５％相同である。

【0119】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくともさらに１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する配列番号１９に記載のＥＰＯペプチドを提供する。別の実施形態では、本発明の方法は、配列番号１９に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号１９）。

【0120】

別の実施形態では、ＥＰＯペプチドは、貧血症の治療のために、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つの追加のＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する。別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する配列番号２０に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号２０）。

【0121】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する、配列番号２１に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号２１）。

【0122】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する配列番号２２に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲ（配列番号２２）。

【0123】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する、配列番号２３に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲ（配列番号２３）。

【0124】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する、配列番号２４に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号２４）。

【0125】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に少なくとも１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを追加で有する、配列番号２５に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲ（配列番号２５）。

【0126】

別の実施形態では、本発明の方法は、ＥＰＯペプチドおよびＮ末端上の１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上の２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドをコードする、配列番号２６に記載の核酸を提供する：ｔｃｔａｇａｇｇｔｃａｔｃａｔｇｇｇｇｇｔｇｃａｃｇａａｔｇｔｃｃｔｇｃｃｔｇｇｃｔｇｔｇｇｃｔｔｃｔｃｃｔｇｔｃｃｃｔｔｃｔｇｔｃｇｃｔｃｃｃｔｃｔｇｇｇｃｃｔｃｃｃａｇｔｃｃｔｇｇｇｃｔｃｃｔｃｔｔｃｃｔｃａａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｃｃｃｇａｇｃｃｔｔｃｃａａｇｔｃｃａｔｃｃｃｇａｃｔｃｃｃｇｇｇｇｃｃｃｔｃｇｇａｃａｃｃｃｃａａｔａｔｔａｃｃａｃａａｇｃｃｃｃａｃｃａｃｇｃｃｔｃａｔｃｔｇｔｇａｃａｇｃｃｇａｇｔｃｃｔｇｇａｇａｇｇｔａｃｃｔｃｔｔｇｇａｇｇｃｃａａｇｇａｇｇｃｃｇａｇａａｔａｔｃａｃｇａｃｇｇｇｃｔｇｔｇｃｔｇａａｃａｃｔｇｃａｇｃｔｔｇａａｔｇａｇａａｔａｔｃａｃｔｇｔｃｃｃａｇａｃａｃｃａａａｇｔｔａａｔｔｔｃｔａｔｇｃｃｔｇｇａａｇａｇｇａｔｇｇａｇｇｔｃｇｇｇｃａｇｃａｇｇｃｃｇｔａｇａａｇｔｃｔｇｇｃａｇｇｇｃｃｔｇｇｃｃｃｔｇｃｔｇｔｃｇｇａａｇｃｔｇｔｃｃｔｇｃｇｇｇｇｃｃａｇｇｃｃｃｔｇｔｔｇｇｔｃａａｃｔｃｔｔｃｃｃａｇｃｃｇｔｇｇｇａｇｃｃｃｃｔｇｃａｇｃｔｇｃａｔｇｔｇｇａｔａａａｇｃｃｇｔｃａｇｔｇｇｃｃｔｔｃｇｃａｇｃｃｔｃａｃｃａｃｔｃｔｇｃｔｔｃｇｇｇｃｔｃｔｇｇｇａｇｃｃｃａｇａａｇｇａａｇｃｃａｔｃｔｃｃｃｃｔｃｃａｇａｔｇｃｇｇｃｃｔｃａｇｃｔｇｃｔｃｃａｃｔｃｃｇａａｃａａｔｃａｃｔｇｃｔｇａｃａｃｔｔｔｃｃｇｃａａａｃｔｃｔｔｃｃｇａｇｔｃｔａｃｔｃｃａａｔｔｔｃｃｔｃｃｇｇｇｇａａａｇｃｔｇａａｇｃｔｇｔａｃａｃａｇｇｇｇａｇｇｃｃｔｇｃａｇｇａｃａｇｇｇｇａｃａｇａｔｃｃｔｃｔｔｃｃｔｃａａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｃｃｃｇａｇｃｃｔｔｃｃａａｇｔｃｃａｔｃｃｃｇａｃｔｃｃｃｇｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｃｃｔｇｃｃａｃａｇａｇｃａｇｃｔｃｃｔｃｔａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｔｃｃａｔｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｃｃｃｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｃｃｃｃｔｃｔｇａｃａｃｃｃｃｔａｔｃｃｔｇｃｃｔｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｔｃｔｇｇａｔｃｃｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号２６）。別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを有する配列番号６６に記載のＥＰＯペプチドを含むアミノ酸配列を提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲ（配列番号６６）。

【0127】

別の実施形態では、本発明の方法は、ＥＰＯペプチドおよびＮ末端上の２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドをコードする、配列番号６７に記載の核酸配列を提供する：ＡＴＧＧＧＣＧＴＧＣＡＣＧＡＧＴＧＴＣＣＴＧＣＴＴＧＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＣＴＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＧＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＣＴＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＡＣＣＣＡＧＣＣＴＧＣＣＣＡＧＣＣＣＴＴＣＴＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＣＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＣＣＡＴＣＣＴＧＣＣＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＣＣＣＡＧＣＡＧＡＣＴＧＣＣＡＧＧＣＣＣＴＴＣＣＧＡＴＡＣＣＣＣＡＡＴＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＣＡＧＡＣＴＧＡＴＣＴＧＣＧＡＣＡＧＣＣＧＧＧＴＧＣＴＧＧＡＡＡＧＡＴＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＧＣＣＡＡＡＧＡＧＧＣＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＡＣＣＧＧＣＴＧＣＧＣＣＧＡＧＣＡＣＴＧＣＡＧＣＣＴＧＡＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＧＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＧＡＡＣＴＴＣＴＡＣＧＣＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＡＴＧＧＡＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＡＧＧＣＣＧＴＧＧＡＡＧＴＧＴＧＧＣＡＧＧＧＡＣＴＧＧＣＣＣＴＧＣＴＧＡＧＣＧＡＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＡＧＡＧＧＡＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＴＧＧＴＧＡＡＣＡＧＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＧＣＣＣＣＴＧＣＡＧＣＴＧＣＡＴＧＴＧＧＡＴＡＡＧＧＣＣＧＴＧＴＣＣＧＧＣＣＴＧＣＧＧＡＧＣＣＴＧＡＣＣＡＣＡＣＴＧＣＴＧＡＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＣＧＣＴＣＡＧＡＡＡＧＡＧＧＣＣＡＴＣＴＣＴＣＣＣＣＣＴＧＡＴＧＣＣＧＣＣＴＣＴＧＣＣＧＣＣＣＣＴＣＴＧＡＧＡＡＣＣＡＴＣＡＣＣＧＣＣＧＡＣＡＣＣＴＴＣＣＧＧＡＡＧＣＴＧＴＴＣＣＧＧＧＴＧＴＡＣＡＧＣＡＡＣＴＴＣＣＴＧＣＧＧＧＧＣＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＴＧＴＡＣＡＣＣＧＧＣＧＡＧＧＣＣＴＧＣＣＧＧＡＣＣＧＧＣＧＡＴＡＧＡＴＡＡＧＣＴＴＧＧＣＧＣＧＣＣ（配列番号６７）。

【0128】

別の実施形態では、本発明の方法は、Ｎ末端上に２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上に２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを有する、配列番号６８に記載のＥＰＯペプチドを提供する：ＭＧＶＨＥＣＰＡＷＬＷＬＬＬＳＬＬＳＬＰＬＧＬＰＶＬＧＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号６８）。

【0129】

別の実施形態では、本発明の方法は、ＥＰＯペプチドおよびＮ末端上の２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドおよびＣ末端上の２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドをコードする、配列番号６９に記載の核酸配列を提供する：ＡＴＧＧＧＣＧＴＧＣＡＣＧＡＧＴＧＴＣＣＴＧＣＴＴＧＧＣＴＧＴＧＧＣＴＧＣＴＧＣＴＧＡＧＣＣＴＧＣＴＧＴＣＣＣＴＧＣＣＴＣＴＧＧＧＣＣＴＧＣＣＴＧＴＧＣＴＧＧＧＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＣＴＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＡＣＣＣＡＧＣＣＴＧＣＣＣＡＧＣＣＣＴＴＣＴＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＣＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＣＣＡＴＣＣＴＧＣＣＴＣＡＧＡＧＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＡＣＣＡＣＣＡＴＣＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＣＣＣＡＧＣＡＧＡＣＴＧＣＣＡＧＧＣＣＣＴＴＣＣＧＡＴＡＣＣＣＣＡＡＴＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＣＡＧＡＣＴＧＡＴＣＴＧＣＧＡＣＡＧＣＣＧＧＧＴＧＣＴＧＧＡＡＡＧＡＴＡＣＣＴＧＣＴＧＧＡＡＧＣＣＡＡＡＧＡＧＧＣＣＧＡＧＡＡＣＡＴＣＡＣＣＡＣＣＧＧＣＴＧＣＧＣＣＧＡＧＣＡＣＴＧＣＡＧＣＣＴＧＡＡＣＧＡＧＡＡＴＡＴＣＡＣＣＧＴＧＣＣＣＧＡＣＡＣＣＡＡＡＧＴＧＡＡＣＴＴＣＴＡＣＧＣＣＴＧＧＡＡＧＣＧＧＡＴＧＧＡＡＧＴＧＧＧＣＣＡＧＣＡＧＧＣＣＧＴＧＧＡＡＧＴＧＴＧＧＣＡＧＧＧＡＣＴＧＧＣＣＣＴＧＣＴＧＡＧＣＧＡＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＡＧＡＧＧＡＣＡＧＧＣＣＣＴＧＣＴＧＧＴＧＡＡＣＡＧＣＡＧＣＣＡＧＣＣＣＴＧＧＧＡＧＣＣＣＣＴＧＣＡＧＣＴＧＣＡＴＧＴＧＧＡＴＡＡＧＧＣＣＧＴＧＴＣＣＧＧＣＣＴＧＣＧＧＡＧＣＣＴＧＡＣＣＡＣＡＣＴＧＣＴＧＡＧＡＧＣＣＣＴＧＧＧＣＧＣＴＣＡＧＡＡＡＧＡＧＧＣＣＡＴＣＴＣＴＣＣＣＣＣＴＧＡＴＧＣＣＧＣＣＴＣＴＧＣＣＧＣＣＣＣＴＣＴＧＡＧＡＡＣＣＡＴＣＡＣＣＧＣＣＧＡＣＡＣＣＴＴＣＣＧＧＡＡＧＣＴＧＴＴＣＣＧＧＧＴＧＴＡＣＡＧＣＡＡＣＴＴＣＣＴＧＣＧＧＧＧＣＡＡＧＣＴＧＡＡＧＣＴＧＴＡＣＡＣＣＧＧＣＧＡＧＧＣＣＴＧＣＣＧＧＡＣＣＧＧＣＧＡＴＡＧＡＡＧＣＡＧＣＴＣＣＡＧＣＡＡＧＧＣＴＣＣＡＣＣＣＣＣＣＡＧＣＣＴＧＣＣＡＴＣＣＣＣＡＡＧＴＡＧＡＣＴＧＣＣＣＧＧＧＣＣＣＴＣＴＧＡＣＡＣＡＣＣＴＡＴＣＣＴＧＣＣＡＣＡＧＴＣＣＡＧＣＡＧＣＴＣＣＡＡＡＧＣＴＣＣＣＣＣＡＣＣＡＴＣＣＣＴＣＣＣＡＴＣＣＣＣＡＴＣＣＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＡＣＣＡＴＣＣＧＡＣＡＣＴＣＣＡＡＴＴＣＴＧＣＣＴＣＡＧＴＡＡＧＣＴＴＧＧＣＧＣＧＣＣ（配列番号６９）。

【0130】

一実施形態では、「インターフェロン」とは、哺乳類インターフェロンポリペプチドＩ型を指す。一実施形態では、「インターフェロン」とは、哺乳類のインターフェロンポリペプチドＩＩ型を指す。いくつかの実施形態において、当業者に公知の追加の適切なインターフェロンポリペプチドが利用される。いくつかの実施形態において、インターフェロンはα−インターフェロンである。いくつかの実施形態において、インターフェロンはβ−インターフェロンである。いくつかの実施形態において、インターフェロンはγ−インターフェロンである。いくつかの実施形態において、インターフェロンはω−インターフェロンである。いくつかの実施形態において、インターフェロンは亜種インターフェロンである。一実施形態では、亜種インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−α２ａである。一実施形態では、亜種インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−α２ｂである。一実施形態では、亜種インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−β１ａである。一実施形態では、亜種インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−β１ｂである。

【0131】

一実施形態では、本発明のインターフェロンは、抗ウイルス活性または抗増殖活性等のインターフェロン活性を示す。いくつかの実施形態における、インターフェロンの非限定例のＧｅｎＢａｎｋ受託番号が以下の表１に列挙される。

【0132】

一実施形態では、本発明のインターフェロンは相同体も指す。一実施形態では、本発明のインターフェロンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、表１に列挙されるインターフェロン配列と少なくとも５０％相同である。一実施形態では、本発明のインターフェロンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、表１に列挙されるインターフェロン配列と少なくとも６０％相同である。一実施形態では、本発明のインターフェロンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、表１に列挙されるインターフェロン配列と少なくとも７０％相同である。一実施形態では、本発明のインターフェロンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、表１に列挙されるインターフェロン配列と少なくとも８０％相同である。一実施形態では、本発明のインターフェロンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、表１に列挙されるインターフェロン配列と少なくとも９０％相同である。一実施形態では、本発明のインターフェロンアミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、表１に列挙されるインターフェロン配列と少なくとも９５％相同である。いくつかの実施形態において、本発明による相同性には、その欠失、挿入、または置換変異体（例えば、アミノ酸置換）およびその生物学的に活性なポリペプチド断片も包含される。一実施形態では、インターフェロンβの１７位におけるシステインは、セリンで置換されている。

【0133】

下記の表１は、それらの各ＮＣＢＩ配列番号と一緒に、インターフェロンの例を列挙している。

【0134】

別の実施形態では、ペプチドまたはポリペプチドとして本明細書で提供されるインターフェロン（ＩＦＮ）は、Ｉ型インターフェロンである。別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−αである。別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−βである。別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）はＩＦＮ−γである。別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、配列番号２７に記載のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、配列番号２８は以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮ（配列番号２７、ヒトインターフェロン−β１ａ）。別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、ヒトインターフェロンβ１ａ（ｈＩＦＮβ１ａ）のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＰ＿００２１６７．１に記載のアミノ酸配列を含む。

【0135】

別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、配列番号２８に記載のヌクレオチド酸配列にコードされる。別の実施形態では、配列番号２８は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａｇｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃａｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃａｇａｇｇａａａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａｇｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａｇｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａｇｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｇａｔｇａｇｔｃｃｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号２８、ヒトインターフェロン−β１ａ）。別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、ヒトインターフェロンβ１ａ（ｈＩＦＮβ１ａ）のヌクレオチド酸（ＮＡ）分子にコードされる。別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、ＧｅｎｅＢａｎｋ受託番号ＮＭ＿００２１７６に記載のヌクレオチド酸配列を含むヌクレオチド酸（ＮＡ）分子にコードされる。

【0136】

別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、配列番号２９に記載のアミノ酸配列を含む。別の実施形態では、配列番号２９は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＴＦ＊ＬＱＰＦＥＡＦＡＬＡＱＱＶＶＧＤＴＶＲＶＶＮＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮ（配列番号２９）。

【0137】

別の実施形態では、本明細書に記載のインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドは、配列番号３０に記載のヌクレオチド酸配列にコードされる。別の実施形態では、配列番号３０は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ａｃａｔｔｃｔａａｃｔｇｃａａｃｃｔｔｔｃｇａａｇｃｃｔｔｔｇｃｔｃｔｇｇｃａｃａａｃａｇｇｔａｇｔａｇｇｃｇａｃａｃｔｇｔｔｃｇｔｇｔｔｇｔｃａａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｔｃｔｃｃｔｃｃａａａｔｔｇｃｔｃｔｃｃｔｇｔｔｇｔｇｃｔｔｃｔｃｃａｃｔａｃａｇｃｔｃｔｔｔｃｃａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｔｔｇｃｔｔｇｇａｔｔｃｃｔａｃａａａｇａａｇｃａｇｃａａｔｔｔｔｃａｇｔｇｔｃａｇａａｇｃｔｃｃｔｇｔｇｇｃａａｔｔｇａａｔｇｇｇａｇｇｃｔｔｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｃａａｇｇａｃａｇｇａｔｇａａｃｔｔｔｇａｃａｔｃｃｃｔｇａｇｇａｇａｔｔａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａｇｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃａｔｔｇａｃｃａｔｃｔａｔｇａｇａｔｇｃｔｃｃａｇａａｃａｔｃｔｔｔｇｃｔａｔｔｔｔｃａｇａｃａａｇａｔｔｃａｔｃｔａｇｃａｃｔｇｇｃｔｇｇａａｔｇａｇａｃｔａｔｔｇｔｔｇａｇａａｃｃｔｃｃｔｇｇｃｔａａｔｇｔｃｔａｔｃａｔｃａｇａｔａａａｃｃａｔｃｔｇａａｇａｃａｇｔｃｃｔｇｇａａｇａａａａａｃｔｇｇａｇａａａｇａａｇａｔｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇａａａａｃｔｃａｔｇａｇｃａｇｔｃｔｇｃａｃｃｔｇａａａａｇａｔａｔｔａｔｇｇｇａｇｇａｔｔｃｔｇｃａｔｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａｇｇａｇｔａｃａｇｔｃａｃｔｇｔｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔａｇｔｃａｇａｇｔｇｇａａａｔｃｃｔａａｇｇａａｃｔｔｔｔａｃｔｔｃａｔｔａａｃａｇａｃｔｔａｃａｇｇｔｔａｃｃｔｃｃｇａａａｃｔｇａ（配列番号３０）。

【0138】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびＣ末端に結合されたＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびＣ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびＮ末端に結合されたＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびＮ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、Ｎ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰ単位、および／またはＣ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、Ｎ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰ単位、およびＣ末端に直列に結合された２つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、Ｎ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰ単位、およびＣ末端に結合された２つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、Ｎ末端に結合された１つのＣＴＰ単位、およびＣ末端に結合された少なくとも２つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、Ｎ末端に結合された１つのＣＴＰ単位、およびＣ末端に直列に結合された少なくとも２つのＣＴＰ単位を含む。

【0139】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよび少なくとも３つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよび３つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３１に記載のアミノ酸配列を含むアミノ酸配列にコードされるインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド−ＣＴＰポリペプチドを含む。別の実施形態では、配列番号３１は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号３１）。

【0140】

別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびＣＴＰを含む本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３２に記載の核酸分子にコードされる。別の実施形態では、配列番号３２は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａｇｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃａｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃａｇａｇｇａａａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａｇｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａｇｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａｇｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｃｔｇｃｃｃａｇｔｃｃａａｇｃｃｇａｃｔｃｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｔａｃａｃｃａａｔｔｃｔｇｃｃａｃａｇｔｇａｔｇａ（配列番号３２）。

【0141】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびそのカルボキシ末端に結合された２つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３３に記載のアミノ酸配列を含むアミノ酸配列にコードされるインターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド−ＣＴＰ（×２）を含む。別の実施形態では、配列番号３３は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号３３）。

【0142】

別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびそのカルボキシ末端に結合された２つのＣＴＰ単位を含む本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３４に記載の核酸分子にコードされる。別の実施形態では、配列番号３４は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａｇｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃａｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃａｇａｇｇａａａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａｇｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａｇｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａｇｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｃｔｇｃｃｃａｇｔｃｃａａｇｃｃｇａｃｔｃｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｃｃｔｇｃｃａｃａｇａｇｃａｇｃｔｃｃｔｃｔａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｔｃｃａｔｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｃｃｃｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｃｃｃｃｔｃｔｇａｃａｃｃｃｃｔａｔｃｃｔｇｃｃｔｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｃｃｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号３４）。

【0143】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、ＩＦＮのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位、およびＩＦＮのカルボキシ末端に結合された２つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、ＩＦＮのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位およびＩＦＮのカルボキシ末端に直列に結合された２つのＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、（アミノ末端からカルボキシ末端まで）、配列番号３６５に記載のアミノ酸配列を含む、ＣＴＰ（×１）−インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド−ＣＴＰ（×２）を含む。別の実施形態では、配列番号３５は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号３５）。

【0144】

別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、ＩＦＮのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位およびＩＦＮのカルボキシ末端に結合された２つのＣＴＰ単位を含む本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３６に記載の核酸分子にコードされる。別の実施形態では、配列番号３６は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｇｃａｇｃａｇｃｔｃｃａａｇｇｃｃｃｃａｃｃｃｃｃｃａｇｃｃｔｇｃｃｃａｇｃｃｃｃａｇｃａｇａｃｔｇｃｃａｇｇｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｃｃｃｃｃａｔｃｃｔｇｃｃｃｃａｇａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａｇｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃａｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃａｇａｇｇａａａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａｇｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａｇｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａｇｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｃｔｇｃｃｃａｇｔｃｃａａｇｃｃｇａｃｔｃｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｃｃｔｇｃｃａｃａｇａｇｃａｇｃｔｃｃｔｃｔａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃｔｃｃａｔｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｃｃｃｔｃｃｃｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｃｃｃｃｔｃｔｇａｃａｃｃｃｃｔａｔｃｃｔｇｃｃｔｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｃｃｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号３６）。

【0145】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、ＩＦＮのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ、およびＩＦＮコード配列内に位置する単一のＣＴＰを含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、（アミノ末端からカルボキシ末端まで）、配列番号３７に記載のアミノ酸配列を含むＣＴＰ（×１）−インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド（断片１）−ＣＴＰ−インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド（断片２）を含む。別の実施形態では、配列番号３７は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮ（配列番号３７）。

【0146】

別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、ＩＦＮのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位、およびＩＦＮコード配列内に位置する単一のＣＴＰ単位を含む本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３８に記載の核酸分子にコードされる。別の実施形態では、配列番号３８は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｇｃａｇｃａｇｃｔｃｃａａｇｇｃｃｃｃａｃｃｃｃｃｃａｇｃｃｔｇｃｃｃａｇｃｃｃｃａｇｃａｇｇｃｔｇｃｃａｇｇｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｃｃｃｃｃａｔｃｃｔｇｃｃｃｃａｇａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａａｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃｃｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃｃｇａａｇａｇａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａａｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａａｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａａｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇｃｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃａｃｃｃｔｃｃｃｔｇｃｃｃｔｃｃｃｃａａｇｃａｇａｃｔｇｃｃｃｇｇａｃｃｃｔｃｃｇａｃａｃａｃｃａａｔｔｃｔｇｃｃａｃａｇａｔｇｔｃｃｔａｃａａｔｃｔｇｃｔｃｇｇａｔｔｔｃｔｇｃａｇｃｇｃｔｃｃｔｃｃａａｃｔｔｔｃａｇｔｇｔｃａｇａａｇｃｔｃｃｔｃｔｇｇｃａｇｃｔｃａａｔｇｇｃｃｇｃｃｔｇｇａａｔａｔｔｇｔｃｔｇａａａｇａｃａｇａａｔｇａａｔｔｔｔｇａｃａｔｃｃｃａｇａｇｇａａａｔｔａａａｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｔｔｔｃａｇａａａｇａａｇａｔｇｃｔｇｃｔｃｔｃａｃａａｔｃｔａｔｇａａａｔｇｃｔｃｃａｇａａｔａｔｃｔｔｔｇｃａａｔｃｔｔｔｃｇｃｃａｇｇａｃａｇｃｔｃｃｔｃｃａｃｃｇｇｇｔｇｇａａｔｇａｇａｃａａｔｔｇｔｃｇａｇａａｔｃｔｇｃｔｃｇｃｃａａｔｇｔｃｔａｔｃａｔｃａｇａｔｃａａｔｃａｃｃｔｃａａｇａｃａｇｔｃｃｔｃｇａａｇａａａａａｃｔｃｇａａａａａｇａａｇａｔｔｔｃａｃａｃｇｃｇｇｃａａａｃｔｇａｔｇｔｃｃｔｃｃｃｔｇｃａｔｃｔｇａａｇｃｇｃｔａｃｔａｔｇｇｇｃｇｃａｔｃｃｔｇｃａｔｔａｔｃｔｇａａａｇｃｔａａａｇａａｔａｃｔｃｃｃａｃｔｇｔｇｃｔｔｇｇａｃａａｔｔｇｔｇｃｇｃｇｔｃｇａｇａｔｃｃｔｇａｇａａａｃｔｔｔｔａｔｔｔｃａｔｔａａｃｃｇｃｃｔｇａｃａｇｇａｔａｃｃｔｇｃｇｃａａｃｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号３８）。

【0147】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびそのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号３９に記載のアミノ酸配列を含む、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド−ＣＴＰを含む。別の実施形態では、配列番号３９は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮ^＊（配列番号３９）。

【0148】

別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチドおよびそのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰを含む本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号４０に記載の核酸分子にコードされる。別の実施形態では、配列番号４０は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｇｃａｇｃａｇｃｔｃｃａａｇｇｃｃｃｃａｃｃｃｃｃｃａｇｃｃｔｇｃｃｃａｇｃｃｃｃａｇｃａｇｇｃｔｇｃｃａｇｇｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｃｃｃｃｃａｔｃｃｔｇｃｃｃｃａｇａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａａｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃｃｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃｃｇａａｇａｇａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａａｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａａｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａａｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇｃｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｇａｔｇａｇｔｃｃｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号４０）。

【0149】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、そのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位、およびそのカルボキシ末端に結合された単一のＣＴＰ単位を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号４１に記載のアミノ酸配列を含む、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド−ＣＴＰを含む。別の実施形態では、配列番号４１は、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む：ＭＴＮＫＣＬＬＱＩＡＬＬＬＣＦＳＴＴＡＬＳＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＣＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ^＊（配列番号４１）。

【0150】

別の実施形態では、インターフェロン（ＩＦＮ）ペプチド、そのアミノ末端に結合された単一のＣＴＰ単位、およびそのカルボキシ末端に結合された単一のＣＴＰ単位を含む本明細書に記載のポリペプチドは、配列番号４２に記載の核酸分子にコードされる。別の実施形態では、配列番号４２は、以下のヌクレオチド酸（ＮＡ）配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｇａｃａｔｇａｃｃａａｃａａｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇｃａｇａｔｃｇｃｃｃｔｇｃｔｇｃｔｇｔｇｃｔｔｃａｇｃａｃｃａｃｃｇｃｃｃｔｇａｇｃａｇｃａｇｃａｇｃｔｃｃａａｇｇｃｃｃｃａｃｃｃｃｃｃａｇｃｃｔｇｃｃｃａｇｃｃｃｃａｇｃａｇａｃｔｇｃｃａｇｇｃｃｃｃａｇｃｇａｃａｃｃｃｃｃａｔｃｃｔｇｃｃｃｃａｇａｔｇａｇｃｔａｃａａｃｃｔｇｃｔｇｇｇｃｔｔｃｃｔｇｃａｇａｇｇｔｃｃａｇｃａａｃｔｔｃｃａｇｔｇｃｃａｇａａｇｃｔｇｃｔｇｔｇｇｃａｇｃｔｇａａｃｇｇｃａｇｇｃｔｇｇａａｔａｃｔｇｃｃｔｇａａｇｇａｃａｇｇａｔｇａａｃｔｔｃｇａｃａｔｃｃｃａｇａｇｇａａａｔｃａａｇｃａｇｃｔｇｃａｇｃａｇｔｔｃｃａｇａａｇｇａｇｇａｃｇｃｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｔｃｔａｃｇａｇａｔｇｃｔｇｃａｇａａｃａｔｃｔｔｃｇｃｃａｔｃｔｔｃａｇｇｃａｇｇａｃａｇｃａｇｃａｇｃａｃｃｇｇｃｔｇｇａａｃｇａｇａｃｃａｔｃｇｔｇｇａｇａａｃｃｔｇｃｔｇｇｃｃａａｃｇｔｇｔａｃｃａｃｃａｇａｔｃａａｃｃａｃｃｔｇａａａａｃｃｇｔｇｃｔｇｇａａｇａｇａａｇｃｔｇｇａａａａｇｇａｇｇａｃｔｔｃａｃｃａｇｇｇｇｃａａｇｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｃｃｔｇａａｇａｇｇｔａｃｔａｃｇｇｃａｇａａｔｃｃｔｇｃａｃｔａｃｃｔｇａａｇｇｃｃａａｇｇａｇｔａｃａｇｃｃａｃｔｇｃｇｃｃｔｇｇａｃｃａｔｃｇｔｇａｇｇｇｔｇｇａｇａｔｃｃｔｇａｇｇａａｃｔｔｃｔａｃｔｔｃａｔｃａａｃａｇｇｃｔｇａｃｃｇｇｃｔａｃｃｔｇａｇｇａａｃａｇｃｔｃｃａｇｃａｇｃａａｇｇｃｃｃｃｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｃｔｇｃｃｃａｇｔｃｃａａｇｃｃｇａｃｔｃｃｃｔｇｇｇｃｃｃｔｃｃｇａｔａｃａｃｃａａｔｔｃｔｇｃｃａｃａｇｔｇａｔｇａａｇｇｔｃｔｇｇａｔｇｃｇｇｃｃｇｃ（配列番号４２）。

【0151】

別の実施形態では、インターフェロンβペプチドは、以下のアミノ酸（ＡＡ）配列を含む配列番号４３を含む：ＭＳＹＮＬＬＧＦＬＱＲＳＳＮＦＱＳＱＫＬＬＷＱＬＮＧＲＬＥＹＣＬＫＤＲＭＮＦＤＩＰＥＥＩＫＱＬＱＱＦＱＫＥＤＡＡＬＴＩＹＥＭＬＱＮＩＦＡＩＦＲＱＤＳＳＳＴＧＷＮＥＴＩＶＥＮＬＬＡＮＶＹＨＱＩＮＨＬＫＴＶＬＥＥＫＬＥＫＥＤＦＴＲＧＫＬＭＳＳＬＨＬＫＲＹＹＧＲＩＬＨＹＬＫＡＫＥＹＳＨＣＡＷＴＩＶＲＶＥＩＬＲＮＦＹＦＩＮＲＬＴＧＹＬＲＮ（配列番号４３）。

【0152】

一実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片は、グルカゴン様ペプチド−１である。別の実施形態では、グルカゴン様ペプチド−１は、本発明の教示に従って利用される。別の実施形態では、「グルカゴン様ペプチド−１」のアミノ末端およびカルボキシ末端の両方へのＣＴＰ配列の結合は、作用強度の増加をもたらす。別の実施形態では、ペプチドのアミノ末端およびカルボキシ末端の両方へのＣＴＰの結合は、インビボ活性の延長をもたらす。別の実施形態では、グルカゴン様ペプチドのアミノ末端およびカルボキシ末端の両方へのＣＴＰの結合は、インビボ活性の延長をもたらす。

【0153】

一実施形態では、「グルカゴン様ペプチド−１」（ＧＬＰ−１）とは、哺乳類ポリペプチドを指す。一実施形態では、「グルカゴン様ペプチド−１」（ＧＬＰ−１）とは、ヒトポリペプチドを指す。別の実施形態では、ＧＬＰ−１は、ＧＬＰ−１受容体に結合しシグナル伝達経路を惹起しインスリン分泌活性をもたらす能力を有する、グルカゴンプレプロタンパク質（ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５）から切断される。一実施形態では、「インスリン分泌活性」とは、グルコースレベルの上昇に応答してインスリン分泌を刺激し、それにより細胞によるグルコース取り込みを引き起こし、血漿グルコースレベルを減少させる能力を指す。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ−１ポリペプチドには、限定はされないが、米国特許第５，１１８，６６６号明細書（特許文献３）（参照によって本明細書に組み込まれる）に記載されているものが含まれる。

【0154】

一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１は、ＧＬＰ−１相同体も指す。一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１アミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５に記載のＧＬＰ−１配列と少なくとも５０％相同である。一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１アミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５に記載のＧＬＰ−１配列と少なくとも６０％相同である。一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１アミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５に記載のＧＬＰ−１配列と少なくとも７０％相同である。一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１アミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５に記載のＧＬＰ−１配列と少なくとも８０％相同である。一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１アミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５に記載のＧＬＰ−１配列と少なくとも９０％相同である。一実施形態では、本発明のＧＬＰ−１アミノ酸配列は、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定された、ＧｅｎＢａｎｋ ＩＤ番号ＮＰ００２０４５に記載のＧＬＰ−１配列と少なくとも９５％相同である。

【0155】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はアポリポタンパク質である。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片は、アポリポタンパク質Ａ１（ＡＰＯ−Ａ１）である。別の実施形態では、アポリポタンパク質は、Ｎ末端および／またはＣ末端上で少なくとも１つのＣＴＰペプチドに結合される。別の実施形態では、アポリポタンパク質（ａｐｏｌｉｐｏｔｒｏｔｅｉｎ）は、アポリポタンパク質ＡＩ、アポリポタンパク質ＡＩＩ、アポリポタンパク質ＡＩＶ、またはその類似体もしくは変異体である。

【0156】

一実施形態では、本発明によるアポリポタンパク質構築物は、コレステロールおよび他の脂質と複合体を形成し、これらの化合物の肝臓への輸送を補助するそれらの能力から、大まかにＨＤＬ類似体と見なされてもよい。

【0157】

別の実施形態では、天然アポリポタンパク質Ａ−Ｉ、Ａ−ＩＩまたはＡ−ＩＶの機能等価物は、脂質結合アッセイを用いて測定されることが好都合であり得る。哺乳動物において実質的に同一の生理応答を誘発するＣＴＰ修飾アポリポタンパク質の能力は、ウサギまたはげっ歯類（例えばマウス）等の試験生物においてコレステロール逆転送を実行する能力の測定によって、測定されることが好都合であり得る。

【0158】

一実施形態では、ＣＴＰ修飾アポリポタンパク質を含むポリペプチドは、少なくとも１つのＣＴＰの付加により引き起こされる修飾にもかかわらず、インビボにおいて、天然アポリポタンパク質と同等にまたはそれよりずっと良く、コレステロール逆転送を実行することが可能である。別の実施形態では、インビトロにおいて、ＣＴＰ修飾アポリポタンパク質はより低いインビトロ生物活性を有するが、これは半減期の延長によって補われる。別の実施形態では、ＣＴＰ修飾アポリポタンパク質の血漿内半減期は、野生型アポリポタンパク質の血漿内半減期と比較して延長されることが好ましい。一実施形態では、半減期の延長は、腎臓を通じた濾過の速度を減少させ得る、アポリポタンパク質構築物の流体力学的サイズによるものである。

【0159】

一実施形態では、ＡＰＯ−Ａ１のアミノ酸配列は、ＤＥＰＰＱＳＰＷＤＲＶＫＤＫＡＴＶＹＶＤＶＬＫＤＳＧＲＤＹＶＳＱＦＥＧＳＡＧＫＧＬＮＬＫＬＬＤＮＷＤＳＶＴＳＴＦＳＫＬＲＥＱＬＧＰＶＴＱＥＦＷＤＮＬＥＫＥＴＥＧＬＲＧＥＭＳＫＤＬＥＥＶＫＡＫＶＱＰＹＬＤＤＦＱＫＫＷＱＥＥＭＥＬＹＲＱＫＶＥＰＬＲＡＥＬＱＥＧＡＲＱＫＬＨＥＬＱＥＫＬＳＰＬＧＥＥＭＲＤＲＡＲＡＨＶＤＡＬＲＴＨＬＡＰＹＳＤＥＬＲＱＲＬＡＡＲＬＥＡＬＫＥＮＧＧＡＲＬＡＥＹＨＡＫＡＴＥＨＬＳＴＬＳＥＫＡＫＰＡＬＥＤＬＲＱＧＬＬＰＶＬＥＳＦＫＶＳＦＬＳＡＬＥＥＹＴＫＫＬＮＴＱ（配列番号４４）またはその相同体もしくは変異体である。一実施形態では、本発明の方法は、Ｃ末端上に１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを有するＡＰＯ−Ａ１ペプチドを構成するアミノ酸配列を提供する：ＭＫＡＡＶＬＴＬＡＶＬＦＬＴＧＳＱＡＲＨＦＷＱＱＤＥＰＰＱＳＰＷＤＲＶＫＤＬＡＴＶＹＶＤＶＬＫＤＳＧＲＤＹＶＳＱＦＥＧＳＡＬＧＫＱＬＮＬＫＬＬＤＮＷＤＳＶＴＳＴＦＳＫＬＲＥＱＬＧＰＶＴＱＥＦＷＤＮＬＥＫＥＴＥＧＬＲＱＥＭＳＫＤＬＥＥＶＫＡＫＶＱＰＹＬＤＤＦＱＫＫＷＱＥＥＭＥＬＹＲＱＫＶＥＰＬＲＡＥＬＱＥＧＡＲＱＫＬＨＥＬＱＥＫＬＳＰＬＧＥＥＭＲＤＲＡＲＡＨＶＤＡＬＲＴＨＬＡＰＹＳＤＥＬＲＱＲＬＡＡＲＬＥＡＬＫＥＮＧＧＡＲＬＡＥＹＨＡＫＡＴＥＨＬＳＴＬＳＥＫＡＫＰＡＬＥＤＬＲＱＧＬＬＰＶＬＥＳＦＫＶＳＦＬＳＡＬＥＥＹＴＫＫＬＮＴＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号７０）。

【0160】

別の実施形態では、本発明の方法は、ＡＰＯ−Ａ１ペプチドおよびＣ末端上の１つのＣＴＰアミノ酸ペプチドをコードする、配列番号７１に記載の核酸配列を提供する：ＡＴＧＡＡＧＧＣＣＧＣＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＣＴＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＴＴＴＣＴＧＡＣＣＧＧＣＴＣＴＣＡＧＧＣＣＣＧＧＣＡＣＴＴＣＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＡＣＧＡＧＣＣＴＣＣＣＣＡＧＴＣＣＣＣＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＧＡＡＧＧＡＣＣＴＧＧＣＣＡＣＣＧＴＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＴＧＣＴＧＡＡＧＧＡＣＴＣＣＧＧＣＡＧＡＧＡＣＴＡＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＴＴＣＧＡＧＧＧＣＴＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＣＴＧＡＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＡＣＴＧＧＧＡＣＴＣＣＧＴＧＡＣＣＴＣＣＡＣＣＴＴＣＴＣＣＡＡＧＣＴＧＣＧＣＧＡＡＣＡＧＣＴＧＧＧＡＣＣＴＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＡＴＴＣＴＧＧＧＡＣＡＡＣＣＴＧＧＡＡＡＡＡＧＡＧＡＣＡＧＡＧＧＧＣＣＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＡＡＴＧＴＣＣＡＡＧＧＡＣＣＴＧＧＡＡＧＡＧＧＴＣＡＡＡＧＣＣＡＡＧＧＴＧＣＡＧＣＣＣＴＡＣＣＴＧＧＡＣＧＡＣＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＡＴＧＧＣＡＧＧＡＡＧＡＧＡＴＧＧＡＡＣＴＧＴＡＣＣＧＧＣＡＧＡＡＧＧＴＧＧＡＡＣＣＣＣＴＧＣＧＧＧＣＣＧＡＧＣＴＧＣＡＧＧＡＡＧＧＣＧＣＴＡＧＡＣＡＧＡＡＧＣＴＧＣＡＣＧＡＡＣＴＧＣＡＧＧＡＡＡＡＧＣＴＧＴＣＣＣＣＣＣＴＧＧＧＣＧＡＧＧＡＡＡＴＧＣＧＧＧＡＣＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＣＣＣＡＣＧＴＧＧＡＣＧＣＣＣＴＧＡＧＡＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＣＣＣＣＣＴＡＣＴＣＴＧＡＣＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＡＧＡＧＧＣＴＧＧＣＣＧＣＣＡＧＡＣＴＧＧＡＡＧＣＣＣＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＧＣＣＣＧＧＣＴＧＧＣＣＧＡＧＴＡＣＣＡＣＧＣＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＧＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＣＧＡＧＡＡＧＧＣＣＡＡＧＣＣＣＧＣＣＣＴＧＧＡＡＧＡＴＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＡＴＣＣＴＴＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＴＴＣＣＴＧＴＣＣＧＣＴＣＴＧＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＣＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＡＣＣＣＡＧＴＣＣＴＣＣＡＧＣＴＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＡＣＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＣＣＴＡＧＴＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＣＣＣＣＣＡＴＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＴＧＡＴＧＡＧＧＡＴＣＣＧＣＧＧＣＣＧＣＧＡＧＣＴＣ（配列番号７１）。

【0161】

一実施形態では、本発明の方法は、Ｃ末端上に２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドを有するＡＰＯ−Ａ１ペプチドを構成する、アミノ酸配列を提供する：ＭＫＡＡＶＬＴＬＡＶＬＦＬＴＧＳＱＡＲＨＦＷＱＱＤＥＰＰＱＳＰＷＤＲＶＫＤＬＡＴＶＹＶＤＶＬＫＤＳＧＲＤＹＶＳＱＦＥＧＳＡＬＧＫＱＬＮＬＫＬＬＤＮＷＤＳＶＴＳＴＦＳＫＬＲＥＱＬＧＰＶＴＱＥＦＷＤＮＬＥＫＥＴＥＧＬＲＱＥＭＳＫＤＬＥＥＶＫＡＫＶＱＰＹＬＤＤＦＱＫＫＷＱＥＥＭＥＬＹＲＱＫＶＥＰＬＲＡＥＬＱＥＧＡＲＱＫＬＨＥＬＱＥＫＬＳＰＬＧＥＥＭＲＤＲＡＲＡＨＶＤＡＬＲＴＨＬＡＰＹＳＤＥＬＲＱＲＬＡＡＲＬＥＡＬＫＥＮＧＧＡＲＬＡＥＹＨＡＫＡＴＥＨＬＳＴＬＳＥＫＡＫＰＡＬＥＤＬＲＱＧＬＬＰＶＬＥＳＦＫＶＳＦＬＳＡＬＥＥＹＴＫＫＬＮＴＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号７２）。

【0162】

別の実施形態では、本発明の方法は、ＡＰＯ−Ａ１ペプチドおよびＣ末端上の２つのＣＴＰアミノ酸ペプチドをコードする、配列番号７３に記載の核酸配列を提供する：ＡＴＧＡＡＧＧＣＣＧＣＣＧＴＧＣＴＧＡＣＣＣＴＧＧＣＣＧＴＧＣＴＧＴＴＴＣＴＧＡＣＣＧＧＣＴＣＴＣＡＧＧＣＣＣＧＧＣＡＣＴＴＣＴＧＧＣＡＧＣＡＧＧＡＣＧＡＧＣＣＴＣＣＣＣＡＧＴＣＣＣＣＣＴＧＧＧＡＣＡＧＡＧＴＧＡＡＧＧＡＣＣＴＧＧＣＣＡＣＣＧＴＧＴＡＣＧＴＧＧＡＣＧＴＧＣＴＧＡＡＧＧＡＣＴＣＣＧＧＣＡＧＡＧＡＣＴＡＣＧＴＧＴＣＣＣＡＧＴＴＣＧＡＧＧＧＣＴＣＴＧＣＣＣＴＧＧＧＣＡＡＧＣＡＧＣＴＧＡＡＣＣＴＧＡＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＡＡＣＴＧＧＧＡＣＴＣＣＧＴＧＡＣＣＴＣＣＡＣＣＴＴＣＴＣＣＡＡＧＣＴＧＣＧＣＧＡＡＣＡＧＣＴＧＧＧＡＣＣＴＧＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＡＴＴＣＴＧＧＧＡＣＡＡＣＣＴＧＧＡＡＡＡＡＧＡＧＡＣＡＧＡＧＧＧＣＣＴＧＡＧＡＣＡＧＧＡＡＡＴＧＴＣＣＡＡＧＧＡＣＣＴＧＧＡＡＧＡＧＧＴＣＡＡＡＧＣＣＡＡＧＧＴＧＣＡＧＣＣＣＴＡＣＣＴＧＧＡＣＧＡＣＴＴＣＣＡＧＡＡＧＡＡＡＴＧＧＣＡＧＧＡＡＧＡＧＡＴＧＧＡＡＣＴＧＴＡＣＣＧＧＣＡＧＡＡＧＧＴＧＧＡＡＣＣＣＣＴＧＣＧＧＧＣＣＧＡＧＣＴＧＣＡＧＧＡＡＧＧＣＧＣＴＡＧＡＣＡＧＡＡＧＣＴＧＣＡＣＧＡＡＣＴＧＣＡＧＧＡＡＡＡＧＣＴＧＴＣＣＣＣＣＣＴＧＧＧＣＧＡＧＧＡＡＡＴＧＣＧＧＧＡＣＡＧＡＧＣＣＡＧＡＧＣＣＣＡＣＧＴＧＧＡＣＧＣＣＣＴＧＡＧＡＡＣＣＣＡＣＣＴＧＧＣＣＣＣＣＴＡＣＴＣＴＧＡＣＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＡＧＡＧＧＣＴＧＧＣＣＧＣＣＡＧＡＣＴＧＧＡＡＧＣＣＣＴＧＡＡＡＧＡＧＡＡＣＧＧＣＧＧＡＧＣＣＣＧＧＣＴＧＧＣＣＧＡＧＴＡＣＣＡＣＧＣＴＡＡＧＧＣＴＡＣＣＧＡＧＣＡＣＣＴＧＴＣＣＡＣＣＣＴＧＴＣＣＧＡＧＡＡＧＧＣＣＡＡＧＣＣＣＧＣＣＣＴＧＧＡＡＧＡＴＣＴＧＣＧＧＣＡＧＧＧＣＣＴＧＣＴＧＣＣＣＧＴＧＣＴＧＧＡＡＴＣＣＴＴＣＡＡＧＧＴＧＴＣＣＴＴＣＣＴＧＴＣＣＧＣＴＣＴＧＧＡＡＧＡＧＴＡＣＡＣＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＡＡＣＡＣＣＣＡＧＴＣＣＴＣＣＡＧＣＴＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＡＣＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＴＡＧＣＣＣＴＡＧＴＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＣＡＣＣＡＡＴＣＣＴＧＣＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＣＴＣＣＴＣＴＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＴＣＣＣＴＧＣＣＡＴＣＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＣＣＣＣＴＣＴＧＡＣＡＣＣＣＣＴＡＴＣＣＴＧＣＣＴＣＡＧＴＧＡＴＧＡＡＧＧＴＣＴＧＧＡＴＣＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号７３）。

【0163】

一実施形態では、アポリポタンパク質またはその断片の機能的等価物は、少なくとも１つのアミノ酸の付加、置換または欠失によって得られ得る。アミノ酸配列があるアミノ酸の別のアミノ酸への置換を含む場合、そのような置換は保存的アミノ酸置換であり得る。配列番号４４の断片は、２個以上のそのような置換、例えば２個の保存的アミノ酸置換、例えば３個または４個保存的アミノ酸置換、例えば５個または６個の保存的アミノ酸置換、例えば７個または８個の保存的アミノ酸置換、例えば１０〜１５個の保存的アミノ酸置換、例えば１５〜２５個の保存的アミノ酸置換、例えば２５〜７５個の保存的アミノ酸置換、例えば７５〜１２５個の保存的アミノ酸置換、例えば１２５〜１７５個の保存的アミノ酸置換を含み得る。置換は、いかなる一つまたは複数の所定のアミノ酸群内でもなされ得る。

【0164】

別の実施形態では、アポリポタンパク質の断片は、脂質結合領域を含有する。

【0165】

本発明で用いられる「機能的等価物」は、好ましい一実施形態に従って、本明細書で提供される配列の所定の断片の対応する機能性を参照することにより確立される。

【0166】

本明細書で提供される配列の変異体の機能的等価物は、挿入、欠失および置換（例えば保存的置換）の数および範囲が増加するにつれて、好ましい所定の配列から徐々に相違していくアミノ酸配列を示すと理解される。この差異は、好ましい所定の配列と断片または機能的等価物との間の相同性における減少として測定される。

【0167】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片はサイトカインである。別の実施形態では、サイトカインはヘマトポエチンサイトカインである。別の実施形態では、サイトカインはインターフェロンサイトカインである。別の実施形態では、サイトカインはケモカインである。別の実施形態では、サイトカインは腫瘍壊死因子サイトカインである。別の実施形態では、本明細書で使用されるサイトカインは生物活性および臨床効果を含む。別の実施形態では、本明細書で使用されるサイトカインは治療用タンパク質である。

【0168】

アポリポタンパク質の断片または機能的等価物は全て、アポリポタンパク質の好ましい所定の配列に対してそれらが示す相同性の程度に関わらず、本発明の範囲内に含まれる。この理由は、配列番号４４の配列のいくつかの領域は、得られる断片の結合活性に対していかなる重要な影響も無く、容易に変異可能である可能性が最も高い、または完全に欠失することが可能であるからである。配列番号４４の機能的に等価な変異体を作製する方法は、米国特許第６，８９７，０３９号明細書（特許文献４）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。

【0169】

一実施形態では、本明細書で提供される目的ポリペプチドまたはその断片は凝固因子である。別の実施形態では、本発明の凝固因子はタンパク質である。別の実施形態では、本発明の凝固因子はペプチドである。別の実施形態では、本発明の凝固因子はポリペプチドである。別の実施形態では、凝固因子は酵素である。別の実施形態では、凝固因子はセリンプロテアーゼである。別の実施形態では、凝固因子は糖タンパク質である。別の実施形態では、凝固因子はトランスグルタミナーゼである。別の実施形態では、凝固因子は不活性チモーゲンである。別の実施形態では、凝固因子は当業者に公知のあらゆる凝固因子である。別の実施形態では、凝固因子はＦＶＩＩＩである。別の実施形態では、凝固因子はＦＶである。別の実施形態では、凝固因子は第ＸＩＩＩ因子である。別の実施形態では、凝固因子は第Ｘ因子である。別の実施形態では、凝固因子はトロンビンである。別の実施形態では、凝固因子はフィブリンである。別の実施形態では、凝固因子はＦＶＩＩａである。別の実施形態では、凝固因子はＦＶＩＩである。別の実施形態では、凝固因子はＦＩＸである。別の実施形態では、凝固因子はＦＸである。別の実施形態では、凝固因子はＦＸＩａである。別の実施形態では、凝固因子はＦＸＩＩである。別の実施形態では、凝固因子はＦＸａである。別の実施形態では、凝固因子はＦＶａである。別の実施形態では、凝固因子はプロトロンビンである。別の実施形態では、凝固因子はトロンビンである。別の実施形態では、凝固因子はＦＶである。別の実施形態では、凝固因子はＦＸＩである。別の実施形態では、凝固因子はｖＷＦである。別の実施形態では、凝固因子はＦＶＩＩＩａである。別の実施形態では、凝固因子はＢ欠失ドメインＦＶＩＩＩ（Ｂ−ｄｅｌｅｔｅｄ Ｄｏｍａｉｎ ＦＶＩＩＩ）（ＦＶＩＩＩＢＤＤ）である。別の実施形態では、凝固因子はＦＩＸａである。別の実施形態では、凝固因子はプレカリクレインである。別の実施形態では、凝固因子はカリクレインである。別の実施形態では、凝固因子はＦＸＩＩａである。別の実施形態では、凝固因子はフィブリノーゲンである。別の実施形態では、凝固因子はトロンボモジュリンである。別の実施形態では、凝固因子はＦＩＩである。

【0170】

別の実施形態では、凝固因子は糖タンパク質である。別の実施形態では、凝固因子はビタミンＫ依存性糖タンパク質である。別の実施形態では、凝固因子はビタミンＫ非依存性糖タンパク質である。別の実施形態では、凝固因子は組換えタンパク質である。別の実施形態では、凝固因子は組換え糖タンパク質である。別の実施形態では、凝固因子は組換え糖タンパク質ＦＶである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＶＩである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＶＩＩである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＶＩＩＩである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＩＸである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＸである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＸＩである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＸＩＩである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦｖＷである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＩＩである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＩＸａである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＸＩａである。別の実施形態では、凝固因子は組換えフィブリンである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＶＩＩａである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＸａである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＶａである。別の実施形態では、凝固因子は組換えプロトロンビンである。別の実施形態では、凝固因子は組換えトロンビンである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＶＩＩＩａである。別の実施形態では、凝固因子は組換えプレカリクレインである。別の実施形態では、凝固因子は組換えカリクレインである。別の実施形態では、凝固因子は組換えＦＸＩＩａである。別の実施形態では、凝固因子はあらゆる公知の凝固因子である。別の実施形態では、シグナルペプチドを含む凝固因子は、あらゆる公知の組換え凝固因子である。別の実施形態では、凝固因子は、Ｃ末端に結合された１〜１０個のＣＴＰ反復を含み、Ｎ末端に結合されたＣＴＰを含まない。別の実施形態では、シグナルペプチドを含む凝固因子は、あらゆる公知の組換え凝固因子である。別の実施形態では、凝固因子は、Ｃ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰを含み、Ｎ末端に結合されたＣＴＰを含まない。別の実施形態では、Ｃ末端に結合された１〜１０個のＣＴＰ反復を含み、Ｎ末端に結合されたＣＴＰを含まない凝固因子は、改変凝固因子である。別の実施形態では、Ｃ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰを含み、Ｎ末端に結合されたＣＴＰを含まない凝固因子は、改変凝固因子である。別の実施形態では、Ｃ末端に結合された１〜１０個のＣＴＰ反復を含み、Ｎ末端に結合されたＣＴＰを含まない凝固因子は、複合型凝固因子である。別の実施形態では、Ｃ末端に結合された少なくとも１つのＣＴＰを含み、Ｎ末端に結合されたＣＴＰを含まない凝固因子は、複合型凝固因子である。

【0171】

別の実施形態では、ＦＩＸ、ＦＶＩＩ、第Ｘ因子、プロテインＣおよびプロトロンビンのドメイン構成と同様または同一のドメイン構成を含む、凝固因子。別の実施形態では、凝固因子は、Ｎ末端プロペプチドを有する前駆物質として合成される。別の実施形態では、本明細書で使用される凝固因子は、不活性プロ酵素の形態にある。別の実施形態では、凝固因子は肝細胞内で産生される。別の実施形態では、凝固因子は、グルタミン酸（Ｇｌｕ）をγカルボキシグルタミン酸（Ｇｌａ）に変換するγカルボキシラーゼのためのドッキング部位を含む。別の実施形態では、凝固因子は市販の凝固因子である。
［００３３］ 別の実施形態では、第ＶＩＩ因子のアミノ酸配列は以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰ（配列番号４５）。

【0172】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子のアミノ酸配列は以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰ^＊ＧＣＧＲ（配列番号４６）。

【0173】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子をコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ＣＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＧＴＣＴＣＣＣＡＧＧＣＣＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＴＧＣＣＴＴＣＴＧＣＴＴＧＧＧＣＴＴＣＡＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＣＴＧＣＡＧＴＣＴＴＣＧＴＡＡＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＣＣＡＣＧＧＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＧＧＣＧＣＧＣＣＡＡＣＧＣＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＣＧＧＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＧＡＧＴＧＣＡＡＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＧＣＴＣＣＴＴＣＧＡＧＧＡＧＧＣＣＣＧＧＧＡＧＡＴＣＴＴＣＡＡＧＧＡＣＧＣＧＧＡＧＡＧＧＡＣＧＡＡＧＣＴＧＴＴＣＴＧＧＡＴＴＴＣＴＴＡＣＡＧＴＧＡＴＧＧＧＧＡＣＣＡＧＴＧＴＧＣＣＴＣＡＡＧＴＣＣＡＴＧＣＣＡＧＡＡＴＧＧＧＧＧＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＡＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＴＣＣＴＡＴＡＴＣＴＧＣＴＴＣＴＧＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＴＴＣＧＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＣＴＧＴＧＡＧＡＣＧＣＡＣＡＡＧＧＡＴＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＴＣＴＧＴＧＴＧＡＡＣＧＡＧＡＡＣＧＧＣＧＧＣＴＧＴＧＡＧＣＡＧＴＡＣＴＧＣＡＧＴＧＡＣＣＡＣＡＣＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＧＣＴＣＣＴＧＴＣＧＧＴＧＣＣＡＣＧＡＧＧＧＧＴＡＣＴＣＴＣＴＧＣＴＧＧＣＡＧＡＣＧＧＧＧＴＧＴＣＣＴＧＣＡＣＡＣＣＣＡＣＡＧＴＴＧＡＡＴＡＴＣＣＡＴＧＴＧＧＡＡＡＡＡＴＡＣＣＴＡＴＴＣＴＡＧＡＡＡＡＡＡＧＡＡＡＴＧＣＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＣＡＡＧＧＣＣＧＡＡＴＴＧＴＧＧＧＧＧＧＣＡＡＧＧＴＧＴＧＣＣＣＣＡＡＡＧＧＧＧＡＧＴＧＴＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＴＧＴＴＧＴＴＧＧＴＧＡＡＴＧＧＡＧＣＴＣＡＧＴＴＧＴＧＴＧＧＧＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＴＣＡＡＣＡＣＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＧＴＣＴＣＣＧＣＧＧＣＣＣＡＣＴＧＴＴＴＣＧＡＣＡＡＡＡＴＣＡＡＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＣＣＴＧＡＴＣＧＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＧＡＧＣＡＣＧＡＣＣＴＣＡＧＣＧＡＧＣＡＣＧＡＣＧＧＧＧＡＴＧＡＧＣＡＧＡＧＣＣＧＧＣＧＧＧＴＧＧＣＧＣＡＧＧＴＣＡＴＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＧＴＣＣＣＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＡＴＣＧＣＧＣＴＧＣＴＣＣＧＣＣＴＧＣＡＣＣＡＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣＣＴＣＡＣＴＧＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＣＣＣＣＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＧＡＡＣＧＧＡＣＧＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＣＧＴＧＣＧＣＴＴＣＴＣＡＴＴＧＧＴＣＡＧＣＧＧＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＣＧＴＧＧＣＧＣＣＡＣＧＧＣＣＣＴＧＧＡＧＣＴＣＡＴＧＧＴＣＣＴＣＡＡＣＧＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＴＧＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＴＣＡＣＧＧＡＡＧＧＴＧＧＧＡＧＡＣＴＣＣＣＣＡＡＡＴＡＴＣＡＣＧＧＡＧＴＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＴＧＣＣＧＧＣＴＡＣＴＣＧＧＡＴＧＧＣＡＧＣＡＡＧＧＡＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＧＧＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＣＣＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＣＣＡＣＴＡＣＣＧＧＧＧＣＡＣＧＴＧＧＴＡＣＣＴＧＡＣＧＧＧＣＡＴＣＧＴＣＡＧＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＴＧＣＧＣＡＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＣＴＴＴＧＧＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＡＧＧＧＴＣＴＣＣＣＡＧＴＡＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＣＴＧＣＡＡＡＡＧＣＴＣＡＴＧＣＧＣＴＣＡＧＡＧＣＣＡＣＧＣＣＣＡＧＧＡＧＴＣＣＴＣＣＴＧＣＧＡＧＣＣＣＣＡＴＴＴＣＣＣＴＧＡＧＧＡＴＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号４７）。

【0174】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）をコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ＣＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＧＴＣＴＣＣＣＡＧＧＣＣＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＴＧＣＣＴＴＣＴＧＣＴＴＧＧＧＣＴＴＣＡＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＣＴＧＣＡＧＴＣＴＴＣＧＴＡＡＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＣＣＡＣＧＧＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＧＧＣＧＣＧＣＣＡＡＣＧＣＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＣＧＧＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＧＡＧＴＧＣＡＡＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＧＣＴＣＣＴＴＣＧＡＧＧＡＧＧＣＣＣＧＧＧＡＧＡＴＣＴＴＣＡＡＧＧＡＣＧＣＧＧＡＧＡＧＧＡＣＧＡＡＧＣＴＧＴＴＣＴＧＧＡＴＴＴＣＴＴＡＣＡＧＴＧＡＴＧＧＧＧＡＣＣＡＧＴＧＴＧＣＣＴＣＡＡＧＴＣＣＡＴＧＣＣＡＧＡＡＴＧＧＧＧＧＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＡＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＴＣＣＴＡＴＡＴＣＴＧＣＴＴＣＴＧＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＴＴＣＧＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＣＴＧＴＧＡＧＡＣＧＣＡＣＡＡＧＧＡＴＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＴＣＴＧＴＧＴＧＡＡＣＧＡＧＡＡＣＧＧＣＧＧＣＴＧＴＧＡＧＣＡＧＴＡＣＴＧＣＡＧＴＧＡＣＣＡＣＡＣＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＧＣＴＣＣＴＧＴＣＧＧＴＧＣＣＡＣＧＡＧＧＧＧＴＡＣＴＣＴＣＴＧＣＴＧＧＣＡＧＡＣＧＧＧＧＴＧＴＣＣＴＧＣＡＣＡＣＣＣＡＣＡＧＴＴＧＡＡＴＡＴＣＣＡＴＧＴＧＧＡＡＡＡＡＴＡＣＣＴＡＴＴＣＴＡＧＡＡＡＡＡＡＧＡＡＡＴＧＣＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＣＡＡＧＧＣＣＧＡＡＴＴＧＴＧＧＧＧＧＧＣＡＡＧＧＴＧＴＧＣＣＣＣＡＡＡＧＧＧＧＡＧＴＧＴＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＴＧＴＴＧＴＴＧＧＴＧＡＡＴＧＧＡＧＣＴＣＡＧＴＴＧＴＧＴＧＧＧＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＴＣＡＡＣＡＣＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＧＴＣＴＣＣＧＣＧＧＣＣＣＡＣＴＧＴＴＴＣＧＡＣＡＡＡＡＴＣＡＡＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＣＣＴＧＡＴＣＧＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＧＡＧＣＡＣＧＡＣＣＴＣＡＧＣＧＡＧＣＡＣＧＡＣＧＧＧＧＡＴＧＡＧＣＡＧＡＧＣＣＧＧＣＧＧＧＴＧＧＣＧＣＡＧＧＴＣＡＴＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＧＴＣＣＣＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＡＴＣＧＣＧＣＴＧＣＴＣＣＧＣＣＴＧＣＡＣＣＡＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣＣＴＣＡＣＴＧＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＣＣＣＣＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＧＡＡＣＧＧＡＣＧＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＣＧＴＧＣＧＣＴＴＣＴＣＡＴＴＧＧＴＣＡＧＣＧＧＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＣＧＴＧＧＣＧＣＣＡＣＧＧＣＣＣＴＧＧＡＧＣＴＣＡＴＧＧＴＣＣＴＣＡＡＣＧＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＴＧＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＴＣＡＣＧＧＡＡＧＧＴＧＧＧＡＧＡＣＴＣＣＣＣＡＡＡＴＡＴＣＡＣＧＧＡＧＴＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＴＧＣＣＧＧＣＴＡＣＴＣＧＧＡＴＧＧＣＡＧＣＡＡＧＧＡＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＧＧＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＣＣＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＣＣＡＣＴＡＣＣＧＧＧＧＣＡＣＧＴＧＧＴＡＣＣＴＧＡＣＣＧＧＣＡＴＣＧＴＧＡＧＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＴＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＣＴＴＣＧＧＣＧＴＧＴＡＣＡＣＣＡＧＧＧＴＧＴＣＣＣＡＧＴＡＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＣＴＧＡＴＧＡＧＡＡＧＣＧＡＧＣＣＣＡＧＡＣＣＣＧＧＣＧＴＧＣＴＧＣＴＧＡＧＡＧＣＣＣＣＣＴＴＣＣＣＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＴＧＣＣＣＡＧＣＣＣＴＡＧＣＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＣＣＡＧＣＧＡＣＡＣＣＣＣＣＡＴＣＣＴＧＣＣＣＣＡＧＴＧＡＧＧＡＴＣＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号４８）。

【0175】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ^＊（配列番号４９）。

【0176】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）をコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ＣＴＣＧＡＧＧＡＣＡＴＧＧＴＣＴＣＣＣＡＧＧＣＣＣＴＣＡＧＧＣＴＣＣＴＣＴＧＣＣＴＴＣＴＧＣＴＴＧＧＧＣＴＴＣＡＧＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＣＴＧＣＡＧＴＣＴＴＣＧＴＡＡＣＣＣＡＧＧＡＧＧＡＡＧＣＣＣＡＣＧＧＣＧＴＣＣＴＧＣＡＣＣＧＧＣＧＣＣＧＧＣＧＣＧＣＣＡＡＣＧＣＧＴＴＣＣＴＧＧＡＧＧＡＧＣＴＧＣＧＧＣＣＧＧＧＣＴＣＣＣＴＧＧＡＧＡＧＧＧＡＧＴＧＣＡＡＧＧＡＧＧＡＧＣＡＧＴＧＣＴＣＣＴＴＣＧＡＧＧＡＧＧＣＣＣＧＧＧＡＧＡＴＣＴＴＣＡＡＧＧＡＣＧＣＧＧＡＧＡＧＧＡＣＧＡＡＧＣＴＧＴＴＣＴＧＧＡＴＴＴＣＴＴＡＣＡＧＴＧＡＴＧＧＧＧＡＣＣＡＧＴＧＴＧＣＣＴＣＡＡＧＴＣＣＡＴＧＣＣＡＧＡＡＴＧＧＧＧＧＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＡＣＣＡＧＣＴＣＣＡＧＴＣＣＴＡＴＡＴＣＴＧＣＴＴＣＴＧＣＣＴＣＣＣＴＧＣＣＴＴＣＧＡＧＧＧＣＣＧＧＡＡＣＴＧＴＧＡＧＡＣＧＣＡＣＡＡＧＧＡＴＧＡＣＣＡＧＣＴＧＡＴＣＴＧＴＧＴＧＡＡＣＧＡＧＡＡＣＧＧＣＧＧＣＴＧＴＧＡＧＣＡＧＴＡＣＴＧＣＡＧＴＧＡＣＣＡＣＡＣＧＧＧＣＡＣＣＡＡＧＣＧＣＴＣＣＴＧＴＣＧＧＴＧＣＣＡＣＧＡＧＧＧＧＴＡＣＴＣＴＣＴＧＣＴＧＧＣＡＧＡＣＧＧＧＧＴＧＴＣＣＴＧＣＡＣＡＣＣＣＡＣＡＧＴＴＧＡＡＴＡＴＣＣＡＴＧＴＧＧＡＡＡＡＡＴＡＣＣＴＡＴＴＣＴＡＧＡＡＡＡＡＡＧＡＡＡＴＧＣＣＡＧＣＡＡＡＣＣＣＣＡＡＧＧＣＣＧＡＡＴＴＧＴＧＧＧＧＧＧＣＡＡＧＧＴＧＴＧＣＣＣＣＡＡＡＧＧＧＧＡＧＴＧＴＣＣＡＴＧＧＣＡＧＧＴＣＣＴＧＴＴＧＴＴＧＧＴＧＡＡＴＧＧＡＧＣＴＣＡＧＴＴＧＴＧＴＧＧＧＧＧＧＡＣＣＣＴＧＡＴＣＡＡＣＡＣＣＡＴＣＴＧＧＧＴＧＧＴＣＴＣＣＧＣＧＧＣＣＣＡＣＴＧＴＴＴＣＧＡＣＡＡＡＡＴＣＡＡＧＡＡＣＴＧＧＡＧＧＡＡＣＣＴＧＡＴＣＧＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＣＧＡＧＣＡＣＧＡＣＣＴＣＡＧＣＧＡＧＣＡＣＧＡＣＧＧＧＧＡＴＧＡＧＣＡＧＡＧＣＣＧＧＣＧＧＧＴＧＧＣＧＣＡＧＧＴＣＡＴＣＡＴＣＣＣＣＡＧＣＡＣＧＴＡＣＧＴＣＣＣＧＧＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＣＣＡＣＧＡＣＡＴＣＧＣＧＣＴＧＣＴＣＣＧＣＣＴＧＣＡＣＣＡＧＣＣＣＧＴＧＧＴＣＣＴＣＡＣＴＧＡＣＣＡＴＧＴＧＧＴＧＣＣＣＣＴＣＴＧＣＣＴＧＣＣＣＧＡＡＣＧＧＡＣＧＴＴＣＴＣＴＧＡＧＡＧＧＡＣＧＣＴＧＧＣＣＴＴＣＧＴＧＣＧＣＴＴＣＴＣＡＴＴＧＧＴＣＡＧＣＧＧＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＣＴＧＣＴＧＧＡＣＣＧＴＧＧＣＧＣＣＡＣＧＧＣＣＣＴＧＧＡＧＣＴＣＡＴＧＧＴＣＣＴＣＡＡＣＧＴＧＣＣＣＣＧＧＣＴＧＡＴＧＡＣＣＣＡＧＧＡＣＴＧＣＣＴＧＣＡＧＣＡＧＴＣＡＣＧＧＡＡＧＧＴＧＧＧＡＧＡＣＴＣＣＣＣＡＡＡＴＡＴＣＡＣＧＧＡＧＴＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＴＧＣＣＧＧＣＴＡＣＴＣＧＧＡＴＧＧＣＡＧＣＡＡＧＧＡＣＴＣＣＴＧＣＡＡＧＧＧＧＧＡＣＡＧＴＧＧＡＧＧＣＣＣＡＣＡＴＧＣＣＡＣＣＣＡＣＴＡＣＣＧＧＧＧＣＡＣＧＴＧＧＴＡＣＣＴＧＡＣＣＧＧＣＡＴＣＧＴＧＡＧＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＧＧＣＴＧＣＧＣＣＡＣＣＧＴＧＧＧＣＣＡＣＴＴＣＧＧＣＧＴＧＴＡＣＡＣＣＡＧＧＧＴＧＴＣＣＣＡＧＴＡＣＡＴＣＧＡＧＴＧＧＣＴＧＣＡＧＡＡＡＣＴＧＡＴＧＡＧＡＡＧＣＧＡＧＣＣＣＡＧＡＣＣＣＧＧＣＧＴＧＣＴＧＣＴＧＡＧＡＧＣＣＣＣＣＴＴＣＣＣＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＣＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＣＣＣＴＡＧＣＣＴＧＣＣＣＡＧＣＣＣＴＡＧＣＡＧＡＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＣＡＣＣＡＡＴＣＣＴＧＣＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＣＴＣＣＴＣＴＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＴＣＣＣＴＧＣＣＡＴＣＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＣＴＧＣＣＡＧＧＣＣＣＣＴＣＴＧＡＣＡＣＣＣＣＴＡＴＣＣＴＧＣＣＴＣＡＧＴＧＡＴＧＡＡＧＧＴＣＴＧＧＡＴＣＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号５０）。

【0177】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ^＊＊（配列番号５１）。

【0178】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ（カルボキシ末端に３個結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号５２）。

【0179】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ（×４）（カルボキシ末端に４個結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号５３）。

【0180】

別の実施形態では、第ＶＩＩ因子−ＣＴＰ（×５）（カルボキシ末端に５個結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＶＳＱＡＬＲＬＬＣＬＬＬＧＬＱＧＣＬＡＡＶＦＶＴＱＥＥＡＨＧＶＬＨＲＲＲＲＡＮＡＦＬＥＥＬＲＰＧＳＬＥＲＥＣＫＥＥＱＣＳＦＥＥＡＲＥＩＦＫＤＡＥＲＴＫＬＦＷＩＳＹＳＤＧＤＱＣＡＳＳＰＣＱＮＧＧＳＣＫＤＱＬＱＳＹＩＣＦＣＬＰＡＦＥＧＲＮＣＥＴＨＫＤＤＱＬＩＣＶＮＥＮＧＧＣＥＱＹＣＳＤＨＴＧＴＫＲＳＣＲＣＨＥＧＹＳＬＬＡＤＧＶＳＣＴＰＴＶＥＹＰＣＧＫＩＰＩＬＥＫＲＮＡＳＫＰＱＧＲＩＶＧＧＫＶＣＰＫＧＥＣＰＷＱＶＬＬＬＶＮＧＡＱＬＣＧＧＴＬＩＮＴＩＷＶＶＳＡＡＨＣＦＤＫＩＫＮＷＲＮＬＩＡＶＬＧＥＨＤＬＳＥＨＤＧＤＥＱＳＲＲＶＡＱＶＩＩＰＳＴＹＶＰＧＴＴＮＨＤＩＡＬＬＲＬＨＱＰＶＶＬＴＤＨＶＶＰＬＣＬＰＥＲＴＦＳＥＲＴＬＡＦＶＲＦＳＬＶＳＧＷＧＱＬＬＤＲＧＡＴＡＬＥＬＭＶＬＮＶＰＲＬＭＴＱＤＣＬＱＱＳＲＫＶＧＤＳＰＮＩＴＥＹＭＦＣＡＧＹＳＤＧＳＫＤＳＣＫＧＤＳＧＧＰＨＡＴＨＹＲＧＴＷＹＬＴＧＩＶＳＷＧＱＧＣＡＴＶＧＨＦＧＶＹＴＲＶＳＱＹＩＥＷＬＱＫＬＭＲＳＥＰＲＰＧＶＬＬＲＡＰＦＰＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号５４）。

【0181】

別の実施形態では、第ＩＸ因子をコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ＧＣＧＡＴＣＧＣＣＡＴＧＣＡＧＣＧＣＧＴＧＡＡＣＡＴＧＡＴＣＡＴＧＧＣＡＧＡＡＴＣＡＣＣＡＧＧＣＣＴＣＡＴＣＡＣＣＡＴＴＧＣＣＴＴＴＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＡＣＴＣＡＧＴＧＣＴＧＡＡＴＧＴＡＣＡＧＴＴＴＴＴＣＴＴＧＡＴＣＡＴＧＡＡＡＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＡＡＴＴＣＴＧＡＡＴＣＧＧＣＣＡＡＡＧＡＧＧＴＡＴＡＡＴＴＣＡＧＧＴＡＡＡＴＴＧＧＡＡＧＡＧＴＴＴＧＴＴＣＡＡＧＧＧＡＡＣＣＴＴＧＡＧＡＧＡＧＡＡＴＧＴＡＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＧＴＧＴＡＧＴＴＴＴＧＡＡＧＡＡＧＣＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＴＴＴＧＡＡＡＡＣＡＣＴＧＡＡＡＧＡＡＣＡＡＣＴＧＡＡＴＴＴＴＧＧＡＡＧＣＡＧＴＡＴＧＴＴＧＡＴＧＧＡＧＡＴＣＡＧＴＧＴＧＡＧＴＣＣＡＡＴＣＣＡＴＧＴＴＴＡＡＡＴＧＧＣＧＧＣＡＧＴＴＧＣＡＡＧＧＡＴＧＡＣＡＴＴＡＡＴＴＣＣＴＡＴＧＡＡＴＧＴＴＧＧＴＧＴＣＣＣＴＴＴＧＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧＡＡＡＧＡＡＣＴＧＴＧＡＡＴＴＡＧＡＴＧＴＡＡＣＡＴＧＴＡＡＣＡＴＴＡＡＧＡＡＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＧＡＧＣＡＧＴＴＴＴＧＴＡＡＡＡＡＴＡＧＴＧＣＴＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＴＧＧＴＴＴＧＣＴＣＣＴＧＴＡＣＴＧＡＧＧＧＡＴＡＴＣＧＡＣＴＴＧＣＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＡＡＣＣＡＧＣＡＧＴＧＣＣＡＴＴＴＣＣＡＴＧＴＧＧＡＡＧＡＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＡＣＡＡＡＣＴＴＣＴＡＡＧＣＴＣＡＣＣＣＧＴＧＣＴＧＡＧＡＣＴＧＴＴＴＴＴＣＣＴＧＡＴＧＴＧＧＡＣＴＡＴＧＴＡＡＡＴＴＣＴＡＣＴＧＡＡＧＣＴＧＡＡＡＣＣＡＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＣＴＣＡＡＡＧＣＡＣＣＣＡＡＴＣＡＴＴＴＡＡＴＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＧＡＧＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡＴＧＣＣＡＡＡＣＣＡＧＧＴＣＡＡＴＴＣＣＣＴＴＧＧＣＡＧＧＴＴＧＴＴＴＴＧＡＡＴＧＧＴＡＡＡＧＴＴＧＡＴＧＣＡＴＴＣＴＧＴＧＧＡＧＧＣＴＣＴＡＴＣＧＴＴＡＡＴＧＡＡＡＡＡＴＧＧＡＴＴＧＴＡＡＣＴＧＣＴＧＣＣＣＡＣＴＧＴＧＴＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＴＴＡＡＡＡＴＴＡＣＡＧＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＴＧＡＡＣＡＴＡＡＴＡＴＴＧＡＧＧＡＧＡＣＡＧＡＡＣＡＴＡＣＡＧＡＧＣＡＡＡＡＧＣＧＡＡＡＴＧＴＧＡＴＴＣＧＡＡＴＴＡＴＴＣＣＴＣＡＣＣＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＣＡＧＣＴＡＴＴＡＡＴＡＡＧＴＡＣＡＡＣＣＡＴＧＡＣＡＴＴＧＣＣＣＴＴＣＴＧＧＡＡＣＴＧＧＡＣＧＡＡＣＣＣＴＴＡＧＴＧＣＴＡＡＡＣＡＧＣＴＡＣＧＴＴＡＣＡＣＣＴＡＴＴＴＧＣＡＴＴＧＣＴＧＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＡＣＧＡＡＣＡＴＣＴＴＣＣＴＣＡＡＡＴＴＴＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＡＴＧＴＡＡＧＴＧＧＣＴＧＧＧＧＡＡＧＡＧＴＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＧＧＧＡＧＡＴＣＡＧＣＴＴＴＡＧＴＴＣＴＣＣＡＧＴＡＣＣＴＴＡＧＡＧＴＴＣＣＡＣＴＴＧＴＴＧＡＣＣＧＡＧＣＣＡＣＡＴＧＴＣＴＴＣＧＡＴＣＴＡＣＡＡＡＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＡＴＡＡＣＡＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＴＣＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＧＴＡＧＡＧＡＴＴＣＡＴＧＴＣＡＡＧＧＡＧＡＴＡＧＴＧＧＧＧＧＡＣＣＣＣＡＴＧＴＴＡＣＴＧＡＡＧＴＧＧＡＡＧＧＧＡＣＣＡＧＴＴＴＣＴＴＡＡＣＴＧＧＡＡＴＴＡＴＴＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＴＧＴＧＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＣＡＡＡＴＡＴＧＧＡＡＴＡＴＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＡＴＣＣＣＧＧＴＡＴＧＴＣＡＡＣＴＧＧＡＴＴＡＡＧＧＡＡＡＡＡＡＣＡＡＡＧＣＴＣＡＣＴＴＧＡＡＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号５５）。

【0182】

別の実施形態では、第ＩＸ因子のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＱＲＶＮＭＩＭＡＥＳＰＧＬＩＴＩＣＬＬＧＹＬＬＳＡＥＣＴＶＦＬＤＨＥＮＡＮＫＩＬＮＲＰＫＲＹＮＳＧＫＬＥＥＦＶＱＧＮＬＥＲＥＣＭＥＥＫＣＳＦＥＥＡＲＥＶＦＥＮＴＥＲＴＴＥＦＷＫＱＹＶＤＧＤＱＣＥＳＮＰＣＬＮＧＧＳＣＫＤＤＩＮＳＹＥＣＷＣＰＦＧＦＥＧＫＮＣＥＬＤＶＴＣＮＩＫＮＧＲＣＥＱＦＣＫＮＳＡＤＮＫＶＶＣＳＣＴＥＧＹＲＬＡＥＮＱＫＳＣＥＰＡＶＰＦＰＣＧＲＶＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲＡＥＴＶＦＰＤＶＤＹＶＮＳＴＥＡＥＴＩＬＤＮＩＴＱＳＴＱＳＦＮＤＦＴＲＶＶＧＧＥＤＡＫＰＧＱＦＰＷＱＶＶＬＮＧＫＶＤＡＦＣＧＧＳＩＶＮＥＫＷＩＶＴＡＡＨＣＶＥＴＧＶＫＩＴＶＶＡＧＥＨＮＩＥＥＴＥＨＴＥＱＫＲＮＶＩＲＩＩＰＨＨＮＹＮＡＡＩＮＫＹＮＨＤＩＡＬＬＥＬＤＥＰＬＶＬＮＳＹＶＴＰＩＣＩＡＤＫＥＹＴＮＩＦＬＫＦＧＳＧＹＶＳＧＷＧＲＶＦＨＫＧＲＳＡＬＶＬＱＹＬＲＶＰＬＶＤＲＡＴＣＬＲＳＴＫＦＴＩＹＮＮＭＦＣＡＧＦＨＥＧＧＲＤＳＣＱＧＤＳＧＧＰＨＶＴＥＶＥＧＴＳＦＬＴＧＩＩＳＷＧＥＥＣＡＭＫＧＫＹＧＩＹＴＫＶＳＲＹＶＮＷＩＫＥＫＴＫＬＴ^＊（配列番号５６）。

【0183】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）をコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ＧＣＧＡＴＣＧＣＣＡＴＧＣＡＧＣＧＣＧＴＧＡＡＣＡＴＧＡＴＣＡＴＧＧＣＡＧＡＡＴＣＡＣＣＡＧＧＣＣＴＣＡＴＣＡＣＣＡＴＣＴＧＣＣＴＴＴＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＡＣＴＣＡＧＴＧＣＴＧＡＡＴＧＴＡＣＡＧＴＴＴＴＴＣＴＴＧＡＴＣＡＴＧＡＡＡＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＡＡＴＴＣＴＧＡＡＴＣＧＧＣＣＡＡＡＧＡＧＧＴＡＴＡＡＴＴＣＡＧＧＴＡＡＡＴＴＧＧＡＡＧＡＧＴＴＴＧＴＴＣＡＡＧＧＧＡＡＣＣＴＴＧＡＧＡＧＡＧＡＡＴＧＴＡＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＧＴＧＴＡＧＴＴＴＴＧＡＡＧＡＡＧＣＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＴＴＴＧＡＡＡＡＣＡＣＴＧＡＡＡＧＡＡＣＡＡＣＴＧＡＡＴＴＴＴＧＧＡＡＧＣＡＧＴＡＴＧＴＴＧＡＴＧＧＡＧＡＴＣＡＧＴＧＴＧＡＧＴＣＣＡＡＴＣＣＡＴＧＴＴＴＡＡＡＴＧＧＣＧＧＣＡＧＴＴＧＣＡＡＧＧＡＴＧＡＣＡＴＴＡＡＴＴＣＣＴＡＴＧＡＡＴＧＴＴＧＧＴＧＴＣＣＣＴＴＴＧＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧＡＡＡＧＡＡＣＴＧＴＧＡＡＴＴＡＧＡＴＧＴＡＡＣＡＴＧＴＡＡＣＡＴＴＡＡＧＡＡＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＧＡＧＣＡＧＴＴＴＴＧＴＡＡＡＡＡＴＡＧＴＧＣＴＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＴＧＧＴＴＴＧＣＴＣＣＴＧＴＡＣＴＧＡＧＧＧＡＴＡＴＣＧＡＣＴＴＧＣＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＡＡＣＣＡＧＣＡＧＴＧＣＣＡＴＴＴＣＣＡＴＧＴＧＧＡＡＧＡＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＡＣＡＡＡＣＴＴＣＴＡＡＧＣＴＣＡＣＣＣＧＴＧＣＴＧＡＧＡＣＴＧＴＴＴＴＴＣＣＴＧＡＴＧＴＧＧＡＣＴＡＴＧＴＡＡＡＴＴＣＴＡＣＴＧＡＡＧＣＴＧＡＡＡＣＣＡＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＣＴＣＡＡＡＧＣＡＣＣＣＡＡＴＣＡＴＴＴＡＡＴＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＧＡＧＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡＴＧＣＣＡＡＡＣＣＡＧＧＴＣＡＡＴＴＣＣＣＴＴＧＧＣＡＧＧＴＴＧＴＴＴＴＧＡＡＴＧＧＴＡＡＡＧＴＴＧＡＴＧＣＡＴＴＣＴＧＴＧＧＡＧＧＣＴＣＴＡＴＣＧＴＴＡＡＴＧＡＡＡＡＡＴＧＧＡＴＴＧＴＡＡＣＴＧＣＴＧＣＣＣＡＣＴＧＴＧＴＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＴＴＡＡＡＡＴＴＡＣＡＧＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＴＧＡＡＣＡＴＡＡＴＡＴＴＧＡＧＧＡＧＡＣＡＧＡＡＣＡＴＡＣＡＧＡＧＣＡＡＡＡＧＣＧＡＡＡＴＧＴＧＡＴＴＣＧＡＡＴＴＡＴＴＣＣＴＣＡＣＣＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＣＡＧＣＴＡＴＴＡＡＴＡＡＧＴＡＣＡＡＣＣＡＴＧＡＣＡＴＴＧＣＣＣＴＴＣＴＧＧＡＡＣＴＧＧＡＣＧＡＡＣＣＣＴＴＡＧＴＧＣＴＡＡＡＣＡＧＣＴＡＣＧＴＴＡＣＡＣＣＴＡＴＴＴＧＣＡＴＴＧＣＴＧＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＡＣＧＡＡＣＡＴＣＴＴＣＣＴＣＡＡＡＴＴＴＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＡＴＧＴＡＡＧＴＧＧＣＴＧＧＧＧＡＡＧＡＧＴＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＧＧＧＡＧＡＴＣＡＧＣＴＴＴＡＧＴＴＣＴＴＣＡＧＴＡＣＣＴＴＡＧＡＧＴＴＣＣＡＣＴＴＧＴＴＧＡＣＣＧＡＧＣＣＡＣＡＴＧＴＣＴＴＣＧＡＴＣＴＡＣＡＡＡＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＡＴＡＡＣＡＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＴＣＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＧＴＡＧＡＧＡＴＴＣＡＴＧＴＣＡＡＧＧＡＧＡＴＡＧＴＧＧＧＧＧＡＣＣＣＣＡＴＧＴＴＡＣＴＧＡＡＧＴＧＧＡＡＧＧＧＡＣＣＡＧＴＴＴＣＴＴＡＡＣＴＧＧＡＡＴＴＡＴＴＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＴＧＴＧＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＣＡＡＡＴＡＴＧＧＡＡＴＡＴＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＡＴＣＣＣＧＧＴＡＴＧＴＣＡＡＣＴＧＧＡＴＴＡＡＧＧＡＡＡＡＡＡＣＡＡＡＧＣＴＣＡＣＴＡＧＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＣＣＣＧＡＧＣＣＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＡＡＧＣＡＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＣＡＣＣＡＡＴＣＣＴＧＣＣＡＣＡＧＴＧＡＴＧＡＡＧＧＴＣＴＧＧＡＴＣＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号５７）。

【0184】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＱＲＶＮＭＩＭＡＥＳＰＧＬＩＴＩＣＬＬＧＹＬＬＳＡＥＣＴＶＦＬＤＨＥＮＡＮＫＩＬＮＲＰＫＲＹＮＳＧＫＬＥＥＦＶＱＧＮＬＥＲＥＣＭＥＥＫＣＳＦＥＥＡＲＥＶＦＥＮＴＥＲＴＴＥＦＷＫＱＹＶＤＧＤＱＣＥＳＮＰＣＬＮＧＧＳＣＫＤＤＩＮＳＹＥＣＷＣＰＦＧＦＥＧＫＮＣＥＬＤＶＴＣＮＩＫＮＧＲＣＥＱＦＣＫＮＳＡＤＮＫＶＶＣＳＣＴＥＧＹＲＬＡＥＮＱＫＳＣＥＰＡＶＰＦＰＣＧＲＶＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲＡＥＴＶＦＰＤＶＤＹＶＮＳＴＥＡＥＴＩＬＤＮＩＴＱＳＴＱＳＦＮＤＦＴＲＶＶＧＧＥＤＡＫＰＧＱＦＰＷＱＶＶＬＮＧＫＶＤＡＦＣＧＧＳＩＶＮＥＫＷＩＶＴＡＡＨＣＶＥＴＧＶＫＩＴＶＶＡＧＥＨＮＩＥＥＴＥＨＴＥＱＫＲＮＶＩＲＩＩＰＨＨＮＹＮＡＡＩＮＫＹＮＨＤＩＡＬＬＥＬＤＥＰＬＶＬＮＳＹＶＴＰＩＣＩＡＤＫＥＹＴＮＩＦＬＫＦＧＳＧＹＶＳＧＷＧＲＶＦＨＫＧＲＳＡＬＶＬＱＹＬＲＶＰＬＶＤＲＡＴＣＬＲＳＴＫＦＴＩＹＮＮＭＦＣＡＧＦＨＥＧＧＲＤＳＣＱＧＤＳＧＧＰＨＶＴＥＶＥＧＴＳＦＬＴＧＩＩＳＷＧＥＥＣＡＭＫＧＫＹＧＩＹＴＫＶＳＲＹＶＮＷＩＫＥＫＴＫＬＴＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ^＊＊（配列番号５８）。

【0185】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）をコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ＧＣＧＡＴＣＧＣＣＡＴＧＣＡＧＣＧＣＧＴＧＡＡＣＡＴＧＡＴＣＡＴＧＧＣＡＧＡＡＴＣＡＣＣＡＧＧＣＣＴＣＡＴＣＡＣＣＡＴＣＴＧＣＣＴＴＴＴＡＧＧＡＴＡＴＣＴＡＣＴＣＡＧＴＧＣＴＧＡＡＴＧＴＡＣＡＧＴＴＴＴＴＣＴＴＧＡＴＣＡＴＧＡＡＡＡＣＧＣＣＡＡＣＡＡＡＡＴＴＣＴＧＡＡＴＣＧＧＣＣＡＡＡＧＡＧＧＴＡＴＡＡＴＴＣＡＧＧＴＡＡＡＴＴＧＧＡＡＧＡＧＴＴＴＧＴＴＣＡＡＧＧＧＡＡＣＣＴＴＧＡＧＡＧＡＧＡＡＴＧＴＡＴＧＧＡＡＧＡＡＡＡＧＴＧＴＡＧＴＴＴＴＧＡＡＧＡＡＧＣＡＣＧＡＧＡＡＧＴＴＴＴＴＧＡＡＡＡＣＡＣＴＧＡＡＡＧＡＡＣＡＡＣＴＧＡＡＴＴＴＴＧＧＡＡＧＣＡＧＴＡＴＧＴＴＧＡＴＧＧＡＧＡＴＣＡＧＴＧＴＧＡＧＴＣＣＡＡＴＣＣＡＴＧＴＴＴＡＡＡＴＧＧＣＧＧＣＡＧＴＴＧＣＡＡＧＧＡＴＧＡＣＡＴＴＡＡＴＴＣＣＴＡＴＧＡＡＴＧＴＴＧＧＴＧＴＣＣＣＴＴＴＧＧＡＴＴＴＧＡＡＧＧＡＡＡＧＡＡＣＴＧＴＧＡＡＴＴＡＧＡＴＧＴＡＡＣＡＴＧＴＡＡＣＡＴＴＡＡＧＡＡＴＧＧＣＡＧＡＴＧＣＧＡＧＣＡＧＴＴＴＴＧＴＡＡＡＡＡＴＡＧＴＧＣＴＧＡＴＡＡＣＡＡＧＧＴＧＧＴＴＴＧＣＴＣＣＴＧＴＡＣＴＧＡＧＧＧＡＴＡＴＣＧＡＣＴＴＧＣＡＧＡＡＡＡＣＣＡＧＡＡＧＴＣＣＴＧＴＧＡＡＣＣＡＧＣＡＧＴＧＣＣＡＴＴＴＣＣＡＴＧＴＧＧＡＡＧＡＧＴＴＴＣＴＧＴＴＴＣＡＣＡＡＡＣＴＴＣＴＡＡＧＣＴＣＡＣＣＣＧＴＧＣＴＧＡＧＡＣＴＧＴＴＴＴＴＣＣＴＧＡＴＧＴＧＧＡＣＴＡＴＧＴＡＡＡＴＴＣＴＡＣＴＧＡＡＧＣＴＧＡＡＡＣＣＡＴＴＴＴＧＧＡＴＡＡＣＡＴＣＡＣＴＣＡＡＡＧＣＡＣＣＣＡＡＴＣＡＴＴＴＡＡＴＧＡＣＴＴＣＡＣＴＣＧＡＧＴＴＧＴＴＧＧＴＧＧＡＧＡＡＧＡＴＧＣＣＡＡＡＣＣＡＧＧＴＣＡＡＴＴＣＣＣＴＴＧＧＣＡＧＧＴＴＧＴＴＴＴＧＡＡＴＧＧＴＡＡＡＧＴＴＧＡＴＧＣＡＴＴＣＴＧＴＧＧＡＧＧＣＴＣＴＡＴＣＧＴＴＡＡＴＧＡＡＡＡＡＴＧＧＡＴＴＧＴＡＡＣＴＧＣＴＧＣＣＣＡＣＴＧＴＧＴＴＧＡＡＡＣＴＧＧＴＧＴＴＡＡＡＡＴＴＡＣＡＧＴＴＧＴＣＧＣＡＧＧＴＧＡＡＣＡＴＡＡＴＡＴＴＧＡＧＧＡＧＡＣＡＧＡＡＣＡＴＡＣＡＧＡＧＣＡＡＡＡＧＣＧＡＡＡＴＧＴＧＡＴＴＣＧＡＡＴＴＡＴＴＣＣＴＣＡＣＣＡＣＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＣＡＧＣＴＡＴＴＡＡＴＡＡＧＴＡＣＡＡＣＣＡＴＧＡＣＡＴＴＧＣＣＣＴＴＣＴＧＧＡＡＣＴＧＧＡＣＧＡＡＣＣＣＴＴＡＧＴＧＣＴＡＡＡＣＡＧＣＴＡＣＧＴＴＡＣＡＣＣＴＡＴＴＴＧＣＡＴＴＧＣＴＡＣＡＡＧＧＡＡＴＡＣＡＣＧＡＡＣＡＴＣＴＴＣＣＴＣＡＡＡＴＴＴＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＡＴＧＴＡＡＧＴＧＧＣＴＧＧＧＧＡＡＧＡＧＴＣＴＴＣＣＡＣＡＡＡＧＧＧＡＧＡＴＣＡＧＣＴＴＴＡＧＴＴＣＴＴＣＡＧＴＡＣＣＴＴＡＧＡＧＴＴＣＣＡＣＴＴＧＴＴＧＡＣＣＧＡＧＣＣＡＣＡＴＧＴＣＴＴＣＧＡＴＣＴＡＣＡＡＡＧＴＴＣＡＣＣＡＴＣＴＡＴＡＡＣＡＡＣＡＴＧＴＴＣＴＧＴＧＣＴＧＧＣＴＴＣＣＡＴＧＡＡＧＧＡＧＧＴＡＧＡＧＡＴＴＣＡＴＧＴＣＡＡＧＧＡＧＡＴＡＧＴＧＧＧＧＧＡＣＣＣＣＡＴＧＴＴＡＣＴＧＡＡＧＴＧＧＡＡＧＧＧＡＣＣＡＧＴＴＴＣＴＴＡＡＣＴＧＧＡＡＴＴＡＴＴＡＧＣＴＧＧＧＧＴＧＡＡＧＡＧＴＧＴＧＣＡＡＴＧＡＡＡＧＧＣＡＡＡＴＡＴＧＧＡＡＴＡＴＡＴＡＣＣＡＡＧＧＴＡＴＣＣＣＧＧＴＡＴＧＴＣＡＡＣＴＧＧＡＴＴＡＡＧＧＡＡＡＡＡＡＣＡＡＡＧＣＴＣＡＣＴＡＧＣＴＣＣＡＧＣＡＧＣＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＣＣＣＧＡＧＣＣＴＧＣＣＣＴＣＣＣＣＡＡＧＣＡＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＧＣＣＣＴＣＣＧＡＣＡＣＡＣＣＡＡＴＣＣＴＧＣＣＡＣＡＧＡＧＣＡＧＣＴＣＣＴＣＴＡＡＧＧＣＣＣＣＴＣＣＴＣＣＡＴＣＣＣＴＧＣＣＡＴＣＣＣＣＣＴＣＣＣＧＧＣＴＧＣＣＴＧＧＣＣＣＣＴＣＴＧＡＣＡＣＣＣＣＴＡＴＣＣＴＧＣＣＴＣＡＧＴＧＡＴＧＡＡＧＧＴＣＴＧＧＡＴＣＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号５９）。

【0186】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ−ＣＴＰ（カルボキシ末端に結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＱＲＶＮＭＩＭＡＥＳＰＧＬＩＴＩＣＬＬＧＹＬＬＳＡＥＣＴＶＦＬＤＨＥＮＡＮＫＩＬＮＲＰＫＲＹＮＳＧＫＬＥＥＦＶＱＧＮＬＥＲＥＣＭＥＥＫＣＳＦＥＥＡＲＥＶＦＥＮＴＥＲＴＴＥＦＷＫＱＹＶＤＧＤＱＣＥＳＮＰＣＬＮＧＧＳＣＫＤＤＩＮＳＹＥＣＷＣＰＦＧＦＥＧＫＮＣＥＬＤＶＴＣＮＩＫＮＧＲＣＥＱＦＣＫＮＳＡＤＮＫＶＶＣＳＣＴＥＧＹＲＬＡＥＮＱＫＳＣＥＰＡＶＰＦＰＣＧＲＶＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲＡＥＴＶＦＰＤＶＤＹＶＮＳＴＥＡＥＴＩＬＤＮＩＴＱＳＴＱＳＦＮＤＦＴＲＶＶＧＧＥＤＡＫＰＧＱＦＰＷＱＶＶＬＮＧＫＶＤＡＦＣＧＧＳＩＶＮＥＫＷＩＶＴＡＡＨＣＶＥＴＧＶＫＩＴＶＶＡＧＥＨＮＩＥＥＴＥＨＴＥＱＫＲＮＶＩＲＩＩＰＨＨＮＹＮＡＡＩＮＫＹＮＨＤＩＡＬＬＥＬＤＥＰＬＶＬＮＳＹＶＴＰＩＣＩＡＤＫＥＹＴＮＩＦＬＫＦＧＳＧＹＶＳＧＷＧＲＶＦＨＫＧＲＳＡＬＶＬＱＹＬＲＶＰＬＶＤＲＡＴＣＬＲＳＴＫＦＴＩＹＮＮＭＦＣＡＧＦＨＥＧＧＲＤＳＣＱＧＤＳＧＧＰＨＶＴＥＶＥＧＴＳＦＬＴＧＩＩＳＷＧＥＥＣＡＭＫＧＫＹＧＩＹＴＫＶＳＲＹＶＮＷＩＫＥＫＴＫＬＴＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ^＊＊（配列番号６０）。

【0187】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ（×３）（カルボキシ末端に３個結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＱＲＶＮＭＩＭＡＥＳＰＧＬＩＴＩＣＬＬＧＹＬＬＳＡＥＣＴＶＦＬＤＨＥＮＡＮＫＩＬＮＲＰＫＲＹＮＳＧＫＬＥＥＦＶＱＧＮＬＥＲＥＣＭＥＥＫＣＳＦＥＥＡＲＥＶＦＥＮＴＥＲＴＴＥＦＷＫＱＹＶＤＧＤＱＣＥＳＮＰＣＬＮＧＧＳＣＫＤＤＩＮＳＹＥＣＷＣＰＦＧＦＥＧＫＮＣＥＬＤＶＴＣＮＩＫＮＧＲＣＥＱＦＣＫＮＳＡＤＮＫＶＶＣＳＣＴＥＧＹＲＬＡＥＮＱＫＳＣＥＰＡＶＰＦＰＣＧＲＶＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲＡＥＴＶＦＰＤＶＤＹＶＮＳＴＥＡＥＴＩＬＤＮＩＴＱＳＴＱＳＦＮＤＦＴＲＶＶＧＧＥＤＡＫＰＧＱＦＰＷＱＶＶＬＮＧＫＶＤＡＦＣＧＧＳＩＶＮＥＫＷＩＶＴＡＡＨＣＶＥＴＧＶＫＩＴＶＶＡＧＥＨＮＩＥＥＴＥＨＴＥＱＫＲＮＶＩＲＩＩＰＨＨＮＹＮＡＡＩＮＫＹＮＨＤＩＡＬＬＥＬＤＥＰＬＶＬＮＳＹＶＴＰＩＣＩＡＤＫＥＹＴＮＩＦＬＫＦＧＳＧＹＶＳＧＷＧＲＶＦＨＫＧＲＳＡＬＶＬＱＹＬＲＶＰＬＶＤＲＡＴＣＬＲＳＴＫＦＴＩＹＮＮＭＦＣＡＧＦＨＥＧＧＲＤＳＣＱＧＤＳＧＧＰＨＶＴＥＶＥＧＴＳＦＬＴＧＩＩＳＷＧＥＥＣＡＭＫＧＫＹＧＩＹＴＫＶＳＲＹＶＮＷＩＫＥＫＴＫＬＴＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号６１）。

【0188】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ（×４）（カルボキシ末端に４個結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＱＲＶＮＭＩＭＡＥＳＰＧＬＩＴＩＣＬＬＧＹＬＬＳＡＥＣＴＶＦＬＤＨＥＮＡＮＫＩＬＮＲＰＫＲＹＮＳＧＫＬＥＥＦＶＱＧＮＬＥＲＥＣＭＥＥＫＣＳＦＥＥＡＲＥＶＦＥＮＴＥＲＴＴＥＦＷＫＱＹＶＤＧＤＱＣＥＳＮＰＣＬＮＧＧＳＣＫＤＤＩＮＳＹＥＣＷＣＰＦＧＦＥＧＫＮＣＥＬＤＶＴＣＮＩＫＮＧＲＣＥＱＦＣＫＮＳＡＤＮＫＶＶＣＳＣＴＥＧＹＲＬＡＥＮＱＫＳＣＥＰＡＶＰＦＰＣＧＲＶＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲＡＥＴＶＦＰＤＶＤＹＶＮＳＴＥＡＥＴＩＬＤＮＩＴＱＳＴＱＳＦＮＤＦＴＲＶＶＧＧＥＤＡＫＰＧＱＦＰＷＱＶＶＬＮＧＫＶＤＡＦＣＧＧＳＩＶＮＥＫＷＩＶＴＡＡＨＣＶＥＴＧＶＫＩＴＶＶＡＧＥＨＮＩＥＥＴＥＨＴＥＱＫＲＮＶＩＲＩＩＰＨＨＮＹＮＡＡＩＮＫＹＮＨＤＩＡＬＬＥＬＤＥＰＬＶＬＮＳＹＶＴＰＩＣＩＡＤＫＥＹＴＮＩＦＬＫＦＧＳＧＹＶＳＧＷＧＲＶＦＨＫＧＲＳＡＬＶＬＱＹＬＲＶＰＬＶＤＲＡＴＣＬＲＳＴＫＦＴＩＹＮＮＭＦＣＡＧＦＨＥＧＧＲＤＳＣＱＧＤＳＧＧＰＨＶＴＥＶＥＧＴＳＦＬＴＧＩＩＳＷＧＥＥＣＡＭＫＧＫＹＧＩＹＴＫＶＳＲＹＶＮＷＩＫＥＫＴＫＬＴＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号６２）。

【0189】

別の実施形態では、第ＩＸ因子−ＣＴＰ（×５）（カルボキシ末端に５個結合）のアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＱＲＶＮＭＩＭＡＥＳＰＧＬＩＴＩＣＬＬＧＹＬＬＳＡＥＣＴＶＦＬＤＨＥＮＡＮＫＩＬＮＲＰＫＲＹＮＳＧＫＬＥＥＦＶＱＧＮＬＥＲＥＣＭＥＥＫＣＳＦＥＥＡＲＥＶＦＥＮＴＥＲＴＴＥＦＷＫＱＹＶＤＧＤＱＣＥＳＮＰＣＬＮＧＧＳＣＫＤＤＩＮＳＹＥＣＷＣＰＦＧＦＥＧＫＮＣＥＬＤＶＴＣＮＩＫＮＧＲＣＥＱＦＣＫＮＳＡＤＮＫＶＶＣＳＣＴＥＧＹＲＬＡＥＮＱＫＳＣＥＰＡＶＰＦＰＣＧＲＶＳＶＳＱＴＳＫＬＴＲＡＥＴＶＦＰＤＶＤＹＶＮＳＴＥＡＥＴＩＬＤＮＩＴＱＳＴＱＳＦＮＤＦＴＲＶＶＧＧＥＤＡＫＰＧＱＦＰＷＱＶＶＬＮＧＫＶＤＡＦＣＧＧＳＩＶＮＥＫＷＩＶＴＡＡＨＣＶＥＴＧＶＫＩＴＶＶＡＧＥＨＮＩＥＥＴＥＨＴＥＱＫＲＮＶＩＲＩＩＰＨＨＮＹＮＡＡＩＮＫＹＮＨＤＩＡＬＬＥＬＤＥＰＬＶＬＮＳＹＶＴＰＩＣＩＡＤＫＥＹＴＮＩＦＬＫＦＧＳＧＹＶＳＧＷＧＲＶＦＨＫＧＲＳＡＬＶＬＱＹＬＲＶＰＬＶＤＲＡＴＣＬＲＳＴＫＦＴＩＹＮＮＭＦＣＡＧＦＨＥＧＧＲＤＳＣＱＧＤＳＧＧＰＨＶＴＥＶＥＧＴＳＦＬＴＧＩＩＳＷＧＥＥＣＡＭＫＧＫＹＧＩＹＴＫＶＳＲＹＶＮＷＩＫＥＫＴＫＬＴＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱＳＳＳＳＫＡＰＰＰＳＬＰＳＰＳＲＬＰＧＰＳＤＴＰＩＬＰＱ（配列番号６３）。

【0190】

別の実施形態では、本発明の凝固因子−ＣＴＰを発現する細胞にフューリンが添加される。別の実施形態では、フューリンは、細胞内での本発明の凝固因子−ＣＴＰの産生効率を増加させる。別の実施形態では、フューリン本発明の凝固因子−ＣＴＰのコード配列を含むベクターと一緒に同時形質移入される。別の実施形態では、フューリンは別々のベクターにコードされる。別の実施形態では、フューリンおよび凝固因子−ＣＴＰは、１つのベクターにコードされる。別の実施形態では、フューリンのコード配列は、ｐＣＩ−ＤＨＦＲ内に挿入される。別の実施形態では、フューリンのコード配列は、ｐＣＩ−ｄｈｆｒ／ｓｍａＩ＋ＮｏｔＩに設計される（フューリン／ＡｓｉｓＩ Ｆ．Ｉ．＋ＮｏｔＩ）。

【0191】

別の実施形態では、フューリンをコードする核酸配列は、以下の核酸配列を含む：ｔｃｔａｇａｇｔｃｇａｃｃｃＣＧＣＣＡＴＧＧＡＧＣＴＧＡＧＧＣＣＣＴＧＧＴＴＧＣＴＡＴＧＧＧＴＧＧＴＡＧＣＡＧＣＡＡＣＡＧＧＡＡＣＣＴＴＧＧＴＣＣＴＧＣＴＡＧＣＡＧＣＴＧＡＴＧＣＴＣＡＧＧＧＣＣＡＧＡＡＧＧＴＣＴＴＣＡＣＣＡＡＣＡＣＧＴＧＧＧＣＴＧＴＧＣＧＣＡＴＣＣＣＴＧＧＡＧＧＣＣＣＡＧＣＧＧＴＧＧＣＣＡＡＣＡＧＴＧＴＧＧＣＡＣＧＧＡＡＧＣＡＴＧＧＧＴＴＣＣＴＣＡＡＣＣＴＧＧＧＣＣＡＧＡＴＣＴＴＣＧＧＧＧＡＣＴＡＴＴＡＣＣＡＣＴＴＣＴＧＧＣＡＴＣＧＡＧＧＡＧＴＧＡＣＧＡＡＧＣＧＧＴＣＣＣＴＧＴＣＧＣＣＴＣＡＣＣＧＣＣＣＧＣＧＧＣＡＣＡＧＣＣＧＧＣＴＧＣＡＧＡＧＧＧＡＧＣＣＴＣＡＡＧＴＡＣＡＧＴＧＧＣＴＧＧＡＡＣＡＧＣＡＧＧＴＧＧＣＡＡＡＧＣＧＡＣＧＧＡＣＴＡＡＡＣＧＧＧＡＣＧＴＧＴＡＣＣＡＧＧＡＧＣＣＣＡＣＡＧＡＣＣＣＣＡＡＧＴＴＴＣＣＴＣＡＧＣＡＧＴＧＧＴＡＣＣＴＧＴＣＴＧＧＴＧＴＣＡＣＴＣＡＧＣＧＧＧＡＣＣＴＧＡＡＴＧＴＧＡＡＧＧＣＧＧＣＣＴＧＧＧＣＧＣＡＧＧＧＣＴＡＣＡＣＡＧＧＧＣＡＣＧＧＣＡＴＴＧＴＧＧＴＣＴＣＣＡＴＴＣＴＧＧＡＣＧＡＴＧＧＣＡＴＣＧＡＧＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＣＧＧＡＣＴＴＧＧＣＡＧＧＣＡＡＴＴＡＴＧＡＴＣＣＴＧＧＧＧＣＣＡＧＴＴＴＴＧＡＴＧＴＣＡＡＴＧＡＣＣＡＧＧＡＣＣＣＴＧＡＣＣＣＣＣＡＧＣＣＴＣＧＧＴＡＣＡＣＡＣＡＧＡＴＧＡＡＴＧＡＣＡＡＣＡＧＧＣＡＣＧＧＣＡＣＡＣＧＧＴＧＴＧＣＧＧＧＧＧＡＡＧＴＧＧＣＴＧＣＧＧＴＧＧＣＣＡＡＣＡＡＣＧＧＴＧＴＣＴＧＴＧＧＴＧＴＡＧＧＴＧＴＧＧＣＣＴＡＣＡＡＣＧＣＣＣＧＣＡＴＴＧＧＡＧＧＧＧＴＧＣＧＣＡＴＧＣＴＧＧＡＴＧＧＣＧＡＧＧＴＧＡＣＡＧＡＴＧＣＡＧＴＧＧＡＧＧＣＡＣＧＣＴＣＧＣＴＧＧＧＣＣＴＧＡＡＣＣＣＣＡＡＣＣＡＣＡＴＣＣＡＣＡＴＣＴＡＣＡＧＴＧＣＣＡＧＣＴＧＧＧＧＣＣＣＣＧＡＧＧＡＴＧＡＣＧＧＣＡＡＧＡＣＡＧＴＧＧＡＴＧＧＧＣＣＡＧＣＣＣＧＣＣＴＣＧＣＣＧＡＧＧＡＧＧＣＣＴＴＣＴＴＣＣＧＴＧＧＧＧＴＴＡＧＣＣＡＧＧＧＣＣＧＡＧＧＧＧＧＧＣＴＧＧＧＣＴＣＣＡＴＣＴＴＴＧＴＣＴＧＧＧＣＣＴＣＧＧＧＧＡＡＣＧＧＧＧＧＣＣＧＧＧＡＡＣＡＴＧＡＣＡＧＣＴＧＣＡＡＣＴＧＣＧＡＣＧＧＣＴＡＣＡＣＣＡＡＣＡＧＴＡＴＣＴＡＣＡＣＧＣＴＧＴＣＣＡＴＣＡＧＣＡＧＣＧＣＣＡＣＧＣＡＧＴＴＴＧＧＣＡＡＣＧＴＧＣＣＧＴＧＧＴＡＣＡＧＣＧＡＧＧＣＣＴＧＣＴＣＧＴＣＣＡＣＡＣＴＧＧＣＣＡＣＧＡＣＣＴＡＣＡＧＣＡＧＴＧＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＴＧＡＧＡＡＧＣＡＧＡＴＣＧＴＧＡＣＧＡＣＴＧＡＣＴＴＧＣＧＧＣＡＧＡＡＧＴＧＣＡＣＧＧＡＧＴＣＴＣＡＣＡＣＧＧＧＣＡＣＣＴＣＡＧＣＣＴＣＴＧＣＣＣＣＣＴＴＡＧＣＡＧＣＣＧＧＣＡＴＣＡＴＴＧＣＴＣＴＣＡＣＣＣＴＧＧＡＧＧＣＣＡＡＴＡＡＧＡＡＣＣＴＣＡＣＡＴＧＧＣＧＧＧＡＣＡＴＧＣＡＡＣＡＣＣＴＧＧＴＧＧＴＡＣＡＧＡＣＣＴＣＧＡＡＧＣＣＡＧＣＣＣＡＣＣＴＣＡＡＴＧＣＣＡＡＣＧＡＣＴＧＧＧＣＣＡＣＣＡＡＴＧＧＴＧＴＧＧＧＣＣＧＧＡＡＡＧＴＧＡＧＣＣＡＣＴＣＡＴＡＴＧＧＣＴＡＣＧＧＧＣＴＴＴＴＧＧＡＣＧＣＡＧＧＣＧＣＣＡＴＧＧＴＧＧＣＣＣＴＧＧＣＣＣＡＧＡＡＴＴＧＧＡＣＣＡＣＡＧＴＧＧＣＣＣＣＣＣＡＧＣＧＧＡＡＧＴＧＣＡＴＣＡＴＣＧＡＣＡＴＣＣＴＣＡＣＣＧＡＧＣＣＣＡＡＡＧＡＣＡＴＣＧＧＧＡＡＡＣＧＧＣＴＣＧＡＧＧＴＧＣＧＧＡＡＧＡＣＣＧＴＧＡＣＣＧＣＧＴＧＣＣＴＧＧＧＣＧＡＧＣＣＣＡＡＣＣＡＣＡＴＣＡＣＴＣＧＧＣＴＧＧＡＧＣＡＣＧＣＴＣＡＧＧＣＧＣＧＧＣＴＣＡＣＣＣＴＧＴＣＣＴＡＴＡＡＴＣＧＣＣＧＴＧＧＣＧＡＣＣＴＧＧＣＣＡＴＣＣＡＣＣＴＧＧＴＣＡＧＣＣＣＣＡＴＧＧＧＣＡＣＣＣＧＣＴＣＣＡＣＣＣＴＧＣＴＧＧＣＡＧＣＣＡＧＧＣＣＡＣＡＴＧＡＣＴＡＣＴＣＣＧＣＡＧＡＴＧＧＧＴＴＴＡＡＴＧＡＣＴＧＧＧＣＣＴＴＣＡＴＧＡＣＡＡＣＴＣＡＴＴＣＣＴＧＧＧＡＴＧＡＧＧＡＴＣＣＣＴＣＴＧＧＣＧＡＧＴＧＧＧＴＣＣＴＡＧＡＧＡＴＴＧＡＡＡＡＣＡＣＣＡＧＣＧＡＡＧＣＣＡＡＣＡＡＣＴＡＴＧＧＧＡＣＧＣＴＧＡＣＣＡＡＧＴＴＣＡＣＣＣＴＣＧＴＡＣＴＣＴＡＴＧＧＣＡＣＣＧＣＣＣＣＴＧＡＧＧＧＧＣＴＧＣＣＣＧＴＡＣＣＴＣＣＡＧＡＡＡＧＣＡＧＴＧＧＣＴＧＣＡＡＧＡＣＣＣＴＣＡＣＧＴＣＣＡＧＴＣＡＧＧＣＣＴＧＴＧＴＧＧＴＧＴＧＣＧＡＧＧＡＡＧＧＣＴＴＣＴＣＣＣＴＧＣＡＣＣＡＧＡＡＧＡＧＣＴＧＴＧＴＣＣＡＧＣＡＣＴＧＣＣＣＴＣＣＡＧＧＣＴＴＣＧＣＣＣＣＣＣＡＡＧＴＣＣＴＣＧＡＴＡＣＧＣＡＣＴＡＴＡＧＣＡＣＣＧＡＧＡＡＴＧＡＣＧＴＧＧＡＧＡＣＣＡＴＣＣＧＧＧＣＣＡＧＣＧＴＣＴＧＣＧＣＣＣＣＣＴＧＣＣＡＣＧＣＣＴＣＡＴＧＴＧＣＣＡＣＡＴＧＣＣＡＧＧＧＧＣＣＧＧＣＣＣＴＧＡＣＡＧＡＣＴＧＣＣＴＣＡＧＣＴＧＣＣＣＣＡＧＣＣＡＣＧＣＣＴＣＣＴＴＧＧＡＣＣＣＴＧＴＧＧＡＧＣＡＧＡＣＴＴＧＣＴＣＣＣＧＧＣＡＡＡＧＣＣＡＧＡＧＣＡＧＣＣＧＡＧＡＧＴＣＣＣＣＧＣＣＡＣＡＧＣＡＧＣＡＧＣＣＡＣＣＴＣＧＧＣＴＧＣＣＣＣＣＧＧＡＧＧＴＧＧＡＧＧＣＧＧＧＧＣＡＡＣＧＧＣＴＧＣＧＧＧＣＡＧＧＧＣＴＧＣＴＧＣＣＣＴＣＡＣＡＣＣＴＧＣＣＴＧＡＧＧＴＧＧＴＧＧＣＣＧＧＣＣＴＣＡＧＣＴＧＣＧＣＣＴＴＣＡＴＣＧＴＧＣＴＧＧＴＣＴＴＣＧＴＣＡＣＴＧＴＣＴＴＣＣＴＧＧＴＣＣＴＧＣＡＧＣＴＧＣＧＣＴＣＴＧＧＣＴＴＴＡＧＴＴＴＴＣＧＧＧＧＧＧＴＧＡＡＧＧＴＧＴＡＣＡＣＣＡＴＧＧＡＣＣＧＴＧＧＣＣＴＣＡＴＣＴＣＣＴＡＣＡＡＧＧＧＧＣＴＧＣＣＣＣＣＴＧＡＡＧＣＣＴＧＧＣＡＧＧＡＧＧＡＧＴＧＣＣＣＧＴＣＴＧＡＣＴＣＡＧＡＡＧＡＧＧＡＣＧＡＧＧＧＣＣＧＧＧＧＣＧＡＧＡＧＧＡＣＣＧＣＣＴＴＴＡＴＣＡＡＡＧＡＣＣＡＧＡＧＣＧＣＣＣＴＣＴＧＡＡＣＧＣＧＧＣＣＧＣ（配列番号６４）。

【0192】

別の実施形態では、フューリンのアミノ酸配列は、以下のアミノ酸配列を含む：ＭＥＬＲＰＷＬＬＷＶＶＡＡＴＧＴＬＶＬＬＡＡＤＡＱＧＱＫＶＦＴＮＴＷＡＶＲＩＰＧＧＰＡＶＡＮＳＶＡＲＫＨＧＦＬＮＬＧＱＩＦＧＤＹＹＨＦＷＨＲＧＶＴＫＲＳＬＳＰＨＲＰＲＨＳＲＬＱＲＥＰＱＶＱＷＬＥＱＱＶＡＫＲＲＴＫＲＤＶＹＱＥＰＴＤＰＫＦＰＱＱＷＹＬＳＧＶＴＱＲＤＬＮＶＫＡＡＷＡＱＧＹＴＧＨＧＩＶＶＳＩＬＤＤＧＩＥＫＮＨＰＤＬＡＧＮＹＤＰＧＡＳＦＤＶＮＤＱＤＰＤＰＱＰＲＹＴＱＭＮＤＮＲＨＧＴＲＣＡＧＥＶＡＡＶＡＮＮＧＶＣＧＶＧＶＡＹＮＡＲＩＧＧＶＲＭＬＤＧＥＶＴＤＡＶＥＡＲＳＬＧＬＮＰＮＨＩＨＩＹＳＡＳＷＧＰＥＤＤＧＫＴＶＤＧＰＡＲＬＡＥＥＡＦＦＲＧＶＳＱＧＲＧＧＬＧＳＩＦＶＷＡＳＧＮＧＧＲＥＨＤＳＣＮＣＤＧＹＴＮＳＩＹＴＬＳＩＳＳＡＴＱＦＧＮＶＰＷＹＳＥＡＣＳＳＴＬＡＴＴＹＳＳＧＮＱＮＥＫＱＩＶＴＴＤＬＲＱＫＣＴＥＳＨＴＧＴＳＡＳＡＰＬＡＡＧＩＩＡＬＴＬＥＡＮＫＮＬＴＷＲＤＭＱＨＬＶＶＱＴＳＫＰＡＨＬＮＡＮＤＷＡＴＮＧＶＧＲＫＶＳＨＳＹＧＹＧＬＬＤＡＧＡＭＶＡＬＡＱＮＷＴＴＶＡＰＱＲＫＣＩＩＤＩＬＴＥＰＫＤＩＧＫＲＬＥＶＲＫＴＶＴＡＣＬＧＥＰＮＨＩＴＲＬＥＨＡＱＡＲＬＴＬＳＹＮＲＲＧＤＬＡＩＨＬＶＳＰＭＧＴＲＳＴＬＬＡＡＲＰＨＤＹＳＡＤＧＦＮＤＷＡＦＭＴＴＨＳＷＤＥＤＰＳＧＥＷＶＬＥＩＥＮＴＳＥＡＮＮＹＧＴＬＴＫＦＴＬＶＬＹＧＴＡＰＥＧＬＰＶＰＰＥＳＳＧＣＫＴＬＴＳＳＱＡＣＶＶＣＥＥＧＦＳＬＨＱＫＳＣＶＱＨＣＰＰＧＦＡＰＱＶＬＤＴＨＹＳＴＥＮＤＶＥＴＩＲＡＳＶＣＡＰＣＨＡＳＣＡＴＣＱＧＰＡＬＴＤＣＬＳＣＰＳＨＡＳＬＤＰＶＥＱＴＣＳＲＱＳＱＳＳＲＥＳＰＰＱＱＱＰＰＲＬＰＰＥＶＥＡＧＱＲＬＲＡＧＬＬＰＳＨＬＰＥＶＶＡＧＬＳＣＡＦＩＶＬＶＦＶＴＶＦＬＶＬＱＬＲＳＧＦＳＦＲＧＶＫＶＹＴＭＤＲＧＬＩＳＹＫＧＬＰＰＥＡＷＱＥＥＣＰＳＤＳＥＥＤＥＧＲＧＥＲＴＡＦＩＫＤＱＳＡＬ^＊（配列番号６５）。

【0193】

いくつかの実施形態において、凝固因子という用語にはさらに、凝固活性を有する公知の凝固因子の相同体も含まれる。いくつかの実施形態において、本発明による相同性には、その欠失、挿入、または置換変異体（例えば、アミノ酸置換）およびその生物学的に活性なポリペプチド断片も包含される。

【0194】

別の実施形態では、本発明には、凝固活性を有する凝固因子の相同体も含まれる。別の実施形態では、本発明には、凝固活性を有する本明細書に記載の凝固因子の相同体も含まれる。別の実施形態では、相同体、例えば、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定される、凝固因子と少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８７％、少なくとも８９％、少なくとも９１％、少なくとも９３％、少なくとも９５％またはそれ以上、例えば９９％相同であるポリペプチド。

【0195】

別の実施形態では、本発明にはフューリンの相同体が含まれる。別の実施形態では、相同体、例えば、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）のＢｌａｓｔＰソフトウェア（初期パラメータ−を使用）を用いて決定される、フューリンと少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８７％、少なくとも８９％、少なくとも９１％、少なくとも９３％、少なくとも９５％またはそれ以上、例えば９９％相同であるポリペプチド。

【0196】

一実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の相同体とは、その欠失、挿入、または置換変異体（例えばアミノ酸置換）およびその生物学的に活性なポリペプチド断片も指す。

【0197】

別の実施形態では、３個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドが、本明細書で提供されるペプチドまたはポリペプチドのＣ末端に結合される。別の実施形態では、４個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片のＣ末端に結合される。別の実施形態では、５個の絨毛性ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチドが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片のＣ末端に結合される。別の実施形態では、１〜１０個のＣＴＰが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片のアミノ末端またはＣ末端に結合される。別の実施形態では、１〜１０個のＣＴＰが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片のＮ末端に結合される。別の実施形態では、１〜１０個のＣＴＰが、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片のＣ末端に結合される。

【0198】

本明細書に記載の要素またはステップを含む本発明の組成物および方法が、別の実施形態ではそれらの要素またはステップから成り得、あるいは、別の実施形態ではそれらの要素またはステップから本質的に成り得ることを理解されたい。別の実施形態では、用語「を含む」とは、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片等の指示された活性薬剤の包含、並びに、医薬産業において公知の、他の活性薬剤、および薬剤的または生理学的に許容される担体、賦形剤、皮膚軟化剤、安定剤等の包含を指す。別の実施形態では、用語「から本質的に成る」とは、その唯一の活性成分が指示された活性成分である組成物を指すが、製剤を安定化、保存等するための他の化合物も含まれる場合があり、ただし、これらは指示された活性成分の治療効果には直接的に関与しない。別の実施形態では、用語「から本質的に成る」とは、活性成分の放出を促進する成分を指し得る。別の実施形態では、用語「から成る」とは、活性成分および薬剤的に許容できる担体または賦形剤を含有する組成物を指す。

【0199】

一実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端またはＣ末端に結合した少なくとも１つのゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。

【0200】

別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した１〜３個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した１〜５個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した１〜１０個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した２〜３個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した２〜５個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した２〜１０個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した３〜５個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した３〜８個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した３〜１０個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した６〜１０個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した１個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端および／またはＣ末端に結合した２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）に結合したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、ＣＴＰペプチドは、ポリペプチドまたはその断片のいずれかの側（Ｎ末端またはＣ末端）に直列に結合される。

【0201】

一実施形態では、本明細書で提供されるポリヌクレオチドを含む発現ベクターが本明細書で提供される。別の実施形態では、発現ベクターを含む細胞が本明細書で提供される。別の実施形態では、発現ベクターを含む組成物が本明細書で提供される。

【0202】

別の実施形態では、本発明は、本明細書に記載の細胞を含む組成物を提供する。別の実施形態では、細胞は真核細胞である。別の実施形態では、細胞は原核細胞である。

【0203】

一実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、ポリペプチドまたはその断片の分解に対する増強された保護を与える。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、クリアランスに対する増強された保護を与える。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、延長されたクリアランス時間を与える。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、その最高血中濃度（Ｃｍａｘ）を増強する。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、その最高血中濃度到達時間（Ｔｍａｘ）を増強する。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、その半減期（Ｔ^１／_２）を延長させる。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片のＣ末端におけるＣＴＰ配列は、その曲線下面積（ＡＵＣ）を拡張する。

【0204】

別の実施形態では、本発明の複合型ポリペプチドまたはその断片は、無修飾ポリペプチドまたはその断片と同じ方法で用いられる。別の実施形態では、本発明のポリペプチドまたはその断片は、無修飾ポリペプチドまたはその断片と同じ方法で用いられる。別の実施形態では、本発明のポリペプチドまたはその断片は、インビボにおいて、延長された循環血液中半減期および血漿中滞留時間、減少したクリアランス、並びに増加した臨床活性を有する。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の向上された特性のために、この複合体は、ポリペプチドまたはその断片よりも低頻度に投与される。

【0205】

別の実施形態では、投与頻度の減少は治療法の改善をもたらし、これは、一実施形態では、患者の服薬遵守の改善に繋がり、そして治療成績の向上、および患者の生活の質の向上に繋がる。別の実施形態では、従来の複合体と比較して、本明細書でさらに提供される流体力学的体積を有する本明細書で提供される複合体は、向上したインビボ作用強度、向上した安定性、上昇したＡＵＣレベル、および延長された循環血液中半減期を有する。

【0206】

別の実施形態では、本発明はさらに、ポリペプチドまたはその断片の、Ｎ末端に結合された１つのグリコシル化ゴナドトロピンカルボキシ末端ペプチド（ＣＴＰ）およびＣ末端に結合された２つのグリコシル化ＣＴＰを含むＣＴＰ−修飾ポリペプチドを含む医薬組成物を提供する。

【0207】

別の実施形態では、グリコシル化ＣＴＰおよび非グリコシル化ＣＴＰの組み合わせが、本明細書でさらに提供される目的ポリペプチドまたはその断片を修飾する際に用いられ得ることを理解されたい。そのような組み合わせには、例えば、ポリペプチドまたはその断片のＮ末端に結合された少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰ、およびポリペプチドまたはその断片のＣ末端に結合された少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰ、並びにその逆の場合が含まれ得る。さらに、別の実施形態では、同じ末端（Ｎ末端またはＣ末端）に結合された少なくとも１つのグリコシル化ＣＴＰおよび少なくとも１つの非グリコシル化ＣＴＰの組み合わせも企図される。これらの組み合わせは、グリコシル化ＣＴＰおよび／または非グリコシル化ＣＴＰの切断も含み得る。そのような組み合わせは、目的ポリペプチドまたはその断片に最適な流体力学的体積または流体力学的サイズに到達するために、本明細書で提供される本発明により手引きされた当業者によって決定され得る。結果として、最適な流体力学的体積を有する目的ポリペプチドまたはその断片は、最適に所望された特徴、すなわち、向上した作用強度、向上した安定性、上昇したＡＵＣレベル、増強された生物学的利用能および延長された循環血液中半減期を有し得る。

【0208】

一実施形態では、治療有効量の、本明細書で提供される目的のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物が、本明細書で提供される。別の実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の治療有効量は、治療されている特定の状態、治療されている患者の状態、および組成物中のその他の成分等の要素に応じて決定される。別の実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の治療効果は、最適な流体力学的体積に到達するための、グリコシル化ＣＴＰペプチドおよび／または非グリコシル化ＣＴＰペプチドの付加または除去によって、最適に調整される。そうすることで、当業者は最適な治療効果を有するＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片に到達することができることを理解されたい。

【0209】

一実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片は、治療的用途を有する。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片は、予防的用途を有する。

【0210】

一実施形態では、本明細書で提供される方法に関連して用いられる場合の「減少させる、減少、低下させる等」の用語は、予め測定または決定されたレベルからの、または正常レベルからの１００％の減少を指す。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから８９〜９９％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから７９〜８８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから６９〜７８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから５９〜６８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから４９〜５８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから３９〜４８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから２９〜３８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから１９〜２８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから９〜１８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから５〜８％である。別の実施形態では、減少は予め決定されたレベルから１〜４％である。

【0211】

一実施形態では、本発明と共に用いるのに適した組織特異的プロモーターは、一つまたは複数の特異的細胞集団において機能的な配列を含む。例としては、限定はされないが、肝臓特異的であるアルブミン等のプロモーター［Ｐｉｎｋｅｒｔ ｅｔ ａｌ．， （１９８７） Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ． １：２６８−２７７］、リンパ系特異的プロモーター［Ｃａｌａｍｅ ｅｔ ａｌ．， （１９８８） Ａｄｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ４３：２３５−２７５］；具体的には、Ｔ細胞受容体［Ｗｉｎｏｔｏ ｅｔ ａｌ．， （１９８９） ＥＭＢＯ Ｊ． ８：７２９−７３３］および免疫グロブリン；［Ｂａｎｅｒｊｉ ｅｔ ａｌ． （１９８３） Ｃｅｌｌ ３３７２９−７４０］のプロモーター、神経フィラメントプロモーター［Ｂｙｒｎｅ ｅｔ ａｌ． （１９８９） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８６：５４７３−５４７７］等のニューロン特異的プロモーター、膵臓特異的プロモーター［Ｅｄｌｕｎｃｈ ｅｔ ａｌ． （１９８５） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３０：９１２−９１６］または乳清プロモーター（米国特許第４，８７３，３１６号明細書（特許文献５）および欧州特許出願公開第２６４，１６６号公報（特許文献６））等の乳腺特異的プロモーターが挙げられる。本発明と共に用いるのに適した誘導性プロモーターとしては、例えば、テトラサイクリン誘導性プロモーター（Ｓｒｏｕｒ， Ｍ．Ａ．， ｅｔ ａｌ．， ２００３． Ｔｈｒｏｍｂ． Ｈａｅｍｏｓｔ． ９０： ３９８−４０５）が挙げられる。

【0212】

一実施形態では、「ポリヌクレオチド分子」という成句は、単離され、ＲＮＡ配列、相補的ポリヌクレオチド配列（ｃＤＮＡ）、ゲノムポリヌクレオチド配列および／または複合性ポリヌクレオチド配列（例えば、上記の組み合わせ）の形態で与えられる、一本鎖または二本鎖の核酸配列を指す。

【0213】

一実施形態では、「相補的ポリヌクレオチド配列」とは、逆転写酵素またはあらゆる他のＲＮＡ依存性ＤＮＡポリメラーゼを用いるメッセンジャーＲＮＡの逆転写から得られる配列を指す。一実施形態では、配列は後に、インビボまたはインビトロにおいて、ＤＮＡポリメラーゼを用いて増幅され得る。

【0214】

一実施形態では、「ゲノムポリヌクレオチド配列」とは、染色体に由来する（染色体から単離された）配列を指し、従って、染色体の連続した部分を表す。

【0215】

一実施形態では、「複合性ポリヌクレオチド配列」とは、少なくとも部分的に相補的であり、且つ少なくとも部分的にゲノム性である配列を指す。一実施形態では、複合性配列は、本発明のポリペプチドをコードするのに必要ないくつかのエクソン配列、およびそれらの間に挟まれるいくつかのイントロン配列を含み得る。一実施形態では、イントロン配列は、他の遺伝子のイントロン配列を含む、あらゆる供給源のイントロン配列であり得、典型的には、保存的スプライシングシグナル配列を含む。一実施形態では、イントロン配列は、シス作動性発現調節エレメントを含む。

【0216】

一実施形態では、本発明のポリヌクレオチドは、ＰＣＲ法、または当業者に公知のあらゆる他の方法または手順を用いて調製される。別の実施形態では、手順には、２つの異なるＤＮＡ配列のライゲーションが含まれる（例えば、“Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ”， ｅｄｓ． Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， １９９２を参照）。

【0217】

一実施形態では、本明細書で提供される目的の改変ポリペプチドまたはその断片をコードする本発明のポリヌクレオチドは、組換えペプチド／ポリペプチドの発現を可能にするために発現ベクター（すなわち、核酸コンストラクト）内に挿入される。一実施形態では、本発明の発現ベクターは、このベクターを原核生物における複製および組込みに適したものにする追加の配列を含む。一実施形態では、本発明の発現ベクターは、このベクターを真核生物における複製および組込みに適したものにする追加の配列を含む。別の実施形態では、本発明の発現ベクターは、このベクターを原核生物および真核生物の両方における複製および組込みに適したものにするシャトルベクターを含む。別の実施形態では、クローニングベクターは、転写開始配列および翻訳開始配列（例えば、プロモーター、エンハンサー）並びに転写終止配列および翻訳終止配列（例えば、ポリアデニル化シグナル）を含む。

【0218】

一実施形態では、種々の原核細胞または真核細胞が、本明細書で提供されるＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片を発現するための宿主発現系として用いられ得る。別の実施形態では、これらとしては、限定はされないが、微生物、例えば、前記ポリペプチドコード配列を含有する組換えバクテリオファージＤＮＡ、プラスミドＤＮＡまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換された細菌；前記ポリペプチドコード配列を含有する組換え酵母発現ベクターで形質転換された酵母；前記ポリペプチドコード配列を含有する、組換えウイルス発現ベクター（例えば、カリフラワーモザイクウイルス、ＣａＭＶ；タバコモザイクウイルス、ＴＭＶ）に感染された、またはＴｉプラスミド等の組換えプラスミド発現ベクターで形質転換された、植物細胞系が挙げられる。

【0219】

一実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を発現するために非細菌発現系が用いられる（例えば、ＣＨＯ細胞等の哺乳類発現系）。別の実施形態では、哺乳類細胞において本発明のポリヌクレオチドを発現するために用いられる発現ベクターは、ｐＣＩ−ｄｈｆｒｒベクターである。ｐＣＩ−ｄｈｆｒｒベクターの構築は、一実施形態に従って、下記実施例の材料と方法に記載されている。

【0220】

一実施形態では、本発明の細菌系において、いくつかの発現ベクターは、発現されるポリペプチドに意図される用途に応じて有利に選択され得る。一実施形態では、大量のポリペプチドが望ましい。一実施形態では、恐らくは、発現された産物を、タンパク質産物が容易に精製される細菌のペリプラズムまたは培地に向かわせる疎水性シグナル配列との融合物としての、高レベルのタンパク質産物の発現を指示するベクターが望ましい。一実施形態では、ポリペプチドの回収を助けるために、ある特定の融合タンパク質が特定の切断部位を用いて操作される。一実施形態では、そのような操作に適応可能なベクターとしては、限定はされないが、大腸菌発現ベクターのｐＥＴ系列が挙げられる［Ｓｔｕｄｉｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌ． １８５：６０−８９（１９９０）］。

【0221】

一実施形態では、酵母発現系が用いられる。一実施形態では、米国特許第５，９３２，４４７号明細書（特許文献７）（その特許の全体は参照することによって本願に組み込まれる）に記載されているように、構成的プロモーターまたは誘導性プロモーターを含有するいくつかのベクターが酵母において用いられ得る。別の実施形態では、外来ＤＮＡ配列の酵母染色体内への組込みを促進するベクターが用いられる。

【0222】

一実施形態では、本発明の発現ベクターは、例えば、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）等の単一のｍＲＮＡからのいくつかのタンパク質の翻訳を可能にする追加のポリヌクレオチド配列、およびプロモーター−キメラポリペプチドのゲノム組込みのための配列をさらに含み得る。

【0223】

一実施形態では、哺乳類発現ベクターとしては、限定はされないが、インビトロジェン社から入手できる、ｐｃＤＮＡ３、ｐｃＤＮＡ３．１（＋／−）、ｐＧＬ３、ｐＺｅｏＳＶ２（＋／−）、ｐＳｅｃＴａｇ２、ｐＤｉｓｐｌａｙ、ｐＥＦ／ｍｙｃ／ｃｙｔｏ、ｐＣＭＶ／ｍｙｃ／ｃｙｔｏ、ｐＣＲ３．１、ｐＳｉｎＲｅｐ５、ＤＨ２６Ｓ、ＤＨＢＢ、ｐＮＭＴ１、ｐＮＭＴ４１、ｐＮＭＴ８１、プロメガ社から入手できるｐＣＩ、ストラタジーン社（Ｓｔｒａｔｅｇｅｎｅ）から入手できるｐＭｂａｃ、ｐＰｂａｃ、ｐＢＫ−ＲＳＶおよびｐＢＫ−ＣＭＶ、クロンテック社から入手できるｐＴＲＥＳ、並びにこれらの誘導体が挙げられる。

【0224】

一実施形態では、レトロウイルス等の真核生物ウイルス由来の調節エレメントを含有する発現ベクターが、本発明で用いられる。ＳＶ４０ベクターとしては、ｐＳＶＴ７およびｐＭＴ２が挙げられる。別の実施形態では、ウシパピローマウイルス由来のベクターとしてはｐＢＶ−１ＭＴＨＡが挙げられ、エプスタイン・バーウイルス（Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒ ｖｉｒｕｓ）由来のベクターとしてはｐＨＥＢＯ、およびｐ２Ｏ５が挙げられる。他の例示的なベクターとしては、ｐＭＳＧ、ｐＡＶ００９／Ａ＋、ｐＭＴＯ１０／Ａ＋、ｐＭＡＭｎｅｏ−５、バキュロウイルスｐＤＳＶＥ、およびＳＶ−４０初期プロモーター、ＳＶ−４０後期プロモーター、メタロチオネインプロモーター、マウス乳癌ウイルスプロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、ポリヘドリンプロモーター、または真核細胞内の発現に有効であることが示される他のプロモーターの指示の下での、タンパク質の発現を可能にするあらゆる他のベクターが挙げられる。

【0225】

一実施形態では、組換えウイルスベクターは、水平感染および標的特異性等の利点を与えるため、本発明のペプチド／ポリペプチドのインビボ発現に有用である。一実施形態では、水平感染は、例えば、レトロウイルスの生活環に固有のものであり、単一の感染細胞が、母体から分離し隣接細胞に感染する多くの子孫ウイルス粒子を産生する過程である。一実施形態では、その結果として、その大部分が元のウイルス粒子に最初は感染されていなかった広い領域が、急速に感染状態となる。一実施形態では、側方に伝播することができないウイルスベクターが産生される。一実施形態では、この特徴は、所望の目的が、特定の遺伝子を限定された数の標的細胞のみに導入することである場合に有利であり得る。

【0226】

一実施形態では、本発明の発現ベクターを細胞に導入するために、種々の方法が用いられ得る。そのような方法は、概して、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇｓ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ （１９８９， １９９２）， ｉｎ Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ， Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ， Ｍｄ． （１９８９）， Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｓｏｍａｔｉｃ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ， Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ， Ｍｉｃｈ． （１９９５）， Ｖｅｇａ ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｅ Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ， Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ Ｍｉｃｈ． （１９９５）， Ｖｅｃｔｏｒｓ： Ａ Ｓｕｒｖｅｙ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｖｅｃｔｏｒｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｕｓｅｓ， Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ， Ｂｏｓｔｏｎ Ｍａｓｓ． （１９８８）およびＧｉｌｂｏａ ｅｔ ａｔ． ［Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４ （６）： ５０４−５１２， １９８６］に記載されており、例えば、安定または一過性導入、リポフェクション、エレクトロポレーションおよび組換えウイルスベクターによる感染が挙げられる。さらに、ポジティブ・ネガティブ選択法（ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｎｅｇａｔｉｖｅ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ）については、米国特許第５，４６４，７６４号明細書（特許文献８）および同第５，４８７，９９２号明細書（特許文献９）（参照によって本明細書に組み込まれる）を参照されたい。

【0227】

一実施形態では、ウイルス感染による核酸の導入は、ウイルスの感染性によりより高いトランスフェクション効率を得ることができることから、リポフェクションおよびエレクトロポレーション等の他の方法に優るいくつかの利点を与える。

【0228】

本明細書で提供される改変ポリペプチドまたはその断片が、あらゆる適切な投与様式（例えば、皮下投与、経口投与、鼻腔内投与、静脈内（ｉｎｔｒａ−ｖｅｎａｌ）投与、またはインビボ遺伝子治療）を用いて、個体に投与された核酸コンストラクトからも発現され得ることは理解されよう。一実施形態では、核酸コンストラクトは、適切な遺伝子送達ビヒクル／方法（トランスフェクション、形質導入、相同組換え等）および必要に応じた発現系によって適切な細胞に導入され、その後、改変細胞は培養液中で増殖され、個体に戻される（すなわち、エキソビボ遺伝子治療）。

【0229】

一実施形態では、植物発現ベクターが用いられる。一実施形態では、ポリペプチドコード配列の発現はいくつかのプロモーターによって駆動される。別の実施形態では、ＣａＭＶの３５Ｓ ＲＮＡおよび１９Ｓ ＲＮＡプロモーター等のウイルスプロモーター［Ｂｒｉｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ ３１０：５１１−５１４ （１９８４）］、またはＴＭＶに対するコートタンパク質プロモーター［Ｔａｋａｍａｔｓｕ ｅｔ ａｌ．， ＥＭＢＯ Ｊ． ６：３０７−３１１ （１９８７）］が用いられる。別の実施形態では、例えば、ＲＵＢＩＳＣＯの小サブユニット［Ｃｏｒｕｚｚｉ ｅｔ ａｌ．， ＥＭＢＯ Ｊ． ３：１６７１−１６８０ （１９８４）；およびＢｒｏｇｌｉ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２４：８３８−８４３ （１９８４）］または熱ショックプロモーター、例えば、ダイズｈｓｐ１７．５−Ｅまたはｈｓｐ１７．３−Ｂ［Ｇｕｒｌｅｙ ｅｔ ａｌ．、 Ｍｏｌ． Ｃｅｌｌ． Ｂｉｏｌ． ６：５５９−５６５ （１９８６）］等の植物プロモーターが用いられる。一実施形態では、コンストラクトは、Ｔｉプラスミド、Ｒｉプラスミド、植物ウイルスベクター、直接ＤＮＡ形質転換、マイクロインジェクション、エレクトロポレーションおよび当業者に周知の他の手法を用いて植物細胞に導入される。例えば、Ｗｅｉｓｓｂａｃｈ ＆ Ｗｅｉｓｓｂａｃｈ ［Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， ＮＹ， Ｓｅｃｔｉｏｎ ＶＩＩＩ， ｐｐ ４２１−４６３ （１９８８）］を参照されたい。当該技術分野において周知の昆虫および哺乳類宿主細胞系等の他の発現系も、本発明により用いられ得る。

【0230】

挿入されたコード配列（ポリペプチドをコード）の転写および翻訳に必要なエレメントを含有する以外に、本発明の発現コンストラクトが、発現ポリペプチドの安定性、産生、精製、収率または活性を最適化するよう操作された配列も含み得ることは理解されよう。

【0231】

一実施形態では、形質転換細胞は、大量の組換え改変オキシントモジュリンペプチドの発現を可能にする効率的な条件下で培養される。別の実施形態では、効率的な培養条件としては、限定はされないが、タンパク質産生を可能にする効率的な培地、バイオリアクター、温度、ｐＨおよび酸素条件が挙げられる。一実施形態では、効率的な培地とは、本発明の組換えポリペプチドを産生するために細胞が培養されるいかなる培地をも指す。別の実施形態では、培地としては、典型的には、同化可能な炭素、窒素およびリン酸供給源、並びに適切な塩、ミネラル、金属並びにビタミン等の他の栄養分を含有する水溶液が挙げられる。本発明の細胞は、従来の発酵バイオリアクター、振盪フラスコ、試験管、マイクロタイターディッシュおよびペトリ皿内で培養され得る。別の実施形態では、培養は、組換え細胞に適した温度、ｐＨおよび酸素含量において行われる。別の実施形態では、培養条件の決定は当業者の専門知識の範囲内である。

【0232】

一実施形態では、産生に用いられるベクターおよび宿主系に応じて、本明細書で提供される、得られるポリペプチドまたはその断片、または、別の実施形態では、得られるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、ＣＴＰのグリコシル化を起こすために組換え細胞内で発現されるか、発酵培地中に分泌されるか、または哺乳類細胞の外表面上に保持される。

【0233】

一実施形態では、培養液中での所定の時間の後、組換えポリペプチドまたはその断片の回収が行われる。

【0234】

一実施形態では、句「組換え改変ポリペプチドまたはその断片の回収」とは、前記ポリペプチドまたはその断片を含有する全発酵培地の収集を指し、追加の分離または精製ステップを意味する必要はない。別の実施形態では、当該技術分野において周知の追加の分離または精製ステップが、組換え改変ポリペプチドまたはその断片を回収するために実行される。

【0235】

一実施形態では、本明細書で提供される改変ポリペプチドまたはその断片もしくはその変異体は、限定はされないが、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、濾過、電気泳動、疎水性相互作用クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、コンカナバリンＡクロマトグラフィー、等電点電気泳動および示差的可溶化（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）等の種々の標準的なタンパク質精製法を用いて精製される。

【0236】

回収を容易にするために、発現コード配列は、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および融合された切断可能な部分をコードするよう操作され得る。さらに、融合タンパク質は、本ポリペプチドが、アフィニティークロマトグラフィーによって、例えば、切断可能な部分に特異的なカラム上への固定化によって容易に単離可能であるように、設計され得る。切断部位は、改変ポリペプチドまたはその断片間で操作され、切断可能な部分およびポリペプチドは、融合タンパク質をこの部位で特異的に切断する適切な酵素または作用剤を用いた処理により、クロマトグラフィカラムから放出され得る。［例えば、Ｂｏｏｔｈ ｅｔ ａｌ．， Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｌｅｔｔ． １９：６５−７０ （１９８８）；およびＧａｒｄｅｌｌａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６５：１５８５４−１５８５９ （１９９０）を参照］。

【0237】

一実施形態では、本明細書で提供される操作されたペプチドまたはポリペプチドは、「実質的に純粋な」形態で回収される。

【0238】

一実施形態では、句「実質的に純粋な」とは、本明細書に記載の適用において、本タンパク質の効率的な使用を可能にする純粋さを指す。

【0239】

また、本明細書で提供される改変ポリペプチドまたはその断片は、インビトロ発現系を用いて合成され得る。別の実施形態では、インビトロ合成法は当該技術分野において周知であり、その系の構成要素は市販されている。

【0240】

一実施形態では、組換え改変ポリペプチドまたはその断片は、合成および精製され；インビボまたはインビトロにおいて、それらの治療効果は評価され得る。本発明の組換え改変ポリペプチドまたはその断片の結合活性は、当業者に公知の種々のアッセイを用いて確認され得る。

【0241】

別の実施形態では、本発明のポリペプチドまたはその断片は、個体に単独で提供され得る。一実施形態では、本明細書で提供される改変ポリペプチドまたはその断片は、薬剤的に許容できる担体と混合された医薬組成物の一部として、個体に提供され得る。

【0242】

別の実施形態では、「医薬組成物」とは、生理適合性の担体および賦形剤等の他の化学成分を含有する、本明細書に記載の活性成分のうちの一つまたは複数の調製物を指す。医薬組成物の目的は、生物への化合物の投与を容易にすることである。

【0243】

別の実施形態では、「活性成分」とは、生物学的効果の要因である目的のポリペプチド配列を指す。

【0244】

別の実施形態では、本明細書において同義的に用いられる句「生理学的に許容される担体」および「薬剤的に許容できる担体」とは、重大な刺激作用を生物に引き起こさず、投与された化合物の生物活性および特性を抑制しない、担体または希釈剤を指す。アジュバントはこれらの句に含まれる。一実施形態では、薬剤的に許容できる担体に含まれる成分の１つは、例えば、有機媒体および水性媒体の両方において広範囲の溶解性を有する生体適合性高分子である、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）であり得る（Ｍｕｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ． （１９７９））。

【0245】

別の実施形態では、用語「賦形剤」とは、活性成分の投与をさらに容易にするために医薬組成物に加えられる、不活性な物質を指す。一実施形態では、賦形剤としては、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、種々の糖類および種々の種類のデンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油並びにポリエチレングリコールが挙げられる。

【0246】

薬剤の製剤法および投与法は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、マック出版社（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．）、ペンシルバニア州イーストン、最新版（参照により本明細書に組み込まれる）に見出される。

【0247】

用量域の種々の実施形態は、本発明により意図されるものである。本明細書で提供されるＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、一実施形態では、０．００５〜１００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．００５〜５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．０１〜５０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．１〜２０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．１〜１０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．０１〜５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．００１〜０．０１ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．００１〜０．１ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．１〜５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．５〜５０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．２〜１５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は０．８〜６５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１〜５０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は５〜１０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は８〜１５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１０〜２０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は２０〜４０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は６０〜１２０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１２〜４０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は４０〜６０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は５０〜１００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１〜６０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１５〜２５ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は５〜１０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は５５〜６５ｍｇ／日の範囲内である。

【0248】

別の実施形態では、投与量は５０〜５００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は５０〜１５０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１００〜２００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は１５０〜２５０ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は２００〜３００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は２５０〜４００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は３００〜５００ｍｇ／日の範囲内である。別の実施形態では、投与量は３５０〜５００ｍｇ／日の範囲内である。

【0249】

一実施形態では、投与量は２０ｍｇ／日である。一実施形態では、投与量は３０ｍｇ／日である。一実施形態では、投与量は４０ｍｇ／日である。一実施形態では、投与量は５０ｍｇ／日である。一実施形態では、投与量は０．０１ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は０．１ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は１ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は０．５３０ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は０．０５ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は５０ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は１０ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は２０〜７０ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は５ｍｇ／日である。

【0250】

一実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は１〜５ｍｇ／日である。一実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は１〜３ｍｇ／日である。別の実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は２ｍｇ／日である。

【0251】

別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／２日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／３日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／４日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／５日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／６日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／週である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／９日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／１１日である。別の実施形態では、投与量は１〜９０ｍｇ／１４日である。

【0252】

別の実施形態では、ＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は１０〜５０ｍｇ／日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／２日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／３日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／４日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０マイクログラム／５日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／６日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／週である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／９日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／１１日である。別の実施形態では、投与量は１０〜５０ｍｇ／１４日である。

【0253】

別の実施形態では、用量は、ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇとして与えられ得る。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ−修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、一実施形態では、０．００５〜１００ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．００５〜５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．０１〜５０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．１〜２０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．０１〜５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．００１〜０．０１ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．００１〜０．１ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．１〜５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．５〜５０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．２〜１５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、０．８〜６５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、１〜５０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、５〜１０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、８〜１５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、１０〜２０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、２０〜４０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、６０〜１２０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、１２〜４０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、４０〜６０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、５０〜１００ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、１〜６０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、１５〜２５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、５〜１０ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。別の実施形態では、投与量は、５５〜６５ｍｇ／ｋｇまたは単位／ｋｇの範囲内である。

【0254】

別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、鼻腔内用剤形に製剤化される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、注射用剤形に製剤化される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．０００１ｍｇ〜０．６ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．００１ｍｇ〜０．００５ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．００５ｍｇ〜０．０１ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．０１ｍｇ〜０．３ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．２ｍｇ〜０．６ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片は、そのアミノ末端上にＣＴＰを有さない。

【0255】

別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．２ｍｇ〜２ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、２ｍｇ〜６ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、４ｍｇ〜１０ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、５ｍｇから、および１５ｍｇの範囲で対象に投与される。

【0256】

別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、０．２ｍｇ〜２ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、２ｍｇ〜６ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、４ｍｇ〜１０ｍｇの範囲の用量で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、５ｍｇから、および１５ｍｇの範囲で対象に投与される。

【0257】

別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、６５％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、５５％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、４５％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、１０％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、２５％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、３５％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を用いて投与される作動薬量と比較して、７５％の作動薬量を含有するような投与量である。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の投与量は、非ＣＴＰ修飾作動薬を用いて投与される作動薬量と比較して、１００％の作動薬量を含有するような投与量である。しかし、投与量が非ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片と同じ作動薬量を含有する場合であっても、通常の作動薬と比較して、その延長された半減期のためにより低頻度に投与されるという点で、対象にとってなお有利である。

【0258】

別の実施形態では、本明細書で提供される複合型ポリペプチドまたはその断片の治療有効量は、１日１回投与される５０〜５００ＩＵ／ｋｇ体重である。別の実施形態では、複合型ポリペプチドまたはその断片の治療有効量は、１日１回投与される１５０〜２５０ＩＵ／ｋｇ体重である。別の実施形態では、複合型ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、ヒト患者への種々の手段による投与に有効な強度で製剤化される。

【0259】

一実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を含むＣＴＰ修飾ポリペプチドは、対象において循環中のポリペプチドまたはその断片の活性を２０〜３０ＩＵ／ｄＬに至らせるのに有効な量で投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を含むＣＴＰ修飾ポリペプチドは、対象において循環中のポリペプチドまたはその断片の活性を２５〜５０ＩＵ／ｄＬに至らせるのに有効な量で投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を含むＣＴＰ修飾ポリペプチドは、対象において循環中のポリペプチドまたはその断片の活性を５０〜１００ＩＵ／ｄＬに至らせるのに有効な量で投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を含むＣＴＰ修飾ポリペプチドは、対象において循環中のポリペプチドまたはその断片の活性を１００〜２００ＩＵ／ｄＬに至らせるのに有効な量で投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を含むＣＴＰ修飾ポリペプチドは、対象において循環中のポリペプチドまたはその断片の活性を１０〜５０ＩＵ／ｄＬに至らせるのに有効な量で投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片を含むＣＴＰ修飾ポリペプチドは、対象において循環中のポリペプチドまたはその断片の活性を２０〜１００ＩＵ／ｄＬに至らせるのに有効な量で投与される。

【0260】

一実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、週１回の頻度で対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、週２回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、２週間毎（２週間に１回）対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、月２回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、月１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、１日１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片は、２日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、３日に１回対象に投与される。

【0261】

別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、４日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、５日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、６日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、７〜１４日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、１０〜２０日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、５〜１５日に１回対象に投与される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、１５〜３０日に１回対象に投与される。

【0262】

別の実施形態では、本発明の方法は、本明細書の治療で提供されるポリペプチドまたはその断片を必要としている慢性疾患に罹患した患者の服薬率を増加させることを含む。別の実施形態では、本明細書で提供される要素によりＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズを増加させることによって。別の実施形態では、本発明の方法は、ポリペプチドまたはその断片の投与頻度の減少を可能にする。

【0263】

別の実施形態では、服薬率という用語は指示順守度を含む。別の実施形態では、本発明の方法は、本明細書で提供される要素または増加により、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズを増加させて、ポリペプチドまたはその断片の投与頻度の減少をもたらすことによって、治療を必要としている患者の服薬率を増加させることを含む。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の投与頻度における減少は、ＣＴＰ修飾、およびポリペプチドまたはその断片をより安定なものにする本明細書で提供される要素または増加によるその後の流体力学的サイズの増加により、達成される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の投与頻度における減少は、ＣＴＰ修飾、およびポリペプチドまたはその断片の半減期（Ｔ^１／_２）を延長させる本明細書で提供される要素または増加によるその後の流体力学的サイズの増加により、達成される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の投与頻度における減少は、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片のクリアランス時間の延長またはクリアランス速度の減少をもたらす本明細書で提供される要素または増加により、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズを増加させることによって達成される。

【0264】

別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片の投与頻度における減少は、ポリペプチドまたはその断片のＡＵＣ測定値の増加をもたらす本明細書で提供される要素または増加により、ポリペプチドまたはその断片の流体力学的サイズを増加させることによって達成される。

【0265】

経口投与は、一実施形態では、錠剤、カプセル剤、菓子錠剤、咀嚼錠、懸濁剤、乳剤等を含む単位剤形を含む。そのような単位剤形は、安全且つ有効な量の、本明細書で提供される所望のポリペプチドまたはその断片を含み、そのそれぞれは、一実施形態では、約０．７もしくは３．５ｍｇ〜約２８０ｍｇ／７０ｋｇ、または別の実施形態では、約０．５もしくは１０ｍｇ〜約２１０ｍｇ／７０ｋｇである。経口投与用の単位剤形の調製に適した薬剤的に許容できる担体は、当該技術分野において周知である。別の実施形態では、錠剤は、典型的には、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、マンニトール、ラクトースおよびセルロース等の不活性希釈剤；デンプン、ゼラチンおよびスクロース等の結合剤；デンプン、アルギン酸およびクロスカルメロース（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｏｓｅ）等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸および滑石等の滑沢剤のような、従来の薬剤適合性（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ−ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ）アジュバントを含む。一実施形態では、粉末混合物の流動性を向上させるために、二酸化ケイ素等の流動促進剤が用いられ得る。一実施形態では、外観のために、ＦＤ＆Ｃ色素等の着色料が添加され得る。アスパルテーム、サッカリン、メントール、ペパーミント、および果実加香剤等の甘味剤および香味剤は、咀嚼錠にとって有用なアジュバントである。カプセル剤は、典型的には、上記で開示された一つまたは複数の固体希釈剤を含む。別の実施形態では、担体成分の選択は、味、費用、および貯蔵性のような二次的な検討事項に依存するが、これは、本発明の目的にはあまり重要ではなく、当業者によって容易になされ得る。

【0266】

一実施形態では、経口剤形は、所定の放出プロファイルを含む。一実施形態では、本発明の経口剤形は、持続放出性の錠剤、カプセル剤、菓子錠剤または咀嚼錠を含む。一実施形態では、本発明の経口剤形は、徐放性の錠剤、カプセル剤、菓子錠剤または咀嚼錠を含む。一実施形態では、本発明の経口剤形は、即放性の錠剤、カプセル剤、菓子錠剤または咀嚼錠を含む。一実施形態では、経口剤形は、当業者に公知の医薬品活性成分の所望の放出プロファイルに従って、製剤化される。

【0267】

経口組成物は、別の実施形態では、溶液、乳剤、懸濁剤等を含む。別の実施形態では、そのような組成物の調製に適した薬剤的に許容できる担体は、当該技術分野において周知である。別の実施形態では、液状経口組成物は、約０．００１％〜約０．９３３％の１つもしくは複数の所望の化合物を含み、または、別の実施形態では、約０．０１％〜約１０％の１つもしくは複数の所望の化合物を含む。

【0268】

一実施形態では、本発明の方法で用いられる組成物は、溶液または乳剤を含み、これらは、別の実施形態では、安全且つ有効な量の本発明の化合物および所望により、局所的鼻腔内投与を目的とした他の化合物を含む、水性の溶液または乳剤である。別の実施形態では、組成物は、約０．００１％〜約１０．０％（ｗ／ｖ）の主題の化合物、より好ましくは、約００．１％〜約２．０の主題の化合物を含み、これは、鼻腔内経路による前記化合物の全身送達に用いられる。

【0269】

別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、筋肉内に注射される（筋肉内注射）。別の実施形態では、ポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、皮膚下に注射される（皮下注射）。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、筋肉内に注射される。別の実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片および少なくとも１つのＣＴＰ単位を含むポリペプチドは、皮膚に注射される。別の実施形態では、本明細書に記載の本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片は、全身投与により投与される。別の実施形態では、本明細書に記載の本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片は、静脈内注射により投与される。別の実施形態では、投与は、非経口投与、経肺投与、経口投与、局所的投与、皮内投与、筋肉内投与、腹腔内投与、静脈内投与、皮下投与、鼻腔内投与、経鼻投与、眼内投与、点眼、硬膜外投与、頬側投与、直腸内投与、経粘膜投与、腸管内投与、または髄内注射およびくも膜下腔内投与もしくは直接脳室内投与を含む非経口送達であり得る。

【0270】

別の実施形態では、調製物は、例えば、患者の身体の特定領域への直接的な調製物の注射により、全身的にではなく、局所的に投与される。

【0271】

一実施形態では、投与経路は経腸経路であり得る。別の実施形態では、経路は、結膜、経皮、皮内、動脈内、膣内、直腸内、腫瘍内、傍癌（ｐａｒｃａｎｃｅｒａｌ）、経粘膜、筋肉内、血管内、心室内、頭蓋内、鼻腔内、舌下、またはこれらの組み合わせであり得る。

【0272】

別の実施形態では、医薬組成物は、液状製剤の静脈内、動脈内、または筋肉内注射により投与される。別の実施形態では、液状製剤には、溶液、懸濁剤、分散液、乳剤、油剤等が含まれる。一実施形態では、医薬組成物は静脈内に投与され、それ故、静脈内投与に適した形態に製剤化される。別の実施形態では、医薬組成物は動脈内に投与され、それ故、動脈内投与に適した形態に製剤化される。別の実施形態では、医薬組成物は筋肉内に投与され、それ故、筋内投与に適した形態に製剤化される。

【0273】

さらに、別の実施形態では、医薬組成物は、体表に局所投与され、それ故、局所投与に適した形態に製剤化される。適切な局所製剤には、ゲル剤、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、滴剤等が含まれる。局所投与において、本発明の化合物は、追加の適切な１つまたは複数の治療薬と組み合わされ、調製され、医薬担体を含有するまたは含有しない生理学的に許容される希釈剤中で溶液、懸濁剤、または乳剤として適用される。

【0274】

一実施形態では、本発明の医薬組成物は、当該技術分野において周知のプロセスにより、例えば、従来の混合、溶解、顆粒化、糖剤製造、研和、乳化、カプセル化、包括または凍結乾燥プロセスにより、製造される。

【0275】

一実施形態では、本明細書に従って使用される医薬組成物は、調剤上用いられ得る、活性成分の調製物への加工を促進する賦形剤および助剤を含む一つまたは複数の生理学的に許容される担体を用いて、従来の方式で製剤化される。一実施形態では、製剤は、選択された投与経路に依存する。

【0276】

一実施形態では、本発明の注射剤は、水溶液中で製剤化される。一実施形態では、本発明の注射剤は、ハンクス液、リンゲル液、または生理食塩緩衝液等の生理適合性緩衝液中で製剤化される。別の実施形態では、経粘膜投与において、浸透されるべき障壁に適した浸透剤が、製剤に用いられる。そのような浸透剤は、当該技術分野において周知である。

【0277】

一実施形態では、本明細書に記載の調製物は、例えば、ボーラス投与または持続点滴による非経口投与用に製剤化される。別の実施形態では、注射用製剤は、所望により追加の保存剤を含有する、例えばアンプル内または複数回投与容器内の単位剤形において、提供される。別の実施形態では、組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁剤、溶液または乳剤であり、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤等の製剤化剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ ａｇｅｎｔ）を含有する。

【0278】

別の実施形態では、本組成物は、塩化ベンザルコニウムおよびチメロサール等の保存剤；エデト酸ナトリウム等のキレート化剤；リン酸塩、クエン酸塩および酢酸塩等の緩衝液；塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、マンニトール等の等張化剤；アスコルビン酸、アセチルシスチン、メタ重亜硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ ｍｅｔａｂｉｓｕｌｆｏｔｅ）等の抗酸化剤；芳香族剤；セルロースおよびその誘導体を含む重合体等の粘度調整剤；並びにポリビニルアルコール、並びにこれらの水性組成物のｐＨを必要に応じて調整するための酸および塩基も含む。別の実施形態では、本組成物は、局所麻酔薬または他の活性物質も含む。本組成物は、スプレー剤（ｓｐｒａｙｓ）、噴霧剤（ｍｉｓｔｓ）、滴剤等として用いられ得る。

【0279】

一実施形態では、非経口投与用の医薬組成物としては、水溶性形態の活性調製物の水溶液が挙げられる。さらに、活性成分の懸濁剤は、適切な油性または水性の注射用懸濁剤として調製され得る。別の実施形態では、適切な親油性溶媒またはビヒクルとしては、ゴマ油等の脂肪油、またはオレイン酸エチル、トリグリセリドもしくはリポソーム等の合成脂肪酸エステルが挙げられる。別の実施形態では、水性の注射用懸濁剤は、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストラン等の、懸濁剤の粘度を増加させる物質を含有する。別の実施形態では、懸濁剤は、活性成分の溶解性を増加させることで高濃度溶液の調製を可能にする適切な安定剤または作用剤も含有する。

【0280】

別の実施形態では、活性化合物は、ベシクル内、具体的にはリポソーム内で送達され得る（Ｌａｎｇｅｒ， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３ （１９９０）； Ｔｒｅａｔ ｅｔ ａｌ．， ｉｎ Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ， Ｌｏｐｅｚ− Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｆｉｄｌｅｒ （ｅｄｓ．）， Ｌｉｓｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ｐｐ． ３５３−３６５ （１９８９）； Ｌｏｐｅｚ−Ｂｅｒｅｓｔｅｉｎ， ｉｂｉｄ．， ｐｐ． ３１７−３２７； Ｊ． Ｅ． Ｄｉｅｄｅｒｉｃｈｓ ａｎｄ ａｌ．， Ｐｈａｒｍ．／ｎｄ． ５６ （１９９４） ２６７− ２７５を参照）。

【0281】

別の実施形態では、放出制御製剤中で送達される医薬組成物は、点滴静注、埋め込み型浸透圧ポンプ、経皮貼布、リポソーム、または他の投与様式用に製剤化される。一実施形態では、ポンプが用いられる（Ｌａｎｇｅｒ， ｓｕｐｒａ； Ｓｅｆｔｏｎ， ＣＲＣ Ｃｒｉｔ． Ｒｅｆ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｅｎｇ． １４：２０１ （１９８７）； Ｂｕｃｈｗａｌｄ ｅｔ ａｌ．， Ｓｕｒｇｅｒｙ ８８：５０７ （１９８０）； Ｓａｕｄｅｋ ｅｔ ａｌ．， Ｎ． Ｅｎｇｌ． Ｊ． Ｍｅｄ． ３２１：５７４ （１９８９）を参照）。別の実施形態では、高分子物質が用いられ得る。さらに別の実施形態では、放出制御製剤は、治療標的（すなわち、脳）の近傍に設置され得るため、わずかのみの全身用量を必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ， ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ， ｓｕｐｒａ， ｖｏｌ． ２， ｐｐ． １１５−１３８ （１９８４）を参照）。他の放出制御製剤は、Ｌａｎｇｅｒによるレビュー（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３ （１９９０））の中で考察されている。

【0282】

別の実施形態では、活性成分は、使用前に適切なビヒクル（例えば、無菌の発熱性物質除去水溶液）を用いて構成するための、粉末形態である。別の実施形態では、組成物は噴霧（ａｔｏｍｉｚａｔｉｏｎ）および吸入投与用に製剤化される。別の実施形態では、組成物は、噴霧手段が結合した容器内に含有される。

【0283】

一実施形態では、本発明の調製物は、例えば、カカオ脂または他のグリセリド等の従来の坐剤基剤を用いて、坐剤または停留浣腸剤等の経直腸組成物に製剤化される。

【0284】

一実施形態では、本発明に照らした使用に適した医薬組成物には、使用目的を達成するのに有効な量で活性成分が含有される組成物が含まれる。別の実施形態では、治療有効量は、疾患の症状を予防、軽減もしくは改善する、または治療中の対象の生存を延長させるのに有効な、活性成分の量を意味する。

【0285】

一実施形態では、治療有効量の決定は、十分に、当業者の能力の範囲内である。

【0286】

薬剤的に許容できる担体またはその成分として機能し得る物質のいくつかの例は、ラクトース、グルコースおよびスクロース等の糖類；コーンスターチおよびジャガイモデンプン等のデンプン；カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、およびメチルセルロース等のセルロースおよびその誘導体；トラガント末；麦芽；ゼラチン；滑石；ステアリン酸およびステアリン酸マグネシウム等の固体滑沢剤；硫酸カルシウム；落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油およびカカオ脂等の植物油；プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコール等のポリオール；アルギン酸；商標名Ｔｗｅｅｎ（登録商標）乳化剤等の乳化剤；ラウリル硫酸ナトリウム等の湿潤剤；着色料；香味剤；錠剤化剤、安定剤；抗酸化剤；保存剤；発熱性物質除去水；等張食塩水；およびリン酸緩衝液である。本化合物と組み合わせて用いられるべき薬剤的に許容できる担体の選択は、基本的には、本化合物が投与される方法によって決定される。主題の化合物が注射される場合、一実施形態では、薬剤的に許容できる担体は、ｐＨが約７．４に調整されている、血液適合性の懸濁化剤を含有する無菌生理食塩水である。

【0287】

さらに、本組成物は、結合剤（例えば、アカシア、コーンスターチ、ゼラチン、カルボマー、エチルセルロース、グアーガム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポビドン）、崩壊剤（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸、二酸化ケイ素、クロスカルメロース（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｏｓｅ）ナトリウム、クロスポビドン、グアーガム、デンプングリコール酸ナトリウム）、種々のｐＨおよびイオン強度の緩衝液（例えば、Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ．、酢酸塩、リン酸塩）、表面への吸収を防ぐアルブミンまたはゼラチン等の添加剤、界面活性剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ２０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８、胆汁酸塩）、プロテアーゼ阻害剤、界面活性剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）、透過促進剤、可溶化剤（例えば、グリセロール、ポリエチレングリセロール）、抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、ブチルヒドロキシアニソール）、安定剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ｈｙｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌｍｅｔｈｙｌ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ））、粘度増加剤（例えば、カルボマー、コロイド状二酸化ケイ素、エチルセルロース、グアーガム）、甘味料（例えば、アスパルテーム、クエン酸）、保存剤（例えば、チメロサール、ベンジルアルコール、パラベン）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）、流動助剤（ｆｌｏｗ−ａｉｄ）（例えば、コロイド状二酸化ケイ素）、可塑剤（例えば、フタル酸ジエチル、クエン酸トリエチル）、乳化剤（例えば、カルボマー、ヒドロキシプロピルセルロース、ラウリル硫酸ナトリウム）、高分子コーティング剤（例えば、ポロキサマーまたはポロキサミン）、コーティングおよび膜形成剤（例えば、エチルセルロース、アクリル酸、ポリメタクリル酸）および／またはアジュバントをさらに含む。

【0288】

シロップ剤、エリキシル剤、乳剤および懸濁剤用の担体の典型的な成分としては、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、液状スクロース、ソルビトールおよび水が挙げられる。懸濁剤において、典型的な懸濁化剤としては、メチルセルロース、カルボキシルメチルセルロースナトリウム、セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ（商標）、ＲＣ−５９１）、トラガントおよびアルギン酸ナトリウムが挙げられ；典型的な湿潤剤としては、レシチンおよびポリエチレンオキシドソルビタン（例えば、ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０）が挙げられる。典型的な保存剤としては、メチルパラベンおよび安息香酸ナトリウムが挙げられる。別の実施形態では、経口用液状組成物は、上記に開示された甘味料、香味剤および着色剤等の一つまたは複数の成分も含有する。

【0289】

本組成物は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ヒドロゲル等の高分子化合物から成る特定の調製物中への、もしくはその表面上への、またはリポソーム、マイクロエマルション、ミセル、単層もしくは多層リポソーム、赤血球ゴースト、もしくはスフェロプラスト上への、活性物質の取り込みも含む。そのような組成物は、物理的状態、溶解性、安定性、インビボにおける放出速度、およびインビボにおけるクリアランス速度に影響を与える。

【0290】

高分子（例えば、ポロキサマーまたはポロキサミン）で被膜された粒状組成物、および組織特異的受容体、リガンドもしくは抗原に対する抗体に結合された、または組織特異的受容体のリガンドに結合された本化合物も本発明に包含される。

【0291】

一実施形態では、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドンまたはポリプロリン等の水溶性高分子の共有結合によって修飾された化合物。別の実施形態では、修飾された化合物は、静脈内注射後に血液中で、対応する未修飾化合物が示すよりも実質的により長い半減期を示す。一実施形態では、修飾はまた、本化合物の水溶液中での溶解性を増加させ、凝集を除去し、本化合物の物理的および化学的安定性を増強し、本化合物の免疫原性および反応性を大きく減少させる。別の実施形態では、所望のインビボ生物活性は、未修飾化合物を用いるよりも、より低頻度の、またはより低用量での、そのような高分子−化合物アブダクト（ａｂｄｕｃｔ）の投与によって達成される。

【0292】

有効量または有効用量の調製物は、インビトロアッセイから最初に推定することができる。一実施形態では、用量は動物モデルにおいて公式化することができ、そのような情報を用いることで、ヒトにおける有用な用量をより正確に決定することができる。

【0293】

一実施形態では、本明細書に記載の活性成分の毒性および治療効果は、細胞培養液または実験動物における標準的なインビトロでの薬学的手法によって、決定することができる。一実施形態では、これらのインビトロおよび細胞培養アッセイおよび動物試験から得られたデータは、ヒトにおける使用のための投与量の範囲を公式化する際に用いることができる。一実施形態では、投与量は、採用される剤形および利用される投与経路に応じて変動する。一実施形態では、正確な製剤、投与経路および投与量は、患者の状態を鑑みて個々の医師により選択され得る。［例えば、Ｆｉｎｇｌ， ｅｔ ａｌ．， （１９７５）“Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ”，Ｃｈ．１ ｐ．１を参照］。

【0294】

一実施形態では、治療される状態の重症度および応答性に応じて、投薬は単回または複数回投与の投薬となり得、治療過程は数日間〜数週間、または治癒するまで、または病状の低減が達成されるまで継続される。

【0295】

一実施形態では、投与される組成物の量は、当然ながら、治療を受けている対象、病気の重症度、投与様式、処方医師の判断等に依存する。

【0296】

一実施形態では、適合性の医薬担体中で製剤化された本発明の調製を含む組成物も、調製され、適切な容器内に入れられ、表示された状態の治療のために標識される。

【0297】

別の実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドまたはその断片またはその変異体（ＣＴＰ修飾）形態は、非イオン性界面活性剤（すなわち、界面活性剤）、種々の糖類、有機ポリオールおよび／またはヒト血清アルブミン等の複合有機賦形剤および安定剤と組み合わされた、凍結乾燥された（すなわち、フリーズドライ化された）調製物である。別の実施形態では、医薬組成物は、注射用無菌蒸留水中で調製された、本明細書で提供される凍結乾燥したポリペプチドまたはその断片を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、本明細書で提供される凍結乾燥したポリペプチドまたはその断片を含み、注射用無菌ＰＢＳ中で調製される。別の実施形態では、医薬組成物は、注射用無菌０．９％ＮａＣｌ中で調製された、本明細書で提供される凍結乾燥したポリペプチドまたはその断片を含む。

【0298】

別の実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片、並びにヒト血清アルブミン、ポリオール、糖類、および陰イオン界面活性安定化剤等の複合担体を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、ＣＴＰ−ポリペプチドまたはその断片、並びにラクトビオン酸および酢酸／グリシン緩衝液を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片、並びにインターフェロン組成物の水中の溶解性を増加させるアルギニンまたはグルタミン酸等のアミノ酸を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載の凍結乾燥したＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片、並びにグリシンまたはヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）、緩衝液（例えば、酢酸）および等張剤（例えば、ＮａＣｌ）を含む。別の実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載の凍結乾燥したＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片、並びにリン酸緩衝液、グリシンおよびＨＡＳを含む。

【0299】

別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、約４〜７．２のｐＨを有する緩衝液中に置かれた場合に安定化される。別の実施形態では、ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、約４〜８．５のｐＨを有する緩衝液中に存在する。別の実施形態では、ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、約６〜７のｐＨを有する緩衝液中に存在する。別の実施形態では、ＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、約６．５のｐＨを有する緩衝液中に存在する。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、安定化剤としてのアミノ酸、および場合によっては塩（アミノ酸が荷電側鎖を含有しない場合）を用いて安定化される。

【0300】

別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、アミノ酸である安定化剤を約０．３重量％〜５重量％で含む液体組成物である。

【0301】

別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、投与精度および製品安全性を提供する。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、注射適用において用いるための、生物学的に活性な安定な溶液を提供する。別の実施形態では、医薬組成物は、凍結乾燥されていない本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む。

【0302】

別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、投与前の保存および輸送を容易にする、液体状態での長期間の保存を可能にする溶液を提供する。

【0303】

別の実施形態では、本明細書で提供されるＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、マトリックス材料として固体脂質を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む注射用医薬組成物は、マトリックス材料として固体脂質を含む。別の実施形態では、スプレー凝結による脂質微小粒子の生成は、Ｓｐｅｉｓｅｒ （Ｓｐｅｉｓｅｒ ａｎｄ ａｌ．， Ｐｈａｒｍ． Ｒｅｓ． ８ （１９９１） ４７−５４）に記載されており、その後に、経口投与用脂質ナノペレット（Ｓｐｅｉｓｅｒ ＥＰ ０１６７８２５（１９９０））が続く。別の実施形態では、用いられる脂質は、身体により良好な耐容性を示される（例えば、非経口栄養法のための乳剤中に存在する、脂肪酸から構成されるグリセリド）。

【0304】

別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、高分子微粒子を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、ナノ粒子を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、リポソームを含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、脂質エマルジョンを含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、ミクロスフェアを含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、脂質ナノ粒子を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、両親媒性脂質を含む脂質ナノ粒子を含む。別の実施形態では、本明細書に記載のＣＴＰ修飾ポリペプチドまたはその断片を含む医薬組成物は、薬剤、脂質マトリックスおよび界面活性剤を含む脂質ナノ粒子を含む。別の実施形態では、脂質マトリックスは、少なくとも５０％（ｗ／ｗ）のモノグリセリド含量を有する。

【0305】

一実施形態では、本発明の組成物は、活性成分を含有する一つまたは複数の単位剤形を含有する、ＦＤＡ承認キット等のパックまたはディスペンサーデバイス内に提供される。一実施形態では、パックは、例えば、ブリスター包装等の、金属箔またはプラスチック箔を含む。一実施形態では、パックまたはディスペンサーデバイスは、投与のための説明書を伴う。一実施形態では、パックまたはまたはディスペンサーは、医薬品の製造、使用または販売を規制する政府機関により規定される形態で、容器に付随する注意書きを伴い、この注意書きは、組成物の形態またはヒトもしくは動物投与の前記機関による承認を反映するものである。そのような注意書きは、一実施形態では、処方薬のための、または承認された製品挿入物の、米国食品医薬品局によって承認されたラベリングである。

【0306】

一実施形態では、本明細書で提供されるポリペプチドまたはその断片が、各薬剤単独での治療と比較して治療効果の向上を達成するために、追加の活性薬剤と共に個体に提供され得ることは理解される。別の実施形態では、併用療法に伴う有害副作用を回避するための処置（例えば、補完的薬剤の投与および選択）がとられる。

【0307】

一実施形態では、用語「約」は、量的な用語において、±５％、または別の実施形態では、±１０％、または別の実施形態では、±１５％、または別の実施形態では、±２０％を意味する。

【0308】

用語「対象」とは、一実施形態では、ある状態またはその続発症の治療を必要としている、またはそれに罹患しやすい、ヒトを含む哺乳動物を指す。対象には、イヌ、ネコ、ブタ、雌ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ラット、およびマウス並びにヒトが含まれ得る。用語「対象」は、あらゆる点で正常である個体を除外しない。

【0309】

本発明のさらなる目的、利点、および新規の特徴は、限定を意図するものではない以下の実施例を検討することにより、当該技術分野の当業者に明らかになるだろう。さらに、上記で説明され、以下の特許請求の範囲で特許請求される種々の実施形態および本発明の態様のそれぞれは、以下の実施例において実験的裏付けを得る。

【実施例】

【0310】

材料および方法
様々なＣＴＰ修飾タンパク質の作製

【0311】

ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＡＰＯ−Ａ１、第ＩＸ因子および第ＶＩＩ因子のＤＮＡコード領域をＣＴＰペプチドのＤＮＡ配列にライゲーションした。ＣＴＰペプチドを、表２に詳細に示されるように、単一コピーでまたは直列に、Ｎ末端および／またはＣ末端に融合した。改変プラスミドを、タンパク質の流体力学的体積を増加させる際に決定的な役割を果たすＯ−グリカンの適切な構造化が可能なＣＨＯ細胞株に形質移入し、発現させた（表５参照）。様々なタンパク質を、以下に詳細に示される、各タンパク質のために独自に開発された特別あつらえの方法に従って精製した。

【0312】

ＣＴＰ−ＥＰＯ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物をＢｌｕｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムに添加した。溶出した生成物を希釈し、Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムに添加した。Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムからの溶出画分を、Ａｍｉｃｏｎ遠心装置（３０ｋＤａカットオフ）を用いる限外濾過で処理し、透析した。濃縮および透析した画分をＰｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムに添加した。Ｐｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅからの溶出画分を、Ａｍｉｃｏｎ遠心装置（３０ｋＤａカットオフ）を用いる限外濾過で処理し、ＰＢＳ（ｐＨ７）に対して透析した。

【0313】

ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＥＰＯおよびＣＴＰ−ＣＴＰ−ＥＰＯ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムに添加し、溶出させた。溶出画分を硫酸アンモニウムで条件付けし、Ｐｈｅｎｙｌ ＳｅｐｈａｒｏｓｅＨＳカラムに添加した。溶出フェニルを濃縮し透析した。次の２つのカラムはフロースルー様式である：Ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ ｔｙｐｅ Ｉ ４０μおよびＳＰ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ。最終産物を濃縮し、透析し、−２０℃で保存した。

【0314】

ＡＰＯ−ＣＴＰおよびＡＰＯ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：ＡＰＯタンパク質のこれら２つの変種を、アフィニティーカラム（Ｃａｐｔｕｒｅ Ｓｅｌｅｃｔ Ａｐｏ、Ｂａｃ）を用いて精製した。清澄した収集物をＰＢＳで１：１希釈し、前記カラムから溶出させた。溶出物を濃縮し、ＰＢＳに対して透析し、−８０℃で保存した。

【0315】

ＣＴＰ−ｈＧＨ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物をＵＦＤＦ１を用いて濾過した。ウイルス不活性化を達成した。第一のクロマトグラフィーは、陰イオン交換クロマトグラフィー、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦである。第二のクロマトグラフィーの樹脂はＰｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅである。第二のクロマトグラフィーの溶出物プールを、ＵＦＤＦ−２で透析濾過および濃縮した。ＵＦＤＦ−２ステップの後に、２つのさらなるクロマトグラフィー、フロースルー様式のＣｅｒａｍｉｃ Ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ Ｔｙｐｅ Ｉ ４０μＭおよびＳＰ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦを実行した。ナノ濾過を実行した。生成物溶液を４１±１ｍｇ／ｍＬに濃縮し、透析した。

【0316】

ＦＩＸ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：トリス塩酸（ｐＨ９）を清澄した収集物に添加した。第一のクロマトグラフィーカラムを、陰イオン交換、Ｑカラムを用いて実行した。次のカラムは、Ｈｅｐａｒｉｎ Ｈｙｐｅｒ Ｄであった。溶出画分を最終ｐＨが６．８である１０ｍＭリン酸ナトリウムの最終濃度に調整した。最後のクロマトグラフィーステップはＣＨＴ樹脂上で実行した。溶出画分を濃縮し、ＴＢＳ（ｐＨ７．５）に対して透析した。

【0317】

ＦＩＸ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物を濃縮し、透析した。唯一のクロマトグラフィーステップは、アフィニティークロマトグラフィー、Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｊａｃａｌｉｎである。溶出産物を濃縮し、ＴＢＳ（ｐＨ７．５）に対して透析した。

【0318】

ＦＩＸ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物を濃縮し、透析した。唯一のクロマトグラフィーステップは、アフィニティークロマトグラフィー、Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｊａｃａｌｉｎである。溶出産物を濃縮し、ＴＢＳ（ｐＨ７．５）に対して透析した。

【0319】

ＡＰＯＡ１−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物を濃縮し、透析した。第一のクロマトグラフィーを、陰イオン交換クロマトグラフィー、ＤＥＡＥ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦカラムを用いて実行した。第二のクロマトグラフィーステップを、Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｊａｃａｌｉｎ樹脂上で実行した。溶出物を透析濾過し、ＴＢＳ（ｐＨ７．４）に対してＵＦＤＦ−２中で濃縮した。

【0320】

ＡＰＯＡ１−ＣＴＰ：第一のクロマトグラフィーを、アフィニティークロマトグラフィー、Ｃａｐｔｕｒｅ−Ｓｅｌｅｃｔ ＡＰＯ−ＡＩカラムを用いて実行した。第二のクロマトグラフィーステップをＩｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ Ｊａｃａｌｉｎ樹脂上で実行した。溶出物を透析濾過し、ＴＢＳ（ｐＨ７．４）に対してＵＦＤＦ−２中で濃縮した。

【0321】

ＡＰＯＡ１：希釈した収集物を、アフィニティークロマトグラフィー、Ｃａｐｔｕｒｅ−Ｓｅｌｅｃｔ ＡＰＯ−ＡＩに添加した。溶出物を透析濾過し、ＴＢＳ（ｐＨ７．４）に対してＵＦＤＦ−２中で濃縮した。

【0322】

ＦＶＩＩａ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物を濃縮し、透析した。ウイルス不活性化を達成した。第一のクロマトグラフィーを、アフィニティーカラム、ＶＩＩ Ｓｅｌｅｃｔを用いて実行した。溶出画分を希釈し、その後、次のカラムであるＣｅｒａｍｉｃ Ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ（ＣＨＴ）に添加した。ＣＨＴ溶出物をＰｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムに添加した。溶出物を透析濾過し、陰イオン交換クロマトグラフィーカラム上で活性化した。次に、カラムを洗浄し、生成物を溶出した。ナノ濾過を実行した。

【0323】

ＦＶＩＩａ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ−ＣＴＰ：清澄した収集物を濃縮し、透析した。第一のクロマトグラフィーを、アフィニティーカラム、ＶＩＩ Ｓｅｌｅｃｔを用いて実行した。溶出画分を、次のカラムであるＣｅｒａｍｉｃ Ｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅ（ＣＨＴ）に添加した。カラムを洗浄し、生成物を希釈した。ＣＨＴ溶出物をＰｈｅｎｙｌ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅカラムに添加した。溶出物を透析濾過し、濃縮した。第ＶＩＩ因子を陰イオン交換クロマトグラフィー上で活性化した。次に、カラムを洗浄し、生成物を溶出した。

【0324】

【0325】

ＣＴＰ修飾タンパク質の糖鎖除去
ＣＴＰ修飾タンパク質の糖鎖除去を、Ｇｌｙｋｏ Ｓｉａｌｉｄａｓｅ Ａ（カタログ番号ＰＺ ＰＺＧＫ８００４０、プロザイム社（Ｐｒｏｚｙｍｅ））、Ｏ−ｇｌｙｃａｎａｓｅ（カタログ番号ＰＺ ＰＺＧＫ８００９０、プロザイム社）およびＮ−ｇｌｙｃａｎａｓｅ（カタログ番号ＰＺＧＫＥ−５００６Ａ、プロザイム社）を用いて実行した。タンパク質を、ｓｉａｌｉｄａｓａ Ａを用いて２時間（３７℃）消化し、次に、Ｏ−ｇｌｙｃａｎａｓｅおよび必要であればＮ−ｇｌｙｃａｎａｓｅを用いて一晩消化した。

【0326】

ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦによる分子量決定
ＣＴＰ修飾タンパク質の分子量（Ｍｗ）を、ＲＥＦＬＥＸ−ＩＶモデル（ブルカー・ダルトニクス社（Ｂｒｕｋｅｒ Ｄａｌｔｏｎｉｃｓ）、ドイツ、ブレーメン）を用いるＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ法により測定した。マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析計（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ ＭＳ）は、ＵＶ光吸収マトリックスおよび生体分子様タンパク質またはペプチドの強沈殿物がレーザーパルスにより照射される技術である。イオン化生体分子は電場内で加速され、飛行管に進入する。この管内での飛行中、異なる分子はそれらの質量電荷比に応じて分離され、異なる時間に検出器に到達する。このようにして、各分子は分子量に変換され得る別々のシグナルを生む。前記方法は、４００〜３５０，０００Ｄａの分子量を有する様々なタンパク質およびペプチドの特徴付けに用いられる。前記方法は非常に高感度な方法であり、０．１〜０．０１％の正確さで、低量（１０〜１５から１０〜１８モルまで）の試料の検出を可能にする。前記測定を、分析研究業務ユニット（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ Ｕｎｉｔ）（ベングリオン大学、イスラエル、ベールシェバ）で行った。

【0327】

ＳＥＣカラムを用いるＨＰＬＣによる流体力学的サイズの解析
タンパク質の流体力学的サイズを、ｈＧＨ、ＥｐｏおよびＡｐｏ天然および関連ＣＴＰ修飾タンパク質用のＴＳＫｇｅｌ Ｇ２０００ＳＷ ＳＥＣカラム（カタログ番号０８５４０、トーソーハース社（ＴｏｓｏＨａａｓ））、または第ＩＸ因子および第ＶＩＩ因子天然および関連ＣＴＰ修飾タンパク質用のＴＳＫｇｅｌ Ｇ３０００ＷＸＬ ＳＥＣカラム（カタログ番号０８５４１、トーソーハース社）を用いる、ＨＰＬＣ（Ｄｉｏｎｅｘ ＵｌｔｉＭａｔｅ ３０００）で測定した。Ｈ Ｍｗ較正キット（カタログ番号１５１−１９０１、バイオラド社）をタンパク質サイズの測定に用いた。結果を対数適合（ｌｏｇａｒｉｔｈｍｉｃ ｆｉｔ）（ｙ＝ａ＊ｌｎＸ＋ｂ）に当てはめ、様々なタンパク質の流体力学的サイズを算出した。

【0328】

結果
実施例１：様々なＣＴＰ修飾タンパク質の作製
１１種の異なるＣＴＰ修飾タンパク質をＣＨＯ細胞株において形質移入および発現させた。種々の収集物を上記方法に従って精製した。精製したタンパク質を図１および図２に示す。

【0329】

実施例２：ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ法による分子量の解析

【0330】

様々なグリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質および非グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の分子量を、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ法を用いて決定し、それらの対応する未修飾タンパク質の分子量（ＣＴＰに融合されていない無処理タンパク質、すなわち、ｈＧＨに対してはＢｉｏｔｒｏｐｉｎ、Ｅｐｏ、ＡｐｏＡＩに対してはＥＰＲＥＸ（登録商標）、第ＩＸ因子に対してはＭｏｎｏｎｉｎｅ（登録商標）、およびＦＶＩＩａに対してはＮｏｖｏＳｅｖｅｎ（ノボセブン）（登録商標））の分子量、表３）に対して比較した。全ての天然および非グリコシル化タンパク質の測定されたＭｗは、タンパク質のアミノ酸配列に基づく理論Ｍｗと良く一致した。非グリコシル化ＣＴＰおよびグリコシル化ＣＴＰの１コピー当たりの分子量の増加を算出し、それぞれ図３Ａおよび図３Ｂに示した。分子量に対するＣＴＰの１コピーの寄与を以下の通りに算出した：最初に、未修飾タンパク質の測定された、または理論的な（天然ｈＧＨの場合）分子量を、それらの対応するＣＴＰ修飾タンパク質の測定された分子量から減算することにより、分子量の増加を算出した。次に、算出された増加値を各タンパク質におけるＣＴＰコピーの数で除算した。例えば、ＭＯＤ−４０２３（Ｎ末端で１コピーのＣＴＰに融合され、Ｃ末端で直列の２コピーのＣＴＰに融合されたｈＧＨ）は、３８，１２８の分子量を有し、一方、天然ｈＧＨは２２，０００の理論分子量を有する。それら２つのタンパク質間の差異は、１６．１３ｋＤａであり、このことは、各グリコシル化ＣＴＰの寄与が５．４ｋＤａ（１６．１３を３コピーのＣＴＰで除算）であることを意味する。全ての測定されたタンパク質における１コピーの非グリコシル化ＣＴＰの平均寄与は、２．７６ｋＤａ±０．１０３である（図３Ａ、表３）。この結果は、２．７８ｋＤａである単一ＣＴＰの理論的Ｍｗと一緒に整列される。グリコシル化ＣＴＰは、平均４．７６ｋＤａ±０．４２２をＭｗに寄与し（図３Ｂ、表３）、種々の測定されたタンパク質間に有意差はない。

【0331】

【0332】

実施例３：ＨＰＬＣ法による流体力学的サイズの解析
流体力学的体積は、分子ふるいカラムを通過させる際のタンパク質の滞留時間（ＲＴ）に影響を与える主要なパラメーターである。従って、タンパク質サイズを、ＨＭｗ Ｇｅｌ ｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｋｉｔ（カタログ番号１５１−１９０１、バイオラド社）を用いて、ＳＥＣカラムにより算出した。標準物質の滞留時間をＳＥＣ ＴＳＫ ２０００カラムおよびＴＳＫ ３０００カラムの両方において測定し、解析法の正確さを決定するために各カラムについての相対誤差％（％ＲＥ）を算出した。較正タンパク質の観測されたＭｗの％ＲＥを算出し、較正タンパク質の既知の予測Ｍｗと比較した。検量線および％ＲＥに対する算出Ｍｗの結果を、ＴＳＫ２０００ ＳＥＣカラムについては表４ａに示し、ＴＳＫ３０００ ＳＥＣカラムについては表４ｂに示した。結果は、％ＲＥが２０％以下（≦２０％）であったことを示しており、このことは、広範囲のタンパク質の決定された分子量における高い精度を示している。

【0333】

【0334】

【0335】

ＣＴＰ修飾タンパク質の流体力学的体積に対するグリコシル化ＣＴＰの寄与を決定するために、種々のＣＴＰ修飾タンパク質をＳＥＣカラムにより解析し、それらの流体力学的サイズを算出した。対応する組換えタンパク質：Ｂｉｏｔｒｏｐｉｎ（ｒｈＧＨ）、ＥＰＲＥＸ（登録商標）（ｒＥＰＯ）、ＡｐｏＡＩ、Ｍｏｎｏｎｉｎｅ（登録商標）（ｒＦＩＸ）およびＮｏｖｏＳｅｖｅｎ（登録商標）（ｒＦＶＩＩａ）を、前記タンパク質に対するグリコシル化ＣＴＰの寄与を算出するために、それらのＣＴＰ修飾対応タンパク質と並行して解析した（表５、図４Ａおよび図４Ｂ）。図４Ａは、ＳＥＣカラムによって測定された、未修飾タンパク質に対する、ＣＴＰ修飾タンパク質の流体力学的サイズの総増加量を表している。

【0336】

【0337】

グリコシル化ＣＴＰの１コピーの分子量における増加値を、未修飾タンパク質の測定した流体力学的サイズをそれらの対応するＣＴＰ修飾タンパク質の測定した流体力学的サイズから減算することにより算出した。次に、各タンパク質のＣＴＰコピーの数で算出した増加値を除算した。種々のタンパク質の分子量に対する１コピーのグリコシル化ＣＴＰの算出された寄与を、図４Ｂに示す。種々のタンパク質は、グリコシル化ＣＴＰの１コピー当たり２９ｋＤａ〜５３ｋＤａの範囲の増加を示している。

【0338】

興味深くそして予想外なことに、ＦＩＸおよびＦＶＩＩａの、１コピーのグリコシル化ＣＴＰの寄与は、他の測定されたタンパク質と比較して４３〜５３ｋＤａ（ＣＴＰの１コピー当たり）の寄与を有して顕著により高かった（表５）。グリコシル化ＣＴＰの１コピー当たりの流体力学的サイズにおける増加値は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦによって測定された、分子量に対するグリコシル化ＣＴＰの１コピー当たりの算出された４．７６ｋＤａの寄与よりもかなり高い。方法毎の算出Ｍｗにおける差異は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦがタンパク質の実際のＭｗを測定している一方で、ＳＥＣ−ＨＰＬＣ測定はタンパク質の流体力学的体積によって影響を受けるという事実により生じるものであり、このことは、グリコシル化ＣＴＰが結合したタンパク質の流体力学的体積を実質的に増加させていることを示唆している。流体力学的体積の規模は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦによって測定されたＣＴＰ当たりの算出された寄与と比較して、約６〜１１倍より高い。当然ながら、修飾されているタンパク質の流体力学的サイズに対するＣＴＰの寄与は、ｈＧＨおよびＣＴＰ修飾ＥＰＯ変異体においてはより低かったが（約３０ｋＤａ）、ＦＩＸおよびＦＶＩＩ−ＣＴＰ修飾変異体においてはわずかにより高く、驚くべきことに、特定のタンパク質に付加されているＣＴＰの数に影響されなかった。

【0339】

さらに、タンパク質のＭｗに対する非グリコシル化ＣＴＰの寄与をＳＥＣ−ＨＰＬＣにより測定した（表６、図５Ａおよび図５Ｂ）。Ｓｉａｌｉｄａｓｅ Ａ（シアル酸を除去）と一緒にタンパク質を３７℃で２時間インキュベートし、続いてＯ−ｇｌｙｃａｎａｓｅ（Ｏ−グリカンを除去）を添加することにより脱グリコシル化を行った。Ｎ−グリカンを含有する、ＥＰＲＥＸ（登録商標）（ｒＥＰＯ）、Ｍｏｎｏｎｉｎｅ（登録商標）（ｒＦＩＸ）、ＮｏｖｏＳｅｖｅｎ（登録商標）（ｒＦＶＩＩ）およびそれらの対応するＣＴＰ修飾タンパク質の場合、一晩消化させてＮ−グリカンを除去するためにＮ−ｇｌｙｃａｎａｓｅを添加した。種々のタンパク質の流体力学的サイズまたは流体力学的体積に対する非グリコシル化ＣＴＰの寄与を算出し、それらの対応する未修飾タンパク質と比較した。すなわち、流体力学的体積に対する非グリコシル化ＣＴＰ修飾ポリペプチドの寄与を、非グリコシル化ＣＴＰ修飾ポリペプチドの流体力学的体積を、対応する非グリコシル化未修飾タンパク質の流体力学的体積と比較することにより算出した。例えば、ＥＰＯの場合、Ｎ−グリカンおよびＯ−グリカンをＥＰＲＥＸ（登録商標）から除去し、ＣＴＰ修飾Ｅｐｏ変異体の流体力学的体積における増加を算出し、それらの分子量と比較した。

【0340】

図５Ａは無処理タンパク質の流体力学的サイズにおける増加値を示しており、一方、図５Ｂは非グリコシル化ＣＴＰ修飾タンパク質の１コピーの寄与を示している。非グリコシル化ＣＴＰは、対応する未修飾タンパク質と比較した場合、ＣＴＰ修飾タンパク質の流体力学的サイズを著しく増加させる。１コピーの非グリコシル化ＣＴＰの算出された寄与は、非グリコシル化ＣＴＰの１コピー当たり８ｋＤａ〜２１ｋＤａの範囲で、種々のタンパク質間で異なっていた（表６）。２８個のアミノ酸から成るＣＴＰの理論分子量が２．７８ｋＤａであり、測定された分子量（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦによって）も約２．７６ｋＤａであったことを考慮すると、これらの結果は、分子量に対する非グリコシル化ＣＴＰの寄与が予想よりもより高いことを示唆している。さらに、グリコシル化ＣＴＰにおいて同様に観察されたように、流体力学的体積は、非グリコシル化（ｎｏｎ−ｇｌｙｃｏｌｙｓａｔｅｄ）ＣＴＰについても、予測よりもかなり高いことが観察された。全体として、タンパク質へのＣＴＰの結合は、ＣＴＰ骨格およびＣＴＰグリカンの両方に起因する、流体力学的体積における増加をもたらす。

【0341】

特定のタンパク質に付加されたＣＴＰの数が、特定のタンパク質の流体力学的サイズへの寄与に影響を与えなかったことも観察された。非グリコシル化ＣＴＰの最も著しい増加は、タンパク質のＣ末端にＣＴＰのコピーを有するＡｐｏ、ＦＩＸおよびＦＶＩＩにおいて観察された。Ｃ末端におけるＣＴＰの付加が流体力学的体積に対するより高い寄与をもたらすというこの発見は、予期されなかったものである。興味深いことに、そして予想外なことに、Ａｐｏ、ＦＩＸおよびＦＶＩＩａ ＣＴＰ修飾タンパク質の、１コピーの非グリコシル化ＣＴＰの寄与は、非常に似ており約２０ｋＤａと測定されたが（表６）、これら凝固因子のグリコシル化ＣＴＰの寄与は、Ａｐｏグリコシル化ＣＴＰと比較して有意により高かった（表５）。

【0342】

【0343】

本研究により、１コピーのグリコシル化ＣＴＰが流体力学的体積に対して少なくとも２８（ｋＤａ）寄与し、それぞれＳＥＣ−ＨＰＬＣおよびＭＡＬＤＩ−ＴＯＦを用いて決定された分子量の増加値は４．７６（ｋＤａ）０．４２２であることが示された。ＣＴＰ修飾タンパク質の流体力学的体積におけるこの予期しない規模が、ＣＴＰ修飾タンパク質において観察された血中半減期の延長および生物活性の増強の理由である可能性がある。非グリコシル化ＣＴＰは、流体力学的体積に対して少なくとも８（ｋＤａ）寄与し、分子量増加値は２．７６（ｋＤａ） ０．１０３であった。興味深いことに、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦによって測定された非グリコシル化ＣＴＰペプチドおよびグリコシル化ＣＴＰペプチドの分子量は、前記タンパク質の全てにおいて同様であった。さらに、ＳＥＣ−ＨＰＬＣによって測定されたグリコシル化ＣＴＰペプチド修飾タンパク質および非グリコシル化ＣＴＰペプチド修飾タンパク質の流体力学的体積は異なっていた。これらの発見は、ＣＴＰペプチドの分子量は、異なる位置で異なるタンパク質に融合された場合は同様であるが、ＳＥＣカラム測定によって明らかなように、ＣＴＰペプチドが結合した異なるタンパク質の流体力学的体積の予期せぬ増加を引き起こすことを示唆している。

【0344】

添付の図面を参照して本発明の好ましい実施形態を記述したが、本発明がこれらの詳細な実施形態に限定されず、添付の特許請求の範囲において決定される本発明の範囲または趣旨から逸脱することなく、当業者によって様々な変更や修正がそれらにおいて為されてもよいことを理解されたい。

【図1】

【図2】

【図3A】

【図3B】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]