特許 6420753 製剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6420753

(24)【登録日】2018年10月19日

(45)【発行日】2018年11月7日

(54)【発明の名称】製剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/5377 20060101AFI20181029BHJP

   A61K 9/19 20060101ALI20181029BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20181029BHJP

   A61K 47/04 20060101ALI20181029BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20181029BHJP

   A61K 47/36 20060101ALI20181029BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20181029BHJP

   C07D 401/12 20060101ALI20181029BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/5377

   A61K9/19

   A61K47/12

   A61K47/04

   A61K47/26

   A61K47/36

   A61P35/00

   C07D401/12CSP

【請求項の数】30

【外国語出願】

【全頁数】55

(21)【出願番号】特願2015-243831(P2015-243831)

(22)【出願日】2015年12月15日

(65)【公開番号】特開2016-113461(P2016-113461A)

(43)【公開日】2016年6月23日

【審査請求日】2018年3月20日

(31)【優先権主張番号】62/093,060

(32)【優先日】2014年12月17日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/250,633

(32)【優先日】2015年11月4日

(33)【優先権主張国】US

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】593141953

【氏名又は名称】ファイザー・インク

(74)【代理人】

【識別番号】100133927

【弁理士】

【氏名又は名称】四本 能尚

(74)【代理人】

【識別番号】100137040

【弁理士】

【氏名又は名称】宮澤 純子

(74)【代理人】

【識別番号】100147186

【弁理士】

【氏名又は名称】佐藤 眞紀

(74)【代理人】

【識別番号】100174447

【弁理士】

【氏名又は名称】龍田 美幸

(72)【発明者】

【氏名】ケヴィン リチャード バック

(72)【発明者】

【氏名】マイケル クラム

(72)【発明者】

【氏名】エイダン ハーパー

(72)【発明者】

【氏名】ジョナサン リチャード リリス

(72)【発明者】

【氏名】ティモシー マイケル ルーカス

(72)【発明者】

【氏名】サミット ルースラ

(72)【発明者】

【氏名】ダブリュ． ジェームズ ファン

【審査官】 原口 美和

(56)【参考文献】

【文献】 特開２０１０−２１５６２０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１１−５１０６９７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 J. Med. Chem.，２０１０年，Vol. 53，pp. 2636-2645

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／５３７７

Ａ６１Ｋ ９／１９

Ａ６１Ｋ ４７／０４

Ａ６１Ｋ ４７／１２

Ａ６１Ｋ ４７／２６

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ｃ０７Ｄ ４０１／１２

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素もしくはその乳酸塩、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、６ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分な乳酸が存在する、または
１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素もしくはそのリン酸塩、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、
医薬水溶液製剤をフリーズドライすることによって取得可能な凍結乾燥製剤。

【請求項2】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素もしくはその乳酸塩、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、６ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分な乳酸が存在する、請求項１に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項3】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、６ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分な乳酸が存在する、請求項１または２に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項4】

前記医薬水溶液製剤において１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、２．５から５．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在する、請求項１から３のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項5】

前記医薬水溶液製剤において１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、５．０から５．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在し、少なくとも２．５モル当量の乳酸が存在する、請求項１から４のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項6】

前記医薬水溶液製剤において１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在する、請求項４に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項7】

前記医薬水溶液製剤において１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、少なくとも２．５モル当量の乳酸が存在する、請求項６に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項8】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、少なくとも２．５モル当量の乳酸が存在し、透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、請求項１から３のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項9】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素乳酸塩、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、少なくとも１．５モル当量の乳酸が存在し、透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、請求項１または２に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項10】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、約４．１モル当量の乳酸が存在し、ｐＨが３．７以下の透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、請求項８に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項11】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、２．５から５．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在し、２．５超から８．０モル当量までの乳酸が存在し、透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、請求項１または２に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項12】

前記医薬水溶液製剤においてＤＬ−乳酸、Ｌ−乳酸またはＤ−乳酸が使用される、請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項13】

前記医薬水溶液製剤においてＤＬ−乳酸が使用される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項14】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素またはそのリン酸塩、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、請求項１に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項15】

前記医薬水溶液製剤が１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、請求項１または１４に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項16】

前記医薬水溶液製剤において１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、３．０から３．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在する、請求項１５に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項17】

前記医薬水溶液製剤において少なくとも５モル当量のオルトリン酸が使用される、請求項１５または１６に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項18】

前記医薬水溶液製剤において５から７モル当量までのオルトリン酸が使用される、請求項１７に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項19】

増量剤を追加で含有する請求項１から１８のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項20】

前記増量剤がマンニトールである、請求項１９に記載の凍結乾燥製剤。

【請求項21】

水、または浸透圧調節剤を含む水溶液を使用して、請求項１から２０のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤を再構成または構成することによって、透明な医薬水溶液製剤を調製する方法。

【請求項22】

前記浸透圧調節剤が、デキストロース、スクロースもしくはマンニトール、またはそれらの任意の２つ以上の混合物である、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

必要に応じて、静脈内または非経口投与に適切なｐＨを有するように調整される、請求項２１または２２に記載の方法。

【請求項24】

前記ｐＨが、３から４．５までである、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素もしくはそのリン酸塩、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、
医薬水溶液製剤。

【請求項26】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、請求項２５に記載の医薬水溶液製剤。

【請求項27】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、３．０から３．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在する、請求項２６に記載の医薬水溶液製剤。

【請求項28】

少なくとも５モル当量のオルトリン酸が使用される、請求項２６または２７に記載の医薬水溶液製剤。

【請求項29】

５から７モル当量までのオルトリン酸が使用される、請求項２８に記載の医薬水溶液製剤。

【請求項30】

がんの治療において使用するための、請求項１から２０および２５から２９のいずれか一項に記載の製剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、または薬学的に許容できるその塩を含む医薬製剤に関する。より詳細には、本発明は、透明な溶液である、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、または薬学的に許容できるその塩を含む医薬水性製剤に関する。そのような製剤は、患者への静脈内投与に特に適切である。

【背景技術】

【0002】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素およびその調製は、ＷＯ２００９／１４３３１３において開示されている。該化合物は、がんの治療に有用な、ＰＩ３キナーゼおよびｍＴＯＲの阻害剤である。

【0003】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の結晶性形態、およびその調製のためのプロセスは、ＷＯ２０１０／０９６６１９において開示されている。

【0004】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素は、化学構造：

【0005】

【化1】

を有する。

【0006】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素は結晶性形態で調製することができ、２５℃および６０％相対湿度（ＲＨ：Ｒｅｌａｔｉｖｅ Ｈｕｍｉｄｉｔｙ）では、この形態で最長３年間、化学的にかつ物理的に安定である。しかしながら、この遊離塩基は、必要とされる治療投薬量レベルでの静脈内または非経口投与に適切な水溶液製剤の調製を可能にするには水溶性が不十分である。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【特許文献1】ＷＯ２００９／１４３３１３

【特許文献2】ＷＯ２０１０／０９６６１９

【非特許文献】

【0008】

【非特許文献1】Ｃｈｅｎら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ、２００１；２６，６３

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

（ａ）貯蔵中に（例えば２５℃および６０％ＲＨで）化学的に安定であり、かつ／または（ｂ）ヒトを含む哺乳動物への薬物の有効な静脈内（または非経口）投与を容易にするであろう、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の薬学的に許容できる製剤を開発することが必要である。

【0010】

好ましくは、製剤は、この薬物の特定の薬物動態学的およびバイオアベイラビリティ特徴を考慮すると、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の静脈内投与に適している。

【0011】

あらゆる薬物の静脈内製剤は、患者への安全かつ有効な投与を容易にするために溶液であることが必須である。該製剤は、粒子のないものでなくてはならず、ゲルも懸濁液も形成してはならない。透明な水溶液が好ましい。

【0012】

透明な溶液は、目視検査で観察できるいかなる可視微粒子も本質的にない、視覚的に透明な溶液として定義される。一般に、何らかの微粒子状物質が観察されれば、製剤は静脈内投与に適さず、血管の閉塞が起こり得るため、利用すべきではない。したがって、目視試験の定性的性質を考慮すると、用語「いかなる可視微粒子も本質的にない」は、通常、可視微粒子状物質が観察されない場合に適用される。

【0013】

微粒子状物質は、次の通りに定義され得る：
・ 微塵−拡大せずにその形状を決定することができない離散粒子
・ 煙または渦流−煙または竜巻のように見え、通常、試料バイアル床面が起源であり、バイアルを旋回させると巻き上がる、微細粒子
・ 綿状材料−ゆるく凝集した粒子または柔らかい薄片
・ ガラス様、金属状等のように記述され得る明確な形状または特徴を持つ微粒子

【0014】

目視検査は、「微粒子汚染：可視粒子（Ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ ｃｏｎｔａｍｉｎａｔｉｏｎ：ｖｉｓｉｂｌｅ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ）」と題されたヨーロッパ薬局方２．９．２０において定義されている方法に従って行うことができる。この方法は、溶液中に存在し得る、気泡以外の外部からの流動的で溶解しない粒子による、注射および注入の微粒子汚染を決定するものである。試験は、可視粒子に関する非経口溶液の品質の視覚的評価のための簡単な手順を提供することが意図されている。他の妥当な方法を使用してもよい。

【0015】

ヨーロッパ薬局方２．９．２０において、装置（図２に示されている「図２．９．２０．−１」を参照）は、以下を備えるビューイングステーションからなる：
・ 垂直位置に保持された適切なサイズの艶消し黒色パネル
・ 該黒色パネルの隣に垂直位置に保持された適切なサイズの反射防止白色パネル
・ 適切な傘の付いた白色光源および適切な散光器が装着された調整可能なランプホルダー（それぞれ長さ５２５ｍｍの２本の１３ワット蛍光管を含有するビューイングイルミネーターが適切である）。ビューイングポイントにおける照明の強度は、２０００ルクスから３７５０ルクスの間に維持されるが、着色ガラスおよびプラスチック容器にはより高い値が好ましい。

【0016】

該方法では、「容器からいかなる接着ラベルも除去し、外側を洗浄し、乾燥させる。容器を穏やかに旋回または反転させて、気泡が入らないことを確実にし、白色パネルの前で約５秒間観察する。黒色パネルの前で手順を繰り返す。いかなる粒子の存在も記録する。」と述べられている。

【課題を解決するための手段】

【0017】

現在、驚くべきことに、この技術的問題は、
１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素もしくはその乳酸塩、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、６ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分な乳酸が存在する、または
１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素もしくはそのリン酸塩、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、医薬水溶液製剤（以後、「本発明の製剤」）によって解決されることを見出した。

【0018】

そのような製剤は、静脈内にまたは非経口で、好ましくは浸透圧調節剤の添加とともに、（分解が起こるのを回避するために）患者に直接投与することができる。代替として、後日の患者への投与のために、増量剤および／または浸透圧調節剤を含有していてもよいそのような製剤を最初にフリーズドライして、好ましくは少なくとも２年間にわたる貯蔵中に化学的に安定な、凍結乾燥固体組成物を調製してよく、次いで、この凍結乾燥固体組成物を、構成または再構成して、静脈内（または非経口）経路による患者への投与の直前に、好ましくは必要に応じて浸透圧調節剤を添加して、透明な水溶液を提供することができる。

【0019】

本発明の製剤において使用される乳酸またはオルトリン酸の代替的な酸の、２．５〜５．５ｍｇ／ｍｌの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素という好ましい濃度での使用は、微粒子状物質またはそのゲルを含有する濁った製剤をもたらし、患者への静脈内（または非経口）投与に必要とされる本質的に透明な、粒子のない溶液にはつながらないことが分かった。

【0020】

乳酸を含む製剤に関して：
・ ６ｍｇ／ｍｌ以上の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の溶液濃度では、患者への静脈内投与に必要とされるｐＨの必要な透明な溶液は取得されない、または常には取得されないことが分かった。
・ 好ましくは、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、６ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分な乳酸が存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 本発明の製剤中における１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の濃度は、１から５．５ｍｇ／ｍｌまで、２から５．５ｍｇ／ｍｌまで、または３から５．５ｍｇ／ｍｌまでであってよい（命名された遊離塩基として算出される）。
・ 好ましくは、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、２．５から５．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の遊離塩基が使用される場合、２．５モル当量超の乳酸が本発明の製剤中に存在する。より好ましくは、３から１０まで、２．５超から８．０、３．５から４．５モル当量までの乳酸が本発明の製剤中に存在する。最も好ましくは、約４．１モル当量の乳酸が本発明の製剤中に存在する。
・ 好ましくは、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の遊離塩基が使用される場合、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、５．０から５．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在し、少なくとも２．５モル当量の乳酸が存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の遊離塩基が使用される場合、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、少なくとも２．５モル当量の乳酸が存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の遊離塩基が使用される場合、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、少なくとも２．５モル当量の乳酸が存在し、透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、医薬水溶液製剤を提供する。
・ １−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素は、乳酸と１：１（モル当量）乳酸塩を形成することに留意すべきである。本発明の製剤は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素遊離塩基を使用して、または１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の乳酸塩を使用して調製され得る。乳酸塩が使用される場合、本発明の製剤中における２．５モル当量超の乳酸の好ましい下限の存在を実現するために、好ましくは１．５モル当量超の乳酸が使用される。
・ 好ましくは、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素乳酸塩、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、少なくとも１．５モル当量の乳酸が存在し、透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、医薬水溶液製剤を提供する。
・ ＤＬ−乳酸、Ｄ−乳酸もしくはＬ−乳酸、またはそれらの任意の組合せを、本発明の製剤において使用してよい。好ましくは、ＤＬ−乳酸が使用される。
・ 好ましくは、本発明の製剤のｐＨは、３．７以下である。より好ましくは、本発明の製剤のｐＨは、３．０から３．７まで、３．３から３．６まで、または３．４から３．５までである。
・ 好ましい実施形態において、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、最大５．５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、２．５モル当量超の乳酸が存在し、ｐＨが３．７以下の透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましい実施形態において、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、乳酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、約５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度で存在し、約４．１モル当量の乳酸が存在し、ｐＨが３．７以下の透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、医薬水溶液製剤を提供する。
・ １−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩の結晶性形態を使用して、本発明の製剤を調製してよい。好ましくは、使用される１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩の結晶性形態は、約１６．２、１７．３、１８．４、１８．９、１９．９、２０．９および２３．１°（２θ）（＋／−０．２°（２θ））において主要なピークを持つＰＸＲＤパターン（Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ４回折計および銅Ｋα線を使用して測定されたもの）を有する。１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩のこの結晶性形態は、約６．５、１５．９、２０．９、２２．１および２３．１°（２θ）（＋／−０．２°（２θ））において特徴的なピークを有することにより、この塩の他の公知の形態から区別される。

【0021】

オルトリン酸を含む製剤に関して：
・ 好ましくは、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、透明な溶液を提供するために十分なオルトリン酸が存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、３．０から３．５ｍｇ／ｍｌまでの溶液濃度で存在する、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、本発明は、少なくとも５モル当量のオルトリン酸が使用される、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、本発明は、５から７モル当量までのオルトリン酸が使用される、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましい実施形態において、本発明は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、オルトリン酸および水を含み、ここで、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、４ｍｇ／ｍｌ未満の溶液濃度で存在し、５から７モル当量までのオルトリン酸が存在し、透明な溶液が形成されることを確実にするのに十分な量である、医薬水溶液製剤を提供する。
・ 好ましくは、調製された製剤のｐＨは、静脈内投与の前で、２〜２．５である。次いで、ｐＨは、好ましくは、静脈内投与のために３．０〜４．５に調整される。
・ １−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素のリン酸塩が使用される場合、これは、好ましくはオルトリン酸を使用して調製される。

【0022】

凍結乾燥固体組成物を提供するために本発明の製剤がフリーズドライされる場合、増量剤は、好ましくは、フリーズドライプロセス開始前に製剤に添加される。増量剤の主要機能は、投与前に水性製剤の迅速な再構成または構成を可能にするであろう非崩壊性の（ｎｏｎ−ｃｏｌｌａｐｓｉｂｌｅ）構造的完全性を持つフリーズドライした固体を提供することであり、これは、効率的な凍結乾燥も容易にするはずである。増量剤は、典型的には、製剤中における溶質の全質量が２ｇ／１００ｍｌ未満である場合に使用される。血液との等張性を実現するために増量剤を添加してもよい。増量剤は、サッカリド、糖アルコール、アミノ酸もしくはポリマーから選択されてよく、またはそれらのいずれかの２つ以上の混合物であってよい。好ましくは、増量剤は、糖もしくは糖アルコール、またはそれらの混合物である。好ましくは、糖はスクロースである。好ましくは、糖アルコールはマンニトールである。

【0023】

凍結乾燥固体組成物の再構成は、透明な溶液を取得するための凍結乾燥前に存在していた必須の分量の水の添加により、実現され得る。次いで、使用前に浸透圧調節剤を添加してよい。

【0024】

凍結乾燥固体組成物の構成は、透明な溶液が取得されることを確実にするために、適切な分量の水および／または適切な浸透圧調節剤の水溶液を使用して実現され得る。

【0025】

浸透圧調節剤は、赤血球の円鋸歯状形成または溶血を回避するため、ならびに患者への疼痛および不快感を緩和するまたは回避するために、注射による患者への製剤の静脈内または非経口投与前に存在しなくてはならない。これは、患者に投与される製剤が、該患者の血液のものとほぼ同じである有効浸透圧を有することを必要とする。

【0026】

適切な浸透圧調節剤は、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、スクロース、プロピレングリコールもしくはデキストロース、またはそれらの任意の２つ以上の混合物等の非イオン性浸透圧調節剤である。好ましくは、非イオン性浸透圧調節剤は、デキストロース、スクロースもしくはマンニトールであるか、またはそれらの任意の２つ以上の混合物である。

【0027】

静脈内投与に適切な水性医薬製剤は、概して、３から９までのｐＨを有する。静脈内に投与される本発明の製剤は、好ましくは、３から４．５までのｐＨを有する。

【0028】

本発明の製剤は、ヒトを含む哺乳動物における、がんの治癒的、緩和的または予防的治療に使用され得る。治療されるがんは、白血病、皮膚がん、膀胱がん、乳がん、子宮がん、卵巣がん、前立腺がん、肺がん、結腸がん、膵臓がん、腎がん、胃がんおよび脳腫瘍からなる群から選択され得る。

【0029】

本明細書で開示される製剤を使用するがんの治療のために静脈内経路によって投与される１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の週用量は、好ましくは、１週間当たり１００〜４００ｍｇ／ｍｌの範囲内である。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】実施例４、調製Ａによる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩の結晶性形態のＰＸＲＤパターンを示す図である。

【図2】ヨーロッパ薬局方２．９．２０：「図２．９．２０．−１．−可視粒子のための装置（Ａｐｐａｒａｔｕｓ ｆｏｒ ｖｉｓｉｂｌｅ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ）」を示す図である。

【図3】フルスケールでのブランク溶液（希釈剤）のクロマトグラムを示す図である。

【図4】ブランク溶液（希釈剤）の拡大クロマトグラムを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0031】

下記の実施例は、本発明の製剤の調製を例証するものである。

【実施例】

【0032】

（実施例１）
５ｍｇ／ｍｌの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素およびＤＬ−乳酸を含む医薬水溶液製剤の調製
Ｄ，Ｌ−乳酸（３３４ｍｇ）を灌注用水に溶解して、溶液を１００ｍｌの総体積で作製した。１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素（２００ｍｇ）を、３７ｍｌのこの乳酸溶液に溶解し、Ｕｌｔｒａ Ｔｕｒｒａｘ Ｔ２５（商標）ホモジナイザーで１２０分間混合し、溶液を超音波浴中で１０分間音波破砕した。次いで、混合物を磁気撹拌器で終夜撹拌して、透明な溶液を提供した。メスフラスコを使用して、乳酸溶液でこれを最大４０ｍｌ体積にした。０．２μｍのナイロンフィルターを使用して、層流空気流（ＬＡＦ）キャビネット内の清浄な５０ｍｌバイアル中に溶液を濾過した。濾過した溶液の最初の５ｍｌを使用してフィルターを湿らせ、濾過した溶液を代表するものではないとして廃棄した。バイアルを圧着し、清浄なリオストッパー（ｌｙｏ−ｓｔｏｐｐｅｒ）およびフリップオフキャップを使用して密閉した。溶液を目視検査すると、透明な無色溶液であることが分かった。

【0033】

（実施例２）
（ａ）１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、ＤＬ−乳酸およびマンニトールを含む５ｍｇ／ｍｌの医薬水溶液製剤の調製、および（ｂ）その凍結乾燥固体組成物の調製
（ａ）３６，１００ｇの注射用水を容器に秤量した。１２５．８２ｇのＤＬ−乳酸（９０．６％純度、非経口グレード）をゆっくり添加し、混合物を乳酸が溶解するまで撹拌した。１９５．３ｇの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素をゆっくり添加し、混合物を材料が溶解するまで撹拌した。１９００ｇのマンニトール粉末（非経口）を徐々に添加し、混合物を材料が溶解するまで撹拌した。注射用水を添加して、溶液を添加して３８，７６０ｇの総重量にし、溶液をさらに１０分間撹拌した。ｐＨを確認すると、２９．３℃の溶液温度では３．４であることが分かった。溶液を、インライン０．４５μｍ浄化フィルターおよび０．２２μｍフィルターアセンブリに通して滅菌濾過した。次いで、この溶液を、５０ｍＬのバイアルに、各バイアル２０．８ｍＬの標的充填体積で充填した。バイアルを、それぞれ２０ｍｍのＧｒａｙ Ｌｙｏ Ｄ７７７−１ Ｖ１０−Ｆ５９７Ｗ ＦｌｕｒｏＴｅｃ Ｓｉｌｉｃｏｎｉｓｅｄ（商標）栓で部分的に栓をした（密閉しない）。

【0034】

（ｂ）次いで、これらのバイアルをステンレス鋼トレイに装填し、ＬＳＬ１０００（商標）凍結乾燥機に挿入した。棚温度を５℃に設定した。フリーズドライサイクルは、以下の方法を使用して実行した。

【0035】

【表1】

【0036】

凍結乾燥機に、滅菌濾過した窒素を、約７００ｍｂａｒ（７０，０００パスカル）の設定点まで再充填し、栓を使用してバイアルを完全に閉鎖した。次いで、滅菌濾過した空気を使用して凍結乾燥機を大気圧になるまで換気し、バイアルを凍結乾燥機から取り出した。

【0037】

各バイアルは、フリーズドライした（凍結乾燥）製剤を白色固体として含有していた。

【0038】

（実施例３）
凍結乾燥固体組成物からの、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素、ＤＬ−乳酸およびマンニトールを含む５ｍｇ／ｍｌの医薬水溶液製剤の再構成
実施例２（ｂ）において調製した凍結乾燥固体組成物試料のバイアルを、次の通りに再構成した。

【0039】

およそ２５ｍｌの注射用水をシリンジに入れ、０．２ミクロンのＰＶＤＦフィルター膜をシリンジに取り付けた。およそ５ｍｌの水を該膜に通して濾過し、廃棄した。次いで、シリンジ内に残っている２０ｍｌの水を、実施例２（ｂ）において調製した通りの凍結乾燥組成物を含有する５０ｍｌのバイアル中に濾過した。混合物を、透明な無色溶液が実現されるまで、バイアル中で旋回させた。

【0040】

再構成された溶液を、次の通りに分析した：

【0041】

（ａ）ｐＨ
バイアル中の溶液のｐＨは、２３．２℃でｐＨ＝３．５２と測定された。

【0042】

（ｂ）再構成した溶液の視覚的外観
再構成したバイアルの１つを、上述したヨーロッパ薬局方２．９．２０の方法に基づく方法を使用して、目視検査した。方法は、あらゆる可視粒子の存在を観察するように設計されている。

【0043】

この方法によって、バイアル中の溶液を、Ｖｅｒｉｖｉｄｅ ＤＣＡＣ６０（商標）光キャビネット内、艶消し黒色パネルおよび白色パネルに対する３２５０ルクスの光メーター検針を使用して、目視検査した。

【0044】

結果は、再構成時に微粒子状物質がない透明な無色溶液が実現されたことを示した。

【0045】

（ｃ）肉眼では見えない粒子の分析
バイアル中の溶液を、米国薬局方３６＜７８８＞方法１（「Ｌｉｇｈｔ Ｏｂｓｃｕｒａｔｉｏｎ Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｃｏｕｎｔ Ｔｅｓｔ」）において定義されている方法に基づく肉眼では見えない微粒子の決定方法を使用することにより、ＨＩＡＣ ａｐｐａｒａｔｕｓ（商標）を使用して、肉眼では見えない粒子の存在について評価した。溶液を非経口または静脈内投与に適切なものにするために、結果は、ＵＳＰ３６＜７８８＞方法１の「試験１．Ｂ」についての基準に適合するものでなくてはならず、これは、該基準が、肉眼では見えない微粒子状物質についての可能な限り広範な許容限界を定義しているからである。この試験では、次の通りに述べられている：
「試験１．Ｂ（１００ｍＬ未満の公称含有量で容器内に供給された非経口注入用溶液または注射用溶液）−調製は、試験されるユニット中に存在する粒子の平均数が、１０μｍ以上では容器当たり６０００を超えず、２５μｍ以上では容器当たり６００を超えないならば、試験に適合する。」

【0046】

この方法により、最初に、１０のバイアル溶液試料をプールした。各５ｍＬ以上の４つの試料をプールした溶液から取り出し、各試料について、ＨＩＡＣ ＨＲＬＤ ４００（商標）センサーを使用して、１０μｍおよび２５μｍ以上の粒子の数をカウントした。最初の試料について取得された結果は無視した。残り３つの試料のそれぞれについて、容器当たりの粒子の平均数を算出し、ＵＳＰ３６＜７８８＞試験１．Ｂの要件と比較した。これらの試料はそれぞれ、溶液を非経口または静脈内投与に適切なものにするためのＵＳＰ３６＜７８８＞試験１．Ｂの合否判定基準を満たしていた。

【0047】

（実施例４）
１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩の結晶性形態の調製
調製Ａ：
１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素（５２ｍｇ）を２ｍｌのバイアルに秤量した。９８：２ｖ／ｖ酢酸エチル：ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）中のＬ−乳酸の２２ｍｇ／ｍｌ溶液をバイアルに添加した。このスラリーを、約２３℃で２４時間撹拌した。次いで、スラリーを０．２μｍのナイロン遠心分離フィルターに通して濾過して、結晶性の表題化合物を単離した。

【0048】

生成物を、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ４（商標）回折計および銅Ｋα線を使用するＰＸＲＤ（以下の「調査７」を参照）によって分析し、図１において示されているパターンを得た。

【0049】

調製Ｂ：
１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素（５２ｍｇ）を２ｍｌのバイアルに秤量した。９８：２ｖ／ｖ酢酸エチル：ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）中のＬ−乳酸の２２ｍｇ／ｍｌ溶液をバイアルに添加した。スラリーを、５℃／分の速度で６０℃に加熱し、６０℃で２０分間保持し、次いで、０．１℃／分で５℃に冷却し、この温度で、スラリーが単離されるまで（加熱ステップの開始後２４時間）保持した。スラリーを０．２μｍのナイロン遠心分離フィルターに通して濾過して、結晶性の表題化合物を単離した。

【0050】

生成物を、Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ４回折計および銅Ｋα線を使用するＰＸＲＤ（以下の「調査７」を参照）によって分析し、図１において示されているものと一致するパターンを得た。

【0051】

下記の調査を本発明に関して行った。

【0052】

調査
１．種々の酸を用いる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３ｍｇ／ｍｌの水性製剤に関する調査
手順
約６．８モル当量の各酸（指示されている場合を除く）を使用するために、９つの個々の酸性緩衝溶液を次の通りに調製した：

【0053】

【表2-1】

【0054】

【表2-2】

【0055】

安定性試験は、上記で調製した各酸緩衝液につき、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の約３ｍｇ／ｍｌの試料３つを使用して行った。これらの試料は、１５．４５ｍｇ（９７．１％ＡＰＩ活性による）という標的重量の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素を使用し、必要とされる分量を各バイアルに次の通りに秤量することによって調製した：

【0056】

【表3】

【0057】

５ｍＬのそれぞれの緩衝液を、バイアル中の秤量した試料に導入し、バイアルをそれぞれ圧着したキャップによって閉鎖し、次いで、保護フィルムで密閉した。バイアルを、２５℃のオーブン内、ローラーベッド上に５日間置いた。

【0058】

結果
５日間の期間の終わりに、各試料のｐＨを測定し、各試料の目視観察を、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して行い、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。

【0059】

６つのバイアルは、実験の経過中にローラーから落ちたことが分かり、それらのバイアルが実際に回転していた正確な時間は不明であることを意味している。これらの試料には、以下の「ｐＨ結果」および「目視観察」の表においてアスタリスク（＊）が付けられている。

【0060】

【表4】

【0061】

【表5】

【0062】

結論
結果は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素およびＤＬ−乳酸を含有する３ｍｇ／ｍｌの試料が、２５℃で５日後に透明な溶液を実現したことを示す。１つを除き他のすべての試料（オルトリン酸−Ｎ＝２つの試料）は、透明な溶液を実現することができなかった。そのため、ＤＬ−乳酸およびオルトリン酸以外の酸は、必要とされるＡＰＩ（医薬品有効成分）濃度での患者への静脈内投与のための医薬水溶液製剤の調製に適切ではないであろう。

【0063】

２．種々の酸を用いる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３ｍｇ／ｍｌおよび４ｍｇ／ｍｌの水性製剤に関する調査
手順
（ａ）３ｍｇ／ｍｌの製剤において、約６．８モル当量のそれぞれの酸を使用するために、４つの個々の酸性緩衝溶液を次の通りに調製した：

【0064】

【表6】

【0065】

安定性試験は、上記で調製した各酸緩衝液につき、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の約３ｍｇ／ｍｌの試料３つを使用して行った。これらの試料は、１５．４５ｍｇ（９７．１％ＡＰＩ活性による）という標的重量の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素を使用し、必要とされる分量を各バイアルに次の通りに秤量することによって調製した：

【0066】

【表7】

【0067】

（ｂ）４ｍｇ／ｍｌの製剤において、約５．１モル当量のそれぞれの酸（指示されている場合を除く）を使用するために、個々の酸性緩衝溶液を次の通りに調製した：

【0068】

【表8-1】

【0069】

【表8-2】

【0070】

安定性試験は、上記で調製した各酸緩衝液につき、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の約４ｍｇ／ｍｌの試料３つを使用して行った。これらの試料は、２０．６０ｍｇ（９７．１％ＡＰＩ活性による）という標的重量の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素を使用し、必要とされる分量を各バイアルに次の通りに秤量することによって調製した：

【0071】

【表9】

【0072】

上記の（ａ）および（ｂ）両方の製剤について、５ｍＬのそれぞれの緩衝液を、バイアル中の秤量した試料に導入し、バイアルをそれぞれ圧着したキャップによって閉鎖し、保護フィルムで密閉した。バイアルを、２５℃のオーブン内、ローラーベッド上に５日間置いた。

【0073】

結果
５日間の期間の終わりに、各試料のｐＨを測定し、各試料の目視観察を、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して行い、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。

【0074】

２５℃で５日後のｐＨ
３ｍｇ／ｍＬ

【0075】

【表10】

【0076】

４ｍｇ／ｍＬ

【0077】

【表11】

【0078】

２５℃で５日後の試料の目視観察
３ｍｇ／ｍＬ

【0079】

【表12】

【0080】

４ｍｇ／ｍＬ

【0081】

【表13】

【0082】

結論
結果は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素およびＤ−乳酸、Ｌ−乳酸またはＤＬ−乳酸を含有する３ｍｇ／ｍｌおよび４ｍｇ／ｍｌの試料が、２５℃で５日後に透明な溶液を実現したことを示す。

【0083】

結果は、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素およびオルトリン酸を含有する３ｍｇ／ｍｌの試料も、２５℃で５日後に透明な溶液を実現したことを示す。

【0084】

他のすべての試料は、透明な溶液を実現することができなかったため、ＤＬ−乳酸、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳酸およびオルトリン酸以外の酸は、必要とされるＡＰＩ濃度での患者への静脈内投与のための医薬水溶液製剤の調製に適切ではないであろう。

【0085】

３．様々なｐＨおよび濃度のＤＬ−乳酸を用いる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の水性製剤に関する調査
手順
（ａ）１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３ｍｇ／ｍｌ、５ｍｇ／ｍｌ、５．５ｍｇ／ｍｌ、６ｍｇ／ｍｌおよび６．５ｍｇ／ｍｌの製剤の調製において使用するための緩衝溶液は、下記の計算に従って調製した（ＷＦＩ＝灌注用水）（^＊９０％Ｗ／Ｗ水中ＤＬ−乳酸）。
・ １０ｍＬスケールにおける０．９モル当量での３ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中４．３９ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１）
・ １０ｍＬスケールにおける２．２５モル当量での３ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中１０．９８ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（２）
・ １０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での３ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中１７．９９ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（３）
・ １０ｍＬスケールにおける０．９モル当量での５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中７．３２ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（４）
・ １０ｍＬスケールにおける２．２５モル当量での５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中１８．２９ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（５）
・ １０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中３０ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（６）
・ １０ｍＬスケールにおける７．２モル当量での５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中５８．５４ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（７）
・ １０ｍＬスケールにおける１０．８モル当量での５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中８７．８０ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（８）
・ １０ｍＬスケールにおける２．２５モル当量での５．５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中２０．１２ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（９）
・ １０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での５．５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中３３ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１０）
・ １０ｍＬスケールにおける１０．８モル当量での５．５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中９６．５８ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１１）
・ １０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での６ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中３６ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１２）
・ ２０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での６ｍｇ／ｍＬは、２０ｍＬのＷＦＩ中７２ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１４）
・ １０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での６．５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中３９ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１３）
・ ２０ｍＬスケールにおける３．７モル当量での６．５ｍｇ／ｍＬは、１０ｍＬのＷＦＩ中７８ｍｇのＤＬ−乳酸^＊に等しい。（１５）

【0086】

緩衝溶液は、１０ｍｌ（^＊以下の表において指示されている場合には２０ｍｌ）のメスフラスコ中ＷＦＩを使用し、下記のＤＬ−乳酸重量（^＊＊９０％Ｗ／Ｗ水中ＤＬ−乳酸）を使用して調製する：

【0087】

【表14】

【0088】

（ｂ）下記の分量の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素を、バイアルに秤量した（注意：１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素は９７．１％の活性を有し、これを下回る標的重量はこの活性に対して補正した）。

【0089】

【表15】

【0090】

５ｍＬの対応するＤＬ−乳酸緩衝液を、バイアル中のＡＰＩに添加し、次いで、各バイアルを、圧着したキャップで閉鎖し、保護フィルムを使用して密閉した。

【0091】

試料１〜１１を、室温および５０ｒｐｍのローラーベッド上に約２１．５時間置いた。

【0092】

試料１２および１３を、室温および５０ｒｐｍのローラーベッド上に約２３時間置いた。

【0093】

試料１４および１５を、室温および５０ｒｐｍのローラーベッド上に約２５時間置いた。

【0094】

約２１．５／２３／２５時間の期間後の結果
指定された回転期間の終わりに、各試料のｐＨを測定し、各試料の目視観察を、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して行い、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。
ｐＨ

【0095】

【表16】

視覚的評価

【0096】

【表17】

【0097】

下記の観察が為された：
・ 試料７、８および１１は、ローラーベッド上に置いて２時間以内に溶液になったようであった。
・ 試料６は、ローラーベッド上に置いて４時間以内に溶液になったようであった。
・ 試料３および１０は、ローラーベッド上に置いて２０時間以内に溶液になったようであった。

【0098】

結論
約２４時間の期間後、透明な溶液を実現するためには、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の溶液濃度は６ｍｇ／ｍｌ未満でなくてはならず、２．５モル当量を超えるＤＬ−乳酸が製剤において使用されなくてはならないと結論付けることができる。しかしながら、試料１４および１５についての上記の結果は、それぞれ３．６および３．７モル当量のＤＬ−乳酸を用いて、６ｍｇ／ｍｌおよび６．５ｍｇ／ｍｌ両方の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の溶液濃度で透明な溶液が実現可能であることを示している。試料１４および１５についてのこれらの結果は、試料１２および１３についての結果と比較すると、透明および不透明な溶液の両方が生じ得る準安定領域がおそらく存在するという事実を反映している。

【0099】

７２時間の期間後の結果
約２１．５時間の上記の回転期間後、試料１〜１１を、さらなる時間にわたって回転させることなく室温で貯蔵して、約７２時間の全実験期間を提供した。いくつかの試料は、全７２時間の期間の終わりに溶液になったことが観察され、これは、初期の約２１．５時間の回転期間後には溶解していなかった。

【0100】

上記の約２５時間の回転期間後、試料１４および１５を、さらなる時間にわたって室温で回転させながら貯蔵して、約７３時間の全実験期間を提供した。

【0101】

これらの試料を、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して視覚的に評価し、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。ｐＨも測定した。結果は次の通りであった：
（ｉ）７２時間後の視覚的評価

【0102】

【表18】

（ｉｉ）約２４時間および７２時間の期間後のｐＨ結果および視覚的評価の比較

【0103】

【表19-1】

【0104】

【表19-2】

【0105】

結論
全７２時間の実験期間後、少なくとも２．３モル当量のＤＬ−乳酸が製剤において使用される場合、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の５および５．５ｍｇ／ｍｌの溶液濃度を使用して、透明な溶液が実現可能であると結論付けることができる。透明な溶液は、２．５モル当量超のＤＬ−乳酸が製剤において使用される場合、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３ｍｇ／ｍｌの溶液濃度を使用しても実現可能である。試料１４および１５についての上記の結果は、それぞれ３．６および３．７モル当量のＤＬ−乳酸を用いて、６ｍｇ／ｍｌおよび６．５ｍｇ／ｍｌ両方の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の溶液濃度で透明な溶液が実現可能であることを示している。試料１４および１５についてのこれらの結果は、試料１２および１３についての結果と比較すると、透明および不透明な溶液の両方が生じ得る準安定領域がおそらく存在するという事実を反映している。

【0106】

４． ６．８モル当量のオルトリン酸を用いる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３ｍｇ／ｍｌの水性製剤に関する調査
手順
約３３．３ｍＭのオルトリン酸水溶液を、次の通りに調製した。０．３２５６９ｇのオルトリン酸を約８０ｍＬの灌注用水に分注した。これを、灌注用水を使用して、メスフラスコ中１００ｍＬ体積にし、ｐＨを１．９２として記録した。

【0107】

３ｍｇ／ｍＬ濃度の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が望ましく、これは、９７．１％の薬効を考慮しなくてはならなかった。

【0108】

１０ｍＬのスケールが確定し、したがって、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の標的重量は３０．９ｍｇであった。ＡＰＩの３つの試料は、各２０ｍＬのバイアル中、下記の重量を使用して調製した：

【0109】

【表20】

【0110】

上記で調製した１０ｍＬのオルトリン酸緩衝液を、エアーディスプレイスメントピペットを使用して各バイアルに分注した。バイアルを、圧着したキャップでそれぞれ閉鎖し、保護フィルムで密閉した。

【0111】

試料を、室温のローラーベッド上に約１９時間置いた。

【0112】

これらの試料を、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して視覚的に評価し、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。ｐＨも測定した。結果は次の通りであった：

【0113】

【表21】

【0114】

希釈
透明で粒子のない溶液が上記の方法によって取得されたが、各試料のｐＨは、３から４．５までのｐＨが好ましい静脈内投与に好ましいとするには低すぎる。

【0115】

したがって、３つの試料を、それぞれ０．５ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬおよび０．０５ｍｇ／ｍＬに希釈して、ｐＨが静脈内投与に適切なｐＨまで増大するか否か同定した。希釈した試料を、平衡に到達するためにローラーベッド上に終夜置いた。ｐＨも測定した。試料のｐＨは、次の通りであった：
０．５ｍｇ／ｍＬ

【0116】

【表22】

０．１ｍｇ／ｍＬ

【0117】

【表23】

０．０５ｍｇ／ｍＬ

【0118】

【表24】

【0119】

試料のそれぞれを、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して視覚的に評価し、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。各試料は、視覚的に透明な溶液であることが観察された。

【0120】

結論
結果は、６．８モル当量のオルトリン酸を用いて１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の透明で粒子のない３ｍｇ／ｍｌの水溶液製剤を製剤化することが可能であることを示す。しかしながら、この製剤またはその再構成した製剤のｐＨは、静脈内投与には適切でなく、したがって、静脈内投与に適切な溶液ｐＨを実現するためには、その後０．５ｍｇ／ｍＬ未満に希釈しなくてはならないであろう。

【0121】

これらの結果を、上記の乳酸製剤について取得された結果と比較すると、実現可能なｐＨおよび１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素濃度は、オルトリン酸を使用した場合よりも低い。したがって、乳酸は、概して、オルトリン酸よりも、本発明による１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の静脈内投与のための水溶液製剤の調製に適切である。

【0122】

５．酢酸を用いる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３ｍｇ／ｍｌ、４ｍｇ／ｍｌおよび５ｍｇ／ｍｌの水性製剤に関する調査
手順
３３．３ｍＭの酢酸溶液を調製するために、０．２０７１ｇの氷酢酸を２５０ｍＬのガラスビーカーに分注し、およそ８０ｍＬのＷＦＩ（灌注用水）を添加した。

【0123】

０．０１３８ｇの酢酸ナトリウム三水和物を添加し、溶液に溶解した。溶液を、ＷＦＩを使用して、メスフラスコ中１００ｍＬ体積にし、ｐＨを３．３５として記録した。

【0124】

３つの濃度のＡＰＩ（３、４および５ｍｇ／ｍＬ）が望ましく、これらは９７．１％のＡＰＩ効能を考慮して補正しなくてはならなかった。ＡＰＩ重量は、下記の計算に従って決定した。
・ ３０ｍｇ活性は、３０．９ｍｇの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素である
・ ４０ｍｇ活性は、４１．２ｍｇの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素である
・ ５０ｍｇ活性は、５１．４９ｍｇの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素である

【0125】

下記の重量を、２０ｍＬのガラスバイアルに分注した：

【0126】

【表25】

【0127】

上記で調製した１０ｍＬの酢酸緩衝液を、秤量した試料のそれぞれに導入した。バイアルを、圧着したキャップでそれぞれ閉鎖し、保護フィルムで密閉した。

【0128】

試料を、室温のローラーベッド上に置き、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して視覚的に評価し、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。視覚的分析は、２４時間、４８時間、７２時間および６日間の期間で行った。

【0129】

結果
これらの２４時間、４８時間、７２時間および６日間の期間のいずれの後にも、試料は透明な溶液を実現しなかった。

【0130】

試料のｐＨを、次の通りに評価した：
（ａ）４８時間後にｐＨ確認
緩衝液初期ｐＨ＝３．３５
（ｉ）３ｍｇ／ｍＬの試料に関して

【0131】

【表26】

（ｉｉ）４ｍｇ／ｍＬの試料に関して

【0132】

【表27】

（ｉｉｉ）５ｍｇ／ｍＬの試料に関して

【0133】

【表28】

（ｂ）６日後にｐＨ確認
（ｉ）３ｍｇ／ｍＬの試料に関して

【0134】

【表29】

（ｉｉ）４ｍｇ／ｍＬの試料に関して

【0135】

【表30】

（ｉｉｉ）５ｍｇ／ｍＬの試料に関して

【0136】

【表31】

【0137】

結論
結果は、３、４および５ｍｇ／ｍｌの濃度において、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素が、３３．３ｍＭの酢酸を使用して透明な溶液を生成しないことを示す。使用した３ｍｇ／ｍｌの水性製剤は、約６．８モル当量の酢酸を含有していた。使用した４ｍｇ／ｍｌの水性製剤は、約５．１モル当量の酢酸を含有していた。使用した５ｍｇ／ｍｌの水性製剤は、約４．１モル当量の酢酸を含有していた。

【0138】

６．オルトリン酸を用いる１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３および３．５ｍｇ／ｍｌの水性製剤に関する調査
３３．３ｍＭのオルトリン酸水溶液を、次の通りに調製した。０．３２７６７ｇのオルトリン酸を約７５ｍＬの灌注用水に分注した。これを、メスフラスコ中、灌注用水を使用して１００ｍＬ体積にし、ｐＨを１．９４として記録した。

【0139】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の３および３．５ｍｇ／ｍＬの製剤が望ましく、これは、９７．１％の薬効を考慮しなくてはならなかった。

【0140】

使用した３ｍｇ／ｍｌの水性製剤は、約６．８モル当量のオルトリン酸を含有していた。使用した３．５ｍｇ／ｍｌの水性製剤は、約５．９モル当量のオルトリン酸を含有していた。

【0141】

５ｍＬのスケールが確定し、したがって、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の標的重量は、３ｍｇ／ｍＬの製剤については１５．５ｍｇ、３．５ｍｇ／ｍＬの製剤については１８．０ｍｇであった。３つの試料を、各製剤について、各２０ｍＬのバイアル中、下記の重量を使用して調製した：

【0142】

【表32】

【0143】

上記で調製した５ｍＬのオルトリン酸緩衝液を、エアーディスプレイスメントピペットを使用して各バイアルに分注した。バイアルを、圧着したキャップでそれぞれ閉鎖し、保護フィルムで密閉した。

【0144】

試料を、室温のローラーベッド上に１５時間置いた。

【0145】

これらの試料を、ヨーロッパ薬局方２．９．２０（上記）において記述されている通り、ライトボックスを使用して視覚的に評価し、黒色および白色背景に対して試料を検査した。試料を、狭い（Ｔｙｎｄａｌｌ）ビーム光源を使用する照明によっても試験し、次いで、溶解されていない固体粒子を同定するために、光ビームに垂直の方向から目視検査した。すべての溶液は、視覚的に透明であることが観察された。ｐＨも測定した。

【0146】

結果は次の通りであった（注意：３３．３ｍＭのオルトリン酸の新しいｐＨは、ｐＨ＝１．９４であった）。
３ｍｇ／ｍＬ

【0147】

【表33】

３．５ｍｇ／ｍＬ

【0148】

【表34】

【0149】

結論
結果は、５．９モル当量のオルトリン酸を用いて１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の透明で粒子のない３．０または３．５ｍｇ／ｍＬの水溶液製剤を製剤化することが可能であることを示す。

【0150】

しかしながら、ｐＨ読み取りは、これらの製剤の直接静脈内または非経口投与を可能にするのに適切なｐＨを提供するためには、希釈が必要とされるであろうことを実証している。

【0151】

これらの結果を、上記の乳酸製剤について取得された結果と比較すると、実現可能なｐＨおよび１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素濃度は、オルトリン酸を使用した場合よりも低い。したがって、乳酸は、静脈内または非経口投与に適切な、１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の透明で粒子のない水溶液製剤の調製に好ましい。

【0152】

７． １−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩の結晶性形態の特徴付け
ＰＸＲＤ分析
粉末Ｘ線回折（ＰＸＲＤ：ｐｏｗｄｅｒ Ｘ−ｒａｙ ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ）分析は、銅放射線（波長：１．５４０６Å）を使用するＢｒｕｋｅｒ Ｄ４（商標）回折計で行った。管電圧およびアンペア数を、それぞれ３５ｋＶおよび４０ｍＡに設定した。使用した発散スリットはｖ６であり、散乱スリットは０．４９９ｍｍに設定した。可変受光スリットを使用した。回折された放射線は、Ｖａｎｔｅｃ検出器によって検出した。２．０から５５°２θまでの５．４°／分（０．２秒／０．０１８°ステップ）におけるθ−２θ連続走査を使用した。コランダム標準を分析して、機器配列を確認した。データを収集し、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＸＳソフトウェアを使用して分析した。試料は、それらをシリコンウェハ上に置くことによって調製した。ＤＩＦＦＲＡＣ．ＥＶＡ Ｖ３．１ソフトウェアを使用して、ＰＸＲＤスペクトルを視覚化し、評価した。ＰＸＲＤデータファイル（．ｒａｗ）は、ピーク探索前には処理しなかった。概して、１．３の閾値および０．３の幅値を使用して、予備的ピーク割り当てをした。自動割り当ての出力を視覚的に確認して、必要に応じて手動で為された妥当性および調整を確実にした。加えて、適切ならば、ピークをスペクトル内に手動で割り当てた。マウンティングメディウムに関係する２８．１°（２θ）におけるピークを、手動でリストから除去した。

【0153】

本明細書において報告されている測定に使用されるＢｒｕｋｅｒ機器でのブラッグ−ブレンターノ型幾何学を使用するＸ線回折測定を実施するために、試料を、典型的には、フラットシリコンプレートに置く。試料粉末をスライドガラスまたは同等物によって圧迫して、ランダム面および適正な試料高さを確実にする。次いで、試料ホルダーを機器に入れる。入射Ｘ線ビームを、最初にホルダーの平面に対して小角度で試料に向け、次いで、入射ビームとホルダーの平面との間の角度を連続的に増大させる円弧を介して移動させる。そのようなＸ線粉末分析に関連する測定差異は、（ａ）試料調製における誤差（例えば、試料高さ）、（ｂ）機器誤差（例えば、フラット試料誤差）、（ｃ）較正誤差、（ｄ）オペレータ誤差（ピーク場所を決定する際に存在する誤差を含む）、および（ｅ）材料の性質（例えば、好ましい配向および透明度誤差）を含む様々な要因により生じる。較正誤差および試料高さ誤差は、多くの場合、同じ方向へのすべてのピークのシフトをもたらす。フラットホルダーを使用する際の試料高さにおける小さな差異は、ＰＸＲＤピーク位置における大きな変位につながることになる。系統的な研究は、典型的なブラッグ−ブレンターノ型配置において株式会社島津製作所ＸＲＤ−６０００を使用して、１ｍｍの試料高さ差異が１°（２θ）の高さのピークシフトにつながることを示した（Ｃｈｅｎら、Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ、２００１；２６，６３）。これらのシフトは、Ｘ線回折図形から同定することができ、シフトを補償する（系統的な補正因子をすべてのピーク位置値に適用する）または機器を再較正することによって解消することができる。上記で言及した通り、系統的な補正因子を適用してピーク位置を一致させることにより、種々のマシンからの測定値を矯正することが可能である。概して、この補正因子は、Ｂｒｕｋｅｒにより測定されたピーク位置を予測されるピーク位置と一致させることになり、０から０．２°（２θ）までの範囲内であってよい。

【0154】

実施例４、調製Ａの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩の結晶性形態のＰＸＲＤパターンを図１に提供し、銅Ｋα（ＣｕＫα）線を用いてＢｒｕｋｅｒ Ｄ４回折計で測定された通りの°（２θ）（＋／−０．２°（２θ））および（２．５％以上の）相対強度の観点から表現される下記のピーク一覧によって特徴付ける：

【0155】

【表35】

【0156】

１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素Ｌ−乳酸塩のこの結晶性形態は、約６．５、１５．９、２０．９、２２．１および２３．１°（２θ）（＋／−０．２°（２θ））において特徴的なピークを有することにより、この塩の他の公知の（半結晶性）形態から区別される。

【0157】

７．本発明の凍結乾燥固体製剤の化学的安定性
５０ｍＬの透明バイアル中の、実施例２の方法に従って調製した凍結乾燥固体製剤の試料を、２５℃／６０％相対湿度（ＲＨ）および４０℃／７５％ＲＨで貯蔵後の化学分解について、様々な異なる時点において分析した。数種の試料を各条件について評価して、選択された時点における代表的結果を可能にした。

【0158】

４０℃／７５％ＲＨの試料を６カ月後に試験した。

【0159】

２５℃／６０％ＲＨの試料を、６カ月、１２カ月、２４カ月および３６カ月後に試験した。

【0160】

試験期間中のあらゆる分解を測定するために、下記の方法論を使用する高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ：Ｈｉｇｈ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）を使用して、試料を化学的純度について試験した。

【0161】

ＨＰＬＣ方法
ＨＰＬＣ方法において使用するための溶液、試料および標準は、以下の通りに調製する：
・ 参照標準：公知の効能値を持つ１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素。
・ 希釈剤：アセトニトリル／水（１：１ｖ／ｖ）。
・ 移動相Ａ：水酸化アンモニウム水溶液でｐＨが９．８に調整された１０ｍＭ重炭酸アンモニウム緩衝溶液
・ 移動相Ｂ：アセトニトリル
・ 試料溶媒：３ｍＬの０．１Ｎ塩酸水溶液を１０００ｍＬのメスフラスコに添加し、希釈剤（アセトニトリル／水、１：１ｖ／ｖ）を用いて設定された体積に希釈する。よく混合する。
注記：より大きいまたはより小さい体積の溶液は、適切な比の成分を使用して調製され得る。

【0162】

標準およびチェック標準調製物：
・ 試料溶媒中の約２ｍｇ／ｍＬ（＋／−１０％）の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素参照標準の２つの溶液を正確に調製し、両方の濃度を正確に記録する。これらが標準およびチェック標準溶液である。希釈剤を使用して、これらの溶液を２マイクログラム／ｍＬ前後の１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の濃度に正確に希釈することにより、標準およびチェック標準調製物を生成する。

【0163】

感受性溶液：
・ 希釈剤を使用し、標準調製物を、およそ０．０６マイクログラム／ｍＬの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素の濃度に正確に希釈する。

【0164】

試料調製：
・ ２つの凍結乾燥固体製剤バイアルの１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素（実施例２の方法に従って調製したもの）は、各バイアルに２０ｍＬの水を添加し、バイアルを振とうして固体を溶解し、泡が消失するまで待つことによって、再構成する。溶液を１０００ｍＬのメスフラスコに移す。各バイアルを希釈剤で少なくとも２回すすぎ、洗液をメスフラスコに移す。希釈剤を用いて設定された体積に希釈する。

【0165】

クロマトグラフィー条件：
・ 液体クロマトグラフィーシステム−例えば、Ｗａｔｅｒｓ２６９５（商標）またはＡｇｉｌｅｎｔ１１００（商標）マシン
・ カラム：Ｗａｔｅｒｓ Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８（商標）、１５ｃｍ×４．６ｍｍ、３．５μｍまたは同等物
・ カラム温度：４０℃
・ 注入体積：２０μＬ
・ 流速：１．０ｍＬ／分
・ 検出：３０３ｎｍのＵＶ
・ 実行時間：６０分
・ 移動相Ａ
・ 移動相Ｂ
・ 線形勾配表：

【0166】

【表36】

【0167】

注釈
安定なベースラインが取得されるまで移動相Ｂをカラムに送り込むことにより、ＨＰＬＣマシンを準備する（これには通常３０分前後かかる）。

【0168】

注入シーケンスを実行する前に、移動相Ａでクロマトグラフィーシステムを再平衡化する（通常１０〜１５分）。

【0169】

試料を実行する前に、上記のクロマトグラフィー条件を使用して、システムが、ブランク希釈剤、感受性溶液および標準調製物を注入することによって使用するために適切であることを確実にする。

【0170】

初期ＨＰＬＣ設定時、またはシステムに対する何らかの重大な変更後には、下記の基準を満足しなければならない。システム適合性を試験する前に、少なくとも１つのコンディショニングブランクを注入することが推奨される。

【0171】

【表37】

【0172】

上記のクロマトグラフィー条件に従って、チェック標準調製物を注入する。このチェック標準調製物の応答係数（標準の面積、標準重量、希釈係数および純度係数から算出したもの）は、標準調製物の±５％以内でなくてはならない。

【0173】

システム適合性が実証された後、ブランク溶液、標準調製物および調製された試験試料を注入し、続いて、上記のクロマトグラフィー条件に従って、標準調製物を注入する。標準調製物注入間に６つ以下の試験試料を注入することが推奨される。各注入（標準および試料）について、各クロマトグラムにおける１−（４−｛［４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル］カルボニル｝フェニル）−３−［４−（４，６−ジモルホリン−４−イル−１，３，５−トリアジン−２−イル）フェニル］尿素ピークの保持時間および面積を測定する。各試料注入について、ブランク注入では現れない、試料注入において存在するあらゆるピークの保持時間およびピーク面積も測定する。勾配アーチファクトが存在しても統合しない。ブランク注入クロマトグラムを試料クロマトグラムと比較して、試料中のどのピークがブランクおよび勾配アーチファクトのピークと関係しているかを決定する。％分解物を算出し、０．０５％以上の個々の分解物ピークを報告する。未知の分解物は、それらの相対保持時間で個々に報告すべきである。公知の分解物は、名称で個々に報告すべきである。

【0174】

結果を以下の表にまとめる。

【0175】

略語一覧
・ ＮＭＴ＝以下
・ ＮＲ＝報告されず
・ ＲＲＴ＝相対保持時間
・ すべての％はｗ／ｗである
分解物１

【0176】

【化2】

分解物２

【0177】

【化3】

分解物３、４、５および６
これらはそれぞれ、ＲＲＴのみによって特徴付けられた。

【0178】

【表38】

【0179】

【表39】

【0180】

結論
結果は、５０ｍＬの透明バイアル中の、実施例２の方法に従って調製した凍結乾燥固体製剤の試料が、２５℃／６０％ＲＨでは少なくとも３６カ月、４０℃／７５％ＲＨでは少なくとも６カ月にわたって化学的に安定であることを示す。

【符号の説明】

【0181】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】