特許 6440981 浄化処理剤及び浄化処理方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6440981

(24)【登録日】2018年11月30日

(45)【発行日】2018年12月19日

(54)【発明の名称】浄化処理剤及び浄化処理方法

(51)【国際特許分類】

   B09C 1/10 20060101AFI20181210BHJP

   C02F 3/34 20060101ALI20181210BHJP

   C02F 3/00 20060101ALI20181210BHJP

   A62D 3/02 20070101ALI20181210BHJP

   A62D 101/22 20070101ALN20181210BHJP

【ＦＩ】

   B09C1/10ZAB

   C02F3/34 Z

   C02F3/00 D

   A62D3/02

   A62D101:22

【請求項の数】7

【全頁数】13

(21)【出願番号】特願2014-145554(P2014-145554)

(22)【出願日】2014年7月16日

(65)【公開番号】特開2016-19960(P2016-19960A)

(43)【公開日】2016年2月4日

【審査請求日】2017年6月2日

(73)【特許権者】

【識別番号】506347517

【氏名又は名称】ＤＯＷＡエコシステム株式会社

(73)【特許権者】

【識別番号】000006127

【氏名又は名称】森永乳業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100091362

【弁理士】

【氏名又は名称】阿仁屋 節雄

(74)【代理人】

【識別番号】100105256

【弁理士】

【氏名又は名称】清野 仁

(74)【代理人】

【識別番号】100161034

【弁理士】

【氏名又は名称】奥山 知洋

(74)【代理人】

【識別番号】100156834

【弁理士】

【氏名又は名称】橋村 一誠

(72)【発明者】

【氏名】横山 圭一

(72)【発明者】

【氏名】中田 創

(72)【発明者】

【氏名】田辺 宏至

(72)【発明者】

【氏名】小室 昭

(72)【発明者】

【氏名】齋藤 仁志

(72)【発明者】

【氏名】越智 浩

【審査官】 上坊寺 宏枝

(56)【参考文献】

【文献】 特開平０８−０６６６９８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００２−１９２１８７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１２−１８３５２６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１０−００５５７０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表昭５５−５００９７６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１６−０１３５２７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０００−２３２８７６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平１０−３１３８５３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１３−５３４８６１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００８−２７２５３０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００５−３０５３２１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００４／０７８３７５（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｂ０９Ｂ １／１０−５／００

Ｂ０９Ｃ １／００−１／１０

Ｃ０２Ｆ ３／００、３／２８−３／３４

Ｃ０９Ｋ １７／００−１７／５２

Ａ６２Ｄ ３／０２

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物と、ホエイ蛋白質及び／又はホエイ画分とを含むことを特徴とする土壌及び／又は地下水に含まれる有機塩素化合物の浄化処理剤。

【請求項2】

前記培養物が培養菌体を除去したものである請求項１に記載の浄化処理剤。

【請求項3】

前記培養物が固形分量で５〜４０質量％含有されている請求項１又は２に記載の浄化処理剤。

【請求項4】

さらに、リン及びカリウムを含む請求項１〜３のいずれか一項に記載の浄化処理剤。

【請求項5】

前記リンが５０〜４００ｐｐｍ、及び前記カリウムが１０〜１００ｐｐｍをそれぞれ含有する請求項４に記載の浄化処理剤。

【請求項6】

第１の浄化処理剤は、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物と、ホエイ蛋白質及び／又はホエイ画分とを含む土壌及び／又は地下水の浄化処理剤であり、
第２の浄化処理剤は、前記培養物が培養菌体を除去したものである前記第１の浄化処理剤であり、
第３の浄化処理剤は、前記培養物が固形分量で５〜４０質量％含有されている前記第１又は第２の浄化処理剤であり、
第４の浄化処理剤は、さらに、リン及びカリウムを含む前記第１〜第３のいずれか一項の浄化処理剤であり、
第５の浄化処理剤は、前記リンが５０〜４００ｐｐｍ、及び前記カリウムが１０〜１００ｐｐｍをそれぞれ含有する前記第４の浄化処理剤であるとき、
前記第１〜第５のいずれか一項に記載の浄化処理剤を用いて土壌及び／又は地下水の有機塩素化合物を浄化処理する方法。

【請求項7】

浄化処理が嫌気性バイオレメディエーションにより処理されるものである請求項６に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、嫌気性バイオレメディエーションによる土壌及び／又は地下水の浄化処理法に用いる浄化処理剤、及び当該浄化処理剤を用いて土壌及び／又は地下水の汚染物質を浄化処理する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

近年、有機塩素化合物に代表される有機ハロゲン化合物による土壌、地下水等の汚染が問題となっている。
このような有機ハロゲン化合物により汚染された土壌、地下水等の修復技術として、汚染地下水を汲み上げた後、その汲み上げた地下水に鉄粉等を投入することによる汚染物の吸着や、汚染された土壌に鉄粉を混ぜ、汚染物の吸除去を図る浄化処理方法がある。一方、先行技術文献１、２のように、微生物を活用して土壌、地下等に含まれる難分解性の有害物質を分解して汚染を除去するバイオレメディエーション（生物修復法）処理による浄化処理方法も提案されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0003】

【特許文献1】特開２００５−３０５３２１号公報

【特許文献2】国際公開第２００４／０７８３７５号パンフレット

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

嫌気性のバクテリアを用いたバイオレメディエーション処理は、省エネルギーであり、低コストでもある優れた浄化処理方法である。
しかしながら本発明者らの検討によれば、従来の技術に係る嫌気性バイオレメディエーション処理では、汚染物質の浄化に長時間を要するという問題点がある。例えば、従来の技術に係る嫌気性バイオレメディエーション処理によって、シス−１，２−ジクロロエチレンが分解されるまでには２〜６ヶ月間の時間を要する。

【0005】

本発明は、上述の状況の下で為されたものであり、その解決しようとする課題は、嫌気性バイオレメディエーション処理による土壌、地下水等の浄化期間を、短期間で行うことの出来る浄化処理剤を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0006】

上述の課題を解決する為、本発明者らが研究を行なった結果、嫌気性バイオレメディエーション処理による汚染された土壌、地下水等の浄化処理の際に、浄化処理剤へ、ビフィズス菌培養物や乳酸菌培養物を加えることで、汚染物質の中でも除去に長時間を要するシス−１，２−ジクロロエチレン（本発明において「ｃＤＣＥ」と記載する場合がある。）、トリクロロエチレン（本発明において「ＴＣＥ」と記載する場合がある。）、パークロロエチレン（本発明において「ＰＣＥ」と記載する場合がある。）等の有機塩素化合物による汚染物質の浄化期間を短縮出来るという知見を得た。さらに、当該浄化処理剤へ、リン・カリウムを添加することにより、前記浄化期間をさらに短縮出来るという知見を得て、本発明を完成したものである。

【0007】

即ち、上述の課題を解決するための本発明は、以下の第１〜第７の発明に記載されたものである。
第１の発明は、
ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物と、ホエイ蛋白質及び／又はホエイ画分とを含むことを特徴とする土壌及び／又は地下水に含まれる有機塩素化合物の浄化処理剤である。
第２の発明は、
前記培養物が培養菌体を除去したものである第１の発明に記載の浄化処理剤である。
第３の発明は、
前記培養物が固形分量で５〜４０質量％含有されている第１又は第２の発明に記載の浄化処理剤である。
第４の発明は、
さらに、リン及びカリウムを含む第１から第３のいずれかの発明に記載の浄化処理剤である。
第５の発明は、
前記リンが５０〜４００ｐｐｍ、及び前記カリウムが１０〜１００ｐｐｍをそれぞれ含有する第４の発明に記載の浄化処理剤である。

【0008】

第６の発明は、
第１の浄化処理剤は、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物と、ホエイ蛋白質及び／又はホエイ画分とを含む土壌及び／又は地下水の浄化処理剤であり、
第２の浄化処理剤は、前記培養物が培養菌体を除去したものである前記第１の浄化処理剤であり、
第３の浄化処理剤は、前記培養物が固形分量で５〜４０質量％含有されている前記第１又は第２の浄化処理剤であり、
第４の浄化処理剤は、さらに、リン及びカリウムを含む前記第１から第３のいずれか一項の浄化処理剤であり、
第５の浄化処理剤は、前記リンが５０〜４００ｐｐｍ、及び前記カリウムが１０〜１００ｐｐｍをそれぞれ含有する前記第４の浄化処理剤であるとき、
前記第１〜第５のいずれか一項に記載の浄化処理剤を用いて土壌及び／又は地下水の有機塩素化合物を浄化処理する方法である。
第７の発明は、
前記浄化処理が嫌気性バイオレメディエーションにより処理されるものである第６の発明に記載の方法である。

【発明の効果】

【0009】

本発明に係る浄化処理剤を、被処理対象である土壌、地下水中へ存在させることで、当該土壌、地下水中に含まれる塩素系汚染物質に対する嫌気性バイオレメディエーション処理による浄化期間を短縮することが出来る。

【図面の簡単な説明】

【0010】

【図1】実サイトにおける注入井戸配置例の模式的な平面図である。

【図2】注入井戸の模式的な断面図である。

【図3】薬液調製・注入装置例の模式的なブロック図である。

【図4】実施例２においてＴＣＥ濃度の分析結果をプロットしたグラフである。

【図5】実施例２においてｃＤＣＥ濃度の分析結果をプロットしたグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0011】

１．浄化処理剤
本発明に係る浄化処理剤は、土壌及び／又は地下水の浄化に用いられるものであって、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物を含むものである。
本発明の浄化処理剤の形態は特に限定されるものではなく、土壌及び／又は地下水に存在できる状態であれば、液体又は固体のいずれの形態も含まれるものである。
また、本発明の浄化処理剤は、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物に加えて、リン、及びカリウムを含有しても良く、さらに所望により、乳糖やホエイ（乳清）蛋白質、ホエイ蛋白質濃縮物、チーズホエイ、又はこれらを粉状化したホエイパウダー等も含有させることができるものである。
なお、本発明の浄化処理剤は、一定の濃度に濃縮又は乾燥化されたものとして調製することができ、浄化処理の際に、所定の濃度となるように希釈して使用することが可能である。
以下、本発明に係る浄化処理剤について、成分ごとに説明する。

【0012】

１）ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物
本発明の浄化処理剤に含まれる培養物に使用されるビフィズス菌や乳酸菌に特に制限はなく、通常、食品業界等で使用されるビフィズス菌や乳酸菌のいずれのものも好適に使用することができる。特に安全性に優れるとの理由から、ビフィズス菌として、ビフィドバクテリウム属細菌に属するビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス、ビフィドバクテリウム・アニマリス等が好ましい。また、乳酸菌として、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・ガッセリ、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ブルガリクス、ラクトバチルス・ヘルベティカス、エンテロコッカス・フェカリス、エンテロコッカス・フェシウム等が好ましい。これらのビフィズス菌及び乳酸菌からなる群から選択されるいずれか１種を用いてもよいし、又は２種以上を組み合わせて用いてもよい。

【0013】

本発明の浄化処理剤に含まれる培養物に使用される培地は、ビフィズス菌や乳酸菌の培養に用いられるような市販の培地であってよく、例えば、炭素源としてグルコース、ラクトース等を添加し、その他、脱脂粉乳、酵母エキス、肉エキス等や無機塩類等を添加した培地等が挙げられる。
当該培地中で、ビフィズス菌や乳酸菌は２５〜４５℃、２〜１２０時間の条件にて培養した後、必要に応じて固形物を除去し、デキストリン等の賦形剤を加えて乾燥することによって、本発明に係るビフィズス菌培養物粉末及び乳酸菌培養物粉末を得ることができる。

【0014】

当該ビフィズス菌培養物や乳酸菌培養物には、培地に添加されている各成分に加えて、ビフィズス菌や乳酸菌の生育の際に生ずる有機酸やビタミン類などの微量成分を追加して含有させることができる。
なお、本発明の浄化処理剤に用いられるビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物としては、一般に市販された培養品（市販品）をそのまま利用することも可能であり、例えば、森永乳業株式会社製の培養品であるＣＢＷ−３０が挙げられる。ＣＢＷ−３０は、黄白色粉末で、その水溶液はｐＨ５程度の黄色を帯びた透明物で、わずかに不溶物を含むものであり、特開平６−０４６８１１号公報の段落０００５、又は特開２００６−２６２７１３号公報の段落００２０の表２・実施例６にそれぞれ記載されたものとして、すでに利用可能となっているものである。
そして、本発明者らの検討によれば、本発明に係る浄化処理剤において、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物が、固形分量で５〜４０質量％含有されていることが好ましいことを判明した。

【0015】

２）リン、カリウム
本発明に係る浄化処理剤へは、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物を主たる成分とするとともに、これらに加えてリン及びカリウムを添加させることが可能である。
本発明の浄化処理剤にリン及びカリウムを添加する場合、浄化処理剤に対して外添比率で５０〜４００ｐｐｍのリン、１０〜１００ｐｐｍのカリウムを含有させることにより、土壌、及び／又は地下水中に含まれる塩素系汚染物質に対する嫌気性バイオレメディエーション処理による浄化期間をさらに短縮することが出来る。
本発明において添加されるリン源、カリウム源の好ましい例としては、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウム等が例示される。なお、リン源、カリウム源として、市販の植物用液体肥料を使用することも可能である。

【0016】

３）乳糖
本発明に係る浄化処理剤へは、ビフィズス菌培養物及び乳酸菌培養物からなる群から選択されるいずれかの培養物を主たる成分とするとともに、これらに加えてリン及びカリウムを添加させるほか、さらに乳糖を添加させることが可能である。
乳糖は、乳に含まれる糖質であり、チーズ製造時に分離されるホエイから蛋白質を除去し、濃縮・結晶化等を行って製造されるものである。構造的には、Ｄ−ガラクトースとＤ−グルコースがβ−１，４ガラクシド結合したものである。

【0017】

４）ホエイ（乳清）蛋白質、ホエイ画分
本発明に係る浄化処理剤へは、必要に応じて、ホエイ（乳清）蛋白質及び／又は乳からカゼイン等を除去したホエイ画分を添加させることが可能である。ホエイ（乳清）蛋白質とは、牛乳から乳蛋白の主成分であるカゼイン、脂肪、糖質、脂溶性ビタミンなどを取り除いた画分であり、一般的には、チーズ製造やカゼイン製造の過程で分離した後に残る黄緑色の水溶液中の蛋白質成分である。例えば、チーズ製造の際に得られるチーズホエイには、ホエイ蛋白質が固形分で６〜７質量％含まれており、乳糖が全固形中の７０質量％以上を占める。
したがって、本発明に添加されるホエイ蛋白質は、チーズ製造やカゼイン製造の段階で生じたホエイ画分（ホエイ蛋白質の他に乳糖等が含まれるもの）として添加しても良く、当該ホエイ画分を膜処理法等により濃縮したホエイ蛋白質濃縮物（ＷＰＣ）として添加することも可能である。なお、ホエイ画分には、β−ラクトグロブリン、α−ラクトアルブミン、免疫グロブリン、血清アルブミン、ラクトフェリンといった水溶性の蛋白質が１３％程度含まれ、ナトリウム、カルシウム、カリウム、リンなどの灰分が１０％程度、脂肪や水溶性ビタミンも微量含まれている。これら成分は、原料乳の組成、カードの種類、製造条件などにより若干異なる。
当該ホエイ画分を乾燥させて粉状化したものとして、ホエイパウダーが例示される。

【0018】

２．浄化処理剤を用いて土壌又は地下水の汚染物質を嫌気性バイオレメディエーションにより浄化処理する方法
以下、図面を参照しながら本発明に係る浄化処理剤を用いた、土壌又は地下水の汚染物質を嫌気性バイオレメディエーションにより浄化処理する方法の一例について説明する。
本発明におけるバイオレメディエーション（bioremediation）とは、微生物や菌類や植物、あるいはそれらの酵素を用いて、有害物質で汚染された自然環境（土壌や水質の汚染の状態）を、有害物質を含まない元の状態に戻す処理のことである。本発明においては、特に嫌気性下において処理される、バイオレメディエーションによる浄化処理方法が例示される。

【0019】

図１は、被処理対象の土壌又は地下水が存在する実サイト（例えば、１０ｍ×１０ｍ＝１００ｍ^２）の模式的な平面図である。
当該実サイトへ嫌気性バイオレメディエーションによる浄化処理を行う際は、例えば１．５〜１０ｍといった適宜な間隔をもって、注入井戸を設ける。例えば図１では、１０ｍ×１０ｍ＝１００ｍ^２の領域に３．４ｍ間隔で９本の注入井戸を設けた例である。

【0020】

図２は、上記注入井戸の模式的な断面図である。当該実サイトは、最上層が不透水層であり、当該不透水層の下層に透水層があり、当該透水層の下層に不透水層がある例である。注入井戸には薬液注入用のパイプを設け、最上層の不透水層、その下の透水層まで到達させる。当該薬液注入用のパイプが透水層を貫通している部分には細孔を設け、当該細孔を通じて薬液が透水層に注入される。

【0021】

図３は、上記薬液注入用のパイプへ浄化処理剤を供給する為の、浄化処理剤液調製・注入装置例の模式的なブロック図である。
貯水槽には水が貯水され、薬剤溶解槽と薬液調製槽とへ水を供給する。薬剤溶解槽には濃縮された浄化処理剤を投入し、貯水槽からの水に溶解、希釈させて薬液調製槽へ送る。当該薬剤溶解槽から送られた浄化処理剤は、貯水槽からの水によって所定濃度に希釈され、ポンプで加圧されて注入井戸に設けられたパイプ内へ圧送される。そして、上述したようにパイプ内へ圧送された薬液は、透水層に注入される。
なお、浄化処理剤は水等で５０〜３００倍程度に希釈して使用することが好ましい。

【実施例】

【0022】

以下、実施例を参照しながら、本発明を具体的に説明する。
本実施例においては、実験室での確認試験および実地による本試験について説明する。

【0023】

（実施例１）
［実験室での確認試験］
（１）土壌又は地下水試料
正確な評価を行うために、土壌、又は地下水の試料は、Ａサイト（帯水層深度５〜１１ｍの土壌および地下水）、Ｂサイト（帯水層深度１５〜２８ｍの土壌および地下水）、Ｃサイト（帯水層深度２〜９ｍの土壌および地下水）から採取したものを用いた。

【0024】

（２）浄化処理剤試料
２５質量％ビフィズス菌培養物、５質量％乳糖、６５質量％ホエイパウダー、及び５質量％ホエイ蛋白質濃縮物を含む浄化処理剤試料１〜４を準備した。なお、ビフィズス菌培養物は、森永乳業株式会社製ＣＢＷ−３０を用いた。ＣＢＷ−３０は、ヒト由来のビフィドバクテリウム属に属する微生物である、ビフィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium Longum ATCC BAA−999）を用いて、常法にて培養し、培養菌体を除去して製造されたものである。なお、Bifidobacterium Longum ATCC BAA−999は、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（住所：12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852, USA）から一般に入手することも可能である。

【0025】

また、試料１〜４と同様であるが、ホエイパウダーおよびホエイ蛋白濃縮物を含まない試料５（２５質量％ビフィズス菌培養物、及び７５質量％乳糖）、試料１〜４と同様であるが、ビフィズス菌培養物を含まない比較例試料（３０質量％乳糖、６５質量％ホエイパウダー、及び５質量％ホエイ蛋白濃縮物）を準備した。
ここで、試料３〜５及び比較例試料には、リン及びカリウムが含まれている。試料３については、１４質量％リン酸水素二カリウム及び６質量％リン酸三カリウムをそれぞれ含んでおり、試料４については、５質量％リン酸水素二カリウムを含んでいる。さらに、試料５については、５質量％リン酸水素二カリウムを含んでおり、比較例試料については、５質量％リン酸水素二カリウムを含んでいる。

【0026】

当該試料１〜５、比較例試料の配合比率を表１に示す。
また、試料２に係るホエイパウダー、ホエイタンパク質濃縮物、ビフィズス菌培養物、乳糖には、金属塩含有量の少ないものを選択して配合した（表中に^＊を付した。）。
なお、リン酸水素二カリウム、リン酸三カリウムについては、土壌、又は地下水の試料と浄化処理剤試料との混合物へ外添することを考慮し、当該混合物に対し外添する際の質量％で表記した。

【0027】

試料１〜５、比較例試料に係る脂肪、たんぱく質、炭水化物、灰分、及び水分の成分分析結果を表２に示す。
また、試料１〜５、比較例試料の無機成分（ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、リン、及び塩素）の含有量を表３に示す。
また、試料１〜５、比較例試料の各１０ｇを１Ｌ水溶液としたときのｐＨ値と、試料１〜５、比較例試料の各１ｇ中における全炭素量（ＴＯＣ）を表４に示す。

【0028】

【表1】

【表2】

【表3】

【表4】

【0029】

（３）試験方法
ＶＯＣｓ（揮発性有機化合物）の影響が少ないテフロン（登録商標）製の蓋および採水コックと、ガスパージ用コックとが付いた１Ｌガラス瓶に、Ａ〜Ｃサイト土壌（１００ｃｍ^３）と地下水試料とを合せて１Ｌ採取した。
当該Ａ〜Ｃサイトの試料を冷蔵して実験室へ移動し、以後の操作は窒素雰囲気下のグローブボックス内で行った。
Ａサイト試料（６個）には、試料１〜５、及び比較例試料をそれぞれ投入した。なお、比較例試料^＊として、０日目のＡサイトの比較例試料に、ｃＤＣＥを１ｍｇ／Ｌ添加した。また、Ｂサイト試料（４個）に、試料１〜４をそれぞれ投入した。さらに、Ｃサイト試料（４個）に、試料１〜４をそれぞれ投入した。
その際、浄化処理剤試料１Ｌ中における、ホエイパウダー、ホエイ蛋白濃縮物、ビフィズス菌培養物、乳糖の量の合計が０．５ｇとなるように添加し、リン、カリウムは外添として添加した。
試料投入後にガラス瓶を密栓し、試料を土壌地下水試料に溶解させた。
ガスパージ用コックより嫌気性ガスパージを行った後、Ａ，Ｂサイトの試料には市販試薬のＴＣＥ，ＰＣＥを添加し、Ｃサイトの試料には市販試薬のＴＣＥを添加した。
また、試料５、比較例試料を投入するＡサイト試料には、市販試薬のＴＣＥ，ＰＣＥを添加した。

【0030】

ガラス瓶を２３℃の恒温槽にて保管し、所定期間ごとに採水して、ＶＯＣｓ（ＴＣＥ，ｃＤＣＥ，ＰＣＥ）の定量分析を、１日から最長１２５日迄行った。このとき、採水は試験系内のヘッドスペースの変化を小さくするため、最小量で行った。また、採水時に空気が侵入しないよう、窒素ガスを入れて採取水をガラス瓶から押し出した。各サイトの試料のｐＨ値は常時、中性域になるようにｐＨ調整剤によって調整した。
当該ＶＯＣｓの定量分析結果を表５〜表１２に示す。

【0031】

表５は、Ａサイト試料におけるＴＣＥ量を、試料１〜５、比較例試料において１日から１５日迄、定量分析した測定結果である。
表６は、Ａサイト試料におけるｃＤＣＥ量を、試料１〜５、比較例試料において１日から４３日迄、定量分析した測定結果である。但し、比較例試料において１日から４３日迄、ｃＤＣＥが検出されなかった。そこで、０日目のＡサイト試料に市販試薬のｃＤＣＥを添加して４３日迄、定量分析を行った。その分析結果を表６の比較例試料^＊に示した。
表７は、Ａサイト試料におけるＰＣＥ量を、試料１〜５、比較例試料において１日から１５日迄、定量分析した測定結果である。
表８は、Ｂサイト試料におけるＴＣＥ量を、試料１〜４において１日から２１日迄、定量分析した測定結果である。

【0032】

表９は、Ｂサイト試料におけるｃＤＣＥ量を、試料１〜４において１日から１２５日迄、定量分析した測定結果である。
表１０は、Ｂサイト試料におけるＰＣＥ量を、試料１〜４において１日から２１日迄、定量分析した測定結果である。
表１１は、Ｃサイト試料におけるＴＣＥ量を、試料１〜４において１日から２１日迄、定量分析した測定結果である。
表１２は、Ｃサイト試料におけるｃＤＣＥ量を、試料１〜４において１日から６０日迄、定量分析した測定結果である。

【0033】

【表5】

【表6】

【表7】

【表8】

【表9】

【表10】

【表11】

【表12】

【0034】

（４）まとめ
表５、７、８、１０、１１から明らかなように、ビフィズス菌培養物を含む試料１〜４は、いずれもＴＣＥ、ＰＣＥを短期間で分解出来ることが判明した。このことから、試料１〜４は、いずれも嫌気性バイオレメディエーションに用いる浄化処理剤として優れていることが判明した。
また、乳糖は含まれるが、実質的にホエイ蛋白質を含まない試料５は、８日以降に、ＴＣＥ、ＰＣＥの分解が始まるが、嫌気性バイオレメディエーションに用いる浄化処理剤として優れていることが判明した。
一方、ビフィズス菌培養物を含まない比較例試料は、１５日程度ではＴＣＥ、ＰＣＥともほとんど分解出来ないことも判明した。

【0035】

表６、９、１２から明らかなように、上述したＴＣＥの分解（脱塩素）に伴い、ｃＤＣＥが生成してくる。試料１〜５は、いずれもこれらｃＤＣＥを短期間で分解出来ることが判明した。このことから、試料１〜５は、ｃＤＣＥに関しても、いずれも嫌気性バイオレメディエーションに用いる浄化処理剤として優れていることが判明した。
さらに、ビフィズス菌培養物を含む試料１〜５の中でも、カリウムやリンの含有量が高い試料３、４はｃＤＣＥの分解速度が、さらに早いことも判明した。
これに対し、ビフィズス菌培養物を含まない比較例試料は、４３日を経過してもＴＣＥの分解が進まず、ｃＤＣＥが検出されなかった。この為、上述したように、０日目のＡサイト試料に市販試薬のｃＤＣＥを添加して４３日迄、定量分析を行ったが、分解速度は遅かった。

【0036】

（実施例２）
［実地による本試験］
（１）試験方法
「発明を実施するための形態」欄の「２．浄化処理剤を存在させた土壌又は地下水の嫌気性バイオレメディエーションによる浄化処理方法」において説明した、図２に基づく注入井戸を２本掘削した。
当該２本の注入井戸の一方へ、前記実施例１に記載された試料１を、水にて１５０倍に希釈して注入した。他方の注入井戸の一方へ、実施例１の試料４を、水にて１５０倍に希釈して注入した。
浄化処理剤試料の注入前と、注入後は１ヶ月置きに地下水を採水し、ＶＯＣｓであるＴＣＥ濃度、ｃＤＣＥ濃度の定量分析を、６カ月迄行った。
当該定量分析結果を、図４、５に示す。ここで、図４、５は、縦軸にＴＣＥ濃度またはｃＤＣＥ濃度をとり、横軸に時間（経過日数）をとり、試料１の結果を−●−でプロットし、試料４の結果を−■−でプロットしたグラフである。

【0037】

（２）まとめ
図４から明らかなように、試料１及び試料４は、いずれもＴＣＥを短期間で分解していることが判明した。
次に、図５から明らかなように、上述したＴＣＥの分解（脱塩素）に伴い、ｃＤＣＥが生成してくることが明らかとなった。試料１及び試料４は、いずれもこれらｃＤＣＥを分解していることが判明した。そして、試料４は、試料１より速くｃＤＣＥを分解していることも判明した。

【0038】

以上の結果から、ビフィズス菌培養物を含む試料１及び試料４は、いずれも嫌気性バイオレメディエーションに用いる浄化処理剤として優れていることが、実地による本試験においても判明した。
試料１よりもカリウムやリンの含有量が高い試料４は、ｃＤＣＥの分解速度が３〜４倍速く、当該観点からはさらに好ましいことも判明した。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】