特許 6450192 トリアゾール架橋した、およびチオエーテル架橋したペプチドミメティック大環状化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6450192

(24)【登録日】2018年12月14日

(45)【発行日】2019年1月9日

(54)【発明の名称】トリアゾール架橋した、およびチオエーテル架橋したペプチドミメティック大環状化合物

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/00 20060101AFI20181220BHJP

   A61K 38/12 20060101ALI20181220BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20181220BHJP

【ＦＩ】

   C07K14/00ZNA

   A61K38/12

   A61P35/00

【請求項の数】21

【全頁数】154

(21)【出願番号】特願2014-557791(P2014-557791)

(86)(22)【出願日】2013年2月14日

(65)【公表番号】特表2015-508777(P2015-508777A)

(43)【公表日】2015年3月23日

(86)【国際出願番号】US2013026241

(87)【国際公開番号】WO2013123267

(87)【国際公開日】20130822

【審査請求日】2016年2月15日

(31)【優先権主張番号】61/599,362

(32)【優先日】2012年2月15日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/723,762

(32)【優先日】2012年11月7日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/599,365

(32)【優先日】2012年2月15日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/723,767

(32)【優先日】2012年11月7日

(33)【優先権主張国】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】509163754

【氏名又は名称】エイルロン セラピューティクス，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100140109

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 新次郎

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100106208

【弁理士】

【氏名又は名称】宮前 徹

(74)【代理人】

【識別番号】100120112

【弁理士】

【氏名又は名称】中西 基晴

(74)【代理人】

【識別番号】100122644

【弁理士】

【氏名又は名称】寺地 拓己

(72)【発明者】

【氏名】ゲラヴァイス，ヴァンサン

(72)【発明者】

【氏名】コンリー，クリストファー・アール

(72)【発明者】

【氏名】レンティーニ，スコット・ポール

【審査官】 小金井 悟

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１０／０３３６１７（ＷＯ，Ａ２）

【文献】 特表２０１０−５１９３１８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２００９／０３２６１９２（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 Chem. Commun. (Camb)，２０１１年 ９月 ７日，Vol.47, No.33，p.9396-9398

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｋ １／００−１９／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

配列番号：４５６と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドミメティック大環状化合物であって、該ペプチドミメティック大環状化合物はＭＤＭ２またはＭＤＭＸに結合し、該ペプチドミメティック大環状化合物が次式を有する、前記ペプチドミメティック大環状化合物：

【化1】

［式中：
それぞれのＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤは独立してアミノ酸であり；
それぞれのＥは独立してＡｌａ（アラニン）、Ｄ−Ａｌａ（Ｄ−アラニン）、Ａｉｂ（α−アミノイソ酪酸）、Ｓａｒ（Ｎ−メチルグリシン）、およびＳｅｒ（セリン）から選択されるアミノ酸であり；
それぞれのＲ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化2】

それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは独立して１〜１０００の整数であり；
ｗは独立して３〜１０００の整数であり；
ｕは１〜１０の整数であり；および
それぞれのｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数である］
または医薬的に許容できる塩。

【請求項2】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比してＭＤＭ２またはＭＤＭＸへの向上した結合親和性を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項3】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株に対する抗腫瘍有効性を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項4】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株におけるアポトーシスの誘導を示す、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項5】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍に対する抗腫瘍有効性を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項6】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍におけるアポトーシスの誘導を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項7】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した細胞透過性を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項8】

ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した可溶性を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項9】

［Ｄ］_ｖが−Ｌｅｕ_１−Ｔｈｒ_２−Ｐｈｅ_３である、請求項１〜８のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項10】

ｗが３〜１０である、請求項１〜９のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項11】

ｖが１〜１０である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項12】

配列番号：４５６と少なくとも９５％同一である、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項13】

ｘ＋ｙ＋ｚの和が２、３、または６である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項14】

ｕが１〜５の整数である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項15】

対象においてがんを処置に使用するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項16】

対象においてｐ５３および／またはＭＤＭ２および／またはＭＤＭＸの活性の調節に使用するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項17】

対象においてｐ５３およびＭＤＭ２の間の、および／またはｐ５３およびＭＤＭＸタンパク質の間の相互作用の拮抗に使用するための、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項18】

請求項１〜１４のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩を含有する医薬組成物。

【請求項19】

対象においてがんを処置するための、請求項１８の医薬組成物。

【請求項20】

式：

【化3】

［式中、ｖは２であり、ｗは３〜１０の整数であり、Ｘａａ_５はＧｌｕであり、それぞれのＸａａ_６〜Ｘａａ_１０は独立してアミノ酸である］を有する、請求項１に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【請求項21】

［Ｄ］_ｖがＬｅｕ_１−Ｔｈｒ_２−である、請求項２０に記載のペプチドミメティック大環状化合物または医薬的に許容できる塩。

【発明の詳細な説明】

【背景技術】

【0001】

[0001] ヒト転写因子タンパク質ｐ５３はＤＮＡ損傷および細胞ストレスに反応して細胞周期停止およびアポトーシスを誘導し、それにより細胞の悪性形質転換からの保護において重要な役割を果たしている。Ｅ３ユビキチンリガーゼＭＤＭ２（ＨＤＭ２としても知られている）は、ｐ５３のトランス活性化活性を中和する直接結合相互作用を通してｐ５３の機能を負に制御し、ｐ５３タンパク質の核からの搬出をもたらし、ｐ５３をユビキチン化−プロテアソーム経路による分解へと向ける。欠失、変異、またはＭＤＭ２の過剰発現のいずれかによるｐ５３活性の喪失は、ヒトの癌における最も一般的な欠陥である。野生型ｐ５３を発現する腫瘍は、活性なｐ５３を安定化する、またはその濃度を増大させる薬剤に弱い。この状況において、ＭＤＭ２の活性の阻害はｐ５３活性を回復させて癌細胞をインビトロおよびインビボでアポトーシスに対して再度感受性にするための検証されたアプローチとして現れてきた。ＭＤＭＸ（ＭＤＭ４）はより最近類似のｐ５３の負の制御因子として同定されており、研究はＭＤＭ２およびＭＤＭＸのｐ５３結合接触面の間の著しい構造上の相同性を明らかにしてきた。ｐ５３−ＭＤＭ２およびｐ５３−ＭＤＭＸのタンパク質間相互作用はｐ５３の同じ１５残基のアルファヘリックスのトランス活性化ドメインにより媒介されており、それはＭＤＭ２およびＭＤＭＸの表面上の疎水性の裂溝の中に挿入される。ｐ５３のこのドメイン内の３残基（Ｆ１９、Ｗ２３、およびＬ２６）は、ＭＤＭ２およびＭＤＭＸへの結合に必須である。

【0002】

[0002] ｐ５３、ＭＤＭ２および／またはＭＤＭＸに結合してその活性を調節することができる化合物に関するかなりの必要性が残っている。本明細書において、ｐ５３の活性を調節するｐ５３に基づくペプチドミメティック大環状化合物（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ ｍａｃｒｏｃｙｃｌｅｓ）を提供する。本明細書において、ｐ５３、ＭＤＭ２および／またはＭＤＭＸタンパク質間の相互作用を阻害するｐ５３に基づくペプチドミメティック大環状化合物も提供する。さらに、本明細書において、癌および他の過剰増殖性疾患が含まれるがこれらに限定されない疾患を処置するために用いることができるｐ５３に基づくペプチドミメティック大環状化合物を提供する。

【発明の概要】

【0003】

[0003] 本明細書において、ヒトｐ５３の一部に関連する安定に架橋したペプチド（“ｐ５３ペプチドミメティック大環状化合物”）を記載する。これらの架橋したペプチドは、一緒に分子内架橋を形成する少なくとも２つの修飾されたアミノ酸を含有し、それはｐ５３のＭＤＭ２への結合に、およびｐ５３のＭＤＭＸへの結合に重要であると考えられているｐ５３の一部のアルファヘリックス二次構造を安定化するのを助けることができる。従って、本明細書で記載される架橋したポリペプチドは、架橋していない対応するポリペプチドと対比して向上した生物学的活性を有することができる。そのｐ５３ペプチドミメティック大環状化合物は、ｐ５３のＭＤＭ２への、および／またはｐ５３のＭＤＭＸへの結合に干渉し、それにより機能するｐ５３を遊離させ、その破壊を阻害すると考えられている。本明細書で記載されるｐ５３ペプチドミメティック大環状化合物は、療法的に、例えばｐ５３の望ましくなく低いレベルもしくは低い活性を特徴とする癌および他の障害を処置するために、および／またはＭＤＭ２もしくはＭＤＭＸの活性の望ましくなく高いレベルを特徴とする癌および他の障害を処置するために用いることができる。そのｐ５３ペプチドミメティック大環状化合物は、不適切な細胞周期停止およびアポトーシスの病気、例えば神経変性および免疫不全に加えて、過剰な細胞生存および増殖の病気、例えば癌および自己免疫をもたらす、ｐ５３転写経路の制御の混乱と関係するあらゆる障害の処置のためにも有用であり得る。一部の態様において、そのｐ５３ペプチドミメティック大環状化合物はＭＤＭ２（例えばＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）受入番号：２２８９５２；ＧＩ：２２８９５２）および／またはＭＤＭＸ（ＭＤＭ４とも呼ばれる；ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）受入番号：８８７０２７９１；ＧＩ：８８７０２７９１）に結合する。

【0004】

[0004] １観点において、本明細書において、表４、表４ａ、表４ｂ、または表５中のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％、８０％、９０％、または９５％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドミメティック大環状化合物を提供する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、表６、表６ａ、表７、表７ａ、または表７ｂに示されるようなペプチドではない。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は表４から選択されるアミノ酸配列を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は表４ａから選択されるアミノ酸配列を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は表４ｂから選択されるアミノ酸配列を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は表５から選択されるアミノ酸配列を有する。

【0005】

[0005] あるいは、前記のペプチドミメティック大環状化合物のアミノ酸配列は上記のように選択され、かつさらにここでその大環状化合物には全炭素（ａｌｌ ｃａｒｂｏｎ）架橋もトリアゾールも含まれない。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はヘリックス、例えばα−ヘリックスを含む。他の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はα，α−ジ置換アミノ酸を含む。ペプチドミメティック大環状化合物は、少なくとも２つのアミノ酸のα−位を連結するクロスリンカーを含むことができる。前記の２つのアミノ酸の少なくとも１つはα，α−ジ置換アミノ酸であることができる。

【0006】

[0006] 一部の態様において、次式のペプチドミメティック大環状化合物が提供される：

【0007】

【化1】

【0008】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【0009】

【化2】

【0010】

、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_３−］であり；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0011】

【化3】

【0012】

；
Ｌ_１、Ｌ_２およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0013】

[0007] 一部の態様において、ｖおよびｗは１〜３０の整数である。一部の態様において、ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数である。

【0014】

[0008] 一部の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚの和は３または６である。一部の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚの和は３である。他の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚの和は６である。

【0015】

[0009] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸はアルギニン（Ｒ）ではなく、および／またはＥにより表される２番目のＣ末端アミノ酸はトレオニン（Ｔ）ではないという条件付きで特許請求される。例えば、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＣ末端アミノ酸は正に荷電した側鎖も極性非荷電側鎖も含まない。一部の態様において、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＣ末端アミノ酸は疎水性側鎖を含む。例えば、ｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＮ末端アミノ酸は疎水性側鎖、例えば大きい疎水性側鎖を含む。

【0016】

[0010] 一部の態様において、ｗは３〜１０００である。例えば、Ｅにより表される３番目のアミノ酸は大きい疎水性側鎖を含む。

【0017】

[0011] 次式のペプチドミメティック大環状化合物も提供される：

【0018】

【化4】

【0019】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２（配列番号：１）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0020】

【化5】

【0021】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0022】

[0012] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は次式を有する：

【0023】

【化6】

【0024】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２（配列番号：２）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0025】

【化7】

【0026】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0027】

[0013] 一部の態様において、式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物が提供される：

【0028】

【化8】

【0029】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２（配列番号：１）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0030】

【化9】

【0031】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_９は独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合によりＲ_ａおよび／またはＲ_ｂで置換されており；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0032】

[0014] 一部の態様において、式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物が提供される：

【0033】

【化10】

【0034】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２（配列番号：２）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0035】

【化11】

【0036】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_９は独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合によりＲ_ａおよび／またはＲ_ｂで置換されており；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0037】

[0015] 一部の態様において、表４、４ａ、または４ｂ中のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％同一であるアミノ酸配列を含む式（Ｉ）のペプチドミメティック大環状化合物が提供され、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は次式を有する：

【0038】

【化12】

【0039】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【0040】

【化13】

【0041】

、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_３−］であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0042】

【化14】

【0043】

；
Ｌ_１、Ｌ_２およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_９は独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合によりＲ_ａおよび／またはＲ_ｂで置換されており；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0044】

[0016] 一部の態様において、式ＩＩのペプチドミメティック大環状化合物が提供される：

【0045】

【化15】

【0046】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【0047】

【化16】

【0048】

、［−ＮＨ−Ｌ_４−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_４−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_４−］であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0049】

[0017] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸はアルギニン（Ｒ）ではなく、および／またはＥにより表される２番目のＣ末端アミノ酸はトレオニン（Ｔ）ではないという条件付きで特許請求される。例えば、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＣ末端アミノ酸は正に荷電した側鎖も極性非荷電側鎖も含まない。一部の態様において、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＣ末端アミノ酸は疎水性側鎖を含む。例えば、ｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＮ末端アミノ酸は疎水性側鎖、例えば大きい疎水性側鎖を含む。

【0050】

[0018] 一部の態様において、ｗは３〜１０００である。例えば、Ｅにより表される３番目のアミノ酸は大きい疎水性側鎖を含む。

【0051】

[0019] 次式のペプチドミメティック大環状化合物も提供される：

【0052】

【化17】

【0053】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２（配列番号：１）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0054】

[0020] 次式のペプチドミメティック大環状化合物も提供される：

【0055】

【化18】

【0056】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２（配列番号：２）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0057】

[0021] 一部の態様において、それぞれのＥは独立してＡｌａ（アラニン）、Ｄ−Ａｌａ（Ｄ−アラニン）、Ａｉｂ（α−アミノイソ酪酸）、Ｓａｒ（Ｎ−メチルグリシン）、およびＳｅｒ（セリン）から選択されるアミノ酸である。一部の態様において、［Ｄ］_ｖは−Ｌｅｕ_１−Ｔｈｒ_２である。

【0058】

[0022] 一部の態様において、ｗは３〜１０、例えば３〜６、３〜８、６〜８、または６〜１０の整数である。一部の態様において、ｗは３である。他の態様において、ｗは６である。一部の態様において、ｖは１〜１０、例えば２〜５の整数である。一部の態様において、ｖは２である。

【0059】

[0023] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比してＭＤＭ２またはＭＤＭＸへの向上した結合親和性を有する。他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して低減したＭＤＭＸ対ＭＤＭ２への結合親和性の比率を有する。さらに他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株に対する抗腫瘍有効性を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株におけるアポトーシスの誘導を示す。他の例において、請求項１のペプチドミメティック大環状化合物であって、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したｐ５３陽性対ｐ５３陰性または変異体腫瘍細胞株に関するインビトロ抗腫瘍有効性比率を有する。一部の例において、その向上したインビトロでの有効性比率は１〜２９、３０以上４９まで、または５０以上である。さらに他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍に対する抗腫瘍有効性を有する。一部の例において、その向上したインビボでの有効性比率は２９まで、３０以上４９まで、または５０以上である。さらに他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍におけるアポトーシスの誘導を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した細胞透過性を有する。他の場合において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した可溶性を有する。

【0060】

[0024] 一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログである。一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログであり、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した特性、例えば向上した結合親和性、向上した可溶性、向上した細胞有効性、向上した細胞透過性、向上したインビボもしくはインビトロ抗腫瘍有効性、または向上したアポトーシスの誘導を有する。

【0061】

[0025] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したＭＤＭ２またはＭＤＭＸに対する結合親和性を有する。他の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して低減したＭＤＭＸ対ＭＤＭ２に対する結合親和性の比率を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はＸａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した可溶性を有し、またはそのペプチドミメティック大環状化合物はＸａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した細胞有効性を有する。

【0062】

[0026] 一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログであり、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した生物学的活性、例えば向上した結合親和性、向上した可溶性、向上した細胞有効性、向上したヘリックス性、向上した細胞透過性、向上したインビボもしくはインビトロ抗腫瘍有効性、または向上したアポトーシスの誘導を有する。

【0063】

[0027] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、そのｐ５３−／−細胞株に対する結合親和性よりも少なくとも２倍、３倍、５倍、１０倍、２０倍、３０倍、５０倍、７０倍、または１００倍大きいｐ５３＋／＋細胞株に対する活性を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、そのｐ５３−／−細胞株に対する結合親和性よりも１〜２９倍、３０〜４９倍、または５０倍以上大きいｐ５３＋／＋細胞株に対する活性を有する。活性は、例えばＩＣ５０値として測定することができる。例えば、そのｐ５３＋／＋細胞株はＳＪＳＡ−１、ＲＫＯ、ＨＣＴ−１１６、またはＭＣＦ−７であり、ｐ５３−／−細胞株はＲＫＯ−Ｅ６またはＳＷ−４８０である。一部の態様において、そのペプチドは１μＭ未満のｐ５３＋／＋細胞株に対するＩＣ５０を有する。

【0064】

[0028] 一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログであり、そのペプチドミメティック大環状化合物はそのｐ５３−／−細胞株に対する結合親和性よりも少なくとも１０倍大きいｐ５３＋／＋細胞株に対する活性を有する。

【0065】

[0029] 加えて、対象にペプチドミメティック大環状化合物を投与することを含む、対象において癌を処置する方法が提供される。対象にペプチドミメティック大環状化合物を投与することを含む、対象においてｐ５３もしくはＭＤＭ２もしくはＭＤＭＸの活性を調節する方法、または対象にそのようなペプチドミメティック大環状化合物を投与することを含む、対象においてｐ５３ならびにＭＤＭ２および／またはＭＤＭＸタンパク質の間の相互作用に拮抗する方法も提供される。

【0066】

援用
[0030] 本明細書中で言及するすべての刊行物、特許および特許出願を、あたかもそれぞれの刊行物、特許、または特許出願を具体的かつ個々に援用すると示した場合と同じ程度まで本明細書に援用する。

【発明を実施するための形態】

【0067】

[0031] 本明細書で用いられる際、用語“大環状化合物（ｍａｃｒｏｃｙｃｌｅ）”は、少なくとも９個の共有結合した原子により形成されるリングまたは環が含まれる化学構造を有する分子を指す。

【0068】

[0032] 本明細書で用いられる際、用語“ペプチドミメティック大環状化合物”または“架橋したポリペプチド”は、複数のペプチド結合ならびに同じ分子内の第１の天然存在または非天然存在アミノ酸残基（またはアナログ）および第２の天然存在または非天然存在アミノ酸残基（またはアナログ）の間で大員環を形成する少なくとも１つの大員環形成リンカーにより連結された複数のアミノ酸残基を含む化合物を指す。ペプチドミメティック大環状化合物には、大員環形成リンカーが第１アミノ酸残基（またはアナログ）のα炭素を第２アミノ酸残基（またはアナログ）のα炭素に連結している態様が含まれる。そのペプチドミメティック大環状化合物には場合により１個以上のアミノ酸残基および/またはアミノ酸アナログ残基間に１個以上の非ペプチド結合が含まれ、場合により大員環を形成するいずれかに加えて１個以上の非天然存在アミノ酸残基またはアミノ酸アナログ残基が含まれる。“対応する架橋していないポリペプチド”は、ペプチドミメティック大環状化合物の文脈において言及される場合、その大環状化合物と同じ長さの、その大環状化合物に対応する野生型配列の同等の天然アミノ酸を含むポリペプチドに関するものと理解される。

【0069】

[0033] 本明細書で用いられる際、用語“安定性”は、円二色性、ＮＭＲもしくは別の生物物理学的測定法により測定した際のペプチドミメティック大環状化合物による溶液中での定められた二次構造の維持、またはインビトロもしくはインビボでのタンパク質分解性の分解への抵抗性を指す。本発明で考慮される二次構造の限定ではない例は、α−ヘリックス、３_１０ヘリックス、β−ターン、およびβ−プリーツシート(β−ｐｌｅａｔｅｄ ｓｈｅｅｔ）である。

【0070】

[0034] 本明細書で用いられる際、用語“ヘリックス安定性”は、円二色性またはＮＭＲにより測定した際のペプチドミメティック大環状化合物によるαヘリックス構造の維持を指す。例えば、一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は、円二色性により決定した際のα−ヘリックス性において、対応する架橋していない大環状化合物と比較して少なくとも１．２５倍、１．５倍、１．７５倍または２倍の増大を示す。

【0071】

[0035] 用語“アミノ酸”は、アミノ基およびカルボキシル基の両方を含有する分子を指す。適切なアミノ酸には、限定ではなく、天然存在アミノ酸ならびに有機合成または他の代謝経路により調製された非天然存在アミノ酸のＤ−およびＬ−異性体両方が含まれる。アミノ酸という用語には、本明細書で用いられる際、限定ではなく、α−アミノ酸、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、およびアミノ酸アナログが含まれる。

【0072】

[0036] 用語“α−アミノ酸”は、α−炭素として指定される炭素に結合したアミノ基およびカルボキシル基の両方を含有する分子を指す。

【0073】

[0037] 用語“β−アミノ酸”は、アミノ基およびカルボキシル基両方をβ配置で含有する分子を指す。

【0074】

[0038] 用語“天然存在アミノ酸”は、天然において合成されるペプチド中に一般的にあり、１文字略号Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｃ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、ＹおよびＶにより知られる２０種類のアミノ酸のいずれか１つを指す。

【0075】

[0039] 下記の表は天然アミノ酸の特性の要約を示す。

【0076】

【表1】

【0077】

[0040] “疎水性アミノ酸”には、限定ではなく、小疎水性アミノ酸（ｓｍａｌｌ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ）および大疎水性アミノ酸（ｌａｒｇｅ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ）が含まれる。“小疎水性アミノ酸”は、グリシン、アラニン、プロリン、およびそのアナログである。“大疎水性アミノ酸”は、バリン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン、およびそのアナログである。“極性アミノ酸”は、セリン、トレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、チロシン、およびそのアナログである。“荷電アミノ酸”は、リジン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、およびそのアナログである。

【0078】

[0041] 用語“アミノ酸アナログ”は、構造的にアミノ酸に類似し、ペプチドミメティック大環状化合物の形成においてアミノ酸の代わりに使用することができる分子を指す。アミノ酸アナログには、限定ではなく、β−アミノ酸、およびアミノ基またはカルボキシル基が同様に反応性の基により置換されたアミノ酸（例えば、第一級アミンの第二級もしくは第三級アミンによる置換、またはカルボキシ基のエステルによる置換）が含まれる。

【0079】

[0042] 用語“非天然アミノ酸”は、天然において合成されるペプチド中に一般的にあり１文字略号Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｃ、Ｄ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、ＹおよびＶにより知られる２０種類のアミノ酸の１つではないアミノ酸を指す。非天然アミノ酸またはアミノ酸アナログには、限定ではなく、下記に従う構造が含まれる。

【0080】

【化19-1】

【0081】

【化19-2】

【0082】

【化19-3】

【0083】

【化19-4】

【0084】

[0043] アミノ酸アナログにはβ−アミノ酸アナログが含まれる。β−アミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：環状β−アミノ酸アナログ；β−アラニン；（Ｒ）−β−フェニルアラニン；（Ｒ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−３−酢酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（１−ナフチル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２，４−ジクロロフェニル）酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−クロロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−シアノフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−フルオロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−フリル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−メチルフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−ナフチル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−チエニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（２−トリフルオロメチルフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３，４−ジクロロフェニル）酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３，４−ジフルオロフェニル）酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−ベンゾチエニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−クロロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−シアノフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−フルオロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−メチルフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−ピリジル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−チエニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−ブロモフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−シアノフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−フルオロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−ヨードフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−メチルフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−ニトロフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−ピリジル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−４−ペンタフルオロ−フェニル酪酸；（Ｒ）−３−アミノ−５−ヘキセン酸；（Ｒ）−３−アミノ−５−ヘキシン酸；（Ｒ）−３−アミノ−５−フェニルペンタン酸；（Ｒ）−３−アミノ−６−フェニル−５−ヘキセン酸；（Ｓ）−１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリン−３−酢酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（１−ナフチル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２，４−ジクロロフェニル）酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−クロロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−シアノフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−フルオロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−フリル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−メチルフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−ナフチル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−チエニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（２−トリフルオロメチルフェニル）−酪酸；
（Ｓ）−３−アミノ−４−（３，４−ジクロロフェニル）酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３，４−ジフルオロフェニル）酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−ベンゾチエニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−クロロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−シアノフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−フルオロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−メチルフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−ピリジル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−チエニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（３−トリフルオロメチルフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−ブロモフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−クロロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−シアノフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−フルオロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−ヨードフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−メチルフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−ニトロフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−ピリジル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−（４−トリフルオロメチルフェニル）−酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−４−ペンタフルオロ−フェニル酪酸；（Ｓ）−３−アミノ−５−ヘキセン酸；（Ｓ）−３−アミノ−５−ヘキシン酸；（Ｓ）−３−アミノ−５−フェニルペンタン酸；（Ｓ）−３−アミノ−６−フェニル−５−ヘキセン酸；１，２，５，６−テトラヒドロピリジン−３−カルボン酸；１，２，５，６−テトラヒドロピリジン−４−カルボン酸；３−アミノ−３−（２−クロロフェニル）−プロピオン酸；３−アミノ−３−（２−チエニル）−プロピオン酸；３−アミノ−３−（３−ブロモフェニル）−プロピオン酸；３−アミノ−３−（４−クロロフェニル）−プロピオン酸；３−アミノ−３−（４−メトキシフェニル）−プロピオン酸；３−アミノ−４，４，４−トリフルオロ−酪酸；３−アミノアジピン酸；Ｄ−β−フェニルアラニン；β−ロイシン；Ｌ−β−ホモアラニン；Ｌ−β−ホモアスパラギン酸 γ−ベンジルエステル；Ｌ−β−ホモグルタミン酸 δ−ベンジルエステル；Ｌ−β−ホモイソロイシン；Ｌ−β−ホモロイシン；Ｌ−β−ホモメチオニン；Ｌ−β−ホモフェニルアラニン；Ｌ−β−ホモプロリン；Ｌ−β−ホモトリプトファン；Ｌ−β−ホモバリン；Ｌ−Ｎω−ベンジルオキシカルボニル−β−ホモリジン；Ｎω−Ｌ−β−ホモアルギニン；Ｏ−ベンジル−Ｌ−β−ホモヒドロキシプロリン；Ｏ−ベンジル−Ｌ−β−ホモセリン；Ｏ−ベンジル−Ｌ−β−ホモトレオニン；Ｏ−ベンジル−Ｌ−β−ホモチロシン；γ−トリチル−Ｌ−β−ホモアスパラギン；（Ｒ）−β−フェニルアラニン；Ｌ−β−ホモアスパラギン酸 γ−ｔ−ブチルエステル；Ｌ−β−ホモグルタミン酸 δ−ｔ−ブチルエステル；Ｌ−Ｎω−β−ホモリジン；Ｎδ−トリチル−Ｌ−β−ホモグルタミン；Ｎω−２，２，４，６，７−ペンタメチル−ジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル−Ｌ−β−ホモアルギニン；Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−β−ホモヒドロキシ−プロリン；Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−β−ホモセリン；Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−β−ホモトレオニン；Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−β−ホモチロシン；２−アミノシクロペンタンカルボン酸；および２−アミノシクロヘキサンカルボン酸。

【0085】

[0044] アミノ酸アナログには、アラニン、バリン、グリシンまたはロイシンのアナログが含まれる。アラニン、バリン、グリシン、およびロイシンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：α−メトキシグリシン；α−アリル−Ｌ−アラニン；α−アミノイソ酪酸；α−メチル−ロイシン；β−（１−ナフチル）−Ｄ−アラニン；β−（１−ナフチル）−Ｌ−アラニン；β−（２−ナフチル）−Ｄ−アラニン；β−（２−ナフチル）−Ｌ−アラニン；β−（２−ピリジル）−Ｄ−アラニン；β−（２−ピリジル）−Ｌ−アラニン；β−（２−チエニル）−Ｄ−アラニン；β−（２−チエニル）−Ｌ−アラニン；β−（３−ベンゾチエニル）−Ｄ−アラニン；β−（３−ベンゾチエニル）−Ｌ−アラニン；β−（３−ピリジル）−Ｄ−アラニン；β−（３−ピリジル）−Ｌ−アラニン；β−（４−ピリジル）−Ｄ−アラニン；β−（４−ピリジル）−Ｌ−アラニン；β−クロロ−Ｌ−アラニン；β−シアノ−Ｌ−アラニン；β−シクロヘキシル−Ｄ−アラニン；β−シクロヘキシル−Ｌ−アラニン；β−シクロペンテン−１−イル−アラニン；β−シクロペンチル−アラニン；β−シクロプロピル−Ｌ−Ａｌａ−ＯＨ・ジシクロヘキシルアンモニウム塩；β−ｔ−ブチル−Ｄ−アラニン；β−ｔ−ブチル−Ｌ−アラニン；γ−アミノ酪酸；Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸；２，４−ジニトロ−フェニルグリシン；２，５−ジヒドロ−Ｄ−フェニルグリシン；２−アミノ−４，４，４−トリフルオロ酪酸；２−フルオロ−フェニルグリシン；３−アミノ−４，４，４−トリフルオロ−酪酸；３−フルオロ−バリン；４，４，４−トリフルオロ−バリン；４，５−デヒドロ−Ｌ−ｌｅｕ−ＯＨ・ジシクロヘキシルアンモニウム塩；４−フルオロ−Ｄ−フェニルグリシン；４−フルオロ−Ｌ−フェニルグリシン；４−ヒドロキシ−Ｄ−フェニルグリシン；５，５，５−トリフルオロ−ロイシン；６−アミノヘキサン酸；シクロペンチル−Ｄ−Ｇｌｙ−ＯＨ・ジシクロヘキシルアンモニウム塩；シクロペンチル−Ｇｌｙ−ＯＨ・ジシクロヘキシルアンモニウム塩；Ｄ−α，β−ジアミノプロピオン酸；Ｄ−α−アミノ酪酸；Ｄ−α−ｔ−ブチルグリシン；Ｄ−（２−チエニル）グリシン；Ｄ−（３−チエニル）グリシン；Ｄ−２−アミノカプロン酸；Ｄ−２−インダニルグリシン；Ｄ−アリルグリシン・ジシクロヘキシルアンモニウム塩；Ｄ−シクロヘキシルグリシン；Ｄ−ノルバリン；Ｄ−フェニルグリシン；β−アミノ酪酸；β−アミノイソ酪酸；（２−ブロモフェニル）グリシン；（２−メトキシフェニル）グリシン；（２−メチルフェニル）グリシン；（２−チアゾイル）グリシン；（２−チエニル）グリシン；２−アミノ−３−（ジメチルアミノ）−プロピオン酸；Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸；Ｌ−α−アミノ酪酸；Ｌ−α−ｔ−ブチルグリシン；Ｌ−（３−チエニル）グリシン；Ｌ−２−アミノ−３−（ジメチルアミノ）−プロピオン酸；Ｌ−２−アミノカプロン酸 ジシクロヘキシル−アンモニウム塩；Ｌ−２−インダニルグリシン；Ｌ−アリルグリシン・ジシクロヘキシル アンモニウム塩；Ｌ−シクロヘキシルグリシン；Ｌ−フェニルグリシン；Ｌ−プロパルギルグリシン；Ｌ−ノルバリン；Ｎ−α−アミノメチル−Ｌ−アラニン；Ｄ−α，γ−ジアミノ酪酸；Ｌ−α，γ−ジアミノ酪酸；β−シクロプロピル−Ｌ−アラニン；（Ｎ−β−（２，４−ジニトロフェニル））−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸；（Ｎ−β−１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）エチル）−Ｄ−α，β−ジアミノプロピオン酸；（Ｎ−β−１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）エチル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸；（Ｎ−β−４−メチルトリチル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸；（Ｎ−β−アリルオキシカルボニル）−Ｌ−α，β−ジアミノプロピオン酸；（Ｎ−γ−１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）エチル）−Ｄ−α，γ−ジアミノ酪酸；（Ｎ−γ−１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）エチル）−Ｌ−α，γ−ジアミノ酪酸；（Ｎ−γ−４−メチルトリチル）−Ｄ−α，γ−ジアミノ酪酸；（Ｎ−γ−４−メチルトリチル）−Ｌ−α，γ−ジアミノ酪酸；（Ｎ−γ−アリルオキシカルボニル）−Ｌ−α，γ−ジアミノ酪酸；Ｄ−α，γ−ジアミノ酪酸；４，５−デヒドロ−Ｌ−ロイシン；シクロペンチル−Ｄ−Ｇｌｙ−ＯＨ；シクロペンチル−Ｇｌｙ−ＯＨ；Ｄ−アリルグリシン；Ｄ−ホモシクロヘキシルアラニン；Ｌ−１−ピレニルアラニン；Ｌ−２−アミノカプロン酸；Ｌ−アリルグリシン；Ｌ−ホモシクロヘキシルアラニン；およびＮ−（２−ヒドロキシ−４−メトキシ−Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−ＯＨ。

【0086】

[0045] アミノ酸アナログにはさらにアルギニンまたはリジンのアナログが含まれる。アルギニンおよびリジンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：シトルリン；Ｌ−２−アミノ−３−グアニジノプロピオン酸；Ｌ−２−アミノ−３−ウレイドプロピオン酸；Ｌ−シトルリン；Ｌｙｓ（Ｍｅ）_２−ＯＨ；Ｌｙｓ（Ｎ_３）−ＯＨ；Ｎδ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン；Ｎω−ニトロ−Ｄ−アルギニン；Ｎω−ニトロ−Ｌ−アルギニン；α−メチル−オルニチン；２，６−ジアミノヘプタン二酸；Ｌ−オルニチン；（Ｎδ−１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキサ−１−イリデン）エチル）−Ｄ−オルニチン；（Ｎδ−１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソ−シクロヘキサ−１−イリデン）エチル）−Ｌ−オルニチン；（Ｎδ−４−メチルトリチル）−Ｄ−オルニチン；（Ｎδ−４−メチルトリチル）−Ｌ−オルニチン；Ｄ−オルニチン；Ｌ−オルニチン；Ａｒｇ（Ｍｅ）（Ｐｂｆ）−ＯＨ；Ａｒｇ（Ｍｅ）_２−ＯＨ（非対称）；Ａｒｇ（Ｍｅ）_２−ＯＨ（対称）；Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ；Ｌｙｓ（Ｍｅ）_２−ＯＨ・ＨＣｌ；Ｌｙｓ（Ｍｅ_３）−ＯＨクロリド；Ｎω−ニトロ−Ｄ−アルギニン；およびＮω−ニトロ−Ｌ−アルギニン。

【0087】

[0046] アミノ酸アナログには、アスパラギン酸またはグルタミン酸のアナログが含まれる。アスパラギン酸およびグルタミン酸のアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：α−メチル−Ｄ−アスパラギン酸；α−メチル−グルタミン酸；α−メチル−Ｌ−アスパラギン酸；γ−メチレン−グルタミン酸；（Ｎ−γ−エチル）−Ｌ−グルタミン；［Ｎ−α−（４−アミノベンゾイル）］−Ｌ−グルタミン酸；２，６−ジアミノピメリン酸；Ｌ−α−アミノスベリン酸；Ｄ−２−アミノアジピン酸；Ｄ−α−アミノスベリン酸；α−アミノピメリン酸；イミノ二酢酸；Ｌ−２−アミノアジピン酸；トレオ−β−メチル−アスパラギン酸；γ−カルボキシ−Ｄ−グルタミン酸 γ，γ−ジ−ｔ−ブチルエステル；γ−カルボキシ−Ｌ−グルタミン酸 γ，γ−ジ−ｔ−ブチルエステル；Ｇｌｕ（ＯＡｌｌ）−ＯＨ；Ｌ−Ａｓｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ；およびピログルタミン酸。

【0088】

[0047] アミノ酸アナログには、システインおよびメチオニンのアナログが含まれる。システインおよびメチオニンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：Ｃｙｓ（ファルネシル）−ＯＨ、Ｃｙｓ（ファルネシル）−ＯＭｅ、α−メチル−メチオニン、Ｃｙｓ（２−ヒドロキシエチル）−ＯＨ、Ｃｙｓ（３−アミノプロピル）−ＯＨ、２−アミノ−４−（エチルチオ）酪酸、ブチオニン、ブチオニンスルホキシイミン、エチオニン、メチオニン メチルスルホニウムクロリド、セレノメチオニン、システイン酸、［２−（４−ピリジル）エチル］−ＤＬ−ペニシラミン、［２−（４−ピリジル）エチル］−Ｌ−システイン、４−メトキシベンジル−Ｄ−ペニシラミン、４−メトキシベンジル−Ｌ−ペニシラミン、４−メチルベンジル−Ｄ−ペニシラミン、４−メチルベンジル−Ｌ−ペニシラミン、ベンジル−Ｄ−システイン、ベンジル−Ｌ−システイン、ベンジル−ＤＬ−ホモシステイン、カルバモイル−Ｌ−システイン、カルボキシエチル−Ｌ−システイン、カルボキシメチル−Ｌ−システイン、ジフェニルメチル−Ｌ−システイン、エチル−Ｌ−システイン、メチル−Ｌ−システイン、ｔ−ブチル−Ｄ−システイン、トリチル−Ｌ−ホモシステイン、トリチル−Ｄ−ペニシラミン、シスタチオニン、ホモシスチン、Ｌ−ホモシスチン、（２−アミノエチル）−Ｌ−システイン、セレノ−Ｌ−シスチン、シスタチオニン、Ｃｙｓ（ＳｔＢｕ）−ＯＨ、およびアセトアミドメチル−Ｄ−ペニシラミン。

【0089】

[0048] アミノ酸アナログには、フェニルアラニンおよびチロシンのアナログが含まれる。フェニルアラニンおよびチロシンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれる：β−メチル−フェニルアラニン、β−ヒドロキシフェニルアラニン、α−メチル−３−メトキシ−ＤＬ−フェニルアラニン、α−メチル−Ｄ−フェニルアラニン、α−メチル−Ｌ−フェニルアラニン、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、２，４−ジクロロ−フェニルアラニン、２−（トリフルオロメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、２−（トリフルオロメチル）−Ｌ−フェニルアラニン、２−ブロモ−Ｄ−フェニルアラニン、２−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、２−クロロ−Ｄ−フェニルアラニン、２−クロロ−Ｌ−フェニルアラニン、２−シアノ−Ｄ−フェニルアラニン、２−シアノ−Ｌ−フェニルアラニン、２−フルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、２−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、２−メチル−Ｄ−フェニルアラニン、２−メチル−Ｌ−フェニルアラニン、２−ニトロ−Ｄ−フェニルアラニン、２−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、２；４；５−トリヒドロキシ−フェニルアラニン、３，４，５−トリフルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、３，４，５−トリフルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、３，４−ジクロロ−Ｄ−フェニルアラニン、３，４−ジクロロ−Ｌ−フェニルアラニン、３，４−ジフルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、３，４−ジフルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシ−Ｌ−フェニルアラニン、３，４−ジメトキシ−Ｌ−フェニルアラニン、３，５，３’−トリヨード−Ｌ−チロニン、３，５−ジヨード−Ｄ−チロシン、３，５−ジヨード−Ｌ−チロシン、３，５−ジヨード−Ｌ−チロニン、３−（トリフルオロメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、３−（トリフルオロメチル）−Ｌ−フェニルアラニン、３−アミノ−Ｌ−チロシン、３−ブロモ−Ｄ−フェニルアラニン、３−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、３−クロロ−Ｄ−フェニルアラニン、３−クロロ−Ｌ−フェニルアラニン、３−クロロ−Ｌ−チロシン、３−シアノ−Ｄ−フェニルアラニン、３−シアノ−Ｌ−フェニルアラニン、３−フルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、３−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、３−フルオロ−チロシン、３−ヨード−Ｄ−フェニルアラニン、３−ヨード−Ｌ−フェニルアラニン、３−ヨード−Ｌ−チロシン、３−メトキシ−Ｌ−チロシン、３−メチル−Ｄ−フェニルアラニン、３−メチル−Ｌ−フェニルアラニン、３−ニトロ−Ｄ−フェニルアラニン、３−ニトロ−Ｌ−フェニルアラニン、３−ニトロ−Ｌ−チロシン、４−（トリフルオロメチル）−Ｄ−フェニルアラニン、４−（トリフルオロメチル）−Ｌ−フェニルアラニン、４−アミノ−Ｄ−フェニルアラニン、４−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン、４−ベンゾイル−Ｄ−フェニルアラニン、４−ベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニン、４−ビス（２−クロロエチル）アミノ−Ｌ−フェニルアラニン、４−ブロモ−Ｄ−フェニルアラニン、４−ブロモ−Ｌ−フェニルアラニン、４−クロロ−Ｄ−フェニルアラニン、４−クロロ−Ｌ−フェニルアラニン、４−シアノ−Ｄ−フェニルアラニン、４−シアノ−Ｌ−フェニルアラニン、４−フルオロ−Ｄ−フェニルアラニン、４−フルオロ−Ｌ−フェニルアラニン、４−ヨード−Ｄ−フェニルアラニン、４−ヨード−Ｌ−フェニルアラニン、ホモフェニルアラニン、チロキシン、３，３−ジフェニルアラニン、チロニン、エチル−チロシン、およびメチル−チロシン。

【0090】

[0049] アミノ酸アナログには、プロリンのアナログが含まれる。プロリンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：３，４−デヒドロ−プロリン、４−フルオロ−プロリン、ｃｉｓ−４−ヒドロキシ−プロリン、チアゾリジン−２−カルボン酸、およびｔｒａｎｓ−４−フルオロ−プロリン。

【0091】

[0050] アミノ酸アナログには、セリンおよびトレオニンのアナログが含まれる。セリンおよびトレオニンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：３−アミノ−２−ヒドロキシ−５−メチルヘキサン酸、２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタン酸、２−アミノ−３−エトキシブタン酸、２−アミノ−３−メトキシブタン酸、４−アミノ−３−ヒドロキシ−６−メチルヘプタン酸、２−アミノ−３−ベンジルオキシプロピオン酸、２−アミノ−３−ベンジルオキシプロピオン酸、２−アミノ−３−エトキシプロピオン酸、４−アミノ−３−ヒドロキシブタン酸、およびα−メチルセリン。

【0092】

[0051] アミノ酸アナログには、トリプトファンのアナログが含まれる。トリプトファンのアミノ酸アナログの例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：α−メチル−トリプトファン；β−（３−ベンゾチエニル）−Ｄ−アラニン；β−（３−ベンゾチエニル）−Ｌ−アラニン；１−メチル−トリプトファン；４−メチル−トリプトファン；５−ベンジルオキシ−トリプトファン；５−ブロモ−トリプトファン；５−クロロ−トリプトファン；５−フルオロ−トリプトファン；５−ヒドロキシ−トリプトファン；５−ヒドロキシ−Ｌ−トリプトファン；５−メトキシ−トリプトファン；５−メトキシ−Ｌ−トリプトファン；５−メチル−トリプトファン；６−ブロモ−トリプトファン；６−クロロ−Ｄ−トリプトファン；６−クロロ−トリプトファン；６−フルオロ−トリプトファン；６−メチル−トリプトファン；７−ベンジルオキシ−トリプトファン；７−ブロモ−トリプトファン；７−メチル−トリプトファン；Ｄ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ノルハルマン−３−カルボン酸；６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロノルハルマン−１−カルボン酸；７−アザトリプトファン；Ｌ−１，２，３，４−テトラヒドロ−ノルハルマン−３−カルボン酸；５−メトキシ−２−メチル−トリプトファン；および６−クロロ−Ｌ−トリプトファン。

【0093】

[0052] 一部の態様において、アミノ酸アナログはラセミ体である。一部の態様において、アミノ酸アナログのＤ異性体が用いられる。一部の態様において、アミノ酸アナログのＬ異性体が用いられる。他の態様において、アミノ酸アナログはＲまたはＳ立体配置であるキラル中心を含む。さらに他の態様において、β−アミノ酸アナログのアミノ基（単数または複数）を、保護基、例えばｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ基）、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）、トシル等で置換する。さらに他の態様において、β−アミノ酸アナログのカルボン酸官能基を、例えばそのエステル誘導体として保護する。一部の態様において、アミノ酸アナログの塩が用いられる。

【0094】

[0053] “非必須”アミノ酸残基は、本明細書で用いられる際、ポリペプチドの本質的な生物学的または生化学的活性（例えば受容体の結合または活性化）を消失させる、または実質的に変化させることなく変化させることができる、ポリペプチドの野生型配列中に存在するアミノ酸残基である。

【0095】

[0054] “必須”アミノ酸残基は、本明細書で用いられる際、変化させた場合に結果としてポリペプチドの本質的な生物学的または生化学的活性（例えば受容体の結合または活性化）の消失または実質的な消失をもたらす、ポリペプチドの野生型配列中に存在するアミノ酸残基である。

【0096】

[0055] “保存的アミノ酸置換”は、アミノ酸残基を類似の側鎖を有する異なるアミノ酸残基で置き換えるアミノ酸置換である。類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当技術分野で定められている。これらのファミリーには、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｋ、Ｒ、Ｈ）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｄ、Ｅ）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｇ、Ｎ、Ｑ、Ｓ、Ｔ、Ｙ、Ｃ）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ａ、Ｖ、Ｌ、Ｉ、Ｐ、Ｆ、Ｍ、Ｗ）、ベータ−分枝側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｔ、Ｖ、Ｉ）、および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、Ｙ、Ｆ、Ｗ、Ｈ）が含まれる。従って、例えばポリペプチド中の予測される非必須アミノ酸残基を、同じ側鎖ファミリーからの別のアミノ酸残基で置き換える。許容可能な置換の他の例は、等配電子的（ｉｓｏｓｔｅｒｉｃ）考慮（例えば、メチオニンの代わりにノルロイシン）または他の特性（例えば、フェニルアラニンの代わりに２−チエニルアラニン、またはトリプトファンの代わりに６−Ｃｌ−トリプトファン）に基づく置換である。

【0097】

[0056] 用語“キャッピング基”は、主題ペプチドミメティック大環状化合物のポリペプチド鎖のカルボキシ末端またはアミノ末端のどちらかに存在する化学的部分を指す。カルボキシ末端のキャッピング基には、非修飾カルボン酸（すなわち−ＣＯＯＨ）、または置換基を有するカルボン酸が含まれる。例えば、カルボキシ末端をアミノ基で置換して、Ｃ末端においてカルボキサミドを生成することができる。多様な置換基には、第一級および第二級アミン（ペグ化第二級アミンが含まれる）が含まれるが、これらに限定されない。Ｃ末端に関する代表的な第二級アミンキャッピング基には下記のものが含まれる。

【0098】

【化20】

【0099】

[0057] アミノ末端のキャッピング基には、非修飾アミン（すなわち−ＮＨ_２）、または置換基を有するアミンが含まれる。例えば、アミノ末端をアシル基で置換して、Ｎ末端においてカルボキサミドを生成することができる。多様な置換基には、置換されたアシル基（Ｃ_１〜Ｃ_６カルボニル、Ｃ_７〜Ｃ_３０カルボニルが含まれる）およびペグ化カルバメートが含まれるが、これらに限定されない。Ｎ末端に関する代表的なキャッピング基には下記のものが含まれる。

【0100】

【化21】

【0101】

[0058] 用語“員（ｍｅｍｂｅｒ）”は、本明細書で大環状化合物または大員環形成リンカーと合わせて用いられる際、大員環を形成している、または形成することができる原子を指し、置換基または側鎖原子を除外する。類似により、シクロデカン、１，２−ジフルオロ−デカンおよび１，３−ジメチルシクロデカンは、水素もしくはフルオロ置換基またはメチル側鎖は大員環の形成に参加しないため、全て１０員の大環状化合物とみなされる。

【0102】

[0059] 記号“

【0103】

【化22】

【0104】

”は、分子構造の一部として用いられる場合、単結合またはｔｒａｎｓもしくはｃｉｓ二重結合を指す。

【0105】

[0060] 用語“アミノ酸側鎖”は、アミノ酸中のα−炭素（または別の主鎖原子）に結合した部分を指す。例えば、アラニンに関するアミノ酸側鎖はメチルであり、フェニルアラニンに関するアミノ酸側鎖はフェニルメチルであり、システインに関するアミノ酸側鎖はチオメチルであり、アスパラギン酸に関するアミノ酸側鎖はカルボキシメチルであり、チロシンに関するアミノ酸側鎖は４−ヒドロキシフェニルメチルである、等。他の非天然存在アミノ酸側鎖、例えば天然において生じるアミノ酸側鎖（例えば、アミノ酸代謝産物）または合成により作られるアミノ酸側鎖（例えば、α，αジ置換アミノ酸）も含まれる。

【0106】

[0061] 用語“α，αジ置換アミノ酸”は、２つの天然または非天然アミノ酸側鎖に結合している炭素（α−炭素）に結合したアミノ基およびカルボキシル基の両方を含有する分子または部分を指す。

【0107】

[0062] 用語“ポリペプチド”は、共有結合（例えば、アミド結合）により連結された２個以上の天然または非天然存在アミノ酸を包含する。本明細書で記載されるようなポリペプチドには、完全長タンパク質（例えば、完全にプロセシングされたタンパク質）ならびにより短いアミノ酸配列（例えば、天然存在タンパク質の断片または合成ポリペプチド断片）が含まれる。

【0108】

[0063] 用語“大環状化試薬（ｍａｃｒｏｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ ｒｅａｇｅｎｔ）”または“大員環形成試薬”は、本明細書で用いられる際、２つの反応性基の間の反応を媒介することによりペプチドミメティック大環状化合物を調製するために用いることができるあらゆる試薬を指す。反応性基は、例えばアジドおよびアルキンであることができ、その場合、大環状化試薬には、限定ではなく、Ｃｕ試薬、例えば反応性Ｃｕ（Ｉ）種を供給する試薬、例えばＣｕＢｒ、ＣｕＩまたはＣｕＯＴｆ、ならびに還元剤、例えばアスコルビン酸またはアスコルビン酸ナトリウムの添加によりその場で活性なＣｕ（Ｉ）試薬に変換することができるＣｕ（ＩＩ）塩、例えばＣｕ（ＣＯ_２ＣＨ_３）_２、ＣｕＳＯ_４、およびＣｕＣｌ_２が含まれる。大環状化試薬には、さらに例えば、反応性Ｒｕ（ＩＩ）を供給することができる当技術分野で既知のＲｕ試薬、例えばＣｐ^＊ＲｕＣｌ（ＰＰｈ_３）_２、［Ｃｐ^＊ＲｕＣｌ］_４または他のＲｕ試薬が含まれ得る。他の場合において、その反応性基は末端オレフィンである。そのような態様において、その大環状化試薬または大員環形成試薬はメタセシス触媒であり、これには安定化された後周期遷移金属カルベン錯体触媒、例えばＶＩＩＩ属遷移金属カルベン触媒が含まれるが、これらに限定されない。例えば、そのような触媒は、＋２酸化状態、１６の電子数を有し、５配位した、ＲｕおよびＯｓ金属中心である。他の例では、触媒はＷまたはＭｏ中心を有する。多様な触媒が下記の文献で開示されている：Grubbs et al., “Ring Closing Metathesis and Related Processes in Organic Synthesis” Acc. Chem. Res. 1995, 28, 446-452、米国特許第５，８１１，５１５号；米国特許第７，９３２，３９７号；米国特許出願公開第２０１１／００６５９１５号；米国特許出願公開第２０１１／０２４５４７７号；Yu et al., “Synthesis of Macrocyclic Natural Products by Catalyst-Controlled Stereoselective Ring-Closing Metathesis”, Nature 2011, 479, 88；およびPeryshkov et al., “Z-Selective Olefin Metathesis Reactions Promoted by Tungsten Oxo Alkylidene Complexes”, J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 20754。さらに他の場合において、その反応性基はチオール基である。そのような態様において、その大環状化試薬は、例えば２つのチオール反応性基、例えばハロゲン基で官能化されたリンカーである。

【0109】

[0064] 用語“ハロ”または“ハロゲン”は、フッ素、塩素、臭素もしくはヨウ素、またはそのラジカルを指す。

【0110】

[0065] 用語“アルキル”は、示された数の炭素原子を含有する、直鎖または分枝鎖である炭化水素鎖を指す。例えば、Ｃ_１〜Ｃ_１０はその基が１個から１０個まで（１個および１０個を含む）の炭素原子をその中に有することを示す。数値表記が一切ない場合、“アルキル”は１〜２０個（１個および２０個を含む）の炭素原子をその中に有する鎖（直鎖または分枝鎖）である。

【0111】

[0066] 用語“アルキレン”は、二価アルキル（すなわち、−Ｒ−）を指す。

【0112】

[0067] 用語“アルケニル”は、１個以上の炭素−炭素二重結合を有する直鎖または分枝鎖である炭化水素鎖を指す。アルケニル部分は、示された数の炭素原子を含有する。例えば、Ｃ_２〜Ｃ_１０はその基が２個から１０個まで（２個および１０個を含む）の炭素原子をその中に有することを示す。用語“低級アルケニル”は、Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニル鎖を指す。数値表記が一切ない場合、“アルケニル”は２〜２０個（２個および２０個を含む）の炭素原子をその中に有する鎖（直鎖または分枝鎖）である。

【0113】

[0068] 用語“アルキニル”は、１個以上の炭素−炭素三重結合を有する直鎖または分枝鎖である炭化水素鎖を指す。アルキニル部分は、示された数の炭素原子を含有する。例えば、Ｃ_２〜Ｃ_１０はその基が２個から１０個まで（２個および１０個を含む）の炭素原子をその中に有することを示す。用語“低級アルキニル”は、Ｃ_２〜Ｃ_６アルキニル鎖を指す。数値表記が一切ない場合、“アルキニル”は２〜２０個（２個および２０個を含む）の炭素原子をその中に有する鎖（直鎖または分枝鎖）である。

【0114】

[0069] 用語“アリール”は６炭素単環式または１０炭素二環式の芳香族環系を指し、ここで各環の０、１、２、３または４個の原子が置換基により置換されている。アリール基の例にはフェニル、ナフチル等が含まれる。用語“アリールアルコキシ”は、アリールで置換されたアルコキシを指す。

【0115】

[0070] “アリールアルキル”は、上記で定義したようなアリール基であって、そのアリール基の水素原子の１個が上記で定義したようなＣ_１〜Ｃ_５アルキル基で置き換えられているアリール基を指す。アリールアルキル基の代表例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：２−メチルフェニル、３−メチルフェニル、４−メチルフェニル、２−エチルフェニル、３−エチルフェニル、４−エチルフェニル、２−プロピルフェニル、３−プロピルフェニル、４−プロピルフェニル、２−ブチルフェニル、３−ブチルフェニル、４−ブチルフェニル、２−ペンチルフェニル、３−ペンチルフェニル、４−ペンチルフェニル、２−イソプロピルフェニル、３−イソプロピルフェニル、４−イソプロピルフェニル、２−イソブチルフェニル、３−イソブチルフェニル、４−イソブチルフェニル、２−ｓｅｃ−ブチルフェニル、３−ｓｅｃ−ブチルフェニル、４−ｓｅｃ−ブチルフェニル、２−ｔ−ブチルフェニル、３−ｔ−ブチルフェニルおよび４−ｔ−ブチルフェニル。

【0116】

[0071] “アリールアミド”は、上記で定義したようなアリール基であって、そのアリール基の水素原子の１個が１個以上の−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２基で置き換えられているアリール基を指す。アリールアミド基の代表例には、２−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２−フェニル、３−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２−フェニル、４−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２−フェニル、２−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２−ピリジル、３−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２−ピリジル、および４−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２−ピリジルが含まれる。

【0117】

[0072] “アルキル複素環”は、上記で定義したようなＣ_１〜Ｃ_５アルキル基であって、そのＣ_１〜Ｃ_５アルキル基の水素原子の１個が複素環で置き換えられているＣ_１〜Ｃ_５アルキル基を指す。アルキル複素環基の代表例には、−ＣＨ_２ＣＨ_２−モルホリン、−ＣＨ_２ＣＨ_２−ピペリジン、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−モルホリン、および−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−イミダゾールが含まれるが、これらに限定されない。

【0118】

[0073] “アルキルアミド”は、上記で定義したようなＣ_１〜Ｃ_５アルキル基であって、そのＣ_１〜Ｃ_５アルキル基の水素原子の１個が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２基で置き換えられているＣ_１〜Ｃ_５アルキル基を指す。アルキルアミド基の代表例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：−ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ（Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２）ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ（Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２）ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ（Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２）ＣＨ_２ＣＨ_３、−Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_３、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ_３−ＣＨ_３、および−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ＝ＣＨ_２。

【0119】

[0074] “アルカノール”は、上記で定義したようなＣ_１〜Ｃ_５アルキル基であって、そのＣ_１〜Ｃ_５アルキル基の水素原子の１個がヒドロキシル基で置き換えられているＣ_１〜Ｃ_５アルキル基を指す。アルカノール基の代表例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３および−Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２ＯＨ。

【0120】

[0075] “アルキルカルボキシ”は、上記で定義したようなＣ_１〜Ｃ_５アルキル基であって、そのＣ_１〜Ｃ_５アルキル基の水素原子の１個が−ＣＯＯＨ基で置き換えられているＣ_１〜Ｃ_５アルキル基を指す。アルキルカルボキシ基の代表例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：−ＣＨ_２ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＨ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＨ_２ＣＨ_３、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）ＣＨ_２ＣＨ_３および−Ｃ（ＣＨ_３）_２ＣＨ_２ＣＯＯＨ。

【0121】

[0076] 用語“シクロアルキル”には、本明細書で用いられる際、３〜１２個の炭素、好ましくは３〜８個の炭素、より好ましくは３〜６個の炭素を有する飽和および部分不飽和環状炭化水素基が含まれ、ここでそのシクロアルキル基はさらに場合により置換されている。いくつかのシクロアルキル基には、限定ではなく、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルが含まれる。

【0122】

[0077] 用語“ヘテロアリール”は、単環式の場合１〜３個のヘテロ原子、二環式の場合１〜６個のヘテロ原子、または三環式の場合１〜９個のヘテロ原子を有する、芳香族の５〜８員単環式、８〜１２員二環式、または１１〜１４員三環式の環系を指し、前記のヘテロ原子はＯ、ＮまたはＳから選択され（例えば、炭素原子、および単環式、二環式または三環式の場合それぞれ１〜３、１〜６または１〜９個のＯ、ＮまたはＳのヘテロ原子）、ここで各環の０、１、２、３または４個の原子が置換基により置換されている。ヘテロアリール基の例には、ピリジル、フリルまたはフラニル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、ピリミジニル、チオフェニルまたはチエニル、キノリニル、インドリル、チアゾリル等が含まれる。

【0123】

[0078] 用語“ヘテロアリールアルキル”または用語“ヘテロアラルキル”は、ヘテロアリールで置換されたアルキルを指す。用語“ヘテロアリールアルコキシ”は、ヘテロアリールで置換されたアルコキシを指す。

【0124】

[0079] 用語“ヘテロアリールアルキル”または用語“ヘテロアラルキル”は、ヘテロアリールで置換されたアルキルを指す。用語“ヘテロアリールアルコキシ”は、ヘテロアリールで置換されたアルコキシを指す。

【0125】

[0080] 用語“ヘテロシクリル”は、単環式の場合１〜３個のヘテロ原子、二環式の場合１〜６個のヘテロ原子、または三環式の場合１〜９個のヘテロ原子を有する、非芳香族の５〜８員単環式、８〜１２員二環式、または１１〜１４員三環式の環系を指し、前記のヘテロ原子はＯ、ＮまたはＳから選択され（例えば、炭素原子、および単環式、二環式または三環式の場合それぞれ１〜３、１〜６または１〜９個のＯ、ＮまたはＳのヘテロ原子）、ここで各環の０、１、２または３個の原子が置換基により置換されている。ヘテロシクリル基の例には、ピペラジニル、ピロリジニル、ジオキサニル、モルホリニル、テトラヒドロフラニル等が含まれる。

【0126】

[0081] 用語“置換基”は、あらゆる分子、化合物または部分上の第２の原子または基、例えば水素原子に置き換わる基を指す。適切な置換基には、限定ではなく、ハロ、ヒドロキシ、メルカプト、オキソ、ニトロ、ハロアルキル、アルキル、アルカリール（ａｌｋａｒｙｌ）、アリール、アラルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、アリールオキシ、アミノ、アルコキシカルボニル、アミド、カルボキシ、アルカンスルホニル、アルキルカルボニル、およびシアノ基が含まれる。

【0127】

[0082] 一部の態様において、１種類以上の本明細書で開示される化合物は１個以上の不斉中心を含有し、従ってラセミ体およびラセミ混合物、単一の鏡像異性体、個々のジアステレオマーおよびジアステレオマー混合物として存在する。１態様において、別途明記しない限り、これらの化合物の異性型は本発明に含まれる。一部の態様において、１種類以上の本明細書で開示される化合物は多数の互変異性型でも表され、そのような場合、その１種類以上の化合物には本明細書で記載される化合物の全ての互変異性型が含まれる（例えば、環系のアルキル化が結果として多数の部位におけるアルキル化をもたらす場合、その１種類以上の化合物には全てのそのような反応生成物が含まれる）。別途明記しない限り、そのような化合物の全てのそのような異性型が本発明に含まれる。別途明記しない限り、本明細書で記載される化合物の全ての結晶形態が本発明に含まれる。

【0128】

[0083] 本明細書で用いられる際、用語“増大させる”および“減少させる”は、それぞれ少なくとも５％の統計的に有意な（すなわち、ｐ＜０．１）増大または減少を引き起こすことを意味する。

【0129】

[0084] 本明細書で用いられる際、変数に関する数値範囲の列挙は、本発明はその範囲内の値のいずれかと等しい変数を用いて実施することができることを伝えることを意図している。従って、本質的に不連続である変数に関して、その変数はその数値範囲（その範囲の終点を含む）内のいずれかの整数値に等しい。同様に、本質的に連続的である変数に関して、その変数はその数値範囲（その範囲の終点を含む）内のいずれかの実数値に等しい。一例として、限定ではなく、０〜２の値を有すると記載されている変数は、その変数が本質的に不連続である場合は０、１または２の値をとり、その変数が本質的に連続的である場合は０．０、０．１、０．０１、０．００１の値、または≧０かつ≦２であるあらゆる他の実数値をとる。

【0130】

[0085] 本明細書で用いられる際、別途具体的に示さない限り、語“または”は包含的な“および／または”の意味で用いられており、排他的な“どちらか／または”の意味では用いられていない。

【0131】

[0086] 用語“平均して”は、各データ点に関して少なくとも３つの独立した反復（ｒｅｐｌｉｃａｔｅｓ）を実施することから得られた平均値を表す。

【0132】

[0087] 用語“生物活性”は、大環状化合物の構造的および機能的特性を包含する。生物活性は、例えば構造安定性、アルファ−ヘリックス性、標的に関する親和性、タンパク質分解性の分解に対する抵抗性、細胞透過性、細胞内安定性、インビボ安定性、またはそれらのあらゆる組み合わせである。

【0133】

[0088] 用語“結合親和性”は、例えばペプチドミメティック大環状化合物および標的の間の結合相互作用の強さを指す。結合親和性は、例えば平衡解離定数（“Ｋ_Ｄ”）として表すことができ、それは濃度の尺度である単位（例えばＭ、ｍＭ、μＭ、ｎＭ等）で表される。数値的には、結合親和性およびＫ_Ｄ値は、より低い結合親和性がより高いＫ_Ｄ値に対応し、一方でより高い結合親和性がより低いＫ_Ｄ値に対応するように、逆に変動する。高い結合親和性が望ましい場合、“向上した”結合親和性はより高い結合親和性、従ってより低いＫ_Ｄ値を指す。

【0134】

[0089] 用語“結合親和性の比率”は、第１の結合相互作用の解離定数（Ｋ_Ｄ値）（分子）対第２の結合相互作用の解離定数（分母）の比率を指す。従って、標的１対標的２に対する“低減した結合親和性の比率”は、Ｋ_Ｄ（標的１）/Ｋ_Ｄ（標的２）として表される比率に関するより低い値を指す。この概念は、標的１対標的２に関する“向上した選択性”として特性付けることもでき、それは標的１に関するＫ_Ｄ値における減少または標的２に関するＫ_Ｄ値に関する値における増大のどちらによることもできる。

【0135】

[0090] 用語“インビトロ有効性”は、被験化合物、例えばペプチドミメティック大環状化合物がインビトロの試験系またはアッセイにおいて有益な結果をもたらす程度を指す。インビトロ有効性は、例えば“ＩＣ_５０”または“ＥＣ_５０”の値として測定することができ、それはその試験系における最大の作用の５０％をもたらすその被験化合物の濃度を表す。

【0136】

[0091] 用語“インビトロ有効性の比率”または“インビトロ有効性比率”は、第１のアッセイからのＩＣ_５０またはＥＣ_５０値（分子）対第２のアッセイからのＩＣ_５０またはＥＣ_５０値（分母）の比率を指す。従って、向上したアッセイ１対アッセイ２に関するインビトロ有効性比率は、ＩＣ_５０（アッセイ１）／ＩＣ_５０（アッセイ２）として、あるいはＥＣ_５０（アッセイ１）／ＥＣ_５０（アッセイ２）として表される比率に関するより低い値を指す。この概念はアッセイ１対アッセイ２における“向上した選択性”として特性付けることもでき、それは標的１に関するＩＣ_５０もしくはＥＣ_５０値における減少または標的２に関するＩＣ_５０もしくはＥＣ_５０値に関する値における増大のどちらによることもできる。

【0137】

[0092] 本発明の１以上の特定の態様の詳細を添付の図面および以下の記載において述べる。本発明の他の特徴、目的、および利点は、その記載および図面から、ならびに特許請求の範囲から明らかであろう。

【0138】

ペプチドミメティック大環状化合物
[0093] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は式（Ｉ）を有する：

【0139】

【化23】

【0140】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【0141】

【化24】

【0142】

、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_３−］であり；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0143】

【化25】

【0144】

；
Ｌ_１、Ｌ_２およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0145】

[0094] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は次式を有する：

【0146】

【化26】

【0147】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【0148】

【化27】

【0149】

、［−ＮＨ−Ｌ_４−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_４−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_４−］であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0150】

[0095] 一部の態様において、ｖおよびｗは１〜３０の整数である。一部の態様において、ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数である。

【0151】

[0096] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸はアルギニン（Ｒ）ではなく、および／またはＥにより表される２番目のＣ末端アミノ酸はトレオニン（Ｔ）ではないという条件付きで特許請求される。例えば、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＣ末端アミノ酸は正に荷電した側鎖も極性非荷電側鎖も含まない。一部の態様において、ｕ＝１かつｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＣ末端アミノ酸は疎水性側鎖を含む。例えば、ｗ＝２である場合、Ｅにより表される最初のＣ末端アミノ酸および／または２番目のＮ末端アミノ酸は疎水性側鎖、例えば大きい疎水性側鎖を含む。

【0152】

[0097] 一部の態様において、ｗは３〜１０００である。例えば、Ｅにより表される３番目のアミノ酸は大きい疎水性側鎖を含む。

【0153】

[0098] 式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の一部の態様において、Ｌ_１およびＬ_２は、単独または組み合わせのどちらにおいても、全炭化水素鎖もチオエーテルも形成しない。式ＩＩのペプチドミメティック大環状化合物の他の態様において、Ｌ_１およびＬ_２は、単独または組み合わせのどちらにおいても、全炭化水素鎖もトリアゾールも形成しない。

【0154】

[0099] １例において、Ｒ_１およびＲ_２の少なくとも１つはアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。別の例において、Ｒ_１およびＲ_２の両方が独立してアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。一部の態様において、Ｒ_１およびＲ_２の少なくとも１つはメチルである。他の態様において、Ｒ_１およびＲ_２はメチルである。

【0155】

[00100] 一部の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚは少なくとも３である。他の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚは１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。一部の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚの和は３または６である。一部の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚの和は３である。他の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚの和は６である。大環状化合物または大環状化合物前駆体中のＡ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥのそれぞれの存在は独立して選択される。例えば、ｘが３である場合の式［Ａ］_ｘにより表される配列は、アミノ酸が同一ではない態様（例えばＧｌｎ−Ａｓｐ−Ａｌａ）ならびにアミノ酸が同一である態様（例えばＧｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ）を包含する。これは示した範囲中のｘ、ｙ、またはｚのあらゆる値に当てはまる。同様に、ｕが１より大きい場合、それぞれの化合物は同じまたは異なるペプチドミメティック大環状化合物を包含することができる。例えば、化合物は異なるリンカーの長さまたは化学組成を含むペプチドミメティック大環状化合物を含むことができる。

【0156】

[00101] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はα−ヘリックスである二次構造を含み、Ｒ_８は−Ｈであり、これはヘリックス内水素結合を可能にする。一部の態様において、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの少なくとも１つはα，α−ジ置換アミノ酸である。１例において、Ｂはα，α−ジ置換アミノ酸である。例えば、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの少なくとも１つは２−アミノイソ酪酸である。他の態様において、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの少なくとも１つは

【0157】

【化28】

【0158】

である。

【0159】

[00102] 他の態様において、第１のＣαから第２のＣαまで測定した場合の大員環形成リンカーＬの長さは、所望の二次ペプチド構造、例えば第１のＣα〜第２のＣαの残基が含まれるが必ずしもこれに限定されないそのペプチドミメティック大環状化合物の残基により形成されるα−ヘリックスを安定化するように選択される。

【0160】

[00103] 次式のペプチドミメティック大環状化合物も提供される：

【0161】

【化29】

【0162】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２（配列番号：１）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0163】

【化30】

【0164】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0165】

[00104] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は次式を有する：

【0166】

【化31】

【0167】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２（配列番号：２）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【0168】

【化32】

【0169】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0170】

[00105] 次式のペプチドミメティック大環状化合物も提供される：

【0171】

【化33】

【0172】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２（配列番号：１）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0173】

[00106] 次式のペプチドミメティック大環状化合物も提供される：

【0174】

【化34】

【0175】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２（配列番号：２）の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。

【0176】

[00107] １態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は下記のものであり：

【0177】

【化35】

【0178】

式中、それぞれのＲ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、またはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。

【0179】

[00108] 関連する態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は下記のものであり：

【0180】

【化36】

【0181】

式中、Ｒ_１’およびＲ_２’は独立してアミノ酸である。

【0182】

[00109] 他の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は下記に示す式のいずれかの化合物であり：

【0183】

【化37-1】

【0184】

【化37-2】

【0185】

【化37-3】

【0186】

式中、“ＡＡ”はいずれかの天然または非天然アミノ酸側鎖を表し、“

【0187】

【化38】

【0188】

”は上記で定義したような［Ｄ］_ｖ、［Ｅ］_ｗであり、ｎは０〜２０、５０、１００、２００、３００、４００または５００の整数である。一部の態様において、ｎは０である。他の態様において、ｎは５０未満である。

【0189】

[00110] 式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物に関する大員環形成リンカーＬの典型的な態様を下記に示す。

【0190】

【化39-1】

【0191】

【化39-2】

【0192】

【化40】

【0193】

[00111] 他の態様において、式ＩまたはＩＩの化合物中のＤおよび／またはＥは細胞による取込みを促進するためにさらに修飾されている。一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物の脂質付加またはＰＥＧ化は細胞による取込みを促進し、生物学的利用能を増大させ、血液循環を増大させ、薬物動態を変化させ、免疫原性を減少させ、および／または必要とされる投与頻度を減少させる。

【0194】

[00112] 他の態様において、式ＩまたはＩＩの化合物中の［Ｄ］および［Ｅ］の少なくとも１つは追加の大員環形成リンカーを含む部分を表し、従ってそのペプチドミメティック大環状化合物は少なくとも２つの大員環形成リンカーを含む。特定の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は２つの大員環形成リンカーを含む。１態様において、ｕは２である。

【0195】

[00113] 一部の態様において、本明細書で記載される大員環形成リンカーのいずれかを、表４、４ａ、４ｂ、６、および６ａにおいて示される配列のいずれかとのあらゆる組み合わせで用いることができ、本明細書で示されるＲ−置換基のいずれかとのあらゆる組み合わせでも用いることができる。

【0196】

[00114] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は少なくとも１つのα−ヘリックスモチーフを含む。例えば、式ＩまたはＩＩの化合物中のＡ、Ｂおよび／またはＣには１つ以上のα−ヘリックスが含まれる。一般的な事柄として、α−ヘリックスにはターンあたり３〜４個のアミノ酸残基が含まれる。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物のα−ヘリックスには１〜５ターンが含まれ、従って３〜２０個のアミノ酸残基が含まれる。特定の態様において、そのα−ヘリックスには１ターン、２ターン、３ターン、４ターン、または５ターンが含まれる。一部の態様において、その大員環形成リンカーはそのペプチドミメティック大環状化合物内に含まれるα−ヘリックスモチーフを安定化する。従って、一部の態様において、第１のＣαから第２のＣαまでの大員環形成リンカーＬの長さは、α−ヘリックスの安定性を増大させるように選択される。一部の態様において、その大員環形成リンカーはそのα−ヘリックスの１ターンから５ターンまでに及ぶ。一部の態様において、その大員環形成リンカーはそのα−ヘリックスのおおよそ１ターン、２ターン、３ターン、４ターン、または５ターンに及ぶ。一部の態様において、その大員環形成リンカーの長さはそのα−ヘリックスのターンあたりおおよそ５Å〜９Å、またはそのα−ヘリックスのターンあたりおおよそ６Å〜８Åである。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ１ターンに及ぶ場合、その長さはおおよそ５個の炭素−炭素結合〜１３個の炭素−炭素結合、おおよそ７個の炭素−炭素結合〜１１個の炭素−炭素結合、またはおおよそ９個の炭素−炭素結合に等しい。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ２ターンに及ぶ場合、その長さはおおよそ８個の炭素−炭素結合〜１６個の炭素−炭素結合、おおよそ１０個の炭素−炭素結合〜１４個の炭素−炭素結合、またはおおよそ１２個の炭素−炭素結合に等しい。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ３ターンに及ぶ場合、その長さはおおよそ１４個の炭素−炭素結合〜２２個の炭素−炭素結合、おおよそ１６個の炭素−炭素結合〜２０個の炭素−炭素結合、またはおおよそ１８個の炭素−炭素結合に等しい。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ４ターンに及ぶ場合、その長さはおおよそ２０個の炭素−炭素結合〜２８個の炭素−炭素結合、おおよそ２２個の炭素−炭素結合〜２６個の炭素−炭素結合、またはおおよそ２４個の炭素−炭素結合に等しい。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ５ターンに及ぶ場合、その長さはおおよそ２６個の炭素−炭素結合〜３４個の炭素−炭素結合、おおよそ２８個の炭素−炭素結合〜３２個の炭素−炭素結合、またはおおよそ３０個の炭素−炭素結合に等しい。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ１ターンに及ぶ場合、その連結はおおよそ４原子〜１２原子、おおよそ６原子〜１０原子、またはおおよそ８原子を含有する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ２ターンに及ぶ場合、その連結はおおよそ７原子〜１５原子、おおよそ９原子〜１３原子、またはおおよそ１１原子を含有する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ３ターンに及ぶ場合、その連結はおおよそ１３原子〜２１原子、おおよそ１５原子〜１９原子、またはおおよそ１７原子を含有する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ４ターンに及ぶ場合、その連結はおおよそ１９原子〜２７原子、おおよそ２１原子〜２５原子、またはおおよそ２３原子を含有する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ５ターンに及ぶ場合、その連結はおおよそ２５原子〜３３原子、おおよそ２７原子〜３１原子、またはおおよそ２９原子を含有する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ１ターンに及ぶ場合、結果として生じる大環状化合物はおおよそ１７員〜２５員、おおよそ１９員〜２３員、またはおおよそ２１員を含有する環を形成する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ２ターンに及ぶ場合、結果として生じる大環状化合物はおおよそ２９員〜３７員、おおよそ３１員〜３５員、またはおおよそ３３員を含有する環を形成する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ３ターンに及ぶ場合、結果として生じる大環状化合物はおおよそ４４員〜５２員、おおよそ４６員〜５０員、またはおおよそ４８員を含有する環を形成する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ４ターンに及ぶ場合、結果として生じる大環状化合物はおおよそ５９員〜６７員、おおよそ６１員〜６５員、またはおおよそ６３員を含有する環を形成する。その大員環形成リンカーがα−ヘリックスのおおよそ５ターンに及ぶ場合、結果として生じる大環状化合物はおおよそ７４員〜８２員、おおよそ７６員〜８０員、またはおおよそ７８員を含有する環を形成する。

【0197】

[00115] 別途記載しない限り、あらゆる化合物（ペプチドミメティック大環状化合物、大環状化合物前駆体、および他の組成物が含まれる）は１個以上の同位体濃縮された原子の存在においてのみ異なる化合物を包含することも意味している。例えば、重水素もしくはトリチウムによる水素の置き換え、または^１３Ｃ−もしくは^１４Ｃ−濃縮された炭素による炭素の置き換えを除いて記載された構造を有する化合物は、本明細書において意図されている。

【0198】

[00116] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比してＭＤＭ２またはＭＤＭＸへの向上した結合親和性を有する。他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して低減したＭＤＭＸ対ＭＤＭ２への結合親和性の比率を有する。さらに他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株に対する抗腫瘍有効性を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株におけるアポトーシスの誘導を示す。他の例において、請求項１のペプチドミメティック大環状化合物であって、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したｐ５３陽性対ｐ５３陰性または変異体腫瘍細胞株に関するインビトロ抗腫瘍有効性比率を有する。さらに他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍に対する抗腫瘍有効性を有する。さらに他の例において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍におけるアポトーシスの誘導を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した細胞透過性を有する。他の場合において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した可溶性を有する。

【0199】

[00117] 一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログである。一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログであり、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した特性、例えば向上した結合親和性、向上した可溶性、向上した細胞有効性、向上した細胞透過性、向上したインビボもしくはインビトロ抗腫瘍有効性、または向上したアポトーシスの誘導を有する。

【0200】

[00118] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したＭＤＭ２またはＭＤＭＸに対する結合親和性を有する。他の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して低減したＭＤＭＸ対ＭＤＭ２に対する結合親和性の比率を有する。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はＸａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した可溶性を有し、またはそのペプチドミメティック大環状化合物はＸａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した細胞有効性を有する。

【0201】

[00119] 一部の態様において、Ｘａａ_５はＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログであり、ここでそのペプチドミメティック大環状化合物は、Ｘａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した生物学的活性、例えば向上した結合親和性、向上した可溶性、向上した細胞有効性、向上したヘリックス性、向上した細胞透過性、向上したインビボもしくはインビトロ抗腫瘍有効性、または向上したアポトーシスの誘導を有する。

【0202】

[00120] １態様において、本明細書で開示される化合物は、そのような化合物を構成する１個以上の原子において、非天然の割合の原子の同位元素を含有することができる。例えば、その化合物は、例えばトリチウム（^３Ｈ）、ヨウ素−１２５（^１２５Ｉ）または炭素−１４（^１４Ｃ）のような放射性同位元素を用いて放射標識することができる。別の態様において、本明細書で開示される化合物は、ケイ素原子と置き換えられた１個以上の炭素原子を有することができる。本明細書で開示される化合物の全ての同位体的バリエーションは、放射性であろうとなかろうと、本明細書において意図されている。

【0203】

ペプチドミメティック大環状化合物の調製
[00121] 式ＩおよびＩＩのペプチドミメティック大環状化合物は、当技術分野で既知の多様な方法のいずれかにより調製することができる。例えば、表４、表４ａまたは表４ｂ中の“＄４ｒｎ６”または“＄４ａ５”により示される残基を有する式Ｉの大環状化合物は、同じ分子中の第２の残基とクロスリンカーを形成することができる残基またはそのような残基の前駆体で置換することができる。

【0204】

[00122] 一部の態様において、これらのペプチドミメティック大環状化合物の合成は、アジド部分およびアルキン部分を含有するペプチドミメティック前駆体を合成し；続いてそのペプチドミメティック前駆体を大環状化試薬と接触させてトリアゾールで連結されたペプチドミメティック大環状化合物を生成することを特徴とする多工程プロセスを含む。そのようなプロセスは、例えば２００８年２月２５日に出願された米国特許出願公開第１２／０３７，０４１号において記載されている。大環状化合物または大環状化合物前駆体は、例えば液相または固相法により合成され、天然存在および非天然存在アミノ酸の両方を含有することができる。例えば、Chemistry and Biochemistry of the Amino Acids(G.C. Barrettによる編集、Chapman and Hall、1985)中のHunt,“The Non-Protein Amino Acids”を参照。

【0205】

[00123] 式Ｉの大環状化合物の一部の態様において、アジドがある残基のα炭素に連結されており、アルキンが別の残基のα炭素に結合している。一部の態様において、そのアジド部分はアミノ酸Ｌ−リジン、Ｄ−リジン、アルファ−メチル−Ｌ−リジン、アルファ−メチル−Ｄ−リジン、Ｌ−オルニチン、Ｄ−オルニチン、アルファ−メチル−Ｌ−オルニチンまたはアルファ−メチル−Ｄ−オルニチンのアジドアナログである。別の態様において、そのアルキン部分はＬ−プロパルギルグリシンである。さらに他の態様において、そのアルキン部分はＬ−プロパルギルグリシン、Ｄ−プロパルギルグリシン、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−５−ヘキシン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−５−ヘキシン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−７−オクチン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−７−オクチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−８−ノニン酸および（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−８−ノニン酸からなる群から選択されるアミノ酸である。

【0206】

[00124] 一部の態様において、本明細書において式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物を合成するための方法が提供され、その方法は次式のペプチドミメティック前駆体を大環状化試薬と接触させる工程を含み：

【0207】

【化41】

【0208】

式中、ｖ、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_７、Ｒ_８、Ｌ_１およびＬ_２は上記で定義した通りであり；その大環状化試薬がＣｕ試薬である場合、Ｒ_１２は−Ｈであり、その大環状化試薬がＲｕ試薬である場合、Ｒ_１２は−Ｈまたはアルキルであり；そしてさらにここで、前記の接触工程は結果としてその前駆体中のアルキンおよびアジド部分の間の共有結合の形成をもたらす。例えば、その大環状化試薬がＲｕ試薬である場合、Ｒ_１２はメチルであってよい。

【0209】

[00125] 一部の態様において、本明細書において式ＩＩのペプチドミメティック大環状化合物を合成するための方法が提供され、その方法は次式のペプチドミメティック前駆体を式Ｘ−Ｌ_２−Ｙの化合物と接触させる工程を含み：

【0210】

【化42】

【0211】

式中、ｖ、ｗ、ｘ、ｙ、ｚ、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_７、Ｒ_８、Ｌ_１およびＬ_２は式ＩＩの化合物に関して定義した通りであり；そしてＸおよびＹはそれぞれ独立してチオール基と反応することができる反応性基であり；
そしてさらにここで、前記の接触工程は結果として式ＩＩＩ中の２個のチオール基の間の共有結合の形成をもたらす。

【0212】

[00126] 本明細書で開示されるペプチドミメティック大環状化合物において、Ｒ_１およびＲ_２の少なくとも１つはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、またはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。一部の態様において、Ｒ_１およびＲ_２は両方とも独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、またはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。一部の態様において、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの少なくとも１つはα，α−ジ置換アミノ酸である。１例において、Ｂはα，α−ジ置換アミノ酸である。例えば、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥの少なくとも１つは２−アミノイソ酪酸である。

【0213】

[00127] 例えば、Ｒ_１およびＲ_２の少なくとも１つはアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。別の例において、Ｒ_１およびＲ_２は両方とも独立してアルキルであり、置換されていないか、またはハロ−で置換されている。一部の態様において、Ｒ_１およびＲ_２の少なくとも１つはメチルである。他の態様において、Ｒ_１およびＲ_２はメチルである。その大環状化試薬はＣｕ試薬またはＲｕ試薬であることができる。

【0214】

[00128] 一部の態様において、そのペプチドミメティック前駆体はその接触工程の前に精製される。他の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はその接触工程の後に精製される。さらに他の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物はその接触工程の後にリフォールディングされる。その方法は溶液中で実施することができ、あるいはその方法は固体支持体上で実施することができる。

【0215】

[00129] 本明細書で開示される方法を、そのペプチドミメティック前駆体またはペプチドミメティック大環状化合物に結合する標的高分子の存在下において前記の結合に有利な条件下で実施することも、本明細書において予想されている。一部の態様において、その方法は、そのペプチドミメティック前駆体またはペプチドミメティック大環状化合物に優先的に結合する標的高分子の存在下において前記の結合に有利な条件下で実施される。その方法は、ペプチドミメティック大環状化合物のライブラリーを合成するために適用することもできる。

【0216】

[00130] 一部の態様において、式Ｉの化合物を作るためのペプチドミメティック前駆体のアルキン部分は、Ｌ−プロパルギルグリシン、Ｄ−プロパルギルグリシン、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−５−ヘキシン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−５−ヘキシン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−７−オクチン酸、（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−７−オクチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−８−ノニン酸、および（Ｒ）−２−アミノ−２−メチル−８−ノニン酸からなる群から選択されるアミノ酸の側鎖である。他の態様において、式Ｉの化合物を作るためのペプチドミメティック前駆体のアジド部分は、ε−アジド−Ｌ−リジン、ε−アジド−Ｄ−リジン、ε−アジド−α−メチル−Ｌ−リジン、ε−アジド−α−メチル−Ｄ−リジン、δ−アジド−α−メチル−Ｌ−オルニチン、およびδ−アジド−α−メチル−Ｄ−オルニチンからなる群から選択されるアミノ酸の側鎖である。

【0217】

[00131] 一部の態様において、式ＩＩの化合物を作るためのペプチドミメティック前駆体のチオール基は、Ｌ−システイン、Ｄ−システイン、Ｌ−Ｎ−メチルシステイン、Ｄ−Ｎ−メチルシステイン、Ｌ−ホモシステイン、Ｄ−ホモシステイン、Ｌ−Ｎ−メチルホモシステイン、Ｄ−Ｎ−メチルホモシステイン、α−メチル−Ｌ−システイン、α−メチル−Ｄ−システイン、α−メチル−Ｌ−ホモシステイン、α−メチル−Ｄ−ホモシステイン、Ｌ−ペニシラミン、Ｄ−ペニシラミン、Ｌ−Ｎ−メチルペニシラミン、Ｄ−Ｎ−メチルペニシラミンからなる群から選択されるアミノ酸の側鎖であり、全ての形態は液相または固相ペプチド合成のために適切に保護される。

【0218】

[00132] 一部の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚは３であり、Ａ、ＢおよびＣは独立して天然または非天然アミノ酸である。他の態様において、ｘ＋ｙ＋ｚは６であり、Ａ、ＢおよびＣは独立して天然または非天然アミノ酸である。

【0219】

[00133] 一部の態様において、その接触工程は、プロトン性溶媒、水性溶媒、有機溶媒、およびそれらの混合物からなる群から選択される溶媒中で実施される。例えば、その溶媒は、Ｈ_２Ｏ、ＴＨＦ、ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏ、ｔＢｕＯＨ／Ｈ_２Ｏ、ＤＭＦ、ＤＩＰＥＡ、ＣＨ_３ＣＮもしくはＣＨ_２Ｃｌ_２、ＣｌＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌまたはそれらの混合物からなる群から選択することができる。その溶媒はヘリックス形成を有利にする溶媒であることができる。

【0220】

[00134] 代わりの、しかし同等の保護基、脱離基または試薬が代わりに用いられ、その合成工程のいくつかは、所望の化合物を生成するために代わりの順序または順番で実施される。本明細書で記載される化合物の合成において有用な合成化学変換および保護基の方法論（保護および脱保護）には、例えば下記の文献で記載されているようなものが含まれる：Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 第２版, John Wiley and Sons (1991); Fieser and Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994);およびPaquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)、ならびにその続版。

【0221】

[00135] 本明細書で開示されるペプチドミメティック大環状化合物は、例えば、Fields et al., Synthetic Peptides: A User's Guide中の第３章, ed. Grant, W. H. Freeman & Co., New York, N. Y., 1992, p. 77において記載されているような化学合成法により作製される。従って、例えば、ペプチドは自動化されたメリフィールド（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ）固相合成技法を用いて、アミンをｔＢｏｃまたはＦｍｏｃ化学のどちらかにより保護して、側鎖が保護されたアミノ酸を用いて、例えば自動ペプチド合成装置（例えば、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（カリフォルニア州フォスターシティー）、モデル４３０Ａ、４３１、または４３３）上で合成される。

【0222】

[00136] 本明細書で記載されるペプチドミメティック前駆体およびペプチドミメティック大環状化合物を生成する１つの方法は、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を用いる。Ｃ末端アミノ酸を架橋ポリスチレン樹脂にリンカー分子との酸不安定性結合により付着させる。この樹脂は合成のために用いられる溶媒中で不溶性であり、これは過剰な試薬および副産物を洗い流すのを比較的簡単かつ迅速にする。Ｎ末端はＦｍｏｃ基で保護され、それは酸中では安定であるが、塩基により除去することができる。側鎖官能基は必要に応じて塩基安定性、酸不安定性の基で保護される。

【0223】

[00137] より長いペプチドミメティック前駆体は、例えばネイティブケミカルライゲーション（ｎａｔｉｖｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｌｉｇａｔｉｏｎ）を用いて個々の合成ペプチドを連結する（ｃｏｎｊｏｉｎｉｎｇ）ことにより生成される。あるいは、より長い合成ペプチドは、周知の組換えＤＮＡおよびタンパク質発現技法により生合成される。そのような技法は周知の標準的なマニュアルにおいて詳細なプロトコルと共に提供されている。本明細書で開示されるペプチドミメティック前駆体をコードする遺伝子を構築するために、そのアミノ酸配列を逆翻訳して、そのアミノ酸配列をコードする核酸配列を、好ましくはその遺伝子を発現させるべき生物に関して最適であるコドンを用いて得る。次に、合成遺伝子を、典型的にはそのペプチドおよび必要であればいずれかの調節エレメントをコードするオリゴヌクレオチドを合成することにより作製する。その合成遺伝子を適切なクローニングベクターに挿入し、宿主細胞中にトランスフェクションする。次いでそのペプチドを選択された発現系および宿主に適した適切な条件下で発現させる。そのペプチドを標準的な方法により精製し、特性付ける。

【0224】

[00138] ペプチドミメティック前駆体は、例えばハイスループット、コンビナトリアル様式で、例えばハイスループット多チャンネル（ｐｏｌｙｃｈａｎｎｅｌ）コンビナトリアル合成装置(例えば、ＣｒｅｏＳａｌｕｓ（ケンタッキー州ルイビル）からのＴｈｕｒａｍｅｄ ＴＥＴＲＡＳマルチチャンネルペプチド合成装置、またはＡＡＰＰＴＥＣ，Ｉｎｃ．（ケンタッキー州ルイビル）からのＭｏｄｅｌ Ａｐｅｘ ３９６マルチチャネルペプチド合成装置）を用いて作製される。

【0225】

[00139] 以下の合成スキームは本発明を説明するためだけに提供されており、本明細書で記述されるような本発明の範囲を限定することは意図していない。

【0226】

[00140] 合成スキーム１〜５は式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の調製を記述している。その図を単純化するため、その説明的なスキームは、アジドアミノ酸アナログであるε−アジド−α−メチル−Ｌ−リジンおよびε−アジド−α−メチル−Ｄ−リジン、ならびにアルキンアミノ酸アナログであるＬ−プロパルギルグリシン、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、および（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸を示している。従って、下記の合成スキームにおいて、それぞれのＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_７およびＲ_８は−Ｈであり；それぞれのＬ_１は−（ＣＨ_２）_４−であり；そしてそれぞれのＬ_２は−（ＣＨ_２）−である。しかし、上記の詳細な記述全体を通して特筆したように、多くの他のアミノ酸アナログを用いることができ、ここでＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_７、Ｒ_８、Ｌ_１およびＬ_２は本明細書で開示される様々な構造から独立して選択することができる。

【0227】

[00141] 合成スキーム１：

【0228】

【化43】

【0229】

[00142] 合成スキーム１は、本明細書で開示されるような式Ｉの化合物を調製するために有用ないくつかの化合物の調製を記載する。キラル補助剤（Ｓ）−２−［Ｎ−（Ｎ’−ベンジルプロリル）アミノ］ベンゾフェノン（ＢＰＢ）およびアミノ酸（例えばグリシンまたはアラニン）から誘導されたシッフ塩基のＮｉ（ＩＩ）錯体を、Belokon et al. (1998), Tetrahedron Asymm. 9:4249-4252において記載されているように調製する。得られた錯体を続いてアジドまたはアルキニル部分を含むアルキル化試薬と反応させると、鏡像異性体富化された本明細書で開示される化合物が得られる。所望であれば、得られた化合物をペプチド合成での使用のために保護することができる。

【0230】

[00143] 合成スキーム２：

【0231】

【化44】

【0232】

[00144] 合成スキーム２に示す式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の合成のための一般法において、そのペプチドミメティック前駆体はアジド部分およびアルキン部分を含有し、溶液相または固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なアミノ酸Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロパルギルグリシン、ならびにアミノ酸（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−６−ヘプチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、Ｎ−メチル−ε−アジド−Ｌ−リジンおよびＮ−メチル−ε−アジド−Ｄ−リジンのＮ−α−Ｆｍｏｃ保護形態を用いて合成される。次いで、そのペプチドミメティック前駆体を、標準的な条件（例えば、９５％ＴＦＡのような強酸）により脱保護し、固相樹脂から切断する。そのペプチドミメティック前駆体を粗製混合物として、または反応前に精製した後、有機溶液または水溶液中で大環状化試薬、例えばＣｕ（Ｉ）と反応させる(Rostovtsev et al. (2002), Angew. Chem. Int. Ed. 41:2596-2599; Tornoe et al. (2002), J. Org. Chem. 67:3057-3064; Deiters et al. (2003), J. Am. Chem. Soc. 125:11782-11783; Punna et al. (2005), Angew. Chem. Int. Ed. 44:2215-2220)。１態様において、そのトリアゾール形成反応はα−ヘリックス形成を有利にする条件下で実施される。１態様において、その大環状化工程はＨ_２Ｏ、ＴＨＦ、ＣＨ_３ＣＮ、ＤＭＦ、ＤＩＰＥＡ、ｔＢｕＯＨ、またはその混合物からなる群から選択される溶媒中で実施される。別の態様において、その大環状化工程はＤＭＦ中で実施される。一部の態様において、その大環状化工程は緩衝された水性または部分的に水性の溶媒中で実施される。

【0233】

[00145] 合成スキーム３：

【0234】

【化45】

【0235】

[00146] 合成スキーム３に示す式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の合成のための一般法において、そのペプチドミメティック前駆体はアジド部分およびアルキン部分を含有し、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なアミノ酸Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロパルギルグリシン、ならびにアミノ酸（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−６−ヘプチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、Ｎ−メチル−ε−アジド−Ｌ−リジンおよびＮ−メチル−ε−アジド−Ｄ−リジンのＮ−α−Ｆｍｏｃ保護形態を用いて合成される。そのペプチドミメティック前駆体を、樹脂上で粗製混合物として大環状化試薬、例えばＣｕ（Ｉ）試薬と反応させる(Rostovtsev et al. (2002), Angew. Chem. Int. Ed. 41:2596-2599; Tornoe et al. (2002), J. Org. Chem. 67:3057-3064; Deiters et al. (2003), J. Am. Chem. Soc. 125:11782-11783; Punna et al. (2005), Angew. Chem. Int. Ed. 44:2215-2220)。次いで、得られたトリアゾール含有ペプチドミメティック大環状化合物を、標準的な条件（例えば、９５％ＴＦＡのような強酸）により脱保護し、固相樹脂から切断する。一部の態様において、その大環状化工程はＣＨ_２Ｃｌ_２、ＣｌＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌ、ＤＭＦ、ＴＨＦ、ＮＭＰ、ＤＩＰＥＡ、２，６−ルチジン、ピリジン、ＤＭＳＯ、Ｈ_２Ｏ、またはそれらの混合物からなる群から選択される溶媒中で実施される。一部の態様において、その大環状化工程は緩衝された水性または部分的に水性の溶媒中で実施される。

【0236】

[00147] 合成スキーム４：

【0237】

【化46】

【0238】

[00148] 合成スキーム４に示す式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の合成のための一般法において、そのペプチドミメティック前駆体はアジド部分およびアルキン部分を含有し、溶液相または固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なアミノ酸Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロパルギルグリシン、ならびにアミノ酸（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−６−ヘプチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、Ｎ−メチル−ε−アジド−Ｌ−リジンおよびＮ−メチル−ε−アジド−Ｄ−リジンのＮ−α−Ｆｍｏｃ保護形態を用いて合成される。次いで、そのペプチドミメティック前駆体を、標準的な条件（例えば、９５％ＴＦＡのような強酸）により脱保護し、固相樹脂から切断する。そのペプチドミメティック前駆体を粗製混合物として、または反応前に精製した後、大環状化試薬、例えばＲｕ（ＩＩ）試薬、例えばＣｐ^＊ＲｕＣｌ（ＰＰｈ_３）_２または［Ｃｐ^＊ＲｕＣｌ］_４(Rasmussen et al. (2007), Org. Lett. 9:5337-5339; Zhang et al. (2005), J. Am. Chem. Soc. 127:15998-15999)と反応させる。一部の態様において、その大環状化工程はＤＭＦ、ＣＨ_３ＣＮおよびＴＨＦからなる群から選択される溶媒中で実施される。

【0239】

[00149] 合成スキーム５：

【0240】

【化47】

【0241】

[00150] 合成スキーム５に示す式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の合成のための一般法において、そのペプチドミメティック前駆体はアジド部分およびアルキン部分を含有し、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なアミノ酸Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｌ−プロパルギルグリシン、ならびにアミノ酸（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−４−ペンチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−６−ヘプチン酸、（Ｓ）−２−アミノ−２−メチル−６−ヘプチン酸、Ｎ−メチル−ε−アジド−Ｌ−リジンおよびＮ−メチル−ε−アジド−Ｄ−リジンのＮ−α−Ｆｍｏｃ保護形態を用いて合成される。そのペプチドミメティック前駆体を樹脂上で粗製混合物として大環状化試薬、例えばＲｕ（ＩＩ）試薬と反応させる。例えば、その試薬はＣｐ^＊ＲｕＣｌ（ＰＰｈ_３）_２または［Ｃｐ^＊ＲｕＣｌ］_４であることができる(Rasmussen et al. (2007), Org. Lett. 9:5337-5339; Zhang et al. (2005), J. Am. Chem. Soc. 127:15998-15999)。一部の態様において、その大環状化工程はＣＨ_２Ｃｌ_２、ＣｌＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌ、ＣＨ_３ＣＮ、ＤＭＦ、およびＴＨＦからなる群から選択される溶媒中で実施される。

【0242】

[00151] 一部の態様において、式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物はトリアゾール部分上のハロゲン基置換、例えばヨード置換を含む。そのようなペプチドミメティック大環状化合物は、部分的な構造を有する前駆体から、本明細書で教示される架橋法を用いて調製することができる。そのような置換を含む本明細書で記載されるようなあらゆる長さのクロスリンカーを調製することができる。１態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は下記に示すスキームに従って調製される。その反応は、例えば、ＣｕＩおよびアミン配位子、例えばＴＥＡまたはＴＴＴＡの存在下で実施される。例えば、Hein et al. Angew. Chem., Int. Ed. 2009, 48, 8018-8021を参照。

【0243】

[00152]

【0244】

【化48】

【0245】

[00153] 他の態様において、ヨード置換されたトリアゾールが下記に示すスキームに従って生成される。例えば、下記の反応スキーム中の第２工程は、例えばＣｕＩおよびＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）を用いて、ＴＨＦの存在下で実施される（例えば、Zhang et al., J. Org. Chem. 2008, 73, 3630-3633を参照）。他の態様において、下記に示す反応スキーム中の第２工程は、例えばＣｕＩおよびヨウ素化剤、例えばＩＣｌを用いて実施される（例えば、Wu et al., Synthesis 2005, 1314-1318を参照）。

【0246】

【化49】

【0247】

[00154] 一部の態様において、ヨード置換されたトリアゾール部分をクロスカップリング反応、例えば鈴木カップリングまたは薗頭カップリングにおいて用いて、置換されたクロスリンカーを含むペプチドミメティック大環状化合物が得られる。下記に示すようなアルキンを用いる薗頭カップリングを、例えばパラジウム触媒、例えばＰｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２、ＣｕＩの存在下で、かつ塩基、例えばトリエチルアミンの存在下で実施することができる。下記に示すようなアリールボロン酸または置換アルケニルボロン酸を用いる鈴木カップリングを、触媒、例えばＰｄ（ＰＰｈ_３）_４の存在下で、かつ塩基、例えばＫ_２ＣＯ_３の存在下で実施することができる。

【0248】

【化50】

【0249】

[00155] ヨード置換トリアゾールと反応するあらゆる適切なトリアゾール置換基を、本明細書で記載される鈴木カップリングにおいて用いることができる。鈴木カップリングにおける使用のためのトリアゾール置換基の例を下記に示し：

【0250】

【化51】

【0251】

ここで“Ｃｙｃ”は適切なアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合により下記に記載するようなＲ_ａもしくはＲ_ｂ基で置換されている。

【0252】

[00156] 一部の態様において、その置換基は下記のものである：

【0253】

【化52】

【0254】

[00157] ヨード置換トリアゾールと反応するあらゆる適切な置換基を、本明細書で記載される薗頭カップリングにおいて用いることができる。薗頭カップリングにおける使用のためのトリアゾール置換基の例を下記に示し：

【0255】

【化53】

【0256】

ここで“Ｃｙｃ”は適切なアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合により下記に記載するようなＲ_ａもしくはＲ_ｂ基で置換されている。

【0257】

[00158] 一部の態様において、そのトリアゾール置換基は下記のものである：

【0258】

【化54】

【0259】

[00159] 一部の態様において、上記で示したＣｙｃ基はさらに少なくとも１個のＲ_ａまたはＲ_ｂ置換基により置換されている。一部の態様において、Ｒ_ａおよびＲ_ｂの少なくとも１つは独立して下記のものである：

【0260】

【化55】

【0261】

[00160] 他の態様において、そのトリアゾール置換基は

【0262】

【化56】

【0263】

であり、Ｒ_ａおよびＲ_ｂの少なくとも１つはアルキル（水素、メチル、またはエチルが含まれる）または下記のものである：

【0264】

【化57】

【0265】

[00161] 本発明は、本明細書で記載される式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物の合成において、非天然存在アミノ酸およびアミノ酸アナログの使用を意図している。安定なトリアゾール含有ペプチドミメティック大環状化合物の合成のために用いられる合成法に受け入れられるあらゆるアミノ酸またはアミノ酸アナログを、本発明において用いることができる。例えば、Ｌ−プロパルギルグリシンは本発明における有用なアミノ酸として意図される。しかし、異なるアミノ酸側鎖を含有する他のアルキン含有アミノ酸も本発明において有用である。例えば、Ｌ−プロパルギルグリシンはアミノ酸のα−炭素およびアミノ酸側鎖のアルキンの間に１つのメチレン単位を含有する。本発明は、α−炭素およびアルキンの間に複数のメチレン単位を含むアミノ酸の使用も意図している。アミノ酸Ｌ−リジン、Ｄ−リジン、アルファ−メチル−Ｌ−リジン、およびアルファ−メチル−Ｄ−リジンのアジドアナログも、本発明における有用なアミノ酸として意図される。しかし、異なるアミノ酸側鎖を含有する他の末端アジドアミノ酸も本発明において有用である。例えば、Ｌ−リジンのアジドアナログは、そのアミノ酸のα−炭素およびアミノ酸側鎖の末端アジドの間に４つのメチレン単位を含有する。本発明は、α−炭素および末端アジドの間に４つより少ない、または４つより多いメチレン単位を含むアミノ酸の使用も意図している。下記の表１は、本明細書で開示されるペプチドミメティック大環状化合物の調製において有用ないくつかのアミノ酸を示す。

【0266】

【表2】

【0267】

[00162] 一部の態様において、そのアミノ酸およびアミノ酸アナログはＤ−立体配置のものである。他の態様において、それらはＬ−立体配置のものである。一部の態様において、そのペプチドミメティック中に含有されるアミノ酸およびアミノ酸アナログの一部はＤ−立体配置のものであり、一方でそのアミノ酸およびアミノ酸アナログの一部はＬ−立体配置のものである。一部の態様において、そのアミノ酸アナログはα，α−ジ置換されており、例えばα−メチル−Ｌ−プロパルギルグリシン、α−メチル−Ｄ−プロパルギルグリシン、ε−アジド−アルファ−メチル−Ｌ−リジン、およびε−アジド−アルファ−メチル−Ｄ−リジンである。一部の態様において、そのアミノ酸アナログはＮ−アルキル化されており、例えばＮ−メチル−Ｌ−プロパルギルグリシン、Ｎ−メチル−Ｄ−プロパルギルグリシン、Ｎ−メチル−ε−アジド−Ｌ−リジン、およびＮ−メチル−ε−アジド−Ｄ−リジンである。

【0268】

[00163] 式ＩＩの大環状化合物の調製は、例えば２００７年１２月１７日に出願された米国特許出願公開第１１／９５７，３２５号において記載されており、それを本明細書に援用する。合成スキーム６〜９は、そのような式ＩＩの化合物の調製を記載している。その図を単純化するため、その説明的なスキームはＬ−またはＤ−システインから誘導されたアミノ酸アナログを示しており、ここでＬ_１およびＬ_３は両方とも−（ＣＨ_２）−である。しかし、上記の詳細な記述全体を通して特筆したように、多くの他のアミノ酸アナログを用いることができ、ここでＬ_１およびＬ_３は独立して本明細書で開示される様々な構造から選択することができる。記号“［ＡＡ］_ｍ”、“［ＡＡ］_ｎ”、“［ＡＡ］_ｏ”は、アミド結合で連結された部分、例えば天然または非天然アミノ酸の配列を表す。前に記載したように、それぞれの“ＡＡ”の存在はあらゆる他の“ＡＡ”の存在から独立しており、“［ＡＡ］_ｍ”のような式は、例えば同一でないアミノ酸の配列ならびに同一のアミノ酸の配列を包含する。

【0269】

合成スキーム６：

【0270】

【化58】

【0271】

[00164] スキーム６において、そのペプチドミメティック前駆体は２つの−ＳＨ部分を含有し、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なＮ−α−Ｆｍｏｃアミノ酸、例えばＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−トリチル−Ｌ−システインまたはＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−トリチル−Ｄ−システインを用いて合成される。Ｄ−システインまたはＬ−システインのアルファ−メチル化されたバージョンを既知の方法（Seebach et al. (1996), Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 35:2708-2748、およびその中の参考文献）により生成し、次いでそれを既知の方法（“Bioorganic Chemistry: Peptides and Proteins”, Oxford UniversityPress, New York: 1998、その全内容を本明細書に援用する）により適切に保護されたＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−トリチル単量体へと変換する。次いで、その前駆体ペプチドミメティックを、標準的な条件（例えば、９５％ＴＦＡのような強酸）により脱保護し、固相樹脂から切断する。その前駆体ペプチドミメティックを粗製混合物として、または反応前に精製した後、有機溶液または水溶液中でＸ−Ｌ_２−Ｙと反応させる。一部の態様において、そのアルキル化反応は、大環状化を有利にするため、かつ重合を避けるため、希薄な条件（すなわち０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ）下で実施される。一部の態様において、そのアルキル化反応は、有機溶液、例えば液体ＮＨ_３（Mosberg et al. (1985), J. Am.Chem. Soc. 107:2986-2987; Szewczuk et al. (1992), Int. J. Peptide Protein Res. 40 :233-242）、ＮＨ_３／ＭｅＯＨ、またはＮＨ_３／ＤＭＦ（Or et al. (1991), J. Org. Chem. 56:3146-3149）中で実施される。他の態様において、そのアルキル化は水溶液、例えば６ＭグアニジウムＨＣＬ、ｐＨ８中で実施される（Brunel et al. (2005), Chem. Commun. (20):2552-2554）。他の態様において、アルキル化反応のために用いられる溶媒はＤＭＦまたはジクロロエタンである。

【0272】

合成スキーム７：

【0273】

【化59】

【0274】

[00165] スキーム７において、その前駆体ペプチドミメティックは２つ以上の−ＳＨ部分を含有し、その内の２つはそれらの選択的な脱保護およびそれに続く大員環形成のためのアルキル化を可能にするように特別に保護されている。その前駆体ペプチドミメティックは、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なＮ−α−Ｆｍｏｃアミノ酸、例えばＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−ｐ−メトキシトリチル−Ｌ−システインまたはＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−ｐ−メトキシトリチル−Ｄ−システインを用いて合成される。Ｄ−システインまたはＬ−システインのアルファ−メチル化されたバージョンを既知の方法（Seebach et al. (1996), Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 35:2708-2748、およびその中の参考文献）により生成し、次いでそれを既知の方法（Bioorganic Chemistry: Peptides and Proteins, Oxford University Press, New York: 1998、その全内容を本明細書に援用する）により適切に保護されたＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−ｐ−メトキシトリチル単量体へと変換する。次いで、そのペプチドミメティック前駆体のＭｍｔ保護基を標準的な条件（例えば穏やかな酸、例えばＤＣＭ中１％ＴＦＡ）により選択的に切断する。次いでその前駆体ペプチドミメティックを、樹脂上で有機溶液中でＸ−Ｌ_２−Ｙと反応させる。例えば、その反応は立体障害塩基（ｈｉｎｄｅｒｅｄ ｂａｓｅ）、例えばジイソプロピルエチルアミンの存在下で行われる。一部の態様において、そのアルキル化反応は、有機溶液、例えば液体ＮＨ_３（Mosberg et al. (1985), J. Am.Chem. Soc. 107:2986-2987; Szewczuk et al. (1992), Int. J. Peptide Protein Res. 40 :233-242）、ＮＨ_３／ＭｅＯＨ、またはＮＨ_３／ＤＭＦ（Or et al. (1991), J. Org. Chem. 56:3146-3149）中で実施される。他の態様において、そのアルキル化反応はＤＭＦまたはジクロロエタン中で実施される。次いでそのペプチドミメティック大環状化合物を標準的な条件（例えば、９５％ＴＦＡのような強酸）により脱保護し、固相樹脂から切断する。

【0275】

合成スキーム８：

【0276】

【化60】

【0277】

[00166] スキーム８において、そのペプチドミメティック前駆体は２つ以上の−ＳＨ部分を含有し、その内の２つはそれらの選択的な脱保護およびそれに続く大員環形成のためのアルキル化を可能にするように特別に保護されている。そのペプチドミメティック前駆体は、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により、商業的に入手可能なＮ−α−Ｆｍｏｃアミノ酸、例えばＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−ｐ−メトキシトリチル−Ｌ−システイン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−ｐ−メトキシトリチル−Ｄ−システイン、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−Ｓ−ｔ−ブチル−Ｌ−システイン、およびＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−Ｓ−ｔ−ブチル−Ｄ−システインを用いて合成される。Ｄ−システインまたはＬ−システインのアルファ−メチル化されたバージョンを既知の方法（Seebach et al. (1996), Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 35:2708-2748、およびその中の参考文献）により生成し、次いでそれを既知の方法（Bioorganic Chemistry: Peptides and Proteins, Oxford University Press, New York: 1998、その全内容を本明細書に援用する）により適切に保護されたＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−ｐ−メトキシトリチルまたはＮ−α−Ｆｍｏｃ−Ｓ−Ｓ−ｔ−ブチル単量体へと変換する。そのペプチドミメティック前駆体のＳ−Ｓ−ｔブチル保護基を既知の条件（例えばＤＭＦ中２０％ ２−メルカプトエタノール、参考文献：Galande et al. (2005), J. Comb. Chem. 7:174-177）により選択的に切断する。次いでその前駆体ペプチドミメティックを、樹脂上で有機溶液中でモル過剰量のＸ−Ｌ_２−Ｙと反応させる。例えば、その反応は立体障害塩基、例えばジイソプロピルエチルアミンの存在下で行われる。次いで、そのペプチドミメティック前駆体のＭｍｔ保護基を標準的な条件（例えば穏やかな酸、例えばＤＣＭ中１％ＴＦＡ）により選択的に切断する。次いでそのペプチドミメティック前駆体を、樹脂上で有機溶液中で立体障害塩基を用いた処理により環化させる。一部の態様において、そのアルキル化反応は、有機溶液、例えばＮＨ_３／ＭｅＯＨまたはＮＨ_３／ＤＭＦ（Or et al. (1991), J. Org. Chem. 56:3146-3149）中で実施される。次いで、そのペプチドミメティック大環状化合物を標準的な条件（例えば、９５％ＴＦＡのような強酸）により脱保護し、固相樹脂から切断する。

【0278】

合成スキーム９：

【0279】

【化61】

【0280】

[00167] スキーム９において、そのペプチドミメティック前駆体は２つのＬ−システイン部分を含有する。そのペプチドミメティック前駆体は、生きた細胞における既知の生物学的発現系により、または既知のインビトロの無細胞発現法により合成される。その前駆体ペプチドミメティックを、粗製混合物として、または反応前に精製した後、有機溶液または水溶液中でＸ−Ｌ_２−Ｙと反応させる。一部の態様において、そのアルキル化反応は、大環状化を有利にするため、かつ重合を避けるため、希薄な条件（すなわち０．１５ｍｍｏｌ／Ｌ）下で実施される。一部の態様において、そのアルキル化反応は、有機溶液、例えば液体ＮＨ_３（Mosberg et al. (1985), J. Am.Chem. Soc. 107:2986-2987; Szewczuk et al. (1992), Int. J. Peptide Protein Res. 40 :233-242）、ＮＨ_３／ＭｅＯＨ、またはＮＨ_３／ＤＭＦ（Or et al. (1991), J. Org. Chem. 56:3146-3149）中で実施される。他の態様において、そのアルキル化は水溶液、例えば６ＭグアニジウムＨＣＬ、ｐＨ８中で実施される（Brunel et al. (2005), Chem. Commun. (20):2552-2554）。他の態様において、そのアルキル化はＤＭＦまたはジクロロエタン中で実施される。別の態様において、そのアルキル化は非変性水溶液中で実施され、さらに別の態様において、そのアルキル化はα−ヘリックス構造の形成を有利にする条件下で実施される。さらに別の態様において、そのアルキル化は、そのアルキル化の間に結合したα−ヘリックス立体構造の形成を誘導するため、その前駆体ペプチドミメティックの別のタンパク質への結合を有利にする条件下で実施される。

【0281】

[00168] チオール基との反応に適しているＸおよびＹに関する様々な態様が予想されている。一般に、それぞれのＸまたはＹは独立して表２に示される一般的なカテゴリーから選択される。例えば、ＸおよびＹはハライド、例えば−Ｃｌ、−Ｂｒまたは−Ｉである。本明細書で記載される大員環形成リンカーのいずれかを、示した配列のいずれかとのあらゆる組み合わせで、そして本明細書で示されるＲ−置換基のいずれかとのあらゆる組み合わせでも用いることができる。

【0282】

【表3】

【0283】

[00169] 本発明は、式ＩＩのペプチドミメティック大環状化合物の合成における天然存在および非天然存在アミノ酸およびアミノ酸アナログの両方の使用を意図している。安定なビス−スルフヒドリルを含有するペプチドミメティック大環状化合物の合成のために用いられる合成法に受け入れられるあらゆるアミノ酸またはアミノ酸アナログを、本発明において用いることができる。例えば、システインは本発明における有用なアミノ酸として意図される。しかし、異なるアミノ酸側鎖を含有するシステイン以外の硫黄含有アミノ酸も有用である。例えば、システインはアミノ酸のα−炭素およびアミノ酸側鎖の末端−ＳＨの間に１つのメチレン単位を含有する。本発明は、α−炭素および末端の−ＳＨの間に複数のメチレン単位を含むアミノ酸の使用も意図している。限定的でない例には、α−メチル−Ｌ−ホモシステインおよびα−メチル−Ｄ−ホモシステインが含まれる。一部の態様において、そのアミノ酸およびアミノ酸アナログはＤ−立体配置のものである。他の態様において、それらはＬ−立体配置のものである。一部の態様において、そのペプチドミメティック中に含有されるアミノ酸およびアミノ酸アナログの一部はＤ−立体配置のものであり、一方でそのアミノ酸およびアミノ酸アナログの一部はＬ−立体配置のものである。一部の態様において、そのアミノ酸アナログはα，α−ジ置換されており、例えばα−メチル−Ｌ−システインおよびα−メチル−Ｄ−システインである。

【0284】

[00170] 本発明には、大員環形成リンカーがそのペプチドミメティック前駆体中の２個以上の−ＳＨ部分を連結して本明細書で開示されるペプチドミメティック大環状化合物を形成するために用いられている大環状化合物が含まれる。上記で記載したように、その大員環形成リンカーは立体構造の硬性、増大した代謝安定性および／または増大した細胞透過性を与える。さらに、一部の態様において、その大員環を形成する連結は、そのペプチドミメティック大環状化合物のα−ヘリックス二次構造を安定化する。上記で定義したように、その大員環形成リンカーは式Ｘ−Ｌ_２−Ｙのものであり、ここでＸおよびＹは両方とも同じまたは異なる部分である。ＸおよびＹは両方とも、１つの大員環形成リンカー−Ｌ_２−がビス−スルフヒドリルを含有するペプチドミメティック大環状化合物をビスアルキル化することを可能にする化学特性を有する。上記で定義したように、そのリンカー−Ｌ_２−にはアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、もしくはヘテロシクロアリーレン、または−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−が含まれ、その全てが場合により上記で定義したようなＲ_５基で置換されていることができる。さらに、その大員環形成リンカー−Ｌ_２−内の、そのスルフヒドリル含有アミノ酸の−ＳＨに結合した炭素以外の１〜３個の炭素原子は、場合によりヘテロ原子、例えばＮ、ＳまたはＯで置換されている。

【0285】

[00171] その大員環形成リンカーＸ−Ｌ_２−ＹのＬ_２構成要素は、とりわけそのペプチドミメティック大環状化合物を形成するために用いられる２個のアミノ酸アナログの位置の間の距離に応じて、長さを変動させることができる。さらに、その大員環形成リンカーのＬ_１および／またはＬ_３構成要素の長さは変動するため、安定なペプチドミメティック大環状化合物を形成するための適切な全体の長さのリンカーを作り出すためにＬ_２の長さも変動させることができる。例えば、用いられるアミノ酸アナログをＬ_１およびＬ_３のそれぞれに追加のメチレン単位を追加することにより変更する場合、Ｌ_１およびＬ_３の増大した長さを相殺するために、Ｌ_２の長さをおおよそ２個のメチレン単位に相当する長さだけ減少させる。

【0286】

[00172] 一部の態様において、Ｌ_２は式−（ＣＨ_２）_ｎ−のアルキレン基であり、ここでｎは約１〜約１５の整数である。例えば、ｎは１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。他の態様において、Ｌ_２はアルケニレン基である。さらに他の態様において、Ｌ_２はアリール基である。

【0287】

[00173] 表３はＸ−Ｌ_２−Ｙ基の追加の態様を示す。

【0288】

【表4】

【0289】

[00174] 適切であると予想されるペプチドミメティック大環状化合物を形成する追加の方法には、Mustapa, M. Firouz Mohd et al., J. Org. Chem (2003), 68, pp. 8193-8198; Yang, Bin et al. Bioorg Med. Chem. Lett. (2004), 14, pp. 1403-1406；米国特許第５，３６４，８５１号；米国特許第５，４４６，１２８号；米国特許第５，８２４，４８３号；米国特許第６，７１３，２８０号；および米国特許第７，２０２，３３２号により開示された方法が含まれる。そのような態様において、アルファ位において追加の置換基Ｒ−を含有するアミノ酸前駆体が用いられる。そのようなアミノ酸をその大環状化合物前駆体中に所望の位置において組み込み、それはそのクロスリンカーが置換される位置、あるいはその大環状化合物前駆体の配列中の他の箇所であることができる。次いで示された方法に従って前駆体の環化をもたらす。

【0290】

[00175] 一部の態様において、そのアミノ酸の−ＮＨ部分は、−Ｆｍｏｃおよび−Ｂｏｃが含まれるがそれらに限定されない保護基を用いて保護される。他の態様において、そのアミノ酸はそのペプチドミメティック大環状化合物の合成の前に保護されない。

【0291】

アッセイ
[00176] ペプチドミメティック大環状化合物の特性を、例えば下記に記載する方法を用いることによりアッセイする。一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は、本明細書で記載される置換基を欠いた対応するポリペプチドと対比して向上した生物学的特性を有する。

【0292】

α−ヘリックス性を決定するためのアッセイ
[00177] 溶液中では、α−ヘリックスドメインを有するポリペプチドの二次構造はランダムコイル構造およびα−ヘリックス構造の間で動的平衡に達すると考えられ、これはしばしば“ヘリックス性パーセント”として表される。従って、例えば、アルファ−ヘリックスドメインは溶液中で主にランダムコイルであり、α−ヘリックス含量は通常は２５％より下である。一方で、最適化されたリンカーを有するペプチドミメティック大環状化合物は、例えば対応する非架橋ポリペプチドのアルファ−ヘリックス性よりも少なくとも２倍大きいアルファ−ヘリックス性を有する。一部の態様において、大環状化合物は５０％より大きいアルファ−ヘリックス性を有するであろう。ペプチドミメティック大環状化合物のヘリックス性をアッセイするために、その化合物を水溶液中で溶解させる（例えば、ｐＨ７の５０ｍＭリン酸カリウム溶液、または蒸留したＨ_２Ｏ、２５〜５０μＭの濃度にする）。円二色性（ＣＤ）スペクトルを、分光偏光計（例えば、Ｊａｓｃｏ Ｊ−７１０）上で、標準的な測定パラメーター（例えば、温度２０℃；波長１９０〜２６０ｎｍ；ステップ解像度０．５ｎｍ；速度２０ｎｍ／秒；蓄積（ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｓ）１０；応答１秒；バンド幅１ｎｍ；経路長（ｐａｔｈ ｌｅｎｇｔｈ）０．１ｃｍ）を用いて得る。各ペプチドのα−ヘリックス含量を、平均残基楕円率（ｍｅａｎ ｒｅｓｉｄｕｅ ｅｌｌｉｐｔｉｃｉｔｙ）（例えば［Φ］２２２ｏｂｓ）をモデルのヘリックス性デカペプチドに関する報告された値で割ることにより計算する(Yang et al. (1986), Methods Enzymol. 130:208)。

【0293】

融解温度（Ｔｍ）を決定するためのアッセイ
[00178] α−ヘリックスのような二次構造を含むペプチドミメティック大環状化合物は、例えば対応する非架橋ポリペプチドよりも高い融解温度を示す。典型的には、ペプチドミメティック大環状化合物は６０℃より高いＴｍを示し、これは水溶液中での高度に安定な構造を表す。大員環形成の融解温度への作用をアッセイするため、ペプチドミメティック大環状化合物または非修飾ペプチドを蒸留Ｈ_２Ｏ中で（例えば５０μＭの終温度で）溶解させ、ある温度範囲（例えば４〜９５℃）にわたって分光偏光計（例えばＪａｓｃｏ Ｊ−７１０）上で標準的なパラメーター（例えば、波長２２２ｎｍ；ステップ解像度０．５ｎｍ；速度２０ｎｍ／秒；蓄積１０；応答１秒；バンド幅１ｎｍ；温度上昇速度：１℃／分；経路長０．１ｃｍ）を用いて楕円率における変化を測定することによりＴｍを決定する。

【0294】

プロテアーゼ抵抗性アッセイ
[00179] ペプチド主鎖のアミド結合はプロテアーゼによる加水分解を受けやすく、それによりペプチド系化合物をインビボでの急速な分解に弱くする。しかし、ペプチドヘリックス形成は典型的にはアミド主鎖を埋没させ、従ってそれをタンパク質分解性の切断から遮閉することができる。ペプチドミメティック大環状化合物にインビトロでトリプシンタンパク質分解を施して、対応する非架橋ポリペプチドと比較した分解速度におけるあらゆる変化を評価することができる。例えば、そのペプチドミメティック大環状化合物および対応する非架橋ポリペプチドをトリプシンアガロースと共にインキュベートし、その反応を様々な時点で遠心分離により停止し、続いてＨＰＬＣに注入して２８０ｎｍにおける紫外吸収により残留基質を定量化する。簡潔には、そのペプチドミメティック大環状化合物およびペプチドミメティック前駆体（５ｍｃｇ）をトリプシンアガロース（Ｐｉｅｒｃｅ）（Ｓ／Ｅ 約１２５）と共に０、１０、２０、９０、および１８０分間インキュベートする。反応を高速での卓上遠心分離により停止し；分離した上清中の残留基質を２８０ｎｍにおけるＨＰＬＣに基づくピーク検出により定量化する。タンパク質分解反応は一次速度論を示し、速度定数ｋをｌｎ［Ｓ］対時間のプロットから決定する（ｋ＝−１×勾配）。

【0295】

エクスビボ安定性アッセイ
[00180] 最適化されたリンカーを有するペプチドミメティック大環状化合物は、例えば対応する非架橋ポリペプチドのエクスビボ半減期よりも少なくとも２倍長いエクスビボ半減期を有し、１２時間以上のエクスビボ半減期を有する。エクスビボ血清安定性試験のために、多様なアッセイを用いることができる。例えば、ペプチドミメティック大環状化合物および対応する非架橋ポリペプチド（２ｍｃｇ）を、新鮮なマウス、ラットおよび／またはヒトの血清（２ｍＬ）と共に３７℃で０、１、２、４、８、および２４時間インキュベートする。未変化の化合物のレベルを決定するために、下記の手順を用いることができる：１００μｌの血清を２ｍｌの遠心チューブに移し、続いて１０μＬの５０％ギ酸および５００μＬのアセトニトリルを添加し、１４，０００ＲＰＭで４±２℃において１０分間遠心分離することにより、試料を抽出する。次いで上清を新しい２ｍｌチューブに移し、Ｔｕｒｂｏｖａｐ上でＮ_２＜１０ｐｓｉ、３７℃の下で蒸発させる。その試料を１００μＬの５０：５０ アセトニトリル：水中で再構成し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析を行なう。

【0296】

インビトロ結合アッセイ
[00181] 受容体タンパク質に対するペプチドミメティック大環状化合物およびペプチドミメティック前駆体の結合および親和性を評価するために、例えば蛍光偏光アッセイ（ＦＰＡ）が用いられる。ＦＰＡ技法は、偏光および蛍光トレーサーを用いて分子の配向および運動性を測定する。偏光により励起されると、高い見掛け分子量を有する分子に付着した蛍光トレーサー（例えば、ＦＩＴＣ）（例えば、大きいタンパク質に結合したＦＩＴＣ標識ペプチド）は、より小さな分子に付着した蛍光トレーサー（例えば、溶液中で遊離しているＦＩＴＣ標識ペプチド）と比較してそれらの回転速度がより遅いため、より高いレベルの偏光蛍光を発する。

【0297】

[00182] 例えば、蛍光標識したペプチドミメティック大環状化合物（２５ｎＭ）を受容体タンパク質（２５〜１０００ｎＭ）と共に結合用緩衝液（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ、ｐＨ７．４）中で室温において３０分間インキュベートする。結合活性を、例えばルミネセンス分光光度計（例えば、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ ＬＳ５０Ｂ）上で蛍光偏光により測定する。Ｋｄ値は、例えばＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，カリフォルニア州サンディエゴ）を用いる非線形回帰分析により決定することができる。ペプチドミメティック大環状化合物は、一部の態様において、対応する非架橋ポリペプチドと類似の、またはより低いＫｄを示す。

【0298】

ペプチド−タンパク質相互作用のアンタゴニストを特性付けるためのインビトロ置換アッセイ
[00183] ペプチドおよび受容体タンパク質の間の相互作用に拮抗する化合物の結合および親和性を評価するために、例えばペプチドミメティック前駆体配列に由来する蛍光標識したペプチドミメティック大環状化合物を利用する蛍光偏光アッセイ（ＦＰＡ）が用いられる。そのＦＰＡ技法は、偏光および蛍光トレーサーを用いて分子の配向および運動性を測定する。偏光により励起されると、高い見掛け分子量を有する分子に付着した蛍光トレーサー（例えば、ＦＩＴＣ）（例えば、大きいタンパク質に結合したＦＩＴＣ標識ペプチド）は、より小さな分子に付着した蛍光トレーサー（例えば、溶液中で遊離しているＦＩＴＣ標識ペプチド）と比較してそれらの回転速度がより遅いため、より高いレベルの偏光蛍光を発する。蛍光標識したペプチドミメティック大環状化合物および受容体タンパク質の間の相互作用に拮抗する化合物は、競合結合ＦＰＡ実験で検出されるであろう。

【0299】

[00184] 例えば、推定アンタゴニスト化合物（１ｎＭ〜１ｍＭ）および蛍光標識したペプチドミメティック大環状化合物（２５ｎＭ）を受容体タンパク質（５０ｎＭ）と共に結合緩衝液（１４０ｍＭ ＮａＣｌ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣＬ、ｐＨ７．４）中で室温において３０分間インキュベートする。アンタゴニスト結合活性を、例えば発光分光光度計（例えば、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ ＬＳ５０Ｂ）上で蛍光偏光により測定する。Ｋｄ値は、例えばＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，カリフォルニア州サンディエゴ）を用いる非線形回帰分析により決定することができる。

【0300】

[00185] あらゆるクラスの分子、例えば小さい有機分子、ペプチド、オリゴヌクレオチドまたはタンパク質を、このアッセイで推定アンタゴニストとして調べることができる。

【0301】

親和性選択−質量分析によるタンパク質−リガンド結合に関するアッセイ
[00186] タンパク質に関する被験化合物の結合および親和性を評価するために、例えば親和性選択質量分析アッセイが用いられる。タンパク質−リガンド結合実験は、システムワイド制御実験（ｓｙｓｔｅｍ−ｗｉｄｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ）に関して概説される下記の代表的な手順に従って、１μＭのペプチドミメティック大環状化合物＋５μＭのｈＭＤＭ２を用いて実施される。ペプチドミメティック大環状化合物の４０μＭストック溶液の１μＬ ＤＭＳＯアリコートを、１９μＬのＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水：１５０ｍＭのＮａＣｌを含有する５０ｍＭ、ｐＨ７．５のリン酸緩衝液）中で溶解させる。得られた溶液を反復ピペッティングにより混合し、１００００ｇで１０分間の遠心分離により清澄にする。得られた上清の４μＬアリコートに、４μＬのＰＢＳ中１０μＭのｈＭＤＭ２を添加する。従って、それぞれ８．０μＬの実験試料は、ＰＢＳ中５．０μＭ濃度のタンパク質４０ｐｍｏｌ（１．５μｇ）＋１μＭペプチドミメティック大環状化合物および２．５％ＤＭＳＯを含有する。各濃度点に関してこうして調製した二重（Ｄｕｐｌｉｃａｔｅ）試料を室温で６０分間インキュベートし、次いで４℃に冷却した後、５．０μＬ注入液のサイズ排除クロマトグラフィー−ＬＣ−ＭＳ分析を実施する。標的タンパク質、タンパク質−リガンド複合体、および結合していない化合物を含有する試料をＳＥＣカラム上に注入し、ここでその複合体は迅速ＳＥＣ工程により結合していない構成要素から分離される。ＳＥＣカラム溶離液をＵＶ検出器を用いてモニターして、ＳＥＣカラムのボイド容量中に溶離する早期溶離タンパク質画分がカラム上に保持されている結合していない構成要素から十分に分離されていることを確認する。タンパク質およびタンパク質−リガンド複合体を含有するピークが一次ＵＶ検出器から溶離した後、それは試料ループに入り、そこでそれはＳＥＣステージからの流動流（ｆｌｏｗ ｓｔｒｅａｍ）から切り離されて、バルブ機構（ｖａｌｖｉｎｇ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ）によりＬＣ−ＭＳに直接移される。そのペプチドミメティック大環状化合物の（Ｍ＋３Ｈ）^３＋イオンがＥＳＩ−ＭＳにより予想されたｍ／ｚにおいて観察され、そのタンパク質−リガンド複合体の検出が確証される。

【0302】

タンパク質−リガンドのＫｄ滴定実験に関するアッセイ
[00187] タンパク質に関する被験化合物の結合および親和性を評価するために、例えばタンパク質−リガンドのＫｄ滴定実験が実施される。タンパク質−リガンドのＫ_ｄ滴定実験は下記の通りに実施される：系列希釈した滴定剤ペプチドミメティック大環状化合物のストック溶液（５、２．５、...、０．０９８ｍＭ）の２μＬ ＤＭＳＯアリコートを調製し、次いで３８μＬのＰＢＳ中で溶解させる。得られた溶液を反復ピペッティングにより混合し、１００００ｇで１０分間の遠心分離により清澄にする。得られた上清の４．０μＬアリコートに、４．０μＬのＰＢＳ中１０μＭのｈＭＤＭ２を添加する。従って、それぞれ８．０μＬの実験試料は、ＰＢＳ中５．０μＭ濃度のタンパク質４０ｐｍｏｌ（１．５μｇ）、変動濃度（１２５、６２．５、...、０．２４μＭ）の滴定剤ペプチド、および２．５％のＤＭＳＯを含有する。各濃度点に関してこうして調製した二重試料を室温で３０分間インキュベートし、次いで４℃に冷却した後、２．０μＬ注入液のＳＥＣ−ＬＣ−ＭＳ分析を実施する。（Ｍ＋Ｈ）^１＋、（Ｍ＋２Ｈ）^２＋、（Ｍ＋３Ｈ）^３＋、および／または（Ｍ＋Ｎａ）^１＋イオンをＥＳＩ−ＭＳにより観察し；抽出されたイオンクロマトグラムを定量化し、次いで“A General Technique to Rank Protein-Ligand Binding Affinities and Determine Allosteric vs. Direct Binding Site Competition in Compound Mixtures.” Annis, D. A.; Nazef, N.; Chuang, C. C.; Scott, M. P.; Nash, H. M. J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 15495-15503において、また、“ALIS: An Affinity Selection-Mass Spectrometry System for the Discovery and Characterization of Protein-Ligand Interactions” D. A. Annis, C.-C. Chuang, and N. Nazef. In Mass Spectrometry in Medicinal Chemistry. Wanner K, Hoefner Gによる編集: Wiley-VCH; 2007:121-184. Mannhold R, Kubinyi H, Folkers G (シリーズの編者): Methods and Principles in Medicinal Chemistryにおいても記述されているように、方程式に当てはめて結合親和性Ｋ_ｄを得る。

【0303】

親和性選択−質量分析による競合結合実験に関するアッセイ
[00188] 被験化合物がタンパク質に競合結合する能力を決定するために、例えば親和性選択質量分析アッセイを実施する。３種類の化合物のそれぞれの４００μＭストックの２μＬアリコートを１４μＬのＤＭＳＯと組み合わせることにより、構成要素あたり４０μＭのリガンドの混合物を調製する。次いで、この構成要素あたり４０μＭの混合物の１μＬアリコートを、滴定剤ペプチドミメティック大環状化合物の系列希釈ストック溶液（１０、５、２．５、...、０．０７８ｍＭ）の１μＬ ＤＭＳＯアリコートと組み合わせる。これらの２μＬの試料を３８μＬのＰＢＳ中で溶解させる。得られた溶液を反復ピペッティングにより混合し、１００００ｇで１０分間の遠心分離により清澄にする。得られた上清の４．０μＬアリコートに、４．０μＬのＰＢＳ中１０μＭのｈＭＤＭ２タンパク質を添加する。従って、それぞれ８．０μＬの実験試料は、ＰＢＳ中５．０μＭ濃度のタンパク質４０ｐｍｏｌ（１．５μｇ）＋０．５μＭのリガンド、２．５％のＤＭＳＯ、および変動濃度（１２５、６２．５、...、０．９８μＭ）の滴定剤ペプチドミメティック大環状化合物を含有する。各濃度点に関してこうして調製した二重試料を室温で６０分間インキュベートし、次いで４℃に冷却した後、２．０μＬ注入液のＳＥＣ−ＬＣ−ＭＳ分析を実施する。これらおよび他の方法に関する追加の詳細が“A General Technique to Rank Protein-Ligand Binding Affinities and Determine Allosteric vs. Direct Binding Site Competition in Compound Mixtures.” Annis, D. A.; Nazef, N.; Chuang, C. C.; Scott, M. P.; Nash, H. M. J. Am. Chem. Soc. 2004, 126, 15495-15503において、また、“ALIS: An Affinity Selection-Mass Spectrometry System for the Discovery and Characterization of Protein-Ligand Interactions” D. A. Annis, C.-C. Chuang, and N. Nazef. In Mass Spectrometry in Medicinal Chemistry. Wanner K, Hoefner Gによる編集: Wiley-VCH; 2007:121-184. Mannhold R, Kubinyi H, Folkers G (シリーズの編者): Methods and Principles in Medicinal Chemistryにおいても提供されている。

【0304】

無傷細胞における結合アッセイ
[00189] ペプチドまたはペプチドミメティック大環状化合物の、無傷細胞におけるそれらの天然の受容体に対する結合を、免疫沈降実験により測定することができる。例えば、無傷細胞を蛍光標識した（ＦＩＴＣ標識した）化合物と共に血清の非存在下で４時間インキュベートし、続いて血清交換および４〜１８時間にわたるさらなるインキュベーションを行なう。次いで細胞をペレット化し、溶解用緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ［ｐＨ７．６］、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１％ ＣＨＡＰＳおよびプロテアーゼ阻害剤カクテル）中で４℃において１０分間インキュベートする。抽出液を１４，０００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、上清を収集し、１０μｌのヤギ抗ＦＩＴＣ抗体と共に４℃で回転させながら２時間インキュベートし、続いてプロテインＡ／Ｇ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（５０μｌの５０％ビーズスラリー）と共に４℃でさらに２時間インキュベートする。迅速な遠心分離の後、そのペレットを増大する塩濃度（例えば、１５０、３００、５００ｍＭ）を含有する溶解用緩衝液中で洗浄する。次いでそのビーズを１５０ｍＭ ＮａＣｌで再平衡化した後、ＳＤＳを含有する試料用緩衝液を添加して煮沸する。遠心分離後、上清を場合により４％〜１２％勾配ビス−Ｔｒｉｓゲルを用いて電気泳動し、続いてＩｍｍｏｂｉｌｏｎ−Ｐ膜に転写する。ブロッキング後、ブロットを場合によりＦＩＴＣを検出する抗体と、そしてペプチドミメティック大環状化合物に結合するタンパク質を検出する１種類以上の抗体ともインキュベートする。

【0305】

細胞透過性アッセイ
[00190] ペプチドミメティック大環状化合物は、例えば対応する非架橋大環状化合物と比較してより細胞透過性である。最適化されたリンカーを有するペプチドミメティック大環状化合物は、例えば対応する非架橋大環状化合物よりも少なくとも２倍大きい細胞透過性を有し、しばしば適用されるペプチドミメティック大環状化合物の２０％以上が４時間後に細胞に透過していることが観察されるであろう。ペプチドミメティック大環状化合物および対応する非架橋大環状化合物の細胞透過性を測定するために、無傷細胞を、蛍光標識した（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｌｙ−ｌａｂｅｌｅｄ）（例えば蛍光標識した（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎａｔｅｄ））ペプチドミメティック大環状化合物または対応する非架橋大環状化合物（１０μＭ）と共に、無血清培地中で３７℃において４時間インキュベートし、培地で２回洗浄し、トリプシン（０．２５％）と共に３７℃で１０分間インキュベートする。細胞を再度洗浄し、ＰＢＳ中で再懸濁する。細胞の蛍光を、例えばＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターまたはＣｅｌｌｏｍｉｃｓのＫｉｎｅｔｉｃＳｃａｎ（登録商標）ＨＣＳ Ｒｅａｄｅｒのどちらかを用いることにより分析する。

【0306】

細胞有効性アッセイ
[00191] 特定のペプチドミメティック大環状化合物の有効性を、例えば様々な腫瘍原性および非腫瘍原性細胞株ならびにヒトまたはマウス細胞集団に由来する初代細胞を用いる細胞に基づく殺作用アッセイにおいて決定する。細胞生存度を、例えばペプチドミメティック大環状化合物（０．５〜５０μＭ）と共にインキュベートする２４〜９６時間にわたってモニターして、１０μＭ未満のＥＣ_５０で殺すペプチドミメティック大環状化合物を同定する。細胞生存度を測定するいくつかの標準的なアッセイが商業的に利用可能であり、それらは場合によりそのペプチドミメティック大環状化合物の有効性を評価するために用いられる。加えて、場合によりアネキシンＶおよびカスパーゼの活性化を測定するアッセイを用いて、そのペプチドミメティック大環状化合物がアポトーシス機構を活性化することにより細胞を殺すかどうかを評価する。例えば、細胞生存度を細胞内ＡＴＰ濃度の関数として決定するＣｅｌｌ Ｔｉｔｅｒ−ｇｌｏアッセイを用いる。

【0307】

インビボ安定性アッセイ
[00192] ペプチドミメティック大環状化合物のインビボ安定性を調べるために、その化合物を例えばマウスおよび／またはラットにＩＶ、ＩＰ、ＰＯまたは吸入経路により０．１から５０ｍｇ／ｋｇまでの範囲の濃度で投与し、注射後０分、５分、１５分、３０分、１時間、４時間、８時間、および２４時間の時点で血液標本を採取する。次いで２５μＬの新鮮な血清中の未変化の化合物のレベルを、上記のようにＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより測定する。

【0308】

動物モデルにおけるインビボ有効性
[00193] インビボでのペプチドミメティック大環状化合物の抗発癌活性を決定するために、その化合物を例えば単独で（ＩＰ、ＩＶ、ＰＯ、吸入または経鼻経路により）、または最適以下の用量の関連する化学療法（例えばシクロフォスファミド、ドキソルビシン、エトポシド）との組み合わせで与える。１例において、ルシフェラーゼを安定発現する５×１０^６個のＲＳ４；１１細胞（急性リンパ芽球性白血病を有する患者の骨髄から確立された）を、ＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスにおいて、それらに全身照射を施した３時間後に尾静脈により注射する。未処置のままにする場合、この形態の白血病はこのモデルにおいて３週間で致死的である。その白血病は、例えばそのマウスにＤ−ルシフェリン（６０ｍｇ／ｋｇ）を注射し、麻酔した動物を画像化する（ｉｍａｇｉｎｇ）（例えば、Ｘｅｎｏｇｅｎ Ｉｎ Ｖｉｖｏ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ、Ｃａｌｉｐｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、マサチューセッツ州ホプキントン）ことにより容易にモニターされる。全身生物発光を、Ｌｉｖｉｎｇ Ｉｍａｇｅ Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｃａｌｉｐｅｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、マサチューセッツ州ホプキントン）による光子束（光子／秒）の積算により定量化する。単独または最適以下の用量の関連する化学療法剤との組み合わせでのペプチドミメティック大環状化合物を、例えば、白血病マウスに（注射の１０日後／実験の１日目、１４〜１６の生物発光範囲で）尾静脈またはＩＰ経路により、０．１ｍｇ／ｋｇから５０ｍｇ／ｋｇまでの範囲の用量で７〜２１日間投与する。場合により、そのマウスを実験全体を通して１日おきに画像化し、実験の期間の間毎日生存をモニターする。満了したマウスに場合により実験の終了時に剖検を行う。別の動物モデルは、ルシフェラーゼを安定発現する、ヒト濾胞性リンパ腫に由来する細胞株であるＤｏＨＨ２のＮＯＤ−ＳＣＩＤマウス中への移植である。これらのインビボ試験は、場合により予備的な薬物動態学的、薬力学的および毒物学データをもたらす。

【0309】

臨床試験
[00194] ヒトの処置に関するペプチドミメティック大環状化合物の適合性を決定するために、臨床試験を実施する。例えば、癌を有すると診断され、処置を必要とする患者を選択し、処置群および１以上の対照群に分けることができ、ここでその処置群にはペプチドミメティック大環状化合物を投与し、一方で対照群にはプラセボまたは既知の抗癌薬を与える。このように、ペプチドミメティック大環状化合物の処置の安全性および有効性を、生存率および生活の質のような要因に関して患者群の比較を実施することにより評価することができる。この例では、ペプチドミメティック大環状化合物で処置した患者群はプラセボで処置した患者対照群と比較して向上した長期生存率を示し得る。

【0310】

医薬組成物および投与経路
[00195] 本明細書で開示される医薬組成物には、ペプチドミメティック大環状化合物およびその医薬的に許容できる誘導体またはプロドラッグが含まれる。“医薬的に許容できる誘導体”は、レシピエントに投与した際に本明細書で開示される化合物を（直接または間接的に）供給することができる、本明細書で開示される化合物のあらゆる医薬的に許容できる塩、エステル、エステルの塩、プロドラッグまたは他の誘導体を意味する。特に好ましい医薬的に許容できる誘導体は、哺乳類に投与した際に親化合物種と対比してその化合物の生物学的利用能を（例えば、経口投与した化合物の血中への吸収を増大させることにより）増大させる、または活性な化合物の生物学的区画（例えば、脳またはリンパ系）への送達を増大させる誘導体である。一部の医薬的に許容できる誘導体には、水溶性または胃腸粘膜を越える能動輸送を増大させる化学基が含まれる。

【0311】

[00196] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は、選択的な生物学的特性を増強するための適切な官能基を共有結合的に、または非共有結合的に連結することにより修飾される。そのような修飾には、所与の生物学的区画（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）中への生物学的透過を増大させる、経口による利用能を増大させる、溶解性を増大させて注射による投与を可能にする、代謝を変化させる、および排出速度を変化させる修飾が含まれる。

【0312】

[00197] 本明細書で開示される化合物の医薬的に許容できる塩類には、医薬的に許容できる無機および有機の酸および塩基から誘導される塩類が含まれる。適切な酸塩の例には下記のものが含まれる：酢酸塩、アジピン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、パモ酸塩（ｐａｌｍｏａｔｅ）、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびウンデカン酸塩。適切な塩基から誘導される塩類には、アルカリ金属（例えば、ナトリウム）塩、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）塩、アンモニウム塩、およびＮ−（アルキル）_４^＋塩が含まれる。

【0313】

[00198] 本明細書で提供される化合物からの医薬組成物の調製に関して、医薬的に許容できるキャリヤーには固体または液体キャリヤーのいずれも含まれる。固形製剤には、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤、および分散性顆粒剤が含まれる。固体キャリヤーは、希釈剤、矯味矯臭剤、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤、または封入材料の役目も果たす１種類以上の物質であることができる。配合および投与に関する技法の詳細は、科学文献および特許文献において十分に記載されており、例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, Maack Publishing Co，ペンシルベニア州イーストンの最新版を参照。

【0314】

[00199] 散剤において、キャリヤーは微粉砕された固体であり、それは微粉砕された有効構成要素との混合状態にある。錠剤において、有効構成要素は必要な結合特性を有するキャリヤーと適切な割合で混合され、所望の形状および大きさに圧縮される。

【0315】

[00200] 適切な固体賦形剤は炭水化物またはタンパク質増量剤であり、下記のものが含まれるが、これらに限定されない：乳糖、ショ糖、マンニトール、またはソルビトールが含まれる糖類；トウモロコシ、コムギ、コメ、ジャガイモ、または他の植物からのデンプン；セルロース、例えばメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、またはカルボキシメチルセルロースナトリウム；ならびにアラビアガムおよびトラガントガムが含まれるガム；ならびにタンパク質、例えばゼラチンおよびコラーゲン。所望である場合、崩壊剤または可溶化剤、例えば架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸、またはその塩、例えばアルギン酸ナトリウムが添加される。

【0316】

[00201] 液状製剤には、限定ではなく、液剤、懸濁液剤および乳剤、例えば水溶液または水／プロピレングリコール溶液が含まれる。非経口注射のために、液体製剤を水性ポリエチレングリコール溶液中の溶液状に配合することができる。

【0317】

[00202] 医薬製剤は単位剤形であることができる。そのような形態では、製剤は適量の有効構成要素を含有する単位用量に小分割される。単位剤形は包装された製剤であることができ、包装は個別の量の製剤を収容している；例えば、パケットされた（ｐａｃｋｅｔｅｄ）錠剤、カプセル剤、およびバイアルまたはアンプル中の散剤。単位剤形はカプセル剤、錠剤、カシェ剤もしくはトローチ剤そのものであることもでき、またはそれは適切な数のこれらのいずれかが包装された形態であることができる。

【0318】

[00203] 本明細書で開示される１種類以上の組成物がペプチドミメティック大環状化合物および１種類以上の追加の療法剤または予防剤の組合わせを含む場合、その化合物および追加の薬剤は両方とも、単剤療法計画で通常投与される投与量の約１〜１００％、より好ましくは約５〜９５％の投与レベルで存在すべきである。一部の態様において、その追加の薬剤は本明細書で開示される１種類以上の化合物とは別に、多剤投与計画の一部として投与される。あるいは、それらの薬剤は単一の剤形の一部であり、本明細書で開示される１種類以上の化合物と一緒に単一の組成物中に混合される。

【0319】

使用方法
[00204] １観点において、本明細書において新規のペプチドミメティック大環状化合物が提供され、それはそのペプチドミメティック大環状化合物がモデルとしているタンパク質またはペプチドの天然のリガンド（単数または複数）に結合する薬剤を同定するための競合結合アッセイにおいて有用である。例えば、ｐ５３／ＭＤＭＸ系において、標識したｐ５３に基づくペプチドミメティック大環状化合物を、ＭＤＭＸに競合結合する小分子と共にＭＤＭＸ結合アッセイにおいて用いることができる。競合結合試験は、ｐ５３／ＭＤＭＸ系に特異的な薬物候補の迅速なインビトロでの評価および決定を可能にする。そのような結合試験は、本明細書で開示されるペプチドミメティック大環状化合物のいずれかおよびそれらの結合パートナーを用いて実施することができる。

【0320】

[00205] そのペプチドミメティック大環状化合物に対する抗体の生成が本明細書において提供される。一部の態様において、これらの抗体はそのペプチドミメティック大環状化合物およびそのペプチドミメティック大環状化合物が関連する前駆体ペプチド、例えばｐ５３の両方に特異的に結合する。例えばそのような抗体は、例えばｐ５３およびＭＤＭＸの間で結合する天然のタンパク質間相互作用を撹乱する。

【0321】

[00206] 他の観点において、本明細書において、ｐ５３、ＭＤＭ２またはＭＤＭＸが含まれる分子の異常な（例えば不十分または過剰な）発現または活性と関係する障害の危険にさらされている（またはそれにかかりやすい）、またはその障害を有する対象を処置する予防的および療法的方法の両方を提供する。

【0322】

[00207] 別の態様において、障害は少なくとも部分的にはｐ５３もしくはＭＤＭ２もしくはＭＤＭＸの異常なレベル（例えば過剰発現または過小発現）により、または異常な活性を示すｐ５３もしくはＭＤＭ２もしくはＭＤＭＸの存在により引き起こされる。従って、５３に由来するペプチドミメティック大環状化合物によるｐ５３もしくはＭＤＭ２もしくはＭＤＭＸのレベルおよび／または活性の低減、またはｐ５３もしくはＭＤＭ２もしくはＭＤＭＸのレベルおよび／または活性の増進が、例えばその障害の有害な症状を改善または低減するために用いられる。

【0323】

[00208] 別の観点において、本明細書において、過剰増殖性疾患および炎症性障害が含まれる疾患を、結合パートナー間の、例えばｐ５３およびＭＤＭ２またはｐ５３およびＭＤＭＸの間の相互作用または結合を妨げることにより処置または予防するための方法を提供する。これらの方法は、有効量の化合物をヒトが含まれる温血動物に投与することを含む。一部の態様において、本明細書で開示される１種類以上の化合物の投与は、細胞増殖停止またはアポトーシスを誘導する。

【0324】

[00209] 本明細書で用いられる際、用語“処置”は、疾患、疾患の症状または疾患に対する素因を治療する、治癒させる、軽減する、緩和する、変化させる、治す、改善する、向上させる、またはそれに影響を及ぼす目的での、療法剤の疾患、疾患の症状または疾患に対する素因を有する患者への適用もしくは投与、または療法剤の患者から分離された組織もしくは細胞株への適用もしくは投与として定義されている。

【0325】

[00210] 一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、癌および新生物性の病気を処置、予防、および／または診断するために用いることができる。本明細書で用いられる際、用語“癌”、“過剰増殖性”および“新生物性”は、自律的増殖に関する能力を有する細胞、すなわち急速に増殖する細胞増殖を特徴とする異常な状態または病気を指す。過剰増殖性および新生物性疾患状態は、病的、すなわち疾患状態を特徴とする、もしくは構成することとして分類することができ、または非病的、すなわち正常から逸脱しているが疾患状態とは関係していないこととして分類することができる。その用語は、全てのタイプの癌性増殖または発癌プロセス、転移性組織または悪性形質転換した細胞、組織、もしくは器官を、組織病理学的タイプまたは浸潤性の病期にかかわらず含むことを意味している。転移性腫瘍は、乳房、肺、肝臓、結腸および卵巣由来の腫瘍が含まれるがこれらに限定されない多数の原発腫瘍のタイプから生じ得る。“病的過剰増殖性”細胞は、悪性腫瘍増殖を特徴とする疾患状態において生じる。非病的過剰増殖性細胞の例には、創傷修復と関係する細胞の増殖が含まれる。細胞増殖性および／または分化性障害の例には、癌、例えば癌腫、肉腫、または転移性障害が含まれる。一部の態様において、そのペプチドミメティック大環状化合物は、乳癌、卵巣癌、結腸癌、肺癌、そのような癌の転移等を制御するための新規の療法剤である。

【0326】

[00211] 癌または新生物性の病気の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：線維肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫（ｌｙｍｐｈａｎｇｉｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓａｒｃｏｍａ）、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、胃癌、食道癌、直腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、子宮癌、頭頚部の癌、皮膚癌、脳癌、扁平上皮癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎児性癌、ウィルムス腫瘍、子宮頚癌、精巣癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫、白血病、リンパ腫、またはカポジ肉腫。

【0327】

[00212] 増殖性障害の例には、造血性新生物性障害が含まれる。本明細書で用いられる際、用語“造血性新生物性障害”には、例えば骨髄、リンパもしくは赤血球系列、またはその前駆細胞に起因する、造血系由来の過形成性／新生物性細胞を含む疾患が含まれる。その疾患は、未分化型（ｐｏｏｒｌｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ）急性白血病、例えば赤芽球性白血病および急性巨核芽球性白血病に起因し得る。追加の典型的な骨髄性障害には下記のものが含まれるが、これらに限定されず：急性前骨髄性（ｐｒｏｍｙｅｌｏｉｄ）白血病（ＡＰＭＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および慢性（ＣＭＬ）骨髄性白血病(Vaickus (1991), Crit Rev. Oncol./Hemotol. 11:267-97において総説されている)；リンパ性悪性腫瘍には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：Ｂ−系列ＡＬＬおよびＴ−系列ＡＬＬが含まれる急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、前リンパ性白血病（ＰＬＬ）、有毛細胞白血病（ＨＬＬ）およびワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症（ＷＭ）。悪性リンパ腫の追加の形態には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：非ホジキンリンパ腫およびその変種、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫（ＡＴＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）、大顆粒リンパ球性白血病（ＬＧＦ）、ホジキン病およびリード・スタンバーグ病（Ｒｅｅｄ−Ｓｔｅｍｂｅｒｇ ｄｉｓｅａｓｅ）。

【0328】

[00213] 乳房の細胞増殖性および／または分化性障害の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：例えば上皮過形成、硬化性乳管増生症、および小管乳頭腫（ｓｍａｌｌ ｄｕｃｔ ｐａｐｉｌｌｏｍａｓ）が含まれる増殖性乳房疾患；腫瘍、例えば間質腫瘍、例えば線維腺腫、葉状腫瘍、および肉腫、ならびに上皮性腫瘍、例えば大管乳頭腫（ｌａｒｇｅ ｄｕｃｔ ｐａｐｉｌｌｏｍａｓ）；乳管上皮内癌（ページェット病が含まれる）および上皮内小葉癌が含まれる上皮内（非浸潤性）癌、ならびに浸潤性乳管癌、浸潤性小葉癌、髄様癌、膠様（粘液）癌、管状癌、および浸潤性乳頭状癌が含まれるがこれらに限定されない浸潤癌（浸潤する癌）が含まれる乳房の癌、ならびに種々の悪性新生物。男性の乳房における障害には女性化乳房および癌腫が含まれるが、これらに限定されない。

【0329】

[00214] 皮膚の細胞増殖性および／または分化性障害の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：増殖性皮膚疾患、例えば、粘膜黒色腫、表在拡大型黒色腫、結節型黒色腫、黒子（例えば悪性黒子、悪性黒子型黒色腫、または末端黒子型黒色腫）、メラニン欠乏性黒色腫、線維形成性黒色腫、スピッツ母斑の特徴を有する黒色腫、小型母斑様細胞を有する黒色腫、ポリープ状黒色腫、および軟組織黒色腫が含まれる黒色腫；小結節性基底細胞癌、表在性基底細胞癌、結節性基底細胞癌（侵食性潰瘍）、嚢胞性基底細胞癌、瘢痕性基底細胞癌、色素性基底細胞癌、異常（ａｂｅｒｒａｎｔ）基底細胞癌、浸潤性基底細胞癌、母斑性基底細胞癌症候群、ポリープ状基底細胞癌、細孔様（ｐｏｒｅ−ｌｉｋｅ）基底細胞癌、およびＰｉｎｋｕｓ型線維上皮腫が含まれる基底細胞癌；棘細胞腫（大細胞棘細胞腫）、腺様扁平上皮癌、類基底扁平上皮癌、明細胞扁平上皮癌、印環細胞扁平上皮癌、紡錘細胞扁平上皮癌、マルジョラン潰瘍、ケーラー紅色肥厚症、およびボーエン病が含まれる扁平上皮癌（ｓｑｕａｍｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ）；または他の皮膚もしくは皮下腫瘍。

【0330】

[00215] 肺の細胞増殖性および／または分化性障害の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：腫瘍随伴症候群、細気管支肺胞癌、神経内分泌腫瘍、例えば気管支カルチノイド、種々の腫瘍、および転移性腫瘍が含まれる気管支原性癌；炎症性胸水、非炎症性胸水、気胸、ならびに孤在性線維性腫瘍（胸膜線維腫）および悪性中皮腫が含まれる胸膜腫瘍が含まれる胸膜の病態。

【0331】

[00216] 結腸の細胞増殖性および／または分化性障害の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：非新生物性ポリープ、腺腫、家族性症候群、結腸直腸発癌現象、結腸直腸癌、およびカルチノイド腫瘍。

【0332】

[00217] 肝臓の細胞増殖性および／または分化性障害の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：結節性過形成、腺腫、ならびに肝臓の原発癌および転移性腫瘍が含まれる悪性腫瘍。

【0333】

[00218] 卵巣の細胞増殖性および／または分化性障害の例には下記のものが含まれるが、これらに限定されない：卵巣腫瘍、例えば体腔上皮の腫瘍、漿液性腫瘍、粘液性腫瘍、子宮内膜性腫瘍、明細胞腺癌、嚢胞腺線維腫、ブレンナー腫瘍、表面上皮腫瘍；生殖細胞腫瘍、例えば成熟（良性）奇形腫、単胚葉性奇形腫（ｍｏｎｏｄｅｒｍａｌ ｔｅｒａｔｏｍａｓ）、未熟悪性奇形腫、未分化胚細胞腫、内胚葉洞腫瘍、絨毛癌；性索−間質腫瘍（ｓｅｘ ｃｏｒｄ−ｓｔｏｍａｌ ｔｕｍｏｒｓ）、例えば顆粒膜−莢膜細胞腫、卵胞膜細胞腫線維腫（ｔｈｅｃｏｍａｆｉｂｒｏｍａｓ）、男性胚細胞腫、ヒル細胞腫（ｈｉｌｌ ｃｅｌｌ ｔｕｍｏｒｓ）、および生殖腺芽細胞腫；ならびに転移性腫瘍、例えばクルーケンベルグ腫瘍。

【0334】

[00219] 本発明の好ましい態様を本明細書において示し、記載してきたが、そのような態様は例としてのみ提供されていることは当業者には明らかであろう。ここで、当業者には数多くの変形、変更および置換が本発明から逸脱することなく思い浮かぶであろう。本明細書で記載される態様に対する様々な代替案を本発明の実施において用いることができることは理解されるべきである。下記の特許請求の範囲がその範囲を定めており、これらの特許請求の範囲内の方法および構造ならびにそれらの均等物はそれに含まれることが意図されている。

【実施例】

【0335】

実施例１：６−クロロトリプトファン Ｆｍｏｃアミノ酸の合成

【0336】

【化62】

【0337】

[00220] ｔｅｒｔ−ブチル ６−クロロ−３−ホルミル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート、１。乾燥ＤＭＦ（１２ｍＬ）の攪拌溶液に、ＰＯＣｌ_３（３．９２ｍＬ、４３ｍｍｏｌ、１．３等量）を０℃においてアルゴンの下で滴加した。その溶液を同じ温度で２０分間攪拌した後、６−クロロインドール（５．０ｇ、３３ｍｍｏｌ、１等量）の乾燥ＤＭＦ（３０ｍＬ）中における溶液を滴加した。得られた混合物を室温まで温まらせ、さらに２．５時間攪拌した。水（５０ｍＬ）を添加し、その溶液を４Ｍ水性ＮａＯＨ（ｐＨ約８）で中和した。結果として生じた固体を濾別し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた。この物質をそれ以上精製せずに次の工程において直接用いた。粗製のホルミルインドール（３３ｍｍｏｌ、１等量）のＴＨＦ（１５０ｍＬ）中における攪拌溶液に、Ｂｏｃ_２Ｏ（７．９１ｇ、３６．３ｍｍｏｌ、１．１等量）およびＤＭＡＰ（０．４ｇ、３．３ｍｍｏｌ、０．１等量）を室温においてＮ_２下で連続的に添加した。得られた混合物を室温で１．５時間攪拌し、溶媒を減圧下で蒸発させた。その残留物をＥｔＯＡｃ中で溶解させ、１Ｎ ＨＣｌで洗浄し、乾燥させ、濃縮すると、ホルミルインドール１（９ｇ、２工程にわたって９８％）が白色固体として得られた。¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.70 (s, Boc, 9H); 7.35 (dd, 1H); 8.21 (m, 3H); 10.07 (s, 1H)。

【0338】

[00221] ｔｅｒｔ−ブチル ６−クロロ−３−（ヒドロキシメチル）−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート、２。化合物１（８．８６ｇ、３２ｍｍｏｌ、１等量）のエタノール（１５０ｍＬ）中における溶液に、ＮａＢＨ_４（２．４ｇ、６３ｍｍｏｌ、２等量）を添加した。その反応を室温で３時間攪拌した。その反応混合物を濃縮し、その残留物をジエチルエーテルおよび水の中に注いだ。有機層を分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮すると白色固体が得られた（８．７ｇ、９８％）。この物質をそれ以上精製せずに次の工程において直接用いた。¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.65 (s, Boc, 9H); 4.80 (s, 2H, CH2); 7.21 (dd, 1H); 7.53 (m, 2H); 8.16 (bs, 1H)。

【0339】

[00222] ｔｅｒｔ−ブチル ３−（ブロモメチル）−６−クロロ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート、３。化合物２（４．１ｇ、１４．６ｍｍｏｌ、１等量）のジクロロメタン（５０ｍＬ）中におけるアルゴン下の溶液に、トリフェニルホスフィン（４．５９ｇ、１７．５ｍｍｏｌ、１．２等量）のジクロロメタン（５０ｍＬ）中における溶液を−４０℃において添加した。その反応溶液を４０℃でさらに３０分間攪拌した。次いでＮＢＳ（３．３８ｇ、１９ｍｍｏｌ、１．３等量）を添加した。得られた混合物を室温まで温まらせ、一夜攪拌した。ジクロロメタンを蒸発させ、４塩化炭素（１００ｍＬ）を添加し、その混合物を１時間攪拌し、濾過した。その濾液を濃縮し、シリカのプラグに装填し、ヘキサン類中２５％ＥｔＯＡｃで迅速に溶離させた。その溶液を濃縮すると、白色の泡状物質が得られた（３．８４ｇ、７７％）。¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.66 (s, Boc, 9H); 4.63 (s, 2H, CH₂); 7.28 (dd, 1H); 7.57 (d, 1H); 7.64 (bs, 1H); 8.18 (bs, 1H)。

【0340】

[00223] αＭｅ−６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ、４。Ｓ−Ａｌａ−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ（２．６６ｇ、５．２ｍｍｏｌ、１等量）およびＫＯ−ｔＢｕ（０．８７ｇ、７．８ｍｍｏｌ、１．５等量）に、アルゴン下で５０ｍＬのＤＭＦを添加した。ＤＭＦの溶液（５．０ｍＬ）中の臭化物誘導体化合物３（２．６８ｇ、７．８ｍｍｏｌ、１．５等量）を注射器により添加した。その反応混合物を周囲温度で１時間攪拌した。次いでその溶液を５％水性酢酸で停止し（ｑｕｅｎｃｈｅｄ）、水で希釈した。所望の生成物をジクロロメタン中で抽出し、乾燥させ、濃縮した。油性の生成物４を順相上でのフラッシュクロマトグラフィー（固体装填）によりＥｔＯＡｃおよびヘキサン類を溶離液として用いて精製すると、赤色固体が得られた（１．７８ｇ、収率４５％）。αＭｅ−６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ、４: M+H 計算値 775.21、M+H 実測値 775.26; ¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.23 (s, 3H, αMe); 1.56 (m, 11H, Boc + CH₂); 1.82-2.20 (m, 4H, 2CH₂); 3.03 (m, 1H, CH_α); 3.24 (m, 2H, CH₂); 3.57および4.29 (AB系, 2H, CH₂ (ベンジル), J= 12.8Hz); 6.62 (d, 2H); 6.98 (d, 1H); 7.14 (m, 2H); 7.23 (m, 1H); 7.32-7.36 (m, 5H); 7.50 (m, 2H); 7.67 (bs, 1H); 7.98 (d, 2H); 8.27 (m, 2H)。

【0341】

[00224] Ｆｍｏｃ−αＭｅ−６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、６。３Ｎ ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１／３、１５ｍＬ）の５０℃の溶液に、化合物４（１．７５ｇ、２．３ｍｍｏｌ、１等量）のＭｅＯＨ（５ｍｌ）中における溶液を滴加した。その出発物質は３〜４時間以内に見えなくなった。次いでその酸性溶液を氷浴で０℃に冷却し、Ｎａ_２ＣＯ_３（１．２１ｇ、１１．５ｍｍｏｌ、５等量）の水溶液で停止した。メタノールを除去し、さらに８等量のＮａ_２ＣＯ_３（１．９５ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）をその懸濁液に添加した。次いでニッケルを捕捉する（ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ）ＥＤＴＡ二ナトリウム塩二水和物（１．６８ｇ、４．５ｍｍｏｌ、２等量）を添加し、その懸濁液を２時間攪拌した。Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（０．８４ｇ、２．５ｍｍｏｌ、１．１等量）のアセトン（５０ｍＬ）中における溶液を添加し、その反応を一夜攪拌した。その後、その反応をジエチルエーテルおよび１Ｎ ＨＣｌで希釈した。次いで有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。所望の生成物６を順相上でアセトンおよびジクロロメタンを溶離液として用いて精製すると、白色の泡状物質が得られた（０．９ｇ、収率７０％）。Ｆｍｏｃ−αＭｅ−６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、６: M+H 計算値 575.19、M+H 実測値 575.37; ¹H NMR (CDCl₃) 1.59 (s, 9H, Boc); 1.68 (s, 3H, Me); 3.48 (bs, 2H, CH₂); 4.22 (m, 1H, CH); 4.39 (bs, 2H, CH₂); 5.47 (s, 1H, NH); 7.10 (m, 1H); 7.18 (m, 2H); 7.27 (m, 2H); 7.39 (m, 2H); 7.50 (m, 2H); 7.75 (d, 2H); 8.12 (bs, 1H)。

【0342】

[00225] ６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ、５。Ｇｌｙ−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ（４．６ｇ、９．２ｍｍｏｌ、１等量）およびＫＯ−ｔＢｕ（１．１４ｇ、１０．１ｍｍｏｌ、１．１等量）に、アルゴン下で９５ｍＬのＤＭＦを添加した。ＤＭＦの溶液（１０ｍＬ）中の臭化物誘導体化合物３（３．５ｇ、４．６ｍｍｏｌ、１．１等量）を注射器により添加した。その反応混合物を周囲温度で１時間攪拌した。次いでその溶液を５％水性酢酸で停止し（ｑｕｅｎｃｈｅｄ）、水で希釈した。所望の生成物をジクロロメタン中で抽出し、乾燥させ、濃縮した。油性の生成物５を順相上でのフラッシュクロマトグラフィー（固体装填）によりＥｔＯＡｃおよびヘキサン類を溶離液として用いて精製すると、赤色固体が得られた（５ｇ、収率７１％）。６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ、５: M+H 計算値 761.20、M+H 実測値 761.34; ¹H NMR (CDCl₃) δ: 1.58 (m, 11H, Boc + CH₂); 1.84 (m, 1H); 1.96 (m, 1H); 2.24 (m, 2H, CH₂); 3.00 (m, 1H, CH_α); 3.22 (m, 2H, CH₂); 3.45および4.25 (AB系, 2H, CH₂ (ベンジル), J= 12.8Hz); 4.27 (m, 1H, CH_α); 6.65 (d, 2H); 6.88 (d, 1H); 7.07 (m, 2H); 7.14 (m, 2H); 7.28 (m, 3H); 7.35-7.39 (m, 2H); 7.52 (m, 2H); 7.96 (d, 2H); 8.28 (m, 2H)。

【0343】

[00226] Ｆｍｏｃ−６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、７。３Ｎ ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１／３、４４ｍＬ）の５０℃の溶液に、化合物５（５ｇ、６．６ｍｍｏｌ、１等量）のＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中における溶液を滴加した。その出発物質は３〜４時間以内に見えなくなった。次いでその酸性溶液を氷浴で０℃に冷却し、Ｎａ_２ＣＯ_３（３．４８ｇ、３３ｍｍｏｌ、５等量）の水溶液で停止した。メタノールを除去し、さらに８等量のＮａ_２ＣＯ_３（５．５７ｇ、５２ｍｍｏｌ）をその懸濁液に添加した。ニッケルを捕捉するＥＤＴＡ二ナトリウム塩二水和物（４．８９ｇ、１３．１ｍｍｏｌ、２等量）およびその懸濁液を２時間攪拌した。Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（２．２１ｇ、６．５５ｍｍｏｌ、１．１等量）のアセトン（１００ｍＬ）中における溶液を添加し、その反応を一夜攪拌した。その後、その反応をジエチルエーテルおよび１Ｎ ＨＣｌで希釈した。次いで有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。所望の生成物７を順相上でアセトンおよびジクロロメタンを溶離液として用いて精製すると、白色の泡状物質が得られた（２．６ｇ、収率６９％）。Ｆｍｏｃ−６Ｃｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、７: M+H 計算値 561.17、M+H 実測値 561.37; ¹H NMR (CDCl₃) 1.63 (s, 9H, Boc); 3.26 (m, 2H, CH₂); 4.19 (m, 1H, CH); 4.39 (m, 2H, CH₂); 4.76 (m, 1H); 5.35 (d, 1H, NH); 7.18 (m, 2H); 7.28 (m, 2H); 7.39 (m, 3H); 7.50 (m, 2H); 7.75 (d, 2H); 8.14 (bs, 1H)。

【0344】

実施例１ａ：式Ｉの化合物の合成における使用のためのアルキン化合物の合成

【0345】

【化63】

【0346】

[00227] （５−ヨードペンタ−１−イニル）ベンゼンの合成。反応フラスコ中に、ＴＨＦ（２００ｍＬ）の溶液に、（５−クロロペンタ−１−イニル）ベンゼンフェニルアセチレン（１０ｇ、９７．９１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、その反応混合物をドライアイス浴中で−７８℃に冷却した。ｎＢｕＬｉ（９５．９５ｍｍｏｌ、３８．３９ｍＬ）を滴加し、−７８℃で０．５時間反応させた。−７８℃において１−ブロモ−３−クロロプロパンを添加した。５時間攪拌し、その間にその反応を室温まで温まらせた。次いで反応を９０℃で３時間還流した。その溶媒を蒸留して除き、次いで水（１５０ｍＬ）およびエーテル（１５０ｍＬ）を添加した。その粗生成物を抽出し、エーテルを蒸留して除き、得られた粗製の混合物をアセトン中で溶解させた。ヨウ化ナトリウム（２２．９２ｍｍｏｌ、３．４４ｇ）をその溶液中に添加した。その反応混合物に還流凝縮器を取り付け、７０℃に２日間加熱した。短経路蒸留装置を用いてアセトンを蒸留して除いた。エーテル（１５０ｍＬ）および水（１５０ｍＬ）を添加し、抽出を行った。次いでエーテルを硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸留して除くと、５．００ｇの生成物が得られた（収率９８％）。それ以上の生成は行わなかった。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) 2.072 (m, 2H, CH₂); 2.605 (t, 2H, CH₂); 3.697 (m, 2H, CH₂); 7.276 (m, 2H, フェニル); 7.389 (m, 2H, フェニル); 7.484 (m, 1H, フェニル)。

【0347】

【化64】

【0348】

[00228] ＭｅＳ５−フェニルアルキン−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢの合成。Ｓ−Ａｌａ−Ｎｉ−ＳＢＰＢ（１８．１７ｍｍｏｌ、９．３０ｇ）およびＫＯ−ｔＢｕ（２７．２６ｍｍｏｌ、３．０５ｇ）に、２００ｍＬのＤＭＦをアルゴン下で添加した。ＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解した（５−ヨードペンタ−１−イニル）ベンゼン（２７．２６ｍｍｏｌ、７．３６ｇ）を注射器により添加した。その反応混合物を周囲温度で１時間攪拌した。次いでその溶液を酢酸（２７．２６ｍｍｏｌ、１．５８ｍＬ）で停止し、水（１００ｍＬ）で希釈した。その生成物をジクロロメタン（１００ｍＬ）で抽出し、分離し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。その粗生成物を、順相上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、アセトンおよびジクロロメタンを溶離液として用いて精製すると、所望の生成物が赤色固体として得られた（９．４８ｇ、７９．８％）。M+H 計算値 654.22, M+H 実測値 654.4; ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) 1.17 (s, 3H, Me ( Me-Phe)); 1.57 (m, 1H, CH₂); 1.67 (m, 1H, CH₂); 1.89 (m, 1H, CH₂); 2.06 (m, 1H, CH₂); 2.24 (m, 2H, CH₂); 3.05 (m, 1H); 3.18 (s, 2H); 3.26 (m, 1H); 3.56および4.31 (ABシステム, 2H, CH₂(ベンジル), J= 12.8Hz); 6.64 (m, 2H); 6.94 (d, 1H); 7.12 (m, 1H); 7.20 (m, 1H); 7.20-7.40 (m, 10H); 7.43 (m, 2H); 8.01 (d, 2H); 8.13 (m, 1H)。

【0349】

[00229] （Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−２−メチル−７−フェニルヘプタ−６−イン酸の合成。３Ｎ ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１／１、２３ｍＬ）の７０℃における溶液に、ＭｅＳ５−フェニルアルキン−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ（１４．５ｍｍｏｌ、９．４８ｇ）のＭｅＯＨ（７０ｍｌ）中における溶液を滴加した。その出発物質は１０〜２０分以内に消失した。次いでその緑色の反応混合物を真空中で濃縮した。水を添加し（１００ｍＬ）、結果として生じた沈殿（Ｓ−ＢＰＢ ＨＣｌ塩）を濾別した。炭酸ナトリウム（１１６ｍｍｏｌ、１２．２９ｇ）およびＥＤＴＡ（２９ｍｍｏｌ、１０．７９ｇ）をその母液に添加した。その混合物を室温で３時間攪拌して遊離のニッケルを捕捉した。５０ｍＬのアセトンの添加後、その反応を氷浴で０℃に冷却した。アセトン（５０ｍｌ）中で溶解させたＦｍｏｃ−ＯＳｕ（１６．６８ｍｍｏｌ、５．６２ｇ）を添加し、その反応を一夜攪拌しながら周囲温度まで温まらせた。その後、その反応を酢酸エチル（３００ｍＬ）で希釈した。次いで有機層を分離した。その水層を濃ＨＣｌで酸性化した。所望の生成物をジクロロメタン（４００ｍＬ）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。その粗生成物を、順相上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１０％ＭＢＴＥ／ＤＣＭを溶離液として用いて精製すると、所望の生成物が白色固体として得られた（６．０５ｇ、５１％）。M+H 計算値 454.53, M+H 実測値 454.2; ¹H NMR (CDCl₃) 1.50 (bs, 2H, CH₂); 1.60 (bs, 3H, CH₃); 2.05 (bs, 1H, CH₂); 2.30 (bs, 1H, CH₂); 2.42 (bs, 2H, CH₂); 4.20 (m, 1H, CH); 4.40 (bs, 2H, CH₂); 5.58 (s, 1H, NH); 7.26 (m, 3H); 7.32 (m, 2H); 7.37 (m, 4H); 7.58 (d, 2H); 7.76 (d, 2H)。

【0350】

【化65】

【0351】

[00230] ６−ヨードヘキサ−２−インの合成。反応フラスコ中に、ＴＨＦ（２５０ｍＬ）の溶液に、５−クロロ−１−ペンチン（４８．７ｍｍｏｌ、５．０ｇ）を添加した。次いで、その反応混合物をドライアイス浴中で−７８℃に冷却した。ｎＢｕＬｉ（５１．１ｍｍｏｌ、２０．４４ｍＬ）を滴加し、−７８℃で０．５時間反応させ、室温まで温まらせた。次いでヨウ化メチル（５４．５ｍｍｏｌ、３．３９ｍＬ）をその反応混合物に添加した。その反応を５時間攪拌した。水を添加し（１．５ｍＬ）、ＴＨＦを蒸留して除いた。その粗生成物をペンタン（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を用いて抽出した。ペンタンを蒸留して除き、得られた粗製の混合物をアセトン（３００ｍＬ）中で溶解させた。ヨウ化ナトリウム（１７２．９ｍｍｏｌ、２５．９２ｇ）をその溶液中に添加した。その反応混合物に還流凝縮器を取り付け、７０℃に２日間加熱した。短経路蒸留装置を用いてアセトンを蒸留して除いた。エーテル（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を添加し、抽出を行った。次いでエーテルを硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸留して除くと、８．３５ｇの生成物が得られた（収率８３％）。それ以上の精製は行わなかった。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 1.762 (t, 3H, CH₃); 1.941 (m, 2H, CH₂); 2.245 (m, 2H, CH₂); 3.286 (m, 2H, CH₂)。

【0352】

【化66】

【0353】

[00231] ＭｅＳ５−メチルアルキン−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢの合成。Ｓ−Ａｌａ−Ｎｉ−ＳＢＰＢ（１９．５３ｍｍｏｌ、１０ｇ）およびＫＯ−ｔＢｕ（２９．２９ｍｍｏｌ、３．２８ｇ）に、２００ｍＬのＤＭＦをアルゴン下で添加した。ＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解した６−ヨードヘキサ−２−イン（２９．２９ｍｍｏｌ、６．０９ｇ）を注射器により添加した。その反応混合物を周囲温度で１時間攪拌した。次いでその溶液を酢酸（２９．２９ｍｍｏｌ、１．６９ｍＬ）で停止し、水（１００ｍＬ）で希釈した。その生成物を、ジクロロメタン（３００ｍＬ）で抽出し、分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。その粗生成物を、順相上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、アセトンおよびジクロロメタンを溶離液として用いて精製すると、所望の生成物が赤色固体として得られた（８．１０ｇ、７０％）。M+H 計算値 592.2, M+H 実測値 592.4; ¹H NMR (500 Mz, CDCl₃) δ 1.17 (s, 3H, CH₃ (αMe-Phe)); 1.57 (m, 1H, CH₂); 1.67 (m, 1H, CH₂); 1.89 (m, 1H, CH₂); 2.06 (m, 1H, CH₂); 2.24 (m, 2H, CH₂); 3.05 (m, 1H); 3.18 (s, 2H); 3.26 (m, 1H); 3.56および4.31 (ABシステム, 2H, CH₂ (ベンジル), J= 12.8Hz); 6.64 (m, 2H); 6.94 (d, 1H); 7.12 (m, 1H); 7.20 (m, 1H); 7.20-7.40 (m, 10H); 7.43 (m, 2H); 8.01 (d, 2H); 8.13 (m, 1H)。

【0354】

[00232] （Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−２−メチルオクタ−６−イン酸の合成。３Ｎ ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（１／１、２３ｍＬ）の７０℃における溶液に、ＭｅＳ５−メチルアルキン−Ｎｉ−Ｓ−ＢＰＢ（１３．７０ｍｍｏｌ、８．１０ｇ））のメタノール（７０ｍｌ）中における溶液を滴加した。その出発物質は１０〜２０分以内に消失した。次いでその緑色の反応混合物を真空中で濃縮した。水（１５０ｍＬ）を添加し、結果として生じた沈殿（Ｓ−ＢＰＢ ＨＣｌ塩）を濾別した。炭酸ナトリウム（１１６ｍｍｏｌ、１２．２９ｇ）、ＥＤＴＡ（２９ｍｍｏｌ、１０．７９ｇ）をその母液に添加した。その混合物を室温で３時間攪拌して遊離のニッケルを捕捉した。７５ｍＬのアセトンの添加後、その反応を氷浴で０℃に冷却した。アセトン（７５ｍｌ）中で溶解させたＦｍｏｃ−ＯＳｕ（１５．７６ｍｍｏｌ、５．３１ｇ）を添加し、その反応を一夜攪拌しながら周囲温度まで温まらせた。その後、その反応を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。次いで有機層を分離した。その水層を濃ＨＣｌで酸性化した。所望の生成物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮した。その粗生成物を、順相上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、１０％ＭＢＴＥ／ＤＣＭを溶離液として用いて精製すると、所望の生成物が白色固体として得られた（２．４０ｇ、４５％）。M+H 計算値 392.18, M+H 実測値 392.3; ¹H NMR (500 Mz, CDCl₃) δ 1.38 (bs, 1H, CH₂); 1.50 (bs, 1H, CH₂); 1.60 (bs, 2H, CH₂); 1.75 (s, 3H, CH₃); 1.95 (bs, 2H, CH₂); 2.10 (bs, 3H, CH₃); 4.20 (m, 1H, CH); 4.40 (bs, 2H, CH₂); 5.58 (s, 1H, NH); 7.32 (m, 2H); 7.42 (m, 2H); 7.59 (d, 2H); 7.78 (d, 2H)。

【0355】

実施例２：式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物。

【0356】

[00233] ペプチドミメティック大環状化合物を、本明細書に記載されるように、および本明細書にそのまま援用する２００８年２月２５日に出願された係属中の米国特許出願第１２／０３７，０４１号におけるように調製する。２個以上の天然存在アミノ酸を対応する合成アミノ酸で置き換えることにより、ペプチドミメティック大環状化合物をデザインする。ｉおよびｉ＋４、ならびにｉおよびｉ＋７の位置において置換を行なう。ペプチド合成を、手動または自動ペプチド合成装置（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、モデル４３３Ａ）上のどちらかで、固相条件、ｒｉｎｋ ａｍｉｄｅ ＡＭ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）、およびＦｍｏｃ主鎖保護基化学を用いて実施する。天然のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）のカップリングに関して、１０当量のアミノ酸および１：１：２のモル比のカップリング試薬ＨＢＴＵ／ＨＯＢｔ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）／ＤＩＥＡを用いる。非天然アミノ酸（４当量）を１：１：２のモル比のＨＡＴＵ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）／ＨＯＢｔ／ＤＩＥＡを用いてカップリングさせる。その合成ペプチドのＮ末端をアセチル化し、一方でＣ末端をアミド化する。

【0357】

[00234] 一般に、完全に（ｕｌｌｙ）保護された樹脂に結合したペプチドを、ＰＥＧ−ＰＳ樹脂上で（装填０．４５ｍｍｏｌ／ｇ）０．５ｍｍｏｌスケールで合成した。一時的なＦｍｏｃ基の脱保護を、その樹脂に結合したペプチドのＤＭＦ中２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンによる３×１０分間の処理により達成した。ＮＭＰ（３回）、ジクロロメタン（３回）およびＮＭＰ（３回）による洗浄後、それぞれの連続するアミノ酸のカップリングを、適切な予め活性化したＦｍｏｃ−アミノ酸誘導体と共に１×６０分間インキュベートすることにより達成した。全ての保護されたアミノ酸（１．０ｍｍｏｌ）をＮＭＰ中で溶解させ、ＨＣＴＵ（１．０ｍｍｏｌ）、Ｃｌ−ＨＯＢｔ（１．０ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．０ｍｍｏｌ）で活性化した後、そのカップリング溶液を脱保護された樹脂に結合したペプチドに移した。カップリングが完了した後、その樹脂を次の脱保護／カップリングサイクルに備えて洗浄した。アミノ末端のアセチル化をＮＭＰ中無水酢酸／ＤＩＥＡの存在下で実施した。それぞれのカップリングの完了を検証するために、完全に組み立てた樹脂に結合したペプチドのアリコートから得た切断および脱保護した試料のＬＣ−ＭＳ分析を成し遂げた。

【0358】

[00235] １，４−トリアゾール基を含むペプチドミメティック大環状化合物（例えばＳＰ１５３）の調製に関する典型的な例では、ＤＭＦ中２０％（ｖ／ｖ）２，６−ルチジンを４０ｍｌガラスバイアル中でペプチド樹脂（０．５ｍｍｏｌ）に添加し、１０分間振盪した。次いでアスコルビン酸ナトリウム（０．２５ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．２２ｍｌ、１．２５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてヨウ化銅（Ｉ）（０．２４ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた反応混合物を機械的に周囲温度で１６時間振盪した。

【0359】

[00236] １，５−トリアゾール基を含むペプチドミメティック大環状化合物（ＳＰ９３２、ＳＰ９３３）の調製に関する典型的な例では、ペプチド樹脂（０．２５ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭで洗浄した。樹脂をマイクロ波バイアル中に装填した。容器を排気し、窒素でパージした。クロロ（ペンタメチルシクロペンタジエニル）ビス（トリフェニルホスフィン）ルテニウム（ＩＩ）、１０％装填、（Ｓｔｒｅｍ ４４−０１１７）を添加した。無水トルエンをその反応容器に添加した。次いでその反応物をマイクロ波中に装填し、９０℃で１０分間維持した。反応は完了のために時間を延長する（ｂｅ ｐｕｓｈｅｄ ａ ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ ｔｉｍｅ）必要がある可能性がある。他の場合では、クロロ（１，５−シクロオクタジエン）（ペンタメチルシクロペンタジエニル）ルテニウム（“Ｃｐ^＊ＲｕＣｌ（ｃｏｄ）”）を、例えば室温においてトルエンを含む溶媒中で用いることができる。

【0360】

[00237] ヨード置換トリアゾール基を含むペプチドミメティック大環状化合物(例えばＳＰ４５７）の調製に関する典型的な例では、ＴＨＦ（２ｍｌ）を４０ｍｌガラスバイアル中でペプチド樹脂（０．０５ｍｍｏｌ）に添加し、１０分間振盪した。次いでＮ−ブロモスクシンイミド（０．０４ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０５ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．０４ｍｌ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた反応混合物を機械的に周囲温度で１６時間振盪した。ヨード−トリアゾールクロスリンカーをさらに、例えばボロン酸とのカップリング反応により置換して、ＳＰ４６５のようなペプチドミメティック大環状化合物をもたらすことができる。典型的な例では、ＤＭＦ（３ｍｌ）を４０ｍｌガラスバイアル中でヨード−トリアゾールペプチド樹脂（０．１ｍｍｏｌ）に添加し、１０分間振盪した。次いでフェニルボロン酸（０．０４ｇ、０．３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．００６ｇ、０．００５ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（０．０８３ｇ、０．６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた反応混合物を機械的に７０℃で１６時間振盪した。ヨード−トリアゾールクロスリンカーをさらに、例えば末端アルキンとのカップリング反応（例えば薗頭カップリング）により置換して、ＳＰ４６８のようなペプチドミメティック大環状化合物をもたらすこともできる。典型的な例では、２：１ ＴＨＦ：トリエチルアミン（３ｍｌ）を４０ｍｌガラスバイアル中でヨード−トリアゾールペプチド樹脂（０．１ｍｍｏｌ）に添加し、１０分間振盪した。Ｎ−ＢＯＣ−４−ペンチン−１−アミン（０．０４ｇ、０．２ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド（０．０１４ｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加し、５分間振盪した。次いでヨウ化銅（Ｉ）（０．００４ｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加し、得られた反応混合物を機械的に７０℃で１６時間振盪した。

【0361】

[00238] そのトリアゾール環化した樹脂に結合したペプチドをＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ（９５／５／５ ｖ／ｖ）を用いた室温で２．５時間の処理により脱保護し、固体支持体から切断した。その樹脂の濾過後、そのＴＦＡ溶液を冷ジエチルエーテル中で沈殿させ、遠心分離すると、所望の生成物が固体として得られた。その粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製した。例えば、架橋した化合物の精製は逆相Ｃ１８カラム（Ｖａｒｉａｎ）上での高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（Ｖａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ）により達成され、純粋な化合物が得られる。その純粋な化合物の化学組成を、ＬＣ／ＭＳ質量分析（Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣシステムとインターフェースで接続されたＭｉｃｒｏｍａｓｓ ＬＣＴ）およびアミノ酸分析（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、モデル４２０Ａ）により確認した。

【0362】

[00239] 表４は式Ｉのペプチドミメティック大環状化合物のリストを示す。

【0363】

【表5-1】

【0364】

【表5-2】

【0365】

【表5-3】

【0366】

【表5-4】

【0367】

【表5-5】

【0368】

【表5-6】

【0369】

【表5-7】

【0370】

【表5-8】

【0371】

【表5-9】

【0372】

【表6】

【0373】

[00240] 上記および他の箇所で示される配列において、下記の略号を用いる：“Ｎｌｅ”はノルロイシンを表し、“Ａｉｂ”は２−アミノイソ酪酸を表し、“Ａｃ”はアセチルを表し、そして“Ｐｒ”はプロピオニルを表す。“＄”として表されるアミノ酸は、１個の二重結合を含む全炭素クロスリンカーにより連結されたアルファ−Ｍｅ Ｓ５−ペンテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“＄ｒ５”として表されるアミノ酸は、１個の二重結合を含む全炭素により連結されたアルファ−Ｍｅ Ｒ５−ペンテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“＄ｓ８”として表されるアミノ酸は、１個の二重結合を含む全炭素クロスリンカーにより連結されたアルファ−Ｍｅ Ｓ８−オクテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“＄ｒ８”として表されるアミノ酸は、１個の二重結合を含む全炭素クロスリンカーにより連結されたアルファ−Ｍｅ Ｒ８−オクテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“Ａｈｘ”はアミノシクロヘキシルリンカーを表す。そのクロスリンカーは、それぞれのアミノ酸のアルファ炭素の間に８個または１１個の炭素原子を含む線状全炭素クロスリンカーである。“＄／”として表されるアミノ酸は、クロスリンカーにより一切連結されていないアルファ−Ｍｅ Ｓ５−ペンテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“＄／ｒ５”として表されるアミノ酸は、クロスリンカーにより一切連結されていないアルファ−Ｍｅ Ｒ５−ペンテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“＄／ｓ８”として表されるアミノ酸は、クロスリンカーにより一切連結されていないアルファ−Ｍｅ Ｓ８−オクテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“＄／ｒ８”として表されるアミノ酸は、クロスリンカーにより一切連結されていないアルファ−Ｍｅ Ｒ８−オクテニル−アラニン オレフィンアミノ酸である。“Ａｍｗ”として表されるアミノ酸は、アルファ−Ｍｅ トリプトファンアミノ酸である。“Ａｍｌ”として表されるアミノ酸は、アルファ−Ｍｅ ロイシンアミノ酸である。“Ａｍｆ”として表されるアミノ酸は、アルファ−Ｍｅ フェニルアラニンアミノ酸である。“２ｆｆ”として表されるアミノ酸は、２−フルオロ−フェニルアラニンアミノ酸である。“３ｆｆ”として表されるアミノ酸は、３−フルオロ−フェニルアラニンアミノ酸である。“Ｓｔ”として表されるアミノ酸は、２個のペンテニル−アラニン オレフィン側鎖を含むアミノ酸であり、そのそれぞれが示したような別のアミノ酸に架橋されている。“Ｓｔ／／”として表されるアミノ酸は、２個の架橋されていないペンテニル−アラニン オレフィン側鎖を含むアミノ酸である。“％Ｓｔ”として表されるアミノ酸は、２個のペンテニル−アラニン オレフィン側鎖を含むアミノ酸であり、そのそれぞれが示したような別のアミノ酸に完全飽和炭化水素架橋により架橋されている。“Ｂａ”として表されるアミノ酸はベータ−アラニンである。架橋されたアミノ酸の表記（例えば“＄ｅｒ８”または“＄ｚｒ８”）内の小文字の“ｅ”または“ｚ”は、二重結合の立体配置（それぞれ（ｒｅ ｅｃｔｉｖｅｌｙ）ＥまたはＺ）を表す。他の文脈において、“ａ”または“ｆ”のような小文字は、Ｄアミノ酸（例えばそれぞれＤ−アラニン、またはＤ−フェニルアラニン）を表す。“ＮｍＷ”として表記されるアミノ酸はＮ−メチルトリプトファンを表す。“ＮｍＹ”として表記されるアミノ酸はＮ−メチルチロシンを表す。“ＮｍＡ”として表記されるアミノ酸はＮ−メチルアラニンを表す。“Ｓａｒ”として表記されるアミノ酸はサルコシンを表す。“Ｃｈａ”として表記されるアミノ酸はシクロヘキシルアラニンを表す。“Ｃｐｇ”として表記されるアミノ酸はシクロペンチルグリシンを表す。“Ｃｈｇ”として表記されるアミノ酸はシクロヘキシルグリシンを表す。“Ｃｂａ”として表記されるアミノ酸はシクロブチルアラニンを表す。“Ｆ４Ｉ”として表記されるアミノ酸は４−ヨードフェニルアラニンを表す。“Ｆ３Ｃｌ”として表記されるアミノ酸は３−クロロフェニルアラニンを表す。“Ｆ４ｃｏｏｈ”として表記されるアミノ酸は４−カルボキシフェニルアラニンを表す。“Ｆ３４Ｆ２”として表記されるアミノ酸は３，４−ジフルオロフェニルアラニンを表す。“６ｃｌＷ”として表記されるアミノ酸は６−クロロトリプトファンを表す。表記“ｉｓｏ１”または“ｉｓｏ２”は、ペプチドミメティック大環状化合物が単一異性体であることを示す。“Ａｃ３ｃ”はアミノシクロプロパンカルボン酸残基を表す。

【0374】

[00241] “Ｃｏｕ４”、“Ｃｏｕ６”、“Ｃｏｕ７”および“Ｃｏｕ８”として表記されるアミノ酸は、それぞれ下記の構造を表す：

【0375】

【化67】

【0376】

[00242] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は、例えばそのクロスリンカーの構造内の二重結合の立体配置（Ｅ対Ｚ）のため、１種類より多くの異性体で得られる。そのような異性体は従来のクロマトグラフィー法により分離することができ、または分離することができない。一部の態様において、一方の異性体は他方の異性体と対比して向上した生物学的特性を有する。１態様において、ペプチドミメティック大環状化合物のＥクロスリンカーオレフィン異性体はそのＺカウンターパートと対比してより良好な可溶性、より良好な標的親和性、より良好なインビボもしくはインビトロ有効性、より高いヘリックス性、または向上した細胞透過性を有する。別の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物のＺクロスリンカーオレフィン異性体はそのＥカウンターパートと対比してより良好な可溶性、より良好な標的親和性、より良好なインビボもしくはインビトロ有効性、より高いヘリックス性、または向上した細胞透過性を有する。

【0377】

[00243] クロスリンカーを形成するアミノ酸は、下記に示す凡例に従って表される。

【0378】

[00244] 各アミノ酸のアルファ位の立体化学は、別途示さない限りＳである。“４Ｍｅ”と標記したアミノ酸は、メチル置換されたアルキン（内部アルキン）を含むアミノ酸を用いて、結果として４位にメチル基を含むトリアゾール基をもたらして調製した。“４Ｐｈ”と標記したアミノ酸は、フェニル置換されたアルキン（内部アルキン）を含むアミノ酸を用いて、結果として４位にフェニル基を含むトリアゾール基をもたらして調製した。アジドアミノ酸に関して、示した炭素原子の数はアルファ炭素および末端アジドの間のメチレン単位の数を指す。アルキンアミノ酸に関して、示した炭素原子の数はアルファ位およびトリアゾール部分の間のメチレン単位の数＋アルキンに由来するトリアゾール基内の２つの炭素原子である。

【0379】

＄５ｎ３ アルファ−Ｍｅ アジド １，５ トリアゾール（３炭素）
＃５ｎ３ アルファ−Ｈ アジド １，５ トリアゾール（３炭素）
＄４ａ５ アルファ−Ｍｅ アルキン １，４ トリアゾール（５炭素）
＄４ａ６ アルファ−Ｍｅ アルキン １，４ トリアゾール（６炭素）
＄５ａ５ アルファ−Ｍｅ アルキン １，５ トリアゾール（５炭素）
＄５ａ６ アルファ−Ｍｅ アルキン １，５ トリアゾール（６炭素）
＃４ａ５ アルファ−Ｈ アルキン １，４ トリアゾール（５炭素）
＃５ａ５ アルファ−Ｈ アルキン １，５ トリアゾール（５炭素）
＄５ｎ５ アルファ−Ｍｅ アジド １，５ トリアゾール（５炭素）
＄５ｎ６ アルファ−Ｍｅ アジド １，５ トリアゾール（６炭素）
＄４ｎ５ アルファ−Ｍｅ アジド １，４ トリアゾール（５炭素）
＄４ｎ６ アルファ−Ｍｅ アジド １，４ トリアゾール（６炭素）
＄４ｒａ５ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アルキン １，４ トリアゾール（５炭素）
＄４ｒａ６ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アルキン １，４ トリアゾール（６炭素）
＄４ｒｎ４ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，４ トリアゾール（４炭素）
＄４ｒｎ５ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，４ トリアゾール（５炭素）
＄４ｒｎ６ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，４ トリアゾール（６炭素）
＄５ｒｎ５ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，５ トリアゾール（５炭素）
＄５ｒａ５ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アルキン １，５ トリアゾール（５炭素）
＄５ｒａ６ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アルキン １，５ トリアゾール（６炭素）
＄５ｒｎ６ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，５ トリアゾール（６炭素）
＃５ｒｎ６ アルファ−Ｈ Ｒ−アジド １，５ トリアゾール（６炭素）
＄４ｒｎ５ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，４ トリアゾール（５炭素）
＃４ｒｎ５ アルファ−Ｈ Ｒ−アジド １，４ トリアゾール（５炭素）
４Ｍｅ＄５ｒｎ６ アルファ−Ｍｅ Ｒ−アジド １，５ トリアゾール（６炭素）；４−Ｍｅ置換トリアゾール
４Ｍｅ＄５ａ５ アルファ−Ｍｅ アルキン １，５ トリアゾール（５炭素）；４−Ｍｅ置換トリアゾール
４Ｐｈ＄５ａ５ アルファ−Ｍｅ アルキン １，５ トリアゾール（５炭素）；４−フェニル置換トリアゾール
[00245] “５Ｉ”、“５ｐｅｎＮＨ２”、“５ＢｎｚＮＨ２”、“５ｐｒｐＯＭｅ”、“５Ｐｈ”、および“５ｐｒｐ”として表記されるアミノ酸は、下記の式Ｉの典型的なペプチドミメティック大環状化合物において示されるタイプの架橋したアミノ酸を指す：

【0380】

【化68】

【0381】

[00246] 上記の構造において、Ｘは例えば下記の置換基の１つであり：

【0382】

【化69】

【0383】

ここで“Ｃｙｃ”は適切なアリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合により上記で記載したようなＲ_ａもしくはＲ_ｂ基で置換されている。

【0384】

[00247] 一部の態様において、そのトリアゾール置換基は下記のものからなる群から選択される：

【0385】

【化70】

【0386】

[00248] 表４は式Ｉの典型的なペプチドミメティック大環状化合物を示す：

【0387】

【表7-1】

【0388】

【表7-2】

【0389】

Chemical Formula：化学式
Exact Mass：厳密な質量
Molecular Weight：分子量
[00249] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表５において示されるペプチドミメティック大環状化合物を除外する：

【0390】

【表8】

【0391】

[00250] 示したペプチドはＮ末端キャッピング基、例えばアセチル、またはそのキャッピング基およびそのペプチド配列の開始点の間に追加のリンカー、例えばベータ−アラニンを含むことができる。

【0392】

[00251] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表５において示されるようなペプチドミメティック大員環構造を含まない。

【0393】

実施例３：式ＩＩのペプチドミメティック大環状化合物。

【0394】

[00252] ペプチドミメティック大環状化合物を、２個以上の天然存在アミノ酸を対応する合成アミノ酸で置き換えることによりデザインした。ｉおよびｉ＋４、ならびにｉおよびｉ＋７の位置において置換を行った。大環状化合物を、固相ペプチド合成、続いてそのペプチドのチオール含有側鎖による架橋により生成した。ペプチド合成を、手動または自動ペプチド合成装置（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、モデル４３３Ａ）上のどちらかで、固相条件、ｒｉｎｋ ａｍｉｄｅ ＡＭ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）、およびＦｍｏｃ主鎖保護基化学を用いて実施する。その合成ペプチドのＮ末端をアセチル化し、一方でＣ末端をアミド化する。

【0395】

[00253] 完全に保護された樹脂に結合したペプチドを、ＲｉｎｋアミドＭＢＨＡ樹脂（装填０．６２ｍｍｏｌ／ｇ）で０．１ｍｍｏｌスケールで合成する。一時的なＦｍｏｃ基の脱保護を、その樹脂に結合したペプチドのＮＭＰ中２５％（ｖ／ｖ）ピペリジンによる２×２０分間の処理により達成する。ＮＭＰおよびジクロロメタンを大規模に（ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ）流して洗浄した後、それぞれの連続するアミノ酸のカップリングを、適切
な予め活性化したＦｍｏｃ−アミノ酸誘導体と共に１×６０分間インキュベートすることにより達成した。全ての保護されたアミノ酸（１ｍｍｏｌ）をＮＭＰ中で溶解させ、ＨＣＴＵ（１ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１ｍｍｏｌ）で活性化した後、そのカップリング溶液を脱保護された樹脂に結合したペプチドに移した。カップリングが完了した後、その樹脂を次の脱保護／カップリングサイクルに備えて大規模に流して洗浄した。アミノ末端のアセチル化をＮＭＰ／ＮＭＭ中無水酢酸／ＤＩＥＡの存在下で実施した。それぞれのカップリングの完了を検証するために、完全に組み立てた樹脂に結合したペプチドのアリコートから得た切断および脱保護した試料のＬＣ−ＭＳ分析を成し遂げた。

【0396】

[00254] 架橋した化合物の精製は逆相Ｃ１８カラム（Ｖａｒｉａｎ）上での高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（Ｖａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ）により達成され、純粋な化合物が得られる。その純粋な化合物の化学組成を、ＬＣ／ＭＳ質量分析（Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣシステムとインターフェースで接続されたＭｉｃｒｏｍａｓｓ ＬＣＴ）およびアミノ酸分析（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、モデル４２０Ａ）により確認した。

【0397】

[00255] 典型的な例では、ペプチド樹脂（０．１ｍｍｏｌ）をＤＣＭで洗浄した。一時的なＭｍｔ基の脱保護を、その樹脂に結合したペプチドの２％ ＴＦＡ／ＤＣＭ ５％
ＴＩＰＳによる３×３分間の処理、次いで濾液中にオレンジ色が観察されなくなるまでの３０分間の処理により達成した。処理の間にその樹脂をＤＣＭを大規模に流して洗浄した。Ｍｍｔを完全に除去した後、その樹脂を５％ ＤＩＥＡ／ＮＭＰ溶液で３回洗浄し、ビスチオエーテルカップリングの準備ができたと考えられた。樹脂を反応バイアル中に装填した。ＤＣＭ／ＤＭＦ １／１をその反応バイアルに添加し、続いてＤＩＥＡ（２．４等量）を添加した。５分間十分に混合した後、４，４’−ビス（ブロモメチル）ビフェニル（１．０５等量）（ＴＣＩ Ａｍｅｒｉｃａ Ｂ１９２１）を添加した。次いでその反応を機械的に室温で一夜攪拌した。必要である場合、完了に達するようにその反応を延長した。類似の手順を、５−メチレン、６−メチレンまたは７−メチレンクロスリンカー（“％ｃ７”、“％ｃ６”、または“％ｃ５”）の調製において用いることができる。

【0398】

[00256] そのビスチオエーテル樹脂結合ペプチドを、ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＴＩＳ（９４／３／３ ｖ／ｖ）を用いた室温で３時間の処理により脱保護し、固体支持体から切断した。その樹脂の濾過後、そのＴＦＡ溶液を冷ジエチルエーテル中で沈殿させ、遠心分離すると、所望の生成物が固体として得られた。その粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製した。

【0399】

[00257] 表６はペプチドミメティック大環状化合物のリストを示す。

【0400】

【表9-1】

【0401】

【表9-2】

【0402】

【表9-3】

【0403】

【表9-4】

【0404】

【表9-5】

【0405】

【表9-6】

【0406】

【表9-7】

【0407】

【表9-8】

【0408】

【表9-9】

【0409】

表６ａは代表的なペプチドミメティック大環状化合物を示す：

【0410】

【表10】

【0411】

[00258] 選択された典型的なペプチドミメティック大環状化合物の部分構造を下記に示す：

【0412】

【化71】

【0413】

[00259] 典型的なペプチドミメティック大環状化合物の構造を下記に示す：

【0414】

【化72】

【0415】

[00260] 典型的なペプチドミメティック大環状化合物の別の構造を下記に示す：

【0416】

【化73】

【0417】

[00261] “＃ｃｓ５”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への５メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−システインである。“＃ｃ
５”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への５メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−システインである。“＃ｃｓ６”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への６メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−システインである。“＃ｃ６”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への６メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−システインである。“＃ｃｓ７”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への７メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−システインである。“＃ｃ７”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への７メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−システインである。“＃ｃｓ８”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への８メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−システインである。“＃ｃ８”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への８メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−システインである。“％ｃｓ７”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への７メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｄ−システインである。“％ｃ７”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への７メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｌ−システインである。“％ｃｓ８”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への８メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｄ−システインである。“％ｃ８”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への８メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｌ−システインである。“％ｃｓ９”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への９メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｄ−システインである。“％ｃ９”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への９メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｌ−システインである。“％ｃｓ１０”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への１０メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｄ−システインである。“％ｃ１０”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への１０メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｌ−システインである。“ｐｅｎ８”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への８メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−ペニシラミンである。“Ｐｅｎ８”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７への８メチレンクロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−ペニシラミンである。“＃ｃｓＢｐｈ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｈ（４，４’−ビスメチル−ビフェニル）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−システインである。“＃ｃＢｐｈ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｈ（４，４’−ビスメチル−ビフェニル）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−システインである。“％ｃｓＢｐｈ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｈ（４，４’−ビスメチル−ビフェニル）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｄ−システインである。“％ｃＢｐｈ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｈ（４，４’−ビスメチル−ビフェニル）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｌ−システインである。“＃ｃｓＢｐｙ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｙ（６，６’−ビスメチル−［３，３’］ビピリジン）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＤ−システインである。“＃ｃＢｐｙ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｙ（６，６’−ビスメチル−［３，３’］ビピリジン）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたＬ−システインである。“％ｃｓＢｐｙ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｙ（６，６’−ビスメチル−［３，３’］ビピリジン）クロスリンカーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｄ−システインである。“％ｃＢｐｙ”として表されるアミノ酸は、ｉからｉ＋７へのＢｐｙ（６，６’−ビスメチル−［３，３’］ビピリジン）クロスリンカ
ーにより別のチオール含有アミノ酸に連結されたアルファ−メチル−Ｌ−システインである。上記で示したメチレン単位の数は、そのクロスリンカーの２個のチオール基の間のメチレン単位の数を指す。

【0418】

[00262] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は、例えばそのクロスリンカーの構造内の二重結合の立体配置（Ｅ対Ｚ）のため、１種類より多くの異性体で得られる。そのような異性体は従来のクロマトグラフィー法により分離することができ、または分離することができない。一部の態様において、一方の異性体は他方の異性体と対比して向上した生物学的特性を有する。１態様において、ペプチドミメティック大環状化合物のＥクロスリンカーオレフィン異性体はそのＺカウンターパートと対比してより良好な可溶性、より良好な標的親和性、より良好なインビボもしくはインビトロ有効性、より高いヘリックス性、または向上した細胞透過性を有する。別の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物のＺクロスリンカーオレフィン異性体はそのＥカウンターパートと対比してより良好な可溶性、より良好な標的親和性、より良好なインビボもしくはインビトロ有効性、より高いヘリックス性、または向上した細胞透過性を有する。

【0419】

[00263] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表７において示されるペプチドミメティック大環状化合物を除外する：

【0420】

【表11】

【0421】

[00264] 示したペプチドは、Ｎ末端キャッピング基、例えばアセチル、またはそのキャッピング基およびそのペプチド配列の開始点の間に追加のリンカー、例えばベータ−アラニンを含むことができる。

【0422】

[00265] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表７において示されるようなペプチドミメティック大員環構造を含まない。

【0423】

[00266] 他の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表７ａにおいて示されるペプチドミメティック大環状化合物を除外する：

【0424】

【表12】

【0425】

[00267] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表７ａにおいて示されるようなペプチドミメティック大員環構造を含まない。

【0426】

[00268] 他の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は、表７ｂにおいて示され、Muppidi et al., Chem. Commun. (2011) DOI: 10.1039/c1cc13320aにおいて開示されているペプチドミメティック大環状化合物を除外し：

【0427】

【表13】

【0428】

ここで表７ｂ中のＣはＬ−システインを意味し、ｃはＤ−システインを意味し；そして＃ｃＢｐｈ、＃ｃＢｐｙ、＃ｃｓＢｐｈ、および＃ｃｓＢｐｙは本明細書において定義されている通りである。

【0429】

[00269] 一部の態様において、ペプチドミメティック大環状化合物は表７ｂにおいて示されるようなペプチドミメティック大員環構造を含まない。

【0430】

実施例４：アルファ−ヘリックス性の円二色性（ＣＤ）分析
[00270] ペプチド溶液を、Ｊａｓｃｏ Ｊ−８１５分光偏光計（Ｊａｓｃｏ Ｉｎｃ．、メリーランド州イーストン）をＪａｓｃｏ Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｎａｇｅｒ Ｖｅｒ．２システムソフトウェアと共に用いてＣＤ分光法により分析する。ペルチェ温度制御装置を用いて光学セルの温度制御を維持する。結果は等式［θ］＝θｏｂｓ・ＭＲＷ／１０^＊ｌ^＊ｃから計算されるような平均モル楕円率［θ］（ｄｅｇ ｃｍ２ ｄｍｏｌ−１）として表され、ここでθｏｂｓはミリ度での観察された楕円率であり、ＭＲＷはペプチドの平均残基重量（ペプチド分子量／残基数）であり、ｌはセンチメートルでのそのセルの光路長であり、そしてｃはｍｇ／ｍｌでのペプチド濃度である。ペプチド濃度はアミノ酸分析により決定する。ペプチドのストック溶液を穏和な（ｂｅｎｉｇｎ）ＣＤ緩衝液（２０ｍＭリン酸、ｐＨ２）中で調製する。そのストックを用いて、１０ｍｍ経路長セルでの分析のために、穏和なＣＤ緩衝液または５０％トリフルオロエタノール（ＴＦＥ）を含むＣＤ緩衝液のどちらかにおける０．０５ｍｇ／ｍｌのペプチド溶液を調製する。ペプチド溶液の可変波長測定を、４℃において１９５から２５０ｎｍまで、０．２ｎｍのきざみ幅で、そして走査速度５０ｎｍ／分で走査する。６回の走査の平均を報告する。

【0431】

実施例５：蛍光偏光（ＦＰ）を用いたＭＤＭ２の直接結合アッセイ
[00271] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
１． ＭＤＭ２（組織内、４１ｋＤ）をＦＰ緩衝液（高塩濃度緩衝液−２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣＨＡＰＳ、ｐＨ ７．５）中に希釈して、１０μＭの使用ストック溶液を作る。

【0432】

２． ３０μｌの１０μＭのタンパク質ストック溶液を９６ウェル黒色ＨＥマイクロプレート（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）のＡ１およびＢ１ウェルの中に入れる。

【0433】

３． ３０μｌのＦＰ緩衝液を縦列Ａ２〜Ａ１２、Ｂ２〜Ｂ１２、Ｃ１〜Ｃ１２、およびＤ１〜Ｄ１２中に満たす。

【0434】

４． Ａ１、Ｂ１からＡ２、Ｂ２中に；Ａ２、Ｂ２からＡ３、Ｂ３に；...のタンパク質ストックの２または３倍系列希釈を、最後の希釈点において１桁ｎＭ濃度に達するように行う。

【0435】

５． （１００％ＤＭＳＯ中）１ｍＭのＦＡＭ標識した線状ペプチドをＤＭＳＯで１００μＭに希釈する（１：１０希釈）。次いで、水により１００μＭから１０μＭに希釈し（１：１０希釈）、次いでＦＰ緩衝液で１０μＭから４０ｎＭに希釈する（１：２５０希釈）。これが使用溶液であり、それはウェル中で１０ｎＭの濃度であろう（１：４希釈）。その希釈したＦＡＭ標識ペプチドを暗所で使用まで保存する。

【0436】

６． １０μｌの１０ｎＭのＦＡＭ標識ペプチドをそれぞれのウェル中に添加してインキュベートし、異なる時点で読み取る。５−ＦＡＭ−ＢａＬＴＦＥＨＹＷＡＱＬＴＳ−ＮＨ_２（配列番号：１０１２）に関するＫｄは約１３．３８ｎＭである。

【0437】

実施例６：ＭＤＭ２に関する競合蛍光偏光アッセイ
[00272] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
１． ＭＤＭ２（組織内、４１ｋＤ）をＦＰ緩衝液（高塩濃度緩衝液−２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣＨＡＰＳ、ｐＨ ７．５）中に希釈して、８４ｎＭ（２×）の使用ストック溶液を作る。

【0438】

２． ２０μｌの８４ｎＭ（２×）のタンパク質ストック溶液を９６ウェル黒色ＨＥマイクロプレート（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）のそれぞれのウェルの中に入れる。

【0439】

３． （１００％ＤＭＳＯ中）１ｍＭのＦＡＭ標識した線状ペプチドをＤＭＳＯで１００μＭに希釈する（１：１０希釈）。次いで、水により１００μＭから１０μＭに希釈し（１：１０希釈）、次いでＦＰ緩衝液で１０μＭから４０ｎＭに希釈する（１：２５０希釈）。これが使用溶液であり、それはウェル中で１０ｎＭの濃度であろう（１：４希釈）。その希釈したＦＡＭ標識ペプチドを暗所で使用まで保存する。

【0440】

４． 未標識のペプチド用量プレートを１μＭ（終濃度）のペプチドを用いて出発してＦＰ緩衝液を用いて作り、以下の希釈スキームを用いて６点に関する５倍系列希釈を作る。

【0441】

（１００％ＤＭＳＯ中）１０ｍＭをＤＭＳＯで希釈して５ｍＭにする（１：２希釈）。次いで、Ｈ_２Ｏで５ｍＭから５００μＭに希釈し（１：１０希釈）、次いでＦＰ緩衝液で５００μＭから２０μＭに希釈する（１：２５希釈）。４μＭ（４×）から６点に関して５倍系列希釈を作る。

【0442】

５． １０μｌの系列希釈された未標識ペプチドを、２０μｌの８４ｎＭのタンパク質で満たされたそれぞれのウェルに移す。

【0443】

６． １０μｌの１０ｎＭ（４×）のＦＡＭ標識ペプチドをそれぞれのウェル中に添加し、３時間インキュベートして読み取る。

【0444】

実施例７：蛍光偏光（ＦＰ）を用いたＭＤＭＸの直接結合アッセイ
[00273] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
１． ＭＤＭＸ（組織内、４０ｋＤ）をＦＰ緩衝液（高塩濃度緩衝液−２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣＨＡＰＳ、ｐＨ ７．５）中に希釈して、１０μＭの使用ストック溶液を作る。

【0445】

２． ３０μｌの１０μＭのタンパク質ストック溶液を９６ウェル黒色ＨＥマイクロプレート（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）のＡ１およびＢ１ウェルの中に入れる。

【0446】

３． ３０μｌのＦＰ緩衝液を縦列Ａ２〜Ａ１２、Ｂ２〜Ｂ１２、Ｃ１〜Ｃ１２、およびＤ１〜Ｄ１２中に満たす。

【0447】

４． Ａ１、Ｂ１からＡ２、Ｂ２中に；Ａ２、Ｂ２からＡ３、Ｂ３に；...のタンパク質ストックの２または３倍系列希釈を、最後の希釈点において１桁ｎＭ濃度に達するように行う。

【0448】

５． （１００％ＤＭＳＯ中）１ｍＭのＦＡＭ標識した線状ペプチドをＤＭＳＯで１００μＭに希釈する（１：１０希釈）。次いで、水により１００μＭから１０μＭに希釈し（１：１０希釈）、次いでＦＰ緩衝液で１０μＭから４０ｎＭに希釈する（１：２５０希釈）。これが使用溶液であり、それはウェル中で１０ｎＭの濃度であろう（１：４希釈）。その希釈したＦＡＭ標識ペプチドを暗所で使用まで保存する。

【0449】

６． １０μｌの１０ｎＭのＦＡＭ標識ペプチドをそれぞれのウェル中に添加してイン
キュベートし、異なる時点で読み取る。

【0450】

５−ＦＡＭ−ＢａＬＴＦＥＨＹＷＡＱＬＴＳ−ＮＨ_２（配列番号：１０１２）に関するＫｄは約５１ｎＭである。

【0451】

実施例８：ＭＤＭＸに関する競合蛍光偏光アッセイ
[00274] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
１． ＭＤＭＸ（組織内、４０ｋＤ）をＦＰ緩衝液（高塩濃度緩衝液−２００ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＣＨＡＰＳ、ｐＨ ７．５）中に希釈して、３００ｎＭ（２×）の使用ストック溶液を作る。

【0452】

２． ２０μｌの３００ｎＭ（２×）のタンパク質ストック溶液を９６ウェル黒色ＨＥマイクロプレート（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）のそれぞれのウェルの中に入れる。

【0453】

３． （１００％ＤＭＳＯ中）１ｍＭのＦＡＭ標識した線状ペプチドをＤＭＳＯで１００μＭに希釈する（１：１０希釈）。次いで、水により１００μＭから１０μＭに希釈し（１：１０希釈）、次いでＦＰ緩衝液で１０μＭから４０ｎＭに希釈する（１：２５０希釈）。これが使用溶液であり、それはウェル中で１０ｎＭの濃度であろう（１：４希釈）。その希釈したＦＡＭ標識ペプチドを暗所で使用まで保存する。

【0454】

４． 未標識のペプチド用量プレートを５μＭ（終濃度）のペプチドを用いて出発してＦＰ緩衝液を用いて作り、以下の希釈スキームを用いて６点に関する５倍系列希釈を作る。

【0455】

５． （１００％ＤＭＳＯ中）１０ｍＭをＤＭＳＯで希釈して５ｍＭにする（１：２希釈）。次いで、Ｈ_２Ｏで５ｍＭから５００μＭに希釈し（１：１０希釈）、次いでＦＰ緩衝液で５００μＭから２０μＭに希釈する（１：２５希釈）。２０μＭ（４×）から６点に関して５倍系列希釈を作る。

【0456】

６． １０μｌの系列希釈された未標識ペプチドをそれぞれのウェルに移し、それを２０μｌの３００ｎＭのタンパク質で満たす。

【0457】

７． １０μｌの１０ｎＭ（４×）のＦＡＭ標識ペプチドをそれぞれのウェル中に添加し、３時間インキュベートして読み取る。

【0458】

[00275] 実施例４〜７からの結果を表８において示す。ＩＣ５０およびＫｉ値に関して下記の尺度を用いる：“＋”は１０００ｎＭより大きい値を表し、“＋＋”は１００ｎＭより大きく１０００ｎＭ以下の値を表し、“＋＋＋”は１０ｎＭより大きく１００ｎＭ以下の値を表し、そして“＋＋＋＋”は１０ｎＭ以下の値を表す。細胞生存度アッセイの結果（実施例９におけるように実施される）も表８に含まれており、下記の尺度を用いる：“＋”は３０μＭより大きい値を表し、“＋＋”は１５μＭより大きく３０μＭ以下の値を表し、“＋＋＋”は５μＭより大きく１５μＭ以下の値を表し、そして“＋＋＋＋”は５μＭ以下の値を表す。“ＩＣ５０比”は、ｐ５３−／−細胞における平均ＩＣ５０と対比したｐ５３＋／＋細胞における平均ＩＣ５０の比率を表す。

【0459】

【表14】

【0460】

実施例９：競合結合ＥＬＩＳＡ（ＭＤＭ２＆ＭＤＭＸ）
[00276] ｐ５３−Ｈｉｓ６タンパク質（配列番号：１０１３として開示される“Ｈｉｓ６”）（３０ｎＭ／ウェル）を室温で９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎプレートのウェル中で一夜コートする。その実験の日に、プレートを自動化されたＥＬＩＳＡプレート洗浄機を用いて１×ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０（０．０５％）で洗浄し、ＥＬＩＳＡ Ｍｉｃｒｏ ｗｅｌｌ Ｂｌｏｃｋｉｎｇを用いて室温で３０分間ブロッキングし；過剰なブロッキング剤を、プレートを１×ＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０（０．０５％）で洗浄することにより洗い落とす。ペプチドを１０ｍＭ ＤＭＳＯストックから滅菌水中で５００μＭ使用ストックに希釈し、さらなる希釈はＤＭＳＯの濃度を試料にわたって一定に保つために０．５％ ＤＭＳＯ中で行う。そのペプチドをウェルに５０μｌ体積中で２×所望濃度で入れ、続いて希釈したＧＳＴ−ＭＤＭ２またはＧＳＴ−ＨＭＤＸタンパク質（終濃度：１０ｎＭ）を添加する。試料を室温で２時間インキュベートし、プレートをＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０（０．０５％）で洗浄した後、ＨＲＰ安定化緩衝液中で０．５μｇ／ｍｌに希釈した１００μｌのＨＲＰコンジュゲート抗ＧＳＴ抗体［Ｈｙｐｒｏｍａｔｒｉｘ、ＩＮＣ］を添加する。検出抗体と共に３０分間インキュベートした後、プレートを洗浄し、ウェルあたり１００μｌのＴＭＢ−Ｅ基質溶液と共に３０分間までインキュベートし；反応を１Ｍ ＨＣＬを用いて停止し、マイクロプレートリーダー上で４５０ｎｍにおいて吸光度を測定する。データをＧｒａｐｈ Ｐａｄ ＰＲＩＳＭソフトウェアを用いて分析する。

【0461】

実施例１０：細胞生存度アッセイ
[00277] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
細胞を蒔く：アッセイの前日に、細胞をトリプシン処理し、計数し、予め決められた密度で９６ウェルプレートに蒔く。下記の細胞密度を使用するそれぞれの細胞株に関して用いる：
・ＳＪＳＡ−１：７５００細胞／ウェル
・ＲＫＯ：５０００細胞／ウェル
・ＲＫＯ−Ｅ６：５０００細胞／ウェル
・ＨＣＴ−１１６：５０００細胞／ウェル
・ＳＷ−４８０：２０００細胞／ウェル
・ＭＣＦ−７：５０００細胞／ウェル
[00278] 試験の日に、培地を室温において１１％ＦＢＳを含む新しい培地（アッセイ培地）と取り替える。ウェルあたり１８０μＬのアッセイ培地を添加する。細胞を含まない対照ウェルには２００μｌの培地を入れる。

【0462】

[00279] ペプチドの希釈：全ての希釈は室温で行われ、室温で細胞に添加される。

【0463】

・ＤＭＳＯ中でペプチドの１０ｍＭストックを調製する。そのストックを１：３希釈スキームを用いてＤＭＳＯを希釈液として用いて系列希釈して、１０、３．３、１．１、０．３３、０．１１、０．０３、０．０１ｍＭ溶液を得る。その系列ＤＭＳＯ希釈したペプチドを、滅菌水を用いて３３．３倍希釈する。これはある範囲の１０×使用ストックを与える。また、対照ウェルに関してＤＭＳＯ／滅菌水（３％ＤＭＳＯ）混合物も調製する。

【0464】

・従って、その使用ストック濃度範囲のμＭは３００、１００、３０、１０、３、１、０．３および０μＭであろう。それぞれの希釈工程において、マルチチャンネル（ｍｕｌｔｉｃｈａｎｎｅｌ）を用いてウェルを混合する。

【0465】

・横列Ｈは対照を有する。Ｈ１〜Ｈ３には２０ｕｌのアッセイ培地を入れるであろう。Ｈ４〜Ｈ９には２０ｕｌの３％ＤＭＳＯ−水ビヒクルを入れるであろう。Ｈ１０〜Ｈ１２は細胞を含まない培地のみの対照を有するであろう。

【0466】

・陽性対照：ＭＤＭ２小分子阻害剤であるＮｕｔｌｉｎ−３ａ（１０ｍＭ）を陽性対照として用いる。Ｎｕｔｌｉｎはペプチドと同じ希釈スキームを用いて希釈された。

【0467】

[00280] 使用溶液の細胞への添加：
・２０μｌの１０×所望濃度を適切なウェルに添加して、ウェル中で合計２００μｌの体積中で終濃度を達成する。（２０μｌの３００μＭペプチド＋１８０μｌの培地中の細胞＝ウェル中で２００μｌの体積中で３０μＭの終濃度）。ピペットを用いて穏やかに数回混合する。従って、用いられる終濃度範囲は３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３および０μＭであろう（強力なペプチドに関してはさらなる希釈が含まれる）。

【0468】

・対照には、ペプチドを与えられないがペプチドを含有するウェルと同じ濃度のＤＭＳＯを含有するウェル、および細胞を含有しないウェルが含まれる。

【0469】

・加湿した５％ＣＯ_２の雰囲気中で３７℃で７２時間インキュベートする。

【0470】

・細胞の生存度をＰｒｏｍｅｇａからのＭＴＴ試薬を用いて決定する。ＳＪＳＡ−１、ＲＫＯ、ＲＫＯ−Ｅ６、ＨＣＴ−１１６細胞の生存度を３日目に決定し、ＭＣＦ−７細胞の生存度を５日目に決定し、ＳＷ−４８０細胞の生存度を６日目に決定する。指定されたインキュベーション時間の終了時に、プレートを室温に至らせる。それぞれのウェルから８０μｌのアッセイ培地を取り出す。１５μｌの解凍したＭＴＴ試薬をそれぞれのウェルに添加する。

【0471】

・プレートを加湿した５％ＣＯ_２の雰囲気中で３７℃で２時間インキュベートしておき、１００μｌの可溶化試薬を製造業者のプロトコル通りに添加する。攪拌しながら室温で１時間インキュベートし、Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｂｉｏｔｅｋマルチプレートリーダー上で５７０ｎｍの吸光度に関して読み取る。

【0472】

・ＧｒａｐｈＰａｄ ＰＲＩＳＭ分析ツールを用いて、細胞生存度をＤＭＳＯ対照に対して分析する。

【0473】

[00281] 試薬：
・Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ細胞培養培地
ｉ．Ｆａｌｃｏｎ ９６ウェル透明細胞培養処理プレート（Ｎｕｎｃ ３５３０７２）
・ＤＭＳＯ（Ｓｉｇｍａ Ｄ ２６５０）
・ＲＰＭＩ １６４０（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ７２４００）
・ＭＴＴ（Ｐｒｏｍｅｇａ Ｇ４０００）
[00282] 機器：吸光度の読み取りのためのマルチプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ
２）。

【0474】

[00283] 結果は表８において示されている。

【0475】

実施例１１：Ｐ２１ ＥＬＩＳＡアッセイ
[00284] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
細胞を蒔く：
・アッセイの前日に、ＳＪＳＡ１細胞をトリプシン処理し、計数し、９６ウェルプレートにおいて７５００細胞／１００μｌ／ウェルの密度で蒔く。

【0476】

・試験の日に、培地を新しいＲＰＭＩ−１１％ＦＢＳ（アッセイ培地）と取り替える。ウェルあたり９０μＬのアッセイ培地を添加する。細胞を含まない対照ウェルには１００μｌの培地を入れる。

【0477】

[00285] ペプチドの希釈：
・ＤＭＳＯ中でペプチドの１０ｍＭストックを調製する。そのストックを１：３希釈スキームを用いてＤＭＳＯを希釈液として用いて系列希釈して、１０、３．３、１．１、０．３３、０．１１、０．０３、０．０１ｍＭ溶液を得る。その系列ＤＭＳＯ希釈したペプチドを、滅菌水を用いて３３．３倍希釈する。これはある範囲の１０×使用ストックを与える。また、対照ウェルに関してＤＭＳＯ／滅菌水（３％ＤＭＳＯ）混合物も調製する。

【0478】

・従って、その使用ストック濃度範囲のμＭは３００、１００、３０、１０、３、１、０．３および０μＭであろう。それぞれの希釈工程において、マルチチャンネルを用いてウェルを混合する。

【0479】

・横列Ｈは対照を有する。Ｈ１〜Ｈ３には１０ｕｌのアッセイ培地を入れるであろう。Ｈ４〜Ｈ９には１０ｕｌの３％ＤＭＳＯ−水ビヒクルを入れるであろう。Ｈ１０〜Ｈ１２は細胞を含まない培地のみの対照を有するであろう。

【0480】

・陽性対照：ＭＤＭ２小分子阻害剤であるＮｕｔｌｉｎ−３ａ（１０ｍＭ）を陽性対照として用いる。Ｎｕｔｌｉｎはペプチドと同じ希釈スキームを用いて希釈された。

【0481】

[00286] 使用ストックの細胞への添加：
・１０μｌの１０×所望濃度を適切なウェルに添加して、ウェル中で合計１００μｌの体積中で終濃度を達成する。（１０μｌの３００μＭペプチド＋９０μｌの培地中の細胞＝ウェル中で１００μｌの体積中で３０μＭの終濃度）。従って、用いられる終濃度範囲は３０、１０、３、１、０．３および０μＭであろう。

【0482】

・対照には、ペプチドを与えられないがペプチドを含有するウェルと同じ濃度のＤＭＳＯを含有するウェル、および細胞を含有しないウェルが含まれるであろう。

【0483】

・２０時間インキュベートした後、培地を吸引し；細胞を１×ＰＢＳ（Ｃａ^＋＋／Ｍｇ^＋＋を含まない）で洗浄し、６０μｌの１×細胞溶解用緩衝液（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓの１０×緩衝液を１×に希釈し、プロテアーゼ阻害剤およびホスファターゼ阻害剤を補ったもの）中で氷上で３０分間溶解させる。

【0484】

・プレートを４℃において５０００ｒｐｍの速度で８分間遠心分離し；透明な上清を集め、さらなる使用まで−８０℃で凍結させる。

【0485】

[00287] タンパク質の推定：
・その溶解物の総タンパク質含有量を、ＴｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒからのＢＣＡタンパク質検出キットおよびＢＳＡ標準を用いて測定する。典型的には、ウェルあたり約６〜７μｇのタンパク質が予想される。

【0486】

・ウェルあたり５０μｌのその溶解液を用いて、ｐ２１ ＥＬＩＳＡを構成する。

【0487】

[00288] ヒト総ｐ２１ ＥＬＩＳＡ：そのＥＬＩＳＡアッセイのプロトコルは、製造業者の説明書通りに従う。５０μｌの溶解物をそれぞれのウェルに関して用いて、それぞれのウェルを３重（ｔｒｉｐｌｉｃａｔｅ）で構成する。

【0488】

[00289] 試薬：
・Ｃｅｌｌ−Ｂａｓｅｄ Ａｓｓａｙ （−）−Ｎｕｔｌｉｎ−３（１０ｍＭ）：Ｃａｙｍａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、カタログ番号６０００３４
・ＯｐｔｉＭＥＭ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ カタログ番号５１９８５
・Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ溶解用緩衝液（１０Ｘ）、Ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、カタログ番号９８０３
・プロテアーゼ阻害剤カクテル錠（ミニ）、Ｒｏｃｈｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、カタログ番号０４６９３１２４００１
・ホスファターゼ阻害剤カクテル錠、Ｒｏｃｈｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、カタログ番号０４９０６８３７００１
・ヒト総ｐ２１ ＥＬＩＳＡキット、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＤＹＣ１０４７−５
・停止溶液（１Ｍ ＨＣＬ）、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号７００２
[00290] 機器：微量遠心機−Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ ５４１５Ｄおよび吸光度の読み取りのためのマイクロプレートリーダー（Ｓｙｎｅｒｇｙ ２）。

【0489】

実施例１２：カスパーゼ３検出アッセイ：
[00291] そのアッセイは下記の一般的なプロトコルに従って実施される：
細胞を蒔く：アッセイの前日に、ＳＪＳＡ１細胞をトリプシン処理し、計数し、９６ウェルプレートにおいて７５００細胞／１００μｌ／ウェルの密度で蒔く。試験の日に、培地を新しいＲＰＭＩ−１１％ＦＢＳ（アッセイ培地）と取り替える。ウェルあたり１８０μＬのアッセイ培地を添加する。細胞を含まない対照ウェルには２００μｌの培地を入れる。

【0490】

[00292] ペプチドの希釈：
・ＤＭＳＯ中でペプチドの１０ｍＭストックを調製する。そのストックを１：３希釈スキームを用いてＤＭＳＯを希釈液として用いて系列希釈して、１０、３．３、１．１、０．３３、０．１１、０．０３、０．０１ｍＭ溶液を得る。その系列ＤＭＳＯ希釈したペプチドを、滅菌水を用いて３３．３倍希釈する。これはある範囲の１０×使用ストックを与える。また、対照ウェルに関してＤＭＳＯ／滅菌水（３％ＤＭＳＯ）混合物も調製する。

【0491】

・従って、その使用ストック濃度範囲のμＭは３００、１００、３０、１０、３、１、０．３および０μＭであろう。それぞれの希釈工程において、マルチチャンネルを用いてウェルを混合する。２０ｕｌの１０×使用ストックを適切なウェルに添加する。

【0492】

・横列Ｈは対照を有する。Ｈ１〜Ｈ３には２０ｕｌのアッセイ培地を入れるであろう。Ｈ４〜Ｈ９には２０ｕｌの３％ＤＭＳＯ−水ビヒクルを入れるであろう。Ｈ１０〜Ｈ１２は細胞を含まない培地のみの対照を有するであろう。

【0493】

・陽性対照：ＭＤＭ２小分子阻害剤であるＮｕｔｌｉｎ−３ａ（１０ｍＭ）を陽性対照として用いる。Ｎｕｔｌｉｎはペプチドと同じ希釈スキームを用いて希釈された。

【0494】

[00293] 使用ストックの細胞への添加：
・１０μｌの１０×所望濃度を適切なウェルに添加して、ウェル中で合計１００μｌの体積中で終濃度を達成する。（１０μｌの３００μＭペプチド＋９０μｌの培地中の細胞＝ウェル中で１００μｌの体積中で３０μＭの終濃度）。従って、用いられる終濃度範囲は３０、１０、３、１、０．３および０μＭであろう。

【0495】

・対照には、ペプチドを与えられないがペプチドを含有するウェルと同じ濃度のＤＭＳＯを含有するウェル、および細胞を含有しないウェルが含まれるであろう。

【0496】

・４８時間インキュベートした後、８０μｌの培地をそれぞれのウェルから吸引し；ウェルあたり１００μｌのカスパーゼ３／７Ｇｌｏアッセイ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ カスパーゼ３／７ ｇｌｏアッセイシステム、Ｇ８０９２）を添加し、穏やかに振盪しながら室温で１時間インキュベートする。

【0497】

・Ｓｙｎｅｒｇｙ Ｂｉｏｔｅｋマルチプレートリーダー上で蛍光に関して読み取る。

【0498】

・データをＤＭＳＯ処理した細胞と比較したカスパーゼ３の活性化として分析する。

【0499】

実施例１３．ペプチドミメティック大環状化合物による細胞溶解
[00294] ＳＪＳＡ−１細胞を１日前に透明な平底プレート（Ｃｏｓｔａｒ、カタログ番号３５３０７２）中に７５００細胞／ウェルで１００ｕｌ／ウェルの増殖培地と共に蒔き、横列Ｈの縦列１０〜１２は培地単独のために空のままにする。アッセイの日に、培地をＲＰＭＩ １％ ＦＢＳ培地、ウェルあたり９０ｕＬの培地と交換する。

【0500】

[00295] ペプチドミメティック大環状化合物の１０ｍＭストック溶液を１００％ＤＭＳＯ中で調製する。次いでペプチドミメティック大環状化合物を１００％ＤＭＳＯ中で系
列希釈し、次いで滅菌水中でさらに２０倍希釈して、それぞれのペプチドミメティック大環状化合物の５％ＤＭＳＯ／水中の使用ストック溶液を５００ｕＭから６２．５ｕＭまでの範囲の濃度で調製した。

【0501】

[00296] １０ｕＬのそれぞれの化合物を９０ｕＬのＳＪＳＡ−１細胞に添加して、０．５％ ＤＭＳＯを含有する培地中で５０ｕＭ〜６．２５ｕＭの終濃度を得る。陰性対照（非溶解性）試料は０．５％ ＤＭＳＯのみであり、陽性対照（溶解性）試料には１０ｕＭ Ｍｅｌｉｔｔｉｎおよび１％ Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００が含まれる。

【0502】

[00297] 細胞プレートを３７℃で１時間インキュベートする。１時間のインキュベーション後、その細胞の形態を顕微鏡により調べ、次いでそのプレートを室温において１２００ｒｐｍで５分間遠心分離した。それぞれのペプチドミメティック大環状化合物および対照試料に関する４０ｕＬの上清を透明なアッセイプレートに移す。ＬＤＨの放出をＣａｙｍｅｎからのＬＤＨ細胞毒性アッセイキット（カタログ番号１０００８８２）を用いて測定する。

【0503】

実施例１４：ｐ５３ ＧＲＩＰアッセイ
[00298] Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ^＊ ＢｉｏＩｍａｇｅ ｐ５３−ＭＤＭ２再分布アッセイは、薬物化合物または他の刺激に反応したＭＤＭ２とのタンパク質相互作用およびＧＦＰタグ化ｐ５３の細胞内転位置（ｃｅｌｌｕｌａｒ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ）をモニターする。組み換えＣＨＯ−ｈＩＲ細胞は増強緑色蛍光タンパク質（ＥＧＦＰ）のＣ末端に融合したヒトｐ５３（１−３１２）ならびにＰＤＥ４Ａ４およびＭＤＭ２（１−１２４）の間の融合タンパク質であるＰＤＥ４Ａ４−ＭＤＭ２（１−１２４）を安定発現する。それらは実験条件のｐ５３およびＭＤＭ２の相互作用への作用を測定するためのすぐに使えるアッセイ系を提供する。画像化および分析はＨＣＳプラットフォームを用いて実施する。

【0504】

[00299] ＣＨＯ−ｈＩＲ細胞を、１％ペニシリン−ストレプトマイシン、０．５ｍｇ／ｍｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ、１ｍｇ／ｍｌ Ｚｅｏｃｉｎおよび１０％ ＦＢＳを補ったＨａｍ’ｓ Ｆ１２培地中で定期的に維持する。細胞を、アッセイを行う１８〜２４時間前に培地を用いてウェルあたり７０００細胞／１００μｌの密度で９６ウェルプレート中に蒔く。次の日に、培地を新しくして、ＰＤ１７７を３μＭの終濃度になるように細胞に添加してフォーカス形成を活性化する。対照ウェルはＰＤ−１７７溶液なしのままにする。ＰＤ１７７による刺激の２４時間後、細胞をＯｐｔｉ−ＭＥＭ培地で１回洗浄し、５０μＬのＰＤ−１７７（６μＭ）を補ったＯｐｔｉ−ＭＥＭ培地を細胞に添加する。ペプチドを１０ｍＭ ＤＭＳＯストックから滅菌水中で５００μＭの使用ストックに希釈し、さらなる希釈はＤＭＳＯの濃度を試料にわたって一定に保つために０．５％ ＤＭＳＯ中で行う。最終的な最も高いＤＭＳＯ濃度は０．５％であり、それを陰性対照として用いる。Ｃａｙｍａｎ ＣｈｅｍｉｃａｌｓのＣｅｌｌ−Ｂａｓｅｄ Ａｓｓａｙ （−）−Ｎｕｔｌｉｎ−３（１０ｍＭ）を陽性対照として用いる。Ｎｕｔｌｉｎをペプチドと同じ希釈スキームを用いて希釈する。５０μｌの２×所望濃度を適切なウェルに添加して、最終的な所望濃度を達成する。次いで細胞をペプチドと共に、加湿した５％ＣＯ_２雰囲気中で３７℃において６時間インキュベートする。インキュベーション期間の後、細胞を、培地を穏やかに吸引して除き、ウェルあたり１５０μｌの固定溶液を室温で２０分間添加することにより固定する。固定された細胞を各回ウェルあたり２００μｌのＰＢＳで４回洗浄する。最後の洗浄の終了時に、１００μｌの１μＭ Ｈｏｅｃｈｓｔ染色溶液を添加する。密封したプレートを暗所で少なくとも３０分間インキュベートし、ＰＢＳで洗浄して過剰な染色液を除去し、ＰＢＳをそれぞれのウェルに添加する。プレートを４℃において暗所で３日間まで保管することができる。ｐ５３／ＭＤＭ２の転位置を、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ Ａｒｒａｙｓｃａｎ機器上で分子転位置モジュールを用いて、１０×対物レンズ、ＸＦ−１００フィルターセットを用いて、ＨｏｅｃｈｓｔおよびＧＦＰに関して画像化する。出力パラメーターはＭｅａｎ−ＣｉｒｃＲＩＮＧＡｖｅＩｎｔｅｎＲａｔｉｏ（核および細胞質の平均蛍光強度の比率（ウェル平均））であった。画像分析のために用いられたウェルあたりの最小許容可能細胞数は５００細胞に設定した。

【0505】

実施例１５：ペプチドミメティック大環状化合物に関する可溶性の決定
[00300] ペプチドミメティック大環状化合物をまずニート（ｎｅａｔ）Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、３８８４０−１Ｌ−Ｆ）中で溶解させて２０〜１４０ｍｇ／ｍＬの濃度範囲にわたる２０×ストック溶液を作る。そのＤＭＡストック溶液を２％ Ｓｏｌｕｔｏｌ−ＨＳ−１５、２５ｍＭヒスチジン、４５ｍｇ／ｍＬマンニトールを含有する水性ビヒクル中で２０倍希釈して、５％ ＤＭＡ、２％ Ｓｏｌｕｔｏｌ−ＨＳ−１５、２５ｍＭヒスチジン、４５ｍｇ／ｍＬマンニトール中１〜７ｍｇ／ｍＬのペプチドミメティック大環状化合物の終濃度を得る。その最終溶液をピペッティングまたは軽いボルテックスを繰り返すことにより穏やかに混合し、次いでその最終溶液を室温において超音波水浴中で１０分間超音波処理する。次いでフードライト（ｈｏｏｄ ｌｉｇｈｔ）の下で７×視覚拡大鏡を用いて注意深い目視観測を実施して、沈殿が底の上に、または懸濁液として存在するかどうかを決定する。追加の濃度範囲を必要に応じて試験して、それぞれのペプチドミメティック大環状化合物に関する最大溶解限度を決定する。
本明細書は以下の発明の開示を包含する：
［１］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-1】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化74-2】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［２］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-3】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬまたはＬ’は独立して式−Ｌ_１−Ｌ_２−の大員環形成リンカーであり；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
Ｌ_１、Ｌ_２、およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［３］表４、４ａ、または４ｂ中のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドミメティック大環状化合物であって、該ペプチドミメティック大環状化合物が次式を有する、前記ペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-4】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【化74-5】

、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_３−］であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化74-6】

；
Ｌ_１、Ｌ_２およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［４］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-7】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化74-8】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［５］表６または６ａ中のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドミメティック大環状化合物であって、該ペプチドミメティック大環状化合物が次式を有し：

【化74-9】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【化74-10】

、［−ＮＨ−Ｌ_４−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_４−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_４−］であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３およびＬ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］、
ここで該ペプチドミメティック大環状化合物は表７、表７ａまたは表７ｂのペプチドミメティック大環状化合物ではない、前記ペプチドミメティック大環状化合物。
［６］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-11】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
Ｌ_１、Ｌ_２、およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［７］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-12】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化74-13】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_９は独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合によりＲ_ａおよび／またはＲ_ｂで置換されており；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［８］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-14】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｇｌｕ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０／Ｃｂａ_１０−Ｘ_１１−Ａｌａ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化74-15】

；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_９は独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合によりＲ_ａおよび／またはＲ_ｂで置換されており；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［９］表４、４ａ、または４ｂ中のアミノ酸配列からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約６０％同一であるアミノ酸配列を含むペプチドミメティック大環状化合物であって、該ペプチドミメティック大環状化合物が次式を有する、前記ペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-16】

［式中：
それぞれのＡ、Ｃ、Ｄ、およびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｂはアミノ酸、

【化74-17】

、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＣＯ−］、［−ＮＨ−Ｌ_３−ＳＯ_２−］、または［−ＮＨ−Ｌ_３−］であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬおよびＬ’は独立して次式の大員環形成リンカーであり：

【化74-18】

；
Ｌ_１、Ｌ_２およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_３は独立して水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
それぞれのＲ_４は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＫは独立してＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_７は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_８は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
それぞれのＲ_９は独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル基であり、置換されていないか、または場合によりＲ_ａおよび／またはＲ_ｂで置換されており；
ｖおよびｗは独立して１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｕは１〜１０、例えば１〜５、１〜３または１〜２の整数であり；
ｘ、ｙおよびｚは独立して０〜１０の整数であり、例えばｘ＋ｙ＋ｚの和は２、３、または６であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［１０］それぞれのＬおよびＬ’が独立して次式：

【化74-19】

の大員環形成リンカーである、［７］、［８］または［９］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１１］次式のペプチドミメティック大環状化合物：

【化74-20】

［式中：
Ｘａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０のそれぞれは個々にアミノ酸であり、ここでＸａａ_３、Ｘａａ_５、Ｘａａ_６、Ｘａａ_７、Ｘａａ_８、Ｘａａ_９、およびＸａａ_１０の少なくとも３つは配列Ｐｈｅ_３−Ｘ_４−Ｈｉｓ_５−Ｔｙｒ_６−Ｔｒｐ_７−Ａｌａ_８−Ｇｌｎ_９−Ｌｅｕ_１０−Ｘ_１１−Ｓｅｒ_１２の対応する位置におけるアミノ酸と同じアミノ酸であり、ここでそれぞれのＸはアミノ酸であり；
それぞれのＤおよびＥは独立してアミノ酸であり；
Ｒ_１およびＲ_２は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロアルキル、もしくはヘテロシクロアルキルであり、置換されていないか、もしくはハロ−で置換されており；またはＲ_１およびＲ_２の少なくとも１つは前記のＤもしくはＥアミノ酸の１つのアルファ位に連結された大員環形成リンカーＬ’を形成しており；
それぞれのＬまたはＬ’は独立して式−Ｌ_１−Ｌ_２−の大員環形成リンカーであり；
Ｌ_１およびＬ_２は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレン、または［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは場合によりＲ_５で置換されており；
Ｒ_３は水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルアルキル、シクロアリール、またはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており；
Ｌ_１、Ｌ_２、およびＬ_３は独立してアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、シクロアリーレン、ヘテロシクロアリーレンまたは［−Ｒ_４−Ｋ−Ｒ_４−］_ｎであり、それぞれは置換されていないか、またはＲ_５で置換されており；
それぞれのＫはＯ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ_２、ＣＯ、ＣＯ_２、またはＣＯＮＲ_３であり；
それぞれのＲ_４はアルキレン、アルケニレン、アルキニレン、ヘテロアルキレン、シクロアルキレン、ヘテロシクロアルキレン、アリーレン、またはヘテロアリーレンであり；
それぞれのＲ_５は独立してハロゲン、アルキル、−ＯＲ_６、−Ｎ（Ｒ_６）_２、−ＳＲ_６、−ＳＯＲ_６、−ＳＯ_２Ｒ_６、−ＣＯ_２Ｒ_６、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
それぞれのＲ_６は独立して−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、蛍光性部分、放射性同位体または療法薬であり；
Ｒ_７は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＤ残基と共に環状構造の一部であり；
Ｒ_８は−Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールアルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアリール、もしくはヘテロシクロアリールであり、場合によりＲ_５で置換されており、またはＥ残基と共に環状構造の一部であり；
ｖは１〜１０００、例えば１〜５００、１〜２００、１〜１００、１〜５０、１〜３０、１〜２０、または１〜１０の整数であり；
ｗは３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０の整数であり；そして
ｎは１〜５の整数である］。
［１２］Ｘａａ_５がＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログである、［１］、［２］、［４］、［６］、［７］、［８］、または［１１］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１３］［１２］に記載のペプチドミメティック大環状化合物であって、Ｘａａ_５がＧｌｕまたはそのアミノ酸アナログであり、該ペプチドミメティック大環状化合物がＸａａ_５がＡｌａである対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した特性、例えば向上した結合親和性、向上した可溶性、向上した細胞有効性、向上したヘリックス性、向上した細胞透過性、向上したインビボもしくはインビトロ抗腫瘍有効性、または向上したアポトーシスの誘導を有する、前記ペプチドミメティック大環状化合物。
［１４］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比してＭＤＭ２またはＭＤＭＸへの向上した結合親和性を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１５］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して低減したＭＤＭＸ対ＭＤＭ２への結合親和性の比率を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１６］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株に対する抗腫瘍有効性を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１７］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビトロでのｐ５３陽性腫瘍細胞株におけるアポトーシスの誘導を示す、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１８］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したｐ５３陽性対ｐ５３陰性または変異体腫瘍細胞株に関するインビトロ抗腫瘍有効性比率を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［１９］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍に対する抗腫瘍有効性を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２０］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上したインビボでのｐ５３陽性腫瘍におけるアポトーシスの誘導を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２１］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した細胞透過性を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２２］ペプチドミメティック大環状化合物が、ｗが０、１または２である対応するペプチドミメティック大環状化合物と対比して向上した可溶性を有する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２３］それぞれのＥが独立してＡｌａ（アラニン）、Ｄ−Ａｌａ（Ｄ−アラニン）、Ａｉｂ（α−アミノイソ酪酸）、Ｓａｒ（Ｎ−メチルグリシン）、およびＳｅｒ（セリン）から選択されるアミノ酸である、［１］〜［２２］のいずれかに記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２４］［Ｄ］_ｖが−Ｌｅｕ_１−Ｔｈｒ_２である、［１］〜［２３］のいずれかに記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２５］ｗが３〜１０である、［１２］〜［２４］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２６］ｗが３〜６である、［２５］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２７］ｗが６〜１０である、［２５］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２８］ｗが６である、［２７］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［２９］ｖが１〜１０である、［１２］〜［２４］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３０］ｖが２〜１０である、［２４］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３１］ｖが２〜５である、［２５］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３２］ｖが２である、［２６］に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３３］ｗが３〜１０００、例えば３〜５００、３〜２００、３〜１００、３〜５０、３〜３０、３〜２０、または３〜１０である、［１］〜［２４］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３４］ペプチドミメティック大環状化合物が表５、表７、表７ａ、または表７ｂの大環状化合物ではない、［１］〜［３３］のいずれかに記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３５］それぞれのＥがＳｅｒもしくはＡｌａまたはそのアナログである、［１］〜［３４］のいずれかに記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３６］アミノ酸アナログである少なくとも１個のアミノ酸を含む、［１］〜［２４］のいずれか［１］〜［２４］のに記載のペプチドミメティック大環状化合物。
［３７］対象に［１］〜［３６］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物を投与することを含む、対象において癌を処置する方法。
［３８］対象においてｐ５３および／またはＭＤＭ２および／またはＭＤＭＸの活性を調節する方法であって、該対象に［１］〜［２４］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物を投与することを含む、前記方法。
［３９］対象においてｐ５３およびＭＤＭ２の間の、および／またはｐ５３およびＭＤＭＸタンパク質の間の相互作用に拮抗する方法であって、該対象に［１］〜［２４］のいずれか１項に記載のペプチドミメティック大環状化合物を投与することを含む、前記方法。