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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6475610
(24)【登録日】2019年2月8日
(45)【発行日】2019年2月27日
(54)【発明の名称】抗生活習慣病用剤及びそれを含んでなる経口組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 31/716 20060101AFI20190218BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20190218BHJP
A23L 33/125 20160101ALI20190218BHJP
A61P 3/00 20060101ALN20190218BHJP
A61P 3/06 20060101ALN20190218BHJP
A61P 1/10 20060101ALN20190218BHJP
A61P 3/04 20060101ALN20190218BHJP
A61P 1/04 20060101ALN20190218BHJP
【ＦＩ】
A61K31/716
A61P1/16
A23L33/125
!A61P3/00
!A61P3/06
!A61P1/10
!A61P3/04
!A61P1/04
【請求項の数】6
【全頁数】54
(21)【出願番号】特願2015-503006(P2015-503006)
(86)(22)【出願日】2014年2月27日
(86)【国際出願番号】JP2014054819
(87)【国際公開番号】WO2014133060
(87)【国際公開日】20140904
【審査請求日】2017年2月14日
(31)【優先権主張番号】特願2013-41270(P2013-41270)
(32)【優先日】2013年3月1日
(33)【優先権主張国】JP
(31)【優先権主張番号】特願2013-102193(P2013-102193)
(32)【優先日】2013年5月14日
(33)【優先権主張国】JP
(31)【優先権主張番号】特願2013-211477(P2013-211477)
(32)【優先日】2013年10月8日
(33)【優先権主張国】JP
(31)【優先権主張番号】特願2014-5489(P2014-5489)
(32)【優先日】2014年1月15日
(33)【優先権主張国】JP
【微生物の受託番号】IPOD FERM BP-10770
【微生物の受託番号】IPOD FERM BP-10771
(73)【特許権者】
【識別番号】397077760
【氏名又は名称】株式会社林原
(74)【代理人】
【識別番号】100108486
【弁理士】
【氏名又は名称】須磨 光夫
(72)【発明者】
【氏名】谷口 美文
(72)【発明者】
【氏名】井上 紳一郎
(72)【発明者】
【氏名】渡邊 光
【審査官】
深草 亜子
(56)【参考文献】
【文献】
特開２０１０−１００５８３（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開２００９−１６１５２２（ＪＰ，Ａ）
【文献】
国際公開第２００８／１３６３３１（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
国際公開第２００６／０５４４７４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
特開２００５−２８１１８８（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開２００３−３３９３４４（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開２００５−０４７８２９（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開平０３−１５１８５４（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特表２００６−５１２２９５（ＪＰ，Ａ）
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ａ６１Ｋ ３１／７０−３１／７３９
Ａ２３Ｌ ３３／００−３３／２９
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記（Ａ）乃至（Ｅ）の特徴を有し、且つ、メチル化分析において下記（１）乃至（４）の特徴を有する分岐α−グルカン混合物を含有し、当該分岐α−グルカン混合物を水溶性食物繊維量として成人（体重６０ｋｇ）一日当り０．５ｇ以上摂取又は投与するように用いられることを特徴とするアルコール性脂肪肝の予防又は改善剤：
（Ａ）グルコースを構成糖とし、
（Ｂ）α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（Ｃ）グルコース重合度が６乃至４３０であって、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）が２０以下で、
（Ｄ）平成８年５月厚生省告示第１４６号の栄養表示基準記載の高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量２０質量％以上であり、
（Ｅ）イソマルトデキストラナーゼ（ＥＣ ３．２．１．９４）を作用させて得られる消化物の固形物当たりのイソマルトース含量が２０質量％以上５０質量％以下である；
（１）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールの比が１：０．６乃至１：４の範囲にあり、
（２）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールとの合計が部分メチル化グルシトールアセテートの６０％以上を占め、
（３）２，４，６−トリメチル−１，３，５−トリアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上１０％以下であり、
（４）２，４−ジメチル−１，３，５，６−テトラアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上である。
（Ａ）グルコースを構成糖とし、
（Ｂ）α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（Ｃ）グルコース重合度が６乃至４３０であって、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）が２０以下で、
（Ｄ）平成８年５月厚生省告示第１４６号の栄養表示基準記載の高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量２０質量％以上であり、
（Ｅ）イソマルトデキストラナーゼ（ＥＣ ３．２．１．９４）を作用させて得られる消化物の固形物当たりのイソマルトース含量が２０質量％以上５０質量％以下である；
（１）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールの比が１：０．６乃至１：４の範囲にあり、
（２）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールとの合計が部分メチル化グルシトールアセテートの６０％以上を占め、
（３）２，４，６−トリメチル−１，３，５−トリアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上１０％以下であり、
（４）２，４−ジメチル−１，３，５，６−テトラアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上である。
【請求項2】
前記特徴（Ｃ）に規定されるグルコース重合度が６乃至２１０である請求項１記載のアルコール性脂肪肝の予防又は改善剤。
【請求項3】
前記特徴（Ｃ）に規定される重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）が１乃至３である請求項１又は２記載のアルコール性脂肪肝の予防又は改善剤。
【請求項4】
前記特徴（Ｄ）に規定される水溶性食物繊維含量が７５乃至８５質量％である請求項１乃至３のいずれかに記載のアルコール性脂肪肝の予防又は改善剤。
【請求項5】
請求項１乃至４のいずれかに記載のアルコール性脂肪肝の予防又は改善剤と、ポリフェノール、甘味料、及び高甘味度甘味料から選ばれる１種又は２種以上を含有することを特徴とするアルコール性脂肪肝の予防又は改善用の経口組成物。
【請求項6】
前記ポリフェノールが、糖転移ルチン、糖転移ヘスペリジン、及び糖転移ナリンジンから選ばれる１種又は２種以上であることを特徴とする請求項５記載のアルコール性脂肪肝の予防又は改善用の経口組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、生活習慣病を予防又は改善する抗生活習慣病用剤及びそれを含んでなる経口組成物に関し、詳細には、ヒトが日常的に手軽かつ安全に、しかも、継続的に摂取でき、生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる抗生活習慣病用剤及びそれを含んでなる経口組成物に関する。【背景技術】
【0002】
先進諸国では、生活水準の向上と医療技術の発展に伴って平均寿命が伸び、急速に高齢化が進んでいる。生活水準の変化と高齢化により、生活習慣病と呼ばれるさまざまな疾患の発症率が著しく増加しており、生活習慣病を予防又は改善するための研究が進められている。生活習慣病を予防又は改善するためには、アルコール摂取量の制限や食事量のコントロール、ウォーキングやジョギングなどの有酸素運動をすることが推奨されているが、これらを適切な指導の下に長期間、日常的に行うことは困難である。このような状況下、手軽かつ継続的に摂取可能な可食性素材やそれを含む食品や医薬品等によって、生活習慣病を効果的に予防又は改善する研究が進められている（例えば非特許文献１乃至４）。しかしながら、従来から提案されている可食性素材の中には、食品等として使用した場合に味、香り、食感等の風味の低下を生じるものや、大量に摂取しないと効果が認められないもの、或いは、体調や体質によっては下痢などが発生するなどの欠点があるものも少なくない。現在の多様な食生活に対応するためには、生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる上に、食品に配合した場合でも風味の低下を生じることがなく、手軽かつ継続的に摂取可能な可食性素材さらにはそれを含む食品等の開発が望まれている。【0003】
生活習慣病の中では、特に日常的なアルコール飲料の過剰摂取や、食生活の欧米化による高脂肪食品の摂取量増加に伴う「脂肪肝」が特に深刻な社会問題である。脂肪肝とは、肝細胞（肝臓）に中性脂肪が異常に蓄積した状態をいい、正常な肝臓内部の中性脂肪含量は通常２乃至４質量％であるが、この含量が５質量％以上となった状態を脂肪肝というとされている。脂肪肝の診断は、前記中性脂肪含量に加え、血液検査におけるＧＯＴ、ＧＰＴの値や、ＴＧ、コリンエステラーゼ、アルブミン、総コレステロール、及び低密度リポ蛋白質の値などに基づいて診断される。近年、脂肪肝の患者は急増しており、男性の約４０％、女性の約１５％は脂肪肝に罹患しているといわれている。【0004】
脂肪肝には、アルコール性脂肪肝と非アルコール性脂肪肝があり、その内、アルコールの過剰摂取により誘発されるアルコール性脂肪肝は、アルコール性の肝炎、肝線維症、さらには肝硬変へと進行する場合がある。これら一連の肝臓疾患はアルコール性肝障害と呼ばれ、一旦、肝線維症や肝硬変にまで進行してしまうと、肝機能の回復は極めて困難となる。一方、非アルコール性脂肪肝として、高脂肪食品摂取に起因する高脂肪食性の脂肪肝があり、高脂肪食性の脂肪肝は、ヒトが日常的又は比較的長期間に亘って継続的に高脂肪食品を摂取する場合、高脂肪食品由来の脂肪が消費されずに体内に残り、これが中性脂肪となって肝臓に蓄積することにより誘発されると考えられている。アルコール性脂肪肝及び高脂肪食性の脂肪肝は、いずれも代表的な生活習慣病であり、メタボリックシンドロームを進行させる一因となる。したがって、それら脂肪肝に至らぬよう生活習慣を改善することは勿論であるが、日常的に摂取する食品や医薬品等によって脂肪肝を予防又は改善することができれば、その意義は多大である。【0005】
アルコール性脂肪肝や高脂肪食性の脂肪肝を発症する詳細なメカニズムは不明であるが、（１）食事による体内への脂肪酸流入量の増加や、（２）肝臓における脂肪酸のβ−酸化やω−酸化の低下等によって発症すると考えられている。前記（１）は高脂肪食品の過剰摂取が原因となるし、前記（２）は、日常的なアルコール摂取によりもたらされるものである。【0006】
脂肪肝を予防又は改善する剤等としては、これまでにインスリン抵抗性改善剤、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ベタイン、コリンなどが知られている（例えば特許文献１）。しかし、本発明者らが知る限り、ヒトが日常的に手軽かつ安全に、しかも継続的に摂取でき、生活習慣に起因する脂肪肝を効果的に予防又は改善できる抗生活習慣病用剤は未だ提供されていない。【先行技術文献】
【特許文献】
【0007】
【特許文献1】特開平４−３００８２８号公報
【非特許文献】
【0008】
【非特許文献1】「食品と開発」、Ｖｏｌ．４８、Ｎｏ．１、ＵＢＭメディア株式会社、ｐ．１５−１７（２０１３）
【非特許文献2】「食物繊維−基礎と臨床−」 株式会社朝倉書店 ｐ．１９１−２０３（１９９７）
【非特許文献3】「食品と科学」 ２００３年８月号、株式会社食品と科学社、ｐ．８３−８７（２００３）
【非特許文献4】「日本調理科学会誌」、Ｖｏｌ．４２、Ｎｏ．６、一般社団法人日本調理学会、ｐ．３８６−３９３（２００９）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0009】
本発明は、ヒトが日常的に手軽かつ安全に、しかも継続的に摂取でき、生活習慣病、中でもアルコール性又は高脂肪食性の脂肪肝を効果的に予防又は改善することができる抗生活習慣病用剤と、これを含んでなる経口組成物、さらにはそれらを含んでなる高脂肪食品を提供することを課題とする。【課題を解決するための手段】
【0010】
本出願人は、先に国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットにおいて新規な分岐α−グルカンを開示し、当該分岐α−グルカンが非う蝕性、難消化性、適度の粘性、生体における血糖値・血中インスリンの上昇抑制作用などの優れた作用を有していることを開示した。また、本出願人は、特開２０１０−１００５８３号公報において、前記分岐α−グルカンが脂質代謝改善作用を有することを開示した。本発明者らは、前記分岐α−グルカンの生理学的・薬理学的作用についてさらに研究を行う過程で、前記分岐α−グルカンが低いグリセミックインデックス値（ＧＩ値）を示す素材であること、及び前記分岐α−グルカンをヒトが摂取すると、前記分岐α−グルカンに含まれる水溶性食物繊維の一部が大腸に達して腸内細菌による発酵により水素ガスが発生することを見出した。また、前記分岐α−グルカンをヒトが摂取すると便通改善や整腸作用（腸内のビフィズス菌占有率の増加作用）がもたらされることを見出した。さらに、前記分岐α−グルカンをヒトが摂取すると高い満腹感と満足度が得られ、しかもその効果が持続することを見出した。ＧＩ値とは、よく知られているとおり、ある食品素材を摂取したときの血糖値の上昇の度合いを、ブドウ糖を摂取したときの血糖値の上昇度合いに対する相対値で表した数値であり、例えば非特許文献３、４に示されるとおり、ＧＩ値が低い食品を摂取すると、ＧＩ値が高い食品を摂取する場合に比べて、生活習慣病のリスクが低減されることが知られている。また、非特許文献１に示されるとおり、腸内細菌の作用によって腸内で発生する水素ガスには、活性酸素を除去し、酸化ストレスが原因とされる生活習慣病などを予防又は改善する効果があることが知られている。したがって、ＧＩ値が低く、かつ、腸内細菌による水素ガスの発生を招来する前記分岐α−グルカンは、生活習慣病の効果的な予防又は改善に有効である。また、前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに、便通改善や整腸作用がもたらされるので、便秘に起因する生活習慣病等の疾患の効果的な予防又は改善に有効である。さらに、前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに高い満腹感と満足度が得られ、しかもその効果が持続するので、過食が予防でき、生活習慣病の効果的な予防又は改善に有効である。さらに、前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに潰瘍性大腸炎の進行を抑制する効果がある。潰瘍性大腸炎の発症メカニズムは明らかではないが、腸内環境の変化やストレスなどが要因と考えられている。前述した通り、前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに腸内環境を改善する作用があるので、潰瘍性大腸炎の進行の抑制効果も有している。斯かる知見に基づき、本発明者らはさらに研究を重ね、マウスおよびラットを用いた試験により、前記分岐α−グルカンが、生活習慣病の中でも、特に高脂肪食品の摂取又はアルコール飲料の摂取に起因する脂肪肝を効果的に予防又は改善する作用を有していることを確認し、本発明を完成した。【0011】
すなわち本発明は、下記（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴を有する分岐α−グルカンを含有する抗生活習慣病用剤を提供することによって上記の課題を解決するものである。（Ａ）グルコースを構成糖とし、
（Ｂ）α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（Ｃ）グルコース重合度が６乃至４３０であって、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）が２０以下で、
（Ｄ）本文記載の高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量が２０質量％以上である。
【0012】
上記（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴を有する分岐α−グルカンは、ＧＩ値が低く、これを摂取したときには腸内細菌による水素ガスの発生をもたらすとともに、便通改善効果、整腸作用をもたらす。さらに、前記分岐α−グルカンを摂取すると、高い満腹感および満足度を与え、しかもその効果の持続をもたらす。よって前記分岐α−グルカンは、生活習慣病を有意に予防又は改善する作用を有し、さらには高脂肪食品の摂取又はアルコール飲料の摂取に起因する脂肪肝を効果的に予防又は改善する作用を有している。したがって、上記（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴を有する分岐α−グルカンは抗生活習慣病用剤の有効成分として極めて有用である。なお、本明細書でいう抗生活習慣病用剤とは、生活習慣病を予防、改善、又は治療等するために用いられる剤を意味する。【0013】
上記（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴を有する分岐α−グルカンは、より好適には、メチル化分析において下記（１）乃至（４）の特徴を有する分岐α−グルカンである。（１）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールの比が１：０．６乃至１：４の範囲にあり、
（２）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールとの合計が部分メチル化グルシトールアセテートの６０％以上を占め、
（３）２，４，６−トリメチル−１，３，５−トリアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上１０％以下であり、
（４）２，４−ジメチル−１，３，５，６−テトラアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上である。
【0014】
メチル化分析において上記（１）乃至（４）の特徴を有する分岐α−グルカンは、ＧＩ値が低く、これを摂取したときには腸内細菌による水素ガスの発生をもたらし、生活習慣病を有意に予防又は改善する作用を有するとともに、高脂肪食品の摂取又はアルコール飲料の摂取に起因する脂肪肝を効果的に予防又は改善する作用を有しており、抗生活習慣病用剤の有効成分として極めて有用である。【0015】
本発明の抗生活習慣病用剤は、例えば、ポリフェノール、甘味料、及び高甘味度甘味料から選ばれる１種または２種以上と組み合わせることによって、本発明の抗生活習慣病用剤と、ポリフェノール、甘味料、及び高甘味度甘味料から選ばれる１種または２種以上を含有する経口組成物とすることもできる。経口組成物とは、ヒト又はヒト以外の動物が経口摂取することができる組成物を意味する。本発明の抗生活習慣病用剤と組み合わせて用いることができる前記ポリフェノールとしては、例えば、糖転移ルチン、糖転移ヘスペリジン、糖転移ナリンジンが挙げられ、これらのポリフェノールは、いずれか１種を単独で用いても良いし、２種以上を組み合わせて用いても良い。本発明の抗生活習慣病用剤と組み合わせて用いることができる前記甘味料としては、砂糖、麦芽糖、ブドウ糖、異性化糖、トレハロース、蜂蜜、メープルシュガー、ソルビトール、及びマルチトールが挙げられ、これらの甘味料は、いずれか１種を単独で用いも良いし、２種以上を組み合わせて用いても良い。また、本発明の抗生活習慣病用剤と組み合わせて用いることができる前記高甘味度甘味料としては、ネオテーム、アスパルテーム、ステビア抽出物、酵素処理ステビア、スクラロース、アセスルファムＫ、サッカリン、ソーマチン、及びグリチルリチンが挙げられ、これらの高甘味度甘味料は、そのいずれか１種を単独で用いても良いし、或いは２種以上を組み合わせて用いても良い。【0016】
本発明の抗生活習慣病用剤又はこれを含有する本発明の経口組成物は、高脂肪食品と同時又は相前後して摂取するのが望ましく、より好適には、本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を高脂肪食品に配合し、本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を含んでなる高脂肪食品として提供されるのが望ましい。高脂肪食品が本発明の抗生活習慣病用剤又はこれを含有する本発明の経口組成物を含んでいる場合には、摂取者が特段意識することなく、高脂肪食品と同時に本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を摂取することができるので、無理なく継続的に、しかも摂取する高脂肪食品の量に応じた量だけ本発明の抗生活習慣病用剤又はこれを含有する本発明の経口組成物を摂取することができるという優れた利点が得られる。【0017】
本発明の抗生活習慣病用剤、これを含有する経口組成物、又は、これらを含んでなる高脂肪食品は、生活習慣病を予防又は改善する抗生活習慣病用剤として用いられることは勿論であるが、生活習慣病の中でも特に脂肪肝を予防又は改善する抗脂肪肝用剤として用いられるのが好ましい。また、本発明の抗生活習慣病用剤に有効成分として含まれる前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに腸内細菌による腸内水素ガスの発生をもたらすという作用があるので、本発明の抗生活習慣病用剤、これを含有する経口組成物、又は、これらを含んでなる高脂肪食品は、腸内水素ガス発生促進剤としても使用することができる。また、本発明の抗生活習慣病用剤に有効成分として含まれる前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに便通改善と整腸作用（腸内のビフィズス菌占有率の増加作用）が得られるので、本発明の抗生活習慣病用剤、これを含有する経口組成物、又は、これらを含んでなる高脂肪食品は、便通改善剤又は整腸剤としても使用することができる。さらに、本発明の抗生活習慣病用剤に有効成分として含まれる前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに高い満腹感と満足度が得られ、しかもその効果が持続するので、本発明の抗生活習慣病用剤、これを含有する経口組成物、又は、これらを含んでなる高脂肪食品は、満腹感持続剤、又は満腹感向上剤、又は腹持ち剤としても使用することができる。さらに、本発明の抗生活習慣病用剤に有効成分として含まれる前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに活性型グルカゴン様ペプチド−１の分泌が促進するので、本発明の抗生活習慣病用剤、これを含有する経口組成物、又は、これらを含んでなる高脂肪食品は、活性型グルカゴン様ペプチド分泌促進剤としても使用することができる。さらに、本発明の抗生活習慣病用剤に有効成分として含まれる前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに潰瘍性大腸炎の進行を抑制する効果があるので、本発明の抗生活習慣病用剤、これを含有する経口組成物、又は、これらを含んでなる高脂肪食品は、潰瘍性大腸炎予防剤又は治療剤としても利用できる。【発明の効果】
【0018】
前記分岐α−グルカンは、低いグリセミックインデックス値（ＧＩ値）を示す可食性素材であり、また、これを摂取すると、前記分岐α−グルカンの少なくとも一部が大腸に達して、腸内細菌による発酵作用による水素ガスの発生や便通改善、整腸作用をもたらす。さらに、前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに高い満腹感と満足度が得られ、しかもその効果が持続するので、過食が予防できる。よって、前記分岐α−グルカンを含有する本発明の抗生活習慣病用剤、又はこれを含有する本発明の経口組成物によれば、生活習慣病を効果的に予防又は改善することができるという利点が得られる。また本発明の抗生活習慣病用剤又はこれを含有する経口組成物によれば、生活習慣病の中でも特にアルコール性及び高脂肪食性の脂肪肝を効果的に予防又は改善することができるという利点が得られる。さらに、本発明の抗生活習慣病用剤又はこれを含有する経口組成物を含んでなる本発明の高脂肪食品によれば、高脂肪食品の摂取と同時に、摂取者が意識することなく、摂取する高脂肪食品の量に応じた量の抗生活習慣病用剤又はそれを含む経口組成物を摂取することができるという利点が得られる。さらに、本発明の抗生活習慣病用剤が有効成分とする前記分岐α−グルカンは、澱粉又はその部分分解物やアミロースを原料として酵素的方法によって製造することができ、ヒト又はヒト以外の動物に長期間に亘って摂取させるか投与しても、副作用の心配なく安全に用いることができる可食性素材であることから、工業的に廉価かつ安定して供給することができるとともに、ヒト及びヒト以外の動物が日常的に安全かつ手軽に、しかも継続的に摂取することができる。また、前記分岐α−グルカンを飲食品等の経口組成物や高脂肪食品に配合した場合に、それら経口組成物や高脂肪食品の風味や食感を改善する効果があるので、ヒトが継続的に手軽に摂取することができる。【図面の簡単な説明】
【0019】
【図1】製造例１の方法で得られた分岐α−グルカンのゲル濾過ＨＰＬＣクロマトグラムである。
【図2】飼育試験満了後の試験群１のラット肝臓のヘマトキシリン−エオジン（Ｈ−Ｅ）染色標を顕微鏡で撮影した写真の中間調画像を示す図である。
【図3】飼育試験満了後の試験群２のラット肝臓のヘマトキシリン−エオジン（Ｈ−Ｅ）染色標を顕微鏡で撮影した写真の中間調画像を示す図である。
【図4】飼育試験満了後の試験群３のラット肝臓のヘマトキシリン−エオジン（Ｈ−Ｅ）染色標を顕微鏡で撮影した写真の中間調画像を示す図である。
【図5】飼育試験満了後の試験群４のラット肝臓のヘマトキシリン−エオジン（Ｈ−Ｅ）染色標を顕微鏡で撮影した写真の中間調画像を示す図である。
【図6】ヒトにおける呼気水素ガス排出の経時変化を示したグラフである（横軸は分岐α−グルカン１摂取後の経過時間、縦軸は呼気水素ガス発生量（ｐｐｍ））。
【図7】実験６−１−１および実験６−２−２で用いた「満腹感」および「満足度」に関するアンケート用紙を示す図である（ＶＡＳ法）。
【図8】実験６−１−１での被験者の「満腹感」に関するスコアの経時変化を示す図である。
【図9】実験６−１−１での被験者の「満足度」に関するスコアの経時変化を示す図である。
【図10】実験６−１−２での被験者の「満腹感」に関するスコアの経時変化を示す図である。
【図11】実験６−１−２での被験者の「満足度」に関するスコアの経時変化を示す図である。
【図12】ラットの活性型ＧＬＰ−１分泌量を示したグラフである。（横軸は、「０」は摂取前、「比較群」はマルトデキストリンを摂取した群、「実施群」は本分岐α−グルカンを摂取した群であり、縦軸は活性型ＧＬＰ−１の分泌量である（ｐｇ/ｍｌ））。
【発明を実施するための形態】
【0020】
本発明において、抗生活習慣病用剤の有効成分として用いられる分岐α−グルカンは、本出願人が先に国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットにおいて開示した分岐α−グルカンであり、斯かる分岐α−グルカンは以下の（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴を有している。（Ａ）グルコースを構成糖とし、
（Ｂ）α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有し、
（Ｃ）グルコース重合度が６乃至４３０であって、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）が２０以下で、
（Ｄ）本文記載の高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）により求めた水溶性食物繊維含量が２０質量％以上である。
【0021】
すなわち、本発明で抗生活習慣病用剤の有効成分として用いられる分岐α−グルカン（以下、「本分岐α−グルカン」という。）は、グルコースを唯一の構成糖とするグルカン（特徴（Ａ））であり、α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有している（特徴（Ｂ））。なお、「非還元末端グルコース残基」とは、α−１，４結合を介して連結したグルカン鎖のうち、還元性を示さない末端に位置するグルコース残基を意味し、「α−１，４結合以外の結合」とは、文字どおりα−１，４結合以外の結合であり、α−１，２結合、α−１，３結合、α−１，６結合、α−１，４，６、及びα−１，３，６結合が挙げられる。【0022】
さらに、本分岐α−グルカンは、グルコース重合度が６乃至４３０であって、重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）が２０以下（特徴（Ｃ））の分岐α−グルカンである。ここで、「グルコース重合度」とは、グルカンを構成するグルコース残基の個数を指し、例えば、ゲル濾過クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）等を用いて常法により測定することができる。本分岐α−グルカンのグルコース重合度は、通常、６乃至４３０であるが、好ましくはグルコース重合度が１０乃至１００、より好ましくは２５乃至７５のものがより好適に用いられる。また、本分岐α−グルカンの重量平均分子量（Ｍｗ）を数平均分子量（Ｍｎ）で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）は、通常２０以下であるが、より好ましくは、Ｍｗ／Ｍｎが１０以下、更に好ましくは、１乃至３であるものを用いるのが良い。【0023】
さらに、本分岐α−グルカンは、高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）によって求めた水溶性食物繊維含量が２０質量％以上であるという特徴（特徴（Ｄ））を備えている。本分岐α−グルカンは、通常、水溶性食物繊維含量が２０質量％以上であるが、水溶性食物繊維含量が６０質量％以上のものが好ましく、より好ましくは７５乃至８５質量％であるものが好適に用いられる。【0024】
本分岐α−グルカンにおける水溶性食物繊維含量を求める「高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）」（以下、単に「酵素−ＨＰＬＣ法」という。）とは、平成８年５月厚生省告示第１４６号の栄養表示基準、「栄養成分等の分析方法等（栄養表示基準別表第１の第３欄に掲げる方法）」における第８項、「食物繊維」に記載されている方法であり、その概略を説明すると以下のとおりである。すなわち、試料を熱安定α−アミラーゼ、プロテアーゼおよびアミログルコシダーゼ（グルコアミラーゼ）による一連の酵素処理により分解処理し、イオン交換樹脂により処理液から蛋白質、有機酸、無機塩類を除去することにより高速液体ＨＰＬＣ用の試料溶液を調製する。次いで、ゲル濾過ＨＰＬＣに供し、クロマトグラムにおける、未消化グルカンとグルコースのピーク面積を求め、それぞれのピーク面積と、別途、常法により、グルコース・オキシダーゼ法により求めておいた試料溶液中のグルコース量を用いて、試料の水溶性食物繊維含量を算出する。なお、本明細書を通じて「水溶性食物繊維含量」とは、特に説明がない限り、前記「酵素−ＨＰＬＣ法」で求めた水溶性食物繊維含量を意味する。【0025】
本分岐α−グルカンは上記（Ａ）乃至（Ｄ）によって特徴づけられる分岐α−グルカンであるが、分岐α−グルカンを構成するグルコースの結合様式という観点からみれば、本分岐α−グルカンは、メチル化分析において下記（１）乃至（４）の特徴を示す分岐α−グルカンである。（１）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールの比が１：０．６乃至１：４の範囲にある；
（２）２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトールと２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールとの合計が部分メチル化グルシトールアセテートの６０％以上を占める；
（３）２，４，６−トリメチル−１，３，５−トリアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０．５％以上１０％以下である；および、
（４）２，４−ジメチル−１，３，５，６−テトラアセチルグルシトールが部分メチル化グルシトールアセテートの０.５％以上である。
【0026】
メチル化分析とは、周知のとおり、多糖またはオリゴ糖において、これを構成する単糖の結合様式を決定する方法として一般的に汎用されている方法である。メチル化分析をグルカンにおけるグルコースの結合様式の分析に適用する場合、まず、グルカンを構成するグルコース残基における全ての遊離の水酸基をメチル化し、次いで、完全メチル化したグルカンを加水分解する。次いで、加水分解により得られたメチル化グルコースを還元してアノマー型を消去したメチル化グルシトールとし、更に、このメチル化グルシトールにおける遊離の水酸基をアセチル化することにより部分メチル化グルシトールアセテート（なお、「部分メチル化グルシトールアセテート」におけるアセチル化された部位と「グルシトールアセテート」の表記を省略して、「部分メチル化物」と略称する場合がある。）を得る。得られる部分メチル化物を、ガスクロマトグラフィーで分析することにより、グルカンにおいて結合様式がそれぞれ異なるグルコース残基に由来する各種部分メチル化物は、ガスクロマトグラムにおける全ての部分メチル化物のピーク面積に占めるピーク面積の百分率（％）で表すことができる。そして、このピーク面積％から当該グルカンにおける結合様式の異なるグルコース残基の存在比、すなわち、各グルコシド結合の存在比率を決定することができる。部分メチル化物についての「比」は、メチル化分析のガスクロマトグラムにおけるピーク面積の「比」を意味し、部分メチル化物についての「％」はメチル化分析のガスクロマトグラムにおける「面積％」を意味するものとする。【0027】
上記（１）における「２，３，６−トリメチル−１，４，５−トリアセチルグルシトール」（以下、「２，３，６−トリメチル化物」と略称する。）は、分岐α−グルカンにおいてα−１，４結合していたグルコース残基に対応し、「２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトール」（以下、「２，３，４−トリメチル化物」と略称する。）は、α−１，６結合していたグルコース残基に対応する。そして、上記（１）が規定する「２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の比が１：０．６乃至１：４の範囲にある」とは、本分岐α−グルカンが、メチル化分析において、α−１，４結合していたグルコース残基に対するα−１，６結合していたグルコース残基の比率が「０．６乃至４」の範囲にあることを意味する。本分岐α−グルカンは、通常、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の比が１：０．６乃至１：４の範囲にあり、好ましい場合には、前記比が１：２乃至１：４の範囲にあり、より好ましい場合には、１：２．３乃至１：３．３の範囲にあるものが好適に用いられる。【0028】
上記（２）が規定する「２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物との合計が部分メチル化物の６０％以上を占める」とは、α−１，４結合しているグルコース残基と、α−１，６結合しているグルコース残基の合計が、グルカンを構成する全グルコース残基の６０％以上を占めることを意味する。本分岐α−グルカンは、通常、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物との合計が、部分メチル化物の６０％以上（すなわち、α−１，４結合しているグルコース残基と、α−１，６結合しているグルコース残基の合計が、本分岐α−グルカンを構成する全グルコース残基の６０％以上）であるが、好ましくは６５乃至７５％、更に好ましくは６５乃至７２％の範囲にあるものが好適に用いられる。【0029】
同様に、上記（３）における「２，４，６−トリメチル−１，３，５−トリアセチルグルシトール」（以下、「２，４，６−トリメチル化物」と略称する。）は、α−１，３結合していたグルコース残基に対応し、「２，４，６−トリメチル化物が部分メチル化物の０．５％以上１０％未満である」とは、本分岐α−グルカンにおいては、通常、α−１，３結合したグルコース残基がグルカンを構成する全グルコース残基の０．５％以上１０％未満存在することを意味する。本分岐α−グルカンとしては、２，４，６−トリメチル化物が部分メチル化物の０．５乃至１０％未満、好ましくは１乃至３％未満の範囲にあるものが好適に用いられる。【0030】
更に、上記（４）における「２，４−ジメチル−１，３，５，６−テトラアセチルグルシトール」（以下、「２，４−ジメチル化物」と略称する。）は、α−１，３結合及びα−１，６結合していたグルコース残基（すなわちα−１，３，６結合していたグルコース残基）に対応し、上記（４）が規定する「２，４−ジメチル化物が部分メチル化物の０．５％以上である」とは、本分岐α−グルカンにおいては、α−１，３，６結合したグルコース残基が、グルカンを構成する全グルコース残基の０．５％以上存在することを意味する。本分岐α−グルカンは、通常、２，４−ジメチル化物が部分メチル化物の０．５％以上であるが、好ましくは２，４−ジメチル化物が部分メチル化物の４乃至９％、より好ましくは５乃至９％の範囲にあるものが好ましく用いられる。【0031】
更に、本分岐α−グルカンは、グルカンにおけるイソマルトース構造の還元末端側に隣接するα−１，２、α−１，３、α−１，４、及びα−１，６結合のいずれの結合様式であっても加水分解する特徴を有するイソマルトデキストラナーゼ（ＥＣ ３．２．１．９４）を作用させると、消化物の固形物当たりイソマルトースを、通常、２０質量％以上５０質量％以下生成するという特徴を備えている。【0032】
本分岐α−グルカンは、上記（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴を有しているか、或いは、メチル化分析において上記（１）乃至（４）の特徴を有している限り、如何なる方法で製造されたものであっても良いが、例えば酵素反応によって製造するのが好ましい。酵素反応によって本分岐α−グルカンを製造する際には、α−グルコシル転移作用（糖転移作用）を有する酵素を用いて製造することができる。なお、本明細書においては、特に断りのない限り、α−グルコシル転移作用を有する酵素を「α−グルコシル転移酵素」という。【0033】
本分岐α−グルカンを製造するα−グルコシル転移酵素としては、例えば、本出願人が先に国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットにおいて開示したα−グルコシル転移酵素を挙げることができる。前記α−グルコシル転移酵素は、マルトース及び／又はグルコース重合度が３以上のα−１，４グルカンに作用し、実質的に加水分解することなくα−グルコシル転移を触媒することにより、本分岐α−グルカンを生成する。前記α−グルコシル転移酵素は、加水分解活性が弱い点、低濃度から高濃度まで基質溶液の濃度に依存せず効率の良い転移活性を有する点、及び、α−１，３のみならずα−１，３，６結合をも生成する点に特徴のある酵素である。α−グルコシル転移作用を有する酵素としては、α−グルコシダーゼ（ＥＣ．３．２．１．２０）などが挙げられる。酵素の添加量および酵素の反応時間、反応条件については、水溶性食物繊維含量、分子量分布、α−１，４結合以外の結合の割合を調節する目的等で、当業者が適宜決定できる。【0034】
本分岐α−グルカンの製造に用いられるα−グルコシル転移酵素は、その給源によって制限されず、市販のものを用いても、微生物等から単離したものを用いてもよく、給源となる微生物は、天然由来の微生物に加えて、α−グルコシル転移酵素生産能を有する組換え微生物であってもよい。好ましい給源としては、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットに記載された、土壌より単離した微生物バチルス・サーキュランス ＰＰ７１０（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７１）（日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６所在の独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、２００７年２月１日付けで、受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７１として寄託）や、アルスロバクター・グロビホルミス ＰＰ３４９（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７０）（日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１ 中央第６所在の独立行政法人産業技術総合研究所 特許生物寄託センターに、２００７年２月１日付けで、受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７０として寄託）などが挙げられる。【0035】
前記バチルス・サーキュランス ＰＰ７１０（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７１）由来のα−グルコシル転移酵素や、アルスロバクター・グロビホルミス ＰＰ３４９（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７０）由来のα−グルコシル転移酵素の反応メカニズムは、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレット記載の通りであるが、下記に説明すると、前記α−グルコシル転移酵素は、（１）基質としてマルトース及び／又はグルコース重合度が３以上のα−１，４グルカンに作用し、非還元末端グルコース残基を他のα−１，４グルカンの非還元末端グルコース残基に主としてα−１，４またはα−１，６グルコシル転移することにより、非還元末端グルコース残基の４位または６位水酸基にグルコースがα−結合したα−１，４グルカン（グルコース重合度が１増加したα−グルカン）と、グルコース重合度が１減じたα−１，４グルカンを生成する。
（２）（１）で生じたグルコース重合度が１減じたα−１，４グルカンに作用し、（１）で生じたグルコース重合度が１増加したα−グルカンに対して、（１）と同様に分子間α−１，４又はα−１，６グルコシル転移することにより、（１）で生成したグルコース重合度が１増加したα−グルカンの非還元末端グルコース残基の４又は６位水酸基にグルコースをさらに転移し、鎖長を伸長する。
（３）上記（１）及び（２）の反応を繰り返すことにより、マルトース及び／又はグルコース重合度３以上のα−１，４グルカンからα−１，４及びα−１，６結合を有するグルカンを生成する。
（４）また前記α−グルコシル転移酵素はさらに、頻度は低いながらもα−１，３グルコシル転移やグルカンの内部にあるα−１，６結合したグルコース残基に対するα−１，４又はα−１，３グルコシル転移を触媒することにより、α−１，３結合、α−１，４，６結合、及びα−１，３，６結合をも有するグルカンを生成する。
（５）上記（１）乃至（４）の反応が繰り返される結果として、グルコースが主としてα−１，４結合及びα−１，６結合で結合し、僅かながらα−１，３結合、α−１，４，６結合、及びα−１，３，６結合を有する本分岐α−グルカンを生成する。
【0036】
上述したα−グルコシル転移酵素などの酵素を用いた酵素反応によって生成される本分岐α−グルカンは、通常、様々な分岐構造や重合度を有する分岐α−グルカンの混合物の形態にある。本発明においては、本分岐α−グルカンを生成された混合物のまま用いても良いし、常法により分子量ごとに分画して、比較的グルコース重合度の揃った画分として用いることもできる。したがって、本分岐α−グルカンには、グルコース重合度が６乃至４３０の範囲内で、本分岐α−グルカンを分子量或いはグルコース重合度を目安に分画した本分岐α−グルカンの画分も当然に含まれる。【0037】
前記α−グルコシル転移酵素を用いる前記製造方法によって生成される本分岐α−グルカンは、分子量が２０００万乃至３０００万の高分子量の水溶性多糖を含有している場合があり、その量は、通常、本分岐α−グルカン１００質量％に対し０．０１乃至２質量％程度である。因みに、本分岐α−グルカンは、上記（Ａ）乃至（Ｄ）の特徴又はメチル化分析における上記（１）乃至（４）の特徴を有する限り、上記水溶性多糖を含有していても抗生活習慣病用剤の有効成分として所期の効果を発揮する。したがって、本発明の抗生活習慣病用剤に含有させるに際しては、前記水溶性多糖を適宜の方法で分画、除去しても良いし、分画、除去しなくても良い。【0038】
また、本分岐α−グルカンを常法により還元して、還元物として用いることもできる。なお、還元物とは、糖の還元末端のグルコースのアルデヒド基が還元され、水酸基となっているものを言う。還元物を調製する方法は、常法に従って行えばよく、例えば、本分岐α−グルカン混合物を濃度３０〜６０質量％水溶液にし、オートクレーブに入れ、触媒としてラネーニッケル８〜１５質量％を添加し、攪拌しながら温度を９０〜１４０℃に上げ、水素圧を２０〜１５０ｋｇ/ｃｍ２に上げて水素添加を完了させた後、ラネーニッケルを除去し、次いで活性炭による脱色、イオン交換樹脂による脱塩などの精製工程を経た後、濃縮する方法等が挙げられる。また、低圧で還元物を調製してもよく、例えば、本分岐α−グルカン混合物を濃度３０〜５０質量％水溶液にし、オートクレーブに入れ、触媒としてラネーニッケル３０〜５０質量％を添加し、攪拌しながら温度を１００〜１３０℃に上げ、水素圧を９．０〜９．８ｋｇ/ｃｍ２に上げて水素添加を完了させた後、ラネーニッケルを除去し、次いで活性炭による脱色、イオン交換樹脂による脱塩などの精製工程を経た後、濃縮する方法等が挙げられる。【0039】
また、酵素反応によって本分岐α−グルカンを調製する際、α−グルコシル転移酵素とともに、他の公知のアミラーゼを併用して反応させることにより、分岐α−グルカンの水溶性食物繊維含量や分子量分布を調節することができる。例えば、澱粉液化液に、α−グルコシル転移酵素とともに、澱粉の内部のα−１，４結合を加水分解して新たな非還元末端グルコース残基を生じさせるα−アミラーゼやシクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼ（以下、「ＣＧＴａｓｅ」ということもある）などを併用して作用させることにより、分子量分布の幅を狭め粘度を低減させたり、耐老化性の向上や消化性の低減（水溶性食物繊維性の向上）に寄与するα−１，４結合以外の結合（すなわちα−１，６結合やα−１，３結合などの分岐構造）の割合をさらに増加させることも有利に実施できる。また、イソアミラーゼなどの澱粉枝切り酵素を併用することにより、分子量分布の幅を狭め、粘度を低減させることもできる。【0040】
分岐α−グルカンにおける分岐の割合を増やすこと、すなわち水溶性食物繊維性と耐老化性を向上させることを目的とする場合には、α−グルコシル転移酵素と組み合わせで用いる酵素としては、ＣＧＴａｓｅが特に好ましい。α−グルコシル転移酵素とＣＧＴａｓｅを組み合わせて澱粉原料に作用させると、特に、分岐の割合（数）を増やすことができる。α−グルコシル転移酵素とＣＧＴａｓｅとを組合わせて作用させた場合に得られる分岐α−グルカンの分岐の割合（数）が増えるメカニズムは、例えば以下のように考えることができる。（１）ＣＧＴａｓｅの加水分解作用により、α−１，４グルカンを加水分解し、α−１，４グルカンを低分子化し、新たな非還元末端が生成する。
（２）α−グルコシル転移酵素の転移作用により、グルコシル基をα−１，４グルカンの非還元末端にα−１，６グルコシル転移又はα−１，３グルコシル転移し、分岐構造を導入する。
（３）ＣＧＴａｓｅの分子間転移作用により、上記（２）により導入された分岐構造のグルコース残基の４位水酸基にα−１，４グルカン鎖を転移し、分岐構造の鎖長が伸展する。
（４）さらに、α−グルコシル転移酵素の転移作用により、鎖長が伸展して生成したα−１，４グルカン鎖の非還元末端にさらにグルコシル基を、α−１，６グルコシル転移又はα−１，３グルコシル転移し、さらなる分岐構造を導入する。
（５）上記（１）〜（４）の反応が２種類の酵素の併用作用により混然一体となって行われ、α−１，６及び／又はα−１，３結合を比較的多く有する分岐α−グルカンが生成する。
【0041】
本発明の抗生活習慣病用剤に含有される本分岐α−グルカンの量には特に制限はないが、本分岐α−グルカンを１乃至１００質量％、好ましくは、５乃至１００質量％、より好ましくは１０乃至１００質量％の範囲で含有していれば良い。斯かる本発明の抗生活習慣病用剤は、含まれる本分岐α―グルカンを、水溶性食物繊維含量として、ヒト成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、通常、０．５ｇ乃至１００ｇの範囲で摂取できる量で摂取乃至は投与するのが好ましい。また、本発明の抗生活習慣病用剤は、本分岐α−グルカンに加えて、必要に応じて、水、食塩水、生理食塩水、蛋白質、ペプチド、ポリフェノール、ミネラル、抗菌物質、酵素、難消化性の多糖類、甘味料（例えば、砂糖、麦芽糖、ブドウ糖、異性化糖、トレハロース、蜂蜜、メープルシュガー、ソルビトール、マルチトール等）、高甘味度甘味料（例えば、ネオテーム、アスパルテーム、ステビア抽出物、酵素処理ステビア、スクラロース、アセスルファムＫ、サッカリン、ソーマチン、グリチルリチン等）、着色料、着香料、糊料、安定化剤、賦形剤、増量剤、ｐＨ調整剤などから選ばれる１種または２種以上の成分を、０．０１乃至５０質量％、好ましくは、０．１乃至４０質量％の割合で適宜配合して利用することもできる。【0042】
また、本分岐α−グルカンを含有する本発明の抗生活習慣病用剤は、そのまま抗生活習慣病用剤として用いても良いし、本分岐α−グルカンに加えて、さらに、ポリフェノール、甘味料、及び高甘味度甘味料から選ばれる１種または２種以上の成分を添加して、経口組成物として用いることができる。【0043】
本発明の経口組成物において、ポリフェノールは、本分岐α−グルカンの抗生活習慣病用剤としての効果を安定化及び／又は増強するために用いられ、例えば、糖転移ルチン、糖転移ヘスペリジン、糖転移ナリンジン、ルチン、ヘスペリジン、ナリンジンなどのポリフェノールなどが好適に用いられる。なお、ポリフェノールは単離されたものであってもよいし、飲食品（例えば紅茶や緑茶等の茶飲料）や食品素材などに含まれている形態であってもよい。これらのポリフェノールはいずれか１種を単独で本発明の経口組成物に配合しても良いし、いずれか２種以上を組み合わせて本発明の経口組成物に配合しても良い。配合するポリフェノールの量は、ポリフェノール量の合計で、通常、０．０１乃至９９質量％、好ましくは、０．１乃至７０質量％、より好ましくは、１乃至５０質量％、より更に好ましくは、１乃至３０質量％の割合で用いることができる。なお、前記ポリフェノールの内、糖転移ルチン、糖転移ヘスペリジン、及び糖転移ナリンジンから選ばれる１種または２種以上と本分岐α−グルカンとの組み合わせは、生活習慣病を予防又は改善するという本発明の所期の効果をより安定的かつ持続的に発揮させ、相加効果以上の顕著な効果を発揮し得るので、より好ましい組み合わせである。【0044】
また、本発明の経口組成物において、甘味料及び高甘味度甘味料は、本発明の経口組成物を飲み易くして、ヒトが日常的に手軽かつ継続的に摂取し易くするために用いられる。甘味料としては例えば、砂糖、麦芽糖、ブドウ糖、異性化糖、トレハロース、蜂蜜、メープルシュガー、ソルビトール、及びマルチトールから選ばれる１種又は２種以上の成分が挙げられ、通常、それら成分は、合計で、０．００１乃至５０質量％、好ましくは、０．０１乃至７０質量％、より好ましくは、０．１乃至５０質量％、より更に好ましくは、１乃至３０質量％の割合で用いることができる。【0045】
また、本発明の経口組成物に用いられる高甘味度甘味料としては、例えば、ネオテーム、アスパルテーム、ステビア抽出物、酵素処理ステビア、スクラロース、アセスルファムＫ、サッカリン、ソーマチン、及びグリチルリチンから選ばれる１種または２種以上の成分が挙げられ、通常、それら成分は、合計で、０．００１乃至５０質量％、好ましくは、０．０１乃至７０質量％、より好ましくは、０．１乃至５０質量％の割合で用いることができる。特に、前記高甘味度甘味料の内、ネオテーム、アスパルテーム、ステビア抽出物、酵素処理ステビア、スクラロース、及びアセスルファムＫから選ばれる１種または２種以上の成分と本分岐α−グルカンとの組み合わせは、本発明の所期の効果を損ねず、かつ、本分岐α−グルカンには、それら高甘味度甘味料の後味の悪さを改善する効果があるので、本発明の経口組成物を飲み易くするという面から特に好ましい。【0046】
本発明の経口組成物には、上記成分に加えて、さらに、水、食塩水、生理食塩水、蛋白質、ペプチド、ポリフェノール、ミネラル、抗菌物質、酵素、難消化性の多糖類、着色料、着香料、糊料、安定化剤、賦形剤、増量剤、ｐＨ調整剤などから選ばれる１種又は２種以上を０．０１乃至５０質量％、好ましくは、０．１乃至４０質量％の割合で適宜配合することができる。【0047】
本発明の経口組成物は、粉末状、粒状、顆粒状、液状、ペースト状、クリーム状、タブレット状、カプセル状、カプレット状、ソフトカプセル状、錠剤状、棒状、板状、ブロック状、丸薬状、固形状、ゲル状、ゼリー状、グミ状、ウエハース状、ビスケット状、飴状、チュアブル状、シロップ状、スティック状などの適宜の形態とすることができ、医薬品や医薬部外品だけでなく、特定保健用食品、栄養補助食品、又は健康食品などの生活習慣病を予防又は改善することを目的に摂取される飲食品に配合することができる。配合される飲食品の具体例としては、炭酸飲料、乳飲料、ゼリー飲料、スポーツドリンク、酢飲料、豆乳飲料、鉄含有飲料、乳酸菌飲料、緑茶、紅茶、ココア、コーヒーなどの飲料、米飯、粥、パン、麺類、スープ、味噌汁、ヨーグルトなどの食品、ソフトキャンディー、ハードキャンディ、グミ、ゼリー、クッキー、ソフトクッキー、せんべい、あられ、おこし、求肥、餅類、わらび餅、まんじゅう、ういろう、餡類、羊羹、水羊羹、錦玉、ゼリー、ペクチンゼリー、カステラ、ビスケット、クラッカー、パイ、プリン、バタークリーム、カスタードクリーム、シュークリーム、ワッフル、スポンジケーキ、ホットケーキ、マフィン、ドーナツ、チョコレート、ガナッシュ、シリアルバー、チューインガム、キャラメル、ヌガー、フラワーペースト、ピーナッツペースト、フルーツペースト、ジャム、マーマレードなどの菓子、アイスクリーム、シャーベット、ジェラートなどの氷菓、更には、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、フリカケ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、中華の素、天つゆ、麺つゆ、ソース、トマトソース、ケチャップ、焼き肉のタレ、焼き鳥のタレ、から揚げ粉、天ぷら粉、カレールウ、シチューの素、スープの素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガー、コーヒーシュガーなどの各種調味料や調理加工品があげられる。また、生活習慣病を予防又は改善（治療）するための液剤、シロップ剤、経管栄養剤、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、舌下剤、顆粒剤、散剤、粉剤、乳剤、噴霧剤などの形態にある薬剤に配合することもできる。また、本発明の経口組成物は、ヒト以外の動物が摂取するペットフードや飼料に配合することもできる。【0048】
本発明の経口組成物は、必要に応じて、経管投与や経皮投与などの非経口的投与方法により胃または消化管や皮膚組織へ投与することもできる。本発明の経口組成物は、経口摂取又は非経口的投与のいずれによっても、脂肪肝を含めた各種生活習慣病を効果的に予防または改善することができる。したがって、本発明における「経口組成物」には、特に断りがない限り、通常の意味での経口組成物に加え、経管投与や経皮投与などの非経口投与方法によって投与される組成物も当然に含まれる。【0049】
さらに本発明の抗生活習慣病用剤及びそれを含有する本発明の経口組成物は、適宜高脂肪食品に配合して、本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を含んでなる高脂肪食品としても好適に利用することができる。本発明の高脂肪食品は本分岐α−グルカンを含んでいるので、これを摂取すると、食品中に含まれる本分岐α−グルカンによって、高脂肪食品摂取に起因する脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善する効果がある。加えて、本分岐α−グルカンは、食品の味、香り、食感等の風味に悪影響を及ぼさないので、本分岐α−グルカンを含んでいても食品本来の風味が保たれ、本発明に係る高脂肪食品は摂取し易い高脂肪食品である。【0050】
本明細書でいう高脂肪食品とは、高脂肪食品とは、脂肪酸を比較的多く含む食品全般を意味し、食品質量当たり、脂肪酸を合計で、５乃至１００質量％含む食品を意味する。本明細書でいう脂肪酸とは、脂肪肝などの生活習慣病の原因となる脂肪酸であり、飽和脂肪酸、一価及び多価不飽和脂肪酸などの不飽和脂肪酸及びトランス脂肪酸を意味し、具体的には、ミリスチン酸、ミリストレイン酸、ペンタデカン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、ヘプタデカン酸、ヘプタデセン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、アラキドン酸、イコセン酸、ベヘン酸、ドコサヘキサエン酸などを例示できる。前記脂肪酸の中でも、パルミチン酸及びステアリン酸などの飽和脂肪酸や、ミリストレイン酸及びオレイン酸などの一価不飽和脂肪酸等は、脂肪肝などの生活習慣病の原因となりやすい脂肪酸である。なお、上記脂肪酸の含量は、公知の方法により定量することができる。具体的には、例えば、ＪＩＳ規格（ＪＩＳＫ００７０、ＪＩＳＫ３３３１）に記載された方法、より詳細には、試料からクロロホルム−メタノール混液などの有機溶媒で脂質を抽出し、その脂質量を定量するクロロホルム−メタノール混液抽出法や、試料に内部標準物質を添加してアルカリけん化し、三フッ化ホウ素メタノールなどで脂肪酸を全てメチルエステル化した後、メチルエステルを分取し、ガスクロマトグラフィーで分析する公知の方法によって定量することができる。【0051】
本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を配合するに好適な高脂肪食品の具体例としては、牛肉、豚肉、馬肉、羊肉、鶏肉、魚卵（タラコ、数の子、ブリ、イクラ）、魚油（イワシ油、ニシン油、マグロ油、カツオ油、サンマ油、メンハーデン油など）、肝油、魚油、魚粕、骨油、牛脂、豚脂、馬脂、シア脂、魚油エキス、畜肉・魚肉加工品（ハム、ソーセージ、ウインナー、ベーコン、フライドチキン、ミートボールなど）、家禽卵（鶏卵、鶉卵など）、牛乳、乳製品（ヨーグルトなどの発酵乳製品を含む）、アボカド油、あまに油、オリーブ油、カカオ脂、からし油、きり油、こめ油、サフラワー油、大豆油、とうもろこし油、菜種油、パーム油、パーム核油、ひまし油、ナッツ類油（ぶどう種子油、ホホバ油、綿実油、やし油、落花生油、カポック油、ごま油、けし油、ひまわり油など）、油脂高含有パン・ケーキ・菓子（プリン、チョコレート、クッキー、クラッカー、ドーナッツ、フライドポテトなど）、ハンバーグ、ハンバーガー、バター、マーガリン、マヨネーズ、ドレッシング、アイスクリーム、油脂粉乳、中華料理、ラーメン、即席麺（即席ラーメンなど）、スープ、天ぷら、フライ、油揚げなどを例示できる。【0052】
脂肪酸を比較的多く含む高脂肪食品は、ヒトが日常的に比較的多量かつ長期間乃至は高頻度で摂取すると、脂肪肝などの生活習慣病を発症する可能性が高まるといわれているが、本発明の高脂肪食品によれば、高脂肪食品の摂取と同時に、当該食品中に含まれる本分岐α−グルカンや、それに加えてポリフェノールなどの他の成分を、意識することなく摂取することができるので、高脂肪食品を摂取しつつ、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができるという優れた利点が得られる。【0053】
本発明の高脂肪食品中に含有させる本分岐α−グルカンの量は、対象となる高脂肪食品に含まれる脂肪酸の種類と量に応じて適宜設定すれば良いが、本分岐α−グルカンを、含まれる水溶性食物繊維含量として、ヒト成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、通常、０．５ｇ以上、好ましくは、１乃至５０ｇ、より好ましくは３乃至３０ｇの範囲で摂取することができる量とすれば良い。より詳細には、有効成分である本分岐α−グルカンを、その水溶性食物繊維含量で、高脂肪食品の総摂取量（但し、高脂肪食品の総摂取量とは脂肪酸摂取量を意味する）に対し、通常、２質量％以上好ましくは４質量％以上、さらに好ましくは１０質量％以上の量となるように、高脂肪食品に配合、含有させれば良い。高脂肪食品に直接含有させる代わりに、本分岐α−グルカンを含む本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を、高脂肪食品の総摂取量に対して上記の割合となるように、高脂肪食品の摂取と同時に、又は相前後して摂取するようにしても良いことは勿論である。【0054】
本分岐α−グルカンは、高脂肪食品が完成する迄の適宜の工程、又は完成後に高脂肪食品に含有させればよく、含有させる方法も、例えば、混合、混捏、混和、攪拌、懸濁、散布、噴霧、溶解、被覆などの斯界で汎用されるいずれの方法であっても良い。【0055】
本発明の抗生活習慣病用剤、経口組成物、及び高脂肪食品は、これに含まれる本分岐α−グルカンが低ＧＩ値の食品素材であることに加えて、腸内細菌による腸内での水素ガスの発生を促進し、活性酸素の除去を通じて酸化ストレスを低減するので、各種生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。さらに、前記分岐α−グルカンには、これを摂取したときに高い満腹感と満足度が得られ、しかもその効果が持続するので、過食を予防でき、各種生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。摂取するタイミングは、食事直前または食事と同時に、ヒト成人（体重６０ｋｇ）一回当たり、０．５ｇ乃至１００ｇの範囲で摂取することが、満腹感を得るためには好ましい。なお、前記分岐α−グルカンを摂取したときに満腹感が得られる要因は明らかではないが、後述する活性型グルカゴン様ペプチド−１の分泌が促進されることが要因のひとつとして考えることができる。本発明の抗生活習慣病用剤、経口組成物、及び高脂肪食品は、生活習慣病の中でも、特に高脂肪食品又はアルコール飲料の過剰摂取に起因する高脂肪食品性又はアルコール性の脂肪肝を効果的に予防又は改善することができるので、脂肪肝の予防又は改善剤として使用されるときには極めて有用である。【0056】
なお、本明細書でいうアルコール又はアルコール飲料とは、アルコール飲料全般を意味し、具体的には、日本酒、焼酎、ビール、発泡酒、黄酒（老酒など）、シードル、ワイン、強化ワイン（食前ワイン、マデイラ酒、ポートワイン、シェリー酒、マルサラワインなど）、カクテル、スピリッツ（ブランデー、ジン、ラム酒、ウォッカ、ウィスキーなど）、リキュール、テキーラなどを例示できる。【0057】
なお、本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を、アルコール性の脂肪肝の予防又は改善剤として使用する場合の摂取量につき、例えば、アルコール濃度が約１５％の日本酒を例にとって説明すると、日本酒を一日に１合（１合＝１８０ｍｌ）摂取する場合、摂取するエタノールは約２５ｇ／日となる。この場合、本分岐α−グルカンをその水溶性食物繊維含量で、通常、既述したとおり、２質量％以上（すなわち約０．５ｇ以上）、好ましくは５質量％以上（すなわち約１．０ｇ以上）、さらに好ましくは１０質量％以上（すなわち約２．５ｇ以上）経口的に摂取又は投与することにより、アルコールに起因する脂肪肝を効果的に予防又は改善することができる。摂取の方法としては、アルコール飲料と同時又は相前後して本分岐α−グルカンを含む本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を摂取しても良いし、アルコール飲料と同時又は相前後して摂取する食品（いわゆる酒の肴、各種おつまみ等）中に水溶性食物繊維含量が前記範囲となるように本分岐α−グルカンを含む本発明の抗生活習慣病用剤又は経口組成物を含有せしめてもよい。【0058】
以下、本分岐α−グルカンの製造例を下記に説明する。当然ながら、本分岐α−グルカンの製造方法が、下記に示す製造例に限定されないことは言うまでもない。【0059】
１．酵素の調製１−１．調製例１
本分岐α−グルカンを製造するために用いる、α−グルコシル転移酵素の調製例を説明する。バチルス・サーキュランス ＰＰ７１０（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７１）を、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレット記載の方法でファーメンターで約２４時間培養した。培養後、遠心分離し、培養液上清を回収し、８０％飽和となるように硫安を添加し、４℃で２４時間放置することにより塩析した。塩析物を遠心分離して回収し、これを２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解後、同緩衝液に対して透析し、膜濃縮し、濃縮粗酵素液１を調製した。本濃縮粗酵素液１のα−グルコシル転移酵素活性は２００単位／ｍｌであった。また、本濃縮粗酵素液１には約２５単位／ｍｌのアミラーゼ活性も認められた。
【0060】
１−２．調製例２本分岐α−グルカンを製造するために用いる、上記以外のα−グルコシル転移酵素の調製例を説明する。アルスロバクター・グロビホルミス ＰＰ３４９（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０７７０）を、国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットに記載の方法でファーメンターで約２４時間培養した。培養後、遠心分離し、培養液上清を回収し、８０質量％飽和となるように硫安を添加し、４℃で２４時間放置することにより塩析した。塩析物を遠心分離して回収し、これに２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解後、同緩衝液に対して透析し、膜濃縮し、濃縮粗酵素液２を調製した。本濃縮粗酵素液２のα−グルコシル転移酵素活性は５０単位／ｍｌであった。
【0061】
２．本分岐α−グルカンの製造２−１．製造例１
前記調製例１で調製した濃縮粗酵素液１を用いた本分岐α−グルカンの製造方法例について説明する。まず、３０．０質量％トウモロコシ澱粉液化液（ＤＥ３．５）に、最終濃度１ｍＭとなるように塩化カルシウムを加えた後、５０℃に冷却し、これに濃縮粗酵素液１を、α−グルコシル転移酵素活性として基質固形物１グラム当たり１１．３単位加え、更に、５０℃、ｐＨ６．０で４８時間作用させた。その反応液を８０℃で６０分間保った後、冷却し、濾過し、得られる濾液を常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型およびＯＨ型イオン樹脂により脱塩・精製し、更に濃縮し、噴霧乾燥して、分岐α−グルカン１の粉末を得た。得られた分岐α−グルカン１は、前述したα−グルコシル転移酵素の反応メカニズムにより、α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有する。
【0062】
得られた分岐α−グルカン１の分子量分布をゲル濾過ＨＰＬＣ法にて分析した。ゲル濾過ＨＰＬＣは、カラムに『ＴＳＫＧＥＬ α−３０００』（株式会社東ソー製）を２本連結したものを用い、溶離液に１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて、カラム温度４０℃、流速０．５ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計ＲＩＤ−１０Ａ（株式会社島津製作所製造）
を用いて行った。図１に分岐α−グルカン１のゲル濾過ＨＰＬＣクロマトグラムを示した。ゲル濾過ＨＰＬＣクロマトグラムから明らかなように、製造例１の方法で得られた分岐α−グルカン１には、分岐α−グルカンとしての画分（Ｓ１画分）と高分子量の水溶性多糖画分（Ｓ２画分）が含まれることが判明し、その質量比はＳ１画分を１００質量％としたとき、Ｓ２画分は０．９質量％であった。また、ゲル濾過ＨＰＬＣクロマトグラムから、分岐α−グルカン１はグルコース重合度が６乃至２１０の分岐α−グルカンの混合物であることが判明した。
【0063】
上記Ｓ１画分とＳ２画分の平均分子量をそれぞれ調べるために、各画分をそれぞれサイズ排除クロマトグラフィーにより分離し、各画分の平均分子量を多角度光散乱検出器および示差屈折率検出器により測定した。カラムに『ＳｈｏｄｅｘＳＢ−８０６Ｍ』（昭和電工株式会社製）を用い、溶離液に１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて、流速１ｍｌ／分の条件で行い、検出は多角度光散乱検出器『ＤＡＷＮ ＨＥＬＥＯＳ（Ｗｙａｔｔａ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）』、及び示差屈折率検出器『ＯｐｔｉｌａｂｒＥＸ（Ｗｙａｔｔａ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社製）』を用いて行った。その結果、各画分の重量平均分子量（Ｍｗ）と数平均分子量（Ｍｎ）、重量平均分子量を数平均分子量で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）は表１に示す通りであった。
【0064】
【表1】
【0065】
分岐α−グルカン１の水溶性食物繊維含量を、栄養表示基準（平成８年５月厚生省告示第１４６号）における栄養成分等の分析方法等（栄養表示基準別表第１の第３欄に掲げる方法）、８．食物繊維、（２）高速液体クロマトグラフ法（酵素−ＨＰＬＣ法）記載の方法に準じて下記の方法により調べた。なお、酵素処理用のキットとして、総食物繊維測定キット（『Ｄｉｅｔａｒｙ Ｆｉｂｅｒ，Ｔｏｔａｌ，Ａｓｓａｙ，Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｋｉｔ』、シグマ社製）を用いた。【0066】
被験試料として０．１ｇの分岐α−グルカン１を試験管にとり、０．０８Ｍリン酸緩衝液５ｍｌを添加しｐＨを６．０に調整した。これに、食物繊維測定キット付属の熱安定α−アミラーゼ（バチルス・リケニホルミス由来耐熱性α−アミラーゼ、シグマ社製）溶液０．０１ｍｌを加え、アルミ箔で覆い、沸騰水浴中で５分毎に攪拌しつつ３０分間反応させ、冷却した。得られた反応液に、０．２７５Ｍ水酸化ナトリウム溶液約１ｍｌを添加しｐＨを７．５に調整した後、キット付属のプロテアーゼ（バチルス・リケニホルミス由来、シグマ社製）溶液０．０１ｍｌを加え、アルミ箔で覆い、６０℃の水浴中で振盪しつつ３０分間反応させ、冷却した。得られたプロテアーゼ処理液に０．３２５Ｍ塩酸を約１ｍｌ添加し、ｐＨを４．３に調整した後、キット付属のアミログルコシダーゼ（アスペルギルス・ニガー由来、シグマ社製）溶液０．０１ｍｌを加え、アルミ箔で覆い、６０℃の水浴中で振盪しつつ３０分間反応させ、冷却した。次いで、得られた反応液約７ｍｌを、イオン交換樹脂（オルガノ株式会社販売のアンバーライトＩＲＡ−６７（ＯＨ型）とアンバーライト２００ＣＴ（Ｈ型）を１：１で混合）にＳＶ１．０で通液することにより脱塩し、さらに約３倍量の脱イオン水にて溶出し、溶出液の総量を約２８ｍｌとした。得られた溶出液をエバポレーターにて濃縮し、孔径０．４５μｍのメンブランフィルターにて濾過した後、メスフラスコで２５ｍｌに定容したものを分析用試料溶液とした。得られた分析用試料溶液は、下記の条件による高速液体クロマトグラフィーに供した。カラムとして『ＴＧＫｇｅｌ Ｇ２５００ＰＷＸＬ（内径７．８ｍｍ×長さ３００ｍｍ，株式会社東ソー製）』２本を直列に連結したものを用い、溶離液は脱イオン水、試料濃度は０．８質量％、カラム温度８０℃、流速０．５ｍｌ／分、分析時間５０分で、示差屈折計で検出した。上記で得られたクロマトグラムにおいて、酵素処理によっても分解されずに残存する未消化グルカンを水溶性食物繊維とした。この水溶性食物繊維と分解されて生成したグルコースのピーク面積をそれぞれ求め、別途、常法のグルコース・オキシダーゼ法にて定量した分析用試料溶液中のグルコース量を用いて、下記の式１により水溶性食物繊維量を求めた。さらに、下記の式２により被験試料の水溶性食物繊維含量を求めた。斯かる酵素−ＨＰＬＣ法により求めた分岐α−グルカン１の水溶性食物繊維含量は８０．０質量％であった。
【0067】
【数1】
【0068】
【数2】
【0069】
以上のとおり、製造例１で製造された分岐α−グルカン１は、グルコースを構成糖とし、α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有する分岐α−グルカンであり、グルコース重合度が６乃至２１０の混合物で、Ｍｗ／Ｍｎが１．２、水溶性食物繊維含量が８０．０質量％の分岐α−グルカンであった。【0070】
分岐α−グルカン１を構成するグルコースの結合様式を常法に従ってメチル化分析により測定した。また、下記条件によるガスクロマトグラフィー法で部分メチル化物を調べた。カラムに『ＤＢ−５キャピラリーカラム（内径０．２５ｍｍ×長さ３０ｍ×膜厚１μｍ，Ｊ＆ＷＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）、キャリアーガスにヘリウムを用いて、カラム温度は１３０℃で２分間保持した後、２５０℃まで５℃／分で昇温し、２５０℃で２０分間保持した。流速は１ｍｌ／分の条件、検出はＦＩＤ法にて行った。その結果、分岐α−グルカン１は、メチル化分析において、部分メチル化物である２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の比が１：２．４を示し、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の合計は部分メチル化物の７０．５％を占めていた。また、２，４，６−トリメチル化物は部分メチル化物の２．４％を示し、２，４−ジメチル化物は部分メチル化物の６．４％を示した。【0071】
分岐α−グルカン１の構造をさらに特徴づける目的で、イソマルトデキストラナーゼ消化試験を行った。分岐α−グルカン１の水溶液（最終濃度１質量％）にアルスロバクター・グロビホルミス由来のイソマルトデキストラナーゼ（株式会社林原製）を基質固形物１グラム当たり１００単位加え、５０℃、ｐＨ５．０で１６時間作用させ、１００℃で１０分間保持して反応を停止した後、その反応液中の糖組成を高速液体ＨＰＬＣおよびガスクロマトグラフィーを用いて調べた。ＨＰＬＣは、カラムに『ＭＣＩ ＧＥＬ ＣＫ０４ＳＳ』（株式会社三菱化学製）２本を用い、溶離液に水を用いて、カラム温度８０℃、流速０．４ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計ＲＩＤ−１０Ａ（株式会社島津製作所製）を用いて行った。ガスクロマトグラフィーは、常法に従って糖質をトリメチルシリル化（ＴＭＳ化）した後、カラムに『２％シリコンＯＶ−１７ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｒｂ Ｗ／ＡＷ−ＤＭＳ』（株式会社ジー・エル・サイエンス製）を用い、１分間当たり７．５℃の昇温速度で温度１６０℃から３２０℃まで昇温した。キャリアーガスとして窒素ガスを用い、検出はＦＩＤ法にて行った。その結果、イソマルトデキストラナーゼ消化において、分岐α−グルカン１からは糖組成として３５．０質量％のイソマルトースが生成した。この結果は、分岐α−グルカン１がイソマルトース構造をそれぞれ、少なくとも３５．０質量％程度含んでいることを示すものである。【0072】
２−１．製造例２次いで、製造例１とは異なる方法で本分岐α−グルカンを製造した。すなわち、澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃１００』、松谷化学株式会社販売）を濃度３３質量％となるように水に溶解し、これをｐＨ６．０に調整し、上記酵素の調製例２で得た濃縮粗酵素液２を、α−グルコシル転移酵素活性として基質固形物１グラム当たり２２単位加え、４０℃、７２時間作用させた。反応終了後、反応液を９５℃に加熱し、１０分間保った後、冷却し、濾過し、得られる濾液を常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型およびＯＨ型イオン樹脂により脱塩・精製し、更に濃縮して分岐α−グルカン２の溶液を得た。得られた分岐α−グルカン２は、前述したα−グルコシル転移酵素の反応メカニズムにより、α−１，４結合を介して連結したグルコース重合度３以上の直鎖状グルカンの一端に位置する非還元末端グルコース残基にα−１，４結合以外の結合を介して連結したグルコース重合度１以上の分岐構造を有する分岐α−グルカンである。
【0073】
得られた分岐α−グルカン２の分子量分布を、製造例１と同様の方法で測定した。その結果、分岐α−グルカン２はグルコース重合度が１０乃至４３０の混合物であることが判明した。また、重量平均分子量は５７００ダルトン、数平均分子量は２３７５ダルトンであり、重量平均分子量を数平均分子量で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）は２．４であった。【0074】
得られた分岐α−グルカン２の水溶性食物繊維含量を、製造例１と同様の方法で求めたところ、８１．０質量％であった。また、分岐α−グルカン２を構成するグルコースの結合様式を製造例１と同様の方法でメチル化分析により測定したところ、分岐α−グルカン２は、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物との比が１：２．８を示し、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の合計は部分メチル化物の６８．０％を占めていた。また、２，４，６−トリメチル化物は部分メチル化物の２．６％を示し、２，４−ジメチル化物は部分メチル化物の７．０％であった。さらに、分岐α−グルカン２は、イソマルトデキストラナーゼ消化により、３３．０質量％のイソマルトースを生成した。【0075】
以下、実験に基づいて本発明をより詳細に説明する。【0076】
＜実験１：アルコール摂取に起因する脂肪肝の抑制試験＞アルコール（エタノール）誘導性ラット脂肪肝モデルを用いて、製造例１で得られた分岐α−グルカン１粉末のアルコール性脂肪肝に及ぼす影響を調べた。すなわち、５週齢のＳＤ雄ラット（日本クレア株式会社から購入）２４匹を一群６匹からなる試験群１乃至４に分け、予備飼育（飼育期間は２週間）として、全群のラットを通常飼料（商品名『ＮＭＦ』、オリエンタル酵母工業株式会社製）を用いて１週間飼育後、表２に示す配合組成の液体飼料Ａ（商品名『Ｆ２ＬＣＷ』、オリエンタル酵母工業株式会社製。）を用いて更に１週間飼育した。次いで表２に示すように、試験群１のラットには液体飼料Ａ、試験群２のラットには液体試料Ｂ、試験群３のラットには液体試料Ｃ、試験群４のラットには液体試料Ｄを用いて１週間飼育した。なお、試験群３および４のラットはエタノールに馴化させるために、１週間かけて液体飼料Ａへのエタノール添加量を１質量／体積％から５質量／体積％へと段階的に増加させながら飼育した。その後、本飼育試験（飼育期間は５週間）として、全群のラットを各飼料を用いて５週間飼育した。なお、予備飼育および本飼育試験期間中、各飼料は自由摂取とし、各群ラットの体重および摂食量を経時的に測定した。本飼育試験を開始してから２、４週間経過後、直ちに試験群１乃至４のラットを６時間絶食させた後、部分採血し、血清中のＴＧ、ＧＯＴ、およびＧＰＴ濃度を常法により測定した。更に、本飼育試験始後、３２日目に試験群３および４のラットを６時間絶食させた後、部分採血し、血中のエタノール濃度を常法により測定した。次いで、５週間に亘る本飼育試験満了後、直ちに、全群のラットを一晩絶食させた後、エーテル麻酔下、血液および肝臓をサンプリングし、血清中のＴＧ、ＧＯＴ、ＧＰＴ、および遊離脂肪酸（以下、「ＮＥＦＡ」と言う。）の濃度、および肝臓中のＴＧ、コレステロール、およびＮＥＦＡ含量を常法により測定した。なお、各群ラットの肝臓をサンプリングするに際しては、肝臓をそれぞれ摘出し、肝臓質量を測定するとともに、常法により、肝臓の一部をホルマリン固定し、ヘマトキシリン−エオジン（Ｈ−Ｅ）染色標本を調製し、脂肪肝の有無を組織学的に調べた。なお、製造例１で得られた分岐α−グルカン１には８０．０質量％の水溶性食物繊維が含有するので、６ｇの分岐α−グルカン１に含まれる水溶性食物繊維は約５ｇである。
【0077】
【表2】
【0078】
予備飼育後の本飼育試験の開始時（０日目）および開始後３５日目の体重を表３に示した。【0079】
【表3】
【0080】
表３に示す結果から明らかなとおり、通常飼料を用いて飼育した試験群１と通常飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群２のラット体重の変化と、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３とアルコール添加飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群４のラット体重の変化から、分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群２および４のラット体重は、分岐α−グルカン１を添加しない飼料を用いて飼育した試験群１および３のラット体重と比べ、同等か若干増加する傾向を示した。この結果は、分岐α−グルカン１が、生体の生育を阻害しない安全な素材であることを示すものである。【0081】
本飼育試験を通じての飼料摂取量／日、摂取カロリー／日、エタノール総摂取量（ｇ）および分岐α−グルカン摂取量（ｇ／日・ｋｇ（体重））を表４に示した。【0082】
【表4】
【0083】
表４に示されるとおり、通常飼料を用いて飼育した試験群１および２のラットの飼料摂取量と比べ、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３および４のラットの飼料摂取量は減少傾向を示したが、これはラットがアルコールに対して忌避性を示すためと考えられた。また、通常飼料を用いて飼育した試験群１と通常飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群２のラットにおける飼料摂取量と、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３とアルコール添加飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群４のラットにおける飼料摂取量との対比から、分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群２及び試験群４のラットの飼料摂取量はそれぞれ、分岐α−グルカン１を添加しない飼料を用いて飼育した試験群１及び試験群３のラットの飼料摂取量と比べ、若干増加する傾向を示した。この結果は、分岐α−グルカン１が、摂食障害を生じない安全な素材であることを示すものである。また、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３のラットと、アルコール添加飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群４のラットにおけるアルコール（エタノール）総摂取量は、試験群３に比べ試験群４の方が若干多い傾向にあった。【0084】
本飼育試験を開始してから２、４および５週間経過した時点での、血清中のＧＯＴおよびＧＰＴ濃度を表５に示した。【0085】
【表5】
【0086】
表５に示す結果から明らかなとおり、本飼育試験を開始してから２、４、及び５週間の時点での血清中のＧＯＴ、ＧＰＴ濃度は、通常飼料を用いて飼育した試験群１及び試験群２と較べ、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３及び試験群４は高値を示した。試験群１及び試験群２においては、血清中のＧＯＴ、ＧＰＴ濃度に大差はなく、分岐α−グルカン１の影響は認められなかった。一方、試験群３及び試験群４においては、飼育期間が延びるにつれ、分岐α−グルカン１によるＧＯＴ、ＧＰＴ抑制作用が顕著に認められた。これは、分岐α−グルカン１により、アルコール摂取に依存して惹起され、悪化する肝障害が効果的に低減されたことを示すものである。【0087】
本飼育試験の終了時点での肝臓質量、肝臓中のＴＧ、コレステロール、およびＮＥＦＡ含量を表６に示した。【0088】
【表6】
【0089】
表６の結果から明らかなとおり、通常飼料を用いて飼育した試験群１のラットと比べ、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３のラットにあっては、本飼育試験終了時点での肝臓質量、肝臓中のＴＧ、コレステロール、およびＮＥＦＡ含量のいずれもが増加傾向を示した。すなわち、通常飼料を用いて飼育した試験群１のラットと比べ、アルコール添加飼料を用いて飼育した試験群３のラットは、肝臓質量、脂肪肝の指標となる肝臓中のＴＧ、コレステロール、およびＮＥＦＡ含量のいずれも、約１．２乃至約１．８倍増加した。これに対し、アルコール添加飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群４のラットにあっては、肝臓中のＴＧ、コレステロール、およびＮＥＦＡ含量のいずれも、試験群１とほぼ同等であった。この結果は、分岐α−グルカン１が、アルコール摂取に起因する肝臓中のＴＧ、コレステロール、およびＮＥＦＡ含量の増加を効果的に低減することを示すものである。なお、通常飼料を用いて飼育した試験群１のラットと通常飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群２のラットにあっては、本飼育試験の終了時点での肝臓質量に実質的な差は見られなかったが、試験群２のラットの肝臓中のＴＧ、コレステロールは試験群１のラットと比べ減少傾向を、ＮＥＦＡ含量は増加傾向を示した。【0090】
また、各群ラットの肝臓の組織学的所見によれば、試験群３のラットの肝臓はいずれも、脂肪肝特有の黄土色を帯びた色調を呈していた。また、図２乃至４にそれぞれ示す試験群１乃至試験群３のラットのＨ−Ｅ染色標本の顕微鏡写真の中間調画像から明らかなとおり、試験群３のラットの肝臓は、小葉全域、瀰漫性に微細乃至大空胞までの、中等度乃至強度の空胞変性（脂肪蓄積）が観察されたとともに、試験群３のラットの肝細胞内における脂肪蓄積の割合は、試験群１及び試験群２のラットと比べ明らかに増大し、明らかに脂肪肝が誘発されていたのに対し、試験群４のラットにあっては、正常な肝臓の色調を呈していた。また、図２、図３および図５にそれぞれ示す試験群１、２、及び４のラットのＨ−Ｅ染色標本の顕微鏡写真の中間調画像から明らかなとおり、試験群４のラットにあっては、小葉全域で軽度の微細空胞変性が認められたものの、肝細胞内における脂肪蓄積の割合は、試験群１のラットとほぼ同等の状態にあり、脂肪肝が誘発されていない肝臓であった。【0091】
本実験結果から、本分岐α−グルカンは、アルコール摂取に起因する脂肪肝を効果的に予防または改善する作用を有することが判明した。よって、本発明の抗生活習慣病用剤及びこれを含む本発明の経口組成物は、アルコール性脂肪肝のみならず、アルコール性脂肪肝の進行にともない惹起されるアルコール性の肝炎、肝繊維症、肝硬変などの肝障害を効果的に予防又は抑制することができる。【0092】
＜実験２：高脂肪食摂取に起因する脂肪肝の抑制試験＞高脂肪飼料により誘導されるマウス脂肪肝モデルを用いて、本分岐α−グルカンが、高脂肪飼料摂取に起因する脂肪肝に及ぼす影響について調べた。すなわち、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウス（７週齢：日本クレア株式会社から購入）２１匹を平均体重がほぼ均等になるように一群７匹からなる試験群１乃至３に分けた。試験群１のマウスは、日本クレア株式会社製の通常飼料（商品名『ＣＥ−２』）を用いて８週間飼育した。また、試験群２のマウスは、日本クレア株式会社製の高脂肪飼料（商品名『Ｈｉｇｈ Ｆａｔ Ｄｉｅｔ ３２（ＨＦＤ３２）』）を用いて８週間飼育した。試験群１及び試験群２の飲用水には蒸留水を用いた。また、試験群３のマウスは、前記高脂肪飼料を用いて８週間飼育し、飲用水には、製造例１で得られた分岐α−グルカン１を２質量％となるように蒸留水に混合し、溶解したものを用いた。なお、いずれの試験群においても、飼料および飲用水は自由摂取とした。また、試験期間中、各群マウスの体重および摂食量、飲水量を経時的に測定した。
【0093】
なお、前記通常飼料と高脂肪飼料の１００ｇ中の一般成分値を以下に示す。＜通常飼料（『ＣＥ−２』）の一般成分値＞
水分 ８．９ｇ
粗たんぱく質 ２５．４ｇ
粗脂肪 ４．４ｇ
粗灰分 ４．１ｇ
粗繊維 ６．９ｇ
可溶性無窒素物 ５０．３ｇ
合計 １００ｇ
＜高脂肪飼料（『ＨＦＤ３２』）の一般成分値＞
水分 ６．２ｇ
粗たんぱく質 ２５．５ｇ
粗脂肪 ３２．０ｇ
粗灰分 ４．０ｇ
粗繊維 ２．９ｇ
可溶性無窒素物 ２９．４ｇ
合計 １００ｇ
【0094】
前記高脂肪飼料の配合組成を以下に示す。＜高脂肪飼料（『ＨＦＤ３２』）の配合組成＞
ミルクカゼイン ２４．５質量％
卵白粉末 ５質量％
Ｌ−シスチン ０．４３質量％
粉末牛脂（牛脂８０％含有） １５．８８質量％
紅花油（高オレイン酸タイプ） ２０．００質量％
結晶セルロース ５．５質量％
マルトデキストリン ８．２５質量％
乳糖 ６．９２８質量％
ショ糖 ６．７５質量％
ＡＩＮ９３ビタミン混合 １．４質量％
ＡＩＮ９３Ｇミネラル混合 ５．０質量％
重酒石酸コリン ０．３６重量％
第３ブチルヒドロキノン ０．００２質量％
合計 １００質量％
【0095】
前記高脂肪飼料中１００ｇに含まれる脂肪酸含量を表７に示す。【表7】
【0096】
８週間に亘る飼育試験終了後、試験群１乃至３のマウスを一晩絶食させた後、エーテル麻酔下、血液および肝臓をサンプリングし、肝臓中のＴＧ、ＮＥＦＡ含量を常法により測定するとともに、血漿中のＧＯＴおよびＧＰＴ濃度を測定した。なお、各群ラットの肝臓をサンプリングするに際しては、肝臓を摘出し、常法により、肝臓質量を測定するとともに脂肪肝の有無について調べた。飼育試験の開始時と終了時の体重を表８に示す。【0097】
【表8】
【0098】
表８に示す結果から明らかなとおり、飼育試験終了時点において、通常飼料を用いて飼育した試験群１のマウスと較べ、高脂肪飼料を用いて飼育した試験群２のマウス体重は約１．６倍増大した。一方、高脂肪飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群３のマウス体重は、試験群２のマウス体重の約０．９３倍と有意に低かった。この結果は、分岐α−グルカン１により、高脂肪食摂取に起因する体重増加が有意に抑制されることを示している。【0099】
飼育試験を通じての総飼料摂取量、総摂取カロリーおよび飲水量を表９に示す。【0100】
【表9】
【0101】
表９に示す結果から明らかなとおり、通常飼料を用いて飼育した試験群１のマウスと比べ、高脂肪飼料を用いて飼育した試験群２のマウス、および高脂肪飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群３のマウスの総飼料摂取量は少ないものの、総摂取カロリーは増加傾向を示した。また、高脂肪飼料を用いて飼育した試験群２のマウスと、高脂肪飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群３のマウスとを対比すると、各群マウスの総飼料摂取量および総摂取カロリーはいずれも同等であった。なお、飲水量は、試験群１と比べ試験群２及び試験群３は少ない傾向を示したが、試験群２及び試験群３との間に実質的な差はなかった。この結果は、分岐α−グルカン１が、摂食障害を生じない安全な素材であることを示すものである。【0102】
さらに、飼育試験終了時点での肝臓質量、血漿中のＧＯＴおよびＧＰＴ濃度および肝臓中のＴＧおよびＮＥＦＡ含量を表１０に示す。【0103】
【表10】
【0104】
また、表１０に示す結果から明らかなとおり、高脂肪飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群３のマウスの肝臓質量は、高脂肪飼料のみを用いて飼育した試験群２の約８６％に留まり、高脂肪飼料により誘導される肝臓質量の増大が有意に抑制されていた。また、試験群３のマウスの肝臓中のＴＧおよびＮＥＦＡ含量はそれぞれ、試験群２の約７２および約７５％に留まり、高脂肪飼料に起因する肝臓中のＴＧおよびＮＥＦＡの増大が有意ないしは顕著に抑制されていた。同様に、試験群３のマウスの血漿中のＧＯＴおよびＧＰＴ濃度はそれぞれ、試験群２の約９０％及び約７４％と有意乃至は顕著に抑制されていた。この結果は、分岐α−グルカン１が、高脂肪飼料の摂取により誘導されるマウス肝臓中のＴＧおよびＮＥＦＡ含量、および血漿中のＧＯＴおよびＧＰＴ濃度増加をいずれも有意乃至は顕著に抑制する作用を有することを示すものである。【0105】
本実験結果から、本分岐α−グルカンは、高脂肪食品摂取に起因する脂肪肝を効果的に予防または改善する作用を有することが判明した。よって、本分岐α−グルカンを含有する本発明の抗生活習慣病用剤及び経口組成物は、過剰に摂取された高脂肪食品に起因する脂肪肝や体重増加を効果的に予防乃至は低減することができるので、脂肪肝のみならず、メタボリックシンドロームや生活習慣病の進行を予防することができる。【0106】
＜実験３：高脂肪食摂取に起因する食後高脂血症の抑制試験＞高脂肪飼料により誘導されるマウス脂肪肝モデルを用いて、製造例１で得られた分岐α−グルカン１が高脂肪飼料摂取に起因する食後高脂血症に及ぼす影響について調べた。飼育期間および分析項目以外は実験２と同じ試験系を用いた。すなわち、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウス（７週齢：日本クレア株式会社から購入）２１匹を平均体重がほぼ均等になるように一群７匹からなる試験群１乃至３に分けた。試験群１のマウスは、日本クレア株式会社製の通常飼料（商品名『ＣＥ−２』）を用いて３週間飼育した。また、試験群２のマウスは、日本クレア株式会社製の高脂肪飼料（商品名『Ｈｉｇｈ Ｆａｔ Ｄｉｅｔ ３２（ＨＦＤ３２）』）を用いて３週間飼育した。試験群１及び試験群２の飲用水には蒸留水を用いた。また、試験群３のマウスは、前記高脂肪飼料を用いて３週間飼育し、飲用水には、製造例１で得られた分岐α−グルカン１を２質量％となるように蒸留水に混合し、溶解したものを用いた。なお、いずれの試験群においても、飼料および飲用水は自由摂取とした。
【0107】
３週間に亘る飼育試験終了後、試験群１乃至３のマウスを一晩絶食させた後、尾静脈より採血した（投与前）。その後にオリーブ油０．２ｍｌを胃内投与し、経時的に尾静脈から採血し、血漿中のＴＧ含量を測定した。血漿中のＴＧ含量を表１１に示す。【0108】
【表11】
【0109】
表１１に示す結果から明らかなとおり、高脂肪飼料に分岐α−グルカン１を添加した飼料を用いて飼育した試験群３のマウスの血漿ＴＧ含量は、高脂肪飼料のみを用いて飼育した試験群２より有意に低く、高脂肪飼料により誘導される食後高脂血症が分岐α−グルカン１の摂取により有意に抑制されることが判明した。また、分岐α−グルカン１を摂取した試験群３の血漿ＴＧ含量はオリーブ油投与後６時間にわたって、通常飼料を用いて飼育した試験群１と同程度に低く抑えられており、本結果は分岐α−グルカン１が、高脂肪飼料の継続摂取により誘導される食後高脂血症の症状を顕著に抑制する作用を有することを示すものである。【0110】
＜実験４：消化吸収性の検討＞ラットおよびヒトにおける本分岐α−グルカンの消化吸収性を製造例１で製造された分岐α−グルカン１を用いて検討した。
【0111】
＜実験４−１：ラットにおける消化吸収性の検討＞ラットを使用して、本分岐α−グルカンの消化吸収性を検討した。すなわち、７週齢のウィスター系雄ラット各群５匹を用いて、一晩絶食後、胃ゾンデにて製造例１で製造した分岐α−グルカン１又は澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃１』、松谷化学工業株式会社製造）の水溶液を経口投与した。投与量はラット体重１ｋｇ当り固形分として３．３ｇとした。サンプル投与１時間後、３時間後、６時間後に胃、小腸、盲腸の内容物全量を蒸留水に懸濁し、良く撹拌することにより各サンプルの抽出を行った。抽出したサンプルの濃度をフェノール−硫酸法により測定した。測定結果は表１２に示す（投与したサンプル量を１００％とし、残存内容物を重量％で示した）。
【0112】
【表12】
【0113】
表１２から明らかなように、投与後３時間後には澱粉部分分解物は消化管（胃、小腸、盲腸）内からほとんど消失していることがわかった。すなわち、澱粉部分分解物は投与後３時間で、ほとんどすべてが消化吸収されたと考えられる。一方、分岐α−グルカン１は投与後３時間後において、小腸内に２７．８％、盲腸内に３．５％残存しており、少なくとも計３１．３％は消化管内に残存していた。よって、分岐α−グルカン１は少なくとも３０％程度、消化管内で消化吸収されないことが判明した。【0114】
＜実験４−２：ヒトにおける消化吸収性の検討＞次に、製造例１で製造された分岐α−グルカン１を用いて、ヒトにおける本分岐α−グルカンの消化吸収性を検討した。ヒトにおける糖質の消化吸収性を推察する指標としてグリセミックインデックス値（ＧＩ値）がある。ＧＩ値とは炭水化物５０グラムを摂取した際の血糖値上昇の度合いを、ブドウ糖を１００とした場合の相対値で表すとされ、下記式３に示す計算式により算出される。
【0115】
式３：ＧＩ＝｛（試料摂取時の血糖値下曲線の面積）／（ブドウ糖摂取時の血糖値下曲線の面積）｝×１００
【0116】
なお、ＧＩ値の低い食品を摂取することは、ＧＩ値の高い食品を摂取した場合と比較して様々な疾患（生活習慣病）のリスクが低減することが知られている（非特許文献３や非特許文献４を参照）。分岐α−グルカンのＧＩ値は次のように測定した。【0117】
市販のブドウ糖（商品名『トレーランＧ液』、味の素製薬株式会社製造）と製造例１の方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、血糖値の推移を調べた。健康なボランティアの男性４名と女性７名の合計１１名を被験者として、試験開始５時間前から、水以外の飲食物の摂取を禁止した。これら被験者に、まずブドウ糖５０ｇを含む１５０ｍｌの試験標品を摂取させた。血液を、摂取直前、摂取後１５分後、３０分後、４５分後、６０分後、９０分後、１２０分後に採取した。次いで、１週間以上の間隔をあけて、同じ被験者に分岐α−グルカン１を５０ｇ含む１５０ｍｌの試験標品を用いた以外はブドウ糖の場合と同様にして試験し、採血した。それぞれの血液の血糖値を測定し、試験標品摂取時の血糖値の経時的な差分変化及びその数値に基づき計算した摂取直後乃至摂取１２０分間の血糖値曲線下面積を表１３に示す。【0118】
【表13】
【0119】
表１３に示されるとおり、分岐α−グルカン１のＧＩ値は５７であったことから、約６０％程度が消化吸収されたと推察され、残りの約４０％が消化管内で消化吸収されないことが判明した。また、この結果は、本分岐α−グルカンのＧＩ値が低いことを示すものなので、本分岐α−グルカンを摂取することによって様々な疾患のリスクが低減され、生活習慣病が予防又は改善されることを示している。【0120】
＜実験５：大腸発酵による水素ガスの発生確認試験＞水溶性食物繊維が大腸に達し、腸内細菌に発酵分解されると水素ガスが発生することが知られている。発生した水素ガスは、抗酸化力（活性酸素除去力）があり、酸化ストレスが原因とされる疾患（例えば、生活習慣病、ガン、各種炎症性疾患などの様々な疾患）の予防または改善に寄与することが知られている（非特許文献１を参照）。また、水溶性食物繊維が大腸に達することで、善玉菌が増加して腸内環境が改善され、便通改善につながることも知られている。よって、本分岐α−グルカンに含まれる水溶性食物繊維が、実際に大腸に達し発酵分解を受けているか否かを調べるため、製造例１で製造された分岐α−グルカン１の摂取後の呼気中に水素ガスが含まれているか否かを下記方法により確認した。
【0121】
健康なボランティアの男性２名に、製造例１の方法で得た分岐α−グルカン１粉末５０ｇを水１５０ｍｌに溶かし試験標品として摂取させた。摂取直前、摂取後１時間、２時間、３時間、４時間、６時間、８時間に呼気を採取し、呼気水素・メタン分析装置（商品名『ＢＧＡ−１０００Ｄ』、株式会社呼気生化学栄養代謝研究所製造）を用いて呼気水素ガス量の経時変化を比較した。この結果を示したのが、図６である。図６に示すように、分岐α−グルカン１を摂取した場合の呼気水素ガスは、摂取２時間後から排出され始めて４時間後にピークに達し、その後徐々に減少した。なお、分岐α−グルカン１を摂取しない場合には、呼気水素ガスは検出されなかった。よって、摂取した分岐α−グルカン１のうち、消化吸収を逃れた部分は大腸に到達し、腸内細菌によって発酵分解を受けることが明らかとなった。【0122】
以上の結果は、本分岐α−グルカンに含有される水溶性食物繊維が大腸に達し、腸内細菌による発酵によって水素ガスが発生することを示すものである。よって、本分岐α−グルカンを摂取することにより腸内環境が改善され、便通改善効果があることが判明した。また、本分岐α−グルカンを摂取することにより、腸内細菌によって産生される水素ガスによって、酸化ストレスが原因とされる疾患（例えば、生活習慣病、ガン、各種炎症性疾患などの様々な疾患）の予防又は改善効果を得ることができる。【0123】
＜実験６：ヒトにおける便通改善効果の検討＞ヒトが本分岐α−グルカンを摂取した場合の便通改善効果を、製造例１で製造された分岐α−グルカン１をヒトに実際に摂取させることによって検討した。まず、健常で規則正しい生活をしており、週の排便回数が２〜４回の成人女性の被験者２０名を選出した。
【0124】
製造例１の方法で得た分岐α−グルカン１粉末１０ｇを水１００ｍｌに溶かした水（試験水）と、分岐α−グルカン１粉末を含まない水１００ｍｌ（対照水）を準備した。被験者を１０名ずつ２群に分け、一方の群（試験群）には試験水１００ｍｌを、もう一方の群（対照群）には対照水を１００ｍｌ、４週間毎食後に摂取させた。摂取前および摂取４週目に排便日数（週に何日便通があったか）、排便回数（週に何回便通があったか）および排便量（週に鶏卵Ｌサイズ換算で何個程度の便があったか）のアンケートを行った。また、摂取前および摂取４週目に便を回収して定量的リアルタイムＰＣＲ法を用いて常法にしたがって腸内細菌の解析を行った。【0125】
その結果、試験群では試験水の摂取前の排便日数が一週間当たり３．３日、排便回数が一週間当たり３．６回、排便量が一週間当たり８．２個であったのに対し、摂取４週目の排便日数が一週間当たり４．４日、排便回数が一週間当たり５．２回、排便量が一週間当たり１２．７個であり、排便日数、排便回数および排便量ともに、有意に増加していた。なお、対照群では、摂取前と摂取４週目で排便日数、排便回数および排便量にほぼ変化はなかった。以上の試験結果は、本分岐α−グルカンを摂取することにより、便通が改善されることを示すものである。【0126】
また、腸内細菌の解析においては、試験群では、摂取前の腸内のビフィズス菌占有率が３２％、摂取４週目では４２％であったの対し、対照群では腸内のビフィズス菌占有率にほぼ変化はなかった。以上の試験結果は、本分岐α−グルカンを摂取することにより、腸内のビフィズス菌占有率が増加し、整腸作用をもたらすことを示すものである。【0127】
以上の結果から、本分岐α−グルカンを摂取することにより、便通が改善し、腸内のビフィズス菌占有率が上昇し、腸内環境が整えられ、便秘が原因とされる疾患（例えば、生活習慣病、大腸ガン、腹痛などの様々な疾患）を効果的に予防又は改善できることが分かった。また、全ての試験を通じて、本分岐α−グルカンを摂取した際の副作用や体調変化は観察されず、この結果は、本分岐α−グルカンが安全にしかも継続的に摂取できることを示すものである。【0128】
＜実験７：満腹感持続効果の確認試験＞ヒトが本分岐α−グルカンを摂取した場合の満腹感効果を、製造例１で製造された分岐α−グルカン１を用いて検討した。また、満腹感効果の作用メカニズムの一つを確認するために、ラットが本分岐α−グルカンを摂取した場合のグルカゴン様ペプチド−１（以下、「ＧＬＰ−１」と略称する。）分泌に与える効果を確認した。
【0129】
＜実験７−１−１：ヒトにおける満腹感効果の検討１＞ヒトが本分岐α−グルカンを摂取した場合の満腹感効果を、製造例１で製造された分岐α−グルカン１を用いて検討した。まず、健常で規則正しい生活をしており、１日３回（朝、昼、晩）食事をとる習慣のある成人の被験者２８名を選出した。なお、全被験者に対して、各試験の前日２１時までに食事を終わらせ、十分な睡眠をとり、体調を整えさせた。
【0130】
製造例１の方法で得た分岐α−グルカン１粉末５０ｇを水２００ｍｌに溶かした溶液（以下、「分岐グルカン水」と略称する。）と、マルトデキストリン粉末（商品名『パインデックス＃１』、松谷化学株式会社販売）５０ｇを水２００ｍｌに溶かした溶液（以下、「マルトデキストリン水」と略称する。）を準備した。各被験者に５日間以上間隔を開けて２回の試験日を設け、試験日のうち一日は分岐グルカン水２００ｍｌを、もう一日はマルトデキストリン水２００ｍｌを摂取させた。なお、試験は二重盲検のクロスオーバーで行い、どちらの水を摂取したか被験者には分からない条件で行った。摂取直後および摂取後２時間から摂取後３．５時間まで３０分ごとに、水５０ｍｌを摂取させたが、それ以外の飲食は禁止とした。各被験者の食欲スコアをＶＡＳ（Ｖｉｓｕａｌ Ａｎａｌｏｇｕｅ Ｓｃａｌｅ）法を用いて、以下のように評価した。なお、ＶＡＳ法については、例えば、「肥満研究」 日本肥満学会 Ｖｏｌ．１８、Ｎｏ．１、ｐ．３９−５１（２０１２）に紹介されている。【0131】
図７に示すようなＶＡＳ法によるアンケート用紙（長さ１００ｍｍの線分図）を用いて、被験者の「満腹感」及び「満足度」の度合いを評価した。すなわち、各被験者に、分岐グルカン水又はマルトデキストリン水の摂取直後から摂取後４時間まで３０分ごとに、各被験者が感じる各時点での「満腹感」及び「満足度」に応じて、図７の線分図における該当すると思われる箇所に印をつけてもらい、その印の線分上での位置を線分の左端を０ｍｍとし、左端からつけられた印までの距離（ｍｍ）として測定し、測定された各距離（ｍｍ）を各時点での「満腹感」及び「満足度」のスコアとした。【0132】
被験者の「満腹感」に関するスコアの平均値を図８に示した。図８から明らかなように、本分岐α−グルカンを含む分岐グルカン水を摂取した場合には、マルトデキストリンを含むマルトデキストリン水を摂取した場合と比較して、摂取後１時間３０分から４時間までより高い満腹感が得られた。また、被験者の「満足度」に関するスコアの平均値を図９に示した。図９から明らかなように、本分岐α−グルカンを含む分岐グルカン水を摂取した場合には、マルトデキストリンを含むマルトデキストリン水を摂取した場合と比較して、摂取直後から摂取後４時間までより高い満足度が得られた。【0133】
＜実験７−１−２：ヒトにおける満腹感効果の検討２＞ヒトが本分岐α−グルカンを摂取した場合の満腹感効果を、製造例１で製造された分岐α−グルカン１とパンを同時に被験者に摂取してもらうことにより検討した。まず、健常で規則正しい生活をしており、１日３回（朝、昼、晩）食事をとる習慣のある成人の被験者２８名を選出した。なお、全被験者に対して、各試験の前日２１時までに食事を終わらせ、十分な睡眠をとり、体調を整えさせた。
【0134】
実験７−１−１で用いたのと同じ分岐グルカン水と、マルトデキストリン水を準備した。各被験者に５日間以上間隔を開けて２回の試験日を設け、試験日のうち一日は分岐グルカン水２００ｍｌとバターロール２個（山崎製パン製、１個９９ｋｃａｌ、タンパク質３．０ｇ、脂質２．５ｇ、炭水化物１６．１ｇ）を摂取させ、もう一日はマルトデキストリン水２００ｍｌとバターロール２個（山崎製パン製、１個あたり熱量９９ｋｃａｌ、タンパク質３．０ｇ、脂質２．５ｇ、炭水化物１６．１ｇ）を摂取させた。両日とも摂取開始から５分以上１０分以内に分岐グルカン水又はマルトデキストリン水とパンの摂取を終えさせた。なお、試験は二重盲検のクロスオーバーで行い、分岐グルカン水又はマルトデキストリン水のうち、どちらの水を摂取したか被験者には分からない条件で行った。摂取直後および摂取後２時間から摂取後３．５時間まで３０分ごとに、水５０ｍｌを摂取させたが、それ以外の飲食は禁止とした。分岐グルカン水とパン又はマルトデキストリン水とパンの摂取直後から摂取後４時間まで３０分ごとに、各被験者の感じる「満腹感」及び「満足度」のスコアを、実験７−１−１と同様に、ＶＡＳ法を用いて測定した。【0135】
被験者の「満腹感」についてのスコアの平均値を図１０に示した。図１０から明らかなように、本分岐α−グルカンを含む分岐グルカン水をパンと同時に摂取した場合には、マルトデキストリンを含むマルトデキストリン水をパンと同時に摂取した場合と比較して、摂取後２時間３０分から４時間の間で有意に高い満腹感が得られた。また、マルトデキストリン水をパンと同時に摂取した場合と比較してより高い満腹感効果が、分岐グルカン水とパンの摂取直後から少なくとも４時間は持続する傾向があることが分かった。また、被験者の「満足度」に関するスコアの平均値を図１１に示した。図１１から明らかなように、本分岐α−グルカンを含む分岐グルカン水をパンと同時に摂取した場合には、マルトデキストリンを含むマルトデキストリン水をパンと同時に摂取した場合と比較して、摂取後２時間３０分から４時間の間で有意に高い満足度が得られた。また、マルトデキストリン水をパンと同時に摂取した場合と比較してより高い満足度が、分岐グルカン水とパンの摂取直後から少なくとも４時間は持続する傾向があることが分かった。【0136】
以上、実験７−１−１および７−１−２の試験結果は、ヒトが本分岐α−グルカンを摂取することにより、マルトデキストリンを摂取した場合と比較して、高い満腹感と満足度が得られ、その効果が長時間持続することを示すものである。また、本分岐α−グルカンはパン等の食品又は脂肪含有食品と同時に摂取することにより、本分岐α−グルカン単独で摂取する場合よりも、高い満腹感効果と満足度が得られ、その効果がより長く持続することが示された。よって、本分岐α−グルカンを単独で或いは他の飲食物と共に摂取することにより、食事や間食の量や回数を減らすことが可能となり、食べ過ぎを予防することができ、総摂取カロリーを抑制することができる。よって、本分岐α−グルカンを単独で或いは他の飲食物と共に摂取することにより、特に過食傾向の人がなりやすい生活習慣病、特に高脂肪食品又はアルコールの摂取量増加に伴う「脂肪肝」を効果的に予防又は改善できることが分かった。また、全ての試験を通じて、本分岐α−グルカンを摂取した際の副作用や体調変化は観察されず、この結果は、本分岐α−グルカンが安全にしかも継続的に摂取できることを示すものである。【0137】
＜実験７−２：活性型ＧＬＰ−１抑制効果確認試験＞ＧＬＰ−１は摂食抑制に関与するホルモンとして最もよく知られており、活性型ＧＬＰ−１と不活性型ＧＬＰ−１がある。このなかでも特に活性型ＧＬＰ−１の分泌が増加することは、満腹感の増加および持続をうながし、摂食抑制が誘導されると言われている（例えば、「日本臨床」、Ｖｏｌ．６９、Ｎｏ．５、株式会社日本臨床社、ｐ．８２６−８２９およびｐ．９４６−９５０（２０１１）参照）。そこで、ラットが本分岐α−グルカンを摂取した場合、活性型ＧＬＰ−１の分泌にどのような影響を与えるかを下記のようにして調べた。
【0138】
一晩絶食した９週齢の雄性Ｗｉｓｔａｒラット（日本クレア製）１６匹を８匹ずつ２群に分け、一方の群（実施群）には製造例１の方法で得た分岐α−グルカン１を、もう一方の群（比較群）にはマルトデキストリン（商品名『パインデックス＃１』、松谷化学株式会社販売）をラット体重１ｋｇあたり２ｇの用量で胃ゾンデで経口投与した。投与直前、投与３０分後に各ラットからソムノペンチル麻酔下で門脈血を採取した。血液はアプロチニン（＃５９９−０１２８３和光純薬工業株式会社製）５００ＫＩＵ/ｍＬを含むＥＤＴＡ−２Ｎａ処理された血漿分離管に移し、氷冷、遠心分離し血漿を得た。得られた血漿にＤＰＰ−４阻害剤（＃ＤＰＰ４−０１０、ミリポア社製）２０μＬ/ｍＬを添加してすみやかに−８０℃で凍結保存した。保存血漿を用いて、レビスＧＬＰ（Ａｃｔｉｖｅ）ＥＬＩＳＡ ｋｉｔ（＃ＡＫＭＧＰ−０１１、株式会社シバヤギ製）を用いて血漿中の活性型ＧＬＰ−１量（ｐｇ／ｍｌ）を測定した。【0139】
投与直前及び投与３０分後での測定結果の平均値を図１２に示す。なお、図１２中、「０」は投与直前の測定結果を示しており、投与直前の測定結果は、実施群及び比較群を併せた全体の平均値である。図１２に示すように、マルトデキストリンを摂取させた比較群では、活性型ＧＬＰ−１の測定値は投与３０分後も投与直前と殆ど変わらず、活性型ＧＬＰ−１の分泌がほとんど見られなかった。一方、分岐α−グルカンを摂取させた実施群では、摂取直前と比較して活性型ＧＬＰ−１の測定値は約２倍となり、マルトデキストリンを摂取した比較群と比較して、有意に増加することが示された。【0140】
以上のとおり、本分岐α−グルカンの摂取により活性型ＧＬＰ−１の分泌が増加し、このことが、本分岐α−グルカンを摂取することにより、満腹感及び満足度が高まり、摂食抑制が誘導されるメカニズムの一つであると考えることができる。【0141】
＜実験８：潰瘍性大腸炎に及ぼす分岐α−グルカンの影響＞ラットが本分岐α−グルカンを摂取した場合の潰瘍性大腸炎に及ぼす効果を、製造例１で製造された分岐α−グルカン１を用いて検討した。実験では、飼育期間１と飼育期間２を設け、飼育期間１において、表１４に示す配合組成の飼料（以下、「通常食」という。）を与え、飼育期間２において、通常食のコーンスターチの一部をデキストラン硫酸ナトリウム（平均分子量５，０００、和光純薬株式会社販売、以下、「ＤＳＳ」と略記する。）に置き換えて、ＤＳＳの配合量が５質量（ｗ／ｗ）％となるように調製した飼料（以下、「ＤＳＳ食」という。）を与えることでラットの潰瘍性大腸炎を誘導した（『Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ． Ｈｅｐａｔｏｌ．』、第１６巻、第１６０〜１６８頁（２００１年）参照）。以下、詳細に説明する。
【0142】
【表14】
【0143】
被験動物としてＳＤ系雄性ラット（４週齡、日本チャールスリバー社販売）を用いた。まず、ラットに対して、実験２で用いたものと同じ日本クレア株式会社製の通常飼料（商品名『ＣＥ−２』）を給餌器で与えながら、１週間予備飼育を行った。予備飼育後、各ラットの体重を測定し、各試験群の体重の平均が均等になるように６匹づつ、対照群、試験群１、試験群２の３群に分けた。これらラットにつき、まず「飼育期間１」を７日間設け、飼育期間１の終了翌日から潰瘍性大腸炎の誘導期間として「飼育期間２」を８日間設け、以下に示すように飼料と飲料を摂取させた。飼育期間１では、対照群には飼料として表１４の配合組成の通常食を与えながら、飲料として蒸留水を１日当たり２０ｍｌを与えた。一方、試験群１には、飼料として表１４の配合組成の通常食を与えながら、飲料として１．０質量％の分岐α−グルカン１を蒸留水に溶かしたものを１日当たり２０ｍｌ与えた。また、試験群２には、飼料として表１４の配合組成の通常食を与えながら、飲料として２．０質量％の分岐α−グルカン１を蒸留水に溶かしたものを１日当たり２０ｍｌ与えた。続いて、「飼育期間２」では、すべての群に飼料として表１４の「通常食」に代えて、表１４記載の組成のＤＳＳ食を与えながら、各群に飼育期間１で摂取した飲料をそのまま継続して摂取させ、飼育した。【0144】
各群について、飼育期間２とその翌日の計９日間、ＤＳＳ食摂取により誘導される潰瘍性大腸炎の症状の評価を、潰瘍性大腸炎に特徴的な症状として挙げられる下痢と貧血の症状により評価した。【0145】
まず、下痢の症状は、肉眼による糞便の性状および血便の観察に基づく症状スコア（Ｄｉｓｅａｓｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ｉｎｄｅｘ：以下、「ＤＡＩ」という）により評価した（Ｔｓｕｂｏｕｃｈｉら（『Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ』、第７４巻、９１〜１００頁（２００６年）参照）。糞便の性状は、正常（０）、少し軟便（１）、軟便（２）、水様便（３）の４段階で判定してスコア化し、血便は、糞便の色調により、正常（０）、茶色（１）、赤茶けた色（２）、血便（３）の４段階で判定してスコア化し、それらの合計（０〜６）を下痢の症状スコア（ＤＡＩ）とした。統計処理はＤＡＩについて、Ｍａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ Ｕテストにより有意差検定を行ない、ｐ＜０．０５を有意とした。各群のスコアの推移と、飼育期間２終了翌日のラットの生存数を表１５に示す。【0146】
【表15】
【0147】
表１５から明らかなように、ＤＳＳ摂取後においては、すべてのラットでＤＡＩの上昇がみられ、潰瘍性大腸炎が誘導された。しかしながら、本分岐α−グルカンを摂取していない対照群のラットのＤＡＩは、ＤＳＳ食摂取８日後には６．０となり、血便を伴う水様の便が確認され、１匹が、症状悪化により死亡したのに対し、本分岐α−グルカンを摂取した試験群１および２のラットのＤＡＩは、ＤＳＳ摂取５日後以降、対照群に比して有意に低値を示し、死亡したラットはいなかった。よって、本分岐α−グルカンは、潰瘍性大腸炎の特徴的な症状として挙げられる下痢の症状（便の性状および血便）を緩和する作用があることが示された。【0148】
次いで、対照群と試験群２の生存ラットを各々、麻酔下で解剖し、腹部大静脈から採血して、貧血の指標となるヘマトクリット値（％）を、常法（ミクロヘマトクリット法）により測定した。その結果、対照群のヘマトクリット値は３３．８％を示したのに対し、本分岐α−グルカンを２．０質量％摂取した試験群２のヘマトクリット値は４４．５％を示し、対照群と比較して有意に低下が抑制されていた。ヘマクリット値の正常値は、一般に、ラットで４３〜４９％と言われており、試験群２のラットのヘマクリット値は正常値であると言える。よって、本分岐α−グルカンは、潰瘍性大腸炎の特徴的な症状として挙げられる貧血の指標となるヘマトクリット値の低下に対しても有意な改善作用があることが確認された。これらの結果は、本分岐α−グルカンに、潰瘍性大腸炎の進行を抑制する効果があり、ヒトの潰瘍性大腸炎の予防や改善、治療に利用できることを物語っている。【0149】
以下、本発明を実施例に基づいてより詳細に説明する。しかしながら、本発明は、これら実施例によりなんら限定されるものではない。【実施例1】
【0150】
＜抗生活習慣病用剤＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を５ｇずつポリエチレン製容器に充填し、密封し、本発明の抗生活習慣病用剤を得た。
【0151】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、生活習慣病や脂肪肝を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎等を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取するように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。本品をアルコール又は高脂肪食品の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。【実施例2】
【0152】
＜抗生活習慣病用剤＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末から常法により高分子の水溶性多糖を除去した画分を準備し、５ｇずつポリエチレン製容器に充填し、密封し、本発明の抗生活習慣病用剤を得た。
【0153】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、生活習慣病や脂肪肝を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品またはアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取するように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。本品をアルコール又は高脂肪食品の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。本品は、室温下でも吸湿、変色することなく、１年以上に亘って安定である。【実施例3】
【0154】
＜抗生活習慣病用剤＞製造例２に示す方法で得た分岐α−グルカン２溶液を常法にしたがって濾過して、１００ｍｌボトルに無菌的に充填して、液剤形態の抗生活習慣病用剤を得た。
【0155】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、生活習慣病や脂肪肝を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取するように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、そのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。本品をアルコール又は高脂肪食品の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。【実施例4】
【0156】
＜抗生活習慣病用剤＞まず、調整例１の方法で調製したα−グルコシル転移酵素の濃縮粗酵素液１を国際公開第ＷＯ２００８／１３６３３１号パンフレットの実験６に記載された方法で、ポリアクリルアミドゲル電気泳動で単一のバンドになるまで精製し、α−グルコシル転移酵素の精製液を調製した。３０％タピオカ澱粉乳をｐＨ６．５に調整し、これにα−アミラーゼ（ノボザイム社製）を澱粉グラム当たり０．２質量％になるように加え、９５℃で１５分間反応させ、その反応液を、オートクレーブ（１２０℃）を１０分間行った後、４０℃に冷却した。これに上で得たα−グルコシル転移酵素の精製液を固形物１グラム当たり１０単位加え、４０℃
、ｐＨ６．０で２４時間作用させた。その反応液を９５℃で１０分間保った後、冷却し、濾過して得られる濾液を常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ
型及びＯＨ型イオン樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮、噴霧乾燥して分岐α−グルカン粉末を得た。本分岐α−グルカンは、メチル化分析において、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物との比が１：０．６を示し、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の合計は部分メチル化物の８０．０％
を占めていた。また、２，４，６−トリメチル化物及び２，４−ジメチル化物は、それぞれ部分メチル化物の１．１及び０．８％を示した。また、得られた分岐α−グルカンはグルコース重合度が６乃至２１０の混合物であった。本分岐α−グルカンは、重量平均分子量９７，４５０ダルトン、数平均分子量５，５３０ダルトンであり、重量平均分子量を数平均分子量で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）は１７．６であった。さらに、酵素−ＨＰＬＣ法により求めた水溶性食物繊維含量は４０．１質量％であった。
【0157】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、生活習慣病や脂肪肝を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取するように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、そのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。本品をアルコール又は高脂肪食品の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。【実施例5】
【0158】
＜抗生活習慣病用剤＞３０％タピオカ澱粉乳をｐＨ６．５に調整し、これにα−アミラーゼ（ノボザイム社製）を澱粉グラム当たり０．２質量％になるように加え、９５℃で１５分間反応させ、その反応液を、オートクレーブ（１２０℃）を１０分間行った後、４０℃に冷却した。これに実施例４で得たα−グルコシル転移酵素の精製液を固形物１グラム当たり１０単位加え、さらに、バチルス・ステアロサーモフィラス由来のＣＧＴａｓｅ（株式会社林原製）を固形物１グラム当たり０．１単位加え、４０℃
、ｐＨ６．０で２４時間作用させた。その反応液を９５℃で１０分間保った後、冷却し、濾過して得られる濾液を常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン樹脂により脱塩して精製し、更に濃縮、噴霧乾燥して分岐α−グルカン粉末を得た。本分岐α−グルカンは、メチル化分析において、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物との比が１：１．６を示し、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の合計は部分メチル化物の７２．０％
を占めていた。また、２，４，６−トリメチル化物及び２，４−ジメチル化物は、それぞれ部分メチル化物の１．４及び１．７％を示した。また、得られた分岐α−グルカンはグルコース重合度が６乃至６２の混合物であった。本分岐α−グルカンは、重量平均分子量３２，８３０ダルトン、数平均分子量４，７３０ダルトンであり、重量平均分子量を数平均分子量で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）は６．９であった。さらに、酵素−ＨＰＬＣ法により求めた水溶性食物繊維含量は５７．５質量％であった。
【0159】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、生活習慣病や脂肪肝を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取するように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、そのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。本品をアルコール又は高脂肪食品の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。【実施例6】
【0160】
＜抗生活習慣病用剤＞実施例５の製造方法において、α−グルコシル転移酵素を市販のアスペルギルス・ニガー由来のα−グルコシダーゼに置き換え、その他の工程は実施例５と同様に行い、分岐α−グルカン粉末を得た。本分岐α−グルカンは、メチル化分析において、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物との比が１：０．９を示し、２，３，６−トリメチル化物と２，３，４−トリメチル化物の合計は部分メチル化物の６０．０％
を占めていた。また、２，４，６−トリメチル化物及び２，４−ジメチル化物は、それぞれ部分メチル化物の０．７及び０．８％を示した。また、得られた分岐α−グルカンはグルコース重合度が６乃至６２の混合物であった。本分岐α−グルカンは、重量平均分子量８６０ダルトン、数平均分子量４７０ダルトンであり、重量平均分子量を数平均分子量で除した値（Ｍｗ／Ｍｎ）は１．８であった。さらに、酵素−ＨＰＬＣ法により求めた水溶性食物繊維含量は２１．５質量％であった。
【0161】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、生活習慣病や脂肪肝を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取するように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、そのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。本品をアルコール又は高脂肪食品の摂取の前後に摂取してもよいことは勿論である。【実施例7】
【0162】
＜経口組成物＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末９ｇおよび糖転移ヘスペリジン（商品名『林原ヘスペリジンＳ』、株式会社林原販売）１ｇを均一に混合し、５ｇずつポリエチレン製容器に充填し、密封し、本発明の粉末状の経口組成物を得た。
【0163】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、糖転移ヘスペリジンの肝臓保護作用と相まって、本分岐α−グルカンの効果が発揮されるので、高脂肪食品又はアルコール摂取に起因する脂肪肝を予防又は改善するための組成物として有利に用いることができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約０．５乃至約１００ｇの範囲で、本品をそのまま、或いは、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取すればよい。【実施例8】
【0164】
＜経口組成物＞製造例２に示す方法で得た分岐α−グルカン２溶液１０ｇ、糖転移ヘスペリジン（商品名『林原ヘスペリジンＳ』、株式会社林原販売）２ｇ、及びアスパルテーム０．０５ｇを精製水１００ｍｌに添加し、混合し、溶解し、精密濾過し、滅菌容器に５０ｍｌずつ無菌的に充填して、本発明の液状の経口組成物を得た。
【0165】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、糖転移ヘスペリジンの肝臓保護作用と相まって、本分岐α−グルカンの効果が発揮されるので、本品は、高脂肪食品又はアルコール摂取に起因する脂肪肝を予防又は改善するための組成物として有利に用いることができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、水溶性食物繊維換算で、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約１０乃至５００ｍｌの範囲で摂取する。本品は、アスパルテームにより適度の甘味が付与されていることから摂取し易く、また、本分岐α−グルカンがアスパルテームの後味の悪さ（苦みや渋み）を改善するので、大変飲みやすい。本品はそのまま摂取しても良いが、水、お茶、コーヒーなどの飲料と混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取してもよい。【実施例9】
【0166】
＜経口組成物＞製造例２に示す方法で得た分岐α−グルカン２溶液１０ｇ、糖転移ルチン１ｇ、糖転移ヘスペリジン（商品名『林原ヘスペリジンＳ』、株式会社林原販売）１ｇ、糖転移ナリンジン（株式会社林原製）１ｇ、及びアスパルテーム０．００２ｇを精製水１００ｍｌに混合し、溶解し、精密濾過し、５０ｍｌを無菌的に充填して、本発明の液状の経口組成物を得た。
【0167】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、糖転移ルチン、糖転移ヘスペリジン、及び糖転移ナリンジンの肝臓保護作用と相まって、本分岐α−グルカンの効果が発揮されるので、本品は、高脂肪食品又はアルコール摂取に起因する脂肪肝を予防又は改善するために有利に用いることができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約２５乃至約５００ｍｌの範囲で摂取する。本品は、アスパルテームにより適度の甘味が付与されていることから摂取し易く、また、本分岐α−グルカンがアスパルテームの後味の悪さ（苦みや渋み）を改善するので、大変飲みやすい。本品はそのまま摂取してもよいが、水、お茶、コーヒーなどの飲料と混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取してもよい。【実施例10】
【0168】
＜経口組成物＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末１０ｇ及びネオテーム０．０１ｇを均一に混合し、５ｇずつポリエチレン製容器に充填し、本発明の経口組成物を得た。
【0169】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約５乃至約１００ｇの範囲で摂取する。本品は、ネオテームにより適度の甘味が付与されていることから摂取し易く、また、本分岐α−グルカンがネオテームの後味の悪さ（苦みや渋み）を改善するので、大変飲みやすい。本品はそのまま摂取してもよいが、水、お茶、コーヒーなどの飲料と混合して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取してもよい。【実施例11】
【0170】
＜経口組成物＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末２５ｇ、ソルビトール１５ｇ、結晶セルロース１０ｇ、及びマルトース（商品名『サンマルト緑』、株式会社林原販売）３５ｇを均一に混合し、常法にしたがって打錠機により打錠し、本発明の錠剤の形態にある経口組成物（厚さ約６ｍｍ、硬度約２６００ｍｇ）を得た。
【0171】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約５乃至約１００ｇの範囲で摂取する。本品は、マルトースにより適度の甘味が付与されていることから摂取し易く、物理的強度も充分であり、水中での崩壊性も良好である。【実施例12】
【0172】
＜経口組成物＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末１００質量部、甘草１質量部、及び糖転移ヘスペリジン（商品名『林原ヘスペリジンＳ』、株式会社林原販売）５質量部とを均一に攪拌混合し、常法にしたがって、顆粒形成機にかけて顆粒化し、硬質カプセルに充填し、１カプセル当たり、分岐α−グルカン１を１ｇ含有する、カプセルの形態にある本発明の経口組成物を得た。
【0173】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約５乃至約１００ｇの範囲で摂取する。本品は、取扱性、保存安定性に優れ、本分岐α−グルカンによる脂肪肝の予防又は改善作用と、甘草及び糖転移ヘスペリジンによる肝臓保護作用又は中性脂肪低減作用とが相まって、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例13】
【0174】
＜経口組成物＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末１０質量部、ウコン０．１質量部、及び糖転移ルチン１質量部を均一に攪拌し、混合し、常法にしたがって、本発明の顆粒状の経口組成物を得た。
【0175】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約５乃至約１００ｇの範囲で摂取する。本品は、取扱性、保存安定性に優れ、本分岐α−グルカンによる脂肪肝の予防又は改善作用と、ウコン及び糖転移ルチンによる肝臓保護作用又は中性脂肪低減作用とが相まって、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。本品はそのまま摂取してもよいし、水、お茶、コーヒーなどの飲料に溶解して摂取するか、アルコール又は高脂肪食品に添加して摂取しても良い。【実施例14】
【0176】
＜経口組成物＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末１００質量部、糖転移ヘスペリジン（商品名『林原ヘスペリジンＳ』、株式会社林原販売）３質量部、糖転移ルチン３質量部、及びグルクロノラクトン０．１質量部とを均一に攪拌し、混合し、常法にしたがって、顆粒形成機にかけて顆粒化し、硬質カプセルに充填し、１カプセル当たり分岐α−グルカン１を３ｇ含有する本発明の経口組成物を得た。
【0177】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は、高脂肪食品又はアルコールの摂取量に依存して変動するものの、高脂肪食品又はアルコールの総摂取量に対し、本分岐α−グルカンを２質量％以上の量で経口摂取されるように、通常、成人（体重６０ｋｇ）一日当たり、約５乃至約１００ｇの範囲で摂取する。本品は、取扱性、保存安定性に優れ、本分岐α−グルカンによる脂肪肝の予防又は改善作用と、糖転移ヘスペリジン、糖転移ルチン、及びグルクロノラクトンによる肝臓保護作用ないしは中性脂肪低減作用とが相まって、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例15】
【0178】
＜経口組成物（炭酸飲料）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物である炭酸飲料を製造した。果糖ぶどう糖液糖５０ｇ、クエン酸１ｇ、クエン酸ナトリウム０．３ｇ、香料０．０２ｇを炭酸水５００ｍｌと混合した。この混合液を攪拌しながら、砂糖４０ｇを加え、さらに分岐α−グルカン１粉末を重量比で５％、１０％、２０％添加した飲料をそれぞれ本発明の炭酸飲料Ａ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た炭酸飲料を、対照とした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、炭酸飲料Ａ〜Ｃは、分岐α−グルカン１を含有しない対照と比較してボディ感とフレーバー感が増し、フレーバー感が持続されると評価された。よって、本分岐α−グルカンを５〜２０％添加することにより、炭酸飲料のボディ感とフレーバー感が増し、嗜好性を向上させる効果があることが明らかとなった。
【0179】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンが炭酸飲料のボディ感とフレーバー感を増す効果があるので、本品は大変飲みやく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例16】
【0180】
＜経口組成物（茶飲料）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物である紅茶を製造した。茶葉４０ｇに対し沸騰水１Ｌを加え、茶葉をろ過して紅茶抽出液１Ｌを得た。紅茶抽出液に分岐α−グルカン１粉末を重量比で３％、５％、８％添加した紅茶を、それぞれ本発明の紅茶飲料Ａ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た茶飲料を、対照とした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、紅茶飲料Ａ〜Ｃは、分岐α−グルカン１を含有しない対照と比較して、茶飲料の苦みや渋みが低減されていると評価され、本分岐α−グルカンの添加により、紅茶飲料に含有するポリフェノール特有の苦みや渋みをマスキングする効果があることが分かった。なお、紅茶飲料に代えて緑茶を用いて同様の試験を行ったところ、分岐α−グルカンを添加した緑茶飲料についても、同様に苦みや渋みが低減されているとの評価が得られ、本分岐α−グルカンに茶飲料に含まれているポリフェノール特有の苦みや渋みをマスキングする効果があることが分かった。
【0181】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンが茶飲料の苦みや渋みを抑制するので、本品は大変飲みやく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例17】
【0182】
＜経口組成物（乳酸菌飲料）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物である乳酸菌飲料を製造した。市販の乳酸菌飲料に、分岐α−グルカン粉末を重量比で５％、１０％、２０％添加した乳酸菌飲料を、それぞれ本発明の乳酸菌飲料Ａ、Ｂ、Ｃとした。市販の乳酸菌飲料を対照とし２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、乳酸菌飲料Ａ、Ｂは、分岐α−グルカン１を含有しない対照と比較して、ボディ感が増し、飲みやすさが向上するとの評価が得られた。また、乳酸菌飲料Ｃはボディ感はさらに増したものの、分岐α−グルカンを含有しない乳酸菌飲料と飲みやすさの点において同等という評価が得られた。以上より、本分岐α−グルカンを５〜２０％添加することで、乳酸菌飲料のボディ感を向上させる効果があることが明らかとなった。また、本分岐α−グルカンを５〜１０％添加することで、乳酸菌飲料の飲みやすさを向上させる効果があることが明らかとなった。
【0183】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンが乳酸菌飲料のボディ感を増し、飲みやすくするので、本品は大変飲みやく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例18】
【0184】
＜経口組成物（豆乳飲料）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物である豆乳飲料を製造した。成分無調整豆乳４５０ｇおよび水５０ｇを混合し、分岐α−グルカン１粉末を重量比で２％、８％添加した豆乳を、それぞれ本発明の豆乳飲料ＡおよびＢとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た豆乳飲料を、対照の豆乳飲料とした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、豆乳飲料ＡおよびＢは、分岐α−グルカン１を含有しない対照の豆乳飲料と比較して、えぐ味と生臭さが抑制されているとの評価が得られ、本分岐α−グルカンを含有することによって嗜好性の高い豆乳飲料が得られることが分かった。以上の結果から、本分岐α−グルカンには、豆乳飲料特有のえぐ味や生臭さをマスキングする効果があることが明らかとなった。
【0185】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンが豆乳飲料特有のえぐ味や生臭さを抑制するので、本品は大変飲みやく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例19】
【0186】
＜経口組成物（鉄含有飲料）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物である鉄含有飲料を製造した。クエン酸鉄アンモニウム
０．０３ｇ、果糖ぶどう糖液糖９．３ｇ、クエン酸０．０５ｇ、クエン酸ナトリウム０．０１６ｇを水と混合した。得られた溶液に分岐α−グルカン１粉末を重量比で３％、５％、８％添加した飲料を、それぞれ本発明の鉄含有飲料Ａ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た鉄含有飲料を、対照の鉄含有飲料とした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、鉄含有飲料Ａ〜Ｃは、分岐α−グルカン１を含有しない対照の鉄含有飲料と比較して、鉄味が抑制され、嗜好性の高い鉄含有飲料であるとの評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、鉄含有飲料特有の鉄味をマスキングする効果があることが明らかとなった。
【0187】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンが鉄含有飲料特有の鉄味を抑制するので、本品は大変飲みやく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例20】
【0188】
＜経口組成物（酢飲料）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の経口組成物である酢飲料を製造した。果糖ぶどう糖液糖２７ｇ、スクラロース０．０１７ｇ、酢５０ｇおよび水５００ｍｌを混合した。得られた溶液に分岐α−グルカン１を重量比で２％、８％添加した飲料を、それぞれ本発明の酢飲料Ａ、Ｂとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得た酢飲料を、対照の酢飲料とした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、酢飲料Ａ、Ｂは、分岐α−グルカン１を含有しない対照の酢飲料と比較して、酸味と酸臭が抑制され、飲みやすい酢飲料であるとの評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、酢飲料特有の酸味をマスキングする効果があることが明らかとなった。
【0189】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンが酢飲料特有の酸味を抑制するので、本品は大変飲みやすく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例21】
【0190】
＜経口組成物（ヨーグルト）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物であるヨーグルトを製造した。まず、市販のヨーグルト１００ｇに、分岐α−グルカン１粉末を１．５ｇ、５ｇ、１０ｇ、２０ｇを添加し、それぞれ本発明のヨーグルトＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄとした。なお、これらヨーグルトＡ〜Ｄを４℃で２日間保存しても離水は無く、形も保たれており、分岐α−グルカンにヨーグルトの離水抑制効果があることが明らかとなった。また、ヨーグルトの硬さをレオメーター（株式会社サン科学製ＣＲ−５００ＤＸ）を用いて測定したところ、分岐α−グルカン１の添加量が多いほどゲル強度が増し保形性が向上することが明らかとなった。さらに、分岐α−グルカン１を添加しない市販のヨーグルトを対照とし、２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、ヨーグルトＡ〜Ｄは、対照のヨーグルトと比較して、ヨーグルト特有の酸味と発酵臭が抑制されているとの評価が得られた。以上の結果より、本分岐α−グルカンにヨーグルトの酸味や発酵臭を抑制する効果があることが明らかとなった。なお、上記結果は、ヨーグルトの製造過程（ヨーグルトの発酵前や発酵途中）で分岐α−グルカン１を添加した場合も同様であった。
【0191】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本分岐α−グルカンがヨーグルト特有の酸味や発酵臭を抑制するので、本品は摂取しやすく、摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。【実施例22】
【0192】
＜経口組成物（フルーツソース）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物であるフルーツソースを製造した。ミキサーにかけたパイナップル２５０ｇ、砂糖１２５ｇを水と混合した。得られた混合液に分岐α−グルカン１粉末を重量比で５％、１０％添加して加熱し、それぞれ本発明のフルーツソースＡ、Ｂとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得たフルーツソースを、対照のフルーツソースとした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、フルーツソースＡ、Ｂは、分岐α−グルカン１を含有しない対照のフルーツソースと比較して、パイナップル本来の味は保持された一方、ボディ感が付与され、とろみのあるソースであるとの評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、フルーツソースにとろみを付与する効果があることが明らかとなった。
【0193】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。本品はそのまま摂取してもよいし、水などの飲料に溶解して摂取するか、パンやケーキなどのお菓子や料理に添加して摂取しても良い。【実施例23】
【0194】
＜経口組成物（トマトソース）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の経口組成物であるトマトソースを製造した。トマトピューレ、たまねぎ、砂糖、塩、顆粒コンソメ、加工でんぷんを原料とするトマトソースに、分岐α−グルカン１を重量比で５％、１０％、１５％添加して、オーブンで１００℃で加熱し、本発明のトマトソースＡ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得たトマトソースを、対照のトマトソースとした。トマトソースＡ、Ｂ、Ｃは、分岐α−グルカン１を添加しない対照のトマトソースと比較して、トマトの色が鮮やかで風味がよく、水分移行の少ないソースであった。本品をピザやパスタに使用した場合、ピザやパスタへの水分の染み込みが抑制され、表面にソースが残りやすくなるため、料理の色や艶がよくなる効果がある。また、パスタ等の麺類に本品を使用した際には、麺のほぐれや食感が向上した。よって、本分岐α−グルカンには、トマトソースの水分移行の抑制効果、麺のほぐれ効果、麺の食感改善効果があることが明らかとなった。なお、上記の麺のほぐれ効果につき、パスタ以外の麺についても同様の効果があるか確認するために、市販のうどんを用いて、麺のほぐれを観察した。まず、うどんを常法に従って茹で、茹でたうどん１５０ｇを、分岐α−グルカン１を５質量％、１０質量％、または２０質量％配合した水５００ｇに１分間浸漬させ、液切りし、４℃で７時間保存した。保存後のうどんをしずかに持ち上げ、約１００秒間保持し、麺のほぐれ度合いを観察した結果、分岐α−グルカン１を５〜２０質量％配合した水で浸漬させたうどんは、麺がよくほぐれるという効果があった。このことは、本分岐α−グルカンが麺のほぐし剤としても利用可能であることを物語っている。
【0195】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。本品はそのまま摂取してもよいし、パスタ等の麺類やピザなどの料理に添加して摂取しても良い。【実施例24】
【0196】
＜経口組成物（アイスクリーム）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物であるアイスクリーム（ジェラート）を製造した。オレンジジュース３５ｇ、グラニュー糖２５ｇ、水３５ｇ、および分岐α−グルカン１粉末を５ｇ混合し、９０℃で加熱した。室温まで冷却後、アイスクリームメーカーに入れて２０分間ミキシングを行い、本発明のアイスクリームを得た。また、分岐α−グルカン１を混合しない点以外は、上記と同様の方法で得たアイスクリームを、対照のアイスクリームとした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、本発明のアイスクリームは対照のアイスクリームと比較して、なめらかな食感であるとの評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、アイスクリーム等の冷菓の食感をなめらかにする効果があることが明らかとなった。
【0197】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、本分岐α−グルカンが冷菓の味、香り等の風味に悪い影響を及ぼさず、食感を向上させるため、本品は摂取しやすい食品である。【実施例25】
【0198】
＜経口組成物（ソフトキャンディ）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物であるソフトキャンディを製造した。グラニュー糖２００ｇ、水４０ｇ、水あめ２００ｇ、分岐α−グルカン１粉末を２０ｇまたは４０ｇ配合し、鍋に入れ加熱し、１２６℃まで煮詰めた。さらに硬化油脂４５．５ｇ、乳化剤２.１ｇを加え、乳化させ、あらかじめ溶かしておいた３３％ゼラチン液１２ｇを加え、生地温度が９０℃以下になったところでフォンダン２５ｇを加えて混合した。上記で得られた生地を、温度４０℃下で熟成させ、圧延成型を行い、ソフトキャンディを得た。分岐α−グルカン１を２０ｇ、４０ｇ配合して得られたソフトキャンディを、それぞれ本発明のソフトキャンディＡおよびＢとした。また、分岐α−グルカン１を配合しない点以外は、上記と同様の方法で得たソフトキャンディを、対照のソフトキャンディとした。２０〜５０代の男女１０名で適当な大きさに切ったソフトキャンディを用いて官能評価を行ったところ、分岐α−グルカン１を含有したソフトキャンディＡおよびＢは対照のソフトキャンディと比較して歯つきが低減され、食べやすく、溶けにくいソフトキャンディであるとの評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、ソフトキャンディの歯つきを低減し、溶けにくくする（耐熱保形性の向上）効果があった。
【0199】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、本分岐α−グルカンがソフトキャンディの味、香り等の風味に悪い影響を及ぼさず、歯つきを低減させるため、本品は摂取しやすい食品である。【実施例26】
【0200】
＜経口組成物（ハードキャンディ）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１を用いて、本発明の経口組成物であるハードキャンディを製造した。グラニュー糖１８０ｇ、水４０ｇ、水あめ１６０ｇを混合した。これに、分岐α−グルカン１粉末を重量比で５質量％、１０質量％または２０質量％配合し、鍋に入れて１５０℃まで煮詰め、冷却し、成型を行い、ハードキャンディを得た。分岐α−グルカン１を５質量％、１０質量％、２０質量％配合して得られたハードキャンディを、それぞれ本発明のハードキャンディＡ、ＢおよびＣとした。対照として、分岐α−グルカン１を配合しないハードキャンディを製造して、２０〜５０代の男女１０名でハードキャンディＡ〜Ｃの官能評価を行ったところ、分岐α−グルカン１を含有したハードキャンディＡ〜Ｃは分岐α−グルカン１を含有しない対照のハードキャンディと比較して、なめるととろっとした食感が付与され食べやすく、口の中での滞留時間が長くなるとの評価が得られた。また、分岐α−グルカン１を含有したキャンディは、なめた際に口の中が温かく感じるという評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、食感の改善効果と口の中での滞留時間が向上する効果があり、キャンディを摂取した者に対して温感を付与する効果があることが明らかとなった。温感が付与されるメカニズムは明らかではないが、本分岐α−グルカンを含有したキャンディの溶解熱が通常のキャンディよりも高いことが一因と考えられる。
【0201】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、本分岐α−グルカンがハードキャンディの食感等を向上し、本品をなめた者に温感を付与する効果があるため、本品は摂取しやすく、のど飴等として好適に利用できる。【実施例27】
【0202】
＜経口組成物（スープ）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の経口組成物であるスープを製造した。まず、市販のコンソメスープの素をお湯適量に溶かした。これに分岐α−グルカン１を重量比で５％、１０％、１５％添加して溶かしたスープを、それぞれ本発明のスープＡ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない点以外は、上記と同様の方法で得たスープを、対照のスープとした。２０〜５０代の男女１０名で官能評価を行ったところ、スープＡ、Ｂ、Ｃは、分岐α−グルカン１を含有しない対照のスープと比較して、ボディ感とコクが増し、ざらつきの少ないさらっとした食感があり、飲みやすいスープであるとの評価が得られた。よって、本分岐α−グルカンには、スープにボディ感とコクを付与し、食感を改善する効果があることが明らかとなった。なお、ポタージュスープや冷製スープであっても、同様の結果が得られた。
【0203】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、本分岐α−グルカンがスープの味、香り等の風味に悪い影響を及ぼさず、食感を向上させるため、本品は摂取しやすい食品である。【実施例28】
【0204】
＜経口組成物（米飯）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の経口組成物である米飯を製造した。米５００ｇを洗米した後、水７５０ｍｌおよび分岐α−グルカン１を米の重量比０．５％、１％、３％、５％、１０％、２０％になるように加え、電気式炊飯器で炊飯し、それぞれ本発明の米飯Ａ〜Ｆとした。
【0205】
米飯Ａ〜Ｆのほぐれをしゃもじで混ぜて比較したところ、分岐α−グルカン１を３〜２０％添加して炊いた米飯で炊飯後のほぐれが向上するとの評価が得られた。特に、分岐α−グルカン１を１０〜２０％添加して炊いた米飯で炊飯後のほぐれは顕著に向上するとの評価が得られた。さらに、分岐α−グルカン１を３〜２０％を添加して炊いた米飯は粒感（食感）が向上するとの評価が得られた。以上より、よって、本分岐α−グルカンは、米飯のほぐれを向上させ、米飯の食感を改良する効果があることが明らかとなった。【0206】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。本品は摂取することで脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。また、本分岐α−グルカンが米飯の味、香り等の風味に悪い影響を及ぼさず、食感を向上させるため、本品は摂取しやすい食品である。【実施例29】
【0207】
＜経口組成物（パン）＞小麦粉１０００ｇ、塩２０ｇ、砂糖６０ｇ、脱脂粉乳２０ｇ、パン酵母２５ｇ、水７００ｍｌおよび分岐α−グルカン１粉末を２０ｇ、４０ｇ、８０ｇ配合して、常法により食パンを製造した。分岐α−グルカン１を２０ｇ、４０ｇ、８０ｇを配合した食パンをそれぞれ本発明の食パンＡ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を配合しない点以外は、上記と同様に製造し、対照の食パンを得た。食パンＡ、Ｂ、Ｃは、分岐α−グルカン１を含有しない対照の食パンと比べて、窯入れ時に体積が膨張していた。よって、本分岐α−グルカンをパンに含有させると焼成時の窯伸び向上を促し、パンのボリュームを増大させる効果があることが明らかとなった。この結果は、ロールパンやビスケットの場合であってもほぼ同様であった。
【0208】
本品を摂取することにより、便通改善効果があり、満腹感が持続し、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することや潰瘍性大腸炎を予防又は改善することができる。また、本分岐α−グルカンが味、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、本品は摂取しやすい食品である。【実施例30】
【0209】
＜高脂肪食品（ハンバーグ）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるハンバーグを製造した。すなわち、牛豚合挽き肉１００ｇ（脂肪酸１０乃至１５質量％含有）、塩こしょう２ｇ、牛乳１２ｇ、全卵２５ｇ、生パン粉１２ｇ、及び２ｇの分岐α−グルカン１（水溶性食物繊維を約１．５ｇ含有）をよく混ぜ合わせ、ねばりが得られるまで捏ね、炒めた玉ねぎを混合し生地を調製した。上記で得られた生地を常法により焼き、ハンバーグを得た。
【0210】
本品は、ハンバーグ中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有する。よって本品は、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンが味、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、本品はハンバーグ本来の味を保持した摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例31】
【0211】
＜高脂肪食品（バタークリーム）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるバタークリームを製造した。すなわち、砂糖１００ｇと１０ｇの分岐α−グルカン１（水溶性食物繊維約８ｇ含有）を水１００ｇに加熱溶解し、煮詰めてシロップを得た。次いで、全卵１００ｇ（脂肪酸約８％含有）を泡立て、先に煮詰めたシロップを加え常法により泡立てメレンゲを作った。これに無塩マーガリン２００ｇ（脂肪酸約８０％含有）及び香料を加え、本発明の高脂肪食品であるバタークリームを得た。また、分岐α−グルカン１を混合しない点以外は、上記と同様に製造し、対照のバタークリームを得た。２０〜５０代の男女８名で官能評価を行ったところ、分岐α−グルカン１を配合したバタークリームは対照と比較して、本品は柔らかさや口どけが増し、気泡も少ないとの評価が得られたことから、本分岐α−グルカンには、バタークリームの味質改良効果があることが明らかとなった。
【0212】
本品は、バタークリーム中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有する。よって本品は、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンはバタークリームの味質を改良し、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、本品は摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例32】
【0213】
＜高脂肪食品（プリン）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるプリンを製造した。すなわち、砂糖４０ｇに対し、４ｇ、８ｇ、２０ｇ、４０ｇの分岐α−グルカン１を混合し、８０℃の牛乳２５０ｇに溶解し、全卵１００ｇ（脂肪酸約８％含有）と混合し、裏漉して原料液とし、各原料液をプラスチック容器に充填して常法により加熱してプリンを得た。分岐α−グルカン１を４ｇ、８ｇ、２０ｇ、４０ｇ配合したプリンをそれぞれ本発明の高脂肪食品であるプリンＡ〜Ｄとした。また、分岐α−グルカン１を混合しない点以外は、上記と同様に製造し、対照のプリンを得た。
【0214】
プリンＡ〜Ｄは、分岐α−グルカン１の配合量を増やすほど柔らかいプリンとなり、食感がなめらかとなった。また、分岐α−グルカン１を配合しない対照のプリンと比較して同等の保形性を有していた。以上のことから、本分岐α−グルカンには、プリン等の卵加工品に対する食感改良効果（やわらかさ、なめらかさの付与効果）があることが明らかとなった。【0215】
本品は、プリン中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有する。よって本品は、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンはプリンに対する食感改良効果があり、味、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、本品はプリン本来の風味を保持した摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例33】
【0216】
＜高脂肪食品（チョコレート）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるチョコレートを製造した。まず、ブラックチョコレートと生クリーム（脂肪酸約４０質量％含有）を６０℃で混合した。得られた混合物に分岐α−グルカン１を重量比で５％、１０％、２０％、４０％添加し、冷却した後、成形し、それぞれ、チョコレートＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄとした。いずれのチョコレートもべたつくことなく製造が可能であった。また、分岐α−グルカン１を混合しない点以外は、上記と同様に製造し、対照のチョコレートを得た。
【0217】
チョコレートＡ〜Ｄを４０度の保温庫に３０分間保存し、耐熱性を調べたとろ、分岐α−グルカン１を１０％、２０％添加したチョコレートＢおよびＣは、対照のチョコレートと比較して、耐熱性が向上し、溶けにくくなっていた。以上のことから、本分岐α−グルカンには、チョコレートの耐熱性を向上させ、溶けにくくする効果があることが明らかとなった。【0218】
本品は、チョコレート中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有する。よって本品は、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンはチョコレートの耐熱性向上効果があるため本品は溶けにくく、本分岐α−グルカンが味、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、本品は摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例34】
【0219】
＜高脂肪食品（クッキー）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるクッキーを製造した。バター（脂肪酸約８０質量％含有）２５ｇ、砂糖１７ｇ、薄力粉３８ｇ、全卵１２ｇに、分岐α−グルカン１を８ｇまたは１３ｇ混合し、ミキサーで攪拌し、常法によりクッキー生地を得た。得られた生地を冷却後、適当な大きさにカットし、厚さ１０ｍｍに圧延したものを天板に並べ、電気オーブンにて１７０℃で１５分間焼成した後、冷却してクッキーを得た。分岐α−グルカン１を８ｇ、１３ｇ混合して得られたクッキーを本発明のクッキーＡ、Ｂとした。また、分岐α−グルカン１を混合しない点以外は上記クッキー生地と同じクッキー生地を用いて対照のクッキーを製造した。
【0220】
製造時において、クッキーＡおよびＢは、分岐α−グルカン１を配合しない対照のクッキーと比較して、クッキー生地のべたつきが抑制された。また、分岐α−グルカンを配合することで、クッキーの硬さが増し、割れにくいクッキーとなり、カリカリとした食感のクッキーとなることが明らかとなった。以上のことから、本分岐α−グルカンには、クッキー生地のべたつきを抑制し、クッキーを割れにくくし、食感を改良する効果があることが明らかとなった。この結果は、ソフトクッキーやビスケットの場合であってもほぼ同様であった。【0221】
本品は、クッキー中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有する。よって本品は、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンはクッキーの硬さを向上させる効果があり、味、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例35】
【0222】
＜高脂肪食品（から揚げ）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるから揚げを製造した。市販のから揚げ粉に対して、重量比で分岐α−グルカン１を３％、５％、１０％を添加し、混合した。これらを鶏もも肉（脂肪酸約５質量％含有）１００ｇあたり１０ｇまぶして、１７０℃の熱した油（脂肪酸１００質量％）で常法によりから揚げを得た。分岐α−グルカン１を３％、５％、１０％を添加したから揚げ粉を用いて得られたから揚げを、それぞれから揚げＡ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない市販のから揚げ粉を用いて対照のからあげを得た。
【0223】
から揚げＡ、Ｂ、Ｃは、分岐α−グルカン１を配合しない対照のから揚げと比較して、食感がカリッとしていた。よって、本分岐α−グルカンには、から揚げ等のフライ食品に対する食感改良効果（クリスピー感の向上効果）があることが明らかとなった。なお、製造例２に示す方法で得た分岐α−グルカン２を添加したから揚げ粉を用いて得たから揚げも、同様に、食感がカリッとしたから揚げであった。【0224】
本品は、から揚げ中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有するので、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンは味、香り、色等に悪い影響を及ぼさないだけでなく、から揚げの食感（クリスピー感）も向上させるため、本品はから揚げ本来の風味やうま味を保持し、食感が改良された、摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例36】
【0225】
＜高脂肪食品（天ぷら）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品である天ぷらを製造した。市販の天ぷら粉に対して、重量比で分岐α−グルカン１を５％、１０％、１５％を添加し、得られた粉を具材にまぶして、１７０℃の熱した油（脂肪酸１００質量％）で常法により天ぷらを得た。分岐α−グルカン１を５％、１０％、１５％を添加した天ぷら粉を用いて得られた天ぷらを、それぞれ天ぷらＡ、Ｂ、Ｃとした。また、分岐α−グルカン１を添加しない市販の天ぷら粉を用いて対照の天ぷらを得た。
【0226】
天ぷらＡ、Ｂ、Ｃの製造において、分岐α−グルカン１を配合しない対照の天ぷらと比較して、食感もカリッとしていたことから、本分岐α−グルカンには、天ぷらの食感改良効果（クリスピー感の向上効果）があることが明らかとなった。【0227】
本品は、本分岐α−グルカンを含有するので、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンは味、香り、色等に悪い影響を及ぼさないだけでなく、天ぷらの食感（クリスピー感）も向上させるため、本品は天ぷら本来の風味やうま味を保持し、食感が改良された、摂取しやすい高脂肪食品である。【実施例37】
【0228】
＜高脂肪食品（ケーキ）＞製造例１に示す方法で得た分岐α−グルカン１粉末を用いて、本発明の高脂肪食品であるスポンジケーキを製造した。バター（脂肪酸約８０質量％含有）７０ｇ、砂糖２５０ｇ、薄力粉１７５ｇ、全卵３５０ｇに、分岐α−グルカン１を８ｇまたは１６ｇを常法により混合し、スポンジ生地を得た。得られた生地を冷却後、適当な大きさにカットし、オーブンにて１８０℃で３０分間焼成した後、冷却してスポンジケーキを得た。分岐α−グルカン１を８ｇ、１６ｇ混合して得られたスポンジケーキを本発明のスポンジケーキＡ、Ｂとした。また、分岐α−グルカン１を混合しない点以外は上記スポンジ生地と同じスポンジ生地を用いて対照のスポンジケーキを製造した。
【0229】
製造時において、スポンジケーキＡおよびＢは、対照のスポンジケーキと比較して、生地のべたつきが抑制された。また、分岐α−グルカン１を配合することで、口どけが良く、軽い食感となり、しっとり感が向上することが明らかとなった。この結果は、マフィンやパウンドケーキの場合であっても同様であった。以上のことから、本分岐α−グルカンは、ケーキやマフィンの生地のべたつきを抑制することができ、製造効率を上げ、得られるケーキ等の食感を改良する効果があることが明らかとなった。【0230】
本品は、ケーキ中に含まれる脂肪酸含量に対し、本分岐α−グルカンを水溶性食物繊維換算で２質量％以上含有する。よって本品は、これを摂取しても脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品である。さらに本品は本分岐α−グルカンを含有するので、摂取することで便通改善効果があり、少ない食事量であっても高い満腹感を得ることができるので、摂食抑制（食事量と摂取カロリーの低減）につながり、この点からも脂肪肝などの生活習慣病が惹起される可能性の低い優れた高脂肪食品であるといえる。また、本分岐α−グルカンはケーキの食感を向上させる効果があり、味、香り、食感等の風味に悪い影響を及ぼさないため、摂取しやすい高脂肪食品である。【産業上の利用可能性】
【0231】
本発明の抗生活習慣病用剤、経口組成物、及び高脂肪食品は、摂取することにより、脂肪肝などの生活習慣病を効果的に予防又は改善することができる。本発明の抗生活習慣病用剤、経口組成物及び高脂肪食品は、便通改善剤、満腹感持続剤、潰瘍性大腸炎予防剤等としても利用でき、食生活が欧風化し、高齢化が進みつつある現代において、本発明の産業上の利用可能性は多大である。