特許 6482458 ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ（ＡＳＢＩ）およびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6482458

(24)【登録日】2019年2月22日

(45)【発行日】2019年3月13日

(54)【発明の名称】ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ（ＡＳＢＩ）およびその使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/352 20060101AFI20190304BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20190304BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20190304BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/352

   A61P25/28

   A61P43/00 111

【請求項の数】25

【全頁数】77

(21)【出願番号】特願2015-501819(P2015-501819)

(86)(22)【出願日】2013年3月15日

(65)【公表番号】特表2015-510941(P2015-510941A)

(43)【公表日】2015年4月13日

(86)【国際出願番号】US2013032481

(87)【国際公開番号】WO2013142370

(87)【国際公開日】20130926

【審査請求日】2016年3月11日

【審判番号】不服2017-18032(P2017-18032/J1)

【審判請求日】2017年12月5日

(31)【優先権主張番号】61/612,848

(32)【優先日】2012年3月19日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/728,688

(32)【優先日】2012年11月20日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】513038668

【氏名又は名称】バック・インスティテュート・フォー・リサーチ・オン・エイジング

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】ヴァーゲス・ジョン

(72)【発明者】

【氏名】デイル・イー・ブレーデセン

【合議体】

【審判長】 村上 騎見高

【審判官】 穴吹 智子

【審判官】 藤原 浩子

(56)【参考文献】

【文献】 ＣＨＯ， Ｊｕｎｇ Ｋｅｕｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐｒｅｎｙｌａｔｅｄ ｆｌａｖｏｎｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｔｅｍ ｂａｒｋ ｏｆ Ｍｏｒｕｓ ｌｈｏｕ ｏｎ β−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ（ＢＡＣＥ−１），Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０１１年，Ｖｏｌ．２１， Ｎｏ．１０，ｐ．２９４５−２９４８

【文献】 ＳＨＩＭＭＹＯ， Ｙｏｓｈｉａｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｆｌａｖｏｎｏｌｓ ａｎｄ ｆｌａｖｏｎｅｓ ａｓ ＢＡＣＥ−１ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ： Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｉｎ ｃｅｌｌ−ｆｒｅｅ， ｃｅｌｌ−ｂａｓｅｄ ａｎｄ ｉｎ ｓｉｌｉｃｏ ｓｔｕｄｉｅｓ ｒｅｖｅａｌ ｎｏｖｅｌ ｐｈａｒｍａｃｏｐｈｏｒｅ ｆｅａｔｕｒｅｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ，２００８年，Ｖｏｌ．１７８０， Ｎｏ．５，ｐ．８１９−８２５

【文献】 ＳＥＲＭＢＯＯＮＰＡＩＳＡＲＮ， Ｔｈｉｅｎｄａｎａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｂｕｔｙｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｒｏｍ Ｆｉｃｕｓ ｆｏｖｅｏｌａｔａ，Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａ，２０１２年，Ｖｏｌ．８３， Ｎｏ．４，ｐ．７８０−７８４

【文献】 ＧＵＯ， Ａｖａ Ｊ．Ｙ． ｅｔ ａｌ．，Ｇａｌａｎｇｉｎ， ａ ｆｌａｖｏｎｏｌ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ Ｒｈｉｚｏｍａ Ａｌｐｉｎｉａｅ Ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ， ｉｎｈｉｂｉｔｓ ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅｓｔｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ，Ｃｈｅｍｉｃｏ−Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，２０１０年，ｐ．２４６−２４８

【文献】 添付文書，アリセプト，２００９年 ７月，第２０版，インターネット＜ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｄｒｃ．ｔｏｙａｋｕ．ａｃ．ｊｐ／ｐａｃｋｉｎｓ／ｐｄｆ／１７００３３／１７００３３＿１１９００１２Ｃ１０２０＿１＿１６／１７００３３＿１１９００１２Ｃ１０２０＿１＿１６．ｐｄｆ＞

【文献】 最新 創薬化学 下巻，株式会社 テクノミック，１９９９年 ９月２５日，ｐ．２７５−２７６

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

ＣＡＰＬＵＳ

ＲＥＧＩＳＴＲＹ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

前アルツハイマー病疾患および／または認知機能障害の開始を防止するもしくは遅延させる、または前アルツハイマー病疾患または認知機能障害からアルツハイマー病への進行を防止するもしくは遅延させるための、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）であって、前記ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤は、哺乳類に投与される際にガランギンに処理されるガランギンプロドラッグであり、前記ガランギンプロドラッグは、式：

【化1】

で表され、
式中、
Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３は、Ｈまたは

【化2】

からなる群から選択される保護基であり、
Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３の少なくとも１つはＨではなく、
前記プロドラッグは、哺乳類に投与される際ＢＡＣＥによるＡＰＰ処理を部分的または完全に阻害する、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項2】

Ｒ^１がＨである、請求項１に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項3】

Ｒ^２および／またはＲ^３が

【化3】

である、請求項１または２に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項4】

Ｒ^２およびＲ^３がともに

【化4】

である、請求項３に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項5】

Ｒ^２および／またはＲ^３が

【化5】

である、請求項１または２に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項6】

Ｒ^２およびＲ^３がともに

【化6】

である、請求項５に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項7】

Ｒ^２および／またはＲ^３が

【化7】

である、請求項１または２のいずれかに記載のＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項8】

Ｒ^２およびＲ^３がともに

【化8】

である、請求項７に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項9】

Ｒ^２および／またはＲ^３が

【化9】

である、請求項１または２に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項10】

Ｒ^２およびＲ^３がともに

【化10】

である、請求項９に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項11】

Ｒ^２および／またはＲ^３が

【化11】

である、請求項１または２に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項12】

Ｒ^２およびＲ^３が、ともに

【化12】

である、請求項１１に記載の、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）。

【請求項13】

前アルツハイマー病疾患および／または認知機能障害の開始を防止するもしくは遅延させる、または前アルツハイマー病疾患または認知機能障害からアルツハイマー病への進行を防止するもしくは遅延させるための医薬の製造における、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）の使用。

【請求項14】

前記医薬が、認知的に無症状の前アルツハイマー病疾患から前アルツハイマー病認知機能障害への移行を防止するまたは遅延させるためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項15】

前記医薬が、前アルツハイマー病認知機能障害の開始を防止するまたは遅延させるためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項16】

前記医薬が、前アルツハイマー病認知機能障害のアルツハイマー病への進行を防止するまたは遅延させるためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項17】

前記医薬が、ＭＣＩのアルツハイマー病への進行を防止もしくは遅延させるためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項18】

前記医薬が、Αβの陽性生体指標を示す臨床的に正常な５０歳以上のヒト対象のためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項19】

前記医薬が、無症状の脳アミロイド症とともに場合によって下流神経変性および／または認識・行動低下を示す対象のためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項20】

前記医薬が、軽度の認知機能障害と診断された対象のためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項21】

前記医薬が、
アルツハイマー病を発症する危険性がある対象；および／または
アルツハイマー病を発症する家族性の危険性を有する対象；および／または
家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）の突然変異を有する対象；および／または
ＡＰＯＥε４対立遺伝子を有する対象
のためのものである、請求項１３に記載の使用。

【請求項22】

前記医薬が、
前記ＡＳＢＩを主要活性成分とする製剤処方である；および／または
前記ＡＳＢＩを唯一の薬剤的活性成分とする製剤処方である、
請求項１３〜２１のいずれか一項に記載の使用。

【請求項23】

前記医薬が、全タウ（ｔＴａｕ）、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、人工アミロイド前駆体タンパク（ＡＰＰｎｅｏ）、可溶性Αβ４０、リン酸化タウ／Αβ４２比率および全タウ／Αβ４２比率からなる群から選択される１つ以上の成分におけるＣＳＦの値の減少および／またはΑβ４２／Αβ４０比率、Αβ４２／Αβ３８比率、ｓＡＰＰα、ｓＡＰＰα／ｓＡＰＰβ比率、ｓＡＰＰα／Αβ４０比率およびｓＡＰＰα／Αβ４２比率からなる群から選択される１つ以上の成分におけるＣＳＦの値の増加を生じさせる、請求項１３〜２２のいずれか一項に記載の使用。

【請求項24】

前記医薬が、対象の脳におけるプラーク負荷の減少を生じさせる；および／または
前記医薬が、対象の脳におけるプラーク形成の速度の減少を生じさせる；および／または
前記医薬が、対象の臨床的認知症等級（ＣＤＲ）の改善、安定または減退速度の低減を生じさせる；および／または
前記医薬が、脳アミロイド症、および／または下流神経変性の減少を生じさせる、
請求項１３〜２３のいずれか一項に記載の使用。

【請求項25】

前記ＡＳＢＩが経口投与、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与および直腸投与からなる群から選択される経路によって投与されるために調剤される、請求項１３〜２４のいずれか一項に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本願は２０１２年１１月２０日出願ＵＳ６１／７２８，６８８号および２０１２年３月１９日出願ＵＳ６１／６１２，８４８号の利益とそれらに対する優先権を請求するものであり、この両方は、参照することによってその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

政府による後援の声明
本発明は国立衛生研究所の国立老化研究所による助成Ｒ０１ＡＧ０３４４２７号によって一部が後援された。政府は本発明において一定の権利を有する。

【背景技術】

【0003】

アミロイドβペプチド（Ａβ）はβアミロイド線維とプラークの主要な構成要素であり、ますます多くの病理に関与するものとされている。病理の例としては、アルツハイマー病、ダウン症、パーキンソン病、記憶喪失（アルツハイマー病およびパーキンソン病に伴う記憶喪失を含む）、注意欠陥症状（アルツハイマー病、パーキンソン病およびダウン症に伴う注意欠陥症状を含む）、認知症（若年性認知症、老年性認知症、およびアルツハイマー病、パーキンソン病、ダウン症に伴う認知症を含む）、進行性核上麻痺、皮質基底核変性症、神経変性、嗅覚障害（アルツハイマー病、パーキンソン病、ダウン症に関連する嗅覚障害を含む）、βアミロイド血管症（脳アミロイド血管症を含む）、遺伝性脳出血、軽度認識障害（ＭＣＩ）、緑内障、アミロイド症、ＩＩ型糖尿病、血液透析（β２ミクログロブリンおよび合併症を引き起こす）、スクレピー、牛海綿状脳炎、クロイツフェルト・ヤコブ病、外傷性脳損傷および同類のものを含むが、これに限られない。

【0004】

Ａβペプチドは、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）と呼ばれる膜貫通タンパク質のタンパク質分解によって生成される短いペプチドである。Ａβペプチドは、ＡβのＮ末端付近におけるβセクレターゼ作用およびＡβのＣ末端付近におけるガンマセクレターゼ作用によるＡＰＰの切断から作られる（ＡＰＰの切断はαセクレターゼ作用によっても生じ、可溶性ＡＰＰαとして知られる非アミロイド生成性断片の分泌をもたらす）。βサイトＡＰＰ切断酵素（ＢＡＣＥ−１）はβセクレターゼ作用によるＡβ生成に関与する主要なアスパルチルプロテアーゼとされている。ＢＡＣＥ−１の阻害はＡβの生成を阻害することが示されている。

【0005】

アルツハイマー病（ＡＤ）は世界中で２千万人が罹患していると推定され、認知症の最大の原因であるとされている。世界的な高齢化が進むにつれ、アルツハイマー病（ＡＤ）患者数は、現在アメリカでおよそ５４０万人であるが、増え続けるだろう。アルツハイマー病は進行性認知症および記憶喪失を伴う神経変性病である。ＡＤの２つの主要な特徴は、凝集Ａβペプチドを含む細胞外沈着物の蓄積と脳の特定領域のＡＤにおけるニューロンのシナプス損失である。ＡＤの発病原因は複雑であるものの、有力な遺伝学的および生化学的根拠が、Ａβの過剰生成あるいはこのペプチドの除去の失敗が、主としてアミロイド沈着を通してＡＤを引き起こすアミロイドカスケードにおける最初の事象であることを示唆しており、また、アミロイド沈着は、ＡＤ罹患の脳組織を特徴付ける、神経原線維変化の生成、ニューロン機能障害およびミクログリア活性化に関与するとされている。

【0006】

有力な遺伝的生化学的な根拠によって理解されるように、Ａβの蓄積は神経変性をもたらす複雑なカスケードの最初の事象であるとされている。アミロイドカスケード仮説（ＨａｒｄｙおよびＡｌｌｓｏｐ（１９９１）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，１２：３８３−３８８；Ｓｅｌｋｏｅ（１９９６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１：１８２９５−１８２９８；Ｈａｒｄｙ（１９９７）Ｔｒｅｎｄｓ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２０：１５４−１５９；ＨａｒｄｙおよびＳｅｌｋｏｅ（２００２） Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９７：３５３−３５６）は、Ａβの過剰生成あるいはこのペプチドの除去の失敗は、主としてアミロイド沈着を通してＡＤを引き起こし、アミロイド沈着は、ＡＤ罹患の脳組織の特徴である、神経原線維変化の生成、ニューロン機能障害、およびミクログリア活性化に関与するとされていると述べている（Ｂｕｓｃｉｇｌｉｏら（１９９５）Ｎｅｕｒｏｎ，１４：８７９−８８８；Ｇｏｔｚら（１９９５）ＥＭＢＯ Ｊ．，１４：１３０４−１３１３；Ｌｅｗｉｓら（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９３：１４８７−１４９１；Ｈａｒｄｙら（１９８５）Ｎａｔ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．， １：３５５−３５８）。

【0007】

ＡＤの病因におけるＡβの原因としての働きをふまえ、Ａβレベルを下げるまたは神経毒性Ａβ種の生成を防止する新しい治療法が、この疾患の発症防止あるいは進行阻害のための方法として提言されている。実際に、ここ十年の主要な焦点は脳のＡβ生成と凝集の阻害、実質性Ａβ除去の増強、およびＡβが引き起こす細胞死滅の防止である。

【0008】

膜結合性のプロテアーゼβセクレターゼおよびγセクレターゼによるＡＰＰの一連の切断はＡβの生成をもたらす。βセクレターゼ経路に競合するタンパク質分解経路、αセクレターゼ経路はＡβドメイン内におけるＡＰＰの切断をもたらし、それによってＡβの生成を不可能にする（Ｓｅｌｋｏｅ（２００１）Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．， ８１：７４１−７６６ Ｈｕｓｓａｉｎら（１９９９）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１４：４１９−４２７；Ｓｉｎｈａら（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ，４０２：５３７−５４０；Ｖａｓｓａｒら（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８６：７３５−７４１）。βサイトＡＰＰ切断酵素−１（ＢＡＣＥ１）はβアミロイド生成性経路（同文献）におけるＡＰＰの第１の切断を解決する主要なβセクレターゼ作用であると特定された。

【0009】

ＢＡＣＥ１は、特にペプシン族からの真核性アスパラギン酸プロテアーゼと相同性を有する５０１アミノ酸タンパク質である（Ｙａｎら（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ，４０２： ５３３−５３７）。他のアスパラギン酸プロアテーゼと同様、ＢＡＣＥ１は、プロドメインを有するチモーゲンとして生成され、フリン（ｆｕｒｉｎ）によって切断されて、成熟タンパク質を放出する。ＢＡＣＥ１はＡＰＰに切断を生じさせ細胞外ドメイン（ｓＡＰＰβ）を細胞外空間に放出する内腔活性領域を伴うＩ型膜貫通タンパク質である。残っているＣ末端断面（ＣＴＦ）は更に遠いγセクレターゼによる切断を経て、ＡβとＡＰＰ細胞内Ｃ末端ドメイン（ＡＩＣＤ）の放出をもたらす。

【0010】

レセニリンは、その不正確なＡＰＰの切断が、Ｃ末端において数アミノ酸長だけ長さが異なる、種々のＡβを生成する、γセクレターゼの主要な酵素構成要素であると提言されている。Ａβの大半はアミノ酸４０（Ａβ４０）で終わるが、４２アミノ酸異形（Ａβ４２）は、より凝集の影響を受けやすいことが示され、老人斑形成の核となると仮定されている。γセクレターゼの調整もまた３８アミノ酸異形（Ａβ３８）の増加をもたらす。競合するαセクレターゼ経路はαおよびγセクレターゼによる連続的切断によってもたらされる。ジスインテグリンおよび金属プロアテーゼ族の３つの金属プロアテーゼ（ＡＤＡＭ９、１０、および１７）はＡβ配列において位置１６でＡＰＰに切断を生じさせるαセクレターゼ活動の候補者として提言されている。過剰発現実験を用いて、ＡＤＡＭ１０はＡＰＰの切断のαセクレターゼである可能性が高いことが示されている（Ｖａｓｓａｒ（２００２） Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．，５４：１５８９−１６０２；Ｂｕｘｂａｕｍら（１９９８）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：２７７６５−２７７６７；Ｋｏｉｋｅら（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，３４３（Ｐｔ ２）： ３７１−３７５）。この切断も、神経保護作用を示す、細胞外ドメイン（ｓＡＰＰα）を放出する（Ｌａｍｍｉｃｈら（１９９９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． ＵＳＡ，９６：３９２２−３９２７）。続く８３アミノ酸ＣＴＦ（Ｃ８３）の切断は、非アミロイド生成性のｐ３およびＡＩＣＤを放出する（Ｆｕｒｕｋａｗａら（１９９６） Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，６７：１８８２−１８９６）。これらの断片の機能は完全には解明されていないが、ＡＩＣＤは細胞間の信号伝達を媒介するという仮説が立てられている。

【0011】

アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）からのＡβ生成を調節する代謝経路を明らかにする研究は、βあるいはγセクレターゼのいずれの阻害もＡβ生成を制限するので、Ａβ生成するセクレターゼは良い治療標的であると示唆している。βセクレターゼがＡＰＰを始め、Ａβ生成において律速段階の役割を果たすという事実（により）その阻害は多くの研究群による努力を集めている。特許文献からの例の数は増えており、例えば以下を含む：Ｗ０２００６００９６５３、Ｗ０２００７００５４０４、Ｗ０２００７００５３６６、Ｗ０２００７０３８２７１、Ｗ０２００７０１６０１２、ＵＳ２００５／０２８２８２６、ＵＳ２００７０７２９２５、Ｗ０２００７１４９０３３、Ｗ０２００７１４５５６８、Ｗ０２００７１４５５６９、Ｗ０２００７１４５５７０、Ｗ０２００７１４５５７１、Ｗ０２００７１１４７７１、ＵＳ２００７０２９９０８７、Ｗ０２００５／０１６８７６、Ｗ０２００５／０１４５４０、Ｗ０２００５／０５８３１１、Ｗ０２００６／０６５２７７、Ｗ０２００６／０１４７６２、Ｗ０２００６／０１４９４４、Ｗ０２００６／１３８１９５、Ｗ０２００６／１３８２６４、Ｗ０２００６／１３８１９２、Ｗ０２００６／１３８２１７、Ｗ０２００７／０５０７２１、Ｗ０２００７／０５３５０６、Ｗ０２００７／１４６２２５、Ｗ０２００６／１３８２３０、Ｗ０２００６／１３８２６５、Ｗ０２００６／１３８２６６、Ｗ０２００７／０５３５０６、Ｗ０２００７／１４６２２５、Ｗ０２００８／０７３３６５、Ｗ０２００８／０７３３７０、Ｗ０２００８／１０３３５１、ＵＳ２００９／０４１２０１、ＵＳ２００９／０４１２０２、およびＷ０２０１０／０４７３７２。

【0012】

プロテアーゼ阻害法の欠点は、ＢＡＣＥあるいはγセクレターゼ複合体のような所与のプロアテーゼの全ての基質を阻害することである。γセクレターゼの場合、ノッチのようなＡＰＰ以外の基質はγセクレターゼ阻害の潜在的副作用および最近のγセクレターゼ阻害物質の失敗に対する懸念を生む。セマガセスタットはそのような懸念を強めている。

【0013】

ＢＡＣＥはＡβ４２の生成およびアルツハイマー病（ＡＤ）の病状をもたらすＡＰＰ処理に関与する主要酵素である。ＢＡＣＥ−１（ＢＡＣＥとも呼ばれる）はその発見以来人気を集める研究分野であり、おそらく薬剤研究において最も有望な研究対象としてγセクレターゼに勝っている。研究対象としてのγセクレターゼの問題の１つは、ニューロンの発達において重要な役割を果たすノッチの公知の切断である。プレセニリン不活性のマウスは短い体長に伴う異常な体節形成および軸骨格発達、さらに脳出血を示した（Ｓｈｅｎら（１９９７）Ｃｅｌｌ，８９：６２９−６３９；Ｗｏｎｇら（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ，３８７：２８８−２９２）。対照的に、いくつかのグループは、ＢＡＣＥ１不活性のマウスは健康で、有害作用を示さないと述べたが（Ｌｕｏら（２００１）Ｎａｔ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，４：２３１−２３２；Ｒｏｂｅｒｄｓら（２００１）Ｈｕｍ． Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，１０： １３１７−１３２４）一方で１つのグループが、生存可能で繁殖力もあるものの、そのマウスにおいてわずかな神経化学的損失および行動の変化を指摘した（Ｈａｒｒｉｓｏｎら（２００３）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２４：６４６−６５５）。昨今の研究はＢＡＣＥ１不活性マウスが末梢神経の低髄鞘形成を示すことを述べている（Ｗｉｌｌｅｍら（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ，３１４：６６４−６６６）が、髄鞘形成が既に済んでいる成獣におけるＢＡＣＥ１阻害の結果は不明瞭である。最近ＢＡＣＥ１は、ＳＴ６Ｇａｌ Ｉ、ＰＳＧＬ−１、電位依存ナトリウム・チャンネルのサブユニット、ＡＰＰ様タンパク質（ＡＰＬＰ）、ＬＤＬ受容体関連タンパク質（ＬＲＰ）および最も近年報告されたＩＩＩ型ニューレグリン１（ＮＲＧ１）（Ｗｉｌｌｅｍら（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ，３１４：６６４−６６６；Ｈｕら（２００６）Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，９：１５２０−１５２５）を含む、複数の基質に切断を生じさせると述べられている。したがって、直接ＢＡＣＥ１を阻害することの結果はまだ完全には理解されていない。

【0014】

遷移状態の反応阻害物質と複合したＢＡＣＥ−１活性領域の分子モデリング（Ｓａｕｄｅｒら（２０００）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３００：２４１−２４８）および後続のＸ線結晶学（Ｈｏｎｇら（２０００）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９０： １５０−１５３；Ｍａｉｌｌａｒｄら（２００７）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，５０：７７６−７８１）はＢＡＣＥ−１基質相互作用についての決定的な情報を提供した。構造的に、ＢＡＣＥ−１活性領域は他のアスパルチルプロアテーゼより開放で疎水性が低く、効果的な生体内におけるＢＡＣＥ反応阻害物質の候補の開発を困難にしている。ＢＡＣＥ直接反応阻害物質開発に向けられた薬品発見への大きな努力がある一方で、未だにいずれも臨床試験において著しい進展を見せていない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0015】

【特許文献1】Ｗ０２００６／００９６５３

【特許文献2】Ｗ０２００７／００５４０４

【特許文献3】Ｗ０２００７／００５３６６

【特許文献4】Ｗ０２００７／０３８２７１

【特許文献5】Ｗ０２００７／０１６０１２

【特許文献6】ＵＳ２００５／０２８２８２６

【特許文献7】ＵＳ２００７／０７２９２５

【特許文献8】Ｗ０２００７／１４９０３３

【特許文献9】Ｗ０２００７／１４５５６８

【特許文献10】Ｗ０２００７／１４５５６９

【特許文献11】Ｗ０２００７／１４５５７０

【特許文献12】Ｗ０２００７／１４５５７１

【特許文献13】Ｗ０２００７／１１４７７１

【特許文献14】ＵＳ２００７／０２９９０８７

【特許文献15】Ｗ０２００５／０１６８７６

【特許文献16】Ｗ０２００５／０１４５４０

【特許文献17】Ｗ０２００５／０５８３１１

【特許文献18】Ｗ０２００６／０６５２７７

【特許文献19】Ｗ０２００６／０１４７６２

【特許文献20】Ｗ０２００６／０１４９４４

【特許文献21】Ｗ０２００６／１３８１９５

【特許文献22】Ｗ０２００６／１３８２６４

【特許文献23】Ｗ０２００６／１３８１９２

【特許文献24】Ｗ０２００６／１３８２１７

【特許文献25】Ｗ０２００７／０５０７２１

【特許文献26】Ｗ０２００７／０５３５０６

【特許文献27】Ｗ０２００７／１４６２２５

【特許文献28】Ｗ０２００６／１３８２３０

【特許文献29】Ｗ０２００６／１３８２６５

【特許文献30】Ｗ０２００６／１３８２６６

【特許文献31】Ｗ０２００７／０５３５０６

【特許文献32】Ｗ０２００７／１４６２２５

【特許文献33】Ｗ０２００８／０７３３６５

【特許文献34】Ｗ０２００８／０７３３７０

【特許文献35】Ｗ０２００８／１０３３５１

【特許文献36】ＵＳ２００９／０４１２０１

【特許文献37】ＵＳ２００９／０４１２０２

【特許文献38】Ｗ０２０１０／０４７３７２

【非特許文献】

【0016】

【非特許文献1】ＨａｒｄｙおよびＡｌｌｓｏｐ（１９９１）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，１２：３８３−３８８；

【非特許文献2】Ｓｅｌｋｏｅ（１９９６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７１：１８２９５−１８２９８；

【非特許文献3】Ｈａｒｄｙ（１９９７）Ｔｒｅｎｄｓ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２０：１５４−１５９

【非特許文献4】ＨａｒｄｙおよびＳｅｌｋｏｅ（２００２） Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９７：３５３−３５６

【非特許文献5】Ｂｕｓｃｉｇｌｉｏら（１９９５）Ｎｅｕｒｏｎ，１４：８７９−８８８

【非特許文献6】Ｇｏｔｚら（１９９５）ＥＭＢＯ Ｊ．，１４：１３０４−１３１３

【非特許文献7】Ｌｅｗｉｓら（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９３：１４８７−１４９１

【非特許文献8】Ｈａｒｄｙら（１９８５）Ｎａｔ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．， １：３５５−３５８

【非特許文献9】Ｓｅｌｋｏｅ（２００１）Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．， ８１：７４１−７６６

【非特許文献10】Ｈｕｓｓａｉｎら（１９９９）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１４：４１９−４２７

【非特許文献11】Ｓｉｎｈａら（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ，４０２：５３７−５４０

【非特許文献12】Ｖａｓｓａｒら（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８６：７３５−７４１

【非特許文献13】Ｙａｎら（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ，４０２： ５３３−５３７

【非特許文献14】Ｖａｓｓａｒ（２００２） Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．，５４：１５８９−１６０２

【非特許文献15】Ｂｕｘｂａｕｍら（１９９８）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７３：２７７６５−２７７６７

【非特許文献16】Ｋｏｉｋｅら（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．，３４３（Ｐｔ ２）： ３７１−３７５

【非特許文献17】Ｌａｍｍｉｃｈら（１９９９）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． ＵＳＡ，９６：３９２２−３９２７

【非特許文献18】Ｆｕｒｕｋａｗａら（１９９６） Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，６７：１８８２−１８９６

【非特許文献19】Ｓｈｅｎら（１９９７）Ｃｅｌｌ，８９：６２９−６３９

【非特許文献20】Ｗｏｎｇら（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ，３８７：２８８−２９２

【非特許文献21】Ｌｕｏら（２００１）Ｎａｔ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，４：２３１−２３２

【非特許文献22】Ｒｏｂｅｒｄｓら（２００１）Ｈｕｍ． Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，１０： １３１７−１３２４

【非特許文献23】Ｈａｒｒｉｓｏｎら（２００３）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２４：６４６−６５５

【非特許文献24】Ｗｉｌｌｅｍら（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ，３１４：６６４−６６６

【非特許文献25】Ｈｕら（２００６）Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，９：１５２０−１５２５

【非特許文献26】Ｓａｕｄｅｒら（２０００）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３００：２４１−２４８

【非特許文献27】Ｈｏｎｇら（２０００）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９０： １５０−１５３

【非特許文献28】Ｍａｉｌｌａｒｄら（２００７）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，５０：７７６−７８１

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0017】

ＬＹ２８１１３７６やＣＴＳ２１１６６のようないくつかのＢＡＣＥ反応阻害物質が臨床試験を受けたが、安全性の理由で第一相を超えて進まなかった。ＢＡＣＥの他の生理的基質の発見は、ＢＡＣＥ反応阻害物質あるいはＢＡＣＥ調節因子の臨床開発における主要な懸念を生み、この疾患に対する治療としてのこれらの反応阻害物質の発展においての大きな障害となりうる。

【課題を解決するための手段】

【0018】

ある特定の実施形態において、フラボノイドおよびその誘導体または類似体（およびそのプロドラッグ）がＡＰＰ特異性の（またはＡＰＰ選択的な）ＢＡＣＥ反応阻害物質（ＡＳＢＩ）として働くと考えられるものとして特定される。様々な実施形態において、フラボノイドは、式：

【0019】

【化1】

【0020】

によって特徴付けることができ、
式中Ｒ^１は、ＯＨ、Ｏ−サッカリド、Ｏ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｏ−アリール、Ｏ−ヘテロアリール、およびカルバミン酸塩からなる群から選択され、
Ｒ^４およびＲ^５は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｏ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｓ−アルキル、Ｓ−アリール、カルボン酸塩、ハロゲン、ＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨＣＯ−アルキルおよびヘテロアリール、アルキル尿素およびカルバミン酸塩からなる群から独立的に選択され、Ｒ^２およびＲ^３は、Ｈ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｏ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｓ−アルキル、Ｓ−アリール、カルボン酸塩、ハロゲン、ＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨＣＯ−アルキル、ヘテロアリール、アルキル尿素、およびカルバミン酸塩からなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２はＯＨであり、Ｒ^３はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３は、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される（例えば、当該Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルのアルキル構成要素はＣ_１−１２アルキル、またはＣ_１−９アルキル、またはＣ_１−６アルキル、またはＣ_１−３アルキルである）。ある特定の実施形態においてＲ^２および／またはＲ^３はハロゲンである（例Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆｌ、Ｉ、など）。ある特定の実施形態においてＲ^２はハロゲンであり、Ｒ^３はハロゲンである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はＣｌ、Ｂｒ、Ｆｌ、およびＩからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３は、Ｓ−アリールおよびヘテロアリールからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は独立的に選択されるＳ−アリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は独立的に選択されるヘテロアリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／または、Ｒ^５はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はＨであり、Ｒ^５はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はＯＨであり、Ｒ^５はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はＯＨであり、Ｒ^５はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はＨであり、Ｒ^５はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５がＯＨである場合、Ｒ^１はＯ−サッカリドである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＯ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^４およびＲ^５は、Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキル、およびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される（例えば、当該Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルのアルキル構成要素はＣ_１−１２アルキル、またはＣ_１−９アルキル、あるいはＣ_１−６アルキル、あるいはＣ_１−３アルキルである）。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はハロゲンである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はハロゲンであり、Ｒ^５はハロゲンである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆｌ、およびＩからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５は、Ｓ−アリールおよびヘテロアリールからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^４およびＲ^５は独立的に選択されるＳ−アリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４およびＲ^５は独立的に選択されるヘテロアリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＯ−サッカリドである（例えば、Ｏ−単糖、Ｏ−二糖、Ｏ−三糖）。ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＯ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｏ−アリール、あるいは、Ｏ−ヘテロアリールである。ある特定の実施形態において、ＡＰＰ特異性の（または選択的な）ＢＡＣＥ反応阻害物質はガランギンまたはその誘導体である。ある特定の実施形態において、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤はガランギンである。ある特定の実施形態において、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤はルチンあるいはその誘導体である。ある特定の実施形態において、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤はルチンである。

【0021】

様々な実施形態においてＡＳＢＩプロドラッグが提供される。ある特定の実施形態において、プロドラッグは哺乳類に投与されると、処理されてガランギンとなる、ガランギンプロドラッグである。実例となるガランギンプロドラッグは、限定されないが、式：

【0022】

【化2】

【0023】

により特徴づけられるガランギンプロドラッグであり、
式中、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３はＨ、あるいは、哺乳類の体内において除去される保護基であり、Ｒ^１、Ｒ^２、およびＲ^３の１つ以上がＨではなく、当該プロドラッグは、哺乳類に投与された場合、ＡＰＰのＢＡＣＥ処理を部分的あるいは完全に阻害する。ある特定の実施形態において、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３の１つ以上が次からなる群から独立的に選択される。

【0024】

【化3】

【0025】

ある特定の実施形態においてＲ^１はＨであり、Ｒ^２およびＲ^３は同一あるいは異なり、上記の群のいかなる組み合わせからも構成される。ある特定の実施形態においてプロドラッグは図１および／または図２に示す式を有する。

【0026】

ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは製剤処方として提供され、ここで、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは主要活性成分である。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは唯一の薬剤的活性成分である（例えば、薬剤作用がＢＡＣＥの阻害である）。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは製剤処方において提供され、ここで神経薬理学的作用あるいは精神神経的作用のために提供される成分が他にはない。

【0027】

ある特定の実施形態において、前アルツハイマー病疾患および／または認知機能障害の発症を防止するもしくは遅延させる、および／または１つ以上の前アルツハイマー病疾患および／または認知機能障害を改善する、または前アルツハイマー病疾患もしくは認知機能障害の進行を防止するまたは遅延させるための方法が提供される。方法は典型的に、前アルツハイマー認知機能障害の発症を防止するまたは遅延させるおよび／または前アルツハイマー認知機能障害の１つ以上の症状を改善するおよび／または前アルツハイマー認知機能障害からアルツハイマー病への進行を防止するまたは遅延させるために十分な量のＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）および／またはＡＳＢＩプロドラッグを必要とする対象へ投与すること（または投与を引き起こすこと）を含む。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグはＡＳＩフラボノイドおよび／または本明細書に記載されるようにＡＳＢＩプロドラッグを含む（例えば、上記の通り）。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩはガランギンであり、および／またはＡＳＢＩプロドラッグはガランギンプロドラッグである。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグ（例えば、ガランギンおよび／またはガランギンプロドラッグ）は製剤処方において投与され、ここでＡＳＢＩは主要活性要素である。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグ（例えば、ガランギンおよび／またはガランギンプロドラッグ）は製剤処方において投与され、ここでＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは唯一の薬剤的活性成分である。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグ（例えば、ガランギンおよび／またはガランギンプロドラッグ）は製剤処方において投与され、神経薬理学的作用あるいは精神神経的作用のために提供される他の物質はない。ある特定の実施形態において、方法は、認知的に無症状の前アルツハイマー病疾患から前アルツハイマー病認知機能障害への移行を防止するまたは遅延させる方法である。ある特定の実施形態において、方法は、前アルツハイマー病認知機能障害の発病を防止するまたは遅延させる方法である。ある特定の実施形態において、方法は１つ以上の前アルツハイマー病認知機能障害症状の改善を含む。ある特定の実施形態において、方法は、前アルツハイマー病認知機能障害からアルツハイマー病への進行の防止することまたは遅延させることを含む。ある特定の実施形態において、対象は、臨床的標準人体罹患年齢である、５０歳以上、５５歳以上、６０歳以上、６５歳以上、７０歳以上、７５歳以上、８０歳以上においてＡβのバイオマーカー陽性を示す。ある特定の実施形態において、対象は無症状の脳アミロイド症を示す。ある特定の実施形態において、対象は下流神経変性と複合した脳アミロイド症を示す。ある特定の実施形態において、対象は下流神経変性と複合した脳アミロイド症およびわずかな認知／行動減退を示す。ある特定の実施形態において、下流神経変性は、タウおよびＦＤＧ摂取からなる群から選択されるニューロン損傷マーカーの１つ以上の上昇によって決定づけられる。ある特定の実施形態において、脳アミロイド症はＰＥＴ、またはＣＳＦ分析および／または構造ＭＲＩ（ｓＭＲＩ）によって決定づけられる。ある特定の実施形態において、対象は、軽度認知機能障害と診断された対象である。ある特定の実施形態において、対象はゼロ超から約１．５等級未満の臨床的認知症を示す。ある特定の実施形態において、対象はヒトである。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病を発病する危険性がある。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病にかかる家族性の危険性を有する。ある特定の実施形態において、対象は、家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）変異を有する。ある特定の実施形態において、対象はＡＰＯＥε４対立遺伝子を有する。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグの投与は、ＭＣＩのアルツハイマー病への進行を遅延させるまたは防止する。ある特定の実施形態において、対象はパーキンソン病もしくは統合失調症を有さず、またその遺伝的な危険因子を持たない。ある特定の実施形態において、対象はパーキンソン病もしくは統合失調症と診断されていない、またはその危険性を持たない。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病以外の神経疾患あるいは障害の危険性を有すると診断されない。ある特定の実施形態において、投与は全タウ（ｔＴａｕ）、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、ＡＰＰネオ、可溶性Ａβ４０、ｐＴａｕ／Ａβ４２比率およびｔＴａｕ／Ａβ４２比率からなる群から選択される１つ以上の要素のレベルの、ＣＳＦにおける減少および／またはＡβ４２／Ａβ４０比率、Ａβ４２／Ａβ３８比率、ｓＡＰＰα、ｓＡＰＰα／ｓＡＰＰβ比率、ｓＡＰＰα／Ａβ４０比率、およびｓＡＰＰα／Ａβ４２比率からなる群から選択される１つ以上の要素のレベルの、ＣＳＦにおける上昇を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は、対象の脳におけるプラーク負荷の減少を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は対象の脳におけるプラーク形成の速度の減少を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は対象の認知能力における改善を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は、対象の臨床的認知症等級（ＣＤＲ）の改善、安定化、若しくは減退速度の低減を生じさせる。ある特定の実施形態において、対象はヒトであり、投与は、その本人によって認識される改善を生じさせる。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、経口送達、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール送達、吸入送達、静脈内送達、目への局所送達、眼内注射、および直腸送達からなる群から選択される経路を経由して投与される。ある特定の実施形態において、化合物は経口投与される。ある特定の実施形態において、投与期間は少なくとも３週間にわたる、または６カ月にわたる、または１年にわたる。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグはイソフォレーシス送達、経皮送達、エアロゾール投与、吸入投与、経口投与、静脈内投与、目への局所送達、眼内注射、および直腸投与からなる群から選択される経路を通して投与されるように調剤される。ある特定の実施形態において、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、タクリンイピダクリン、ガランタミン、ドネペジル、イコペジル、ザナペジル、リバスティグミン、ナメンダ、フペルジンＡ、フェンセリン、フィゾスチグミン、ネオスチグミン、ピリドスチグミン、アンベノニウム、デマルカリウム、エドロホニウム、ラドスチギルおよびウンゲレミン、メトリフォナート等）は、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグと同時に投与されない。

【0028】

様々な実施形態において、アルツハイマー病の１つ以上の症状を改善する、および／またはアルツハイマー病を回復に向かわせる、および／またはアルツハイマー病進行の速度を減少させる方法が提供される。方法は典型的に、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）および／またはＡＳＢＩプロドラッグを、アルツハイマー病の１つ以上の症状を改善する、および／またはアルツハイマー病を回復に向かわせる、および／またはアルツハイマー病進行の速度を減少させるのに十分な量で、それを必要とする対象に対する投与すること（あるいは投与を引き起こすこと）を含む。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、ＡＳＢＩフラボノイドおよび／または本明細書に記載されるＡＳＢＩプロドラッグ（例えば、上記の通り）を含む。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩはガランギンであり、および／またはＡＳＢＩプロドラッグはガランギンプロドラッグである（例えば、図１および／または図２に示すプロドラッグ）。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＩＢプロドラッグは製剤処方によって投与され、ここでＡＳＢＩ、および／またはＡＳＢＩプロドラッグは主要活性成分である。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは製剤処方によって投与され、ここでＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは唯一の薬剤的活性成分である。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは製剤処方によって投与され、ここで神経薬理学的作用あるいは精神神経的作用のために提供される成分が他にはない。ある特定の実施形態において、対象はヒト（あるいはヒト以外の哺乳類）である。ある特定の実施形態において、対象は、５０歳以上、５５歳以上、６０歳以上、６５歳以上、７０歳以上、７５歳以上、あるいは８０歳以上のヒトである。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病の初期段階であると診断されている。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病の中期段階であると診断されている。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病の後期段階であると診断されている。ある特定の実施形態において、投与はアルツハイマー病の重症度を低減する。ある特定の実施形態において、投与はアルツハイマー病の１つ以上の症状を改善する。ある特定の実施形態において、投与はアルツハイマー病の進行速度を減少させる。ある特定の実施形態において、投与は、全タウ（ｔＴａｕ）、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、ＡＰＰネオ、可溶性Ａβ４０、ｐＴａｕ／Ａβ４２比率およびｔＴａｕ／Ａβ４２比率からなる群から選択される１つ以上の要素のレベルのＣＳＦにおける減少および／またはＡβ４２／Ａβ４０比率、Ａβ４２／Ａβ３８比率、ｓＡＰＰα、ｓＡＰＰα／ｓＡＰＰβ比率、ｓＡＰＰα／Ａβ４０比率、およびｓＡＰＰα／Ａβ４２比率からなる群から選択される１つ以上の要素のレベルのＣＳＦにおける上昇をもたらす。認知的に無症状の前アルツハイマー病疾患から全アルツハイマー病認知機能障害への移行を防止するまたは遅延させる方法である。ある特定の実施形態において、投与は対象の脳におけるプラーク負荷の減少を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は対象の脳におけるプラーク形成の速度の減少を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は対象の認知能力における改善を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は対象の臨床的認知症等級（ＣＤＲ）の改善、安定化、若しくは減退速度の低減を生じさせる。ある特定の実施形態において、対象はヒトであり、当該投与はその本人によって認識される改善を生じさせる。ある特定の実施形態において、投与は、脳アミロイド症および／または下流神経変性の減少を生じさせる。ある特定の実施形態において、下流神経変性は、タウ、ＦＤＧ摂取、ｓＡＰＰαの減少、ｓＡＰＰベータの増加、およびＡｂｅｔａからなる群から選択されるニューロン損傷の１つ以上のマーカーによって決定づけられる。ある特定の実施形態において、脳アミロイド症はＰＥＴ，ＣＳＦ分析によって決定づけられる。および構造ＭＲＩ（ｓＭＲＩ）。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病を示唆する臨床的認知症等級を示す。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病に罹患する家族性の危険性を有する。ある特定の実施形態において、対象は家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）異形を有する。ある特定の実施形態において、対象はＡＰＯＥε４対立遺伝子を有する。ある特定の実施形態において、対象はパーキンソン病もしくは統合失調症ではなく、またその遺伝的な危険因子を持たない。ある特定の実施形態において、対象はパーキンソン病もしくは統合失調症と診断されていない、またはその危険性を持たない。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病以外の神経疾患あるいは障害の危険性を有しない。ある特定の実施形態において、対象はアルツハイマー病以外の神経疾患あるいは障害の危険性を有すると診断されない。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、経口送達、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与、皮下投与、目への局所投与、眼内注射、および直腸投与からなる群から選択される経路を通して投与される。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、経口送達、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与、および直腸投与からなる群から選択される経路を通して投与されるように調剤される。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは経口投与される。ある特定の実施形態において、投与期間は３週間にわたる、あるいは６カ月にわたる、あるいは１年にわたる。ある特定の実施形態において、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、タクリンエピダクリン、ガランタミン、ドネペジル、イコペジル、ザナペジル、リバスティグミン、Ｎａｍｅｎｄａ、フペルジンＡ、フェンセリン、フィゾスチグミン、ネオスチグミン、ピリドスチグミン、アンベノニウム、デマルカリウム、エドロホニウム、ラドスチジルおよびアンジェレミン、メトリフォナート、等）は当該ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグと同時に投与されない。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、経口送達、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与、および直腸投与からなる群から選択される経路を通して投与される。

【0029】

様々な実施形態において、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）および／または哺乳類における緑内障の進行を遅延させる、停止するまたは回復に向かわせる方法が提供される。方法は典型的に、進行を遅延させる、あるいは１つ以上の症状および／または当該ＡＭＤおよび／または緑内障のマーカーを、停止する、回復に向かわせる、あるいは改善するのに十分な量のＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグの哺乳類への投与を含む。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグはＡＳＩフラボノイドおよび／または本明細書に記載されるＡＳＢＩプロドラッグ（例えば、上記の通り）を含む。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩはガランギンでありおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグはガランギンプロドラッグである（例えば、図１および／または図２に図示したプロドラッグ）。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、経口送達、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与、皮下投与、目への局所投与、眼内注射、および直腸投与からなる群から選択される経路を通して投与される。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、経口送達、イソフォレーシス送達、経皮送達、非経口送達、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与、および直腸投与からなる群から選択される経路を通して投与されるように調剤される。ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩおよび／またはＡＳＢＩプロドラッグは、目に投与される（例えば、点眼薬、眼内注射等を経由して）。ある特定の実施形態において、投与期間は３週間にわたる、あるいは６カ月にわたる、あるいは１年にわたる。

【0030】

定義
概して、水素あるいはＨのようなある特定の元素への言及は、その元素の全ての同位体を含むことを意図する。例えば、Ｒ基が水素を含むと定義される場合、それは重水素および三重水素も含む。したがって、同位体標識した化合物は本発明の範囲内である。

【0031】

概して、「置換された」は下に定義する有機基（例えば、アルキル基）であって、そこに含まれる水素原子への一つ以上の結合が非水素原子あるいは非炭素原子への結合に置き換えられているものを指す。置換された基はまた、炭素原子あるいは水素原子への一つ以上の結合が、ヘテロ原子への、二重、三重を含む、一つ以上の結合に置き換えられている基も含む。したがって、置換された基は、別様に特定されない限り、１つ以上の置換基と置換される。いくつかの実施形態において、置換された基は１、２、３、４、５あるいは６つの置換基と置換される。置換基の例は、ハロゲン（すなわち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ）、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アルケノキシ基、アリールオキシ基、アラルキルオキシ基、ヘテロシクルオロキシ基、ヘテロシクリルアルコキシ基、カルボニル（オキソ）、カルボキシル、エステル、ウレタン、オキシム、ヒドロキシルアミン、アルコキシアミン、アラルコキシアミン、チオール、硫化物、スルホキシド、スルホン、スルホニル、スルホンアミド、アミン、Ｎ−オキシド、ヒドラジン、ヒドラジド、ヒドラゾン、アジド、アミド、尿素、アミジン、グアニジン、エナミン、イミド、イソシアネート、イソチオシアネート、シアン酸塩、チオシアン酸塩、イミン、ニトロ基、ニトリル（すなわち、ＣＮ）、等である。

【0032】

「アルキル」という用語は、直鎖アルキル、分枝アルキル、シクロアルキルまたさらにシクロアルキル−アルキルとして知られる、あらゆるすべての基を指し、包含する。実例となるアルキル基は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、オクチル、およびデシルを含むが、これに限られない。「シクロアルキル」という用語は、多環基、飽和ヒドロカルビル基を含む、環状基を指す。例は、シクロペンチル、シクロヘキシル、ジシクロペンチル、ノルボニル、オクタヒドロナフチル、およびスピロ［３．４］オクチルを含むが、これに限られない。ある特定の実施形態において、アルキル基は、１〜１２炭素原子（Ｃ１−１２アルキル）、あるいは１〜９炭素原子（Ｃ_１−９アルキル）、あるいは１〜６炭素原子（Ｃ_１−６アルキル）、あるいは１〜５炭素原子（Ｃ_１−５アルキル）、あるいは１〜４炭素原子（Ｃ_１−４アルキル）、あるいは１〜３炭素原子（Ｃ_１−３アルキル）、あるいは１−２炭素原子（Ｃ_１−２アルキル）を含む。

【0033】

例として、「Ｃ_１−６アルキル基」という用語は１つから６つの炭素原子を有する直鎖あるいは分枝鎖アルキル基を指し、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基、ｓ−ブチル基、ｎ−ペンチル基、ｔ−アミル基、３−メチルブチル基、ネオペンチル基、およびｎ−ヘキシル基によって例示され得る。

【0034】

「アルコキシ」という用語は、ここでは単一の末端酸素原子を介し結合されたアルキル基を意味する。「アルコキシ」基は、アルキルが上記のように定義づけられる、−−Ｏ−アルキルとして表されてもよい。「アリールオキシ」という用語は同様に用いられ、下で定義するアリールを伴い、−−Ｏ−アリールとして表されてもよい。「ヒドロキシ」という用語は、−−ＯＨを指す。

【0035】

同様に、本願では「アルキルチオ」は、単一の末端硫黄原子を介して結合されたアルキル基を意味する。「アルキルチオ」基は、アルキルが上記のように定義づけられる−−Ｓ−アルキルとして表されてもよい。「アリールチオ」という用語は同様に用いられ、下に定義するアリールを伴い、−−Ｓ−アリールとして表されてもよい。「メルカプト」という用語は−−ＳＨを指す。

【0036】

アリール基はヘテロ原子を含まない環式芳香族炭化水素である。アリール基は単環式、二環式および多環式の環系を含む。したがって、アリール基は、フェニル基、アズレニル基、ヘプタレニル基、ビフェニレニル基、インダセニル基、フルオレニル基、フェナントレニル基、トリフェニレニル基、ピレニル基、ナフタセニル基、クリセニル基、ビフェニル基、アントラセニル基、インデニル基、ペンタレニル基、およびナフチル基を含むが、これに限られない。いくつかの実施形態において、アリール基は、６〜１４の炭素、他では６から１２、あるいは６〜１０の炭素原子を基の環状部に含む。「アリール基」という表現は、縮合芳香族脂肪族環系のような縮合環（例えば、インダニル、テトラハイドロナフタイル等）を含む基を含むが、環要素の１つに結合されて、アルキル基あるいはハロ基のような他の基を有するアリール基を含まない。むしろ、トリルのような基は、置換アリール基と呼ばれる。代表的な置換アリール基は単置換であっても複数置換であってもよい。例えば、単置換されたアリール基は、上記したような置換基に置換される、２、３、４、５、あるいは６置換フェニルあるいはナフチル基を含むが、これに限られない。

【0037】

「ヘテロアリール基」という用語は、Ｏ、ＳおよびＮから選択される１つ以上のヘテロ原子を含む、単環式あるいは縮合環芳香族複素環式基を指す。芳香族複素環式基が縮合環を有する場合、それは部分的に水素化された単環式基を含むことができる。そのようなヘテロアリール基の例は、ピラゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾール基、チアジアゾリル基、イミダゾリル基、フリル基、チエニル基、オキサゾニル基、イソオキサゾリル基、ピロリル基、イミダゾリル基、（１，２，３）−および（１，２，４）−トリアゾニル基、テトラゾリル基、ピラニル基、ピリジル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、ピリダジニル基、キノリル基、イソキノリル基、ベンゾフラニル基、イソベンゾフラニル基、インドリル基、イソインドリル基、インダゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾ［ｂ］チオフェニル基、チエノ［２，３−ｂ］チオフェニル基、（１，２）−および（１，３）−ベンゾオキサチオール基、クロメニル基、２−オキソクロメニル基、ベンゾチアジアゾリル基、キノリジニル基、フタラジニル基、ナフチリジニル基、キノキサリニル基、キナゾリニル基、シンノリニル基、およびカルバゾリル基を含む。

【0038】

化合物の「誘導体」は、その化合物の１つ以上の官能基において化学修飾が行われる、化学的に修飾された化合物を意味する。しかしながら、誘導体はその派生の元となった化合物の薬学作用を維持あるいは強化することが期待されている。

【0039】

本明細書では、「投与」は局所投与および全身投与を指し、例えば、腸内投与、非経口投与、肺内投与、および局所／経皮投与を含む。本明細書に記載される方法に使用できる対象に対する投与の経路（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異性体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ、当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）は、例えば、経口（ｐｅｒ ｏｓ（ｐ．ｏ．））投与、経鼻あるいは吸入投与、坐薬としての投与、局所投与、経皮送達（例えば、経皮貼布を経由して）、くも膜下（ＩＴ）投与、静脈（ｉｖ）投与、腹腔内（ｉｐ）投与、筋内（ｉｍ）投与、病巣内投与、あるいは皮下（ｓｃ）投与、あるいは、対象に対する小型浸透圧ポンプやデポ製剤等のような持続放出装置の埋め込みを含む。投与は非経口および経粘膜を含むいかなる経路（例えば、経口、経鼻、膣内、直腸、あるいは経皮）によることができる。非経口投与は例えば、静脈、筋内、動脈内、皮内、皮下、腹腔内、脳室内、イオノフォアおよび頭蓋内を含む。他の送達方法は、リポソーム製剤の使用、静脈内注射、経皮貼布等を含むが、これに限られない。

【0040】

「全身投与」および「全身的に投与された」という用語は、循環系を経由して、調剤作用の、標的とする部位を含む体内の部位に投与されるようにするための、本明細書に記載される薬剤および組成物の哺乳類に対する投与方法を指す。全身投与は、経口、経鼻、直腸および非経口（例えば、消化管経由を除く、例えば筋内、静脈、動脈内、経皮および皮下）投与を含む。

【0041】

「同時投与」あるいは「併用投与」あるいは「〜と同時に投与」という用語は、例えば本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチン、およびその類似体、誘導体、あるいはプロドラッグのようなＡＳＢＩ）および第２の活性剤（例えば、認知増強剤）に関して使われる場合、両者が同時に生理作用を達成できるよう、薬剤および第２の活性剤の投与を指す。しかしながら、２つの薬剤は合わせて投与される必要はない。ある特定の実施形態において、一方の薬剤投与が他方の薬剤投与に先行してもよい。同時の生理作用は、必ずしも循環系における両者の同時の存在を要求するわけではない。しかしながら、ある特定の実施形態において、同時投与は、任意の所与の服用に対する最大血清濃度のかなりの割合（例えば、２０％以上、望ましくは３０％あるいは４０％以上、更に望ましくは５０％あるいは６０％以上、最も望ましくは７０％あるいは８０％あるいは９０％以上）で、典型的に、両薬剤の同時体内存在をもたらす。

【0042】

「有効量」あるいは「薬学的有効量」という用語は、求められる結果をもたらすために必要な１つ以上の薬剤の量および／または服用量および／または投薬レジメを指し、例としては、哺乳類における軽度認知機能障害（ＭＣＩ）に関連する１つ以上の症状を軽減するのに十分な量、あるいは、哺乳類の脳におけるアミロイド沈着によって特徴づけられる疾患の重症度を軽減するあるいは進行を遅延させるのに十分な量（例えば、治療有効量）、哺乳類の脳におけるアミロイド沈着によって特徴づけられる疾患の、発症の危険性を減少させる、あるいは発症を遅延させるおよび／または最重症を減少させるのに十分な量（例えば、予防的有効量）がある。

【0043】

「投与をもたらす」という用語は、医療専門家（例えば、医師）あるいは対象に対する論点の薬剤投与を管理する、および／または管理する、対象の診療を管理している人が起こす行動を指す。投与をもたらすことは診断、および／または適切な治療あるいは予防投薬計画、および／または対象への特定の薬剤の処方を含むことができる。そのような処方は、例えば、処方箋書式の下書き、カルテの注釈、等を含むことができる。

【0044】

本明細書では、「治療すること」および「治療」は、その用語が対応する疾患または状態、あるいはそのような疾患や状態の１つ以上の症状に対して、発症を遅延させる、進行を遅延させるあるいは回復に向かわせる、重症度を減少させる、あるいはそれを軽減または防止することを指す。

【0045】

「軽減すること」は、その病状あるいは疾患の１つ以上の症状の低減あるいは除去および／またはその病状あるいは疾患の発症あるいは１つ以上の症状の重症度のペースの低減あるいは遅延させることおよび／またはその病状あるいは疾患の防止を指す。ある特定の実施形態において、その病状あるいは疾患の１つ以上の症状の低減あるいは除去は、病状あるいは疾患に特徴的な１つ以上のマーカー（例えば、全タウ（ｔＴａｕ）、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、ＡＰＰネオ、可溶性Ａβ４０、ｐＴａｕ／Ａβ４２比率、およびｔＴａｕ／Ａβ４２比率および／またはＡβ４２／Ａβ４０比率、Ａβ４２／Ａβ３８比率、ｓＡＰＰα、ｓＡＰＰα／ｓＡＰＰβ比率、ｓＡＰＰα／Ａβ４０比率、ｓＡＰＰα／Ａβ４２比率等からなる群から選択される１つ以上の構成要素のレベルのＣＳＦにおける上昇）の低減または除去および／または１つ以上の診断基準（例えば、臨床的認知症等級（ＣＤＲ））の減少、安定化、あるいは逆転を含むことができるが、これに限られない。

【0046】

本明細書において「本質的に〜からなる」という用語は、方法または組成物において記載された、活性医薬品の属または種を指し、記載された適応または目的で実質的な作用を単独に有しない他の薬剤を更に含み得る。いくつかの実施形態において、「本質的に〜からなる」という用語は、列挙される薬剤以外の、１つ以上の神経薬理学的作用を有する余分の薬剤（例えば、ガランギン、ルチン、およびその類似体、誘導体、あるいはプロドラッグのようなＡＳＢＩ以外のもの）の包含を、明示的に除外する。いくつかの実施形態において、「本質的に〜からなる」という用語は、本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチン、およびその類似体、誘導体、あるいはプロドラッグのようなＡＳＢＩ以外のもの）以外の１つ以上の余分な活性剤の包含を明示的に除外する。いくつかの実施形態において、「本質的に〜からなる」という用語は、１つ以上のアセチルコリンエステラーゼ阻害剤の包含を明示的に除外する。

【0047】

「対象」、「個人」および「患者」という用語は、代替可能的に哺乳類、好適にはヒトあるいはヒト以外の霊長類を指すが、家畜哺乳類（例えば、イヌあるいはネコ）実験動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、ハムスター、テンジクネズミ）および農業哺乳類（例えば、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ）も指す。様々な実施形態において、対象は、病院、精神科医療施設、外来部門または他の臨床的な状況で医師あるいは他の医療従事者の診療の下でのヒトでありうる（例えば、成人男性、成人女性、青年男性、青年女性、男児、女児）。ある特定の実施形態において、対象は、医師あるいは他の医療従事者の診療下、または処方下にない場合がある。

【0048】

本願では、「処方」または「製剤」または「投薬形態」または「製剤処方」は対象への送達のための、少なくとも１つの治療薬剤あるいは医薬を含む組成物を指す。ある特定の実施形態において、投薬形態は一定の「処方」または「製剤」を含み、トローチ剤、錠剤、錠剤、カプセル、坐薬、薄膜、ストリップ、液状剤、パッチ、フィルム剤、ジェル剤、スプレー剤あるいは他の形式で対象に投与されてよい。

【0049】

「粘膜」という用語は、概して、あらゆる体内の粘膜に覆われた生体膜を指す。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤は、口、舌下、鼻、舌、肺、直腸、および膣粘膜を含むがこれに限られない、体内におけるいかなる粘膜を経由しても投与が可能である。口腔および消化管の粘膜による吸収が対象となるものである。したがって、経口、口腔内、舌下、歯肉、口蓋吸収が本願において熟慮される。

【0050】

薬品等の「経粘膜」送達という用語は、粘膜を越える、あるいは粘膜を通り抜けるすべての送達形態を包含することを意図する。

【0051】

本明細書での「生物学的接着」という用語は、例えば粘膜のような生体表面への投薬形態の接着の過程を指す。

【0052】

「制御薬品送達」は、生体内での求められる薬物動態プロファイルに達成するために制御された様式での一定の投薬形態からの薬品の放出あるいは投与を指す。「制御」薬品送達の一側面は、求められる薬品放出の動態を確立するために処方および／または投薬形態を操作する能力にある。

【0053】

「持続薬品送達」は源（例えば、製剤）からの薬物の数分間から数時間、数日、数週間あるいは数ヵ月という長期であるが特定の期間にわたる持続的な様式での放出あるいは投与を指す。様々な実施形態において、「持続的」という用語は、ＩＶ投与から得られるような短期間作用段階の欠如によって特徴づけられるプロファイルを伴い、数分から１日にわたる期間におよぶ一貫したおよび／または相当一定な薬品のレベルの送達を指す。

【0054】

本明細書でのＴ_ｍａｘは最大の観察される血漿濃度の時点を意味する。

【0055】

本明細書でのＣ_ｍａｘは最大の観察される血漿濃度を意味する。

【0056】

本明細書での血漿ｔ_１／２は観察される「血中濃度半減期」を意味し、薬物血漿濃度がその最大値（Ｃ_ｍａｘ）に到達するのに必要な時間を表す。これは薬理効果の平均持続時間の決定を容易にする。さらに、それは同一または異なる経路を経由した送達の後の、異なる被験物質の持続期間の直接的で有意義な比較を容易にする。

【0057】

「最適治療標的比率」または「ＯＴＴＲ」という用語は、治療水準で薬品が存在する平均時間を表し、薬品の消失半減期で正規化した、血漿中の薬品濃度が、Ｃ_ｍａｘの５０％超を維持する時間に、対象の投与形態で取得されるＣ_ｍａｘに対する、同等の投与量のＩＶ投与後のＣ_ｍａｘの比率を乗じたものとして定義され、下記の数式により計算される。
ＯＴＴＲ＝（Ｃ^ＩＶ_ｍａｘ／Ｃ_ｍａｘ）ｘ（投与量／投与量^ＩＶ）（Ｃ_ｍａｘの５０％超である時間）／（薬品の終末^ＩＶ消失半減期）

【図面の簡単な説明】

【0058】

【図1】ルチン、ガランギン‐１、およびプロガランギンの構造を示す。

【図2】ガランギンおよび様々なプロガランチン（ｐｒｏ−ｇａｌａｎｔｉｎｓ）を図示する。

【図3】図３Ａは小型臨床ライブラリーのスクリーニングからの散布図に示されるＡｌｐｈａＬｉｓａ分析におけるルチンの特定を図示する。図３ＢはＭＢＰ−Ｃ１２５のＢＡＣＥ切断の検出に用いられる一次ＡｌｐｈａＬｉｓａ分析を概略的に図示する。

【図4】ＡＳＢＩを特定するためのＢＡＣＥによるＭＢＰ−Ｃ１２５およびＰ５−Ｐ５切断におけるバイオフラボノイド族をスクリーニングした結果を示す。

【図5A】ルチンおよびガランギンによるＳＨ−ＳＹ５ＹにおけるｓＡＰＰβの阻害を示す。

【図5B】表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によるガランギンのＡＰＰ断片への結合を示す。

【図6A】図６Ａはガランギンがβ−ＣＴＦ生成を阻害することを示す。ヒトＡＰＰを安定的に過剰発現させるチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞が、２４時間１０μＭガランギンあるいはＤＭＳＯで処理され、その後細胞溶解物および馴化培地が採集された。細胞溶解物における全長ＡＰＰおよびβ−ＣＴＦのレベルおよび、馴化培地におけるｓＡＰＰαのレベルがウェスタンブロット法で検出された。

【図6B】図６Ｂはガランギンがニューレグリン１のＢＡＣＥ１切断を阻害しないことを示す。ＳＥＡＰ−ＮＲＧ１−β１のＢＡＣＥ１依存の切断が、ＤＭＳＯあるいはガランギンで処理され、対照ヒト胎児腎臓２９３（ＨＥＫ２９３）細胞（ＳＥＡＰ−ＮＲＧ１−β１）あるいはＢＡＣＥ１と共発現するＨＥＫ２９３細胞（ＳＥＡＰ−ＮＲＧ１−β１＋ＢＡＣＥ１）の上清でのＳＥＡＰ分析によって評価された。ＳＥＡＰ−ＮＲＧ１−ｂ１融合タンパク質の脱落の増加が、ＢＡＣＥ１共発現に基づいて測定された。共発現細胞における脱落はガランギンによって阻害されなかった。エラーバーは標準誤差を示す。（非有意、ｐ＞０．０５、ｎ＝４、スチューデントｔ−検定）。

【図7】ガランギンによるＡＰＰ−Ｇａｌ４およびＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４トランス活性化の阻害を図示する。図７Ａ：転写の強力なトランス活性化が、Ｍｉｎｔ３およびＴＡＺが存在した場合、Ｇａｌ４ＤＮＡ結合領域に融合されたＡＰＰで達成された。このトランス活性化はガランギンおよびＢＡＣＥ阻害剤ＩＶによって阻害された。図７Ｂ：転写の強力なトランス活性化が、Ｍｉｎｔ３およびＴＡＺの両方が存在する場合、Ｇａｌ４ＤＮＡ結合領域に融合されたＡＰＬＰ２でも達成された。このトランス活性化はガランギンおよびＢＡＣＥ阻害剤ＩＶによって阻害された。図表は、細胞が、Ｇａｌ４−ルシフェラーゼレポータープラスミド（トランス活性化測定のため）、−ガラクトシターゼプラスミド（同時遺伝子導入の効率性について正規化するため）、およびテストプラスミド（Ｍｉｎｔ３、ＴＡＺおよびＡＰＰ−Ｇａｌ４またはＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４）と同時遺伝子導入された実験結果を示す。正規化されたルシフェラーゼ作用はＤＭＳＯ対照のパーセンテージとして表される（図７Ａ、７Ｂ）。エラーバーは標準誤差を示す（^＊：ｐ＜０．０５、 ^＊＊：ｐ＜０．０１、^＊＊＊：ｐ＜０．００１、ｎ＝３、スチューデントｔ−検定）。

【図8】ガランギンおよびプロガランギンの薬物動態を図示する（ＰＧ−１）。ガランギンおよびＰＧ−１両者において血漿中濃度は脳組織レベルよりも高かったが、ガランギンのみの場合よりもＰＧ−１注射の後の方がガランギンレベルはかなり高かった。

【図9】パネルＡ−ＤはＡβ１−４０およびＡβ１−４２レベルを示す。Ａβ１−４０レベルは、ガランギン処置マウスの脳においてわずかにより低く（パネルＡ）、Ａβ１−４２は変わらなかった。Ａβ１−４０およびＡβ１−４２の両方はプロガランギンＩ処置のマウスの脳においてわずかに低くなった。Ａβ１−４０（パネルＡ）はわずかに低下し、Ａβ１−４２（パネルＢ）は同じままである。Ａβ１−４０（パネルＣ）およびＡβ１−４２（パネルＤ）の両方はプロガランギン−１において低下している。兄弟の場合のみ、全てＮ＝３。

【図10】ＡＳＢＩ作用の分子クランプモデルを図示する。

【図11】プロガランギン（化合物２）の合成図を図示する。

【発明を実施するための形態】

【0059】

ある特定の実施形態において、新規機序によりβセクレターゼ媒介のＡＰＰ処理を阻害するバイオフラボノイド類似体が特定される。具体的には、これらの分子がＭＢＰ−Ｃ１２５ＡＰＰ基質のＢＡＣＥ切断を阻害し、結果としてＣ９９の生成の阻害をもたらすが、β−サイトペプチド基質（Ｐ５−Ｐ５’）の阻害はもたらさないと考えられている。さらに、ここで特定される様々なバイオフラボノイドおよびその類似体は神経芽腫ＳＨＳＹ５Ｙ細胞におけるｓＡＰＰβを阻害する。さらに阻害作用はＭＢＰ−Ｃ１２５基質への結合と関連していることが証明されている。したがって、これらの分子はＡＰＰ特異性の阻害剤（ＡＳＢＩ）であり、ＡＰＰ処理を調節する新たな機序を供給すると考えられる。これらのＡＳＢＩは病理学的ＡＰＰ処理によって特徴づけられる病理（例えば、アルツハイマー病、ＭＣＩあるいは前症候的ＭＣＩのような、前アルツハイマー病疾患等）の治療、および、または、予防に用いることができる。

【0060】

ＡＳＢＩは少なくとも選択的で、ＡＰＰ基質に特有であるように思われ、ＡＳＢＩは典型的に酵素の他の基質では活性でないため、望ましくない副作用をあまり示さないと考えられる。γセクレターゼの阻害剤に関しては、ＮｏｔｃｈのようなＡＰＰ以外の基質がγセクレターゼ阻害の潜在的副作用に対する懸念を生み、γセクレターゼ阻害剤の最近の失敗、セマガセスタットはそのような懸念を増強させる。ＢＡＣＥの場合も同様に、例えば、ＰＳＧＬ１またはＬＲＰのような非ＡＰＰ基質の阻害は有害な副作用を生成し得る。したがって、最適なＢＡＣＥ阻害剤は、ＢＡＣＥではなくＡＰＰに結合し、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害（ＡＳＢＩ）をもたらす物となる。

【0061】

特定の理論に拘束されないが、そのようなＡＳＢＩはＡＰＰまたはＡＰＰ−ＢＡＣＥ複合体（「不活性」複合体）と膜にて相互作用し、初期エンドソームにおける「活性」複合体への移行を防ぎ、ｐＨ＜５でＢＡＣＥは完全に活性状態であると考えられる（例えば、図１０を参照）。いくつかのβ−サイト結合抗体はＢＡＣＥによるＡＰＰの切断を遮断し、さらにＡＤの動物モデルにおいても作用することが示されているが、しかしながら、効果的調剤開発のためには、抗体のような比較的大きい生体分子よりも有機小分子のほうが典型的に好まれる。

【0062】

本明細書に記載される第１のＡＳＢＩの特定に関するデータは、そのようなアプローチが実施可能であるということを示す。ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）はアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のＢＡＣＥ切断を阻害するが、他の基質のタンパク質分解的切断は阻害しない。そのような治療薬はアルツハイマー病（または他のアミロイド生成性疾患）の治療薬の新しい種類を表すと考えられる。

【0063】

初めに、４４８化合物の臨床ライブラリーがスクリーニングされ、この分析はフラボノイドＰ５−Ｐ５’基質の切断を防がない一方で、特異的にＢＡＣＥのＭＢＰ−Ｃ１２５基質を阻害する単一フラボノイドの特定をもたらした。このバイオフラボノイド、ルチン（例えば、図１を参照）は栄養剤で、細胞内におけるｓＡＰＰβを阻害することもわかっている。バイオフラボノイドのパネルがその後細胞培養においてＡＳＢＩおよびｓＡＰＰβ分析で試験された。この試験は別の栄養剤で、ＡＳＢＩ分析およびＡＰＰのＢＡＣＥ切断の防止における細胞において効果的だった公知のヒト使用を伴う、第２のフラボノイド、ガランギン（例えば、図１を参照）を特定した。ガランギンもまた、アセチルコリンエステラーゼ（ＡＣｈＥ）の阻害剤であると報告された。簡素なニトロセルロースフィルターリガンド結合分析を用い、ＭＢＰ−Ｃ１２５基質への様々なバイオフラボノイドの初期結合が実証された。バイオフラボノイドのパネルがＡＳＢＩ分析においてスクリーニングされた。ルチンおよびガランギンは、細胞内におけるｓＡＰＰβレベルを調整するのに効果的であると特定され、ＡＰＰ基質への結合を示す（実施例１を参照）。

【0064】

フラボノイドがＡＰＰおよびＡＰＬＰ２のＢＡＣＥ切断を阻害することができたと実証された。ＨＥＫ−２９３分析はこのデータを得るためにＡＰＰまたはＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４に遺伝子導入された。この分析系はＯｒｃｈｏｌｓｋｉら（２０１１）Ｊ．Ｊ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ．２３（４）：６８９−６９９に記載される。トランス活性化がＭｉｎｔ３およびＴａｚとの遺伝子導入によって達成される。ＡＳＢＩはＡＰＰ−Ｇａｌ４のトランス活性化のみを阻害し、ＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４のトランス活性化は阻害しないことが予期された。これらの実験のために細胞は、Ｇａｌ４ルシフェラーゼレポータープラスミド（トランス活性化測定のため）、ベータガラクトシターゼプレスミド（同時遺伝子導入の効率性の為に正規化するため）および特定されたテストプラスミドと同時遺伝子導入された。正規化されたルシフェラーゼ作用はＡＰＰ−Ｇａｌ４単独による転写の誘導に対する倍率（図７Ａ）として、またはＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４単独の誘導に対する倍率として（図７Ｂ）として表される。１０μＭのガランギンのこの分析における予備試験は、それがＡＰＰ−Ｇａｌ４およびＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４を阻害することを示した。

【0065】

ＮＴｇマウスを用いた脳摂取分析におけるこれら２つのバイオフラボノイド初期薬物動力学的評価は、ルチンはｓｃ服用の後１０ｍｐｋでのいかなる脳レベルも有しないということを示したが、ガランギンが相当な脳レベルを示し（１時間で４０ｎｇ／ｇ）、したがって、遺伝子組換え（Ｔｇ）マウスモデルにおける概念実証研究の評価を可能にする。Ｔｇマウスの処置が、５日間にわたって１００ｍｐｋでのｓｃ経路によって施された。ガランギンが次いでｓＡＰＰα、およびＡβ４０ならびにＡβ４２に対する効果に関して評価された（例１を参照）。Ａβレベルの減少はこの研究において非常に有望であった。ガランギンの脳レベルの更なる増加がガランギンのプロドラッグの使用によって可能であった（図１を参照）。

【0066】

本明細書に提供される例は、ある特定のバイオフラボノイドがＡＰＰに結合しＡＰＰおよびＡＰＬＰ２のＢＡＣＥ切断を阻害することを示し、したがって、それらはＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤であるということを示唆する。これらの分子はＢＡＣＥの直接阻害からの潜在毒性のないアルツハイマー病の治療の新しい種類を表す。ガランギンはＡＤマウスモデルにおいてＡβ４０およびＡβ４２を減少させるのに効果的であることも示された。

【0067】

ルチンはマウスモデルにおいて効果的ではなかったが、これは血液脳関門を通過することの困難によるものであると思われる。しかしながら、これは、ルチンおよびその誘導体あるいは類似体が、本明細書に記載される方法における使用に不適当であるということを意味するわけではない。分子の血液脳関門通過および／または血液脳関門迂回の多くの方法が当業者に知られている。

【0068】

典型的に、脳内を標的とする薬品の機序はＢＢＢ通過またはＢＢＢ背後通過を含む。様々な実施形態において、ＢＢＢ通過の薬品送達の様式は浸透手段によるＢＢＢの撹乱を伴う；生化学的な、ブラジキニンのような血管刺激物質の使用によって；または高密度焦点式超音波（ＨＩＦＵ）の局部照射によっても（例えば、ＭｃＤａｎｎｏｌｄら（２００８）Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｙ，３４（５）： ８３４−８４０を参照）行われる。ＢＢＢ通過をする他の方法は、グルコースおよびアミノ酸担体のような担体輸送体；受容体媒介トランスサイトーシス；およびｐ−糖タンパク質のような能動拡散輸送体の遮断を含む、内因性輸送システムの使用を伴ってもよい。ＢＢＢの背後を通過する薬品送達の方法は（注射針を用いるような）脳内移植および対流促進配分を含む。ある特定の実施形態において、ｍマンニトールをＢＢＢ通過に用いることができる。ナノ粒子もまたＢＢＢを超える薬品移動を助けることができる（例Ｓｉｌｖａ，（２００８）． ＢＭＣ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，９：Ｓ４、等を参照）。

【0069】

ガランギンおよびルチンにおけるＡＳＢＩ作用の発見を背景に、同様の作用が、本明細書に記載される追加のバイオフラボノイド類似体の多くの中に存在すると思われる。これらの類似体のうちいかなるものの特定のＡＳＢＩ作用も、例えば、上記分析および本明細書に提供される実施例において、記載された分析を用いて容易に確認することができる。

【0070】

膜結合性のプロテアーゼβセクレターゼおよびγセクレターゼによるＡＰＰの一連の切断はＡβの形成をもたらす。β−サイトＡＰＰ切断酵素−１（ＢＡＣＥ１）はβ−アミロイド生成性経路におけるＡＰＰの第１の切断を媒介する主要βセクレターゼ作用として特定された。本明細書に記載されるＡＳＢＩ化合物のＡＰＰにおける特にＢＡＣＥ１作用の遮断する能力を背景に、これらのＡＳＢＩ化合物は、Ａβレベルを下げるまたは神経毒Ａβ種の形成を防止することができると考えられる（また本明細書に記載されるデータもそれを示す）。したがって、これらの化合物は、疾患の進行を防止するまたは遅延させる、および／またはアミロイド生成性疾患経路の前臨床的兆候の進行を防止するまたは遅延させると考えられる。

【0071】

したがって、これらの薬剤は、前アルツハイマー病認知機能障害の発症を防止するまたは遅延させる、および／または前アルツハイマー病認知機能障害の１つ以上の症状を改善する、および／または、前アルツハイマー病疾患あるいはアルツハイマー病の認知機能障害の進行を防止するまたは遅延させる、および／または非アミロイド生成性経路によるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の処理を促進すると考えられる。ある特定の実施形態において、これらの薬剤はアルツハイマー病の治療（例えば、疾患の重症度を軽減するため、および／または疾患の１つ以上の症状を改善するため、および／または疾患の進行を遅延させるため）に用いることができる。

【0072】

治療および予防方法
様々な実施形態において、治療および／または予防方法が、活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、および、その類似体、誘導体、プロドラッグ、または、その互変異生体または立体異性体、あるいは、当該ＡＳＢＩ、当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、あるいはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）を活用して提供される。典型的に、方法は、１つ以上の活性剤を対象（例えば、その薬剤を必要とするヒト）に対して、求められる治療または予防結果を実現するのに十分な量で投与することを含む。

【0073】

予防
ある特定の実施形態において、活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、プロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ、当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、あるいはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）は様々な予防状況において活用される。したがって、例えば、ある特定の実施形態において、活性剤は、アルツハイマー病認知機能障害の発症を防止するもしくは遅延させる、および／または前アルツハイマー病疾患の１つ以上の症状および／または認知機能障害を改善するおよび／または、前アルツハイマー病疾患および／または認知機能障害からアルツハイマー病への進行を防止するもしくは遅延させるために用いられ得る。

【0074】

したがって、ある特定の実施形態において、本明細書に記載される予防方法は「危険性のある」および／または、初期アルツハイマー病（ＡＤ）病理変化の兆候を有すると特定されるが、ＭＣＩ若しくは認知症の臨床基準には合致しない対象に対して企図される。特定の理論にとらわれず、この疾患の「前臨床的」段階でさえ、ＡＤ認知症への進行の危険性のあるＡＤ−病態生理学的過程（略ＡＤ−Ｐ、例Ｓｐｅｒｌｉｎｇ（２０１１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ＆ Ｄｅｍｅｎｔｉａ，１−１３参照）を示唆するバイオマーカー兆候を有する完全に無症状の個人から、すでにわずかな減退を見せているもののＭＣＩの標準基準（例Ａｌｂｅｒｔら（２０１１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ａｎｄ Ｄｅｍｅｎｔｉａ， １−１０（ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｊａｌｚ．２０１１．０３．００８）には満たないバイオマーカー陽性個人への連続した範囲を表すと考えられる。

【0075】

この後者の個人の群は「非標準、非ＭＣＩ」として分類されるかもしれないが、「前症状的」「前臨床的」「無症状的」または「前顕在的」と指定され得る。様々な実施形態において、この前症状的ＡＤの連続した範囲は（１）１つ以上のアポリタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）ε４対立遺伝子を有し、ＡＤ−Ｐバイオマーカー陽性の点においてＡＤ認知症を進行させる危険性の増加を有すると知られているあるいは考えられる個人および（２）前症状的バイオマーカー陽性段階にあり、ほとんど確実に臨床的症状および認知症への進行を顕示するであろう常染色体優性突然変異有する者を包含する。

【0076】

最も広く正当性が認められているＡＤ−Ｐのバイオマーカーが異常を示し、同様に秩序ある様式で最大値に達成したバイオマーカーモデルが提言されている（例えば、Ｊａｃｋら（２０１０）Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ．，９：１１９−１２８）。このバイオマーカーモデルは提案した（前ＡＤ／ＡＤ）の病態生理学的順序に匹敵し、ＡＤの前臨床的（無症状的）段階の追跡に適切である（例Ｓｐｅｒｌｉｎｇら（２０１１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ＆ Ｄｅｍｅｎｔｉａ，１−１３内図３を参照）。脳アミロイドのバイオマーカーは陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）結像におけるＣＳＦ Ａβ_４２の減少およびアミロイドトレーサー保持の上昇を含むがこれに限られない。上昇したＣＳＦタウはＡＤに特異的ではなく、ニューロン損傷のバイオマーカーであると考えられる。代謝低下の側頭頭頂パターンを伴う減少したＰＥＴ上のフルオロデキシグルコース１８Ｆ（ＦＤＧ）の取り込みはＡＤ関連のシナプス機能障害のバイオマーカーである。側頭葉内側部、傍辺縁系および側頭頭頂皮質を含む特徴的パターンにおける、構造的磁気共鳴映像法（ＭＲＩ）上の脳萎縮はＡＤ関連の神経変性のバイオマーカーである。他のマーカーは、容積測定ＭＲＩ、ＦＤＧ−ＰＥＴ、または血漿バイオマーカーを含むがこれに限られない（例えば、Ｖｅｍｕｒｉら（２００９）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，７３：２９４−３０１；Ｙａｆｆｅら（２０１１）ＪＡＭＡ ３０５：２６１−２６６）。

【0077】

ある特定の実施形態において、本明細書において企図される予防方法に適する対象は無症状的脳アミロイド症を有するとして特徴付けられる対象を含むがこれに限られない。いくつかの実施形態において、これらの個人は、ＰＥＴアミロイド結像上の上昇したトレーサー保持および／またはＣＳＦ分析における低いＡβ４２を伴うＡβ蓄積のバイオマーカー兆候を有するが、神経変性またはわずかな認知的および／または行動的症状を示唆する付加的な脳変化の検出可能な兆候は有しない。

【0078】

現在利用可能なＡβのＣＳＦおよびＰＥＴ結像バイオマーカーは、主としてアミロイド蓄積および小繊維型アミロイドの沈着の兆候を供給する。データは、可溶性またはオリゴマー型Ａβは、タンクの役割を果たす、プラークと平衡状態であり得ると提言している。ある特定の実施形態において、可溶性Ａβのみが存在する同定可能な前プラーク段階があることが熟慮される。ある特定の実施形態において、オリゴマー型アミロイドが病理カスケードにおいて臨床的であり、有益なマーカーを供給してもよいということが熟慮される。さらに、早期シナプス変化はアミロイド蓄積の兆候以前に存在し得る。

【0079】

ある特定の実施形態において、本明細書で企図される予防方法に適する対象は、シナプス機能障害および／または送気神経変性の兆候を伴いアミロイド陽性として特徴付けられる対象を含むがこれに限られない。様々な実施形態において、これらの対象はアミロイド陽性の兆候および１つ以上の「下流」ＡＤ−Ｐ関連のニューロン損傷のマーカーの存在を有する。実例となるしかし制限的ではないニューロン損傷のマーカーは（１）上昇したＣＳＦタウまたはリン酸化タウ（２）ＦＤＧ−ＰＥＴ上のＡＤのようなパターンにおける代謝低下（すなわち後帯状、楔前部および／または側頭頭頂皮質）および（３）容積測定ＭＲＩにおいて、特有の解剖学的分布における皮質の細線化／灰白質損失（すなわち、側面および内側頭頂、後帯状、および外側側頭皮質）、および／または海馬萎縮を含むがこれに限られない。他のマーカーは、既定ネットワーク接続性のｆＭＲＩ測定を含むがこれに限られない。ある特定の実施形態において、ＦＤＧ−ＰＥＴおよびｆＭＲＩのような機能的画像法によって査定される初期シナプス機能障害は容積損失の前に検出可能である。特定の理論にとらわれず、早期神経変性の兆候を伴うアミロイド陽性の個人は、軌道をさらに進んでいる（すなわち、前臨床的（無症状的）ＡＤの後期段階）可能性があると考えられる。

【0080】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される予防方法に適する対象は神経変性およびわずかな認知的減退の兆候を有するアミロイド陽性によって特徴づけられる対象を含むが、これに限られない。特定の理論にとらわれず、アミロイド蓄積、初期神経変性のバイオマーカー兆候およびわずかな認知的減退の兆候を有する個人は前臨床的（無症状的）ＡＤの最終段階であり、軽度認知機能障害（ＭＣＩ）の臨床的基準との境界領域に接近していると考えられる。これらの個人は、個人が標準認知測定の「標準」領域内の能力を見せる場合であっても、（具体的に認知予備力の代理を考慮する場合）個人自身の基準値からの減退の兆候を示す可能性がある。特定の理論にとらわれず、より精度の高い認知測定、具体的にエピソード記憶測定はアミロイド陽性個人における非常にわずかな認知機能障害を検出する可能性があると考えられる。ある特定の実施形態において、基準は記憶減退または他のわずかな神経行動的変化の自己申請を含むがこれに限られない。

【0081】

上記のように、本明細書に記載される予防方法に適した対象／患者は、疾患（例えば、ＭＣＩのようにアミロイドプラーク形成によって特徴づけられる疾患）の危険性にあるが症状は示さない個人、ならびにある特定症状またはマーカーを現在示している対象とを含む。ＭＣＩおよびその後のアルツハイマー病の危険性は概して加齢とともに増加するということが知られている。したがって、ある特定の実施形態において、他の危険要素の無い無症状の対象において、予防適用は、５０歳以上の患者または５５歳以上の患者または６０歳以上の患者または６５歳以上の患者または７０歳以上の患者または７５歳以上の患者または８０歳以上の患者に関するものであり、具体的に軽度認知機能障害（ＭＣＩ）の最重症度の発症を防止するまたは遅延させるおよび／またはＭＣＩからアルツハイマー（ＡＤ）病初期段階への進行を遅延させるまたは防止することを目的とする。

【0082】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される方法は、無症状であろうと疾患の症状を示していようと、既知のアルツハイマー病（または他のアミロイド生成性疾患）の遺伝的危険性を有している個人に特に有益な方法を提言する。そのような個人は、ＭＣＩまたはＡＤを経験したことのある血縁者（例えば、親、祖父母、兄弟姉妹）を有し、危険性が遺伝子またはバイオマーカーの分析によって決定づけられた個人を含む。アルツハイマー病の危険性の遺伝子マーカーは、例えば、ＡＰＰ遺伝子における変異、具体的にそれぞれＨａｒｄｙ変異Ｓｗｅｄｉｓｈ変異を参照し、７１７位置および６７０及び６７１位置における変異（Ｈａｒｄｙ（１９９７）Ｔｒｅｎｄｓ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２０：１５４−１５９を参照）を含む。他の危険性のマーカーは、プレセニリン遺伝子（ＰＳ１およびＰＳ２）における変異、ＡＤの家族歴、家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）変異、ＡＰＯＥε４対立遺伝子、高コレステロール血症またはアテローム性動脈硬化を有することを含む。アルツハイマー病進行のさらなる感受性遺伝子は例えばＳｌｅｅｇｅｒｓら（２０１０）Ｔｒｅｎｄｓ Ｇｅｎｅｔ．２６（２）：８４−９３において考察されている。

【0083】

いくつかの実施形態において、対象は無症状であるがＭＣＩまたはアルツハイマー病進行の家族性および／または遺伝的危険性を有する。無症状の患者において、治療はいかなる年齢（例えば、２０，３０，４０，５０歳）においても開始できる。しかしながら、大抵は、患者が最低でも約４０，５０，６０、または７０歳になるまで治療は不必要である。

【0084】

いくつかの実施形態において、対象は例えば軽度認知機能障害（ＭＣＩ）またはアルツハイマー病（ＡＤ）の症状を示している。現在アルツハイマー病を罹患している個人は、特徴的な認知症、ならびに上記の危険要素の存在によって認識される。さらに多数の診断検査がＡＤを有する個人を特定するために入手可能である。これらはＣＳＦタウ、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、Ａβ４２レベルおよびＣ末端切断ＡＰＰ断片（ＡＰＰネオ）の測定を含む。増加した全タウ（ｔＴａｕ）、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、ＡＰＰネオ、可溶性Ａβ４０、ｐＴａｕ／Ａβ４２比率およびｔＴａｕ／Ａβ４２比率、および減少したＡβ４２レベル、Ａβ４２／Ａβ４０比率、Ａβ４２／Ａβ３８比率、ｓＡＰＰαレベル、ｓＡＰＰα／ｓＡＰＰβ比率、ｓＡＰＰα／Ａβ４０比率、およびｓＡＰＰα／Ａβ４２比率はＡＤの存在を示す。いくつかの実施形態において、対象または患者はＭＣＩを有すると診断される。尿における神経系タンパク質（ＮＴＰ）の上昇したレベルおよび／またはα２−マクログロブリン（α２Ｍ）の上昇したレベルおよび／または血漿における構成要因Ｈ（ＣＦＨ）もまたＭＣＩおよび／またはＡＤのバイオマーカーである（例Ａｎｏｏｐら（２０１０）Ｉｎｔ．Ｊ． Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ．２０１０：６０６８０２参照）。

【0085】

ある特定の実施形態において、治療に適した患者は加齢に伴う記憶障害（ＡＡＭＩ）、または軽度認知機能障害（ＭＣＩ）を有する可能性がある。本明細書に記載される方法は特にＭＣＩの予防および／または治療に適合している。そのような例において、方法はＭＣＩの発症を遅延させるまたは防止する、および／または１つ以上のＭＣＩの特徴的な症状を減少させる、および／またはＭＣＩからアルツハイマー病の早期、中期、後期段階への進行を遅延させるまたは防止する、または疾患の最重症度を低減させることができる。

【0086】

軽度認知機能障害（ＭＣＩ）
軽度認知機能障害（ＭＣＩ、初期認知症または孤立性記憶障害としても知られる）は年齢や教育に対して予期されるものを超えるが、典型的に日常活動の妨げにはならない認知機能障害を有する個人に与えられる診断である（例Ｐｅｔｅｒｓｅｎら（１９９９）Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．５６（３）：３０３−３０８を参照）。それは多くの例において正常な加齢と認知症の間の境界あるいは移行段階であると考えられている。ＭＣＩは様々な症状を示し得るが、記憶喪失が主症状である場合、それは「健忘症ＭＣＩ」と呼ばれ、度々アルツハイマー病の危険性要素であると見なされる（例Ｇｒｕｎｄｍａｎら（２００４） Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．６１（１）：５９−６６；およびインターネット上ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗｉｋｉ／Ｍｉｌｄ＿ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ＿ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ−ｃｉｔｅ＿ｎｏｔｅ−Ｇｒｕｎｄｍａｎ−１を参照）。個人が記憶以外の領域における障害を有する場合、それは非健忘症単一または多数領域ＭＣＩであると分類され、これらの個人は他の認知症に（例えば、レビー小体を伴う認知症）転換する可能性がより高いと考えられている。健忘症ＭＣＩ患者はアルツハイマー病の神経病理学的基準に達しない場合があるが、患者はアルツハイマー病進展の移行段階にある可能性があり、この仮説的移行段階にある患者は新皮質における拡散アミロイドおよび側頭葉内側部における頻繁な神経原線維変化を示す（例Ｐｅｔｅｒｓｅｎら（２００６）Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．６３（５）：６６５−７２）。

【0087】

ＭＣＩの診断は典型的に、臨床観察、神経画像検査、血液検査および神経心理学検査を含む包括的臨床評価を含む。ある特定の実施形態において、ＭＣＩの診断基準はＡｌｂｅｒｔら（２０１１）Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ＆Ｄｅｍｅｎｔｉａ．１−１０によって記載されるものを含むがこれに限られない。本明細書に記載されるように、診断基準は（１）高度な結像技術や脳脊髄液分析が利用不可能な医療機関によって用いられ得る主要臨床基準および（２）臨床試験を含む臨床研究状況において用いられ得る研究基準を含む。第２の基準セットは結像及び脳脊髄液測定に基づいたバイオマーカー使用を包含する。ＡＤによる軽度認知機能障害の最後の基準セットは、バイオマーカー発見の存在および本質によって決まる確実な４レベルを有する。

【0088】

ある特定の実施形態において、ＭＣＩの臨床評価／診断は（１）患者または情報提供者または臨床医によって報告される認知の変化（すなわち、長期にわたる減退の歴史的又は観察的兆候）を反映する懸念、（２）典型的に記憶を含む１つ以上の認知領域における障害の客観的証拠（すなわち、複数領域における認知機能レベルを確立するための形式または臨床検査）、（３）機能的能力における独立性の保持、（４）認知症ではない、およびある特定の実施形態において（５）ＡＤ病態生理学的過程に一致するＭＣＩ病因、を含む。可能ならば典型的に認知減退の血管、外傷性、医学的原因は除外される。ある特定の実施形態において、可能ならば認知における長期的な減退の兆候が特定される。適切な場合、診断はＡＤ遺伝的要素と一致する病歴によって強化される。

【0089】

認知領域における障害に関しては、本人の以前のレベルと比較した認知の変化に関する懸念の兆候があるはずである。患者の年齢及び教育的背景に期待されるものより大きい１つ以上の認知領域における低い能力があるはずである。反復検査が可能な場合、能力における減退は時間とともに顕著であるはずである。この変化は記憶、実行機能、注意、言語および空間視覚能力を含む様々な認知領域において起こり得る。エピソード記憶（すなわち、新情報を学習し保持する能力）における障害は、後にＡＤ認知症の診断へと進行するＭＣＩ患者においてもっとも一般的に見られる。

【0090】

機能的能力における独立性の保持に関しては、ＭＣＩを有する人は買い物をするのに用いる複雑機能的タスクを遂行することに軽度な問題を一般的に有する。彼らはそのような活動を遂行するにあたり過去に比べ、より時間をかけ、より非効率的になり、より多くの間違いをする可能性がある。にもかかわらず、彼らは一般的に最小の支援または援助で日常生活における機能の自身の独立性を維持する。

【0091】

認知症に関しては、認知的変化は十分に軽度であり、社会的または職業的機能における重大な障害の兆候はない。個人が一度しか評価されていない場合、変化は、病歴からおよび／またはその個人に期待される以上に認知能力に障害があるという兆候によって推論される。

【0092】

認知検査は、個人の認知機能障害の程度を客観的に査証するにあたり最良である。ＭＣＩを有する個人の認知検査におけるスコアは典型的に、文化的に適切な基準データにおける、個人と同等の年齢及び教育に対する平均を、１から１．５標準偏差で下回る（すなわち、可能な場合障害領域において）。

【0093】

エピソード記憶（すなわち、新情報を学習し保持する能力）は後にＡＤ認知症の診断へと進行するＭＣＩ患者において最も一般的に見られる。数年内にＡＤ認知症へと進行する可能性が非常に高いＭＣＩ患者を特定するのに有益である、様々なエピソード記憶検査がある。これらの検査は典型的に即時および遅延想起の両者を査定し、遅延後の保持を決定づけることができる。全てではないものの、この点において有益だと証明されている検査の多くは複数試験を有する単語リスト学習テストである。そのような検査は経時的な学習速度、ならびに学習試験の過程で身に付けられた最大量を明らかにする。それらは、個人が実際は即時想起のタスクに注意を払っているということを示すのに有益でもあり、この場合これは即時想起に保持された内容の相対量を査定する基準として用いることができる。そのような検査の例はフリーアンドキュー選択連想検査、Ｒａｙ聴覚言語学習検査、およびカリフォルニア言語学習検査を含むがこれに限られない。他のエピソード記憶測定は改定ウェクスラー記憶検査（または他の版）の論理的記憶ＩおよびＩＩ項の即時および遅延想起、および改定ウェクスラー記憶検査ＩおよびＩＩの視覚再現下位試験のような非言語素材の即時および遅延想起を含むがこれに限られない。

【0094】

他の認知領域がＭＣＩを有する個人において障害を受けるため、記憶に加え領域を検査することが望ましい。これらは実行機能（例えば、集合移動、論理的思考、問題解決、計画立案）、言語（例えば、命名、流暢性、表現的発話、理解）、空間視覚能力、および注意制御（例えば、単純および分割された注意）を含むがこれに限られない。トレイルメーキング検査（実行機能）、ボストン命名検査、文字およびカテゴリー流暢性（言語）、形状模写（空間能力）、およびディジットスパンフォワード検査（注意）を含むがこれに限られない、多くの臨床神経心理学的測定が、これらの認知領域を査定するために使用可能である。

【0095】

上に示したように、遺伝子要素がＭＣＩの診断に含まれ得る。ＡＤの常染色体優性型の存在が既知の場合（すなわちＡＰＰ，ＰＳ１，ＰＳ２における変異）、ＭＣＩの進行はＡＤ認知症への前兆である可能性が最も高い。これらの場合の大多数は早期のＡＤ発症に発展し得る（すなわち６５歳以上での発症）。

【0096】

さらに、後期のＡＤ認知症発症の発展における遺伝子影響がある。たとえば、アポリタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）遺伝子における１つまたは２つのε４対立遺伝子の存在は、広くＡＤ認知症後記発症の危険性を増やすとして認められている遺伝的変異である。証拠は、ＭＣＩの臨床的認知的あるいは病院学的基準に達しおよびＡＰＯＥε４陽性である個人は、数年内にＡＤ認知症に進行する可能性が遺伝子特徴を有しない個人に比べ高いということを示している。負荷遺伝子がＡＰＯＥよりは小さいが重要な役割を果たし、ＡＤ認知症への進行の危険性における変化をもたらすと考えられている（例Ｂｅｒｔｒａｍら（２０１０）Ｎｅｕｒｏｎ，２１：２７０−２８１を参照）。

【0097】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される予防方法に適する対象は上記の主要な臨床基準の１つ以上を有すると特定された対象、および／または例えば下記のような１つ以上のＭＣＩに対する「研究基準」を有すると特定された対象を含むがこれに限られる必要はない。

【0098】

ＭＣＩの特定／予後判定の「研究基準」は、ＭＣＩ症候群がＡＤの病態生理学的過程によるものであるという可能性を増加させるバイオマーカーを含むが、これに限られない。特定の理論にとらわれず、臨床基準およびバイオマーカーの共同適用は、ＭＣＩ症候群がＡＤ病態生理学的過程によるものであるということの様々な確実性をもたらすと考えられている。ある特定の実施形態において、最も研究され、臨床転帰に適用されている２つのカテゴリーのバイオマーカーが熟慮されている。これらは「Ａβ」（ＣＳＦＡβ_４２、および／またはＰＥＴアミロイド結像を含む）および「ニューロン損傷のバイオマーカー」（ＭＲＩ上でのＣＳＦタウ／ｐ−タウ、海馬、または側頭葉内側部萎縮、およびＰＥＴまたはＳＰＥＣＴで上での側頭頭頂／楔前部代謝低下または低循環を含むがこれに限られない。）

【0099】

特定の理論にとらわれず、Ａβおよびニューロン損傷（タウ／ｐ−タウの増加またはＡＤ特有の地形模様におけるバイオマーカー結像）の兆候は共にＡＤ病態生理学的過程が存在することの最も高い可能性をもたらす。逆に、これらのバイオマーカーが陰性である場合、これは別の診断の可能性に関する情報を供給し得る。バイオマーカーに関する発見は相反する可能性があり、したがっていかなるバイオマーカーの組み合わせも鑑別診断状況における使用において指示的（指示尺度）でありそれ自身は決定的ではない。異常の異なる重症度は様々な可能性または予後をもたらす可能性があり、それらは広範囲の適用には正確に量で表すのが困難であることを認める。

【0100】

臨床的および認知的ＭＣＩ症候群が病因学としてのＡＤに一致する潜在ＭＣＩ患者にとって、バイオマーカー分析の追加は診断におけるあるレベル確実性をもたらす。エピソード記憶障害および推定変性病因の兆候を含む、ＭＣＩの臨床的および認知的症候群が確立された最も典型的な例において、最も可能性の高い要因はＡＤの神経変性過程である。しかしながら、最終的な結果はなお可変の程度の確実性を有する。ＡＤ認知症への進行の可能性は認知減退の重症度およびＡＤ病態生理が根底の原因であると示唆する証拠の性質によって異なる。特定の理論にとらわれず、ニューロン損傷を反映する陽性バイオマーカーは認知症への進行が数年以内に起こる可能性を増加させ、Ａβ蓄積およびニューロン損傷を反映する陽性発見は共にその診断がＡＤによるＭＣＩであるという最も高い可能性をもたらすと考えられている。

【0101】

陽性Ａβバイオマーカーおよびニューロン損傷の陽性バイオマーカーは、ＭＣＩ症候群はＡＤ過程によるものであるという指摘を供給し、対象は本明細書に記載される方法に適切である。

【0102】

ニューロン損傷バイオマーカーが検査されていないまたは検査されることができない状況における陽性ＡβバイオマーカーまたはＡβバイオマーカーが検査されていないまたは検査されることができない状況におけるニューロン損傷の陽性バイオマーカーはＭＣＩ症候群がＡＤによるものであるという中級の可能性を示す。そのような対象は本明細書に記載される方法に適すると思われる。

【0103】

Ａβ及びニューロン損傷双方に対す陰性バイオマーカーは、ＭＣＩ症候群がＡＤによるものではないということを示す。そのような例において患者は本明細書に記載される方法に適さない可能性がある。

【0104】

磁気共鳴映像法が軽度認知機能障害から後期アルツハイマー病への脳における灰白質の進行性消失を含む劣化を観察することができるという証拠がある（例えば、Ｗｈｉｔｗｅｌｌら（２００８）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ７０（７）：５１２−５２０）。ＰｉＢ ＰＥＴ結像として知られる技術は、それらの沈着と選択的に結合するＣ１１トレーサーを用いて生きている対象におけるベータアミロイド沈着の領域および形を明確に示す（例Ｊａｃｋら（２００８）Ｂｒａｉｎ １３１（Ｐｔ３）：６６５−６８０）。

【0105】

ある特定の実施形態において、ＭＣＩは典型的に１）記憶障害の兆候、２）一般的認知的および機能的能力の保存の観察、３）診断された認知症の不在がある場合に診断される。

【0106】

ある特定の実施形態において、ＭＣＩおよびアルツハイマー病の段階は部分的に臨床的認知症評価（ＣＤＲ）のスコアによって特定、分類され得る。ＣＤＲはアルツハイマー病および関連する認知症に適応できる認知的および機能的能力の６領域、すなわち記憶、見当識、判断力および問題解決、社会適応、家庭および趣味、および身の回りの世話を特徴付けるために用いられる５点尺度である。各評価に必要な情報は患者および信頼できる情報提供者または副次的情報源（例えば、家族）の半構造化面接を通して獲得される。

【0107】

ＣＤＲ表は、面接データおとび臨床判断に基づき適切な評価をする臨床医を導く説明的いかりを提供する。各領域に対する評価に加え、ＣＤＲスコアの全体がアルゴリズムの使用を通して算出される。このスコアは患者の障害／認知症のレベルを特徴付けるおよび追跡するのに有益である：０＝通常、０．５＝非常に軽度な認知症、１＝軽度認知症、２＝中度認知症および、３＝重度認知症。実例となるＣＤＲ表を表１に示す。

【0108】

【表1】

【0109】

約０．５または約０．５から１．０のＣＤＲ評価は大抵臨床的に関連のあるＭＣＩと見なされる。高いＣＤＲ評価はアルツハイマー病への進行を示唆するものであり得る。

【0110】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される１つ以上の薬剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または、当該ＡＳＢＩ、当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、プロドラッグ）の投与は、タウ、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、ＡＰＰネオ、可溶性Ａβ４０、可溶性Ａβ４２および／またはＡβ４２／Ａβ４０比率からなる群から選択される１つ以上の構成要素のレベルのＣＳＦにおける減少がある場合、および／または、対象の脳におけるプラーク負荷の減少がある場合、および／または、対象の脳におけるプラーク形成の速度の減少がある場合、および／または、対象の認知能力における改善がある場合、および／または、対象による生活の質の認識された向上がある場合、および／または、臨床的認知症評価（ＣＤＲ）における大きな減少がある場合、および／または、臨床的認知症評価の増加のペースが遅延したあるいは停止した場合、および／または、ＭＣＩからＡＤ早期段階への進行が遅延したあるいは停止した場合において、効果的であると見なされる。

【0111】

いくつかの実施形態において、ＭＣＩの診断はいくつかの臨床検査の結果を考慮して決定付けられ得る。例えば、Ｇｒｕｎｄｍａｎら、Ａｒｃｈ Ｎｅｕｒｏｌ（２００４）６１：５９−６６は、客観的記憶障害を特定するための簡単な記憶試験（段落の想起）、記憶以上のより広い認知障害を除外するための全般認知の測定（以下詳細に記載のミニ認知状態試験（ＭＭＳＥ））、および患者の記憶病訴および記憶障害を確認して患者が認知症を患わないことを保証するための、患者と介護者との構造臨床面談を使用しＭＣＩの診断を臨床的効率に確定可能である。ＭＣＩの患者は、平均して、この一連の試験に含む非記憶認知測定で、標準より下１標準偏差（ＳＤ）未満の結果となる。学習、注意、カテゴリー流暢性、認知速度および実行機能の検査はＭＣＩを有する患者において損なわれる可能性があるが、これらは記憶障害に比べ圧倒的に顕著ではない。

【0112】

アルツハイマー病（ＡＤ）
ある特定の実施形態において、活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異性体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、または、その類似体、誘導体、プロドラッグ）、および／または、それらの製剤がアルツハイマー病の治療のために企図される。そのような例において、本明細書に記載される方法は、アルツハイマー病（ＡＤ）の発症を防止するまたは遅延させる、対象が臨床ＡＤ診断へ移行した場合ＡＤの重症度を減少させる、および／または、アルツハイマー病の１つ以上の症状を軽減するのに有益である。

【0113】

具体的に、アルツハイマー病が早期段階の場合、方法は１つ以上のＡＤ特有の症状を減少させるまたは除去する、および／または、ＭＣＩからアルツハイマー病初期又は後期段階への進行を遅延させるまたは防止することができる。

【0114】

現在アルツハイマー病を患っている個人は、特徴的認知症、ならびに上記危険性要素の存在から認識され得る。さらに、多くの診断検査がＡＤを有する個人を特定するために使用可能である。現在アルツハイマー病を患っている個人は、特徴的認知症、上記危険性要素の存在から認識され得る。さらに、多くの診断検査がＡＤを有する個人を特定するために使用可能である。これらはＣＳＦタウ、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）ｓＡＰＰα、ｓＡＰＰβ、Ａβ４０、Ａβ４２レベル、および／または、Ｃ末端切断ＡＰＰ断片（ＡＰＰネオ）の測定を含む。増加したタウ、ｐＴａｕ、ｓＡＰＰβ、および／または、ＡＰＰネオ、および／または、減少したｓＡＰＰα、可溶性Ａβ４０および／または可溶性Ａβ４２レベルは、特に鑑別診断状況において、ＡＤの存在を示す。

【0115】

ある特定の実施形態において、治療に適する対象はアルツハイマー病を有する可能性がある。アルツハイマー病を患っている個人はアルツハイマー病および関連障害協会（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（ＡＤＲＤＡ）基準によっても診断され得る。ＮＩＮＣＤＳ−ＡＤＲＤＡアルツハイマー病基準は１９８４年に神経および伝達障害および脳卒中国立機関（ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｖｅ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ ａｎｄ Ｓｔｒｏｋｅ）、および、アルツハイマー病および関連障害協会（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ Ｒｅｌａｔｅｄ Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）（現在はアルツハイマー協会として知られる）によって提言され、アルツハイマー病（ＡＤ）の診断に最も用いられるものの１つである。ＭｃＫｈａｎｎ、ら（１９８４）Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ３４（７）： ９３９−４４。この基準によると、認知機能障害および疑わしい認知症の存在は、有危険性または推定ＡＤの臨床診断のための神経心理学的検査によって確認されるべきである。しかしながら、組織病理学的確認（脳組織の顕微鏡検査）が概して決定的診断に用いられる。ＮＩＮＣＤＳ−ＡＤＲＤＡアルツハイマー病基準はＡＤにおいて損なわれ得る８認知領域、すなわち記憶、言語、知覚能力、注意、構成能力、見当識、問題解決および機能的能力を特定する。これらの基準はよい信頼性および妥当性を示す。

【0116】

患者機能の基本的評価は、ミニメンタルステート検査のような古典的な精神測定法（Ｆｏｌｓｔｅｉｎら（１９７５）Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １２ （３）：１８９−１９８）および、アルツハイマー病を有する患者の状態と機能を評価する包括的尺度であるアルツハイマー病評価尺度（ＡＤＡＳ）を用いて表すことができる（例Ｒｏｓｅｎら（１９８４）Ａｍ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒ．，１４１：１３５６−１３６４を参照）。これらの精神測定尺度はアルツハイマー病の状態の進行の測定基準を供給する。適性質的人生尺度（Ｓｕｉｔａｂｌｅ ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ｌｉｆｅ ｓｃａｌｅｓ）は治療を観察するためにも用いられ得る。疾患進行の程度はミニメンタルステート検査（ＭＭＳＥ）を用いて決定付けられ得る（例えば、Ｆｏｌｓｔｅｉｎらｓｕｐｒａを参照）。２５点（３０点中）以上のいかなるスコアも事実上標準（正常）である。これより低い場合、スコアは重度（≦９点）、中度（１０〜２０点）または軽度（２１〜２４点）のアルツハイマー病を示す。

【0117】

アルツハイマー病は表２に示されるように、１）中度認知低下（中期または早期アルツハイマー病）、２）中程度に重い認知低下（中度または中期アルツハイマー病）、３）重度認知低下（中度重度または中期アルツハイマー病）および４）極めて重度の認知低下（重度または後期アルツハイマー病）を含む様々な段階に分類される。

【0118】

【表2A】

【表2B】

【0119】

様々な実施形態において、アルツハイマー病と診断された対象への、本明細書に記載される１つ以上の薬剤の投与は、タウ、リン酸化タウ（ｐＴａｕ）、ＡＰＰネオ、可溶性Ａβ４０、可溶性Ａβ４２、および／またはＡβ４２／Ａβ４０比率からなる群から選択される１つ以上の構成要素のレベルのＣＳＦにおける低下がある場合、および／または、対象の脳におけるプラーク負荷の減少がある場合、および／または、対象の脳におけるプラーク形成の速度の減少がある場合、および／または、対象の認知能力における改善がある場合、および／または、対象によって認知される生活の質改善がある場合、および／または、対象の臨床的認知症等級（ＣＤＲ）における相当な低下がある場合、および／または、臨床的認知症等級における増加のペースが遅延または停止した場合、および／または、ＡＤの進行が遅延または停止した場合（例えば、表３に示した１つの段階から別の段階への進行が遅延または停止した場合）に効果的であると見なされる。

【0120】

ある特定の実施形態において、本方法が適している対象は概してアルツハイマー病以外の精神疾患または障害を有しない。例えば、ある特定の実施形態において、対象はパーキンソン病および／または統合失調症および／または視診病のような神経疾患または障害を有しないおよび危険性を有しない。

【0121】

活性剤
本明細書に記載される方法は、例えばガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグのような１つ以上の活性剤の投与が、例えば軽度認知機能障害、アルツハイマー病、黄斑変性症等のような脳におけるアミロイド沈着によって特徴づけられる疾患の治療および／または予防に用途を見い出すという発見に部分的に基づいている。

【0122】

バイオフラボノイド
ある特定の実施形態において本明細書に記載される方法において用いられる活性剤はガランギンまたはルチンのようなフラボノイド、および／またはその誘導体および／または類似体を含む。ある特定の実施形態において、フラボノイドは式：

【0123】

【化4】

【0124】

で表される、フラボノイドであり、
式中、Ｒ^１はＯＨ、Ｏ−サッカリド、Ｏ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｏ−アリール、Ｏ−ヘテロアリールからなる群から選択され、
Ｒ^４およびＲ^５はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｏ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｓ−アルキル、Ｓ−アリール、カルボン酸塩、ハロゲン、ＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨＣＯ−アルキル、およびヘテロアリール、アルキル尿素、およびカルバミン酸塩からなる群から独立的に選択され、
Ｒ^２およびＲ^３はＨ、ＯＨ、ＮＨ_２、Ｏ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｓ−アルキル、Ｓ−アリール、カルボン酸塩、ハロゲン、ＮＨ−アルキル、Ｎ，Ｎ−ジアルキル、ＮＨＣＯ−アルキル、ヘテロアリール、アルキル尿素、およびカルバミン酸塩からなる群から独立的に選択される。

【0125】

ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２はＯＨでありＲは^３ＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はＯ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態においてＯ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルのアルキル構成要素は、Ｃ_１−１２アルキルまたはＣ_１−９アルキルまたはＣ_１−６アルキルまたはＣ_１−３アルキルである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はハロゲンである。ある特定の実施形態においてＲ^２はハロゲンでありＲ^３はハロゲンである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はＣｌ、Ｂｒ、ＦｌおよびＩからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^２および／またはＲ^３はＳ−アリールおよびヘテロアリールからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は独立的に選択されるＳ−アリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は独立的に選択されるヘテロアリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＯＨである。ある特定の実施形態においてＲ^４はＨでありＲ^５はＯＨである、またはＲ^４はＯＨでありＲ^５はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はＯＨでありＲ^５はＯＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＨである。ある特定の実施形態においてＲ^４はＨでありＲ^５はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５がＯＨである場合、Ｒ^１はＯ−サッカリドである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＯ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^４およびＲ^５はＯ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、当該Ｏ−アルキル、Ｓ−アルキル、ＮＨ−アルキルおよびＮＨＣＯ−アルキルのアルキル構成要素はＣ_１−１２アルキル、またはＣ_１−９アルキル、またはＣ_１−６アルキル、またはＣ_１−３アルキルである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４およ
び／またはＲ^５はハロゲンである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４はハロゲンでありＲ^５はハロゲンである。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＣｌ、Ｂｒ、Ｆｌ、およびＩからなる群から独立的に選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^４および／またはＲ^５はＳ−アリールおよびｈｅｔｅｒからなる群から選択される。ある特定の実施形態において、Ｒ^４およびＲ^５は独立的に選択されるヘテロアリールである。ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＯ−サッカリドである（例えば、Ｏ−単糖、Ｏ−二糖、Ｏ−三糖等）。ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＯ−アルキル、Ｏ−トリフルオロメチル、Ｏ−アリールまたはＯ−ヘテロアリールである。

【0126】

ある特定の実施形態において、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤はガランギンまたはその誘導体である。ある特定の実施形態において、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤はルチンまたはその誘導体である。

【0127】

本明細書で企図される、ガランギンおよび／またはルチンその様々な誘導体の製造方法は当業者に公知である。ガランギンおよびルチンの両者はある誘導体と同様に市販されている。

【0128】

これらの化合物は、当業者に公知の方法を用い、本明細書に記載される様々な誘導体および類似体を調製するためにさらに官能化され得る。例えば実施例２に記載した手順は、様々な市販のジヒドロキシ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−オンを用い、類似体の合成において用いられる。アセトキシ基への変換は実施例２に記載されるように成される。ジメチルジオキシランでの処理が３−ヒドロキシフラボンへ変換するために用いられる。さらなる弱塩基による加水分解がアセトキシ保護基を除去するために成され、フラボン誘導体の粗混合物は、求められるフラボン類似体を獲得するため、フラッシュ・クロマトグラフィーおよび再結晶によって精製される。

【0129】

フラボノイドプロドラッグ
ある特定の実施形態において本明細書に記載される様々なフラボノイドはフラボノイドプロドラッグとして提供され得ることが企図される。実例となるガランギンプロドラッグを図２に示す。

【0130】

ある特定の実施形態において、プロドラッグは、式ＩＩ：

【0131】

【化5】

【0132】

で表されるガランギンプロドラッグであり、
式中、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３はＨである、または哺乳類の体内において除去された保護基であり、そこにおいてＲ^１、Ｒ^２およびＲ^３の１つ以上がＨではなく、そこにおいて当該プロドラッグは哺乳類に投与された場合、ＡＰＰのＢＡＣＥ処理を部分的または完全に阻害する）。

【0133】

ある特定の実施形態においてＲ^１、Ｒ^２およびＲ^３のうちの少なくとも１つが、Ｒ^１、Ｒ^２およびＲ^３のうちの少なくとも１つが次からなる群から独立的に選択されるからなる群から独立的に選択される。

【0134】

【化6】

【0135】

ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２は上記ａ基であり、Ｒ^３は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態においてＲ^３は上記ａ基であり、Ｒ^２は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態においてＲ^２およびＲ^３は両方とも上記ａ基である。

【0136】

ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２は上記ｂ基であり、Ｒ^３は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^３は上記ｂ基であり、Ｒ^２は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は両方とも上記ｂ基である。

【0137】

ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２は上記ｃ基であり、Ｒ^３は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^３は上記ｃ基であり、Ｒ^２は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は両方とも上記ｃ基である。

【0138】

ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２はｄ基であり、Ｒ^３は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態においてＲ^３は上記ｄ基であり、Ｒ^２は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は両方とも上記ｄ基である。

【0139】

ある特定の実施形態において、Ｒ^１はＨである。ある特定の実施形態において、Ｒ^２は上記ｅ基であり、Ｒ^３は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^３はｅ基であり、Ｒ^２は上記ａ，ｂ，ｃ，ｄ，またはｅ基である。ある特定の実施形態において、Ｒ^２およびＲ^３は両方とも上記ｅ基である。

【0140】

本明細書に記載されるようなガランギンプロドラックの調製方法は当業者に公知である。

【0141】

そのような手順の１つを実施例２に記載する。（化合物２の合成には図１１の合成図を参照）

【0142】

様々な活性剤および合成図は実例を意図するものであり制限的ではない。本明細書で提供される教示を用い、多数の他のフラボノイド、フラボノイド誘導体およびフラボノイドプロドラッグＡＳＢＩ化合物を当業者によって合成することができる。

【0143】

製剤処方
ある特定の実施形態において、本明細書に記載される１つ以上の活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ、当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）は、それを必要とする哺乳類、例えばアミロイド前駆体タンパク質の異常な処理によって特徴づけられる疾患の危険性を有するまたは罹患している哺乳類、ＭＣＩからアルツハイマー病への進行の危険性を有する哺乳類等に投与される。ある特定の実施形態において、活性剤は、前アルツハイマー病疾患および／または認知機能障害の発症を防止するまたは遅延させるため、および／または、前アルツハイマー病認知機能障害の１つ以上の症状を改善するため、および／または、前アルツハイマー病疾患または認知機能障害からアルツハイマー病への進行を防止するまたは遅延させるため、および／または、非アミロイド生成性経路によってアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の処理を促進するために投与される。

【0144】

活性剤は生来の形態、または所望であれば、塩、エステル、アミド、プロドラッグまたは誘導体が薬理学上適切すなわち現在の方法において効果的であるという条件の下、塩、エステル、アミド、プロドラッグ、誘導体、等の形態で投与され得る。塩、エステル、アミド、プロドラッグまたは活性剤の他の誘導体は、有機合成化学の当業者に公知の標準手順、例えばＭａｒｃｈ（１９９２）Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ； Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４ｔｈ Ｅｄ．Ｎ．Ｙ．Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ記載の標準手順、および上記標準手順を用いて調製され得る。

【0145】

例えば、薬学的に許容可能な塩は、塩を形成することができる官能基を有する本明細書に記載される薬剤に対して調製され得る。薬学的に許容可能な塩は、親化合物の作用を保持し、それが投与された対象およびそれが投与された状況に有害または逆効果をもたらさないあらゆる塩である。

【0146】

様々な実施形態において、薬学的に許容可能な塩は有機または無機塩基から得ることができる。塩は一価または多価イオンであってもよい。特に対象となるのは、無機イオンである、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、およびマグネシウムである。有機塩はアミン、具体的にはモノアルキル、ジアルキル、またはトリアルキルアルキルアミン、またはエタノールアミンのようなアンモニウム塩で生成されてもよい。塩はカフェイン、トロメタミンおよび類似分子で形成されてもよい。

【0147】

塩、エステル、アミド、プロドラッグ等として薬学的活性剤を製剤する方法は当業者に公知である。例えば塩は、適切な酸との反応を典型的に含む従来の方法を用いて遊離塩基から調製され得る。概して、薬品の塩基形がメタノールやエタノールのような極性有機溶媒において溶解され、そこに酸が添加される。結果として生じる塩は沈殿するか、またはより極性の低い溶媒を加えることで溶液から取り出される。酸付加塩を調製するために適切な酸は、有機塩酸、例えば、酢酸、プロビオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸等、および、無機塩酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等を含むがこれに限られない。酸付加塩は適切な塩基での処理によって遊離塩基に再変換することができる。本明細書に記載される活性剤の、ある特定の、特に望ましい酸付加塩は、塩化水素酸または臭化水素酸を用いて調製されるようなハロゲン化物塩を含む。反対に、本発明の活性剤の塩基性塩の調製は、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、トリメチルアミン等のような薬学的に許容可能な塩基を用いた同様の方法で調製される。特に望ましい塩基性塩はアルカリ金属塩、例えば、ナトリウム塩、および銅塩を含む。

【0148】

塩基性薬品の塩形態の調製には、対イオンのｐＫａは薬品のｐＫａより最低で約２ｐＨ単位低いことが好ましい。同様に酸性薬品の塩形態の調製には、対イオンのｐＫａは、薬品のｐＫａより最低で約２ｐＨ単位高いことが好ましい。これは対イオンが溶液のｐＨを、塩プラトーに至るためにｐＨ_ｍａｘよりも低いレベルにすることを可能にし、ここでは塩の可溶性が遊離酸または遊離塩基の可溶性より優勢となる。医薬品有効成分（ＡＰＩ）におけるイオン化基のｐＫａ単位、および、酸または塩基における相違の一般化された規則はプロトン移動をエネルギー的に起こりやすくすることを意図するものである。ＡＰＩのｐＫａと対イオンが大きく異ならない場合、水性の環境で固体複合物は形成するがすぐに不均化を起こし得る（すなわち薬品および対イオンのそれぞれに分解する。）

【0149】

好適には、対イオンは薬学的に許容可能な対イオンである。適切な陰イオン塩形態は、酢酸、安息香酸、ベンジレート、酒石酸、臭化物、炭酸、塩化物、クエン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、フマル酸、グルセプチン酸、グルコン酸塩、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヨウ化物、乳酸塩、ラクトビオン酸、リンゴ酸、マレイン酸、マンデル酸、メシラート、臭化メチル、粘液酸、ナプシル酸、硝酸塩、パモ酸（エンボネート）、リン酸塩および二リン酸塩、サリチル酸塩および二サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸エステル塩、硫酸塩、酒石酸塩、トシレート、トリエチオダイド、吉草酸塩等を含むがこれに限られず、一方で、適切な陽イオン形態は、アルミニウム、ベンザチン、カルシウム、エチレンジアミン、リジン、マグネシウム、メグルミン、カリウム、プロカイン、ナトリウム、トロメタミン、亜鉛等を含むが、これに限られない。

【0150】

エステルの調製は典型的に活性剤の分子構造内に存在するヒドロキシル基および／またはカルボキシル基の官能基化を含む。ある特定の実施形態において、エステルは典型的にアシル置換された遊離アルコール基の誘導体、すなわちＲがアルキルで、好適には低アルキルの、式ＲＣＯＯＨのカルボン酸から誘導された部分である。エステルは、消耗であれば、従来の水素化分解または加水分解手順によって遊離塩基に再変換され得る。

【0151】

アミドもまた当業者に公知または関連文献に記載の技術を用いて調製できる。例えば、アミドは、適切なアミン反応物質を用いエステルから調製され得、またはアンモニアまたは低アルキルアミンとの反応により無水物または酸塩化物から調製され得る。

【0152】

様々な実施形態において、本明細書に特定される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）は、１つ以上の本明細書に記載される病理／適応の予防的および／または治療的療法（例えば、過剰アミロイドプラーク形成および／または沈着または不要アミロイドまたは前アミロイド処理によって特徴づけられる病理）のために、非経口投与、局所投与、経口投与、経鼻投与（または別の方法による吸引）、直腸投与、またはエアロゾールまたは経皮による局所投与に有益である。

【0153】

本明細書に記載される活性剤は薬学的に許容可能な担体（添加剤）と結合することができ、薬理組成物を形成する。薬学的に許容可能な担体は１つ以上の生理的に許容可能な化合物を含むことができ、それは例えば組成物を安定させるまたは活性剤の吸収を増加または減少させる働きをする。生理的に許容可能な化合物は、例えば、グルコース、スクロースのような炭水化物、またはデキストラン、アスコルビン酸、グルタチオンのような抗酸化物質、キレート剤、低分子量タンパク質、脂質のような保護及び摂取促進剤、活性剤のクリアランスまたは加水分解を減少させる組成物、または添加剤又は他の安定剤および／または緩衝剤を含むことができる。

【0154】

他の生理的に許容可能な化合物で、具体的に錠剤、カプセル、ジェルカプセル等の調製に有益なものは、結合剤、希釈剤／増量剤、崩壊剤、滑沢剤、懸濁化剤等を含むがこれに限られない。

【0155】

ある特定の実施形態において、経口投薬形態（例えば、錠剤）を製造するためには、例えば、賦形剤（例えば、ラクトース、スクロース、デンプン、マンニトール等）、任意の崩壊剤（例えば、炭酸カルシウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスポヒドン等）、結合剤（例えば、αデンプン、アラビアゴム、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、シクロデキストリン等）、および任意の滑沢剤（例えば、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００等）が活性成分（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）に加えられ、結果として得られる組成物が圧縮される。必要な場合、圧縮された生成物は、味を消すため、または腸溶性または持続放出性のために、公知の方法を用いて被覆される。適切な被覆物質はエチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）、エチレングリコール、酢酸フタル酸セルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびＥｕｄｒａｇｉｔ（ＲｏｈｍおよびＨａａｓ、ドイツ、メタクリル酸アクリル共重合体）を含むがこれに限られない。

【0156】

他の生理的に許容可能な化合物は湿潤剤、乳化剤、分散剤または防腐剤を含み、防腐剤は、微生物の成長および活動を防止することに特に有益である。様々な防腐剤が公知であり、例えばフェノールおよびアスコルビン酸を含む。当業者は、生理的に許容可能な化合物を含む薬学的に許容可能な担体の選択は、例えば活性剤の投与経路および活性剤の具体的な生理化学的特徴に左右されるということをよく理解するだろう。

【0157】

ある特定の実施形態において、添加剤は無菌であり、概して望ましくない物質を含まない。これらの組成物は従来の公知の滅菌技術で滅菌され得る。錠剤およびカプセルのような様々な経口投薬形態添加剤には無菌状態は要求されない。ＵＳＰ／ＮＦ基準が通常十分である。

【0158】

調剤組成物は投与方法に応じて、様々な単位投与形態で投与され得る。適切な単位投薬形態は、粉末、錠剤、丸剤、カプセル、トローチ剤、坐薬、パッチ、スプレー式点鼻薬、注射剤、埋め込み型持続放出製剤、粘着性フィルム剤、局所ニス、脂質複合体等を含むがこれに限られない。

【0159】

本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）からなる調剤組成物は従来の混合、分解、粒状化、糖衣錠生成、粉末化、乳化、カプセル化、封入または凍結乾燥処理の手段によって製造され得る。調剤組成物は１つ以上の生理的に許容可能な担体、希釈剤、賦形剤または助剤を用いて、従来の方法で製剤され得、薬学的活性剤から薬学的に使用可能な調製への処理を容易にする。適切な製剤は選択された投与経路に依存する。

【0160】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤は経口投与のために製剤される。経口投与には、適切な製剤が、活性剤と経口投与に適切で当業者に公知の薬学的に許容可能な担体を混合することによって、容易に製剤され得る。そのような担体は本明細書に記載される活性剤の、錠剤、丸剤、糖衣錠、カプレット、リゼンジ、ジェルカプセル、カプセル、液剤、ジェル剤、シロップ剤、スラリー剤、懸濁液等としての治療を受ける対象への経口投与を可能にする。経口固体製剤、例えば粉末、カプセルおよび錠剤に適切な添加剤は、糖（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール）セルロース調製（例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム）、合成高分子（例えば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））のような増量剤、造粒剤、および結合剤を含み得る。所望であれば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギン酸またはアルギン酸ナトリウムのようなその塩、のような崩壊剤も加えられ得る。所望であれば固体投薬形態は、標準技術を用い、糖衣または腸溶性コーティングであり得る。腸溶性コーティング粒子の調製は例えば米国特許第４，７８６，５０５号および４，８５３，２３０号において開示される。

【0161】

吸入による投与には、活性剤が、加圧パックまたは噴霧器からエアロゾールスプレー形式で便利に送達され、高圧ガス、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切なガスを用いる。加圧エアロゾールの場合、投与単位は計量された量を送達する弁を供給することによって決定づけられる。例えば吸入具または吸入器において用いられるゼラチンのような、カプセルおよびカートリッジは、化合物の粉末混合およびラクトースまたはデンプンのような適切な粉末基剤を含み製剤され得る。

【0162】

様々な実施形態において、活性剤は坐薬または停留浣腸のような直腸または膣内組成物に製剤され得、ココアバターまたは他のグリセリドのような従来の坐薬の基剤を含む。直腸または膣内送達の活性剤製剤方法は当業者に公知であり、（例えば、Ａｌｌｅｎ（２００７） Ｓｕｐｐｏｓｉｔｏｒｉｅｓ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓを参照）活性剤と適切な基剤の組み合わせを典型的に含む（例えば、親水性（ＰＥＧ）、ココアバターまたはウィテップゾールＷ４５のような脂溶性物質）、Ｓｕｐｐｏｃｉｒｅ ＡＰおよびポリグリコライズドグリセリド等のような両親媒性物質）。基剤は所望の融解／送達プロファイルに基づき選択及び調合される。

【0163】

局所投与には、本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）は液剤、ジェル剤、軟膏、クリーム剤、懸濁剤等として製剤され得、当業者に公知の通りである。

【0164】

ある特定の実施形態において本明細書に記載される活性剤は、当業者に公知の標準方法に従って、全身投与（例えば、注入物質として）のために製剤される。全身投与は、例えば、皮下、静脈、筋内、くも膜下または腹腔内注射のような注射による投与のために意図されたもの、および経皮、経粘膜経口または肺内投与のために意図されたものを含むがこれに限られない。注射のために、本明細書に記載される活性剤は、水溶液、好適にはハンクス液、リンガー液のように生理的に相溶性のある緩衝剤、または生理食塩水緩衝剤および／またはある乳剤において製剤され得る。水溶液は、懸濁剤、安定剤および／または分散剤のようの製剤薬剤を含みうる。ある特定の実施形態において、活性剤は、適切なビヒクル、例えば滅菌発熱性物質除去蒸留水と使用前に構成される、粉末形態で提供され得る。経粘膜投与および／または血液脳関門通過のためには、関門を浸透するのに適切な浸透剤が製剤において用いられ得る。そのような浸透剤は概して当業者に公知である。注入可能製剤および吸入可能性剤は概して無菌または実質的に無菌製剤として提供される。

【0165】

前で記載された製剤に加え、活性剤はデポ製剤としても製剤され得る。そのような長期作用型製剤は埋め込み（例えば皮下または筋内）によってまたは筋内注射によって投与され得る。したがって、例えば、活性剤は適切な高分子または疎水性物質（例えば許容可能な油における乳剤として）またはイオン交換樹脂と製剤され得、または難溶性誘導体として、例えば難溶性塩として、製剤され得る。

【0166】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤はまた、従来の経皮薬品送達系すなわち「パッチ」を用い、皮膚を通して送達され得、ここで活性剤は典型的に、皮膚に添付する薬品送達装置としての役割を果たす積層構造の中に含有される。そのような構造において、薬品組成物は典型的に上部の下地層の下にある層または「貯留層」に含まれる。この文脈における「貯留層」という用語は、皮膚表面への送達に最終的に利用できる「活性成分」の量を指すということが理解されるだろう。したがって、例えば、「貯留層」は、パッチの下地層上の粘着剤における、または当業者に公知の様々な異なるマトリックス製剤のいかなるものにおける活性成分をも含みうる。パッチは単一の貯留層または複数の貯留層を含み得る。

【0167】

１つの例示的実施形態において、貯留層は薬学的に許容可能な接触粘着物質の高分子マトリックスから成り、薬品送達の間、システムを皮膚に添付する役割を果たす。適切な皮膚摂食粘着物質の例は、ポリエチレン、ポリシロキサン、ポリイソブチレン、ポリアクリル酸塩、ポリウレタン等を含むがこれに限られない。または、薬品保有貯留層および皮膚摂食粘着剤は離れて別の層に存在し、粘着剤が貯留層の下にあり、この場合貯留槽は上記のように高分子マトリックスまたは、液体あるいはヒドロゲル貯留層、または他の形態を有し得る。これらの層の下地層は、装置の上表面の役割を果たすが、好適にはパッチの主要構造要素として機能し、装置にその柔軟性の大部分を供給する。下地層に選択される物質は好適に活性剤および存在するいかなる他の物質にも実質的に不浸透である。

【0168】

または他の調剤送達系が用いられ得る。例えば、リポソーム、乳剤、およびマイクロエマルション／ナノエマルションが送達賦形剤の公知の例であり、薬学的活性化合物の保護及び送達に用いられ得る。ジメチルスルホキシドのような特定の有機溶媒も、大抵高い毒性の損失を伴うものの、また用いられ得る。

【0169】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）はナノエマルションにおいて製剤される。ナノエマルションは水中油型（Ｏ／Ｗ）ナノエマルションおよび油中水滴型（Ｗ／Ｏ）ナノエマルションを含むがこれに限られない。ナノエマルションは約２０から約１０００ｎｍの平均液滴直径を有する乳化として定義付けることができる。大抵、平均液滴サイズは約２０ｎｍまたは５０ｎｍから約５００ｎｍの間である。サブミクロンエマルション（ＳＭＥ）およびミニエマルションという用語が同義語として用いられる。

【0170】

実例となる水中油型（Ｏ／Ｗ）ナノエマルションは、界面活性剤ミセル、すなわち小分子界面活性剤または合成洗剤からなるミセル（例えば、ＳＤＳ／ＰＢＳ／２−プロパノール）、高分子ミセル−高分子、共重合体、またはブロック共重合体界面活性剤からなるミセル（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｌ６４／ＰＢＳ／２−プロパノール）、混合ミセル、すなわち２つ以上の界面活性剤要素を有するミセル、または液相（概してアルコールまたは脂肪酸化合物）の１つがミセル形成に関与するミセル（例えば、オクタン酸／ＰＢＳ／ＥｔＯＨ）、統合ミセル、すなわち活性剤が補助的界面活性剤の役割を果たし、ミセルの不可欠な部分を形成する混合ミセル、およびピカリング（固相）エマルション、すなわち活性剤が固体ナノ粒子の外側と会合する乳化（例えば、ポリスチレンナノ粒子／ＰＢＳ／非油相）を含むがこれに限られない。

【0171】

実例となる油中水滴型（Ｗ／Ｏ）ナノエマルションは、界面活性剤ミセル、すなわち小分子界面活性剤または洗剤からなるミセル（例えば、ジオクチルスルホコハク酸／ＰＢＳ／２−プロパノール、イソプロピルミリステート／ＰＢＳ／２−プロパノール等）、高分子ミセル、すなわち高分子、共重合体、またはブロック共重合体界面活性剤からなるミセル（例えば、ＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）Ｌ１２１／ＰＢＳ／２−プロパノール）、混合ミセル、すなわち２つ以上の界面活性剤要素を有するまたは液相の１つ（概してアルコールまたは脂肪酸化合物）がミセル形成に関与するミセル（例えば、カプリン酸／カプリル酸ジグリセリド／ＰＢＳ／ＥｔＯＨ）、統合ミセル、すなわち活性剤が補助的界面活性剤の役割を果たし、ミセルの不可欠な部分を形成する混合ミセル（例えば、活性剤／ＰＢＳ／ポリプロピレングリコール）、およびピカリング（固相）エマルション、すなわち活性剤が固体ナノ粒子の外側と会合するエマルション（例えば、キトサンナノ粒子／非水相／鉱油）を含むがこれに限られない。

【0172】

上に示されたように、ある特定の実施形態において、ナノエマルションは１つ以上の界面活性剤または洗剤を含む。いくつかの実施形態において、界面活性剤は非陰イオン洗剤（例えば、ポリソルベート界面活性剤、ポリオキシエチレンエーテル等）である。本発明において利用を見出す界面活性剤は、ＴＷＥＥＮ（登録商標）、ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）、およびＴＹＬＯＸＡＰＯＬ（登録商標）族の化合物のような界面活性剤を含むがこれに限られない。

【0173】

ある特定の実施形態において、エマルションはさらに１つ以上の陽イオンハロゲン保有化合物を含み、それには塩化セチルピリジニウムを含むがこれに限られない。さらなる実施形態において、組成物はさらに、組成物と微生物の相互作用を増加させる（相互作用促進剤）１つ以上の化合物（例えば、エチレンジアミン四酢酸のようなキレート剤、または緩衝剤におけるエチレンビス（オキシエチレンニトリロ）テトラ酢酸）を含む。

【0174】

いくつかの実施形態において、ナノエマルションはさらに乳化形成を支援する乳化剤かを含む。乳化剤は油水界面で凝集し２つの隣接した液滴の直接接触を防止するある種の連続膜を形成する化合物を含む。本発明のある特定の実施形態は抗病原性特性を損なうことなく水を用いて求められる濃度に容易に希釈される水中油型（Ｏ／Ｗ）乳化組成物を特徴とする。

【0175】

水相に分散した個別の油滴に加え、ある特定の水中油型エマルションは小脂質小胞（例えば、大抵いくつかの互いから水相の層で分離する実質的に同心の脂質二重層からなる脂質球）、ミセル（例えば、極性頭部基が水相に向かって外方向に面し、無極性尾部基が水相から内方向に隔離されるように配置された５０〜２００の分子の小集合体における両親媒性分子）またはラメラ相（各粒子が薄いフィルムまたは水によって分離された平行両親媒性二分子層からなる脂質分散）のような、他の脂質構造も含みうる。

【0176】

これらの脂質構造は無極性残基（例えば、長鎖炭化水素）を水から遠ざける疎水性力の結果として形成される。上記の脂質調製は概して界面活性剤脂質製剤（ＳＬＰ）として記載される。ＳＬＰは粘膜に対して最小限に有毒で、小腸内で代謝されると考えられている（例えば、Ｈａｍｏｕｄａら（１９９８）Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓｅａｓｅ １８０： １９３９を参照）。

【0177】

ある特定の実施形態において、エマルションは水相において分配される不連続な油相を含み、第１成分はアルコールおよび／またはグリセロールを含み、第２成分は界面活性剤またはハロゲン保有化合物を含む。水相はいかなるタイプの水相をも含むことができ、水（例えば、脱イオン水、蒸留水、水道水）および溶液（例えば、リン酸緩衝食塩水または他の緩衝システム）を含むがこれに限られない。油相はいかなるタイプの油をも含むことができ、植物油（例えば、大豆油、アボカド油、アマニ油、ココナッツ油、綿実油、スクアレン油、オリーブ油、菜種油、ベニバナ油およびヒマワリ油）、動物油（例えば、魚油）、香味油、不水溶性ビタミン、鉱油、および潤滑油を含むがこれに限られない。ある特定の実施形態において、油相は水中油型乳化の３０〜９０体積％を成し（すなわち最終乳化総量の３０〜９０％を構成する）、より好適には５０〜８０％である。製剤は特定の界面活性剤に制限される必要はないが、しかしながらある特定の実施形態において、界面活性剤はポリソルベート界面活性剤（例えば、ＴＷＥＥＮ ２０（登録商標）、ＴＷＥＥＮ ４０（登録商標）、ＴＷＥＥＮ ６０（登録商標）、およびＴＷＥＥＮ ８０（登録商標））、フェノキシポリエトキシエタノール（例えば、ＴＲＩＴＯＮ（登録商標）Ｘ−１００、Ｘ−３０１、Ｘ−１６５、Ｘ−１０２およびＸ−２００、およびＴＹＬＯＸＡＰＯＬ（登録商標））またはドデシル硫酸ナトリウム等である。

【0178】

ある特定の実施形態においてハロゲン含有成分が存在する。ハロゲン含有化合物の本質、いくつかの好適な実施形態においてハロゲン含有化合物は、塩化物塩（例えば、ＮａＣｌ、ＫＣｌ等）、ハロゲン化セチルピリジニウム、ハロゲン化セチルトリメチルアンモニウム、ハロゲン化セチルジメチルアンモニウム、ハロゲン化セチルジメチルベンジルアンモニウム、ハロゲン化セチルトリブチルホスホニウム、ハロゲン化ドデシルトリメチルアンモニウム、ハロゲン化テトラデシルトリメチルアンモニウム、塩化セチルピリジニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化セチルベンジルジメチルアンモニウム、臭化セチルピリジニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、臭化セチルジメチルエチルアンモニウム、臭化セチルブチルホスホニウム、臭化ドデシルトリメチルアンモニウム、臭化テトラデシルトリメチルアンモニウム等を含む。

【0179】

ある特定の実施形態において、エマルションは第４級アンモニウム化合物を含む。第４級アンモニウム化合物は、Ｎ−アルキルジメチルベンジルアンモニウムサッカリン酸塩、１，３，５−トリアジン−１，３，５（２Ｈ，４Ｈ，６Ｈ）−トリエタノール、１−デカナミニウム、Ｎ−デシル−Ｎ，Ｎ−ジメチル−、塩化物（または）塩化ジデシルジメチルアンモニウム、２−（２−（ｐ−（ジイソイソブイル）クレソキシ）エトキシ）塩化エチルジメチルベンジルアンモニウム、２−（２−（ｐ−（ジイソブチル）フェノキシ）エトキシ）塩化エチルジメチルベンジルアンモニウム、アルキル１または３ベンジル−１−（２−ヒドロキセチル）−２−塩化イミダゾリニウム、アルキルビス（２−ヒドロキシエチル）塩化ベンジルアンモニウム、塩化アルキルデメチルベンジルアンモニウム、アルキルジメチル３，４−塩化ジクロロベンジルアンモニウム（１００％Ｃ１２）、アルキルジメチル３，４−塩化ジクロロベンジルアンモニウム（５０％Ｃ１４、４０％Ｃ１２、１０％Ｃ１６）、アルキルジメチル３，４−塩化ジクロロベンジルアンモニウム（５５％Ｃ１４、２３％Ｃ１２、２０％Ｃ１６）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（１００％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（１００％Ｃ１６）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（４１％Ｃ１４、２８％Ｃ１２）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（４７％Ｃ１２、１８％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（５５％Ｃ１６、２０％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（５８％Ｃ１４、２８％Ｃ１６）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（６０％Ｃ１４、２５％Ｃ１２）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（６１％Ｃ１１、２３％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（６１％Ｃ１２、２３％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（６５％Ｃ１２、２５％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（６７％Ｃ１２、２４％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（６７％Ｃ１２、２５％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（９０％Ｃ１４、５％Ｃ１２）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（９３％Ｃ１４、４％Ｃ１２）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（９５％Ｃ１６、５％Ｃ１８）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（および）塩化ジデシルジメチルアンモニウム、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（脂肪酸内の）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（Ｃ１２−Ｃ１６）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム（Ｃ１２−Ｃ１８）、塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウムおよび塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、塩化アルキルジメチルジメチベンジルアンモニウム、臭化アルキルジメチルエチルアンモニウム（９０％Ｃ１４、５％Ｃ１６、５％Ｃ１２）、臭化アルキルジメチルエチルアンモニウム（大豆油の脂肪酸内の混合アルキルおよびアルケニル基）、塩化アルキルジメチルエチルベンジルアンモニウム、塩化アルキルジメチルエチルベンジルアンモニウム（６０％Ｃ１４）、塩化アルキルジメチルイソプロイルベンジルアンモニウム（５０％Ｃ１２、３０％Ｃ１４、１７％Ｃ１６、３％Ｃ１８）、塩化アルキルトリメチルアンモニウム（５８％Ｃ１８、４０％Ｃ１６、１％Ｃ１４、１％Ｃ１２）、塩化アルキルトリメチルアンモニウム（９０％Ｃ１８、１０％Ｃ１６）、塩化アルキルジメチル（エチルベンジル）アンモニウム（Ｃ１２−１８）、ジ（Ｃ８−１０）−アルキルジメチルアンモニウム塩化物、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、塩化ジアルキルジメチルアンモニウム、塩化ジアルキルメチルベンジルアンモニウム、塩化ジデシルジメチルアンモニウム、塩化ジイソデシルジメチルアンモニウム、塩化ジオクチルジメチルアンモニウム、塩化ドデシルビス（２−ヒドロキシエチル）オクチル水素アンモニウム、塩化ドデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ドデシルカーバモイルメチルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘプタデシルヒドロキシエチルイミダゾリニウム、ヘキサヒドロ−１，３，５−スリス（２−ヒドロキシエチル）−ｓ−トリアジン、塩化ミリスタルコニウム（および）ＱｕａｔＲＮＩＵＭ１４、Ｎ，塩化Ｎ−ジメチル−２−ヒドロキシプロピルアンモニウムポリマー、ｎ−塩化アルキルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ｎ−アルキルジメチルエチルベンジルアンモニウム、塩化ｎ−テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム一水和物、塩化オクチルデシルジメチルアンモニウム、塩化オクチルドデシルジメチルアンモニウム、塩化オクチフェノキシエトキシエチルジメチルベンジルアンモニウム、オキシジエチレンビス（塩化アルキルジメチルアンモニウム）、第４級アンモニウム化合物、ジココアルキルジメチル、塩化物、塩化トリメトルキシリプロピルジメチルオクタデシルアンモニウム、トリメトキシリルｑｕａｔｓ、塩化トリメチルドデシルベンジルアンモニウム、ｎ−塩化ドデシルジメチルエチルベンジルアンモニウム、ｎ−塩化ヘクサデシルジメチルベンジルアンモニウム、ｎ−塩化テトラデシルジメチルベンジルアンモニウム、ｎ−塩化テトラデシルジメチルエチルベンジルアンモニウム、およびｎ−塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムを含むがこれに限られない。

【0180】

ナノエマルション製剤およびその生成方法は当業者に公知であり、例えば以下に記載される：米国特許第７，４７６，３９３、７，４６８，４０２、７，３１４，６２４、６，９９８，４２６、６，９０２，７３７、６，６８９，３７１、６，５４１，０１８、６，４６４，９９０、６，４６１，６２５、６，４１９，９４６、６，４１３，５２７、６，３７５，９６０、６，３３５，０２２、６，２７４，１５０、６，１２０，７７８、６，０３９，９３６、５，９２５，３４１、５，７５３，２４１、５，６９８，２１９および５，１５２，９２３号およびＦａｎｕｎら（２００９）Ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｏｎｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ）， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔａｎ Ｆｌ．。

【0181】

ある特定の実施形態において、１つ以上の本明細書に記載される活性剤は、例えば希釈可能状態で貯蔵容器内に（例えば、あらかじめ計量された量で）、または可溶性カプセル内に、ある量の水、アルコール、水素、過酸化物、または他の希釈剤へ追加可能状態で「濃縮物」として提供され得る。

【0182】

持続放出製剤
ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤の「持続放出」製剤が企図される。様々な実施形態において、そのような持続放出製剤は静脈の血漿中濃度の高いピークおよび従来の即放出経口投薬形態を回避するために設計される。

【0183】

実例となる持続放出製剤は例えば治療薬剤を有する固体高分子の半透性マトリックスを含む。持続放出物質の様々な用法が確立されており、当業者に公知である。持続放出カプセルは、その化学的性質に依存して、化合物を数週間から１００日以上にわたって放出し得る。治療試薬の化学的性質および生物学的安定性に応じて、安定化のための追加方策が用いられ得る。

【0184】

ある特定の実施形態において、そのような「持続放出」製剤は粘膜を利用し、錠剤崩壊（または浸食）および／または薬品溶出および長期にわたる錠剤からの放出を独立的に制御することが可能であり、より安全な送達プロファイルを供給する。ある特定の実施形態において本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）の経口製剤は、規定量の時間にわたり送達される規定量の活性剤を含む単一、反復服用量を供給する。

【0185】

例示的持続放出製剤の１つは実質的に均質組成物であり、約０．０１％から約９９％ｗ／ｗ、または約０．１％から約９５％、または約０．１％、または約１％、または約２％、または約５％、または約１０％、または約１５％、または約２０％、または約８０％、または約９０％、または約９５％、または約９７％、または約９８％、または約９９％の活性成分（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ、またはその互変異生体または立体異性体、または当該ＡＳＢＩ，当該立体異性体、または当該互変異生体の薬学的に許容可能な塩または溶媒和物、またはその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）、および対象（患者）の標的粘膜に接着を供給する１つ以上の粘膜接着剤（本明細書で「生体接着剤」とも呼ばれる）を含み、さらに１つ以上の次のものを含み得る：単一の錠剤内で添加剤の結合を供給する１つ以上の結合剤、１つ以上のヒドロゲル形成添加剤、１つ以上の増量剤、１つ以上の滑沢剤、１つ以上の流動促進剤、１つ以上の可溶化剤、１つ以上の界面活性剤、１つ以上の香味剤、１つ以上の崩壊剤、１つ以上の緩衝賦形剤、１つ以上のコーティング剤、１つ以上の制御放出調整剤、および１つ以上の薬品の溶出または崩壊時間及び動態を改変および制御する、または活性薬品を分解から保護する他の賦形剤および要素。

【0186】

様々な実施形態において、経口腔粘膜送達のための持続放出調剤投薬形態は固体または非固体であり得る。１つの好適な実施形態において、投薬形態は固体であり、唾液との接触後にヒドロゲルになる。

【0187】

適切な賦形剤は、製剤に追加される市販製品の生産に必要な物質を含むがこれに限られず、増量剤、結合剤、界面活性剤、生体接着剤、滑沢剤、崩壊剤、安定剤、可溶化剤、流動促進剤、溶出または崩壊時間に影響する添加物または要素を含み得るがこれに限られない。適切な賦形剤は上記のものに限られず、また他の経口製剤に適切な無毒性の薬学的に許容可能な担体はＲｅｍｉｎｇｔｏｎの調剤科学１７版（１９８５年）において示される。

【0188】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤の経口腔粘膜薬品送達のための持続放出製剤は１つ以上の生体接着剤（粘膜接着剤）またはいくつかの生体接着剤の混合物を含み薬品送達の間口腔粘膜への接着を促進する。さらに生体接着剤は投薬形態が浸水している間における投薬形態浸食時間および／または薬品溶出動態を制御することに効果的であり得る。そのような粘膜接着薬品送達システムは、吸収位置での薬品の滞留時間を延長することができ、また薬品のバイオアベイラビリティを増加させることができるため、非常に有益である。ヒドロゲルを形成する粘膜接着高分子は典型的に親水性および膨潤性であり、接着に有利に働く、ヒドロキシル基、カルボキシル基、アミノ着のような多数の水素結合形成基を含む。乾燥形態で用いられる場合、それらは粘膜表面から水分を誘導して膨張し、水素結合、静電気、疎水性またはファンデルワールス相互作用を通した高分子／粘液相互作用をもたらす。

【0189】

実例となる適切な粘膜接着および生体接着物質は天然、合成または生体高分子、脂質、リン脂質等を含むがこれに限られない。天然および／または合成高分子の例は、セルロース誘導体（メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース等）、天然ガム（グアーガム、キサンタンガム、ローカストビーンガム、カラヤガム、ビーガム等）、ポリアクリル酸塩（ＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）、ポリカルボフィル等）、アルギン酸塩、チオール含有高分子、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）ｙエチレン、全分子量のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（好適には１０００から４０，０００Ｄａの間、線状または分岐、いかなる組成でも）、全分子量のデキストラン（好適には１０００から４０，０００Ｄａの間、いかなる原料からでも）、乳酸とグリコール酸の混合によって調製される（様々な粘着性、分子量および乳酸／グリコール酸比率のＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ）のようなブロック高分子、反復単位のいかなる数および結合のポリエチレングリコール−ポリプロピレングリコールブロック共重合体（ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（登録商標）、ＴＥＫＴＲＯＮＩＸ（登録商標）またはＧＥＮＡＰＯＬ（登録商標）ブロック共重合体）、上記共重合体の結合物理的または科学的に結合した単位（例えばＰＥＧ−ＰＬＡまたはＰＥＧ−ＰＬＧＡ共重合体）混合物を含む。好適には、生体接着添加剤は、ポリエチレングリコール、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）ｙエチレン、ポリアクリル酸高分子、例えばＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）（例えばＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）７１Ｇ，９３４Ｐ，９７１Ｐ，９７４Ｐ，等）およびポリカルボフィル（例えばＮＯＶＥＯＮ（登録商標）ＡＡ−１、ＮＯＶＥＯＮ（登録商標）ＣＡ−１、ＮＯＶＥＯＮ（登録商標）ＣＡ−２等）、セルロースおよびその誘導体および最も好適にはそれはポリエチレングリコール、カルボポール、および／またはセルロース誘導体またはその結合からなる群から選択される。

【0190】

ある特定の実施形態において粘膜接着／生体接着添加剤は典型的に１〜５０％ｗ／ｗ、好適には１〜４０％ｗ／ｗまたは最も好適には５〜３０％ｗ／ｗの間で存在する。と具体的な製剤は１つ以上の異なる生体接着剤を任意の組み合わせで含み得る。

【0191】

ある特定の実施形態において、系口腔粘膜薬品送達のための製剤は結合剤または２つ以上の結合剤の混合物も含み得、単一の投薬形態への添加剤の結合を容易にする。例示的な結合剤は、セルロース誘導体（例えばメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース等）、ポリアクリル酸塩（例えばＣＡＲＢＯＰＯＬ（登録商標）、ポリカルボフィル等）、ＰＯＶＩＤＯＮＥ（登録商標）（全等級）、あらゆる分子量または等級、照射済みまたは未照射のＰＯＬＹＯＸ（登録商標）（登録商標）、デンプン、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ＡＶＩＣＥＬ（登録商標）等からなる群から選択される。ある特定の実施形態において、結合剤は典型的に０．５〜６０％ｗ／ｗ、好適には１〜３０％ｗ／ｗおよび最も好適には１．５〜１５％ｗ／ｗで存在する。

【0192】

ある特定の実施形態において、製剤は１つ以上のヒドロゲル形成賦形剤も含む。例示的なヒドロゲル形成添加剤は、ポリエチレングリコールおよびエチレングリコール骨格を有するホモ重合体または架橋ヘテロ重合体の他の高分子、エチレングリコール単位を用いるブロック共重合体、例えばＰＯＬＹＯＸ（登録商標）ｙエチレンホモ重合体（例えばＰＯＬＹＯＸ（登録商標）（登録商標）Ｎ１０／分子量＝１００，０００ ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）−８０／分子量＝２００，０００、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）１１０５／分子量＝９００，０００、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）−３０１／分子量＝４，０００，０００、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）−３０３／分子量＝７，０００，０００、ＰＯＬＹＯＸ（登録商標）ＷＳＲ−Ｎ−６０Ｋ、全てユニオンカーバイドの商標）、全物質量および等級のヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）（例えばＭＥＴＯＬＯＳＥ（登録商標）９０ＳＨ５００００、ＭＥＴＯＬＯＳＥ（登録商標）９０ＳＨ３００００、全て信越化学工業の商標）、ポロキサマー（ＬＵＴＲＯＬ（登録商標）Ｆ−６８、ＬＵＴＲＯＬ（登録商標）Ｆ−１２７、Ｆ−１０５等、全てＢＡＳＦ化学の商標）、ＧＥＮＡＰＯＬ（登録商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ、例えばＰＥＧ−１５００、ＰＥＧ−３５００、ＰＥＧ−４０００、ＰＥＧ−６０００、ＰＥＧ−８０００、ＰＥＧ−１２０００、ＰＥＧ−２０，０００など）、天然ガム（キサンタンガム、ローカストビーンガム等）およびセルロース誘導体（ＨＣ、ＨＭＣ、ＨＭＰＣ、ＨＰＣ、ＣＰ、ＣＭＣ）、ポリアクリル酸塩基の遊離または架橋高分子及びその結合、生分解性高分子、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、および物理的ブレンドまたは交差結合によるその結合からなる群から選択される。ある特定の実施形態において、ヒドロゲル成分は交差結合され得る。ヒドロゲル形成添加は典型的に０．１〜７０％ｗ／ｗ、好適には１〜５０％ｗ／ｗ又は最も好適には１〜３０％ｗ／ｗで存在する。

【0193】

ある特定の実施形態において、製剤は１つ以上の、投薬形態の水和において選択的に薬品分子に接着し、したがって経口投薬形態からの拡散の比率を減少させる物質である、制御放出調整剤も含み得る。そのような添加剤はまた製剤による水分の取り込み比率を減少させ得、したがってより延長した薬品溶出および錠剤からの放出を可能にする。概して選択された添加剤は脂溶性であり、疎水性または脂溶性薬品へ自然に複合体を形成することができる。放出調整剤と薬品の会合の程度は製剤における調整剤−医薬品比率を変えることで変化させることができる。さらにそのような相互作用は、製造過程において放出調整剤と活性薬品の適切な組み合わせによって適切に促進される。または、制御放出調整剤は、正電荷または負電荷の正味荷電を有する合成高分子または生物高分子の荷電高分子であり得、静電相互作用によって活性成分に結合することができ、したがって錠剤中の拡散および／またはその粘着表面への透過の動態の両方を修飾する。上に記載された他の化合物と同様に、そのような相互作用は可逆であり、活性成分との永続的化学結合を含まない。ある特定の実施形態において、制御放出調整剤は典型的に０〜８０％ｗ／ｗ、好適には１〜２０％ｗ／ｗ、最も好適には１〜１０％ｗ／ｗで存在する。

【0194】

様々な実施形態において、持続放出製剤は経口投薬形態の開発に求められる当業者に公知の他の従来の成分を含み得る。これらの成分は１つ以上の増量剤（例えばラクトースＵＳＰ、デンプン１５００、マンニトール、ソルビトール、マリトールまたは他の非還元糖、微結晶性セルロース（例えば、ＡＶＩＣＥＬ（登録商標））、リン酸水素カルシウム脱水物、スクロース、およびその混合物）、少なくとも１つの可溶化剤（例えばシクロデキストリン、ｐＨ調整剤、塩および緩衝剤、界面活性剤、脂肪酸、リン脂質、脂肪酸の金属等）、金属塩および緩衝剤、有機（例えば酢酸塩、クエン酸、酒石酸塩等）または無機（リン酸、炭酸塩、重炭酸塩、ホウ酸塩、硫酸塩、亜硫酸塩、亜硫酸水素塩、メタ重亜硫酸塩、塩化物等）、金属の塩、例えばナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等）、少なくとも１つの滑沢剤（例えばステアリン酸およびステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム等の二価陽イオン、タルク、グリセロールモノステアレート等）、１つ以上の流動促進剤（コロイド状二酸化ケイ素、沈降二酸化ケイ素、ヒュームドシリカ（ＣＡＢ−Ｏ−ＳＩＬ（登録商標） Ｍ−５Ｐ、キャボットコーポレーションの商標）、ステアロウェットおよびステロテックス、シリカ（例えばＳＩＬＯＩＤ（登録商標）およびＳＩＬＯＸ（登録商標）シリカ−Ｇｒａｃｅ Ｄａｖｉｓｏｎプロダクツの商標、アエロジル−デグサファーマの商標）、高脂肪酸、その金属塩、硬化植物油等）、香味剤または甘味剤および着色剤（例えばアスパルテーム、マンニトール、ラクトース、スクロース、他の人工甘味料、酸化鉄およびＦＤ＆Ｃレーキ）、化学薬品の物理的劣化から薬品物質を安定化させる支援をする添加剤（例えば抗酸化物質、抗加水分解剤、凝集抑制剤等）を含み得る。抗酸化物質は、ＢＨＴ、ＢＨＡ、ビタミン、クエン酸、ＥＤＴＡ、重硫酸ナトリウム、メタビサルフェートナトリウム、チオ尿素、メチオニン、界面活性剤、アミノ酸、例えばアルギニン、グリシン、ヒスチジン、メチオニン塩、ｐＨ調整剤、キレート剤および乾燥または液剤形態における緩衝剤、錠剤崩壊動態および錠剤からの薬品放出ひいては薬物動態に影響し得る１つ以上の賦形剤（崩壊剤、例えば当業者に公知のものおよび、デンプン、カルボキシ−メチルセルロース型または架橋ポリビニルピロリドン（例えばクロスポビドン、ＰＶＰ−ＸＬ）、アルギン酸塩、セルロースベースの崩壊剤（例えば精製セルロース、メチルセルロース、架橋ナトリウムカルボキシメチルセルロース（Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ）およびカルボキシメチルセルロース）、セルロースの低置換ヒドロキシプロピルエステル、微結晶性セルロース（例えばＡＶＩＣＥＬ（登録商標））、イオン交換樹脂（例えばＡＭＢＲＥＬＩＴＥ（登録商標）ＩＰＲ８８）、ガム（例えば寒天、ローカストビーン、カラヤ、ペクチンおよびトラガカント）、グアーガム、ガムカラヤ、キチンおよびキトサン、スメクタ、ゲランガム、イサプギュラハスク、ポラクリリンカリウム（Ｔｕｌｓｉｏｎ^３３９）・ガス放出崩壊剤（例えば重曹、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウムまたは炭酸カルシウムに加え、クエン酸および酒石酸）、デンプングリコール酸ナトリウム、（例えばＥＸＰＬＯＴＡＢ（登録商標）およびＰＲＩＭＯＧＥＬ（登録商標））、デンプンＤＣ等、少なくとも１つの持続薬品放出に有益なあらゆる型の生分解性高分子を含み得る。例示的高分子組成物は、ポリ無水物および乳酸およびグリコール酸の共重合体、ポリ（ｄｌ−ラクチド−共−グリコリド）（ＰＬＧＡ）、ポリ（乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（グリコール酸）（ＰＧＡ）、ポリオルトエステル、タンパク質、および多糖を含むがこれに限られない。

【0195】

ある特定の実施形態において、活性剤は化学的に修飾され得、血漿中の薬物動態を大きく改変することができる。これは例えばポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）との複合体化によって達成され得、部位特異的ＰＥＧ化を含む。ＰＥＧ化は、薬物動態の最適化、免疫原性および投薬回数の低減により薬品の性能を改善し得る。

【0196】

本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）のＧＩまたは経口腔粘膜送達のための製剤生成方法もまた提供される。１つの方法は粉末生成、乾燥粉末混合および直接圧縮による錠剤化の段階を含む。または、湿式造粒過程が用いられ得る。そのような方法（たとえば高せん断造粒過程）は、活性成分および場合によってはいくつかの賦形剤のミキサー内での混合を含む。結合剤は乾燥混合段階で加えられたまたは造粒に用いられる液体に溶解した添加剤の１つであり得る。造粒溶液または懸濁液はミキサー内の乾燥粉末に加えられ、望まれる特性に至るまで混合される。これは大抵、適性な溶解時間、含量均一性、および他の物理的特性を有し、投薬形態の生成に適する特性の顆粒を生成する。湿式造粒段階の後、製品はほとんどの場合乾燥および／または乾燥後に製粉され、製品の大部分が所望の寸法範囲に形成される。時折、製品は湿った状態で寸法された後に、振動造粒機または製粉機を用いて乾燥される。乾燥造粒は許容可能寸法範囲に収まるように、最初に篩過装置によって、その後過大粒子の製粉化によって処理され得る。

【0197】

さらに、製剤は他の造粒過程によっても製造され得、全て当業者に公知であるが、例えば噴霧式流動層造粒、押出および球形化または流動層ローター造粒がある。

【0198】

さらに、発明の錠剤投薬形態は、上記のように製造された最初の錠剤を当業者に公知の適切なコーティングを用いて被覆することにより調製され得る。そのようなコーティングは、活性コアを損傷から（摩耗、破損、ダスト生成）、輸送及び保存の間コアがさらされる影響から（大気湿度、温度変動）保護することを意図し、当然これらのフィルムコーティングは着色され得る。水蒸気に対するフィルムコーティングの密閉効果は水蒸気透過性によって表される。被覆は利用可能な過程の１つ、例えばワースターコーティング、ドライコーティング、フィルムコーティング、流動層コーティング、パンコーティング等によって施され得る。典型的な被覆物質は、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリビニルピロリドンビニルアセテート共重合体（ＰＶＰＶＡ）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルアルコール／ポリエチレングリコール共重合体（ＰＶＡ／ＰＥＧ）、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ジェランガム、マルトデキストリン、メタクリル樹脂、メチルセルロース、ヒドロキシルプロピルメチルセルロース（全等級および分子量のＨＰＭＣ）、カラギナン、セラック等を含む。

【0199】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤を含む錠剤コアは、生体接着剤および／またはｐＨ抵抗物質で被覆され得、上記のように定義付けられた物質が舌下空洞における錠剤の生物学的接着を改善することを可能にする。

【0200】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩ、およびその類似体、誘導体、またはプロドラッグ）は包接錯体として製剤される。シクロデキストリン包接錯体に限られない一方で、シクロデキストリンは調剤的包接錯体の形成に最も頻繁に用いられる薬剤である。シクロデキストリン（ＣＤ）はグルコースの環状オリゴマーであり、典型的に６、７、または８グルコース単量体を含み、α−１、４結合を伴う。これらのオリゴマーは一般的にそれぞれα−ＣＤ、β−ＣＤ、およびγ−ＣＤと呼ばれる。最大１２グルコース単量体を含む高オリゴマーが公知であり、本明細書に記載される製剤において企図される。官能性シクロデキストリン包接錯体もまた企図される。実例となるが制限的でない官能性シクロデキストリンはシクロデキストリンのスルホン酸塩、スルホン酸塩およびスルフィン酸塩、または二硫酸塩、１つ以上のエーテルがヒドロキシブテニルシクロデキストリンであるシクロデキストリンの混合エーテルのスルホン酸塩、スルホン酸塩およびスルフィン酸塩、または二硫酸塩を含むがこれに限られない。実例となるシクロデキストリンは、１つ以上のヒドロキシブテニル置換基がスルホン酸化およびスルフィン酸化または二硫酸化した１つ以上の２−ヒドロキシブテニル置換基を含む多糖エーテル、および、１つ以上のヒドロキシブテニル置換基がスルホン酸化およびスルフィン酸化または二硫酸化した１つ以上の２−ヒドロキシブテニル置換基を含むアルキルポリグリコシドエーテルを含む。様々な実施形態において、スルホン酸化ヒドロキシブテニルシクロデキストリンと１つ以上の本明細書に記載される活性剤の間で形成される包接錯体が企図される。シクロデキストリン、およびシクロデキストリン包接錯体の調製方法は例えば米国特許公報第２００４／００５４１６４号およびそこに記載された参考文献さらに米国特許公報第２０１１／０２１８１７３号およびそこに記載された参考文献において見られる。

【0201】

薬物動態（ＰＫ）および薬剤特性
本明細書に記載される持効性（制御された）放出の経口（ＧＩまたは経粘膜）製剤の１つの優位点は、固体投与形態または液体投与形態を問わず、即放性製剤に比べて、対象の治療期間内に血漿薬品濃度をより長期間で維持出来ることである。そのような従来の即放性製剤に対して典型的に観察される高いピークのプラズマ水準は、１〜１２時間以上で薬品の持効性放出によって鈍くなる。更に、錠剤の溶解期間中は薬品が継続的に口腔から血流に渡り込み、より安定したプラトーで血漿薬物動態を提供するため、血漿水準の急落を回避する。更に、本明細書に記載される投与形態は、治療安全性に支障が生じる血漿薬物動態における山および谷の減少による潜在的な有害な副作用を最小化することによって治療安全性を向上させ得る。

【0202】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤の経口経粘膜製剤は、粘膜を活用し、独立に錠剤の切断（または崩壊）および時間とともに薬品の溶解ならびに錠剤からの放出によってより安全な送達プロフィールを提供するように設計される。本明細書に記載される経口製剤は、所定分量の活性剤を含む、個別の、繰り返し投与を提供する。

【0203】

本明細書に記載される生体接着経口経粘膜製剤の優位点の１つは、非常に一貫性のある生物学的利用能を示し、固体投与形態または静脈内投与態形態を問わず、現在利用可能な投与形態に比べてより長期間で対象の治療期間内に血漿薬品濃度をより長期間で維持出来ることである。更に、錠剤の溶解期間以上の間、薬品が継続的に口腔またはＧＩ管から血流に渡り込み、血漿水準の急落を回避し、従来の即放性経口投与形態に比べて、長期間のプラトー段階を有する血漿薬物動態を提供する。更に、本明細書に記載される投与形態は、治療安全性に支障が生じ、現在利用可能な投与形態において典型的である、血漿薬品薬物動態における山および谷の比較的な減少による潜在的な有害な副作用を最小化することによって治療安全性を向上させ得る。

【0204】

本明細書に記載される様々な実施形態における生体接着製剤は、本明細書に記載される活性剤の薬物動態のプロフィールを操作制御するように設計可能である。したがって、製剤は、「低速な」分解時間（および崩壊動態プロフィール）および低速な薬品放出を達成するように調節可能であり、それによって、維持可能な薬品作用を提供する、非常に長期間の薬物動態のプロフィールを可能にする。そのような製剤が高速な作用開始を提供するように、依然として設計されることもあるが、多くの場合は、持続的な薬品ＰＫおよび作用を可能にしながら、生体接着機構、作用の再現性、鈍くされたＣ_ｍａｘ等、他の性能特性を維持することが求められる。

【0205】

本発明の生体接着経粘膜製剤の性能および特性は、製造方法に対して独立である。いくつかの従来の確立された既知の工程を、投与形態の物理化学特性または体内性能に影響を及ぼさずに、本発明の製剤を製造することに使用可能である（例えば湿式および乾式造粒法、直接圧縮法等）。

【0206】

本発明の投与形態の投与後に、本明細書に記載される活性剤の測定血漿水準に対する持続性プラトー段階を示す例示的な数学比率は「最適治療標的比率」または「ＯＴＴＲ」という用語であり、治療水準で薬品が存在する平均時間を表し、薬品の消失半減期に対して正規化した、血漿中の薬品濃度がＣ_ｍａｘの５０％超を維持する時間に、対象の投与形態で取得されるＣ_ｍａｘに対する、同等の投与量のＩＶ投与後の正規化されたＣ_ｍａｘの比率を乗じたものとして、定義される。ある特定の実施形態において、ＯＴＴＲを下記の数式で計算できる。
ＯＴＴＲ＝（Ｃ^ＩＶ_ｍａｘ／Ｃ_ｍａｘ）×（投与量／投与量^ＩＶ）（Ｃ_ｍａｘの５０％超である時間）／（薬品の終末^ＩＶ消失半減期）

【0207】

ある特定の実施形態において、ＯＴＴＲは、約１５を超えるか、または約２０を超えるか、または約２５を超えるか、または約３０を超えるか、または約４０を超えるか、または約５０を超える。

【0208】

投与
ある特定の実施形態において本明細書に記載される１つ以上の活性剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグ）が、それを必要とする哺乳動物（例えば、アミロイド前駆体タンパク質の以上処理を特徴とする病理学の危険性があるか、もしくはそれを患う哺乳動物、またはＭＣＩがアルツハイマー病へ進行する危険性がある哺乳動物、等）に対して投与される。ある特定の実施形態において活性剤が、前アルツハイマー症の発生を防ぐまたは遅延させる、および／または前アルツハイマー症の１つ以上の病状を改善させる、および／または前アルツハイマー症もしくは疾患がアルツハイマー病へ進行することを防ぐまたは遅延させる、および／または非アミロイド生成性経路によるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）を促進するために投与される。ある特定の実施形態において１つ以上の活性剤が、初期、中期または未期アルツハイマー病の治療において、例えば疾患の重度を緩和する、および／または疾患の１つ以上の病状を改善させる、および／または疾患の進行を遅延させるために投与される。

【0209】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤（ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグ）は、いくつかの経路のいずれかで投与できる。したがって、例えば、経口、非経口（静脈内（ＩＶ）、筋内（ＩＭ）、デポＩＭ、皮下（ＳＱ）およびデポＳＱ）、舌下、経鼻（吸入）、髄腔内、経皮（例えば、経皮パッチで）、局所的に、電気泳動法で、または直腸に投与できる。典型的に投与形態は頭脳への送達を簡易にするように選択される（例えば、血液脳関門を通す通過）。これに関して、本明細書に記載される化合物は容易に頭脳に送達可能であることを指摘する。当業者に既知の投与形態は、当該化合物の送達に適切である。活性剤は、治療を受ける対象に対して望ましくない副作用無しに、予防および／または治療的に有用な効果を生成するために十分な分量／投与量の計画で投与する。具体的な分量／投与量計画は、個人の体重、性別、年齢ならびに健康状態、および特定の化合物の製剤、生化学的性質、生物学的活性、生物学的利用度および副作用によって異なる。

【0210】

ある特定の実施形態において治療または予防の有効量は、治療する疾患に対する既知の体外および体内のモデルシステムで薬剤を試験することによって経験的に決定でき得る。治療または予防の有効投与量は、先ず低い投与量で投与し、それから、最小限の副作用で、または副作用が無く望ましい効果を達成する投与量に至るまで、少しずつ増加することによって決定できる。

【0211】

ある特定の実施形態において、経口投与の場合、本明細書に記載される薬剤で、前アルツハイマー症の発生を防ぐまたは遅延させる、および／または前アルツハイマー症の１つ以上の病状を改善させる、および／または前アルツハイマー症もしくは疾患がアルツハイマー病へ進行することを防ぐまたは遅延させる、および／または非アミロイド生成性経路によるアミロイド前駆体タンパク質を促進する、および／またはＡＤの治療または予防のための有効投与量は、約０．１ｍｇ／１日〜約５００ｍｇ／１日もしくは約１，０００ｍｇ／１日、または約０．１ｍｇ／１日〜約２００ｍｇ／１日の範囲に入り、例えば約１ｍｇ／１日〜約１００ｍｇ／１日、例えば約５ｍｇ／１日〜約５０ｍｇ／１日を挙げる。いくつかの実施形態において、対象に、約０．０５〜約０．５０ｍｇ／ｋｇ、例えば約０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１０ｍｇ／ｋｇ、０．２０ｍｇ／ｋｇ、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．５０ｍｇ／ｋｇの投与量で化合物を投与する。患者に１つの投与量から始めるが、時間が経って患者の状況が変わるとともに、投与量を変更（適宜に増加または減少）してもよいことが理解される。転帰評価に応じて、より高い投与量を使用してもよい。例えば、ある特定の実施形態において、１０００ｍｇ／１日まで、例えば、５ｍｇ／１日、１０ｍｇ／１日、２５ｍｇ／１日、５０ｍｇ／１日、１００ｍｇ／１日、２００ｍｇ／１日、３００ｍｇ／１日、４００ｍｇ／１日、５００ｍｇ／１日、６００ｍｇ／１日、７００ｍｇ／１日、８００ｍｇ／１日、９００ｍｇ／１日、または１０００ｍｇ／１日を投与してもよい。

【0212】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤は、経口で、例えば、ＩＶ、ＩＭ、デポＩＭ、ＳＣまたはデポＳＣで投与してもよい。非経口投与の場合は、治療上有効な量で、約０．５〜約１００ｍｇ／１日、好ましくは約５〜約５０ｍｇ／１日を送達すべきである。一ヶ月に一回または２週間毎に、注射用のデポ製剤を使用する場合、投与量は約０．５ｍｇ／１日〜約５０ｍｇ／１日、または月間投与量で、約１５ｍｇ〜約１，５００ｍｇとするべきである。多少アルツハイマー病の患者が忘れがちであることで、好ましくは非経口投与形態をデポ製剤とする。

【0213】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤は舌下で投与してもよい。舌下で投与する場合、化合物またはその類似体は、上記ＩＭ投与に記載された分量で１日に１〜４回投与してもよい。

【0214】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤は経鼻で投与してもよい。この経路で投与する場合、当業者に知られるように、鼻噴霧または乾式粉末が適切な投与形態である。経鼻投与に対して化合物またはその誘導体の投与量は、上記ＩＭ投与に対する分量である。

【0215】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤は髄腔内投与してもよい。この経路で投与する場合、当業者に知られるように、適切な投与形態は非経口投与形態としてもよい。髄腔内投与に対して化合物またはその類似体の投与量は、上記ＩＭ投与に対する分量である。

【0216】

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤は局所に投与してもよい。この経路で投与する場合、適切な投与形態は、クリーム、軟膏またはパッチである。局所に投与する場合、投与量は約１．０ｍｇ／１日〜約２００ｍｇ／１日である。パッチで送達可能な分量が限られたため、２つ以上のパッチを使用してもよい。パッチの数および大きさが重要ではなく、重要なのは、当業者に知られるように、化合物の治療上有効な量を送達することである。化合物は、当業者に知られるように、坐剤として直腸に投与してもよい。坐剤投与の場合、治療上有効な量は約１．０ｍｇ〜約５００ｍｇである。

【0217】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤は、当業者に知られるように、移植で投与してもよい。化合物を移植で投与する場合、治療上有効な量は上記デポ投与に対する分量である。

【0218】

様々な実施形態において、投与形態は対象に対して、毎日１回、２回、３回、または４回に投与してもよい。好ましくは、化合物を３回以下に、より好ましくは１日に１回または２回に投与する。好ましくは、薬剤を経口投与形態で投与する。

【0219】

当業者に明らかであろうが、精確な投与量および投与頻度は、投与する当業者の医師によく知られるように、治療する特定の疾患、治療する疾患の重度、特定の患者の年齢、体重、一般的な健康状態、および患者が受ける他の薬品によって異なる。

【0220】

組成物および方法は本明細書に人間の使用に関して記載されるが、動物用、例えば獣医学の使用にも適切である。したがって、好ましい生物は、ヒト、非ヒト霊長類、犬科、ウマ科、猫科、豚、有蹄動物、ウサギ目、等を含むがそれに限られない。

【0221】

上記の製剤および投与方法は、例示的であり、制限を付ける意図ではない。本明細書に記載される教示を使用することによって他の適切な製剤および投与形態が簡単に考案可能であることを理解される。

【0222】

供用治療
ある特定の実施形態において、本明細書に記載される活性剤（例えばガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグ）は、ＭＣＩおよび／またはＡＤを含む、脳内のアミロイド沈着を特徴とする疾患を治療または予防するために使用する、他の治療的な薬剤または方法と供用してもよい。そのような薬剤または方法は、アセチルコリンエステラーゼ阻害剤（例えば、（−）−フェンセリンエナンチオマー、タクリン、イピダクリン、ガランタミン、ドネペジル、イコペジル、ザナペジル、リバスティグミン、フペルジンＡ、フェンセリン、フィゾスチグミン、ネオスチグミン、ピリドスチグミン、アンベノニウム、デマルカリウム、エドロホニウム、ラドスチギルおよびウンゲレミンを制限無しに含む）、ＮＭＤＡ受容体拮抗薬（例えば、メマンチンを制限無しに含む）、ムスカリン様受容体作用薬（例えば、タルサクリジン、ＡＦ−１０２Ｂ、ＡＦ−２６７Ｂ（ＮＧＸ−２６７）を制限無しに含み）、ニコチン受容体作用薬（例えば、イスプロニクリン（ＡＺＤ−３４８０）を制限無しに含む）、β−セクレターゼ阻害剤（例えば、ロシグリタゾンおよびピオグリタゾンを含むチアゾリジンジオンを制限無しに含む）、γ−セクレターゼ阻害剤（例えば、セマガセスタット（ＬＹ−４５０１３９）、ＭＫ−０７５２、Ｅ−２０１２、ＢＭＳ−７０８１６３、ＰＦ−３０８４０１４、ベガセスタット（ＧＳＩ−９５３）およびＮＩＣ５−１５を制限無しに含む）、Ａβ凝集の阻害剤（例えば、クリオキノール（ＰＢＴ１）、ＰＢＴ２、トラミプロサート（ホモタウリン）、シロ−イノシトール（シロ−イシクロヘキサンヘキサオールとも呼ばれ、ＡＺＤ−１０３およびＥＬＮＤ−００５を制限無しに含む）、Ａβ断片での受動免疫療法（例えば、バピネオズマブおよびエピガロカテキン−３−ガレート（例えば、Ｃｇ）を制限無しに含む）、シクロオキシゲナーゼＩＩ阻害剤のような抗炎症剤、ビタミンＥおよびギンコライドのような抗酸化剤、免疫学的方法、例えばＡβペプチドで免疫付与、または抗−Ａβペプチド抗体、スタチン、Ｃｅｒｅｂｒｏｌｙｓｉｎ（商標），ＡＩＴ−０８２（Ｅｍｉｌｉｅｕ （２０００）、Ａｒｃｈ．Ｎｅｕｒｏｌ．５７：４５４）、ネトリン（Ｌｕｏｒｅｎｃｏ（２００９）Ｃｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ １６：６５５−６６３）、ネトリン ミメティック、ＮＧＦ、ＮＧＦミメティック、ＢＤＮＦならびに他の未来の神経栄養性薬剤、および神経発生を促進する薬剤（例えば幹細胞治療）の投与を含む。ＭＣＩおよび／またはＡＤを含む、脳内のアミロイド沈着を特徴とする疾患を治療または予防するための、トロピセトロン、ジスルフィラム、ホノキオールおよび／またはニメタゼパムとの組み合わせで有用な、さらなる薬剤は、例えば、Ｍａｎｇｉａｌａｓｃｈｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ（２０１０）９：７０２−７１６に記載されている。

【0223】

様々な実施形態において、本明細書に記載される活性剤の１つ以上との供用治療は、それらの薬剤と一緒にアセチルコリンエステラーゼ阻害剤を投与することを明示的に除外する。

【0224】

加齢性黄斑変性症および緑内障に対するＡＳＢＩの使用
様々な実施形態においてＡＳＢＩは前アルツハイマー症の発生を防ぐまたは遅延させる、および／または前アルツハイマー症の１つ以上の病状を改善させる、および／または前アルツハイマー症もしくは疾患がアルツハイマー病へ進行することを防ぐまたは遅延させる、および／または非アミロイド生成性経路によるアミロイド前駆体タンパク質を促進する、および／またはアルツハイマー病の治療のために使用することが企図されるが、他にもＡＳＢＩの用途も企図される。具体的に、ある特定の実施形態において、ＡＳＢＩは、加齢性黄斑変性症および／または緑内障に対して治療および／または予防に使用することが企図される。

【0225】

特定の理論に拘束されるものではないが、異常な細胞外沈着が加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）の発症および進行を促進すると考えられており、アルツハイマー病および粥状硬化症の場合でもそうである。両方の疾患において、タンパク質沈着は多数の共通要素、例えばアポＥ、補体およびＡβペプチドを含む。例えば、ヒトＡＭＤにおいて、Ａβペプチド沈着はドルーゼンに伴い、そこで蓄積し、活性化された補体部分と共局在化する（Ａｎｄｅｒｓｏｎら（２００４）Ｅｘｐ．Ｅｙｅ．Ｒｅｓ．，７８：２４３−２５６；Ｄｅｎｔｃｈｅｖら（２００３）Ｍｏｌ．Ｖｉｓ．，９：１８４−１９０；Ｊｏｈｎｓｏｎら（２００２）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９９：１１８３０−１１８３５．）．Ｌｕｉｂｌら（２００６）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．， １１６：３７８−３８５は、Ａβのオリゴマー型を特異的に認識する抗体を使用することによって、ドナーのヒト眼球のドルーゼン、サブ−ＲＰＥ基底沈殿物およびＲＰＥにおいて潜在的に毒性のアミロイドオリゴマーの存在を示す。これらのＡβオリゴマーは、ドルーゼンを有さない年齢一致の対照ドナー眼球には検知されなかった。Ｉｓａｓら（２０１０） Ｉｎｖｅｓｔ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．，５１：１３０４−１３１０も、ドルーゼン中に可溶性とともに熟成のＡβ小線維を検知した。合わせて、これらの所見は、ＡＭＤの発症におけるＡβの関与を示す。更に、Ａβペプチドは、ＡＭＤのネズミモデルにおいて、サブ−ＲＰＥ基底沈殿物および新生血管病変に検知された（Ｄｉｎｇら（２００８）Ｖｉｓｉｏｎ Ｒｅｓ．，４８：３３９−３４５；Ｍａｌｅｋら（２００５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１０２：１１９００−１１９０５）。このモデルにおいて、老化ヒトアポＥ４対象置換ネズミ（アポＥ４ネズミ）は、高脂肪、コレステロール含有（ＨＦＣ）飼料が与えられると、（アポＥ４−ＨＦＣネズミ）乾および湿ＡＭＤの両方の場合に認める形態上の特徴を示す。これらの特徴は、肥厚びまん性のサブ−ＲＰＥ沈殿物、脂質およびタンパク質含有の限局的なドルーゼンのような沈殿物、ブルッフ膜の肥厚、感光体変性領域に反対するＲＰＥ萎縮症の所々の領域およびＣＮＶを含む（Ｍａｌｅｋら（２００５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１０２：１１９００−１１９０５）。ＡＭＤのアポＥ４−ＨＦＣネズミモデルにおいて、Ａβ蓄積はＲＰＥ／脈絡膜のレベルで損害を誘発すると考えられ、また以前には、抗Ａβ４０特定抗体の前進投与は本モデルで示す視覚機能の低下を部分的に軽減可能であることが示されている（Ｄｉｎｇら（２００８）Ｖｉｓｉｏｎ Ｒｅｓ．，４８：３３９−３４５）。また、Ａβ４０およびＡβ４２の双方を同時に標的とする抗Ａβ免疫療法がアポＥ４−ＨＦＣネズミにおいて、病理組織学的変化を遮断し、完全に視覚機能を保護することも示された。（Ｄｉｎｇら（２０１１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，１０８（２８）：Ｅ２７９−Ｅ２８７）

【0226】

特定の理論に拘束されるものではないが、眼球内でＡβへのＡＰＰ処理は、網膜および網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞層にてＢＡＣＥおよびγ−セクレターゼの作用により起こり、またｓＡＰＰαおよびＡβは、硝子体液に分泌されると考えられている（例として、Ｐｒａｋａｓａｍら（２００８）Ｊ．Ａｌｚｈ．Ｄｉｓ．，２０： １２４３−１２５３を参照）。Ａβは、更に房水に送達され、そこでは容易に測定可能である。

【0227】

これらの所見を踏まえて、ＡＳＢＩ、例えば本明細書に記載されるものは、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）および／または緑内障の治療または予防において有用であり得ると考えられる。したがって、ＡＳＢＩは、ＡＭＤ（および／または緑内障）が現れることを遅延するまたは予防するため、および／またはＡＭＤ病状の１つ以上を緩和するため、および／または疾患の進行を減速する、停止する、または逆行させるために対象に投与することができると考えられる。様々な実施形態において、１つ以上のＡＳＢＩ（例えば、本明細書に記載される活性剤の１つ以上）を、これらの目的に対象（例えば、ヒト、非ヒト哺乳動物）に投与する。上記のように、様々な実施形態において、ＡＳＢＩは経口投与、電気泳動送達、経皮送達、非経口投与、エアロゾール投与、吸入投与、静脈内投与および直腸投与からなる群から選択される経路を介し投与する。

【0228】

ある特定の実施形態において、投与は直接に眼球に行う。したがって、例えば、ある特定の実施形態において、薬剤は点眼液の形で、眼内注射経由等で投与可能である。

【0229】

典型的にＡＳＢＩは、ＡＭＤまたは緑内障の治療および／または予防のための有効量で投与し、その有効量は投与様式によって異なる。ある特定の実施形態において、有効量は、哺乳動物において、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）に伴う１つ以上の病状を緩和するのに十分な量である。ある特定の実施形態において、有効量はＡＭＤ疾患（または緑内障）のリスクを減少するかその発症を遅延させる、および／または硝子体液および／または房水にてＡβの減少、および／または網膜および／またはＲＰＥ細胞層にてアミロイド沈着の減少によって特徴付けられる、その最終的な重度を減少するのに十分な量である。

【0230】

ＡＰＰ処理を評価するためのアッセイシステム
特定の理論に拘束されないが、本明細書に記載される活性剤（例えば、ガランギンやルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグ）は、非アミロイド生成性経路によるＡＰＰ処理を促進する、および／またはアミロイド生成性経路によるＡＰＰ処理を減少するまたは阻害すると考えられる。非アミロイド生成性経路において、先ずＡＰＰはＡβ配列内でαセクレターゼにより切断され、ＡＰＰｓα細胞外ドメイン（「ｓＡＰＰα」）を放出する。一方、アミロイド生成性経路は、βセクレターゼがＡＰＰをＡβのアミノ末端で切断する時に開始し、それによってＡＰＰｓβ細胞外ドメイン（「ｓＡＰＰβ」）を放出する。非アミロイド生成性およびアミロイド生成性経路によるＡＰＰ処理は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｘｕ（２００９）Ｊ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓ．，１６（２）：２１１−２２４およびＤｅ Ｓｔｒｏｏｐｅｒら（２０１０ Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｎｅｕｒｏｌ ６（２）：９９−１０７で考察されている。

【0231】

活性剤の有効性を評価する１つの方法は、アミロイド生成性経路によるＡＰＰ処理の程度に対して、低下または除去を特定することであり、例えば、対象薬剤の投与に応答して、βセクレターゼ切断によるＡＰＰ処理レベルの減少または除去が挙げられる。βセクレターゼ切断部位にてＡＰＰ切断の程度を特定するためのアッセイは当該技術分野において周知である。例示的なアッセイは、例えば米国特許第５，７４４，３４６号および第５，９４２，４００号に記載される。生物学試料におけるｓＡＰＰαおよびｓＡＰＰβ、またＡＰＰｎｅｏおよびＡβの有無および水準を特定するキットは、例えば、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒから、市販のものを取得可能である。

【0232】

ＡＳＢＩアッセイ
本明細書に記載される、いかなる化合物のＡＳＢＩ活性も、例えば、本明細書に記載される実施例において示すアッセイにより、容易に確認できる。基本的に、ある特定の実施形態において、ＡＰＰ基質のＭＢＰ−Ｃ１２５のＢＡＣＥ切断を阻害する化合物を特定するために一対のアッセイを使用し、その結果、Ｃ９９の生成を阻害するが、β−位ペプチド基質（Ｐ５−Ｐ５’）は阻害しない。

【0233】

実施例に示すように、一実施形態において、ＭＢＰ−Ｃ１２５ ＡＰＰ６９５ｗｔの融合タンパク質を基質の１つとして使用してもよい。第２の基質は市販のＰ５−Ｐ５’蛍光基質にしてもよい。各基質は、例えば９６ウェルプレート形式で組み換えＢＡＣＥ（Ｒ＆Ｄ（ｃａｔ＃９３１−ＡＳ−０５０）と培養する。ＭＢＰ−Ｃ１２５基質は、ＢＡＣＥ切断によるＣ−９９生成物はＡｌｐｈａＬｉｓａアッセイを読み出しとして使用し測定可能である。Ｐ５−５’基質に対しては、ＢＡＣＥ切断による蛍光の損失を読み出しとして使用してもよい。ＡＳＢＩは、蛍光基質を阻害せずにＭＢＰ−Ｃ１２５のＢＡＣＥ切断を阻害する。

【0234】

他の細胞無しの系
活性剤の阻害活性を示す例示的なアッセイは、例えば、ＷＯ００／１７３６９、ＷＯ００／０３８１９および米国特許第５，９４２，４００号および第５，７４４，３４６号に記載される。そのようなアッセイは、細胞無しの培養、またはαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼを発現する細胞およびαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼの切断部位を有するＡＰＰ基質を使用する細胞有りの培養において実施可能である。

【0235】

１つの例示的な実施形態において、対象の薬剤を、ＡＰＰのαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ切断部位を含有するＡＰＰ基質、例えば、ＫＭ−ＤＡまたはＮＬ−ＤＡ（ＡＰＰ−ＳＷ）のアミノ酸配列を含む、完全ＡＰＰまたはその変異体、ＡＰＰ断片、または組み換えあるいは合成ＡＰＰ基質、と接触させ、αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ酵素、その断片、またはαセクレターゼまたはβセクレターゼのＡＰＰ切断部位で切断するように有効である合成または組み換えポリペプチド変異体の存在下で、酵素の切断活性に適切な培養条件で培養する。望ましい活性を有する薬剤は、ＡＰＰ基質の切断を低下または予防し、適切な基質は基質ペプチドあるいは該ペプチドもしくはそのαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ切断生成物の精製や検知を容易にすることに有用である修飾を含む、融合タンパク質またはペプチドであり得る誘導体を任意に含む。有用な修飾は、抗体結合のために既知の抗原性エピトープの挿入、ラベルまたは検出可能な部分の接続、結合基質の接続等を含む。

【0236】

細胞無しの体内アッセイに適切な培養条件は、例えば、約２００ナノモル〜１０マイクロモル基質、約１０〜２００ピコモル酵素、および約０．１ナノモル〜１０マイクロモルの薬剤の水溶液で、ｐＨの約４〜７で、約３７℃で、約１０分〜３時間の期間を含む。これらの培養条件は、実施例に過ぎなく、特定のアッセイ部分および／または望ましい測定体制に応じて変更可能である。特定のアッセイ部分に対して培養条件の最適化は、使用する特定のαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ酵素ならびにその最適なｐＨ、アッセイに使用する可能性がある任意の他の追加酵素および／またはマーカー等を考慮すべきである。そのような最適化は一般的で、過度の実験の必要がない。

【0237】

別の例示的なアッセイは、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）がＡＰＰ−ＳＱのＣ末端１２５アミノ酸に融合された融合ペプチドを活用する。ＭＢＰ部分は抗ＭＢＰ取得抗体によりアッセイ基質上に捕捉される。αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼの存在下で取得された融合タンパク質を培養すると、それぞれにαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ切断部位で基質の切断を引き起こす。この系は、対象の薬剤の阻害活性を検出するために使用することができる。切断活性の分析は、例えば切断生成物の免疫学的アッセイにより行っても良い。そのような免疫学的アッセイの１つは、例えば抗体ＳＷ１９２を使用し、切断された融合タンパク質のカルボキシ末端で露出された独自のエピトープを検出する。このアッセイは、例えば米国特許第５，９４２，４００に記載される。

【0238】

細胞有りのアッセイ
多数の細胞に基づいたアッセイが、αセクレターゼ活性とβセクレターゼ活性の相対関係および／またはＡＰＰ処理による、非アミロイド生成性よりもアミロイド生成性のＡβオリゴマーの放出に対して、対象の薬剤の活性を評価するために使用することができる。細胞内で、薬剤が存在すると存在しない状態でＡＰＰ基質とαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ酵素との接触は、薬剤のαセクレターゼ促進および／またはβセクレターゼ阻害の活性を示すために使用することができる。好ましくは、薬剤の存在下のアッセイは、非阻害対照と比較すると、酵素活性に対する、少なくとも約３０％、最も好ましくは、少なくとも約５０％の阻害を提供する。

【0239】

一実施形態において、αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼを自然に発現する細胞を使用する。別の方法で、上記のように細胞は、組み換えαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ、あるいは合成変異酵素を発現するように修飾する。ＡＰＰ基質は培養媒体に添加してもよく、好ましくは細胞に発現する。ＡＰＰ、ＡＰＰの変異体または突然変異体を自然に発現する細胞、またはＡＰＰのアイソフォーム、突然変異または変異ＡＰＰ、組み替えまたは合成ＡＰＰ、ＡＰＰ断片あるいは、αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼＡＰＰ切断部位を含む合成ＡＰＰペプチドまたは融合タンパク質を発現するように転換した細胞が使用できるが、但し、発現されたＡＰＰｇ酵素に直接に接触可能であり、酵素切断活性を分析可能であることを条件とする。

【0240】

通常ＡＰＰからＡβを処理するヒト細胞株は薬剤の阻害活性アッセイに対して有用な手段を提供する。Ａβおよび／または他の切断生成分の生成と、培養媒体への放出は、例えばウェスタンブロット法または、ＥＬＩＳＡのような酵素接続免疫学的アッセイ（ＥＩＡ）等の免疫学的アッセイにより測定可能である。

【0241】

ＡＰＰ基質および活性αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼを発現する細胞を、薬剤の存在下で培養して、対照と比較したαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼの相対的な酵素活性を示すことができる。αセクレターゼとβセクレターゼとの相対的活性はＡＰＰ基質の一つ以上の切断生成物の分析により測定できる。例えば、基質ＡＰＰに対するβセクレターゼ活性の阻害は、Ａβ、ｓＡＰＰβおよびＡＰＰｎｅｏのような特定のβセクレターゼによるＡＰＰ切断生成物の放出を低下させるであろうことが予測される。基質ＡＰＰに対してαセクレターゼ活性の促進または強化は、ｓＡＰＰαおよびｐ３ペプチドのような特定のαセクレターゼによるＡＰＰ切断生成物の放出を増加させるであろうことが予測される。

【0242】

神経および非神経細胞の両方ともＡβを処理し放出するが、内因性βセクレターゼ活性の水準は低く、多くの場合はＥＩＡでは検出し難い。したがって、強化βセクレターゼ活性、ＡＰＰからＡβへの強化処理、および／またはＡβの強化生成を有することが既知である細胞腫の使用が好ましい。例えば、ＡＰＰのスエーデン突然変異（ＡＰＰ−ＳＷ）、インディアナ突然変異（ＡＰＰ−ＩＮ）、またはＡＰＰ−ＳＷ−ＩＮの細胞の遺伝子移入は、強化βセクレターゼ活性を有し、容易に測定可能なＡβ分量を生成する細胞を提供する。

【0243】

そのようなアッセイにおいて、例えばＡＰＰ、αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼを発現する細胞が、ＡＰＰ基質の切断部位でαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ酵素活性に適切な条件下で培養媒体に培養される。細胞を薬剤に露出すると、媒体に放出するＡβ分量および／または細胞溶解物中のＣＴＦ９９断片の量が対照と比較すると低下する。ＡＰＰの切断生成物は、例えば、上記のように特定の抗体との免疫反応により分析できる。

【0244】

αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ活性の分析に好ましい細胞は、一次ヒト神経細胞、導入遺伝子がＡＰＰである一次トランスジェニック動物神経細胞、およびＡＰＰ−ＳＷ等の、ＡＰＰを発現する安定性２９３細胞株のように他の細胞を含む。

【0245】

体内アッセイ動物モデル
αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼの相対的な活性、および／またはＡβを放出するためのＡＰＰ処理に対して、対象薬剤の活性を分析することに、様々な動物モデルを使用できる。例えば、ＡＰＰ基質、αセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ酵素を発現するトランスジェニック動物を、薬剤の阻害活性を示すことに使用することができる。特定のトランスジェニック動物モデルは、例えば米国特許第５，８７７，３９９号、第５，６１２，４８６号、第５，３８７，７４２号、第５，７２０，９３６号、第５，８５０，００３号、第５，８７７，０１５号、および第５，８１１，６３３号、そしてＧａｎｅｓら、１９９５， Ｎａｔｕｒｅ ３７３：５２３に記載される。好ましくは、ＡＤの病態生理学に関連する特徴を示す動物を使用する。本明細書に記載されるようなトランスジェニックネズミに薬剤を投与することにより、薬剤の阻害活性を示す別の方法が提供される。薬剤を薬学有効担体中で、対象組織まで適切な治療量で届く投与経路を介して投与することも好ましい。

【0246】

βセクレターゼ切断部位でＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断、およびＡβ放出に対しての阻害は、これらの動物において、脳脊髄液または組織のような、動物体液中の切断断片を測定することによって分析できる。同様に、αセクレターゼ切断部位でＡＰＰのαセクレターゼ媒介切断およびｓＡＰＰα放出の促進または強化は、これらの動物において、脳脊髄液または組織のような、動物体液中の切断断片を測定することによって分析できる。ある特定の実施形態において、Ａβ沈着または斑に対する脳組織分析が好ましい。

【0247】

ＡＰＰ基質をαセクレターゼおよび／またはβセクレターゼ酵素と、薬剤の存在下で、ＡＰＰの酵素媒介切断、および／または基質からＡβの放出を可能にする、十分な条件の下で、接触させると、望ましい薬剤はβセクレターゼ切断部位でＡＰＰのβセクレターゼ媒介切断を減少することに有効、および／またはＡβの放出分量を減少することに有効である。薬剤は、αセクレターゼ切断部位でＡＰＰのαセクレターゼ媒介切断を減少することに効果的、および／またはｓＡＰＰαの放出分量を減少することにも好ましくて有効である。そのような接触が、例えば、上記のように、動物モデルに対して薬剤の投与の場合は、薬剤は動物の脳組織中のＡβ沈着を減少し、βアミロイド斑の数および／または大きさを減少することに有効である。ヒトの対象に対する投与の場合は、薬剤は、Ａβの増大分量を特徴とする病気の進行を阻害遅延させること、ＡＤの進行を遅延させること、および／またはその病気のリスクがある患者においてＡＤの発症または発病を予防することに有用である。

【0248】

臨床有効性を監視する方法
様々な実施形態において、治療の有効性は、薬剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグ）の投与を開始する前の病気のパラメータに対するベースライン測定値を薬剤または類似体を投与後の一つ以上の時点で同一のパラメータと比較することにより決定することができる。測定でき、例示的なパラメータの一つは、ＡＰＰ処理のバイオマーカー（例えば、ペプチドオリゴマー）である。そのようなバイオマーカーは、血液、血漿、血清、尿、粘液または脳脊髄液（ＣＳＦ）における、ｓＡＰＰα、ｐ３（Ａβ１７−４２またはＡβ１７−４０）、ｓＡＰＰβ、可溶性Ａβ４０および／または可溶性Ａβ４２の増加したレベルを含むがそれらに限らない。ｓＡＰＰαおよび／またはｐ３の増加したレベル、およびｓＡＰＰβおよび／またはＡＰＰｎｅｏの低下したレベルの検出は、治療の有効性指標である。逆に、ｓＡＰＰαおよび／またはｐ３の低下したレベル、および／またはｓＡＰＰβ、ＡＰＰｎｅｏ、タウまたはリン酸化タウ（ｐＴａｕ）の増加したレベルの検出は、治療が有効ではないことを示す。

【0249】

治療の有効性を測定するための別のパラメータは頭脳中のアミロイド斑沈着のレベルである。アミロイド斑は当該技術分野においていかなる周知の方法でも、例えばＣＴ、ＰＥＴ、ＰＩＢ−ＰＥＴおよび／またはＭＲＩにより測定できる。薬剤（例えば、ガランギン、ルチンのようなＡＳＢＩおよびその類似体、誘導体またはプロドラッグ）の投与は斑の形成速度の減少、および頭脳中の斑沈着の逆行または減少までの結果となり得る。治療の有効性は、対象の認知能力に対して安定化および／または改善を観察することによって判断できる。認知能力は、当業者の許容範囲内でいかなる方法でも評価可能であり、例えば、臨床的認知症定格（ＣＤＲ）、ミニ認知状態試験（ＭＭＳＥ）、またはＦｏｌｓｔｅｉｎ試験、ＤＳＭ−ＩＶ（精神疾患の診断・統計マニュアル、第４版）またはＤＳＭ−Ｖに記載された評価基準、等を含む。

【0250】

臨床的有効性は当該技術分野において、いかなる周知の方法でも監視可能である。有効性を監視する測定可能なバイオマーカーは、血液、血漿、血清、尿、粘液または脳脊髄液（ＣＳＦ）におけるｓＡＰＰα、ｓＡＰＰβ、Ａβ４２、Ａβ４０、ＡＰＰｎｅｏおよびｐ３（例えば、Ａβ１７−４２ ｏｒ Ａβ１７−４０）のレベルを監視することを含むがそれらに限らない。ｓＡＰＰαおよび／またはｐ３の増加したレベルおよびｓＡＰＰβおよび／またはＡＰＰｎｅｏの低下したレベルの検出は、治療または予防計画の有効性指標である。逆に、ｓＡＰＰαおよび／またはｐ３の低下したレベルおよびｓＡＰＰβおよび／またはＡＰＰｎｅｏの増加したレベルの検出は、治療または予防計画の有効性が無い指標である。他のバイオマーカーは、タウおよびリン酸化タウ（ｐＴａｕ）を含む。タウおよびｐＴａｕの低下したレベルの検出は、治療または予防計画の有効性指標である。

【0251】

有効性は、脳内のアミロイド斑負荷を測定することによっても決定することができる。脳内のアミロイド斑負荷が増加しないか、または低下する場合、治療または予防計画が有効であると見なす。逆に、脳内のアミロイド斑負荷が増加する場合、治療または予防計画が有効ではないと見なす。アミロイド斑負荷は、当該技術分野において、いかなる周知の方法でも、例えばＣＴ、ＰＥＴ、ＰＩＢ−ＰＥＴおよび／またはＭＲＩを含めて、測定できる。

【0252】

有効性は、対象の認知能力を測定することによっても決定できる。認知能力は当該技術分野においていかなる周知の方法でも測定することができる。例示的な試験は臨床的認知症定格（ＣＤＲ）スコアを与えるか、またはミニ認知状態試験（ＭＭＳＥ）を適用することを含む（Ｆｏｌｓｔｅｉｎら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １２（３）：１８９−９８）。例えば、ＣＤＲまたはＭＭＳＥを適用する際に、同じスコアを維持するか、またはスコアが向上する対象は、治療または予防計画が有効であることを示す。逆に、例えばＣＤＲまたはＭＭＳＥを適用する際に、低下した認知能力を示すスコアを受ける対象は、治療または予防計画が有効ではないことを示す。

【0253】

ある特定の実施形態において、監視方法は、薬剤の投与量を投与する前に、対象における測定可能なバイオマーカーまたはパラメータ（例えば、アミロイド斑負荷または認知能力）のベースライン値を測定し、それからこれを、治療後に同じ測定可能なバイオマーカーまたはパラメータの値と比較することを含む。

【0254】

他の方法において、測定可能なバイオマーカーまたはパラメータの対照値（例えば、平均値および標準偏差）が、対照群に対して決定される。ある特定の実施形態において、対照群の全員は、事前治療を受けておらず、ＡＤ、ＭＣＩを患わずＡＤまたはＭＣＩの発症リスクがない。そのような場合は、測定可能なバイオマーカーまたはパラメータの値が対照値に近づいたら、治療は有効であると見なす。別の実施形態において、対照群の全員は、事前治療を受けなかったが、ＡＤまたはＭＣＩが診断されている。そのような場合は、測定可能なバイオマーカーまたはパラメータの数値が対照値に近づいたら、治療は有効ではないと見なす。

【0255】

別の方法において、現在治療を受けていないが、以前治療を受けた対象が、治療の再開が必要かどうかを判断するために、一つ以上のバイオマーカーまたは臨床パラメータを監視される。対象における一つ以上のバイオマーカーまたは臨床パラメータの測定値は、以前治療後に対象において達成した値と比較することができる。別の方法において、対象において測定した値は、治療を受けた後に対象群に対して測定した対照値（平均値に加えて標準偏差／ＡＮＯＶＡ）と比較可能である。別の方法において、対象に対して測定した値は、予防的に治療し、疾患の病状を認めない対象群、または疾患特徴の改善を示す、治療的に治療を受けた対象群に対する対照値と比較することができる。そのような場合、測定可能なバイオマーカーまたはパラメータの数値が対照値に近づいたら、治療は有効であると見なし、再開の必要はない。これらのすべての場合、対照レベルに対して有意義な差異（例えば、１標準偏差を超える）は、対象において治療を再開すべきである指標である。

【0256】

ある特定の実施形態において、分析用の組織試料は、典型的に対象からの血液、血漿、血清、尿、粘液または脳脊髄液である。

【0257】

キット
様々な実施形態において、活性剤（例えば、本明細書に記載される、ガランギン、ルチンおよびその類似体、誘導体、その互変異生体または立体異性体、またはそのプロドラッグのような、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ））は、複数または単一投与容器に封入することができる。封入した薬剤は、例えば、使用するために組み立てる部分や部品を含めて、キットの形で提供可能である。例えば、凍結乾燥された形態の活性剤および適切な希釈剤を、使用する前に組み合わせるための分離された成分として提供することができる。キットは、活性剤および、同時投与用の第２の治療薬剤を含み得る。活性剤および第２の治療薬剤は、別々の成分として提供可能である。キットは複数の容器を含み、各容器が化合物の一つ以上の単位投与量を含み得る。その容器は、好ましくは、望ましい投与様式に適応し、本明細書に記載されるように、経口投与の場合は、錠剤、ゲルカプセル、持続放出カプセル等、非経口投与の場合は、デポ薬品、事前充填シリンジ、アンプル、バイアル等、および局所投与の場合は、パッチ、メディパッド、クリーム等を含むがそれらに限らない。

【0258】

ある特定の実施形態において、キットを提供し、本明細書に記載される一つ以上のＡＳＢＩ化合物、またはそのプロドラッグ、互変異生体または立体異性体、または該化合物の薬学的に許容範囲内の塩または溶媒和を含む、上述立体異性体または上述互変異生体またはプロドラッグ好ましくは薬学組成物として適切な容器の中で、および／または適切な梱包で提供し、また、一つ以上の追加活性剤を、任意に、存在する場合、望ましくは薬学組成物として適切な容器の中で、および／または適切な梱包で提供し、なお、任意で、例えば化合物または組成物の投与方法について使用説明書等の、任意に使用説明を含む。

【0259】

別の実施形態において、単一または複数の容器、本明細書に記載または請求される一つ以上のＡＳＢＩ化合物、またはその互変異生体あるいは立体異性体、または該化合物、該互変異生体または該立体異性体の薬学的に許容できる塩または溶媒和物を含む薬学的に許容できる組成物、任意に一つ以上の追加治療薬剤を含む薬学的に許容範囲内の組成物、および任意に、使用説明を含むキットを提供する。キットは、意図される用途に適切なラベル（例えば、説明資料）を任意に含み得る。

【0260】

いかなる薬学的な薬品でもそうであるが、梱包材および／または容器は、保管および配達の際に薬品の安定性を保護するように設計される。さらに、キットは、使用説明、または使用者、例えば医師、技術者または患者に助言を与える、予防剤、治療剤または対象の疾患に対する改善的な治療をどのように組成物を正しく投与するかに関して他の情報や資料を含み得る。いくつかの実施形態において、使用説明は、実際の投与量および監視手順を含むがそれに限らない投与計画を述べるまたは提案し得る。

【0261】

いくつかの実施形態において、使用説明は、組成物の投与がアレルギー反応、例えばアナフィラキシーを含むがそれに限らない拒絶反応をもたらし得ることを示す情報や資料を含み得る。情報や資料は、アレルギー反応が、軽度の掻痒性皮疹のみとして現れるか、または紅皮症、血管炎、アナフィラキシー、Ｓｔｅｖｅｎ−Ｊｏｈｎｓｏｎ症候群等のように重度であり得ることを示すことができる。ある特定の実施形態において、情報や資料はアナフィラキシーが致命的であることがあり、いずれかの異種タンパク質が体内に導入される場合に起こり得ることを示し得る。ある特定の実施形態において、情報や資料はこれらのアレルギー反応がじんましんまたは発疹として現れ、致命的な全身性反応に進み、露出のすぐ後に、例えば、１０分以内に起こり得ることを示し得る。情報や資料は、アレルギー反応により対象に感覚異常症、低血圧症、喉頭水腫、認知状態の変化、貌面あるいは咽頭血管性水腫、気道閉塞、気管支けいれん、蕁麻疹ならびにかゆみ症、血清病、関節炎、アレルギー性腎炎、糸球体腎炎、側頭動脈炎、好酸球増加症、またはそれらの組み合わせを経験する可能性があることをさらに示し得る。

【0262】

使用説明の資料は典型的に書面または印刷資料を含むが、それらに限定されない。そのような指示を記憶し、エンドユーザーに通信可能な、いかなる媒体も本発明により企図される。そのような媒体は、電子ストレージ媒体（例えば磁気ディスク、テープ、カートリッジ）光媒体（例えばＣＤ ＲＯＭ）等、を含むがそれらに限定されない。そのような媒体は、そのような使用説明資料を提供するインターネットサイトのアドレスを含み得る。

【0263】

いくつかの実施形態において、キットは、一つ以上の梱包材、例えば箱、瓶、管、バイアル、容器、噴霧器、吸入器、静注パック、封筒等、および本明細書に記載される活性剤を含む、少なくとも一つの単位投与形態ならびに梱包材を含み得る。いくつかの実施形態において、キットは、対象の疾患に対して組成物を予防的、治療的または改善的な治療として使用するための説明も含む。

【0264】

いくつかの実施形態において、キットは、例えば、箱、瓶、管、バイアル、容器、噴霧器、吸入器、静注パック、封筒等、一つ以上の梱包材、その梱包材内に、一つ以上の活性剤（例えば、本明細書に記載される、ガランギン、ルチン、およびその類似体、誘導体、その互変異生体あるいは立体異性体、またはそのプロドラッグのような、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ））を含む薬剤、少なくとも一つの単位投与量を含む第１の組成物、および例えば、（本明細書に記載されるように）アルツハイマー病の治療および／または予防において使用する薬剤またはそのプロドラッグ、コドラッグ、代謝産物、類似体、相同体、同族体、誘導体、塩およびそれらの組み合わせのような、第２の薬剤を含む第２の組成物を含み得る。いくつかの実施形態において、キットは、対象の疾患に対して組成物を予防的、治療的または改善的な治療として使用するための説明も含み得る。

【0265】

ある特定の実施形態において、説明書／説明資料は、存在する場合、投与量、および／または治療計画、および／またはキットに含まれる活性剤の禁忌を教示する。説明資料は、存在する場合、典型的に書面または印刷資料を含むが、それらに限らない。そのような説明を記憶し、エンドユーザーに通信可能で、いかなる媒体も本発明により企図される。そのような媒体は、電子ストレージ媒体（例えば磁気ディスク、テープ、カートリッジ）光媒体（例えばＣＤ ＲＯＭ）等、を含むがそれらに限定されない。そのような媒体は、そのような教科材を提供するインターネットサイトのアドレスを含み得る。

【実施例】

【0266】

下記の実施例は、請求された発明を、制限せず、例示するために記載される。

【実施例1】

【0267】

ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）：
アルツハイマー病に対する治療剤の新規分類
様々な病理に対する治療におけるプロテアーゼ阻害戦略（例えばＢＡＣＥ阻害剤）の重要な制限は、基質標的作用であり、すなわち、所与の標的プロテアーゼ、例えばＢＡＣＥまたはγセクレターゼ複合体の、全基質の切断の阻害である。γ−セクレターゼの場合は、ＡＰＰ以外の基質、例えばＮｏｔｃｈは、γ−セクレターゼ阻害の潜在的な副作用に関する懸念を生じ、そしてγ−セクレターゼ阻害剤であるＳｅｍａｇａｃｅｓｔａｔの最近の失敗は、そのような懸念を強化する。ＢＡＣＥの場合は、非ＡＰＰ基質、例えばＰＳＧＬ１またはＬＲＰの阻害が、同様な懸念を生じる。

【0268】

したがって、最適なＢＡＣＥ阻害剤は、ＢＡＣＥではなくＡＰＰに結合し、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害に繋がるものである（ＡＳＢＩ）。そのような治療剤はアルツハイマー病の治療剤で新規分類となる、すなわち、ＡＳＢＩの分類である。

【0269】

本実施例に報告される、最初のＡＳＢＩの特定に関するデータは、そのような取り組み方が実施可能であることを証明する。ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のＢＡＣＥ切断を阻害するが、他の基質のタンパク質分解切断を阻害しない。ＡＳＢＩアッセイにおいて４４８の臨床化合物（ＮＣＣ ３３６４）を含む小規模の収集を検索することによって、１μＭの投与量でＡＳＢＩとして有効であった、シトラスフラボノイド配糖体であるルチンというバイオフラボノイドを特定した。バイオフラボノイド群のさらなる分析では、５０μＭの投与量でＡＳＢＩと同様に作用する、ガランガル根茎からのバイオフラボノイドである、ガランギンという第２の分子を発見した。これらのバイオフラボノイドは、ＡＤに対する疾患修飾治療剤の新規と考えられる分類の最初の成員を表す。

【0270】

本明細書に記載される、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤を特定し、特異的にＡＰＰ処理を調節する体内能力を評価する取り組み方の計画的な適用は、今まで報告されていないと考える。細胞モデルにおいてＡＳＢＩとして作用する分子リード化合物を提供する、バイオフラボノイド栄養サプリメントを特定した。プロドラッグの取り組み方を介して、脳において増加している、このバイオフラボノイドのレベルが、ＡＤネズミモデルにおいてＡβ４２の低下に繋がることが証明された。したがって、ＡＳＢＩは、ＡＤに対する治療剤の新規分類を表す。

【0271】

材料および方法
化合物
ルチン（ＡＳＢＩ−１）を、Ｓｉｇｍａ（ｃａｔ ＃ Ｒ５１４３，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手して、ガランギン（ＡＳＢＩ−２）を、Ｓｉｇｍａ（ｃａｔ＃ ２８２２００，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）から入手して、プロガランギン（ＰＧ−１）を、合成した。

【0272】

ＡＳＢＩアッセイ。
ａ）ＭＢＰ−Ｃ１２５基質に対するＢＡＣＥ切断阻害用の化合物の評価、およびｂ）Ｐ５−Ｐ５’基質のＢＡＣＥ阻害剤候補の評価、の２部分を含む。

【0273】

ａ） ＭＢＰ−Ｃ１２５切断アッセイ。
ＡＰＰの１２５ Ｃ−末端残基（水中１μＬ／１ｍＭ）を有するマルトーゼ結合タンパク質のタンパク質構造物を、フラボノイド（１００ｕＭ）１５とともに培養した。次に、混合物に対してＢＡＣＥ（Ｓｉｇｍａ ＃Ｂ９０５９、ＢＡＳＥ緩衝液中、５μｌの３単位／ｍｌ）により、３０分で切断を行った。０、１０、２０および３０分後に反応混合物の２μＬを凍結し、作成されたＡＰＰ−Ｃ９９を特定するために、それぞれの時点に対して同時に定量を行った。定量は、抗Ａｂｅｔａ受容ビーズ（ＡＬ２７５ＡＣ）を抗ＡＰＰ受容ビーズ（ＡＬ２７５ＡＣ）と交換し、抗体を２ｘのＡＬＰＨＡＬｉｓａ緩衝液と混合することによって変更されたＰｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ＡＬＰＨＡＬｉｓａアミロイドアミロイドベータキット（ＡＬ２７５Ｃ）を使用し実行した。

【0274】

ｂ）Ｐ５−Ｐ５’切断アッセイ。
１００μＭでのフラボノイドによる、蛍光基質Ｐ５−Ｐ５’のＢＡＣＥ切断の阻害を、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ＣＳ００１０）製のβ−セクレターゼ（ＢＡＣＥ１）活性検出キットおよび標準プロトコルを使用して測定した。

【0275】

プラスミド
ｐＡＰｔａｇ５−ＮＲＧ１−β１構造体が、Ｃａｒｌ Ｂｌｏｂｅｌ博士の厚意によって提供された（Ｈｏｒｉｕｃｈｉら（２００５）Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．２８３：４５９−４７１）。ＢＡＣＥ１構造体はＭｉｃｈａｅｌ Ｗｉｌｌｅｍ博士およびＣｈｒｉｓｔｉａｎ Ｈａａｓｓ博士から贈られたものである（Ｗｉｌｌｅｍら（２００６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３１４：６６４−６６６）。ｐＣＭＶ５−Ｍｉｎｔ３、ｐＭｓｔ−ＡβＰＰ、ｐＧ５Ｅ１Ｂ−ｌｕｃおよびｐＣＭＶ−ＬａｃＺ構造体が、Ｔｈｏｍａｓ Ｓｕｄｈｏｆ博士、Ｐａｔｒｉｃｋ Ｍｅｈｌｅｎ博士およびＶｅｒｏｎｉｑｕｅ Ｃｏｒｓｅｔ博士の厚意により提供された（Ｃａｏ（２００１）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２９３：１１５−１２０）。ｐＥＦ−Ｎ−ＦＬＡＧ−ＴＡＺ構造体が、Ｍｉｃｈａｅｌ Ｙａｆｆｅ博士およびＩａｉｎ Ｆａｒｒａｎｃｅ博士の厚意により提供された。ｐｃＤＮＡ３．１−ＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４構造体は、以前に説明されている（Ｏｒｃｈｏｌｓｋｉら（２０１１）Ｊ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓ．２３：６８９−６９９）。

【0276】

細胞培養およびウェスタンブロット。
ヒトＡβＰＰ過剰発現チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株（７Ｗ）がＥｄｗａｒｄ Ｋｏｏ博士の厚意により提供された。プラスミド構築物はリポフェクタミン２０００（インビトロゲン）を伴い一時的にＨＥＫ２９３Ｔまたは７Ｗ細胞に核酸導入された。ウェスタンブロット分が以前に記載されたように実施された（Ｓｗｉｓｔｏｗｓｋｉら（２００９）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２９：１５７０３−１５７１２）。簡潔に言えば、核酸導入の４８時間後、細胞を採取し、ＮＰ−４０細胞溶解緩衝剤（５０ｍＭ ＴｒｉｓＨＣｌ，ｐＨ ８．０、１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび１％ＮＰ−４０）内で溶解した。細胞溶解物を１Ｘ ＬＤＳローディングバッファー（インビトロゲン）および５０ｍＭ ＤＴＴと混合し、１００℃で１０分間煮沸した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびエレクトロントランスファー後、ウェスタンブロッティングを抗ＡＰＰ抗体（β−ＣＴＦに対するＣＴ１５、Ｅｄｗａｒｄ Ｋｏｏ博士の厚意により贈られた、全長ＡＰＰおよびｓＡＰＰαに対する６Ｅ１０（Ｃｏｖａｎｃｅ））を用いて施された。３０分間のＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ洗浄を二次抗体との培養後に行った。

【0277】

ニューレグリン１脱落分析
ヒト胎盤分泌アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）−ＮＲＧ１（ｐＡＰｔａｇ５−ＮＲＧ１−β１）融合タンパク質をコード化するｃＤＮＡ構築物を、全長野生型ＢＡＣＥ１を伴いまたは伴わず、リポフェクタミン２０００（インビトロゲン）を用いて、以前に記載のように、６穴フォーマット内のＨＥＫ２９３細胞に核酸導入した（Ｖａｓｓａｒら（１９９９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８６：７３５−７４１）。核酸導入後、培地をＤＭＥＭ含有１０％加熱不活性化ウシ胎仔血清に交換し、２４時間培養した。ＳＥＡＰ作用を馴化培地において測定した。アルカリホスファターゼ活性の測定には、２００μｌの反応液（０．１Ｍグリシン、ｐＨ１０．４、１ｍＭ ＭｇＣｌ_２，１ｍｇ／ｍｌ４−ニトロフェニルジナトリウム塩六水和物を含む１ｍＭ ＺｎＣｌ_２、シグマ）が２０μｌの馴化培地に加えられた。吸収度は４０５ｎｍで読み取った。両側スチューデントｔ−検定を用いて統計分析を行った。

【0278】

トランス活性化分析
ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を５つのプラスミド（１）ｐＧ５Ｅ１Ｂ−ｌｕｃ，０．３μｇ、（２）ｐＣＭＶ−ＬａｃＺ，０．１μｇ、（３）ｐＭｓｔ−ＡＰＰ（ＡＰＰ−Ｇａｌ４）またはｐｃＤＮＡ３．１−ＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４、０．３μｇ、（４）ｐＣＭＶ５−Ｍｉｎｔ３、１．０μｇ；（５）ｐＥＦ−Ｎ−ＦＬＡＧ−ＴＡＺ，１．０μｇと共核酸導入した。細胞を核酸導入後、４８時間、０．２ｍｌ ｐｅｒ ｗｅｌｌ細胞培養溶解緩衝剤（Ｐｒｏｍｅｇａ）においてし、それらのルシフェラーゼおよびβ−ガラクトシターゼ作用を、それぞれＰｒｏｍｅｇａルシフェラーゼ分析キットおよびＰｒｏｍｅｇａβ−ガラクトシターゼ分析キットによって決定づけた。ルシフェラーゼ作用は、核酸導入の効率性および転写への一般的効果について、対照へのβ−ガラクトシターゼ作用によって正規化された。核酸導入は８０〜９０％コフルエンシー（ｃｏｆｌｕｅｎｃｙ）でリポフェクタミン２０００（インビトロゲン）を用いて６穴プレート内で行われた。

【0279】

表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）試験。
カルボキシメチル化したデキストラン（ＣＭ−５）チップの４つのフロー細胞（ＦＣ１、ＦＣ２、ＦＣ３、ＦＣ４）の表面を、５０ｍＭのＮａＯＨ、１ｍＭのＨＣｌの０．０５％のＨ_３ＰＯ_４で順次、２０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．４、１２５ｍＭ塩化ナトリウムで平行して、３０μｌ／分の流速で、１分間、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ−１００（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用し、洗浄した。３つの融合タンパク質を、２０ｍＭのリン酸塩、１２５ｍＭの塩化ナトリウムｐＨ７．４を使用し、アミンカップリングにより固定した。その３つのタンパク質は、マルトーゼ結合タンパク質（ＭＢＰ）およびＡＰＰ細胞外ドメインの残基２３０−６２４（９０−ｋＤａ）（ＦＣ４）を含む融合タンパク質であるＭＢＰ−ｅＡＰＰ_{２３０−６２４}、残基２３０−６２４（４５−ｋＤａ）（ＦＣ２）のみを含むタンパク質であるｅＡＰＰ_{２３０−６２４}および、チオレドキシン（ＴＲＸ）ならびに細胞外ドメイン（２０−ｋＤａ）（ＦＣ３）の残基５７５−６２４を含む融合タンパク質であるＴＲＸ−ｅＡＰＰ_{５７５−６２４}であった。タンパク質はＬｉｂｅｕら（２０１１）， Ｊ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ Ｄｉｓ．，２５（３）：５４７−５６６ Ｌｉｂｅｕら（２０１１）に説明された通りに生成された。フロー細胞ＦＣ１を対照として使用した。ガランギンをＤＭＳＯ中の１０ｍＭ溶液から１％ＤＭＳＯ、２０ｍＭリン酸ナトリウムｐＨ７．４，１２５ｍＭ 塩化ナトリウム、０．０５％ Ｔｗｅｅｎ中の５０μＭまで希釈し、それから１．５倍で１０段階希釈した。各希釈に対して結合トレースを記録し、結合フェーズは６０秒であり、解離フェーズは２４０秒であった。各サイクルは２０℃で行われ、流速は不変で２０μｌ／分であった。追加の２４０秒の緩衝液フローは、６０μｌ／分で細胞に亘って再生フェーズとして、化合物を完全にタンパク質から分離することを容易にするために適用した。センソグラムは、Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ１００評価ソフトウェアを使用し、基準および緩衝液信号を減ずるによって取得された。結合曲線はＰＲＩＳＭ（Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｉｎｃ）でモデル化された。

【0280】

薬物動態学（ＰＫ）分析。
ガランギンおよびプロガランギンの頭脳浸透を標準ＰＫで評価し、皮下（Ｓｕｂ−Ｑ）注射で５匹の成体非トランスジェニックマウスに５０μｌの５ｍｇ／ｍｌ標準原液のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の化合物、または２５ｇのマウスに対して、１０ｍｇ／ｋｇの投与量を与えた。注射を受けたマウスを、１、２、４、６および８時間の時点でケタミン／キシラジンで麻酔し、心穿刺で採血した。次にマウスを食塩水でかん流し、脳組織を切断しドライアイス上でスナップ凍結した。血液を３０００ｒｐｍで、１０分で遠心し、血漿上澄を取得した。血漿および右半脳を、Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ（ＩＡＳ，Ｂｅｒｋｅｌｅｙ，ＣＡ）へ、化合物の基準試料とともに、組織中と血漿中の化合物水準分析のために送った。化合物レベルは、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳアプローチで測定した。

【0281】

パイロット有効性テスト。
ガランギンおよびプロガランギン（ＰＧ−１）を、１０％Ｓｏｌｕｔｏｌ／１５％ＤＭＳＯ／７５％ポリエチレングリコール（Ｐｅｇ）に溶解した。各化合物について、１０ｍｇ／ｍｌの標準原液を調製し、毎日、１４日間に、４０ｍｋｄの投与量で、１００μｌの皮下注射を行った。ガランギン群およびプロガランギン群に５匹のＰＤＡＰＰのＡＤモデルＪ２０マウスがおり、９匹の媒体のみの処置を受けたＪ２０対照も使用した。治療の最後の日に、注射の２時間後、上記のようにネズミを麻酔し、血漿を取得するために採血し、脳組織を採取した。右半脳は、海馬および内嗅皮質を隔離するために詳細に切断し、これらの組み合わせた組織を、生化学的分析に使用した。残りの組織および血漿は、化合物水準分析のためにＩＡＳに送った。

【0282】

生化学。
Ａβ１−４２およびＡβ１−４０水準は海馬／内嗅皮質の組織を使用し測定した。簡単にいえば、凍結組織試料の重量を測り、５Ｍ ｇｕａｎｄｉｎｅ−ＨＣｌ／５０ｍＭ Ｔｒｉｓ、ｐＨ８中の２０％ ｗ／ｖ超音波分解生成物を調製した。超音波分解は、氷水中で試料の試験管を使用し、６０Ｈｚで４ｘ５秒に、それから８０Ｈｚで３ｘ５秒行った。次に試料は室温で３時間に回転し、アッセイ実行まで−２０℃で凍結した。Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＥＬＩＳＡキットを、メーカーの指示に従い、Ａβ１−４０およびＡβ１−４２に使用した。

【0283】

結果
ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）の特定。
ＡＳＢＩ特定のために、２基質試験法を使用し、一次高速大量処理スクリーニング（ＨＴＳ）アッセイを準備した（図３Ａおよび３Ｂ）。以前報告された（Ｓｉｎｈａら（１９９９） Ｎａｔｕｒｅ，４０２：５３７−５４０）ＢＡＣＥ基質、すなわち、野生型ＡＰＰのカルボキシ末端１２５に融合されたマルトーゼ結合タンパク質を含むＭＢＰ−Ｃ１２５ ＡＰＰ_６９５ｗｔ融合タンパク質を、一次基質として使用し、ＡＰＰのＢＡＣＥ切断部位のＰ５−Ｐ５’残基より由来した市販のＰ５−Ｐ５’蛍光基質を二次基質として使用した。各基質は、９６ウェルプレート形式で組み換えＢＡＣＥ（Ｒ＆Ｄ（ｃａｔ＃９３１−ＡＳ−０５０）と培養した。ＭＢＰ−Ｃ１２５基質は、ＢＡＣＥ切断によるＣ−９９生成物をＡｌｐｈａＬＩＳＡアッセイを用い、読み出しとして測定可能であった（図３Ｂ）。Ｐ５−５’基質に対しては、ＢＡＣＥ切断による蛍光の損失を読み出しとして使用した。ＡＳＢＩはＭＢＰ−Ｃ１２５基質のＢＡＣＥ切断を阻害しながら、ＡＳＢＩがどこでＡＰＰ基質を結合したかによって、必ずしも蛍光基質の切断を阻害する訳ではないであろうことが予想された。

【0284】

４４８化合物が含まれた臨床化合物収集の予備的なスクリーニングに基づいて、最初のスクリーニングでただ１つの化合物を特定できたため、当たる比率が非常に低いことを予想した。次に、さらなる開発のために検証された「ヒット」を特定するように、潜在的な「ヒット」に対して投与量応答曲線を作成した。ＨＴＳスクリーニングを、各候補に対して１０μＭの初期濃度で行った。４４８の市販臨床化合物の小規模の化合物収集を使用し初期スクリーニングを完了した。スクリーニングでは、一つのヒット（図３Ａ）をもたらし、バイオフラボノイドであるルチン（ＡＳＢＩ−１、ルトサイドとも呼ぶ）であると特定された。これは蕎麦に存在するシトラスフラボノイドグリコシドから得られる。このバイオフラボノイドは、ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞においてｓＡＰＰβを減少させ、ＡＰＰ特異的であることが示され、ルチンが特有にＡＰＰのＢＡＣＥ切断に作用するという考えを支持する。次に、一連のバイオフラボノイド（図４）を試験し、最初は細胞においてｓＡＰＰβ阻害の能力を試験した。別のバイオフラボノイドであるガランギンも特定され、ＡＳＢＩのような挙動を有し、ＭＢＰ基質のＢＡＣＥ切断を阻害しながら（図４、菱形）、Ｐ５−Ｐ５’基質に対して阻害を示さない（図４円形）。ガランギン（ＡＳＢＩ−２）は、ガランガル根茎に存在するフラバノールであり、一般的に栄養サプリメントとして使用される。

【0285】

細胞においてｓＡＰＰβおよびＡＰＰ処理に対してバイオフラボノイドＡＳＢＩの作用。
ＡＰＰは、２つの主要な経路で処理され、非アミロイド生成性経路はαセクレターゼ切断が係り、ＡＰＰをｓＡＰＰαおよびα−ＣＴＦ（Ｃ８３）にタンパク質分解するが、アミロイド生成性経路は、β−セクレターゼ切断から始まり、ＡＰＰをｓＡＰＰβおよびβ−ＣＴＦ（Ｃ９９）に切断する。次にβ−ＣＴＦはγ−セクレターゼにより切断され、ＡβおよびＡＩＣＤを生成する。ＡＰＰのβ−セクレターゼ処理を阻害する、ＡＳＢＩの能力をＡＰＰを発現するＳＨ−ＳＹ５Ｙ神経芽腫細胞において試験した。ＢＡＣＥ切断精製物から形成されたｓＡＰＰβ断片をＰｅｒｋｉｎ−ＥｌｍｅｒのＡｌｐｈａＬｉｓａアッセイ（Ｃａｔ＃Ａ２１３２）を使用し測定した。初期スクリーニングにおけるルチンの発見後、１μＭではＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞によるｓＡＰＰβの生成を僅かに阻害することを示した（図５Ａ）。一連のバイオフラボノイドを試験することによってガランギンがＡＳＢＩとして特定された。ガランギンでＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞を処理すると、５０μＭで、同様にｓＡＰＰβレベルを低下させた。ＡＰＰレベルに対しての効果は検出できなかった。

【0286】

バイオフラボノイドＡＳＢＩはＡＰＰ−Ｇａｌ４およびＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４のトランス活性化を阻害する
ＡＰＰ−Ｃ３１切断が細胞の死と関連する一方で、γ−セクレターゼ切断にしたがって生成されるＡＰＰ細胞内領域（ＡＩＣＤ）は様々なシグナル伝達経路に関連づけられており、さらにＫＡＩ１、ネプリリシンおよびＡＰＰそのものを含む多くの遺伝子発現を調整することが示されている（Ｈｏｎｇら（２０００）Ｓｃｉｅｎｃｅ）。ＡＰＰ−Ｇａｌ４／Ｍｉｎｔ３／ＴＡＺトランス活性分析（Ｍａｉｌｌａｒｄら（２００７）Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，５０：７７６−７８１；Ｈａｒｄｙら（１９９１）Ｔｒｅｎｄｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．，１２：３８３−３８８）が確立され、この分析を用いて、ＡＳＢＩがＡＰＰ−Ｇａｌ４トランス活性化を阻害するということが発見された（図７）。この効果を確認するため、ＡＰＰＧａｌ−４／Ｆｅ６５トランス活性化分析が行われた。ＡＰＰ−Ｇａｌ４トランス活性化におけるＡＳＢＩの効果を試験した（図７）。これらの結果は、ルチン（ＡＳＢＩ−１）およびガランギン（ＡＳＢＩ−２）がＡＰＰおよび関連構成員であるＡＰＰ−Ｇａｌ４トランス活性化の両方を阻害するということを示す。

【0287】

ＡＳＢＩのＡＰＰとの相互作用
ＡＳＢＩのＡＰＰとの相互作用についての探索ためにリガンドブロット技法を用い、そこではＭＢＰ−Ｃ１２５ＡＰＰがニトロセルロースブロッタンド（ｂｌｏｔａｎｄ）上にドットブロットされ、バイオフラボノイドによる処理の際に、タンパク質への結合が検出された。ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）によるニトロセルロースフィルター結合分析が対照として用いられた。ＵＶおよびＭＡＬＤＩ質量分光学分析の両方を用いてバイオフラボノイドの結合が決定された。これはタンパク質小分子相互作用の定性的測定であるが、ＡＳＢＩがＡＰＰに結合したことを確かに示す。

【0288】

次に表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）を用いて、ＡＰＰへの結合を実証し、さらにガランギンのＡＰＰへの親和性を決定した。

【0289】

表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）のスクリーニング：
ＡＰＰの細胞外ドメインのための化合物の結合親和性をＳＰＲを用いて決定した。ＡＰＰの細胞外ドメインの断片への、化合物の親和性を測定する技法が開発された。ガランギンについて、結合実験法ＴＲＸ−ｅＡＰＰ５７５−６２４が用いられた。ｅＡＰＰをＣＭ５ビアコアチップ（ＧＥヘルスケア社）に架橋した。様々な濃度のガランギンがチップ上へ流入する形で用いられ、プラズモン共鳴信号がビアコアＴ１００を用いて決定された（図５Ｂ）。

【0290】

バイオフラボノイド ＡＳＢＩ処理がＡＤ遺伝子導入マウスモデルにおけるＡβを減少させる
マウスにおけるバイオフラボノイドであるルチンおよびガランギンの脳透過性が評価され、１０ｍｐｋの皮下投与の後、低レベルのガランギン（１時間あたりＣｍａｘ約５０ｎｇ／ｇ）が脳内で検出できた一方で、脳内でルチンは全く検出されなかったということが見出された（図８）。ガランギンの脳レベルが高められうるのかを確かめるために、プロドラッグ（ＰＧ−１）が試験され、ガランギンの脳への伝達の向上（１時間あたりＣｍａｘ約１００ｎｇ／ｇ）をもたらした。これらの薬物動態分析に基づき、ガランギンおよびプロガランギン（ＰＧ−１）をＡＤマウスモデル、つまりＰＤＡＰＰ（Ｊ２０）マウスにて試験することが決定された。

【0291】

４０ｍｐｋでのガランギンによるＪ２０マウスの処理は、Ａβ４０のいくらかの減少を示す一方で、Ａβ４２は海馬および大脳皮質において変化がなかった。しかしながら、プロガランギンによる処理では、そのプロドラッグの処理時に見られるガランギンの脳レベルの上昇に一致する形でＡβ４０およびＡβ４２両方の減少を示す。これらの結果は併せて、バイオフラボノイドのガランギンが直接ＡＰＰに作用し、ＡＰＰのＢＡＣＥ切断は阻害するがニューレグリンおよびＢＡＣＥ標的ペプチドは阻害せず、ＢＡＣＥ依存ＡＰＰ核信号を阻害し、さらにＡＤ遺伝子導入マウスモデルにおいてＡβ１−４２を減少させるということを示す。

【0292】

考察
栄養剤として用いられ、新規機序β−セクレターゼ仲介ＡＰＰ処理を阻害する２つのバイオフラボノイド類似物が特定された。これらの分子はＭＢＰ−Ｃ１２５ＡＰＰ基質のＢＡＣＥ切断を阻害し、結果としてＣ９９の生成の阻害をもたらすが、β−ペプチド基質（Ｐ５−Ｐ５’）の切断は阻害しない。さらに、これらのバイオフラボノイドは神経芽細胞腫ＳＨ−ＳＹ５Ｙ細胞におけるｓＡＰＰβを減少させる一方で、ガランギンはニューレグリンＢＡＣＥ依存の切断を減少させることができない。さらに、この活動はＭＢＰ−Ｃ１２５基質との結合に関係があることが実証された。これらの知見はＡＰＰ処理を調節する新たな構造を定義する。

【0293】

本明細書に記載されるこの手法は、アルツハイマー病（ＡＤ）に対するプロテアーゼ阻害剤策略の重要な制限に対処し、例えばＢＡＣＥまたはγ−セクレターゼ化合物のような既出の標的プロテアーゼの全ての基質の切断の阻害が回避されるような構造を提供する。Ｎｏｔｃｈのような、ＡＰＰ以外のγ−セクレターゼ基質はγ−セクレターゼ阻害の副作用の潜在性への懸念を引き起こし、γ−セクレターゼ阻害剤およびセマガセスタットの近年の失敗はそのような懸念をさらに強めている。ＢＡＣＥの場合において、ＰＳＧＬ１およびＬＲＰのような非ＡＰＰ基質が同様の懸念を招いている。そのため、最適なＢＡＣＥ阻害剤とは、ＢＡＣＥよりもむしろＡＰＰと結合し、ＡＰＰ特異性のＢＡＣＥ阻害剤（ＡＳＢＩ）に至るようなものであろう。本明細書に記載されるそのような治療法は、アルツハイマー病治療の新たな分野を具現する。

【0294】

既知の２つのＢＡＣＥ基質が、免疫機能において重要である可能性が高い：それは白血球付着を仲介するＰ−セレクチン糖タンパク質リガンド−１（Ｌｉｃｈｔｅｎｔｈａｌｅｒら（２００３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：４８７１３−４８７１９）、および切断後に分泌され、免疫反応の阻害に関わる酵素であるシアリル−トランスフェラーゼＳＴ６ＧａｌＩ（Ｋｉｔａｚｕｍｅら（２００３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７８：１４８６５−１４８７１）である。ＳＴ６ＧａｌＩのみによって合成されるシアリル−アルファ−２，６ガラクトース残基のＢ−細胞特異的レクチン、ＣＤ２２／Ｓｉｇｌｅｃ−２との相互作用はＢ−細胞機能（同文献）にとって重要である。グリコシル化酵素を欠乏するマウスが通常に成長しているように見えるものの、加齢とともにわずかな神経異常を示すということは注目に値する。グリコシル化酵素を欠乏するマウスは音刺激によって誘導される壊滅的な聴覚原性発作を示す。この点において、ＢＡＣＥ１ヌルのマウスの免疫抗原投与に対する反応についての報告書は現在のところ提出されていないという点に留意することは重要である。ＢＡＣＥ１はＡＰＰ同族体、つまりＡＰＬＰ２を処理するということもまた示されている；この同族体は、推測されるＢＡＣＥ１切断サイト周辺のＡＰＰの配列特異性とは異なった配列特異性を有するが、しかしガランギンはＢＡＣＥによるＡＰＬＰ２の切断をも阻害した。ＡＰＬＰ２タンパク質分解産物のレベルはＢＡＣＥ１欠乏マウスにおいて減少し、ＢＡＣＥ１過剰マウスにおいて増加した（Ｐａｓｔｏｒｉｎｏら（２００４）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２５：６４２−６４９）。ＡＤにおける病態修飾療法の甚大な必要性を鑑みるに、ＡＰＰ基質に特有のＢＡＣＥ阻害剤を開発するこの手法は新規であり、この疾患に対する有効な臨床候補となる可能性がある。

【0295】

ＡＳＢＩを特定するためのＨＴＳ分析が設定された。この分析における４４８の化合物の臨床ライブラリーの一次審査は、Ｐ５−Ｐ５’基質の切断を防止しなかった一方でＢＡＣＥのＭＳＢ−Ｃ１２５基質を明確に阻害したバイオフラボノイドの特定につながった。このバイオフラボノイド、つまりルチンも、細胞内におけるｓＡＰＰβの生成を阻害することが発見された栄養剤である。バイオフラボノイドの一群がその後に細胞培養内のＡＳＢＩおよびｓＡＰＰβ分析において試験された。この試験から別のバイオフラボノイドおよびガランギンが特定された。ガランギンはＡＳＢＩ分析および細胞内において、ＡＰＰのＢＡＣＥ切断を防止するのに効果的であった別の栄養剤である。単純なニトロセルロースフィルターリガンド結合分析を用いて、様々なバイオフラボノイドのＭＢＰ−Ｃ１２５基質との初期結合が実証された。バイオフラボノイドの一群がＡＳＢＩ分析において審査された。しかしながら、ルチンおよびガランギンのみがＡＳＢＩとして有効であった（図４）。ガランギンは細胞内のｓＡＰＰβレベルを調節し、ＡＰＰ基質への結合を示した（図５）。興味深いことに、ガランギンはアセチルコリンエステラーゼの阻害剤であること（Ｇｕｏら（２０１０） Ｃｈｅｍｉｃｏ−Ｃｉｏｌ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ，１８７：２４６−２４８）、自食作用を誘導すること（Ｗｅｎら（２０１２）Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，８９：２４７−２５５）も報告されている。

【0296】

ＡＰＰおよびＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４でトランスフェクトされたＨＥＫ−２９３分析を用いて、バイオフラボノイドがＡＰＰおよびＡＰＬＰ２のＢＡＣＥ切断を阻害することが実証された（この分析の詳細についてはＯｒｃｈｏｌｓｋｉら（２０１１）Ｊ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ Ｄｉｓ．，２３（４）：６８９−９９を参照のこと）。Ｍｉｎｔ３およびＴａｚとのトランスフェクションにおいてトランス活性化が達成された。ＡＳＢＩはＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４のトランス活性化ではなく、ＡＰＰ−Ｇａｌ４のトランス活性化のみを阻害すると期待された。しかしながら、ガランギンはＡＰＰ−Ｇａｌ４およびＡＰＬＰ２−Ｇａｌ４の両方を阻害した。そのため、ガランギンはＡＰＰへの特有性というよりはむしろＡＰＰ族への特有性を示す；しかしながらＡＰＬＰ２に由来したＡβ類似断片の実証を鑑みるに、ＡＰＰおよびＡＰＬＰ２両方のＢＡＣＥ切断を阻害する能力は、ＡＰＰのみの切断を阻害するよりも望ましいかもしれない（Ｅｇｇｅｒｔら（２００４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（１８）：１８１４６−１８１５６）。

【0297】

ＮＴｇマウスを用いた脳への取り込み分析におけるこれら２つのバイオフラボノイドの当初の薬物動態評価は、ルチンが血液脳関門を通過しないということを示した一方で、ガランギンは一定の脳通過を示しために、遺伝子導入（Ｔｇ）マウスモデルにおける概念実証研究のその評価が可能となった。その後ガランギンはそのＡβ４０およびＡβ４２におけるインビボ効果を評価された（図７）。Ａβレベルの減少はこの研究において非常に有望である。ガランギンのプロドラッグ（ＰＧ−１）を用いることでガランギンの脳レベルのさらなる上昇が可能であり、ＰＧ−１はインビボにおいてＡβ４０およびＡβ４２を減少させるのにガランギンよりも有効であるということが実証された。

【0298】

結論として、本研究はある特定のバイオフラボノイドがＡＰＰに結合し、さらにＡＰＰおよびＡＰＬＰ２のＢＡＣＥ切断を阻害する能力を有することを示し、したがってそれらがＡＰＰに特異的なＢＡＣＥ阻害剤として機能することを示す。これらは、ＢＡＣＥの直接阻害による潜在毒性を持たない、アルツハイマー病治療剤の新しい分類を体現する。そのプロドラッグ類似物としてのガランギン、つまりプロガランギン−１もＡＤマウスモデルにおいてＡβ４０およびＡβ４２を減少させるのに効果的であることもまた示された。

【実施例2】

【0299】

ＡＳＢＩとしてのプロガランギン
ＣＮＳ曝露試験が行われ、ヘパリンプラズマおよび脳を回収するための経時的構造から構成された。１０ｍｇ／ｋｇでのガランギンまたはプロガランギン（化合物−２）の皮下投与の後、その化合物のプラズマおよび脳内レベルが定量ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法によって決定された。プラズマサンプルが内部標準を含むアセトニトリル：メタノール（１：１）混合物で沈殿された。脳サンプルが酢酸エチルに直接均質化され、または液−液法によって５Ｍグアニジン均等質から抽出された。結果として生じる浮遊物を、蒸発乾固させ、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法分析に供した。各々の化合物に対して５匹のマウスを使用した。それから脳−プラズマ比およびプラズマ／脳最高血中濃度レベルが決定された（例および図８を参照のこと）。

【0300】

実験の手順−化合物合成
５，７ジアセトキシフラボン：
５，７−ジヒドロキシ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−４−オン（５．００ｇ、１９．６７ｍｍｏｌ）をピリジン（１：５、４２ｍＬ）中の無水酢酸の溶液に加え、さらにその反応混合物を常温で６０時間攪拌した。その反応混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、濾過した。この固形物を追加のジエチルエーテル（３ｘ５０ｍＬ）で洗浄し、高真空下で乾燥し、４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−５，７−ジイルジアセテート（６．４０ｇ、１８．９２ ｍｍｏｌ、９６％）を白い結晶性固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ２．３６（ｓ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＯＯ）、２．４５（ｓ、３Ｈ、ＣＨ３ＣＯＯ）、６．６７（ｓ、１Ｈ、Ｈ−３）、６．８５（ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−６）、７．３６（ｄ、Ｊ＝２Ｈｚ、１Ｈ、Ｈ−８）、７．５０（ｍ、３Ｈ、Ｈ−３’、５’、Ｈ−４’）、７．８４（ｄｄ、Ｊ＝８Ｈｚ、２Ｈ、Ｈ−２’、６’）；１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＨＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ２１．２（ｑ、ＣＨ３ＣＯＯ）、２１．３（ｑ、ＣＨ３−Ｃ＝Ｏ）、１０８．７（ｄ、Ｃ−３）、１０９．１（ｄ、Ｃ−８）、１１３．７（ｄ、Ｃ−６）、１１５．１（ｓ、Ｃ−４ａ）、２６．３（２×ｄ、Ｃ−２’、６’）、１２９．２（２×ｄ、Ｃ−３’、５’）、１３１．２（ｄ、Ｃ−４’）、１３１．９（ｓ、Ｃ−１’）、１５０．３（ｓ、Ｃ−５）、１５４．０（ｓ、Ｃ−７）、１５７．８（ｓ、Ｃ−８ａ）、１６２．６（ｓ、Ｃ−２）、１６８．１（ｓ、ＣＨ３−Ｃ＝Ｏ）、１６９．５（ｓ、ＣＨ３ＣＯＯ）、１７６．５（ｓ、Ｃ−４）。

【0301】

ＤＭＮＯの調整：
３Ｌの、三つ口丸底反応フラスコに、高効率の機械的攪拌棒、固形物用の追加じょうご、および凝縮装置（３０ｃｍ）を装着し、下方移動のために設置し、二口受容フラスコにつなぎ、後者のフラスコを、ドライアイス／アセトン溶液槽によって−７８℃で冷却した。反応フラスコを、水（２５４ｍＬ）、アセトン（１９２ｍＬ）およびＮａＨＣＯ３（５８ｇ）の混合物で充填し、氷／水槽の支援により、５〜１０℃に冷却した。激しい攪拌と冷却を行いながら、固体ＯＸＯＮＥ（登録商標）（１２０ｇ、０．１９５ｍｏｌ）を３分間隔で５回に分けて加えた。最後の追加から３分後、追加じょうごを栓で置き換え、フラスコに中程度の真空（８０〜１００ｍｍＨｇ）を適用した。冷却槽（５〜１０℃）を反応フラスコから取り除き、激しく撹拌しながら、ＤＭＤＯ／アセトン溶液を蒸留し、冷却された（−７８℃）受容フラスコに９０分かけて収集した。受容フラスコを−２０℃にまで暖め、Ｋ_２ＣＯ_３上で３時間乾燥した。ＤＭＤＯ溶液を乾燥した管に濾過し、使用まで−２０℃で保管した。約１３０ｍｌのＤＭＤＯ溶液を回収した。ＤＭＤＯの濃度は、０．２ｍＬアリコートの乾燥したＤＭＤＯ溶液をＣＤＣｌ_３に溶かし、ジメチルジオキシラン（δ１．６５における）メチルプロトン信号の高さとアセトン（０．５％）の右方の^１３Ｃ衛星ピークのメチルプロトン信号の高さの比較によってＮＭＲによって決定し、その結果０．０５ＭのＤＭＤＯ溶液となった。この分析は遅延なく行われなくてはならない。

【0302】

５，７−ジアセトキシ−３−ヒドロキシフラボン：
４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−５，７−ジイルジアセテート（１．８０ｇ、５．３２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３２ｍｌ）中の乾燥粉末状４Å分子篩（１．８０ｇ）の懸濁液に加え、０℃まで冷却した。ＤＭＤＯ溶液（１２０ｍｌ、７．０ｍｍｏｌ、１．３２当量）を滴下した。結果として生じた溶液を０℃で３時間攪拌し、常温まで暖めさせ、その温度で４８時間撹拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（登録商標）床上で無水硫酸ナトリウムの層を通して濾過し、揮発性物質を真空、周囲温度で除去し、粗製７−オキソ−１ａ−フェニル−７，７ａ−ジヒドロ−１ａＨ−オキシレノ［２，３−ｂ］クロメン−４，６ジイルジアセテート（約１．９０ｇ）油として得た。この油を次の段階に進めた。

【0303】

粗製反応混合物（約１．９０ｇ）を１５ｍｇのｐ−ＴＳＡを含むＤＣＭ（３２ｍｌ）内で攪拌した。反応混合物はほぼ即時凝固した。反応混合物をＣＤＭ（２０ｍｌ）で希釈し、２日間攪拌して、その段階でＴＬＣ分析は７−オキソ−１α−フェニル−７，７α−ジヒドロ−１αＨオキシレン［２，３−ｂ］クロメン−４，６ジイルジアセテートの消費を示した。反応混合物をシリカゲル上に吸着させ、フラッシュカラムクロマトグラフィー（クロロホルム溶離剤とする）を繰り返して、純粋でない３−ヒドロキシ−４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−５，７−ジイルジアセテート（８００ｍｇ）を得た。アセトン／ジエチルエーテル混合物からの再結晶によってさらなる精製が達成され、３−ヒドロキシ−４−オキソ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−５，７−ジイルジアセテート（６６０ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ、２段階で３５％）を、クリーム色の固体として得た。この物質は水和物として単離された。さらに、微量のジエチルエーテルが、真空下の延長した乾燥の後の真空下でも除去できなかった。

【0304】

本明細書に記載される実施例および実施形態は例示説明の目的のみのものであり、様々な修正や変更が、それに鑑みて当業者に提言されること、およびそれらが本願の意図および範囲および添付の特許請求の範囲内に含まれることが理解される。本明細書において引用されるすべての出版物、特許および特許申請は、その全体が参照により本明細書に援用される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】