特許 6482466 サイトメガロウイルスの阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6482466

(24)【登録日】2019年2月22日

(45)【発行日】2019年3月13日

(54)【発明の名称】サイトメガロウイルスの阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 413/12 20060101AFI20190304BHJP

   C07D 417/12 20060101ALI20190304BHJP

   C07D 417/14 20060101ALI20190304BHJP

   A61K 31/427 20060101ALI20190304BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20190304BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20190304BHJP

   A61K 31/433 20060101ALI20190304BHJP

   A61P 31/22 20060101ALI20190304BHJP

   A61P 31/00 20060101ALI20190304BHJP

   C12N 7/00 20060101ALN20190304BHJP

【ＦＩ】

   C07D413/12

   C07D417/12CSP

   C07D417/14

   A61K31/427

   A61K31/5377

   A61K31/4439

   A61K31/433

   A61P31/22

   A61P31/00

   !C12N7/00ZNA

【請求項の数】15

【全頁数】73

(21)【出願番号】特願2015-540764(P2015-540764)

(86)(22)【出願日】2013年10月31日

(65)【公表番号】特表2015-536947(P2015-536947A)

(43)【公表日】2015年12月24日

(86)【国際出願番号】US2013067673

(87)【国際公開番号】WO2014070978

(87)【国際公開日】20140508

【審査請求日】2016年10月26日

(31)【優先権主張番号】61/722,151

(32)【優先日】2012年11月3日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】503385923

【氏名又は名称】ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング

(74)【代理人】

【識別番号】100092093

【弁理士】

【氏名又は名称】辻居 幸一

(74)【代理人】

【識別番号】100082005

【弁理士】

【氏名又は名称】熊倉 禎男

(74)【代理人】

【識別番号】100084663

【弁理士】

【氏名又は名称】箱田 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100093300

【弁理士】

【氏名又は名称】浅井 賢治

(74)【代理人】

【識別番号】100119013

【弁理士】

【氏名又は名称】山崎 一夫

(74)【代理人】

【識別番号】100123777

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 さつき

(74)【代理人】

【識別番号】100179925

【弁理士】

【氏名又は名称】窪田 真紀

(72)【発明者】

【氏名】ファデル リー

(72)【発明者】

【氏名】ビロドー フランソワ

(72)【発明者】

【氏名】ポワリエ モード

(72)【発明者】

【氏名】パリジャン マシュー

(72)【発明者】

【氏名】クーン シリル

(72)【発明者】

【氏名】ティボー カール

(72)【発明者】

【氏名】トリン タオ

【審査官】 安藤 倫世

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００４／０５２８８０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００９／０１１８５０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００２−５３１５５４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 BLOOM, J. D. ET AL，Thiourea inhibitors of herpes viruses. Part 1: Bis-(aryl)thiourea inhibitors of CMV，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，２００３年，13(17)，2929-2932

【文献】 C.G.WERMUTH編，『最新 創薬化学 上巻』，株式会社テクノミック，１９９８年 ８月１５日，235-271頁，13章 等価置換に基づく分子の変換

【文献】 野崎正勝ら，創薬化学，化学同人，１９９５年 ７月 １日，p.98-99

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

以下の式を有する、化合物、またはそのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオマーもしくは互変異性体

【化1】

（式中、
環Ｙは、イミダゾール、トリアゾール、およびピリジンからなる群から選択され、前記イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、（Ｃ_2-6）アルケニル、（Ｃ_2-6）アルキニル、または（Ｃ_1-6）アルキル（ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｙ¹、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−Ｙ¹、または−Ｎ（Ｈ）−（Ｃ_1-6）アルキル）−Ｙ¹により一置換または二置換されていてもよい）により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｙ¹は、アリール、複素環、またはヘテロアリールであり、前記アリール、複素環、またはヘテロアリールは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ²は、存在しない、（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_3-7）シクロアルキル、−Ｏ、−Ｎ（Ｒ^2A）、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_3-7）シクロアルキル−§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_1-6）アルキル−§（必要な場合、Ｙ環に結合している部位は^*で示されており、フェニル環に結合している部位は§で示されている）であり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ^2Aは、Ｈまたは（Ｃ_1-6）アルキルであり、
Ｒ³は、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルであり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、アリール、複素環、またはヘテロアリールにより一置換または二置換されていてもよく、
ｎは、０、１、２または３であり、
Ｙ環においては、−Ｒ²と−フェニルとが、Ｙ環がイミダゾールの場合には２位と４位、−Ｒ²と−フェニルとが、Ｙ環がトリアゾールの場合には３位と５位、−Ｒ²と−フェニルとが、Ｙ環がピリジンの場合には２位と６位に位置する）
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項2】

以下の式を有する、化合物、またはそのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオマーもしくは互変異性体

【化2】

（式中、
環Ｙは、イミダゾール、トリアゾール、およびピリジンからなる群から選択され、前記イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、（Ｃ_2-6）アルケニル、（Ｃ_2-6）アルキニル、または（Ｃ_1-6）アルキル（ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｙ¹、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−Ｙ¹、または−Ｎ（Ｈ）−（Ｃ_1-6）アルキル）−Ｙ¹により一置換または二置換されていてもよい）により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｙ¹は、アリール、複素環、またはヘテロアリールであり、前記アリール、複素環、またはヘテロアリールは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ²は、存在しない、（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_3-7）シクロアルキル、−Ｏ、−Ｎ（Ｒ^2A）、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_3-7）シクロアルキル−§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_1-6）アルキル−§（必要な場合、Ｙ環に結合している部位は^*で示されており、フェニル環に結合している部位は§で示されている）であり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ^2Aは、Ｈまたは（Ｃ_1-6）アルキルであり、
Ｒ³は、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルであり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、アリール、複素環、またはヘテロアリールにより一置換または二置換されていてもよく、
ｎは、０、１、２または３であり、
Ｚ¹とＺ²の一方はＣＨであり、Ｚ¹とＺ²の他方はＮであり、
Ｙ環においては、−Ｒ²と−ピリジンとが、Ｙ環がイミダゾールの場合には２位と４位、−Ｒ²と−ピリジンとが、Ｙ環がトリアゾールの場合には３位と５位、−Ｒ²と−ピリジンとが、Ｙ環がピリジンの場合には２位と６位に位置する）
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項3】

以下の式を有する、化合物、またはそのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオマーもしくは互変異性体

【化3】

（式中、
環Ｙは、イミダゾール、トリアゾール、およびピリジンからなる群から選択され、前記イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、（Ｃ_2-6）アルケニル、（Ｃ_2-6）アルキニル、または（Ｃ_1-6）アルキル（ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｙ¹、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−Ｙ¹、または−Ｎ（Ｈ）−（Ｃ_1-6）アルキル）−Ｙ¹により一置換または二置換されていてもよい）により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｙ¹は、アリール、複素環、またはヘテロアリールであり、前記アリール、複素環、またはヘテロアリールは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ²は、存在しない、（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_3-7）シクロアルキル、−Ｏ、−Ｎ（Ｒ^2A）、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_3-7）シクロアルキル−§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_1-6）アルキル−§（必要な場合、Ｙ環に結合している部位は^*で示されており、フェニル環に結合している部位は§で示されている）であり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ^2Aは、Ｈまたは（Ｃ_1-6）アルキルであり、
Ｒ³は、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルであり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、アリール、複素環、またはヘテロアリールにより一置換または二置換されていてもよく、
ｎは、０、１、２または３であり、
Ｙ環においては、−Ｒ²と−ピリジノンとが、Ｙ環がイミダゾールの場合には２位と４位、−Ｒ²と−ピリジノンとが、Ｙ環がトリアゾールの場合には３位と５位、−Ｒ²と−ピリジノンとが、Ｙ環がピリジンの場合には２位と６位に位置する）
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項4】

環Ｙが、イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンからなる群から選択される、請求項１から３のいずれか１項に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項5】

環Ｙが、イミダゾールである、請求項４に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項6】

環Ｙが、トリアゾールである、請求項４に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項7】

環Ｙが、ピリジンである、請求項４に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項8】

Ｒ²が存在しないか、またはＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよい（Ｃ_1-6）アルキルである、請求項１から７のいずれか１項に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項9】

Ｒ²が存在しない、請求項８に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項10】

Ｒ³が、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮ、または（Ｃ_1-6）アルキルである、請求項１から９のいずれか１項に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項11】

Ｒ³が、ハロまたは（Ｃ_1-6）ハロアルキルである、請求項１０に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項12】

ｎが、０、１または２である、請求項１から１１のいずれか１項に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項13】

ｎが、１または２である、請求項１２に記載の化合物、
または薬学的に許容されるその塩。

【請求項14】

請求項１から１３のいずれか１項に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を含む、医薬組成物。

【請求項15】

ＣＭＶ疾患および／もしくは感染症の処置または予防用の、請求項１から１３のいずれか１項に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子提出した配列表を含んでおり、その全体は参照により本明細書に組み込まれている。２０１３年１０月１５日に作成された前記ＡＳＣＩＩのコピーは、１３−０１８１＿ＳＬ．ｔｘｔと名付け、サイズは１，７０１バイトである。

【0002】

本発明は、Ｎ−ビアリールアミドアナログおよびサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の複製の阻害剤としてのそれらの使用、そのようなアナログを含有する医薬組成物、ならびにＣＭＶ疾患および／または感染症の処置および予防におけるこれらのアナログの使用方法に関する。

【背景技術】

【0003】

ＣＭＶ、すなわちβ−ヘルペスウイルスは、正常な免疫系または免疫不全系のある成人および小児を含めた、世界中の母集団すべてに作用する、頻度が高くどこにでも存在しているウイルスである。免疫抑制されている宿主におけるＣＭＶ複製は、未検査の状態に置かれた場合、深刻な罹患率、死亡率、ならびに細菌および真菌感染症、移植片対宿主病、および移植片の失敗の可能性に対する素因などの他の合併症をもたらす。ＣＭＶ感染症は、造血幹細胞移植（ＨＣＴ）または固形臓器移植（ＳＯＴ）を受けた患者における、最も一般的な感染症である。ＣＭＶは、移植候補の成人の５０〜８０％に流行し、小児では有病率はより低いことが分かっている。現在のゴールドスタンダード（Ｇｏｌｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ）（バルガンシクロビル、ガンシクロビル）は骨髄毒であり、ＨＣＴにおける骨髄移植の妨げとなる。したがって、この母集団におけるその使用は、先行療法に限られ、その投与期間および用量サイズは、その毒性により制限されることが多い。この毒性により、ＳＯＴにおいても、予防的使用期間および用量が制限される。その結果、ＣＭＶ疾患の一層有効な予防および移植片の生着を可能にし、かつ処置に関連する合併症を実質的に低減する、バルガンシクロビル、ガンシクロビルの毒性を伴わない新規薬剤は、大きな技術革新を示すと思われる。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0004】

本発明は、ＣＭＶ複製に対する阻害活性を有する一連の新規化合物を提供する。
本発明のさらなる目的は、以下の説明および実施例から、当業者には想起される。

【課題を解決するための手段】

【0005】

本発明の実施形態は、式（Ｉ）の化合物、またはそのラセミ体、鏡像異性体、ジアステレオマーもしくは互変異性体

【化1】

(I)
（式中、
Ｒ¹は、ＳまたはＯであり、
Ｒ^1Aは、ＣＨまたはＮであり、
環Ｚは、フェニル、ピリジン、およびピリジノンからなる群から選択され、前記フェニル、ピリジンおよびピリジノンは、それぞれ、（Ｃ_1-6）アルキルまたは−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
環Ｙは、イミダゾール、トリアゾール、およびピリジンからなる群から選択され、前記イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、（Ｃ_2-6）アルケニル、（Ｃ_2-6）アルキニル、または（Ｃ_1-6）アルキル（ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｙ¹、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−Ｙ¹、または−Ｎ（Ｈ）−（Ｃ_1-6）アルキル）−Ｙ¹により一置換または二置換されていてもよい）により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｙ¹は、アリール、複素環、またはヘテロアリールであり、前記アリール、複素環、またはヘテロアリールは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ²は、存在しない、（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_3-7）シクロアルキル、−Ｏ、−Ｎ（Ｒ^2A）、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−^§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_3-7）シクロアルキル−^§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_1-6）アルキル−^§（必要な場合、Ｙ環に結合している部位は^*で示されており、フェニル環に結合している部位は^§で示されている）であり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ^2Aは、Ｈまたは（Ｃ_1-6）アルキルであり、
Ｒ³は、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルであり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、アリール、複素環、またはヘテロアリールにより一置換または二置換されていてもよく、
ｎは、０、１、２または３である）
またはそれらの塩を提供する。

【0006】

本発明の別の実施形態は、以下の式を有する化合物

【化2】

（式中、環Ｙ、Ｒ²、Ｒ³およびｎは、上で定義した通りである）、または薬学的に許容されるその塩を提供する。

【0007】

本発明の別の実施形態は、以下の式を有する化合物

【化3】

（式中、環Ｙ、Ｒ²、Ｒ³およびｎは、上で定義した通りであり、Ｚ¹とＺ²の一方はＣＨであり、Ｚ¹とＺ²の他方はＮである）、または薬学的に許容されるその塩を提供する。

【0008】

本発明の別の実施形態は、以下の式を有する化合物

【化4】

（式中、環Ｙ、Ｒ²、Ｒ³およびｎは、上で定義した通りである）、または薬学的に許容されるその塩を提供する。

【0009】

本発明の別の実施形態は、医薬としての、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する。
ヒトにおけるＣＭＶ疾患および／もしくは感染症の処置または予防用の医薬を製造するための、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩の使用も本発明の範囲内にある。
本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が、本発明の範囲内に含まれる。
本実施形態のさらなる態様によれば、本発明による医薬組成物はさらに、治療有効量の少なくとも１種の他の抗ウイルス剤を含む。

【0010】

本発明はまた、ＣＭＶ感染症を有するかまたはそれを有するリスクがあるヒトにおける、該感染症の処置のための、本明細書の上に記載されている医薬組成物の使用も提供する。
本発明はまた、ＣＭＶ疾患を有するかまたはそれを有するリスクがあるヒトにおける、該疾患の処置のための、本明細書の上に記載されている医薬組成物の使用も提供する。
本発明の別の態様は、抗ＣＭＶウイルス有効量の本発明の化合物、薬学的に許容されるその塩、または上記の組成物を、単独で、または一緒にもしくは個別に投与される少なくとも１種の他の抗ウイルス剤と組み合わせてヒトに投与することにより、ヒトにおけるＣＭＶ疾患および／もしくは感染症を処置または予防する方法を含む。
本発明のさらなる態様は、ＣＭＶ疾患および／または感染症を処置するのに有効な組成物と、該組成物がＣＭＶによる疾患および／または感染症を処置するために使用し得ることを表示するラベルを含む包装材とを含む、製造品であって、該組成物が、本発明による本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、製造品を言及する。
本発明のさらに別の態様は、ＣＭＶの複製が阻害される条件下で、ウイルスを有効量の本発明の化合物またはその塩に暴露するステップを含む、ＣＭＶの複製を阻害する方法に関する。
さらに、ＣＭＶの複製を阻害するための本発明の化合物またはその塩の使用が、本発明の範囲に含まれる。

【発明を実施するための形態】

【0011】

定義
本明細書において具体的に定義されていない用語は、本開示および内容の観点から、当業者により上記の用語に対して示される意味を示すべきである。しかし、本明細書中で使用される場合、反対に指定されない限り、以下の用語は、示されている意味を有しており、以下の慣例が守られる。以下に定義される基、ラジカル、または部分では、炭素原子数は、多くの場合、その基の前に指定され、例えば、Ｃ_1-6−アルキルとは、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基またはアルキルラジカルを意味する。一般に、２つ以上の部分基を含む基の場合、最初に呼ぶ部分基は、ラジカルの結合点であり、例えば、置換基「−Ｃ_1-3−アルキル−アリール」とは、Ｃ_1-3−アルキル基に結合しているアリール基であり、Ｃ_1-3−アルキル基がコアに結合していることを意味する。特に、具体的に明記しない限り、２つ以上の部分基を含む基の場合、置換基は、部分基のどちらか一方に結合していてもよい。

【0012】

本発明の化合物が、化学名の形態で示されており、かつ式として何らかの不一致がある場合、式が優先するものとする。アスタリスクまたは

【化5】

の表示は、部分式において使用され、定義されているコア分子に結合している結合を示すことができる。

【0013】

具体的に示されていない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲全体にわたり、所与の化学式または名称は、その互変異性体、ならびにすべての立体、光学および幾何異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオマー、Ｅ／Ｚ異性体、アトロプ異性体）、およびラセミ体、ならびに別々の鏡像異性体の異なる比率の混合物、ジアステレオマー混合物、または上記の形態の任意の混合物を包含するものであり、この場合、こうした異性体および鏡像異性体、ならびに塩（薬学的に許容されるその塩を含む）、およびその溶媒和物（例えば、遊離化合物の溶媒和物を含む水和物、または該化合物の塩の溶媒和物など）が存在している。

【0014】

当業者であれば、本発明の化合物の鏡像異性体を分離する方法、高める方法、または選択的に調製する方法を知っている。純粋な立体異性体（例えば、鏡像異性体およびジアステレオマー）、または所望の鏡像異性体過剰率（ｅｅ）すなわち鏡像体純度の混合物の調製は、（ａ）鏡像異性体の分離もしくは分割、または（ｂ）当業者に公知のエナンチオ選択的合成、またはそれらの組合せからなる多くの方法の１種または複数によって達成される。これらの分割方法は一般に、キラル認識に依存しており、以下に限定されないが、キラル固定相を用いたクロマトグラフィー、エナンチオ選択的なホスト−ゲスト錯体形成、キラル補助基を使用する分割または合成、エナンチオ選択的合成、酵素または非酵素的な速度論的分割、または自発的エナンチオ選択的な結晶化を含む。そのような方法は、キラル分離技法、A Practical Approach (2nd Ed.),G. Subramanian (ed.), Wiley-VCH, 2000; T.E. BeesleyおよびR. P. W. Scott, Chiral Chromatography, John Wiley & Sons, 1999;およびSatinder Ahuja, Chiral Separations by Chromatography, Am. Chem. Soc., 2000において一般に開示されている。さらに、以下に限定されないが、ＧＣ、ＨＰＬＣ、ＣＥ、またはＮＭＲ、および絶対配置および立体配座の帰属（以下に限定されないが、ＣＤ、ＯＲＤ、Ｘ線結晶解析法、またはＮＭＲを含む）を含めた、鏡像異性体過剰率すなわち純度を定量化する周知の方法が同様に存在している。

【0015】

用語「ハロ」とは一般に、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を示す。
用語「Ｃ_1-n−アルキル」（式中、ｎは２〜ｎの整数である）は、単独または別のラジカルと組み合わされて、１〜ｎ個のＣ原子を有する、非環式の飽和、分岐または線状炭化水素ラジカルを示す。例えば、用語Ｃ_1-3−アルキルは、Ｈ₃Ｃ−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−、Ｈ₃Ｃ−ＣＨ₂−ＣＨ₂−、およびＨ₃Ｃ−ＣＨ（ＣＨ₃）−のラジカルを包含する。
用語「Ｃ_2-n−アルケニル」は、前記基の少なくとも２個の炭素原子が、二重結合によって互いに結合している場合、少なくとも２個のそうした炭素原子を有する「Ｃ_1-n−アルキル」に関する定義において定義した基に対して使用される。
用語「Ｃ_2-n−アルキニル」は、前記基の少なくとも２個の炭素原子が、三重結合によって互いに結合している場合、少なくとも２個のそうした炭素原子を有する「Ｃ_1-n−アルキル」に関する定義において定義した基に対して使用される。
用語「カルボシクリル」または「炭素環」は、本明細書で使用する場合、単独または別のラジカルと組み合わされて、３〜１４個の炭素原子からなる単環式、二環式、または三環式環構造を意味する。用語「カルボシクリル」または「炭素環」は、完全に飽和している環系、および芳香族環系、および部分的に飽和している環系を指す。用語「カルボシクリル」または「炭素環」は、縮合系、架橋系、およびスピロ環系を包含する。

【0016】

用語「Ｃ_3-n−シクロアルキル」（式中、ｎは４〜ｎの整数である）は、単独または別のラジカルと組み合わされて、３〜ｎ個のＣ原子を有する、環式の飽和している非分岐炭化水素ラジカルを示す。例えば、用語Ｃ_3-7−シクロアルキルには、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルが含まれる。

【0017】

用語「アリール」は、本明細書で使用する場合、単独または別のラジカルと組み合わされて、６個の炭素原子を含有する炭素環式芳香族単環式基を示し、この基はさらに、少なくとも１つの別の５員または６員の炭素環式環に縮合していてもよく、この炭素環式環は、芳香族、飽和、または不飽和であってもよい。アリールには、以下に限定されないが、フェニル、インダニル、インデニル、ナフチル、アントラセニル、フェナントレニル、テトラヒドロナフチル、およびジヒドロナフチルが含まれる。
用語「ヘテロシクリル」または「複素環」は、Ｎ、ＯまたはＳ（Ｏ）_r（ｒ＝０、１または２である）から選択される、３〜１４個の環原子からなる、１個または複数のヘテロ原子を含有する芳香族環系を含む、飽和もしくは不飽和の単環式または多環式環系を意味し、この場合、ヘテロ原子は芳香族環の一部ではない。用語「ヘテロシクリル」または「複素環」は、可能な異性体のすべて含むものと意図されている。したがって、用語「ヘテロシクリル」または「ヘテロシクリル」は、各形態が任意の原子に共有結合により結合し得るので、適切な価数を維持している限り、ラジカルとしては図示されていない以下の例示的な構造を含む。

【化6】

【0018】

用語「ヘテロアリール」は、Ｎ、ＯまたはＳ（Ｏ）_r（ｒ＝０、１または２である）から選択される、５〜１４個の環原子からなる、１個もしくは複数のヘテロ原子を含有する単環式または多環式環系を意味し、この場合、ヘテロ原子の少なくとも１個は、芳香族環の一部である。用語「ヘテロアリール」は、可能な異性体のすべて含むものと意図されている。したがって、用語「ヘテロアリール」は、各形態が任意の原子に共有結合により結合し得るので、適切な価数を維持している限り、ラジカルとしては図示されていない以下の例示的な構造を含む。

【化7】

【0019】

上に与えられている用語の多くは、式または基の定義において繰り返し使用されてもよく、また各場合において、互いに独立して、上に示した意味の１つを有する。

【0020】

「薬学的に許容される」という句は、本明細書では、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症がなく、ヒトおよび動物の組織に接触させて使用するのに適した、化合物、物質、組成物、および／または剤形を指すため、および利益／リスク比の妥当な釣り合いをとるために使用される。

【0021】

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される塩」とは、親化合物がその酸または塩基との塩を作ることにより修飾されている、開示化合物の誘導体を指す。薬学的に許容される塩の例には、以下に限定されないが、アミンなどの塩基性残基の無機酸塩または有機酸塩、カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩または有機塩などが含まれる。例えば、そのような塩には、酢酸塩、アスコビン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、炭酸水素塩、酒石酸水素塩、臭化物塩／臭化水素酸塩、カルシウムエデト酸塩／エデト酸塩、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物塩／塩酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エタンジスルホン酸塩、エストレート エシレート、フマル酸塩、グルセプチン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコ−ル酸塩、グリコリルアルスニレート（ｇｌｙｃｏｌｌｙｌａｒｓｎｉｌａｔｅ）、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドラバミン、ヒドロキシマレイン酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨージド、イソチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、メシル酸塩、メチルブロミド、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、粘液酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、パントテン酸塩、フェニル酢酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩 塩基性酢酸塩、コハク酸塩、スルファミド、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トルエンスルホン酸塩、トリエチオジド、アンモニウム、ベンザチン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン、およびプロカインが含まれる。さらなる薬学的に許容される塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛などのような金属由来の陽イオンにより形成することができる（Pharmaceutical salts, Birge, S.M.ら, J. Pharm. Sci.,(1977), 66, 1-19も参照されたい）。

【0022】

本発明の薬学的に許容される塩は、慣用的な化学的方法により塩基性または酸性部分を含む親化合物から合成することができる。一般に、そうした塩は、水、またはエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールもしくはアセトニトリルのような有機希釈液またはそれらの混合物中で、遊離酸または塩基形態のこれらの化合物を、十分量の適切な塩基または酸と反応させることによって調製することができる。
例えば、本発明の化合物を精製するかまたは単離するのに有用な、上記のもの以外の酸の塩も、本発明の一部を含む。
本明細書で使用する場合、用語「処置」とは、患者においてＣＭＶ疾患の症状を緩和もしくはなくすため、および／またはウイルス負荷を軽減するために、本発明による化合物または組成物を投与することを意味する。
本明細書で使用する場合、用語「予防」とは、ウイルスへの個体の暴露後であるが、疾患の症状の出現前、および／または血中にウイルスが検出される前に、疾患の症状の出現を予防するため、本発明による化合物または組成物を投与することを意味する。
用語「治療有効量」とは、それを必要としている患者に投与した場合、その化合物がそれらに対して利用性を有している、疾患状況、状態、または障害の処置を行うたのに十分な、本発明による化合物の量を意味している。そのような量は、研究者もしくは臨床家によって求められる、組織系もしくは患者の生物的または医学的応答を誘発するのに十分と思われる。治療有効量を構成する本発明による化合物の量は、化合物およびその生物活性、投与に使用される組成物、投与時間、投与経路、化合物の排出速度、処置期間、処置される疾患状況または障害のタイプおよびその重症度、本発明の化合物と組み合わせて、または同時に使用される薬物、ならびに患者の年齢、体重、総合的な健康、性別および食習慣などの要因に応じて変動することになろう。そのような治療有効量は、当業者自身の知識、現状技術、および本開示を考慮して、当業者により、型どおり決定することができる。

【0023】

さらなる実施形態
以下の好ましい実施形態では、本発明による式（Ｉ）の化合物の基および置換基が、詳細に記載されている。

【化8】

(I)

【0024】

以下の定義のいずれも、およびそれぞれが、互いに組み合わされてもよい。
Ｒ¹：
Ｒ¹−Ａ：Ｒ¹は、ＯまたはＳである。
Ｒ¹−Ｂ：Ｒ¹は、Ｏである。
Ｒ¹−Ｃ：Ｒ¹は、Ｓである。
Ｒ^1A：
Ｒ^1A−Ａ：Ｒ^1Aは、ＣＨまたはＮである。
Ｒ^1A−Ｂ：Ｒ^1Aは、Ｎである。
Ｒ^1A−Ｃ：Ｒ^1Aは、ＣＨである。

【0025】

環Ｚ：
環Ｚ−Ａ：環Ｚは、フェニル、ピリジンおよびピリジノンからなる群から選択され、前記フェニル、ピリジンおよびピリジノンは、それぞれ、（Ｃ_1-6）アルキルまたは−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよい。
環Ｚ−Ｂ：環Ｚは、フェニル、ピリジンおよびピリジノンからなる群から選択される。
環Ｚ−Ｃ：環Ｚは、フェニルである。
環Ｚ−Ｄ：環Ｚは、ピリジンである。
環Ｚ−Ｅ：環Ｚは、ピリジノンである。

【0026】

環Ｙ：
環Ｙ−Ａ：環Ｙは、イミダゾール、トリアゾール、およびピリジンからなる群から選択され、前記イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、（Ｃ_2-6）アルケニル、（Ｃ_2-6）アルキニル、または（Ｃ_1-6）アルキル（ＯＨ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、Ｙ¹、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−Ｙ¹、または−Ｎ（Ｈ）−（Ｃ_1-6）アルキル）−Ｙ¹により一置換または二置換されていてもよい）により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｙ¹は、アリール、複素環、またはヘテロアリールであり、前記アリール、複素環、またはヘテロアリールは、それぞれ、ハロ、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルにより一置換、二置換、または三置換されていてもよい。
環Ｙ−Ｂ：環Ｙは、イミダゾール、トリアゾールおよびピリジンからなる群から選択される。
環Ｙ−Ｃ：環Ｙは、イミダゾールである。
環Ｙ−Ｄ：環Ｙは、トリアゾールである。
環Ｙ−Ｅ：環Ｙは、ピリジンである。

【0027】

Ｒ²：
Ｒ²−Ａ：Ｒ²は、存在しない、（Ｃ_1-6）アルキル、（Ｃ_3-7）シクロアルキル、−Ｏ、−Ｎ（Ｒ^2A）、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−^§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_3-7）シクロアルキル−^§、^*−Ｎ（Ｒ^2A）−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ_1-6）アルキル−^§（必要な場合、Ｙ環に結合している部位は^*で示されており、フェニル環に結合している部位は^§で示されている）であり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよく、
Ｒ^2Aは、Ｈまたは（Ｃ_1-6）アルキルである。
Ｒ²−Ｂ：Ｒ²は存在しないか、またはＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、−Ｏ−アリール、および−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル−アリールからなる群から独立して選択される置換基により一置換、二置換、または三置換されていてもよい（Ｃ_1-6）アルキルである。
Ｒ²−Ｃ：Ｒ²は、存在しない。

【0028】

Ｒ³：
Ｒ³−Ａ：Ｒ³は、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮ、ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ_1-6）アルキル、または（Ｃ_1-6）アルキルであり、
前記アルキルはそれぞれ、ＯＨ、Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、アリール、複素環、またはヘテロアリールにより一置換または二置換されていてもよい。
Ｒ³−Ｂ：Ｒ³は、ハロ、（Ｃ_1-6）ハロアルキル、−ＣＮまたは（Ｃ_1-6）アルキルである。
Ｒ³−Ｃ：Ｒ³は、ハロまたは（Ｃ_1-6）ハロアルキルである。

【0029】

ｎ：
ｎ−Ａ：ｎは、０、１、２または３である。
ｎ−Ｂ：ｎは、０、１または２である。
ｎ−Ｃ：ｎは、１または２である。

【0030】

本発明のさらなる部分実施形態（ｓｕｂｇｅｎｅｒｉｃ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）が、以下の表に説明されており、この場合、各実施形態の各置換基は、上で説明されている定義に従って定義されている。

【表1】

本発明による最も好ましい化合物の例は、表１中の各単一化合物である。

【0031】

医薬組成物
本発明の化合物の投与に適した調製物は、当業者に明らかであり、例えば、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、ロゼンジ剤、トローチ剤、溶液剤、シロップ剤、エリキシル剤、サシェ剤、注射剤、吸入剤、および散剤を含む。薬学的な活性化合物の含有量は、全体としての組成物の０．０５〜９０重量％、好ましくは０．１〜５０重量％の範囲にあるべきである。
適切な錠剤は、例えば、本発明による１種または複数の化合物と、公知の賦形剤、例えば不活性な希釈剤、担体、崩壊剤、アジュバント、界面活性剤、結合剤および／または滑沢剤とを混合することにより得ることができる。錠剤は、いくつかの層からなってもよい。
適切な注射剤は、例えば、本発明による１種または複数の化合物と、公知の賦形剤、例えば不活性な希釈剤、担体、共溶媒、アジュバント、界面活性剤、および／またはシクロデキストリン錯体とを混合することにより得ることができる。注射可能な製剤は、エマルション剤または懸濁剤であってもよい。

【0032】

併用療法
本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩が、ＣＭＶ進入阻害剤、ＣＭＶ初期転写事象阻害剤、ＣＭＶヘリカーゼ−プライマーゼ阻害剤、ＣＭＶ ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤、ＵＬ９７キナーゼの阻害剤、ＣＭＶプロテアーゼ阻害剤、ＣＭＶターミナーゼ阻害剤、ＣＭＶ成熟阻害剤、ＣＭＶのライフサイクルにおける別の標的の阻害剤、ＣＭＶワクチン、およびＣＭＶ生物薬剤から選択される、少なくとも１つの追加の薬剤と共投与される、併用療法が考えられる。
これらの追加の薬剤を本発明の化合物と組み合わせて、単一医薬剤形を作製してもよい。あるいは、これらの追加の薬剤は、例えばキットを使用する、多回剤形の一部として患者に別々に投与されてもよい。そのような追加の薬剤は、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩の投与前、それと同時に、またはその後に、患者に投与することができる。
１日あたりに施用可能な本発明の化合物の用量範囲は、通常、体重の０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは体重の０．１〜５０ｍｇ／ｋｇである。投与単位はそれぞれ、５％〜９５％の活性化合物（ｗ／ｗ）を都合よく含み得る。好ましくは、そのような調製物は、２０％〜８０％の活性化合物を含んでいる。
実際の医薬として有効な量または治療投与量は、当然ながら、患者の年齢および体重、投与経路、および疾患の重症度などの、当業者に公知の要因に依存することになろう。どのような場合でも、この組合せ物は、患者特有の状態に基づいて、医薬として有効な量を送達するのを可能にする投与量および様式で投与されよう。

【0033】

本発明の組成物が、本発明の化合物と、１つもしくは複数の追加の治療剤または予防剤との組合せ物を含む場合、化合物と追加の薬剤の両方が、単剤療法レジメンにおいて通常投与される投与量の、約１０〜１００％の間、より好ましくは約１０〜８０％の間の投与量レベルで存在すべきである。
そのような併用療法において使用するために考えられる抗ウイルス剤には、以下に限定されないが、ヒトにおけるウイルスの産生および／または複製に必要な宿主またはウイルス機序のどちらかを妨害する薬剤を含む、ヒトにおけるウイルスの産生および／または複製を阻害するのに有効な薬剤（化合物または生物物質）が含まれる。そのような薬剤は、ＣＭＶ進入阻害剤、ＣＭＶ初期転写事象阻害剤、ＣＭＶヘリカーゼ−プライマーゼ阻害剤、ＣＭＶ ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤（ガンシクロビル（Ｃｙｔｏｖｅｎｅ）、バルガンシクロビル（Ｖａｌｃｙｔｅ、Ｃｙｍｅｖａｌ）、シドフォビル（Ｖｉｓｔｉｄｅ）、ホスカルネット（Ｆｏｓｃａｖｉｒ）、ＣＭＸ００１、シクロプロパビル（ＭＢＸ−４００）およびバラシクロビル（Ｖａｌｔｒｅｘ、Ｚｅｌｉｔｒｅｘ）など）、ＵＬ９７キナーゼの阻害剤（マリバビルなど）、ＣＭＶプロテアーゼ阻害剤、ＣＭＶターミナーゼ阻害剤（ＡＩＣ２４６（レテルモビル（Ｌｅｔｅｒｍｏｖｉｒ））など）、ＣＭＶ成熟阻害剤、他の阻害剤（アルテスネートなど）、ＣＭＶワクチン（ＴｒａｎｓＶａｘなど）、およびＣＭＶ生物薬剤（サイトガム（Ｃｙｔｏｔｅｃｔ）、ＴＣＮ−２０２、およびＣＭＶ ＩｇＧなど）から選択することができる。

【実施例】

【0034】

本発明の他の特徴は、本発明の原理を例示する、以下の非限定例から明白となろう。当業者に周知の通り、反応は、空気または水分から反応成分を保護するために必要な場合、不活性雰囲気（以下に限定されないが、窒素またはアルゴン）中で行われる。温度は、摂氏度（℃）で与えられる。特に明記されていない限り、溶液のパーセントおよび比は、容積対容積の関係を表す。以下の例において使用されている反応剤は、本明細書に記載されている通り得ることができるか、または本明細書に記載されていない場合、それ自体が市販であるか、もしくは市販の物質から当分野で公知の方法により調製することができる。質量スペクトル分析は、エレクトロスプレー質量分析計を使用して記録することができる。

【0035】

化合物および中間体は、カラムサイズに応じて、流速１８〜８５ｍＬ／分で、市販の通常の相シリカであるＲｅｄｉｓｅｐ Ｒ_fを４〜１２０ｇ用いる、２５４ｎｍでのＴｅｌｅｄｙｎｅ ＩＳＣＯ Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒ_f Ｓｙｓｔｅｍ、またはＳｉｌｉｃｙｃｌｅカラムにより精製することができる。質量スペクトル分析は、サンプルオーガナイザー、ＰＤＡ検出器、カラムマネージャー、サンプルマネージャー、二成分溶媒マネージャー、およびＳＱ検出器からなる、フローインジェクション分析質量分析法またはＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｕｌｔｒａｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ＬＣ Ｓｙｓｔｅｍを使用して記録することができる。

【0036】

マイクロ波条件中で行った反応は、バイアル操作用のＲｏｂｏｔ Ｓｉｘｔｙを装備した、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ ２．０マイクロ波合成装置で実施する。温度範囲は、４０〜２５０℃である。圧力範囲は０〜２０ｂａｒであり、出力範囲は２．４５ＧＨｚで０〜４００ワットである。バイアルサイズは、０．５ｍＬ〜２０ｍＬで変動する。溶媒吸収レベルは、デフォルト設定で高い。適用可能な場合、実験項において特定の反応時間および温度が示されている。

【0037】

分取ＲＰ−ＨＰＬＣは、以下の具体的な測定条件の１つを使用して、標準状態下で行われる。
Ａ） Ｗａｔｅｒｓ ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ、１９×５０ｍｍ）、最初に初期グラジエント条件において保持時間１分で溶出し、次に、１０ｍＭギ酸アンモニウム（ｐＨ３．８）を含有するＭｅＯＨの直線グラジエントにより、３０ｍＬ／分で１０分間かけて溶出する。所望の生成物を含有する画分をプールし、濃縮して凍結乾燥する。
Ｂ） Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ、１９×５０ｍｍ）、最初に初期グラジエント条件において保持時間１分で溶出し、次に、１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム（ｐＨ１０．０）を含有するＭｅＯＨの直線グラジエントにより、３０ｍＬ／分で１０分間かけて溶出する。所望の生成物を含有する画分をプールし、濃縮して凍結乾燥する。
Ｃ） Ｗａｔｅｒｓ ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ、１９×５０ｍｍ）、最初に初期グラジエント条件において保持時間１分で溶出し、次に、０．０６％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、３０ｍＬ／分で１０分間かけて溶出する。所望の生成物を含有する画分をプールして、凍結乾燥する。
Ｄ） Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ、１９×５０ｍｍ）、最初に初期グラジエント条件において保持時間１分で溶出し、次に、１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム（ｐＨ１０．０）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、３０ｍＬ／分で１０分間かけて溶出する。所望の生成物を含有する画分をプールして、凍結乾燥する。

【0038】

Ｅ） Ｗａｔｅｒｓ ＳｕｎＦｉｒｅ Ｐｒｅｐ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ、１９×５０ｍｍ）、最初に初期グラジエント条件において保持時間０．５分で溶出し、次に、１０ｍＭギ酸アンモニウム（ｐＨ３．８）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、４５ｍＬ／分で６．９分間かけて溶出する。溶離液は、全操作中、Ｔｉｍｂｅｒｌｉｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＴＬ６００ Ｍｏｂｉｌｅ Ｐｈａｓｅ Ｈｅａｔｅｒを使用して４５℃に温める。所望の生成物を含有する画分をプールして、凍結乾燥する。
Ｆ） Ｗａｔｅｒｓ ＸＳｅｌｅｃｔ Ｐｒｅｐ ＣＳＨ ＯＢＤ Ｃ１８カラム（５μｍ、３０×７５ｍｍ）、最初に初期グラジエント条件において保持時間０．５分で溶出し、次に、０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、６０ｍＬ／分で６．４分間かけて溶出する。溶離液は、全操作中、Ｔｉｍｂｅｒｌｉｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ ＴＬ６００ Ｍｏｂｉｌｅ Ｐｈａｓｅ Ｈｅａｔｅｒを使用して４５℃に温める。所望の生成物を含有する画分をプールして、凍結乾燥する。

【0039】

分析用ＵＰＬＣは、以下の具体的な測定条件の１つを使用して、標準状態下で行われる。
Ａ） Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１×３０ｍｍ）、１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム（ｐＨ１０）を含有するＭｅＯＨの直線グラジエントにより、０．７５ｍＬ／分で２．２分間かけて溶出する。
Ｂ） Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｃ１８カラム（１．８μｍ、２．１×３０ｍｍ）、１０ｍＭギ酸アンモニウム（ｐＨ３．８）を含有するＭｅＯＨの直線グラジエントにより、０．８ｍＬ／分で２．３分間かけて溶出する。
Ｃ） Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｃ１８カラム（１．８μｍ、２．１×３０ｍｍ）、０．０６％ＴＦＡ（ｖ／ｖ）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、０．９ｍＬ／分で２．２分間かけて溶出する。

【0040】

Ｄ） Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１×３０ｍｍ）、１０ｍＭ炭酸水素アンモニウム（ｐＨ１０）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、０．７５ｍＬ／分で２．２分間かけて溶出する。

【0041】

Ｅ） Ｗａｔｅｒｓ ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ ＨＳＳ Ｃ１８カラム（１．８μｍ、２．１×３０ｍｍ）、１０ｍＭギ酸アンモニウム（ｐＨ３．８）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、０．８ｍＬ／分で２．３分間かけて溶出する。溶離液は、全操作中、カラムプレヒーターを使用して４５℃に温める。
Ｆ） Ｗａｔｅｒｓ ＸＳｅｌｅｃｔ ＵＰＬＣ ＣＳＨ Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１×３０ｍｍ）、０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）を含有するＭｅＣＮの直線グラジエントにより、０．９ｍＬ／分で２．０分間かけて溶出する。溶離液は、全操作中、カラムプレヒーターを使用して４５℃に温める。

【0042】

例中に使用される略語は、以下を含む。
Ａｃ：アセチル、ＡｃＯＨ：酢酸、ＢＥＨ：エチレン架橋ハイブリッド、ＢＯＣまたはＢｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル、Ｂｕ：ブチル、ｄｂａ：ジベンジリデンアセトン、ＤＣＥ：１，２−ジクロロエタン、ＤＣＭ：ジクロロメタン、ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン、ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地、ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド、ｄｐｐｆ：１，１’−ジフェニルホスフィニルフェロセン、ｅｑまたはｅｑｕｉｖ：当量、Ｅｔ：エチル、Ｅｔ₂Ｏ：ジエチルエーテル、ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル、ＥｔＯＨ：エタノール、ＨＡＴＵ：［Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート］、Ｈｅｘ：ヘキサン、ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー、ＨＳＳ：高強度シリカ、ⁱＰｒまたはｉ−Ｐｒ：１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｉＰｒＯＨ：イソプロパノール、Ｍｅ：メチル、ＭｅＣＮ：アセトニトリル、ＭｅＯＨ：メタノール、ＭＳ：質量分析法、［Ｍ＋Ｈ］⁺：プロトン化分子イオン、ＭＴＢＥまたはｔ−ＭＢＥ：ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ＯＢＤ：最適床密度（ｏｐｔｉｍｕｍ ｂｅｄ ｄｅｎｓｉｔｙ）、ＰＤＡ：フォトダイオードアレイ、Ｐｈ：フェニル、Ｐｒ：プロピル、ＲＰ：逆相、ＲＴ：室温（１８〜２２℃）、ｔｅｒｔ−ブチルまたはｔ−ブチル：１，１−ジメチルエチル、ＴＥＡ：トリエチルアミン、ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸、ＴＨＦ：テトラヒドロフラン、ｔ_R：保持時間およびＵＰＬＣ：超高速液体クロマトグラフィー、Ｘａｎｔｐｈｏｓ：４，５−ビス（ジフェニルホスフィノ）−９，９−ジメチルキサンテン

【0043】

（例Ａ１）化合物Ａ１ｂの調製

【化9】

ＤＣＭ（１００ｍＬ）中のＡ１ａ（１０．０ｇ、７７．４ｍｍｏｌ、Ｃｏｍｂｉ Ｂｌｏｃｋｓ）を塩化オキサリル（６６．０ｍＬ、６１９．５ｍｍｏｌ）により処理する。次に、ＤＭＦ（５９９．６μＬ、７．７ｍｍｏｌ）を滴下して加えると、ガスが発生する。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌し、次に、減圧下で濃縮して、トルエン（１５０ｍＬ）を用いて共沸し、高真空下で１時間乾燥するとＡ１ｂが得られ、これを次の反応にそのまま使用する。

【0044】

（例Ａ２）化合物１０１８の調製

【化10】

工程１：
アニリンＡ２ａ（Ａｌｄｒｉｃｈ、４．０ｇ、２９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１４０ｍＬ）に溶解する。酸塩化物Ａ１ｂ（４．４ｇ、２９ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を０℃に冷却する。ＤＩＰＥＡ（６．２ｍＬ、３６ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物をＲＴまで温め、１０分間撹拌する。この反応混合物をＤＣＭと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液とに分配する。有機層を水およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮すると、Ａ２ｂが得られる。

【0045】

工程２：
Ａ２ｂ（１４ｇ、５７ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（４００ｍＬ）溶液に、三臭化フェニルトリメチルアンモニウム（２２ｇ、５７ｍｍｏｌ）を加える。この混合物をＲＴで４時間撹拌し、次に、得られた混合物をＥｔＯＡｃ（１Ｌ）に溶解して、水によりすすぐ。有機相を分離し、さらにブラインにより洗浄し、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で脱水してろ過し、減圧下で濃縮してフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂中の０〜６％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、Ａ２ｃが得られる。

【0046】

工程３：
Ａ２ｃ（３００ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）およびＡ２ｄ（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ、１８０ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（４ｍＬ）に溶解し、ＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物を一晩撹拌し、次に、濃縮乾固すると粗製Ａ２ｅが得られ、これをそのまま次の工程に使用する。

【0047】

工程４：
密封可能な容器中で、粗製Ａ２ｅおよびＮＨ₄ＯＡｃ（６５０ｍｇ、８．５ｍｍｏｌ）をキシレン（８ｍＬ）中で懸濁させ、この混合物を密封して、１４０℃に加熱する。２時間後、この反応混合物を約６０℃に冷却し、回転蒸発により乾固する。残渣をＡｃＯＨ（６ｍＬ）にとり、分取ＨＰＬＣ（３回注入、Ｓｕｎｆｉｒｅカラム、ＭｅＣＮ／水中のＴＦＡ）により精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１０１８が得られる。

【0048】

（例Ａ３）化合物１０１６の調製

【化11】

工程１：
ＤＩＰＥＡ（０．６６ｍＬ、３．８ｍｍｏｌ）、Ａ３ａ（２５０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、およびＡ３ｂ（Ａｓｔａｔｅｃｈ）（３００ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１３ｍＬ）溶液を、ＨＡＴＵ（５４０ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物を１時間撹拌し、次に、水およびＥｔＯＡｃにより希釈する。有機層を分離し、水により洗浄し（２×）、相分離器に通す。このろ液を蒸発乾固し、残渣をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製するとＡ３ｃが得られる。

【0049】

工程２：
密封可能な容器中で、Ａ３ｃ（４０ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）およびＮＨ₄ＯＡｃ（４０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）をキシレン（１ｍＬ）中で懸濁させ、この混合物を密封して、１４０℃に加熱する。１時間後、この反応混合物をＲＴまで冷却し、水とＥｔＯＡｃとに分配する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で脱水し、濃縮するとＡ３ｄが得られる。

【0050】

工程３：
ＴＨＦ（０．３ｍＬ）およびＨＣｌ（１Ｎ、０．３ｍＬ）に溶解したＡ３ｄ（２５ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｓｎ粉末（１８ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を１時間撹拌し、次に、ＮａＯＨ（１Ｎ、０．３５ｕＬ）および水（１０ｍＬ）により希釈する。この混合物を３０分間撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃにより抽出する。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で脱水し、濃縮するとＡ３ｅが得られる。

【0051】

工程４：
ＲＴのＤＩＰＥＡ（０．０５０ｍＬ、０．２９ｍｍｏｌ）、Ａ１ａ（１０ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）、およびＡ３ｅ（２０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を、ＨＡＴＵ（３６ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物を２時間撹拌する。別の反応容器で、ＲＴのＤＩＰＥＡ（０．０５０ｍＬ、０．２９ｍｍｏｌ）およびＡ１ａ（１０ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）の溶液を、ＨＡＴＵ（３６ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）により処理する。この混合物を５分間撹拌した後、もとの反応混合物に加える。この反応混合物を３０分間撹拌し、次に、ＡｃＯＨ（５００μＬ）により希釈する。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１０１６が得られる。

【0052】

（例Ａ４）化合物Ａ４ｂの調製

【化12】

４−アミノフェニルボロン酸ピナコールエステルＡ４ａ（５００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ、Ｏａｋｗｏｏｄ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液に、１，３−チアゾール−４−カルボン酸Ａ１ａ（３８３．１ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ、Ｃｏｍｂｉ Ｂｌｏｃｋｓ）、ＤＩＰＥＡ（９９３．８μＬ、５．７ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．２ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を４５分間撹拌し、次に、水（１５ｍＬ）を加え、この懸濁液を一晩撹拌する。沈殿物をろ過し、水（１０ｍＬ）およびＤＣＭ（１０ｍＬ）によりすすぐ。残渣を高真空および窒素通気下で１５分間乾燥すると、Ａ４ｂが得られ、これを後の工程にそのまま使用する。

【0053】

（例Ａ５）化合物Ａ５ｂの調製

【化13】

Ａ４ａ（１．０ｇ、４．６ｍｍｏｌ、Ｏａｋｗｏｏｄ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を、Ａ１ａ（７６６．３ｍｇ、６．０ｍｍｏｌ、Ｃｏｍｂｉ Ｂｌｏｃｋｓ）、ＤＩＰＥＡ（２．０ｍＬ、１１．４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（２．４ｇ、６．４ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物を３０分間撹拌し、次に、水（３０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とに分配する。層を分離し、有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮する。粗製残渣を１５分間、音波照射によって水（４０ｍＬ）中で粉末にする。懸濁液をろ過し、水（２５ｍＬ）によりすすぐ。残渣を高真空および窒素通気下で１時間乾燥すると、Ａ５ｂが得られる。

【0054】

（例Ａ６）化合物Ａ６ｃの調製

【化14】

０℃のＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＮａＨ（鉱物油中６０％、３８７．９ｍｇ、９．７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ａ６ａ（２．０ｇ、８．８ｍｍｏｌ、Ｍａｔｒｉｘ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を加える。この反応混合物をＲＴまで温め、３０分間撹拌する。次に、０℃まで再度冷却し、Ａ６ｂ（１．９ｍＬ、１０．６ｍｍｏｌ、Ｃｏｍｂｉ Ｂｌｏｃｋｓ）を加える。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）により希釈する。この有機層を水（３０ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）により洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過する。このろ液を濃縮すると、Ａ６ｃが得られ、これをさらに精製することなく使用する。

【0055】

（例Ａ７）化合物１０７０の調製

【化15】

工程１：
中間体Ａ６ｃ（６２０．０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）およびＡ４ｂ（５１６．８ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４８０．０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）、ジオキサン（７．５ｍＬ）および水（２．５ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（２００．６ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中で１２０℃に加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、水（２０ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。この粗生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、Ａ７ａが得られる。

【0056】

工程２：
中間体Ａ７ａ（５３．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）およびｍ−トリルボロン酸（１８．０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、Ａｃｒｏｓ）、炭酸カリウム（３０．５ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１．５ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１２．７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中で１２０℃に加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、水（１０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）とに分配する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄してＭｇＳＯ₄で脱水し、ろ過して濃縮すると粗生成物Ａ７ｂが得られ、これをそのまま次の工程に持ち越す。

【0057】

工程３：
粗製中間体Ａ７ｂ（５４．２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）の混合物に溶解する。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌する。完了後、溶媒を真空で除去すると、粗生成物が得られ、これをＤＣＭ（５ｍＬ）中で粉末にする。残渣をろ過し、ＤＣＭ（５ｍＬ）によりすすぐ。ＭｅＣＮおよび水を加え、この混合物を冷凍して凍結乾燥すると、化合物１０７０が得られる。

【0058】

（例Ａ８）化合物１０３４の調製

【化16】

工程１：
ＲＴのトリアゾールＡ６ａ（５．０ｇ、２２．０ｍｍｏｌ、Ｍａｔｒｉｘ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液を、炭酸カリウム（７．６ｇ、５５．１ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（３６５．９ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）により処理した後、ベンジル３−ブロモプロピルエーテルＡ８ａ（４．３ｍＬ、２４．２ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加える。得られる混合物を７５℃で一晩加熱し、ＲＴまで冷却し、次に、ＥｔＯＡｃ（４００ｍｌ）を加える。有機層をブライン、水、次に、再度ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水する。溶媒蒸発させると粗生成物が得られ、これをＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を使用して精製すると、Ａ８ｂが得られる。

【0059】

工程２：
０℃の中間体Ａ８ｂ（１．９ｇ、５．１ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）溶液を、三臭化ホウ素（ＤＣＭ中の１．０Ｍ、１６．９ｍＬ、１６．９ｍｍｏｌ）により処理する。この混合物をＲＴまで温め、一晩撹拌する。この混合物を０℃まで冷却し、水によりクエンチして、次にＥｔＯＡｃ（３×７５ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、相分離器を使用してろ過する。この粗生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（２０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製すると、中間体Ａ８ｃが得られる。

【0060】

工程３：
中間体Ａ８ｃ（５００．０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）およびＡ４ｂ（６９５．３ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４８５．０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１５ｍＬ）および水（１．５ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（２０２．８ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）を加え、次に、バイアルに蓋をしてマイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）により希釈し、ブライン（３×７５ｍＬ）により洗浄して相分離器によりろ過する。中間体Ａ８ｄは、ＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（１００％ＥｔＯＡｃ）によって得られる。

【0061】

工程４：
中間体Ａ８ｄ（３００．０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、３−（トリフルオロメチル）フェニルボロン酸Ａ８ｅ（１６７．５ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ、Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、炭酸カリウム（２０３．１ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ジオキサン（９ｍＬ）および水（３ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（８４．９ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中で１２０℃に加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、水（２５ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×４５ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１０３４が得られる。

【0062】

（例Ａ９）化合物１１２１の調製

【化17】

工程１：
０℃のＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＮａＨ（鉱物油中６０％、１９４．０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、トリアゾールＡ６ａ（１．０ｇ、４．４ｍｍｏｌ、Ｍａｔｒｉｘ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を加える。この反応混合物をＲＴまで温め、３０分間撹拌する。次に、０℃まで再度冷却し、臭化アリルＡ９ａ（７６２．９μＬ、８．８ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を加える。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）により希釈する。この有機層を水（２５ｍＬ）およびブライン（２５ｍＬ）により洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過する。このろ液を濃縮すると、Ａ９ｂが得られ、これをそのまま後の工程に使用する。

【0063】

工程２：
アセトン（６５ｍＬ）および水（１０ｍＬ）の混合物中の中間体Ａ９ｂ（８６３．４ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）の溶液を、四酸化オスミウム（ｔ−ＢｕＯＨ中、２．５重量％、８．１ｍＬ、０．６５ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリンＮ−オキシド（４５４．７ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌して濃縮し、次に、水（６０ｍＬ）と２−Ｍｅ−ＴＨＦ（２×７５ｍＬ）とに分配する。有機層を合わせ、１０％水性チオ硫酸ナトリウムおよび水により洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮すると中間体Ａ９ｃが得られ、これをさらに精製することなく使用する。

【0064】

工程３：
中間体Ａ９ｃ（４８６．７ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）およびＡ４ｂ（６４０．８ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４４７．０ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１２ｍＬ）および水（４ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１８６．９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中で１２０℃に加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、水（３５ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×６０ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。この粗生成物をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（１００％ＥｔＯＡｃ）により精製すると、中間体Ａ９ｄが得られる。

【0065】

工程４：
中間体Ａ９ｄ（９６．５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、３−クロロフェニルボロン酸Ａ９ｅ（４２．７ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、炭酸カリウム（６２．９ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１．５ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（２６．３ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中で１２０℃に加熱する。この反応混合物をＲＴまで冷却した後、水（１５ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×２０ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。粗生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１１２１が得られる。

【0066】

（例Ａ１０）化合物１１１４および１１１６の調製

【化18】

工程１：
無水ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の４−ヨードイミダゾールＡ１０ａ（５．０ｇ、２５．８ｍｍｏｌ）（Ｓｙｎｔｈｏｎｉｘ）の０℃の混合物に、ＮａＨ（油中６０％、１．２４ｇ、３０．９ｍｍｏｌ）を加える。得られる混合物を１０分間撹拌した後、塩化４−メトキシベンジル（４．３７ｍＬ、３２．２ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）を加える。この混合物をＲＴまで温め、一晩撹拌する。飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）を加え、この混合物を１０分間撹拌する。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。この有機層を水およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（２０：８０〜８０：２０のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、Ａ１０ｂが得られる。

【0067】

工程２：
中間体Ａ１０ｂ（２．０ｇ、６．４ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＣＮ（４０ｍＬ）に溶解し、塩化３−（トリフルオロメチル）ベンゾイル（１．９ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）、次いでＥｔ₃Ｎ（１．８ｍＬ、１２．７ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物を一晩、加熱して還流し、ＲＴまで冷却して水（１５ｍＬ）により処理する。得られる混合物を５分間撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃ（３×）により抽出する。層を分離し、有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（０：１００〜５０：５０のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、Ａ１０ｃが得られる。

【0068】

工程３：
中間体Ａ１０ｃ（９７１ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、４−アミノ−２−ヒドロキシピリジン（２００ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）（Ａｃｏｎｐｈａｒｍ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（３７５ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＣｕＩ（８６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、Ｋ₂ＣＯ₃（５０１ｍｇ、３．６ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に溶解する。音波照射下、得られる混合物をＡｒ（ｇ）を用いて１０分間、バブリングした後、１０時間１３０℃に加熱する。この混合物をＲＴまで冷却してＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）により希釈してブライン（３×）により洗浄し、ＭｇＳＯ₄により乾燥して濃縮すると、粗製物質が得られ、これをｔ−ＢＭＥを使用して粉末にすると、Ａ１０ｄが得られる。
工程４：
中間体Ａ１０ｄ（２５７ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＣＮ（４ｍＬ）に溶解した後、酸塩化物Ａ１ｂ（１１３ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１９ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物をＲＴで２時間撹拌してろ過し、残渣をＭｅＣＮによりすすぐと、Ａ１０ｅが得られる。

【0069】

工程５：
中間体Ａ１０ｅ（１．９５ｇ、３．４ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解した後、ＴＦＡ（１０ｍＬ）により処理する。得られる混合物を７５℃で一晩撹拌して冷却し、濃縮乾固する。それをトルエンで共蒸発させた後、１Ｎ ＮａＯＨを添加することにより中和する。得られる混合物を音波処理し、ろ過する。残渣を水およびＭｅＯＨによりすすぎ、真空下で乾燥すると、Ａ１０ｆが得られる。
工程６：
中間体Ａ１０ｆ（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２ｍＬ）にＲＴで溶解した後、ＭｅＭｇＢｒ（０．４７ｍＬ、０．６５ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ／トルエン（１：３）中の１．４Ｍ）により処理する。得られる混合物を１時間撹拌し、次に飽和ＮＨ₄Ｃｌ（２ｍＬ）水溶液を加える。得られる混合物を３０分間撹拌し、次に、水を加える。この混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１１４が得られる。

【0070】

工程７：
化合物１１１４（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のＴＦＡ（３．０ｍｌ）溶液を密封した反応容器に入れ、３時間７０℃に加熱し、次に、濃縮乾固すると、Ａ１０ｇが得られる。

【0071】

工程８：
Ａ１０ｇ（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）のｉＰｒＯＨ（１０ｍＬ）溶液を、ギ酸アンモニウム（２００ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（５％ｗ／ｗ、２００ｍｇ）により処理する。得られる混合物を８０℃で５時間撹拌し、ＲＴまで冷却して、Ａｃｒｏｄｉｓｃによってろ過する。ろ液を直接使用して、分取ＨＰＬＣにより生成物を精製すると化合物１１１６が得られる。

【0072】

（例Ａ１１）化合物１０９２および１０８７の調製

【化19】

工程１：
ＲＴで、５−アミノ−２−ブロモピリジンＡ１１ａ（１．０ｇ、５．８ｍｍｏｌ）（Ｏａｋｗｏｏｄ）をＤＣＭ（１５ｍＬ）に懸濁した後、酸塩化物Ａ１ｂ（９８１ｍｇ、６．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．５ｍＬ、１４．５ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物をＲＴで一晩撹拌し、次に、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液（５ｍｌ）を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると、Ａ１１ｂが得られる。

【0073】

工程２：
中間体Ａ１１ｂ（５００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を無水ジオキサン（５ｍＬ）に溶解し、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（７２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）およびヘキサジメチルスズ（０．４３ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物を４時間９０℃に加熱し、次に、ＲＴまで冷却した後、Ａ１０ｃ（３９４ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）およびＰｄ［（ＰＰｈ₃）］₄により処理する。得られる混合物を６時間、１１０℃に加熱し、ＲＴまで冷却して、次に、水（５ｍＬ）を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると、粗製物質が得られ、これをＭｅＯＨを使用して粉末にすると、Ａ１１ｃが得られる。

【0074】

工程３：
中間体Ａ１１ｃ（５０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（０．７ｍＬ）に溶解した後、ＴＦＡ（０．７ｍＬ）により処理する。得られる混合物を７５℃で一晩撹拌し、次に、ＲＴまで冷却し、濃縮乾固する。この残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、５Ｎ ＮａＯＨを用いて塩基性にし、ＥｔＯＡｃにより抽出する。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮乾固すると、Ａ１１ｄが得られる。
工程４：
中間体Ａ１１ｄ（４０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２ｍＬ）にＲＴで溶解した後、ＭｅＭｇＢｒ（０．２６ｍＬ、０．３６ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ／トルエン（１：３）中の１．４Ｍ）により処理する。得られる混合物を１時間撹拌し、次に、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（２ｍＬ）を加える。この混合物を３０分間撹拌し、次に、水を加える。この混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１０９２が得られる。

【0075】

工程５：
中間体Ａ１１ｅは、例Ａ１０からの工程７に従い、中間体Ａ１０ｇと同様に化合物１０９２から作製する。
工程６：
化合物１０８７は、例Ａ１０からの工程８に従い、化合物１１１６と同様にＡ１１ｅから作製する。

【0076】

（例Ａ１２）化合物１１２９および１１２０の調製

【化20】

工程１：
ＲＴで、４−アミノ−２−ヒドロキシピリジンＡ１２ａ（１．５ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）（Ａｃｏｎｐｈａｒｍ）を無水ＭｅＣＮ（５０ｍＬ）に溶解した後、酸塩化物Ａ１ｂ（１０．１ｇ、６８．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２３．７ｍＬ、１３６．２ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物をＲＴで一晩撹拌し、次に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により希釈する。得られる溶液をＲＴで１０Ｎ ＮａＯＨ（４．０ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）により処理し、次に、２０分間撹拌する。この混合物をろ過し、水およびアセトンによりすすぐと、Ａ１２ｂが得られる。

【0077】

工程２：
中間体Ａ１２ｂ（１．３ｇ、５．９ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１３ｍＬ）に溶解し、Ｃｓ₂ＣＯ₃（３．８３ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）および２，６−ジクロロピリジン（１．０ｇ、７．１ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物を２４時間、１００℃に加熱し、ＲＴまで冷却して、次に、ＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ）により希釈し、ブラインおよび水により洗浄する。界面の固体を含む有機層を集め、蒸発させた。得られる混合物をＭｅＯＨにより粉末にしてろ過すると、Ａ１２ｃが得られる。

【0078】

工程３：
中間体Ａ１２ｃ（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、Ｋ₂ＣＯ₃（８２．９ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、３−クロロフェニルボロン酸（３０．５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（１５．８ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）および水（０．２ｍＬ）により処理する。得られる混合物を２０分間、マイクロ波中で１３０℃に加熱し、ＲＴまで冷却して、Ａｃｒｏｄｉｓｃフィルターによりろ過し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより直接精製すると、化合物１１２９が得られる。

【0079】

工程４：
ＤＭＦ（２ｍＬ）中のＡ１２ｃ（４０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、Ｋ₂ＣＯ₃（６６ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）、およびｍ−クロロフェノール（Ａｌｄｒｉｃｈ、２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）の混合物を密封した反応容器に入れ、１６０℃に加熱して一晩撹拌する。得られる混合物をＲＴまで冷却し、Ａｃｒｏｄｉｓｃによりろ過して、このろ液を使用して分取ＨＰＬＣにより生成物を直接精製すると、化合物１１２０が得られる。

【0080】

（例Ａ１３）化合物１１３０の調製

【化21】

工程１：
中間体Ａ１２ｃ（４０１ｍｇ、１，２ｍｍｏｌ）を無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（１２６．９ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）および１−エトキシビニル−トリ−ｎ−ブチルスズ（０．５３ｍＬ、１．５７ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物をマイクロ波中、１４５℃で２５分間加熱し、冷却して１Ｎ ＨＣｌ（３．６ｍＬ、３．６ｍｍｏｌ）により処理し、ＲＴで２時間撹拌する。次に、この混合物を１Ｎ ＮａＯＨを用いて塩基性にしてろ過する。残渣を水、ＭｅＯＨにより洗浄し、ＥｔＯＡｃで粉末にしてろ過するとＡ１３ａが得られる。

【0081】

工程２：
ＲＴの１−ヨード−トリフルオロメチルベンゼン（４００ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を、塩化イソプロピルマグネシウム（塩化リチウム錯体）（１．８０ｍＬ、２．３５ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１．３Ｍ溶液）により処理する。得られる混合物をＲＴで１５分間撹拌し、次に、この溶液２ｍＬを中間体Ａ１３ａ（５０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１ｍＬ）溶液に加える。この混合物を３０分間撹拌し、次に飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（２ｍＬ）を加える。この混合物を１０分間撹拌し、次に、水を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１３０が得られる。

【0082】

（例Ａ１４）化合物１０５９の調製

【化22】

工程１：
ＲＴで、４−アミノ−２−ヒドロキシピリジンＡ１４ａ（１．５ｇ、９．９ｍｍｏｌ）（Ａｌｆａ）をＤＣＭ（４０ｍＬ）に溶解した後、酸塩化物Ａ１ｂ（１．９ｇ、１３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３．４ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）により処理する。得られる混合物をＲＴで３０分間撹拌し、次に、ＤＣＭにより希釈して、飽和ＮａＨＣＯ₃およびブラインにより洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、蒸発乾固する。残渣をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ１４ｂが得られる。

【0083】

工程２：
Ａ１４ｂ（２．１ｇ、８．０ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（８ｍＬ）、ＴＨＦ（２５ｍＬ）、水（６ｍＬ）に溶解し、水性ＮａＯＨ（５Ｎ、１．８ｍＬ、８．８ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌する。この有機溶媒を回転蒸発により除去し、得られる水溶液を冷凍して凍結乾燥すると、Ａ１４ｃが得られる。
工程３：
Ａ１４ｄ（５．０ｇ、３２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１７０ｍＬ）に溶解し、（ＰｈＭｅ₃Ｎ）ＢＲ₃（１２ｇ、３２ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物をＲＴで撹拌する。３０分後、この混合物をＥｔＯＡｃと水とに分配する。有機層を分離し、ブラインにより洗浄する。生成物をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製し、得られる残渣をＥｔＯＡｃ／ヘキサンから再結晶すると、Ａ１４ｅが得られる。

【0084】

工程４：
Ａ１４ｅ（１００ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびＡ１４ｃ（５０ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（２ｍＬ）に溶解した後、ＤＩＰＥＡ（０．０６ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を５０℃に加熱し、３日間撹拌する。この混合物をＲＴまで冷却し、次に、濃縮乾固すると粗製Ａ１４ｆが得られ、これをそのまま次の工程に使用する。

【0085】

工程５：
密封可能な容器中で、Ａ１４ｆおよびＮＨ₄ＯＡｃ（２８０ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）をトルエン（２ｍＬ）に懸濁させ、この混合物を密封して、１００℃に加熱する。この混合物を一晩撹拌し、ＲＴまで冷却して、回転蒸発により乾固する。残渣をＤＭＳＯ（２ｍＬ）にとり、分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１０５９が得られる。

【0086】

（例Ａ１５）化合物１０４５の調製

【化23】

工程１：
ＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）、Ａ１５ａ（Ａｌｄｒｉｃｈ、５３０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）、およびＡ１ａ（３００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１４ｍＬ）溶液を、ＨＡＴＵ（１．３ｇ、３．５ｍｍｏｌ）により処理する。この混合物を２時間撹拌し、次に、水およびＥｔＯＡｃにより希釈する。有機層を分離し、水（２×）により洗浄する。有機層を相分離器に通し、ろ液を蒸発乾固する。生成物をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ１５ｂが得られる。

【0087】

工程２：
化合物１０４５は、例Ａ１４からの工程２〜５に従い、化合物１０５９と同様にＡ１５ｂから作製する。

【0088】

（例Ａ１６）化合物１０５２の調製

【化24】

工程１：
カルボン酸エステルＡ１４ｃ（１．０ｇ、３．７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２０ｍＬ）に溶解し、１滴のＤＭＦと共に、塩化オキサリル（４．６ｍＬ、９．２ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を１時間撹拌し、次に、濃縮する。ＤＣＭ（２０ｍＬ）、次いでエーテル中のジアゾメタン（１．６Ｍ、２５ｍＬ、４０ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を２時間撹拌した後、濃縮する。この混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）にとり、ＡｃＯＨ（３３％、０．７６ｍＬ、４．４ｍｍｏｌ）中のＨＢｒを加える。この混合物を２０分間撹拌する。この反応混合物をＥｔＯＡｃと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液とに分配する。有機層を水およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。生成物をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ１６ａが得られる。

【0089】

工程２：
化合物１０５２は、例Ａ２からの工程３および４に従い、化合物１０１８と同様にＡ１６ａから作製する。

【0090】

（例Ａ１７）化合物１１０３の調製

【化25】

工程１：
ＤＩＰＥＡ（１．２ｍＬ、７．０ｍｍｏｌ）、Ａ１７ａ（Ａｌｄｒｉｃｈ、５３０ｍｇ、３．５ｍｍｏｌ）、およびＡ１ａ（３００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１４ｍＬ）溶液を、ＨＡＴＵ（１．３ｇ、３．５ｍｍｏｌ）により処理する。この混合物を２時間撹拌し、次に、水およびＥｔＯＡｃにより希釈する。有機層を分離し、水により洗浄し（２×）、相分離器に通す。このろ液を蒸発乾固し、残渣をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製するとＡ１７ｂが得られる。

【0091】

工程２：
ビス（ピナコレート）ジボロン（６５０ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（５８０ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ）およびＡ１７ｂ（６５０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（１０ｍＬ）中で混合する。この反応混合物を音波照射しながら、窒素により１０分間パージする。Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ₂／ＤＣＭ錯体（１６０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を９５℃で２時間撹拌する。水およびＥｔＯＡｃをこの混合物に加え、不溶物質をボロシリケートフィルター上でろ過することにより除去する。有機層を分離し、水（３×）およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮する。この残渣をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶解し、Ｎａ₂ＣＯ₃（２Ｍ、２．９ｍＬ、５．９ｍｍｏｌ）および２，４−ジブロモ−１−メチル−１Ｈ−イミダゾールＡ１７ｃ（Ａｌｄｒｉｃｈ、５７０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液を加える。この反応混合物を１０分間、音波照射しながら、窒素によりパージする。Ｐｄ［ＰＰｈ₃］₄（１００ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を６時間、１１０℃に加熱する。この混合物をＥｔＯＡｃおよび水中に希釈し、相を分離する。この有機相を水（３×）およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮する。生成物をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ１７ｄが得られる。

【0092】

工程３：
中間体Ａ１７ｄ（６５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、３−クロロ−２−メチルフェニルボロン酸Ａ１７ｅ（４６ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、Ｃｕｓｃｈｅｍ）、リン酸カリウム（０．５Ｍ、０．７ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）、およびＴＨＦ（１．５ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物を１０分間、窒素によりパージし、Ａ１７ｆ（J. Am. Chem. Soc. 2010, 132, 14073に従って調製、１４ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、１５分間、マイクロ波中、１２０℃で加熱する。ＲＴまで冷却した後、この反応混合物を濃縮乾固し、ＭｅＯＨ／水に再溶解し、Ａｃｒｏｄｉｓｃによりろ過する。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１１０３が得られる。

【0093】

（例Ａ１８）化合物１０９７の調製

【化26】

工程１：
中間体Ａ５ｂ（７４０ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）をジオキサン（１６ｍＬ）および水（５．４ｍＬ）に溶解し、Ｋ₂ＣＯ₃（５２０ｍｇ、３．８ｍｍｏｌ）およびＡ１７ｃ（Ａｌｄｒｉｃｈ、４５０ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を１０分間、音波照射しながら、窒素によりパージする。Ｐｄ［ＰＰｈ₃］₄（２２０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を２０分間、マイクロ波中、１２０℃に加熱する。この混合物をＥｔＯＡｃおよび水中に希釈し、相を分離する。この有機層を水（３×）およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮する。残渣をｃｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ１８ａが得られる。

【0094】

工程２：
化合物１０９７は、例Ａ１７からの工程３に従って、化合物１１０３と同様に、Ａ１８ａから作製する。

【0095】

（例Ａ１９）化合物１０９６の調製

【化27】

工程１：
中間体Ａ５ｂ（１７０ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）をジオキサン（５．７ｍＬ）および水（０．７６ｍＬ）に溶解し、Ｋ₂ＣＯ₃（１２０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）およびＡ１９ａ（Ｃｏｍｂｉ−Ｂｌｏｃｋｓ、１００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を１０分間、音波照射しながら、窒素によりパージする。Ｐｄ［ＰＰｈ₃］₄（４８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を２０分間、マイクロ波中、１２０℃に加熱する。この混合物をＥｔＯＡｃおよび水中に希釈し、相を分離する。この有機相を水（３×）およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮する。生成物をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ１９ｂが得られる。

【0096】

工程２：
化合物１０９６は、例Ａ１７からの工程３に従い、化合物１１０３と同様に、Ａ１９ｂから作製する。

【0097】

（例Ａ２０）化合物１０９８の調製

【化28】

工程１：
化合物１０１８（９ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（０．３ｍＬ）に溶解し、Ｋ₂ＣＯ₃（６ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、次いで臭化プロパルギル（Ａｌｆａ、３μＬ、０．０３ｍｍｏｌ）を加える。６時間後、この反応混合物をＭｅＯＨ（１ｍＬ）、次いで水（２０ｍＬ）により希釈する。得られる固体をろ過により集め、ＭｅＣＮ／水に再溶解し、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１０９８が得られる。

【0098】

（例Ａ２１）化合物１０８６の調製

【化29】

工程１：
ニトリルＡ２１ａ（Ａｌｆａ、１．０ｇ、６．６ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液に、０℃で、固体ＮａＨ（１００％、１７４ｍｇ、７．３ｍｍｏｌ）を加える。この混合物を０℃で１時間撹拌し、次に、ＭｅＩ（０．４２ｍＬ、７．３ｍｍｏｌ）を加える。この混合物を一晩撹拌し、次に、水およびＥｔ₂Ｏにより希釈する。この有機層を水（２×）により洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮する。残渣をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ２１ｂが得られる。

【0099】

工程２：
ＡｌＭｅ₃（Ａｌｄｒｉｃｈ、トルエン中の２Ｍ、５．８ｍＬ、１２ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃のＰｈＭｅ（２３ｍＬ）中の塩化アンモニウム（０．６２ｇ、１２ｍｍｏｌ）を加える（注意：ガス発生）。この混合物を１５分間撹拌した後、ＲＴまで温め、Ａ２１ｂ（３９０ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）溶液を加える。この反応混合物を８０℃まで加熱する。この混合物を一晩撹拌した後、０℃に冷却し、ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）によりクエンチする。この混合物を３０分間撹拌し、次に、ボロシリケートフィルターペーパーによりろ過する。このろ液を濃縮し、溶離液として１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを使用して、生成物Ａ２１ｃをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製する。

【0100】

工程３：
ＭｅＣＮ（１．５ｍＬ）中のＡ２１ｃ（５４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）およびＡ２ｃ（８０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＤＩＰＥＡ（０．０２ｍＬ、０．１５ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を５０℃に加熱する。この反応混合物を１時間撹拌した後、ＲＴまで冷却し、１：１ ＭｅＯＨ／水により希釈し、全容積２ｍＬにする。この混合物をＡｃｒｏｄｉｓｃによりろ過し、残渣を分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１０８６が得られる。

【0101】

（例Ａ２２）化合物１１１８および１１１９の調製

【化30】

【0102】

工程１：
無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）中のＡ１０ａ（２．０ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）（Ｓｙｎｔｈｏｎｉｘ）の０℃の混合物に、ＮａＨ（油中６０％、４９５ｍｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を加える。得られる混合物を１０分間撹拌した後、（３−ブロモ−プロポキシメチル）ベンゼン（２．３ｍＬ、１２．９ｍｍｏｌ）（Ｃｈｅｍｂｒｉｄｇｅ−ＢＢ）を加える。得られる混合物をＲＴまで温め、次に、一晩撹拌する。飽和ＮＨ₄Ｃｌ（２０ｍＬ）の水溶液を加え、この混合物を１０分間撹拌する。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。この有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（２０：８０〜８０：２０のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、Ａ２２ａが得られる。

【0103】

工程２：
中間体Ａ２２ａ（１．９ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＣＮ（４０ｍＬ）に溶解し、塩化３−（トリフルオロメチル）ベンゾイル（１．６ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）、次いでＥｔ₃Ｎ（１．５ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）（Ａｎａｃｈｅｍｉａ）により処理する。得られる混合物を一晩、加熱して還流し、ＲＴまで冷却して水（１５ｍＬ）により処理する。得られる混合物を５分間撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃ（３×）により抽出する。層を分離し、有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（０：１００〜５０：５０のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、Ａ２２ｂが得られる。
工程３：
中間体Ａ２２ｂ（５１４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、４−アミノ−２−ヒドロキシピリジン（１００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ）（Ａｃｏｎｐｈａｒｍ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（１８７ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）、ＣｕＩ（４３ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）、Ｋ₂ＣＯ₃（２５１ｍｇ、１，８２ｍｍｏｌ）（Ｆｌｕｋａ）を無水ＤＭＳＯ（１０ｍＬ）に溶解する。音波照射下、得られる混合物をＡｒ（ｇ）を用いて１０分間、バブリングした後、１０時間１３０℃に加熱する。この混合物をＲｔまで冷却し、次に、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）により希釈してブライン（３×）により洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると、Ａ２２ｃが得られる。

【0104】

工程４：
中間体Ａ２２ｃ（４４１ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＣＮ（８ｍＬ）に溶解した後、Ａ１ｂ（１９７ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．３１ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物をＲＴで１時間撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃにより希釈し、１Ｎ ＮａＯＨ、水、次にブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（８０：２０〜１００：０のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、Ａ２２ｄが得られる。
工程５：
中間体Ａ２２ｄ（１４５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（２ｍＬ）にＲＴで溶解した後、ＭｅＭｇＢｒ（０．５１ｍＬ、０．７２ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ／トルエン（１：３）中の１．４Ｍ、Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物を３０分間撹拌し、次に、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（２ｍＬ）を加える。この混合物を３０分間撹拌し、次に、水を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１１８が得られる。

【0105】

工程６：
化合物１１１８（９０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（３ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却する。ＢＢｒ₃（０．４３ｍＬ、０．４３ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中の１Ｍ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）の溶液を加える。得られる混合物をＲＴで１時間撹拌し、次に、水を加える。５Ｎ ＮａＯＨを用いてこの混合物を塩基性にし、次にＥｔＯＡｃにより抽出する。層を分離し、有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１１９が得られる。

【0106】

（例Ａ２３）化合物１１１５、１１１３および１１１１の調製

【化31】

【0107】

工程１：
中間体Ａ２２ｂ（７００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）を無水ジオキサン（１０ｍＬ）に溶解し、ＰｄＣｌ₂（ＰＰｈ₃）₂（９６ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）およびヘキサジメチルスズ（０．５６ｍＬ、２．７ｍｍｏｌ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物を４時間９０℃に加熱し、次に、ＲＴまで冷却した後、Ａ１１ｂ（５４１ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）およびＰｄ［（ＰＰｈ₃）］₄（２３６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）（Ｓｔｒｅｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）により処理する。得られる混合物を６時間、１１０℃まで加熱し、次に、ＲＴまで冷却する。水（５ｍＬ）を加え、この混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出する。層を分離し、有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ（３０：７０〜１００：０のＥｔＯＡｃ／ヘキサン、次に５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製すると、Ａ２３ａが得られる。

【0108】

工程２：
中間体Ａ２３ａ（２７５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４ｍＬ）にＲＴで溶解した後、ＭｅＭｇＢｒ（１．３ｍＬ、１．９ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ／トルエン（１：３）中の１．４Ｍ、Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物を３０分間撹拌し、次に飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（２ｍＬ）を加える。この混合物を３０分間撹拌し、次に、水を加える。この混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物（ｃｏｍｏｐｕｎｄ）１１１５が得られる。

【0109】

工程３：
中間体Ａ２３ａ（２７５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を無水ＤＣＭ（４ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却する。ＢＢｒ₃（１．５ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ、ＤＣＭ中の１Ｍ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）の溶液を加え、得られる混合物をＲＴで１時間撹拌する。水を加える。５Ｎ ＮａＯＨを用いてこの混合物を塩基性にし、次に、ＥｔＯＡｃにより抽出する。層を分離し、有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると、Ａ２３ｃが得られる。

【0110】

工程４：
中間体Ａ２３ｃ（２３５ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（４ｍＬ）にＲＴで溶解した後、ＭｅＭｇＢｒ（１．０ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）（ＴＨＦ／トルエン（１：３）中の１．４Ｍ、Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物を１時間撹拌し、次に飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液（２ｍＬ）を加える。この混合物を３０分間撹拌し、次に、水を加える。混合物をＥｔＯＡｃ（３×）により抽出し、層を分離する。有機層を水、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して濃縮すると粗製物質が得られ、これを分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１１３が得られる。
工程５：
化合物１１１３（２８０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）をＲＴでＴＦＡ（６ｍＬ）に溶解する。得られる溶液を一晩８０℃に加熱し、冷却して濃縮すると、Ａ２３ｅが得られる。

【0111】

工程６：
中間体Ａ２３ｅ（２７０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）をＲＴでｉＰｒＯＨ（１５ｍＬ）に懸濁させ、次に、ギ酸アンモニウム（５１１ｍｇ、８．１ｍｍｏｌ）（Ａｃｒｏｓ）、次いで、５％Ｐｄ／Ｃ（５００ｍｇ）（Ａｌｄｒｉｃｈ）により処理する。得られる混合物を８０で一晩撹拌し、ＲＴまで冷却して、次に、Ａｃｒｏｄｉｓｃフィルターを使用してろ過する。この混合物を濃縮して、分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１１１が得られる。

【0112】

（例Ａ２４）化合物１１０９および１０４１の調製

【化32】

【0113】

工程１：
中間体Ａ８ｃ（１．５ｇ、５．３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶解し、デス−マーチンペルヨージナン（３．３ｇ、７．９ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を一晩撹拌し、１０％水性チオ硫酸ナトリウム（１５ｍＬ）および飽和炭酸水素ナトリウム（１５ｍＬ）によりクエンチする。この不均一溶液を３０分間撹拌し、次に、水層をＥｔＯＡｃ（２×６０ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、減圧下で濃縮すると粗製中間体Ａ２４ａが得られる。

【0114】

工程２：
中間体Ａ２４ａ（１．４ｇ、４．９ｍｍｏｌ）のジオキサン（６０ｍＬ）溶液に、ＮａＨ₂ＰＯ₄（２．７ｇ、１９．８ｍｍｏｌ）の水溶液（１５ｍＬ）およびＮＨ₂ＳＯ₃Ｈ（７２０．７ｍｇ、７．４ｍｍｏｌ）を加える。次に、この混合物を０℃に冷却し、ＮａＣｌＯ₂（５８１．８ｍｇ、６．４ｍｍｏｌ）の水溶液（１５ｍＬ）を加える。この混合物を０℃で１５分間撹拌する。Ｎａ₂ＳＯ₃（７４８．４ｍｇ、５．９ｍｍｏｌ）を加え、得られる混合物を０℃で１時間撹拌し、１Ｎ ＨＣｌ（７５ｍＬ）により酸性にしてＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせてブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮すると中間体Ａ２４ｂが得られ、これをさらに精製することなく使用する。

【0115】

工程３：
中間体Ａ２４ｂ（２００．０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）およびＡ４ｂ（２６５．１ｍｇ、０．８０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１８４．９ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）、ジオキサン（６ｍＬ）および水（２ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（７７．３ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中、１２０℃で加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、１Ｎ ＨＣｌ（２０ｍＬ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×３０ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮すると、Ａ２４ｃが得られる。

【0116】

工程４：
中間体Ａ２４ｃ（７０．０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）、３−クロロフェニルボロン酸Ａ９ｅ（３１．１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、炭酸カリウム（１５．８ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ジオキサン（３ｍＬ）および水（１ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（１９．２ｍｇ、０．０１７ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、２０分間、マイクロ波中、１２０℃で加熱する。この反応混合物をＲＴまで冷却した後、１Ｎ ＨＣｌ（１０ｍＬ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（２×１５ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮乾固する。生成物を分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１０４１が得られる。

【0117】

工程５：
化合物１０４１（７５．３ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を、Ａ２４ｅ（３２．４μＬ、０．２２ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｃｉｈ）、ＤＩＰＥＡ（７２．２μＬ、０．４２ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（８８．３ｍｇ、０，２３ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物を１時間撹拌し、次に、水（１５ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）とに分配する。層を分離する。有機層をブライン（３×）により洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮するとＡ２４ｆが得られ、これをさらに精製することなく使用する。
工程６：
粗製中間体Ａ２４ｆ（１００．０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２．５ｍＬ）およびＴＦＡ（２．５ｍＬ）の混合物に溶解する。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌する。溶媒を真空で除去すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１１０９が得られる。

【0118】

（例Ａ２５）化合物１１１７の調製

【化33】

工程１：
中間体Ａ６ｃ（５０．０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、Ａ１２ｂ（３１．０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３８．７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入し、これに蓋をしてマイクロ波中、１６０℃で３０分間加熱する。この反応混合物をＲＴまで冷却し、水（０．５ｍＬ）、炭酸カリウム（１９．４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、Ａ９ｅ（２６．３ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、Ｍａｔｒｉｘ）およびＰｄ（ＰＰｈ₃）₄（１６．２ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、マイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱する。得られる混合物を水（１０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）とに分配する。層を分離し、有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過する。ろ液を減圧下で濃縮するとＡ２５ａが得られ、これをそのまま使用する。

【0119】

工程２：
粗製中間体Ａ２５ａ（７４．１ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）およびＴＦＡ（２ｍＬ）の混合物に溶解する。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌する。完結後、溶媒を真空で除去すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣによって精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１１１７が得られる。

【0120】

（例Ａ２６）化合物１０７７の調製

【化34】

【0121】

工程１：
中間体Ａ８ｂ（１６５．３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）およびＡ５ｂ（１７４．６ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１２１．８ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１．５ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（５０．９ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、マイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱する。この反応混合物をＲＴまで冷却した後、水（１５ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（３５ｍＬ）とに分配する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。この粗製残渣をＣｏｍｂｉＦｌａｓｈ（０％〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製すると、中間体Ａ２６ａが得られる。

【0122】

工程２：
中間体Ａ２６ａ（１４０．２ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、Ａ８ｅ（６４．１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、Ｆｒｏｎｔｉｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、炭酸カリウム（７７．８ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）、ジオキサン（３．６ｍＬ）および水（１．２ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。この反応混合物をアルゴンにより５分間脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄（３２．５ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）を加える。バイアルに蓋をして、マイクロ波中、１２０℃で２０分間加熱する。この反応混合物をＲＴに冷却した後、水（２５ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×４５ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮する。この粗製残渣を分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物Ａ２６ｂが得られる。

【0123】

工程３：
０℃に冷却した化合物Ａ２６ｂ（１０８．０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液を、三臭化ホウ素（ＤＣＭ中の１Ｍ、６３２．４μＬ、０．６３ｍｍｏｌ）により処理する。この反応混合物をＲＴで３日間撹拌し、次に水（１５０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）とに分配する。層を分離し、有機層をＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、減圧下で濃縮すると粗製中間体Ａ２６ｃが得られ、これをさらに精製することなく使用する。

【0124】

工程４：
ＲＴで中間体Ａ２６ｃ（９０．７ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、デス−マーチンペルヨージナン（１２１．９ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を加える。この反応混合物を一晩撹拌し、１０％水性チオ硫酸ナトリウム（２０ｍＬ）および飽和炭酸水素ナトリウム（３０ｍＬ）によりクエンチする。この不均一溶液を３０分間撹拌し、次に、水層をＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）により抽出する。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、減圧下で濃縮すると粗製中間体Ａ２６ｄが得られる。

【0125】

工程５：
中間体Ａ２６ｄ（４５．０ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）、氷酢酸（１８０．３μＬ、３．１５ｍｍｏｌ）、およびモルホリン（８２．６μＬ、０．９５ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）のＤＭＦ（６ｍＬ）溶液をＲＴで４５分間撹拌し、次にトリアセトキシボロヒドリド（１６１．８ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）を加え、得られる混合物を一晩撹拌する。完結後、混合物を飽和炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）とに分配する。層を分離し、有機層をＭｇＳＯ₄で脱水してろ過し、濃縮すると粗生成物が得られ、これを分取ＨＰＬＣにより精製する。純粋な画分をプールし、冷凍して凍結乾燥すると、化合物１０７７が得られる。

【0126】

（例Ａ２７）化合物１００４および１１３２の調製

【化35】

工程１：
ＮａＯＨ（７．３ｇ、１８０ｍｍｏｌ）の水溶液（１８ｍＬ）を０℃に冷却し、Ａ２７ａ（Ａｌｄｒｉｃｈ、８．８ｇ、９２ｍｍｏｌ）を加える。この溶液を１０分間撹拌し、次に、Ｂｏｃ₂Ｏ（５．０ｇ、２３ｍｍｏｌ）のアセトン（１７ｍＬ）溶液を加える。この反応混合物を２．５時間撹拌し、次に、濃縮して約半分の容積にする。この溶液をＥｔＯＡｃにより抽出し、有機層をＭｇＳＯ₄で脱水して濃縮すると、Ａ２７ｂが得られる。

【0127】

工程２：
カーバメートＡ２７ｂ（１．５ｇ、９．２ｍｍｏｌ）およびブロモケトンＡ２ｃ（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２２ｍＬ）に溶解し、この反応物を一晩撹拌する。この反応物をＥｔＯＡｃにより希釈し、この混合物を水により洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、濃縮乾固する。生成物をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、Ａ２７ｃが得られる。

【0128】

工程３：
ＨＡＴＵ（３８４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）、Ａ２７ｄ（Ａｐｏｌｌｏ、２００ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）、およびＡ２７ｃ（３００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液を、ＲＴでＤＩＰＥＡ（０．３４ｍＬ）により処理する。この反応混合物を一晩撹拌し、次に、水およびＥｔＯＡｃにより希釈する。有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃および飽和ＮＨ₄Ｃｌにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水して蒸発させる。残渣をＣｏｍｂｉｆｌａｓｈにより精製すると、化合物１００４およびＡ２７ｆが得られる。

【0129】

工程４：
Ａ２７ｆ（３６ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）溶液を、ＭｅＩ（１０μＬ、０．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（０．１ｍＬ）溶液により処理する。この反応混合物をＲＴで一晩撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃにより希釈して飽和ＮａＨＣＯ₃により洗浄する。有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、濃縮乾固する。残渣をジオキサン中の４Ｍ ＨＣｌ（０．３ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）中で懸濁させ、この混合物を一晩撹拌する。この混合物を蒸発乾固し、次に、水（０．２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（１．８ｍＬ）に溶解する。この溶液をＡｃｒｏｄｉｓｃによりろ過し、分取ＨＰＬＣにより精製すると、化合物１１３２が得られる。

【0130】

（例Ａ２８）化合物１０３９の調製

【化36】

工程１：
中間体Ａ７ａ（２５ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）、アニリン（７．１μＬ、０．０７８ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）、Ｘａｎｔｐｈｏｓ（３．０ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ）、ナトリウムフェノキシド（９．０ｍｇ、０．０７８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ₂（ｄｂａ）₃（４．８ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ）およびジオキサン（１ｍＬ）をマイクロ波用バイアル中に投入する。バイアルに蓋をして、マイクロ波中、１５０℃で２時間加熱する。この反応混合物をＲＴで冷却した後、ＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）により希釈する。有機層を水、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液およびブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ₄で脱水、ろ過して減圧下で濃縮すると、粗製中間体Ａ２８ａが得られる。

【0131】

工程２：
化合物１０３９は、例Ａ７からの工程３に従い、Ａ７ｂから化合物１０７０と同様に、Ａ２８ａから作製する。

【0132】

（例Ａ２９）化合物１０８９の調製

【化37】

工程１：
化合物Ａ２９ａは、例Ａ１０からの工程１に従い、Ａ１０ａから化合物Ａ１０ｂと同様に、Ａ１０ａから作製する。

【0133】

工程２：
化合物１０８９は、例Ａ１０からの工程３および４に従い、Ａ１０ｃから化合物Ａ１０ｅと同様に、Ａ２９ａから作製する。

【0134】

（例Ａ３０）化合物１１３３の調製

【化38】

工程１：
化合物Ａ３０ｂは、例Ａ５における化合物Ａ５ｂの調製と同様に、化合物Ａ４ａおよびＡ３０ａ（Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ）から調製する。

【0135】

工程２：
化合物Ａ３０ｃは、例Ａ７における化合物Ａ７ａの調製と同様に、化合物Ａ３０ｂから調製する。

【0136】

工程３：
化合物１１３３は、例Ａ７における化合物１０７０の調製と同様に３−クロロフェニルボロン酸（Ｆｒｏｎｔｉｅｒ）およびＡ３０ｃから調製する。

【0137】

（例Ａ３１）化合物１１４３の調製

【化39】

工程１：
化合物Ａ３１ａは、例Ａ３における化合物Ａ３ｅの調製と同様に、化合物Ａ２ｄ（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）から調製する。

【0138】

工程２：
化合物１１４３は、例Ａ３における化合物１０１６の調製と同様に、化合物Ａ３１ｂ（Ａｌｄｒｉｃｈ）およびＡ３１ａから調製する。

【0139】

（例Ａ３２）化合物１１３９の調製

【化40】

工程１：
化合物Ａ３２ｂは、例Ａ１５における化合物Ａ１５ｂの調製と同様に、化合物Ａ３０ａ（Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ）およびＡ３２ａ（Ｆｌｕｋａ）から調製する。

【0140】

工程２：
化合物Ａ３２ｂ（０．９０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（３ｍＬ）に溶解し、ＴＦＡ（３ｍＬ）を加える。この反応混合物を１５分間撹拌し、蒸発乾固し、残渣をＥｔＯＡｃと１０％ＨＣｌとに分配する。有機層をＭｇＳＯ₄で脱水し、濃縮乾固するとＡ３２ｃが得られる。

【0141】

工程３：
化合物１１３９は、例Ａ１４からの工程２〜５に従い、化合物１０５９と同様に、Ａ３２ｃから作製する。

【0142】

（例Ａ３３）化合物１０３８の調製

【化41】

工程１：
化合物Ａ３３ｂは、例Ａ５における化合物Ａ５ｂの調製と同様に、化合物Ａ４ａおよびＡ３１ｂ（Ａｌｄｒｉｃｈ）から調製する。

【0143】

工程２：
化合物Ａ３３ｃは、例Ａ７における化合物Ａ７ａの調製と同様に、２，６−ジブロモピリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ）および化合物Ａ３３ｂから調製する。
工程３：
化合物１０３８は、例Ａ７における化合物Ａ７ｂの調製と同様に、３−クロロフェニルボロン酸（Ｆｒｏｎｔｉｅｒ）およびＡ３３ｃから調製する。

【0144】

（例Ａ）ＨＣＭＶ ＡＤ１６９ ＣＰＥアッセイ
このアッセイフォーマットは、色素還元アッセイを用いる、感染に対して細胞を保護する化合物の能力を決定する、ＣＰＥ（細胞変性効果）を基本とするアッセイである（Ｐｒｏｍｅｇａ製のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ、Ｎｏｎ−Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ＡｓｓａｙのＭＴＳ）。代謝的に活性な細胞中に見られるデヒドロゲナーゼ酵素により、ＭＴＳの水水溶性ホルマザンへの変換が行われる。４９０ｎｍにおける吸光度によって決定されるホルマザン生成物の量は、培養中の生存細胞数に正比例する。

【0145】

試薬および物質：

【表2】

【0146】

化合物の調製：
化合物のＤＭＳＯ保存溶液の段階希釈は、列２〜１１および１４〜２３では、ＤＭＳＯを使用して行う。列１、１２、１３および２４には、ＤＭＳＯしか存在していない。ＤＭＳＯ段階希釈液４μＬを得て、Ｄ−ＭＥＭ ５％ＦＢＳ培養培地９６μＬを使用して希釈し、４％ＤＭＳＯ（７×）を得る。

【0147】

ＣＰＥアッセイ：
このアッセイを行うために、前日にプレート培養したＭＲＣ−５細胞（１ウェルあたり１００００個の細胞）を４０μＬ含有するアッセイプレートに、新しく調製したプレート用４％ＤＭＳＯ段階希釈液１０μＬを加える。希釈したウイルス２０μＬを列２〜１２および１４〜２４に加え、非感染対照（列１および１３）には、最終ＤＭＳＯ濃度０．６％となるよう、Ｄ−ＭＥＭ ５％ＦＢＳ培地しか添加しない。ウイルス希釈は、３〜４のシグナル対バックグラウンドを得る（一般に、１ウェルあたりウイルス保存液０．１〜１μＬの間、またはＭＯＩ＝０．０５である）のに必要なウイルス量に基づく。化合物を含まない感染対照（列１２および２４）中で１００％ＣＰＥを得るために、このアッセイプレートを５％ＣＯ₂、３７℃で９日間、インキュベートする。新たに混合した室温のＭＴＳ／ＰＭＳ（１：２０ｖ／ｖ）１０μＬを加え、このプレートを５％ＣＯ₂、３７℃で４〜５時間インキュベートする（１００％ＣＰＥ対照において、２．３の飽和信号となるまで）。このプレートをバイオセーフティ用Ｔｏｐｓｅａｌにより密封し、ＯＤ４９２ｎｍでＥｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）または同等なもので読取りを行う。

【0148】

（例Ｂ）ＨＣＭＶ ＡＤ１６９−Ｂａｃスルシフェラーゼアッセイ
このアッセイフォーマットは、培養培地に、直接ＢＩＧｌｏ基質（以下に示した通り調製）を添加した後の、ルシフェラーゼシグナルの低下を検出することにより、化合物が感染を阻害する能力を決定するルシフェラーゼリポーターに基づくアッセイである。ルシフェリンのモノ酸化は、Ｍｇ₂₊、ＡＴＰおよび分子状酸素の存在下で、ルシフェラーゼによって触媒される。オキシルシフェリンの生成は、適切なプレートリーダーを用いて検出することができる発光反応である。ヒトサイトメガロウイルスＡＤ１６９−Ｂａｃは、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙのＤｒ．Ｔｈｏｍａｓ Ｓｈｅｎｋ（参照により本明細書に組み込まれている参考文献Ｙｕ ｅｔ ａｌ． ２００２ − Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７６（５）：２３１６−２３２８）から取得し、組換えによって改変し、ＨＣＭＶゲノム中のＵＳ２−ＵＳ６位にヒト化ホタルルシフェラーゼ遺伝子（Ｌｕｃ２）を導入する。このウイルスはＭＲＣ−５細胞中で広がる。

【0149】

試薬および物質：

【表3】

【0150】

ＢＩＧｌｏルシフェラーゼ緩衝液用：

【表4】

【0151】

最終濃度：
トリシン ２５ｍＭ
ＥＤＴＡ ０．５ｍＭ
ＮａＴＰＰ（三リン酸Ｎａ） ０．５４ｍＭ
ＭｇＳＯ４ １６．３ｍＭ
^**ＡＴＰ １．２ｍＭ
^**ベータ−メルカプト ５６．８ｍＭ
^**ルシフェリン ０．０５ｍＭ
Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００ ０．１０％
ｐＨ ７．８（１０Ｎ ＮａＯＨにより調節）
^**ｐＨ調節後にのみ添加
−８０℃で保管

【0152】

化合物の調製：
化合物のＤＭＳＯ保存溶液の段階希釈は、列２〜１１および１４〜２３では、ＤＭＳＯを使用して行う。列１、１２、１３、および２４には、ＤＭＳＯしか存在していない。ＤＭＳＯ段階希釈液４μＬを得て、Ｄ−ＭＥＭ ５％ＦＢＳ培養培地９６μＬを使用して希釈し、４％ＤＭＳＯ（７×）を得る。

【0153】

ＡＤ１６９ルシフェラーゼアッセイ：
このアッセイを行うために、前日にプレート培養したＭＲＣ−５細胞（１ウェルあたり１００００個の細胞）を２５μＬ含有するアッセイプレートに、新しく調製したプレート用４％ＤＭＳＯ段階希釈液７μＬを加える。希釈したウイルス１７μＬを列２〜１２および１４〜２４に加え、非感染対照（列１および１３）には、最終ＤＭＳＯ濃度０．６％となるよう、Ｄ−ＭＥＭ ５％ＦＢＳ培地しか添加しない。ウイルス希釈は、ＣＰＥなしで可能な最高のルシフェラーゼシグナルを得る（一般に、１ウェルあたりウイルス保存液０．０５〜１μＬの間、またはＭＯＩ＝０．０２である）のに必要なウイルス量に基づく。アッセイプレートは５％ＣＯ₂、３７℃で３日間インキュベートする。室温のＢＩＧｌｏ緩衝液１５μＬを、やはり室温で１５分間インキュベートした室温のアッセイプレートに加える。このプレートをバイオセーフティ用ＴｏｐＳｅａｌにより密封し、蛍光シグナルをＴｏｐＣｏｕｎｔプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）または同等なもので読み取る。

【0154】

（例Ｃ）ＨＣＭＶ ＡＤ１６９ ｑＰＣＲ ９６ウェルアッセイ
ｈＣＭＶ量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）アッセイは、化合物が、感染後の最初の７２時間の間に、ｈＣＭＶウイルスＤＮＡの複製を直接または間接的に阻害する能力を評価するものである。侵入またはｈＣＭＶポリメラーゼのどちらか一方を阻害する化合物は、このアッセイにおいて活性である。化合物は、各９６ウェルプレートにつき８種の化合物による９点の用量応答を使用して、９６ウェルプレート中のｑＰＣＲアッセイで試験する。このアッセイは、Ｓｃｈｎｅｐｆら（Antiviral Research 81 (2009) 64-67）により記載されている、リアルタイムＰＣＲによるヒトサイトメガロウイルスの抗ウイルス薬の感受性を迅速に決定する方法から改良を加えた。

【0155】

試薬および物質：

【表5】

【0156】

細胞溶解緩衝液用：

【表6】

【0157】

最終濃度：
１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ８．０
５０ｍＭ ＫＣｌ
２ｍＭ ＭｇＣｌ₂
０．４５％Ｔｗｅｅｎ２０
０．４５％Ｎｏｎｉｄｅｔ Ｐ４０

【0158】

プライマーおよびプローブ：
・ｑＨＣＭＶ７＝ＵＳ１７フォワードプライマー、５’ ＧＡＡ ＧＧＴ ＧＣＡ ＧＧＴ ＧＣＣ ＣＴＧ ３’（配列番号１）、ＩＤＴによる合成
・ｑＨＣＭＶ８＝ＵＳ１７リバースプライマー、５’ＧＴＧ ＴＣＧ ＡＣＧ ＡＡＣ ＧＡＣ ＧＴＡ ＣＧ ３’（配列番号２）、ＩＤＴによる合成
・ｑＨＣＭＶ９＝ＵＳ１７プローブ、ＺＥＮ内部クエンチャおよびＩｏｗａ Ｂｌａｃｋ ＦＱクエンチャを含むＦＡＭプローブ、５’−ＦＡＭ−ＡＣＧ ＧＴＧ ＣＴＧ／ＺＥＮ／ＴＡＧ ＡＣＣ ＣＧＣ ＡＴＡ ＣＡＡ Ａ−ＩＡＢｋＦＱ−３’（配列番号３）、ＩＤＴによる合成
・ＲＰ８ＬＬ＝ミトコンドリアフォワードプライマー、５’ ＡＣＣ ＣＡＣ ＴＣＣ ＣＴＣ ＴＴＡ ＧＣＣ ＡＡＴ ＡＴＴ ３’（配列番号４）、ＩＤＴによる合成
・ＲＰ９ＬＬ＝ミトコンドリアリバースプライマー、５’ ＧＴＡ ＧＧＧ ＣＴＡ ＧＧＣ ＣＣＡ ＣＣＧ ３’（配列番号５）、ＩＤＴによる合成
・ＲＰ１１ＬＬ＝Ｉｏｗａ Ｂｌａｃｋ ＦＱクエンチャを含むＪＯＥプローブを含むミトコンドリアプローブ、５’ ＪＯＥ−ＣＴＡ ＧＴＣ ＴＴＴ ＧＣＣ ＧＣＣ ＴＧＣ ＧＡＡ ＧＣＡ−ＩＡＢｋＦＱ−３’（配列番号６）、ＩＤＴによる合成

【0159】

化合物の調製：
化合物のＤＭＳＯ保存溶液の段階希釈は、列２〜１０では、ＤＭＳＯを使用して行う。列１および１１には、ＤＭＳＯしか存在していない。列１２は空のままである。ＤＭＥＭ ５％ＦＢＳ細胞培養培地を用いて、希釈化合物をさらに希釈する。

【0160】

ＡＤ１６９ ｑＰＣＲアッセイ：
このアッセイを行うために、前日にプレート培養したＭＲＣ−５細胞（１ウェルあたり３００００個の細胞）を５０μＬ含有するアッセイプレートプレートに、新しく調製した阻害剤希釈液２５μＬを加える。９点の用量応答において、列１はモック感染細胞を含有しており、適切なＤＭＳＯ濃度を有する陰性対照で働き、列２〜１０は、化合物希釈液を含有しており、列１１は、適切なＤＭＳＯ濃度を有する感染細胞を含有しており、陽性対照として働く。列１２は、ｑＰＣＲ過程における標準曲線用に役立つ。ＤＭＥＭ ５％ＦＢＳ培地中で希釈したウイルス２５μＬ（ＭＯＩ＝０．０５で感染させるため）を列２〜１１に加え、非感染対照（列１）には、最終ＤＭＳＯ濃度０．６％となるよう、Ｄ−ＭＥＭ ５％ＦＢＳ媒体しか加えない。５％ＣＯ₂のインキュベーター中、３７℃で３日間、プレートをインキュベートする。次に、新たに加えたプロテイナーゼＫを含む各ウェルに細胞溶解緩衝液１００μＬを１：５の比（すなわち、プロテイナーゼＫ２００μＬ：細胞溶解緩衝液１０００μＬ）で加え、このアッセイプレートを５６℃で１時間インキュベートすることにより、全細胞溶解物を得る。プレートを１３００ｒｐｍで２分間、遠心分離にかけ、ｑＰＣＲに進む前に、いかなる縮合物も除去する。
細胞溶解物を注意深くピペット操作で上下にして十分に混合し、Ｈ₂Ｏ中で１：４０に希釈し、細胞に添加する溶解緩衝液１００μＬに対して、１：８０の最終希釈液にする。希釈溶解物５μＬをｑＰＣＲ反応に使用する。プロテイナーゼＫを不活性化するために、ＰＣＲ機器中、９５℃で５分間のインキュベートが必要である。細胞溶解物を−２０℃で保管するか、またはｑＰＣＲを直ちに行うために使用することができる。

【0161】

標準曲線の作成：
プライマーｑＨＣＭＶ７およびｑＨＣＭＶ８を使用して、ＡＤ１６９からのＵＳ１７遺伝子の８１ｂｐフラグメントをＰＣＲによって増幅する。ＰＣＲ生成物をｐＣＲ４ ＴＯＰＯベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にクローニングし、挿入を内在しているクローンを選択する。ミトコンドリアＤＮＡも加えて、ＨＣＭＶコピー数を正規化する。加熱不活性化溶解緩衝液中で、細胞溶解物と同じ希釈度（１：８０）にして、ＵＳ１７プラスミドおよびミトコンドリアＤＮＡの段階希釈を行う。通常、１０Ｅ６〜１０Ｅ２コピー（１ウェルあたり）の範囲の標準曲線が適切である。

【0162】

典型的なｑＰＣＲ反応は、以下からなる。
希釈済み全細胞溶解物 ５μＬ
ＴａｑＭａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ ＰＣＲ Ｍａｓｔｅｒ ｍｉｘ １２．５μＬ
１０μＭのｑＨＣＭＶ７およびｑＨＣＭＶ８ ０．５μＬ ｌ
１０μＭのｑＨＣＭＶ９プローブ ０．５μＬ
１０μＭのＲＰ８ＬＬおよびＲＰ９ｌｌ ０．２５μＬ
１０μＭのＲＰ１１ＬＬプローブ ０．２５μＬ
Ｒｏｘリファレンス色素 ０．５μＬ
Ｈ２Ｏ ５．５μＬ
最終容積２５μＬ

【0163】

ｑＰＣＲサイクルは、９５℃、１０分間でのＤＮＡの初期変性およびＴａｑ酵素の活性化、次いで９５℃で１５秒間および６０℃で１分間の４５サイクルからなる。６０℃での伸張ステップ後に、サイクル毎に蛍光を測定する。反応、データ取得、および解析は、ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ７５００リアルタイムＰＣＲシステムまたは他の適切なリアルタイムＰＣＲシステムを使用して実施する。

【0164】

本発明の化合物をすべて、例Ａ、Ｂ、およびＣにおいて記載されているアッセイの少なくとも１つで試験し、ＥＣ₅₀値は、６μＭ以下の範囲にあることを示している。代表的なデータを以下に示す。

【0165】

【表7】

【0166】

化合物の表
以下の表は、本発明の代表的な化合物を列挙している。各化合物の保持時間（ｔ_R）は、例中に記載されている標準的分析用ＨＰＬＣまたはＵＰＬＣ条件を使用して測定する。当業者に周知の通り、保持時間の値は、特定の測定状態に影響を受ける。したがって、溶媒、流速、直線グラジエントなどの同一の条件を使用した場合でさえ、保持時間の値は、例えば、異なるＨＰＬＣまたはＵＰＬＣ機器で測定すると変動することがある。同じ機器で測定した場合でさえも、例えば異なる個々のＨＰＬＣまたはＵＰＬＣカラムを使用して測定した場合、その値は変動することがあり、または同じ機器および同じ個々のカラムで測定した場合でも、その値は、異なる機会に取られた個々の測定間で変動することがある。

【0167】

表１中の化合物はすべて、上に記載されている例と同様にして合成される。この表中の各化合物に関して、例番号によって、各化合物を調製するための同様の合成経路が特定される。適切な修正を含めた同様の合成経路を使用して、本明細書に記載されている本発明の化合物を調製することができることが、当業者には明白であろう。

【0168】

【表8】

【0169】

本出願において列挙されている特許、特許出願、および出版物をすべて含めた、参照文献の各々は、それらの各々が個々に組み込まれているかのごとく、それらの全体が参照により、本明細書に組み込まれている。さらに、本発明の上記の教示において、当業者は、本発明に対してある種の変更または修正を行うことができること、およびこれらの均等物は、依然として、本出願の添付の特許請求の範囲により定義される本発明の範囲内にあることが理解されよう。

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]