特許6502255IP Force 特許公報全文掲載

技術分野

真皮毛根鞘(DS)細胞を培養するための無血清培地であって、血小板由来成長因子(PDGF)を含んで成る、無血清培地、又はPDGFを含んで成る無血清培地を用いた、DS細胞を培養するための方法

発明が解決しようとする課題[発明の詳細な説明]から抜粋

本発明の課題は、DS細胞の培養に適した無血清培地を提供することにある。

課題を解決するための手段[発明の詳細な説明]から抜粋

本発明者は、PDGF、特にPDGF−BBを添加した無血清培地で培養することにより、DS細胞を有意に増殖させることができる、という驚くべき知見を得た。
【発明の効果】
本発明の無血清培地により、再生医療への臨床応用や、創薬・毒性試験などへの応用に適したDS細胞を効率よく培養することができる。

この発明についての権利主張の範囲[特許請求の範囲]

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この特許公報に記載されている図面[図面の簡単な説明]から抜粋

【図1】無血清培地として、1) HFDM-1 (-) 培地、2) HFDM-1 (+) 培地、3) PDGF-AA (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地、及び4) PDGF-BB (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地を用いて培養したヒトDS細胞の2 日目及び10 日目における顕微鏡写真である。

【図2】無血清培地として、1) HFDM-1 (-) 培地、2) HFDM-1 (+) 培地、3) PDGF-AA (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地、及び4) PDGF-BB (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地を用いて培養したヒトDS細胞の細胞数変化 (2, 5, 10日目)を示すグラフである。

【図3】無血清培地として、1) StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、2) PDGF-BB (10 ng/ml)を溶解させた StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、3) Mosaic hMSC SF Culture Medium (sup+, BD)、4)PDGF-BB(10 ng/ml)を溶解させたMosaic hMSC SF Culture Medium (sup+, BD)を用いて培養したヒトDS細胞の2 日目及び7 日目における顕微鏡写真である。

【図4】無血清培地として、1) StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、2) PDGF-BB (10 ng/ml)を溶解させた StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、3) Mosaic hMSC SF Culture Medium (sup+, BD)、4)PDGF-BB(10 ng/ml)を溶解させたMosaic hMSC SF Culture Medium (sup+, BD)を用いて培養したヒトDS細胞の細胞数変化(2, 7日目)を示すグラフである。

【図5】無血清培地として、1) HFDM-1 (-) 培地、2) HFDM-1 (+) 培地、3) PDGF-AA (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地、及び4) PDGF-BB (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地を用いて培養したヒトDS細胞の2 日目及び7 日目における顕微鏡写真である。

【図6】無血清培地として、1) HFDM-1 (-) 培地、2) HFDM-1 (+) 培地、3) PDGF-AA (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地、及び4) PDGF-BB (10 ng/ml) を溶解させた HFDM-1 (-) 培地を用いて培養したヒトDS細胞の細胞数変化 (2, 4, 7日目)を示すグラフである。

【図7】無血清培地として、1) StemProSFM CTS(sup-, Lifetechnologies)、2) PDGF-BB (10 ng/ml)を溶解させた StemProSFM CTS(sup-, Lifetechnologies)、3) StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、4)PDGF-BB(10 ng/ml)を溶解させたStemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)を用いて培養したヒトDS細胞の2 日目及び7 日目における顕微鏡写真である。

【図8】無血清培地として、1) StemProSFM CTS(sup-, Lifetechnologies)、2) PDGF-BB (10 ng/ml)を溶解させた StemProSFM CTS(sup-, Lifetechnologies)、3) StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、4)PDGF-BB(10 ng/ml)を溶解させたStemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)を用いて培養したヒトDS細胞の細胞数変化(2, 4, 7日目)を示すグラフである。

【図9】無血清培地として、1) StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、2)PDGF-BB(10 ng/ml)を溶解させたStemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)を用いて培養したヒト皮膚繊維芽細胞の2 日目及び7 日目における顕微鏡写真である。

【図10】無血清培地として、1) StemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)、2)PDGF-BB(10 ng/ml)を溶解させたStemProSFM CTS(sup+, Lifetechnologies)を用いて培養したヒト皮膚繊維芽細胞の細胞数変化(2, 7日目)を示すグラフである。

選択図 図1出願人が指定した本件の代表的な図

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