特許 6529931 求電子的に活性化されたポリオキサゾリン由来の架橋ポリマーおよびインプラント

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6529931

(24)【登録日】2019年5月24日

(45)【発行日】2019年6月12日

(54)【発明の名称】求電子的に活性化されたポリオキサゾリン由来の架橋ポリマーおよびインプラント

(51)【国際特許分類】

   C08L 79/02 20060101AFI20190531BHJP

   A61L 15/58 20060101ALI20190531BHJP

   A61L 17/00 20060101ALI20190531BHJP

   A61L 24/04 20060101ALI20190531BHJP

   A61L 31/06 20060101ALI20190531BHJP

   C08J 3/24 20060101ALI20190531BHJP

   C08J 5/18 20060101ALI20190531BHJP

   C09J 179/02 20060101ALI20190531BHJP

【ＦＩ】

   C08L79/02ZBP

   A61L15/58 310

   A61L17/00

   A61L24/04 200

   A61L31/06

   C08J3/24 Z

   C08J5/18CEZ

   C09J179/02

【請求項の数】11

【外国語出願】

【全頁数】31

(21)【出願番号】特願2016-123770(P2016-123770)

(22)【出願日】2016年6月22日

(62)【分割の表示】特願2013-548377(P2013-548377)の分割

【原出願日】2012年1月2日

(65)【公開番号】特開2017-8315(P2017-8315A)

(43)【公開日】2017年1月12日

【審査請求日】2016年7月22日

【審判番号】不服2017-17412(P2017-17412/J1)

【審判請求日】2017年11月24日

(31)【優先権主張番号】11150099.7

(32)【優先日】2011年1月4日

(33)【優先権主張国】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】518046565

【氏名又は名称】ガット・テクノロジーズ・ビー．ブイ．

【氏名又は名称原語表記】ＧＡＴＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ Ｂ．Ｖ．

(74)【代理人】

【識別番号】100108855

【弁理士】

【氏名又は名称】蔵田 昌俊

(74)【代理人】

【識別番号】100103034

【弁理士】

【氏名又は名称】野河 信久

(74)【代理人】

【識別番号】100153051

【弁理士】

【氏名又は名称】河野 直樹

(74)【代理人】

【識別番号】100179062

【弁理士】

【氏名又は名称】井上 正

(74)【代理人】

【識別番号】100189913

【弁理士】

【氏名又は名称】鵜飼 健

(74)【代理人】

【識別番号】100199565

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 茂

(72)【発明者】

【氏名】リチャルド・ホーゲンボーム

(72)【発明者】

【氏名】ヨハネス・カスパー・マティアス・エリザベス・ベンデル

(72)【発明者】

【氏名】ヤン・コルネリス・マリア・ファン・へスト

【合議体】

【審判長】 大熊 幸治

【審判官】 近野 光知

【審判官】 橋本 栄和

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００９／０８９５４２（ＷＯ，Ａ２）

【文献】 国際公開第２００９／１０８９１０（ＷＯ，Ａ２）

【文献】 特表２００３−５０２４８８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許第５６３５５７１（ＵＳ，Ａ）

【文献】 特許第５９６０１６５（ＪＰ，Ｂ２）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０８Ｌ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｌ

ＣＡＰｌｕｓ／ＲＥＧ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ｍ個の求電子基を含む求電子的に活性化されたポリオキサゾリン（ＥＬ−ＰＯＸ）、およびｎ個の求核基を含む求核架橋剤を含む生体適合性の架橋ポリマーの製造用キットであって、
前記求電子基は前記求核基と反応して共有結合を介した架橋を形成することが可能で；
ｍ≧２、ｎ≧２およびｍ＋ｎ≧５であり；
前記ｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基であり、および／またはｍ≧３である、キット。

【請求項2】

前記ＥＬ−ＰＯＸおよび前記求核架橋剤の別々に収納された容量体を含み、前記ＥＬ−ＰＯＸは１〜９５重量％の濃度で第１の溶媒に含まれており、前記求核架橋剤は１〜９５重量％の濃度で第２の溶媒に含まれており、前記第１および前記第２の溶媒は５〜５０重量％の水を含む、請求項１に記載のキット。

【請求項3】

別々に収納された前記容量体は、両方の容量体を同時に分注できる分注手段内に収容されている、請求項２に記載のキット。

【請求項4】

前記ＥＬ−ＰＯＸを含有する生体適合性のフィルムおよび前記求核架橋剤を含有する生体適合性のフィルムを含む、請求項１に記載のキット。

【請求項5】

０．０１〜１０００μｍの重量平均直径を有する粒子を含み、前記粒子はＥＬ−ＰＯＸを含有する粒子および前記求核架橋剤を含有する粒子を含む、請求項１に記載のキット。

【請求項6】

求電子的に活性化されたポリオキサゾリン（ＥＬ−ＰＯＸ）の乾燥物を少なくとも１重量％含み、接着性組織テープ、組織封止剤、止血多孔質材およびインプラントからなる群から選択される組織接着性の医療製品であって、前記ＥＬ−ＰＯＸは、少なくとも１個のペンダント反応性求電子基を含む少なくとも２個の反応性求電子基を含み、前記反応性求電子基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド、エテンスルホニル、イミドエステル、アセトアセテート、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ビニルアクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミドおよびそれらの組み合わせから選択される、組織接着性の医療製品。

【請求項7】

組織接着性の医療製品に含有されるＥＬ−ＰＯＸは架橋していない、請求項６に記載の組織接着性の医療製品。

【請求項8】

組織接着性の医療製品が求核架橋剤を含まない、請求項６または７に記載の組織接着性の医療製品。

【請求項9】

ＥＬ−ＰＯＸは別の未反応のフィルム形成ポリマーのマトリックス中に組み込まれている、請求項６〜８のいずれか１項に記載の組織接着性の医療製品。

【請求項10】

乾燥物の１０〜９５重量％のＥＬ−ＰＯＸと、乾燥物の５〜９０％の別の未反応のフィルム形成ポリマーを含む、請求項９に記載の組織接着性の医療製品。

【請求項11】

組織封止剤である、請求項６〜１０のいずれか１項に記載の組織接着性の医療製品。

【発明の詳細な説明】

【発明の概要】

【0001】

[発明の分野]
本発明は、求電子的に活性化されたポリオキサゾリン（ＥＬ−ＰＯＸ）と架橋剤との反応により得られる、生体適合性の共有結合架橋ポリマーに関する。

【0002】

本発明はさらに、このような架橋ＰＯＸ−ポリマーを含む生体適合性の医療製品に関する。このような医療製品の例として医療用インプラントが挙げられ、医療用インプラントとして骨インプラント、軟組織インプラント、接着性インプラント、被覆インプラント（coating on implant）、縫合糸、接着性組織封止剤および接着性組織テープが挙げられる。

【0003】

また、生体適合性の架橋ＰＯＸ−ポリマーの製造用キットが提供される。

【0004】

本発明はさらに、組織の成分と反応可能な反応基を含む求電子的に活性化されたＰＯＸの乾燥物を少なくとも１重量％含む組織接着性の医療製品を提供する。

【0005】

[発明の背景]
組織接着剤は、創傷閉鎖、外科手術における縫合糸またはステープルの補助または置きかえ、合成オンレイまたはインレイの角膜への接着、薬物送達デバイスおよび例えば手術後の癒着を防ぐ癒着防止剤としてなどの多くの潜在的な医療用途を有している。

【0006】

従来の組織接着剤として、フィブリン封止剤、シアノアクリレート系封止剤および他の合成封止剤ならびに重合性マクロマ−が挙げられる。これら従来の封止剤の一部は、接着用途の特定の範囲に適しているのみである。例えば、シアノアクリレート系接着剤は局部的な創傷閉鎖に用いられているが、有毒な分解生成物の放出によりシアノアクリレート系接着剤を体内に用いることは制限されている。フィブリン系接着剤は高価であり、多くの場合に冷蔵貯蔵を必要とし、緩やかに硬化し、機械的強度に限界があり、およびウイルス感染の危険性がある。

【0007】

特定の用途、例えば眼への用途、例えば外傷（例えば角膜の裂傷）または外科手術（例えば硝子体茎切除、腹部ヘルニア、白内障の手術、ＬＡＳＩＫ手術、緑内障の手術および角膜の移植）によって生じる創傷の密閉；神経外科の用途、例えば硬膜の密閉；瘻孔または斑点を密閉する閉塞のために、緩やかに分解する組織接着剤が必要とされている。

【0008】

この１０年間に、数種類の（半）合成のヒドロゲル組織接着剤が開発されており、これらでは接着性が改良されており、これらは無毒である。これらのヒドロゲル組織接着剤の大部分、例えばＤｕｒａＳｅａｌ（登録商標）は、例えばＰＥＧ−スクシンイミジルグルタレートなどのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）でエンドキャップされたｍＰＥＧ−ＮＨＳ前駆体によるポリマー修飾治療（polymer-modified therapeutic）で用いられるＰＥＧ化と呼ばれる処理に化学的に基づいている。ＰＥＧ化に基づくこれらのヒドロゲル組織接着剤は通常、急速に膨潤するか、もしくは溶解して除去され、または凝集力（相互接続の機械的強度）が不十分であり、その結果、ヒドロゲル組織接着剤の外科用接着剤としての有効性が低下する。さらに、これらのヒドロゲル組織接着剤を塗布するためにデュアルシリンジ噴霧技術が必要とされることがあり、この技術は凍結乾燥した出発材料から多量の試料を生成することを必要とする。最後に、このようなＰＥＧ系材料の性質は容易に制御することができず、ＮＨＳ基の数は鎖末端の数に制限されており、鎖末端は鎖末端当たり多数のＮＨＳ基を含む場合があり、その結果、規則正しく分散した基よりも高密度のＮＨＳ基となる。

【0009】

ＷＯ０２／０６２２７６には星形状のＰＥＧ−スクシンイミジルグルタレート前駆体を含むヒドロゲル組織封止剤が記載されており、ＰＥＧ−スクシンイミジルグルタレート前駆体はまた、星型ＰＥＧ−ＮＨＳ、星型ＰＥＧ−ＮＳ、星型ＳＧ−ＰＥＧまたは星型ＰＥＧ−ＳＧとして周知であり、トリリシン前駆体と反応する。星型ＳＧ−ＰＥＧ前駆体がｐＨ４のリン酸塩中で再構成されていてもよいし、トリリシン前駆体がｐＨ８のホウ酸塩緩衝液中で再構築されていてもよい。混合中、トリリシン前駆体のアミンと、星型ＳＧ−ＰＥＧ前駆体のＮＨＳ活性化末端カルボキシレート基との間に共有アミド結合が形成される。

【0010】

ＵＳ２００３／０１１９９８５およびＵＳ２００５／０００２８９３には、同じ星型ＰＥＧ−ＮＨＳ／トリリシンの原理に基づく組織封止剤が記載されている。この組織封止剤において、ヒドロゲルは、求核基を有する成分と求電子基を有する成分とが反応して共有結合を介して架橋ネットワークが形成されることにより生成されている。

【0011】

ＷＯ２０１０／０４３９７９には多孔質層を含むインプラントが開示されており、この多孔質層は、第１の副層と第２の副層と第１の別の層とを含む。第１の副層は第１のヒドロゲル前駆体を含み、第２の副層にはヒドロゲル前駆体が存在せず、第１の別の層は第２のヒドロゲル前駆体を含む無孔層である。第１のヒドロゲル前駆体は求核官能基を有しており、第２のヒドロゲル前駆体は求電子官能基を有している。

【0012】

ＷＯ０２／１０２８６４には、架橋可能な組成物が記載されている。架橋可能な組成物は、
ａ）ｍ個の求核基を有する第１の架橋可能な成分Ａであってｍ＞２である成分Ａ、
ｂ）ｎ個の求電子基を有する第２の架橋可能な成分Ｂであって、求電子基はｍ個の求核基と反応して共有結合を形成可能であり、ｎ＞２であるとともにｍ＋ｎ＞４である成分Ｂ、ならびに
ｃ）少なくとも１個の官能基を有する第３の架橋可能な成分Ｃであって、官能基は、（ｉ）成分Ｂの求電子基と反応可能な求核基および（ｉｉ）成分Ａの求核基と反応可能な求電子基から選択され、成分Ｃの官能基の全数がｐで示され、ｍ＋ｎ＋ｐ＞５となる成分Ｃから成る。成分Ａ、ＢおよびＣの少なくとも一つは親水性ポリマーから成り、組成物の架橋は生体適合性で非免疫原性の架橋マトリックスを生じる。親水性ポリマーの例として、ポリオキサゾリンが言及されている。

【0013】

ＷＯ２００６／０７８２８２には、ｍ個の求核基で置換されたコアを有する第１の成分であってｍ＞２である第１の成分、およびｎ個の求電子基で置換されたコアを有する第２の成分であってｎ＞２であるとともにｍ＋ｎ＞４である第２の成分から成る乾燥粉末組成物が記載されている。乾燥粉末組成物において、求核基および求電子基は乾燥環境下では無反応性であるが、水環境に曝されると反応性となり、水環境中において各成分が相互に反応して３次元の構成物を形成するようになる。第１または第２の成分のコアは親水性ポリマーであり得る。ＷＯ２００６／０７８２８２には異なる親水性ポリマーの範囲が言及されており、異なる親水性ポリマーとしてポリオキサゾリンが挙げられる。

【0014】

ＷＯ２０１０／０３３２０７には、直接に、または１つ以上の原子のスペーサ部分を介してのいずれかで水溶性の非ペプチドポリマーと共有結合的に結合している治療用ペプチド部分の残基を含むコンジュゲートが記載されている。ポリオキサゾリンが水溶性ポリマーの一例として言及されている。

【0015】

ＷＯ２００９／０４３０２７には、ポリオキサゾリンの分枝した単官能型、およびこのようなポリオキサゾリン誘導体と薬物とのコンジュゲートが記載されている。例１８には、ビス−アミンと構造−［Ｎ（ＣＯＣＨ₂ＣＨ₃）ＣＨ₂ＣＨ₂］_n−を有する繰り返し単位を含むポリオキサゾリンとのカップリングが記載されている。この結合において、末端の窒素はメチルに結合しており、他の末端は以下の求電子残基−ＯＣＯ₂−ＮＨＳを有している。

【0016】

ＵＳ５，６３５，５７１には、末端ＮＨ₂またはＯＨ基とペンダントエステル基とを含むポリオキサゾリンが記載されている。ペンダントエステル基と鎖末端ＮＨ₂との間のアミド化、またはペンダントエステル基と鎖末端ＯＨ基との間のエステル交換により、多分枝ポリマーが生成されている。

【0017】

Ｃｈｕｊｏ他（Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｇｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｏｘａｚｏｌｉｎｅ ｂｙ Ｍｅａｎｓ ｏｆ Ｄｉｅｌｓ−Ａｌｄｅｒ Ｒｅａｃｔｉｏｎ， Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ， １９９０（２３）， ２６３６−２６４１）には、フラン修飾ポリ（Ｎ−アセチルエチレンイミン）（ＰＡＥＩ）とマレイミド修飾ＰＡＥＩとの間の分子間ディールス−アルダー反応によるポリオキサゾリンヒドロゲルの生成が記載されている。フラン修飾ＰＡＥＩおよびマレイミド修飾ＰＡＥＩは、ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下で、それぞれフランまたはマレイミドカルボン酸との反応により部分的に加水分解されたＰＡＥＩから合成された。

【0018】

Ｌｕｘｅｎｈｏｆｅｒ （Ｔｈｅｓｉｓ： Ｎｏｖｅｌ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｐｏｌｙ（２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）ｓ ａｓ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｆｏｒ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ， Ｔｅｃｈｎｉｓｃｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔ（ａｅ）ｔ Ｍ（ｕe）ｎｃｈｅｎ （２００７））にはポリ（２−オキサゾリン）ヒドロゲルが記載されている。これらのヒドロゲルは、アルデヒド側鎖を含むポリ（２−メチル−２−オキサゾリン）とヒドラジンまたはアミン側鎖を含むポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）との架橋により調製されている。４〜９の範囲内のｐＨを有する水性緩衝液中でのゲル化および膨潤が評価された。

【0019】

インプラントまたは組織封止剤の用途を有するポリマーの範囲を広げること、特にＰＥＧ系ポリマーが有していない性質を有しつつ同様に生体適合性であるポリマーを提供することは興味あることである。

【0020】

[発明の概要]
本発明者らは、優れた移植および／または封止特性を有するポリマーが、少なくとも２個の求電子基を含む求電子的に活性化されたポリオキサゾリン（ＥＬ−ＰＯＸ）と２個以上の求核基を含む架橋剤とを反応させることにより得ることができることを発見した。架橋ポリマーに用いられるＥＬ−ＰＯＸは少なくとも１個のペンダント求電子基を含む、または含まない場合には少なくとも３個の末端求電子基を含む。

【0021】

本発明の一態様によれば、架橋ポリマーは組織接着性を有しており、組織接着性は未反応の求電子基をポリマーが含むという事実に起因しており、未反応の求電子基は組織内に自然に存在している求核種含有成分と反応することができる。したがって、本発明は、ＥＬ−ＰＯＸと求核架橋剤との反応により得られる、組織接着性で生体適合性の共有結合架橋ポリマーを提供し、前記ＥＬ−ＰＯＸはｍ個の求電子基を含み；および前記求核架橋剤はｎ個の求核基を含み、ｍ個の求電子基はｎ個の求核基と反応して共有結合を形成することができ；ｍ≧２、ｎ≧２およびｍ＋ｎ≧５であり；ｍ個の求電子基の少なくとも１個がペンダント求電子基であり、および／またはｍ≧３であり；ならびにＥＬ−ＰＯＸは求核架橋剤に含まれる求核基の量と比較して過剰量の求電子基を含む。

【0022】

本発明の架橋ポリマーは多くの有益な性質を備えている：
・架橋ポリマーの接着性および機械的性質は、アルキル側鎖および／または末端基の官能化の程度および種類、ならびにポリマー鎖の長さを制御することにより効率的に操作可能である。カチオン性の２−アルキル−２−オキサゾリン重合を適宜用いてＰＯＸポリマーのアルキル側鎖中に多数の活性基を組み込むことができる；
・架橋ポリマーの凝集性は、ポリマー中の架橋の数／密度により主に決定される。ポリマー中の架橋の数は、ＰＯＸのアルキル側鎖中に活性基を様々な量で組み込むことにより広範囲に変更可能である；
・架橋ポリマーの膨潤指数は、ＰＯＸ中の架橋の数およびアルキル側鎖の鎖長を操作することより制御可能である；
・架橋ポリマーで作製したインプラントは、局所的な薬物送達用の理想的な薬物デポ（drug depot）である。薬物、例えば抗生物質、ＶＥＧＦなどの成長因子、および骨形成因子（ＢＭＰ−２）の放出は相互接続ネットワークからの緩慢な拡散により維持されていてもよく、相互接続ネットワークは該ネットワーク内のアルキル側鎖の種類および架橋の密度に依存している；
・架橋ポリマーの生分解性は、加水分解性基、例えばエステルまたはカーボネートのコポリマー中への組み込みにより効率的に制御可能である。さらに、内部の架橋の数の影響を受ける。したがって、用途に合わせてポリマーの生分解性を微調整することができる；
・薬物送達の研究におけるエンドキャップＰＯＸ−ＮＨＳに基づいて、ＰＯＸはＰＥＧと同様の、またはより良好なステルス性および防汚挙動（antifouling behaviour）を有しているように見える。腎クリアランスのために、ＰＯＸは３０，０００以下の分子量を有しているべきである。

【0023】

本発明の別の側面は生体適合性の架橋ポリマーの製造用キットに関し、前記キットは本明細書で前述したＥＬ−ＰＯＸおよび求核架橋剤を含み、ｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基である。このキットは、骨の代用材料、癒着防止インプラント（フィルム）、接着性インプラント（例えば動脈の穿刺部位を閉じるための、塞栓形成のための、また尿失禁を治療するための組織封止剤）を送達するために適宜用いられていてもよい。

【0024】

ＥＬ−ＰＯＸおよび架橋剤が結合する際に架橋が生じる頻度は、不活性ではない液体、例えば水（ｐＨ）、アルコールおよび／またはポリオールを加えることにより効率的に制御可能である。

【0025】

本発明はまた、本発明の組織接着性の架橋ポリマーの乾燥物を少なくとも１重量％含む生体適合性の医療製品を提供する。このような生体適合性の医療製品の例として、インプラント、組織封止剤、接着性組織テープ、縫合材、ポリマー被覆ステントおよび止血材が挙げられる。

【0026】

本発明はさらに、ＥＬ−ＰＯＸの乾燥物を少なくとも１０重量％含む組織接着性の医療製品であって、前記ＥＬ−ＰＯＸは少なくとも１個のペンダント求電子基を含む少なくとも２個の求電子基を含む。前記反応基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト（イソチオシアナト）、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド、エテンスルホニル、イミドエステル、アセトアセテート、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニルアクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミドおよびそれらの組み合わせから選択される、組織接着性の医療製品を提供する。前述した反応基は組織内に自然に存在している求核種含有成分と反応することができ、それによってＥＬ−ＰＯＸを含む医療製品に組織接着性が付与される。

【0027】

本発明の組織接着性の医療製品は下記の利点を示す：
・ＥＬ−ＰＯＸの親水性／疎水性のバランスに起因して、ＥＬ−ＰＯＸは有機液体、例えばエタノールおよびジクロロメタンならびに水に溶解する。

【0028】

・ＥＬ−ＰＯＸは、例えばポリエチレングリコールと比較して著しく高いガラス転移温度を示す優れた非晶質性を有している。

【0029】

・ＥＬ−ＰＯＸはフィルム形成能を有しており、限られた量の可塑剤で容易に可塑化する。求電子的に活性化されたＰＥＧに対するＥＬ−ＰＯＸの利点は、特定の用途のためにポリマー性質を調整すべく、異なるとともに官能化された複数の基を鎖の途中に組み込む可能性があることである；
・ＰＯＸは、インプラントが水または体液に曝されていない場合には、インプラント中のＮＨＳ基のための保護環境を備えている。

【0030】

[発明の詳細な説明]
したがって、本発明の一側面は、求電子的に活性化されたポリオキサゾリン（ＥＬ−ＰＯＸ）と求核架橋剤との反応により得られる、組織接着性で生体適合性の共有結合架橋ポリマーに関する。前記ＥＬ−ＰＯＸはｍ個の求電子基を含み；および前記求核架橋剤はｎ個の求核基を含み、ｍ個の求電子基はｎ個の求核基と反応して共有結合を形成することができ；ｍ≧２、ｎ≧２およびｍ＋ｎ≧５であり；ｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基であり、および／またはｍ≧３であり；ＥＬ−ＰＯＸは求核架橋剤に含まれる求核基の量と比較して過剰量の求電子基を含む。

【0031】

本明細書で用いられる用語「ポリオキサゾリン」はポリ（Ｎ−アシルアルキレンイミン）またはポリ（アロイルアルキレンイミン）を示しており、さらにＰＯＸと称される。ＰＯＸの例としてポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）が挙げられる。用語「ポリオキサゾリン」はまた、ＰＯＸコポリマーを含む。

【0032】

術語「ペンダント求電子基」は、ＰＯＸポリマー鎖の末端に位置する求電子鎖とは対照的に、ＰＯＸポリマーの側鎖、例えばアルキルまたはアリール側鎖中に含まれる求電子基を示す。特定の側鎖中の各求電子基をペンダント求電子基とみなす場合には、ＰＯＸポリマーの特定の側鎖は１個以上の求電子基を適宜含んでいてもよいことを理解すべきである。

【0033】

本明細書で用いられる用語「アミン基」は第１級または第２級アミン基を示す。

【0034】

本発明の架橋ポリマーが、モノマー１００個当たりに特定の基または結合が特定の数で存在することに基づいて特徴付けられているときは常に、このことはポリマーが少なくとも１００個のモノマーを含むことを意味していないことを理解すべきである。例えば、８０個のモノマーおよび８個のペンダント基を含む架橋ポリマーは、モノマー１００個当たり１０個のペンダント基を含む。同様に、ポリマーが８０個のモノマーを含み、このポリマーが例えばモノマー１００個当たり少なくともｘ個のペンダント基を含むと規定されている場合、この基準は、この特定のポリマーが平均して少なくとも０．８ｘ個のペンダント基を含む場合に満たされる。

【0035】

好ましくは、本発明のＥＬ−ＰＯＸはポリオキサゾリンポリマーの求電子的に活性化された型であり、その繰り返し単位は下記式（Ｉ）で示される：
（ＣＨＲ¹）_mＮＣＯＲ²Ｒ²および各Ｒ¹は独立して、Ｈ、置換されていてもよいＣ_1~22アルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよいアラルキル、置換されていてもよいアリールから選択され、ｍは２または３である。本発明はまた、ポリオキサゾリンコポリマーの使用を含み、ポリオキサゾリンコポリマーは２個以上の異なる繰り返し単位を含み、繰り返し単位は式（Ｉ）で示される。

【0036】

好ましくは、式（Ｉ）中のＲ¹およびＲ²は、ＨおよびＣ_1~22アルキルから選択され、さらに好ましくはＨおよびＣ_1~4アルキルから選択される。Ｒ₁は最も好ましくはＨである。式（Ｉ）中の整数ｍは、好ましくは２と等しい。

【0037】

好ましい態様によれば、本発明に従って用いられるポリオキサゾリンはポリマーであり、さらに好ましくは２−アルキル−２−オキサゾリンのホモポリマーである。前記２−アルキル−２−オキサゾリンは２−メチル−２−オキサゾリン、２−エチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリン、２−ブチル−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、ポリオキサゾリンは２−エチル−オキサゾリンのホモポリマーである。

【0038】

好ましくは、本発明の架橋ポリマーで用いられる求電子的活性ＰＯＸ（ＥＬ−ＰＯＸ）および架橋剤は同一ではない。

【0039】

求核架橋剤のｎ個の求核基は、好ましくはアミン基、チオール基およびそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、これらの求核基はアミン基である。

【0040】

ＥＬ−ＰＯＸは、その側鎖中で、その末端で（但し、ＥＬ−ＰＯＸは少なくとも３個の末端エレクロフィリック（elecrophilic）基を含む）、または両方で活性化可能である。末端エンドキャップされたＥＬ−ＰＯＸの例として、スクシンイミジルスクシネートエステル、例えばＣＨ₃Ｏ−ＰＯＸ−Ｏ₂Ｃ−ＣＨ₂−Ｃ（ＣＨ₂ＣＯ₂−ＮＨＳ）₃が挙げられる。側鎖活性化ＥＬ−ＰＯＸの例として、アルキル側鎖中にＮＨＳ基を含むＰＯＸが挙げられる。ＥＬ−ＰＯＸのさらに別の例として、ＮＨＳ−エステルにより末端が官能化された星状ポリマーが挙げられる。

【0041】

ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、好ましくは周囲および／または生理的条件で好ましくはアミン基またはチオール基に対する反応性が高い。したがってＵＳ５，６３５，５７１とは異なり、求電子基は、好ましくは下記式−（ＣＯ）Ｒ（ＣＯ）ＯＲ²を有するペンダントエステル基ではなく、ここでＲは２〜１８個の炭素原子を含むフェニレンまたはアルキレンであり、Ｒ²はＣ_1~4アルキルである。

【0042】

ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、好ましくはカルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト（イソチオシアナト）、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド（マレイミジル）、エテンスルホニル、イミドエステル、アセトアセテート、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、ビニル、アクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミドおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0043】

より好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、カルボン酸エステル、酸塩化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド、エテンスルホニルおよびそれらの組み合わせから選択される。さらに好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、スクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルエステル、マレイミドおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0044】

最も好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、イソシアナト、チオイソシアナト、スクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルエステル、マレイミドおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0045】

求電子基として使用可能なスルホン酸エステルの例として、メシレート、トシレート、ノシレート、トリフレートおよびそれらの組み合わせが挙げられる。使用可能なオレフィンの例として、アクリレート、メタクリレート、エチルアクリレートおよびそれらの組み合わせが挙げられる。活性化ヒドロキシル基の例として、ｐ−ニトロフェニルクロロカーボネート、カルボニルジイミダゾール（例えば１，１−カルボニルジイミダゾール）およびスルホニルクロリドから選択される活性化剤で活性化されているヒドロキシル基が挙げられる。

【0046】

一つの好ましい態様によれば、求核架橋剤の求核基はアミン基であり、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、イミドエステル、ジヒドロキシ−フェニル誘導体およびそれらの組み合わせから選択される。

【0047】

用いられていてもよいスクシンイミジル誘導体の例として、スクシンイミジルグルタレート、スクシンイミジルプロピオネート、スクシンイミジルスクシンアミド、スクシンイミジルカーボネート、ジスクシンイミジルスベレート、ビス（スルホスクシンイミジル）スベレート、ジチオビス（スクシンイミジルプロピオネート）、ビス（２−スクシンイミドオキシカルボニルオキシ）エチルスルホンおよび３，３’−ジチオビス（スルホスクシンイミジル−プロピオネート）が挙げられる。使用可能なスルホスクシンイミジル誘導体の例として、スルホスクシンイミジル（４−ヨードアセチル）アミノベンゾエート、ビス（スルホスクシンイミジル）スベレート、スルホスクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）−シクロヘキサン−１−カルボキシレート、ジチオビス−スルホスクシンイミジルプロピオネート、ジスルホ−スクシンイミジルタルタレート、ビス［２−（スルホ−スクシンイミジルオキシカルボニルオキシエチルスルホン）］、エチレングリコールビス（スルホスクシンイミシルスクシネート）、ジチオビス−（スクシンイミジルプロピオネート）が挙げられる。ジヒドロキシフェニル誘導体の例として、ジヒドロキシフェニルアラニン、３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）、ドーパミン、３，４−ジヒドロキシヒドロケイ皮酸（dihydroxyhydroccinamic acid）（ＤＯＨＡ）、ノルエピネフリン、エピネフリンおよびカテコールが挙げられる。

【0048】

さらに好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、アルデヒド、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、イミドエステル、ジヒドロキシフェニル誘導体およびそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、求電子基はＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、アルデヒド、ジヒドロキシフェニル誘導体およびそれらの組み合わせの群から選択される。

【0049】

別の好ましい態様によれば、求核架橋剤の求核基はチオール基であり、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基は、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、マレイミド、ビニルスルホン、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニル、アクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミド、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネートおよびそれらの組み合わせから選択される。より好ましくは、求電子基は、スクシンイミジルエステル、ハロアセタール、マレイミド、またはジヒドロキシフェニル誘導体およびそれらの組み合わせから選択される。最も好ましくは、求電子基は、マレイミドまたはジヒドロキシフェニル誘導体およびそれらの組み合わせから選択される。

【0050】

本発明の利点は、ＥＬ−ＰＯＸに含まれる求電子基の数ｍが少なくとも１３である場合に特に認識される。

【0051】

本発明に係るＥＬ−ＰＯＸは、有利には２−ＮＨＳ−官能性−２−オキサゾリンおよび２−アルキル−２−オキサゾリンのコポリマーに由来する。コポリマーに含まれる２−ＮＨＳ−官能性−２−オキサゾリンは、好ましくはメルカプトアルカノエートＮＨＳ−エステル官能化２−アルケニル−２−オキサゾリンまたは２−ＮＨＳ−アルカノエート−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。さらに好ましくは、２−ＮＨＳ−官能性−２−オキサゾリンは、メルカプト酢酸ＮＨＳ−エステル官能化２−ブテニル−２−オキサゾリン、２−ＮＨＳプロピオネート−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0052】

ＮＨＳ−エステルはポリマーの合成中に用いられるモノマーに既に含まれていてもよいし、または官能性コモノマーへのカップリングもしくはＰＯＸの部分的加水分解、続いて生じるポリマー鎖中の第２級アミン基のアルキル化もしくはアミド化により後に導入されていてもよい。２−アルキル−２−オキサゾリンは、好ましくは２−エチル−２−オキサゾリン、２−メチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。通常、ＥＬ−ＰＯＸは２−ＮＨＳ−官能性−２−オキサゾリンおよび２−アルキル−２−オキサゾリンを１：３３〜１：２、より好ましくは１：２０〜１：５の範囲内であるモル比で含む。

【0053】

別の望ましい態様によれば、本発明に係るＥＬ−ＰＯＸは２−アルキル−２−オキサゾリンおよび２−マレイミド−官能化−２−オキサゾリンのコポリマーである。後者のマレイミド単位を、アミンもしくは酸側鎖官能基または部分的加水分解で生じる主鎖の第２級アミンの後修飾で導入することができる。

【0054】

本発明のＥＬ−ＰＯＸは、有利には１個以上のペンダント求電子基を含む。通常、ＥＬ−ＰＯＸはモノマー１００個当たり３〜５０個のペンダント求電子基、より好ましくはモノマー１００個当たり４〜３５個のペンダント求電子基、さらに好ましくはモノマー１００個当たり少なくとも５〜２０個のペンダント求電子基を含む。

【0055】

本明細書において既に説明したように、１個以上の求電子基がＥＬ−ＰＯＸの側鎖に含まれていてもよい。しかしながら、好ましくはＥＬ−ＰＯＸの各ペンダント求電子基は異なる側鎖に位置している。

【0056】

本発明に従って用いられるＥＬ−ＰＯＸは通常、１，０００〜１００，０００ｇ／モル、より好ましくは５，０００〜５０，０００および最も好ましくは１０，０００〜３０，０００ｇ／モルの範囲内の分子量を有している。

【0057】

特に好ましい態様によれば、求核架橋剤に含まれるｎ個の求核基は第１級アミン基である。

【0058】

本発明の一つの態様において、架橋ポリマーに用いられる求核架橋剤は、１，０００ｇ／モル未満、より好ましくは７００ｇ／モル未満および最も好ましくは４００ｇ／モル未満の分子量を有する低分子量ポリアミンである。さらに好ましくは、求核架橋剤は、ジリシン；トリリシン；テトラリシン；ペンタリシン；ジシステイン；トリシステイン；テトラシステイン；ペンタシステイン；リシン、オルニチン、システイン、アルギニンおよびそれらの組み合わせから選択される２個以上のアミノ酸残基と他のアミノ酸残基とを含むオリゴペプチド；スペルミン；トリス（アミノメチル）アミン；アルギニンならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される。

【0059】

本発明の別の態様によれば、架橋ポリマーに用いられる求核架橋剤は、少なくとも２個のアミン基を含む求核的に活性化されたＰＯＸ（ＮＵ−ＰＯＸ）；キトサン；キトサン誘導体（例えばＷＯ２００９／０２８９６５に記載のジカルボキシ−誘導体化キトサンポリマー）、ポリエチレンイミン；ポリビニルアミン；ポリアリルアミン；アミン官能化ポリ（メタ）アクリレート；アミン官能化部分を含む多糖、例えばポリ（ガラクトサミン）；スチレン（styrenics）；リシン、オルニチン、システイン、アルギニンおよびそれらの組み合わせから選択される２個以上のアミノ酸残基と他のアミノ酸残基とを含むポリペプチド；ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される高分子量ポリアミンである。天然源または組み替え体由来のアルブミンは、ポリペプチドとして適宜用いられていてもよいポリペプチドの例である。アミン官能化ポリエチレングリコールは、求核架橋剤として適宜用いることができる高分子量ポリアミンの別の例である。

【0060】

高分子量架橋剤は通常、少なくとも２，０００ｇ／モル、さらに好ましくは少なくとも１０，０００ｇ／モルの分子量を有している。

【0061】

好ましくは、求核架橋剤は、（ＷＯ２０１０／０３３２０７に記載されたコンジュゲートとは対照的に）５個を超える、より好ましくは２個を超えるアミノ酸残基を含む薬学的活性ペプチドではない。最も好ましくは、架橋剤は薬学的活性ペプチドではない。ここで用語「薬学的活性ペプチド」は、科学的に証明されているペプチドの薬学的活性を意味している。

【0062】

特に好ましい態様によれば、高分子量ポリアミンは少なくとも２個のアミン基を含むＮＵ−ＰＯＸである。さらに好ましくは、高分子ポリアミンは、システアミン修飾２−アルケニル−２−オキサゾリンまたは２−ｔ−ＢＯＣ−アミノアルキル−２−オキサゾリンと２−アルキル−２−オキサゾリンとのホモポリマーまたはコポリマーから得られる。コポリマーに含まれる、システアミン修飾２−アルケニル−２−オキサゾリンは、好ましくは２−ブテニル−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。２−アルキル−２−オキサゾリンは、好ましくは２−エチル−２−オキサゾリン、２−メチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。アミン部分はまた、ＰＯＸの部分的な加水分解、続いて生じるポリマー鎖中の第２級アミン基のアルキル化またはアミド化により導入可能である。通常、ＮＵ−ＰＯＸはシステアミン修飾２−アルケニル−２−オキサゾリンおよび２−アルキル−２−オキサゾリンを１：３３〜１：２、より好ましくは１：２０〜１：５の範囲内であるモル比で含む。

【0063】

別の好ましい態様によれば、求核架橋剤に含まれるｎ個の求核基はチオール（スルホヒドリル）基である。

【0064】

本発明の一つの態様において、架橋ポリマーで用いられる求核架橋剤は、２個以上のチオール基を含む低分子量ポリチオールであり、低分子量ポリチオールは１，０００ｇ／モル未満、より好ましくは７００ｇ／モル未満および最も好ましくは４００ｇ／モル未満の分子量を有している。さらに好ましくは、求核架橋剤は、トリメルカプトプロパン、エタンジチオール、プロパンジチオール、２−メルカプトエチルエーテル、２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール、テトラ（エチレングリコール）ジチオール、ペンタ（エチレングリコール）ジチオール、ヘキサエチレングリコールジチオール；チオール修飾ペンタエリトリトール、ジペンタエリトリトール、トリメチロールプロパンまたはジトリメチロールプロパン；少なくとも２個のシステイン単位を含むオリゴペプチドの群から選択される。

【0065】

本発明の別の態様によれば、架橋ポリマーに用いられる求核架橋剤は高分子量ポリチオールであり、高分子量ポリチオールは少なくとも２個のチオール基を含むＮＵ−ＰＯＸ；チオール−官能化ポリ（メタ）アクリレート；チオール−官能性部分を含む多糖；スチレン；２個以上のチオール基を含むポリペプチドの群から選択される。

【0066】

特に好ましい態様によれば、高分子量ポリチオールは、少なくとも２個のチオール基を含むＮＵ−ＰＯＸである。さらに好ましくは、高分子ポリチオールはチオール末端基を有するポリ（２−アルキル−２−オキサゾリン）であり、チオール末端基は、キサントゲン酸カリウムを有する多官能性開始剤による重合、続いてアミノ分解によりフリーのチオール基を得るエンドキャップにより導入されている。また、チオール部分は、保護されたチール含有モノマーの共重合により、酸、アミンもしくはアルケニル側鎖の修飾により、または部分的加水分解で生じる主鎖の第２級アミンの修飾によりＮＵ−ＰＯＸの側鎖中に導入される。２−アルキル−２−オキサゾリンは、好ましくは２−エチル−２−オキサゾリン、２−メチル−２−オキサゾリン、２−プロピル−２−オキサゾリンおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0067】

ＮＵ−ＰＯＸは通常、１，０００〜１００，０００ｇ／モル、より好ましくは１０，０００〜３０，０００ｇ／モルの範囲内の分子量を有している。

【0068】

特に好ましい態様によれば、架橋ポリマーのＥＬ−ＰＯＸ成分に含まれるｍ個の求電子基は、周囲および／または生理的条件下で架橋剤のｎ個の求核基と反応して共有結合を形成することができる。最も好ましくは、求電子基は周囲条件下で求核基と反応して共有結合を形成することができる。周囲温度で架橋を形成する能力は、架橋がインサイチュ（in situ）、例えば手術中に生じなくてはならない場合に特に好都合である。通常、３５℃および１気圧で、ＥＬ−ＰＯＸと架橋剤との間の架橋反応は３０分以内、好ましくは１０分以内、より好ましくは５分以内、最も好ましくは２分以内に完了する。

【0069】

本明細書において既に説明したように、求核架橋剤の求核基と反応しないフリーの求電子基を架橋ポリマーが含む場合には、特定の用途にとって好都合であり得る。このような架橋ポリマーは、架橋剤に含まれる求核基の量と比較して過剰量の求電子基を含むＥＬ−ＰＯＸを用いることにより得られる。したがって、好ましい態様において、比ｍ／ｎは１．２を超えており、より好ましくは１．５を超えており、最も好ましくは２．０を超えている。通常、後者の比は１０００を超えず、より好ましくは２００を超えず、さらに好ましくは５０を超えず、および最も好ましくは１０を超えない。

【0070】

本発明の架橋ポリマー中の未反応の求電子基は組織接着性をポリマーに付与する。これは、求電子基が組織内に自然に存在している求核基（例えばアミノ基およびチオール基）と反応することができるからである。したがって、未反応の求電子基を含む架橋ポリマーが組織に塗布される際には、未反応の求電子基は組織中の求核基と反応することができ、それによりポリマーと組織との間に強力な接着が生じる。

【0071】

架橋ポリマーの組織接着性は、架橋ポリマー中の未反応の求電子基の数を操作することにより、非常に効率的に制御可能である。一般的に、未反応の求電子基の数がより多いと、接着はより強力である。

【0072】

したがって、本発明の特に好ましい態様によれば、架橋ポリマーは、モノマー１００個当たり、架橋ポリマーのＥＬ−ＰＯＸ成分に含まれており、求核架橋剤の求核基と反応していない求電子基を少なくとも１個、より好ましくは２〜９５個、さらに好ましくは５〜７０個、最も好ましくは１０〜５０個含む。

【0073】

架橋ポリマーにおける反応した、および未反応の求電子基の総数の内、未反応の求電子基は好ましくは１０〜９５％、より好ましくは２０〜８０％および最も好ましくは４０〜６０％を示す。

【0074】

架橋ポリマーは通常、ＥＬ−ＰＯＸと求核架橋剤とが５０：１〜１：１のモル比、より好ましくは１０：１〜３：２の範囲内で反応することにより得られる。

【0075】

有利には、ＥＬ−ＰＯＸの側鎖の３〜５０％、より好ましくは４〜３５％および最も好ましくは５〜２０％が求電子基を含む。本明細書において既に説明したように、複数のペンダント求電子基を有するＥＬ−ＰＯＸの架橋により得られる架橋ポリマーは、末端の求電子基のみを有するＥＬ−ＰＯＸの架橋により得られる架橋ポリマーとは対照的に多数の利点を示す。この利点として、特性、例えば凝集性、機械的強度、膨潤性、生分解性および粘性を求電子基でエンドキャップされているポリマーで可能な場合と比較して非常により広い範囲にわたって調整する可能性が挙げられる。この点において、求電子的に活性化されたＰＥＧ（これは医療用インプラントに関する多数の従来技術文献に記載されている）はペンダント求電子基の組み込みを可能にするいかなる側鎖も含んでいないことに留意されたい。

【0076】

（乾燥した）架橋ポリマーが水と接触した際に膨潤する能力は、架橋の程度に強く依存している。架橋がより多いと、膨潤指数はより低い。好ましくは、ポリマーはモノマー１００個当たり５０個以下、より好ましくは２０個以下および最も好ましくは１０個以下の共有結合を含み、該共有結合はＥＬ−ＰＯＸ中の求電子基と架橋剤中の求核基との間の反応により形成されている。通常、この共有結合の数はモノマー１００個当たり少なくとも２個である。

【0077】

本発明の架橋ポリマーに用いられるＥＬ−ＰＯＸは通常、少なくとも１，０００ｇ／モル、より好ましくは５，０００〜１００，０００ｇ／モルおよび最も好ましくは１０，０００〜３０，０００ｇ／モルの分子量を有している。

【0078】

ペンダント求電子基を含むＥＬ−ＰＯＸおよびペンダント求核基を含むＮＵ−ＰＯＸは、様々な求電子種、例えばハロゲン化アルキル、スルホン酸エステル、強酸およびその他により始まる２−オキサゾリンモノマーのカチオン重合によって適宜調製可能である。側鎖に活性基を含むＰＯＸ−誘導体は、必須の基を含む２−オキサゾリンモノマーから直接に、またはポリマー前駆体のポリマー類似反応により調製可能である。側鎖にヒドロキシル、アミノ、カルボキシル、メルカプトおよびアルデヒド基を含むＰＯＸの調製は文献に記載されている。

【0079】

ＰＯＸ末端での官能基の合成は、例えばＡｎｎａ Ｍｅｒｏ他（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｏｌｙ（２−ｅｔｈｙｌ ２−ｏｘａｚｏｌｉｎｅ）−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎｄ ｄｒｕｇｓ： Ｓｕｉｔａｂｌｅ ａｌｔｅｒｎａｔｉｖｅｓ ｔｏ ＰＥＧ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ？， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ １２５ （２００８） ８７−９５）に記載されている。

【0080】

本発明に従って用いられるＥＬ−ＰＯＸはホモポリマーまたはコポリマーであり得る。最も好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸはコポリマーである。

【0081】

ＥＬ−ＰＯＸコポリマー、特に両親媒性コポリマーは、いくつかの異なる方法で調製可能である。例えば、（保護された）求電子または求核基を含む２−オキサゾリンと親水性または親油性のコモノマーとを重合することが可能である。ＰＯＸの部分的加水分解、続いて生じるポリマー中の第２級アミン基の修飾も可能である。ポリマーの別の種類は、活性化２−アルキル−２−オキサゾリンと他のポリマー、例えばポリラクチド、ポリカプロラクトンまたはポリエチレングリコールとのブロック共重合により調製可能である。

【0082】

アルキル側鎖中にエチルおよびＮＨＳ基を含むＥＬ−ＰＯＸのコポリマーは、２−エチル−２−オキサゾリン（ＥＴＯＸ）と２−（３−ブテニル）−２−オキサゾリン（ＢＵＴＯＸ）とをカチオン重合させてポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーを得ることにより合成可能である。このポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーは、３−メルカプトプロピオニック−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルにより、または最初にメルカプトプロピオン酸のチオール−エンカップリング、続いてＮＨＳで活性化させてＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーを合成する２ステップアプローチにより官能化可能である。

【0083】

アルキル側鎖中にエチルおよびアミノ（−ＮＨ₂）基を含むＮＵ−ＰＯＸも同様に、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーとシステアミンとの反応、またはＰＯＸの部分的加水分解、続いて後修飾により合成可能である。

【0084】

アルキル側鎖中にエチルおよびチオール（−ＳＨ）基を含むＮＵ−ＰＯＸも同様に、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーと過剰なエタンジスルフィドとの反応により、または２−エチル−２−オキサゾリンと保護されたチオール基を有するモノマーとの共重合により調製可能である。

【0085】

本発明の架橋ポリマーがＮＨＳ−活性化ＥＬ−ＰＯＸの架橋により得られる場合には、生分解性は実質上の非分解性から易分解性まで変動することができる。生分解性をエステル結合の組み込みにより高めることができ、エステル結合はＮＨＳ−エステルとアミンとの間の反応により生じる第２級アミドと比較してより容易に加水分解される。エステルは水性の環境中において緩やかに加水分解されるが、第２級アミドは架橋ネットワーク中で非常に緩やかであろう酵素分解により主に加水分解される。

【0086】

カチオン重合は、所定の数の活性基を有するコポリマーの合成を可能にする。さらに、多数の活性基がＰＯＸ中の多数のアルキル側鎖にカップリングされるように、これらの活性基を組み込むためにカチオン性２−アルキル−２−オキサゾリン重合を用いてもよい。このことはさらに、架橋ポリマーが未反応の求電子基を高濃度で有する場合に、優れた凝集性および優れた接着性を有する高度に架橋したポリマーの生成を可能にする。

【0087】

さらに、カチオン重合により様々な官能基を側鎖および／または末端に組み込みことができ、それによりＰＯＸポリマー系の多様性を高めることができる。

【0088】

コポリマー毎に所定の数の活性基を含むコポリマーの合成を以下のように行なうことができる。コポリマーは、前述したようにＥＴＯＸおよびＢＵＴＯＸをカチオン重合させてポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーを得ることにより合成される。チオール−エン・ラジカルカップリングを介した３−メルカプトプロピオニック−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルによる官能化中（直接または最初にメルカプトプロピオン酸の導入、続いてＮＨＳ活性化による２ステップのいずれか）、ＮＨＳで活性された側鎖が導入される。最初のＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸのモル比が９０／１０である場合、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマー当たりの反応基の割合は１０％になるであろう。最初の９０／１０ＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸ混合物中のＢＵＴＯＸを増加させることにより、最終的には−ＮＨＳ基の割合がより高く、例えば１０％を超えるであろう。組み込まれたＮＨＳ基の正確な数は、ポリマーの長さを決める開始剤に対するモノマーの比により制御可能である。例えば、９０／１０であるＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸの比、および１００：１であるモノマー対開始剤の比を用いることにより、１０個のＮＨＳ基を含む１００個の繰り返し単位を有するポリマーが得られる。モノマー対開始剤の比が２００：１に変更される場合、生じるコポリマーは、同じＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸの比により２０個のＮＨＳ基を有するだろう。同様の手順に従ってＰＯＸ−マレイミドを合成することができ、その結果、チオール−エン・ラジカルカップリングによってチオール修飾マレイミド（フランで保護されている）がポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーに付加される。フラン−マレイミドの脱保護により、ＥＬ−ＰＯＸとしてのＰＯＸ−マレイミドが得られる。

【0089】

本発明の架橋ポリマーは、生分解性であってもよいし、または非生分解性であってもよい。好ましくは、ポリマーは生分解性である。

【0090】

本発明のさらなる態様は、本明細書で既に定義した組織接着性の架橋ポリマーの乾燥物を少なくとも１重量％、好ましくは少なくとも２５重量％および最も好ましくは５０〜１００重量％含む生体適合性の医療製品に関する。このような医療製品の例として、インプラント、組織封止剤、接着性組織テープ、接着性組織フィルム、縫合材、ポリマー被覆ステントおよび止血（多孔質）材が挙げられる。

【0091】

ＥＬ−ＰＯＸ、架橋剤、およびＥＬ−ＰＯＸと架橋剤との組み合わせは、溶媒キャスティングまたは溶融押し出しにより、例えば非晶質のフィルムまたはテープとなる形状に形成可能である。ＥＬ−ＰＯＸの求電子基と架橋剤の求核基との間の反応により架橋がもたらされ、過剰な求電子基により架橋ポリマーが組織との結合を形成することが可能になる。したがって、本発明により、凝集性と接着性とを組み合わせた医療製品の調製が可能になる。

【0092】

ＰＯＸフィルムの非常に重要な性質は、完全乾燥中にＰＯＸフィルムが内部を加水分解から保護することである。したがって、ＥＬ−ＰＯＸ中または架橋ポリマー中の過剰な（未反応の）求電子基は、保管中にその活性を維持するであろう。未反応の求電子基を含む医療製品が組織に塗布される際には、この求電子基と求核反応物質、特に組織に含まれるアミノまたはチオール基との間で求電子−求核反応が起き、それによって共有結合を介して架橋した外部ネットワーク（接着）が形成されるだろう。したがって、医療製品は、有利には架橋ポリマーの少なくとも１０重量％未満、さらに好ましくは５重量％未満および最も好ましくは１重量％未満の水を含む。

【0093】

医療製品はまた、好ましくは有機溶媒を限られた量以下で含む。好ましくは、前記製品は、架橋ポリマーの５重量％未満、より好ましくは０．５重量％未満の有機溶媒を含む。

【0094】

例えば組織封止テープの場合には、ＥＬ−ＰＯＸおよび架橋剤は溶媒キャスティングまたは溶融押し出しに必要な任意の比率で混合可能である。この手法により、接着性組織テープに必要な性質の非常に正確な微調整が可能になる。ＥＬ−ＰＯＸ中の求電子基の量が多いとともに架橋剤から供給される求核基の数が比較的少ない場合には、生じる架橋ポリマーの凝集力は低くなるとともに組織への接着力は高くなるであろう。当然のことながら、比較的多い量の架橋剤とＥＬ−ＰＯＸ中の過剰量の求電子基とを組み合わせることにより、高い凝集力および高い接着力を有する接着性組織テープを製造することも可能である。

【0095】

本発明の医療製品の特に望ましい態様は、接着性組織テープまたは接着性組織フィルムである。本発明によって優れた組織接着性を有するテープまたはフィルムの調製が可能になり、これは組織内に自然に存在している求核基と反応可能な未反応の求電子基の存在に起因している。さらに、本発明の架橋ポリマーにより、その非晶質性および調節可能なガラス転移温度に起因して、凝集性があり、柔軟で弾力性のあるテープおよびフィルムならびに特定の用途によく合う丈夫でより硬い材料の調製が可能になる。

【0096】

本明細書において既に説明したように、医療製品に含まれる架橋ポリマーが非晶質状態である場合には非常に好都合である。用語「非晶質」は、固体ではあるが、その固体内において分子の位置に関して長距離秩序がない材料を示している。秩序の欠如により、非晶質固体は結晶性固体から区別される。

【0097】

さらに好ましくは、架橋ポリマーは少なくとも−５０℃、より好ましくは少なくとも０℃および最も好ましくは少なくとも２０℃のガラス転移温度を有している。通常、ポリマーのガラス転移温度は１２０℃を超えない。

【0098】

本発明の接着性組織フィルムの接着性組織テープは、実質量の水を吸収して凝集性ヒドロゲルを形成することができるという利点を示す。水の吸収により、製品に著しい膨潤が生じていてもよい。しかしながら、製品を水蒸気と接触させる際に著しい膨潤が生じないように製品を設計することも可能である。

【0099】

一つの望ましい態様によれば、医療製品が水蒸気と接触する際に医療製品は著しい膨潤を示さない。通常、そのような医療製品は、１００％以下、好ましくは３０％以下および最も好ましくは１０％以下の膨潤指数を有している。低い膨潤指数を有する医療製品は、硬膜欠損部の治療および脊髄の治療に適宜適用可能である。

【0100】

別の好ましい態様によれば、医療製品が水を吸収することができる際には医療製品は著しい膨潤を示す。通常、そのような膨潤性の製品は、１００〜１０００％の膨潤指数を有している。高い膨潤指数を有する医療製品は止血、例えば手術中または手術後の止血に適宜用いられていてもよい。

【0101】

膨張指数は、完全に膨潤した材料からなる約２ｇの試料の正確な重量を記録することにより測定される。次に、膨潤した材料が２０ｍＬのＰＢＳ緩衝液中に浸漬され、温風乾燥機内において３７℃で２４時間にわたり恒温放置される。次いで、材料がペーパータオルで拭かれて秤量される。膨潤が下記式に基づいて算出される。

【0102】

膨潤指数％＝（Ｗ_t−Ｗ₀）Ｗ₀×１００
ここで、
Ｗ₀は膨潤した材料の恒温放置前の重量であり、
Ｗ_tは膨潤した材料の恒温放置後の重量である。

【0103】

より大きな架橋は、より強固なネットワークを作り出し、これは膨潤を減少させることができるだろう。このことは、特定の用途において、例えば医療製品が、ゲル膨潤により副作用が起きる可能性がある厳しい場所に用いられるインプラント、縫合材または組織封止剤である場合に有利であり得る。この場合、膨潤指数は好ましくは５０％を超えず、最も好ましくは１０％を超えない。

【0104】

本発明により、例えば支持層を必要とすることなく、優れた性質を有する接着性組織テープまたは組織フィルムを調製することが可能になる。したがって、接着性組織テープは、好ましくは単一層のテープである。同様に、接着性組織フィルムは、好ましくは単一層のフィルムである。

【0105】

別の望ましい態様によれば、本発明の医療製品はインプラントである。特に好ましい態様によれば、インプラントに含まれる架橋ポリマーは組織の再生を支持するマトリックスを備えている。好ましくは、マトリックスは、骨材料への付着性ならびに細胞付着およびその後の組織形成を導くのに適切な機械的性質を有している生分解可能で三次元の生体吸収可能な多孔質の構成物である。骨の再生のために、構成物はまた、好ましくは耐荷重性であり、耐荷重性は、インプラントまたはインサイチュ（in situ）で形成されるインプラント中の任意の液成分が可能な限り低く保持されるべきであることを意味する。この点において、非常に限られた量の可塑剤、例えばトリアセチンまたは水がＥＬ−ＰＯＸおよびＮＵ−ＰＯＸを押し出し可能な状態にするのに必要であるということは好都合である。

【0106】

特に好ましい態様によれば、本発明のインプラントに含まれるポリマーネットワークは骨伝導性充填材（osteoconductive filler）、例えば骨補填材を含む。骨伝導性充填材は、自家骨、自家骨粒子、自家骨補填材、ヒトの死体の骨（human cadaver bone）、異種骨移植材（xenograft bone graft material）、動物の骨、成長因子または合成材料、例えばヒドロキシアパタイト、リン酸三カルシウムおよび生体活性ガラスを含む。

【0107】

本発明の別の態様は、本発明の生体適合性の架橋ポリマーの製造用キットに関し、前記キットは、本明細書で既に定義したＥＬ−ＰＯＸおよび求核架橋剤を含む。好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸのｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基である。

【0108】

独立して、ＥＬ−ＰＯＸおよび求核架橋剤は液状または粉末状で提供されていてもよい。粉末状で提供される場合、粉末は、同じキット内に含まれていてもよい液体中に速やかに分散可能であるべきである。

【0109】

本発明のキットで製造可能な架橋ポリマーは、組織接着性を有していてもよいし、有していなくてもよい。いくつかの用途に関して、キットが組織接着性を有する架橋ポリマーの製造に使用可能である場合には有益である。したがって、有利には、本発明のキットに含まれるＥＬ−ＰＯＸは、求核架橋剤に含まれる求核基の量と比較して過剰量の求電子基を含む。したがって、ＥＬ−ＰＯＸおよび求核架橋剤は、反応して本明細書で既に定義した組織接着性の架橋ポリマーを形成することができる。

【0110】

好ましい態様において、キットは、ＥＬ−ＰＯＸおよび求核剤の別々に収納された容量体（volume）を含む。ＥＬ−ＰＯＸおよび架橋剤が迅速な架橋反応を受けることを可能にするために、ＥＬ−ＰＯＸと架橋剤の両方が液状で提供されることが好ましい。より好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸが１〜９５重量％の濃度で第１の溶媒に含まれるとともに求核架橋剤が１〜９５重量％の濃度で第２の溶媒に含まれる。

【0111】

特に好ましい態様によれば、第１の溶媒および第２の溶媒は、水、ポリオール、アルコール（例えばエタノールまたはイソ−プロパノール）、およびそれらの組み合わせから選択される。ＥＬ−ＰＯＸを含む容量体および／または架橋剤を含む容量体は、有利にはポリオール、水、または両方の混合物を含む。さらに、後者の容量体は適宜緩衝化されていてもよい。本発明のキットで用いられる溶媒（単数または複数）および緩衝系は、最適な架橋速度を達成するために適切に選択される。

【0112】

本発明のキットで適宜用いることができるポリオールとして、グリセロール、ジアセチン、トリアセチン、ソルビトールおよびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0113】

特に好ましい態様によれば、第１の溶媒および第２の溶媒は、５〜５０重量％の水、より好ましくは１０〜３０重量％の水および最も好ましくは１５〜２０重量％の水を含む。

【0114】

可塑剤を用いてＥＬ−ＰＯＸおよび任意でＮＵ−ＰＯＸを可塑化することによりインサイチュ（in situ）での架橋特性を向上させることができ、可塑剤はトリアセチン、グリセロール、トリメチルアミンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。通常、可塑剤はＥＬ−ＰＯＸおよび／またはＮＵ−ＰＯＸの１〜５０重量％、より好ましくは３〜１５重量％の濃度で用いられる。

【0115】

ＥＬ−ＰＯＸおよび求核剤の別々に収納された容量体は、ｐＨ調整剤を適宜含んでいてもよい。水または体液の存在下で、容量体または架橋ＥＬ−ＰＯＸ−配合物を含むＥＬ−ＰＯＸの微小環境でのｐＨをより酸性の条件に移動させるために、本発明に従って酸性化剤が有利には用いられる。用語「微小環境でのｐＨ」は、架橋ＥＬ−ＰＯＸ−配合物中のＥＬ−ＰＯＸ内およびその近くのｐＨを示す。

【0116】

適宜用いられていてもよい酸性化剤の例として、プロトンを放出可能な有機および無機成分、例えば有機または無機酸、酸性ポリマー、例えばカルボマー、または潜在性の酸（例えばグルコノ−δ−ラクトン）が挙げられる。好ましくは、酸性化剤は２５℃で１〜７、好適には２〜６．５、より好適には３〜６．５のｐＫ_aを有している。

【0117】

ＥＬ−ＰＯＸを含み別々に収納された容量体のｐＨは、好ましくは２〜７、より好ましくは３〜６、最も好ましくは４〜５の範囲内である。

【0118】

求核剤を含み別々に収納された容量体は、好ましくはアルカリ化剤を含み、アルカリ化剤は水または体液の存在下で、容量体を含む求核剤の微小環境でのｐＨをよりアルカリ性の条件に移動させる。

【0119】

適切なアルカリ化剤の例として、アンモニア溶液、炭酸アンモニウム、アルカリ金属炭酸塩（例えば炭酸カリウムおよび炭酸ナトリウム）を含むアルカリ金属塩、水酸化カリウム、水酸化ナトリウムならびにホウ酸ナトリウム（ホウ砂）、または第３級アミン（例えばトリエチルアミン）、トリエタノールアミンもしくは他のアミン（例えばジエタノールアミンおよびモノエタノールアミン）が挙げられる。

【0120】

好ましくは、アルカリ化剤は２５℃で８〜１４、好適には８．５〜１１、より好適には９〜１１のｐＫ_aを有している。

【0121】

求核剤を含み別々に収納された容量体のｐＨは、好ましくは７〜１２、より好ましくは８〜１１，最も好ましくは９〜１０の範囲内である。

【0122】

ＥＬ−ＰＯＸおよび架橋剤の別々に収納された容量体は、有利には分注手段内に収容されており、分注手段から両方の容量体を同時に分注することができる。したがって、２つの架橋剤を同時に搬送していてもよく、架橋ポリマーがインサイチュ（in situ）で生成される。２つの反応剤を同時に分注してそれらが架橋すべき場所へ搬送することによりプレ混合を避けることができ、早期の架橋が効果的に抑えられる。適切な分注手段の例として、スプレー式ディスペンサ、シリンジ、およびデュアルシリンジが挙げられる。シリンジはスタティックミキサを適宜含んでおり、スタティックミキサにより、２つの反応剤が前記シリンジから同時に吐出される際に互いに混合されるのが確実になる。

【0123】

好ましい態様によれば、別々に収納された容量体の少なくとも１つは、視認性を高めるために可視化剤を含有する。可視化剤（例えば着色料）は、ヒトの眼が検出可能な波長で光を反射または放出する。可視化剤を含むことにより、使用者にとって反応混合物を正確に塗布することは容易である。適切な着色料の例として、ＦＤ＆ＣおよびＤ＆Ｃ着色料、例えばＦＤ＆ＣバイオレットＮｏ．２、ＦＤ＆ＣブルーＮｏ．１、Ｄ＆ＣグリーンＮｏ．６、Ｄ＆ＣグリーンＮｏ．５、Ｄ＆ＣバイオレットＮｏ．２；天然着色料、例えばビートルートレッド、カンタキサンチン、クロロフィル、エオシン、サフラン、カルミン、インドシアニングリーン、または合成外科縫合糸で通常見られる有色色素が挙げられる。同様に、染料、例えばフルオロセインおよびメチレンブルーを用いることができる。可視化剤は、ヒドロゲルとの化学的な結合に適していてもよいし、適していなくてもよい。

【0124】

代替の態様において、キットは、ＥＬ−ＰＯＸを含有する第１の生体適合性の薄いフィルム、および求核架橋剤を含有する第２の生体適合性の薄いフィルムを含む。２枚のフィルムは、それらが互いに重なり合って組み合わされた後に適宜用いられていてもよい。フィルムには、その比表面積を高めるために孔が適宜開けられていてもよい。

【0125】

求核架橋剤を含有する生体適合性の薄いフィルムは、好ましくは本明細書において既に定義されているアルカリ化剤を含む。

【0126】

別の代替の態様によれば、キットは、０．０１〜１０００μｍの重量平均直径（weight averaged mean diameter）を有する粒子、ＥＬ−ＰＯＸを含有する粒子を含む前記粒子、および求核架橋剤を含有する粒子を含む。ＥＬ−ＰＯＸおよび求核架橋剤は同じ粒子に含有されていてもよく、またはそれらは同じ粉末内の異なる粒子に含有されていてもよい。

【0127】

前述した粉末は、止血粉末として適宜用いられていてもよく、止血粉末を周囲条件下で保存することができる。

【0128】

ＥＬ−ＰＯＸおよび／または求核架橋剤に加えて、止血粉末に含まれる粒子は担体、好ましくは水溶性担体を適宜含有してもよい。適宜用いられていてもよい担体の例として、単糖；ジ−およびオリゴ糖（例えばラクトース、マンニトール、トレハロース、エリトリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトール、イソマルト、マルトデキストリン、セロビオース、グルコース、フルクトース、マルツロース、ラクツロース、マルトース、ゲンチオビオース、イソマルトース、ラクチトール、パラチニトール、ズルシトール、リビトール、スクロース、ラフィノース、ゲンチアノース、プランテオース、ベルバスコース、スタキオース、メレジトース、イノシトール）；および多糖（例えばデキストラン、スターチ（アミロース、アミロペクチン）、グリコーゲン、セルロース、キチン、アルジネート、カロース、クリソラミナリン、キシラン、アラビノキシラン、マンナン、フコイダンおよびガラクトマンナン）；ならびにそれらの炭水化物の組み合わせが挙げられる。好ましくは、用いられる担体は少なくとも０℃、より好ましくは少なくとも２５℃のガラス転移温度を有している。

【0129】

通常、止血粉末は２５〜７５重量％のＥＬ−ＰＯＸ、２５〜７５重量％の求核架橋剤および０〜５０重量％の担体を含む。

【0130】

本発明のさらに別の側面は、ＥＬ−ＰＯＸの乾燥物を少なくとも１重量％、好ましくは少なくとも５０重量％および最も好ましくは少なくとも９０重量％含む組織接着性の医療製品に関し、前記ＥＬ−ＰＯＸは、少なくとも１個のペンダント求電子基を含む少なくとも２個の求電子基を含み、前記反応基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド、エテンスルホニル、イミドエステル、アセトアセテート、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニルアクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミドおよびそれらの組み合わせから選択される。ＥＬ−ＰＯＸ中の求電子基は、カルボン酸エステル、酸塩化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド、エテンスルホニルおよびそれらの組み合わせから適宜選択されていてもよい。

【0131】

好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸ中の求電子基は、アルデヒド、イミドエステル、イソシアナト、チオイソシアナト、スクシンイミジル誘導体、スルホスクシンイミジル誘導体、ジヒドロキシフェニル誘導体、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、マレイミド、ビニルスルホンおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0132】

さらに好ましくは、ＥＬ−ＰＯＸに含有される求電子基は、アルデヒド、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、イミドエステル、ジヒドロキシフェニル誘導体、ハロアセタール、マレイミドおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0133】

最も好ましくは、求電子基は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、アルデヒド、マレイミド、ジヒドロキシフェニル誘導体およびそれらの組み合わせからなる群から選択される。

【0134】

本発明のこの特定の態様によれば、組織接着性の医療製品に含有されるＥＬ−ＰＯＸは架橋していないか、または部分的にのみ架橋していることが好ましい。最も好ましくは、組織接着性の医療製品に含有されるＥＬ−ＰＯＸは架橋していない。

【0135】

本発明の組織接着性の製品は、本明細書で既に定義した求核架橋剤を含んでもよい。前記架橋剤から供給される反応性求核基の数がＥＬ−ＰＯＸに含有される反応性求電子基の数よりも著しく少ないことが好ましい。したがって、ＥＬ−ＰＯＸと求核架橋剤との間の架橋反応後に十分な数の求電子基が残存し、架橋ポリマーと例えば組織との間に接着がもたらされるだろうということが確実になる。この望ましい態様は、例えばＥＬ−ＰＯＸおよび求核架橋剤を可塑化して単一のフィルムまたはテープにすることにより実現されていてもよい。組織テープとしての適用の前に、後者のテープは、活性剤を含有する別の水溶性フィルム、または活性剤を含有する液体もしくは塗布可能な組成物と組み合わされていてもよい。

【0136】

特に好ましい態様によれば、組織接着性の医療製品は、ＥＬ−ＰＯＸの乾燥物を少なくとも１重量％、好ましくは少なくとも５０重量％および最も好ましくは少なくとも７５重量％含むとともに、ＮＵ−ＰＯＸの乾燥物を少なくとも１重量％、好ましくは少なくとも５０重量％および最も好ましくは７５重量％含む。有利には、ＥＬ−ＰＯＸおよびＮＵ−ＰＯＸはともに、組織接着性の製品に含有される乾燥物の少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも９５重量％を示す。

【0137】

組織接着性の医療製品におけるＥＬ−ＰＯＸおよびＮＵ−ＰＯＸの併用は、例えば溶融押し出しにより、製品を非晶質のフィルム、テープまたは粉末の形態で製造することができるという利点を提供する。

【0138】

架橋していない形態でＥＬ−ＰＯＸおよびＮＵ−ＰＯＸの組み合わせを用いることに伴う利点は、手術中にその領域が容易に広がる非常に柔軟なフィルムまたはテープの調製が可能になるという事実である。さらに、ＥＬ−ＰＯＸおよびＮＵ−ＰＯＸが速やかに反応して架橋ポリマーを形成すると直ちに、組織接着性の医療製品（例えばフィルムまたはテープ）により水が吸収され、それにより優れた封止性が提供される。

【0139】

別の態様によれば、組織接着性の医療製品は求核架橋剤を含まない。ＥＬ−ＰＯＸは、別の（未反応）フィルム形成ポリマーのマトリックスに適宜組み込まれていてもよく、ポリマーとしてポリオキサゾリン（例えばポリエチルオキサゾリン、ポリメチルオキサゾリンまたはポリプロピルオキサゾリン）が挙げられる。好ましくは、この態様に係る接着性の医療製品は、乾燥物の１０〜９５重量％、より好ましくは３０〜８０重量％および最も好ましくは５０〜７０重量％のＥＬ−ＰＯＸを含む。別のフィルム形成ポリマーは、好ましくは接着性の医療製品に含有される乾燥物の５〜９０％、より好ましくは２０〜７０％および最も好ましくは３０〜５０％を示す。

【0140】

組織接着性の医療製品に含まれるＥＬ−ＰＯＸは、好ましくはモノマー１００個当たり少なくとも２個の求電子基、より好ましくはモノマー１００個当たり少なくとも５個の求電子基、さらに好ましくはモノマー１００個当たり１０〜８０個の求電子基および最も好ましくはモノマー１００個当たり１０〜５０個の求電子基を含有する。

【0141】

本発明に包含される組織接着性の医療製品の例として、接着性組織テープ、組織封止剤、止血多孔質材およびインプラントが挙げられる。

【0142】

テープまたはフィルムの形態の医療製品は、ＥＬ−ＰＯＸおよび水溶性バッキング膜を含むポリマーマトリックスを適宜含んでいてもよい。バッキング膜またはフィルムを使用することにより、ＥＬ−ＰＯＸが不必要な接着を生じないことが確実になる。これは、周囲の組織への共有結合を抑えることができるからである。バッキング膜は、任意の適切な生体適合性ポリマーで形成されていてもよい。好ましくは、バッキング膜は、第１級アミンを含有する生体適合性ポリマーで形成されている。これは、第１級アミンがＥＬ−ＰＯＸと共有結合することができるからである。

【0143】

本発明に係る架橋ポリマー、ＥＬ−ＰＯＸおよびＮＵ−ＰＯＸは、有利にはそれらに含まれるオキサゾリン単位の一つと共有結合している抗菌剤を含んでもよい。より好ましくは、架橋ポリマーまたはＥＬ−ＰＯＸは抗菌剤を含有しており、抗菌剤はアミドまたはイミド基を介してオキサゾリン単位に共有結合している。抗菌剤の例として、アミノフェノール、アミノクレゾール、アミノレゾルシノールおよびアミノナフトールが挙げられる。抗菌剤は、スペーサ基（例えばアルキレン、オキシアルキレンまたはシリコーン）を介してＰＯＸ−ポリマーと適宜結合していてもよい。抗菌剤とＰＯＸポリマーとが共有結合することにより、ポリマーの生分解中に抗菌剤が緩やかに放出されることを確実にすることができる。

【0144】

本発明のさらなる態様は接着フィルムを含む組成物を提供し、接着フィルムは、
・ＥＬ−ＰＯＸ、ＥＬ−ＰＯＸ由来の本発明に係る生体適合性の共有結合架橋ポリマーおよびそれらの組み合わせから選択されるポリマー材料、ならびに
・１つ以上のジヒドロキシフェニレンアラニン（ＤＨＰ）誘導体を含む。

【0145】

ＤＨＰ誘導体は、好ましくは３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン（ＤＯＰＡ）、ドーパミン、３，４−ジヒドロキシヒドロケイ皮酸（ＤＯＨＡ）、カテコールおよびそれらの組み合わせから選択される。

【0146】

通常、接着フィルムは、乾燥物の少なくとも１重量％、より好ましくは少なくとも２５重量％、最も好ましくは５０〜１００重量％のポリマー材料を含有する。

【0147】

接着フィルムのＤＨＰの含有量は通常、乾燥物の１０〜９５重量％、より好ましくは２０〜８０重量％および最も好ましくは４０〜６０重量％の範囲内である。

【0148】

接着フィルムの水の含有量は、好ましくは５重量％を超えず、より好ましくは１重量％を超えない。

【0149】

組成物は１個以上の添加成分をさらに適宜含んでいてもよく、添加成分は、充填材、酸化剤、架橋剤、ミクロゲル、別のポリマー、薬物および他の治療薬から選択される。

【0150】

接着フィルムは単一層から成っていてもよいし、複数層から成っていてもよい。

【0151】

組織−反応性求電子基と組織表面上の官能基との間の反応は、ｐＨにより変化してもよい。したがって、適用直前に組織表面を緩衝化すること、または、より好ましくは反応性求電子基および／またはＥＬ−ＰＯＸを有する共有的に架橋したポリマーを含有する製品が緩衝液を含むことが好ましくてもよい。このような製品が例えば接着フィルムまたはテープである場合、フィルムまたはテープの組織−接触層が緩衝液を含むことが有利であってもよい。９．０〜１２．０、特に９．５〜１１．５の範囲内のｐＨを有する緩衝液によって製品の組織表面を緩衝化することにより、前記製品の接着性が高められていてもよい。

【0152】

本発明に係る医療製品は、様々な手術の用途で有利に使用することができる。これらの手術の用途の例を以下に要約する。

【表1】

【0153】

超音波造影剤として作用するポリマー被覆気泡を、本明細書で前述したキットまたは医療製品に適宜組み込むことができる。ポリマー被覆気泡は、その造影性を、血液と該血液に含まれる気体との間の音響インピーダンスの大きな不整合から得る。その気泡を被覆するために用いることができるポリマーの例として、ポリラクチド、ポリグリコライド、ポリカプロラクトン、ポリラクチドおよびポリグリコライドのコポリマー、ラクチドおよびラクトンのコポリマー、多糖、ポリ無水物、ポリスチレン、ポリアルキルシアノアクリレート、ポリアミド、ポリホスファゼン、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリウレタン、メタクリル酸およびアクリル酸のコポリマー、ヒドロキシエチルメタクリレートおよびメチルメタクリレートのコポリマー、ポリエステル（例えばポリカーボネート）、およびタンパク質が挙げられる。好ましいポリマーは、生体適合性および／生分解性のポリマーである。好ましい態様において、ポリマーはポリ乳酸ｃｏ−グリコール酸（ＰＬＧＡ）である。

【0154】

また、ＥＬ−ＰＯＸ、ＮＵ−ＰＯＸまたは架橋ポリマーは、気泡が封入されるように製造されていてもよい。好ましくは、気体は、ｐＨ調整剤（ＥＬ−ＰＯＸ相中に配合されている）と炭酸ガス放出基剤（ＮＵ−ＰＯＸ相中に配合されている）との反応によりインサイチュ（in situ）で発生する。さらに好ましくは、ｐＨ調整剤および炭酸ガス放出基剤は、一体化したＮＵ−ＰＯＸ／ＥＬ−ＰＯＸ相中に配合されており、ＮＵ−ＰＯＸ／ＥＬ−ＰＯＸ相中において、ｐＨ調整剤は、水または体液との接触により、より低いｐＨをもたらす。

【0155】

本発明は、以下の非限定的な例によりさらに説明される。

【0156】

［実施例］
例１
２−エチル−２−オキサゾリン（ＥＴＯＸ）および２−（３−ブテニル）−２−オキサゾリン（ＢＵＴＯＸ）のカチオン重合によってポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーを得ることにより、アルキル側鎖中にエチルおよびＮＨＳ基を含むＥＬ−ＰＯＸの両親媒性コポリマーを合成した。

【0157】

初めにメルカプトプロピオン酸のチオール−エンカップリング、続いてＮＨＳによる活性化でＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーを合成する２ステップアプローチにおいて、このポリ［２−（エチル／３−ブテニル）−２−オキサゾリンコポリマーを官能化した。最初のＥＴＯＸ／ＢＵＴＯＸのモル比は９０／１０であり、したがって、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマー当たりの反応基の割合は、前述したように１０％であった。

【0158】

このＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーの８４．３ｍｇの量を１５０μＬのエタノール（無水）に溶解し、トリリシントリアセテート９．５ｍｇを含有する水、エタノールおよびトリエチルアミン（１：１：１
ｖ／ｖ／ｖ）の混合物１５０μＬと混合した。一体化した液体混合物（２８重量％のポリマーを含有し、ＮＨＳ−アミン比が１：１．２５である約３００μＬ）は３０〜４５秒以内に架橋ネットワーク（ゲル）になった。

【0159】

例２例１に記載されたように、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーを合成した。
このＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーの３００ｍｇの量を７５０μＬのエタノール（無水）に溶解し、約１０μＬのトリエチルアミンを含有する、５０／５０ ｖ／ｖのエタノール／水の中のトリリシントリアセテート１５０μＬ（１０ｍｇ）を加えた。

【0160】

この配合物の破裂圧力を以下の方法で試験した。簡単に記載すると、新鮮なウシの硬膜を適切な大きさの組織切片に解体した。硬膜を３ｍｍの輪状に切開し、次いで測定可能な圧力下で輪状切開から模擬体液を押し出すことができるように硬膜をビュレットに固定した。

【0161】

活性ＰＯＸコポリマーを含有する配合物を室温での吸引により非晶質のテープ状に乾燥させ、固定した硬膜上に置いてシールを形成した。数分後、模擬体液の圧力をシールが破裂する程度まで高めた（破裂圧力）。破裂圧力が７５ｍｍＨｇであることが分かった。このフィルムにおけるＮＨＳ：アミン比は２．７：１である。

【0162】

比較例Ａ
本実験では、フィルムが、側鎖が活性化されていないポリ−エチル−オキサゾリンフィルムからなること以外は、（同じ硬膜を用いて）例２に記載の実験を繰り返した。本実験では、破裂圧力が約１５ｍｍＨｇであることが分かった。

【0163】

これらの結果は、ポリ［２−（エチル／３−ブテニル）］−２−オキサゾリンコポリマーに反応性架橋基、例えばＮＨＳを組み込むことにより、ウシの硬膜のコラーゲンに対するテープの接着力が著しく高まることを示している。

【0164】

例３
アクアゾル５０（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥｔＯｘ）、分子量５０，０００）の酸性加水分解を制御してポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］コポリマー（ＰＥｔＯｘ−ＰＥＩ）を得ることにより、アルキル側鎖中にエチルおよびＮＨＳ基を含有するＥＬ−ＰＯＸの両親媒性コポリマーを合成した。ＰＥｔＯｘ−ＰＥＩにおいて、最初の２−エチル−オキサゾリン単位の６％を加水分解した。

【0165】

トリエチルアミンの存在下でのメチルスクシニルクロリドのカップリング、続いて水酸化リチウムによるメチルエステルの加水分解、続いてＥＤＣの存在下でのＮＨＳによる、取得するカルボン酸部分の活性化によりＮＨＳ−側鎖活性化ポリ（２−エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）−２−オキサゾリンコポリマーを合成する３ステップアプローチにおいて、このポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］を官能化した。ＵＶ−ｖｉｓ分光法で測定したコポリマーのＮＨＳによる最終的な官能化は４．４％であった。

【0166】

このＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーの１５ｍｇの量を２１７μＬのエタノール（無水）に溶解し、トリリシン１．０ｍｇを含む水、エタノールおよびトリエチルアミン（１：１：１ ｖ／ｖ／ｖ）の混合物１６μＬと混合した。一体化した液体混合物（１．０１：１．００のＮＨＳ−アミン比を有する約６．５重量％のポリマーを含有する約２３０μＬ）は室温で６０秒以内に架橋ネットワーク（ゲル）になった。

【0167】

例４
例３に記載されたように、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーを合成した。

【0168】

このＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーの４１０ｍｇの量を８．２５ｍＬのエタノール（無水）に溶解し、トリリシン（５ｍｇ）を含有するエタノール２３μＬ、水１０μＬおよびトリエチルアミン１０μＬの溶液を加えた。このフィルムにおけるＮＨＳ：アミン比は５．５：１である。

【0169】

この配合物の破裂圧力を例２に記載されたように試験した。新鮮なウシの硬膜の代わりに、ウシの腹膜を使用した。

【0170】

活性ＰＯＸコポリマーを含有する配合物を４０℃で非晶質のテープ状に乾燥させ、固定した腹膜上に置いてシールを形成した。数分後、模擬体液の圧力をシールが破裂する程度まで高めた（破裂圧力）。破裂圧力が１１ｍｍＨｇであることが分かった。

【0171】

比較例Ｂ
例４に記載されたのと同じ方法で作成し、ＮＨＳ：アミン比が１：１と等しい非晶質のテープを、固定した腹膜上に置いてシールを形成した。数分後、模擬体液の圧力をシールが破裂する程度まで高めた（破裂圧力）。破裂圧力が３．７ｍｍＨｇであることが分かり、このことは、組織接着性を確保するために過剰な求電子基を有することの重要性を示していた。

【0172】

比較例Ｃ
側鎖が活性化されていないアクアゾル５０（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン）（ＰＥｔＯｘ）、分子量５０，０００）フィルムからなるフィルム（テープ）により、例４に記載の「破裂」実験を繰り返した。この実験に関して、破裂圧力は約２．６ｍｍＨｇであることが分かった。水に接触すると、このフィルムは溶解し始める。

【0173】

この結果は、ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーへの反応性架橋基、例えばＮＨＳの組み込みにより、ウシの腹膜のコラーゲンに対するテープの接着力が著しく高まることを示している。

【0174】

例５
例４に記載されたのと同じ方法で作成したが、ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーを用いるのみである非晶質のテープを、固定した腹膜の上に置いてシールを形成した。数分後、模擬体液の圧力をシールが破裂する程度まで高めた（破裂圧力）。破裂圧力は３．７ｍｍＨｇであることが分かった。水に接触すると、このフィルムも溶解し始める。

【0175】

このテープの接着性は優れていた。求核架橋剤の欠如に起因して凝集性が制限要因であり、結果として適度に低い破裂圧力となった（フィルムが破れた）。例えばコポリマーと疎水性支持体とを組み合わせることにより、この接着テープの凝集性を向上させることができる。

【0176】

例６
例３に記載されたように、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーを合成した。

【0177】

アクアゾル５０（ポリ（２−エチル−２−オキサゾリン（ＰＥｔＯｘ）、分子量５０，０００）の酸性加水分解を制御してポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］コポリマー（ＰＥｔＯｘ−ＰＥＩ）を得ることにより、アミン側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）を合成した。ＰＥｔＯｘ−ＰＥＩにおいて、最初の２−エチルオキサゾリン単位の１２％を加水分解した。

【0178】

最初にトリエチルアミンの存在下でのメチルスクシニルクロリドのカップリング、続いて形成されたメチルエステル側鎖とエチレンジアミンとの反応によりアミン側鎖活性化ポリ（２−エチル／アミノ−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマーを得る２ステップアプローチにおいて、このポリ［２−エチル−２−オキサゾリン／エチレンイミン］を官能化した。

【0179】

このＮＵ−ＰＯＸ（３．４ｍｇ）を含有する２５０μＬのホウ酸塩緩衝液（０．１Ｍ、ｐＨ８．５）の溶液を、１００μＬのＨ₂Ｏに溶解したＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマー（１０．０ｍｇ）の溶液に加えた。一体化した液体混合物（１．０１：１．００のＮＨＳ−アミン比を有する約４重量％のポリマーを含有する約３５０μＬ）は室温で２０秒以内に架橋ネットワーク（ゲル）になった。

【0180】

例７
例３に記載されているように、ＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーを合成した。

【0181】

例６に記載されているように、アミン側鎖官能化ポリ（２−エチル／アミノ−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマー（ＮＵ−ＰＯＸ）を合成した。

【0182】

このＮＨＳ−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーの２６６ｍｇの量を１．３３ｍＬのエタノール（無水）に溶解し、ＮＵ−ＰＯＸ（１８．４ｍｇ）を含有する得エタノール（無水）８２２μＬおよびトリエチルアミン２７μＬの溶液を加えた。活性ＰＯＸコポリマーを含有する溶液を４０℃で非晶質のテープ状に乾燥させ、固定した腹膜上に置いてシールを形成した。この構成体の破裂圧力を例４に記載されたように測定した。このフィルムにおけるＮＨＳ：アミン比は５．５：１である。

【0183】

数分後、模擬体液の圧力をシールが破裂する程度まで高めた（破裂圧力）。破裂圧力は２３ｍｍＨｇであることが分かり、それは例５に記載された基準となる実験の破裂圧力２．６ｍｍＨｇよりも著しく高い。

【0184】

これらの結果も同様に、ポリ［２−（エチル／ＮＨＳ−エステル−エチル）］−２−オキサゾリンコポリマーへの反応性架橋基、例えばＮＨＳの組み込みにより、ウシの腹膜のコラーゲンに対するテープの接着力が著しく高まることを示している。このテープの接着性は優れていた。求核架橋剤（ＮＵ−ＰＯＸ）に起因して凝集性は良好であり、結果として比較的高い破裂圧力となった。破裂が発生する際にフィルムは破れておらず、このことは、この場合には凝集性の低下よりはむしろ接着性の低下が制限要因であったことを示している。

【0185】

例８
例６に記載されたように、アミン側鎖官能化ポリ（２−エチル／アミノ−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマーを合成した。アミンと無水マレイン酸とを反応させてマレイミド−側鎖活性化ポリ（２−エチル／マレイミド−エチル−アミド−エチル）−２−オキサゾリンコポリマーを得ることにより、このＮＵ−ＰＯＸをＥＬ−ＰＯＸにした。

【0186】

ペンタエリトリトールポリエチレングリコールエーテルテトラ−アミンからなるアミン誘導体化ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）ポリマー成分からチオール誘導体化ポリエチレングリコール（置換された４アームＰＥＧ）ポリマーを合成した。アミン基をＳ−アセチルチオグリコール酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルに結合させた。チオールのアセチル保護基の除去後、チオール置換４アームＰＥＧを得た。

【0187】

マレイミド−側鎖活性化ポリ［２−（エチル／マレイミド−エチル−アミド−エチル］−２−オキサゾリンコポリマーの１７．５ｍｇの量を１００μＬのエタノール（無水）に溶解し、チオール置換４アームＰＥＧチオール３２ｍｇを含有する水およびトリエチルアミン（１００：２ ｖ／ｖ）の混合物１０２μＬと混合した。一体化した液体混合物（マレイミド−アミンの比が３：２であるポリマーを２５重量％含む約２００μＬ）は、室温で２０秒以内に架橋ネットワーク（ゲル）になった。
以下に、出願当初の特許請求の範囲に記載された発明を付記する。
［１］
求電子的に活性化されたポリオキサゾリン（ＥＬ−ＰＯＸ）と求核架橋剤との反応により得られる、組織接着性で生体適合性の共有結合架橋ポリマーであって、
前記ＥＬ−ＰＯＸはｍ個の求電子基を含み；
前記求核架橋剤はｎ個の求核基を含み、前記ｍ個の求電子基は前記ｎ個の求核基と反応して共有結合を形成することが可能で；
ｍ≧２、ｎ≧２およびｍ＋ｎ≧５であり；
前記ｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基であり、および／またはｍ≧３であり；
前記ＥＬ−ＰＯＸは前記求核架橋剤に含有される求核基の量に比較して過剰量の求電子基を含む、ポリマー。
［２］
前記架橋ポリマーは、前記ＥＬ−ＰＯＸ成分に含まれており、前記求核架橋剤の求核基と反応していない求電子基をモノマー１００個当たり少なくとも１個含む、［１］に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［３］
前記ｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基である、［１］または［２］に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［４］
前記ｎ個の求核基は、アミン基、チオール基およびそれらの組み合わせから選択される、［１］〜［３］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［５］
前記ＥＬ−ＰＯＸに含有される前記求電子基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド（マレイミジル）、エテンスルホニル、イミドエステル、アセトアセテート、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、ビニル、アクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミドおよびそれらの組み合わせから選択される、［１］〜［４］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［６］
前記求核基はアミン基であり、前記ＥＬ−ＰＯＸに含まれる前記求電子基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、イミドエステル、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、およびそれらの組み合わせから選択される、［４］または［５］に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［７］
前記求核基はチオール基であり、前記ＥＬ−ＰＯＸに含まれる前記求電子基は、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、マレイミド、ビニルスルホン、ジヒドロキシフェニル誘導体、ビニル、アクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミド、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネートおよびそれらの組み合わせから選択される、［４］または［５］に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［８］
前記求核架橋剤は１，０００ｇ／モル未満の分子量を有する低分子ポリアミンである、［１］〜［７］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［９］
前記求核架橋剤は、少なくとも２個の求核基を含む求核的に活性化されたＰＯＸ（ＮＵ−ＰＯＸ）；キトサン；キトサン誘導体、ポリエチレンイミン；ポリビニルアミン；ポリアリルアミン；アミン官能化ポリ（メタ）アクリレート；アミン官能化ポリエチレングリコール；アミン官能化部分を含む多糖、例えばポリ（ガラクトサミン）；スチレン；リシン、オルニチン、システイン、アルギニンおよびそれらの組み合わせから選択される２種以上のアミノ酸残基と他のアミノ酸残基とを含むポリペプチド；ならびにそれらの組み合わせからなる群から選択される高分子量ポリアミンである、［１］〜［７］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［１０］
比ｍ：ｎは少なくとも１：１である、［１］〜［９］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［１１］
前記ＥＬ−ＰＯＸを前記求核架橋剤と少なくとも１：１のモル比で反応させることにより得られる、［１］〜［１０］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［１２］
前記ＥＬ−ＰＯＸは、モノマー１００個当たりペンダント求電子基を３〜５０個含有する、［１］〜［１１］のいずれか１に記載の生体適合性の架橋ポリマー。
［１３］
［１］〜［１２］のいずれか１に記載の架橋ポリマーの乾燥物を少なくとも１重量％、好ましくは少なくとも２５重量％含む生体適合性の医療製品。
［１４］
接着性組織テープ、接着性組織フィルム、組織封止剤、止血材、縫合材、ポリマー被覆ステントまたはインプラントである、［１３］に記載の医療製品。
［１５］
前記架橋ポリマーの１０重量％未満の水を含む、［１３］または［１４］に記載の医療製品。
［１６］
０〜１００％の膨潤指数を有するテープまたはフィルムである、［１３］〜［１５］のいずれか１に記載の医療製品。
［１７］
前記架橋ポリマーは非晶質状態である、［１３］〜［１６］のいずれか１に記載の医療製品。
［１８］
前記架橋ポリマーは少なくとも０℃のガラス転移温度を有している、［１３］〜［１７］のいずれか１に記載の医療製品。
［１９］
［１］〜［１８］のいずれか１に記載のＥＬ−ＰＯＸ、および［１］〜［１８］のいずれか１に記載の求核架橋剤を含み、前記ｍ個の求電子基の少なくとも１個はペンダント求電子基である、生体適合性の架橋ポリマーの製造用キット。
［２０］
前記ＥＬ−ＰＯＸおよび前記求核架橋剤の別々に収納された容量体を含み、前記ＥＬ−ＰＯＸは１〜９５重量％の濃度で第１の溶媒に含まれており、前記求核架橋剤は１〜９５重量％の濃度で第２の溶媒に含まれており、前記第１および前記第２の溶媒は５〜５０重量％の水を含む、［１９］に記載のキット。
［２１］
別々に収納された前記容量体は、両方の容量体を同時に分注できる分注手段内に収容されている、［２０］に記載のキット。
［２２］
前記ＥＬ−ＰＯＸを含有する生体適合性のフィルムおよび前記求核架橋剤を含有する生体適合性のフィルムを含む、［１９］に記載のキット。
［２３］
０．０１〜１０００μｍの重量平均直径を有する粒子を含み、前記粒子はＥＬ−ＰＯＸを含有する粒子および前記求核架橋剤を含有する粒子を含む、［１９］に記載のキット。
［２４］
前記ＥＬ−ＰＯＸは求核架橋剤に含まれる求核基の量と比較して過剰量の求電子基を含む、［１９］〜［２３］のいずれか１に記載のキット。
［２５］
ＥＬ−ＰＯＸの乾燥物を少なくとも１重量％含む組織接着性の医療製品であって、前記ＥＬ−ＰＯＸは、少なくとも１個のペンダント求電子基を含む少なくとも２個の求電子基を含み、前記反応基は、カルボン酸エステル、スルホン酸エステル、ホスホン酸エステル、ペンタフルオロフェニルエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、ｐ−ニトロチオフェニルエステル、酸ハロゲン化物基、無水物、ケトン、アルデヒド、イソシアナト、チオイソシアナト、イソシアノ、エポキシド、活性化ヒドロキシル基、オレフィン、グリシジルエーテル、カルボキシル、スクシンイミジルエステル、スクシンイミジルカーボネート、スクシンイミジルカルバメート、スルホスクシンイミジルエステル、スルホスクシンイミジルカーボネート、マレイミド、エテンスルホニル、イミドエステル、アセトアセテート、ジヒドロキシ−フェニル誘導体、ハロアセタール、オルトピリジルジスルフィド、ビニルアクリレート、アクリルアミド、ヨードアセトアミドおよびそれらの組み合わせから選択される、組織接着性の医療製品。
［２６］
接着性組織テープ、組織封止剤、止血材またはインプラントである、［２５］に記載の組織接着性の医療製品。