特許 6543258 治療用重合性ナノ粒子とそれを作製して使用する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6543258

(24)【登録日】2019年6月21日

(45)【発行日】2019年7月10日

(54)【発明の名称】治療用重合性ナノ粒子とそれを作製して使用する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/517 20060101AFI20190628BHJP

   A61K 9/19 20060101ALI20190628BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20190628BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20190628BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20190628BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20190628BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20190628BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/517

   A61K9/19

   A61K47/34

   A61K47/12

   A61P35/00

   A61P35/02

   A61P43/00 111

【請求項の数】7

【全頁数】119

(21)【出願番号】特願2016-542377(P2016-542377)

(86)(22)【出願日】2014年9月12日

(65)【公表番号】特表2016-530324(P2016-530324A)

(43)【公表日】2016年9月29日

(86)【国際出願番号】GB2014052787

(87)【国際公開番号】WO2015036792

(87)【国際公開日】20150319

【審査請求日】2017年9月12日

(31)【優先権主張番号】61/878,227

(32)【優先日】2013年9月16日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/939,332

(32)【優先日】2014年2月13日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】300022641

【氏名又は名称】アストラゼネカ アクチボラグ

(74)【代理人】

【識別番号】100140109

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 新次郎

(74)【代理人】

【識別番号】100075270

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 泰

(74)【代理人】

【識別番号】100101373

【弁理士】

【氏名又は名称】竹内 茂雄

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100122644

【弁理士】

【氏名又は名称】寺地 拓己

(72)【発明者】

【氏名】アシュフォード，マリアンヌ・バニース

(72)【発明者】

【氏名】ノーラン，ザ・サード，ジェームス・マーティン

(72)【発明者】

【氏名】シン，イヨン

(72)【発明者】

【氏名】ソン，ヤン−ホ

(72)【発明者】

【氏名】トロヤーノ，グレッグ

(72)【発明者】

【氏名】ワン，ホン

【審査官】 鶴見 秀紀

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１２−５１６１６０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００６−５２８１７９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１３−５０６００６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１３−５１４３７７（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／００−３１／８０

Ａ６１Ｋ ９／００−９／７２

Ａ６１Ｋ ４７／００−４７／６９

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ａ６１Ｐ ３５／０２

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

１５〜２５重量パーセントの２−（３−（（７−（３−（エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ）プロポキシ）キナゾリン−４−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−Ｎ−（３−フルオロフェニル）アセトアミド；
７〜１５重量パーセントのパモ酸；及び
ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み
ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）ブロックと５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールブロックを有し、ポリ（エチレン）グリコールブロックが治療用ナノ粒子の１０〜３０重量パーセントの量で存在する、治療用ナノ粒子。

【請求項2】

７０〜１４０ｎｍの流体力学的径を有する、請求項１の治療用ナノ粒子。

【請求項3】

請求項１または２の複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬的に許容される組成物。

【請求項4】

がんの治療に用いられる、請求項３に記載の組成物。

【請求項5】

がんが固形腫瘍又は血液癌である、請求項４に記載の組成物。

【請求項6】

固形腫瘍が小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）である、請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

血液癌が急性骨髄性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、および骨髄異形成症候群から選択される、請求項５に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、治療用重合性ナノ粒子とそれを作製して使用する方法に関する。

【背景技術】

【0002】

ある薬物を患者へ送達する（例えば、特別な組織又は細胞種へ、又は正常組織より多く特定の疾患組織へ選好的に分布させる）か又は薬物の放出を制御するシステムは、有益なものと久しく認識されてきた。

【0003】

例えば、正常組織より多く特定の疾患組織へ選好的に分布される活性薬剤が含まれる治療薬は、その組織における該薬物の曝露を身体中の他の組織に優って増加させる可能性がある。このことは、細胞傷害量の薬物を周囲の非癌性組織を殺傷することなく癌細胞へ送達することが望ましい、癌のような病態を治療するときに、特に重要である。有効な薬物分布は、抗癌療法でよく見られる、望まれなくて時に生命を脅かす副作用を抑える可能性がある。

【0004】

ナノ粒子は、その大きさと表面特性により、「増強された浸透及び保持」効果を介して、血管系における延長された循環と疾患組織／腫瘍の欠陥構造全体の選好的な組織蓄積を可能にするはずである。

【0005】

制御放出療法を提供する治療薬はまた、有効量の薬物を送達することが可能でなければならないが、一部のナノ粒子送達系では、その量に限界があることが知られている。例えば、ナノ粒子の大きさを有利な送達特性を有するのに十分小さく保つ一方で、適正量の薬物が各ナノ粒子と会合したナノ粒子系を製造することは、挑戦的な課題であり得る。

【0006】

従って、癌のような疾患を治療するための治療薬剤の治療レベルを送達する一方で、患者の副作用を抑えることも可能であるナノ粒子治療薬とそのようなナノ粒子を作製する方法へのニーズが存在する。

【0007】

癌（と他の過剰増殖性疾患）は、非制御の細胞増殖を特徴とする。この細胞増殖の正常な調節の喪失は、細胞周期全体の進行を制御する細胞経路に対する遺伝子損傷の結果としてしばしば生じるらしい。

【0008】

真核生物では、秩序だったタンパク質リン酸化のカスケードが細胞周期を制御すると考えられている。このカスケードにおいて必須の役割を担うプロテインキナーゼのいくつかのファミリーがすでに同定されている。ヒトの腫瘍では、正常組織と比較するときに、これらキナーゼの多くの活性が増加している。このことは、このタンパク質の発現レベルの増加（例えば、遺伝子増幅の結果として）によって、又は活性化補助因子又は阻害タンパク質の発現の変化によって起こり得る。

【0009】

オーロラキナーゼ（Aurora Kinases）（オーロラＡ、オーロラＢ、及びオーロラＣ）は、細胞周期調節性のセリン−スレオニンプロテインキナーゼをコードする（Adams et al., 2001, Trends in Cell Biology. 11(2): 49-54 に概説されている）。これらは、Ｇ２と有糸分裂期を通して発現及びキナーゼ活性のピークを示して、癌におけるヒトのオーロラキナーゼの役割が久しく示唆されてきた。

【0010】

バラセルチブ（barasertib）としても知られる、下記に図示したＡＺＤ１１５２（２−（エチル（３−（（４−（（５−（２−（（３−フルオロフェニル）アミノ）−２−オキソエチル）−１Ｈ−ピラゾール−３−イル）アミノ）キナゾリン−７−イル）オキシ）プロピル）アミノ）エチル二水素リン酸塩）として知られるオーロラキナーゼ阻害剤は、国際特許出願ＷＯ２００４／０５８７８１（実施例３９）に初めて開示されて、アストラゼネカ社によって、様々な癌の潜在的な治療薬として研究されてきた。しかしながら、数日にわたって連続的に送達される静脈内溶液剤としてのＡＺＤ１１５２の臨床投与には、いくつかの実践的な課題がある。

【0011】

【化1】

【0012】

ＡＺＤ１１５２は、生体内で、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ（２−（３−（（７−（３−（エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ）プロポキシ）キナゾリン−４−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−Ｎ−（３−フルオロフェニル）アセトアミド）として知られる化合物（やはりＷＯ２００４／０５８７８１に開示されている）へ代謝されることが知られている。実は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、大きな程度で、ＡＺＤ１１５２自体が投与されるときに生物学的効果を発揮する部分なのである。しかしながら、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの医薬組成物、特に実用的な投与に適したものについては、これまで具体的に記載されることも検証されることも無かった。

【0013】

【化2】

【0014】

ＷＯ２０１４／０４３６２５には、プロトン化可能な窒素のある基礎治療薬剤が含まれるナノ粒子製剤について記載されている。

【発明の概要】

【0015】

本明細書に記載するのは、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩が治療薬剤として含まれる重合性ナノ粒子と、そのような治療用ナノ粒子を作製して使用する方法である。

【0016】

本明細書では、「治療薬剤」（the or a therapeutic agent）と言えば、文脈が他に示さなければ、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を意味すると理解されたい。

【0017】

特に、治療薬剤は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａである。

【0018】

１つの側面では、治療用ナノ粒子を提供する。この治療用ナノ粒子は、約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと約０．２〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩、特にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0019】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと好適な重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0020】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体、疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0021】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体、並びにコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0022】

本明細書では、ジオクチルスルホコハク酸をドクサート酸とも呼ぶ。スルホコハク酸ジオクチルナトリウムは、ドクサートナトリウムとしても知られている。

【0023】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体、及びパモ酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0024】

別の側面では、好適な重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の混合物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0025】

別の側面では、好適な重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の相互作用によって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0026】

さらなる側面では、好適な重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の間で形成される疎水性イオン対を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0027】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体、及び疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0028】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の混合物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0029】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の相互作用によって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0030】

さらなる側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の間で形成される疎水性イオン対を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0031】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体、並びにコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0032】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体、及びパモ酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0033】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸の混合物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0034】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸の相互作用によって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0035】

さらなる側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸の間で形成される疎水性イオン対を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0036】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとパモ酸の混合物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0037】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0038】

さらなる側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体と、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0039】

別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、並びにコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0040】

別の側面では、約５０〜約９４．９５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩、特にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0041】

別の側面では、約５０〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩、特にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0042】

別の側面では、治療用ナノ粒子を提供する。この治療用ナノ粒子は、約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、及びジオクチルスルホコハク酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。別の側面では、コール酸とデオキシコール酸の混合物を該ナノ粒子の約０．０５〜約３５重量パーセントの全量で使用する。さらなる側面において、疎水性酸は、オレイン酸である。

【0043】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0044】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0045】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約６５〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0046】

別の側面では、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、
ａ）約１〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）；及び
ｂ）約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの混合物を含む。

【0047】

別の側面では、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、
ａ）約１〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）；及び
ｂ）約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの相互作用によって得られる生成物を含む。

【0048】

さらなる側面では、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、
ａ）約１〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）；及び
ｂ）約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの間で形成される疎水性イオン対を含む。

【0049】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0050】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0051】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約５５〜約８０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１０〜約２０重量パーセントのパモ酸、及び約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0052】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0053】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0054】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約５５〜約８５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約５〜約２０重量パーセントのパモ酸、及び約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0055】

別の側面では、約５５〜約８５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約５〜約２０重量パーセントのパモ酸の混合物を含む。

【0056】

別の側面では、約５５〜約８５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約５〜約２０重量パーセントのパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含む。

【0057】

さらなる側面では、約５５〜約８５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約５〜約２０重量パーセントのパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含む。

【0058】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0059】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含む。

【0060】

さらなる側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含む。

【0061】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。

【0062】

別の側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0063】

さらなる側面では、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0064】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約６５〜約７６重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約２０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約９〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0065】

いくつかの態様において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、ポリ（乳）酸を約０．７〜約０．９の数平均分子量比率で有する。他の態様において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、ポリ（乳）酸を約０．７５〜約０．８５の数平均分子量比率で有する。

【0066】

ある態様では、想定されるナノ粒子が約１０〜約２５重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む。他の態様では、想定されるナノ粒子が約２０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む。

【0067】

いくつかの態様において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。他の態様において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。

【0068】

ある態様では、想定されるナノ粒子が約６５重量パーセント〜約８５重量パーセントの共重合体を含む。

【0069】

いくつかの態様では、想定されるナノ粒子が、７０〜１４０ｎｍのような、２００ｎｍ未満の流体力学的径を有する。

【0070】

いくつかの態様では、想定されるナノ粒子が、本明細書では「疎水性酸」とも呼ばれる、実質的に疎水性の酸を含む。例えば、想定されるナノ粒子は、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸、又は約１０〜約２０重量パーセントの実質的に疎水性の酸を含み得る。想定されるナノ粒子は、他の態様において、約５〜約２０重量パーセントの実質的に疎水性の酸を含み得る。ある態様では、１種より多くの実質的に疎水性の酸を使用し得て、この想定されるナノ粒子は、全部で約５〜約１５重量パーセント又は約１０〜約２０重量パーセントの疎水性酸を一緒に含み得る。想定されるナノ粒子は、他の態様において、デオキシコール酸、コール酸、デオキシコール酸とコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択される、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸を含み得る。

【0071】

ある態様において、実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比は、約０．９：１〜約１．１：１であり、ここでこの酸は、デオキシコール酸である。他の態様において、実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比は、約０．９：１〜約１．１：１であり、ここでこの酸は、ジオクチルスルホコハク酸である。さらなる態様において、疎水性酸の内容は、デオキシコール酸とコール酸の混合物を、例えば、約３：２のデオキシコール酸：コール酸のような、１：５と５：１の間のデオキシコール酸：コール酸の比で含む。他の態様において、実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比は、約０．７５：１〜約１．０：１であり、ここでこの酸は、パモ酸である。

【0072】

いくつかの態様では、治療薬剤のｐＫ_ａが疎水性酸のｐＫ_ａより少なくとも約１．０ｐＫ_ａ単位だけ高い。

【0073】

ある態様において、実質的に疎水性の酸と治療薬剤は、想定される治療用ナノ粒子において、疎水性イオン対を形成する。いくつかの態様において、疎水性酸は、胆汁酸である。例えば、いくつかの態様において、胆汁酸は、デオキシコール酸である。他の態様において、胆汁酸は、コール酸である。なおさらなる態様において、胆汁酸は、デオキシコール酸とコール酸の混合物である。他の態様において、疎水性酸は、ジオクチルスルホコハク酸である。なおさらなる態様において、疎水性酸は、オレイン酸である。さらなる態様において、疎水性酸は、パモ酸である。

【0074】

いくつかの態様では、想定されるナノ粒子が約５〜約２０重量パーセントの治療薬剤を含む。他の態様では、想定されるナノ粒子が約１０〜約２０重量パーセントの治療薬剤を含む。他の態様では、想定されるナノ粒子が約１５〜約２０重量パーセントの治療薬剤を含む。他の態様では、想定されるナノ粒子が約８〜約１５重量パーセントの治療薬剤を含む。他の態様では、想定されるナノ粒子が約８〜約２０重量パーセントの治療薬剤を含む。

【0075】

どの好ましい製剤の組成も、いくつかの考慮因子（factors）の均衡物であり得て、それには、限定されないが、以下が含まれる：
可能であれば、患者へ投与されるべき医薬組成物の容量を最小化して薬物負荷を増加させた製剤；
大規模製造で再現可能で確実に達成され得る製剤；
治療薬剤の経時的な放出プロフィールを最適化する製剤；
疾患部位へ選好的に分布する製剤。

【0076】

さらなる考慮因子は、下記の「実施例」中の動物モデルにおいて例示されるように、投薬後に患者の骨髄に対して抑制又は最小の有害効果を及ぼす製剤であり得る。

【0077】

どの特別な好ましい製剤でも、上記考慮因子のあらゆる１以上が考慮され得る。

【0078】

別の側面では、本明細書において記載又は例示されるどの方法によっても入手可能なナノ粒子を提供する。別の側面では、本明細書において記載又は例示されるどの方法によっても入手されるナノ粒子を提供する。さらなる側面では、実質的に本明細書に記載されるような治療用ナノ粒子を提供する。

【0079】

別の側面では、医薬的に許容される組成物を提供する。この医薬的に許容される組成物は、複数の想定される治療用ナノ粒子と医薬的に許容される賦形剤を含む。

【0080】

なお別の側面では、癌（例えば、限定されないが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）やびまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫のような血液癌と、結直腸癌や肺癌のような固形腫瘍癌が含まれる）を治療することの必要な患者においてそれを治療する方法を提供する。この方法は、本発明で想定される治療用ナノ粒子を含んでなる治療有効量の組成物を該患者へ投与することを含む。

【図面の簡単な説明】

【0081】

【図1】図面１は、開示されるナノ粒子を生成するためのエマルジョン法のフローチャートである。

【図2A】図面２Ａと図面２Ｂは、開示されるエマルジョン法のフロー図を示す。

【図2B】図面２Ａと図面２Ｂは、開示されるエマルジョン法のフロー図を示す。

【図3】図面３は、対照の治療用ナノ粒子製剤についてのインビトロ（in vitro）放出プロフィールを図示する。

【図4】図面４は、デオキシコール酸ナノ粒子製剤についてのインビトロ放出プロフィールを対照の治療用ナノ粒子製剤に対して図示する。

【図5】図面５は、ドクサート酸ナノ粒子製剤についてのインビトロ放出プロフィールを対照の治療用ナノ粒子製剤に対して図示する。

【図6】図面６は、雌性ヌードラットにおけるＳＷ６２０ヒト結直腸異種移植片モデルからの結果を図示する。

【図7】図面７は、１つのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤を用いた投薬スケジュール試験からの結果を図示する。

【図8】図面８は、インビボ（in-vivo）曝露試験における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子の血漿濃度のＡＺＤ１１５２ ＩＶに対する比較を図示する。

【図9】図面９は、パモ酸ナノ粒子製剤のインビトロ放出プロフィールを対照の治療用ナノ粒子製剤に対して図示する。

【図10】図面１０は、３種のナノ粒子製剤について比較した薬物動態プロフィールを図示する。

【図11】図面１１は、ＳＷ６２０試験からの結果の比較を図示する。

【図12】図面１２は、ＳＷ６２０試験からの結果のさらなる比較を図示する。

【図13】図面１３は、あるナノ粒子製剤の骨髄への効果を図示する。

【図14】図面１４は、あるナノ粒子製剤の骨髄への効果を図示する。

【図15】図面１５は、ＡＺＤ１１５２とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのナノ粒子製剤Ｇ１及びＧ２のインビボ活性を図示する。

【図16】図面１６は、骨髄無傷性（integrity）に対する製剤Ｇ１と製剤Ｇ２の効果を図示する。

【図17】図面１７は、担Ｕ２９３２腫瘍マウスにおける、製剤Ｇ１由来の腫瘍制御とＡＺＤ１１５２由来のそれとの間の比較を図示する。

【図18】図面１８は、担ＳＣ−６１原発性腫瘍マウスにおける、製剤Ｇ１由来の腫瘍制御とＡＺＤ１１５２由来のそれとの間の比較を図示する。

【図19-1】図面１９と図面１９ａ〜１９ｅは、製剤Ｅ〜製剤Ｇについて比較した薬物動態プロフィールを図示する。

【図19-2】図面１９と図面１９ａ〜１９ｅは、製剤Ｅ〜製剤Ｇについて比較した薬物動態プロフィールを図示する。

【図19-3】図面１９と図面１９ａ〜１９ｅは、製剤Ｅ〜製剤Ｇについて比較した薬物動態プロフィールを図示する。

【図20】図面２０は、実施例１１に示す製剤Ｇ１バッチの３７℃でのインビトロ放出を図示する。

【発明を実施するための形態】

【0082】

本明細書に記載するのは、治療薬剤としてのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩が含まれる重合性ナノ粒子と、そのような治療用ナノ粒子を作製して使用する方法である。いくつかの態様では、開示されるナノ粒子における、実質的に疎水性の酸（胆汁酸又は本明細書に開示するような他の好適な酸のような）の包含（調合）、及び／又はナノ粒子製造法における包含は、改善された薬物負荷が含まれるナノ粒子をもたらす場合がある。さらに、ある態様では、疎水性酸が含まれる、及び／又はその存在下で製造されるナノ粒子は、改善された制御放出特性を明示する場合がある。例えば、開示されるナノ粒子は、疎水性酸の非存在下で製造されるナノ粒子と比べて、治療薬剤をよりゆっくりと放出する場合がある。

【0083】

どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、疎水性酸（胆汁酸又は本明細書に開示するような他の好適な酸のような）が含まれる、開示されるナノ粒子製剤が有意に改善された製剤特性（例、薬物負荷及び／又は放出プロフィール）を有するのは、それが実質的に疎水性の酸と、例えば治療薬剤のアミン基の間の疎水性イオン対（ＨＩＰ）の形成を介して生じ得るためと考えられている。本明細書に使用するように、ＨＩＰは、クーロン引力によって一緒になった、反対に帯電したイオンの対である。また、どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、いくつかの態様では、ＨＩＰを使用して、治療薬剤の疎水性を高めることができる。いくつかの態様では、疎水性が高まった治療薬剤がナノ粒子製剤にとって有益であり得て、この治療薬剤の有機溶媒におけるより高い溶解度をもたらし得る、ＨＩＰ形成を生じる可能性がある。ＨＩＰ形成は、本発明で想定されるように、例えば、薬物負荷が増加したナノ粒子をもたらす可能性がある。例えば、いくつかの態様では、治療薬剤の水溶液中の溶解度の減少により、治療薬剤のナノ粒子からのより遅い放出も起こり得る。さらに、治療薬剤を大きな疎水性の対イオンと複合させることで、治療薬剤の重合性マトリックス内での拡散を遅らせることができる。有利にも、ＨＩＰ形成は、疎水性基の治療薬剤への共有結合（covalent conjugation）を必要とせずに生じる。

【0084】

どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、ＨＩＰの強度は、想定されるナノ粒子の薬物負荷と放出速度に影響を及ぼし得ると考えられている。例えば、ＨＩＰの強度は、以下でより詳しく考察するように、治療薬剤のｐＫ_ａと疎水性酸のｐＫ_ａの間の差の大きさを増やすことによって高めることができる。また、どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、イオン対形成の諸条件は、想定されるナノ粒子の薬物負荷と放出速度に影響を及ぼす場合があると考えられている。

【0085】

開示される製剤中でのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の間の（上記に記載したような）相互作用の正確な本質が何であれ、好ましい製剤は、下記により詳しく考察するように、疎水性酸を含んでなるものであって、高い薬物負荷（例えば、約１５〜約２２重量％、又は約１５〜約２０重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのような、約１５〜約２５重量パーセント（重量％）のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ）と好適な放出プロフィールを有するものである。好適にも、このような製剤はまた、ＡＺＤ１１５２を含む他の製剤と比較して、骨髄に対して低下した影響を有する。

【0086】

本明細書に開示するナノ粒子には、１、２、３以上の生体適合性及び／又は生分解性ポリマーが含まれる。例えば、想定されるナノ粒子には、約３５〜約９９．７５重量パーセントの間、いくつかの態様では約５０〜約９９．７５重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９９．５重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９９重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９８重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９７重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９６重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９５重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９４重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９３重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９２重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９１重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約９０重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約８５重量パーセント、いくつかの態様では約５０〜約８０重量パーセント、そしていくつかの態様では約６５〜約８５重量パーセントの１以上のブロック共重合体（これには、生分解性ポリマーとポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）が含まれる）と、約０〜約５０重量パーセントの生分解性ホモポリマーが含まれ得る。

【0087】

ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ
開示されるナノ粒子には、治療薬剤としてのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ（ｐＫ_ａ１＝５．７；ｐＫ_ａ２＝８．４６）又はその医薬的に許容される塩が含まれる。本明細書では、治療薬剤と言えば、文脈が他に示さなければ、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩、しかし特にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを意味すると理解されたい。

【0088】

本発明の第一の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなるナノ粒子を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の相互作用によって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸を混合することによって得られる生成物を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の間の疎水性イオン対を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。

【0089】

本発明の別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａをナノ粒子に含んでなる医薬組成物を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸を含んでなる治療用ナノ粒子を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の相互作用によって得られる生成物を含む治療用ナノ粒子を含んでなる医薬組成物を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸を混合することによって得られる生成物を含む治療用ナノ粒子を含んでなる医薬組成物を提供する。本発明のさらなる側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸の間の疎水性イオン対を含む治療用ナノ粒子を含んでなる医薬組成物を提供する。

【0090】

本発明の別の側面では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを有効成分として含有する複数の治療用ナノ粒子を含んでなる医薬組成物を提供する。そのようなナノ粒子は、好適にも、該ナノ粒子においてＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと混合された、パモ酸のような疎水性酸も含有して、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体のような好適な重合体をさらに含有する。

【0091】

ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの好適な医薬的に許容される塩は、例えば、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、又はトリフルオロ酢酸のような強い無機酸又は有機酸との酸付加塩であり得る。他の好適な医薬的に許容される塩には、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩、及びｐ−トルエンスルホン酸塩が含まれる。なおさらに好適な医薬的に許容される塩には、本明細書に定義される疎水性酸のような酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの塩が含まれる。製造プロセスの中へ投入される、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの好適な塩のための対イオンは、本明細書に記載されるようなナノ粒子の生成のプロセスに干渉しないように選択しなければならないと理解されよう。簡便には、製造溶液から容易に洗い流せるか又はこの製造プロセスにすでに存在している対イオンに対応する対イオンを使用してよい。

【0092】

いくつかの態様では、開示されるナノ粒子に、約０．２〜約３５重量パーセント、約０．２〜約２０重量パーセント、約０．２〜約１０重量パーセント、約０．２〜約５重量パーセント、約０．５〜約５重量パーセント、約０．７５〜約５重量パーセント、約１〜約５重量パーセント、約２〜約５重量パーセント、約３〜約５重量パーセント、約１〜約２０重量パーセント、約２〜約２０重量パーセント、約５〜約２０重量パーセント、約１〜約１５重量パーセント、約２〜約１５重量パーセント、約３〜約１５重量パーセント、約４〜約１５重量パーセント、約５〜約１５重量パーセント、約１〜約１０重量パーセント、約２〜約１０重量パーセント、約３〜約１０重量パーセント、約４〜約１０重量パーセント、約５〜約１０重量パーセント、約１０〜約３０重量パーセント、約１５〜約２５、又は約１５〜約２０重量パーセントの治療薬剤が含まれ得る。

【0093】

特別な側面では、開示されるナノ粒子に、約５〜約２０、好ましくは約１０〜約２０、なおより好ましくは約１５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、又は約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが含まれ得る。

【0094】

疎水性酸
ある態様では、開示されるナノ粒子が疎水性酸（例、胆汁酸）を含む、及び／又は疎水性酸が含まれる方法によって製造される。そのようなナノ粒子は、疎水性酸無しの方法によって製造されるナノ粒子より高い薬物負荷を有する場合がある。例えば、疎水性酸を含んでなる方法によって製造される開示されるナノ粒子の薬物負荷（例、重量）は、疎水性酸無しの方法によって製造される開示されるナノ粒子よりも、約２倍〜約１０倍の間高い、又はそれよりずっと高い場合がある。いくつかの態様において、疎水性酸を含んでなる第一の方法によって製造される開示されるナノ粒子の薬物負荷（重量）は、第二の方法によって製造される開示されるナノ粒子よりも、少なくとも約２倍高い、少なくとも約３倍高い、少なくとも約４倍高い、少なくとも約５倍高い、又は少なくとも約１０倍高い場合があり、ここで第二の方法は、この第二の方法に疎水性酸が含まれないこと以外は、第一の方法と同一である。

【0095】

どの好適な疎水性酸も、想定される。いくつかの態様において、疎水性酸は、カルボン酸（例、モノカルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸、又は同等物）、スルフィン酸、スルフェン酸、又はスルホン酸であってよい。いくつかの事例では、想定される疎水性酸に、２種以上の酸の混合物が含まれ得る。いくつかの事例では、疎水性酸の塩を製剤中に使用してよい。本明細書では、「疎水性酸」と言えば、文脈が他に求めなければ、想定される疎水性酸の混合物にも同様に適用されると理解されたい。

【0096】

例えば、開示されるカルボン酸は、脂肪族カルボン酸（例、環式又は非環式、分岐鎖又は非分岐鎖の炭化水素鎖を有するカルボン酸）であってよい。いくつかの態様では、開示されるカルボン酸が、限定されないが、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩ）、スルホニル、ニトロ、及びオキソが含まれる、１以上の官能基で置換されてよい。ある態様では、開示されるカルボン酸が未置換であってよい。

【0097】

例示のカルボン酸には、置換又は未置換の脂肪酸（例、Ｃ_６〜Ｃ_５０脂肪酸）が含まれ得る。いくつかの事例において、脂肪酸は、Ｃ_１０〜Ｃ_２０脂肪酸であってよい。他の事例において、脂肪酸は、Ｃ_１５〜Ｃ_２０脂肪酸であってよい。脂肪酸は、いくつかの事例において、飽和であってよい。他の態様において、脂肪酸は、不飽和であってよい。例えば、脂肪酸は、一価不飽和脂肪酸でも多価不飽和脂肪酸でもよい。いくつかの態様では、不飽和脂肪酸基の二重結合がシス（cis）コンホメーションであり得る。いくつかの態様では、不飽和脂肪酸の二重結合がトランス（trans）コンホメーションであり得る。不飽和脂肪酸には、限定されないが、ω−３、ω−６、及びω−９脂肪酸が含まれる。

【0098】

飽和脂肪酸の非限定的な例には、カプロン酸、エナント酸、カプリル酸、ペラルゴン酸、カプリン酸、ウンデカン酸、ラウリン酸、トリデカン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、パルミチン酸、マルガリン酸、ステアリン酸、ノナデカン酸、アラキジン酸、ヘンエイコサン酸、ベヘン酸、トリコサン酸、リグノセリン酸、ペンタコサン酸、セロチン酸、ヘプタコサン酸、モンタン酸、ノナコサン酸、メリシン酸、ヘナトリアコンタン酸、ラッセル酸、プシル（psyllic）酸、ゲダ酸、セロプラスチン酸、ヘキサトリアコンタン酸、及びこれらの組合せが含まれる。

【0099】

不飽和脂肪酸の非限定的な例には、ヘキサデカトリエン酸、α−リノレイン酸、ステアリドン酸、エイコサトリエン酸、エイコサテトラエン酸、エイコサペンタエン酸、ヘンエイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、テトラコサペンタエン酸、テトラコサヘキサエン酸、リノール酸、γ−リノレイン酸、エイコサジエン酸、ジホモ−γ−リノレイン酸、アラキドン酸、ドコサジエン酸、アドレン酸、ドコサペンタエン酸、テトラコサテトラエン酸、テトラコサペンタエン酸、オレイン酸（ｐＫ_ａ＝約４〜５；ｌｏｇＰ＝６．７８）、エイコセン酸、ミード酸、エルカ酸、ネルボン酸、ルメン酸、α−カレンド酸、β−カレンド酸、ジャカル酸、α−エレオステアリン酸、β−エレオステアリン酸、カタルプ酸、プニカ酸、ルメレン酸、α−パリナリン酸、β−パリナリン酸、ボセオペンタエン酸、ピノレン酸、ポドカプリン酸、パルミトレイン酸、バクセン酸、ガドレイン酸、エルカ酸、及びこれらの組合せが含まれる。

【0100】

疎水性酸の他の非限定的な例には、１−ヒドロキシ−２−ナフト酸（キシナホ酸としても知られている）（ｐＫ_ａ＝約２〜３；ｌｏｇＰ＝２．９７）、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸（ｐＫ_ａ＝−２；ｌｏｇＰ＝１．３）、ナフタレン−２−スルホン酸（ｐＫ_ａ＝−１．８；ｌｏｇＰ＝２．１）、パモ酸（ｐＫ_ａ＝２．４）、ケイ皮酸、フェニル酢酸、（±）−カンファー−１０−スルホン酸、ドデシルベンゼンスルホン酸（ｐＫ_ａ＝−１．８；ｌｏｇＰ＝６．６）、及びこれらの組合せのような芳香族酸が含まれる。疎水性酸の他の非限定的な例には、ドデシル硫酸（ｐＫ_ａ＝−０．０９；ｌｏｇＰ＝４．５）、ジオクチルスルホコハク酸（ｐＫ_ａ＝−０．８；ｌｏｇＰ＝５．２）、ジオレオイルホスファチジン酸（ｐＫ_ａ＝〜２）、及びビタミンＤ_３硫酸塩（ｐＫ_ａ＝−１．５）が含まれる。

【0101】

いくつかの態様において、疎水性酸は、胆汁酸であってよい。胆汁酸の非限定的な例には、ケノデオキシコール酸、ウルソデオキシコール酸、デオキシコール酸（ｐＫ_ａ＝４．６５；ｌｏｇＰ＝３．７９）、ハイコール酸、β−ムリコール酸、コール酸（ｐＫ_ａ＝約４．５；ｌｏｇＰ＝２．４８）、タウロコール酸、硫酸コレステリル（ｐＫ_ａ＝−１．４）、リトコール酸、アミノ酸抱合胆汁酸、及びこれらの組合せが含まれる。いくつかの態様では、コール酸とデオキシコール酸の混合物を使用してよい。アミノ酸抱合胆汁酸は、どの好適なアミノ酸へも抱合してよい。いくつかの態様において、アミノ酸抱合胆汁酸は、グリシン抱合胆汁酸又はタウリン抱合胆汁酸である。

【0102】

ある事例において、疎水性酸は、高分子電解質であってよい。例えば、高分子電解質は、ポリスルホン酸（例、ポリ（スチレンスルホン酸）又は硫酸デキストラン）又はポリカルボン酸（例、ポリポリアクリル酸又はポリメタクリル酸）であってよい。

【0103】

１つの側面において、疎水性酸は、コール酸、デオキシコール酸（コール酸とデオキシコール酸の混合物が含まれる）、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択される。

【0104】

別の側面において、疎水性酸は、パモ酸である。

【0105】

いくつかの事例では、想定される酸が、約１０００Ｄａ未満、いくつかの態様では約５００Ｄ未満、いくつかの態様では約４００Ｄａ未満、いくつかの態様では約３００Ｄａ未満、いくつかの態様では約２５０Ｄａ未満、いくつかの態様では約２００Ｄａ未満、そしていくつかの態様では約１５０Ｄａ未満の分子量を有し得る。いくつかの事例では、該酸が、約１００Ｄａと約１０００Ｄａの間、いくつかの態様では約２００Ｄａと約８００Ｄａの間、いくつかの態様では約２００Ｄａと約６００Ｄａの間、いくつかの態様では約１００Ｄａと約３００Ｄａの間、いくつかの態様では約２００Ｄａと約４００Ｄａの間、いくつかの態様では約３００Ｄａと約５００Ｄａの間、そしていくつかの態様では約３００Ｄａと約１０００Ｄａの間の分子量を有し得る。ある態様では、想定される酸が、約３００Ｄａより大きい、いくつかの態様では４００Ｄａより大きい、そしていくつかの態様では５００Ｄａより大きい分子量を有し得る。ある態様において、治療薬剤のナノ粒子からの放出速度は、このナノ粒子製剤中に使用される疎水性酸の分子量を高めることによって遅くすることができる。

【0106】

いくつかの態様では、疎水性酸を、少なくとも一部は該酸の強さに基づいて選択してよい。例えば、疎水性酸は、２５℃で決定される、約−５〜約７、いくつかの態様では約−３〜約５、いくつかの態様では約−３〜約４、いくつかの態様では約−３〜約３．５、いくつかの態様では約−３〜約３、いくつかの態様では約−３〜約２、いくつかの態様では約−３〜約１、いくつかの態様では約−３〜約０．５、いくつかの態様では約−０．５〜約０．５、いくつかの態様では約１〜約７、いくつかの態様では約２〜約７、いくつかの態様では約３〜約７、いくつかの態様では約４〜約６、いくつかの態様では約４〜約５．５、いくつかの態様では約４〜約５、そしていくつかの態様では約４．５〜約５の水中の酸解離定数（ｐＫ_ａ）を有し得る。いくつかの態様において、該酸は、２５℃で決定される、約７未満、約５未満、約３．５未満、約３未満、約２未満、約１未満、又は約０未満のｐＫ_ａを有し得る。

【0107】

ある態様において、疎水性酸は、少なくとも一部は、疎水性酸のｐＫ_ａと治療薬剤のｐＫ_ａの間の差に基づいて選択され得る。例えば、いくつかの事例において、疎水性酸のｐＫ_ａと治療薬剤のｐＫ_ａの間の差は、２５℃で決定される、約１ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約１ｐＫ_ａ単位と約１０ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約１ｐＫ_ａ単位と約５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約１ｐＫ_ａ単位と約３ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約１ｐＫ_ａ単位と約２ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約２ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約２ｐＫ_ａ単位と約１０ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約２ｐＫ_ａ単位と約５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約２ｐＫ_ａ単位と約３ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約３ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約３ｐＫ_ａ単位と約１０ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約３ｐＫ_ａ単位と約５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約４ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約４ｐＫ_ａ単位と約１０ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約４ｐＫ_ａ単位と約６ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約５ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約５ｐＫ_ａ単位と約１０ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約５ｐＫ_ａ単位と約７ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約７ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約７ｐＫ_ａ単位と約９ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約９ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約９ｐＫ_ａ単位と約１１ｐＫ_ａ単位の間、いくつかの態様では約１１ｐＫ_ａ単位と約１３ｐＫ_ａ単位の間、そしていくつかの態様では約１３ｐＫ_ａ単位と約１５ｐＫ_ａ単位の間の差であってよい。

【0108】

いくつかの事例において、疎水性酸のｐＫ_ａと治療薬剤のｐＫ_ａの間の差は、２５℃で決定される、少なくとも約１ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約２ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約３ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約４ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約５ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約６ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約７ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約８ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約９ｐＫ_ａ単位、いくつかの態様では少なくとも約１０ｐＫ_ａ単位、そしていくつかの態様では少なくとも約１５ｐＫ_ａ単位であってよい。

【0109】

１つの態様において、疎水性酸のｐＫ_ａとＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの第一ｐＫ_ａの間の差は、２５℃で決定される、２ｐＫ_ａ単位と５ｐＫ_ａ単位の間にある。

【0110】

疑念の回避のために言えば、パモ酸（４，４’−メチレンビス［３−ヒドロキシ−２−ナフト酸］）は、３８８．３７の分子量を有して、ｐＫａ^１＝２．６７とｌｏｇＰ＝６．１６９を有すると報告されている（SciFinder）。

【0111】

いくつかの態様において、疎水性酸は、約２と約１５の間、いくつかの態様では約５と約１５の間、いくつかの態様では約５と約１０の間、いくつかの態様では約２と約８の間、いくつかの態様では約４と約８の間、いくつかの態様では約２と約７の間、又はいくつかの態様では約４と約７の間のｌｏｇＰを有し得る。いくつかの事例において、疎水性酸は、約２より大きい、約４より大きい、約５より大きい、又は６より大きいｌｏｇＰを有し得る。

【0112】

いくつかの態様では、想定される疎水性酸が、例えば、治療用ナノ粒子の特性を改善するために有利である相転移温度を有し得る。例えば、該酸は、約３００℃未満、いくつかの事例では約１００℃未満、そしていくつかの事例では約５０℃未満の融点を有し得る。ある態様において、該酸は、約５℃と約２５℃の間、いくつかの事例では約１５℃と約５０℃の間、いくつかの事例では約３０℃と約１００℃の間、いくつかの事例では約７５℃と約１５０℃の間、いくつかの事例では約１２５℃と約２００℃の間、いくつかの事例では約１５０℃と約２５０℃の間、そしていくつかの事例では約２００℃と約３００℃の間の融点を有し得る。いくつかの事例において、該酸は、約１５℃未満、いくつかの事例では約１０℃未満、又はいくつかの事例では約０℃未満の融点を有し得る。ある態様において、該酸は、約−３０℃と約０℃の間、又はいくつかの事例では約−２０℃と約−１０℃の間の融点を有し得る。

【0113】

例えば、本明細書に開示する方法及びナノ粒子における使用のための酸を、少なくとも一部は、該酸を含んでなる溶媒中の治療薬剤の溶解度に基づいて選択してよい。例えば、いくつかの態様において、該酸を含んでなる溶媒に溶けた治療薬剤は、約１５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約２０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約７５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの間、約１２５ｍｇ／ｍＬ〜約１７５ｍｇ／ｍＬの間、約１５ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬの間、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約７５ｍｇ／ｍＬの間の溶解度を有し得る。いくつかの態様において、該酸を含んでなる溶媒に溶けた治療薬剤は、約１０ｍｇ／ｍＬより大きい、約５０ｍｇ／ｍＬより大きい、又は約１００ｍｇ／ｍＬより大きい溶解度を有し得る。いくつかの態様において、疎水性酸を含んでなる溶媒に溶けた治療薬剤（例、治療薬剤、溶媒、及び疎水性酸からなる第一溶液）は、疎水性酸を含有しない溶媒に該治療薬剤が溶けている場合（例、治療薬剤と溶媒からなる第二溶液）よりも、少なくとも約２倍大きい、いくつかの態様では少なくとも約５倍大きい、いくつかの態様では少なくとも約１０倍大きい、いくつかの態様では少なくとも約２０倍大きい、いくつかの態様では約２倍〜約２０倍大きい、又はいくつかの態様では約１０倍〜約２０倍より大きい溶解度を有し得る。

【0114】

いくつかの事例において、薬物溶液（治療薬剤の溶液）中の酸の濃度は、約１重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約２重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約３重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約４重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約５重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約６重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約８重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１０重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１２重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１４重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１６重量パーセントと約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１重量パーセントと約５重量パーセントの間、いくつかの態様では約３重量パーセントと約９重量パーセントの間、いくつかの態様では約６重量パーセントと約１２重量パーセントの間、いくつかの態様では約９重量パーセントと約１５重量パーセントの間、いくつかの態様では約１２重量パーセントと約１８重量パーセントの間、そしていくつかの態様では約１５重量パーセントと約２１重量パーセントの間であってよい。ある態様において、疎水性酸の薬物溶液中の濃度は、少なくとも約１重量パーセント、いくつかの態様では少なくとも約２重量パーセント、いくつかの態様では少なくとも約３重量パーセント、いくつかの態様では少なくとも約５重量パーセント、いくつかの態様では少なくとも約１０重量パーセント、いくつかの態様では少なくとも約１５重量パーセント、そしていくつかの態様では少なくとも約２０重量パーセントであってよい。

【0115】

ある態様において、疎水性酸の治療薬剤に対するモル比（例、初めはナノ粒子の製剤化の間、及び／又はナノ粒子中のモル比）は、約０．２５：１〜約６：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約５：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約４：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約３：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約２：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約１．５：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約１：１の間、いくつかの態様では約０．２５：１〜約０．５：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約６：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約５：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約４：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約３：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約２：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約１．５：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約１：１の間、いくつかの態様では約０．５：１〜約０．７５：１の間、いくつかの態様では約０．７５：１〜約２：１の間、いくつかの態様では約０．７５：１〜約１．５：１の間、いくつかの態様では約０．７５：１〜約１．２５：１の間、いくつかの態様では約０．７５：１〜約１：１の間、いくつかの態様では約１：１〜約６：１の間、いくつかの態様では約１：１〜約５：１の間、いくつかの態様では約１：１〜約４：１の間、いくつかの態様では約１：１〜約３：１の間、いくつかの態様では約１：１〜約２：１の間、いくつかの態様では約１：１〜約１．５：１の間、いくつかの態様では約１．５：１〜約６：１の間、いくつかの態様では約１．５：１〜約５：１の間、いくつかの態様では約１．５：１〜約４：１の間、いくつかの態様では約１．５：１〜約３：１の間、いくつかの態様では約２：１〜約６：１の間、いくつかの態様では約２：１〜約４：１の間、いくつかの態様では約３：１〜約６：１の間、いくつかの態様では約３：１〜約５：１の間、そしていくつかの態様では約４：１〜約６：１の間であってよい。いくつかの態様において、その比は、約２：１である。

【0116】

他の態様において、疎水性酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対する、ナノ粒子の生成の間（それらが最初に一緒に混合されるとき）のモル比は、約０．７５：１〜約１：１、例えば約０．８：１〜約１：１である。１つの態様において、疎水性酸はパモ酸であって、パモ酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対する、ナノ粒子の生成の間（それらが最初に一緒に混合されるとき）のモル比は、約０．７５：１〜約１：１、例えば約０．８：１〜約１：１である。この態様は、本明細書の実施例７、実施例７ａ、及び実施例７ｂに例示される。１つの態様において、パモ酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対する、それらが最初に一緒に混合されるときのモル比は、約０．８：１であって、これは、実施例７と実施例７ｂで例示される。１つの態様において、パモ酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対する、それらが最初に一緒に混合されるときのモル比は、約１：１であって、これは実施例７ａで例示される。

【0117】

いくつかの事例において、疎水性酸の治療薬剤に対する最初の（ナノ粒子の製剤化の間の）モル比は、疎水性酸の治療薬剤に対するナノ粒子中の（被包化されない疎水性酸及び治療薬剤の除去後の）モル比と異なる場合がある。他の事例において、疎水性酸の治療薬剤に対する最初の（ナノ粒子の製剤化の間の）モル比は、疎水性酸の治療薬剤に対するナノ粒子中の（被包化されない疎水性酸及び治療薬剤の除去後の）モル比と本質的に同じであってよい。例えば、実施例７と実施例７ｂによって例示される、本明細書においてＧ１と呼ばれる製剤において、パモ酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対する投入モル比は約０．８：１であるが、例示のＧ１中の最終モル比は約０．７６：１であって、製剤Ｇ１の典型的なバッチでは、約０．６５〜０．７５：１の間にある。同様に、実施例７ａのＧ２での投入比は約１：１であって、最終モル比は、例示されるように、約０．８７：１であり、典型的なバッチでは、約０．８５〜０．９５：１の間にある。

【0118】

いくつかの事例では、治療薬剤を含有する溶液を、重合体を含有する溶液とは別に調製してよくて、次いでこの２つの溶液をナノ粒子製剤化に先立って組み合わせてよい。例えば、１つの態様では、第一溶液が治療薬剤と疎水性酸を含有して、第二溶液が重合体を含有して疎水性酸を含有してもよい。第二溶液が疎水性酸を含有しない場合の製剤は、例えば、この方法に使用される疎水性酸の量を最小化するのに、又はいくつかの事例では、疎水性酸と、例えば、その疎水性酸の存在下で分解し得る重合体の間の接触時間を最小化するのに有利であり得る。他の事例では、治療薬剤、重合体、及び疎水性酸を含有する単一溶液を調製してよい。

【0119】

いくつかの態様では、ナノ粒子の製剤化に先立って、疎水性イオン対を形成してよい。例えば、想定されるナノ粒子を製剤化するのに先立って、疎水性イオン対を含有する溶液を調製してよい（例えば、治療薬剤と疎水性酸の好適な量を含有する溶液を調製することによって）。他の態様では、疎水性イオン対をナノ粒子の製剤化の間に形成してよい。例えば、治療薬剤を含有する第一溶液と疎水性酸を含有する第二溶液を、ナノ粒子を製造するためのプロセス工程の間に（例えば、エマルジョン生成に先立って、及び／又はエマルジョン生成の間に）組み合わせてよい。ある態様では、疎水性イオン対を、想定されるナノ粒子における治療薬剤と疎水性酸の被包化に先立って、形成してよい。他の態様では、疎水性イオン対を、ナノ粒子において、例えば、治療薬剤と疎水性酸の被包化の後で形成してよい。

【0120】

ある態様では、疎水性酸が、１００ｍＬの水につき約２ｇ未満、いくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１ｇ未満、いくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１００ｍｇ未満、いくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１０ｍｇ未満、そしていくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１ｍｇ未満の溶解度（２５℃で決定される）を有し得る。他の態様において、該酸は、１００ｍＬの水につき約１ｍｇ〜１００ｍＬの水につき約２ｇの間、いくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１ｍｇ〜１００ｍＬの水につき約１ｇの間、いくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１ｍｇ〜１００ｍＬの水につき約５００ｍｇの間、そしていくつかの態様では１００ｍＬの水につき約１ｍｇ〜１００ｍＬの水につき約１００ｍｇの間の溶解度（２５℃で決定される）を有し得る。いくつかの態様において、疎水性酸は、２５℃で、水に本質的に溶けない場合がある。

【0121】

いくつかの態様では、開示されるナノ粒子が、そのナノ粒子の製造の間に使用される疎水性酸を本質的に含まない場合がある。他の態様では、開示されるナノ粒子が疎水性酸を含み得る。例えば、いくつかの態様において、開示されるナノ粒子中の酸含量は、約０．０５重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約０．５重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約２重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約３重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約５重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約７重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１０重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約１５重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約２０重量パーセント〜約３０重量パーセントの間、いくつかの態様では約０．０５重量パーセント〜約０．５重量パーセントの間、いくつかの態様では約０．０５重量パーセント〜約５重量パーセントの間、いくつかの態様では約１重量パーセント〜約５重量パーセントの間、いくつかの態様では約３重量パーセント〜約１０重量パーセントの間、いくつかの態様では約５重量パーセント〜約１５重量パーセントの間、そしていくつかの態様では約１０重量パーセント〜約２０重量パーセントの間であってよい。

【0122】

放出プロフィール
いくつかの態様では、開示されるナノ粒子が、例えば、室温（例、２５℃）及び／又は３７℃でリン酸緩衝液中に置かれるとき、治療薬剤の約２％未満、約５％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、約３０％未満、又は４０％未満を実質的に即時に（例えば、約１分〜約３０分、約１分〜約２５分、約５分〜約３０分、約５分〜約１時間、約１時間、又は約２４時間にわたって）放出する。ある態様では、治療薬剤を含んでなるナノ粒子が、例えば２５℃及び／又は３７℃で水溶液（例、リン酸緩衝液）中に置かれるとき、約１時間にわたって放出される治療薬剤の約０．０１〜約５０％、いくつかの態様では約０．０１〜約２５％、いくつかの態様では約０．０１〜約１５％、いくつかの態様では約０．０１〜約１０％、いくつかの態様では約１〜約４０％、いくつかの態様では約５〜約４０％、そしていくつかの態様では約１０〜約４０％に実質的に相当する速度で治療薬剤を放出し得る。いくつかの態様では、治療薬剤を含んでなるナノ粒子が、例えば２５℃及び／又は３７℃で水溶液（例、リン酸緩衝液）中に置かれるとき、約４時間にわたって放出される治療薬剤の約１０〜約７０％、いくつかの態様では約１０〜約４５％、いくつかの態様では約１０〜約３５％、又はいくつかの態様では約１０〜約２５％に実質的に相当する速度で治療薬剤を放出し得る。

【0123】

いくつかの態様では、開示されるナノ粒子が、３７℃でリン酸緩衝液中に置かれるとき、例えば、少なくとも約１分、少なくとも約１時間、又はそれより多くの時間の間、治療薬剤を実質的に保持し得る。

【0124】

いくつかの態様では、想定される治療用ナノ粒子が、３７℃でリン酸緩衝液中に置かれるとき、少なくとも約１分間、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを実質的に保持する。

【0125】

いくつかの態様では、想定される治療用ナノ粒子が、３７℃でリン酸緩衝液中に置かれるとき、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの約３０％未満を実質的に即時に放出する。

【0126】

いくつかの態様では、想定される治療用ナノ粒子が、３７℃でリン酸緩衝液中に置かれるとき、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの約１０〜約４５％を約１時間にわたって放出する。

【0127】

想定されるナノ粒子のインビトロ放出プロフィールは、以下のように測定することができる：
この放出は、ナノ粒子から放出媒体中へ放出されるＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの量をＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ全体の量で割ることによって計算した。この２つの数値を得るために、放出媒体（沈降条件を確実にするためにポリソルベート２０を含有するリン酸緩衝液（ＰＢＳ））を含有する密閉容器の中へ特定量のナノ粒子を注入して、３７℃の水浴中でインキュベートした。各設定時点で、２つの試料を取った。全体のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ値を得るために使用する第一の試料は、その容器から採取して、ＨＰＬＣ用に調製した。各時点で放出されたＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを得るために使用する第二の試料は、採取してから超遠心分離においてペレット化して、懸濁液（又は上清）に放出されたＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのみを残してから、これをＨＰＬＣ用の試料として調製した。好適なＨＰＬＣ法を実施例１０に示す。

【0128】

実施例７〜７ｂに示すものに似た定量組成である製剤Ｇ１と製剤Ｇ２（特に、Ｇ１製剤は、パモ酸：ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのモル比を約０．６５〜０．７５：１の範囲に有して、Ｇ２製剤は、そのモル比を約０．８５〜０．９５：１に有する）についてそれぞれ９種のバッチを検査した。下記のデータは、７２時間にわたる平均放出値を示す。

【0129】

３７℃インビトロ放出プロフィール

【0130】

【表1】

【0131】

１つの側面では、１６−５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、パモ酸、及びＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる、想定される治療用ナノ粒子が、ＰＢＳとポリソルベート２０において３７℃で３０時間後にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの２０％未満を放出する。別の側面では、１６−５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、パモ酸、及びＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる、想定される治療用ナノ粒子が、ＰＢＳとポリソルベート２０において３７℃で４０時間後にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの２０％未満を放出する。別の側面では、１６−５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、パモ酸、及びＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる、想定される治療用ナノ粒子が、ＰＢＳとポリソルベート２０において３７℃で５０時間後にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの２０％未満を放出する。別の側面では、１６−５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、パモ酸、及びＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる、想定される治療用ナノ粒子が、ＰＢＳとポリソルベート２０において３７℃で２４時間後にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの約１０％を放出する。これらの側面において、簡便にも、放出は、上記の方法によって測定される。

【0132】

１つの側面において（例えば、治療用ナノ粒子が、デオキシコール酸、コール酸（デオキシコール酸とコール酸の混合物が含まれる）、ジオクチルスルホコハク酸、又はパモ酸を含む場合）、治療用ナノ粒子は、投薬後２４時間で４０％未満が放出されるような速度でＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａをインビボ放出する。別の側面において（例えば、治療用ナノ粒子が、デオキシコール酸、コール酸（デオキシコール酸とコール酸の混合物が含まれる）、ジオクチルスルホコハク酸、又はパモ酸を含む場合）、治療用ナノ粒子は、投薬後２４時間で３０％未満が放出されるような速度でＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａをインビボ放出する。１つの側面において（例えば、治療用ナノ粒子が、デオキシコール酸、コール酸（デオキシコール酸とコール酸の混合物が含まれる）、ジオクチルスルホコハク酸、又はパモ酸を含む場合）、治療用ナノ粒子は、投薬後２４時間で２５〜３５％が放出されるような速度でＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａをインビボ放出する。別の側面において（例えば、治療用ナノ粒子がパモ酸を含む場合）、治療用ナノ粒子は、投薬後２４時間で１５％未満が放出されるような速度でＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａをインビボ放出する。

【0133】

一般に、「ナノ粒子」は、１０００ｎｍ未満、例えば、約１０ｎｍ〜約２００ｎｍの直径を有するあらゆる粒子を意味する。開示される治療用ナノ粒子には、約６０〜約１２０ｎｍ、又は約７０〜約１２０ｎｍ、又は約８０〜約１２０ｎｍ、又は約９０〜約１２０ｎｍ、又は約１００〜約１２０ｎｍ、又は約６０〜約１３０ｎｍ、又は約７０〜約１３０ｎｍ、又は約８０〜約１３０ｎｍ、又は約９０〜約１３０ｎｍ、又は約１００〜約１３０ｎｍ、又は約１１０〜約１３０ｎｍ、又は約６０〜約１４０ｎｍ、又は約７０〜約１４０ｎｍ、又は約８０〜約１４０ｎｍ、又は約９０〜約１４０ｎｍ、又は約１００〜約１４０ｎｍ、又は約１１０〜約１４０ｎｍ、又は約６０〜約１５０ｎｍ、又は約７０〜約１５０ｎｍ、又は約８０〜約１５０ｎｍ、又は約９０〜約１５０ｎｍ、又は約１００〜約１５０ｎｍ、又は約１１０〜約１５０ｎｍ、又は約１２０〜約１５０ｎｍの直径を有するナノ粒子が含まれ得る。

【0134】

いくつかの態様において、想定される治療用ナノ粒子の流体力学的径は、約６０〜約１５０ｎｍ、又は約９０〜約１４０ｎｍ、又は約９０〜約１２０ｎｍである。さらなる側面において、想定される治療用ナノ粒子の流体力学的径は、例えば、治療用ナノ粒子が、デオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、パモ酸、又はこれらの混合物より選択される実質的に疎水性の酸を含む場合、約９０〜約１１０ｎｍである。

【0135】

１つの態様において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとパモ酸とともに生成されて、５００ｎｍより小さい（２００ｎｍより小さい、例えば、７０〜１４０ｎｍのような）流体力学的径を有する。

【0136】

特に、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと疎水性酸（コール酸、デオキシコール酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される）とともに生成される。別の態様において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとデオキシコール酸及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸とともに生成される。１つの側面において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとデオキシコール酸とともに生成される。別の側面において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとジオクチルスルホコハク酸とともに生成される。別の側面において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２とコール酸とともに生成される。１つの側面において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとコール酸とデオキシコール酸の混合物とともに生成され；この側面において、好適にも、疎水性酸は、約３：２のデオキシコール酸：コール酸の比にあって、疎水性酸全体：ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの比は、約２：１である（ここで比は、重量パーセントによって表される）。別の側面において、開示されるナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとパモ酸とともに生成される。

【0137】

重合体
いくつかの態様において、ナノ粒子は、重合体と治療薬剤のマトリックスを含み得る。いくつかの態様において、治療薬剤は、この重合性マトリックスの少なくとも一部と会合することができる。治療薬剤は、この重合性マトリックスの表面と会合する、その内部に被包化される、それによって囲まれる、及び／又はそれ全体に分散されることが可能である。

【0138】

開示されるナノ粒子には、どの好適な重合体も使用することができる。重合体は、天然重合体でも非天然（合成）重合体でもよい。重合体は、ホモポリマーでも、２種以上の単量体を含んでなる共重合体でもよい。配列に関して言えば、共重合体は、ランダム、ブロックでも、ライダム配列とブロック配列の組合せを含んでもよい。典型的には、重合体は、有機重合体である。

【0139】

本明細書に使用する「重合体」という用語には、当該技術分野で使用されるようなその通常の意味、即ち、共有結合によって連結した１以上の反復単位（単量体）を含んでなる分子構造という意味が付与される。この反復単位は、すべて同一であってよく、またいくつかの事例では、重合体の内部に１種より多い反復単位があってよい。いくつかの事例において、重合体は、生体に由来する可能性がある（生重合体）。非限定的な例には、ペプチド又はタンパク質が含まれる。いくつかの事例では、重合体に追加の部分、例えば、下記に記載されるような生体部分も存在してよい。重合体の内部に１種より多い反復単位が存在するならば、その重合体は、「共重合体」であると言われる。重合体を利用するどの態様にあっても、利用される重合体は、いくつかの事例において、共重合体であり得ると理解されたい。共重合体を形成する反復単位は、どの形式でも配置されてよい。例えば、反復単位は、ランダムな順序で、交互の順序で、又はブロック共重合体（即ち、第一反復単位をそれぞれ含んでなる１以上の領域（例、第一ブロック）と、第二反復単位をそれぞれ含んでなる１以上の領域（例、第二ブロック）、等を含んでなる）として配置されてよい。ブロック共重合体は、２個（ジブロック共重合体）、３個（トリブロック共重合体）、又はより多い数の個別ブロックを有し得る。

【0140】

開示される粒子には共重合体が含まれ得て、これは、いくつかの態様では、通常は２個以上の重合体の共有結合によって互いと一緒に会合した、２個以上の重合体（本明細書に記載するもののような）について記載する。従って、共重合体は、第一重合体と第二重合体を含み得て、これらは、一緒にコンジュゲートしてブロック共重合体を形成し、ここで第一重合体は、ブロック共重合体の第一ブロックであり得て、第二重合体は、ブロック共重合体の第二ブロックであり得る。当然ながら、当業者は、ブロック共重合体が、いくつかの事例では、多数ブロックの重合体を含有し得ること、そして本明細書に使用する「ブロック共重合体」が、単一の第一ブロックと単一の第二ブロックのみを有するブロック共重合体だけに限定されないことを理解されよう。例えば、ブロック共重合体は、第一重合体を含んでなる第一ブロック、第二重合体を含んでなる第二ブロック、及び第三重合体又は第一重合体を含んでなる第三ブロック、等を含み得る。いくつかの事例では、ブロック共重合体が任意数の第一重合体の第一ブロックと任意数の第二重合体の第二ブロック（そしてある事例では、第三ブロック、第四ブロック、等）を含有することができる。加えて、いくつかの事例では、ブロック共重合体が他のブロック共重合体から生成される可能性があることにも注目すべきである。例えば、第一のブロック共重合体が別の重合体（これは、ホモポリマー、生重合体、別のブロック共重合体、等であってよい）へコンジュゲートして、多種類のブロックを含有する新しいブロック共重合体を生成しても、及び／又は他の部分へ（例、非重合性部分へ）コンジュゲートしてもよい。

【0141】

いくつかの態様において、重合体（例えば、共重合体又はブロック共重合体）は、両親媒性（即ち、親水性部分と疎水性部分、又は相対的に親水性の部分と相対的に疎水性の部分を有すること）であり得る。親水性重合体は、概して水を引き付けるものであって、疎水性重合体は、概して水をはじくものであり得る。重合体が親水性か疎水性かは、例えば、その重合体の試料を調製してその水との接触角を測定することによって確認することができる（典型的には、親水性重合体が６０°未満の接触角を有するのに対して、疎水性重合体は約６０°より大きい接触角を有するものである）。いくつかの事例において、２個以上の重合体の親水性は、互いに対して相対的に測定してよい（即ち、第一重合体は、第二重合体より親水性である）。例えば、第一重合体は、第二重合体より小さな接触角を有し得る。

【0142】

１組の態様では、本発明で想定される重合体（共重合体又はブロック共重合体のような）に生体適合性ポリマーが含まれ、これは、生きた被験者へ挿入又は注射されるときに、免疫系による（例えば、Ｔ細胞応答を介した）有意な炎症及び／又は該重合体の急性拒絶を伴わずに、典型的には有害反応を引き起こさない重合体である。従って、本発明で想定される治療用粒子は、非免疫原性であり得る。本明細書に使用する「非免疫原性」という用語は、通常は、循環抗体、Ｔ細胞、又は反応性免疫細胞を誘発しないか又はその最小レベルしか誘発せず、そして通常は、個体においてそれ自体に抗する免疫応答を誘発しない、そのネイティブ状態の内因性成長因子に関連する。

【0143】

生体適合性は、典型的には、免疫系の少なくとも一部による、ある材料の急性拒絶に関連する（非生体適合性の材料が被験者へ移植されると、その被験者において、その材料の免疫系による拒絶が十分に制御し得ないほどに、そしてしばしば、その材料を被験者から除去しなければならないような度合いであるほどに重篤であり得る免疫応答を誘発する）。生体適合性を判定するための１つの簡単な検査は、ある重合体をインビトロの細胞へ曝露することであり得る；生体適合性ポリマーとは、典型的には、中程度の濃度で（例、５０マイクログラム／１０^６個の細胞の濃度で）有意な細胞死を生じない重合体である。例えば、生体適合性ポリマーは、線維芽細胞又は上皮細胞のような細胞へ曝露されるとき、そのような細胞によって食作用を受けるか又は他のやり方で取り込まれたとしても、約２０％未満の細胞死しか引き起こし得ない。様々な態様において有用であり得る生体適合性ポリマーの非限定的な例には、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリヒドロキシブチレート、ポリ（グリセロールセバカート）、ポリグリコリド（ポリ（グリコール）酸）（ＰＧＡ）、ポリラクチド（ポリ（乳）酸）（ＰＬＡ）、ポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸（ＰＬＧＡ）、ポリカプロラクトン、又は上記及び／又は他の重合体が含まれる共重合体又は誘導体が含まれる。

【0144】

ある態様では、想定される生体適合性ポリマーが生分解性であってよく、その重合体は、生理学的な環境の内部で（身体の内部のように）化学的及び／又は生物学的に分解することができる。本明細書に使用するように、「生分解性」重合体とは、細胞中へ導入されるときに、細胞の機構によって（生物学的に分解可能）、及び／又は加水分解のような化学的な方法によって（化学的に分解可能）、該細胞に対して有意な毒性効果を伴うことなく細胞が再使用し得るか又は処理し得る成分へ分解されるものである。１つの態様において、生分解性ポリマーとその分解副産物は、生体適合性であり得る。

【0145】

本明細書に開示する粒子は、ＰＥＧを含有しても含有しなくてもよい。加えて、ある態様は、ポリ（エステル−エーテル）を含有する共重合体、例えば、エステル結合（例、Ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’結合）及びエーテル結合（例、Ｒ−Ｏ−Ｒ’結合）によって結合した反復単位を有する重合体に対して指向され得る。いくつかの態様では、カルボン酸基を含有する、加水分解可能な重合体のような生分解性ポリマーをポリ（エチレングリコール）反復単位とコンジュゲートさせて、ポリ（エステル−エーテル）を生成することができる。ポリ（エチレングリコール）反復単位を含有する重合体（例、共重合体、例、ブロック共重合体）は、「ＰＥＧ化」重合体と呼ばれる場合もある。

【0146】

例えば、想定される重合体は、水への曝露時に（例、被験者の内部で）自発的に加水分解されるものであってよいか又は、その重合体は、熱への曝露時に（例、約３７℃の温度で）分解してよい。重合体の分解は、使用する重合体又は共重合体に依拠して、様々な速度で起こり得る。例えば、重合体の半減期（重合体の５０％が単量体、及び／又は他の非重合性部分へ分解され得る時間）は、その重合体に依拠して、日数、週数、月数、又は年数のオーダーであり得る。重合体は、例えば、酵素活性又は細胞機構によって、いくつかの事例では、例えば、リゾチームへの曝露（例えば、相対的に低いｐＨを有する）を介して、生物学的に分解され得る。いくつかの事例において、重合体は、細胞に対して有意な毒性効果を伴うことなく該細胞が再使用し得るか又は処理し得る単量体及び／又は他の非重合性部分へ分解され得る（例えば、ポリラクチドが加水分解されて乳酸を生成し得る、ポリグリコリドが加水分解されてグリコール酸を生成し得る、等）。

【0147】

いくつかの態様では、重合体がポリエステルであってよく、これには、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）とポリ（ラクチド−コ−グリコリド）のような、乳酸単位とグリコール酸単位を含んでなる共重合体［本明細書では、「ＰＬＧＡ」と総称される］と、グリコール酸単位を含んでなるホモポリマー［本明細書では「ＰＧＡ」と呼ばれる］と、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、及びポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドのような乳酸単位を含んでなるホモポリマー［本明細書では「ＰＬＡ」と総称される］が含まれる。いくつかの態様では、例示のポリエステルに、例えば、ポリヒドロキシ酸；ラクチド及びグリコリドのＰＥＧ化重合体及び共重合体（例、ＰＥＧ化ＰＬＡ、ＰＥＧ化ＰＧＡ、ＰＥＧ化ＰＬＧＡ、及びこれらの誘導体）が含まれる。いくつかの態様では、ポリエステルに、例えば、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）ＰＥＧ化ポリ（オルトエステル）、ポリ（カプロラクトン）、ＰＥＧ化ポリ（カプロラクトン）、ポリリジン、ＰＥＧ化ポリリジン、ポリ（エチレンイミン）、ＰＥＧ化ポリ（エチレンイミン）、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−Ｌ−リジン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）、ポリ［α−（４−アミノブチル）−Ｌ−グリコール酸］、及びこれらの誘導体が含まれる。

【0148】

いくつかの態様では、重合体がＰＬＧＡであり得る。ＰＬＧＡは、乳酸とグリコール酸からなる生体適合性で生分解性の共重合体であって、様々な形態のＰＬＧＡを乳酸：グリコール酸の比によって特性決定することができる。乳酸は、Ｌ−乳酸、Ｄ−乳酸、又はＤ，Ｌ−乳酸であり得る。ＰＬＧＡの分解速度は、乳酸−グリコール酸の比を改変することによって調節することができる。いくつかの態様では、ほぼ８５：１５、ほぼ７５：２５、ほぼ６０：４０、ほぼ５０：５０、ほぼ４０：６０、ほぼ２５：７５、又はほぼ１５：８５といった乳酸：グリコール酸の比によってＰＬＧＡを特性決定することができる。いくつかの態様において、粒子の重合体（例、ＰＬＧＡブロック共重合体又はＰＬＧＡ−ＰＥＧブロック共重合体）中の「乳酸単量体」対「グリコール酸単量体」の比は、水分取込み、治療薬剤放出、及び／又は重合体分解動態といった様々なパラメータについて最適化するように選択してよい。

【0149】

いくつかの態様では、重合体が１以上のアクリル重合体であり得る。ある態様では、アクリル重合体に、例えば、アクリル酸及びメタクリル酸の共重合体、メチルメタクリレート共重合体、エトキシエチルメタクリレート、シアノエチルメタクリレート、アミノアルキルメタクリレート共重合体、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、メタクリル酸アルキルアミド共重合体、ポリ（メチルメタクリレート）、ポリ（メタクリル酸ポリアクリルアミド、アミノアルキルメタクリレート）共重合体、グリシジルメタクリレート共重合体、ポリシアノアクリレート、及び上述の重合体の１以上を含んでなる組合せが含まれる。アクリル重合体は、アクリル酸エステルとメタクリル酸エステルの完全重合化した共重合体を低含量の四級アンモニウム基とともに含み得る。

【0150】

いくつかの態様では、重合体がカチオン性重合体であり得る。一般に、カチオン性重合体は、核酸（例、ＤＮＡ、ＲＮＡ、又はこれらの誘導体）の陰性荷電鎖と縮合する、及び／又はそれらを保護することが可能である。いくつかの態様では、開示される粒子における、ポリ（リジン）、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）、及びポリ（アミドアミン）デンドリマーのようなアミン含有重合体の使用が想定される。

【0151】

いくつかの態様では、重合体が、カチオン性側鎖を担う分解性ポリエステルであり得る。これらのポリエステルの例には、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−Ｌ−リジン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）が含まれる。

【0152】

ＰＥＧは、終端にあって、末端基を包含し得ると想定される。例えば、ＰＥＧは、ヒドロキシル、メトキシ又は他のアルコキシル基、メチル又は他のアルキル基、アリール基、カルボン酸、アミン、アミド、アセチル基、グアニジノ基、又はイミダゾールにおいて終結してよい。他の想定される末端基には、アジド、アルキン、マレイミド、アルデヒド、ヒドラジド、ヒドロキシルアミン、アルコキシアミン、又はチオール部分が含まれる。

【0153】

当業者は、例えば、ＥＤＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）とＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）を使用してアミン中の終端にあるＰＥＧ基へ重合体を反応させることによって、開環重合化技術（ＲＯＭＰ）によって、又は同等のやり方によって重合体をＰＥＧ化するための方法と技術について知っているものである。

【0154】

１つの態様において、重合体の分子量（又は、例えば、共重合体の異なるブロックの、例えば、分子量の比）は、本明細書に開示するような有効な治療のために最適化することができる。例えば、重合体の分子量は、粒子分解速度（生分解性ポリマーの分子量を調整することができる場合のように）、溶解度、水分取込み、及び薬物放出動態に影響を及ぼす場合がある。例えば、重合体の分子量（又は、例えば、共重合体の異なるブロックの、例えば、分子量の比）は、その粒子が、治療される被験者の中で、妥当な時間（数時間から１〜２週間、３〜４週間、５〜６週間、７〜８週間、等の範囲に及ぶ）内で分解されるように調整することができる。

【0155】

開示される粒子は、例えば、ＰＥＧとＰＬ（Ｇ）Ａのジブロック共重合体を含み得て、ここで例えば、ＰＥＧ部分は、約１，０００〜２０，０００、例えば、約２，０００〜２０，０００、例えば、約２〜約１０，０００の数平均分子量を有し得て、そしてＰＬ（Ｇ）Ａ部分は、約５，０００〜約２０，０００、又は約５，０００〜１００，０００、例えば、約２０，０００〜７０，０００、例えば、約１５，０００〜５０，０００の数平均分子量を有し得る。

【0156】

例えば、本明細書に開示されるのは、約１０〜約９９重量パーセントのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体、又は約２０〜約８０重量パーセント、約４０〜約８０重量パーセント、又は約３０〜約５０重量パーセント、又は約７０〜約９０重量パーセントのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が含まれる、例示の治療用ナノ粒子である。例示のポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体には、約１５〜約２０ｋＤａ、又は約１０〜約２５ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳）酸と、約４ｋＤａ〜約６ｋＤａ、又は約２ｋＤａ〜約１０ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールが含まれ得る。

【0157】

いくつかの態様において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、ポリ（乳）酸の数平均分子量比率を、約０．６〜約０．９５に、いくつかの態様では約０．７〜約０．９の間に、いくつかの態様では約０．６〜約０．８の間に、いくつかの態様では約０．７〜約０．８の間に、いくつかの態様では約０．７５〜約０．８５の間に、いくつかの態様では約０．８〜約０．９の間に、そしていくつかの態様では約０．８５〜約０．９５の間に有し得る。ポリ（乳）酸の数平均分子量比率は、共重合体のポリ（乳）酸成分の数平均分子量を、ポリ（乳）酸成分の数平均分子量とポリ（エチレン）グリコール成分の数平均分子量の総和で割ることによって計算し得ると理解されるべきである。。

【0158】

開示されるナノ粒子には、約１〜約５０重量パーセントのポリ（乳）酸又はポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸（これには、ＰＥＧが含まれない）が含まれてもよく、また約１〜約５０重量パーセント、又は約１０〜約５０重量パーセント、又は約３０〜約５０重量パーセントのポリ（乳）酸又はポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸が含まれてもよい。例えば、ポリ（乳）酸又はポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸は、約５〜約１５ｋＤａ、又は約５〜約１２ｋＤａの数平均分子量を有し得る。例示のＰＬＡは、約５〜約１０ｋＤａの数平均分子量を有し得る。例示のＰＬＧＡは、約８〜約１２ｋＤａの数平均分子量を有し得る。

【0159】

治療用ナノ粒子は、いくつかの態様において、約１０〜約３０重量パーセント、いくつかの態様では約１０〜約２５重量パーセント、いくつかの態様では約１０〜約２０重量パーセント、いくつかの態様では約１０〜約１５重量パーセント、いくつかの態様では約１５〜約２０重量パーセント、いくつかの態様では約１５〜約２５重量パーセント、いくつかの態様では約２０〜約２５重量パーセント、いくつかの態様では約２０〜約３０重量パーセント、又はいくつかの態様では約２５〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含有し得て、ここでこのポリ（エチレン）グリコールは、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体、ポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体、又はポリ（エチレン）グリコールホモポリマーとして存在し得る。ある態様において、ナノ粒子の重合体は、脂質へコンジュゲートすることができる。この重合体は、例えば、脂質終結化ＰＥＧであり得る。

【0160】

１つの態様において、治療用ナノ粒子は、約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含有し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと約０．２〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。１つの側面において、このポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有し；例えば、このポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。

【0161】

別の態様において、治療用ナノ粒子は、約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含有し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと約０．２〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。１つの側面において、このポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有し；例えば、このポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。

【0162】

別の態様において、治療用ナノ粒子は、約５０〜約９９重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含有し、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと約１〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含む。１つの側面において、このポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有し；例えば、このポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。

【0163】

１つの側面において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、ポリ（乳）酸を約０．７〜約０．９（約０．７５〜約０．８５のような）の数平均分子量比率で有する。

【0164】

１つの側面において、治療用ナノ粒子は、約１０〜約２５重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む。さらなる側面において、治療用ナノ粒子は、約２０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む。

【0165】

さらなる側面において、治療用ナノ粒子は、約６５重量パーセント〜約８５重量パーセントの共重合体、例えば、約６５重量パーセント〜約８０重量パーセントの共重合体を含む。

【0166】

さらなる側面では、疎水性酸がパモ酸である場合、治療用ナノ粒子は、約６５〜約７５パーセントの共重合体のように、約６０〜約８０パーセントの共重合体（特に、ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、特に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体）を含み、ここでポリ（エチレン）グリコール含量は、ナノ粒子の約１５〜約２０重量パーセントである。しかしながら、当業者には、ナノ粒子中に存在する重合体の重量パーセントは、疎水性酸（パモ酸のような）とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの量が変動するので、バッチ間である程度は変動するものであることが理解されよう。

【0167】

ナノ粒子の製造
本開示の別の側面は、開示されるナノ粒子を作製するシステム及び方法へ指向される。いくつかの態様では、２種以上の異なる重合体（例、共重合体、例、ブロック共重合体）を異なる比で使用して、その重合体（例、共重合体、例、ブロック共重合体）より粒子を生成することによって、その粒子の特性を制御することができる。例えば、その生体適合性、及び／又は生じる粒子の免疫原性を制御するその能力に関して、重合体（例、共重合体、例、ブロック共重合体）を選択してよい。

【0168】

いくつかの態様では、ナノ粒子製造法（例えば、下記に考察するようなナノ沈殿法又はナノエマルジョン法）において使用する溶媒に疎水性酸を含めてよく、これは、この方法を使用して製造されるナノ粒子へ有利な特性を付与する場合がある。上記に考察したように、いくつかの事例において、疎水性酸は、開示されるナノ粒子の薬物負荷を改善させる場合がある。さらに、いくつかの事例において、開示されるナノ粒子の制御放出特性は、疎水性酸の使用によって改善され得る。いくつかの事例において、疎水性酸は、例えば、この方法において使用される有機溶液又は水溶液に含めてよい。１つの態様において、疎水性酸は、水溶性塩（ナトリウム塩のような）の形態で、例えばコール酸ナトリウムとして水溶液に取り込まれる。１つの態様において、薬物は、有機溶液と疎水性酸と組み合わせて、そして１以上の重合体と組み合わせてもよい。薬物を溶かすために使用される溶液中の疎水性酸の濃度については上記に考察したが、例えば、約１重量パーセントと約３０重量パーセントの間、等であり得る。

【0169】

１組の態様において、粒子は、１以上の重合体を含んでなる溶液を提供する工程と、該溶液を重合体非溶媒と接触させて粒子を産生する工程によって生成される。この溶液は、重合体非溶媒と混和性でも非混和性でもよい。例えば、アセトニトリルのような水混和性の液体が重合体を含有し得て、このアセトニトリルを水（重合体非溶媒）と接触させる（例えば、そのアセトニトリルを水中へ制御された速度で注ぐことによって）ときに粒子が生成される。この溶液の内部に含まれた重合体は、重合体非溶媒との接触時に、沈殿してナノ粒子のような粒子を生成することができる。２つの液体は、周囲温度及び周囲圧で一方が他方に少なくとも１０重量％のレベルで溶けない場合に、互いと「非混和性」又は混和性でないと言われる。典型的には、有機溶液（例、ジクロロメタン、アセトニトリル、クロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトン、ホルムアミド、ジメチルホルムアミド、ピリジン類、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、等）と水性の液体（例、水、又は溶けた塩又は他の分子種を含有する水、細胞培地又は生物学的培地、エタノール、等）は、互いに関して非混和性である。例えば、第一溶液は、第二溶液の中へ（好適な割合又は速度で）注がれる場合がある。いくつかの事例では、第一溶液が非混和性の第二液と接触するとき、ナノ粒子のような粒子が生成され得る。例えば、接触時の重合体の沈殿は、第一溶液が第二液へ注がれる間に、重合体がナノ粒子を生成することを引き起こし、そしていくつかの事例では、例えば、導入速度が注意深く制御されて比較的遅い速度で保たれるとき、ナノ粒子が生成する場合がある。このような粒子生成の制御は、当業者によって、定型的な実験を使用するだけで、容易に最適化することができる。

【0170】

開示される方法を使用して、表面機能性、表面荷電、大きさ、ゼータ（ζ）電位、疎水性、免疫原性を制御する能力、等の特性を高度に制御することができる。例えば、粒子のライブラリーを合成してスクリーニングして、特異的な密度の諸成分（moieties）が粒子の表面に存在することをその粒子に可能にする、特別な重合体の比を有する粒子を同定することができる。このことは、１以上の特異的性質（例えば、特異的な大きさと諸成分の特異的な表面密度）を有する粒子が、過度の努力を伴うことなく製造されることを可能にする。従って、ある態様は、そのようなライブラリーを使用するスクリーニング技術、並びにそのようなライブラリーを使用して同定されるあらゆる粒子へ指向される。加えて、同定は、どの好適な方法によって行ってもよい。例えば、その同定は、直接的又は間接的であってよく、定量的又は定性的に進行してよい。

【0171】

別の態様では、図面１、図面２Ａ、及び図面２Ｂに代表される方法のような、ナノエマルジョン法を提供する。例えば、治療薬剤、疎水性酸、第一重合体（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ又はＰＬＧＡ−ＰＥＧのようなジブロック共重合体）、及びあってもよい第二重合体（例、（ＰＬ（Ｇ）Ａ−ＰＥＧ又はＰＬＡ）を有機溶液と合わせて、第一有機相を形成し得る。このような第一相には、約１〜約５０重量％の固形物、約５〜約５０重量％の固形物、約５〜約４０重量％の固形物、約１〜約１５重量％の固形物、又は約１０〜約３０重量％の固形物が含まれ得る。この第一有機相を第一水溶液と合わせて、第二相を形成し得る。先の有機溶液には、例えば、トルエン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル、ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジクロロメタン、クロロホルム、アセトン、ベンジルアルコール、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、Ｓｐａｎ（登録商標）８０、Ｂｒｉｊ（登録商標）１００又は同等物、及びこれらの組合せを含めることができる。この有機溶液には、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）も含めてよい。ある態様において、該有機相には、ベンジルアルコール、酢酸エチル、及びこれらの組合せを含めてよい。別の態様において、該有機相には、ベンジルアルコール、酢酸エチル、及びＤＭＳＯを含めてよい。この第二相には、約０．１重量％と５０重量％の間、約１重量％と５０重量％の間、約５重量％と４０重量％の間、又は約１重量％と１５重量％の間の固形物があり得る。水溶液は、水であり得て、コール酸ナトリウム、ナトリウムドクサート、酢酸エチル、ポリビニルアセテート、及びベンジルアルコールの１以上との組合せであってもよい。この水溶液はまた、ＤＭＳＯ、及び／又はＢｒｉｊ（登録商標）１００、又は同等物を含有してよい。いくつかの態様において、該水溶液は、水中にＢｒｉｊ（登録商標）１００、ベンジルアルコール、及びＤＭＳＯを含む。いくつかの態様において、該水相のｐＨは、プロトン化治療薬剤のｐＫ_ａ、及び／又は疎水性酸のｐＫ_ａに基づいて選択され得る。例えば、ある態様において、治療薬剤は、プロトン化されるとき、第一ｐＫ_ａを有し得て、疎水性酸は第二ｐＫ_ａを有し得て、該水相は、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のｐＫ_ａ単位に等しいｐＨを有し得る。特別な態様において、該水相のｐＨは、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のほぼ等距離にあるｐＫ_ａ単位に等しい場合がある。

【0172】

例えば、油相又は有機相は、非溶媒（水）とごく一部しか混和しない溶媒を使用し得る。故に、十分低い比で混合されるとき、及び／又は有機溶媒で予め飽和した水を使用するとき、有機（油）相は、液体のままである。この有機（油）相は、例えば、高エネルギー分散システム（ホモジェナイザー又は超音波破砕機のような）を使用して、水溶液中へ乳化させて、液滴として、ナノ粒子へ剪断することができる。エマルジョンの水性部分、他には「水相」として知られるものは、コール酸ナトリウム（又は、可能であればナトリウムドクサート）からなって酢酸エチルとベンジルアルコールが予め飽和した界面活性溶液であり得る。いくつかの事例において、有機相（例、第一有機相）には、治療薬剤が含まれ得る。付言すると、ある態様において、水溶液（例、第一水溶液）には、実質的に疎水性の酸が含まれ得る。他の態様では、治療薬剤と実質的に疎水性の酸がともに有機相に溶けてよい。

【0173】

第二相を乳化してエマルジョン相を形成する工程は、例えば、１回又は２回の乳化工程において実施してよい。例えば、一次エマルジョンを調製してから乳化して、微細エマルジョンを生成してよい。この一次エマルジョンは、例えば、単純混合、高圧ホモジェナイザー、プローブ超音波破砕機、撹拌子、又はローター・スターターホモジェナイザーを使用して、生成することができる。一次エマルジョンは、例えば、プローブ超音波破砕機又は高圧ホモジェナイザーの使用を介して、例えば、ホモジェナイザーを通す１、２、３回以上の通過を使用することによって、微細エマルジョンへ生成してよい。例えば、高圧ホモジェナイザーを使用するとき、その圧力は、約３０〜約６０ｐｓｉ、約４０〜約５０ｐｓｉ、約１０００〜約８０００ｐｓｉ、約２０００〜約４０００ｐｓｉ、約４０００〜約８０００ｐｓｉ、又は約４０００〜約５０００ｐｓｉ（例えば、約２０００、２５００、４０００、又は５０００ｐｓｉ）であってよい。使用する圧力は、５，０００〜１５，０００ｐｓｉ、約８，０００〜１５，０００ｐｓｉのように、約５，０００〜２０，０００ｐｓｉ、例えば、８，０００〜約１２，０００ｐｓｉであってよい。本明細書に例示される方法では、約９，０００ｐｓｉ（実施例７、実施例７ａ、及び実施例７ｂを参照のこと）と約１１，０００ｐｓｉ（実施例１のように）を使用する。

【0174】

いくつかの事例では、治療薬剤と疎水性酸の溶解度を最大にして所望されるＨＩＰを生成するために、微細エマルジョン状態（これは、エマルジョン中の液滴の表面積対体積比がきわめて高いことによって特性決定される）を選択することができる。ある態様では、微細エマルジョン状態の下で、溶けた成分の平衡がごく迅速に、そしてナノ粒子の固化より速く発生する可能性がある。このように、例えば、治療薬剤と疎水性酸の間のｐＫ_ａ差に基づいてＨＩＰを選択すること、又は微細エマルジョンのｐＨ、及び／又はクエンチ溶液のｐＨといった他のパラメータを調整することは、例えば、治療薬剤及び／又は疎水性酸のナノ粒子から外への拡散に対抗するようにナノ粒子中のＨＩＰの形成に指向することによって、ナノ粒子の薬物負荷と放出特性に有意な影響を及ぼす可能性がある。

【0175】

いくつかの態様において、治療薬剤と実質的に疎水性の酸は、第二相を乳化する工程に先立って、第二相において合わせてよい。いくつかの事例において、治療薬剤と実質的に疎水性の酸は、第二相を乳化する工程に先立って、疎水性イオン対を形成してよい。他の態様において、治療薬剤と実質的に疎水性の酸は、第二相の乳化の間に、疎水性イオン対を形成してよい。例えば、治療薬剤と実質的に疎水性の酸は、第二相を乳化する工程と実質的に同時に、第二相において合わせてよく、例えば、治療薬剤と実質的に疎水性の酸は、別々の溶液（例えば、２つの実質的に非混和性の溶液）に溶かしてよく、それから乳化の間にそれらを合わせる。別の例において、治療薬剤と実質的に疎水性の酸は、別々の混和性溶液に溶かしてしてよく、次いでそれらを乳化の間に第二相へ給する。

【0176】

溶媒の抽出を完了させて粒子を固化するには、溶媒の蒸発又は希釈のいずれかが必要とされ得る。抽出とより大規模な方法の動力学（kinetics）をよりよく制御するために、水性クエンチ液による溶媒希釈法を使用し得る。例えば、エマルジョンは、すべての有機溶媒を溶かしてクエンチされた相を形成するのに十分な濃度まで冷水へ希釈することができる。いくつかの態様では、クエンチングが少なくとも一部は約５℃以下の温度で実施され得る。例えば、クエンチングにおいて使用される水（又は他のクエンチ溶液）は、室温未満である温度（例えば、約０℃〜約１０℃、又は約０℃〜約５℃）にあってよい。この溶液はまた、クエンチングの間に冷やしてよい。ある態様では、エマルジョン相のクエンチングに（例えば、放出プロフィールのようなナノ粒子の特性を改善することによって、又は薬物負荷のようなナノ粒子パラメータを改善することによって）有利であるｐＨを有するクエンチ液（the quench）を選択することができる。このクエンチ液のｐＨは、例えば、酸又は塩基の滴定、又は緩衝液の適正な選択によって調整し得る。

【0177】

いくつかの態様において、クエンチ液のｐＨは、プロトン化された治療薬剤のｐＫ_ａ、及び／又は疎水性酸のｐＫ_ａに基づいて選択され得る。例えば、ある態様において、治療薬剤は、プロトン化されるとき、第一ｐＫ_ａを有し得て、疎水性酸は、第二ｐＫ_ａを有し得て、エマルジョン相は、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のｐＫ_ａ単位に等しいｐＨを有する水溶液でクエンチされ得る。いくつかの態様では、生じるクエンチされた相も、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のｐＫ_ａ単位に等しいｐＨを有し得る。特別な態様において、このｐＨは、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のほぼ等距離にあるｐＫ_ａ単位に等しい場合がある。

【0178】

いくつかの態様において、クエンチ液は、ｐＨを約２と約１２の間、いくつかの態様では約３と約１０の間、いくつかの態様では約３と約９の間、いくつかの態様では約３と約８の間、いくつかの態様では約３と約７の間、いくつかの態様では約４と約８の間、いくつかの態様では約４と約７の間、いくつかの態様では約４と約６の間、いくつかの態様では約４と約５の間、いくつかの態様では約４．２と約４．８の間、いくつかの態様では約６と約１０の間、いくつかの態様では約６と約９の間、いくつかの態様では約６と約８の間、いくつかの態様では約６と約７の間に有し得る。ある態様において、クエンチ液は、約４．５のｐＨを有し得る。さらなる態様において、クエンチ液は、約６．５のｐＨを有し得る。緩衝液のｐＨは、温度の関数として変動する場合があることを理解されたい。他に特定しなければ、本明細書において言及される緩衝液のｐＨは、２３℃でのｐＨである。

【0179】

いくつかの態様において、クエンチ液は、緩衝剤を含んでなる水溶液（緩衝液）であり得る。どの好適な緩衝剤も使用してよい。緩衝剤の非限定的な例には、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、ホウ酸塩、イミダゾール、ＭＥＳ（４−モルホリンエタンスルホン酸）、ビス−トリス（ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ−トリス（ヒドロキシメチル）メタン）、ＡＤＡ（Ｎ−（２−アセトアミド）イミノジ酢酸）、ＡＣＥＳ（Ｎ−（２−アセトアミド）−２−アミノエタンスルホン酸）、ＰＩＰＥＳ（１，４−ピペラジンジエタンスルホン酸）、ＭＯＰＳＯ（３−モルホリノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）、ビス−トリスプロパン（１，３−ビス［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ］プロパン）、ＢＥＳ（Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸）、ＭＯＰＳ（３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸）、ＴＥＳ（２−［（２−ヒドロキシ−１，１−ビス（ヒドロキシメチル）エチル）アミノ］エタンスルホン酸）、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−エタンスルホン酸）、ＤＩＰＳＯ（３−（Ｎ，Ｎ−ビス［２−ヒドロキシエチル］アミノ）−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）、ＭＯＢＳ（４−（Ｎ−モルホリノ）ブタンスルホン酸）、ＴＡＰＳＯ（２−ヒドロキシ−３−［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミノ］−１−プロパンスルホン酸）、Ｔｒｉｚｍａ（２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオール）、ＨＥＰＰＳＯ（４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸））、ＰＯＰＳＯ（ピペラジン−Ｎ，Ｎ’−ビス（２−ヒドロキシプロパンスルホン酸））、ＴＥＡ（トリエチルアミン）、ＥＰＰＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンプロパンスルホン酸）、トリシン（Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］グリシン）、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（ジグリシン）、ビシン（Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン）、ＨＥＰＢＳ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ’−（４−ブタンスルホン酸））、ＴＡＰＳ（Ｎ−［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］−３−アミノプロパンスルホン酸）、ＡＭＰＤ（２−アミノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール）、ＴＡＢＳ（Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−４−アミノブタンスルホン酸）、ＡＭＰＳＯ（Ｎ−（１，１−ジメチル−２−ヒドロキシエチル）−３−アミノ−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）、ＣＨＥＳ（２−（シクロヘキシルアミノ）エタンスルホン酸）、ＣＡＰＳＯ（３−（シクロヘキシルアミノ）−２−ヒドロキシ−１−プロパンスルホン酸）、ＡＭＰ（β−アミノイソブチルアルコール）、ＣＡＰＳ（３−（シクロヘキシルアミノ）−１−プロパンスルホン酸）、ＣＡＢＳ（４−（シクロヘキシルアミノ）−１−ブタンスルホン酸）、及びこれらの組合せが含まれる。緩衝液が酸と塩基を平衡状態で含む（例えば、酸と共役塩基、及び／又は塩基と共役酸）ことが理解されるべきである。従って、さらに理解されるべきことに、簡潔さのために、緩衝液又は緩衝剤が本明細書において遊離酸（例、リン酸）又はその共役塩基（例、リン酸塩）の呼称、あるいは遊離塩基（例、イミダゾール）又はその共役酸（例、イミダゾリウム）の呼称によって言及される場合があるが、当業者であれば、緩衝剤の２種以上の異なるプロトン化分子種（例、Ｈ_３ＰＯ_４、Ｈ_２ＰＯ_４⁻、ＨＰＯ_４^２−、及びＰＯ_４^３−）の間に平衡状態が存在することを理解されよう。いくつかの態様において、クエンチ液は、２種以上の緩衝剤を含み得る。例えば、クエンチ液は、２、３、４、又は５種の緩衝剤を含み得る。いくつかの態様において、クエンチ液は、リン酸塩とクエン酸塩の混合物を含み得る。他の態様において、クエンチ液は、ホウ酸塩、リン酸塩、及び酢酸塩の混合物（例、ブリトン−ロビンソン（Britton-Robbinson）緩衝液、これは、所望のｐＨまで増減される、０．０４Ｍ Ｈ_３ＢＯ_３、０．０４Ｍ Ｈ_３ＰＯ_４、及び０．０４Ｍ ＣＨ_３ＣＯＯＨを含む）を含み得る。

【0180】

いくつかの態様では、緩衝液（クエンチ液）が特別なｐＨ範囲内で好適な緩衝能を有し得る。例示の緩衝液についての非限定的なｐＨ範囲を下記の表Ａに提供する。ある態様では、緩衝液が緩衝剤の濃度を約０．００１Ｍと約１Ｍの間、いくつかの態様では約０．００１Ｍと約０．５Ｍの間、いくつかの態様では約０．０１Ｍと約０．５Ｍの間、いくつかの態様では約０．０５Ｍと約０．５Ｍの間、いくつかの態様では約０．１Ｍと約０．５Ｍの間、いくつかの態様では約０．０１Ｍと約０．２Ｍの間、いくつかの態様では約０．０５Ｍと約０．１５Ｍの間、そしていくつかの態様では約０．０７５Ｍと約０．１２５Ｍの間に有し得る。

【0181】

表Ａ．例示の緩衝液についての非限定的なｐＨ範囲

【0182】

【表2】

【0183】

いくつかの態様では、クエンチ液が実質的なｐＨ変化に抵抗するのに十分な緩衝剤濃度を有し得る。例えば、クエンチされた相が、エマルジョン相のｐＨから１未満のｐＨ単位、いくつかの態様では０．５未満のｐＨ単位、いくつかの態様では、０．２未満のｐＨ単位、いくつかの態様では０．１未満のｐＨ単位、そしていくつかの態様では０．０５未満のｐＨ単位だけ異なるｐＨを有し得る。いくつかの態様において、クエンチされた相のｐＨは、（クエンチングに先立つ）エマルジョン相のｐＨと実質的に同じであり得る。

【0184】

いくつかの態様において、クエンチされた相は、ｐＨを約２と約１２の間、いくつかの態様では約３と約１０の間、いくつかの態様では約３と約９の間、いくつかの態様では約３と約８の間、いくつかの態様では約３と約７の間、いくつかの態様では約４と約８の間、いくつかの態様では約４と約７の間、いくつかの態様では約４と約６の間、いくつかの態様では約４と約５の間、いくつかの態様では約４．２と約４．８の間、いくつかの態様では約６と約１０の間、いくつかの態様では約６と約９の間、いくつかの態様では約６と約８の間、いくつかの態様では約６と約７の間に有し得る。ある態様において、クエンチされた相は、約４．６のｐＨを有し得る。

【0185】

当業者は、緩衝液（例、クエンチ液）を所望のｐＨで容易に調製することができる。例えば、緩衝剤を含有する溶液を強酸（例、ＨＣｌ）又は強塩基（例、ＮａＯＨ）で滴定することによって、緩衝液を所望のｐＨで調製することができる。あるいは、弱酸（例、クエン酸）をその共役塩基（例、クエン酸ナトリウム塩）と組み合わせることによるか又は弱塩基（例、イミダゾール）をその共役酸（例、塩化イミダゾール）と組み合わせることによって、緩衝液を所望のｐＨで調製することができる。当業者であれば、ヘンダーソン−ハッセルバルヒ（Henderson-Hasselbalch）の式を使用することによって、緩衝液を調製するときに使用する弱酸又は弱塩基の量と対応する共役物の量を決定することができよう。

【0186】

１つの側面において、クエンチ溶液は、ｐＨ６．５での緩衝液（０．１７Ｍリン酸ナトリウム緩衝液のような）である。簡便にも、このクエンチ溶液は、それへエマルジョンを加える前に、５℃未満へ冷やす。簡便にも、クエンチ液とエマルジョン溶液の混合物は、それらを一緒に混合する間に冷却される。１つの態様において、クエンチ溶液のエマルジョンに対する比は、１０：１（重量）である。別の態様において、クエンチ溶液のエマルジョンに対する比は、３：１である。この側面と態様において、簡便にも、疎水性酸は、パモ酸である。

【0187】

ある態様では、例えば、微細エマルジョンにおける平衡状態の結果として、ＨＩＰ形成が乳化の間か又はその後で起こり得る。どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、有機可溶性の対イオン（疎水性酸）は、ＨＩＰ形成の結果として、エマルジョンのナノ粒子中への治療薬剤の拡散を促進することができると考えられている。どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、ナノ粒子の固化の前にＨＩＰがナノ粒子中に留まり得るのは、ナノ粒子中のＨＩＰの溶解度がエマルジョンの水相中及び／又はクエンチ液中のＨＩＰの溶解度より高いからである。例えば、治療薬剤のｐＫ_ａと疎水性酸のｐＫ_ａの間にあるｐＨをクエンチ液に対して選択することによって、イオン化した治療薬剤及び疎水性酸の形成を最適化することができる。しかしながら、あまりに高いｐＨを選択すると、疎水性酸をナノ粒子の外へ拡散させる傾向があり得る一方で、あまりに低いｐＨを選択すると、治療薬剤をナノ粒子の外へ拡散させる傾向があり得る。

【0188】

いくつかの態様において、ナノ粒子製剤化法に使用される水溶液（例、限定されないが、水相、エマルジョン相、クエンチ液、及びクエンチされた相が含まれる）のｐＨは、独立して選択してよくて、約１と約３の間、いくつかの態様では約２と約４の間、いくつかの態様では約３と約５の間、いくつかの態様では約４と約６の間、いくつかの態様では約５と約７の間、いくつかの態様では約６と約８の間、いくつかの態様では約７と約９の間、そしていくつかの態様では約８と約１０の間であり得る。ある態様において、ナノ粒子製剤化法に使用される水溶液のｐＨは、約３と約４の間、いくつかの態様では約４と約５の間、いくつかの態様では約５と約６の間、いくつかの態様では約６と約７の間、いくつかの態様では約７と約８の間、そしていくつかの態様では約８と約９の間であり得る。

【0189】

達成される被包化効率（この方法中の有効成分全量と比較した、ナノ粒子中の有効成分の百分率）は、使用される製剤の正確な成分と詳細なプロセスパラメータに伴って変動するものである。高い被包化効率がより経済的である。いくつかの態様では、この段階ですべての治療薬剤が粒子に被包化されるわけではないので、クエンチされた相へ薬物可溶化剤を加えて、可溶化相を形成する。薬物可溶化剤は、例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、ポリビニルピロリドン、シクロデキストラン、ドデシル硫酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、ジエチルニトロソアミン、酢酸ナトリウム、尿素、グリセリン、プロピレングリコール、グリコフロール、ポリ（エチレン）グリコール、ビス（ポリオキシエチレングリコール）ドデシルエーテル、安息香酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、又はこれらの組合せであってよい。例えば、クエンチされたナノ粒子の懸濁液へＴｗｅｅｎ（登録商標）８０を加えて遊離薬物を可溶化して、薬物結晶の形成を妨げることができる。いくつかの態様では、薬物可溶化剤の治療薬剤に対する比が、約２００：１〜約１０：１、又はいくつかの態様では約１００：１〜約１０：１（重量）である。

【0190】

この可溶化相を濾過して、ナノ粒子を回収することができる。

【0191】

例えば、限外濾過膜を使用してナノ粒子懸濁液を濃縮して、有機溶媒、遊離薬物（即ち、被包化されない治療薬剤）、薬物可溶化剤、及び他の製造助剤（界面活性剤）のような異物（extraneous material）を実質的に消失させることができる。

【0192】

例示の濾過は、クロスフロー又はタンジェンシャルフロー濾過システムを使用して実施し得て、ここでは供給物を透過側に対して陽圧で濾過膜に（接線方向に）通過させる。ある割合の異物がこの膜を透過物又は濾液として通過して、他のものはすべて膜の供給側に残余物として保持される。例えば、溶質、ミセル、及び有機溶媒を通過させる一方でナノ粒子を保持するのに適した孔径を有する膜を使用することによって、ナノ粒子を選択的に分離させることができる。約３００〜５００ｋＤａ（約５〜２５ｎｍ）の分子量カットオフがある例示の膜を使用し得る。

【0193】

いくつかの態様において、残余物中の異物の濃度は、水で「洗い流すこと」（透析濾過と呼ばれる方法）によって低下させることができる。除去される異物の量は、残余物の容量に対する、発生する濾液量に関連する。発生する濾液量は、通常、「透析濾過容量」又はダイア容量（diavolumes）という用語で言及される。単一ダイア容量とは、透析濾過を開始するときの残余物の容量である。

【0194】

透析濾過は、供給懸濁液から濾液が除去されるのと同じ速度でこの懸濁液へ透析濾液（冷却した脱イオン水、例えば、約０〜約５℃、又は０〜約１０℃）を加え得ることを意味する、定容アプローチを使用して実施し得る。回収される濾液の容量が残余物の開始容量に等しくなるとき、１ダイア容量が処理されたことになる。

【0195】

いくつかの態様では、濾過する工程に、約０〜約５℃又は０〜約１０℃の第一温度と、約２０〜約３０℃又は１５〜約３５℃の第二温度を使用する第一濾過工程が含まれ得る。いくつかの態様では、濾過工程に、約１〜約３０、いくつかの事例では約１〜約１５、又はいくつかの事例では１〜約６のダイア容量を処理することが含まれ得る。例えば、濾過工程には、約１〜約３０、又はいくつかの事例では約１〜約６のダイア容量を約０〜約５℃で処理すること、及び少なくとも１のダイア容量（例、約１〜約１５、約１〜約３、又は約１〜約２のダイア容量）を約２０〜約３０℃で処理することが含まれ得る。いくつかの態様では、濾過工程が、異なるダイア容量を異なる別個の温度で処理することを含む。

【0196】

１つの態様では、約２０ダイア容量の冷脱イオン水を使用する。別の態様では、約２０ダイア容量の脱イオン水を周囲温度で使用する。

【0197】

ナノ粒子懸濁液を精製して濃縮した後で、粒子は、例えば、約０．２μｍの深さのプレフィルターを使用して、１、又は２個以上の滅菌フィルター及び／又はデプスフィルターに通過させてよい。例えば、滅菌濾過工程は、濾過トレインを制御速度で使用して治療用ナノ粒子を濾過する工程を伴ってよい。いくつかの態様において、濾過トレインには、デプスフィルターと滅菌フィルターが含まれ得る。

【0198】

ナノ粒子を調製する別の態様では、治療薬剤（ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ）と重合体（ホモポリマー及び共重合体）の混合物からなる有機相が形成される。この有機相を水相とほぼ１：５の比（有機相：水相）で混合する（ここで水相は、界面活性剤といくらかの溶けた溶媒からなる）。この２つの相を単純混合の下で、又はローター・スターターホモジェナイザーの使用により合わせることによって、一次エマルジョンが生成される。次いで、この一次エマルジョンを、高圧ホモジェナイザーの使用により、微細エマルジョンへ生成する。次いで、この微細エマルジョンを、脱イオン水へ混合しながら加えることによって、クエンチさせる。いくつかの態様において、クエンチ液：エマルジョンの比は、約２：１〜約４０：１、又はいくつかの態様では約５：１〜約１５：１であり得る。いくつかの態様において、クエンチ液：エマルジョンの比は、ほぼ８．５：１である。次いで、このクエンチ液へＴｗｅｅｎ（登録商標）（例、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０）の溶液を加えて、全体でほぼ２％のＴｗｅｅｎ（登録商標）を達成する。これは、遊離した被包化されない治療薬剤（即ち、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ）を溶かすのに役立つ。次いで、このナノ粒子を、遠心分離又は限外濾過／透析濾過のいずれかによって単離する。

【0199】

製剤の製造に使用される重合体、治療薬剤（即ち、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ）、及び疎水性酸の量は、最終製剤から異なる場合があることが理解されよう。例えば、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのいくらかは、ナノ粒子に完全に取り込まれない場合があって、そのような遊離したＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、例えば、濾過して除去されてよい。例えば、ある態様では、約９％の第一疎水性酸（例、脂肪酸）を含有する第一有機溶液に約１１重量パーセントの理論負荷のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含有する第一有機溶液、約８９重量パーセントの重合体（例えば、重合体には、ＰＬＡ−ＰＥＧが含まれ得る）を含有する第二有機溶液、及び約０．１２％の第二疎水性酸（例、胆汁酸）を含有する水溶液を製剤の製造に使用し得て、これは、例えば、約２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約９７．５重量パーセントの重合体、及び約０．５％の全疎水性酸を含んでなる最終ナノ粒子をもたらす。このような方法は、約１〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ（例えば、約１、約２、約３、約４、約５、約８、約１０、又は約１５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ）が含まれる、患者への投与に適した最終ナノ粒子を提供し得る。

【0200】

さらに、トリフルオロ酢酸のような疎水性酸を使用する方法（例えば、実施例３を参照のこと）より生成される産物は、当初は水相中の界面活性剤として使用されるコール酸ナトリウムのような塩由来の疎水性酸とのイオン交換を受ける場合があることが理解されよう。例えば、実施例３に示すように、トリフルオロ酢酸とコール酸ナトリウムの製造における使用の後では、ナノ粒子中の疎水性酸としてコール酸が保持される場合がある。

【0201】

いくつかの態様では、エマルジョン相をクエンチする工程が、約２と約８の間（約４と約７の間のような）のｐＨを有する第二水相とエマルジョン相を混合する工程を含む。

【0202】

別の側面では、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する。この方法は、第一有機相を第一水溶液と合わせて、第二相を形成する工程；この第二相を乳化して、エマルジョン相を形成する工程（ここでエマルジョン相は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａである基礎治療薬剤、及び実質的に疎水性の酸を含む）；このエマルジョン相のクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程を含み、ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨを有する第二水相とこのエマルジョン相を混合する工程を含む。

【0203】

いくつかの態様において、この方法は、クエンチされた相を濾過して、治療用ナノ粒子を回収する工程をさらに含む。

【0204】

いくつかの態様において、この方法は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと第二相中の酸を、第二相を乳化する工程に先立って合わせる工程を含む。例えば、いくつかの態様では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとこの酸が、第二相を乳化する工程に先立って、疎水性イオン対を形成する。他の態様では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとこの酸が、第二相の乳化の間に、疎水性イオン対を形成する。

【0205】

いくつかの態様において、この方法は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと第二相中の酸を、第二相を乳化する工程と実質的に同時に合わせる工程を含む。例えば、いくつかの態様において、第一有機相は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含み、そして第一水溶液は、その酸を含む。

【0206】

他の態様において、第一有機相は、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及び実質的に疎水性の酸を含む。

【0207】

１つの側面では、第一有機相を第一水溶液と合わせて、第二相を形成する工程；この第二相を乳化して、エマルジョン相を形成する工程（ここでエマルジョン相は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａである基礎治療薬剤、及びパモ酸を含む）；このエマルジョン相のクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する。この側面において、好ましくは、このエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨを有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む。

【0208】

さらなる側面では、第一有機相を第一水溶液と合わせて、第二相を形成する工程；この第二相を乳化して、エマルジョン相を形成する工程（ここでエマルジョン相は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａである基礎治療薬剤、及びデオキシコール酸とジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）；このエマルジョン相のクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨを有する水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する。

【0209】

簡便にも、このエマルジョン相は、クエンチングの前のある時間（５〜１５分のような）の間、例えば氷中での保存によって、保持される。上記に言及したように、いくつかの側面において、エマルジョンは、粗エマルジョンの生成に続く微細エマルジョンの生成という、２段階の方法で行われる。いくつかの態様では、粗エマルジョンが形成されて、これが簡便にも、例えば、微細エマルジョンが形成される前のある時間（５〜１５分のような）の間、例えば氷中での保存によって、保持され得る。微細エマルジョンそれ自体も、例えば、０〜５℃の温度で、いくつかの態様では約２℃で、クエンチング前の１〜１５分（いくつかの態様では約１分、他の態様では約２分、他の態様では１分以内、なおさらなる態様では少なくとも５分）の間、保存してよい。

【0210】

簡便にも、このクエンチングは、５℃未満のような低減した温度で行われる。

【0211】

好適にも、上記の側面及び態様において、第一水相は、水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含む。

【0212】

さらなる側面では、第一有機相を第一水溶液と合わせて、第二相を形成する工程；この第二相を乳化して、エマルジョン相を形成する工程（ここでエマルジョン相は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａである基礎治療薬剤、並びにデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）；このエマルジョン相をホールド時間の間保持してもよい工程（簡便には約０℃で５〜１５分のように）；このエマルジョン相のクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する水溶液とこのエマルジョン相を、好ましくは５℃未満で混合する工程を含む）を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する。好適にも、第一水相は、水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含む。

【0213】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を１以上の溶媒中に含む）を第一水溶液（水中に界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、エマルジョンを生成する工程；
３）このエマルジョン相をホールド時間の間保持してもよい工程（簡便には、約０℃で５〜１５分のように）；
４）このエマルジョン相の５℃未満でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
５）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0214】

好適にも、第一水相は、水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含む。

【0215】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を１以上の溶媒中に含む）を第一水溶液（水中に界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の５℃未満でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0216】

好適にも、第一水相は、水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含む。

【0217】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにＤＭＳＯ中にデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）を第一水溶液（水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、エマルジョンを生成する工程；
３）このエマルジョン相をホールド時間の間保持してもよい工程（簡便には、約０℃で５〜１５分のように）；
４）このエマルジョン相の５℃未満でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
５）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0218】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0219】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにＤＭＳＯ中にデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）を第一水溶液（水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0220】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0221】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにＤＭＳＯ中にデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する緩衝液を含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0222】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0223】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが１：３と１：４の間のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する緩衝液を含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0224】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0225】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びＤＭＳＯ中にパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、ｐＨ６．５を有する緩衝液を含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を約２０：１〜１００：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0226】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが１：３と１：４の間のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）このクエンチされた溶液へ可溶化剤としての界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0227】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）可溶化剤としての界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0228】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0229】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間待つ工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）可溶化剤としての界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0230】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0231】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待つ工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0232】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0233】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待つ工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0234】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）約１分後、このエマルジョン相の約２℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
６）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を加える工程；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0235】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、約１モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0236】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）約１分後、このエマルジョン相の約２℃でのクエンチング（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、そしてここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約１０：１である）；
６）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を約１００：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で加える工程；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0237】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、約１モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0238】

さらなる側面では、以下の工程を含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、１モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）約１分後、このエマルジョン相の約２℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、そしてここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約１０：１である）；
６）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を約１００：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で加える工程；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0239】

さらなる側面では、本明細書の実施例において説明する具体的な方法のいずれも含んでなる、治療用ナノ粒子を製造するための方法を提供する。

【0240】

いくつかの態様において、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、プロトン化されるとき、第一ｐＫ_ａを有して、上記酸は、第二ｐＫ_ａを有して、エマルジョン相は、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のｐＫ_ａ単位に等しいｐＨを有する水溶液でクエンチされる。例えば、いくつかの事例において、クエンチされた相は、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のｐＫ_ａ単位に等しいｐＨを有する。いくつかの態様において、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、プロトン化されるとき、第一ｐＫ_ａを有し、上記酸は、第二ｐＫ_ａを有して、第一水溶液は、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のｐＫ_ａ単位に等しいｐＨを有する。いくつかの態様において、（例えば、クエンチされた相又は第一水溶液の）ｐＨは、第一ｐＫ_ａと第二ｐＫ_ａの間のほぼ等距離にあるｐＫ_ａ単位に等しい。

【0241】

別の側面では、治療用ナノ粒子を提供する。この治療用ナノ粒子は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及び実質的に疎水性の酸を含んでなる混合物の乳化によって、エマルジョン相を形成する工程；及びこのエマルジョン相のクエンチングによって、複数の治療用ナノ粒子を含む、クエンチされた相を形成する工程によって製造される。

【0242】

別の側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにデオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択される実質的に疎水性の酸を含んでなる混合物の乳化によって、エマルジョン相を形成する工程；及びこのエマルジョン相のクエンチングによって、複数の治療用ナノ粒子を含む、クエンチされた相を形成する工程によって製造される。

【0243】

なお別の側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含んでなる混合物の乳化によって、エマルジョン相を形成する工程；及びこのエマルジョン相のクエンチングによって、複数の治療用ナノ粒子を含む、クエンチされた相を形成する工程によって製造される。

【0244】

いくつかの態様では、エマルジョン相のクエンチングが、約２と約８の間のｐＨ（約４と７の間のｐＨのような）を有する水溶液とエマルジョン相を混合する工程を含む。５℃未満のような、低減した温度でのクエンチングが好ましい。

【0245】

なお別の側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及び実質的に疎水性の酸を含んでなる混合物の乳化によって、エマルジョン相を形成する工程；及びこのエマルジョン相のクエンチングによって、複数の治療用ナノ粒子を含む、クエンチされた相を形成する工程によって製造され、ここでエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨを有する水溶液とエマルジョン相を混合する工程を含む。

【0246】

なお別の側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにデオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択される実質的に疎水性の酸を含んでなる混合物の乳化によって、エマルジョン相を形成する工程；及びこのエマルジョン相のクエンチングによって、複数の治療用ナノ粒子を含む、クエンチされた相を形成する工程によって製造され、ここでエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨを有する水溶液とエマルジョン相を混合する工程を含む。

【0247】

なお別の側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、第一重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含んでなる混合物の乳化によって、エマルジョン相を形成する工程；及びこのエマルジョン相のクエンチングによって、複数の治療用ナノ粒子を含む、クエンチされた相を形成する工程によって製造され、ここでエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨを有する水溶液とエマルジョン相を混合する工程を含む。

【0248】

いくつかの態様において、想定される水溶液（例、第一水溶液又は第二水溶液）のｐＨは、約４と約７の間、例えば、約４と約５の間、又は約６と約７の間である。

【0249】

いくつかの態様では、想定される水溶液が、リン酸塩、クエン酸塩、又はリン酸塩とクエン酸塩の混合物を含む。いくつかの態様において、第二水溶液は、ホウ酸塩、リン酸塩、及び酢酸塩の混合物を含む。

【0250】

いくつかの態様では、治療用ナノ粒子を製造するために想定される方法が、クエンチされた相を濾過して治療用ナノ粒子を回収する工程を含む。

【0251】

いくつかの態様において、クエンチされた相は、エマルジョン相と実質的に同じｐＨを有する。いくつかの態様において、クエンチされた相は、約４と約７の間、例えば、約４と約５の間、又は約６と約７の間のｐＨを有する。

【0252】

別の側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を１以上の溶媒中に含む）を第一水溶液（水中に界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、エマルジョンを生成する工程；
３）このエマルジョン相をホールド時間の間保持してもよい工程（簡便には、約０℃で５〜１５分のように）；
４）このエマルジョン相の５℃未満でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
５）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0253】

好適にも、第一水相は、水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含む。

【0254】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を１以上の溶媒中に含む）を第一水溶液（水中に界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0255】

好適にも、第一水相は、水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含む。

【0256】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにＤＭＳＯ中にデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）を第一水溶液（水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、エマルジョンを生成する工程；
３）このエマルジョン相をホールド時間の間保持してもよい工程（簡便には、約０℃で５〜１５分のように）；
４）このエマルジョン相の５℃未満でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
５）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0257】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0258】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、並びにＤＭＳＯ中にデオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される実質的に疎水性の酸を含む）を第一水溶液（水とベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0259】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0260】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びＤＭＳＯ中にパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にコール酸ナトリウム又はポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する緩衝液を含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0261】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0262】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが１：３と１：４の間のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、約４と約７の間のｐＨ（約６．５のｐＨのような）を有する緩衝液を含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0263】

このクエンチされた溶液へ、濃縮と濾過に先立って、水中のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０のようなさらなる界面活性剤を追加してよい。

【0264】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、酢酸エチル中に重合体、ＴＦＡ／水／ベンジルアルコール溶媒系にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びＤＭＳＯ中にパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、ｐＨ６．５を有する緩衝液を含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を約２０：１〜１００：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0265】

さらなる側面では、治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが１：３と１：４の間のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）このクエンチされた溶液へ可溶化剤としての界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0266】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ１として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間、待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）可溶化剤としての界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0267】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0268】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ１として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）のような界面活性剤を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で５〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分の遅延時間の間待つ工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
７）可溶化剤としての界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0269】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0270】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ１として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待つ工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液を加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0271】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0272】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ１として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待つ工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0273】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ２として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）約１分後、このエマルジョン相の約２℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含む）；
６）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を加える工程；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0274】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、約１モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0275】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ２として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含む）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）約１分後、このエマルジョン相の約２℃でのクエンチング（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、そしてここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約１０：１である）；
６）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を約１００：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で加える工程；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0276】

簡便にも、パモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、約１モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える。

【0277】

さらなる側面では、本明細書において製剤Ｇ２として記載される治療用ナノ粒子を提供し、ここでこの治療用ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる製造の方法によって製造される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、１モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）約１分後、このエマルジョン相の約２℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、そしてここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約１０：１である）；
６）このクエンチ液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を約１００：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で加える工程；
７）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0278】

１つの側面において、最終ナノ粒子には、（約８〜約２０重量％のような、約１０〜約２０重量％のような、約１０〜約１５重量％のような、約１０〜約１６重量％のような、約１２〜約１６重量％のような、約１５〜約２０重量％のような、約１５〜約１８重量％のような）約５〜約２０重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが含まれる。１つの側面において、最終ナノ粒子には、約１０〜約２０重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが含まれる。さらなる側面において、最終ナノ粒子には、約１５〜約２０重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが含まれる。さらなる側面において、最終ナノ粒子には、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが含まれる。

【0279】

本発明のさらなる特徴は、約１０〜１６重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約５０〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、並びにコール酸、デオキシコール酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含んでなる最終ナノ粒子を提供する。この特徴の１つの態様において、疎水性酸は、デオキシコール酸とジオクチルスルホコハク酸より選択される。この特徴の別の態様において、疎水性酸は、デオキシコール酸である。この特徴の別の態様において、疎水性酸は、ジオクチルスルホコハク酸である。この特徴の別の態様において、疎水性酸は、コール酸である。この特徴の別の態様において、疎水性酸は、コール酸とデオキシコール酸の混合物であり；この態様において、好適にも疎水性酸は、約３：２のモル比のデオキシコール酸：コール酸であって、全疎水性酸：ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのモル比は、約２：１である。

【0280】

本発明のさらなる特徴は、約１０〜２０重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約５０〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、並びに、コール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含んでなるナノ粒子を提供する。

【0281】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0282】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0283】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、約６５〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0284】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0285】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、約５５〜約８０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１０〜約２０重量パーセントのパモ酸、及び約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0286】

別の側面において、治療用ナノ粒子は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、約６５〜約７６重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約２０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約９〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0287】

本発明のさらなる特徴は、約１０〜２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約５０〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、及びパモ酸を含んでなるナノ粒子を提供する。

【0288】

本発明のさらなる特徴は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の各製剤を含む。本発明のなおさらなる特徴は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の各製剤を含み、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、約（＋／−）１重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の各製剤を含み、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、約（＋／−）１．５重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の各製剤を含み、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、約（＋／−）２重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。

【0289】

１つの側面では、想定されるナノ粒子が、７０〜１４０ｎｍのような、２００ｎｍ未満の流体力学的径を有する。

【0290】

本発明のさらなる側面では、約１５〜２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなるナノ粒子を提供する（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0291】

本発明のさらなる側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなるナノ粒子を提供する（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0292】

本発明のさらなる側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１０重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなるナノ粒子を提供し（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で４０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で５０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定され得る。

【0293】

本発明のさらなる側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１０重量パーセントのパモ酸（ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａとパモ酸は、疎水性イオン対を形成する）、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなるナノ粒子を提供し（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で４０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で５０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定され得る。

【0294】

本発明のさらなる側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１０重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなるナノ粒子を提供し（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出され、そしてここで該ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる方法によって作製される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0295】

本発明のさらなる側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１０重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなるナノ粒子を提供し（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる方法によって作製される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0296】

１つの側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜１０重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる、本明細書において製剤Ｇ１と記載される治療用ナノ粒子を提供する（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0297】

別の側面では、約１５〜２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約９〜１３重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなる、本明細書において製剤Ｇ２と記載される治療用ナノ粒子を提供する（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0298】

医薬製剤
別の側面に従えば、本明細書に開示するナノ粒子を医薬的に許容される担体と組み合わせて、医薬組成物を生成することができる。当業者であれば理解されるように、この担体は、下記に記載するような投与の経路、標的組織の位置、送達される薬物、薬物の送達の時間経過、等に基づいて選択され得る。

【0299】

別の側面では、医薬的に許容される組成物を提供する。この医薬的に許容される組成物は、複数の想定される治療用ナノ粒子と医薬的に許容される担体を含む。この医薬的に許容される組成物は、１以上の賦形剤及び／又は希釈剤も含み得る。この側面の１つの態様において、医薬組成物は、複数の治療用ナノ粒子を含み、ここで該ナノ粒子は、約１０〜２０重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約５０〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、並びにコール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含む。

【0300】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んで、疎水性酸をさらに含んでもよい。

【0301】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体を含んで、疎水性酸をさらに含んでもよい。

【0302】

別の側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここで該ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）、並びに、コール酸、デオキシコール酸、パモ酸、及びジオクチルスルホコハク酸より選択される疎水性酸を含む。

【0303】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んで、疎水性酸をさらに含む。これらの側面において、簡便にも疎水性酸は、デオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択され；簡便にも疎水性酸は、デオキシコール酸とコール酸の混合物であってよい。

【0304】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0305】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約６５〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0306】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0307】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約５５〜約８０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１０〜約２０重量パーセントのパモ酸、及び約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0308】

本発明のさらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約６５〜約７６重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約２０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約９〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む。

【0309】

上記の特徴において記載される医薬組成物において、簡便にも共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。

【0310】

本発明のさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応する。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応し、ここでここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、約（＋／−）１重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものから約（＋／−）１．５重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものから約（＋／−）２重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％は、約（＋／−）３重量％まで変動し、疎水性酸の量は、本明細書に例示される製剤中の比率に対応するＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの量に比例して変動して、重合体の量も、それに従って変動する。

【0311】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２５重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含む（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0312】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含む（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0313】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及び約６３〜約７８重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含む（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0314】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量％のパモ酸の混合物を含む。

【0315】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量％のパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含む。

【0316】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、（ナノ粒子の）約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと（ナノ粒子の）約７〜約１５重量％のパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含む。

【0317】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で４０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で５０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定される。

【0318】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出されて、そしてここで該ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる方法によって作製される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0319】

好適にも、上記医薬組成物中のナノ粒子は、７０〜１４０ｎｍのような、２００ｎｍ未満の流体力学的径を有する。

【0320】

本発明の医薬組成物は、経口経路と非経口経路が含まれる、当該技術分野で知られたどの手段によっても患者へ投与することができる。「患者」という用語は、本明細書に使用するように、ヒト、並びに非ヒト（例えば、哺乳動物、鳥類、爬虫類、両生類、及び魚類が含まれる）に言及する。例えば、非ヒトは、哺乳動物（例、齧歯動物、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、霊長動物、又はブタ）であってよい。ある態様では、消化管に見出される消化酵素との接触が回避されるので、非経口経路が望ましい。このような態様によれば、本発明の組成物は、注射（例えば、静脈内、皮下又は筋肉内、腹腔内の注射）によって、直腸に、膣内に、局所的に（散剤、クリーム剤、軟膏剤、又は滴剤によるように）、又は吸入によって（スプレー剤によるように）投与され得る。

【0321】

特別な態様において、当該ナノ粒子は、それを必要とする被験者へ全身的に（例えば、ＩＶ（静脈内）注入又は注射によって）投与される。

【0322】

注射可能な調製物、例えば、無菌で注射可能な水性又は油性の懸濁液剤は、好適な分散剤又は湿潤剤と懸濁剤を使用する既知の技術に従って製剤化し得る。無菌の注射可能な調製物はまた、非経口的に許容される無毒の希釈剤又は溶媒中の無菌の注射可能な溶液剤、懸濁液剤、又は乳剤であってよく、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液剤であってよい。利用し得る、許容される希釈剤又は溶媒には、水、リンゲル液（米国薬局方）、及び等張塩化ナトリウム溶液がある。加えて、溶媒又は懸濁媒体として、無菌の不揮発性油剤が慣用的に利用され得る。この目的には、合成のモノグリセリド又はジグリセリドを含めて、どの無刺激な不揮発性油剤も利用することができる。加えて、注射液の調製には、オレイン酸のような脂肪酸が使用される。１つの態様において、本発明のコンジュゲートは、１％（ｗ／ｖ）ナトリウムカルボキシメチルセルロースと０．１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ^ＴＭ８０を含んでなる液体担体に懸濁される。注射可能な製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通す濾過によって、又は無菌水又は他の無菌の注射可能な媒体にに溶かすか、使用に先立って分散させることができる、無菌の固形組成物の形態に滅菌剤を取り込むことによって滅菌することができる。

【0323】

経口投与用の固体剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤が含まれる。そのような固体剤形において、被包化されるか又は被包化されないコンジュゲートは、クエン酸ナトリウム又はリン酸二カルシウムのような少なくとも１つの不活性な医薬的に許容される賦形剤又は担体、及び／又は（ａ）デンプン類、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、及びケイ皮酸のような充填剤又は増嵩剤、（ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖、及びアカシアのような結合剤、（ｃ）グリセロールのような保湿剤、（ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプン又はタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のケイ酸塩、及び炭酸ナトリウムのような崩壊剤、（ｅ）パラフィンのような溶解遅延剤、（ｆ）四級アンモニウム化合物のような吸収促進剤、（ｇ）例えば、セチルアルコールとグリセロールモノステアレートのような湿潤剤、（ｈ）カオリンとベントナイトクレイのような吸収剤、並びに（ｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール類、ラウリル硫酸ナトリウム、及びこれらの混合物のような滑沢剤と混合される。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合、この剤形は、緩衝剤も含んでよい。

【0324】

治療薬剤を含有するナノ粒子の正確な投与量は、治療される患者の観点から個々の医師によって選択されて、一般的には、治療される患者に対して有効量の治療用ナノ粒子を提供するように投与量と投与が調整されると理解されよう。本明細書に使用するように、治療薬剤を含有するナノ粒子の「有効量」とは、所望される生体応答を引き起こすのに必要な量を意味する。当業者によって理解されるように、治療薬剤を含有するナノ粒子の有効量は、所望される生物学的エンドポイント、送達される薬物、標的組織、投与の経路、等といった要因に依拠して変動し得る。例えば、治療薬剤を含有するナノ粒子の有効量は、所望される量によって、所望される期間にわたって腫瘍サイズの低下をもたらす量であり得る。考慮され得る追加の要因には、病態の重症度；治療される患者の年齢、体重、及び性別；食事、投与の時間及び頻度；薬物の組合せ；反応感受性；及び療法への耐性／応答性が含まれる。

【0325】

当該ナノ粒子は、投与の容易さと投与量の均一性のために単位剤形で製剤化され得る。本明細書に使用する「単位剤形」という表現は、治療される患者に適正なナノ粒子の物理的に離散した単位を意味する。しかしながら、この組成物の１日の総使用量は、担当医によって、健全な医学的判断の範囲内で決定されると理解されよう。どのナノ粒子でも、治療有効量は、初めに、細胞培養アッセイ、又は動物モデル（通常は、マウス、ウサギ、イヌ、又はブタ）のいずれかで推定することができる。動物モデルはまた、望まれる濃度範囲と投与経路を達成するために使用される。次いで、このような情報を使用して、ヒトにおける投与に有用な用量及び経路を決定することができる。ナノ粒子の治療効果と毒性は、細胞培養又は実験動物における標準的な製薬手順、例えば、ＥＤ_５０（この用量は、集団の５０％において治療上有効である）とＬＤ_５０（この用量は、集団の５０％にとって致死的である）によって判定することができる。毒性効果の治療効果に対する用量比が治療係数であって、それは、ＬＤ_５０／ＥＤ_５０の比として表現することができる。いくつかの態様では、大きな治療係数を示す医薬組成物が有用であり得る。細胞培養アッセイと動物試験より得られるデータは、ヒト使用のための投与量の範囲を定式化するときに使用することができる。

【0326】

１つの側面において、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ含有ナノ粒子を含んでなる医薬製剤は、それがＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを数日にわたってゆっくり放出するように設計される。例えば、この医薬製剤は、患者へ（例えば）７日間の治療サイクルの１日目と３日目、１日目と５日目、又は１日目と７日目にある用量が投与されるようなものであってよい。このサイクルは、１ヶ月又は２ヶ月の治療サイクルにおいて、毎週、２週、又は３週繰り返してよい。このように、来診ごとに投与される薬物の量は、その治療スケジュールにわたる特別な薬物曝露の全体量を達成するために計算される。有利にも、このナノ粒子含有製剤は、ＡＺＤ１１５２を投与するこれまでに知られた方法と比較して、各投薬での患者への薬物の投与に必要とされる時間を低減して、患者が必要とする治療のための病院受診の回数を低減する可能性がある。

【0327】

好適にも、ヒトへ投与されるとき、本発明のナノ粒子製剤によって送達されるＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの用量は、１００ｍｇ〜２０００ｍｇの範囲にあり得る。投与すべき正確な全体用量は、例えば、上記に記載のスケジュールにおいて送達される、患者にとって最適のＰＫ及び安全性のプロフィールと、治療される腫瘍の種類によって決定されよう。

【0328】

ある態様では、本明細書に開示する組成物に、約１０ｐｐｍのパラジウム、又は約８ｐｐｍ未満、又は約６ｐｐｍ未満のパラジウムが含まれてよい。例えば、本発明で提供されるのは、約１０ｐｐｍ未満のパラジウムを有する、ナノ粒子が含まれる組成物である。

【0329】

いくつかの態様では、本明細書に開示するナノ粒子と凍結に適した溶液が含まれる、凍結に適した組成物が想定され、例えば、単糖、二糖、又は多糖（例、ショ糖及び／又はトレハロース）のような糖類、及び／又は塩類、及び／又はシクロデキストリンの溶液をナノ粒子懸濁液へ加える。糖類（例、ショ糖又はトレハロース）は、例えば、凍結時の凝集からその粒子を防ぐための凍結保護物質として作用し得る。例えば、本発明で提供するのは、複数の開示されるナノ粒子、ショ糖、イオン性ハロゲン化物、及び水を含んでなるナノ粒子製剤であり；ここでナノ粒子／ショ糖／水／イオン性ハロゲン化物は、約３〜４０％／１０〜４０％／２０〜９５％／０．１〜１０％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）又は約５〜１０％／１０〜１５％／８０〜９０％／１〜１０％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）である。例えば、そのような溶液には、本明細書に開示するようなナノ粒子、約５％〜約２０重量％のショ糖と塩化ナトリウムのようなイオン性ハロゲン化物が、約１０〜約１００ｍＭの濃度で含まれ得る。別の実施例において、本発明で提供するのは、複数の開示されるナノ粒子、トレハロース、シクロデキストリン、及び水を含んでなるナノ粒子製剤であって；ここでこのナノ粒子／トレハロース／水／シクロデキストリンは、約３〜４０％／１〜２５％／２０〜９５％／１〜２５％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）又は約５〜１０％／１〜２５％／８０〜９０％／１０〜１５％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）である。

【0330】

例えば、想定される溶液剤には、本明細書に開示するようなナノ粒子、トレハロース又はショ糖のような約１〜約２５重量％の二糖類（例、約５〜約２５重量％のトレハロース又はショ糖、例えば、約１０重量％のトレハロース又はショ糖、又は約１５重量％のトレハロース又はショ糖、例えば、約５重量％のショ糖）、及び約１〜約２５重量％の濃度のβ−シクロデキストリンのようなシクロデキストリン（例えば、約５％〜約２０％、例えば、１０重量％又は約２０重量％、又は約１５〜約２０重量％のシクロデキストリン）が含まれ得る。想定される製剤には、複数の開示されるナノ粒子（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧと活性薬剤を有するナノ粒子）、約２〜約１５重量％（又は約４重量％〜約６重量％、例えば、約５重量％）のショ糖、及び約５重量％〜約２０重量％（例えば、約７重量％〜約１２重量％、例えば、約１０重量％）のシクロデキストリン（例えば、ＨＰｂＣＤ）が含まれ得る。

【0331】

本開示は、復元させたときに、大きな凝集体をほとんど有さない、凍結乾燥させた医薬組成物に一部関する。そのような大きな凝集体は、約０．５μｍより大きい、約１μｍより大きい、又は約１０μｍより大きいサイズを有し得て、復元した溶液において望まれ得ない。凝集体の大きさは、参照により本明細書に組み込まれる、米国薬局方（ＵＳＰ）３２＜７８８＞項に示されるものを含めて、多様な技術を使用して測定することができる。ＵＳＰ３２＜７８８＞項に概説される検査法には、光遮蔽粒子計測法、微粒子計測法、レーザー回折法、及び単粒子光学検知法が含まれる。１つの態様において、所与の試料中の粒径は、レーザー回折法、及び／又は単粒子光学検知法を使用して測定される。

【0332】

光遮蔽粒子計測法によるＵＳＰ３２＜７８８＞は、懸濁液中の粒径をサンプリングするためのガイドラインについて説明する。１００ｍＬ以下の溶液剤では、１０μｍ以上である存在粒子の平均数が容器当たり６０００個を超えず、そして２５μｍ以上である存在粒子の平均数が容器当たり６００個を超えなければ、その調製品は、検査に適合である。

【0333】

ＵＳＰ３２＜７８８＞に概説されるように、微粒子計測法は、接眼ミクロメータを有する、１００±１０倍の倍率へ調整した双眼顕微鏡を使用して粒子量を定量するためのガイドラインについて説明する。接眼ミクロメータは、１００倍の倍率で視るときに黒い基準円が１０μｍと２５μｍを示す四分円へ分割された円からなる、円径のグラチクル（graticle）である。このグラチクルの下には、直線の尺度が提供される。１０μｍと２５μｍを基準とした粒子の数を視覚的に集計する。１００ｍＬ以下の溶液剤では、１０μｍ以上である存在粒子の平均数が容器当たり３０００個を超えず、そして２５μｍ以上である存在粒子の平均数が容器当たり３００個を超えなければ、その調製品は、検査に適合である。

【0334】

いくつかの態様では、開示される組成物の１０ｍＬの水性試料が、復元時に、サイズが１０ミクロン以上である粒子を１ｍｌに付き６００個未満含み；及び／又はサイズが２５ミクロン以上である粒子を１ｍｌに付き６０個未満含む。

【0335】

粒径を測定するのに動的光散乱法（ＤＬＳ）を使用し得るが、それはブラウン運動に依拠するので、この技術では、より大きな粒子を検出し得ない場合がある。レーザー回折法は、粒子と懸濁媒体の間の屈折率の差に依拠する。この技術は、粒子を１ミクロン以下〜ミリメートルの範囲で検出することが可能である。ナノ粒子懸濁液では、比較的少量（例、約１〜５重量％）の大型粒子を定量することができる。単粒子光学検知法（ＳＰＯＳ）は、希釈懸濁液の光遮蔽を使用して、約０．５μｍの個々の粒子を計数する。測定される試料の粒子濃度を知ることによって、凝集体の重量パーセント、又は凝集体濃度（粒子／ｍＬ）を計算することができる。

【0336】

凍結乾燥の間には、粒子の表面の脱水により、凝集体の形成が起こり得る。この脱水は、凍結乾燥の前に、二糖類のような凍結保護物質を懸濁液中に使用することによって、回避することができる。好適な二糖類には、ショ糖、ラクツロース、乳糖、麦芽糖、トレハロース、又はセロビオース、及び／又はこれらの混合物が含まれる。他の想定される二糖類には、コジビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β−トレハロース、α，β−トレハロース、ソフォロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビオース、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、及びキシロビオースが含まれる。復元は、出発の懸濁液と比べるとき、同等のＤＬＳサイズ分布を示す。しかしながら、レーザー回折法では、一部の復元溶液において、粒径が１０μｍより大きい粒子を検出することができる。さらに、ＳＰＯＳはまた、サイズが１０μｍより大きい粒子をＦＤＡガイドライン（１０μｍより大きい粒子が１ｍＬに付き１０^４〜１０^５個）の濃度より高い濃度で検出する場合がある。

【0337】

いくつかの態様では、ショ糖、トレハロース又はこれらの混合物のような糖類への追加の凍結保護物質として１以上のイオン性ハロゲン塩を使用してよい。糖類には、二糖類、単糖類、三糖類、及び／又は多糖類が含まれ得て、他の賦形剤（例、グリセロール）及び／又は界面活性剤も含まれ得る。追加の凍結保護物質として、シクロデキストリンを含めてもよい。シクロデキストリンは、イオン性ハロゲン塩の代わりに加えてよい。あるいは、シクロデキストリンは、イオン性ハロゲン塩に追加して加えてよい。

【0338】

好適なイオン性ハロゲン塩には、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛、又はこれらの混合物が含まれ得る。追加の好適なイオン性ハロゲン塩には、塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化アンモニウム、臭化ナトリウム、臭化カルシウム、臭化亜鉛、臭化カリウム、臭化マグネシウム、臭化アンモニウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カルシウム、ヨウ化亜鉛、ヨウ化カリウム、ヨウ化マグネシウム、又はヨウ化アンモニウム、及び／又はこれらの混合物が含まれる。１つの態様では、イオン性ハロゲン塩とともに約１〜約１５重量パーセントのショ糖を使用し得る。１つの態様において、凍結乾燥させた医薬組成物は、約１０〜約１００ｍＭの塩化ナトリウムを含み得る。別の態様において、凍結乾燥させた医薬組成物は、約１００〜約５００ｍＭの二価イオン性塩化物塩（塩化カルシウム又は塩化亜鉛のような）を含み得る。なお別の態様において、凍結乾燥させる懸濁液剤は、シクロデキストリンをさらに含んでよく、例えば、約１〜約２５重量パーセントのシクロデキストリンを使用し得る。

【0339】

好適なシクロデキストリンには、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、又はこれらの混合物が含まれ得る。本明細書に開示する組成物における使用が想定される例示のシクロデキストリンには、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰｂＣＤ）、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチルエチル−β−シクロデキストリン、ジエチル−β−シクロデキストリン、トリ−Ｏ−アルキル−−β−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、及びマルトシル−β−シクロデキストリンが含まれる。１つの態様では、約１〜約２５重量パーセント（例、約１０〜約１５重量％、例、５〜約２０重量％）のトレハロースをシクロデキストリンととも使用し得る。１つの態様において、凍結乾燥させた医薬組成物は、約１〜約２５重量パーセントのβ−シクロデキストリンを含み得る。例示の組成物は、ＰＬＡ−ＰＥＧ、活性／治療薬剤、約４重量％〜約６重量％（例、約５重量％）のショ糖、及び約８〜約１２重量パーセント（例、約１０重量％）のＨＰｂＣＤを含んでなるナノ粒子を含み得る。

【0340】

１つの側面では、開示されるナノ粒子を含んでなる、凍結乾燥された医薬組成物を提供し、ここで凍結乾燥させた医薬組成物を約１００ｍＬ以下の水性媒体において約５０ｍｇ／ｍＬのナノ粒子濃度で復元させたとき、非経口投与に適した復元された組成物は、１０ミクロン以上の微粒子を６０００個未満（３０００個未満のように）；及び／又は２５ミクロン以上の微粒子を６００個未満（３００個未満のように）含む。

【0341】

微粒子の数は、光遮蔽粒子計測法によるＵＳＰ３２＜７８８＞、微粒子計測法によるＵＳＰ３２＜７８８＞、レーザー回折法、及び単粒子光学検知法といった手段によって定量することができる。

【0342】

ある側面では、疎水性重合体セグメントと親水性重合体セグメントを有する共重合体；活性薬剤；糖類；及びシクロデキストリンをそれぞれ含んでなる複数の治療用粒子を含んでなる、復元時に非経口使用に適した医薬組成物を提供する。

【0343】

例えば、共重合体は、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコール共重合体であってよい。復元時には、１００ｍＬの水性試料が、１０ミクロン以上の大きさを有する６０００個未満の微粒子；及び、２５ミクロン以上の大きさを有する６００個未満の微粒子を含み得る。

【0344】

二糖類とイオン性ハロゲン塩を加える工程は、約５〜約１５重量パーセントのショ糖又は約５〜約２０重量パーセントのトレハロース（例、約１０〜約２０重量パーセントのトレハロース）と約１０〜約５００ｍＭのイオン性ハロゲン塩を加える工程を含み得る。イオン性ハロゲン塩は、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、及び塩化亜鉛、又はこれらの混合物より選択され得る。ある態様では、約１〜約２５重量パーセントのシクロデキストリンも加えられる。

【0345】

別の態様において、二糖類とシクロデキストリンを加える工程は、約５〜約１５重量パーセントのショ糖又は約５〜約２０重量パーセントのトレハロース（例、約１０〜約２０重量パーセントのトレハロース）と約１〜約２５重量パーセントのシクロデキストリンを加える工程を含み得る。ある態様では、約１０〜約１５重量パーセントのシクロデキストリンが加えられる。シクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、又はこれらの混合物より選択され得る。

【0346】

別の側面では、復元時にナノ粒子の凝集を防ぐために凍結乾燥製剤へ糖類と塩類を加える工程を含んでなる、ナノ粒子の医薬組成物における粒子の実質的な凝集を防ぐ方法を提供する。ある態様では、凍結乾燥製剤へシクロデキストリンも加えられる。なお別の態様では、復元時にナノ粒子の凝集を防ぐために凍結乾燥製剤へ糖類とシクロデキストリンを加える工程を含んでなる、ナノ粒子の医薬組成物における粒子の実質的な凝集を防ぐ方法を提供する。

【0347】

想定される凍結乾燥組成物は、約４０ｍｇ／ｍＬより高い治療用粒子濃度を有し得る。非経口投与に適した製剤は、１０ｍＬ用量において、１０ミクロンより大きいサイズを有する、約６００個未満の粒子を有し得る。凍結乾燥させる工程は、約−４０℃より高い、又は例えば約−３０℃未満の温度で組成物を凍結させて、凍結組成物を生成する工程；及びこの凍結組成物を乾燥させて凍結乾燥組成物を生成する工程を含み得る。乾燥させる工程は、約−２５〜約−３４℃、又は約−３０〜約−３４℃の温度で、約５０ｍＴｏｒｒで起こり得る。

【0348】

本発明のさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥（された）医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応する。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応し、ここでここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、約（＋／−）１重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものから約（＋／−）１．５重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものから約（＋／−）２重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と呼ばれる実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、約（＋／−）３重量％まで変動し、疎水性酸の量は、本明細書に例示される製剤中の比率に対応するＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの量に比例して変動して、重合体の量も、それに従って変動する。

【0349】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２５重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含む（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0350】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含む（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0351】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及び約６３〜約７８重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含む（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）。

【0352】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量％のパモ酸の混合物を含む。

【0353】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量％のパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含む。

【0354】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、（ナノ粒子の）約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと（ナノ粒子の）約７〜約１５重量％のパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含む。

【0355】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で４０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。この側面の別の態様では、該ナノ粒子から、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で５０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定される。

【0356】

さらなる側面では、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤を含んでなる凍結乾燥医薬組成物を提供し、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量％のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量％のパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出されて、そしてここで該ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる方法によって作製される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0357】

好適にも、上記医薬組成物中のナノ粒子は、７０〜１４０ｎｍのような、２００ｎｍ未満の流体力学的径を有する。

【0358】

さらなる側面では、キットオブパーツを提供し、このキットは：
１）上記に記載されるような開示されるナノ粒子を含んでなる、凍結乾燥医薬組成物；及び
２）使用説明書を含む。

【0359】

さらなる側面では、キットオブパーツを提供し、このキットは：
１）上記に記載されるような開示されるナノ粒子を含んでなる、凍結−乾燥させた（freeze-dried）医薬組成物；及び
２）使用説明書を含む。

【0360】

治療の方法
いくつかの態様では、想定されるナノ粒子を使用して、疾患、障害、及び／又は病態を治療する、軽減する、改善する、緩和する、その発現を遅らせる、その進行を阻害する、その重症度を抑える、及び／又はその１以上の症状又は特徴の発症を抑えることができる。いくつかの態様では、想定されるナノ粒子を使用して、固形腫瘍、例えば、癌、及び／又は癌細胞を治療することができる。

【0361】

「癌」という用語には、悪性の癌だけでなく前悪性の癌も含まれる。癌には、限定されないが、血液系（血液）癌（例、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病、マントル細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞性リンパ腫、骨髄腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群）、前立腺癌、胃癌、結直腸癌、皮膚癌（例、メラノーマ又は基底細胞癌）、肺癌（例、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ））、乳癌、卵巣癌、頭頚部癌、気管支癌、膵臓癌、尿膀胱癌、脳又は中枢神経系の癌、末梢神経系癌、食道癌、口腔癌又は咽頭癌、肝癌（例、肝細胞癌）、腎癌（例、腎細胞癌）、精巣癌、胆管癌、小腸癌又は虫垂癌、消化管間質腫瘍、唾液腺癌、甲状腺癌、副腎癌、骨肉腫、軟骨肉腫、血液系組織の癌、等が含まれる。「癌細胞」は、腫瘍（固形腫瘍）の形態であり得て、被験者の内部で単独に存在する（例、白血病細胞）か又は癌に由来する細胞系であり得る。

【0362】

１つの側面において、治療される癌は、白血病である。別の側面において、治療される癌は、血液癌である。別の側面において、治療される癌は、ＡＭＬのような血液癌である。別の側面において、治療される癌は、ＤＬＢＣＬのような血液癌である。別の側面において、治療される癌は、骨髄異形成症候群のような血液癌である。

【0363】

別の側面において、治療される癌は、固形腫瘍である。別の側面において、治療される癌は、ＮＳＣＬＣである。別の側面において、治療される癌は、ＳＣＬＣである。別の側面において、治療される癌は、卵巣癌である。別の側面において、治療される癌は、結直腸癌である。

【0364】

１つの側面では、本発明のナノ粒子を使用して、高度に増殖性の癌種を治療する。

【0365】

患者は、この治療より利益を受ける可能性がより高いことを示唆し得るバイオマーカーを使用して選択され得る。例えば、それらの腫瘍が増殖速度の高い細胞を有する（例えば、ｃ−ｍｙｃの高い発現又は増幅の故に）か又は調節不全のアポトーシス機能を有する（例えば、Ｂｃｌ−２遺伝子転座の故に）ことが理由である。

【0366】

癌では、多様な身体症状が伴う可能性がある。癌の症状は、腫瘍の種類及び位置に概して依存する。例えば、肺癌が、咳、息切れ、及び胸痛を引き起こす可能性がある一方で、結腸癌は、下痢、便秘、及び血便を引き起こすことが多い。しかしながら、わずかな例を挙げると、多くの癌で、一般には、以下の症状を伴うことが多い：発熱、寒気、寝汗、咳、呼吸困難、体重減少、食欲喪失、食欲不振、吐気、嘔吐、下痢、貧血、黄疸、肝肥大、喀血、疲労感、不快感、認知機能不全、うつ症状、ホルモン異常、好中球減少症、疼痛、非治癒性の痛み、リンパ節肥大、末梢神経障害、及び性機能不全。

【0367】

１つの側面では、癌の治療の方法を提供する．いくつかの態様において、癌の治療は、本発明の粒子の必要な被験者へ所望の結果を達成するのに必要であるような量で、必要であるような時間の間、その治療有効量を投与することを含む。ある態様において、本発明の粒子の「治療有効量」は、癌を治療する、軽減する、改善する、緩和する、その発現を遅らせる、その進行を阻害する、その重症度を抑える、及び／又はその１以上の症状又は特徴の発症を抑えるのに有効な量である。

【0368】

故に、本発明の１つの側面によれば、癌の予防又は治療の必要なヒトのような温血動物における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子を含んでなる組成物の治療有効量を該患者へ投与することを含んでなる、癌の予防又は治療の方法を提供する。

【0369】

１つの側面では、癌に罹患している被験者へ本発明の組成物を投与するための方法を提供する。いくつかの態様では、所望の結果（癌の治療）を達成するのに必要であるような量で、必要であるような時間の間、被験者へナノ粒子が投与され得る。ある態様では、想定されるナノ粒子の「治療有効量」が、癌を治療する、軽減する、改善する、緩和する、その発現を遅らせる、その進行を阻害する、その重症度を抑える、及び／又はその１以上の症状又は特徴の発症を抑えるのに有効な量である。

【0370】

本発明のさらなる特徴では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子を、ヒトのような温血動物における医薬品としての使用に提供する。

【0371】

本発明のさらなる特徴では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子を、ヒトのような温血動物における抗増殖効果の産生における使用に提供する。

【0372】

本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子を、ヒトのような温血動物における、固形腫瘍疾患の抑制及び／又は治療における抗浸潤剤としての使用に提供する。

【0373】

本発明のさらなる特徴では、ヒトのような温血動物での癌の予防又は治療における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の使用を提供する。

【0374】

本発明のさらなる特徴では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子を、ヒトのような温血動物での癌の予防又は治療における使用に提供する。

【0375】

本発明のさらなる特徴では、ヒトのような温血動物における癌の予防又は治療用医薬品の製造における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の使用を提供する。

【0376】

上記の特徴の１つの側面において、癌は、固形腫瘍である。これらの特徴の別の側面において、癌は、白血病である。

【0377】

本発明のさらなる側面によれば、ヒトのような温血動物における抗増殖効果の産生のための、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の使用を提供する。

【0378】

本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、ヒトのような温血動物における抗増殖効果の産生に使用のための医薬品の製造における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の使用を提供する。

【0379】

本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、ヒトのような温血動物における、固形腫瘍疾患の抑制及び／又は治療での抗浸潤剤としての使用のための医薬品の製造における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の使用を提供する。

【0380】

本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、抗増殖効果の産生のような治療の必要な、ヒトのような温血動物におけるその産生のための方法を提供し、該方法は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の有効量を前記動物へ投与することを含む。

【0381】

本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、抗浸潤効果の産生のような治療の必要な、ヒトのような温血動物において、固形腫瘍疾患の抑制及び／又は治療によってそれを産生するための方法を提供し、該方法は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の有効量を前記動物へ投与することを含む。

【0382】

本発明のさらなる側面によれば、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子を、ヒトのような温血動物における固形腫瘍疾患の予防又は治療における使用に提供する。

【0383】

本発明のさらなる側面によれば、ヒトのような温血動物における固形腫瘍疾患の予防又は治療に使用のための医薬品の製造における、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の使用を提供する。

【0384】

本発明のこの側面のさらなる特徴によれば、固形腫瘍疾患の予防又は治療のような治療の必要な、ヒトのような温血動物におけるそのための方法を提供し、該方法は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子の有効量を前記動物へ投与することを含む。

【0385】

上記の使用と方法では、簡便にも１００ｍｇ〜２０００ｍｇのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが７日間の治療サイクルの（例えば）１日目と３日目、１日目と５日目、又は１日目と７日目に投与される。このサイクルは、１ヶ月又は２ヶ月の治療サイクルにおいて、毎週、２週、又は３週繰り返してよい。

【0386】

上記の使用と方法において、好適にも、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子は、以下の１）〜１６）に収載されるような医薬組成物の形態で投与される：
１）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含み、そして疎水性酸をさらに含んでもよい）；
２）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体を含み、そして疎水性酸をさらに含んでもよい）；
３）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体を含み、そして疎水性酸をさらに含む）；
上記の側面において、簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択され；簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸とコール酸の混合物であってよい；
４）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んで、疎水性酸をさらに含む）。これらの側面において、簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択され；簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸とコール酸の混合物であってよい；
５）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
６）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約６５〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
７）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
８）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約５５〜約８０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１０〜約２０重量パーセントのパモ酸、及び約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
９）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約６５〜約７６重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約２０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約９〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
１０）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；
１１）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；
１２）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコール）を有する）と、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の混合物を含む）；
１３）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含む）；
１４）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、（ナノ粒子の）約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと（ナノ粒子の）約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含む）；
１５）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定される）。

【0387】

１６）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物［ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定され、そしてここで該ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる方法によって作製される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程］。

【0388】

上記の使用及び方法における使用のために上記に記載される医薬組成物において、簡便にも、共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。

【0389】

上記の使用及び方法において、好適にも、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と言及される実施例の製剤の１つと１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物の形態で投与される。上記の方法及び使用における使用にまた適しているのは、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２として実施例に記載される製剤［しかしここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものより約（＋／−）１重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）］と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物の形態で投与される、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子である。上記の方法及び使用における使用にまた適しているのは、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２として実施例に記載される製剤［しかしここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものより約（＋／−）１．５重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）］と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物の形態で投与される、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子である。上記の方法及び使用における使用にまた適しているのは、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２として実施例に記載される製剤［しかしここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％、及び／又は疎水性酸の重量％は、実施例に記載されるものより約（＋／−）２重量％変動する（そして重合体の量も、それに従って変動する）］と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物の形態で投与される、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる治療用ナノ粒子である。本発明のなおさらなる特徴は、複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物を含み、ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、本明細書において製剤Ｅ、Ｆ１、Ｆ２、Ｇ１、及びＧ２と言及される実施例の製剤の１つに対応するが、ここでＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの重量％は、約（＋／−）３重量％まで変動し、疎水性酸の量は、本明細書に例示される製剤中の比率に対応するＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの量に比例して変動して、重合体の量も、それに従って変動する。

【0390】

上記の側面のいくつかにおいて、治療用ナノ粒子は、約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み得て、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてコール酸、デオキシコール酸、又はジオクチルスルホコハク酸（特に、デオキシコール酸、ジオクチルスルホコハク酸、又はデオキシコール酸とコール酸の混合物）といった、上記に定義されるような実質的に疎水性の酸をさらに含んでもよい。

【0391】

本発明の治療プロトコールは、想定されるナノ粒子の治療有効量を健常な個体（即ち、癌の症状を示さない、及び／又は癌と診断されていない被験者）へ投与することを伴う。例えば、健常な個体を、癌の発症、及び／又は癌の症状の発現に先立って、想定されるナノ粒子で「免疫化」し得て；リスク状態の個体（例えば、癌の家族歴を有する患者；癌の発症に関連する１以上の遺伝子突然変異を担う患者；癌の発症に関連する遺伝子多型を有する患者；癌の発症に関連するウイルスに感染した患者；癌の発症に関連する習慣及び／又は生活様式のある患者、等）を癌の症状の発現と実質的に同時に（例えば、その４８時間以内、２４時間以内、又は１２時間以内に）治療することができる。当然ながら、癌を有することが知られている個体は、本発明の治療をいつでも受けてよい。

【0392】

他の態様では、開示されるナノ粒子を使用して、癌細胞（例、肺癌細胞）の成長を阻害することができる。本明細書に使用するように、「癌細胞の成長を阻害する」又は「癌細胞の成長を阻害すること」という用語は、癌細胞の増殖及び／又は遊走の速度の遅延、癌細胞の増殖及び／又は遊走の阻止、又は癌細胞の殺傷に言及し、それにより癌細胞の成長速度は、未処理の対照癌細胞の観測又は予測される成長速度と比較して低下する。「成長を阻害する」という用語はまた、癌細胞又は腫瘍の大きさの低下、又はその消失、並びにその転移可能性の低下を意味する可能性がある。好ましくは、このような細胞レベルでの阻害は、患者中の癌の大きさを低下させる、その成長を妨げる、その攻撃性を抑制する、又はその転移を予防又は阻害する場合がある。当業者は、多様な好適な指標のいずれによっても、癌細胞の成長が阻害されているかどうかを容易に判定することができる。

【0393】

癌細胞の成長の阻害は、例えば、細胞周期の特別な相における癌細胞の停止（例えば、細胞周期のＧ２／Ｍ相での停止）によって裏付けることができる。癌細胞の成長の阻害はまた、癌細胞又は腫瘍の大きさの直接的又は間接的な測定によって裏付けることができる。ヒト癌患者において、そのような測定は、一般に、磁気共鳴造影法、コンピュータＸ線体軸断層撮影法、及びＸ線撮影法のようなよく知られた造影法を使用してなされる。癌細胞の成長は、循環中の癌胎児抗原、前立腺特異抗原、又は癌細胞の成長に相関する他の癌特異抗原のレベルを定量することによるように、間接的に判定することもできる。癌成長の阻害はまた、被験者の生存延長、及び／又は健康と幸福の増進に概して相関する。

【0394】

本発明でまた提供するのは、活性薬剤が含まれる、本明細書に開示するナノ粒子を患者へ投与する方法であって、ここでは、患者への投与時に、そのようなナノ粒子が、該薬剤単独の投与（即ち、開示されるナノ粒子としてではない投与）と比べて、分布容積を実質的に低下させる、及び／又は遊離型のＣ_ｍａｘを実質的に低下させる。

【0395】

本発明のナノ粒子は、患者へ単独療法として投与しても、慣用的な外科又は放射線療法、又は化学療法と（同時的又は連続的に）組み合わせて投与してもよい。そのような化学療法には、以下の抗腫瘍剤のカテゴリーの１以上が含まれ得る：
（ｉ）アルキル化剤（例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、テモゾラミド、及びニトロソ尿素）；代謝拮抗剤（例えば、ゲンシタビンと、５−フルオロウラシル及びテガフールといったフルオロピリミジン類、ラルチトレキセド、メトトレキセート、シトシンアラビノシド、及びヒドロキシ尿素のような抗葉酸剤）；抗腫瘍抗生物質（例えば、アドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン、及びミトラマイシンのようなアントラサイクリン類）；有糸分裂阻害剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシン、及びビノレルビンのようなビンカアルカロイドとタキソール及びタキソテールのようなタキソイド類、及びポロキナーゼ阻害剤）；トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド及びテニポシドのようなエピポドフィロトキシン類、アムサクリン、トポテカン、及びカンプトテシン）；及び治療用抗体（例えば、リツキシマブ）のような他の薬剤といった、医科腫瘍学において使用される他の抗増殖／抗新生物薬とその組合せ；
（ｉｉ）抗エストロゲン（例えば、タモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、及びヨードキシフェン）、プロゲストゲン（例えば、酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害剤（例えば、アナストロゾール、レトロゾール、ボラゾール、及びエキセメスタン）のような抗ホルモン剤；
（ｉｉｉ）増殖因子機能とその下流のシグナル伝達経路の阻害剤：含まれるのは、Stern et al.（Critical Reviews in Oncology/Haematology, 2005, 54, pp 11-29）によって概説される、あらゆる増殖因子又は増殖因子受容体標的のＡｂ（抗体）モジュレーターであり；また含まれるのは、そのような標的の低分子阻害剤である（例えば、キナーゼ阻害剤−例には、抗ｅｒｂＢ２抗体のトラスツズマブ［Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ^ＴＭ］、抗ＥＧＦＲ抗体のパニツムマブ、抗ＥＧＦＲ抗体のセツキシマブ［Ｅｒｂｉｔｕｘ，Ｃ２２５］、及びチロシンキナーゼ阻害剤（ゲフィチニブ又はエルロチニブのような表皮増殖因子ファミリー受容体（ＥＧＦＲ／ｅｒｂＢ１）チロシンキナーゼ阻害剤、ラパチニブのようなｅｒｂＢ２チロシンキナーゼ阻害剤、及びアファタニブのような混合型ｅｒｂ１／２阻害剤のような、ｅｒｂＢ受容体ファミリーの阻害剤が含まれる）が含まれる；他の増殖因子群とそれらの受容体についても同様の戦略が利用可能であり、例えば、肝細胞増殖因子ファミリー又はその受容体（ｃ−ｍｅｔとｒｏｎが含まれる）の阻害剤；インスリンとインスリン増殖因子ファミリー又はそれらの受容体（ＩＧＦＲ、ＩＲ）の阻害剤；血小板由来増殖因子ファミリー又はその受容体（ＰＤＧＦＲ）の阻害剤、及びｃ−ｋｉｔ、ＡｎＬＫ、及びＣＳＦ−１Ｒのような他の受容体チロシンキナーゼによって媒介されるシグナル伝達の阻害剤が含まれる；
また含まれるのは、ＰＩ３−キナーゼシグナル伝達経路中のシグナル伝達タンパク質を標的とするモジュレーター、例えば、ＰＩ３Ｋ−α／β／γのようなＰＩ３−キナーゼアイソフォームとＡＫＴ、ｍＴＯＲ、ＰＤＫ、ＳＧＫ、ＰＩ４Ｋ、又はＰＩＰ５Ｋのようなｓｅｒ／ｔｈｒキナーゼの阻害剤であり；また含まれるのは、上記に収載されないセリン／スレオニンキナーゼの阻害剤、例えば、ベムラフェニブのようなｒａｆ阻害剤、セルメチニブ（ＡＺＤ６２４４）のようなＭＥＫ阻害剤、イマチニブ又はニロチニブのようなＡｂｌ阻害剤、イブルチニブのようなＢｔｋ阻害剤、フォスタマチニブのようなＳｙｋ阻害剤、ＪＡＫ、ＳＴＡＴ、及びＩＲＡＫ４のような他のｓｅｒ／ｔｈｒキナーゼの阻害剤、並びにサイクリン依存性キナーゼ阻害剤である；
（ｉｖ）ＤＮＡ損傷シグナル伝達経路のモジュレーター、例えば、ＰＡＲＰ阻害剤（例、オラパリブ［Olaparib］）、ＡＴＲ阻害剤又はＡＴＭ阻害剤、及び細胞周期のモジュレーター、例えば、ＣＤＫ４及びＣＤＫ６阻害剤（例、パルボシクリブ）；
（ｖ）Ｂｃｌファミリーモジュレーターのような、アポトーシス経路及び細胞死経路のモジュレーター（例、ＡＢＴ−２６３／ナビトクラックス（Navitoclax）、ＡＢＴ−１９９）；
（ｖｉ）血管内皮増殖因子の効果を阻害する抗血管新生剤［例えば、抗血管内皮細胞増殖因子抗体のベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ^ＴＭ）と、例えば、ソラフェニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、スニチニブ、及びバンデタニブのような、ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、及び他の機序によって作用する化合物（例えば、リノマイド、インテグリンαｖβ３機能の阻害剤、及びアンジオスタチン）］；
（ｖｉｉ）コンブレタスタチンＡ４のような血管傷害剤；
（ｖｉｉｉ）抗浸潤剤［例えば、ダサチニブ（J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661）とボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）のようなｃ−Ｓｒｃキナーゼファミリー阻害剤、及びマリマスタトのようなメタロプロテイナーゼ阻害剤、ウロキナーゼプラスミノゲンアクチベータ受容体機能の阻害剤、又はヘパラナーゼへの抗体］；
（ｉｘ）インターロイキン２、インターロイキン４、又は顆粒球マクロファージコロニー刺激因子のようなサイトカインでのトランスフェクションのような、患者腫瘍細胞の免疫原性を高めるための生体外（ex-vivo）及び生体内（in-vivo）アプローチ、Ｔ細胞アネルギーを減少させるアプローチ、サイトカインにトランスフェクトされた樹状細胞のようなトランスフェクトされた免疫細胞を使用するアプローチ、サイトカインにトランスフェクトされた腫瘍細胞系を使用するアプローチ、及び抗イディオタイプ抗体を使用するアプローチが含まれる、免疫療法アプローチ。具体例には、ＰＤ−１に標的指向するモノクローナル抗体（例、ＢＭＳ−９３６５５８）、ＰＤＬ−１に標的指向するモノクローナル抗体（例、ＭＥＤＩ４７３６、ＵＳ８，７７９，１０８を参照のこと）、又はＣＴＬ４に標的指向するモノクローナル抗体（例、イピリムマブとトレメリムマブ）が含まれる；
（ｘ）アンチセンス又はＲＮＡｉベースの療法、例えば、収載した標的へ指向されるもの；
（ｘｉ）例えば、異常ｐ５３又は異常ＢＲＣＡ１若しくはＢＲＣＡ２のような異常遺伝子を置換するアプローチ、シトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼ、又は細菌の窒素レダクターゼ酵素を使用するようなＧＤＥＰＴ（遺伝子指向型酵素プロドラッグ療法）アプローチ、及び、多剤耐性遺伝子治療のような、化学療法又は放射線療法への患者耐性を高めるアプローチが含まれる、遺伝子治療アプローチ。

【0396】

１つの態様では、上記に定義されるような本発明のナノ粒子と下記に定義されるようなｉ−ａ）、ｉｖ−ａ）、及びｉｘ−ａ）より選択される別の抗腫瘍剤を含んでなる、癌の治療における使用に適した組合せを提供し、ここでｉ−ａ）は上記ｉ）の亜集合であり、ｉｖ−ａ）は上記ｉｖ）の亜集合であり、そしてｉｘ−ａ）は上記ｉｘ）の亜集合であり、そしてここで：
ｉ−ａ）は、限定されないが、固形腫瘍と血液癌において抗有糸分裂化学療法に置き換わるか又はそれを増強する、タキサン類とビンカアルカロイドのような、標準治療の化学療法レジメンを含み；
ｉｖ−ａ）は、限定されないが、ＤＮＡ損傷修復と細胞周期を阻害する薬剤が含まれる、ＤＮＡ損傷応答に標的指向する療法を含み；そして
ｉｘ−ａ）は、限定されないが、免疫チェックポイント遮断の阻害剤が含まれる、ＣＴＬＡ４、ＰＤ−１、及びＰＤＬ−１標的指向療法のような、免疫媒介療法を含む。

【0397】

本発明のこの側面によれば、上記に定義されるような本発明のナノ粒子と別の抗腫瘍剤、特に上記の（ｉ）〜（ｘｉ）に収載される抗腫瘍剤のいずれも含んでなる、癌の治療における使用に適した組合せを提供する。特に、上記の（ｉ）〜（ｘｉ）に収載される抗腫瘍剤は、治療される具体的な癌への標準治療であり；当業者は、「標準治療」の意味を理解するものである。

【0398】

故に、本発明のさらなる側面では、本明細書に開示する本発明のナノ粒子を、別の抗腫瘍剤、特に上記のｉ−ａ）、ｉｖ−ａ）、又はｉｘ−ａ）のような、（ｉ）〜（ｘｉ）に収載されるものより選択される抗腫瘍剤と組み合わせて提供する。例えば、ｉ−ａ）、ｉｖ−ａ）、又はｉｘ−ａ）のような、上記の（ｉ）〜（ｘｉ）に収載されるものより選択される抗腫瘍剤と組み合わせた使用のための本発明のナノ粒子は、以下の１）〜１６）より選択される医薬組成物として提供され得る：
１）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含み、そして疎水性酸をさらに含んでもよい）；
２）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体を含み、そして疎水性酸をさらに含んでもよい）；
３）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、好適な重合体を含み、そして疎水性酸をさらに含む）；
上記の側面において、簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択され；簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸とコール酸の混合物であってよい；
４）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んで、疎水性酸をさらに含む）。これらの側面において、簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸、コール酸、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸より選択され；簡便にも、疎水性酸は、デオキシコール酸とコール酸の混合物であってよい；
５）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
６）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約６５〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、コール酸とデオキシコール酸の混合物、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）、及び約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
７）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約３５〜約９４重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１〜約３５重量パーセントのパモ酸、及び約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
８）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約５５〜約８０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約１０〜約２０重量パーセントのパモ酸、及び約１０〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
９）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約６５〜約７６重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約２０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール、約９〜約１５重量パーセントのパモ酸、及び約１５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む）；
１０）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２５重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；
１１）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み、ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；
１２）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコール）を有する）と、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の混合物を含む）；
１３）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の相互作用によって得られる生成物を含む）；
１４）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、ジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）と、（ナノ粒子の）約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａと（ナノ粒子の）約７〜約１５重量パーセントのパモ酸の間で形成される疎水性イオン対を含む）；
１５）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物（ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定される）。

【0399】

１６）複数の治療用ナノ粒子と１以上の医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、及び／又は担体を含んでなる医薬組成物［ここでそれぞれの治療用ナノ粒子は、約１５〜約２２重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、約７〜約１５重量パーセントのパモ酸、及びジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含み（ここでこの治療用ナノ粒子は、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含み、そしてポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する）；ここで該ナノ粒子からは、ＰＢＳ及びポリソルベート２０において３７℃で３０時間後に２０％未満のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａが放出される。簡便にも、ナノ粒子からのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの放出は、上記に記載の方法を使用して測定され、そしてここで該ナノ粒子は、以下の工程を含んでなる方法によって作製される：
１）第一有機相（これは、ベンジルアルコール：酢酸エチルが約１：３．６のモル比で存在するような、ＴＦＡ、ベンジルアルコール、ＤＭＳＯ、及び酢酸エチルを含んでなる溶媒混合物中に、１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ、及びパモ酸を含み、そしてパモ酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、０．８モルのパモ酸：１モルのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａというイニシャル比で加える）を第一水溶液（水、ＤＭＳＯ、及びベンジルアルコール中にポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（例えば、Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００という商品名で販売されている）を含んでなる）と合わせて、第二相を形成する工程（ここで水相の有機相に対する比は、約５．５：１である）；
２）この第二相を乳化して、粗エマルジョンを生成する工程；
３）この粗エマルジョンをホールド時間の間保持する工程（簡便には、約０℃で１０〜１５分、例えば、氷浴に浸けることによるように）；
４）高圧ホモジェナイザーを使用してナノエマルジョンを生成する工程；
５）少なくとも５分（例えば１０分）の遅延時間の間待ってもよい工程；
６）このエマルジョン相の０〜５℃でのクエンチングによって、クエンチされた相を形成する工程（ここでこのエマルジョン相のクエンチングは、緩衝液（０．１７Ｍリン酸緩衝液のような）をｐＨ６．５で含んでなる第二水溶液とこのエマルジョン相を混合する工程を含み、ここで第二水溶液のエマルジョンに対する比は、約３：１のように、約２：１と約１０：１の間である）；
７）このクエンチ溶液へ界面活性剤水溶液（Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０、例えば、水中３５重量パーセントのＴｗｅｅｎ（登録商標）８０溶液のような）を（例えば、約２０：１のＴｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比で）加える工程；
８）生じるナノ粒子を濾過によって濃縮して単離する工程。

【0400】

本明細書に記載されるナノ粒子にＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる他の好適な医薬組成物も、上記の組合せにおいて使用され得る。

【0401】

本発明のさらなる側面を以下の特徴において提示する：
１．約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり；約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと約０．２〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む、治療用ナノ粒子。

【0402】

２．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７〜約０．９の数平均分子量比率で有する、特徴１の治療用ナノ粒子。

【0403】

３．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７５〜約０．８５の数平均分子量比率で有する、特徴１の治療用ナノ粒子。

【0404】

４．約１０〜約２５重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴１、２又は３の治療用ナノ粒子。

【0405】

５．約２０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴１、２又は３の治療用ナノ粒子。

【0406】

６．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴１〜特徴５の治療用ナノ粒子。

【0407】

７．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴６の治療用ナノ粒子。

【0408】

８．約６５重量パーセント〜約８５重量パーセントの共重合体を含んでなる、特徴１〜特徴６のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0409】

９．実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１〜特徴８のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0410】

１０．約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１〜特徴８のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0411】

１１．約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１〜特徴８のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0412】

１２．約１０〜約２０重量パーセントの実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１〜特徴８のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0413】

１３．疎水性酸が胆汁酸である、特徴９〜特徴１２のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0414】

１４．胆汁酸が、デオキシコール酸、コール酸、又はこれらの混合物である、特徴１３の治療用ナノ粒子。

【0415】

１５．疎水性酸がジオクチルスルホコハク酸である、特徴９〜特徴１２のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0416】

１６．疎水性酸がパモ酸である、特徴９〜特徴１２のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0417】

１７．実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比が約０．５：１〜約１．６：１であり、ここでこの酸は、デオキシコール酸、コール酸、又はコール酸とデオキシコール酸の混合物である、特徴９〜特徴１２のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0418】

１８．実質的に疎水性の酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対するモル比が約１．３：１〜約１．６：１であり、ここでこの酸は、コール酸とデオキシコール酸の混合物である、特徴９〜特徴１２のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0419】

１９．実質的に疎水性の酸のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａに対するモル比が約０．９：１〜約１．１：１であり、ここでこの酸は、ジオクチルスルホコハク酸である、特徴９〜特徴１２のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0420】

２０．ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのｐＫ_ａが疎水性酸のｐＫ_ａより少なくとも約１．０ｐＫ_ａ単位大きい、特徴９〜特徴１５のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0421】

２１．実質的に疎水性の酸とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａがその中で疎水性イオン対を形成する、特徴９〜特徴１９のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0422】

２２．約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる、特徴１〜特徴２１のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0423】

２３．約１０〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含んでなる、特徴１〜特徴２１のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0424】

２４．約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール；ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩である約５〜約３０重量パーセントの治療薬剤；及び、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、及びジオクチルスルホコハク酸からなる群より選択される）；又はデオキシコール酸とコール酸である約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸の混合物のいずれかを含む、治療用ナノ粒子。

【0425】

２５．約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール；ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩である約５〜約３０重量パーセントの治療薬剤；及び、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、及びジオクチルスルホコハク酸からなる群より選択される）；又はデオキシコール酸とコール酸である約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸の混合物のいずれかを含む、治療用ナノ粒子。

【0426】

２６．約３５〜約９４．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール；約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、（又はコール酸とデオキシコール酸の混合物）、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）；及び、約５〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む、治療用ナノ粒子。

【0427】

２７．約６５〜約９０重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール；約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、（又はコール酸とデオキシコール酸の混合物）、ジオクチルスルホコハク酸、及びパモ酸からなる群より選択される）；及び、約５〜約２０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む、治療用ナノ粒子。

【0428】

２８．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７〜約０．９の数平均分子量比率で有する、特徴２４、特徴２５、特徴２６、又は特徴２７の治療用ナノ粒子。

【0429】

２９．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７５〜約０．８５の数平均分子量比率で有する、特徴２４、特徴２５、特徴２６、又は特徴２７の治療用ナノ粒子。

【0430】

３０．約１０〜約２５重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴２４、特徴２５、特徴２６、又は特徴２７の治療用ナノ粒子。

【0431】

３１．約２０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴２４、特徴２５、特徴２６、又は特徴２７の治療用ナノ粒子。

【0432】

３２．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴２４〜特徴３１のいずれもの治療用ナノ粒子。

【0433】

３３．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴２４〜特徴３１のいずれもの治療用ナノ粒子。

【0434】

３４．約６５重量パーセント〜約８５重量パーセントの共重合体を含んでなる、特徴２４〜特徴３３のいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0435】

３５．特徴１〜特徴３４のいずれか１項の複数の治療用ナノ粒子と医薬的に許容される賦形剤を含んでなる医薬的に許容される組成物。

【0436】

３６．特徴１〜特徴３４のいずれか１項の治療用ナノ粒子を含んでなる組成物の治療有効量を、癌を治療することの必要な患者へ投与することを含んでなる、該患者において癌を治療する方法。

【0437】

３７．癌が肺癌である、特徴３６の方法。

【0438】

３８．癌が白血病である、特徴３６の方法。

【0439】

３９．癌が結直腸癌である、特徴３６の方法。

【0440】

本発明のさらなる側面を以下の特徴に提示する：
１ａ．約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体又はジブロックポリ（乳酸−コ−グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり；約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールと約０．２〜約３０重量パーセントのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩を含む、治療用ナノ粒子。

【0441】

２ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７〜約０．９の数平均分子量比率で有する、特徴１ａの治療用ナノ粒子。

【0442】

３ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７５〜約０．８５の数平均分子量比率で有する、特徴１ａの治療用ナノ粒子。

【0443】

４ａ．約１０〜約２５重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴１ａの治療用ナノ粒子。

【0444】

５ａ．約２０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴１ａの治療用ナノ粒子。

【0445】

６ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴１ａの治療用ナノ粒子。

【0446】

７ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴６ａの治療用ナノ粒子。

【0447】

８ａ．約６５重量パーセント〜約８５重量パーセントの共重合体を含んでなる、特徴１ａ〜特徴６ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0448】

９ａ．実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１ａ〜特徴８ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0449】

１０ａ．約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１ａ〜特徴８ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0450】

１１ａ．約５〜約１５重量パーセントの実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１ａ〜特徴８ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0451】

１２ａ．約１０〜約２０重量パーセントの実質的に疎水性の酸をさらに含んでなる、特徴１ａ〜特徴８ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0452】

１３ａ．実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比が約０．５：１〜約１．６：１であり、ここでこの酸は、デオキシコール酸、コール酸、又はコール酸とデオキシコール酸の混合物である、特徴９ａ〜特徴１２ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0453】

１４ａ．実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比が約１．３：１〜約１．６：１であり、ここでこの酸は、コール酸とデオキシコール酸の混合物である、特徴９ａ〜特徴１２ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0454】

１５ａ．実質的に疎水性の酸の治療薬剤に対するモル比が約０．９：１〜約１．１：１であり、ここでこの酸は、ジオクチルスルホコハク酸である、特徴９ａ〜特徴１２ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0455】

１６ａ．治療薬剤のｐＫ_ａが疎水性酸のｐＫ_ａより少なくとも約１．０ｐＫ_ａ単位大きい、特徴９ａ〜特徴１５ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0456】

１７ａ．実質的に疎水性の酸と治療薬剤がその中で疎水性イオン対を形成する、特徴９ａ〜特徴１６ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0457】

１８ａ．疎水性酸が胆汁酸である、特徴９ａ〜特徴１７ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0458】

１９ａ．胆汁酸が、デオキシコール酸、コール酸、又はこれらの混合物である、特徴１８ａの治療用ナノ粒子。

【0459】

２０ａ．疎水性酸がジオクチルスルホコハク酸である、特徴９ａ〜特徴１８ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0460】

２１ａ．約５〜約２０重量パーセントの治療薬剤を含んでなる、特徴１ａ〜特徴２０ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0461】

２２ａ．約１０〜約２０重量パーセントの治療薬剤を含んでなる、特徴１ａ〜特徴２０ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0462】

２３ａ．約５０〜約９９．７５重量パーセントのジブロックポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体を含んでなり、約１０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコール；ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ又はその医薬的に許容される塩である約５〜約３０重量パーセントの治療薬剤；及び、約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸（デオキシコール酸、コール酸、及びジオクチルスルホコハク酸からなる群より選択される）；又はデオキシコール酸とコール酸である約０．０５〜約３５重量パーセントの実質的に疎水性の酸の混合物のいずれかを含む、治療用ナノ粒子。

【0463】

２４ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７〜約０．９の数平均分子量比率で有する、特徴２３ａの治療用ナノ粒子。

【0464】

２５ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体がポリ（乳）酸を約０．７５〜約０．８５の数平均分子量比率で有する、特徴２３ａの治療用ナノ粒子。

【0465】

２６ａ．約１０〜約２５重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴２３ａの治療用ナノ粒子。

【0466】

２７ａ．約２０〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含む、特徴２３ａの治療用ナノ粒子。

【0467】

２８ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１５ｋＤａ〜約２０ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約４ｋＤａ〜約６ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴２３ａの治療用ナノ粒子。

【0468】

２９ａ．ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコール共重合体が約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する、特徴２８ａの治療用ナノ粒子。

【0469】

３０ａ．約６５重量パーセント〜約８５重量パーセントの共重合体を含んでなる、特徴２３ａ〜特徴２９ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子。

【0470】

３１ａ．特徴１ａ〜特徴３０ａのいずれか１項の複数の治療用ナノ粒子と医薬的に許容される賦形剤を含んでなる医薬的に許容される組成物。

【0471】

３２ａ．特徴１ａ〜特徴３０ａのいずれか１項の治療用ナノ粒子を含んでなる組成物の治療有効量を、癌を治療することの必要な患者へ投与することを含んでなる、該患者において癌を治療する方法。

【0472】

３３ａ．癌が肺癌である、特徴３２ａの方法。

【0473】

３４ａ．癌が白血病である、特徴３２ａの方法。

【0474】

３５ａ．癌が結直腸癌である、特徴３２ａの方法。

【実施例】

【0475】

ここまで本発明について一般的に記載したが、ある種の側面及び態様の例示の目的のためにのみ含まれて、本発明をいかなるやり方でも限定することを企図しない、以下の実施例を参照することで、それがより容易に理解されよう。

【0476】

以下の実施例のそれぞれは、本発明の別々の独立した側面を提供する。特に、以下の実施例に開示される製剤と、それらを作製するために開示される方法は、本発明の別々の独立した側面を含む。

【0477】

ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａは、ＷＯ２００４／０５８７８１又はＷＯ２００７／１３２２１０に記載されるように作製し得る。

【0478】

略語：
以下の略語を使用する場合がある。

【0479】

ＥＡ 酢酸エチル
ＢＡ ベンジルアルコール
ＤＩ 脱イオン化
ＴＦＦ タンジェンシャルフロー濾過
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
Ｌｙｏ／ｏｖｅｎ 凍結乾燥オーブン
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ｓｃｉｄ 重度複合免疫不全
Ｂｒｉｊ（登録商標）１００ Ｂｒｉｊ（登録商標）Ｓ１００界面活性剤は、平均分子量が約４６７０である市販のポリオキシエチレン（１００）ステアリルエーテル（ケミカル・アブストラクト（ＣＡＳ）番号：９００５−００−９）である。

【0480】

Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０ ポリソルベート８０としても知られている、市販のポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（ＣＡＳ番号：９００５−６５−６）。

【0481】

Ｓｐａｎ（登録商標）８０ 市販のソルビタンモノオレエート（ＣＡＳ番号：１３３８−４３−８）。

【0482】

疑念の回避のために言えば、以下の実施例において「重合体−ＰＥＧ」について言及される場合、それは、ＰＬＡ−ＰＥＧ共重合体を意味し、ここでこの共重合体は、約１６ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳酸）と約５ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを有する。そのような重合体は、市販品を利用可能であるか、又は当該技術分野で知られた方法によって作製してよい。例えば、ＷＯ２０１０／００５７２１では、そのような重合体が使用されている。

【0483】

実施例１：ナノエマルジョン法を使用する、２−（３−（（７−（３−（エチル（２−ヒドロキシエチル）アミノ）プロポキシ）キナゾリン−４−イル）アミノ）−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−Ｎ−（３−フルオロフェニル）アセトアミドを含有する治療用ナノ粒子の製造
本実施例では、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ含有ナノ粒子を製造するための手順を明示する。

【0484】

デオキシコール酸ナノ粒子の製造手順
１．重合体溶液の調製
１．１ ２０ｍＬガラス瓶へ重合体−ＰＥＧ（３５０ｍｇ）を加える。

【0485】

１．２ このガラス瓶へ３．１５ｇの酢酸エチルを加えて一晩激しく撹拌して、重合体−ＥＡ溶液を得る。

【0486】

２．薬物溶液の調製
２．１ ９％デオキシコール酸／ＢＡを作製するために、配合表に基づいて、２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて、１８．２ｇのＢＡ中へ１．８ｇのデオキシコール酸を加える。

【0487】

２．２ この溶液を８０℃で３０分間加熱する。

【0488】

２．３ ２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて１５０ｍｇの治療薬剤を秤量する。

【0489】

２．４ この薬物へ上記の９％デオキシコール酸を加えて８０℃で１５〜３０分間放置して、澄明な薬物溶液を得る。

【0490】

２．５ 製剤化の前に補正し、薬物溶液と重合体溶液を合わせる。

【0491】

３．水溶液（水中０．４７５％コール酸ナトリウム、４％ベンジルアルコール）の調製：
３．１ １Ｌボトルへ４．７５ｇのコール酸ナトリウムと９５５．２５ｇの脱イオン水を加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0492】

３．２ このコール酸ナトリウム／水へ４０ｇのベンジルアルコールを加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0493】

４．エマルジョンの生成。水相の有機相に対する比は、５：１である。

【0494】

４．１ 有機相を水溶液へ注いで、携帯式ローター／スターターホモジェナイザーを使用して室温で１０秒間ホモジェナイズして、粗エマルジョンを生成する。

【0495】

４．２ この溶液を、ゲージで約１１，０００ｐｓｉに設定した圧力で高圧ホモジェナイザー（１１０Ｓ）に１回慎重に通過させて、ナノエマルジョンを生成する。

【0496】

５．ナノ粒子の生成
撹拌プレート上で撹拌しながら、このエマルジョンをクエンチ液（脱イオン水）へ５℃未満で注ぐ。クエンチ液のエマルジョンに対する比は、１０：１である。

【0497】

６．水中３５％（ｗ／ｗ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を１００：１ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比でクエンチ液へ加える。

【0498】

７．ＴＦＦによるナノ粒子の濃縮
７．１ このクエンチ液を３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（２ｘ０．１ｍ^２膜）付きのＴＦＦで約２００ｍＬまで濃縮する。

【0499】

７．２ 冷たい脱イオン水を使用して、約２０ダイア容量（４リットル）を透析濾過する。

【0500】

７．３ 容量を最小容量まで減少させる。

【0501】

７．４ １００ｍＬの冷水を容器へ加えて、膜にポンプで通して濯ぐ。

【0502】

７．５ ガラス瓶に材料（約１００ｍＬ）を回収する。

【0503】

８．無濾過最終スラリーの固形物濃度の定量：
８．１ 秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の最終スラリーを加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0504】

８．２ 十分乾燥させたスラリーの容量中のナノ粒子の重量を定量する。

【0505】

９． ０．４５μｍで濾過した最終スラリーの固形物濃度の定量：
９．１ 最終スラリー試料の一部を濾過した後で、０．４５μｍシリンジフィルターを通してショ糖を加える。

【0506】

９．２ 秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の濾過済み試料を加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0507】

１０．１分量のショ糖を最終９分量のスラリー試料へ加えて、１０％ショ糖を得る。

【0508】

１１．ショ糖入りの無濾過最終スラリーの残存試料を凍結させる。

【0509】

ドクサートナノ粒子の製造手順
１．重合体溶液の調製
１．１ ２０ｍＬガラス瓶へ重合体−ＰＥＧ（７５０ｍｇ）を加える。

【0510】

１．２ このガラス瓶へ２．７５ｇの酢酸エチルを加えて一晩激しく撹拌して、重合体−ＥＡ溶液を得る。

【0511】

２．薬物溶液の調製
２．１ ３０％ドクサート／ベンジルアルコール（「３０％ドクサート／ＢＡ」）を作製するために、表１を使用する。

【0512】

２．２ ２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて２５０ｍｇの治療薬剤を秤量する。

【0513】

２．３ この薬物へ上記３０％ドクサート／ＢＡの６９０ｍｇを加えて１時間以上激しく撹拌して、澄明な薬物溶液を得る。

【0514】

２．４ 製剤化の前に補正し、薬物溶液と重合体溶液を加える。

【0515】

表１．ドクサート／ＢＡ溶液の調製

【0516】

【表3】

【0517】

３．水溶液（水中０．４７５％コール酸ナトリウム、４％ベンジルアルコール）の調製：
３．１ １Ｌボトルへ４．７５ｇのコール酸ナトリウムと９５５．２５ｇの脱イオン水を加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0518】

３．２ このコール酸ナトリウム／水へ４０ｇのベンジルアルコールを加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0519】

４．エマルジョンの生成。水相の有機相に対する比は、５：１である。

【0520】

４．１ 有機相を水溶液へ注いで、携帯式ローター／スターターホモジェナイザーを使用して室温で１０秒間ホモジェナイズして、粗エマルジョンを生成する。

【0521】

４．２ この溶液を、ゲージで約１１，０００ｐｓｉに設定した圧力で高圧ホモジェナイザー（１１０Ｓ）に１回慎重に通過させて、ナノエマルジョンを生成する。

【0522】

５．ナノ粒子の生成
撹拌プレート上で撹拌しながら、このエマルジョンをクエンチ液（脱イオン水）へ５℃未満で注ぐ。クエンチ液のエマルジョンに対する比は、１０：１である。

【0523】

６．水中３５％（ｗ／ｗ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を１００：１ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比でクエンチ液へ加える。

【0524】

７．ＴＦＦによるナノ粒子の濃縮
７．１ このクエンチ液を３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（２ｘ０．１ｍ^２膜）付きのＴＦＦで約２００ｍＬまで濃縮する。

【0525】

７．２ 冷たい脱イオン水を使用して、約２０ダイア容量（４リットル）を透析濾過する。

【0526】

７．３ 容量を最小容量まで減少させる。

【0527】

７．４ １００ｍＬの冷水を容器へ加えて、膜にポンプで通して濯ぐ。

【0528】

７．５ ガラス瓶に材料（約１００ｍＬ）を回収する。

【0529】

８．無濾過最終スラリーの固形物濃度の定量：
８．１ 秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の最終スラリーを加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0530】

８．２ 十分乾燥させたスラリーの容量中のナノ粒子の重量を定量する。

【0531】

９． ０．４５μｍで濾過した最終スラリーの固形物濃度の定量：
９．１ 最終スラリー試料の一部を濾過した後で、０．４５μｍシリンジフィルターを通してショ糖を加える。

【0532】

９．２ 秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の濾過済み試料を加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0533】

１０．１分量のショ糖を最終９分量のスラリー試料へ加えて、１０％ショ糖を得る。

【0534】

１１．ショ糖入りの無濾過最終スラリーの残存試料を凍結させる。

【0535】

上記手順のバリエーションでは、上記の工程３．１において、コール酸ナトリウムの代わりにナトリウムドクサートを使用してよい。

【0536】

実施例２：ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを含有する治療用ナノ粒子の特性決定
本実施例は、デオキシコール酸とドクサートのような疎水性対イオンとの共被包化により薬物負荷が大いに改善された（約３％から約１５％までの薬物負荷）ことを実証する。治療薬剤のナノ粒子からの放出は、疎水性イオン対として製剤化されるとき、対照製剤と比較して、実質的により遅かった。

【0537】

対照製剤
対イオンを含まない単純ナノ粒子（「ＮＰ」）として対照製剤を作製した。ＰＬＡ−ＰＥＧ重合体マトリックス（１６ｋＤａ ＰＬＡ／５ｋＤａ ＰＥＧ）（「１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧ」）を追加の賦形剤無しで使用して、ＮＰを製造した。

【0538】

ベンジルアルコール（「ＢＡ」）又はＢＡ／水に治療薬剤を溶かして薬物溶液を生成して、この薬物溶液へ酢酸エチル（「ＥＡ」）中の重合体溶液を注ぎ、その直後にホモジェナイゼーション用の水へ加えた。この対照製剤は、比較的低い薬物負荷（約３％）、高いバースト（約２０％）、及び速やかな放出（４時間で５０％より多い）のあるナノ粒子をもたらす（表１と図面３を参照のこと）。上記の結果は、分子量が比較的低い（＜６００ｋＤａ）、及び／又は疎水性がより少ない（ｌｏｇＰ＜３）ＡＰＩでは、稀なことではない。

【0539】

表２．対照ナノ粒子製剤

【0540】

【表4】

【0541】

デオキシコール酸製剤
実施例１の手順に従って、表３に示すような有機相中の様々な量のデオキシコール酸を使用してデオキシコール酸製剤を作製した。１６／５ ＰＬＡ−ＰＥＧを使用してナノ粒子を製造した。

【0542】

表３．デオキシコール酸ナノ粒子製剤

【0543】

【表5】

【0544】

下記の表４は、デオキシコール酸製剤についての特性決定データを提供する。このデータによって裏付けられるように、デオキシコール酸の存在は、最終ナノ粒子製剤におけるＡＰＩ負荷を対照ナノ粒子に比べて大いに高める。

【0545】

表４．デオキシコール酸含有製剤についての特性決定データ

【0546】

【表6】

【0547】

図面４は、デオキシコール酸対イオンの無い対照ＮＰからの放出と比較した、デオキシコール酸ＮＰからの薬物の制御された遅い／持続放出を示すインビトロ治療薬剤放出を示す。

【0548】

下記の表は、本明細書において「製剤Ｆ１」と呼ばれる、特別なナノ粒子製剤の粒子中の各成分の組成（重量パーセントによる）について記載する。

【0549】

【表7】

【0550】

ドクサート製剤
インシチュー（in-situ）変換法を使用して、ドクサートナトリウム（例えば、「エアゾール（Aerosol）ＯＴ」又は「ＡＯＴ」として市販されている）を酸性型（即ち、ジオクチルスルホコハク酸）へ変換した後で、薬物と混合した。ドクサートナトリウムをＢＡに溶かして、調整されたＨＣｌ／ドクサート比で濃ＨＣｌ溶液を加えた。この混合物を激しく撹拌して、プロトン交換とそのナトリウム塩の遊離酸性型への変換を容易にした。次いで、飽和塩化ナトリウム溶液を加えて、激しく撹拌することによって混合して、ＢＡ混合物において生成された水と塩化ナトリウム塩を抽出した。混合した後で、この試料を相分離のために室温でインキュベートした。経時的に、ＢＡが上部にあって水層が下部にある、２つの層が徐々に発現した。ドクサート対イオンを含有する薬物溶媒として上層を吸引した。ＢＡ中のドクサート酸の濃度は、ＢＡ中のドクサートナトリウムの濃度として報告した。１６／５ ＰＬＡ／ＰＥＧ重合体を用いたデオキシコール酸製剤についての実施例１の手順を使用して、ドクサートナノ粒子製剤を製造した。典型的なドクサート酸調製物を表５に収載する。

【0551】

表５．ＢＡ（薬物溶媒として）中のプロトン化ドクサートナトリウム溶液（ＤＳＳ）の典型的な調製物

【0552】

【表8】

【0553】

下記の表６は、代表的なドクサート製剤についての特性決定データを提供する。どの理論にも束縛されることを望まずに言えば、ドクサート対イオンの存在は、疎水性イオン対合（ＨＩＰ）のプロセスによって、薬物の被包化と負荷を高めるのに役立つと考えられている。

【0554】

表６．ドクサート酸含有製剤の特性決定データ

【0555】

【表9】

【0556】

図面５は、ドクサート対イオンの無い対照ＮＰからの放出と比較した、ドクサート酸ＮＰからの薬物の制御された遅い／持続放出を示すインビトロ治療薬剤放出を示す。

【0557】

下記の表は、本明細書において「製剤Ｆ２」と呼ばれる、特別なナノ粒子製剤の粒子中の各成分の組成（重量パーセントによる）について記載する。

【0558】

【表10】

【0559】

実施例３
コール酸を含有する製剤について下記に記載する。この製剤は、本明細書において「製剤Ｅ」と呼ばれる。

【0560】

【表11】

【0561】

コール酸ナノ粒子の製造手順
１．重合体溶液の調製
１．１ ２０ｍＬガラス瓶へ重合体−ＰＥＧ（３５０ｍｇ）を加える。

【0562】

１．２ このガラス瓶へ８．１１ｇの酢酸エチルを加えて一晩激しく撹拌して、重合体−ＥＡ溶液を得る。

【0563】

２．薬物溶液の調製
２．１ ３％ ＴＦＡ／ＢＡを作製するために、配合表に基づいて、２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて、６３ｍｇのＴＦＡを２．０３ｇのＢＡへ加える。

【0564】

２．２ ２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて１５０ｍｇの治療薬剤を秤量する。

【0565】

２．３ この薬物へ上記のＢＡ中３％ ＴＦＡを加えて１５〜３０分間混合して、澄明な薬物溶液を得る。

【0566】

２．４ 製剤化の前に補正し、薬物溶液と重合体溶液を合わせる。

【0567】

３．水溶液（水中０．５２％コール酸ナトリウム、４％ベンジルアルコール）の調製：
３．１ １Ｌボトルへ５．２ｇのコール酸ナトリウムと９５４．８ｇの脱イオン水を加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0568】

３．２ このコール酸ナトリウム／水へ４０ｇのベンジルアルコールを加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0569】

４．エマルジョンの生成。水相の有機相に対する比は、５：１である。

【0570】

４．１ 有機相を水溶液へ注いで、携帯式ローター／スターターホモジェナイザーを使用して室温で１０秒間ホモジェナイズして、粗エマルジョンを生成する。

【0571】

４．２ この溶液を、ゲージで約１１，０００ｐｓｉに設定した圧力で高圧ホモジェナイザー（１１０Ｓ）に１回慎重に通過させて、ナノエマルジョンを生成する。

【0572】

５．ナノ粒子の生成
撹拌プレート上で撹拌しながら、このエマルジョンをクエンチ液（脱イオン水）へ５℃未満で注ぐ。クエンチ液のエマルジョンに対する比は、１０：１である。

【0573】

６．水中３５％（ｗ／ｗ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を１００：１ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比でクエンチ液へ加える。

【0574】

７．ＴＦＦによるナノ粒子の濃縮
７．１ このクエンチ液を３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（２ｘ０．１ｍ^２膜）付きのＴＦＦで約２００ｍＬまで濃縮する。

【0575】

７．２ 冷たい脱イオン水を使用して、約２０ダイア容量（４リットル）を透析濾過する。

【0576】

７．３ 容量を最小容量まで減少させる。

【0577】

７．４ １００ｍＬの冷水を容器へ加えて、膜にポンプで通して濯ぐ。

【0578】

７．５ ガラス瓶に材料（約１００ｍＬ）を回収する。

【0579】

８．無濾過最終スラリーの固形物濃度の定量：
８．１ 秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の最終スラリーを加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0580】

８．２ 十分乾燥させたスラリーの容量中のナノ粒子の重量を定量する。

【0581】

９． ０．４５μｍで濾過した最終スラリーの固形物濃度の定量：
９．１ 最終スラリー試料の一部を濾過した後で、０．４５μｍシリンジフィルターを通してショ糖を加える。

【0582】

９．２ 秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の濾過済み試料を加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0583】

１０．１分量のショ糖を最終９分量のスラリー試料へ加えて、１０重量％のショ糖を得る。

【0584】

１１．ショ糖入りの無濾過最終スラリーの残存試料を凍結させる。

【0585】

実施例４
実施例１のジオクチルスルホコハク酸製剤の方法に類似した方法によって、さらなる製剤を製造した。このさらなる製剤について下記の表に詳述して、本明細書において「製剤Ｂ」と呼ぶ。

【0586】

【表12】

【0587】

実施例５−治療係数
ラットとマウス中のＳＷ６２０ヒト腫瘍異種移植片モデルにおいてデータを作成した。この担ＳＷ６２０腫瘍雌性ヌードラットモデルは、より長期の異種移植片試験においてより頻繁に生じて示されない、自発的な腫瘍退縮を受けやすいことが知られている。

【0588】

ラット治療係数試験（雌性ヌードラット中のＳＷ６２０）
雌性ヌードラットをアストラ・ゼネカ社（Astra Zeneca）で飼育して、１５０ｇの最小体重で試験へ供した。動物の脇腹にＳＷ６２０ヒト腫瘍細胞を接種して、腫瘍が０．４〜０．９ｃｍ^３に達したときに、投薬を開始した。対照、ＡＺＤ１１５２、又はＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤Ｂ又はＥのいずれかの化合物を静脈内（ＩＶ）に５ｍｌ／ｋｇで投薬した。ＡＺＤ１１５２は、トリス緩衝液担体において（１〜４日目にそれぞれ２５ｍｇ／ｋｇの用量で、ＩＶ）投薬し、そしてＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤は、生理食塩水において（１日目と３日目にそれぞれ２５ｍｇ／ｋｇの用量で、ＩＶ）投薬した。指定の時点で動物を犠牲にして、腫瘍、血液、及び大腿骨／骨髄の試料を取った。大腿骨に由来するヘマトキシリン及びエオジン染色切片の病理学者による評価によって、腫瘍と骨髄に対する処理の効果をスコア化した。

【0589】

ＡＺＤ１１５２とＡＺＤ１１５２ナノ粒子製剤Ｂ及びＥの腫瘍における効果は、肥大した倍数性異常核の存在によって特徴付けられる。図面６は、５日目に入手した試料に由来する、それぞれの療法での処理に続く腫瘍の代表的な画像を示す。ＡＺＤ１１５２とＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤Ｂ及びＥの骨髄に対する効果は、骨髄由来細胞の損失によって特徴付けられる。図面６は、５日目に入手した試料に由来する、それぞれの療法での処理に続く腫瘍の代表的な画像を示す。

【0590】

図面６は、ＡＺＤ１１５２の半分の薬剤強度で送達された製剤Ｅが、より大きな効力を有し（Ａ）、腫瘍の病理変化に類似したスペクトルを誘発する（Ｂ）が、骨髄には危害を加えない（Ｃ）ことを示す。

【0591】

マウス抗腫瘍試験（雄性ヌードマウス中のＳＷ６２０）
雄性ヌードマウスをアストラ・ゼネカ社で飼育した。動物の脇腹にＳＷ６２０ヒト腫瘍細胞を接種してから、腫瘍がほぼ０．２５ｃｍ^３に達したときに、試験用に無作為化した。ＡＺＤ１１５２は、トリス緩衝液担体において指定の濃度で投薬した。ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤Ｅは、生理食塩水において投薬した。ＡＺＤ１１５２についてのこれまでの前臨床研究と方法論については、Wilkinson et al, Clinical Cancer Research 2007 (13) 3682 に公表されている。

【0592】

ラットとマウスにおけるＳＷ６２０ヒト腫瘍異種移植片モデルにおいて作成されたデータから、ＡＺＤ１１５２ ＩＶの２５ｍｇ／ｋｇで４日間の送達（全量：１００ｍｇ／ｋｇ）が最大の効力をもたらすことが示唆された。

【0593】

マウスのこのＳＷ６２０モデルでは、実施例３からのナノ粒子が１００ｍｇ／ｋｇでＡＺＤ１１５２ ＩＶと同等の効力を示して、この効力は、２５ｍｇ／ｋｇ（単用量）のみというより低い用量でも、１日目と３日目に５ｍｇ／ｋｇ（１０ｍｇ／ｋｇと同等）であっても達成されて、その効力が多様な異なる投薬スケジュールと（ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのナノ粒子製剤を使用する）ＡＺＤ１１５２のＩＶ製剤よりずっと低い用量を使用しても達成し得ることを示した。

【0594】

従って、特許請求されたＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤は、より低い薬剤強度で送達されるときに、同等又は向上した腫瘍への効力を示した。このことは、より少ない副作用、例えば、より少ない骨髄毒性をもたらす可能性がある。

【0595】

１００ｍｇ／ｋｇ（ＩＶ）ＡＺＤ１１５２に対して、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤の５０ｍｇ／ｋｇ用量の同等物で最大の活性が達成された。本発明の製剤を使用することによって、ＩＶ投薬されるＡＺＤ１１５２のこれまでの最大耐薬量と同じ有害効果があっても、より有効な成分を患者へ提供することが可能であるかもしれない。このように、本発明の製剤のリスク／利益プロフィールは、改善される可能性がある。

【0596】

図面７は、ヌードマウス中のＳＷ６２０異種移植片に製剤Ｅを用いた効力／用量スケジュール試験からのデータを示す。この試験では、ＡＺＤ１１５２を０〜３日目に２５ｍｇ／ｋｇで投薬した（全量：１００ｍｇ／ｋｇ）。製剤Ｅは、上記に記載のような多様な異なるスケジュールで投薬した。

【0597】

実施例６
実施例５において記載したヌードラットの試験からのＡＺＤ１１５２ＩＶ（１〜４日目に４ｘ２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ投薬）を製剤Ｂ（１日目と３日目に２ｘ２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ投薬）及びＥ（１日目と３日目に２ｘ２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ投薬）を比較して、インビボ曝露について検証した。この結果（いくつかのデータ点からの平均値）を図面８に示す。ＡＺＤ１１５２ ＩＶ投薬に続いて測定した濃度は、薬物ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａについてのものである。

【0598】

このデータは、サンプリング時点で試料より抽出したＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの全量（ナノ粒子内部のものとそれから放出されたもの）を示すので、その薬物又は被包化薬物のいずれかがこの時間経過にわたってどのくらい長く体内に依然として存在するか（即ち、投薬後のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａへの曝露の寿命）を示す。このデータは、静脈内の活性薬剤としてよりナノ粒子製剤として送達される場合の方が、より低い薬剤強度でより高い全血中薬剤濃度をより長い期間の間持続してもたらしたことを示す。

【0599】

ナノ粒子を投薬したインビボ試料由来の全薬物を測定する生体分析法の要約
これは、ナノ粒子からの薬物のさらなる放出を止めるために、可能な限り氷上で行うべき多工程法である。

【0600】

全薬物抽出法：
・固体の親薬物をＤＭＳＯに溶かして２ｍＭ濃度とする。

【0601】

・適正な希釈倍率を使用して、各血漿試料の５０μｌを９６ウェルプレート中へ等分する。

【0602】

・ＤＭＳＯ中２ｍＭストック液より、Hamilton Star Robot を使用して、標準検量曲線を作成する（作成の詳細については、付言１を参照のこと）。

【0603】

・１５０μｌのアセトニトリルを内部標準とともに加える。

【0604】

・このプレートを振り混ぜて、試料を混合する。

【0605】

・遠心分離機において４５００ｒｐｍで１０分間スピンする。

【0606】

・上清の５０μｌを清浄な９６ウェルプレートへ移す。

【0607】

・３００μｌの水を加える。

【0608】

・ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（液体クロマトグラフィー−質量分析法／タンデム質量分析法）により分析する。

【0609】

付言１−標準曲線作成の詳細
このロボットは、はじめに好適な希釈液を希釈用のマイクロプレートへ加えた後で、このストック液をマイクロプレートの右から左へ（各化合物に付き１つの列）連続的に希釈する（下記の表Ａを参照のこと）：

【0610】

【表13】

【0611】

【表14】

【0612】

ＬＣ−ＭＳ／ＭＳパラメータ

【0613】

【表15】

【0614】

最適化パラメータ

【0615】

【表16】

【0616】

実施例７（名目１ｇバッチを使用する）
パモ酸ナノ粒子の手順
下記に示す方法に従って、パモ酸を含むＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのナノ粒子を製造した。

【0617】

（本明細書において製剤Ｇ１と以下に記載される製剤の）組成：

【0618】

【表17】

【0619】

７．１ パモ酸溶液の調製。２．９ｇのパモ酸を７．１ｇのＤＭＳＯと容器中で混合することによって、パモ酸の２９％（ｗ／ｗ）ＤＭＳＯ溶液を調製した。この容器を加熱オーブンにおいて７０〜８０℃ですべてのパモ酸が溶けるまで加熱した。

【0620】

７．２ ８％ ＴＦＡ／７．５％水／８４．５％ベンジルアルコール（重量％）溶液の調製。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（３．２ｇ）、脱イオン（ＤＩ）水（３．０ｇ）、及びベンジルアルコール（ＢＡ）（３３．８ｇ）を合わせて、８％ ＴＦＡ／７．５％水／８４．５％ベンジルアルコール（重量％）溶液を調製した。

【0621】

７．３ 緩衝液調製：
１０００ｍＬの０．１７Ｍリン酸（ｐＫａ２＝７．２）緩衝液（ｐＨ＝６．５）を作製するために、２種のストック緩衝液：Ａ（１３．２６ｇの一塩基性リン酸ナトリウム無水物、ＮａＨ_２ＰＯ_４Ｈ_２Ｏ（Ｍｒ＝１１９．９８）を６５０ｍＬの純水に溶かす）とＢ（１０．８２ｇの二塩基性リン酸ナトリウム無水物、ＮａＨ_２ＰＯ_４（Ｍｒ＝１４１．９６）を６５０ｍＬの純水に溶かす）を調製する。２５℃の実験室温度で、ｐＨ＝６．５０になるまで、緩衝液Ａへ緩衝液Ｂを混合しながら加える。

【0622】

代替法：
１０００ｍＬの０．１７Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）を作製するために：２５℃の実験室温度で、約８００ｍＬの脱イオン水へ１６．２６ｇの一塩基性リン酸ナトリウム塩二水和物（ＮａＨ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ；ＦＷ＝１５６．０１）と１１．７０ｇの二塩基性リン酸ナトリウム塩二水和物（Ｎａ_２ＨＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ；ＦＷ＝１７７．９９）を溶かして、十分過剰の水を加えて１０００ｍｌとする。

【0623】

７．４ 重合体溶液の調製
・２０ｍＬガラス瓶へ重合体−ＰＥＧ（７００ｍｇ）を加える。

【0624】

・このガラス瓶へ７０７８ｍｇの酢酸エチルを加えて一晩激しく撹拌して、重合体−ＥＡ溶液を得る。

【0625】

７．５ 水溶液の調製
・水中０．１２％ Ｂｒｉｊ（登録商標）１００，４％ベンジルアルコール
・１Ｌのボトルへ１．２ｇのＢｒｉｊ（登録商標）１００と９５８．８ｇの脱イオン水を加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0626】

・このＢｒｉｊ（登録商標）／水へ４０ｇのベンジルアルコールを加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0627】

７．６ 薬物溶液の調製
・２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて３００ｍｇのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを秤量する。

【0628】

・このＡＺＤ１１５２へ上記の８％ ＴＦＡ／７．５％水／ＢＡ溶液の２３９９ｍｇを加える。

【0629】

・この薬物溶液へ上記の２９％パモ酸／ＤＭＳＯ溶液の６３４ｍｇを加えて激しく撹拌して、澄明な薬物溶液を得る。

【0630】

・製剤化の前に補正し、薬物溶液と重合体溶液を合わせる。

【0631】

７．７ エマルジョンの生成。水相の有機相に対する比は、５：１である。

【0632】

・有機相を水溶液へ注いで、携帯式ローター／スターターホモジェナイザーを使用して室温で１０秒間ホモジェナイズして、粗エマルジョンを生成する。氷中に１０〜１５分間保存する。

【0633】

・この溶液を、圧縮空気インレットゲージで約９，０００ｐｓｉに設定した圧力で高圧ホモジェナイザー（１１０Ｓ）に１回慎重に通過させて、ナノエマルジョンを生成する。

【0634】

ナノ粒子の生成
・撹拌プレート上で撹拌しながら、このエマルジョンをクエンチ液（０．１７Ｍリン酸ナトリウム、ｐＨ６．５）へ５℃未満で注ぐ。クエンチングの前に、回収の開始から少なくとも５分が経過したことを確認する。クエンチ液のエマルジョンに対する比は、１０：１である。

【0635】

・水中３５％（ｗ／ｗ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を１００：１ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比でクエンチ液へ加える。

【0636】

・このナノ粒子をタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）により濃縮する。

【0637】

・このクエンチ液を３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（３ｘ０．１ｍ^２膜）付きのＴＦＦで約２００ｍＬまで濃縮する。

【0638】

・冷たい脱イオン水を使用して、約２０ダイア容量（４リットル）を透析濾過する。

【0639】

・容量を最小容量まで減少させる。

【0640】

・１００ｍＬの冷水を容器へ加えて、膜にポンプで通して濯ぐ。

【0641】

・ガラス瓶に材料（約１００ｍＬ）を回収する。

【0642】

７．８ 無濾過最終スラリーの固形物濃度の定量：
・秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の最終スラリーを加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0643】

・十分乾燥させたスラリーの容量中のナノ粒子の重量を定量する。

【0644】

７．９ ０．４５μｍで濾過した最終スラリーの固形物濃度の定量：
・最終スラリー試料の一部を濾過した後で、０．４５μｍシリンジフィルターを通してショ糖を加える。

【0645】

・秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の濾過済み試料を加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0646】

７．１０ １分量のショ糖を最終９分量のスラリー試料へ加えて、１０％ショ糖を得る。

【0647】

７．１１ ショ糖入りの無濾過最終スラリーの残存試料を凍結させる。

【0648】

図面９は、パモ酸対イオンの無い基準ナノ粒子（実施例２の対照製剤についての記載のように作製）からの放出と比較した、パモ酸ナノ粒子からの薬物の制御された遅い／持続放出を実証する、代表的なＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａインビトロ放出を示す。

【0649】

本明細書で以下製剤Ｇ２と呼ばれる別のパモ酸製剤を以下のように製造した：（名目１ｇバッチを使用する）
組成：

【0650】

【表18】

【0651】

実施例７ａ
７ａ．１ パモ酸溶液の調製。２．９ｇのパモ酸を７．１ｇのＤＭＳＯと容器中で混合することによって、パモ酸の２９％（ｗ／ｗ）ＤＭＳＯ溶液を調製した。この容器を加熱オーブンにおいて７０〜８０℃ですべてのパモ酸が溶けるまで加熱した。

【0652】

７ａ．２ ８％ ＴＦＡ／７．５％水／８４．５％ベンジルアルコール（重量％）溶液の調製。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（３．２ｇ）、脱イオン（ＤＩ）水（３．０ｇ）、及びベンジルアルコール（ＢＡ）（３３．８ｇ）を合わせて、８％ ＴＦＡ／７．５％水／８４．５％ベンジルアルコール（重量％）溶液を調製した。

【0653】

７ａ．３ 緩衝液調製：
１０００ｍＬの０．１７Ｍリン酸（ｐＫａ２＝７．２）緩衝液（ｐＨ＝６．５）を作製するために、２種のストック緩衝液：Ａ（１３．２６ｇの一塩基性リン酸ナトリウム無水物、ＮａＨ_２ＰＯ_４Ｈ_２Ｏ（Ｍｒ＝１１９．９８）を６５０ｍＬの純水に溶かす）とＢ（１０．８２ｇの二塩基性リン酸ナトリウム無水物、ＮａＨ_２ＰＯ_４（Ｍｒ＝１４１．９６）を６５０ｍＬの純水に溶かす）を調製する。２５℃の実験室温度で、ｐＨ＝６．５０になるまで、緩衝液Ａへ緩衝液Ｂを混合しながら加える。

【0654】

代替法：
１０００ｍＬの０．１７Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）を作製するために：２５℃の実験室温度で、約８００ｍＬの脱イオン水へ１６．２６ｇの一塩基性リン酸ナトリウム塩二水和物（ＮａＨ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ；ＦＷ＝１５６．０１）と１１．７０ｇの二塩基性リン酸ナトリウム塩二水和物（Ｎａ_２ＨＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ；ＦＷ＝１７７．９９）を溶かして、十分過剰の水を加えて１０００ｍｌとする。

【0655】

７ａ．４ 重合体溶液の調製
・２０ｍＬガラス瓶へ重合体−ＰＥＧ（７００ｍｇ）を加える。

【0656】

・このガラス瓶へ６５７２ｍｇの酢酸エチルを加えて一晩激しく撹拌して、重合体−ＥＡ溶液を得る。

【0657】

７ａ．５ 水溶液の調製
・水中０．１５％ Ｂｒｉｊ（登録商標）１００，４％ベンジルアルコール
・１Ｌのボトルへ１．５ｇのＢｒｉｊ（登録商標）１００と９５８．５ｇの脱イオン水を加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0658】

・このＢｒｉｊ（登録商標）／水へ４０ｇのベンジルアルコールを加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0659】

７ａ．６ 薬物溶液の調製
・２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて３００ｍｇのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを秤量する。

【0660】

・このＡＺＤ１１５２へ上記の８％ ＴＦＡ／７．５％水／ＢＡ溶液の２７４６ｍｇを加える。

【0661】

・この薬物溶液へ上記の２９％パモ酸／ＤＭＳＯ溶液の７９２ｍｇを加えて激しく撹拌して、澄明な薬物溶液を得る。

【0662】

・製剤化の前に補正し、薬物溶液と重合体溶液を合わせる。

【0663】

７ａ．７ エマルジョンの生成。水相の有機相に対する比は、５：１である。

【0664】

・有機相を水溶液へ注いで、携帯式ローター／スターターホモジェナイザーを使用して室温で１０秒間ホモジェナイズして、粗エマルジョンを生成する。氷中に１０分間保存する。

【0665】

・この溶液を、圧縮空気インレットゲージで約９，０００ｐｓｉに設定した圧力で高圧ホモジェナイザー（１１０Ｓ）に１回慎重に通過させて、ナノエマルジョンを生成する。

【0666】

ナノ粒子の生成
・撹拌プレート上で撹拌しながら、このエマルジョンをクエンチ液（０．１７Ｍリン酸ナトリウム、ｐＨ６．５）へ５℃未満で直ちに注ぐ。クエンチ液のエマルジョンに対する比は、１０：１である。

【0667】

・水中３５％（ｗ／ｗ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を１００：１ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比でクエンチ液へ加える。

【0668】

・このナノ粒子をタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）により濃縮する。

【0669】

・このクエンチ液を３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（３ｘ０．１ｍ^２膜）付きのＴＦＦで約２００ｍＬまで濃縮する。

【0670】

・冷たい脱イオン水を使用して、約２０ダイア容量（４リットル）を透析濾過する。

【0671】

・容量を最小容量まで減少させる。

【0672】

・１００ｍＬの冷水を容器へ加えて、膜にポンプで通して濯ぐ。

【0673】

・ガラス瓶に材料（約１００ｍＬ）を回収する。

【0674】

７ａ．８ 無濾過最終スラリーの固形物濃度の定量：
・秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の最終スラリーを加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0675】

・十分乾燥させたスラリーの容量中のナノ粒子の重量を定量する。

【0676】

７ａ．９ ０．４５μｍで濾過した最終スラリーの固形物濃度の定量：
・最終スラリー試料の一部を濾過した後で、０．４５μｍシリンジフィルターを通してショ糖を加える。

【0677】

・秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の濾過済み試料を加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0678】

７ａ．１０ １分量のショ糖を最終９分量のスラリー試料へ加えて、１０重量％のショ糖を得る。

【0679】

７ａ．１１ ショ糖入りの無濾過最終スラリーの残存試料を凍結させる。

【0680】

実施例７ｂ
製剤Ｇ１（名目１ｇバッチ）を作製するためのさらなる方法について下記に記載する：
７ｂ．１ パモ酸溶液の調製。２．９ｇのパモ酸を７．１ｇのＤＭＳＯと容器中で混合することによって、パモ酸の２９％（ｗ／ｗ）ＤＭＳＯ溶液を調製した。この容器を加熱オーブンにおいて７０〜８０℃ですべてのパモ酸が溶けるまで加熱した。

【0681】

７ｂ．２ ８％ ＴＦＡ／７．５％水／８４．５％ベンジルアルコール（重量％）溶液の調製。トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（３．２ｇ）、脱イオン（ＤＩ）水（３．０ｇ）、及びベンジルアルコール（ＢＡ）（３３．８ｇ）を合わせて、８％ ＴＦＡ／７．５％水／８４．５％ベンジルアルコール（重量％）溶液を調製した。

【0682】

７ｂ．３ 緩衝液調製：
１０００ｍＬの０．１７Ｍリン酸（ｐＫａ２＝７．２）緩衝液（ｐＨ＝６．５）を作製するために、２種のストック緩衝液：Ａ（１３．２６ｇの一塩基性リン酸ナトリウム無水物、ＮａＨ_２ＰＯ_４Ｈ_２Ｏ（Ｍｒ＝１１９．９８）を６５０ｍＬの純水に溶かす）とＢ（１０．８２ｇの二塩基性リン酸ナトリウム無水物、ＮａＨ_２ＰＯ_４（Ｍｒ＝１４１．９６）を６５０ｍＬの純水に溶かす）を調製する。２５℃の実験室温度で、ｐＨ＝６．５０になるまで、緩衝液Ａへ緩衝液Ｂを混合しながら加える。

【0683】

代替法：
１０００ｍＬの０．１７Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．５）を作製するために：２５℃の実験室温度で、約８００ｍＬの脱イオン水へ１６．２６ｇの一塩基性リン酸ナトリウム塩二水和物（ＮａＨ_２ＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ；ＦＷ＝１５６．０１）と１１．７０ｇの二塩基性リン酸ナトリウム塩二水和物（Ｎａ_２ＨＰＯ_４・２Ｈ_２Ｏ；ＦＷ＝１７７．９９）を溶かして、十分過剰の水を加えて１０００ｍｌとする。

【0684】

７ｂ．４ 重合体溶液の調製
・２０ｍＬガラス瓶へ重合体−ＰＥＧ（５９１．３ｍｇ）を加える。

【0685】

・このガラス瓶へ５９７８．６ｍｇの酢酸エチルを加えて一晩激しく撹拌して、重合体−ＥＡ溶液を得る。

【0686】

７ｂ．５ 水溶液の調製
・水中０．１２％ Ｂｒｉｊ（登録商標）１００、４％ベンジルアルコール、５．７％ ＤＭＳＯ
・１Ｌのボトルへ１．４ｇのＢｒｉｊ（登録商標）１００と９０１．６ｇの脱イオン水を加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0687】

・このＢｒｉｊ（登録商標）／水へ４０ｇのベンジルアルコールと５７ｇのＤＭＳＯを加えて、撹拌プレート上で溶けるまで混合する。

【0688】

７ｂ．６ 薬物溶液の調製
・２０ｍｌシンチレーションバイアルにおいて２５３．４ｍｇのＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａを秤量する。

【0689】

・このＡＺＤ１１５２へ上記の８％ ＴＦＡ／７．５％水／ＢＡ溶液の２０２６．８ｍｇを加える。

【0690】

・この薬物溶液へ上記の２９％パモ酸／ＤＭＳＯ溶液の５３５．５ｍｇを加えて激しく撹拌して、澄明な薬物溶液を得る。

【0691】

・製剤化の前に補正し、薬物溶液と重合体溶液を合わせる。

【0692】

７ｂ．７ エマルジョンの生成。水相の有機相に対する比は、５．５：１である。

【0693】

・有機相を水溶液へ注いで、携帯式ローター／スターターホモジェナイザーを使用して室温で１０秒間ホモジェナイズして、粗エマルジョンを生成する。氷中に１０〜１５分間保存する。

【0694】

・この溶液を、圧縮空気インレットゲージで約９，０００ｐｓｉに設定した圧力で高圧ホモジェナイザー（１１０Ｓ）に１回慎重に通過させて、ナノエマルジョンを生成する。

【0695】

ナノ粒子の生成
・撹拌プレート上で撹拌しながら、このエマルジョンをクエンチ液（０．１７Ｍリン酸ナトリウム、ｐＨ６．５）へ５℃未満で注ぐ。クエンチングの前に、回収の開始から少なくとも５分が経過したことを確認する。クエンチ液のエマルジョンに対する重量比は、３：１である。

【0696】

・水中３５％（ｗ／ｗ）Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０を２０：１ Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０：薬物の重量比でクエンチ液へ加える。

【0697】

・このナノ粒子をタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）により濃縮する。

【0698】

・このクエンチ液を３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（３ｘ０．１ｍ^２膜）付きのＴＦＦで約２００ｍＬまで濃縮する。

【0699】

・周囲温度の脱イオン水を使用して、約２０ダイア容量（４リットル）を透析濾過する。

【0700】

・容量を最小容量まで減少させる。

【0701】

・１００ｍＬの脱イオン水を容器へ加えて、膜にポンプで通して濯ぐ。

【0702】

・ガラス瓶に材料（約１００ｍＬ）を回収する。

【0703】

７ｂ．８ 無濾過最終スラリーの固形物濃度の定量：
・秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の最終スラリーを加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0704】

・十分乾燥させたスラリーの容量中のナノ粒子の重量を定量する。

【0705】

７ｂ．９ ０．４５μｍで濾過した最終スラリーの固形物濃度の定量：
・最終スラリー試料の一部を濾過した後で、０．４５μｍシリンジフィルターを通してショ糖を加える。

【0706】

・秤量済みの２０ｍＬシンチレーションバイアルへある量の濾過済み試料を加えて、真空下に凍結乾燥／オーブンで乾燥させる。

【0707】

７ｂ．１０ １分量のショ糖を最終９分量の無濾過スラリー試料へ加えて、１０重量％のショ糖を得る。

【0708】

７ｂ．１１ ショ糖入りの無濾過最終スラリーの残存試料を凍結させる。

【0709】

実施例８：製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２の比較
製剤Ｅについては実施例３で記載した。製剤Ｆ１と製剤Ｆ２については実施例２で記載した。

【0710】

インビボ曝露
図面１０は、製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２についてのラットにおけるインビボ曝露の比較を示す。この実験は、ラットにおいて２５ｍｇ／ｋｇの単用量で行って、実施例６の記載に類似した方法によって分析した。

【0711】

インビボ効力データ
図面１１に示すデータは、製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２が、ＳＷ６２０腫瘍異種移植片が定着したヌードラットへの短期投薬に続いて同等の効力をもたらすことを示す。この実験は、実施例５に記載のような方法に従って行った。担ＳＷ６２０腫瘍ラットにＡＺＤ１１５２を１日２５ｍｇ／ｋｇで４日間、又は製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２を２５ｍｇ／ｋｇで０日目と２日目に投薬した。製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２は、同等の効力をもたらした。この効力は、ＡＺＤ１１５２と同等であって、この時点では、ＡＺＤ１１５２と製剤Ｅを用いたこれまでの試験において見られた効力に類似した。本試験は、腫瘍の薬物動態マーカーと骨髄の分析を可能にするために、９日目で終わらせた。これらのデータは、製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２が同等の効力をもたらすことを実証する。

【0712】

腫瘍ホスホ−ヒストンＨ３バイオマーカーに対するナノ粒子製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２の比較
この実験は、ＳＷ６２０腫瘍中のホスホヒストンＨ３リン酸化（ｐＨＨ３）に対する製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２の効果を比較する。ＡＺＤ１１５２を陽性対照として含めた。この活性は、Ｓｅｒ^１０でのヒストンＨ３リン酸化（オーロラＢキナーゼ活性の高感度できわめて動的な代用マーカーとしてのｐＨＨ３）の阻害として測定した。各処理群について、初回投薬後２４時間と９６時間で細胞周期のＧ２／Ｍ期にある細胞のｐＨＨ３陽性度［％］の平均レベルを計算して、ＢＩＮＤプラセボで処理した腫瘍より抽出した、Ｇ２／Ｍ細胞周期にある細胞について観測されるｐＨＨ３レベル（ここでは１００％と参照される）と比較した。不等分散を仮定するスチューデントのｔ検定を使用して、統計学的有意差を計算した（^＊ｐ＜０．０５，^＊＊ｐ＜０．０１，^＊＊＊ｐ＜００１，ｎ．ｓ．Ｐ＞０．０５）。

【0713】

雌性ヌードラットにおいて定着したＳＷ６２０結腸異種移植片に対して上記に記載のように製剤（製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２）を投薬した。ラットにＢＩＮＤプラセボ（０ｍｇ／ｋｇ）、又はＡＺＤ１１５２又はＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ製剤Ｅ／Ｆ１／Ｆ２を１日目に２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ注射して、２日目（初回投薬から２４時間後）又は５日目（初回投薬から９６時間後）に終わらせた。Wilkinson, RW et al., Clin Cancer Res, 2007; 13(12) による既報のように、メディマシーン（Medimachine，BD Biosystems）を使用して、凍結した腫瘍を脱凝集させ、８０％エタノールで少なくとも１２時間固定して、ＤＮＡ含量（ＰＩ染色）と、BD FACSCanto 分析機を使用するフローサイトメトリーによるｐＨＨ３分析（ｐＨＨ３の一次抗体：Millipore 06-570；二次抗体：ＦＩＴＣ抗ウサギＩｇＧフルオレセイン共役二次抗体、Millipore AP307F）のために調製した。

【0714】

図面１２は、細胞周期のＧ２／Ｍ期内にあるｐＨＨ３陽性細胞の比率がＡＺＤ１１５２によって２４時間で最大限に抑制されたことを示す。製剤Ｅ又はＦ１、Ｆ２へ曝露された腫瘍では、ＡＺＤ１１５２を受けた動物と比較して、単回投薬後２４時間でｐＨＨ３のさほどの低下を示さなかった。９６時間では、ｐＨＨ３低下のレベルが全群で類似していた。

【0715】

上記のデータは、製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２が、単回投薬の時間経過にわたって、ｐＨＨ３、即ちオーロラキナーゼＢ活性の同等の抑制をもたらすことを示す。

【0716】

骨髄に対する製剤Ｅ、Ｆ１、及びＦ２の影響
本実施例は、２つの独立した尺度によって評価される、骨髄に対する製剤の影響を示す。

【0717】

ラットに指定の時点でＢＩＮＤプラセボ（０ｍｇ／ｋｇ）又はＡＺＤ１１５２／ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ製剤Ｅ／Ｆ１／Ｆ２を２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ注射して、指定の時点で犠牲にした。

【0718】

それぞれの動物より骨髄試料を抽出した。第一に、骨髄の試料を病理学的評価用に処理した。大腿脛骨関節を１０％緩衝化ホルマリンに採取し、標準手順を使用して脱灰し、パラフィン包埋して、ヘマトキシリンとエオジンで染色した。病理学者によって、骨髄の低細胞性の病理学的評価を行った（図面１３）。骨髄無傷性について病理学者がスコア化した。「骨髄への影響無し」を０とし、「骨髄に対する最大限の影響」を４とする０〜４の採点システムに基づいて、骨髄低細胞性のスコアを作成した。上記の図面は、動物の各群についての５日目と９日目のメジアン、９５％信頼区間とその範囲を示す。このデータは、ＡＺＤ１１５２が骨髄に対して大きな影響を及ぼした一方で、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの試験した各ナノ粒子製剤が骨髄に対する同等の最小限の影響を示したことを示す。

【0719】

第二に、骨髄フラッシュ（flushes）を採取して、骨髄の細胞性をＦＡＣＳによって検査した。終了時に、それぞれの大腿骨からの骨髄を氷上で５０％ ＦＢＳと５０％ ＰＢＳへ採取した。４℃での遠心分離によって細胞をペレットにして、ＰＢＳに再懸濁させた。細胞を再び４℃でペレットにしてＰＢＳに再懸濁させた。５０μｌのＬＤＳ−７５１（メタノール中０．５ｍｇ／ｍｌ）を加えて、細胞を激しく撹拌した。最後に、この細胞を５０ミクロンフィルターに通してＦＡＣＳ管の中へ濾過した。この試料を FACS Canto（Beckton Dickinson）で分析した。この結果を図面１４に示す。骨髄低細胞性を未処理対照に対する有核細胞の全数として表す。各個別動物におけるそれぞれの骨髄試料の細胞性百分率を示す。点線は、担体（空のナノ粒子）のみを受けた動物において見られた、全有核細胞値の最低の百分率を表す。この結果は、ＡＺＤ１１５２が骨髄に対して大きな影響を及ぼした一方で、試験したＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのナノ粒子製剤のそれぞれが骨髄に対して同等の最小効果を示したことを示す。

【0720】

実施例９：製剤Ｇ群のデータ
腫瘍ホスホヒストンＨ３バイオマーカーに対するナノ粒子製剤Ｇ１及びＧ２の比較
この実験は、ＳＷ６２０腫瘍中のホスホヒストンＨ３リン酸化（ｐＨＨ３）に対する製剤Ｇ１と製剤Ｇ２の効果を比較する。ＡＺＤ１１５２を陽性対照として含めた。

【0721】

この活性は、Ｓｅｒ^１０でのヒストンＨ３リン酸化（オーロラＢキナーゼ活性の高感度できわめて動的な代用マーカーとしてのｐＨＨ３）の阻害として測定した。各処理群について、初回投薬後２４、４８、７２、９６、及び１２０時間で細胞周期のＧ２／Ｍ期にある細胞のｐＨＨ３陽性度［％］の平均レベルを計算して、ＢＩＮＤプラセボで処理した腫瘍より抽出した、Ｇ２／Ｍ細胞周期にある細胞について観測されるｐＨＨ３レベル（ここでは１００％と参照される）と比較した。

【0722】

雌性ヌードラットにおいて定着したＳＷ６２０結腸異種移植片に対して上記に記載のように製剤（製剤Ｇ１と製剤Ｇ２）を投薬した。ラットにＢＩＮＤプラセボ（０ｍｇ／ｋｇ）、又はＡＺＤ１１５２又はＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ製剤Ｇ１又はＧ２を１日目に２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ注射して、２日目（初回投薬から２４時間後）、３日目（初回投薬から４８時間後）、４日目（初回投薬から７２時間後）、５日目（初回投薬から９６時間後）、及び６日目（初回投薬から１２０時間後）に終わらせた。Wilkinson, RW et al., Clin Cancer Res, 2007; 13(12) による既報のように、メディマシーン（Medimachine，BD Biosystems）を使用して、凍結した腫瘍を脱凝集させ、８０％エタノールで少なくとも１２時間固定して、ＤＮＡ含量（ＰＩ染色）と、BD FACSCanto 分析機を使用するフローサイトメトリーによるｐＨＨ３分析（ｐＨＨ３の一次抗体：Millipore 06-570；二次抗体：ＦＩＴＣ抗ウサギＩｇＧフルオレセイン共役二次抗体、Millipore AP307F）のために調製した。

【0723】

図面１５は、細胞周期のＧ２／Ｍ期内にあるｐＨＨ３陽性細胞の比率がＡＺＤ１１５２によって２４時間で最大限に抑制されたことを示す。製剤Ｇ１又は製剤Ｇ２へ曝露された腫瘍では、ＡＺＤ１１５２を受けた動物と比較して、単回投薬後２４時間でｐＨＨ３のさほどの低下を示さなかった。ｐＨＨ３活性の最大低下が生じるのは、製剤Ｇ１又は製剤Ｇ２の初回投与後７２時間と１２０時間の間である。上記のデータは、製剤Ｇ１と製剤Ｇ２が、単回投薬の時間経過にわたって、ｐＨＨ３、即ちオーロラキナーゼＢ活性を抑制したことを示す。

【0724】

骨髄に対する製剤Ｇ１及び製剤Ｇ２の影響
本実施例は、骨髄に対するこの製剤の影響を示す。

【0725】

ラットに１日目と３日目にＢＩＮＤプラセボ（０ｍｇ／ｋｇ）又はＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａ製剤Ｇ１又はＧ２を２５ｍｇ／ｋｇでＩＶ注射して、指定の時点で犠牲にした。

【0726】

それぞれの動物より骨髄試料を抽出して、病理学的評価用に処理した。大腿脛骨関節を１０％緩衝化ホルマリンに採取し、標準手順を使用して脱灰し、パラフィン包埋して、ヘマトキシリンとエオジンで染色した。病理学者によって、骨髄の低細胞性の病理学的評価を行った（図面１６）。骨髄無傷性について病理学者がスコア化した。「骨髄への影響無し」を０とし、「骨髄に対する最大限の影響」を４とする０〜４の採点システムに基づいて、骨髄低細胞性のスコアを作成した。上記の図面は、動物の各群における個々の動物の５日目と９日目のスコアを示す。このデータは、ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａの試験した各ナノ粒子製剤が骨髄の最小〜軽微な低細胞性を５日目に示したが、それが９日目までにはＢＩＮＤプラセボと同等のレベルへ戻ったことを示す。

【0727】

Ｕ２９３２びまん性大細胞型Ｂ細胞異種移植片への効力試験
雄性ｓｃｉｄマウスをチャールズ・リバー（Charles River）社で飼育した。動物の脇腹にＵ２９３２ヒト腫瘍細胞を接種してから、腫瘍がほぼ０．２５ｃｍ^３に達したときに、試験用に無作為化した。ＡＺＤ１１５２は、トリス緩衝液担体において指定の濃度で投薬した。ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤Ｇ１は、生理食塩水において投薬した。マウスのこのＵ２９３２モデルにおいて、ナノ粒子製剤Ｇ１は、１００ｍｇ／ｋｇの全用量でＡＺＤ１１５２ ＩＶと同等の効力を示して、この効力は、５０ｍｇ／ｋｇのみというより低い全用量でも達成されて、より低用量のＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａのナノ粒子製剤がＡＺＤ１１５２のＩＶ製剤と同等であることを示した。

【0728】

図面１７は、ｓｃｉｄマウスのＵ２９２７異種移植片における製剤Ｇ１での効力試験からのデータを示す。担Ｕ２９２７腫瘍マウスに、ＡＺＤ１１５２を腫瘍移植後２６〜３０日目に毎日２５ｍｇ／ｋｇ（全用量：１００ｍｇ／ｋｇ）で、又は製剤Ｇ１を腫瘍移植後２６日目と２８日目に２５ｍｇ／ｋｇ（全用量：５０ｍｇ／ｋｇ）で静脈内投薬した。このデータは、製剤Ｇ１がＡＺＤ１１５２の半分の用量でそれと同等の効力をもたらすことを実証する。

【0729】

ＳＣ−６１ ＳＣＬＣ患者由来外植片への効力試験
雌性ヌードマウスをハーラン（Harlan）社で飼育した。動物の脇腹にＳＣ−６１ヒト腫瘍断片を接種してから、腫瘍がほぼ０．２ｃｍ^３に達したときに、試験用に無作為化した。ＡＺＤ１１５２は、トリス緩衝液担体において指定の濃度で投薬した。ＡＺＤ１１５２−ｈｑｐａナノ粒子製剤Ｇ１は、生理食塩水において投薬した。マウスのこのＳＣ−６１モデルにおいて、ナノ粒子製剤Ｇ１は、５０ｍｇ／ｋｇの全用量で１００ｍｇ／ｋｇの全用量でのＡＺＤ１１５２ ＩＶと同等の効力を示した。

【0730】

図面１８は、ヌードマウスのＳＣ−６１患者由来外植片における製剤Ｇ１での効力試験からのデータを示す。担ＳＣ−６１腫瘍マウスに、ＡＺＤ１１５２を無作為化後０〜３日目に毎日２５ｍｇ／ｋｇ（全用量：１００ｍｇ／ｋｇ）で、又は製剤Ｇ１を腫瘍無作為化後０日目と２日目に２５ｍｇ／ｋｇ（全用量：５０ｍｇ／ｋｇ）で静脈内投薬した。

【0731】

このデータは、このモデルにおいて、製剤Ｇ１がＡＺＤ１１５２の半分の用量だけで、それより長い腫瘍制御をもたらすことを実証する。

【0732】

製剤Ｇ１と製剤Ｇ２のインビボ曝露
図面１９は、製剤Ｇ１と製剤Ｇ２のインビボ曝露データを、図面１０からの製剤Ｅと製剤Ｆについてのそれと重ねて示す。いずれのデータも、関連する製剤のラットにおける２５ｍｇ／ｋｇでの単用量より作成して、実施例６の記載に類似した方法によって分析した。図面１９ａ〜１９ｅは、個々のデータラインのそれぞれを別々に示す。

【0733】

実施例１０：インビトロ放出を測定するのに適したＨＰＬＣ条件
機器パラメータ

【0734】

【表19】

【0735】

ポンプ勾配プログラム

【0736】

【表20】

【0737】

実施例１１
パモ酸含有製剤Ｇ１の３つのバッチに関するバッチデータを下記に示す。粒径は、動的光散乱法によって測定した。

【0738】

【表21】

【0739】

上記バッチについての３７℃でのインビトロ放出プロフィールを図面２０に示す。

【0740】

同等物
当業者は、本明細書に記載した本発明の具体的な態様に対する多くの同等物について認識するか、又は定型的な実験だけを使用して、それを確かめることができよう。そのような同等物も、以下の特許請求項に含まれると企図される。

【0741】

参照による組込み
本明細書に引用したすべての特許、公開特許出願、ウェブサイト、及び他の参考文献の全体内容は、その全体が参照により本明細書に明確に組み込まれる。

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19-1】

【図19-2】

【図19-3】

【図20】