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▶ センプラ ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6553067
(24)【登録日】2019年7月12日
(45)【発行日】2019年7月31日
(54)【発明の名称】糖尿病および肝疾患を治療するための組成物および方法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/7056 20060101AFI20190722BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20190722BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20190722BHJP
【ＦＩ】
A61K31/7056
A61P3/10
A61P1/16
【請求項の数】14
【全頁数】50
(21)【出願番号】特願2016-550869(P2016-550869)
(86)(22)【出願日】2015年2月11日
(65)【公表番号】特表2017-505785(P2017-505785A)
(43)【公表日】2017年2月23日
(86)【国際出願番号】US2015015353
(87)【国際公開番号】WO2015123256
(87)【国際公開日】20150820
【審査請求日】2018年2月8日
(31)【優先権主張番号】61/939,961
(32)【優先日】2014年2月14日
(33)【優先権主張国】US
(31)【優先権主張番号】61/984,225
(32)【優先日】2014年4月25日
(33)【優先権主張国】US
(31)【優先権主張番号】62/086,911
(32)【優先日】2014年12月3日
(33)【優先権主張国】US
(73)【特許権者】
【識別番号】511100970
【氏名又は名称】センプラ ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100114775
【弁理士】
【氏名又は名称】高岡 亮一
(74)【代理人】
【識別番号】100121511
【弁理士】
【氏名又は名称】小田 直
(74)【代理人】
【識別番号】100202751
【弁理士】
【氏名又は名称】岩堀 明代
(74)【代理人】
【識別番号】100191086
【弁理士】
【氏名又は名称】高橋 香元
(72)【発明者】
【氏名】フェルナンデス，プラブハバシ
【審査官】
伊藤 清子
(56)【参考文献】
【文献】
米国特許第０５７６００１０（ＵＳ，Ａ）
【文献】
国際公開第２０１３／０４８８７４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
国際公開第２０１３／０３０７３５（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
特表２０１４−５２５４３４（ＪＰ，Ａ）
【文献】
Diabetic Care, 2001, Vol.24, No.3, pp.607
【文献】
Diabetologi, 2000, Vol.43, No.4, pp.411-415
【文献】
J. Diabetes. Complications, Vol.22, No.5, pp.339-347
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ａ６１Ｋ ３１／７０５６
Ａ６１Ｐ １／１６
Ａ６１Ｐ ３／１０
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
糖尿病または脂肪肝疾患の治療用の医薬組成物であって、当該医薬組成物はソリスロマイシンまたはその薬学的に許容される塩を含む、組成物。
【請求項2】
ソリスロマイシンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
ソリスロマイシンの塩を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項4】
脂肪肝疾患の治療用の請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
前記脂肪肝疾患はＮＡＳＨである、請求項４に記載の組成物。
【請求項6】
前記脂肪肝疾患は肝線維症である、請求項４に記載の組成物。
【請求項7】
前記脂肪肝疾患は、高血清カイロミクロン、高血清ＶＬＤＬ−コレステロール、高血清ＬＤＬ−コレステロール、またはそれらの組み合わせである、請求項４に記載の組成物。
【請求項8】
糖尿病の治療用の請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項9】
高血糖症の治療用の請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項10】
糖尿病を治療するための医薬品の製造のための、ソリスロマイシンまたはその塩の使用。
【請求項11】
脂肪肝疾患を治療するための医薬品の製造のための、ソリスロマイシンまたはその塩の使用。
【請求項12】
前記脂肪肝疾患はＮＡＳＨである、請求項１１に記載の使用。
【請求項13】
前記脂肪肝疾患は肝線維症である、請求項１１に記載の使用。
【請求項14】
前記脂肪肝疾患は、高血清カイロミクロン、高血清ＶＬＤＬ−コレステロール、高血清ＬＤＬ−コレステロール、またはそれらの組み合わせである、請求項１１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照本出願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）の下、２０１４年２月１４に出願された米国仮特許出願第６１／９３９，９６１号、２０１４年４月２５日に出願された米国仮特許出願第６１／９８４，２２５号、および、２０１４年１２月３日に出願された米国仮特許出願第６２／０８６，９１１号（その各々の開示は明確に参照により本明細書に組み込まれる）の恩典を主張する。
【0002】
技術分野本明細書で記載される発明は、糖尿病、脂肪肝疾患、肝および肺線維症などの線維性疾患、および肝細胞がんを治療するための化合物、組成物、および方法に関する。
【背景技術】
【0003】
通常、糖尿病と呼ばれる真性糖尿病（ＤＭ）は長期間の高血糖レベルにより特徴付けられる一群の代謝疾患である。治療しないまま放置すると、糖尿病は多くの合併症を引き起こす可能性があり、急性合併症、例えば糖尿病性ケトアシドーシスおよび非ケトン性高浸透圧性昏睡、および重篤な長期合併症、例えば心血管疾患、脳卒中、腎不全、足部潰瘍および目へのダメージが挙げられる。糖尿病は、一般に十分なインスリンを産生しない膵臓または産生されたインスリンに適正に応答しない体細胞のいずれかにより引き起こされる。
【0004】
３つの主な型の真性糖尿病が存在する。インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）または若年性糖尿病とも呼ばれる１型ＤＭは、不十分なインスリン産生に起因する。インスリン非依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）または成人発症型糖尿病とも呼ばれる２型ＤＭは、一般にインスリン抵抗性から始まり、この場合、細胞はインスリンに適正に応答することができなくなる。２型ＤＭは１型ＤＭに至ることもある。妊娠糖尿病、第３の型は、糖尿病の既往歴のない妊婦が高血糖値を発症した場合に起こる。
【0005】
推定３億８７００万人の人々が、世界中で糖尿病を有しており、２型糖尿病がその症例の約９０％を占める。糖尿病は、２〜５００万の死／年を引き起こすと推定される。加えて、糖尿病を有する人々の数は報告によれば、年々連続して上昇すると予測される。糖尿病の地球規模の経済コストは、＄６０００億を超えると推定され、米国糖尿病コストは＄２０００億を上回る。
【0006】
インスリンは主要なホルモンであり、血液から身体、とりわけ肝臓、筋肉、および脂肪組織のほとんどの細胞中へのグルコースの取込を制御する。インスリン欠乏および／またはインスリン受容体非感受性は、全ての形態の真性糖尿病において中心的役割を果たす。身体は、食物の腸管吸収、肝臓に貯蔵されたグリコーゲンの分解、および糖新生、体内の非炭水化物源からのグルコースの生成からグルコースを獲得している。インスリンは糖新生および／またはグリコーゲンの分解を阻害することにより、体内のグルコースレベルのバランスを保つ。インスリンはまた、脂肪および筋肉細胞中へのグルコース輸送を刺激し、肝臓におけるグリコーゲンの形態でのグルコースの貯蔵を刺激する。
【0007】
血糖の上昇レベルに応じて、典型的には食後、インスリンが膵臓のランゲルハンス島において見出されるβ細胞により血液中に放出される。グルコースレベルが低いと、β細胞からのインスリン放出の減少、およびグルカゴンに媒介されるグリコーゲンのグルコースへの分解が起こる。このように、不十分なインスリンしか使用できない場合、細胞はインスリン非感受性またはインスリン抵抗性のためにインスリンの効果に対して不十分な応答をし、またはインスリン自体が欠陥のあるものとなり、そうして、グルコースは適正に吸収されず、または適切に、肝臓および筋肉に貯蔵されない。正味の効果は持続的に高レベルの血糖、不十分なタンパク質合成、アシドーシス、および他の代謝機能不全であり、糖尿、多尿および体液喪失の増加、血液量喪失、脱水および多飲が挙げられる。
【0008】
多くの場合、糖尿病は、脂肪肝疾患（ＦＬＤ）と合併し、例えば、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）が挙げられる。しかしながら、対象集団は同一の広がりをもたない。
【0009】
脂肪肝とも呼ばれるＦＬＤは、トリグリセリド脂肪の大きな空胞が肝臓細胞中に、脂肪症、細胞内での脂質の異常な保持のプロセスを介して蓄積する可逆状態である。ＦＬＤは複数の原因を有するが、２つの主因は、合併性インスリン抵抗性ありまたはなしの過剰なアルコール摂取および肥満である。ＦＬＤはまた、報告によれば、脂肪代謝機能不全を有する他の疾患と共に起こる。形態学的に、原因に関係なく、アルコール性ＦＬＤから非アルコール性ＦＬＤを含んで、ＦＬＤは一般に異なる段階での小滴性および大滴性脂肪変化を示す。
【0010】
ＦＬＤはそれ自体可逆であり得るが、脂肪の蓄積はまた、進行性肝炎、一般に脂肪性肝炎と呼ばれる肝臓の炎症を伴い、より重篤な非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、およびより重篤なＮＡＳＨに至る可能性がある。過剰なアルコール摂取が一因となるいくつかの場合には、ＦＬＤはまた、アルコール性脂肪症、またはより重篤な形態のアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）と呼ばれる。
【0011】
ＮＡＳＨはＮＡＦＬＤの進行性形態、一般に重篤な形態であり、この場合、過剰な脂肪の蓄積（脂肪症）が、肝臓細胞損傷、炎症および線維症と併存し、これにより、最終的には肝硬変および肝細胞がんに至る。
【0012】
一般に、ＦＬＤの病態はトリグリセリド（中性脂肪）の細胞質内（ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍａｔｉｃ）蓄積である。疾患の初期では、肝細胞は核の周りに小さな小さな脂肪空胞（リポソーム）を示す（小滴性脂肪変化）。肝臓細胞は、中心に位置する核を移動させない複数の脂肪滴で満たされる。後期では、空胞のサイズが増加し、核を細胞の周辺に追いやり、特徴的な印環が出現する（大滴性脂肪変化）。これらの小胞はよく描出され、光学的に「空」となり、というのも、組織プロセシング中に溶解するからである。大きな空胞は合体し、脂肪嚢胞、および他の不可逆的病変を生成する可能性がある。大滴性脂肪変性は報告によれば、ＦＬＤの最も一般的な形態であり、典型的にはアルコール、糖尿病、肥満およびコルチコステロイドと関連する。妊娠およびライ症候群の急性脂肪肝は小滴性脂肪変化により引き起こされる重篤な肝疾患の例である。一般に、肝臓内の脂肪が５〜１０重量％を超えると、脂肪症の診断がなされる。
【0013】
ＦＬＤは１つまたは複数の根本原因、例えば、アルコールおよびメタボリックシンドローム、糖尿病、高血圧、肥満および脂質異常症、代謝性原因、例えば無βリポ蛋白血症、糖原病、ウェーバー・クリスチャン病、妊娠の急性脂肪肝、およびリポジストロフィー、栄養性原因、例えば、栄養障害、完全静脈栄養、重篤な体重減少、再栄養症候群、空回腸バイパス術、胃バイパス術、および細菌異常増殖を有する空腸憩室症、薬物および毒素原因、例えばアミオダロン、メトトレキサート、ジルチアゼム、期限切れのテトラサイクリン、高活性抗レトロウイルス剤療法、グルココルチコイド、タモキシフェン、およびリンまたはキノコ中毒のような環境肝毒素との曝露または治療により起こり得るもの、および他の原因、例えば炎症性腸疾患、ＨＩＶ、Ｃ型肝炎、例えば遺伝子型３、およびα１アンチトリプシン欠損症、ならびにそれらの組み合わせの結果であり得る。
【0014】
脂肪酸代謝における欠陥もまた、ＦＬＤの発病の一因となり得、これは、エネルギー消費およびその燃焼における不均衡によるものであり、脂質貯蔵となり、またはインスリンへの末梢抵抗という結果となり得、よって、脂肪酸の脂肪組織から肝臓への輸送が増加される。脂肪酸の酸化および合成に関与する酵素を制御する受容体分子（ＰＰＡＲ−α、ＰＰＡＲ−γおよびＳＲＥＢＰ１）の障害または阻害もまた、脂肪蓄積の一因となることが報告されている。加えて、アルコール依存は、ミトコンドリアおよび他の細胞構造にダメージを与え、さらに細胞エネルギーメカニズムを障害することが報告されている。非アルコール性ＦＬＤは、肝臓細胞における過剰の未代謝エネルギーから生じ得る。肝臓脂肪症は、報告によれば、根本原因が低減され、または除去されれば、可逆およびある程度非進行性である。
【0015】
多くの場合、ＮＡＳＨは、糖尿病と合併するが、対象集団は同一の広がりをもたない。
【0016】
脂肪性肝炎のアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）への進行は、報告によれば、誘因の持続または重症度に依存する。両方の病状における病理学的病変は同様である。しかしながら、炎症反応の程度は広く変動し、必ずしも脂肪蓄積の程度と相関するとは限らない。脂肪症（脂質の保持）および脂肪性肝炎の発症はＦＬＤ進行における連続段階を表し得る。
【0017】
広範な炎症および高度の脂肪症を有する肝疾患は、疾患のより重篤な形態まで進行する。肝細胞風船化および様々な程度の壊死がしばしばこの段階で存在する。肝臓細胞死および炎症反応は星状細胞の活性化につながり、これは肝線維症において重要な役割を果たす。線維症の程度は広く変動する。類洞周囲線維症は、報告によれば、とりわけ成人において、最も一般的であり、末端肝静脈の周りのゾーン３で優勢である。
【0018】
肝硬変へのさらなる進行は、脂肪の量および脂肪性肝炎の程度ならびに様々な他の感作因子により影響され得る。アルコール性ＦＬＤでは、連続するアルコール消費と関連する肝硬変への移行は十分に立証されているが、非アルコール性ＦＬＤに関与するプロセスは不明確である。
【0019】
最後に、治療しないまま放置されると、脂肪肝疾患、例えばＮＡＳＨはしばしば、肝細胞がん（ＨＣＣ）に進行する。非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は現代社会では高度にまん延している（１５％〜４５％）ことが報告されている。加えて、それらの症例の１０％〜２５％は、肝硬変、末期肝疾患またはＨＣＣに至る肝線維症を発症することが報告されている。今日まで、ＮＡＦＬＤまたはＮＡＳＨを治療するために１つの療法も認可されていない。したがって、脂肪肝疾患を有する患者を治療するための、新しい化合物、その医薬組成物、およびその使用方法が必要とされている。
【0020】
肺線維症、または肺の瘢痕は、肺における過剰な線維性結合組織の形成または発症（線維症）である。肺線維症は正常な肺実質の線維性組織との徐々の交換を含む。正常な肺の瘢痕組織による置換は酸素拡散能力において不可逆的減少を引き起こす。加えて、コンプライアンスの減少は、肺線維症を拘束性肺疾患にする。これは、肺実質に固有の拘束性肺疾患の主因である。世界中で５００万の人々が、肺線維症により影響を受けている。幅広い発生率および有病率が肺線維症に対して報告されている。
【0021】
肺線維症は他の疾患の二次的影響となり得る。これらのほとんどが、間質性肺疾患として分類される。例としては、自己免疫障害、ウイルス感染または他の肺への顕微鏡的損傷が挙げられる。しかしながら、肺線維症はまた、特発性であることがあり、公知の原因なしで現れることがある。ほとんどの特発性症例が特発性肺線維症として診断される。これは、通常型間質性肺炎（ＵＩＰ）として知られている特徴的な組の組織学的／病理的特徴の排除の診断である。どちらの場合にも、患者のサブセットにおける遺伝的素因を指摘する証拠が相次いでいる。例えば、サーファクタントタンパク質Ｃ（ＳＰ−Ｃ）における突然変異が、肺線維症の病歴を有するいくつかのファミリーにおいて存在することが見出されている。
【0022】
二次的影響として肺線維症を引き起こし得る疾患および病状としては、下記が挙げられる：石綿肺、珪肺症におけるような環境および職業的汚染物質の吸入、ならびにある一定のガスへの曝露；過敏性肺炎（ほとんどが、しばしば、細菌、真菌、または畜産物で汚染されたダストの吸入に起因する）；喫煙；結合組織疾患、例えば関節リウマチ、ＳＬＥ、および強皮症；結合組織が関与する疾患、例えばサルコイドーシスおよびウェゲナー肉芽腫症；ならびに感染。
【0023】
二次的影響としての肺線維症はまた、ある一定の薬物療法、例えばアミオダロン、ブレオマイシン（ピンギアンマイシン）、ブスルファン、メトトレキサート、およびニトロフラントインにより引き起こされ得る。二次的影響としての肺線維症はまた、胸部への放射線療法により引き起こされ得る。
【0024】
肺線維症は瘢痕組織を生成させる。瘢痕はいったん発症すると永久的である。そのため、治療は、一般に、進行を減速させること、および根本原因を除去または制限することによる防止に制限される。特発性肺線維症のための治療選択肢は非常に制限される。調査試験が進行中であるが、いずれかの薬物療法がこの状況を著しく助けることができるという証拠はない。肺移植が重篤な症例において使用可能な唯一の治療選択肢である。いくつかの型の肺線維症は、コルチコステロイド（例えばプレドニゾン）および／または身体の免疫系を抑制する他の薬物療法に応答することができるが、これらの型の薬物は時として、線維症に至るプロセスを減速させようとして処方される。それにもかかわらず、現在のところ、特発性肺線維症のための公知の治療または治癒選択肢はない。したがって、新しい治療選択肢が必要とされる。
【発明の概要】
【0025】
糖尿病を有する宿主動物を治療するための化合物、その医薬組成物、ならびに方法および前記の使用が本明細書で記載される。ＦＬＤを有する宿主動物を治療するための化合物、その医薬組成物、ならびに方法および前記の使用もまた、本明細書で記載される。肺線維症および／または肝線維症の予防的治療を含む、肺線維症および／または肝線維症を有する宿主動物を治療するための化合物、その医薬組成物、ならびに方法および前記の使用もまた、本明細書で記載される。ＨＣＣを発症するリスクがある宿主動物の予防的治療のための化合物、その医薬組成物、ならび方法および前記の使用もまた、本明細書で記載される。
【0026】
１つ以上の、本明細書で記載される化合物を含有する、単位用量および単位剤形を含む、医薬組成物もまた、本明細書で記載される。１つの態様では、組成物は、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを有する宿主動物を治療するための、治療的有効量の、１つ以上の化合物を含む。組成物は、他の構成成分および／または材料成分、例えば、限定はされないが、他の治療的に活性な化合物、および／または１つ以上の担体、希釈剤、賦形剤、など、およびそれらの組み合わせを含み得ることが理解されるべきである。別の実施形態では、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを有する宿主動物を治療するために、化合物および医薬組成物を使用するための方法もまた、本明細書で記載される。１つの態様では、方法は、１つ以上の、本明細書で記載される化合物および／または組成物を、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを有する宿主動物に投与する工程を含み、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む。別の態様では、方法は、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを有する宿主動物を治療するために、治療的有効量の、本明細書で記載される１つ以上の化合物および／または組成物を投与することを含む。別の実施形態では、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを有する宿主動物を治療するための薬剤の製造における、本明細書で記載される化合物および組成物の使用もまた、本明細書で記載される。１つの態様では、薬剤は、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを有する宿主動物を治療するために、治療的有効量の、本明細書で記載される１つ以上の化合物および／または組成物を含む。
【0027】
糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを治療するための化合物、組成物、ならびに方法および使用は、他の治療、例えば、根本原因を治療すること、例えばアルコールの過剰な消費、および／または脂質および／または炭水化物由来のカロリーが占める割合が高い食物を含有する長期食事を減少させること、インスリン抵抗性、高脂血症を減少させ、および／または体重減少を誘導し、肝機能を改善する薬物療法を投与することと併用して使用することができることが理解されるべきである。肺線維症を治療するための化合物、組成物、ならびに方法および使用は、他の治療、例えば根本原因を治療すること、例として、肺線維症という結果を引き起こし得る物質および材料への曝露を減少させること、または肺線維症という結果を引き起こし得る状況または筋書きを除去することと併用して使用され得ることもまた理解されるべきである。本明細書で記載される化合物は、単独で、またはそのような疾患を治療するのに有用な他の化合物、例えば同じか、または異なる作用様式により治療的に有効となり得るそれらの化合物と組み合わせて使用され得ることもまた本明細書では理解されるべきである。加えて、本明細書で記載される化合物は、そのような疾患の他の症状を治療するために投与される他の化合物、例えば肥満を治療するために投与される化合物、などと組み合わせて使用され得ることが本明細書では理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【0028】
【図1】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における肝重量を示す。
【図2】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における全血グルコースレベルを示す。
【図3】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における血清カイロミクロンレベルを示す。
【図4】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルを示す。
【図5】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における血清ＨＤＬ−コレステロールレベルを示す。
【図6】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における血清トリグリセリドレベルを示す。
【図7】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物における血漿ＭＩＦレベルを示す。
【図8】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物におけるＮＡＦＬＤ活性スコア（ＮＡＳ）を示す。
【図9】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物におけるシリウスレッド陽性面積を示す。
【図10】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物におけるＧ６ｐｃ ｍＲＮＡ発現レベルを示す。
【図11】正常な、ビヒクルで処置した、およびソリスロマイシンで処置した試験動物におけるＦＢＰａｓｅ ｍＲＮＡ発現レベルを示す。
【発明を実施するための形態】
【0029】
本明細書で記載される化合物、組成物、および方法は、肺または肝線維症を予防的に治療する、および／またはＨＣＣを予防的に治療することを含む、糖尿病、ＦＬＤ、線維性疾患、および／またはＨＣＣを治療するのに有用であることが予想外に発見された。
【0030】
本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用は予想外に、宿主動物において全血グルコースレベルを減少させる。本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用は予想外に、ＦＬＤを有する宿主動物において、肝重量を減少させ、および／または肝臓対身体重量比を減少させる。本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用は予想外に、ＦＬＤを有する宿主動物において、肝臓における脂肪蓄積（肝臓の淡黄色呈色を引き起こし得る）を抑制する。本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用は予想外に、ＦＬＤを有する宿主動物において肝線維症の発症を減少、防止、または減速させる。本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用は予想外に、ＦＬＤを有する宿主動物において肝臓癌、例えばＨＣＣの発症を減少、防止、または減速させる。本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用は予想外に、宿主動物において肺線維症の発症を減少、防止、または減速させる。
【0031】
発明の１つの例示的な実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法が、本明細書で糖尿病のために記載される。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法が本明細書で、ＦＬＤを治療するために記載される。別の実施形態では、ＦＬＤは、ＮＡＦＬＤ、ＡＳＨ、およびＮＡＳＨ、またはそれらの組み合わせから選択される。別の実施形態では、ＦＬＤはＮＡＳＨである。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法が本明細書で、糖尿病を治療するために記載される。別の実施形態では、糖尿病は１型ＤＭである。別の実施形態では、糖尿病は２型ＤＭである。別の実施形態では、糖尿病は妊娠性ＤＭである。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法が本明細書で、線維性疾患を治療するために記載される。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法が本明細書で、ＨＣＣを予防的に治療するために記載される。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法が本明細書で、ＨＣＣの発症を防止および／または遅延させるために記載される。
【0032】
本明細書で記載される方法によれば、化合物は直接または、１つ以上の担体、希釈剤、もしくは賦形剤、またはそれらの組み合わせを含み得る医薬組成物、単位用量、または単位剤形の一部として投与され得る。加えて、本明細書で記載される化合物、組成物、単位用量、および単位剤形は、前記疾患を治療するのに有用であり、前記疾患を治療するための薬剤の製造において使用される。
【0033】
本明細書で記載される化合物は、肝臓組織内で蓄積することもまた、観察されている。本明細書で記載される化合物は予想外に、肝臓ダメージを引き起こさず、さらには、軽度、中度、さらには重度の肝不全を有する宿主動物、例えばヒトにより良好な耐容性が示される。したがって、本明細書で記載される化合物は肝臓を標的にすることができるので、全ての型のＦＬＤを含む肝疾患を治療するのに有用である。そのため、本明細書で記載される発明は、高い用量のエリスロマイシンまたはクラリスロマイシンでは起こる得るような、治療量で高い肝毒性を示す化合物を含まないことが理解されるべきである。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物の効力は抗菌効果、例えば腸内ミクロフローラへの抗菌効果によるものではないと考えられる。例えば、本明細書で記載される化合物はグラム陰性腸内物、例えば腸内細菌科、グラム陰性嫌気性菌、またはエンドトキシン産生細菌に影響を与えず、腸フローラにわずかな影響しか与えない。
【0034】
本明細書で記載される化合物、およびその組成物は肺内に蓄積し、肺内、上皮を覆う流体内、ならびにヒト研究における肺マクロファージ内で高い濃度を達成することもまた、予想外に発見された。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法は、肺線維症を治療するために本明細書で記載される。別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法は、予防的治療のために、例えば肺線維症の発症を防止および／または遅延させるために本明細書で記載される。ある一定の状況下では、宿主動物は肺線維症という結果を引き起こし得る条件または材料に曝露されるであろうという先行通知があるであろうことが認識される。それらの状況下では、本明細書で記載される化合物、組成物、および方法は、宿主動物を予防的に治療して、肺線維症が起こり得る程度を減少させる、あるいは、肺線維症を引き起こす条件または材料へのそのような曝露後の肺線維症の発症を防止するために使用され得る。理論に縛られないが、本明細書では、そのような予防的治療は、肺線維症を引き起こす条件または材料へのそのような曝露後に起こり得る炎症の量または程度を減少させることができると考えられる。
【0035】
別の実施形態では、化合物、その組成物、および前記を使用する治療方法は、免疫抑制宿主動物、例えばヒトにおける肺線維症を予防的に治療するために本明細書で記載される。例えば、肺移植を受けている、またはその予定になっている患者は、移植された組織の拒絶に対抗するために免疫抑制剤が投与され得る。そのような拒絶は、炎症および／または線維症が先行する、またはそれを引き起こすと報告されている。それらの患者は、本明細書で記載される化合物および組成物を、移植手順前に、またはこれと併用して投与され、線維症が防止され得る。
【0036】
別の実施形態では、化合物、組成物、および方法が、宿主動物において、汎細気管支炎、びまん性汎細気管支炎（ＤＰＢ）、気管支拡張症、などを含む細気管支炎を治療するために本明細書で記載される。
【0037】
発明のいくつかの例示的な実施形態は下記節により記載される：下記式
【化1】
式中：
Ｘは、
【化2】
ここで、Ｘは各（＊）原子で連結され；
Ｗ１１はヒドロキシまたはその誘導体であり；Ｗ１２はＨ、またはヒドロキシもしくはその誘導体であり；あるいはＷ１１およびＷ１２は付着された炭素原子と一緒になり、酸素および／または窒素含有複素環を形成し、その各々は任意で置換され；
ＱはＯまたは（ＮＲ、Ｈ）であり；ここで、Ｒは水素または任意で置換されたアルキルであり；あるいはＲおよびＷ１１は一緒になり、アミナールエーテル、例えば任意で置換された１，３−オキサジンを形成し；ならびにＱ１はヒドロキシもしくはその誘導体またはアミノもしくはその誘導体であり；
ＲＡはヒドロキシもしくはヒドロキシ誘導体、または酸素で付着された糖であり；ならびにＺは水素であり；あるいはＲＡおよびＺは付着された炭素と一緒になり、Ｃ＝Ｏ基を形成し；
ＲＢはアミノ含有糖であり；
ＲＣはヒドロキシまたはその誘導体であり；あるいは
ＲＣおよびＱは一緒になり、エノールエーテルを形成し；あるいは
ＲＣおよびＷ１２およびＱは一緒になり、ケタールを形成し；ならびに
ＲＦはＨまたはＦである、組成物、単位用量、または単位剤形。
【0038】
少なくとも１つの化合物は、下記式またはその薬学的に許容される塩を有する、前節の組成物、単位用量、または単位剤形。【化3】
【0039】
少なくとも１つの化合物は、下記式またはその薬学的に許容される塩を有し；【化4】
Ｃは、Ｈまたはアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルであり、その各々は任意で置換され；
Ｂは結合であり、またはＢは任意で置換されたヘテロアリールであり；ならびに
Ａは結合であり、またはＡは、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＣＲ、ＣＲ２、およびＮＲ、およびそれらの組み合わせから形成された任意的なリンカーであり、ここで、各Ｒは各場合において、存在せず二重または三重結合を形成する、水素である、または任意で置換されたアルキルである、から独立して選択される、前節の組成物、単位用量、または単位剤形。
【0040】
少なくとも１つの化合物は、下記式【化5】
【0041】
宿主動物において糖尿病を治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0042】
宿主動物においてＦＬＤを治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0043】
宿主動物においてＮＡＳＨを治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0044】
宿主動物において肝線維症を治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0045】
宿主動物において肝線維症を予防的に治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0046】
宿主動物においてＨＣＣを予防的に治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0047】
宿主動物において肺線維症を治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0048】
宿主動物において肺線維症を予防的に治療するための方法であって、宿主動物に、有効量の、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形を投与する工程を含む、方法。
【0049】
宿主動物において糖尿病を治療するための薬剤の製造における、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形の使用。
【0050】
宿主動物においてＦＬＤを治療するための薬剤の製造における、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形の使用。
【0051】
宿主動物においてＮＡＳＨを治療するための薬剤の製造における、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形の使用。
【0052】
宿主動物において肝線維症を治療するまたは予防的に治療するための薬剤の製造における、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形の使用。
【0053】
宿主動物においてＨＣＣを予防的に治療するための薬剤の製造における、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形の使用。
【0054】
宿主動物において肺線維症を治療するまたは予防的に治療するための薬剤の製造における、前節の任意の一つの組成物、単位用量、または単位剤形の使用。
【0055】
ＺはＨであり、ＲＡはヒドロキシまたはその誘導体である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0056】
ＺはＨであり、ＲＡはヒドロキシまたはアシルオキシである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0057】
ＺはＨであり、ＲＡはクラジノシルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0058】
ＺはＨであり、ＲＡはクラジノシルではない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0059】
ＺおよびＲＡは付着された炭素と一緒になり、Ｃ＝Ｏを形成する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0060】
ＲＢはデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0061】
ＲＢはデソサミニルではない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0062】
ＲＢはデソサミニル誘導体である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0063】
デソサミニル誘導体は、デソサミニルに比べて、修飾された水素結合を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0064】
デソサミニル誘導体は、デソサミニルに比べて、修飾された塩基性を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0065】
デソサミニル誘導体の窒素は、デソサミニルに比べて、修飾された水素結合を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0066】
デソサミニル誘導体の窒素は、デソサミニルに比べて、修飾された塩基性を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0067】
デソサミニル誘導体の酸素は、デソサミニルに比べて、修飾された水素結合を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0068】
ＲＢはＯ−アシルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0069】
ＲＢはＯ−アルキルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0070】
アルキルはＣ２−Ｃ１８アルキルである、前節の単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0071】
ＲＢはデソサミニル−Ｎ−オキシドまたはデスメチルデソサミニル−Ｎ−オキシドである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0072】
ＲＢはデスメチルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0073】
ＲＢはＮ−アシルデスメチルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0074】
ＲＢはＮ−置換デスメチルデソサミニルであり、ここで、置換基はエチル、ヒドロキシエチル、プロピル、イソプロピル、ヒドロキシプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシ−ｓｅｃ−ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル、シクロペンチルメチル、またはプロパルギルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0075】
ＲＢはＮ−置換ビスデスメチルデソサミニルであり、ここで、置換基はエチル、ヒドロキシエチル、プロピル、イソプロピル、ヒドロキシプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ヒドロキシ−ｓｅｃ−ブチル、シクロブチル、シクロプロピルメチル、シクロペンチルメチル、またはプロパルギルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0076】
置換基はイソプロピル、イソブチル、シクロプロピルメチル、シクロペンチルメチル、またはシクロブチルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0077】
置換基はイソプロピル、シクロブチル、２−ヒドロキシプロピル、または２−ヒドロキシ−２−メチルプロピルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0078】
ＲＢはＮ−アルキルデスメチルデソサミニルであり、ここでアルキルはＣ２−Ｃ１８アルキルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0079】
ＲＢはデスメチルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0080】
ＲＢはＮ−エチルデスメチルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0081】
ＲＢはＮ−（２−ヒドロキシエチル）デスメチルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0082】
ＲＢはＮ−プロパルギルデスメチルデソサミニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0083】
ＲＢは下記式のラジカルであり【化6】
【0084】
複素環は５〜７員複素環である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0085】
ＲＮ１およびＲＯは一緒になり、オキサゾリジノン、または下記式のイミノオキサゾリジノンを形成する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。【化7】
【0086】
ＲＣはヒドロキシまたはアルコキシである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0087】
ＲＣはヒドロキシである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0088】
ＲＣはメトキシである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0089】
ＲＦはＦである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0090】
Ｑ１はヒドロキシもしくはその誘導体またはアミノもしくはその誘導体である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0091】
Ｑ１はヒドロキシまたはその誘導体である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0092】
Ｑ１はヒドロキシまたはアシルオキシである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0093】
Ｗ１１およびＷ１２はどちらもヒドロキシである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0094】
Ｗ１１およびＷ１２は一緒になり、炭酸塩を形成する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0095】
Ｗ１１はＯＨであり；ならびにＷ１２はＨである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0096】
Ｗ１１およびＷ１２は付着された炭素原子と一緒になり、カルバメートを形成し、ここで、その窒素は、式Ｃ−Ｂ−Ａ−のラジカルで置換され、ここで、Ｃは、Ｈまたはアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルであり、その各々は任意で置換され；Ｂは結合であり、またはＢは任意で置換されたヘテロアリールであり；ならびにＡは結合であり、またはＡは、Ｏ、Ｃ（Ｏ）、ＣＲ、ＣＲ２、およびＮＲ、およびそれらの組み合わせから形成された任意的なリンカーであり、ここで、各Ｒは各場合において、存在せず二重または三重結合を形成する、水素である、または任意で置換されたアルキルである、から独立して選択される、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0097】
Ａはアルキレン、例えばＣ３−Ｃ５アルキレン、またはＣ４アルキレン、または（ＣＨ２）４である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。Ｂはイミダゾールラジカルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。Ｂは１，２，３−トリアゾールラジカルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。Ｃは任意で置換されたヘテロアリールまたは任意で置換されたヘテロアリールアルキルラジカルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。Ｃは任意で置換されたフェニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。Ｃはアミノ置換フェニル、例えば３−アミノ置換フェニルである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0098】
化合物は１４環大環状分子である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0099】
化合物は１５環大環状分子である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0100】
化合物は、ソリスロマイシン、ロキシスロマイシン、アジスロマイシン、フルリスロマイシン、およびジリスロマイシン、およびその薬学的に許容される塩、およびそれらの組み合わせからなる群より選択される、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0101】
化合物はロキシスロマイシンまたはその薬学的に許容される塩である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0102】
化合物はソリスロマイシンまたはその薬学的に許容される塩である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0103】
化合物は、エリスロマイシン感受性細菌に対して約４以上の平均ＭＩＣ５０を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0104】
化合物は、エリスロマイシン感受性細菌に対して約８以上の平均ＭＩＣ５０を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0105】
化合物は、エリスロマイシン感受性細菌に対して約１６以上の平均ＭＩＣ５０を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0106】
化合物は、エリスロマイシン感受性細菌に対して約３２以上の平均ＭＩＣ５０を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0107】
化合物は実質的に非抗菌性であり、または臨床的に有意な抗菌活性または効力を有さない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0108】
化合物は低い肝毒性を示す、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0109】
化合物は負のＱＴ効果、例えばＱＴおよび／またはｔＱＴ延長を示さない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0110】
化合物はアラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）を臨床的に有意なレベルまで増加させない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0111】
化合物はアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）を臨床的に有意なレベルまで増加させない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0112】
化合物は血清カイロミクロンを減少させる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0113】
化合物は血清ＶＬＤＬ−コレステロールを減少させる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0114】
化合物は血清ＬＤＬ−コレステロールを減少させる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0115】
化合物は血清ＨＤＬ−コレステロールを増加させる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0116】
方法により、より低い全血グルコースレベルが得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0117】
方法により、高血糖症の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0118】
方法により肝臓糖新生の抑制が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0119】
方法により肝臓糖新生の抑制および／または炎症の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0120】
方法により、グルコース−６−ホスファターゼ（Ｇ６ｐｃ）の発現（ｍＲＮＡレベル）またはレベルの減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0121】
方法により、フルクトース１，６ビスホスファターゼ（ＦＢＰａｓｅ）の発現（ｍＲＮＡレベル）またはレベルの減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0122】
方法により、肝臓における脂肪沈着の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0123】
方法により、肝臓の淡黄色呈色の抑制が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0124】
方法により、肝重量の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0125】
方法により、肝臓対身体重量比の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0126】
方法により、風船化の減少、肝臓風船様変性の減少、および／または風船化スコアの減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0127】
方法により、約５０％、約７０％、約８０％約９０％、約９５％、またはそれ以上の風船化減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。風船化は０〜１０のスコアとして表すことができ、そのため、前記パーセンテージ改善は、対応するスコア、例えば１、２、３、４、または５、などのスコアの変化で表されることが理解される。しかしながら、風船化が、例えば１０から９、５から４、または２から１、など、単一指数と同じくらい小さい減少であっても、治療効力が確立されることが理解されるべきである。
【0128】
方法により、風船化の実質的に完全な欠如が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0129】
方法により、脂肪症の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0130】
方法により、肝線維症の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0131】
方法により、血漿ＭＩＦの増加が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0132】
方法により、肺線維症の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0133】
方法により、好中球浸潤の減少が得られる、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0134】
宿主動物は肝不全を有する、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0135】
治療は、放射線への曝露、例えば放射線療法を受ける、または受けている宿主動物に対して予防的または治療的である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0136】
治療は放射線への曝露、例えば放射線療法を受ける、または受けている癌患者に対して予防的または治療的である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。理論に縛られないが、本明細書では、実質的な肺炎症が放射線療法と共に起こると考えられる。そのため、本明細書で記載される化合物、組成物、および方法は、そのような治療に先立って、および治療後に、使用することができる。
【0137】
治療は免疫抑制療法および／または肺移植を受ける宿主動物に対して予防的または治療的である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0138】
方法は動物体重全体に負の効果を与えない、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0139】
投与工程は約０．１〜１０、０．１〜５、または０．３〜２ｍｇ／ｋｇ ｂｉｄの用量を含む、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0140】
投与工程は、ｑ．ｄ．またはｂ．ｉ．ｄ投与される約１〜６００、約５〜５００、約１０〜４００、約１００〜４００、約２００〜４００、約１５０〜３５０、約５０〜３００、約１００〜３００、約１５０〜２５０、約５０〜２００、または約１００〜２００ｍｇの１日用量を含む、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0141】
投与工程は、ｑ．ｄ．またはｂ．ｉ．ｄ投与される約５００、約４５０、約４００、約３５０、約３００、約２５０、約２００、約１５０、または約１００ｍｇの１日用量を含む、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0142】
投与工程は、ｑ．ｄ．またはｂ．ｉ．ｄ投与される約３００、約２７５、約２６０、約２４０、約２２５、約２００、約１７５、約１５０、または約１２５ｍｇの１日用量を含む、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0143】
投与工程はｂ．ｉ．ｄである、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0144】
投与工程はｑ．ｄ．である、前節の任意の一つの単位用量、単位剤形、方法、使用、または組成物。
【0145】
ＮＡＳＨを患う患者は、ＮＡＳＨの結果として生じる心血管死から生じる死亡率に苦しむ可能性があることが、本明細書では認識され、理解される。そのため、望まれない心血管効果、例えばＱＴ効果を引き起こさないという追加の特徴をも有する化合物が望ましいことが理解される。
【0146】
別の実施形態では、本明細書で記載される化合物および方法は脂質管理療法、例えばスタチンの共投与、などと併用して使用する必要はない。
【0147】
ＮＡＳＨは、一定の条件下で、肝臓の炎症を減少させることにより治療され得ることが、本明細書で発見されている。本明細書で記載される化合物は肝臓炎症を減少させることもまた、本明細書で発見されている。したがって、理論に縛られないが、本明細書では、ＮＡＳＨの治療における化合物の効力は、少なくとも一部は、本明細書で記載される組成物および方法に従い投与される化合物の抗炎症効果から生じると考えられる。
【0148】
本明細書で記載される化合物は肝臓組織内に蓄積することもまた、本明細書で発見されている。多くの療法領域において、肝臓クリアランスは、治療薬の蓄積のための肝臓に対する有害作用の可能性のために、望ましくない経路となることが認識される。しかしながら、本明細書で記載される疾患を治療するための治療的な用量では、本明細書で記載される化合物は、肝臓内で有効となるのに十分蓄積するが、著しい有害作用を引き起こすほど高いレベルではないことが発見されている。
【0149】
本明細書で記載される化合物は強力な抗炎症活性を有することが発見されている。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物、組成物、方法、および使用の効力は少なくとも一部はそのような抗炎症特性によると考えられる。また、理論に縛られないが、本明細書では、炎症は、ＦＬＤで観察される肝臓ダメージを引き起こすまたは悪化させるのに重要な役割を果たし得ると考えられる。本明細書では、選択的抗炎症効果が特に有用となり得ることが理解される。
【0150】
前記の各々ならびに下記実施形態および節の各々において、式は化合物の全ての薬学的に許容される塩だけを含み、表すのではなく、化合物式の任意のおよび全ての水和物および／または溶媒和物を含むことが理解されるべきである。ある一定の官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、および同様の基は、水および／または様々な溶媒と、化合物の様々な物理形態で、錯体および／または配位化合物を形成することが認識される。したがって、上記式は、そのような水和物および／または薬学的に許容される溶媒和物を含む溶媒和物の記載であると理解されるべきである。
【0151】
前記の各々ならびに下記実施形態および節の各々において、式は、各可能な異性体、例えば立体異性体および幾何異性体を、個々に、ならびに任意のおよび全ての可能な混合物で、含み、表すこともまた理解されるべきである。前記の各々および下記実施形態の各々では、式は、化合物の任意のおよび全ての結晶形態、部分結晶形態、ならびに非晶質および／またはアモルファス形態を含み、表すこともまた理解されるべきである。
【0152】
例示的な誘導体としては、本明細書で記載される化合物から合成的に調製され得るそれらの化合物、ならびに本明細書で記載されるものと同様に調製され得るが、開始材料の選択で異なるそれらの化合物の両方が挙げられるが、それらに限定されない。そのような誘導体は、本明細書で記載される化合物のプロドラッグ、１つ以上の保護基を含む本明細書で記載される化合物、例えば、本明細書で記載される他の化合物の調製において使用される化合物を含み得ることが理解されるべきである。
【0153】
前記ならびに下記実施形態および節の各々は、化学的に関連する様式で組み合わせてもよく、本明細書で記載される実施形態のサブセットが生成されることが理解されるべきである。したがって、全てのそのようなサブセットもまた、本明細書で記載される発明の例示的な実施形態であることがさらに理解されるべきである。
【0154】
前記および下記実施形態および節に言及する場合、特徴の全ての可能な組み合わせ、ならびに全ての可能な亜属およびサブコンビネーションが記載されることが理解されるべきである。
【0155】
本明細書で記載される化合物は１つ以上のキラル中心を含むことができ、または別様に、複数の立体異性体として存在することができる。１つの実施形態では、本明細書で記載される発明は、いずれかの特定の立体化学要求に限定されないこと、ならびに化合物、ならびにそれらを含む組成物、方法、使用、および薬剤は光学的に純粋であってもよく、または様々な立体異性体混合物、例えば、鏡像異性体のラセミおよび他の混合物、ジアステレオマーの他の混合物、などのいずれかであってもよいことが理解されるべきである。立体異性体のそのような混合物は１つ以上のキラル中心で単一立体化学配置を含んでもよく、一方、１つ以上の他のキラル中心で立体化学配置の混合物を含んでもよいこともまた理解されるべきである。
【0156】
同様に、本明細書で記載される化合物は幾何学的中心、例えばｃｉｓ、ｔｒａｎｓ、Ｅ、およびＺ二重結合を含んでもよい。別の実施形態では、本明細書で記載される発明は、いずれかの特定の幾何異性体要求に限定されないこと、化合物、ならびにそれらを含む組成物、方法、使用、および薬剤は純粋であってもよく、または様々な幾何異性体混合物のいずれかであってもよいことが理解されるべきである。幾何異性体のそのような混合物は１つ以上の二重結合で単一の配置を含んでもよく、一方、１つ以上の他の二重結合で幾何学の混合物を含んでもよいこともまた理解されるべきである。
【0157】
本明細書では、「アルキル」という用語は、任意で分枝される炭素原子の鎖を含む。本明細書では、「アルケニル」および「アルキニル」という用語はそれぞれ、任意で分枝され、それぞれ、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む、炭素原子の鎖を含む。アルキニルはまた、１つ以上の二重結合を含み得ることが理解されるべきである。ある一定の実施形態では、アルキルは、便宜的に制限された長さ、例えば、Ｃ１−Ｃ２４、Ｃ１−Ｃ１２、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ６、およびＣ１−Ｃ４、ならびにＣ２−Ｃ２４、Ｃ２−Ｃ１２、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、などを有することがさらに理解されるべきである。例示的に、そのような特定的に制限された長さのアルキル基、例えば、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ６、およびＣ１−Ｃ４、ならびにＣ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４などは低級アルキルと呼ばれ得る。ある一定の実施形態では、アルケニルおよび／またはアルキニルはそれぞれ、便宜的に制限された長さ、例えばＣ２−Ｃ２４、Ｃ２−Ｃ１２、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、ならびにＣ３−Ｃ２４、Ｃ３−Ｃ１２、Ｃ３−Ｃ８、Ｃ３−Ｃ６、およびＣ３−Ｃ４、などを有し得ることがさらに理解されるべきである。例示的に、そのような特定的に制限された長さのアルケニルおよび／またはアルキニル基、例えば、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、ならびにＣ３−Ｃ８、Ｃ３−Ｃ６、およびＣ３−Ｃ４、などは、低級アルケニルおよび／またはアルキニルと呼ばれ得る。本明細書では、短いアルキル、アルケニル、および／またはアルキニル基ほど、化合物に低い親油性を与える可能性があり、したがって異なる薬物動態挙動を有するであろうことが認識される。本明細書で記載される発明の実施形態では、各場合において、アルキルの記述は、本明細書で規定されるアルキル、任意で低級アルキルを示すことが理解されるべきである。本明細書で記載される発明の実施形態では、各場合において、アルケニルの記述は、本明細書で規定されるアルケニル、任意で低級アルケニルを示すことが理解されるべきである。本明細書で記載される発明の実施形態では、各場合において、アルキニルの記述は、本明細書で規定されるアルキニル、任意で低級アルキニルを示すことが理解されるべきである。例示的なアルキル、アルケニル、およびアルキニル基は、限定はされないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、など、ならびに１つ以上の二重および／または三重結合を含む対応する基、またはそれらの組み合わせである。
【0158】
本明細書では、「アルキレン」という用語は、任意で分枝される炭素原子の二価の鎖を含む。本明細書では、「アルケニレン」および「アルキニレン」という用語は、任意で分枝され、それぞれ、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む、炭素原子の二価の鎖を含む。アルキニレンはまた、１つ以上の二重結合を含み得ることが理解されるべきである。ある一定の実施形態では、アルキレンは、便宜的に制限された長さ、例えばＣ１−Ｃ２４、Ｃ１−Ｃ１２、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ６、およびＣ１−Ｃ４、ならびにＣ２−Ｃ２４、Ｃ２−Ｃ１２、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、などを有することがさらに理解されるべきである。例示的に、そのような特定的に制限された長さのアルキレン基、例えばＣ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ６、およびＣ１−Ｃ４、ならびにＣ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、などは低級アルキレンと呼ばれ得る。ある一定の実施形態では、アルケニレンおよび／またはアルキニレンはそれぞれ、便宜的に制限された長さ、例えばＣ２−Ｃ２４、Ｃ２−Ｃ１２、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、ならびにＣ３−Ｃ２４、Ｃ３−Ｃ１２、Ｃ３−Ｃ８、Ｃ３−Ｃ６、およびＣ３−Ｃ４、など有し得ることがさらに理解されるべきである。例示的に、そのような特定的に制限された長さのアルケニレンおよび／またはアルキニレン基、例えばＣ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４、ならびにＣ３−Ｃ８、Ｃ３−Ｃ６、およびＣ３−Ｃ４、などは低級アルケニレンおよび／またはアルキニレンと呼ばれ得る。本明細書では、短いアルキレン、アルケニレン、および／またはアルキニレン基ほど、化合物に低い親油性を与える可能性があり、したがって異なる薬物動態挙動を有するであろうことが認識される。本明細書で記載される発明の実施形態では、各場合において、アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンの記述は本明細書で規定されるアルキレン、アルケニレン、およびアルキニレン、任意で低級アルキレン、アルケニレン、およびアルキニレンを示すことが理解されるべきである。例示的なアルキル基は、限定はされないが、メチレン、エチレン、ｎ−プロピレン、イソプロピレン、ｎ−ブチレン、イソブチレン、ｓｅｃ−ブチレン、ペンチレン、１，２−ペンチレン、１，３−ペンチレン、ヘキシレン、ヘプチレン、オクチレン、などである。
【0159】
本明細書では、「シクロアルキル」という用語は、任意で分枝される炭素原子の鎖を含み、ここで、鎖の少なくとも一部は環状である。シクロアルキルアルキルはシクロアルキルのサブセットであることが理解されるべきである。シクロアルキルは多環であってもよいことが理解されるべきである。例示的なシクロアルキルとしては、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、２−メチルシクロプロピル、シクロペンチルエト−２−イル、アダマンチル、などが挙げられるが、それらに限定されない。本明細書では、「シクロアルケニル」という用語は、任意で分枝され、少なくとも１つの二重結合を含む炭素原子の鎖を含み、ここで、鎖の少なくとも一部は環状である。１つ以上の二重結合は、シクロアルケニルの環状部分および／またはシクロアルケニルの非環状部分に存在し得ることが理解されるべきである。シクロアルケニルアルキルおよびシクロアルキルアルケニルはそれぞれ、シクロアルケニルのサブセットであることが理解されるべきである。シクロアルキルは多環であってもよいことが理解されるべきである。例示的なシクロアルケニルとしては、シクロペンテニル、シクロヘキシルエテン−２−イル、シクロヘプテニルプロペニル、などが挙げられるが、それらに限定されない。シクロアルキルおよび／またはシクロアルケニルを形成する鎖は、便宜的に制限された長さ、例えばＣ３−Ｃ２４、Ｃ３−Ｃ１２、Ｃ３−Ｃ８、Ｃ３−Ｃ６およびＣ５−Ｃ６を有することがさらに理解されるべきである。本明細書では、それぞれ、シクロアルキルおよび／またはシクロアルケニルを形成するアルキルおよび／またはアルケニル鎖が短いほど、化合物に低い親油性を与える可能性があり、したがって異なる薬物動態挙動を有するであろうことが認識される。
【0160】
本明細書では、「ヘテロアルキル」という用語は、炭素および少なくとも１つのヘテロ原子の両方を含み、任意で分枝される原子の鎖を含む。例示的なヘテロ原子としては、窒素、酸素、および硫黄が挙げられる。ある一定のバリエーションでは、例示的なヘテロ原子はまた、リン、およびセレンを含む。本明細書では、ヘテロシクリルおよび複素環を含む「シクロヘテロアルキル」という用語は、炭素および少なくとも１つのヘテロ原子の両方を含み、例えばヘテロアルキル、任意で分枝される原子の鎖を含み、ここで、鎖の少なくとも一部は環状である。例示的なヘテロ原子としては、窒素、酸素、および硫黄が挙げられる。ある一定のバリエーションでは、例示的なヘテロ原子はまた、リン、およびセレンを含む。例示的なシクロヘテロアルキルとしては、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ホモピペラジニル、キヌクリジニル、などが挙げられるが、それらに限定されない。
【0161】
本明細書では、「アリール」という用語は、単環式および多環式芳香族炭素環状基を含み、その各々は任意で置換され得る。本明細書で記載される例示的な芳香族炭素環状基としては、フェニル、ナフチル、などが挙げられるが、それらに限定されない。本明細書では、「ヘテロアリール」という用語は、芳香族複素環基を含み、その各々は任意で置換され得る。例示的な芳香族複素環基としては、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、テトラジニル、キノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、などが挙げられるが、それらに限定されない。
【0162】
本明細書では、「アミノ」という用語は、ＮＨ２、アルキルアミノ、およびジアルキルアミノ基を含み、ここで、ジアルキルアミノ内の２つのアルキル基は、同じか、または異なってもよく、すなわちアルキルアルキルアミノである。例示的に、アミノとしては、メチルアミノ、エチルアミノ、ジメチルアミノ、メチルエチルアミノ、などが挙げられる。加えて、アミノが別の用語を修飾する、または別の用語により修飾された場合、例えばアミノアルキル、またはアシルアミノでは、アミノという用語の上記バリエーションはその中に含まれることが理解されるべきである。例示的に、アミノアルキルとしては、Ｈ２Ｎ−アルキル、メチルアミノアルキル、エチルアミノアルキル、ジメチルアミノアルキル、メチルエチルアミノアルキル、などが挙げられる。例示的に、アシルアミノとしては、アシルメチルアミノ、アシルエチルアミノ、などが挙げられる。
【0163】
本明細書では、「アミノおよびその誘導体」という用語は、本明細書で記載されるアミノ、ならびにアルキルアミノ、アルケニルアミノ、アルキニルアミノ、ヘテロアルキルアミノ、ヘテロアルケニルアミノ、ヘテロアルキニルアミノ、シクロアルキルアミノ、シクロアルケニルアミノ、シクロヘテロアルキルアミノ、シクロヘテロアルケニルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ、アリールアルケニルアミノ、アリールアルキニルアミノ、ヘテロアリールアミノ、ヘテロアリールアルキルアミノ、ヘテロアリールアルケニルアミノ、ヘテロアリールアルキニルアミノ、アシルアミノ、などを含み、その各々は任意で置換される。「アミノ誘導体」という用語はまた、尿素、カルバメート、などを含む。
【0164】
本明細書では、「ヒドロキシおよびその誘導体」という用語は、ＯＨ、およびアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、ヘテロアルキルオキシ、ヘテロアルケニルオキシ、ヘテロアルキニルオキシ、シクロアルキルオキシ、シクロアルケニルオキシ、シクロヘテロアルキルオキシ、シクロヘテロアルケニルオキシ、アリールオキシ、アリールアルキルオキシ、アリールアルケニルオキシ、アリールアルキニルオキシ、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールアルキルオキシ、ヘテロアリールアルケニルオキシ、ヘテロアリールアルキニルオキシ、アシルオキシ、などを含み、その各々は任意で置換される。「ヒドロキシ誘導体」という用語はまた、カルバメート、などを含む。
【0165】
本明細書では、「チオおよびその誘導体」という用語は、ＳＨ、およびアルキルチオ、アルケニルチオ、アルキニルチオ、ヘテロアルキルチオ、ヘテロアルケニルチオ、ヘテロアルキニルチオ、シクロアルキルチオ、シクロアルケニルチオ、シクロヘテロアルキルチオ、シクロヘテロアルケニルチオ、アリールチオ、アリールアルキルチオ、アリールアルケニルチオ、アリールアルキニルチオ、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールアルキルチオ、ヘテロアリールアルケニルチオ、ヘテロアリールアルキニルチオ、アシルチオ、などを含み、その各々は任意で置換される。「チオ誘導体」という用語はまた、チオカルバメート、などを含む。
【0166】
本明細書では、「アシル」という用語は、ホルミル、およびアルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルキニルカルボニル、ヘテロアルキルカルボニル、ヘテロアルケニルカルボニル、ヘテロアルキニルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、シクロアルケニルカルボニル、シクロヘテロアルキルカルボニル、シクロヘテロアルケニルカルボニル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、アリールアルケニルカルボニル、アリールアルキニルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアリールアルキルカルボニル、ヘテロアリールアルケニルカルボニル、ヘテロアリールアルキニルカルボニル、アシルカルボニル、などを含み、その各々は任意で置換される。
【0167】
本明細書では、「カルボニルおよびその誘導体」という用語は、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｓ）、Ｃ（ＮＨ）基およびその置換アミノ誘導体を含む。
【0168】
本明細書では、「カルボン酸およびその誘導体」という用語は、ＣＯ２Ｈ基およびその塩、ならびにそのエステルおよびアミド、およびＣＮを含む。
【0169】
本明細書では、「スルフィン酸またはその誘導体」という用語は、ＳＯ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【0170】
本明細書では、「スルホン酸またはその誘導体」という用語は、ＳＯ３Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【0171】
本明細書では、「スルホニル」という用語は、アルキルスルホニル、アルケニルスルホニル、アルキニルスルホニル、ヘテロアルキルスルホニル、ヘテロアルケニルスルホニル、ヘテロアルキニルスルホニル、シクロアルキルスルホニル、シクロアルケニルスルホニル、シクロヘテロアルキルスルホニル、シクロヘテロアルケニルスルホニル、アリールスルホニル、アリールアルキルスルホニル、アリールアルケニルスルホニル、アリールアルキニルスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、ヘテロアリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールアルケニルスルホニル、ヘテロアリールアルキニルスルホニル、アシルスルホニル、などを含み、その各々は任意で置換される。
【0172】
本明細書では、「ホスフィン酸またはその誘導体」という用語は、Ｐ（Ｒ）Ｏ２Ｈおよびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含み、ここで、Ｒはアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、シクロヘテロアルキル、シクロヘテロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、アリールアルキル、またはヘテロアリールアルキルであり、その各々は任意で置換される。
【0173】
本明細書では、「ホスホン酸またはその誘導体」という用語は、ＰＯ３Ｈ２およびその塩、ならびにそのエステルおよびアミドを含む。
【0174】
本明細書では、「ヒドロキシルアミノおよびその誘導体」という用語は、ＮＨＯＨ、およびアルキルオキシルＮＨ アルケニルオキシルＮＨ アルキニルオキシルＮＨ ヘテロアルキルオキシルＮＨ ヘテロアルケニルオキシルＮＨ ヘテロアルキニルオキシルＮＨ シクロアルキルオキシルＮＨ シクロアルケニルオキシルＮＨ シクロヘテロアルキルオキシルＮＨ シクロヘテロアルケニルオキシルＮＨ アリールオキシルＮＨ アリールアルキルオキシルＮＨ アリールアルケニルオキシルＮＨ アリールアルキニルオキシルＮＨ ヘテロアリールオキシルＮＨ ヘテロアリールアルキルオキシルＮＨ ヘテロアリールアルケニルオキシルＮＨ ヘテロアリールアルキニルオキシルＮＨ アシルオキシ、などを含み、その各々は任意で置換される。
【0175】
本明細書では、「ヒドラジノおよびその誘導体」という用語は、アルキルＮＨＮＨ、アルケニルＮＨＮＨ、アルキニルＮＨＮＨ、ヘテロアルキルＮＨＮＨ、ヘテロアルケニルＮＨＮＨ、ヘテロアルキニルＮＨＮＨ、シクロアルキルＮＨＮＨ、シクロアルケニルＮＨＮＨ、シクロヘテロアルキルＮＨＮＨ、シクロヘテロアルケニルＮＨＮＨ、アリールＮＨＮＨ、アリールアルキルＮＨＮＨ、アリールアルケニルＮＨＮＨ、アリールアルキニルＮＨＮＨ、ヘテロアリールＮＨＮＨ、ヘテロアリールアルキルＮＨＮＨ、ヘテロアリールアルケニルＮＨＮＨ、ヘテロアリールアルキニルＮＨＮＨ、アシルＮＨＮＨ、などを含み、その各々は任意で置換される。
【0176】
「任意で置換された」という用語は、本明細書では、任意で置換されるラジカル上の、水素原子の他の官能基による置き換えを含む。そのような他の官能基としては、例示的に、アミノ、ヒドロキシル、ハロ、チオール、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ニトロ、スルホン酸およびその誘導体、カルボン酸およびその誘導体、などが挙げられるが、それらに限定されない。例示的に、アミノ、ヒドロキシル、チオール、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、および／またはスルホン酸のいずれかは任意で置換される。
【0177】
本明細書では、「任意で置換されたアリール」および「任意で置換されたヘテロアリール」という用語は、任意で置換されるアリールまたはヘテロアリール上での、水素原子の他の官能基による置き換えを含む。それぞれ、本明細書ではアリール置換基またはヘテロアリール置換基とも呼ばれる、そのような他の官能基としては、例示的には、アミノ、ヒドロキシ、ハロ、チオ、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、ニトロ、スルホン酸およびその誘導体、カルボン酸およびその誘導体、などが挙げられるが、それらに限定されない。例示的には、アミノ、ヒドロキシ、チオ、アルキル、ハロアルキル、ヘテロアルキル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリールヘテロアルキル、および／またはスルホン酸のいずれかは任意で置換される。
【0178】
例示的な置換基としては、ラジカル−（ＣＨ２）ｘＺＸが挙げられるが、それらに限定されず、ここで、ｘは、０〜６の整数であり、ＺＸは、ハロゲン、ヒドロキシ、アルカノイルオキシ、例えばＣ１−Ｃ６アルカノイルオキシ、任意で置換されたアロイルオキシ、アルキル、例えばＣ１−Ｃ６アルキル、アルコキシ、例えばＣ１−Ｃ６アルコキシ、シクロアルキル、例えばＣ３−Ｃ８シクロアルキル、シクロアルコキシ、例えばＣ３−Ｃ８シクロアルコキシ、アルケニル、例えばＣ２−Ｃ６アルケニル、アルキニル、例えばＣ２−Ｃ６アルキニル、ハロアルキル、例えばＣ１−Ｃ６ハロアルキル、ハロアルコキシ、例えばＣ１−Ｃ６ハロアルコキシ、ハロシクロアルキル、例えばＣ３−Ｃ８ハロシクロアルキル、ハロシクロアルコキシ、例えばＣ３−Ｃ８ハロシクロアルコキシ、アミノ、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノ、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノ、アルキルカルボニルアミノ、Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アルキルカルボニルアミノ、アミノアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキルアミノアルキル、（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アミノアルキル、アルキルカルボニルアミノアルキル、Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６アルキル）アルキルカルボニルアミノアルキル、シアノ、およびニトロから選択され；あるいはＺＸは、−ＣＯ２Ｒ４および−ＣＯＮＲ５Ｒ６から選択され、ここで、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、個々の事象において、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルから各々独立して選択される。
【0179】
「プロドラッグ」という用語は、本明細書では、一般に、生物系に投与されると、１つ以上の自然化学反応（複数可）、酵素触媒化学反応（複数可）、および／または代謝化学反応（複数可）、またはそれらの組み合わせの結果として、生物活性化合物を生成する任意の化合物を示す。インビボでは、プロドラッグは典型的には酵素（例えばエステラーゼ、アミダーゼ、ホスファターゼ、など）、単純な生物化学、または他のインビボでのプロセスにより作用され、より薬理学的に活性な薬物を遊離または再生させる。この活性化は、内在性宿主酵素または、プロドラッグの投与に先だって、その後、またはそれ中に、宿主に投与される非内在性酵素の作用を介して起こり得る。プロドラッグ使用のさらなる詳細は、米国特許第５，６２７，１６５号に記載される。プロドラッグは目標、例えば標的送達、安全性、安定性、などが達成されるとすぐに、便宜的に元の薬物に変換され、続いてプロドラッグを形成する基の放出された残りのその後の急速除去が起こることが認識される。
【0180】
プロドラッグは、本明細書で記載される化合物から、最終的にインビボで開裂して、化合物上に存在する１つ以上の官能基、例えば−ＯＨ−、−ＳＨ、−ＣＯ２Ｈ、−ＮＲ２を与える基を付着させることにより調製され得る。例示的なプロドラッグとしては、カルボン酸エステル（ここで、基はアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、アシルオキシアルキル、アルコキシカルボニルオキシアルキルである）ならびにヒドロキシル、チオールおよびアミンのエステル（ここで、付着される基はアシル基、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、リン酸または硫酸である）が挙げられるが、それらに限定されない。活性エステルとも呼ばれる、例示的なエステルとしては１−インダニル、Ｎ−オキシスクシンイミド；アシルオキシアルキル基、例えばアセトキシメチル、ピバロイルオキシメチル、β−アセトキシエチル、β−ピバロイルオキシエチル、１−（シクロヘキシルカルボニルオキシ）プロプ−１−イル、（１−アミノエチル）カルボニルオキシメチル、など；アルコキシカルボニルオキシアルキル基、例えばエトキシカルボニルオキシメチル、α−エトキシカルボニルオキシエチル、β−エトキシカルボニルオキシエチル、など；ジアルキルアミノアルキル基、例えば、ジ−低級アルキルアミノアルキル基、例えばジメチルアミノメチル、ジメチルアミノエチル、ジエチルアミノメチル、ジエチルアミノエチル、など；２−（アルコキシカルボニル）−２−アルケニル基、例えば２−（イソブトキシカルボニル）ペント−２−エニル、２−（エトキシカルボニル）ブト−２−エニル、など；ならびにラクトン基、例えばフタリジル、ジメトキシフタリジル、などが挙げられるが、それらに限定されない。
【0181】
さらに例示的なプロドラッグは、本明細書で記載される化合物の溶解度および／または安定性を増加させるように機能する化学部分、例えば、アミドまたはリン基を含む。アミノ基に対するさらに例示的なプロドラッグとしては、下記が挙げられるが、それらに限定されない：（Ｃ３−Ｃ２０）アルカノイル；ハロ−（Ｃ３−Ｃ２０）アルカノイル；（Ｃ３−Ｃ２０）アルケノイル；（Ｃ４−Ｃ７）シクロアルカノイル；（Ｃ３−Ｃ６）−シクロアルキル（Ｃ２−Ｃ１６）アルカノイル；任意で置換されたアロイル、例えば非置換アロイルまたはハロゲン、シアノ、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルおよび（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシからなる群より選択される１〜３つの置換基（その各々は、任意で、１〜３つのハロゲン原子の１つ以上でさらに置換される）により置換されたアロイル；任意で置換されたアリール（Ｃ２−Ｃ１６）アルカノイルおよび任意で置換されたヘテロアリール（Ｃ２−Ｃ１６）アルカノイル、例えば、非置換である、またはハロゲン、（Ｃ１−Ｃ３）アルキルおよび（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシからなる群より選択される１〜３つの置換基（その各々は任意で、１〜３つのハロゲン原子でさらに置換される）により置換されたアリールまたはヘテロアリールラジカル；ならびに、ヘテロアリール部分においてＯ、ＳおよびＮから選択される１〜３つのヘテロ原子を、アルカノイル部分において２〜１０個の炭素原子を有する任意で置換されたヘテロアリールアルカノイル、例えば、非置換である、またはハロゲン、シアノ、トリフルオロメタンスルホニルオキシ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、および（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシからなる群より選択される１〜３つの置換基（その各々は任意で、１〜３つのハロゲン原子でさらに置換される）により置換されたヘテロアリールラジカル。説明される基は例示であり、包括的ではなく、従来のプロセスにより調製され得る。
【0182】
プロドラッグ自体は著しい生物活性を有さない可能性があるが、代わりに、投与後インビボで、１つ以上の自然化学反応（複数可）、酵素触媒化学反応（複数可）、および／または代謝化学反応（複数可）、またはそれらの組み合わせを受け、生物活性である、または生物活性化合物の前駆体である、本明細書で記載される化合物を生成することができることが理解される。しかしながら、場合によっては、プロドラッグは生物活性であることが認識される。プロドラッグはしばしば、改善された経口バイオアベイラビリティ、薬力学的半減期、などにより、薬物効力または安全性を改善するように機能し得ることもまた、認識される。プロドラッグはまた、望ましくない薬物特性を単純にマスクし、または薬物送達を改善する基を含む、本明細書で記載される化合物の誘導体を示す。例えば、本明細書で記載される１つ以上の化合物は便宜的にブロックされ、または最小に抑えられる望ましくない特性を示す可能性があり、それらは、臨床薬物適用において薬理学的、薬剤的、または薬物動態障壁となり得、例えば低い経口薬物吸収、部位特異性の欠如、化学不安定性、毒性、および不十分な患者許容性（不快な味、臭い、注射部位での疼痛、など）、などである。プロドラッグ、または可逆誘導体を使用した他の戦略は薬物の臨床適用の最適化において有用となり得ることが本明細書では認識される。
【0183】
本明細書では、「脱離基」という用語は、これが付着された原子上で求電子性部位を発生させる反応性官能基を示し、そのため、求核剤が原子上の求電子性部位に対して添加され得る。例示的な脱離基としては、ハロゲン、任意で置換されたフェノール、アシルオキシ基、スルホノキシ基、などが挙げられるが、それらに限定されない。そのような脱離基はアルキル、アシル、など上に存在し得ることが理解されるべきである。そのような脱離基はまた、本明細書では、例えば、脱離基がアシル上に存在する場合、活性化基と呼ばれ得る。加えて、従来のペプチド、アミド、およびエステルカップリング剤、例えば、限定はされないがＰｙＢｏｐ、ＢＯＰ−Ｃｌ、ＢＯＰ、ペンタフルオロフェノール、クロロギ酸イソブチル、などは、カルボニル基上に本明細書で規定される脱離基を含む様々な中間体を形成する。
【0184】
本明細書で開示されるいかなる場合も、任意の変数に対する整数の範囲の記述は、列挙された範囲、範囲内の全ての個々のメンバー、およびその変数に対する全ての可能なサブレンジを示すことが理解されるべきである。例えば、ｎは、０〜８の整数であるという記述は、その範囲、０、１、２、３、４、５、６、７、および８の個々の、かつ選択可能な値を示し、例えばｎは０であり、またはｎは１であり、またはｎは２である、などである。加えて、ｎは、０〜８の整数であるという記述はまた、各および全てのサブレンジを示し、その各々は、さらなる実施形態の基礎として、例えばｎは、１〜８、１〜７、１〜６、２〜８、２〜７、１〜３、２〜４、などの整数である。
【0185】
本明細書では、「組成物」という用語は一般には、特定の材料成分を特定の量で含む任意の生成物、ならびに直接的または間接的に、特定の材料成分の特定の量での組み合わせから得られる任意の生成物を示す。本明細書で記載される組成物は、本明細書で記載される単離された化合物または本明細書で記載される化合物の塩、溶液、水和物、溶媒和物、および他の形態から調製され得ることが理解されるべきである。組成物は、本明細書で記載される化合物の様々なアモルファス、非アモルファス、部分結晶、結晶、および／または他の形態学的な形態から調製され得ることもまた理解されるべきである。組成物は、本明細書で記載される化合物の様々な水和物および／または溶媒和物から調製され得ることもまた理解されるべきである。したがって、本明細書で記載される化合物を列挙するそのような医薬組成物は、本明細書で記載される化合物の様々な形態学的な形態および／または溶媒和物もしくは水和物形態の各々、またはその任意の組み合わせを含むと理解されるべきである。加えて、組成物は、本明細書で記載される化合物の様々な共結晶から調製され得ることが理解されるべきである。
【0186】
例示的に、組成物は、１つ以上の担体、希釈剤、および／または賦形剤を含み得る。本明細書で記載される化合物、またはそれらを含む組成物は、治療的有効量で、本明細書で記載される方法に適切な任意の従来の剤形にて製剤化され得る。本明細書で記載される化合物、またはそれらを含む組成物、例えばそのような製剤は、本明細書で記載される方法のための多種多様の従来の経路により、多種多様の投与形式で、公知の手順を使用して投与され得る（一般に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，（第２１版， ２００５）を参照されたい）。
【0187】
本明細書で使用される「治療的有効量」という用語は、研究者、獣医師、医師または他の臨床医により探究されている組織系、動物またはヒトにおいて生物学的または薬用応答を誘発する活性化合物または医薬品のその量を示し、治療される疾患または障害の症状の軽減が含まれる。１つの態様では、治療的有効量は、いずれかの医学的処置に適用可能な合理的な利益／リスク比で、疾患または疾患の症状を治療または軽減することができるものである。しかしながら、本明細書で記載される化合物および組成物の総一日使用量は主治医により、健全な医学的判断の範囲内で決定され得ることが理解されるべきである。いずれかの特定の患者に対する特定の治療的に有効な投与レベルは下記を含む様々な因子に依存するであろう：治療される障害および障害の重症度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別および食事：使用される特定の化合物の投与時間、投与経路、および排泄速度；治療の持続期間；使用される特定の化合物と組み合わせて、または同時に使用される薬物；ならびに通常の技術の研究者、獣医師、医師または他の臨床医によく知られている同様の因子。
【0188】
単独療法か併用療法に関するかどうかに関係なく、治療的有効量は、本明細書で記載される化合物の１つ以上の投与中に起こり得る、任意の毒性、または他の望ましくない副作用を参照して便宜的に選択されることもまた、認識される。さらに、本明細書で記載される併用療法により、そのような毒性、または他の望ましくない副作用を示す化合物のより少ない用量の投与が可能になり、この場合、そのようなより少ない用量は、毒性の閾値未満であり、または、別様に併用療法なしで投与されるものよりも治療濃度域が低いことが認識される。
【0189】
本明細書で記載される例示的な投与量および投与プロトコルに加えて、本明細書で記載される化合物の任意の１つまたはその混合物の有効量は、担当診断医または医師により、公知の技術を使用して、および／または類似の状況下で得られる結果を観察することにより、容易に決定することができることが理解されるべきである。有効量または用量の決定では、多くの因子が担当診断医または医師により考慮され、限定はされないが、ヒトを含む哺乳類の種、そのサイズ、年齢、および全体的な健康、関与する特定の疾患または障害、疾患または障害の程度または関与または重症度、個々の患者の応答、投与される特定化合物、投与方法、投与される調製物のバイオアベイラビリティ特性、選択される投与レジメン、併用薬物療法の使用、および他の関連する状況が挙げられる。
【0190】
特許請求される組み合わせの各化合物の投与量はいくつかの因子に依存し、下記が挙げられる：投与方法、治療される病状、病状の重症度（病状が治療されるか防止されるかに関係なく）、および治療される人間の年齢、体重、および健康。加えて、特定の患者についての薬理ゲノミクス（治療薬の薬物動態、薬力学的または効力プロファイルに対する遺伝子型の効果）情報は、使用される投与量に影響を与え得る。
【0191】
本明細書で記載される方法では、共投与の個々の構成成分、または組み合わせは、任意の好適な手段により、同時期に、同時に、順次、別々にまたは単一医薬製剤で投与することができることが理解されるべきである。共投与される化合物または組成物が別々の剤形で投与される場合、各化合物に対する１日あたりに投与される投与数は、同じか、または異なってもよい。化合物または組成物は、同じか、または異なる投与経路により投与され得る。化合物または組成物は、同時または交互レジメンに従い、療法過程中同じか、または異なる時間に、同時に分割された、または単一の形態で投与され得る。
【0192】
「投与する」という用語は、本明細書では、本明細書で記載される化合物および組成物を宿主動物に導入する全ての手段を含み、経口（ｐｏ）、静脈内（ｉｖ）、筋肉内（ｉｍ）、皮下（ｓｃ）、経皮、吸入、頬側、眼内、舌下、腟内、直腸、などが挙げられるがそれらに限定されない。本明細書で記載される化合物および組成物は、単位剤形および／または従来の無毒性の薬学的に許容される担体、アジュバント、および／またはビヒクルを含む製剤で投与され得る。
【0193】
経口投与のための例示的な形式としては、錠剤、カプセル、エリキシル剤、シロップ、などが挙げられる。
【0194】
非経口投与のための例示的な経路としては、静脈内、動脈内、腹腔内、硬膜外、尿道内、胸骨内、筋肉内および皮下、ならびに任意の他の当技術分野において認識される非経口投与経路が挙げられる。
【0195】
例示的に、投与することは、全身および局所使用の両方、例えば、疾患、損傷、または欠陥部位、あるいは特定の器官または組織系に局所投与される場合を含む。例示的な局所投与は、直視下手術、または疾患、損傷、または欠陥部位に到達できる他の手順中に実施され得る。あるいは、局所投与は、非経口送達を使用して実施され得、この場合、本明細書で記載される化合物または組成物は局所的に、治療される宿主動物における複数の他の非標的部位への一般的な分布なしで、その部位に堆積される。局所投与は直接損傷部位で実施され得、または局所的に周囲組織において実施され得ることがさらに認識される。特定の組織型、例えば器官、などへの局所送達に関する同様のバリエーションもまた、本明細書で記載される。
【0196】
本明細書で記載される疾患、投与経路および／または化合物および／または組成物が局所的に、または全身的投与されるかによって、幅広い許容される投与量が本明細書で企図され、約１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇの範囲に含まれる用量が挙げられる。投与量は、１回でもよく、または分割されてもよく、多種多様のプロトコルに従い、例えばｑ．ｄ．、ｂ．ｉ．ｄ．、ｔ．ｉ．ｄ．、または一日おき、一週間に１回、一ヶ月に１回、四半期に１回、などで投与され得る。これらの場合の各々において、本明細書で記載される治療的有効量は、投与プロトコルにより決定される、投与の一過程、あるいは合計の１日、１週、１ヶ月、または四半期用量に対応することが理解される。
【0197】
本明細書で記載される１つ以上の化合物を使用してＦＬＤまたは肺線維症の１つ以上の影響を治療または寛解するための、本明細書で記載される化合物、組成物、および方法の有効な使用は、動物モデル、例えば、疾患のマウス、イヌ、ブタ、および非ヒト霊長類動物モデルに基づくことができる。例えば、ヒトにおけるＦＬＤまたは肺線維症は、機能喪失、および／または症状の発症により特徴付けられ得、その各々は、動物、例えばマウス、および他の代替試験動物、例えば本明細書で記載されるものにおいて誘発され得ることが理解される。
【0198】
下記実施例は、さらに発明の特定の実施形態を説明するが；しかしながら、下記例示的な例は、決して、発明を制限するものと解釈されるべきではない。
【0199】
実施例実施例。下記略語が本明細書で使用される：アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）；ヘマトキシリンおよびエオシン（ＨＥ）；高脂肪食（ＨＦＤ）；マウス白血病ウイルス逆転写酵素（ＭＭＬＶ−ＲＴ）；非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）；ＮＡＦＬＤ活性スコア（ＮＡＳ）；非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）；標準偏差（ＳＤ）；特定の病原体を含まない（ＳＰＦ）；ステリック動物モデル（ＳＴＡＭ）；ならびにストレプトゾトシン（ＳＴＺ）。
【0200】
実施例。例示的に、試験化合物をビヒクル、例えば０．５％メチルセルロース（ｍｅｔｈｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）＋０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０中で製剤化し、例えば各投与に対して１０ｍＬ／ｋｇの体積で経口投与する。
【0201】
実施例。ＮＡＳＨ−ＨＣＣ（ＳＴＡＭ（商標））モデル．Ｃ５７ＢＬ／６（１５日妊娠雌）マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｊａｐａｎ（神奈川、日本）から入手する。雄の子を研究のために選択する。ＮＡＳＨを雄マウスにおいて、出生後２日に２００μｇストレプトゾトシン（ＳＴＺ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ＵＳＡ）溶液の単回皮下注射により誘導し、続いて、４週齢で開始して、ＨＦＤを与える（５７ｋｃａｌ％脂肪、ｃａｔ＃：ＨＦＤ３２、ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ、日本）。５週齢で、マウスを対照群と１つ以上の処置群に分割する（一般に８マウス／群）。動物を９週齢で屠殺し、生化学、組織学、および遺伝子発現分析を実施する。
【0202】
研究で使用した全ての動物を、地方条例にしたがい収容し、世話をする。試験動物をＳＰＦ施設内で、温度（２３±２℃）、湿度（４５±１０％）、照明（１２時間人工明暗サイクル；８：００〜２０：００の光）および換気の制御された条件下にて維持する。高圧（２０±４Ｐａ）を実験室内で維持する。試験動物をポリカーボネートケージＫＮ−６００（Ｎａｔｓｕｍｅ Ｓｅｉｓａｋｕｓｈｏ、日本）内に収容し、最大４匹のマウス／ケージとする。滅菌したＰＵＬＭＡＳμ（Ｍａｔｅｒｉａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ、日本）を寝床のために使用し、一週間に１回交換する。滅菌した固体ＨＦＤを、ケージの上端の金属蓋に入れて、自由に与える。純水をゴム栓および先管が取り付けられた水ボトルから自由に提供する。水ボトルを一週間に１回交換し、清浄にし、オートクレーブで滅菌し、再利用する。
【0203】
一般に、上昇したＮＡＦＬＤ活性スコア（ＮＡＳ）≧５、脂肪症、および上昇したＡＬＴは第６週までに明らかになり、ＮＡＳＨは第７週までに明らかになり、類洞周囲線維症は第９週までに明らかになり、小結節は第１２週までに明らかになり、ＨＣＣは第１６週までに明らかになる。マウスにおける類洞周囲線維症は、ヒトにおけるＮＡＳＨに対するモデルであることが本明細書では理解されるべきである（Ｆｕｊｉｉ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｄ Ｍｏｌ Ｍｏｒｐｈｏｌ ４６： １４１−１５２ （２０１３））。
【0204】
第５〜９週中（第３５±２日に開始）、試験化合物を（一般に経口）１０ｍＬ／ｋｇに希釈した様々な用量で、様々な投与プロトコルに従い、処置群（各８匹のマウス）に投与し、一方、第２の群（８匹のマウス）にはビヒクルのみを投与する。動物を９週で屠殺する。
【0205】
実施例。全血および血漿生化学の測定．非空腹時血糖を全血において、ＬＩＦＥ ＣＨＥＣＫ（ＥＩＤＩＡ、日本）を使用して測定した。血漿生化学では、血液を、抗凝固薬（Ｎｏｖｏ−Ｈｅｐａｒｉｎ， Ｍｏｃｈｉｄａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ、日本）を有するポリプロピレン管内に収集し、１，０００×ｇで１５分間４℃にて遠心分離した。上清を収集し、−８０℃で、使用まで保存した。血漿ＡＬＴレベルを、ＦＵＪＩ ＤＲＩ−ＣＨＥＭ ７０００（Ｆｕｊｉｆｉｌｍ、日本）により測定した。血漿インスリン、ＭＩＦおよびＩＬ−２２を、それぞれ、超高感度マウスインスリンＥＬＩＳＡキット（Ｍｏｒｉｎａｇａ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｃｉｅｎｃｅ、日本）、マウスマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）ＥＬＩＳＡ（Ｋａｍｉｙａ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ、ＵＳＡ）、Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ ＥＬＩＳＡマウス／ラットＩＬ−２２イムノアッセイキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＡ）により定量した。
【0206】
実施例。血清生化学の測定．血清生化学では、血液を、抗凝固薬なしのポリプロピレン管内に収集し、室温で３０分間、４℃で１時間インキュベートし、その後、１，０００×ｇで１５分間４℃にて遠心分離する。上清を収集し、使用まで−８０℃で保存した。血清トリグリセリド、ＨＤＬ−コレステロール、ＬＤＬ−コレステロール、ＶＬＤＬ−コレステロール、およびカイロミクロン（ＵＬＤＬ）をＨＰＬＣによりＳｋｙｌｉｇｈｔ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｉｎｃ．（日本）で定量する。
【0207】
実施例。肝臓生化学の測定−肝臓トリグリセリド含量．肝臓総脂質抽出物をＦｏｌｃｈ法により取得する（Ｆｏｌｃｈ Ｊ． ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ．， １９５７；２２６：４９７）。肝臓試料をクロロホルム−メタノール（２：１、ｖ／ｖ）中でホモジナイズし、一晩室温でインキュベートする。クロロホルム−メタノール−水（８：４：３、ｖ／ｖ／ｖ）で洗浄した後、抽出物を蒸発して乾燥させ、イソプロパノールに溶解する。肝臓トリグリセリド（ＴＧ）およびコレステロール含量を、それぞれ、トリグリセリドＥ試験およびコレステロールＥ試験により測定した（Ｗａｋｏ Ｐｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、日本）。トリグリセリド含量が検出限界を超えた場合、抽出物をイソプロパノールで２倍希釈する。
【0208】
実施例。病理組織学的分析．ＨＥ染色では、切片をブアン固定液中で前固定した左外側肝臓組織のパラフィンブロックから切り出し、Ｌｉｌｌｉｅ−Ｍａｙｅｒヘマトキシリン（Ｍｕｔｏ Ｐｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、日本）およびエオシン溶液（Ｗａｋｏ Ｐｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）で染色する。ＮＡＦＬＤ活性スコア（ＮＡＳ）を、Ｋｌｅｉｎｅｒの判断基準に従い計算する（Ｋｌｅｉｎｅｒ ＤＥ． ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２００５；４１：１３１３）。脂肪症および肝細胞風船化を有してＮＡＳ≧５だと、一般にＮＡＳＨの診断と考えられる。【表1】
【0209】
実施例。コラーゲン沈着（線維症の尺度）を可視化するために、ブアン固定された左外側肝臓切片を、ピクロシリウスレッド溶液（Ｗａｌｄｅｃｋ、ドイツ）を用いて染色する。
【0210】
実施例。免疫組織化学（炎症の尺度）のために、切片をティシュー・テックＯＣＴコンパウンドに包埋された凍結肝臓組織から切り出し、アセトン中で固定する。内在性ペルオキシダーゼ活性を、０．０３％Ｈ２Ｏ２を用いて５分間ブロックし、続いてＢｌｏｃｋ Ａｃｅ（Ｄａｉｎｉｐｐｏｎ Ｓｕｍｉｔｏｍｏ Ｐｈａｒｍａ、日本）と共に１０分間インキュベートする。切片を、抗Ｆ４／８０抗体の２００倍希釈物（ＢＭＡ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ、スイス）、抗ＣＫ−１８抗体の５０倍希釈物（ＬｉｆｅＳｐａｎ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅｓ、ＵＳＡ）または抗Ｇｒ−１抗体（培養上清）と共に一晩４℃でインキュベートした。Ｆ４／８０は、肝臓中のマクロファージおよびクッパー細胞のためのマーカーであり；ＣＫ−１８抗体はダメージを受けた肝細胞中の細胞骨格を測定し；ならびに抗Ｇｒ−１抗体は好中球応答を測定する。二次抗体（ＨＲＰ−ヤギ抗ラット抗体、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、ＵＳＡ）とのインキュベーション後、酵素−基質反応を、３、３’−ジアミノベンジジン／Ｈ２Ｏ２溶液（Ｎｉｃｈｉｒｅｉ、日本）を用いて実施する。
【0211】
実施例。線維化面積の定量分析のために、シリウスレッドで染色した切片の明視野画像を中心静脈の周りで、デジタルカメラ（ＤＦＣ２８０；Ｌｅｉｃａ、ドイツ）を使用して、２００倍拡大率で獲得し、５つのフィールド／切片における陽性面積を、ＩｍａｇｅＪソフトウェア（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、ＵＳＡ）を用いて測定する。炎症面積の定量分析のために、Ｆ４／８０−免疫染色切片の明視野画像を、中心静脈の周りでデジタルカメラ（ＤＦＣ２８０；Ｌｅｉｃａ、ドイツ）を使用して、２００倍拡大率で獲得し、５つのフィールド／切片における陽性面積を、ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いて測定する（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、ＵＳＡ）。
【0212】
実施例。統計検定。統計分析をＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ４（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ＵＳＡ）、または等価の装置上でスチューデントｔ検定を用いて実施する。Ｐ値＜０．０５は統計的に有意であると考えられる。片側ｔ検定でＰ値＜０．１０に戻ると、ある動向または傾向が推定される。結果は平均±ＳＤとして表される。ビヒクル処置群の統計学的有意性は一般には、必要に応じて、正常群との比較を示す。本明細書で記載される化合物で処置された群の統計学的有意性は一般には、必要に応じて、ビヒクル処置群との比較を示す。
【0213】
実施例。例示的な用量反応試験群。群１−正常。８匹の正常マウスに正常食を自由に、処置なしで９週齢まで、与える。群２−ビヒクル。８匹のＮＡＳＨマウスにビヒクル（０．５％ｗ／ｖメチルセルロース＋０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０）を１０ｍＬ／ｋｇの体積で１日２回５〜９週齢まで経口投与する。群３−ソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇ。８匹のＮＡＳＨマウスにソリスロマイシンが補充されたビヒクルを朝に５ｍｇ／ｋｇの用量で、および夜にビヒクル（５ｍｇ／ｋｇ／日）を５〜９週齢まで経口投与する。群４−ソリスロマイシン１０ｍｇ／ｋｇ。８匹のＮＡＳＨマウスにソリスロマイシンが補充されたビヒクルを１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回（２０ｍｇ／ｋｇ／日）５〜９週齢まで経口投与する。群５−ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ。８匹のＮＡＳＨマウスにソリスロマイシンが補充されたビヒクルを２５ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回（５０ｍｇ／ｋｇ／日）５〜９週齢まで経口投与する。群６−ソリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ。８匹のＮＡＳＨマウスにソリスロマイシンが補充されたビヒクルを５０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回（５０ｍｇ／ｋｇ／日）５〜９週齢まで経口投与する。【表2】
【0214】
実施例。平均体重。ビヒクル群は、屠殺の日に、正常群に比べ、平均体重において著しい減少を示した。群４はビヒクル群に比べ平均体重の著しい減少を示した。屠殺の日に、ビヒクル群と群３、５、または６のいずれかの間で、平均体重の著しい差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、群４における平均体重の減少は用量または試験化合物に関連せず、その代わりに処置群における試験動物の低い数字を反映すると考えられる。
【0215】
実施例。肝重量。ビヒクル群は、正常群に比べ、平均肝重量において著しい増加を示した（ｐ＜０．００１）。平均肝重量は、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇ群の間で肝重量における統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン１０ｍｇ／ｋｇおよび２５ｍｇ／ｋｇ群は、ビヒクル群に比べ、平均肝重量において著しい低減を示した（それぞれ、ｐ＜０．０１およびｐ＜０．００１）。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群に対する肝重量は、数値的に正常群と同様であることが観察される。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は疾患のこの症状に治癒をもたらすと考えられる。
【0216】
実施例。肝臓対身体重量比（図１）。ビヒクル群は、正常群に比べ、平均肝臓対身体重量比において著しい増加を示した（ｐ＜０．００１）。平均肝臓対身体重量比は、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、比における統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群は、ビヒクル群に比べ、平均肝臓対身体重量比において著しい減少を示した（ｐ＜０．０１）。理論に縛られないが、本明細書では、平均肝重量の減少は治療効力を示すと考えられる。
【0217】
【表3】
【0218】
実施例。全血グルコース（図２および表１）。ビヒクル群は、正常群に比べ、全血グルコースレベルにおいて著しい増加を示した（ｐ＜０．００１）。全血グルコースレベルは、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、全血グルコースレベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群は、ビヒクル群に比べ、全血グルコースレベルにおいて著しい減少を示した（ｐ＜０．０５）。加えて、観察された減少は、インスリンの増加を伴わなかった。理論に縛られないが、本明細書では、インスリンの増加なしでの全血グルコースレベルの減少は糖尿病の治療に対する治療効力を示すと考えられる。
【0219】
実施例。血漿ＡＬＴ（表１）。血漿ＡＬＴは、報告によれば、肝臓ダメージの指標である。ビヒクル群における血漿ＡＬＴレベルは、正常群に比べ増加する傾向を示した。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群（群３〜６）の間では、血漿ＡＬＴレベルにおける著しい差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は、ＡＬＴに対して、そうでなければ、望まれない副作用が引き起こされるであろう実質的な影響を有さないと考えられる。
【0220】
実施例。血清カイロミクロン（図３および表１）。ビヒクル群における血清カイロミクロンレベルは正常群に比べ著しく増加した（ｐ＜０．００１）。血清カイロミクロンレベルは、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、血清カイロミクロンレベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群における血清カイロミクロンレベルはビヒクル群に比べ著しく減少した（ｐ＜０．０５）。理論に縛られないが、本明細書では、血清カイロミクロンレベルの減少は、治療効力を示すと考えられる。
【0221】
実施例。血清ＶＬＤＬ−コレステロール（図４および表１）。ビヒクル群における血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルは、正常群に比べ、著しく増加した（ｐ＜０．０５）。血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルは、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群における血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルはビヒクル群に比べ著しく減少した（ｐ＜０．０５）。理論に縛られないが、本明細書では、血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルの減少は、治療効力を示すと考えられる。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群に対する血清ＶＬＤＬ−コレステロールレベルは、数値的に正常群と同様であることが観察される。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は疾患のこの症状に治癒をもたらすと考えられる。
【0222】
実施例。血清ＨＤＬ−コレステロール（図５および表１）。ビヒクル群における血清ＨＤＬ−コレステロールレベルは正常群に比べ著しく増加した（ｐ＜０．０５）。血清ＨＤＬ−コレステロールレベルは増加する用量の関数として上昇傾向にあったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または２５ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、血清ＨＤＬ−コレステロールレベルにおける統計的に有意な差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、血清ＨＤＬ−コレステロールレベルの増加は、治療効力を示すと考えられる。
【0223】
実施例。血清トリグリセリド（図６および表１）。ビヒクル群における血清トリグリセリドレベルは正常群に比べ著しく増加した（ｐ＜０．０５）。血清トリグリセリドレベルは、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、血清トリグリセリドレベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群における血清トリグリセリドレベルはビヒクル群に比べ著しく減少した（ｐ＜０．０１）。理論に縛られないが、本明細書では、血清トリグリセリドレベルの減少は、治療効力を示すと考えられる。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群に対する血清トリグリセリドレベルは、数値的に正常群と同様であることが観察される。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は疾患のこの症状に治癒をもたらすと考えられる。
【0224】
実施例。肝臓トリグリセリド含量（表１）。ビヒクル群における肝臓トリグリセリド含量は正常群に比べ著しく増加した（ｐ＜０．００１）。肝臓トリグリセリド含量は、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群（群３〜６）の間で、肝臓トリグリセリド含量における統計的に有意な差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、肝臓トリグリセリドレベルの減少は、治療効力を示すと考えられる。
【0225】
実施例。血漿インスリン（表１）。ビヒクル群における血漿インスリンレベルは正常群に比べ著しく減少した（ｐ＜０．０１）。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、血漿インスリンレベルにおける統計的に有意な差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物はインスリン非依存性プロセスにより、例えば糖新生を阻害することにより、血糖値を低下させると考えられる。
【0226】
実施例。血漿ＭＩＦ（図７および表１）。ビヒクル群と正常群の間で血漿ＭＩＦレベルにおける著しい差はなかった。血漿ＭＩＦレベルは増加する用量の関数として上昇傾向にあったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇ群のいずれかの間で、血漿ＭＩＦレベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群における血漿ＭＩＦレベルはビヒクル群に比べ著しく増加した（ｐ＜０．０１）。ＭＩＦは、報告によれば、自然免疫の重要な制御因子である。白血球は免疫応答においてＭＩＦを血流中に放出する。循環ＭＩＦは他の免疫細胞上のＣＤ７４に結合し、急性免疫応答を引き起こす。理論に縛られないが、本明細書では、ＭＩＦレベルは炎症発症および／または進行の正の予後および診断指標であると考えられる。加えて、理論に縛られないが、本明細書では、ＭＩＦレベルは線維症、例えば肝線維症発症および／または進行の正の予後および診断指標であると考えられる。加えて、理論に縛られないが、本明細書では、ＭＩＦレベルは、ＨＣＣ発症および／または進行の正の予後および診断指標であると考えられる。特に、低減されたＭＩＦレベルは、報告によれば、ＨＣＣの可能性または存在を示す。加えて、理論に縛られないが、本明細書では、本明細書におけるデータは、本明細書で記載される治療方法は、線維症への進行、またはその発症、例えば肝線維症発症および／または進行を遅延および／または防止することにより、予防的治療において有効であるという結論を支持すると考えられる。加えて、理論に縛られないが、本明細書では、本明細書におけるデータは、本明細書で記載される治療方法は、ＨＣＣへの進行、またはその発症を遅延および／または防止することにより、予防的治療において有効であるという結論を支持すると考えられる。
【0227】
実施例。血漿ＩＬ−２２（表１）。ビヒクル群における血漿ＩＬ−２２レベルは、正常群に比べ、著しく減少した（ｐ＜０．０１）。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で血漿ＩＬ−２２レベルにおける統計的に有意な差はなかった。
【0228】
【表4】
【0229】
実施例。組織学的分析（図８）。本明細書で記載される化合物、例えばソリスロマイシンは、脂肪症の減少、肝細胞風船化の減少、および小葉炎症の減少により測定されるように、ＳＴＡＭマウスのＮＡＳを著しく減少させる。ＮＡＳはＮＡＳＨの活性を評価するための臨床エンドポイントの１つであるので、処置群における観察される変化は、本明細書で記載される化合物は抗ＮＡＳＨ治療薬として臨床的に有効であるという結論を支持する（Ｓａｎｙａｌ ＡＪ． ｅｔ ａｌ．， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ， ２０１１；５４：３４４）。ＨＥで染色した切片の顕微鏡写真を評価する。ビヒクル群由来の肝臓切片は重篤な小滴性および大滴性脂肪沈着、肝細胞風船化および炎症細胞浸潤を示した。これらの観察と一致して、ＮＡＳは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく増加した。群２中の全てのマウス（ビヒクルのみ）がＮＡＳ＞５を有した。ビヒクル群と群３の間で、ＮＡＳにおける統計的に有意な差はなかった。群４〜６は、ビヒクル群と比べてＮＡＳの著しい低減を有し、肝細胞風船化および炎症細胞浸潤において著しい改善を示した。ソリスロマイシン１０ｍｇ／ｋｇおよび２５ｍｇ／ｋｇ群に対するＮＡＳは、ビヒクル群に比べ著しく減少した（それぞれ、ｐ＜０．０１およびｐ＜０．００１）。
【0230】
実施例。シリウスレッド染色（図９および表２）。肝臓のシリウスレッドで染色した切片の顕微鏡写真を評価する。ビヒクル群由来の肝臓切片は、正常群に比べ、肝小葉の中心周囲領域においてコラーゲン沈着の増加を示した。線維化面積のパーセンテージ（シリウスレッド陽性面積）は、正常群に比べ、ビヒクル群において著しく増加した（ｐ＜０．００１）。ビヒクル群に比べ、線維化面積は、群４において減少する傾向を示し、群５および６では著しく減少した。線維化面積は、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇ群の間で、線維化面積における統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群における線維化面積は、ビヒクル群に比べ、著しく減少した（ｐ＜０．０５）。理論に縛られないが、本明細書では、処置群で観察される線維化の中程度の減少は、全ての群における低い全体線維化によると考えられる。長期モデルでは、線維化が疾患モデルにおいてより顕著になるであろう。理論に縛られないが、本明細書では、短期間処置は、未処置対照に比べ、線維化において一貫した改善を示すが、線維化は短期間にわたるそのモデルでは広範ではないと考えられる。しかしながら、長期処置は、未処置対照に比べ、連続する改善を示し、というのも、線維化は時間と共に増加するからである。理論に縛られないが、本明細書では、線維化面積の減少は治療効力を示すと考えられる。
【0231】
【表5】
【0232】
実施例。Ｆ４／８０免疫組織化学（表２）。Ｆ４／８０抗原はマクロファージ限定細胞表面糖タンパク質であり、ここで、染色は、マクロファージに特異的である。Ｆ４／８０−免疫染色切片の顕微鏡写真を評価する。ビヒクル群由来の肝臓切片は、正常群に比べ、肝小葉において、Ｆ４／８０陽性細胞の数およびサイズの増加を示した。Ｆ４／８０陽性面積のパーセンテージは、正常群に比べ、ビヒクル群において著しく増加した（ｐ＜０．００１）。ビヒクル群と群３〜６のいずれかとの間で、Ｆ４／８０陽性マクロファージの面積における著しい差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は、マクロファージに対して、そうでなければ、望まれない副作用が引き起こされるであろう実質的な影響を有さないと考えられる。ソリスロマイシンはマクロファージ集団に影響を与えないことが報告されている。
【0233】
実施例。好中球マーカーとしてのＧｒ−１免疫組織化学（図１０）。Ｇｒ−１−免疫染色切片の顕微鏡写真を評価する。ビヒクル群由来の肝臓切片は、正常群に比べ、肝小葉において浸潤Ｇｒ−１陽性細胞の増加を示した。全ての用量のソリスロマイシン処置群において、Ｇｒ−１陽性細胞はビヒクル群に比べ減少した。本明細書で記載されるように、化合物はマクロファージを阻害する、またはＴＮＦα発現を媒介するのいずれかにより好中球浸潤を減少させるとは考えられない。理論に縛られないが、本明細書では、好中球浸潤の減少は、例えば、肝臓および肺疾患の両方において治療効力を示すと考えられる。
【0234】
実施例。ＣＫ−１８免疫組織化学。ＣＫ−１８−免疫染色切片の顕微鏡写真を評価する。ビヒクル群由来の肝臓切片は、正常群に比べ、変性肝細胞において、ＣＫ−１８に対する強い強度の免疫染色を示した。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、ＣＫ−１８免疫染色の明確な変化はなかった。ＣＫ−１８は肝臓内の主な中間径フィラメントタンパク質である。ＣＫ−１８染色の増加は、肝細胞メージ、とりわけアポトーシスを反映する。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は、ＣＫ−１８免疫組織化学から明らかなように、細胞骨格に対し有害作用を示さないと考えられる。
【0235】
実施例。量的ＲＴ−ＰＣＲ。全ＲＮＡを、ＲＮＡｉｓｏ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ、日本）を使用して、製造者の指示に従い、肝臓試料から抽出する。１μｇのＲＮＡを、４．４ｍＭ ＭｇＣｌ２（Ｒｏｃｈｅ、スイス）、４０Ｕ ＲＮａｓｅ阻害剤（Ｔｏｙｏｂｏ、日本）、０．５ｍＭ ｄＮＴＰ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）、６．２８μＭランダム六量体（Ｐｒｏｍｅｇａ）、５×第一鎖緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａ）、１０ｍＭジチオトレイトール（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および２００Ｕ ＭＭＬＶ−ＲＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む、２０μＬの最終体積の反応混合物を使用して逆転写させる。反応を１時間、３７℃で、続いて５分間９９℃で実施する。リアルタイムＰＣＲを、リアルタイムＰＣＲ ＤＩＣＥおよびＳＹＢＲ ｐｒｅｍｉｘ Ｔａｑ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ）を用いて実施する。相対ｍＲＮＡ発現レベルを計算するために、各遺伝子の発現を、参照遺伝子３６Ｂ４（遺伝子記号：Ｒｐｌｐ０）に対して正規化する。ＰＣＲ−プライマーセットは、共に係属中の米国仮特許出願第６２／０８６，９１１号（その開示は参照により本明細書に組み込まれる）に記載される。
【0236】
実施例。遺伝子発現分析（表３）。ＴＮＦ−α ｍＲＮＡ発現レベルは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0237】
ＭＣＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルは、正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された（ｐ＜０．００１）。ＭＣＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルは、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または２５ｍｇ／ｋｇ群の間で、ＭＣＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇｑ．ｄ．群におけるＭＣＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルは、ビヒクル群に比べ、肝臓内のＭＣＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルにおいて著しい減少を示した（正規化されたビヒクル：１．００±０．４２、ソリスロマイシン：０．６４±０．１４）。本明細書で記載されるように、化合物は、マクロファージを阻害する、またはＴＮＦα発現を媒介することのいずれかにより、ＭＣＰ−１を減少させるとは考えられない。理論に縛られないが、本明細書では、ＭＣＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルの減少は、例えば肝臓および肺疾患の両方において、治療効力を示すと考えられる。
【0238】
ＭＭＰ−９ ｍＲＮＡ発現レベルは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された。ＭＭＰ−９ ｍＲＮＡ発現レベルは、増加する用量の関数として下降線をたどったが、ビヒクル群とソリスロマイシン５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、または２５ｍｇ／ｋｇ群の間で、ＭＭＰ−９ ｍＲＮＡ発現レベルにおける統計的に有意な差はなかった。ソリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．群におけるＭＭＰ−９ ｍＲＮＡ発現レベルは、ビヒクル群に比べ、肝臓のＭＭＰ−９ ｍＲＮＡ発現レベルにおいて著しい減少を示した（正規化されたビヒクル：１．００±０．３４、ソリスロマイシン：０．５９±０．２５）。本明細書で記載されるように、化合物は、マクロファージを阻害する、またはＴＮＦα発現を媒介することのいずれかにより、ＭＭＰ−９を減少させるとは考えられない。理論に縛られないが、本明細書では、ＭＭＰ−９ ｍＲＮＡ発現レベルの減少は、例えば肝臓および肺疾患の両方において、治療効力を示すと考えられる。
【0239】
コラーゲン１型 ｍＲＮＡ発現レベルは、正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、コラーゲン１型 ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。理論に縛られないが、本明細書では、コラーゲン１型 ｍＲＮＡ発現レベルにより証明されるように、本明細書で記載される化合物は、細胞骨格に対し有害作用を示さないと考えられる。
【0240】
α−ＳＭＡ ｍＲＮＡ発現レベルは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、α−ＳＭＡ ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0241】
ＴＩＭＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルは、正常群に比べ、ビヒクル群において上方制御される傾向を示した。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、ＴＩＭＰ−１ ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0242】
ＴＧＦ−β ｍＲＮＡ発現レベルは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、ＴＧＦ−β ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0243】
Ｇｃｋ ｍＲＮＡ発現レベルは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく下方制御された。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、Ｇｃｋ ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0244】
Ｇ６ｐｃ ｍＲＮＡ発現レベルは、正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された（ｐ＜０．００１）（図１０）。Ｇ６ｐｃ ｍＲＮＡ発現レベルは、表３に示されるように、ビヒクル群に比べ、全ての用量のソリスロマイシン群において著しく下方制御された。Ｇ６ｐｃ（グルコース−６−ホスファターゼ）は、Ｄ−グルコース６−リン酸のＤ−グルコースおよびオルトリン酸への加水分解を触媒する、小胞体の膜内在性タンパク質である。Ｇ６ｐｃはグルコースホメオスタシス、糖新生およびグリコーゲン分解の両方における鍵酵素である。理論に縛られないが、本明細書では、Ｇ６ｐｃ ｍＲＮＡ発現レベルの減少は、治療効力を示すと考えられる。理論に縛られないが、本明細書では、データは、本明細書で記載される化合物は糖新生を抑制し、および／または減少させ、そのため、糖尿病の治療で有効であるという結論を支持すると考えられる。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群に対するＧ６ｐｃ ｍＲＮＡ発現レベルは、数値的に正常群と同様であることが観察される。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は疾患のこの症状に治癒をもたらすと考えられる。
【0245】
Ｐｃｋ１ ｍＲＮＡ発現レベルは正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された。ビヒクル群といずれかの用量のソリスロマイシン群の間で、Ｐｃｋ１ ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0246】
ＦＢＰａｓｅ ｍＲＮＡ発現レベルは、正常群に比べ、ビヒクル群において著しく上方制御された（ｐ＜０．００１）（図１１）。ＦＢＰａｓｅ ｍＲＮＡ発現レベルは、表３に示されるように、ビヒクル群に比べ、全ての用量のソリスロマイシン群において著しく下方制御された。ＦＢＰａｓｅ（フルクトースビスホスファターゼ）は糖新生において、フルクトース−１，６−二リン酸をフルクトース６−リン酸に変換し、解糖においてホスホフルクトキナーゼにより触媒される反応の逆転を触媒する。理論に縛られないが、本明細書では、ＦＢＰａｓｅ ｍＲＮＡ発現レベルの減少は、治療効力を示すと考えられる。理論に縛られないが、本明細書では、データは、本明細書で記載される化合物は糖新生を抑制し、および／または減少させ、そのため、糖尿病の治療で有効であるという結論を支持すると考えられる。ソリスロマイシン２５ｍｇ／ｋｇ群に対するＦＢＰａｓｅ ｍＲＮＡ発現レベルは、数値的に正常群と同様であることが観察される。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される化合物は疾患のこの症状に治癒をもたらすと考えられる。
【0247】
Ｇｌｕｔ２ ｍＲＮＡ発現レベルは、ビヒクル群と正常群の間で著しくは異ならなかった。Ｇｌｕｔ２ ｍＲＮＡ発現レベルは、ビヒクル群に比べ、ソリスロマイシン１０ｍｇ／ｋｇ群において下方制御される傾向を示した。ビヒクル群と他のソリスロマイシン群の間で、Ｇｌｕｔ２ ｍＲＮＡ発現レベルにおける著しい差はなかった。
【0248】
【表6】
【0249】
実施例。肉眼的肝臓所見はソリスロマイシン処置により改善される。肝臓を試験動物から取り出し、壁側および内臓側の両方を、呈色および巨視的肉眼所見に対して、視覚的に評価した。正常群に比べて、ビヒクル処置群の肝臓は、色が著しく黄色になった。黄色呈色は一般に肝臓の全ての部分に対して均質であり、壁側および内臓側の両方で同様であった。増加する用量の関数として、ソリスロマイシン処置群の肝臓は、実質的に、色がより黄色でなく、黄色呈色は最高ソリスロマイシン用量ではほぼなかった。最高ソリスロマイシン投与群では、壁側は、正常群とほぼ同じであった。全てのソリスロマイシン処置群では、壁側は、内臓側より、色がわずかにより黄色でなかった。
【0250】
ソリスロマイシン処置は、全血グルコースレベルおよびＮＡＳを著しく減少させ、その抗ＮＡＳＨ効果が確認された。ＮＡＳでは、ソリスロマイシンの用量反応が証明された。というのも、２５ｍｇ／ｋｇ（１日２回）のソリスロマイシンは、１０ｍｇ／ｋｇ（１日２回、ｐ＜０．０１）および５ｍｇ／ｋｇ（ｎ．ｓ．）のソリスロマイシンに比べ、優れた効果を示したからである（ｐ＜０．００１）。しかしながら、血漿インスリンは、ソリスロマイシンには著しくは影響されない。そのため、ソリスロマイシンはインスリン非依存性メカニズムにより高いグルコースを修正する。理論に縛られないが、本明細書では、ソリスロマイシンは糖新生を調節すると考えられる。理論に縛られないが、本明細書では、ソリスロマイシンのグルコース低下効果は、肝臓における糖新生の抑制に起因し、そのため、ソリスロマイシンは糖尿病の治療において有用であると考えられる。理論に縛られないが、本明細書では、ソリスロマイシン処置は、このモデルにおいてグルコースおよび脂質代謝を調節することにより、抗ＮＡＳＨおよび抗線維化効果を有することも考えられる。
【0251】
小葉炎症および肝細胞風船化スコアはソリスロマイシンの抗ＮＡＳＨメカニズムにおける顕著な根本的因子である。Ｆ４／８０およびＣＫ−１８の面積は、試験群間で同様であると考えられるが、好中球の浸潤が、ソリスロマイシンによる処置により低減される。
【0252】
統計的に有意な血糖減少がソリスロマイシン（２５ｍｇ／ｋｇ、ｂ．ｉ．ｄ．および５０ｍｇ／ｋｇ、ｑ．ｄ．）を用いると観察される。統計的に有意な血清トリグリセリドおよびＶＬＤＬ−コレステロールレベルの低減がソリスロマイシン（２５ｍｇ／ｋｇ、ｂ．ｉ．ｄ．）を用いると観察される。
【0253】
肝臓におけるＧ６ｐｃおよびＦＢＰａｓｅ ｍＲＮＡ発現レベルの統計的に有意な低減が、ソリスロマイシン（２５ｍｇ／ｋｇ、ｂ．ｉ．ｄ．）を用いると観察される。ビヒクル処置対照に比べ、より低い用量のいずれに対しても（群３〜５）、ＴＮＦ−α、ＭＭＰ−９、Ｇｃｋ、Ｐｃｋ１、Ｇｌｕｔ２の相対遺伝子発現において著しい差は観察されなかった。ビヒクル処置対照に比べ、より低い用量のいずれに対しても（群３〜５）、線維症制御と関連する遺伝子の相対遺伝子発現（ＴＧＦ−β、コラーゲン１型、α−ＳＭＡ、ＴＩＭＰ−１）において著しい差は観察されなかった。
【0254】
シリウスレッド染色から明らかなように、統計的に有意な線維化の低減がソリスロマイシン（２５ｍｇ／ｋｇ、ｂ．ｉ．ｄ．）を用いると観察される。
【0255】
実施例。肝不全を有するヒトにおけるソリスロマイシンの安全性。ソリスロマイシンは、８００ｍｇもの高さの用量で投与されると、軽度、中度、さらに重度の肝臓障害を有するヒトにおいて耐容性がよいことが決定された。同じ用量が与えられた健康な対照に比べると、安全性において著しい差は観察されなかった。対照的に、他のマクロライド、例えばエリスロマイシンおよびクラリスロマイシンは、報告によれば、肝臓に毒性があり、そのようなものとして肝疾患、およびまたは肝不全を有する宿主動物の治療と適合しない。
【0256】
実施例。肝臓障害を有する被験体におけるソリスロマイシンの安全性および薬物動態。ソリスロマイシンの安全性、薬物動態（ＰＫ）、およびタンパク質結合を、正常な肝機能を有する健康な被験体（年齢、体重、および性別に対して対応）と比べて、軽度、中度、および重度肝臓障害を有する被験体において評価した。軽度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈクラスＡ）、中度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈクラスＢ）、および重度（Ｃｈｉｌｄ−ＰｕｇｈクラスＣ）肝臓障害を有する被験体および正常な肝機能を有する健康な対応対照被験体において、１相、非盲検、複数回投与研究で、評価を実施した。全ての被験体は、第１日に８００ｍｇの１日１回投与、続いて第２日から５日まで４００ｍｇを受けた。
【0257】
３３の被験体を登録した：軽度障害（平均Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈスコア５．６２５）を有する８、中度障害（平均Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈスコア７．３７５）を有する８、重度障害（平均Ｃｈｉｌｄ−Ｐｕｇｈスコア１０．６２５）を有する８、および正常な肝機能を有する９の健康な対照。１の被験体、健康な対照は研究薬物を２回の投与後、発疹のために中断し；全ての他の被験体（ｎ＝３２）は研究を完了した。全体で、肝臓障害コホート（軽度ｎ＝１、中度ｎ＝４、重度ｎ＝４）における治療により発現したＡＥを報告する被験体の数は対照群（ｎ＝４）におけるものと同じくらいであった。最も一般的に報告されるＡＥは軽度下痢および軽度頭痛であった。
【0258】
５日のソリスロマイシン投与後、第８日での肝機能試験におけるベースラインからの平均変化はいずれのコホートにおいても臨床的に有意でなく、コホート間で著しくは異なっていなかった。ＡＬＴ（ＩＵ／Ｌ）では、コホート：対照による平均（±ＳＤ）変化＝２．６±４．４７、軽度＝４．０±８．００、中度＝７．８±６．９２、重度＝６．３±１４．６１。ＡＳＴ（ＩＵ／Ｌ）では、コホート：対照による平均（±ＳＤ）変化＝−０．６±２．９２、軽度＝０．４±５．９３、中度＝０．１±１０．５６、重度＝５．８±２２．４４。直接ビリルビン（ｍｇ／ｄＬ）では、コホート：対照による平均（±ＳＤ）変化＝０．００±０．０５３、軽度＝０．００±０．０７６、中度＝０．０３±０．０４６、重度＝０．０４±０．２０７。任意の肝機能試験におけるベースラインからの個々の変化なしは臨床的に有意であると考えた。
【0259】
第５日でのＰＫパラメータを、肝臓障害コホートと対照群間で比較し、幾何平均比を計算した。【表7】
【0260】
肝臓障害コホートのいずれにおいても、第５日では、蓄積は認められなかったが、半減期（時間）の増加が重度群において観察された（対照＝８．９、軽度＝１０．２、中度＝１０．４、重度＝１５．７）。第５日Ｃｍａｘでは、平均血漿タンパク質結合パーセンテージは、軽度または中度肝臓障害により著しくは影響されなかったが、重度コホートにおいてわずかに低かった。
【0261】
ソリスロマイシンのようなマクロライド抗生物質は、主として、肝臓依存性メカニズムを介して、代謝され、排泄される；この研究は慢性肝疾患を有する患者におけるソリスロマイシンの安全性およびＰＫを評価した。経口投与されたソリスロマイシンのおよそ７８％が吸収されることが観察されている。１５％未満の未変化ソリスロマイシンは糞便中で排泄される。経口投与されたソリスロマイシンの約７０％は肝臓により代謝され、排泄されることもまた、観察されている。したがって、高い肝臓濃度が観察される。ソリスロマイシンを軽度、中度、または重度肝臓障害を有する患者に投与する場合、投与量調整は必要ない。ソリスロマイシンはこの患者集団において耐容性がよく、健康な対照に比べ、安全性における著しい差は、認められなかった。
【0262】
実施例。ブレオマイシン誘発肺損傷。肺炎症を、雌マウスにおいて、ブレオマイシンの単回気管内投与により誘発する。２０匹のマウスを２つの群に分ける。第−２日〜第６日まで、１つの群にビヒクルを投与し、もう一方に試験薬物、例えばソリスロマイシンを経口的に１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与する。マウスにおける１００ｍｇ／ｋｇは、ヒトにおける４５０〜５００ｍｇ、例えば４８０ｍｇ用量に等価であると一般に考えられることが本明細書では理解されるべきである。動物を第７日に屠殺する。
【0263】
病原体を含まない７週齢雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを、ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ（Ｔｏｋｙｏ、日本）から入手し、少なくとも６日順化させる。第０日に、２０匹のマウスを、Ｍｉｃｒｏｓｐｒａｙｅｒ（登録商標）（Ｐｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ、ＵＳＡ）を使用する、５０μＬ／動物の体積の、ブレオマイシン硫酸塩（ＢＬＭ、Ｎｉｐｐｏｎ Ｋａｙａｋｕ、日本）を含む０．９％生理食塩水の単回気管内投与により誘発して肺線維症を発症させる。個々の体重を実験期間中、毎日測定する。マウスの生存、臨床徴候および挙動を毎日、モニタする。
【0264】
この同じモデルは、炎症誘発前、予防的プロトコル、例えばある期間、例として２日間の前処置を用いて実施することができる。
【0265】
実施例。ソリスロマイシンはブレオマイシン誘発肺損傷により引き起こされるマウスにおける炎症を低減させる。肺線維症は、特に、ブレオマイシン（ＢＬＭ）、メトトレキサート、シクロホスファミド、および多くの新しい薬剤を含むレジメンを有する悪性腫瘍のための化学療法を受けた患者の管理において問題となる。これらの患者は、肺感染ならびに肺損傷由来の炎症に感受性が高い。ソリスロマイシンはサイトカイン放出に対する強い効果および優れた抗炎症効果を示すことが発見されている。肺炎症および線維症を防止する能力に対するソリスロマイシンの効果は、ブレオマイシン誘発肺炎症および線維症モデルにおいて説明される。群１（ＢＬＭ−ビヒクル）：１０匹のＢＬＭ誘発肺線維症モデルマウスにビヒクル（カルボキシメチルセルロース）を、１０ｍＬ／ｋｇの体積で１日１回、第−２日（ＢＬＭ投与前２日）から第６日まで経口投与する。群２（ＢＬＭ−ソリスロマイシン）：１０匹のＢＬＭ誘発肺線維症モデルマウスにソリスロマイシンが補充されたビヒクルを、１００ｍｇ／ｋｇの用量で（０．５％メチルセルロース（ｍｅｔｈｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）＋０．２％Ｔｗｅｅｎ８０ビヒクルに溶解）１日１回、第−２日から第６日まで経口投与する。
【0266】
ＢＡＬＦ試料を滅菌ＰＢＳで３回（各０．８ｍＬ）、気管を介して肺をフラッシングすることにより収集した。第１の洗浄を他の２回とは別々に維持した。ＢＡＬＦを１，０００×ｇで３分間４℃にて遠心分離し、上清を収集し、使用まで−８０℃で保存した。第１の画分および洗浄流体の残りの画分由来の細胞ペレットをプールした。ＢＡＬＦの総細胞数を血球計数器によりカウントし、細胞分画をＤｉｆｆ−Ｑｕｉｃｋ（Ｓｙｓｍｅｘ、日本）で染色したサイトスピン調製物により決定した。細胞分画測定を約２００細胞まで実施した。
【0267】
ＢＡＬＦにおけるＭＭＰ−９を、マウス総ＭＭＰ−９ Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ ＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＡ）により定量した。イムノアッセイは０．０７８ｎｇ／ｍＬの検出限界を有した。
【0268】
実施例。病理組織学的分析。１０％中性緩衝ホルマリン中で前固定した右肺組織を切片化し、ヘマトキシリンおよびエオシン（ＨＥ）染色ならびにマッソントリクローム染色のために使用した。肺線維症の程度を、量的組織学的分析のためのＡｓｈｃｒｏｆｔスコア（４）を用いて評価した。
【0269】
実施例。量的ＲＴ−ＰＣＲ。全ＲＮＡを肺試料からＲＮＡｉｓｏ（Ｔａｋａｒａ Ｂｉｏ、日本）を使用して抽出した。１μｇのＲＮＡを、４．４ｍＭ ＭｇＣｌ２（Ｒｏｃｈｅ、スイス）、４０Ｕ ＲＮａｓｅ阻害剤（Ｔｏｙｏｂｏ、日本）、０．５ｍＭ ｄＮＴＰ（Ｐｒｏｍｅｇａ、ＵＳＡ）、６．２８μＭ ランダム六量体（Ｐｒｏｍｅｇａ）、５×第一鎖緩衝液（Ｐｒｏｍｅｇａ）、１０ｍＭジチオトレイトール（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）および２００Ｕ ＭＭＬＶ−ＲＴ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を含む、２０μＬの最終体積の反応混合物を使用して逆転写させた。反応を１時間３７℃で、続いて５分間９９℃で実施した。リアルタイムＰＣＲを、リアルタイムＰＣＲ ＤＩＣＥおよびＳＹＢＲ ｐｒｅｍｉｘ Ｔａｑ（ＴａｋａｒａＢｉｏ）を使用して実施した。相対ｍＲＮＡ発現レベルを計算するために、各遺伝子の発現を、参照遺伝子ＧＡＰＤＨに対して正規化した。
【0270】
任意の日および屠殺の日に、ビヒクル群とソリスロマイシン群の間で、体重変化における著しい差はなかった。
【0271】
ＢＡＬＦ（気管支肺胞洗浄液）の分析。ＢＡＬＦ中の細胞を血球計数器によりカウントし、細胞分画をＤｉｆｆ−Ｑｕｉｋ（Ｓｙｓｍｅｘ、日本）で染色したサイトスピン調製物において決定する。ＢＡＬＦ由来の上清中のＭＭＰ−９を酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ；Ｃａｔ＃ＭＭＰＴ９０、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＡ）により定量する。肺切片に対する病理組織学的なアッセイを標準方法に従い実施する。マッソントリクローム染色およびＡｓｈｃｒｏｆｔスコアの推定は、ＨＥ染色を含む。肺由来の全ＲＮＡを使用する遺伝子発現アッセイは、ＴＮＦ−α、ＭＣＰ−１およびＭＭＰ−９に対して実施されるリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ分析を用いて得られる。
【0272】
気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中の細胞の総数、とりわけリンパ球、好中球および好酸球の総数は、ビヒクル群に比べ、ソリスロマイシン群において著しく減少する。ＢＡＬＦビヒクル群とソリスロマイシン群の間で、マクロファージの数における著しい差はなかった。ＭＭＰ−９レベルはソリスロマイシン群において減少傾向を示す（Ｐ＜０．１）。
【0273】
実施例。組織学的分析：マッソントリクローム染色およびＡｓｈｃｒｏｆｔスコア。ビヒクル群において、マッソントリクローム染色は肺の間質腔における限局性線維化病変を明らかにした。ビヒクル群とソリスロマイシン群の間で、Ａｓｈｃｒｏｆｔスコアにおける著しい差はなかった（ビヒクル：１．６±０．２、ソリスロマイシン：１．４±０．５）。
【0274】
実施例。ＨＥ−染色。ビヒクル群において、ＨＥ染色は、肺胞壁肥厚、肺胞腔の崩壊および閉塞を伴うびまん性肺胞破壊、ならびに肺の肺胞および間質腔における炎症細胞浸潤を明らかにした。ビヒクル群とソリスロマイシン群の間で、肺胞壁肥厚、びまん性肺胞破壊および炎症細胞浸潤における明らかな差はなかった。
【0275】
実施例。ビヒクルまたはソリスロマイシン５０ｍｇ／ｋｇ ｑ．ｄ．で処置したマウスのＢＡＬＦ分析【表8】
【表9】
【0276】
理論に縛られないが、本明細書では、線維症に関する、本明細書で記載される化合物の効力は、少なくとも一部はそれらの、好中球数、ＭＭＰ−９発現、および／またはＭＣＰ−１発現の１つ以上を減少させる能力によるものであり得ると考えられる。ＭＣＰ−１およびＭＭＰ−９は、炎症細胞の動員に関与する。理論に縛られないが、本明細書ではまた、効力はマクロファージ阻害またはＴＮＦα発現の減少に依存しないと考えられる。理論に縛られないが、本明細書ではまた、線維症に関する、本明細書で記載される化合物の効力は、少なくとも一部はそれらの、ＴＮＦα発現を増加させる能力によるものであり得ると考えられる。ＴＮＦαは、炎症細胞のアポトーシスを誘導することにより疾患発症を阻止することが報告されている（Ｒｏｄｖｏｌｄ， Ｋ．Ａ．， Ｍ．Ｈ． Ｇｏｔｆｒｉｅｄ， Ｊ．Ｇ． Ｓｔｉｌｌ， Ｋ． Ｃｌａｒｋ， ａｎｄ Ｐ． Ｆｅｒｎａｎｄｅｓ． “Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｐｌａｓｍａ， ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｌｉｎｉｎｇ ｆｌｕｉｄ， ａｎｄ ａｌｖｅｏｌａｒ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｓｏｌｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ ｉｎ ｈｅａｌｔｈｙ ａｄｕｌｔ ｓｕｂｊｅｃｔｓ． Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ． ２０１２；５６：５０７６−５０８１）。
【0277】
本明細書で記載される化合物による処置で、ＢＡＬＦにおける炎症細胞の低減が得られる。１つの有効なエンドポイントはより低い白血球数である。ソリスロマイシン処置は、肺においてＴＮＦ−α発現を上方制御し、これにより、炎症細胞のアポトーシスが誘導され得る。結果から、本明細書で記載される化合物は、宿主動物における肺線維症の疾患進行および発症を防止するのに有益であろうことが示唆される。
【0278】
実施例。培養細胞に対する硫黄マスタード（ＳＭ）毒性およびラットにおける吸入毒性。麻酔されたラットを蒸気吸入によりＳＭに気管内曝露させる。ラットを、試験薬物を用いて、例えば１０、２０、または４０ｍｇ／ｋｇの用量で、曝露１時間前に、その後、２４時間毎に処置する。１、３、または７日の試験薬物による処置後、ＳＭにより引き起こされる症状を評価する。１つの有効なエンドポイントは、ＳＭ誘発細胞毒性からの気道上皮細胞およびマクロファージに対する保護効果である。効果を病理組織診断により確認する。別の有効なエンドポイントは、処置群における気管の用量依存的保護である。動物モデルの追加の詳細は、一般にＧａｏ（２００７）およびＧａｏ（２０１１）に記載される。
【0279】
実施例。ＦＸＲシグナル経路。本明細書で記載される化合物の治療効力は、ＦＸＲシグナル経路に依存しない。ソリスロマイシンを、ハイブリッドＦＸＲ受容体を発現するレポーター細胞アッセイにおいて試験する（Ｉｎｄｉｇｏ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、ＰＡ）。アゴニストおよびアンタゴニスト活性を測定する。ソリスロマイシンを３０μＭで開始して、１：３希釈を続けて試験する。ソリスロマイシン（ＣＥＭ−１０１）は、驚いたことに、ヒトＦＸＲアッセイにおいて、アゴニスト活性も、著しいアンタゴニスト活性も示さないことが見出された。ソリスロマイシンはアンタゴニストアッセイにおいて、細胞毒性の証拠を示さない。理論に縛られないが、本明細書では、本明細書で記載される疾患の治療における活性のためのＦＸＲ経路への依存により、望まれない副作用としてトリグリセリド（ＴＧ）および低密度脂質（ＬＤＬ）の増加が引き起こされ得ると考えられる。例えば、様々な形態のＦＬＤを有する患者は心血管疾患のリスクを有する可能性があり、これはトリグリセリドおよび低密度脂質の増加により悪化し得る。
【0280】
実施例。本明細書で記載される化合物、例えばソリスロマイシンは、高い心血管疾患リスクを有する宿主動物の治療において有効である。予想外に、経口または静脈内のいずれかにより投与されると、ソリスロマイシンはＱＴまたはｔＱＴ延長、または他の負のＱＴ効果を示さないことが見出されている。ＰＫ分析により、ソリスロマイシンは、２０００〜３０００ｎｇ／ｍＬもの高さの血漿レベルに達したことが示された。対照的に、エリスロマイシン、クラリスロマイシン、アジスロマイシン、およびテリスロマイシンの各々はＱＴ陽性であることが報告されている。
【0281】
実施例。嫌気性腸内細菌の感受性．本明細書で記載される化合物はグラム陰性腸内物、例えば腸内細菌科、グラム陰性嫌気性菌、またはエンドトキシン産生細菌に影響を与えず、および腸フローラにわずかな影響を与える。【表10】
【0282】
化合物例【化8】
【化9】
【0283】
下記刊行物、および本明細書で引用される追加の刊行物の各々は参照により本明細書に組み込まれる：Ｇａｏ Ｘ， Ｒａｙ Ｒ， Ｘｉａｏ Ｙ， Ｂａｒｋｅｒ ＰＥ， Ｒａｙ Ｐ． Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｌｆｕｒ ｍｕｓｔａｒｄ−ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｂｙ ｔｈｅ ｍａｃｒｏｌｉｄｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｒｏｘｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ． ＢＭＣ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２００７， ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｍｅｄｃｅｎｔｒａｌ．ｃｏｍ／１４７１−２１２１／８／１７
Ｇａｏ Ｘ， Ａｎｄｅｒｓｏｎ ＤＲ， Ｂｒｏｗｎ ＡＷ， Ｌｉｎ Ｈ， Ａｍｎｕａｙｓｉｒｉｋｕｌ Ｊ， Ｃｈｕａ ＡＬ， Ｈｏｌｍｅｓ ＷＷ， ａｎｄ Ｒａｙ Ｐ． Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａ ｍａｃｒｏｌｉｄｅ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ， ｒｏｘｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ， ａｇａｉｎｓｔ ｓｕｌｆｕｒ ｍｕｓｔａｒｄ ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ． Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｐａｔｈｏｌ ２０１１； ３９： １０５６−１０６４． ＤＯＩ： １０．１１７７／０１９２６２３３１１４２２０７９