特許 6556861 アリーロキシ又はヘテロアリーロキシ置換の５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジン化合物、その製造方法及び医薬の使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6556861

(24)【登録日】2019年7月19日

(45)【発行日】2019年8月7日

(54)【発明の名称】アリーロキシ又はヘテロアリーロキシ置換の５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジン化合物、その製造方法及び医薬の使用

(51)【国際特許分類】

   C07D 471/04 20060101AFI20190729BHJP

   A61K 31/4375 20060101ALI20190729BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20190729BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20190729BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20190729BHJP

   A61P 7/06 20060101ALI20190729BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20190729BHJP

【ＦＩ】

   C07D471/04 113

   C07D471/04CSP

   A61K31/4375

   A61P43/00 111

   A61P19/02

   A61P29/00 101

   A61P7/06

   A61P1/04

   A61P29/00

【請求項の数】26

【全頁数】51

(21)【出願番号】特願2017-551697(P2017-551697)

(86)(22)【出願日】2015年12月14日

(65)【公表番号】特表2018-513144(P2018-513144A)

(43)【公表日】2018年5月24日

(86)【国際出願番号】CN2015097244

(87)【国際公開番号】WO2016155357

(87)【国際公開日】20161006

【審査請求日】2017年11月21日

(31)【優先権主張番号】201510140858.2

(32)【優先日】2015年3月27日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】517340035

【氏名又は名称】瀋陽三生製薬有限責任公司

【氏名又は名称原語表記】ＳＨＥＮＹＡＮＧ ＳＵＮＳＨＩＮＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ．， ＬＴＤ．

(74)【代理人】

【識別番号】100103894

【弁理士】

【氏名又は名称】家入 健

(72)【発明者】

【氏名】周雲隆

(72)【発明者】

【氏名】蔡遂雄

(72)【発明者】

【氏名】王光鳳

(72)【発明者】

【氏名】焦玲玲

(72)【発明者】

【氏名】閔平

(72)【発明者】

【氏名】景羽

(72)【発明者】

【氏名】郭明

【審査官】 早乙女 智美

(56)【参考文献】

【文献】 中国特許出願公開第１０３６９４１７２（ＣＮ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００９／０７５８２６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１３／１３４６６０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００６−５２７２００（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２００９／０１１１８０６（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特表２０１２−５００８０２（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ ４７１／０２

Ｃ０７Ｄ ４７１／０４

Ａ６１Ｐ ７／０６

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記化学式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容可能な塩であって、

【化1】

（Ｉ）
そのうち、Ｒ２、Ｒ３は、それぞれ独立した水素であり、Ｒ１は水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ａｒはナフタレン環、ピリジン環、チオフェン環、フラン環及び置換若しくは非置換のベンゼン環から選択される芳香環又はヘテロ芳香環であり、
前記置換若しくは非置換のベンゼン環は、下記化学式（ＩＩ）に示す構造を有し、

【化2】

（ＩＩ）
そのうち、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、水素、Ｃ１〜Ｃ７アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、ハロゲンによって任意に置換されるＣ１〜Ｃ３アルコキシ、ハロゲンによって任意に置換されるＣ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ及びフェニルからなる群からそれぞれ独立に選択される、
上記化学式（ＩＩ）中のＲ６、Ｒ７によって下記構造の環を形成することができ、

【化3】

そのうち、ｎは１、２、３又は４の整数であり、Ａ１及びＡ２は、酸素、炭素及び窒素原子からそれぞれ独立に選択される、化合物又はその薬学的に許容可能な塩。

【請求項2】

前記薬学的に許容可能な塩は、塩基付加塩である、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。

【請求項3】

前記化合物は、下記化学式（ＩＩＩ）に示す構造を有し、

【化4】

（ＩＩＩ）
そのうち、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、水素、Ｃ１〜Ｃ７アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、ハロゲンによって任意に置換されるＣ１〜Ｃ３アルコキシ、ハロゲンによって任意に置換されるＣ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ及びフェニルからなる群からそれぞれ独立に選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。

【請求項4】

前記化合物は、下記化学式（ＩＶ）に示す構造を有し、

【化5】

（ＩＶ）
そのうち、ｎは１、２、３又は４の整数であり、Ａ１及びＡ２は、酸素、炭素及び窒素原子からそれぞれ独立に選択される、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。

【請求項5】

前記化合物は、下記化学式６〜１９に示す化合物からなる群より選択される化合物である、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩。

【化6】

【化7】

【化8】

【化9】

【化10】

【化11】

【化12】

【化13】

【化14】

【化15】

【化16】

【化17】

【化18】

及び

【化19】

【請求項6】

請求項１に記載の化合物の製造方法であって、下記ステップ１〜ステップ６を含み、
ステップ１：２，６−ジクロロピリジン−３−ギ酸メチルと相応の置換芳香フェノール（ＡｒＯＨ）をアルカリ性条件、特定触媒の存在下で反応させ、下記エーテル中間体（ＩＶ）を生成し、

【化20】

ステップ２：ステップ１で得られたエーテル中間体（ＩＶ）とＲ_１ＣＨ２ＭｇＢｒを用い
て触媒の存在下で塩素原子をアルキル基に置換させ、下記２，６−二置換ピリジン−３−ギ酸メチル中間体（Ｖ）を生成し、

【化21】

ステップ３：ステップ２で得られた中間体（Ｖ）の２位メチル又はメチレン基を臭素化して、臭化物中間体（ＶＩ）を生成し、

【化22】

ステップ４：ステップ３で得られた中間体（ＶＩ）をＮ−トシルグリシンメチルエステルを用いて置換させ、ｐ−トルエンスルホニル中間体（ＶＩＩ）を生成し、

【化23】

ステップ５：ステップ４で得られた中間体（ＶＩＩ）をアルカリ性条件下で環化させ、５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジンギ酸メチル中間体（ＶＩＩＩ）を生成し、

【化24】

ステップ６：ステップ５で得られた中間体（ＶＩＩＩ）をグリシンと反応させて通式（Ｉ
）の化合物を生成し、
そのうち、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＡｒは請求項１に記載のＲ１、Ｒ２，Ｒ３及びＡｒと同じである、製造方法。

【請求項7】

前記ステップ１において、アルカリ性条件とは塩基としてトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンを加えることで実現され、触媒は１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン、Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミンであり、溶媒はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドであり、
前記ステップ２において、触媒は１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリドであり、前記反応溶媒はテトラヒドロフラン、ジオキサンから選ばれ、反応温度は０℃〜５０℃であり、
前記ステップ３において、臭素化試薬としてＮ−ブロモスクシンイミド、ジブロモヒダントイン、臭化銅（Ｉ）、液体臭素を使用し、臭素化反応の開始剤はアゾビスイソニトリル、過酸化ベンゾイルから選択され、臭素化反応の溶媒はテトラクロロメタン、ジクロロメタン及びクロロホルムから選択され、
前記ステップ４において、塩基は炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸ナトリウムから選択され、反応溶媒はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシドから選択され、反応温度は２０℃〜８０℃であり、
前記ステップ５において、アルカリ性条件とは塩基としてナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔ−ブトキシド、ナトリウムｔ−ブトキシドを加えることで実現され、反応溶媒はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、テトラヒドロフランから選択され、反応温度は０℃〜４０℃であり、好ましい反応時間は０．５時間〜３時間であり、
前記ステップ６において、アルカリ性条件は塩基としてナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔ−ブトキシド、ナトリウムｔ−ブトキシドを加えることで実現され、反応溶媒はメタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノールから選択され、反応温度は８０℃〜１４０℃である、請求項６に記載の製造方法。

【請求項8】

医薬組成物であって、
治療有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩、及び薬学的に許容可能な担体を含む、医薬組成物。

【請求項9】

ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼを阻害するための医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用。

【請求項10】

内因性ＥＰＯの生成を促進するための医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用。

【請求項11】

低酸素誘導因子αを安定させるための医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用。

【請求項12】

慢性疾患相関性貧血を治療するための医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用。

【請求項13】

前記慢性疾患相関性貧血がリウマチ性関節炎、リウマチ熱又は炎症性腸疾患である、請求項１２に記載の使用。

【請求項14】

炎症性サイトカインの生成を促進するための医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用。

【請求項15】

前記炎症性サイトカインが腫瘍壊死因子、インターロイキン、又はインターフェロンである、請求項１４に記載の使用。

【請求項16】

貧血対象に対して外部からエリスロポエチンを投与する際の抵抗性を改善する医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用であって、
前記化合物の投与によって造血前駆細胞のエリスロポエチンに対する応答を改善する、使用。

【請求項17】

鉄摂取、鉄輸送及び鉄利用率向上に必須な因子の生成を促進するための医薬品の製造における、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩の使用であって、
前記因子として赤芽細胞アミノレブリン酸シンターゼ、トランスフェリン、トランスフェリン受容体及びセルロプラスミンからなる群から選択される、使用。

【請求項18】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼを阻害する方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項19】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、内因性ＥＰＯの生成を促進する方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項20】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、低酸素誘導因子αを安定させるための方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項21】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、慢性疾患相関性貧血を治療するための方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項22】

前記慢性疾患相関性貧血がリウマチ性関節炎、リウマチ熱又は炎症性腸疾患である、請求項２１に記載の方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項23】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、炎症性サイトカイン生成を促進する方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項24】

前記炎症性サイトカインが腫瘍壊死因子、インターロイキン又はインターフェロンである、請求項２３に記載の方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項25】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与すること含み、
前記投与によって造血前駆細胞のエリスロポエチンに対する応答を改善する、貧血対象に対して外部からエリスロポエチンを投与する際の抵抗性を改善する方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【請求項26】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含み、
前記投与によって鉄摂取、鉄輸送及び鉄利用率向上に必須な因子の生成を促進し、
前記因子として赤芽細胞アミノレブリン酸シンターゼ、トランスフェリン、トランスフェリン受容体及びセルロプラスミンからなる群から選択される、鉄摂取、鉄輸送及び鉄利用率向上に必須な因子の生成を促進する方法（但し、ヒトに対する医療行為を除く）。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は医薬品の分野に関する。具体的には、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼに対して阻害作用を示す新規なアリーロキシ又はヘテロアリーロキシ置換の５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジン化合物、その製造方法及び医薬用途に関する。

【背景技術】

【0002】

低酸素誘導因子（ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ，ＨＩＦ）は、塩基性ヘリックス−ループ−ヘリックス（ｂａｓｉｃ ｈｅｌｉｘ−ｌｏｏｐ−ｈｅｌｉｘ，ｂＨＬＨ）及びＰＡＳ（Ｐｅｒ／Ａｒｎｔ／Ｓｉｍ）を含む活性化転写因子であり、生物細胞内において一連の遺伝子調節を経て細胞の低酸素状態に適応するものである（Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｒ．，Ｈａｒｄｙ，Ａ及びＳｃｈｏｆｉｅｌｄ，Ｃ．Ｊ．，人体酸素感知装置及びその操作（Ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｏｘｙｇｅｎ ｓｅｎｓｉｎｇ ｍａｃｈｉｎｅｒｙ ａｎｄ ｉｔｓ ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ）、Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．，２００８，３７，１３０８〜１３１９頁；Ｋａｅｌｉｎ，Ｗ．Ｇ．，Ｊｒ．，及びＲａｔｃｌｉｆｆｅ，Ｐ．Ｊ．，後生動物による酸素センサー：ＨＩＦヒドロキシラーゼ経路における中心的役割（Ｏｘｙｇｅｎ ｓｅｎｓｉｎｇ ｂｙ ｍｅｔａｚｏａｎｓ：ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ＨＩＦ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ ｐａｔｈｗａｙ）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ，２００８，３０，３９３〜４０２頁；Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ，Ｃ．Ｊ．，及びＲａｔｃｌｉｆｆｅ，Ｐ．Ｊ．，ＨＩＦヒドロキシラーゼを利用する酸素センサー（Ｏｘｙｇｅｎ ｓｅｎｓｉｎｇ ｂｙ ＨＩＦ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅｓ）Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．，２００４，５，３４３〜３５４頁）。

【0003】

１９９２年、Ｗａｎｇらがエリスロポエチン（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｎｔｉｎ，ＥＰＯ）の研究を行った際に、細胞が低酸素状態になるとＥＰＯ生成を促進する活性化転写因子を発見し、後に該因子を低酸素誘導因子（以下、「ＨＩＦ」とも略称する）と名づけた。ＨＩＦは、細胞の低酸素状態における適応性と生存率に極めて重要であり、細胞の酸素量が通常の２０％から１％に低下した場合であっても、ＨＩＦの作用下では細胞が生き残ることが、後の研究により実証されている。

【0004】

ＨＩＦはＨＩＦ−ａ及びＨＩＦ−ｂの２つの単位で構成され、ＨＩＦ−ａは酸素依存性の分解ドメイン（ｏｘｙｇｅｎ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ｄｏｍａｉｎ，ＯＤＤＤ）を含み、当該ドメインは細胞の酸素量に応答するために必須な構成単位である。ＨＩＦ−ａはＨＩＦ−ｂと安定なダイマーを形成することができ、当該ダイマーが細胞核内に移行して糖代謝関連酵素、ＧＬＵＴ−１、エリスロポエチン、及び血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）等といった重要な酵素又は酵素系の発現を促し、細胞が低酸素状態に適応できるようにする。ＨＩＦ−ｂはアリール炭化水素受容体核内輸送体（ａｒｙｌ ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ ｎｕｃｌｅａｒ ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｏｒ，ＡＲＮＴ）の一種であり、ＨＩＦ−ａと結合してヘテロダイマーを形成し、下流遺伝子の転写を促進する。

【0005】

現在、ＨＩＦ−１ａ、ＨＩＦ−２ａ、ＨＩＦ−３ａの３種類のＨＩＦ−ａサブタイプが発見されている。ＨＩＦ−１ａは１９９５年にＷａｎｇらによって同定されたＨＩＦ−ａサブタイプであり、ヒト及びマウスの複数箇所で発現する。ＨＩＦ−２ａは１９９７年に単離、同定され、タンパク質配列がＨＩＦ−１ａと４８％の類似性を示すと共に、ＨＩＦ−１ａと類似した機能を果たし、肺、内皮細胞及び頸動脈のみに発現する。ＨＩＦ−３ａは最近になって新たに発見されたＨＩＦ−ａサブタイプであり、当該サブタイプに関する研究は未だに不十分である。

【0006】

細胞内におけるＨＩＦ−ａの発現は酸素含有量の影響を受けないが、通常の酸素量においても、細胞内におけるＨＩＦ−ａの半減期は５分程度であり、安定に存在することができない。ＨＩＦ−ａは低酸素状態においてのみ安定に存在し、下流の転写因子を活性化する役割を果たすことができる。一方、酸素量が通常である細胞内において、ＨＩＦ−ａのＯＤＤＤ内における４０２位及び５６４位の２つのプロリン残基はプロリルヒドロキシラーゼによって４−ヒドロキシプロリンに酸化される。そのため、２つのプロリン残基は、ＨＩＦ−ａとＨＩＦ−ｂとによるダイマー形成を阻害すると同時に、ｐＶＨＬタンパク質と結合して速やかに分解し、低酸素環境に抵抗する機能を失ってしまう。ＨＩＦ−ａの分解過程で重要な役割を果たすプロリルヒドロキシラーゼ（Ｐｒｏｌｙｌ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ、以下、「ＰＨＤ」又は「ＥＧＬＮ」とも略称する）は、２−ケトグルタル酸（２−ｏｘｏｇｌｕｔａｒａｔｅ，２−ＯＧ）依存性の酸素添加酵素である。ＰＨＤは２−ＯＧと二価鉄イオンとを補因子とし、１個の酸素原子をプロリン分子の４位に結合させてヒドロキシプロリンを形成し、同時に２−ＯＧを１分子の二酸化炭素とコハク酸に変換する。２−ＯＧ類似体又は二価ニッケル、コバルト、マンガンイオンは、ＰＨＤによるＨＩＦ−ａプロリン残基の酸化過程に拮抗してＨＩＦ−ａの分解を抑制することができるため、ＨＩＦ−ａとＨＩＦ−ｂとのダイマー形成を促して下流の転写因子を活性化させ、結果として低酸素環境に抵抗する機能を果たすことができる。ＰＨＤは３種のサブタイプに分けられ、それぞれＰＨＤ１、ＰＨＤ２及びＰＨＤ３である。更に、研究によりＰＨＤ１の抑制が骨格筋細胞の衰退の治療に有用であり、虚血状態において筋線維芽細胞を温存することにより炎症性腸疾患と大腸炎を治療することができ、並びに、心臓病及び腎臓病患者の心不全と虚血を治療できることが実証されている。一方、他の２種類のＰＨＤサブタイプについては、その機能において区分があるかどうかは未だに不明である。

【0007】

ＨＩＦの１つの重要な役割は、生体内においてエリスロポエチン（ＥＰＯ）の発現を促進することである。ＥＰＯは、糖タンパク質ホルモンであり、赤血球の増殖、分化、及び成熟を刺激することができる。ＥＰＯは、更に、骨髄の造血機能を刺激して赤血球数を適時且つ効果的に増加させ、血液の酸素運搬能を向上させることができ、同時に、生体の酸素に対する結合、輸送と供給能力を高めて低酸素状態を改善することができる。正常な生理状況において、ＥＰＯは主に腎臓組織で合成されて放出されるため、腎不全患者は体内で正常にＥＰＯを合成できず、常に虚血症状に苦しめられる。ＥＰＯは、２０世紀の８０年代末にＡｍｇｅｎ社によって初めて製品化され、その後に慢性腎不全、エイズ、癌及び化学療法に起因する貧血の治療に利用されるようになっている。現在、ＥＰＯの製造と応用面において大きな進展を成し遂げているが、外因性ＥＰＯの供給応用は依然として幾つかの問題を抱えている。かかる問題として、例えば、１）ＥＰＯの使用費用が高いため、長期使用は患者に相当重い負担を強い、２）ＥＰＯは大分子量の糖タンパク質であるため生体利用度が低く、さらに生体内における半減期が短く、消化管内の酵素系によって分解されやすいといった特徴があり、ＥＰＯ注射によって頻繁に投与せざるを得ず、患者自らが適宜に決めうる服用形態が制限され、患者に不便を感じさせ、３）産業規模で合成したＥＰＯは免疫原性の問題を回避できず、薬品使用に一定のリスクがある等が挙げられる。

【0008】

外因性大分子量のＥＰＯは使用面において上述の多くの問題を抱えているため、低分子量のＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ阻害剤の開発が急務である。したがって、外因性ＥＰＯを使用する代わりに、ＨＩＦ−ａの分解を抑制し、更に生体内における内因性ＥＰＯの生成を促進し、患者により多くの選択肢をもたらすことが期待されている。

【0009】

現在、Ａｋｅｂｉａ社のＡＫＢ−６５４８、Ｆｉｂｒｏｇｅｎ社のＦＧ−４５９２の２種類のＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼが既に第ＩＩ相試験段階に入っている（ＷＯ２０１２１７０３７７Ａ１，ＵＳ２０１０３３１３７４Ａ１，ＵＳ２０１０３０５０９７Ａ１，Ｐ＆ＧＵＳ２００７２９９０８６Ａ１，ＵＳ２００４２５４２１５Ａ１，ＵＳ２００７２９８１０４Ａ１，ＵＳ２００９０８２３５７Ａ１，ＵＳ２０１０１１３４４４Ａ１，ＷＯ２０１３１３４６６０，ＷＯ２０１００５９５５２Ａ１）。

【化1】

【化2】

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

したがって、本発明の１つの目的は、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼを阻害するアリーロキシ又はヘテロアリーロキシ置換の５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジン化合物及びその塩を提供することである。

【0011】

本発明のもう１つの目的は、上記化合物の製造方法を提供することである。

【0012】

また、本発明のもう１つの目的は、上記化合物又はその塩を含んでなる医薬組成物を提供することである。

【0013】

更に、本発明のもう１つの目的は、上記化合物又はその塩の医薬品製造における用途を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0014】

本発明の目的は、以下の技術思想によって実現される。すなわち、下記化学式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容可能な塩であって、

【化3】

（Ｉ）
そのうち、Ｒ２、Ｒ３はそれぞれ独立した水素であり、Ｒ１は水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、Ａｒはナフタレン環、ピリジン環、チオフェン環、フラン環及び置換ベンゼン環から選択される芳香環又はヘテロ芳香環である。

【0015】

Ａｒが置換ベンゼン環である場合、本発明に係る化合物は下記化学式（ＩＩ）で表される構造を有する。

【化4】

（ＩＩ）
そのうち、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７及びＲ８は、水素、Ｃ１〜Ｃ７アルキル、Ｃ１〜３アルコキシ、ハロゲンによって任意に置換されるＣ１〜Ｃ３アルコキシ、ハロゲンによって任意に置換されるＣ１〜Ｃ３アルキル、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ及びフェニルからなる群よりそれぞれ独立に選択される。

【0016】

また、上記化学式（ＩＩ）中のＲ６、Ｒ７によって環を形成した場合、本発明の化合物は下記化学式（ＩＩＩ）で表される構造を有する。

【化5】

（ＩＩＩ）
そのうち、ｎは１、２、３又は４の整数であり、Ａ１及びＡ２は、酸素、炭素及び窒素原子からなる群よりそれぞれ独立に選択される。

【0017】

更に、本発明は、上記化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明に係る化合物の薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明に係る化合物の薬学的に許容可能な塩として、好ましくは、前記化合物と薬学的に許容可能な塩基が反応して生成した薬学的に許容可能な塩基付加塩である。前記薬学的に許容可能な塩基として水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸カリウム、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、ジエタノールアミン、リシン、エタノールアミン、ジエチルアミン、ピペラジン等が挙げられるが、これらに限定されない。

【0018】

本発明において、特に好ましい化合物は、下記表１に示される化合物である。

【0019】

【表1】

【0020】

本発明のもう１つの側面において、上記化学式（Ｉ）で表される化合物の製造方法を提供し、つまり、上記通式（Ｉ）で表される化合物は以下の反応経路を経て合成される。

【0021】

【化6】

【0022】

本発明によると、上記化学式（Ｉ）の化合物の製造方法は以下のステップを含む。

【0023】

ステップ１：２，６−ジクロロピリジン−３−ギ酸メチルと相応の置換芳香フェノール（ＡｒＯＨ）をアルカリ性条件、特定触媒の存在下で反応させ、エーテル中間体（ＩＶ）を生成する。

【0024】

ステップ２：ステップ１で得られたエーテル中間体（ＩＶ）とＲ_１ＣＨ_２ＭｇＢｒを用いて触媒の存在下で塩素原子をアルキル基に置換させ、２，６−二置換ピリジン−３−ギ酸メチル中間体（Ｖ）を生成する。

【0025】

ステップ３：ステップ２で得られた中間体（Ｖ）の２位メチル又はメチレン基を臭素化し、臭化物中間体（ＶＩ）を生成する。

【0026】

ステップ４：ステップ３で得られた中間体（ＶＩ）をＮ−トシルグリシンメチルエステルを用いて置換させ、ｐ−トルエンスルホニル中間体（ＶＩＩ）を生成する。

【0027】

ステップ５：ステップ４で得られた中間体（ＶＩＩ）に対して、アルカリ性条件下でピリジン２位のメチル又はメチレン基を脱プロトン化させて炭素陰イオンを形成し、そして、炭素陰イオンを分子内におけるピリジン環上のカルボメトキシ基に接触させてケトンを形成し、並びに、アルカリ性条件下で速やかにｐ−トルエンスルホニル基を除去することで５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジンギ酸メチル中間体（ＶＩＩＩ）を生成する。

【0028】

ステップ６：ステップ５で得られた中間体（ＶＩＩＩ）をグリシンと反応させて化学式（Ｉ）の化合物を生成する。

【0029】

上記ステップ１において、２，６−ジクロロピリジン−３−ギ酸メチルと相応の置換芳香フェノールをアルカリ性条件、特定触媒の存在下で反応させ、エーテル中間体（ＩＶ）を生成する。このとき、好ましい塩基はトリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンであり、好ましい触媒は１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（「トリエチレンジアミン」とも称する）、Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミンであり、好ましい溶媒はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドである。

【0030】

上記ステップ２において、ステップ１で得られた中間体（ＩＶ）とグリニャール試薬Ｒ_１ＣＨ_２ＭｇＢｒをを用いて特定触媒の存在下で塩素原子をアルキル基に置換させ、２，６−二置換ピリジン−３−ギ酸メチル中間体（Ｖ）を生成する。このとき、好ましい触媒は１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド（以下、「Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２」とも略称する）であり、好ましい反応溶媒としてテトラヒドロフラン、ジオキサン等が挙げられ、好ましい反応温度は０℃〜５０℃である。

【0031】

上記ステップ３において、ステップ２で得られた中間体（Ｖ）のピリジン２位のメチル又はメチレン基をラジカル反応によって臭素化する。このとき、臭素化試薬としてＮ−ブロモスクシンイミド、ジブロモヒダントイン、臭化銅（Ｉ）、液体臭素などが好ましく、臭素化反応の開始剤としてアゾビスイソニトリル（例えば、アゾビスイソブチロニトリル）、過酸化ベンゾイル等が好ましく、臭素化反応の溶媒としてテトラクロロメタン、ジクロロメタン及びクロロホルムが好ましい。反応は還流しながら行い、臭化物中間体（ＶＩ）を生成する。

【0032】

上記ステップ４において、ステップ３で得られた中間体（ＶＩ）を塩基の触媒作用下でＮ−トシルグリシンメチルエステルで置換し、ｐ−トルエンスルホニル中間体（ＶＩＩ）を生成する。このとき、好ましい塩基として炭酸カリウム、炭酸セシウム、炭酸ナトリウムが挙げられ、好ましい反応溶媒としてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド等が挙げられ、好ましい反応温度は２０℃〜８０℃である。

【0033】

上記ステップ５において、ｐ−トルエンスルホニル中間体（ＶＩＩ）をアルカリ性の条件下で分子内環化させ、同時にｐ−トルエンスルホニル基を除去して５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジンギ酸メチル中間体（ＶＩＩＩ）を生成する。このとき、好ましい塩基としてナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムt- ブトキシド、ナトリウムt- ブトキシドが挙げられ、好ましい反応溶媒としてＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、メタノール、エタノール、テトラヒドロフラン等が挙げられ、好ましい反応温度は０℃〜４０℃であり、好ましい反応時間は０．５時間〜３時間である。

【0034】

上記ステップ６において、５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジンギ酸メチル中間体（ＶＩＩＩ）を密閉状態、アルカリ性条件下で加熱してグリシンと反応させ、ギ酸メチルを直接にホルミルアミノアセトキシ基に置き換えて５−ヒドロキシ−１，７−ナフチリジン目的産物（Ｉ）を生成する。このとき、好ましい塩基としてナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムt- ブトキシド、ナトリウムt- ブトキシド等が挙げられ、好ましい反応溶媒としてメタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール等が挙げられ、好ましい反応温度は８０℃〜１４０℃である。

【0035】

本発明のもう１つの側面において、治療有効量で上記化学式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。

【0036】

また、１つの実施形態において、本発明は、治療有効量で上記化学式（ＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。

【0037】

また、もう１つの実施形態において、本発明は治療有効量で上記化学式（ＩＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容可能な塩と、薬学的に許容可能な担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。

【0038】

本発明は、更に化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩のＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼを阻害するための医薬品、並びに、前記化合物の内因性ＥＰＯ生成を促進するための医薬品の製造における用途を提供する。また、本発明は、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物の低酸素誘導因子αを安定させるための医薬品、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物の慢性疾患相関性貧血を治療するための医薬品の製造における用途を提供し、そのうち、前記慢性疾患相関性貧血とはリウマチリウマチ性関節炎、リウマチ熱又は炎症性腸疾患を指す。また、本発明は、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物の炎症性サイトカイン生成を促進するための医薬品の製造における用途を提供し、そのうち、前記炎症性サイトカインとは腫瘍壊死因子、インターロイキン又はインターフェロンを指すものである。また、本発明は、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物の貧血対象に対して外部からエリスロポエチンを投与する際の抵抗性を改善する医薬品の製造における用途を提供し、そのうち、前記化合物の投与によって造血前駆細胞の前記エリスロポエチンに対する応答を改善することができ、また、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物の鉄摂取、鉄輸送及び鉄利用率向上に必須な因子の生成を促進するための医薬品の製造における用途を提供し、そのうち、前記因子として赤芽細胞アミノレブリン酸シンターゼ、トランスフェリン、トランスフェリン受容体、及びセルロプラスミンが挙げられる。

【0039】

本発明は、更に化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することによりＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼを阻害する方法、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与して内因性ＥＰＯの生成を促進する方法、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することにより低酸素誘導因子αを安定させる方法、及び化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与して慢性疾患相関性貧血を治療する方法を提供し、そのうち前記慢性疾患相関性貧血とはリウマチ性関節炎、リウマチ熱又は炎症性腸疾患を指すものである。

【0040】

本発明は、更に化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することにより炎症性サイトカイン生成を促進する方法を提供し、そのうち、前記炎症性サイトカインとは腫瘍壊死因子、インターロイキン又はインターフェロンを指すものである。

【0041】

本発明のもう１つの側面において、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することにより、貧血対象に対して外部からエリスロポエチンを投与する際の抵抗性を改善する方法を提供し，そのうち前記化合物の投与によって造血前駆細胞の前記エリスロポエチンに対する応答を改善することができる。本発明は、更に化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）で表される本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩を投与することにより鉄摂取、鉄輸送及び鉄利用率向上に必須な因子の生成を促進する方法を提供し、そのうち、前記因子として赤芽細胞アミノレブリン酸シンターゼ、トランスフェリン、トランスフェリン受容体及びセルロプラスミンが挙げられる。

【発明を実施するための形態】

【0042】

以下、実施例を挙げて本発明を詳述する。以下の実施例は本発明を例示したに過ぎず、本発明の範囲を制限するものでなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲で種々の変更を加えることが可能である。

【0043】

実施例１：２−（５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化7】

ステップ１：２−クロロ−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル８．８０ｇ（４２．７２ｍｍｏｌ）とフェノール４．０２ｇ（４２．７２ｍｍｏｌ）と、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４５ｍＬとを入れて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン７．８０ｍＬ（５５．５４ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン７２０ｍｇ（６．４１ｍｍｏｌ）を加え、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４時間〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ（２１．３６ｍｍｏｌ）、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、４０ｍＬの水をゆっくり滴下した後、大量の白色固形物が析出するまで室温で更に２時間攪拌した。減圧濾過し、残渣をイソプロパノール：水＝１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃で８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの固形物７．２０ｇを得た。

【0044】

ステップ２：２−エチル−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
１００ｍＬ三口フラスコで脱水処理を行い、アルゴンガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル１．３２ｇ（５ｍｍｏｌ）、Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２１６ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらＥｔＭｇＢｒ濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液１１ｍＬ（１１ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回に分けてゆっくり滴下した後、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−エチル−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの淡黄色油状物１．１９ｇを得た。

【0045】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に２−エチル−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル３．２０ｇ（１２．４５ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド３．５３ｇ（１９．８３ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル３．２５ｇ（１９．８３ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン２０ｍＬを入れて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0046】

ステップ４：２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル４．０８ｇ（１２．１４ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル２．９４ｇ（１２．１４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム３．３５ｇ（２４．２８ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム０．１８ｇ（１．２２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの黄色固形物３．２６ｇを得た。

【0047】

ステップ５：５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ギ酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル５００ｍｇ（１ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド５ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬを滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水を加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出した（５０ｍＬ×２回）した。有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて体積比でジクロロメタン：酢酸エチル＝８０：１の混合液で溶出し、溶媒を留去して５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ギ酸メチルの白色固形物２００ｍｇを得た。

【0048】

ステップ６：２−（５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造。
５０ｍＬの密閉反応管に、順に５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ギ酸メチル２００ｍｇ（０．６５ｍｍｏｌ）、グリシン１４６ｍｇ（１．９５ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬ及びメタノール５ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を順に大量の水、そして少量のメタノールで洗い流し、真空乾燥して２−（５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物１２５ｍｇを得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２８（ｓ，１Ｈ）、１２．８５（ｓ，１Ｈ）、９．１２（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、８．６３（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５７−７．４６（ｍ，３Ｈ）、７．４１−７．２８（ｍ，３Ｈ）、４．０５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．５３（ｓ，３Ｈ）。

【0049】

実施例２：（２−（２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸）の合成

【化8】

ステップ１：２−クロロ−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）、４−フルオロフェノール（１．１２ｇ，１０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１２ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン（１．８０ｍＬ，１３ｍｍｏｌ）を滴下した後、更にトリエチレンジアミン（１６８ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を加え、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で更に０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下した後、大量の白色固形物が析出するまで室温で２時間攪拌した。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、更に５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を２．０７ｇ、収率７３．６７％で得た。

【0050】

ステップ２：２−エチル−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチル１．９０ｇ（６．７５ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド２１ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２、０．０４ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１３ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン１４ｍＬ（１４ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−エチル−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を１．４５ｇ、収率７７．９８％で得た。

【0051】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に２−エチル−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチル（１．４５ｇ，５．２７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．０３ｇ，５．８０ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（０．９５ｇ，５．８０ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0052】

ステップ４：６−（４−フルオロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−フルオロフェノキシ）ニコチン酸メチル（１．６５ｇ，４．６６ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（１．１３ｇ，４．６６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．２９ｇ，９．３２ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（７１ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−フルオロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を１．７９ｇ、収率７４．４３％で得た。

【0053】

ステップ５：２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（４−フルオロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（１．７９ｇ，３．４７ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１０ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．８ｍＬ（４ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を７４０ｍｇ、収率７６５．０４％で得た。

【0054】

ステップ６：２−（２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（３２８ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、グリシン（２２５ｍｇ，３ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０.６ｍＬ（３ｍｍｏｌ）、及びメタノール８ｍＬを加え、１２０℃、密閉状態下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、希塩酸を用いて固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗い流し、真空乾燥して２−（２−（４−フルオロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を１００ｍｇ、収率２７％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２７（ｓ，１Ｈ）、９．１３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．６４（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．５５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４６−７．２８（ｍ，４Ｈ）、４．０４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．５３（ｓ，３Ｈ）。

【0055】

実施例３：（２−（２−（４−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸）の合成

【化9】

ステップ１：２−クロロ−６−（４−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）、４−クロロフェノール（１．５７ｇ，１０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１２ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン（１．８０ｍＬ，１３ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（１６８ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させ、薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテルと酢酸エチルが６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認した。後処理として、順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で更に０．５時間攪拌した。そして、４０ｍＬの水をゆっくり滴下し、大量の白色固形物を析出するまで室温で２時間攪拌した。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（４−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を２．３６ｇ、収率７９．１９％で得た。

【0056】

ステップ２：６−（４−クロロフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（４−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチル２ｇ（６．７１ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド２１ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２、０．０４ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１３ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液１４ｍＬ（１４ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下した後、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−クロロフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を１．６７ｇ、収率８５．２２％で得た。

【0057】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（４−クロロフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（１．６７ｇ，５．７２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．１２ｇ，６．２９ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（１．０３ｇ，６．２９ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0058】

ステップ４：６−（４−クロロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチル（１．９１ｇ，５．１５ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（１．２５ｇ，５．１５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．４２ｇ，１０．３０ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（７８ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−クロロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を１．２０ｇ、収率４３．７３％で得た。

【0059】

ステップ５：２−（４−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（４−クロロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル１．２０ｇ（２．２５ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１０ｍＬを加えて溶かし、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．９ｍＬ（４．５ｍｍｏｌ）滴下して攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整した。ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜ、そしてジクロロメタンで抽出した（５０ｍＬ×２回）。有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（４−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を５３０ｍｇ、収率７１．７７％で得た。

【0060】

ステップ６：２−（２−（４−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（４−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（３５０ｍｇ，１．０２ｍｍｏｌ）、グリシン（２２５ｍｇ，３．０６ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．６ｍＬ（３ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加えた。１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させ、ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認した。後処理として溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるまで希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（４−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を５０ｍｇ、収率１２．１１％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２９（ｓ，１Ｈ）、９．１２（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．６０−７．５８（ｍ，３Ｈ）、７．４７−７．３９（ｍ，２Ｈ）、４．０４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）。

【0061】

実施例４：２−（２−（３−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化10】

ステップ１：２−クロロ−６−（３−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）、３−クロロフェノール（１．２８ｇ，１０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１２ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン（１．８ｍｌ，１３ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（１６８ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で更に０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（３−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を１．７７ｇ、収率５９．４０％で得た。

【0062】

ステップ２：６−（３−クロロフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（３−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチル１．７７ｇ（５．９４ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド１６ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２、０．０３ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液１２ｍｌ（１２ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下した後、更に室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（３−クロロフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を１．５１ｇ、収率８７．０６％で得た。

【0063】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（３−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（３−クロロフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（１．５１ｇ，５．１７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．０１ｇ，５．６９ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（０．９４ｇ，５．６９ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（３−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0064】

ステップ４：６−（３−クロロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（３−クロロフェノキシ）ニコチン酸メチル（１．５４ｇ，４．１５ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（１．００ｇ，４．１５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．１５ｇ，８．３０ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（６３ｍｇ，０．４２ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（３−クロロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を０．５２ｇ、収率２３．５０％で得た。

【0065】

ステップ５：２−（３−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（３−クロロフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（５２０ｍｇ，０．９８ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１０ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．４ｍＬ（２ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整した。ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（３−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を２５０ｍｇ、収率７８．１２％で得た。

【0066】

ステップ６：２−（２−（３−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（３−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（１８０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）、グリシン（１２４ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液（０．４ｍｌ，２ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させ、ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認した。後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（３−クロロフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を３０ｍｇ、収率１４．１３％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．３０（ｓ，１Ｈ）、１２．８３（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．６１−７．５０（ｍ，３Ｈ）、７．４１−７．３５（ｍ，２Ｈ）、４．０５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５５（ｓ，３Ｈ）。

【0067】

実施例５：（２−（５−ヒドロキシ−８−メチル−２−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸）の合成

【化11】

ステップ１：２−クロロ−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）、４−（トリフルオロメチル）フェノール（１．６２ｇ，１０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１２ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン（１．８ｍＬ，１３ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（１６８ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間真空乾燥して２−クロロ−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を１．７５ｇ、５２．８７％で得た。

【0068】

ステップ２：２−エチル−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチル１．７５ｇ（５．２９ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド１６ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２、０．０３ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液１１ｍｌ（１１ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、更に室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−エチル−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を１．４３ｇ、収率８３．２２％で得た。

【0069】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に２−エチル−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチル（１．４３ｇ，４．４０ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（８６２ｍｇ，４．８４ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（７９４ｍｇ，４．８４ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0070】

ステップ４：２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチル（１．４２ｇ，３．５１ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（８５０ｍｇ，３．５１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（９７０ｍｇ，７．０２ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（５３ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を１．０８ｇ、収率５４．２９％で得た。

【0071】

ステップ５：５−ヒドロキシ−８−メチル−２−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）ニコチン酸メチル（３１０ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド５ｍＬを加えて溶かし、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液（０．３ｍｌ，１．５ｍｍｏｌ）を滴下して攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整した。そして、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して５−ヒドロキシ−８−メチル−２−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を１３０ｍｇ、収率６２．７９％で得た。

【0072】

ステップ６：２−（５−ヒドロキシ−８−メチル−２−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に５−ヒドロキシ−８−メチル−２−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（１３０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、グリシン（８１ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液（０．２ｍＬ，１ｍｍｏｌ）、及びメタノール５ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（５−ヒドロキシ−８−メチル−２−（４−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を３２ｍｇ、収率２２．１０％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．３１（ｓ，１Ｈ）、１２．８４（ｓ，１Ｈ）、９．１５（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９４−７．８５（ｍ，２Ｈ）、７．６８−７．５９（ｍ，３Ｈ）、４．０５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）。

【0073】

実施例６：（２−（２−（４−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸）の合成

【化12】

ステップ１：２−クロロ−６−（４−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）、4-ヒドロキシベンゾニトリル（１．２０ｇ，１０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１２ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン１．８０ｍＬ（１３ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（１６８ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加え、溶液が濁った状態から透明になるまで室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（４−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を１．９４ｇ、収率６７．３６％で得た。

【0074】

ステップ２：６−（４−シアノフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（４−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチル１．９４ｇ（６．７４ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド１６ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０３ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液７ｍＬ（７ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、更に室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−シアノフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を１．２３ｇ、収率６４．７５％で得た。

【0075】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（４−シアノフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（１．２３ｇ，４．３６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．８５ｇ，４．８０ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（０．７９ｇ，４．８０ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0076】

ステップ４：６−（４−シアノフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチル（１．３０ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（８７１ｍｇ，３．６０ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（９９４ｍｇ，７．２０ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（５４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−シアノフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を０．８９ｇ、収率４７．２６％で得た。

【0077】

ステップ５：２−（４−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスクに、６−（４−シアノフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（８９０ｍｇ，１．７０ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド８ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．７ｍＬ（３．５ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（４−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を３７０ｍｇ、収率５７．５２％で得た。

【0078】

ステップ６：２−（２−（４−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（４−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（１１０ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、グリシン（７５ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．２ｍＬ（１ｍｍｏｌ）、及びメタノール５ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（４−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を３０ｍｇ、収率２４．１７％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．３１（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．０５−７．９７（ｍ，２Ｈ）、７．６７−７．５９（ｍ，３Ｈ）、４．０４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）。

【0079】

実施例７：２−（２−（３−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化13】

ステップ１：２−クロロ−６−（３−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（３．０９ｇ，１５ｍｍｏｌ）、３−ヒドロキシベンゾニトリル（１．７９ｇ，１５ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１８ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン２．７ｍＬ（６．５ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（２５２ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させ、薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認した。後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で更に２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（３−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を３．５１ｇ、収率８１．２５％で得た。

【0080】

ステップ２：６−（３−シアノフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に加２−クロロ−６−（３−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチル３．５１ｇ（１２．１６ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド３３ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０６ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン２０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液２５ｍｌ（２５ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で攪拌しながら反応０．５時間，薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認した。１３ｍＬの１０％のクエン酸水溶液反応を停止させ、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（３−シアノフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を３．４０ｇ、収率９８．９３％で得た。

【0081】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（３−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（３−シアノフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（３．４０ｇ，１２．０６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２．３６ｇ，１３．２７ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（２．１８ｇ，１３．２７ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン２０ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（３−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0082】

ステップ４：６−（３−シアノフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（３−シアノフェノキシ）ニコチン酸メチル（４．３４ｇ，１２ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（２．９０ｇ，１２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３．３１ｇ，２４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１８０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（３−シアノフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を３．０５ｇ、収率４８．５１％で得た。

【0083】

ステップ５：２−（３−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（３−シアノフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（３．０５ｇ，５．８３ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１５ｍＬを加えて溶かし、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液２．４ｍＬ（１２ｍｍｏｌ）を滴下して攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（３−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を１．８０ｇ、収率９２．１４％で得た。

【0084】

ステップ６：２−（２−（３−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（３−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（２５０ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）、グリシン（１２４ｍｇ，２．２５ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬ（２．２５ｍｍｏｌ）、及びメタノール５ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（３−シアノフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を９０ｍｇ、収率３１．９０％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．３１（ｓ，１Ｈ）、１２．８５（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６８（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２−７．９７（ｍ，１Ｈ）、７．８６−７．６６（ｍ，３Ｈ）、７．６２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５２（ｓ，３Ｈ）。

【0085】

実施例８：２−（２−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化14】

ステップ１：６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（２．０６ｇ，１０ｍｍｏｌ）、４−（ｔ−ブチル）フェノール（１．５０ｇ，１０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１２ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン１．８０ｍＬ（１３ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（１６８ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）を加えた後、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加え、溶液が濁った状態から透明になるまで室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの固形物を２．６０ｇ、収率８１．５０％で得た。

【0086】

ステップ２：６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチル２．６０ｇ（８．１３ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド２２ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０４ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液１７ｍＬ（１７ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、更に室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を２．１９ｇ、収率８５．８５％で得た。

【0087】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（２．１９ｇ，６．９９ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．３７ｇ，７．６９ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（１．２６ｇ，７．６９ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0088】

ステップ４：６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）ニコチン酸メチル（２．４８ｇ，６．３２ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（１．５３ｇ，６．３２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（１．７５ｇ，１２．６４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（９５ｍｇ，０．６３ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水を加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を０．９３ｇ、収率２６．４９％で得た。

【0089】

ステップ５：２−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（９３０ｍｇ，１．６８ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド８ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．７ｍＬ（３．５ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を４２０ｍｇ、収率６８．４８％で得た。

【0090】

ステップ６：２−（２−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（３６０ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、グリシン（１６９ｍｇ，３ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．６ｍＬ（３ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（４−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を１４０ｍｇ、収率３４．８０％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２９（ｓ，１Ｈ）、９．１１（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．５５−７．４５（ｍ，３Ｈ）、７．３４−７．２５（ｍ，２Ｈ）、４．０３（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５８（ｓ，３Ｈ）、１．３４（ｓ，９Ｈ）．

【0091】

実施例９：２−（５−ヒドロキシ−２−（４−メトキシフェノキシ）−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化15】

ステップ１：２−クロロ−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（３．０９ｇ，１５ｍｍｏｌ）、４−メトキシフェノール（１．８６ｇ，１５ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１８ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン２．７ｍＬ（１９．５ｍｍｏｌ）を滴下した後、更にトリエチレンジアミン（２５２ｍｇ，２．２５ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明な溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で更に０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下してから室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの固形物を４．０５ｇ、収率９１．８４％で得た。

【0092】

ステップ２：２−エチル−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチル４．０５ｇ（１３．７９ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド３７ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０７ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン２０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液２８ｍＬ（２８ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下した後、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１の混合液で溶出し、溶媒を留去して２−エチル−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を３．０５ｇ、収率７７．１５％で得た。

【0093】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に２−エチル−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチル（３．０５ｇ，１０．６２ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（２．０８ｇ，１１．６８ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（１．９２ｇ，１１．６８ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0094】

ステップ４：２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチル（３．１８ｇ，８．６９ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（２．１０ｇ，８．６９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．４０ｇ，１７．３８ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１３１ｍｇ，０．８７ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を２．０６ｇ、収率４４．９０％で得た。

【0095】

ステップ５：５−ヒドロキシ−２−（４−メトキシフェノキシ）−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）−６−（４−メトキシフェノキシ）ニコチン酸メチル（２．０６ｇ，３．９０ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１０ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液１．６ｍＬ（８ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して５−ヒドロキシ−２−（４−メトキシフェノキシ）−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を８３０ｍｇ、収率６２．５７％で得た。

【0096】

ステップ６：２−（５−ヒドロキシ−２−（４−メトキシフェノキシ）−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に５−ヒドロキシ−２−（４−メトキシフェノキシ）−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（２７０ｍｇ，０．８０ｍｍｏｌ）、グリシン（１８０ｍｇ，２．４０ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬ（２．５ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（５−ヒドロキシ−２−（４−メトキシフェノキシ）−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を７８ｍｇ、収率２５．６５％で得た。
１Ｈ―ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２７（ｓ，１Ｈ）、１２．８３（ｓ，１Ｈ）、９．１２（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３４−７．２５（ｍ，２Ｈ）、７．０９−６．９８（ｍ，２Ｈ）、４．０４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、３．８１（ｓ，３Ｈ）、２．５５（ｓ，３Ｈ）。

【0097】

実施例１０：２−（２−（４−ブロモフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化16】

ステップ１：６−（４−ブロモフェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（８．２４ｇ，４０ｍｍｏｌ）、４−ブロモフェノール（６．９２ｇ，４０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド５０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン７．２ｍＬ（５２ｍｍｏｌ）を滴下した後、更にトリエチレンジアミン（６７２ｍｇ，６ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して６−（４−ブロモフェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの固形物を１１．４８ｇ、収率８３．９２％で得た。

【0098】

ステップ２：６−（４−ブロモフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に６−（４−ブロモフェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチル１．０３ｇ、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド１０ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０２ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液６ｍＬを０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で更に攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−ブロモフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を７９０ｍｇ、収率７８．０７％で得た。

【0099】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（４−ブロモフェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（４−ブロモフェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（７９０ｍｇ２．３５ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（４６１ｍｇ，２．５９ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（４２５ｍｇ，２．５９ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（４−ブロモフェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0100】

ステップ４：６−（４−ブロモフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（４−ブロモフェノキシ）ニコチン酸メチル（８９０ｍｇ，２．１４ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（５１８ｍｇ，２．１４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５９１ｍｇ，４．２８ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（３２ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１５ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（４−ブロモフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を４２０ｍｇ、収率３３．９４％で得た。

【0101】

ステップ５：２−（４−ブロモフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（４−ブロモフェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（１．１４ｇ，２ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１０ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．８ｍＬ（４ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（４−ブロモフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を５４０ｍｇ、収率７０．２６％で得た。

【0102】

ステップ６：２−（２−（４−ブロモフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（４−ブロモフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（２９０ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）、グリシン（１６９ｍｇ，２．２５ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬ（２．５ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整して溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（４−ブロモフェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を１０８ｍｇ、収率３３．５３％で得た。
１Ｈ―ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２８（ｓ，１Ｈ）、１２．８３（ｓ，１Ｈ）、９．１３（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６５（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４−７．６５（ｍ，２Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．４２−７．３３（ｍ，２Ｈ）、４．０５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５４（ｓ，３Ｈ）。

【0103】

実施例１１：２−（２−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化17】

ステップ１：６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（３．０９ｇ，１５ｍｍｏｌ）、３−（ｔ−ブチル）フェノール（２．２５ｇ，１５ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１８ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン２．７ｍＬ（６．５ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（２５２ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を加えた。そして、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの固形物を３．５３ｇ、収率７３．７７％で得た。

【0104】

ステップ２：６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−クロロニコチン酸メチル３．５３ｇ（１１．０４ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド３２ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０６ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液２２ｍＬ（２２ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１の混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を３．０９ｇ、収率８９．２１％で得た。

【0105】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（３．０９ｇ，９．８６ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．９３ｇ，１０．８５ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（１．７８ｇ，１０．８５ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0106】

ステップ４：６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）ニコチン酸メチル（３．４２ｇ，８．７２ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（２．１１ｇ，８．７２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．４１ｇ，１７．４４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１３１ｍｇ，０．８７ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を１．５５ｇ、収率３２．１０％で得た。

【0107】

ステップ５：２−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（１．５５ｇ，２．８０ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド１０ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液１．２ｍＬ（６ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を６３０ｍｇ、収率６１．６３％で得た。

【0108】

ステップ６：２−（２−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（３６０ｍｇ，１ｍｍｏｌ）、グリシン（１６９ｍｇ，３ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．６ｍＬ（３ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（３−（ｔ−ブチル）フェノキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を１０８ｍｇ、収率２６．８５％で得た。
１Ｈ―ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２８（ｓ，１Ｈ）、１２．８１（ｓ，１Ｈ）、９．１２（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６３（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．５２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４７−７．３８（ｍ，２Ｈ）、７．３７−７．３０（ｍ，１Ｈ）、７．２０−７．１５（ｍ，１Ｈ）、４．０４（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５５（ｓ，３Ｈ）、１．３２（ｓ，９Ｈ）。

【0109】

実施例１２：２−（２−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化18】

ステップ１：２−クロロ−６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）ニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル（３．０９ｇ，１５ｍｍｏｌ）、２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−フェノール（２．２８ｇ，１５ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１８ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン２．７ｍＬ（６．５ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（２５２ｍｇ，０．７５ｍｍｏｌ）を加え、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）ニコチン酸メチルの固形物を４．０５ｇ、収率８４．１１％で得た。

【0110】

ステップ２：６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）ニコチン酸メチル４．０５ｇ（１２．６２ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド３３ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０６ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン２０ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液２５ｍＬ（２５ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を２．６５ｇ、収率６６．６８％で得た。

【0111】

ステップ３：２−（１−ブロモエチル）−６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（２．６５ｇ，８．４１ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．６５ｇ，９．２５ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（１．５２ｇ，９．２５ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン２０ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモエチル）−６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0112】

ステップ４：６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモエチル）−６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）ニコチン酸メチル（３．０６ｇ，７．７７ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（１．８８ｇ，７．７７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．１４ｇ，１５．５４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１１７ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を９１６ｍｇ、収率２１．２１％で得た。

【0113】

ステップ５：２−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（９１６ｍｇ，１．６５ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド８ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．７ｍＬ（３．５ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を２８０ｍｇ、収率４６．１８％で得た。

【0114】

ステップ６：２−（２−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（２８０ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）、グリシン（１７１ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液（０．５ｍｌ，２．５０ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（（２，３−ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキソ−６−イル）オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を１３０ｍｇ、収率４１．５７％で得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．３２（ｓ，１Ｈ）、９．０８（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，１Ｈ）、８．６２（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．４５（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．００−６．９０（ｍ，２Ｈ）、６．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．２９（ｓ，４Ｈ）、３．９９（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．６０（ｓ，３Ｈ）。

【0115】

実施例１３：２−（２−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキソ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化19】

ステップ１：６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に加入２，６−ジクロロニコチン酸メチル（４．１２ｇ，２０ｍｍｏｌ）、［１，１’−ビフェニル］−４−フェノール（３．４０ｇ，２０ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２４ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン３．８ｍＬ（２６ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン（３３６ｍｇ，３ｍｍｏｌ）を加え、透明溶液が濁った状態になるまで室温で攪拌しながら４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−クロロニコチン酸メチルの固形物を５．６６ｇ、収率８３．２４％で得た。

【0116】

ステップ２：６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、窒素ガス雰囲気下で順に６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−クロロニコチン酸メチル３．４０ｇ（１０ｍｍｏｌ）、１，２−ビス(ジフェニルホスフィノ)エタンニッケルクロリド２７ｍｇ（Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２，０．０５ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン１５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらエチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液２０ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えた反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−エチルニコチン酸メチルの淡黄色油状物を２．７８ｇ、収率８３．４８％で得た。

【0117】

ステップ３：６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−（１−ブロモエチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−エチルニコチン酸メチル（２．７８ｇ，８．３４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．６３ｇ，９．１７ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル（１．５０ｇ，９．１７ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン１５ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−（１−ブロモエチル）ニコチン酸メチルの淡黄色油状物を得てそのまま次の反応に用いた。

【0118】

ステップ４：６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−（１−ブロモエチル）ニコチン酸メチル（３．１４ｇ，７．６２ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル（１．８５ｇ，７．６２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．１０ｇ，１５．２４ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１１４ｍｇ，０．７６ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド２０ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチルの淡黄色固形物を０．７４ｇ、収率１６．８９％で得た。

【0119】

ステップ５：２−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、６−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）エチル）ニコチン酸メチル（７４０ｍｇ，１．２９ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド５ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬ（２．５ｍｍｏｌ）を滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチルの白色固形物を２８６ｍｇ、収率５７．５７％で得た。

【0120】

ステップ６：２−（２−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキソ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に２−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキシ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−カルボン酸メチル（２８０ｍｇ，０．７２ｍｍｏｌ）、グリシン（１８０ｍｇ，２．１６ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．５ｍＬ（２．５ｍｍｏｌ）、及びメタノール６ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（２−（［１，１’−ビフェニル］−４−オキソ）−５−ヒドロキシ−８−メチル−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の黄色固形物を７９ｍｇ、収率２５．３９％で得た。
１Ｈ―ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．２９（ｓ，１Ｈ）、１２．８３（ｓ，１Ｈ）、９．１４（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、８．６６（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．８５−７．７０（ｍ，４Ｈ）、７．６１−７．３５（ｍ，６Ｈ）、４．０５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５８（ｓ，３Ｈ）。

【0121】

実施例１４：２−（５−ヒドロキシ−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の合成

【化20】

ステップ１：２−クロロ−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
２５０ｍＬのナス型フラスコに、順に２，６−ジクロロニコチン酸メチル８．８０ｇ（４２．７２ｍｍｏｌ）、フェノール４．０２ｇ（４２．７２ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらトリエチルアミン７．８０ｍＬ（５５．５４ｍｍｏｌ）を滴下し、更にトリエチレンジアミン７２０ｍｇ（６．４１ｍｍｏｌ）を加え、室温で攪拌しながら透明溶液が濁った状態になるまで４〜５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝６：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として順にＨＯＡｃ１．３０ｍＬ（２１．３６ｍｍｏｌ）、イソプロパノール２５ｍＬ、及び氷水１５ｍＬを加えて溶液が濁った状態から透明になるようにし、室温で０．５時間攪拌した。そして、水４０ｍＬをゆっくり滴下して室温で２時間攪拌し、大量の白色固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣をイソプロパノールと水とが１：１の混合溶液で洗浄し、５０℃、８時間かけて真空乾燥して２−クロロ−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの固形物を７．２０ｇ得た。

【0122】

ステップ２：２−メチル−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
１００ｍＬの三口フラスコで脱水処理を行い、アルゴンガス雰囲気下で順に２−クロロ−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル１．３２ｇ（５ｍｍｏｌ）、Ｎｉ（ＤＰＰＥ）Ｃｌ_２１６ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）、及び脱水テトラヒドロフラン５ｍＬを加えて溶かし、室温で攪拌しながらメチルマグネシウムブロマイド濃度１Ｍのテトラヒドロフラン溶液１１ｍＬ（１１ｍｍｏｌ）を０．５時間の間隔で２回分けてゆっくり滴下し、室温で攪拌しながら０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、１０％のクエン酸水溶液１３ｍＬを加えて反応を停止させた。酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−メチル−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの淡黄色油状物を８４０ｍｇ得た。

【0123】

ステップ３：２−（１−ブロモメチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順に２−メチル−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル６５９ｍｇ（２．７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド４３５ｍｇ（４ｍｍｏｌ）、アゾビスイソブチロニトリル４４２ｍｇ（１９．８３ｍｍｏｌ）、及びテトラクロロメタン２０ｍＬを加えて溶かし、還流攪拌しながら２時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝７：１）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が３０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−ブロモメチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの淡黄色油状物１．１ｇを得てそのまま次の反応に用いた。

【0124】

ステップ４：２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）メチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの製造
１００ｍＬのナス型フラスコに、順にステップ３で得られた２−（１−ブロモメチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル１．１ｇ（３．４ｍｍｏｌ）、Ｎ−トシルグリシンメチルエステル５７５ｍｇ（２．３８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム７００ｍｇ、ヨウ化ナトリウム５１ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド６ｍＬを加えて溶かし、５０℃で攪拌しながら１０時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）を用いて原料が殆ど反応していることを確認し、酢酸エチルと水とを加えてよく振り混ぜた後に酢酸エチルで抽出し（５０ｍＬ×３回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて石油エーテルと酢酸エチルとの体積比が４：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）メチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチルの淡黄色固形物７００ｍｇを得た。

【0125】

ステップ５：５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ギ酸メチルの製造
５０ｍＬのフラスコに、２−（１−（Ｎ−（２−メトキシ−２−オキソエチル）−４−メチルフェニルスルホニルアミノ）メチル）−６−フェノキシピリジン−３−ギ酸メチル４８３ｍｇ（１．４５ｍｍｏｌ）、及びジメチルスルホキシド５ｍＬを加えて溶かし、攪拌しながらナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．３２ｍＬを滴下して０．５時間反応させた。薄層クロマトグラフィー（体積比で酢酸エチル：ジクロロメタン＝１：２０）を用いて原料が完全に反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、ジクロロメタンと水とを加えてよく振り混ぜた後にジクロロメタンで抽出し（５０ｍＬ×２回）、有機相を回収して飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濾過し、濾液を粗製シリカゲルと混ぜ合わせ、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてジクロロメタンと酢酸エチルとの体積比が８０：１である混合液で溶出し、溶媒を留去して５−ヒドロキシ−８−メチル−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ギ酸メチルの白色固形物３４０ｍｇを得た。

【0126】

ステップ６：２−（５−ヒドロキシ−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の製造
５０ｍＬの密閉反応管に、順に５−ヒドロキシ−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ギ酸メチル１００ｍｇ（０．３４ｍｍｏｌ）、グリシン７６ｍｇ（０．０２ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド濃度５Ｍのメタノール溶液０．１３ｍＬ、及びメタノール３ｍＬを加え、１２０℃、密閉条件下で攪拌しながら２０時間反応させた。ＬＣＭＳを用いて原料が殆ど反応していることを確認し、後処理として希塩酸を用いて反応液をｐＨ４に調整し、溶液が黄色の懸濁液から透明液、更に黄色の懸濁液となるようにし、固形物を析出させた。減圧濾過し、残渣を大量の水、そして少量のメタノールで洗浄し、真空乾燥して２−（５−ヒドロキシ−２−フェノキシ−１，７−ナフチリジン−６−ホルミルアミノ）酢酸の白色固形物３０ｍｇを得た。
１Ｈ―ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ１３．６２（ｓ，１Ｈ）、１２．８２（ｓ，１Ｈ）、９．３９（ｂｒｓ，１Ｈ）、８．６９（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．５２（ｓ，１Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．５６−７．４７（ｍ，２Ｈ）、７．３８−７．２９（ｍ，３Ｈ）、４．０２（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ）。

【0127】

測定例１：体外におけるＨＩＦ−ＰＨＤ２阻害剤系化合物の肝癌細胞Ｈｅｐ３Ｂのエリスロポエチン発現に対する促進作用
実験用肝癌細胞Ｈｅｐ３Ｂ（中国典型培養物保存センター、ＣＣＴＣＣ）の培養に必要な完全培地として、ＭＥＭ（ＧＩＢＣＯ社製、Ｃａｔ番号ＧＮＭ４１５００、杭州吉諾生物医薬技術有限会社より購入）に１０％血清ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ社製、Ｃａｔ番号１００９９−１４１）及び１％のペニシリン−ストレプトマイシン（Ｃａｔ番号ＧＮＭ１５１４０、杭州吉諾生物医薬技術有限会社より購入）を添加したものを使用し、３７℃かつＣＯ_２５％のインキュベーターを用いて細胞培養を行った。実験用試薬であるジメチルスルホキシド（分子生物学実験用、純度＞＝９９．９％、Ｃａｔ番号Ｄ８４１８）はシグマ社製であり、測定用ＥＬＩＳＡキット（ヒトエリスロポエチン定量用ＩＶＤ ＥＬＩＳＡ、商品コードＤＥＰ００）はＲ＆Ｄシステムズ社製であった。測定用対照物としてＡＫＢ−６５４８は、自ら作製、又は商業ルートを介して購入した。測定試料は、遮光密封して−２０℃に保存した。

【0128】

測定試料及び陽性対照物を遮光条件下で滅菌水又はジメチルスルホキシドに完全に溶かし、それぞれの濃度が１０^−１ｍｏｌ／Ｌ、１０^−２ｍｏｌ／Ｌの保存液を調製して−２０℃に保存した。ＦＢＳ濃度０．５％のＭＥＭ培地を希釈液として前記測定試料の保存液を希釈し、それぞれの濃度が１００μｍｏｌ／Ｌ、１０μｍｏｌ／Ｌの測定用希釈液を調製した。９６ウェルプレートに２００μＬ／ウェル（１．５又は２．０×１０^４細胞／ウェル）の量で肝癌細胞Ｈｅｐ３Ｂの完全培地懸濁液を加え、温度３７℃、ＣＯ_２濃度５％のインキュベーターで一晩培養した。９６ウェルプレート内の古い培地を捨て、細胞をＦＢＳ０．５％のＭＥＭ培地で１回洗浄した後、遮光条件下で２００μＬ／ウェルの量で測定試料を加えてそれぞれの濃度が１００μｍｏｌ／Ｌ、１０μｍｏｌ／Ｌとなるようにし、各濃度は平行して２つのウェルを設けてそれぞれ測定用ウェル及び予備用ウェルとした。また、測定液の代わりに希釈液を加えて細胞対照ウェル（測定試料と溶媒を含まず）とした。また、測定液の代わりに同じ濃度の溶媒（ジメチルスルホキシド）を含む希釈液を用い、溶媒対照ウェル（測定試料を含まず）とした。温度３７℃、ＣＯ_２濃度５％のインキュベーターで２４時間培養した後、上清を捨てサンプルとして−２０℃に冷凍保存した。停止液を１００μＬ／ウェルの量で加えた後、マイクロプレートリーダーを用いてＡ４５０ｎｍ〜Ａ６００ｎｍの範囲でＯＤ値を測定し、検量線に基づいて測定試料のＥＰＯ発現に対する促進活性（ｍＩＵ／ｍＬ）を算出した。測定結果を下記表２に示す。

【0129】

【表2】

【0130】

表２に示すように、陽性対照物であるＦＧ−４５９２に比べて、本発明に係る化合物は、細胞内のＥＰＯ発現に対してより顕著な促進作用を示し、細胞内におけるＥＰＯの発現レベルが陽性対照物であるＦＧ−４５９２の１．５倍以上である場合が殆どであった。

【0131】

測定例２：本発明に係る化合物のＰＨＤ２に対する抑制効果（ＩＣ_５０）の測定
蛍光偏光法（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ，ＦＰ）により低酸素誘導因子ＨＩＦ−１αとＶＢＣ複合体（ｖｏｎ Ｈｉｐｐｅｌ−Ｌｉｎｄａｕ ｐｒｏｔｅｉｎ−ＥｌｏｎｇｉｎＢ−ＥｌｏｎｇｉｎＣ，ＶＢＣ）との相互作用を測定し、ＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ（ｐｒｏｌｙｌ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅｓ２，ＰＨＤ２）阻害剤化合物の酵素抑制活性を測定した。

【0132】

アスコルビン酸２００μＭ、α−ケトグルタル酸２０μＭ、及びＦｅＣｌ_２１００μＭを含むＮＥＴＮ（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１００ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、０．５％ ＮＰ−４０、１ｍＭ ＰＭＳＦ）緩衝液に、遮光条件下において終濃度が１μＭになるようにＦＡＭ−ＨＩＦ（５５６−５７５）を加えた。そして、所定濃度の測定化合物及び陽性化合物（陰性対照及び陽性対照として化合物の代わりに緩衝液を用いる）を加え、最後に終濃度が０．５μｇ／μＬになるようにＰＨＤ２（陰性対照としてＰＨＤ２の代わりに緩衝液を用いる）を加えた。よく混ぜ合わせて室温、遮光状態にて静置することにより３０分間反応させた後、９５℃の湯浴に１分間置いて反応を停止させた。温度が室温に戻るまで待ち、試料を次の測定に備えて一時保存した。黒色の９６ウェルプレートにＥＢＣ緩衝液（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１２０ｍＭ ＮａＣｌ、０．５％ ＮＰ−４０）を加え、更に終濃度が３００ｎＭのＧＳＴ−ＶＢＣ複合体（ブランク対照としてウェルにＥＢＣ緩衝液のみを入れる）を加えた。そして、遮光条件下においてＰＨＤ２プロリンヒドロキシル化反応のサンプルを終濃度が１００ｎＭとなるように加え、反応基質とした。十分混ぜ合わせた後、全波長マルチモードプレートリーダー（ＴＥＣＡＮ ｉｎｆｉｎｉｔｅ Ｍ１０００）を用いて励起波長４０７ｎＭ、発光波長５１８ｎＭの条件下で横手方向及び長手方向の蛍光強度値を測定した。蛍光偏光度（ｍＰ）は、下記の数式（１）に従って算出した。

【0133】

蛍光偏光度（ｍＰ）：
ｍＰ＝１０００×（横手方向の蛍光強度値−Ｇ因子×長手方向の蛍光強度値）／（横手方向の蛍光強度値＋Ｇ因子×長手方向の蛍光強度値） …数（１）
但し、横手方向の蛍光強度値＝測定ウェルの横手方向における蛍光強度値−ブランク対照の横手方向における蛍光強度値
長手方向の蛍光強度値＝測定ウェルの長手方向における蛍光強度値−ブランク対照の長手方向における蛍光強度値

【0134】

また、下記の数式（２）に従って測定化合物のＰＨＤ２抑制率（％）を算出した。

【0135】

抑制率（％）＝１−（ｍＰ測定ウェル−ｍＰ陰性対照ウェル）／（ｍＰ陽性対照ウェル−ｍＰ陰性対照ウェル） …数（３）

【0136】

ＩＣ_５０はＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ４．０ソフト（Ｇｏｌｄｅｎ ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｇｏｌｄｅｎ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ，ＵＳＡ）を利用し、非線形回帰法に従って算出した。測定結果から、本発明に係る化合物がＨＩＦプロリルヒドロキシラーゼ阻害活性を示すことが確認できた。

【0137】

【表3】

【0138】

測定例３：本発明に係る化合物の正常マウスにおける赤血球形成に対する促進効果
オスのＢＡＬＢ／ｃマウス８０匹を１１群に分け、各投与群あたり８匹ずつに分け、ブランク対照群は１０匹に分けた。陽性対照群として、ＡＫＢ−６５４８投与群は、経口投与で、１日１回１００ｍｇ／ｋｇを３回投与し、ＦＧ−４５９２投与群は、経口投与で、１日１回２５ｍｇ／ｋｇを３回投与し、ＥＰＯ投与群は、１日目と３日目に皮下注射で１００ＩＵ／ｋｇを投与した。本発明に係る化合物は、経口投与で、１日１回２５ｍｇ／ｋｇを３回投与した。最終投与から４時間経った時点でマウスの眼窩から採血し、ＥＤＴＡ−Ｋ２法を利用して抗凝固処理を行い、自動血球分析装置を用いて網状赤血球（ＲＥＴＩＣ）を計数した。下記表４に示すように、対照化合物及び本発明に係る化合物の場合は何れも正常マウスを超え（ｐ＜０．０１）、特に一部の化合物においては低分子陽性対照薬及びＥＰＯを超える効果を示した。

【0139】

【表4】