特許 6571180 ＺＥＳＴＥホモログ２エンハンサー阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6571180

(24)【登録日】2019年8月16日

(45)【発行日】2019年9月4日

(54)【発明の名称】ＺＥＳＴＥホモログ２エンハンサー阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 409/12 20060101AFI20190826BHJP

   A61K 31/4436 20060101ALI20190826BHJP

   C07D 409/14 20060101ALI20190826BHJP

   A61K 31/4545 20060101ALI20190826BHJP

   C07D 495/04 20060101ALI20190826BHJP

   C07D 413/14 20060101ALI20190826BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20190826BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20190826BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20190826BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20190826BHJP

【ＦＩ】

   C07D409/12

   A61K31/4436

   C07D409/14CSP

   A61K31/4545

   C07D495/04 105A

   C07D413/14

   A61K31/506

   A61P35/00

   A61P35/02

   A61P43/00 111

【請求項の数】18

【全頁数】101

(21)【出願番号】特願2017-522890(P2017-522890)

(86)(22)【出願日】2015年10月28日

(65)【公表番号】特表2017-532360(P2017-532360A)

(43)【公表日】2017年11月2日

(86)【国際出願番号】EP2015075009

(87)【国際公開番号】WO2016066697

(87)【国際公開日】20160506

【審査請求日】2018年10月29日

(31)【優先権主張番号】62/069,438

(32)【優先日】2014年10月28日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/075,596

(32)【優先日】2014年11月5日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】513110104

【氏名又は名称】グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、（ナンバー２）、リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＧＬＡＸＯＳＭＩＴＨＫＬＩＮＥ ＩＮＴＥＬＬＥＣＴＵＡＬ ＰＲＯＰＥＲＴＹ （ＮＯ．２） ＬＩＭＩＴＥＤ

(74)【代理人】

【識別番号】100091982

【弁理士】

【氏名又は名称】永井 浩之

(74)【代理人】

【識別番号】100091487

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 行孝

(74)【代理人】

【識別番号】100082991

【弁理士】

【氏名又は名称】佐藤 泰和

(74)【代理人】

【識別番号】100105153

【弁理士】

【氏名又は名称】朝倉 悟

(74)【代理人】

【識別番号】100143971

【弁理士】

【氏名又は名称】藤井 宏行

(74)【代理人】

【識別番号】100188651

【弁理士】

【氏名又は名称】遠藤 広介

(72)【発明者】

【氏名】スティーブン、デイビッド、ナイト

(72)【発明者】

【氏名】ケネス、アレン、ニューランダー

(72)【発明者】

【氏名】シンロン、ティアン

【審査官】 伊佐地 公美

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１３／０６７２９６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２０１４−５１６９３１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１３／１２０１０４（ＷＯ，Ａ２）

【文献】 特表２０１６−５１７８７８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１６−５２３９５５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１４／０９７０４１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２０１４−５１３０８４（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩：

【化1】

［式中、
ＸおよびＹは、それぞれ独立してＣＨ、ＣまたはＮであり；
ここで、ＸがＮの場合、ＹはＣＨであり、かつ

は単結合であり；
ＹがＮの場合、ＸはＣＨであり、かつ

は単結合であり；
ＸおよびＹがそれぞれＣＨの場合、

は単結合であり；かつ
ＸがＣの場合、ＹがＣであり、かつ

は二重結合であり、
Ｚは、ＣＨまたはＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立して（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルであり；
Ｒ^３およびＲ^４は、それぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４は、一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６は、それぞれ独立して（Ｃ_１-Ｃ_３）アルキルであり；かつ
Ｒ^７は、ハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシル、ピリミジニル、オキサゾリルメチルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される。]
ただし前記化合物が、
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）（エチル）アミノ）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、５−（（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）（エチル）アミノ）−４−メチル−Ｎ−（（６−メチル−２−オキソ−４−プロピル−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）チオフェン−３−カルボキサミド、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン-1-イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン-1-イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、もしくはＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（エチル（４−（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）アミノ）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれら各化合物のそれぞれの立体異性体もしくはその混合物でないことを条件とする。

【請求項2】

ＸおよびＹがそれぞれ独立してＣＨまたはＮであり、ここでＸおよびＹの少なくとも１つがＣＨであり、かつ

が単結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項3】

ＸがＮであり、ＹがＣＨであり、かつ

が単結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項4】

ＹがＮであり、ＸがＣＨであり、かつ

が単結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項5】

ＸおよびＹがそれぞれＣＨであり、かつ

が単結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項6】

ＸおよびＹがそれぞれＣであり、かつ

が二重結合である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項7】

ＺがＣＨである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項8】

ＺがＮである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項9】

Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれメチルである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項10】

Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項11】

Ｒ^５がメチルである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項12】

Ｒ^６がエチルである、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項13】

Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項14】

５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−ヒドロキシピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
２−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（２−フルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
Ｎ’−シアノ−４−（１−（５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）−Ｎ−メチルピペリジン−１−カルボキシイミドアミド；
５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；または
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
である、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項15】

請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含んでなる医薬組成物。

【請求項16】

癌を治療するための、請求項１５に記載の医薬組成物。

【請求項17】

前記癌が、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣細胞腫、髄芽細胞腫、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、および甲状腺癌からなる群から選択される、請求項１６に記載の医薬組成物。

【請求項18】

ＥＺＨ２により媒介される障害を治療するための、請求項１５に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、Ｚｅｓｔｅホモログ２エンハンサー（ＥＺＨ２）を阻害する、従って、癌細胞の増殖の阻害および／またはアポトーシスの誘導に有用である化合物に関する。

【背景技術】

【0002】

エピジェネティック修飾は、細胞増殖、分化、および細胞生存を含む多くの細胞プロセスの調節に重要な役割を果たす。グローバルなエピジェネティック修飾は癌に共通しており、ＤＮＡおよび／またはヒストンのメチル化のグローバルな変化、ノンコーディングＲＮＡの調節不全、ならびにヌクレオソームリモデリングを含み、癌遺伝子、腫瘍抑制因子およびシグナル伝達経路の異常な活性化または不活性化をもたらす。しかしながら、癌において起こる遺伝子突然変異とは異なり、これらのエピジェネティック変異は、関与する酵素の選択的阻害によって逆転させることができる。ヒストンまたはＤＮＡのメチル化に関与する数種のメチル化酵素が、癌において調節不全となっていることが知られている。従って、特定のメチル化酵素の選択的阻害剤は、癌などの増殖性疾患の治療に有用であると思われる。

【0003】

ＥＺＨ２（ヒトＥＺＨ２遺伝子：Cardoso, C, et al; European J of Human Genetics, Vol. 8, No. 3 Pages 174-180, 2000）は、ヒストンＨ３のリシン２７をトリメチル化することによって（Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３）標的遺伝子をサイレンシングする働きをするポリコームリプレッサー複合体２（ＰＲＣ２）の触媒サブユニットである。ヒストンＨ３は、真核細胞のクロマチン構造に含まれる５つの主要なヒストンタンパク質のうちの１つである。ヒストンは、主要な球状ドメインと長いＮ末端テールを特徴とし、「糸を通したビーズ」構造のようなヌクレオソームの構造に関わっている。ヒストンタンパク質は、高度に翻訳後修飾を受けるが、５つのヒストンのうちヒストンＨ３が最も大規模な修飾を受ける。用語「ヒストンＨ３」は、単独では、配列変異体間または修飾状態間を区別しないという点で意図的にあいまいな用語である。ヒストンＨ３は、新たに浮上したエピジェネティック分野で重要なタンパク質であり、その配列変異体および様々な修飾状態は動的かつ長期的な遺伝子調節に役割を果たすと考えられる。

【0004】

ＥＺＨ２発現の増強は、前立腺、乳房、皮膚、膀胱、肝臓、膵臓、頭頸部の腫瘍を含む多くの固形腫瘍で見られており、癌の侵襲性、転移および不良な転帰と相関がある(Varambally et al., 2002; Kleer et al., 2003; Breuer et al., 2004; Bachmann et al., 2005; Weikert et al., 2005; Sudo et al., 2005; Bachmann et al., 2006)。例えば、高レベルのＥＺＨ２を発現する腫瘍では前立腺切除後の再発リスクの増大が見られ、高ＥＺＨ２レベルを有する乳癌患者では、転移の増大、無病生存期間の短縮および死亡の増加が見られる(Varambally et al., 2002; Kleer et al., 2003)。より最近では、ＥＺＨ２と反対の働きをするＨ３Ｋ２７デメチラーゼのＵＴＸ（遍在転写テトラトリコペプチド反復配列Ｘ(ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeats X)）における不活性化突然変異が、多くの固形腫瘍種および血液腫瘍種（腎臓腫瘍、膠芽腫、食道腫瘍、乳房腫瘍、結腸腫瘍、非小細胞肺腫瘍、小細胞肺腫瘍、膀胱腫瘍、多発性骨髄腫、および慢性骨髄性白血病を含む）で確認されており、低いＵＴＸレベルが乳癌の低い生存率と相関し、ＵＴＸ機能の低下がＨ３Ｋ２７ｍｅ３の増大および標的遺伝子の抑制をもたらすことが示唆される(Wang et al., 2010)。これらのデータを考え合わせると、Ｈ３Ｋ２７ｍｅ３レベルの増大が多くの腫瘍種で癌の侵襲性に寄与すること、およびＥＺＨ２活性の阻害が治療利益を提供し得ることが示唆される。

【0005】

多くの研究が、ｓｉＲＮＡまたはｓｈＲＮＡによるＥＺＨ２の直接的ノックダウンまたはＳＡＨヒドロラーゼ阻害剤３−デアザネプラノシンＡ（ＤＺＮｅｐ）治療によるＥＺＨ２の間接的低下がｉｎ ｖｉｔｒｏで癌細胞株の増殖および浸潤を、そしてｉｎ ｖｉｖｏで腫瘍の成長を低下させることを報告している(Gonzalez et al., 2008, GBM 2009)。
異常なＥＺＨ２活性が癌の進行をもたらす厳密な機構は知られていないが、多くのＥＺＨ２標的遺伝子が腫瘍抑制因子であり、このことは腫瘍抑制因子機能の低下が重要な機構であることを示唆する。さらに、不死化または初代上皮細胞におけるＥＺＨ２過剰発現は足場非依存性の増殖および浸潤を促進し、ＥＺＨ２の触媒活性を必要とする(Kleer et al., 2003; Cao et al., 2008)。

【0006】

従って、ＥＺＨ２活性の阻害が細胞増殖および浸潤を低下させることを示唆する強い証拠が存在する。よって、ＥＺＨ２活性を阻害する化合物は、癌の治療に有用であると思われる。

【発明の概要】

【0007】

本発明は、式（Ｉ）の化合物：

【化1】

［式中、
ＸおよびＹは、それぞれ独立してＣＨ、ＣまたはＮであり；
［ここで、ＸがＮの場合、ＹはＣＨであり、かつ

は単結合であり；
ＹがＮの場合、ＸはＣＨであり、かつ

は単結合であり；
ＸおよびＹがそれぞれＣＨの場合、

は単結合であり；かつ
ＸがＣの場合、ＹがＣであり、かつ

は二重結合である］
Ｚは、ＣＨまたはＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２は、それぞれ独立して（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルであり；
Ｒ^３およびＲ^４は、それぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４は一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６は、それぞれ独立して（Ｃ_１-Ｃ_３）アルキルであり；かつ
Ｒ^７は、ハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシル、ピリミジニル、オキサゾリルメチルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される。]
またはその薬学的に許容可能な塩に関するが、
但し、前記化合物がＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）（エチル）アミノ）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、５−（（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）（エチル）アミノ）−４−メチル−Ｎ−（（６−メチル−２−オキソ−４−プロピル−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）チオフェン−３−カルボキサミド、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（エチル（４−（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）アミノ）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれら各化合物のそれぞれの立体異性体もしくは混合物でないことを条件とする。

【0008】

本発明の別の側面は、固形腫瘍の癌細胞にアポトーシスを誘導する方法、固形腫瘍を治療する方法に関する。

【0009】

本発明の別の側面は、式（Ｉ）の化合物と薬学的に許容可能な賦形剤とを含んでなる医薬製剤に関する。

【0010】

別の側面では、癌細胞においてアポトーシスを誘導することによるなど、ＥＺＨ２により媒介される障害の治療(treatment)に使用するための薬剤の製造における、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩または溶媒和物の使用が提供される。

【0011】

別の側面において、本発明は、ＥＺＨ２により媒介される疾患の治療のための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。本発明はさらに、ＥＺＨ２により媒介される疾患の治療における有効治療物質としての式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。

【0012】

別の側面において、本発明は、療法(therapy)に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0013】

別の側面では、ＥＺＨ２により媒介される障害の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。

【0014】

別の側面では、細胞増殖疾患の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。

【0015】

別の側面では、固形腫瘍、例えば、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣細胞腫、髄芽細胞腫、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎臓(kidney)癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎(renal)癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、および甲状腺癌の治療を含む、癌の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩が提供される。

【0016】

別の側面では、本発明の式（Ｉ）の化合物を他の有効成分と共投与する方法が提供される。

【0017】

別の側面では、ＥＺＨ２により媒介される障害の治療に使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１つの抗新生物薬の組合せが提供される。

【0018】

別の側面では、細胞増殖疾患の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１つの抗新生物薬の組合せが提供される。

【0019】

別の側面では、固形腫瘍、例えば、脳腫瘍（神経膠腫）、膠芽腫、白血病、リンパ腫、バナヤン−ゾナナ症候群、カウデン病、レルミット−ダクロス病、乳癌、炎症性乳癌、ウィルムス腫瘍、ユーイング肉腫、横紋筋肉腫、脳室上衣細胞腫、髄芽細胞腫、結腸癌、胃癌、膀胱癌、頭頸部癌、腎臓癌、肺癌、肝臓癌、黒色腫、腎癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、肉腫、骨肉腫、骨の巨細胞腫瘍、および甲状腺癌の治療を含む、癌の治療に使用するための式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と少なくとも１つの抗新生物薬の組合せが提供される。

【発明の具体的説明】

【0020】

本発明は、上記で定義される式（Ｉ）の化合物に関する。

【0021】

一態様では、本発明は、ＸおよびＹがそれぞれ独立してＣＨまたはＮ、ここで少なくともＸおよびＹのうち１つがＣＨであり、かつ

が単結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明は、ＸがＮであり、ＹがＣＨであり、かつ

が単結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明は、ＹがＮであり、ＸがＣＨであり、かつ

が単結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明は、ＸおよびＹがそれぞれＣＨであり、かつ

が単結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明は、ＸおよびＹがそれぞれＣであり、かつ

が二重結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。

【0022】

別の態様では、本発明は、ＸがＣＨまたはＣであり、かつＹがＣＨ、ＣまたはＮであり、ここで、ＹがＮの場合、ＸがＣＨであり、かつ

が単結合であり、ＸおよびＹがそれぞれＣＨである場合、

は単結合であり、ならびにＸがＣの場合、ＹがＣであり、かつ

が二重結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。

【0023】

特定の態様では、本発明は、ＺがＣＨである式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明は、ＺがＮである式（Ｉ）の化合物に関する。

【0024】

別の態様では、本発明は、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルである、式（Ｉ）の化合物に関する。特定の態様では、本発明は、Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれメチルである式（Ｉ）の化合物に関する。

【0025】

別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素である式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表す式（Ｉ）の化合物に関する。

【0026】

別の態様では、本発明は、Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルである、式（Ｉ）の化合物に関する。特定の態様では、Ｒ^５がメチルである式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様において、本発明は、Ｒ^６がエチルである式（Ｉ）の化合物に関する。

【0027】

別の態様では、本発明は、Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明はＲ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルである式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明は、Ｒ^７が−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である式（Ｉ）の化合物に関する。特定の態様では、本発明はＲ^７がジメチルアミノである式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明はＲ^７がヒドロキシルである式（Ｉ）の化合物に関する。

【0028】

別の態様では、本発明は、Ｒ^７が−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルである式（Ｉ）の化合物に関する。別の態様では、本発明は、ＺがＮであり、かつＲ^７が−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルである、式（Ｉ）の化合物に関する。特定の態様では、本発明は、ＺがＮであり、かつＲ^７が−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨＣＨ_３である、式（Ｉ）の化合物に関する。

【0029】

別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が２−フルオロプロピル、２−フルオロ−２−メチルプロピル、２，２−ジフルオロエチル、２，２−ジフルオロプロピル、２，２，２−トリフルオロエチル、ヒドロキシル、ジメチルアミノ、ピリミジン−２−イル、オキサゾ−ル−２−イルメチルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨＣＨ_３からなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が２−フルオロ−２−メチルプロピル、２，２−ジフルオロプロピル、２，２，２−トリフルオロエチル、ヒドロキシル、ジメチルアミノ、ピリミジン−２−イルおよびオキサゾ−ル−２−イルメチルからなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が２−フルオロ−２−メチルプロピル、２，２−ジフルオロプロピルおよび２，２，２−トリフルオロエチルからなる群から選択される、式（Ｉ）の化合物に関する。さらなる特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が２−フルオロ−２−メチルプロピルである式（Ｉ）の化合物に関する。よりさらなる特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が２，２−ジフルオロプロピルである式（Ｉ）の化合物に関する。

【0030】

特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が-Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である場合、以下の条件：
（ｉ）ＺがＮであること；
（ｉｉ）Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表すこと；または
（ｉｉｉ）ＸおよびＹがそれぞれＣであり、かつ

が二重結合であること
の少なくとも１つが満たされなければならない、式（Ｉ）の化合物に関する。

【0031】

別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が-Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である場合、ＺがＮである、式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が-Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である場合、Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表す、式（Ｉ）の化合物に関する。別の特定の態様では、本発明は、Ｒ^７が-Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である場合、ＸおよびＹはそれぞれＣであり、かつ

が二重結合である、式（Ｉ）の化合物に関する。

【0032】

別の態様では、本発明はまた、式（Ｉａ）の化合物：

【化2】

［式中、
Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、式（Ｉ）で定義されたとおりである。］
またはその薬学的に許容可能な塩に関するが、但し、化合物がＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）（エチル）アミノ）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、５−（（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）（エチル）アミノ）−４−メチル−Ｎ−（（６−メチル−２−オキソ−４−プロピル−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）チオフェン−３−カルボキサミドもしくはＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（エチル（４−（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）アミノ）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれら各化合物のそれぞれの立体異性体もしくは混合物でないことを条件とする。

【0033】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ独立して水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およぎＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される；
式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0034】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であり；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0035】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＣＨまたはＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉａ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0036】

別の態様では、本発明はまた、式（Ｉｂ）の化合物：

【化3】

［式中、
Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、式（Ｉ）で定義されたとおりである。］
またはその薬学的に許容可能な塩に関するが、但し、化合物がＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドもしくはＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれら各化合物のそれぞれの立体異性体もしくは混合物でないことを条件とする。

【0037】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であり；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｂ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0038】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４ がそれぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７ がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される；
式（Ｉｂ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0039】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＣＨまたはＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｂ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0040】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＣＨであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７が−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である；
式（Ｉｂ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0041】

別の態様では、本発明はまた式（Ｉｂ２）の化合物：

【化4】

［式中、
Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６および Ｒ^７は、式（Ｉ）で定義されたとおりである］
またはその薬学的に許容可能な塩に関するが、但し、化合物がＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドもしくはＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれら各化合物のそれぞれの立体異性体もしくは混合物でないことを条件とする。

【0042】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１および Ｒ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であり；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｂ２）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0043】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４ がそれぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される；
式（Ｉｂ２）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0044】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＣＨまたはＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｂ２）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0045】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＣＨであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７が−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２である；
式（Ｉｂ２）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0046】

別の態様では、本発明はまた、式（Ｉｃ）の化合物：

【化5】

［式中、
Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、式（Ｉ）で定義されたとおりである。］
またはその薬学的に許容可能な塩に関するが、但し、化合物がＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれらの立体異性体もしくは混合物でないことを条件とする。

【0047】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される；
式（Ｉｃ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0048】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１および Ｒ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であるか；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｃ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0049】

別の態様では、本発明はまた、式（Ｉｃ２）の化合物：

【化6】

［式中、
Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６および Ｒ^７は、式（Ｉ）で定義されたとおりである］
またはその薬学的に許容可能な塩に関するが、但し、化合物がＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド、またはこれらの立体異性体もしくは混合物でないことを条件とする。

【0050】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１および Ｒ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される；
式（Ｉｃ２）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0051】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１および Ｒ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であるか；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｃ２）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0052】

別の態様では、本発明は、式（Ｉｄ）の化合物：

【化7】

［式中、
Ｚ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６およびＲ^７は、式（Ｉ）で定義されたとおりである］
またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0053】

特定の態様では、本発明は、
ＺがＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であるか；
またはＲ^３およびＲ^４が一緒になって−ＣＨ_２ＣＨ_２−を表し；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２、ヒドロキシルおよび−Ｃ（＝Ｎ−ＣＮ）ＮＨ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキルからなる群から選択される；
式（Ｉｄ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0054】

別の特定の態様では、本発明は、
ＺがＣＨまたはＮであり；
Ｒ^１およびＲ^２がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはｎ−ブチルであり；
Ｒ^３およびＲ^４がそれぞれ水素であり；
Ｒ^５およびＲ^６がそれぞれ独立してメチル、エチル、ｎ−プロピルまたはイソプロピルであり；かつ
Ｒ^７がハロ（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル、−Ｎ（（Ｃ_１-Ｃ_４）アルキル）_２およびヒドロキシルからなる群から選択される；
式（Ｉｄ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩に関する。

【0055】

本発明の特定の化合物は以下を含む：
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｓ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−ヒドロキシピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド；
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
２−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（２−フルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ ピリジン−４（５Ｈ）−オン；
Ｎ’−シアノ−４−（１−（５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）−Ｎ−メチルピペリジン−１−カルボキシイミドアミド(carboximidamide)；
５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル(methylcarbamimidoyl)）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド； および
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド；
またはこれらの薬学的に許容可能な塩。

【0056】

絶対的ではないが一般に、本発明の塩は薬学的に許容可能な塩である。塩基性アミンまたは他の塩基性官能基を含有する開示の化合物の塩は、遊離塩基を塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、または酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸、マンデル酸、フマル酸、マロン酸、ピルビン酸、シュウ酸、グリコール酸、サリチル酸、ピラノシジル酸（グルクロン酸またはガラクツロン酸など）、α−ヒドロキシ酸（クエン酸または酒石酸など）、アミノ酸（アスパラギン酸またはグルタミン酸など）、芳香族酸（安息香酸または桂皮酸など）、スルホン酸（ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸など）などの有機酸で処理することを含む、当技術分野で公知の任意の好適な方法によって作製することができる。薬学的に許容可能な塩の例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオール酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、ブチン−１，４−二酸塩、ヘキシン−１，６−二酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニルブトレート(phenylbutrates)、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、マンデル酸塩、およびスルホン酸塩（キシレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩およびナフタレン−２−スルホン酸塩が含まれる。

【0057】

カルボン酸または他の酸性官能基を含有する開示の化合物の塩は、好適な塩基と反応させることにより作製することができる。このような薬学的に許容可能な塩は、薬学的に許容可能な陽イオンを与える塩基を伴って形成される得るものであり、アルカリ金属塩（特に、ナトリウムおよびカリウム）、アルカリ土類金属塩（特に、カルシウムおよびマグネシウム）、アルミニウム塩およびアンモニウム塩、ならびにトリメチルアミン、トリエチルアミン、モルホリン、ピリジン、ピペリジン、ピコリン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、２−ヒドロキシエチルアミン、ビス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、トリ−（２−ヒドロキシエチル）アミン、プロカイン、ジベンジルピペリジン、デヒドロアビエチルアミン、Ｎ，Ｎ’−ビスデヒドロアビエチルアミン、グルカミン、Ｎ−メチルグルカミン、コリジン、キニーネ、キノリン、ならびにリシンおよびアルギニンなどの塩基性アミノ酸といった生理学的に許容可能な有機塩基から作製される塩が含まれる。

【0058】

薬学的に許容可能でない他の塩も本発明の化合物の製造に有用である場合があり、これらは本発明のさらなる側面をなすと考えられるべきである。シュウ酸塩またはトリフルオロ酢酸塩などのこれらの塩は、それら自体は薬学的に許容可能なものではないが、本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容可能な塩を得る際の中間体として有用な塩の製造に有用であり得る。

【0059】

式（Ｉ）の化合物またはその塩は、立体異性体の形態（例えば、それは１以上の不斉炭素原子を含有する）で存在し得る。個々の立体異性体（鏡像異性体およびジアステレオマー）およびこれらの混合物は、本発明の範囲内に含まれる。同様に、式（Ｉ）の化合物または塩は、式で示される以外の互変異性形で存在してもよく、これらも本発明の範囲内に含まれると理解される。本発明は、本明細書の上記で定義される特定の基のあらゆる組合せおよびサブセットを含むと理解されるべきである。本発明の範囲は、立体異性体の混合物、ならびに精製された鏡像異性体または鏡像異性体的／ジアステレオマー的に富化された混合物を含む。本発明は以上に定義される特定の基のあらゆる組合せおよびサブセットを含むと理解されるべきである。

【0060】

本発明はまた、１以上の原子が、自然界で通常見られる原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子に置き換わっているということ以外は、式（Ｉ）および下記に挙げられたものと同一である同位体標識化合物も含む。本発明の化合物およびそれらの薬学的に許容可能な塩に組み込むことのできる同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、およびヨウ素の同位体、例えば、^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３１Ｐ、^{３２Ｐ、３５}Ｓ、^１８Ｆ、^３６Ｃｌ、^１２３Ｉ、および^１２５Ｉが挙げられる。

【0061】

上記の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物および前記化合物の薬学的に許容可能な塩は、本発明の範囲内である。同位体で標識された本発明の化合物、例えば、^３Ｈまたは^１４Ｃなどの放射性同位体が組み込まれた化合物は、薬剤および／または基質の組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム化、すなわち、^３Ｈ同位体および炭素−１４、すなわち、^１４Ｃ同位体は、それらの調製の容易さおよび検出性のために特に好ましい。^１１Ｃおよび^１８Ｆ同位体は、ＰＥＴ（陽電子放出断層撮影）において特に有用であり、^１２５Ｉ同位体は、ＳＰＥＣＴ（単一光子放射型コンピューター断層撮影）において特に有用であり、総て脳撮像において有用である。さらに、重水素、すなわち、^２Ｈなどのより重い同位体による置換により、より大きい代謝安定性、例えば、ｉｎ ｖｉｖｏ半減期の増大または用量要求の低減から生じる特定の治療利益を得ることができ、それ故、状況によっては好ましいことがある。本発明の式（Ｉ）および下記の同位体標識化合物は一般に、以下のスキームおよび／または実施例で開示された手順を実施することにより、非同位体標識試薬の代わりに、容易に入手し得る同位体標識試薬を用いることによって製造可能である。

【0062】

本発明はさらに、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と１以上の賦形剤（薬学分野において担体および／または希釈剤とも呼ばれる）とを含んでなる医薬組成物（医薬処方物とも呼ばれる）を提供する。賦形剤は、その処方物の他の成分と適合し、かつ、そのレシピエント（すなわち、患者）に有害でないという意味で薬学的に許容可能である。

【0063】

好適な薬学的に許容可能な賦形剤は、選択される特定の投与形によって異なる。さらに、好適な薬学的に許容可能な賦形剤は、その組成物中で役立ち得る特定の機能に関して選択されてもよい。例えば、ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、均一な投与形の製造を助けるそれらの能力に関して選択されてよい。ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、安定な投与形の製造を助けるそれらの能力に関して選択されてよい。ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、ひと度患者に投与された本発明の１または複数の化合物の、ある器官または身体部分から別の器官または身体部分への運搬または輸送を助けるそれらの能力に関して選択されてよい。ある特定の薬学的に許容可能な賦形剤は、患者のコンプライアンスを向上させるそれらの能力に関して選択されてよい。

【0064】

好適な薬学的に許容可能な賦形剤には、下記の種類の賦形剤：希釈剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動促進剤、造粒剤、被覆剤、湿潤剤、溶媒、補助溶媒、沈殿防止剤、乳化剤、甘味剤、香味剤、矯味剤、着色剤、固化防止剤、湿潤剤(hemectants)、キレート剤、可塑剤、増粘剤、酸化防止剤、保存剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤が含まれる。当業者ならば、ある種の薬学的に許容可能な賦形剤は２つ以上の機能を果たす場合があり、どれくらいの量の賦形剤がその処方物中に存在するか、他のどんな成分がその処方物中に存在するかによって選択的機能を果たし得ることを認識するであろう。

【0065】

当業者ならば、本発明において使用するための適当な量の好適な薬学的に許容可能な賦形剤を選択できるだけの当技術分野の知識および技能を持っている。さらに、薬学的に許容可能な賦形剤を記載し、好適な薬学的に許容可能な賦形剤を選択する上で有用となり得る、当業者に利用可能な多くの情報源が存在する。例としては、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)、The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が挙げられる。

【0066】

本発明の医薬組成物は、当業者に公知の技術および方法を用いて調製される。当技術分野で慣用される方法のいくつかは、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)に記載されている。

【0067】

医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形であり得る。このような単位は、式（Ｉ）の化合物もしくはその塩の治療上有効な量、または所望の治療上有効な量を達成するために所与の時点で複数の単位投与形が投与され得るような治療上有効な量の画分を含有してよい。好ましい単位用量処方物は、本明細書の上記に挙げたように、有効成分の一日用量もしくは分割用量、またはその適切な画分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、製薬技術分野で周知のいずれの方法によって調製してもよい。

【0068】

医薬組成物は、例えば、経口（頬側または舌下を含む）、直腸内、経鼻、局所（頬側、舌下、または経皮を含む）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、または皮内を含む）経路などの適切ないずれの経路による投与にも適合可能である。このような組成物は、例えば有効成分を１または複数の賦形剤と会合させることにより、製薬分野で公知のいずれの方法によって調製してもよい。

【0069】

経口投与に適合される場合、医薬組成物は、錠剤またはカプセル剤などの離散単位；散剤または顆粒剤；水性もしくは非水性液体中の溶液または懸濁液；可食フォームまたはホイップ；水中油型液体エマルションまたは油中水型液体エマルションであり得る。本発明の化合物もしくはその塩、または本発明の医薬組成物はまた、「速溶性」医薬として投与するために、キャンディ、ウエハース、および／または舌テープ(tongue tape)処方物中に配合してもよい。

【0070】

例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与の場合、有効薬物成分は、エタノール、グリセロール、水などの経口用非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体と組み合わせてもよい。散剤または顆粒剤は、化合物を適切な微細サイズに粉砕し、例えばデンプンまたはマンニトールのような可食炭水化物などの医薬担体を同様に粉砕したものと混合することによって調製される。香味剤、保存剤、分散剤、および着色剤も存在してよい。

【0071】

カプセル剤は、上記のように粉末混合物を作製し、成形されたゼラチンまたは非ゼラチン系の剤皮に充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に粉末混合物に添加することができる。寒天、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセル剤が摂取された際の医薬の利用度を向上するために添加することができる。

【0072】

さらに、所望される場合または必要な場合には、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤もまた本混合物に配合することができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類（例えば、グルコースもしくはβ−ラクトース）、トウモロコシ甘味剤、天然および合成ガム、例えば、アラビアガム、トラガカントガム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの投与形に使用される滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定されるものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。

【0073】

錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッグを形成し、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することにより調剤される。粉末混合物は、適宜粉砕された化合物を、上記の希釈剤または基剤、ならびに場合によりカルボキシメチルセルロース、およびアルギン酸塩、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの再吸収促進剤、ならびに／またはベントナイト、カオリン、もしくはリン酸二カルシウムなどの吸収剤とともに混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ、デンプンペースト、アカディア糊、またはセルロース系もしくはポリマー材料の溶液などの結合剤を湿らせ、スクリーンに通すことによって造粒することができる。造粒の別法として、粉末混合物を打錠機にかけることができるが、その結果、形成の不完全なスラッグが崩壊して顆粒となる。顆粒は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油の添加により、錠剤成形鋳型への粘着を防ぐように滑沢化することができる。次に、滑沢化された混合物が打錠される。本発明の化合物または塩は、自由流動性の不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラッグ化工程を経ずに、直接打錠することもできる。セラックの封止コート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスのつや出しコーティングからなる半透明の保護コーティングを提供することができる。
異なった用量を識別するために、これらコーティングに色素を添加することができる。

【0074】

溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口液は、所与量が所定量の有効成分を含有するように、単位投与形で調製することができる。シロップ剤は、本発明の化合物またはその塩を、適宜着香した水溶液に溶かすことにより調製することができ、一方、エリキシル剤は、非毒性のアルコール性ビヒクルの使用により調製される。懸濁液は、本発明の化合物または塩を非毒性ビヒクルに分散させることにより処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミントオイルなどの着香添加剤、天然甘味剤、サッカリン、または他の人工甘味剤なども添加することができる。

【0075】

必要に応じて、経口投与のための単位投与処方物をマイクロカプセル化することができる。処方物はまた、放出を延長または持続させるために、例えば、粒子状材料をポリマーまたはワックスなどでコーティングまたは包埋することにより調製することもできる。

【0076】

本発明においては、錠剤およびカプセル剤が医薬組成物の送達のために好ましい。

【0077】

本発明の別の側面によれば、式（Ｉ）の化合物またはその塩と少なくとも１種類の賦形剤とを混合（または混入）することを含んでなる、医薬組成物の調製方法が提供される。

【0078】

本発明はまた、哺乳動物、特にヒトにおける治療の方法を提供する。本発明の化合物および組成物は、細胞増殖性疾患を治療するために使用される。本明細書で提供される方法および組成物により治療され得る病的状態には、限定されるものではないが、癌（以下にさらに述べる）、自己免疫疾患、真菌性障害、関節炎、移植片拒絶、炎症性腸疾患、限定されるものではないが、手術、血管形成術などを含む医療行為後に誘発される増殖などが含まれる。細胞は過増殖状態でも低増殖状態（異常な状態）でないと考えられてもなお治療が必要な場合があると認識される。例えば、創傷治癒中、細胞は「正常に」増殖しているといえるが、増殖の促進が望ましいと考えられる。よって、一態様では、本発明は、これらの障害または状態のいずれか１つに罹患したまたは罹患しようとしている細胞または患者への適用を含む。

【0079】

本明細書で提供される組成物および方法は、特に、前立腺癌、乳癌、脳腫瘍、皮膚癌、子宮頸癌、精巣癌などの腫瘍を含む癌の治療に有用であると思われる。それらは特に転移性または悪性腫瘍の治療に特に有用である。より詳しくは、本発明の組成物および方法により治療可能な癌としては、限定されるものではないが、星状細胞癌、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、肝細胞癌、喉頭癌、肺癌、経口癌、卵巣癌、前立腺癌および甲状腺癌および肉腫などの腫瘍種が含まれる。より具体的には、これらの化合物は、心臓：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫および奇形腫；肺：気管支原生癌（扁平上皮細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支）癌、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫；消化管：食道（扁平上皮癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（膵管腺癌、インスリノーマ、グルカゴノーマ、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）；尿生殖路：腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍（腎芽細胞腫）、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（精上皮腫、奇形腫、胚性癌腫、奇形癌、絨毛癌、肉腫、間質性細胞癌、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫瘍、脂肪腫）；肝臓：肝細胞腫（肝細胞癌）、胆管癌、肝芽細胞腫、血管肉腫、肝細胞性腺腫、血管腫；胆道：胆嚢癌、乳頭部癌、胆管癌；骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫瘍、脊索腫、オステオクロンフローマ(osteochronfroma)（骨軟骨性外骨腫）、良性軟骨腫、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨腫および巨細胞腫；神経系：頭骨（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、脳室上衣細胞腫、胚細胞腫（松果体腫）、多形性膠芽腫、乏突起膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）；婦人科：子宮（子宮内膜癌）、子宮頸（子宮頸癌、腫瘍前子宮頚部異形成）、卵巣（卵巣癌（漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類癌）、顆粒膜卵胞膜細胞腫、セルトリライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、陰門（扁平上皮癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、扁平上皮癌、ブドウ状肉腫（胎児性横紋筋肉腫）、卵管（癌）；血液系：血液（骨髄性白血病（急性および慢性）、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（悪性リンパ腫）；皮膚：悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、黒子(moles)異形成母斑、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬；および副腎：神経芽細胞腫を治療するために使用することができる。よって、本明細書に示される「癌性細胞」という用語は、上記で特定された病態のいずれか１つの侵された、または関連する細胞を含む。

【0080】

本化合物は、他の治療薬、特に、本化合物の活性を増強するまたは消失時間を延長する薬剤と組み合わせるか、または共投与することができる。本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物の投与と少なくとも１つの他の治療方法の使用を含んでなる。一態様では、本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物の投与と外科的療法を含んでなる。一態様では、本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物の投与と放射線療法を含んでなる。一態様では、組合せ療法は、本発明によれば、少なくとも１つの本発明の化合物と少なくとも１つの支持療法剤（例えば、少なくとも１つの制吐薬）の投与を含んでなる。一態様では、本発明による組合せ療法は、少なくとも１つの本発明の化合物と少なくとも１つの他の化学療法薬の投与を含んでなる。ある特定の態様では、本発明は、少なくとも１つの本発明の化合物と少なくとも１つの抗新生物薬の投与を含んでなる。さらに別の態様では、本発明は、本開示のＥＺＨ２阻害剤はそれら自体、活性または有意に活性はないが、単独療法として活性があってもなくてもよい別の療法と組み合わせた際に、その組合せが有用な治療転帰を与える療法計画を含んでなる。

【0081】

用語「共投与する」およびその派生語は、本明細書で使用する場合、本明細書に記載のＥＺＨ２阻害化合物と、化学療法および放射線療法を含む癌治療において有用であることが知られているさらなる１または複数の有効成分との同時投与またはいずれかの個別逐次投与様式を意味する。さらなる１または複数の有効成分という用語は、本明細書で使用する場合、癌治療を必要とする患者に投与した際に有利な特性を示すことが知られる、または示す任意の化合物または治療薬を含む。好ましくは、投与が同時でない場合、これらの化合物は互い近接した時間に投与される。さらに、化合物が同じ投与形で投与されるかどうかは問われず、例えば、ある化合物を局所投与し、別の化合物を経口投与してもよい。

【0082】

一般に、治療される感受性腫瘍に対して活性を有する抗新生物薬が、本発明において特定の癌の治療に共投与され得る。このような薬剤の例は、Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T. Devita and S. Hellman (編), 第6版(2001年11月15日)に見出せる。関与する薬物および癌の特定の特性に基づいて、薬剤のどの組合せが有用であるかを識別することができる。本発明において有用である典型的な抗新生物薬としては、限定されるものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドなどの微小管阻害剤；白金配位錯体；ナイトロジェンマスタード、オキサアザホスホリン、アルキルスルホネート、ニトロソ尿素、およびトリアゼンなどのアルキル化剤；アントラサイクリン、アクチノマイシン、およびブレオマイシンなどの抗生物質；エピポドフィロトキシンなどのトポイソメラーゼＩＩ阻害剤；プリンおよびピリミジン類似体および抗葉酸化合物などの代謝拮抗剤；カンプトテシンなどのトポイソメラーゼＩ阻害剤；ホルモンおよびホルモン類似体；アザシチジンおよびデシタビンなどのＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤；シグナル伝達経路阻害剤；非受容体チロシンキナーゼ血管新生阻害剤；免疫治療薬；アポトーシス促進剤；ならびに細胞周期シグナル伝達阻害剤が挙げられる。

【0083】

一般に、治療される感受性新生物に対して活性を有する任意の化学療法薬は、特定の薬剤が本発明の化合物を使用する療法に臨床上適合する限り、本発明の化合物と組み合わせて使用してよい。本発明において有用な典型的な抗新生物薬としては、限定されるものではないが、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、細胞分裂抑制薬、ヌクレオシド類似体、トポイソメラーゼＩおよびＩＩ阻害剤、ホルモンおよびホルモン類似体；レチノイド、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤；細胞増殖または増殖因子機能の阻害剤、血管新生阻害剤、およびセリン／トレオニンまたは他のキナーゼ阻害剤を含むシグナル伝達経路阻害剤；サイクリン依存性キナーゼ阻害剤；モノクローナル、ワクチンまたは他の生物薬剤を含む、アンチセンス療法および免疫治療薬が挙げられる。

【0084】

ヌクレオシド類似体は、デオキシヌクレオチド三リン酸に変換され、複製中のＤＮＡにシトシンの代わりに組み込まれる化合物である。ＤＮＡメチルトランスフェラーゼは、修飾された塩基に共有結合して、不活性な酵素およびＤＮＡメチル化の低下をもたらす。ヌクレオシド類似体の例としては、骨髄異形成障害の治療に使用されるアザシチジンおよびデシタビンが挙げられる。ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤としては、皮膚Ｔ細胞リンパ腫の治療のためのボリノスタットが含まれる。ＨＤＡＣは、ヒストンの脱アセチル化を介してクロマチンを修飾する。さらに、ＨＤＡＣは、多くの転写因子およびシグナル達分子を含む多様な基質を有する。他のＨＤＡＣ阻害剤も開発中である。

【0085】

シグナル伝達経路阻害剤は、細胞内変化を引き起こす化学プロセスを遮断または阻害する阻害剤である。本明細書で使用する場合、この変化は細胞増殖または分化または生存である。本発明において有用なシグナル伝達阻害剤としては、限定されるものではないが、受容体チロシンキナーゼ、非受容体型チロシンキナーゼ、ＳＨ２／ＳＨ３ドメイン遮断剤、セリン／トレオニンキナーゼ、ホスファチジルイノシトール−３−ＯＨキナーゼ、ミオイノシトールシグナル伝達およびＲａｓ癌遺伝子の阻害剤が含まれる。シグナル伝達経路阻害剤は、上記の組成物および方法において本発明の化合物と組み合わせて使用され得る。

【0086】

受容体キナーゼ血管新生阻害剤はまた、本発明において使用が見出せる。ＶＥＧＦＲおよびＴＩＥ−２に関連する血管新生の阻害剤は、シグナル伝達阻害剤に関して上記で述べられている（両方とも受容体チロシンキナーゼ）。他の阻害剤も本発明の化合物と組み合わせて使用可能である。例えば、ＶＥＧＦＲ（受容体チロシンキナーゼ）を認識しないが、そのリガンドと結合する抗ＶＥＧＦ抗体；血管新生を阻害するインテグリン（α_ｖβ_３）の小分子阻害剤；エンドスタチンおよびアンギオスタチン（非ＲＴＫ）も本発明の化合物と組み合わせた場合に有用であるといえる。ＶＥＧＦＲ抗体の一例は、ベバシズマブ（アバスチン(AVASTIN)（商標））である。

【0087】

増殖因子受容体のいくつかの阻害剤が開発中であり、リガンドアンタゴニスト、抗体、チロシンキナーゼ阻害剤、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびアプタマーが含まれる。これらの増殖因子受容体阻害剤はいずれも、本明細書に記載の組成物および方法／使用のいずれにおいても本発明の化合物と組み合わせて使用可能である。トラスツズマブ（ハーセプチン(Herceptin)（商標））は、増殖因子機能の抗ｅｒｂＢ２抗体阻害剤の一例である。増殖因子機能の抗ｅｒｂＢ１抗体阻害剤の一例は、セツキシマブ（エルビタックス(Erbitux)（商標）、Ｃ２２５）である。ベバシズマブ（アバスチン(Avastin)（商標））は、ＶＥＧＦＲに対するモノクローナル抗体の一例である。上皮細胞増殖因子受容体の小分子阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ラパチニブ（Tykerb（商標））およびエルロチニブ（タルセバ(TARCEVA)（商標））が挙げられる。メシル酸イマチニブ（グリベック(GLEEVEC)（商標））は、ＰＤＧＦＲ阻害剤の一例である。ＶＥＧＦＲ阻害剤の例としては、パゾパニブ（ボトリエント(Votrient)（商標））、ＺＤ６４７４、ＡＺＤ２１７１、ＰＴＫ７８７、スニチニブおよびソラフェニブが挙げられる。

【0088】

微小管阻害剤または有糸分裂阻害剤は、細胞周期のＭ期、すなわち有糸分裂期の間に腫瘍細胞の微小管に対して活性である細胞周期特異的薬剤である。微小管阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ジテルペノイドおよびビンカアルカロイドが挙げられる。

【0089】

ジテルペノイドは、天然源に由来し、細胞周期のＧ_２／Ｍ期に作用する細胞周期特異的抗癌剤である。ジテルペノイドは、微小管のβ−チューブリンサブユニットと結合することによりこのタンパク質を安定化させると考えられている。その後タンパク質の分解が阻害され、有糸分裂が停止し、細胞死をたどると思われる。ジテルペノイドの例としては、限定されるものではないが、パクリタキセルおよびその類似体であるドセタキセルが挙げられる。

【0090】

パクリタキセル、５β，２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサ−ヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４，１０−ジアセテート２−ベンゾエートの（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−ベンゾイル−３−フェニルイソセリンとの１３−エステルは、タイヘイヨウイチイ(Taxus brevifolia)から単離された天然ジテルペン生成物であり、注射液タキソール(TAXOL)（商標）として市販されている。パクリタキセルは、テルペンのタキサンファミリーのメンバーである。パクリタキセルは、１９７１年にWaniら(J. Am. Chem, Soc., 93:2325. 1971)によって初めて単離され、化学法およびＸ線結晶学的方法によってその構造が同定された。その活性の１つの機構は、パクリタキセルの、チューブリンと結合し、それにより癌細胞増殖を阻害する能力に関連している。Schiff et al., Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77:1561-1565 (1980); Schiff et al., Nature, 277:665-667 (1979); Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441 (1981)。いくつかのパクリタキセル誘導体の合成および抗癌活性に関する総説としては、D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistry vol. 26, “New trends in Natural Products Chemistry 1986”, Attaur-Rahman, P.W. Le Quesne編(Elsevier, Amsterdam, 1986) pp 219-235を参照。

【0091】

パクリタキセルは、米国における難治性卵巣癌の治療における臨床使用(Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. lnt, Med., 111:273,1989)および乳癌の治療(Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83:1797,1991)に承認されている。パクリタキセルは、皮膚における新生物(Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46)および頭頸部癌(Forastire et. al., Sem. Oncol., 20:56, 1990)の治療のための潜在的候補である。またこの化合物は、多発性嚢胞腎疾患(Woo et. al., Nature, 368:750. 1994)、肺癌、およびマラリアの治療にも可能性を示している。パクリタキセルで患者を治療すると、閾値濃度（５０ｎＭ）を超える投与期間に関連して(Kearns, C.M. et. al., Seminars in Oncology, 3(6) p.16-23, 1995)、骨髄抑制が起こる（複数の細胞系譜、Ignoff, R.J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998）。

【0092】

ドセタキセル、（２Ｒ，３Ｓ）−Ｎ−カルボキシ−３−フェニルイソセリン，Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの５β−２０−エポキシ−１，２α，４，７β，１０β，１３α−ヘキサヒドロキシタクス−１１−エン−９−オン４−アセテート２−ベンゾエートとの１３−エステルの三水和物は、注射液としてタキソテール(TAXOTERE)（商標）として市販されている。ドセタキセルは、乳癌の治療に指示される。ドセタキセルは、ヨーロッパイチイの針葉から抽出した天然の前駆物質１０−デアセチル−バッカチンＩＩＩを使用して製造された、パクリタキセル（前項参照）の半合成誘導体である。ドセタキセルの用量制限毒性は好中球減少である。

【0093】

ビンカアルカロイドは、ニチニチソウ由来の細胞周期特異的抗新生物薬である。ビンカアルカロイドは、チューブリンと特異的に結合することによって細胞周期のＭ期（有糸分裂）に作用する。その結果、結合されたチューブリン分子は、重合して微小管になることができない。有糸分裂は中期で停止し、細胞死をたどると考えられている。ビンカアルカロイドの例としては、限定されるものではないが、ビンブラスチン、ビンクリスチン、およびビノレルビンが挙げられる。

【0094】

ビンブラスチン、硫酸ビンカロイコブラスチンは、注射液としてベルバン(VELBAN)（商標）として市販されている。ビンブラスチンは、種々の固形腫瘍の第二選択療法として指示される可能性があるが、精巣癌、ならびにホジキン病、リンパ球性および組織球性リンパ腫を含む種々のリンパ腫の治療に主として指示される。骨髄抑制がビンブラスチンの用量制限副作用である。

【0095】

ビンクリスチン、ビンカロイコブラスチンの２２−オキソ−硫酸塩は、注射液としてオンコビン(ONCOVIN)（商標）として市販されている。ビンクリスチンは、急性白血病の治療に指示されており、ホジキンおよび非ホジキン悪性リンパ腫の治療計画の中でも使用されている。脱毛および神経学的作用がビンクリスチンの最も一般的な副作用であり、程度は低いが、骨髄抑制および胃腸粘膜炎作用が生じる。

【0096】

酒石酸ビノレルビンの注射液（ナベルビン(NAVELBINE)（商標））として市販されているビノレルビン、３’，４’−ジデヒドロ−４’−デオキシ−Ｃ’−ノルビンカロイコブラスチン［Ｒ−（Ｒ^＊，Ｒ^＊）−２，３−ジヒドロキシブタン二酸（１：２）（塩）］は、半合成ビンカアルカロイドである。ビノレルビンは、単剤として、またはシスプラチンなどの他の化学療法薬と組み合わせて、種々の固形腫瘍、特に、非小細胞肺癌、進行性乳癌、およびホルモン不応性前立腺癌の治療に指示される。骨髄抑制がビノレルビンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0097】

白金配位錯体は、非細胞周期特異的抗癌剤であり、ＤＮＡと相互作用する。白金錯体は、腫瘍細胞に侵入し、アクア化を受け、ＤＮＡとの鎖内架橋および鎖間架橋を形成し、腫瘍に対して有害な生物学的作用を引き起こす。白金配位錯体の例としては、限定されるものではないが、シスプラチンおよびカルボプラチンが挙げられる。

【0098】

シスプラチン、シス−ジアンミンジクロロ白金は、注射液としてプラチノール(PLATINOL)（商標）として市販されている。シスプラチンは、主として転移性の精巣癌および卵巣癌ならびに進行性膀胱癌の治療に指示される。シスプラチンの主な用量制限副作用は、腎毒性（水分補給と利尿により管理可能）、および耳毒性である。

【0099】

カルボプラチン、ジアンミン［１，１−シクロブタン−ジカルボキシレート（２−）−Ｏ，Ｏ’］白金は、注射液としてパラプラチン(PARAPLATIN)（商標）として市販されている。カルボプラチンは、主として進行性卵巣癌の第一選択および第二選択治療に指示される。骨髄抑制がカルボプラチンの用量制限毒性である。

【0100】

アルキル化剤は、非細胞周期特異的抗癌剤(non-phase anti-cancer specific agents)であり、かつ、強力な求電子試薬である。一般に、アルキル化剤は、アルキル化によって、リン酸基、アミノ基、スルフヒドリル基、ヒドロキシル基、カルボキシル基、およびイミダゾール基などのＤＮＡ分子の求核部分を介してＤＮＡと共有結合を形成する。このようなアルキル化によって核酸機能が破壊され細胞死に至る。アルキル化剤の例としては、限定されるものではないが、シクロホスファミド、メルファラン、およびクロラムブシルなどのナイトロジェンマスタード；ブスルファンなどのスルホン酸アルキル；カルムスチンなどのニトロ尿素；ならびにダカルバジンなどのトリアゼンが挙げられる。

【0101】

シクロホスファミド、２−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］テトラヒドロ−２Ｈ−１，３，２−オキシアザホスホリン２−オキシド一水和物は、注射液または錠剤としてシトキサン(CYTOXAN)（商標）として市販されている。シクロホスファミドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫、および白血病の治療に指示される。脱毛、悪心、嘔吐および白血球減少がシクロホスファミドの最も一般的な用量制限副作用である。

【0102】

メルファラン、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］−Ｌ−フェニルアラニンは、注射液または錠剤としてアルケラン(ALKERAN)（商標）として市販されている。メルファランは、多発性骨髄腫および切除不能な卵巣上皮癌の待期療法に指示される。骨髄抑制がメルファランの最も一般的な用量制限副作用である。

【0103】

クロラムブシル、４−［ビス（２−クロロエチル）アミノ］ベンゼンブタン酸は、ロイケラン(LEUKERAN)（商標）錠剤として市販されている。クロラムブシルは、慢性リンパ性白血病、ならびにリンパ肉腫、巨大濾胞性リンパ腫、およびホジキン病などの悪性リンパ腫の待期療法に指示される。骨髄抑制がクロラムブシルの最も一般的な用量制限副作用である。

【0104】

ブスルファン、ジメタンスルホン酸１，４−ブタンジオールは、マイレラン(MYLERAN)（商標）錠剤として市販されている。ブスルファンは、慢性骨髄性白血病の待期療法に指示される。骨髄抑制がブスルファンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0105】

カルムスチン、１，３−［ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソ尿素は、ＢｉＣＮＵ（商標）として凍結乾燥物質の単一バイアルとして市販されている。カルムスチンは、脳腫瘍、多発性骨髄腫、ホジキン病、および非ホジキンリンパ腫用に、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、待期療法に指示される。遅発性骨髄抑制がカルムスチンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0106】

ダカルバジン、５−（３，３−ジメチル−１−トリアゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドは、材料の単一バイアルとしてＤＴＩＣ−Ｄｏｍｅ（商標）として市販されている。ダカルバジンは、転移性悪性黒色腫の治療、および他の薬剤と組み合わせてホジキン病の第二選択治療に指示される。悪心、嘔吐、および食欲不振がダカルバジンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0107】

抗生物質系抗新生物薬は、非細胞周期特異的薬剤であり、ＤＮＡと結合するかまたはＤＮＡにインターカレートする。一般に、このような作用によって安定なＤＮＡ複合体かまたは鎖の切断が生じ、それにより核酸の通常機能が乱れ、細胞死に至る。抗生物質系抗新生物薬の例としては、限定されるものではないが、ダクチノマイシンなどのアクチノマイシン；ダウノルビシンおよびドキソルビシンなどのアントロサイクリン；ならびにブレオマイシンが挙げられる。

【0108】

ダクチノマイシンは、アクチノマイシンＤとしても知られ、注射液の形態でコスメゲン(COSMEGEN)（商標）として市販されている。ダクチノマイシンは、ウィルムス腫瘍および横紋筋肉腫の治療に指示される。悪心、嘔吐および食欲不振がダクチノマイシンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0109】

ダウノルビシン、（８Ｓ−シス−）−８−アセチル−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リクソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、リポソーム注射形態としてダウノキソーム(DAUNOXOME)（商標）として、または注射液としてセルビジン(CERUBIDINE)（商標）として市販されている。ダウノルビシンは、急性非リンパ球性白血病および進行性ＨＩＶ関連カポジ肉腫の治療における寛解導入に指示される。骨髄抑制がダウノルビシンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0110】

ドキソルビシン、（８Ｓ，１０Ｓ）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リクソ−ヘキソピラノシル）オキシ］−８−グリコロイル，７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−１−メトキシ−５，１２ナフタセンジオン塩酸塩は、注射可能な形態としてルベックス(RUBEX)（商標）またはアドリアマイシンＲＤＦ(ADRIAMYCIN RDF)（商標）として市販されている。ドキソルビシンは、主として急性リンパ芽球性白血病および急性骨髄芽球性白血病の治療に指示されるが、いくつかの固形腫瘍およびリンパ腫の治療における有用成分でもある。骨髄抑制がドキソルビシンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0111】

ブレオマイシン、ストレプトミセス・ヴェルチシルス(Streptomyces verticillus)の株から単離された細胞傷害性グリコペプチド系抗生物質の混合物は、ベレノキサン(BLENOXANE)（商標）として市販されている。ブレオマイシンは、単剤として、または他の薬剤と組み合わせて、扁平上皮癌、リンパ腫、および精巣癌の待期療法に指示される。肺毒性および皮膚毒性がブレオマイシンの最も一般的な用量制限副作用である。

【0112】

トポイソメラーゼＩＩ阻害剤としては、限定されるものではないが、エピポドフィロトキシンが挙げられる。

【0113】

エピポドフィロトキシンは、マンドレイク植物由来の細胞周期特異的抗新生物薬である。エピポドフィロトキシンは、一般に、トポイソメラーゼＩＩとＤＮＡとの三元複合体を形成してＤＮＡ鎖の切断を引き起こすことによって、細胞周期のＳ期およびＧ_２期において細胞に影響を及ぼす。この鎖切断が蓄積し、細胞死をたどる。エピポドフィロトキシンの例としては、限定されるものではないが、エトポシドおよびテニポシドが挙げられる。

【0114】

エトポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−エチリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液またはカプセル剤としてベプシド(VePESID)（商標）として市販されており、一般にＶＰ−１６として知られている。エトポシドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、精巣癌および非小細胞肺癌の治療に指示される。骨髄抑制がエトポシドの最も一般的な副作用である。白血球減少の発生率の方が、血小板減少(leukopenialeukopenia)よりも重大となる傾向がある。

【0115】

テニポシド、４’−デメチル−エピポドフィロトキシン９［４，６−０−（Ｒ）−テニリデン−β−Ｄ−グルコピラノシド］は、注射液としてブモン(VUMON)（商標）として市販されており、一般にＶＭ−２６として知られている。テニポシドは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、小児における急性白血病の治療に指示される。骨髄抑制がテニポシドの最も一般的な用量制限副作用である。テニポシドは、白血球減少(leukopenialeukopenia)および血小板減少の両方を誘発し得る。

【0116】

代謝拮抗性抗新生物薬は、ＤＮＡ合成を阻害すること、またはプリンもしくはピリミジン塩基の合成を阻害し、それによりＤＮＡ合成を制限することによって細胞周期のＳ期（ＤＮＡ合成）に作用する、細胞周期特異的抗新生物薬である。その結果、Ｓ期は進行せず、細胞死をたどる。代謝拮抗性抗新生物薬の例としては、限定されるものではないが、フルオロウラシル、メトトレキサート、シタラビン、メルカプトプリン(mecaptopurine)、チオグアニン、およびゲムシタビンが挙げられる。

【0117】

５−フルオロウラシル、５−フルオロ−２，４−（１Ｈ，３Ｈ）ピリミジンジオンは、フルオロウラシルとして市販されている。５−フルオロウラシルを投与すると、チミジル酸合成が阻害され、またＲＮＡおよびＤＮＡの両方に組み込まれる。その結果は一般に細胞死である。５−フルオロウラシルは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、乳癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、および膵癌の治療に指示される。骨髄抑制および粘膜炎が５−フルオロウラシルの用量制限副作用である。他のフルオロピリミジン類似体としては、５−フルオロデオキシウリジン（フロクスウリジン）および５−フルオロデオキシウリジン一リン酸が挙げられる。

【0118】

シタラビン、４−アミノ−１−β−Ｄ−アラビノフラノシル−２（１Ｈ）−ピリミジノンは、シトサール−Ｕ(CYTOSAR-U)（商標）として市販されており、一般にＡｒａ−Ｃとして知られている。シタラビンは、成長中のＤＮＡ鎖へのシタラビンの末端組み込みによってＤＮＡ鎖の伸長を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示すと考えられている。シタラビンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。他のシチジン類似体としては、５−アザシチジンおよび２’，２’−ジフルオロデオキシシチジン（ゲムシタビン）が挙げられる。シタラビンは、白血球減少(leukopenialeukopenia)、血小板減少、および粘膜炎を誘発する。

【0119】

メルカプトプリン、１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオン一水和物は、プリントール(PURINETHOL)（商標）として市販されている。メルカプトプリンは、現時点でまだ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示す。メルカプトプリンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。骨髄抑制および胃腸粘膜炎が、高用量のメルカプトプリンの副作用と予想される。有用なメルカプトプリン類似体はアザチオプリンである。

【0120】

チオグアニン、２−アミノ−１，７−ジヒドロ−６Ｈ−プリン−６−チオンは、タブロイド(TABLOID)（商標）として市販されている。チオグアニンは、現時点でまだ特定されていないメカニズムによってＤＮＡ合成を阻害することにより、Ｓ期で細胞期特異性を示す。チオグアニンは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、急性白血病の治療に指示される。白血球減少(leukopenialeukopenia)、血小板減少、および貧血を含む骨髄抑制がチオグアニン投与の最も一般的な用量制限副作用である。しかしながら、消化管副作用も起こり、用量制限となり得る。他のプリン類似体としては、ペントスタチン、エリスロヒドロキシノニルアデニン、リン酸フルダラビン、およびクラドリビンが挙げられる。

【0121】

ゲムシタビン、２’−デオキシ−２’，２’−ジフルオロシチジン一塩酸塩（β−異性体）は、ジェムザール(GEMZAR)（商標）として市販されている。ゲムシタビンは、Ｓ期にて、またＧ１／Ｓ境界を通る細胞の進行を遮断することによって、細胞期特異性を示す。
ゲムシタビンは、シスプラチンと組み合わせて局所進行性非小細胞肺癌の治療に指示され、また単独で局所進行性膵癌の治療に指示される。白血球減少(leukopenialeukopenia)、血小板減少、および貧血を含む骨髄抑制が、ゲムシタビン投与の最も一般的な用量制限副作用である。

【0122】

メトトレキサート、Ｎ−［４［［（２，４−ジアミノ−６−プテリジニル）メチル］メチルアミノ］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸は、メトトレキサートナトリウムとして市販されている。メトトレキサートは、プリンヌクレオチドおよびチミジル酸の合成に必要とされるジヒドロ葉酸レダクターゼの阻害を介して、ＤＮＡの合成、修復、および／または複製を阻害することによって、特にＳ期に細胞周期作用を示す。メトトレキサートは、単剤として、または他の化学療法薬と組み合わせて、絨毛癌、髄膜白血病、非ホジキンリンパ腫、ならびに乳癌、頭部癌、頸部癌、卵巣癌、および膀胱癌の治療に指示される。骨髄抑制（白血球減少、血小板減少、および貧血）および粘膜炎が、メトトレキサート投与の予想される副作用である。

【0123】

カンプトテシンおよびカンプトテシン誘導体を含むカンプトテシン類は、トポイソメラーゼＩ阻害剤として入手可能または開発中である。カンプトテシン細胞傷害活性は、そのトポイソメラーゼＩ阻害活性に関連すると考えられている。カンプトテシンの例としては、限定されるものではないが、イリノテカン、トポテカン、および下記の７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトテシンの種々の光学形態が挙げられる。

【0124】

イリノテカンＨＣｌ、（４Ｓ）−４，１１−ジエチル−４−ヒドロキシ−９−［（４−ピペリジノピペリジノ）カルボニルオキシ］−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン塩酸塩は、注射液カンプトサール(CAMPTOSAR)（商標）として市販されている。

【0125】

イリノテカンは、その活性代謝物ＳＮ−３８とともにトポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合する、カンプトテシンの誘導体である。細胞傷害性は、トポイソメラーゼＩ：ＤＮＡ：イリンテカンまたはＳＮ−３８の三元複合体と複製酵素との相互作用により引き起こされる回復不能な二本鎖切断の結果として生じると考えられている。イリノテカンは、結腸または直腸の転移性癌の治療に指示される。イリノテカンＨＣｌの用量制限副作用は、好中球減少を含む骨髄抑制、および下痢を含むＧＩ作用である。

【0126】

トポテカンＨＣｌ、（Ｓ）−１０−［（ジメチルアミノ）メチル］−４−エチル−４，９−ジヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３’，４’，６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４−（４Ｈ，１２Ｈ）−ジオン一塩酸塩は、注射液ハイカムチン(HYCAMTIN)（商標）として市販されている。トポテカンは、トポイソメラーゼＩ−ＤＮＡ複合体と結合して、ＤＮＡ分子のねじれ歪みに応答してトポイソメラーゼＩにより引き起こされる一本鎖切断の再連結を妨げるカンプトテシンの誘導体である。トポテカンは、転移性の卵巣癌および小細胞肺癌の第二選択治療に指示される。トポテカンＨＣｌの用量規制副作用は、骨髄抑制、主に好中球減少である。

【0127】

本明細書には、ＥＺＨ１および／またはＥＺＨ２を阻害することによって改善することができ、それによって、例えば、メチル化により活性化される標的遺伝子およびメチル化により抑制される標的遺伝子の発現のレベルを調節したり、シグナル伝達タンパク質の活性を調節したりする、自己免疫および炎症性の病態および疾患の治療または予防法が提供される。方法は、本明細書に記載された薬剤の治療的有効量を、ヒト（例えば、それを必要とするヒト）に投与することを含んでなりうる。

【0128】

炎症は、外傷に対する、一群の血管性、細胞性、および神経性の応答を意味する。炎症は、単球、好中球、および顆粒球などの炎症細胞組織への移動として特徴付けられることができる。これは通常、内皮バリアー機能の減少および組織への浮腫を伴う。炎症は、急性または慢性のいずれかとして分類されることができる。急性炎症は、有害な刺激に対する体の初期応答であり、血液から傷害組織への血漿および白血球の移動の増加によって達成される。生化学的な事象のカスケードが伝播し、傷害組織内の局所血管系、免疫系、およびさまざまな細胞を巻き込んで、炎症反応を成熟させる。長期の炎症は、慢性炎症として知られ、炎症の部位に存在する細胞の種類の漸進的な変化を導き、炎症プロセスから同時に起こる組織の破壊および治癒を特徴とする。

【0129】

炎症は、感染症に対する免疫応答の一部として、または外傷に対する急性の応答として起こる場合、有益であり、通常は自己限定的である。しかし、炎症はさまざまな病態の下で有害な可能性がある。これには、感染体に応えて過剰な炎症が生じることが含まれ、臓器障害および死（例えば、敗血症の場合）につながる可能性がある。そのうえ、慢性炎症は、一般に有害であり、組織への重篤で不可逆的な障害を引き起して、数多くの慢性疾患の根源にある。そのような場合では、外来物質に対する慢性の応答はまた、自己組織に対するバイスタンダー（bystander）障害につながる可能性があるが、免疫応答はしばしば、自己組織（自己免疫）に向けられる。

【0130】

従って抗炎症治療の目的は、この炎症を減じること、存在する場合、自己免疫を阻害すること、および生理的プロセスまたは治癒および組織修復の進行を可能にすることである。

【0131】

下記に例示されるように、薬剤は、筋骨格系炎症、血管炎症、神経炎症、消化器系炎症、眼炎症、生殖系の炎症、他の炎症を含む、体のいかなる組織および臓器の炎症を治療するのに使用されうる。

【0132】

筋骨格系炎症は、筋骨格系のいかなる炎症病態、特に手、手首、ひじ、肩、あご、脊椎、首、臀部、膝（knew）、足首、および足の関節を含む骨格関節を冒す炎症病態、ならびに腱などの筋肉を骨に結合させる組織を冒す病態を指す。本発明の化合物で治療されうる筋骨格系炎症の例としては、関節炎（例えば、変形性関節症、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、急性および慢性感染性関節炎、痛風および偽痛風に伴う感染性関節炎、ならびに若年性特発性関節炎）、腱炎、滑膜炎、腱鞘炎、滑液包炎、結合織炎（線維筋痛症）、上顆炎、筋炎、ならびに骨炎（例えば、ページェット病、恥骨骨炎、および嚢胞性線維性骨炎（osteitis fibrosa cystic）を含む）が挙げられる。

【0133】

眼炎症は、眼瞼を含む眼のいかなる構造体の炎症を指す。本発明において治療されうる眼炎症としては、例えば、眼瞼炎、眼瞼皮膚弛緩症、結膜炎、涙腺炎、角膜炎、乾性角結膜炎（ドライアイ）、強膜炎、睫毛乱生、およびブドウ膜炎が挙げられる。

【0134】

本発明において治療されうる神経系の炎症としては、例えば、脳炎、ギラン・バレー症候群、髄膜炎、神経性筋強直症、ナルコレプシー、多発性硬化症、脊髄炎、および統合失調症が挙げられる。

【0135】

本発明において治療されうる血管系またはリンパ系の炎症としては、例えば、動脈硬化（arthrosclerosis）、関節炎、静脈炎、血管炎、およびリンパ管炎が挙げられる。

【0136】

本発明において治療されうる消化器系の炎症病態としては、例えば、胆管炎、胆嚢炎、腸炎、小腸結腸炎、胃炎、胃腸炎、回腸炎、および直腸炎が挙げられる。

【0137】

本発明において治療されうる生殖系の炎症病態としては、例えば、子宮頸管炎、絨毛羊膜炎、子宮内膜炎、副睾丸炎、臍炎、卵巣炎、睾丸炎、卵管炎、卵管卵巣膿瘍、尿道炎、腟炎、外陰炎、および外陰部痛が挙げられる。

【0138】

薬剤を使用して、炎症性の構成要素を有する自己免疫の病態を治療しうる。そのような病態としては、急性汎発性全身性脱毛症（alopecia universalise）、ベーチェット病、シャーガス病、慢性疲労症候群、自律神経失調症、脳脊髄炎、強直性脊椎炎、再生不良性貧血、化膿性汗腺炎、自己免疫性肝炎、自己免疫性卵巣炎、セリアック病、クローン病、１型糖尿病、巨細胞性動脈炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本病、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、川崎病、エリテマトーデス、顕微鏡的大腸炎、顕微鏡的多発動脈炎、混合結合組織病、多発性硬化症、重症筋無力症、オプソクローヌスミオクローヌス症候群（opsocionus myoclonus syndrome）、視神経炎、オード甲状腺炎（ord's thyroiditis）、天疱瘡、結節性多発動脈炎、多発筋痛症、ライター症候群、シェーグレン症候群、側頭動脈炎、ウェゲナー肉芽腫症、温式自己免疫性溶血性貧血、間質性膀胱炎、ライム病、斑状強皮症、サルコイドーシス、硬皮症、潰瘍性大腸炎、および白斑が挙げられる。

【0139】

薬剤を使用して、炎症性の構成要素を有するＴ細胞媒介性過敏性疾患を治療しうる。そのような病態としては、接触過敏症、接触皮膚炎（例えばツタウルシによるもの）、蕁麻疹（uticaria）、皮膚アレルギー、呼吸器アレルギー（花粉症、アレルギー性鼻炎）、およびグルテン過敏性腸症（セリアック病（Celliac disease））が挙げられる。

【0140】

本発明において処理治療されうる他の炎症病態としては、例えば、虫垂炎、皮膚炎、皮膚筋炎、心内膜炎、結合織炎、歯肉炎、舌炎、肝炎、化膿性汗腺炎、虹彩炎、喉頭炎、乳腺炎、心筋炎、腎炎、耳炎、膵炎、耳下腺炎、心膜炎（percarditis）、腹膜炎（peritonoitis）、咽頭炎、胸膜炎、肺臓炎、前立腺炎（prostatistis）、腎盂腎炎、および口内炎（stomatisi）、移植による拒否反応（腎臓、肝臓、心臓、肺、膵臓（例えば島細胞）、骨髄、角膜、小腸などの臓器、皮膚同種異系移植片、皮膚同種同系移植片、および心臓弁異種移植片（xengraft）、血清病（sewrum sickness）、ならびに移植片対宿主病を含む）、急性膵炎、慢性膵炎、急性呼吸窮迫症候群、セクザリー症候群（Sexary’s syndrome）、先天性副腎過形成症、非化濃性甲状腺炎、がんに伴う高カルシウム血症、天疱瘡、水疱性疱疹状皮膚炎、重症多形性紅斑、剥脱性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、季節性または通年性アレルギー性鼻炎、気管支ぜんそく、接触皮膚炎、アトピー性（astopic）皮膚炎、薬物過敏（hypersensistivity）反応、アレルギー性結膜炎、角膜炎、眼部帯状疱疹、虹彩炎および虹彩毛様体炎（oiridocyclitis）、網脈絡膜炎、視神経炎、症候性サルコイドーシス、劇症または播種性肺結核化学療法、成人における特発性血小板減少性紫斑病、成人における続発性血小板減少症、後天性（自己免疫性）溶血性貧血、成人における白血病およびリンパ腫、小児の急性白血病、限局性腸炎、自己免疫性血管炎、多発性硬化症、慢性閉塞性肺疾患、固形臓器移植拒絶、敗血症が挙げられる。

【0141】

好ましい治療は、移植による拒否反応、乾癬性関節炎、多発性硬化症、１型糖尿病、ぜんそく、全身性エリテマトーデス（lupus erythematosis）、慢性肺疾患、および感染性の病態（例えば敗血症）に伴う炎症の治療にいずれか１つを含む。

【0142】

医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供され得る。このような単位は、治療される病態、投与経路、ならびに患者の年齢、体重および状態によって、例えば、０．５ｍｇ〜１ｇ、好ましくは１ｍｇ〜７００ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１００ｍｇの式（Ｉ）の化合物を含有してよく、または医薬組成物は、単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位投与形で提供してもよい。好ましい単位用量組成物は、本明細書の上記に挙げたように、有効成分の一日用量もしくは分割用量、またはその適切な画分を含有するものである。さらに、このような医薬組成物は、製薬技術分野で周知のいずれの方法によって調製してもよい。

【0143】

医薬組成物は、例えば、経口（頬側または舌下を含む）、直腸内、経鼻、局所（頬側、舌下、または経皮を含む）、膣内、または非経口（皮下、筋肉内、静脈内、または皮内を含む）経路などの適切ないずれの経路による投与にも適合可能である。このような組成物は、例えば式（Ｉ）の化合物を１または複数の担体または賦形剤と会合させることにより、製薬分野で公知のいずれの方法によって調製してもよい。

【0144】

経口投与に適合した医薬組成物は、カプセル剤または錠剤などの離散単位；散剤または顆粒剤；水性または非水性液体中の溶液または懸濁液；可食フォームまたはホイップ；水中油型液体エマルションまたは油中水型液体エマルションとして提供され得る。

【0145】

カプセル剤は、上記のように粉末混合物を作製し、成形されたゼラチン剤皮に充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウムまたは固体ポリエチレングリコールなどの流動促進剤および滑沢剤を、充填操作の前に粉末混合物に添加することができる。寒天、炭酸カルシウム、または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤または可溶化剤もまた、カプセル剤が摂取された際の医薬の利用度を向上するために添加することができる。

【0146】

さらに、所望される場合または必要な場合には、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤、および着色剤もまた本混合物に配合することができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、天然糖類（例えば、グルコースもしくはβ−ラクトース）、トウモロコシ甘味剤、天然および合成ガム、例えば、アラビアガム、トラガカントガムまたはアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックスなどが挙げられる。これらの投与形に使用される滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが挙げられる。崩壊剤としては、限定されるものではないが、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが挙げられる。錠剤は、例えば、粉末混合物を調製し、造粒またはスラッグを形成し、滑沢剤および崩壊剤を加え、打錠することにより調剤される。粉末混合物は、適宜粉砕された化合物を、上記の希釈剤または基剤、ならびに場合によりカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、もしくはポリビニルピロリドンなどの結合剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級塩などの再吸収促進剤、ならびに／またはベントナイト、カオリン、もしくはリン酸二カルシウムなどの吸収剤とともに混合することによって調製される。粉末混合物は、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク、または鉱油の添加により造粒することができる。次に、滑沢化された混合物が打錠される。本発明の化合物は、自由流動性の不活性担体と組み合わせて、造粒またはスラッグ化工程を経ずに、直接打錠することもできる。セラックの封止コート、糖またはポリマー材料のコーティング、およびワックスのつや出しコーティングからなる透明または不透明の保護コーティングを提供することができる。異なった単位用量を識別するために、これらコーティングに色素を添加することができる。

【0147】

溶液、シロップ、およびエリキシルなどの経口液は、所与量が所定量の式（Ｉ）の化合物を含有するように、単位投与形で調製することができる。シロップ剤は、本化合物を、適宜着香した水溶液に溶かすことにより調製することができ、一方、エリキシル剤は、非毒性のアルコール性ビヒクルの使用により調製される。懸濁液は、本化合物を非毒性ビヒクルに分散させることにより処方することができる。エトキシル化イソステアリルアルコールおよびポリオキシエチレンソルビトールエーテルなどの可溶化剤および乳化剤、保存剤、ペパーミントオイルなどの着香添加剤、または天然甘味剤、またはサッカリン、または他の人工甘味剤なども添加することができる。

【0148】

必要に応じて、経口投与のための単位投与医薬組成物をマイクロカプセル化することができる。処方物はまた、放出を延長または持続させるために、例えば、粒子状材料をポリマーまたはワックスなどでコーティングまたは包埋することにより調製することもできる。

【0149】

直腸投与に適合した医薬組成物は、坐剤または浣腸として提供してよい。

【0150】

膣投与に適合した医薬組成物は、膣坐剤、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー処方物として提供してよい。

【0151】

非経口投与に適合した医薬処方物としては、抗酸化剤、バッファー、静菌剤および組成物を意図するレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性および非水性無菌注射液、ならびに沈殿防止剤および増粘剤を含み得る水性および非水性無菌懸濁液が含まれる。これらの医薬組成物は単位用量または複数用量容器、例えば、密閉アンプルおよびバイアルで提供されてよく、使用直前に無菌液体担体、例えば、注射水を加えるだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存してよい。即時調合注射溶液および懸濁液は、無菌の粉末、顆粒および錠剤から調製され得る。

【0152】

本医薬組成物は、特に上述した成分の他、対象とする処方物のタイプに関して当技術分野で慣例の他の薬剤を含んでよく、例えば、経口投与に好適なものは香味剤を含んでよいと理解されるべきである。

【0153】

本発明の化合物の治療上有効な量は、例えば、意図するレシピエントの年齢および体重、治療を必要とする厳密な病態およびその重篤度、処方物の性質、および投与経路を含むいくつかの因子によって異なり、最終的には投薬を支持する担当者の裁量にある。しかしながら、貧血治療のための有効量の式（Ｉ）の化合物は一般に、０．００１〜１００ｍｇ／ｋｇレシピエント体重／日の範囲、好適には０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。７０ｋｇの成体哺乳動物では、１日当たりの実際の量は好適には７〜７００ｍｇであり、この量は１日当たり単回用量で与えられてよく、合計一日用量が同じとなるように１日当たり数回（例えば、２回、３回、４回、５回または６回）の分割用量で与えられてよい。有効量の塩または溶媒和物などは、式（Ｉ）の化合物自体の有効量の割合として決定され得る。上記に挙げられた他の症状の治療にも同様の用量が適当であることが想定される。

【0154】

定義
用語はそれらの許容される意味の範囲内で使用される。以下の定義は、定義された用語を限定するのではなく、明らかにすることを意味する。

【0155】

本明細書において使用する場合、用語「アルキル」は、明示された数の炭素原子を有する飽和、直鎖または分岐型炭化水素部分を表す。用語「（Ｃ_１−Ｃ_６）アルキル」は、１〜６個の炭素原子を含有するアルキル部分を意味する。例示的アルキルとしては、限定されるものではないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、およびヘキシルが含まれる。

【0156】

「ハロ（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル」など、用語「アルキル」が、他の置換基と組み合わせて使用される場合、用語「アルキル」は、二価の直鎖または分岐鎖炭化水素基を包含することが意図され、その結合点はアルキル部分を介する。用語「ハロ（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル」は、直鎖または分岐鎖炭素基である１〜４個の炭素原子を含有するアルキル部分の１以上の炭素原子において、同じであっても異なっていてもよい１以上のハロゲン原子を有する基を有する基を意味することを意図する。本発明において有用な「ハロ（Ｃ_１−Ｃ_４）アルキル」基の例は、限定されるものではないが、−ＣＦ_３（トリフルオロメチル）、−ＣＣｌ_３（トリクロロメチル）、１，１−ジフルオロエチル、２−フルオロ−２−メチルプロピル、２，２−ジフルオロプロピル、２，２，２−トリフルオロエチルおよびヘキサフルオロイソプロピルが含まれる。

【0157】

用語「ハロゲン」および「ハロ」は、クロロ、フルオロ、ブロモ、またはヨード置換基を表す。「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、−ＯＨ基を意味することを意図する。

【0158】

本明細書において使用する場合、用語「てもよい(optionally)」は、次に記載される１または複数の事象が、発生しても、または発生しなくてもよいことを意味し、発生する１または複数の事象、および発生しない１または複数の事象の両方を含む。

【0159】

本明細書において使用する場合、用語「治療」は、特定の病態を緩和すること、病態の１以上の症状を排除または軽減すること、病態の進行を緩徐化また排除すること、および過去に罹患したまたは診断された患者または対象者における病態の再発を遅延させることを意味する。

【0160】

本明細書において使用する場合、用語「有効量」は、例えば、研究者または臨床医により求められる、組織、系、動物、またはヒトの生物学的または医学的応答を惹起する薬物また医薬剤の量を意味する。

【0161】

用語「治療的有効な量」は、そのような量を受容していない対応する対象者と比較して、疾患、障害、もしくは副作用の治療の改善、治癒、もしくは改善、または疾患もしくは障害の進行速度の減少をもたらす任意の量を意味する。この用語はまた、正常な生理学的機能を増進するのに有効な量もその範囲内に含む。療法において使用するために、治療上有効な量の式（Ｉ）の化合物ならびにその塩は、粗化学物質として投与してもよい。加えて、前記有効成分は医薬組成物として提供してもよい。

【0162】

化合物の製造
略号
ＡｃＯＨ 酢酸
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｂｏｃ_２Ｏ 二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル
ＣＨ_３ＣＮ アセトニトリル
ＣＨ_３ＮＯ_２ ニトロメタン
Ｃｓ_２ＣＯ_３ 炭酸セシウム
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＢＡＬ−Ｈ ジイソブチルアルミニウム水素化物
ＤＭＡＰ ４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミドヒドロクロリド
ＥＳ エレクトロスプレー
Ｅｔ_３Ｎ トリエチルアミン
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＣＯＣｌ クロロギ酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
ｈ 時間
Ｈ_２ 水素ガス
ＨＣｌ 塩酸
Ｈ_２Ｏ 水
Ｈ_２ＳＯ_４ 硫酸
ＨＯＡｔ １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
Ｉｎ（ＯＴｆ）_３ インジウム（ＩＩＩ）トリフルオロメタン メタンスルホネート
Ｋ_２ＣＯ_３ 炭酸カリウム
ＫＯＡｃ 酢酸カリウム
ＫＯｔＢｕ ｔｅｒｔ−ブトキシドカリウム
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィー質量分析
ＬｉＢＨ_４ ホウ化水素リチウム
ＬｉＣｌＯ_４ 過塩素酸リチウム
ＭｅＯＨ メタノール
ＭｇＳＯ_４ 硫酸マグネシウム
ｍｉｎ 分
ＭＳ 質量分析
ＮａＢＨ_４ ホウ化水素ナトリウム
ＮａＢＨ_３ＣＮ シアノホウ化水素ナトリウム
ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３ トリアセトキシホウ化水素ナトリウム
Ｎａ_２ＣＯ_３ 炭酸ナトリウム
ＮａＨＣＯ_３ 重炭酸ナトリウム
ＮａＨＭＤＳ ビス（トリメチルシリル）アミドナトリウム
Ｎａ_２ＨＰＯ_４ リン酸二ナトリウム
ＮａＮＯ_２ 亜硝酸ナトリウム
ＮａＯＨ 水酸化ナトリウム
Ｎａ_２ＳＯ_４ 硫酸ナトリウム
ＮＢＳ Ｎ−ブロモコハク酸イミド
ＮＨ_４Ｃｌ 塩化アンモニウム
ＮＨ_４ＯＡｃ 酢酸アンモニウム
ＮＨ_４ＯＨ 水酸化アンモニウム
ＮＭＭ Ｎ−メチルモルホリン
２−ＮＴｆ_２−ピリジン １，１，１−トリフルオロ−Ｎ−（ピリジン−２−イル）−Ｎ−（（トリフルオロメチル）スルホニル）メタンスルホンアミド
Ｐｄ／Ｃ 炭素上のパラジウム
ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ） ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）
Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４ テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）
ＰｈＨ ベンゼン
Ｐ_２Ｏ_５ 五酸化二リン
ＰＯＣｌ_３ 塩化ホスホリル
ｐｙｒ ピリジン
ＲＴ 室温
ＳＯＣｌ_２ 塩化チオニル
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
Ｔｆ_２Ｏ トリフルオロメタン スルホン酸無水物
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴｉＣｌ_４ 塩化チタン（ＩＶ）
ＴＭＳＣｌ 塩化トリメチルシリル
Ｔｉ（ＯｉＰｒ）_４ チタン酸イソプロポキシド （ＩＶ）

【0163】

一般合成スキーム
本発明の化合物は、周知の標準的な合成法を含む様々な方法によって作製することができる。例示的な一般合成法を以下に示し、その後、本発明の具体的化合物を実施例において製造する。当業者ならば、本明細書に記載の置換基が本明細書に記載の合成法に適合しなければ、その置換基は反応条件に適した好適な保護基で保護されてもよい。保護基は、所望の中間体または目的化合物を提供するために、一連の反応の適切な時点で除去することができる。下記のスキームの総てにおいて、有機合成の一般原則に従い、要すれば、感受性または反応性の基に対する保護基が使用される。保護基は有機合成の標準的方法(T.W. Green and P.G.M. Wuts, (1991) Protecting Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons,保護基に関して引用することより本明細書の一部とされる)に従って操作される。これらの基は、化合物合成の都合のよい段階で、当業者に容易に明らかとなる方法を用いて除去される。方法の選択、ならびに反応条件およびそれらの実行順序は、本発明の化合物の製法と一致するものとする。標準的な材料は市販されているか、または市販の出発材料から、当業者に公知の方法を用いて製造される。

【0164】

式（Iｄ）の化合物は、スキーム１または類似の方法に従い調製することができる。適切に置換されたチオフェン−３−カルボン酸のエステル化によって対応するエステルがもたらされる。インジウムを媒介した適切に置換された無水物（または塩化アシル）とのアシル化反応によって５−アシルチオフェンが得られる。適切に置換されたケトンとのマクマリー結合によって四置換オレフィンが得られる。適切に置換されたトリフラート（またはアルキルハリド）とのアルキル化または適切に置換されたアルデヒドとの還元的アミノ化によって、置換された誘導体が得られる。エステルの鹸化、続く結果として得られるカルボン酸の適切に置換されたアミンとの結合によって、式（Iｄ）の化合物が得られる。
スキーム１：式（Iｄ）の化合物の合成

【化8】

【0165】

式（Ｉｃ）の化合物は、スキーム２または類似の方法に従い、調製することができる。適切に置換されたケトンの、それに対応するワインレブアミド(Weinreb amide)からの生成は、適切なグリニャール（またはアルキルリチウム）試薬で成し得る。対応するビニルトリフラートの生成、続く適切に置換されたブロモチオフェンへのパラジウムを媒介した結合によって三置換オレフィンが得られる。オレフィンの還元、続く適切に置換されたトリフラート（またはアルキルハリド）とのアルキル化または適切に置換されたアルデヒドとの還元的アミノ化によって、置換された誘導体が得られる。エステルの鹸化、続く結果として得られるカルボン酸の適切に置換されたアミンとの結合によって、式（Ｉｃ）の化合物が得られる。
スキーム２：式（Ｉｃ）の化合物の合成

【化9】

【0166】

Ｒ^３およびＲ^４が一緒になって-ＣＨ_２ＣＨ_２−を表す式（Ｉ）の化合物は、スキーム３または類似の方法に従い調製することができる。適切に置換されたチオフェンカルバルデヒドとニトロメタンとの縮合によって対応するニトロビニルチオフェンが得られる。ニトロビニルの還元、続く結果として得られるアミンの捕捉によって対応するウレタンが産出される。ウレタンをＰＯＣｌ_３／Ｐ_２Ｏ_５で処理することによってラクタムが得られる。適切に置換された無水物（または塩化アシル）とのインジウムを媒介したアシル化反応によって５−アシルチオフェンが得られる。適切に置換されたアミンとの還元的アミノ化または適切に置換されたケトンとのマクマリー結合によって合成の(elaborated)チオフェンラクタムが得られる。ラクタム窒素の適切に置換されたアルキルハリドとのアルキル化、続くベンジル保護基の除去によって、式（Ｉ）の化合物が得られる。
スキーム３：化合物（I）の合成

【化10】

【0167】

式（Ｉｃ２）の化合物は、スキーム４または類似の方法に従い、調製することができる。イリジウムを媒介したホウ素化、続く適切に置換されたトリフレートとのスズキ結合によって、対応する結合したオレフィンが得られる。オレフィンのイリジウムを媒介した不斉還元、続くＢｏｃ保護基の除去によってピペリジンが得られる。適切に置換されたトリフレート（またはアルキルハリド）とのアルキル化または適切に置換されたアルデヒドとの還元的アミノ化によって、置換された誘導体が得られる。エステルの鹸化、続く結果として得られるカルボン酸の適切に置換されたアミンとの結合によって、式（Ｉｃ２）の化合物が得られる。
スキーム４：式（Ｉｃ２）の化合物の合成

【化11】

【実施例】

【0168】

実験
以下の指針は、本明細書に記載の総ての実験手順に当てはまる。反応は総て、特に断りのない限り、炉で乾燥させたガラス器具を用い、陽圧窒素下で行った。示されている温度は外部温度（すなわち、槽温）であり、およその数値である。空気および水分感受性の液体は、シリンジを介して移した。試薬は受け取ったものをそのまま使用した。使用溶媒は、販売者により「無水」として挙げられているものである。溶液中の試薬に関して挙げられているモル濃度はおよその数値であり、対応する標品に対して事前に滴定を行うことなく用いた。反応は総て、特に断りのない限り撹拌子により撹拌した。加熱は、特に断りのない限り、シリコーン油(silicon oil)を含有する加熱浴を用いて行った。マイクロ波照射（２．４５ＧＨｚで０〜４００Ｗ）により行う反応は、Biotageイニシエーター（商標）２．０装置をBiotageマイクロ波ＥＸＰバイアル（０．２〜２０ｍＬ）およびセプタムおよびキャップとともに用いて行った。溶媒およびイオン電荷に基づいて使用した照射レベル（すなわち、高、通常、低）は、販売者の仕様書に基づいた。−７０℃より低い温度への冷却は、ドライアイス／アセトンまたはドライアイス／２−プロパノールを用いて行った。乾燥剤として用いた硫酸マグネシウムおよび硫酸ナトリウムは無水級であり、互換的に使用された。「真空」または「減圧下」で除去されると記載されている溶媒は、回転蒸発によりこれを行った。

【0169】

分取順相シリカゲルクロマトグラフィーは、RediSepもしくはISCOGoldシリカゲルカートリッジ（４ｇ〜３３０ｇ）を備えたTeledyne ISCO CombiFlash Companion装置、またはＳＦ２５シリカゲルカートリッジ（４ｇ〜３００ｇ）を備えたAnalogix IF280装置、またはＨＰシリカゲルカートリッジ（１０ｇ〜１００ｇ）を備えたBiotage SP1装置を使用して行った。逆相ＨＰＬＣによる精製は、特に断りのない限り、固相としてYMC-packカラム（ＯＤＳ−Ａ ７５×３０ｍｍ）を用いて行った。特に断りのない限り、２５ｍＬ／分 Ａ（ＣＨ_３ＣＮ−０．１％ＴＦＡ）：Ｂ（水−０．１％ＴＦＡ）、１０〜８０％勾配Ａ（１０分）の移動相を、２１４ｎＭでのＵＶ検出とともに用いた。

【0170】

PE Sciex API 150シングル四重極質量分析計（カナダ、オンタリオ州、ソーンヒル、PE Sciex）を、エレクトロスプレーイオン化法を陽イオン検出モードで用いて作動させた。ゼロエア発生器（アメリカ合衆国、マサチューセッツ州、へーバリル、Balston Inc.）から霧化ガスを生成し、６５ｐｓｉで送達し、カーテンガスは、Dewar液体窒素容器から５０ｐｓｉで送達される高純度窒素であった。エレクトロスプレーニードルにかけられる電圧は４．８ｋＶであった。オリフィスは２５Ｖに設定し、質量分析計は、０．２ａｍｕのステップマスを用い、プロファイルデータを回収しながら、０．５スキャン／秒の速度でスキャンを行った。

【0171】

方法Ａ ＬＣＭＳ。 サンプルを、Hamilton１０μＬシリンジを備えたＣＴＣ ＰＡＬ オートサンプラー（ノースカロライナ州、キャルボロ、LEAP Technologies）を用いて質量分析計に導入し、Valco 10ポートインジェクションバルブに注入を行った。ＨＰＬＣポンプはShimadzu LC-10ADvp（メリーランド州、コロンビア、Shimadzu Scientific Instruments）であり、０．３ｍＬ／分、および３．２分で４．５％Ａから９０％Ｂへの直線勾配、０．４分の保持で作動させた。移動相は容器Ａの１００％（Ｈ_２Ｏ ０．０２％ＴＦＡ）および容器Ｂの１００％（ＣＨ_３ＣＮ ０．０１８％ＴＦＡ）から構成された。固定相はAquasil（Ｃ１８）であり、カラム寸法は１ｍｍ×４０ｍｍであった。検出は２１４ｎｍでのＵＶ、蒸発光散乱（ＥＬＳＤ）およびＭＳによった。

【0172】

方法Ｂ、ＬＣＭＳ。 あるいは、ＬＣ／ＭＳを備えたAgilent 1100分析ＨＰＬＣシステムを用い、１ｍＬ／分、および２．２分で５％Ａから１００％Ｂへの直線勾配、０．４分保持で作動させた。移動相は、容器Ａの１００％（Ｈ_２Ｏ ０．０２％ＴＦＡ）および容器Ｂの１００％（ＣＨ_３ＣＮ ０．０１８％ＴＦＡ）から構成された。固定相は粒径３．５μｍのZobax（Ｃ８）であり、カラム寸法は２．１ｍｍ×５０ｍｍであった。検出は２１４ｎｍでのＵＶ、蒸発光散乱（ＥＬＳＤ）およびＭＳによった。

【0173】

方法Ｃ、ＬＣＭＳ。 あるいは、キャピラリーカラム（５０×４．６ｍｍ、５μｍ）を備えたMDSSCIEX API 2000を用いた。ＨＰＬＣは、ＣＨ_３ＣＮ：ＮＨ_４ＯＡｃバッファーで溶出するZorbax SB-C18（５０×４．６ｍｍ、１．８μｍ）カラムを備えたAgilent-1200シリーズＵＰＬＣシステムにて行った。反応はマイクロ波（ＣＥＭ、Discover）中で行った。

【0174】

^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Bruker AVANCE 400MHz装置を、再処理のために使用されるACD Spect manager v.10とともに用いて、４００ＭＨｚで記録した。示されている多重度は、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝ｔ三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎｔ＝五重線、ｓｘｔ＝六重線、ｍ＝多重線、ｄｄ＝二重の二重線、ｄｔ＝二重の三重線などであり、ｂｒは幅広のシグナルを示す。そうではないことが示されない限り、ＮＭＲはＤＭＳＯ−ｄ_６中のものである。

【0175】

分析的ＨＰＬＣ： 生成物は、Agilent 1100 Analyticalクロマトグラフィーシステムにより、４．５×７５ｍｍ Zorbax XDB-C18カラム（３．５μｍ）を、２ｍＬ／分、Ｈ_２Ｏ（０．１％ギ酸）中、５％ＣＨ_３ＣＮ（０．１％ギ酸）から９５％ＣＨ_３ＣＮ（０．１％ギ酸）への４分勾配、１分保持で用いて分析した。

【0176】

中間体
中間体１
ａ）２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチノニトリル

【化12】

トルエン（５０ｍＬ）中、２−ヒドロキシ−４，６−ジメチルニコチノニトリル（５ｇ，３３．７ｍｍｏｌ）の溶液を、塩化ベンジル（４．７０ｍＬ，４０．５ｍｍｏｌ）および酸化銀（８．６０ｇ，３７．１ｍｍｏｌ）で処理し、次いで一晩１１０℃で撹拌した。反応物を、セライト（商標）を介して濾過し、固体物をＤＣＭ（２ｘ１００ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層をブライン （３０ ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４を介して濾過し、真空内濃縮し、残渣を得た。残渣を石油エーテル中２０−３０％ ＤＣＭを用いて、真空でシリカのプラグを介して精製した。所望の画分を合わせ、濃縮し、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチノニトリル（９ｇ，３５．９ｍｍｏｌ，収率１０６％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.47-7.56 (m, 2H), 7.31-7.43 (m, 3H), 6.72 (s, 1H), 5.51 (s, 2H), 2.48 (d, J=3.03 Hz, 6H). MS(ES) [M+H]⁺ 239.0.

【0177】

ｂ）２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチンアルデヒド

【化13】

不活性雰囲気下で、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチノニトリル（９ｇ，３５．９ｍｍｏｌ）の冷却した（氷浴）溶液に、ゆっくりとトルエン（４３．１ｍＬ，４３．１ｍｍｏｌ）中、１Ｍ ＤＩＢＡＬ−Ｈの溶液をシリンジで添加した。反応物を２０分間０℃で撹拌し、その時に氷浴を取り除き、反応物を一晩ＲＴで撹拌した。ＬＣＭＳは〜１４％の出発材が残留していることを示した。追加の分量のトルエン（１０．７６ｍＬ，１０．７６ｍｍｏｌ）中１ Ｍ ＤＩＢＡＬ−Ｈを添加し、反応物をＲＴで撹拌し続けた。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。反応物を冷却（氷浴）し、１Ｎ ＨＣｌ（５０ｍＬ）で急冷した。＊＊注意−発熱性。反応物をアルミニウム塩が自由に流動するまで３０分撹拌した。反応物を２．５Ｎ ＮａＯＨ（〜１５ｍＬ，〜ｐＨ７．５）で中性化した。二相混合物を濾過し、濾液をＤＣＭ（１００ｍＬ２Ｘ）で洗浄した。層を分離し、水性層をＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（brine）（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４を介して濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（カラム：８０グラムシリカ、溶出：０−５％ヘプタン中ＥｔＯＡｃ、勾配：１５分）によって精製した。所望の画分を合わせ、真空濃縮し、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチンアルデヒド（３．５ｇ，１４．３６ｍｍｏｌ，収率４０．０％） をふわふわとした白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 10.58 (s, 1H), 7.49 (d, J=7.07 Hz, 2H), 7.31-7.44 (m, 3H), 6.67 (s, 1H), 5.54 (s, 2H), 2.59 (s, 3H), 2.50 (s, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 242.1, [M+Na]⁺ 264.0.

【0178】

ｃ）（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタノール

【化14】

ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中、２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルニコチンアルデヒド（３．４６ｇ，１４．３４ｍｍｏｌ）の懸濁液を不活性雰囲気下で保存し、氷浴中で０℃に冷却した。撹拌した懸濁液にＮａＢＨ_４（０．６５１ｇ，１７．２１ｍｍｏｌ）を２分割にして添加した。第一回分のＮａＢＨ_４が添加された後、懸濁液は溶液になった。反応物を０℃で１０分間撹拌し、その時に氷浴を取り除き、反応物をＲＴで一晩撹拌した。反応溶液を真空除去し、残った白色固体残渣を飽和ＮａＨＣＯ_３（６０ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（１２５ｍＬ）とに分けた。水性層をＥｔＯＡｃ（１２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４を介して濾過し、真空濃縮し、（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタノール（３．５ｇ，１４．３９ｍｍｏｌ，１００％収率）を無色半透明の油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.44-7.53 (m, 2H), 7.30-7.43 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 5.46 (s, 2H), 4.72 (s, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.25 (br. s., 1H). MS(ES) [M+H]⁺ 244.1.

【0179】

ｄ）２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン

【化15】

ＤＣＭ（７０ｍＬ）中、（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メタノール（３．５ｇ，１４．３９ｍｍｏｌ）の懸濁液を不活性雰囲気下で保存し、３０分間ドライアイス／ＣＨ_３ＣＮ浴中で−４０℃に冷却した。冷却した溶液にＤＣＭ（１０．７９ｍＬ，２１．５８ｍｍｏｌ）中、２Ｍ ＳＯＣｌ_２を１回で添加し、反応物を−４０℃で撹拌し続けた。１時間後、ＬＣＭＳは５％の出発材料が残っていることを示した。追加のＤＣＭ（１．４３９ｍＬ，２．８８ｍｍｏｌ）中、２Ｍ ＳＯＣｌ_２を添加し、反応を継続させた。２０分後、反応物を氷水に注ぎ、飽和ＮａＨＣＯ_３（３０ｍＬ）でｐＨを７−８に調節した。水性層をＤＣＭ（１２５ｍＬ，２Ｘ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４を介して濾過し、真空濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（カラム：８０グラムシリカ。溶出：０−１０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン。勾配：１４分）によって精製し、２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン（２．８４ｇ，１０．７４ｍｍｏｌ，７４．７％収率）を無色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.48-7.57 (m, 2H), 7.30-7.45 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.38 (s, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 262.1.

【0180】

中間体２
ａ）４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化16】

ＲＴにて、窒素下で、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、３−ブロモ−４−メチルチオフェン（２０．０ｇ，１１３ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液にＴＨＦ中、イソプロピル塩化マグネシウム塩化リチウム錯体１．３Ｎ（９０ｍＬ，１１７ｍｍｏｌ）を滴状添加した。反応物を一晩撹拌した。反応物を−７８℃に冷却し、クロロギ酸メチル（１２ｍＬ，１５５ｍｍｏｌ）で処理した。反応物をＲＴに温め、１時間撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄し、３０分撹拌し、（水相にとどまった白色懸濁液を形成した）、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を真空下（４〜２ｍｍＨｇ）で４４〜５０℃（５０〜７５℃の油浴）にて短行程蒸留した。主画分および後の画分を合わせ、生成物４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１３．２ｇ，８５ｍｍｏｌ，収率７４．８ ％）を透明液体として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 156.8.

【0181】

ｂ）４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化17】

ＣＨ_３ＮＯ_２（５０ｍＬ）中、４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（５．０ｇ，３２．０ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ＬｉＣｌＯ_４（４．０ｇ，３７．６ｍｍｏｌ）、プロピオン酸無水物（５．８７ｍＬ，３８．４ｍｍｏｌ）およびＩｎ（ＯＴｆ）_３（０．９ｇ，１．６０１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を５０℃にて２時間撹拌した。ＬＣＭＳは反応が完了したことを示した。反応物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、濾過し、真空下で乾燥するまで蒸発させた。残留褐色固体をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco RediSep（商標）Rf Gold１２０ｇ，０〜２５％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）（ＤＣＭでロード）によって精製した。純粋画分を合わせ、乾燥するまで蒸発させた。残留黄色固体をヘキサンで粉末化し、濾過し、真空下で乾燥させ、生成物４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボン酸メチル（４．６０ｇ，２１．６７ｍｍｏｌ，収率６７．７％）を白色固体として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 212.9.

【0182】

中間体３
５−ブロモ−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化18】

ＤＭＦ（２００ｍＬ）中、４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１２ｇ，７７ｍｍｏｌ）溶液に、ＮＢＳ（１４．３６ｇ，８１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を一晩ＲＴで撹拌した。混合物を水（１．５Ｌ）に注ぎ、１時間撹拌し、濾過した。５−ブロモ−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１７．５ｇ，７０．７ｍｍｏｌ，収率９２％）を白色固体（真空オーブン内で乾燥させた上で融解し、冷凍保存した上で固体化した）として単離した。

【0183】

中間体４
トリフルオロメタンスルホン酸２−フルオロ−２−メチルプロピル

【化19】

ＤＣＭ（８ｍＬ）中、２−フルオロ−２−メチルプロパン−１−オール（１．３ｇ，１４．１１ ｍｍｏｌ）、Ｅｔ_３Ｎ（２．３６１ｍＬ，１６．９４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．１２１ｇ，０．９８８ｍｍｏｌ）の冷却した（−２０℃）溶液に、Ｔｆ_２Ｏ（２．８６ｍＬ，１６．９４ｍｍｏｌ）を滴状添加した。反応物を０℃で２時間撹拌した。反応物をＤＣＭで希釈し、１Ｍ クエン酸および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮し２．２ｇのトリフルオロメタンスルホン酸２−フルオロ−２−メチルプロピルを褐色油状物として得た。

【0184】

実施例
実施例１
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化20】

ａ）４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化21】

１Ｌ丸底フラスコに入れた亜鉛粉末（２１ｇ，３２１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２５０ｍＬ）の撹拌した懸濁液に、窒素下で、氷浴中で０℃に冷却しながら、ＴｉＣｌ_４（１７ｍＬ，１５５ｍｍｏｌ）を、シリンジを用い短い凝縮器(via syringe through a short condensor)を通して添加した（黄色噴煙を伴う活発な反応）。反応物をＴＨＦ（７５ｍＬ）ですすぎ、結果として得られた黒色スラリーを還流で（７０℃油浴）２時間（反応物は動きを止めたが、温められるにつれ再開した）加熱した。ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボン酸メチル（５．０ｇ，２３．５６ｍｍｏｌ）、４−オキソピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１５．０ｇ，７５ｍｍｏｌ）およびピリジン（２０ｍＬ，２４７ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、２日間加熱を継続した。反応物をＲＴに冷却し、飽和水性（sat. aq.）ＮＨ_４Ｃｌ（５００ｍＬ）で急冷し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で抽出した。上方ＥｔＯＡｃ相をセライト（商標）のパッド上に慎重に静かに注ぎ、濾過した。この手順を、濃青水性懸濁液を新鮮なＥｔＯＡｃで撹拌し、静かに注ぐことで３回繰り返した（注記：下方の濃い水性懸濁液は簡単に濾過することができず、次第に濾過器を詰まらせた）。合わせた有機物をブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）させ、濾過し、蒸発させて乾燥させた。

【0185】

上記の粗製塩酸アミンを、ＤＣＭ（２５０ｍＬ）中で取り出し、Ｅｔ_３Ｎ（６．０ｍＬ，４３．０ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ_２Ｏ（９．５７ｍＬ，４１．２ｍｍｏｌ）で、氷浴中で、０℃にて処理した。反応物をＲＴに温め、１時間撹拌した。反応物を真空下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ中で取り出し、水性ＮａＨＣＯ_３で洗浄した（大容量の白色固体が生成された）。固体を濾過し出し、ＥｔＯＡｃですすいだ。生成物を含む透明な濾液を分液漏斗へ移した。下方ＮａＨＣＯ_３相を除去し、ＥｔＯＡｃ相を１Ｎ ＨＣｌ、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold 120g, ０〜２５％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．０８ｇ，１４．１０ｍｍｏｌ，収率５９．９％）を無色油状物として得、これは真空下で白色固体へと固体化した。反応を２度繰り返し、合計１２．１７ｇの生成物を得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.04 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.51 (br. s., 2H), 3.34 (br. s., 2H), 2.44 (t, J=5.8 Hz, 2H), 2.34 (br. s., 2H), 2.24 (s, 3H), 2.01 (t, J=5.8 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H), 0.94 (t, J=7.6 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ -Boc 280.0, [M+H]⁺ -イソブチレン 324.1, M+Na⁺ 402.1.

【0186】

ｂ）５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化22】

４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１２．１ｇ，３１．９ｍｍｏｌ）に、ジオキサン（３０ｍＬ，１２０ｍｍｏｌ）中ＨＣｌを添加した。３０分間撹拌した後、反応物を蒸発させて乾燥させ、粗製アミン塩酸塩を白色固体フォームとして得た。

【0187】

氷浴内で、０℃にて、ＣＨ_３ＣＮ（２５０ｍＬ）中、２，２−ジフルオロプロパン−１−オール（１６．３ｇ，１７０ｍｍｏｌ）およびピリジン（１６．３ｍＬ，２０２ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、Ｔｆ_２Ｏ（２８ｍＬ，１６６ｍｍｏｌ）を滴状添加した。反応物を０℃で３０分間撹拌し、ＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）中、上記の塩酸アミンおよびＫ_２ＣＯ_３（４６．８ｇ，３３９ｍｍｏｌ）のスラリーに急冷して添加した。反応物をＣＨ_３ＣＮ（５０ｍＬ）ですすいだ。反応物をＲＴに温め、５０℃に加熱し、６時間撹拌した。反応物を真空下で蒸発させて乾燥させ、ＤＣＭ中で取り出し、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold 120g, ５〜１５％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１０．０５ｇ，２４．７４ｍｍｏｌ，収率７８％）を無色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.03 (s, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.70 (t, J=12.6 Hz, 4H), 2.57 - 2.43 (m, 4H), 2.32 (br. s., 2H), 2.25 (s, 3H), 2.06 (br. s., 2H), 1.67 (t, J=18.8 Hz, 3H), 0.94 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 358.2.

【0188】

ｃ）５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化23】

ＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）中、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１０．０ｇ，２８．０ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、５Ｎ ＮａＯＨ（２０ｍＬ，１００ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を７０℃にて４時間撹拌した。反応物を真空下で濃縮し、ＭｅＯＨを除去し、６Ｎ ＨＣｌ（１６．７ｍＬ）でｐＨ〜７に中性化した。ガム状の物質が生成され、それをＤＣＭで抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過して固体フォームへと蒸発させた。

【0189】

上記に、３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（５．８ｇ，３０．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（３．８ｇ，２７．９ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）およびＮＭＭ（３．４ｍＬ，３０．９ｍｍｏｌ）を添加した。任意の固体塊を撹拌ロッドで粉砕した。撹拌している懸濁液にＥＤＣ遊離塩基（５．０ｇ，３２．２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、還流凝縮器を取り付けてＲＴで３時間、次いで４０℃で一晩撹拌した。反応物を真空下で濃縮した。曇った溶液をセライト（商標）のパッドを通して濾過し、より少ない容量のＤＣＭですすいだ。透明な濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ２２０ｇ，０〜５％ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）で精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させた。結果として得られた固体を１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで粉末にし、濾過し、ヘキサンで洗浄し、真空下で蒸発させ、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（１１．５６ｇ，２４．２０ｍｍｏｌ，収率８７％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.48 (s, 1H), 8.01 (t, J=5.1 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.24 (d, J=5.1 Hz, 2H), 2.71 (t, J=14.1 Hz, 2H), 2.61 (t, J=4.7 Hz, 2H), 2.46 (br. s., 2H), 2.38 (t, J=5.6 Hz, 2H), 2.30 - 2.21 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.93 (t, J=5.3 Hz, 2H), 1.62 (t, J=19.2 Hz, 3H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 478.3.

【0190】

実施例２
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化24】

ａ）５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化25】

ＣＨ_３ＣＮ（５ｍＬ）中、４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル塩酸塩（１６０ｍｇ，０．５０７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３（３３０ｍｇ，１．０１３ｍｍｏｌ）およびトリフルオロメタンスルホン酸２−フルオロ−２−メチルプロピル（４５４ｍｇ，２．０２６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間５０℃で加熱した。反応混合物をＲＴへ冷却し、水で急冷し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた有機物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜５０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（９２ｍｇ）を無色油状物として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 354.3.

【0191】

ｂ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化26】

ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（９０ｍｇ，０．２５５ｍｍｏｌ）の溶液に、８Ｎ ＮａＯＨ（０．１５９ｍＬ，１．２７３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３５℃で１８時間加熱した。混合物を６Ｎ ＨＣｌ（０．２１２ｍＬ，１．２７３ ｍｍｏｌ）で中性化し、濃縮した。

【0192】

ジメチルスルホキシド（２．０００ｍＬ）中の残渣の溶液に、３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（６２．４ｍｇ，０．３３１ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ （０．１４０ｍＬ，１．２７３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（９８ｍｇ，０．５０９ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（６９．３ｍｇ，０．５０９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間ｒｔで撹拌した。混合物を水（１０ｍＬ）で急冷した。結果として得られた沈殿物を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥させ、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（１０５ｍｇ） をオフホワイトの固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.86 (t, J=7.45 Hz, 3 H), 1.28 (s, 3H), 1.33 (s, 3 H), 1.93 (t, J=5.31 Hz, 2 H), 2.07 (s, 3H), 2.11 (s,3H), 2.18 (s, 3H), 2.20 - 2.32 (m, 2 H), 2.34 - 2.46 (m, 6H), 4.23 (d, J=5.05 Hz, 2 H), 5.86 (s, 1 H), 7.78 (s, 1 H), 8.01 (t, J=4.93 Hz, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 474.3.

【0193】

実施例３
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド

【化27】

実施例２の一般的手順に従い、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミドを調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.48 (s, 1H), 8.01 (t, J=4.93 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.24 (d, J=5.05 Hz, 2H), 3.33 (s, 2H), 3.18 (q, J=10.27 Hz, 2H), 2.69 (d, J=5.05 Hz, 2H), 2.39 (t, J=5.56 Hz, 2H), 2.26 (d, J=6.82 Hz, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.93 (t, J=5.31 Hz, 2H), 0.87 (t, J=7.45 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 482.3.

【0194】

実施例４
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化28】

ａ）４−プロピオニルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化29】

窒素下で、０℃（氷浴）にて、ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．０ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ＴＨＦ（２８ｍＬ，５６．０ｍｍｏｌ）中、２Ｎ塩化エチルマグネシウムを添加した。反応物を０℃で４時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ_４Ｃｌで急冷し、ＥｔＯＡｃで抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で蒸発させて乾燥させた。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ２２０ｇ，０〜４０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した（ＵＶ陰性、ＥｔＯＨ中Ｈ_２ＳＯ_４で炭化させることによって視認された）。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、４−プロピオニルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８．１０ｇ，３３．６ｍｍｏｌ，収率９１％）を無色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ） ［Ｍ＋Ｈ］＋−イソブチレン−１８ １６７．９，［Ｍ＋Ｈ］＋−イソブチレン １８６．０， Ｍ＋Ｎａ＋２６４．１．

【0195】

ｂ）４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル

【化30】

窒素下で、−７８℃（ＣＯ_２，アセトン）で、ＴＨＦ（８０ｍＬ）中、４−プロピオニルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６．９ｇ，２８．６ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、ＴＨＦ（３１ｍＬ，３１．０ｍｍｏｌ）中、１Ｎ ＮａＨＭＤＳを滴状添加した。反応物を１時間−７８℃で撹拌した。次に、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、２−ＮＴｆ_２−ピリジン（１１．４ｇ，３１．８ ｍｍｏｌ）の溶液を５分間にわたり滴状添加した。反応物を−７８℃で１時間、次いで３０分間０℃で撹拌した。反応物を水（１５０ｍＬ）で急冷し、ＥｔＯＡｃ（２ｘ１５０ｍＬ）で抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。粗製生成物をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold２２０ｇ，０〜２０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した（ＵＶ陰性、ＥｔＯＨ中Ｈ_２ＳＯ_４で炭化させることによって視認された）。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル（９．１５ｇ，２４．５１ｍｍｏｌ，収率８６％）を無色油状物として得た。ＭＳ（ＥＳ） ［Ｍ＋Ｈ］＋ −イソブチレン３１８．１．

【0196】

ｃ）４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル

【化31】

１，４−ジオキサン（２００ ｍＬ）中、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’−オクタメチル−２，２’−ビ（１，３，２−ジオキサボロラン）（１７．３９ｇ，６８．５ｍｍｏｌ）、５−ブロモ−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（７ｇ，２９．８ｍｍｏｌ）および ＫＯＡｃ（９．６４ｇ，９８ｍｍｏｌ）の脱気した溶液に、ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）−ＤＣＭ付加物（１．２１６ｇ，１．４８９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩７０℃で加熱し、その時に懸濁液をシリカの短いパッドに濾過し通した。濾液に、４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６．６７ｇ，１７．８６ｍｍｏｌ）、水（６０ｍＬ）およびＮａ_２ＣＯ_３（７．８９ｇ，７４．４ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４（１．７２０ｇ，１．４８９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１時間７０℃で加熱した。反応物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈し、濾過した。層を分離し、有機物をブラインで洗浄し、Ｍｇ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（flash chrmatography）（８％ＴＨＦ：ヘキサン）によって精製し、４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６．２ｇ，１５．５２ｍｍｏｌ，５２．１％収率）を白色固体として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 402.2 (M+Na)

【0197】

ｄ）４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル

【化32】

ＥｔＯＨ（１２０ｍＬ）中、４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル（６．２ｇ，１６．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（Degussa，１２ｇ，１１．２８ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２４時間Ｈ_２雰囲気（バルーン）下で撹拌し、その時に混合物をセライト（商標）に濾過し通し、蒸発させた。残渣をジオキサン（１０ｍＬ）中に溶解させ、３Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）を添加した。反応混合物を還流で１０分間加熱し、次いで蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と１Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３（５０ｍＬ）とに区分けした。層を分離し、有機物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させ、４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．６ｇ，８．７８ｍｍｏｌ，収率５３．７％）を無色液体として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 282.2.

【0198】

ｅ）５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（Ｓ）−メチルおよび５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（Ｒ）−メチル

【化33】

ＣＨ_３ＣＮ（１００ｍＬ）中、２，２−ジフルオロプロパン−１−オール（３．１７ｇ，３３．０ｍｍｏｌ）およびピリジン（２．９７ｍＬ，３６．７ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）溶液に、Ｔｆ_２Ｏ（５．７０ｍＬ，３３．８ｍｍｏｌ）を滴状添加した。反応物を０℃で３０分間撹拌した。冷却したスラリーに、ＣＨ_３ＣＮ（２０ｍＬ）中、４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル 塩酸塩（２．６ｇ，７．３４ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（９．１３ｇ，６６．０ｍｍｏｌ）の冷溶液を添加した。反応物をＲＴまで温め、次いで一晩５０℃で加熱した。反応物を真空下で蒸発させて乾燥させ、ＤＣＭ中で取り出し、水、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold １２０ｇ,５％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（２．０５ｇ，５．４２ｍｍｏｌ，収率７３．８％）を黄色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.00 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.99 (d, J=11.12 Hz, 1H), 2.86 (d, J=11.12 Hz, 1H), 2.53-2.75 (m, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.04-2.27 (m, 2H), 1.84-2.01 (m, 2H), 1.62 (t, J=18.69 Hz, 4H), 1.30-1.47 (m, 5H), 0.76 (t, J=7.33 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 360.2.

【0199】

ラセミ化合物の生成物をキラルＨＰＬＣ（キラルセル（Chiralcel）ＯＤ−Ｈ，５ミクロン，３０ｍｍｘ２５０ｍｍ，２５０ｎｍ ＵＶ，９８：２：０．１ ｎ−ヘプタン：２−プロパノール：イソプロピルアミン）によって消散させた。 消散した生成物を２−プロパノールで２度希釈し、濃縮し、次いで真空オーブン（５０℃）内で乾燥させ、下記を得た：
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸Ｓ−（−）−メチル（８７０ｍｇ）：＞９９．８％ ｅｅ， ［α］_Ｄ＝−９．６°（ｃ＝０．５０，ＭｅＯＨ，２４℃）および
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸Ｒ−（＋）−メチル（８６０ｍｇ）：９９．７４％ｅｅ；［α］_Ｄ＝＋８．８°（ｃ＝０．５０，ＭｅＯＨ，２４℃）。

【0200】

ｆ）（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化34】

ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（Ｒ）−メチル（８６０ｍｇ，２．３９２ｍｍｏｌ）の溶液に、３Ｍ ＮａＯＨ（５ｍＬ，４００ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を一晩撹拌し、その時に６Ｍ ＨＣｌで中性化し、蒸発させて乾燥させた。

【0201】

ＤＭＦ（１０．００ｍＬ）中、残渣の懸濁液に、３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（５４２ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）、次にＥＤＣ（５５０ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３９１ｍｇ，２．８７ｍｍｏｌ）を添加した。５分後、ＮＭＭ （０．７８９ｍＬ，７．１８ｍｍｏｌ）を添加し、溶液をＲＴで３時間撹拌した。反応混合物を６０ｍＬの水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃ（２ｘ５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物を水（３０ｍＬ）、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣を２０％ＣＨ_３ＣＮ：水から結晶化し、（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（７８０ｍｇ，１．６２６ｍｍｏｌ， 収率６８．０％）を白色固体として得た（注記：ＥＺＨ２阻害に関し、エチル基の絶対立体化学はＲ異性体の公知の選好に基づき指定された）。¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄) δ 7.60 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.01 (d, J=11.62 Hz, 1H), 2.89 (d, J=11.12 Hz, 1H), 2.74 (ddd, J=3.79, 7.89, 11.05 Hz, 1H), 2.64 (t, J=14.02 Hz, 2H), 2.37 (s, 2H), 2.25 (d, J=5.56 Hz, 6H), 2.18 (dt, J=2.40, 11.56 Hz, 1H), 2.03-2.11 (m, 1H), 1.86-2.01 (m, 2H), 1.60 (t, J=18.69 Hz, 3H), 1.20-1.49 (m, 5H), 0.76 (t, J=7.33 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 480.3.

【0202】

実施例５
（Ｓ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化35】

実施例４ｆの手順に従い、（Ｓ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドを調製した。¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄) δ 7.60 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 4.45 (s, 2H), 3.01 (d, J=11.62 Hz, 1H), 2.89 (d, J=10.61 Hz, 1H), 2.74 (ddd, J=3.79, 7.89, 11.05 Hz, 1H), 2.65 (t, J=14.15 Hz, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.25 (d, J=6.06 Hz, 6H), 2.18 (dt, J=2.53, 11.62 Hz, 1H), 2.07 (dt, J=2.53, 11.62 Hz, 1H), 1.87-2.01 (m, 2H), 1.60 (t, J=18.82 Hz, 3H), 1.18-1.48 (m, 5H), 0.76 (t, J=7.20 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 480.3.

【0203】

実施例６
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化36】

実施例４の手順に従い、ラセミのＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（２−フルオロ−２−メチルプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドを調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.62 - 0.76 (m, 3 H), 1.08 -2.97 (m, 24 H), 3.26 - 3.41 (m, 2 H), 4.17 - 4.31 (m, 2 H), 5.79 - 5.94 (m, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.98 (t, J=4.93 Hz, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 476.3.

【0204】

実施例７
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化37】

ａ）５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化38】

４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ，２．６３ｍｍｏｌ）に、ジオキサン（２０ｍＬ，６５８ｍｍｏｌ）中、ＨＣｌを添加した。３０分間撹拌した後、反応物を真空下で蒸発させて乾燥させ、脱保護したピペリジンＨＣｌ塩を白色固体フォームとして得た。

【0205】

ＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中、白色固体の溶液に、水（２．５ｍＬ）中、ＮａＮＯ_２（０．４６ｇ， ６．６７ｍｍｏｌ）の溶液を２時間にわたり、分割して滴状添加した。反応をＬＣＭＳによってモニターした。２時間後、反応は９１％完了していた（Ｎ−ニトロソ中間体MS(ES) [M+H]⁺ 309.2）。反応物に、ゆっくりと分割して亜鉛粉末（１．５ｇ，２２．９４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物は、触ったところ温たかくなっていて、氷浴内で冷却した。ＲＴで２時間撹拌した後、反応物をセライト（商標）のパッドに濾過し通し、亜鉛を除去し、少量の ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）ですすいだ。濾液に水（２．０ｍＬ，２６．９ｍｍｏｌ）中、３７重量％のホルムアルデヒドを添加した。撹拌した混合物にＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（２．３ｇ，１０．８５ｍｍｏｌ）を３０分間にわたり分割して添加した。反応物を一晩ＲＴで撹拌した。ＬＣＭＳは、１７％の所望するジメチルヒドラジンを示した。反応混合物を真空下で蒸発させて乾燥させ、ＤＣＭ中で取り出し、１Ｎ Ｎａ_２ＣＯ_３で処理し、３０分間撹拌した。懸濁液をセライト（商標）のパッドに濾過し通し、少量のＤＣＭですすいだ。透明な濾液を分液漏斗に移した。生成物を含む下方有機相を除去し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，０〜８％ ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）によって精製した。（生成物はカラムから３〜５％ＥｔＯＨで溶出し出した）。生成物を含む画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（２００ｍｇ，０．３６０ｍｍｏｌ，１３．６５％ 収率）を淡黄色油状物として得た。 MS(ES) [M+H]⁺ 323.2.

【0206】

ｂ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化39】

ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中、５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（２００ｍｇ，０．６２０ｍｍｏｌ） の溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ（４ｍＬ，４．００ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を７０℃で４時間加熱した。反応物を真空下で濃縮し、ＭｅＯＨを除去し、１Ｎ ＨＣｌ（４．０ｍＬ）で中性化した。白色固体懸濁が生成された。混合物を真空下で蒸発させ、粗製カルボン酸を白色固体として得た。

【0207】

上記に３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（１５０ ｍｇ，０．７９５ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（８４ｍｇ，０．６２ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＮＭＭ（９０μＬ，０．８１９ｍｍｏｌ）を添加した。固体塊を撹拌ロッドで粉砕した。撹拌している懸濁液に ＥＤＣ遊離塩基（１３０ｍｇ，０．８３７ｍｍｏｌ）を添加した。還流凝縮器を取り付けて、反応物を２時間ＲＴで、次いで４０℃で４時間撹拌した。曇った溶液をセライト（商標）のパッドに濾過し通し、少量のＤＣＭですすいだ。透明な濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，２〜１０％ＤＣＭ中（５％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ））によって精製した。 純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲル（silca gel）クロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，１５〜４０％ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）によって再精製した。純粋画分を合わせ、真空下で濃縮し、ヘキサンで粉末化し、濾過し、ヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させ、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−（ジメチルアミノ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（１４４ｍｇ，０．３２５ｍｍｏｌ，収率５２．５％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.49 (s, 1H), 8.02 (t, J=5.1 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.24 (d, J=5.1 Hz, 2H), 2.61 (br. s., 2H), 2.45 (br. s., 2H), 2.40 (t, J=5.4 Hz, 3H), 2.26 (br. s., 2H) 2.25 (s, 6H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.94 (t, J=5.4 Hz, 2H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 443.3.

【0208】

実施例８
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−ヒドロキシピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化40】

ａ）５−（１−（１−（ベンゾイルオキシ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化41】

４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ，２．６３ ｍｍｏｌ）に、ジオキサン（２０ｍＬ，６５８ｍｍｏｌ）中、ＨＣｌを添加した。反応物をＲＴで３０分間撹拌し、次いで真空下で蒸発させて乾燥させ、塩酸アミン（amine hydrodrochloride ）を白色固体フォームとして得た。上記に、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中でＮａ_２ＨＰＯ_４（２．５ｇ，１７．６１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を撹拌し、ベンゾイルペルオキシド（１．０ｇ，４．１３ｍｍｏｌ）で３０分にわたり分割して処理した。２時間ＲＴで撹拌した後、ＬＣＭＳによる変化は見られなかった。反応物を一晩５０℃で撹拌した。ＬＣＭＳはほとんど所望の生成物を示した。反応物をＲＴに冷却し、真空下で蒸発させて乾燥させ、ＥｔＯＡｃ中で取り出し、１Ｎ Ｎａ_２ＣＯ_３、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ４）、濾過し、蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ８０ｇ，１０〜４０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、５−（１−（１−（ベンゾイルオキシ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（０．６４ｇ，１．６０２ｍｍｏｌ，収率６０．８％）を白色フォームとして得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.06 (s, 1H), 8.04 - 8.01 (m, 2H), 7.62 - 7.56 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.61 (br. s., 1H), 3.42 (br. s., 1H), 3.02 (br. s., 1H), 2.85 (br. s., 2H), 2.60 (br. s., 1H), 2.38 (br. s., 4H), 2.30 (br. s., 3H), 0.97 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 400.2.

【0209】

ｂ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−ヒドロキシピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化42】

ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中、５−（１−（１−（ベンゾイルオキシ）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（０．６４ｇ，１．６０２ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、５Ｎ ＮａＯＨ（２．０ｍＬ，１０．００ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を７０℃で１６時間加熱した。反応物を真空下で濃縮し、ＭｅＯＨを除去し、６Ｎ ＨＣｌ（１．７ｍＬ）で中性化した。白色固体懸濁が生成された。混合物を真空下で蒸発させ、粗製脱ベンゾイル化したカルボン酸を安息香酸で汚染されたオフホワイトの白色固体として得た。

【0210】

上記に３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（０．６０４ｇ，３．２０ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（４０ｍＬ）およびＮＭＭ（０．３５２ｍＬ，３．２０ｍｍｏｌ）を添加した。固体塊を撹拌ロッドで粉砕した。撹拌している懸濁液に、ＥＤＣ遊離塩基（０．５４７ｇ，３．５２ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２時間ＲＴで、次いで４時間４０℃で撹拌した。ＬＣＭＳは、所望の生成物をそれのＯ−ベンゾイル化誘導体（注記：反応混合物に存在している安息香酸は再ベンゾイル化に至った）としておよび他の不純物を示した。曇った溶液はセライト（商標）のパッドに濾過し通し、少量のＤＣＭですすいだ。透明の濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，０〜１０％ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）によって精製した。Ｏ−ベンゾイル化生成物を含む画分を合わせ、蒸発させて乾燥させた。残渣をＭｅＯＨ（２５ｍＬ）中で取り出し、５Ｎ ＮａＯＨ（１．５ｍＬ）で処理した。反応物を一晩７０℃で加熱した。反応物を６Ｎ ＨＣｌ（１．３ｍＬ）で中性化し、真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣をＤＣＭ中で取り出し、水性ＮａＨＣＯ_３で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep （商標）Rf Gold ４０ｇ，１０〜２０％ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）によって精製し、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（１−ヒドロキシピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（２５１ｍｇ，０．６０４ｍｍｏｌ，収率３７．７％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.49 (br. s., 1H), 8.02 (t, J=5.1 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.24 (d, J=4.8 Hz, 2H), 3.16 (br. s., 1H), 2.98 (br. s., 1H), 2.73 - 2.66 (m, 1H), 2.42 - 2.32 (m, 1H), 2.31 - 2.17 (m, 2H), 2.18 (s, 3H
), 2.11 (s, 3H), 2.07 (br. s., 3H), 2.02 (br. s., 1H), 1.92 (br. s., 1H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 416.2.

【0211】

実施例９
５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化43】

ａ）（Ｚ）−４−メチル−２−（２−ニトロビニル）チオフェン

【化44】

４−メチルチオフェン−２−カルバルデヒド（１０．０ ｇ，７９．３ｍｍｏｌ）、ＣＨ_３ＮＯ_２ （１００ｍＬ）およびＮＨ_４ＯＡｃ（１．１ｇ，１４．２７ｍｍｏｌ）の溶液を１００℃で４時間加熱した。反応物をＲＴに冷却し、真空下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ中で取り出し、１Ｎ ＨＣｌ、水性（aq.）ＮａＨＣＯ_３、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco RediSep（商標）Rf Gold１２０ｇ，０〜１５％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、（Ｚ）−４−メチル−２−（２−ニトロビニル）チオフェン（９．６３ｇ，５６．９１ ｍｍｏｌ，収率７１．８％）を黄色油状物（真空下で固体化した）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.10 (d, J=13.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J=13.4 Hz, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 2.31 (d, J=0.8 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 170.0.

【0212】

ｂ）（２−（４−メチルチオフェン−２−イル）エチル）カルバミン酸エチル

【化45】

窒素下で、２Ｎ ＬｉＢＨ_４（１２０ｍＬ，２４０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＭＳＣｌ（６０ｍＬ，４７３ｍｍｏｌ）を１０分にわたり滴状添加した。反応物は白色懸濁液になった。１５分撹拌した後、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、（Ｚ）−４−メチル−２−（２−ニトロビニル）チオフェン（９．６０ｇ，５６．７４ｍｍｏｌ）の溶液を約２０分にわたりゆっくりと滴状添加した。活発なガス発生が見られた。反応物は触れたところ若干温まっていて、定期的に氷を加えながら水浴内で冷却した。反応物を４時間ＲＴで撹拌し、次いで５０℃まで温めて一晩撹拌した。反応物を氷浴内で冷却し、ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）で慎重に急冷した。１時間撹拌した後、反応物を真空下で濃縮し、粗製２−アミノエチル−４−メチルチオフェンを得た。 MS(ES) [M+H]⁺ 142.1.

【0213】

ＤＣＭ（２００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）中、粗製２−アミノエチル−４−メチルチオフェンの冷却した（０℃）溶液に、Ｎａ_２ＣＯ_３（２５ｇ，２３５．９ｍｍｏｌ）およびＥｔＯＣＯＣｌ （０．７１０ｍＬ，７．３９ｍｍｏｌ）をゆっくりと滴状添加した。結果として得られた混合物をＲＴに温め、１時間撹拌した。反応物をセライト（商標）のパッドに濾過し通し、透明な濾液を分液漏斗に移した。下方有機相を除去し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold １２０ｇ，１０〜３０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、（２−（４−メチルチオフェン−２−イル）エチル）カルバミン酸エチル（９．２９ｇ，４３．５５ｍｍｏｌ，収率７６．７％）を無色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.74 (s, 1H), 6.66 (s, 1H), 4.80 (br. s., 1H), 4.14 (q, J=6.9 Hz, 2H), 3.46 (q, J=6.3 Hz, 2H), 2.98 (t, J=6.6 Hz, 2H), 2.24 (d, J=0.8 Hz, 3H), 1.26 (t, J=7.1 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 214.1.

【0214】

ｃ）３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化46】

（２−（４−メチルチオフェン−２−イル）エチル）カルバミン酸エチル（９．２０ｇ，４３．１３ ｍｍｏｌ）にＰＯＣｌ_３（１００ｍＬ，１０７ｍｍｏｌ）およびＰ_２Ｏ_５（１４ｇ，９８．６ ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を還流下で３時間加熱した（混合物は一時的にガム状ｐｐｔ．を生成し、それは加熱することで次第に溶解した）。濃い反応混合物をＲＴに冷却し、真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣を慎重に氷で急冷し、水性（aq.）Ｎａ_２ＣＯ_３で塩基性化し、ＤＣＭで抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ８０ｇ，３０〜８０％ヘキサン中ＥｔＯＡｃ）によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、ヘキサンで粉末化し、濾過し、真空下で乾燥させ３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン− ４（５Ｈ）−オン（２．２２ｇ，１３．２７ｍｍｏｌ，収率３０．７８％）をオフホワイトの固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.72 (m, 1H), 5.75 (br. s., 1H), 3.62 (t, J=6.2 Hz, 2H), 3.05 (t, J=6.7 Hz, 2H), 2.50 (d, J=1.3 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 168.0.

【0215】

ｄ）３−メチル−２−プロピオニル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化47】

ＣＨ_３ＮＯ_２（５０ｍＬ）中、３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１．６ｇ，９．５７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＣｌＯ_４（１．２３ｍｇ，１１．５７ｍｍｏｌ）、プロピオン酸無水物（３．０８ｍＬ，２０．１２ｍｍｏｌ）およびＩｎ（ＯＴｆ）_３（３０８ｍｇ，０．５４７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を７０℃で４時間加熱した。反応物をＲＴに冷却し、水（２００ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣をＭｅＯＨ（２００ｍＬ）中で取り出した。混合物にＫ_２ＣＯ_３（１０．０ｇ，７２．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を一晩６０℃で加熱した。反応物を蒸発させて乾燥させ、１Ｎ ＨＣｌ（１５０ｍＬ）で酸性化し、ＤＣＭで抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco RediSep（商標）Rf Gold ８０ｇ，２０〜５０％ＤＣＭ中ＥｔＯＡｃ）（大量のＤＣＭでロードした）によって精製した。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、ヘキサンで粉末化し、 濾過し、真空下で乾燥させ、３−メチル−２−プロピオニル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（２１０１．５９ｇ，７．１２ ｍｍｏｌ，収率７４．４％）を淡黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 5.97 (br. s., 1H), 3.63 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.08 (t, J=6.7 Hz, 2H), 2.88 (s, 3H), 2.87 (q, J=7.3 Hz, 2H), 1.23 (t, J=7.2 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 224.1.

【0216】

ｅ）２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化48】

３−メチル−２−プロピオニル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（２８０ｍｇ，１．２５４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルピペリジン−４−アミン（３２５ ｍｇ，２．５３ｍｍｏｌ）に、Ｔｉ（ＯｉＰｒ）_４（０．８０ｍＬ，２．７３ｍｍｏｌ）およびベンゼン（３ｍＬ）を添加した。反応物を１８時間８０℃で撹拌した。反応物をＭｅＯＨ（３ｍＬ）で希釈し、次いでＮａＢＨ_３ＣＮ（３１５ｍｇ，５．０２ｍｍｏｌ）を２時間にわたり２分割して添加した。反応物を６０℃で加熱し、さらに２時間撹拌した。反応物を真空下で蒸発させて乾燥させ、（９：１）ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中で取り出し、１Ｎ Ｎａ_２ＣＯ_３（１０ｍＬ）で処理した。結果として得られた懸濁液を３０分間撹拌した。懸濁液をセライト（商標）のパッドに（ゆっくりと）濾過し通し、（９：１）ＤＣＭ／ＭｅＯＨ（５ｍＬ）ですすいだ。透明濾液を分液漏斗に移した。下方有機相を除去し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，５〜２０％ＤＣＭ中（５％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ））によって精製した。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７− ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（３６０ｍｇ，１．０１９ｍｍｏｌ，収率８１％）を無色油状物（真空下で白色固体フォームへ固体化した）として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 5.59 (br. s., 1H), 3.69 (dd, J=4.7, 9.5 Hz, 1H), 3.59 (dt, J=2.8, 6.8 Hz, 2H), 3.18 - 3.07 (m, 1H), 3.01 (t, J=6.8 Hz, 2H), 2.97 - 2.93 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.29 (s, 6H), 2.17 - 1.88 (m, 4H), 1.88 - 1.72 (m, 2H), 1.70 - 1.39 (m, 3H), 0.81 (t, J=7.3 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 336.3.

【0217】

ｆ）５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化49】

窒素の雰囲気下で、ＤＭＦ（５ｍＬ）中、２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（３５０ｍｇ，１．０４３ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）溶液に、ＴＨＦ（１．３ｍＬ，１．３０ｍｍｏｌ）中、１Ｎ ＫＯｔＢｕを滴状添加した。混合物を５分間撹拌し、次いでＴＨＦ（１ ｍＬ）中、２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン（３５０ ｍｇ，１．３３７ｍｍｏｌ）を１回で添加した。１５分間０℃で撹拌した後、混合物を飽和したＮＨ_４Ｃｌ（１．５ ｍＬ）で急冷し、真空下で蒸発させほとんど乾燥させた。残渣を水性（aq.）Ｎａ_２ＣＯ_３（５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭで抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，０〜１５％ＤＣＭ中（５％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ））によって精製した。純粋画分を合わせ、真空下で蒸発させて乾燥させ、５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（５３０ｍｇ，０．９４５ｍｍｏｌ，収率９１％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.51 - 7.43 (m, 2H), 7.41 - 7.30 (m, 3H), 6.64 (s, 1H), 5.43 (s, 2H), 4.87 - 4.74 (m, 2H), 3.68 (dd, J=4.7, 9.5 Hz, 1H), 3.38 (t, J=6.8 Hz, 2H), 3.10 (d, J=10.9 Hz, 1H), 2.95 (dd, J=2.3, 11.1 Hz, 1H), 2.71 (t, J=6.8 Hz, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.29 (s, 6H), 2.17 - 1.88 (m, 4H), 1.79 (t, J=15.3 Hz, 2H), 1.69 - 1.38 (m, 3H), 0.80 (t, J=7.3 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 561.4.

【0218】

ｇ）５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化50】

５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（５３０ｍｇ，０．９４５ｍｍｏｌ）にＴＦＡ（１０ｍＬ，１３０ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を４５℃まで加熱し、３時間撹拌した。反応物を真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣を１Ｎ Ｎａ_２ＣＯ_３（５ｍＬ）で塩基性化し、ＤＣＭで抽出し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，１０〜２０％ＤＣＭ中（５％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ））によって精製した。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、ヘキサンで粉末化し、濾過し、真空下で乾燥させ、５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（４−（ジメチルアミノ）ピペリジン−１−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（５２０ｍｇ，１．０５０ｍｍｏｌ）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.54 (br. s., 1H), 5.88 (s, 1H), 4.54 - 4.42 (m, 2H), 3.71 (dd, J=5.2, 8.7 Hz, 1H), 3.50 (t, J=6.7 Hz, 2H), 3.07 (d, J=10.1 Hz, 1H), 2.89 (d, J=10.1 Hz, 1H), 2.85 (t, 3H), 2.68 (br. s., 1H), 2.51 (s, 6H) (DMSOピーク下に埋もれる), 2.36 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.04 - 1.76 (m, 5H), 1.59 - 1.34 (m, 3H), 0.75 (t, J=7.2 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 471.3.

【0219】

実施例１０
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化51】

ａ）５−（１−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化52】

ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中、亜鉛（１２．６０ｇ，１９３ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）懸濁液に、 ＴｉＣｌ_４（１０．２６ｍＬ，９３ｍｍｏｌ）を短い凝縮器（a short condensor）に通して添加した。混合物を還流で２時間加熱した。混合物をｒｔに冷却し、ＴＨＦ（３０ｍＬ）中、４−メチル−５−プロピオニルチオフェン−３−カルボン酸メチル（３ｇ，１４．１３ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−オン（６．６２ｇ，４２．４ｍｍｏｌ）およびピリジン（１２．００ｍＬ，１４８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。反応混合物を還流で２０時間加熱した。混合物をｒｔに冷却し、水（１００ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で冷却し、濾過し、セライト（商標）の短いパッドに濾過し通した。青色固体をＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液の有機層を回収し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜６０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、５−（１−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１．７１ｇ，３６％）を無色油状物として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 337.2

【0220】

ｂ）４−メチル−５−（１−（４−オキソシクロヘキシリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル

【化53】

１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中、５−（１−（１，４−ジオキサスピロ［４．５］デカン−８−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１．５ｇ，４．４６ ｍｍｏｌ）の溶液に、６Ｎ ＨＣｌ（５．９４ｍＬ，３５．７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間ｒｔで撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を１０％ＮａＨＣＯ_３で処理し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜７０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、４−メチル−５−（１−（４−オキソシクロヘキシリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル（１．１ｇ）を無色油状物として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 293.2

【0221】

ｃ）５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化54】

ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、４−メチル−５−（１−（４−オキソシクロヘキシリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル（１１０ｍｇ，０．３７６ｍｍｏｌ）の溶液に、３−メトキシアゼチジン塩酸塩（６０．４ｍｇ，０．４８９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．０８５ｍＬ，０．４８９ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（０．０４３ｍＬ，０．７５２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２０分間ｒｔで撹拌し、その時にＮａＢＨ_３ＣＮ（７０．９ｍｇ，１．１２９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間ｒｔで撹拌した。ＬＣＭＳにより反応は検出されなかった。混合物を６時間５０℃まで加熱した。ＬＣＭＳは所望する生成物を示さず、むしろ減少したシクロヘキサノールを示した。混合物を１０％ＮａＨＣＯ_３で急冷し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）て濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（３６ｍｇ）をオフホワイトの固体として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 295.2

【0222】

ｄ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化55】

ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、 ５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（３５ｍｇ，０．１１９ｍｍｏｌ）の溶液にＮａＯＨ（０．０７４ｍＬ，０．５９４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間４０℃で加熱した。混合物をＨＣｌ（０．０９９ｍＬ，０．５９４ｍｍｏｌ）で処理して濃縮した。残渣を真空下で乾燥させ、ジメチルスルホキシド（２．０００ｍＬ）で処理した。この混合物に ３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（２９．２ｍｇ，０．１５５ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（０．０７８ｍＬ，０．７１３ ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（４５．６ｍｇ，０．２３８ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（３２．４ｍｇ，０．２３８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間ｒｔで撹拌した。反応物混合物を水（１０ｍＬ）で急冷し、結果として得られた沈殿物を濾過によって回収し、真空下で乾燥させ、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−５−（１−（４−ヒドロキシシクロヘキシリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（４５ｍｇ，８８％）をオフホワイトの固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.87 (t, J=7.45 Hz, 3 H), 1.10-1.50 (m, 2H), 1.60-1.90 (m, 3H), 1.96 - 2.30 (m, 13 H), 3.66 (m, 1H), 4.24 (d, J=5.05 Hz, 2 H), 4.54 (d, J=4.04 Hz, 1 H), 5.87 (s, 1 H), 7.70 - 7.82 (m, 1 H), 7.92 - 8.11 (m, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 415.2

【0223】

実施例１１
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド

【化56】

実施例４の手順に従い、ラセミのＮ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド（１１７．７ｍｇ，０．２４３ｍｍｏｌ，収率４７．８％）を白色固体として調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.47 (s, 1H), 7.98 (t, J=5.05 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.23 (d, J=5.05 Hz, 2H), 3.07 (d, J=10.36 Hz, 2H), 2.90 (br. s., 1H), 2.83 (d, J=10.36 Hz, 1H), 2.64-2.77 (m, 1H), 2.26 (s, 1H), 2.15-2.20 (m, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.82 (br. s., 2H), 1.03-1.42 (m, 6H), 0.69 (t, J=7.20 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 484.3.

【0224】

実施例１２
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド

【化57】

ａ）４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル

【化58】

ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル塩酸塩（６０ｍｇ，０．１９０ｍｍｏｌ） の溶液に、オキサゾ−ル−２−カルバルデヒド（２３．９７ｍｇ，０．２４７ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（０．０４３ｍＬ，０．２４７ ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（０．０２３ｍＬ，０．３９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２０分間撹拌し、その時にＮａＢＨ_３ＣＮ（４７．７ｍｇ，０．７６０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間ＲＴで撹拌した。混合物を１０％ＮａＨＣＯ_３で急冷し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。抽出物を 乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）て濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー （シリカゲル，０〜８０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（hexaens）)を用いて精製し、４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル（４９ｍｇ）を無色油状物として得た。 MS(ES) [M+H]⁺ 361.2.

【0225】

ｂ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド

【化59】

実施例１ｃの一般的手順に従い、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（オキサゾ−ル−２−イルメチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド（２７ｍｇ，収率４２％）を調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.85 (t, J=7.45 Hz, 3 H), 1.71 - 1.80 (m, 1 H), 1.93 (t, J=5.43 Hz, 2 H), 2.05 (s, 3 H), 2.11 (s, 3 H), 2.18 (s, 3H), 2.19 - 2.45 (m, 5 H), 3.52 - 3.75 (m, 3 H), 4.23 (d, J=5.05 Hz, 2 H), 5.86 (s, 1 H), 7.16 (d, J=0.76 Hz, 1 H), 7.78 (s, 1 H), 7.93 - 8.15 (m, 2 H). MS(ES) [M+H]⁺ 481.3.

【0226】

実施例１３
Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド

【化60】

ａ）４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル

【化61】

１，４−ジオキサン（３ｍＬ）中、４−メチル−５−（１−（ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル塩酸塩（９８ｍｇ，０．３１０ｍｍｏｌ）の溶液に、２−クロロピリミジン（４２．６ｍｇ，０．３７２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５１．５ｍｇ，０．３７２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間還流で加熱した。混合物を濾過して濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボン酸メチル（８４ｍｇ）をオフホワイトの固体として得た。MS(ES) [M+H]⁺ 358.2.

【0227】

ｂ）Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド

【化62】

実施例１ｃの一般的手順に従い、Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチル−５−（１−（１−（ピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）チオフェン−３−カルボキサミド（９１ｍｇ，収率８０％） を調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.85 (t, J=7.45 Hz, 3 H), 1.71 - 1.80 (m, 1 H), 1.93 (t, J=5.43 Hz, 2 H), 2.05 (s, 3 H), 2.11 (s, 3 H), 2.18 (s, 3H), 2.19 - 2.45 (m, 5 H), 3.52 - 3.75 (m, 3 H), 4.23 (d, J=5.05 Hz, 2 H), 5.86 (s, 1 H), 7.16 (d, J=0.76 Hz, 1 H), 7.78 (s, 1 H), 7.93 - 8.15 (m, 2 H). MS(ES) [M+H]⁺ 478.3.

【0228】

実施例１４
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化63】

実施例４の手順に従い、ラセミの５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（１０９ｍｇ，０．２３４ｍｍｏｌ）を調製した。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 12.78 (br. s., 1H), 7.43 (s, 1H), 7.38 (t, J=5.56 Hz, 1H), 5.94-6.02 (m, 1H), 5.66-5.89 (m, 1H), 4.51 (d, J=5.81 Hz, 2H), 2.78-3.06 (m, 2H), 2.60-2.77 (m, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.27 (s, 6H), 1.98-2.19 (m, 2H), 1.81-1.97 (m, 2H), 1.30-1.48 (m, 4H), 0.67-0.94 (m, 4H). MS(ES) [M+H]⁺ 466.2.

【0229】

実施例１５
５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化64】

ａ）５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル

【化65】

４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）プロピリデン）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．０ｇ，２．６３ｍｍｏｌ）に、１，４−ジオキサン（１５ｍＬ，６０．０ｍｍｏｌ）中、ＨＣｌを添加した。混合物を３０分間ＲＴで撹拌し、次いで固体フォームに真空下で蒸発させて乾燥させた。

【0230】

ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中、メチルイソチオシアネート（２００ｍｇ，２．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、水素シアナミドナトリウム（１８０ｍｇ，２．８１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３時間還流で加熱（８０℃ 油浴）し、その時にＲＴに冷却した。混合物にＤＭＦ（５．０ｍＬ）中、上記のアミン塩酸塩の溶液を添加した。ＥＤＣ遊離塩基（４５０ｍｇ，２．９０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を２時間撹拌した。反応混合物を真空下で蒸発させ、ＤＣＭ中で取り出し、水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco RediSep（商標）Rf Gold８０ｇ，０〜１０％ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）によって精製し、５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（０．７２ｇ，１．９９７ｍｍｏｌ，収率７６％）を白色固体フォームとして得た。 ¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.05 (s, 1H), 5.06 - 4.99 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.62 (br. s., 2H), 3.38 (br. s., 2H), 3.05 (d, J=4.8 Hz, 3H), 2.59 (t, J=5.8 Hz, 2H), 2.39 - 2.30 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.16 (t, J=5.9 Hz, 2H), 0.94 (t, J=7.6 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 361.2.

【0231】

ｂ）５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化66】

ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中、 ５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（０．７０ｇ，１．９４２ｍｍｏｌ）の溶液に５Ｎ ＮａＯＨ（２．０ｍＬ，１０．００ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を６時間７０℃で撹拌した。反応物を真空下で濃縮し、ＭｅＯＨを除去し、６Ｎ ＨＣｌ（１．７ｍＬ）で処理した。白色ガム状固体懸濁が生成された。混合物を真空下で蒸発させ、ＮａＣｌで汚染された粗製カルボン酸をオフホワイトの固体として得た。

【0232】

上記に３−（アミノメチル）−４，６−ｄｉメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン塩酸塩（５００ｍｇ，２．６５ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（３０ｍＬ）、ＨＯＡｔ（２７０ｍｇ，１．９８４ｍｍｏｌ）およびＮＭＭ（０．３０ｍＬ，２．７３ｍｍｏｌ）を添加した。固体塊を撹拌ロッドで粉砕した。撹拌された懸濁液に、ＥＤＣ遊離塩基（３７０ｍｇ，２．３８３ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を２時間ＲＴで、次いで４時間４０℃で撹拌した。曇った混合物をセライト（商標）のパッドに濾過し通し、少量のＤＣＭですすいだ。透明な濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（Isco RediSep（商標）Rf Gold８０ｇ，１０〜２５％ＥｔＯＡｃ中ＥｔＯＨ）によって精製した。純粋画分を合わせ、蒸発させて乾燥させ、ＥｔＯＡｃ、ヘキサンで粉末化し、濾過し、真空下で乾燥させて、５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（０．７５ｇ，１．５６ｍｍｏｌ，収率８０％）を白色固体として得た。 ¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.48 (br. s., 1H), 8.03 (t, J=4.8 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.20 (q, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.24 (d, J=4.8 Hz, 2H), 3.51 (t, J=5.2 Hz, 2H), 3.32 (br. s., 2H), 2.84 (d, J=4.5 Hz, 3H), 2.47 (t, J=5.2 Hz, 2H), 2.33 - 2.23 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 2.02 - 1.97 (m, 2H), 0.87 (t, J=7.5 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 481.2.

【0233】

実施例１６
２−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化67】

ａ）４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボン酸メチル

【化68】

窒素下で、撹拌棒つき２５０ｍＬの丸底フラスコに（１，５−シクロオクタジエン（cycloocatadiene））（メトキシ）イリジウム（Ｉ）二量体（０．９５５ｇ，１．４４０ｍｍｏｌ）を添加した。撹拌しながら、４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン （２３．２８ｍＬ，１６１ｍｍｏｌ）を、シリンジを介して添加し、次いでｎ−ヘキサン中、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ジピリジル（０．７７３ｇ，２．８８ｍｍｏｌ）（１５０ｍＬ）の溶液を添加した。濃い混合物を１分撹拌し、その時に ４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（１５ｇ，９６ｍｍｏｌ）を滴状添加した（ガス発生）。反応物を１．５時間撹拌した。反応物を真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（Isco RediSep（商標）Rf Gold３３０ｇ，０〜１００％ＤＣＭ／ヘキサン、クロロホルム中１％Ｅｔ_３Ｎの３カラム容積で事前処理されたカラム）によって精製し、４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボン酸メチル（１９．５ｇ，６５．７ｍｍｏｌ，収率６８．４％）を淡い褐色油状物として得、それは放置することで固体化した。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ（商標）Rf Gold ４０ｇ，8.32 (s, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.70 (s, 3H), 1.36 (s, 12H). MS(ES) [M+H]⁺ 283.2.

【0234】

ｂ）４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル

【化69】

１，４−ジオキサン（３０ｍＬ）中、 ３−メチル−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（０．８２ｇ，２．８０ｍｍｏｌ）および（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル ４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（１．０４４ｇ，２．８０ｍｍｏｌ）の溶液に、水（１０ｍＬ）およびＮａ_２ＣＯ_３ （０．７４１ｇ，６．９９ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を脱気し、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４（０．１６２ ｇ，０．１４０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１時間７０℃で加熱した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、濾過した。層を分離し、有機物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。黒色残渣をカラムクロマトグラフィー（５０-１００％ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル（９５０ｍｇ，２．４３３ ｍｍｏｌ，収率８７％）を無色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 5.73-5.86 (m, 1H), 5.66 (br. s., 1H), 4.15 (br. s., 2H), 3.63 (t, J=6.69 Hz, 2H), 3.03 (t, J=6.69 Hz, 2H), 2.67 (t, J=13.01 Hz, 2H), 2.25 (s, 3H), 1.64-1.80 (m, 3H), 1.49-1.53 (m, 3H), 1.44-1.47 (m, 9H), 1.30-1.41 (m, 2H). MS(ES) [M+Na]⁺ 413.2.

【0235】

ｃ）４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化70】

ＥｔＯＨ（３０ｍＬ）中、４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロプ−１−エン−１−イル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル（９５０ｍｇ，２．４３３ｍｍｏｌ）の脱気（窒素）した溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ (Degussa,１．５ｇ，１．４１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を水素雰囲気（バルーン）下で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、濃縮し、４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８５０ｍｇ，２．０５７ｍｍｏｌ，収率８５％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 5.77 (br. s., 1H), 3.98-4.29 (m, 2H), 3.61 (t, J=6.82 Hz, 2H), 3.01 (t, J=6.69 Hz, 2H), 2.65-2.77 (m, 2H), 2.51-2.62 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.11 (d, J=12.88 Hz, 1H), 1.81-1.95 (m, 2H), 1.36-1.61 (m, 11H), 1.02-1.20 (m, 2H), 0.79 (t, J=7.33 Hz, 3H). MS(ES) [M+Na]⁺ 415.2

【0236】

ｄ）４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化71】

窒素の雰囲気下で、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中、４−（１−（３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８５０ｍｇ， ２．１６５ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃氷浴）溶液に、ＴＨＦ（２．８１ｍＬ，２．８１ｍｍｏｌ）中、１Ｎ ＫＯｔＢｕを滴状添加した。混合物を５分撹拌し、その時にＴＨＦ（５ｍＬ）中、２−（ベンジルオキシ）−３−（クロロメチル）−４，６−ジメチルピリジン（７３７ｍｇ，２．８１ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を１５分間０℃で撹拌した。混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ（５ｍＬ）で急冷した。混合物を水およびＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離し、有機物を水、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させて乾燥させた。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー (Isco RediSep（商標）Rf Gold ４０ｇ，１０〜３０％（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製し、４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｇ，１．８４５ｍｍｏｌ，収率８５％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.45-7.51 (m, 2H), 7.29-7.41 (m, 4H), 6.65 (s, 1H), 5.46 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 3.84-4.28 (m, 2H), 3.38 (t, J=6.69 Hz, 2H), 2.70 (t, J=6.69 Hz, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.37 (s, 3H), 1.88 (dd, J=4.04, 7.33 Hz, 2H), 1.32-1.58 (m, 12H), 1.01-1.21 (m, 2H), 0.78 (t, J=7.33 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 618.4.

【0237】

ｅ）５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ｄｉメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化72】

１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）中、４−（１−（５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（９００ｍｇ，１．４５７ｍｍｏｌ）の冷却した（１０℃）溶液に、１，４−ジオキサン （３ｍＬ，１２．００ｍｍｏｌ）中、４Ｍ ＨＣｌを添加した。 反応混合物を１時間１０℃に維持した。反応をＬＣＭＳによってモニターした。１時間後、１，４−ジオキサン（３ｍＬ，１２．００ｍｍｏｌ）中、追加の４Ｍ ＨＣｌを添加した。出発材料が消費された後、反応混合物を６Ｍ ＮａＯＨ（ｐＨ〜９）で中性化し、ＤＣＭで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィー（３０％［５％ＮＨ_４ＯＨ／ＭｅＯＨ］：７０％ＤＣＭ）によって精製し、５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（４５０ｍｇ，０．８２６ｍｍｏｌ，収率５６．７％）を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄) δ 7.42 (dd, J=1.64, 7.96 Hz, 2H), 7.25-7.34 (m, 3H), 6.72 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.77 (s, 2H), 3.34-3.38 (m, 2H), 3.06 (d, J=12.38 Hz, 1H), 2.96 (d, J=12.38 Hz, 1H), 2.73-2.80 (m, 1H), 2.66-2.72 (m, 2H), 2.56 (dt, J=2.78, 12.38 Hz, 1H), 2.46 (dt, J=2.65, 12.44 Hz, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 1.88-2.05 (m, 2H), 1.31-1.61 (m, 3H), 1.03-1.28 (m, 2H), 0.79 (t, J=7.33 Hz, 3H)
MS(ES) [M+H]⁺ 518.3.

【0238】

ｆ）２−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化73】

ＣＨ_３ＣＮ（２０ｍＬ）中、 ２，２−ジフルオロプロパン−１−オール（１９３ｍｇ，２．０１０ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．１６３ｍＬ，２．０１０ｍｍｏｌ）の冷却した（０℃）溶液に、Ｔｆ_２Ｏ（０．３１２ｍＬ，１．８４９ｍｍｏｌ）を滴状添加した。反応物を３０分間０℃に維持した。

【0239】

ＣＨ_３ＣＮ（２０ｍＬ）中、５−（（２−（ベンジルオキシ）−４，６−ジメチルピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−２−（１−（ピペリジン−４−イル）プロピル）−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（２０８ｍｇ，０．４０２ｍｍｏｌ）およびＫ_２ＣＯ_３（５００ｍｇ，３．６２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、上記の冷反応混合物（トリフルオロメタンスルホン酸２，２−ジフルオロプロピル含有）を添加した。反応物をＲＴに温め、次いで一晩５０℃まで加熱した。反応物を濾過し、真空下で蒸発させて乾燥させた。残渣をＥｔＯＡｃ中で溶解し、結果として得られた溶液を水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、真空下で濃縮して油状物を得た。

【0240】

ＴＦＡ（５ｍＬ，６４．９ｍｍｏｌ）中、上記の油状物の溶液を３０分間維持し、その時に濃縮した。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（５〜６０％ＭｅＣＮ：０．１％ギ酸との水）によって精製した。画分を含有する生成物を６Ｍ ＨＣｌ（０．５ｍＬ）で処理し、濃縮し、２−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（９０ｍｇ，０．１６９ｍｍｏｌ，収率４２．１％） を白色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄) δ 7.07 (s, 1H), 4.82 (s, 2H), 3.88-3.99 (m, 2H), 3.72-3.86 (m, 3H), 3.65 (d, J=12.63 Hz, 1H), 3.07-3.27 (m, 4H), 2.80-2.91 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.40 (s, 2H), 2.27 (d, J=14.15 Hz, 1H), 2.00 (ddd, J=3.79, 7.20, 13.52 Hz, 1H), 1.57-1.89 (m, 7H), 1.47 (ddd, J=7.07, 11.18, 13.58 Hz, 1H), 0.80 (t, J=7.33 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 506.3.

【0241】

実施例１７
５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（２−フルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン

【化74】

実施例１６の手順に従い、５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−２−（１−（１−（２−フルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−３−メチル−６，７−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−４（５Ｈ）−オン（１１０ ｍｇ，０．１９９ｍｍｏｌ）を調製した。¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄) δ 7.07 (s, 1H), 5.11-5.38 (m, 1H), 4.82 (s, 2H), 3.87-4.03 (m, 2H), 3.56-3.81 (m, 2H), 3.36-3.42 (m, 4H), 3.22-3.31 (m, 1H), 3.15 (t, J=6.95 Hz, 2H), 2.92-3.10 (m, 2H), 2.80-2.91 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.22-2.33 (m, 1H), 2.00 (ddd, J=3.79, 7.33, 13.64 Hz, 1H), 1.48-1.88 (m, 4H), 1.35-1.46 (m, 3H), 0.80 (t, J=7.20 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 488.3.

【0242】

実施例１８
Ｎ’−シアノ−４−（１−（５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）−Ｎ−メチルピペリジン−１−カルボキシミドアミド

【化75】

実施例１５および１６の手順に従い、Ｎ’−シアノ−４−（１−（５−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−４−オキソ−４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジン−２−イル）プロピル）−Ｎ−メチルピペリジン−１−カルボキシミドアミド（３５ｍｇ，０．０６５ｍｍｏｌ）を調製した。¹H NMR (400 MHz, MeOH-d₄) δ 11.53 (s, 1H), 7.13 (d, J=4.8 Hz, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.98 (d, J=12.6 Hz, 1H), 3.89 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.50 (t, J=6.7 Hz, 2H), 2.64-2.89 (m, 8H), 2.28-2.33 (m, 3H), 2.15 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.87 (d, J=11.4 Hz, 2H), 1.52-1.64 (m, 1H), 1.25-1.42 (m, 2H), 1.12-1.20 (m, 1H), 1.00-1.09 (m, 1H), 0.71 (t, J=7.2 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 509.0.

【0243】

実施例１９
５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバムイミドイル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化76】

実施例４および１５の手順に従い、５−（１−（１−（Ｎ’−シアノ−Ｎ−メチルカルバンミドイル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（４９ｍｇ，０．０９６ｍｍｏｌ）を調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.46 (br. s., 1H), 7.98 (t, J=4.9 Hz, 1H), 7.64-7.73 (m, 1H), 7.13 (q, J=4.3 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.22 (d, J=5.1 Hz, 2H), 3.98 (d, J=13.4 Hz, 1H), 3.88 (d, J=13.1 Hz, 1H), 2.64-2.87 (m, 5H), 2.18 (d, J=2.5 Hz, 6H), 2.11 (s, 3H), 1.80-1.92 (m, 2H), 1.55-1.66 (m, 1H), 1.29-1.43 (m, 2H), 0.91-1.19 (m, 3H), 0.70 (t, J=7.3 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 483.

【0244】

実施例２０
５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化77】

実施例２の一般的手順に従い、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イリデン）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドを調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.48 (s, 1H), 8.02 (t, J=5.05 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 5.95-6.32 (m, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.23 (d, J=5.05 Hz, 2H), 2.72 (dt, J=4.29, 15.66 Hz, 2H), 2.60 (br. s., 2H), 2.44 (br. s., 2H), 2.35-2.41 (m, 2H), 2.21-2.31 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.11 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.93 (t, J=5.05 Hz, 2H), 0.86 (t, J=7.45 Hz, 3H). MS(ES) [M+H]⁺ 464.2.

【0245】

実施例２１
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化78】

実施例４の一般的手順に従い、（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）プロピル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドを調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 0.69 (t, J=7.20 Hz, 3 H) 1.09 - 1.23 (m, 2 H) 1.25 - 1.39 (m, 3 H) 1.75 - 1.90 (m, 2 H) 1.93 - 2.02 (m, 1 H) 2.02 - 2.09 (m, 1 H) 2.11 (s, 3 H) 2.18 (s, 6 H) 2.56 - 2.74 (m, 3 H) 2.80 (d, J=11.12 Hz, 1 H) 2.89 (d, J=11.62 Hz, 1 H) 4.22 (d, J=5.05 Hz, 2 H) 5.86 (s, 1 H) 6.06 (t, J=4.29 Hz, 1 H) 7.68 (s, 1 H) 7.98 (t, J=5.05 Hz, 1 H) 11.47 (s, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 466.2.

【0246】

実施例２２
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化79】

ａ）４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボン酸メチル

【化80】

（１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（iridinum）（ｌ）二量体（３２５ ｍｇ，０．４９０ｍｍｏｌ）が充填された１００−ｍＬ丸底フラスコに、撹拌しながら４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（７．１０ｇ，５５．５ｍｍｏｌ）を添加し、続けてｎ−ヘキサン（３５ｍＬ）中、４，４’−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２’−ジピリジン（２６０ｍｇ，０．９６９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２分室温で撹拌し、４−メチルチオフェン−３−カルボン酸メチル（５ｇ，３２ｍｍｏｌ）を滴状添加した。混合物を１８時間室温で撹拌した。次いで反応混合物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜１００％ＤＣＭ／ヘキサン）を用いて精製し、５．８ｇの生成物を無色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.36 (s, 12 H), 2.70 (s, 3 H), 3.87 (s, 3 H), 8.32 (s, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 283.1.

【0247】

ｂ）４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニルピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化81】

１，４−ジオキサン（７２ｍＬ）中、４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボン酸メチル （２．６５ ｇ， ９．３９ｍｍｏｌ）溶液に、４−（１−（（（トリフルオロメチル）スルホニル）オキシ）ビニル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．３８ｇ，９．３９ｍｍｏｌ）、Ｎａ_２ＣＯ_３（２．４８９ｇ，２３．４８ｍｍｏｌ）および水（２４ｍＬ）を添加した。混合物を、Ｎ_２をバブリング（bubbling）することによって１０分脱気した。Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４（０．５４３ｇ，０．４７０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１時間７０℃で加熱した。反応混合物をＲＴに冷却し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて抽出し、２．８ｇの生成物を無色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.27 - 1.55 (m, 11 H), 1.78 (m, 2 H), 2.26 - 2.46 (m, 4 H), 2.71 (t, J=11.49 Hz, 2 H), 3.87 (s, 3 H), 4.18 (br. s., 2 H), 5.13 (s, 1 H), 5.29 - 5.39 (m, 1 H), 8.02 (s, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 388.1.

【0248】

ｃ）４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル

【化82】

ＤＣＭ（５０ｍＬ）中、４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）ビニル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｇ，３．２８ｍｍｏｌ）および（（４Ｒ，５Ｒ）−（＋）−Ｏ−［１−ベンジル−１−（５−メチル−２−フェニル−４，５−ジヒドロオキサゾ−ル−４−イル）−２−フェニルエチル］（ジシクロヘキシルホスフィナイト）（１，５−ＣＯＤ）イリジウム（Ｉ）テトラキス（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニルホウ酸塩（６３ｍｇ，３６μｍｏｌ）の溶液を、Parr shakerで、３０分間、５０ｐｓｉ水素圧で水素化した。混合物を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜４０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル （１．１ｇ）を無色油状物として得た。生成物の光学的純度を、キラルＨＰＬＣ（キラルパック（Chiralpak） ＡＹ−Ｈ，５ミクロン，４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ；２４５，２５０ｎｍＵＶ；９０：１０：０．１ｎ−ヘプタン：ＥｔＯＨ：イソプロピルアミン，等張性，１．０ｍｌ／分）によって９８％ｅ．ｅ．に決定した。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.03 - 1.33 (m, 5 H), 1.38 - 1.58 (m, 11 H), 1.88 (d, J=12.38 Hz, 1 H), 2.37 (s, 3 H), 2.48 - 2.77 (m, 2 H), 2.94 (quin, J=7.26 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 4.05-4.15 (m, 1 H), 7.97 (s, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 390.2.

【0249】

ｄ）５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（Ｒ）−メチル

【化83】

ＤＣＭ（２ｍＬ）中、４−（１−（４−（メトキシカルボニル）−３−メチルチオフェン−２−イル）エチル）ピペリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（８５ｍｇ，０．２３１ ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−ジオキサン（０．２８９ｍＬ，１．１５６ｍｍｏｌ）中、４Ｎ ＨＣｌを添加した。混合物を４時間ＲＴで維持した。混合物を濃縮し、残渣を真空下で乾燥させた。次いで残渣をＣＨ_３ＣＮ（２ｍＬ）で希釈した。この混合物にトリフルオロメタンスルホン酸２，２−ジフルオロエチル（１６３ｍｇ，０．７６３ ｍｍｏｌ）およびＣｓ_２ＣＯ_３（１７３ｍｇ，０．５３２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２時間５０℃で加熱した。混合物を冷却し、ＤＣＭで希釈し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル，０〜５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）を用いて精製し、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（Ｒ）−メチル（６８ｍｇ）を無色油状物として得た。

【0250】

ｅ）（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化84】

ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中、５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボン酸（Ｒ）−メチル（６８ｍｇ，０．２０５ｍｍｏｌ）の溶液に、８Ｎ ＮａＯＨ（０．１４ｍＬ，１．１２０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間４０℃で加熱した。混合物を６Ｎ ＨＣｌ（０．１８７ｍＬ，１．１２ｍｍｏｌ）で処理し、濃縮した。残渣を真空下で蒸発させ、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）で希釈した。この混合物に３−（アミノメチル）−４，６−ジメチルピリジン−２（１Ｈ）−オン、塩酸塩（５８．１ｍｇ，０．３０８ｍｍｏｌ）、ＮＭＭ（０．１３５ｍＬ，１．２３１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（７９ｍｇ，０．４１０ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（５５．９ｍｇ，０．４１０ ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１８時間ＲＴで撹拌した。反応混合物を水（１０ｍＬ）で急冷し、結果として得られた沈殿物を濾過によって回収し、真空下で乾燥させ、（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロエチル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド（４９ｍｇ）をオフホワイトの固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.08 - 1.38 (m, 7 H), 1.76 (m, 1 H), 1.92 - 2.14 (m, 5 H), 2.18 (m, 6 H), 2.64 (td, J=15.73, 4.17 Hz, 2 H), 2.82 (d, J=11.87 Hz, 1 H), 2.86 - 2.97 (m, 2 H), 4.17 - 4.30 (m, 2 H), 5.86 (s, 1 H),5.94-6.23 (m, 1H), 7.65 (s, 1 H), 7.97 (t, J=5.05 Hz, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 452.2.

【0251】

実施例２３
（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミド

【化85】

実施例２２の一般的手順に従い、（Ｒ）−５−（１−（１−（２，２−ジフルオロプロピル）ピペリジン−４−イル）エチル）−Ｎ−（（４，６−ジメチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）メチル）−４−メチルチオフェン−３−カルボキサミドを調製した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.09 - 1.39 (m, 7 H), 1.58 (t, J=19.07 Hz, 3 H), 1.76 (m, 1 H), 1.98 - 2.27 (m, 12 H), 2.63 (m, 2 H), 2.81 (d, J=12.13 Hz, 1 H), 2.91 (m, 2 H), 4.17 - 4.28 (m, 2 H), 5.86 (s, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.97 (t, J=4.93 Hz, 1 H). MS(ES) [M+H]⁺ 466.3.

【0252】

アッセイプロトコール
本明細書に含まれる化合物を、ＰＲＣ２複合体内のＥＺＨ２のメチルトランスフェラーゼ活性を阻害するそれらの能力に関して評価した。ヒトＰＲＣ２複合体は、Ｓｆ９細胞で５メンバーのタンパク質（ＦＬＡＧ−ＥＺＨ２、ＥＥＤ、ＳＵＺ１２、ＲｂＡｐ４８、ＡＥＢＰ２）のそれぞれを共発現させた後、共精製することにより作製した。酵素活性を、トリチウム化メチル基が３Ｈ−ＳＡＭから、ヒストンＨ３に由来するビオチニル化非メチル化ペプチド基質上のリシン残基へ転移される、シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）で測定した。ペプチドはストレプトアビジンコーティングＳＰＡビーズに捕捉され、得られたシグナルはViewLuxプレートリーダーで読まれた。

【0253】

パートＡ 化合物の調製
１．１００％ＤＭＳＯ中に、固体からの化合物の１０ｍＭ原液を調製する。
２．３８４ウェルプレートに、ＤＭＳＯ対照用の第６列と第１８列を残し、各試験化合物に関して１００％ＤＭＳＯで１１点連続希釈系（１：４希釈、最高濃度１０ｍＭ）を設定した。
３．希釈系プレートから反応プレート（Corning、３８４ウェル ポリスチレンＮＢＳカタログ番号３６７３）に１０ｎＬの化合物を分注する。

【0254】

パートＢ 試薬の調製
以下の溶液を調製する。
１．１×基本バッファー、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８、２ｍＭ ＭｇＣｌ_２：基本バッファー１Ｌ当たり、１Ｍ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８（５０ｍＬ）、１Ｍ ＭｇＣｌ_２ （２ ｍＬ）および蒸留水（９４８ｍＬ）を合わせる。
２．１×アッセイバッファー：１×アッセイバッファー１０ｍＬ当たり、１ｘ基本バッファー（９．９６ｍＬ）、１Ｍ ＤＴＴ（４０μＬ）、および１０％Ｔｗｅｅｎ−２０（１μＬ）を合わせ、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８、２ｍＭ ＭｇＣｌ_２、４ｍＭ ＤＴＴ、０．００１％Ｔｗｅｅｎ−２０の終濃度とする。
３．２×酵素溶液：２×酵素溶液１０ｍＬ当たり、１×アッセイバッファー（９．９９ｍＬ）および３．２４μＭ ＥＺＨ２ ５メンバー複合体（６．１７μＬ）を合わせ、１ｎＭの最終酵素濃度とする。
４．ＳＰＡビーズ溶液：ＳＰＡビーズ溶液１ｍＬ当たり、ストレプトアビジンコーティングＳＰＡビーズ（PerkinElmer、カタログ番号ＲＰＮＱ０２６１、４０ｍｇ）および１ｘアッセイバッファー（１ｍＬ）を合わせ、途中（working）濃度４０ｍｇ／ｍＬとする。
５．２×基質溶液：２×基質溶液１０ｍＬ当たり、４０ｍｇ／ｍＬＳＰＡビーズ溶液（３７５μＬ）、１ｍＭビオチニル化ヒストンＨ３Ｋ２７ペプチド（２００μＬ）、１２．５μＭ ３Ｈ−ＳＡＭ（２４０μＬ；１ｍＣｉ／ｍＬ）、１μＭ冷ＳＡＭ（５７μＬ）および１×アッセイバッファー（９．１３ｍＬ）を合わせ、０．７５ｍｇ／ｍＬＳＰＡビーズ溶液、１０μＭビオチニル化ヒストンＨ３Ｋ２７ペプチド、０．１５μＭ３Ｈ−ＳＡＭ（〜１２ ｕＣｉ／ｍＬ ３Ｈ−ＳＡＭ）および２．８５μＭ冷ＳＡＭの終濃度とする。
６．２．６７×クエンチ溶液：２．６７×クエンチ溶液１０ｍＬ当たり、１ｘアッセイバッファー（９．７３ ｍＬ）および１０ｍＭ冷ＳＡＭ（２６７μＬ）を合わせ、１００μＭ冷ＳＡＭの終濃度とする。

【0255】

パートＣ ３８４ウェルGrenier Bio-Oneプレートでのアッセイ反応
化合物の添加
１．１０ｎＬ／ウェルの１０００×化合物を試験ウェル（上記の通り）に区分する。
２．第６列および第８列（それぞれ高対照および低対照用）には１０ｎＬ／ウェルの１００％ＤＭＳＯを区分する。

【0256】

アッセイ
１．第１８列に５μＬ／ウェルの１×アッセイバッファーを分注する（低対照反応）。
２．第１〜２４列に５μＬ／ウェルの２×基質溶液を分注する。（注記：基質溶液は、マトリックス貯蓄槽（reservoir）に分注する前に、均一なビーズ懸濁液を確保するために混合されるべきである。）
３．第１〜１７、１９〜２４列に５μＬ／ウェルの２×酵素溶液を分注する。
４．反応物を室温で６０分間インキュベートする。

【0257】

クエンチ
１．第１〜２４列に６μＬ／ウェルの２．６７×クエンチ溶液を分注する。
２．アッセイプレートを封止し、約１分間５００ｒｐｍで回転させる。
３．暗順応プレートを約１５〜６０分ViewLux装置に入れる。

【0258】

プレートの読み取り
１．Viewluxプレートリーダーにて、６１３ｎｍの発光用フィルターまたは透明フィルター（３００秒暴露）を用いてアッセイプレートを読み取る。

【0259】

試薬の添加は手作業で行うこともできるし、または自動液体ハンドラーで行うこともできる。

【0260】

結果
阻害パーセントは、各化合物濃度についてＤＭＳＯ対照に対して計算し、得られた値は、ＡＢＡＳＥデータフィッティングソフトウエアパッケージ内の標準的なＩＣ_５０フィッティングパラメーターを用いて当てはめを行った。

【0261】

例示的化合物は一般に、上記または類似のアッセイに従って試験し、ＥＺＨ２の阻害剤であることが判明した。そのようなアッセイに従って試験された特定の生物活性を下表に挙げる。≦10nMのIC₅₀値は、化合物の活性がアッセイにおける検出の限界に近づいていたことを示している。アッセイの実行を繰り返すと、若干異なるＩＣ_５０値となる場合がある。

【0262】

【表1】