特許 6571688 置換アセチドラジド誘導体、その調製方法及び使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6571688

(24)【登録日】2019年8月16日

(45)【発行日】2019年9月4日

(54)【発明の名称】置換アセチドラジド誘導体、その調製方法及び使用

(51)【国際特許分類】

   C07C 251/86 20060101AFI20190826BHJP

   C07C 249/16 20060101ALI20190826BHJP

   A61K 31/165 20060101ALI20190826BHJP

   A61P 7/06 20060101ALI20190826BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20190826BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20190826BHJP

【ＦＩ】

   C07C251/86CSP

   C07C249/16

   A61K31/165

   A61P7/06

   A61P9/10

   A61P43/00 111

【請求項の数】18

【全頁数】47

(21)【出願番号】特願2016-569920(P2016-569920)

(86)(22)【出願日】2015年5月20日

(65)【公表番号】特表2017-517522(P2017-517522A)

(43)【公表日】2017年6月29日

(86)【国際出願番号】CN2015079370

(87)【国際公開番号】WO2015180583

(87)【国際公開日】20151203

【審査請求日】2018年2月5日

(31)【優先権主張番号】201410238255.1

(32)【優先日】2014年5月30日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】513026012

【氏名又は名称】インスティテュート オブ ファーマコロジー アンド トキシコロジー アカデミー オブ ミリタリー メディカル サイエンシズ ピー．エル．エー．チャイナ

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100077517

【弁理士】

【氏名又は名称】石田 敬

(74)【代理人】

【識別番号】100087871

【弁理士】

【氏名又は名称】福本 積

(74)【代理人】

【識別番号】100087413

【弁理士】

【氏名又は名称】古賀 哲次

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100150810

【弁理士】

【氏名又は名称】武居 良太郎

(74)【代理人】

【識別番号】100182730

【弁理士】

【氏名又は名称】大島 浩明

(72)【発明者】

【氏名】リー ソーン

(72)【発明者】

【氏名】シヤオ ジュインハイ

(72)【発明者】

【氏名】ワーン リーリー

(72)【発明者】

【氏名】ローン ローン

(72)【発明者】

【氏名】リー ウエイ

(72)【発明者】

【氏名】ルオ ハオミーン

(72)【発明者】

【氏名】リー フェイフェイ

(72)【発明者】

【氏名】ジョーン ウー

(72)【発明者】

【氏名】ジュヨン ジービーン

(72)【発明者】

【氏名】シエ ユインドーァ

(72)【発明者】

【氏名】リー シーンジョウ

(72)【発明者】

【氏名】ジョウ シンボー

(72)【発明者】

【氏名】ワーン シヤオクイ

(72)【発明者】

【氏名】ツァオ ルイユエン

【審査官】 神谷 昌克

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１０／０６０２７７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００８−５４５７１８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２０１１／０００３８５１（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特表２００６−５２７１９９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１１−５１３２０６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 LUO,H. et al.，Design, Synthesis and Antitumor Activity of a Novel Series of PAC-1 Analogs，Chemical Research in Chinese Universities，２０１３年，Vol.29, No.5，p.906-910

【文献】 HSU,D.C. et al.，Parallel Synthesis and Biological Evaluation of 837 Analogues of Procaspase-Activating Compound 1 (PAC-1)，ACS Combinatorial Science，２０１２年，Vol.14, No.1，p.44-50

【文献】 YEOH,K.K. et al.，Dual-action inhibitors of HIF prolyl hydroxylases that induce binding of a second iron ion，Organic & Biomolecular Chemistry，２０１３年，Vol.11, No.5，p.732-745

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｃ

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉ

【化1】

［式中、
ｎは１、２、３、４又は５であり；
ＡはＯ又はＳであり；
Ｒ_３は水素及びＣ_１−Ｃ_４アルキルから選択され；
Ａｒ^１はＲ_１で置換されたアリールであり、Ｒ_１は：
水素， Ｃ_１−Ｃ_６アルキル， Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ， トリフルオロメチル及びシアノから選択され；
Ａｒ^２はＲ_２， Ｒ_４及びＲ_５で置換されたフェニルであり、ここでＲ_２はオルト位、Ｒ_４はメタ位、Ｒ_５はパラ位に有り；
ここで、
Ｒ_２は、水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_６アルキル， Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ， アリル， ハロゲン及びＣ_１−Ｃ_４ジアルキルアミノから選択され；
Ｒ_４は、水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ， ハロゲン及びＣ_１−Ｃ_４ジアルキルアミノから選択され；そして
Ｒ_５は、水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_６アルキル， Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ， アリル及びハロゲンから選択され；
ここでＲ_２， Ｒ_４及びＲ_５は同時に水素ではなく、かつ
ここでＲ_４はＲ_５と異なり、Ｒ_２はＲ_５と異なる］
で表される化合物又はその医薬として許容される塩。

【請求項2】

Ａｒ^１が、下記項目（１）〜（３）の要件：
（１）アリールがフェニル， ナフチル， アントラセニル， フェナントレニル， インデニル， フルオレニル及びアセナフテニルから選択される；
（２）Ｃ_１−Ｃ_６アルキルがＣ_１−Ｃ_４アルキルである；
（３）Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシがＣ_１−Ｃ_４アルコキシである；
を１つ以上満たす、請求項１に記載の化合物又はその医薬として許容される塩。

【請求項3】

Ａｒ^２が、下記項目（１）〜（４）の要件：
（１）Ｃ_１−Ｃ_６アルキルがＣ_１−Ｃ_４アルキルである；
（２）Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシがＣ_１−Ｃ_４アルコキシである；
（３）Ｃ_１−Ｃ_４ジアルキルアミノがＣ_１−Ｃ_３ジアルキルアミノである；
（４）ハロゲンがフッ素、塩素、臭素及びヨウ素から選択される；
を１つ以上満たす、請求項１に記載の化合物又はその医薬として許容される塩。

【請求項4】

請求項１に記載の化合物又はその医薬として許容される塩であって：
ｎが１又は２であり；
ＡがＯであり；
Ｒ_３が水素であり；
Ａｒ^１がＲ_１で置換されたフェニル又はナフチルであり、Ｒ_１が：水素， Ｃ_１−Ｃ_４アルキル， メトキシ， エトキシ， トリフルオロメチル及びシアノから選択され；
Ｒ_２が、水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_４アルキル， メトキシ， エトキシ， アリル， ハロゲン， ジメチルアミノ， ジエチルアミノ及びメチルエチルアミノから選択され；
Ｒ_４が、水素， ヒドロキシ， メトキシ， エトキシ， ハロゲン， ジメチルアミノ， ジエチルアミノ及びメチルエチルアミノから選択され；
Ｒ_５が、水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_４アルキル， メトキシ， エトキシ， アリル及びハロゲンから選択される；
化合物又はその医薬として許容される塩。

【請求項5】

以下：
（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（２，３−ジヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−［（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（２，３−ジヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−ブロモ−６−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３， ５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−３− （Ｎ− （２− （Ｎ− （４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ）プロピル）Ｎ−メチルアミノ）アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（２，３−ジヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−ブロモ−６−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド，
（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド；
から選択される、化合物又は医薬として許容されるその塩。

【請求項6】

以下の工程：
１）Ｎ，Ｎ’−ジメチルエタンジアミン又はＮ，Ｎ’−ジメチルプロパンジアミンをテトラヒドロフランに溶解し、加熱により還流し、塩化ベンジルをゆっくり滴下して、式１

【化2】

の化合物を生成及び分離する工程；
２）式１の化合物、ＮａＨＣＯ_３をアセトンに添加し、還流し、クロロ酢酸メチルを添加して、式２

【化3】

の化合物を生成及び分離する工程；
３）溶媒としてエタノールを使用し、ヒドラジン水和物又は対応する置換ヒドラジンを添加し、還流し、そして式２の化合物を滴下により添加してヒドラジン分解を起こすことにより、式３

【化4】

の化合物を生成する工程；
４）式３の化合物を対応するサリチル酸アルデヒド又は芳香族ケトンと反応させることにより、式Ｉ

【化5】

の化合物を生成する工程；
を含み、ここでn、A、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、Ar¹及びAr²は請求項１〜４のいずれかにおいて規定されるのと同一の意味を有する、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物を調製する方法。

【請求項7】

以下の項目（１）〜（３）：
（１）工程１）において、塩化ベンジルとＮ，Ｎ’−ジメチルエタンジアミン又はＮ，Ｎ’−ジメチルプロパンジアミンとのモル比が１：６である；
（２）工程１）において、反応はＴＬＣを用いてモニタリングされる；
（３）工程１）において、塩化ベンジルが完全に反応した後、加熱が停止され、冷却が実施され、その後回転蒸発を実施することにより溶媒を蒸発させ、当該産物をＮａＯＨ水溶液を用いて洗浄し、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２を用いて抽出し、抽出中ｐＨ１２以上を維持し；有機層が組み合わされてこれをカラムクロマトグラフィーに供することにより、式１の化合物を取得する；
のいずれか１つ以上により特徴付けられる、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬として許容される塩、及び１つ以上の医薬として許容される助剤を含有する、医薬組成物。

【請求項9】

インビトロでプロリンヒドロキシラーゼを阻害する又はＨＩＦ−１を安定化する方法であって、有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬として許容される塩を使用する工程を含む、方法。

【請求項10】

前記プロリンヒドロキシラーゼがプロリル−４−ヒドロキシラーゼ又はＥＣ１．１４．１１．２である、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記ＨＩＦ−１がＨＩＦ−αである、請求項９に記載の方法。

【請求項12】

前記ＨＩＦ−αがＨＩＦ−１α， ＨＩＦ−２α又はＨＩＦ−３αである、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

薬剤として使用される、請求項８に記載の医薬組成物。

【請求項14】

プロリンヒドロキシラーゼを阻害する、又はＨＩＦ−１を安定化するために使用される、又は貧血、急性虚血性再灌流傷害の、治療及び／又は予防及び／又は術後アジュバント療法のために使用される、請求項８に記載の医薬組成物。

【請求項15】

前記プロリンヒドロキシラーゼがプロリル−４−ヒドロキシラーゼ又はＥＣ１．１４．１１．２である、請求項１４に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記ＨＩＦ−１がＨＩＦ−αである、請求項１４に記載の医薬組成物。

【請求項17】

前記ＨＩＦ−αがＨＩＦ−１α， ＨＩＦ−２α又はＨＩＦ−３αである、請求項１６に記載の医薬組成物。

【請求項18】

エリスロポエチン、ヘムオキシゲナーゼ−１及び／又はアディポネクチンを上方制御するために使用される、請求項８に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、医薬品化合物の分野に属し、置換アセチドラジド誘導体、その調製方法及び使用に関する。

【背景技術】

【0002】

１９９２年、Ｓｅｍｅｎｚａらは、エリスロポエチン遺伝子の低酸素応答エレメントに特異的に結合するタンパク質を見出し、このタンパク質は、低酸素誘導因子−１（ＨＩＦ−１）と名付けられた。ＨＩＦ−１は哺乳類細胞中に広く存在し、主に血管新生、細胞生存及び死、またｐＨを制御する。ＨＩＦ−１は、２つのサブユニット（ＨＩＦ−α及びＨＩＦ−β）からなるヘテロダイマーで、これらの２つのサブユニットは、アルカリヘリックスループヘリックス転写因子スーパーファミリーのメンバーであり、ＰＥＲ−ＡＨＲ／ＡＲＮＴ−ＳＩＭ （ＰＡＳ）ドメインを有する。ＨＩＦ−αは、ＨＩＦ−１α， ＨＩＦ−２α及びＨＩＦ−３αの３つのサブユニットを有し、ＨＩＦ−１α及びＨＩＦ−２αは高い配列同一性を有し、同一のＤＮＡ結合ドメインを認識するが、生物学的効果が異なる。

【0003】

正常酸素条件下、ＨＩＦ−１αの酸素依存的分解ドメイン（ＯＤＤＤ）中の４０２〜５６４部位に有るプロリン残基が、プロリルヒドロキシラーゼ（ＰＨＤ）によってヒドロキシ化され、エロンギン（ｅｌｏｎｇｉｎ）Ｃ、エロンギンＢ等のユビキチンタンパク質を集め、ユビキチン連結プロテアーゼ複合体を形成して、それらは、腫瘍サプレッサーのフォン・ヒッペル・リンドウ遺伝子産物（ｐＶＨＬ）と結合したとき、ユビキチン依存的経路を介して分解される。低酸素条件下、ＰＨＤの不活性化することによりプロリン残基がヒドロキシ化せず、ＨＩＦ−１αがｐＶＨＬと結合しないため、その分解が妨げられる。

【0004】

ＨＩＦ−１αの活性化は下流の標的遺伝子の上方制御をもたらし、これは、癌形成、脈管形成、細胞生存、グルコース代謝等の多くの生理的減少に広く関与する、７０以上のＨＩＦ−１α標的遺伝子において確認されている。下流標的遺伝子の中で、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）及びエリスロポエチン（ＥＰＯ）は腫瘍血管新生の中核的な増殖因子であり、グルコーストランスポーター（Ｇｌｕｔ−１）はグルコースレベルを低下させ、カルボアンヒドラーゼＩＸ（ＣＡＩＸ）は、ｐＨ変化を制御する。

【0005】

２００１年、Ｂｒｕｉｃｋは、ＨＩＦ−αをヒドロキシ化するタンパク質を発見し、Ｉｖａｎらは、ヒト遺伝子におけるプロリンヒドロキシラーゼをコードする遺伝子、即ちＥＧＬＮ−１， ＥＧＬＮ−２及びＥＧＬＮ−３を発見し、これらは、ＰＨＤ２， ＰＨＤ１及びＰＨＤ３をコードする。２００２年、Ｏｅｈｍｅは、第四のＰＨＤ、即ちＰＨＤ４を発見し、これは、高レベルで発現するとき、ＨＩＦ−αをヒドロキシ化する。

【0006】

プロリンヒドロキシラーゼの阻害メカニズムは、大まかに鉄キレート剤又は鉄競合剤と、２−ケトグルタル酸アナログの２つのグループに分類される。鉄キレート剤又は鉄競合剤は、ＯＤＤＤのＦｅ^２＋結合部位に結合し、ＨＩＦ−αのプロリンヒドロキシラーゼ（例えばプロリル−４−ヒドロキシラーゼ；ＥＣ１．１４．１１．２）への結合を阻害することにより、ヒドロキシ化反応を終結させて、ＨＩＦ−αの分解を回避し、ＨＩＦ−αの安定化を達成する。２−ケトグルタル酸アナログは、内在性２−オキソグルタレート（２−ＯＧ）との競合によりプロリンヒドロキシラーゼを阻害し、これらのプロリンヒドロキシラーゼの阻害剤は、研究の焦点である。

【0007】

現在、ＨＩＦ−１αを安定化して、限定されないがエリスロポエチン（ＥＰＯ）、ヘムオキシゲナーゼ−１、アディポネクチン誘導性一酸化窒素シンターゼ等を含む、下流標的遺伝子を下方制御することにより、貧血、急性虚血性再灌流傷害等の疾患を治療する目的を達成するための、プロリンヒドロキシラーゼの経口小分子阻害剤の合成に関する、活発な研究が行われている。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明の発明者らは、高度な研究と独創的な作業を経て、置換アセチドラジド誘導体、即ち式Ｉの化合物を得た。発明者らは、驚くべきことに、この化合物又はその医薬として許容される塩が、効果的に、プロリンヒドロキシラーゼを阻害し、ＨＩＦ−α、特にＨＩＦ−１αを効果的に安定化し、貧血、急性虚血性再灌流傷害の、治療及び／又は予防及び／又は術後アジュバント療法のための医薬の製造における有効性を有することを見出した。従って、下記のような発明が提供される。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明の一つの側面は、式Ｉ

【化1】

［式中、
ｎは１、２、３、４又は５であり；
ＡはＯ又はＳであり；
Ｒ_３は水素及びＣ_１−Ｃ_４アルキルから選択され；
Ａｒ^１はＲ_１で置換されたアリールであり、Ｒ_１は：
水素， Ｃ_１−Ｃ_６アルキル， Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ， トリフルオロメチル及びシアノから選択され；
Ａｒ^２はＲ_２， Ｒ_４及びＲ_５で置換されたアリールであり、Ｒ_２， Ｒ_４及びＲ_５は：
水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_６アルキル， Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ， アリル， ハロゲン及びＣ_１−Ｃ_４ジアルキルアミノから独立して選択され；ここでＲ_２， Ｒ_４及びＲ_５は同時に水素ではない］
で表される化合物又はその医薬として許容される塩に関する。

【0010】

Ｒ_２， Ｒ_４及びＲ_５は同時に水素ではない限り、Ｒ_２， Ｒ_４及びＲ_５のいずれか２つ又は３つが同一又は異なってもより。

【0011】

本発明の一つの態様において、Ａｒ^１はＲ_１で置換されたフェニルであり、Ｒ_１は、オルト位、パラ位又はメタ位に有る。

【0012】

本発明の一つの態様において、Ａｒ^２はＲ_２， Ｒ_４， Ｒ_５で置換されたフェニルであり、Ｒ_２， Ｒ_４， Ｒ_５は、オルト位、パラ位又はメタ位に有る。

【0013】

本発明のいずれかの項の化合物、又はその医薬として許容される塩に関して、好ましくは、Ａｒ^１又はＡｒ^２は、下記項目（１）〜（５）の要件：
（１）アリールがフェニル， ナフチル， アントラセニル， フェナントレニル， インデニル， フルオレニル及びアセナフテニルから選択される；
（２）Ｃ_１−Ｃ_６アルキルがＣ_１−Ｃ_４アルキルである；
（３）Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシがＣ_１−Ｃ_４アルコキシである；
（４）Ｃ_１−Ｃ_４ジアルキルアミノがＣ_１−Ｃ_３ジアルキルアミノである；
（５）ハロゲンがフッ素、塩素、臭素及びヨウ素から選択される；
を１つ以上満たす。

【0014】

本発明のいずれかの項の化合物、又はその医薬として許容される塩に関して、好ましくは：
ｎが１又は２であり；
ＡがＯであり；
Ｒ_３が水素であり；
Ａｒ^１がＲ_１で置換されたフェニル又はナフチルであり、Ｒ_１が：水素， Ｃ_１−Ｃ_４アルキル， メトキシ， エトキシ， トリフルオロメチル及びシアノから選択され；
Ａｒ^２がＲ_２， Ｒ_４及びＲ_５で置換されたフェニル又はナフチルであり、Ｒ_２， Ｒ_４及びＲ_５ が：水素， ヒドロキシ， Ｃ_１−Ｃ_４アルキル， メトキシ， エトキシ， アリル， ハロゲン， ジメチルアミノ， ジエチルアミノ及びメチルエチルアミノから独立して選択され；ここでＲ_２， Ｒ_４及びＲ_５は同時に水素ではない。

【0015】

本発明のいずれかの項において、化合物、又はその医薬として許容される塩として、好ましくは、下記表１に記載の化合物、又はその医薬として許容される塩である。

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【表1-7】

【表1-8】

【0016】

本発明の他の側面は、以下の工程：
１）Ｎ，Ｎ’−ジメチルエタンジアミン又はＮ，Ｎ’−ジメチルプロパンジアミンをテトラヒドロフランに溶解し、加熱により還流し、塩化ベンジルをゆっくり滴下して、式１

【化2】

の化合物を生成及び分離する工程；
２）式１の化合物、ＮａＨＣＯ_３をアセトンに添加し、還流し、クロロ酢酸メチル又はクロロエタンスルホン酸メチルを添加して、式２

【化3】

の化合物を生成及び分離する工程；
３）溶媒としてエタノールを使用し、ヒドラジン水和物又は対応する置換ヒドラジンを添加し、還流し、そして式２の化合物を滴下により添加してヒドラジン分解を起こすことにより、式３

【化4】

の化合物を生成する工程；
４）式３の化合物を対応するサリチル酸アルデヒド又は芳香族ケトンと反応させることにより、式Ｉ

【化5】

の化合物を生成する工程；
を含み、ここで全ての表記は本発明の上記項目のいずれかにおいて言及されるのと同一の意味を有する、本発明の式Ｉの化合物を調製する方法に関する。

【0017】

本発明の上記いずれかの項の調製方法において、以下の項目（１）〜（３）：
（１）工程１）において、塩化ベンジルとＮ，Ｎ’−ジメチルエタンジアミン又はＮ，Ｎ’−ジメチルプロパンジアミンとのモル比が１：６である；
（２）工程１）において、反応はＴＬＣを用いてモニタリングされる；
（３）工程１）において、塩化ベンジルが完全に反応した後、加熱が停止され、冷却が実施され、その後回転蒸発を実施することにより溶媒を蒸発させ、当該産物をＮａＯＨ水溶液を用いて洗浄し、そしてＣＨ_２Ｃｌ_２を用いて抽出し、抽出中ｐＨ１２以上を維持し；有機層が組み合わされてこれをカラムクロマトグラフィーに供することにより、式１の化合物を取得する；
のいずれか１つ以上により特徴付けられる。

【0018】

本発明の更なる側面は、本発明のいずれかの項目の化合物又はその医薬として許容される塩、及び１つ以上の医薬として許容される助剤を含有する、医薬組成物に関する。

【0019】

本発明のいずれか１つの項目の化合物又はその医薬として許容される塩、又は本発明の医薬組成物において、好ましくは、それは医薬として使用される。

【0020】

本発明のいずれか１つの項目の化合物又はその医薬として許容される塩、又は本発明の医薬組成物において、好ましくは、それはプロリンヒドロキシラーゼを阻害する、又はＨＩＦ−１を安定化するのに、又は貧血、急性虚血性再灌流傷害の、治療及び／又は予防及び／又は術後アジュバント療法に使用され；好ましくは、当該プロリンヒドロキシラーゼがプロリル−４−ヒドロキシラーゼ又はＥＣ１．１４．１１．２であり；好ましくは当該ＨＩＦ−１がＨＩＦ−αであり；より好ましくは当該ＨＩＦ−αがＨＩＦ−１α， ＨＩＦ−２α又はＨＩＦ−３αである。

【0021】

本発明の医薬として許容される塩又は医薬組成物は、エリスロポエチン、ヘムオキシゲナーゼ−１及び／又はアディポネクチンを上方制御するために使用される。

【0022】

本発明の更なる他の側面は、プロリンヒドロキシラーゼを阻害する、又はＨＩＦ−１を安定化する医薬の製造における、又は貧血、急性虚血性再灌流傷害の、治療及び／又は予防及び／又は術後アジュバント療法のための医薬の製造における、本発明のいずれかの項目の化合物又はその医薬として許容される塩の使用に関し；好ましくは当該ＨＩＦ−１がＨＩＦ−αである。

【0023】

本発明の更なる他の側面は、エリスロポエチン、ヘムオキシゲナーゼ−１及び／又はアディポネクチンを上方制御する医薬の製造における、本発明のいずれかの項目の化合物又はその医薬として許容される塩の使用に関する。

【0024】

本発明の更なる他の側面は、インビトロ又はインビボでプロリンヒドロキシラーゼを阻害する又はＨＩＦ−１を安定化する方法に関し、当該方法は、有効量の本発明のいずれかの項目の化合物又はその医薬として許容される塩を使用する工程を含み；好ましくは当該ＨＩＦ−１がＨＩＦ−αである。本発明の一つの態様において、当該方法は非治療目的である。

【0025】

本発明の更なる他の側面は、又は貧血、急性虚血性再灌流傷害の、治療及び／又は予防及び／又は術後アジュバント療法の方法に関し、当該方法は、有効量の本発明のいずれかの項目の化合物又はその医薬として許容される塩を使用する工程を含む。

【0026】

当業者は、本発明の化合物が、それらの医薬として許容される塩の形態で使用され得ることを認識し得る。安定な酸性塩のより具体的な例として、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、過塩素酸、フマル酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ギ酸、乳酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、パルモ酸（ｐａｌｍｏｉｃ）、マロン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ヒドロキシナフトエ酸、ヨウ化水素酸、リンゴ酸、ｓｔｅｒｏｉｃ酸、タンニン酸等の塩が含まれる。シュウ酸のような他の酸は、それ自体は医薬として許容されないが、本発明の化合物及びその医薬として許容される塩を得るための中間体として使用し得る塩の調製に使用され得る。好ましい塩基性塩のより特定的な例には、ナトリウム、リチウム、カリウム、マグネシウム、アルミニウム、カルシウム、亜鉛、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミンおよびプロカインの塩が含まれる。

【0027】

本発明の医薬組成物は、有効量の、本発明の式Ｉの化合物又はその医薬として許容される塩、及び１つ以上の安定な助剤を含有する。ここで、助剤は限定されないが、イオン交換剤、酸化アルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質、例えばヒトアルブミン、緩衝剤、例えばリン酸塩、グリセロール、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物脂肪酸の部分グリセリド、水、塩又は電解質、例えば硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド二酸化ケイ素、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、蜜蝋、ラノリンが挙げられる。

【0028】

本発明の化合物の医薬組成物は、以下の手段：経口投与、スプレー吸入、直腸内投与、経鼻投与、口腔投与、局所投与、非経口投与、例えば皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、髄腔内、脳室内、胸腔内又は頭蓋内注射若しくは分散、又は移植リザーバーによる投与、のいずれかによって投与されてもよく、その中で経口投与、腹腔内又は静脈内注射が好ましい。

【0029】

経口投与において、本発明の化合物は、限定されないが、錠剤、カプセル、水溶液又は水懸濁物等の、経口投与に適した任意の調製剤形で加工されてもよく、錠剤の担体として、通常、ラクトース及びコーンスターチが含まれ、ステアリン酸マグネシウム等の潤滑剤が添加されてもよい。カプセルの希釈剤として、通常、ラクトース及び乾燥コーンスターチが含まれる。水懸濁物において、有効成分は、通常、適切な乳化剤及び分散剤と一緒に用いられる。必要に応じて、経口投与用の上記剤形は、更に、幾つかの甘味料、香料又は着色料と共に添加されてもよい。

【0030】

局所投与において、特に眼球、皮膚又は腸管下部等の容易に届く表面又は器官の神経性疾患の治療のための局所投与において、本発明の化合物は、様々な疾患表面又は器官における局所投与のための様々な剤形で加工されてもよく、それらは特に下記で例示される。

【0031】

眼球用の局所投与において、本発明の化合物は、マイクロ化懸濁物又は溶液の剤形をなすように製剤化されてもよく、ここで使用される担体は、所定のｐＨの等張滅菌生理食塩水であり、クロロベンジルアルコキシド等の保存料が添加されてもされなくてもよい。眼球の使用において、化合物はワセリン軟膏等の軟膏の形態であってもよい。

【0032】

皮膚用の局所投与において、本発明の化合物は、軟膏、ローション又はクリーム等の適切な剤形をなすように製剤化されてもよく、有効成分は１つ以上の担体中に懸濁又は溶存している。軟膏は、限定されないが、ミネラルオイル、液状ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン、乳化ワックス及び水を含む担体を用いてもよく、ローション又はクリームに有用な担体は、限定されないが、ミネラルオイル、モノステアリン酸ソルビタン、Ｔｗｅｅｎ−６０、セチルエステルワックス、ヘキサデケン芳香族アルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール及び水を含む。

【0033】

本発明の化合物は、更に、滅菌注射剤形で投与されてもよく、滅菌注射水又は油懸濁物又は滅菌注射溶液を含み、有用な担体及び溶媒として、水、リンゲル溶液及び等張ＮａＣｌ溶液を含む。加えて、モノグリセリド又はジグリセリド等の滅菌不揮発性油脂も、溶媒又は懸濁媒体として使用され得る。

【0034】

本発明の化合物の用量及び用法が、患者の年齢、体重、性別、通常の健康状態、栄養状態、化合物の活性強度、投与時間、代謝速度、疾患の重症度及び医師の主観的判断等の多くの要因に依存する旨留意すべきである。好ましい用量は１日あたり０．０１〜１００ｍｇ／体重ｋｇ、最適な用量は５〜１０ｍｇ／体重ｋｇである。

【0035】

本発明において、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルキルを意味し、例えばメチル， エチル， プロピル， イソプロピル， ｎ−ブチル， ｓｅｃ−ブチル， ｔｅｒｔ−ブチル， ペンチル， ２−ペンチル， イソペンチル， ネオペンチル， ヘキシル， ２−ヘキシル， ３−ヘキシルを意味し；同様にＣ_１−Ｃ_４アルキル， Ｃ_１−Ｃ_３アルキル又はＣ_１−Ｃ_２アルキルが想定され得る。具体的なアルキルは、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル， Ｃ_１−Ｃ_３アルキル又はＣ_１−Ｃ_２アルキルであり得る。

【0036】

Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシは、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐アルコキシを意味し、例えばメトキシ， エトキシ， プロポキシ， イソプロポキシ， ｎ−ブトキシ， ｓｅｃ−ブトキシ， ｔｅｒｔ−ブトキシ， ペントキシ， ２−ペントキシ， イソペントキシ， ネオ−ペントキシ， ヘキシルオキシ， ２−ヘキシルオキシ， ３−ヘキシルオキシ等であり；同様にＣ_１−Ｃ_４アルコキシ， Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ又はＣ_１−Ｃ_２アルコキシが想定され得る。具体的なアルコキシは、Ｃ_１−Ｃ_４アルコキシ， Ｃ_１−Ｃ_３アルコキシ又はＣ_１−Ｃ_２アルコキシである。

【0037】

ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素原子を意味する。

【0038】

アリールは、単環式環（例えばフェニル）、多環式環（例えばキセニル）又は少なくとも１つの環が芳香族環である複数が融合した環（例えば１， ２， ３， ４−テトラヒドロナフチル， ナフチル）を有する、芳香族炭素環を意味し、任意で、例えばハロゲン， 低級アルキル， 低級アルコキシ， トリフルオロメチル， アリール， ヘテロアリール及びヒドロキシで１−、２−、又は３−置換される。

【0039】

アリールアルキルは、１つ以上のアリール（上記で定義されている）で置換されたアルキル（上記で定義されている）を意味する。好ましくは、アリールアルキルは、アリール−Ｃ_ｌ−Ｃ_３アルキルである。例えばベンジル、フェニルエチル等を含む。

【0040】

ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素原子を意味する。

【0041】

Ｃ_１−Ｃ_４ジアルキルアミノは、Ｃ_１−Ｃ_３ジアルキルアミノ又はＣ_１−Ｃ_２ジアルキルアミノであり得る。具体例として、ジメチルアミノ， ジエチルアミノ， メチルエチルアミノ， ジ−ｎ−プロピルアミノ又はジ−イソ−プロピルアミノを含む。

【0042】

本発明において、特に規定の無い限り、「安定化」は「分解されないこと」を意味し；好ましくは「プロリンヒドロキシラーゼにより分解されないこと」を意味する。

【0043】

本発明において、特に規定の無い限り、プロリンヒドロキシラーゼは、プロリル−４−ヒドロキシラーゼ又はＥＣ １．１４．１１．２を意味する。

【0044】

本発明において、特に規定の無い限り、ＨＩＦ−１はＨＩＦ−αであり；好ましくはＨＩＦ−αはＨＩＦ−１α， ＨＩＦ−２α又はＨＩＦ−３αである。

【0045】

本発明を実施する具体的なモデル
本発明の態様を、実施例と組み合わせて詳細に例示する。しかしながら、当業者は、下記実施例は本発明を単に例示するものであり、本発明の範囲を限定するものではないことを理解する。具体的な条件が例に示されていない場合、公知の条件又は製造者が推奨する条件が適用される。その製造手段が示されていない試薬又は装置は、市販されている公知の製品である。

【0046】

化合物の融点は、ＹＲＴ−３型融点装置によって測定されており、ここで温度は校正されていない。^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＲＸ ４００タイプＮＭＲスペクトロメーターによって測定される。ＦＡＢ質量スペクトルは、Ｚａｂｓｐｅｃｔ高解像度磁気質量スペクトロメーターにより測定される。

【実施例】

【0047】

中間体の調製
調製実施例１：中間体１

【化6】

９．６ ｍＬ （０．３６ ｍｏｌ）のＮ，Ｎ’−ジメチルエタンジアミン及び１００ ｍＬのテトラヒドロフランを、定圧漏斗、還流濃縮チューブ及び温度計を備えた三つ首の容器に添加し、均等に撹拌し、その後加熱した。反応溶液が僅かに沸騰したとき（約５６℃）、１０ ｇ （０．０６ ｍｏｌ）の１−クロロメチルナフタレンを反応溶液にゆっくり滴下すると、白色の沈殿物が少しずつ生成し、反応の終了をモニタリングするために、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）が使用された。反応溶液中の１−クロロメチルナフタレンのスポットが薄層クロマトグラフィー上から消えたとき加熱を停止し、冷却を実施し、回転蒸発により溶媒を蒸発させ、３ｍｏｌ／ｌの水酸化ナトリウム溶液で洗浄し、ジクロロメタンで洗浄液を抽出し、ここで抽出の間ｐＨ１２以上を維持し、全ての有機相が纏められ、シリカカラムにより分離されて（溶出：ジクロロメタン／メタノール＝２０／１）、黄色の液体として収率８６％で｛［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ’−メチルアミノを得た。１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１８ （７Ｈ， ｍ）， ４．１０ （２Ｈ， ｓ）， ３．２６ （３Ｈ， ｓ）， ２．５０ （４Ｈ， ｍ）， ２．２６ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ２２９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0048】

調製実施例２：中間体２

【化7】

３．５６ ｇ （０．０２ ｍｏｌ）の｛［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ’−メチルアミン及び２．１ ｇ （０．０２５ ｍｏｌ）の炭酸水素ナトリウムを、定圧漏斗、還流濃縮チューブ及び温度計を備えた三つ首の容器に添加し、そして４０ｍＬのアセトンを添加し、均等に撹拌し、その後加熱により還流し、２．３６ ｇ （０．０２２ ｍｏｌ）の酢酸メチルを反応溶液にゆっくり滴下し、反応の終了をモニタリングするために、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）が使用された。反応溶液中の｛［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ’−メチルアミンのスポットが薄層クロマトグラフィー上から消えたとき加熱を停止し、冷却を実施し、回転蒸発により溶媒を蒸発させ、シリカカラムにより分離されて（溶出：酢酸エチル／石油＝１／３）、淡黄色の液体として、収率８５％で、メチル２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝酢酸塩を取得した。１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１８ （７Ｈ， ｍ）， ４．１０ （２Ｈ， ｓ）， ３．６８ （３Ｈ， ｓ）， ３．３２ （２Ｈ， ｓ）， ２．３７ （４Ｈ， ｍ）， ２．２６ （６Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ３０１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0049】

調製実施例３：中間体３

【化8】

２．１ ｇ （０．０６ ｍｏｌ）の８５ ％ヒドラジン水和物及び５０ ｍｌの無水エタノールを、定圧漏斗、還流濃縮チューブ及び温度計を備えた２５０ｍｌ三つ首の容器に添加し、均等に撹拌し、その後加熱により還流し、５．０ ｇ （０．０２ ｍｏｌ）のメチル２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝酢酸塩を反応溶液にゆっくり添加し、２時間反応させ、加熱を停止し、冷却を実施し、回転蒸発により溶媒を蒸発させ、シリカカラムにより分離されて（溶出：ジクロロメタン／メタノール＝１０／１）、白色の固体として、収率８６％で、２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジドを取得した。１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： ８．１８ （７Ｈ， ｍ）， ４．１０ （２Ｈ， ｓ）， ３．２９ （２Ｈ， ｓ）， ２．３７ （４Ｈ， ｍ）， ２．２６ （６Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ３０１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0050】

調製実施例４：中間体４

【化9】

パラ−及びメタ−塩酸トリフルオロメチルベンジルを原材料として使用し、中間体１と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２４６．１ ｍ／ｅ．

【0051】

調製実施例５：中間体５

【化10】

中間体４を原材料として使用し、中間体２と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝３１８．２ ｍ／ｅ．

【0052】

調製実施例６：中間体６

【化11】

中間体５を原材料として使用し、中間体３と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝３１８．２ ｍ／ｅ．

【0053】

調製実施例７：中間体７

【化12】

４−イソプロピルベンジルクロリドを原材料として使用し、中間体１と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２２０．２ ｍ／ｅ．

【0054】

調製実施例８：中間体８

【化13】

中間体７を原材料として使用し、中間体２と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２９２．２ ｍ／ｅ．

【0055】

調製実施例９：中間体９

【化14】

中間体８を原材料として使用し、中間体３と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２９２．２ ｍ／ｅ．

【0056】

調製実施例１０：中間体１０

【化15】

３−メトキシベンジルクロリドを原材料として使用し、中間体１と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２０８．２ ｍ／ｅ．

【0057】

調製実施例１１：中間体１１

【化16】

中間体１０を原材料として使用し、中間体２と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２８０．２ ｍ／ｅ．

【0058】

調製実施例１２：中間体１２

【化17】

中間体１１を原材料として使用し、中間体３と同一の操作を行った。黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２８０．２ ｍ／ｅ．

【0059】

調製実施例１３：中間体１３

【化18】

４−（ブロモ−メチル）ベンゾニトリルを原材料として使用し、中間体１と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２０３．１ ｍ／ｅ．

【0060】

調製実施例１４：中間体１４

【化19】

中間体１３を原材料として使用し、中間体２と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２７５．２ ｍ／ｅ．

【0061】

調製実施例１５：中間体１５

【化20】

中間体１４を原材料として使用し、中間体３と同一の操作を行った。黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２７５．２ ｍ／ｅ．

【0062】

調製実施例１６：中間体１６

【化21】

４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルクロリドを原材料として使用し、中間体１と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２３４．２ ｍ／ｅ．

【0063】

調製実施例１７：中間体１７

【化22】

中間体１６を原材料として使用し、中間体２と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝３０６．２ ｍ／ｅ．

【0064】

調製実施例１８：中間体１８

【化23】

中間体１７を原材料として使用し、中間体３と同一の操作を行った。黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝３０６．２ ｍ／ｅ．

【0065】

調製実施例１９：中間体１９

【化24】

パラ−ｔｅｒｔ−ブチルベンジルクロリド及びＮ，Ｎ’−ジメチルプロパンジアミンを原材料として使用し、中間体１と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝２４８．２ ｍ／ｅ．

【0066】

調製実施例２０：中間体２０

【化25】

中間体１６を原材料として使用し、中間体２と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝３２０．２ ｍ／ｅ．

【0067】

調製実施例２１：中間体２１

【化26】

中間体１７を原材料として使用し、中間体３と同一の操作を行った。淡黄色の液体産物を取得した。ＭＳ［Ｍ］^＋＝３２０．２ ｍ／ｅ．

【0068】

実施例１： （Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド （化合物１）

【化27】

０．５ ｇ （１．７ ｍｍｏｌ）の中間体３及び２０ｍＬの無水エタノールを、温度計及び還流濃縮チューブを備えた１００ｍｌ二つ首の容器に添加し、加熱により還流し、０．３６ ｇ （０．２４ ｍｍｏｌ）のオルト−バニリンを反応溶液に滴下し、２時間反応させ、加熱を停止し、冷却を実施し、回転蒸発により溶媒を蒸発させ、シリカカラムにより分離されて（溶出：ジクロロメタン／メタノール＝１０／１）、白色の固体として、収率８５％で、（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジドを取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６） δ： １１．３０ （２Ｈ， ｍ）， ８．４７ （１Ｈ， ｍ）， ７．８４ （２Ｈ， ｍ）， ７．５２ （４Ｈ， ｍ）， ６．８０ （１Ｈ， ｍ）， ６．６６ （１Ｈ， ｍ）， ６．３６ （１Ｈ， ｓ）， ５．６９ （１Ｈ， ｓ）， ４．０１ （２Ｈ， ｓ） ３．８３ （３Ｈ， ｓ）， ３．３０ （２Ｈ， ｓ）， ２．７９ （４Ｈ， ｓ）， ２．６１ （３Ｈ， ｓ）， ２．０７ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４３５．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0069】

実施例２：（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド （化合物２）

【化28】

中間体３及び３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．４８ （１Ｈ， ｓ）， １１．２６ （１Ｈ， ｓ）， ８．５８ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．６８ Ｈｚ）， ７．９０ （２Ｈ， ｍ）， ７．４７ （４Ｈ， ｍ）， ７．２１ （１Ｈ， ｓ）， ６．１８ （１Ｈ， ｓ）， ５．７５ （１Ｈ， ｓ）， ４．００ （２Ｈ， ｓ）， ３．３４ （２Ｈ， ｓ）， ２．７８ （４Ｈ， ｓ）， ２．６８ （３Ｈ， ｓ）， ２．０１ （３Ｈ， ｓ）， １．３２（９Ｈ， ｓ）， １．２４（９Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ５１７．６［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0070】

実施例３： （Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド （化合物３）

【化29】

中間体３及び３−エトキシサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．２５ （２Ｈ， ｍ）， ８．４７ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．１２ Ｈｚ）， ７．９０ （２Ｈ， ｍ）， ６．８０ （１Ｈ， ｍ）， ６．６２ （２Ｈ， ｍ）， ６．３４ （１Ｈ， ｓ）， ５．７０ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ７．５６ Ｈｚ）， ４．０５ （４Ｈ， ｍ）， ３．３０ （２Ｈ， ｍ）， ２．７３ （４Ｈ， ｓ）， ２．５７ （３Ｈ， ｓ）， ２．０６ （３Ｈ， ｓ）， １．４３ （４Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４４９．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0071】

実施例４：（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物４）

【化30】

中間体３及び２−ヒドロキシ−１−ナフタルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １２．６２ （１Ｈ， ｓ）， １１．８１ （１Ｈ， ｓ）， ８．７１ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．１２ Ｈｚ）， ７．７５ （８Ｈ， ｍ）， ７．２６ （１Ｈ， ｍ）， ７．０９ （３Ｈ， ｍ）， ６．０２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．６８ Ｈｚ）， ４．０３ （２Ｈ， ｓ）， ３．４２ （２Ｈ， ｓ）， ２．９０ （２Ｈ， ｓ）， ２．７０ （５Ｈ， ｍ）， ２．１４ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４５５．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0072】

実施例５：（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物５）

【化31】

中間体３及び４−（ジエチルアミノ）サリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．０８ （１Ｈ， ｓ）， １０．８７ （１Ｈ， ｓ）， ８．４９ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．３２ Ｈｚ）， ７．８９ （２Ｈ， ｍ）， ７．４８ （４Ｈ， ｍ）， ６．２７ （１Ｈ， ｓ）， ６．０８ （２Ｈ， ｍ）， ５．８４ （１Ｈ， ｓ）， ３．９８ （２Ｈ， ｓ）， ３．３０ （６Ｈ， ｍ）， ２．７２ （４Ｈ， ｓ）， ２．５７ （３Ｈ， ｓ）， ２．０４ （３Ｈ， ｓ）， １．１８（６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４７６．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0073】

実施例６：（Ｅ）−Ｎ’−（３−ブロモ−４−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物６）

【化32】

中間体３及び３−ブロモ−４−ヒドロキシベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．０２ （１Ｈ， ｓ）， ８．４９ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．３２ Ｈｚ）， ７．９４ （２Ｈ， ｍ）， ７．５４ （４Ｈ， ｍ）， ６．９２ （３Ｈ， ｍ）， ６．０６ （１Ｈ， ｓ）， ４．００ （２Ｈ， ｓ）， ３．３２ （２Ｈ， ｓ）， ２．７２ （４Ｈ， ｓ）， ２．９４ （３Ｈ， ｓ）， ２．０３ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４８３．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0074】

実施例７：（Ｅ）−Ｎ’−（４−ブロモベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（ナフタレン−１−イル−メチレン）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物７）

【化33】

中間体３及びｐ−ブロモベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．０８ （１Ｈ， ｓ）， ８．４９ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ８．３２ Ｈｚ）， ７．８６ （２Ｈ， ｍ）， ７．５２ （４Ｈ， ｍ）， ７．３１ （２Ｈ， ｍ）， ６．８１ （２Ｈ， ｍ）， ６．１８ （１Ｈ， ｓ）， ３．９８ （２Ｈ， ｓ）， ３．３１ （２Ｈ， ｓ）， ２．７０ （４Ｈ， ｓ）， ２．６１ （３Ｈ， ｓ）， ２．０３ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４６７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0075】

実施例８：（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物８）

【化34】

中間体６及び３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．５０ （１Ｈ， ｓ）， １１．２５ （１Ｈ， ｓ）， ７．９４ （１Ｈ， ｓ）， ７．６７ （４Ｈ， ｍ）， ７．３４ （１Ｈ， ｓ）， ６．６９ （１Ｈ， ｓ）， ３．７１ （２Ｈ， ｓ）， ３．２８ （２Ｈ， ｓ）， ２．６４ （２Ｈ， ｓ）， ２．５３ （２Ｈ， ｓ）， ２．３６ （３Ｈ， ｓ）， ２．２５ （３Ｈ， ｓ）， １．４２ （９Ｈ， ｓ）， １．２４ （９Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ５３５．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0076】

実施例９：（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物９）

【化35】

中間体６及び３−エトキシサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．４３ （１Ｈ， ｓ）， １１．０５ （１Ｈ， ｓ）， ８．１０ （１Ｈ， ｓ）， ７．６４ （４Ｈ， ｍ）， ６．９０ （２Ｈ， ｍ）， ６．６１ （１Ｈ， ｍ）， ４．１３ （２Ｈ， ｍ）， ３．６６ （２Ｈ， ｓ）， ３．２５ （２Ｈ， ｓ）， ２．５８ （４Ｈ， ｍ）， ２．２９ （６Ｈ， ｍ）， １．４７ （３Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４６７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0077】

実施例１０：（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１０）

【化36】

中間体６及び４−（ジエチルアミノ）サリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．２０ （１Ｈ， ｓ）， １１．０１ （１Ｈ， ｓ）， ７．８７ （１Ｈ， ｓ）， ７．６６ （４Ｈ， ｍ）， ６．７１ （１Ｈ， ｍ）， ６．２２ （２Ｈ， ｍ）， ６．１９ （１Ｈ， ｓ）， ３．６６ （２Ｈ， ｓ）， ３．３８ （４Ｈ， ｍ）， ３．２５ （２Ｈ， ｓ）， ２．６１ （４Ｈ， ｍ）， ２．３３ （６Ｈ， ｍ）， １．２０ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４９４．７［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0078】

実施例１１：（Ｅ）−Ｎ’−（２，３−ジヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−トリフルオロメチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１１）

【化37】

中間体６及び２，３−ジヒドロキシベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．４５ （２Ｈ， ｓ）， ７．８０ （１Ｈ， ｓ）， ７．６５ （４Ｈ， ｍ）， ６．９５ （１Ｈ， ｍ）， ６．７４ （１Ｈ， ｍ）， ６．４２ （１Ｈ， ｍ）， ３．６５ （１Ｈ， ｓ）， ３．２８ （２Ｈ， ｓ）， ２．６１ （４Ｈ， ｍ）， ２．３４ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４３９．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0079】

実施例１２：（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１２）

【化38】

中間体９及びオルト−バニリンを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．８７ （１Ｈ， ｓ）， １１．３９ （１Ｈ， ｓ）， ７．２７ （５Ｈ， ｍ）， ６．８６ （１Ｈ， ｍ）， ６．７４ （１Ｈ， ｍ）， ６．４０ （１Ｈ， ｍ）， ３．８９ （３Ｈ， ｓ）， ３．５７ （２Ｈ， ｍ）， ３．２７ （２Ｈ， ｓ）， ２．８９ （１Ｈ， ｍ）， ２．６１ （４Ｈ， ｍ）， ２．３８ （３Ｈ， ｓ）， ２．２０ （３Ｈ， ｓ）， １．２５ （６Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４２７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0080】

実施例１３：（Ｅ）−Ｎ’−［（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１３）

【化39】

中間体９及び３−エトキシサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．８４ （１Ｈ， ｓ）， １１．３０ （１Ｈ， ｓ）， ７．７０ （１Ｈ， ｓ）， ７．３２ （４Ｈ， ｍ）， ６．８９ （１Ｈ， ｍ）， ６．７１ （１Ｈ， ｍ）， ６．３９ （１Ｈ， ｍ）， ４．１２ （２Ｈ， ｍ）， ３．５６ （２Ｈ， ｓ）， ３．２７ （２Ｈ， ｓ）， ２．９０ （１Ｈ， ｍ）， ２．６２ （４Ｈ， ｍ）， ２．３８ （３Ｈ， ｓ）， ２．２０ （３Ｈ， ｓ）， １．４８ （３Ｈ， ｍ）， １．２４ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４４１．６［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0081】

実施例１４：（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１４）

【化40】

中間体９及び２−ヒドロキシ−１−ナフタルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １２．７０ （１Ｈ， ｓ）， １２．１８ （１Ｈ， ｓ）， ８．７６ （１Ｈ， ｓ）， ７．７０ （２Ｈ， ｍ）， ７．３８ （８Ｈ， ｍ）， ３．６１ （２Ｈ， ｓ）， ３．３２ （２Ｈ， ｓ）， ２．７５ （１Ｈ， ｍ）， ２．６６ （２Ｈ， ｍ）， ２．５２ （２Ｈ， ｍ）， ２．４１ （３Ｈ， ｓ）， ２．２９ （３Ｈ， ｓ）， １．０８ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ４４７．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0082】

実施例１５：（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１５）

【化41】

中間体９及び３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．６７ （２Ｈ， ｍ）， ７．７８ （１Ｈ， ｓ）， ７．３２ （３Ｈ， ｍ）， ７．２３ （２Ｈ， ｍ）， ６．６９ （１Ｈ， ｓ）， ３．５７ （２Ｈ， ｓ）， ３．２７ （２Ｈ， ｓ）， ２．８７ （１Ｈ， ｍ）， ２．６１ （２Ｈ， ｍ）， ２．４３ （２Ｈ， ｍ）， ２．３５ （３Ｈ， ｓ）， ２．２５ （３Ｈ， ｓ）， １．４４ （９Ｈ， ｓ）， １．２７ （９Ｈ， ｓ）， １．１９ （６Ｈ，ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）： ５０９．６［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0083】

実施例１６：（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１６）

【化42】

中間体９及び４−（ジエチルアミノ）サリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．４０ （１Ｈ， ｓ）， １１．２３ （１Ｈ， ｓ）， ７．６１ （１Ｈ， ｓ）， ７．３２ （５Ｈ， ｍ）， ６．５５ （１Ｈ， ｍ）， ６．１９ （１Ｈ， ｓ）， ６．１０ （１Ｈ， ｍ）， ３．５５（２Ｈ， ｓ）， ３．３７ （４Ｈ， ｍ）， ３．２３ （２Ｈ， ｓ）， ２．９０ （１Ｈ， ｍ）， ２．５９ （２Ｈ， ｓ）， ２．５０ （２Ｈ， ｓ）， ２．３６ （３Ｈ， ｓ）， ２．１８ （３Ｈ， ｓ）， １．２５ （１２Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４６８．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0084】

実施例１７：（Ｅ）−Ｎ’−（２，３−ジヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１７）

【化43】

中間体９及び２，３−ジヒドロキシベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．９１ （２Ｈ， ｍ）， ７．４９ （１Ｈ， ｓ）， ７．３２ （５Ｈ， ｍ）， ６．９１ （１Ｈ， ｍ）， ６．６８ （１Ｈ， ｍ）， ６．２３ （１Ｈ， ｍ）， ３．５５ （２Ｈ， ｓ）， ３．２８ （２Ｈ， ｓ）， ２．９１ （１Ｈ， ｍ）， ２．６３ （４Ｈ， ｍ）， ２．４２ （３Ｈ， ｓ）， ２．１７ （３Ｈ， ｓ）， １．２６ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４１３．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0085】

実施例１８：（Ｅ）−Ｎ’−（３−ブロモ−６−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−イソプロピルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１８）

【化44】

中間体９及び３−ブロモ−６−ヒドロキシベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。白色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １２．０４ （１Ｈ， ｓ）， １１．３１ （１Ｈ， ｓ）， ７．３１ （６Ｈ， ｍ）， ６．８４ （２Ｈ， ｍ）， ３．５４ （２Ｈ， ｓ）， ３．２９ （２Ｈ， ｓ）， ２．９５ （１Ｈ， ｍ）， ２．６４ （２Ｈ， ｍ）， ２．５７ （２Ｈ， ｍ）， ２．４５ （３Ｈ， ｓ）， ２．１８ （３Ｈ， ｓ）， １．２４ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４７７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0086】

実施例１９：（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物１９）

【化45】

中間体１２及びオルト−バニリンを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．７４ （１Ｈ， ｓ）， １１．３８ （１Ｈ， ｓ）， ７．８４ （１Ｈ， ｓ）， ７．２８ （１Ｈ， ｍ）， ６．９６ （５Ｈ， ｍ）， ６．５２ （１Ｈ， ｍ）， ３．９１ （３Ｈ， ｓ）， ３．８０ （３Ｈ， ｓ）， ３．５８ （２Ｈ， ｓ）， ３．２８ （２Ｈ， ｓ）， ２．６２ （４Ｈ， ｍ）， ２．３８ （３Ｈ， ｍ）， ２．２５ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４１５．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0087】

実施例２０：（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−３−（Ｎ−（２−（Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ）プロピル）Ｎ−メチルアミノ）アセチドラジド（化合物２０）

【化46】

中間体１２及び３−エトキシサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．７０ （１Ｈ， ｓ）， １１．２６ （１Ｈ， ｓ）， ７．８１ （１Ｈ， ｓ）， ７．２７ （１Ｈ， ｍ）， ６．９７ （４Ｈ， ｍ）， ６．７５ （１Ｈ， ｍ）， ６．５１ （１Ｈ， ｍ， ４．１３ （２Ｈ， ｍ）， ３．７６ （３Ｈ， ｓ）， ３．５６ （２Ｈ， ｓ）， ３．２６ （２Ｈ， ｓ）， ２．６０ （４Ｈ， ｍ）， ２．３６ （３Ｈ， ｓ）， ２．２３ （３Ｈ， ｓ）， １．４８ （３Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４２９．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0088】

実施例２１：（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２１）

【化47】

中間体１２及び２−ヒドロキシ−１−ナフタルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １２．７０ （１Ｈ， ｓ）， １２．１１ （１Ｈ， ｓ）， ８．７６ （１Ｈ， ｓ）， ７．７５ （２Ｈ， ｍ）， ７．３１ （３Ｈ， ｍ）， ７．２１ （４Ｈ， ｍ）， ６．８２ （１Ｈ， ｍ）， ３．７２ （３Ｈ， ｓ）， ３．６１ （２Ｈ， ｓ）， ３．３４ （２Ｈ， ｓ）， ２．７２ （２Ｈ， ｍ）， ２．５８ （２Ｈ， ｓ）， ２．４６ （３Ｈ， ｓ）， ２．２９ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４３５．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0089】

実施例２２：（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２２）

【化48】

中間体１２及び３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．６４ （２Ｈ， ｍ）， ７．６５ （１Ｈ， ｓ）， ７．３２ （２Ｈ， ｍ）， ６．９９ （２Ｈ， ｍ）， ６．８２ （１Ｈ， ｍ）， ６．５６ （１Ｈ， ｓ）， ３．７４ （３Ｈ， ｓ）， ３．５５ （２Ｈ， ｓ）， ３．２８ （２Ｈ， ｓ）， ２．６４ （４Ｈ， ｍ）， ２．４３ （３Ｈ， ｓ）， ２．２１ （３Ｈ， ｓ）， １．４４ （９Ｈ， ｓ）， １．３０ （９Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４９７．６［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0090】

実施例２３：（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２３）

【化49】

中間体１２及び４−（ジエチルアミノ）サリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．２９ （２Ｈ， ｍ）， ７．６９ （１Ｈ， ｓ）， ７．３０ （１Ｈ， ｍ）， ６．９７ （３Ｈ， ｍ）， ６．６５ （１Ｈ， ｍ）， ６．２０ （２Ｈ， ｍ）， ３．７８ （３Ｈ， ｓ）， ３．５６ （２Ｈ， ｓ）， ３．３６ （４Ｈ， ｍ）， ３．２３ （２Ｈ， ｓ）， ２．５９ （４Ｈ， ｍ）， ２．３５ （３Ｈ， ｓ）， ２．２２ （３Ｈ， ｓ）， １．１８ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４５６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0091】

実施例２４：（Ｅ）−Ｎ’−（２，３−ジヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２４）

【化50】

中間体１２及び２，３−ジヒドロキシベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．７７ （２Ｈ， ｍ）， ７．５５ （１Ｈ， ｓ）， ７．２９ （１Ｈ， ｍ）， ６．９９ （３Ｈ， ｍ）， ６．８５ （１Ｈ， ｍ）， ６．７５ （１Ｈ， ｍ）， ６．３９ （１Ｈ， ｍ）， ３．７６ （３Ｈ， ｓ）， ３．５７ （２Ｈ， ｓ）， ３．２９ （２Ｈ， ｓ）， ２．６３ （４Ｈ， ｍ）， ２．４１ （３Ｈ， ｓ）， ２．２２ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４０１．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0092】

実施例２５：（Ｅ）−Ｎ’−（３−ブロモ−６−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（３−メトキシベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２５）

【化51】

中間体１２及び３−ブロモ−６−ヒドロキシベンザルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．８１ （１Ｈ， ｓ）， １１．２５ （１Ｈ， ｓ）， ７．３４ （３Ｈ， ｍ）， ６．９９ （７Ｈ， ｍ）， ３．８０ （３Ｈ， ｓ）， ３．５４ （２Ｈ， ｓ）， ３．２８ （２Ｈ， ｓ）， ２．６３ （４Ｈ， ｍ）， ２．４４ （３Ｈ， ｓ）， ２．１８ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４６３．３［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0093】

実施例２６：（Ｅ）−Ｎ’−［（２−ヒドロキシナフタレン−１−イル）メチレン］−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２６）

【化52】

中間体１５及び２−ヒドロキシ−１−ナフタルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １２．４９ （１Ｈ， ｓ）， １１．４６ （１Ｈ， ｓ）， ９．０６ （１Ｈ， ｓ）， ７．７６ （２Ｈ， ｍ）， ７．６５ （２Ｈ， ｍ）， ７．５５ （３Ｈ， ｍ）， ７．４０ （２Ｈ， ｍ）， ７．２２ （１Ｈ， ｍ）， ３．６８ （２Ｈ， ｓ）， ３．３３ （２Ｈ， ｓ）， ２．６８ （２Ｈ， ｍ）， ２．５５ （２Ｈ， ｍ）， ２．４１ （３Ｈ， ｓ）， ２．２９ （３Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４３０．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0094】

実施例２７：（Ｅ）−Ｎ’−（３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２７）

【化53】

中間体１５及び３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．４４ （１Ｈ， ｓ）， １１．１１ （１Ｈ， ｓ）， ８．１１ （１Ｈ， ｓ）， ７．６５ （２Ｈ， ｍ）， ７．５１ （２Ｈ， ｍ）， ７．３６ （１Ｈ， ｓ）， ６．７５ （１Ｈ， ｓ）， ３．６３ （２Ｈ， ｓ）， ３．２７ （２Ｈ， ｓ）， ２．６４ （４Ｈ， ｍ）， ２．３６ （３Ｈ， ｓ）， ２．２４ （３Ｈ， ｓ）， １．４３ （９Ｈ， ｓ）， １．３０ （９Ｈ， ｓ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４９２．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0095】

実施例２８：（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２８）

【化54】

中間体１５及びｏ−バニリンを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．３１ （１Ｈ， ｓ）， １１．１０ （１Ｈ， ｓ）， ８．３６ （１Ｈ， ｓ）， ７．６５ （４Ｈ， ｍ）， ６．９２ （２Ｈ， ｍ）， ６．７０ （１Ｈ， ｍ）， ３．９４ （３Ｈ， ｓ）， ３．６６ （２Ｈ， ｓ）， ３．２７ （２Ｈ， ｓ）， ２．６１ （４Ｈ， ｍ）， ２．３１ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４１０．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0096】

実施例２９：（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物２９）

【化55】

中間体１５及び３−エトキシサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．２６ （１Ｈ， ｓ）， １０．９０ （１Ｈ， ｓ）， ８．２９ （１Ｈ， ｓ）， ７．６３ （４Ｈ， ｍ）， ６．９０ （３Ｈ， ｍ）， ４．１４ （２Ｈ， ｍ）， ３．６５ （２Ｈ， ｓ）， ３．２５ （２Ｈ， ｓ）， ２．５９ （４Ｈ， ｍ）， ２．２９ （６Ｈ， ｍ）， １．４８ （３Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４２４．４［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0097】

実施例３０：（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−シアノベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物３０）

【化56】

中間体１５及び４−（ジエチルアミノ）サリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．１３ （１Ｈ， ｓ）， １０．８５ （１Ｈ， ｓ）， ７．９６ （１Ｈ， ｓ）， ７．６４ （４Ｈ， ｍ）， ６．７５ （１Ｈ， ｍ）， ６．２０ （２Ｈ， ｍ）， ３．６３ （２Ｈ， ｓ）， ３．３７ （４Ｈ， ｍ）， ３．２３ （２Ｈ， ｓ）， ２．６０ （４Ｈ， ｍ）， ２．３３ （３Ｈ， ｓ）， ２．２３ （３Ｈ， ｓ）， １．１９ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４５１．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0098】

実施例３１：（Ｅ）−Ｎ’−（３−メトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物３１）

【化57】

中間体１８及びｏ−バニリンを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．９２ （１Ｈ， ｓ）， １０．４１ （１Ｈ， ｓ）， ７．７２ （１Ｈ， ｓ）， ７．４２ （４Ｈ， ｍ）， ６．９０ （２Ｈ， ｍ）， ６．４０ （１Ｈ， ｍ）， ３．９０ （３Ｈ， ｓ）， ３．５７ （２Ｈ， ｓ）， ３．２９ （２Ｈ， ｓ）， ２．６３ （４Ｈ， ｍ）， ２．４０ （３Ｈ， ｓ）， ２．２１ （３Ｈ， ｓ）， １．３２ （９Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４４１．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0099】

実施例３２：（Ｅ）−Ｎ’−（３−エトキシ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛２−［Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］エチル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物３２）

【化58】

中間体１８及び３−エトキシサリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．８６ （１Ｈ， ｓ）， １１．２９ （１Ｈ， ｓ）， ７．６９ （１Ｈ， ｍ）， ７．３９ （４Ｈ， ｍ）， ６．８７ （１Ｈ， ｍ）， ６．７２ （１Ｈ， ｍ）， ６．３８ （１Ｈ， ｍ）， ４．１２ （２Ｈ， ｓ）， ３．５６ （２Ｈ， ｓ）， ３．２７ （２Ｈ， ｓ）， ２．６１ （４Ｈ， ｍ）， ２．３８ （３Ｈ， ｓ）， ２．１８ （３Ｈ， ｓ）， １．４６ （３Ｈ， ｍ） １．３２ （９Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４５５．５［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0100】

実施例３３：（Ｅ）−Ｎ’−（４−Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシベンザル）−２−｛Ｎ−｛３−［Ｎ−（４−ｔｅｒｔ−ブチルベンジル）−Ｎ−メチルアミノ］プロピル｝Ｎ−メチルアミノ｝アセチドラジド（化合物３３）

【化59】

中間体２１及び４−（ジエチルアミノ）サリチルアルデヒドを原材料として、実施例１と同一の操作を行った。淡黄色の固体産物を取得した。^１Ｈ−ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ： １１．１３ （１Ｈ， ｓ）， １０．１９ （１Ｈ， ｓ）， ８．１０ （１Ｈ， ｓ）， ７．２９ （２Ｈ， ｍ）， ７．２３ （２Ｈ， ｍ）， ６．８７ （１Ｈ， ｍ）， ６．１８ （２Ｈ， ｍ）， ３．４８ （２Ｈ， ｓ）， ３．３３ （４Ｈ， ｍ）， ３．１６ （２Ｈ， ｓ）， ２．５２ （２Ｈ， ｍ）， ２．４５ （２Ｈ， ｍ）， ２．３３ （３Ｈ， ｓ）， ２．２２ （３Ｈ， ｓ）， １．７４ （２Ｈ， ｍ）， １．２７ （９Ｈ， ｓ）， １．１７ （６Ｈ， ｍ）； ＥＩ−ＭＳ （ｍ／ｚ）：４９６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋．

【0101】

本発明の化合物は、ＥＧＦＰ−ＨＩＦ−１α−ＣＨＯｈＩＲ細胞モデルを用いてスクリーニングされ、プロリンヒドロキシラーゼを阻害することによりＨＩＦ−１αを安定化する薬理作用を示し、それは以下のように例示された。

【0102】

実験実施例１：本発明の化合物のＨＩＦ−１α安定化活性の評価
化合物は、３０ｍＭストック溶液を形成するようにＤＭＳＯを用いて製剤化され、そして２ｘワーキング溶液を形成するように解析栄養溶液を用いて製剤化され、そして、スクリーニング及び用量−効果の関係を取得するために、０．０３， ０．１， ０．３， １， ３， １０， ３０ μＭの７つの最終濃度のものが使用された。陽性化合物ビピリジンは、１００ｍＭ母液を形成するようにＤＭＳＯを用いて製剤化され、そして２ｘワーキング溶液を形成するように解析栄養溶液を用いて製剤化された。対照として最終濃度１００μＭの陽性化合物ビピリジンが使用され、最終濃度３‰のＤＭＳＯを用いた解析栄養溶液は、溶媒対象として使用された。

【0103】

ＥＧＦＰ−ＨＩＦ−１α融合タンパク質を安定的に発現するＣＨＯｈＩＲ細胞（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入）を、０．５ｍｇ／ｍｌのＧ４１８及び１０％のＦＢＳを含有するＦ１２培養溶液中で、３７℃及び５％ＣＯ_２下で培養し、これを蛍光検出に供され得る９６ウェル培養プレートに０．８×１０^４細胞／１００μｌ／ウェルの量で播種して、３７℃及び５％ＣＯ_２下で１８〜２４時間培養した。当該細胞を１００μｌ／ウェルの量の解析栄養溶液で洗浄し、１００μｌ／ウェルの量の解析栄養溶液を添加し、１００μｌ／ウェルの量の２ｘ薬物を添加し、各濃度を並行して３ウェル用意した。細胞を３７℃及び５％ＣＯ_２下で３時間インキュベーションした後、１００μｌ／ウェルの量の１２％ホルムアルデヒドを添加し、室温で３０分間固定を実施した。培養培地を捨て、プレートをＰＢＳで２回洗浄し、１μＭヘキストを含有するＰＢＳを用いて、室温で１時間染色を実施した。検出は、ＩＮ Ｃｅｌｌ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０００ライブセルイメージングシステムを用いて実施された。検出条件を以下に示す：２０ｘ対物レンズ、励起波長Ｅｘ＝４６０ｎｍ、放射波長Ｅｍ＝５３５ｎｍ、露光時間３００ｍｓで細胞核パッセージの青色蛍光を検出；励起波長Ｅｘ＝４７５ｎｍ、放射波長Ｅｍ＝５３５ｎｍ、露光時間５００ｍｓで細胞質パッセージの緑色蛍光ＥＧＦＰを検出；画像は、各ウェルにおいて５箇所の視野で連続的に撮像された。ＧＥ社のＩＮ Ｃｅｌｌ Ａｎａｌｙｚｅｒ １０００ Ｍｕｌｔｉｔａｒｇｅｔ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｍｏｄｕｌｅを用いて、細胞核中のＨＩＦ−１αの緑色蛍光の凝集を解析し、ＢＰ１００μＭ処理群を、ＨＩＦ−１αの１００％活性化として使用した。

【0104】

活性化率（％）＝（薬物処理群の細胞核の輝度−溶媒対照処理群の細胞核の輝度）／（アゴニストＢＰ処理群の細胞核の輝度−溶媒対照処理群の細胞核の輝度）×１００％

【0105】

各濃度点の並行検出における３ウェルの間で、１５個の視野の平均値が、活性化率の計算に使用された。

【0106】

その結果を表２に示す。
表２：ＨＩＦ−１α活性（ＥＣ_５０）の安定化における幾つかの実施例化合物の効果

【表2】

【0107】

この結果は、本発明の化合物がＨＩＦ−１αの分解を効果的に防止し、ＨＩＦ−１αの活性を安定化する効果を有することを示し、それらの効果は、陽性対照のビピリジンよりも遥かに優れていた。

【0108】

この実施例における実験方法は、プロリンヒドロキシラーゼを用いてＨＩＦ−１αの分解を検出する周知の方法であり、ある化合物がＨＩＦ−１αを安定化出来ることが確認されたら、それは、Ｆｅ^２＋をキレーティングすることによりプロリンヒドロキシラーゼを阻害する筈である。従って、本発明の化合物は、プロリンヒドロキシラーゼを阻害する効果を有することも確認された。

【0109】

加えて、プロリンヒドロキシラーゼ分解において、ＨＩＦ−１α， ＨＩＦ−２α及びＨＩＦ−３αの全てがＦｅ^２＋触媒作用に依存している場合（Ｈｉｒｓｉｌａ Ｍ， Ｋｏｉｖｕｎｅｎ Ｐ， Ｇｕｎｚｌｅｒ Ｖ， Ｋｉｖｉｒｉｋｋｏ ＫＩ， Ｍｙｌｌｙｈａｒｊｕ Ｊ． Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｐｒｏｌｙｌ ４−ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅｓ ｔｈａｔ ｍｏｄｉｆｙ ｔｈｅ ｈｙｐｏｘｉａ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ ｆａｃｔｏｒ． Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２７８（３３）， ３０７７２−３０７８０ （２００３）．）、本発明の化合物が、ＨＩＦ−２α， ＨＩＦ−３αを安定化する、又はそれらを分解から保護する作用を有することも決定され得る。

【0110】

本発明を実施する具体的なモデルが詳細に記載されたが、当業者は、斯かる開示の教示に従ってこれらの詳細が改変及び変化し得ること、及びこれらの変化が、本発明の保護範囲内に有ることを理解し得る。本発明の全保護範囲は、特許請求の範囲及びその任意の均等物により規定される。