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特許6574815脂肪分解能を有する菌株を含む脱毛症防止または発毛促進用の組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6574815
(24)【登録日】2019年8月23日
(45)【発行日】2019年9月11日
(54)【発明の名称】脂肪分解能を有する菌株を含む脱毛症防止または発毛促進用の組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 35/744 20150101AFI20190902BHJP
A61K 35/747 20150101ALI20190902BHJP
A61P 17/14 20060101ALI20190902BHJP
A61P 15/10 20060101ALI20190902BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20190902BHJP
A23L 33/135 20160101ALI20190902BHJP
C12N 1/20 20060101ALI20190902BHJP
C12R 1/01 20060101ALN20190902BHJP
C12R 1/225 20060101ALN20190902BHJP
【ＦＩ】
A61K35/744
A61K35/747
A61P17/14
A61P15/10
A61P3/06
A23L33/135
C12N1/20 A
C12R1:01
C12R1:225
【請求項の数】14
【全頁数】21
(21)【出願番号】特願2017-122537(P2017-122537)
(22)【出願日】2017年6月22日
(65)【公開番号】特開2018-35136(P2018-35136A)
(43)【公開日】2018年3月8日
【審査請求日】2017年6月22日
(31)【優先権主張番号】10-2016-0111042
(32)【優先日】2016年8月30日
(33)【優先権主張国】KR
(31)【優先権主張番号】10-2017-0009282
(32)【優先日】2017年1月19日
(33)【優先権主張国】KR
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 （１）株式会社シンクフル，専用ショッピングモールのウェブサイト，平成２８年１２月２３日，ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｓａｙｇ．ｃｏ．ｋｒ
【微生物の受託番号】KCCM KCCM11830P
【微生物の受託番号】KCCM KCCM11827P
【微生物の受託番号】KCCM KCCM11841P
【微生物の受託番号】KCCM KCCM11910P
【微生物の受託番号】KCCM KCCM11911P
【微生物の受託番号】KCCM KCCM11909P
(73)【特許権者】
【識別番号】517220483
【氏名又は名称】コエンバイオ カンパニー リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100114890
【弁理士】
【氏名又は名称】アインゼル・フェリックス＝ラインハルト
(74)【代理人】
【識別番号】100116403
【弁理士】
【氏名又は名称】前川 純一
(74)【代理人】
【識別番号】100135633
【弁理士】
【氏名又は名称】二宮 浩康
(74)【代理人】
【識別番号】100162880
【弁理士】
【氏名又は名称】上島 類
(72)【発明者】
【氏名】ヨム キュジン
【審査官】
鳥居 福代
(56)【参考文献】
【文献】
特開２００７−０７０３０５（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開２０１０−１１１６７０（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開２００９−２１５３２５（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特開２００４−２１０６５９（ＪＰ，Ａ）
【文献】
特表２０１５−５２６０８５（ＪＰ，Ａ）
【文献】
韓国公開特許第１０−２０１６−００７１０４２（ＫＲ，Ａ）
【文献】
Experimental Dermatology，２０１０年，Vol.19, No.5，pp.401-405
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ａ６１Ｋ ３５／００−３５／７６８
Ａ２３Ｌ ３３／１３５
Ｃ１２Ｎ １／２０
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
脂肪分解能を有するリューコノストック・ホルザプフェリイ（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｈｏｌｚａｐｆｅｌｉｉ）、リューコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、及びラクトバチルス・サケイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉ）からなる群から選択された少なくとも１種の菌株を含み、経口の形態で投与される、脱毛症防止または発毛促進用の組成物。
【請求項2】
前記菌株がリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｈｏｌｚａｐｆｅｌｉｉ ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株、リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓＣｅｂ−ｋｃ−００１：ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株、またはラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉ：ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株であることを特徴とする、請求項１に記載の脱毛症防止または発毛促進用の組成物。
【請求項3】
前記脂肪分解能を有する菌株が１日約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｇ／ｋｇの量で投与されることを特徴とする、請求項１又は請求項２に記載の組成物。
【請求項4】
前記組成物が医薬組成物または食品組成物であることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項5】
５×１０４〜５×１０８ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株が、一回当たり３０ｍｌ〜１００ｍｌ、１日１回〜４回投与されることを特徴とする、請求項１ないし４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項6】
前記リューコノストック・ホルザプフェリイ（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｈｏｌｚａｐｆｅｌｉｉ）がさらに性機能改善効果を有することを特徴とする、請求項１ないし５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項7】
前記組成物がさらにコレステロール低下能を有する菌株であるラクトバチルス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）を含むことを特徴とする、請求項１ないし６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項8】
前記ラクトバチルス・ファーメンタム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ）がＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ Ｃｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）であることを特徴とする、請求項７に記載の組成物。
【請求項9】
前記組成物が薬剤学的にまたは食品学的に許容される担体をさらに含むことを特徴とする、請求項１ないし８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項10】
前記脂肪分解能を有する菌株が組成物の重量の０．０５〜８０重量％で含まれることを特徴とする、請求項１ないし９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項11】
前記組成物がコレステロール低下能を有する菌株を組成物の重量の０．０５〜５０重量％で含むことを特徴とする、請求項７又は８に記載の組成物。
【請求項12】
脱毛症防止、発毛促進、及び脂肪分解の少なくとも１つのためのリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株、その培養物、その濃縮物またはその乾燥物。
【請求項13】
脱毛症防止、発毛促進、及び脂肪分解の少なくとも１つのためのラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株、その培養物、その濃縮物またはその乾燥物。
【請求項14】
脂肪分解能を有するリューコノストック・ホルザプフェリイ（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｈｏｌｚａｐｆｅｌｉｉ）、リューコノストック・メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、及びラクトバチルス・サケイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉ）からなる群から選択された少なくとも１種の菌株、その培養物、その濃縮物、またはその乾燥物を製造し、前記菌株、その培養物、その濃縮物、またはその乾燥物に薬剤学的にまたは食品学的に許容される担体を適用して、経口の形態で投与される脱毛症防止または発毛促進用の組成物を製造することを含む、脱毛症防止または発毛促進用の組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、脂肪分解能を有する菌株を含む、脱毛症防止または発毛促進用の組成物に関するものである。
【背景技術】
【0002】
現代社会における脱毛症患者は急激に増加しており、脱毛症対策が必要な対象者の６割が２０〜３０代と、脱毛症になる年齢層が低くなりつつある。韓国では、脱毛症に苦しむ患者数が約一千万人に達すると推定され、それによる社会経済的な問題が台頭し、深刻度を増している。
【0003】
脱毛症の症状が重くなればなるほどうつ病や不安になりやすく、ストレスを知覚しやすく、人間関係や異性とのお付き合いを苦手に思いやすく、家庭円満ではないことが多いと報告されており、保健学分野から注目されている。
【0004】
脱毛症の原因は未だ解明されていないが、症状を引き起こす可能性があるものとして、遺伝的要因、ホルモン異常、免疫学的異常などによる原因が報告されている。
【0005】
現在、脱毛症治療剤として、米国のＦｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）の承認を取得した経皮塗布用ミノキシジル（Ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）と経口投与用のＦｉｎａｓｔｅｒｉｄｅが多く使用されているが、心血管系障害、皮膚刺激、性機能低下および奇形児のリスクなど副作用を伴うという限界がある。
【0006】
一方、先行研究で生薬製剤を用いた脱毛症改善の効果について報告されているが、その結果は不十分なものである。最近、植物抽出物と何首烏（カシュウ）など漢方材料を熱水抽出して、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属の乳酸菌で発酵させたものを利用した発毛促進の研究が始まり、それらの特許に関する報告もあるが、そのほとんどは実験マウスによる研究結果であり、実際、脱毛症の人や脱毛症が進行している人を対象にした研究は皆無である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0007】
【特許文献1】韓国公開特許第２００６−００９２６７６号公報
【特許文献2】韓国公開特許第２００６−００３９６７０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0008】
本発明は、脱毛症防止または発毛促進に効果的な組成物、またはキムチから分離した、脂肪分解に効果的な、新規な菌株を提供しようとするものである。さらに、本発明は、副作用なく安全に使用できる、脱毛症防止または発毛促進用の組成物を提供しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【0009】
本発明の一態様は、脂肪分解能を有する菌株を含む、脱毛症防止または発毛促進用の組成物に関するものである。
【0010】
脂肪分解能を有する菌株はキムチから分離した乳酸菌であることができ、具体例としては、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ属またはＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属の菌株が挙げられる。より具体的には、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｈｏｌｚａｐｆｅｌｉｉ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉであり得る。さらなる具体例としては、リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｈｏｌｚａｐｆｅｌｉｉ Ｃｅｂ−ｋｃ−００３：ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株、リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓＣｅｂ−ｋｃ−００１：ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株、またはラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｓａｋｅｉ：ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株が挙げられる。
【0011】
リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３は、２０１６年４月１１日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１８３０Ｐとして寄託されており、前記菌株は脱毛症防止、発毛促進、性機能改善、コレステロール低下、および／または脂肪分解に効果的である。
【0012】
リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１は、２０１６年４月６日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１８２７Ｐとして寄託されており、前記菌株は脱毛症防止、発毛促進、性機能改善、コレステロール低下、および／または脂肪分解に効果的である。
【0013】
ラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２は、２０１６年６月１日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１８４１Ｐとして寄託されており、前記菌株は脱毛症防止、発毛促進、性機能改善、コレステロール低下、および／または脂肪分解に効果的である。
【0014】
脂肪分解能を有する菌株は、菌株それ自体で使用されるか、その培養物、その濃縮物、またはその乾燥物の形で使用され得る。したがって、前記組成物は、脂肪分解能を有する菌株、その培養物、その濃縮物、またはその乾燥物を含むことができる。
【0015】
脂肪分解能を有する菌株は、通常の菌株の培養方法により培養することができる。培地としては、天然培地または合成培地を使用することができる。培地の炭素源としては、例えば、グルコース、スクロース、デキストリン、グリセロール、でん粉などを使用することができ、窒素源としては、ペプトン、肉抽出物、酵母抽出物、乾燥酵母、大豆、アンモニウム塩、ナイトレート、およびその他の有機または無機窒素含有化合物を使用することができるが、これらの成分に限定されるものではない。培地に含まれる無機塩としては、マグネシウム、マンガン、カルシウム、鉄、カリウムなどを使用することができるが、これらに限定されるものではない。前記炭素源、窒素源、無機塩の成分に加えて、アミノ酸、ビタミン、核酸、およびこれらに関連する化合物が培地に添加され得る。菌株の培養温度の条件は、２０〜４０℃の範囲内で１２時間〜４日間培養することができる。一実施例において、培養培地に黒豆、白何首烏、熟地黄、甘草、川▲きゅう▼（センキュウ）、杜仲（トチュウ）、桂皮（ケイヒ）、当帰（トウキ）、石菖蒲（セキショウブ）、赤何首烏、側柏葉（ソクハクヨウ）、生姜、柏子仁（ハクシジン）、茜草（アカネ）、升麻（ショウマ）、蔓荊子（マンケイシ）などの生薬製剤、その抽出物、またはこれらの混合物を添加して培養し、前記培養物を使用することにより、本発明における菌株の脱毛症防止、あるいは発毛促進の効果をより改善することができる。特に、培養培地に黒豆および／または白何首烏を添加することが好ましく、その添加量は、それぞれの培地重量を基準に０．０１重量％〜１０重量％、具体的には、０．０１重量％〜５重量％程度が好ましい。
【0016】
脂肪分解能を有する菌株の培養物は、菌体を含む培養原液であり、または培養上澄み液を除去あるいは濃縮した菌体であり得る。前記培養物の組成は、脂肪分解能を有する菌株の培養に必要な成分だけではなく、前記菌株の生長に相乗的に作用する成分をさらに含むことができ、これらによる組成は、当業界の通常の技術を有する者によって容易に選択され得る。
【0017】
また、菌株の状態は、液状状態または乾燥状態であり、乾燥方法は風乾燥、自然乾燥、噴霧乾燥、および凍結乾燥が可能であるが、これらに限定されるものではない。
【0018】
前記組成物は、脱毛症防止または発毛促進に効果的であり、さらに性機能改善または脂肪分解効果がある。前記組成物は、食品組成物または医薬組成物であり、食品組成物の一態様において、食品、健康食品、健康補助食品、または健康機能性食品組成物であり得る。医薬組成物の一態様では、医薬外品または医薬的製剤であり得る。
【0019】
一実施例において前記組成物は、黒豆、白何首烏、熟地黄、甘草、川▲きゅう▼（センキュウ）、杜仲（トチュウ）、桂皮（ケイヒ）、当帰（トウキ）、石菖蒲（セキショウブ）、赤何首烏、側柏葉（ソクハクヨウ）、エゾウコギ、松葉、松花、蕎麦、知母、生姜、柏子仁（ハクシジン）、茜草（アカネ）、升麻（ショウマ）、蔓荊子（マンケイシ）などの生薬製剤、その抽出物、またはそれらの混合物などの脱毛症防止または発毛促進に効果的な生薬成分；またはミノキシジルやｆｉｎａｓｔｅｒｉｄｅなどの医薬成分をさらに含むことができる。
【0020】
本発明における他の態様は、脂肪分解能を有する菌株およびコレステロール低下能を有する菌株を含む、脱毛症防止または発毛促進用組成物に関するものである。前記コレステロール低下能を有する菌株はチョングッチャン（納豆のような韓国の伝統発酵食品）に由来したものであり得る。具体的には、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ属、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ属、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｅｎｔｅｒｏｃｕｃｃｕｓ属、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属などであり、より具体的には、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｓｚｅｒｉ、Ｅｎｔｅｒｏｃｕｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍなどであり得る。具体例では、Ｂｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｒｅｕｓｚｅｒｉ Ｃｅｂ−ｃｈ−００３（ＫＣＣＭ１１９１１Ｐ）、Ｅｎｔｅｒｏｃｕｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ Ｃｅｂ−ｃｈ−００１（ＫＣＣＭ１１９０９Ｐ）、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｅｒｍｅｎｔｕｍ Ｃｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）を、本明細書に開示された脂肪分解能を有する菌株と共に使用することができる。
【0021】
ブレビバチルス・リュゼリＣｅｂ−ｃｈ−００３は、チョングッチャンから分離した菌株であり、２０１６年１０月７日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１９１１Ｐとして寄託されており、前記菌株は性機能改善、コレステロールの低下に効果的である。
【0022】
エンテロコッカス・フェシウムＣｅｂ−ｃｈ−００１は、チョングッチャンから分離した菌株であり、２０１６年１０月７日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１９０９Ｐとして寄託されており、前記菌株は性機能改善、コレステロールの低下に効果的である。
【0023】
ラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２は、チョングッチャンから分離した菌株であり、２０１６年１０月７日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１９１０Ｐとして寄託されており、前記菌株は性機能改善、コレステロールの低下に効果的である。
【0024】
コレステロール低下能を有する菌株を添加する場合、組成物は２．５×１０４〜２．５×１０１０ＣＦＵ／ｍｌのコレステロール低下能を有する菌株をさらに含み、好ましくは５×１０５〜５×１０８ＣＦＵ／ｍｌのコレステロール低下能を有する菌株を含む。コレステロール低下能を有する菌株は、組成物の重量の０．０５〜５０重量％で含み得る。
【0025】
また、前記組成物は、コラーゲンをさらに含み得る。
【0026】
本発明の組成物は、５×１０４〜５×１０１０ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株を含み、好ましくは、１×１０６〜１×１０９ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株を含む。
【0027】
本発明の組成物は、薬学的あるいは食品学的に許容される担体をさらに含むことができ、担体と共に製剤化されて、食品または医薬品として提供され得る。
【0028】
本発明における用語である「薬学的あるいは食品学的に許容される担体」は、生物体を刺激せず、投与菌株の生物学的活性及び特性を阻害しない担体または希釈剤のことを指す。
【0029】
前記組成物は、経口または非経口の様々な剤形で製剤化され得るが、好ましくは液状経口溶液で剤形化され得る。
【0030】
液状溶液で製剤化される場合には、許容される薬剤学的あるいは食品学的な許容担体は、滅菌および生体に適したものであり、食塩水、滅菌水、緩衝食塩水、アルブミン注射溶液、デキストロース溶液、マルトデキストリン溶液、グリセロール、およびこれらの成分のうち、一つ以上を混合して使用することができ、必要に応じて抗酸化剤、緩衝液、静菌剤など、通常の他添加剤を添加することができる。また希釈剤、分散剤、界面活性剤、結合剤、潤滑剤を付加的に添加して、水溶液、懸濁液、乳濁液などの液状剤形、丸薬、カプセル、顆粒または錠剤に製剤化することができる。また、組成物の品質低下を防止するために、結着剤、乳化剤、保存剤などをさらに添加することができ、また、アミノ酸剤、ビタミン剤、酵素剤、香味剤、非タンパク質態窒素化合物、ケイ酸塩剤、緩衝剤、抽出剤、オリゴ糖などをさらに含むことができる。液状形態で投与する場合の投与量は、５×１０４〜５×１０８ＣＦＵ／ｍｌの、好ましくは１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株の量で、一回当たり３０ｍｌ〜１００ｍｌを、１日１回〜４回投与することができる。一実施例において、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株の量で、一回当たり５０ｍｌを、１日２回〜４回投与することができる。より具体的には、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株の量を一回当たり５０ｍｌ〜１００ｍｌを１日１回〜２回投与することができる。さらに具体的には、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株を朝食３０分前に５０ｍｌ〜１００ｍｌを１回投与し、夕食３０分前または就寝前に５０ｍｌ〜１００ｍｌを１回投与することができる。コレステロール低下能を有する菌株をさらに含む場合、その投与量は、２．５×１０４〜２．５×１０８ＣＦＵ／ｍｌの、好ましくは５×１０５〜５×１０７ＣＦＵ／ｍｌのコレステロール低下能を有する菌株の量で、一回当たり１５ｍｌ〜５０ｍｌを１日１回〜４回投与することができる。一実施例において、５×１０５〜５×１０７ＣＦＵ／ｍｌのコレステロール低下能を有する菌株の量で、一回当たり２５ｍｌ〜５０ｍｌを１日２回〜４回投与することができる。より具体的には、５×１０５〜５×１０７ ＣＦＵ／ｍｌのコレステロール低下能を有する菌株の量を、一回当たり２５ｍｌ〜１００ｍｌを１日１回〜２回投与することができる。さらに具体的には、５×１０５〜５×１０７ＣＦＵ／ｍｌの脂肪分解能を有する菌株を朝食３０分前に２０ｍｌ〜１００ｍｌを１回投与し、夕食３０分前または就寝前に２０ｍｌ〜１００ｍｌを１回投与することができる。コレステロール低下能を有する菌株の投与は、脂肪分解能を有する菌株と同時に投与すること、順次投与すること、または投与サイクルと投与量を変えて投与することができる。
【0031】
本発明における脂肪分解能を有する菌株を含む経口投与用剤形は、例えば、錠剤、トローチ剤、ロゼンジ、水溶性または油性懸濁液、調剤粉末または顆粒、エマルジョン、ハードまたはソフトカプセル、シロップまたはエリキシル剤などがある。錠剤やカプセルなどの剤形で製剤化するためには、ラクトース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、でん粉、アミロペクチン、セルロースまたはゼラチンなどの結合剤、ジカルシウムホスフェートなどの賦形剤、トウモロコシでん粉またはサツマイモでん粉などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリルフマル酸ナトリウムまたはポリエチレングリコールワックスなどの潤滑剤を含むことができ、カプセル剤形の場合は前記物質の他にも脂肪油などの液体担体をさらに含むことができる。
【0032】
前記組成物または前記脂肪分解能を有する菌株、または前記コレステロール低下能を有する菌株の１日投与量は、各々の患者の体重、年齢、性別、健康状態、治療と予防、または改善しようとする主な症状、投与時間、投与方法、重症度に応じて異なるが、約０．０００１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｇ／ｋｇ、具体的には約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇであり、一日１回〜６回、例えば、一日１回〜４回投与、あるいは適用することができる。
【0033】
前記組成物内における脂肪分解能を有する菌株は、液状または乾燥状態であり、液状形態が好ましい。乾燥方法は、風乾燥、自然乾燥、噴霧乾燥、および凍結乾燥が可能であるが、これに限定されるものではない。本発明の脂肪分解能を有する菌株は、粉末形態で組成物の重量の０．０５〜８０重量％、例えば、０．１〜７０重量％、０．１〜５０重量％、または１〜３０重量％の量で混合され得る。コレステロール低下能を有する菌株は、粉末形態で組成物の重量の０．０５〜５０重量％、例えば、０．１〜５０重量％、０．１〜４０重量％、または１〜３０重量％の量で混合され得る。
【0034】
本発明のさらなる態様は、前記脂肪分解能を有する菌株を含む組成物を対象体に投与することを含む、脱毛症防止または発毛促進方法に関するものである。前記態様において、脂肪分解能を有する菌株を含む組成物の詳細は前述した内容と同様である。したがって、重複記載を避けるために、これに関する記載を省略する。
【0035】
本発明のさらなる態様は、リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１の菌株またはラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２の菌株、その培養物、その濃縮物またはその乾燥物に関するものである。前記菌株は、脂肪分解能を有する菌株であり、キムチから分離した乳酸菌である。前記菌株は脱毛症防止、発毛促進、性機能改善、または脂肪分解に効果的である。
【0036】
本発明のさらなる態様は、脂肪分解能を有する菌株、その培養物、その濃縮物、またはその乾燥物を製造して、前記菌株、その培養物、その濃縮物、またはその乾燥物に薬剤学的にまたは食品学的に許容される担体を適用することを含む、脱毛症防止または発毛促進用の組成物の製造方法に関するものである。前記態様において、脂肪分解能を有する菌株、その培養、担体などの詳細は前述した内容と同様である。したがって、重複記載を避けるために、これに関する記載を省略する。
【0037】
本発明の一態様は、脂肪分解能を有する菌株またはその培養物、その濃縮液またはその乾燥物を含む、性機能障害改善用の組成物に関するものである。前記性機能障害の改善は、例えば、勃起不全の改善であり得る。または、本発明のさらなる態様は、脂肪分解能を有する菌株またはその培養物、その濃縮液またはその乾燥物の治療的または予防的有効量を性機能障害の予防または治療のために対象体に投与することを含む、性機能障害の予防または治療方法に関するものである。前記治療的または予防的有効量は、前述した内容と同様である。
【発明の効果】
【0038】
本発明における脂肪分解能を有する菌株またはこれを含む組成物は、脱毛症防止、発毛促進、または性機能の改善に効果的である。
【0039】
脂肪分解能を有する菌株またはこれを含む組成物は、副作用なく安全に脱毛症防止、発毛促進、コレステロール低下または性機能改善に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【0040】
【図15】図１５は、リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株とラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株を共に服用する前と後（約２ヶ月）の毛髪の変化を示す写真である。
【図16】図１６は、リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株とラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株を共に服用する前と後（約１．５ヶ月）の毛髪の変化を示す写真である。
【図17】図１７は、ラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株とラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株を共に服用する前と後（約１．５ヶ月）の毛髪の変化を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【0041】
以下、実施例を挙げて本発明をより詳細に説明する。しかし、これらの実施例は、本発明の例示的説明であり、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。
【0042】
実施例１〜３：キムチから分離した、リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株、リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株、およびラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株の分離と同定
【0043】
（１）試料の確保と菌株の分離
【0044】
韓国の伝統食品であるキムチを採取し、確保した試料を段階希釈して、３％塩化ナトリウムが添加されたＢＨＩ固体培地（Ｄｉｆｃｏ、ＵＳＡ）に塗抹した後、３７℃の条件で２４時間培養した。前記試料から優占菌株を分離した。選別されたコロニーは、３回にわたって新しい培地に移して培養する方法で純粋分離し、純粋培養した菌を２０％グリセロールが添加された培地に入れて、零下７０℃以下で保存した。
【0045】
（２）形態学的、分類学的特性調査
【0046】
前記分離した菌株を同定するために、一次的に形態学的、生化学的調査を行った。形態的な特徴はグラム染色の結果でグラム陽性であった。分類学的特性を分析するために１６ｓ ｒＲＮＡ ｐａｒｔｉａｌ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇによる分析を行っており、その結果、前記分離菌株はリューコノストック・ホルザプフェリイと９９％の相同性を有することが確認された。
【0047】
本発明者らは、新規に分離したリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３を２０１６年４月１１日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１８３０Ｐとして寄託した。
【0048】
また、前記キムチ試料と相違するキムチを対象に、前述の方法で培養試料から優占菌株を分離し、これを形態学的および生化学的調査を行った結果、当該菌株はリューコノストック・メセンテロイデスと９９％の相同性を有することが確認された。
【0049】
本発明者らは、新規に分離したリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１の菌株を２０１６年４月６日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１８２７Ｐとして寄託した。
【0050】
また、前記キムチ試料と相違するキムチを対象に、前述の方法で培養試料から優占菌株を分離し、これを形態学的におよび生化学的に調査を行った結果、当該菌株は、ラクトバチルス・サケイの菌株と９９％の相同性を有することが確認された。
【0051】
本発明者らは、新規に分離したラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２の菌株を２０１６年６月１日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１８４１Ｐとして寄託した。
【0052】
前記菌株をそれぞれ凍結乾燥して菌株粉末を製造した。
【0053】
（３）菌株の培養液の製造
【0054】
リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３の培養液を下記の方法で製造した。
【0055】
精製水１００リットルにＤｅｘｔｒｏｓｅ ２ｋｇ、全脂粉乳１．５ｋｇ、酵母抽出液０．０５ｋｇをそれぞれ添加した後、１２１℃で１５〜３０分間高温・高圧滅菌し、３５℃前後で冷却した後、リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３を無菌状態で０．２〜０．４リットル接種し、３５℃前後で２〜３日間培養して、リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３の培養液を得た。
【0056】
リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）とラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）についても、前記培養液の製造方法と同様に行い、各菌株の培養液をそれぞれ実施例１〜３から得た。
【0057】
実施例４：リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株の脂肪分解効果
【0058】
リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株の脂肪分解効果を検討するために、前記菌株の培養液、２０ｍｌ〜１００ｍｌを豚脂１０００ｃｃにそれぞれ処理した後、３７℃で２４時間振とうした。対照群としてＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍの菌株を前述の方法と同様に処理した。
【0059】
前記結果は、図１のように示す。
【0060】
前記結果から、本発明のリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）菌株粉末が濃度に比例して脂肪分解に効果的であり、他の乳酸菌であるＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍに比べて改善効果が有意に高いことが分かる。
【0061】
実施例５：リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株の性機能改善および予防効果
【0062】
リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株粉末を、性機能における異常な症状と喫煙の有無別の、４５歳〜７０歳の１０人の男性に、合計３ヶ月間、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌのリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の量を一回当たり５０ｍｌ〜１００ｍｌ、１日１回〜２回、毎日経口投与した。前記菌株の投与前後において、１ヶ月おきに、早朝勃起回数、勃起力、勃起持続力などを自己評価してもらった。
【0063】
そのうち、服用１ヶ月から３ヶ月の間に、アンケートに応じた人は４人であり、その結果は下記表１のように示す。
【0064】
【表1】
【0065】
前記結果から、本発明のリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株粉末を継続的に服用すると、性機能異常の予防効果があり、さらに、性機能障害の治療効果があることが確認された。
【0066】
また、血流増加と毛細血管弛緩作用により勃起力の向上に資するＮＯの２４時間の生成濃度（Ｈａｃａｔ細胞から発生）をさらに評価した。本発明における新規な菌株とＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍとの比較テスト（３回繰り返して得られた平均値）の結果は、図２のように示す。
【0067】
実施例６：ラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の脂肪分解効果
【0068】
ラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株の脂肪分解効果を検討するために、前記菌株の培養液２０ｍｌ〜１００ｍｌを、豚脂１０００ｃｃにそれぞれ処理した後、３７℃で２４時間振とうした。対照群としてＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍの菌株を前述の方法と同様に処理した。
【0069】
前記結果は、表２と図３のように示す。
【0070】
【表2】
【0071】
前記結果から、本発明のラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株粉末が濃度に比例して脂肪分解に効果的であり、他の乳酸菌であるＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍに比べて、改善効果が有意に高いことが分かる。
【0072】
実施例７：リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の脂肪分解効果
【0073】
リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株の脂肪分解効果を検討するために、前記菌株の培養液２０ｍｌ〜１００ｍｌを、豚脂１０００ｃｃにそれぞれ処理した後、３７℃で２４時間振とうした。対照群としてＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍの菌株を前述の方法と同様に処理した。
【0074】
前記結果は、表３及び図４のように示す。
【0075】
【表3】
【0076】
前記結果から、本発明のリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株粉末が濃度に比例して脂肪分解に効果的であり、他の乳酸菌であるＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍに比べて改善効果が有意に高いことが分かる。
【0077】
実施例８：リューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株の脱毛症防止効果
【0078】
実施例１から得られたリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株の培養液を、脱毛症の症状がある４０歳〜８５歳の男性５人と女性１人に１ヶ月〜４ヶ月の間、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌのリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の量を一回当たり５０ｍｌ〜１００ｍｌを１日２回、毎日経口投与した。
【0079】
前記菌株の投与前と服用１０日後、２０日後および３０日後において、１０日おきに、１回の頭髪洗浄後の抜け毛の本数を数えた。
【0080】
前記実験結果は、下記表４のように示す。
【0081】
【表4】
【0083】
前記結果から、本発明のリューコノストック・ホルザプフェリイＣｅｂ−ｋｃ−００３（ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ）の菌株が脱毛症防止に効果的であり、また、毛髪の太さと量、艶を顕著に改善し、脱毛症治療に効果的であることが分かる。
【0084】
実施例９：リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株の脱毛症防止効果
【0085】
実施例２から得られたリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株の培養液を脱毛症の症状がある４３歳の女性、６０歳の男性、４９歳の女性の合計３人に１ヶ月〜３ヶ月間、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌのリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株の量で、一回当たり５０ｍｌ〜１００ｍｌ、１日２回、毎日経口投与した。
【0086】
前記菌株の投与前と服用１０日後、２０日後および３０日後において、１０日おきに、１回の頭髪洗浄後の抜け毛の本数を数えた。
【0087】
前記実験結果は、下記表５のように示す。
【0088】
【表5】
【0090】
前記結果から、本発明のリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株が脱毛症防止に効果的であり、また、毛髪の太さと量、艶を顕著に改善し、脱毛症治療に効果的であることが分かる。
【0091】
実施例１０：ラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株の脱毛症防止効果
【0092】
実施例３から得られたラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株の培養液を脱毛症の症状がある５２歳の男性、４２歳の女性、６０歳の男性の合計３人に０．８ヶ月〜３ヶ月間、１×１０６〜１×１０８ＣＦＵ／ｍｌのラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株の量で、一回当たり５０ｍｌ〜１００ｍｌを１日２回、毎日経口投与した。
【0093】
前記菌株の投与前と服用１０日後、２０日後および２７日後において、１回の頭髪洗浄後の抜け毛の本数を数えた。
【0094】
前記実験結果は、下記表６のように示す。
【0095】
【表6】
【0097】
前記結果から、本発明のラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株が脱毛症防止に効果的であり、また、頭皮の改善、毛髪の太さと量、艶を顕著に改善し、脱毛症治療に効果的であることが分かる。
【0098】
実施例１１：ラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株の分離と同定
【0099】
（１）試料の確保と菌株の分離
【0100】
韓国の伝統食品であるチョングッチャンを採取し、確保した試料を段階希釈して、３％塩化ナトリウムが添加されたＢＨＩ固体培地（Ｄｉｆｃｏ、ＵＳＡ）に塗抹した後、３７℃の条件で２４時間培養した。前記試料から優占菌株を分離した。選別されたコロニーは、３回にわたって新しい培地に移して培養する方法で純粋分離し、純粋培養した菌を２０％グリセロールが添加された培地に入れて零下７０℃以下で保存した。
【0101】
（２）形態学的、分類学的特性調査
【0102】
前記分離した菌株を同定するために、一次的に形態学的、生化学的調査を行った。形態的な特徴は、グラム染色の結果でグラム陽性であった。分類学的特性を分析するために１６ｓ ｒＲＮＡ ｐａｒｔｉａｌ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇによる分析を行っており、その結果、分離菌株はラクトバチルス・ファーメンタムと９９％の相同性を有することが確認された。
【0103】
本発明者らは、新規に分離したラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２を２０１６年１０月７日、韓国微生物保存センター（Ｋｏｒｅａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ、ソウル市西大門区弘済−２街−ギル１２０−８６１）に受託番号ＫＣＣＭ１１９１０Ｐとして寄託した。
【0104】
前記菌株を凍結乾燥して菌株粉末を製造した。
【0105】
（３）菌株の培養液の製造
【0106】
ラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の培養液を、下記の方法で製造した。
【0107】
精製水１００リットルにＤｅｘｔｒｏｓｅ ２ｋｇ、全脂粉乳１．５ｋｇ、酵母抽出液０．０５ｋｇをそれぞれ添加した後、１２１℃で１５〜３０分間高温・高圧滅菌し、３５℃前後で冷却した後、ラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２を無菌状態で０．２〜０．４リットル接種し、３５℃前後で２〜３日間培養してラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の培養液を得た。
【0108】
実施例１２：ラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株のコレステロール低下効果
【0109】
ラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株粉末のコレステロール低下効果を検討するために、それぞれ１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌのラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の凍結乾燥粉末液、および対照群としてそれぞれ１ｍｇ／ｍｌ〜５ｍｇ／ｍｌのＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍの粉末液を使用した。
【0110】
＜コレステロール（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）除去能＞
【0111】
本発明に規定するコレステロール（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）除去能は、具体的には、下記の方法で測定することができる。
【0112】
ＭＲＳ培地３０ｍｌを５０ｍｌ用のファルコン（ｆａｌｃｏｎ）チューブ（ｔｕｂｅ）に入れて被検菌（グリセロール（ｇｌｙｃｅｒｏｌ）ストック（ｓｔｏｃｋ））を接種（１×１０７個／ｍｌ）し、３０℃で２４時間培養する。得られた培養液３００μｌをコレステロール（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）培地（３５０ｍｇ／Ｌのコレステロール（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）（Ｗａｋｏ Ｐｕｒｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、０．２％胆汁酸（ｗ／ｖ）を含むＭＲＳ培地３０ｍｌに添加する。３７℃で２４時間培養した後、４℃、８，０００ｒｐｍで１０分間遠心分離（ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ）を行い、上澄み液中のコレステロール濃度（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ ｌｅｖｅｌ）をＤｅｔｅｒｍｉｎｅｒ ＦＣ（Ｋｙｏｗａ Ｍｅｄｅｘ Ｃｏ．、Ｌｔｄ．）を用いて測定する。培地中に含まれた初期コレステロール量（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）に対して、培地から除去されたコレステロールの量（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）の割合（％）を算出する。
【0113】
その結果は、図１９および表７のように示す。これは３回処理を繰り返して得られた平均値を表す。
【0114】
【表7】
【0115】
実施例１３：リューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株とラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株の併用による脱毛症防止効果
【0116】
実施例２から得られたリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株の培養液と実施例１１から得られたラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株の培養液を、脱毛症の症状がある５６歳の男性、５５歳の男性の合計２人に１ヶ月〜３ヶ月間、０．５×１０６〜０．５×１０８ＣＦＵ／ｍｌのリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株と、０．５×１０６〜０．５×１０８ＣＦＵ／ｍｌのラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株を、１回当たり二つの菌株を合わせた全体容積が５０ｍｌ〜１００ｍｌになるようにして、１日２回、毎日経口投与した。
【0117】
前記菌株の投与前と服用１０日後、２０日後および４０日後において、１回の頭髪洗浄後の抜け毛の本数を数えた。
【0118】
前記実験結果は、下記表８のように示す。
【0119】
【表8】
【0121】
前記結果から、本発明のリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株とラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株を併用して服用すると、脱毛症防止に特に効果的であり、これはリューコノストック・メセンテロイデスＣｅｂ−ｋｃ−００１（ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ）の菌株を単独投与したときより、毛髪の太さや量、艶を顕著に改善する治療効果があることが分かる。
【0122】
実施例１４：ラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株とラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株の併用による脱毛症防止効果
【0123】
実施例３から得られたラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株の培養液と実施例９から得られたラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株の培養液を、脱毛症の症状がある２８歳の男性と５４歳の男性の合計２人に、１ヶ月〜３ヶ月間、０．５×１０６〜０．５×１０８ＣＦＵ／ｍｌのラクトバチルス・サケイＣｅｂ−ｋｃ−００２（ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ）の菌株と、０．５×１０６〜０．５×１０８ＣＦＵ／ｍｌのラクトバチルス・ファーメンタムＣｅｂ−ｃｈ−００２（ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ）の菌株を、１回当たり二つの菌株を合わせた全体容積が５０ｍｌ〜１００ｍｌになるようにして、１日２回、毎日経口投与した。
【0124】
前記菌株の投与前と服用１０日後、２０日後および４０日後において、１回の頭髪洗浄後の抜け毛の本数を数えた。
【0125】
前記実験結果は、下記表９のように示す。
【0126】
【表9】
【受託番号】
【0128】
寄託機関名：韓国微生物保存センター（国外）受託番号：ＫＣＣＭ１１８３０Ｐ
受託日：２０１６０４１１
【0129】
寄託機関名：韓国微生物保存センター（国外）受託番号：ＫＣＣＭ１１８２７Ｐ
受託日：２０１６０４０６
【0130】
寄託機関名：韓国微生物保存センター（国外）受託番号：ＫＣＣＭ１１８４１Ｐ
受託日：２０１６０６０１
【0131】
寄託機関名：韓国微生物保存センター（国外）受託番号：ＫＣＣＭ１１９１１Ｐ
受託日：２０１６１００７
【0132】
寄託機関名：韓国微生物保存センター（国外）受託番号：ＫＣＣＭ１１９０９Ｐ
受託日：２０１６１００７
【0133】
寄託機関名：韓国微生物保存センター（国外）受託番号：ＫＣＣＭ１１９１０Ｐ
受託日：２０１６１００７