特許 6576445 ファルネシル類の芳香族化合物及びその応用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6576445

(24)【登録日】2019年8月30日

(45)【発行日】2019年9月18日

(54)【発明の名称】ファルネシル類の芳香族化合物及びその応用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/365 20060101AFI20190909BHJP

   C07D 307/58 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 31/155 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/48 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/06 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/107 20060101ALI20190909BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20190909BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20190909BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20190909BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20190909BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20190909BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20190909BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20190909BHJP

   A23L 33/10 20160101ALI20190909BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/365

   C07D307/58CSP

   A61K31/155

   A61K9/08

   A61K9/14

   A61K9/20

   A61K9/48

   A61K9/06

   A61K9/107

   A61K9/12

   A61P43/00 121

   A61P3/10

   A61P3/06

   A61P9/10

   A61P27/02

   A61P1/16

   A23L33/10

【請求項の数】10

【全頁数】61

(21)【出願番号】特願2017-519570(P2017-519570)

(86)(22)【出願日】2015年12月18日

(65)【公表番号】特表2017-535531(P2017-535531A)

(43)【公表日】2017年11月30日

(86)【国際出願番号】CN2015097938

(87)【国際公開番号】WO2016173274

(87)【国際公開日】20161103

【審査請求日】2017年4月7日

(31)【優先権主張番号】201510217149.X

(32)【優先日】2015年4月30日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201510294277.4

(32)【優先日】2015年6月2日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201510394003.2

(32)【優先日】2015年7月7日

(33)【優先権主張国】CN

(31)【優先権主張番号】201510578951.1

(32)【優先日】2015年9月11日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】517121939

【氏名又は名称】中国科学院微生物研究所

【氏名又は名称原語表記】ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＯＦ ＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹ， ＣＨＩＮＥＳＥ ＡＣＡＤＥＭＹ ＯＦ ＳＣＩＥＮＣＥＳ

(74)【代理人】

【識別番号】110000947

【氏名又は名称】特許業務法人あーく特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】劉 宏偉

(72)【発明者】

【氏名】汪 ▲カイ▼

(72)【発明者】

【氏名】宝 麗

(72)【発明者】

【氏名】韓 俊杰

【審査官】 伊藤 清子

(56)【参考文献】

【文献】 中国特許第１０４４９６９４３（ＣＮ，Ｂ）

【文献】 国際公開第２００８／１０８８２５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 Molecules, 2014, Vol.19, No.2, pp.1672-1684

【文献】 J. Nat. Prod., 2009, Vol.72, No.11, pp.2019-2023

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／３６５

Ａ２３Ｌ ３３／１０

Ａ６１Ｋ ９／０６

Ａ６１Ｋ ９／０８

Ａ６１Ｋ ９／１０７

Ａ６１Ｋ ９／１２

Ａ６１Ｋ ９／１４

Ａ６１Ｋ ９／２０

Ａ６１Ｋ ９／４８

Ａ６１Ｋ ３１／１５５

Ａ６１Ｐ １／１６

Ａ６１Ｐ ３／０６

Ａ６１Ｐ ３／１０

Ａ６１Ｐ ９／１０

Ａ６１Ｐ ２７／０２

Ａ６１Ｐ ４３／００

Ｃ０７Ｄ ３０７／５８

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩であって、
前記ファルネシル類の芳香族化合物の構造式は以下の構造式（Ｉ）に示される化合物であって：

【化1】

構造式（Ｉ）

式中、Ｒ_１は、水素、Ｃ₁〜Ｃ₅のアルキル基、ニトロ基、フルオロ、クロロ、ブロモ、エステル基、アシルアミノ基又はアルコキシ基から選ばれ；Ｒ_１の数は、１、２又は３であ
り；１’配置はＲ配置又はＳ配置から選ばれ、Ｒ_２は水素であり、Ｘは酸素であり、２’
位と３’位間の結合は二重結合であり、ｎ＝１、２又は３であり；Ｒ_３はメチル基である
ことを特徴とする、ファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩。

【請求項2】

以下の群から選ばれるいずれか１種であることを特徴とする、ファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩。

【化2】

【化3】

【化4】

【請求項3】

請求項１又は２に記載の少なくとも1つの化合物又はその薬用塩を含む組成物であって、
その用途が、
（１）α−グルコシダーゼを阻害するための阻害剤の製造；
（２）２型糖尿病を治療及び／又は予防する医薬品の調製；
（３）α−グルコシダーゼを阻害する医薬品の調製；
（４）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害するための阻害剤の製造；
（５）脂質異常症を治療及び／又は予防する医薬品の調製；
（６）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害する医薬品の調製；
（７）血糖降下及び血中脂質降下作用を有する食品又は保健機能食品の調製；
（８）プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂを阻害するための阻害剤の製造；
（９）プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂを阻害するための阻害剤としての医薬品の調製；
（１０）ジペプチジルペプチダーゼ−４を阻害するための阻害剤の製造；
（１１）ジペプチジルペプチダーゼ−４を阻害するための阻害剤としての医薬品の調製；
（１２）アルドースレダクターゼを阻害するための阻害剤の製造；
（１３）アルドースレダクターゼを阻害するための阻害剤としての医薬品の調製；
（１４）糖尿病性網膜症又は糖尿病性足疾患を治療及び／又は予防する医薬品の調製；
（１５）非アルコール性脂肪性肝疾患を治療及び／又は予防する食品又は保健機能食品の調製、
からなる群より選ばれることを特徴とする、組成物。

【請求項4】

前記阻害剤又は医薬品は、注射剤、錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、経口液剤、軟膏剤、クリーム剤又はスプレー剤であることを特徴とする、請求項３に記載の組成物。

【請求項5】

前記阻害剤又は医薬品には、１種以上の薬学的に許容される補助材料が含まれることを特徴とする、請求項３に記載の組成物。

【請求項6】

前記補助材料には、薬学分野で常套の希釈剤、賦形剤、充填剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、吸収促進剤、界面活性剤、吸着担体、滑剤及び緩和剤が含まれることを特徴とする、請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

前記食品又は保健機能食品は、内服液、茶系飲料、トローチ、カプセル剤、飲料又は発泡性錠剤であることを特徴とする、請求項３に記載の組成物。

【請求項8】

前記食品又は保健機能食品は、日常の健康管理、糖尿病の予防、又は糖尿病の治療中・治療後における補助機能として用いられることを特徴とする、請求項３に記載の組成物。

【請求項9】

前記医薬品は経口、経管投与、注射、噴霧、物理的又は化学的媒体などの方法で投与され、若しくは他の物質と混合又は包まれて投与されることを特徴とする、請求項３に記載の組成物。

【請求項10】

血糖降下作用の医薬品、食品又は保健機能食品を調製するための組成物であって、前記請求項１又は２に記載の少なくとも1つの化合物又はその薬用塩と、メトホルミンとを含むことを特徴とする、組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は化合物の応用分野に関し、特にファルネシル類の芳香族化合物及びその応用に関するものである。

【背景技術】

【0002】

社会の発展や人々の生活水準の向上に伴い、食事の構成も変化しており、過剰な飲食傾向が代謝性疾患の発生率上昇を招いているが、中でも高血糖症及び脂質異常症が最も注目されており、現時点で世界の糖尿病患者は２億人前後で、驚くべき割合で年々増加している。中国の糖尿病患者は４０００万人おり、世界の糖尿病人口の５分の１を占めている。加えて、血液中の脂質増加によるアテローム性動脈硬化症、冠状動脈性心疾患など心血管疾患の発生率が年々上昇しており、若年化の傾向が見られている。血糖降下薬や脂質降下薬は、薬物研究の１つの焦点となっている。

【0003】

近年のヒドロキシメチルグルタリル補酵素Ａ還元酵素阻害剤の医薬開発の成功は、脂質降下薬の研究分野で飛躍的発展を遂げた。このタイプの医薬品は、コレステロール合成過程における律速酵素のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を競合的に阻害することにより、体内の内因性コレステロール合成レベルを低下させることができ、現在の高コレステロール血症治療において効果が高い医薬品である。

【0004】

α−グルコシダーゼは、小腸絨毛の刷子縁膜上に存在する加水分解酵素群であり、α−アミラーゼ、マルターゼ、イソマルターゼ、スクラーゼ、ラクターゼ、トレハロースなどが含まれる。主に体内の炭水化物の消化・吸収に関与している。α−グルコシダーゼ阻害剤は小腸の刷子縁上のα−グルコシダーゼを競合的又は非競合的に阻害することで、オリゴ糖又は多糖類から吸収可能な単糖への変換過程を遅らせ、それによって糖尿病患者の食後血糖の上昇幅が効果的に抑制され、血糖値を徐々に一定のレベルに安定させて維持させるものであり、単純な食事管理では効果が得られない２型糖尿病患者の治療に第一選択薬として用いられている血糖降下薬である。

【0005】

現在市販されているα−グルコシダーゼ阻害剤タイプの医薬品には、主にアカルボース、ボグリボース、ミグリトールなどが挙げられるが、現在使用されているこれらの阻害剤はいずれもある程度の副作用があり、例えば胃腸の副作用、蕁麻疹、肝機能障害、心血管系へのリスクがある。

【0006】

したがって、高血糖及び脂質異常症の予防や治療に用いられる、より安全で効果の高い新薬を見出すことが必要不可欠であり、急務である。

【0007】

糖尿病患者のうち、その大半を占めるのは２型糖尿病である。２型糖尿病発症の要因となるのがインスリン抵抗性であり、その形成においてはプロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ（ＰＴＰ１Ｂ）がインスリン抵抗性を惹起する重要な役割を果たす。ＰＴＰ１Ｂはインスリンシグナル伝達経路の負の調節因子として、活性化されたインスリン受容体又はその基質のチロシン残基を脱リン酸化し、それによりインスリンシグナル伝達を終了させ、身体にインスリン抵抗性を引き起こし、身体がインスリン欠乏状態となって、さらに２型糖尿病へ発展することが研究により実証されている。動物実験では、ＰＴＰ１Ｂノックアウトマウスのグルコース耐性及びインスリン耐性試験において、インスリン感受性に著しく向上が表れた。よって、ＰＴＰ１Ｂ阻害剤は２型糖尿病の新型治療薬として重要な役割を果たすことができる。

【0008】

近年、ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−４）阻害剤が糖尿病治療の新たな方向性として医薬研究者に広く注目されている。２００６年には、ＦＤＡがメルク社のシタグリプチンを承認し、ＤＰＰ−４阻害剤が初めて発売された。ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−４）は、セリンプロテアーゼ類であり、ＧＬＰ−１、ＧＩＰなどのインクレチンを速やかに分解・不活化させることができる。それは多機能性のプロテアーゼであり、ＤＰＰ−４阻害剤を使用することでＧＬＰ−１、ＧＩＰの分解を抑制し、インクレチン及びニューロペプチド活性を増強し、空腹時及び食後のグルコース濃度や糖化ヘモグロビンレベルを低下させ、インスリン感受性及びβ細胞機能を改善することができる。

【0009】

ポリオール代謝経路の亢進は糖尿病合併症の原因の１つとなる。血糖値が上昇すると、グルコースからグルコース−６−リン酸への変換を触媒するヘキソキナーゼが飽和されて、アルドースレダクターゼ（ＡＲ）の生成が刺激されることにより、ＡＲ活性を顕著に増強させて、ポリオール経路を活性化し、ソルビトール自体の極性によって細胞膜を透過しにくいため、細胞内に大量のソルビトールが生成されて、糖尿病性腎症、血管疾患、網膜症など多くの糖尿病合併症が引き起こされる。アルドースレダクターゼ阻害剤は、ポリオール経路のＡＲを阻害し、グルコースが大量にソルビトールへ変化するのを阻止することができ、ポリオールレベルを正常範囲に戻し、且つ神経伝達機能を改善し、白内障の形成及びタンパク尿の発生を遅らせることができ、これにより糖尿病合併症を予防または遅延させるという目的が達成される。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

本発明は、ファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩の、α−グルコシダーゼ、ジペプチジルペプチダーゼ−４、アルドースレダクターゼ、プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ又はＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害剤としての応用、又は２型糖尿病及び／又は脂質異常症を治療及び／又は予防する医薬品及び保健機能食品としての調製、又は肝保護作用を有する医薬品及び保健機能食品としての調製、又は糖尿病性網膜症、糖尿病性足疾患を治療及び／又は予防する医薬品及び保健機能食品としての調製への応用を提供し、本発明のファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩により調製された阻害剤、医薬品、保健機能食品は無毒で副作用もなく、顕著な治療効果が得られる。

【課題を解決するための手段】

【0011】

本発明の第１態様では、ファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩における下記の（１）〜（１５）のいずれか１項の応用を提供する。

【0012】

（１）α−グルコシダーゼ阻害剤とする；

【0013】

（２）２型糖尿病を治療及び／又は予防する医薬品の調製；

【0014】

（３）α−グルコシダーゼを阻害する医薬品の調製；

【0015】

（４）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤とする；

【0016】

（５）脂質異常症を治療及び／又は予防する医薬品の調製；

【0017】

（６）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害する医薬品の調製；

【0018】

（７）血糖降下及び血中脂質降下作用を有する食品又は保健機能食品の調製；

【0019】

（８）プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤とする；

【0020】

（９）プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤としての医薬品の調製；

【0021】

（１０）ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤とする；

【0022】

（１１）ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤としての医薬品の調製；

【0023】

（１２）アルドースレダクターゼ阻害剤とする；

【0024】

（１３）アルドースレダクターゼ阻害剤としての医薬品の調製；

【0025】

（１４）糖尿病性網膜症又は糖尿病性足疾患を治療及び／又は予防する医薬品の調製；

【0026】

（１５）非アルコール性脂肪性肝疾患を治療及び／又は予防する食品又は保健機能食品の調製。

【0027】

上記の発明によれば、前記ファルネシル類の芳香族化合物の構造式は以下の構造式（Ｉ）に示される化合物である。式中、Ｒ₁は、水素、Ｃ₁〜Ｃ₅のアルキル基、ニトロ基、フルオロ、クロロ、ブロモ、エステル基、ヒドロキシ基、アシルアミノ基又はアルコキシ基から選ばれるいずれか１種であり；１’配置はＲ配置又はＳ配置から選ばれ；Ｒ₂は、水素又はアルコキシ基から選ばれ；Ｘは、酸素、水素、カルボキシ基又はヒドロキシ基から選ばれる１種であり；２’位と３’位間は炭素−炭素単結合又は炭素−炭素二重結合であり；１４’位は、エステル基又はカルボキシ基から選ばれ；Ｎ＝１、２又は３であり；Ｒ₃はヒドロキシ基、アルデヒド基、エステル基又はカルボキシ基から選ばれる１種である。

【0028】

上記の発明によれば、前記ファルネシル類の芳香族化合物は以下のＳ１〜Ｓ３８から選ばれるいずれか１種である。

【化2】

【化3】

【化4】

【化5】

【0029】

本発明の第２態様では、組成物における下記の（１）〜（１５）のいずれか１項の応用を提供するが、前記組成物には前記構造式（Ｉ）に示される化合物又はその薬用塩が少なくとも１種以上含まれる。

【0030】

（１）α−グルコシダーゼ阻害剤とする；

【0031】

（２）２型糖尿病を治療及び／又は予防する医薬品の調製；

【0032】

（３）α−グルコシダーゼを阻害する医薬品の調製；

【0033】

（４）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤とする；

【0034】

（５）脂質異常症を治療及び／又は予防する医薬品の調製；

【0035】

（６）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害する医薬品の調製；

【0036】

（７）血糖降下及び血中脂質降下作用を有する食品又は保健機能食品の調製；

【0037】

（８）プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤とする；

【0038】

（９）プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤としての医薬品の調製；

【0039】

（１０）ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤とする；

【0040】

（１１）ジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤としての医薬品の調製；

【0041】

（１２）アルドースレダクターゼ阻害剤とする；

【0042】

（１３）アルドースレダクターゼ阻害剤としての医薬品の調製；

【0043】

（１４）糖尿病性網膜症又は糖尿病性足疾患を治療及び／又は予防する医薬品の調製；

【0044】

（１５）非アルコール性脂肪性肝疾患を治療及び／又は予防する食品又は保健機能食品の調製。

【0045】

また、本発明はファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩を提供するが、前記ファルネシル類の芳香族化合物が以上のＳ１〜Ｓ１２、Ｓ１４〜Ｓ２７、及びＳ２９〜Ｓ３０に示されるいずれか１種の化合物である。

【0046】

また、本発明は組成物における血糖降下作用の医薬品、食品又は保健機能食品の調整の応用を提供するが、前記組成物には前記構造式（Ｉ）に示される１種以上の化合物とメトホルミンとが含まれる。

【0047】

上記の発明によれば、前記阻害剤又は医薬品は、注射剤、錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、カプセル剤、経口液剤、軟膏剤、クリーム剤又はスプレー剤である。

【0048】

上記の発明によれば、前記食品又は保健機能食品は、内服液、茶系飲料、トローチ、カプセル剤、飲料又は発泡性錠剤である。

【0049】

上記の発明によれば、前記食品又は保健機能食品は、日常の健康管理、糖尿病の予防、又は糖尿病の治療中・治療後における補助機能として用いられる。

【0050】

上記の発明によれば、前記阻害剤又は医薬品には、１種以上の薬学的に許容される補助材料が含まれる。

【0051】

上記の発明によれば、前記補助材料には、薬学分野で常套の希釈剤、賦形剤、充填剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、吸収促進剤、界面活性剤、吸着担体、滑剤及び緩和剤が含まれる。

【0052】

上記の発明によれば、前記医薬品は経口、経管投与、注射、噴霧、物理的又は化学的媒体などの方法で投与され、若しくは他の物質と混合又は包まれて投与される。

【0053】

本発明に係るファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩は、α−グルコシダーゼ又はＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素の阻害剤として、又は２型糖尿病又は脂質異常症を治療及び／又は予防する医薬品としての調製、又は血糖降下及び血中脂質降下作用を有する食品又は保健機能食品としての調製、又はプロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤として、又はプロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ阻害剤としての医薬品の調製、又はジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤として、又はジペプチジルペプチダーゼ−４阻害剤としての医薬品の調製、又はアルドースレダクターゼ阻害剤として、およびアルドースレダクターゼ阻害剤としての医薬品の調製ができる。

【発明の効果】

【0054】

実験では、本発明に係るファルネシル類の芳香族化合物がα−グルコシダーゼ、ジペプチジルペプチダーゼ−４を効果的に阻害し、それにより血糖の上昇を抑制でき；アルドースレダクターゼを阻害し、それにより糖尿病合併症を予防または遅延させることができ；ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害し、それにより体内の内因性コレステロール合成レベルを低下させ、血中脂質を低下させ、非アルコール性脂肪性肝疾患の発生を抑制することができ；プロテインチロシンホスファターゼ１Ｂを阻害し、体内のポリオールレベルを維持し、神経伝達機能を改善し、白内障の形成及びタンパク尿を遅延させることで、糖尿病合併症を予防または遅延させることができることが実証されている。要約すると、本発明のファルネシル類の芳香族化合物及びその薬用塩は、血糖を低下させる、インスリン抵抗性の症状（高血糖症、高コレステロール血症、非アルコール性脂肪性肝疾患）を生じさせる因子を阻害する、などの方法により、２型糖尿病及びその合併症を治療及び／又は予防することができる。

【図面の簡単な説明】

【0055】

【図1】Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物がＫＫＡｙ系高血糖マウスの肝組織スライスに与える影響を示しており（ＨＥ：２０×）、図中、Ａ：正常対照群；Ｂ：モデル群；Ｃ：Ｓ１３に示される化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）；Ｄ：Ｓ１３に示される化合物（２０ｍｇ／ｋｇ）；Ｅ：Ｓ２８に示される化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）；Ｆ：Ｓ２８に示される化合物（２０ｍｇ／ｋｇ）である。

【0056】

【図2】Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物の投与から２４日後のＷｉｓｔｅｒ系ラットの肝組織スライス顕微鏡写真であり（ＨＥ：２０×）、図中、Ａ：正常対照群；Ｂ：モデル群；Ｃ：Ｓ１３に示される化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）；Ｄ：Ｓ１３に示される化合物（２０ｍｇ／ｋｇ）；Ｅ：Ｓ２８に示される化合物（１０ｍｇ／ｋｇ）；Ｆ：Ｓ２８に示される化合物（２０ｍｇ／ｋｇ）である。

【発明を実施するための形態】

【0057】

以下、実施例と合わせて本発明について詳細に説明するが、後述する実施例は本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。

【0058】

後述の実施例中で使用する実験方法は、特に説明がない限り、すべて常套の方法である。

【0059】

後述の実施例中で用いられる材料、試薬などは、特に説明がない限り、すべて商業的供給源から調達できるものである。

【0060】

霊芝子実体は北京同仁堂薬店から購入した。

【0061】

α−グルコシダーゼ：Ｓｉｇｍａ社から購入（カタログ番号Ｇ５００３）；ＨＭＧ−ＣｏＡ：Ｓｉｇｍａ社から購入（カタログ番号２４８９５７２９）；ＮＡＤＰＨ：Ｓｉｇｍａ社から購入（カタログ番号１０１０７８２４００１）；４−ニトロフェニル−α−Ｄ−グルコピラノシド：百霊威科技有限公司から購入（カタログ番号２７０３０５）；グルコース測定キット（カタログ番号Ｅ１０１０）：普利莱基因技術有限公司から購入；ストレプトゾシン：百霊威科技有限公司から購入（カタログ番号Ｍ０２５４０）；Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（ＳＰＦグレード）：北京維通利華実験動物技術有限公司。合成試薬は全て常套の試薬であり、百霊威科技有限公司から購入した。

【実施例1】

【0062】

実施例１、構造式Ｓ１３及び構造式Ｓ２８、Ｓ３１〜Ｓ３８に示される化合物の調製

【0063】

（１）霊芝の抽出物の調製
霊芝子実体を切砕し、秤量５ｋｇとする。１５Ｌの９５％エタノール−水（体積百分率）溶液を用いて１時間毎に３回還流抽出する。抽出液を合わせて、減圧濃縮して乾燥させ、１７０ｇの抽出物が得られた。

【0064】

さらに、抽出物を６００ｍｌの蒸留水で溶解し、等容積のｎ−ヘキサンで３回抽出し、有機相を除去する。再び等容積の酢酸エチルで水相を３回抽出し、水相を除去して、酢酸エチル抽出液を合わせる。ロータリーエバポレーター（ＲＥ−５２ＡＡ、上海亜栄生化儀器厂から購入）で酢酸エチルを蒸発させ、得られた５４ｇのエキスをＬＺ−Ｅと記した。

【0065】

（２）化合物の調製
ステップ（１）で調製したＬＺ−Ｅをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離し、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル系（ｎ−ヘキサン：酢酸エチルの容積比は９：１、４：１、７：３、１：１）で勾配溶離を行い、各勾配溶離で３つの保持容量を流し、各容量は５００ｍｌである。薄層クロマトグラフィーの挙動分析に基づき、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル（容積比は９：１）系からＬＺ−Ｅ１画分を得て；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル（容積比は４：１）からＬＺ−Ｅ２〜ＬＺ−Ｅ３画分を得て；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル（容積比は７：３）からＬＺ−Ｅ４、ＬＺ−Ｅ５画分を得て；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル（容積比は１：１）からＬＺ−Ｅ６画分を得て；計６つの画分を得て、各画分を凍結乾燥した。

【0066】

薄層クロマトグラフィー分析により、ＬＺ−Ｅ４中の活性物質の含有量が高いことが明らかとなったため、その画分に対しＯＤＳカラムを用いてさらに分離した。容量百分率が１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、７０％、９０％のメタノール水溶液で順に溶離し、各溶離系で３つの保持容量を流し、各容量は５００ｍｌである。薄層クロマトグラフィーでの挙動に基づき、２５４ｎｍのＵＶ光を照射して異なる画分を判定し、容量百分率が１０％のメタノール水溶液からＬＺ−Ｅ４−１画分を得て；容量百分率が２０％のメタノール水溶液系からＬＺ−Ｅ４−２〜ＬＺ−Ｅ４−４画分を得て；容量百分率が３０％のメタノール水溶液系からＬＺ−Ｅ４−５〜ＬＺ−Ｅ４−１０画分を得て；容量百分率が４０％のメタノール水溶液系からＬＺ−Ｅ４−１１〜ＬＺ−Ｅ４−１４画分を得て；容量百分率が５０％のメタノール水溶液系からＬＺ−Ｅ４−１５〜ＬＺ−Ｅ４−１８画分を得て；容量百分率が７０％、９０％のメタノール水溶液系からＬＺ−Ｅ４−１９〜ＬＺ−Ｅ４−２３画分を得て；計２３個の画分を得て、各画分を凍結乾燥した。

【0067】

薄層クロマトグラフィー分析により、ＬＺ−Ｅ４−１２中の活性物質の含有量が高いことが明らかとなったため、ＬＺ−Ｅ４−１２画分に対しさらにＨＰＬＣ分離を行った。容量百分率が５６％のアセトニトリルの酸性水（ここでの酸性水は容量百分率が０．０１％のトリフルオロ酢酸の水溶液）溶液を溶離液としてＨＰＬＣの調製を行い、流速を２ｍｌ／ｍｉｎとし、１８．９、２１．２、２４．５、２６．２、３０．２、３５．８ｍｉｎのクロマトグラフピークを採取し、構造式Ｓ３１、Ｓ３２、Ｓ３３、Ｓ３４、Ｓ３５、Ｓ３６に示される化合物が得られた。

【0068】

薄層クロマトグラフィー分析により、ＬＺ−Ｅ４−１４中の活性物質の含有量が高いことが明らかとなったため、ＬＺ−Ｅ４−１４画分に対しさらにＨＰＬＣ分離を行った。容量百分率が５２％のアセトニトリルの酸性水（ここでの酸性水は容量百分率が０．０１％のトリフルオロ酢酸の水溶液）溶液を溶離液としてＨＰＬＣの調製を行い、流速を２ｍｌ／ｍｉｎとし、２１．１ｍｉｎのクロマトグラフピークを採取し、ＬＺ−Ｅ４−１４−１を得て；ＬＺ−Ｅ４−１４−１に対し４５％のアセトニトリルのＨＰＬＣでキラル分離を行い、流速を２ｍｌ／ｍｉｎとし、３１．１ｍｉｎ、３２．５ｍｉｎのクロマトグラフピークを採取し、それぞれ構造式Ｓ１３、Ｓ２８に示される化合物が得られた。

【0069】

薄層クロマトグラフィー分析により、ＬＺ−Ｅ４−１８中の活性物質の含有量が高いことが明らかとなったため、ＬＺ−Ｅ４−１８画分に対しさらにＨＰＬＣ分離を行った。容量百分率が４６％のアセトニトリルの酸性水（ここでの酸性水は容量百分率が０．０１％のトリフルオロ酢酸の水溶液）溶液を溶離液としてＨＰＬＣの調製を行い、流速を２ｍｌ／ｍｉｎとし、１５．４ｍｉｎのクロマトグラフピークを採取し、ＬＺ−Ｅ４−１８−１を得て；ＬＺ−Ｅ４−１８−１に対し４０％のアセトニトリルのＨＰＬＣでキラル分離を行い、流速を２ｍｌ／ｍｉｎとし、２５．１ｍｉｎ、２６．４ｍｉｎのクロマトグラフピークを採取し、それぞれ構造式Ｓ３７、Ｓ３８に示される化合物が得られた。

【0070】

上述の薄層クロマトグラフィーの条件は以下のとおりである：

【0071】

薄層プレート：青島海洋薄層板公司。薄層展開系条件：クロロホルム：メタノール＝２０：１、２ｍｌ；温度２５℃。

【0072】

上述のＨＰＬＣの条件は以下のとおりである：ＨＰＬＣグレードのメタノールでサンプルを１０ｍｇ／ｍｌの溶液に調製し、サンプルロード量は毎回１５μＬとし、クロマトカラムはＫｒｏｍａｓｉｌ、１０×２５０ｍｍ、Ｃ１８セミ分取カラムとし、カラム温度は２５℃、波長２１０ｎｍで検出を行う。

【実施例2】

【0073】

実施例２、構造式Ｓ１〜Ｓ３０に示される化合物の合成〕

【0074】

合成ルート

【化6】

【0075】

化合物Ａは異なる置換基のベンズアルデヒド誘導体であり、具体的な構造式は以下の表を参照されたい。

【表1】

【0076】

化合物Ｂ：−７８℃に冷却したＡ（１５．０ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（１５ｍｌ）にビニルマグネシウムブロミド（１ＭのＴＨＦ溶液、１６ｍｌ、１６ｍｍｏｌ）を滴下して１時間攪拌した。塩化アンモニウム飽和液（２０ｍｌ）で希釈した後、酢酸エチル（３０ｍｌ）で３回抽出し、有機層と合わせて水と塩水で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、化合物Ｂが得られた。

【0077】

化合物１′Ｒ−Ｃ：化合物Ｂ（１０ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン溶液（３０ｍｌ）中にダイアトマイト（３ｇ）を添加し、５分間攪拌した。次にＰＣＣ（クロロクロム酸ピリジニウム、２．５６ｇ）を添加し、３時間攪拌した後、真空濃縮し、エキスは高速シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、得られたケトンを５ｍｌのテトラヒドロフランに溶解し、室温で（Ｒ）−メチル−ＣＢＳオキサザボロリジン触媒のメチルベンゼン溶液（１．０ｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）及びボランのジメチルスルフィド溶液（１０ｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）中に添加し、反応液を室温下で５時間攪拌し、塩化アンモニウム飽和液（１０ｍＬ）を添加し、エーテルで抽出し（３×２０ｍＬ）、飽和食塩水で洗浄（２×１０ｍＬ）後、ＭｇＳＯ₄で乾燥させた後に溶媒を蒸発させた。得られた粗成品は高速シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて分離し（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）、化合物１′Ｒ−Ｃが得られた。

【0078】

化合物１′Ｓ−Ｃ：化合物Ｂ（１０ｍｍｏｌ）の無水塩化メチレン溶液（３０ｍｌ）中にダイアトマイト（３ｇ）を添加し、５分間攪拌した。次にＰＣＣ（クロロクロム酸ピリジニウム、２．５６ｇ）を添加し、３時間攪拌した後、真空濃縮し、エキスは高速シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、得られたケトンを５ｍｌのテトラヒドロフランに溶解し、室温で（Ｓ）−メチル−ＣＢＳオキサザボロリジン触媒のメチルベンゼン溶液（１．０ｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）及びボランのジメチルスルフィド溶液（１０ｍｏｌ／Ｌ、１ｍｍｏｌ、１ｍＬ）中に添加し、反応液を室温下で５時間攪拌し、塩化アンモニウム飽和液（１０ｍＬ）を添加し、エーテルで抽出し（３×２０ｍＬ）、飽和食塩水で洗浄（２×１０ｍＬ）後、ＭｇＳＯ₄で乾燥させた後に溶媒を蒸発させた。得られた粗成品は高速シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて分離し（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）、化合物１′Ｓ−Ｃが得られた。

【0079】

（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエノール（Ｅ）：ゲラニオール（４ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）の四塩化炭素溶液（５０ｍｌ）中にトリフェニルホスフィン（１０．２ｇ、３８．９ｍｍｏｌ）を添加した。体系を加熱還流状態で１時間攪拌した後、０℃に冷却し、２０ｍｌのｎ−ヘキサン溶液を添加し、５分間攪拌し、濾過し、濾液を真空濃縮して置換ゲラニオールが得られた。

【0080】

−７８℃に冷却したテトラメチルエチレンジアミン（ＴＭＥＤＡ、１９．５ｍｌ、１３０ｍｍｏｌ）中にｎ−ブチルリチウム（２．６８Ｍのｎ−ヘキサン溶液、４８．５ｍｌ、１３０ｍｍｏｌ）を滴下し、白色沈殿を形成させ、１０分間攪拌した後、２−メチルアリルアルコール（６．８２ｍｌ、８１．０ｍｍｏｌ）、無水エーテル（８０ｍｌ）を滴下した。体系を室温下で２２時間攪拌した。体系中に暗橙色のゼリー状の物質が生じたら、−７８℃に冷却して、１０ｍｌの置換ゲラニオールのエーテル溶液を添加した。体系を室温下で１時間攪拌した。温度を０℃に低下させ、１Ｎ ＨＣ１（１００ｍｌ）で希釈後にエーテル（２００ｍｌ）で３回抽出し、有機層と合わせて水と塩水で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、無色油状の物質（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエノール（Ｅ）（４．８１ｍｇ、９０％）が得られた。

【0081】

（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５、９−ヘプタジエナール（Ｆ）：（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエノール（Ｅ）（３．９５ｇ，９０％）のｎ−ヘキサン溶液（１０ｍｌ）中に活性二酸化マンガン（１４．４ｇ、１６２ｍｍｏｌ）を添加した。体系を室温下で６時間攪拌し、濾過して真空濃縮した後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、無色油状の物質（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５、９−ヘプタジエナール（Ｆ）（５．０１ｍｇ、７５％）が得られた。

【0082】

（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエン酸（Ｇ）：０℃に冷却した（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５、９−ヘプタジエナール（F）（８５０ｍｇ、４．１２ｍｍｏｌ）、２−メチル−２−ブチレン（４．９０ｍｌ、４１．２ｍｍｏｌ）のｔ−ブチルアルコール（２０ｍｌ）、水（１０ｍｌ）の混合溶液中にリン酸二水素ナトリウム（２．５４ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）の水溶液（５ｍｌ）及び次亜塩素酸ナトリウム（８０％、１．１４ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を添加した。体系を室温下で１時間攪拌した。塩水（３０ｍｌ）で希釈後に塩化メチレン（３０ｍｌ）で３回抽出し、有機層と合わせて水と塩水で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、無色油状の物質（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエン酸（Ｇ）（７６０ｍｇ、８３％）が得られた。

【0083】

化合物１′Ｒ−Ｈ：０℃に冷却した（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエン酸（G）（３５．１ｍｇ、１５８μｍｏｌ）のメチルベンゼン溶液中にジイソプロピルアミン（１１０μＬ、６３１μｍｏｌ）、２、４、６−トリクロロベンゾイルクロリド（１００μＬ、６３１μｍｏｌ）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１５４ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を添加した。次に１′Ｒ−Ｃ（４０．１ｍｇ、１２４μｍｏｌ）のメチルベンゼン溶液を添加し、２ｍｌのメチルベンゼンで希釈した。体系を室温下で８時間攪拌した。ベンゼン（１０ｍｌ）、飽和炭素水素ナトリウム水溶液（１５ｍｌ）で希釈後に酢酸エチル（３０ｍｌ）で３回抽出し、有機層と合わせて水と塩水で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、無色油状の物質（１′Ｒ、５Ｅ）−１′−［２″、５″−ジ（メトキシメトキシ）ベンゼン］プロ−２−ピ−１−ニル−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエニルエステル（H）（６７．０ｍｇ、９２％）が得られた。

【0084】

１′Ｓ−Ｈ：０℃に冷却した（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−メチルウンデセン−５，９−ジエン酸（G）（３５．１ｍｇ、１５８μｍｏｌ）のメチルベンゼン溶液にジイソプロピルアミン（１１０μＬ、６３１μｍｏｌ）、２、４、６−トリクロロベンゾイルクロリド（１００μＬ、６３１μｍｏｌ）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１５４ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）を添加した。次に１′S−Ｃ（４０．１ｍｇ、１２４μｍｏｌ）のメチルベンゼン溶液を添加し、２ｍｌのメチルベンゼンで希釈した。体系を室温下で８時間攪拌した。ベンゼン（１０ｍｌ）、飽和炭素水素ナトリウム水溶液（１５ｍｌ）で希釈後に酢酸エチル（３０ｍｌ）で３回抽出し、有機層と合わせて水と塩水で抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、無色油状の物質１′Ｓ−H（６９．０ｍｇ、９３％）が得られた。

【0085】

化合物１′Ｒ−Ｉ（Ｓ１〜Ｓ１５）：室温下での１′Ｒ−Ｈ（１５．１ｍｇ、３２．９μｍｏｌ）、第１世代Ｇｒｕｂｂｓ触媒（１．４ｍｇ、１．６μｍｏｌ）の脱気した塩化メチレン（２ｍｌ）を５時間攪拌し、次に第１世代Ｇｒｕｂｂｓ触媒（１．４ｍｇ、１．６μｍｏｌ）をもう一度添加し、３時間攪拌した。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、無色油状の物質１′Ｒ−Ｉ（１１．０ｍｇ、８０％）が得られた。

【0086】

１′Ｓ−Ｉ（Ｓ１６〜Ｓ３０）：室温下での１′Ｓ−Ｈ（１５．１ｍｇ、３２．９μｍｏｌ）、第１世代Ｇｒｕｂｂｓ触媒（１．４ｍｇ、１．６μｍｏｌ）の脱気した塩化メチレン（２ｍｌ）を５時間攪拌し、次に第１世代Ｇｒｕｂｂｓ触媒（１．４ｍｇ、１．６μｍｏｌ）をもう一度添加し、３時間攪拌した。真空濃縮後のエキスはシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ｎ−ヘキサン／酢酸エチル、１０：１）を用い、化合物１′Ｓ−Ｉが得られた。

【実施例3】

【0087】

実施例３、Ｓ１〜Ｓ３８に示される化合物：

【化7】

【化8】

【化9】

【化10】

【0088】

調製して得られた化合物それぞれに対して核磁気共鳴、赤外線検出、質量分析を行い、各化合物の構造を確定した。

【0089】

ここで、核磁気共鳴装置はＢｒｕｋｅｒＭｅｒｃｕｒｙ−５００ＭＨｚ及びＢｒｕｋｅｒＭｅｒｃｕｒｙ−６００ＭＨｚ（ブルカ―・オプティクス社）、赤外分光光度計はＮｉｃｏｌｅｔ ＩＳ５ＦＴ−ＩＲ（米国、Ｎｉｃｏｌｅｔ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｌｔｄ）、質量分析計はＢｒｕｋｅｒ ＡＰＥＸ ＩＩＩ ７．０Ｔ及びＡＰＥＸ ＩＩ ＦＴ−ＩＣＲ（ブルカ―・オプティクス社）を使用した。

【0090】

Ｓ１、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−ベンゾフラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋５１．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．３３（ｔ、８．３、２Ｈ）、７．２７（ｔ、８．３、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、７．１５（ｄ、８．３、２Ｈ）、６．４３（ｓ、１Ｈ）、５．０９（ｔ、７．０、１Ｈ）、５．０６（ｔ、７．０、１Ｈ）、２．３９（ｔ、７．０、２Ｈ）、２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．０２（ｍ、２Ｈ）、１．９６（ｍ、２Ｈ）１．６６（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．０、１４７．１、１４１．５、１３６．８、１３３．２、１３１．５、１２８．９（×２）、１２７．５（×２）、１２７．１、１２４．１、１２２．２、８２．１、３９．６、２６．８、２５．７、２５．４、２１．２、１７．８、１６．２ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３１１．２００９（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₂、３１１．２００６）。

【0091】

Ｓ２、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−ナフチル）−フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋１７．４（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3、５００ＭＨｚ）：δ_H；８．０８（ｄ、８．４、１Ｈ）、７．９１（ｄ、８．０、１Ｈ）、７．８６（ｄ、８．０、１Ｈ）、７．６０（ｔ、７．６、１Ｈ）、７．５６（ｔ、７．６、１Ｈ）、７．４４（ｔ、７．６、１Ｈ）、７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．３６（ｍ、１Ｈ）、６．６６（ｓ、１Ｈ）、５．１３（ｔ、７．０、１Ｈ）、５．０６（ｔ、７．０、１Ｈ）、２．４３（ｔ、７．０、２Ｈ）、２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．０２（ｍ、２Ｈ）、１．９７（ｍ、２Ｈ）、１．６６（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C１７３．８、１４７．４、１３６．９．１３４．０、１３３．８、１３１．５、１３１．３、１３０．７、１２９．６、１２９．１、１２６．９、１２６．１１２５．４、１２４．１、１２３．５、１２２．６、１２２．５、７９．３、３９．６、２６．６、２５．７、２５．７、２５．５、１７．７、１６．２；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６１．２１６２（計算値 Ｃ₂₅Ｈ₂₈Ｏ₂、３６１．２１６２）。

【0092】

Ｓ３、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−メトキシメチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋７１．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．２７（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｔ、７．７、１Ｈ）、７．１５（ｄ、７．５、１Ｈ）、６．９３（ｔ、７．５、１Ｈ）、６．８１（ｄ、７．５、１Ｈ）、６．２３（ｓ、１Ｈ）、６．０１（ｓ、２Ｈ）、３．５０（ｓ、３Ｈ）、２．３８（ｔ、７．５、２Ｈ）、２．２９（ｍ、２Ｈ）、２．０３（ｍ、２Ｈ）、１．９６（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C１７４．１、１５３．０、１４７．１、１３６．８、１３３．１、１３１．５、１２９．８、１２６．６、１２４．２、１２２．６、１２２．１、１２１．３、１１５．８、９５．２、７８．０、５０．９、３９．６、２６．５、２５．７、２５．７、２５．４、１７．１、１６．１ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３７１．２２２１（計算値 Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｏ₄、３７１．２２１７）。

【0093】

Ｓ４、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−ヒドロキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋５４．２（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．２７（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｔ、７．７、１Ｈ）、７．１５（ｄ、７．５、１Ｈ）、６．９３（ｔ、７．５、１Ｈ）、６．８１（ｄ、７．５、１Ｈ）、６．２３（ｓ、１Ｈ）、２．３８（ｔ、７．５、２Ｈ）、２．２９（ｍ、２Ｈ）、２．０３（ｍ、２Ｈ）、１．９６（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）；δ_H；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C １７４．１、１５３．０、１４７．１、１３６．８、１３３．１、１３１．５、１２９．８、１２６．６、１２４．２、１２２．６、１２２．１、１２１．３、１１５．８、７８．０、３９．６、２６．５、２５．７、２５．７、２５．４、１７．１、１６．１ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３２７．１９５４（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₃、３２７．１９５３）。

【0094】

Ｓ５、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−ニトリル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋３８．２（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H ８．１７（ｄ、８．３、１Ｈ）、７．６８（ｔ、７．６、１Ｈ）、７．５４（ｄ、７．９、１Ｈ）、７．５３（ｍ、１Ｈ）、７．３３（ｓ、１Ｈ）、６．５３（ｓ、１Ｈ）、５．０６（ｍ、２Ｈ）、２．３８（ｔ、７．６、２Ｈ）、２．２６（ｍ、２Ｈ）、１、９９（ｍ、２Ｈ）、１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．６６（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C １７３．７、１４８．１、１４７．１、１３７．０、１３４．７、１３３．６、１３２．３、１３１．５、１２９．４、１２８．１、１２５．３、１２４．１、１２２．３、７８．４、３９．６、２６．６、２５．７、２５．７、２５．４、１７．７、１６．１ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５６．１８５５（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₅ＮＯ₄、３５６．１８５６）。

【0095】

Ｓ６、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−メチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋３９．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．１８（ｄ、７．９、２Ｈ）、７．１３（ｄ、７．９、２Ｈ）、７．０８（ｓ、１Ｈ）、５．８３（ｓ、１Ｈ）、５．１２（ｔ、７．５、１Ｈ）、５．０７（ｔ、７．５、１Ｈ）、２．４０（ｍ、２Ｈ）、２．３５（ｓ、３Ｈ）、２．３１（ｍ、２Ｈ）、２．０４（ｍ、２Ｈ）、１．９８（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．０、１４７．９、１３９．１、１３６．８、１３３．５、１３２．１、１３１．５、１２９．５（×２）、１２６．６（×２）、１２４．１、１２２．６、８２．２、３９．６、２６．６、２５．７、２５．７、２５．４、２１．２、１７．７、１６．２ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３２５．２１６６（計算値 Ｃ₂₂Ｈ₂₈Ｏ₂、３２５．２１６２）。

【0096】

Ｓ７、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−エチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋５４．９（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．２０（ｄ、７．９、２Ｈ）、７．１３（ｄ、７．９、２Ｈ）、７．０６（ｓ、１Ｈ）、５．８４（ｓ、１Ｈ）、５．１２（ｔ、７．５、１Ｈ）、５．０７（ｔ、７．５、１Ｈ）、２．６５（ｑ、７．６、２Ｈ）、２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．０５（ｍ、２Ｈ）、１．９８（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）、１．２３（ｔ、７．６、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．０、１４７．９、１４５．４、１３６．８、１３３．５、１３２．４、１３１．５、１２８．４（×２）、１２６．６（×２）、１２４．１、１２２．６、８２．３、３９．６、２８．６、２６．６、２５．７、２５．７、２５．４、１７．７、１６．２、１５．５；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３３９．２３２２（計算値 Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｏ₂、３３９．２３１９）。

【0097】

Ｓ８、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−イソプロピル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋４８．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：７．２６（ｄ、７．９、２Ｈ）、７．１９（ｄ、７．９、２Ｈ）、７．１０（ｓ、１Ｈ）、５．８７（ｓ、１Ｈ）、５．１５（ｍ、２Ｈ）、５．０８（ｍ、２Ｈ）、２．９４（ｍ、１Ｈ）、２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．０６（ｍ、２Ｈ）、２．００（ｍ、２Ｈ）、１．６９（ｓ、３Ｈ）、１．６２（ｓ、６Ｈ）、１．２８（ｓ、３Ｈ）、１．２６（ｓ、３Ｈ）；δ_C：１７４．０、１５０．１、１４７．９、１３６．８、１３３．５、１３２．５、１３１．５、１２７．０（×２）、１２６．７、１２６．６、１２４．２、１２２．６、８２．２、３９．６、３３．９、２６．６ ２５．７、２５．７、２５．４、２３．９（×２）、１７．７、１６．２；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５３．２４７５（計算値 Ｃ₂₄Ｈ₃₂Ｏ₂、３５３．２４７５）。

【0098】

Ｓ９、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−ｔ−ブチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋５８．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．４０（ｄ、７．６、２Ｈ）、７．１８（ｄ、７．６、２Ｈ）、７．０７（ｓ、１Ｈ）、５．８５（ｓ、１Ｈ）、５．１１（ｔ、７．５、１Ｈ）、５．０７（ｔ、７．５、１Ｈ）、２．４０（ｍ、２Ｈ）、２．３１（ｍ、２Ｈ）、２．０５（ｍ、２Ｈ）、１．９８（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、６Ｈ）、１．３１（ｓ、９Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．０、１５２．３、１４７．９、１３６．８、１３３．５、１３２．１、１３１．５、１２６．４（×２）、１２５．９（×２）、１２４．１、１２２．６、８２．２、３９．６、３４．７、３１．２（×３）、２６．６、２５．７、２５．７、２５．４、１７．７、１６．２ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６７．２６３２（計算値 Ｃ₂₅Ｈ₃₄Ｏ₂、３６７．２６３２）。

【0099】

Ｓ１０、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−メトキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋７８．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．１７（ｄ、７．６、２Ｈ）、７．０５（ｄ、７．６、２Ｈ）、６．８９（ｓ、１Ｈ）、５．８２（ｓ、１Ｈ）、５．１２（ｔ、７．５、１Ｈ）、５．０７（ｔ、７．５、１Ｈ）、３．８１（ｓ、３Ｈ）、２．４０（ｍ、２Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．０４（ｍ、２Ｈ）、１．９９（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）δ_C：１７４．０、１６０．３、１４７．８、１３６．８、１３３．７、１３１．５、１２８．２（×２）、１２７．０、１２４．１、１２２．６、１１４．３（×２）、８２．１、５５．４、３９．７、２６．６、２５．７、２５．７、２５．４、１７．７、１６．２ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４１．２１１５（計算値 Ｃ₂₂Ｈ₂₈Ｏ₃、３４１．２１１１）。

【0100】

Ｓ１１、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−ニトリル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋９２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；８．０７（ｄ、７．６、２Ｈ）、７．４８（ｄ、７．６、２Ｈ）、７．２９（ｓ、１Ｈ）、５．８２（ｓ、１Ｈ）、５．０１（ｔ、７．５、１Ｈ）、４．９７（ｔ、７．５、１Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．１９（ｍ、２Ｈ）、１．９２（ｍ、２Ｈ）、１．８２（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５７（ｓ、３Ｈ）、１．４５（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．０、１４７．９、１４５．９、１４１．８、１３７．７、１３７．２、１３１．２、１２７．２（×２）、１２３．８、１２３．６（×２）、１２１．４、８９．５、３９．６、２６．６、２５．７、２５．７、２５．５、１７．７、１６．１、ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５６．１８５２（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₅ＮＯ₄、３５６．１８５６）。

【0101】

Ｓ１２、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２，５−ジメトキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋４６．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．１９（ｓ、１Ｈ）、６．８２（ｍ、２Ｈ）、６．７６（ｓ、１Ｈ）、６．１９（ｓ、１Ｈ）、５．１０（ｔ、７．６、１Ｈ）、５．０６（ｔ、７．６、１Ｈ）、３．８６（ｓ、３Ｈ）、３．７２（ｓ、３Ｈ）、２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．０３（ｍ、２Ｈ）、１．９７（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C １７６．７、１５１．１、１４８．８、１３７．７、１３２．９、１３２．１、１２３．９、１２３．４、１２５．３、１２３．４、１１７．１、１１７．１、１１３．１、７９．８、５５．８、５６．１、４０．７、２７．６、２６．８、２６．１、２５．８、１７．７、１６．２ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３７１．２２１８（計算値 Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｏ₄、３７１．２２１７）。

【0102】

Ｓ１３、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２，５−ヒドロキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋９２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．１８（ｓ、１Ｈ）、６．８３（ｍ、２Ｈ）、６．７６（ｓ、１Ｈ）、６．１９（ｓ、１Ｈ）、５．１０（ｔ、７．６、１Ｈ）、５．０６（ｔ、７．６、１Ｈ）、２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．２６（ｍ、２Ｈ）、２．０３（ｍ、２Ｈ）、１．９７（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C １７６．７、１５１．３、１４８．５、１３７．６、１３２．８、１３２．１、１２３．９、１２３．４、１２５．３、１２３．４、１１７．１、１１７．１、１１３．１、７９．８、４０．７、２７．６、２６．８、２６．１、２５．８、１７．７、１６．２ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４３．１８３４（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₄、３４３．１８３１）。

【0103】

Ｓ１４、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２，６−フルオロ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋８９．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．３３（ｍ、１Ｈ）、７．０７（ｓ、１Ｈ）、６．９０（ｍ、２Ｈ）、６．２２（ｓ、１Ｈ）、５．５１３（ｔ、７．６、１Ｈ）、５．０７（ｔ、７．６、１Ｈ）、２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．０４（ｍ、２Ｈ）、１．９９（ｍ、２Ｈ）、１．６６（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．０、１５８．７、１５５．２、１４８．６、１３５．７、１３５．１、１３２．６、１３２．０、１２４．５、１２３．５、１１７．３、１１６．０、１１５．８、７９．８、３９．７、２６．６、２５．７、２５．７、２５．４、１７．７、１６．２；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４７．１８１７（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₄Ｆ₂Ｏ₄、３４７．１８１７）。

【0104】

Ｓ１５、［（Ｒ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（３，４，５−フルオロ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋２１．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．２７（ｍ、１Ｈ）、７．０２（ｓ、１Ｈ）、６．９１（ｍ、１Ｈ）、５．７７（ｓ、１Ｈ）、５．０８（ｍ、２Ｈ）、２．４１（ｍ、２Ｈ）、２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．０２（ｍ、２Ｈ）、１．９９（ｍ、２Ｈ）、１．６５（ｓ、３Ｈ）、１．５９（ｓ、６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７２．９、１４６．４（×２）、１３７．２、１３４．６、１３１．８、１３１．６、１２４．０（×２）、１２２．３（×２）、１１０．９、１１０．７、８０．２、３９．６、２６．６、２５．７、２５．６、２５．４、１７．７、１６．２；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６５．１７２５（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₃Ｆ₃Ｏ₄、３６５．１７２３）。

【0105】

Ｓ１６、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−ベンゾフラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −４９．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１は一致、ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３１１．２００８（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₂、３１１．２００６）。

【0106】

Ｓ１７、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−ナフチル）−フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −２４．４（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ２は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６１．２１６１（計算値 Ｃ₂₅Ｈ₂₈Ｏ₂、３６１．２１６２）。

【0107】

Ｓ１８、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−メトキシメチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −６１．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ３は一致、ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３７１．２２１５（計算値 Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｏ₄、３７１．２２１７）。

【0108】

Ｓ１９、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−ヒドロキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −３８（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ４は一致、ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３２７．１９５１（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₃、３２７．１９５３）。

【0109】

Ｓ２０、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２−ニトリル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −４２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ５は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５６．１８５２（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₅ＮＯ₄、３５６．１８５６）。

【0110】

Ｓ２１、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−メチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −３８．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ６は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３２５．２１６０（計算値 Ｃ₂₂Ｈ₂₈Ｏ₂、３２５．２１６２）。

【0111】

Ｓ２２、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−エチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −３２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ７は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３３９．２３２２（計算値 Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｏ₂、３３９．２３１９）。

【0112】

Ｓ２３、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−イソプロピル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −４５．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ８は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５３．２４７５（計算値 Ｃ₂₄Ｈ₃₂Ｏ₂、３５３．２４７５）。

【0113】

Ｓ２４、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−ｔ−ブチル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −４６．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ９は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６７．２６３２（計算値 Ｃ₂₅Ｈ₃₄Ｏ₂、３６７．２６３２）。

【0114】

Ｓ２５、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−メトキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −６２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１０は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４１．２１１５（計算値 Ｃ₂₂Ｈ₂₈Ｏ₃、３４１．２１１１）。

【0115】

Ｓ２６、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（ｐ−ニトリル）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −６７．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１１は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５６．１８５８（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₅ＮＯ₄、３５６．１８５６）。

【0116】

Ｓ２７、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２，５−ジメトキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −５７．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１２は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３７１．２２１５（計算値 Ｃ₂₃Ｈ₃₀Ｏ₄、３７１．２２１７）。

【0117】

Ｓ２８、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２，５−ヒドロキシ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −８８．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１３は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４３．１８３０（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₄、３４３．１８３１）。

【0118】

Ｓ２９、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（２，６−フルオロ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −８４．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１４は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４７．１８１７（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₄Ｆ₂Ｏ₄、３４７．１８１７）。

【0119】

Ｓ３０、［（Ｓ，Ｅ）−３−（４，８−ジメチルノナン−３，７−ジアルケン−１−イル）−５−（３，４，５−フルオロ）フェニル］フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −３２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ１５は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６５．１７２３（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₃Ｆ₃Ｏ₄、３６５．１７２３）。

【0120】

Ｓ３１、［（２Ｚ，５Ｅ）−２−（２−（２，５−ジメチルフェニル）エチリデン）−６，１０−ジメチルテトラデカン−５，９−ゲラン酸］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．３８（ｓ、１Ｈ）、６．９３（ｄ、２．８、１Ｈ）、６．７５（ｄ、８．６、１Ｈ）、６．７１（ｄｄ、８．６、２．８）、５．１１（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．０６（ｔ、６．８、１Ｈ）、３．５２（ｓ、３Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、２．２７（ｍ、２Ｈ）、２．００（ｍ、２Ｈ）、１．９２（ｍ、２Ｈ）、１．６８（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｓ、６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７１．６、１５１．１、１４８．７、１４６．９、１３７．１、１３５．８、１３１．６、１２５．０、１２３．８、１２３．６、１１８．３、１１８．０、１１４．１、１０７．６、５６．９、４３．０、２７．２、２６．１、２５．８、２５．７、１７．７、１６．１：ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３７３．２０１１（計算値 Ｃ₂₂Ｈ₂₈Ｏ₅ ３７３．２０１０）。

【0121】

Ｓ３２、［（２Ｚ，５Ｅ）−２−（２−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチリデン）−６，１０−ジメチルテトラデカン−５，９−ゲラン酸］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋３．０（ｃ ０．１、ＣＤＣｌ₃）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．７０（ｓ、１Ｈ）、７．１３（ｄ、２．７、１Ｈ）、７．０４（ｄｄ、８．８、２．７）、６．８２（ｄ、８．８、１Ｈ）、５．０６（ｔ、７．１、１Ｈ）、４．９９（ｔ、６．９、１Ｈ）、２．６５（ｍ、２Ｈ）、２．２０（ｍ、２Ｈ）、１．９４（ｍ、２Ｈ）、１．７５（ｍ、２Ｈ）、１．６２（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）、１．５４（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１９８．７、１７０．１、１５７．２、１５０．７、１４５．９、１３７．６、１３２．９、１２６．６、１２５．４、１２４．０、１２１．３、１１９．９、１１５．９、４０．６、２９．２、２８．５、２７．６、２５．９、１６．２、１５．８：ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５９．１８５３（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₅、３５９．１８５３）。

【0122】

Ｓ３３、［（２Ｚ，５Ｅ，９Ｅ）−２−（２−（２，５−ジメチルフェニル）−２−オキソエチリデン）−１１−ヒドロキシ−６，１０−ジメチルテトラデカン−５，９−ゲラン酸］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋２．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；６．６４（ｄ、８．５、１Ｈ）、６．６１（ｄ、２．８、１Ｈ）、６．５２（ｄｄ、８．５、２．８）、５．９８（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．３９（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．１４（ｔ、７．３、１Ｈ）、３．９４（ｓ、２Ｈ）、３．６９（ｄ、７．７、２Ｈ）２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．１０（ｍ、２Ｈ）、２．００（ｍ、２Ｈ）、１．６６（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７２．３、１５１．２、１４９．３、１４０．５、１３６．７、１３５．８、１３３．３、１２８．０、１２６．８、１２４．６、１１７．８、１１６．９、１１４．８、６９．０、４０．６、３５．９、３１．５、２８．５、２７．３、１６．２、１３．７：ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６１．２０１０（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₈Ｏ₅、３６１．２０１０）。

【0123】

Ｓ３４、［（２Ｚ，５Ｅ）−２−（２−（２，５−ジメチルフェニル）エチリデン）−６，１０−ジメチルテトラデカン−５，９−ゲラン酸］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ ＋１．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；６．６４（ｄ、８．５、１Ｈ）、６．６１（ｄ、２．８、１Ｈ）、６．５２（ｄｄ、８．５、２．８）、５．９８（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．１３（ｔ、７．３、１Ｈ）、５．１０（ｔ、７．３、１Ｈ）、３．６９（ｄ、７．７、２Ｈ）、２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．０５（ｍ、２Ｈ）、２．００（ｍ、２Ｈ）、１．６８（ｓ、３Ｈ）、１．６２（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７２．３、１５１．２、１４９．３、１４０．５、１３６．７、１３３．３、１２８．０、１２５．５、１２４．４、１１７．８、１１６．９、１１４．８、４０．４ ３５．９、３１．５、２８．５、２７．７、２５．９、１７．８、１６．２：ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３４５．２０６３（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₈Ｏ₄、３４５．２０６０）。

【0124】

Ｓ３５、［（２Ｚ，５Ｅ，９Ｅ）−２−（２−（２，５−ジメチルフェニル）−２−オキソエチリデン）−１１−アルデヒド−６，１０−ジメチルテトラデカン−５，９−ゲラン酸］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −４．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；６．６４（ｄ、８．５、１Ｈ）、６．６１（ｄ、２．８、１Ｈ）、６．５２（ｄｄ、８．５、２．８）、５．９８（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．３９（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．１４（ｔ、７．３、１Ｈ）、３．６９（ｄ、７．７、２Ｈ）２．３３（ｍ、２Ｈ）、２．１９（ｍ、２Ｈ）、２．１０（ｍ、２Ｈ）、２．００（ｍ、２Ｈ）、１．６６（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１９４．０、１７２．３、１５１．２、１４９．３、１４０．５、１３６．７、１３５．８、１３３．３、１２８．０、１２６．８、１２４．６、１１７．８、１１６．９、１１４．８、４０．６、３５．９、３１．５、２８．５、２７．３、１６．２、１３．７：ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３５９．１８５４（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₆Ｏ₅、３５９．１８５４）。

【0125】

Ｓ３６、［（Ｅ）−２−（２−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−２−オキソエチル）−６，１０−ジメチルテトラデカン−５，９−ゲラン酸］、黄色、油状の物質、［α］_D²⁵ −３．０（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．３８（ｄ、２．９、１Ｈ）、７．０８（ｄｄ、８．９、２．９、１Ｈ）、６．７９（ｄ、８．９、１Ｈ）、５．１８（ｔ、７．１、１Ｈ）、５．１０（ｔ、７．１、１Ｈ）、３．５０（ｄｄ、１７．９、９．２、１Ｈ）、３．１６（ｄｄ、１７．９、４．４、１Ｈ）、３．０３（ｍ、２Ｈ）、２．１４（ｍ、２Ｈ）、２．０５（ｍ、２Ｈ）、１．９９（ｍ、２Ｈ）、１．８７（ｍ、２Ｈ）、１．６４（ｓ、３Ｈ）、１．６１（ｓ、３Ｈ）、１．５８（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、１２５ＭＨｚ）：δ_C：２０５．０、１７６．４、１５６．３、１５０．２、１３６．２、１３１．６、１２５．６、１２５．０、１２４．３、１２０．０、１１９．３、１１５．４、４０．３、４０．１、３２．６、２７．３、２６．１、２５．７、１７．７、１６．１；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺３６１．２０１３（計算値 Ｃ₂₁Ｈ₂₈Ｏ₅、３６１．２０１０）。

【0126】

Ｓ３７、（Ｒ）−［５−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−３−（４−メチルペンタン−３−アルケン−１−イル）フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、無色油状の物質、［α］_D²⁵ ＋４２．１（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；¹Ｈ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、５００ＭＨｚ）：δ_H；７．３５（ｄ、１．４、１Ｈ）、６．７６（ｄ、８．６、１Ｈ）、６．６５（ｄｄ、８．６、２．９、１Ｈ）、６．５３（ｄ、２．９、１Ｈ）、６．２０（ｄ、１．４、１Ｈ）、５．１２（ｔ、７．１、２Ｈ）、２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．２８（ｍ、２Ｈ）、１．６４（ｓ、３Ｈ）、１．５７（ｓ、３Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（ＭｅＯＤ、１２５ＭＨｚ）：δ_C：１７４．６、１５１．３、１４９．５、１４８．２、１３３．１、１３２．７、１２３．９、１２３．６、１１７．０、１１６．８、１１３．２、７８．３、２６．６、２５．９、２５．７、１７．７；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺２７５．１２８１（計算値 Ｃ₁₆Ｈ₁₈Ｏ₄、２７５．１２８１）。

【0127】

Ｓ３８、（Ｓ）−［５−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−３−（４−メチルペンタン−３−アルケン−１−イル）フラン−２（５Ｈ）−ケトン］、無色油状の物質、［α］_D²⁵ −３５．１（ｃ ０．１、ＭｅＯＨ）；ＮＭＲデータと化合物Ｓ３７は一致；ｐｏｓｉｔｉｖｅ ＨＲＴＯＦＭＳ ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］⁺２７５．１２８４（計算値 Ｃ₁₆Ｈ₁₈Ｏ₄、２７５．１２８１）。

【実施例4】

【0128】

実施例４、構造式Ｓ１〜Ｓ３８に示される化合物のインビトロでのα−グルコシダーゼ活性阻害試験

【0129】

試験試料溶液：実施例３で調製したＳ１〜Ｓ３８に示される３８個の化合物を正確に秤量し、ＤＭＳＯで５ｍＭに調合し、活性試験に使用した（最終濃度範囲は０．０５〜５０μＭ、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）；アカルボースを陽性対照とする（最終濃度はそれぞれ４０００μＭ、１０００μＭ、２５０μＭ、６２．５μＭとし、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）。

【0130】

以上の異なる濃度の試験試料溶液を２５μＬ取り、２５μＬのα−グルコシダーゼ水溶液（濃度０．２Ｕ／ｍＬ）及び１７５μＬのリン酸塩緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．０）を添加した。混合溶液を室温に１０分間放置してから２５μＬの４−ニトロフェニル−α−Ｄ−グルコピラノシド水溶液（濃度２．５ｍＭ）を添加し、３７℃のインキュベータに３０分間、５０００ｒｐｍの遠心分離に５分間かけ、上清１５０μＬを９６ウェルプレート中に取り、４０５ｎｍ帯の波長で吸光度を測定した。

【0131】

実験で同時にセットするブランク群は：試験試料溶液の代わりに２５μＬのリン酸塩緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．０）を使用し；ブランク対照群は：試験試料溶液の代わりに２５μＬのリン酸塩緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．０）を使用し、同時にα−グルコシダーゼ水溶液の代わりに２５μＬのリン酸塩緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．０）を使用し；試料対照群は：α−グルコシダーゼ水溶液の代わりに２５μＬのリン酸塩緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．０）を使用した。

【0132】

各実験群を３回繰り返し、平均値を結果とする。下記の公式で試料のα−グルコシダーゼ阻害率を計算する：
阻害率（％）＝［１−（試料群吸光度−試料対照群吸光度）
／（ブランク群吸光度−ブランク対照群吸光度）］×１００％

【0133】

実験データを統計解析し、下記の公式で各試験試料を計算した結果のＩＣ₅₀値を表２に示す。
ＩＣ₅₀＝［Ｃ_L（Ｉ_H−５０）＋Ｃ_H（５０−Ｉ_L）］／（Ｉ_H−Ｉ_L）

【0134】

Ｃ_L：低濃度値；Ｃ_H：高濃度値；Ｉ_H：高濃度下での阻害率；Ｉ_L：低濃度下での阻害率。

【0135】

どの化合物も強いα−グルコシダーゼ阻害活性を有し、その活性は陽性対照薬のアカルボースより強いことが示されている。

【表2】

【実施例5】

【0136】

実施例５、構造式Ｓ１〜Ｓ３８に示される化合物のインビトロでのＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素活性阻害試験

【0137】

試験試料溶液：実施例３で調製したＳ１〜Ｓ３８に示される３８個の化合物を正確に秤量し、ＤＭＳＯで１０ｍＭに調合し、活性試験に使用した（最終濃度範囲は１〜１００μＭ、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）；アトルバスタチンを陽性対照とする（最終濃度はそれぞれ１００μＭ、５０μＭ、２５μＭ、１２．５μＭとし、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）。

【0138】

以上の異なる濃度の試験試料溶液を１μＬ取り、２５μＬのＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素水溶液（濃度０．２Ｕ／ｍＬ）、２５μＬのＮＡＤＰＨ水溶液（濃度０．２Ｕ／ｍＬ）及び２４μＬのリン酸塩緩衝液（５０ｍＭ、ｐＨ７．０）を添加した。混合溶液を室温に１０分間放置してから２５μＬのＨＭＧ−ＣｏＡを添加し、３７℃のインキュベータに３０分間、５０００ｒｐｍの遠心分離に５分間かけ、上清８０μＬを９６ウェルプレート中に取り、５５０ｎｍ帯の波長で吸光度を測定した。

【0139】

上述の各実験群を３回繰り返し、平均値を結果とする。下記の公式で試料のＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害率を計算する：

【数3】

阻害率（％）＝［１−（試料群吸光度−試料対照群吸光度）／（ブランク群吸光度−ブランク対照群吸光度）］×１００％

【0140】

実験データを統計分析し、各試験試料を計算した結果のＩＣ₅₀値を表３に示す。どの化合物も強いＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害活性を有し、その活性は陽性対照薬のアトルバスタチンより強いことが示されている。

【表3】

【実施例6】

【0141】

実施例６、構造式Ｓ１〜Ｓ３８に示される化合物のインビトロでのプロテインチロシンホスファターゼ１Ｂ（ＰＴＰ-１Ｂ）活性阻害試験

【0142】

実施例３で調製したＳ１〜Ｓ３８に示される３８個の化合物を正確に秤量し、ＤＭＳＯで２００μＭに調合し、活性試験に使用した（最終濃度範囲は１〜５０μＭ、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）；バナジン酸ナトリウムを陽性対照とする（最終濃度はそれぞれ２０μＭ、１０μＭ、５μＭ、２μＭ、１μＭとし、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）。

【0143】

実験ステップ：９６ウェルプレートに以下の試薬を順に添加するが、配合比率は下記のように群別で異なる：

【0144】

試験群：化合物溶液５０μＬ＋濃度１７０μｇ／ｍＬのＰＴＰ−１Ｂ溶液５０μＬ

【0145】

陽性対照群：バナジン酸ナトリウム溶液５０μＬｌ＋濃度１７０μｇ／ｍＬのＰＴＰ−１Ｂ溶液５０μＬ

【0146】

ブランク群：緩衝液５０μＬ＋濃度１７０μｇ／ｍＬのＰＴＰ−１Ｂ溶液５０μＬ

【0147】

バックグラウンド群：化合物溶液５０μＬ＋緩衝液５０μＬ

【0148】

試薬を添加した９６ウェルプレートを室温に１０分間放置して化合物と酵素を十分反応させた後、５０μＬ、１ｍＭのｐＮＰＰ溶液を基質として添加し、３７℃のインキュベータで３０分間反応させ、各ウェルに５０μＬ、３ＭのＮａＯＨを添加して反応を終了させ、各ウェルの４０５ｎｍ帯での光学密度を測定した。

【0149】

実験データを統計分析し、各試験試料を計算した結果のＩＣ₅₀値を表４に示す。どの化合物も一定のＰＴＰ−１Ｂ酵素阻害活性を有することが示されている。

【表4】

【実施例7】

【0150】

実施例７、構造式Ｓ１〜Ｓ３８に示される化合物のインビトロでのアルドース還元酵素活性阻害試験

【0151】

実施例３で調製したＳ１〜Ｓ３８に示される３８個の化合物を正確に秤量し、ＤＭＳＯで１ｍＭに調合し、活性試験に使用した（最終濃度範囲は１〜１００μＭ、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）；エパルレスタットを陽性対照とする（最終濃度はそれぞれ２０μＭ、１０μＭ、５μＭ、２μＭ、１μＭとし、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）。

【0152】

実験ステップ：９６ウェルプレートに以下の試薬を順に添加するが、配合比率は下記のように群別で異なる：

【0153】

試験群：化合物溶液１０μＬ＋濃度（０．１ｍＭ）のＮＡＤＰＨ溶液２５μＬ＋ＰＢＳ緩衝液２５μｌ＋アルドース還元酵素希釈液１５μＬ

【0154】

陽性対照群：エパルレスタット溶液１０μＬ＋濃度（０．１ｍＭ）のＮＡＤＰＨ溶液２５μＬ＋ＰＢＳ緩衝液２５μｌ＋アルドース還元酵素希釈液１５μＬ

【0155】

ブランク群：濃度（０．１ｍＭ）のＮＡＤＰＨ溶液２５μＬ＋ＰＢＳ緩衝液３５μＬ＋アルドース還元酵素希釈液１５μＬ

【0156】

バックグラウンド群：濃度（０．１ｍＭ）のＮＡＤＰＨ溶液２５μＬ＋ＰＢＳ緩衝液６０μＬ＋アルドース還元酵素希釈液１５μＬ

【0157】

試薬を添加した９６ウェルプレートを室温に１０分間放置して化合物と酵素を十分反応させた後、バックグラウンド群を除く、他の３群それぞれに２５μＬ、１０mＭＤのＬ−グリセルアルデヒド溶液を基質として添加し、３７℃のインキュベータで３０分間反応させ、各ウェルの３４０ｎｍ帯での光学密度を測定した。

【0158】

実験データを統計分析し、各試験試料を計算した結果のＩＣ₅₀値を表５に示す。どの化合物も一定のアルドース還元酵素阻害活性を有することが示されている。

【表5】

【実施例8】

【0159】

実施例８、構造式Ｓ１〜Ｓ３８に示される化合物のインビトロでのジペプチジルペプチダーゼ−４活性阻害試験

【0160】

実施例３で調製したＳ１〜Ｓ３８に示される３８個の化合物を正確に秤量し、ＤＭＳＯで１ｍＭに調合し、活性試験に使用した（最終濃度範囲は１〜１００μＭ、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）；シタグリプチンリン酸塩を陽性対照とする（最終濃度はそれぞれ２０μＭ、１０μＭ、５μＭ、２μＭ、１μＭとし、調合時に少量のＤＭＳＯに溶解した後、蒸留水で対応濃度に希釈し、ＤＭＳＯが最終体積分率＜０．１％となるよう制御する）。

【0161】

ＤＰＰ−４阻害物質スクリーニングキットを用いて上述の化合物に対し試験を行った。

【0162】

実験データを統計分析し、各試験試料を計算した結果のＩＣ₅₀値を表６に示す。どの化合物も一定のジペプチジルペプチダーゼ−４阻害活性を有することが示されている。

【表6】

【実施例9】

【0163】

実施例９、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物が高脂肪飼料摂取ラットの血中脂質に与える影響

【0164】

材料：実施例１で調製したＳ１３及びＳ２８に示される２つの化合物を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで１０ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。ラットは北京維通利華実験動物技術有限公司から購入、温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施した。血清中総コレステロールＴＣキット（バッチ番号２０１３１１１２）、低密度リポタンパク質ＬＤＬ−Ｃキット（バッチ番号２０１４０１１４）、高密度リポタンパク質ＨＤＬ−Ｃキット（バッチ番号２０１４０４１３）、トリグリセリドＴＧキット（バッチ番号２０１３１２２６）、スーパーオキシドジスムターゼＳＯＤキット（バッチ番号２０１４０２１３）、アラニンアミノトランスフェラーゼＡＬＴキット（バッチ番号２０１３１００６）は南京建成生物工程研究所から購入した。

【0165】

方法：健康なＳＤ系雄性ラット、２００±２０ｇを取り、１週間の予備飼育後に実験を実施し、ランダムに４群に分け、各群８匹とする。対照群には通常飼料を与え、他の群には高脂肪飼料を与えた（高脂肪飼料とは、通常飼料に１％のコレステロール、０．２％のブタ胆汁抽出物、１０％のラード、１０％の卵黄子を加えたもの）。飼育してから３週間後、各群のラットそれぞれに１０ｍｇ／ｍｌの抽出溶液（５０ｍｇ／ｋｇに相当）１ｍｌを胃内投与して、１０日間継続して、対照群及びモデル群には等量の生理食塩水を与えた。最後の投与後、採血して、４℃で３０００ｒｐｍの遠心分離を行い、血清の総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）を測定した。

【0166】

結果：対照群及びモデル群と比べ、この２つの化合物はラットの血中脂質の状況を有意に改善することができ、ラットの血清のＡＬＴ（アラニンアミノトランスフェラーゼ）に対しても良好な反転作用が得られ、高脂質血が引き起こす肝臓損傷から保護できることが示されており、これは生体のＳＯＤ酵素が増加したことによって実現したと推測されるが、結果は表７を参照されたい。

【表7】

【0167】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【実施例10】

【0168】

実施例１０、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物の正常マウスの血糖に対する活性研究

【0169】

材料：実施例１で調製したＳ１３、Ｓ２８に示される２つの化合物を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで１０ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。ＳＰＦ級昆明種マウスは北京維通利華実験動物技術有限公司から購入、温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施した。グルコースアッセイキット（バッチ番号２０１４０４０３）は南京建成生物工程研究所から購入した。

【0170】

方法：雄性のＳＰＦ級昆明種マウス、２０±２ｇを取り、１週間の予備飼育後に実験を実施し、ランダムに３群に分け、各群１２匹とする。各群それぞれに１０ｍｇ／ｍｌの抽出溶液（５０ｍｇ／ｋｇに相当）０．１ｍｌを胃内投与して、１０日間継続して、対照群には等量の生理食塩水を与えた。最後の投与後に１０時間絶食し、眼窩採血し、グルコースアッセイキットに従い血糖を測定した。

【0171】

結果：対照群と比べ、２つの化合物群マウスの血糖値に統計的差異はなく、この２つの化合物は正常マウスの血糖に対し影響を及ぼさないことが示されたが、表８を参照されたい。

【表8】

【実施例11】

【0172】

実施例１１、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物のアロキサン誘発性高血糖マウスの血糖に対する活性研究

【0173】

材料：実施例１で調製したＳ１３及びＳ２８に示される化合物を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで１０ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。ＳＰＦ級マウスは北京維通利華実験動物技術有限公司から購入、温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施した。グルコースアッセイキット（バッチ番号２０１４０４０３）は南京建成生物工程研究所から購入した。

【0174】

方法：６０匹の雄性ＳＰＦ級昆明種マウス、２０±２ｇを取り、１週間の予備飼育後に実験を実施した。ランダムに１０匹を取り出して対照群とし、他の５０匹は体重に従いアロキサンを２２０ｍｇ／ｋｇ腹腔内注射してモデルを作成して、７２時間後、眼窩採血して血糖を測定し、血糖が８．８〜２０ｍｍｏｌ／Ｌのマウスを選んで後続の試験を実施した。本実験中で選ばれたマウスは３２匹おり、血糖のレベルに従いランダムにモデル群及び投与群に分けた。投与群それぞれに１０ｍｇ／ｍｌの抽出溶液（５０ｍｇ／ｋｇに相当）０．１ｍｌを胃内投与して、１０日間継続して、対照群及びモデル群には等量の生理食塩水を与えた。最後の投与後に１０時間絶食し、眼窩採血し、グルコースアッセイキットに従い血糖を測定した。

【0175】

結果：表９から分かるように、投与前は正常対照群を除いて、他のマウスの血糖値が大幅に上昇しており、アロキサンのモデル作成が成功していることが示されている。投与後の血糖はある程度低下しており、Ｓ１３、Ｓ２８の化合物は血糖マウスの血糖値を有意に低下させることができ、糖尿病及び糖尿病合併症の治療に用いることができるといえる。

【表9】

【0176】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【実施例12】

【0177】

実施例１２、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物が高血糖のＫＫＡｙマウスの血糖に与える影響

【0178】

材料：試験試料溶液は実施例２での化合物Ｓ１３及び化合物Ｓ８である。化合物Ｓ１３及びＳ２８を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで５ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。ＫＫＡｙマウスは中国医学科学院北京協和医学院動物研究所から購入、温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施した。血糖計はドイツのロシュ社製品である。

【0179】

方法：６〜８週齢の雄性Ｃ５７マウス、体重２０〜２２ｇ、１０匹を正常対照群（１）として、６〜８週齢、体重２８〜３２ｇの雄性ＫＫＡｙマウスの空腹時の血糖を測定し、血糖値及び体重の状況に基づき均等に群分けした：（２）モデル対照群、（３）化合物Ｓ１３を１ｍｇ／ｋｇ投与、（４）化合物Ｓ１３を５ｍｇ／ｋｇ投与、（５）化合物Ｓ１３を１０ｍｇ／ｋｇ投与、（６）化合物Ｓ１３を２０ｍｇ／ｋｇ投与、（７）化合物Ｓ２８を１ｍｇ／ｋｇ投与、（８）化合物Ｓ２８を５ｍｇ／ｋｇ投与、（９）化合物Ｓ２８を１０ｍｇ／ｋｇ投与、（１０）化合物Ｓ２８を２０ｍｇ／ｋｇ投与、（１１）メトホルミン８ｇ／ｋｇ、（１２）２．５ｍｇ／ｋｇの化合物Ｓ１３＋メトホルミン４ｇ／ｋｇ、（１３）５ｍｇ／ｋｇの化合物Ｓ１３＋メトホルミン４ｇ／ｋｇ、（１４）２．５ｍｇ／ｋｇの化合物Ｓ２８＋メトホルミン４ｇ／ｋｇ、（１５）５ｍｇ／ｋｇの化合物Ｓ２８＋メトホルミン４ｇ／ｋｇ、各群８匹として、３週間続けて投与した。モデル対照群には等量の０．５％のＣＭＣ−Ｎａを与えた。

【0180】

メトホルミンは現在の臨床で第一選択薬とされている血糖降下薬であり、主に肝臓での糖放出を低下させ、消化管からのグルコース吸収を減少させて、外周血糖の取り込み及び利用を促進させることにより、インスリン感受性を高める効果が得られるが、メトホルミンは肝臓、腎臓への障害を引き起こす；一方で本発明の化合物Ｓ１３はＰＴＰ１−Ｂ、ＤＰＰ−４に対する強力な阻害作用によりインスリン感受性が増強されるため、我々は２種類の薬剤を併用することで、インスリン感受性の増強作用を高め、さらには肝臓、腎臓等を保護して障害がないようにすることができると考えた。

【0181】

測定指標：１）血糖に対する薬剤の影響：投与第１日目：動物を絶食して２時間後に採血（０時）して、空腹時の血糖値を測定し、化合物を胃内投与して、投与してから３０分後に尾尖採血して血糖値を測定した。

【0182】

２）体重及び血糖に対する影響：投与第２日目、５日目、８日目、１１日目、１４日目、１７日目、２０日目に体重を計測し記録して、投与後に尾尖採血して血糖値を測定した（表１０を参照）。

【0183】

３）ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）：投与第１２日目にブドウ糖負荷を検査した：動物を絶食して１２時間後に採血（０時）して投与し、且つブドウ糖（２．０ｇ／ｋｇ）を経口投与し、それぞれ３０分後、６０分後、１２０分後に尾尖採血して血糖値を測定した（表１１を参照）。

【0184】

４）最後の投与後、麻酔で殺処分し、採血して、４℃で３０００ｒｐｍの遠心分離を行い、血清の総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）を測定した。

【0185】

５）最後の投与後、肝臓を摘出し、ホルマリン中に固定して、組織スライスを観察した。

【0186】

実験結果は、構造式Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物が高血糖マウスの血糖に有意な作用を有しており、体重への影響は少なく、ブドウ糖負荷マウスに対しても有意な低下作用を有することが示された（表１０及び表１１）。メトホルミンとの併用後は、効果がより顕著となり、且つメトホルミンによる肝障害に対しての報告作用も有することができ、２型糖尿病の治療薬の調製に用いるか又はメトホルミンと併用して２型糖尿病の治療に用いるか又は治療中・治療後における補助機能として用いることができる。

【表10】

【表11】

【0187】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【0188】

対照群及びモデル群と比べ、これらの化合物はマウスの血中脂質の状況を有意に改善することができ、マウスの血清のＡＬＴに対しても良好な反転作用が得られ、高脂質血が引き起こす肝障害から保護できることが示されており、これは生体のＳＯＤ酵素が増加したことによって実現したと推測されるが、結果は表１２を参照されたい。

【表12】

【0189】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【0190】

図１が示すように、解剖時の肝臓に対するおおよその肉眼的観察及び組織の病理スライスのＨＥ染色を合わせると、モデル群マウスの肝細胞内はいずれもサイズの異なる大量の脂肪空砲を有し、脂肪肝が形成されている。しかしながら、化合物Ｓ１３及び化合物Ｓ２８群マウスの肝細胞内の脂肪空砲は基本的に消失していることが認められ、化合物Ｓ１３及び化合物Ｓ２８の異なる用量群がいずれも糖尿病の合併症による非アルコール性脂肪性肝疾患を有効に治療できることが結果により示された。

【実施例13】

【0191】

実施例１３、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物が非アルコール性脂肪性肝疾患に与える影響

【0192】

材料：実施例１で調製したＳ１３及びＳ２８に示される２つの化合物を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで５ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。雄性ＳＰＦ級Ｗｉｓｔｅｒラット６０匹、体重１８０〜２２０ｇ、維通利華実験動物中心から購入した。温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施し、血清中総コレステロールＴＣキット（バッチ番号２０１３１１１２）、低密度リポタンパク質ＬＤＬ−Ｃキット（バッチ番号２０１４０１１４）、高密度リポタンパク質ＨＤＬ−Ｃキット（バッチ番号２０１４０４１３）、トリグリセリドＴＧキット（バッチ番号２０１３１２２６）、アラニンアミノトランスフェラーゼＡＬＴキット（バッチ番号２０１３１００６）は南京建成生物工程研究所から購入した。

【0193】

方法：雄性ＳＰＦ級Ｗｉｓｔｅｒラットをランダムに群分けした：（１）正常群、（２）モデル対照群、（３）Ｓ１３に示される化合物を１０ｍｇ／ｋｇ投与、（４）Ｓ１３に示される化合物を２０ｍｇ／ｋｇ投与、（５）Ｓ２８に示される化合物を１０ｍｇ／ｋｇ投与、（６）Ｓ２８に示される化合物を２０ｍｇ／ｋｇ投与、各群１０匹とする。正常群ラットには通常飼料を与え、残りの群のラットにはコリン欠乏飼料（高脂肪飼料）を毎日与えて、ラットの摂食量及び体重を計測した。コリン欠乏飼料を与えると肝細胞変性、肝炎及び肝障害を誘発し、同時に血中脂質レベルの上昇及びインスリン抵抗性を誘発するので、げっ歯類動物の脂肪肝モデル作成においてよく用いられる方法である。

【0194】

高脂肪飲食を与えて８週間後、投与群に投与を開始し、４週間続けて投与した。正常群及びモデル対照群には等量の０．５％のＣＭＣ−Ｎａを与えた。投与から４週間後、ラットを麻酔で殺処分し、肝臓組織及び血を採取した。

【0195】

測定指標：

【0196】

１）肝臓指数。

【0197】

２）血清中総コレステロール、高密度リポタンパク質、低密度リポタンパク質及びトリグリセリドの含有量を測定する。

【0198】

３）アラニンアミノトランスフェラーゼ含有量を測定する。

【0199】

４）肝臓組織スライス：最後の投与後、麻酔で殺処分し、氷上で肝臓を摘出し、素早くホルマリン中に入れて固定し、組織スライスを準備する。

【0200】

実験結果は表１３が示すように、正常対照群と比べ、モデル群の肝臓指数は有意に上昇しており、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物を投与した後は脂肪肝ラットの肝臓指数を有意に低下させることができる。同時にモデル群のＴＣ、ＬＤＬ−Ｃ、ＴＧはいずれも有意に上昇し、ＨＤＬ−Ｃは有意に低下しており、本モデルが明らかな脂質異常症を引き起こしていることを示しているが、モデル群と比べ、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物を投与した後は非アルコール性脂肪性肝疾患ラットの血中脂質を低下させることができ、同時に肝機能を改善し、血漿のＡＬＴの含有量を低下させることができる。

【表13】

【0201】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【0202】

解剖時の肝臓に対するおおよその肉眼的観察及び組織の病理スライスのＨＥ染色を合わせると、モデル群ラットの肝細胞内はいずれもサイズの異なる大量の脂肪空砲を有しているが、Ｓ１３及びＳ２８に示される化合物群ラットの肝細胞内の脂肪空砲は基本的に消失していることが認められた。

【実施例14】

【0203】

実施例１４、Ｓ９及びＳ２４に示される化合物がｏｂ／ｏｂ糖尿病モデルマウスの血糖、血中脂質および非アルコール性脂肪性肝疾患に与える影響
材料：試験試料溶液は実施例２での化合物Ｓ９及び化合物Ｓ２４である。化合物Ｓ９及びＳ２４を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで５ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。Ｏｂ／ｏｂマウスは中国医学科学院北京協和医学院動物研究所から購入、温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施した。血糖計はドイツのロシュ社製品である。
方法：６〜８週齢の雄性Ｃ５７マウス、体重２０〜２２ｇ、１０匹を正常対照群（１）として、６〜８週齢、体重３６〜４０ｇの雄性ｏｂ／ｏｂマウスの空腹時の血糖を測定し、血糖値及び体重の状況に基づき均等に群分けした：（２）モデル対照群、（３）化合物Ｓ９を０．３ｍｇ／ｋｇ投与、（４）化合物Ｓ９を１ｍｇ／ｋｇ投与、（５）化合物Ｓ９を３ｍｇ／ｋｇ投与、（６）化合物Ｓ２４を０．３ｍｇ／ｋｇ投与、（７）化合物Ｓ２４を１ｍｇ／ｋｇ投与、（８）化合物Ｓ２４を３ｍｇ／ｋｇ投与、（９）メトホルミン１００ｍｇ／ｋｇ、（１０）アカルボース１０ｍｇ／ｋｇ、各群１０匹として、４週間続けて投与した。モデル対照群には等量の０．５％のＣＭＣ−Ｎａを与えた。
測定指標：
１）血糖に対する薬剤投与の影響：投与当日（０日目）、７日目、１４日目、２１日目、２８日目に尾尖採血して血糖値を測定した（表１４を参照）。
２）ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）：投与第２５日目にブドウ糖負荷を検査した：動物を絶食して１２時間後に採血（０時）して投与し、且つブドウ糖（２．０ｇ／ｋｇ）を経口投与し、それぞれ４０分後、８０分後、１２０分後に尾尖採血して血糖値を測定した（表１５を参照）。
３）最後の投与後、麻酔で殺処分し、採血して、４℃で３０００ｒｐｍの遠心分離を行い、血清の糖化ヘモグロビン含有量を測定した（表１６を参照）。
４）最後の投与後、麻酔で殺処分し、採血して、４℃で３０００ｒｐｍの遠心分離を行い、血清の総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）、アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）を測定した（表１７を参照）。
５）最後の投与後、肝臓を摘出し、ホルマリン中に固定して、組織スライスを観察した。
実験結果は、構造式Ｓ９及びＳ２４に示される化合物が高血糖マウスの血糖に有意な作用を有しており、ブドウ糖負荷マウスに対しても有意な低下作用を有することが示された（表１４及び表１５）。

【表14】

【表15】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【表16】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１
対照群及びモデル群と比べ、これらの化合物はマウスの血中脂質の状況を有意に改善することができ、マウスの血清のＡＬＴ、ＡＳＴに対しても良好な反転作用が得られ、高脂質血が引き起こす肝障害から保護できることが示されており、結果は表１７を参照されたい。

【表17】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１
図３が示すように、解剖時の肝臓に対するおおよその肉眼的観察及び組織の病理スライスのＨＥ染色を合わせると、モデル群マウスの肝細胞内はいずれもサイズの異なる大量の脂肪空砲を有し、脂肪肝が形成されている。しかしながら、化合物Ｓ９及び化合物Ｓ２４群マウスの肝細胞内の脂肪空砲は基本的に消失していることが認められ、化合物Ｓ９及び化合物Ｓ２４の異なる用量群がいずれも糖尿病の合併症による非アルコール性脂肪性肝疾患を有効に治療できることが結果により示された。
[実施例１５]

【0204】

実施例１５、Ｓ９及びＳ２４に示される化合物が高脂肪飼料誘導の肥満マウスの血糖、血中脂質および非アルコール性脂肪性肝疾患に与える影響
材料：試験試料溶液は実施例２での化合物Ｓ９及び化合物Ｓ２４である。化合物Ｓ９及びＳ２４を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで５ｍｇ／ｍｌの溶液を調合し、活性試験に使用した。Ｏｂ／ｏｂマウスは中国医学科学院北京協和医学院動物研究所から購入、温度２０〜２４℃、恒湿５０〜６０％、光照射１２時間（８：００〜２０：００）、防音、飼料と水は自由摂取として、環境適応のため１週間後に実験を実施した。血糖計はドイツのロシュ社製品である。
方法：健康な雄性Ｃ５７マウス１６０匹、２２−２４ｇを取り、１週間の予備飼育後に実験を実施した。ランダムに１０匹を選択して対照群として、通常飼料を与えた。残りの１５０匹にはＤ１２４９２高脂肪飼料を与えた。飼育してから４週間後、体重によって選別して（対照群と比べ、体重は１５％増加したものを選択）、最終選別は９０匹を得た。空腹時の血糖を測定し、血糖値及び体重の状況に基づき均等に群分けした：（１）雄性Ｃ５７マウス１０匹を正常対照群として、（２）モデル対照群、（３）化合物Ｓ９を０．３ｍｇ／ｋｇ投与、（４）化合物Ｓ９を１ｍｇ／ｋｇ投与、（５）化合物Ｓ９を３ｍｇ／ｋｇ投与、（６）化合物Ｓ２４を０．３ｍｇ／ｋｇ投与、（７）化合物Ｓ２４を１ｍｇ／ｋｇ投与、（８）化合物Ｓ２４を３ｍｇ／ｋｇ投与、（９）ロシグリタゾン１０ｍｇ／ｋｇ、各群１０匹として、４週間続けて投与した。モデル対照群には等量の０．５％のＣＭＣ−Ｎａを与えた。
測定指標：
１）血糖に対する薬剤投与の影響：投与当日（０日目）、７日目、１４日目、２１日目、２８日目に尾尖採血して血糖値を測定した（表１８を参照）。
２）ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）：投与第２５日目にブドウ糖負荷を検査した：動物を絶食して１２時間後に採血（０時）して投与し、且つブドウ糖（２．０ｇ／ｋｇ）を経口投与し、それぞれ４０分後、８０分後、１２０分後に尾尖採血して血糖値を測定した（表１９を参照）。
３）最後の投与後、麻酔で殺処分し、採血して、４℃で３０００ｒｐｍの遠心分離を行い、血清の糖化ヘモグロビン含有量を測定した（表２０を参照）。
４）最後の投与後、麻酔で殺処分し、採血して、４℃で３０００ｒｐｍの遠心分離を行い、血清の総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、トリグリセリド（ＴＧ）、遊離脂肪酸（ＮＥＦＡ）、アラニンアミノ基転移酵素（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノ基転移酵素（ＡＳＴ）を測定した（表２１を参照）。
５）最後の投与後、肝臓を摘出し、ホルマリン中に固定して、組織スライスを観察した。
実験結果は、構造式Ｓ９及びＳ２４に示される化合物が高脂肪飼料誘導の肥満、糖尿病マウスの血糖に有意な作用を有しており、ブドウ糖負荷マウスに対しても有意な低下作用を有することが示された（表１８及び表１９）。

【表18】

【表19】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１

【表20】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１
対照群及びモデル群と比べ、これらの化合物はマウスの血中脂質の状況を有意に改善することができ、マウスの血清のＡＬＴに対しても良好な反転作用が得られ、高脂質血が引き起こす肝障害から保護できることが示されており、結果は表２１を参照されたい。

【表21】

正常群と比較、＃Ｐ＜０．０５、＃＃Ｐ＜０．０１；モデル群と比較、＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１
図４が示すように、解剖時の肝臓に対するおおよその肉眼的観察及び組織の病理スライスのＨＥ染色を合わせると、モデル群マウスの肝細胞内はいずれもサイズの異なる大量の脂肪空砲を有し、脂肪肝が形成されている。しかしながら、化合物Ｓ９及び化合物Ｓ２４群マウスの肝細胞内の脂肪空砲は基本的に消失していることが認められ、化合物Ｓ９及び化合物Ｓ２４の異なる用量群がいずれも糖尿病の合併症による非アルコール性脂肪性肝疾患を有効に治療できることが結果により示された。
[実施例１６]

【0205】

実施例１６、マウスにおける急性毒性試験
１、実験材料
６〜８週齢の雄性昆明種マウス、２０匹、体重２０〜２２ｇ、北京維通利華実験動物技術有限公司から購入。

【0206】

２、実験方法

【0207】

１）化合物の調合

【0208】

Ｓ１３及びＳ２８に示される２つの化合物を正確に秤量し、０．５％のＣＭＣ−Ｎａで濃度０．２ｇ／ｍｌの溶液を調合した。

【0209】

２）動物の群分けと投与

【0210】

マウスを３〜５日間の予備飼育後、実験前日の夜６時から絶食し、水は自由摂取とする。実験時、マウスを体重に従いランダムに群分けし、各群１０匹として、胃内投与し、マウスの体重１０ｇ毎に０．２５ｍｌを投与、即ち投与用量は５ｇ／ｋｇとする。対照群に０．５％のＣＭＣ−Ｎａを、マウスの体重１０ｇ毎に０．２５ｍｌを胃内投与した。体重の状況に基づき均等に群分けした：（１）雄性対照群、（２）雄性Ｓ９を５ｍｇ／ｋｇ投与群、（３）雄性Ｓ２４を５ｍｇ／ｋｇ投与群、（４）雌性対照群、（５）雌性Ｓ９を５ｍｇ／ｋｇ投与群、（６）雌性Ｓ２４を５ｍｇ／ｋｇ投与群、1回投与後4週間観察した。

【0211】

３）評価指標

【0212】

投与後の動物の一般状態を観察し、例えば外観、行動、刺激への反応、分泌物及び排泄物などに異常な現象が生じた時間を記録した。死亡発生の有無を観察し、死亡発生時間を記録、検死し、異常現象の有無を観察した。

【0213】

急性毒性試験において、胃内投与したラット、マウスの毒性グレードをＬＤ₅₀に従い５つのグレードに分ける：ＬＤ₅₀＜１ｍｇ／ｋｇは重度な反応性、ＬＤ₅₀が１〜５０ｍｇ／ｋｇの間は中等度な反応性、ＬＤ₅₀が５１〜５００ｍｇ／ｋｇは軽度な反応性、ＬＤ₅₀が５０１〜５０００ｍｇ／ｋｇの間は軽微な反応性、５０００ｍｇ／ｋｇ以上は反応性なし。

【0214】

３、実験結果

【0215】

投与後、明らかな異常現象はいずれも見られず、Ｓ２８群マウスの体重は若干減少していた。２９日後、マウスを頸椎脱臼で殺処分し、検死したが、明らかな異常現象はいずれも見られなかった。

【0216】

Ｓ９、Ｓ１３、Ｓ２４及びＳ２８に示される化合物のＬＤ₅₀はいずれも５０００ｍｇ／ｋｇより大きくて、且つ検死において明らかな異常はなく、Ｓ９、Ｓ１３、Ｓ２４、Ｓ２８に示される化合物は「反応性なし」に属することが示された。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図1F】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図2F】

【図3】

【図4】