特許 6602907 活性作用物質の送達のための生分解性脂質

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6602907

(24)【登録日】2019年10月18日

(45)【発行日】2019年11月6日

(54)【発明の名称】活性作用物質の送達のための生分解性脂質

(51)【国際特許分類】

   C07D 295/15 20060101AFI20191028BHJP

   C07D 295/088 20060101ALI20191028BHJP

   A61K 47/22 20060101ALN20191028BHJP

【ＦＩ】

   C07D295/15CSP

   C07D295/088

   !A61K47/22

【請求項の数】2

【外国語出願】

【全頁数】189

(21)【出願番号】特願2018-39568(P2018-39568)

(22)【出願日】2018年3月6日

(62)【分割の表示】特願2014-546124(P2014-546124)の分割

【原出願日】2012年12月7日

(65)【公開番号】特開2018-111707(P2018-111707A)

(43)【公開日】2018年7月19日

【審査請求日】2018年3月13日

(31)【優先権主張番号】61/568,133

(32)【優先日】2011年12月7日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】61/623,274

(32)【優先日】2012年4月12日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】511112478

【氏名又は名称】アルニラム・ファーマシューティカルズ・インコーポレーテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】マーティン・メイアー

(72)【発明者】

【氏名】ムトゥサミー・ジャヤラマン

(72)【発明者】

【氏名】アキン・アキンク

(72)【発明者】

【氏名】松田 成夫

(72)【発明者】

【氏名】パチャムトゥ・カダサミ

(72)【発明者】

【氏名】カラントッタティル・ジー・ラジーヴ

(72)【発明者】

【氏名】ムティアー・マノハラン

【審査官】 安藤 倫世

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１１／１５３４９３（ＷＯ，Ａ２）

【文献】 特許第６３０５３４４（ＪＰ，Ｂ２）

【文献】 特開２０１８−０８７２５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１５−５０５８３８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１１／１４１７０３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／１４１７０４（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／１４１７０５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／０００１０６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／０００１０７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／０５４４０１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／１３６３６９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００９−５０１６９９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１０−５０５８７３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開昭６０−２１５６９３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００７−２３０７８９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第９５／０２８１４６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開平０５−２８６８２４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 CHESNOY S，STRUCTURE AND FUNCTION OF LIPID-DNA COMPLEXES FOR GENE DELIVERY，ANNUAL REVIEW OF BIOPHYSICS AND BIOMOLECULAR STRUCTURE，米国，ANNUAL REVIEWS INC.，２０００年 １月 １日，V29，P27-47

【文献】 Chemistry and Physics of Lipids，１９８６年，39，221-236

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｃ

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

の化合物、又はその塩であって、式中
Ｒ’は存在せず；
Ｒ^１及びＲ^２は、これらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された複素環を形成し；
Ｒは、各存在において、独立して、−（ＣＲ^３Ｒ^４）−であり、
Ｒ^３及びＲ^４は、各存在において、独立して、Ｈであり；
Ｑへの前記点線は、存在せず；
Ｑは−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^４）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−又は−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ^５は、各存在において、独立して、Ｈ又はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；
Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ、独立して、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル）から選択される生分解性基であり；
Ｒ^ｚは、各存在において、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキルであり；
ａは、１、２、３、４、５又は６であり；
ｂは、０、１、２、又は３であり；
Ｌ^１及びＬ^２は、それぞれ、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン又はＣ_２〜Ｃ_５アルケニレンであり；
Ｘ及びＹは、それぞれ、独立して、Ｃ_４〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_４〜Ｃ_２０アルケニレンであり；並びに
Ｚ^１及びＺ^２は、それぞれ、独立して、Ｃ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルであり、前記Ｃ_８〜Ｃ_１４アルケニル基は、二重結合に隣接する炭素原子において１つ又は２つのフッ素原子で任意に置換されてもよく、前記炭素原子が、前記二重結合と前記Ｚ^１又はＺ^２の末端との間にある、化合物、又はその塩。

【請求項2】

式

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

の化合物、又はその塩であって、式中
Ｒ’は存在せず；
Ｒ^１及びＲ^２は、これらが結合している窒素原子と一緒に、任意選択で置換された複素環を形成し；
Ｒは、各存在において、独立して、−（ＣＲ^３Ｒ^４）−であり、
Ｒ^３及びＲ^４は、各存在において、独立して、Ｈであり；
Ｑへの前記点線は、存在せず；
Ｑは−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^４）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−又は−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ^５は、各存在において、独立して、Ｈ又はＣ_１〜Ｃ_４アルキルであり；
Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ、独立して、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル）から選択される生分解性基であり；
ａは、１、２、３、４、５又は６であり；
ｂは、０、１、２、又は３であり；
Ｌ^１及びＬ^２は、それぞれ、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン又はＣ_２〜Ｃ_５アルケニレンであり；
Ｘ及びＹは、それぞれ、独立して、アルキレン又はアルケニレンであり；並びに
Ｚは、各存在において、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキルである、化合物又はその塩。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、双方ともに参照により本明細書に組み込まれている、２０１１年１２月７日に出願された米国仮特許出願第６１／５６８，１３３号明細書、及び２０１２年４月１２日に出願された米国仮特許出願第６１／６２３，２７４号明細書の利益を主張するものである。

【0002】

本発明は、生分解性脂質及び核酸などの活性作用物質の送達のためのそれらの用途に関する。

【背景技術】

【0003】

治療用核酸としては、短鎖干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、プラスミド、免疫刺激性核酸、アンチセンス、アンタゴｍｉｒ、アンチｍｉｒ、マイクロＲＮＡ模倣体、スーパーｍｉｒ、Ｕ１アダプタ、及びアプタマーが挙げられる。ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡの場合、これら核酸は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）と呼ばれるプロセスを通して、特定のタンパク質の細胞内レベルを下方制御することが可能である。ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡ構築物が、標的タンパク質に対するあらゆるヌクレオチド配列で合成され得るために、ＲＮＡｉの治療的用途は非常に広範である。現在までに、ｓｉＲＮＡ構築物は、インビトロ及びインビボモデルの双方で標的タンパク質を特異的に下方制御するための能力を示してきた。加えて、ｓｉＲＮＡ構築物は、臨床試験で現在評価を受けている。

【0004】

しかしながら、ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡ構築物が現在直面している２つの問題は、第１に、血漿中のヌクレアーゼ消化に対するこれらの感受性であり、第２に、遊離ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡとして全身投与される場合、これらがタンパク質ＲＩＳＣに結合することができる場所である細胞内コンパートメントに到達するためのこれらの限定された能力である。コレステロール及びＰＥＧ脂質などの他の脂質、並びにオリゴヌクレオチド（ｓｉＲＮＡ及びｍｉＲＮＡなど）を含むカチオン性脂質から形成される脂質ナノ粒子は、オリゴヌクレオチドの細胞内取込を容易にするために使用されてきた。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

オリゴヌクレオチドの送達のために、改善されたカチオン性脂質及び脂質ナノ粒子が望まれている。好ましくは、これら脂質ナノ粒子は、高い薬剤：脂質比を提供し、血清中の分解及びクリアランスから核酸を保護し、全身送達に好適であり、並びに核酸の細胞内送達を提供するであろう。加えて、これら脂質−核酸粒子は、核酸の有効量における患者の治療が患者に対する重大な毒性及び／又はリスクに関連しないように、忍容性が高く、適切な治療指数をもたらさねばならない。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明は、核酸−脂質粒子を形成するために好適なカチオン性脂質及びＰＥＧ脂質に関する。本発明のカチオン性脂質及びＰＥＧ脂質のそれぞれは、１つ以上の生分解性基を含む。この生分解性基は、カチオン性又はＰＥＧ脂質の脂質部分（例えば、疎水性鎖）内に位置する。これらカチオン性及びＰＥＧ脂質は、核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ）などの活性作用物質を送達するために、脂質粒子に組み込まれることが可能である。生分解性基の脂質への組み込みは、標的領域への活性作用物質の送達後に、より迅速な代謝及び体内からの脂質の除去をもたらす。結果として、これら脂質は、生分解性基を有しない類似の脂質よりも低い毒性を有する。

【0007】

一実施形態において、このカチオン性脂質は、式（Ｉ）の化合物又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、生分解性基に隣接するアルファ位で（生分解性基と第三級炭素との間に）分岐アルキルを有する：

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

式中、
Ｒ’は存在しないか、水素、又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）であり、
Ｒ^１及びＲ^２については、
（ｉ）Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ、独立して、任意選択で置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキルアルキル、複素環、又はＲ^１０であるか；
（ｉｉ）Ｒ^１及びＲ^２は、これらが結合している窒素原子と一緒に任意選択で置換された複素環を形成するか；又は
（ｉｉｉ）Ｒ^１及びＲ^２の一方は、任意選択で置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、又は複素環であり、他方は、（ａ）隣接する窒素原子及び（ｂ）窒素原子に隣接する（Ｒ）_ａ基と共に４〜１０員の複素環又はヘテロアリール（例えば、６員環）を形成し；
Ｒは、各存在において、独立して、−（ＣＲ^３Ｒ^４）−であり；
Ｒ^３及びＲ^４は、各存在において、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、アルキル、アルコキシ、−ＮＨ_２、Ｒ^１０、アルキルアミノ、又はジアルキルアミノ（１つの好ましい実施形態においては、Ｒ^３及びＲ^４は、各存在において、独立してＨ又はＣ_１〜Ｃ_４アルキルである）であり；
Ｒ^１０は、各存在において、独立して、ＰＥＧ及びポリ（オキサゾリン）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（グリセロール）、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］及びポリ（アミノ酸）類に基づくポリマー類から選択され、ここで、
（ｉ）ＰＥＧ又はポリマーは、直鎖又は分岐鎖であり、（ｉｉ）ＰＥＧ又はポリマーは、ｎ個のサブユニットで重合され、（ｉｉｉ）ｎは、１０〜２００ユニットの数平均重合度であり、並びに（ｉｖ）式の化合物は最大で２個のＲ^１０基（好ましくは、最大で１個のＲ^１０基）を有し；
Ｑへの点線は、存在しないか又は結合であり；
Ｑへの点線が存在しない場合、Ｑは存在しないか又は−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^４）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−又は−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−であり；又は
Ｑへの点線が結合である場合、（ｉ）ｂは０であり、及び（ｉｉ）Ｑ及びこれに隣接する第三級炭素（Ｃ^＊）は、５〜１０個の環原子を有する置換又は非置換の、一環式又は二環式複素環式基（例えば、複素環式基中のヘテロ原子は、Ｏ及びＳから選択され、好ましくはＯである）を形成し；
Ｒ^５は、各存在において、独立して、Ｈ又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）であり；
Ｘ及びＹは、それぞれ、独立して、アルキレン又はアルケニレン（例えば、Ｃ_４〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_４〜Ｃ_２０アルケニレン）であり；
Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ、独立して、生分解性基（例えば、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル））であり；
Ｒ^ｚは、各存在において、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル（例えば、メチル、エチル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、又はｎ−ヘキシル）であり；
ａは、１、２、３、４、５又は６であり；
ｂは、０、１、２、又は３であり；並びに
Ｚ^１及びＺ^２は、それぞれ、独立して、Ｃ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルであり、このアルケニル基は、任意選択で、二重結合とＺ^１又はＺ^２の末端との間にある、二重結合に対してアルファ位の１つ又は２つのフッ素原子で置換されてもよい（例えば、

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

）。

【0008】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0009】

一実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は、双方ともアルキル（例えば、メチル）である。

【0010】

他の実施形態において、ａは３である。別の実施形態において、ｂは０である。

【0011】

他の実施形態において、ａは３であり、ｂは０であり、並びにＲは−ＣＨ_２−である。更に他の実施形態において、ａは３であり、ｂは０であり、Ｒは−ＣＨ_２−であり、並びにＱは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。別の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２はメチルであり、ａは３であり、ｂは０であり、Ｒは−ＣＨ_２−であり、並びにＱは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。

【0012】

別の実施形態において、Ｘ及びＹは、それぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_６−である。別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。

【0013】

他の実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ、独立して、−ＯＣ（Ｏ）−又は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。例えば、一実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。

【0014】

別の実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＩＩ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、生分解性基に対してアルファ位で（生分解性基とテールの末端、すなわち、Ｚ^１又はＺ^２との間で）分岐アルキルを有する：

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

式中、
Ｒ’は存在しないか、水素、又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）であり、
Ｒ^１及びＲ^２については、
（ｉ）Ｒ^１及びＲ^２は、それぞれ、独立して、任意選択で置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキルアルキル、複素環、又はＲ^１０であるか；
（ｉｉ）Ｒ^１及びＲ^２は、これらが結合している窒素原子と一緒に任意選択で置換された複素環を形成するか；又は
（ｉｉｉ）Ｒ^１及びＲ^２の一方は、任意選択で置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、又は複素環であり、他方は、（ａ）隣接する窒素原子及び（ｂ）窒素原子に隣接する（Ｒ）_ａ基と共に４〜１０員の複素環又はヘテロアリール（例えば、６員環）を形成し；
Ｒは、各存在において、独立して、−（ＣＲ^３Ｒ^４）−であり、
Ｒ^３及びＲ^４は、各存在において、独立して、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、アルキル、アルコキシ、−ＮＨ_２、Ｒ^１０、アルキルアミノ、又はジアルキルアミノ（１つの好ましい実施形態においては、Ｒ^３及びＲ^４のそれぞれは、独立してＨ又はＣ_１〜Ｃ_４アルキルである）であり；
Ｒ^１０は、各存在において、独立して、ＰＥＧ及びポリ（オキサゾリン）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（グリセロール）、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ［Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド］及びポリ（アミノ酸）類に基づくポリマー類から選択され、ここで、
（ｉ）ＰＥＧ又はポリマーは、直鎖又は分岐鎖であり、（ｉｉ）ＰＥＧ又はポリマーは、ｎ個のサブユニットで重合され、（ｉｉｉ）ｎは、１０〜２００ユニットの数平均重合度であり、並びに（ｉｖ）式の化合物は最大で２個のＲ^１０基（好ましくは、最大で１個のＲ^１０基）を有し；
Ｑへの点線は、存在しないか又は結合であり；
Ｑへの点線が存在しない場合、Ｑは存在しないか又は−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^４）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−又は−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−であり；又は
Ｑへの点線が結合である場合、（ｉ）ｂは０であり、及び（ｉｉ）Ｑ及びこれに隣接する第三級炭素（Ｃ^＊）は、５〜１０個の環原子を有する置換又は非置換の、一環式又は二環式複素環式基（例えば、複素環式基中のヘテロ原子は、Ｏ及びＳから選択され、好ましくはＯである）を形成し；
Ｒ^５は、各存在において、独立して、Ｈ又はアルキルであり；
Ｘ及びＹは、それぞれ、独立して、アルキレン（例えば、Ｃ_６〜Ｃ_８アルキレン）又はアルケニレンであり、このアルキレン又はアルケニレン基は、Ｍ^１又はＭ^２基に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されており（例えば、

【化5】

[この文献は図面を表示できません]

であり）；
Ｍ^１及びＭ^２は、それぞれ、独立して、生分解性基（−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化6】

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（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル））であり；
Ｒ^ｚは、各存在において、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル（例えば、メチル、エチル、イソプロピル）であり；
ａは、１、２、３、４、５又は６であり；
ｂは、０、１、２、又は３であり；並びに
Ｚ^１及びＺ^２は、それぞれ、独立して、Ｃ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルであり、（ｉ）アルケニル基は、任意選択で、二重結合とＺ^１又はＺ^２の末端との間にある、二重結合に対してアルファ位の１つ又は２つのフッ素原子で置換されてもよく（例えば、

【化7】

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であり）及び（ｉｉ）Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つの末端は、少なくとも８個の炭素原子でＭ^１又はＭ^２から離隔されている。

【0015】

別の実施形態において、Ｘ及びＹは、それぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_６−である。別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。

【0016】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0017】

別の実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＩＩＩ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、生分解性基に隣接する２〜６個の炭素原子である位置で（すなわち、ベータ（β）、ガンマ（γ）、デルタ（δ）、イプシロン（ε）又はゼータ位（ζ））（生分解性基とテールの末端、すなわちＺ^１又はＺ^２の間）分岐点を有する：

【化8】

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式中、
Ｒ’、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^１０、Ｑ、Ｒ^５、Ｍ^１、Ｍ^２、Ｒ^ｚ、ａ、及びｂは、式（Ｉ）のように定義され；
Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン又はＣ_２〜Ｃ_５アルケニレンであり；
Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、アルキレン（例えば、Ｃ_４〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_６〜Ｃ_８アルキレン）又はアルケニレン（例えば、Ｃ_４〜Ｃ_２０アルケニレン）であり；並びに
Ｚ^１及びＺ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルであり、このアルケニル基は、二重結合とＺ^１又はＺ^２との間である二重結合に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されてもよく（例えば、

【化9】

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であり）、但し、Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つの末端は、少なくとも８個の炭素原子によって基Ｍ^１又はＭ^２から離隔されている。

【0018】

一実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−ＣＨ_２−である。別の実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−（ＣＨ_２）_２−である。一実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−（ＣＨ_２）_３−である。更に別の実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−（ＣＨ_２）_４−である。更に別の実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−（ＣＨ_２）_５−である。更に別の実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−である。好ましい実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−ＣＨ_２−又は−（ＣＨ_２）_２−である。

【0019】

一実施形態において、Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。別の例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。更に別の例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。

【0020】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0021】

別の実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＩＩＩＡ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、生分解性基Ｍ^１及びＭ^２から２〜６個の炭素原子である位置で（すなわち、ベータ（β）、ガンマ（γ）、デルタ（δ）、イプシロン（ε）又はゼータ位（ζ））（すなわち、生分解性基とテールの末端、すなわちＺ^１又はＺ^２の間）分岐点を有する。

【化10】

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式中、
Ｒ’、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^１０、Ｑ、Ｒ^５、Ｍ^１、Ｍ^２、ａ、及びｂは、式（Ｉ）のように定義され；
各Ｒ^ｚは、独立してＣ_１〜Ｃ_８アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６アルキル又はＣ_２〜Ｃ_３アルキル）であり；
Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン（例えば、Ｃ_２〜Ｃ_３アルキレン）又はＣ_２〜Ｃ_５アルケニレンであり；
Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、アルキレン（例えば、Ｃ_４〜Ｃ_２０アルキレ又はＣ_７〜Ｃ_９アルキレン）又はアルケニレン（例えば、Ｃ_４〜Ｃ_２０アルケニレン又はＣ_７〜Ｃ_９アルケニレン）であり；並びに
Ｚ^１及びＺ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_８アルキル（例えば、Ｃ_１、Ｃ_３又はＣ_５アルキルなどのＣ_１〜Ｃ_６アルキル）又はＣ_２〜Ｃ_８アルケニル（Ｃ_２〜Ｃ_６アルケニルなど）であり；
カチオン性該脂質は、

【化11】

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から選択されるものではない。

【0022】

一実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−（ＣＨ_２）_２−である。別の実施形態において、Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ−（ＣＨ_２）_３−である。

【0023】

一実施形態において、Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、４〜１２又は７〜９である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。更に別の例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９である。

【0024】

１つの好ましい実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である（ここでＭ^１及びＭ^２中のカルボニル基は、可変基Ｘに結合し、Ｍ^１及びＭ^２中の酸素原子は可変基Ｌ^１及びＬ^２に結合する）。

【0025】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0026】

１つの好ましい実施形態において、Ｚ^１及びＺ^２は、分岐鎖アルキル又は分岐鎖アルケニル基である。

【0027】

式（ＩＩＩＡ）の一実施形態において、Ｚ^１、Ｚ^２、及び各Ｒ^ｚは、Ｃ_３〜Ｃ_８アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_６アルキルなど）である。式（ＩＩＩＡ）の別の実施形態において、Ｚ^１、Ｚ^２、及び各Ｒ^ｚは、Ｃ_３〜Ｃ_８分岐鎖アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_６分岐鎖アルキルなど）である。式（ＩＩＩＡ）の更に別の実施形態において、Ｚ^１、Ｚ^２、及び各Ｒ^ｚは、Ｃ_３〜Ｃ_８直鎖アルキル（Ｃ_３〜Ｃ_６直鎖アルキルなど）である。

【0028】

式（ＩＩＩＡ）の一実施形態において、分岐点は、各テール内の生分解性基Ｍ^１及びＭ^２から第２位（β位）にある。Ｚ^１、Ｚ^２、及び各Ｒ^ｚは、Ｃ_３〜Ｃ_８分岐鎖アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６分岐鎖アルキル）又はＣ_３〜Ｃ_８直鎖アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６直鎖アルキル）などのＣ_３〜Ｃ_８アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６アルキル）である。１つの好ましい実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である（ここでＭ^１及びＭ^２中のカルボニル基は、可変基Ｘに結合し、Ｍ^１及びＭ^２中の酸素原子は可変基Ｌ^１及び／又はＬ^２に結合する）。

【0029】

式（ＩＩＩＡ）の一実施形態において、分岐点は、各テール内の生分解性基Ｍ^１及びＭ^２から第３位（γ位）にある。Ｚ^１、Ｚ^２、及び各Ｒ^ｚは、Ｃ_３〜Ｃ_８分岐鎖アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６分岐鎖アルキル）又はＣ_３〜Ｃ_８直鎖アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６直鎖アルキル）などのＣ_３〜Ｃ_８アルキル（例えば、Ｃ_３〜Ｃ_６アルキル）である。１つの好ましい実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である（ここでＭ^１及びＭ^２中のカルボニル基は、可変基Ｘに結合し、Ｍ^１及びＭ^２中の酸素原子は可変基Ｌ^１及び／又はＬ^２に結合する）。

【0030】

式（ＩＩＩＡ）の一実施形態において、分岐点は、各テール内の生分解性基Ｍ^１及びＭ^２から第３位（γ位）にある。

【0031】

式（ＩＩＩＡ）の別の実施形態において、Ｍ^１及び／又はＭ^２は、−Ｏ（Ｃ（Ｏ）−ではない（ここでＭ^１及び／又はＭ^２中の酸素原子は、可変基Ｘに結合し、Ｍ^１及び／又はＭ^２中のカルボニルは可変基Ｌ^１及び／又はＬ^２に結合する）。式（ＩＩＩＡ）の更に別の実施形態において、Ｚ^１、Ｚ^２、及び各Ｒ^ｚは、Ｃ_３〜Ｃ_１０シクロアルキル（Ｃ_１〜Ｃ_６アルキル）ではない。

【0032】

別の実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＩＶ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、生分解性基に隣接する２〜６個の炭素原子にある位置で（すなわち、ベータ（β）、ガンマ（γ）、デルタ（δ）、イプシロン（ε）又はゼータ位（ζ））（生分解性基とテールの末端、すなわちＺ^１又はＺ^２の間）分岐点を有する：

【化12】

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式中、
Ｒ’、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^１０、Ｑ、Ｒ^５、Ｍ^１、Ｍ^２、Ｒ^ｚ、ａ、及びｂは、式（Ｉ）のように定義され；
Ｌ^１及びＬ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_５アルキレン又はＣ_２〜Ｃ_５アルケニレンであり；
Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、アルキレン又はアルケニレン（例えば、Ｃ_１２〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_１２〜Ｃ_２０アルケニレン）であり；並びに
Ｚは、各存在において、独立して、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル（好ましくは、メチル）である。

【0033】

例えば、一実施形態において、−Ｌ^１−Ｃ（Ｚ）_３は、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３である。別の実施形態において、−Ｌ^１−Ｃ（Ｚ）_３は、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３である。

【0034】

一実施形態において、各テール（例えば、−Ｘ−Ｍ^１−Ｌ^１−Ｃ（Ｚ）_３又は−Ｙ−Ｍ^２−Ｌ^２−Ｃ（Ｚ）_３）の総炭素含量は、約１７〜約２６である。例えば、総炭素含量は、約１９〜約２６又は約２１〜約２６である。

【0035】

別の実施形態において、Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。一実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_６−である。別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。

【0036】

一実施形態において、カチオン性脂質は、式（Ｖ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、少なくとも１つのテールでアルコキシ又はチオアルコキシ（すなわち、−Ｓ−アルキル）基置換を有する：

【化13】

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式中、
Ｒ’、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^１０、Ｑ、Ｒ^５、Ｍ^１、Ｍ^２、ａ、及びｂは、式（Ｉ）のように定義され；
Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、アルキレン（例えば、Ｃ_６〜Ｃ_８アルキレン）又はアルケニレンであり、このアルキレン又はアルケニレン基は、Ｍ^１又はＭ^２基に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されていて（例えば、

【化14】

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であり）；
Ｚ^１及びＺ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルであり、ここで（ｉ）Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つのＣ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルは、１つ以上のアルコキシ（例えば、−ＯＣＨ_３などのＣ_１〜Ｃ_４アルコキシ）又はチオアルコキシ（−ＳＣＨ_３などのＣ_１〜Ｃ_４チオアルコキシ）基で置換され、並びに（ｉｉ）このアルケニル基は、二重結合とＺ^１又はＺ^２の末端との間にある二重結合に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されてもよい（例えば、

【化15】

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である）。

【0037】

一実施形態において、Ｚ^１及び／又はＺ^２上のアルコキシ置換は、Ｍ^１及び／又はＭ^２基からベータ位にある。

【0038】

別の実施形態において、Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_６−である。別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。

【0039】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0040】

一実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＶＩＡ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、二重結合に対してアルファ又は生分解性基に対してアルファのいずれかである位置で少なくとも１つのテール上で１つ以上のフルオロ置換基を有する：

【化16】

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式中、
Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、ａ、及びｂは、式（Ｉ）に関して定義された通りであり；
Ｑは、存在しないか、又は−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^４）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−又は−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−であり；
Ｒ’は存在しないか、水素、又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）であり；並びに
Ｒ^９及びＲ^１０のそれぞれは、独立して、（ａ）１つ以上の生分解性基を有する、並びに（ｂ）（ｉ）生分解性基に対してアルファであり、生分解性基と星印（^＊）をつけた第三級炭素原子との間の位置、又は（ｉｉ）炭素−炭素二重結合に対してアルファであり、二重結合とＲ^９又はＲ^１０基の末端との間の位置で、１つ以上のフッ素原子で任意選択で置換された、Ｃ_１２〜Ｃ_２４アルキル（例えば、Ｃ_１２〜Ｃ_２０アルキル）、Ｃ_１２〜Ｃ_２４アルケニル（例えば、Ｃ_１２〜Ｃ_２０アルケニル）、又はＣ_１２〜Ｃ_２４アルコキシ（例えば、Ｃ_１２〜Ｃ_２０アルコキシ）であり；各生分解性基は、独立してＣ_１２〜Ｃ_２４アルキル、アルケニル、又はアルコキシ基に割り込むか、又はＣ_１２〜Ｃ_２４アルキル、アルケニル、又はアルコキシ基の末端で置換されていて；
ここでは、
（ｉ）Ｒ^９及びＲ^１０の少なくとも１つがフルオロ基を含有し；
（ｉｉ）この化合物は以下の部分を含有せず：

【化17】

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式中、――――は任意の結合であり；並びに
（ｉｉｉ）Ｒ^９及びＲ^１０の末端は、８個以上の原子（例えば、１２個又は１４個以上の原子）の鎖によって、星印（^＊）をつけた第三級炭素原子から離隔されている。

【0041】

１つの好ましい実施形態において、Ｒ^９及びＲ^１０の末端は、１８〜２２個の炭素原子（例えば、１８〜２０個の炭素原子）の鎖によって、星印（^＊）をつけた第三級炭素原子から離隔されている。

【0042】

別の実施形態において、Ｒ^９及び／又はＲ^１０の末端は、式−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＦ_３を有する。

【0043】

別の実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＶＩＢ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、二重結合に対してアルファ又は生分解性基に対してアルファのいずれかである位置で少なくとも１つのテール上で１つ以上のフルオロ置換基を有する：

【化18】

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式中、
Ｒ’、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^１０、Ｑ、Ｒ^５、Ｍ^１、Ｍ^２、ａ、及びｂは、式（Ｉ）のように定義され；
Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、アルキレン（例えば、Ｃ_６〜Ｃ_８アルキレン）又はアルケニレンであり、このアルキレン又はアルケニレン基は、Ｍ^１又はＭ^２基に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されていて（例えば、

【化19】

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であり）；
Ｚ^１及びＺ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_８〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_８〜Ｃ_１４アルケニルであり、ここで該Ｃ_８〜Ｃ_１４アルケニルは、二重結合に対してアルファ位で１つ以上のフッ素原子で任意選択で置換されていて（例えば、

【化20】

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であり）、
Ｘ、Ｙ、Ｚ^１、及びＺ^２の少なくとも１つは、フッ素原子を含有する。

【0044】

一実施形態において、Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つは、二重結合に対してアルファ又は生分解性基に対してアルファのいずれかである位置で２つのフルオロ基によって置換されている。一実施形態において、Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つは、生分解性基に対してアルファである位置で末端−ＣＦ_３基を有する（すなわち、Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つが−Ｃ（Ｏ）ＯＣＦ_３基で終端する）。

【0045】

例えば、Ｚ^１及びＺ^２の少なくとも１つは、以下の部分の１つ以上を含んでもよい。

【化21】

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【0046】

一実施形態において、Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。別の例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。

【0047】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0048】

一実施形態において、カチオン性脂質は、式（ＶＩＩ）の化合物、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、これは、少なくとも１つのテール内の生分解性基としてアセタール基を有する：

【化22】

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式中、
Ｒ’、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^１０、Ｑ、Ｒ^５、ａ、及びｂは、式（Ｉ）のように定義され；
Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、アルキレン（例えば、Ｃ_６〜Ｃ_８アルキレン）又はアルケニレンであり、このアルキレン又はアルケニレン基は、Ｍ^１又はＭ^２基に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されていて（例えば、

【化23】

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であり）；
Ｍ^１及びＭ^２はそれぞれ、独立して、生分解性基（例えば、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化24】

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であり、（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_４〜Ｃ_１０アルキル又はＣ_４〜Ｃ_１０アルケニル））であり；
但し、Ｍ^１及びＭ^２の少なくとも１つは、

【化25】

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であり；並びに
Ｚ^１及びＺ^２はそれぞれ、独立して、Ｃ_４〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_４〜Ｃ_１４アルケニルであり、ここで、このアルケニル基は、二重結合とＺ^１又はＺ^２の末端との間にある二重結合に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で任意選択で置換されてもよい（例えば、

【化26】

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である）。

【0049】

一実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２のそれぞれは、

【化27】

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である。

【0050】

別の実施形態において、Ｘ及びＹはそれぞれ、独立して、−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、式中ｎは４〜２０、例えば、４〜１８、４〜１６、又は４〜１２である。一実施形態において、ｎは、４、５、６、７、８、９、又は１０である。１つの例示的な実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_６−である。別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_７−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_９−である。更に別の実施形態において、Ｘ及びＹは、−（ＣＨ_２）_８−である。

【0051】

Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−基は、以下の表１に示しているもの、及びそれらの塩を含める、本明細書に記載されているヘッド基のいずれかであり得る。１つの好ましい実施形態において、Ｒ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−（Ｒ）_ｂ−は、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_２−ＯＣ（Ｏ）−ＮＨ−、又は（ＣＨ_３）_２Ｎ−（ＣＨ_２）_３−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｎ−Ｏ−である。

【0052】

別の実施形態において、本発明は、
（ｉ）中心の炭素原子と、
（ｉｉ）中心炭素原子に直接結合した窒素含有ヘッド基と、
（ｉｉｉ）中心炭素原子に直接結合した２つの疎水性テール［各疎水性テールは、式−Ｒ^ｅ−Ｍ−Ｒ^ｆである｛式中、Ｒ^ｅはＣ_４〜Ｃ_１４アルキル又はアルケニルであり、Ｍは生分解性基であり、並びにＲ^ｆは、分岐鎖アルキル又はアルケニル（例えば、Ｃ_１０〜Ｃ_２０アルキル又はＣ_１０〜Ｃ_２０アルケニル）であり、これによって、（ｉ）−Ｒ^ｅ−Ｍ−Ｒ^ｆの鎖長さは最大で２０個の原子であり（すなわち、中心炭素原子の後ろの最初の炭素原子からテールの末端までのテールの全長は最大で２０である）、並びに（ｉｉ）基−Ｒ^ｅ−Ｍ−Ｒ^ｆは、少なくとも２０個の炭素原子を有する（例えば、少なくとも２１個の原子）を有する｝］と、を有するカチオン性脂質又はその塩に関する。任意選択で、Ｒ^ｅ中のアルキル又はアルケニル基は、Ｍ^１又はＭ^２に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で置換されてもよい（例えば、

【化28】

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である）。更に、任意選択で、Ｒ^ｆ中のアルケニル基は、二重結合とＲ^ｆの末端との間にある二重結合に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で置換されてもよい（例えば、

【化29】

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である）。

【0053】

一実施形態において、本発明のカチオン性脂質（式Ｉ〜ＶＩＩなどの）は、非対称疎水性基（すなわち、異なる化学式を有する２つの疎水性基）を有する。例えば、カチオン性脂質は式

【化30】

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を有するか、又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、
式中、
Ｇは、分岐した又は分岐していないＣ_３〜Ｃ_１５アルキル、アルケニル又はアルキニル（例えば、ｎ−Ｃ_８アルキル、ｎ−Ｃ_９アルキル、又はｎ−Ｃ_１０アルキル）であり；
Ｒ^１２は、分岐した又は分岐していないアルキレン又はアルケニレン（例えば、Ｃ_１２〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_１２〜Ｃ_２０アルケニレンなどのＣ_６〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_６〜Ｃ_２０アルケニレン）であり；
Ｍ_１は、生分解性基（例えば、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化31】

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であり（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル））；
Ｒ^３及びＲ^４は、式（Ｉ）のように定義され；
Ｒ^５は、各存在において、独立して、Ｈ又はアルキル（例えばＣ_１〜Ｃ_４アルキル）であり；
Ｒ^１３は、分岐した又は分岐していないＣ_３〜Ｃ_１５アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；

【化32】

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は約４〜約１３、より好ましくは約５〜約８（例えば、約５〜約７、約５〜約６．５、約５．５〜約６．５、又は約６〜約６．５）のｐＫ_ａを有するプロトン化可能な基を含む。

【0054】

一実施形態において、第一級基は、（ｉ）ヘッド基と、（ｉｉ）両疎水性テールが直接結合している中心部分（例えば、中心炭素原子）とを含む。代表的な中心部分としては、中心炭素原子、中心窒素原子、中心炭素環式基、中心アリール基、中心複素環式基（例えば、中心テトラヒドロフラニル基又は中心ピロリジニル基）及び中心ヘテロアリール基が挙げられるが、これらに限定されない。

【0055】

代表的な

【化33】

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は、限定されないが、

【化34】

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が挙げられ；式中、ｎは０〜６である。

【0056】

代表的な非対称カチオン性脂質としては、

【化35】

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が挙げられ、式中、ｗは０、１、２、又は３であり；並びにｘ及びｙは、それぞれ独立して、１、２、３、４、５、６、又は７である。

【0057】

前述の生分解性カチオン性脂質の好ましい実施形態において、生分解性カチオン性脂質は、少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値（Ｓｌｏｖｅｎｓｋｙ Ｇｒｏｂ、スロバキア共和国のＭｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ Ｃｈｅｍｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓからｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｌｏｇｐ．ｈｔｍｌで入手可能なソフトウェアによって計算された）を有する。より好ましくは、このｌｏｇＰ値は、少なくとも１０．２又は１０．３である。

【0058】

前述の生分解性カチオン性脂質の別の好ましい実施形態において、脂質ナノ粒子中の生分解性カチオン性脂質は、少なくとも１．４のこれ以降ｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌと呼ばれる、ＨＰＬＣ保持時間（脂質ナノ粒子中のコレステロールの保持時間と対比した）を有する。（ＨＰＬＣパラメータは、以下の実施例で提供されている。特に断らない限り、脂質ナノ粒子の配合組成は、実施例３１に記載されているものである）。より好ましくは、ｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌ値は、少なくとも１．７５、２．０、又は２．２５である。

【0059】

別の実施形態において、本発明の生分解性カチオン性脂質は、

【化36】

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【化37】

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（式中、ｍ及びｎは整数であり、並びにｍ＋ｎ＝１３である）

【化38】

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（式中、ｍ及びｎは整数であり、並びにｍ＋ｎ＝１３である）

【化39】

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（式中、ｍ及びｎは整数であり、並びにｍ＋ｎ＝１３である）

【化40】

[この文献は図面を表示できません]

（式中、ｍ及びｎは整数であり、並びにｍ＋ｎ＝１３である）
から選択されるものではない。

【0060】

更に別の実施形態において、この生分解性カチオン性脂質は、双方ともに参照により本明細書に組み込まれている、国際公開第２０１１／１５３４９３号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１２／００２７８０３号明細書で開示されているものから選択されるものではない。

【0061】

更に別の実施形態は、（ｉ）少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値及び／又は少なくとも１．４のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌと、（２）カチオン性脂質の脂質部分（例えば、疎水性鎖）の中間又は遠位セクションで位置する１つ以上の生分解性基（エステル基など）とを有する生分解性カチオン性脂質であり、但し、この化合物は、

【化41】

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から選択されない。

【0062】

別の実施形態において、生分解性脂質は、双方ともに参照により本明細書に組み込まれている、国際公開第２０１１／１５３４９３号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１２／００２７８０３号明細書で開示されているものから選択されない。カチオン性脂質への生分解性基の組み込みは、標的領域への活性医薬成分の送達後に、カチオン性脂質のより迅速な代謝及び体内からの除去をもたらす。好ましい実施形態において、カチオン性脂質は、その生分解性基中に分岐鎖アルキル又は分岐鎖アルケニル基を含む。別の好ましい実施形態において、このカチオン性脂質は、少なくとも１０．２又は１０．３のｌｏｇＰを有する。更に別の好ましい実施形態において、このカチオン性脂質は、少なくとも１．７５、２．０、又は２．２５のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌを有する。このカチオン性脂質は、約４〜約７（６．０〜６．５など）のｐＫａを有する。

【0063】

一実施形態において、少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値及び／又は少なくとも１．４のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌを有するカチオン性脂質は、（ａ）ヘッド基（好ましくは、本明細書に記載されているヘッド基などの窒素含有ヘッド基）と、（ｂ）それぞれが式−（疎水性鎖）−（生分解性基）−（疎水性鎖）である、少なくとも２つの疎水性テールと、（ｃ）ヘッド基及び疎水性テールに結合するリンカー基（例えば、単一の中心炭素原子）と、を含む。このカチオン性脂質は、以下に列挙された特性の１つ、２つ、３つ、４つ又はそれ以上を有することが好ましい：
（ｉ）約４〜約７（６．０〜６．５など）のｐＫａを有すること；
（ｉｉ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）において、この生分解性基が約６〜約１２個の炭素原子（例えば、６〜８個の炭素原子又は８〜１２個の炭素原子）によって、疎水性テールの末端から離隔されていること；
（ｉｉｉ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）について、リンカー基から疎水性テールの末端までの鎖長さは、最大で２１（例えば、最大で２０、約１７〜約２１、約１８〜約２０、又は約１６〜約１８）であること（鎖長さを計算する場合、リンカー基中の原子はカウントされない）；
（ｉｖ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）について、疎水性テール中の炭素原子の総数が、約１７〜約２６個（約１９〜約２６個、又は約２１〜約２６個など）であること；
（ｖ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）について、リンカー基と生分解性基との間の炭素原子の数が、約５〜約１０個（例えば、６〜１０個、又は７〜９個）に及ぶこと；
（ｖｉ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）について、リンカー基と疎水性テールの末端との間の炭素原子の総数が、約１５〜約２０個（１６〜２０個、１６〜１８個、又は１８〜２０個など）であること；
（ｖｉｉ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）について、生分解性基と疎水性テールの末端との間の炭素原子の総数が、約１２〜約１８個（１３〜２５個など）であること；
（ｖｉｉｉ）少なくとも１つの疎水性テール（及び好ましくは全ての疎水性テール）について、疎水性テール中の末端疎水性鎖が、例えば、分岐が、生分解性基に対して疎水性鎖上のα、β、γ、又はδ位で発生する、分岐鎖アルキル又はアルケニル基であること；
（ｉｘ）脂質ナノ粒子として製剤化される場合（実施例３５など）、カチオン性脂質が、約３時間未満（約２．５時間未満、約２時間未満、約１．５時間未満、約１時間未満、約０．５時間未満又は約０．２５時間未満など、の肝臓内のインビボ半減期（ｔ_１／２）を有すること；
（ｘ）脂質ナノ粒子として製剤化される場合（実施例３５など）、カチオン性脂質が、投与後最初の２４時間以内でＣ_ｍａｘに対する脂質レベルにおいて１０倍を超える低下を伴い、マウスの肝臓から排除されること；
（ｘｉ）脂質ナノ粒子として製剤化される場合（実施例３５など）、カチオン性脂質が、投与後最初の１６８時間以内でＣ_ｍａｘに対する脂質レベルにおいて１０倍又はそれを超える低下を伴い、マウスの脾臓から排除されること；並びに
（ｘｉｉ）脂質ナノ粒子として製剤化される場合（実施例３５など）、カチオン性脂質が、４８時間以下の齧歯類又は非ヒト霊長類における終末相の血漿半減期（ｔ１／２β）を伴い、血漿から排除されること。

【0064】

本発明は、前述の特性のいくつかの組み合わせ又は全てを有する化合物を具体化する。これら特性は、核酸などの活性作用物質の送達までそのまま残され、その後、疎水性テールの切断がインビボで生じる、カチオン性脂質を提供する。例えば、この化合物は、（ｌｏｇＰ又はｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌ値に加えて）特性（ｉ）から（ｖｉｉｉ）全てを有することが可能である。別の実施形態において、この化合物は、特性（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、及び（ｖｉｉｉ）を有する。更に別の実施形態において、この化合物は、特性（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｖ）、（ｖｉ）、及び（ｖｉｉｉ）を有する。

【0065】

別の実施形態は、カチオン性脂質を調製する方法であり、方法は：
（ａ）少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値及び／又は少なくとも１．４のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌを有し、任意選択で、上記リストからの１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の特性（すなわち、特性（ｉ）〜（ｘｉｉ））も有するカチオン性脂質を設計する工程と；
（ｂ）工程（ａ）のカチオン性脂質を合成する工程と、を含む。工程（ａ）におけるカチオン性脂質は、（ａ）ヘッド基（好ましくは、本明細書に記載されているヘッド基などの窒素含有ヘッド基）と、（ｂ）それぞれが式−（疎水性鎖）−（生分解性基）−（疎水性鎖）である、少なくとも２つの疎水性テールと、（ｃ）ヘッド基及び疎水性テールに結合するリンカー基（例えば、単一の中心炭素原子）と、を含むことが可能である。工程（ａ）は：
（ａ）（ｉ）少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値及び／又は少なくとも１．４のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌを有し、任意選択で、上記リストからの１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の特性（すなわち、特性（ｉ）〜（ｘｉｉ））も有する１つ以上のカチオン性脂質を調製する工程と；
（ａ）（ｉｉ）このカチオン性脂質をスクリーニングし、脂質ナノ粒子中のこれらの効力及び／又は毒性を決定する工程と；
（ａ）（ｉｉｉ）合成のためにカチオン性脂質を選択する工程と、を含んでもよい。

【0066】

更に別の実施形態は、カチオン性脂質を設計する方法であり、方法は：
（ａ）少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値及び／又は少なくとも１．４のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌを有し、任意選択で、上記リストからの１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の特性（すなわち、特性（ｉ）〜（ｘｉｉ））も有するカチオン性脂質を選択する工程と；
（ｂ）任意選択で、
（ｉ）少なくとも１０．１のｌｏｇＰ値及び／又は少なくとも１．４のｔ_{ｌｉｐｉｄ}−ｔ_ｃｈｏｌを有し、任意選択で、上記リストからの１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上の特性（すなわち、特性（ｉ）〜（ｘｉｉ））も有する１つ以上のカチオン性脂質を調製する工程と；
（ｉｉ）このカチオン性脂質をスクリーニングし、脂質ナノ粒子中のこれらの効力及び／又は毒性を決定する工程と；
（ｉｉｉ）任意選択で、更なる開発又は使用のために、カチオン性脂質を選択する工程と、を含む。

【0067】

一実施形態において、ＰＥＧ脂質は、式

【化42】

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を有する：
式中、
Ｇ_１は、分岐された又は分岐されていないＣ_３〜Ｃ_１５アルキル、アルケニル又はアルキニル（例えば、ｎ−Ｃ_８アルキル、ｎ−Ｃ_９アルキル、又はｎ−Ｃ_１０アルキル）であり；又はＧ_１は−Ｒ^１２−Ｍ_１−Ｒ^１３であり；
Ｒ^１２は、分岐された又は分岐されていないアルキレン又はアルケニレン（例えば、Ｃ_１２〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_１２〜Ｃ_２０アルケニレンなどのＣ_６〜Ｃ_２０アルキレン又はＣ_６〜Ｃ_２０アルケニレン）であり；
Ｍ_１は、生分解性基（例えば、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化43】

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（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル））であり；
Ｒ^３及びＲ^４は、式（Ｉ）のように定義され；
それぞれのＲ^５は、独立して、Ｈ又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）であり、
Ｒ^１３は、分岐された又は分岐されていないＣ_３〜Ｃ_１５アルキル、アルケニル又はアルキニルであり；

【化44】

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は、

【化45】

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の部分などのＰＥＧ部分を含み、式中ｂは１０〜１，０００の整数（例えば、５〜１００、１０〜６０、１５〜５０、又は２０〜４５）であり；Ｒ^３は−Ｈ、−Ｒ^ｃ、又は−ＯＲ^ｃであり；Ｒ^ｃは、−Ｈ、アルキル、アシル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクリルである。

【0068】

一実施形態において、このペグ化第一級基は、（ｉ）ＰＥＧ部分を有するヘッド基と、（ｉｉ）そこに両疎水性テールが直接結合している中心部分（例えば、中心炭素原子）とを含有する。代表的な中心部分としては、中心炭素原子、中心窒素原子、中心炭素環式基、中心アリール基、中心複素環式基（例えば、中心テトラヒドロフラニル基又は中心ピロリジニル基）及び中心ヘテロアリール基が挙げられるが、これらに限定されない。

【0069】

代表的な

【化46】

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としては、限定されないが、

【化47】

[この文献は図面を表示できません]

（式中、ｂは１０〜１００（例えば、２０〜５０又は４０〜５０））が挙げられる。

【0070】

本発明の別の実施形態は、
（ｉ）ＰＥＧ部分（例えば、エトキシ単位などの１０〜１０００の繰り返し単位を有する）を含むヘッド基を含んでいるペグ化第一級基と、
（ｉｉｉ）ペグ化第一級基に直接結合した１つ以上の疎水性テール（好ましくは、２つの疎水性テール）（ここで、少なくとも１つの疎水性テールは、式−Ｒ^ｅ−Ｍ−Ｒ^ｆであり（式中、Ｒ^ｅはＣ_４〜Ｃ_１４アルキル又はアルケニルであり、Ｍは生分解性基であり、並びにＲ^ｆは、分岐鎖アルキル又はアルケニル（例えば、Ｃ_１０〜Ｃ_２０アルキル又はＣ_１０〜Ｃ_２０アルケニル）であり）、これによって、（ｉ）−Ｒ^ｅ−Ｍ−Ｒ^ｆの鎖長さは最大で２０個の原子であり（すなわち、中心炭素原子の後ろの最初の炭素原子からテールの末端までのテールの全長は最大で２０である）、並びに（ｉｉ）基−Ｒ^ｅ−Ｍ−Ｒ^ｆは、少なくとも２０個の炭素原子（例えば、少なくとも２１個の原子）を有する）と、を有するＰＥＧ脂質（又はその塩）である。任意選択で、Ｒ^ｅ中のアルキル又はアルケニル基は、Ｍ^１又はＭ^２基に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で置換されてもよい（例えば、

【化48】

[この文献は図面を表示できません]

である）。更に、任意選択で、Ｒ^ｆ中のアルケニル基は、二重結合とＲ^ｆの末端との間にある二重結合に対してアルファ位で１つ又は２つのフッ素原子で置換されてもよい（例えば、

【化49】

[この文献は図面を表示できません]

である）。一実施形態において、ペグ化第一級基は、（ｉ）ＰＥＧ部分を有するヘッド基と、（ｉｉ）そこに疎水性テールが直接結合している中心部分（例えば、中心炭素原子）と、を含有する。このＰＥＧ部分は、５〜１００、１０〜６０、１５〜５０、又は２０〜４５の繰り返し単位を有することが可能である。例えば、ＰＥＧ部分は、式

【化50】

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の部分を有することが可能であり、式中ｂは１０〜１，０００の整数（例えば、５〜１００、１０〜６０、１５〜５０、又は２０〜４５）であり；Ｒ^３は−Ｈ、−Ｒ^ｃ、又は−ＯＲ^ｃであり；Ｒ^ｃは、−Ｈ、アルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）、アシル、シクロアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、又はヘテロシクリルである。

【0071】

更に別の実施形態は、本発明のカチオン性脂質及び／又はＰＥＧ脂質を含有する脂質粒子である。一実施形態において、この脂質粒子は、本発明のカチオン性脂質（例えば、式（Ｉ）〜（ＶＩＩＩ）の１つの）を含有する。別の実施形態において、この脂質粒子は、本発明のＰＥＧ脂質（例えば、式（ＩＸ）の）を含有する。更に別の実施形態において、この脂質粒子は、本発明のカチオン性脂質及び本発明のＰＥＧ脂質を含有する。

【0072】

好ましい実施形態において、この脂質粒子は、中性脂質、凝集を低減することが可能な脂質、カチオン性脂質、及び任意選択で、ステロール（例えば、コレステロール）を含む。好適な中性脂質としては、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ＰＯＰＣ、ＤＯＰＥ、及びＳＭが挙げられるが、これらに限定されない。好適な凝集を低減することが可能な脂質としては、ＰＥＧ−ＤＭＡ、ＰＥＧ−ＤＭＧ、及び本発明のもの（例えば、式（ＩＸ）の）などのＰＥＧ脂質、又はこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

【0073】

脂質粒子は、活性作用物質（例えば、治療薬）を更に含有する。活性作用物質は、プラスミド、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、アンタゴｍｉｒ、アプタマー、又はリボザイムなどの核酸であり得る。好ましい実施形態において、この核酸はｓｉＲＮＡである。別の好ましい実施形態において、この核酸は、ｍｉＲＮＡである。

【0074】

別の実施形態において、脂質粒子は、本発明のカチオン性脂質、中性脂質、及びステロールを含有する。この脂質粒子は、核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡ）などの活性作用物質を更に含有する。

【0075】

本発明の更に別の実施形態において、脂質粒子は、本発明のＰＥＧ脂質、カチオン性脂質、中性脂質及びステロールを含有する。この脂質粒子は、核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡ）などの活性作用物質を更に含有する。

【0076】

本明細書に記載されているこの脂質粒子は、脂質ナノ粒子であり得る。

【0077】

本発明の更に別の実施形態は、本発明の脂質粒子及び薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物である。

【0078】

一実施形態において、このカチオン性脂質は、核酸分子の送達までそのまま残り、その後、インビボで疎水性テールの切断が生じる。

【0079】

別の実施形態において、このＰＥＧ脂質は、核酸分子の送達までそのまま残り、その後、インビボで疎水性テールの切断が生じる。

【0080】

別の実施形態において、本発明は、核酸分子を送達させる方法に関し、方法は、（ｉ）核酸分子と、（ｉｉ）本発明のカチオン性脂質及び／又はＰＥＧ脂質とを含む核酸脂質粒子を投与する工程を含む。一実施形態において、このカチオン性脂質及び／又はＰＥＧ脂質は、核酸分子の送達までそのまま残り、その後、インビボで疎水性テールの切断が生じる。

【0081】

更に別の態様は、本発明の脂質粒子を細胞に供給することによる細胞中の標的遺伝子の発現を調整する方法である。活性化作用物質は、プラスミド、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、アンタゴｍｉｒ、アプタマー、及びリボザイムから選択される核酸であり得る。好ましい実施形態において、この核酸は、ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡである。

【0082】

更に別の態様は、本発明の医薬組成物を対象に供給することによる、ポリペプチドの過発現に特徴がある疾患又は障害を治療する方法であり、活性作用物質は、ｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、及びアンチセンスオリゴヌクレオチドから選択される核酸であり、このｓｉＲＮＡ、マイクロＲＮＡ、又はアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ポリペプチドをコード化するポリヌクレオチドに特異的に結合するポリヌクレオチド、又はその相補体を含む。好ましい実施形態において、この核酸はｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡである。

【0083】

更に別の態様は、本発明の医薬組成物を対象に供給することによる、ポリペプチドの過小発現に特徴がある疾患又は障害を治療する方法であり、活性作用物質は、ポリペプチド又はその機能的変異体若しくは断片をコードするプラスミドである。

【0084】

更に別の態様は、本発明の医薬組成物を対象に供給することによる対象において免疫応答を誘導する方法であり、活性作用物質は、免疫刺激性オリゴヌクレオチドである。

【0085】

更に別の態様は、上記記載の組成物又は脂質粒子を含むトランスフェクション試薬であり、この組成物又は脂質粒子は、核酸を含む。細胞と接触する場合、この試薬は、核酸を効率的に細胞に送達させる。更に別の態様は、上記記載の組成物又は脂質粒子を獲得又は形成し、この組成物又は脂質粒子を細胞に接触させることによる、細胞内部に核酸を送達させる方法である。

【発明を実施するための形態】

【0086】

一態様において、本発明は、中性脂質、凝集を低減させることが可能な脂質（例えば、ＰＥＧ脂質）、カチオン性脂質、及び任意選択でステロールを含有する脂質粒子に関する。特定の実施形態において、この脂質粒子は、活性作用物質（例えば、治療薬）を更に含有する。これら脂質、脂質粒子及びそれを含む組成物の様々な例示的な実施形態、並びに治療薬を送達し、遺伝子及びタンパク質発現を調節するためのこれらの用途が、以下に更に詳細に説明される。

【0087】

カチオン性脂質
一実施形態において、カチオン性脂質は、式Ｉ〜ＶＩＩＩのいずれか１つの化合物である。以下の開示は、式Ｉ〜ＶＩＩＩの化合物を含める、上記記載の化合物の様々な実施形態を説明する。

【0088】

一実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２はそれぞれ、独立して：
−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−、又は

【化51】

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である（式中、Ｒ^１１は、Ｃ_２〜Ｃ_８アルキル又はアルケニル）。

【0089】

別の実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２はそれぞれ、独立して：
−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−である。

【0090】

更に別の実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２はそれぞれ、独立して：
−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−である。

【0091】

別の実施形態において、Ｍ^１及びＭ^２はそれぞれ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。

【0092】

一実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２はそれぞれ、独立して、任意選択で置換されたアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、又は複素環である。一実施形態において、Ｒ^１はアルキルであり、Ｒ^２は、アルキル、シクロアルキル又はシクロアルキルアルキルである。一実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２はそれぞれ、独立して、アルキル（例えば、メチル、エチル、又はイソプロピルなどのＣ_１〜Ｃ_４アルキル）である。一実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は、双方ともメチルである。別の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２は、これらが結合している窒素原子と一緒に任意選択で置換された複素環（例えば、Ｎ−メチルピぺラジニル）を形成する。別の実施形態において、Ｒ^１及びＲ^２の１つは、

【化52】

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である（例えば、Ｒ^１は２つの前述の基の１つであり、Ｒ^２は水素である）。

【0093】

一実施形態において、Ｒ’は水素又はアルキルである。別の実施形態において、Ｒ’は水素又はメチルである。一実施形態において、Ｒ’は存在しない。一実施形態において、Ｒ’は存在しないか又はメチルである。

【0094】

正電荷を運ぶ原子（例えば、窒素原子）を含有するカチオン性脂質化合物については、この化合物は負に帯電した対イオンも含有する。この対イオンは、有機又は無機アニオンなどの任意のアニオンであり得る。アニオンの好適な例としては、トシレート、メタンスルホネート、アセテート、シトレート、マロネート、タータレート、スクシネート、ベンゾエート、アスコルベート、α−ケトグルタレート、α−グリセロホスフェート、ハライド（例えば、クロリド）、硫酸塩、硝酸塩、重炭酸塩、及び炭酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、この対イオンはハライド（例えば、Ｃｌ）である。

【0095】

一実施形態において、各Ｒは、独立して、−（ＣＲ^３Ｒ^４）−であり、式中、Ｒ^３及びＲ^４はそれぞれ、独立して、Ｈ又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）である。例えば、一実施形態において、各Ｒは、独立して−（ＣＨＲ^４）−であり、式中各Ｒ^４は、独立して、Ｈ又はアルキル（例えば、Ｃ_１〜Ｃ_４アルキル）である。別の実施形態において、各Ｒは、独立して、−ＣＨ_２−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−又は−ＣＨ（ｉＰｒ）−である（式中、ｉＰｒはイソプロピルである）。別の実施形態において、各Ｒは、−ＣＨ_２−である。

【0096】

別の実施形態において、Ｒ^５は、それぞれの場合で、水素又はメチルである。例えば、Ｒ^５は、それぞれの場合、水素であり得る。

【0097】

一実施形態において、Ｑは存在しないか、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−又は−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−である。一実施形態において、Ｑは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。

【0098】

一実施形態において、Ｑへの点線は存在せず、ｂは０であり、並びにＲ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−及びこれに隣接する第三級炭素（Ｃ^＊）は以下の基を形成する：

【化53】

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式中、ｎは１〜４（例えば、ｎは２）である。

【0099】

一実施形態において、Ｑへの点線は存在せず、ｂは０であり、並びにＲ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−及びこれに隣接する第三級炭素は以下の基を形成する：

【化54】

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式中、ｎは１〜４（例えば、ｎは２）であり、並びにＲ^１、Ｒ^２、Ｒ、ａ、及びｂは、式（Ｉ）に関して定義された通りである。一実施形態において、ａは３である。

【0100】

一実施形態において、Ｑへの点線は存在せず、ｂは０であり、並びにＲ’Ｒ^１Ｒ^２Ｎ−（Ｒ）_ａ−Ｑ−及びこれに隣接する第三級炭素は以下の基を形成する：

【化55】

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式中、ｎは１〜４（例えば、ｎは２）であり、並びにＲ^１、Ｒ^２、Ｒ、ａ、及びｂは、式（Ｉ）に関して定義された通りである。一実施形態において、ａは０である。例えば、この基は：

【化56】

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であり得る。

【0101】

一実施形態において、ｂは０である。別の実施形態において、ａは２、３、又は４であり、並びにｂは０である。例えば、一実施形態において、ａは３であり並びにｂは０である。別の実施形態において、ａは３であり、ｂは０であり、並びにＱは−Ｃ（Ｏ）Ｏ−である。

【0102】

特定の実施形態において、カチオン性脂質中に存在する生分解性基は、エステル（例えば、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｏ）−）、ジスルフィド（−Ｓ−Ｓ−）、オキシム（例えば、−Ｃ（Ｈ）＝Ｎ−Ｏ−又は−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｈ）−）、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、（ＮＲ^５）Ｃ（Ｓ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−から選択される。

【0103】

本発明のカチオン性脂質（式Ｉ〜ＶＩの化合物を含める）に好適なコレステロール部分は、式

【化57】

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を有する。

【0104】

更なる実施形態は、ヘッド基、１つ以上の疎水性テール、及びヘッド基と１つ以上のテールとの間の中心部分を有するカチオン性脂質を含む。このヘッド基は、アミン、例えば、所望のｐＫ_ａを有するアミンを含むことができる。このｐＫ_ａは、脂質の構造、特にヘッド基の性質｛例えば、アニオン性官能基、水素結合供与体官能基、水素結合受容体基、疎水性基（例えば、脂肪族基）、親水性基（例えば、ヒドロキシル又はメトキシ）、又はアリール基などの官能基の存在、不在、及び場所｝によって影響を受ける可能性がある。ヘッド基のアミンは、カチオン性アミン；第一級、第二級、又は第三級アミンであり得；ヘッド基は、１つのアミン基（モノアミン）、２つのアミン基（ジアミン）、３つのアミン基（トリアミン）、又はオリゴアミン又はポリアミンにおけるような多数のアミン基を含むことができる。ヘッド基は、例えば、イミダゾール、ピリジン、又はグアニジニウム基などのアミンよりも塩基性が強くない官能基を含むことが可能である。ヘッド基は、双性イオン性であり得る。その他のヘッド基も同様に適切である。

【0105】

代表的な中心部分としては、中心炭素原子、中心窒素原子、中心炭素環式原子、中心アリール基、中心複素環式基（例えば、中心テトラヒドロフラニル基又は中心ピロリジニル基）及び中心ヘテロアリール基が挙げられるが、これらに限定されない。更に、中心部分としては、例えば、グルセリドリンカー、非環式グリセリド類似体リンカー、又は環式リンカー（スピロリンカー、二環式リンカー、及び多環式リンカーを含める）を挙げることができる。中心部分は、エーテル、エステル、ホスフェート、ホスホネート、ホスホロチオエート、スルホネート、ジスルフィド、アセタール、ケタール、イミン、ヒドラゾン、又はオキシムなどの官能基を含むことができる。他の中心部分及び官能基も同様に適切である。

【0106】

一実施形態において、カチオン性脂質は、ラセミ混合物である。別の実施形態において、このカチオン性脂質は、１つのジアステレオマーで富化され、例えば、このカチオン性脂質は、少なくとも９５％、少なくとも９０％、少なくとも８０％又は少なくとも７０％のジアステレオマー過剰を有する。更に別の実施形態において、このカチオン性脂質は、１つのエナンチオマーで富化され、例えば、この脂質は少なくとも９５％、少なくとも９０％、少なくとも８０％又は少なくとも７０％のエナンチオマー過剰を有する。更に別の実施形態において、このカチオン性脂質は、キラル純粋であり、例えば、単一の光学異性体である。更に別の実施形態において、このカチオン性脂質は、１つの光学異性体に対して富化されている。

【0107】

二重結合が存在する場合（例えば、炭素−炭素二重結合又は単素−窒素二重結合）、二重結合の周りの配置において異性が存在し得る（すなわち、シス／トランス又はＥ／Ｚ異性）。二重結合の配置が化学構造内で示される場合、対応する異性体がまた存在し得ることが理解される。存在する異性体の量は、異性体の相対的安定性及び異性体間を変換するために要するエネルギーに応じて様々であり得る。したがって、実際上では、一部の二重結合は、単一の配置のみで存在し、一方その他のもの（例えば、相対的安定性が類似していて、変換のエネルギーが低い場合）は、分離不能な配置の平衡混合物として存在することがある。

【0108】

場合によっては、二重結合不飽和が、環式不飽和によって置き換えられる。環式不飽和は、脂環式不飽和、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、又はシクロオクチル基であり得る。場合によっては、この環式基は、多環式基、例えば、二環式基又は三環式基であり得る。二環式基は架橋され、融合され、又はスピロ構造を有することが可能である。場合によっては、二重結合部分は、シクロプロピル部分、例えば、

【化58】

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で置き換えられることも、

【化59】

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で置き換えられることも可能である。

【0109】

カチオン性脂質は、１つ以上の生分解性基を含む。この生分解性基は、生物学的環境内で、例えば、生物体、器官、組織、細胞、又は細胞器官内で結合破壊反応を受けることが可能である１つ以上の結合を含有する。生分解性結合を含有する官能基としては、例えば、エステル、ジチオール、及びオキシムが挙げられる。生分解は、対象に投与される場合、体内からの化合物のクリアランスに影響を及ぼす因子であり得る。生分解は、細胞ベースアッセイで測定することが可能であり、ここではカチオン性脂質を含んでいる製剤が細胞に曝され、試料が様々な時点で採取される。脂質フラクションが、細胞から抽出され、分離され、ＬＣ−ＭＳによって分析されることが可能である。ＬＣ−ＭＳデータから、生分解の速度（例えば、ｔ_１／２値として）が測定され得る。

【0110】

例えば、化合物

【化60】

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は、各脂肪族鎖中にエステル結合を含み、これは、例えばリパーゼ又はエステラーゼなどに曝される場合、生物学的環境において加水分解を受けることが可能である。化合物の構造ももちろん、化合物が生分解を受ける速度に影響を及ぼす。したがって、

【化61】

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などの、メチル置換基が生分解性基のもう一方の側にある化合物は、生分解の異なる速度を呈することが予想される。この速度に及ぼすより大きな効果は、加水分解の部位での化合物の構造における変化から予想されると考えられる。加水分解の速度に影響を及ぼし得る１つの修正、これによって生分解及び対象の体内からのクリアランスの速度に影響を与える１つの修正は、加水分解反応の解離基に、第一級アルコールよりはむしろ第二級アルコールを有するようにさせることである。

【0111】

例えば、理論によって束縛されようとするものではないが、上記で示した化合物１は、以下のスキームに示したように代謝され得る。

【化62】

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【0112】

一実施形態において、本明細書に記載されているいずれかの実施形態のカチオン性脂質は、約３時間未満（約２．５時間未満、約２時間未満、約１．５時間未満、約１時間未満、約０．５時間未満又は約０．２５時間未満など）のインビボ半減期（ｔ_１／２）（例えば、肝臓、脾臓又は血漿における）を有する。このカチオン性脂質は、好ましくは、所望の活性医薬成分（例えば、核酸）をその標的に効率的に送達する安定な脂質ナノ粒子を形成するのに十分であるよう、そのままで残り、又は半減期を有するが、その後迅速に分解し、対象への副作用を最小限に抑える。例えば、マウスにおいて、このカチオン性脂質は、脾臓中で、約１〜約７時間のｔ_１／２を有することが好ましい。

【0113】

別の実施形態において、１つ又は複数の生分解性基を含有している、本明細書に記載されているいずれかの実施形態のカチオン性脂質は、１つ又は複数の生分解性基を含まない類似のカチオン性脂質に関するものの約１０％未満（例えば、約７．５％未満、約５％未満、約２．５％未満）のインビボ半減期（ｔ_１／２）（例えば、肝臓、脾臓又は血漿における）を有する。

【0114】

いくつかのカチオン性脂質は、中心部分（炭素原子など）を介してヘッド基と組み合された疎水性基として便宜上表わされ得る。例として、化合物

【化63】

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は、以下のように、ヘッド基、中心部分、及び２つの疎水性基の組み合わせとしても考えられ得る。

【化64】

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【0115】

本発明は、（中心部分（中心炭素原子など）と組み合わせて）以下に列挙されたヘッド基及び疎水性基の任意の組み合わせから構成される化合物を含む。

【0116】

いくつかの好適なヘッド基は、表１Ａで示したものを含む。

【0117】

【表1】

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【0118】

【表2】

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【0119】

好適な第一級基としては、表１Ａからのヘッド基と中心炭素原子との組み合わせであるものが挙げられるが、これらに限定されない。その他の好適な第一級基としては、以下の表１Ｂ中のものが挙げられる。

【0120】

【表3】

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【0121】

いくつかの好適な疎水性テール基としては、表１Ｃ中に示したものが挙げられる。

【0122】

【表4】

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【0123】

【表5】

[この文献は図面を表示できません]

【0124】

【表6】

[この文献は図面を表示できません]

【0125】

その他の好適なテール基は、式−Ｒ^１２−Ｍ^１−Ｒ^１３であるものを含み、式中、Ｒ^１２は、Ｃ_４〜Ｃ_１４アルキル又はＣ_４〜Ｃ_１４アルケニルであり、Ｍ^１は、上記で定義された通りの生分解性基であり、並びにＲ^１３は、分岐鎖アルキル又はアルケニル（例えば、Ｃ_１０〜Ｃ_２０アルキル又はＣ_１０〜Ｃ_２０アルケニル）であり、これによって、（ｉ）−Ｒ^１２−Ｍ^１−Ｒ^１３の鎖長さは、最大で２１個の原子であり（すなわち、第三級炭素（星印を付けた）の後ろの最初の炭素からテールの末端までのテールの全長が最大で２１であり）、並びに（ｉｉ）基−Ｒ^１２−Ｍ^１−Ｒ^１３は、少なくとも２０個の炭素原子（例えば、少なくとも２１又は２２個の炭素原子）を有する。

【0126】

１つの好ましい実施形態において、−Ｒ^１２−Ｍ^１−Ｒ^１３の鎖長さは、最大で２１（例えば、最大で２０）である。例えば、鎖長さは、約１７〜約２４又は約１８〜約２０であり得る。

【0127】

一実施形態において、各テール（−Ｒ^１２−Ｍ^１−Ｒ^１３）の総炭素原子含量は、約１７〜約２６である。例えば、総炭素原子含量は、約１９〜約２６又は約２１〜約２６であり得る。

【0128】

一実施形態において、このテールは、式

【化65】

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を有し、式中Ｒ^１３は、約１３〜約１７個の炭素原子を有するアルキル又はアルケニル基であり、最初の炭素（上記の最も左側の炭素原子）からテールの末端までのテールの全炭素長さが、最大で２０である。好ましくは、このテールは、約２２〜約２６個の炭素原子を有する。一実施形態において、化合物のＲ^１３のその結合点からエステル基までの最大長は、１２個の炭素原子である（例えば、最大長は、１１個の炭素原子であり得る）。１つの好ましい実施形態において、アルキル又はアルケニル基中の分岐は、Ｒ^１３の結合点からエステル基までのδ位又はそれ以降にある。好適なＲ^１３基としては、

【化66】

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が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、カチオン性脂質は、

【化67】

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又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、式中、Ｒ^１３は、上述の基から選択される。

【0129】

別の例は、式

【化68】

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のテールであり、式中、Ｒ^１３は、約１３〜約１５個の炭素原子を有するアルキル又はアルケニル基であり、最初の炭素（すなわち、第三級炭素に結合している最も左側の炭素原子）からテールの末端までのテールの全炭素長さが、最大で２０である。好ましくは、このテールは、約２４〜約２６個の炭素原子を有する。一実施形態において、化合物のＲ^１３のその結合点からエステル基までの最大長は、１０個の炭素原子である（例えば、最大長は、９個の炭素原子であり得る）。１つの好ましい実施形態において、アルキル又はアルケニル基中の分岐は、Ｒ^１３の結合点からエステル基までのδ位又はそれ以降にある。好適なＲ^１３基としては、

【化69】

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が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、カチオン性脂質は、

【化70】

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又はその塩（例えば、その薬学的に許容可能な塩）であり、式中、Ｒ^１３は、上記の基から選択される。

【0130】

Ｒ^１３基は、ジヒドロシトロネロール、ラバンジュロール、フィトール、又はジヒドロフィトールなどの天然物から誘導されてもよい。一実施形態において、上記テール中のＲ^１３基は、ジヒドロシトロネロール基（ラセミ基又はキラル純粋な基のいずれかとして）である。

【化71】

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例えば、ジヒドロシトロネロール基を有するカチオン性脂質は、

【化72】

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であるか、又はその塩であり得る。

【0131】

別の実施形態において、上記テール中のＲ^１３基は、以下に示すようなラバンジュロール基又はその同族体である。

【化73】

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【0132】

別の実施形態において、上記テール中のＲ^１３基は、フィトール又はジヒドロフィトール基である。

【化74】

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例えば、カチオン性脂質は、

【化75】

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であり得る。

【0133】

式

【化76】

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のカチオン性脂質は、以下のようなヘッド基、リンカー部分、及び疎水性鎖の２つの部分の組み合わせとしても考えることが可能である。

【化77】

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【0134】

様々なヘッド基、リンカー部分、及び疎水性鎖Ｉ及びＩＩが、以下に列挙されている。本発明は、以下に列挙されたヘッド、リンカー、疎水性鎖Ｉ、及び疎水性鎖ＩＩ基の任意の組み合わせから構成された化合物を含む。

【0135】

【表7】

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【0136】

【表8】

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【0137】

【表9】

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【0138】

【表10】

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【0139】

【表11】

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【0140】

【表12】

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【0141】

本発明のその他のカチオン性脂質は、以下の表３中のものを含む。以下の化合物中のそれぞれの非対称炭素原子は、キラル純粋（Ｒ又はＳ）又はラセミ体のいずれかであり得る。これらカチオン性脂質並びに実施例（例えば実施例３６及び３７）におけるものは、核酸−脂質粒子を形成するために好適である。

【0142】

【表13】

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【0143】

【表14】

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【0144】

【表15】

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【0145】

【表16】

[この文献は図面を表示できません]

【0146】

【表17】

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【0147】

【表18】

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【0148】

【表19】

[この文献は図面を表示できません]

【0149】

【表20】

[この文献は図面を表示できません]

【0150】

【表21】

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【0151】

【表22】

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【0152】

【表23】

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【0153】

【表24】

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【0154】

【表25】

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【0155】

【表26】

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【0156】

【表27】

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【0157】

【表28】

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【0158】

【表29】

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【0159】

【表30】

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【0160】

【表31】

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【0161】

【表32】

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【0162】

【表33】

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【0163】

別の態様において、本発明は、式Ｉ〜ＶＩＩの化合物を調製する方法に関する。好適な例示的合成法が、以下の実施例セクションに示したスキーム１〜２７で図示されている。

【0164】

一実施形態において、本発明のカチオン性脂質は、以下の化合物、及びその塩（その薬学的に許容可能な塩を含む）から選択される。これらカチオン性脂質は、核酸−脂質粒子を形成するために好適である。

【化78】

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【化79】

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【化80】

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【化81】

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【0165】

別の実施形態において、本発明のカチオン性脂質は、以下の化合物、及びその塩（その薬学的に許容可能な塩を含める）から選択される。

【化82】

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【化83】

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【化84】

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【0166】

別の実施形態において、本発明のカチオン性脂質は、以下の化合物、又はその塩（その薬学的に許容可能な塩を含める）から選択される。

【化85】

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【化86】

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【0167】

更なる代表的なカチオン性脂質としては、限定されないが、

【0168】

【表34】

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【0169】

【表35】

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【0170】

【表36】

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【0171】

【表37】

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【0172】

【表38】

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【0173】

【表39】

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【0174】

【表40】

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【0175】

【表41】

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【0176】

【表42】

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【0177】

【表43】

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【0178】

【表44】

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【0179】

【表45】

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【0180】

【表46】

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【0181】

【表47】

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【0182】

【表48】

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【0183】

【表49】

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【0184】

【表50】

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【0185】

【表51】

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【0186】

【表52】

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【0187】

【表53】

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【0188】

【表54】

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【0189】

【表55】

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【0190】

【表56】

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が挙げられる。

【0191】

あるいは、式

【化87】

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（式中Ｘは、例えば、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−であり得る）のヘッドを有する上記化合物については、このヘッドは、Ｘ基（又はその他の官能基）と窒素原子との間に１つのメチレン単位を有することが可能である。例えば、このヘッド基は、

【化88】

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であり得る。

【0192】

カチオン性脂質は、その中でアルキル置換基が異なるもの（例えば、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ−及びＮ−プロピル−Ｎ−エチルアミノ−）を含める、示されたもの以外の代替脂肪酸基及びその他のジアルキルアミノ基を有するものを含む。

【0193】

特定の実施形態において、このカチオン性脂質は、少なくとも１つのプロトン化可能又は脱プロトン化可能な基を有することで、この脂質は、生理学的ｐＨ又は生理学的ｐＨ未満のｐＨで（例えばｐＨ７．４で）正に帯電され、第２のｐＨ、好ましくは生理学的ｐＨ又は生理学的ｐＨを超えるｐＨで中性である。このような脂質は、カチオン性脂質とも呼ばれる。当然、ｐＨの機能としてのプロトンの付加又は除去は、平衡プロセスであること、並びに荷電又は中性脂質については、優占種を指し、脂質の全てが荷電形態又は中性形態で存在することが必ずしも必要ではないことを理解されるであろう。この脂質は、複数のプロトン化可能又は脱プロトン化可能な基を有することができ、又は双性イオン性であり得る。

【0194】

特定の実施形態において、プロトン化可能な脂質（すなわち、カチオン性脂質）は、約４〜約１１の範囲のプロトン化可能な基のｐＫ_ａを有する。例えば、この脂質は、脂質粒子内に組み込まれる場合、約４〜約７、例えば、約５．５〜約６．８などの約５〜約７のｐＫ_ａを有することができる。このような脂質は、より低いｐＨの製剤段階でカチオン性であり得、一方、粒子は、ｐＨ７．４周辺の生理学的ｐＨにおいて（完全ではないが）大きく表面中和されるであろう。

【0195】

特定の実施形態において、この脂質は荷電脂質である。本明細書で使用するとき、用語「荷電脂質」とは、限定されないが、１つ又は２つの脂肪アシル又は脂肪アルキル鎖と第四級アミノヘッド基とを有する脂質を包含する。この第四級アミンは、永久正電荷を運ぶ。このヘッド基は、任意選択で、生理学的ｐＨでプロトン化され得る第一級、第二級、又は第三級アミンなどのイオン性基を含むことが可能である。第四級アミンの存在は、第四級アミンを欠如する（例えば、第四級アミンが第三級アミンで置き換えられている）構造的に類似する化合物中の基のｐＫ_ａと比較して、イオン性基のｐＫ_ａを変更することが可能である。

【0196】

本発明に含まれるものは、本明細書に記載されているカチオン性脂質の遊離型、並びにその薬学的に許容可能な塩及びその立体異性体である。このカチオン性脂質は、アミンカチオン性脂質のプロトン化塩であり得る。用語「遊離型」とは、非塩型でのアミンカチオン性脂質を指す。遊離型は、塩を、希水性ＮａＯＨ、炭酸カリウム、アンモニア及び重炭酸ナトリウムなどの好適な希水性塩基溶液で処理することで再生することが可能である。

【0197】

本発明のカチオン性脂質の薬学的に許容可能な塩は、通常の化学的な方法によって、塩基性又は酸性部分を含有する本発明のカチオン性脂質から合成することが可能である。一般的に、塩基性カチオン性脂質の塩は、イオン交換クロマトグラフィーにより、又は好適な溶媒又は溶媒の様々な混合中で、遊離塩基を所望の塩形成無機又は有機酸の理論量又は過剰量と反応させることによるのいずれかで調製される。同様に、酸性化合物の塩は、適切な無機又は有機塩基との反応により形成される。

【0198】

したがって、本発明のカチオン性脂質の薬学的に許容可能な塩は、塩基性の本発明のカチオン性脂質を無機又は有機酸と反応することで形成されるような、本発明のカチオン性脂質の非毒性塩を含む。例えば、非毒性塩としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機塩から誘導されるもの、並びに酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ−安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、及びトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）などの有機酸から調製された塩が挙げられる。

【0199】

本発明のカチオン性脂質が酸性である場合、好適な「薬学的に許容可能な塩」とは、無機塩基及び有機塩基を含める薬学的に許容可能な非毒性塩基から調製される塩を指す。無機塩基から誘導される塩としては、アルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第二鉄塩、第一鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、マンガン塩、第一マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、及び亜鉛塩が挙げられる。一実施形態において、この塩基は、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウムから選択される。薬学的に許容可能な有機非毒性塩基から誘導される塩としては、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ^１−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルフォリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルフォリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、及びトロメタミンなどの天然型置換アミン、環式アミン及び塩基性イオン交換樹脂を含める第一、第二及び第三アミン、置換型アミンの塩が挙げられる。

【0200】

本発明のカチオン性脂質は、生物学的条件下で、カルボキシル基などの化合物中の脱プロトン化酸性部分はアニオン性であり得、その後、この電子電荷は、第四級窒素原子などのプロトン化された又はアルキル化された塩基性部分のカチオン正電荷に対して分子内部で脱平衡化されるために、分子内塩又は双性イオンである可能性があることにも留意されたい。

【0201】

上記で具体的に記載されたものに加えて、生理学的ｐＨ周辺で正味の正電荷を運ぶ１つ以上の追加のカチオン性脂質もまた、本明細書に記載されている脂質粒子及び組成物中に含有されてもよい。このようなカチオン性脂質としては、このようなカチオン性脂質としては、Ｎ，Ｎ−ジオレイル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムクロリド（「ＤＯＤＡＣ」）；Ｎ−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル−Ｎ，Ｎ−Ｎ−トリエチルアンモニウムクロリド（「ＤＯＴＭＡ」）；Ｎ，Ｎ−ジステアリル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムブロミド（「ＤＤＡＢ」）；Ｎ−（２，３−ジオレオイルオキシ）プロピル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド（「ＤＯＴＡＰ」）；１，２−ジオレイルオキシ−３−トリメチルアミノプロパン塩化物塩（「ＤＯＴＡＰ．Ｃｌ」）；３β−（Ｎ−（Ｎ’，Ｎ’−ジメチルアミノエタン）−カルバモイル）コレステロール（「ＤＣ−Ｃｈｏｌ」）；Ｎ−（１−（２，３−ジオレイルオキシ）プロピル）−Ｎ−２−（スペルミンカルボキサミド）エチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウムトリフルオロアセテート（「ＤＯＳＰＡ」）；ジオクタデシルアミドグリシルカルボキシスペルミン（「ＤＯＧＳ」）；１，２−ジオレイル−ｓｎ−３−ホスホエタノールアミン（「ＤＯＰＥ」）；１，２−ジオレオイル−３−ジメチルアンモニウムプロパン（「ＤＯＤＡＰ」）；Ｎ，Ｎ−ジメチル−２，３−ジオレイルオキシ）プロピルアミン（「ＤＯＤＭＡ」）；及びＮ−（１，２−ジミリスチルオキシプロプ−３−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（「ＤＭＲＩＥ」）が挙げられるが、これらに限定されない。更に、例えば、ＬＩＰＯＦＥＣＴＩＮ（ＧＩＢＣＯ／ＢＲＬから入手可能な、ＤＯＴＭＡ及びＤＯＰＥを含んでいる）、並びにＬＩＰＯＦＥＣＴＡＭＩＮＥ（ＧＩＢＣＯ／ＢＲＬから入手可能な、ＤＯＳＰＡ及びＤＯＰＥを含む）などの多くの市販のカチオン性脂質の調製物を使用することが可能である。

【0202】

ＰＥＧ脂質
ＰＥＧ脂質に好適なヘッド基としては、以下の表３中に示すものなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0203】

【表57】

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【0204】

代表的なＰＥＧ脂質としては、

【化89】

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【化90】

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が挙げられるが、これらに限定されない：
式中、
ｎは１０〜１００の整数（例えば、２０〜５０又は４０〜５０）であり；
ｓ、ｓ’、ｔ及びｔ’は、独立して、０、１、２、３、４、５、６又は７であり；並びにｍは、１、２、３、４、５、又は６である。

【0205】

その他の代表的なＰＥＧ脂質としては、

【0206】

【表58】

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【0207】

【表59】

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が挙げられるが、これらに限定されない。

【0208】

その他の脂質成分
本明細書に記載されている脂質及び粒子はまた、１つ以上の中性脂質を含有してもよい。存在する場合、中性脂質は、生理学的ｐＨにおいて非荷電形態又は双性イオン形態のいずれかで存在する数々の脂質種であり得る。このような脂質としては、例えば、ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミド、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、セファリン、及びセレブロシドが挙げられる。一実施形態において、この中性脂質成分は、２つのアシル基を有する脂質（例えば、ジアシルホスファチジルコリン及びジアシルホスファチジルエタノールアミン）である。一実施形態において、この中性脂質は、Ｃ_１０〜Ｃ_２０の範囲の炭素鎖長さを備える飽和脂肪酸を含有する。別の実施形態において、この中性脂質は、Ｃ_１０〜Ｃ_２０の範囲の炭素鎖長さを備えるモノ不飽和又は二不飽和脂肪酸を含有する。好適な中性脂質としては、ＤＳＰＣ、ＤＰＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＯＰＥ、ＤＳＰＣ、及びＳＭが挙げられるが、これらに限定されない。

【0209】

本明細書に記載されている脂質粒子及び組成物はまた、凝集を低減することが可能な１つ以上の脂質を含有してもよい。形成中に凝集を低減する脂質の例としては、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）変性脂質（ＰＥＧ−ＤＭＧ及びＰＥＧ−ＤＭＡなどのＰＥＧ脂質）、モノシアロガングリオシド Ｇｍ１、及び（その全体が参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第６，３２０，０１７号明細書に記載されているものなどの）ポリアミドオリゴマー（「ＰＡＯ」）が挙げられる。好適なＰＥＧ脂質としては、ＰＥＧ変性ホスファチジルエタノールアミン及びホスファチジン酸、ＰＥＧ−セラミド接合体（例えば、ＰＥＧ−ＣｅｒＣ１４又はＰＥＧ−ＣｅｒＣ２０）（参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第５，８２０，８７３号明細書に記載されているものなど）、ＰＥＧ変性ジアルキルアミン及びＰＥＧ変性１，２−ジアシルオキシプロパン−３−アミン、ＰＥＧ変性ジアシルグリセロール及びジアルキルグリセロール、ｍＰＥＧ（ｍｗ２０００）−ジアステアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ−ＤＳＰＥ）が挙げられるが、これらに限定されない。

【0210】

この脂質粒子及び組成物は、コレステロールなどのステロールを含有してもよい。

【0211】

脂質粒子
他の態様において、本発明は、本明細書に記載されているカチオン性脂質の１つ以上を含有する脂質粒子に関する。一実施形態において、この脂質粒子は、１つ以上の式Ｉ〜ＶＩＩの化合物を含有する。

【0212】

脂質粒子としては、リポソームが挙げられるがこれに限定されない。本明細書で使用するとき、リポソームとは、水性の内部を封入している脂質含有膜を有する構造である。

【0213】

別の実施形態は、本発明のカチオン性脂質、非カチオン性脂質（中性脂質など）、任意選択でＰＥＧ−脂質接合体（本明細書で説明されている脂質粒子の凝集を低減するための脂質など）、任意選択でステロール（例えば、コレステロール）、及び核酸を含んでいる核酸−脂質粒子（例えば、ＳＮＡＬＰ）である。本明細書で使用するとき、用語「ＳＮＡＬＰ」とは、安定核酸−脂質粒子を指す。ＳＮＡＬＰは、脂質から作られた粒子を表し、ここでは核酸（例えば、干渉ＲＮＡ）は脂質内に封入される。特定の例において、ＳＮＡＬＰは、これらが静脈内（ｉ．ｖ．）注射後に延長した循環寿命を呈することが可能であり、これらが遠位部位（例えば、投与部位から物理的に離隔された部位）において蓄積することが可能であり、並びにこれら遠位部位における標的遺伝子発現のサイレンシングを媒介することが可能であるために、全身適用に有用である。核酸は、その開示が全体で参照により本明細書に組み込まれている、国際公開第００／０３６８３号パンフレットで記載されているように、縮合剤と複合体を形成され、ＳＮＡＬＰ内に封入される。

【0214】

例えば、この脂質粒子は、カチオン性脂質、融合促進脂質（例えば、ＤＰＰＣ）、中性脂質、コレステロール、及びＰＥＧ変性脂質を含有することが可能である。一実施形態において、この脂質粒子は、約２０〜７０％のカチオン性脂質：０．１〜５０％の融合促進脂質：５〜４５％の中性脂質：２０〜５５％のコレステロール：０．５〜１５％のＰＥＧ変性脂質のモル比で（脂質粒子中の１００％の全モルに基づいて）、上記脂質混合物を含む。

【0215】

脂質粒子の別の実施形態において、カチオン性脂質は、（脂質粒子の１００％の全モルに基づいて）約２０％及び訳６０％のモル百分率で存在し；中性脂質は約５％〜約２５％のモル百分率で存在し；ステロールは約２５％〜約５５％のモル百分率で存在し；並びにＰＥＧ脂質はＰＥＧ−ＤＭＡ、ＰＥＧ−ＤＭＧ、又はこれらの組み合わせであり、約０．５％〜約１５％の百分率で存在する。

【0216】

特定の実施形態において、カチオン性脂質／ＤＳＰＣ／Ｃｈｏｌ／ＰＥＧ−ＤＭＧ又はＰＥＧ−ＤＭＡのモル％に関するモル脂質比は、約４０／１０／４０／１０、３５／１５／４０／１０又は５２／１３／３０／５である。この混合物は、０．１〜５０％、０．１〜５０％、０．５〜５０％、１〜５０％、５％〜４５％、１０％〜４０％、又は１５％〜３５％のモル比で融合促進脂質と更に組み合わせてもよい。言い換えると、脂質／ＤＳＰＣ／Ｃｈｏｌ／ＰＥＧ−ＤＭＧ又はＰＥＧ−ＤＭＡの４０／１０／４０／１０混合物が、５０％のモル比で融合促進脂質と組み合され、得られた脂質粒子は、２０／５／２０／５／５０（カチオン性脂質／ＤＳＰＣ／Ｃｈｏｌ／ＰＥＧ−ＤＭＧ又はＰＥＧ−ＤＭＡ／融合促進ペプチドのモル％）の全モル比を有することが可能である。別の実施形態において、これら組成物中の中性脂質、ＤＳＰＣが、ＰＯＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＥ又はＳＭで置き換えられる。

【0217】

一実施形態において、この脂質粒子は、本発明のカチオン性脂質、中性脂質、ステロール及びＰＥＧ変性脂質を含む。一実施形態において、この脂質粒子は、モルベースで約２５％〜約７５％の、例えば、モルベースで、約３５〜約６５％、約４５〜約６５％、約６０％、約５７．５％、約５７．１％、約５０％又は約４０％のカチオン性脂質を含有する。一実施形態において、この脂質粒子は、モルベースで約０％〜約１５％の、例えば、モルベースで、約３〜約１２％、約５〜約１０％、約１５％、約１０％、約７．５％、約７．１％又は約０％の中性脂質を含有する。一実施形態において、この中性脂質はＤＰＰＣである。一実施形態において、この中性脂質はＤＳＰＣである。一実施形態において、この製剤は、モルベースで約５％〜約５０％の、例えば、モルベースで、約１５〜約４５％、約２０〜約４０％、約４８％、約４０％、約３８．５％、約３５％、約３４．４％、約３１．５％又は約３１％のステロールを含有する。一実施形態において、このステロールはコレステロールである。

【0218】

本明細書に記載されている脂質粒子は、１つ以上の治療薬を更に含むことが可能である。好ましい実施形態において、この脂質粒子は、ｓｉＲＮＡ又はｍｉＲＮＡなどの核酸（例えば、オリゴヌクレオチド）を含有する。

【0219】

一実施形態において、この脂質粒子は、モルベースで約０．１％〜約２０％の、例えば、モルベースで、約０．５〜約１０％、約０．５〜約５％、約１０％、約５％、約３．５％、約１．５％、約０．５％、又は約０．３％のＰＥＧ変性脂質を含有する。一実施形態において、このＰＥＧ変性脂質はＰＥＧ−ＤＭＧである。一実施形態において、このＰＥＧ変性脂質はＰＥＧ−ｃ−ＤＭＡである。一実施形態において、この脂質粒子は、モルベースで、２５〜７５％のカチオン性脂質、０．５〜１５％の中性脂質、５〜５０％のステロール、及び０．５〜２０％のＰＥＧ変性脂質を含有する。

【0220】

一実施形態において、この脂質粒子は、モルベースで、３５〜６５％のカチオン性脂質、３〜１２％の中性脂質、１５〜４５％のステロール、及び０．５〜１０％のＰＥＧ変性脂質を含有する。一実施形態において、この脂質粒子は、モルベースで、４５〜６５％のカチオン性脂質、５〜１０％の中性脂質、２５〜４０％のステロール、及び０．５〜５％のＰＥＧ変性脂質を含有する。一実施形態において、このＰＥＧ変性脂質は、２，０００Ｄａの平均分子量のＰＥＧ分子を含む。一実施形態において、このＰＥＧ変性脂質は、ＰＥＧ−ジスチリルグリセロール（ＰＥＧ−ＤＳＧ）である。

【0221】

一実施形態において、脂質：ｓｉＲＮＡの比は、少なくとも約０．５：１、少なくとも約１：１、少なくとも約２：１、少なくとも約３：１、少なくとも約４：１、少なくとも約５：１、少なくとも約６：１、少なくとも約７：１、少なくとも約１１：１又は少なくとも約３３：１である。一実施形態において、脂質：ｓｉＲＮＡの比は、約１：１〜約３５：１、約３：１〜約１５：１、約４：１〜約１５：１、又は約５：１〜約１３：１である。一実施形態において、脂質：ｓｉＲＮＡの比は、約０．５：１〜約１２：１である。

【0222】

一実施形態において、この脂質粒子はナノ粒子である。更なる実施形態において、この脂質粒子は、約５０ｎｍ〜約２５０ｎｍ（例えば、約５０ｎｍ〜約２００ｎｍ）などの約５０ｎｍ〜約３００ｎｍの平均直径サイズを有する。

【0223】

一実施形態において、本発明に記載されている実施形態のいずれかのカチオン性脂質を含有する脂質粒子は、３時間未満（約２．５時間未満、約２時間未満、約１．５時間未満、約１時間未満、約０．５時間未満又は約０．２５時間未満など）のインビボ半減期（ｔ_１／２）（例えば、肝臓、脾臓又は血漿中の）を有する。

【0224】

別の実施形態において、本発明に記載されている実施形態のいずれかのカチオン性脂質を含有する脂質粒子は、１つ又は複数の生分解性基を含まない同一のカチオン性脂質のものの約１０％未満（例えば、約７．５％未満、約５％未満、約２．５％未満）のインビボ半減期（ｔ_１／２）（例えば、肝臓、脾臓又は血漿中の）を有する。

【0225】

追加の成分
本明細書に記載されている脂質粒子及び組成物は、１つ以上の抗酸化剤を更に含むことが可能である。抗酸化剤は、脂質粒子を安定化し、脂質粒子内に存在するカチオン性脂質及び／又は活性作用物質の分解を防止し、減少させ、及び／又は阻害する。抗酸化剤は、親水性抗酸化剤、親油性抗酸化剤、金属キレート剤、一次抗酸化剤、二次抗酸化剤、それらの塩、及びそれらの混合物であり得る。特定の実施形態において、抗酸化剤は、ＥＤＴＡ又はその塩などの金属キレート剤を、単独で若しくは一次抗酸化剤、二次抗酸化剤、又はその他の金属キレート剤などの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、又はそれ以上の追加の抗酸化剤と組み合わせて含む。１つの好ましい実施形態において、この抗酸化剤は、１つ以上の一次抗酸化剤及び／又は二次抗酸化剤との混合物で、ＥＤＴＡ又はその塩などの金属キレート剤を含む。例えば、この抗酸化剤は、ＥＤＴＡ又はその塩、トコフェロール又はその塩などの一次抗酸化剤、並びにパルミチン酸アスコルビル又はその塩などの二次抗酸化剤を含むことが可能である。一実施形態において、この抗酸化剤は、少なくとも約１００ｍＭのクエン酸又はその塩を含む。抗酸化剤の例としては、親水性抗酸化剤、親油性抗酸化剤、及びこれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。親水性抗酸化剤の非限定的な例としては、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、クエン酸、エチレングリコール四酢酸（ＥＧＴＡ）、１，２−ビス（ｏ−アミノフェノキシ）エタン−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＢＡＰＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、２，３−ジメルカプト−１−プロパンスルホン酸（ＤＭＰＳ）、ジメルカプトコハク酸（ＤＭＳＡ）、ｃｃ−リポ酸、サリチルアルデヒドイソニコチノイルヒドラゾン（ＳＩＨ）、ヘキシルチオエチルアミン塩酸塩（ＨＴＡ）、デスフェリオキサミン、これらの塩、及びこれらの混合物などのキレート化剤（例えば、金属キレート剤）が挙げられる。追加の親水性抗酸化剤としては、アスコルビン酸、システイン、グルタチオン、ジヒドロリポ酸、２−メルカプトエタンスルホン酸、２−メルカプトベンズイミダゾールスルホン酸、６−ヒドロキシ−２，５，７，８−テトラメチルクロマン−２−カルボン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、これらの塩、及びこれらの混合物が挙げられる。親油性抗酸化剤の非限定的例としては、α−、β−、γ−及びδ−トコフェロール並びにα−、β−、γ−及びδ−トコトリエノールなどのビタミンＥ異性体；２−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルフェノール、２−ｆｅｒｔ−ブチル−５−メチルフェノール、及び２−ｔｅｒｔ−ブチル−６−メチルフェノールなどのポリフェノール；ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）（例えば、２−ｔｅｒｉ−ブチル−４−ヒドロキシアニソール及び３−ｔｅｒｔ−ブチル−４−ヒドロキシアニソール）；ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）；ｔｅｒｔ−ブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）；パルミチン酸アスコルビル；ｒｃ−プロピルガレート；これらの塩；及びこれらの混合物が挙げられる。好適な抗酸化剤及びこのような抗酸化剤を含有する製剤は、参照により本明細書に組み込まれている、国際公開第２０１１／０６６６５１号パンフレットに記載されている。

【0226】

別の実施形態において、脂質粒子又は組成物は、抗酸化剤ＥＤＴＡ（若しくはその塩）、抗酸化剤クエン酸（若しくはその塩）、又はα−トコフェロール（若しくはその塩）及び／又はパルミチン酸アスコルビル（若しくはその塩）などの１つ以上の一次及び／又は二次抗酸化剤（例えば、これらの混合物）と組み合わせたＥＤＴＡ（若しくはその塩）を含有する。

【0227】

一実施形態において、抗酸化剤は、脂質粒子内に存在するカチオン性脂質の分解を防止し、阻害し、又は低減するのに十分な量で存在する。例えば、この抗酸化剤は、少なくとも約又は約０．１ｍＭ、０．５ｍＭ、１ｍＭ、１０ｍＭ、１００ｍＭ、５００ｍＭ、１Ｍ、２Ｍ、若しくは５Ｍ、又は約０．１ｍＭ〜約１Ｍ、約０．１ｍＭ〜約５００ｍＭ、約０．１ｍＭ〜約２５０ｍＭ、若しくは約０．１ｍＭ〜約１００ｍＭの濃度で存在することが可能である。

【0228】

本明細書に記載されている脂質粒子及び組成物は、アポリポタンパク質を更に含むことができる。本明細書で使用するとき、用語「アポリポタンパク質」又は「リポタンパク質」とは、当業者に既知のアポリポタンパク質並びにその変異体及び断片を指し、並びに以下に記載されているアポリポタンパク質作動体、その類似体又は断片を指す。

【0229】

好ましい実施形態において、活性作用物質は、ｓｉＲＮＡなどの核酸である。例えば、活性作用物質は、ＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンタゴｍｉｒ、ＤＮＡ、プラスミド、リボソームＲＮＡ（ｒＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）（例えば、単鎖で、長さ１７〜２５のヌクレオチドであるｍｉＲＮＡ）、転移ＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、短鎖干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、核内低分子ＲＮＡ（ｓｎＲＮＡ）、抗原、その断片、タンパク質、ペプチド、ワクチン及び小分子又はこれらの混合物を含めるが、これらに限定されない、関心ある産物でコード化される核酸であり得る。１つのより好ましい実施形態において、この核酸は、オリグヌクレオチド（例えば、長さ１５〜５０のヌクレオチド（又は長さ１５〜３０若しくは２０〜３０のヌクレオチド））である。ｓｉＲＮＡは、例えば、１６〜３０ヌクレオチドの長さである二重鎖領域を有することが可能である。別の実施形態において、この核酸は、免疫刺激性オリゴヌクレオチド、デコイオリゴヌクレオチド、スーパーｍｉｒ、ｍｉＲＮＡ模倣体、又はｍｉＲＮＡ阻害剤である。スーパーｍｉｒとは、リボ核酸（ＲＮＡ）又はデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）若しくはその双方又はその修飾体の単鎖又は二重鎖又は部分的に二重鎖のオリゴマー又はポリマーを指し、これは、ｍｉＲＮＡと実質的に等しいヌクレオチド配列並びにその標的に対してアンチセンスであるヌクレオチド配列を有する。ｍｉＲＮＡ模倣体とは、１つ以上のｍｉＲＮＡの遺伝子サイレンシング能力を模倣するために使用することできるある種の分子を表す。したがって、用語「マイクロＲＮＡ模倣体」とは、ＲＮＡｉ経路に侵入し、遺伝子発現を調節することが可能である、合成非コードＲＮＡを指す（すなわち、このｍｉＲＮＡは、内因性ｍｉＲＮＡのソースからの精製によって得られない）。

【0230】

脂質−核酸粒子内に存在する核酸は、任意の形態であり得る。この核酸は、例えば、単鎖ＤＮＡ又はＲＮＡ、若しくは二重鎖ＤＮＡ又はＲＮＡ、あるいはＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッドであり得る。二重鎖ＲＮＡの非限定的な例としては、ｓｉＲＮＡが挙げられる。単鎖核酸としては、例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド、リボザイム、マイクロＲＮＡ、及び三重鎖形性オリグヌクレオチドが挙げられる。本発明の脂質粒子は、１つ以上のリガンドにコンジュゲートされている核酸を送達することも可能である。

【0231】

医薬組成物
脂質粒子は、特に治療薬を伴う場合、医薬組成物として製剤化されることが可能であり、例えば、これは、生理食塩水又はリン酸塩緩衝液などの薬学的に許容可能な希釈剤、賦形剤、又は担体を更に含む。

【0232】

得られる医薬調製物は、通常の周知の滅菌技術によって滅菌され得る。水性溶液は、その後、使用のために包装され、又は無菌条件下で濾過され、凍結乾燥されることが可能であり、凍結乾燥調製物は、投与前に無菌水性溶液と混合される。この組成物は、生理学的条件に近づけるために、任意選択で、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、並びに浸透圧調整剤、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、及び塩化カルシウムなどの薬学的に許容可能な補助物質を含有してもよい。更に、この脂肪懸濁液は、保存時に脂質をフリーラジカル及び脂質過酸化の損傷に対して保護する脂質保護剤を含有してもよい。α−トコフェロールなどの親油性フリーラジカル失活剤及びフェリオキサミンなどの水溶性鉄特異的キレート剤が好ましい。

【0233】

医薬品製剤中の脂質粒子又は脂質−核酸粒子の濃度は、例えば、約０．０１重量％未満から約０．０５〜５重量％まで、又は少なくとも０．０５〜５重量％まで、１０〜３０重量％と同程度まで、異なり得る。

【0234】

製造法
カチオン性脂質、それらを含有する脂質粒子、及びカチオン性脂質及び／又は脂質粒子を含有している医薬組成物を製造する方法は、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれている、国際公開第２０１０／０５４４０６号パンフレット、同第２０１０／０５４４０１号パンフレット、同第２０１０／０５４４０５号パンフレット、同第２０１０／０５４３８４号パンフレット、同第２０１０／０４２８７７号パンフレット、同第２０１０／１２９７０９号パンフレット、同第２００９／０８６５５８号パンフレット、及び同第２００８／０４２９７３号パンフレット、並びに米国特許出願公開第２００４／０１４２０２５号明細書、同第２００６／００５１４０５号明細書及び同第２００７／００４２０３１号明細書に記載されている。

【0235】

例えば、一実施形態において、有機溶液（例えば、エタノール）中の１つ以上の脂質（本明細書に記載されている実施形態のいずれかのカチオン性脂質を含める）の溶液を調製する。同様に、水性緩衝溶液（例えば、クエン酸緩衝液）中の１つ以上の活性（治療）薬剤（例えば、ｓｉＲＮＡ分子又は２つのｓｉＲＮＡ分子の１：１モル混合物など）の溶液を調製する。この２つの溶液を混合し、希釈して、ｓｉＲＮＡ脂質粒子のコロイド状懸濁液を形成する。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ脂質粒子は、約８０〜９０ｎｍの平均粒子サイズを有する。他の実施形態において、この分散液は、０．４５／２ミクロンのフィルターを通して濾過し、濃縮し、接線流濾過によって透析濾過することが可能である。

【0236】

定義
本明細書で使用するとき、用語「カチオン性脂質」は、生理学的ｐＨにおいてプロトン化されカチオン性脂質を形成することが可能である、１つ又は２つの脂肪酸又は脂肪族鎖及びヘッド基を含有するアミノ酸を有する脂質であるものを含む。いくつかの実施形態において、カチオン性脂質は、「アミノ酸接合カチオン脂質」と呼ばれる。

【0237】

複合体の投与が、疾患又は障害に有効な治療レジメンである対象又は患者はヒトであるが、治験又はスクリーニング若しくは活性物質実験における実験動物を含める任意の動物であり得る。したがって、当業者であれば容易に理解することができるように、本発明の方法、化合物及び組成物は、任意の動物、特に哺乳動物への投与に特に適していて、これらは、決して限定するものではないが、ヒト、ネコ又はイヌ科動物などの飼育動物、限定されないがウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ及びブタ種などの家畜、野生動物（野生状態のもの又は動物園で飼育されているもののいずれでも）、マウス、ラット、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、イヌ、及びネコなどの研究用動物、ニワトリ、七面鳥、及び鳴禽類など鳥類種、すなわち獣医学的使用のためのものが挙げられる。

【0238】

上記一般式中に記された化学基の多くは、特定の順序で表記されている（例えば、−ＯＣ（Ｏ）−）。化学基は、特に明記しない限り、示された順序で一般式に組み込まれるべきであることが意図されている。例えば、−（Ｒ）_ｉ−（Ｍ^１）_ｋ−（Ｒ）_ｍ−の形の一般式（式中、Ｍ^１は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−であり、ｋは１である）は、特記しない限り、−（Ｒ）_ｉ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−（Ｒ）_ｍ−を指す。化学基が特定の順序で表記される場合、特記されない限り、逆の順序もまた考えられることを理解するべきである。例えば、一般式−（Ｒ）_ｉ−（Ｍ^１）_ｋ−（Ｒ）_ｍ−（式中、Ｍ^１は−Ｃ（Ｏ）ＮＨとして定義される（すなわち、−（Ｒ）_ｉ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（Ｒ）_ｍ−））において、特記されない限り、Ｍ^１が−ＮＨＣ（Ｏ）−である化合物（すなわち、−（Ｒ）_ｉ−ＮＨＣ（Ｏ）−（Ｒ）_ｍ−）もまた考えられる。

【0239】

用語「生分解性カチオン性脂質」とは、カチオン性脂質の脂質部分（例えば、疎水性鎖）の中間又は遠位セクションに位置する１つ以上の生分解性基を有するカチオン性脂質を指す。生分解性基のカチオン性脂質への組み込みは、標的領域への活性医薬成分の送達後に、カチオン性脂質のより迅速な代謝及び体内からの除去をもたらす。

【0240】

本明細書で使用するとき、用語「生分解性基」とは、生物学的条件において、例えば、生物体、器官、組織、細胞、又は細胞小器官において、結合破壊反応を受けることが可能である１つ以上の結合を有する基を指す。例えば、生分解性基は、ヒトなどの哺乳動物の体部によって（例えば加水分解によって）代謝可能であり得る。生分解性結合を含有するいくつかの基としては、例えば、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｓ）−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｒ^５）＝Ｎ−Ｏ−、−Ｏ−Ｎ＝Ｃ（Ｒ^５）−、−Ｃ（Ｏ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）（ＮＲ^５）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^５）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５）−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＳｉ（Ｒ^５）_２Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）Ｏ−、又は−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ^３Ｒ^４）Ｃ（Ｏ）−が挙げられるが、これらに限定されない。

【0241】

本明細書で使用するとき、「脂肪族」基は、その中で炭素原子が鎖に結合されている非芳香族基であり、これは飽和又は不飽和のいずれかである。

【0242】

用語「アルキル」及び「アルキレン」とは、直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素部分を指す。一実施形態において、アルキル基は、直鎖飽和炭化水素である。特記しない限り、この「アルキル」又は「アルキレン」基は、１〜２４個の炭素原子を含有する。代表的な飽和直鎖アルキル基としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、及びｎ−ヘキシルが挙げられる。代表的な飽和分岐鎖アルキル基としては、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、及びイソペンチルが挙げられる。

【0243】

用語「アルケニル」とは、１つ以上の炭素−炭素二重結合を有する直鎖又は分岐鎖炭化水素を指す。一実施形態において、アルケニル基は、１、２、又は３個の二重結合を含有し、その他は飽和されている。特記されない限り、「アルケニル」基は、２〜２４個の炭素原子を含有する。アルケニル基は、シス及びトランス異性体の双方を含む。代表的な直鎖及び分岐鎖アルケニル基としては、エチレニル、プロピレニル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、及び２，３−ジメチル−２−ブテニルが挙げられる。

【0244】

用語「アルキニル」とは、１つ以上の炭素−炭素三重結合を有する直鎖又は分岐鎖炭化水素部分を指す。特記されない限り、「アルキニル」基は、２〜２４個の炭素原子を含有する。代表的な直鎖及び分岐鎖アルキニル基としては、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、及び３−メチル−１−ブチニルが挙げられる。

【0245】

特記されない限り、用語「分岐鎖アルキル」、「分岐鎖アルケニル」、及び「分岐鎖アルキニル」とは、基内の１つの炭素が（１）少なくとも３つの他の炭素原子に結合している、及び（２）環式基の環原子ではない、アルキル、アルケニル、又はアルキニル基を指す。例えば、アルキル、アルケニル、又はアルキニル基中のスピロ環式基は、分岐点とはみなされない。

【0246】

特記されない限り、用語「アシル」とは、水素、アルキル、部分的に飽和された又は完全に飽和されたシクロアルキル、部分的に飽和された又は完全に飽和された複素環、アリール、又はヘテロアリールで置換されたカルボニル基を指す。例えば、アシル基としては、（Ｃ_１〜Ｃ_２０）アルカノイル（例えば、ホルミル、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、カプロイル、及びｔ−ブチルアセチル）、（Ｃ_３〜Ｃ_２０）シクロアルキルカルボニル（例えば、シクロプロピルカルボニル、シクロブチルカルボニル、シクロペンチルカルボニル、及びシクロヘキシルカルボニル）、複素環式カルボニル（例えば、ピロリジニルカルボニル、ピロリド−２−オン−５−カルボニル、ピペリジニルカルボニル、ピペラジニルカルボニル、及びテトラヒドロフラニルカルボニル）、アロイル（例えば、ベンゾイル）及びヘテロアロイル（例えば、チオフェニル−２−カルボニル、チオフェニル−３−カルボニル、フラニル−２−カルボニル、フラニル−３−カルボニル、１Ｈ−ピロイル−２−カルボニル、１Ｈ−ピロイル−３−カルボニル、及びベンゾ［ｂ］チオフェニル−２−カルボニル）が挙げられる。

【0247】

用語「アリール」とは、芳香族一環式、二環式、又は三環式炭化水素環系を指す。特記されない限り、この「アリール」基は、６〜１４個の炭素原子を有する。アリール部分の例としては、フェニル、ナフチル、アントラセニル、及びピレニルが挙げられるが、これらに限定されない。

【0248】

用語「シクロアルキル」及び「シクロアルキレン」とは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルなどの飽和一環式又は二環式炭化水素部分を指す。特記されない限り、この「シクロアルキル」又は「シクロアルキレン」基は、３〜１０個の炭素原子を含有する。

【0249】

用語「シクロアルキルアルキル」とは、アルキル基に結合したシクロアルキル基を指し、ここでは、アルキル基は、分子の残部に結合されている。

【0250】

用語「複素環」（又は「ヘテロシクリル」）とは、飽和又は不飽和のいずれかである、非芳香族５〜８員一環式環系、又は７〜１２員の二環式環系、又は１１〜１４員三環式環系を指し、一環式の場合、１〜３個のヘテロ原子を含有し、二環式の場合、１〜６個のヘテロ原子を含有し、又は三環式の場合１〜９個のヘテロ原子を含有し（ヘテロ原子は、窒素、酸素及びイオウから独立して選択され）、この窒素及びイオウヘテロ原子は、任意選択で酸化されてもよく、窒素ヘテロ原子は、任意選択で第四級化されてもよい。例えば、複素環は、シクロアルコキシ基であり得る。複素環は、複素環内の任意のヘテロ原子又は炭素原子を介して、分子の残部に結合され得る。複素環としては、モルフォリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、及びテトラヒドロチオピラニルが挙げられるが、これらに限定されない。

【0251】

用語「ヘテロアリール」とは、一環式の場合は１〜３個のヘテロ原子を有し、二環式の場合は１〜６個のヘテロ原子を有し、三環式の場合は１〜９個のヘテロ原子を有する、芳香族５〜８員の一環式、７〜１２員の二環式、又は１１〜１４員の三環式環系を指し、このヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、又はＳから選択される（例えば、一環式、二環式、又は三環式の場合、それぞれ炭素原子及び１〜３個、１〜６個、又は１〜９個のＮ、Ｏ、又はＳのヘテロ原子）。本明細書に記載されているヘテロアリール基はまた、共通の炭素−炭素結合を共有する融合環を含有してもよい。

【0252】

用語「置換された」とは、特に断らない限り、特定された置換基のラジカルによる所定の構造内の１つ以上の水素の置き換えを指し、特定の置換基は、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル、チオール、アルキルチオ、オキソ、チオキシ、アリールチオ、アルキルチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アリールスルホニルアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキル、アミノ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルアミノアルキル、アリールアミノアルキル、アミノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アミノカルボニルアルキル、アシル、アラルコキシカルボニル、カルボン酸、スルホン酸、スルホニル、リン酸、アリール、ヘテロアリール、複素環、及び脂肪族基が挙げられるが、これらに限定されない。置換基は、更に置換されてもよいことが理解される。例示的な置換基としては、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、及び環式アミノ化合物が挙げられる。

【0253】

用語「ハロゲン」又は「ハロ」とは、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを指す。

【0254】

以下の略語を本出願において使用することができる：
ＤＳＰＣ：ジステアロイルホスファチジルコリン；ＤＰＰＣ：１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン；ＰＯＰＣ：１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−ホスファチジルコリン；ＤＯＰＥ：１，２−ジオレオイル−ｓｎ−３−ホスホエタノールアミン；ＰＥＧ−ＤＭＧ：一般的に１，２−ジミリストイル−ｓｎ−グリセロール−メトキシポリエチレングリコール（例えばＰＥＧ ２０００）を指す：ＴＢＤＰＳＣｌ：ｔｅｒｔ−ブチルクロロジフェニルシラン；ＤＭＡＰ：ジメチルアミノピリジン；ＨＭＰＡ：ヘキサメチルホスホラミド；ＥＤＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド；ＤＩＰＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；ＤＣＭ：ジクロロメタン；ＴＥＡ：トリエチルアミン；ＴＢＡＦ：テトラブチルアンモニウムフルオリド。

【0255】

様々な有機基及び保護基を調製するための方法は、当該技術分野で既知であり、それらの使用及び変更は、当業者の能力の範囲内にある（例えば、Ｇｒｅｅｎ，Ｔ．Ｗ．ｅｔ．ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９）；Ｓｔａｎｌｅｙ Ｒ．Ｓａｎｄｌｅｒ ａｎｄ Ｗｏｌｆ Ｋａｒｏ，Ｏｒｇａｎｉｃ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ（１９８９）；Ｇｒｅｇ Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ（１９９６）；及びＬｅｒｏｙ Ｇ．Ｗａｄｅ，Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ Ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｍｅｔｈｏｄｓ（１９８０）を参照）。簡単に言うと、保護基は、官能基の不必要な反応性を低減又は排除する任意の基である。保護基は、特定の反応中に官能基の反応性をマスクするために官能基に添加し、その後、元の官能基を暴露するために除去することが可能である。いくつかの実施形態において、「アルコール保護基」が使用される。「アルコール保護基」は、アルコール官能基の不必要な反応性を低減又は排除する任意の基である。保護基は、当該技術分野で周知の技術を使用して、添加及び除去することが可能である。

【0256】

この化合物は、本明細書に記載されている技術の少なくとも１つ又は既知の有機合成技術によって調製することができる。

【実施例】

【0257】

実施例１：

【化91】

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化合物２：ＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍＬ）中の化合物１（１０．０ｇ、１８．８ミリモル、国際公開第２０１０／０５４４０６号パンフレットを参照）の溶液に、トリエチルアミン（７．８６ｍＬ、５６．４ミリモル）、ＤＭＡＰ（４５９ｍｇ、３．７６ミリモル）及びｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン（９．６２ｍＬ、３７．６ミリモル）を加えた。この反応混合物を２４時間にわたって撹拌した。この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後、粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜５％のＥｔＯＡｃ）によって精製し、２を得た（１２．４ｇ、１６．１ミリモル、８６％、Ｒ_ｆ＝０．２４（ヘキサン使用））。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６６−７．６８（ｍ，４Ｈ）、７．３３−７．４２（ｍ，６Ｈ）、５．３０−５．３９（ｍ，４Ｈ）、３．６７−３．７２（ｍ，１Ｈ）、１．９７−２．０４（ｍ，８Ｈ）、１．０７−１．４２（ｍ，５２Ｈ）、１．０５（ｓ，９Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。

【0258】

化合物３：ｔｅｒｔ−ブタノール（１００ｍＬ）、ＴＨＦ（３０ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）中、２の溶液（１２．４ｇ、１６．１ミリモル）に、４−メチルモルフォリンＮ−オキシド（４．１５ｇ、３５．４ミリモル）及び四酸化オスミウム（４１ｍｇ、０．１６１ｍｇ）を加えた。この反応混合物を１６時間撹拌し、次いで重亜硫酸ナトリウムにより急冷した。蒸発により溶媒を除去した後に、残渣をＥｔ_２Ｏ（５００ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（３００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝１：１、Ｒ_ｆ＝０．４９）により精製し、３を得た（１２．７ｇ、１５．１ミリモル、９４％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６６−７．６８（ｍ，４Ｈ）、７．３３−７．４３（ｍ，６Ｈ）、３．６７−３．７３（ｍ，１Ｈ）、３．５７−３．６２（ｍ，４Ｈ）、１．８２（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，４Ｈ）、１．１０−１．５１（ｍ，６０Ｈ）、１．０４（ｓ，９Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。

【0259】

化合物４：１，４−ジオキサン（２２０ｍＬ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２（７０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（５５ｍＬ）、及びＨ_２Ｏ（５５ｍＬ）中、３の溶液（１２．６ｇ、１５．０ミリモル）に、ＮａＩＯ_４（７．７０ｇ、３６．０ミリモル）を加えた。この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物をＥｔ_２Ｏ（５００ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（３００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後に、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１、Ｒ_ｆ＝０．３０）により精製し、４を得た（７．９８ｇ、１４．５ミリモル、９７％）。Ｃ_３５Ｈ_５４ＮａＯ_３Ｓｉについての分子量は（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値＝５７３．３７４０、実測値＝５７３．３であった。

【0260】

化合物７：ＴＨＦ（２０ｍＬ）及びＨＭＰＡ（４ｍＬ）中、５（Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、６３、１１４０−１１４５、２００６を参照；１．０９ｇ、２．１８ミリモル）の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（１ＭのＴＨＦ溶液、４．３６ｍＬ、４．３６ミリモル）を−２０℃で加えた。得られた混合物を同じ温度で２０分間撹拌し、次いで−７８℃まで冷却した。ＴＨＦ（４ｍＬ）中の４（５００ｍｇ、０．９０８ミリモル）の溶液を加えた。この混合物を撹拌し、室温に一晩かけて暖めた。ＭＳ分析は、二価酸の形成を示した（６；Ｃ_５３Ｈ_８５Ｏ_５Ｓｉ（Ｍ−Ｈ）⁻ 計算値＝８２９．６１６６、観測値＝８２９．５）。この混合物に、ＮａＨＣＯ_３（１．１０ｇ、１３．１ミリモル）及び硫酸ジメチル（１．２４ｍＬ、１３．１ミリモル）を加え、室温で２時間撹拌した。反応物に飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（５０ｍＬ）を加えて急冷し、次いでＥｔ_２Ｏ（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１、Ｒ_ｆ＝０．３５）により精製し、７を得た（２７０ｍｇ、０．３１４ミリモル、３５％）。Ｃ_５５Ｈ_９０ＮａＯ_５Ｓｉについての分子量は、（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値＝８８１．６４５５、実測値＝８８１．６４８４であった。

【0261】

化合物８：ＴＨＦ（２．５ｍＬ）中の７（２６５ｍｇ、０．３０８ミリモル）の溶液に、ｎ−ＴＢＡＦ（１ＭのＴＨＦ溶液、０．５５５ｍＬ、０．５５５ミリモル）を加えた。反応混合物を４５℃で１４時間にわたって撹拌した。濃縮後に、この混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝３：１、Ｒ_ｆ＝０．５２）により精製し、８を得た（１５５ｍｇ、０．２５０ミリモル、８１％）。Ｃ_３９Ｈ_７２ＮａＯ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値＝６４３．５２７７、実測値＝６４３．５２７３であった。

【0262】

化合物９：ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）中の８（１５０ｍｇ、０．２４２ミリモル）及び４−（ジメチルアミノ）酪酸塩酸塩（４９ｍｇ、０．２９０ミリモル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．１２６ｍＬ、０．７２６ミリモル）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（５６ｍｇ、０．２９０ミリモル）及びＤＭＡＰ（６ｍｇ、０．０４８４ミリモル）を加えた。この反応混合物を室温で１４時間撹拌した。次いで反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜５％のＭｅＯＨ）により精製し、化合物９を得た（１２１ｍｇ、０．１６５ミリモル、６８％、Ｒ_ｆ＝０．２５（ＣＨ_２Ｃｌ_２中５％のＭｅＯＨで展開））。Ｃ_４５Ｈ_８４ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値＝７３４．６２９９、実測値＝７３４．５であった。

【0263】

化合物１０：化合物９をＣＨ_３ＣＮ及びＣＨＣｌ_３中、ＣＨ_３Ｃｌで処理し、化合物１０を得ることができる。

【0264】

実施例２：

【化92】

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化合物１２：ＴＨＦ（２０ｍＬ）及びＨＭＰＡ（４ｍＬ）中の１１（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９５）、３８、６３６−４６参照；１．２５ｇ、２．５８ミリモル）の溶液に、ＬｉＨＭＤＳ（１ＭのＴＨＦ溶液、２．５８ｍＬ、２．５８ミリモル）を−２０℃で加えた。この混合物を同じ温度で２０分間撹拌し、次いで−７８℃まで冷却した。ＴＨＦ（９ｍＬ）及びＨＭＰＡ（０．９ｍＬ）中の４（５００ｍｇ、０．９０８ミリモル）の溶液を加えた。混合物を撹拌し、−７８℃から室温まで一晩かけて暖めた。Ｈ_２Ｏ（４０ｍＬ）を加えて反応物を急冷し、次いでＥｔ_２Ｏ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後に、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝９：１、Ｒ_ｆ＝０．３５）により精製し、１２を得た（１３６ｍｇ、０．１６９ミリモル、１９％）。Ｃ_５１Ｈ_８２ＮａＯ_５Ｓｉについての分子量は、（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値＝８２５．５８２９、実測値＝８２５．５であった。

【0265】

５に代えて１３を使用して、化合物７について記載されたものと類似の手順に従って、化合物１２を得た（１３５ｍｇ、０．１６８ミリモル、４６％）。

【0266】

化合物１５／化合物１６：ＴＨＦ（５ｍＬ）中の１２（８００ｍｇ、０．９９６ミリモル）の溶液に、ｎ−ＴＢＡＦ（１ＭのＴＨＦ溶液、５ｍＬ、５．００ミリモル）を加えた。反応混合物を４５℃で１６時間にわたって撹拌した。濃縮後に、混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、１５（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝３：１、Ｒ_ｆ＝０．４６、３７２ｍｇ、０．６５９ミリモル、６６％）及び１６（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ＝９５：５、Ｒ_ｆ＝０．３６、１３５ｍｇ、０．２５１ミリモル、２５％）を得た。１５；Ｃ_３５Ｈ_６４ＮａＯ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値＝５８７．４６５１、実測値＝５８７．４６５２であった。１６；Ｃ_３３Ｈ_６１Ｏ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値＝５３７．４５１９、実測値＝５３７．５であった。

【0267】

化合物１７：ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）中の化合物１５（１６４ｍｇ、０．２９０ミリモル）及び４−（ジメチルアミノ）酪酸塩酸塩（５８ｍｇ、０．３４８ミリモル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．１５２ｍＬ、０．８７０ミリモル）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（６７ｍｇ、０．３４８ミリモル）及びＤＭＡＰ（７ｍｇ、０．０５８ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で１４時間にわたって撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過し濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜５％のＭｅＯＨ）により精製し、化合物１７を得た（１５８ｍｇ、０．２３３ミリモル、８０％、Ｒ_ｆ＝０．２４（ＣＨ_２Ｃｌ_２中５％のＭｅＯＨで展開））。Ｃ_４５Ｈ_８４ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値＝７３４．６２９９、実測値＝７３４．５であった。

【0268】

化合物１８：化合物１７をＣＨ_３ＣＮ及びＣＨＣｌ_３中、ＣＨ_３Ｃｌで処理し、化合物１８を得ることができる。

【0269】

化合物１９：ＴＨＦ（２ｍＬ）及びＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の１６（１３０ｍｇ、０．２４２ミリモル）の溶液に、トリメチルシリルジアゾメタン（Ｅｔ_２Ｏ中２Ｍ溶液、０．１５８ｍＬ、０．３１５ミリモル）を加えた。反応混合物を１４時間撹拌した、蒸発後に、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝３：１、Ｒ_ｆ＝０．５０）により精製し、１９を得た（９９ｍｇ、０．１８０ミリモル、７４％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．２９−５．４０（ｍ，４Ｈ）、４．１２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．６６（ｓ，３Ｈ）、３．５５−３．５９（ｍ，１Ｈ）、２．３０（ｄｄ，Ｊ＝１４．７，７．２Ｈｚ，４Ｈ）、１．９８−２．０７（ｍ，８Ｈ）、１．６０−１．６８（ｍ，４Ｈ）、１．２３−１．４３（ｍ，３７Ｈ）。

【0270】

化合物２０：ＣＨ_２Ｃｌ_２（３ｍＬ）中の化合物１９（９５ｍｇ、０．１６８ミリモル）及び４−（ジメチルアミノ）酪酸塩酸塩（４２ｍｇ、０．２５２ミリモル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．０８８ｍＬ、０．５０４ミリモル）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（４８ｍｇ、０．５０４ミリモル）及びＤＭＡＰ（４ｍｇ、０．０３４ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で１４時間にわたって撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過し濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜５％のＭｅＯＨ）により精製し、化合物２０を得た（１０３ｍｇ、０．１５５ミリモル、９２％、Ｒ_ｆ＝０．１９（ＣＨ_２Ｃｌ_２中５％のＭｅＯＨで展開））。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．２９−５．４０（ｍ，４Ｈ）、４．８３−４．８９（ｍ，１Ｈ）、４．１２（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．６７（ｓ，３Ｈ）、２．２８−２．３４（ｍ，８Ｈ）、２．２３（ｓ，６Ｈ）、１．９８−２．０７（ｍ，８Ｈ）、１．７６−１．８３（ｍ，２Ｈ）、１．６０−１．６８（ｍ，４Ｈ）、１．２３−１．５１（ｍ，３５Ｈ）。

【0271】

化合物２１：化合物２０をＣＨ_３ＣＮ及びＣＨＣｌ_３中、ＣＨ_３Ｃｌで処理し、化合物２１を得ることができる。

【0272】

実施例３：ジ−アルデヒド中間体４についての代替合成

【化93】

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ジ−アルデヒド４は、１−ブロモ−９−デセンを使用して、スキーム３に示したように合成することが可能である。ヘッド基２７を含有するジ−アルデヒドは、例えば、ウィッティング反応を使用して、末端エステル置換された脂質の合成に有用であり得る。オゾン分解は、ジ−アルデヒド４及び２７をもたらすことが可能である。

【0273】

実施例４：化合物８についての代替合成

【化94】

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化合物８は、スキーム４に示す通りに合成することが可能である。

【0274】

化合物２９：５００ｍＬの無水ＤＭＦ中、ＮａＨ（油中６０％、８２ｇ、１．７０９６モル）の撹拌懸濁液に、１．５ＬのＤＭＦ中、化合物２８（２５０ｇ、１．７０９６モル）の溶液を、０℃で滴下漏斗を使用してゆっくりと加えた。この反応混合物を３０分間撹拌し、次いで臭化ベンジル（２０８．８６ｍＬ、１．７０９６モル）を窒素雰囲気下でゆっくりと加えた。次いで反応物を周囲温度まで暖め、１０時間にわたって撹拌した。次いで、混合物を砕氷（約２ｋｇ）で急冷し、酢酸エチル（２×１Ｌ）で抽出した。有機層を水（１Ｌ）で洗浄して、不必要なＤＭＦを除去し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗化合物を、ＤＣＭ中０〜５％のＭｅＯＨで溶出させて、６０〜１２０のシリカゲル上で精製し、化合物２９（２２０ｇ、５４％）を淡黄色液体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２４（ｍ，５Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、３．６３−３．６０（ｍ，２Ｈ）、３．４７−３．４３（ｍ，２Ｈ）、１．６３−１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３９−１．２３（ｍ，８Ｈ）。

【0275】

化合物３０：化合物２９（１３３ｇ、０．５６３５モル）を１．５ＬのＤＣＭ中に溶解し、ＣＢｒ_４（２８０．３５ｇ、０．８４５６モル）を、この撹拌溶液に加え、不活性雰囲気下で反応混合物を０℃まで冷却した。次いでＰＰｈ_３（２５１．０３ｇ、０．９５７１モル）を、２０℃未満の温度を保ちながら、少量ずつ添加した。添加完了後に、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応の完了後に、反応混合物から沈殿した固体（ＰＰｈ_３Ｏ）を濾過により除去し、濾液を砕氷（約１．５ｋｇ）で希釈し、ＤＣＭ（３×７５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空下で蒸留した。得られた粗化合物を、溶出系としてヘキサン中０〜５％の酢酸エチルを使用して、６０〜１２０メッシュのシリカゲルカラム上でクロマトグラフィーを行い、化合物３０（１５０ｇ、８９％）を淡黄色液体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２５（ｍ，５Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、３．４７−３．４１（ｍ，２Ｈ）、３．４１−３．３７（ｍ，２Ｈ）、１．８６−１．８０（ｍ，４Ｈ）、１．６２−１．５６（ｍ，２Ｈ）、１．４２−１．２９（ｍ，８Ｈ）。

【0276】

化合物３１：新たに活性化した削り屑状Ｍｇ（２４．０８ｇ、１．００３モル）に２００ｍＬの無水ＴＨＦを加え、続いて不活性雰囲気下でヨウ素一摘みをこの混合物に添加した。１Ｌの乾燥ＴＨＦ中化合物３０（１５０ｇ、０．５０１６モル）の溶液を、発熱反応を制御しながら、ゆっくりと加えた。反応物を１時間加熱還流し、次いで室温に冷却した。次いでギ酸メチル（６０．２４ｇ、１．００３３モル）をゆっくりと加え、２時間にわたって反応を続けた。反応完了後に、１０％ＨＣｌ、続いて水（１Ｌ）をゆっくりと添加することにより反応物を急冷し、酢酸エチル（３×１Ｌ）で抽出した。有機層を５リットルのビーカーに採取し、５００ｍＬのメタノールで希釈し、０℃に冷却した。この溶液に、過剰量のＮａＢＨ_４（約５当量）を少しずつ加え、ＨＣｌの添加によって切断されないギ酸エステルの加水分解を確実にした。得られた溶液を１時間撹拌し、次いで揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水（１Ｌ）中に取り上げ、１０％のＨＣｌ溶液（ｐＨ４）で酸性化した。次いで、生成物を酢酸エチル（３×１Ｌ）で抽出した。次いで有機相を乾燥し、ロータリーエバポレーター上で濃縮し、所望の化合物３１（５７ｇ、２４％）を固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ＝７．３５−７．３２（ｍ，８Ｈ）、７．２９−７．２４（ｍ，２Ｈ）、４．４９（ｓ，４Ｈ）、３．５６（ｍ，１Ｈ）、３．４６−３．４３（ｍ，４Ｈ）、１．６３−１．５６（ｍ，４Ｈ）、１．４４−１．３４（ｍ，２８Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１００ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝１３８．５６、１２８．２１、１２７．４９、１２７．３４、７２．７２、７１．７６、７０．３７、３７．３７、２９．６４、２９．５６、２９．４７、２９．３３、２６．０７、２５．５４。

【0277】

化合物３２：化合物３１（５６ｇ、０．１１９６モル）を７００ｍＬの乾燥ＴＨＦ中に溶解し、０℃に冷却した。ＴＢＳＣｌ（３６．０６ｇ、０．２３９６モル）ゆっくりと加え、続いて不活性雰囲気下でイミダゾール（３２．５５ｇ、０．４７８６モル）を添加した。次いで反応物を室温で１８時間にわたって撹拌した。完了時に、反応物を氷（約１ｋｇ）で急冷し、酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、酸性不純物を除去し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、減圧下で蒸発させて、粗化合物を得て、これをシリカゲル（６０〜１２０メッシュ）により精製し、０〜１０％の酢酸エチル−ヘキサンで溶出して、化合物３２（６０ｇ、８２％）を帯黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２４（ｍ，１０Ｈ）、４．４９（ｓ，４Ｈ）、３．６０−３．５７（ｍ，１Ｈ）、３．４６−３．４３（ｍ，４Ｈ）、１．６１−１．５４（ｍ、４Ｈ）、１．４１−１．２６（ｍ，２８Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0278】

化合物３３：化合物３２（６０ｇ、０．１０３０モル）を５００ｍＬの酢酸エチル中に溶解し、Ｎ_２で２０分間脱気した。炭素上の（１０重量％）Ｐｄ（１２ｇ）を加え、反応物を水素の雰囲気下で１８時間にわたって撹拌した。撹拌完了後、セライト層を通して混合物を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空下で蒸発させて、化合物３３を得て（１９ｇ、４６％）、これは次の合成シーケンスでの使用のために十分に純粋であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝３．６４−３．５８（ｍ，５Ｈ）、１．５９（ｂｒ，２Ｈ）、１．５７−１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３８−１．２２（ｍ，２８Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0279】

化合物３４：化合物３３（８．２ｇ、０．０１９９モル）を１００ｍＬの乾燥ＤＣＭ中に溶解し、０℃に冷却した。ＴＥＡ（２２．１４ｍＬ、０．１５９２モル）を不活性雰囲気下で加えた。混合物を５分間撹拌した後に、塩化メシル（４．６ｍＬ、０．０５９モル）を滴加し、反応物を更に３時間撹拌した。反応完了後に、混合物を氷（約２００ｇ）で急冷し、ＤＣＭ（３×７５ｍＬ）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、蒸発させて、粗化合物を得て、これを、溶出系としてヘキサン中０〜３０％の酢酸エチルを用いて、６０〜１２０メッシュのシリカゲルカラムで精製し、化合物３４（８．２ｇ、７３％）を淡黄色液体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝４．２２−４．１９（ｍ，４Ｈ）、３．６０−３．５８（ｍ，１Ｈ）、２．９９（ｓ，６Ｈ）、１．７５−１．６９（ｍ，４Ｈ）、１．３８−１．２８（ｍ，２８Ｈ）、０．８６（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0280】

化合物３５：４００ｍＬの乾燥エーテル中、化合物３４（８．２ｇ、０．０１４６モル）の溶液に、ＭｇＢｒ_２Ｅｔ_２Ｏ（２２．７４ｇ、０．０８８１７モル）を、窒素雰囲気下で０℃において少量ずつ加えた。添加の完了後に、反応混合物を２８時間にわたって加熱還流した。反応の完了後に、反応において形成された無機物質を濾過により除去した。濾液を蒸発させて、得られた粗化合物を、溶出系としてヘキサン中０〜３％の酢酸エチルを用いて、６０〜１２０メッシュのシリカゲルカラム上で精製し、化合物３５（６．６ｇ、８５％）を無色液体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝３．６１−３．５８（ｍ，１Ｈ）、３．４１−３．３７（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）、１．８７−１．８０（ｍ，４Ｈ）、１．４２−１．２５（ｍ，２４Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０１２（ｓ，６Ｈ）。

【0281】

化合物３６：６０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中のエチニルトリメチルシラン（５．３ｍＬ、０．０３７８モル）の溶液を−７８℃まで冷却し、ヘキサン中、１．４Ｍのｎ−ＢｕＬｉ（２３ｍＬ、０．０３４０５モル）を不活性雰囲気下でゆっくりと加えた。反応物を１０分間撹拌し、次いでＨＭＰＡ（２．３ｇ、０．０１３２４モル）を加え、次いで得られた混合物を０℃で２時間撹拌し、その後−７８℃に冷却した。これに、６０ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の化合物３５（５ｇ、０．００９４モル）の溶液をゆっくりと加え、添加の完了後に、反応物を室温まで暖め、室温で１８時間維持した。反応の進行を^１Ｈ ＮＭＲで監視した。反応完了後に、反応混合物を０℃に冷やし、飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（５０ｍＬ）、続いて水（２００ｍＬ）を注意深く添加することによって急冷した。水相をヘキサン（３×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層を乾燥し、真空下で溶媒を除去し、化合物３６（５ｇ、９４％）を得て、これを更なる精製をすることなく使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ＝３．６２−３．５６（ｍ，１Ｈ）、２．２１−２．１７（ｍ，４Ｈ）、１．４９−１．４７（ｍ，４Ｈ）、１．３７−１．２６（ｍ、２４Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．１３（ｓ，１８Ｈ）、０．０２１（ｓ，６Ｈ）。

【0282】

化合物３７：５０ｍＬのメタノール中の化合物３６（５ｇ、０．００８８モル）の撹拌溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（６．１ｇ、０．０４４モル）を一度に加え、得られた混合物を周囲温度で１８時間にわたって撹拌した。次いで、ロータリーエバポレーターで揮発性物質を除去し、粗混合物を１００ｍＬの水で希釈し、ヘキサン（３×１００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空下で蒸発させて、化合物３７（３．５ｇ、９７％）を得て、これを更に精製することなく使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝３．６０−３．５８（ｍ，１Ｈ）、２．１９−２．１４（ｍ，４Ｈ）、１．９３−１．９２（ｍ，２Ｈ）、１．５４−１．４９（ｍ，４Ｈ）、１．３７−１．２７（ｍ、２４Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0283】

化合物３９：化合物３７（２．５ｇ、０．００５９８モル）を２５ｍＬの乾燥ＴＨＦ中に溶解し、−４０℃に冷却した。ｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中１．４Ｍ、１２．９ｍＬ、０．０１７９４モル）をゆっくりと添加し、続いて、１０分間おいて、ＨＭＰＡ（２５ｍＬ）をゆっくりと加えた。得られた混合物を窒素雰囲気下、−４０℃で３０分間維持した。次いで、２５ｍＬの乾燥ＴＨＦ中の化合物３８（３．５ｇ、１．０１１９６モル）の溶液を、冷却した反応混合物に滴加した。得られた混合物を２時間かけて室温まで暖めて、次いで室温で１８時間にわたって撹拌した。次いで、飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（約５０ｍＬ）を加えることで急冷し、生成物を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出した。溶媒をロータリーエバポレーター上で除去し、得られた粗生成物を、溶出系としてジクロロメタン中０〜３％の酢酸エチルを用いて、（１００〜２００メッシュ）シリカゲルカラムによって精製し、化合物３９（０．９ｇ、１８％）を黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝４．５６−４．５５（ｍ，２Ｈ）、３．８７−３．８３（ｍ，２Ｈ）、３．７４−３．６８（ｍ，２Ｈ）、３．５９−３．５７（ｍ，１Ｈ）、３．４９−３．４６（ｍ，２Ｈ）、３．３９−３．３３（ｍ，２Ｈ）、２．１３−２．１０（ｍ，８Ｈ）、１．８７−１．７５（ｍ，２Ｈ）、１．７４−１．６６（ｍ，２Ｈ）、１．５７−１．４２（ｍ，２０Ｈ）、１．４０−１．１９（ｍ、４０Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0284】

化合物４０：１０ｍＬの乾燥エーテル中の化合物３９（５０４ｍｇ、０．５９８ミリモル）の溶液に、ＭｇＢｒ_２Ｅｔ_２Ｏ（９２６ｍｇ、３．５９ミリモル）を加えた。反応混合物を１４時間にわたって撹拌し、次いで、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液を加えることで急冷した。生成物をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、化合物４０を得た（３０７ｍｇ、０．４５５ミリモル、７６％、Ｒ_ｆ＝０．３６（ヘキサン：ＥｔＯＡｃ＝２：１で展開））。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．５９−３．６６（ｍ，５Ｈ）、２．１４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，８Ｈ）、１．２１−１．５９（ｍ、５２Ｈ）、０．８８（ｓ，９Ｈ）、０．０３（ｓ，６Ｈ）。

【0285】

化合物４１：無水ＤＭＦ（５ｍＬ）中、化合物４０（１８０ｍｇ、０．２６７ミリモル）の溶液に、ピリジニウムジクロメート（６０３ｍｇ、１．６０ミリモル）を加えた。反応混合物を、４８時間にわたって撹拌した。水（２０ｍＬ）による希釈の後に、混合物をＥｔ_２Ｏ（３×４０ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物を、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、化合物４１を得た（５３ｍｇ、０．０７５ミリモル、２８％、Ｒ_ｆ＝０．２５（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ＝９５：４．５：０．５で展開））。Ｃ_４３Ｈ_７７Ｏ_５Ｓｉについての分子量は、（Ｍ−Ｈ）⁻計算値が７０１．５５４０であり、実測値が７０１．５であった。この化合物は、ＴＥＭＰＯ酸化によって合成することが可能である。

【0286】

化合物４２：化合物１９について記載されたものに類似する手順で、化合物４２を得た（２３ｍｇ、０．０３２ミリモル、化合物４０から２１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．６７（ｓ，６Ｈ）、３．５９−３．６２（ｍ，１Ｈ）、２．３０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ）、２．１３（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，８Ｈ）、１．２７−１．６４（ｍ、４８Ｈ）、０．８８（ｓ，９Ｈ）、０．０３（ｓ，６Ｈ）。

【0287】

Ｐ−２ニッケル条件を使用する還元は、化合物４３を与えることが可能であり、引き続いてのＴＢＡＦによる脱保護で化合物８を得ることができる。

【0288】

実施例５：化合物８の代替合成

【化95】

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化合物８は、スキーム５で示した通りに合成され得る。臭化物５１は、そのグリニャール試薬に変換され、次いでギ酸エチルと結合して、化合物５２を得ることができる。その後の酸処理、酸化、及び還元によって、化合物８を得ることができる。

【0289】

実施例６：化合物８の代替合成

【化96】

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化合物８は、スキーム６で示した通りに合成され得る。化合物５８、６０、又は６２のいずれかの臭化物は、ギ酸エチルと反応し、末端官能化ジ−オレフィン鎖を生成することが可能である。次いで化合物８は、標準化学反応を用いて、このジオレフィン鎖から調製することができる。

【0290】

実施例７：末端エステル脂質についての一般的合成スキーム

【化97】

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スキーム７に示すように、鎖長さ及びリンカー長さ並びに窒素原子上のエステル官能基及び置換基中のアルキル基が誘導され得る。

【0291】

実施例８：末端エステル脂質についての一般的合成スキーム２

【化98】

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スキーム８に示したように、銅媒介カップリングが、末端官能基を備える脂質鎖を含有するジ−インをもたらし、これは容易に還元され、脂質鎖を含有するジ−エンを生成することが可能である。リンカー及び脂質鎖の長さ並びに官能置換基（Ｒ、Ｒ_１、Ｒ_２）が誘導され得る。

【0292】

実施例９：末端ベンジルエステル脂質の合成

【化99】

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化合物２０１：化合物７（１．３０ｇ、１．５１ミリモル）を、ＴＨＦ（２５ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（５ｍＬ）中、水酸化リチウム一水和物（３１７ｍｇ、７．５５ミリモル）で処理した。アンバーライトＩＲ−１２０（プラス）イオン交換樹脂を加え、その後１０分間撹拌した。得られた透明溶液を濾過し、ＴＨＦ／Ｈ_２Ｏで洗浄し、蒸発させた。トルエンとの同時蒸発により化合物２０１を得た（１．２２ｇ、１．４７ミリモル、９７％）。Ｃ_５３Ｈ_８５Ｏ_５Ｓｉの分子量については、（Ｍ−Ｈ）⁻計算値が８２９．６１６６で、実測値が８２９．５であった。

【0293】

化合物２０２：化合物９について記載されたものに類似する手順をベンジルアルコール及び２０１（１０１ｍｇ、０．１２１ミリモル）で行い、化合物２０２（８７ｍｇ、０．０８６０ミリモル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６８−７．６６（ｍ，４Ｈ）、７．４２−７．３０（ｍ，１６Ｈ）、５．３８−５．３０（ｍ，４Ｈ）、５．１１（ｓ，４Ｈ）、３．７１−３．６８（ｍ，１Ｈ）、２．３５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．０４−１．９７（ｍ，８Ｈ）、１．６６−１．６２（ｍ，４Ｈ）、１．４０−１．０７（ｍ，４４Ｈ）、１．０４（ｓ，９Ｈ）。

【0294】

化合物２０３：化合物８について記載されたものに類似する手順を２０２（３４２ｍｇ、０．３３８ミリモル）で行い、化合物２０２（１３６ｍｇ、０．１７６ミリモル、５２％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．３８−７．３０（ｍ，１０Ｈ）、５．３８−５．３０（ｍ，４Ｈ）、５．１１（ｓ，４Ｈ）、３．５７（ｂｒｓ，１Ｈ）、２．３５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．０１−１．９８（ｍ，８Ｈ）、１．６６−１．６０（ｍ，４Ｈ）、１．４５−１．２５（ｍ，４４Ｈ）。

【0295】

化合物２０４：化合物９について記載されたものに類似する手順を２０３（１３３ｍｇ、０．１７２ミリモル）で行い、化合物２０４（９３ｍｇ、０．１０５ミリモル、６１％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．３８−７．２６（ｍ，１０Ｈ）、５．３８−５．３０（ｍ，４Ｈ）、５．１１（ｓ，４Ｈ）、４．８８−４．８３（ｍ，１Ｈ）、２．３７−２．２７（ｍ，８Ｈ）、２．２２（ｓ，６Ｈ）、２．０３−１．９７（ｍ，８Ｈ）、１．８１−１．２６（ｍ，５０Ｈ）。

【0296】

実施例１０：末端ｔ−ブチルエステル脂質及び誘導体の合成

【化100】

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化合物２０６：化合物１２について記載されたものに類似する手順を２０５（３．８０ｇ、０．７６１ミリモル）及び化合物４（１．７５ｇ、３．１７ミリモル）で行い、化合物２０６（２．００ｇ、２．１２ミリモル、６７％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６８−７．６６（ｍ，４Ｈ）、７．４２−７．３３（ｍ，６Ｈ）、５．３９−５．３１（ｍ，４Ｈ）、３．７１−３．６８（ｍ，１Ｈ）、２．２０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．０１−１．９８（ｍ，８Ｈ）、１．５９−１．５５（ｍ，４Ｈ）、１．４４（ｓ，１８Ｈ）、１．４１−１．１１（ｍ，４４Ｈ）、１．０４（ｓ，９Ｈ）。

【0297】

化合物２０７：化合物８について記載されたものに類似する手順を２０６（２６５ｍｇ、０．２８１ミリモル）で行い、化合物２０７（１６１ｍｇ、０．２２８ミリモル、８１％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．３８−５．３０（ｍ，４Ｈ）、３．５８（ｂｒｓ，１Ｈ）、２．２０（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，４Ｈ）、２．０１−１．９８（ｍ，８Ｈ）、１．５９−１．５５（ｍ，４Ｈ）、１．４４（ｓ，１８Ｈ）、１．３５−１．２６（ｍ，４４Ｈ）。

【0298】

化合物２０８：化合物９について記載されたものに類似する手順を２０７（１５８ｍｇ、０．２２４ミリモル）で行い、化合物２０８（１３８ｍｇ、０．１６９ミリモル、７５％）を得た。Ｃ_５１Ｈ_９６ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が８１８．７２３８で、実測値が８１８．７であった。

【0299】

化合物２０９：化合物２０８（１４８ｍｇ、０．１８１ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（６ｍＬ）中のＴＦＡ（１．５ｍＬ）で２．５時間処理した。蒸発及びトルエンとの同時蒸発後に、化合物２０９（１５４ｍｇ、定量的）を得た。Ｃ_４３Ｈ_８０ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が７０６．５９８０で、実測値が７０６．５であった。

【0300】

化合物２１０：化合物９について記載されたものに類似する手順を２０９（０．０６１ミリモル）及びシス−２−ヘキセン−１−オール（１８．３ｍｇ、０．１８３ミリモル）で行い、化合物２１０（３２ｍｇ、０．０３６８ミリモル、６０％）を得た。Ｃ_５５Ｈ_１００ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が８７０．７５５１で、実測値が８７０．５であった。

【0301】

実施例１１：内部エステル／アミド脂質−１の合成

【化101】

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化合物２１３：化合物２１１（５０３ｍｇ、１．０ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３５ｍＬ）及びＤＩＰＥＡ（１．７４ｍＬ、１０ミリモル）中２１２（５３３ｍｇ、３．０ミリモル）で１４時間にわたって処理した。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理後に、化合物２１３（５０６ｍｇ、０．７４８ミリモル、７５％）を得た。Ｃ_４１Ｈ_７８Ｎ_３Ｏ_４についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が６７６．５９９２で、実測値が６７６．４であった。

【0302】

化合物２１５：化合物２１１（５０３ｍｇ、１．０ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３５ｍＬ）中２１４（４６９ｍｇ、３．０ミリモル）及びＫ_２ＣＯ_３（１．３８ｇ、１０ミリモルで１４時間にわたって処理した。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理後に、化合物２１５（２４４ｍｇ、０．３４６ミリモル、３５％）を得た。Ｃ_４３Ｈ_８０ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が７０６．５９８６で、実測値が７０６．４であった。

【0303】

化合物２１７：化合物２１１（４２５ｍｇ、０．８４５ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３５ｍＬ）中２１６（５２５ｍｇ、３．０８ミリモル）及びＫ_２ＣＯ_３（１．１７ｇ、８．４５ミリモルで１４時間にわたって処理した。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理後に、化合物２１７（４０７ｍｇ、０．５５４ミリモル、６６％）を得た。Ｃ_４５Ｈ_８４ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が７３４．６２９９で、実測値が７３４．４であった。

【0304】

化合物２１９：化合物２１１（５０３ｍｇ、１．０ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３５ｍＬ）中２１８（５９５ｍｇ、３．０ミリモル）及びＫ_２ＣＯ_３（１．３８ｇ、１０ミリモル）で１４時間にわたって処理した。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理後に、化合物２１９（５１９ｍｇ、０．６５７ミリモル、６６％）を得た。Ｃ_４９Ｈ_９２ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が７９０．６９２５で、実測値が７９０．７であった。

【0305】

実施例１２：内部エステル脂質−２２３の合成

【化102】

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化合物２２１：化合物９について記載されたものに類似する手順を２２０（３９０ｍｇ、１．９３ミリモル）及び２１８（７６５ｍｇ、３．８６ミリモル）で行い、化合物２２１（８７８ｍｇ、１．５６ミリモル、８１％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６７−５．６１（ｍ，２Ｈ）、５．５４−５．４８（ｍ，２Ｈ）、４．６２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．４７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４Ｈ）、２．３３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４Ｈ）、２．１２−２．０６（ｍ，４Ｈ）、１．９３−１．８６（ｍ，４Ｈ）、１．３８−１．２６（ｍ，３２Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。

【0306】

化合物２２２：化合物２２１（３１８ｍｇ、０．５６５ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５ｍＬ）及びＡｃＯＨ（０．２ｍＬ）中ＮａＢＨ（ＯＡｃ）_３（３６０ｍｇ、１．７０ミリモル）で１６時間にわたって処理した。蒸発、カラムクロマトグラフィー後に、化合物２２２（１４１ｍｇ、０．２５０ミリモル、４４％）を得た。Ｃ_３５Ｈ_６５Ｏ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が５６５．４８３２で、実測値が５６５．４であった。

【0307】

化合物２２３：化合物９について記載されたものに類似する手順を２２２（１３７ｍｇ、０．２４３ミリモル）で行い、化合物２２３（１３７ｍｇ、０．２０２ミリモル、８３％）を得た。Ｃ_４１Ｈ_７６ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が６７８．５６７３で、実測値が６７８．５であった。

【0308】

実施例１３：内部エステル脂質−２２７の合成

【化103】

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化合物２２５：化合物９について記載されたものに類似する手順を２２４（２００ｍｇ、０．７７４ミリモル）及び２１６（２６４ｍｇ、１．５５ミリモル）で行い、化合物２２５（３４１ｍｇ、０．６０６ミリモル、７８％）を得た。Ｃ_３５Ｈ_６２ＮａＯ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値が５８５．４４９５で、実測値が５８５．５であった。

【0309】

化合物２２６：化合物２２５（２８３ｍｇ、０．５０３ミリモル）を、ＴＨＦ（５ｍＬ）及びＡｃＯＨ（０．２ｍＬ）中、ＮａＢＨ_４（５７ｍｇ，１．５１ミリモル）で８時間にわたって処理した。蒸発、カラムクロマトグラフィーを行った後に、化合物２２６（１８５ｍｇ、０．３２８ミリモル、６５％）を得た。Ｃ_３５Ｈ_６４ＮａＯ_５についての分子量は（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値が５８７．４６５１、実測値が５８７．３であった。

【0310】

化合物２２７：化合物９について記載されたものに類似する手順を２２６（２３０ｍｇ、０．４０７ミリモル）で行い、化合物２２７（２４８ｍｇ、０．３６６ミリモル、９０％）を得た。Ｃ_４１Ｈ_７６ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が６７８．５６７３で、実測値が６７８．５であった。

【0311】

実施例１４：リノレイル鎖を有する末端エステル脂質−２３２の合成

【化104】

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化合物２３０：化合物７について記載されたものに類似する手順を２２８（３．２７ｇ、６．０ミリモル）及び４（１．２７ｇ、２．３０ミリモル）で行い、化合物２３０（１．３１ｇ、１．５３ミリモル、６７％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６８−７．６６（ｍ，４Ｈ）、７．４２−７．３３（ｍ，６Ｈ）、５．４２−５．２９（ｍ，８Ｈ）、３．７１−３．６８（ｍ，１Ｈ）、３．６６（ｓ，６Ｈ）、２．７７（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．３３−２．２８（ｍ，４Ｈ）、２．１１−２．０１（ｍ，８Ｈ）、１．６９−１．６０（ｍ，４Ｈ）、１．４３−１．１０（ｍ，３２Ｈ）、１．０４（ｓ，９Ｈ）。

【0312】

化合物２３１：化合物８について記載されたものに類似する手順を２３０（１．３０ｇ、１．５２ミリモル）で行い、化合物２３１（６１１ｍｇ、０．９９０ミリモル、６５％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．４１−５．２９（ｍ，８Ｈ）、３．６７（ｓ，６Ｈ）、３．５８（ｂｒｓ，１Ｈ）、２．７７（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．３２（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，４Ｈ）、２．１０−２．００（ｍ，８Ｈ）、１．６９−１．６０（ｍ，４Ｈ）、１．４３−１．２９（ｍ，３２Ｈ）。

【0313】

化合物２３２：化合物９について記載されたものに類似する手順を２３１（５２０ｍｇ、０．８４３ミリモル）で行い、化合物２３２（６００ｍｇ、０．８２２ミリモル、９７％）を得た。Ｃ_４５Ｈ_８０ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が７３０．５９８６で、実測値が７３０．５であった。

【0314】

実施例１５：リノレイル鎖を有する末端エステル脂質の合成

【化105】

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化合物２３１はまた、スキーム１５に示した通りに合成した。

【0315】

化合物１１２：化合物１１１（８４０ｍｇ、２．６９ミリモル）を、ＭｅＯＨ（４０ｍＬ）中ジメチル（１−ジアゾ−２−オキソプロピル）ホスホネート（０．９７０ｍＬ、６．４６ミリモル）及びＫ_２ＣＯ_３（１．４９ｇ、１０．８ミリモル）で６時間にわたって処理した。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理の後に、化合物１１２（７００ｍｇ、２．３０ミリモル、８６％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．５８（ｂｒｓ，１Ｈ）、２．１８（ｔｄ，Ｊ＝７．１，２．６Ｈｚ，４Ｈ）、１．９４（ｔ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，２Ｈ）、１．５６−１．２５（ｍ，２８Ｈ）。

【0316】

化合物２３４：化合物１１２（２０７ｍｇ、０．６８０モル）を、ＤＭＦ（３．５ｍＬ）中、２３３（３１６ｍｇ、１．３６ミリモル）、Ｋ_２ＣＯ_３（２８２ｍｇ、２．０４ミリモル）、ＮａＩ（４０８ｍｇ、２．７２ミリモル）及びＣｕＩ（５１８ｍｇ、２．７２ミリモル）で１８時間にわたって処理した。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理の後に、化合物２３４（２９２ｍｇ、０．４８０ミリモル、７１％）を得た。Ｃ_３９Ｈ_６１Ｏ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が６０９．４５１９で、実測値が６０９．５であった。

【0317】

化合物２３１：ＥｔＯＨ（２８．５ｍＬ）中の酢酸ニッケル（ＩＩ）四水和物（５３３ｍｇ、２．１４ミリモル）の撹拌溶液に、ＥｔＯＨ（２．１４ｍＬ）中、ＮａＢＨ_４の１Ｍ溶液を室温で加えた。３０分後、エチレンジアミン（０．５７４ｍＬ、８．５７ミリモル）及びＥｔＯＨ（３ｍＬ）中、２３４（２９０ｍｇ、０．４７６ミリモル）の溶液を加え、次いで１時間撹拌した。セライトを通して反応物を濾過し、蒸発させた。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理の後に、化合物２３１（２１９ｍｇ、０．３５５ミリモル、７５％）を得た。Ｃ_３９Ｈ_６９Ｏ_５についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が６１７．５１４５で、実測値が６１７．３であった。

【0318】

実施例１６：内部オキシム脂質−２３８の合成

【化106】

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化合物２３７：化合物２３５（４６５ｍｇ、１．７８ミリモル）を、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）中ヒドラジン一水和物（６４〜６５％、０．１３５ｍＬ、１．７８ミリモル）で４時間処理した。濾過、次いで蒸発の後に、粗生成物をＥｔＯＨ（５ｍＬ）中に再懸濁させた。この溶液に、化合物１１１（１６０ｍｇ、０．５１２ミリモル）及びＡｃＯＨ（数滴）を加えた。水処理、次いでカラムクロマトグラフィー処理の後に、化合物２３７（１６５ｍｇ、０．３０６ミリモル、６０％）を得た。Ｃ_３３Ｈ_６７Ｎ_２Ｏ_３についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が５３９．５１５２で、実測値が５３９．３であった。

【0319】

化合物２３８：化合物９について記載されたものに類似する手順を２３７（１６２ｍｇ、０．３０１ミリモル）で行い、化合物２３８（１６８ｍｇ、０．２５８ミリモル、８６％）を得た。Ｃ_３９Ｈ_７８Ｎ_３Ｏ_４についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が６５２．５９９２で、実測値が６５２．４であった。

【0320】

実施例１７

【化107】

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８−ベンジルオキシ−オクタン−１−オール（２４０）：５００ｍＬの無水ＤＭＦ中のＮａＨ（油中６０％、８２ｇ、１．７０９６モル）の撹拌懸濁液に、１．５ＬのＤＭＦ中化合物２３９（２５０ｇ、１．７０９６モル）の溶液を、滴下漏斗を用いて、０℃でゆっくりと加えた。反応混合物を３０分間撹拌し、次いで臭化ベンジル（２０８．８６ｍＬ、１．７０９６モル）を窒素雰囲気下でゆっくりと加えた。次いで、反応物を周囲温度まで暖め、１０時間にわたって撹拌した。反応完了後に、混合物を砕氷（約２ｋｇ）で急冷し、酢酸エチル（２×１Ｌ）で抽出した。有機相を水（１Ｌ）で洗浄して、不必要なＤＭＦを除去し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で蒸発乾固した。粗化合物を、ＤＣＭ中０〜５％のＭｅＯＨで溶出して、６０〜１２０メッシュのシリカゲル上で精製し、化合物２４０（２２０ｇ、５４％）を淡黄色液体として得た。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２４（ｍ，５Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、３．６３−３．６０（ｍ，２Ｈ）、３，４７−３．４３（ｍ，２Ｈ）、１．６３−１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３９−１．２３（ｍ，８Ｈ）。

【0321】

（８−ブロモ−オクチルオキシメチル）−ベンゼン（２４１）：化合物２４０を、１．５ＬのＤＣＭ中に溶解し、ＣＢｒ_４（２８０．３５ｇ、０．８４５６モル）を、この撹拌溶液に加え、不活性雰囲気下で反応混合物を０℃まで冷却した。次いで、２０℃未満の温度を維持しながら、ＰＰｈ_３（２５１．０３ｇ、０．９５７１モル）を少しずつ加え、添加完了後に、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応完了後に、反応混合物から沈殿した固体（ＰＰｈ_３Ｏ）を濾過により単離し、濾液を砕氷（約１．５ｋｇ）で希釈し、ＤＣＭ（３×７５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で蒸留した。得られた粗化合物を溶出系としてヘキサン中０〜５％の酢酸エチルを用いて、６０〜１２０メッシュのシリカゲル上でクロマトグラフィーを行い、化合物２４１（１５０ｇ、８９％）を淡黄色液体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２５（ｍ，５Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、３，４７−３．４１（ｍ，２Ｈ）、３．４１−３．３７（ｍ，２Ｈ）、１．８６−１．８０（ｍ，４Ｈ）、１．６２−１．５６（ｍ，２Ｈ）、１．４２−１．２９（ｍ，８Ｈ）。

【0322】

１７−ビス−ベンジルオキシ−ヘプタデカン−９−オール（２４２）：新たに活性化した削り屑状Ｍｇ（２４．０８ｇ、１．００３モル）に２００ｍＬの無水ＴＨＦを加え、続いて不活性雰囲気下でヨウ素一摘みをこの混合物に添加した。グリニヤール形成の開始後に、１Ｌの乾燥ＴＨＦ中化合物２４１（１５０ｇ、０．５０１６モル）の溶液を、発熱反応を制御しながら、ゆっくりと加えた。添加完了後、反応物を１時間加熱還流し、次いで室温に冷却した。次いでギ酸メチル（６０．２４ｇ、１．００３３モル）をゆっくりと加え、２時間にわたって反応を続けた。反応完了後に、１０％ＨＣｌ、続いて水（１Ｌ）をゆっくりと添加することにより反応物を急冷し、酢酸エチル（３×１Ｌ）で抽出した。有機層を５リットルのビーカーに採取し、５００ｍＬのメタノールで希釈し、０℃に冷却した。この溶液に、過剰量のＮａＢＨ_４（約５当量）を少量ずつ加え、ＨＣｌの添加によって切断されないギ酸エステルの加水分解を確実にした。得られた溶液を１時間撹拌し、次いで揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水（１Ｌ）中に取り上げ、１０％のＨＣｌ溶液（ｐ^Ｈ４）で酸性化した。次いで、生成物を酢酸エチル（３×１Ｌ）で抽出した。次いで有機相を乾燥し、ロータリーエバポレーター上で濃縮し、化合物２４２（５７ｇ、２４％）を固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３５−７．３２（ｍ，８Ｈ）、７．２９−７．２４（ｍ，２Ｈ）、４．４９（ｓ，４Ｈ）、３．５６（ｍ，１Ｈ）、３．４６−３．４３（ｍ，４Ｈ）、１．６３−１．５６（ｍ，４Ｈ）、１．４４−１．３４（ｍ，２８Ｈ）。Ｃ^１３ＮＭＲ（１００ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝１３８．５６、１２８．２１、１２７．４９、１２７．３４、７２．７２、７１．７６、７０．３７、３７．３７、２９．６４、２９．５６、２９．４７、２９．３３、２６．０７、２５．５４。

【0323】

［９−ベンジルオキシ−１−（８−ベンジルオキシ−オクチル）−ノニルオキシ］−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラン（２４３）：化合物２４２（５６ｇ、０．１１９６モル）を７００ｍＬの無水ＴＨＦ中に溶解し、０℃に冷却した。ＴＢＭ−ＳＣｌ（３６．０６ｇ、０．２３９６モル）ゆっくりと加え、続いて不活性雰囲気下でイミダゾール（３２．５５ｇ、０．４７８６モル）を添加した。次いで反応物を室温で１８時間にわたって撹拌し、その後、氷（約１ｋｇ）で急冷した。生成物を酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、酸性不純物を除去し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、減圧下で蒸発させて、粗化合物を生成し、これをシリカゲル（６０〜１２０メッシュ）により精製し、０〜１０％の酢酸エチル−ヘキサンで溶出して、化合物２４３（６０ｇ、８２％）を帯黄色油状物として得た。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２４（ｍ，１０Ｈ）、４．４９（ｓ，４Ｈ）、３．６０−３．５７（ｍ，１Ｈ）、３．４６−３．４３（ｍ，４Ｈ）、１．６１−１．５４（ｍ、４Ｈ）、１．４１−１．２６（ｍ，２８Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0324】

９−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−ヘプタデカン−１，１７−ジオール（２４４）：化合物２４３（６０ｇ、０．１０３０モル）を５００ｍＬの酢酸エチル中に溶解し、Ｎ_２で２０分間脱気した。炭素上の（１０重量％）Ｐｄ（１２ｇ）を加え、反応物を水素の雰囲気下で１８時間にわたって撹拌した。撹拌完了後、セライト層を通して混合物を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空下で蒸発させた。このようにして得られた化合物２４４（１９ｇ、４６％）は、次の反応を実行するために、十分に純粋であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ＝３．６４−３．５８（ｍ，５Ｈ）、１．５９（ｂｒ，２Ｈ）、１．５７−１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３８−１．２２（ｍ，２８Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0325】

９−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−ヘプタデカンジオン酸（２４５）：無水ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の２４４（２ｇ、０．００４９モル）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下で０℃においてピリジニウムジクロメート（２．７ｇ、０．００７４モル）を加えた。次いで、反応混合物を、１０〜１５分の時間をかけて室温まで暖め、２４時間続けた。次いで、反応物を水（１００ｍＬ）で希釈した。、ＤＣＭ（３×４０ｍＬ）を使用して水相を抽出した。有機相を塩水（１×２５ｍＬ）で洗浄し、真空下で濃縮して、粗酸を得て、その後これを、ヘキサン中０〜３０％の酢酸エチル系を使用して、（１００〜２００メッシュ）シリカゲルカラムによって精製した。純粋な生成物（２４５）を、淡黄色油状物として得た（０．７ｇ、３３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ＝３．６１−３．５６（ｍ，１Ｈ）、２．３５−２．３２（ｍ，４Ｈ）、１．６４−１．５９（ｍ，４Ｈ）、１．４０−１．１９（ｍ，２４Ｈ）、０．８６（ｓ，９Ｈ）、０．０１７（ｓ，６Ｈ）；ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］−４３１．００；ＨＰＬＣ（ＥＬＳＤ）純度−９６．９４％。

【0326】

ジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）ヘプタデカンジオエート（２４６）：二価酸２４５（０．４２ｇ、０．９７ミリモル）を２０ｍＬのジクロロメタン中に溶解し、これに、シス−２−ノネン−１−オール（０．３５ｇ、２．４４ミリモル）を加え、続いてヒューニッヒの塩基（０．６８ｇ、４．９ミリモル）及びＤＭＡＰ（１２ｍｇ）を加えた。この混合物に、ＥＤＣＩ（０．４７ｇ、２．４４ミリモル）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（４０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３（５０ｍＬ）、水（６０ｍＬ）及び塩水（６０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で溶媒を除去した。このようにして得られた粗生成物を、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒｆ精製システム（４０ｇのシリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜１０％のＭｅＯＨ）により精製し、純粋な生成物２４６（０．３５ｇ、５３％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６４（ｄｔ，Ｊ＝１０．９，７．４Ｈｚ，２Ｈ）、５．５８−５，４３（ｍ、２Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．７１−３．４８（ｍ、１Ｈ）、２．３０（ｔ，Ｊ−７．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．２０−１．９８（ｍ，４Ｈ）、１．７１−１．５３（ｍ，４Ｈ）、１．３１（ｄｄｄ，Ｊ−８．３，７．０，３．７Ｈｚ，３４Ｈ）、１．０７−０．６８（ｍ、１４Ｈ）、０．０２（ｓ，５Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ １７８．１８、１３９．８１、１２７．７８、８１．７３、８１．４２、８１．１０、７６．７２、６４．５９、４１．５２、４１．３２、３８．７６、３６．０９、３４．１０、３３．９３、３３．８０、３３．７０、３３．５９、３３．５５、３３．２６、３１．９５、３０．３４、２９．６９、２９．５８、２９．３９、２７．０１、２２．５６、１８．４８、０．０１。

【0327】

ジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−ヒドロキシヘプタデカンジオエート（２４７）：シリル保護化ジエステル２４６（０．３ｇ、０．４４ミリモル）を、ＴＨＦ（６ｍＬ）中ＴＢＡＦの１Ｍ溶液中に溶解し、この溶液を４０℃で２日間保持した。反応混合物を、水（６０ｍＬ）で希釈し、エーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、このようにして得られた粗生成物を、カラムで精製し、純粋な生成物を単離した（０．０９７ｇ、３９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６４（ｄｔ，Ｊ＝１０．９，７．４Ｈｚ，２Ｈ）、５．５２（ｄｔ，Ｊ＝１１．０，６．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．５７（ｓ，１Ｈ）、２．３０（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ）、２．０９（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ）、１．７５−１．５３（ｍ，４Ｈ）、１．５３−１．０６（ｍ，３６Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７３．９８、１３５．６４、１２３．５７、７７．５４、７７．２２、７６．９１、７２．１４、６０．４１、３７．６９、３４．５４、３１．８９、２９．７０、２９．６０、２９．４４、２９．２９、２９．０７、２７．７６、２５．８０、２５．１５、２２．８２、１４．２９。

【0328】

ジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−（（４−（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエート：アルコール２４７（０．０８３ｇ、０．１４７ミリモル）を、２０ｍＬのジクロロメタン中に溶解し、これにジメチルアミノ酪酸塩酸塩（０．０３０ｇ、０．１７６ミリモル）を加え、続いて、ヒューニッヒの塩基（０．０４５ｇ、０．４４ミリモル）及びＤＭＡＰ（２ｍｇ）を加えた。この混合物に、ＥＤＣＩ（０．０３４ｇ、０．１７６ミリモル）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌し、ＴＬＣ（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中１０％のＭｅＯＨ）が、出発アルコールの完全な消失を示した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（４０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）、水（６０ｍＬ）及び塩水（６０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で溶媒を除去した。このようにして得られた粗生成物を、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒｆ精製システム（４０ｇのシリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜１０％のＭｅＯＨ）により精製し、純粋な生成物（０．０６２ｇ、６２％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．７４−５．５８（ｍ，２Ｈ）、５．５１（ｄｔｔ，Ｊ＝９．７，６．８，１．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．９５−４．７５（ｍ，１Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．３５−２．２４（ｍ，８Ｈ）、２．２２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，６Ｈ）、２．０９（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）、１．８３−１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．６０（ｄｄ，Ｊ＝１４．４，７．２Ｈｚ，４Ｈ）、１．４９（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，４Ｈ）、１．４１−１．１３（ｍ，３０Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１７３．７２、１７３．３６、１３５．４０、１２３．３５、７４．１２、６０．１８、５８．９５、４５．４６、３４．３０、３４．１１、３２．４５、３１．６７、２９．３８、２９．３５、２９．１７、２９．０７、２８．８４、２７．５３、２５．２８、２４．９３、２３．１６、２２．５９、１４．０６。Ｃ_４１Ｈ_７５ＮＯ_６のＭＷ：計算値（ＭＨ^＋）：６７８．０４、実測値：６７８．５。

【0329】

実施例１８
以下のより短い経路を、本発明の化合物１の類似体の合成に使用した。市販の９−ブロモノン−１−エン２４８を、マグネシウムで処理して、対応のグリニヤード試薬を形成し、これをエチルホルメートと反応させて、対応の付加物２４９を得て、このブロモブチリルクロリドによる処理が、ブロモエステル２５０をもたらした。ブロモエステル２５０のＲｕＯ_４による処理が、二価酸２５１をもたらした。ブロモ二価酸２５１のジメチルアミンによる処理が、アミノ二価酸２５２をもたらした。ＤＭＦの存在下での二価酸２５２の塩化オキザリルによる処理が、二価酸塩化物２５３をもたらした。脂質２５４ａ−ｎは、酸塩化物２５３を対応のアルコールで処理することにより合成した。

【化108】

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【0330】

【表60】

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【0331】

【表61】

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【0332】

【表62】

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【0333】

【表63】

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【0334】

【表64】

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【0335】

【表65】

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【0336】

ノナデカ−１，１８−ジエン−１０−オール（２４９）の合成
火炎乾燥した５００ｍＬのＲＢフラスコに、新たに活性化した削り屑状Ｍｇ（９ｇ）を加え、フラスコに、磁気撹拌バー、追加の漏斗及び還流冷却器を取り付けた。このセットアップを脱気し、アルゴンを流し、注射器を通してフラスコに１００ｍＬの無水エーテルを添加した。臭化物３（５１．３ｇ、２５０ミリモル）を無水エーテル（１００ｍＬ）中に溶解し、追加の漏斗に添加した。このエーテル溶液の約５ｍＬを、激しく撹拌しながら、削り屑状Ｍｇに加えた。発熱反応が認められ（グリニヤール試薬形成を確認／加速するために、５ｍｇのヨウ素を加え、即時の脱色を観察し、グリニヤール試薬の形成を認めた）、エーテルの還流を始めた。水中でフラスコを冷やすことにより穏やかな還流を続けながら、この臭化物の溶液の残りを滴加した。添加の完了後に、反応混合物を３５℃で１時間保持し、次いで氷浴で冷却した。ギ酸エチル（９ｇ、１２１ミリモル）を無水エーテル（１００ｍＬ）中に溶解し、追加の漏斗に移し、撹拌しながら反応混合物に滴加した。発熱反応が観察され、反応混合物の還流を開始した。反応の開始後、ギ酸塩のエーテル性溶液の残りをストリームとして迅速に添加し、反応混合物を周囲温度で更に１時間にわたって撹拌した。１０ｍＬのアセトンを滴加し、続いて氷冷水（６０ｍＬ）を加えることによって、反応物を急冷した。この溶液が均一になり、層が分離するまで、反応混合物を、Ｈ_２ＳＯ_４水溶液（１０体積％、３００ｍＬ）で処理した。水相をエーテル（２×２００ｍＬ）で抽出した。合わせたエーテル層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、粗生成物を得て、これをカラム（シリカゲル、ヘキサン中０〜１０％のエーテル）クロマトグラフィーにより精製した。生成物フラクションを蒸発させて、純粋な生成物２４９を白色固体として得た（３０．６ｇ、９０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．２６（ｓ，１Ｈ）、５．８１（ｄｄｔ，Ｊ＝１６．９，１０．２，６．７Ｈｚ，８Ｈ）、５．０４−４．８８（ｍ，１６Ｈ）、３．５７（ｄｄ，Ｊ＝７．６，３．３Ｈｚ，４Ｈ）、２．０４（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１６Ｈ）、１．５９（ｓ，１Ｈ）、１．４５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，８Ｈ）、１．４３−１．１２（ｍ，９４Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ｃｄｃｌ_３）：δ１３９．４０、１１４．３３、７７．５４、７７．２２、７６．９０、７２．２１、３７．７０、３４．００、２９．８６、２９．６７、２９．２９、２９．１２、２５．８５。

【0337】

ノナデカ−１，１８−ジエン−１０−イル−４−ブロモブタノエート（２５０）の合成
無水ＤＣＭ（３００ｍＬ）中、アルコール２４９（５．６ｇ、２０モル）の溶液に、塩化ブロモブチル（２０ミリモル）を、不活性雰囲気下０℃でゆっくりと注意深く加えた。反応混合物を室温まで暖め、２０時間にわたって撹拌し、ＴＬＣ（シリカゲル、ヘキサン中１０％の酢酸エチル）により監視した。反応の完了時に、混合物を水（４００ｍＬ）で希釈し、有機層を分離した。次いで有機相をＮａＨＣＯ_３の飽和溶液（１×４００ｍＬ）、続いて塩水（１×１００ｍＬ）で洗浄し、真空下で濃縮した。次いで粗生成物を、ヘキサン中２〜３％の酢酸エチル溶液で溶出するシリカゲル（１００〜２００メッシュ）カラムで精製し、所望の生成物２５０の６ｇ（９０％）を無色液体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．８０（ｄｄｔ，Ｊ＝１６．９，１０．２，６．７Ｈｚ，２Ｈ）、５．０５−４．８１（ｍ，５Ｈ）、３．４６（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．４８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．１７（ｐ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．１１−１．９３（ｍ，４Ｈ）、１．６５−１．４４（ｍ，４Ｈ）、１．４３−１．１７（ｍ，１９Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ｃｄｃｌ_３）：δ１７２．５１、１３９．３７、１１４．３５、７７．５４、７７．２３、７６．９１、７４．８６、３４．３１、３３．９９、３３．０１、３２．９６、２９．６５、２９．５６、２９．２４、２９．０９、２８．１１、２５．５２。

【0338】

９−（（４−ブロモブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオン酸（２５１）の合成
ジクロロメタン（３００ｍＬ）及びアセトニトリル（３００ｍＬ）中、ブロモエステル２５０（１２．１ｇ、２８．２ミリモル）の溶液に、ＲｕＣｌ_３（１．１６ｇ、５モル％）を加え、反応混合物を１０℃まで冷やし、水（４００ｍＬ）中、メタ過ヨウ素酸ナトリウム（６０ｇ）を滴加した。これを１０℃で２０時間にわたり撹拌した。反応混合物を水で希釈した。層を分離し、有機層に、飽和ブライン溶液を撹拌しながら加え、続いて、脱色（暗緑色から淡黄色）のために３％の亜硫酸ナトリウム溶液を滴加した。層を分離し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧で蒸発させて、純粋な生成物を得た。Ｃ_２０Ｈ_３５ＢｒＯ_７についてのＭＷは計算値：４６７．３９；実測値４６５．４（Ｍ−２Ｈ）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．９４（ｓ，２Ｈ）、４．８８−４．６９（ｍ，１Ｈ）、３．５３（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ）、２．４３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．１７（ｔ、Ｊ＝７，４Ｈｚ，４Ｈ）、２．０９−１．９５（ｍ、２Ｈ）、１．９０（ｓ、３Ｈ）、１．４６（ｓ、７Ｈ）、１．２３（ｓ、１５Ｈ）。

【0339】

９−（（４−ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオン酸（２５２）の合成
ブロモ酸２５１（２ミリモル）をＴＨＦ（２０ｍＬ）中、ジメチルアミンの２Ｍ溶液中に溶解し、これに１ｇの無水Ｋ_２ＣＯ_３を加え、混合物を加圧瓶中５０℃にて一晩加熱した。ＴＬＣが反応の完了を示した。反応混合物を酢酸で酸性化し、水（１００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２×６０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮乾固し、次の反応において使用した。Ｃ_２３Ｈ_４３ＮＯ_６についてのＭＷは計算値：４２９．５９；実測値４３０．６（ＭＨ）^＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１１．８７−１１．８２（ｍ，７Ｈ）、５．７５（ｄ，Ｊ＝０．７Ｈｚ，１５Ｈ）、４．８５−４．６９（ｍ，３８Ｈ）、３．６４−３．５５（ｍ，１２Ｈ）、３．３５−２．８３（ｍ，１０６Ｈ）、３．０１−２．９０（ｍ，５９Ｈ）、２．９４（ｄｄｄ，Ｊ＝３０．６，７．７，４．０Ｈｚ，６３Ｈ）、２．９０−２．７３（ｍ，９Ｈ）、２．７０（ｓ，２２１Ｈ）、２．５７−２．４６（ｍ，９１Ｈ）、２．４４−２．３０（ｍ，７６Ｈ）、２．１７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１４７Ｈ）、１．８９（ｔｑ，Ｊ＝１５．５，７．６Ｈｚ，８８Ｈ）、１．７９−１．６９（ｍ，１３Ｈ）、１．６５−１．３２（ｍ，３１１Ｈ）、１．２８（ｄ，Ｊ＝４６．０Ｈｚ，５９８Ｈ）。

【0340】

９−（（４−（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオイルクロリド（２５３）の合成
二価酸２５２を、触媒活性ＤＭＦの存在下でジクロロメタン中の塩化オキザリルでこれを処理することにより、対応する二価酸塩化物２５３に変換し、反応混合物の濃縮後に得られた粗酸塩化物を、異なるアルコールとのカップリング用として使用した。

【0341】

カチオン性脂質２５４ａ−ｎの合成についての一般手順
ジクロロメタン（３０ｍＬ）中の酸塩化物２５３（５００ｍｇ、１ミリモル）の溶液に、対応するアルコール（５当量）を室温で添加し、続いて固体Ｋ_２ＣＯ_３（１ｇ）を加え、溶液を室温で１６時間にわたって撹拌した。反応混合物をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３（１００ｍＬ）で洗浄し、有機層を乾燥し（無水Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して、粗生成物を得て、これをＣｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒｆ精製システムにより精製した。

【0342】

化合物２５４ｂ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｂを７２％の収率で（５５４ｍｇ）単離した。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ４．９１＝４．７８（ｍ，１Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ）、３．８１（ｓ，６Ｈ）、３．６３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．２９（ｄｔ，Ｊ＝１５．２，７．５Ｈｚ，８Ｈ）、２．２１（ｓ，６Ｈ）、１．８４−１．６９（ｍ，２Ｈ）、１．５７（ｄｔ，Ｊ＝１３．４、５．２Ｈｚ，９Ｈ）、１．５３−１．４０（ｍ，４Ｈ）、１．２７（ｓ，４３Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ｃｄｃｌ３）：δ１７４．４５、１７４．１３、１７３．５９、７７．５４、７７．２２、７６．９１、７４．３４、６４．５４、５９．１７、５１．６５、４５．６７、３４．５６、３４．３５、３４．２７、３２．６７、２９．５９、２９．４０、２９．３３、２９．３１、２９．２５、２８．８３、２６．０６、２５．５１、２５．１８、２５．１１、２３．３８。Ｃ_４３Ｈ_７９ＮＯ_１０のＭＷ：計算値７７０．０９；実測値７７０．６８。

【0343】

化合物２５４ｃ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｃを６９％の収率で（４９０ｍｇ）単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ５．７１−５．３６（ｍ，４Ｈ）、４．８９−４．７２（ｍ，１Ｈ）、４．５９（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．２６（ｄｄｄ，Ｊ＝２．２３，１３．０，８．６Ｈｚ，９Ｈ）、２．１９（ｓ，６Ｈ）、２．１２−１．９５（ｍ，４Ｈ）、１．８２−１．６８（ｍ，２Ｈ）、１．６３−１．３７（ｍ，８Ｈ）、１．３７−１．００（ｍ，３２Ｈ）、０．８５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ｃｄｃＬ３）δ１７３．９４、１７３．５７、１３５．６１、１２３．５７、７７．５４、７７．２２，７６．９１、７４．３４、６０．４０、５９．１６、４５．６５、３４．５２、３４．３３、３２．６６、３１．８８、２９．５９、２９．５７、２９．３８、２９．２８、２９．０６、２７．７５、２５．４９、２５．１４、２３．３５、２２．８１、１４．２８。Ｃ_４３Ｈ_８３ＮＯ_６のＭＷ：計算値７１０．１２；実測値７１０．８１。

【0344】

化合物２５４ｄ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｄを６７％の収率で（４５６ｍｇ）単離した。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ４．９２−４．７８（ｍ，１Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ）、３．６３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．３９−２．２４（ｍ，８Ｈ）、１．８９−１．７０（ｍ，２Ｈ）、１．６９−１．５４（ｍ，８Ｈ）、１．５１（ｄｄ，Ｊ＝１７．２、６．３Ｈｚ，４Ｈ）、１．２７（ｓ，４２Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。Ｃ_４１Ｈ_７９ＮＯ_６のＭＷ：計算値６８２．０７；実測値６８２．９６。

【0345】

化合物２５４ｅ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｅを７０％の収率で（４７４ｍｇ）単離した。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ５．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝１２．９，９．８，７．３Ｈｚ，２Ｈ）、５．４０−５．２３（ｍ、２Ｈ）、４．９２−４．７７（ｍ，１Ｈ）、４．０５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）、２．３２（ｄｄｄ，Ｊ＝２３．４，１４．５，７．１Ｈｚ，１２Ｈ）、２．２１（ｓ，６Ｈ）、２．０７−１．９１（ｍ，４Ｈ）、１．８４−１．７０（ｍ，２Ｈ）、１．６６−１．３９（ｍ，８Ｈ）、１．４０−１．１５（ｍ、２６Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，５Ｈ）。Ｃ_４１Ｈ_７５ＮＯ_６のＭＷ：計算値（ＭＨ^＋）６７８．０４；実測値６７８．５。

【0346】

化合物２５４ｆ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｆを７３％の収率で（５５９ｍｇ）単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．８７−５．６２（ｍ，２Ｈ）、５．５５（ｄｔｔ，Ｊ−９．１，６．４，１．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．９３−４．７５（ｍ，１Ｈ）、４．５０（ｄｄ，Ｊ＝６．５，０．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．４０−２．１７（ｍ、１３Ｈ）、２．１２−１．９５（ｍ，４Ｈ）、１．８９−１．６７（ｍ，２Ｈ）、１．６９−１．４４（ｍ，７Ｈ）、１．４１−１．１２（ｍ、２５Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，５Ｈ）。Ｃ_４１Ｈ_７５ＮＯ_６のＭＷ：計算値（ＭＨ^＋）６７８．０４；実測値６７８．５。

【0347】

化合物２５４ｇ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｇを６３％の収率で（４３２ｍｇ）単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９３−４．７７（ｍ，１Ｈ）、４．２０−３．９５（ｍ，４Ｈ）、２．４４−２．２３（ｍ、８Ｈ）、２．２１（ｓ，６Ｈ）、１．８４−１．６６（ｍ，３Ｈ）、１．６８−１．３４（ｍ，１５Ｈ）、１．３５−１．１７（ｍ、２０Ｈ）、１．１７−１．０４（ｍ，５Ｈ）、０．８８（ｄｄ，Ｊ＝１２．４，６．６Ｈｚ，１６Ｈ）。Ｃ_４３Ｈ_８３ＮＯ_６のＭＷ：計算値７１０．１２；実測値７１０．８１。

【0348】

化合物２５４ｈ：上記手順を使用することにより、脂質２５４ｈを６６％の収率で（４６６ｍｇ）単離した。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ５．０８（ｄｄｄ，Ｊ＝７．１，５．９，１．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．９１−４．７５（ｍ，１Ｈ）、４．２２−３．９７（ｍ，４Ｈ）、２．３９−２．２２（ｍ、８Ｈ）、２．２３（ｄ，Ｊ＝１６．７Ｈｚ，７Ｈ）、２．０９−１．８４（ｍ，４Ｈ）、１．８６−１．７１（ｍ，３Ｈ）、１．７１−１．０２（ｍ，４４Ｈ）、０．９１（ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，６Ｈ）。Ｃ_４３Ｈ_７９ＮＯ_６のＭＷ：計算値７０６．１２；実測値７０６．８１。

【0349】

実施例１９
別のアプローチにおいて、以下の合成アプローチが、本発明の化合物１の合成に使用される。

【化109】

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【0350】

実施例２０

【化110】

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８−ベンジルオキシ−オクタン−１−オール（２）：５００ｍＬの無水ＤＭＦ中ＮａＨ（油中６０％、８２ｇ、１．７０９６モル）の撹拌懸濁液に、１．５ＬのＤＭＦ中の化合物１（２５０ｇ、１．７０９６モル）の溶液を、０℃で滴下漏斗を使用してゆっくりと加えた。反応混合物を３０分間撹拌し、これに臭化ベンジル（２０８．８６ｍＬ、１．７０９６モル）を、窒素雰囲気下でゆっくりと加えた。次いで反応物を周囲温度まで暖め、１０時間にわたって撹拌した。反応完了後に、混合物を、砕氷（約２ｋｇ）で急冷し、酢酸エチル（２×１Ｌ）で抽出した。有機層を水（１Ｌ）で洗浄し、不必要なＤＭＦを除去し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空下で蒸発乾固した。粗化合物を、ＤＣＭ中０〜５％のＭｅＯＨで溶出して、６０〜１２０のシリカゲル上で精製し、化合物２（２２０ｇ、５４％）を淡黄色液体として得た。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２４（ｍ，５Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、３．６３−３．６０（ｍ，２Ｈ）、３，４７−３．４３（ｍ，２Ｈ）、１．６３−１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３９−１．２３（ｍ，８Ｈ）。

【0351】

（８−ブロモ−オクチルオキシメチル）−ベンゼン（３）：化合物２（１３３ｇ、０．５６３５モル）を、１．５ＬのＤＣＭ中に溶解し、ＣＢｒ_４（２８０．３５ｇ、０．８４５６モル）を、この撹拌溶液に加え、不活性雰囲気下で反応混合物を０℃まで冷却した。次いで、２０℃未満の温度を維持しながら、ＰＰｈ_３（２５１．０３ｇ、０．９５７１モル）を少しずつ加え、添加完了後に、反応混合物を室温で３時間撹拌し、ＴＬＣにより監視した。反応完了後に、反応混合物から沈殿した固体（ＰＰｈ_３Ｏ）を濾過で除き、濾液を砕氷（約１．５ｋｇ）で希釈し、ＤＣＭ（３×７５０ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で蒸留した。得られた粗化合物を溶出系としてヘキサン中０〜５％の酢酸エチルを用いて、６０〜１２０メッシュのシリカゲル上でクロマトグラフィーを行い、化合物３（１５０ｇ、８９％）を淡黄色液体として得た。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２５（ｍ，５Ｈ）、４．４９（ｓ，２Ｈ）、３，４７−３．４１（ｍ，２Ｈ）、３．４１−３．３７（ｍ，２Ｈ）、１．８６−１．８０（ｍ，４Ｈ）、１．６２−１．５６（ｍ，２Ｈ）、１．４２−１．２９（ｍ，８Ｈ）。

【0352】

１，１７−ビス−ベンジルオキシ−ヘプタデカン−９−オール（４）：新たに活性化した削り屑状Ｍｇ（２４．０８ｇ、１．００３モル）に２００ｍＬの無水ＴＨＦを加え、続いて不活性雰囲気下でヨウ素一摘みをこの混合物に添加した。グリニヤール形成の開始後に、１Ｌの乾燥ＴＨＦ中化合物３（１５０ｇ、０．５０１６モル）の溶液を、発熱反応を制御しながら、ゆっくりと加えた。添加完了後、反応物を１時間還流し、次いで室温に冷却した。次いでギ酸メチル（６０．２４ｇ、１．００３３モル）をゆっくりと加え、２時間にわたって反応を続けた。反応完了後に、１０％ＨＣｌ、続いて水（１Ｌ）をゆっくりと添加することにより反応物を急冷し、酢酸エチル（３×１Ｌ）で抽出した。有機層を５リットルのビーカーに採取し、５００ｍＬのメタノールで希釈し、０℃に冷却した。この溶液に、過剰量のＮａＢＨ_４（約５当量）を少量ずつ加え、ＨＣｌの添加によって切断されないギ酸エステルの加水分解を確実にした。得られた溶液を１時間撹拌し、次いで揮発性物質を真空下で除去した。残渣を水（１Ｌ）中に取り上げ、１０％のＨＣｌ溶液（Ｐ^Ｈ４）で酸性化した。次いで、生成物を酢酸エチル（３×１Ｌ）で抽出した。次いで有機相を乾燥し、ロータリーエバポレーター上で濃縮し、所望の化合物４（５７ｇ、２４％）を固体として得た。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ＝７．３５−７．３２（ｍ，８Ｈ）、７．２９−７．２４（ｍ，２Ｈ）、４．４９（ｓ，４Ｈ）、３．５６（ｍ，１Ｈ）、３．４６−３．４３（ｍ，４Ｈ）、１．６３−１．５６（ｍ，４Ｈ）、１．４４−１．３４（ｍ，２８Ｈ）。Ｃ^１３ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝１３８．５６、１２８．２１、１２７．４９、１２７．３４、７２．７２、７１．７６、７０．３７、３７．３７、２９．６４、２９．５６、２９．４７、２９．３３、２６．０７、２５．５４。

【0353】

［９−ベンジルオキシ−１−（８−ベンジルオキシ−オクチル）−ノニルオキシ］−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラン（５）：化合物４（５６ｇ、０．１１９６モル）を７００ｍＬの無水ＴＨＦ中に溶解し、０℃に冷却した。ＴＢＭＳ−Ｃｌ（３６．０６ｇ、０．２３９６モル）をゆっくりと加え、続いて不活性雰囲気下でイミダゾール（３２．５５ｇ、０．４７８６モル）を添加した。次いで反応物を室温で１８時間にわたって撹拌した。反応が完了したことをＴＬＣによって判断し、その後、氷（約１ｋｇ）で急冷し、酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出した。有機層を分離し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液で洗浄し、酸性不純物を除去し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、減圧下で蒸発させて、粗化合物を生成し、これをシリカゲル（６０〜１２０メッシュ）により精製し、０〜１０％の酢酸エチル−ヘキサンで溶出して、化合物５（６０ｇ、８２％）を帯黄色油状物として得た。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝７．３３−７．２４（ｍ，１０Ｈ）、４．４９（ｓ，４Ｈ）、３．６０−３．５７（ｍ，１Ｈ）、３．４６−３．４３（ｍ，４Ｈ）、１．６１−１．５４（ｍ、４Ｈ）、１．４１−１．２６（ｍ，２８Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0354】

９−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−ヘプタデカン−１，１７−ジオール（６）：化合物５（６０ｇ、０．１０３０モル）を５００ｍＬの酢酸エチル中に溶解し、Ｎ_２で２０分間脱気した。炭素上の（１０重量％）Ｐｄ（１２ｇ）を加え、反応物を水素雰囲気下で１８時間にわたって撹拌した。反応完了（ＴＬＣによって判定）後、セライト層を通して混合物を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空下で蒸発させた。このようにして得られた化合物６（１９ｇ、４６％）は、次の反応を実行するために、十分に純粋であった。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ＝３．６４−３．５８（ｍ，５Ｈ）、１．５９（ｂｒ，２Ｈ）、１．５７−１．５１（ｍ，４Ｈ）、１．３８−１．２２（ｍ，２８Ｈ）、０．８７（ｓ，９Ｈ）、０．０２（ｓ，６Ｈ）。

【0355】

９−（ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラニルオキシ）−ヘプタデカンジオン酸（７）：無水ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の化合物６（２ｇ、０．００４９モル）の撹拌溶液に、不活性雰囲気下で０℃においてピリジニウムジクロメート（２．７ｇ、０．００７４モル）を加えた。次いで、反応混合物を、１０〜１５分の時間をかけて室温まで暖め、２４時間続けた。反応の進行をＴＬＣによって監視した。完了後に、酸化反応物を水（１００ｍＬ）で希釈した。ＤＣＭ（３×４０ｍＬ）を使用して水相を抽出した。有機相を塩水（１×２５ｍＬ）で洗浄し、真空下で濃縮して、粗酸を得て、その後これを、ヘキサン中０〜３０％の酢酸エチル系を使用して、（１００〜２００メッシュ）シリカゲルカラムによって精製した。純粋な生成物２６−００３を、淡黄色油状物として得た（０．７ｇ、３３％）。Ｈ^１ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ＝３．６１−３．５６（ｍ，１Ｈ）、２．３５−２，３２（ｍ，４Ｈ）、１．６４−１．５９（ｍ，４Ｈ）、１．４０−１．１９（ｍ，２４Ｈ）、０．８６（ｓ，９Ｈ）、０．０１７（ｓ，６Ｈ）；ＬＣ−ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］−４３１．００；ＨＰＬＣ（ＥＬＳＤ）純度−９６．９４％。

【0356】

ジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）ヘプタデカンジオエート（８）：二価酸７（０．４２ｇ、０．９７ミリモル）を２０ｍＬのジクロロメタン中に溶解し、これに、シス−２−ノネン−１−オール（０．３５ｇ、２．４４ミリモル）を加え、続いてヒューニッヒの塩基（０．６８ｇ、４．９ミリモル）及びＤＭＡＰ（１２ｍｇ）を加えた。この混合物に、ＥＤＣＩ（０．４７ｇ、２．４４ミリモル）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌し、ＴＬＣ（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中５％のＭｅＯＨ）は出発酸の完全な消失を示した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（４０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３（５０ｍＬ）、水（６０ｍＬ）及び塩水（６０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で溶媒を除去した。このようにして得られた粗生成物を、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒｆ精製システム（４０ｇのシリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜１０％のＭｅＯＨ）により精製し、純粋な生成物８（０．３５ｇ、５３％）を無色油状物として単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ５．６４（ｄｔ，Ｊ＝１０．９，７．４Ｈｚ，２Ｈ）、５．５８−５，４３（ｍ、２Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．７１−３．４８（ｍ、１Ｈ）、２．３０（ｔ，Ｊ−７．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．２０−１．９８（ｍ，４Ｈ）、１．７１−１．５３（ｍ，４Ｈ）、１．３１（ｄｄｄ，Ｊ＝８．３，７．０，３．７Ｈｚ，３４Ｈ）、１．０７−０．６８（ｍ、１４Ｈ）、０．０２（ｓ，５Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１７８．１８、１３９．８１、１２７．７８、８１．７３、８１．４２、８１．１０、７６．７２、６４．５９、４１．５２、４１．３２、３８．７６、３６．０９、３４．１０、３３．９３、３３．８０、３３．７０、３３．５９、３３．５５、３３．２６、３１．９５、３０．３４、２９．６９、２９．５８、２９．３９、２７．０１、２２．５６、１８．４８、０．０１。

【0357】

ジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−ヒドロキシヘプタデカンジオエート（９）：シリル保護化ジエステル８（０．３ｇ、０．４４ミリモル）を、ＴＨＦ（６ｍＬ）中ＴＢＡＦの１Ｍ溶液中に溶解し、この溶液を４０℃で２日間保持し、その後、ＴＬＣは、反応の完了を示した。反応混合物を、水（６０ｍＬ）で希釈し、エーテル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を濃縮し、このようにして得られた粗生成物を、カラムで精製し、純粋な生成物を単離した（０．０９７ｇ、３９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６４（ｄｔ，Ｊ＝１０．９，７．４Ｈｚ，２Ｈ）、５．５２（ｄｔ，Ｊ＝１１．０，６．８Ｈｚ，２Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．５７（ｓ，１Ｈ）、２．３０（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ）、２．０９（ｑ、Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ）、１．７５−１．５３（ｍ，４Ｈ）、１．５３−１．０６（ｍ，３６Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ１７３．９８、１３５．６４、１２３．５７、７７．５４、７７．２２、７６．９１、７２．１４、６０．４１、３７．６９、３４．５４、３１．８９、２９．７０、２９．６０、２９．４４、２９．２９、２９．０７、２７．７６、２５．８０、２５．１５、２２．８２、１４．２９。

【0358】

ジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−（（４−（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエート：アルコール９（０．０８３ｇ、０．１４７ミリモル）を、２０ｍＬのジクロロメタン中に溶解し、これにジメチルアミノ酪酸塩酸塩（０．０３０ｇ、０．１７６ミリモル）を加え、続いて、ヒューニッヒの塩基（０．０４５ｇ、０．４４ミリモル）及びＤＭＡＰ（２ｍｇ）を加えた。この混合物に、ＥＤＣＩ（０．０３４ｇ、０．１７６ミリモル）を加え、反応混合物を室温で一晩撹拌し、ＴＬＣ（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中１０％のＭｅＯＨ）が、出発アルコールの完全な消失を示した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（４０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３（５０ｍＬ）、水（６０ｍＬ）及び塩水（６０ｍＬ）で洗浄した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で溶媒を除去した。このようにして得られた粗生成物を、Ｃｏｍｂｉｆｌａｓｈ Ｒｆ精製システム（４０ｇのシリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜１０％のＭｅＯＨ）により精製し、純粋な生成物（０．０６２ｇ、６２％）を無色油状物として単離した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．７４−５．５８（ｍ，２Ｈ）、５．５１（ｄｔｔ，Ｊ＝９．７，６．８，１．３Ｈｚ，２Ｈ）、４．９５−４．７５（ｍ，１Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．３５−２．２４（ｍ，８Ｈ）、２．２２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，６Ｈ）、２．０９（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，４Ｈ）、１．８３−１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．６０（ｄｄ，Ｊ＝１４．４，７．２Ｈｚ，４Ｈ）、１．４９（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，４Ｈ）、１．４１−１．１３（ｍ，３０Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）。^１３ＣＮＭＲ（１０１ ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７３．７２、１７３．３６、１３５．４０、１２３．３５、７４．１２、６０．１８、５８．９５、４５．４６、３４．３０、３４．１１、３２．４５、３１．６７、２９．３８、２９．３５、２９．１７、２９．０７、２８．８４、２７．５３、２５．２８、２４．９３、２３．１６、２２．５９、１４．０６。Ｃ_４１Ｈ_７５ＮＯ_６のＭＷ：（ＭＨ^＋）計算値：６７８．０４、実測値：６７８．５。

【0359】

別の実施形態において、以下のより短い経路をジ（（Ｚ）−ノン−２−エン−１−イル）９−（（４−（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘプタデカンジオエートの合成に使用した。市販の９−ブロモノン−１−エン１０を、マグネシウムで処理して、対応のグリニヤード試薬を形成し、これをギ酸エチルと反応させて、対応の付加物１１を得て、このブロモブチリルクロリドによる処理が、ブロモエステル１２をもたらした。ブロモエステル１２のＲｕＯ_４による処理が、二価酸１３をもたらした。ブロモ二価酸１３のジメチルアミンによる処理が、アミノ二価酸１４をもたらした。アミノ二価酸１４のアルコール１５とのカップリングが、良好な収率で生成物をもたらした。

【0360】

実施例２１

【化111】

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実施例２２

【化112】

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実施例２３

【化113】

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実施例２４

【化114】

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化合物５０１：乾燥ピリジン（１００ｍＬ）中の２−ヒドロキシ１−オクタノール５ｇ（３１．２５ミリモル）、ＤＭＡＰ ０．３８ｇ（３．１ミリモル）の溶液に、ＤＭＴｒ−Ｃｌを加え、室温で１４時間にわたって撹拌した。１０ｍＬの水を加え、酢酸エチルで抽出し、飽和ＮａＨＣＯ_３及び塩水で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、溶媒を濃縮して粗生成物５００（２０ｇ）を得て、これをトルエンと２回同時蒸発し、更なる精製をすることなく次の工程で使用した。乾燥ＴＨＦ（２５０ｍＬ）中の上記粗ＤＭＴｒエーテルに、ＮａＨ及びヨードメタンを０℃で加え、次いで３０分かけて室温まで戻し、その後２日間撹拌した。５ｍＬの水を加え、濃縮し、続いてカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜３０％の酢酸エチル）を行い、対応する生成物５０１（１０．２５ｇ、Ｒ_ｆ：０．４５、ヘキサン中２０％の酢酸エチル）及び８．４ｇの回収された出発物質５００を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．４７−６．８（ｍ，１３Ｈ）、３．７９（ｓ，６Ｈ）、３．４２（ｓ，３Ｈ）、３．２９−３．２６（ｍ，１Ｈ）、３．１３−３．０４（ｍ，２Ｈ）、１．５５−１．４７（ｍ，２Ｈ）、１．３−１．２（ｍ、１０Ｈ）、０．８９（ｔ、Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）。

【0361】

アルコール５０２：化合物５０１（１０．２５ｇ、２１．５ミリモル）を７５ｍＬの８０％酢酸中に溶解し、室温で１４時間にわたって撹拌した。１０ｍＬのメタノールを加え、濃縮し、続いてカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜５０％の酢酸エチル）を行い、予想された生成物５０２を無色油状物として生成した（１．８ｇ、８２％、Ｒ_ｆ：０．３、ヘキサン中３０％の酢酸エチル）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．７１−３．６５（ｍ，１Ｈ）、３．５−３．４５（ｍ、１Ｈ）、３．４１（ｓ、３Ｈ）、３．２８−３．２５（ｍ，１Ｈ）、１．９３−１．９（ｍ，１Ｈ）、１．４５−１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．３９−１．２７（ｍ、１０Ｈ）、０．８８（ｓ、Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）。

【0362】

化合物５０３：化合物５０３を、化合物２１３についての一般的実験手順に従って合成した。０．３ｇ、淡黄色の油状物（５２％、Ｒ_ｆ＝０．２、ジクロロメタン中５％のメタノール）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８７−４．８４（ｍ，１Ｈ）、４．１８−４．００（ｍ、４Ｈ）、３．４（ｓ、６Ｈ）、３．３７−３．１９（ｍ，２Ｈ）、２．３４−２．２６（ｍ，６Ｈ）、２．２（ｓ，６Ｈ）、１．８−１．６（ｍ、２Ｈ）、１．６３−１．２（ｍ，５０Ｈ）、０．８８（ｓ、Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。

【0363】

実施例２５

【化115】

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化合物５０４：アルコール１１（４．０１ｇ、２２．２５ミリモル）、ＴＢＤＰＳ−Ｃｌ（１２．２４ｇ、４４．５ミリモル）及びＤＭＡＰ（０．５４ｇ、４．４２ミリモル）の撹拌溶液に、トリエチルアミン（８．９９ｇ、９０ミリモル）を加え、室温で１４時間撹拌した。上記溶液に、イミダゾール（１．５１ｇ、２２．２５ミリモル）を加え、撹拌を室温で１４時間続けた。２０ｍＬの水を加え、ＤＣＭで抽出し、続いて２Ｎ ＨＣｌ、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮して、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１０％の酢酸エチル）によって精製し、化合物５０４を産生した（７．３８ｇ、７９％、Ｒ_ｆ：０．８、ヘキサン中５％の酢酸エチル）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６８−７．６６（ｍ，４Ｈ）、７．４３−７．３３（ｍ、６Ｈ）、５．８６−５．７６（ｍ，２Ｈ）、５．０２−４．９１（ｍ，４Ｈ）、３．７３−３．６７（ｍ、１Ｈ）、２．０４−１．９９（ｍ，４Ｈ）、１．４２−１．０８（ｍ，２４Ｈ）、１．０５（ｓ、９Ｈ）。

【0364】

化合物５０５：４００ｍＬのＤＣＭ／ＣＨ_３ＣＮ（１：１）中、ジエン５０４（７．３８ｇ、１７．６ミリモル）及びＲｕＣｌ_３（０．１８ｇ、０．８８ミリモル）の撹拌溶液に、４００ｍＬの水に溶解したＮａＩＯ_４（３７．６ｇ、１７６ミリモル）を５℃周辺で３０分間かけて滴加し、室温で３時間撹拌した。有機層を分離し、続いて３％のＮａ_２Ｓ溶液（１００ｍＬ）、水（２５０ｍＬ）、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物５０５（４ｇ、４２％、Ｒ_ｆ：０．３、ヘキサン中４０％の酢酸エチル）を得て、これを更に精製することなく次の工程で使用した。

【0365】

化合物５０６：７５ｍＬの乾燥ＤＣＭ中、酸５０５（４ｇ、７．２２ミリモル）、ＨＢＴＵ（６．０２ｇ、１５．８８ミリモル）、ＨＯＢｔ（２．１４ｇ、１５．８８ミリモル）及びＤＭＡＰ（８８ｍｇ、０．７２ミリモル）の撹拌溶液に、５ｍＬのメタノールを加え、室温で１４時間にわたって撹拌した。１０ｍＬの水を加え、続いてＤＣＭ（３×５０ｍＬ）で抽出し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜３０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５０６（２ｇ、４７．６％、Ｒ_ｆ：０．３、ヘキサン中１０％の酢酸エチル）を産生した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６７−７．６５（ｍ，４Ｈ）、７．４１−７．３３（ｍ，６Ｈ）、３．７０−３．６４（ｍ、１Ｈ）、３．６６（ｓ，６Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，４Ｈ）、１．６３−１．０７（ｍ、２４Ｈ）、１．０４（ｓ、９Ｈ）。

【0366】

化合物５０７：乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のジメチルエステル５０６（１．０ｇ、１．７９ミリモル）の撹拌溶液に、ＫＨＭＤＳ（０．７５２ｇ、３．７６ミリモル）及びヨウ化メチル（０．７６２ｇ、５．３７ミリモル）を０℃で加え、その後３０分かけて室温まで戻し、２４時間にわたって撹拌した。１０ｍＬの飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液を加え、続いて酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜５％の酢酸エチル）により精製して、生成物５０７（０．２１８ｇ、２０％、Ｒ_ｆ：０．８、ヘキサン中５％の酢酸エチル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６８−７．６５（ｍ，４Ｈ）、７．４１−７．３３（ｍ、６Ｈ）、３．７０−３．６７（ｍ、１Ｈ）、３．６７（ｓ，６Ｈ）、２．４３−２．３８（ｍ、２Ｈ）、１．５９−１．０７（ｍ、２４Ｈ）、１．１３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，６Ｈ）、１．０４（ｓ、９Ｈ）。

【0367】

化合物５０９：１０ｍＬのＭｅＯＨ／ＴＨＦ（１：１）中、メチルエステル５０７の撹拌溶液に、１ｍＬの水中、ＬｉＯＨ（０．０７９ｇ、３．２７ミリモル）を加え、室温で２４時間にわたって撹拌した。上記溶液に、１ｍＬの水中、ＫＯＨ（０．１８３ｇ、３．２７ミリモル）を加え、更に２日間撹拌した。２ｍＬの飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液を加え、続いて酢酸エチル（３×２５ｍＬ）で抽出し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物５０８（０．４５ｇ、Ｒ_ｆ：０．２、ヘキサン中１０％の酢酸エチル）を得て、これを更に精製することなく次の工程で使用した。乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）中、上記二価酸５０８（０．４５ｇ）、シス−２−ノネン−１−オール（０．６６ｇ、４．６ミリモル）及びＥＤＣ・ＨＣｌ（０．８２ｇ、４．６ミリモル）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（１．２ｇ、９．２４ミリモル）を加え、室温で３日間にわたって撹拌した。１０ｍＬの水を加え、続いてＤＣＭで抽出し、その後２Ｎ ＨＣｌ、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５０９（０．３ｇ、５５％、Ｒ_ｆ：０．５、ヘキサン中３％の酢酸エチル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６７−７．６５（ｍ，４Ｈ）、７．４２−７．３３（ｍ、６Ｈ）、５．６７−５．６（ｍ，２Ｈ）、５．５５−５．４９（ｍ，２Ｈ）、４．６１５（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，４Ｈ）、３．７１−３．６５（ｍ，１Ｈ）、２．４４−２．３５（ｍ、２Ｈ）、２．１０（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，４Ｈ）、１．６４−１．０７（ｍ、４０Ｈ）、１．１３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ）、１．０４（ｓ，９Ｈ）、０．８６（ｔ，Ｊ＝１０Ｈｚ，６Ｈ）。

【0368】

化合物５１１：乾燥ＴＨＦ中、シリルエーテル５０９（０．３ｇ、０．３６ミリモル）の溶液に、ピリジン（１ｍＬ）及びＨＦ・Ｐｙｒ（１ｍＬ）を滴加し、４５℃で４８時間にわたって撹拌した。溶媒を蒸発させて、精製することなく、次の工程で使用した。乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、上記粗アルコール５１０、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ酪酸（０．３４ｇ、２．０４ミリモル）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．３９ｇ、２．０４ミリモル）及びＤＭＡＰ（０．０６ｇ、０．５１ミリモル）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（０．５ｇ、３．８８ミリモル）を加え、室温で２日間撹拌した。１０ｍＬの水を加え、続いてＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサンを含有する１％のＴＥＡ中０〜３０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５１１（０．１６７ｇ、６６％、Ｒ_ｆ：０．４、ＤＣＭ中１０％のＭｅＯＨ）を得た。Ｃ_４３Ｈ_７９ＮＯ_６についての分子量は（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値が７０６．５９であり、実測値は７０６．５であった。

【0369】

実施例２６

【化116】

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化合物５１２：１００ｍＬのＴＨＦ／ＨＭＰＡ（４：１）中、４−ペンチン酸の撹拌溶液に、−７８℃でｎＢｕＬｉ（３．１ｇ、４９ミリモル）を滴加し、３０分間撹拌した。次いで反応混合物を０℃にもどし、２時間撹拌した。再度、反応混合物を−７８℃に冷却し、ｎ−臭化ブチル（３．０７ｇ、２２．４４ミリモル）を滴加し、室温で１４時間撹拌した。１０ｍＬの飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液を加え、続いて酢酸エチル（３×２５ｍＬ）で抽出し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜３０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５１２（０．４ｇ、Ｒ_ｆ：０．８、ヘキサン中３０％の酢酸エチル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．５９−２．５５（ｍ，２Ｈ）、２．４９−２．４４（ｍ，２Ｈ）、２．１６−２．１１（ｍ，２Ｈ）、１．４９−１．３４（ｍ、４Ｈ）、０．９（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）。

【0370】

化合物５１３：ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）中、Ｎｉ（ＯＡｃ）_２（０．４５ｇ、２．５３ミリモル）の懸濁液に、ＮａＢＨ_４（０．０９６ｇ、１２．６５ミリモル）を室温で少量ずつ加え、Ｈ_２雰囲気下で１５分間撹拌した。固体を濾過で除き、続いて溶媒を濃縮し、化合物５１３を得た（０．３５ｇ、８８．６％、Ｒ_ｆ：０．６、ヘキサン中２０％の酢酸エチル）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１０．８８（ｂｒ，ｓ，１Ｈ）、５．４７−５．４１（ｍ，１Ｈ）、５．３５−５．３１（ｍ，１Ｈ）、２．４３−２．３３（ｍ，４Ｈ）、２．０７−２．０３（ｍ，２Ｈ）、１．３６−２．２７（ｍ、４Ｈ）、０．９（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，３Ｈ）。

【0371】

化合物５１５：ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中、ジ−アセテート５１４（１．５ｇ、３．０９ミリモル）の撹拌溶液に、ナトリウム金属片（０．０５ｇ、２．１７ミリモル）を加え、室温で１４時間撹拌した、ドライアイスで中和し、濃縮し、続いて酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物５１５（１．１ｇ、８８．７％）を得て、これを精製することなく次の工程で使用した。

【0372】

化合物５１６：乾燥ＤＣＭ（１５ｍＬ）中、上記ジオール５１５（０．４ｇ、１ミリモル）、５１３（０．３４１ｇ、２．１９ミリモル）、ＤＭＡＰ（０．１ｇ、０．８２ミリモル）及びＥＤＣ・ＨＣｌ（０．５７ｇ、２．９８ミリモル）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（５．９７ｇ、６ミリモル）を加え、室温で２日間撹拌した。１０ｍＬの水を加え、続いて酢酸エチルで抽出し、１ＮのＨＣｌ、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５１６（０．３３５ｇ、５０％、Ｒ_ｆ：０．６、ヘキサン中５％の酢酸エチル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．４５−５．３８（ｍ，２Ｈ）、５．３６−５．２９（ｍ，２Ｈ）、４．０６（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，４Ｈ）、３．６３−３．５８ ９ｍ，１Ｈ）、２．３９−２．３１（ｍ，８Ｈ）、２．０７−２．０２（ｍ，４Ｈ）、１．６５−１．５７（ｍ、４Ｈ）、１．４−１．２８（ｍ、３２Ｈ）、０．９（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）、０．８８（ｓ、９Ｈ）、０．０３（ｓ，６Ｈ）。

【0373】

化合物５１７：乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中、シリルエーテル５１６（０．３ｇ、０．３６ミリモル）の溶液に、ピリジン（１ｍＬ）及びＨＦ・Ｐｙｒ（１ｍＬ）を滴加し、４５℃で２４時間にわたって撹拌した。溶媒を蒸発させて、続いてカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物５１７（０．２ｇ、７２％、Ｒ_ｆ：０．４、ヘキサン中１０％の酢酸エチル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．４３−５．３６（ｍ，２Ｈ）、５．３４−５．２７（ｍ，２Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，４Ｈ）、３．５９−３．５３（ｍ、１Ｈ）、２．３７−２．３（ｍ，８Ｈ）、２．０５−２．０（ｍ，４Ｈ）、１．６１−１．２９（ｍ、３７Ｈ）、０．８８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ）。

【0374】

化合物５１８：乾燥ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、アルコール５１７（０．２ｇ、０．３５５ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ酪酸（０．３６ｇ、２．１４ミリモル）、ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．４０６ｇ、２．１４ミリモル）及びＤＭＡＰ（０．０４３ｇ、０．３６ミリモル）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（０．５５ｇ、４．２６ミリモル）を加え、室温で２日間撹拌した。１０ｍＬの水を加え、続いてＤＣＭ（３×２５ｍＬ）で抽出し、飽和ＮａＨＣＯ_３、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサンを含有する１％のＴＥＡ中０〜３０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５１８（０．１７２ｇ、７２％、Ｒ_ｆ：０．２、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．４３−５．３６（ｍ，２Ｈ）、５．３２−５．２７（ｍ，２Ｈ）、４．８７−４．８３（ｍ，１Ｈ）、４．０３（ｔ，Ｊ＝６Ｈｚ，４Ｈ）、２．３６−２．２（ｍ，６Ｈ）、２．３２（ｓ，６Ｈ）、２．０３−１．２５（ｍ，４０Ｈ）、０．８８（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ）。

【0375】

実施例２７

【化117】

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化合物５２１：Ｅｔ_２Ｏ中Ｍｇの懸濁液に、臭化アルキル（２５ｇ、１０７．７ミリモル）を４０℃で１時間かけて滴加した。ギ酸エチルを上記反応混合物に０〜５℃で加え、反応混合物を室温で１４時間にわたって撹拌した。反応混合物を氷冷飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液に注ぎ、続いてＥｔ_２Ｏ（３×２５０ｍＬ）で抽出し、水、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをＭｅＯＨ（２５０ｍＬ）中に再溶解し、ナトリウムの小片（０．１ｇ）を加え、室温で１４時間撹拌した。溶媒を蒸発させて、１００ｍＬの水を加え、続いて固体を濾過し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄して、淡黄色末５２１（１７ｇ、９４％、Ｒ_ｆ：０．８、ヘキサン中１０％の酢酸エチル）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．８４−５．７４（ｍ，２Ｈ）、５．０−４．８９（ｍ，４Ｈ）、３．６４−３．４９（ｍ，１Ｈ）、２．０４−１．９９（ｍ，４Ｈ）、１．７９（ｂｒ，ｓ，１Ｈ）、１．４４−１．２３（ｍ，３２Ｈ）。

【0376】

化合物５２２：乾燥ＤＣＭ（５０ｍＬ）中、５２１（１０ｇ、２９．７３ミリモル）及びＤＭＡＰ（０．１ｇ、０．８２ミリモル）の撹拌溶液に、４−ブロモブチリルクロリド（６．５６ｇ、３５．６８ミリモル）を加え、室温で１４時間撹拌した。５ｍＬの飽和ＮａＨＣＯ_３を加え、有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮し、粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜１０％の酢酸エチル）により精製して、化合物５２２（９．６ｇ、６６．７％、Ｒ_ｆ：０．９、ヘキサン中５％の酢酸エチル）を生成した。

【0377】

化合物５２４：化合物５０５と同一の実験手順に従って、酸化を行い、化合物５２３を得た（８．６ｇ、８３．５％、Ｒ_ｆ：０．１、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）。この粗物質をＴＨＦ（２０ｍＬ）中、２ＮのＮ，Ｎ−ジメチルアミンに溶解し、密閉チューブ内で１４時間、６０℃に加熱した。反応混合物を濃縮し、次いで反応混合物のｐＨを３とした。この混合物を凍結乾燥し、化合物５２４をＨＣｌ塩として得た（４ｇ、８２％）。Ｃ２７Ｈ５１ＮＯ６についての（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値は４８６．３７であり、実測値は４８６．２であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９４−４．８９（ｍ，１Ｈ）、３．３２−３．３（ｍ，２Ｈ）、３．２−３．１６（ｍ，２Ｈ）、２．９１（ｓ，６Ｈ）、２．４７（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，４Ｈ）、２．０５−１．９７（ｍ，２Ｈ）、１．６１−１．５６（８Ｈ）、１．４−１．２５（ｍ，２２Ｈ）。

【0378】

【表66】

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【0379】

エステル５２５、５２６，５２７及び５２８の合成：
標題化合物を、化合物５１６についての実験手順に従って合成した。

【0380】

化合物５２５：（０．７５ｇ、６０％、Ｒ_ｆ：０．３、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６５−５．５９（ｍ，２Ｈ）、５．５３−５．４７（ｍ，２Ｈ）、４．８７−４．８１（ｍ，１Ｈ）、４．５９５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，４Ｈ）、２．４３−２．２５（ｍ，８Ｈ）、２．２（ｓ，６Ｈ）、２．１−２．０３（ｍ，４Ｈ）、１．８１−１．７３（ｍ，２Ｈ）、１．６１−１．５６（ｍ，４Ｈ）、１．４８−１．４７（ｍ、４Ｈ）、１．３６−１．２３（ｍ，３２Ｈ）、０．８６（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ）。

【0381】

化合物５２６：（０．３５８ｇ、６０．９％、Ｒ_ｆ：０．５、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８７−４．８１（ｍ，１Ｈ）、４．０７−３．９５（ｍ，４Ｈ）、２．３２−２．２４（ｍ，６Ｈ）、２．２（ｓ，６Ｈ）、１．８０−１．６９（ｍ，４Ｈ）、１．６−１．１４（ｍ，４６Ｈ）、０．８８−０．８４（ｍ，２４Ｈ）。

【0382】

化合物５２７：（０．２５８ｇ、５６．８％、Ｒ_ｆ：０．５、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）。Ｃ４７Ｈ９１ＮＯ６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７６６．２３；実測値７６６．７。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８６−４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．１２−４．０２（ｍ、４Ｈ）、２．３１−２．２３（ｍ、８Ｈ）、２．１９（ｓ，６Ｈ）、１．８０−１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．６６−１．０６（ｍ，５２Ｈ）、０．８７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ）、０．８４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１２Ｈ）。

【0383】

化合物５２８：（０．３ｇ、６８．１％、Ｒ_ｆ：０．５、ＤＣＭ中５％のＭｅＯＨ）。Ｃ４７Ｈ９１ＮＯ６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７６６．２３；実測値７６６．７。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８６−４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．１２−４．０２（ｍ，４Ｈ）、２．３１−２．２１（ｍ，８Ｈ）、２．１９（ｓ，６Ｈ）、１．７９−１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．６６−０．９８（ｍ，５２Ｈ）、０．８７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，６Ｈ）、０．８３５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１２Ｈ）。

【0384】

実施例２８

【化118】

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化合物５３３、５３４、５３５及び５３６の合成：標題化合物（１ミリモル）を、脱シリル化工程を除いては、化合物５１３の実験手順に従って合成し、この脱シリル化は、室温でＴＨＦ中のＴＢＡＦを使用して行われる。

【0385】

化合物５３７、５３８、５３９及び５４０の合成：標題化合物（１ミリモル）を、化合物５２５の実験手順に従って合成する。

【0386】

実施例２９

【化119】

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化合物２４３（Ｘ＝Ｏ／ＮＨ、Ｒ＝アルキル／アリール）は、スキーム１６−２に示す通りに合成することが可能である。２３９のトシル基は、求核置換によってフタルイミド基で置き換えられることが可能である。脱保護化、続いて酸性条件下の１１１とのカップリング後に、２４２が合成され得る。標準エステル化によって、カチオン性脂質２４３及びその類似体を得る。

【0387】

実施例３０：エステル含有脂質の合成

【化120】

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化合物１５：化合物１３（５０３ｍｇ、１，０ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）中、ＥＤＣＩ（２．３０ｇ、１２．０ミリモル）、ＤＭＡＰ（２３５ｍｇ、１．９２ミリモル）及びＤＩＥＡ（８．３４ｍＬ、４７．９ミリモル）の存在下で、１４（４６９ｍｇ、３．０ミリモル）で１４時間にわたって処理した。水処理後、カラムクロマトグラフィーを行い、化合物１５（１．２２ｇ、１．５４ミリモル、４０％）を得た。Ｃ_４９Ｈ_９２ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７９０．６９２５；実測値７９０．７。

【0388】

化合物１６：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１３及びテトラヒドロラバンジュロールから合成した。収率：０．３５８ｇ、６１％。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８７−４．８１（ｍ，１Ｈ）、４．０７−３．９５（ｍ，４Ｈ）、２．３２−２．２４（ｍ，６Ｈ）、２．２（ｓ，６Ｈ）、１．８０−１．６９（ｍ，４Ｈ）、１．６−１．１４（ｍ，４６Ｈ）、０．８８−０．８４（ｍ，２４Ｈ）。

【0389】

化合物１７：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１２（１．０ｇ、２．１５ミリモル）及び３（１．０３ｇ、５．１６ミリモル）から合成した。収率：８５６ｍｇ（５０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９１−４．７９（ｍ，１Ｈ）、４．０８（ｔ、Ｊ＝７．１Ｈｚ，４Ｈ）、２．３５−２．２５（ｍ，１４Ｈ）、１．８９−１．７６（ｍ，２Ｈ）、１．６７−１．１３（ｍ，６２Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．０８、７４．４５、６３．０８、４５．２７、３４．７６、３４．５６、３４．２８、３３．７０、３２．６１、３２．３９、２９．５４、２９．３６、２９．２８、２６．３６、２５．４７、２５．１３、２２．８３、１４．２６。Ｃ_４９Ｈ_９６ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７９４．７２３８；実測値７９４．６。

【0390】

化合物１８：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１３（１．０ｇ、２．１５ミリモル）及び３（１ｇ）から合成した。収率：１ｇ（５９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９４−４．７４（ｍ，１Ｈ）、４．１７−３．８５（ｍ，４Ｈ）、２．４６−２．１９（ｍ，１２Ｈ）、１．９３−１．７９（ｍ，２Ｈ）、１．７４−１．４５（ｍ，１０Ｈ）、１．３７（ｄ，Ｊ＝２０．２Ｈｚ，２Ｈ）、１．３５−１．１３（ｍ，４４Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．１９、７７．５３、７７．２１、７６．９０、６３．１２、３４．８１、３４．６６、３４．３５、３３．７６．３２．６６、３２．４５、２９．７６、２９．７３、２９．６３、２９．４８、２９．３９、２６．４２、２５．５７、２５．２３、２２．８９、１４．３２。Ｃ_５３Ｈ_１０３ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：８５０．３８；実測値８５０．７。

【0391】

化合物１９：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１２及び１１から合成した。収率：８６０ｍｇ（５１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９０−４．８１（ｍ，１Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、２．３７−２．１７（ｍ，１４Ｈ）、１．８４−１．０６（ｍ，４８Ｈ）、０．９３−０．７８（ｍ，２４Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．０６、７４．３５、６５．５１、６４，９１、５９．０５、４５．５１、４３．７７、３７．１０、３４．５５、３４．２９、３２．５５、２９．５４、２９．３７、２９．３４、２９．２８、２８．５８、２８．１９、２６．９９、２６．７４、２５．４７、２５．１５、２２．９０、２２．８２、１９．６０、１９．４１、１９．２８。Ｃ_４７Ｈ_９２ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７６６．６９２５；実測値７６６．５。

【0392】

化合物２０：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１３及び１１から合成した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８６（ｐ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，４Ｈ）、２．３８−２．１７（ｍ，１４Ｈ）、１．８４−１．０７（ｍ，５６Ｈ）、０．９３−０．７６（ｍ，２４Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．１１、１７３．４６、７４．４４、６４，９０、５９．０６、４５．５１、４３．７７、３７．１１、３４．５９、３４．３２、３２．５７、２９．７１、２９．６７、２９．５７、２９．４３、２９．３４、２８．５８、２８．２０、２７．００、２６．７５、２５．５１、２５．２０、２２．９０、２２．８２、１９．４１、１９．２８。Ｃ_５１Ｈ_１００ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：８２２．７５５１；実測値８２２．６。

【0393】

化合物２１：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１２及び６から合成した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９１−４．７８（ｍ，１Ｈ）、４．１５−３．９８（ｍ，４Ｈ）、２．３９−２．１８（ｍ，１４Ｈ）、１．８４−１．１１（ｍ，４４Ｈ）、０．９２−０．７７（ｍ，２４Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．０６、１７３．４４、７４．３６、６３，７３、５９．０３、４５．４８、４１．００、３６．９８、３４．５６、３４．２９、３２．５４、２９．６０、２９．５４、２９．４９、２９．３６、２９．２８、２８．５２、２５．４７、２５．１３、２３．１５、２２．８５、２２．８１、１９．４９、１８．８９。Ｃ_４５Ｈ_８８ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７３８．６６１２；実測値７３８．６。

【0394】

化合物２２：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１３及び６から合成した。収率：９００ｍｇ（５７％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．９２−４．７８（ｍ，１Ｈ）、４．１５−３．９１（ｍ，４Ｈ）、３．３３−３．０８（ｍ，１Ｈ）、２．３６−２．１５（ｍ，１４Ｈ）、１．７９（ｄｑ、Ｊ＝１４．３，７．２Ｈｚ，２Ｈ）、１．７４−１．５５（ｍ，８Ｈ）、１．５５−１．３７（ｍ，９Ｈ）、１．３５−０．９５（ｍ，３６Ｈ），０．９６−０．６１（ｍ，２７Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．１６、１７３．５２、７７．５４、７７．２２、７６．９１、７４．４８、６３．７６、５９．１０、４５．５５、４２．０２、４１．０４、３８．７５、３７．０９、３７．０２、３４．６５、３４．３６、３２．６２、３０．７１、２９．７５、２９．７２、２９．６４、２９．６２、２９．５３、２９．４８、２９．４４、２９．３８、２８．５６、２８．４５、２５．５６、２５．２３、２３．５９、２３．２３、２２．９０、２２．８６、１９．５４、１９．０３、１８．９４。Ｃ_４９Ｈ_９５ＮＯ_６についての分子量は、（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７９４．２８１７；実測値７９４．７。

【0395】

化合物２４：この化合物は、化合物１５について記載されたものと類似の手順を使用して、１３及び２３から合成した。収率：０．５６７ｇ（３０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ４．８５（ｐ、Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．２０−３．９３（ｍ，４Ｈ）、２．４１−２．１８（ｍ，１３Ｈ）、１．９２−１．７２（ｍ，２Ｈ）、１．５６（ｄｄｄ、Ｊ＝２７．４，１６．４，５．８Ｈｚ，１２Ｈ）、１．３９（ｓ，２Ｈ）、１．２５（ｓ，５４Ｈ）、０．９１（ｄｔ，Ｊ−１３．７，６．４Ｈｚ，１１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．１８、１７３．５１、７７．５４、７７．２３、７６．９１、７４．５０、６３．１２、５９．１０、４５．５５、３４．８１、３４．６６、３４．３８、３３．７６、３２．６７、３２．６２、３２．４５、２９．７７、２９．７３、２９．６４、２９．４９、２９．３９、２６．４２、２５．５７、２５．２４、２３．２３、２２．８９、１４．３２。Ｃ_４７Ｈ_８８ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７６２．６６１２；実測値７６２．５。

【0396】

実施例３１：アルコール成分の合成

【化121】

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化合物２：化合物２は、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９、１４７３に記載されているものに類似した手順を使用して、１から合成した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．６６（ｓ，３Ｈ）、２．２３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、１．８４（ｂｒｓ，１Ｈ）、１．２７（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１６Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．２９、５１．４９、３９．２５、３５．２２、３４．００、３２．２４、２６．３４、２２．７７、１４．２２。

【0397】

化合物３：ＴＨＦ（８５ｍＬ）中、ＬｉＡｌＨ_４（２．８４ｇ、７４．９ミリモル）の懸濁液に、ＴＨＦ（２５ｍＬ）中、化合物２（８．５５ｇ、３７．４ミリモル）を添加した。反応混合物を一晩還流した。水処理後、カラムクロマトグラフィーを行い、純粋な化合物３（７．３５ｇ、３６．７ミリモル、９８％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．６６（ｔ、Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、１．５９−１．１２（ｍ，１９Ｈ）、０．８８（（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ）。

【0398】

化合物４：テトラヒドロラバンジュロール（１０．１ｇ、６３．８ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２００ｍＬ）及びＥｔ_３Ｎ（１７．６ｍＬ）中のメタンスルホニルクロリド（６．３８ｍＬ）で処理した。水処理を行い、粗メシレートを得て、これをＥｔＯＨ（９０ｍＬ）及びＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）中、ＫＣＮ（４．９８ｇ、７６．５ミリモル）で処理した。水処理後、カラムクロマトグラフィーを行い、純粋な化合物４（８．３６ｇ、５０．０ミリモル、７２％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ２．３８−２．２３（ｍ，２Ｈ）、１．８６−１．７８（ｍ，１Ｈ）、１．５９−１．４２（ｍ，３Ｈ）、１．４０−１．０７（ｍ，３Ｈ）、０．９３−０．８９（ｍ，１２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１１９．７３、４１．６９、３６．４６、３０．１０、２８．４４、２８．３３、２２．８２、２２．５９、１９．６２、１９．１１、１９．０５。

【0399】

化合物６：シアノ誘導体４を、酸性条件下でエチルエステルに変換し、化合物５を得て、このエステルをＴＨＦ中のＬｉＡｌＨ_４により還元して、化合物６を得た。

【0400】

化合物７：テトラヒドロラバンジュロール（９８．１ｇ、５１．２ミリモル）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２００ｍＬ）中のＰＣＣ（１６．６ｇ、７６．８ミリモル）で酸化した。水処理後、カラムクロマトグラフィーを行い、純粋な化合物７（６．１９ｇ、３９．６ミリモル、７７％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ９．６０（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ，１Ｈ）、２．０５−１．７９（ｍ，１Ｈ）、１．７１−１．３６（ｍ，４Ｈ）、１．２３−１．０４（ｍ，２Ｈ）、１．０２−０．８２（ｍ，１２Ｈ）。

【0401】

化合物９：トルエン（４０ｍＬ）及びＣＨ_２Ｃｌ_２（１８ｍＬ）中の化合物７の溶液に、８（３．９６ｇ、１１．８ミリモル）を加えた。混合物を７０℃で一晩加熱した。カラムクロマトグラフィーを行い、純粋な化合物９（１．４０ｇ、６．５９ミリモル、５１％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ６．７７（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，９．９Ｈｚ，１Ｈ）、５．７６（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．７３（ｓ，３Ｈ）、１．９７−１．８３（ｍ，１Ｈ）、１．７２−１．６４（ｍ，１Ｈ）、１．５４−１．４０（ｍ、２Ｈ）、１．３７−１．２２（ｍ，１Ｈ）、１．１８−０．９７（ｍ，２Ｈ）、０．９４−０．７８（ｍ、１２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１６７．１９、１５２．５４、１２１．７０、５１．５３、４９．６６、３６．９５、３１．７６、２９．４９、２８．２９、２２．９２、２２．５４、２０．８４、１９．２４。

【0402】

化合物１０：ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中化合物９（１．０ｇ、４．７１ミリモル）の溶液に、Ｐｄ−Ｃ（１２５ｍｇ）を加えた。混合物をＨ_２雰囲気下で一晩撹拌した。混合物をセライト上で濾過し、次いで蒸発させて、純粋な化合物１０（９２４ｍｇ、４．３１ミリモル、９２％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．６７（ｓ、３Ｈ）、２．４１−２．１６（ｍ，２Ｈ）、１．７４−１．５７（ｍ，２Ｈ）、１．５７−１．４２（ｍ，２Ｈ）、１．３３−１．０２（ｍ，５Ｈ）、０．８８−０．８３（ｍ，１２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．７８、５１．６２、４３．７１、３６．９７、３２．６９、２９．２３、２８．５６、２７．９４、２５．９２、２２．８５、２２．７９、１９．３２、１９．１９。

【0403】

化合物１１：ＴＨＦ（１２ｍＬ）中、ＬｉＡｌＨ_４（４４４ｍｇ、１１．７ミリモル）の懸濁液に、ＴＨＦ（８ｍＬ）中、化合物１０（１．２５ｇ、５．８３ミリモル）の溶液を加えた。反応混合物を一晩還流した。水処理を行い、粗化合物１１（１．１ｇ）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ３．６３（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、１．７４−１．６６（ｍ，１Ｈ）、１．６０−１．４５（ｍ，３Ｈ）、１．３７−１．０５（ｍ，７Ｈ）、０．８８−０．８２（ｍ，１２Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ６３．７５、４４．００、３７．１６、３１．２２、２９．４０、２８．６１、２８．２８、２６．６２、２２．９０、２２．８２、１９．４３、１９．２８。

【0404】

実施例３２：エステル含有脂質の合成

【化122】

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化合物２６：化合物２５（８４０ｍｇ、１．０３ミリモル）を、ＴＦＡ（９ｍＬ）及びＣＨ_２Ｃｌ_２（３６ｍＬ）中で、室温で３時間撹拌した。溶媒を蒸発させて、トルエンと３回、同時蒸発させて、化合物２６を得た。Ｃ_４３Ｈ_８０ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７０６．５９８６、実測値：７０６．４。

【0405】

化合物２７：前の工程からの化合物２６を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍＬ）中、ＥＤＣＩ（５９２ｍｇ、３．０９ミリモル）、ＤＭＡＰ（５０ｍｇ、０．４１２ミリモル）及びＤＩＥＡ（１．４４ｍＬ、８．２４ミリモル）の存在下で、２，２−ジメチルプロパノール（３６３ｍｇ、４．１２ミリモル）で１４時間にわたって処理した。水処理後、カラムクロマトグラフィーを行い、化合物２７（５７５ｍｇ、０．６７９ミリモル、６６％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．４０−５．２８（ｍ，４Ｈ）、４．９１−４．８１（ｍ，１Ｈ）、３．７６（ｓ，４Ｈ）、２．３４−２．２７（ｍ，８Ｈ）、２．２２（ｓ，６Ｈ）、２．０３−１．９７（ｍ，８Ｈ）、１．８３−１．２６（ｍ、５０Ｈ）、０．９４（ｓ、１８Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．１４、１７３．５３、１３０．０９、１２９．９２、７４．４１、７３．７２、５９．１２、４５．６１、３４．６０、３４．３２、３２．６４、３１．４５、２９．９３、２９．８５、２９．７１、２９．６８、２９．４８、２９．３２、２９．２８、２７．３９、２７．３３、２６．６２、２５．５２、２５．２２、２３．３２。Ｃ_５３Ｈ_１００ＮＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：８４６．７５５１、実測値：８４６．５。

【0406】

実施例３３：第四級脂質の合成
Ａ．実施例３１及び３２で合成されたアミノ脂質は、ＣＨ_３ＣＮ及びＣＨＣｌ_３中のＣＨ_３Ｃｌによる処理によって、以下に示したように対応する第四級脂質に変換することが可能である。

【化123】

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【0407】

Ｂ．ボディパイ（ＢＯＤＩＰＹ）−脂質コンジュゲートの合成

【化124】

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化合物１０２：ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍＬ）中、化合物１０１（２．００ｇ、４．３０ミリモル）及びシス−２−ノネン−１−オール（１．８１ｍＬ、１０．７ミリモル）の溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（３．００ｍＬ、１７．２ミリモル）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．０６ｇ、１０．７ミリモル）及びＤＭＡＰ（１０６ｍｇ、０．８６８ミリモル）を加えた。反応混合物を室温で１８時間にわたって撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン中０〜５％のＥｔＯＡｃ）により精製し、化合物１０２を得た（２．１１ｇ、２．９６ミリモル、６９％、Ｒ_ｆ＝０．４５（ヘキサン中１０％のＥｔＯＡｃで展開））。^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６７−５．６１（ｍ，２Ｈ）、５．５４−５．４９（ｍ、２Ｈ）、４．８９−４．８４（ｍ、１Ｈ）、４．６２（ｄ、Ｊ＝６．５Ｈｚ，４Ｈ）、３．４６（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．４８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．３０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，４Ｈ）、２．２０−２．１４（ｍ，２Ｈ）、２．１２−２．０４（ｍ、４Ｈ）、１．６３−１．６０（ｍ，４Ｈ）、１．５１−１．５０（ｍ、４Ｈ）、１．３７−１．２７（ｍ、３２Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７３．９０、１７２．４５、１３５．５８、１２３．５１、７４．７４、６０．３６、３４．４７、３４．２４、３２．９３、３２．９１、３１．８３、２９．５４、２９．４８、２９．３１、２９．２１、２９．０１、２８．０３、２７．７０、２５．４３、２５．０８、２２．７６、１４．２３。Ｃ_３９Ｈ_６９ＢｒＮａＯ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｎａ）^＋計算値：７３５．４２、実測値：７３５．２。

【0408】

化合物１０３：ＤＭＦ（２０ｍＬ）中、１０２（２．１１ｇ、２．９６ミリモル）の溶液に、ＤＭＦ（２０ｍＬ）中、Ｎ−Ｂｏｃ−１，６−ジアミノヘキサン（６７０ｍｇ、３．１０ミリモル）を０℃で加えた。この混合物を室温で１８時間にわたって撹拌した。次いで、ＤＭＦ（１ｍＬ）中、追加のＮ−Ｂｏｃ−１，６−ジアミノヘキサン（１６０ｍｇ、０．７４０ミリモル）を加え、混合物を１２時間撹拌した。反応物を、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１００ｍＬ）を添加することにより急冷し、次いでＥｔ_２Ｏ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、無水ＭｇＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後に、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２中５％のＭｅＯＨ、Ｒ_ｆ＝０．２４）により精製し、１０３を得た（１．２８ｇ、１．５１ミリモル、５１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６７−５．６１（ｍ，２Ｈ）、５．５５−５．５０（ｍ，２Ｈ）、４．８８−４．８１（ｍ，１Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、４．５４（ｂｒｓ，１Ｈ）、３．１１−３．０８（ｍ，２Ｈ）、２．６７−２．５９（ｍ，４Ｈ）、２．３５（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）、２．２９（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，４Ｈ）、２．１０−２．０７（ｍ，４Ｈ）、１．８４−１．８１（ｍ，４Ｈ）、１．６３−１．５７（ｍ，４Ｈ）、１．５０−１．４７（ｍ，８Ｈ）、１．４４（ｓ，９Ｈ）、１．３８−１．２７（ｍ，３４Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７３．９０、１７３．５３、１３５．５７、１２３．５０、７４．４９、６０．３６、４９．８２、４９．２９、４０．６４、３４．４７、３４．２４、３２．６８、３１．８３、３０．１６、２９．８９、２９．５４、２９．５０、２９．３３、２９．２３、２９．０１、２８．５８、２７．６９、２７．１１、２６．８０、２５．４４、２５．３７、２５．０９、２２．７６、１４．２３。Ｃ_５０Ｈ_９３Ｎ_２Ｏ_８についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：８４９．６９、実測値：８４９．５。

【0409】

化合物１０４：ＴＨＦ（２０ｍＬ）中１０３（１．１６ｇ、１．３７ミリモル）の溶液に、ホルムアルデヒド（Ｈ_２Ｏ中３７重量％、０．３０６ｍＬ、４．１１ミリモル）、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＴＨＦ中１Ｍ溶液、２．０６ｍＬ、２．０６ミリモル）及び酢酸（０．００８ｍＬ、０．１３７ミリモル）を０℃で加えた。この混合物を室温で１７時間にわたって撹拌した。反応物を、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）を添加することにより急冷し、次いでＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ×３）で抽出した。有機層を分離し、無水ＭｇＳＯ_４上で乾燥した。濾過及び濃縮後に、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２中８％のＭｅＯＨ、Ｒ_ｆ＝０．４６）により精製し、１０４を得た（５３１ｍｇ、０．６１５ミリモル、４５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ５．６６−５．６０（ｍ，２Ｈ）、５．５３−５．４７（ｍ，２Ｈ）、４．８６−４．８０（ｍ，１Ｈ）、４．６１−４．５９（ｍ，５Ｈ）、３．１２−３．０７（ｍ，２Ｈ）、２．８９−２．７８（ｍ，４Ｈ）、２．６２（ｓ、３Ｈ）、２．４０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，４Ｈ）、２．１１−２．０６（ｍ，４Ｈ）、１．９９−１．９２（ｍ，２Ｈ）、１．６９−１．２７（ｍ，５７Ｈ）、０．８７（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７３．８６、１７２．４５、１５６．１８、１３５．５５、１２３．４５、７５．２４、６０．３２、５６．６８、５５．８３、４０．７２、４０．３６、３４．４０、３４．０９、３１．７９、３１．２９、２９．９２、２９．４９、２９．４１、２９．２６、２９．１７、２８．９６、２８．５５、２７．６５、２６．４９、２６．３０、２５．４１、２５．０２、２４．７９、２２．７１、２０．１２、１４．１９。Ｃ_５１Ｈ_９５Ｎ_２Ｏ_８についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：８６３．７１、実測値：８６３．６。

【0410】

化合物１０５：ＣＨ_２Ｃｌ_２（８ｍＬ）中化合物１０４（５２５ｍｇ、０．６０８ミリモル）の溶液に、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を０℃で加えた。この反応混合物を０℃で１時間、室温で３時間にわたって撹拌した。反応混合物を蒸発させて、トルエンと３回にわたって同時蒸発させ、次いで真空中で一晩乾燥し、化合物１０５を得た（６０３ｍｇ、０．６０３ミリモル（２ ＴＦＡ塩として定量的に計算）、Ｒ_ｆ＝０．２４（ＣＨ_２Ｃｌ_２中８％のＭｅＯＨで展開））。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ８．０６（ｂｒｓ，１Ｈ）、５．６８−５．６１（ｍ，２Ｈ）、５．５５−５．４９（ｍ，２Ｈ）、４．８７−４．８１（ｍ，１Ｈ）、４．６２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、４．２８（ｂｒｓ，３Ｈ）、３．２０−３．０２（ｍ，６Ｈ）、２．８２（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，３Ｈ）、２．４５−２．４０（ｍ，２Ｈ）、２．３０（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，４Ｈ）、２．１２−２．００（ｍ，６Ｈ）、１．７８−１．２２（ｍ，５２Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１７４．０４、１７２．０８、１６１．８４、１６１．４７、１３５．６３、１２３．４４、１１７．６０、１１４．７１、７５．５６、６０．４１、５５．６９、５５．２７、３９．９４、３９．６４、３４．４４、３４．０６、３１．８２、３０．７２、２９．５３、２９．４３、２９．２８、２９．１９、２９．００、２７．６９、２６．５８、２５．４２、２５．２７、２５．０５、２４．６０、２３．０６、２２．７５、１９．００、１４．２２。Ｃ_４６Ｈ_８７Ｎ_２Ｏ_６についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：７６３．６６、実測値：７６３．４。

【0411】

化合物１０６：ＣＨ_２Ｃｌ_２（１ｍＬ）及びＥｔ_３Ｎ（０．０５０ｍＬ、０．３６０ミリモル）中、１０５（２３．８ｍｇ、０．０２４０ミリモル（２ＴＦＡ塩として計算））の溶液に、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍＬ）中、ＢＯＤＩＰＹ（登録商標）４９３／５０３（１０ｍｇ、０．０２４０ミリモル、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ＃Ｄ２１９１）の溶液を加えた。この反応混合物を１時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーに充填し、ＣＨ_２Ｃｌ_２中０〜５％のＭｅＯＨで溶出した。生成物の着色フラクションを回収し（ＣＨ_２Ｃｌ_２中５％のＭｅＯＨ、Ｒ_ｆ＝０．３６）、１０６（２６ｍｇ、０．０２４ミリモル、定量的）に得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ６．０５（ｓ，２Ｈ）、５．６７−５．６１（ｍ，２Ｈ）、５．５４−５．４８（ｍ，２Ｈ）、４．８５−４．８２（ｍ，１Ｈ）、４．６１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．３７−３．３２（ｍ，２Ｈ）、３．２７−３．２２（ｍ，２Ｈ）、２．５１−２．４４（ｍ，１７Ｈ）、２．３４−２．２７（ｍ，８Ｈ）、２．１２−２．０６（ｍ，４Ｈ）、１．６０−１．２１（ｍ，５２Ｈ）、０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，６Ｈ）。Ｃ_６２Ｈ_１０４ＢＦ_２Ｎ_４Ｏ_７についての分子量：（Ｍ＋Ｈ）^＋計算値：１０６５．８０、実測値：１０６５．５。

【0412】

実施例３４：多エステル含有脂質及びアセタール結合脂質

【化125】

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化合物５００２の合成：ＤＣＭ（２０ｍＬ）中、アルコール５００１（１．０ｇ、５．１５ミリモル）、無水グリコール酸５０００（５．６６ミリモル）の溶液に、ＤＭＡＰ（１．２６ｇ、１０．４１ミリモル）を加え、室温で４８時間にわたって撹拌した。この反応混合物を濃縮し、続いてカラム精製を行い、対応する生成物５００２（１．４ｇ、８６％）をＤＭＡＰ塩として得た。ＬＣＭＳ：計算値：３１６．２２（Ｍ^＋）、実測値：３１５．１（Ｍ^＋−１）。

【0413】

化合物５００４の合成：ＤＣＭ（１００ｍＬ）中、アルコール５００３（５．０ｇ、４４．６ミリモル）、４−（ジメチルアミノ）酪酸塩酸塩（８．１ｇ、４８．３ミリモル）及びＥＤＣ（１０．３ｇ、５３．６ミリモル）の溶液に、ＤＩＥＰＡ（２３ｇ、１７８．３ミリモル）を加え、室温で一晩撹拌した。通常の処理後、粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製した（９．０ｇ、９０％）。

【0414】

化合物５００５の合成：１０ｍＬのＴＨＦ中、ジエン５００４（４．０ｇ、１８ミリモル）の撹拌溶液に、９−ＢＢＮを加え、一晩撹拌した。上記溶液に、６．６ｍＬの３ＭのＮａＯＡｃ及び７．４ｍＬの３０％Ｈ_２Ｏ_２を０〜５℃で加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌した。通常の処理後、粗物質をカラムクロマトグラフィーにより精製し、５００５（２．６ｇ、５５％）を粘性油状物として得た。ＬＣＭＳ：計算値：２６１．１９（Ｍ^＋）、実測値：２６２．１（Ｍ^＋＋１）。

【0415】

化合物５００６及び５００７の合成：１０ｍＬのＤＣＭ中、ジエン５００５（２６０ｍｇ、１ミリモル）、酸５００２（１．０ｇ、２．２８ミリモル）ＥＤＣ（３８７ｍｇ、２ミリモル）の溶液に、ＤＩＥＡ（５１６ｍｇ、４ミリモル）を加え、一晩撹拌した。通常の処理後、粗物質をカラムクロマトグラフィーにより精製し、５００６（０．１ｇ、１２％）及び５００７（０．２ｇ、３６％）を得た。化合物５００６についてのＬＣＭＳ：計算値：８５７．６２（Ｍ^＋）、実測値：８５８．５（Ｍ^＋＋１）、８８０．５（Ｍ^＋＋Ｎａ）。化合物５００７についてのＬＣＭＳ：計算値：５５９．４（Ｍ^＋）、実測値：５６０．４（Ｍ^＋＋１）。

【化126】

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【0416】

化合物５０１１の合成：５ｍＬのクロロトリメチルシラン中、アルコール５００８（２．６６ｇ、１０ミリモル）の撹拌溶液に、パラホルムアルデヒド（０．３ｇ、１０ミリモル）を加え、室温で一晩撹拌した。過剰なクロロトリメチルシランを蒸発させて、続いて減圧下で乾燥し、対応する生成物５００９を得て、これを更に精製することなく、次の工程に使用した。化合物５００９を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、ジオール（２６１ｍｇ、１ミリモル）、ＤＩＥＡ（２．５ｇ、１９．４ミリモル）及びＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１６ミリモル）の溶液に滴加し、一晩撹拌した。溶媒を濃縮することにより、粗生成物５０１０を得て、これを５ｍＬのＴＨＦに溶解し、２ｍＬの１Ｎ−ＮａＯＨを加え、室温で２日間にわたって撹拌した。通常の処理後に、粗物質をカラムクロマトグラフィーにより精製して、対応する生成物５０１１（２００ｍｇ、２８％）を得た。化合物５０１０についてのＬＣＭＳ：計算値：１１３１．９５（Ｍ^＋）、実測値：１０９６．９８（Ｍ^＋−Ｃｌ⁻）。化合物５０１１についてのＬＣＭＳ：計算値：７０４．６３（Ｍ^＋）、実測値：７２７．５（Ｍ^＋＋Ｎａ）。

【0417】

化合物５０１２の合成：１０ｍＬのＤＣＭ中、アルコール５０１１（２００ｍｇ、０．２８４ミリモル）、４−（ジメチルアミノ）酪酸塩酸塩（１０３ｍｇ、０．５７ミリモル）、ＥＤＣ（１０９ｍｇ、０．５７ミリモル）の溶液に、ＤＩＥＡ（２９４ｍｇ、４ミリモル）を加え、一晩撹拌した。通常の処理後に、粗物質をカラムクロマトグラフィーにより精製して、５０１２（１９０ｍｇ、８５％）を得た。化合物５０１２についてのＬＣＭＳ：計算値：８１７．７２（Ｍ^＋）、実測値：８１８．５（Ｍ^＋＋Ｎａ）。

【化127】

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【0418】

化合物５０１６の合成：５ｍＬのクロロトリメチルシラン中、アルコール５０１３（１．０ｇ、７．０３ミリモル）の溶液に、アセトアルデヒド（０．３ｇ、７．０３ミリモル）を加え、室温で２時間撹拌した。過剰なクロロトリメチルシランを蒸発させて、続いて減圧下で乾燥し、対応する生成物５０１４を得て、これを更に精製することなく、次の工程に使用した。化合物５０１４を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中、ジオール５０１５（２２３ｍｇ、０．５５ミリモル）、ＤＩＥＡ（２ｍＬｇ、１１．５ミリモル）及びＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１６ミリモル）の溶液に滴加し、一晩撹拌した。１０ｍＬの水を添加し、続いてＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出し、水、飽和ＮａＨＣＯ_３、塩水で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。溶媒を濃縮することで粗生成物を得て、これを更に精製することなく、次の工程に使用した。化合物５０１６についてのＬＣＭＳ：計算値：７３８．６６（Ｍ^＋）、実測値：７６１．５（Ｍ^＋＋Ｎａ）。

【0419】

化合物５０１７の合成：５ｍＬのＴＨＦ中アルコール５０１６の溶液に、ＴＨＦ（０．５４ミリモル）中、０．５４ｍＬの１Ｍ−ＴＢＡＦを加え、室温で２日間にわたって撹拌した。通常の処理後に、粗物質をカラムクロマトグラフィーにより精製して、５０１７を得た。しかしながら、これは、いくらかの分離できない不純物を含有し、したがって更に精製することなく次の工程に使用した。化合物５０１７についてのＬＣＭＳ：計算値：６２４．５７（Ｍ^＋）、実測値：６４７．５（Ｍ^＋＋Ｎａ）。

【0420】

化合物５０１８の合成：１０ｍＬのＤＣＭ中、アルコール５０１７（０．５５ミリモル）、４−（ジメチルアミノ）酪酸塩酸塩（１１６ｍｇ、０．６４ミリモル）、ＥＤＣ（１２３ｍｇ、０．６４ミリモル）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（１６５ｍｇ、１．２８ミリモル）を加え、２日間にわたって撹拌した。通常の処理後に、粗物質をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭを含有する１％のＥｔ_３Ｎ中、０〜１０％のＭｅＯＨ）により精製して、５０１８（３００ｍｇ、５０１５から７５％）を得た。化合物５０１８についてのＬＣＭＳ：計算値：７３７．６５（Ｍ^＋）、実測値：７３８．６（Ｍ^＋＋１）、７６０．５（Ｍ^＋＋Ｎａ^＋）。

【0421】

実施例３５：脂質ナノ粒子の調製
本明細書に記載されているカチオン性脂質は、その全体が参照により本明細書に組み込まれている、国際公開第２０１０／０８８５３７号パンフレットに記載されているインライン混合法を使用して、ＡＤ−１６６１二重鎖（以下の表に示した）を含有するリポソームを製剤化するために使用される。この脂質ナノ粒子は、以下の表に示す配合組成を有した。

【0422】

【表67】

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【0423】

ｓｉＲＮＡ ＡＤ−１６６１二重鎖は、以下に示した配列を有する。

【0424】

【表68】

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【0425】

小文字は２’ＯＭｅ修飾であり、Ｎｆは、２’Ｆ修飾ヌクレオ塩基であり、ｄＴはデオキシチミジンであり、ｓはホスホチオエートである。

【0426】

脂質ナノ粒子を、以下の通りに調製した。表中に記載された比のカチオン性脂質、ＤＳＰＣ、コレステロール、及びＰＥＧ−ＤＭＧを、２５ｍｇ／ｍＬの総脂質濃度で、エタノール中に溶解した。

【0427】

ｓｉＲＮＡ保存溶液を、ｓｉＲＮＡ ＡＤ−１６６１を低ｐＨの酢酸塩又はクエン酸塩緩衝液（ｐＨ＝４）中、０．８ｍｇ／ｍＬで溶解することにより調製した。

【0428】

この保存溶液は、完全に透明であるべきで、脂質はｓｉＲＮＡと混合する前に完全に溶解されねばならない。したがって、これが適切に判定された場合、溶液は加熱され、脂質を完全に溶解した。

【0429】

各溶液をＴ字型接合部に汲み入れることによって（すなわち、インライン混合によって）、個々の保存溶液を混合した。具体的には、エタノール溶液（０．０１インチのＰＥＥＫチューブを介して、５ｍｌ／分で）及び水性緩衝溶液（０．０２インチのＰＥＥＫチューブを介して、１５ｍＬ／分で）を、Ｔ字型接合部（ＰＥＥＫ Ｔｅｅ ｂｏｄｙ、ＩＤＥＸ）を通して混合した。

【0430】

Ｔ字型接合部の後ろには、単一チューブが配置されていて、ここで混合されたストリームが放出するであろう。エタノールを移動させ、透析によってＰＢＳに交換される。次いで、脂質製剤は、遠心分離又は透析濾過を使用して、適切な作業濃度に濃縮される。

【0431】

実施例３６の表中に列挙されたカチオン性脂質を含有している脂質ナノ粒子を、上記記載の通りに調製した。

【0432】

実施例３６：脂質ナノ粒子の有効性
血液凝固カスケードにおける顕著なタンパク質であるＶＩＩ因子（ＦＶＩＩ）は、肝臓（肝細胞）において合成され、血漿中に分泌される。血漿中のＦＶＩＩレベルは、簡単なプレートベースの比色検定法によって判定することが可能である。したがって、ＦＶＩＩは、肝細胞由来のタンパク質のｓｉＲＮＡ媒介ダウンレギュレーションを判定するための格好のモデルを代表する。

【0433】

実施例３５で調製された脂質ナノ粒子の製剤を、雌の７〜９週齢、１５〜２５ｇの雌Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおいて、処置群当たり３匹のマウスを使用して、０．１、０．３、１．０及び５．０ｍｇ／ｋｇにおいて、それらのＦＶＩＩノックダウンについて最初に評価した。全ての試験は、リン酸塩緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ、対照群）又はベンチマーク製剤のいずれかを受容する動物を含んだ。試験の直前に、製剤をＰＢＳ中で適切な濃度まで希釈した。マウスを秤量し、適切な投与体積を計算した（１０μｌ／ｇ体重）。試験製剤及びベンチマーク製剤並びにＰＢＳ（対照動物用）を、外側尾静脈を介して静脈内投与した。２４時間後に、動物をケタミン／キシラジンの腹腔内注射で麻酔処理し、心穿刺により５００〜７００μｌの血液を血清セパレータチューブ（ＢＤ Ｍｉｃｒｏｔａｉｎｅｒ）に回収した。血液を１５℃にて２，０００×ｇで１０分間遠心分離し、血清を回収し、分析まで−７０℃で保存した。血清試料を３７℃で３０分間解凍し、ＰＢＳ中で希釈し、９６−ウェルアッセイプレートに分けた。ＶＩＩ因子レベルを、発色アッセイ（Ｂｉｏｐｈｅｎ ＦＶＩＩキット、Ｈｙｐｈｅｎ ＢｉｏＭｅｄ）を使用し、製造業者の使用説明書に従って評価し、吸光度を４０５ｎｍの波長フィルターを具備したマイクロプレートリーダーにおいて測定した。血漿ＦＶＩＩレベルを定量化し、ＥＤ_５０値（対照動物と比較して血漿ＦＶＩＩレベルにおいて５０％の減少をもたらす投与量）を、対照動物から得た血清のプール試料から作製した標準曲線を使用して計算した。高レベルのＦＶＩＩノックダウン（ＥＤ_５０＜＜０．１ｍｇ／ｋｇ）を示すこれら着目した製剤を、効力を確認し、ＥＤ_５０レベルを確立するために、より低い用量範囲で別個の試験において再試験した。

【0434】

以下の表は、本明細書に記載されているカチオン性脂質のいくつかについてのＥＤ_５０値を示している。２つの星印（^＊＊）は、０．００１〜０．１０のＥＤ_５０値を示している。１つの星印（^＊）は、０．１０を超えるＥＤ_５０値を示している。

【0435】

【表69】

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【0436】

【表70】

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【0437】

【表71】

[この文献は図面を表示できません]

【0438】

【表72】

[この文献は図面を表示できません]

【0439】

実施例３７：疎水性及び安定性
以下の表に列挙されている生分解性カチオン性脂質についてのｌｏｇＰ値を、Ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ Ｃｈｅｍｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ｏｆ Ｓｌｏｖｅｎｓｋｙ Ｇｒｏｂ，Ｓｌｏｖａｋ Ｒｅｐｕｂｌｉｃからｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｍｏｌｉｎｓｐｉｒａｔｉｏｎ．ｃｏｍ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ｌｏｇｐ．ｈｔｍｌで入手可能なソフトウェアを使用して計算した。

【0440】

更に、各生分解性カチオン性脂質についてのＨＰＬＣ保持時間を、これらから調製した脂質ナノ粒子中で測定した。脂質ナノ粒子を、ＡＤ−１６６１をペイロードとして使用して、実施例３５に記載された通りに調製した。保持時間は、コレステロールについての保持時間に対して以下の表で報告されている。

【0441】

使用されたＨＰＬＣ緩衝液は、２つの溶液（溶液＃１及び溶液＃２）の混合物であった。
溶液＃１：８０％メタノール／２０％ １０ｍＭ ＮＨ_４ＨＣＯ_３
溶液＃２：８０％メタノール／２０％イソプロパノール

【0442】

混合物中の２つの溶液の比は、以下の表に示した通りに経時的に変化させた。

【0443】

【表73】

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【0444】

脂質ナノ粒子のサイズを、透析の前後で一晩測定した。一般的に、脂質ナノ粒子のサイズにおける大きな変化は、安定性に劣ることを示す。

【0445】

Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡのＭａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｉｎｃ．）を使用して、脂質ナノ粒子サイズを決定するために、動的光散乱を用いた。全ての測定は、解析モデルとして通常の解析度モードを使用して、１７３°の散乱角で５３２ｎｍの波長にて行った。

【0446】

これら実験の結果を以下の表に示す。

【0447】

【表74】

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【0448】

【表75】

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【0449】

実施形態に対するこれら及び他の改変を、上記の詳細な説明に照らして行うことが可能である。一般的に、以下の特許請求の範囲において、使用される用語は、明細書及び特許請求の範囲で開示された特定の実施形態に限定するよう解釈されるべきではないが、このような特許請求の範囲に与えられる均等物の完全な範囲と共にあらゆる考え得る実施形態を含むと解釈されるべきである。したがって、特許請求の範囲は、本開示により限定されるものではない。