特許 6607186 血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法及びプログラム

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6607186

(24)【登録日】2019年11月1日

(45)【発行日】2019年11月20日

(54)【発明の名称】血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法及びプログラム

(51)【国際特許分類】

   G01N 27/00 20060101AFI20191111BHJP

   G01N 33/49 20060101ALI20191111BHJP

   G01N 33/86 20060101ALI20191111BHJP

   G01N 33/48 20060101ALI20191111BHJP

【ＦＩ】

   G01N27/00 Z

   G01N33/49 Z

   G01N33/86

   G01N33/48 K

【請求項の数】16

【全頁数】28

(21)【出願番号】特願2016-513674(P2016-513674)

(86)(22)【出願日】2015年3月16日

(86)【国際出願番号】JP2015057647

(87)【国際公開番号】WO2015159623

(87)【国際公開日】20151022

【審査請求日】2018年2月5日

(31)【優先権主張番号】特願2014-85859(P2014-85859)

(32)【優先日】2014年4月17日

(33)【優先権主張国】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】000002185

【氏名又は名称】ソニー株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100112874

【弁理士】

【氏名又は名称】渡邊 薫

(72)【発明者】

【氏名】ブルン マルクオレル

(72)【発明者】

【氏名】川口 香織

(72)【発明者】

【氏名】町田 賢三

(72)【発明者】

【氏名】林 義人

(72)【発明者】

【氏名】梅津 友行

【審査官】 吉田 将志

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１０／０７９８４５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２００７−０６４９１６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１２−１９４０８７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１３−２２１７８２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特公平０７−０４３３８８（ＪＰ，Ｂ２）

【文献】 特許第４９２１３５９（ＪＰ，Ｂ２）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｇ０１Ｎ ２７／００−２４

Ｇ０１Ｎ ３３／４８−９８

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

同一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析部を少なくとも備え、
前記解析部は、血液試料の電気的特性の経時変化データから、凝固振幅または凝固率を推定し、推定された値に基づいて評価を行う、血液状態解析装置。

【請求項2】

前記薬剤は、前記血液の凝固系若しくは線溶系に対する活性剤又は抑制剤である請求項１に記載の血液状態解析装置。

【請求項3】

前記解析部は、更に、各血液試料の電気的特性の経時変化データから、凝固時間、クロット形成時間、クロットの最大堅固、最大溶解、凝固時間から一定時間経過後のクロット堅固、最大堅固から一定時間経過後のクロット堅固及び最大堅固後のクロット線速度からなる群から選択される少なくとも１種の値を算出し、算出された値に基づいて評価を行う請求項１に記載の血液状態解析装置。

【請求項4】

前記解析部は、前記算出された値を、前記血液試料のヘマトクリット値により補正する請求項３に記載の血液状態解析装置。

【請求項5】

前記解析部は、前記血液の凝固系について、血小板因子による影響若しくはフィブリノゲンによる影響又はその両方を評価する請求項１に記載の血液状態解析装置。

【請求項6】

前記薬剤は、血小板機能抑制剤、フィブリノゲン機能抑制剤又はフィブリン重合抑制剤である請求項５に記載の血液状態解析装置。

【請求項7】

前記解析部は、前記薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で前記薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データの差、又は、前記経時変化データから算出した値の差に基づいて、前記薬剤の影響を評価する請求項１に記載の血液状態解析装置。

【請求項8】

前記解析部は、前記血液試料に含まれる対象因子による影響をなくすための最低限の薬剤投与量を推定する請求項６に記載の血液状態解析装置。

【請求項9】

前記解析部は、前記血液の線溶系について、プラスミン又はプラスミノゲンによる影響を評価する請求項１に記載の血液状態解析装置。

【請求項10】

前記薬剤は、プラスミノゲン若しくはプラスミンの活性剤又は阻害剤である請求項９に記載の血液状態解析装置。

【請求項11】

前記解析部は、前記薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で前記薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データを比較することにより、プラスミン又はプラスミノゲンによる影響を評価する請求項１０に記載の血液状態解析装置。

【請求項12】

前記薬剤はヘパリンであり、前記解析部は前記ヘパリンによる血液凝固抑制効果を評価する請求項１に記載の血液状態解析装置。

【請求項13】

同一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する測定部を備える電気的特性測定装置と、
前記電気的特性測定装置で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析部を備え、
前記解析部は、血液試料の電気的特性の経時変化データから、凝固振幅または凝固率を推定し、推定された値に基づいて評価を行う、血液状態解析装置と、
を有する血液状態解析システム。

【請求項14】

更に、前記電気的特性測定装置での測定データ及び／又は前記血液状態解析装置での解析結果を記憶する情報記憶部を備えるサーバを有し、
前記サーバは、ネットワークを介して、前記電気的特性測定装置及び／又は前記血液状態解析装置と接続されている請求項１３に記載の血液状態解析システム。

【請求項15】

同一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する測定工程と、
前記測定工程で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析工程と、
を有し、
前記解析工程では、血液試料の電気的特性の経時変化データから、凝固振幅または凝固率を推定し、推定された値に基づいて評価を行う、血液状態解析方法。

【請求項16】

同一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データから、凝固振幅または凝固率を推定し、推定された値に基づいて、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析機能を、コンピュータに実現させるためのプログラム。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本技術は、血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法及びプログラムに関する。より詳しくは、電気的特性の経時変化から血液の凝固特性を評価する技術に関する。

【背景技術】

【0002】

従来、凝固系や線溶系の評価には、プロトロンビン時間（ＰＴ）や活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）が用いられている。これらの手法は、遠心分離して得られた血漿に凝固剤を添加し、血漿が凝固し始めるまでの時間を測定するものである。一方、全血を用いた評価方法としては、血液の凝固過程における粘弾性変化を力学的に測定するトロンボエラストメトリーがある（例えば、特許文献１，２参照）。

【0003】

また、本発明者は、血液の誘電率から血液凝固に関する情報を取得する手法を提案している（例えば、特許文献３参照）。特許文献３に記載の血液凝固系解析装置では、クエン酸添加等により付与された血液の抗凝固剤作用が解かれた以後から所定期間における着目すべき周波数の誘電率の増加を示すパラメータから、一定の粘弾特性が表れる時期を推定し、血栓のリスクを評価している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】特表２０１０−５１３９０５号公報

【特許文献2】特表２０１０−５１８３７１号公報

【特許文献3】国際公開第２０１０／０７９８４５号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

トロンボエラストメトリーは、血漿や血小板等の血液の構成成分全てが相互に作用し合って凝固していく過程を観察し、包括的に血液凝固能を評価する手法である。このような手法は、急性期の包括的凝固検査として、ＴＥＧ（登録商標）やＲＯＴＥＭ（登録商標）として欧米企業により製品化されている。しかしながら、これらの製品は、（１）測定が自動化されておらず検査結果が測定者の手技に依存する、（２）振動の影響を受けやすい、（３）品質管理手順が煩雑でそのための試薬が高価である、（４）出力信号（トロンボエラストグラム）の解釈に熟練を要する等の問題がある。そして、これらの理由が、十分な普及を阻む第一の原因であると考えられる。

【0006】

これに対して、特許文献３に記載の血液凝固系解析装置は、測定と解析の自動化や、高い測定精度等により前述したトロンボエラストメトリーの弱点を克服できるだけでなく、測定開始直後の血液の状態変化も観察することができる。そして、この血液凝固系解析装置では、トロンボエラストメトリーでは評価できなかった凝固初期の反応や血液の状態を表す他の因子を評価することが可能である。このため、現在、誘電率等の電気的特性を利用して血液の凝固系や線溶系を評価することが可能な臨床検査用装置の開発が求められている。

【0007】

そこで、本開示は、電気的特性から血液の凝固系や線溶系の評価を精度よく行うことができる血液状態解析装置、血液状態解析システム、血液状態解析方法及びプログラムを提供することを主目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本開示に係る血液状態解析装置は、一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析部を少なくとも備える。
この血液状態解析装置では、前記薬剤として、前記血液の凝固系若しくは線溶系に対する活性剤又は抑制剤を用いることができる。
前記解析部は、各血液試料の電気的特性の経時変化データから、凝固時間、クロット形成時間、クロットの最大堅固、最大溶解、凝固振幅、凝固率、凝固時間から一定時間経過後のクロット堅固、最大堅固から一定時間経過後のクロット堅固及び最大堅固後のクロット線速度からなる群から選択される少なくとも１種の値を算出し、算出された値に基づいて評価を行うことができる。
その場合、前記解析部は、前記算出された値を、前記血液試料のヘマトクリット値により補正してもよい。
また、前記解析部は、前記血液の凝固系について、血小板因子による影響若しくはフィブリノゲンによる影響又はその両方を評価することもできる。
その場合、前記薬剤には、血小板機能抑制剤、フィブリノゲン機能抑制剤又はフィブリン重合抑制剤を用いることができる。
そして、前記解析部は、例えば、前記薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で前記薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データの差、又は、前記経時変化データから算出した値の差に基づいて、前記薬剤の影響を評価することができる。
また、前記解析部は、例えば、前記血液試料に含まれる対象因子による影響をなくすための最低限の薬剤投与量を推定することもできる。
一方、前記解析部は、前記血液の線溶系について、プラスミン又はプラスミノゲンによる影響を評価することもできる。
その場合、前記薬剤は、プラスミノゲン若しくはプラスミンの活性剤又は阻害剤を用いることができる。
そして、前記解析部は、例えば、前記薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で前記薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データを比較することにより、プラスミン又はプラスミノゲンによる影響を評価することができる。
更に、本開示の血液状態解析装置は、前記薬剤にヘパリンを使用し、前記解析部で前記ヘパリンによる血液凝固抑制効果を評価してもよい。

【0009】

本開示に係る血液状態解析システムは、一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する測定部を備える電気的特性測定装置と、前記電気的特性測定装置で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析部を備える血液状態解析装置と、を有する。
本開示の血液状態解析システムは、更に、前記電気的特性測定装置での測定データ及び／又は前記血液状態解析装置での解析結果を記憶する情報記憶部を備えるサーバを有し、前記サーバは、ネットワークを介して、前記電気的特性測定装置及び／又は前記血液状態解析装置と接続されていてもよい。

【0010】

本開示に係る血液状態解析方法は、一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する測定工程と、前記測定工程で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析工程と、を有する。

【0011】

本開示に係るプログラムは、一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析機能をコンピュータに実現させるためのものである。

【発明の効果】

【0012】

本開示によれば、電気的特性の経時変化データから、血液の凝固系又は線溶系の評価を精度よく行うことができる。なお、ここに記載された効果は必ずしも限定されるものではなく、本開示中に記載されたいずれかの効果であってもよい。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】本開示の第１の実施形態の血液状態解析システムの概略構成を示す図である。

【図2】血液凝固に伴う複素誘電率の経時変化を示す図面代用グラフであり、Ａは実数部（ε´）を示し、Ｂは虚数部（ε”）を示す。

【図3】血液の凝固強さについて、粘弾性測定により求めた値と、誘電率から求めた値を比較した図面代用グラフである。

【図4】図１に示す血液状態解析装置の動作例を示すフローチャート図である。

【図5】ＣｙＤ濃度が異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図面代用グラフである。

【図6】図５に示す１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）において、ＣｙＤ濃度が０μｇ／ｍＬの血液試料の値と、その他の血液試料の値との差を示す図面代用グラフである。

【図7】複素誘電率の実数部（ε´）から求めた凝固振幅と、ＣｙＤ濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図8】複素誘電率の実数部（ε´）から求めた凝固率と、ＣｙＤ濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図9】線溶系促進剤（ｔＰＡ）及び線溶系阻害剤（アプロティニン）濃度が異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図面代用グラフである。

【図10】図９に示す１０ＭＨｚにおけるε´の値から算出した評価パラメータの値を示す図面代用グラフである。

【図11】ヘパリン濃度が異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図面代用グラフである。

【図12】図１１に示す１０ＭＨｚにおけるε´の値から求めた凝固時間と、ヘパリン濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図13】ヘパリン濃度が異なる血液試料の凝固曲線を示す図面代用グラフである。

【図14】ヘパリン濃度と凝固時間差との関係を示す図面代用グラフである。

【図15】Ａはフィブリノゲン阻害剤（Ｐｅｆａｂｌｏｃ）濃度と凝固振幅との関係を示す図であり、Ｂは凝固時間との関係を示す図面代用グラフである。

【図16】図１に示す血液状態解析装置の他の動作例を示すフローチャート図である。

【図17】ＰＬＴ及びＨＣＴが異なる血液試料の１ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図面代用グラフである。

【図18】ＰＬＴ及びＨＣＴが異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図面代用グラフである。

【図19】図１８に示す血液試料にＣｙＤを過剰に添加したときの凝固曲線である。

【図20】図１８に示す値と図１９に示す値の差を示す図面代用グラフである。

【図21】複素誘電率の実数部（ε´）から推定した凝固率と、血小板濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図22】複素誘電率の実数部（ε´）から推定した凝固振幅と、血小板濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図23】複素誘電率の実数部（ε´）から推定しＨＣＴで補正した凝固振幅と、血小板の実効濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図24】Ｐｅｆａｂｌｏｃ濃度が異なる複数の検体について、ＣｙＤ濃度と凝固振幅との関係を調べた結果を示す図面代用グラフである。

【図25】ＣｙＤ濃度が異なる複数の検体について、Ｐｅｆａｂｌｏｃ濃度と凝固振幅との関係を調べた結果を示す図面代用グラフである。

【図26】血液凝固に伴う複素誘電率の実数部の経時変化の例を示す図面代用グラフである。

【図27】Ｐｅｆａｂｌｏｃを添加していない血液試料の測定結果を示す図面代用グラフである。

【図28】ＣｙＤにより血小板の機能が完全に抑制されている血液試料の振幅ＣＦとフィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢとの関係を示す図面代用グラフである。

【図29】振幅ＣＦ−ａ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢと、血小板の実効濃度ＰＬＴとの関係を示す図面代用グラフである。

【図30】振幅ＣＦ−ａ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢと、血小板の実効濃度ＰＬＴとの関係を示す図面代用グラフである。

【図31】ＣｙＤ濃度を横軸、各ＣｙＤ濃度における振幅（ＣＦ−ＣｙＤＸ）からＣｙＤにより血小板の機能が完全に抑制されている血液試料の振幅（ＣＦ−ＣｙＤＹ）を引いた値を縦軸として作成した図面代用グラフである。

【図32】Ｐｅｆａｂｌｏｃそれぞれの濃度の傾きと、フィブリノゲン測定装置（商品名「ＤＲＩＨｅｍａｔｏ」（登録商標）、Ａ＆Ｔ社製）で測定したフィブリノゲンの実効濃度との関係を示す図面代用グラフである。

【図33】フィブリノゲン測定装置（商品名「ＤＲＩＨｅｍａｔｏ」（登録商標）、Ａ＆Ｔ社製）で測定したフィブリノゲンの実効濃度を用いた場合の、モデルの確認（１）で用いた結果とは異なる測定結果から前記数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとの相関を示す図面代用グラフである。

【図34】図２８から算出したフィブリノゲンの実効濃度を用いた場合の、モデルの確認（１）で用いた結果とは異なる測定結果から前記数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとの相関を示す図面代用グラフである。

【図35】複素誘電率の初期値とヘマトクリット値の関係を示す図面代用グラフである。

【図36】多項目自動血球計数装置で測定したヘマトクリット値を使用して補正した場合の図３３に対応する比較データを示す図面代用グラフである。

【図37】多項目自動血球計数装置で測定したヘマトクリット値を使用して補正した場合の図３４に対応する比較データを示す図面代用グラフである。

【図38】複素誘電率の初期値から算出したヘマトクリット値を使用して補正した場合の図３３に対応する比較データを示す図面代用グラフである。

【図39】複素誘電率の初期値から算出したヘマトクリット値を使用して補正した場合の図３４に対応する比較データを示す図面代用グラフである。

【発明を実施するための形態】

【0014】

以下、本開示を実施するための形態について、添付の図面を参照して詳細に説明する。なお、本開示は、以下に示す各実施形態に限定されるものではない。また、説明は、以下の順序で行う。
１．第１の実施の形態
（電気的特性から血液の凝固系・線溶系を評価する血液状態解析システムの例）
２．第１の実施の形態の変形例
（ＨＣＴにより補正を行う血液状態解析システムの例）

【0015】

（１．第１の実施の形態）
先ず、本開示の第１の実施形態に係る血液状態解析システムについて説明する。図１は本実施形態の血液状態解析システムの概略構成を示す図である。図１に示すように、本実施形態の血液状態解析システム１は、電気的特性測定装置１０と血液状態解析装置１１が設けられている。また、本実施形態の血液状態評価システムには、必要に応じて、サーバ１２や表示装置１３等が接続されていてもよい。

【0016】

［電気的特性測定装置１０］
電気的特性測定装置１０は、評価対象の血液試料が充填されるサンプル容器に設けられた電極対間に電圧を印加して、特定の周波数又は周波数帯域で、血液試料の電気的特性を経時的に測定する測定部を備えている。電気的特性測定装置１０で測定される電気的特性は、例えばインピーダンス、コンダクタンス、アドミッタンス、キャパシタンス、誘電率、導電率、位相角及びこれらを電気量変換することにより得られる量が挙げられる。なお、本実施形態の血液状態解析システム１は、これらの電気的特性のうち１種で評価可能であるが、２種以上の電気的特性を利用することもできる。

【0017】

電気的特性測定装置１０の構成は、特に限定されるものではなく、測定する電気的特性に応じて、適宜設定することができる。例えば、電極対間に交流電圧を印加し、血液のインピーダンスや複素誘電率を測定する場合は、インピーダンスアナライザーやネットワークアナライザーを使用することもできる。なお、電気的特性測定装置１０は、後述する血液状態解析装置１１において利用する周波数又は周波数帯域についてのみ測定を行ってもよいが、周波数を変えて広帯域で電気的特性を測定し、得られたスペクトルから評価に利用する周波数又は周波数帯域を抽出することもできる。

【0018】

［血液状態解析装置１１］
血液状態解析装置１１は、直接又はネットワーク１４を介して電気的特性測定装置１０に接続されており、薬剤又は血液中の因子が血液の凝固特性又は線溶特性に及ぼす影響を評価する解析部を備えている。この血液状態解析装置１１には、電気的特性測定装置１０で測定された電気的特性の経時変化データが入力され、解析部は電気的特性の経時変化データを利用して評価を行う。

【0019】

［サーバ１２］
サーバ１２は、例えば、ネットワーク１４を介して電気的特性測定装置１０、血液状態解析装置１１及び表示装置１３等と接続されており、情報記憶部等が設けられている。そして、サーバ１２は、電気的特性測定装置１０や血液状態解析装置１１からアップロードされた各種データを管理し、要求に応じて表示装置１３や血液状態解析装置１１に出力する。

【0020】

［表示装置１３］
表示装置１３は、電気的特性測定装置１０で測定された血液試料の電気的特性データや血液状態解析装置１１での評価結果等を表示する。なお、表示装置１３には、ユーザが表示するデータを選択し入力するための情報入力部が設けられていてもよい。この場合、ユーザにより入力された情報は、ネットワーク１４を介してサーバ１２や血液状態解析装置１１に送信される。

【0021】

［動作］
次に、本実施形態の血液状態解析システムの動作、即ち、血液状態解析システムを用いて、血液試料の凝固系や線溶系を評価する方法について説明する。図２は血液凝固に伴う複素誘電率の経時変化を示す図であり、Ａは実数部（ε´）を示し、Ｂは虚数部（ε”）を示す。また、図３は血液の凝固強さ（clot strength）について、粘弾性測定により求めた値と、誘電率から推定した値を比較した図である。

【0022】

例えば、図２Ａ及び図２Ｂに示すように、血液の複素誘電率の経時変化データからは、凝固開始時間ａや凝固終了時間ｂを推定することができる。また、複素誘電率の実数部と虚数部の振幅差は凝固振幅に相当し、凝固開始時間ａと凝固終了時間ｂとを結ぶ線の傾きは、凝固率に相当する。そして、図３に示すように、複素誘電率から推定した血液の凝固強さ（clot strength）の値は、トロンボエラストメトリー等の粘弾性測定により求めた凝固強さの値とは、相関関係がある。

【0023】

そこで、本実施形態の血液状態解析システムでは、同一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、薬剤又は血液中の因子が血液の凝固系や線溶系に及ぼす影響を評価する。その際、評価には、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データを利用する。図４は図１に示す血液状態解析システム１の動作例を示すフローチャート図である。

【0024】

具体的には、図４に示すように、先ず、電気的特性測定装置１０により、薬剤濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する（測定工程Ｓ１）。その後、電気的特性測定装置１０で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、血液状態解析装置１１において、薬剤又は血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する（解析工程Ｓ２）。

【0025】

（測定工程Ｓ１）
測定工程Ｓ１では、同一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する。その際、電気的特性の測定条件は、特に限定されるものではなく、評価対象の血液を変質させない範囲で、電気的特性の種類等に応じて適宜設定することができる。

【0026】

また、測定は、後述する解析工程において利用する周波数又は周波数帯域についてのみ行ってもよいが、利用する周波数及び周波数帯域の全てを含むような広帯域で電気的特性を測定することもできる。その場合、血液状態解析装置１１において、得られたスペクトルから、評価に利用する周波数又は周波数帯域を抽出すればよい。具体的には、測定を行う周波数帯域としては、蛋白質の影響が比較的少ない１００Ｈｚ〜１００ＭＨｚの範囲が好ましく、１ｋＨｚ〜１０ＭＨｚの範囲がより好ましい。

【0027】

一方、血液試料に添加される薬剤としては、血液の凝固系若しくは線溶系に対する活性剤又は抑制剤を用いることができる。具体的には、サイトカラシンＤ（以下、ＣｙＤと略す。）等の血小板機能抑制剤、H-Gly-Pro-Arg-Pro-OH×AcOH（PefablocFG）等のフィブリノゲン機能抑制剤、フィブリン重合抑制剤、プラスミノゲン活性剤、アプロチニンやトラネキサム酸等のプラスミン抑制剤、ヘパリン等の凝固抑制剤等が挙げられる。

【0028】

（解析工程Ｓ２）
解析工程Ｓ２では、電気的特性測定装置１０で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、血液状態解析装置１１において、薬剤又は血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する。例えば、各血液試料の電気的特性の経時変化データから、従来、血液の凝固系や線溶系の評価で用いられているパラメータを算出する。ここで、血液の凝固系や線溶系の評価用パラメータとしては、例えば、凝固時間（ClotingTime）、クロット形成時間（ClotFormationTime）、クロットの最大堅固（MaximumColtfirmness）、最大溶解（MaximumLysis）、凝固振幅（Coagulationamplitude）、凝固率（Coagulationrate）、凝固時間から一定時間経過後のクロット堅固、最大堅固から一定時間経過後のクロット堅固、最大堅固後のクロット線速度等が挙げられる。

【0029】

また、例えば、凝固系の評価を行う場合、評価対象の凝固因子としては、血小板因子やフィブリノゲン等が挙げられる。その場合、血液試料に添加する薬剤としては、血小板機能抑制剤、フィブリノゲン機能抑制剤又はフィブリン重合抑制剤等を使用することができる。そして、これらの影響についての評価は、例えば、薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データから求めた凝固振幅又は凝固率の差に基づいて行うことができる。

【0030】

図５はＣｙＤ濃度が異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図である。また、図６は図５に示す１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）において、ＣｙＤ濃度が０μｇ／ｍｌの血液試料の値と、その他の血液試料の値との差を示す図である。図５に示すように、１０ＭＨｚにおけるε´の値及びその経時変化特性は、ＣｙＤ濃度に応じて変化することがわかる。また、図６に示すように、ＣｙＤ濃度が高くなる程、その影響が大きくなることが分かる。

【0031】

図７は複素誘電率の実数部（ε´）から求めた凝固振幅と、ＣｙＤ濃度との関係を示す図である。図８は複素誘電率の実数部（ε´）から求めた凝固速度（＝（振幅Ｂ−振幅Ａ）／（時間Ｂ−時間Ａ））と、ＣｙＤ濃度との関係を示す図である。図７及び図８に示すように、複素誘電率の実数部（ε´）から求めた凝固振幅や凝固速度の値と、血液試料のＣｙＤ濃度とは、相関関係があることがわかる。

【0032】

そして、この評価結果から、血液に含まれる対象因子の影響を完全になくすための最低限の薬剤投与量を推定することが可能となる。例えば、ＣｙＤの場合はある濃度以上になると凝固率は変化しなくなるため、図８に破線で示すＣｙＤを過剰に含有する血液試料の凝固率と一致する３．３μｇ／ｍｌが、血小板因子の作用を完全に抑制するための最低限の薬剤投与量と推定される。また、図８に示す血液試料の場合、血小板数は１μｌあたり１３６５００個であるため、血小板因子を阻害するためのＣｙＤ量は血小板１個あたり２５ｎｇとなる。

【0033】

また、例えば、線溶系の評価を行う場合は、評価対象の凝固因子としては、プラスミノゲンやプラスミン等が挙げられる。その場合、血液試料に添加する薬剤としては、プラスミノゲン若しくはプラスミンの活性剤又は阻害剤を使用することができる。図９は線溶系促進剤（ｔＰＡ）及び線溶系阻害剤（アプロティニン）濃度が異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図である。

【0034】

図９は、血液に線溶系促進剤であるｔＰＡを添加して人工的に作製した線溶系の血液試料を用いて測定した値であり、ｔＰＡ＝８、アプロティニン＝０の血液試料は線溶系促進の患者の血液と同様の特徴を示す。図９に示すように、１０ＭＨｚにおけるε´の値及びその経時変化特性は、アプロティニン濃度に応じて変化することがわかる。なお、図９には、薬剤を添加していない対照血液試料（ｔＰＡ＝０、アプロティニン＝０）の測定結果も併せて示す。

【0035】

線溶系の血液についての評価は、例えば、図２に示すＢの時間から３０分後の振幅を、Ｂの時間の振幅で除した値（ＬＩ３０：線溶に伴う最大堅固から一定時間経過後のクロット堅固源）を、評価パラメータとして用いることができる。図１０は図９に示す１０ＭＨｚにおけるε´の値から算出した評価パラメータの値を示す図である。図１０に示すように、血液に線溶系阻害剤であるアプロティニンを添加することにより、評価パラメータであるＬＩ３０の値は、薬剤を添加していない対照血液試料の値にまで戻ることがわかる。

【0036】

なお、線溶系の評価は、前述した方法に限定されるものではなく、例えば１００ｋＨｚなどのように１０ＭＨｚ以外の周波数でも可能であり、また、評価も線溶系関連のパラメータを用いることができ、ＬＩ３０以外の値を使用してもよい。

【0037】

本実施形態の血液状態解析方法は、前述した評価項目及び評価方法に限定されるものではなく、例えば薬剤にヘパリンを使用し、ヘパリンによる血液凝固抑制効果を評価することもできる。図１１はヘパリン濃度が異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図であり、図１２は図１１に示す１０ＭＨｚにおけるε´の値から求めた凝固時間と、ヘパリン濃度との関係を示す図である。また、図１３はヘパリン濃度が異なる血液試料の凝固曲線を示す図であり、図１４はヘパリン濃度と凝固時間差との関係を示す図である。

【0038】

図１１に示すように、１０ＭＨｚにおけるε´の値及びその経時変化特性は、ヘパリン濃度に応じて変化することがわかる。また、図１２に示すように、ヘパリン濃度の増加に伴い凝固時間が長くなり、ヘパリン濃度が高い程その影響は大きいことがわかる。そこで、ヘパリンの影響については、例えば図１３に示す凝固時間により評価することができる。具体的には、図１４に示すように、ヘパリンを添加した血液試料と添加していない血液試料とで凝固時間の差を求めることにより、血液試料中のヘパリン量を推定することができる。

【0039】

更に、薬剤にＰｅｆａｂｌｏｃなどのフィブリノゲン阻害剤を用いることにより、フィブリノゲンの影響についても評価することが可能である。図１５Ａはフィブリノゲン阻害剤（Ｐｅｆａｂｌｏｃ）濃度と凝固振幅との関係を示す図であり、図１５Ｂは凝固時間との関係を示す図である。図１５Ａ及び図１５Ｂに示すように、血液試料のフィブリノゲン阻害剤（Ｐｅｆａｂｌｏｃ）濃度が増加すると、凝固振幅や凝固時間が変化するため、この特性を利用することで、フィブリノゲンの影響の評価やフィブリノゲンの量を推定が可能となる。

【0040】

解析工程Ｓ２は、前述した各機能を実現するためのコンピュータプログラムを作成し、パーソナルコンピュータ等に実装することが可能である。このようなコンピュータプログラムは、例えば、磁気ディスク、光ディスク、光磁気ディスク、フラッシュメモリ等の記録媒体に格納されていてもよく、また、ネットワークを介して配信することもできる。

【0041】

本実施形態の血液状態解析システムでは、評価に、電気的特性の経時変化データを用いているため、従来の評価方法では観測することができなかった特定の因子の影響を評価することが可能である。これにより、従来よりも信頼性の高い評価結果を得ることができる。また、本実施形態の血液状態解析システムは、簡便な方法で、かつ短時間の測定で、血液の凝固系又は線溶系の評価を精度よく行うことができる。

【0042】

なお、本実施形態の血液状態解析システムでは、測定装置と解析装置をそれぞれ個別に設けているが、これらは一体となっていてもよい。また、解析装置は、予め測定しておいたデータに基づいて評価を行うこともできる。

【0043】

（２．第１の実施の形態の変形例）
本開示の血液状態解析システムでは、電気的特性の経時変化データから推定されたパラメータをそのまま評価に用いることもできるが、これらの推定値を、血液のヘマトクリット値（ＨＣＴ）を用いてデータを補正してもよい。図１６は本変形例の血液状態解析装置の他の動作例を示すフローチャート図である。具体的には、図１６に示すように、本変形例の血液状態解析システムでは、解析工程Ｓ２において、データ補正を行う。

【0044】

図１７はＰＬＴ及びＨＣＴが異なる血液試料の１ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図である。図１８はＰＬＴ及びＨＣＴが異なる血液試料の１０ＭＨｚにおける複素誘電率の実数部（ε´）の経時変化を示す図である。図１９は図１８に示す血液試料にＣｙＤを過剰に添加したときの凝固曲線であり、この図から血小板の影響が完全に無くなった状態での凝固過程を観察することができる。図２０は図１８に示す値と図１９に示す値の差を示す図であり、この図から血小板の影響と、フィブリノゲンと血小板の相互作用が凝固に及ぼす影響を観察することができる。

【0045】

図１７及び図１８に示すように、１０ＭＨｚにおけるε´の値及びその経時変化特性は、ＨＣＴに応じて変化する。そして、図１７〜図２０に示す結果から、ＨＣＴが同等の血液試料では、血小板数と凝固振幅又は凝固率には、相関関係があることがわかる。ただし、ＨＣＴが変化すると、血小板数が同等であっても、凝固振幅が大きくなる。また、ＨＣＴが小さく、血小板数が多い場合は、凝固振幅はほとんど変化がない。このことから、ＨＣＴによる補正は、有効であると考えられる。

【0046】

図２１は複素誘電率の実数部（ε´）から推定した凝固率と、血小板濃度との関係を示す図である。図２２は複素誘電率の実数部（ε´）から推定した凝固振幅と、血小板濃度との関係を示す図である。図２１及び図２２に丸（○）で示すデータは、図１７のデータから抽出したＣｙＤ添加なしのデータであり、×で示すデータは、図１８のデータから抽出したＣｙＤ過剰添加のデータである。そして、図２１及び図２２に四角（□）で示すデータは、これらの差分、即ち、血小板の影響と、フィブリノゲンと血小板の相互作用が凝固に及ぼす影響を示す。

【0047】

なお、本技術において、「実効濃度」とは、所定の反応に対して実際に機能している分子や細胞等の濃度をいう。例えば、単に、血小板の濃度とは、一定の血液検体に含まれる血小板の数であるが、血液凝固反応における血小板の実効濃度とは、血液凝固反応において実際に機能する血小板の数である。即ち、血小板の機能を抑制する薬剤等を添加した場合には、血小板の実効濃度は減少する。

【0048】

図２１及び図２２に示すように、丸で示すデータと、四角で示すデータは、血小板数に依存する。なお、図２１及び図２２において破線で囲んだデータは、図１７〜図１９に示す血小板数が少ない血液試料と、血小板数が多い血液試料に相当する。これらの血液試料は、他の血液試料とＨＣＴが異なっており、その結果、凝固率や振幅でも血小板数との相関関係がずれている。このため、これらの血液試料のデータについては補正が必要となる。

【0049】

図２３は図２１に示す値をＨＣＴで補正（ＨＣＴの４乗で正規化）したものである。図２３に示すように、図２１のデータをＨＣＴで補正した結果、血小板数との関係が直線になっている。また、一の検体から、ＣｙＤありとなしの凝固差分をとる場合、その２つの凝固曲線の誘電測定により、ＨＣＴと血小板数を推定することができる。

【0050】

このように、ＨＣＴによる補正を行うことで、解析装置による評価結果の精度を更に向上させることができる。なお、本変形例における上記以外の構成及び効果は、前述した第１の実施形態と同様である。

【0051】

また、本開示は、以下のような構成をとることもできる。
（１）
一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析部を少なくとも備える血液状態解析装置。
（２）
前記薬剤は、前記血液の凝固系若しくは線溶系に対する活性剤又は抑制剤である（１）に記載の血液状態解析装置。
（３）
前記解析部は、各血液試料の電気的特性の経時変化データから、凝固時間、クロット形成時間、クロットの最大堅固、最大溶解、凝固振幅、凝固率、凝固時間から一定時間経過後のクロット堅固、最大堅固から一定時間経過後のクロット堅固及び最大堅固後のクロット線速度からなる群から選択される少なくとも１種の値を算出し、算出された値に基づいて評価を行う（１）又は（２）に記載の血液状態解析装置。
（４）
前記解析部は、前記算出された値を、前記血液試料のヘマトクリット値により補正する（３）に記載の血液状態解析装置。
（５）
前記解析部は、前記血液の凝固系について、血小板因子による影響若しくはフィブリノゲンによる影響又はその両方を評価する（１）〜（４）のいずれかに記載の血液状態解析装置。
（６）
前記薬剤は、血小板機能抑制剤、フィブリノゲン機能抑制剤又はフィブリン重合抑制剤である（５）に記載の血液状態解析装置。
（７）
前記解析部は、前記薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で前記薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データの差、又は、前記経時変化データから算出した値の差に基づいて、前記薬剤の影響を評価する（５）又は（６）に記載の血液状態解析装置。
（８）
前記解析部は、前記血液試料に含まれる対象因子の影響をなくすための最低限の薬剤投与量を推定する（５）〜（７）のいずれかに記載の血液状態解析装置。
（９）
前記解析部は、前記血液の線溶系について、プラスミン又はプラスミノゲンによる影響を評価する（１）〜（４）のいずれかに記載の血液状態解析装置。
（１０）
前記薬剤は、プラスミノゲン若しくはプラスミンの活性剤又は阻害剤である（９）に記載の血液状態解析装置。
（１１）
前記解析部は、前記薬剤を含有しない血液試料及び任意の濃度で前記薬剤を含有する血液試料の電気的特性の経時変化データを比較することにより、プラスミン又はプラスミノゲンによる影響を評価する（９）又は（１０）に記載の血液状態解析装置。
（１２）
前記薬剤はヘパリンであり、前記解析部は前記ヘパリンによる血液凝固抑制効果を評価する（１）〜（４）のいずれかに記載の血液状態解析装置。
（１３）
一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する測定部を備える電気的特性測定装置と、 前記電気的特性測定装置で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析部を備える血液状態解析装置と、を有する血液状態解析システム。
（１４）
更に、前記電気的特性測定装置での測定データ及び／又は前記血液状態解析装置での解析結果を記憶する情報記憶部を備えるサーバを有し、 前記サーバは、ネットワークを介して、前記電気的特性測定装置及び／又は前記血液状態解析装置と接続されている（１３）に記載の血液状態解析システム。
（１５）
一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域で、電気的特性を経時的に測定する測定工程と、前記測定工程で測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析工程と、を有する血液状態解析方法。
（１６）
一の血液検体から調整された薬剤の種類又は濃度が異なる２以上の血液試料について、特定の周波数又は周波数帯域において測定された電気的特性の経時変化データを利用して、前記薬剤又は前記血液中の因子が前記血液の凝固系又は線溶系に及ぼす影響を評価する解析機能を、コンピュータに実現させるためのプログラム。

【0052】

なお、本明細書に記載された効果はあくまでも例示であって限定されるものではなく、また他の効果があってもよい。

【実施例1】

【0053】

以下、本開示の効果について具体的に説明する。本実施例では、健常者から採取した血液サンプルに、ＣｙＤ又はＰｅｆａｂｌｏｃの濃度を変えて添加し、その凝固過程における複素誘電率の変化を測定した。各血液サンプルのＣｙＤ濃度及びＰｅｆａｂｌｏｃ濃度などを下記表１に示す。また、図２４はＰｅｆａｂｌｏｃ濃度が異なる複数の検体について、ＣｙＤ濃度と凝固振幅との関係を調べた結果であり、図２５はＣｙＤ濃度が異なる複数の検体について、Ｐｅｆａｂｌｏｃ濃度と凝固振幅との関係を調べた結果である。

【0054】

【表1】

【0055】

下記数式１に示すようにクロット堅固ＣＦは、血小板の実効濃度ＰＬＴと、フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢに依存している。なお、下記数式１におけるａ、ｂ、ｃは、測定により求められるパラメータである。

【0056】

【数1】

【0057】

ここで、図２４に示すＰｅｆａｂｌｏｃ濃度が０％のサンプルのデータに、図８に示す解析方法を適用すると、血小板の寄与がなくなるＣｙＤ濃度は、３．４μｇ／ｍｌ（１８０μｌの血液に８μｌのＣｙＤを添加）と推定できる。これにより、血小板の実効濃度（１４２０００／μｌ）を求めることができ、同様に、図２５に示すＣｙＤ濃度０％のサンプルのデータを用いると、フィブリノゲン量を求めることができる。

【0058】

血小板の寄与がない場合、凝固振幅は１０５程度であることから、上記数式１から下記数式２が導出される。

【0059】

【数2】

【0060】

また、ＣｙＤ濃度が０で、フィブリノゲン量が過剰の場合は、上記数式１から下記数式３が導出される。

【0061】

【数3】

【0062】

なお、フィブリノゲンもＣｙＤも添加していない場合は、振幅が１２８であるため、上記数式１は下記数式４で表され、下記数式４から下記数式５が導出される。

【0063】

【数4】

【0064】

【数5】

【0065】

そして、血小板の実効濃度ＰＬＴは、ＣｙＤの濃度依存性のデータから推定できる。また、フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢは、ＰＦＧの濃度依存性のデータから推定できる。一方、ＣｙＤの過剰添加のデータがあり、パラメータｂを予め知っていれば、上記数式２からフィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢを推定することができる。また、Ｐｅｆａｂｌｏｃの過剰添加のデータがあり、パラメータａを予め知っていれば、上記数式３から血小板の実効濃度ＰＬＴを推定することができる。

【0066】

更に、ＣｙＤ濃度依存性と過剰添加のデータに加えて、Ｐｅｆａｂｌｏｃの濃度依存性と過剰添加のデータ及びどちらも添加なしのデータを持っていれば、上記数式５からａ、ｂ、ｃを推定することができる。

【0067】

本実施例では、血小板の実効濃度ＰＬＴが３．４μｇ／ｍｌ（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ＣｙＤ）、フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢが１０００μｇ／ｍｌ（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ＰＦＧ）なので、ａが３０．８８ｍｌ／ＭＧ（ｅｑＣｙＤ）、ｂが０．１０５ｍｌ／ＭＧ（ｅｑＰＦＧ）、ｃが−０．０２４ｍｌ／ＭＧ（ｅｑＣｙＤ）となる。

【0068】

また、上記表１に示すＮｏ．６のサンプルでは、上記数式１は、ＣｙＤ添加なしの場合は下記数式６で表され、ＣｙＤ過剰添加の場合は下記数式７で表される。

【0069】

【数6】

【0070】

【数7】

【0071】

上記数式６及び数式７から、フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢは約９６４０μｇ／ｍｌ（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ＰＦＧ）、血小板の実効濃度ＰＬＴは約１．１μｇ／ｍｌ（ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ＣｙＤ）と算出される。

【実施例2】

【0072】

実施例２では、電気的特性を用いた血液凝固測定において、血液試料中の血小板の実効濃度とフィブリノゲンの実効濃度とが、どのように振幅に影響しているかを確認した。

【0073】

［振幅の規定］
図２６は、血液凝固に伴う複素誘電率の実数部の経時変化の例を示す図である。ある時間の測定値をＡ、測定値の最小値をＢとしたとき、ＡをＢで割ったもの（Ｍｉｎ規格）から１を引いたもの（Ｍｉｎ測定値を０としたとき）を、１００倍したもの（値が小さくなるために補正）を、振幅ＣＦと規定した（下記数式８）。

【0074】

【数8】

【0075】

［血小板とフィブリノゲンの実効濃度との振幅への寄与モデルの仮定］
血液試料中にフィブリノゲンが存在しない場合又は血液試料中のフィビリノゲンが機能しない場合には振幅ＣＦは出ないこと、血液試料中に血小板が存在しない場合又は血液試料中の血小板が機能しない場合には振幅ＣＦはフィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢのみに依存することから、下記数式９のモデルを仮定した。なお、ａ及びｂは定数、ＰＬＴは血小板の実効濃度、ＦＩＢはフィブリノゲンの実効濃度である。

【0076】

【数9】

【0077】

［検定時間の規定］
Ｐｅｆａｂｌｏｃを添加した血液試料では、Ｐｅｆａｂｌｏｃがフィブリノゲンに継続的に効いている可能性があることから、Ｐｅｆａｂｌｏｃ無添加の血液試料から検討時間の規定を行った。具体的には、Ｐｅｆａｂｌｏｃを添加していない血液試料の測定結果から、ほとんどのデータで凝固時間が決定される１０分を検討時間として規定した（図２７）。

【0078】

［モデルの確認（１）］
ＣｙＤにより血小板の機能が抑制されている場合、振幅ＣＦは、フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢに依存的に変化するため、ＣｙＤにより血小板の機能が抑制されている血液試料の振幅ＣＦとフィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢとの関係について確認を行った。ＣｙＤにより血小板の機能が完全に抑制されている血液試料の振幅ＣＦとフィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢとの関係を図２８に示す。

【0079】

図２８に示す通り、血小板の機能が完全に抑制されている血液試料の振幅ＣＦとフィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢとは、下記の数式１０が成り立つことが確認できた。また、図２８より、ａが算出できた（ａ＝０．０２５８）。

【0080】

【数10】

【0081】

また、前記数式９は、下記数式１１となることから、振幅ＣＦ−ａ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢと、血小板の実効濃度ＰＬＴとの関係について確認を行った。振幅ＣＦ−ａ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢと、血小板の実効濃度ＰＬＴとの関係の例を図２９（例１）及び図３０（例２）に示す。

【0082】

【数11】

【0083】

なお、ＣｙＤは、血小板の機能を抑制しているが、血小板自体を減らしている訳ではないため、多項目自動血球計数装置（商品名「ｐｏｃＨ」（登録商標）、シスメックス社製）を用いた血小板数は、ＣｙＤを添加した血液試料についても、ＣｙＤ無添加の血液試料と同じ血小板数となる。そのため、実際に機能している血小板数が分からなかったため、下記の方法で、ＣｙＤ濃度から機能する血小板数を算出した。

【0084】

ＣｙＤ濃度を横軸、各ＣｙＤ濃度における振幅（ＣＦ−ＣｙＤＸ）からＣｙＤにより血小板の機能が完全に抑制されている血液試料の振幅（ＣＦ−ＣｙＤＹ）を引いた値を縦軸として、グラフを作成した（図３１）。次に、ＣｙＤ濃度０から直線が引けるＣｙＤ濃度の値を用いて近似直線を引いた。そして、近似直線の式から、（ＣＦ−ＣｙＤＸ）−（ＣＦ−ＣｙＤＹ）が０になるＣｙＤ濃度を求めた。求められたＣｙＤ濃度で機能する血小板がなくなると考え、下記の数式１２から、各ＣｙＤ濃度における機能する血小板数を求めた。なお、ＣｙＤ濃度が０の時の血小板数は、多項目自動血球計数装置で測定した各ＣｙＤ濃度の血小板数の平均から算出した。Ａは機能する血小板がなくなる濃度の血小板数、Ｂは各ＣｙＤ濃度の血小板数の平均である。

【0085】

【数12】

【0086】

図２９及び図３０に示す通り、傾きがＰｅｆａｂｌｏｃの濃度によって異なることが分かった。また、モデルが成り立つとするならば、傾きはｂ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢになるはずであるから、Ｐｅｆａｂｌｏｃそれぞれの濃度の傾きと、フィブリノゲン測定装置（商品名「ＤＲＩＨｅｍａｔｏ」（登録商標）、Ａ＆Ｔ社製）で測定したフィブリノゲンの実効濃度との関係を確認した（図３２）。

【0087】

図３２に示す通り、傾きとフィブリノゲンの実効濃度との相関が認められるため、下記数式１３が成り立つことが分かった。

【0088】

【数13】

【0089】

よって、前記数式１１が成り立つため、モデルが成り立つことが確認できた。また、図３２よりｂを算出することができた（ｂ＝０．００１４）。

【0090】

［モデルの数式９の各成分の振幅に寄与する割合］
前記数式９のａ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢと、ｂ×フィブリノゲンの実効濃度ＦＩＢ×血小板の実効濃度ＰＬＴのそれぞれの成分が、振幅ＣＦに寄与する割合を算出した。算出した結果を下記表２に示す。なお、フィブリノゲンの実効濃度については、前述の図２８から求めたａの値を用いて、振幅ＣＦから算出した。

【0091】

【表2】

【0092】

表２に示す通り、振幅ＣＦに寄与率は、血小板よりもフィブリノゲンの方が大きいことが分かった。

【0093】

［モデルの確認（２）］
＜フィブリノゲン測定装置で測定したフィブリノゲンの実効濃度を用いた場合＞
フィブリノゲン測定装置（商品名「ＤＲＩＨｅｍａｔｏ」（登録商標）、Ａ＆Ｔ社製）で測定したフィブリノゲンの実効濃度と、多項目自動血球計数装置（商品名「ｐｏｃＨ」（登録商標）、シスメックス社製）を用いて測定した血小板数から前記数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとの相関を調べた。結果を図３３に示す。

【0094】

図３３に示す通り、前記数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとは、相関していることが確認できた。

【0095】

＜図２８から算出したフィブリノゲンの実効濃度を用いた場合＞
図２８から算出したフィブリノゲンの実効濃度と、多項目自動血球計数装置（商品名「ｐｏｃＨ」（登録商標）、シスメックス社製）を用いて測定した血小板数から前記数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとの相関を調べた。結果を図３４に示す。

【0096】

図３４に示す通り、図２８から算出したフィブリノゲンの実効濃度を用いた場合も、前記数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとが、きれいに相関しているため、前記モデルが成り立つことが確認できた。

【実施例3】

【0097】

フィブリノゲン測定装置で測定されるフィブリノゲンの実効濃度は、ヘマトクリット値に依存する。そのため、前記実施例２の結果をより正確に得るためには、ヘマトクリット値の影響を考慮すべきである。そこで、前記実施例２のモデルの確認（１）及び（２）において、下記の数式１４を用いて、補正を行った。

【0098】

【数14】

【0099】

ヘマトクリット値は、多項目自動血球計数装置などを用いて測定することもできるし、電気的特性を用いた血液凝固測定の初期値から算出することも可能である。具体的には、例えば、血液試料の複素誘電率を測定した場合に、その初期値からヘマトクリット値を求めることができる。複素誘電率の初期値とヘマトクリット値の関係を図３５に示す。

【0100】

多項目自動血球計数装置で測定したヘマトクリット値を使用すると、前記数式９の係数は、ａ＝０．０２９９、ｂ＝０．００１６となった。
また、複素誘電率の初期値から算出したヘマトクリット値を使用すると、前記数式９の係数は、ａ＝０．０３０４、ｂ＝０．００１７となった。

【0101】

さらに、数式９を用いて算出した振幅ＣＦと、実際の測定振幅ＣＦとを比較した。多項目自動血球計数装置で測定したヘマトクリット値を使用して補正した場合の図３３に対応する比較データを図３６に、図３４に対応する比較データを図３７にそれぞれ示す。
また、複素誘電率の初期値から算出したヘマトクリット値を使用して補正した場合の図３３に対応する比較データを図３８に、図３４に対応する比較データを図３９にそれぞれ示す。

【0102】

図３６〜図３９に示す通り、前記図３３や図３４と同様に、相関を示していた。また、図３６〜図３９は、それぞれ前記３３及び図３４に比べ、良い相関を示していることから、ヘマトクリット値を用いた補正が有効であることが分かった。

【0103】

なお、本開示は、前述したモデルに限定されるものではなく、例えば、血小板とフィブリノゲンの干渉のタームの形を変えたり、ＰＦＧとＣｙＤの効き方を盛り込むなど適宜設定することができる。

【0104】

１ 血液状態解析システム
１０ 電気的特性測定装置
１１ 血液状態解析装置
１２ サーバ
１３ 表示装置
１４ ネットワーク

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】

【図20】

【図21】

【図22】

【図23】

【図24】

【図25】

【図26】

【図27】

【図28】

【図29】

【図30】

【図31】

【図32】

【図33】

【図34】

【図35】

【図36】

【図37】

【図38】

【図39】