特許 6628073 ウイルスワクチン増強剤、ＩｇＡの産生促進剤、及びＴＬＲ−７の発現促進剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6628073

(24)【登録日】2019年12月13日

(45)【発行日】2020年1月8日

(54)【発明の名称】ウイルスワクチン増強剤、ＩｇＡの産生促進剤、及びＴＬＲ−７の発現促進剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/82 20060101AFI20191223BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20191223BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20191223BHJP

   A61P 31/16 20060101ALI20191223BHJP

   A61K 31/353 20060101ALI20191223BHJP

   A61P 11/04 20060101ALI20191223BHJP

【ＦＩ】

   A61K36/82

   A61P43/00 111

   A61P31/12

   A61P31/16

   A61K31/353

   A61P11/04

【請求項の数】10

【全頁数】13

(21)【出願番号】特願2015-119452(P2015-119452)

(22)【出願日】2015年6月12日

(65)【公開番号】特開2017-1996(P2017-1996A)

(43)【公開日】2017年1月5日

【審査請求日】2018年5月10日

(73)【特許権者】

【識別番号】596126465

【氏名又は名称】アサヒ飲料株式会社

(73)【特許権者】

【識別番号】504145342

【氏名又は名称】国立大学法人九州大学

(74)【代理人】

【識別番号】100106002

【弁理士】

【氏名又は名称】正林 真之

(72)【発明者】

【氏名】北角 有希

(72)【発明者】

【氏名】立花 宏文

【審査官】 渡部 正博

(56)【参考文献】

【文献】 特開２０１１−１６８５７９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１２−２３１７８６（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３６／００−３６／９０６８

Ａ６１Ｋ ３１／００−３１／８０

Ａ６１Ｐ １／００−４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有し、前記べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物はメチル化カテキンを含有する、ウイルスワクチン療法の効果増強剤。

【請求項2】

インフルエンザウイルス用である、請求項１に記載のウイルスワクチン療法の効果増強剤。

【請求項3】

べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有し、前記べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物はメチル化カテキンを含有する、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進剤。

【請求項4】

前記ＩｇＡは、気管支におけるＩｇＡである、請求項３に記載のＩｇＡの産生促進剤。

【請求項5】

べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有し、前記べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物はメチル化カテキンを含有する、ＴＬＲ−７の発現促進剤。

【請求項6】

メチル化カテキンを含有する、ウイルスワクチン療法の効果増強剤。

【請求項7】

インフルエンザウイルス用である、請求項６に記載のウイルスワクチン療法の効果増強剤。

【請求項8】

メチル化カテキンを含有する、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進剤。

【請求項9】

前記ＩｇＡは、気管支におけるＩｇＡである、請求項８に記載のＩｇＡの産生促進剤。

【請求項10】

メチル化カテキンを含有する、ＴＬＲ−７の発現促進剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ウイルスワクチン増強剤、ＩｇＡの産生促進剤、及びＴＬＲ−７の発現促進剤に関する。

【背景技術】

【0002】

疫学研究より、茶を摂取することで、インフルエンザ等のウイルス感染症に感染するリスクを低下させるということが報告されている（非特許文献１）。

【0003】

例えば、特許文献１には、エピガロカテキンとエピガロカテキンガレートとを所定比で含む免疫賦活剤が開示されており、該免疫賦活剤によると、ＩｇＡの産生が促進できることが開示されている。

【0004】

特許文献２には、茶に含まれる成分であるＬ−テアニンとエピガロカテキンガレートとをそれぞれ所定量ずつ含む組成物の投与により、全身性免疫が向上し、風邪及びインフルエンザの発症が減少することが記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開２０１１−１６８５７９号公報

【特許文献2】特開２０１０−５０４３５４号公報

【非特許文献】

【0006】

【非特許文献1】Ｐａｒｋ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｊｏｕｎａｌ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ． １４１．１８６２−７０．（２０１１）

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

高齢者は加齢に伴い免疫が低下しているため、より一層、ウイルス感染症に対する免疫の向上が求められる。高齢者のウイルス感染症に対する免疫獲得にはワクチンが使用されるが、免疫が低下している高齢者に対しては、ワクチンによる免疫向上作用が弱い。

【0008】

そのため、ウイルス感染症に対するワクチンの免疫向上作用をより増強させる必要があるが、特許文献１に記載された免疫賦活剤や、特許文献２に記載された組成物は、この点で十分でない。

【0009】

また、ＩｇＡは、免疫の向上に関連することが知られており、ウイルス感染症を予防するにはウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生を向上させることが必要となる。しかしながら、特許文献１に記載された免疫賦活剤や、特許文献２に記載された組成物は、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生を向上するという点で、十分でない。

【0010】

本発明は以上の実情に鑑みてなされたものであり、ウイルス感染症に対するワクチンの免疫向上作用の増強効果に優れたウイルスワクチン増強剤、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進効果に優れたＩｇＡの産生促進剤、及び、ウイルスを認識する受容体であるＴＬＲ−７の発現促進剤を提供することを目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0011】

本発明者らは、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物により、ウイルス感染症に対するワクチンの免疫向上作用が増強すること、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生が促進すること、及び、ＴＬＲ−７の発現が促進することを見出し、本発明を完成するに至った。より具体的には、本発明は以下のようなものを提供する。

【0012】

（１） べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有する、ウイルスワクチン増強剤。

【0013】

（２） インフルエンザウイルス用である、（１）に記載のウイルスワクチン増強剤。

【0014】

（３） べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有する、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進剤。

【0015】

（４） 前記ＩｇＡは、気管支におけるＩｇＡである、（３）に記載のＩｇＡの産生促進剤。

【0016】

（５） べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有する、ＴＬＲ−７の発現促進剤。

【0017】

（６） メチル化カテキンを含有する、ウイルスワクチン増強剤。

【0018】

（７） インフルエンザウイルス用である、（６）に記載のウイルスワクチン増強剤。

【0019】

（８） メチル化カテキンを含有する、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進剤。

【0020】

（９） 前記ＩｇＡは、気管支におけるＩｇＡである、（８）に記載のＩｇＡの産生促進剤。

【0021】

（１０） メチル化カテキンを含有する、ＴＬＲ−７の発現促進剤。

【発明の効果】

【0022】

本発明によれば、ウイルス感染症に対するワクチンの免疫向上作用の増強効果に優れたウイルスワクチン増強剤、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進効果に優れたＩｇＡの産生促進剤、及び、ウイルスを認識する受容体であるＴＬＲ−７の発現促進剤を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0023】

【図1】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に回収したそれぞれの血清中のＩｇＧ抗体量及びＩｇＡ抗体量のグラフを示す図である。（ａ）は、血清中のＩｇＧ抗体量のグラフを示し、（ｂ）は、血清中のＩｇＡ抗体量のグラフを示す。

【図2】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に回収したそれぞれの血清中のＩｇＧ抗体価及びＩｇＡ抗体価のグラフを示す図である。（ａ）は、血清中のＩｇＧ抗体価のグラフを示し、（ｂ）は、血清中のＩｇＡ抗体価のグラフを示す。

【図3】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に回収したそれぞれの気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体量及びＩｇＡ抗体量のグラフを示す図である。（ａ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体量のグラフを示し、（ｂ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＡ抗体量のグラフを示す。

【図4】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に回収したそれぞれの気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体価及びＩｇＡ抗体価のグラフを示す図である。（ａ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体価のグラフを示し、（ｂ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＡ抗体価のグラフを示す。

【図5】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に摘出した肺及びパイエル板中のＩｇＡ産生細胞の数のグラフを示す図である。（ａ）は、肺中のＩｇＡ産生細胞の数のグラフを示し、（ｂ）は、パイエル板中のＩｇＡ産生細胞の数のグラフを示す。

【図6】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に摘出した脾臓及び肺中のＴＬＲ−７の発現量のグラフを示す図である。（ａ）は、脾臓のリンパ球についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。（ｂ）は、脾臓のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。（ｃ）は、肺のリンパ球についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。（ｄ）は、肺のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。

【図7】「ベにふうき群」、「やぶきた群」、「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」及び「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の屠殺後に摘出した脾臓のＣＤ８^＋Ｔ細胞割合のグラフを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0024】

以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。

【0025】

＜ウイルスワクチン増強剤＞
本発明のウイルスワクチン増強剤は、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有する。これにより、本発明のウイルスワクチン増強剤は、ウイルスワクチンの増強効果に優れる。なお、本明細書において、「ウイルスワクチン」とは、ウイルス感染症に対するワクチンを意味する。また、「ウイルスワクチン増強」とは、ウイルスワクチンにより向上した免疫を増強することを意味する。

【0026】

べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物には、メチル化カテキンが多く含まれている。このメチル化カテキンは、ＴＬＲ（Ｔｏｌｌ様受容体）−７^＋細胞である樹状細胞中のＴＬＲ−７の発現量を増加させる。ＴＬＲ−７の発現量が増加すると、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡを産生するＢ細胞が活性化し、ウイルスワクチンの増強が促進する。これにより、本発明のウイルスワクチン増強剤は、ウイルスワクチン増強効果に優れるものと推測される。

【0027】

また、本発明のウイルスワクチン増強剤に含まれるべにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞におけるＩＬ−２の産生を促進することができる。本発明のウイルスワクチン増強剤は、これにより、ウイルスワクチン増強効果を促進することができる。

【0028】

また、本発明のウイルスワクチン増強剤は、上述のとおり、メチル化カテキンによりウイルスワクチン増強効果に優れるものである。そのため、本発明のウイルスワクチン増強剤は、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含むものに限定されず、メチル化カテキンを含有するもの、又は、メチル化カテキンからなるものであってもよい。

【0029】

本発明のウイルスワクチン増強剤に含まれるべにふうきは、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物のいずれであってもよい。また、本発明のウイルスワクチン増強剤は、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物の両方を含んでもよく、いずれか一方のみ含んでもよい。また、本発明のウイルスワクチン増強剤は、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物以外の成分を含んでもよく、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物のみにより構成されてもよい。

【0030】

本発明のウイルスワクチン増強剤に含まれるべにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物には、メチル化カテキンが含まれる。本発明のウイルスワクチン増強剤におけるメチル化カテキンの含有量は、特に限定されないが、ウイルスワクチン増強効果に優れる点で、固形分含有量で、１ｇ／１００ｇ以上であることが好ましく、１．５ｇ／１００ｇ以上であることがより好ましく、２ｇ／１００ｇ以上であることが更に好ましい。また、本発明のウイルスワクチン増強剤に含まれるメチル化カテキンの量の上限は、特に限定されず、例えば、固形分含有量で、３ｇ／１００ｇ以下であってもよい。なお、本発明のウイルスワクチン増強剤中のメチル化カテキンの固形分含有量は、液体クロマトグラフィーで測定する。

【0031】

メチル化カテキンの種類は、特に限定されず、例えば、エピガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、エピカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、エピカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、カテキン−３−Ｏ−（３−Ｏ−メチル）ガレート、カテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、ガロカテキン−３−Ｏ−（４−Ｏ−メチル）ガレート、エピガロカテキン−３−Ｏ−メチルエチルガレート、エピカテキン−３−Ｏ−メチルエチルガレート、エピカテキン−３−Ｏ−（３，５−Ｏ−ジメチル）ガレート、これらの異性化体等が挙げられる。これらは、単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。

【0032】

本発明のウイルスワクチン増強剤は、メチル化カテキン以外のカテキン類を含んでもよく、含まなくてもよい。このようなカテキン類としては、特に限定されないが、例えば、ガロカテキン、エピガロカテキン、カテキン、エピガロカテキンガレート、エピカテキン、ガロカテキンカレートエピカテキンガレート、カテキンガレート等が挙げられる。これらは、単独で含まれてもよく、２種以上を含んでもよい。

【0033】

本発明のウイルスワクチン増強剤は、ウイルスを認識するＴＬＲ−７の発現を向上させるため、対象とするウイルスの用途は、特に限定されないが、特に、ウイルスワクチン増強効果が優れることから、インフルエンザウイルス用のウイルスワクチン（例えば、インフルエンザワクチンヘマグルチニン等）増強剤であることが好ましい。ただし、これに限定されず、例えば、ラッサ熱ウイルス、ノロウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、エボラウイルス、黄熱ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス等のウイルス用のウイルスワクチン増強剤として用いてもよい。

【0034】

べにふうきの茶葉の形状は、どのような形状であってもよく、例えば、方形状、円形状等に裁断したものであってもよい。また、茶葉を粉砕して粒状に丸めて成形された粉末状の茶葉であってもよい。

【0035】

べにふうき抽出物は、従来の公知の方法により抽出することができる。例えば、べにふうきの茶葉を５０〜１００℃、５〜２０分間、抽出することができる。また、抽出に使用する溶媒は、特に限定されず、例えば、水、エタノール、ヘキサン、イソプロピルアルコール、液化炭酸ガス等であってもよい。

【0036】

上述の抽出液に、従来の公知の種々の成分を配合してもよく、配合しなくてもよい。そのような公知の成分としては、例えば、香料、酸味料（アスコルビン酸、無水クエン酸等）のほか、安定剤、増粘剤、乳化剤、ｐＨ調整剤（重曹等）を任意に使用できる。これら成分はどのように配合してもよく、例えば、溶媒に抽出物を抽出する前に配合してもよく、溶媒に抽出物を抽出した後に配合してもよい。

【0037】

本発明のウイルスワクチン増強剤は、どのような形態で使用してもよく、例えば、上記のべにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物をそのままウイルスワクチン増強剤として使用してもよい。あるいは、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を加工したものであってもよい。加工する増強剤の形状は、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の種々の形状であってもよく、また、液体状であってもよい。あるいは、茶抽出物を粉末化し、凍結乾燥させた状態ものであってもよい。増強剤の加工を行う場合、一般に使用される結合剤、包含剤、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、湿潤剤のような添加剤を含有してもよい。

【0038】

本発明のウイルスワクチン増強剤を液体状とする場合、例えば、容器に収容された形態にすることができる。液体状のウイルスワクチン増強剤が容器に収容された場合、その量は特に限定されず、例えば、１容器当たり５０ｍｌ〜３０００ｍｌであってもよいが、ウイルス増強の効果と摂取又は投与する頻度のバランスの観点から、１容器当たり１００〜２０００ｍｌであることが好ましく、１容器当たり２００〜１０００ｍｌであることが更に好ましく、１容器当たり３００〜６００ｍｌであることが最も好ましい。

【0039】

本発明のウイルスワクチン増強剤の摂取又は投与方法は、特に限定されず、例えば、経口であってもよく、非経口であってもよい。経口摂取又は投与の方法は、特に限定されず、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等に加工したものや、あるい加工していないものをそのまま経口摂取又は投与することができる。また、非経口摂取又は投与の方法は、特に限定されず、注射、吸入等の方法により、摂取又は投与することができる。ウイルスワクチン増強剤の摂取又は投与は、ウイルスワクチンを接種する前（例えば、ウイルスワクチンの接種の１〜３０日前）に行ってもよく、あるいは、ウイルスワクチンを接種した後（例えば、ウイルスワクチンの接種の１〜３０日後）に行ってもよく、ウイルスワクチンの接種と同時に行ってもよい。なお、本発明のウイルスワクチン増強剤の摂取又は投与は、ウイルスワクチンの接種と同様の方法で摂取又は投与してもよく、異なる方法で摂取又は投与してもよい。また、本発明のウイルスワクチン増強剤は、連続して継続的に摂取又は投与してもよく、単発の摂取又は投与であってもよい。本発明のウイルスワクチン増強剤を継続的に摂取又は投与を行う場合、１日当たりの摂取又は投与量は、特に限定されず、目的やウイルスワクチンの量等に応じて適切に選択することができる。

【0040】

＜ＩｇＡの産生促進剤＞
本発明のＩｇＡの産生促進剤は、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有する、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生促進剤である。本発明のＩｇＡの産生促進剤は、これにより、ＩｇＡの産生促進効果に優れる。本発明のＩｇＡの産生促進剤は、上述のウイルスワクチン増強剤と同様のものを用いることができる。

【0041】

本発明のＩｇＡの産生促進剤におけるウイルス抗原は、特に限定されないが、特に、ＩｇＡの産生促進効果が優れることから、インフルエンザウイルス抗原（例えば、インフルエンザワクチンヘマグルチニン等）であることが好ましい。ただし、これに限定されず、例えば、ラッサ熱ウイルス、ノロウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、エボラウイルス、黄熱ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス等のウイルス抗原であってもよい。

【0042】

ＩｇＡはウイルス抗原に特異的なものであれば、特に限定されず、ＩｇＡはウイルス抗原に特異的なＩｇＡが存在する器官（例えば、口腔、鼻腔、呼吸器官、消化器官等）、組織、あるいは細胞に存在するものであれば、どのようなものであってもよい。特に、本発明のＩｇＡの産生促進剤は、呼吸器官のうち、気管支におけるＩｇＡの産生の促進に好適に用いることができる。

【0043】

本発明のＩｇＡの産生促進剤は、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生を促進することから、ウイルス感染症（例えば、ラッサ熱ウイルス、ノロウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、エボラウイルス、黄熱ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス等）の予防又は治療の効能を有する。そのため、本発明のＩｇＡの産生促進剤は、ウイルス感染症の予防又は治療に用いることができる。

【0044】

本発明のＩｇＡの産生促進剤は、上述のとおり、ウイルスワクチン増強剤と同様のものを用いることができるが、他方で、ウイルス感染症の予防又は治療に適しているため、その摂取又は投与は、本発明のＩｇＡの産生促進剤を単独で日常的に摂取又は投与を行うことが好ましい。より具体的には、例えば、本発明のＩｇＡの産生促進剤が液体状である場合、ウイルス感染症の予防又は治療に適していることから、単独で１日当たり５０〜１００ｍｌの量を摂取又は投与することが好ましく、単独で１日当たり１００〜８００ｍｌの量を摂取又は投与することがより好ましく、単独で１日当たり３００〜６００ｍｌの量を摂取又は投与することが更に好ましい。

【0045】

＜ＴＬＲ−７の発現促進剤＞
本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤は、べにふうきの茶葉又はべにふうきの抽出物を含有する。本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤は、これにより、ＴＬＲ−７の発現促進効果に優れる。本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤は、上述のウイルスワクチン増強剤と同様のものと用いることができる。

【0046】

本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤により、ＴＬＲ−７の発現が促進される器官、組織、細胞等の箇所は、特に限定されない。ＴＬＲ−７の発現を促進する器官は、例えば、免疫器官としては脾臓が挙げられ、粘膜を有しかつ、感染の標的となる臓器としては、口腔、鼻腔、呼吸器官、腸、胃、消化管、肛門、陰茎、膣等が挙げられ、またワクチン接種を行う場合のある器官としては、筋肉等が挙げられる。

【0047】

本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤は、ＴＬＲ−７の発現促進効果に優れるが、ＴＬＲ−７はウイルスを認識する受容体であるため、ウイルス感染症（例えば、ラッサ熱ウイルス、ノロウイルス、風疹ウイルス、ポリオウイルス、エボラウイルス、黄熱ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス等）の予防又は治療の効能を有する。そのため、本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤は、ウイルス感染症の予防又は治療に用いることができる。

【0048】

本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤は、上述のとおり、ウイルスワクチン増強剤と同様のものを用いることができるが、他方で、ウイルス感染症の予防又は治療に適しているため、その摂取又は投与は、本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤を単独で日常的に摂取又は投与を行うことが好ましい。より具体的には、例えば、本発明のＴＬＲ−７の発現促進剤が液体状である場合、ウイルス感染症の予防又は治療に適していることから、単独で１日当たり５０〜１００ｍｌの量を摂取又は投与することが好ましく、単独で１日当たり１００〜８００ｍｌの量を摂取又は投与することがより好ましく、単独で１日当たり３００〜６００ｍｌの量を摂取又は投与することが更に好ましい。

【実施例】

【0049】

＜べにふうきのマウスに対する投与試験＞
１１週齢のＢＡＬＢ／ｃ雌マウスを１週間の予備飼育し、その後、平均体重が等しくなるように、実施例１に係る「ベにふうき群」、比較例１に係る「やぶきた群」、対照例１に係る「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」、対照例２に係る「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」の４群（それぞれ、ｎ＝１０）に分けた。

【0050】

実施例１に係る「ベにふうき群」は、インフルエンザワクチンを接種させ、かつ、１質量％べにふうき含有食を摂食させるマウスの群である。

【0051】

比較例１に係る「やぶきた群」は、インフルエンザワクチンを接種させ、かつ、１質量％やぶきた含有食を摂食させるマウスの群である。

【0052】

対照例１に係る「Ｃｏｎｔ．ＰＢＳ群」は、インフルエンザワクチンの代わりにＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）を接種させ、かつ、普通食（ＡＩＮ−９３Ｇ食）を摂食させるマウスの群である。

【0053】

対照例２に係る「Ｃｏｎｔ．ｖａｃｃｉｎｅ群」は、インフルエンザワクチンを接種させ、かつ、普通食（ＡＩＮ−９３Ｇ食）を摂食させるマウスの群である。

【0054】

上記４群に分けると同時に、それぞれの群に対して、普通食、やぶきた食、又はべにふうき食の摂食を開始した。なお、摂食は、それぞれの群のマウスの屠殺が行われる１２時間前まで行い、４ｇ／日の量で行った。摂食開始から２週間後に、インフルエンザワクチンヘマグルチニン（ＨＡ）相当１ｍｇ／２００ｍＬ ＰＢＳ、又はＰＢＳをそれぞれ２００ｍＬ皮下注射し、初回免疫を行った。

【0055】

初回免疫の２週間後に、追加免疫を行った。追加免疫の９日後にマウスの屠殺を行い、血清、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ；ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ ｌａｖａｇｅ ｆｌｕｉｄ）を回収した。また、屠殺後のマウスから、脾臓、肺、パイエル板を摘出した。

【0056】

＜ＩｇＡ及びＩｇＧについての評価＞
ＥＬＩＳＡ法により、上記回収後の血清、気管支肺胞洗浄液のＩｇＡ抗体量及びＩｇＧ抗体量並びにＩｇＡ抗体価及びＩｇＧ抗体価を測定し、体液性免疫及び細胞性免疫に関与する細胞の数及び割合をフローサイトメーターにて測定した。その結果を図１〜図４に示す。図１中、（ａ）は、血清中のＩｇＧ抗体量を示し、（ｂ）は、血清中のＩｇＡ抗体量を示す。また、図２中、（ａ）は、血清中のＩｇＧ抗体価を示し、（ｂ）は、血清中のＩｇＡ抗体価を示す。図３中、（ａ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体量を示し、（ｂ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＡ抗体量を示す。また、図４中、（ａ）は気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体価を示し、（ｂ）は、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＡ抗体価を示す。

【0057】

また、摘出後のそれぞれの群の肺、パイエル板中のＩｇＡ産生細胞の数を、抗ＩｇＡ抗体による染色を行いフローサイトメーターにより測定した。その結果を図５に示す。図５中、（ａ）は、肺中のＩｇＡ産生細胞の数を示し、（ｂ）は、パイエル板中のＩｇＡ産生細胞の数を示す。

【0058】

図１、２に示すように、血清中のＩｇＧ抗体量及びＩｇＡ抗体量は、対照例２、比較例１、実施例１のいずれにおいても、差は見られなかった。

【0059】

図３（ａ）に示すように、気管支肺胞洗浄液中の実施例１のＩｇＧの抗体量は対照例２の抗体量と比較して、有意に減少していた。また、図４（ａ）に示すように、実施例１のＩｇＧ抗体価は、実施例１、比較例１、対照例２の間で差は見られなかった。他方、図３（ｂ）に示すように、実施例１のＩｇＡ抗体量は、増加傾向にあり、図４（ｂ）に示すように、実施例１においてはＩｇＡの割合が有意に増加しており、実施例１においては、対照例２、比較例１と比較して、抗原（ＨＡ）に特異的なＩｇＡが全体的に著しく増加していることがわかった。

【0060】

図５（ａ）に示すように、肺中のＩｇＡ産生細胞の数は、実施例１の方が比較例１より有意に多かった。また、図５（ｂ）に示すように、パイエル板中のＩｇＡ産生細胞の数は、実施例１と対照例２の間で有意な差が見られた。

【0061】

以上に示したとおり、実施例１に係る「べにふうき群」は、比較例１に係る「やぶきた群」より、特に、気管支肺胞洗浄液中において、インフルエンザワクチンヘマグルチニン（ＨＡ）に対するＩｇＡの抗体価が増加した。ウイルスに感染する際は、気道から感染するため、気管支において、ＨＡに対するＩｇＡの抗体価が増えたことは、ウイルスワクチンの効果が増強したことを意味する。すなわち、これらのことから、べにふうきは、やぶきたと比較して、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生を促進し、優れたウイルスワクチンの増強効果を有することわかった。

【0062】

なお、図３（ａ）に示すように、実施例１の気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体量は、対照例２と比較して有意に減少したにもかかわらず、図４（ａ）に示すように、気管支肺胞洗浄液中のＩｇＧ抗体価は対照例２と差がなかった。このことは、実施例１の気管支肺胞洗浄液中ではＩｇＧの力価が増えていることを示し、べにふうきは、感染後の免疫向上にも有効であることがわかった。

【0063】

＜ＴＬＲ−７の発現量の評価＞
摘出後のそれぞれの群の脾臓中及び肺中のＴＬＲ−７の発現量の評価を行った。ＴＬＲ−７の発現量は、フローサイトメーターにより測定した。その結果を、図６に示す。図６中、（ａ）は、脾臓のリンパ球についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。図６中、（ｂ）は、脾臓のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。図６中、（ｃ）は、肺のリンパ球についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。図６中、（ｄ）は、肺のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞についてのＴＬＲ−７の発現量を示したグラフである。

【0064】

図６（ａ）より、脾臓のリンパ球において、実施例１は、対照例２より有意にＴＬＲ−７の発現が促進したことが確認された。他方、比較例１は、脾臓のリンパ球において、ＴＬＲ−７の発現量が、対照例２に対して有意差がなかった。また、図６の（ｃ）より、肺中のリンパ球において、実施例１は、比較例１及び対照例２より、有意にＴＬＲ−７の発現が促進したことが確認された。

【0065】

図６（ｂ）より、脾臓のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞において、実施例１は、対照例２及び比較例１より有意にＴＬＲ−７の発現が促進したことが確認された。また、比較例１は、ＴＬＲ−７の発現量が、対照例２との有意差がなかった。また、図６の（ｄ）より、肺中のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞において、実施例１は、対照例１より、有意にＴＬＲ−７の発現が促進したことが確認された。他方、比較例１は、肺中のリンパ球のうち、ＣＤ１１ｃ^＋細胞において、ＴＬＲ−７の発現量が対照例１に対して有意差がなかった。

【0066】

この結果より、「べにふうき」は、「やぶきた」より、ＣＤ１１ｃ^＋細胞である樹状細胞において、ＴＬＲ−７の発現量を促進させることがわかった。ＴＬＲ−７は、ウイルスに対するセンサーの役割を担う受容体である。

【0067】

以上で述べたことから、ＣＤ１１ｃ^＋細胞である樹状細胞中のＴＬＲ−７の発現量が増加することで、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡを産生するＢ細胞が活性化し、ウイルスワクチンの増強が促進されるものと推測される。

【0068】

「べにふうき」と「やぶきた」は、いずれもカテキン類を含むが、「べにふうき」は、「やぶきた」より、メチル化カテキンの量が多い。そのため、上記の「べにふうき」のウイルスワクチンの増強効果、ウイルス抗原に特異的なＩｇＡの産生の促進効果、及び、ＴＬＲ−７の発現促進効果は、メチル化カテキンによるものであると推測される。

【0069】

＜ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞割合の評価＞

【0070】

摘出後のそれぞれの群の脾臓中のＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞割合の評価を行った。その結果を、図７に示す。ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞割合は、フローサイトメーターにより測定した。

【0071】

図７に示すように、実施例１は、対照例１と比較して、有意に脾臓中のＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞割合が増加した。ＣＤ８^＋Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞であり、ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増加は、ウイルス感染症に対する免疫が向上したことを示す。これらのことから、「べにふうき」は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞を増加させることで、ウイルス感染症に対する免疫を向上させることがわかった。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】