特許 6653410 ＮａＰｉ−ＩＩｂ阻害剤として有用な縮合チオフェン誘導体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6653410

(24)【登録日】2020年1月29日

(45)【発行日】2020年2月26日

(54)【発明の名称】ＮａＰｉ−ＩＩｂ阻害剤として有用な縮合チオフェン誘導体

(51)【国際特許分類】

   C07D 409/12 20060101AFI20200217BHJP

   A61K 31/496 20060101ALI20200217BHJP

   C07D 487/08 20060101ALI20200217BHJP

   A61K 31/4995 20060101ALI20200217BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20200217BHJP

   A61K 47/32 20060101ALI20200217BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20200217BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20200217BHJP

   A61P 9/00 20060101ALI20200217BHJP

【ＦＩ】

   C07D409/12CSP

   A61K31/496

   C07D487/08

   A61K31/4995

   A61K9/20

   A61K47/32

   A61P3/00

   A61P13/12

   A61P9/00

【請求項の数】11

【全頁数】84

(21)【出願番号】特願2019-527785(P2019-527785)

(86)(22)【出願日】2017年8月8日

(65)【公表番号】特表2019-527734(P2019-527734A)

(43)【公表日】2019年10月3日

(86)【国際出願番号】US2017045843

(87)【国際公開番号】WO2018034883

(87)【国際公開日】20180222

【審査請求日】2019年2月6日

(31)【優先権主張番号】62/375,169

(32)【優先日】2016年8月15日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】594197872

【氏名又は名称】イーライ リリー アンド カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(74)【代理人】

【識別番号】100162695

【弁理士】

【氏名又は名称】釜平 双美

(74)【代理人】

【識別番号】100156155

【弁理士】

【氏名又は名称】水原 正弘

(72)【発明者】

【氏名】デイビッド・アンドリュー・コーツ

(72)【発明者】

【氏名】ケビン・ロバート・フェイルズ

(72)【発明者】

【氏名】ジェフリー・アラン・ピーターソン

(72)【発明者】

【氏名】ジェフリー・マイケル・シュカーヤンツ

(72)【発明者】

【氏名】クアンロン・シェン

(72)【発明者】

【氏名】マシュー・ジョン・バリ

(72)【発明者】

【氏名】ジョン・ローリー・ウェッテロー・ザ・セカンド

(72)【発明者】

【氏名】ダリウシュ・スタニスロウ・ウォッカ

(72)【発明者】

【氏名】ヤンピン・シュー

【審査官】 伊藤 幸司

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２０１６／０２６３７２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１４／００３１５３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２０１３−１０７８８０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１１／１３６２６９（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記式

式ＩＩ
（式中、Ｙが縮合シクロヘキサン環または縮合フェニル環であり、
Ａが、

であり、交差線は、式ＩＩのコアとの結合点の結合を示し、破線はＲ^２との結合点の結合を示し、
式中、Ｒ^２が、
−ＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_３ＯＨ、−（ＣＨ_２）_３ＯＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_３ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＯＣＨ_３、−ＣＯＣＨ_３、−ＣＯ（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３、−ＣＯＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＯ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＯＣＨ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、−ＳＯ_２Ｎ［（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３］_２、−ＳＯ_２ＮＨＣＨ_３、−ＳＯ_２（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＨ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＣＨ_３、−ＣＯＮＨＣＨ_３、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−ＣＯＮ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３）_２、−ＣＳＮＨＣＨ_３、

からなる群から選択され、式中、破線が結合点を表し、
式中、Ｒ’が−ＣＯ_２Ｈまたは−ＣＯＮＨ_２である）の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項2】

Ｙが縮合シクロヘキサン環であり、Ａが

であり、Ｒ’が−ＣＯ_２Ｈである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項3】

下記式

（式中、Ｒ^２が、−（ＣＨ_２）_３ＯＨ、−（ＣＨ_２）_３ＯＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_３ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＨ、−ＣＯＣＨ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２Ｎ［（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３］_２、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＣＨ_３、および−ＣＯ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈからなる群から選択され、
式中、Ｒ’が−ＣＯ_２Ｈまたは−ＣＯＮＨ_２である）の化合物である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項4】

Ｒ’が−ＣＯ_２Ｈである、請求項３に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項5】

として構造的に表され得る、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸である、請求項１または３に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。

【請求項6】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムである、請求項５に記載の化合物。

【請求項7】

請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩、および薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤を含む、薬学的組成物。

【請求項8】

３０％の請求項６に記載の化合物および７０％のポリビニルピロリドン−ビニルアセテートを含む、固体分散体製剤。

【請求項9】

請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩を含む、高リン血症治療剤。

【請求項10】

請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩を含む、慢性腎疾患治療剤。

【請求項11】

請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩を含む、慢性腎疾患に関連する心血管疾患の治療剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を有する透析患者、および関連する循環器疾患に関連するリン酸過剰または高リン血症を治療するための化合物を提供する。

【0002】

慢性腎疾患および末期腎疾患を有する透析患者などの腎機能障害を有する患者においては、生体内にリンが蓄積し、血中のリン濃度が上昇し、リン酸が過剰になる。

【0003】

一部の患者においては、このリン酸負荷は高リン血症と呼ばれる状態に達する。ＣＫＤおよびＥＳＲＤにおけるリン酸塩負荷の上昇は、副甲状腺ホルモンの過剰分泌、すなわち二次性副甲状腺機能亢進症を引き起こし、そして骨病変を引き起こす。高リン血症は冠状動脈および大動脈の石灰化、ならびに心血管死亡率および全死因死亡率と関連している。血管石灰化は心臓の機能不全を促進して死をもたらすと考えられている。リン酸調節の機能不全は臨床的に重大な結果をもたらし、そして正常または正常に近い範囲内における血清リン酸レベルのわずかな増加でさえ、罹患率および死亡率の増加と相関し得ることが研究によって示されている。ＣＫＤステージ３および４の患者におけるリン酸過剰、およびリン酸過剰に対する生体の代償性反応は、関連する心血管系の罹患率および死亡率に関係している。ＣＫＤステージ３および４の患者におけるリン酸吸収の減少は、これらの反応を軽減または予防し、心血管の健康を維持する可能性がある。ＣＫＤの早期にリン酸塩負荷を制御することは、罹患患者における罹患率および死亡率を軽減または予防する可能性がある（Ｃ．Ｓ．Ｒｉｔｔｅｒ ａｎｄ Ｅ．Ｓｌａｔｏｐｏｌｓｋｙ，Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｉｎ ＣＫＤ：Ｔｈｅ Ｋｉｌｌｅｒ Ａｍｏｎｇ Ｕｓ，Ｃｌｉｎ．Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１１：１０８８−１１００，２０１６）。

【0004】

ＮａＰｉ−ＩＩの３つのアイソフォームが同定されている。ＮａＰｉ−ＩＩａ（ＩＩａ型、ＳＬＣ３４Ａ１とも呼ばれる）は主に腎臓で発現し、ＮａＰｉ−ＩＩｂ（ＩＩｂ型、ＳＬＣ３４Ａ２とも呼ばれる）は小腸で発現し、ビタミンＤによって調節され得る。ＮａＰｉ−ＩＩｃ（ＩＩｃ型、ＳＬＣ３４Ａ３とも呼ばれる）も腎臓において発現する。消化管におけるリン酸塩吸収は、大部分がＮａＰｉ−ＩＩｂによって行われるのに対して、血中のリン酸塩は腎糸球体によってろ過され、必要量で主に腎尿細管内のＮａＰｉ−ＩＩａおよびＮａＰｉ−ＩＩｃによって再吸収される（Ｍｉｙａｍｏｔｏ，ｅｔ ａｌ．Ｓｏｄｉｕｍ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｃｏｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ：Ｌｅｓｓｏｎｓ ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅ Ｋｎｏｃｋｏｕｔ ａｎｄ Ｍｕｔａｔｉｏｎ Ｓｔｕｄｉｅｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１００（９）：３７１９−３０，２０１１）。

【0005】

過剰なリン酸塩、および／または高リン血症の治療の進歩にもかかわらず、これらの症状を治療するための安全で効果的な治療に対する未だに満たされていない大きな必要性が存在する。現在の治療は、消化管におけるリン酸吸収を抑制するためにリン酸吸着剤を使用している。これらには、例えば、非金属ポリマー吸着剤、例えば炭酸セベラマーおよび塩酸セベラマー、カルシウム塩調製物、例えば沈降炭酸カルシウム、および金属吸着剤、例えば炭酸ランタンが含まれる。しかしながら、これらの薬剤はそれぞれ、便秘、下痢、高カルシウム血症、および金属蓄積などの有害作用を有することが報告されている。さらに、吸着剤による治療は、数グラム程度の吸着剤の毎日の摂取を必要とし、そして療法の不適合は一般的な問題である。したがって、改善された安全性、有効性、および利便性を提供する、リン酸過剰、および／または高リン血症の治療に対する満たされていない必要性が残っている。

【0006】

ＮａＰｉ−ＩＩｂの阻害は、消化管におけるリン酸吸収を抑制し、高リン血症を治療するためのアプローチとして血中リン酸濃度の低下をもたらし得る（Ｓａｂｂａｇｈ ｅｔ ａｌ，Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ，Ａｄｖ．Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ．，１８（２）：８５−９０，２０１１）。ＮａＰｉ−ＩＩｂの阻害によるリン酸塩吸収の抑制は、現在のリン酸塩吸着剤と比較して異なる作用機序を使用し、リン酸塩過剰および／または高リン血症の予防および／または治療に臨床的に有用な利点を提供し得る。さらに、ＮａＰｉ−ＩＩｂ輸送体阻害剤は、二次性副甲状腺機能亢進症、慢性腎疾患、および／またはより一般的には慢性腎疾患に関連する心血管疾患に対して、食事性リン酸塩の吸収を減少させることによってさらなる恩恵を提供し得る。

【0007】

本発明の化合物は、ＮａＰｉ−ＩＩｂ輸送体の阻害剤であり、そしてＮａＰｉ−ＩＩｂの強力な阻害を示す。そのように、本発明の化合物は、ＮａＰｉ−ＩＩｂ媒介性のリン酸吸収が役割を果たす状態、例えば慢性腎疾患および高リン血症の治療に有用であると考えられる。

【0008】

米国特許出願公開第２０１３／００５３３６９号は、ＮａＰｉ−ＩＩｂの阻害剤として特定のテトラヒドロベンゾチオフェン化合物を開示し、高リン血症を含む多くの疾患を治療するのに有用であるとしてその化合物を記載している。

【0009】

吸着剤、または当該技術分野で知られている他の薬剤が有する不利な点を伴わずに、リン酸過剰、高リン血症、慢性腎疾患、および／または慢性腎疾患に関連する心血管疾患の安全で利便性を有する治療の必要性は、患者の腎疾患の治療にとって重要であり続ける。本発明は、リン酸塩過剰、高リン血症、慢性腎疾患、および／または慢性腎疾患に関連する心血管疾患の治療に有用な代替的な化合物を提供する。さらに、提供される化合物は、改善された有効性および／または有利な副作用および耐容性プロファイルを有する、ＮａＰｉ−ＩＩｂ活性に関連した状態の治療の必要性に対処する。

【0010】

本発明は、下記式

【化1】

式ＩＩ
（式中、Ｙは縮合シクロヘキサン環または縮合フェニル環であり、
Ａが、

【化2】

であり、交差線は、式ＩＩのコアとの結合点の結合を示し、破線はＲ^２との結合点の結合を示し、
式中、Ｒ^２は、
−ＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_３ＯＨ、−（ＣＨ_２）_３ＯＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_３ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＯＣＨ_３、−ＣＯＣＨ_３、−ＣＯ（ＣＨ_２）_３ＣＨ_３、−ＣＯＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＯ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＣＨ_２ＮＨ_２、−ＣＯＣＨ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、−ＳＯ_２Ｎ［（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３］_２、−ＳＯ_２ＮＨＣＨ_３、−ＳＯ_２（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＨ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＣＨ_３、−ＣＯＮＨＣＨ_３、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−ＣＯＮ（ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３）_２、−ＣＳＮＨＣＨ_３、

【化3】

からなる群から選択され、式中、破線は結合点を表し、
式中、Ｒ’は−ＣＯ_２Ｈまたは−ＣＯＮＨ_２である）の化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0011】

本発明はさらに、Ｙが縮合シクロヘキサン環であり、Ａが

【化4】

であり、そしてＲ’が−ＣＯ_２Ｈである上記のような式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0012】

本発明はさらに、Ｙが縮合シクロヘキサン環であり、Ａが

【化5】

であり、そしてＲ’が−ＣＯ_２Ｈである上記のような式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0013】

さらに、本発明は、下記式

【化6】

式Ｉ
（式中、Ｒは、−（ＣＨ_２）_３ＯＨ、−（ＣＨ_２）_３ＯＣＨ_３、−（ＣＨ_２）_３ＣＯ_２Ｈ、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＨ、−ＣＯＣＨ_２ＮＨ_２、−ＳＯ_２Ｎ［（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３］_２、−ＣＯＮＨ（ＣＨ_２）_４ＯＣＨ_３、および−ＣＯ（ＣＨ_２）_２ＣＯ_２Ｈからなる群から選択され、
式中、Ｒ’は−ＣＯ_２Ｈまたは−ＣＯＮＨ_２である）の化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0014】

本発明はさらに、Ｒ’が−ＣＯ_２Ｈである上記の式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0015】

以下の特定の実施形態は、式Ｉおよび／またはＩＩの化合物および／または塩である。

【0016】

本発明は、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0017】

本発明は、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−ヒドロキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0018】

本発明は、４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−［ビス（２−メトキシエチル）スルファモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0019】

本発明は、４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−（３−カルボキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0020】

本発明は、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−メトキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0021】

本発明は、４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−（２−アミノアセチル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0022】

本発明は、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−メトキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0023】

本発明は、４−［４−［［３−［［３−［［４−［２−（４−カルバアモイルフェニル）エチル］−３，５−ジフルオロ−フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−イル］−４−オキソ−酪酸である化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。

【0024】

本発明は、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムである塩を提供する。

【0025】

本発明は、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムの固体分散体製剤を提供し、ここで、製剤は、３０％の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウム、および７０％のポリビニルピロリドン−ビニルアセテートを含む。

【0026】

本発明はさらに、以下からなる群から選択される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［（２，２，４−トリメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸ギ酸塩、
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルカルバモチオイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−（２−カルボキシエチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（メチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］）アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、ギ酸塩、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［（４−メトキシカルボニル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、
４−（２，６−ジフルオロ−４−（２−（３−（（（１Ｒ，５Ｓ）−８−ペンタノイル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル）ベンズアミド）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド）フェネチル）安息香酸、
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルスルファモイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（テトラヒドロピラン−４−イルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［４−［［２−［［３−［（８−アセチル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］ベンゾエート、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メトキシエチルスルホニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メトキシエチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（４−メトキシブチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート、
４−［２−［４−［［２−［［３−［［８−［ビス（２−メトキシエチル）カルバモイル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］ベンゾエート、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メチルプロパノイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート、
４−［２−［４−［［２−［［３−［［８−［２−（ジメチルアミノ）アセチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−［１−（メトキシメチル）シクロプロパンカルボニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、および
４−［２−［４−［［２−［［３−［（４−アセチル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸。

【0027】

さらに、本発明は、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。さらに、本発明は、式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および薬学的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。

【0028】

さらに、本発明は、療法における使用のための、式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明は、療法における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムである塩を提供する。

【0029】

さらに、本発明は、高リン血症の治療における使用のための、式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。さらに、本発明は、高リン血症の治療における使用のための、式ＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。さらに、本発明は、慢性腎疾患の治療における使用のための、式ＩもしくはＩＩの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を提供する。本発明は、高リン血症の治療における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムである塩を提供する。本発明は、高リン血症の治療における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムの固体分散体製剤を提供し、ここで、製剤は、３０％の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウム、および７０％のポリビニルピロリドン−ビニルアセテートを含む。

【0030】

本発明は、慢性腎疾患の治療における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムである塩を提供する。本発明は、慢性腎疾患の治療における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムの固体分散体製剤を提供し、ここで、製剤は、３０％の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウム、および７０％のポリビニルピロリドン−ビニルアセテートを含む。

【0031】

本発明は、慢性腎疾患に関連する心血管疾患の治療における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸またはその薬学的に許容可能な塩である、化合物または塩を提供する。本発明は、慢性腎疾患に関連する心血管疾患の治療における使用のための、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムである塩を提供する。本発明は、慢性腎疾患に関連する心血管疾患を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸またはその薬学的に許容可能な塩である、化合物または塩を投与することを含む方法を提供する。

【0032】

さらに、本発明は、高リン血症、および／または慢性腎疾患の治療のための医薬の製造のための、式ＩもしくはＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。

【0033】

さらに、本発明は、高リン血症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。さらに、本発明は、高リン血症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の式ＩＩの化合物またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。

【0034】

さらに、本発明は、高リン血症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸またはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む方法を提供する。さらに、本発明は、高リン血症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムを投与することを含む方法を提供する。さらに、本発明は、高リン血症を治療する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムの固体分散体製剤を投与することを含む方法を提供し、ここで、製剤は、３０％の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウム、および７０％のポリビニルピロリドン−ビニルアセテートを含む。

【0035】

用語「薬学的に許容可能な塩」は、式ＩもしくはＩＩの化合物の塩基性部分と結合して存在する酸付加塩、または式ＩもしくはＩＩの化合物の酸性部分と結合して存在する塩基付加塩を含む。そのような塩は、例えば、当業者に知られている、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｓ．），Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，２００２に列挙されるような薬学的に許容可能な塩を含む。

【0036】

薬学的に許容可能な塩に加えて、他の塩も本発明において企図される。それらは、化合物の精製、または他の薬学的に許容可能な塩の調製において、中間体としての役割を担い得るか、または、本発明の化合物の同定、分析、または精製のために有用である。

【0037】

本明細書において使用されるとき、用語「患者」は、哺乳動物などの温血動物を指し、ヒトを含む。ヒトは好ましい患者である。

【0038】

慢性腎疾患に関連する心血管疾患は、突然の心臓死、不整脈、狭心症、心筋梗塞、および心不全を含み得る（Ｋｅｓｔｅｎｂａｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｒｕｍ Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ Ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ Ｒｉｓｋ Ａｍｏｎｇ Ｐｅｏｐｌｅ ｗｉｔｈ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．１６：５２０−５２８，２００５）。

【0039】

当業者は、現在症状を示している患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することによって、高リン血症および／または慢性腎疾患を治療することができる。したがって、用語「治療」および「治療すること」は、存在する障害、および／またはその症状の進行の緩徐化、妨害、抑止、制御、または停止が存在し得る全てのプロセスを指すことが意図されるが全ての症状の完全な排除を示すことは、かならずしも必要ではない。

【0040】

当業者は、高リン血症および／または慢性肝疾患の認識されている危険因子を有する患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することによって、高リン血症および／または慢性腎疾患を治療することができる。例えば、高血圧症および／または糖尿病などの他の要因を考慮して、正常範囲の上限にリン酸レベルを有する患者は、高リン血症および／または慢性腎疾患、ならびに慢性腎疾患に関連する心血管疾患のリスクを認識しているとみなされ得る。

【0041】

本明細書において使用されるとき、式ＩまたはＩＩの化合物の用語「有効量」は、本明細書において記載される高リン血症および／または慢性腎疾患などの障害を治療するのに有効な量を指す。当業者は、従来の技術の使用により、そして現在の患者にとって情報価値があると考えられる状況下で得られた結果を観察することにより有効量を決定することができる。式ＩまたはＩＩの化合物の有効量または用量を決定する際には、式ＩまたはＩＩのどの化合物を投与するか、他の薬剤の同時投与が存在するかどうか、哺乳類の種、その大きさ、年齢、そして全体的な健康状態、高リン血症および／または慢性腎疾患などの障害の関与の程度または重症度、個々の患者の反応、投与モード、投与された製剤の生物学的利用能特性、選択された投与計画、その他の関連する状況を含む多数の要因が考慮される。

【0042】

本発明の化合物は、単独で、または薬学的に許容可能な担体もしくは賦形剤と組み合わせた薬学的組成物の形態で投与することができ、その割合および性質は、選択された化合物の溶解性および安定性を含む化学的性質、選択された投与経路、および標準的な薬務によって決定される。本発明の化合物は、それ自体有効ではあるが、それらの薬学的に許容可能な塩の形態で製剤化および投与することもできる。

【0043】

製剤を調製する当業者は、選択された化合物の特定の特徴、治療される障害または状態、障害または状態の段階、および他の関連する状況に応じて適切な形態および投与モードを容易に選択することができる（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌ．Ｖ．Ａｌｌｅｎ，Ｅｄｉｔｏｒ，２２^ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，２０１２を参照）。

【0044】

特定の略語は以下のように定義される：「ＡｃＯＨ」は酢酸を指し、「ＡＣＮ」はアセトニトリルを指し、「ＢＯＰ」はベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを指し、「ＤＣＭ」はジクロロメタンまたは塩化メチレンを指し、「ＤＩＰＥＡ」は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンを指し、「ＤＭＦ」は、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを指し、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを指し、「ＥＤＣＩ」は、３−（エチルイミノメチレンアミノ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルプロパン−１−アミンを指し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを指し、「ＥｔＯＨ」はエタノールを指し、「ＦＢＳ」はウシ胎仔血清を指し、「ＨＡＴＵ」は、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェートを指し、「ＨＥＰＥＳ」は、２−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］エタンスルホン酸を指し、「ＨＯＢＴ」は、ヒドロキシベンゾトリアゾールを指し、「ｈｒ」は１時間または複数の時間を指し、「ＩＣ_５０」は、その薬剤について可能な最大阻害応答の５０％を生じる薬剤の濃度を指し、「ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ」は液体クロマトグラフィーエレクトロスプレー質量分析を指し、「ｍｉｎは分または複数の分を指し、「ＭｅＯＨ」はメタノールまたはメチルアルコールを指し、「ＭＴＢＥ」はメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルを指し、「^３３Ｐ」はリン−３３を指し、「ｐｓｉ」は１平方インチあたりのポンド数を表し、「ＰｙＢＯＰ」は、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェートを指し、「ＲＴ」は室温を指し、「ＴＥＡ」はトリエチルアミンを指し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を指し、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを指し、「Ｔｒｉｓ」は、２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−プロパン−１，３−ジオールを指し、「Ｕ／ｍＬ」はミリリットル当たりの単位を指し、「ＰＶＰ−ＶＡ」はポリビニルピロリドン−酢酸ビニルを指す。
スキーム１

【化7】

【0045】

スキーム１は式Ｉｘの化合物への合成経路を示す。一般に、ハロゲン化アルキル化合物ＩＩは、例えばアミンとＴＥＡ、ＤＩＰＥＡなどの適切な非求核性塩基とを使用して、またはＴＨＦ、ＡＣＮ、もしくはＤＭＦなどの適切な有機溶媒中で、当該技術分野において周知の様々な条件下でアミノ化することができる。より具体的には、約２当量のｔｅｒｔ−ブチル３，３−ジメチルピペラジン−１−カルボキシレートを、ＡＣＮ中の約１当量のハロゲン化アルキルＩＩおよび約１２当量のＤＩＰＥＡの存在下でマイクロ波反応容器内で１１０℃に加熱して、アルキルアミンＩＩＩを得ることができる。化合物ＩＩＩのＢｏｃ保護基は、当該技術分野において十分に記載されている酸性条件下で除去することができる。より具体的には、化合物ＩＩをＤＣＭ中の１，４−ジオキサン中の過剰のＨＣｌによって処理して、塩酸塩ＩＶを得ることができる。

【0046】

引き続く化合物ＩＶのアルキル化は、ＤＣＭ、ＡＣＮまたはＤＭＦなどの適切な有機溶媒中の、ＴＥＡ、ＤＩＰＥＡ、ピリジン、または１，８−ジアザビシクロウンデカ−７−エンなどの非求核塩基の存在下で、アルキル化条件下でのハロゲン化アルキルによる処理、例えば適切に置換されたアルキルハライドおよびアミンＩＶによる処理のような当該分野で周知の広範な条件下で行われ得る。さらに、化合物ＩＶのアルキル化は、ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、ＡＣＮ、ＤＣＭ、ＴＨＦ、またはＤＭＦなどの適切な有機溶媒中で、水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、またはシアノ水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤、および触媒量のＡｃＯＨまたはＴＦＡなどの有機酸の存在下で適切に置換されたアルデヒドを用いるなどの還元的アミノ化条件下で行われ得る。より具体的には、化合物ＩＶを約２当量のＤＩＰＥＡで処理し、続いてＤＣＭ中約２当量のナトリウムトリアセトキシボロヒドリドおよび触媒ＡｃＯＨの存在下で、３−メトキシプロピオンアルデヒドまたは４−オキソブタン酸メチルエステルで処理して、それぞれ、化合物ＶａとＶｂを得る。

【0047】

化合物ＩＶのアシル化またはスルホニル化は、当該技術分野で周知の条件下で、例えば、ＤＣＭ、ＴＨＦ、ＡＣＮ、またはＤＭＦなどの適切な有機溶媒中、過剰の適切な非求核塩基、例えばＴＥＡまたはＤＩＰＥＡを用いて塩基性条件下でアシルハライドまたはスルホニルハライドを用いて達成し得る。より具体的には、化合物ＩＶを、約１：１０のＭｅＯＨ：ＡＣＮの混合物中、約４当量のＤＩＰＥＡおよび約２当量のＮ−（４−ヒドロキシブチル）−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボキサミドヒドロクロリドで処理することができ、そしてマイクロ波反応器中１００℃で加熱して化合物Ｖｃを得る。アミンＩＶのアシル化はまた、当該技術分野において周知の標準的なアミドカップリング条件下で、例えば、ＴＥＡまたはＤＩＰＥＡなどの非求核塩基の存在下で、およびＭｅＯＨ、ＡＣＮ、ＴＨＦ、ＤＣＭ、もしくはＤＭＦ、またはそれらの組み合わせなどの適切な有機溶媒中で、ＥＤＣＩおよびＨＯＢＴ、ＨＡＴＵ、ＢＯＰ、またはＰｙＢＯＰを使用して行われ得る。より具体的には、約１．２当量の化合物ＩＶを、約０．９当量の１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンで処理し、続いて、ＤＭＦ中の、約１当量のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン、０．５当量のＨＯＢＴ、および１．２当量のＥＤＣＩで処理して、化合物Ｖｄを得ることができる。化合物ＩＶのスルホニル化は、加熱しながらＤＭＦ中の約１．５当量のビス（２−メトキシエチル）スルファモイルクロリドおよび約５当量のＴＥＡの存在下で達成することができ、化合物Ｖｅを得る。

【0048】

さらに、塩基性条件下でのアミンのイソシアネートへの求核付加による、尿素を得るためのアミンのアシル化もまた、当該技術分野において十分に記載されている。具体的には、ＤＣＭ中約４当量のＴＥＡの存在下で、約１当量の化合物ＩＶを約２当量の１−イソシアナト−４−メトキシ−ブタンで処理して化合物Ｖｆを得ることができる。

【0049】

式Ｉｘの化合物は、当該技術分野で周知のように、酸性または塩基性のいずれかの条件下で化合物Ｖのメチルエステル部分を鹸化することによって調製され得る。より具体的には、化合物Ｖａ〜ＶｆをＴＨＦ、ＭｅＯＨ、Ｈ_２Ｏ、またはそれらの適切な混合物中の約１〜５当量のＬｉＯＨで処理して、式Ｉａ〜ｆの化合物を得ることができる。これらの条件は化合物Ｖｂ中の追加のエステル部分を同時に鹸化することができる。エステル鹸化が完了した後、追加の保護基は、周知の方法によって、例えば、ジオキサン中の過剰の４ＭのＨＣｌでの化合物Ｖｅの処理によって除去することができる。さらに、追加のヘテロ原子保護アルキルアルデヒド、具体的には３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−１−プロパナールを上記のような還元的アミノ化条件下において化合物ＩＶで処理し、その場で脱保護し、そして最終的に上記のように鹸化することができる。より具体的には、３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−１−プロパナールおよび化合物ＩＶを、上記のように水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムおよび触媒ＡｃＯＨを用いて還元的アミノ化条件に処理し、その後過剰な１，４−ジオキサン中のＨＣｌを用いて、その場でシリル基を除去する。上記のように、ＬｉＯＨによって最終鹸化を行って式Ｉｇの化合物を得ることができる。
スキーム２

【化8】

【0050】

式Ｉｃの化合物の代替的な合成はスキーム２に示される。ＤＣＭ中の約１当量の４−［２−（４−アミノ−２，６−ジフルオロ−フェニル）エチル］安息香酸メチルＸＩＩと１．１当量の３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−カルボン酸（Ａｕｒｕｍ Ｐｈａｒｍａｔｅｃｈ）との混合物を、約５当量のＤＩＰＥＡの存在下で、約１．２５当量のビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリドで処理して、生成物化合物ＶＩＩを得て、当該技術分野で周知の標準条件、具体的には溶媒としての１，４−ジオキサンおよびＤＣＭ中の過剰の４ＮのＨＣｌによって脱保護して、アミン化合物ＶＩＩＩを得ることができる。溶媒としてＤＣＭを用いてピリジンの存在下でアミンＶＩＩＩを、具体的には約１．１当量の塩化３−（クロロメチル）ベンゾイルを用いる上記のようなアシル化条件に供し、化合物ＩＸを得ることができる。塩化アルキルＩＸは、当技術分野で周知の広範なアミノ化条件下で、より具体的には、上記のようなＡＣＮ／ＭｅＯＨの混合物中の約４当量のＤＩＰＥＡの存在下で、約２当量のＮ−（４−ヒドロキシブチル）−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボキサミド塩酸塩によってアミノ化して化合物Ｘを得ることができ、続いて上記のように鹸化して式Ｉｃの化合物を得ることができる。
スキーム３

【化9】

【0051】

アニリン化合物ＸＩＩの合成はスキーム３に示される。一般に、ハロゲン化アリールと置換アセチレンとの間のパラジウム−銅媒介Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａクロスカップリングは当該技術分野において周知である。具体的には、約１当量の３，５−ジフルオロ−４−ヨードアニリン（ＡｓｔａＴｅｃｈ）および約１当量の４−エチニル安息香酸メチル（Ａｌｆａ Ａｅｓａｒ）を、ＴＨＦ中の約０．４当量のビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）ジクロリドと約１０当量のＤＩＰＥＡを含む約０．０７当量のＣｕＩとの存在下で加熱してジアリールアセチレン化合物ＸＩを得、これは当該技術分野でよく記載されている標準条件下、具体的にはＴＨＦ／Ｈ_２Ｏの溶媒混合物中のパラジウム黒存在下で約６０ｐｓｉでの触媒水素化によって還元して、必要なアニリン化合物ＸＩＩを得ることができる。
スキーム４

【化10】

【0052】

スキーム４はアミンＸＶの合成を説明する。反応溶媒としてＤＣＭを用いて３当量のＤＩＰＥＡの存在下で１当量のｔ−ブチル−２，２−ジメチルピペラジン−１−カルボキシレートを約１．１当量の４−イソシアナトブタン酸メチルに求核付加すると、尿素化合物ＸＩＩＩを得ることができる。エステル部分の還元は、ＢＨ３、水素化ホウ素リチウム、および水素化ジイソブチルアルミニウムを含む、文献に十分に記載されている広範な条件を用いて達成することができる。より具体的には、１当量のエステルＸＩＩをＴＨＦ中の約３当量の水素化ホウ素リチウムで処理して還元生成物ＸＩＶを得ることができ、続いて上記のようにＢＯＣ保護基を除去すると、必要な化合物ＸＶが得られる。
スキーム５

【化11】

【0053】

スキーム５は、式Ｉｙの化合物の合成を示す。化合物ＸＶＩ中のエステル部分の加水分解は、水性、有機または二相溶媒混合物中のＮａＯＨ、ＫＯＨ、またはＬｉＯＨなどのアルカリ性塩基によるものなど、当該技術分野で周知の条件下で達成することができる。より具体的には、エステルＸＶＩを、ＴＨＦ水溶液の混合物中、５当量のＬｉＯＨで処理することができ、鹸化された酸を穏やかに酸性化すると、化合物ＸＶＩＩが得られる。その後の酸塩化物による直接アミド化は穏やかな条件下で達成することができる（Ｅ．Ｖａｌｅｕｒ ａｎｄ Ｍ．Ｂｒａｄｌｅｙ，Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．，２００９，３８，６０６−６３１）。より具体的には、酸化合物ＸＶＩＩの酸塩化物は、室温で１．２〜２．５当量のビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリドを用いてその場で生成し、続いて過剰のアンモニアで処理して所望の一級アミドＸＶＩＩＩを得ることができる。上記のようにＢＯＣ保護基を除去すると、上記の必要な化合物ＸＩＸが得られる。マスクされていないピペリジン窒素のアシル化は、当該技術分野で周知の条件下で、具体的には無水コハク酸などのアシル化剤の存在下でのＤＩＰＥＡなどの５当量の好適な非求核塩基による化合物ＸＩＸの処理によって達成されて、式Ｉｙの化合物を得ることができる。式Ｉおよび／またはＩＩの他の化合物は、適切な出発物質および必要に応じて修飾を使用して、本明細書に記載のものと類似の手順によって当業者によって調製することができる。

【化12】

【0054】

化合物Ｘの合成はスキーム６に示される。ＢＯＰＣｌ媒介アミドカップリングにより、化合物Ａが得られる。上記のようにＢＯＣ保護基を除去すると、必要な化合物Ｂが得られる。アミノ基のアシル化は、当該技術分野で周知の条件下で、具体的にはピリジンの存在下での３−（クロロメチル）−ベンゾイルクロリドによるＢの処理によって達成され、化合物Ｃを得ることができる。ベンジルクロライドを置換ピペラジンで求核置換すると、安息香酸メチルＤが得られる。上記のようなその後の鹸化により、化合物Ｘが得られる。

【0055】

調製物および実施例
以下の調製物および実施例は、本発明をさらに例示し、本発明の化合物の典型的な合成を表す。試薬および出発材料は、当業者が容易に入手可能であるか、または当業者によって容易に合成され得る。調製物および実施例は限定ではなく例示により説明され、当業者により様々な変更が行われ得ることが理解されるべきである。

【0056】

ＬＣ−ＥＳ／ＭＳはＡＧＩＬＥＮＴ（登録商標）ＨＰ１１００液体クロマトグラフィーシステムにおいて実施される。エレクトロスプレー質量分析測定（ポジティブおよび／またはネガティブモードで取得される）は、ＨＰ１１００ＨＰＬＣと連動する質量選択検出器四重極質量分析計上で行われる。ＬＣ−ＭＳ条件（低ｐＨ）：カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ（登録商標）ＧＥＭＩＮＩ（登録商標）ＮＸ Ｃ１８ ２．１×５０ｍｍ ３．５μｍ、勾配：３分間で５〜１００％Ｂ、その後０．７５分間で１００％Ｂ、または１．５分間で５〜９５％Ｂ、その後０．２５分間で９５％Ｂ、カラム温度：５０℃±１０℃、流速：１．２ｍＬ／分、溶媒Ａ：０．１％ＨＣＯＯＨを含む脱イオン水、溶媒Ｂ：０．１％ギ酸を含むＡＣＮ、波長２１４ｎｍ。代替的なＬＣ−ＭＳ条件（高ｐＨ）：カラム：ＸＴＥＲＲＡ（登録商標）ＭＳ Ｃ１８カラム２．１×５０ｍｍ、３．５μｍ、勾配：０．２５分間で５％の溶媒Ａ、３分間で５％〜１００％の勾配の溶媒Ｂ、および０．５分間で１００％の溶媒Ｂ、または３分間で１０％〜１００％の勾配の溶媒Ｂ、および０．７５分間で１００％の溶媒Ｂ、または１．５分間で５〜９５％のＢ、次いで０．２５分間で９５％のＢ、カラム温度：５０℃±１０℃、流速：１．２ｍＬ／分、溶媒Ａ：１０ｍＭのＮＨ_４ＨＣＯ_３ ｐＨ ９、溶媒Ｂ：ＡＣＮ、波長２１４ｎｍ。

【0057】

核磁気共鳴スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ ＡＶＩＩＩ ＨＤ ４００ＭＨｚ ＮＭＲ ＳｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒまたはＶａｒｉａｎ ＶＮＭＲＳ ３００ＭＨｚまたは４００ＭＨｚ ＮＭＲ Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒにおいて実施され、ｐｐｍで報告されるＣＤＣｌ_３またはＤＭＳＯ−ｄ_６溶液として得られ、標準試料として残りの溶媒［ＣＤＣｌ_３、７．２６ｐｐｍ、ＤＭＳＯ−ｄ_６、２．５０ｐｐｍ］を用いる。ピーク重複度が報告される場合、下記の略語、ｓ（一重項）、ｄ（二重項）、ｔ（三重項）、ｑ（四重項）、ｍ（多重項）、ｂｒ−ｓ（ブロードな一重項）、ｄｄ（二重の二重項）、ｄｔ（二重の三重項）が使用され得る。カップリング定数（Ｊ）は、報告されるとき、ヘルツ（Ｈｚ）で報告される。

【0058】

調製物１
４−［２−（４−アミノ−２，６−ジフルオロ−フェニル）エチニル］安息香酸メチル

【化13】

３，５−ジフルオロ−４−ヨードアニリン（１４．７ｇ、５５．９ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（０．７４５ｇ、３．９１ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリド（１．５９ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）、メチル４−エチニルベンゾエート（９．０５ｇ、５５．９ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（１１４ｍＬ）およびＴＨＦ（４４．１ｍＬ）の懸濁液を６０℃で３時間撹拌する。混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧下で蒸発乾固する。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（１００ｍＬ）を添加し、そして得られた固体を珪藻土でろ過する。ろ液からの有機層を分離し、ＭｇＳＯ_４上で乾燥し、そして減圧下で蒸発乾固する。得られた残渣にＤＣＭ：ヘプタンの１：１混合物（４００ｍＬ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌する。得られた固体をろ過により回収し、そして真空下で乾燥して、表題化合物（８．０ｇ、収率４５．８％）を褐色の固体として得る。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ ３．８６（ｓ，３Ｈ）、６．２６−６．３７（ｍ，４Ｈ）、７．５９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．９６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）。

【0059】

調製物２
４−［２−（４−アミノ−２，６−ジフルオロ−フェニル）エチル］安息香酸メチル

【化14】

５００ｍＬのＰａｒｒシェーカーにＮ_２下でＰｄ黒（０．５３ｇ、５．０ｍｍｏｌ）を充填する。ＭｅＯＨ／ＴＨＦ（２５ｍＬ）の脱気４：１溶液を添加し、続いて、Ｎ_２下で、ＭｅＯＨ／ＴＨＦの４：１混合物（２５ｍＬ）中の４−［２−（４−アミノ−２，６−ジフルオロ−フェニル）エチニル］安息香酸メチル（１．１７ｇ、３．３８ｍｍｏｌ）の脱気溶液を加える。得られた混合物をＮ_２でパージし、そしてＨ_２で６０ｐｓｉに加圧する。密封容器を４０℃で１４時間加熱する。得られた懸濁液をＮ_２下で珪藻土のパッドを通してろ過し、そして真空中で蒸発乾固する。得られた残渣を、ヘキサン／ＴＨＦの２５〜３５％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、真空下での溶媒蒸発および乾燥後に表題化合物を白色固体として得る（４０４ｍｇ、収率４０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ ２．７１−２．８３（ｍ，４Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、５．５２（ｓ，２Ｈ）、６．１０−６．１５（ｍ，２Ｈ）、７．２８（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．８５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）２９２［Ｍ＋１］。

【0060】

調製物３
４−［（４−メトキシ−４−オキソ−ブチル）カルバモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化15】

３０ｍＬのシンチレーションバイアルに、２，２−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔ−ブチル（５００ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（１２ｍＬ）を充填する。得られた溶液を氷／水浴中で冷却し、ＤＩＰＥＡ（１．２０ｍＬ、６．８５ｍｍｏｌ）を一度に添加する。ＤＣＭ（３ｍＬ）中の４−イソシアナトブタン酸メチル（４４７ｍｇ、２．９７ｍｍｏｌ）の溶液を５分間かけて滴下する。反応混合物をゆっくり室温に温め、さらに１５分間撹拌する。混合物を５％クエン酸水溶液（１００ｍＬ）とＤＣＭ（２０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（各２０ｍＬ）でさらに２回抽出する。合わせた有機抽出物を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（３０ｍＬ）で順次洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で蒸発させる。得られた残渣を、ヘキサン／アセトンの３０〜５０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、真空下での溶媒除去および乾燥後に表題化合物を無色の粘性油として得る（８４８ｍｇ、収率９５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（３９９．８ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ １．３４（ｓ，６Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、１．８３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、２．３７（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ）、３．２５−３．３０（ｍ，２Ｈ）、３．３７（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．４７（ｓ，２Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．７１（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）、４．６５−４．６８（ｍ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）３５８［Ｍ＋１］。

【0061】

調製物４
４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化16】

ＴＨＦ中のＬｉＢＨ_４の２Ｍ溶液（３．０２ｍＬ、６．０４ｍｍｏｌ）を、ｔｅｒｔ−ブチル４−［（４−メトキシ−４−オキソ−ブチル）カルバモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−カルボキシレート（７８３ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）を含む１００ｍＬの丸底フラスコに室温で滴下する。反応混合物を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を０．５ｍＬのＭｅＯＨでクエンチし、室温で２０分間撹拌し、５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（１５０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（各５０ｍＬ）でさらに２回抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で蒸発乾固させて、表題化合物を白色の固体として得る（６３４ｍｇ、収率９６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（３９９．８ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ １．３６（ｓ，６Ｈ）、１．４６（ｓ，９Ｈ）、１．５８−１．６３（ｍ，４Ｈ）、３．３１−３．２８（ｍ，２Ｈ）、３．４９（ｓ，２Ｈ）、３．６６−３．６９（ｍ，２Ｈ）、３．７１−３．７４（ｍ，２Ｈ）、３．３７−３．３９（ｍ，２Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）３３０［Ｍ＋１］。

【0062】

調製物５
Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボキサミド塩酸塩

【化17】

３０ｍＬシンチレーションバイアルに、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６３１ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）の溶液を充填する。ジオキサン中の４ＮのＨＣｌ溶液（２．４ｍＬ、９．５８ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下し、得られた溶液を室温で２時間撹拌する。揮発物を真空中で除去し、残渣を真空下で乾燥させて、さらに精製することなく次のステップで使用するのに適した表題化合物を吸湿性の白色油状固体として得る（収率１００％、定量的）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）２３０［Ｍ＋１］。

【0063】

調製物６
４−［２−［４−［［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化18】

１００ｍＬ丸底フラスコに４−［２−（４−アミノ−２，６−ジフルオロ−フェニル）エチル］安息香酸メチル（２．１１ｇ、７．２４ｍｍｏｌ）、３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，５、６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−カルボン酸（２．３７ｇ、７．９７ｍｍｏｌ）、およびＤＣＭ（６０ｍＬ）を充填する。得られた懸濁液を氷／水浴中で冷却し、ＤＩＰＥＡ（５．０５ｍＬ、２９．０ｍｍｏｌ）を滴下して、黄褐色の濁った溶液を得る。固体ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（２．３０ｇ、９．０５ｍｍｏｌ）を０℃で３０分かけて少しずつ加える。次いで反応混合物を室温に温め、２４時間撹拌する。追加の固体３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−カルボン酸（０．６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を添加し、続いて追加のＤＩＰＥＡ（１．２６ｍＬ、７．２５ｍｍｏｌ）および固体ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（０．５８ｇ、２．２６ｍｍｏｌ）を５分かけて少しずつ加える。得られた濁った褐色の反応混合物を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を５％クエン酸水溶液（１５０ｍＬ）とＤＣＭ（２５ｍＬ）との間で分配し、有機層を分離し、そして水性層をＤＣＭ（各５０ｍＬ）でさらに２回抽出する。合わせた有機抽出物を１０％ＮａＨＣＯ_３水溶液（５０ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で順次洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた褐色油状固体を、ヘキサン／（ＤＣＭ中１０％ＭＴＢＥ）の１５〜４０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製する。所望の生成物を含む収集した画分を合わせ、そして減圧下で濃縮し、そして得られた残渣をＭＴＢＥ（１５ｍＬ）と共に粉砕する。得られた固体をろ過により回収し、そして真空下で乾燥して、表題化合物（２．７５ｇ、収率６６％）を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．４４（ｓ，９Ｈ）、１．６９−１．７７（ｍ，４Ｈ）、２．５３−２．６５（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｂｒ ｓ，４Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、７．３０−７．３４（ｍ，４Ｈ）、７．８６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、９．８０（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、９．９４（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）５６９［Ｍ−１］。

【0064】

調製物７
４−［２−［４−［（２−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル）アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル塩酸塩

【化19】

３０ｍＬシンチレーションバイアルに、４−［２−［４−［［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（３５１ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（６ｍＬ）を充填する。得られた淡黄色の溶液を穏やかなＮ_２流に通過させることにより脱気する。ジオキサン中の４ＮのＨＣｌ溶液（１５５ｍＬ、６．１ｍｍｏｌ）を５分かけて滴下し、得られた溶液を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、そして得られた淡黄色残渣を最少量のＤＣＭで粉砕する。得られた固体をろ過により集め、そして真空下で乾燥して、標題化合物をオフホワイトの粉末として得る（３３７ｍｇ、収率９９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（３９９．８ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．７３−１．７５（ｍ，４Ｈ）、２．４０−２．４４（ｍ，２Ｈ）、２．５６−２．５９（ｍ，２Ｈ）、２．８５（ｓ，４Ｈ）、３．８０（ｓ，３Ｈ）、７．２６−７．２８（ｍ，４Ｈ），７．８１−７．８３（ｍ，２Ｈ）、９．２１（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）５７１［Ｍ＋１］。

【0065】

調製物８
４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化20】

２５０ｍＬ丸底フラスコ内のＤＣＭ（８０ｍＬ）中の４−［２−［４−［（２−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル）アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル塩酸塩（２．４３ｇ、４．５５ｍｍｏｌ）の懸濁液を、氷／水浴で０℃に冷却する。ピリジン（０．９２ｍＬ、１１ｍｍｏｌ）を５分間かけて撹拌しながら滴下する。得られた淡黄色溶液を０℃でさらに５分間撹拌し、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の３−（クロロメチル）ベンゾイルクロリド（０．７１ｍＬ、５．０ｍｍｏｌ）の溶液を５分かけて滴下する。反応混合物を０℃でさらに３０分間撹拌する。反応混合物を１５０ｍＬの１０％クエン酸水溶液で希釈し、室温で１時間撹拌する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（各５０ｍＬ）でさらに２回抽出する。合わせた有機抽出物を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で順次洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で蒸発させて乾燥する。得られた残渣をＥｔＯＨ（３０ｍＬ）で粉砕し、そして得られた固体をろ過により集め、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）で洗浄し、そして真空下で乾燥させて表題化合物を黄褐色固体として得る（２．６１ｇ、収率９２％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ）、１．７３−１．８１（ｍ，４Ｈ）、２．６８（ｍ，４Ｈ）、２．９２（ｓ，４Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、４．８３（ｓ，２Ｈ）、７．３２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ） ７．３８−７．３４４（ｍ，２Ｈ）、７．５６（ｔ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．６９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．８２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．８７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．９６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１０．１０（ｓ，１Ｈ）、１１．３４（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ−）６２１［Ｍ−１］。

【0066】

調製物９
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化21】

２ｍＬのマイクロ波バイアルに、ＡＣＮ（１．５ｍＬ）とＭｅＯＨ（５０μＬ）の混合物中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（５０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボキサミド塩酸塩（４２．７ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．０５６ｍＬ、０．３２ｍｍｏｌ）を充填する。得られた黄色懸濁液をＢＩＯＴＡＧＥ（登録商標）イニシエーターマイクロ波シンセサイザー内で１１０℃で４時間加熱する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）とＤＣＭ（２５ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（各２５ｍＬ）でさらに２回抽出し、合わせた有機抽出物を飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で蒸発させて乾燥する。得られた残渣を、Ｈ_２Ｏ／ＡＣＮ中の５％ＨＣＯＯＨの混合物の０％〜１００％の勾配で溶離するＣ−１８シリカ上の逆相クロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色泡状固体として得る（３０．２ｍｇ、収率４６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０５（ｓ，６Ｈ）、１．３７−１．４４（ｍ，４Ｈ）、１．８０−１．８５（ｍ，４Ｈ）、２．２５−２．２７（ｍ，２Ｈ）、２．６５−２．６７７（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｂｒ ｓ，４Ｈ）、２．９６−３．０５（ｍ，２Ｈ）、３．１２（ｓ，２Ｈ）、３．１７−３．２６（ｍ，２Ｈ）、３．３５−３．４１（ｍ，２Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、４．３６（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．３５−６．３９（ｍ，１Ｈ）、７．３２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５１−７．５６（ｍ，４Ｈ）、７．７０−７．８０（ｍ，１Ｈ）、７．８７（ｍ，３Ｈ）、１０．０１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８１６［Ｍ＋１］。

【0067】

調製物１０
４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化22】

２０ｍＬのマイクロ波反応容器に、１５ｍＬのＡＣＮ中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（１．８５ｇ、２．９７ｍｍｏｌ）、３，３−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．９１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（２．０７ｍＬ、１１．９ｍｍｏｌ）を充填する。得られた黄色懸濁液をＢＩＯＴＡＧＥ（登録商標）イニシエーターマイクロ波シンセサイザー内で１１０℃で４時間加熱する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（１５０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。得られた残渣を、ヘキサン中の９：１のＤＣＭ／アセトンの混合物の０％〜１００％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色固体として得る（１．６３ｇ、収率６９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０４（ｓ，６Ｈ）、１．３８（ｓ，９Ｈ）、１．８１−１．７４（ｍ，４Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．７０（ｂｒ ｓ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．１３（ｓ，２Ｈ）、３．２６（ｓ，２Ｈ）、３．５２（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、７．３１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ）、７．５５−７．４６（ｍ，２Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８７（ｍ，３Ｈ）、９．９９（ｓ，１Ｈ）、１１．４９（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８０１［Ｍ＋１］。

【0068】

調製物１１
４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド

【化23】

ＤＣＭ（１４．１ｍＬ）中の４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１３ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液を室温で撹拌し、ジオキサン中４ＮのＨＣｌ（３．５ｍＬ、１４．１ｍｍｏｌ）をシリンジを介して添加する。添加完了後、反応物を室温で一晩撹拌し、減圧下で濃縮乾固する。固体をＤＣＭ／Ｅｔ_２Ｏで粉砕し、得られた沈殿物を真空ろ過により集め、そしてろ過ケークを真空オーブン中５０℃で乾燥させて表題化合物を白色固体として得る（０．９３ｇ、１．２０ｍｍｏｌ、収率８５％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７０１［Ｍ＋１］。

【0069】

調製物１２
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−［ビス（２−メトキシエチル）スルファモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化24】

４ｍＬのＴＨＦ中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（１９０．８ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．１６５ｍＬ、１．１８ｍｍｏｌ）の溶液に、４ｍＬのＴＨＦ中のビス（２−メトキシエチル）スルファモイルクロリド（８７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を滴下する。得られた混合物を５０℃で１８時間加熱する。室温に冷却した後、反応混合物を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）とＤＣＭ（２５ｍＬ）の混合物で希釈する。層を分離し、水層を追加のＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で洗浄する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣を、ヘキサン中のアセトンの混合物の１０％〜３０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に所望の生成物を淡黄色固体として得る（１５０．１ｍｇ、収率７０．８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．１３（ｓ，６Ｈ）、１．８５−１．７０（ｍ，４Ｈ）、２．４３−２．３６（ｍ，２Ｈ）、２．７５−２．６５（ｍ，４Ｈ）、３．０３−２．８６（ｍ，８Ｈ）、３．２４（ｓ，６Ｈ）、３．３６−３．３２（ｍ，４Ｈ）、３．４４（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．５４（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、７．３２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５２−７．３８（ｍ，３Ｈ）、７．５６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．９１−７．８４（ｍ，３Ｈ）、１０．００（ｓ，１Ｈ）、１１．４７（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８９６［Ｍ＋１］。

【0070】

調製物１３
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−メトキシ−４−オキソ−ブチル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化25】

４ｍＬのＤＣＭ中の４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（１４８．４ｍｇ、０．１６８８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（６０μＬ、０．３４ｍｍｏｌ）および４−オキソブタン酸メチルエステル（４０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＡｃＯＨ（０．０１ｍＬ）を添加し、続いてトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０７３ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を添加する。得られた反応混合物を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）とＤＣＭ（２５ｍＬ）の混合物で希釈する。層を分離し、水層を追加のＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で洗浄する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣を、ヘキサン中の９：１のＥｔＯＨ／ＤＣＭ混合物の３５％〜４０％の勾配を使用するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に所望の生成物を淡黄色固体として得る（１３２．１ｍｇ、収率９１．８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０９（ｓ，６Ｈ）、１．７０−１．５８（ｍ，２Ｈ）、１．８７−１．７０（ｍ，４Ｈ）、２．２０−２．０９（ｍ，２Ｈ）、２．３６−２．２７（ｍ，４Ｈ）、２．６３−２．５４（ｍ，２Ｈ）、２．７５−２．６４（ｍ，４Ｈ）、２．９２（ｓ，４Ｈ）、３．３０−３．２８（ｍ，２Ｈ）、３．６５−３．５３（ｍ，５Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、７．３２（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５８−７．３７（ｍ，４Ｈ）、７．７２−７．６９（ｍ，１Ｈ）、７．９１−７．８３（ｍ，３Ｈ）、９．９９（ｓ，１Ｈ）、１１．４５（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８０１［Ｍ＋１］。

【0071】

調製物１４
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−メトキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化26】

４ｍＬのＤＣＭ中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（０．１０８ｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、３−メトキシプロピオンアルデヒド（０．０２３ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（０．０４３ｍＬ、０．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＡｃＯＨ（０．０１ｍＬ）を添加し、続いてトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．０５３ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を添加する。得られた反応混合物を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）およびＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈する。層を分離し、水層を追加のＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で洗浄する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣を、ヘキサン中のアセトンの２５％〜８０％の勾配を使用するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に所望の生成物を淡黄色固体として得る（２６．２ｍｇ、収率２７．６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １１．４４（ｍ，１Ｈ）、９．９８（ｍ，１Ｈ）、７．９２−７．８２（ｍ，３Ｈ）、７．７６−７．７０（ｍ，１Ｈ）、７．５７−７．３８（ｍ，４Ｈ）、７．３６−７．２７（ｍ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，４Ｈ）、３．２７−３．１６（ｍ，４Ｈ）、２．９７−２．８７（ｍ，４Ｈ）、２．７６−２．６４（ｍ，４Ｈ）、２．３７−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．２５−２．１５（ｍ，２Ｈ）、１．９０−１．７１（ｍ，４Ｈ）、１．６７−１．５４（ｍ，２Ｈ）、１．０９（ｓ，６Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７７３［Ｍ＋１］。

【0072】

調製物１５
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）アセチル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化27】

丸底フラスコに、４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（５００ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（２５ｍＬ）、および１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（０．１９ｍＬ、１．２７ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を短時間撹拌し、ＨＯＢＴ（１０３ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２５０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、およびＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシン（１３２ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）で処理する。混合物を、室温で１８時間、撹拌する。混合物を水（２５ｍＬ）で希釈し、得られたスラリーを室温で３時間撹拌する。得られた淡黄色固体をろ過により集め、水で洗浄し、そして風乾した。得られた粉末をＤＣＭに溶解し、無水ＭｇＳＯ_４上で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣を、ＤＣＭ中の１５％ＥｔＯＡｃで２０分間、次いで、ＤＣＭ中の２５％ＥｔＯＡｃで溶離する、シリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を得る（４５１ｍｇ、収率３８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ，ＤＭＳＯ） δ １１．５２−１１．４６（ｍ，１Ｈ）、９．９９（ｓ，１Ｈ）、７．９０−７．８６（ｍ，３Ｈ）、７．７６−７．７４（ｍ，１Ｈ）、７．５７−７．５５（ｍ，１Ｈ）、７．５２−７．４７（ｍ，１Ｈ）、７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ）、７．３３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、６．７６−６．７１（ｍ，１Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、３．８１−３．７６（ｍ，２Ｈ）、３．５７−３．５４（ｍ，２Ｈ）、３．４３−３．３８（ｍ，２Ｈ）、３．３２（ｓ，１２Ｈ，水）、３．２８−３．２２（ｍ，２Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、２．７０（ｓ，４Ｈ）、２．５１−２．５０（ｍ，１６Ｈ，ＤＭＳＯ）、２．３９−２．３５（ｍ，２Ｈ）、１．８７−１．８１（ｍ，４Ｈ）、１．４０−１．３５（ｍ，１０Ｈ）、１．２９−１．２５（ｍ，１Ｈ）、１．０７（ｄ，Ｊ＝２１．１Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８５８［Ｍ＋１］。

【0073】

調製物１６
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−メトキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化28】

３０ｍＬシンチレーションバイアル中で、ＤＣＭ（３ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（１２０ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（６３ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で撹拌し、ＤＣＭ（１ｍＬ）中の１−イソシアナト−４−メトキシ−ブタン（３０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を溶液としてシリンジを介して添加する。得られた反応混合物を室温で４時間撹拌する。反応混合物を減圧下で濃縮し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンの０〜１００％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を黄褐色泡状物として得る（１０２ｍｇ、収率７９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０３（ｓ，６Ｈ）、１．３５−１．４５（ｍ，４Ｈ）、１．６８−１．８２（ｍ，４Ｈ）、２．２１−２．２５（ｍ，２Ｈ）、２．６３−２．７０（ｍ，４Ｈ）、２．８９（ｓ，４Ｈ）、２．９５−３．０２（ｍ，２Ｈ）、３．０９５（ｓ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）；３．１５−３．２２（ｍ，２Ｈ）、３．２５−３．３０（ｍ，２Ｈ）、３．４８（ｓ，２Ｈ）、３．８１５（ｓ，３Ｈ）、６．３３４（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．３０（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ）、７．３５−７．４２（ｍ，２Ｈ）、７．４２−７．５０（ｍ，１Ｈ）、）、７．５０−７．５５（ｍ，１Ｈ）、７．７１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８３−７．８９（ｍ，３Ｈ）、９．９８１（ｓ，１Ｈ）、１１．４４（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８３０［Ｍ＋１］。

【0074】

調製物１７
４−［２−［４−［［２−［［３−［（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化29】

６０ｍＬのシンチレーションバイアルに、４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（３．９２ｇ、４．８ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（５７０ｍｇ、２４ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（２０ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）、およびＨ_２Ｏ（１０ｍＬ）を充填し、得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌する。反応混合物をＨ_２Ｏ（４０ｍＬ）で希釈し、真空中で約１／２の容積に濃縮する。得られた混合物のｐＨを１０％クエン酸水溶液で約５〜６に調整し、得られた無色の懸濁液を１５０ｍＬの水と５０ｍＬの４：１クロロホルム／イソプロパノールとの間で分配する。有機層を分離し、水層のｐＨを１０％クエン酸水溶液で再びｐＨ約５に調整し、混合物を追加の４：１クロロホルム／イソプロパノール（２×５０ｍＬ）で２回抽出する。有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そしてろ液を減圧下で濃縮して表題化合物をオフホワイトの固体として得（３．７ｇ、収率＞９９％）、それはさらなる精製をせずに次のステップで使用され得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７８７［Ｍ＋１］。

【0075】

調製物１８
４−［［３−［［３−［［４−［２−（４−カルバアモイルフェニル）エチル］−３，５−ジフルオロ−フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化30】

５００ｍＬの丸底フラスコに、ＤＣＭ（７５ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸の溶液（３．５０ｇ、４．４５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（３．１ｍＬ、１７．８ｍｍｏｌ）を充填する。この溶液に、固体ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（１．４ｇ、５．３ｍｍｏｌ）を１０分かけて少しずつ添加し、得られた懸濁液を室温で１０分間撹拌する。１，４−ジオキサン中０．５ＭのＮＨ_３溶液（４０ｍＬ、２２．２５ｍｍｏｌ）を一度に添加し、得られた懸濁液を室温で２時間撹拌する。追加のビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（０．７ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を５分かけて少しずつ添加し、得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌しつつ放置する。再び、追加のビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（０．７ｇ、２．７ｍｍｏｌ）を少量ずつ５分かけて再び加え、得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌したままにする。得られた反応混合物を３００ｍＬの５％ＮａＨＣＯ_３水溶液と５０ｍＬのＤＣＭとの間で分配する。層を分離し、水層を追加のＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で２回抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして真空下で濃縮乾固する。得られた黄色泡状残渣をアセトン／ＤＣＭの１０〜１２％の勾配で溶離し、次いで移動相を３５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭに切り替えるシリカ上のクロマトグラフィーにより精製する。所望の生成物を含む収集した画分を合わせ、そして減圧下で濃縮し、そして残渣をＤＣＭと共に粉砕する。得られた固体をろ過により回収し、そして真空下で乾燥して、表題化合物を得る。粉砕ろ液を回収し、真空中で蒸発乾固する。得られた残渣を、ＤＣＭ中のＭｅＯＨの５〜１０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、所望の生成物を含む集めた画分を合わせて蒸発させ、最初の精製から得られた物質に添加し、表題化合物を淡黄色の固体として得る（２．４３ｇ、収率７０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０５（ｓ，６Ｈ）、１．３９（ｓ，９Ｈ）、１．６８−１．９０（ｍ，４Ｈ）、２．２９（ｍ，２Ｈ）、２．７０（ｍ，４Ｈ）、２．８９（ｍ，４Ｈ）、３．１４（ｓ，２Ｈ）、３．２８（ｓ，２Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、７．１６−７．３４（ｍ，３Ｈ）、７．３６−７．５８（ｍ，４Ｈ）、７．６８−７．７３（ｍ，３Ｈ）、７．９０（ｍ，２Ｈ）、１０．００（ｓ，１Ｈ）、１１．４９（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７８６［Ｍ＋１］。

【0076】

調製物１９
Ｎ−［４−［２−（４−カルバモイルフェニル）エチル］−３，５−ジフルオロ−フェニル］−２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボキサミドジヒドロクロリド

【化31】

２５０ｍＬの丸底フラスコ中のＤＣＭ（８０ｍＬ）とＭｅＯＨ（８ｍＬ）の混合物中の４−［［３−［［３−［［４−［２−（４−カルバアモイルフェニル）エチル］−３，５−ジフルオロ−フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．４３ｇ、３．１ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下で十分に脱気し、１，４−ジオキサン中の４ＮのＨＣｌ溶液（１６ｍＬ、６２ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下する。得られた溶液を室温で１２時間撹拌する。揮発物を真空中で除去して、表題化合物を黄色の吸湿性固体として得て（２．４５ｇ、＞９９％）、これはさらに精製することなく次のステップで使用することができる。

【0077】

調製物２０
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［（２，２，４−トリメチルピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化32】

５ｍＬのマイクロ波反応容器に、３ｍＬのＡＣＮ中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（２２５ｍｇ、３６１ｍｍｏｌ）、および１，３，３−トリメチルピペラジン−１−カルボン酸（６５ｍｇ、０．４８８ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（０．２５ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）を充填する。得られた黄色懸濁液をＢＩＯＴＡＧＥ（登録商標）イニシエーターマイクロ波シンセサイザー内で１１０℃で３時間加熱する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）とＤＣＭ（２５ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。得られた残渣を、ＭＴＢＥ中のｄｃｍ中の１０％の７ＮのＮＨ_３／ＭｅＯＨの混合物の２０％〜５０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色固体として得る（１９５ｍｇ、収率７６％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．１１（ｔｗｏ ｓ，６Ｈ）．１．９０−１．６４（ｍ，４Ｈ）、２．２５−１．９４（ｍ，４Ｈ）、２．４０−２．２６（ｍ，２Ｈ）、２．５０（残留ｄｍｓｏ共鳴下、３Ｈ）、２．７９−２．６０（ｂｒ ｓ，４Ｈ）、２．９２（ｓ，４Ｈ）、３．７７−３．７６（ｂｒ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、７．３２（ｍ，２Ｈ）、７．６０−７．３６（ｍ，４Ｈ）、７．７９−７．６７（ｍ，１Ｈ）、７．８７（ｍ，３Ｈ）、９．９９（ｓ，１Ｈ）、１１．４６（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７１５［Ｍ＋１］。

【0078】

調製物２１
４−［（３−メトキシ−３−オキソ−プロピル）カルバモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化33】

２０ｍＬシンチレーションバイアルに、ＤＣＭ（１２ｍＬ）中の２，２−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５００ｍｇ、２．２９ｍｍｏｌ）の溶液を充填し、氷浴で冷却する。冷却しながら、ＤＩＰＥＡ（１．２０ｍＬ、６．８６ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＤＣＭ（３ｍＬ）中の３−イソシアナトプロパン酸メチル（４０４ｍｇ、２．９７ｍｍｏｌ）の溶液を５分間かけて滴下する。得られた混合物を室温に温め、室温で１５分間撹拌する。反応混合物を５％クエン酸水溶液（１００ｍＬ）およびＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈し、層を分離する。水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣を、ヘキサン中のアセトンの３０％〜５３％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を無色の濃い油状物として得る（７２６ｍｇ、物質は約１０％の残留ＤＣＭを含む、収率８３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（３９９．８ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ １．３４（ｓ，６Ｈ）、１．４５（ｓ，９Ｈ）、２．５８−２．４８（ｍ，２Ｈ）、３．３７（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２Ｈ）、３．５４−３．４３（ｍ，４Ｈ）、３．７５−３．６２（ｍ，５Ｈ）、５．０８−４．９９（ｍ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）３４４［Ｍ＋１］。

【0079】

調製物２２
３−［（３，３−ジメチルピペラジン−１−カルボニル）アミノ］プロパン酸メチル塩酸塩

【化34】

ＤＣＭ（７ｍＬ）中の４−［（３−メトキシ−３−オキソ−プロピル）カルバモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２５０ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）の溶液を含む２０ｍＬのシンチレーションバイアルに、ジオキサン中の４Ｎの塩酸（１．６３ｍＬ、６．５４ｍｍｏｌ）を撹拌しながら滴下する。得られた懸濁液を室温で１時間撹拌し、真空中で濃縮し、そして残渣を真空下で乾燥して表題化合物を白色の吸湿性固体として得て、それをそのままで次のステップに使用する。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）２４４［Ｍ＋１］。

【0080】

調製物２３
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−メトキシ−３−オキソ−プロピル）カルバモイル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化35】

５ｍＬのマイクロ波反応容器に、３ｍＬのＡＣＮと０．５ｍＬのＭｅＯＨの混合物中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（１８０ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、３−［（３，３−ジメチルピペラジン−１−カルボニル）アミノ］プロパン酸メチルヒドロクロリド（１６２ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）の溶液、およびＮ，Ｎ−ＤＩＰＥＡ（０．２０２ｍＬ、１．１６ｍｍｏｌ）を充填する。得られた黄色懸濁液をＢＩＯＴＡＧＥ（登録商標）イニシエーターマイクロ波シンセサイザー内で１１０℃で３時間加熱する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）とＤＣＭ（２５ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１５〜８０％の勾配で１５分間溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡橙色固体として得る（８１ｍｇ、収率３４％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８３０［Ｍ＋１］。

【0081】

調製物２４
３−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化36】

２０ｍＬのマイクロ波反応容器に、ＡＣＮ（１２ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（１．８０ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）、および３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７６０ｍｇ、３．４７ｍｍｏｌ）の溶液、およびＤＩＰＥＡ（１．０１ｍＬ、５．７８ｍｍｏｌ）を充填する。得られた黄色懸濁液をＢＩＯＴＡＧＥ（登録商標）イニシエーターマイクロ波シンセサイザー内で１１０℃で１時間加熱する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（１５０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。得られた残渣を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃの１５％〜４５％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色固体として得る（２．２３ｇ、収率９７％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．３８（ｓ，９Ｈ）、１．９５−１．６０（ｍ，８Ｈ）、２．１６（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．５７（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．７０（ｂｒ ｓ，４Ｈ）、２．９２（ｓ，４Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、４．０８−３．９６（ｍ，２Ｈ）、７．３５−７．２６（ｍ，２Ｈ）、７．４５−７．３５（ｍ，２Ｈ）、７．５８−７．４５（ｍ，２Ｈ）、７．７９−７．７２（ｍ，１Ｈ）、７．９２−７．７９（ｍ，３Ｈ）、１０．００（ｓ，１Ｈ）、１１．４１（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７９９［Ｍ＋１］。

【0082】

調製物２５
４−［２−［４−［［２−［［３−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イルメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル二塩酸塩

【化37】

Ｎ_２下で、ＤＣＭ（４５ｍＬ）中の３−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．２３ｇ、２．７９ｍｍｏｌ）の溶液を含む２５０ｍＬのＲＢＦに、ジオキサン中の４Ｎの塩酸（７．０ｍＬ、２８ｍｍｏｌ）を撹拌しながら滴下する。得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌し、真空中で濃縮し、そして残渣を真空下で乾燥して表題化合物を淡黄色固体として得て、それをそれ以上精製することなく次のステップで使用する。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）６９９［Ｍ＋１］。

【0083】

調製物２６
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（メチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化38】

２０ｍＬシンチレーションバイアルに、４−［２−［４−［［２−［［３−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イルメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（１．０４ｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（８ｍＬ）、およびＴＥＡ（０．８９ｍＬ、６．４ｍｍｏｌ）を充填する。得られた懸濁液を、全ての固形物が溶解するまで室温で撹拌する。２ｍＬのＤＣＭ中の塩化メチルアミノホルミル（１４４ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）の溶液を撹拌しながら滴下し、撹拌をさらに１５分間継続する。反応混合物を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（１５０ｍＬ）およびＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、層を分離する。水層をＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣を、５分間かけてＡＣＮ中の１０ｍＭの重炭酸アンモニウム中の５％ＭｅＯＨの混合物の１０〜２０％の勾配で溶離し、１５分かけてＡＣＮ中の１０ｍＭの重炭酸アンモニウム中の５％ＭｅＯＨの混合物の２０〜８０％の勾配で溶離する、Ｃ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後にオフホワイトの固体として表題化合物を得る（５３ｍｇ、収率６８％）。混合物の少量成分としての標題化合物を黄緑色の固体として単離した（１７７ｍｇ、収率１７％）。物質は、追加の精製をせずに次のステップで使用される。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７５２［Ｍ＋１］。

【0084】

調製物２７
４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化39】

ＤＣＭ（５ｍＬ）中の４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４８０ｍｇ、０．５９９ｍｍｏｌ）の溶液を室温で撹拌し、ジオキサン中４ＮのＨＣｌ（４ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）をシリンジを介して添加する。添加完了後、反応物を室温で２時間撹拌し、その間に沈殿物が形成した。得られた混合物を真空中で濃縮して淡黄色の固体とし、次いで周囲温度で１６時間高真空下でさらに乾燥させて、４６４ｍｇの中間体ヒドロクロリドを淡黄色の固体として得る。この固体を飽和重炭酸ナトリウムと酢酸エチルとの間で分配する。層を分離し、水性部分を追加量の酢酸エチルで洗浄する。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、デカントし、次いで真空中で濃縮し、そして真空下５５℃で１６時間乾燥させ、表題生成物を黄褐色の固体として得る（３２３ｍｇ、０．４６１ｍｍｏｌ、収率７７％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７０１［Ｍ＋１］。

【0085】

調製物２８
４−［２−［４−［［２−［［３−［（４−アセチル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化40】

ジクロロメタン（１０ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（２２６ｍｇ、０．３２２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で撹拌し、塩化アセチル（４６μＬ、０．６４５ｍｍｏｌ）で処理する。得られた混合物に、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５ｍＬ）をゆっくり添加する。混合物を室温で１時間急速に撹拌してから飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０ｍＬ）およびジクロロメタン（１５ｍＬ）で希釈する。層を分離し、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥する。混合物をろ過し、ろ過ケークをジクロロメタンでろ過する。得られたろ液を真空乾燥する。粗生成物をアイソクラチック条件下で３：１の酢酸エチル／ヘキサンで溶離する順相フラッシュクロマトグラフィーにより精製し、２４０ｎＭの画分を集める。生成物含有画分をプールし、そして真空中で濃縮して、表題生成物を淡黄色固体として得る（１６９ｍｇ、２２７ｍｍｏｌ、収率７１％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７４１［Ｍ−１］。

【0086】

調製物２９
４−（２，６−ジフルオロ−４−（２−（３−（（（１Ｒ，５Ｓ）−８−ペンタノイル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル）ベンズアミド）））−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド）フェネチル）安息香酸メチル

【化41】

２．６０ｍＬのＤＣＭ中のメチル４−（４−（２−（３−（（（１Ｒ，５Ｓ）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル）ベンズアミド））−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド）−２，６−ジフルオロフェネチル）安息香酸メチルジヒドロクロリド（２００ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．１４５ｍＬ、４．０当量、１．０４ｍｍｏｌ）の溶液に、０．５ｍＬのＤＣＭに溶解した塩化ペンタノイル（８７ｍｇ、１．５当量、０．３９ｍｍｏｌ）を注射器を介して添加する。得られた混合物を室温で６時間撹拌する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を水（１５ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固させて、所望の生成物を淡黄色固体として得る（２１４ｍｇ、収率１００％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７８３［Ｍ＋１］。

【0087】

調製物３０
４−（４−（２−（３−（（（１Ｒ，５Ｓ）−８−（ジメチルグリシル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル）ベンズアミド）））−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド）−２，６−ジフルオロフェネチル）安息香酸メチル

【化42】

ＤＣＭ（２．６ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イルメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル；ジヒドロクロリド（２００ｍｇ、０．２５９２ｍｍｏｌ）、２−（ジメチルアミノ）酢酸（４０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４当量、１．０３７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（７４ｍｇ、１．５当量、０．３９ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシ−７−アゾベンゾトリアゾール（５３ｍｇ、１．５当量、０．３９ｍｍｏｌ）の溶液を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を水（１５ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。残渣をカラムクロマトグラフィー（０〜５％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製して、所望の生成物を淡黄色固体として得る（１３５ｍｇ、収率６６％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７８５［Ｍ＋１］。

【0088】

調製物３１
４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸メチル

【化43】

３ｍＬのＤＣＭ中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（２００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．１４６ｍＬ、１．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｍＬのＤＣＭ中のメチルクロロホルメート（３６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を滴下する。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈して希釈し、水で分配する。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。全ての有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮した。得られた残渣を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃの混合物の０〜３０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に所望の生成物を黄褐色泡状物として得る（１５７ｍｇ、収率８０％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７５７［Ｍ−１］。

【0089】

調製物３２
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルスルファモイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化44】

３ｍＬのＤＣＭ中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（２０１ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（０．１４６ｍＬ、１．０３ｍｍｏｌ）の溶液に、１ｍＬのＤＣＭ中のＮ−メチルスルファモイルクロリド（５０ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を滴下する。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈して希釈し、水で分配する。生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。全ての有機相を合わせ、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮した。得られた残渣を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃの混合物の０〜５０％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に所望の生成物を黄褐色泡状物として得る（５５ｍｇ、収率２７％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７９２［Ｍ−１］。

【0090】

調製物３３
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−［１−（メトキシメチル）シクロプロパンカルボニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化45】

ＤＣＭ（２．６ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イルメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル；ジヒドロクロリド（１５０ｍｇ、０．１９４ｍｍｏｌ）、１−（メトキシメチル）シクロプロパンカルボン酸（３０ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（４当量、０．９７２ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（５６ｍｇ、１．５当量、０．２９ｍｍｏｌ）、および１−ヒドロキシ−７−アゾベンゾトリアゾール（３９ｍｇ、１．５当量、０．２９ｍｍｏｌ）の溶液を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を水とＥｔＯＡｃとの間で分配する。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。残渣をカラムクロマトグラフィー（０〜１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、所望の生成物を白色泡状物として得る（１２８ｍｇ、収率８１％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８１０［Ｍ−１］。

【0091】

調製物３４
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化46】

ＤＭＦ（２．６ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イルメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル；ジヒドロクロリド（２００ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、２−（４−メチルピペラジン−１−イル）酢酸（６２ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）、ヒューニッヒ塩基（０．１７ｇ、１．３０ｍｍｏｌ）、およびＨＡＴＵ（１２７ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で一晩撹拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を水とＥｔＯＡｃとの間で分配する。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。残渣をカラムクロマトグラフィー（０〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製して、所望の生成物を白色の泡状物として得た（２２０ｍｇ、収率１００％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８４０［Ｍ＋１］。

【0092】

以下の調製物３５〜４１を調製物２９と実質的に同様の方法で調製する。

【0093】

調製物３５

【化47】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（テトラヒドロピラン−４−イルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル
４−イソシアントテトラヒドロピランを用いて調製、収率５２％、ＭＳ（ｍ／ｚ）８２４［Ｍ−１］

【0094】

調製物３６

【化48】

４−［２−［４−［［２−［［３−［（８−アセチル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル
塩化アセチルを用いて製造、収率８３％、ＭＳ（ｍ／ｚ）７４１［Ｍ＋１］

【0095】

調製物３７

【化49】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メトキシエチルスルホニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル
塩化２−メトキシエタンスルホニルを用いて調製、収率６４％、ＭＳ（ｍ／ｚ）８２０［Ｍ−１］

【0096】

調製物３８

【化50】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メトキシエチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル
１−イソシアナト−２−メトキシ−エタンを用いて調製、収率９５％、ＭＳ（ｍ／ｚ）８００［Ｍ＋１］

【0097】

調製物３９

【化51】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（４−メトキシブチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル
１−イソシアナト−４−メトキシ−ブタンを用いて調製、収率９０％、ＭＳ（ｍ／ｚ）８２７［Ｍ−１］

【0098】

調製物４０

【化52】

４−［２−［４−［［２−［［３−［［８−［ビス（２−メトキシエチル）カルバモイル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル
Ｎ，Ｎ−ビス（２−メトキシエチル）カルバモイルクロリドを用いて調製、収率５４％、ＭＳ（ｍ／ｚ）８５７［Ｍ−１］

【0099】

調製物４１

【化53】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メチルプロパノイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル
塩化２−メチルプロパノイルを用いて調製、収率１００％、ＭＳ（ｍ／ｚ）７６７［Ｍ−１］

【0100】

調製物４２
４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

【化54】

２０ｍＬのマイクロ波反応容器に、１５ｍＬのＡＣＮ中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（１．８５ｇ、２．９７ｍｍｏｌ）、３，３−ジメチルピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（０．９１ｇ、４．１６ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡ（２．０７ｍＬ、１１．９ｍｍｏｌ）を充填する。得られた黄色懸濁液をＢＩＯＴＡＧＥ（登録商標）イニシエーターマイクロ波シンセサイザー内で１１０℃で４時間加熱する。反応混合物を真空中で濃縮し、残渣を５％ＮａＨＣＯ_３水溶液（１５０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）との間で分配する。有機層を分離し、水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮乾固する。得られた残渣を、ヘキサン中の９：１のＤＣＭ／アセトンの混合物の０％〜１００％の勾配で溶離するシリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色固体として得る（１．６３ｇ、収率６９％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０４（ｓ，６Ｈ）、１．３８（ｓ，９Ｈ）、１．８１−１．７４（ｍ，４Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．７０（ｂｒ ｓ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．１３（ｓ，２Ｈ）、３．２６（ｓ，２Ｈ）、３．５２（ｓ，２Ｈ）、３．８４（ｓ，３Ｈ）、７．３１（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ）、７．５５−７．４６（ｍ，２Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８７（ｍ，３Ｈ）、９．９９（ｓ，１Ｈ）、１１．４９（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８０１［Ｍ＋１］。

【0101】

調製物４３
４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル二塩酸塩

【化55】

ＤＣＭ（１４．１ｍＬ）中の４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１．１３ｇ、１．４１ｍｍｏｌ）の溶液を室温で撹拌し、ジオキサン中４ＮのＨＣｌ（３．５ｍＬ、１４．１ｍｍｏｌ）をシリンジを介して添加する。添加完了後、反応物を室温で一晩撹拌し、減圧下で濃縮乾固する。固体をＤＣＭ／Ｅｔ_２Ｏで粉砕し、得られた沈殿物を真空ろ過により集め、そしてろ過ケークを真空オーブン中５０℃で乾燥させて表題化合物を白色固体として得る（０．９３ｇ、１．２０ｍｍｏｌ、収率８５％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７０１［Ｍ＋１］。

【0102】

調製物４４
４−［２−［４−［［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化56】

丸底フラスコに、２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ベンゾチオフェン−３−カルボン酸（２．６０ｇ、８．８７ｍｍｏｌ）、４−［２−（４−アミノ−２，６−ジフルオロ−フェニル）エチル］安息香酸メチル（２．３５ｇ、８．０７ｍｍｏｌ）、および３０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２を充填する。得られた懸濁液を氷／水浴中で冷却し、ＤＩＰＥＡ（５．６３ｍＬ、３２．３ｍｍｏｌ）を滴下して、黄褐色の濁った溶液を得る。固体ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（２．５７ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）を０℃で３０分かけて少しずつ加える。次いで反応混合物を室温に温め、４８時間撹拌する。追加の固体３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ベンゾチオフェン−３−カルボン酸（１．３ｇ、４．４３ｍｍｏｌ）を添加し、続いて追加のＤＩＰＥＡ（２．８ｍＬ）および固体ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド（１．３ｇ、５．１ｍｍｏｌ）を５分かけて少しずつ加える。得られた濁った褐色の反応混合物を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を４０ｍＬの塩化メチレンで希釈し、次いで５％クエン酸水溶液（１５０ｍＬ）、ブライン（２×２５ｍＬ）で洗浄する。有機層を分離し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた褐色泡状固体をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して表題化合物（２．２ｇ、収率４８％）を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）５６５［Ｍ−１］。

【0103】

調製物４５
４−［２−［４−［（２−アミノベンゾチオフェン−３−カルボニル）アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル塩酸塩

【化57】

丸底フラスコに、３０ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２中の４−［２−［４−［［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（２．２ｇ、３．９ｍｍｏｌ）を充填する。ジオキサン中４ＮのＨＣｌ（９．７ｍＬ、３９ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で１２時間静置する。淡黄色の懸濁液を真空下で濃縮乾固して２．０ｇ（１００％）の表題化合物を得た。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）４６７［Ｍ＋１］。

【0104】

調製物４６
４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化58】

丸底フラスコに、２４ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２中の４−［２−［４−［（２−アミノベンゾチオフェン−３−カルボニル）アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル；ヒドロクロリド（２ｇ、３．９７６ｍｍｏｌ）を充填する。得られた懸濁液を氷浴中で０℃に冷却する。ピリジン（０．８０４ｍＬ、９．９４０ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた黄色懸濁液に、６ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２中の３−（クロロメチル）−ベンゾイルクロリド（０．６２２ｍＬ、４．３７４ｍｍｏｌ）の溶液を５分間かけて滴下して添加し、暗黄色溶液を得た。それを室温まで１時間温める。反応混合物を７５ｍＬの１０％ＮａＨＣＯ_３水溶液で希釈する。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（２×２５ｍＬ）で洗浄する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮する。粗生成物を２０ｍＬのＥｔＯＨを用いて粉砕する。得られたスラリーを室温で３０分間撹拌し、次いでろ過して２．２ｇ（８９％）の表題化合物を淡黄色の固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）６１７［Ｍ−１］。

【0105】

調製物４７
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化59】

マイクロ波フラスコに、１２ｍＬのＣＨ_３ＣＮ中の４−［２−［４−［［２−［［３−（クロロメチル）ベンゾイル］−アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（０．９８ｇ、１．６ｍｍｏｌ）、Ｎ−（４−ヒドロキシブチル）−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボキサミド；ヒドロクロリド（０．５９ｇ、２．２ｍｍｏｌ）、およびＤＩＰＥＡの溶液（１．１ｍＬ、６．３ｍｍｏｌ）を充填する。反応混合物をマイクロ波で４時間１１０℃で加熱する。得られた黄色溶液を室温に冷却し、真空下で濃縮乾固する。残渣を２５ｍＬのＣＨ_２Ｃｌ_２と７５ｍＬの５％ＮａＨＣＯ_３水溶液の間で分配する。有機層をブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮する。１．３ｇ（１００％）の表題化合物が黄色泡状固体として得られる。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８１２［Ｍ＋１］。

【0106】

実施例１
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸

【化60】

３０ｍＬシンチレーションバイアルに、４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（１９６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム一水素化物（１７．２ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（４ｍＬ）、ＭｅＯＨ（２ｍＬ）、およびＨ_２Ｏ（２ｍＬ）を充填する。得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌する。反応混合物を４ｍＬのＨ_２Ｏで希釈し、減圧下で約１／２の容積に濃縮する。１ＮのＨＣｌ水溶液を滴下して濃いオフホワイトの懸濁液を得、これを真空中で蒸発乾固させる。得られた残渣を、Ｈ_２Ｏ／ＡＣＮ中の５％ＮＨ_４ＨＣＯ_３の混合物の０％〜１００％の勾配で溶離するＣ−１８シリカ上の逆相クロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色固体として得る（８２．５ｍｇ、収率４１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０５（ｓ，６Ｈ） １．３７−１．４２（ｍ，４Ｈ）、１．７４−１．８５（ｍ，４Ｈ）、２．２５−２．３０（ｍ，２Ｈ）、２．６４−２．７６（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、２．９６−３．０２（ｍ，２Ｈ）、３．１２−３．１５（ｍ，２Ｈ）、３．１７−３．２５（ｍ，２Ｈ）、３．３５−３．４０（ｍ，２Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、４．３６（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ）、６．３６（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ）、７．３０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．４５−７．５５（ｍ，４Ｈ）、７．７４−７．７９（ｍ，１Ｈ）、７．８４−７．８７（ｍ，４Ｈ）、１０．０１（ｓ，１Ｈ）、１１．４５（ｓ，１Ｈ）、１２．８２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８０２［Ｍ＋１］。

【0107】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムの噴霧乾燥固体分散体は、３０％の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウム、および７０％のＰＶＰ−ＶＡ（ポリビニルピロリドン−ビニルアセテート）を含む非晶質生成物として調製される。全ての物質はイオン交換クロマトグラフィーにより試験され、そして意図された化学量論と一致することが示される。蒸発光散乱検出（ＥＬＳＤ）を用いた陽イオン交換クロマトグラフィーを用いて、活性医薬成分（ＡＰＩ）である４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、およびこの活性医薬成分の固体分散体製剤中のナトリウムのレベルを定量する。陽イオン交換クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は以下の条件下で実施される：ＥＬＳＤ：６０℃、ポンプ：２．０ｍＬ／分、窒素：１．４Ｌ／分、カラム温度：３０℃、カラム：ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ（登録商標）ＬＵＮＡ（登録商標）５μ ＳＣＸ １００Ａ（１５ｃｍ×４．６ｍｍ、５μｍ）、注入量：５０μＬ、移動相Ａ：０．１Ｍギ酸アンモニウム緩衝液、ｐＨ４．５、移動相Ｂ：１００％ＡＣＮ、実行時間：４分。

【0108】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムのスケールアップは、１２６ｍｇの４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、遊離塩基を、１０００ｒｐｍで撹拌しながら６０℃で５ｍＬのアセトン中に入れて実施され、白色固体のスラリーを得る。１８μＬの水酸化ナトリウム（２．１７当量）を添加する。試料は黄色に変わり、偏光顕微鏡法は半アモルファス固体を示す。黄色の固体を真空ろ過により単離して、鮮黄色の物質のケークを得る。１０２ｍｇが回収される。粉末Ｘ線回折（ＸＲＤ）は結晶性の低い固体を示す。

【0109】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウムの固体分散体は、３０％の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、二ナトリウム／７０％ＰＶＰ−ＶＡとして製剤化される。４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸の３０％の薬物充填を含む噴霧乾燥固体分散体のスケールアップは、１０４０．５ｍｇの４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、遊離塩基および２４２６．７ｍｇのＰＶＰ−ＶＡを５０ｍＬのメタノールに入れることによって実施される。物質を攪拌して白色スラリーを得る。０．５１９ｍＬの５Ｎの水酸化ナトリウム（２．０モル当量）をスラリーに添加し、透明な黄色の溶液が形成されるまで浴で超音波処理する。この溶液を熱い窒素流と共に噴霧乾燥機にゆっくりとポンプで送り込み、その結果得られる固体粉末を集め、そしてさらに５０℃の真空オーブン中で一晩真空乾燥して乾燥させる。
噴霧乾燥の条件は以下の通りである。

【表1】

【0110】

回収された噴霧乾燥物質は、直径が約２．５μｍの微視的に非複屈折性の粒子であることが観察された。

【0111】

活性医薬成分および活性医薬成分の固体分散製剤中のナトリウムの観察されたレベルを以下に示す：

【表2】

【0112】

実施例２
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−ヒドロキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸

【化61】

ＤＣＭ（４ｍＬ）中のＤＣＭ（４ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（２１４．６ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．０９７ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）の溶液に３−［（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ］−１−プロパノール（５５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）およびＡｃＯＨ（２５μＬ）を添加する。得られた溶液を室温で３０分間撹拌する。トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（０．１２ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を一度に添加する。混合物を室温で１２時間撹拌し、１０％ＮａＨＣＯ_３水溶液（７５ｍＬ）およびＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈し、層を分離する。水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた残渣をＤＣＭ（３ｍＬ）に溶解し、１，４−ジオキサン中の４ＭのＨＣｌを添加する。得られた溶液を室温で２４時間撹拌する。有機溶媒を減圧下で除去して黄色固体を得る。物質をＭｅＯＨ（２ｍＬ）に溶解し、ＬｉＯＨ（０．３６ｇ、１．４ｍｍｏｌ）を添加する。得られた混合物を室温で１６時間撹拌し、Ｈ_２Ｏ（４ｍＬ）で希釈し、減圧下で体積の約５０％に濃縮する。１ＮのＨＣｌ水溶液を添加し（５ｍＬ）、混合物を減圧下で濃縮する。得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＣＨ_３ＣＮの混合物の１５〜２０％の勾配で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＣＨ_３ＣＮの混合物の２０〜５０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に一ギ酸塩として表題化合物を、黄色の固体として得る（７３ｍｇ、収率３３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．１０（ｓ，６Ｈ）、１．５５（五重線，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ）、１．８５−１．６９（ｍ，４Ｈ）、２．４１−２．０９（ｍ，８Ｈ）、２．８１−２．６１（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．６５−３．３６（ｍ，４Ｈ）、７．２９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ）、７．５７−７．３６（ｍ，４Ｈ）、７．７５−７．７２（ｍ，１Ｈ）、７．９４−７．８０（ｍ，３Ｈ）、８．１５（ｓ，１Ｈ）、１１．１−９．１（ｂｒ，３Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７４５［Ｍ＋１］。

【0113】

実施例３
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−［ビス（２−メトキシエチル）スルファモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル

【化62】

ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏの２：１：１混合物（６ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−［ビス（２−メトキシエチル）スルファモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（１４８．４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＬｉＯＨ（０．０１６ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）を室温で１２時間撹拌する。反応混合物をＨ_２Ｏ（２ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１／３の容積に濃縮し、そして１ＮのＨＣｌ（４ｍＬ）を添加する。その後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＣＨ_３ＣＮの混合物の１５〜２０％の勾配で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＣＨ_３ＣＮの混合物の２０〜５０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色の固体として得る（９９．０ｍｇ、収率６７．８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．１３（ｓ，６Ｈ）、１．８７−１．７０（ｍ，４Ｈ）、２．４４−２．３６（ｍ，２Ｈ）、２．７６−２．６４（ｍ，４Ｈ）、３．０２−２．９１（ｍ，８Ｈ）、３．２４（ｓ，６Ｈ）、３．３６−３．３１（ｍ，４Ｈ）、３．４４（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，４Ｈ）、３．５４−３．４９（ｂｒ ｓ，２Ｈ）、７．３０（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５９−７．３９（ｍ，４Ｈ）、７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．９０−７．８１（ｍ，３Ｈ）、１０．０１（ｓ，１Ｈ）、１１．４７（ｓ，１Ｈ）、１２．８３（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８８３［Ｍ＋１］。

【0114】

実施例４
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−（３−カルボキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化63】

ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏの２：１：１混合物（４ｍＬ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−メトキシ−４−オキソ−ブチル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ−チオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（１２０．８ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびＬｉＯＨ（０．０１７ｇ、０．７１ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１２時間撹拌する。得られた溶液をＨ_２Ｏ（２ｍＬ）で希釈し、次いで減圧下で約１／３の容積に濃縮する。１ＮのＨＣｌ水溶液（４ｍＬ）を添加し、そして溶媒を減圧下で除去する。得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＣＨ_３ＣＮの混合物の１５〜２０％の勾配で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＣＨ_３ＣＮの混合物の２０〜５０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色の固体として得る（７２．５ｍｇ、収率６２．３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．１１（ｓ，６Ｈ）、１．６８−１．５５（ｍ，２Ｈ）、１．８８−１．６９（ｍ，４Ｈ）、２．４０−２．０３（ｍ，１０Ｈ）、２．７９−２．６１（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．７０−３．４０（ｍ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５８−７．３６（ｍ，４Ｈ）、７．７９−７．６９（ｍ，１Ｈ）、７．９２−７．７９（ｍ，３Ｈ）、１０．００（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１２．５４（ｂｒ，２Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７７３［Ｍ＋１］。

【0115】

実施例５
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−メトキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、ギ酸塩

【化64】

ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏの２：１：１混合物（４ｍＬ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（３−メトキシプロピル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（２２．７ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）およびＬｉＯＨ（７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１６時間撹拌する。得られた混合物をＨ_２Ｏ（３ｍＬ）で希釈し、そして減圧下で約１／２の容積に濃縮する。１ＮのＨＣｌ水溶液（５ｍＬ）を添加し、そして溶媒を減圧下で除去する。得られた残渣を、１０分間の１５％〜７０％の勾配で溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色固体として得る（１６．２ｍｇ、収率６８．３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．１１（ｓ，６Ｈ）、１．６８−１．５５（ｍ，２Ｈ）、１．８８−１．６９（ｍ，４Ｈ）、２．４３−２．０７（ｍ，６Ｈ）、２．７９−２．６２（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．２０（ｓ，３Ｈ）、３．６２−３．２３（ｍ，６Ｈ）、７．２９（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ）、７．５８−７．３６（ｍ，４Ｈ）、７．７９−７．６８（ｍ，１Ｈ）、７．８５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，３Ｈ）、８．１４（ｓ，１Ｈ）、１０．００（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１３．１４−１２．４５（ｂｒ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７５９［Ｍ＋１］。

【0116】

実施例６
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−（２−アミノアセチル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化65】

２５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）アセチル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチル（０．４５１ｇ、０．５３ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１２ｍＬ）、ＭｅＯＨ（８ｍＬ）、およびＴＨＦ中の１ＮのＬｉＯＨ（２．５ｍＬ、２．５ｍｍｏｌ）を充填する。混合物をマイクロ波により１００℃で３０分間加熱する。この混合物に１ＮのＨＣｌ水溶液（２．５ｍＬ）を添加し、得られた混合物を窒素流下で撹拌して揮発物を蒸発させる。得られた油状残渣をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）に溶解し、飽和ＮａＣｌ水溶液（１０ｍＬ）で希釈し、そして層を分離する。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そしてろ過ケークを溶媒で洗浄する。ろ液を減圧下で濃縮して、粗製の表題化合物（０．４３１ｇ）を淡黄色の粉末として得る。丸底フラスコに、粗製の表題化合物（０．４２２ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（２５ｍＬ）、およびジオキサン中４ＮのＨＣｌ（１．２５ｍＬ、５ｍｍｏｌ）を添加する。混合物をＴＨＦ（１０ｍＬ）で希釈し、窒素下室温で２４時間、次いで５０℃で４時間撹拌する。この時点で、さらなる部分のジオキサン中の４ＮのＨＣｌ（１．２５ｍＬ、５ｍｍｏｌ）を添加する。加熱を２時間継続し、混合物を室温に冷却する。得られたスラリーをヘキサン（５０ｍＬ）で希釈し、ろ過して粗生成物（３６４ｍｇ）を集める。粗物質をＭｅＯＨ／ＤＭＳＯに溶解し、６分間かけて８５ｍＬ／分でＭｅＯＨ中の１０ｍＭの重炭酸アンモニウム水溶液／ＡＣＮの混合物の２７〜５０％の勾配で、２０５および２３７ｎｍでモニターしながら溶離する、Ｗａｔｅｒｓ ＸＢＲＩＤＧＥ（登録商標）３０×７５ｍｍ ５μｍ Ｃ−１８ ＯＢＤカラムでの逆相ＨＰＬＣにより精製する。適切な画分を減圧下で濃縮乾固させ、４０℃で１８時間乾燥させて表題化合物を得る（０．１６ｇ、収率４３％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１３ＭＨｚ，ＤＭＳＯ） δ ７．９３（ｓ，１Ｈ）、７．８８−７．７９（ｍ，３Ｈ）、７．４６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．４２−７．３６（ｍ，３Ｈ）、７．３１−７．２８（ｍ，２Ｈ）、４．００−３．９７（ｍ，３０Ｈ，ブロード、可動プロトン）、２．８９−２．８６（ｍ，４Ｈ）、２．８６−２．７８（ｍ，３Ｈ）、２．５８−２．５４（ｍ，２Ｈ）、２．５１−２．５０（ｍ，１８Ｈ，ＤＭＳＯ）、２．４４−２．４１（ｍ，３Ｈ）、１．７６−１．７２（ｍ，４Ｈ）、１．０６（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７４４［Ｍ＋１］。

【0117】

実施例７
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−メトキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸

【化66】

ＬｉＯＨ（１４ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を一度に添加するとき、ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：水の３：２：１混合物（３ｍＬ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−メトキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（９３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を室温で撹拌する。得られた反応混合物をＲＴで６時間撹拌し、真空中で濃縮する。得られた残渣を、１０ｍＭの重炭酸アンモニウム水溶液（ｐＨ約１０）およびＡＣＮ中の５％ＭｅＯＨの混合物の２３〜５７％の勾配で７分かけて溶離する、ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ（登録商標）ＧＥＭＩＮＩ−ＮＸ（登録商標）Ｃ−１８カラム上の逆相クロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色泡状固体として得る（８３ｍｇ、収率９１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０３（ｓ，６Ｈ）、１．３８−１．４３（ｍ，４Ｈ）、１．７２−１．７６（ｍ，４Ｈ）、２．２２−２．２８（ｍ，２Ｈ）、２．６０−２．６７（ｍ，２Ｈ）、２．６７−２．７５（ｍ，２Ｈ）、２．８８（ｓ，４Ｈ）、２．９５−３．０２（ｍ，２Ｈ）、３．０９５（ｓ，２Ｈ）、３．１８（ｓ，３Ｈ）；３．１５−３．２２（ｍ，２Ｈ）、３．２３−３．２８（ｍ，２Ｈ）、３．４９（ｓ，２Ｈ）、６．３４（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．２７（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，２Ｈ）、７．３５−７．４２（ｍ，２Ｈ）、７．４０−７．４８（ｍ，１Ｈ），）、７．４７−７．５２（ｍ，１Ｈ）、７．７２−７．７７（ｍ，１Ｈ）、７．８１−７．８８（ｍ，３Ｈ）、１０．０１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１２．７５（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８１６［Ｍ＋１］。

【0118】

実施例８
４−［４−［［３−［［３−［［４−［２−（４−カルバアモイルフェニル）エチル］−３，５−ジフルオロ−フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−イル］−４−オキソ−酪酸

【化67】

ＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（４ｍＬ）中のＮ−［４−［２−（４−カルバモイルフェニル）エチル］−３，５−ジフルオロ−フェニル］−２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボキサミドジヒドロクロリド（９２．０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）に添加し、続いて無水コハク酸（１６０ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を一度に添加する。得られた溶液を室温で２０分間撹拌し、追加の無水コハク酸（５３．４ ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物をさらに２０分間撹拌する。反応混合物をＭｅＯＨ（０．５ｍＬ）の添加によりクエンチし、揮発物を真空中で除去し、そして得られた黄色油状残渣を、１０ｍＭの重炭酸アンモニウム水溶液（ｐＨ約１０）およびＡＣＮ中の５％ＭｅＯＨの混合物の２０〜７０％の勾配で６分かけて溶離する、ＰＨＥＮＯＭＥＮＥＸ（登録商標）ＧＥＭＩＮＩ−ＮＸ（登録商標）Ｃ−１８カラム上の逆相クロマトグラフィーにより精製して、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色固体として得る（５０．９ｍｇ、収率６１％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０３（ｓ，３Ｈ）、１．０９（ｓ，３Ｈ）、１．６２−１．８９（ｍ，４Ｈ）、２．２８（ｍ，１Ｈ）、２．３０（ｍ，１Ｈ）、２．４０−２．４７（ｍ，２Ｈ）、２．５８−２．８１（ｂｒ ｍ，４Ｈ）、２．８８（ｓ，４Ｈ）、３．２７（ｓ，２Ｈ）、３．３０（ｍ，２Ｈ，残留水ピークと一部重なり）、３．３８（ｂｒ ｓ，２Ｈ）、３．５４（ｓ，２Ｈ）、７．１９−７．３１（ｍ，３Ｈ）、７．３１−７．５９（ｍ，３Ｈ）、７．７８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，３Ｈ）、７．９２−７．８５（ｍ，２Ｈ）、８．３６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、８．５６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、９．９９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．５１（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．９３（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７８６［Ｍ＋１］。

【0119】

実施例９
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［（２，２，４−トリメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸ギ酸塩

【化68】

ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏの２：１：１混合物（６ｍＬ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［（２，２，４−トリメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（１６７ｍｇ、０．２３３ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（２２ｍｇ、０．９３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１２時間撹拌する。反応混合物を水（２ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１／３の容積に濃縮し、そして１ＮのＨＣｌ（３ｍＬ）を添加する。その後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１５〜２０％の勾配で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の２０〜５０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色の固体として得る（１２２ｍｇ、収率６８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．１１（ｓ，６Ｈ）、１．８９−１．６７（ｍ，４Ｈ）、２．１５（ｓ，３Ｈ）、２．４１−２．３０（ｍ，４Ｈ）、２．７０（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、４．１０−３．１０（ｂｒ，４Ｈ）、７．２９（ｍ，２Ｈ）、７．５７−７．３６（ｍ，４Ｈ）、７．７５（ｍ，１Ｈ）、７．９０−７．８１（ｍ，３Ｈ）、８．１５（ｓ，１Ｈ）、１０．８−９．７（ｂｒ，１Ｈ）、１２．９−１１．１（ｂｒ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７０１［Ｍ＋１］。

【0120】

実施例１０
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルカルバモイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化69】

２０ｍＬシンチレーションバイアルに、ＤＣＭ（２ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（１４５ｍｇ、０．１８７ｍｍｏｌ）およびＴＥＡの溶液（０．１３ｍＬ、０．９４ｍｍｏｌ）を充填する。得られた懸濁液をそれが透明になるまで撹拌する。１ｍＬのＤＣＭ中の塩化Ｎ−メチルカルバモイル（２１ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）の溶液を滴下する。得られた溶液を室温で１５分間撹拌した。反応混合物を５％水性ＮａＨＣＯ_３（７５ｍＬ）およびＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈し、層を分離する。水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた粗製物質および水酸化リチウム（２３ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ（４ｍＬ）の２：１：１混合物に懸濁し、そして室温で１２時間撹拌する。反応混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１／３の容積に濃縮し、そして１ＮのＨＣｌ（４ｍＬ）を添加する。その後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１０〜１５％の勾配で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１５〜５０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物を淡黄色の固体として得る（１０８ｍｇ、収率７７％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．０６（ｓ，６Ｈ）、１．８８−１．６５（ｍ，４Ｈ）、２．２７（ｓ，２Ｈ）、２．５５（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，３Ｈ）、２．７０（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．１０（ｓ，２Ｈ）、３．２５−３．１５（ｍ，２Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、６．３３（ｍ，１Ｈ）、７．３４−７．２４（ｍ，２Ｈ）、７．５９−７．３７（ｍ，４Ｈ）、７．８３−７．７９（ｍ，１Ｈ）、７．９３−７．８０（ｍ，３Ｈ）、１０．０２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１２．７９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７４４［Ｍ＋１］。

【0121】

実施例１１
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルカルバモチオイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化70】

２０ｍＬシンチレーションバイアルに、ＤＣＭ（３ｍＬ）中の４−［２−［４−［［２−［［３−［（２，２−ジメチルピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルジヒドロクロリド（１６５ｍｇ、０．２１２ｍｍｏｌ）およびＴＥＡの溶液（０．１５ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を充填する。得られた懸濁液をそれが透明になるまで撹拌する。１ｍＬのＤＣＭ中のメチルイソチオシアネート（１８ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液を滴下する。得られた溶液を室温で１５分間撹拌した。反応混合物を５％水性ＮａＨＣＯ_３（７５ｍＬ）およびＤＣＭ（２５ｍＬ）で希釈し、層を分離する。水層をＤＣＭ（２×２５ｍＬ）で抽出する。有機抽出物を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液（２５ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そして減圧下で濃縮する。得られた粗製物質および水酸化リチウム（２６ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏ（４ｍＬ）の２：１：１混合物に懸濁し、そして室温で１２時間撹拌する。反応混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１／３の容積に濃縮し、そして１ＮのＨＣｌ（４ｍＬ）を添加する。その後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１５〜２０％の勾配で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の２０〜６０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物をオフホワイトの固体として得る（７３ｍｇ、収率４５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．０６（ｓ，６Ｈ）、１．８９−１．６８（ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｍ，２Ｈ）、２．７７−２．６１（ｍ，４Ｈ）、２．９９−２．８２（ｍ，７Ｈ）、３．５２（ｓ，２Ｈ）、３．６０（ｓ，２Ｈ）、３．７１（ｂｒ ｓ，２Ｈ）、７．３５−７．２２（ｍ，２Ｈ）、７．５３−７．３５（ｍ，３Ｈ）、７．６８−７．５３（ｍ，２Ｈ）、７．８０−７．６８（ｍ，１Ｈ）、７．９４−７．８０（ｍ，３Ｈ）、１０．０２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４７（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１２．７９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），．ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７６０［Ｍ＋１］。

【0122】

実施例１２
４−［２−［４−［［２−［［３−［［４−（２−カルボキシエチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化71】

ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏの２：１：１混合物（６ｍＬ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−［（３−メトキシ−３−オキソ−プロピル）カルバモイル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（８０ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（１２ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１２時間撹拌する。反応混合物をＨ_２Ｏ（３ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１／３の容積に濃縮し、そして１ＮのＨＣｌ（２ｍＬ）を添加する。その後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１０〜１５％の勾配で１分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１５〜５０％の勾配で２０分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物をオフホワイトの固体として得る（５３ｍｇ、収率６８％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．０５（ｓ，６Ｈ）、１．８８−１．６６（ｍ，４Ｈ）、２．３１−２．２０（ｍ，２Ｈ）、２．４２−２．３１（ｍ，２Ｈ）、２．７９−２．６０（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．１１（ｍ，２Ｈ）、３．２７−３．１５（ｍ，４Ｈ）、３．５１（ｓ，２Ｈ）、６．４８（ｍ，１Ｈ）、７．３５−７．２３（ｍ，２Ｈ）、７．６０−７．３６（ｍ，４Ｈ）、７．８０−７．６８（ｍ，１Ｈ）、７．９４−７．８０（ｍ，３Ｈ）、１０．０２（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１１．４６（ｂｒ ｓ，１Ｈ）、１２．７８−１２．１５（ｂｒ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）８０２［Ｍ＋１］。

【0123】

実施例１３
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（メチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］）アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸、ギ酸塩

【化72】

ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ_２Ｏの２：１：１混合物（４ｍＬ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（メチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（１００ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム（１５ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１２時間撹拌する。反応混合物を水（３ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１／３の容積に濃縮し、そして１ＮのＨＣｌ（３ｍＬ）を添加する。その後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣を、０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１０％で５分間溶離し、次いで０．１％ギ酸／Ｈ_２Ｏ中の０．１％ギ酸／ＡＣＮの混合物の１０〜６５％の勾配で１５分かけて溶離するＣ−１８シリカ上のクロマトグラフィーにより精製し、溶媒蒸発後に表題化合物を黄色がかった黄褐色の固体として得る（６７ｍｇ、収率６７％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：δ １．７７−１．５７（ｍ，２Ｈ）、１．９７−１．７９（ｍ，２Ｈ）、２．１９（ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ，２Ｈ）、２．５２（残留ｄｍｓｏ共鳴との重なり、２Ｈ）、２．５６（ｍ，３Ｈ）、２．９４（ｓ，４Ｈ）、３．５３（ｓ，２Ｈ）、４．１３（ｂｒ ｓ，２Ｈ）、６．３７（ｍ，１Ｈ）、７．６５−７．２５（ｍ，８Ｈ）、８．０８−７．７８（ｍ，６Ｈ）、８．１４（ｓ，１Ｈ）、１０．６３（ｓ，１Ｈ）、１１．９３（ｓ，１Ｈ）、１２．７９（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７３８［Ｍ＋１］。

【0124】

実施例１４
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［（４−メトキシカルボニル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸

【化73】

２５ｍＬのシンチレーションバイアルに、４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸メチル（１５２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（２５ｍｇ、５ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１．５ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）、およびＨ_２Ｏ（０．５ｍＬ）を充填し、得られた懸濁液を室温で８時間撹拌する。反応混合物を蒸発させ、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）中に再構成し、そして勾配溶離を利用してＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ ＥＶＯ Ｃ１８カラム上で精製する。（アセトニトリル／１０ｍＭの重炭酸アンモニウム水溶液ｐＨ１０／５％ＭｅＯＨの３２〜６７％）。溶離液を減圧下で濃縮して、表題化合物（１２４ｍｇ、収率８３％）をオフホワイトの固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７４６［Ｍ＋１］。

【0125】

実施例１５
４−［２−［４−［［２−［［３−［［２，２−ジメチル−４−（メチルスルファモイル）ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化74】

２５ｍＬのシンチレーションバイアルに、４−［［３−［［３−［［３，５−ジフルオロ−４−［２−（４−メトキシカルボニルフェニル）エチル］フェニル］カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−２−イル］カルバモイル］フェニル］メチル］−３，３−ジメチル−ピペラジン−１−カルボン酸メチル（１５２ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（２５ｍｇ、５ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１．５ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）、およびＨ_２Ｏ（０．５ｍＬ）を充填し、得られた懸濁液を室温で８時間撹拌する。反応混合物を蒸発させ、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）中に再構成し、そして勾配溶離を利用してＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ１８カラム上で精製する。（アセトニトリル／１０ｍＭの重炭酸アンモニウム水溶液ｐＨ１０／５％ＭｅＯＨの３２〜６７％）。溶離液を減圧下で濃縮して、表題化合物（１２４ｍｇ、収率８３％）をオフホワイトの固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７４６［Ｍ＋１］。

【0126】

実施例１６
４−（２，６−ジフルオロ−４−（２−（３−（（（１Ｒ，５Ｓ）−８−ペンタノイル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル）ベンズアミド）−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド）フェネチル）安息香酸

【化75】

６０ｍＬシンチレーションバイアルに、４−（２，６−ジフルオロ−４−（２−（３−（（（１Ｒ，５Ｓ）−８−ペンタノイル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル）ベンズアミド）））−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［ｂ］チオフェン−３−カルボキサミド）フェネチル）安息香酸メチル（２１４ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、水酸化リチウム（３３ｍｇ、６．０当量、１．３７ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１．５ｍＬ）、ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ）、およびＨ_２Ｏ（０．５ｍＬ）を充填し、得られた懸濁液を室温で１２時間撹拌する。反応混合物をＨ_２Ｏ（５ｍＬ）で希釈し、真空中で約１／２の容積に濃縮する。得られた混合物のｐＨを１０％クエン酸水溶液で約５〜６に調整し、得られた無色の懸濁液を１５ｍＬの水と５ｍＬの４：１クロロホルム／イソプロパノールとの間で分配する。有機層を分離し、水層のｐＨを１０％クエン酸水溶液で再びｐＨ約５に調整し、混合物を追加の４：１クロロホルム／イソプロパノール（２×１５ｍＬ）で２回抽出する。有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過し、そしてろ液を減圧下で濃縮して表題化合物をオフホワイトの固体として得る（１１４ｍｇ、収率５４％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７６９［Ｍ＋１］。
以下の実施例１７〜２７は、実施例１６と実質的に同様の方法で調製される。

【0127】

実施例１７

【化76】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（テトラヒドロピラン−４−イルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸
収率１７％、ＭＳ ｍ／ｚ ８１２［Ｍ＋１］

【0128】

実施例１８

【化77】

４−［２−［４−［［２−［［３−［（８−アセチル−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］ベンゾエート
収率８５％、ＭＳ ｍ／ｚ ７２７［Ｍ＋１］

【0129】

実施例１９

【化78】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メトキシエチルスルホニル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート
収率７０％、ＭＳ ｍ／ｚ ８０７［Ｍ＋１］

【0130】

実施例２０

【化79】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メトキシエチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート
収率２８％、ＭＳ ｍ／ｚ ７８６［Ｍ＋１］

【0131】

実施例２１

【化80】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（４−メトキシブチルカルバモイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート
収率８４％、ＭＳ ｍ／ｚ ８１５［Ｍ＋１］

【0132】

実施例２２

【化81】

４−［２−［４−［［２−［［３−［［８−［ビス（２−メトキシエチル）カルバモイル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］ベンゾエート
２３％の収率、ＭＳ ｍ／ｚ ８４４［Ｍ＋１］

【0133】

実施例２３

【化82】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−（２−メチルプロパノイル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］ベンゾエート
６２％収率、ＭＳ ｍ／ｚ ７５５［Ｍ＋１］

【0134】

実施例２４

【化83】

４−［２−［４−［［２−［［３−［［８−［２−（ジメチルアミノ）アセチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

収率７３％、ＭＳ ｍ／ｚ ７７０［Ｍ＋１］

【0135】

実施例２５

【化84】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−［１−（メトキシメチル）シクロプロパンカルボニル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸
収率９８％、ＭＳ ｍ／ｚ ７９７［Ｍ＋１］

【0136】

実施例２６

【化85】

４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［８−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）アセチル］−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸
収率５９％、ＭＳ ｍ／ｚ ８２５［Ｍ＋１］

【0137】

実施例２７
４−［２−［４−［［２−［［３−［（４−アセチル−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸

【化86】

２５ｍＬのマイクロ波反応バイアルに４−［２−［４−［［２−［［３−［（４−アセチル］−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］−２，６−ジフルオロ−フェニル］エチル］安息香酸メチルメチル（１６９ｍｇ、０．２２７ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（１２ｍＬ、１４８ｍｍｏｌ）、メタノール（８ｍＬ、１９７ｍｍｏｌ）、および１Ｍの水酸化リチウム水溶液（１．１４ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）を充填する。バイアルに栓をして、得られた混合物を撹拌し、マイクロ波照射により１００℃で３０分間加熱する。次いで反応混合物を１Ｍ塩酸水溶液（１．１４ｍＬ、１．１４ｍｍｏｌ）で注意深く処理し、反応混合物のｐＨを約４にする。得られた混合物を真空中で濃縮乾固し、そして生成物を低ｐＨ逆相クロマトグラフィーにより精製する。^１Ｈ ＮＭＲ（４００．１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １．０４（ｓ，３Ｈ）、１．０９（ｓ，３Ｈ）、１．８４−１．７２（ｍ，４Ｈ）、１．９７（ｂｓ，３Ｈ）、２．２９−２．２７（ｍ，１Ｈ）、２．３７−２．３３（ｍ，１Ｈ）、２．７５−２．６５（ｍ，４Ｈ）、２．９１（ｓ，４Ｈ）、３．２５−３．３．２４（ｍ，２Ｈ）、３．３８−３．３４（ｍ，２Ｈ）、３．５４（ｓ，２Ｈ）、７．２９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．４５−７．３７（ｍ，２Ｈ）、７．５１−７．４６（ｍ，１Ｈ）、７．５５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．７６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．８５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．９１（ｓ，１Ｈ）、９．９９（ｓ，１Ｈ）、１１．４９（ｓ，１Ｈ）、１２．８４（ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７２９［Ｍ＋１］。

【0138】

実施例２８
４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル）メチル］ベンゾイル］アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸

【化87】

８ｍＬの混合溶媒（２：１：１の比のＴＨＦ／ＣＨ_３ＯＨ／Ｈ_２Ｏ）中の４−［２−［２，６−ジフルオロ−４−［［２−［［３−［［４−（４−ヒドロキシブチルカルバモイル）−２，２−ジメチル−ピペラジン−１−イル］メチル］ベンゾイル］アミノ］ベンゾチオフェン−３−カルボニル］アミノ］フェニル］エチル］安息香酸メチル（０．２０ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＬｉＯＨ（１８ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加する。得られた混合物を室温で１２時間放置する。追加のＬｉＯＨ（１８ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）を添加する。そして混合物を室温で４８時間静置し、ジオキサン中４ＮのＨＣｌの１ｍＬで希釈する。溶媒を真空下で除去する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、１２０ｍｇ（５７％）の標記化合物を白色固体として得る。^１Ｈ ＮＭＲ（３９９．８０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）：ｄ １．０６（ｓ，６Ｈ）、１．３１−１．４８（ｍ，４Ｈ）、２．３４（ｓ，２Ｈ）、２．８７−２．９７（ｍ，４Ｈ）、３．０７−３．０９（ｍ，２Ｈ）、３．０９−３．１８（ｓ，２Ｈ）、３．１８−３．２８（ｍ，２Ｈ）、３．３８（水のピークと一部重なり，１Ｈ）、３．５４（ｓ，２Ｈ）、４．３８（ｍ，２Ｈ）、６．３３（ｍ，２Ｈ）、７．２５−７．７１（ｍ，８Ｈ）、７．７３−８．０８（ｍ，６Ｈ）、１０．６４（ｓ，１Ｈ）、１１．９９（ｓ，１Ｈ）、１２．８（ｂｒ ｓ，１Ｈ）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ（ｍ／ｚ）７９８［Ｍ＋１］。

【0139】

インビトロでのＮａＰｉ−ＩＩｂの阻害
^３３Ｐ取り込みの阻害は、ヒトおよびマウスのＮａＰｉ−ＩＩｂ Ｔ−ＲＥＸ（商標）−ＣＨＯ安定細胞株において測定される。ＮａＰｉ−ＩＩｂのｃＤＮＡをプラスミドＳＬＣ３４Ａ２ ｐｃＤＮＡ５／ＴＯ（ヒト）およびＳＬＣ３４Ａ２ ｐｃＤＮＡ５／ＴＯ（マウス）にサブクローニングし、安定細胞株をそれぞれヒトとマウスの両方についてのクローン単離から作製する。マウスおよびヒトの安定株を増殖培地（ダルベッコ改変イーグル培地：栄養混合物Ｆ−１２（３：１）、１０％熱不活性化ＦＢＳ、１％ペニシリン／ストレプトマイシン／ ＦＵＮＧＩＥＺＯＮＥ（登録商標）（ＨＹＣＬＯＮＥ（商標））、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ、２５０μｇ／ｍＬのハイグロマイシン、５μｇ／ｍＬのブラスチシジン）中で連続培養で維持する。０．２５％トリプシンを用いてＴ２２５細胞培養フラスコ（ＣＯＲＮＩＮＧ（登録商標））から細胞を採取し、１００μＬの増殖培地＋１００ｎｇ／ｍＬのテトラサイクリン中に４０，０００細胞／ウェルで９６穴ＣＹＴＯＳＴＡＲ−Ｔ（商標）シンチレーションマイクロプレート（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｓｙｓｔｅｍｓ）に播種する。細胞プレートを３７℃および５％ＣＯ_２で一晩インキュベートする。翌日、化合物を１００％ＤＭＳＯ中の１：３希釈を用いて段階希釈する。アッセイする準備ができるまで、細胞プレートをインキュベーター内に残し得る。細胞プレートをインキュベーターから取り出し、培地を除去する。細胞を、２００μｌのアッセイ緩衝液（１３７ｍＭのＮａＣｌ、５．４ｍＭのＫＣｌ、２．８ｍＭのＣａＣｌ_２、１．２ｍＭのＭｇＳＯ_４、および１４ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ約７．５）で３回洗浄し、洗浄の間にバッファーを除去する。ＤＭＳＯ中で段階希釈した化合物をアッセイ緩衝液でさらに５０倍希釈し、５０μＬをＣＹＴＯＳＴＡＲ−Ｔ（商標）アッセイプレートに添加し、続いてすぐに５０μＬの^３３Ｐ溶液（ＰＥＲＫＩＮ−ＥＬＭＥＲ（登録商標），Ｗａｌｔｏｎ，ＭＡ；０．０５μＣｉ／５０μＬ）を添加する。ＣＹＴＯＳＴＡＲ−Ｔ（商標）アッセイプレートを光から保護するためにホイルで覆い、そして室温で６０分間インキュベートする。６０分のインキュベーション後、１００μＬの停止溶液（アッセイ緩衝液＋４００μＭのフロレチン）をアッセイプレートに添加して^３３Ｐの取り込みを停止させる。停止溶液をウェル当たり１分刻みで加えた後、プレートを直ちにＷａｌｌａｃ ＭＩＣＲＯＢＥＴＡ（登録商標）Ｔｒｉｌｕｘ液体シンチレーションカウンターおよびルミノメーターで読み取る。各々のプレートは別々に処理し得、時間的にずらされてもよいので、停止液が添加された後の計数において遅延がないようにすることができる。試験したすべての濃度における阻害パーセント（最終アッセイ濃度１００〜０．００５μＭ）を、１％ＤＭＳＯ（最小効果）、および１００μＭの十分に有効なＮａＰｉ−ＩＩｂ阻害剤の効果（最大効果）に対して計算する。４パラメータロジスティック曲線フィッティング式を用いてＩＣ_５０値を計算した。提示された数字は標準偏差（ＳＤ）を計算した幾何平均であり、ｎは実験回数である。したがって、表１は、ヒトＮａＰｉ−ＩＩｂおよびマウスＮａＰｉ−ＩＩｂのそれぞれに対する実施例１〜２８の相対ＩＣ_５０値を記載する。
表１．Ｔ−ＲＥＸ（商標）チャイニーズハムスター卵巣安定細胞株におけるヒトおよびマウスのＮａＰｉ−ＩＩｂインビトロデータに対する実施例１〜２８の相対ＩＣ_５０（ｒｅｌ ＩＣ_５０）値。

【表3】

【0140】

インビボでのＮａＰｉ−ＩＩｂの阻害
試験試料およびビヒクル対照の調製のために、ビヒクル、水中２０％ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰＢＣＤ）を試験試料に添加する。必要に応じて超音波水浴中で粒子サイズを小さくするために超音波処理する。必要に応じて、ポリトロンを使用して試験試料溶液中の可視性の粒子を全て分解する。以下の表２に示すように１ＮのＮａＯＨを添加する。ビヒクル対照のｐＨを１ＮのＮａＯＨで８．０〜８．５に調整する。
表２ 示した試験化合物に添加する１ＮのＮａＯＨの量。

【表4】

【0141】

放射性リン酸の調製：ビヒクルとして０．９％生理食塩水を使用して１６．２５ｍＭのＮａ_２ＨＰＯ_４溶液を調製する。透明な溶液が形成されるまで混合する。ｐＨを約７．４に調整する。滅菌０．２μｍポリエーテルスルホン膜を用いてろ過する。放射性リン酸投与溶液の最終調製のために、１ｍＬのＮａ_２ＨＰＯ_４あたり０．５μｌのストックＨ_３^３３ＰＯ_４を添加する。十分に混合し、次いで投与前に０．２μｍのポリエーテルスルホン膜を用いてＨ_３^３３ＰＯ_４＋Ｎａ_２ＨＰＯ_４溶液を滅菌ろ過する。シンチレーションカウンターで各々のサンプルの放射能を測定する。ＤＰＭが１００，０００から１５０，０００の間であれば、投薬を進める。

【0142】

インビボプロトコル：約８〜９週齢のオスのＣ５７Ｂｌ６オスマウスを試験の前日に１６時間絶食させる。それらは試験日の体重に基づいて処置群に割り当てられる。マウスに、上記のように調製した試験試料またはビヒクル対照のいずれかを１０ｍｌ／ｋｇの用量で経口投与する。１５分後、放射性ホスフェート投与溶液を強制経口投与により投与する。１５分後、血液は眼窩出血によって採血する。血漿を調製し、そして各々のマウスからの５０μｌのＥＤＴＡ血漿を１０ｍｌのシンチレーション液と混合し、そして計数をシンチレーション計数により決定する。試験試料の効果は、試験試料処置動物からの血漿中の計数と、ビヒクル対照処置動物の血漿中の計数とを比較することによって決定される［パーセント阻害＝（試験試料処置動物の血漿中の計数／ビヒクル処置動物の血漿中の計数）×１００％］。阻害パーセントは、化合物またはビヒクルの投与後３０分および標識リン酸の投与後１５分に測定される。示した実施例についての阻害パーセントを以下の表３に示す。
表３：実施例化合物４、６、および８のインビボデータ

【表5】

【0143】

様々な濃度の代替的なビヒクル、例えばポリ−１−ビニルピロリドン−コ−ビニルアセテート（ＰＶＰ−ＶＡ）を使用することができる。実施例１は、ＰＶＰ−ＶＡ中でアッセイすることができ、そしてこの試験のために、化合物を実施例１の固体分散体製剤に記載されているように製剤化し、続いて水中に溶解し、次いで強制経口投与によって投与する。ビヒクル対照は、実施例１の最高用量、実施例１の最低用量、および実施例１の中間用量に見られる濃度と一致する、様々な濃度のＰＶＰ−ＶＡを有する水である。いくつかの試験にわたって、放射性標識リン酸の取り込みに対する様々なＰＶＰ−ＶＡの影響が観察されていないため、すべてのビヒクルを平均して阻害パーセントを計算する。
表４：ＰＶＰ−ＶＡ製剤における実施例１のインビボデータ

【表6】

【0144】

試験化合物の胃内容排出に対する効果は、インビボでＮａＰｉ−ＩＩｂを阻害する化合物の能力を評価するために使用されるのと同様の方法で、化合物および放射性標識リン酸を投与することによって評価することができる。マウスを出血させた後、それらを犠牲にし、そしてそれらの胃を採取した。採取した胃を１０ｍｌの１ＮのＮａＯＨ中で一晩消化し、そして回収された放射標識リン酸ＤＰＭをシンチレーション計数により測定する。胃内容排出速度に対する化合物媒介性の効果は、化合物で処置した動物の胃の中のｄｐｍをビヒクルで処置した動物のそれと比較することによって決定される。

【0145】

本発明、例えば実施例１の化合物は、有効性、インビボ分布、インビボ有効性、および前臨床試験における好ましい毒性の欠如などの有利な薬理学的特性を示す。例えば実施例１は、インビボでの胃内容排出の阻害に関して、驚くほど有利なＮａＰｉ−ＩＩｂ阻害の限界を示す。さらに、実施例１は、４日間、正常なラットにインビボで投与された場合、概して良好な耐容性を示し、そしてこのインビボ実験において有利な毒性の欠如を示す。