特許 6682611 核酸の抽出方法およびその抽出カセット

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6682611

(24)【登録日】2020年3月27日

(45)【発行日】2020年4月15日

(54)【発明の名称】核酸の抽出方法およびその抽出カセット

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/00 20060101AFI20200406BHJP

   C12N 15/10 20060101ALI20200406BHJP

【ＦＩ】

   C12M1/00 A

   C12N15/10 100Z

【請求項の数】13

【外国語出願】

【全頁数】14

(21)【出願番号】特願2018-240433(P2018-240433)

(22)【出願日】2018年12月24日

(65)【公開番号】特開2019-115337(P2019-115337A)

(43)【公開日】2019年7月18日

【審査請求日】2019年2月21日

(31)【優先権主張番号】62/610,444

(32)【優先日】2017年12月26日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】201811532891.X

(32)【優先日】2018年12月14日

(33)【優先権主張国】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】596039187

【氏名又は名称】台達電子工業股▲ふん▼有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＤＥＬＴＡ ＥＬＥＣＴＲＯＮＩＣＳ，ＩＮＣ．

(74)【代理人】

【識別番号】110000291

【氏名又は名称】特許業務法人コスモス国際特許商標事務所

(72)【発明者】

【氏名】鐘 ▲威▼宇

(72)【発明者】

【氏名】黄 菘斌

(72)【発明者】

【氏名】劉 興倫

(72)【発明者】

【氏名】高 于凱

(72)【発明者】

【氏名】李 怡臻

【審査官】 田中 晴絵

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２０１７／００１５９９３（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２０１５／００２４４３６（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特開２０１５−０７３４８５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２０１５／００９９２７９（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特表２００９−５２９８８３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００７／１０６５７９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特開２００８−０６１６４９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００５−０８７０７１（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ１２Ｍ １／００

Ｃ１２Ｎ １５／１０

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

抽出モジュールと、
前記抽出モジュールと連通する液体受容モジュールとを含む抽出カセットであって、前記液体受容モジュールは、
第１の側部、第２の側部、およびサンプル供給口を含み、前記第１の側部は前記第２の側部の反対側にあり、前記サンプル供給口は、前記第１の側部に形成される受容モジュール本体、
前記受容モジュール本体に形成されたサンプル室であって、前記サンプル室は前記サンプル供給口と連通し、前記サンプル室は、第１のサンプル室連結口および第２のサンプル室連結口を含み、前記第１のサンプル室連結口は、前記第２の側部に対して前記第１の側部に近いサンプル室、
前記サンプル供給口を封止するように構成された封止部材、
前記受容モジュール本体に形成されたアルコール室、および
前記アルコール室と前記第１のサンプル室の前記第１のサンプル室連結口を連通する第１の経路であって、前記第１の経路の少なくとも一部は前記アルコール室と前記第２の側部との間に配置される第１の経路
を含む抽出カセット。

【請求項2】

前記アルコール室は、アルコール室連結口を含み、前記アルコール室連結口は、前記第１の側部に対して前記第２の側部に近く、前記第１の経路は、前記アルコール室連結口と前記第１のサンプル室連結口を連結する請求項１に記載の抽出カセット。

【請求項3】

前記液体受容モジュールは、第１の混合室および第２の経路を更に含み、
前記第１の混合室は、前記受容モジュール本体に形成され、前記第２のサンプル室連結口は、前記第１の側部に対して前記第２の側部に近く、前記第２の経路は、前記第２のサンプル室連結口と前記第１の混合室を連結する請求項２に記載の抽出カセット。

【請求項4】

前記液体受容モジュールは、第２の混合室、第３の経路、および第４の経路を更に含み、前記第２の混合室は、前記受容モジュール本体に形成され、前記第３の経路は、前記第１の混合室と前記第２の混合室を連結し、前記第４の経路は、前記第２の混合室と前記抽出モジュールを連結し、前記第４の経路は、第４の経路出口を含み、前記第４の経路出口は、前記第１の混合室および前記第２の混合室に対して前記第１の側部に近い請求項３に記載の抽出カセット。

【請求項5】

前記液体受容モジュールは、第１の洗剤室、第２の洗剤室、第５の経路、および第６の経路を更に含み、前記第１の洗剤室および前記第２の洗剤室は、前記受容モジュール本体に形成され、前記第５の経路は、前記第１の洗剤室と前記第１の混合室を連結し、前記第６の経路は、前記第２の洗剤室と前記第１の混合室を連結する請求項４に記載の抽出カセット。

【請求項6】

前記液体受容モジュールは、溶離液室および第７の経路を更に含み、前記溶離液室は前記受容モジュール本体に形成され、前記第７の経路は前記溶離液室と前記抽出モジュールを連結する請求項５に記載の抽出カセット。

【請求項7】

核酸の抽出方法であって、
液体受容モジュールおよび抽出モジュールを含む抽出カセットであって、前記抽出モジュールは、前記液体受容モジュールと連通し、前記液体受容モジュールは、サンプル室、アルコール室、第１の混合室、第２の混合室、第１の洗剤室、第２の洗剤室、および溶離液室を含む抽出カセットを提供するステップ、
アルコールを前記アルコール室内に充填し、第１の洗剤を前記第１の洗剤室内に充填し、第２の洗剤を前記第２の洗剤室内に充填し、且つ溶離液を前記溶離液室内に充填するステップ、
サンプルを前記サンプル室内に充填するステップ、および
前記サンプル室内の前記サンプルを加熱するステップ
を含む方法。

【請求項8】

前記アルコールを前記アルコール室から前記サンプル室に移動させ、前記サンプルと前記アルコールを混ぜて混合液とするステップを更に含む請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記混合液を前記第１の混合室内に移動するステップ、および
前記混合液を前記第１の混合室と前記第２の混合室との間で繰り返し移動させ、前記サンプルと前記アルコールを混合させるステップを更に含む請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記混合液を前記抽出モジュール内に移動させ、前記核酸が前記抽出モジュールによって前記混合液から取得されるステップ、および
前記混合液を前記抽出モジュールの第１の廃液室内に移動させるステップを更に含む請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記第１の洗剤を前記第１の洗剤室から前記第１の混合室および前記第２の混合室に順に移動させ、前記第１の混合室および前記第２の混合室を洗浄するステップ、
前記第１の洗剤を前記抽出モジュールに移動させ、前記抽出モジュールを洗浄するステップ、および
前記第１の洗剤を前記抽出モジュールの前記第１の廃液室に移動させるステップを更に含む請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記第２の洗剤を前記第２の洗剤室から前記第１の混合室および第２の混合室に順に移動させ、前記第１の混合室および前記第２の混合室を洗浄するステップ、
前記第２の洗剤を前記抽出モジュールに移動させ、前記抽出モジュールを洗浄するステップ、および
前記第２の洗剤の少なくとも一部を前記抽出モジュールの第２の廃液室に移動させるステップを更に含む請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記溶離液を前記溶離液室から前記抽出モジュールに移動させ、前記抽出モジュールから前記核酸を取り出すステップを更に含むステップを更に含む請求項１２に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０１７年１２月２６日に出願された米国特許仮出願番号第６２／６１０４４４号からの優先権を主張するものであり、これらの全ては引用によって本願に援用される。

【0002】

本出願は、一部継続出願であり、２０１６年２月８日に出願された継続中の米国特許出願番号第１５／０１８０６７号「Ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｄｅｖｉｃｅ」からの優先権を主張するものである。

【0003】

本出願は、２０１８年１２月１４日に出願された中国特許出願番号第２０１８１１５３２８９１Ｘ号についての優先権を主張するものであり、これらの全ては引用によって本願に援用される。

【0004】

本発明は、抽出カセットに関するものであり、特に、液体受容モジュールを有する抽出カセットに関するものである。

【背景技術】

【0005】

従来の液体受容モジュールでは、サンプル室（ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ）は通常、圧力源に連結された圧力供給口を有する。サンプル室内の液体の移動は、圧力供給口を介して供給された圧力によって制御されることができる。しかしながら、サンプルはしばしばウイルス、バクテリアまたは他の汚染物質を含み、その汚染物質は、圧力供給口を介して分析装置または外部環境に移動することがある。このような汚染物質は不正確なテスト結果を招くだけでなく、オペレータの健康に危険をもたらすことがある。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0006】

一実施形態では、抽出カセットが提供される。抽出カセットは、抽出モジュールおよび液体受容モジュールを含む。液体受容モジュールは、抽出モジュールと連通する。液体受容モジュールは、受容モジュール本体、サンプル室、封止部材、アルコール室、および第１の経路を含む。受容モジュール本体は、第１の側部、第２の側部、およびサンプル供給口を含み、第１の側部は第２の側部の反対側にあり、サンプル供給口は、第１の側部に形成される。サンプル室は、受容モジュール本体に形成され、サンプル室はサンプル供給口と連通し、サンプル室は、第１のサンプル室連結口および第２のサンプル室連結口を含み、第１のサンプル室連結口は、第２の側部に対して第１の側部に近い。封止部材は、サンプル供給口を封止するように構成される。アルコール室は、受容モジュール本体に形成される。アルコール室は、第１の経路を介して第１のサンプル室の第１のサンプル室連結口と連通し、第１の経路の少なくとも一部はアルコール室と第２の側部との間に配置される。

【0007】

一実施形態では、アルコール室は、アルコール室連結口を含み、アルコール室連結口は、第１の側部に対して第２の側部に近く、第１の経路は、アルコール室連結口と第１のサンプル室連結口を連結する。

【0008】

一実施形態では、液体受容モジュールは、第１の混合室および第２の経路を更に含み、第１の混合室は、受容モジュール本体に形成され、第２のサンプル室連結口は、第１の側部に対して第２の側部に近く、第２の経路は、第２のサンプル室連結口と第１の混合室を連結する。

【0009】

一実施形態では、液体受容モジュールは、第２の混合室、第３の経路、および第４の経路を更に含み、第２の混合室は、受容モジュール本体に形成され、第３の経路は、第１の混合室と第２の混合室を連結し、第４の経路は、第２の混合室と抽出モジュールを連結し、第４の経路は、第４の経路出口を含み、第４の経路出口は、第１の混合室および第２の混合室に対して第２の側部に近い。

【0010】

一実施形態では、液体受容モジュールは、第１の洗剤室、第２の洗剤室、第５の経路、および第６の経路を更に含み、第１の洗剤室および第２の洗剤室は、受容モジュール本体に形成され、第５の経路は、第１の洗剤室と第１の混合室を連結し、第６の経路は、第２の洗剤室と第１の混合室を連結する。

【0011】

一実施形態では、液体受容モジュールは、溶離液室および第７の経路を更に含み、溶離液室は受容モジュール本体に形成され、第７の経路は溶離液室と抽出モジュールを連結する。

【0012】

一実施形態では、核酸の抽出方法が提供される。核酸の抽出方法は、以下のステップを含む。まず、抽出カセットが提供され、抽出カセットは、抽出モジュールおよび液体受容モジュールを含み、抽出モジュールは、液体受容モジュールと連通し、液体受容モジュールは、サンプル室、アルコール室、第１の混合室、第２の混合室、第１の洗剤室、第２の洗剤室、および溶離液室を含む。次いで、アルコールがアルコール室内に充填され、第１の洗剤が第１の洗剤室内に充填され、第２の洗剤が第２の洗剤室内に充填され、且つ溶離液が溶離液室内に充填される。次に、サンプルがサンプル室内に充填される。次いで、サンプル室内のサンプルが加熱される。

【0013】

一実施形態では、前記方法は、アルコールをアルコール室からサンプル室に移動させ、サンプルとアルコールを混ぜて混合液とする。

【0014】

一実施形態では、前記方法は、以下のステップを更に含む。まず、混合液が第１の混合室内に移動される。次いで、混合液が第１の混合室と第２の混合室との間で繰り返し移動され、サンプルとアルコールを混合させる。

【0015】

一実施形態では、前記方法は、以下のステップを更に含む。まず、混合液が抽出モジュール内に移動され、核酸が抽出モジュールによって混合液から取得される。次いで、混合液が抽出モジュールの第１の廃液室内に移動される。

【0016】

一実施形態では、前記方法は以下のステップを更に含む。まず、第１の洗剤が第１の洗剤室から第１の混合室および第２の混合室に順に移動され、第１の混合室および第２の混合室を洗浄する。次いで、第１の洗剤は、抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する。次に、第１の洗剤は、抽出モジュールの第１の廃液室に移動される。

【0017】

一実施形態では、前記方法は以下のステップを更に含む。まず、第２の洗剤が第２の洗剤室から第１の混合室および第２の混合室に順に移動され、第１の混合室および第２の混合室を洗浄する。次いで、第２の洗剤は、抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する。次に、第２の洗剤の少なくとも一部が抽出モジュールの第２の廃液室に移動される。

【0018】

一実施形態では、前記方法は、溶離液を溶離液室から抽出モジュールに移動させ、抽出モジュールから核酸を取り出すステップを更に含む。

【発明の効果】

【0019】

本発明の実施形態の抽出カセットを用いて、サンプル室のサンプル供給口は封止部材によって封止される。サンプル室内の混合液は、アルコール室に加えられた圧力によって第１の混合室に移動される。従って、サンプル室内のサンプルのウイルス、細菌、その他の汚染物質が液体受容モジュールから漏れるのを防止することができる。サンプルの汚染物質が第１のサンプル室連結口（サンプル室の上方）および第１の経路を介してアルコール室に入ったとしても、汚染物質はアルコール室によって消毒され、汚染が起こることはない。本発明の実施形態の抽出カセットは、サンプルによって汚染される領域を分析装置の内部または周囲の環境に制限し、分析結果の精度を向上させ、オペレータの健康を保護することができる。

【0020】

詳細な説明は、添付の図面と併せて以下の実施形態で説明する。

【0021】

添付の図面とともに以下の本発明の様々な実施形態の詳細な説明を検討することで、本発明はより完全に理解できる。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1A】図１Ａは、本発明の一実施形態の抽出カセットの組立図である。

【図1B】図１Ｂは、本発明の実施形態の抽出カセットの分解図である。

【図2A】図２Ａは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの詳細図である。

【図2B】図２Ｂは、本発明の実施形態の第３の経路の詳細図である。

【図3A】図３Ａは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3B】図３Ｂは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3C】図３Ｃは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3D】図３Ｄは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3E】図３Ｅは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3F】図３Ｆは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3G】図３Ｇは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3H】図３Ｈは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図3I】図３Ｉは、本発明の実施形態の液体受容モジュールの動作を示している。

【図4A】図４Ａは、本発明の実施形態の核酸抽出方法を示している。

【図4B】図４Ｂは、本発明の実施形態の核酸抽出方法を示している。

【図4C】図４Ｃは、本発明の実施形態の核酸抽出方法を示している。

【発明を実施するための形態】

【0023】

以下の説明では、本発明を実施するベストモードを開示している。この説明は、本発明の一般原理を例示する目的のものであり、本発明を限定するものではない（本発明の範囲は、添付の請求の範囲を参考にして決定される）。

【0024】

図１Ａは、本発明の一実施形態の抽出カセットＣの組立図である。図１Ｂは、本発明の実施形態の抽出カセットＣの分解図である。図１Ａおよび図１Ｂに示すように、抽出カセットＣは、抽出モジュール１、液体受容モジュール２、サンプリングモジュール３、および連結モジュール４を含む。抽出カセットＣは分析装置内に配置されるように構成されている。分析装置は、第１の圧力供給モジュール、分析モジュール、および第２の圧力供給モジュールを含む。第１の圧力供給モジュールおよび第２の圧力供給モジュールは、抽出カセットＣに向かって圧力を加え、抽出カセットＣ内の液体の移動を制御する。分析モジュールは抽出カセットＣを加熱および冷却し、抽出カセットＣ内のサンプルを分析する。

【0025】

図１Ｂに示すように、液体受容モジュール２は、連結モジュール４を介して抽出モジュール１と連通する。液体受容モジュール２の室は、連結モジュール４を介して互いに連通する。図２Ａは液体受容モジュール２の詳細図である。図２Ａに示すように、液体受容モジュール２は、受容モジュール本体２９、サンプル室２１、封止部材２１１、アルコール室２２、および第１の経路２２１を含む。受容モジュール本体２９は、第１の側部２９１、第２の側部２９２、およびサンプル供給口２１２を含む。第１の側部２９１は第２の側部２９２の反対側にある。サンプル供給口２１２は、第１の側部２９１に形成される。サンプル室２１は、受容モジュール本体２９に形成される。サンプル室２１はサンプル供給口２１２と連通する。サンプル室２１は、第１のサンプル室連結口２１３および第２のサンプル室連結口２１４を含む。第１のサンプル室連結口２１３は、第２の側部２９２に対して第１の側部２９１に近い。封止部材２１１は、サンプル供給口２１２を封止するように構成される。アルコール室２２は、受容モジュール本体２９に形成される。アルコール室２２は、第１の経路２２１を介して第１のサンプル室２１の第１のサンプル室連結口２１３と連通する。一実施形態では、第１の経路２２１の少なくとも一部はアルコール室２２と第２の側部２９２との間に配置される。

【0026】

図２Ａに示すように、一実施形態では、アルコール室２２は、アルコール室連結口２２２を含む。アルコール室連結口２２２は、第１の側部２９１に対して第２の側部２９２に近い。第１の経路２２１は、アルコール室連結口２２２と第１のサンプル室連結口２１３を連結する。

【0027】

図２Ａに示すように、一実施形態では、液体受容モジュール２は、第１の混合室２３および第２の経路２３１を更に含む。第１の混合室２３は、受容モジュール本体２９に形成される。第２のサンプル室連結口２１４は、第１の側部２９１に対して第２の側部２９２に近い。第２の経路２３１は、第２のサンプル室連結口２１４と第１の混合室２３を連結する。

【0028】

図２Ａおよび図２Ｂに示すように、一実施形態では、液体受容モジュール２は、第２の混合室２４、第３の経路２４１、および第４の経路２４２を更に含む。第２の混合室２４は、受容モジュール本体２９に形成される。第３の経路２４１は、第１の混合室２３と第２の混合室２４を連結する。第４の経路２４２は、第２の混合室２４と抽出モジュール１を連結する。一実施形態では、第３の経路２４１は、第１の混合室２３と第２の混合室２４の底部を連結する。

【0029】

図２Ａに示すように、一実施形態では、液体受容モジュール２は、第１の洗剤室２５、第２の洗剤室２６、第５の経路２５１、および第６の経路２６１を更に含む。第１の洗剤室２５および第２の洗剤室２６は、受容モジュール本体２９に形成される。第５の経路２５１は、第１の洗剤室２５と第１の混合室２３を連結する。第６の経路２６１は、第２の洗剤室２６と第１の混合室２３を連結する。

【0030】

図２Ａに示すように、一実施形態では、液体受容モジュールは、溶離液室２７および第７の経路２７１を更に含む。溶離液室２７は受容モジュール本体２９に形成され、第７の経路２７１は溶離液室２７と抽出モジュール１を連結する。

【0031】

図３Ａ〜図３Ｉは、本発明の実施形態の液体受容モジュール２の動作を示している。図３Ａに示すように、まず、液体受容モジュール２は、アルコール２８１（アルコール室２２内）、第１の洗剤２８２（第１の洗剤室２５内）、第２の洗剤２８３（第２の洗剤室２６内）、および溶離液２８４（溶離液室２７内）の４つの液体を受容する。次いで、図３Ｂに示すように、サンプル２８５がサンプル室２１内に充填される。抽出カセットＣが分析装置の分析モジュール内に配置された後、サンプル室２１内のサンプル２８５の温度は６０度（６０℃）に上げられる。次に、図３Ｃに示すように、サンプル室２１内のサンプル２８５の温度が６０度（６０℃）に上げられた後、アルコール室２２からのアルコール２８１は、サンプル室２１へ注入され、サンプル２８５とアルコール２８１をサンプル区画２１内で混ぜて混合液２８６とする。次いで、図３Ｄおよび図３Ｅに示すように、サンプル２８５およびアルコール２８１を含む混合液２８６は、サンプル室２１から第１の混合室２３に移動される（図３Ｄ）。次いで、混合液２８６は、第１の混合室２３と第２の混合室２４間で繰り返し移動されて、サンプル２８５とアルコール２８１を混合させる（図３Ｅ）。

【0032】

一実施形態では、サンプル２８５およびアルコール２８１を含む混合液２８６は、抽出モジュール１内に移動され、核酸が抽出モジュール１によって混合液２８６から取得される。次いで、混合液２８６は、抽出モジュール１の第１の廃液室に移動される。

【0033】

次いで、図３Ｆおよび図３Ｇに示すように、第１の洗剤２８２は、第１の洗剤室２５から第１の混合室２３と第２の混合室２４に徐々に移動され、第１の混合室２３および第２の混合室２４を洗浄する。次いで、第１の洗剤２８２は、抽出モジュール１に移動されて抽出モジュール１を洗浄する。次いで、第１の洗剤２８２は、抽出モジュール１の第１の廃液室に移動される。

【0034】

次いで、図３Ｈおよび図３Ｉに示すように、第２の洗剤２８３は、第２の洗剤室２６から第１の混合室２３と第２の混合室２４に徐々に移動され、第１の混合室２３および第２の混合室２４を洗浄する。次いで、第２の洗剤２８３は、抽出モジュール１に移動されて抽出モジュール１を洗浄する。次いで、第２の洗剤２８３の少なくとも一部は、抽出モジュール１の第２の廃液室に移動される。

【0035】

最後に、溶離液２８４は、溶離液室２７から抽出モジュール１に移動され、抽出モジュール１から核酸を取り出す。次いで、核酸を含む溶離液２８４は、サンプリングモジュール３に移動され、定量的にサンプリングされる。

【0036】

図２Ａおよび図３Ｂに示すように、本発明の実施形態の抽出カセットを用いて、サンプル室２１のサンプル供給口２１２は封止部材２１１によって封止される。サンプル室２１内の混合液２８６は、アルコール室２２に加えられた圧力によって第１の混合室２３に移動される。従って、サンプル室２１内のサンプル２８５のウイルス、細菌、その他の汚染物質が液体受容モジュールから漏れるのを防止することができる。サンプル２８５の汚染物質が第１のサンプル室連結口（サンプル室２１の上方）および第１の経路２２１を介してアルコール室２２に入ったとしても、汚染物質はアルコール室２２によって消毒され、汚染が起こることはない。本発明の実施形態の抽出カセットは、サンプル２８５によって汚染される領域を分析装置の内部または周囲の環境に制限し、分析結果の精度を向上させ、オペレータの健康を保護することができる。

【0037】

図２Ａ、図３Ｄ、および図３Ｅに示すように、本発明の実施形態の抽出カセットを用いており、混合液２８６は、第３の経路２４１を介して第１の混合室２３と第２の混合室２４との間を前後に移動することができる。混合液２８６は十分に混合されることで、混合液２８６を十分に混合する効果を最小限のスペースで達成することができる。一実施形態では、第４の経路２４２は、第１の混合室２３および第２の混合室２４の上端よりも高い第４の経路出口２４２Ａを有する。第４の経路出口２４２Ａは、混合液２８６の液面よりも高い。従って、混合液２８６が意図せずに第４の経路出口２４２Ａを通って抽出モジュール１に入るのを防止することができる。

【0038】

図２Ａに示されるように、液体受容モジュール２は、封止部材２１１を除いて一体的に形成され得る。

【0039】

図４Ａ〜図４Ｃは、本発明の実施形態の核酸の抽出方法を示している。図４Ａに示されるように、本発明の核酸の抽出方法は、以下のステップを含む。まず、抽出カセットが提供され、抽出カセットは液体受容モジュールおよび抽出モジュールを含み、抽出モジュールは液体受容モジュールと連通し、液体受容モジュールは、サンプル室、アルコール室、第１の混合室、第２の混合室、第１の洗剤室、第２の洗剤室、および溶離液室を含む（Ｓ１１）。次いで、アルコールがアルコール室内に充填され、第１の洗剤が第１の洗剤室内に充填され、第２の洗剤が第２の洗剤室内に充填され、且つ溶離液が溶離液室内に充填される（Ｓ１２）。次に、サンプルがサンプル室内に充填される（Ｓ１３）。次いで、サンプル室内のサンプルが加熱される（Ｓ１４）。

【0040】

図４Ｂに示されるように、一実施形態では、この方法は以下のステップを更に含む。アルコールがアルコール室からサンプル室に移動され、サンプルとアルコールを混ぜて混合液とする（Ｓ１５）。次に、混合液が第１の混合室内に移動され、次いで混合液が第１の混合室と第２の混合室との間で繰り返し移動され、サンプルとアルコールを混合させる（Ｓ１６）。次に、混合液が抽出モジュール内に移動され、核酸が抽出モジュールによって混合液から取得される（Ｓ１７）。次いで、混合液が抽出モジュールの第１の廃液室内に移動される（Ｓ１８）。

【0041】

図４Ｃに示されるように、一実施形態では、この方法は以下のステップを更に含む。第１の洗剤が第１の洗剤室から第１の混合室および第２の混合室に順に移動され、第１の混合室および第２の混合室を洗浄する（Ｓ２１）。次いで、第１の洗剤が抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する（Ｓ２２）。次に、第１の洗剤が抽出モジュールの第１の廃液室に移動される（Ｓ２３）。次に、第２の洗剤が第２の洗剤室から第１の混合室および第２の混合室に順に移動され、第１の混合室および第２の混合室を洗浄する（Ｓ２４）。次に、第２の洗剤が抽出モジュールに移動されて抽出モジュールを洗浄する（Ｓ２５）。次に、第２の洗剤の少なくとも一部が抽出モジュールの第２の廃液室に移動される（Ｓ２６）。次いで、溶離液が溶離液室から抽出モジュールに移動され、抽出モジュールから核酸を取り出す（Ｓ２７）。

【0042】

１つの実験において、出願人は、高濃度の核酸（Ｍｈプラスミド：１０６コピー／ｍＬ、ＣｙｔＢプラスミド）を含有する口腔細胞保存液を被試験の陽性サンプルとして用い、核酸を含有しない口腔細胞保存液を被試験の陰性サンプルとして用い、陽性サンプルと陰性サンプルの交互テストを行う。陽性サンプルのテスト結果の後の陰性サンプルのテスト結果は、核酸が検出されないことを確認することが望ましい。本発明の実施形態の抽出カセットが交差汚染を効果的に防止できることが実験的に検証された。

【0043】

テスト１： 高濃度の陽性サンプルと陰性サンプルを交互に４回試験する（試験順序：陽性→陰性→陽性→陰性）
結果：陰性サンプル内に核酸は検出されなかった。

【0044】

【表1】

【0045】

テスト２： ５回の高濃度の陽性サンプルテスト後の陰性サンプルテスト（試験順序：陽性→陽性→陽性→陽性→陰性）
結果：陰性サンプル内に核酸は検出されなかった。

【0046】

【表2】

【0047】

クレーム要素を変えるための、請求項における「第１の」、「第２の」、「第３の」等の序数詞の使用は、それ自体が、１つのクレーム要素を他のクレーム要素と比較して優先度、序列、又は順序、もしくは方法を実施する行為の時間的順序を示唆するものではなく、特定の名前を有する１つのクレーム要素を同じ名前を有する他の要素から区別するためのラベルとして（だけ、序数詞を）使用している。

【0048】

本発明は、例として及び望ましい実施の形態によって記述されているが、本発明は開示された実施形態に限定されるものではない。逆に、当業者には自明の種々の変更及び同様の配置をカバーするものである。よって、添付の特許請求の範囲は、最も広義な解釈が与えられ、全てのこのような変更及び同様の配置を含むべきである。

【図1A】

【図1B】

【図2A】

【図2B】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図3F】

【図3G】

【図3H】

【図3I】

【図4A】

【図4B】

【図4C】