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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6689848
(24)【登録日】2020年4月10日
(45)【発行日】2020年4月28日
(54)【発明の名称】トリペプチド化合物、その調製方法及びその用途
(51)【国際特許分類】
C07K 5/06 20060101AFI20200421BHJP
A61P 9/12 20060101ALI20200421BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20200421BHJP
A61P 9/04 20060101ALI20200421BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20200421BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20200421BHJP
A61P 9/06 20060101ALI20200421BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20200421BHJP
A61P 5/00 20060101ALI20200421BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20200421BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20200421BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20200421BHJP
A61K 38/06 20060101ALI20200421BHJP
【ＦＩ】
C07K5/06
A61P9/12
A61P9/00
A61P9/04
A61P9/10
A61P13/12
A61P9/06
A61P3/10
A61P5/00
A61P3/06
A61P3/04
A61P27/02
A61K38/06
【請求項の数】7
【全頁数】66
(21)【出願番号】特願2017-527865(P2017-527865)
(86)(22)【出願日】2015年11月27日
(65)【公表番号】特表2018-505847(P2018-505847A)
(43)【公表日】2018年3月1日
(86)【国際出願番号】CN2015095758
(87)【国際公開番号】WO2016082786
(87)【国際公開日】20160602
【審査請求日】2017年7月21日
(31)【優先権主張番号】201410705180.3
(32)【優先日】2014年11月27日
(33)【優先権主張国】CN
(73)【特許権者】
【識別番号】508340639
【氏名又は名称】西北大学
(74)【代理人】
【識別番号】110000796
【氏名又は名称】特許業務法人三枝国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ジョン シャオフェイ
(72)【発明者】
【氏名】パイ ヤージュン
(72)【発明者】
【氏名】チン ファンガン
(72)【発明者】
【氏名】リュウ ペイ
(72)【発明者】
【氏名】ファン ジァチェン
(72)【発明者】
【氏名】フゥー シールイ
(72)【発明者】
【氏名】ワン シャオシャオ
【審査官】
坂崎 恵美子
(56)【参考文献】
【文献】
国際公開第２００４／０２４７５４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
Journal of Medicinal Chemistry，１９９６年，Vol.39, No.13，p.2594-2608
【文献】
Tetrahedron Ltters，１９８６年，Vol.27, No.16，p.1757-1758
【文献】
Biochemistry，１９８３年，Vol.22，p.1990-1995
【文献】
Journal of the Chemical Society, Perkinson Transactions I，１９８４年，Vol.1984，p.29-39
【文献】
Advances in Experimental Medicine and Biology，１９８６年，Vol.198A，p.427-433
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ｃ０７Ｋ ５／０６
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＷＰＩＤＳ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
以下の構造：
の化合物から選択される、トリペプチド化合物。
【化1】
【請求項2】
請求項１に記載の化合物の鏡像異性体、互変異性体、立体異性体、回転異性体、ジアステレオ異性体又はラセミ体。
【請求項3】
請求項１に記載の化合物の薬学的に許容可能な塩であって、該薬学的に許容可能な塩が薬学的に許容可能な酸性塩及び薬学的に許容可能な塩基性塩を含み、前記薬学的に許容可能な酸性塩が以下の酸：硫酸、硫酸水素塩、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ピルビン酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、安息香酸、樟脳酸、フマル酸、シュウ酸、コハク酸、カンファースルホン酸、マレイン酸、サリチル酸又はα−乳酸の１つにより形成される塩を含み、前記薬学的に許容可能な塩基性塩が以下の塩基：リチウム、ナトリウム及びカリウムを含むアルカリ金属；マグネシウム及びカルシウムを含むアルカリ土類金属；水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、ブチルリチウム、アンモニウム、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、オルニチン、アルギニン、リシン又はヒスチジンの１つにより形成される塩を含む、薬学的に許容可能な塩。
【請求項4】
請求項１に記載の化合物の溶媒和混合物であって、溶媒和物が水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、酢酸エチル及びＤＭＳＯから選択される１つ、又はそれらの組合せである、溶媒和混合物。
【請求項5】
高血圧及びその合併症の予防法、治療又は遅延のための薬剤の製造における請求項１に記載の化合物の使用であって、該合併症が冠動脈性心疾患、狭心症、急性心不全、慢性鬱血性心不全、心筋梗塞及び後遺症、鬱血性心疾患、心筋虚血、心筋炎、心筋線維症、心筋肥大、アテローム性動脈硬化症、良性小動脈性腎硬化症、悪性小動脈性腎硬化症、血管増殖異常及びリモデリング、血管新生関連疾患（新生血管黄斑症等）、高アルドステロン症、不整脈、腎疾患、糖尿病、脳卒中、血栓症、腎不全（糖尿病性腎症等）、高脂血症、肥満、高血糖、網膜動脈硬化症並びに高血圧性眼底病変の１つ又は複数を含む、使用。
【請求項6】
請求項１に記載の化合物、又は請求項３に記載の薬学的に許容可能な塩、及び薬学的に許容可能な担体、賦形剤若しくは希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項7】
高血圧及びその合併症の予防法、治療又は遅延のための薬剤の製造における請求項６に記載の医薬組成物の使用であって、該合併症が冠動脈性心疾患、狭心症、心不全（急性又は慢性鬱血性心不全）、心筋梗塞及び後遺症、鬱血性心疾患、心筋虚血、心筋炎、心筋線維症、心筋肥大、アテローム性動脈硬化症、良性小動脈性腎硬化症、悪性小動脈性腎硬化症、血管増殖異常及びリモデリング、血管新生関連疾患（新生血管黄斑症等）、高アルドステロン症、不整脈、腎疾患、糖尿病、脳卒中、血栓症、腎不全（糖尿病性腎症等）、高脂血症、肥満、高血糖、網膜動脈硬化症並びに高血圧性眼底病変の１つ又は複数を含む、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規の式（Ｉ）の化合物及び対応する薬学的に許容可能な塩に関する。本発明は、上記化合物又はその対応する塩若しくは中間体を調製する方法にも関する。本発明は上記化合物の医薬組成物にも関する。上記化合物はアンジオテンシン変換酵素を阻害する生物活性を有し、該化合物及びその医薬組成物は高血圧及び他の心脳血管系疾患（cardiocerebral vascular system diseases）の予防及び治療において役割を果たす。
【背景技術】
【0002】
２０１３年世界保健デーのテーマは高血圧の管理である。世界保健機関（ＷＨＯ）が発表した調査データによると、高血圧及びその関連合併症はヒトの生命及び健康を脅かす主要な疾患の１つとなっており、その罹患率及び死亡率は腫瘍性疾患を超え、第１位である。世界的に約１０億人の高血圧患者が存在し、毎年７１０万件の心血管系死亡につながり、管理しなければ２０２５年には患者数は１５億６千万人へと増大すると考えられている。中国疾患管理予防センター（Chinese Center For Disease Control And Prevention）の慢性非伝染性疾患予防管理センター（Chronic Noncommunicable Disease Prevention and Control Center）は最新の研究結果を発表し、２０１０年に中国の成人における高血圧の有病率は３３．５％に達し、疾患者の総数は３億３０００万人を超えると推定した。高血圧は心疾患、脳卒中、腎疾患及び糖尿病の罹患率及び死亡率にとって最も重要な危険因子である。年間約２００万件の死亡が高血圧と関連し、高血圧は重大な公衆衛生問題となっている（非特許文献１）。高血圧及びその合併症は社会及び家族に対して大きな経済的負担を強いている。これまで、高血圧及びその合併症の治療の研究には大きな進展が見られているが、高血圧患者の苦痛は未だ完全に解消することができていない。同時に、蔓延する高血圧及びその合併症の危険性により抗高血圧薬市場が急速な発展を遂げている。過去３０年間にわたって、高血圧は主として薬剤によって治療されており、利尿薬、β−受容体遮断薬、α−受容体遮断薬、カルシウム拮抗薬（ＣＣＢ）、アンジオテンシン変換酵素阻害薬（ＡＣＥＩ）及びアンジオテンシン受容体拮抗薬（ＡＲＢ）を含む６つの抗高血圧薬カテゴリー、並びにそれらの種々の組合せが徐々に開発されている。
【0003】
アンジオテンシン変換酵素阻害（ＡＣＥＩ）については、１９８１年のカプトプリルの出現以来、親核（parent nucleus）としてプロリンを用い、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ、亜鉛イオン含有エキソペプチダーゼ）を標的とする薬物の設計が抗高血圧剤分野において研究のホットスポットとなっており、チオール、カルボン酸、リン酸及び他の主要官能基を含有するジペプチド及びトリペプチドのＡＣＥＩ薬及びリード化合物が首尾よく設計されている。これまで、少なくとも１７種のＡＣＥＩ薬が高血圧治療の臨床第一選択薬となっている。他の抗高血圧薬は異なる重点を有し、特にＡＲＢ抗高血圧薬がそれらの長時間効果及び少ない副作用のために徐々に抗高血圧薬の重要な部分となってきている。しかしながら、臨床例では高血圧患者は糖尿病、腎疾患、並びに他の心血管疾患及び脳血管疾患を伴うことが多い。単独の抗高血圧薬では多くの場合、望ましい効果を達成することができないため、２つ以上の抗高血圧薬の組合せが臨床抗高血圧薬のトレンドとなっている。したがって、複数の適応症に対してより効果的であり、好適な多重効果抗高血圧薬が開発される傾向にある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0004】
【非特許文献1】China News Network, October 10, 2010 16:26
【発明の概要】
【0005】
本発明は、式（１）の構造を有するトリペプチド化合物を提供する：【化1】
Ｒは式（ＩＩ）：
【化2】
ここで式（ＩＩ）において、
Ｒ１は水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、アシル、アロイル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール又はヘテロアラルキルから選択され、
Ｒ２は水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、アシル、アロイル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール、ヘテロアラルキル、アルキルチオ、アラルキルチオ、アリールチオ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＯ２又はＣＮから選択され、
Ｒ１及びＲ２は同じであるか又は異なり、
ｎ＝０、１、２、３、４又は５であり、ｎ≧２である場合、複数のＲ１は同じであるか又は異なり、
ｍ＝０、１、２、３、４又は５であり、ｍ≧２である場合、複数のＲ２は同じであるか又は異なり、
Ｗは、
【化3】
【化4】
Ｘは酸素又は水素から選択され、
ここで式（Ｉ）において、
Ｒ’は式（ＩＩＩ）：
【化5】
Ｒ’がＬ−アミノ酸若しくはＤ−アミノ酸、又はアミノ酸誘導体の残基である場合、
【化6】
【化7】
【化8】
【化9】
Ｒ’が存在しない場合、
【化10】
【化11】
ここで式（ＩＩＩ）においてＲ４及びＲ５は各々独立して水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール又はヘテロアラルキルから選択され、Ｒ４及びＲ５は同じであるか又は異なり、
ここで式（Ｉ）において、
Ｒ’’は式（ＩＶ）：
【化12】
ここで式（ＩＶ）において、
Ｙは酸素、窒素又は硫黄から選択され、
Ｙが窒素である場合、Ｒ’’’’はＲ７及びＲ８であり、Ｒ’’は、
【化13】
Ｙが酸素である場合、Ｒ’’’’はＲ９であり、Ｒ’’は−ＯＲ９であり、
Ｙが硫黄である場合、Ｒ’’’’はＲ１０であり、Ｒ’’は−ＳＲ１０であり、
ここでＲ７、Ｒ８、Ｒ９及びＲ１０は同じであっても又は異なっていてもよく、各々独立して水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、ヘテロアリール又はヘテロアラルキルから選択され、
ここで式（Ｉ）において、
Ｒ’’’は水素又はアルキルから選択され、
Ａ＝炭素であり、
Ｌは水素、アルキル、置換アルキル、アリール又は置換アリールから選択され、
Ｄは炭素であるか又は存在せず、ｔ＝０、１、２、３であり、
Ｄが炭素であり、かつＢが炭素である場合、Ａは炭素−炭素二重結合若しくは炭素−炭素単結合によってＢに連結し、Ｋ及びＢ及びＤは環系内にあるか、又はＡは炭素−炭素二重結合若しくは炭素−炭素単結合によってＢに連結し、ＫはＢに連結し、Ｄに連結せず、
Ｋ及びＢ及びＤが環系内にある場合、Ｋは炭素数２〜８のアルキル若しくはヘテロアルキル若しくは炭素数３〜８のアルケニルから選択されるか、又はＫがＢ及びＤとともにアリール、置換アリール、ヘテロアリール若しくは置換ヘテロアリールを形成し、
ＫがＢに連結し、Ｄに連結しない場合、Ｋは水素、アルキル、ヘテロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アルケニル、アルキニル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、アリール、アラルキル、ヘテロアリール又はヘテロアラルキルから選択され、
Ｄが炭素であり、かつＢが硫黄である場合、Ａは炭素−硫黄単結合を介してＢに連結し、Ｋは存在せず、
Ｄが存在しない場合、Ｂは炭素であり、Ｋは水素であり、
ここでアルキル基、シクロアルキル基、ヘテロアルキル基、ヘテロシクリル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アラルキル基、ヘテロアリール基及びヘテロアラルキル基は各々非置換であっても、又はヒドロキシ基、アルコキシ基、アリールオキシ基、チオ基、チオアルキル基、アリールチオ基、アミノ基、アミド基、アルキルアミノ基、アリールアミノ基、アルキルスルホニル基、アリールスルホニル基、スルホンアミド基、アルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、アルキルスルホンアミド基、アリールスルホンアミド基、ケト基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基、カルボキサミド基、アルコキシカルボニルアミノ基、アルコキシカルボニルオキシ基、アルキルウレイド基、アリールウレイド基、ハロ基、シアノ基若しくはニトロ基から選択される１つ若しくは複数の置換基で任意に置換されていてもよい）。
【0006】
任意に、Ｒ基：【化14】
【化15】
【0007】
任意に、Ｒ’基：【化16】
【化17】
【0008】
任意にＹが酸素である場合、Ｒ９はメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又は以下の構造：【化18】
【0009】
任意にＹが窒素である場合、Ｒ’’は、【化19】
【0010】
任意にＹが硫黄である場合、Ｒ’’は、【化20】
【0011】
任意に式（Ｉ）が以下の式の構造：【化21】
【0012】
任意に上に記載のトリペプチド化合物は、以下の構造：
【0013】
【表1】
【0014】
本発明はまたＹが酸素である上に記載の化合物の加水分解物を提供する。
【0015】
本発明はまた上に記載の化合物の鏡像異性体、互変異性体、立体異性体、回転異性体、ジアステレオ異性体又はラセミ体を提供する。
【0016】
本発明はまた上に記載の化合物の薬学的に許容可能な塩及び薬学的に許容可能なエステルであって、該薬学的に許容可能な塩が薬学的に許容可能な酸性塩及び薬学的に許容可能な塩基性塩を含み、薬学的に許容可能な酸性塩が以下の酸：硫酸、硫酸水素塩、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ピルビン酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、安息香酸、樟脳酸、フマル酸、シュウ酸、コハク酸、カンファースルホン酸、マレイン酸、サリチル酸又はα−乳酸の１つにより形成される塩を含み、薬学的に許容可能な塩基性塩が以下の塩基：リチウム、ナトリウム及びカリウムを含むアルカリ金属；マグネシウム及びカルシウムを含むアルカリ土類金属；水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、ブチルリチウム、アンモニウム、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、オルニチン、アルギニン、リシン又はヒスチジンの１つにより形成される塩を含み、該薬学的に許容可能なエステルが化合物中のヒドロキシル基又はフェノール性ヒドロキシル基と酸とにより形成されるエステルを含む、薬学的に許容可能な塩及び薬学的に許容可能なエステルを提供する。
【0017】
本発明はまた上に記載の化合物の溶媒和混合物であって、溶媒和物が水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ブタノール、酢酸エチル及びＤＭＳＯから選択される１つ、又はそれらの組合せである、溶媒和混合物を提供する。
【0018】
本発明はまた上に記載の化合物を調製する方法であって、【化22】
Ｙが窒素又は硫黄から選択される場合、工程（２）は化合物（Ｉ’）の合成後に終了するか、又は工程（２’）は化合物（Ｉ’’）の合成後に終了し、
Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｌ、Ｋ、ｎ、ｍ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ’’’、Ｒ’’’’、ｔ、Ｗ及びＹは請求項１〜７のいずれか一項に記載の通りである；
ａ：α−アミノ酸のアミノの保護；Ｐは好適な保護基を表し、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、アリルオキシカルボニル（Ａｌｌｏｃ）、ベンジルオキシカルボニル、トリチル、ベンジルオキシメチル、フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、フタロイル、ジチオスクシニル、メトキシホルミル、エトキシホルミル、ベンゼンスルホニル、ｐ−トルエンスルホニル、２−（トリメチルシリル）エタンスルホニル、ベンジル（Ｂｎ）、トリチル（Ｔｒ）又はアリルから選択される；
ｂ：ペプチド結合の合成の条件；
ｃ：工程ａに対応する脱保護；
ｅ：ｂと同じ；
ｆ：ｃと同じ；
ｇ：ｂと同じ；
ｇ’：還元的アミノ化；
ｈ：エステル加水分解の条件；
ここで「＊」は不斉中心を表し、「＊」を含む化合物にはその構造式の全てのキラル異性体が含まれる）を提供する。
【0019】
他の態様において、本発明は、高血圧及びその合併症の予防法、治療又は遅延のための薬剤の製造における上に記載の化合物の使用であって、該合併症が冠動脈性心疾患、狭心症、急性心不全、慢性鬱血性心不全、心筋梗塞及び後遺症、鬱血性心疾患、心筋虚血、心筋炎、心筋線維症、心筋肥大、アテローム性動脈硬化症、良性小動脈性腎硬化症、悪性小動脈性腎硬化症、血管増殖異常及びリモデリング、血管新生関連疾患（新生血管黄斑症等）、高アルドステロン症、不整脈、腎疾患、糖尿病、脳卒中、血栓症、腎不全（糖尿病性腎症等）、高脂血症、肥満、高血糖、網膜動脈硬化症並びに高血圧性眼底病変の１つ又は複数を含む、使用を提供する。
【0020】
他の態様において、本発明は、上に記載の化合物、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物の薬学的に許容可能な塩、上に記載の化合物の薬学的に許容可能な担体、賦形剤及び希釈剤を含む医薬組成物を提供する。
【0021】
他の態様において、本発明は、高血圧及びその合併症の予防法、治療又は遅延のための薬剤の製造における上に記載の医薬組成物の使用であって、該合併症が冠動脈性心疾患、狭心症、心不全（急性又は慢性鬱血性心不全）、心筋梗塞及び後遺症、鬱血性心疾患、心筋虚血、心筋炎、心筋線維症、心筋肥大、アテローム性動脈硬化症、良性小動脈性腎硬化症、悪性小動脈性腎硬化症、血管増殖異常及びリモデリング、血管新生関連疾患（新生血管黄斑症等）、高アルドステロン症、不整脈、腎疾患、糖尿病、脳卒中、血栓症、腎不全（糖尿病性腎症等）、高脂血症、肥満、高血糖、網膜動脈硬化症並びに高血圧性眼底病変の１つ又は複数を含む、使用を提供する。
【0022】
本発明に関わる化合物はアンジオテンシン変換酵素の生物学的活性を阻害する効果を有し、化合物自体及びその医薬組成物が高血圧、並びに他の心血管疾患及び脳血管疾患に対して予防効果及び治療効果を有する。
【図面の簡単な説明】
【0023】
【図1】アンジオテンシン変換酵素の濃度とＯＤ ４５０ｎｍの値との間の二次曲線当てはめ図（quadratic curve fitting chart）である。
【図2】ＳＨＲラットにおける２２１Ｓ−１ａの胃内投与後６時間にわたる動脈収縮期圧の変化を示す図である。
【図3】ＳＨＲラットにおける異なる用量（１＃、３＃及び５＃）の２２１Ｓ−１ａの胃内投与後６時間にわたる動脈収縮期圧の変化を示す図である。
【図4】ＳＨＲラットにおける７日間の２２１Ｓ−１ａの胃内投与後の１４日間にわたる動脈収縮期圧の変化を示す図である。
【図5】ＳＨＲラットにおける異なる用量（２＃、４＃及び６＃）の２２１Ｓ−１ａの胃内投与後の１４時間にわたる動脈収縮期圧の変化を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0024】
伝統中国医学の一つであるタンジン（ラテン名：サルビア・ミルティオリザ・ブンゲ（Salvia miltiorrhiza Bunge））が心血管疾患及び脳血管疾患の治療に使用されている。近年、高血圧の治療におけるタンジンの相乗効果が多くの文献で報告されている（Biological & Pharmaceutical Bulletin, 2011, 34 (10), 1596-1601.、Phytotherapy Research, 2010, 24(5), 769-774.、American Journal of Physiology, 2007, 292(5, Pt. 2), H2131-H2137.、Chinese Journal of Clinical Rehabilitation, 2006, 10(23), 73-75、Medicinal and Aromatic Plants-Industrial Profiles, 2000, 14(Sage), 193-205）。プリル（pril）及びサルタン（sartan）抗高血圧薬との組合せで、タンジン薬は特に糖尿病を伴う高血圧患者において顕著な臨床効果を有する。
【0025】
ダンシェンスはタンジンの水溶性抽出物の主成分であり、そのカテコール及び乳酸構造から抗酸化、心血管保護、血管拡張の促進、血圧低下等の独自の効果を有する（Characterization of the Radical Scavenging and Antioxidant Activities of Danshensu and Salvianolic Acid B. Food and Chemical Toxicology, 2008, 46(1), 73-81、Protective effect of danshensu on endothelial vascular activity in rats with isoproterenol-induced injury and its mechanism, Chinese herbal medicine, 2013, 1: 59-64）。ポリフェノール性天然産物がアンジオテンシン変換酵素に対する阻害効果を有することが見出されている（Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitory Effects by Plant Phenolic Compounds: A Study of Structure Activity Relationships. J. Agric. Food Chem. 2013, 61, 11832-11839.、Inhibition of Angiotesin-Converting Enzyme by Quercetin Alters the Vascular Response to Brandykinin and Angiotensin I. Pharmacology, 2002, 65, 182-186.、Ferulic Acid Improves Cardiovascular and Kidney Structure and Function in Hypertensive Rats. J. Cardiovasc. Pharmacol. 2013, 61, 240-249.、Tannic Acid, an Inhibitor for Renal Angiotensin Type 1 Receptor and Hypertension in Spontaneously Hypertensive Rats. Endocr. Rev. 2012, 33, SAT-248.）。本発明では、以前の研究（中国特許出願公開第１８６８９９８号、ボルネオールβ−（３，４−ジヒドロキシフェニル）−α−ヒドロキシプロピオネート、その合成方法及び使用（borneol β-(3,4-dihydroxyphenyl)-α-hydroxypropionate, its synthesis method and use））の結果を参照することにより、従来のＡＣＥ薬の分子骨格にダンシェンス基及び他のフェノール基を導入し、同時に「君薬−使薬対（monarch drug-conductant drug pair）」及びプロドラッグ設計の概念に従ってボルネオール、メントール及び他の基を導入することで、アンジオテンシン変換酵素阻害活性を有する新しいクラスの薬物を設計した。
【0026】
本発明は、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ペリンドプリル、アラセプリル、デラプリル、キナプリル、ラミプリル、シラザプリル、ベナゼプリル、ホシノプリル、ゾフェノプリル、トランドラプリル、イミダプリル、テモカプリル、スピラプリル及びモエキシプリル等の開示のアンジオテンシン変換酵素阻害薬の化学構造に言及する。
【0027】
本発明は、抗高血圧メルカプトアシルアミノ酸誘導体及びそれらの使用（Antihypertensive mercaptoacylamino acid derivatives and their use）（１９８０年、欧州特許出願公開第９８９８号）、変換酵素阻害薬５，６−ジヒドロ［１，４］チアジノ［４，３−ａ］キノリン−１（２Ｈ），４（４ａＨ）−ジオンの調製（Preparation of converting enzyme inhibitor 5,6-dihydro[1,4]thiazino[4,3-a]quinoline-1(2H),4(4aH)-dione）（１９８１年、米国特許第４２７３９２７号）、［４Ｒ］−３−（ω−アロイルプロピオニル）−４−チアゾリジンカルボン酸及びエステル（[4R]-3-(ω-Aroylpropionyl)-4-thiazolidinecarboxylic acids and esters）（１９８３年、米国特許第４３７４２４９号）等のアンジオテンシン変換酵素阻害薬に関する特許文献も参照する。
【0028】
本発明は、以下の化合物を開示する国際公開第９３０２６７９号（１９９３年）、アンジオテンシン変換酵素阻害薬の投与によって月経前症候群を治療する方法（Method of treating premenstrual syndrome by administration of an angiotensin-converting enzyme inhibitor）も参照する。【化23】
【0029】
本発明は、以下の化合物を開示する米国特許出願公開第２００７００３２６６１号（２００７年）、ペリンドプリルの中間体を調製するプロセス（Process for the preparation of intermediates of perindopril）も参照する。【化24】
【0030】
本発明の全文で他に指定のない限り、以下の名称又は用語の定義は本発明の全ての態様に適用される。
【0031】
「アルキル」という用語はメチル、エチル、プロピル及びイソプロピルを含むが、これらに限定されない、１個〜１５個の炭素原子、好ましくは１個〜６個の炭素原子を含有する直鎖又は分岐の脂肪族炭化水素基を意味する。
【0032】
「置換アルキル」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたアルキル基を意味し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。
【0033】
「アルケニル」という用語は少なくとも１つのＣ＝Ｃ二重結合と２個〜１５個の炭素原子、好ましくは２個〜８個の炭素原子とを含有する直鎖又は分岐又は環状の脂肪族炭化水素ラジカルを指す。
【0034】
「置換アルケニル」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたアルケニル基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。
【0035】
「アルキニル」という用語は少なくとも１つのＣ≡Ｃ二重結合と２個〜１５個の炭素原子、好ましくは２個〜８個の炭素原子とを含有する直鎖又は分岐又は環状の脂肪族炭化水素ラジカルを指す。
【0036】
「置換アルキニル」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたアルキニル基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。
【0037】
「アリール」という用語は６個〜１４個の炭素原子、好ましくは６個〜１２個の炭素原子を含む芳香族の単環又は多環構造を指す。
【0038】
「置換アリール」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたアリール基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。
【0039】
「ヘテロアリール」という用語は５個〜１４個の炭素原子、好ましくは５個〜１２個の炭素原子を含み、環の１つ又は複数の炭素原子が窒素、酸素及び硫黄を含むが、これらに限定されない他の元素で置換されている芳香族の単環又は多環構造を指す。好ましいヘテロアリール基としては、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、キノリル、イソキノリル、ピラゾリル、フリル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、ピロリル、ベンゾフラニル及びベンゾチエニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0040】
「置換ヘテロアリール」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたヘテロアリール基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。好ましい置換アラルキル基としては、テトラメチルピラジンアルコール基が挙げられるが、これに限定されない。
【0041】
「アラルキル」という用語はアリール−アルキル基を意味する。ここでアリール及びアルキルは上記の通りである。好ましいアラルキル基としては、ベンジル及びフェネチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0042】
「置換アラルキル」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたアラルキル基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。好ましい置換アラルキル基としては、ｐ−メチルベンジル及びアサルム（asarum：カンアオイ）アルコール基が挙げられるが、これらに限定されない。
【0043】
「シクロアルキル」という用語は通例、３個〜１０個の炭素原子、好ましくは３個〜７個の炭素原子を含有する非芳香族の単環又は多環構造を指し、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0044】
「置換シクロアルキル」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたシクロアルキル基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。好ましい置換シクロアルキル基は３個〜７個の炭素原子を含み、デキストロボルニル（dextrobornyl）、レボメントール及びノルボルニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0045】
「ハロゲン」という用語はフッ素、塩素、臭素及びヨウ素を意味する。好ましいハロゲンとしてはフッ素、塩素及び臭素が挙げられる。
【0046】
「ヘテロシクリル」という用語は概して、１０個以下の環原子、好ましくは４個〜１０個の環原子を含有し、窒素原子、酸素原子、硫黄原子等の１つ又は複数の非炭素原子（単独であっても又は組み合わせて存在していてもよい）を含有する非芳香族の飽和単環式又は多環式環系であって、該環系には隣接する酸素−酸素、酸素−硫黄又は硫黄−硫黄基が存在しない、環系を意味する。好ましいヘテロシクリル基としてはピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピロリル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【0047】
「置換ヘテロシクリル」という用語は１つ又は複数の置換基で置換されたヘテロシクリル基を指し、該置換基は同じであっても又は異なっていてもよく、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、アリール、シアノ、ニトロ、ハロ、アルコキシ、アミノ、アルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、又はシクロアルキルで置換された第一級、第二級若しくは第三級アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルチオ、アルキルケト及びカルボキシルからなる群から選択される。好ましい置換ヘテロシクリル基としては、Ｎ−メチルピペラジニル、３−フルオロピペリジニル、２，６−ジメチルモルホリニル、２−メチルピロリル等が挙げられるが、これらに限定されない。
【0048】
「ヘテロアリールアルキル」という用語はヘテロアリール−アルキル基を指す。ここでヘテロアリール及びアルキルは上記の通りである。好ましいヘテロアリールアルキル基としては、２−ピリジルメチル、３−ピリジルメチル及び４−ピリジルメチルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0049】
「アシル」という用語はアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換アルキル−Ｃ（Ｏ）−、シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−、置換シクロアルキル−Ｃ（Ｏ）−及びヘテロシクリル−Ｃ（Ｏ）−を指す。ここで各基は上記の通りである。好ましいアシル基としてはアセチル、プロピオニル及びシクロブタノイルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0050】
「アロイル」という用語はアリール−Ｃ（Ｏ）−及び置換アリール−Ｃ（Ｏ）−を指す。ここで各基は上記の通りである。好ましいアロイル基としてはベンゾイル及びｐ−メチルベンゾイルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0051】
「アルコキシ」という用語はアルキル−Ｏ−及び置換アルキル−Ｏ−を指す。ここで各基は上記の通りである。好ましいアルキル基としては、メトキシ、エトキシ、イソプロピル、デキストロボルニルオキシ、レボメントールオキシ、２，３，４−トリメトキシベンゼン−２’−アリルオキシ（アサルムアルコール（asary-alcohol）オキシ基）及びテトラメチルピラジンオキシ基が挙げられるが、これらに限定されない。
【0052】
「アラルキルオキシ」という用語はアラルキル−Ｏ−及び置換アラルキル−Ｏ−を指す。ここで各基は上記の通りである。好ましいアラルキルオキシ基としては、ベンジルオキシ及び，３，４−トリメトキシベンゼン−２’−アリルオキシ（アサルムアルコールオキシ基）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0053】
「アリールオキシ」という用語はアリール−Ｏ−及び置換アリール−Ｏ−を指す。ここで各基は上記の通りである。好ましいアリールオキシ基としては、フェノキシ及びｐ−メチルフェノキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【0054】
「アルキルチオ」という用語はアルキル−Ｓ−基を指す。ここでアルキル部分は上記の通りである。好ましいアルキルチオ基としては、メチルチオ、エチルチオ及びプロピルチオが挙げられるが、これらに限定されない。
【0055】
「アラルキルチオ」という用語はアラルキル−Ｓ−基を指す。ここで「アラルキル部分」は上記の通りである。好ましいアラルキルチオ基としては、フェニルメチルチオ及びフェニルエチルチオが挙げられるが、これらに限定されない。
【0056】
「アリールチオ」という用語はアリール−Ｓ−基を指す。ここでアリール基は上記の通りである。好ましいアリールチオ基としては、フェニルチオが挙げられるが、これに限定されない。
【0057】
「アルキルスルホニル」という用語はアルキル−Ｓ（Ｏ２）−基を指す。ここでアルキルは上記の通りである。好ましいアルキルスルホニル基としては、メチルスルホニル及びエチルスルホニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0058】
「アリールスルホニル」という用語はアリール−Ｓ（Ｏ２）−基を指す。ここでアリールは上記の通りである。好ましいアリールスルホニル基としては、ベンゼンスルホニル及びナフチルスルホニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0059】
「少なくとも１つ」という用語は１つ又は複数を意味する。
【0060】
「置換された」という用語は、特定の原子の通常の原子価を満たし、安定な化合物をもたらす限りにおいて指定の基が特定の原子上の１つ又は複数の水素に置き換わることを意味する。
【0061】
「任意に置換された」という用語は特定の基、ラジカル又は部分を置換に選択することを意味する。
【0062】
３． 塩及び溶媒和物本発明において設計されるトリペプチド及びその類似体には、その「プロドラッグ」、「溶媒和物」、「塩」（「酸性塩」、「塩基性塩」及び分子内塩を含む）及び「エステル」も含まれる。トリペプチドの「プロドラッグ」、「溶媒和物」、「塩」及び「エステル」は全て本発明の範囲内に含まれる。「溶媒和物」及び「塩」は対応する化合物の遊離形態に相当する。
【0063】
「プロドラッグ」という用語は、式（Ｉ）の化合物又は塩、その溶媒和物若しくはそのエステルへと代謝されるか、又はｉｎ ｖｉｖｏで化学的に変換され得る薬物の前駆体化合物を指す。
【0064】
「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物が１つ又は複数の溶媒分子と物理的に会合していることを意味する。この物理的会合は、水素結合、ファンデルワールス力等を含む様々な程度のイオン結合及び共有結合を伴う。「溶媒和物」は溶液相及び単離可能な溶媒和物という２つの部分からなる。好適な溶媒和物としては、水和物、メタノレート、エタノレート、ＤＭＳＯ溶媒和物及び酢酸エチル溶媒和物が挙げられるが、これらに限定されない。
【0065】
「塩」という用語は酸性塩、塩基性塩及び分子内塩を含み、本発明において設計されるトリペプチド化合物（式（Ｉ））と無機酸又は有機酸とによって形成される酸性塩、無機塩基及び有機塩基とによって形成される塩基性塩、並びにトリペプチド化合物（式（Ｉ））中に含有される塩基性基（例えばアミノ基、グアニジノ基、イミダゾリル基又はインドリル基等）と酸性基（例えばカルボン酸、スルホン酸アルキル又はリン酸等）とによって形成される分子内塩を意味する。
【0066】
酸性塩を形成するのに使用される酸としては、下記酸が挙げられるが、これらに限定されない：硫酸、硫酸水素塩、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硝酸、炭酸、ホウ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ピルビン酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、安息香酸、樟脳酸、フマル酸、シュウ酸、コハク酸、カンファースルホン酸、マレイン酸、サリチル酸及びα−乳酸。加えて、P. Stahl, Camille G. eds. Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use, 2002, Zurich: Wiley-VCHに記載の薬学的に許容可能な塩を形成する酸が引用することにより本明細書の一部をなす。
【0067】
塩基性塩を形成するのに使用される塩基としては、下記塩基が挙げられるが、これらに限定されない：リチウム、ナトリウム及びカリウム等のアルカリ金属；マグネシウム及びカルシウム等のアルカリ土類金属；水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水素化リチウム、水素化ナトリウム、ブチルリチウム、アンモニウム、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、オルニチン、アルギニン、リシン又はヒスチジン等の塩基性アミノ酸。
【0068】
加えて、本発明のトリペプチド化合物によって形成される薬学的に許容可能なエステルは、化合物中のヒドロキシル基又はフェノール性ヒドロキシル基とカルボン酸（アルキルカルボン酸、置換アルキルカルボン酸、アリールカルボン酸、置換アリールカルボン酸、アラルキルカルボン酸、置換アラルキルカルボン酸、シクロアルキルカルボン酸、置換シクロアルキルカルボン酸、複素環カルボン酸及びヘテロアリールアルキルカルボン酸、例えば酢酸エステル、プロピオン酸エステル、安息香酸エステル及びニコチン酸エステルを含むが、これらに限定されない）とから形成されるカルボン酸エステル；化合物中のヒドロキシル基又はフェノール性ヒドロキシル基とスルホン酸（アルキルスルホン酸、アリールスルホン酸及び置換アリールスルホン酸エステル、例えばメタンスルホン酸エステル、ベンゼンスルホン酸エステル、ｐ−トルエンスルホン酸エステルを含むが、これらに限定されない）とから形成されるスルホン酸エステル；及び化合物中のヒドロキシル基又はフェノール性ヒドロキシル基とアミノ酸（α−アミノ酸、β−アミノ酸、ω−アミノ酸、例えばアラニンエステル及びグルタミン酸エステルを含むが、これらに限定されない）とから形成されるエステル；及び化合物中のヒドロキシル基又はフェノール性ヒドロキシル基とリン酸、モノアルキルリン酸、ジアルキルリン酸、亜リン酸（亜リン酸ジエチル等）とから形成されるリン酸エステルを意味する。
【0069】
加えて、本発明のトリペプチド化合物、並びに薬学的に許容可能な（非毒性の生理学的に許容可能な）「溶媒和物」、「塩」（「酸性塩」、「塩基性塩」及び分子内塩を含む）、「エステル」、関連する「プロドラッグ」、並びに関係のある鏡像異性体、立体異性体、回転異性体、互変異性体、位置異性体及びラセミ体が本発明の範囲内に含まれる。
【0070】
加えて、合成プロセスにおいて対象の分子上の感受性又は反応性基を保護することが可能である。代表的な保護基は、T. W. Greene and P. G. M. Wuts "Protective Groups in Organic Synthesis" John Wiley & Sons, Inc., New York, 1999（その内容全体が引用することにより本明細書の一部をなす）に記載されている。対応する保護基は当該技術分野で既知の方法を用いて付加又は除去することができる。
【0071】
４． 医薬組成物「組成物」という用語は特定の量の特定の成分を含む生成物、及び特定の量の特定の成分の組合せにより直接又は間接的に形成される任意の生成物を指す。
【0072】
「哺乳動物」はヒト及び他の哺乳動物を意味する。
【0073】
「患者」はヒト（people）及び動物を含む。
【0074】
「有効量」という用語は、アンジオテンシン変換酵素を阻害し、それにより予防法、治療、改善又は阻害の所望の効果をもたらすのに効果的な本明細書に記載の化合物又は医薬組成物の量を意味する。
【0075】
「薬学的に許容可能な担体」という用語は、動物に投与した場合に有害反応をもたらさず、医薬担体として働く、本発明の組成物の配合に十分な純度及び品質を有する化合物及び組成物を指す。
【0076】
「薬学的に許容可能な希釈剤」という用語は、動物に投与した場合に有害反応をもたらさず、医薬希釈剤として働く、本発明の組成物の配合に十分な純度及び品質を有する化合物及び組成物を指す。
【0077】
医薬組成物は概して、少なくとも１つの本発明の化合物と１つ又は複数の薬学的に許容可能な担体とを含む。固体剤形には、充填剤（例えばデンプン、微結晶性セルロース、スクロース、グルコース、ラクトース、ソルビトール、マンニトール等）、結合剤（ゼラチン、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、アカシアゴム）、保湿剤（グリセロール）、崩壊剤（炭酸カルシウム、デンプン、寒天、アルギン酸）、溶解遅延剤（パラフィン）、吸収促進剤（第四級アンモニウム化合物）、湿潤剤（セチルアルコール、モノステアリン酸グリセリル）、吸着剤（カオリン、ベントナイト）、滑沢剤（タルク；ポリエチレングリコール固体；ステアリン酸のカリウム塩、カルシウム塩又はマグネシウム塩；ラウリル硫酸塩；塩化ナトリウム、酢酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウムを含む水溶性滑沢剤）、着色剤（クレイ、アルミナ）及び緩衝剤が含まれていてもよい。
【0078】
本発明の化合物は、従来の医薬プロセスに従って錠剤及びカプセル等の好適な剤形へと配合することができる。
【0079】
５． 障害及び疾患本発明の化合物（Ｉ）、並びに薬学的に許容可能な（非毒性の生理学的に許容可能な）塩、エステル及び医薬組成物は心血管疾患及び脳血管疾患、特に高血圧と関連する心血管疾患及び脳血管疾患、並びにその合併症の予防、治療又は遅延に有用である。
【0080】
障害及び疾患には、高血圧、冠動脈性心疾患、狭心症、心不全（急性又は慢性鬱血性心不全）、心筋梗塞及び後遺症、鬱血性心疾患、心筋虚血、心筋炎、心筋線維症、心筋肥大、アテローム性動脈硬化症、良性小動脈性腎硬化症、悪性小動脈性腎硬化症、血管増殖異常及びリモデリング、血管新生関連疾患（新生血管黄斑症等）、高アルドステロン症、不整脈、腎疾患、糖尿病、脳卒中、血栓症、腎不全（糖尿病性腎症等）、高脂血症、肥満、高血糖、網膜動脈硬化症並びに高血圧性眼底病変の１つ又は複数が含まれる。
【0081】
６． 本発明に関するアサルムアルコールを調製する方法は、（１）化合物Ｖと化合物ＶＩとを脂肪アルコール及び触媒の存在下で反応させて、化合物ＶＩＩを得ることと：
【化25】
（２）化合物ＶＩＩを還元して化合物ＶＩＩＩを得ることと：
【化26】
【0082】
工程（１）において化合物ＶＩと脂肪族アルコールとをキシレン、トルエン又はベンゼン中で３時間〜１２時間、好ましくは４時間〜１０時間還流下において反応させる。室温まで冷却した後、２，４，５−トリメトキシベンズアルデヒド（化合物Ｖ）及び触媒を反応混合物に添加し、混合物を５時間〜２４時間、好ましくは８時間〜１４時間更に還流させて化合物ＶＩＩを得る。工程（１）に使用される脂肪族アルコールは、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、ｎ−アミルアルコール及びイソアミルアルコールの１つ、又はそれらの任意の組合せ、好ましくはメタノール及びエタノールの１つ、又はそれらの任意の組合せである。脂肪族アルコールと化合物ＶＩとのモル比は１：１〜１：１０であり、好ましくは脂肪族アルコールと化合物ＶＩとのモル比は１：１〜１：４である。使用される触媒はピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、２，６−ジメチルピリジン、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルピリジン、４−ジメチルピリジン、ピペリジン及びテトラヒドロピロールの１つ、又はそれらの任意の組合せである。触媒と２，４，５−トリメトキシベンズアルデヒドとのモル比は０．１：１〜２：１である。
【0083】
工程２において使用される還元剤は水素化ホウ素ナトリウム、ジヒドロ−ビス（２−メトキシエトキシ）アルミン酸ナトリウム、水素化アルミニウムリチウム又は水素化ジイソブチルアルミニウムであり、還元剤と化合物ＶＩＩとのモル比は１：１〜１０：１である。使用される溶媒はテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ジメチルエチルエーテル、トルエン、ベンゼン、キシレン、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、ジクロロメタン、ジクロロエタン、トリクロロメタン、テトラクロロメタン及びｎ−ヘキサンの１つ、又はそれらの任意の組合せである。反応温度は７８℃〜２５℃であり、反応時間は０．５時間〜２４時間である。略称：
ＥＤＣＩ １−エチル−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩
ＤＣＣ ジシクロヘキシルカルボジイミド
Ａｌｌｏｃ アリルオキシカルボニル
Ｆｍｏｃ フルオレニルメトキシカルボニル
Ｂｎ ベンジルトリチル
Ｔｒ トリチル
Ｔ３Ｐ（商標） １−プロピルリン酸無水物
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＭｅＯＨ メタノール
ＥｔＯＨ エタノール
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＤＭＡＰ ４−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン
ＨＡＴＵ ２−（７−アゾベンゾトリアゾール）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＰｙＢＯＰ １Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリピロリジルヘキサフルオロホスフェート
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
Ｃｂｚ ベンジルオキシカルボニル
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ＭＳ 質量分析
【0084】
以下、本発明の具体的な調製及び実施例を記載する。他に指定のない限り、これらの具体的な実施例は本発明の範囲を限定することを何ら意図するものではなく、実施例に使用される様々な材料及び方法は当業者の知識の範囲内にある。
【実施例】
【0085】
実施例１：【化27】
【化28】
【0086】
工程２：【化29】
【0087】
工程３：【化30】
【0088】
工程４：【化31】
【化32】
【0089】
工程５：【化33】
【化34】
【0090】
工程６：【化35】
【化36】
【0091】
工程７：【化37】
【化38】
【0092】
以下の実施例２〜実施例２８の式（Ｉ）の化合物を上記実施例１に記載の手順に従い、適切な出発物質及び試薬を用いて調製した。【化39】
【0093】
【表2】
【0094】
２２１Ｓ−２ａ及び２２１Ｓ−１４４ａの合成に使用したカップリング剤はＴ３Ｐ（商標）であり、７ａの合成に使用したカップリング剤はＨＡＴＵであり、使用した塩基はＤＩＰＥＡであり、２２１Ｓ−１１９ａの合成に使用したカップリング剤はＰｙＢＯＰであり、２２１Ｓ−１１ａ及び２２１Ｓ−１２ａの合成に使用したカップリング剤はＤＣＣであった。
【0095】
重要中間体Ｌ−ダンシェンスの合成は中国特許出願公開第１０３２８８６３０号に見ることができ、リグストラジン（ligustrazine）アルコールの合成はJournal of Natural Products, 2012, 75 (9), 1589-1594に見ることができ、シクロヘキサンプロリンの合成はOrg. Biomol. Chem., 2012, 10, 2840-2846に見ることができる。アサルムアルコールの合成経路は以下の通りである：【化40】
【0096】
実施例２９：【化41】
【化42】
【0097】
工程２：【化43】
【0098】
工程３：【化44】
【0099】
工程４：【化45】
【0100】
工程５：【化46】
【0101】
工程６：【化47】
【0102】
アミンを含有する他の化合物を同様に塩酸塩へと調製することができる。加えて、他の酸性塩を同様の方法で調製することができる。この場合、対応する酸を、アミン化合物を含有する溶媒にゆっくりと添加し、混合物を低温（２℃〜４℃）又は室温で２時間〜１０時間撹拌して、対応する酸性塩を得た。
【0103】
実施例３０〜実施例３５上述の実施例１９に記載の手順に従い、以下の化合物を適切な出発物質及び試薬を用いて調製した。
【0104】
【表3】
【0105】
２２１Ｓ−１５３ａの合成では、プロリン及びアラニンをＢｏｃで保護し、Ｂｏｃ脱保護反応を実施例１の工程２に従って行った。
【0106】
実施例３６：【化48】
【化49】
【0107】
工程２：【化50】
【0108】
工程３：【化51】
【0109】
工程４：【化52】
【化53】
【0110】
工程５：【化54】
【化55】
【0111】
実施例３７：【化56】
【化57】
【0112】
工程２：【化58】
【化59】
【0113】
工程３：【化60】
【化61】
【0114】
工程４：【化62】
【化63】
【0115】
工程５：【化64】
【化65】
【0116】
実施例３７：工程１：
【化66】
【0117】
工程２：【化67】
【化68】
【0118】
本発明に記載される具体的な実施例は、単に本発明の趣旨の例示的な説明にすぎない。本発明の又は添付の特許請求の範囲に規定の趣旨を逸脱することなく、記載の具体的な実施形態に対して様々な変更、追加及び代替を行うことができることは本発明が属する技術分野の当業者には明らかである。
【0119】
本発明のＬＣ−ＭＳ試験方法ＬＣ−ＱＴＯＦ ＭＳ ＆ ＭＳ／ＭＳ条件：ＨＰＬＣ機器：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＬＣ；カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＣ−Ｃ１８ ４．６×２５０ｍｍ、５μｍ；流量：０．６ｍＬ／分；カラム温度：３０℃；移動相：Ａ−Ｈ２Ｏ、０．１％酢酸／Ｂ−メタノール、Ａ：Ｂ＝２０：８０；ＭＳ機器：Ａｇｉｌｅｎｔ ６５２０ ＱＴＯＦ；イオン源：Ｄｕａｌ ＥＳＩ；イオンモード：ポジティブ；イオンスプレー電圧：３５００Ｖ；乾燥ガス温度：３５０℃；乾燥ガス流量：１０．０Ｌ／分（Ｎ２）；噴霧器圧：４５ｐｓｉ（Ｎ２）；ブレーカー電圧：１３０Ｖ；衝突エネルギー：それぞれ１０ｅＶ、２５ｅＶ及び４０ｅＶ。
【0120】
本発明は新規のアンジオテンシン変換酵素阻害薬に関し、それらの生物学的活性を以下のｉｎ ｖｉｖｏ及びｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイによって更に説明する。
【0121】
アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）活性の決定ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＣＥ活性試験
高速液体クロマトグラフィーアッセイ：Cushman et al. (Biochemical Pharmacology, 1971, 20 (7): 1637-1648.; Journal of Dairy Science, 1995, 78 (4): 777-783.)に記載の方法を参照し、本発明の化合物のアンジオテンシン変換酵素活性を報告されている方法を用いてアッセイした。この方法は、ＡＣＥ活性の連続モニタリングに好適なＡｎｇ Ｉ模倣ヒプリル−ヒスチジル−ロイシン（ＨＨＬ）の加水分解物である馬尿酸（Ｈｉｐ）の含量に基づくものであった。ＡＣＥ阻害薬を添加することで反応の進行を阻害し、それにより馬尿酸の産生を低減することができる。このため、ＡＣＥ阻害活性は阻害薬の添加の前後に産生される馬尿酸の２２８ｎｍでのＵＶ吸光度の変化を測定することによって得られる。
【0122】
材料及び方法：（１）材料：
実験装置：
【0123】
【表4】
【0124】
実験試薬：
【0125】
【表5】
【0126】
（２）実験方法２５μｌのサンプル溶液（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ塩酸緩衝液（ｐＨ＝８．３）に溶解した、３００ｍＭ ＮａＣｌを含有する、５０μｍｏｌ）及び２００μｌの３％基質ＨＨＬ（同じ緩衝液に溶解した）の混合物を３７℃で６分間維持した。５０μｌのＡＣＥ（０．５Ｕ、１．５ｍＬの同じ緩衝剤に溶解した）を添加した後、反応を３７℃で１５分間行い、次いで２５０μｌの１ｍｏｌ／Ｌ塩酸を添加して反応を停止させた。反応混合物を均一に混合し、５分間静置した。２ｍＬの酢酸エチルを添加した後、混合物を６０秒間激しく振盪し、１０００×ｇで１０分間遠心分離した。上清を１５分間沸騰水浴内に入れ、３ｍＬの脱イオン水を添加した後、混合し、静置した。馬尿酸を逆相高速液体クロマトグラフィーによって検出するために２０ｕＬの反応物をロードした（loaded）。ＡＣＥに対するサンプルの阻害効果を産生される馬尿酸の量によって判断し、緩衝液をサンプル溶液の代わりにブランク対照として使用した。ＡＣＥに対するサンプルの阻害率（％）＝（対照馬尿酸のピーク値−サンプル馬尿酸のピーク値）／対照馬尿酸のピーク値×１００％。
【0127】
クロマトグラフィー条件：紫外線検出器；波長：２２８ｎｍ；カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ ＨＣ−Ｃ１８ ４．６×２５０ｍｍ、５μｍ；流量：１．０ｍＬ／分；注入量：２０μＬ；カラム温度：３０℃；移動相：アセトニトリル−水（８０／２０）。結果を表５に示す。
【0128】
【表6】
【0129】
ｉｎ ｖｉｖｏ ＡＣＥ活性試験材料及び方法：
実験装置：
【0130】
【表7】
【0131】
実験材料：
【0132】
【表8】
【0133】
実験原理：二重抗体サンドイッチＥＬＩＳＡ法によるＡＣＥ含量の決定：抗マウスＡＣＥ抗体を酵素プレートにコーティングし、実験時にサンプル又は標準物質中のマウスＡＣＥがコーティングした抗体に結合し、遊離成分を洗い流した。ビオチン化抗マウスＡＣＥ抗体及びホースラディッシュペルオキシダーゼ標識アビジンを順次添加した。抗マウスＡＣＥ抗体がコーティングした抗体に結合したマウスＡＣＥに結合し、ビオチンがアビジンに特異的に結合することで免疫複合体が形成され、遊離成分を洗い流した。発色基質（ＴＭＢ）を添加するが、これはホースラディッシュペルオキシダーゼの触媒作用下で青色を示し、停止液の添加後に黄色となった。ＯＤ値を４５０ｎｍの波長でマイクロプレートリーダーを用いて測定した。ＡＣＥ濃度とＯＤ４５０値との間で二次非線形関係が示され、標準曲線を作成することによってサンプル中のＡＣＥの濃度を算出した。
【0134】
実験方法：（１）実験動物の処理
体重２０±２ｇの１０８匹の雄性Ｋｕｎｍｉｎｇマウスを、それぞれ１群当たり６匹のマウスで正常対照群、陽性対照カプトプリル群及び化合物２２１Ｓ群を含む１８個の群に無作為に分けた。各群の動物に、７日連続で１日１回０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ（１０ｍｌ／ｋｇ）での胃内投与を行った。最終胃内投与の２時間後に、マウスを頚椎脱臼によって屠殺し、心臓、肝臓、脳、肺、腎臓及び血液を採取した。腎臓を試験に使用し、他の組織サンプルは他の実験的試験に使用した。腎臓をＰＢＳで１０倍希釈し、ホモジナイズし、遠心分離し、上清をアッセイに使用するか又は−２０℃で保管した。
【0135】
（２）ＥＬＩＳＡの操作マウスの腎組織におけるＡＣＥのレベルをＥＬＩＳＡによって検出した。全ての工程を取扱説明書に厳密に従って行った。主な工程は以下のようにした。
【0136】
（ａ）サンプルの添加：ブランクウェル（ブランク対照ウェルにはサンプル及び試薬を満たさず、他の工程は変えなかった）、標準ウェル及び測定対象サンプルウェルをそれぞれ設定した。１００μＬの標準溶液又は試験対象のサンプルを異なる濃度で残りのウェルに慎重に添加した。気泡が入らないようにした。次いで、混合物を穏やかに混合した。プレートを蓋で覆い、反応を３７℃で９０分間行った。
【0137】
（ｂ）液体を捨て、プレートを洗浄せずにスピン乾燥した。１００μＬのビオチン化抗体標準溶液（使用前１５分以内に調製した）を各ウェルに添加した。プレートを膜で覆い、３７℃で１時間インキュベートした。
【0138】
（ｃ）ウェル内の液体を捨て、プレートをスピン乾燥し、３回洗浄した。洗浄時に、プレートを約３５０μＬ／ウェルで１分間〜２分間浸漬し、スピン乾燥し、プレートを吸い取り紙上で軽くたたくことによってウェル内の液体を除去した。
【0139】
（ｄ）１００μＬの酵素複合体標準溶液（使用前１５分以内に調製した）を各ウェルに添加した。プレートを膜で覆い、３７℃で３０分間インキュベートした。
【0140】
（ｅ）ウェル内の液体を捨て、プレートをスピン乾燥し、工程（ｃ）と同じ手順で５回洗浄した。
【0141】
（ｆ）９０μＬの基質溶液（ＴＭＢ）を各ウェルに添加し、プレートを膜で覆い、３７℃、暗所で１５分間インキュベートした（実際の発色に応じて適切に短縮又は延長するが、３０分を超えず、標準ウェル内に顕著な勾配が生じた時点で停止した）。
【0142】
（ｇ）５０μＬの停止液を各ウェルに添加して反応を停止させると、青色が即座に黄色に変わった。停止液の添加順序は基質溶液と同じものとする。
【0143】
（ｈ）各ウェルの光学密度（ＯＤ）を４５０ｎｍでマイクロプレートリーダーを用いて決定した。計器を温め、試験手順を設定するためにマイクロプレートリーダーの電源は事前に入れておくものとする。
【0144】
上記の実験データを、【数1】
【0145】
実験結果を図１に示した。式：ｙ＝ａｘ２＋ｂｘ＋ｃ；ここで、ａ：−０．００５２；ｂ：０．２５５６；ｃ：−０．０２３３；Ｒ２：０．９９６８。
【0146】
ｉｎ ｖｉｖｏ活性（ＥＬＩＳＡ）結果を表８に示した。
【0147】
【表9】
【0148】
結果から、本発明の化合物がラットの血液中のＡＣＥ酵素の含量を低減することができ、減少率が陽性薬（positive drug）カプトプリルよりも高く、化合物２２１Ｓ−１ａが最も顕著な低減効果を有することが示された。
【0149】
自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）における血圧の決定実験装置及び試薬
実験装置
【0150】
【表10】
【0151】
実験材料：
【0152】
【表11】
【0153】
実験方法：ＳＰＦグレードの雄性自然発生高血圧モデルラット（ＳＨＲ）（雄性、１２週齢、体重２００ｇ±２０ｇ）を各群６匹のラットでブランク群、対照群及びサンプル群の３つの群に分けた。動物を西北大学生命科学院（School of Life Sciences of Northwest University）の陝西省生物医学動物実験室（Shaanxi Provincial Biomedical Animal Laboratory）に温度２２℃及び湿度５０％、１２時間の明／暗サイクルで餌及び水を自由摂取させて収容した。ＳＨＲラットを５日間環境に適応させた後、血圧測定に適応するように訓練した。投与前に各群のラットの基礎血圧を測定し、収縮期血圧は１９０±５ｍｍＨｇであった。
【0154】
単回投与後のＳＨＲラットの血圧の決定：実験ラットの収縮期血圧を尾パルス間接圧力測定（tail pulse indirect pressure measurement）によって測定した。
【0155】
ＳＨＲラットに胃内投与したが、サンプル及び参照物質（カプトプリル）はどちらも１％Ｔｗｅｅｎ ８０を含有する蒸留水に溶解し、ブランク対照群には１％Ｔｗｅｅｎ ８０を含有する同じ容量の蒸留水を胃内投与した。胃内投与の量は０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ（容量１０ｍｌ／ｋｇ）とし、血圧を胃内投与のそれぞれ１時間後、２時間後、３時間後、４時間後及び６時間後に測定した。
【0156】
特定の測定工程：覚醒ラットを血圧計の固定箱内に入れた。３０℃の加熱プレートを固定箱の底に取り付け、これを１０分間予熱して局部血管を拡張させた。ラットが静止状態になった後、膨張式管状尾チューブ（tail tube）をＳＨＲラットの尾根部に巻き付け、圧力電子パルス検出器をラットの尾根部に取り付けることで、シグナルがコンピューター画面に表示された。シグナルが安定化した後、血圧を測定し、１０ｍｍＨｇ未満の血圧の変化を有する５回の読取り値を１０秒間隔で記録した。平均値をラットの収縮期血圧とみなした。
【0157】
（ａ）ＳＨＲラットにおける２２１Ｓ−１ａの胃内投与後６時間にわたる動脈収縮期圧の変化を図２に示した。
【0158】
（ｂ）ＳＨＲラットにおける異なる用量での２２１Ｓ−１ａの胃内投与後６時間にわたる動脈収縮期圧の変化を図３に示した。
【0159】
結果から、化合物２２１Ｓ−１ａはＳＨＲラットに対して良好な用量依存関係でより良好な抗高血圧効果を示し、その抗高血圧効果がカプトプリルよりも良好であることが示された。
【0160】
（２）複数回投与後のＳＨＲラットにおける血圧の決定：上記の方法及び用量に従ってラットに７日連続で１日１回胃内投与した。血圧を投与の２時間後に測定した。投与の終了後に、血圧を７日連続で１日１回測定し、血圧の変化を記録した。
【0161】
（ａ）ＳＨＲラットにおける７日間の２２１Ｓ−１ａの胃内投与後の１４日間にわたる動脈収縮期圧の変化を図４に示した。
【0162】
（ｂ）ＳＨＲラットにおける異なる用量での２２１Ｓ−１ａの胃内投与後の１４日間にわたる動脈収縮期圧の変化を図５に示した。
【0163】
化合物２２１Ｓ−１ａの７日間にわたる長期投与後に投与を止め、次いで１４日間にわたる動脈収縮期圧の変化を記録した。結果から、化合物２２１Ｓ−１ａがカプトプリルよりも良好な抗高血圧効果を有することが示された。ＳＨＲラットにおける動脈収縮期圧に対する異なる用量の２２１Ｓ−１ａの効果は用量依存的であった。
【0164】
上記の実験データを、【数2】