特許 6689854 Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体のヘテロ二官能性阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6689854

(24)【登録日】2020年4月10日

(45)【発行日】2020年4月28日

(54)【発明の名称】Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体のヘテロ二官能性阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07H 15/207 20060101AFI20200421BHJP

   A61K 31/7034 20060101ALI20200421BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20200421BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20200421BHJP

   A61P 35/04 20060101ALI20200421BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20200421BHJP

【ＦＩ】

   C07H15/207CSP

   A61K31/7034

   A61P43/00 111

   A61P35/00

   A61P35/04

   A61P29/00

【請求項の数】7

【全頁数】55

(21)【出願番号】特願2017-529350(P2017-529350)

(86)(22)【出願日】2015年12月1日

(65)【公表番号】特表2017-536395(P2017-536395A)

(43)【公表日】2017年12月7日

(86)【国際出願番号】US2015063191

(87)【国際公開番号】WO2016089872

(87)【国際公開日】20160609

【審査請求日】2018年10月11日

(31)【優先権主張番号】62/087,085

(32)【優先日】2014年12月3日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】506167421

【氏名又は名称】グリコミメティクス， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(72)【発明者】

【氏名】マグナニ， ジョン エル．

(72)【発明者】

【氏名】サーカー， アルン ケー．

(72)【発明者】

【氏名】ピーターソン， ジョン エム．

【審査官】 神谷 昌克

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１２−５２５３９３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００２−５４３１２６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１３／０９６９２６（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｈ

Ａ６１Ｋ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

【化30】

およびその薬学的に許容される塩から選択される、少なくとも１つの化合物。

【請求項2】

請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。

【請求項3】

がんの処置および／または予防のための組成物であって、ここで、前記がんの細胞は原発部位を離れることができ、前記組成物は、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および任意で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。

【請求項4】

がん細胞をある部位から血流へ動員し、前記がん細胞を前記血流中に滞留させることが望まれるがんの処置および／または予防のための組成物であって、前記組成物は、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および任意で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。

【請求項5】

細胞を循環血液に放出し、前記細胞の前記血液中の滞留を促進するための組成物であって、前記組成物は、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および任意で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。

【請求項6】

腫瘍転移の処置および／または予防のための組成物であって、前記組成物は、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および任意で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。

【請求項7】

炎症性疾患の処置および／または予防のための組成物であって、ここで、細胞の接着または移動が前記疾患において生じており、前記組成物は、請求項１に記載の少なくとも１つの化合物および任意で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０１４年１２月３日に出願された米国仮特許出願第６２／０８７，０８５号に対して３５ Ｕ．Ｓ．Ｃ． § １１９（ｅ）の下の利益を主張し、この出願は、その全体が本明細書に援用される。

【背景技術】

【0002】

がんおよび炎症性疾患を処置するため、ならび循環血液への放出後に細胞の滞留を促進するための化合物、組成物、および方法が本明細書に開示される。例えば、Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体を阻害するヘテロ二官能性化合物および組成物、ならびにその使用が開示される。

【0003】

がんが原発部位を超えて移動する前に、いくつかのがんは処置可能である。しかし、がんは、一度原発部位を超えて広がってしまうと、処置の選択余地が限定され得、生存統計が劇的に落ち込み得る。骨は、がんが原発性腫瘍の場所を離れた後に浸潤する一般的な場所である。乳がんおよび前立腺がんは、骨へと移動するがんの例である。血流において生じる白血病細胞でさえ、骨髄へとホーミングし得る。がんが骨に宿ると、がんは個体において疼痛を引き起こし得る。さらに、骨髄内に入ると、がん細胞は化学療法に耐性を示すようにもなり得る。加えて、罹患した特定の骨が骨髄内で血液細胞を産生する場合、個体は、様々な血液細胞関連障害を発症し得る。したがって、がん細胞が原発部位から離れることを阻止すること、および／またはがん細胞が血流から血管外に遊出し、他の組織へ浸潤することを阻止することが望ましい場合がある。がん細胞が血流に滞留することによって、細胞は化学療法などの処置にさらに反応しやすくなる。

【0004】

いくつかのがんは、すべてまたは部分的に骨内で生じる。このようながんに対して、がん細胞を骨から血流に動員すること、および／またはこれらの細胞（ならびにすでに血流中に存在する任意のがん細胞）が骨にホーミングするか、別の方法で血流を離れるのを阻止することが望ましい場合がある。がん細胞の血流中の滞留（またはがん細胞の血流中への動員、それに続く血流中での滞留）により、細胞は化学療法などの処置により反応しやすくなる。

【0005】

造血幹細胞（ＨＳＣ）も骨髄内に宿り、細胞療法のための材料の供給源である。ＨＳＣは、骨髄内のストローマに接着し、収集するためにはこれらの接着を切断し、骨髄の外に動員しなければならない。収集のために利用可能なＨＳＣの数を増加させるための改善された薬剤が望ましい場合がある。このようなＨＳＣは、生着にとって有用であり得る。

【0006】

したがって、原発部位を離れ得るがん、および骨の中ですべてまたは部分的に生じるがんの処置、ならびに治療グレードの幹細胞の調製に役立つ改善された方法に対する必要性が当技術分野において存在する。本開示は、これらの必要性の１つもしくは複数を満たしてもよいし、および／または他の利点を提供してもよい。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0007】

簡潔に述べると、Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体が役割を果たしている可能性のある疾患を処置するための、ならびに方法を改善するための化合物、組成物、および方法が開示される。本明細書で開示されている化合物はヘテロ二官能性であり、Ｅ−セレクチン阻害剤がＣＸＣＲ４ケモカイン受容体阻害剤に連結している。化合物は、がん細胞が原発部位を離れ得るがんの処置のため、疾患において細胞の接着もしくは移動が生じている炎症性疾患を処置するため、および／または幹細胞（例えば、骨髄前駆細胞）などの細胞を循環血液に放出し、血液中の細胞の滞留を促進するために（例えば、骨髄の外に細胞を動員し、末梢血流中に細胞を維持するために）使用することができる。

【0008】

一部の実施形態では、式（Ｉ）：

【化1】

（式中、
Ｒ^１は、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、
Ｒ^２は、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ^１基から選択され、ここで、Ｙ^１は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、Ｃ_２〜８ハロアルキニル、Ｃ_６〜１８アリール、およびＣ_１〜１３ヘテロアリール基から選択され、
Ｒ^３は、−ＣＮ、−ＣＨ_２ＣＮ、および−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ^２基から選択され、ここで、Ｙ^２は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、−ＯＺ^１、−ＮＨＯＨ、−ＮＨＯＣＨ_３、−ＮＨＣＮ、および−ＮＺ^１Ｚ^２基から選択され、ここで、Ｚ^１およびＺ^２は、同じでも異なっていてもよく、独立して、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、Ｚ^１およびＺ^２は、一緒になって環を形成していてもよく、
Ｒ^４は、Ｃ_３〜８シクロアルキル基から選択され、
Ｒ^５は、独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、ただし、少なくとも１つのＲ^５はＨでないことを条件とし、
ｎは、１〜４の範囲の整数から選択され、
Ｌは、リンカー基から選択される）
のヘテロ二官能性阻害剤、式（Ｉ）のプロドラッグ、および前述のもののいずれかの薬学的に許容される塩が開示される。

【0009】

本明細書で使用される場合、「式（Ｉ）の化合物」は、式（Ｉ）のヘテロ二官能性阻害剤、式（Ｉ）のヘテロ二官能性阻害剤の薬学的に許容される塩、式（Ｉ）のヘテロ二官能性阻害剤のプロドラッグ、および式（Ｉ）のヘテロ二官能性阻害剤のプロドラッグの薬学的に許容される塩を含む。

【0010】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む医薬組成物が提示されている。

【0011】

一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、本明細書に記載されている疾患、障害、および状態のうちの少なくとも１つの処置における使用のための医薬の調製および／または製造のために使用することができる。

【0012】

一部の実施形態では、がん細胞が原発部位を離れ得る少なくとも１種のがんの処置および／または予防のための方法が開示され、方法は、それを必要とする対象に、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物の有効量、ならびに／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む医薬組成物を投与することを含む。

【0013】

一部の実施形態では、がん細胞をある部位から血流へ動員し、かつ／またはがん細胞を血流中に滞留させることが望まれる少なくとも１種のがんの処置および／または予防のための方法が開示され、方法は、それを必要とする対象に、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物の有効量、ならびに／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む医薬組成物を投与することを含む。

【0014】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、腫瘍転移の処置および／または予防のための本明細書に記載されている方法において使用することができる。一部の実施形態では、腫瘍転移は膵臓がんから生じる。一部の実施形態では、腫瘍転移は前立腺がんから生じる。一部の実施形態では、腫瘍転移は膵臓がんから生じる。一部の実施形態では、腫瘍転移は乳がんから生じる。一部の実施形態では、少なくとも１つの追加の化学療法剤、例えば、ゲムシタビンなどが個体に投与される。

【0015】

一部の実施形態では、細胞を循環血液に放出し、細胞の血液中の滞留を促進するための方法が開示され、方法は、それを必要とする対象に、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物の有効量、ならびに／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む医薬組成物を投与することを含む。一部の実施形態では、本方法は、放出された細胞を収集することをさらに含む。一部の実施形態では、放出された細胞の収集はアフェレーシスを利用する。一部の実施形態では、放出された細胞は幹細胞（例えば、骨髄前駆細胞）である。一部の実施形態では、Ｇ−ＣＳＦが個体に投与される。

【0016】

一部の実施形態では、炎症性疾患の処置および／または予防のための方法が開示され、ここで、細胞の接着および／または移動がこの疾患において生じており、方法は、それを必要とする対象に、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物の有効量、ならびに／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む医薬組成物を投与することを含む。

【0017】

以下の記載において、ある特定の詳細は様々な実施形態の十分な理解が得られるように述べられている。しかし、当業者であれば、開示される実施形態は、これらの詳細なしに実施することができることを理解する。他の場合において、周知の構造は、実施形態の記載をいたずらに不明瞭にすることがないよう、詳細に表示または記載されていない。これらおよび他の実施形態は、以下の詳細な説明および付随する図を参照して明らかとなる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
式（Ｉ）：

【化19】

（式中、
Ｒ^１は、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、Ｒ^２は、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ^１基から選択され、ここで、Ｙ^１は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、Ｃ_２〜８ハロアルキニル、Ｃ_６〜１８アリール、およびＣ_１〜１３ヘテロアリール基から選択され、
Ｒ^３は、−ＣＮ、−ＣＨ_２ＣＮ、および−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ^２基から選択され、ここで、Ｙ^２は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、−ＯＺ^１、−ＮＨＯＨ、−ＮＨＯＣＨ_３、−ＮＨＣＮ、および−ＮＺ^１Ｚ^２基から選択され、ここで、Ｚ^１およびＺ^２は、同じでも異なっていてもよく、独立して、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、Ｚ^１およびＺ^２は、一緒になって環を形成していてもよく、
Ｒ^４は、Ｃ_３〜８シクロアルキル基から選択され、
各Ｒ^５は、独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、ただし、少なくとも１つのＲ^５はＨでないことを条件とし、
ｎは、１〜４の範囲の整数から選択され、
Ｌは、リンカー基から選択される）
の化合物、式（Ｉ）のプロドラッグ、および前述のもののいずれかの薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物。
（項目２）
Ｒ^１が、Ｃ_１〜８アルキル基から選択される、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目３）
Ｒ^１が、エチルおよびメチルから選択される、項目２に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目４）
Ｒ^１がエチルである、項目３に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目５）
Ｒ^２が、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ^１から選択され、ここで、Ｙ^１が、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_６〜１８アリール、およびＣ_１〜１３ヘテロアリール基から選択される、先行する項目のいずれかに記載の少なくとも１つの化合物。
（項目６）
Ｒ^２が、

【化20】

から選択される、項目５に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目７）
Ｒ^３が、−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ^２から選択され、ここで、Ｙ^２が、−ＯＺ^１、−ＮＨＯＨ、−ＮＨＯＣＨ_３、および−ＮＺ^１Ｚ^２基から選択され、ここで、Ｚ^１およびＺ^２が、同じでも異なっていてもよく、独立して、Ｈ、およびＣ_１〜８アルキルから選択され、Ｚ^１およびＺ^２が、一緒になって環を形成していてもよい、先行する項目のいずれかに記載の少なくとも１つの化合物。
（項目８）
Ｒ^３が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである、項目７に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目９）
Ｒ^４が、

【化21】

から選択される、先行する項目のいずれかに記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１０）
少なくとも１つのＲ^５がハロである、先行する項目のいずれかに記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１１）
少なくとも１つのＲ^５がブロモである、項目１０に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１２）
ｎが１である、項目１０または１１のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１３）
式（Ｉａ）の化合物：

【化22】

から選択される、項目１から６および９のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１４）
式（Ｉｂ）の化合物：

【化23】

から選択される、項目１から６および９のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１５）
以下の式：

【化24】

から選択される、項目１３に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１６）
以下の式：

【化25】

から選択される、項目１４に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１７）
以下の式：

【化26-1】

【化26-2】

から選択される、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１８）
以下の式：

【化27-1】

【化27-2】

から選択される、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目１９）
前記リンカー基が−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＮＨ−である、項目１から１８のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２０）
前記リンカー基が−ＣＨ_２ＮＨＣＨ_２−である、項目１から１８のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２１）
前記リンカー基が−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ_２−である、項目１から１８のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２２）
以下の式：

【化28-1】

【化28-2】

から選択される、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２３）
以下の式：

【化29-1】

【化29-2】

から選択される、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２４）

【化30】

である、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２５）

【化31】

である、項目１に記載の少なくとも１つの化合物。
（項目２６）
項目１から２３のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物および少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を含む組成物。
（項目２７）
がんの処置および／または予防のための方法であって、ここで、前記がんの細胞は原発部位を離れることができ、前記方法は、がんの処置および／または予防を必要とする対象に、項目１から２５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物の有効量および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を投与するステップを含む方法。
（項目２８）
がん細胞をある部位から血流へ動員し、前記がん細胞を前記血流中に滞留させることが望まれるがんの処置および／または予防のための方法であって、それを必要とする対象に、項目１から２５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物の有効量および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を投与するステップを含む方法。
（項目２９）
細胞を循環血液に放出し、前記細胞の前記血液中の滞留を促進するための方法であって、それを必要とする対象に、項目１から２５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物の有効量および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を投与するステップを含む方法。
（項目３０）
腫瘍転移の処置および／または予防のための方法であって、それを必要とする対象に、項目１から２５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物の有効量および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を投与するステップを含む方法。
（項目３１）
炎症性疾患の処置および／または予防のための方法であって、ここで、細胞の接着または移動が前記疾患において生じており、前記方法は、炎症性疾患の処置および／または予防を必要とする対象に、項目１から２５のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物の有効量および任意選択で少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分を投与するステップを含む方法。

【図面の簡単な説明】

【0018】

【図1A】図１（図１Ａおよび図１Ｂ）は、ヘテロ二官能性化合物９および化合物１６の合成を例示する図である。

【図1B】図１（図１Ａおよび図１Ｂ）は、ヘテロ二官能性化合物９および化合物１６の合成を例示する図である。

【0019】

【図2】図２は、化合物９の４００ＭＨｚ ^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを示している。

【0020】

【図3】図３は、化合物１６の６００ＭＨｚ ^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを示している。

【0021】

【図4】図４は、ヘテロ二官能性化合物９および１６によるＳＤＦ−１誘発性化学走性阻害アッセイの結果を表している。

【0022】

【図5A】図５（図５Ａおよび図５Ｂ）は、ヘテロ二官能性化合物９および１６が阻害剤として使用されるＥ−セレクチンアッセイの結果を表している。

【図5B】図５（図５Ａおよび図５Ｂ）は、ヘテロ二官能性化合物９および１６が阻害剤として使用されるＥ−セレクチンアッセイの結果を表している。

【0023】

【図6】図６は、ヘテロ二官能性化合物９によるＣＸＣＲ４アッセイの結果を表している。

【0024】

【図7】図７は、ヘテロ二官能性化合物９による腫瘍関連線維芽細胞へのリンパ管および血管内皮移動のアッセイの結果を表している。

【0025】

【図8】図８は、ヘテロ二官能性化合物９によるリンパ単層へのＰＤＡＣ細胞結合アッセイの結果を表している。

【0026】

【図9】図９は、ヘテロ二官能性化合物９による脛骨内腫瘍アッセイの結果を表している。

【発明を実施するための形態】

【0027】

詳細な説明
Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体が役割を果たす疾患を処置するため、ならびに循環血液への放出後の細胞の滞留を促進するための化合物、組成物、および方法が本明細書で開示される。化合物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで様々な使用を有する。

【0028】

Ｅ−セレクチン阻害剤は当技術分野で公知である。いくつかのＥ−セレクチン阻害剤は、Ｅ−セレクチンのみに特異的である。他のＥ−セレクチン阻害剤は、Ｅ−セレクチンばかりでなく、これに加えてＰ−セレクチンもしくはＬ−セレクチンまたはＰ−セレクチンとＬ−セレクチンの両方を阻害する能力を有する。Ｅ−セレクチン阻害剤の例（Ｅ−セレクチン特異的またはそうではないもの）は、米国特許第７，０６０，６８５号、米国出願公開番号ＵＳ−２００７−００５４８７０、米国出願公開番号ＵＳ−２００８−０１６１５４６およびこれらの特許文献または公開出願文献のうち任意のものに引用された参考文献に開示されている。これらの例は有機小分子である。他の公知のＥ−セレクチン阻害剤は、アミノ酸ベースの、例えば、抗体などである。例えば、ヒト化モノクローナル抗体ＣＤＰ８５０はＥ−セレクチン阻害剤である。

【0029】

ＣＸＣＲ４ケモカイン受容体阻害剤は当技術分野で公知である。このような阻害剤は通常、間質由来因子−１（ＳＤＦ−１）のＣＸＣＲ４受容体への結合を阻止する。ＣＸＣＲ４ケモカイン受容体阻害剤の例は、ＡＭＤ−３１００（Ｈｅｎｄｒｉｘら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ． Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．、４４巻：１６６７〜１６７３頁、２０００年）；ＡＬＸ４０−４Ｃ（Ｄｏｒａｎｚら、ＡＩＤＳ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ、１７巻：４７５〜４８６頁、２００１年）；およびＴ１３４（Ａｒａｋａｋｉら、Ｊ． Ｖｉｒｏｌ．、７３巻：１７１９〜１７２３頁、１９９９年）である。これらの例として、有機小分子およびアミノ酸ベースの分子、例えば、Ｔ２２ペプチドなどが挙げられる。ＡＭＤ−３１００はビシクラムである。２つのシクラム環のそれぞれが、メチレン基を介して同じフェニル環に結合している（各シクラム環は他方に対してパラである）。

【0030】

Ｅ−セレクチン阻害剤−リンカー−ＣＸＣＲ４ケモカイン受容体阻害剤を含む、Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体の阻害のためのヘテロ二官能性化合物は当技術分野で公知である。例は、例えば、米国特許第８，４１０，０６６号において開示されている。

【0031】

一部の実施形態では、式（Ｉ）：

【化2】

（式中、
Ｒ^１は、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、
Ｒ^２は、−ＯＨ、−ＮＨ_２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ^１、および−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨＹ^１基から選択され、ここで、Ｙ^１は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、Ｃ_２〜８ハロアルキニル、Ｃ_６〜１８アリール、およびＣ_１〜１３ヘテロアリール基から選択され、
Ｒ^３は、−ＣＮ、−ＣＨ_２ＣＮ、および−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ^２基から選択され、ここで、Ｙ^２は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、−ＯＺ^１、−ＮＨＯＨ、−ＮＨＯＣＨ_３、−ＮＨＣＮ、および−ＮＺ^１Ｚ^２基から選択され、ここで、Ｚ^１およびＺ^２は、同じでも異なっていてもよく、独立して、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、Ｚ^１およびＺ^２は、一緒になって環を形成していてもよく、
Ｒ^４は、Ｃ_３〜８シクロアルキル基から選択され、
各Ｒ^５は、独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_２〜８アルケニル、Ｃ_２〜８アルキニル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_２〜８ハロアルケニル、およびＣ_２〜８ハロアルキニル基から選択され、ただし、少なくとも１つのＲ^５はＨでないことを条件とし、
ｎは、１〜４の範囲の整数から選択され、
Ｌは、リンカー基から選択される）
のヘテロ二官能性阻害剤、式（Ｉ）のプロドラッグ、および前述のもののいずれかの薬学的に許容される塩が提供される。

【0032】

一部の実施形態では、Ｒ^１は、Ｈ、Ｃ_１〜４アルキル、およびＣ_１〜４ハロアルキル基から選択される。一部の実施形態では、Ｒ^１は、Ｈ、メチル、エチル、−ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨＦ_２、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｆ、−ＣＨ_２ＣＨＦ_２、および−ＣＨ_２ＣＦ_３から選択される。一部の実施形態では、Ｒ^１はＨである。一部の実施形態では、Ｒ^１は、メチルおよびエチルから選択される。一部の実施形態では、Ｒ^１はメチルである。一部の実施形態では、Ｒ^１はエチルである。

【0033】

一部の実施形態では、Ｒ^２は、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｙ^１および−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｙ^１基から選択され、ここで、Ｙ^１は、Ｃ_１〜８アルキル、Ｃ_１〜８ハロアルキル、Ｃ_６〜１８アリール、およびＣ_１〜１３ヘテロアリール基から選択される。一部の実施形態では、Ｒ^２は、

【化3】

から選択される。

【0034】

一部の実施形態では、Ｒ^３は−Ｃ（＝Ｏ）Ｙ^２であり、ここで、Ｙ^２は、−ＯＺ^１および−ＮＺ^１Ｚ^２基から選択され、ここで、Ｚ^１およびＺ^２は、同じでも異なっていてもよく、独立して、Ｈ、Ｃ_１〜８アルキル、およびＣ_１〜８ハロアルキルから選択され、Ｚ^１およびＺ^２が一緒になって環を形成してもよい。一部の実施形態では、Ｒ^３は−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨである。

【0035】

一部の実施形態では、Ｒ^４は、シクロプロピルおよびシクロヘキシル基から選択される。一部の実施形態では、Ｒ^４は、

【化4】

から選択される。

【0036】

一部の実施形態では、各Ｒ^５は、独立して、Ｈ、ハロ、Ｃ_１〜８アルキル、およびＣ_１〜８ハロアルキル基から選択され、ただし、少なくとも１つのＲ^５がＨではないことを条件とする。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ^５はハロである。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ^５はフルオロである。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ^５はクロロである。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ^５はブロモである。一部の実施形態では、少なくとも１つのＲ^５はヨードである。

【0037】

一部の実施形態では、ｎは２である。一部の実施形態では、ｎは２であり、Ｒ^５はハロである。一部の実施形態では、ｎは２であり、Ｒ^５はブロモである。一部の実施形態では、ｎは１である。一部の実施形態では、ｎは１であり、Ｒ^５はハロである。一部の実施形態では、ｎは１であり、Ｒ^５はブロモである。

【0038】

一部の実施形態では、化合物は、式（Ｉａ）の化合物：

【化5】

から選択される。

【0039】

一部の実施形態では、化合物は、以下の式の化合物：

【化6】

から選択される。

【0040】

一部の実施形態では、化合物は、式（Ｉｂ）の化合物：

【化7】

から選択される。

【0041】

一部の実施形態では、化合物は、以下の式の化合物：

【化8】

から選択される。

【0042】

一部の実施形態では、化合物は、以下の式の化合物：

【化9-1】

【化9-2】

から選択される。

【0043】

一部の実施形態では、化合物は、以下の式の化合物：

【化10-1】

【化10-2】

から選択される。

【0044】

一部の実施形態では、リンカー基は、スペーサー基、例えば、−（ＣＨ_２）_ｐ−および−Ｏ（ＣＨ_２）_ｐ−（式中、ｐは、１〜２０の範囲の整数から選択される）などのスペーサー基を含む基から選択され得る。スペーサー基の他の非限定的例として、カルボニル基およびカルボニル含有基、例えば、アミド基などが挙げられる。スペーサー基の非限定的例は、

【化11】

である。

【0045】

一部の実施形態では、リンカー基は、

【化12】

から選択される。

【0046】

他のリンカー基、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）および−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（式中、ｐは、１〜２０の範囲の整数から選択される）は、当業者および／または本開示を把握している者であれば熟知している。

【0047】

一部の実施形態では、リンカー基は、

【化13】

である。

【0048】

一部の実施形態では、リンカー基は、

【化14】

である。

【0049】

一部の実施形態では、リンカー基は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＮＨ−、−ＣＨ_２ＮＨＣＨ_２−、および−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ_２−から選択される。一部の実施形態では、リンカー基は−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＮＨ−である。

【0050】

一部の実施形態では、化合物は、以下の式の化合物：

【化15-1】

【化15-2】

【化15-3】

から選択される。

【0051】

一部の実施形態では、化合物は、以下の式の化合物：

【化16-1】

【化16-2】

から選択される。

【0052】

少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物もまた提供される。このような医薬組成物は、本明細書でより詳細に記載される。これらの化合物および組成物は本明細書に記載されている方法において使用することができる。

【0053】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、がん細胞が原発部位を離れ得るがんの処置および／または予防のために、本明細書に記載されている方法において使用することができる。原発部位は、例えば、固体組織（例えば、乳房、前立腺、または膵臓）または血流であってよい。

【0054】

乳がん、前立腺がん、および膵臓がんに加えて、浸潤性疾患の他の例として、肺がんおよび黒色腫、ならびに血液の悪性腫瘍（例えば、白血病および骨髄腫）が挙げられる。本明細書で使用される場合、「処置」（「処置する」などの変化形を含む）という用語は、疾患または疾患に伴う合併症に対する処置を含む。例えば、がんに伴う合併症は、疾患を有する個体においてそれ自体現れていない可能性があり、化合物は、個体における合併症が現れるのを阻止するために投与することができる。がん細胞が原発部位を離れ得るがんに伴う合併症として、例えば、がん細胞の他の組織への転移および浸潤が挙げられる。例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）および多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞は骨髄の骨内膜領域に移動し、そこで細胞は休止状態になり、化学療法誘発性アポトーシスから保護される。本明細書に記載の化合物の投与は、がん細胞の接着または移動を阻止し得る。このような阻止により、がん細胞が化学療法による処置により反応しやすくなり得る。予防の文脈での本明細書に記載の化合物の投与は、がんが初めて発生するまたはがんの再発のリスクがある個体に対して行ってもよい。例えば、多形神経膠芽腫などの脳がんは通常、最初の発生に対して別のタイプの療法（例えば、放射線または化学療法など）で処置するが、このような療法は通常再発を予防するのに有効ではない。

【0055】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、がん細胞をある部位から血流へ動員し、血流中にがん細胞を滞留させることが望ましいがんの処置および／または予防のために、本明細書に記載されている方法において使用することができる。

【0056】

このような処置のためのがんの例として、白血病および骨髄腫（例えば、ＡＭＬおよびＭＭ）が挙げられる。がん細胞をある部位から血流へ動員し、その中に細胞を滞留させることにより、がん細胞が化学療法による処置により反応しやすくなり得る。がん細胞の動員元となる部位の例は骨である。がん細胞は、例えば、循環しており、次いで骨へとホーミングすることができる。骨の中に入ると、がん細胞は化学療法から保護される。本明細書に記載の化合物は、例えば、がん細胞を骨から血流に動員し、がん細胞が骨へとホーミングするのを阻止し、それによって、がん細胞を血流に滞留させるのに使用することができる。予防の文脈での本明細書に記載の化合物の投与は、がんが初めて発生するまたはがんの再発のリスクがある個体に対して行ってもよい。例えば、多形神経膠芽腫などの脳がんは通常、最初の発生に対して別のタイプの療法（例えば、放射線または化学療法など）で処置するが、このような療法は通常、再発を予防するのに有効ではない。

【0057】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、細胞（例えば、造血幹細胞など）を循環血液に放出し、血液中の細胞の滞留を促進するための方法において使用することができる。

【0058】

１つの使用方法は、例えば、幹細胞収集のためである。幹細胞は、例えば、高用量の化学療法処置後に必要となり得る。多くの化学療法は、骨髄を抑制し、これが、個体において血液のある特定の構成成分の産生を妨げる。その結果、個体は、様々な血液細胞関連障害を発症し、化学療法の継続が損なわれる可能性がある。本明細書に記載の化合物は、例えば、幹細胞を循環血液に放出し、幹細胞の血液中の滞留を促進するために使用することができる。本方法は、放出された細胞を収集するさらなるステップを含むことができる。例えば、放出された幹細胞を収集することができる。細胞を収集するための様々な技術が当技術分野で公知である。例えば、アフェレーシスを利用することができる。幹細胞の例は骨髄前駆細胞である。このような細胞の骨髄から循環血液への放出および血液中の滞留は様々な用途を有する。例えば、動員された骨髄前駆細胞は、血液から収集することができる。このような収集した細胞の使用は、個体が、骨髄が抑制されるような様式で処置を受ける前に、その個体から健康な骨髄前駆細胞を得ることである。処置後、個体は、処置前に収集した骨髄前駆細胞を利用して、骨髄移植を受けることができる。これは、例えば、個体が、骨髄を抑制する化学療法プロトコールを受ける必要がある場合に有用である。

【0059】

少なくとも１つの（すなわち、１つまたは複数の）コロニー刺激因子で個体をさらに処置することが望ましいこともある。このような因子は、例えば、上記の化合物のうちの少なくとも１つの投与の前にまたは同時に投与してもよい。投与が同時である場合、組合せは、単一の容器または２つ（またはそれ超）の別個の容器から投与することができる。適切なコロニー刺激因子の例は顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）である。Ｇ−ＣＳＦは、骨髄を増殖させ、より多くの幹細胞を産生するように誘導する。本明細書に記載の化合物は、幹細胞を循環血液に放出するのに役立つ。本明細書に記載の化合物とＧ−ＣＳＦとの投与の組み合わせ（別々または一緒に）の結果として、骨髄内で産生され、循環血液に放出された幹細胞は、前述のように収集することができる。このような収集した幹細胞は、例えば、化学療法後に個体に投与することができる。幹細胞は、骨髄に戻り、血液細胞を産生する。本明細書に記載の化合物を適用してＧ−ＣＳＦで処置した骨髄から健康な骨髄前駆細胞を動員し収集することによって、例えば、骨髄移植に有用な細胞が得られる。

【0060】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、腫瘍転移の処置および／または予防のための本明細書に記載されている方法において使用することができる。一部の実施形態では、腫瘍転移は膵臓がんから生じる。一部の実施形態では、腫瘍転移は前立腺がんから生じる。一部の実施形態では、腫瘍転移は膵臓がんから生じる。一部の実施形態では、腫瘍転移は乳がんから生じる。一部の実施形態では、少なくとも１つの追加の化学療法剤、例えば、ゲムシタビンなどが個体に投与される。

【0061】

一部の実施形態では、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、炎症性疾患の処置および／または予防のための方法において使用することができ、ここでこの疾患において細胞の接着または移動が生じている。

【0062】

炎症性疾患の例として、炎症性の皮膚障害、例えば、アトピー性皮膚炎および乾癬などが挙げられる。処置は、疾患またはこれに伴う合併症、例えば、疼痛などを減少させる（部分的にまたは完全に）ことができる。処置は、炎症性疾患またはこれに伴う合併症のための１つまたは複数の他の療法と併せて使用することができる。

【0063】

一部の実施形態では、式（Ｉ）の化合物および／または少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物は、本明細書に記載されている疾患、障害、および／または状態の少なくとも１つを処置するため、あるいは本明細書に記載されている疾患、障害、および／または状態のうちの少なくとも１つの処置における使用のための医薬の調製または製造のために使用することができる。これらの方法および使用のそれぞれがより詳細に記載される。
定義

【0064】

明細書中の用語が範囲として特定されている（例えば、Ｃ_１〜４アルキル）場合、その範囲は、この範囲の各要素を独立して開示し、これを含む。非限定的例として、Ｃ_１〜４アルキルは、独立して、Ｃ_１アルキル、Ｃ_２アルキル、Ｃ_３アルキル、およびＣ_４アルキルを含む。

【0065】

「少なくとも１つの」という用語は、１つまたは複数、例えば、１つ、２つなどを指す。例えば、「少なくとも１つのＣ_１〜４アルキル」という用語は、１つまたは複数のＣ_１〜４アルキル基、例えば、１つのＣ_１〜４アルキル基、２つのＣ_１〜４アルキル基などを指す。

【0066】

「アルキル」という用語は、飽和した直鎖、分枝、および環状の（シクロアルキルとしても特定される）、第１級、第２級、および第３級炭化水素基を含む。アルキル基の非限定的例として、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、ブチル、ｓｅｃブチル、イソブチル、ｔｅｒｔブチル、シクロブチル、１−メチルブチル、１，１−ジメチルプロピル、ペンチル、シクロペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、シクロペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、およびシクロヘキシルが挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、アルキル基は、任意選択で置換されていてもよい。

【0067】

「アルケニル」という用語は、少なくとも１つの二重結合を含む直鎖、分枝、および環状の炭化水素基を含む。アルケニル基の二重結合は、非共役であってもよいし、別の不飽和の基と共役していてもよい。アルケニル基の非限定的例として、ビニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ペンタジエニル、ヘキサジエニル、２−エチルヘキセニル、およびシクロペンタ−１−エン−１−イルが挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、アルケニル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0068】

「アルキニル」という用語は、少なくとも１つの三重結合を含む直鎖および分枝の炭化水素基を含む。アルキニル基の三重結合は、非共役であってもよいし、別の不飽和の基と共役していてもよい。アルキニル基の非限定的例として、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、およびヘキシニルが挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、アルキニル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0069】

「アリール」という用語は、６〜１８個の炭素環原子および少なくとも１つの芳香族環を含む炭化水素環系基を含む。アリール基は、縮合または架橋した環系を含んでもよい、単環式、二環式、三環式または四環式環系であり得る。アリール基の非限定的例として、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、フルオランテン、フルオレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、フェナレン、フェナントレン、プレイアデン、ピレン、およびトリフェニレンから誘導されるアリール基が挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、アリール基は任意選択で置換されていてもよい。

【0070】

「アリールアルキル」または「アラルキル」という用語は、本明細書で定義されたようなアルキル基を介して親分子部分に付加している、本明細書中に記載されるようなアリール基を含む。アリールアルキルまたはアラルキル基の非限定的例として、ベンジル、フェネチル、およびジフェニルメチルが挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、アリールアルキルまたはアラルキル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0071】

「シクロアルキル」または「炭素環」という用語は、縮合または架橋した環系を含んでもよい、飽和した単環式または多環式の炭化水素基を含む。シクロアルキル基の非限定的例として、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、アダマンチル、およびノルボルニルが挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、シクロアルキル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0072】

「Ｅ−セレクチンアンタゴニスト」という用語は、Ｅ−セレクチンのみの阻害剤、ならびにＥ−セレクチンとＰ−セレクチンまたはＬ−セレクチンのいずれかとの阻害剤、ならびにＥ−セレクチン、Ｐ−セレクチンおよびＬ−セレクチンの阻害剤を含む。

【0073】

「縮合した」という用語は、既存の環構造に縮合している、本明細書に記載されている任意の環構造を含む。縮合した環がヘテロシクリル環またはヘテロアリール環である場合、縮合したヘテロシクリル環または縮合したヘテロアリール環の一部となる既存の環構造上の任意の炭素原子が窒素原子で置き換えられていてもよい。

【0074】

「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを含む。

【0075】

「ハロアルキル」という用語は、本明細書で定義されたような少なくとも１つのハロゲンで置換されている、本明細書で定義されたようなアルキル基を含む。非限定的例として、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、および１，２−ジブロモエチルが挙げられる。「フルオロアルキル」は、少なくとも１つのフルオロ基で置換されているハロアルキルである。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ハロアルキル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0076】

「ハロアルケニル」という用語は、本明細書で定義されたような少なくとも１つのハロゲンで置換されている、本明細書で定義されたようなアルケニル基を含む。非限定的例として、フルオロエテニル、１，２−ジフルオロエテニル、３−ブロモ−２−フルオロプロペニル、および１，２−ジブロモエテニルが挙げられる。「フルオロアルケニル」は、少なくとも１つのフルオロ基で置換されているハロアルケニルである。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ハロアルケニル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0077】

「ハロアルキニル」という用語は、本明細書で定義されたような少なくとも１つのハロゲンで置換されている、本明細書で定義されたようなアルキニル基を含む。非限定的例として、フルオロエチニル、１，２−ジフルオロエチニル、３−ブロモ−２−フルオロプロピニル、および１，２−ジブロモエチニルが挙げられる。「フルオロアルキニル」は、少なくとも１つのフルオロ基で置換されているハロアルキニルである。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ハロアルキニル基は、任意選択で置換されていてもよい。

【0078】

「ヘテロシクリル」または「複素環」という用語は、２〜１２個の環炭素原子ならびにＮ、Ｏ、およびＳからそれぞれ独立して選択される１〜６個の環ヘテロ原子を含む、３〜１８員の飽和または部分的に不飽和の非芳香族環状基を含む。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ヘテロシクリル基は、単環式環系であっても、二環式環系であっても、三環式環系であっても、四環式環系であってもよく、これらは縮合した環系または架橋した環系を含み得、そして、ヘテロシクリル基内の窒素、炭素または硫黄原子は任意選択的に酸化されていてもよく、窒素原子は任意選択的に四級化されていてもよく、また、ヘテロシクリル基は部分的に飽和していても、完全に飽和していてもよい。非限定的な例として、ジオキソラニル、チエニル［１，３］ジチアニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフリル、トリチアニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、チアモルホリニル、１−オキソ−チオモルホリニル、および１，１−ジオキソ−チオモルホリニルが挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ヘテロシクリル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0079】

「ヘテロアリール」という用語は、１〜１３個の環炭素原子、ならびにＮ、Ｏ、およびＳからそれぞれ独立して選択される１〜６個の環ヘテロ原子、および少なくとも１つの芳香族環を含む５〜１４員の環状基を含む。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ヘテロアリール基は、単環式環系であっても、二環式環系であっても、三環式環系であっても、四環式環系であってもよく、これらは縮合した環系または架橋した環系を含み得、そして、ヘテロアリール基内の窒素、炭素または硫黄原子が任意選択的に酸化されていてもよく、窒素原子が任意選択的に四級化されていてもよい。非限定的な例として、アゼピニル、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾインドリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾナフトフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキシニル、ベンゾピラニル、ベンゾピラノニル、ベンゾフラニル、ベンゾフラノニル、ベンゾチエニル（ベンゾチオフェニル）、ベンゾトリアゾリル、ベンゾ［４，６］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、フラニル、フラノニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、インダゾリル、インドリル、インダゾリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、イソキノリル、インドリジニル、イソオキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、オキシラニル、１−オキシドピリジニル、１−オキシドピリミジニル、１−オキシドピラジニル、１−オキシドピリダジニル、１−フェニル−１Ｈ−ピロリル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピロリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル キナゾリニル、キノキサリニル、キノリニル、キヌクリジニル、イソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、およびチオフェニル（すなわちチエニル）が挙げられる。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、ヘテロアリール基は任意選択で置換されていてもよい。

【0080】

「薬学的に許容される塩」という用語は、酸付加塩と塩基付加塩との両方を含む。薬学的に許容される酸付加塩の非限定的例として、塩化物、臭化物、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、スルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ギ酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、およびアスコルビン酸塩が挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩の非限定的例として、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム（置換および非置換の）、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、およびアルミニウムの塩が挙げられる。薬学的に許容される塩は、例えば、薬学の分野で周知の標準的手順を使用して得ることができる。

【0081】

「プロドラッグ」という用語は、例えば、生理的条件下でまたは加溶媒分解により、本明細書に記載の生物活性のある化合物へと変換することができる化合物を含む。したがって、「プロドラッグ」という用語は、薬学的に許容される、本明細書に記載されている化合物の代謝前駆体を含む。プロドラッグの考察は、例えば、Ｈｉｇｕｃｈｉ， Ｔ．ら、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ ａｓ Ｎｏｖｅｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ａ．Ｃ．Ｓ． Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｓｅｒｉｅｓ、１４巻、およびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ Ｃａｒｒｉｅｒｓ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ、Ｅｄｗａｒｄ Ｂ． Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ、１９８７年において見出すことができる。「プロドラッグ」という用語はまた、このようなプロドラッグが対象に投与された場合、ｉｎ ｖｉｖｏで本明細書中に記載されているような活性化合物（複数可）を放出する共有結合した担体を含む。プロドラッグの非限定的例として、本明細書に記載されている化合物中のヒドロキシ、カルボキシ、メルカプトおよびアミノ官能基のエステルおよびアミド誘導体が挙げられる。

【0082】

「置換されている」という用語は、任意の上記の基において、少なくとも１個の水素原子が、非水素原子、例えば、ハロゲン原子、例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩなど；例えば、ヒドロキシル基、アルコキシ基、およびエステル基などの基の中の酸素原子；例えば、チオール基、チオアルキル基、スルホン基、スルホニル基、およびスルホキシド基などの基の中の硫黄原子；例えば、アミン、アミド、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、アルキルアリールアミン、ジアリールアミン、Ｎ−酸化物、イミド、およびエナミンなどの基の中の窒素原子；例えば、トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基、およびトリアリールシリル基などの基の中のケイ素原子；ならびに様々な他の基の中の他のヘテロ原子で置き換えられている状況を含む。「置換されている」はまた、任意の上記の基において、少なくとも１個の水素原子が、ヘテロ原子、例えば、オキソ、カルボニル、カルボキシル、およびエステル基の中の酸素、ならびに例えば、イミン、オキシム、ヒドラゾン、およびニトリルなどの基の中の窒素へのより高い次元の結合（例えば、二重結合または三重結合）で置き換えられている状況を含む。

【0083】

「チオアルキル」という用語は、−ＳＲ_ａ基（式中、Ｒ_ａは、本明細書で定義されたようなアルキル、アルケニル、およびアルキニル基から選択される）を含む。明細書中で別途具体的に述べられていない限り、チオアルキル基は任意選択で置換されていてもよい。

【0084】

本開示は、その範囲内に化合物のすべての可能な幾何異性体、例えば、ＺおよびＥ異性体（ｃｉｓおよびｔｒａｎｓ異性体）、ならびに化合物のすべての可能な光学異性体、例えばジアステレオマーおよびエナンチオマーを含む。さらに、本開示は、その範囲内に、個々の異性体とその任意の混合物、例えばラセミ混合物との両方を含む。個々の異性体は、対応する異性体形態の出発材料を使用して得ることができ、またはこれらは従来の分離方法に従い最終化合物の調製後に分離することができる。光学異性体、例えば、エナンチオマーをその混合物から分離するために、従来の分離方法、例えば分別結晶化を使用することができる。

【0085】

本開示は、その範囲内にすべての可能な互変異性体を含む。さらに、本開示は、その範囲内に個々の互変異性体とその任意の混合物との両方を含む。
化合物合成手順

【0086】

以下の一般反応スキームＩおよびＩＩに従い、式（Ｉ）の化合物を調製することができる。当業者は、同様の方法により、または当業者に公知の他の方法を組み合わせることにより、これらの化合物を作製することができることを理解されたい。当業者であれば、適当な出発成分を使用し、必要な場合には合成パラメーターを修正することによって、以下に記載されているものと同様の方式で、本明細書に具体的に例示されていない式（Ｉ）の他の化合物を作製することができることも理解されたい。一般的に、出発成分は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｌａｎｃａｓｔｅｒ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｉｎｃ．、Ｍａｙｂｒｉｄｇｅ、Ｍａｔｒｉｘ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、ＴＣＩ、およびＦｌｕｏｒｏｃｈｅｍ ＵＳＡなどの供給元から得てもよいし、および／または当業者に公知の出典に従い合成してもよいし（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ： Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ， Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ， ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ、５版（Ｗｉｌｅｙ、２０００年１２月）を参照されたい）、および／または本明細書に記載されているように調製してもよい。

【化17】

【0087】

化合物Ｉの脱保護により、臭素化ヒドロキシメチルアルデヒドＩＩを得る。適切なトリ保護シクラムでの還元的アミノ化により化合物ＩＶを生成する。酸化によりアルデヒドＶを得て、これを、還元的アミノ化を介して化合物ＶＩにカップリングすることができる（ＷＯ２０１３／０９６９２６）。次いで、脱保護により本発明の化合物を得る。

【0088】

あるいは、位置異性体の臭化物をスキームＩＩに従い調製することができる。化合物Ｉの酸化によりアルデヒドＩＸを得る。適切なトリ保護シクラムでの還元的アミノ化により中間体Ｘを得る。脱保護からＸＩを得て、これを、還元的アミノ化を介して化合物ＶＩにカップリングしてＸＩＩＩを得ることができる。次いで、脱保護により本発明の化合物を得る。

【化18】

【0089】

当業者であれば、本明細書に記載されているプロセスにおいて、中間体化合物の官能基は、少なくとも１つの適切な保護基で保護されることが必要であり得ることを理解する。このような官能基の非限定的例として、ヒドロキシル基、アルデヒド基、アミノ基、メルカプト基、およびカルボン酸基が挙げられる。ヒドロキシ基に対する適切な保護基の非限定的例として、トリアルキルシリルおよびジアリールアルキルシリル基（例えば、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリルまたはトリメチルシリル）、テトラヒドロピラニル、およびベンジルが挙げられる。アルデヒド基に対する適切な保護基の非限定的例として、１，３−ジオキサンおよび１，３−ジオキソランが挙げられる。アミノ、アミジノおよびグアニジノに対する適切な保護基の非限定的例として、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、およびトリフルオロアセチル（ｔｒｉｆｌｕｏｒａｃｅｔｙｌ）基が挙げられる。メルカプトに対する適切な保護基の非限定的例として、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ”（式中、Ｒ”は、アルキル、アリールまたはアリールアルキルである）、ｐ−メトキシベンジル、およびトリチル基が挙げられる。カルボン酸に対する適切な保護基の非限定的例として、アルキル、アリールおよびアリールアルキルエステルが挙げられる。保護基は、当業者に公知であり、本明細書に記載されているような標準的な技法に従い付加させても、除去してもよい。保護基の使用は、例えば、Ｇｒｅｅｎ、Ｔ．Ｗ．およびＰ．Ｇ．Ｍ． Ｗｕｔｚ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９年）、第３版、Ｗｉｌｅｙに詳細に記載されている。当業者であれば理解すように、保護基はまた、Ｗａｎｇ樹脂、Ｒｉｎｋ樹脂または２−クロロトリチル−塩化物樹脂などのポリマー樹脂であってもよい。
ヘテロ二官能性化合物を特徴付けるための方法

【0090】

本明細書に記載のヘテロ二官能性化合物の生物学的活性は、例えば、当技術分野で規定通りに実施されるおよび本明細書または当技術分野で記載される少なくとも１つのｉｎ ｖｉｔｒｏおよび／またはｉｎ ｖｉｖｏの試験を実施することにより決定することができる。ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイとして、限定ではないものの、結合アッセイ、イムノアッセイ、競合的結合アッセイおよび細胞ベースの活性アッセイが挙げられる。

【0091】

Ｅ−セレクチンのアンタゴニストについてスクリーニングするために阻害アッセイを使用することができる。例えば、アッセイは、本明細書に記載されている化合物の、Ｅ−セレクチンとｓＬｅ^ａまたはｓＬｅ^ｘとの相互作用を阻害する（すなわち、統計的にまたは生物学的に有意な方式で減少、遮断、低減、または阻止する）能力を特徴づけるように実施することができる。阻害アッセイは、ＩＣ_５０値の測定を可能にする競合的結合アッセイであってよい。例として、Ｅ−セレクチン／Ｉｇキメラをマトリックス（例えば、ポリスチレンなどのポリマーで作製されたマルチウェルプレート；試験管などであり得る）上に固定化してもよく、非特異的結合を減少させる組成物（例えば、当業者により規定通りに使用されている無脂肪の乾燥ミルクまたはウシ血清アルブミンまたは他の遮断緩衝液を含む組成物）を添加してもよく、レポーター基を含むｓＬｅ^ａの存在下で、固定化したＥ−セレクチンへの、ｓＬｅ^ａの結合を可能にするのに十分な条件下でかつ十分な時間にわたって、固定化したＥ−セレクチンを候補の化合物と接触させてもよく、固定化したＥ−セレクチンを洗浄してもよく、固定化したＥ−セレクチンに結合しているｓＬｅ^ａの量を検出してもよい。このようなステップの変化形は、当業者により容易にかつ規定通りに達成できる。

【0092】

阻害アッセイは、ＣＸＣＲ４媒介性化学走性のアンタゴニズムについてスクリーニングするために使用することができる。例えば、アッセイを実施して、ＣＸＣＲ４リガンドＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ−１α）へのＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞（これらの細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現する）の膜を横切った移動を阻害する糖模倣性ＣＸＣＲ４アンタゴニストの能力を測定することができる。例として、ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞は細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現するヒトＴリンパ芽球である。細胞を、３ｕＭ Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭで標識して蛍光による検出を可能にすることができる。細胞は、ＣＸＣＲ４アンタゴニストで処理し、トランスウェル挿入部の上側チャンバーに配置することができる。トランスウェルは、各ウェルが６００ｕｌのＲＰＭＩ １６４０＋２％ＦＢＳおよび５０ｎｇ／ｍＬのＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ１α）を含有する２４ウェルプレートのウェル内に配置することができる。細胞は、５％ＣＯ２中、３７℃で３時間上側チャンバーから下側チャンバーへと膜を横断して移動させることができる。トランスウェル挿入部を２４ウェルプレートから取り出すことができ、励起波長４８５ｎｍおよび発光波長５３８ｎｍで、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ ３を使用して下側チャンバー内の蛍光が測定される。

【0093】

あるいは、アッセイを使用して、細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現するように遺伝子操作されたＣＨＯ細胞へのＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ−１α）の結合を阻害する糖模倣性ＣＸＣＲ４アンタゴニストの能力を測定することができる。当業者は、リガンド結合（ＣＸＣＬ１２）によりＣＸＣＲ４を活性化して、ＧｉをＣＸＣＲ４複合体から解離させることができる。活性化したＣＸＣＲ４は、アデニリルシクラーゼに結合し、そうすることでこれを不活化することができ、細胞内ｃＡＭＰレベルの低減をもたらす。細胞内ｃＡＭＰは通常低い。よって、Ｇｉ共役受容体による低レベルのｃＡＭＰの低減は検出するのが困難である。ホルスコリンをＣＨＯ細胞に加えて、アデニリルシクラーゼを直接活性化し（すべてのＧＰＣＲを迂回する）、そうすることで、細胞内のｃＡＭＰレベルを上昇させ、これによって、Ｇｉ応答を容易に観察することができる。ＣＸＣＬ１２のＣＸＣＲ４との相互作用は、ｃＡＭＰの細胞内レベルを低減させ、ＣＸＣＲ４アンタゴニストによる、ＣＸＣＬ１２のＣＸＣＲ４との相互作用の阻害は細胞内のｃＡＭＰレベルを増加させ、これは発光により測定される。

【0094】

あるいは、当業者は、アッセイを使用して、細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現するＪｕｒｋａｔ細胞への抗ＣＸＣＲ４抗体の結合を遮断する糖模倣性ＣＸＣＲ４アンタゴニストの能力を測定することができる。Ｊｕｒｋａｔ細胞を、ＣＸＣＲ４アンタゴニストで処理し、これに続いてフィコエリスリンがコンジュゲートした抗ＣＸＣＲ４抗体で処理することができる。抗体は、４℃で１時間細胞に結合させることができる。細胞を洗浄し、抗ＣＸＣＲ４−ＰＥ抗体の細胞への結合をフローサイトメトリーで評価することができる。

【0095】

ある特定のアッセイに対する条件は、温度、緩衝剤（塩、カチオン、媒体を含む）、およびアッセイに使用される任意の細胞および化合物の統合性を維持する他の成分を含み、当業者であれば、これらに精通しており、そして／または容易にそれらを決定することができる。当業者はまた、本明細書に記載されているインビトロの方法およびインビボの方法を実施する場合、適当な対照をデザインすることができ、これを含めることができることを容易に理解する。

【0096】

本明細書に記載されており、そして当技術分野における少なくとも一つのアッセイおよび技法により特徴づけられる化合物の供給源は、その化合物で処置された対象から得た生物学的試料であってよい。アッセイにおいて使用することができる細胞はまた、生物学的試料において提供されてもよい。「生物学的試料」は対象からの試料を含んでもよく、血液試料（この血液試料から血清または血漿を調製できる）、生検検体、１種または複数種の体液（例えば、肺洗浄、腹水、粘膜洗浄液、滑液、尿）、骨髄、リンパ節、組織外植片、器官培養物、あるいは対象もしくは生物学的供給源に由来する任意の他の組織または細胞調製物であり得る。生物学的試料は、形態学的完全性または物理的な状態が、例えば、解剖、解離、可溶化、分画化、均質化、生化学的もしくは化学的抽出、微粉粉砕、凍結乾燥、超音波処理、または対象もしくは生物学的供給源に由来する試料を処理するための任意の他の手段により破砕されている、組織または細胞調製物をさらに含む。一部の実施形態では、対象または生物学的供給源は、ヒトもしくは非ヒト動物、初代細胞培養物（例えば、免疫細胞）、または、これらに限定されないが、染色体的に統合されたもしくはエピソーム組み換え型の核酸配列を含有し得る遺伝子操作細胞系、不死化もしくは不死化可能な細胞系、体細胞ハイブリッド細胞系、分化もしくは分化可能な細胞系、形質転換細胞系などを含めた培養馴化細胞系であってよい。

【0097】

本明細書に記載されているようにヘテロ官能性阻害剤を特徴づけるための方法は、動物モデル実験を含む。当技術分野で使用されている液体がんに対する例示的動物モデルのための非限定的な例として、多発性骨髄腫（例えば、ＤｅＷｅｅｒｄｔ、Ｎａｔｕｒｅ、４８０巻：Ｓ３８−Ｓ３９頁（２０１１年１２月１５日）ｄｏｉ：１０．１０３８／４８０Ｓ３８ａ；２０１１年１２月１４日オンライン出版； Ｍｉｔｓｉａｄｅｓら、Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、２００９年、１５巻：１２１００２１頁（２００９年）を参照されたい）；急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）（Ｚｕｂｅｒら、Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．、２００９年４月１日；２３巻（７号）：８７７〜８８９頁）が挙げられる。急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）に対する動物モデルは、２０年超にわたり当業者により使用されてきた。固形腫瘍がんに対する多くの例示的動物モデルが規定通りに使用され、当業者には周知である。

【0098】

医学的技術分野の当業者であれば理解しているように、「処置する」および「処置」という用語は、対象（すなわち、患者、個体）の疾患、障害、または状態の医学的な管理を含む（例えば、Ｓｔｅｄｍａｎ’ｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙを参照されたい）。一般的に、適当な用量および処置レジメンは、本明細書に記載されている少なくとも１種の本開示の化合物を、治療上および／または予防上の利点を得るのに十分な量で提供する。治療的処置と予防的または防止的手段の両方に対して、治療上および／または予防上の利点として、例えば、臨床での転帰の改善が挙げられ、この目的は、所望されない生理学的変化もしくは障害を予防もしくは減速もしくは遅らせる（低下させる）こと、またはこのような障害の拡大または重症化を予防もしくは減速もしくは遅らせる（低下させる）ことである。本明細書中で論じたように、対象を処置することによる有利なまたは所望の臨床的結果として、これらに限定されないが、処置すべき疾患、状態、または障害から生じるかまたはこれらに伴う症状の寛解、低下、または軽減；症状の発症の低減；生活の質の改善；疾患を患っていない状態の延長（すなわち、疾患の診断がなされるときの基礎である症状を対象が提示する可能性または傾向を低減させること）：疾患の程度の減退；疾患の安定化した（すなわち、悪化していない）状態；疾患の進行を遅延または減速させること；疾患状態の回復または緩和；および検出可能または検出不能に関わらず、緩解（部分的または全体的）、および／または全生存期間（ｏｖｅｒａｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ）が挙げられる。「処置」は、対象が処置を受けていなかった場合に予想される生存期間と比較して、生存期間を長引かせることを含み得る。処置を必要とする対象として、疾患、状態、または障害をすでに有する対象、さらに疾患、状態、または障害を発症しやすいまたは発症のリスクが高い対象、および疾患、状態、または障害を予防すべき対象（すなわち、疾患、障害、または状態の発症の可能性を低減させる）が挙げられる。

【0099】

本明細書に記載されている方法の一部の実施形態では、対象はヒトである。本明細書に記載されている方法の一部の実施形態では、対象は非ヒト動物である。本明細書に記載されている処置を必要とする対象は、本明細書に記載されている疾患、障害、または状態の少なくとも１つの症状または後遺症を示すことがあるか、または疾患、障害、もしくは状態を発症するリスクが高いことがある。処置され得る非ヒト動物として、哺乳動物、例えば、非ヒト霊長類（例えば、サル、チンパンジー、ゴリラなど）、げっ歯類（例えば、ラット、マウス、アレチネズミ、ハムスター、ケナガイタチ、ウサギ）、ウサギ目の動物、ブタ（ｓｗｉｎｅ）（例えば、ブタ（ｐｉｇ）、小型ブタ（ｐｉｇ））、ウマ、イヌ、ネコ、ウシ属、および他の飼い慣らした動物、農場動物、および動物園の動物が挙げられる。

【0100】

本開示の化合物の、本明細書に記載されている疾患、障害または状態の処置および／または予防における有効性は、医学的および臨床的技術分野の当業者により容易に決定することができる。適当な投与計画の決定および調整（例えば、１用量当たりの化合物の量ならびに／または投与回数および投与頻度を調整すること）はまた、医学的および臨床的技術分野の当業者により容易に実施され得る。健康診断、評価および臨床症状のモニタリング、ならびに本明細書に記載されている分析試験および方法の性能を含めた診断法の一つまたは任意の組合せを対象の健康状態のモニタリングに使用することができる。
医薬組成物および医薬組成物を使用する方法

【0101】

少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物もまた本明細書に提供される。一部の実施形態では、医薬組成物は少なくとも１つの追加の薬学的に許容される成分をさらに含む。

【0102】

薬学的剤形において、本開示の化合物の任意の１種または複数種は、薬学的に許容される誘導体、例えば、塩などの形態で投与される、および／あるいは、これらは、単独で、および／または他の薬学的活性のある化合物を適切に伴って、ならびに他の薬学的活性のある化合物と組み合わせて使用することもできる。

【0103】

有効量または治療有効量とは、単一用量としてまたは一連の用量の一部として対象に投与した場合に少なくとも１つの治療上の効果をもたらすのに有効である、本開示の化合物、あるいは、少なくとも１種のそのような化合物を含む組成物の量を指す。最適な用量は一般的に、実験モデルおよび／または治験を使用して決定することができる。本明細書に記載されている治療剤のそれぞれ（予防的利点のために投与した場合を含む）に対する前臨床および臨床研究のデザインおよび実施は、十分に関連技術分野の当業者の範囲内である。治療剤に最適な用量は、対象の体質量、体重、および／または血液量に依存し得る。一般的には、ある用量で存在する、本明細書に記載されているような式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物の量は、対象の体重１ｋｇ当たり約０．０１μｇ〜約１０００μｇの範囲であり得る。有効な治療を提供するのに十分な最小用量が一部の実施形態において使用され得る。対象は一般的に、処置されているかまたは予防されている疾患または状態に対して適切なアッセイを使用して治療上の有効性についてモニターすることができ、このアッセイは当業者にはよく知られており、本明細書に記載されている。対象に投与する化合物のレベルは、対象由来の生物学的流体中、例えば、血液、血液画分（例えば、血清）中、および／または尿中、および／または他の生物学的試料中の化合物（または化合物の代謝物）のレベルを測定することによってモニターすることができる。化合物、またはその代謝物を検出するために当技術分野で実施されているいずれの方法も、治療的レジメンの経過中に化合物のレベルを測定するために使用することができる。

【0104】

本明細書に記載されている化合物の用量は、対象の状態、すなわち、疾患の段階、疾患により引き起こされた症状の重症度、全般的な健康状態、ならびに年齢、性別、および体重、ならびに医学的技術分野の当業者には明らかな他の要素に依存し得る。同様に、疾患または障害を処置するための治療剤の用量は、医学的技術分野の当業者により理解されているパラメーターに従い決定することができる。

【0105】

医薬組成物は、処置すべき疾患または障害に対して任意の適当な方式で、医学的技術分野の当業者により決定された通りに投与され得る。適当な用量ならびに投与の適切な継続時間および頻度は、患者の状態，患者の疾患の種類および重症度、活性成分の特定の形態、および投与方法を含めた、本明細書中で論じられたような要素により決定される。一般的に、適当な用量（または有効用量）および処置レジメンは、本明細書に記載されている医薬組成物を、治療上および／または予防上の利点（例えば、改善された臨床での転帰、例えば、より頻繁な、完全もしくは部分的な緩解、または疾患を患っていないおよび／もしくは全生存期間の延長、または症状の重症度を低下させること、または上に詳細に記載されている他の利点）を提供するのに十分な量で提供される。

【0106】

本明細書に記載されている医薬組成物は、化合物の有効量を効果的に送達するいくつかの経路のうちのいずれか一つにより、それを必要とする対象に投与され得る。非限定的な適切な投与経路として、局所的、経口、鼻、髄腔内、経腸、口腔、舌下、経皮的、直腸、経膣、眼内、結膜下、舌下、および非経口投与（これらは、皮下、静脈内、筋肉内、胸骨内、空洞内、道内（ｉｎｔｒａｍｅａｔａｌ）、および尿道内への注射および／または点滴を含む）などが挙げられる。

【0107】

本明細書に記載されている医薬組成物は、無菌の水性溶液であっても、水性懸濁液であっても、水性乳濁液であっても、無菌の非水性溶液であっても、非水性懸濁液であっても、非水性乳濁液であってもよく、少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤（すなわち、活性成分の活性を妨げない無毒性材料）をさらに含んでもよい。このような組成物は、固体、液体、またはガス（エアゾール）の形態であってよい。あるいは、本明細書に記載されている組成物は、凍結乾燥物として製剤化してもよいか、または本明細書に記載されている化合物は、当技術分野で公知の技術を使用してリポソーム内に封入されてもよい。医薬組成物は、少なくとも１種の追加の薬学的に許容される成分をさらに含んでもよく、これは生物学的に活性であっても不活性であってもよい。このような成分の非限定的な例として、緩衝液（例えば、中性緩衝化食塩水またはリン酸緩衝食塩水）、炭水化物（例えば、グルコース、マンノース、スクロースまたはデキストラン）、マンニトール、タンパク質、ポリペプチド、アミノ酸（例えば、グリシン）、抗酸化剤、キレート剤（例えば、ＥＤＴＡおよびグルタチオン）、安定剤、色素、香味剤、懸濁化剤および保存剤が挙げられる。

【0108】

医薬組成物における使用のための、当業者に公知の任意の適切な賦形剤または担体を、本明細書に記載されている組成物において利用することができる。治療的使用のための賦形剤は周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ、２１版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂ． Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ（２００５年））に記載されている。一般的に、賦形剤の種類は、投与形式、ならびに活性成分の化学組成に基づいて選択される。医薬組成物は、特定の投与形式用に製剤化することができる。非経口投与に対して、医薬組成物は、水、生理食塩水、アルコール、脂肪、ワックス、および緩衝剤をさらに含んでもよい。経口投与に対して、医薬組成物は、例えば、前記の賦形剤、固体賦形剤および担体の任意のものから選択される少なくとも１種の成分、例えば、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、カオリン、グリセリン、デンプンデキストリン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、グルコース、スクロースおよび炭酸マグネシウムなどをさらに含んでもよい。

【0109】

医薬組成物（例えば、経口投与または注射による送達に対して）は液体の形態であってよい。液体医薬組成物は、例えば、少なくとも１種の以下のものを含み得る：無菌の希釈剤、例えば、注射用水、食塩水溶液、好ましくは生理食塩水、リンゲル溶液、等張性塩化ナトリウム、溶媒または懸濁媒（ｓｕｓｐｅｎｄｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ）としての役目を果たすことができる不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒；抗菌剤；抗酸化剤；キレート剤；緩衝液および張度調整のための剤、例えば、塩化ナトリウムまたはデキストロースなど。非経口の調製物は、ガラスまたはプラスチックで作製されたアンプル、使い捨てシリンジまたは複数回投与用バイアルの中に封入することができる。一部の実施形態では、医薬組成物は、生理食塩水を含む。一部の実施形態では、医薬組成物は注射用医薬組成物、一部の実施形態では、注射用医薬組成物は無菌である。

【0110】

経口製剤に対して、本開示の化合物のうちの少なくとも１種を、単独で、あるいは、錠剤、散剤、顆粒剤および／またはカプセル剤を作製するのに適当な少なくとも１種の添加物、例えば、任意の１種もしくは複数種の従来の添加物、崩壊剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、着色剤、および香味剤と組み合わせて使用することができる。医薬組成物は、胃の環境の低いｐＨからの活性成分の保護および／または腸溶コーティングを提供し得る少なくとも１種の緩衝剤を含むように製剤化され得る。医薬組成物は、経口送達用に、少なくとも１種の香味剤を用いて、例えば、液体、固体もしくは半固体製剤で、かつ／または腸溶コーティングを用いて、製剤化することができる。

【0111】

経口用製剤は、ゼラチンカプセル剤として提供され得、このゼラチンカプセル剤は、粉末状担体と共に活性化合物または生物学的化合物を含有することができる。同様の担体および希釈剤を使用して、圧縮錠を作製することができる。錠剤およびカプセル剤は、ある期間にわたる活性成分の連続放出を得るための持続放出製品として製造され得る。圧縮錠は、いずれの不快な味覚も遮蔽し、錠剤を大気から保護するために糖コーティングもしくはフィルムコーティングされ得るか、または、消化管内で選択的に崩壊するように腸溶コーティングされ得る。

【0112】

医薬組成物は、持続放出または緩徐放出するように製剤化され得る。このような組成物は一般的に周知の技術を使用して調製され得、例えば、口腔、直腸または皮下への埋込み、または所望のターゲット部位での埋込みにより投与され得る。持続放出製剤は、担体マトリックス中に分散した活性のある治療剤を含有することができ、そして／または速度制御膜に取り囲まれたリザーバー内に含有され得る。このような製剤内で使用するための賦形剤は生体適合性であり、それは、生分解性であってよい。好ましくは、製剤は、比較的一定のレベルの活性成分の放出を提供する。持続放出製剤内に含有される活性のある治療剤の量は、埋込みの部位、放出の速度および予想される継続時間、ならびに処置または予防する状態の性質に依存する。

【0113】

本明細書に記載されている医薬組成物は、様々な基剤、例えば、乳化基剤または水溶性基剤などと混合することによって坐剤として製剤化され得る。医薬組成物は、吸入によって投与されるエアゾール製剤として調製されてもよい。組成物は、加圧した、許容される噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などへと製剤化されてもよい。

【0114】

本開示の化合物およびこれらの化合物を含む医薬組成物を、局所的に（例えば、経皮的投与により）投与してもよい。局所的製剤は、経皮的パッチ剤、軟膏剤、ペースト剤、ローション剤、クリーム剤、ゲル剤などの形態であってよい。局所的製剤は、浸透剤もしくは強化剤（透過促進剤とも呼ばれる）、増粘剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤のうちの１種または複数種を含み得る。物理的浸透促進剤は、例えば、イオントホレーシスなどの電気泳動技法、超音波（または「音波泳動法」）の使用などを含む。化学的浸透促進剤は、治療剤の投与前、投与と同時、または投与直後のいずれかに投与される剤であり、皮膚、特に角質層の透過性を増加させて、皮膚を通しての薬物の浸透の向上を提供する。追加的な化学的および物理的浸透促進剤は、例えば、Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ、Ａ．Ｆ． Ｋｙｄｏｎｉｅｕｓ（編）１９８７年、ＣＲＬ Ｐｒｅｓｓ；Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｏｎ Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ、Ｓｍｉｔｈら編（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、１９９５年）；Ｌｅｎｎｅｒａｓら、Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、５４巻：４９９〜５０８頁（２００２年）；Ｋａｒａｎｄｅら、Ｐｈａｒｍ． Ｒｅｓ．、１９巻：６５５〜６０頁（２００２年）；Ｖａｄｄｉら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｈａｒｍ．、９１巻：１６３９〜５１頁（２００２年）；Ｖｅｎｔｕｒａら、Ｊ． Ｄｒｕｇ Ｔａｒｇｅｔ、９巻：３７９〜９３頁（２００１年）；Ｓｈｏｋｒｉら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｈａｒｍ．、２２８巻（１−２号）：９９〜１０７頁（２００１年）；Ｓｕｚｕｋｉら、Ｂｉｏｌ． Ｐｈａｒｍ． Ｂｕｌｌ、２４巻：６９８〜７００頁（２００１年）；Ａｌｂｅｒｔｉら、Ｊ． Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｒｅｌｅａｓｅ、７１巻：３１９〜２７頁（２００１年）；Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら、Ｕｒｏｌｏｇｙ、５７巻：３０１〜５頁（２００１年）；Ｋｉｉｊａｖａｉｎｅｎら、Ｅｕｒ． Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．、１０巻：９７〜１０２頁（２０００年）；およびＴｅｎｊａｒｌａら、Ｉｎｔ． Ｊ． Ｐｈａｒｍ．、１９２巻：１４７〜５８頁（１９９９年）において記載されている。

【0115】

本開示の化合物のうちの少なくとも１種の単位用量（例えば、経口または注射用の用量）を含むキットが提供される。このようなキットは、単位用量を含む容器、対象となる病的状態の処置における治療剤の使用および付随して生じる利点を説明する情報提供のためのパッケージ挿入物、ならびに／または任意選択で少なくとも１種の化合物またはこれを含む組成物の送達のための器具または装置を含み得る。

【実施例】

【0116】

（実施例１）
Ｅ−セレクチンおよびＣＸＣＲ４ケモカイン受容体のヘテロ二官能性阻害剤
（化合物９および１６）
例示的な式（Ｉ）のヘテロ二官能性化合物を、実施例１〜２に記載されているように、および図１に記載されている例示的合成スキームに示されているように合成した。

【0117】

化合物２の合成：化合物１（２．５ｇ、８．３ｍｍｏｌ、Ｑｉａｎら、Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ、２巻、２０１１年、４９５頁）をジオキサン（３０ｍｌ）に溶解し、室温でゆっくりと撹拌しながらＨ_２Ｏ（２０ｍｌ）を加えた。溶液を０℃に冷却し（氷浴）、ゆっくりと撹拌しながらＮａＢＨ_４（３ｇ、７９．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６４℃で１６時間撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し、５Ｎ ＨＣｌでクエンチした。溶液から固体の塊を沈殿させ、これを濾過で除去した。濾液をＥｔＯＡｃ（１２５ｍｌ）で希釈し、分液ロートに移した。相を分離した。有機相を生理食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮した。残渣を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃを移動相として使用するカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物２を得た（１．８ｇ、６．６ｍｍｏｌ、７９．３％）。

【0118】

化合物３の合成：化合物２（１．７ｇ、６．２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３２ｍｌ）に溶解し、室温で撹拌しながら１０Ｎ ＨＣｌ（３０ｍｌ）を加えた。反応混合物を室温で４．５時間撹拌した。反応混合物をＨ_２Ｏ（１５０ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１２５ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相をＮａＨＣＯ_３飽和溶液（１×１２５ｍｌ）およびブライン（１×１２５ｍｌ）で洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣を、ヘキサンおよびＥｔＯＡｃを移動相として使用するカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物３を得た（１．２２ｇ、５．７ｍｍｏｌ、９１．７％）。

【0119】

化合物５の合成：化合物４（３．７ｇ、７．５８ｍｍｏｌ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ、２００３年、４４巻、２４８１〜２４８３頁）と化合物３（２．０５ｇ、９．５３ｍｍｏｌ）の混合物を、トルエン（２×４０ｍｌ）と共蒸発させ、真空下で３０分間保持した。混合物を１，２−ジクロロエタン、４０ｍｌ）に溶解し、アルゴン下、室温で３０分間撹拌し、Ｎａ（ＯＡｃ）_３ＢＨ（３．２ｇ、１５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をアルゴン下、室温で終夜撹拌した。水（６０ｍｌ）を加え、これに続いてＣＨ_２Ｃｌ_２（８０ｍｌ）を加えた。反応混合物を分液ロートに移し、有機相を収集した。水相をＣＨ_２Ｃｌ_２（２×６０ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機相を冷たいＮａＨＣＯ_３飽和溶液（８０ｍｌ）およびブライン（８０ｍｌ）で逐次的に洗浄し、脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣を、ヘキサンおよびＥｔＯＡｃを移動相として使用するカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物５を得た（４．５ｇ、６．５４ｍｍｏｌ、８６．３％）。

【0120】

化合物６の合成：化合物５（４．５ｇ、６．５４ｍｍｏｌ）をアルゴン下でＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍｌ）に溶解し、氷浴上で冷却した。デスマーチン試薬（３．６ｇ、８．４９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をアルゴン下で３時間撹拌し、この間反応混合物はゆっくりと室温に達した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（４０ｍｌ）で希釈し、冷たいＮａＨＣＯ_３飽和溶液および冷たいブラインで洗浄した。有機相を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣を、ヘキサン−ＥｔＯＡｃを移動相として使用するカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物５を得た（３．６ｇ、５．２５ｍｍｏｌ、８０．２８％）。

【0121】

化合物８の合成：化合物６（３．５ｇ、５．１１ｍｍｏｌ）と化合物７（２．８ｇ、ＷＯ２０１３／０９６９２６）の混合物をＭｅＯＨ（３×５０ｍｌ）と共蒸発させ、真空下で乾燥させた。残渣をＭｅＯＨ（５０ｍｌ）に溶解し、アルゴン下、室温で１時間撹拌した。Ｎａ（ＯＡｃ）_３ＢＨ（３．６ｇ、１６．９９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物をアルゴン下、室温で１７時間撹拌した。反応混合物を濃縮した。固体残渣をＣＨＣｌ_３（１００ｍｌ）に懸濁させ、Ｈ_２Ｏ（２５０ｍｌ）を撹拌しながら加えた。混合物を室温で１０分間撹拌し、この間固体生成物が沈殿した。固体生成物を濾取し、水で洗浄し、真空下で乾燥させて、化合物８を得た（４．４ｇ、３．１４ｍｍｏｌ、化合物６に基づき８２．２％）。

【0122】

化合物９の合成：化合物８（４．２ｇ、３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１００ｍｌ）中溶液に、室温で撹拌しながら１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（５０ｍｌ）を加えた。反応混合物（ｐＨ１２．９）を室温で２時間撹拌した。ＡｃＯＨ（３ｍｌ）を加えることによって、生成した反応混合物のｐＨを８．９に調節した。溶媒を蒸発させ、次いで凍結乾燥した。固体の塊をＨ_２Ｏ（２０ｍｌ）に溶解し、ＮａＯＨ溶液を加えることによって、溶液のｐＨを９．５に調節した。Ｈ_２Ｏ（各カラム１５０ｍｌ）、Ｈ_２Ｏ中５０％ＭｅＯＨ（各カラム６０ｍｌ）、Ｈ_２Ｏ中７０％ＭｅＯＨ（各カラム１００ｍｌ）、およびＨ_２Ｏ中８０％ＭｅＯＨ（各カラム５０ｍｌ）を使用する事前充填済みのＳｅｐ−Ｐａｋ Ｃ１８カラム（２×１０ｇ）を使用することによって、脱塩を実施した。所望の化合物をＨ_２Ｏ中５０〜８０％ＭｅＯＨに溶出した。これらを合わせ、全容積の１／４に濃縮した。生成した溶液を凍結乾燥して、化合物８を得た（２．９ｇ、２．６ｍｍｏｌ、８６．７％）。ｍ／ｚ：Ｃ_５２Ｈ_８８ＢｒＮ_７Ｏ_１４に対する［Ｍ＋Ｈ］計算値：１１１６．２；実測値：１１１６．４。

【0123】

化合物１０の合成：化合物２（０．２２５ｇ、０．７３ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２中溶液に、セライトを加え、これに続いて、室温で撹拌しながらクロロクロム酸ピリジニウム（ｃｈｌｏｒｏｃｈｏｍａｔｅ）（０．２８ｇ、１．３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、シリカおよびセライトのベッドを通して濾過した。濾液を蒸発乾固し、カラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１０を得た（０．２ｇ）。

【0124】

化合物１２の合成：シクラム（５ｇ、２５ｍｍｏｌ）の無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（１５０ｍｌ）中懸濁液に、ジアリル二炭酸（１２ｍｌ、ｄ ０．９９１ｇ／ｍｌ、８３．７ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍｌ）中溶液を撹拌しながら滴下添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、この間反応物は薄緑色に変化し、透明な溶液をもたらした。溶媒を除去し、残渣を、ＣＨ_２Ｃｌ_２およびＭｅＯＨを移動相として使用するカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１２を得た（１０．５ｇ、２３．２ｍｍｏｌ、９２．９％）。ＴＬＣ：ＣＨ_２Ｃｌ_２−ＭｅＯＨ（９５：５）。

【0125】

化合物１３の合成：化合物１０（０．１９ｇ、０．７ｍｍｏｌ）および化合物１２（０．４５ｇ、１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１ｍｌおよびＴＨＦ０．５ｍｌ）中溶液を室温で３０分間撹拌した。この溶液に、Ｎａ（ＯＡｃ）_３ＢＨ（０．３６ｇ、１．６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ_２Ｏで洗浄した。有機層を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮乾燥させた。残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して化合物１３を得た（０．２ｇ）。

【0126】

化合物１４の合成：化合物１３（０．２４ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（７ｍｌ）中溶液に、濃縮ＨＣｌ（５ｍｌ）を加え、反応混合物を室温で１０時間撹拌した。反応混合物をＨ_２Ｏ（２０ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３×１６ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相を脱水し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１４を得た（０．１５ｇ）。

【0127】

化合物１５の合成：化合物７（０．１ｇ、０．１４ｍｍｏｌ、ＷＯ２０１３／０９６９２６）と化合物１４（０．１５ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１．５ｍｌ）中混合物を室温で３０分間撹拌し、これに続いて、Ｎａ（ＯＡｃ）_３ＢＨ（０．０９６ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をＭｅＯＨ中に懸濁させた。生成した固体を濾過で除去し、濾液を濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーで精製して、化合物１５を得た（３５ｍｇ）。

【0128】

化合物１６の合成：化合物１５（０．０２８ｇ、０．０２ｍｍｏｌ）のＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍｌ）中溶液に、ＡｃＯＨ（０．００５ｍｌ、０．０９ｍｍｏｌ）を加え、これに続いてＰｄ（ＰＰｈ_３）_４（０．００３ｇ、０．００３ｍｍｏｌ）およびＢｕ_３ＳｎＨ（０．０１７ｍｌ、０．０６ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で３時間撹拌した。反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍｌ）で希釈し、Ｈ_２Ｏ（８ｍｌ）で抽出した。水層を凍結乾燥し、Ｈ_２Ｏに溶解し、Ｓｅｐ−Ｐａｋ Ｃ−１８カラムで精製した。生成物に対応する画分を濃縮し、Ｈ_２Ｏに溶解した。溶液のｐＨをＮａＯＨ溶液で９．５に調節し、凍結乾燥させて、Ｎａ−塩として化合物１６を得た（６．５ｍｇ）。ｍ／ｚ：Ｃ_５２Ｈ_８８ＢｒＮ_７Ｏ_１４に対する［Ｍ＋Ｈ］の計算値：１１１６．２；実測値：１１１６．６
（実施例２）
ＳＤＦ−１誘発性化学走性の阻害を評価するＣＸＣＲ４アッセイ

【0129】

化学走性アッセイを使用して、細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現するＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞のＣＸＣＲ４リガンドＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ−１α）に対する膜を横切った移動を阻害する糖模倣性ＣＸＣＲ４アンタゴニストの能力を測定した。ＣＣＲＦ−ＣＥＭ細胞は、細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現するヒトＴリンパ芽球である。細胞を、３７℃で１５分間、３ｕＭ Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭで標識して、蛍光による検出を可能にした。続いて、細胞を、１０分間の２５０×ｇでペレット化し、２％ＦＢＳを補充したＲＰＭＩ １６４０培地中に、１ｍＬ当たり約５×１０^５個の細胞の最終濃度に再懸濁させた。通常、２００ｕｌの細胞を、２２ｕｌの１０×濃度の試験化合物と混合し、室温に１０分間置いた。処理した細胞を二回反復で評価した。よって、１００ｕｌの細胞を、２つのトランスウェル挿入部（Ｃｏｓｔａｒ番号３４２１；５．０ｕｍポア；６．５ｍｍ直径の挿入部）のそれぞれの上側チャンバーに配置した。トランスウェルを、各ウェルが６００ｕｌのＲＰＭＩ １６４０および２％ＦＢＳおよび５０ｎｇ／ｍＬのＣＸＣＬ１２を含有する２４ウェルプレートのウェルに配置した。陰性対照ウェルは、下側チャンバー内にＣＸＣＬ１２を含有しなかった。細胞を、５％ＣＯ_２中、３７℃で３時間、上側チャンバーから下側チャンバーへ、膜を横切って移動させた。トランスウェル挿入部を２４ウェルプレートから取り出し、励起波長４８５ｎｍおよび発光波長５３８ｎｍで、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ ３を使用して下側チャンバーにおける蛍光を測定した。図４を参照されたい。

【0130】

（実施例３）
Ｅ−セレクチン活性−結合アッセイ
Ｅ−セレクチンのアンタゴニストをスクリーニングし、特徴づける阻害アッセイは競合的結合アッセイであり、このアッセイからＩＣ_５０値を決定することができる。３７℃で２時間のインキュベーションにより、Ｅ−セレクチン／Ｉｇキメラを９６ウェルマイクロタイタープレート内に固定化した。非特異性の結合を減少させるために、ウシ血清アルブミンを各ウェルに添加し、室温で２時間インキュベートした。プレートを洗浄し、ビオチン化した、ｓＬｅ^ａポリアクリルアミドのコンジュゲートの存在下、ストレプトアビジン／西洋わさびペルオキシダーゼと共に試験化合物の段階希釈物をウェルに添加し、室温で２時間インキュベートした。

【0131】

洗浄後、固定化したＥ−セレクチンに結合しているｓＬｅ^ａの量を決定するために、ペルオキシダーゼ基質、３，３’，５，５’テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）を添加した。３分後、Ｈ_３ＰＯ_４の添加により酵素反応を停止させ、波長４５０ｎｍでの光の吸光度を決定した。結合を５０％阻害するのに必要とされる試験化合物の濃度を決定し、以下の表に示されているように、各Ｅ−セレクチンアンタゴニストに対するＩＣ_５０値として報告した。本明細書で開示されている例示的化合物に対するＩＣ_５０値は、以下の表に提供されている。図５を参照されたい。

【表1】

（実施例４）
ＣＸＣＲ４アッセイ − 環状ＡＭＰの阻害

【0132】

ＣＸＣＲ４−ｃＡＭＰアッセイは、細胞表面上にＣＸＣＲ４を発現するように遺伝子操作されたＣＨＯ細胞のＣＸＣＬ１２（ＳＤＦ−１α）への結合を阻害する糖模倣性ＣＸＣＲ４アンタゴニストの能力を測定する。アッセイキットは、ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ（９５−００８１Ｅ２ＣＰ２Ｍ；ｃＡＭＰ Ｈｕｎｔｅｒ ｅＸｐｒｅｓｓ ＣＸＣＲ４ ＣＨＯ−Ｋ１）から購入することができる。キットの指示マニュアルに記載のＧ_ｉ共役受容体アンタゴニスト応答プロトコールに従った。ＣＸＣＲ４などのＧＰＣＲは、通常、３つのＧタンパク質：Ｇｓ、ＧｉまたはＧｑのうちの１つに共役する。キットと共に供給されるＣＨＯ細胞において、ＣＸＣＲ４は、Ｇｉに共役している。リガンド結合（ＣＸＣＬ１２）によるＣＸＣＲ４の活性化後、ＧｉはＣＸＣＲ４複合体から解離し、活性化され、アデニリルシクラーゼに結合し、そうすることでこれを不活化し、細胞内ｃＡＭＰレベルの低減をもたらす。細胞内ｃＡＭＰは通常低く、よって、Ｇｉ共役受容体による低レベルのｃＡＭＰの低減は検出するのが困難である。ホルスコリンをＣＨＯ細胞に加えて、アデニリルシクラーゼを直接活性化し（すべてのＧＰＣＲを迂回する）、そうすることで、細胞内のｃＡＭＰレベルを上昇させ、これによって、Ｇｉ応答を容易に観察することができる。ＣＸＣＬ１２のＣＸＣＲ４との相互作用は、ｃＡＭＰの細胞内のレベルを低減し、ＣＸＣＲ４アンタゴニストによる、ＣＸＣＬ１２のＣＸＣＲ４との相互作用の阻害は細胞内のｃＡＭＰレベルを増加させ、これは発光により測定される。図６を参照されたい。
（実施例５）
腫瘍関連線維芽細胞へのリンパ管および血管内皮移動の阻害

【0133】

８．０×１０^５個の１３．３４線維芽細胞、Ｓ２．０１３腫瘍細胞、およびＣｏｌｏ３５７腫瘍細胞をＴ−２５内にプレーティングした。終夜インキュベートした。培地を血清フリーＥＢＭ−２に変更し、２４時間、細胞を培地に慣らした。培地を収集し、濾過してデブリを除去した。７５０ｕｌの馴化培地をＢｏｙｄｅｎチャンバー移動プレートの下側のウェルに加えた（３反復／細胞型／処理）。プレーティング仕様：２４ウェル；８．０ｕｍポア。血清フリーＥＢＭ−２に希釈した、３．０×１０^４個のｈＬＥＣまたはＨＵＶＥＣを、Ｂｏｙｄｅｎチャンバーの上側のウェルに加えた（５００ｕｌ／挿入部）。１００ｕｇ／ｍｌの化合物９を上側のウェルに加えた。ｈＬＥＣまたはＨＵＶＥＣを終夜移動させた。移動後、挿入部を洗浄し、膜の上側の移動しなかった細胞をＱティップで除去した。移動した細胞をＤｉｆｆ−Ｑｕｉｋキットで固定および染色した。挿入部から膜を取り出し、スライドに載せた。膜の上に四分円を描き、各四分円を画像化した。移動性内皮細胞の数を定量した。図７を参照されたい。
（実施例６）
ＰＤＡＣ細胞のリンパ単層への結合の阻害

【0134】

４．５×１０^４個のｈＬＥＣを８ウェルチャンバースライドのウェルにプレーティングした。内皮細胞の単層がコンフルエントに達するまで細胞をインキュベートした。指定された処理で、内皮細胞を２時間事前処理した：対照培地、１００ｕｇ／ｍｌのＥ−セレクチン特異的アンタゴニスト、１０ｕｇ／ｍｌの化合物９、または１００ｕｇ／ｍｌの化合物９。Ｓ２．０１３またはＣｏｌｏ３５７をＣＦＤＡ−ＳＥ Ｃｅｌｌ Ｔｒａｃｋｅｒ色素で染色した。内皮細胞の事前処理に続いて、血清フリーＥＢＭ−２に希釈した３．０×１０^４個のＳ２．０１３またはＣｏｌｏ３５７細胞をウェルに加え、指定された処理を施した（４００ｕｌ／ウェル；３反復ウェル／処理）。腫瘍細胞を内皮単層上で１時間インキュベートした。結合インキュベーション後、各ウェルをＰＢＳ＋０．５％ ＦＢＳで３回洗浄して、非付着細胞を除去した。４％ＰＦＡおよびカバーガラススライドで固定した。５つの位置／ウェルを１０×倍率で画像化した。各画像において付着細胞の数を定量した。図８を参照されたい。
（実施例７）
前立腺がんモデル

【0135】

ルシフェラーゼをトランスフェクトしたＰＣ３Ｌｕｃ細胞を、２×１０５細胞／血清フリー培地１０μｌで、４週齢の雄ＣＤ１ ｎｕ／ｎｕマウスの近位脛骨へ注入した。ＦａｘｉｔｒｏｎキャビネットＸ線システムを使用することによって転移の発生をモニターし、生体発光分析で腫瘍負荷を評価した（以下を参照されたい）。ＦａｘｉｔｒｏｎキャビネットＸ線システム（Ｆａｘｉｔｒｏｎ ｘ−ｒａｙ ｃｏｒｐ．、Ｗｈｅｅｌｉｎｇ、ＩＬ、ＵＳＡ）を使用して、転移の発生を放射線撮影によりモニターした。放射線分析を、細胞注入後２８日目、３５日目、４２日目および５０日目に実施した。５０日目の後にはＦａｘｉｔｒｏｎ分析を実施しなかった。これは、この時点の後、マウスの麻酔関連死亡の予測されるリスクが顕著に増加したからである。しかし、骨転移と無病生存（ＤＳＦ）の両方の累積的な発生率を決定するために、各動物の死亡時に、または生存している動物において１７０日と定義した追跡調査の終わりに動物を屠殺した際に、Ｘ線をまた繰り返した。溶骨性の病変の負荷を、放射線撮影のデジタル検査（ＩｍａｇｅＪ、Ｗａｙｎｅ Ｒａｓｂａｎｄ、ＮＩＨ、ＵＳＡによるパブリックドメインソフトウエア）で評価した。動物は、心臓注射の１７０日後、または重篤な苦痛の初期徴候がある場合にはこれより早期に、二酸化炭素吸入により屠殺した。すべての動物に対して精密な検死を行い、様々な器官の試料を常法の組織学的分析のために処理した。

【0136】

発光画像化のために、マウスの腹腔内に体重１ｋｇ当たり１５０ｍｇのホタルルシフェラーゼ（Ｓｙｎｃｈｅｍ Ｕｇ ａｎｄ Ｃｏ．ＫＧ、Ｆｅｌｓｂｅｒｇ−Ａｌｔｅｎｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を与えた。ケタミン／キシラジン混合物での麻酔に続いて、マウスを、Ｈａｍａｍａｔｓｕ画像化ステーション（Ｈａｍａｍａｔｓｕ ｐｈｏｔｏｎｉｃｓ、Ｉｔａｌｉａｎ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｏｒ、Ｒｏｍｅ Ｉｔａｌｙ）に配置した。赤色（高い強度／細胞数）から青色（低い強度／細胞数）の目視スケールで専用のＬｉｖｉｎｇ Ｉｍａｇｅソフトウエアを使用した定量に、ルシフェリン／ルシフェラーゼ反応により生成した生体発光を使用した。デジタルグレイスケール動物画像を取得し、これに続いて、動物内の活性のあるルシフェラーゼから出現する検出した光子カウントの空間的分布を表す擬似色画像を取得し、重ね合わせた。信号強度を、１分間の発光積分時間の間の目的の領域内の検出したすべての光子の合計として定量した。動物が、上腕骨または脛骨／大腿領域のいずれかにおいて検出された少なくとも１つの病変を有するかどうかで、腫瘍発生率を２区分尺度において陽性または陰性のいずれかとしてスコア化した。図９を参照されたい。

【0137】

上記の様々な実施形態を組み合わせて、さらなる実施形態を提供することができる。本明細書において言及されかつ／または出願データシートに列挙されたすべての米国特許、米国特許出願公報、米国特許出願、非米国特許、非米国特許出願、および非特許公報は、これらの全体が本明細書に参考として援用されている。必要であれば、様々な特許、出願および公報の概念を利用するために実施形態の態様を修正することによって、またさらなる実施形態を提供することができる。

【図1A】

【図1B】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】