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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6702883
(24)【登録日】2020年5月11日
(45)【発行日】2020年6月3日
(54)【発明の名称】向神経活性ペプチドの安定な組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 38/07 20060101AFI20200525BHJP
A61P 25/24 20060101ALI20200525BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20200525BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20200525BHJP
A61M 5/28 20060101ALI20200525BHJP
A61J 1/05 20060101ALI20200525BHJP
C07K 5/103 20060101ALN20200525BHJP
【ＦＩ】
A61K38/07
A61P25/24
A61K9/08
A61K47/02
A61M5/28
A61J1/05 310
!C07K5/103ZNA
【請求項の数】25
【全頁数】37
(21)【出願番号】特願2016-564190(P2016-564190)
(86)(22)【出願日】2015年4月27日
(65)【公表番号】特表2017-514817(P2017-514817A)
(43)【公表日】2017年6月8日
(86)【国際出願番号】US2015027745
(87)【国際公開番号】WO2015164859
(87)【国際公開日】20151029
【審査請求日】2018年4月24日
(31)【優先権主張番号】61/984,216
(32)【優先日】2014年4月25日
(33)【優先権主張国】US
(73)【特許権者】
【識別番号】516127558
【氏名又は名称】ノーレックス インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100086771
【弁理士】
【氏名又は名称】西島 孝喜
(74)【代理人】
【識別番号】100088694
【弁理士】
【氏名又は名称】弟子丸 健
(74)【代理人】
【識別番号】100094569
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 伸一郎
(74)【代理人】
【識別番号】100084663
【弁理士】
【氏名又は名称】箱田 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100093300
【弁理士】
【氏名又は名称】浅井 賢治
(74)【代理人】
【識別番号】100119013
【弁理士】
【氏名又は名称】山崎 一夫
(74)【代理人】
【識別番号】100123777
【弁理士】
【氏名又は名称】市川 さつき
(74)【代理人】
【識別番号】100111796
【弁理士】
【氏名又は名称】服部 博信
(74)【代理人】
【識別番号】100170944
【弁理士】
【氏名又は名称】岩澤 朋之
(72)【発明者】
【氏名】フック デイヴィッド レンウィック
(72)【発明者】
【氏名】アーガヴァニ モーセン
【審査官】
鳥居 福代
(56)【参考文献】
【文献】
国際公開第２０１３／００１０４４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
特表２００９−５３９９９０（ＪＰ，Ａ）
【文献】
国際公開第２０１３／０４１６２３（ＷＯ，Ａ１）
【文献】
特開昭６１−０５６１９７（ＪＰ，Ａ）
【文献】
米国特許出願公開第２０１２／０１７８６９５（ＵＳ，Ａ１）
【文献】
Neuropsychopharmacology，２０１３年，Vol.38，pp.729-742
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ａ６１Ｋ ３８／００−３８／５８
Ａ６１Ｋ ９／００−９／７２
Ａ６１Ｋ ４７／００−４７／６９
Ｃ０７Ｋ ５／１０３
Ａ６１Ｊ １／０５
Ａ６１Ｍ ５／２８
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
静脈内注射に適した安定な水性組成物であって、６０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬの以下の式：
を有する薬学的に活性な化合物；またはその薬学的に許容可能な塩；
注射用水；及び
酸を含み；
前記安定な水性組成物のｐＨは２５℃で約３．９〜約５．５であり、
前記酸は水性組成物中、塩化物イオンを提供する、前記水性組成物。
注射用水；及び
酸を含み；
前記安定な水性組成物のｐＨは２５℃で約３．９〜約５．５であり、
前記酸は水性組成物中、塩化物イオンを提供する、前記水性組成物。
【請求項2】
前記薬学的に活性な化合物を約１２５ｍｇ／ｍＬ〜約１７５ｍｇ／ｍＬ含む、請求項１に記載の安定な水性組成物。
【請求項3】
前記薬学的に活性な化合物を約１５０ｍｇ／ｍＬ含む、請求項１または２に記載の安定な水性組成物。
【請求項4】
前記薬学的に活性な化合物を約７５ｍｇ／ｍＬ含む、請求項１に記載の安定な水性組成物。
【請求項5】
前記薬学的に活性な化合物を約２００ｍｇ〜約５００ｍｇ含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項6】
前記薬学的に活性な化合物を約４５０ｍｇ含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項7】
前記薬学的に活性な化合物を約３７５ｍｇ含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項8】
前記薬学的に活性な化合物を約２２５ｍｇ含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項9】
前記安定な水性組成物のｐＨは２５℃で約４．５である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項10】
Ｈ+、プロトン化形態の薬学的に活性な化合物、及び／またはこれらの組合せのうち少なくとも１つを含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項11】
前記酸は塩酸である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項12】
前記薬学的に活性な化合物を約１５０ｍｇ／ｍＬ含み、体積が約３ｍＬである前記安定な水性液体組成物の１回用量を患者に投与すると、約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの生理的オスモル濃度が前記患者において得られる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項13】
前記薬学的に活性な化合物を約７５ｍｇ／ｍＬ含み、体積が約３ｍＬである前記安定な水性液体組成物の１回用量を患者に投与すると、約３７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約４７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの生理的オスモル濃度が前記患者において得られる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項14】
室温で１０日後、または室温で２０日後、前記組成物はシクロプロリン‐スレオニン（ジケトピペラジン）、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物を有する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項15】
０℃以下で１か月後、前記組成物はジケトピペラジン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される、最小量の１種以上の分解生成物を有する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項16】
４０℃で３か月後、前記組成物では、ジケトピペラジン及び／またはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2のＧＬＹＸ‐１３ピークの、ＨＰＬＣにより得られた面積は約２％未満である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項17】
４０℃で３週間後、前記組成物では、ジケトピペラジン及び／またはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2のＨＰＬＣによるＧＬＹＸ‐１３ピークの、ＨＰＬＣにより得られた面積は約１％未満または約０．５％未満である、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の安定な水性組成物。
【請求項18】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の前記安定な水性組成物が、少なくとも１回の単回用量として抽出可能な量で収容された容器。
【請求項19】
前記単回用量の体積は約１ｍＬ〜約４ｍＬである、請求項１８に記載の、前記安定な水性組成物が収容された容器。
【請求項20】
前記単回用量の体積は約３ｍＬである、請求項１８に記載の、前記安定な水性組成物が収容された容器。
【請求項21】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の安定な水性組成物を単回用量で含むプレフィルドシリンジ。
【請求項22】
前記単回用量の体積は約１ｍＬ〜約４ｍＬである、請求項２１に記載のプレフィルドシリンジ。
【請求項23】
前記単回用量の体積は約３ｍＬである、請求項２１に記載のプレフィルドシリンジ。
【請求項24】
約１５０ｍｇ／ｍＬの以下の：
に表される化合物；
注射用水；及び
塩酸を含む組成物であって、ｐＨは２５℃で約４．１〜約４．７である、前記組成物。
注射用水；及び
塩酸を含む組成物であって、ｐＨは２５℃で約４．１〜約４．７である、前記組成物。
【請求項25】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載の安定な水性組成物が収容されたプレフィルドシリンジまたはバイアル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照本出願は２０１４年４月２５日に出願された米国仮特許出願第６１／９８４，２１６号の利益を主張するものであり、これは参照によりその全体が本明細書に援用される。
【背景技術】
【0002】
哺乳動物の中枢神経系（ＣＮＳ）は多数の神経活性ペプチドを利用し、向神経活性ペプチド類のソマトスタチン、コレシストキニン、ＶＩＰ、サブスタンスＰ、エンケファリン、ニューロペプチドＹ（ＮＰＹ）、ニューロテンシン、ＴＲＨ、ＣＣＫ及びダイノルフィンを含む、脳及び脊髄内の特化したシグナル伝達に影響を与える。（Ｔｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｃｏｏｐｅｒ，Ｂｌｏｏｍ ａｎｄ Ｒｏｔｈ，５ｔｈ ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８６）。ＣＮＳで動作する複雑なシグナル伝達経路を慎重に解明したところ、ＣＮＳに関連する多様な障害の重要な治療標的を提示するこれらの神経活性ペプチドにより調節された特異的受容体が特定された。
【0003】
Ｎ‐メチル‐Ｄ‐アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体（ＮＭＤＡＲ）は広範なＣＮＳ障害に関与していると思われることから、特に関心を集めている受容体の１つである。ＮＭＤＡＲは脳卒中に関連する脳細胞死、痙攣性障害ならびに学習及び記憶などの神経変性疾患に関与している。ＮＭＤＡＲはまた、中枢神経系における正常なシナプス伝達、シナプス可塑性及び興奮毒性を調節する上で中心的な役割を担っている。ＮＭＤＡＲは更に、長期的増強作用（ＬＴＰ）に関与している。ＬＴＰは学習及び記憶の基礎となる神経連絡の持続的な強化である（Ｂｌｉｓｓ ａｎｄ Ｃｏｌｌｉｎｇｒｉｄｇｅ，１９９３，Ｎａｔｕｒｅ ３６１：３１‐３９を参照）。
【0004】
数種の化合物はアロステリック部位を介してＮＭＤＡ受容体に対して二重の（アゴニスト／アンタゴニスト）効果を発揮することが特定されている。これらの化合物は「パーシャルアゴニスト」と称する。主要部位リガンドの存在下では、パーシャルアゴニストはリガンドの一部を置換し、これにより受容体を介してＣａ++流量を減少させる。主要部位リガンドが存在しないか、または低レベルである場合、パーシャルアゴニストは、受容体チャネルを介してＣａ++流量を増加させるように作用する。
【0005】
近年、ＧＬＹＸ‐１３またはラパスチネル（ｒａｐａｓｔｉｎｅｌ）と称するＮＭＤＡＲの改善されたパーシャルアゴニストが報告されている。ＧＬＹＸ‐１３は以下の構造：【0006】
ＧＬＹＸ‐１３の多くの治療効果が既に明らかにされているが、ＧＬＹＸ‐１３が血液脳関門を効果的に通過し、所望の作用部位で効率的に吸収されることを確実にし、抑鬱、神経因性疼痛または不安などのＣＮＳ障害の治療の改善を達成するため、ＧＬＹＸ‐１３を効率的に送達する方法が依然として必要とされている。また、送達製剤は水性媒体中で安定的である（すなわち分解されない）ことが望ましい。
【発明の概要】
【0007】
本開示は、ＧＬＹＸペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩（例えば、ＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0008】
１態様では、本開示は、以下の式：【0009】
１態様では、本開示は、（ｉ）以下の式：【0010】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載の任意の安定な水性組成物をある量で収容する容器（例えばプレフィルドシリンジまたはバイアル）を特徴とする。ある特定の実施形態では、その量は少なくとも１回の単回用量として抽出可能な量である。ある特定の実施形態では、単回用量は体積約１ｍＬ〜約４ｎＬ（例えば３ｍＬ）とすることも可能である。
【0011】
更なる態様では、本開示は、本明細書に記載の任意の安定な水性組成物を単回用量で含むプレフィルドシリンジを特徴とする。ある特定の実施形態では、単回用量は体積約１ｍＬ〜約４ｍＬ（例えば３ｍＬ）とすることも可能である。
【0012】
１態様では、本開示は、（ｉ）以下の：【0013】
１態様では、本開示は、（ｉ）以下の：【0014】
１態様では、本開示は、（ｉ）以下の：【0015】
別の態様では、本開示は、（ｉ）以下の：【0016】
実施形態には以下の特長の１つ以上が含まれ得る。安定な水性組成物は約２００ｍｇ〜約５００ｍｇ（例えば約４５０ｍｇ；約３７５；または約２２５ｍｇ）の薬学的に活性な化合物を含み得る。安定な水性組成物のｐＨは２５℃で約４．５とすることが可能である。安定な水性組成物は：Ｈ+、プロトン化形態の薬学的に活性な化合物、及び／またはこれらの組合せのうち少なくとも１つを含み得る。酸はフマル酸、リンゴ酸、乳酸、塩酸、臭化水素酸、酢酸、クエン酸、リン酸、硝酸、硫酸及びアスコルビン酸から成る群より選択することが可能である。ある特定の実施形態では、酸は水性組成物（例えば塩酸）中、塩化物イオンを提供する。ある特定の実施形態では、約１５０ｍｇ／ｍＬの薬学的に活性な化合物を含み、体積が約３ｍＬである安定な水性液体組成物の１回用量を患者に投与すると、約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの生理的オスモル濃度が当該患者において得られる。他の実施形態では、約７５ｍｇ／ｍＬの薬学的に活性な化合物を含み、体積が約３ｍＬである安定な水性液体組成物の１回用量を患者に投与すると、約３７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約４７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの生理的オスモル濃度が当該患者において得られる。室温で１０日後、または室温で２０日後、当該組成物にはシクロプロリン‐スレオニン（ジケトピペラジン）、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。０℃以下で１か月後、当該組成物にはジケトピペラジン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。４０℃で３か月後、当該組成物では、ジケトピペラジン及び／またはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2のＧＬＹＸ‐１３ピークの、ＨＰＬＣにより得られた面積は約２％未満となり得る。４０℃で３週間後、当該組成物では、ジケトピペラジン及び／またはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2のＨＰＬＣによるＧＬＹＸ‐１３ピークの、ＨＰＬＣにより得られた面積は約１％未満または約０．５％未満となり得る。当該組成物は以下を含むプロセス：（ｉ）薬学的に活性な化合物及び水を含む第１配合物を提供すること；ならびに（ｉｉ）当該第１配合物を、ｐＨ約３．９〜約５．５にするために十分な量の塩酸またはその供給源と接触させることにより調製できる。
【0017】
実施形態には以下の特長のうち１つ以上が含まれ得る。当該組成物は塩酸、リン酸及び硫酸から成る群より選択される酸を更に含むことが可能である。組成物は更に緩衝液を含むことが可能である。ある特定の実施形態では、緩衝液は塩化物イオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン及びアンモニウムイオンから成る群から選択される。他の実施形態では、緩衝液は酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、炭酸塩、重炭酸塩及びマレイン酸ならびにこれらの塩からなる群より選択される。組成物のｐＨは２５℃で約３．９〜約５．５（例えば４．５）にすることが可能である。ある特定の実施形態では、組成物を投与すると、約５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（例えば６００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇまたは８５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）の生理的オスモル濃度が得られる。室温で１０日後、当該組成物にはシクロ‐プロリン‐スレオニン（すなわちジケトピペラジン）、プロリン‐スレオニン‐ジケトピペラジン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。室温で２０日後、当該組成物にはシクロ‐プロリン‐スレオニン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。０℃以下で１か月後、当該組成物にはシクロ‐プロリン‐スレオニン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。当該組成物には最小量のジケトピペラジン及び／またはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2が生じ得る。
【0018】
更なる態様では、本開示は以下の：【0019】
実施形態には以下の特長の１つ以上が含まれ得る。ある特定の実施形態では、当該水性組成物は約４００ｍｇ〜約７５０ｍｇの化合物または塩、場合により約２．５ｍＬ〜約５ｍＬの水溶液を含むことが可能である。ある特定の実施形態では、水性組成物は約３５０ｍｇ〜約５００ｍｇ（例えば約３５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、または約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ）の化合物または塩、場合により約２ｍＬ〜約４ｍＬの水溶液を含むことが可能である。例えば水性組成物は約４００ｍｇの化合物または塩を約２．７ｍＬの水溶液に含むことが可能である。別の例として、当該水性組成物は約４５０ｍｇの化合物または塩を約３ｍＬの水溶液に含むことが可能である。他の実施形態では、当該水性組成物は約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ（例えば約７００ｍｇ〜約８００ｍｇ）の化合物または塩、場合により約４ｍＬ〜約６ｍＬの水溶液を含むことが可能である。例えば、当該水性組成物は約７５０ｍｇの化合物または塩を約５ｍＬの水溶液に含むことが可能である。当該水性組成物のｐＨは２５℃で約３．９〜約５．５（例えば４．５）である。室温で１０日後、当該組成物にはジケトピペラジン、プロリン‐スレオニン‐ジケトピペラジン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。室温で２０日後、当該組成物にはプロリン‐スレオニン‐ジケトピペラジン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。０℃以下で１か月後、当該組成物にはジケトピペラジン、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物が生じ得る。当該組成物には最小量のプロリン‐スレオニン‐ジケトピペラジン及び／またはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2が生じ得る。
【0020】
１態様では、本開示は以下の式：【0021】
別の態様では、本開示は以下の式：【0022】
１態様では、本開示は以下の式：【0023】
別の態様では、本開示は以下の式：【0024】
実施形態には以下の特長の１つ以上が含まれ得る。ある特定の実施形態では、緩衝液は酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、硫酸塩、コハク酸塩、炭酸塩、重炭酸塩、アルギニン及びマレイン酸ならびにこれらの塩から成る群より選択することが可能である。他の実施形態では、緩衝液は塩化物、硫酸塩及びリン酸塩から成る群より選択されるアニオンとすることが可能である。更に他の実施形態では、緩衝液はクエン酸である。共溶媒は、ポリエチレングリコール、グリセリン、エタノール、ポリプロピレングリコール及びＮ，Ｎ‐ジエメチルアセトアミド（例えば、分子量が約２００〜約９００Ｄａのポリエチレングリコール、または分子量が約４００Ｄａのポリエチレングリコール）から成る群より選択することが可能である。当該組成物のｐＨは２５℃で約４．５〜約６．０とすることが可能である。１０日後、当該組成物には０．５重量パーセント未満のジケトピペラジンまたはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2（例えば１０日後、０．１重量パーセント未満のジケトピペラジンまたはＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2）が生じ得る。１０日後、当該組成物には０．５重量パーセント未満のＴｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐ＮＨ2（例えば１０日後、０．１重量パーセント未満のＴｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐ＮＨ2）が生じ得る。
【図面の簡単な説明】
【0025】
【図1】開示された組成物のｐＨに対する経時的な不純物の形成（％面積 プロリン‐スレオニン‐ジケトピペラジン、ＲＲＴ０．４３）を示す。
【図2】開示された組成物のｐＨに対する経時的な不純物の形成（％面積 プロリン‐スレオニン‐アミド、ＲＲＴ０．５７）を示す。
【発明を実施するための形態】
【0026】
本開示は部分的に、ＧＬＹＸペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩（例えば、ＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0027】
本開示組成物の化学的及び物理的安定性及び／または薬学的許容可能性は当業者に周知の技術により判定し得る。従って、例えば当該化合物の化学的安定性はＨＰＬＣアッセイ及び／または外観の色により、例えば生成物を長期的に保存した後に判定してもよい。物理的安定性データは他の従来の分析技術から得てもよい。
【0028】
大体、およその範囲で、ほぼという意味を示すために、本明細書では「約」という用語を使用している。「約」という用語を数値範囲と共に使用する場合、記述した数値の上下に境界を拡張することによりその範囲を修正している。「〜を含むが限定するものではない」ことを示すために、本明細書では「含む」という用語を使用している。
【0029】
ペプチド本明細書で使用しているように、「ＧＬＹＸペプチド」という用語はＮＭＤＡＲグリシン部位の部分的アゴニスト／アンタゴニスト活性を有するペプチドを指す。ＧＬＹＸペプチドは、参照により本明細書に援用される米国特許第５，７６３，３９３号及び第４，０８６，１９６号に記載された方法などの周知の組換え法または合成法により得てもよい。本開示の製剤の一部を形成することが企図されるＧＬＹＸペプチドの例としては、いくつかの実施形態では、表１に収載された１種以上のペプチドが挙げられる。
【0030】
「ＧＬＹＸ‐１３」は以下の式：【0031】
例えば、本開示の組成物はアルツハイマー病、パーキンソン病、精神疾患及び脳内感染などの多くの神経疾患の治療に有効であると判明する可能性がある。
【0032】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物のｐＨは２５℃で約３．５〜約７である。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物のｐＨは２５℃で約４〜約７（例えば約３．５〜約６．５、約３．５〜約５．５、約４〜約６、約３．９〜約５．５、約４．０〜約５．０、約４．２〜約５．０、約４．２〜約４．８、約４．０〜約４．５）である。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物のｐＨは４.２〜約５．０（例えば約４．２〜約４．８、約４．３〜約４．７、約４．４〜約４．６）である。例えば、本明細書に記載したようなある特定の実施形態における本開示組成物のｐＨは約４．５である。
【0033】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は約１００ｍｇ／ｍＬ未満のＧＬＹＸペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0034】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は約１００ｍｇ／ｍＬ〜約５００ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0035】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は約３５０ｍｇ〜約８００ｍｇ（例えば約４００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７５０ｍｇ）のＧＬＹＸペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0036】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は約２ｍＬ〜約６ｍＬ（例えば約２．５ｍＬ〜約５ｍＬ、約２ｍＬ〜約４ｍＬ、約２．５ｍＬ〜約３．５ｍＬ、約２．７ｍＬ、約３ｍＬ、約４ｍＬ〜約６ｍＬ、約４．５ｍＬ〜約５．５ｍＬ、約５ｍＬ）の水溶液を含むことが可能である。
【0037】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は約３５０ｍｇ〜約８００ｍｇ（例えば約４００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７５０ｍｇ）のＧＬＹＸペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0038】
例えば、本明細書に記載の組成物は約３５０ｍｇ〜約５００ｍｇ（例えば約３５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４００ｍｇ、または約４５０ｍｇ）のＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば上記に示す式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）を、約２ｍＬ〜約４ｍＬ、約２．５ｍＬ〜約３．５ｍＬ、約２．７ｍＬ、約３ｍＬの水溶液に含むことが可能である（例えば約４００ｍｇのペプチドもしくは塩を約２．７ｍＬの水溶液に；または約４５０ｍｇのペプチドもしくは塩を約３ｍＬの水溶液に）。いくつかの実施形態では、当該組成物のｐＨは２５℃で約４〜約５、例えば約４．５であり、及び／または、当該組成物を投与すると、所望の生理的オスモル濃度が達成または維持される；例えば段落［００３１］及び［００３５］〜［００３７］に記載のオスモル濃度パラメータを参照。
【0039】
別の例として、本明細書に記載の組成物は約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ（例えば約７００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７５０ｍｇ）のＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば上記に示す式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）を、約４ｍＬ〜約６ｍＬ、約４．５ｍＬ〜約５．５ｍＬ、約５ｍＬの水溶液に含むことが可能である（例えば約７５０ｍｇのペプチドまたは塩を約５ｍＬの水溶液に）。いくつかの実施形態では、当該組成物のｐＨは２５℃で約４〜約５、例えば約４．５であり、及び／または、当該組成物を投与すると、所望の生理的オスモル濃度が達成または維持される；例えば段落［００３１］及び［００３５］〜［００３７］に記載のオスモル濃度パラメータを参照。
【0040】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物はシリンジ（例えば５ｍＬのガラスまたはプラスチック製シリンジ）に保存することが可能である。例えば、本明細書において、本開示化合物を収容するシリンジが企図される。
【0041】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物で利用されるＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば上記に示す式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）の濃度は、例えば投与して得られる生理的オスモル濃度に依存している場合がある。例えばより低濃度、例えば約１００ｍｇ／ｍＬ未満、または約９０ｍｇ／ｍＬもしくは約７０ｍｇ／ｍＬ未満のＧＬＹＸペプチドでは、当該組成物は低張性である場合がある（生理的オスモル濃度より低い）。組成物が低張性であると、投与に対する患者の反応が不良になる可能性があり、例えば注射可能な低張性溶液であれば、溶血としても公知である血球の膨張及び破壊が起こる可能性がある。より高濃度、例えば２００ｍｇ／ｍＬを超えるＣＬＹＸペプチドでは、当該組成物（例えば水溶液）は高張性である場合がある。組成物が高張性であると、投与に対する患者の反応が不良になる可能性があり、例えば血球が収縮し、円鋸歯状になる。
【0042】
いくつかの実施形態では、障害（例えば抑鬱）への投与法及び／または治療法を提供する。ここでは本明細書に記載の組成物を投与すると、約２００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（例えば約２００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約６００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇまたは約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）の生理的オスモル濃度が維持または達成される。これらの実施形態のうちいくつかの実施形態では、投与時間は約８時間未満である。ある特定の実施形態では、開示した方法は、組成物の１回投与当り約１分〜約５分の注射時間を企図している。更に他の実施形態では、開示した方法は、１分未満（例えば約１秒〜約５５秒、約５秒〜約５５秒、約５秒〜約４５秒、約５秒〜約３０秒、約５秒〜約１５秒）の注射時間を企図している。
【0043】
本明細書に開示された組成物は例えば、約６０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬまたは約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ（例えば約１５０ｍｇ／ｍＬまたは約７５ｍｇ／ｍＬ）の濃度のＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば上記に示す式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）を有する組成物である。企図した治療法にはこのような組成物の投与が含まれ、それにより、例えば約１５０ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３を投与すると、約８００〜１１００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（または約８２０〜８８０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）の生理的オスモル濃度が得られ、または例えば約７５ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３を投与すると約３７５〜４７５ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇが得られる。
【0044】
他の実施形態では、本開示組成物は有機酸または他の酸、例えばフマル酸、リンゴ酸、乳酸、塩酸、臭化水素酸、酢酸、クエン酸、リン酸、硝酸、硫酸、アスコルビン酸、ギ酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、シュウ酸、安息香酸、炭酸、フェノール、尿酸、ｐ‐トルエンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸またはカルボン酸の１種以上を含んでもよく（例えば本開示組成物は塩酸を含む）、ここでは当該組成物のｐＨは２５℃で約４〜約７（例えば約３．５〜約６．５、約３．５〜約５．５、約４〜約６、約３．９〜約５．５、約４．０〜約５．０、約４．２〜約５．０、約４．２〜約４．８、約４．０、約４．５）である。例えば、本開示組成物はＧＬＹＸ‐１３の水溶液を含んでもよく、ここでは当該組成物のｐＨは、５Ｎで調製した酸、例えば５ＮのＨＣｌにより約４．５（または例えば２５℃で４．１〜約５．５）に調整されている。企図した治療法にはこのような組成物の投与が含まれ、それにより、投与すると約４８０〜約９６０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇの生理的オスモル濃度が得られる。例えば、本明細書において、ＧＬＹＸ‐１３濃度が１２０〜１５０ｍｇ／ｍＬで、投与時の（１回投与当り、投与時間は例えば８時間未満、４時間未満、例えば１分〜約８時間、または約１〜５分）オスモル濃度が約２９０〜３６０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである組成物が企図される。
【0045】
本明細書において、例えば緩衝液（例えば酸、例えば塩酸または塩化物イオン）を含み、そのｐＨは２５℃で約４〜約７（例えば約３．５〜約６．５、約３．５〜約５．５、約４〜約６、約３．９〜約５．５、約４．０〜約５．０、約４．２〜約５．０、約４．２〜約４．８、約４．０、約４．５）である組成物も企図される。注射／投与時間が約５秒〜約５分（例えば約５秒〜約２分、約５秒〜約１分、約５秒〜約５５秒、約５秒〜約４５秒、約５秒〜約３０秒、約５秒〜約１５秒）で、生理的オスモル濃度が約５８０〜約７２０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇになるように、このような組成物を注射により患者に投与することを含む治療法を提供する。
【0046】
例えば本明細書に開示された組成物は、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ（例えば約１５０ｍｇ／ｍＬ）の濃度のＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば段落［００２６］で上記に示す式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）を含む組成物である。企図した治療法はこのような組成物を投与することを含み、それにより投与時、約５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（例えば約６００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）の生理的オスモル濃度が得られる。
【0047】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は酸、例えば塩酸を含み、そのｐＨは２５℃で約４〜約７（例えば約３．５〜約６．５、約３．５〜約５．５、約４〜約６、約３．９〜約５．５、約４．０〜約５．０、約４．２〜約５．０、約４．２〜約４．８、約４．０、約４．５）である。企図した治療法はこのような組成物を投与することを含み、それにより投与時、約５００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（例えば約６００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）の生理的オスモル濃度が得られる。例えば本明細書に記載の組成物は、濃度が約１２５ｍｇ／ｍＬ〜約１７５ｍｇ／ｍＬ（例えば約１５０ｍｇ／ｍＬ）で、投与時のオスモル濃度が約６００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（例えば約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）のＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば段落［００２６］で上記に示す式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）を含むことが可能である。ある特定のこれらの実施形態では、１回投与当り、例えば８時間未満、４時間未満；例えば１分未満〜８時間、４時間、２時間、１時間または０．５時間；約１分〜約８時間、４時間、２時間、１時間または０．５時間；約１分〜約５分、１分未満、例えば約１秒〜約５５秒、約５秒〜約５５秒、約５秒〜約４５秒、約５秒〜約３０秒、約５秒〜約１５秒の投与時間で当該組成物を投与する。
【0048】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は例えば緩衝液（例えば酸、例えば塩酸または塩化物イオン）を含み、そのｐＨは２５℃で約３．５〜約６（例えば約３．９〜約５．５、約４．０〜約５．０、約４．２〜約５．０、約４．２〜約４．８、約４．０、約４．５）である。注射／投与時間が約５秒〜約５分（例えば約５秒〜約２分、約５秒〜約１分、１分未満、例えば約１秒〜約５５秒、約５秒〜約５５秒、約５秒〜約４５秒、約５秒〜約３０秒、約５秒〜約１５秒）で、生理的オスモル濃度が約６００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ（例えば約８００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約１，０００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約８５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約９５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ）になるように、このような組成物を注射により患者に投与することを含む治療法を提供する。
【0049】
溶液中、経時的に化合物が急速に分解または破壊されない点で、本開示の水性組成物は安定的である。従ってある特定の実施形態では、室温で１０日以上、３０日以上、４０日以上、または６０日もしくは９０日またはそれ以上経過した後、本開示組成物はシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ（プロリン‐スレオニン‐ジケトピペラジン）、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物を有する。ある特定の他の実施形態では、室温で２０日後、本開示組成物はシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物を有する。例えば本開示組成物は最小量の以下の化合物：【0050】
ある特定の他の実施形態では、約０℃〜１０℃（例えば約２℃〜８℃、約５℃）で３か月後、約０℃〜１０℃（例えば約２℃〜８℃、約５℃）で６か月後、約０℃〜１０℃（例えば約２℃〜８℃、約５℃）で９か月後、約０℃〜１０℃（例えば約２℃〜８℃、約５℃）で１２か月後、約０℃〜１０℃（例えば約２℃〜８℃、約５℃）で５か月後、または更に約０℃〜１０℃（例えば約２℃〜８℃、約５℃）で２４か月以上経過した後、本開示組成物はシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物を有する。
【0051】
ある特定の実施形態では、緩衝液は酢酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、コハク酸、炭酸塩、重炭酸塩及びマレイン酸ならびにこれらの塩から成る群より選択される。別の実施形態では、緩衝液は塩化物、ナトリウム、カリウム及びアンモニウムから成る群より選択される塩である。更に別の実施形態では、ＧＬＹＸペプチド（例えば、ＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば以下の式：【0052】
別の実施形態では、水、ＧＬＹＸペプチド（例えばＧＬＹＸ‐１３ペプチドならびに／またはその誘導体及び／または塩；例えば上記式を有するＧＬＹＸペプチドまたはその塩）及び酸を主成分とする水性組成物を提供する。いくつかの実施形態では、当該組成物はＨ+、プロトン化形態のペプチド、１つ以上のプロトン化形態の任意の１種以上の本明細書に記載の分解生成物、またはこれらの組合せから成る群より選択されるカチオン性対イオンを含む。ある特定の実施形態では、カチオン性対イオンはＨ+、プロトン化形態のペプチドまたはこれらの組合せから成る群より選択される。ある特定の実施形態では、当該組成物は上記で詳述したもの以外のカチオン供給源、例えば金属カチオン、外因性プロトン化アミノ酸またはペプチド、テトラアルキルアンモニウムイオン及び他のプロトン化酸スカベンジャーをほぼ持たない。
【0053】
ある特定の実施形態では、当該組成物は塩化物以外のアニオンをほぼ持たず、例えば酢酸塩及び他のカルボン酸塩含有部分、臭化物、ヨウ化物、硫酸塩含有部分、スルホン酸塩含有部分ならびにリン酸塩含有部分をほぼ持たない。
【0054】
ある特定の実施形態では、共溶媒は本開示組成物中に存在し、ポリエチレングリコール、グリセリン、エタノール、ポリプロピレングリコール及びＮ，Ｎ‐ジエメチルアセトアミドから成る群から選択される。例えばある特定の実施形態では、共溶媒は分子量が約２００〜約９００Ｄａのポリエチレングリコールである。ある特定の実施形態では、共溶媒は分子量が約４００Ｄａ、例えば約４００Ｄａ〜約７００Ｄａ、例えば２００、３００、４００、５００、５００、７００または８００Ｄａのポリエチレングリコールである。
【0055】
ある特定の実施形態では、約２〜約８℃で１週間、１０日、２週間、３週間、４週間、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、９か月、１年、２年、またはそれ以上経過した後、本開示組成物はシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物を有する。別の実施形態では、２５℃で１週間、１０日、２週間、３週間、４週間、２か月、３か月、４か月、５か月、または６か月、１２か月またはそれ以上経過した後、本開示組成物はシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ、Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2、プロリン及び／またはスレオニンから成る群より各々選択される最小量の１種以上の分解生成物を有する。
【0056】
更に別の実施形態では、３か月、または６か月、または１２か月またはそれ以上経過した後、本開示組成物は０．５重量パーセント未満（または例えば０．７重量パーセント未満、もしくは１重量パーセント未満、２重量パーセント未満、３重量パーセント未満、４重量パーセント未満、例えば約１〜３重量パーセント）のＴｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ（ＧＬＹＸ‐１３の脱アミド形態）を有する。別の実施形態では、約１０日後、または約２０日後、または約３０日後、当該組成物は０．１重量パーセント未満のＴｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒを有する。
【0057】
更に別の実施形態では、８℃で３か月、または６か月、または１２か月、２４か月またはそれ以上経過した後、本開示組成物は約０．５または約０．６重量パーセント未満（または例えば約１．２重量パーセント未満、もしくは約０．７重量パーセント未満、１重量パーセント未満、２重量パーセント未満、３重量パーセント未満、４重量パーセント未満、５重量パーセント未満、６重量パーセント未満、７重量パーセント未満。ここでは不純物の重量パーセントは薬学的に活性な化合物、例えばＧＬＹＸ‐１３の百分率である）のシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒを有する。別の実施形態では、４０℃で約１０日後、または約２０日後、または約３０日後、本開示組成物は約０．５重量パーセント未満のシクロ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒを有する。更に別の実施形態では、投与時、当該組成物は最大約５重量パーセント、例えば約０．０１〜約５重量パーセント、例えば約４〜約５重量パーセントのジケトピペラジンを含むことが可能である。
【0058】
更に別の実施形態では、１０日、または２０日、または３０日、またはそれ以上経過した後、本開示組成物は約０．５重量パーセント未満（または例えば約０．７重量パーセント未満、もしくは約１重量パーセント未満）のＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2を有する。別の実施形態では、４０℃で約１０日後、または約２０日後、または約３０日後、当該組成物は０．３重量パーセント未満のＰｒｏ‐Ｔｈｒ‐ＮＨ2を有する。
【0059】
ある特定の実施形態では、１０日後、または２０日後、または３０日後、本開示組成物は約０．５重量パーセント未満（または例えば約０．１重量パーセント未満、もしくは０．４重量パーセント未満、もしくは１重量パーセント未満）のＴｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏを有する。別の実施形態では、４０℃で約１０日後、または約２０日後、または約３０日後、当該組成物は０．１重量パーセント未満のＴｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏを有する。
【0060】
溶液中、経時的に化合物が急速に分解または破壊されない点で、本開示組成物は安定的である。いくつかの実施形態では、室温で、室温未満で、または室温を超える温度で、溶液中、経時的に（例えば１０日以上）、５％未満（例えば４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満）の化合物が急速に分解または破壊される。
【0061】
ある特定の実施形態では、室温を超える温度（例えば３０℃、３５℃、４０℃、４５℃；例えば４０℃）で、１０日以上、２０日以上、３０日以上、４０日以上、５０日以上、６０日以上、または９０日以上（例えば２０日以上）経過した後、５％未満（例えば４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満）の化合物が急速に溶液中で分解または破壊される。１実施形態では、４０℃で２１日後、５％未満（例えば４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満）の化合物が急速に溶液中で分解または破壊される。
【0062】
他の実施形態では、室温で１０日以上、３０日以上、６０日以上、９０日以上、６か月以上または１年以上経過した後、５％未満（例えば４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満）の化合物が急速に溶液中で分解または破壊される。
【0063】
更に他の実施形態では、０℃以下で１か月後、０℃以下で３か月後、０℃以下で６か月後、０℃以下で９か月後、０℃以下で１２か月後、０℃以下で１８か月後、もしくは０℃以下で２４か月後、またはそれ以上経過した後、５％未満（例えば４％未満、３％未満、２％未満、１％未満、０．５％未満）の化合物が急速に溶液中で分解または破壊される。
【0064】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物は上記で詳述した安定性特性のいずれか２つ以上を示すことが可能である。
【0065】
ある特定の実施形態では、当該組成物は分解生成物ジケトピペラジン及びプロリン‐スレオニンアミドの一方または両方を最小量で含む。他の実施形態では、当該組成物はジケトピペラジン、プロリン‐スレオニンアミド、及び本明細書に記載の他の分解生成物のいずれか１種以上から成る群より選択される１種以上の分解生成物を最小量で含む。
【0066】
ある特定の実施形態では、室温を超える温度（例えば３０℃、３５℃、４０℃、４５℃；例えば４０℃）で、１０日以上、２０日以上、３０日以上、４０日以上、５０日以上、６０日以上、または９０日以上（例えば２０日以上）経過した後、当該組成物は１重量パーセント未満（例えば０．７重量パーセント未満、０．５重量パーセント未満、０．４重量パーセント未満、０．３重量パーセント未満）のジケトピペラジンを有する。１実施形態では、４０℃の溶液中、２１日後に、当該組成物は０．７重量パーセント未満、０．４重量パーセント未満、または０．３重量パーセント未満のジケトピペラジンを有する。更に別の実施形態では、投与時、当該組成物は最大約５重量パーセントのジケトピペラジンを含むことが可能である。上記に提供された重量パーセント値は以下の式：（不純物重量）／（残余化合物の重量）×１００から求める。
【0067】
ある特定の実施形態では、室温を超える温度（例えば３０℃、３５℃、４０℃、４５℃；例えば４０℃）で、１０日以上、２０日以上、３０日以上、４０日以上、５０日以上、６０日以上、または９０日以上（例えば２０日以上）経過した後、当該組成物は１重量パーセント未満（または例えば約０．７重量パーセント未満、０．５重量パーセント未満、０．４重量パーセント未満、０．３重量パーセント未満、０．２重量パーセント未満、もしくは０．１重量パーセント未満）のプロリン‐スレオニンアミドを有する。１実施形態では、４０℃の溶液中、２１日後、当該組成物は０．３重量パーセント未満または０．２重量パーセント未満のプロリン‐スレオニンアミドを有する。上記に提供された重量パーセント値は以下の式：（プロリン‐スレオニンアミド重量）／（残余化合物の重量）×１００から求める。
【0068】
いくつかの実施形態では、（ｉ）当該化合物及び水を含む第１配合物の提供；（ｉｉ）第１配合物と、ｐＨ約３．５〜約６．５にするために十分な量の塩酸またはその供給源との接触、を含むプロセスにより当該組成物を調製する。
【0069】
実施形態は上記特長のいずれか１つ、ならびに上記特長の２つ以上の任意の組合せを含むことが可能である。
【0070】
方法本開示は部分的に、本開示の方法に従って治療されることが期待される多様な他の神経状態を治療するための開示されたＧＬＹＸ‐１３静脈内組成物の使用に関する。その状態の例としては、学習障害、自閉症性障害、注意欠陥多動性障害、不安、抑鬱、片頭痛、トゥレット症候群、恐怖症、心的外傷後ストレス障害、認知症、ＡＩＤＳ認知症、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、痙縮、ミオクローヌス、筋痙攣、双極性障害、神経因性疼痛、薬物乱用障害、尿失禁、脳卒中、虚血、てんかん及び統合失調症が挙げられるがこれらに限定されるものではない。
【0071】
企図した方法には、自閉症及び／または自閉症スペクトラム障害の治療を必要とする患者においてそれを治療する方法が含まれ、該方法には有効量の本開示組成物（例えば上記の組成物）を患者へ投与することが含まれる。１実施形態では、自閉症の症状の軽減を必要とする患者においてそれを軽減する方法が企図され、該方法には有効量の本開示組成物を患者へ投与することが含まれる。例えば、投与すると、当該組成物はアイコンタクト回避、交際障害、注意欠陥、憂鬱、多動性、異常な音知覚、不適切な発話、睡眠障害及び固執など自閉症の１種以上の症状の発症率を減少させる可能性がある。このように減少した発症率は未治療の個人（単数または複数）の発症率と比較して評価してもよい。
【0072】
いくつかの実施形態では、自閉症の患者は脆弱性Ｘ症候群、結節性硬化症、先天性風疹症候群及び未処理フェニルケトン尿症などの別の病状も発症する。
【0073】
別の実施形態では、障害の治療を必要とする患者においてそれを治療する方法が企図され、その障害は：てんかん、ＡＩＤＳ及び／またはＡＩＤＳ認知症、パーキンソン病、多系統萎縮症、進行性の核上性麻痺、フリードリヒ運動失調、自閉症、脆弱性Ｘ症候群、結節性硬化症、注意欠陥障害、オリーブ‐橋小脳萎縮症、脳性麻痺、薬物誘導性視神経炎、末梢神経障害、脊髄症、虚血性網膜症、緑内障、心停止、行動障害及び衝動制御障害から成る群より選択され、当該方法には本開示化合物、例えばＧＬＹＸ‐１３を投与することが含まれる。咳、例えば制御不能な咳を治療する方法も本明細書において企図され、当該方法にはＧＬＹＸ‐１３組成物を、それを必要とする患者に投与することが含まれる。
【0074】
例えば、本明細書において、良性ローランドてんかん、前頭葉てんかん、乳児痙攣、若年性ミオクローヌスてんかん、レノックス・ガストー症候群、ランドウ‐クレフナー症候群、ドラベ症候群、進行性ミオクローヌスてんかん、反射てんかん、ラスムッセン症候群、側頭葉てんかん、辺縁系てんかん、てんかん重積状態、腹部てんかん、広範両側性ミオクローヌス、月経随伴性てんかん、ジャクソン発作性疾患、ラフォラ病及び／または光過敏性てんかんを治療する方法が提供され、当該方法には、有効量の本開示組成物を投与することが含まれる。
【0075】
１実施形態では、本明細書において、注意欠陥障害、ＡＤＨＤ（注意欠陥多動性障害）、統合失調症（例えば、統合失調感情性障害、妄想性障害、例えば、妄想型、破瓜型及び／または緊張型統合失調症）、双極性障害（双極Ｉ型障害、双極ＩＩ型障害、気分循環性障害など）、境界性人格障害、不安（社会不安障害、回避性人格障害など）、強迫性障害、アヘン、ニコチン及び／またはエタノール嗜癖の改善（例えば、このような嗜癖を治療する方法、またはこのような嗜癖からの離脱の副作用を改善する方法）、脊髄損傷性糖尿病性網膜症、外傷性脳損傷、前頭側頭型認知症、心的外傷後ストレス症候群ならびに／またはハンチントン舞踏病の治療を必要とする患者において、それを治療する方法が企図され、当該方法には本開示組成物を投与することが含まれる。例えば、統合失調症、嗜癖（例えば、エタノールまたはアヘン）、自閉症（及び自閉症スペクトラム障害）、ハンチントン舞踏病、外傷性脳損傷、脊髄損傷、心的外傷後ストレス症候群ならびに糖尿病性網膜症に罹患した患者は全てＮＭＤＡ受容体発現または機能が改変されている可能性がある。
【0076】
例えば、本明細書において、統合失調症、例えば統合失調症の陰性症状及び認知症状を、それに罹患した患者において治療する方法が提供され、当該方法には治療有効量の本開示組成物を投与することが含まれる。
【0077】
本明細書において、脳卒中及び／または虚血、例えば虚血性脳卒中、脳虚血、一過性虚血発作、心臓虚血及び／または心筋梗塞の治療を必要とする患者において、それを治療する方法が企図され、当該方法には薬学的に有効量の本開示組成物を投与することが含まれる。
【0078】
本明細書において、細胞内の自閉症標的遺伝子発現を調節する方法も提供され、当該方法には、細胞と有効量の本開示組成物とを接触させることが含まれる。自閉症遺伝子発現は例えば、ＡＢＡＴ、ＡＰＯＥ、ＣＨＲＮＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＦＡＰ、ＧＲＩＮ２Ａ、ＰＤＹＮ及びＰＥＮＫから選択してもよい。別の実施形態では、シナプス可塑性に関連する障害に罹患している患者においてシナプス可塑性を調節する方法が提供され、当該方法には有効量の本開示組成物を患者に投与することが含まれる。
【0079】
別の実施形態では、アルツハイマー病、または例えば初期段階のアルツハイマー病に伴う記憶喪失の治療を必要とする患者において、それを治療する方法が提供され、当該方法には本開示組成物を投与することが含まれる。本明細書において、インビトロまたはインビボで（例えば、細胞内で）、アルツハイマーアミロイドタンパク質（例えばベータアミロイドペプチド、例えばイソ型Ａ１‐４２）を調節する方法も提供され、当該方法には、タンパク質と有効量の本開示組成物とを接触させることが含まれる。例えば、いくつかの実施形態では、本開示組成物は、海馬スライスにおける長期増強ならびにアポトーシス性神経細胞死を阻害するこのようなアミロイドタンパク質の能力を遮断する可能性がある。いくつかの実施形態では、本開示組成物は、神経保護特性を必要とするアルツハイマー患者にそれを提供し、例えば後期アルツハイマー関連神経細胞死に治療効果を提供する可能性がある。
【0080】
本明細書において、臨床的に関連のある抗鬱薬及び抗不安薬での治療、ならびに一般的に抑鬱及び不安の治療のための本開示ＧＬＹＸ‐１３組成物の使用も企図される。
【0081】
ある特定の実施形態では、本発明は少なくとも部分的に、本開示ＧＬＹＸ‐１３組成物単独の使用、または、抑鬱や不安を緩和し、抑鬱や不安の再発を防止することが含まれる抑鬱や不安及び／または他の関連する疾患を治療する薬剤を製造するための三環系抗鬱薬、ＭＡＯ‐Ｉ、ＳＳＲＩ、二重及び三重取込み阻害剤及び／または抗不安薬などの１種以上の他の抗鬱治療と組み合わせた使用に関連している。ＧＬＹＸペプチドと組み合わせて使用できる薬物の例としてはアナフラニール、アダピン、アベンチル、エラビル、デシプラミン、パメロール、ペルトフラン、サイネクアン、スルモンチル、トフラニール、ビバクチル、パルネート、ナルジル、マープラン、セレクサ、レクサプロ、ルボックス、パキシル、プロザック、ゾロフト、ウェルブトリン、エフェクサー、レメロン、サインバルタ、デジレル（トラゾドン）及びルジオミールが挙げられる。いくつかの実施形態では、本開示ＧＬＹＸ‐１３組成物の投与は、併用した抗鬱薬治療の場合より速く作用し、よって、このような併用（例えば、基本的に緊急または即時に行うＧＬＹＸ‐１３を投与しながら、ほぼ同時に別のより遅効性の抗鬱薬と併用する投与計画を開始する）は、第２の抗鬱薬がより遅効性である一般的な状況で特に有利である。
【0082】
本明細書において、心理療法、電気痙攣療法、迷走神経刺激及び／または経頭蓋磁気刺激などの他の非薬理学的治療と併用した（例えば同時に、または連続的に）本開示組成物を投与することを含む抑鬱治療法も企図される。
【0083】
挙動または運動協調性に影響を与えることなく、また発作活性を誘導または促進することなく本開示のこの態様に従えば、多様な抑鬱状態を治療することが期待される。本開示のこの態様に従って治療されることが期待される抑鬱状態の例としては、大抑鬱性障害、気分変調性障害、精神病性抑鬱、産後抑鬱、月経前症候群、月経前不快気分障害、季節性情動障害（ＳＡＤ）、不安、気分障害、癌または慢性疼痛、化学療法、慢性ストレス、心的外傷後ストレス障害、自殺の危険性及び双極性障害（または躁鬱障害）などの慢性的病状に起因する抑鬱が挙げられるが、これらに限定されるものではない。双極性障害に起因する抑鬱は双極性抑鬱とも呼ばれ得ることも理解されるべきである。また、いずれかの形態の抑鬱に罹患している患者が不安を経験することは頻繁にある。不安に関連する様々な症状には、特に恐怖、パニック、動悸、息切れ、疲労感、吐き気及び頭痛が挙げられる。現状の方法を利用して不安またはそのいずれかの症状が治療可能になることが期待される。
【0084】
本明細書において、治療耐性患者の抑鬱を治療する方法、または難治性抑鬱、例えば少なくとも１種もしくは少なくとも２種の他の抗鬱化合物もしくは治療薬の適切な方針に応答しない、及び／または応答していない抑鬱障害患者を治療する方法も提供される。例えば、本明細書において、治療耐性患者の抑鬱を治療する方法が提供され、当該方法には、ａ）場合により患者を治療耐性であると特定すること、及びｂ）該患者に有効量の本開示ＧＬＹＸ‐１３化合物を投与することが含まれる。
【0085】
１実施形態では、本明細書において、該当する患者において抑鬱症状を緊急に治療する方法が提供され、当該方法には、例えば単一の単位用量で有効量のＧＬＹＸ‐１３を、例えば静脈内または皮下に投与することが含まれる。このような方法は、上記投与後に約２週間以下、１週間以下、１日以下または１時間以下（例えば１５分以下、半時間以下）の間、抑鬱の少なくとも１つの症状を持つ患者を寛解させる可能性がある。いくつかの実施形態では、このような方法は、上記投与後に約１日以上、１週間以上、または２週間以上の間、抑鬱の少なくとも１つの症状を持つ患者を寛解させる可能性がある。例えば、本明細書において、有効量のＧＬＹＸ‐１３を抑鬱患者に投与することを含む方法が提供され、当該方法では、上記患者は、非ＧＬＹＸ‐１３抗鬱化合物を投与した同患者と比較して、ＧＬＹＸ‐１３の第１回目投与後にほぼ初期段階で抑鬱の少なくとも１つの症状がほぼ寛解している。緊急投与のこのような方法は入院患者または外来患者において有利となる可能性もあることは当業者に理解されているものとする。
【0086】
抑鬱症状、及びその緩和は、医師または心理学者によって、例えば精神状態の検査により確認してもよい。症状には絶望、自傷もしくは自殺の思考、及び／または肯定的な思考または計画の欠如が挙げられる。
【0087】
いくつかの実施形態では、患者はヒト、例えばヒト小児患者である。
【0088】
いくつかの実施形態では、抑鬱または別の企図された適応症を治療する薬剤を製造するため、企図された方法は本開示組成物の単独、または１種以上の他の薬剤との組み合わせた組成物の使用に関する。
【0089】
ＧＬＹＸ‐１３は高治療指数を提供し得る。例えば、ＧＬＹＸ‐１３は約１〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲のｉ．ｖ．用量で治療効果を示す可能性がある。いくつかの実施形態では、例えば用量５００ｍｇ／ｋｇのｉ．ｖ．では運動失調は起こらない。
【0090】
１実施形態では、開示した方法には、本開示組成物の１回用量、または１回以上の用量を投与することが含まれる。いくつかの実施形態では、１回（単回）用量投与から１２時間後、１日後、１週間後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後、または更に８日後、患者はほぼ改善する。
【0091】
治療に使用するために必要な本開示組成物の治療有効量は、治療する状態の性質、所望の治療時間の長さ、患者の年齢及び状態に伴って変化し、最終的に主治医によって決定する。しかし、一般に、ヒト成人の治療に用いられる剤形は通常、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約７０ｍｇ／ｍｌ、または７０〜２００ｍｇ／ｍｌの範囲である。いくつかの実施形態では、開示された剤形は１日約０．５〜２グラムのＧＬＹＸ‐１３を患者に投与することを可能にする。多数の要因により本開示組成物が広範な投与量で投与される可能性がある。他の治療剤と組み合わせて投与する場合、本開示組成物の投与量は、相対的に低い投与量で投与してもよい。結果として、本開示組成物の剤形は約１０ｍｇ／ｍｌ〜約７０ｍｇ／ｍｌ、または例えば約７０ｍｇ／ｍｌ〜約２００ｍｇ／ｍｌであってもよい。本開示組成物の剤形は約１０ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、２５ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、３５ｍｇ／ｍｌ、４０ｍｇ／ｍｌ、４５ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、５５ｍｇ／ｍｌ、６０ｍｇ／ｍｌ、６５ｍｇ／ｍｌまたは７０ｍｇ／ｍｌなどの任意の投与量でよいが、これらに限定されるものではない。８０ｍｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ、１５０ｍｇ／ｍｌまたは２００ｍｇ／ｍｌなどの更に濃縮した溶液も利便性のある剤形として開示する。所望の用量は便宜的に、単回用量で、または適当な間隔で複数回用量として、例えば1日に２回の、３回の、４回もしくはそれ以上の細分用量で投与してもよい。非経口投与に適した本開示の医薬組成物は、１種以上の薬学的に許容可能な滅菌等張水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液または乳濁液、あるいは使用直前に滅菌注射用溶液または分散液になるよう再構成可能な滅菌粉末と組み合わせて対象組成物を含み、当該医薬組成物は抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、製剤を対象の受容者の血液と等張にする溶質、または懸濁化剤もしくは増粘剤を含んでもよい。
【0092】
本開示の医薬組成物に使用し得る好適な水性及び非水性担体の例には、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）及びこれらの好適な混合物、オリーブ油などの植物油、ならびにオレイン酸エチル及びシクロデキストリンなどの注射可能な有機エステルが挙げられる。適切な流動性は例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用、分散液の場合は所望の粒径の維持、及び界面活性剤の使用により維持し得る。
【0093】
ここまで全般的に述べた発明は、本発明のある特定の態様及び実施形態を単に説明する目的として包含されている以下の実施例を参照して更に容易に理解され、また、これらは本発明を限定することを何ら意図するものではない。
【実施例】
【0094】
実施例１．生理食塩水ｐＨ６．５〜７．０中の６０ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸ‐１３ＵＳＰ注射用水（ＷＦＩ）中の９０ｇ／Ｌの塩化ナトリウムの溶液を調製する。
【0095】
１８０ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３溶液の調製ＵＳＰ注射用水（ＷＦＩ）を配合容器に添加して最終適量重量の２０％と同等の量にし、正確な添加重量を記録する。溶液の混合を開始し、計算量のＵＳＰ酢酸を配合容器に添加する。酢酸の量は、調合バッチ中のＧＬＹＸ‐１３目標量の０．９〜１．０モル当量である。
【0096】
計算量のＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を配合容器に添加し、正確な添加重量を記録する。混合を１５〜３０分間継続する。
【0097】
混合を停止し、計算量の９０ｇ／Ｌの生理食塩水を配合容器に添加する。ＮａＣｌの量は、最終製剤中９ｇ／Ｌを達成するために必要な量と同等にしなければならない。
【0098】
６０ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３溶液の調製配合容器の全内容物をポリマー混合バッグまたは大型ステンレス鋼製混合容器に移す。１５〜３０分間混合する。十分量のＷＦＩを溶液に添加して最終目標の最終体積にする。ＨＰＬＣによりＧＬＹＸ‐１３の内容物を試験し、ｐＨを試験する。ｐＨが６．６〜６．９の範囲外であれば、酢酸またはＮａＯＨでｐＨを調整する。最終バッチは、溶液１リットル当り、０．９％の塩化ナトリウム中に６０グラムのＧＬＹＸ‐１３及び６〜６．４グラムの酢酸を収容し；ｐＨは６．５〜７．０でなければならない。
【0099】
滅菌及びバイアル充填以下の連続的な３枚の濾紙：０．４５μｍ濾紙での事前濾過、その後の２枚の０．２２μｍ濾紙で無菌濾過により溶液を滅菌する。各バイアルに２０ｍｌ（２０〜２０．５ｍＬ）のバルク滅菌溶液を充填し、バイアルに栓をし、蓋をする。各バイアルは溶液２０ｍＬ中１．２グラムのＧＬＹＸ‐１３を収容している。
【0100】
実施例２．緩衝液中のＧＬＹＸ‐１３Ａ．ＨＣｌを使用して０．１Ｍトリス緩衝水溶液（「トリスＨＣｌ‐７．０」）ｐＨ７．０を調製し、ｐＨを調整する。
【0101】
６０ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３溶液の調製目標体積の約７５％のトリスＨＣｌ‐７．０緩衝液を配合容器に添加する。目標バッチ体積１リットル当り、ＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を６０ｇ秤量し、配合容器に添加する。１５分間混合する。ｐＨを測定する。ｐＨが範囲（７．０±０．０５）外であれば、それに応じてＨＣｌまたはＮａＯＨで調整する。最終バッチ体積にするために十分なトリスＨＣｌ‐７．０を添加する。最終バルク溶液は、溶液１リットル当り、６０グラムのＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を０．１Ｍトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン／ＨＣｌ緩衝液ｐＨ７．０中に含む。
【0102】
滅菌及びバイアル充填上記と同様に、バイアルを濾過滅菌し、充填する。各バイアルは溶液２０ｍＬ中１．２グラムのＧＬＹＸ‐１３を収容している（６０ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸ‐１３、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン／ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ７．０）。
【0103】
Ｂ．クエン酸塩緩衝液ｐＨ５．６中に６０ｍｇ／ｍＬ：０．１Ｍクエン酸三ナトリウム水溶液を調製し、必要に応じてＨＣｌ及びＮａＯＨでｐＨを５．６に調整する。
【0104】
６０ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３溶液の調製約７５％の目標バッチ体積のクエン酸／クエン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ５．６を配合容器に添加する。目標バッチ体積１リットル当り、ＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を６０ｇ秤量し、配合容器に添加する。１５分間混合する。ｐＨを測定する。ｐＨが範囲（５．６±０．０５）外であれば、それに応じてＨＣｌまたはＮａＯＨで調整する。最終バッチ体積にするために十分なクエン酸／クエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．６）を添加する。最終バルク溶液は、溶液１リットル当り、６０グラムのＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を、０．１Ｍクエン酸／クエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ５．６中に含む。
【0105】
Ｃ．滅菌及びバイアル充填上記と同様に、バイアルを濾過滅菌し、充填する。各バイアルは溶液２０ｍＬ中１．２グラムのＧＬＹＸ‐１３を収容している（ＧＬＹＸ‐１３を含むクエン酸／クエン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ５．６）。
【0106】
Ｃ．２００ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸ‐１３を含むトリス緩衝液ｐＨ７．５Ａ．ＨＣｌを使用して０．１Ｍトリス緩衝水溶液（「トリスＨＣｌ‐７．５」）ｐＨ７．５を調製し、ｐＨを調整する。
【0107】
Ｂ．２００ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３溶液の調製
【0108】
目標体積の約５０％のトリスＨＣｌ‐７．５緩衝液を配合容器に添加する。目標バッチ体積１リットル当り、ＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を２００ｇ秤量し、配合容器に添加する。１５分間混合する。ｐＨを測定する。ｐＨが範囲（７．５±０．０５）外であれば、それに応じてＨＣｌまたはＮａＯＨで調整する。最終バッチ体積にするために十分なトリスＨＣｌ‐７．５を添加する。最終バルク溶液は、溶液１リットル当り、２００グラムのＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を、０．１Ｍトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン／ＨＣｌ緩衝液ｐＨ７．５中に含む。
【0109】
滅菌及びバイアル充填上記と同様に、バイアルを濾過滅菌し、充填する。各バイアルに５ｍｌ（４．８５〜５．１５ｍＬ）のバルク滅菌溶液を充填し、バイアルに栓をし、蓋をする。各バイアルは溶液１０ｍＬ中１グラムのＧＬＹＸ‐１３を収容している。（２００ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸ‐１３、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン／ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ７．５）
【0110】
Ｄ．トリス緩衝液及び４０％ＰＥＧ４００溶液ｐＨ７．５中の２００ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸ‐１３ＨＣｌを使用して０．１Ｍトリス緩衝水溶液（「トリスＨＣｌ‐７．５」）ｐＨ７．５を調製し、ｐＨを調整する。
【0111】
２００ｍｇ／ｍｌのＧＬＹＸ‐１３溶液の調製約２０Ｌの０．２ＭトリスＨＣｌ‐７．５緩衝液を配合容器に添加する。４０ＬのＰＥＧ４００を容器に添加し、３０分間撹拌する。ＧＬＹＸ‐１３遊離塩基を２０ｋｇ秤量し、配合容器に添加する。０．５〜２時間混合する。試料を取り出し、ｐＨを測定する。ｐＨが範囲（７．５±０．０５）外であれば、それに応じてＨＣｌまたはＮａＯＨで調整する。１００Ｌの最終バッチ体積にするために十分なトリスＨＣｌ‐７．５（約３０Ｌ）を添加する。最終バルク溶液は、溶液１リットル当り、２００グラムのＧＬＹＸ‐１３遊離塩基及び４０％のＰＥＧ４００を０．１Ｍトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン／ＨＣｌ緩衝液ｐＨ７．５中に含む。
【0112】
滅菌及びバイアル充填上記と同様に、バイアルを濾過滅菌し、充填する。各バイアルに１０ｍｌ（１０〜１０．５ｍＬ）のバルク滅菌溶液を充填し、バイアルに栓をし、蓋をする。各バイアルは溶液１０ｍＬ中２グラムのＧＬＹＸ‐１３を収容している。（４０％のポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００）、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン／ＨＣｌ緩衝液ｐＨ７．５中の、２００ｍｇ／ｍＬのＧＬＹＸ‐１３）
【0113】
実施例３．ＧＬＹＸ‐１３のＩ．Ｖ．溶液の安定性以下の条件を利用し、ＧＬＹＸ‐１３の安定性をＨＰＬＣにより試験する。
【0114】
ＨＰＬＣ分析法カラム：ＲＰ‐Ｃ１８ＯＤＳ２（５μｍ、８０Ａ、４．６×２５０ｍｍ）
【0115】
溶離液Ａ：１３．４ｇのリン酸二水素カリウム及び４．４ｇの１‐ヘプタンスルホン酸ナトリウム塩を含む１６００ｍＬの水。ｏ‐リン酸でｐＨを２．５に調整する。水で２Ｌに希釈する。
【0116】
溶離液Ｂ：１４００ｍＬのメタノール及び６００ｍＬの水。
【0117】
勾配：２５分間で２０％のＢ〜７０％のＢ；３分間で７０％のＢ〜２０％のＢ；８分間で０％のＢ。
【0118】
流速：１ｍＬ／分
【0119】
検出：ＵＶ（２２０ｎｍ）
【0120】
注射：２０μＬの１ｍｇ／ｍＬ溶液
【0121】
温度：周囲温度
【0122】
ＧＬＹＸ‐１３の保持時間は１２．０〜１２．８分である。Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ‐Ｔｈｒ（ＴＰＰＴ＝脱アミノ化ＧＬＹＸ‐１３）の保持時間は１４．９〜１５．１分である。Ｔｈｒ‐Ｐｒｏ‐Ｐｒｏ（ＴＰＰ）の保持時間は４．８〜５．２分である。本方法を利用して不純物ピークをＧＬＹＸ‐１３ピークに対して、重量／重量パーセントで表さずにパーセント（％）面積で分析する。
【0123】
実施例４．低ｐＨ製剤ＧＬＹＸ‐１３を１５０ｍｇ／ｍＬで調合し、酢酸または塩酸のいずれかで特定のｐＨに調製した。次いで、安定性が向上された条件に当該製剤を供した（４０℃で２か月）。ｐＨ及び対イオン（酢酸及びＨＣｌ）に対する安定性を限定する主要な特性を表１にまとめた。
表１．４０℃で２か月置いたＧＬＹＸ‐１３溶液の安定性
【0124】
表１は、酢酸と比較してＨＣｌが対イオンとして製剤を安定化させることを示している。ｐＨ５．０では、不純物のレベルは１０倍低く、ＧＬＹＸ‐１３の％表示指定量（１５０ｍｇ）は、酢酸溶液に対してＨＣｌ溶液でほぼ５０％高い（製剤ＡＡ‐５対ＨＣｌ‐５を参照）。更に、ｐＨのより低い溶液はｐＨのより高い溶液より安定しており：なお、ＨＣｌ溶液では、不純物レベルは有意に低く、ＧＬＹＸ‐１３の％表示指定量（１５０ｍｇ）は、ｐＨのより高い（８）溶液に対して低いｐＨ（４及び５）では有意に高い（製剤ＨＣｌ‐４及びＨＣｌ‐５対製剤ＨＣｌ‐８を参照）。
【0125】
実施例５．シリンジ／容器安定性試験本試験の目的はシリンジ及びバイアルに充填したＧＬＹＸ‐１３の１５０ｍｇ／ｍＬ製剤の安定性を試験することであった。４種の異なるシリンジと栓の組合せを、１種のバイアルと栓の構成と共に試験した。
【0126】
表２【0127】
Ｆｌｅｘｉｃｏｎチューブを備えたＦｌｅｘｉｃｏｎ蠕動ポンプに目盛りを付け、薬液の密度に基づいて特定の充填量を送達した。２５℃での薬液の密度は１．０４４ｇ／ｍＬであった。溶液５．１ｍＬまたは５．３２ｇをガラスシリンジに充填し、溶液５．１４ｍＬまたは５．３７ｇをポリマーシリンジに充填した。シリンジ／栓部品に残留して送達に利用できない量を考慮して、各シリンジには必要以上の溶液を収容した。バイアルに残留した量を考慮して、各バイアルには５．３２ｇの溶液を充填した。
【0128】
薬液の安定性を、同じ容器／封止具の組合せに充填したプラセボ溶液と比較した。試料を−２０℃、２〜８℃、２５℃及び４０℃で表３〜６に収載した期間保存した。
【0129】
表の試験凡例：
【0130】
１５０ｍｇ／ｍＬで活性物質を含む試料：
【0131】
Ａ＝ｐＨ、外観、アッセイ／関連物質、色、送達可能量（時点毎、全試験例に１シリンジ必要）
【0132】
Ｂ＝送達可能量、ＨＩＡＣ、オスモル濃度、及び旋光度（時点毎に５シリンジ必要）
【0133】
プラセボを含む試料：
【0134】
Ａ＝ｐＨ、外観、アッセイ／関連物質、色（時点毎に１シリンジ必要）
【0135】
Ｂ＝送達可能量、ＨＩＡＣ（時点毎に５シリンジ必要）表３：−２０℃で保存した試料の時点及び試験例
表４：２〜８℃で保存した試料の時点及び試験例
表５：２５℃で保存した試料の時点及び試験例
表６：４０℃で保存した試料の時点及び試験例
【0136】
シリンジ及び試料の試験例及び仕様を以下の選択した時点で試験する。各時点で全ての試験を行うわけではない：ｐＨ、外観、アッセイ／関連物質、色、送達可能量、粒度分布（ＨＩＡＣ）、オスモル濃度及び旋光度。
表３：−２０℃で保存した試料の時点及び試験例
表４：２〜８℃で保存した試料の時点及び試験例
表５：２５℃で保存した試料の時点及び試験例
表６：４０℃で保存した試料の時点及び試験例
【0137】
安定性試験におけるシリンジ及びバイアルの試験例及び仕様を表７に収載する。初期、ならびに４、８、１２及び２４週間後に試験を行った。２週間時点の試料は凍結しておき、４週間の試料と同時に試験した。６週間時点の試料は凍結しておき、８週間の試料と同時に試験した。
【0138】
保存中、水平状態で維持されるようにシリンジはバッグ内で保存した。約６５個のバイアルを直立状態で保存し、５５個のバイアルを倒置状態で保存した。各条件下、保存から４、８、１２及び２４週間後に倒置試料を取り出した。時点毎に必要以上のシリンジが含まれた。表７：薬液の試験例及び仕様
【0139】
シリンジ容器／封止具構成に有意差は無かった。全ての容器／封止具構成は、外観、識別性、アッセイ、同定した関連物質、総関連物質、ｐＨ（活性状態）、粒子状物質（活性状態）及び１容器当りの体積の合格基準を満たしていた。全ての容器／封止具構成に関する４及び８週間後の個々の非同定関連物質及び総非同定関連物質は、いくつかの例で合格基準を満たしていなかった。
【0140】
実施例６．安定性試験試験及び対照物質
ＧＬＹＸ‐１３原薬；及び５Ｍ塩酸溶液；メタノール；２０ｍｍの開口を有する１０ｍＬバイアル；２０ｍｍのＤａｉｋｙｏ製溶液栓；シリンジフィルター、０．２μｍのＭｉｌｌｅｘ‐ＧＶ
ＨＰＬＣ法
カラム：Ｗａｔｅｒｓ社製Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ ＯＤＳ２、３μｍ、４．６×２５０ｍｍ、品番ＰＳＳ８３２１１５
移動相Ａ：２．２ｇ／Ｌのへプタンスルホン酸、６．７ｇ／Ｌのリン酸二水素カリウム、ｐＨ２．５
移動相Ｂ：７０／３０メタノール／水
ニードル洗浄：水
カラム温度：４０±１℃
試料温度：４±１℃
波長：２１０ｎｍ
稼働時間：５０分
流速：１．０ｍＬ／分
勾配：
【0141】
試験薬剤ベースの溶解を試験するため、４種の製剤を調製した（表２）。各製剤は３５ｍＬに調製され、５．２５ｇのＧＬＹＸ‐１３を含有した。
表８．ｐＨ試験用の製剤
【0142】
薬剤をビーカーに添加し、精製水を使用して体積を約２６ｍＬに調整して各製剤を調製した。５ＭのＨＣｌを使用し、少量ずつ添加してｐＨを調整した。各調整から１０分間、溶液を混合し、所望のｐＨにした後に３０分間混合した。３０分後に溶液のｐＨを確認し、必要に応じて調整した。ｐＨのドリフトが確認されなくなったら精製水を使用して溶液を３５ｍＬに調製した。各製剤をバイアル（２．５ｍＬ／バイアル）に充填し、栓で封止し、蓋をした。製剤を４０℃で３週間保存し、試料を週毎に取り出した。外観について週毎の試料全てを調べ、ＨＰＬＣアッセイを利用してｐＨ、アッセイ及び関連物質について試験した。表９．４０℃で３週間置いたＧＬＹＸ‐１３溶液の安定性
【0143】
アッセイ及び不純物ＨＰＬＣ法のために設計された適当なソフトウエアを使用してデータを分析した。表３は３週目の試験時点での安定性データの概要を提供している。不純物１（ＲＲＴ０．４３）はシクロ‐プロリン‐スレオニン（「ジケトピペラジン」）である。不純物２（ＲＲＴ０．５７）はプロリン‐スレオニンアミドである。図１はｐＨに対する経時的な不純物１（ＲＲＴ０．４３）の形成を示す。図２はｐＨに対する経時的な不純物２（ＲＲＴ０．５７）の形成を示す。全データは、重量／重量％で表さずにＧＬＹＸ‐１３ピークの％面積として報告している。
【0144】
上記の例では、低ｐＨ及び中性ｐＨで維持された溶液はより高いｐＨで維持された溶液より安定していることが示されている。例えば、ＧＬＹＸ‐１３の％（１５０ｍｇ）は、より高いｐＨ（７）溶液に対して低いｐＨ（４及び５）で有意に高い（製剤ＨＣｌ‐４及びＨＣｌ‐５対製剤ＨＣｌ‐７を参照）；４０℃で３週間保存した低ｐＨのＧＬＹＸ‐１３溶液のｐＨ及び総不純物のレベルの増加に伴い有意に増加した２種の同定した不純物のレベルは、ｐＨ７溶液と比較してｐＨ４で３倍低い。
【0145】
結果から、ＧＬＹＸ‐１３溶液の安定性はｐＨに反比例していることが分かる。ｐＨ７での不純物形成の速度は、ｐＨ４の速度より約６倍高い。一部ではペプチドは通常、ＨＣｌ中の低ｐＨで加水分解されることから、中性ｐＨ（６〜８、例えば７）に対して低ｐＨ、例えば約４〜約５のＨＣｌ中の、ペプチドのこのように改善された安定性は驚くべきものである。また、安定性試験中に観察されたＧＬＹＸ‐１３濃度の減少／ＧＬＹＸ‐１３分解生成物の増加は、酢酸で調製した製剤よりＨＣＬで調製した製剤で低かった。
【0146】
実施例６．酸試験
【0147】
本試験の目的は、ラパスチネル（ＧＬＹＸ‐１３）１５０ｍｇ／ｍｌの安定性に対する、ｐＨ調整に使用する酸の種類の影響を試験することである。
【0148】
ラパスチネル１５０ｍｇ／ｍｌ溶液を、水中に溶解したラパスチネル粉末で調製し、５ＮのＨＣｌを使用してｐＨを４．５に調整する。本プロトコルには、５Ｎ―下記の記述を除いて―で全て調製した１０種の異なる種類の酸を使用して４．５に調整したｐＨを有するラパスチネル１５０ｍｇ／ｍｌ溶液の調製が記述されている。表１０．材料、試験用製剤のサプライヤー
表１１．器具リスト
【0149】
Ｉ．酸調製
【0150】
Ａ．５ＮのＨＣｌ溶液本研究は事前に調製した５ＮのＨＣｌ溶液を使用する。
【0151】
Ｂ．フマル酸溶液フマル酸の分子量＝１１６．０７×５Ｎ＝５８０.３５ｍｇ／ｍＬ×２５０ｍＬ＝１４５０８７．５ｍｇ
フマル酸は低水溶性であることから、溶液はその最大溶解度に近づけて調製し、ラパスチネルの濃縮溶液（４５０ｍｇ／ｍＬ）を使用してｐＨ調整を容易にする。
【0152】
Ｃ．リンゴ酸溶液リンゴ酸の分子量＝１３４．０９×５Ｎ＝６７０．４５ｍｇ／ｍＬ×２５０ｍＬ＝１６７６１２．５ｍｇ
リンゴ酸の分子量＝１１６．０７×５Ｎ＝５８０．３５ｍｇ／ｍＬ×２５０ｍＬ＝１４５０８７．５ｍｇ
リンゴ酸は低水溶性であることから、溶液はその最大溶解度に近づけて調製し、ラパスチネルの濃縮溶液（４５０ｍｇ／ｍＬ）を使用してｐＨ調整を容易にする。
【0153】
Ｄ．乳酸溶液溶液はその最大溶解度に近づけて調製し、ラパスチネルの濃縮溶液（４５０ｍｇ／ｍＬ）を使用してｐＨ調整を容易にする。
【0154】
Ｅ．５Ｎの酢酸溶液（２５０ｍＬ）酢酸の分子量＝６０．０５×５Ｎ＝３００．２５×２５０ｍＬ＝７５０６２．５ｍｇ
１．７５．０６ｇの酢酸を２５０ｍｌのメスフラスコに添加する。
２．精製水を使用して２５０ｍＬへと適量にし、完全に混合する。
【0155】
Ｆ．５Ｎのクエン酸溶液（２５０ｍＬ）クエン酸の分子量＝１９２．１２×５Ｎ＝９６０．６×２５０ｍＬ＝２４０１５０ｍｇ
１．２４０．１５ｇの酢酸を２５０ｍｌのメスフラスコに添加する。
２．精製水を使用して２５０ｍＬへと適量にし、完全に混合する。
【0156】
Ｇ．５Ｎのリン酸溶液（２５０ｍＬ）リン酸の分子量＝９８×５Ｎ＝４９０×２５０ｍｌ＝１２２５００ｍｇ
１．１２２．５ｇのリン酸を２５０ｍｌのメスフラスコに添加する。
２．精製水を使用して２５０ｍＬへと適量にし、完全に混合する。
【0157】
Ｈ．５Ｎの硝酸溶液（２５０ｍＬ）硝酸の分子量＝６３．０１×５Ｎ＝３１５．０５×２５０ｍＬ＝７８７６２．５ｍｇ
１．７８．７６ｇの硝酸を２５０ｍｌのメスフラスコに添加する。
２．精製水を使用して２５０ｍＬへと適量にし、完全に混合する。
【0158】
Ｉ．５Ｎの硫酸溶液（２５０ｍＬ）硫酸の分子量＝９８．０８×５Ｎ＝４９０．４×２５０ｍｌ＝１２２６００ｍｇ
１．１２２．６ｇの硫酸を２５０ｍｌのメスフラスコに添加する。
２．精製水を使用して２５０ｍＬへと適量にし、完全に混合する。
【0159】
Ｊ．５Ｎのアスコルビン酸溶液（２５０ｍＬ）アスコルビン酸の分子量＝１７６．１２×５Ｎ＝８８０．６×２５０ｍＬ＝２２０１５０ｍｇ
１．２２０．１５ｇのアスコルビン酸を２５０ｍｌのメスフラスコに添加する。
２．精製水を使用して２５０ｍＬへと適量にし、完全に混合する。
【0160】
ＩＩ．ラパスチネル１５０ｍｇ／ｍｌの調製ラパスチネル１５０ｍｇ／ｍｌ溶液を各２５０ｍｌで調製する。必要なラパスチネルの理論量は溶液２５０ｍｌ当り３７．５ｇである。ラパスチネルの実際の重量は力価、残留水分、総不純物、残留溶媒及び強熱残留物（表１２）に基づいて調整する。
表１２．ラパスチネルの総量調整データ
１００＋１．５２＋３．３＋０．３６３２＝１０５．１８， ３７．５ｇ×１．０５１８＝３９．４４ｇ；力価の調整：１００−９９．１＝０．９；３９．４４×１．００９＝３９．７９ｇ、２５０ｍｌバッチ当りに必要なラパスチネル
１．約１８０ｍｌの精製水中に３９．７９ｇのラパスチネルを溶解して１０種の異なるラパスチネル１５０ｍｇ／ｍｌ溶液を調製する。
２．薬液のｐＨを試験し、記録する。
３．各バッチにおいて、異なる酸を使用して各溶液のｐＨを４．５に調整する。
ａ．酸を徐々に添加し、増量毎に添加した酸の体積を記録する。
ｂ．酸の各添加後、溶液のｐＨを記録する。
４．ｐＨ４．５に達した後、溶液を１時間混合する。
５．１時間後にｐＨを試験し、記録する。
６．必要に応じて、溶液用の個々の酸を使用してｐＨを４．５に調整する。添加した酸の体積及び最終ｐＨを記録する。
７．精製水を使用して溶液を２５０ｍｌへと適量にし、よく混合し、ｐＨを記録する。
８．０．２μｍフィルターを備えた真空濾過システムで各溶液を濾過する。
９．各溶液の１試料をＨＰＬＣアッセイ用Ｔ＝０試料として供する。
１０．各溶液を４０℃で保存し、２週間〜４週間保存した後、各バッチから１試料を取り出す。同時に試験できるようになるまで、２週目及び４週目の試料を凍結させる。
１１．ｐＨ、外観、アッセイ／関連物質、色、送達可能量、粒度分布（ＨＩＡＣ）、オスモル濃度及び旋光度について試料を試験する。
【0161】
等価物当業者は、単に通常の実験を利用し、本明細書に記載された本発明の特定の実施形態の等価物が多数あることを認識するか、または確認することができるであろう。このような等価物は以下の特許請求の範囲に包含されるように意図されている。本明細書で参照された交付済み特許、出願及び参考文献は、各々が具体的かつ個別に参照により援用されているように同様の範囲まで参照により本明細書に援用される。矛盾する場合、定義を含む本開示が基準となる。また、材料、方法及び実施例は単に例示であり、限定することを意図するものではない。
【配列表】
[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]