特許 6733554 沈殿促進剤およびそれを用いる沈殿化方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6733554

(24)【登録日】2020年7月13日

(45)【発行日】2020年8月5日

(54)【発明の名称】沈殿促進剤およびそれを用いる沈殿化方法

(51)【国際特許分類】

   C07H 21/02 20060101AFI20200728BHJP

   C07H 21/04 20060101ALI20200728BHJP

   C07K 1/30 20060101ALI20200728BHJP

【ＦＩ】

   C07H21/02

   C07H21/04 A

   C07K1/30

【請求項の数】28

【全頁数】86

(21)【出願番号】特願2016-570709(P2016-570709)

(86)(22)【出願日】2016年1月21日

(86)【国際出願番号】JP2016051757

(87)【国際公開番号】WO2016117663

(87)【国際公開日】20160728

【審査請求日】2018年11月5日

(31)【優先権主張番号】特願2015-9720(P2015-9720)

(32)【優先日】2015年1月21日

(33)【優先権主張国】JP

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】000000066

【氏名又は名称】味の素株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100080791

【弁理士】

【氏名又は名称】高島 一

(74)【代理人】

【識別番号】100136629

【弁理士】

【氏名又は名称】鎌田 光宜

(74)【代理人】

【識別番号】100174296

【弁理士】

【氏名又は名称】當麻 博文

(74)【代理人】

【識別番号】100152308

【弁理士】

【氏名又は名称】中 正道

(72)【発明者】

【氏名】平井 邦博

(72)【発明者】

【氏名】片山 智

(72)【発明者】

【氏名】廣瀬 直子

(72)【発明者】

【氏名】山下 健

(72)【発明者】

【氏名】市丸 泰介

(72)【発明者】

【氏名】高橋 大輔

【審査官】 早川 裕之

(56)【参考文献】

【文献】 特開平０７−２３８１０１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０６−１９２１９０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０６−１５７３８８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１２−５１３４５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００１−５２６１８２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１２／１５７７２３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／１０４１６９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１０／１１３９３９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１２／１６５５４６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１２／１６５５４５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第９７／００７２０７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 Biotechniques，２００９年，４７，１０１９−１０２２

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｈ ２１／０２

Ｃ０７Ｈ ２１／０４

Ｃ０７Ｋ １／３０

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

有機基で保護された有機化合物を、溶媒から沈殿させるための沈殿促進剤であって、
前記沈殿促進剤が、
(1) 式（ＩＩ）：

【化1】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^２および環Ｂ^１は、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
Ｘ^２は、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｘ^３は、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｒ^２は、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい単環式複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基を示し；
ｍは、１〜４の整数を示し；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１を示し、ｍが２、３または４の場合、１を示す。］で表される化合物であるか、あるいは
(2) −Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−および−ＯＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される基を介して、直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基を３〜６個有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_１−８アルカン
であり；
前記有機基が、式（ＩＩＩ）：

【化2】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【化3】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）：

【化4】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
ｋは、３〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【化5】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］で表される基であり；かつ
前記有機化合物が、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチド若しくはオリゴヌクレオチド、またはさらにペプチド合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、アミノ酸若しくはペプチドである、
沈殿促進剤。

【請求項2】

Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基または置換されていてもよい単環式複素環基である、請求項１に記載の沈殿促進剤。

【請求項3】

Ｃ_３−１４炭化水素環が、ベンゼン環およびシクロヘキサン環から選ばれる、請求項１または２に記載の沈殿促進剤。

【請求項4】

Ｚが、式（ａ２）または式（ａ２’）で表される基であり、縮合環が、フルオレン環またはキサンテン環であり、ｋ個のＲ^５が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基であり、ｊ個のＲ^７が、それぞれ独立して、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基であり、且つＲ_ａが、水素原子であるか、またはＲ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する請求項１〜３のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項5】

Ｌが、式（ａ１）で表される基であって、Ｌ_１が、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し、且つＬ_２が、単結合を示す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項6】

Ｌが、式（ａ１’）で表される基であって、Ｌ_１が、フェニレン基を示し、且つＬ_２が、単結合を示す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項7】

Ｙが、酸素原子である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項8】

Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ^４が、水素原子である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項9】

Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、水素原子である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項10】

ＬおよびＹが、単結合であり、Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ^４が、水素原子であり、且つＲ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項11】

有機基で保護された有機化合物が、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項12】

有機基で保護された有機化合物が、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が、有機基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項13】

溶媒が、極性溶媒を含む溶媒である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項14】

極性溶媒を含む溶媒が、極性溶媒と非極性溶媒の混合溶媒である、請求項１３に記載の沈殿促進剤。

【請求項15】

極性溶媒が、アセトニトリルである、請求項１３または１４に記載の沈殿促進剤。

【請求項16】

有機基で保護された有機化合物に対して、０．１モル当量以上使用して、有機基で保護された有機化合物を沈殿させる、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の沈殿促進剤。

【請求項17】

請求項１〜１６のいずれか一項に記載の沈殿促進剤、および
式（ＩＩＩ）：

【化6】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【化7】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）：

【化8】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
ｋは、３〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【化9】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］で表される基で保護され、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチド若しくはオリゴヌクレオチド、またはさらにペプチド合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、アミノ酸若しくはペプチド、
を含む、沈殿混合物。

【請求項18】

請求項１〜１６のいずれか一項に記載の沈殿促進剤を用いて、溶媒から、
式（ＩＩＩ）：

【化10】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【化11】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）：

【化12】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
ｋは、３〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【化13】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］で表される基で保護され、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチド若しくはオリゴヌクレオチド、またはさらにペプチド合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、アミノ酸若しくはペプチド
を沈殿させる方法。

【請求項19】

溶媒が、極性溶媒を含む溶媒である、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

極性溶媒が、アセトニトリルである、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

非極性溶媒中、少なくとも１個の基が、式（ＩＩＩ）：

【化14】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【化15】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）：

【化16】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
ｋは、３〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【化17】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］で表される基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいオリゴヌクレオチド、および請求項１〜１６のいずれか一項に記載の沈殿促進剤を含む反応液に、極性溶媒を添加し、反応液からオリゴヌクレオチドと沈殿促進剤を含む沈殿混合物を分離する工程を含むオリゴヌクレオチドの製造方法。

【請求項22】

極性溶媒が、アセトニトリルである、請求項２１に記載の製造方法。

【請求項23】

ホスホロアミダイト法により行われる請求項２１または２２に記載の製造方法。

【請求項24】

下記工程（１）〜（３）からなる製造サイクルを１回行うか、或いは複数回繰り返すホスホロアミダイト法によるオリゴヌクレオチドの製造方法であって、１サイクル目に下記工程（４）を含み、各サイクルに下記工程（５）を含み、且つ最終サイクルを除く各サイクルに下記工程（６）を含むオリゴヌクレオチドの製造方法：
（１）非極性溶媒中、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が、式（ＩＩＩ）：

【化18】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【化19】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）：

【化20】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
ｋは、３〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【化21】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］で表される基で保護され、５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドを含む反応液に、酸を加えて５’位水酸基の一時保護基を脱保護し、塩基により中和し、５’位水酸基遊離体を含む反応液を得る工程；
（２）非極性溶媒中、５’位水酸基遊離体を含む反応液に、３’位水酸基がホスホロアミダイト化され、且つ５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドを添加してホスファイトトリエステル体を含む反応液を得る工程；
（３）非極性溶媒中、ホスファイトトリエステル体を含む反応液に、酸化剤または硫化剤を添加して、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が式（ＩＩＩ）で表される基で保護され、且つ５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいオリゴヌクレオチドを含む反応液を得る工程；
（４）工程（１）の前、工程（１）と（２）の間、工程（２）と（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、反応液に請求項１〜１６のいずれか一項に記載の沈殿促進剤を加える工程；
（５）工程（４）の後であって、工程（１）と（２）の間、工程（２）と（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、沈殿促進剤を含む反応液に極性溶媒を添加し、反応液から、５’位水酸基遊離体、ホスファイトトリエステル体またはオリゴヌクレオチドと、沈殿促進剤とを含む沈殿混合物を分離する工程；
（６）工程（５）で得られた沈殿混合物に非極性溶媒を加えて反応液とする工程。

【請求項25】

極性溶媒が、アセトニトリルである、請求項２４に記載の製造方法。

【請求項26】

工程（５）および（６）を、工程（３）の後に実行する、請求項２４または２５に記載の製造方法。

【請求項27】

さらに、下記工程（７）を含む、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の製造方法：
（７）オリゴヌクレオチドの保護基を全て除去し、オリゴヌクレオチドを単離する工程。

【請求項28】

非極性溶媒が、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、エステル系溶媒、脂肪族系溶媒、およびこれらの組合せからなる群より選択される溶媒である、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、溶液中の有機化合物（例えばオリゴヌクレオチド、ペプチド等）を沈殿させる際に有用な沈殿促進剤、およびそれを用いる沈殿化方法に関する。

【背景技術】

【0002】

オリゴヌクレオチドの合成方法には、リン酸トリエステル法、Ｈ−ホスホネート法、ホスホロアミダイト法などがあり、現在ではホスホロアミダイト法を用いた固相合成（固相法）が最も汎用されている。またペプチドの合成方法としても、固相合成が汎用されている。固相法はプロセス最適化がなされ自動化も進んでおり、スピード面で有利であるが、設備制約上スケールアップに制限があり、試薬・原料を過剰に使用し、途中段階での反応の進行状況の確認、中間体構造解析等も困難という欠点がある。一方、液相法によるオリゴヌクレオチドおよびペプチドの合成方法も検討されてきたが、操作が煩雑であり収率も低いため、多重合度のオリゴヌクレオチドおよびペプチドを大量且つ迅速に合成することは困難であった。

【0003】

近年、固相法と液相法のそれぞれの欠点を解消しようとする試みとして、液相法において、長鎖の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基（擬似固相保護基）で保護されたヌクレオシドを用いた、オリゴヌクレオチドの合成方法（特許文献１および２）、および擬似固相保護基を有するペプチドを用いた、ペプチドの合成方法（特許文献３、4および５）が報告されている。これらの合成方法では、例えば、非極性溶媒中に溶解した疎水性の擬似固相保護基を有するオリゴヌクレオチドまたはペプチドに、極性溶媒を添加し、該非極性溶媒と極性溶媒の混合溶媒中からこれら化合物を沈殿（固液分離）させることによって、目的物を回収している。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0004】

【特許文献1】国際公開第２０１２／１５７７２３号

【特許文献2】国際公開第２０１４／１８９１４２号

【特許文献3】国際公開第２０１０／１０４１６９号

【特許文献4】国際公開第２０１０／１１３９３９号

【特許文献5】国際公開第２０１１／０７８２９５号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

このような擬似固相保護基を使用したオリゴヌクレオチド、ペプチド等の有機化合物の液相合成において、溶媒中からこれら化合物をさらに効率的に沈殿させ、該化合物の回収率を向上させることが望まれていた。

【0006】

本発明は上記のような事情に着目してなされたものであって、その目的は、擬似固相保護基を有する有機化合物を溶媒から沈殿させる際に、該有機化合物の回収率を向上させることである。

【課題を解決するための手段】

【0007】

上記目的を達成するために本発明者らが鋭意検討を重ねた結果、特定の沈殿促進剤を用いれば、疎水性基または擬似固相保護基を有する有機化合物の沈殿を促進させることができ、その回収率を向上させ得ることを見出した。この知見に基づく本発明は、以下の通りである。

【0008】

［１］ 炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護された有機化合物を、溶媒から沈殿させるための沈殿促進剤であって、前記沈殿促進剤が、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基を１個以上有し、且つ前記沈殿促進剤が有する前記脂肪族炭化水素基の炭素数合計が２０以上である有機化合物である、沈殿促進剤。
［２］ 沈殿促進剤が有する炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基である、前記［１］に記載の沈殿促進剤。
［３］ 有機基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が、直鎖状である、前記［１］または［２］に記載の沈殿促進剤。
［４］ 有機基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基である、前記［１］または［２］に記載の沈殿促進剤。
［５］ （１）式（Ｇ）：

【0009】

【化1】

【0010】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^１は、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
ｎは、１〜４の整数を示す。］
で表される構造を１個以上有する有機化合物、または
（２）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される基を介して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を１個以上有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_１−１０アルカン
である、前記［１］〜［４］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［６］ （１）式（Ｉ）：

【0011】

【化2】

【0012】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^１および環Ｂ^１は、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
Ｘ^２は、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｘ^３は、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｒ^２は、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい単環式複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基を示し；
ｎおよびｍは、それぞれ独立して、１〜４の整数を示し；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１を示し、ｍが２、３または４の場合、１を示す。］で表される化合物、または
（２）−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される基を介して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を１個以上有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_１−１０アルカン
である、前記［１］〜［４］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［７］ Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基または置換されていてもよい単環式複素環基である、前記［６］に記載の沈殿促進剤。
［８］ 式（ＩＩ）：

【0013】

【化3】

【0014】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^２および環Ｂ^１は、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
Ｘ^２は、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｘ^３は、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｒ^２は、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい単環式複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基を示し；
ｍは、１〜４の整数を示し；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１を示し、ｍが２、３または４の場合、１を示す。］で表される化合物である、前記［１］〜［４］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［９］ Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基または置換されていてもよい単環式複素環である、前記［８］に記載の沈殿促進剤。
［１０］ Ｃ_３−１４炭化水素環が、ベンゼン環およびシクロヘキサン環から選ばれる、前記［５］〜［９］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［１１］ 有機基が、式（ＩＩＩ）：

【0015】

【化4】

【0016】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【0017】

【化5】

【0018】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）：

【0019】

【化6】

【0020】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
ｋは、１〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【0021】

【化7】

【0022】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］で表される基を示す、前記［１］〜［１０］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［１２］ Ｚが、式（ａ２）または式（ａ２’）で表される基であり、縮合環が、フルオレン環またはキサンテン環であり、ｋ個のＲ^５が、それぞれ独立して、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基であり、ｊ個のＲ^７が、それぞれ独立して、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基であり、且つＲ_ａが、水素原子であるか、またはＲ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する前記［１１］に記載の沈殿促進剤。
［１３］ Ｌが、式（ａ１）で表される基であって、Ｌ_１が、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し、且つＬ_２が、単結合を示す、前記［１１］または［１２］に記載の沈殿促進剤。
［１４］ Ｌが、式（ａ１’）で表される基であって、Ｌ_１が、フェニレン基を示し、且つＬ_２が、単結合を示す、前記［１１］または［１２］に記載の沈殿促進剤。
［１５］ Ｙが、酸素原子である、前記［１１］〜［１４］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［１６］ Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ^４が、水素原子である、前記［１１］〜［１５］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［１７］ Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、水素原子である、前記［１１］〜［１６］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［１８］ ＬおよびＹが、単結合であり、Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ^４が、水素原子であり、且つＲ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する、前記［１１］または［１２］に記載の沈殿促進剤。
［１９］ 有機基で保護された有機化合物が、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチド若しくはオリゴヌクレオチド、またはさらにペプチド合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、アミノ酸若しくはペプチドである、前記［１］〜［１８］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［２０］ 有機基で保護された有機化合物が、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドである、前記［１］〜［１８］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［２１］ 有機基で保護された有機化合物が、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が、有機基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである、前記［１］〜［１８］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［２２］ 溶媒が、極性溶媒を含む溶媒である、前記［１］〜［２１］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［２３］ 極性溶媒を含む溶媒が、極性溶媒と非極性溶媒の混合溶媒である、前記［２２］に記載の沈殿促進剤。
［２４］ 極性溶媒が、アセトニトリルである、前記［２２］または［２３］に記載の沈殿促進剤。
［２５］ 有機基で保護された有機化合物に対して、０．１モル当量以上使用して、有機基で保護された有機化合物を沈殿させる、前記［１］〜［２４］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤。
［２６］ 前記［１］〜［２５］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤、および炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護された有機化合物を含む、沈殿混合物。
［２７］ 有機基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が、直鎖状である、前記［２６］に記載の沈殿混合物。
［２８］ 前記［１］〜［２５］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤を用いて、溶媒から、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護された有機化合物を沈殿させる方法。
［２９］ 溶媒が、極性溶媒を含む溶媒である、前記［２８］に記載の方法。
［３０］ 極性溶媒が、アセトニトリルである、前記［２９］に記載の方法。
［３１］ 有機基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が、直鎖状である、前記［２８］〜［３０］のいずれか一つに記載の方法。
［３２］ 非極性溶媒中、少なくとも１個の基が炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいオリゴヌクレオチド、および前記［１］〜［２５］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤を含む反応液に、極性溶媒を添加し、反応液からオリゴヌクレオチドと沈殿促進剤を含む沈殿混合物を分離する工程を含むオリゴヌクレオチドの製造方法。
［３３］ 極性溶媒が、アセトニトリルである、前記［３２］に記載の製造方法。
［３４］ 有機基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が、直鎖状である、前記［３２］または［３３］に記載の製造方法。
［３５］ ホスホロアミダイト法により行われる前記［３２］〜［３４］のいずれか一つに記載の製造方法。
［３６］ 下記工程（１）〜（３）からなる製造サイクルを１回行うか、或いは複数回繰り返すホスホロアミダイト法によるオリゴヌクレオチドの製造方法であって、１サイクル目に下記工程（４）を含み、各サイクルに下記工程（５）を含み、且つ最終サイクルを除く各サイクルに下記工程（６）を含むオリゴヌクレオチドの製造方法：
（１）非極性溶媒中、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護され、５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドを含む反応液に、酸を加えて５’位水酸基の一時保護基を脱保護し、塩基により中和し、５’位水酸基遊離体を含む反応液を得る工程；
（２）非極性溶媒中、５’位水酸基遊離体を含む反応液に、３’位水酸基がホスホロアミダイト化され、且つ５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドを添加してホスファイトトリエステル体を含む反応液を得る工程；
（３）非極性溶媒中、ホスファイトトリエステル体を含む反応液に、酸化剤または硫化剤を添加して、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護され、且つ５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいオリゴヌクレオチドを含む反応液を得る工程；
（４）工程（１）の前、工程（１）と（２）の間、工程（２）と（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、反応液に前記［１］〜［２５］のいずれか一つに記載の沈殿促進剤を加える工程；
（５）工程（４）の後であって、工程（１）と（２）の間、工程（２）と（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、沈殿促進剤を含む反応液に極性溶媒を添加し、反応液から、５’位水酸基遊離体、ホスファイトトリエステル体またはオリゴヌクレオチドと、沈殿促進剤とを含む沈殿混合物を分離する工程；
（６）工程（５）で得られた沈殿混合物に非極性溶媒を加えて反応液とする工程。
［３７］ 極性溶媒が、アセトニトリルである、前記［３６］に記載の製造方法。
［３８］ 有機基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が、直鎖状である、前記［３６］または［３７］に記載の製造方法。
［３９］ 工程（５）および（６）を、工程（３）の後に実行する、前記［３６］〜［３８］のいずれか一つに記載の製造方法。
［４０］ さらに、下記工程（７）を含む、前記［３６］〜［３９］のいずれか一つに記載の製造方法：
（７）オリゴヌクレオチドの保護基を全て除去し、オリゴヌクレオチドを単離する工程。
［４１］ 非極性溶媒が、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、エステル系溶媒、脂肪族系溶媒、およびこれらの組合せからなる群より選択される溶媒である、前記［３６］〜［４０］のいずれか一つに記載の製造方法。

【発明の効果】

【0023】

本発明の沈殿促進剤を用いれば、疎水性基である擬似固相保護基を有する有機化合物の溶媒からの沈殿を促進させることができ、その回収率を向上させることができる。

【発明を実施するための形態】

【0024】

［用語］
文中で特に断らない限り、本明細書で用いるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味をもつ。本明細書に記載されたものと同様または同等の任意の方法および材料は、本発明の実施または試験において使用することができるが、好ましい方法および材料を以下に記載する。本明細書で言及したすべての刊行物および特許は、例えば、記載された発明に関連して使用されうる刊行物に記載されている、構築物および方法論を記載および開示する目的で、参照として本明細書に組み入れられる。

【0025】

本明細書において、オリゴヌクレオチドの構成単位となる「ヌクレオシド」とは、核酸塩基が糖（例えば、２−デオキシリボース、リボース、リボース環またはデオキシリボース環の２位炭素原子および４位炭素原子が２価の有機基により結合されたリボースまたはデオキシリボースなど）の１’位にＮ−グリコシド化により結合された化合物を意味する。リボース環またはデオキシリボース環の２位炭素原子および４位炭素原子が２価の有機基により結合されたリボースまたはデオキシリボースとしては、例えば、以下の化合物が挙げられる。

【0026】

【化8】

【0027】

本明細書中、「ヌクレオチド」とは、ヌクレオシドにリン酸基が結合した化合物を意味する。
本明細書中、「オリゴヌクレオチド」とは、ヌクレオシドにヌクレオチドが１個以上連結した化合物を意味する。本発明におけるオリゴヌクレオチドのヌクレオシドの数は特に限定されないが、好ましくは３〜５０、より好ましくは５〜３０である。

【0028】

本明細書中、「ヌクレオシド」および「ヌクレオチド」には、それぞれ、リボース残基またはデオキリボース残基の代わりにモルフォリン残基を有するモルフォリノヌクレオシドおよびモルフォリノヌクレオシドが包含される。
本明細書中、「モルフォリノヌクレオシド」とは、下記式（１）で表される化合物である。本明細書では、式（１）で表されるモルフォリノヌクレオシドをモルフォリノヌクレオシド（１）と称する。他の式で表される化合物も同様に称することがある。

【0029】

【化9】

【0030】

（式中、Ｂａｓｅは、保護されていてもよい核酸塩基を示す）
モルフォリノヌクレオシド（１）は、自体公知の方法（例えば、ＷＯ９１／０９０３３Ａ１に記載の方法）、またはそれに準ずる方法に従い調製することができる。具体的には、下記スキームに示すように、対応するリボヌクレオシド（２）を過ヨウ素酸ナトリウム等で酸化開環して対応する２’，３’−ジアルデヒド（３）とし、ジアルデヒド（３）をアンモニアで閉環して２’，３’−ジヒドロキシモルフォリノヌクレオシド（４）とし、ジヒドロキシモルフォリノヌクレオシド（４）を還元剤（例、水素化シアノホウ素ナトリウム、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムなど）で還元することにより、モルフォリノヌクレオシド（１）を得ることができる。

【0031】

【化10】

【0032】

本明細書中、モルフォリノヌクレオシドの位置番号（１’、２’など）は、原料であるリボヌクレオシド（２）のリボースの炭素原子の位置番号に対応したものを使用するものとする。また、本明細書中、核酸化学の慣例に倣い、モルフォリノオリゴヌクレオチドの５’位の遊離水酸基を有する側の末端のモルフォリノヌクレオシドを「５’−末端」、反対側の末端のモルフォリノヌクレオシドを「３’−末端」と称する。

【0033】

本明細書中、「核酸塩基」とは、核酸の合成に使用されるものであれば特に制限されず、例えば、シトシル基、ウラシル基、チミニル基等のピリミジン塩基、アデニル基、グアニル基等のプリン塩基を挙げることができる。また、「保護されていてもよい核酸塩基」とは、例えば、アミノ基を有する核酸塩基であるアデニル基、グアニル基、またはシトシル基において、アミノ基が保護されていてもよいことを意味し、核酸塩基のアミノ基が、ヌクレオチドの５’位の脱保護条件またはモルフォリノヌクレオチドのモルフォリン環窒素原子の脱保護条件に耐え得る保護基により保護されている核酸塩基が好ましい。かかる「アミノ基の保護基」としては、特に限定されず、例えば、グリーンズ・プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ ＧＲＯＵＰＳ ｉｎ ＯＲＧＡＮＩＣ ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ）、第４版、ウィリー・インターサイエンス（Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）出版（２００６年）等に記載されている保護基を挙げることができる。かかる「アミノ基の保護基」の具体例としては、例えば、ピバロイル基、ピバロイロキシメチル基、トリフルオロアセチル基、フェノキシアセチル基、４−イソプロピルフェノキシアセチル基、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェノキシアセチル基、アセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基、ジメチルホルムアミジニル基、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基等を挙げることができる。これらの中でも、フェノキシアセチル基、４−イソプロピルフェノキシアセチル基、アセチル基、ベンゾイル基、イソブチリル基およびジメチルホルムアミジニル基が好ましい。また、核酸塩基のカルボニル基が保護されていてもよく、例えば、フェノール、２，５−ジクロロフェノール、３−クロロフェノール、３，５−ジクロロフェノール、２−ホルミルフェノール、２−ナフトール、４−メトキシフェノール、４−クロロフェノール、２−ニトロフェノール、４−ニトロフェノール、４−アセチルアミノフェノール、ペンタフルオロフェノール、４−ピバロイロキシベンジルアルコール、４−ニトロフェネチルアルコール、２−（メチルスルフォニル）エタノール、２−（フェニルスルフォニル）エタノール、２−シアノエタノール、２−（トリメチルシリル）エタノール、ジメチルカルバミン酸クロライド、ジエチルカルバミン酸クロライド、エチルフェニルカルバミン酸クロライド、１−ピロリジンカルボン酸クロライド、４−モルフォリンカルボン酸クロライド、ジフェニルカルバミン酸クロライド等を反応させて、カルボニル基を保護することが出来る。ここで、カルボニル基の保護基については、特に導入しなくてもよい場合がある。また、該「核酸塩基」には、上記した基の他に、核酸塩基が任意の置換基（例えば、ハロゲン原子、アルキル基、アラルキル基、アルコキシ基、アシル基、アルコキシアルキル基、ヒドロキシ基、アミノ基、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、シアノ、ニトロ等）により任意の位置に１〜３個置換されている修飾核酸塩基（例えば、８−ブロモアデニル基、８−ブロモグアニル基、５−ブロモシトシル基、５−ヨードシトシル基、５−ブロモウラシル基、５−ヨードウラシル基、５−フルオロウラシル基、５−メチルシトシル基、８−オキソグアニル基、ヒポキサンチニル基等）も包含される。

【0034】

本明細書中、「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、またはヨウ素原子である。

【0035】

本明細書中、「アルキル（基）」としては、直鎖状または分岐鎖状の炭素数１以上のアルキル基が挙げられ、特に炭素数範囲の限定がない場合には、好ましくはＣ_１−１０アルキル基であり、より好ましくはＣ_１−６アルキル基である。炭素数範囲の限定がない場合の好適な具体例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル等が挙げられ、特にメチル、エチルが好ましい。
本明細書中、「Ｃ_ａ−ｂ」とは、炭素数がａ以上ｂ以下（ａ、ｂは整数を示す）を意味する。

【0036】

本明細書中、「アラルキル（基）」としては、Ｃ_７−２０アラルキル基が挙げられ、好ましくはＣ_７−１６アラルキル基（Ｃ_６−１０アリール−Ｃ_１−６アルキル基）である。好適な具体例としては、ベンジル、１−フェニルエチル、２−フェニルエチル、１−フェニルプロピル、ナフチルメチル、１−ナフチルエチル、１−ナフチルプロピル等が挙げられ、特にベンジルが好ましい。

【0037】

本明細書中、「アルコキシ（基）」としては、炭素数１以上のアルコキシ基が挙げられ、特に炭素数範囲の限定がない場合には、好ましくはＣ_１−１０アルコキシ基であり、より好ましくはＣ_１−６アルコキシ基である。炭素数範囲の限定がない場合の好適な具体例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ等が挙げられ、特にメトキシ、エトキシが好ましい。

【0038】

本明細書中、「アシル（基）」としては、例えば、直鎖状または分岐鎖状のＣ_１−６アルカノイル基、Ｃ_７−１３アロイル基等が挙げられる。具体的には、例えば、ホルミル、アセチル、ｎ−プロピオニル、イソプロピオニル、ｎ−ブチリル、イソブチリル、ピバロイル、バレリル、ヘキサノイル、ベンゾイル、ナフトイル、レブリニル等が挙げられ、これらはそれぞれ置換されていてもよい。

【0039】

本明細書中、「アルケニル（基）」としては、直鎖状または分岐鎖状のＣ_２−６アルケニル基等が好ましく、例えば、ビニル、１−プロペニル、アリル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル等が挙げられる。中でも、Ｃ_２−４アルケニル基が好ましい。

【0040】

本明細書中、「アルキニル（基）」としては、Ｃ_２−６アルキニル基等が好ましく、例えば、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、５−ヘキシニル等が挙げられる。中でも、Ｃ_２−４アルキニル基が好ましい。

【0041】

本明細書中、「シクロアルキル（基）」は、環状アルキル基を意味し、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル等が挙げられる。中でも、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等のＣ_３−６シクロアルキル基が好ましく、シクロヘキシルが特に好ましい。

【0042】

本明細書中、「アリール（基）」は、芳香族性を示す単環式あるいは多環式（縮合）の炭化水素基を意味し、具体的には、例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニリル、２−アンスリル等のＣ_６−１４アリール基等が挙げられる。中でもＣ_６−１０アリール基がより好ましく、フェニルが特に好ましい。

【0043】

本明細書中、「炭化水素基」としては、例えば、脂肪族炭化水素基、芳香脂肪族炭化水素基、単環式飽和炭化水素基および芳香族炭化水素基等が挙げられ、具体的には、例えば、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、アラルキル基等の１価基およびそれらから誘導される２価基である。

【0044】

本明細書中、「トリアルキルシリル（基）」中の三つのアルキル基は、互いに同一でもよく、異なっていてもよい。また該アルキル基は、それぞれ独立に、直鎖状または分枝鎖状のいずれでもよい。「トリアルキルシリル（基）」としては、トリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基が好ましく、例えば、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基が挙げられる。

【0045】

本明細書中、「アルキレン（基）」は、直鎖状または分岐鎖状のいずれでもよい。「アルキレン（基）」としては、炭素数１以上のアルキレン基が挙げられ、特に炭素数範囲の限定がない場合には、好ましくはＣ_１−１０アルキレン基であり、より好ましくはＣ_１−６アルキレン基である。好適な具体例としては、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、ヘキシレンが挙げられ、特にメチレン、エチレンが好ましい。

【0046】

本明細書中、「リンカー」としては、例えば、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−Ｓｉ（Ｒ）（Ｒ’）Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ）（Ｒ’）−（Ｒ、Ｒ’は、それぞれ独立して、水素原子またはＣ_１−２２炭化水素基を示す。）等が挙げられる。

【0047】

本明細書中、「置換されていてもよい」における「置換基」には、前記のハロゲン原子、アルキル基、アラルキル基、アルコキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基の他、ヒドロキシ基、ニトロ基、シアノ基、グアニジル基、カルボキシ基、アルコキシカルボニル基（アルコキシ部は前記アルコキシ基と同様）、スルホ基、ホスホ基、アルキルチオ基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、アルキルスルフィニル基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、アルキルスルフォニル基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、アミノ基、モノアルキルアミノ基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、ジアルキルアミノ基（アルキル部は前記アルキル基と同様）、オキソ基、アシルアミノ基（アシル部は前記アルキル基と同様）などが包含される。

【0048】

本明細書中、「Ｃ_３−１４炭化水素環」（「置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環」における「Ｃ_３−１４炭化水素環」を含む）としては、例えば、Ｃ_３−１０シクロアルカン、Ｃ_３−１０シクロアルケン、Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環が挙げられる。
該「Ｃ_３−１０シクロアルカン」としては、例えば、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタンが挙げられる。
該「Ｃ_３−１０シクロアルケン」としては、例えば、シクロプロペン、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘプテン、シクロオクテンが挙げられる。
該「Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環」としては、例えば、ベンゼン、ナフタレンが挙げられる。

【0049】

本明細書中、「単環式複素環基」（「置換されていてもよい単環式複素環基」における「単環式複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１〜４個のヘテロ原子をそれぞれ含有する、単環式芳香族複素環基および単環式非芳香族複素環基が挙げられる。
該「単環式芳香族複素環基」としては、例えば、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニルなどの５〜６員単環式芳香族複素環基が挙げられる。
該「単環式非芳香族複素環基」としては、例えば、アジリジニル、オキシラニル、チイラニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロフラニル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロイソチアゾリル、テトラヒドロオキサゾリル、テトラヒドロイソオキサゾリル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピリジニル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロピリダジニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、モルホリニル（例、モルホリン−４−イル）、チオモルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、アゼピニル、オキセパニル、アゾカニル、ジアゾカニルなどの３〜８員単環式非芳香族複素環基が挙げられる。

【0050】

［沈殿促進剤］
本発明の沈殿促進剤は、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基（以下「本発明の擬似固相保護基」と称することがある）で保護された有機化合物を、溶媒から沈殿させるために用いられる、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基を１個以上有し、前記脂肪族炭化水素基の炭素数合計が２０以上である有機化合物である。本発明の沈殿促進剤は１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。

【0051】

前記溶媒は、好ましくは極性溶媒を含む溶媒であり、より好ましくは極性溶媒と非極性溶媒の混合溶媒である。前記極性溶媒は、好ましくはアセトニトリルである。

【0052】

本発明の沈殿促進剤が有する炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基の炭素数合計は、２０以上であることが必要であり、好ましくは２２以上である。この炭素数合計が２０未満であると、液相中の擬似固相保護基で保護された有機化合物を充分に沈殿させることができず、該有機化合物の回収率が低下する。この上限に特に限定はないが、この炭素数合計は、好ましくは２２０以下、より好ましくは１００以下、さらに好ましくは７０以下である。

【0053】

本発明の沈殿促進剤が有する炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基は、好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基であり、より好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基であり、さらに好ましくは直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり、特に好ましくは直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり、最も好ましくは直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基である。本発明の沈殿促進剤が有する炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基の数は、好ましくは１〜１２、より好ましくは１〜９である。

【0054】

本発明の沈殿促進剤の一態様としては、下記式（Ｇ）で表される構造を１個以上有する有機化合物が挙げられる。

【0055】

【化11】

【0056】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^１は、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
ｎは、１〜４の整数を示す。］

【0057】

式（Ｇ）におけるＸ^１の結合方向は、上記化学式の方向に対応する。例えば、Ｘ^１が−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−である場合、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−の左側でＲ^１と結合し、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−の右側で環Ａ^１と結合する。

【0058】

式（Ｇ）においてＲ^１が複数存在する場合、それらは互いに同じでもよく、異なっていてもよい。Ｘ^１も同様である。

【0059】

本発明の沈殿促進剤の好ましい一態様としては、下記式（Ｉ）で表される化合物が挙げられる。なお、「式（Ｉ）で表される化合物」を「化合物（Ｉ）」と略称することがある。他の式で表される化合物も同様に略称することがある。

【0060】

【化12】

【0061】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^１および環Ｂ^１は、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
Ｘ^２は、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｘ^３は、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｒ^２は、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい単環式複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基または置換されていてもよい単環式複素環基）を示し；
ｎおよびｍは、それぞれ独立して、１〜４の整数を示し；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１を示し、ｍが２、３または４の場合、１を示す。］

【0062】

式（Ｉ）におけるＸ^１、Ｘ^２およびＸ^３の結合方向は、それぞれ、上記化学式の方向に対応する。例えば、Ｘ^３が−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−である場合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−の左側で環Ｂ^１と結合し、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−の右側でＲ^２と結合する。

【0063】

式（Ｉ）においてＲ^１が複数存在する場合、それらは互いに同じでもよく、異なっていてもよい。Ｘ^１、環Ａ^１、およびＸ^２も同様である。

【0064】

本発明の沈殿促進剤のより好ましい一態様としては、下記式（ＩＩ）で表される化合物が挙げられる。

【0065】

【化13】

【0066】

［式中、
Ｒ^１は、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を示し；
Ｘ^１は、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
環Ａ^２および環Ｂ^１は、それぞれ独立して、置換されていてもよいＣ_３−１４炭化水素環を示し；
Ｘ^２は、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｘ^３は、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）を示し；
Ｒ^２は、水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい単環式複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基または置換されていてもよい単環式複素環基）を示し；
ｍは、１〜４の整数を示し；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１を示し、ｍが２、３または４の場合、１を示す。］

【0067】

式（ＩＩ）におけるＸ^１、Ｘ^２およびＸ^３の結合方向は、それぞれ、上記化学式の方向に対応する。例えば、Ｘ^３が−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−である場合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−の左側で環Ｂ^１と結合し、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−の右側でＲ^２と結合する。

【0068】

式（ＩＩ）において複数存在するＲ^１は、互いに同じでもよく、異なっていてもよい。Ｘ^１も同様である。また、式（ＩＩ）において環Ａ^２が複数存在する場合、それらは互いに同じでもよく、異なっていてもよい。Ｘ^２も同様である。

【0069】

Ｒ^１が複数存在する場合、それらは互いに同じものでもよく、異なっていてもよい。Ｒ^１は、それぞれ独立して、好ましくは直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり、より好ましくは直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり、さらに好ましくは直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基である。

【0070】

本発明の一態様において、Ｒ^２は、好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ_３−８シクロアルキル基、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基または置換されていてもよい単環式複素環基であり、より好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基または置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基であり、さらに好ましくは水素原子または置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基であり、特に好ましくは水素原子またはＣ_１−６アルキル基である。

【0071】

本発明の別の態様において、Ｒ^２は、好ましくは水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基または置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい３〜８員単環式非芳香族複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基であり、より好ましくは水素原子または置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基であり、さらに好ましくは水素原子、Ｃ_１−６アルカノイルアミノ基（例、アセチルアミノ基）で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基（例、モルホリン−４−イル基）またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（例、トリイソプロピルシリル基）である。

【0072】

Ｘ^１は、それぞれ独立して、好ましくは単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり、より好ましくは−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−、さらに好ましくは−Ｏ−である。

【0073】

Ｘ^２は、それぞれ独立して、好ましくは−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり、より好ましくは−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり、さらに好ましくは単結合、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）である。

【0074】

Ｘ^３は、好ましくは単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり、より好ましくは単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり、さらに好ましくは単結合、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−である。

【0075】

ｎは、好ましくは１〜３の整数である。
ｍは、好ましくは１〜３の整数であり、より好ましくは１または３である。

【0076】

Ｃ_３−１４炭化水素環は、好ましくはベンゼン環およびシクロヘキサン環から選ばれ、より好ましくはベンゼン環である。

【0077】

好ましい化合物（Ｉ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり；
Ｘ^１が、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい３〜８員単環式非芳香族複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基であり；
ｎが、１〜３の整数であり；
ｍが、１〜３の整数であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが２または３の場合、１である
化合物が挙げられる。この態様において、Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基または置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基であることが一層好ましい。

【0078】

より好ましい化合物（Ｉ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり；
Ｘ^１が、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基であり；
ｎが、１〜３の整数であり；
ｍは、１〜３の整数であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが２または３の場合、１である
化合物が挙げられる。この態様において、Ｒ^２が、水素原子または置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基であることが一層好ましい。

【0079】

より一層好ましい化合物（Ｉ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり；
Ｘ^１が、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｒ^２が、水素原子、Ｃ_１−６アルカノイルアミノ基（例、アセチルアミノ基）で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基（例、モルホリン−４−イル基）またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（例、トリイソプロピルシリル基）であり；
ｎが、１〜３の整数であり；
ｍは、１〜３の整数であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが２または３の場合、１である
化合物が挙げられる。

【0080】

さらに好ましい化合物（Ｉ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基であり；
Ｘ^１が、−Ｏ−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、単結合、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^２が、水素原子、Ｃ_１−６アルカノイルアミノ基（例、アセチルアミノ基）で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基（例、モルホリン−４−イル基）またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（例、トリイソプロピルシリル基）であり；
ｎが、１〜３の整数であり；
ｍが、１または３であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが３の場合、１である
化合物が挙げられる。

【0081】

上述のさらに好ましい化合物（Ｉ）において、Ｒ^２が、水素原子またはＣ_１−６アルキル基であることが一層好ましい。

【0082】

上述のさらに好ましい化合物（Ｉ）において、ｍが１であり、且つｍ’が０である場合、Ｘ^２が、それぞれ独立して、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｒ^２が、Ｃ_１−６アルキル基であることがさらに一層好ましい。

【0083】

上述のさらに好ましい化合物（Ｉ）において、ｍが１または３であり、且つｍ’が１である場合、Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−Ｃ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｘ^３が、単結合または−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−であり、Ｒ^２が、水素原子またはＣ_１−６アルキル基であることがさらに一層好ましい。

【0084】

特に好ましい化合物（Ｉ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基であり；
Ｘ^１が、−Ｏ−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、ベンゼン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、単結合、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^２が、水素原子またはＣ_１−６アルキル基であり；
ｎが、１〜３の整数であり；
ｍが、１または３であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが３の場合、１である
化合物が挙げられる。

【0085】

上述の特に好ましい化合物（Ｉ）において、ｍが１であり、且つｍ’が０である場合、Ｘ^２が、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｒ^２が、Ｃ_１−６アルキル基であることが一層好ましい。

【0086】

上述の特に好ましい化合物（Ｉ）において、ｍが１または３であり、且つｍ’が１である場合、Ｘ^２が、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−Ｃ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｘ^３が、単結合または−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−であることが一層好ましい。

【0087】

好ましい化合物（ＩＩ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり；
Ｘ^１が、それぞれ独立して、単結合、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｏ−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基、置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基、置換されていてもよい３〜８員単環式非芳香族複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基であり；
ｍが、１〜３の整数であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが２または３の場合、１である
化合物が挙げられる。この態様において、Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルケニル基、置換されていてもよいＣ_２−６アルキニル基または置換されていてもよいＣ_６−１４アリール基であることが一層好ましい。

【0088】

より好ましい化合物（ＩＩ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり；
Ｘ^１が、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｒ^２が、水素原子、置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基であり；
ｍが、１〜３の整数であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが２または３の場合、１である
化合物が挙げられる。この態様において、Ｒ^２が、水素原子または置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基であることが一層好ましい。

【0089】

より一層好ましい化合物（ＩＩ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり；
Ｘ^１が、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、それぞれ独立して、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ_２）_ｑ−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）−、−（ＣＨ_２）_ｒ−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−（ＣＨ_２）_ｒ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｒは、０〜３の整数を示す。）であり；
Ｒ^２が、水素原子、Ｃ_１−６アルカノイルアミノ基（例、アセチルアミノ基）で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基（例、モルホリン−４−イル基）またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（例、トリイソプロピルシリル基）であり；
ｍは、１〜３の整数であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが２または３の場合、１である
化合物が挙げられる。

【0090】

さらに好ましい化合物（ＩＩ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基であり；
Ｘ^１が、−Ｏ−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、ベンゼン環またはシクロヘキサン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、単結合、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^２が、水素原子、Ｃ_１−６アルカノイルアミノ基（例、アセチルアミノ基）で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基または３〜８員単環式非芳香族複素環基（例、モルホリン−４−イル基）またはトリ（Ｃ_１−６アルキル）シリル基（例、トリイソプロピルシリル基）であり；
ｍが、１または３であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが３の場合、１である
化合物が挙げられる。

【0091】

上述のさらに好ましい化合物（ＩＩ）において、Ｒ^２が、水素原子またはＣ_１−６アルキル基であることが一層好ましい。

【0092】

上述のさらに好ましい化合物（ＩＩ）において、ｍが１であり、且つｍ’が０である場合、Ｘ^２が、それぞれ独立して、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｒ^２が、Ｃ_１−６アルキル基であることがさらに一層好ましい。

【0093】

上述のさらに好ましい化合物（ＩＩ）において、ｍが１または３であり、且つｍ’が１である場合、Ｘ^２が、それぞれ独立して、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−Ｃ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｘ^３が、単結合または−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−であり、Ｒ^２が、水素原子またはＣ_１−６アルキル基であることがさらに一層好ましい。

【0094】

特に好ましい化合物（ＩＩ）としては、
Ｒ^１が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基であり；
Ｘ^１が、−Ｏ−であり；
環Ａ^２および環Ｂ^１が、ベンゼン環であり；
Ｘ^２が、それぞれ独立して、単結合、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり；
Ｘ^３が、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＯＣ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^２が、水素原子またはＣ_１−６アルキル基であり；
ｍが、１または３であり；
ｍ’は、ｍが１の場合、０または１であり、ｍが３の場合、１である
化合物が挙げられる。

【0095】

上述の特に好ましい化合物（ＩＩ）において、ｍが１であり、且つｍ’が０である場合、Ｘ^２が、単結合、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−（ＣＨ_２）_ｐ−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｒ^２が、Ｃ_１−６アルキル基であることが一層好ましい。

【0096】

上述の特に好ましい化合物（ＩＩ）において、ｍが１または３であり、且つｍ’が１である場合、Ｘ^２が、−（ＣＨ_２）_ｐ−Ｏ−（ＣＨ_２）_ｑ−または−Ｃ（＝Ｏ）−（ｐおよびｑは、それぞれ独立して、０または１の整数を示す。）であり、Ｘ^３が、単結合または−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−であることが一層好ましい。

【0097】

上述の化合物（Ｉ）に包含される具体例としては、下記式（ＩＶ−ａ）〜（ＩＶ−ｎ）のいずれかで表される化合物が挙げられる。これら具体例の中では、化合物（ＩＶ−ａ）〜化合物（ＩＶ−ｌ）が好ましく、化合物（ＩＶ−ａ）〜化合物（ＩＶ−ｊ）がより好ましく、化合物（ＩＶ−ａ）〜化合物（ＩＶ−ｇ）がさらに好ましく、化合物（ＩＶ−ａ）〜化合物（ＩＶ−ｅ）が特に好ましく、化合物（ＩＶ−ａ）および化合物（ＩＶ−ｂ）が最も好ましい。

【0098】

【化14】

【0099】

【化15】

【0100】

【化16】

【0101】

【化17】

【0102】

【化18】

【0103】

【化19】

【0104】

本発明の沈殿促進剤の別の態様としては、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される基を介して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基を１個以上有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_１−１０アルカン（以下「アルカン化合物」と称することがある。）が挙げられる。

【0105】

Ｃ_１−１０アルカンは直鎖状でもよく、分枝鎖状でもよい。Ｃ_１−１０アルカンの炭素数は、好ましくは１〜８、より好ましくは２〜６、さらに好ましくは３〜６である。
アルカン化合物が有する直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基は、好ましくは直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基、より好ましくは直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基、さらに好ましくは直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基である。アルカン化合物が有する直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基の数は、好ましくは２〜６、より好ましくは２〜４、さらに好ましくは３または４である。
直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基とＣ_１−１０アルカンとを結合する基は、好ましくは−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−および−ＯＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される基であり、より好ましくは−Ｏ−である。

【0106】

好ましいアルカン化合物としては、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−および−ＯＣ（＝Ｏ）−からなる群から選択される基を介して、直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基を２〜６個有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_１−８アルカンが挙げられる。より好ましいアルカン化合物としては、−Ｏ−を介して、直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基を２〜４個有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_２−６アルカンが挙げられる。さらに好ましいアルカン化合物としては、−Ｏ−を介して、直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基を３または４個有し、且つさらに置換されていてもよいＣ_３−６アルカンが挙げられる。

【0107】

アルカン化合物の具体例としては、下記式（Ｖ−ａ）または（Ｖ−ｂ）で表される化合物が挙げられる。

【0108】

【化20】

【0109】

［本発明の沈殿促進剤の製造方法］
例えば、Ｘ^１が−Ｏ−であり、ｍが１であり、ｍ’が０である化合物（Ｉ）は、次式のように、ハロゲン原子（Ｘ^ａ）を有する化合物（ＩＡ−１）を用いる、化合物（ＩＡ−２）の水酸基のアルキル化によって製造することができる。アルキル化は、有機合成の分野で周知であり、当業者は、その条件を適宜設定して行うことができる。

【0110】

【化21】

【0111】

（式中、Ｘ^ａは、ハロゲン原子（好ましくは塩素原子または臭素原子）を表し、その他の記号は前記と同義である。）
また、例えば、Ｘ^２が−ＣＨ_２−Ｏ−であり、ｍ’が１である化合物（Ｉ）は、次式のように、ハロゲン原子（Ｘ^ａ）を有する化合物（ＩＡ−３）を用いる、化合物（ＩＢ）の水酸基のアルキル化によって製造することができる。

【0112】

【化22】

【0113】

（式中、各記号は前記と同義である。）
その他の本発明の沈殿促進剤も、自体公知の方法（例えば、アルキル化、エステル化、アミド化等）またはこれに準ずる方法に従って原料化合物から製造することができる。また、原料化合物は、市販品を使用してもよく、自体公知の方法またはこれに準ずる方法に従って製造した化合物を使用してもよい。

【0114】

［本発明の擬似固相保護基］
本発明の沈殿促進剤は、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基（即ち、本発明の擬似固相保護基）で保護された有機化合物を含む溶媒から、該化合物を沈殿させるために用いられる。本発明の擬似固相保護基および擬似固相保護基で保護された有機化合物の具体例としては、ヌクレオシド、ヌクレオチド等については、国際公開第２０１２／１５７７２３号、国際公開第２０１２／１５７７２３号、国際公開第２０１４／１８９１４２号、特開２０１０−１１６４１８号公報等に開示されているもの、アミノ酸、ペプチド等については国際公開第２０１０／１０４１６９号、国際公開第２０１０／１１３９３９号、国際公開第２０１１／０７８２９５号、国際公開第２０１２／０２９７９４号、特開２００９−１８５０６３号公報、特開２０１０−２７５２５４号公報等に開示されているものを挙げることができる。本発明の擬似固相保護基は、酸性条件下では除去されず、塩基性条件下で除去可能な有機基であることが好ましい。

【0115】

本発明の擬似固相保護基の一態様としては、例えば、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環を有する有機基が挙げられる。前記炭化水素基としては、上述したものが挙げられ、脂肪族炭化水素基、芳香脂肪族炭化水素基（例えば、ベンジル基）および単環式飽和炭化水素基と脂肪族炭化水素基とが結合した基（例えば、シクロへキシルメチル基）が好ましい。なお、「炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基」には、「炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基」自体（即ち、「脂肪族炭化水素基が単結合を介して結合した脂肪族炭化水素基」）も含まれる。

【0116】

本発明の擬似固相保護基が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基は、直鎖状でもよく、分岐鎖状でもよいが、本発明の沈殿促進剤の効果を充分に発揮させる上では、直鎖状であることが好ましい。炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基は、より好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基であり、より一層好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基であり、さらに好ましくは直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり、特に好ましくは直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり、最も好ましくは直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基である。

【0117】

前記リンカーは、好ましくは−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｓ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、−Ｓｉ（Ｒ）（Ｒ’）Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒ）（Ｒ’）−（Ｒ、Ｒ’は、それぞれ独立して、水素原子またはＣ_１−２２炭化水素基を示す。）から選ばれ、より好ましくは−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（＝Ｏ）−から選ばれ、より好ましくは−Ｏ−である。

【0118】

前記Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環は、好ましくはベンゼン環およびナフタレン環から選ばれ、より好ましくはベンゼン環である。

【0119】

前記「炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」は、好ましくは「炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」であり、より好ましくは「直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」であり、より一層好ましくは「直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」であり、さらに好ましくは「直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」であり、特に好ましくは「直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」であり、最も好ましくは「直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基がリンカーを介して結合したＣ_６−１４芳香族炭化水素環」である。これらの基では、リンカーが−Ｏ−であることが好ましい。また、これらの基では、Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環がベンゼン環であることが好ましい。

【0120】

前記擬似固相保護基は、好ましくは「直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基が単結合または−Ｏ−を介して結合した炭化水素基が−Ｏ−を介して結合したベンゼン環を有する有機基」であり、より好ましくは「直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したベンゼン環を有する有機基」であり、さらに好ましくは「直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したベンゼン環を有する有機基」であり、特に好ましくは「直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したベンゼン環を有する有機基」であり、最も好ましくは「直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したベンゼン環を有する有機基」である。

【0121】

本発明の擬似固相保護基としては、下記式（ＩＩＩ）で表される基（以下「擬似固相保護基（ＩＩＩ）」と称する。）が挙げられる。

【0122】

【化23】

【0123】

［式中、
^＊＊は、保護される基との結合位置を示し；
Ｌは、単結合、または式（ａ１）若しくは（ａ１’）：

【0124】

【化24】

【0125】

（式中、
^＊は、Ｙとの結合位置を示し；
^＊＊は、前記と同義であり；
Ｒ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２炭化水素基を示し；
Ｌ_１は、２価のＣ_１−２２炭化水素基を示し；且つ
Ｌ_２は、単結合を示すか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基を示し、
Ｙは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示し、並びに
Ｚは、式（ａ２）、式（ａ２’）または式（ａ２”）｛好ましくは式（ａ２）または式（ａ２’）｝：

【0126】

【化25】

【0127】

［式中、
^＊は、結合位置を示し；
Ｒ^４は、水素原子であるか、あるいはＲ_ｂが、下記式（ａ３）で表される基である場合には、環ＣのＲ^６と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環（好ましくはフルオレン環またはキサンテン環）を形成していてもよく；
ｋ個のＱは、それぞれ独立して、−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−を示し；
ｋ個のＲ^５は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基（好ましくは炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基）を示し；
ｋは、１〜４の整数を示し；
環Ａおよび環Ｂは、それぞれ独立して、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよく；
Ｒ_ａは、水素原子、またはハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル基（好ましくは、水素原子）を示し；並びに
Ｒ_ｂは、水素原子、または式（ａ３）：

【0128】

【化26】

【0129】

（式中、^＊は、結合位置を示し；
ｊは、０〜４の整数を示し；
ｊ個のＱは、それぞれ独立して、前記と同意義を示し；
ｊ個のＲ^７は、それぞれ独立して、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基（好ましくは、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基）を示し；
Ｒ^６は、水素原子を示すか、或いは環Ａまたは環ＢのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を示して、環Ａまたは環Ｂおよび環Ｃと共に縮合環（好ましくはフルオレン環またはキサンテン環）を形成していてもよく；且つ
環Ｃは、ｊ個のＯＲ^７に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい。）で表される基を示すか、或いは
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成する。］

【0130】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）により保護される基としては、例えば、水酸基、アミノ基、カルボキシ基が挙げられる。

【0131】

式（ａ２）、式（ａ２’）および式（ａ２”）中のＲ^５、並びに式（ａ３）中のＲ^７が有する炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基は、それぞれ独立して、好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基であり、より好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基であり、さらに好ましくは直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり、特に好ましくは直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり、最も好ましくは直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基である。

【0132】

式（ａ２）、式（ａ２’）および式（ａ２”）中のＲ^５、並びに式（ａ３）中のＲ^７が有するリンカーは、それぞれ独立して、好ましくは−Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、より好ましくは−Ｏ−である。

【0133】

式（ａ２）、式（ａ２’）および式（ａ２”）中のＲ^５、並びに式（ａ３）中のＲ^７（即ち、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基が単結合またはリンカーを介して結合した炭化水素基）は、それぞれ独立して、好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基および直鎖状のＣ_{１０−４０}アルケニル基から選ばれる基であり、より好ましくは直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基であり、さらに好ましくは直鎖状のＣ_{１０−３０}アルキル基であり、特に好ましくは直鎖状のＣ_{１２−２８}アルキル基であり、最も好ましくは直鎖状のＣ_{１４−２６}アルキル基である。

【0134】

式（ａ２）、式（ａ２’）、式（ａ２”）および式（ａ３）中のＱは、好ましくは−Ｏ−である。

【0135】

式（ＩＩＩ）において、式（ａ１）で表されるＬの好ましい態様は、
Ｌ_１が、２価のＣ_１−２２炭化水素基、またはＣＨ_２−Ｏ−１，４−フェニレン−Ｏ−ＣＨ_２であり；且つ
Ｌ_２が、単結合であるか、または^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−６アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して水素原子、もしくは置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、置換されていてもよいＣ_１−６アルキレン結合を形成していてもよい。）で表される基である、
基である。

【0136】

式（ａ１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
Ｌ_１が、２価のＣ_１−２２炭化水素基であり；且つ
Ｌ_２が単結合である
基である。

【0137】

式（ａ１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
Ｌ_１が、エチレン基であり；且つ
Ｌ_２が、^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、Ｃ_１−２２アルキレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子もしくはＣ_１−２２アルキル基を示すか、またはＲ^２’およびＲ^３が一緒になって、環を形成していてもよい。）で表される基を示す。）で表される基である
基である。

【0138】

式（ａ１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
Ｌ_１が、エチレン基であり；且つ
Ｌ_２が、^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）部分が、ピペラジンジイル基（例、１，４−ピペラジンジイル基）を形成する。）で表される基である
基である。

【0139】

式（ａ１）で表されるＬの別の好ましい態様は、
Ｌ_１が、エチレン基であり；且つ
Ｌ_２が、^＊＊Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ^２’）−Ｒ^１’−Ｎ（Ｒ^３）^＊＊＊（式中、^＊＊は、Ｌ_１との結合位置を示し、^＊＊＊は、Ｃ＝Ｏとの結合位置を示し、Ｒ^１’は、ペンチレン基、またはヘキシレン基を示し、Ｒ^２’およびＲ^３は、それぞれ独立して、水素原子またはメチル基を示す。）で表される基である
基である。

【0140】

式（ａ１）で表されるＬの特に好ましい態様としては、入手が容易で安価なスクシニル基である。

【0141】

次に、式（ＩＩＩ）において式（ａ１’）で表されるＬについて説明する。
式（ａ１’）中のＬ_１は、好ましくは２価のＣ_６−１０芳香族炭化水素基であり、より好ましくはフェニレン基である。
式（ａ１’）中のＬ_２は、好ましくは単結合である。
式（ａ１’）中のＬ_１およびＬ_２の好ましい組合せとしては、Ｌ_１が２価のＣ_６−１０芳香族炭化水素基であり、Ｌ_２が単結合である、組合せである。式（ａ１’）中のＬ_１およびＬ_２のより好ましい組合せとしては、Ｌ_１がフェニレン基であり、Ｌ_２が単結合である、組合せである。
式（ａ１’）中のＲ^８およびＲ^９は、それぞれ独立して、好ましくはＣ_１−２２アルキル基であり、より好ましくはＣ_１−１０アルキル基である。

【0142】

式（ａ１’）で表されるＬの好ましい態様は、
Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−２２アルキル基であり；
Ｌ_１が、２価のＣ_６−１０芳香族炭化水素基であり；且つ
Ｌ_２が、単結合である
基である。

【0143】

式（ａ１’）で表されるＬの別の好ましい態様は、
Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり；
Ｌ_１が、フェニレン基であり；且つ
Ｌ_２が、単結合である
基である。

【0144】

式（ＩＩＩ）におけるＹは、単結合、酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）を示す。Ｙが単結合である場合、Ｌが単結合であり、Ｚが、式（ａ２）で表される基であって、Ｒ^４が、水素原子であり、且つＲ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成することが好ましい。

【0145】

式（ＩＩＩ）におけるＹは、好ましくは酸素原子、またはＮＲ（Ｒは、水素原子、アルキル基またはアラルキル基を示す。）であり、Ｒは、好ましくは、水素原子、Ｃ_１−６アルキル基またはＣ_７−１６アラルキル基であり、より好ましくは水素原子、メチル、エチルまたはベンジルであり、特に好ましくは水素原子である。Ｙは、特に好ましくは酸素原子である。

【0146】

式（ＩＩＩ）におけるＺは、好ましくは式（ａ２）または式（ａ２’）で表される基であり、より好ましくは式（ａ２）で表される基である。式（ａ２）において、Ｒ^４が水素原子であることが好ましい。また、式（ａ２）において、Ｒ_ａおよびＲ_ｂが水素原子であることが好ましい。

【0147】

式（ａ２）で表されるＺの好ましい態様は、
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、共に水素原子であり；
Ｒ^４が、水素原子であり；
ｋが、１〜３の整数である；
ｋ個のＱが、−Ｏ−であり；且つ
ｋ個のＲ^５が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基である、
基である。
Ｚがこの態様である場合、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であるか、或いはＬ−Ｙが、単結合であることが一層好ましく、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であることがさらに一層好ましい。

【0148】

式（ａ２）で表されるＺの別の好ましい態様は、
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、共に水素原子であり；
Ｒ^４が、水素原子であり；
ｋが、１〜３の整数であり；
ｋ個のＱが、−Ｏ−であり；
ｋ個のＲ^５が、それぞれ独立して、１〜３個の直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したベンジル基、または１〜３個の直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したシクロヘキシルメチル基であり；且つ
環Ａが、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい、
基である。
Ｚがこの態様である場合、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であるか、或いはＬ−Ｙが、単結合であることが一層好ましく、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であることがさらに一層好ましい。

【0149】

式（ａ２）で表されるＺの別の好ましい態様は、
Ｒ_ａおよびＲ^４が、水素原子であり；
Ｒ_ｂが、式（ａ３）（式中、^＊は結合位置であり、ｊが、０〜３の整数であり、ｊ個のＱが、−Ｏ−であり、ｊ個のＲ^７が、それぞれ独立して、Ｃ_{１０−４０}アルキル基であり、Ｒ^６が、水素原子である。）で表される基である、
基である。
Ｚがこの態様である場合、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であるか、或いはＬ−Ｙが、単結合であることが一層好ましく、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であることがさらに一層好ましい。

【0150】

式（ａ２）で表されるＺのさらに別の好ましい態様は、
Ｒ_ａが、水素原子であり；
Ｒ_ｂが、式（ａ３）（式中、^＊は結合位置であり、ｊが、０〜３の整数であり、ｊ個のＱが、−Ｏ−であり、ｊ個のＲ^７が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基であり、Ｒ^６は、環ＡのＲ^４と一緒になって単結合または−Ｏ−を形成し、それにより環Ａと環Ｃは一緒になってフルオレン環またはキサンテン環を形成する。）で表される基である、
基である。
Ｚがこの態様である場合、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であるか、或いはＬ−Ｙが、単結合であることが一層好ましく、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹが酸素原子であることがさらに一層好ましい。

【0151】

式（ａ２）で表されるＺの別の好ましい態様は、
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
Ｒ^４が、水素原子であり；
ｋが、１〜３の整数であり；
ｋ個のＱが、−Ｏ−であり；且つ
ｋ個のＲ^５が、それぞれ独立して、直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基である、
基である。
Ｚがこの態様である場合、Ｌ−Ｙが、単結合またはスクシニル−１，４−ピペラジンジイル基であることが一層好ましく、Ｌ−Ｙが、単結合であることがさらに一層好ましい。

【0152】

式（ａ２）で表されるＺの別の好ましい態様は、
Ｒ_ａおよびＲ_ｂが、一緒になってオキソ基を形成し；
Ｒ^４が、水素原子であり；
ｋが、１〜３の整数であり；
ｋ個のＱが、−Ｏ−であり；
ｋ個のＲ^５が、それぞれ独立して、１〜３個の直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したベンジル基、または１〜３個の直鎖状のＣ_{１０−４０}アルキル基が−Ｏ−を介して結合したシクロヘキシルメチル基であり；且つ
環Ａが、ｋ個のＱＲ^５に加えて、さらにハロゲン原子、ハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルキル基、およびハロゲン原子で置換されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基からなる群から選択される置換基を有していてもよい、
基である。
Ｚがこの態様である場合、Ｌ−Ｙが、単結合またはスクシニル−１，４−ピペラジンジイル基であることが一層好ましく、Ｌ−Ｙが、単結合であることがさらに一層好ましい。

【0153】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）としては、酸性条件下では除去されず、塩基性条件下で除去可能な基が好ましい。

【0154】

水酸基を保護するための、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基を有する擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例１としては、
Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ^１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ^２が、単結合である。）であり、且つＹ−Ｚが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４−ビス（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４−（１２−ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルオキシ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、ビス（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、２，４−ビス（ドデシルオキシ）シクロヘキシルメチルアミノ基、フェニル（２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４−（１２−ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］シクロヘキシルメチルアミノ基である基、
Ｌ−Ｙが、スクシニル−１，４−ピペラジンジイル基であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基である基、および
Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、（３，５−ジドコシルオキシフェニル）ジフェニルメチル基またはビス（４−クロロフェニル）（３，５−ジドコシルオキシフェニル）メチル基である基
が挙げられる。

【0155】

アミノ基またはイミノ基を保護するための、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基を有する擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例２としては、Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、（３，５−ジドコシルオキシフェニル）ジフェニルメチル基、またはビス（４−クロロフェニル）（３，５−ジドコシルオキシフェニル）メチル基である基が挙げられる。

【0156】

カルボキシ基を保護するための、炭素数１０以上の直鎖状の脂肪族炭化水素基を有する擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例３としては、Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンジル基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジル基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジル基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジル基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジル基、（３，５−ジドコシルオキシフェニル）ジフェニルメチル基、またはビス（４−クロロフェニル）（３，５−ジドコシルオキシフェニル）メチル基である基が挙げられる。

【0157】

水酸基を保護するための、炭素数１０以上の分岐鎖状の脂肪族炭化水素基を有する擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例４としては、Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ^１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ^２が、単結合である。）であり、且つＹ−Ｚが、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ基、４−（３，７，１１−トリメチルドデシルオキシ）ベンジルオキシ基、４−［２，２，４，８，１０，１０−ヘキサメチル−５−ドデカノイルアミノ］ベンジルオキシ基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メチルベンジルオキシ基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メトキシベンジルオキシ基、２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ基、２−［３’，４’，５’−トリ（２”，３”−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］−４−メトキシベンジルオキシ基、３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ基、３，４，５−トリス［３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、２，４−ジ（２−デシルテトラデシルオキシ）ベンジルオキシ基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミノ基、４−（３，７，１１−トリメチルドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、４−［２，２，４，８，１０，１０−ヘキサメチル−５−ドデカノイルアミノ］ベンジルアミノ基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メチルベンジルアミノ基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メトキシベンジルアミノ基、２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミノ基、２−［３’，４’，５’−トリ（２”，３”−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］−４−メトキシベンジルアミノ基、３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルアミノ基、３，４，５−トリス［３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、｛［（２−クロロ−５−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル）］フェニルメチル｝アミノ基、｛［２，３，４−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］フェニルメチル｝アミノ基、または｛ビス［４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）フェニル］メチル｝アミノ基である基、が挙げられる。
ここで、２，３−ジヒドロフィチルとは、３，７，１１，１５−テトラメチルヘキサデシルを意味する。２’，３’−ジヒドロフィチルおよび２”，３”−ジヒドロフィチルも同様である。

【0158】

アミノ基またはイミノ基を保護するための、炭素数１０以上の分岐鎖状の脂肪族炭化水素基を有する擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例５としては、Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンゾイル基、４−（３，７，１１−トリメチルドデシルオキシ）ベンゾイル基、４−［２，２，４，８，１０，１０−ヘキサメチル−５−ドデカノイルアミノ］ベンゾイル基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メチルベンゾイル基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メトキシベンゾイル基、２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンゾイル基、２−［３’，４’，５’−トリ（２”，３”−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］−４−メトキシベンゾイル基、３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンゾイル基、３，４，５−トリス［３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、または２，４−ジ（２−デシルテトラデシルオキシ）ベンゾイル基である基が挙げられる。

【0159】

カルボキシ基を保護するための、炭素数１０以上の分岐鎖状の脂肪族炭化水素基を有する擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例６としては、Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジル基、４−（３，７，１１−トリメチルドデシルオキシ）ベンジル基、４−［２，２，４，８，１０，１０−ヘキサメチル−５−ドデカノイルアミノ］ベンジル基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メチルベンジル基、４−（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）−２−メトキシベンジル基、２，４−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジル基、３，５−ジ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジル基、２−［３’，４’，５’−トリ（２”，３”−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］−４−メトキシベンジル基、３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジル基、３，４，５−トリス［３，４，５−トリ（２’，３’−ジヒドロフィチルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジル基、または２，４−ジ（２−デシルテトラデシルオキシ）ベンジル基である基が挙げられる。

【0160】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）は、好ましくは上述の擬似固相保護基（ＩＩＩ）の具体例１〜具体例６のいずれかであり、より好ましくは具体例１〜具体例３のいずれかである。

【0161】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）は、より一層好ましくは、
Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹ−Ｚが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ジ（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４−（１２−ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基である基、
Ｌ−Ｙが、スクシニル−１，４−ピペラジンジイル基であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基である基、或いは
Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾイル基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾイル基である基、
である。

【0162】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）は、さらに好ましくは
Ｌが、スクシニル基であるか、または式（ａ１’）で表される基（式（ａ１’）中、Ｒ^８およびＲ^９が、それぞれ独立して、Ｃ_１−１０アルキル基であり、Ｌ_１が、２価のフェニレン基であり、Ｌ_２が、単結合である。）であり、且つＹ−Ｚが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ジ（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４−（１２−ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基である基、或いは
Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基である基
である。

【0163】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）は、特に好ましくは
Ｌが、スクシニル基であり、且つＹ−Ｚが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ジ（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４−（１２−ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基である基、或いは
Ｌ−Ｙが、単結合であり、且つＺが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル基である基、
である。

【0164】

擬似固相保護基（ＩＩＩ）は、最も好ましくは、Ｌが、スクシニル基であり、且つＹ−Ｚが、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルオキシ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルオキシ基、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、３，５−ジ（ドコシルオキシ）ベンジルアミノ基、ジ（４−ドコシルオキシフェニル）メチルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、４−メトキシ−２−［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキシルメチルオキシ］ベンジルアミノ基、２，４−ジ（ドデシルオキシ）ベンジルアミノ基、フェニル（２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）フェニル）メチルアミノ基、ビス［４−（１２−ドコシルオキシドデシルオキシ）フェニル］メチルアミノ基、３，５−ビス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基、または３，４，５−トリス［３’，４’，５’−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンジルアミノ基である基である。

【0165】

擬似固相保護基を形成するために用いられる化合物は、自体公知の方法（例えば、上述の特許文献１または２に記載されている方法、エステル化、シリル化等）またはこれに準ずる方法によって製造することができる。例えば、擬似固相保護基を形成するために用いられる式：Ｚ−Ｙ−Ｈで表されるアルコール化合物またはアミン化合物は、以下の工程またはそれに準じた工程によって製造することができる。

【0166】

【化27】

【0167】

［式中のＱ’は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＮＨ−を示し、Ｒ_ｇは、水素原子、ＯＲ_ｈ基（ここで、Ｒ_ｈはＣ_１−６アルキル基等のアルキル基、ベンジル基等のアラルキル基等を示す。）または式（ａ３）：

【0168】

【化28】

【0169】

（式中の各記号は、前記と同意義である。）
で表される基を示し、Ｙ_１はハロゲン原子等の脱離基を示し、他の記号は、前記と同義である。］

【0170】

工程（ａ）
本工程は、式（Ｘ）で表される化合物のＱ’Ｈ（ここで、Ｑ’は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−または−ＮＨ−を示す。）にＲ^５を導入することにより、式（Ｘ−ａ）で表される化合物を製造する工程である。この反応は、Ｑ’が、−Ｏ−、−Ｓ−または−ＮＨ−の場合、反応に影響を及ぼさない溶媒中、塩基の存在下または非存在下で、Ｒ^５に対応するハロゲン化物（塩化物、臭化物またはヨウ化物）、Ｒ^５に対応するカルボン酸若しくは酸ハロゲン化物またはＲ^５に対応するアルキルスルホニルオキシ化物（例えば、メタンスルホニルオキシ化物等）若しくはアリールスルホニルオキシ化物（例えば、ｐ−トルエンスルホニルオキシ化物等）を用いて行われる。また、Ｑ’が−Ｏ−の場合、化合物（Ｘ）とＲ^５に対応する水酸化物をトリフェニルホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジイソプロピル存在下で反応させる光延反応条件下で、この反応を行うこともできる。さらにＱ’が−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−の場合、例えば、化合物（Ｘ）とＲ^５に対応するアミン若しくは水酸化物を縮合剤の存在下で反応させることにより化合物（Ｘ−ａ）を合成することができる。

【0171】

塩基としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド等のアルカリ金属塩；水素化ナトリウム、水素化カリウム等のアルカリ金属水素化物；ピリジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］−７−ウンデセン等のアミン類等が挙げられ、中でも炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水素化ナトリウム等が好ましい。

【0172】

溶媒としては、例えば、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド等のアミド類；クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；アセトニトリル等のニトリル類、Ｎ−メチルピロリドン等あるいはそれらの混合物が挙げられ、中でも、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、トルエン、Ｎ−メチルピロリドン等が好ましい。

【0173】

反応温度は、５０〜１５０℃が好ましく、６０〜１３０℃がより好ましい。反応時間は、２〜３０時間が好ましく、３〜１０時間がより好ましい。

【0174】

工程（ｂ）
本工程は、化合物（Ｘ−ａ）を還元することにより、式（ＸＩ−ａ）で表される化合物を製造する工程である。この還元反応は、還元剤を用いる方法により行うことができる。

【0175】

この還元反応に用いる還元剤としては、例えば、金属水素化物（水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、シアノ水素化ホウ素ナトリウム、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、水素化ジブチルアルミニウム、水素化アルミニウム、水素化アルミニウムリチウム等）等が挙げられ、中でも、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ジブチルアルミニウム等が好ましい。

【0176】

この反応は、反応に影響を及ぼさない溶媒中で行われる。溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール等のアルコール類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；あるいはそれらの混合物が挙げられ、中でもテトラヒドロフラン、トルエン等が好ましい。反応温度は、０〜１００℃が好ましく、３０〜７０℃がより好ましい。反応時間は、１〜２４時間が好ましく、２〜５時間がより好ましい。

【0177】

工程（ｃ）
本工程は、Ｒ_ｇが水素原子またはＯＲ_ｈ基ではない化合物（Ｘ−ａ）を、上記工程（ｂ）と同様の方法により還元する工程である。

【0178】

工程（ｄ−１）
本工程は、Ｒ_ｇが水素原子である化合物（Ｘ−ａ）を、オキシム化することにより、式（ＸＩ’−ａ）で表される化合物を製造する工程である。

【0179】

このオキシム化反応は、反応に影響を及ぼさない溶媒中、塩基存在下で化合物（Ｘ−ａ）とヒドロキシルアミンの酸付加塩とを反応させることにより行われる。

【0180】

ヒドロキシルアミンの酸付加塩としては、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩等の鉱酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等の有機酸塩等が挙げられるが、塩酸塩が特に好ましい。

【0181】

かかる塩基としては、例えば、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウムなどのアルカリ金属塩；ピリジン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンなどの有機アミン類等が挙げられ、中でも、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等が好ましい。

【0182】

溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；および／または、それらの混合物が挙げられ、中でも、ジクロロメタン、クロロホルム、トルエン等が好ましい。反応温度は、１０〜１００℃が好ましく、２０〜６０℃がより好ましい。反応時間は、０．５〜３０時間が好ましく、２〜２０時間がより好ましい。

【0183】

工程（ｄ−２）
本工程は、化合物（ＸＩ’−ａ）を、パラジウム−炭素、ラネーニッケル等の金属触媒存在下の接触水素添加反応、または前記工程（ｂ）と同様の金属水素化物等の還元剤により還元することにより、式（ＸＩ−ｂ）で表される化合物を製造する工程である。

【0184】

化合物（ＸＩ−ｂ）は、工程（ｄ−３）、工程（ｄ−４）および工程（ｄ−５）を経て製造することもできる。

【0185】

工程（ｄ−３）
本工程は、化合物（ＸＩ−ａ）を、例えば塩化アセチル、塩化チオニル等のクロル化剤、または、例えば臭化アセチル、三臭化リン、ジフェニルホスフィン／臭素等のブロム化剤を用いてハロゲン化することにより、式（ＸＩ’−ｂ）で表される化合物を製造する工程である。

【0186】

溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；それらの混合物が挙げられ、中でも、クロロホルム、テトラヒドロフラン、トルエン等が好ましい。反応温度は、１０〜１５０℃が好ましく、３０〜８０℃がより好ましい。反応時間は、０．５〜３０時間が好ましく、２〜２０時間がより好ましい。

【0187】

工程（ｄ−４）
本工程は、化合物（ＸＩ’−ｂ）をアジ化ナトリウム等のアジド化剤を用いてアジド化することにより、式（ＸＩ’−ｃ）で表される化合物を製造する工程である。この反応は、反応に影響を及ぼさない溶媒中、化合物（ＸＩ’−ｂ）をアジド化剤と反応させることにより行われる。

【0188】

溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類；トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等のアミド類；それらの混合物が挙げられ、中でも、クロロホルム、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が好ましい。反応温度は、１０〜１５０℃が好ましく、２０〜１００℃がより好ましい。反応時間は、０．５〜３０時間が好ましく、２〜２０時間がより好ましい。

【0189】

工程（ｄ−５）
本工程は、化合物（ＸＩ’−ｃ）をアミノ化することにより、化合物（ＸＩ−ｂ）を製造する工程である。この反応は、反応に影響を及ぼさない溶媒中、水存在下、化合物（ＸＩ’−ｃ）をトリフェニルホスフィンと反応させるか、接触水素化還元により行われる。

【0190】

トリフェニルホスフィンの使用量としては、化合物（ＸＩ’−ｃ）１モルに対して、好ましくは１〜１０モル、特に好ましくは１〜５モルである。水の使用量は、化合物（ＸＩ’−ｃ）１モルに対して、好ましくは１〜１０モル、特に好ましくは１〜５モルである。

【0191】

溶媒としては、例えば、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；および、それらの混合物が挙げられ、中でも、トルエン、テトラヒドロフラン等が好ましい。反応温度は、１０〜１５０℃が好ましく、２０〜１００℃がより好ましい。反応時間は、０．５〜３０時間が好ましく、２〜２０時間がより好ましい。

【0192】

工程（ｄ−６）
本工程は、化合物（ＸＩ’−ｂ）をＲＮＨ_２（Ｒは前記と同義である）と反応させることにより、Ｙが−ＮＨＲ基である式（ＸＩ−ｃ）で表される化合物を製造する工程である。本工程は、反応に影響を及ぼさない溶媒中、必要により、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等の第３級アミン等の塩基の存在下、化合物（ＸＩ’−ｂ）をＲ−ＮＨ_２で表されるアミンと反応させることにより行われる。

【0193】

溶媒としては、例えば、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；および、クロロホルム、ジクロロメタン等のハロゲン化炭化水素類または、それらの混合物が挙げられ、中でも、トルエン、テトラヒドロフラン、クロロホルム等が好ましい。反応温度は、１０〜１００℃が好ましく、２０〜６０℃がより好ましい。反応時間は、０．５〜３０時間が好ましく、２〜２０時間がより好ましい。

【0194】

工程（ｄ−７）
本工程は、化合物（ＸＩ−ｄ）を−ＣＯＮＨ_２基または−ＯＣＯＮＨ_２基を有する化合物と反応させた後、塩基で処理することにより、化合物（ＸＩ−ｅ）を製造する工程である。化合物（ＸＩ−ｄ）と−ＣＯＮＨ_２基または−ＯＣＯＮＨ_２基を有する化合物との反応は、反応に影響を及ぼさない溶媒中、酸触媒下で行われる。

【0195】

酸触媒としては、例えば、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トルエンスルホン酸等が挙げられ、中でもメタンスルホン酸、トルエンスルホン酸が好ましい。酸触媒の使用量は、化合物（ＸＩ−ｄ）１モルに対して、好ましくは０．０５〜０．５モル、特に好ましくは０．１〜０．３モルである。

【0196】

−ＣＯＮＨ_２基または−ＯＣＯＮＨ_２基を有する化合物としては、例えば、Ｆｍｏｃ−ＮＨ_２、ＨＣＯＮＨ_２、ＣＦ_３ＣＯＮＨ_２、ＡｃＮＨ_２、ＥｔＯＣＯＮＨ_２、Ｃｂｚ−ＮＨ_２等が挙げられ、中でもＦｍｏｃ−ＮＨ_２、ＥｔＯＣＯＮＨ_２等が好ましい。ここで、「Ｆｍｏｃ−」とは、９−フルオレニルメトキシカルボニル基（以下、Ｆｍｏｃ基ともいう。）を意味し、「Ｃｂｚ−」は、ベンジルオキシカルボニル基（以下、Ｃｂｚ基ともいう。）を意味する。

【0197】

なお、工程（ａ）の原料として使用する試薬［即ち、Ｒ^５に対応する水酸化物、ハロゲン化物、アルキルスルホニルオキシ化物（例えば、メタンスルホニルオキシ化物等）またはアリールスルホニルオキシ化物（例えば、ｐ−トルエンスルホニルオキシ化物等）、以下「工程（ａ）の試薬」と略称する。］は、市販品を用いることができる。また、工程（ａ）の試薬は、例えば、
（１）Ｒ^５に対応する水酸化物のハロゲン化、アルキルスルホニルオキシ化またはアリールスルホニルオキシ化により、或いは
（２）Ｒ^５に対応する不飽和水酸化物の還元反応（例えば、白金−炭素（Ｐｔ／Ｃ）、パラジウム−炭素（Ｐｄ／Ｃ）、ロジウム−炭素（Ｒｈ／Ｃ）、ラネーニッケル等の金属触媒の存在下での接触水素添加反応等）、およびそれに続くハロゲン化、アルキルスルホニルオキシ化またはアリールスルホニルオキシ化により、
製造することができる。

【0198】

工程（ａ）の試薬の製造において、ヒドロキシル基から脱離基への変換に用いる試薬としては、例えば、塩化チオニル、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＮＣＳ）等のクロロ化剤、臭化水素酸、臭化アセチル、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）、三臭化リン、ジフェニルホスフィン／臭素等のブロモ化剤等のハロゲン化剤の他、塩化メタンスルホニル、塩化トリフルオロメタンスルホニル等のアルキルスルホニル化剤、塩化ベンゼンスルホニル、塩化ｐ−トルエンスルホニル等のアリールスルホニル化剤等が挙げられ、中でも、ハロゲン化剤である塩化チオニル、臭化水素酸等が好ましい。

【0199】

この反応は、反応に影響を及ぼさない溶媒中で行われ、溶媒としては、例えば、水；クロロホルム、ジクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素類；ベンゼン、トルエン、キシレンなどの芳香族炭化水素類；アセトニトリル、プロピオニトリルなどのニトリル類；テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ジエチルエーテルなどのエーテル類が挙げられ、中でも水、クロロホルム等のハロゲン化炭化水素類が好ましい。反応温度は、１０〜１２０℃が好ましく、５０〜１００℃がより好ましい。反応時間は、１〜７２時間が好ましく、３〜２４時間がより好ましい。

【0200】

Ｑ’が単結合である式：Ｚ−Ｙ−Ｈで表される化合物は、例えば、以下の方法によっても製造することができる。即ち、ベンゼン環上へのＲ^５の導入は、
（１）Ｒ^５に対応するハロゲン化物（塩化物、臭化物、またはヨウ化物）、Ｒ^５に対応するカルボン酸若しくは酸ハロゲン化物を用いるフリーデルクラフツ反応、
（２）上記化合物（Ｘ）に対応する化合物（但し、Ｑ’Ｈが−ＣＨＯ基に置き換わった化合物）をＷｉｔｔｉｇ反応により増炭させた後に、接触水素添加等する方法、または
（３）金属触媒を使用したクロスカップリング等の慣用の有機合成反応
によって行うことができる。

【0201】

なお、上記各スキーム中の反応試薬等は便宜上示されたものであって、上記した定義の範囲内で適宜変更することができる。

【0202】

［本発明の擬似固相保護基で保護された有機化合物］
炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基（本発明の擬似固相保護基）で保護された有機化合物は、溶媒から沈殿させることができれば特に限定はなく、水酸基（−ＯＨ）、スルファニル基（−ＳＨ）、カルボキシ基（−ＣＯＯＨ）、アミノ基（−ＮＨＲ）、イミノ基（−ＮＨ−）、カルボキサミド基（−ＣＯＮＨＲ”）（前記式中、Ｒ”は、水素原子または炭化水素基を示す。）等の官能基を有し、該官能基が本発明の擬似固相保護基で保護された有機化合物（以下「保護された有機化合物」と称することがある。）を使用することができる。保護された有機化合物は、さらに、擬似固相保護基とは異なる保護基（例えば、核酸合成に用いられる保護基）で保護されていてもよい。保護された有機化合物としては、例えば、国際公開第２０１２／１５７７２３号、国際公開第２０１２／１５７７２３号、国際公開第２０１４／１８９１４２号、特開２０１０−１１６４１８号公報、国際公開第２０１０／１０４１６９号、国際公開第２０１０／１１３９３９号、国際公開第２０１１／０７８２９５号、国際公開第２０１２／０２９７９４号、特開２００９−１８５０６３号公報、特開２０１０−２７５２５４号公報等に開示されているヌクレオシド、ヌクレオチド、アミノ酸、ペプチド等を挙げることができる。

【0203】

好ましい保護された有機化合物は、さらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシド、ヌクレオチド若しくはオリゴヌクレオチド、またはさらにペプチド合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、アミノ酸若しくはペプチドである。前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドは、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が本発明の擬似固相保護基で保護されていることが好ましい。前記ヌクレオシド、ヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチドが、モルフォリノヌクレオシド、モルフォリノヌクレオチドまたはモルフォリノオリゴヌクレオチドである場合、前記水酸基ではなく、モルフォリン残基の５’位水酸基が擬似固相保護基で保護されていてもよい。

【0204】

より好ましい保護された有機化合物は、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、デオキシリボース残基の３’位水酸基、並びにモルフォリン残基の５’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が、本発明の擬似固相保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである。

【0205】

さらに好ましい保護された有機化合物は、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が、本発明の擬似固相保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである。

【0206】

特に好ましい保護された有機化合物は、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が、本発明の擬似固相保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである。

【0207】

最も好ましい保護された有機化合物は、リボース残基の３’位水酸基またはデオキシリボース残基の３’位水酸基が、本発明の擬似固相保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよい、ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドである。

【0208】

［沈殿化］
本発明は、本発明の沈殿促進剤を用いて、溶媒から保護された有機化合物を沈殿させる方法（以下「本発明の沈殿化方法」と称することがある。）、そのような方法によって得られる沈殿促進剤および保護される有機化合物を含む沈殿混合物も提供する。前記溶媒は、好ましくは極性溶媒を含む溶媒であり、より好ましくは極性溶媒と非極性溶媒との混合溶媒である。

【0209】

本発明の擬似固相保護基で保護された有機化合物は、疎水性基である擬似固相保護基によって、非極性溶媒に対する溶解性が向上すると共に、極性溶媒に対する溶解性が低下する。このような擬似固相保護基で保護された有機化合物は、例えば、該有機化合物が非極性溶媒に溶解した溶液に、極性溶媒を添加することで沈殿させて、固液分離することができる。本発明の沈殿促進剤は、擬似固相保護基で保護された有機化合物の溶媒からの沈殿を促進させることができ、その回収率を向上させることができる。また目的物（即ち、擬似固相保護基で保護された有機化合物）を得た後、擬似固相保護基を除去することにより、脱保護された有機化合物を得ることもできる。

【0210】

極性溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル系溶媒；アセトン、２−ブタノン等のケトン系溶媒；１，４−ジオキサン、テトラヒドロフラン等の極性エーテル系溶媒；ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピペリドン等のアミド系溶媒、ジメチルスルホキシド等のスルホキシド系溶媒；水等が挙げられる。極性溶媒は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。極性溶媒としては、特にアセトニトリルが好ましい。オリゴヌクレオチドの合成においては、沈殿効率の観点からは、極性溶媒としてメタノールを使用すると回収率が高くなる傾向にあるが、メタノールは、ホスホロアミダイト法におけるカップリング反応を阻害するため、析出させたオリゴヌクレオチドからメタノールを完全に除去する必要があるが、乾燥に多くの時間を要したり、系中にメタノールが残存しているか否かを評価することが難しいという問題がある。一方、アセトニトリルは、沈殿効率が低下する傾向にあるが、ホスホロアミダイト法におけるカップリング反応を阻害することはない。そのため、アセトニトリルを用いて析出させたオリゴヌクレオチドでは、厳密な乾燥や残存溶媒の評価が不要である。本発明の沈殿促進剤を使用すれば、アセトニトリルを使用した場合でも、高収率で目的物を沈殿、回収することができる。

【0211】

非極性溶媒としては、例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン等のハロゲン系溶媒；ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレン等の芳香族系溶媒；酢酸エチル、酢酸イソプロピル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ペンタン、ヘプタン、オクタン、ノナン、シクロヘキサン等の脂肪族系溶媒；ジエチルエーテル、シクロペンチルメチルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル等の非極性エーテル系溶媒が挙げられる。非極性溶媒は、１種のみを使用してもよく、２種以上を併用してもよい。非極性溶媒としては、ハロゲン系溶媒、芳香族系溶媒、エステル系溶媒、脂肪族系溶媒、およびこれらの組合せが好ましく；ジクロロメタン、クロロホルム、１，２−ジクロロエタン、ベンゼン、トルエン、キシレン、メシチレン、ヘキサン、ペンタン、ヘプタン、ノナン、シクロヘキサン、酢酸エチル、酢酸イソプロピルおよびこれらの組合せがより好ましく；クロロホルム、ジクロロメタン、トルエン、およびこれらの組合せがさらに好ましい。

【0212】

保護された有機化合物を充分に沈殿させるために、本発明の沈殿促進剤の使用量は、保護された有機化合物に対して、好ましくは０．１モル当量以上、より好ましくは０．５モル当量以上、さらに好ましくは１モル当量以上である。この上限に特に限定はないが、コストの観点から、本発明の沈殿促進剤の使用量は、保護された有機化合物に対して、好ましくは１０モル当量以下、より好ましくは５モル当量以下、さらに好ましくは２．５モル当量以下である。

【0213】

極性溶媒（好ましくはアセトニトリル）を含む溶媒における極性溶媒量は、保護された有機化合物の回収率を高めるために、極性溶媒以外の溶媒１ｍＬに対して、好ましくは０．５ｍＬ以上、より好ましくは１ｍＬ以上、さらに好ましくは２ｍＬ以上であり、好ましくは２０ｍＬ以下、より好ましくは１０ｍＬ以下、さらに好ましくは８ｍＬ以下である。この極性溶媒量は、保護された有機化合物を沈殿させる際の好適な範囲である。例えば、保護された有機化合物および極性溶媒以外の溶媒を含む溶液を濃縮した後に、上述の範囲となるように極性溶媒を添加して、有機化合物を沈殿させてもよい。また、極性溶媒量が上述の下限未満となるように、保護された有機化合物、極性溶媒以外の溶媒および極性溶媒を含む溶液を調製し、これを濃縮して、極性溶媒量を上述の下限以上に調整することによって、有機化合物を沈殿させてもよい。

【0214】

保護された有機化合物の沈殿化における温度は、好ましくは−１０℃以上、より好ましくは０℃以上、さらに好ましくは５℃以上であり、好ましくは４０℃以下、より好ましくは３０℃以下、さらに好ましくは２５℃以下である。

【0215】

上述の好ましい温度に調整した後の保護された有機化合物の懸濁液の放置時間（即ち、沈殿化のための時間）は、好ましくは５分間以上、より好ましくは１５間分以上、さらに好ましくは３０分間以上であり、好ましくは７２時間以下、より好ましくは１６時間以下、さらに好ましくは３時間以下である。

【0216】

［オリゴヌクレオチドの製造方法］
本発明の沈殿化方法は、特にオリゴヌクレオチドの製造方法に有用である。そのため、本発明は、本発明の沈殿化方法を含むオリゴヌクレオチドの製造方法も提供する。そのような製造方法としては、例えば、少なくとも１個の基が本発明の擬似固相保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいオリゴヌクレオチド、および本発明の沈殿促進剤を含む反応液に、極性溶媒（好ましくはアセトニトリル）を添加し、反応液からオリゴヌクレオチドと沈殿促進剤を含む沈殿混合物を分離する工程を含む方法が挙げられる。本発明のオリゴヌクレオチドの製造方法は、ホスホロアミダイト法により行われることが好ましい。

【0217】

本発明のオリゴヌクレオチドの製造方法の好ましい態様は、下記工程（１）〜（３）からなる製造サイクルを１回行うか、或いは複数回繰り返すホスホロアミダイト法によるオリゴヌクレオチドの製造方法であって、１サイクル目に下記工程（４）を含み、各サイクルに下記工程（５）を含み、且つ最終サイクルを除く各サイクルに下記工程（６）を含む方法である：
（１）非極性溶媒中、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が本発明の擬似固相保護基で保護され、５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド（以下「一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド」と称することがある。）を含む反応液に、酸を加えて５’位水酸基の一時保護基を脱保護し、塩基により中和し、５’位水酸基遊離体を含む反応液を得る工程（脱保護工程）；
（２）非極性溶媒中、５’位水酸基遊離体を含む反応液に、３’位水酸基がホスホロアミダイト化され、且つ５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド（以下「ホスホロアミダイト化されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド」と称することがある。）を添加して、ホスファイトトリエステル体を含む反応液を得る工程（縮合工程）；
（３）非極性溶媒中、ホスファイトトリエステル体を含む反応液に、酸化剤または硫化剤を添加して、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の２’位および３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が本発明の擬似固相保護基で保護され、且つ５’位水酸基が酸性条件下で除去可能な一時保護基で保護され、且つその他の基がさらに核酸合成に用いられる保護基で保護されていてもよいオリゴヌクレオチド（以下「生成オリゴヌクレオチド」と称することがある。）を含む反応液を得る工程（酸化または硫化工程）；
（４）工程（１）の前、工程（１）と（２）の間、工程（２）と（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、反応液に本発明の沈殿促進剤を加える工程（沈殿促進剤の添加工程）；
（５）工程（４）の後であって、工程（１）と（２）の間、工程（２）と（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、沈殿促進剤を含む反応液に極性溶媒（好ましくはアセトニトリル）を添加し、反応液から、５’位水酸基遊離体、ホスファイトトリエステル体またはオリゴヌクレオチドと、沈殿促進剤とを含む沈殿混合物を分離する工程（沈殿化および固液分離工程）；
（６）工程（５）で得られた沈殿混合物に非極性溶媒を加えて反応液とする工程（溶解工程）。
以下、各工程について順に説明する。

【0218】

工程（１）（脱保護工程）
本工程は、一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドから、酸の添加により一時保護基を脱保護し、５’位水酸基遊離体を得る工程である。ここで一時保護基とは、本発明の擬似固相保護基が除去されない酸性条件下で、除去される保護基を意味する。

【0219】

本工程は、非極性溶媒中で行われる。非極性溶媒としては、前述の非極性溶媒が挙げられる。本工程以降の工程で用いられる非極性溶媒も同様である。

【0220】

本工程における一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドの溶液中の濃度は、それらが溶媒に溶解していれば特に限定されないが、好ましくは１〜３０重量％である。

【0221】

本工程に使用する酸としては、良好な脱保護が達成できさえすれば特に限定されないが、トリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリクロロ酢酸、メタンスルホン酸、塩酸、酢酸、ｐ−トルエンスルホン酸等を使用することが好ましい。良好な反応を達成できるという観点で、トリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリクロロ酢酸がより好ましく、トリフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸がさらに好ましく、トリフルオロ酢酸、トリフルオロメタンスルホン酸がさらに一層好ましく、トリフルオロ酢酸が特に好ましい。これら酸は、上記非極性溶媒で希釈しても構わない。また、前記酸を使用する際には、特定の塩基を組み合わせて、酸性度を適宜調整して使用しても構わない。本工程における酸の使用量は、一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド１モルに対し、例えば１〜１００モル、好ましくは１〜４０モルである。

【0222】

本工程の反応温度は、反応が進行しさえすれば特に限定されないが、−１０℃〜５０℃が好ましく、０℃〜４０℃がより好ましい。反応時間は、使用する一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド、酸の種類および非極性溶媒の種類、反応温度等により異なるが、例えば５分〜５時間である。

【0223】

本工程、それに続く縮合工程、および酸化または硫化工程を液中で連続して行うためには、本工程において、一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドの５’位水酸基の一時保護基の除去反応中、または除去反応後に、カチオン捕捉剤を使用することが好ましい。

【0224】

カチオン捕捉剤としては、除去された一時保護基による再保護（原料戻り）や脱保護された官能基への副反応が進行しなければ、特に限定されないが、ピロール、２−メチルピロール、３−メチルピロール、２，３−ジメチルピロール、２，４−ジメチルピロール等のピロール誘導体；インドール、４−メチルインドール、５−メチルインドール、６−メチルインドール、７−メチルインドール、５，６−ジメチルインドール、６，７−ジメチルインドール等のインドール誘導体を使用することができる。良好なカチオン捕捉効果が得られるという観点で、ピロール、３−メチルピロール、２，４−ジメチルピロール、インドール、４−メチルインドール、５−メチルインドール、６−メチルインドール、７−メチルインドール、５，６−ジメチルインドール、６，７−ジメチルインドールが好ましく、ピロール、３−メチルピロール、インドールがより好ましく、ピロール、インドールがさらに好ましく、ピロールが特に好ましい。本工程におけるカチオン捕捉剤の使用量は、一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチド１モルに対し、例えば１〜５０モル、好ましくは５〜２０モルである。

【0225】

脱保護剤として使用される酸は次工程の縮合工程中に存在すると、工程（２）で使用するホスホロアミダイト化されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドの一時保護基の脱保護を誘発するため、中和して除去することが必要である。

【0226】

本工程では、酸の中和のために有機塩基を使用することが好ましい。有機塩基としては、ピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４−トリアゾール、Ｎ−フェニルイミダゾール、２−アミノ−４，６−ジメチルピリミジン、１，１０−フェナントロリン、イミダゾール、Ｎ−メチルイミダゾール、２−クロロベンズイミダゾール、２−ブロモベンズイミダゾール、２−メチルイミダゾール、２−フェニルベンズイミダゾール、Ｎ−フェニルベンズイミダゾール、５−ニトロベンズイミダゾールが好ましく、ピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４−トリアゾール、Ｎ−フェニルイミダゾール、Ｎ−メチルイミダゾール、２−アミノ−４，６−ジメチルピリミジン、１，１０−フェナントロリンがより好ましく、ピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４−トリアゾール、Ｎ−フェニルイミダゾールがさらに好ましく、ピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ベンズイミダゾール、１，２，４−トリアゾールが特に好ましく、ピリジン、２，４，６−トリメチルピリジン、ベンズイミダゾールが最も好ましい。

【0227】

本工程における塩基の使用量は、酸１モルに対し、例えば１〜１０モルであり、好ましくは１〜３モルである。

【0228】

本工程において、特に好ましい酸と塩基との組合せは、トリフルオロ酢酸とピリジン、トリフルオロ酢酸と２，４，６−トリメチルピリジンまたはトリフルオロメタンスルホン酸とベンズイミダゾールである。

【0229】

本工程で使用する一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドに含まれる一時保護基としては、酸性条件下で脱保護が可能であり、且つ水酸基の保護基として用いられるものであれば、特に限定はされないが、例えば、トリチル基、９−（９−フェニル）キサンテニル基、９−フェニルチオキサンテニル基、１，１−ビス（４−メトキシフェニル）−１−フェニルメチル基（ジメトキシトリチル基）等のジ（Ｃ_１−６アルコキシ）トリチル基、１−（４−メトキシフェニル）−１，１−ジフェニルメチル基（モノメトキシトリチル基）等のモノ（Ｃ_１−１８アルコキシ）トリチル基等を挙げることができる。これらの中でも、脱保護のしやすさ、入手の容易さの観点から、一時保護基は、モノメトキシトリチル基、ジメトキシトリチル基であることが好ましく、ジメトキシトリチル基であることがより好ましい。

【0230】

本工程で使用する一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドは、核酸塩基のアミノ基およびイミノ基、リボース残基の３’位水酸基、並びにデオキシリボース残基の３’位水酸基から選ばれる少なくとも１個の基が本発明の擬似固相保護基で保護されていることが好ましく、リボース残基の３’位水酸基またはデオキシリボース残基の３’位水酸基が本発明の擬似固相保護基で保護されていることがより好ましい。

【0231】

本工程で使用する一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドは、さらに好ましくは下記式（ＶＩ）で表される化合物である。

【0232】

【化29】

【0233】

［式中、
ｍ”は、０以上の整数を示し、
ｍ”＋１個のＢａｓｅは、それぞれ独立して、保護されていてもよい核酸塩基を示し、
Ｑ’は、酸性条件下で除去可能な一時保護基を示し、
ｍ”＋１個のＸは、それぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、保護されていてもよい水酸基、或いはリボース環またはデオキシリボース環の２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基（好ましくは水素原子、ハロゲン原子または保護されていてもよい水酸基）を示し、
ｍ”個のＲ^１０は、それぞれ独立して、酸素原子または硫黄原子を示し、
ｍ”個のＷＧは、それぞれ独立して、電子吸引性基を示し、
Ｌ−Ｙ−Ｚは、前記と同義である。］

【0234】

ｍ”が０である場合、化合物（ＶＩ）は一時保護基含有ヌクレオシドであり、ｍ”が１以上である場合、化合物（ＶＩ）は一時保護基含有オリゴヌクレオチドである。式（ＶＩ）において、ｍ”は、４９以下が好ましく、２９以下がより好ましく、１９以下がさらに好ましく、４以下が特に好ましく、２以下が最も好ましい。

【0235】

式（ＶＩ）におけるハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子が好ましく、フッ素原子がより好ましい。

【0236】

式（ＶＩ）における「保護されていてもよい水酸基」の保護基としては、特に限定されず、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ ＧＲＯＵＰＳ ＩＮ ＯＲＧＡＮＩＣ ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ）、第３版、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（ＪＯＨＮ ＷＩＬＬＹ＆ＳＯＮＳ）出版（１９９９年）等に記載されている任意の保護基を挙げることができる。具体的には、メチル基、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、メトキシメチル基、メトキシエチル基、２−テトラヒドロピラニル基、エトキシエチル基、シアノエチル基、シアノエトキシメチル基、フェニルカルバモイル基、１，１−ジオキソチオモルホリン−４−チオカルバモイル基、アセチル基、ピバロイル基、ベンゾイル基、トリメチルシリル基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基、［（トリイソプロピルシリル）オキシ］メチル（Ｔｏｍ）基、１−（４−クロロフェニル）−４−エトキシピペリジン−４−イル（Ｃｐｅｐ）基等を挙げることができる。これらの中でも、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、またはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基であることが好ましく、経済性および入手の容易さの観点から、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基であることが特に好ましい。

【0237】

式（ＶＩ）における「リボース環またはデオキシリボース環の２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基」としては、同一のリボース環またはデオキシリボース環上の２位炭素原子および４位炭素原子と結合するものである限り、特に限定はない。この２価の有機基としては、例えば、置換されていてもよいＣ_２−７アルキレン基、並びに−Ｏ−、−ＮＲ^１３−（Ｒ^１３は水素原子またはＣ_１−６アルキル基を示す）、−Ｓ−、−ＣＯ−、−ＣＯＯ−、−ＯＣＯＮＲ^１４−（Ｒ^１４は水素原子またはＣ_１−６アルキル基を示す）および−ＣＯＮＲ^１５−（Ｒ^１５は水素原子またはＣ_１−６アルキル基を示す）から選ばれる２価のリンカーと、置換されていてもよいＣ_１−７アルキレン基とから構成される２価の有機基等が挙げられる。Ｃ_１−７アルキレン基およびＣ_２−７アルキレン基が有していてもよい置換基としては、例えば、メチリデン基（ＣＨ_２＝）が挙げられる。

【0238】

「２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基」としては、置換されていてもよいＣ_２−７アルキレン基、−ＯＲｉ−（Ｒｉは４位炭素原子と結合するＣ_１−６アルキレン基を示す）、−Ｏ−ＮＲ^１３−Ｒｊ−（Ｒｊは４位炭素原子と結合するＣ_１−６アルキレン基を示し、Ｒ^１３は前記と同義を示す）、−Ｏ−Ｒｋ−Ｏ−Ｒｌ−（ＲｋはＣ_１−６アルキレン基を示し、Ｒｌは４位炭素原子と結合架橋するＣ_１−６アルキレン基を示す）が好ましく、−ＯＲｉ−（Ｒｉは前記と同義を示す）、−Ｏ−ＮＲ^１３−Ｒｊ−（ＲｊおよびＲ^１３は前記と同義を示す）、−Ｏ−Ｒｋ−Ｏ−Ｒｌ−（ＲｋおよびＲｌは前記と同義を示す）がより好ましい。Ｒｉ、Ｒｊ、ＲｋおよびＲｌで示されるＣ_１−６アルキレン基としては、それぞれ独立して、メチレン基またはエチレン基が好ましい。

【0239】

「２位炭素原子および４位炭素原子と結合する２価の有機基」としては、−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＮＲ^１３−ＣＨ_２−（Ｒ^１３は前記と同義を示す）、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−がより好ましく、−Ｏ−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＮＨ−ＣＨ_２−、−Ｏ−Ｎ（ＣＨ_３）−ＣＨ_２−、−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ−ＣＨ_２−（それぞれ、左側が２位炭素原子に結合し、右側が４位炭素原子に結合する。）がさらに好ましい。

【0240】

式（ＶＩ）中のｍ”＋１個のＸは、それぞれ独立して、好ましくは水素原子、ハロゲン原子、または保護されていてもよい水酸基であり、より好ましくは水素原子または保護されていてもよい水酸基である。

【0241】

ｍ”個のＲ^１０は、好ましくは酸素原子である。
ＷＧの電子吸引性基としては、例えば、シアノ基、ニトロ基等が挙げられ、好ましくはシアノ基である。

【0242】

化合物（ＶＩ）は、自体公知の方法（例えば、上述の特許文献１または２に記載されている方法、エステル化、シリル化等）またはこれに準ずる方法で合成することができる。例えば、ｍ”が０であり、Ｌがスクシニル基である化合物（ＶＩ）は、例えば、次式のように、５’位水酸基が一時保護基により保護されたヌクレオシド（ａ）を、塩基存在下、コハク酸無水物と反応させることにより、３’位水酸基にコハク酸が導入された化合物（ｂ）を得、次いで得られた化合物（ｂ）を、縮合剤の存在下、Ｚ−Ｙ−Ｈと脱水縮合させることにより合成することができる。

【0243】

【化30】

【0244】

ヌクレオシド（ａ）から化合物（ｂ）の変換反応は、反応に不活性な溶媒中で行うのが有利である。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン系溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族系溶媒、またはペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン等の脂肪族系溶媒、またはジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、シクロペンチルメチルエーテル等のエーテル系溶媒、およびこれらの混合溶媒が好ましい。中でもジクロロメタン、またはクロロホルムが特に好ましい。

【0245】

化合物（ＶＩ）合成に使用される塩基としては、特に限定されないが、有機塩基が好ましく、トリエチルアミンがより好ましい。

【0246】

化合物（ＶＩ）合成のための脱水縮合反応は、反応に不活性な溶媒中で行うのが有利である。このような溶媒としては、反応が進行する限り特に限定されないが、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン系溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族系溶媒、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン等の脂肪族系溶媒、またはこれらの組合せが好ましい。中でもジクロロメタン、クロロホルムが特に好ましい。

【0247】

化合物（ｂ）とＺ−Ｙ−Ｈとの縮合反応に使用する縮合剤としては、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミドおよびその塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）、ヘキサフルオロリン酸（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリピロリジノホスホニウム（ＰｙＢｏｐ）、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム テトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾトリアゾリウム−３−オキシド ヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）等が挙げられる。中でもＨＢＴＵ、ＨＣＴＵ、Ｎ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミドおよびその塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ）が好ましい。

【0248】

縮合剤の使用量は、化合物（ｂ）１モルに対して、例えば１〜１０モル、好ましくは１〜５モルである。また、Ｚ−Ｙ−Ｈの使用量は、化合物（ｂ）１モルに対して１〜１０モル使用することができ、好ましくは１〜５モルである。反応温度は、反応が進行しさえすれば特に限定されないが、−１０℃〜５０℃が好ましく、０℃〜３０℃がより好ましい。反応時間は、例えば３０分〜７０時間である。

【0249】

Ｌがスクシニル基以外である化合物（ＶＩ）も、上記合成方法におけるコハク酸無水物に代えて、対応する酸無水物、対応するジカルボン酸ハライド、対応するジカルボン酸の活性エステル等を用いて、同様の反応を行うことにより合成することができる。また、ｍ”が１以上である化合物（ＶＩ）は、ｍ”が０である化合物（ＶＩ）を出発原料として用いて５’末端伸長プロセスを繰り返すことによって合成することができる。

【0250】

工程（２）（縮合工程）
本工程は、工程（１）で得られた５’位水酸基遊離体と、ホスホロアミダイト化されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドとを縮合させて、ホスファイトトリエステル体を得る工程である。

【0251】

本工程で使用するホスホロアミダイト化されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドは、ホスホロアミダイト化試薬を反応させる公知の方法（Ｍ．Ｈ．Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １９８７，１５４，２８７−３１３；Ｓ．Ｌ．Ｂｅａｕｃａｇｅ ａｎｄ Ｍ．Ｈ．Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ １９８１，２２，１８５９−１８６２．）に従い合成することができる。ホスホロアミダイト化試薬は市販されており、容易に入手することができる。

【0252】

本工程で使用されるホスホロアミダイト化されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドは、好ましくは下記式（ＶＩＩ）で表される化合物である。

【0253】

【化31】

【0254】

［式中、
ｑ’は、０以上の整数を示し、
Ｒ^１１およびＲ^１２は、それぞれ独立して、アルキル基を示すか、または隣接する窒素原子と一緒になって形成する５または６員の飽和環状アミノ基を示し、かかる飽和環状アミノ基は、窒素原子の他に環構成原子として酸素原子または硫黄原子を１個有していてもよく、
他の記号は前記と同義である。］

【0255】

ｑ’が０である場合、化合物（ＶＩＩ）はホスホロアミダイト化されたヌクレオシドであり、ｑ’が１以上である場合、化合物（ＶＩＩ）はホスホロアミダイト化されたオリゴヌクレオチドである。本工程で使用する化合物（ＶＩＩ）において、ｑ’は、４９以下が好ましく、２９以下がより好ましく、１９以下がさらに好ましく、４以下が特に好ましく、２以下が最も好ましい。

【0256】

本工程の縮合反応の進行が遅い場合には、縮合剤（例えば、ピリジン・トリフルオロ酢酸塩、テトラゾール、５−ベンジルチオ−１Ｈ−テトラゾール、４，５−ジシアノイミダゾール等）を添加してもよい。

【0257】

本工程においては、反応液の酸性度が高くなると、一時保護基が脱離する副反応が生じることがあるので、反応液の酸性化を抑える目的でＮ−メチルイミダゾールを添加することが好ましい。酸性度の調整のために添加するＮ−メチルイミダゾールの使用量は、中和の際に使用する塩基１モルに対し、好ましくは０．１〜１モル、より好ましくは０．５モル程度である。

【0258】

本工程は、工程（１）と同様に、非極性溶媒中で行われる。非極性溶媒の説明は、工程（１）における説明と同じである。

【0259】

本工程におけるホスホロアミダイト化されたヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドの使用量は、工程（１）で得られた５’位水酸基遊離体１モルに対して、例えば１〜１０モル、好ましくは１〜５モルである。

【0260】

本工程における反応温度は、反応が進行しさえすれば特に限定されないが、０℃〜１００℃が好ましく、２０℃〜５０℃がより好ましい。反応時間は、使用する原料の種類、反応温度等によって異なるが、例えば５分〜２４時間である。

【0261】

工程（３）（酸化または硫化工程）
本工程は、工程（２）で得られたホスファイトトリエステル体に酸化剤または硫化剤を反応させることにより、そのホスファイトトリエステル結合をホスフェートトリエステル結合またはチオホスフェートトリエステル結合へと変換させて、生成オリゴヌクレオチドを得る工程である。

【0262】

本工程で使用する酸化剤としては、他の部位を酸化することなく、ホスファイトトリエステル結合を、ホスフェートトリエステル結合に酸化する能力がありさえすれば、特に限定されないが、ヨウ素、（１Ｓ）−（＋）−（１０−カンファニルスルフォニル）オキサジリジン、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド（ＴＢＨＰ）、２−ブタノンペルオキシド、１，１−ジヒドロペルオキシシクロドデカン、ビス（トリメチルシリル）ペルオキシド、ｍ−クロロ過安息香酸を使用することが好ましい。良好な酸化反応が達成できるという観点から、ヨウ素、（１Ｓ）−（＋）−（１０−カンファニルスルフォニル）オキサジリジン、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、２−ブタノンペルオキシド、１，１−ジヒドロペルオキシシクロドデカンがより好ましく、ヨウ素、（１Ｓ）−（＋）−（１０−カンファニルスルフォニル）オキサジリジン、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド、２−ブタノンペルオキシドがさらに好ましく、ヨウ素、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドがさらに一層好ましく、ヨウ素が特に好ましい。かかる酸化剤は、０．０５〜２Ｍの濃度になるように適当な溶媒で希釈して使用することができる。かかる希釈溶媒としては、反応に不活性な溶媒であれば特に限定されないが、ピリジン、ＴＨＦ、ジクロロメタン、水、またはこれらの組合せを挙げることができる。中でも、例えば、ヨウ素／水／ピリジン―ＴＨＦあるいはヨウ素／ピリジン―酢酸、過酸化剤（ＴＢＨＰ）／ジクロロメタンまたはｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシド／ノナンを用いるのが好ましい。

【0263】

本工程に使用する硫化剤としては、ホスファイトトリエステル結合を、チオホスフェートトリエステル結合に変換しうる能力がありさえすれば、特に限定されないが、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（ＤＤＴＴ）、３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン−１，１−ジオキシド（Ｂｅａｕｃａｇｅ試薬）、３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン、フェニルアセチルジスルフィド（ＰＡＤＳ）、テトラエチルチウラムジスルフィド（ＴＥＴＤ）、３−アミノ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（ＡＤＴＴ）、硫黄を使用することが好ましい。良好な反応が進行しうるという観点で、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（ＤＤＴＴ）、３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン−１，１−ジオキシド（Ｂｅａｕｃａｇｅ試薬）、３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン、フェニルアセチルジスルフィド（ＰＡＤＳ）がより好ましく、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン、３Ｈ−１，２−ベンゾジチオール−３−オン−１，１−ジオキシドがさらに好ましく、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオンが特に好ましい。かかる硫化剤は、０．０５〜２Ｍの濃度になるように適当な溶媒で希釈して使用することができる。かかる希釈溶媒としては、反応に不活性な溶媒であれば特に限定されないが、例えば、ジクロロメタン、アセトニトリル、ピリジンまたはこれら任意の混合溶媒が挙げられる。

【0264】

酸化剤または硫化剤の使用量は、工程（２）で得られたホスファイトトリエステル体１モルに対し、例えば１〜５０モル、好ましくは１〜５モルである。

【0265】

反応温度は、反応が進行しさえすれば特に限定されないが、０℃〜１００℃が好ましく、２０℃〜５０℃がより好ましい。反応時間は、ホスファイトトリエステル体の種類、使用する酸化剤または硫化剤の種類、反応温度等によって異なるが、例えば１分〜３時間である。

【0266】

工程（４）（沈殿促進剤の添加工程）
本工程は、工程（１）（脱保護工程）と工程（２）（縮合工程）の間、工程（２）と工程（３）（酸化または硫化工程）の間、工程（３）の後のいずれかにおいて、反応液に極性溶媒（好ましくはアセトニトリル）を添加して反応液から、沈殿したオリゴヌクレオチドを分離する工程（５）（沈殿化および固液分離工程）での沈殿を促進するために、工程（５）の前であって、工程（１）の前、工程（１）と工程（２）の間、工程（２）と工程（３）の間および工程（３）の後のいずれかにおいて、反応液に本発明の沈殿促進剤を加える工程である。

【0267】

本工程において、本発明の沈殿促進剤は１種のみを添加してもよく、２種以上を添加してもよい。本工程における本発明の沈殿促進剤の使用量は、最初の工程（１）で使用される一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドに対して、好ましくは０．１モル当量以上、より好ましくは０．５モル当量以上、さらに好ましくは１モル当量以上である。この上限に特に限定はないが、コストの観点から、本発明の沈殿促進剤の使用量は、最初の工程（１）で使用される一時保護基含有ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドに対して、好ましくは１０モル当量以下、より好ましくは５モル当量以下、さらに好ましくは２．５モル当量以下である。

【0268】

工程（５）（沈殿化および固液分離工程）
本工程は、工程（４）（沈殿促進剤の添加工程）の後であって、工程（１）（脱保護工程）と工程（２）（縮合工程）の間、工程（２）と工程（３）（酸化または硫化工程）の間、工程（３）の後のいずれかにおいて、沈殿促進剤を含む反応液に極性溶媒（好ましくはアセトニトリル）を添加し、反応液から、工程（１）で得られた５’位水酸基遊離体、工程（２）で得られたホスファイトトリエステル体、または工程（３）で得られた生成オリゴヌクレオチド（以下、５’位水酸基遊離体、ホスファイトトリエステル体および生成オリゴヌクレオチドをまとめて「目的物」と称することがある。）と、沈殿促進剤とを含む沈殿混合物を分離する工程である。

【0269】

極性溶媒としては、前述の極性溶媒が挙げられる。本工程で用いる極性溶媒としては、特にアセトニトリルが好ましい。

【0270】

目的物の回収率を高めるために、本工程における極性溶媒（好ましくはアセトニトリル）の添加量は、目的物を含有する反応液中に含まれる非極性溶媒１ｍＬに対して、好ましくは０．５ｍＬ以上、より好ましくは１ｍＬ以上、さらに好ましくは２ｍＬ以上であり、好ましくは２０ｍＬ以下、より好ましくは１０ｍＬ以下、さらに好ましくは８ｍＬ以下である。

【0271】

アセトニトリルを使用する場合、目的物のアセトニトリル中へのロスを最小限とするために水を含んでいてもよい。この場合、アセトニトリル中の水の含有量は、１〜１０％（ｖ／ｖ）が好ましく、３〜８％（ｖ／ｖ）がより好ましい。水の含有量が低すぎる場合は、目的物のアセトニトリル中へのロスが増える場合があり、水の含有量が高すぎる場合は、不要物のアセトニトリル中への除去が不十分となる傾向がある。

【0272】

工程（６）（溶解工程）
本工程は、工程（５）（沈殿化および固液分離工程）で得られた沈殿混合物に非極性溶媒を加えて反応液とする工程であり、本工程によって、上記工程（１）〜（３）からなる製造サイクルを繰り返すことができる。

【0273】

本工程で使用し得る非極性溶媒の説明は、工程（１）の説明と同じである。本工程で得られる反応液中の沈殿混合物の濃度は、沈殿混合物が非極性溶媒に溶解していれば特に限定されないが、好ましくは１〜３０重量％である。

【0274】

本発明のオリゴヌクレオチドの製造方法では、工程（５）（沈殿化および固液分離工程）および工程（６）（溶解工程）を、工程（３）（酸化または硫化工程）の後に実行することが好ましい。

【0275】

本発明のオリゴヌクレオチドの製造方法は、下記工程（７）を含んでいてもよい：
（７）オリゴヌクレオチドの保護基を全て除去し、オリゴヌクレオチド（以下「非保護オリゴヌクレオチド」と称することがある。）を単離する工程（脱保護および単離工程）。

【0276】

工程（７）（脱保護および単離工程）
本発明のオリゴヌクレオチドの製造方法においては、好ましくは工程（５）の後に、保護基の種類・性質に応じて、脱保護を行い、オリゴヌクレオチドを単離することができる。脱保護の方法としては、例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（ＰＲＯＴＥＣＴＩＶＥ ＧＲＯＵＰＳ ＩＮ ＯＲＧＡＮＩＣ ＳＹＮＴＨＥＳＩＳ）、第３版、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ（ＪＯＨＮ ＷＩＬＬＹ＆ＳＯＮＳ）出版（１９９９年）等に記載されている脱保護方法に従い、オリゴヌクレオチドの全ての保護基を除去する工程を行うことができる。具体的には、本発明の擬似固相保護基、および核酸塩基の保護基であるフェノキシアセチル基、アセチル基等、リン酸骨格を保護しているシアノエチル基等は、アンモニア水、アンモニア水／エタノール溶液、またはアンモニア水とメチルアミン水溶液の混合液で処理することにより、全て除去することができる。また、５’水酸基の保護基は、工程（１）で使用される酸またはそれらを適宜希釈した溶液で処理することにより除去することができる。保護基を有しない、オリゴヌクレオチドは酵素により容易に分解されやすいため、空気清浄度管理下でオリゴヌクレオチドを単離することが好ましい。

【0277】

上記各工程における反応の進行の確認は、いずれも一般的な液相有機合成反応と同様の方法を適用できる。即ち、薄層シリカゲルクロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等を用いて反応を追跡することができる。

【0278】

工程（５）（沈殿化および固液分離工程）により得られた５’位水酸基遊離体、ホスファイトトリエステル体または生成オリゴヌクレオチド、あるいは工程（７）（脱保護および単離工程）により得られた非保護オリゴヌクレオチドは、さらに有機合成反応を施すことにより、所望の誘導体へと導くこともできる。本発明によって製造されたオリゴヌクレオチド等は、各種人体用または動物用の医薬品（ＲＮＡ、ＤＮＡ、オリゴ核酸医薬等）、食品（機能性食品、特定保健用食品等）、化成品、生体用や工業用の高分子材料等の各種用途に使用することができる。

【実施例】

【0279】

以下、実施例等に沿って本発明をさらに詳細に説明するが、これら実施例等は本発明の範囲を何ら限定するものではない。また、以下に記載の溶媒比は、特段の記載が無い限り、体積比を表す。また、本発明において使用する試薬や装置、材料は特に言及されない限り、商業的に入手可能である。また、本明細書において、アミノ酸等を略号で表示する場合、各表示は特に言及しない限り、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅによる略号あるいは当該分野における慣用略号に基づくものである。

【0280】

実施例等で使用される基および化合物の略号は、以下のとおりである。
Ｍｅ：メチル基
ＤＭＴｒ：４，４’−ジメトキシトリチル基
ＴＢＤＭＳ：ｔ−ブチルジメチルシリル基
Ｂｏｃ：ｔ−ブトキシカルボニル基
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル
Ｔｒｔ：トリチル基
ＴＯＢ：３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル基
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＨＢＴＵ：Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’,Ｎ’-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート

【0281】

参考例１：ホスホロチオエート２量体の液中連続合成

【0282】

【化32】

【0283】

アルゴン雰囲気下、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］スクシネート（５０４ｍｇ，３２７μｍｏｌ）をジクロロメタン（７．５ｍＬ）に溶解し、ピロール（２１３μＬ，３．２７ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（２９２μＬ，３．９３ｍｍｏｌ）を加えて室温で１５分間攪拌し、反応の完結を薄層クロマトグラフィーにより確認した。反応混合液をピリジン（３１６μＬ，３．９３ｍｍｏｌ）、１−メチルイミダゾール（１５６μＬ，１．９６ｍｍｏｌ）で中和した後、４，５−ジシアノイミダゾール（１１６ｍｇ，９８２ｍｍｏｌ）、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル）］−ホスホロアミダイト（６０９ｍｇ，８１８μｍｏｌ）のアセトニトリル溶液を加え、室温で６０分間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認した。さらに、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（１８４ｍｇ，８９８μｍｏｌ）を加えて室温で３０分間攪拌した後、反応液中にメタノール（１００ｍＬ）を添加し、析出した固体をキリヤマ漏斗を用いた吸引濾過後、乾燥して５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］ スクシネート（５６７ｍｇ，収率９１％）を白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，Ａｒ−ＣＨ_３），１．２８（ｂｒ，ｓ，９０Ｈ，（ＣＨ_２）_１５），１．３０（ｓ，３Ｈ，Ｎ_１^５−ＣＨ_３），１．４６（ｓ，３Ｈ，Ｎ_２^５−ＣＨ_３），１．７３（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２ＣＨ_２），２．２８（ｍ，２Ｈ，２’_１−Ｈ），２．４１（ｍ，２Ｈ，２’_２−Ｈ），２．６８（ｍ，２Ｈ，５’_１−Ｈ ａｎｄ ｍ，４Ｈ，ｓｕｃｃｉｎｙｌ−ＣＨ_２ＣＨ_２），３．４４（ｍ，２Ｈ，５’_２−Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ，ＤＭＴｒ−ＯＣＨ_３），３．９５（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２），４．１０（ｍ，１Ｈ，４’_１−Ｈ），４．３１（ｍ，４Ｈ，ｃｙａｎｏｅｔｈｙｌ−ＣＨ_２ＣＨ_２ ａｎｄ ｍ，１Ｈ，４’_２−Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ_２−ｓｕｃｃｉｎｙｌ），５．２６（ｍ，１Ｈ，３’_１−Ｈ），５．３２（ｍ，１Ｈ，３’_２−Ｈ），６．２７（ｍ，１Ｈ、１’_１−Ｈ），６．３８（ｍ，１Ｈ、１’_２−Ｈ），６．５３（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．８４−７．２９（ｍ，１３Ｈ，ＤＭＴｒ−Ａｒ−Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ，Ｎ_１^６−Ｈ），７．５６（ｍ，１Ｈ，Ｎ_２^６−Ｈ）
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ａｒ−ＣＨ_３），１．２８（ｂｒ，ｓ，９０Ｈ，（ＣＨ_２）_１５），１．３０（ｓ，３Ｈ，Ｎ_１^５−ＣＨ_３），１．４６（ｓ，３Ｈ，Ｎ_２^５−ＣＨ_３），１．７３（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２ＣＨ_２），２．４１（ｍ，２Ｈ，２’_２−Ｈ），２．６８（ｍ，２Ｈ，２’_１−Ｈ ａｎｄ ｍ，４Ｈ，ｓｕｃｃｉｎｙｌ−ＣＨ_２ＣＨ_２），２．７７（ｍ，２Ｈ，５’_１−Ｈ），３．４４（ｍ，２Ｈ，５’_２−Ｈ），３．７９（ｓ，６Ｈ，ＤＭＴｒ−ＯＣＨ_３），３．９５（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２），４．１７（ｍ，１Ｈ，４’_１−Ｈ），４．３１（ｍ，４Ｈ，ｃｙａｎｏｅｔｈｙｌ−ＣＨ_２ＣＨ_２ ａｎｄ ｍ，１Ｈ，４’_２−Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ_２−ｓｕｃｃｉｎｙｌ），５．３３（ｍ，１Ｈ，３’_１−Ｈ ａｎｄ ｍ，１Ｈ，３’_２−Ｈ），６．２７（ｍ，１Ｈ、１’_１−Ｈ），６．３８（ｍ，１Ｈ、１’_２−Ｈ），６．５３（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．８４−７．２９（ｍ，１３Ｈ，ＤＭＴｒ−Ａｒ−Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ，Ｎ_１^６−Ｈ），７．５６（ｍ，１Ｈ，Ｎ_２^６−Ｈ）

【0284】

参考例２：ホスホロチオエート５量体の液中連続合成
参考例１同様の操作を４回繰り返して、５’−Ｏ−（４，４−ジメトキシトリチル）−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］ スクシネート（１．９４ｇ）を得た。

【0285】

参考例３：ホスホロチオエート１０量体の液中連続合成
参考例１と同様の操作を９回繰り返して、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−イル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル スクシネート（１．４１ｇ）を得た。

【0286】

参考例４：ホスホロチオエート２０量体の液中連続合成
参考例１と同様の操作を１９回繰り返して、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−イル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル スクシネート（１．６１ｇ）を得た。

【0287】

比較例１：メチル ３，４，５−トリ（１６−メチルヘプタデカン−１−イルオキシ）ベンゾエートの合成
（１）１６−メチルヘプタデカン−１−イルブロミドの合成

【0288】

【化33】

【0289】

１６−メチルヘプタデカン−１−イルアルコール（５．００ｇ，１８．５ｍｍｏｌ）を臭化水素酸（５０ｍＬ）に溶解し、濃硫酸（８４μＬ，１．５９ｍｍｏｌ）を添加して１００℃で１６時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認した後、反応液を室温まで冷却し、ヘキサン（１５０ｍＬ）を加えた。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で２回、飽和食塩水（５０ｍＬ）で１回洗浄した後、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ショートシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン）で精製し、目的の化合物（５．５６ｇ，収率９０％）を得た。

【0290】

（２）メチル ３，４，５−トリ（１６−メチルヘプタデカン−１−イルオキシ）ベンゾエートの合成

【0291】

【化34】

【0292】

メチル ３，４，５−トリヒドロキシベンゾエート（１．０３ｇ，５．５７ｍｍｏｌ）、１６−メチル−ヘプタデカニルブロミド（５．５６ｇ，１６．７ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３．８５ｇ，２７．９ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０．０ｍＬ）に溶解し、１１０℃で１６時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認後、反応液を室温まで冷却し、酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えた。有機層を、水（１００ｍＬ）で２回、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）で１回、飽和食塩水（１００ｍＬ）で１回洗浄後、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮することで目的の化合物（４．６６ｇ，収率８８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８３−０．９０（ｍ，１８Ｈ，−ＣＨ_３），１．０５−１．５１（ｍ，８１Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−（ＣＨ_２）_１３−ＣＨ（ＣＨ_３）_２），１．７０−１．８４（ｍ，６Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−（ＣＨ_２）_１３−ＣＨ（ＣＨ_３）_２），３．８８（ｓ，３Ｈ，Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３），３．９９−４．０２（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２），７．２５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0293】

比較例２：メチル ４−オクタデシルオキシベンゾエートの合成

【0294】

【化35】

【0295】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（２．７２ｇ，１９．７ｍｍｏｌ）、メチル ４−ヒドロキシベンゾエート（１．００ｇ，６．５７ｍｍｏｌ）、１−ブロモオクタデカン（２．６３ｇ，７．８８ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６０ｍＬ）に溶解し、９０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液に酢酸エチル（１００ｍＬ）とテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）を加え、有機層を、水（１００ｍＬ）で３回、飽和食塩水（１００ｍＬ）で１回で洗浄後、有機層を減圧留去した。濃縮残渣に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加え、７０℃に加温し溶解させた後、５℃まで冷却し、目的の化合物（２．６１ｇ，収率９８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．２６−１．４９（ｍ，３０Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．７６−１．８３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），３．８８（ｓ，３Ｈ，−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３），４．００（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），６．９０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），７．９８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）

【0296】

実施例１：メチル ３，５−ビス（オクタデシルオキシ）ベンゾエートの合成

【0297】

【化36】

【0298】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（１９．９ｇ，１４４ｍｍｏｌ）、メチル ３，５−ジヒドロキシベンゾエート（３．６０ｇ，２１．４ｍｍｏｌ）、１−ブロモオクタデカン（１５．５ｇ，４６．７ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）に溶解し、７０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（８００ｍＬ）中に注ぎ込み沈殿化し、固体を得た。得られた固体をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、メタノール（４００ｍＬ）で固体を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（１３．９ｇ，収率９７％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．２５−１．５５（ｍ，７６Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．７７（ｍ，４Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），３．８９（ｓ，３Ｈ，Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ_３），３．９６（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），６．６３（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0299】

実施例２：メチル ３，５−ビス（ドコシルオキシ）ベンゾエートの合成

【0300】

【化37】

【0301】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（２０．０ｇ，１４５ｍｍｏｌ）、メチル ３，５−ジヒドロキシベンゾエート（３．６０ｇ，２１．４ｍｍｏｌ）、１−ブロモドコサン（１７．９ｇ，４６．０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）に溶解し、７０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（１．００Ｌ）中に注ぎ込み沈殿化し、固体を得た。得られた固体をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解し、メタノール（４００ｍＬ）で固体を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（１６．１ｇ，収率９６％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＣＨ_３），１．２５−１．５５（ｍ，７６Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），１．７７（ｍ，４Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），３．８９（ｓ，３Ｈ，Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ_３），３．９６（ｔ，４Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），６．６３（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0302】

実施例３：２，３，４−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾフェノン

【0303】

【化38】

【0304】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（４．３５ｇ，３１．５ｍｍｏｌ）、２，３，４−トリヒドロキシベンゾフェノン（１．６１ｇ，７．００ｍｍｏｌ）、１−ブロモオクタデカン（７．３２ｇ，２２．０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解し、８０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（２００ｍＬ）中に注ぎ込み沈殿化し、固体を得た。得られた固体をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、メタノール（３００ｍＬ）で固体を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（６．３１ｇ，収率９１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，−ＣＨ_３），１．１１−１．５５（ｍ，９０Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．７４−１．８７（ｍ，４Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），３．８８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−Ｏ−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），３．９９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−Ｏ−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），４．０２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−Ｏ−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），６．６９（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），７．１２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），７．４１（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．５３（ｍ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．７７（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0305】

実施例４：３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）トルエンの合成

【0306】

【化39】

【0307】

水素雰囲気下、２−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ−４−メトキシ−ベンズアルドキシム（４８７ｍｇ，４７０μｍｏｌ）をＴＨＦ（４０ｍＬ）とメタノール（１０ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、１０重量％Ｐｄ／Ｃ（５３．３ｍｇ）を加えた後、室温で６４時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認後、反応液をセライトろ過し、濾液にアセトニトリル（２００ｍＬ）を加え、固体を析出させた。固体をろ取し、乾燥して、目的の化合物（３９１ｍｇ，収率９３％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），１．２６−１．８０（ｍ，９６Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），２．２７（ｓ，３Ｈ，Ａｒ−Ｍｅ），３．８９−３．９６（ｍ，６Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），６．３５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0308】

実施例５：メチル ３，４，５−トリス［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシ］ベンゾエートの合成

【0309】

【化40】

【0310】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（１．３９ｇ，１０．１ｍｍｏｌ）、メチル ３，５−ヒドロキシベンゾエート（１８１ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルクロリド（２．８１ｇ，３．０１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解し、７０℃で１８時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（５０ｍＬ）中に注ぎ込み沈殿化し固体を得た。得られた固体をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解し、アセトニトリル（２００ｍＬ）で固体を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的物の粗生成物を得た。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／ヘキサン（体積比）＝１／２〜１／１）にて精製し、目的の化合物（２．３１ｇ，８１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−Ｏ（ＣＨ２）_１７ＣＨ_３），１．２５−１．７４（ｍ，２９１Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２＋Ｎ^５−ＣＨ_３）_１６ＣＨ_３），３．７５（ｍ，６Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３），３．９０（ｓ，３Ｈ，−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３），３．８６−３．９４（２ｍ，１２Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３），５．０２（ｓ，６Ｈ，３×−Ｈ_２Ｃ−Ａｒ），６．５９（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．６２（ｓ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．３８（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0311】

実施例６：メチル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾエートの合成

【0312】

【化41】

【0313】

１−ブロモオクタデカン（６４．０ｇ，１９２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（７９．６ｇ，５７６ｍｍｏｌ）、３，４，５−トリヒドロキシメチルベンゾエート（１１．０ｇ，６０．０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６００ｍＬ）に溶解し、９０℃で１６時間撹拌した。薄層クロマトグラフィー（ヘキサン／ジクロロメタン（体積比）＝２／１およびジクロロメタン／メタノール（体積比）＝９／１）により反応の完結を確認後、反応液を水（２．００Ｌ）中に注ぎ込み、固体を析出させた後、濾過乾燥した。乾燥した固体をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解し、アセトニトリル（１．５０Ｌ）を加えて固体を析出させ、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（５６．７ｇ，１００％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３），１．２１−１．５１（ｍ，９０Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．７０−，６Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−（ＣＨ_２）_１５−ＣＨ_３），３．８９（ｓ，３Ｈ，Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３），３．９９−４．０３（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２），４．９９（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．２５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0314】

実施例７：３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル アセテートの合成
（１）３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコールの合成

【0315】

【化42】

【0316】

アルゴン雰囲気下、メチル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾエート（１０．０ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）に溶解し、水素化アルミニウムリチウム（８１０ｍｇ，２１．３ｍｍｏｌ）を添加し、室温で３０分間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認し、４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（６．０ｍＬ）によりクエンチし、反応液を濾過した。濾液にメタノール（５００ｍＬ）を加えて固体を析出させ、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（９．６５ｇ，収率９９％）を得た。

【0317】

（２）３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル アセテートの合成

【0318】

【化43】

【0319】

３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコール（１０．０ｇ，１０．５ｍｍｏｌ）、無水酢酸（９．９０ｍＬ，１０５ｍｍｏｌ）、ピリジン（８．４０ｍＬ，１０５ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（１２８ｍｇ，１．０５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、室温で５分間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認し、アセトニトリル（５００ｍＬ）を加えて、固体を析出させ、ろ取した。得られた固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／ジクロロメタン＝２／１−１／１）により精製し、目的の化合物（１０．４ｇ）を白色固体として定量的に得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，−ＣＨ_３），１．２６−１．５０（ｍ，９０Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．７０−１．８３（ｍ，６Ｈ，−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−（ＣＨ_２）_１５−ＣＨ_３），２．１０（ｓ，３Ｈ，Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３），３．９２−３．９８（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−ＯＣＨ_２），４．９９（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ_２），６．５４（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0320】

実施例８：１，２，３−トリ（オクタデシルオキシ）プロパンの合成

【0321】

【化44】

【0322】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（１２．４ｇ，９０．０ｍｍｏｌ）、グリセロール（９２１ｍｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、１−ブロモオクタデカン（１１．０ｇ，３３．０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解し、１１０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（４００ｍＬ）中に注ぎ込み沈殿させ、固体を得た。得られた固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン）で精製し、目的の化合物（４．３０ｇ，５１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，−ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３），１．１８−１．３６（ｍ，９５Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３，ＨＣ（ＣＨ_２）_２），１．５３−１．６２（ｍ，６Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），３．６２−３．６６（ｍ，６Ｈ，−ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３）

【0323】

実施例９：１，３−ジ（オクタデシルオキシ）−２，２−ジ（オクタデシルオキシメチル）プロパンの合成

【0324】

【化45】

【0325】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（６．１０ｇ，４４．１ｍｍｏｌ）、ペンタエリトリトール（５０１ｍｇ，３．６７ｍｍｏｌ）、１−ブロモオクタデカン（５．５０ｇ，１６．５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３５ｍＬ）に溶解し、１１０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（４００ｍＬ）中に注ぎ込み沈殿化し、固体を得た。得られた固体をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、メタノール（３００ｍＬ）で固体を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（３．５７ｇ，８５％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１２Ｈ，−ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３），１．１７−１．３６（ｍ，１２８Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３），１．５３−１．６０（ｍ，８Ｈ，−Ｃ（ＣＨ_２）_４），３．６２−３．６６（ｍ，８Ｈ，−ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１６ＣＨ_３）

【0326】

実施例１０：メチル ４−ドコシルオキシベンゾエートの合成

【0327】

【化46】

【0328】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（１．３６ｇ，９．８５ｍｍｏｌ）、メチル ４−ヒドロキシベンゾエート（５００ｍｇ，３．２９ｍｍｏｌ）、１−ブロモオクタデカン（１．２８ｇ，３．６２ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）に溶解し、９０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（４００ｍＬ）中に注ぎ込み沈殿化し、固体を得た。得られた固体を７０℃で酢酸エチル（５０ｍＬ）に溶解後、室温まで冷却して、結晶を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（１．３７ｇ，９１％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），１．２６−１．５８（ｍ，３８Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），１．７６−１．８３（ｍ，２Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），３．８８（ｓ，３Ｈ，−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３），４．００（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，−ＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），６．９０（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ），７．９８（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）

【0329】

実施例１１：メチル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）シクロヘキサンカルボキシレートの合成

【0330】

【化47】

【0331】

メチル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾエート（１．００ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）にシクロヘキサンを加え、５％ロジウム−炭素（０．８ｇ）を添加し、８０℃および１０気圧にて１６時間、水素還元を実施した。水素還元後の混合物にテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）を加えて、触媒を濾過し、濾液を濃縮し、濃縮液にメタノール（８ｍＬ）を加えて、撹拌した。得られた沈殿物をろ取し、乾燥して、目的の化合物（８２０ｍｇ，収率８２％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８９（９Ｈ，ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，Ｃ_１７Ｈ_３４−Ｍｅ），１．２５−１．４４（９０Ｈ，ｍ），１．５２−１．６０（６Ｈ，ｍ），１．８６−１．９４（４Ｈ，ｍ），２．２３（１Ｈ，ｍ），３．０９−３．１４（２Ｈ，ｍ），３，４１−３．４７（４Ｈ，ｍ），３．６４−３．６８（５Ｈ，ｍ），３．８６（１Ｈ，ｓ）

【0332】

実施例１２：メチル ２，４−ジ（ドコシルオキシ）ベンゾエートの合成

【0333】

【化48】

【0334】

アルゴン雰囲気下、炭酸カリウム（２９．９ｇ，２１７ｍｍｏｌ）、メチル ２，４−ジヒドロキシベンゾエート（３．６５ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）、１−ブロモドコサン（１７．３３ｇ，４４．５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５０ｍＬ）に溶解し、７０℃で１６時間攪拌した。薄層クロマトグラフィーで反応の完結を確認した後、反応液を水（１．００Ｌ）中に注ぎ込み沈殿化し、固体を得た。得られた固体をジクロロメタン（５００ｍＬ）に溶解し、メタノール（４００ｍＬ）で固体を析出させた後、ろ取し、乾燥して、目的の化合物（１６．７ｇ，収率９８％）を得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，６Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＣＨ_３），１．１３−１．５６（ｍ，７６Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），１．８１（ｍ，４Ｈ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），３．８９（ｓ，３Ｈ，Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ_３），４．０２（ｄｄ，４Ｈ，Ｊ＝６．６，１４．８Ｈｚ，−ＯＣＨ_２ＣＨ_２（ＣＨ_２）_１９ＣＨ_３），６．６３（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ），７．１５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）

【0335】

実施例１３：ピバロイルオキシメチル−３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゼンの合成

【0336】

【化49】

【0337】

アルゴン雰囲気下、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコール（２．７３ｇ，２．９９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解後、トリエチルアミン（１．６７ｍＬ，１２．０ｍｍｏｌ）、ピバロイルクロリド（７８１μＬ，６．００ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピリジン（７．３２ｍｇ，６００μｍｏｌ）を順次加え、室温で７時間撹拌した。薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認し、反応液にアセトニトリル（１２５ｍＬ）を加えて固体を析出させ、ろ取した。得られた固体を減圧乾燥し、目的の化合物（２．８０ｇ）を白色固体として定量的に得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８７９（ｔ，Ｊ＝７．０６Ｈｚ，９Ｈ），１．２３（ｓ，９Ｈ），１．２４−１．４０（ｍ，８４Ｈ），１．４０−１．５２（ｍ，６Ｈ），１．７０−１．８１（ｍ，６Ｈ），３．９２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），６．５１（ｓ，２Ｈ）

【0338】

実施例１４：（２Ｓ）−２−（アセチルアミノ）−４−メチルペンタノイルオキシメチル−３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゼンの合成

【0339】

【化50】

【0340】

３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコール（１．８３ｇ，２．００ｍｍｏｌ）、Ｎ−アセチルロイシン（７００ｍｇ，４．０９ｍｍｏｌ）、２，６−ジメチルアミノピリジン（２．５８ｍｇ，２０．０μｍｏｌ）をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解後、ジイソプロピルエチルアミン（１．１６ｍＬ，６．７９ｍｍｏｌ）とＨＢＴＵ（１．９０ｇ，５．００ｍｍｏｌ）を加えて、室温で１５時間撹拌後、さらに４０℃で２１時間撹拌した。反応液をろ過後、ろ液にアセトニトリル（１００ｍＬ）を加えて固体を析出させ、ろ取した。得られた固体を減圧乾燥し、目的の化合物（１．９７ｇ）を白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８７９（ｔ，Ｊ＝７．０６Ｈｚ，９Ｈ），０．９１３（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，３Ｈ），０．９２９（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，３Ｈ），１．２２−１．４０（ｍ，８４Ｈ），１．４０−１．５２（ｍ，７Ｈ），２．０２（ｓ，３Ｈ），１．６０−１．８２（ｍ，８Ｈ），３．９４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），４．６８４（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．６，４．８，４．８Ｈｚ，１Ｈ），５．０２４（ｄ，１２．４Ｈｚ），５．０８２（ｄ，１２．４Ｈｚ），５．８１７（ｄ，８．４Ｈｚ），６．５２（ｓ，２Ｈ）

【0341】

実施例１５：トリイソプロピルシリルオキシメチル−３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゼンの合成

【0342】

【化51】

【0343】

アルゴン雰囲気下、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコール（４．５７ｇ，５．００ｍｍｏｌ）とイミダゾール（１．３６ｇ，２０．０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、トリイソプロピルシリルクロリド（２．１２ｍＬ，１０．０ｍｍｏｌ）を加えて４０℃で６時間撹拌した。室温に冷却後、反応液にアセトニトリル（２５０ｍＬ）を添加して固体を析出させ、ろ取した。得られた固体を減圧乾燥し、目的の化合物（５．２３ｇ）を白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８７９（ｔ，Ｊ＝７．０６Ｈｚ，９Ｈ），１．０９（ｄ，１８Ｈ，６．０Ｈｚ），１．１２−１．２０（ｍ，３Ｈ），１．２２−１．４０（ｍ，８４Ｈ），１．４０−１．５２（ｍ，６Ｈ），１．７０−１．８２（ｍ，６Ｈ），３．９１（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．９７（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），６．５６（ｓ，２Ｈ）

【0344】

実施例１６：４−（３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル）−モルホリンの合成

【0345】

【化52】

【0346】

アルゴン雰囲気下、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）安息香酸（５．００ｇ，５．３９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）に溶解後、ＨＢＴＵ（６．１３ｇ，１６．２ｍｍｏｌ）、モルホリン（１．３１ｍＬ，１６．２ｍｍｏｌ）、およびジイソプロピルエチルアミン（２．９０ｍＬ，１６．２ｍｍｏｌ）を順次加え、室温で１８時間撹拌した。反応の終点を薄層クロマトグラフィー（ヘキサン／ジクロロメタン／酢酸エチル＝２５／５０／２５）で確認後、反応液にアセトニトリル（２５０ｍＬ）を添加して固体を析出させ、ろ取した。得られた固体をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール＝１００／０〜９５／５）で精製し、目的の化合物（５．１８ｇ）を白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８７９（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，９Ｈ），１．２６−１．４７（ｍ，８４Ｈ），１．４２−１．５３（ｍ，６Ｈ），１．７１−１．８０（ｍ，６Ｈ），３．６９（ｍ，８Ｈ）、３．９５（ｍ，６Ｈ），６．５１（ｓ，２Ｈ）

【0347】

試験例１
被沈殿物として、参考例２で合成した５量体または参考例４で合成した２０量体を使用し、沈殿促進剤の添加量と被沈殿物の回収率との関係を検討した。表１および２に示す量で被沈殿物および実施例６で合成した沈殿促進剤（メチル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾエート）をジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させた後、表１および２に示す量のアセトニトリルにより固体を析出させ、得られた固体を桐山ロート（２１ｍ／ｍ）とろ紙（Ｎｏ−５Ａ）を用いてろ取し、アセトニトリル（２０ｍＬ）により固体を洗浄した後に減圧乾燥した。使用した被沈殿物（即ち、参考例２の５量体または参考例４の２０量体）の量および使用した沈殿促進剤の量と、回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量とから算出した回収率（＝１００×（回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量（ｍｇ））／（使用した被沈殿物の量（ｍｇ）＋使用した沈殿促進剤の量（ｍｇ）））を表１および２に示す。

【0348】

【表1】

【0349】

【表2】

【0350】

試験例２
被沈殿物として、参考例３で合成した１０量体を使用し、沈殿促進剤の種類と被沈殿物の回収率との関係を検討した。表３に示す量で参考例３の１０量体と比較例１および２並びに実施例１〜１２で合成した沈殿促進剤のいずれかとをジクロロメタン（０．５ｍＬ）に溶解させた後、アセトニトリル（２．５ｍＬ）により固体を析出させ、得られた固体を桐山ロート（２１ｍ／ｍ）とろ紙（Ｎｏ−５Ａ）を用いてろ取し、アセトニトリル（２．０ｍＬ）により固体を洗浄した後に減圧乾燥した。使用した被沈殿物（即ち、参考例３の１０量体）の量および使用した沈殿促進剤の量と、回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の量とから算出した回収率（＝１００×（回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量（ｍｇ））／（使用した被沈殿物の量（ｍｇ）＋使用した沈殿促進剤の量（ｍｇ）））を表３に示す。

【0351】

【表3】

【0352】

表３で示されるように、実施例１〜１２の沈殿促進剤を使用することによって、参考例３の１０量体の沈殿化を促進し、その回収率を向上させることができる。一方、分岐鎖の脂肪族炭化水素基を有する比較例１の沈殿促進剤、および直鎖の脂肪族炭化水素基を有するが、該基の炭素数合計が２０未満である比較例２の沈殿促進剤を使用すると、これらを使用しない場合に比べて、参考例３の１０量体の回収率が却って低下した。

【0353】

試験例３
被沈殿物として、参考例２で合成した５量体を使用し、沈殿促進剤の種類と被沈殿物の回収率との関係を検討した。表４に示す量で、参考例２の５量体と実施例１３〜１５で合成した沈殿促進剤のいずれかとを、ジクロロメタンに溶解させた。得られた溶液に、撹拌しながら、表４に示す量のアセトニトリルを２４℃において３分間かけて滴下し、固体を析出させて、スラリーを得た。得られたスラリーを氷浴中１０分間静置し、２５Φ桐山ロートおよび５Ｃろ紙を用いて析出した固体をろ取し、得られた固体を、表４に示す量のアセトニトリルで洗浄した。得られた固体を、終夜、減圧乾燥した。使用した被沈殿物（即ち、参考例２の５量体）の量および使用した沈殿促進剤の量と、回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量とから算出した回収率（＝１００×（回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量（ｍｇ））／（使用した被沈殿物の量（ｍｇ）＋使用した沈殿促進剤の量（ｍｇ）））を表４に示す。

【0354】

【表4】

【0355】

試験例４
被沈殿物として、参考例４で合成した２０量体を使用し、沈殿促進剤の種類と被沈殿物の回収率との関係を検討した。表５に示す量で、参考例２の５量体と実施例１３〜１５で合成した沈殿促進剤のいずれかとを、ジクロロメタンに溶解させた。得られた溶液に、撹拌しながら、アセトニトリル（１０．５ｍＬ）を２４℃において３分間かけて滴下し、固体を析出させ、スラリーを得た。得られたスラリーを氷浴中１０分間静置し、２５Φ桐山ロートおよび５Ｃろ紙を用いて析出した固体をろ取し、得られた固体をアセトニトリル（５．０ｍＬ）で洗浄した。得られた固体を、終夜、減圧乾燥した。使用した被沈殿物（即ち、参考例４の２０量体）の量および使用した沈殿促進剤の量と、回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量とから算出した回収率（＝１００×（回収した乾燥後の被沈殿物および沈殿促進剤の混合物の量）／（使用した被沈殿物の量（ｍｇ）＋使用した沈殿促進剤の量（ｍｇ）））を表５に示す。

【0356】

【表5】

【0357】

試験例５
まず、沈殿促進剤を使用せずにペプチドの回収試験を行った。詳しくは、カルボキシ基が３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル基（ＴＯＢ）で保護されたペプチド（Ｈ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＴＯＢ，４３５ｍｇ，０．１６６ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１０ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液を減圧濃縮して、溶液から約５ｍＬのクロロホルムを除去し、濃縮物を得た。濃縮物にアセトニトリル（２０ｍＬ）を加え、固体を析出させた。析出物をろ取し、減圧乾燥して、乾燥したペプチドを得た。使用したペプチドの量および回収した乾燥後のペプチドの量から算出した回収率（＝１００×（回収した乾燥後のペプチドの量（ｍｇ））／（使用したペプチドの量（ｍｇ）））は７１％であった。

【0358】

次に、沈殿促進剤として３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコールを使用したこと以外は前記と同様にして、ペプチドの回収試験を行った。詳しくは、３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル基（ＴＯＢ）で保護されたペプチド（Ｈ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ａｌａ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｌｅｕ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＴＯＢ，４３５ｍｇ，０．１６６ｍｍｏｌ）および３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルアルコール（２００ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１０ｍＬ）に溶解させた。得られた溶液を、減圧濃縮して、溶液から約５ｍＬのクロロホルムを除去し、濃縮物を得た。濃縮物にアセトニトリル（２０ｍＬ）を加え、固体を析出させた。析出物をろ取し、減圧乾燥して、乾燥したペプチドおよび沈殿促進剤の混合物を得た。使用したペプチドの量および使用した沈殿促進剤の量と、回収した乾燥後のペプチドおよび沈殿促進剤の混合物の量とから算出した回収率（＝１００×（回収した乾燥後のペプチドおよび沈殿促進剤の混合物の量（ｍｇ））／（使用したペプチドの量（ｍｇ）＋使用した沈殿促進剤の量（ｍｇ）））は９７％であった。

【0359】

実施例１７：沈殿促進剤を用いたホスホロチオエート２量体の液中連続合成
アルゴン雰囲気下、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］ スクシネート（１．８５ｇ，１．２ｍｍｏｌ）、実施例７で合成した沈殿促進剤である３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル アセテート（１．８６ｇ，１．２０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）に溶解し、インドール（１．４０ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（８８．９μＬ，１．２０ｍｍｏｌ）を加えて室温で２時間攪拌し、反応の完結を薄層クロマトグラフィーにより確認した。反応混合液を１−メチルイミダゾール（９９．７μＬ，１．２６ｍｍｏｌ）で中和した後、４，５−ジシアノイミダゾール（４７６ｍｇ，４．０３ｍｍｏｌ）、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル）］−ホスホロアミダイト（２．００ｇ，２．６９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液を加え、室温で６０分間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認した。さらに、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（６０８ｍｇ，２．９６ｍｍｏｌ）を加えて室温で３０分間攪拌した後、無水酢酸（５６．６μＬ、０．６０ｍｍｏｌ）、２，４，６−トリメチルピリジン（７９．１μＬ，０．６０ｍｍｏｌ）、１−メチルイミダゾール（４７．５μＬ，０．６０ｍｍｏｌ）を加えて室温で１５分間撹拌し、反応液中にアセトニトリル（２００ｍＬ）を添加し、析出した固体を、キリヤマ漏斗を用いた吸引ろ取後、乾燥して５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］ スクシネート（４．１５０ｇ，収率９９．８％）を白色固体として得た。

【0360】

実施例１８：沈殿促進剤を用いたホスホロチオエート２０量体（配列：５’−ＴＣＣＣＧＣＣＴＧＴＧＡＣＡＴＧＣＡＴＴ−３’）の液中連続合成
（１）擬似固相保護基が結合したホスホロチオエート２０量体の合成
実施例１７と同様の操作を１９回繰り返して、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^２−イソブチリル−デオキシグアノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^４−ベンゾイル−デオキシシチジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−Ｎ^６−ベンゾイル−デオキシアデノシン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル−デオキシチミジン ３’−イル ３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル スクシネート（８．５５ｇ）を得た。

【0361】

（２）ホスホロチオエート２０量体の合成（脱保護）および精製
上記（１）で合成した化合物（１００ｍｇ、１０．３μｍｏｌ）と３０重量％アンモニア水（５．００ｍＬ）をオートクレーブに入れて６５℃で４時間加熱した後、シリンジフィルター（ＷＨＡＴＭＡＮ ２５ｍｍ ＧＤ／Ｘ ＰＴＦＥ ０．４５μｍ）により不溶物をろ過した。さらに０．１Ｍ酢酸アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）で希釈し、Ｃ−１８カートリッジ精製を行い、得られた溶出液を凍結乾燥し、目的物である デオキシチミジニル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシグアニジル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシチミジニル−［３’→５’］−デオキシグアニジル−［３’→５’］−デオキシチミジニル−［３’→５’］−デオキシグアニジル−［３’→５’］−デオキシアデニリル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシアデニリル−［３’→５’］−デオキシチミジニル−［３’→５’］−デオキシグアニジル−［３’→５’］−デオキシシチジニル−［３’→５’］−デオキシアデニリル−［３’→５’］−デオキシチミジニル−［３’→５’］−デオキシチミジンを得た。
ＨＰＬＣ（ｓｈｏｄｅｘ ＯＤＰ（４．６φ×１５０ｍｍ）、ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ０．５ｍＬ／ｍｉｎ、１５ｍＭ ＴＥＡ＋２０ｍＭ ＨＦＩＰ／ＭｅＯＨ＝９５／５、１５ｍＭ ＴＥＡ＋２０ｍＭ ＨＦＩＰ／ＭｅＯＨ＝５０／５０ ｇｒａｄｉｅｎｔ：０−７．４ｍｉｎ；０ ｔｏ ６０％、７．５ ｔｏ １１ｍｉｎ；１００％、λ＝２５４ｎｍ）：Ｒｔ＝６．２６ｍｉｎ（７３％）；
ＴＯＦ／ＭＳ：６３４４．５９［Ｍ−Ｈ］⁻

【0362】

実施例１９：沈殿促進剤を用いたホスホロチオエート２量体の液中連続合成

【0363】

【化53】

【0364】

アルゴン雰囲気下、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−イル−ジイソプロピル−４−［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジルオキシカルボニル］フェニル シラン（３３０ｍｇ，２００μｍｏｌ）、実施例７で合成した沈殿促進剤である３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル アセテート（２９０ｍｇ，３０３μｍｏｌ）をジクロロメタン（５．０ｍＬ）に溶解し、インドール（４６９ｍｇ，４．００ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（３０．６μＬ，４００μｍｏｌ）を加えて室温で２時間攪拌し、反応の完結を薄層クロマトグラフィーにより確認した。反応混合液を１−メチルイミダゾール（３４．８μＬ，４３９μｍｏｌ）で中和した後、５−ベンジルチオ−１Ｈ−テトラゾール（１１５ｍｇ，６００μｍｏｌ）、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル）］−ホスホロアミダイト（４４７ｍｇ，６００μｍｏｌ）のアセトニトリル溶液を加え、室温で６０分間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認した。さらに、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（１３６ｍｇ，６６２μｍｏｌ）を加えて室温で３０分間攪拌した後、反応液中にアセトニトリル（３０ｍＬ）を添加し、析出した固体をキリヤマ漏斗を用いた吸引ろ取後、乾燥して５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］ スクシネート（３９８ｍｇ，収率９８％）を白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝０．８８（ｔ，９Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，−ＣＨ_３），１．００−１．０７（ｍ，１２Ｈ，−Ｓｉ−ＣＨ−（ＣＨ_３）_２），１．２１−２．００（ｍ，９６Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），２．３５−２．５０（ｍ，３Ｈ，２’−Ｈ），２．５６−２．６０（ｍ，２Ｈ，２’−Ｈ＋５’−Ｈ），２．７１（ｍ，１Ｈ，５’−Ｈ），３．４１−３．４６（ｍ，２Ｈ，５’−Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ，ＤＭＴｒ−ＯＣＨ_３），３．９３−３．９９（ｍ，６Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），４．１１−４．３０（ｍ，６Ｈ，３’−Ｈ，４’−Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮ），４．５１−４．６０（ｍ，１Ｈ，４’−Ｈ），５．２４（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−ＣＨ_２−Ｏ−），５．３２（ｍ，１Ｈ，３’−Ｈ），６．２８（ｍ，１Ｈ，１Ｈ’−Ｈ），６．３６（ｍ，１Ｈ，１Ｈ’−Ｈ），６．６４（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．８４（ｍ，４Ｈ，ＤＭＴｒ−Ｈ），７．２２−７．６３（ｍ，１１Ｈ，−Ｓｉ−Ａｒ，ＤＭＴｒ−Ｈ），８．０５−８．０８（ｍ，２Ｈ，−Ｓｉ−Ａｒ），８．５８−８．９５（ｍ，２Ｈ，Ｎ^３−Ｈ）

【0365】

実施例２０：沈殿促進剤を用いたホスホロチオエート２量体の液中連続合成

【0366】

【化54】

【0367】

アルゴン雰囲気下、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−Ｎ３−３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンゾイル−デオキシチミジン−３’−イル−ｔ−ブチル−ジメチルシラン（３１２ｍｇ，１９９μｍｏｌ）、実施例７で合成した沈殿促進剤である３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル アセテート（２８７ｍｇ，３００μｍｏｌ）をジクロロメタン（５．０ｍＬ）に溶解し、インドール（４６６ｍｇ，３．９８ｍｍｏｌ）、トリフルオロ酢酸（３０．６μＬ，３９８μｍｏｌ）を加えて室温で２時間攪拌し、反応の完結を薄層クロマトグラフィーにより確認した。反応混合液を１−メチルイミダゾール（３４．８μＬ，４３９μｍｏｌ）で中和した後、５−ベンジルチオ−１Ｈ−テトラゾール（１１５ｍｇ，６００μｍｏｌ）、５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピル）］−ホスホロアミダイト（４４７ｇ，６００μｍｏｌ）のアセトニトリル溶液を加え、室温で６０分間攪拌し、薄層クロマトグラフィーにより反応の完結を確認した。さらに、３−［（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノメチリデン）アミノ］−３Ｈ−１，２，４−ジチアゾール−５−チオン（１３６ｍｇ，６６２μｍｏｌ）を加えて室温で３０分間攪拌した後、反応液中にアセトニトリル（３０ｍＬ）を添加し、析出した固体をキリヤマ漏斗を用いて吸引ろ取した後、乾燥して５’−Ｏ−（４，４’−ジメトキシトリチル）−デオキシチミジン−３’−［Ｏ−（２−シアノエチル）］ホスホロチオニル デオキシチミジン−３’−イル ［３，４，５−トリ（オクタデシルオキシ）ベンジル］ スクシネート（３８２ｍｇ，収率９９％）を白色固体として得た。
^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ＝−０．０１（Ｓ，３Ｈ，Ｓｉ−ＣＨ_３），０．００（Ｓ，３Ｈ，Ｓｉ−ＣＨ_３），０．７５−０．８１（ｍ，１８Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３＋Ｓｉ−Ｃ（ＣＨ_３）_３），１．０５−１．７３（ｍ，９０Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３），２．０８（ｍ，１Ｈ，２’−Ｈ），２．２２（ｍ，１Ｈ，２’−Ｈ），２．３４（ｍ，１Ｈ，２’−Ｈ），２．５３−２．６２（ｍ，２Ｈ，２’−Ｈ＋５’−Ｈ），２．７０（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，５’−Ｈ），３．２５−３．５１（ｍ，２Ｈ，５’−Ｈ），３．７１（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，ＤＭＴｒ−ＯＣＨ_３），３．８７−３．９８（ｍ，７Ｈ，−ＯＣＨ_２（ＣＨ_２）_１５ＣＨ_３＋３’−Ｈ），４．１０−４．３３（ｍ，６Ｈ，−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮ＋２×４’−Ｈ），５．２５（ｄｔ，１Ｈ，Ｊ＝７．９，１５．３Ｈｚ，３’−Ｈ），６．１７（ｔｄ，１Ｈ，Ｊ＝２．２，６．６Ｈｚ，１’−Ｈ），６．３０（ｄｄ，Ｊ＝５．４，８．８，２３．６Ｈｚ，１’−Ｈ），６．７６（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．７８（ｓ，２Ｈ，ＤＭＴｒ−Ｈ），７．０５−７．３９（ｍ，１１Ｈ，ＤＭＴｒ−Ａｒ−Ｈ），７．３９（ｓ，１Ｈ，Ｎ６−Ｈ），７．４７（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，Ｎ６−Ｈ），８．４５（ｍ，１Ｈ，Ｎ３−Ｈ）

【産業上の利用可能性】

【0368】

本発明の沈殿促進剤を用いれば、炭素数１０以上の脂肪族炭化水素基を１個以上有する有機基で保護された有機化合物を溶媒から沈殿させる際に、該有機化合物の回収率を向上させることができるため、本発明の沈殿促進剤は、該有機化合物の合成、特にオリゴヌクレオチドの合成に有用である。

【0369】

本願は、日本で出願された特願２０１５−００９７２０を基礎としており、その内容は本願明細書に全て包含される。

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]