特許 6736705 熱ゲル化人工涙液

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6736705

(24)【登録日】2020年7月17日

(45)【発行日】2020年8月5日

(54)【発明の名称】熱ゲル化人工涙液

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/717 20060101AFI20200728BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20200728BHJP

   A61K 47/32 20060101ALI20200728BHJP

   A61K 47/12 20060101ALI20200728BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20200728BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20200728BHJP

   A61P 27/04 20060101ALI20200728BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/717ZMD

   A61K47/10

   A61K47/32

   A61K47/12

   A61K9/08

   A61P27/02

   A61P27/04

【請求項の数】3

【全頁数】25

(21)【出願番号】特願2019-10213(P2019-10213)

(22)【出願日】2019年1月24日

(62)【分割の表示】特願2018-527825(P2018-527825)の分割

【原出願日】2018年4月25日

(65)【公開番号】特開2019-104740(P2019-104740A)

(43)【公開日】2019年6月27日

【審査請求日】2019年12月4日

(31)【優先権主張番号】特願2017-86512(P2017-86512)

(32)【優先日】2017年4月25日

(33)【優先権主張国】JP

(31)【優先権主張番号】特願2017-249891(P2017-249891)

(32)【優先日】2017年12月26日

(33)【優先権主張国】JP

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】000100492

【氏名又は名称】わかもと製薬株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100094569

【弁理士】

【氏名又は名称】田中 伸一郎

(74)【代理人】

【識別番号】100103610

【弁理士】

【氏名又は名称】▲吉▼田 和彦

(74)【代理人】

【識別番号】100109070

【弁理士】

【氏名又は名称】須田 洋之

(74)【代理人】

【識別番号】100119013

【弁理士】

【氏名又は名称】山崎 一夫

(74)【代理人】

【識別番号】100123777

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 さつき

(74)【代理人】

【識別番号】100111796

【弁理士】

【氏名又は名称】服部 博信

(74)【代理人】

【識別番号】100123766

【弁理士】

【氏名又は名称】松田 七重

(72)【発明者】

【氏名】山村 雄

(72)【発明者】

【氏名】山室 彩香

(72)【発明者】

【氏名】伊豆倉 恵美

(72)【発明者】

【氏名】木村 基

(72)【発明者】

【氏名】大塚 智裕

【審査官】 古閑 一実

(56)【参考文献】

【文献】 特開２００３−０９５９２４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００６−１７６５０１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第０９／００１８９９（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 改訂 医薬品添加物ハンドブック，２００７年 ２月２８日，第１刷，p.825-831,838-845

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ９／００− ９／７２

Ａ６１Ｋ ４７／００−４７／６９

Ａ６１Ｋ ３１／００−３３／４４

Ａ６１Ｐ １／００−４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

(A) 表示粘度が４、１５、２５、１００、４００である群から選ばれる２種類のメチルセルロースを、質量比１：２４〜２４：１で、合計濃度が１〜５ｗ/ｖ％となる量と、
(B) ０．５〜４．０ｗ/ｖ％の、重量平均分子量が３００〜２００００である少なくとも1種類のポリエチレングリコールと、
(C) ０．５〜４．０ｗ/ｖ％の、ＰＶＰ Ｋ２５、ＰＶＰ Ｋ３０、及びＰＶＰ Ｋ９０から選ばれる少なくとも1種類のポリビニルピロリドンと、
(D) ０．５〜４．０ｗ／ｖ％のクエン酸又はそのナトリウム塩を含む、
前記ｗ/ｖ％が、組成物の全量を基準とする濃度である、
ゲル化することを特徴とする眼科用水性組成物（ただし、
（A）表示粘度が４のメチルセルロースと、表示粘度が１５のメチルセルロースとを、質量比１：４〜４：１で、合計濃度が０．２〜５ｗ／ｖ％となる量と、
（B）０．５〜４．０ｗ／ｖ％の、重量平均分子量が４０００又は８０００のポリエチレングリコールと、
（C）０．５〜４．０ｗ／ｖ％のＰＶＰ Ｋ２５と、
（D）１．０〜４．０ｗ／ｖ％のクエン酸又はそのナトリウム塩を含む、
前記ｗ／ｖ％が、組成物の全量を基準とする濃度である、
ゲル化することを特徴とする眼科用水性組成物を除く）。

【請求項2】

２種類のメチルセルロースが１：４〜４：１の質量比で含まれる、請求項１記載の眼科用組成物。

【請求項3】

２種類のメチルセルロースの合計濃度が２〜５ｗ/ｖ％である、請求項１又は２記載の眼科用組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ヒトの体温付近の温度で増粘するが、増粘した組成物に力を加えることで流動性が高まる水性組成物に関するものである。さらに詳しくは、メチルセルロースを主薬としたドライアイなどの治療のために用いられる熱ゲル化人工涙液に関するものである。

【背景技術】

【0002】

涙液は上眼瞼外側にある涙腺で作られ、目の表面に潤いを与え、目頭にある涙点から鼻の奥に排出される。涙液の構造は、目の表面から角膜に向かって油層、水層、ムチン層の三層構造であると以前は言われていた。しかし近年、水層とムチン層の間には仕切りがなく、水層の中にムチンが濃度勾配をもって混ざっているという概念に代わってきた。現在では、油層とムチンの混ざった水層の二層構造という概念になっている。この二層構造のどちらかに異常が出るとドライアイになる。
涙液の油層の異常により生じる「蒸発亢進型ドライアイ」のなかには、マイボーム腺機能不全、眼瞼炎がある。涙液の水層の異常により生じる「涙液減少型ドライアイ」には、シェーグレン症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群などがある。

【0003】

2016年にドライアイ研究会は、「ドライアイは様々な要因により涙液層の安定性が低下する疾患であり、眼不快感や視機能異常を生じ、眼表面の障害を伴うことがある」と定義した。
ドライアイ治療の最大の目的は、涙液の構造を正常に戻し、角結膜上皮障害や自覚症状を改善させることになる。
実際にドライアイの治療に用いられている点眼には、人工涙液、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、フラビンアデニンジヌクレオチドを含有する水性点眼液、血清点眼及び油性点眼などがあり、近年はジクアホソルナトリウムやレバミピドなどのドライアイ治療剤も販売されている。軽症のドライアイである場合、日本国内では人工涙液として、涙液の補助（目のかわき）を効能・効果としたOTCの眼科用薬が入手しやすい。
人工涙液の役割とは、不足している涙液を外部から補充して涙液の増加をはかる方法である。涙液量は正常人では6.5±0.3μL、ドライアイ患者では4.8±0.4μLと報告されており、結膜嚢の容量は20〜30μL、点眼液1滴は約50μLとされているので、正常人、ドライアイ患者のいずれの場合も片眼に対し、人工涙液を1滴点眼すると結膜嚢内は水分で満たされることになる。
人工涙液としては、無機塩類を添加した水性点眼剤が挙げられる。しかしながら、このような水性点眼剤は点眼後鼻涙管を通して速やかに排出される、または眼表面から蒸発するといった現象が生じる。よって、眼表面の水分を維持するため、または自覚症状を軽減するためには、1回2〜3滴、1日5〜6回といった頻回点眼をしなければならない(非特許文献１〜３)。

【0004】

このような人工涙液の眼表面からの排出遅延と、さらに大量の水分を補給することを目的として水溶性高分子を配合した高粘度の点眼剤が市販されている。水溶性高分子として、ヒプロメロース（HPMC）、ヒドロキシエチルセルロース（HEC）あるいはヒアルロン酸及びその薬学的に許容される塩などを粘稠剤として添加している。しかしながら、このような点眼剤は粘性が高いため投与する際に滴下量の調節が困難であったり、点眼後の霧視を初めとする不快感を伴ったりすることが知られている。

【0005】

水溶性高分子のうち、セルロース誘導体のなかでもメチルセルロースは角膜表層保護薬であり、0.5％含有生理食塩水は角膜表面に保水性を与え、涙液と類似した性質を持つ薄い膜を形成することが知られている(非特許文献４)。
また、0.6％及び1.2％メチルセルロース含有生理食塩水よって、豚の眼球において角膜上皮創傷治癒効果が認められたことが知られている(非特許文献５)。
しかし、これらのメチルセルロース含有生理食塩水では、メチルセルロース特有の熱によってゲル化する性質を溶液上で確認しているものではなく、ゲル化による効果は全く考慮していない。

【0006】

メチルセルロースを含有する水性医薬組成物としては、メチルセルロース及びヒアルロン酸及びその薬学的に許容される塩を含有する熱ゲル化製剤あるいはメチルセルロース、マクロゴール4000及びクエン酸ナトリウムを含有する熱ゲル化人工涙液によって、体温付近でゲル化して涙液量を増大させ、眼表面に水分を補給し、涙液油層を保護する目的としてとして使用することが記載されている(特許文献１、２)。
一方、ニューキノロン系抗菌剤を有効成分として、ゲル化温度が十分に低い、熱ゲル化水性医薬組成物が開示されている。また前記組成物として、オフロキサシンゲル化点眼液0.3％「わかもと」が角膜上皮障害に有効であることが報告されている(特許文献３、非特許文献６)。
前記は抗菌剤を含有するゲル化点眼液において、1種類のメチルセルロースを含有し、ゲル化する点眼液の効果を確認したものにすぎない。これらの特許文献に開示されている前記水性医薬組成物は、室温で保存した場合、組成物が徐々にゲル化し、点眼前に液体で投与しやすいという特徴が失われるため、通常、低温で保存することが想定されている。人工涙液の場合、前述の通り頻回点眼することが一般的であるが、可逆性熱ゲル化水性組成物は低温で保存する必要があるため、持ち歩くことは不適である。
メチルセルロース、ポリエチレングリコール及びクエン酸ナトリウム並びに糖アルコール、乳糖、カルメロースあるいはシクロデキストリンのいずれかを含有する水性医薬組成物として、室温でゲル化したとしても軽く振るなど弱い力を加えたときに急激に粘度が低下して液体に戻る組成物、すなわち、揺変性を持つ水性組成物が開示されている(特許文献４)。
ヒドロキシエチルセルロース並びにメチルセルロースあるいはヒプロメロースを含む水溶液からなる水性組成物では、ヒトの体温付近で瞬時に増粘してゲル化せず、軽く振るなどの弱い力を加えたときに急激に粘度が低下して流動性が高まる組成物が開示されている(特許文献５)。
このように携帯できる熱ゲル化製剤であったり、投与後の異物感を生じないような水性組成物であったりと製品の流通やQOLに着目した改良が進められてきた。しかし、ゾル-ゲル相転移を繰り返すことによって揺変性が再現可能な水性組成物については開示されていない。

【0007】

以上のとおり、特定の比率で異なる規格のメチルセルロースを組み合わせた水性組成物であって、体温付近でゲル化するものの、物理的刺激を加えることでゾルに転移し、再現性を示すものは全く知られていない。

【0008】

また、特定の比率で異なる規格のメチルセルロースを組み合わせた水性組成物であって、体温付近でゲル化することにより角膜保護作用を持つあるいは角膜上皮障害を軽減する作用を持つものは全く知られていない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】特開２００３−３４２１９７号公報

【特許文献2】特開２００３−９５９２４号公報

【特許文献3】WO０２／０１１７３４

【特許文献4】WO２００５／０４２０２６

【特許文献5】WO２００９／００１８９９

【非特許文献】

【0010】

【非特許文献1】眼科ケア 2010年冬季増刊（通巻148号）、株式会社メディカ出版、木下茂ほか編集、145-147

【非特許文献2】Ocular Surfaceの診断と治療-ドライアイ-、メディカル葵出版、小口芳久監修

【非特許文献3】ドライアイ研究会Webページ(http://www.dryeye.ne.jp/)

【非特許文献4】第十七改正 日本薬局方解説書、東京廣川書店刊行

【非特許文献5】Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics, Volume 15, Number 1, 1999,59-63

【非特許文献6】眼科臨床紀要4（2）、2011、132-137

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0011】

本発明の解決しようとする課題は、室温付近 (例えば２５℃付近) では低粘度を維持するが、体温付近の熱で粘度が急激に増加することで眼表面の涙液を保持させることができる眼科用水性組成物を提供することである。
本発明の課題はまた、角膜保護用、角膜上皮障害軽減用あるいは角膜損傷回復用眼科用水性組成物を提供することである。
本発明の課題はまた、角膜保護用、角膜上皮障害軽減用あるいは角膜損傷回復用眼科用水性組成物を調製するためのメチルセルロースの使用を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0012】

本発明は、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、及びクエン酸又はその薬学的に許容される塩を含む水溶液であって、２種以上の異なる規格（例えば、粘度）のメチルセルロースを組み合わせることにより、上記課題を達成しうるという知見に基づいて完成されたものである。すなわち、本発明により、以下の眼科用水性組成物；角膜保護用、角膜上皮障害軽減用又は角膜障害回復用眼科用水性組成物；及び角膜保護用、角膜上皮障害軽減用又は角膜障害回復用眼科用水性組成物を調製するためのメチルセルロースの使用を提供する。
１．(A) 少なくとも２種類のメチルセルロース、(B) ポリエチレングリコール、(C) ポリビニルピロリドン、及び(D) クエン酸又はその薬学的に許容される塩を含有し、ゲル化することを特徴とする眼科用水性組成物。
２．(A)成分が２種類のメチルセルロースである、前記１項記載の眼科用水性組成物。
３．２種類のメチルセルロースが１:３０〜３０:１の質量比で含まれる、前記２項記載の眼科用水性組成物。
４．(A)成分が２０℃における2ｗ/ｖ％水溶液の粘度が４〜４００ｍＰａ・ｓのメチルセルロースである、前記１〜３のいずれか１項記載の眼科用水性組成物。
５．(A)成分が、２０℃における2ｗ/ｖ％水溶液の粘度が４ｍＰａ・ｓ、１５ｍＰａ・ｓ、２５ｍＰａ・ｓ、１００ｍＰａ・ｓ、４００ｍＰａ・ｓ、１５００ｍＰａ・ｓ又は４０００ｍＰａ・ｓであるメチルセルロースからなる群から選ばれる２種である、前記１〜３のいずれか１項記載の眼科用水性組成物。
６．(B)成分が、ＰＥＧ８０００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ８００、ＰＥＧ４００及びＰＥＧ３００からなる群から選ばれる少なくとも1種類である、前記１〜５のいずれか１項に記載の眼科用水性組成物。
７．(C)成分が、ＰＶＰ Ｋ１７、ＰＶＰ Ｋ２５、ＰＶＰ Ｋ３０及びＰＶＰ Ｋ９０からなる群から選ばれる少なくとも１種である、前記１〜６のいずれか１項に記載の眼科用水性組成物。
８．熱ゲル化人工涙液である前記１〜７に記載の眼科用水性組成物。
９．(A) 少なくとも２種類のメチルセルロース、(B)ポリエチレングリコール、(C) ポリビニルピロリドン、及び(D) クエン酸又はその薬学的に許容される塩を含有する、角膜保護用、角膜上皮障害軽減用又は角膜障害回復用眼科用水性組成物。
１０．ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、及びクエン酸又はその薬学的に許容される塩と組み合わせて、角膜保護用、角膜上皮障害軽減用又は角膜障害回復用眼科用水性組成物を調製するための、少なくとも２種類のメチルセルロースの使用。

【発明の効果】

【0013】

本発明の眼科用水性組成物は、ドライアイなどの角膜上皮障害治療薬又は涙液補充のための人工涙液として用いることができ、その場合、哺乳類、特にヒトの目に適用する点眼剤として用いられる。この組成物は、ヒトなどの生体に投与されるとその体温で容易に増粘する。また、本発明の組成物は地域や季節などにより温度が高い環境に置かれても増粘するが、揺変性を有するため、軽く振り混ぜることで組成物の流動性が高くなり（つまり、ゾルに変化する）、ゾル-ゲル相転移を繰り返すことができるので、容易に生体に投与することが可能となる。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】本発明の実施例及び比較例において、ゲル化温度を示すグラフである。

【図2】本発明の実施例及び比較例において、揺変性を示すグラフである。

【図3】本発明の実施例及び比較例において、熱に対する応答性を示すグラフである。

【図4】本発明の実施例において、熱に対する応答性を示すグラフである。

【図5】本発明の実施例及び比較例において、ゲル化挙動(１回目)を示すグラフである。

【図6】本発明の実施例及び比較例において、ゲル化に対する再現性(５回目)を示すグラフである。

【図7】本発明の実施例及び比較例において、ゲル化に対する再現性(１０回目)を示すグラフである。

【図8】本発明の実施例及び比較例において、角膜保護作用について評価した結果を示すグラフである。

【図9】は、本発明の実施例及び比較例において、角膜保護作用について評価した結果を示すグラフである。

【図10】本発明の実施例及び比較例において、角膜保護作用について評価した結果を示すグラフである。

【図11】本発明の実施例及び比較例において、眼表面滞留性について評価した結果を示すグラフである。

【図12】本発明の実施例及び比較例において、涙液量測定の結果を示すグラフである。

【図13】本発明の実施例及び比較例において、角膜障害回復作用について評価した結果を示すグラフである。

【図14】本発明の実施例及び比較例の投与開始から12日目に角膜障害を観察した写真である。

【発明を実施するための形態】

【0015】

（A）少なくとも２種のメチルセルロース
本発明に用いられるメチルセルロース（以下、ＭＣともいう）は、医薬品添加物として市販されているものを、適宜使用することができる。例えば粘度で表せば２ｗ／ｖ％水溶液の２０℃における粘度が１２０００ｍＰａ・s（ミリパスカル秒）以下であればよく、１２０ｍＰａ・s以下であるものがより好ましい。メトキシ基の含有率は２６〜３３％の範囲が好ましい。さらにＭＣはその水溶液の粘度によって区別され、例えば、市販品の品種には表示粘度４、１５、２５、１００、４００、１５００、４０００（数字は２ｗ／ｖ％水溶液の２０℃における粘度（単位はミリパスカル・秒）を示す。以降、単に「粘度」ないし「表示粘度」と述べた場合も同じである。例えば、「表示粘度が４」は、２ｗ／ｖ％水溶液の２０℃における粘度が４ミリパスカル・秒であることを意味する）のものがあり、容易に入手可能である。表示粘度４〜４００のＭＣが取り扱いやすいため好ましい。表示粘度が４、１５、２５、１００、４００、１５００及び４０００からなる群から選ばれる２種のＭＣであるのがより好ましい。表示粘度が４のＭＣ、表示粘度が１５のＭＣ、表示粘度が４００のＭＣがさらに好ましく、特に、表示粘度が４のＭＣと表示粘度が１５のＭＣとの組み合わせ、表示粘度が４のＭＣと表示粘度が４００のＭＣとの組み合わせ、及び表示粘度が１５のＭＣと表示粘度が４００のＭＣとの組み合わせが好ましい。とりわけ、表示粘度が４のＭＣと表示粘度が１５のＭＣとの組み合わせが好ましい。ＭＣの概要、規格、用途、使用量及び商品名などについては医薬品添加物辞典（日本医薬品添加物協会編集、薬事日報社発行）に詳細に記載されている。また、MCは日本、米国、欧州の三薬局方での調査合意に基づき規定した医薬品各条として第十七改正日本薬局方に掲載されている。MCの規格の大部分は三薬局方で共通するものである。なお、ＭＣの粘度は、第十七改正日本薬局方に記載の方法に従って測定できる。

【0016】

（B）ポリエチレングリコール
本発明に用いられるポリエチレングリコール（以下、ＰＥＧともいう）は、医薬品添加物として市販されており、例えば、ＰＥＧ−２００、−３００、−４００、−６００、−１０００、−１５００、−１５４０、−２０００、−４０００、−６０００、−８０００、−２００００、−５００００、−５０００００、−２００００００及び−４００００００の商品名で和光純薬工業（株）から、マクロゴール−２００、−４００、−１５００、−４０００、−６０００または−２００００の商品名で三洋化成工業（株）から、さらに、ＣＡＲＢＯＷＡＸ（登録商標） ＰＥＧ ２００、３００、４００、５４０、６００、１０００、１４５０、３３５０、４０００、４６００、８０００の商品名でＤＯＷ ＣＨＥＭＩＣＡＬ ＣＯＭＰＡＮＹより販売されている。本発明の基剤に用いられるＰＥＧの重量平均分子量は３００〜５００００が好ましく、３００〜８０００が特に好ましい。重量平均分子量が３００以上の場合には体温によるゾル-ゲル相転移を起こしやすく、重量平均分子量が５００００以下の場合には液体状態での粘度が高くなりすぎないため好ましい。とりわけ、重量平均分子量が４０００又は８０００のＰＥＧが好ましい。また、２種以上のＰＥＧを混合して重量平均分子量を上記の至適範囲内に調整することも可能である。ＰＥＧの概要、規格、用途、使用量及び商品名などについては医薬品添加物事典（日本医薬品添加物協会編集、薬事日報社発行）に詳細に記載されている。また、ＰＥＧの概要、規格は米国薬局方（2018 U.S. Pharmacopeia National Formulary, USP41 NF36、以下USP41(NF36)という）に詳細に記載されている。なお、ＰＥＧ−４００、−４０００、−６０００及び−２００００の重量平均分子量は、第十七改正日本薬局方に記載の方法に従って測定できる。重量平均分子量が２００から８０００のＰＥＧは、USP41(NF36)に従って粘度を測定することができ、粘度範囲が規定されている。

【0017】

・ポリプロピレングリコール
ＰＥＧに代えて又はＰＥＧに追加して、ポリプロピレングリコールを用いることができる。ポリプロピレングリコールを含ませることにより、本発明の組成物の粘度を適度な範囲に調整することができる。本発明に用いることができるポリプロピレングリコールは、重量平均分子量が200〜40000であるのが好ましく、200〜1200であるのがより好ましく、200〜700であるのが水への溶解性が高いためさらに好ましく、200〜400が特に好ましい。なお、ポリプロピレングリコール2000の重量平均分子量は、医薬品添加物規格2013（薬事日報社発行）に記載の方法に従って測定できる。ポリプロピレングリコールは、例えば、ユニオール（登録商標）D-200、D-250、D-400、D-700、D-1000、D-1200、D-2000、D-4000の商品名で日油株式会社より販売されている。前記ユニオールDシリーズの重量平均分子量、動粘度は油化製品総合カタログ(日油株式会社油化事業部)に記載されている。

【0018】

（C）ポリビニルピロリドン
本発明に用いられるポリビニルピロリドン（以下、ＰＶＰともいう）は、医薬品添加物として市販されているものを、適宜使用することができる。具体的には、ＰＶＰ Ｋ１７、ＰＶＰ Ｋ２５、ＰＶＰ Ｋ３０、ＰＶＰ Ｋ９０等が挙げられる。本発明に用いられるＰＶＰの重量平均分子量は２５００〜２５００００が好ましく、２００００〜１５００００が特に好ましい。ＰＶＰ Ｋ１７、ＰＶＰ Ｋ２５、ＰＶＰ Ｋ３０、ＰＶＰ Ｋ９０からなる群から選ばれる少なくとも１種が好ましい。とりわけ、ＰＶＰ Ｋ２５が好ましい。ＰＶＰの概要、規格、用途、使用量及び商品名などについては医薬品添加物事典（日本医薬品添加物協会編集、薬事日報社発行）に詳細に記載されている。ＰＶＰ Ｋ２５、ＰＶＰ Ｋ３０及びＰＶＰ Ｋ９０はポビドンとして第十七改正日本薬局方に収載されている。ポビドンは日本、米国、欧州の三薬局方での調査合意に基づき規定した医薬品各条として第十七改正日本薬局方に掲載されている。ポビドンの規格の大部分は三薬局方で共通するものである。なお、本書ではＰＶＰ Ｋ２５をＰＶＰ ｋ２５のように表記することがある。

【0019】

（D）クエン酸又はその薬理学的に許容し得る塩
本発明に用いられるクエン酸としては、クエン酸水和物及びクエン酸の薬学的に許容しうる塩が挙げられる。
前記クエン酸の薬学的に許容し得る塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩などを例示できる。ナトリウム塩としては、クエン酸ナトリウム水和物(別名：クエン酸ナトリウム(日局)、以下、クエン酸ナトリウムとする)、クエン酸二水素ナトリウム、クエン酸二ナトリウム等が挙げられる。カリウム塩としては、クエン酸カリウム（クエン酸カリウム一水和物）があげられる。
本書でいうクエン酸ナトリウムは、第十七改正日本薬局方にクエン酸ナトリウム水和物としての概要、規格及び用途が詳細に記載されている。また、クエン酸ナトリウムとして、クエン酸ナトリウム２水和物の概要及び規格がUSP41(NF36)に詳細に記載されている。

【0020】

本発明の眼科用水性組成物におけるＭＣの合計の濃度は０．２〜５ｗ／ｖ％であるのが好ましい。ＭＣの合計の濃度が０．２ｗ／ｖ％以上の場合、眼表面の温度で本発明の組成物がゲル化しやすいので好ましい。またＭＣの合計の濃度が５ｗ／ｖ％以下の場合、粘度が取り扱いやすい範囲に調整できるため好ましい。より好ましくは０．５ｗ／ｖ％以上、さらに好ましくは１ｗ／ｖ％以上である。また、より好ましくは４ｗ／ｖ％以下、さらに好ましくは３ｗ／ｖ％以下である。

【0021】

本発明の眼科用組成物の実施態様として、異なる規格のＭＣを３種類以上混合することもできる。３種類以上のＭＣを混合した組成物は、１種類のＭＣによる組成物よりもヒトの体温付近（３４〜３８℃）での増粘が比較的速やかであるため好ましい。２種類のＭＣを混合した組成物は、室温（１〜３０℃）において液体（ゾル）で保存可能であるように粘性を調整しやすいのでさらに好ましい。
ＭＣの組み合わせが２種類である場合、前記組成物において、１種類のＭＣの濃度は０．１〜３ｗ／ｖ％であるのが好ましい。ＭＣの濃度が０．１ｗ／ｖ％以上の場合、ヒトの体温付近（３４〜３８℃）での増粘がヒトの体温付近（３４〜３８℃）で増粘するので好ましい。またＭＣの濃度が３ｗ／ｖ％以下の場合、室温（１〜３０℃）において粘性の低い水溶液を調製しやすいため好ましい。より好ましくは０．1ｗ／ｖ％以上、さらに好ましくは０．２ｗ／ｖ％以上である。より好ましくは２．５ｗ／ｖ％以上である。
ＭＣの組み合わせが２種類である場合、異なる規格（好ましくは粘度）のＭＣを、質量比にして、１：３０〜３０：１の割合で混合することが好ましく、より好ましくは１：２４〜２４：１の割合、さらに好ましくは１:４〜４:１である。特に、表示粘度が４のＭＣと表示粘度が１５のＭＣとの組み合わせ、表示粘度が４のＭＣと表示粘度が４００のＭＣとの組み合わせ、又は表示粘度が１５のＭＣと表示粘度が４００のＭＣとの組み合わせを、上記の質量比で併用するのが好ましい。とりわけ、表示粘度が４のＭＣと表示粘度が１５のＭＣとの組み合わせを、上記の質量比で併用するのが好ましく、なかでも、１：４〜４：１の質量比で併用するのが好ましい。

【0022】

本発明の眼科用水性組成物の実施態様として、ＭＣ以外の成分としては以下の濃度範囲がより好ましい。
PEGの濃度は０．５〜４．０ｗ／ｖ％の範囲で、濃度が０．５ｗ／ｖ％より低い場合は局所でのゲルが生成しにくいことから実用性に乏しく、また、４ｗ／ｖ%より高いとゲル化温度が低くなり好ましくない。
ポリプロピレングリコールの濃度は０．１〜４ｗ／ｖ％の範囲で、濃度が４ｗ／ｖ％より高いと眼刺激の点で好ましくない。
PVPの濃度は０．５〜４．０ｗ／ｖ％の範囲で、濃度が０．５ｗ／ｖ％より低い場合は局所でのゲルが生成しにくいことから実用性に乏しく、また、４ｗ／ｖ％より高いとゾルの粘度が高くなり好ましくない。
クエン酸の濃度は１．０〜４．０ｗ／ｖ％の範囲で、濃度が１．０ｗ／ｖ％より低い場合は局所でのゲルが生成しにくいことから実用性に乏しく、また、４ｗ／ｖ％より高いと眼刺激の点で好ましくない。

【0023】

本発明の組成物は、
（A）表示粘度が４のＭＣと、表示粘度が１５のＭＣとを、質量比１：４〜４：１で、合計濃度が０．２〜５ｗ／ｖ％となる量と、
（B）０．５〜４．０ｗ／ｖ％の、重量平均分子量が４０００又は８０００のＰＥＧと、
（C）０．５〜４．０ｗ／ｖ％のＰＶＰ Ｋ２５と、
（D）１．０〜４．０ｗ／ｖ％のクエン酸又はそのナトリウム塩を含むのが最も好ましい。この組成物のｐＨ調整剤は、水酸化ナトリウム又は硫酸であるのがよい。

【0024】

本発明の眼科用水性組成物は、哺乳類の体温付近の温度でゲル化することが所望されることから、本発明の眼科用水性組成物のゲル化温度（ゾルからゲルに相転移を起こす温度）は、約３０℃〜４０℃であるのが好ましく、３４℃から４０℃であるのがより好ましい。本発明の眼科用水性組成物は、室温(１〜３０℃)で即時投与可能な液剤として室温で保存できる。前記（B）〜（D）成分の濃度を調整することにより、ゲル化温度を細かく調整することができる。

【0025】

本発明の眼科用組成物は、ドライアイなどの角膜上皮障害治療薬として用いることができる。
本発明の眼科用水性組成物はまた、乾性角結膜炎、涙液減少症における涙液補充のための人工涙液、涙液不足に伴う、コンタクトレンズ装用時の不快感、目のかわき、目の疲れ、目のかすみにおける涙液補充のための人工涙液、目の乾燥による、ヒリヒリする症状、刺激における涙液補充のための人工涙液として用いることができる。
本発明の眼科用水性組成物はまた、角膜の乾燥を抑制し、角膜を保護するための人工涙液又は涙液量を増大させる人工涙液として用いることができる。
本発明の眼科用水性組成物はまた、眼表面で滞留し、角膜上皮障害を軽減する人工涙液として用いることができる。
本発明の眼科用水性組成物はまた、角膜損傷を早期に回復させることで角膜障害を回復することができる人工涙液としての用いることができる。

【0026】

本発明の眼科用水性組成物にはドライアイに対する有効成分としてまたは人工涙液の有効成分として、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、乾燥炭酸ナトリウム、硫酸マグネシウム、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸二水素カリウム等の無機塩類の他に、ブドウ糖などの糖類、Ｌ−アスパラギン酸カリウム、Ｌ−アスパラギン酸マグネシウム、Ｌ−アスパラギン酸マグネシウム・カリウム[等量混合物]、アミノエチルスルホン酸（以下、タウリンともいう）、コンドロイチン硫酸ナトリウム等のアミノ酸類又はその薬学的に許容される塩、ポリビニルアルコール、ヒアルロン酸及びその薬学的に許容される塩、ヒドロキシエチルセルロース、ヒプロメロース（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）等の高分子化合物を配合しても良い。これら有効成分の配合量は期待される薬効が得られる濃度であれば特に制限はない。

【0027】

本発明の眼科用水性組成物は通常ｐＨ３〜１０に調整され、特に眼刺激の点よりｐＨ５〜８で調整されることが好ましい。本発明の人工涙液のｐＨを調整するために、通常添加される種々のｐＨ調整剤を使用してもよい。例えば、酸類、塩基類、アミノ酸類等が挙げられる。酸類としては、例えば、塩酸、硫酸、リン酸、ホウ酸、酢酸、乳酸、グルコン酸、アスコルビン酸などが挙げられる。塩基類としては、例えば、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化ナトリウム、水酸化マグネシウム、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミンなどが挙げられる。アミノ酸類としては、グリシン、ヒスチジン、イプシロンアミノカプロン酸などが挙げられる。

【0028】

本発明の眼科用水性組成物は、必要に応じて、薬学的に許容し得る等張化剤、可溶化剤、保存剤及び防腐剤などを含有してもよい。等張化剤としてはキシリトール、マンニトール、ブドウ糖等の糖類、プロピレングリコール、グリセリン、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどが挙げられる。可溶化剤としては、ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油及びシクロデキストリンが挙げられる。

【0029】

保存剤としてはベンザルコニウム塩化物（以下、ＢＡＣともいう）、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウムなどのイオン系保存剤、グルコン酸クロルヘキシジン、クロルヘキシジン塩酸塩、1,1-ジメチルビグアニド塩酸塩、ポリヘキサメチレンビグアニド、アレキシジン、ヘキセチジン、Ｎ−アルキル−２−ピロリジノンなどのビグアニド系保存剤、塩化ポリドロニウムなどのポリクオタニウム系保存剤、パラヒドロキシ安息香酸メチル、パラヒドロキシ安息香酸プロピル、パラヒドロキシ安息香酸ブチル等のパラベン類、クロロブタノール、フェニルエチルアルコール、ブロノポール及びベンジルアルコールなどのアルコール類、デヒドロ酢酸ナトリウム、ソルビン酸及びソルビン酸カリウムなどの有機酸及びその塩類が使用できる。
点眼液で汎用性の高い防腐剤であるベンザルコニウム塩化物は、一般式：［Ｃ６Ｈ５ＣＨ２Ｎ（ＣＨ３）２Ｒ］Ｃｌで示される。なお、前記一般式において、Ｒはアルキル基を示す。本発明の組成物において、ベンザルコニウム塩化物は岡見化学工業株式会社から販売されているものを使用した。

【0030】

また、その他の添加剤としてヒドロキシエチルセルロース、ポリビニルアルコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、ヒアルロン酸及びその薬学的に許容される塩、コンドロイチン硫酸ナトリウムもしくはポリアクリル酸ナトリウム等の増粘剤、ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）及びそれらの薬学的に許容される塩、トコフェロール及びその誘導体、亜硫酸ナトリウムなどの安定化剤が挙げられる。

【0031】

本発明の眼科用水性組成物の製法としては特に限定されず、例えば、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン及びクエン酸を約６０〜７０℃の熱水に分散させ、１０℃以下に冷却する。必要に応じ、ここに、無機塩類、その他の有効成分、添加剤などを添加溶解し良く混合する。得られた溶液のｐＨを必要に応じてｐＨ調整剤で調整し、滅菌精製水でメスアップし本発明の眼科用水性組成物を調製する。前記組成物を滅菌後、プラスチック製点眼ボトルに充填し、利用に供することができる。本発明の眼科用水性組成物は、哺乳類、特にヒトの目に適用する点眼剤として用いられる。

【0032】

以下に実施例を掲げて本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例のみに限定されるものではない。

【0033】

＜試験例１Ａ＞
メチルセルロース（信越化学工業（株）製、メトローズ（登録商標）ＳＭ−４及びＳＭ−１５）、ポリエチレングリコール（ＣＡＲＢＯＷＡＸ（登録商標） ＰＥＧ８０００、ダウ・ケミカル社製）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ ｋ２５）及びクエン酸ナトリウムを所定量混合し、６０〜７０℃に加熱した滅菌精製水へ添加し、攪拌することで分散させた。均一に分散したことを確認後、攪拌しながら１０℃以下に冷却した。全体が澄明になったことを確認し、ベンザルコニウム塩化物を所定量添加し、溶解した。さらに、１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液又は１Ｍの硫酸水溶液でｐＨを７．０に調整後、滅菌精製水で所定の容量にメスアップし、本発明の眼科用水性組成物を調製した（実施例１、２）。処方内容を表1に示した。
なお、表中、各成分の配合量はすべてｗ／ｖ％で表した。

【0034】

【表1】

【0035】

比較例として、特許文献１の実施例-３及び４と特許文献４の実施例-７、特許文献３の実施例-５を各特許文献記載の方法で調製した（比較例１〜４）。処方内容を表２に示した。

【0036】

【表2】

【0037】

表１、２に示した実施例または比較例の温度と粘度の関係を調べるため、各水性組成物の粘度挙動を観察した。
実施例１、２及び比較例１〜４の組成物の２０℃〜４０℃における粘度を測定して、温度と粘度の関係を評価した。アントンパール社製レオメーター (Ｍｏｄｕｌａｒ Ｃｏｍｐａｃｔ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ １０２) で粘度を測定した。調製した本発明の組成物、約１ｍＬを直径約５０ ｍｍのパラレルプレートと温度コントロール用ペルチェの間にセットした。ペルチェとパラレルプレートのギャップは０．５ ｍｍに設定した。測定開始前に試料を５分間５℃に保冷した。測定開始から、各測定温度まで徐々に昇温した。各測定温度で２４０秒間保持して粘度を測定した。結果を図１に示した。

【0038】

本発明の組成物である実施例１、２は３２℃まで低粘度を維持し、３４℃から４０℃の間で急激に粘度が上昇した。比較例１では３４℃から４０℃の間で粘度が若干上昇するものの、全体的に低粘度で移行した。比較例２、３では３２℃から粘度が上昇し比較例４では２５℃付近で突如として粘度が上昇した。
比較例２、３はゲル化温度が本発明の組成物よりも室温に近く、比較例４では室温で大きく増粘するため、室温での貯法は難しいことが示された。一方で、本発明の眼科用水性組成物は、室温(１〜３０℃)で即時投与可能な液剤として保存できることが示された。

【0039】

＜試験例１Ｂ＞
前述の実施例１,２と同様に次の通り実施例４〜３９を調製した。メチルセルロース（ＳＭ−４、ＳＭ−１５及びＳＭ−４００）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ８０００、ＰＥＧ４０００、ＰＥＧ４００及びＰＥＧ３００）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ ｋ２５、ＰＶＰ ｋ３０及びＰＶＰ ｋ９０）及びクエン酸ナトリウムを所定量混合し、表６の実施例を調製する場合はホウ酸あるいはヒアルロン酸を所定量さらに混合し、６０〜７０℃に加熱した滅菌精製水へ添加し、攪拌することで分散させた。均一に分散したことを確認後、攪拌しながら１０℃以下に冷却した。全体が澄明になったことを確認し、表３〜７に示す他の成分を所定量添加し、溶解した。さらに、１Ｍの水酸化ナトリウム水溶液又は１Ｍの硫酸水溶液でｐＨを調整後、滅菌精製水で所定の容量にメスアップし、本発明の眼科用水性組成物を調製した。
実施例と同様の手順で比較例Ａを調製した。
処方内容を表３〜７に示した。

【0040】

実施例４〜３９及び比較例Ａの組成物の２０℃〜４０℃における粘度を測定して、温度と粘度の関係を評価した。アントンパール社製レオメーター (Ｍｏｄｕｌａｒ Ｃｏｍｐａｃｔ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ １０２) で粘度を測定した。調製した本発明の組成物、約１ｍＬを直径約５０ ｍｍのパラレルプレートと温度コントロール用ペルチェの間にセットした。ペルチェとパラレルプレートのギャップは０．５ ｍｍに設定した。測定開始前に試料を５分間５℃に保冷した。測定開始から、各測定温度まで徐々に昇温した。各測定温度で２４０秒間保持して粘度を測定した。結果を表３〜７に示した。

【0041】

【表3】

【0042】

【表4】

【0043】

【表5】

【0044】

【表6】

【0045】

【表7】

【0046】

表３〜７より、本発明の組成物である実施例４〜３９は、３２℃まで低粘度を維持し、３４℃から４０℃の間で急激に粘度が上昇した。
表３から、本発明の組成物はＭＣの種類に関わらず調製可能であり、熱ゲルの特性を有することが示された。
表３の実施例８と実施例９を比較すると、表示粘度の大きいＭＣの割合が増えるほど低温での粘度が大きくなることが明らかであった。
表４から、ＰＶＰの種類ないし重量平均分子量に関わらず、本発明の組成物が調製可能であり、熱ゲルの特性を有することが示された。
表４の実施例１３と実施例１４を比較すると、クエン酸ナトリウムの濃度が低い組成物のほうが３４〜４０℃において粘度の上昇が緩やかであった。
表４の実施例１２と実施例１３を比較すると、ポリエチレングリコールの濃度が低い組成物のほうが３４〜４０℃において粘度の上昇が緩やかであった。
表４の実施例１３と実施例１５を比較すると、ＰＶＰの濃度が低い組成物のほうが３４〜４０℃において粘度の上昇が緩やかであった。
表５から、本発明の組成物において各種防腐剤の添加が可能であり、熱ゲルの特性に影響を与えないことが明らかであった。
表６から、本発明の組成物においてホウ酸のような酸類、ヒアルロン酸のような増粘剤、トロメタモールのような塩基類，タウリン等のアミノ酸の添加が可能であり、熱ゲルの特性に影響を与えないことが明らかであった。
表６から、ポリエチレングリコールの種類ないし重量平均分子量に関わらず、本発明の組成物が調製可能であり、熱ゲルの特性を有することが示された。
表７から、本発明の組成物において各種無機塩類の添加が可能であり、熱ゲルの特性に影 響を与えないことが明らかであった。

【0047】

表４から、クエン酸ナトリウム及びポリエチレングリコールが本発明の組成物での熱による粘度の上昇に影響を与えていることが明らかであった。
表４から、前述のクエン酸ナトリウムまたはポリエチレングリコールほどではないものの、ＰＶＰが本発明の組成物での熱による粘度の上昇に影響を与えていることが明らかであった。
表５から、防腐剤の種類に限定せず添加可能であることが示されたので、本発明は水性医薬用組成物として適することが示された。
表６及び表7から、本発明の組成物が人工涙液用組成物として適することが示された。
表３〜７から、本発明の組成物は、室温(１〜３０℃)で即時投与可能な液剤として保存できることが示された。
表３〜７から、本発明の組成物は、眼科用水性組成物に適しており、投与後の眼表面の温度に反応し、即時に増粘して滞留性があることが示唆された。

【0048】

＜試験例１Ｃ＞
前述の実施例１,２と同様の手順で実施例４０〜５２を調製し、２０℃〜４０℃における粘度を測定した。処方内容及び測定結果を表８に示した。

【0049】

【表8】

【0050】

実施例40、42、46は20〜32℃付近の粘度が低いものの、36〜40℃の体温付近で粘度が上昇している。
実施例49、51、52、53は30〜34℃で粘度が低いものの、38、40℃で粘度が急激に上昇している。
本試験の粘度測定にて観察した粘度挙動をもって、本発明のほか実施例と同様の粘度推移を持つことから、実施例40〜52でも本発明の特徴を備えていることが示された。

【0051】

＜試験例２＞
表１に示した実施例２及び表２に示した比較例２〜４について、ゲル化時の揺変性を検討した。
実施例２及び比較例２〜４の組成物について、アントンパール社製レオメーター (Ｍｏｄｕｌａｒ Ｃｏｍｐａｃｔ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ １０２) を用いてゲル化後の組成物に対してせん断応力とひずみの関係を求めた。せん断応力を増加させた時にひずみと比例の関係でなくなるポイントがあれば揺変性があると評価した。
調製した本発明及び比較例の組成物、約１ｍＬを直径約５０ ｍｍのパラレルプレートと温度コントロール用ペルチェの間にセットした。ペルチェとパラレルプレートのギャップは０．５ ｍｍに設定した。測定開始前に測定試料を５分間５℃で保冷した。測定開始から約１０分間３６℃に保持した。次に２４０秒間２５℃に保持した後に、振動測定にて、周波数1 (Hz) 、せん断応力を0.01〜10Paに変化させた時のひずみを求めた。結果を図２に示した。

【0052】

本発明の組成物である実施例及び比較例２、３はいずれも応力とひずみが比例の関係でなくなるポイント（降伏応力）が存在するため揺変性があるという結果が示された。比較例４では本試験条件で降伏応力は存在しなかったので、揺変性はないことが示された。

【0053】

＜試験例３Ａ＞
表１に示した実施例１、２及び表２に示した比較例１〜３について、一定期間で加熱と冷却を繰り返して粘度を測定し、再現性を評価した。
本発明の組成物、実施例２について、２０℃と３６℃へ温度調節を繰り返した際の粘度の変化を評価した。アントンパール社製レオメーター (Ｍｏｄｕｌａｒ Ｃｏｍｐａｃｔ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ １０２) で粘度を測定した。調製した本発明の組成物、約１ｍＬを直径約５０ ｍｍのパラレルプレートと温度コントロール用ペルチェの間にセットした。ペルチェとパラレルプレートのギャップは０．５ ｍｍに設定した。測定試料は測定開始前に１０分間５℃で保冷した。測定開始から、３６℃に昇温して２４０秒間保持した後に粘度を測定し、次に２０℃に冷却して２４０秒間保持した後に粘度を測定した。この３６℃と２０℃の操作を４回半繰り返した。比較例４は３６℃での粘度が非常に高く、ほかの試料と同条件で測定ができなかった。よって、実施例１、２および比較例１〜３の結果を図３に示した。

【0054】

本発明の組成物、実施例１、２は２〜５回目の操作において３６℃では粘度が上昇して３００ 〜 ６００ ｍＰａ・ｓを示し、２０℃では粘度が１００ ｍＰａ・ｓ以下を示した。加熱と冷却の操作を４回以上繰り返しても熱に対する応答性を維持していた。本発明の組成物における３６℃での増粘性は、比較例１〜３より強い状態を維持していることが示された。

【0055】

＜試験例３Ｂ＞
表３に示した実施例９、１０について、一定期間で加熱と冷却を繰り返して粘度を測定し、再現性を評価した。
試験操作は試験例３Ａと同様である。結果を図４に示した。

【0056】

試験例３Ｂの試験結果より、本発明の実施例は加熱と冷却の操作を繰り返しても熱に対する応答性を維持していることが示された。

【0057】

＜試験例４＞
表１に示した実施例２及び表２に示した比較例１〜４の温度と溶液状態 (ゾル及びゲル) の関係を検討し、各水性組成物のゲル化再現性を求めた。
実施例２及び比較例１〜４の組成物の３０℃から３６℃へ昇温した際の溶液状態 (ゾル及びゲル) の関係及び、３０℃でゲル構造を崩した後のゲル化再現性を評価した。アントンパール社製レオメーター (Ｍｏｄｕｌａｒ Ｃｏｍｐａｃｔ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ １０２) を用いて振動測定によりゲル化の指標となる貯蔵弾性率 (Ｇ’) と損失弾性率 (Ｇ’’) を測定し、Ｇ’’/ Ｇ’の式で求められる損失正接(tan (δ) )の値を求めた。一般的に、tan (δ)＞1を示すものをゾル、tan (δ)＜1を示すものがゲルであるとされている(ゲル コントロール-ゲルの上手な作り方のゲル化の抑制-、2009年6月、発行：株式会社情報機構)。
調製した本発明の実施例及び比較例、約１ｍＬをそれぞれ直径約５０ ｍｍのパラレルプレートと温度コントロール用ペルチェの間にセットした。ペルチェとパラレルプレートのギャップは０．５ ｍｍに設定した。測定試料は測定開始前に１０分間５℃で保冷した。測定開始から約１分間で３０℃に昇温して３０秒程度保持した。周波数1 (Hz) 、ひずみ5％の試験条件で振動測定し、次に約３０秒間で３６℃に測定試料を昇温し，そのまま１５０秒程度温度を維持した。その後、３０℃、せん断応力１０ Paの条件でパラレルプレートを回転させることによりゲル構造を崩した。再度３６℃へ昇温しながら測定し、これらの操作を１０回繰り返した。１回目のゲル化挙動と、ゲル化再現性の評価において５回目及び１０回目の結果を図５〜７に示した。

【0058】

１回目のゲル化の測定において、比較例４が最も早くtan (δ)＜1となりゲル化していた。その後、比較例３、実施例２、比較例２の順にゲル化し、比較例1はこの時間内でのゲル化は起きていないことが分かった。ゲル化する順番は試験例１の３６℃での粘度に概ね一致した。
ゲル化再現性の評価では、比較例１〜４は操作回数を重ねるごとにゾルへの転移が悪くなっていた。実施例２は、ゾルへの転移が弱くはなっているものの、１０回目の操作においても比較例よりも長い時間ゾル状態を維持していた。
本発明の実施例によって、２種類のメチルセルロースを適当な割合で混合することで、ゲル化再現性が良くなることがこの結果より示された。

【0059】

試験例３Ａ、３Ｂ及び４の結果から、本発明の特徴は表示粘度の異なるＭＣを各種混合して調製することによって得られることが示された。

【0060】

＜試験例５Ａ 角膜保護作用の評価＞
（１）試料溶液
表９の実施例３、比較例５及び比較例６を試験例１と同様に調製した。対照として生理食塩液（光製薬）(以下、生食ともいう)を加えた。

【0061】

【表9】

【0062】

（２）試験方法
有色家兎（系統；Ｋｂｔ：Ｄｕｔｃｈ，搬入時体重１．５〜２．０ ｋｇ、バイオテック）を安楽死させて角膜を採取した（ｎ＝３）。その後、採取した角膜を３５℃で４０分間、インキュベーター内で乾燥させた。乾燥開始直後から、室温で保存した実施例３及び生食と５℃で保存した後使用直前に室温に戻した比較例５と比較例６を、採取した角膜上に１分間隔でそれぞれ１０μＬ×６回ずつ（計６０μＬ）滴下した。乾燥後、角膜を生食で洗浄し、１％メチレンブルー（ナカライテスク）を用いて染色し、４００μＬの抽出液（アセトン（和光純薬工業）：飽和硫酸ナトリウム（和光純薬工業）水溶液＝７：３、容量比）に一昼夜以上浸漬して角膜に残留したメチレンブルーを抽出し、各抽出液の６６０ｎｍにおける吸光度を測定した。
結果を図８に示した。

【0063】

本発明の実施例３の吸光度は、比較例５及び比較例６または生理食塩液よりも低い結果であった。

【0064】

試験例５Ａの結果より、生食又は比較例５及び比較例６のような既存の熱ゲル化製剤よりも、本発明の実施例３の方が角膜の乾燥を抑制する特徴があることを示した。
よって、本発明の組成物は角膜保護作用を有することが示唆された。

【0065】

＜試験例５Ｂ 角膜保護作用の評価２＞
（１）試料溶液
表９の比較例５、表４の実施例１７及び表６の実施例３２を試験例１と同様に調製した。対照として生理食塩液（光製薬）を加えた。

【0066】

（２）試験方法
有色家兎（系統；Ｋｂｔ：Ｄｕｔｃｈ，搬入時体重１．５〜２．０ ｋｇ、バイオテック）を安楽死させて角膜を採取した。その後、採取した角膜に実施例１７、実施例３２及び比較例５を１５０μＬずつ滴下し、３５℃で４０分間、インキュベーター内で乾燥させた。乾燥後、角膜を生食で洗浄し、１％メチレンブルー（ナカライテスク）を用いて染色し、４００μＬの抽出液（アセトン（和光純薬工業）：飽和硫酸ナトリウム（和光純薬工業）水溶液＝７：３、容量比）に一昼夜以上浸漬して角膜に残留したメチレンブルーを抽出し、各抽出液の６６０ｎｍにおける吸光度を測定した。結果を図９に示した。

【0067】

本発明の実施例１７及び実施例３２は比較例５または生理食塩液よりも低い吸光度を示した。

【0068】

試験例５Ｂの結果より、生食又は比較例５のような既存の熱ゲル化製剤よりも、本発明の実施例の方が角膜の乾燥を抑制する特徴があることを示した。
よって、本発明の組成物は角膜保護作用を有することが示唆された。

【0069】

＜試験例６ 本発明及び既存製品における角膜保護作用の比較＞
（１）試料溶液
実施例として、表９の実施例３を試験例１と同様に調製した。
比較例として、ノバルティスファーマ株式会社製のＳＹＳＴＡＮＥ(登録商標) ＵＬＴＲＡを比較例アとした。または同社製のＳＹＳＴＡＮＥ(登録商標) ＧＥＬ ＤＲＯＰＳを比較例イとして用いた。対照として生理食塩液（光製薬）を加えた。

【0070】

（２）試験方法
白色家兎（系統；Ｋｂｓ：ＪＷ，体重３．５ｋｇ以上、北山ラべス）を安楽死させ角膜（ｎ＝３〜７）を採取した後、角膜上に生理食塩液、実施例３、比較例ア及び比較例イをそれぞれ１５０μＬずつ滴下した。滴下後、角膜を３５℃で４０〜５０分間、インキュベーター内で乾燥させた。乾燥後、角膜を生理食塩液で洗浄し、１％メチレンブルー（ナカライテスク）を用いて染色し、４００μＬの抽出液（アセトン（和光純薬工業）：飽和硫酸ナトリウム（和光純薬工業）水溶液＝７：３、容量比）に一昼夜以上浸漬して角膜に残留したメチレンブルーを抽出し、各抽出液の６６０ｎｍにおける吸光度を測定した。
結果を図１０に示した。

【0071】

本発明の実施例３の吸光度は比較例アよりも低く、比較例イと同等以上であった。

【0072】

試験例６の結果より、本発明の眼科用水性組成物は、非粘性水性製剤と比較して同等又はそれ以上の障害防止効果を有することが示唆された。

【0073】

＜試験例７ 本発明及び市販品における眼表面滞留性の比較＞
（１）試料溶液
実施例として、表１の実施例２を試験例１と同様に調製し、点眼ボトルに充填した。
比較例として、試験例６と同様に比較例ア及び比較例イを用いた。
これらの試料溶液に１ｍｇ／ｍＬとなるようにフルオレサイト(登録商標)静注（５００mg）を加えた。

【0074】

（２）試験方法
白色家兎（系統；Kbs:JW、北山ラべス）の眼瞼を緩やかに眼球から引き離し、角膜上に実施例２、比較例ア及び比較例イをそれぞれ３０μＬ滴下後、上下両眼瞼を軽くつまんで強制的に３０秒閉眼させた。点眼３０分後に眼表面を生理食塩液１００μＬでよくすすいだ後、洗浄液を回収し検体とした。同時に、点眼後強制瞬き下における眼表面の洗浄液の回収についても以下の手順で行った。眼瞼を緩やかに眼球から引き離し、角膜上に３０μＬを滴下後、上下両眼瞼を軽くつまんで強制的に３０秒閉眼させ、１０秒に１回の頻度で、強制瞬きさせた。点眼３０分後に眼表面を生理食塩液１００μＬでよくすすいだ後、洗浄液を回収し検体とした。
各検体の４８０ｎｍ(励起波長)及び５２０ｎｍ（吸収波長）を測定し、蛍光色素濃度を算出した。
結果を図１１に示した。

【0075】

眼表面洗浄液中の蛍光色素濃度を比較したところ、瞬きによらず本発明の実施例２は比較例アと同等の蛍光色素濃度を示し、比較例イよりも高い蛍光色素濃度を示した。

【0076】

試験例７の結果より、本発明の組成物は眼表面の滞留性において水溶液の製剤よりも優れていることが示唆された。

【0077】

＜試験例８ 涙液量の測定＞

【0078】

（１）試料溶液
実施例として、表１の実施例２を試験例１と同様に調製し、点眼ボトルに充填した。
対照として、リン酸緩衝生理食塩水（GIBCO（登録商標）PBS buffers、ライフ テクノロジーズ コーポレーション）を用いた。
所定量のベンザルコニウム塩化物[アルキル基の炭素数：14]( ベンジルジメチルテトラデシルアンモニウムクロリド水和物、東京化成工業株式会社)を微量のエタノールに溶解した後、生理食塩水でメスアップして０．１(w/v)％ＢＡＣ溶液を調製した。

【0079】

（２）試験方法
０．１(w/v)％ＢＡＣ溶液を白色家兎（系統；Kbs:JW、北山ラべス）の両眼にマイクロチューブで２０μＬずつ、１日２回（朝、夕）、２週間連日投与した。
前記と投与時間をずらし、朝、夕の間、３時間ごとになるよう、実施例２またはリン酸緩衝生理食塩水を３０μＬずつ両眼に、１日３回、２週間連日投与した。実施例２は点眼ボトルで投与した。リン酸緩衝生理食塩水はマイクロピペットで投与した。試験開始前と１週間後及び２週間後にシルメル試験紙（あゆみ製薬株式会社）を用いて涙液を採取した。結果を図１２及び表１０に示した。

【0080】

【表10】

【0081】

実施例及び対照をいずれも投与しない被験物質非投与群では、２週間後に涙液量の低下が認められた。
リン酸緩衝生理食塩水投与群では、２週間後に涙液量のわずかな増加が認められた。
一方、本発明の実施例２投与群では、経時的な涙液量の増加が認められた。

【0082】

試験例８の結果から、実施例２を連日投与することにより、ＢＡＣ水溶液の点眼に伴う涙液量の低下を抑制し、さらに涙液量を増加させることが明らかとなった。

【0083】

＜試験例9 角膜損傷に対する効果＞

【0084】

（１）試料溶液
実施例として、表9の実施例3を試験例１と同様に調製した。
対照として、生理食塩水（大塚生食注(500mL)（登録商標）、大塚製薬株式会社）を用いた。
比較例として、ノバルティスファーマ社製のＳＹＳＴＡＮＥ(登録商標) ＵＬＴＲＡを比較例アとした。
所定量のベンザルコニウム塩化物（東京化成株式会社)を微量のエタノールに溶解した後、生理食塩水でメスアップして０．１(w/v)％ＢＡＣ溶液を調製した。

【0085】

（２）試験方法
本試験方法はYuqiu Zhangらの方法(Drug and chemical toxicology 2016.39(4) 455-460)を参考とした。
1日に3回（朝から夕方までの4時間毎）、0.1(w/v)%BAC溶液を白色家兎（系統；Ｋｂｓ：ＪＷ、北山ラべス）の両眼にマイクロピペットで20μLずつ、連日投与した。投与期間は投与日を含めて42日間とした。投与前及び42日間投与後にポータブルスリットランプ コーワ SL-17(興和株式会社製、以下SL-17という）を用いて角膜表面の障害の程度を観察した。
0.1(w/v)%BAC溶液を42日間投与後に、1日に4回（朝から夕方までの2.5〜3時間毎）、実施例3、比較例ア及び生理食塩水のそれぞれをマイクロピペットで30μLずつ白色家兎の両眼(1群各5羽、n=10眼)に連日投与した。投与期間は投与日を含めて12日間とした。角膜をフルオレセイン染色してから3分経過後に生理食塩水で洗浄した。SL-17を用いて角膜表面の障害の程度を観察した。各群について、角膜損傷スコアを算出した。結果を図１３,１４に示した。図１４には、無処置(Control)、生理食塩水、実施例3あるいは比較例アの投与開始から１２日目に角膜障害を観察した写真を示した。

【0086】

0.1%BAC溶液を反復投与することにより、重度の角膜障害が確認された。BAC溶液投与終了後、無処置（Control）群及び生理食塩水投与群では、緩やかに角膜障害が回復していることが示された。また、比較例ア投与群は、無処置及び生理食塩水投与群よりも角膜障害の回復の程度が良好であることが示された。さらに、本発明の実施例3投与群では、いずれの群よりも角膜障害の回復が良好であることが示された。

【0087】

試験例9の結果から、実施例3を反復投与することにより、角膜障害が早期に回復することが示唆された。

【産業上の利用可能性】

【0088】

体温付近の温度で急激に増粘する本発明の眼科用水性組成物は生体に投与した場合、投与部位で速やかにゲル化して留まるため、眼表面の涙液を保持させることができる。また、地域や季節等３０℃以上の温度で増粘した場合でも組成物に弱い力を加えるだけで容易に流動性の高い組成物に変化することから、冷所保存が必要なく、携帯可能である。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】