特許 6795718 グルコース感受性インスリン誘導体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6795718

(24)【登録日】2020年11月16日

(45)【発行日】2020年12月2日

(54)【発明の名称】グルコース感受性インスリン誘導体

(51)【国際特許分類】

   C07K 14/62 20060101AFI20201119BHJP

   C12N 15/17 20060101ALI20201119BHJP

   A61K 38/28 20060101ALI20201119BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20201119BHJP

【ＦＩ】

   C07K14/62

   C12N15/17

   A61K38/28

   A61P3/10

【請求項の数】19

【外国語出願】

【全頁数】356

(21)【出願番号】特願2020-58277(P2020-58277)

(22)【出願日】2020年3月27日

(65)【公開番号】特開2020-164525(P2020-164525A)

(43)【公開日】2020年10月8日

【審査請求日】2020年4月28日

(31)【優先権主張番号】19166131.3

(32)【優先日】2019年3月29日

(33)【優先権主張国】EP

(31)【優先権主張番号】19174671.8

(32)【優先日】2019年5月15日

(33)【優先権主張国】EP

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】509091848

【氏名又は名称】ノヴォ ノルディスク アー／エス

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】トマス・ホウ−イェンセン

(72)【発明者】

【氏名】カルステン・ベーレンス

(72)【発明者】

【氏名】イミリアーノ・クロ

(72)【発明者】

【氏名】マルティン・ヴェルナー・ボルクセニウス・ミュンツェル

(72)【発明者】

【氏名】ペル・サウエルベルク

(72)【発明者】

【氏名】トーマス・クルーセ

(72)【発明者】

【氏名】ヤーネ・スペツラー

(72)【発明者】

【氏名】ウルリヒ・ゼンスフース

(72)【発明者】

【氏名】クラウディア・ウルリク・ヒョリンハード

(72)【発明者】

【氏名】ヘニング・トーヘルセン

(72)【発明者】

【氏名】ヴォイチェフ・バルシャネク

(72)【発明者】

【氏名】ズザナ・ドロブニャコヴァ

(72)【発明者】

【氏名】ラジスラフ・ドロズ

(72)【発明者】

【氏名】ミロスラフ・ハヴラーネク

(72)【発明者】

【氏名】ヴラジスラフ・コテク

(72)【発明者】

【氏名】ミラン・シュテングル

(72)【発明者】

【氏名】イヴァン・シュナイドル

(72)【発明者】

【氏名】ハナ・ヴァーニョヴァー

【審査官】 斉藤 貴子

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２０１５／０３２０８３７（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１１／０００８２３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００５−５２６００９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１９／２０４２０６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２０１９／０２４７４６８（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 TAKEI, C. et al.，Sugar-Responsive Layer-by-Layer Film Composed of Phenylboronic Acid-Appended Insulin and Poly(vinyl alcohol)，Chemical and Pharmaceutical Bulletin，２０１８年，Vol.66, No.4，P.368-374

【文献】 HOEG-JENSEN, T. et al.，Insulins with built‐in glucose sensors for glucose responsive insulin release，Journal of Peptide Science，２００５年，Vol.11, No.6，P.339-346

【文献】 CHOU, D. H.-C. et al.，Glucose-responsive insulin activity by covalent modification with aliphatic phenylboronic acid conjugates，Proceedings of the National Academy of Sciences，Vol.112, No.8，P.2401-2406

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｋ Ａ６１Ｋ Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ｉ）ヒトインスリン類似体であって、前記ヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーを含み、前記ペプチドスペーサーが、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、またはＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒを含み、式中、ｑが、１〜３の整数であり、ｒが、３である、ヒトインスリン類似体と、
ｉｉ）Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表す以下の式Ｍ１からなる群から独立して選択される、２つの修飾基Ｍであって、

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

式中、ｎが１であり、Ｗ１が、ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、
式中、＊が、前記ヒトインスリン類似体への付着点を表し、
式中、Ｒ１が、

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＣＦ_３である、
２つの修飾基Ｍと
を含む化合物であって、
１つの修飾基Ｍが、前記ペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、１つの修飾基Ｍが、前記ヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している、
化合物。

【請求項2】

キラルアミノ酸が、Ｌ形態である、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

修飾基Ｍが、同一である、請求項１または２に記載の化合物。

【請求項4】

前記ヒトインスリン類似体が、ｄｅｓＢ３０を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項5】

前記ヒトインスリン類似体が、
ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号１１）；
Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１２）
からなる群から選択されるヒトインスリン類似体である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項6】

前記スペーサーを含むヒトインスリン類似体が、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２１）；
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号２２）；
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２３）；
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２４）；ならびに
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２５）
からなる群から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項7】

前記化合物が、

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例２１５の化合物）；

【化4】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例２３３の化合物）；

【化5】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例２８０の化合物）；

【化6】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３００の化合物）；

【化7】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３０１の化合物）；

【化8】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３３１の化合物）；

【化9】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３３２の化合物）；および

【化10】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３３３の化合物）
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項8】

前記化合物が、

【化11】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例２１５の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項9】

前記化合物が、

【化12】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例２３３の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項10】

前記化合物が、

【化13】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例２８０の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項11】

前記化合物が、

【化14】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３００の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項12】

前記化合物が、

【化15】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３０１の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項13】

前記化合物が、

【化16】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３３１の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項14】

前記化合物が、

【化17】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３３２の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項15】

前記化合物が、

【化18】

[この文献は図面を表示できません]

（実施例３３３の化合物）
である、請求項１に記載の化合物。

【請求項16】

請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物を含む、組成物。

【請求項17】

薬剤として使用するための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項18】

糖尿病、１型糖尿病、２型糖尿病、耐糖能障害、高血糖症、およびメタボリックシンドローム（メタボリックシンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群）の予防または治療で使用するための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項19】

糖尿病、１型糖尿病、２型糖尿病、耐糖能障害、高血糖症、およびメタボリックシンドローム（メタボリックシンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群）の治療または予防のための医薬であって、治療有効量の請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物または請求項１６に記載の組成物を含む、医薬。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、新規のインスリン誘導体、およびそれらの薬学的使用に関する。さらに、本発明は、かかるインスリン誘導体を含む医薬組成物、および糖尿病に関連する医学的状態の治療または予防のためのかかる化合物の使用に関する。

【背景技術】

【0002】

インスリンは、高血糖の治療に最も有効な薬物であるが、インスリン投与量は、生理学的グルコース範囲が狭いため、多すぎるのと少なすぎるのとの間の微妙なバランスである。健康な人は、ほぼ５ｍＭの絶食状態におけるグルコースレベルを有し、糖尿病患者は、ほぼ５ｍＭを得るために食事および基礎インスリン調製物の両方を投与しようと試みる。しかしながら、約３ｍＭ未満の血糖値（低血糖症）は、多くの場合、インスリン治療中に生じ、低血糖症は、不快感、簡潔さの喪失（ｌｏｓｓ ｏｆ ｃｏｎｃｉｓｅｎｅｓｓ）、脳損傷、または死亡につながる可能性がある。したがって、糖尿病患者は、低血糖症を恐れて高いまたは中程度に高い血糖値を積極的に治療することに躊躇する。より高い血糖値のデポーからのみ活性であるかまたは放出され、より低い血糖値において不活性または弱く活性であるインスリン薬物が開発されると、糖尿病治療を助けることができるであろう。かかる目標は、１９７０年代以来、多くの論文において提案されてきたが（Ｂｒｏｗｎｌｅｅ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ １９７９，１１９０、Ｚａｙｋｏｖ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃ．２０１６，４２５）、ほとんどの場合、皮下デポーからグルコース依存的にインスリンを封入および放出するグルコース感受性ポリマーを介している。しかしながら、かかる系はゆっくりであり、したがって、例えば食後の血糖値を急速に変動させる治療には良くない。その結果、皮下グルコース感受性放出系は、臨床試験に達したことが一度もない。

【0003】

インスリン生物活性のグルコース感受性調整が血液中で行われる場合は、より良好である。この願いを叶えることができる１つのアプローチは、脂肪酸部分がアルブミン結合を引き起こす脂肪酸−モノボロネートインスリン誘導体との以前に記載されるようなグルコース感受性アルブミン結合であり得る（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ ＷＯ２０１１／０００８２３、ＷＯ ２０１４／０９３６９６、Ｃｈｏｕ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．２０１５，２４０１）。これらの系におけるアルブミン相互作用の主な駆動力は、脂肪酸−モノボロネートインスリン誘導体（ボロネートではない）の脂肪酸部分から生じ、アルブミン親和性へのグルコースの影響は弱い。したがって、アルブミン結合のグルコース感受性を高めるために、グルコースによって直接移動するグルコース感受性アルブミン結合モチーフの必要がある。モノボロネートは、高いミリモル範囲までの培地中の親和性（Ｋｄ）で、グルコースおよび他の糖に結合することが知られている（Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｅｎｓｏｒｓ Ａｃｔｕａｔｏｒｓ Ｂ ２０１２，４５）。しかしながら、生理学的グルコースレベルにおいて適切なグルコース感受性を提供するために、グルコースに対する強い親和性が必要とされる。グルコース上のヒドロキシ基に対して適切な形状で配置された２つのボロネート／ボロキソールを有するジボロン化合物は、モノボロンに対するグルコース親和性の増加、すなわち、低いＭｍ ＫｄまたはサブｍＭ Ｋｄをもたらすことができる（Ｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｅｎｓｏｒｓ Ａｃｔｕａｔｏｒｓ Ｂ ２０１２，４５）。それらの研究の目的は、光グルコースセンサを作製することであったため、文献に記載されるほとんどのかかるジボロンは、蛍光プローブを含む。かかるプローブが光に感受性があり、有毒であり、かつ着色され得るため、蛍光プローブは、薬物候補において望ましくない。

【0004】

したがって、生理学的血糖値内でグルコース感受性が高められたインスリン誘導体が必要である。

【発明の概要】

【0005】

最も広い態様では、本発明は、インスリン誘導体に関する。

【0006】

本発明の化合物は、驚くべきことに、アルブミン（ＨＳＡ）およびグルコースの両方に結合することが見い出され、ＨＳＡ親和性は、グルコース感受性である。したがって、ＨＳＡの存在下でのヒトインスリン受容体（ＨＩＲ）親和性もまた、グルコース感受性になる。ＨＳＡ結合されたインスリンの分画は、ＨＩＲへの結合から遮蔽されるが、ＨＳＡからのグルコース促進放出は、インスリンの遊離分画を増加させ、したがってグルコースは、ＨＩＲ親和性を高める。

【0007】

疑われるグルコース感受性アルブミン結合を有するすでに開示されたインスリン誘導体とは対照的に、本発明の化合物は、アルブミン結合の脂肪酸部分に依存しないが、グルコースによって直接移動するアルブミン結合モチーフを含み、アルブミン結合へのグルコースの影響の増加、したがってインスリンのグルコース感受性の増加をもたらす。

【0008】

アルブミン結合は、一般に、ペプチドおよびタンパク質系薬剤のインビボ半減期を延長することができる。長期の効果は、アルブミン結合分画が酵素分解および腎臓排出から保護される際に達成され、遊離部分のみが生物活性であり、したがってアルブミン結合分画の受容体媒介クリアランスを防止する。
したがって、本発明の化合物は、グルコース濃度に依存したインスリン活性を示し、したがってグルコース感受性インスリン誘導体として機能する。

【0009】

一態様では、本発明の化合物は、インスリンまたはその類似体、および１つ以上の修飾基を含む。

【0010】

一態様では、修飾基は、グルコースおよびアルブミンに対する親和性を有する。

【0011】

一態様では、インスリンペプチドまたはその類似体は任意選択で、スペーサーを含む。

【0012】

一態様では、本発明の化合物は、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体と、
ｉｉ）１つ以上の修飾基Ｍであって、修飾基Ｍの各々が２つのアリール部分を含み、ホウ素原子が２つのアリール部分の各々に付着している、１つ以上の修飾基Ｍと、を含む。１つ以上の修飾基Ｍの各々は、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖もしくはＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体中のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0013】

一実施形態では、１つ以上の修飾基Ｍは、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体の遊離システインの硫化物に付着している。

【0014】

一態様では、本発明の化合物は、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体と、
ｉｉ）２つ以上の修飾基Ｍであって、修飾基Ｍの各々が２つのアリール部分を含み、ホウ素原子が２つのアリール部分の各々に付着している、１つ以上の修飾基Ｍと、を含む。１つ以上の修飾基Ｍの各々は、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖もしくはＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体中のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0015】

例から分かるように、２つ以上の修飾基Ｍを有する化合物は一般に、１つの修飾基Ｍのみを有する化合物よりも高い程度のグルコース感受性（より高いグルコース因子）を示す。

【0016】

一態様では、本発明は、ペプチドスペーサーを含む新規インスリン類似体を含む、新規インスリン類似体の形態の中間生成物を提供する。

【0017】

一態様では、本発明の化合物は、血液および組織中のグルコース濃度の関数としてインスリン受容体を活性化する。

【0018】

一態様では、本発明の化合物は、低い利用可能性（低い非結合、血漿遊離分画）を有し、したがって、低血糖の状況の間に活性が低いかまたは活性がなく、例えば、約３ｍＭ未満のレベルのグルコース（低血糖症）を有する。

【0019】

一態様では、本発明の化合物は、高い利用可能性（高い非結合、血漿遊離分画）を有し、したがって、高血糖に応答して活性が高く、例えば、約１０ｍＭを超えるグルコース（高血糖症）を有する。
一態様では、本発明の化合物は、グルコース感受性アルブミン結合を示す。

【0020】

別の態様では、本発明は、本発明による化合物を含む医薬組成物に関する。別の態様では、本発明は、薬剤として使用するための本発明による化合物に関する。別の態様では、本発明は、糖尿病の治療で使用するための本発明による化合物に関する。別の態様では、本発明は、本発明による化合物の医学的用途（複数可）に関する。

【0021】

本発明はまた、例示的な実施形態の開示から明らかとなる、さらなる問題を解決することができる。

【図面の簡単な説明】

【0022】

【図1】１０ｍＭおよび３．５〜４ｍＭのグルコースにおけるインスリンアスパルトの静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図2】１０ｍＭおよび３．５〜４ｍＭのグルコースにおけるインスリンデグルデクの静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図3】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２１０（三角形）および実施例番号２１１（丸）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図4】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２３３（三角形）および実施例番号２３４（正方形）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図5】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２４０（三角形）および実施例番号２２７（丸）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図6】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２４１（三角形）および実施例番号１８１（正方形）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図7】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２０５（三角形）および実施例番号２３９（正方形）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図8】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２８５（三角形）および実施例番号２７３（正方形）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図9】１０ｍＭ（黒塗り）および３．５〜４ｍＭ（白抜き）のグルコースにおける実施例番号２８０（三角形）および実施例番号２７２（正方形）の静脈内ボーラスのＰＫプロファイルを示す（実施例Ｅ）。

【図10】実施例番号２０５、２３９、２７２、および２８０に関する３．５〜４ｍＭグルコース対１０ｍＭグルコースにおけるクランプのベースライン調整グルコース注入速度曲線下面積間の比較を示す。

【発明を実施するための形態】

【0023】

本発明は、インスリン誘導体に関する。一態様では、本発明は、グルコース感受性インスリン誘導体に関する。

【0024】

一実施形態では、本発明は、ヒトインスリンまたはその類似体および修飾基を含む化合物に関し、修飾基は、グルコースおよびアルブミンの両方に対する親和性を示す。

【0025】

一実施形態では、修飾基は、グルコース感受性アルブミン結合を示す。

【0026】

一実施形態では、インスリン類似体は、ヒトインスリンの類似体（配列番号１および配列番号２）である。
一実施形態では、本発明のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体は、スペーサーを含んでもよい。

【0027】

一実施形態では、本発明は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、および１つ以上の修飾基Ｍを含む化合物を提供し、修飾基Ｍの各々は、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分の各々に付着している。１つ以上の修飾基Ｍの各々は、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖もしくはＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体中のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。修飾基Ｍはまた、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体の遊離システインの硫化物に付着していてもよい。

【0028】

一般的な定義
「化合物」という用語は、分子実体を指すために本明細書で使用され、したがって、「化合物」は、各化合物または化合物の群に対して定義される最小要素以外の異なる構造要素を有してもよい。「化合物」という用語はまた、本明細書の薬学的に意義のある形態を含むことを意味し、すなわち、本発明は、本明細書に定義される化合物、またはその薬学的に許容される塩、アミド、もしくはエステルに関する。

【0029】

「ペプチド」または「ポリペプチド」という用語は、例えば、本発明の文脈で使用される場合、アミド（またはペプチド）結合によって相互接続された一連のアミノ酸を含む化合物を指す。特定の実施形態では、ペプチドは、ペプチド結合によって相互接続されたアミノ酸からなる。

【0030】

「類似体」という用語は一般に、配列が参照アミノ酸配列と比較したときに１つ以上のアミノ酸変化を有するペプチドを指す。ある特定の変化を「含む」類似体は、それらの参照配列と比較したときにさらなる変化を含み得る。特定の実施形態では、類似体は、特定の変化を「有する」または「含む」。他の特定の実施形態では、類似体は、変化「からなる」。「なる」または「なっている」という用語が類似体との関連で使用される場合、例えば、類似体が、特定のアミノ酸突然変異の群からなるか、またはなっている場合、特定のアミノ酸突然変異が、類似体における唯一のアミノ酸突然変異であることが理解されるべきである。対照的に、特定のアミノ酸突然変異の群を「含む」類似体は、さらなる突然変異を有し得る。

【0031】

「誘導体」という用語は一般に、化学修飾によって、特に１つ以上の置換基の共有結合によって、天然ペプチドまたはその類似体から調製され得る化合物を指す。

【0032】

本発明の文脈では、修飾基Ｍは、共有結合した置換基である。

【0033】

「アミノ酸」という用語は、タンパク質原性（または天然）アミノ酸（その中でも、２０個の標準アミノ酸）、並びに非タンパク質原性（または非天然）アミノ酸を含む。タンパク質原性アミノ酸は、タンパク質に天然に組み込まれるものである。標準アミノ酸は、遺伝子コードによってコードされるアミノ酸である。非タンパク質原性アミノ酸は、タンパク質中に見出されないか、または標準細胞機構によって産生されないかのいずれかである（例えば、それらは、翻訳後修飾に供されなかった可能性がある）。

【0034】

一般に、アミノ酸残基（ペプチド／タンパク質配列）は、それらの正式名称、それらの１文字コード、および／またはそれらの３文字コードによって同定され得る。これら３つの方法は、完全に同等である。下文において、光学異性体が記載されていない本発明のペプチドの各アミノ酸は、（別段の指定がない限り）Ｌ異性体を意味すると理解されるべきである。アミノ酸は、アミノ基およびカルボン酸基、ならびに任意選択で、側鎖と呼ばれる場合が多い１つ以上の追加の基を含有する分子である。

【0035】

本明細書では、「アミノ酸残基」という用語は、形式上、ヒドロキシ基がカルボキシ基から除去されており、かつ／または形式上、水素原子がアミノ基から除去されている、アミノ酸である。

【0036】

以下の例から明らかなように、アミノ酸残基は、それらの正式名称、それらの１文字コード、および／またはそれらの３文字コードによって同定され得る。これら３つの方法は、完全に同等であり、互換性がある。

【0037】

「アリール」という用語は、５〜１２個の炭素原子を有する環状または多環式芳香環を意味する。アリールという用語は、一価種および二価種の両方を含む。アリール基の例としては、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラセニルなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定の実施形態では、アリールは、フェニルである。本明細書では、「アリール」という用語はまた、「ヘテロアリール」を含む。「ヘテロアリール」という用語は、窒素、酸素または硫黄から選択される１個以上の（例えば、１〜４個、特に１、２、または３個）のヘテロ原子を組み込む芳香族単環、二環、または多環を意味する。

【0038】

インスリン
本明細書で使用される場合、「ヒトインスリン」という用語は、その構造および特性が周知のヒトインスリンホルモンを意味する。ヒトインスリンは、Ａ鎖およびＢ鎖と称される２つのポリペプチド鎖を有する。Ａ鎖は、２１個のアミノ酸のペプチドであり、Ｂ鎖は、３０個のアミノ酸のペプチドであり、２つの鎖は、ジスルフィド架橋によって接続され、第１の架橋は、Ａ鎖の７位のシステインとＢ鎖の７位のシステインとの間であり、第２の架橋は、Ａ鎖の２０位のシステインとＢ鎖の１９位のシステインとの間である。第３の架橋は、Ａ鎖の６位のシステインとＡ鎖の１１位のシステインとの間に存在する。

【0039】

ヒトインスリンＡ鎖は、以下の配列、ＧＩＶＥＱＣＣＴＳＩＣＳＬＹＱＬＥＮＹＣＮ（配列番号１）を有する一方、Ｂ鎖は、以下の配列、ＦＶＮＱＨＬＣＧＳＨＬＶＥＡＬＹＬＶＣＧＥＲＧＦＦＹＴＰＫＴ（配列番号２）を有する。

【0040】

「インスリンペプチド」、「インスリン化合物」、または「インスリン」という用語は、本明細書で使用される場合、インスリン活性を有する、すなわち、インスリン受容体を活性化する、ヒトインスリンまたはその類似体もしくは誘導体のいずれかであるペプチドを意味する。

【0041】

インスリン類似体
本明細書で使用される場合、「インスリン類似体」という用語は、インスリンの１つ以上のアミノ酸残基が他のアミノ酸残基によって置換されており、かつ／または１つ以上のアミノ酸残基がインスリンから欠失しており、かつ／または１つ以上のアミノ酸残基がインスリンに付加および／もしくは挿入されている、修飾ヒトインスリンを意味する。

【0042】

本明細書で使用される場合、「インスリン類似体」という用語は、インスリン活性を示す、すなわち、インスリン受容体を活性化する、インスリン類似体を意味する。

【0043】

インスリン類似体は、ヒトインスリンと比較して、１０個未満のアミノ酸修飾（置換、欠失、付加（すなわち、伸長）、挿入、およびこれらの任意の組み合わせ）、あるいはヒトインスリンと比較して、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個未満の修飾を含む。一態様では、インスリン類似体は、ヒトインスリンと比較して、１０個未満のアミノ酸修飾（置換、欠失、付加（すなわち、伸長）、挿入、およびこれらの任意の組み合わせ）、あるいはヒトインスリンと比較して、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個未満の修飾を有する。

【0044】

インスリン分子内の修飾は、鎖（ＡまたはＢ）、位置、および天然アミノ酸残基を置換するアミノ酸残基の１文字または３文字のコードを述べることで表わされる。

【0045】

本明細書では、Ａ１、Ａ２、およびＡ３などの用語は、（Ｎ末端から数えて）インスリンのＡ鎖のそれぞれ１位、２位、および３位などのアミノ酸を示す。同様に、Ｂ１、Ｂ２、およびＢ３などの用語は、（Ｎ末端から数えて）インスリンのＢ鎖のそれぞれ１位、２位、および３位などのアミノ酸を示す。アミノ酸について一文字コードを使用して、Ａ２１Ａ、Ａ２１Ｇ、およびＡ２１Ｑなどの用語は、Ａ２１位におけるアミノ酸がそれぞれＡ、Ｇ、およびＱであることを示す。アミノ酸について三文字コードを使用して、対応する表現は、それぞれＡ２１Ａｌａ、Ａ２１Ｇｌｙ、およびＡ２１Ｇｌｎである。

【0046】

「ｄｅｓＢ３０」とは、Ｂ３０アミノ酸を欠く天然インスリンＢ鎖またはその類似体を意味する。

【0047】

本明細書では、「Ａ−１」または「Ｂ−１」という用語は、それぞれＡ１またはＢ１よりＮ末端にあるアミノ酸の位置を示す。Ａ−２およびＢ−２という用語は、それぞれＡ−１またはＢ−１よりＮ末端にある第１のアミノ酸の位置を示す。

【0048】

「Ａ２２」および「Ｂ３１」という用語は、それぞれＡ２１またはＢ３０よりＣ末端にあるアミノ酸の位置を示す。

【0049】

したがって、例えば、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンは、ヒトインスリンの類似体であり、ここでＡ鎖の１４位のアミノ酸は、グルタミン酸で置換され、Ｂ鎖の１位のアミノ酸は、リジンで置換され、Ｂ鎖の２位のアミノ酸は、プロリンで置換され、Ｂ鎖の２５位のアミノ酸は、ヒスチジンで置換され、Ｂ鎖の２７位および３０位のアミノ酸は、欠失している。

【0050】

置換を有するインスリン類似体の例は、Ａ１４位におけるＴｙｒがＧｌｕで置換されているようなものである。さらに、Ｂ１位またはＢ４位のアミノ酸は、Ｌｙｓで置換されてもよい。Ｂ２位のアミノ酸は、Ｐｒｏで置換されてもよい。Ｂ２５位のアミノ酸は、Ｈｉｓで置換されてもよい。

【0051】

欠失を伴うインスリン類似体の例は、ヒトインスリンのＢ３０アミノ酸が欠失している類似体（ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン）、ヒトインスリンのＢ１アミノ酸が欠失しているインスリン類似体（ｄｅｓＢ１ヒトインスリン）、ヒトインスリンのＢ１およびＢ２アミノ酸が欠失しているインスリン類似体（ｄｅｓＢ１ ｄｅｓＢ２ヒトインスリン）、ならびにｄｅｓＢ２７ヒトインスリンである。

【0052】

Ａ鎖および／またはＢ鎖がＮ末端伸長を有する（すなわち、１つ以上のアミノ酸残基がＮ末端に付加されている）インスリン類似体の例は、Ａ−２ＫおよびＡ−１Ｐを含むヒトインスリン類似体、すなわち、Ａ鎖がＫＰでＮ末端において伸長されているヒトインスリンの類似体である。別の例は、１つのグリシン残基がＢ鎖のＮ末端に付加されるヒトインスリン類似体であり、すなわち、ヒトインスリン類似体は、Ｂ−１Ｇを含む。

【0053】

Ａ鎖および／またはＢ鎖がＣ末端伸長を有する（すなわち、１つ以上のアミノ酸残基がＣ末端に付加されている）インスリン類似体の例は、Ａ２２Ｋを含むヒトインスリン類似体である。

【0054】

さらなる例は、上述の突然変異の組み合わせを含むインスリン類似体である。

【0055】

インスリン類似体の例には、
ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号３および配列番号１１）、
Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１２）、
Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１３）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１４）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１５）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１６）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１７）、
Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１８）、
Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１１）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１９）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号２０）、ならびに
Ａ−２Ｋ Ａ−１Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号７および配列番号１１）が含まれる。

【0056】

スペーサー
上述のように、本発明のインスリン類似体は、ヒトインスリンと比較して、１０個未満のアミノ酸修飾（置換、欠失、伸長、およびこれらの任意の組み合わせ）、あるいはヒトインスリンと比較して、９、８、７、６、５、４、３、２、または１個未満の修飾を含む。最大９個の修飾に加えて、本発明のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体は、ヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端に、またはヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端に、スペーサーを含んでもよい。

【0057】

一実施形態では、スペーサーは、ペプチドであり、これは本明細書において、スペーサーペプチドまたはペプチドスペーサーと称される。別の実施形態では、スペーサーは、非ペプチドリンカーＬである。

【0058】

ペプチドスペーサー
様々なスペーサーペプチドが当該技術分野において既知であり、本発明の化合物で使用され得る。一実施形態では、スペーサーは、ペプチド結合を介して接続された４〜４０個のアミノ酸からなるペプチドセグメントである。一実施形態では、スペーサーは、ペプチド結合を介して接続された４〜２４個のアミノ酸からなるペプチドセグメントである。

【0059】

一実施形態では、スペーサーは、以下のアミノ酸残基のうちの１つ以上を含む：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｇｌｕ（Ｅ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｐ（Ｄ）、およびＬｙｓ（Ｋ）。一実施形態では、スペーサーは、以下のアミノ酸残基のうちの１つ以上を含む：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｇｌｕ（Ｅ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、およびＬｙｓ（Ｋ）。一実施形態では、スペーサーは、以下のアミノ酸残基のうちの１つ以上を含む：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、Ａｒｇ（Ｒ）、Ｐｈｅ（Ｆ）、Ｔｙｒ（Ｙ）、Ａｓｐ（Ｄ）、およびＬｙｓ（Ｋ）。一実施形態では、スペーサーは、以下のアミノ酸残基のうちの１つ以上を含む：Ｇｌｙ（Ｇ）、Ｓｅｒ（Ｓ）、Ｐｒｏ（Ｐ）、およびＬｙｓ（Ｋ）。一実施形態では、スペーサーは、少なくとも１つのＬｙｓ（Ｋ）残基を含む。

【0060】

一実施形態では、本発明のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体は、前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端において、ペプチドスペーサーを含む。一実施形態では、前述のペプチドスペーサーは、（ＧＥＳ）_ｐＫを含み、式中、ｐは、３〜１２の整数である。

【0061】

前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端におけるペプチドスペーサーの例には、（ＧＥＳ）_３Ｋ（配列番号２９）、（ＧＥＳ）_６Ｋ（配列番号３０）、および（ＧＥＳ）_１２Ｋ（配列番号３１）が含まれる。

【0062】

一実施形態では、本発明のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体は、前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端において、ペプチドスペーサーを含む。一実施形態では、前述のペプチドスペーサーは、ＧＫＰＧ、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒ、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｓ、もしくはＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ_４Ｓ）_ｔを含み、式中、ｑ、ｒ、ｓ、およびｔの各々は独立して、１〜５の整数から選択される。別の実施形態では、ペプチドスペーサーは、ＧＫＰＧ、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_３、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_２、またはＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ_４Ｓ）_３を含み、式中、ｑは、１〜３の整数である。

【0063】

前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるペプチドスペーサーの例には、
ＧＫＰＧ（配列番号３２）、
ＧＫＰＧＧＧＧＳ（ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ））（配列番号３３）、
ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_２）（配列番号３４）、
ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_３）（配列番号３５）、
ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_３）（配列番号３６）、
ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_２）（配列番号３７）、および
ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ）_４Ｓ）_３）（配列番号３８）が含まれる。

【0064】

前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端においてペプチドスペーサーを含むインスリン類似体の例には、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）_３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号８および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）_６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号９および配列番号１１）、ならびに
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）_１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１０および配列番号１１）が含まれる。

【0065】

前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーを含むインスリン類似体の例には、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２１）、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号２２）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２３）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２４）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２５）、
Ｂ１−ＧＫＰＧ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２６）、
Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２７）、ならびに
Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２８）が含まれる。

【0066】

リンカーＬ
一態様では、スペーサーは、非ペプチドリンカーＬである。様々な非ペプチドリンカーが当該技術分野において既知であり、本発明の化合物で使用され得る。

【0067】

一実施形態では、本発明のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体は、前述のヒトインスリンまたは前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端において、リンカーＬを含む。

【0068】

一実施形態では、リンカーは、式Ｌ１であり、

【化1】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊１は、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示す。

【0069】

一実施形態では、リンカーは、式Ｌ２であり、

【化2】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊１は、修飾基Ａに対する付着点を示し、＊２は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示し、ｕは、１、２、または３である。一実施形態では、ｕは、２または３である。

【0070】

一実施形態では、リンカーは、式Ｌ３であり、

【化3】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊１は、修飾基Ａに対する付着点を示し、＊２は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示し、ｖは、２または３である。

【0071】

インスリン誘導体
本明細書で使用される場合、「インスリン誘導体」という用語は、化学修飾インスリンまたはその類似体を意味し、修飾（複数可）は、１つ以上の修飾基Ｍの付着の形態である。

【0072】

一実施形態では、１つ以上の修飾基Ｍの各々は、任意選択でスペーサーを介して、ヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖もしくはＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、またはヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体中のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0073】

一実施形態では、各修飾基Ｍは、以下の群のうちの１つから選択される付着点に付着している。
ａ）前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
ｂ）前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、
ｃ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のイプシロンアミノ基、
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のリンカーＬの＊１で印が付けられた末端アミノ基、および
ｄ）前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基。

【0074】

一実施形態では、１つ以下の修飾基Ｍが、群ａ）、ｂ）、ｃ）およびｄ）の各々の中の付着点に付着している。

【0075】

一実施形態では、本発明の化合物は、２つの修飾基Ｍを含み、一方の修飾基Ｍは、ヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のアミノ基、またはヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における任意選択のペプチド伸長のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、もう一方の修飾基Ｍは、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0076】

一実施形態では、本発明の化合物は、正確に２つの修飾基Ｍを有し、一方の修飾基Ｍは、ヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のアミノ基、またはヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における任意選択のペプチド伸長のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、もう一方の修飾基Ｍは、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0077】

一実施形態では、本発明の化合物は、２つの修飾基Ｍを含み、一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基に付着しており、もう一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0078】

一実施形態では、本発明の化合物は、正確に２つの修飾基Ｍを有し、一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基に付着しており、もう一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0079】

一実施形態では、本発明の化合物は、２つの修飾基Ｍを含み、一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、前述のまたはヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、もう一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0080】

一実施形態では、本発明の化合物は、正確に２つの修飾基Ｍを有し、一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、前述のまたはヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、もう一方の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0081】

一実施形態では、本発明の化合物は、１つの修飾基Ｍを含み、修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似類のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0082】

一実施形態では、本発明の化合物は、正確に１つの修飾基Ｍを有し、修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似類のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0083】

一実施形態では、本発明の化合物は、３つまたは４つの修飾基Ｍを含み、第１の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、第２の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、残りの修飾基Ｍは各々、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ酸、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位もしくは２９位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のリンカーＬの＊１で印が付けられた末端アミノ基に付着している。

【0084】

一実施形態では、本発明の化合物は、正確に３つまたは４つの修飾基Ｍを有し、第１の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、第２の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、残りの修飾基Ｍは各々、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ酸、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位もしくは２９位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のリンカーＬの＊１で印が付けられた末端アミノ基に付着している。

【0085】

修飾基Ｍ
本発明の化合物は、１つ以上の修飾基Ｍを含む。一実施形態では、本発明の化合物は、１つ、２つ、３つ、または４つの修飾基Ｍを含む。一実施形態では、本発明の化合物は、２つ以上の修飾基Ｍを含む。一実施形態では、本発明の化合物は、２つ、３つ、または４つの修飾基Ｍを含む。一実施形態では、本発明の化合物は、２つの修飾基Ｍを含む。一実施形態では、本発明の化合物は、正確に２つの修飾基Ｍを有する。１つ以上の修飾基は、同一であっても異なっていてもよい。２つ以上の修飾基は、同一であっても異なっていてもよい。一実施形態では、修飾基は、同一である。

【0086】

修飾基のうちのいくつかは、１つ以上のアミノ酸残基を含む。これらのアミノ酸残基の各々は独立してそれぞれのアミノ酸残基のＤまたはＬ形態であり得、すなわち、修飾基内のキラル原子の各々は独立して、（Ｒ）または（Ｓ）形態であり得る。一実施形態では、修飾基のアミノ酸残基は、Ｌ−アミノ酸残基である。

【0087】

各修飾基Ｍは、ジボロン部分を含み、ジボロン部分（すなわち、修飾基Ｍ）は、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分の各々に付着している。ホウ素原子は、ボロン酸（もしくはｐｋａ／ｐＨに応じてボロネート）の一部であってもよく、またはボロキソール（もしくはｐｋａ／ｐＨに応じてボロキソレート（ｂｏｒｏｘｏｌａｔｅ））の一部であってもよい。

【0088】

ある特定の特徴を「含む」または「含むこと」という用語は、問題の主題がそれらのある特定の特徴を含むが、他の特徴の存在を除外しないことを意味すると解釈されるものである。したがって、修飾基Ｍは、２つ以上のアリール部分を有してもよく、ホウ素原子は、アリール部分の各々に付着している。一実施形態では、修飾基は、正確に２つのアリール部分を有し、ホウ素原子は、２つのアリール部分の各々に付着している。一実施形態では、修飾基は、正確に４つのアリール部分を有し、ホウ素原子は、４つのアリール部分の各々に付着している。

【0089】

本発明のジボロネート／ジボロキソールは、実施例Ａに示されるように、モノボロネートよりも強いグルコースに結合する。さらに、驚くべきことに、本発明のジボロン化合物は、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）に結合することが可能であり、したがって二重作用を有し、これは、この結合もまたグルコース感受性であるためである（ジボロンペプチドのＨＳＡ結合分画は、ペプチド上の受容体結合部位の遮断により不活性である）（実施例Ｂに示されるデータは）。

【0090】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ１であり、

【化4】

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Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、または
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−＊、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化5】

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から選択され、式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される。

【0091】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ１であり、式中、Ｙ１およびＹ２は、Ｈであり、Ｙ３は、ＦまたはＣＦ_３であり、Ｙ４は、ＨまたはＦであり、Ｙ５は、Ｈであり、Ｙ６は、Ｆである。

【0092】

さらに別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ１であり、式中、ｎは、１であり、
Ｗ１は、ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＬ形態を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｒ１は、

【化6】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ１およびＹ２は、Ｈであり、Ｙ３は、ＦまたはＣＦ_３である。

【0093】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ２であり、

【化7】

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式中、Ｗ２は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ２は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、またはＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ２は、

【化8】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、Ｙ１１、およびＹ１２は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される。

【0094】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ２であり、式中、Ｙ７は、Ｈであり、Ｙ８は、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３であり、Ｙ９は、Ｈ、Ｆ、またはＣＦ３であり、Ｙ１０は、Ｆであり、Ｙ１１は、Ｈであり、Ｙ１２は、Ｆであり、ただし、Ｙ８およびＹ９のうちの１つのみがＨであることを前提としている。

【0095】

さらに別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ２であり、式中、Ｗ２は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ２は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＬ形態を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｒ２は、

【化9】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ７およびＹ８は、Ｈであり、Ｙ９は、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３である。

【0096】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ３であり、

【化10】

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３，４−ジアミノ−ピロリジンのＲ，Ｒ、またはＳ，Ｓ、またはＲ，Ｓ立体異性体を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、式中、Ｙ１３およびＹ１４は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される。

【0097】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ３であり、式中、Ｙ１３は、ＨまたはＦであり、Ｙ１４は、ＨまたはＣＦ３であり、ただし、Ｙ１３およびＹ１４のうちの１つのみがＨであることを前提としている。

【0098】

一実施形態では、修飾基は式、Ｍ４であり、

【化11】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１５およびＹ１６は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される。

【0099】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ４であり、式中、Ｙ１５およびＹ１６は独立して、ＨおよびＦから選択される。

【0100】

さらに別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ４であり、式中、Ｙ１５は、Ｈであり、Ｙ１６は、Ｆである。

【0101】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ５であり、

【化12】

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式中、アミノ酸残基の各々は独立して、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す。

【0102】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ６であり、

【化13】

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式中、α−アミノ酸残基は、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１７およびＹ１８は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される。

【0103】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ６であり、式中、Ｙ１７は、ＨまたはＦであり、Ｙ１８は、ＨまたはＦである。

【0104】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ７であり、

【化14】

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式中、Ｗ３は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す。一実施形態では、Ｗ３は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＬ形態を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す。

【0105】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ８であり、

【化15】

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式中、Ｗ４は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４は、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_５、またはＳＦ_５から選択される。

【0106】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ８であり、式中、Ｙ１９は、ＣＦ_３またはＳＦ_５である。

【0107】

さらに別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ８であり、式中、Ｙ１９は、ＣＦ３である。

【0108】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ９であり、

【化16】

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式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２は独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される。

【0109】

別の実施形態では、修飾基は、式Ｍ９であり、式中、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々は独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提としている。

【0110】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ１０であり、

【化17】

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式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す。

【0111】

一実施形態では、修飾基は、式Ｍ１１であり、

【化18】

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式中、アミノ酸残基の各々が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す。

【0112】

本発明の化合物
一実施形態では、本発明の化合物は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、および１つ以上の修飾基Ｍを含み、修飾基Ｍの各々は、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分の各々に付着しており、１つ以上の修飾基Ｍの各々は、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖もしくはＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0113】

別の実施形態では、本発明の化合物は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、および２つの修飾基Ｍを含み、修飾基Ｍの各々は、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分に付着しており、第１の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、第２の修飾基は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0114】

別の実施形態では、本発明の化合物は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、および２つの修飾基Ｍを含み、修飾基Ｍの各々は、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分の各々に付着しており、第１の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基に付着しており、第２の修飾基は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0115】

別の実施形態では、本発明の化合物は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、および２つの修飾基Ｍを含み、修飾基Ｍの各々は、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分に付着しており、第１の修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、第２の修飾基は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。

【0116】

別の実施形態では、本発明の化合物は、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、および１つの修飾基Ｍを含み、修飾基Ｍは、２つのアリール部分を含み、ホウ素原子は、２つのアリール部分に付着しており、修飾基Ｍは、前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位もしくは２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している。
一実施形態では、本発明は、実施例１８１、２０５、２１０、２１１、２２７、２３３、２３４、２３９、２４０、２４１、２７２、２７３、２８０、２８５、２８８、２９１、３００、３０１、３２７、３３１、３３３、および３３５の化合物の群から独立して選択される化合物に関する。

【0117】

一実施形態では、本発明の化合物は、実施例１８１の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２０５の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２１０の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２１１の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２２７の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２３３の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２３４の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２３９の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２４０の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２４１の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２７２の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２７３の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２８０の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２８５の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２８８の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、２９１の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、３００の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、３０１の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、３２７の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、３３１の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、３３３の化合物である。一実施形態では、本発明の化合物は、３３５の化合物である。

【0118】

中間生成物
本発明はさらに、新規のインスリン類似体またはペプチドスペーサーを含むインスリン類似体の形態の中間生成物を提供する。

【0119】

したがって、本発明はまた、以下からなる群から独立して選択される中間生成物に関する。
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１６）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１７）、
Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１８）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号２０）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号８および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号９および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１０および配列番号１１）、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２１）、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号２２）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２３）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２４）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２５）、
Ｂ１−ＧＫＰＧ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２６）、
Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２７）、ならびに
Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２８）が含まれる。

【0120】

インスリン機能
ヒトインスリン受容体（ＩＲ）に対するインスリン類似体の相対結合親和性は、実施例Ｂに記載されるように、シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）での競合結合によって決定され得る。

【0121】

一実施形態では、本発明の化合物は、インスリン受容体に結合する能力を有する。一実施形態では、本発明の化合物は、グルコースが存在しない場合よりも２０ｍＭのグルコースの存在下でより高いインスリン受容体親和性を有する。

【0122】

実施例Ｃに記載されるＡＫＴリン酸化アッセイおよび実施例Ｄに記載される脂質生成アッセイは、インスリン類似体の機能的（アゴニスト）活性の尺度として使用され得る。

【0123】

医薬組成物
本発明はまた、例えば、本発明の類似体、またはその薬学的に許容される塩、アミド、もしくはエステルを含む本発明の化合物、および１つ以上の薬学的に許容される賦形剤（複数可）を含む医薬組成物に関する。かかる組成物は、当該技術分野において既知のとおりに調製され得る。

【0124】

「賦形剤」という用語は、く、活性治療成分（複数可）以外の任意の成分を指す。賦形剤は、非活性物質、不活性物質、および／または医薬的に活性でない物質であり得る。賦形剤は、例えば、担体、ビヒクル、希釈剤として様々な目的を果たし、あつ／または活性物質の投与および／もしくは吸収を改善するように機能し得る。賦形剤の非限定的な例は、溶媒、希釈剤、緩衝液、防腐剤、張性調節剤、キレート剤、および安定剤である。様々な賦形剤を伴った薬学的活性成分の製剤化は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（例えば、第２１版（２００５）および任意のその後の版）を参照されたい。

【0125】

本発明の組成物は、液体製剤、すなわち、水を含む水性製剤の形態であってもよい。液体製剤は、溶液または懸濁液であってもよい。本発明の組成物は、例えば、皮下、筋肉内、腹腔内、または静脈内注射によって実施される非経口投与用であってもよい。

【0126】

アリールホウ素化合物は一般に、中性値付近のｐＨにおいて水溶液中で低い安定性を有する。Ｃ−Ｂ結合は、加水分解してフェニル残基および遊離ホウ酸塩、Ｐｈ−Ｈ＋Ｂ（ＯＨ）_３を得ることができるか、または化合物は、酸化されて、フェノール残基＋遊離ホウ酸塩、Ｐｈ−ＯＨ＋Ｂ（ＯＨ）_３を得ることができる。本発明のある特定の好ましいジボロン化合物およびジボロンインスリン共役体は、本発明の他のアリール−ホウ素および一般のアリール−ホウ素よりも安定であることが見い出されている。安定性は、例えば、長期間、例えば１週間にわたって、２５℃または３７℃で中性ｐＨにおいて水溶液中にあった後のインスリン誘導体の純度を測定することによって評価され得る。

【0127】

薬学的適応
糖尿病
「糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓ）」または「糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓ ｍｅｌｌｉｔｕｓ）」という用語には、１型糖尿病、２型糖尿病、妊娠性糖尿病（妊娠中）、および高血糖症を引き起こす他の状態が含まれる。この用語は、膵臓が不十分な量のインスリンを産生するか、または身体の細胞がインスリンに適切に応答できず、したがって細胞がグルコースを吸収するのを妨げる、代謝障害に使用される。結果として、グルコースは、血液中に蓄積する。

【0128】

インスリン依存性糖尿病（ＩＤＤＭ）および若年発症糖尿病とも呼ばれる１型糖尿病は、通常は絶対的インスリン欠乏をもたらすＢ細胞破壊によって引き起こされる。

【0129】

非インスリン依存性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）および成人発症糖尿病としても既知の、２型糖尿病は、主なインスリン抵抗性、したがって相対的なインスリン欠乏および／またはインスリン抵抗性を伴う主なインスリン分泌不全に関連している。

【0130】

他の適応
一実施形態では、本発明による化合物は、ストレス誘発性高血糖症を含む高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、または１型糖尿病の治療または予防のための薬剤の調製に使用される。

【0131】

別の実施形態では、本発明による化合物は、２型糖尿病の疾患進行を遅延または予防するための薬剤として使用される。

【0132】

本発明の一実施形態では、化合物は、ストレス誘発性高血糖症を含む高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、または１型糖尿病の治療または予防のための薬剤として使用するためのものである。
さらなる実施形態では、本発明は、ストレス誘発性高血糖症を含む高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、または１型糖尿病の治療または予防のための方法に関し、方法は、かかる治療を必要としている患者に、かかる治療のための有効量の本発明による化合物を投与することを含む。

【0133】

投与方法
「治療」という用語は、参照される疾患、障害、または状態の予防および最小化の両方を含むことを意味する（すなわち、「治療」は、文脈によって別段の指示がないか、または明確に矛盾しない限り、本発明の化合物または本発明の化合物を含む組成物の予防的および治療的投与の両方を指す。

【0134】

投与経路は、本発明の化合物を、非経口的に、例えば、皮下、筋肉内、または静脈内などで体内の望ましい場所または適切な場所に効果的に輸送する任意の経路であり得る。

【0135】

非経口投与に関しては、本発明の化合物は、既知のインスタンの製剤と類似的に製剤化される。さらに、非経口投与については、本発明の化合物は、既知のインスタント投与と類似的に投与され、医師は、この手順に精通している。

【0136】

投与される本発明の化合物の量、本発明の化合物を投与する頻度の決定、および任意選択で別の抗糖尿病化合物と一緒に、どの本発明の化合物（複数可）を投与するかの選択は、糖尿病の治療に精通している医師と相談して決定される。

【0137】

本発明のある特定の特徴が本明細書に例示および記載されているが、ここで、多くの修正、置換、変更、および同等物が当業者に想到されるであろう。したがって、添付の実施形態が、本発明の真の趣旨の範囲内にあるようなかかる全ての修正および変更を網羅することを意図していることが理解されるべきである。

【0138】

実施形態
本発明は、本発明の以下の非限定的な実施形態によってさらに説明される。

【0139】

１．化合物であって、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体と、
ｉｉ）１つ以上の修飾基Ｍであって、修飾基Ｍの各々が２つのアリール部分を含み、ホウ素原子が２つのアリール部分の各々に付着しており、
１つ以上の修飾基Ｍの各々が、任意選択でスペーサーを介して、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖もしくはＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体中のリジンのイプシロンアミノ基に付着している、１つ以上の修飾基Ｍと、を含む、化合物。

【0140】

２．修飾基Ｍの各々が独立して、

【化19】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、または
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−＊、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化20】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ１、Ｙ２、Ｙ３、Ｙ４、Ｙ５、およびＹ６が独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される、式Ｍ１、

【化21】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ２は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、またはＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ２が、

【化22】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ７、Ｙ８、Ｙ９、Ｙ１０、Ｙ１１、およびＹ１２が独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される、式Ｍ２、

【化23】

[この文献は図面を表示できません]

３，４−ジアミノ−ピロリジンのＲ，Ｒ、またはＳ，Ｓ、またはＲ，Ｓ、または立体異性体を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、式中、Ｙ１３およびＹ１４が独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される、式Ｍ３、

【化24】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１５およびＹ１６が独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される、式Ｍ４、

【化25】

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式中、アミノ酸残基の各々が独立して、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ５、

【化26】

[この文献は図面を表示できません]

式中、α−アミノ酸残基が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１７およびＹ１８が独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される、式Ｍ６、

【化27】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化28】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９が、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３またはＳＦ_５である、式Ｍ８、

【化29】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、およびＣＦ_３から選択される、式Ｍ９、

【化30】

[この文献は図面を表示できません]

を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、

【化31】

[この文献は図面を表示できません]

式中、アミノ酸残基の各々は独立して、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す。

【0141】

３．修飾基Ｍの各々が独立して、

【化32】

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Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、または
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−＊、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化33】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＦまたはＣＦ_３であり、Ｙ４がＨまたはＦであり、Ｙ５がＨであり、Ｙ６がＦである、式Ｍ１、

【化34】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ２は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、またはＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ２が、

【化35】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ７が、Ｈであり、Ｙ８が、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３であり、Ｙ９が、Ｈ、Ｆ、またはＣＦ３であり、Ｙ１０が、Ｆであり、Ｙ１１が、Ｈであり、Ｙ１２が、Ｆであり、ただし、Ｙ８およびＹ９のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ２、

【化36】

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３，４−ジアミノ−ピロリジンのＲ，Ｒ、またはＳ，Ｓ、またはＲ，Ｓ立体異性体を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、式中、Ｙ１３が、ＨまたはＦであり、Ｙ１４が、ＨまたはＣＦ３であり、ただし、Ｙ１３およびＹ１４のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ３、

【化37】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１５およびＹ１６が独立して、ＨおよびＦから選択される、式Ｍ４、

【化38】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ５、

【化39】

[この文献は図面を表示できません]

式中、アミノ酸残基が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１７が、ＨまたはＦであり、Ｙ１８が、ＨまたはＦである、式Ｍ６、

【化40】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化41】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ_３またはＳＦ_５である、式Ｍ８、

【化42】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、

【化43】

[この文献は図面を表示できません]

を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、

【化44】

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式中、α−アミノ酸残基の各々が独立して、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ１１、からなる群から選択される、実施形態１または２に記載の化合物。

【0142】

４．修飾基Ｍの各々が独立して、

【化45】

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Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、式中、ｎが１であり、
Ｗ１が、ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１が、

【化46】

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であり、
式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＦまたはＣＦ_３である、式Ｍ１、

【化47】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ２が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
式中、Ｒ２が、

【化48】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ７およびＹ８が、Ｈであり、Ｙ９が、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３である、式Ｍ２、

【化49】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１５が、Ｈであり、Ｙ１６が、Ｆである、式Ｍ４、

【化50】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化51】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ３である、式Ｍ８、ならびに

【化52】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提としている、式Ｍ９、からなる群から選択される、実施形態１〜３のいずれか１つに記載の化合物。

【0143】

５．修飾基Ｍが、同一である、実施形態１〜４のいずれか１つに記載の化合物。

【0144】

６．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が任意選択で、
ａ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端におけるペプチドスペーサーであって、前述のペプチドスペーサーが、（ＧＥＳ）_ｐＫを含み、式中、ｐが、３〜１２の整数である、ペプチドスペーサー、または
ｂ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるペプチドスペーサーもしくはリンカーＬであって、
前述のペプチドスペーサーが、ＧＫＰＧ、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒ、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｓ、もしくはＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ_４Ｓ）_ｔを含み、式中、ｑ、ｒ、ｓ、およびｔの各々が独立して、１〜５の整数から選択される、ペプチドスペーサーもしくはリンカーＬ、
からなる群から選択されるスペーサーを含み、前述のリンカーＬが、

【化53】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊１が、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示す、式Ｌ１、

【化54】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊１が、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示し、ｕが、１、２、または３である、式Ｌ２、

【化55】

[この文献は図面を表示できません]

式Ｌ３であって、
式中、＊１が、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示し、ｖが、２または３である、式Ｌ３、から選択される、実施形態１〜５のいずれか１つに記載の化合物。

【0145】

７．ｑが、１〜３から選択される整数であり、ｒが、３であり、ｓが、２であり、ｔが、３である、実施形態６に記載の化合物。

【0146】

８．キラルアミノ酸が、Ｌ形態である、実施形態１〜７のいずれか１つに記載の化合物。

【0147】

９．各修飾基Ｍが、以下の群、
ａ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
ｂ）前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、
ｃ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のイプシロンアミノ基、
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のリンカーＬの＊１で印が付けられた末端アミノ基、および
ｄ）前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基、のうちの１つから選択される付着点に付着している、実施形態１〜８のいずれか１つに記載の化合物。

【0148】

１０．１つ以下の修飾基Ｍが、群ａ）、ｂ）、ｃ）およびｄ）の各々の中の付着点に付着している、実施形態９に記載の化合物。

【0149】

１１．正確に１つ、２つ、３つ、または４つの修飾基Ｍを有する、実施形態１〜１０のいずれか１つに記載の化合物。

【0150】

１２．少なくとも２つの修飾基Ｍを含む、実施形態１〜１０のいずれか１つに記載の化合物。

【0151】

１３．正確に２つ、３つ、または４つの修飾基Ｍを有する、実施形態１〜１０のいずれか１つに記載の化合物。

【0152】

１４．正確に２つの修飾基Ｍを有する、実施形態１〜１０のいずれか１つに記載の化合物。

【0153】

１５．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、ｄｅｓＢ３０を含むヒトインスリン類似体である、実施形態１〜１４のいずれか１つに記載の化合物。

【0154】

１６．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、
ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号３および配列番号１１）、
Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１２）、
Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１３）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１４）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１５）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１６）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１７）、
Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１８）、
Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１１）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１９）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号２０）、ならびに
Ａ−２Ｋ Ａ−１Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号７および配列番号１１）が含まれる。

【0155】

１７．実施形態１の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体であって、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が任意選択で、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーまたはリンカーＬから選択されるスペーサーを含み、
前述のペプチドスペーサーが、ＧＫＰＧ、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒ、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｓ、もしくはＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ_４Ｓ）_ｔを含み、式中、ｑ、ｒ、ｓ、およびｔの各々が独立して、１〜５の整数から選択される、ペプチドスペーサーもしくはリンカーＬ、
からなる群から選択されるスペーサーを含み、前述のリンカーＬが、

【化56】

[この文献は図面を表示できません]

式Ｌ１であって、
式中、＊１が、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示す、式Ｌ１、

【化57】

[この文献は図面を表示できません]

式Ｌ２であって、
式中、＊１が、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示し、ｕが、１、２、または３である、式Ｌ２、

【化58】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊１が、修飾基Ｍに対する付着点を示し、＊２が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端におけるアミノ酸残基のアミノ基への付着点を示し、ｖが、２または３である、式Ｌ３、から選択される、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つ、３つ、または４つの修飾基Ｍであって、修飾基Ｍの各々が独立して、

【化59】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化60】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＦまたはＣＦ_３であり、Ｙ４がＦであり、Ｙ５がＨであり、Ｙ６がＦである、式Ｍ１、

【化61】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ２が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ２が、

【化62】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ７が、Ｈであり、Ｙ８が、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３であり、Ｙ９が、Ｈ、Ｆ、またはＣＦ３であり、Ｙ１０が、Ｆであり、Ｙ１１が、Ｈであり、Ｙ１２が、Ｆであり、ただし、Ｙ８およびＹ９のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ２、

【化63】

[この文献は図面を表示できません]

３，４−ジアミノ−ピロリジンのＲ，Ｒ、またはＳ，Ｓ、またはＲ，Ｓ、または立体異性体を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、式中、Ｙ１３が、ＨまたはＦであり、Ｙ１４が、ＨまたはＣＦ３であり、ただし、Ｙ１３およびＹ１４のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ３、

【化64】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１５が、Ｈであり、Ｙ１６が、Ｆである、式Ｍ４、

【化65】

[この文献は図面を表示できません]

式中、α−アミノ酸残基が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１７が、Ｆであり、Ｙ１８が、Ｈである、式Ｍ６、

【化66】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化67】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ_３またはＳＦ_５である、式Ｍ８、

【化68】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、ならびに

【化69】

[この文献は図面を表示できません]

を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
各修飾基Ｍが、以下の群、
ａ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
ｂ）前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、
ｃ）前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のイプシロンアミノ基、
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のリンカーＬの＊１で印が付けられた末端アミノ基、および
ｄ）前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基、のうちの１つから選択される付着点に付着しており、
１つの修飾基Ｍが、付着点ｃ）のうちの１つに付着しており、１つの修飾基Ｍが、付着点ｄ）に付着している、２つ、３つ、または４つの修飾基Ｍ、を含む、実施形態１に記載の化合物。

【0156】

１８．１つ以下の修飾基Ｍが、群ａ）、ｂ）、ｃ）およびｄ）の各々の中の付着点に付着している、実施形態１７に記載の化合物。

【0157】

１９．化合物が、正確に２つの修飾基Ｍを有し、１つの修飾群Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、１つの修飾基が、
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基、
前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のイプシロンアミノ基、
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端における前述の任意選択のリンカーＬの＊１で印が付けられた末端アミノ基、に付着している、実施形態１７または１８に記載の化合物。

【0158】

２０．実施形態１７〜１９のいずれか１つに記載の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体であって、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が任意選択で、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーを含み、
前述のペプチドスペーサーが、ＧＫＰＧ、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒ、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｓ、またはＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ_４Ｓ）_ｔを含み、式中、ｑが、１〜３の整数であり、ｒが、３であり、ｓが、２であり、ｔが、３である、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つの修飾基Ｍであって、修飾基Ｍの各々が独立して、

【化70】

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Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、式中、ｎが１であり、Ｗ１が、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
式中、Ｒ１が、

【化71】

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であり、
式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＣＦ_３である、式Ｍ１、

【化72】

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式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化73】

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式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ_３である、式Ｍ８、

【化74】

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式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、ならびに
１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、１つの修飾基Ｍが、
前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のイプシロンアミノ基、または
前記ヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体の前記Ｂ鎖の前記Ｎ末端における前記任意選択のペプチドスペーサー中のリジンの前記イプシロンアミノ基、に付着している、２つの修飾基Ｍを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。

【0159】

２１．実施形態１７〜２０のいずれか１つに記載の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリン類似体であって、前述のヒトインスリン類似体が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーを含み、前述のペプチドスペーサーが、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、またはＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒを含み、式中、ｑが、１〜３の整数であり、ｒが、３である、ヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つの修飾基Ｍであって、独立して、

【化75】

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Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、式中、ｎが１であり、Ｗ１が、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
式中、Ｒ１が、

【化76】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＣＦ_３である、式Ｍ１、
１つの修飾基Ｍが、前述のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している、２つの修飾基Ｍ、を含む、実施形態１７〜２０のいずれか１つに記載の化合物。

【0160】

２２．実施形態１７〜２１のいずれか１つに記載の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリン類似体であって、前述のヒトインスリン類似体が任意選択で、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーを含み、
前述のペプチドスペーサーが、ＧＫＰＧ、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、ＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒ、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｓ、またはＴＹＦＦＧＲＫＰＤ（Ｇ_４Ｓ）_ｔを含み、式中、ｑが、１〜３の整数であり、ｒが、３であり、ｓが、２であり、ｔが、３である、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つの修飾基Ｍであって、修飾基Ｍの各々が独立して、

【化77】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、式中、ｎが１であり、Ｗ１が、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
式中、Ｒ１が、

【化78】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＣＦ_３である、式Ｍ１、

【化79】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化80】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ_３である、式Ｍ８、

【化81】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、ならびに
１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、
１つの修飾基Ｍが、
前述のヒトインスリン類似体のＢ鎖の１位もしくは４位のリジン残基のイプシロンアミノ基、または
前記ヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体の前記Ｂ鎖の前記Ｎ末端における前記任意選択のペプチドスペーサー中のリジンの前記イプシロンアミノ基、に付着している、２つの修飾基Ｍを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物。

【0161】

２３．実施形態１７〜２２のいずれか１つに記載の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリン類似体であって、前述のヒトインスリン類似体が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖のＮ末端においてペプチドスペーサーを有し、前述のペプチドスペーサーが、ＧＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｑ、またはＫＰ（Ｇ_４Ｓ）_ｒであり、式中、ｑが、１〜３の整数であり、ｒが、３である、ヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つの修飾基Ｍであって、独立して、

【化82】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、式中、ｎが１であり、Ｗ１が、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、またはＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
式中、Ｒ１が、

【化83】

[この文献は図面を表示できません]

であり、
式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＣＦ_３である、式Ｍ１、
１つの修飾基Ｍが、前述のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している、２つの修飾基Ｍ、を含む、実施形態１７〜２０のいずれか１つに記載の化合物。

【0162】

２４．キラルアミノ酸が、Ｌ形態である、実施形態１７〜２３のいずれか１つに記載の化合物。

【0163】

２５．化合物が、正確に２つの修飾基Ｍを有する、実施形態１７〜２４のいずれか１つに記載の化合物。

【0164】

２６．修飾基Ｍが、同一である、実施形態１７〜２５のいずれか１つに記載の化合物。

【0165】

２７．前述のヒトインスリン類似体が、ｄｅｓＢ３０である、実施形態１７〜２６のいずれか１つに記載の化合物。

【0166】

２８．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、
ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号１１）、
Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１２）、
Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１３）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１６）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１７）、
Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１８）、
Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１１）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１９）、ならびに
Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号２０）、からなる群から選択される、ヒトインスリン類似体である、実施形態１７〜２６のいずれか１つに記載の化合物。

【0167】

２９．前述のスペーサーを含む前述のヒトインスリン類似体が、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２１）、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号２２）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２３）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２４）、ならびに
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２５）、からなる群から選択される、実施形態１７〜２８のいずれか１つに記載の化合物。

【0168】

３０．化合物が、
実施例２８０の化合物、実施例２８４の化合物、実施例２８５の化合物、実施例２８８の化合物、実施例２９１の化合物、実施例３００の化合物、実施例３０１の化合物、実施例３２４の化合物、実施例３２７の化合物、実施例３３１の化合物、実施例３３３の化合物、および実施例３３５の化合物、からなる群から選択される、実施形態１７〜２９のいずれか１つに記載の化合物。

【0169】

３１．化合物が、
実施例２８０の化合物、実施例２８５の化合物、実施例２８８の化合物、実施例２９１の化合物、実施例３００の化合物、実施例３０１の化合物、実施例３２７の化合物、実施例３３１の化合物、実施例３３３の化合物、および実施例３３５の化合物、からなる群から選択される、実施形態１７〜３０のいずれか１つに記載の化合物。

【0170】

３２．化合物が、実施例２８０の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0171】

３３．化合物が、実施例２８４の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0172】

３４．化合物が、実施例２８５の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0173】

３５．化合物が、実施例２８８の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0174】

３６．化合物が、実施例２９１の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0175】

３７．化合物が、実施例３００の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0176】

３８．化合物が、実施例３０１の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0177】

３９．化合物が、実施例３２４の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0178】

４０．化合物が、実施例３２７の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0179】

４１．化合物が、実施例３３１の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0180】

４２．化合物が、実施例３３３の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0181】

４３．化合物が、実施例３３５の化合物である、実施形態３０に記載の化合物。

【0182】

４４．実施形態１の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つの修飾基Ｍであって、独立して、

【化84】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化85】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＦまたはＣＦ_３であり、Ｙ４がＨまたはＦであり、Ｙ５がＨであり、Ｙ６がＦである、式Ｍ１、

【化86】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２が存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表し、
Ｒ２が、

【化87】

[この文献は図面を表示できません]

【化88】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ７が、Ｈであり、Ｙ８が、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３であり、Ｙ９が、Ｈ、Ｆ、またはＣＦ３であり、Ｙ１０が、Ｆであり、Ｙ１１が、Ｈであり、Ｙ１２が、Ｆであり、ただし、Ｙ８およびＹ９のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ２、

【化89】

[この文献は図面を表示できません]

式中、α−アミノ酸残基が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１７が、ＨまたはＦであり、Ｙ１８が、ＨまたはＦである、式Ｍ６、ならびに

【化90】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、ならびに
１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＮ末端アミノ酸残基のアミノ基に付着しており、１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している、２つの修飾基Ｍを含む、実施形態１に記載の化合物。

【0183】

４５．修飾基Ｍが、同一である、実施形態４４に記載の化合物。

【0184】

４６．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、ｄｅｓＢ３０を含むヒトインスリン類似体である、実施形態４４〜４５のいずれか１つに記載の化合物。

【0185】

４７．前述のヒトインスリン類似体が、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンである、実施形態４６に記載の化合物。

【0186】

４８．実施形態１の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体であって、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が任意選択で、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端においてペプチドスペーサーを含み、前述のペプチドスペーサーが、（ＧＥＳ）_ｐＫを含み、式中、ｐが、３〜１２の整数である、ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、
ｉｉ）２つの修飾基Ｍであって、独立して、

【化91】

[この文献は図面を表示できません]

Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、または
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−＊、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化92】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＦまたはＣＦ_３であり、Ｙ４がＨまたはＦであり、Ｙ５がＨであり、Ｙ６がＦである、式Ｍ１、

【化93】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ２は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、またはＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ２が、

【化94】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ７が、Ｈであり、Ｙ８が、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３であり、Ｙ９が、Ｈ、Ｆ、またはＣＦ３であり、Ｙ１０が、Ｆであり、Ｙ１１が、Ｈであり、Ｙ１２が、Ｆであり、ただし、Ｙ８およびＹ９のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ２、

【化95】

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３，４−ジアミノ−ピロリジンのＲ，Ｒ、またはＳ，Ｓ、またはＲ，Ｓ立体異性体を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、式中、Ｙ１３が、ＨまたはＦであり、Ｙ１４が、ＨまたはＣＦ３であり、ただし、Ｙ１３およびＹ１４のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ３、

【化96】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１５およびＹ１６が独立して、ＨおよびＦから選択される、式Ｍ４、

【化97】

[この文献は図面を表示できません]

式中、前記アミノ酸残基の各々が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前記ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への前記付着点を表す、式Ｍ５、

【化98】

[この文献は図面を表示できません]

式中、アミノ酸残基が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１７が、ＨまたはＦであり、Ｙ１８が、ＨまたはＦである、式Ｍ６、

【化99】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化100】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ_３またはＳＦ_５である、式Ｍ８、

【化101】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、

【化102】

[この文献は図面を表示できません]

を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、

【化103】

[この文献は図面を表示できません]

式中、前記アミノ酸残基の各々が、Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、＊が、前記ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への前記付着点を表す、式Ｍ１１、からなる群から選択され、
１つの修飾基Ｍが、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位または２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着しており、１つの修飾基Ｍが、
前述のヒトインスリン類似体のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または
前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＡ鎖のＣ末端における前述の任意選択のペプチドスペーサー中のリジンのイプシロンアミノ基、に付着している、２つの修飾基Ｍを含む、実施形態１に記載の化合物。

【0187】

４９．キラルアミノ酸が、Ｌ形態である、実施形態４４に記載の化合物。

【0188】

５０．修飾基Ｍが、同一である、実施形態４８または４９に記載の化合物。

【0189】

５１．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、ｄｅｓＢ３０を含むヒトインスリン類似体である、実施形態４８〜５１のいずれか１つに記載の化合物。

【0190】

５２．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、
Ａ２１Ｑ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号３および配列番号１１）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１４）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１５）、
Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１１）、ならびに
Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号２０）、からなる群から選択される、ヒトインスリン類似体である、実施形態１７〜２６のいずれか１つに記載の化合物。

【0191】

５３．化合物が、
実施例２２７の化合物、実施例２３９の化合物、実施例２４０の化合物、実施例２４１の化合物、および実施例２７２の化合物からなる群から選択される、実施形態４８〜５２のいずれか１つに記載の化合物。

【0192】

５４．実施形態１の化合物であって、
ｉ）ヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体、
ｉｉ）１つの修飾基Ｍであって、

【化104】

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Ｄ−またはＬ−アミノ酸形態を表し、
式中、ｎは、１〜４の範囲の整数を表し、
Ｗ１は存在せず、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ１は、
ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、
ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、または
ＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−（ＣＨ_２）_２−Ｏ−ＣＨ_２−ＣＯ−＊、
を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ１は、

【化105】

[この文献は図面を表示できません]

から選択され、式中、Ｙ１およびＹ２がＨであり、Ｙ３がＦまたはＣＦ_３であり、Ｙ４がＨまたはＦであり、Ｙ５がＨであり、Ｙ６がＦである、式Ｍ１、

【化106】

[この文献は図面を表示できません]

であって、
式中、Ｗ２は存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、あるいはＷ２は、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態、またはＮＨ−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
Ｒ２が、

【化107】

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から選択され、式中、Ｙ７が、Ｈであり、Ｙ８が、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨＦ_２、またはＣＦ３であり、Ｙ９が、Ｈ、Ｆ、またはＣＦ３であり、Ｙ１０が、Ｆであり、Ｙ１１が、Ｈであり、Ｙ１２が、Ｆであり、ただし、Ｙ８およびＹ９のうちの１つのみがＨであることを前提としている、式Ｍ２、

【化108】

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式中、Ｗ３が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ３が、ＮＨ−ＣＨ（ＣＯＯＨ）−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊のＤもしくはＬ形態を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表す、式Ｍ７、

【化109】

[この文献は図面を表示できません]

式中、Ｗ４が存在せず、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点＊を表すか、またはＷ４が、ＮＨ−ＣＨ_２−Ｃ（＝Ｏ）−＊を表し、式中、＊が、前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ１９がＣＦ_３またはＳＦ_５である、式Ｍ８、

【化110】

[この文献は図面を表示できません]

式中、＊が、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、Ｙ２０、Ｙ２１、およびＹ２２の各々が独立して、ＨおよびＦから選択され、ただし、Ｙ２１がＦである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＨであり、Ｙ２１がＨである場合、Ｙ２０およびＹ２２がＦであることを前提とする、式Ｍ９、

【化111】

[この文献は図面を表示できません]

を表し、式中、＊は、前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体への付着点を表し、
修飾基Ｍが、前述のヒトインスリン類似類のＡ鎖の２２位のリジンのイプシロンアミノ基、または前述のヒトインスリンもしくはヒトインスリン類似体のＢ鎖の２２位もしくは２９位のリジンのイプシロンアミノ基に付着している、１つの修飾基Ｍ、を含む、実施形態１に記載の化合物。

【0193】

５５．前述のヒトインスリンまたはヒトインスリン類似体が、Ａ２２ＫおよびｄｅｓＢ３０を含むヒトインスリン類似体である、実施形態５４に記載の化合物。

【0194】

５６．化合物が、インスリン受容体に結合する能力を有する、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0195】

５７．化合物が、グルコースが存在しない場合よりも２０ｍＭのグルコースの存在下でより高いインスリン受容体親和性を有する、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0196】

５８．化合物が、グルコースが存在しない場合よりも２０ｍＭのグルコースの存在下で少なくとも３倍高いインスリン受容体親和性を有する、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0197】

５９．化合物が、グルコースが存在しない場合よりも２０ｍＭのグルコースの存在下で少なくとも１０倍高いインスリン受容体親和性を有する、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0198】

６０．化合物が、グルコースが存在しない場合よりも２０ｍＭのグルコースの存在下で少なくとも１５倍高いインスリン受容体親和性を有する、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0199】

６１．実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物を含む、組成物。

【0200】

６２．薬剤として使用するための、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0201】

６３．糖尿病、１型糖尿病、２型糖尿病、耐糖能障害、高血糖症、およびメタボリックシンドローム（メタボリックシンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群）の予防または治療で使用するための、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物。

【0202】

６４．糖尿病、１型糖尿病、２型糖尿病、耐糖能障害、高血糖症、およびメタボリックシンドローム（メタボリックシンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群）の治療または予防のための薬剤の製造のための、実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物または実施形態６１に記載の組成物の使用。

【0203】

６５．糖尿病、１型糖尿病、２型糖尿病、耐糖能障害、高血糖症、およびメタボリックシンドローム（メタボリックシンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群）の治療または予防のための方法であって、治療有効量の実施形態１〜５５のいずれか１つに記載の化合物または実施形態６１に記載の組成物への投与を、それを必要としている対象に行うことを含む、方法。

【実施例】

【0204】

材料および方法
略語リスト
ＡＩＢＮ ２，２’−アゾビスイソブチロニトリル
ＡＫＴ 別名ＰＫＢ、タンパク質キナーゼＢ
ＡＬＰ ａｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｏｒ ｌｙｔｉｃｕｓプロテアーゼ
Ａｒ アリール
ＡＲ アリザリンレッドナトリウム
Ｃ１８ オクタデカニル（ＨＰＬＣカラム）
ＣＶ カラム体積
ＤＡＳＴ 三フッ化ジエチルアミノ硫黄
ＤＢＵ １，８−ジアザビシクロ（５．４．０）ウンデカ７−エン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＣ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＭＦ Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＦＦＣ 遊離脂肪細胞（ｒ、ラット）
Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ 炭酸９−フルオレニルメチルＮ−スクシンイミジル
ＨＡＴＵ １−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン３−オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＥＰＥＳ ４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＩＲ ヒトインスリン受容体（Ａ＝Ａアイソフォーム、Ｂ＝Ｂアイソフォーム）
ＨＯＢｔ １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＯＮＳＵ Ｎ−ヒドロキシスクシンミド（ｈｙｄｒｏｘｙｓｕｃｃｉｎｍｉｄｅ）
ＨＲＭＳ 高分解能質量分析
Ｋｄ 変位定数
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィ質量分析
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ｍＭ ミリモル
ＮＢＳＳ Ｎ−ブロモスクシンイミド
Ｎ．Ｄ． 検出不可能
ＮＭＭ Ｎ−メチル−モルホリン
ＮＭＲ 核磁気共鳴
ＮＭＰ Ｎ−メチル−ピロリドン
ＯＥＧ ２−（２−アミノエトキシ）エトキシ−酢酸（オリゴエチレングリコールアミノ酸）
ＲＰ−ＨＰＬＣ 逆相高速液体クロマトグラフィ
Ｐｈ フェニル
ＳＰＡ シンチレーション近接アッセイ
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴＨＰＴＡ トリス（３−ヒドロキシプロピルトリアゾリルメチル）アミン
ＴＳＴＵ スクシンイミジル−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート
ＵＰＬＣ 超高速液体クロマトグラフィ
ＷＧＡ コムギ胚芽凝集素

【0205】

インスリン変異体の調製
[実施例１：酵母におけるインスリン変異体の発現、およびＡＬＰなどでの形質転換]
インスリン類似体を、例えば、ＷＯ２０１７／０３２７９８に開示されるように、周知の技法を使用して酵母で発現させた。より具体的には、イオン交換捕捉によって単離し、以下に記載されるＡＬＰでの処理によって２鎖インスリン類似体に開裂した単鎖前駆体として、インスリン類似体を発現させた。

【0206】

ＳＰセファロースＢＢ上での前駆体の捕捉：
酵母上清を、ＳＰセファロースＢＢで充填したカラム上に１０〜２０ＣＶ／時間の流量で装填した。０．１Ｍクエン酸、ｐＨ３．５による洗浄、および４０％ＥｔＯＨによる洗浄を実施した。類似体を０．２Ｍ酢酸ナトリウムｐＨ５．５／３５％ＥｔＯＨで溶出した。

【0207】

ＡＬＰ消化：
単鎖前駆体の溶液をｐＨ９に調整し、ＡＬＰ酵素を１：１００（ｗ／ｗ）添加した。ＵＰＬＣで反応を追跡した。ＲＰ−ＨＰＬＣ精製用に調製するために、ＡＬＰ開裂プールをｐＨ２．５に調整し、２倍に希釈した。

【0208】

ＲＰ−ＨＰＬＣ精製：
精製をＲＰ−ＨＰＬＣ Ｃ１８によって以下のように実施した：
カラム：１５ｕｍ Ｃ１８ ５０×２５０ｍｍ ２００Å
緩衝液：
Ａ：０．２％ギ酸、５％ＥｔＯＨ、
Ｂ：０．２％ギ酸、５０％ＥｔＯＨ
勾配：２０〜５５％Ｂ緩衝液。
勾配：２０ＣＶ
流量２０ＣＶ／時間
装填ｇ〜５ｇ／Ｌ樹脂
分画をＵＰＬＣによって分析し、プールし、凍結乾燥させた。

【0209】

インスリン類似体を調製し、以下の実施例で使用した：
ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号１１）、
Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１３）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１４）、
Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号５および配列番号１５）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１６）、
Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１７）、
Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号１８）、
Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１１）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号１９）、
Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号６および配列番号２０）、
Ａ−２Ｋ Ａ−１Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号７および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号８および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号９および配列番号１１）、
Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１０および配列番号１１）、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２１）、
Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号４および配列番号２２）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２３）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２４）、
Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２５）、
Ｂ１−ＧＫＰＧ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２６）、
Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２７）、ならびに
Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（配列番号１および配列番号２８）が含まれる。

【0210】

Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンは、ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳを有するＢ１から伸長したｄｅｓＢ３０ヒトインスリンを意味する（ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンのＢ１に接続されたＣ末端Ｓを有する新しいＮ末端Ｇから記述される）。Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンは、ＧＥＳＧＥＳＧＥＳＫを有するＡ２１Ｑから伸長したインスリンを意味する（Ｃ末端Ａ２１Ｑに接続された新しいＮ末端Ｇから記述される）。他のＢ１およびＡ２１伸長インスリン類似体について同様である。Ｂ−１は、Ｂ１からＮ末端の位置を意味し、例えば、Ｂ−１Ｇは、Ｇを有するインスリンＢ１のＮ末端伸長を意味する。

【0211】

ビルディングブロックの調製
中間生成物および最終生成物は、読むことをより容易にするために各実施例内で数字が与えられる。同じ数字が実施例にわたって使用されるが、数字は、各実施例内で明白である。

【0212】

[実施例２：Ｏ−スクシンイミジル３，５−ビス［［［３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル］アミノ］メチル］安息香酸塩]

【化112】

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テトラヒドロフラン（１１０ｍＬ）中２−フルオロ−４−カルボキシフェニルボロン酸（１、８．４４ｇ、４５．９ｍｍｏｌ）、ピナコール（５．４２ｇ、４５．９ｍｍｏｌ）、および硫酸マグネシウム（６０ｇ）の混合物を、室温で一晩撹拌した。懸濁液をセライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させ、真空下で乾燥させて、３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸を（２）をベージュ色粉末として得た。収率：１０．４ｇ（８５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．９３−７．８０（ｍ，２ Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１ Ｈ）；１．３９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0213】

カルボン酸２（１０．３ｇ、３８．６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１３０ｍＬ）中に溶解した。１−ヒドロキシ−ピロリジン−２，５−ジオン（ＨＯＳｕ、８．８９ｇ、７７．２ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．Ｈｃｌ、１４．８ｇ、７７．２ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル（１３０ｍＬ）と０．５Ｍ塩酸水溶液（１３０ｍＬ）との間で分割した。有機層を０．５Ｍ塩酸水溶液で洗浄し（３×１２０ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（４０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（１３０ｍＬ）を添加することによって沈殿させた。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、スクシンイミジル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（３）を白色粉末として得た。収率：１３．９ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．９３−７．８４（ｍ，２ Ｈ）；７．７７（ｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，１ Ｈ）；２．９２（ｓ，４ Ｈ）；１．３９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0214】

３，５−ジメチル安息香酸（４、８２７．６ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）をメタノール（８０ｍＬ）中に懸濁し、濃縮硫酸（８ｍＬ）で処理した。混合物を２日間還流させた。炭酸ナトリウム（５０ｇ）での中和後、混合物を水（２５０ｍＬ）中に溶解し、ジエチルエーテル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、３，５−ジメチル安息香酸メチル（５）を淡黄色油として得た。収率：２９．３ｇ（９７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．６７（ｓ，２ Ｈ）；７．１９（ｓ，１ Ｈ）；３．９１（ｓ，３ Ｈ）；２．３７（ｓ，６ Ｈ）．

【0215】

ギ酸メチル（４５０ｍＬ）中の上記のメチル３，５−ジメチル安息香酸メチル５（２９．３ｇ、１７８ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、１１１ｇ、６２３ｍｍｏｌ）、および１スパチュラのアゾビスイソブチロニトリルの混合物を、２０時間加熱還流させながら、可視光で照射した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン（２００ｍＬ）中に溶解した。沈殿したスクシンイミドを濾過し、濾液を硫酸ナトリウムの飽和水溶液（２×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル１５：１）によって精製した。生成物を酢酸エチル／シクロヘキサン混合物から結晶化し、３，５−ビス（ブロモメチル）安息香酸メチル（６）を白色固体として得た。収率：２５．６ｇ（４５％）。ＲＦ（ＳｉＯ_２、ヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．５０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．０２−７．９５（ｍ，２ Ｈ）；７．６２（ｓ，１ Ｈ）；４．５１（ｓ，４ Ｈ）；３．９４（ｓ，３ Ｈ）．

【0216】

乾燥アセトニトリル（３５０ｍＬ）中の上記の臭化物６（２５．３ｇ、７８．６ｍｍｏｌ）およびジホルミルアミドナトリウム（２０．９ｇ、２２０ｍｍｏｌ）の懸濁液を、４時間還流させた。白色固体を濾過によって除去した後、溶媒を蒸発させた。酢酸エチル／シクロヘキサン混合物からの再結晶により、３，５−ビス（（Ｎ−ホルミルホルムアミド）メチル）安息香酸塩（７）を白色粉末として得た。
収率：２１．０ｇ（８８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．０８（ｓ，４ Ｈ）；７．７２（ｓ，２ Ｈ）；７．４４（ｓ，１ Ｈ）；４．７０（ｓ，４ Ｈ）；３．８４（ｓ，３ Ｈ）．

【0217】

安息香酸塩７（２０．９ｇ、６８．５ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（２２０ｍＬ）および濃縮塩酸（２８０ｍＬ）の混合物中に溶解し、２時間加熱還流させた。室温まで冷却した後、空気の流れを溶液に通した。生成物は、沈殿し始めた。１時間後、溶媒を蒸発させ、生成物をメタノール／ジエチルエーテル混合物から再結晶化して、３，５−ビス（アミノメチル）安息香酸二塩酸塩（８）を白色粉末として得た。収率：１７．１ｇ（９８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．２６（ｂｓ，１ Ｈ）；８．６５（ｂｓ，６ Ｈ）；８．１０（ｓ，２ Ｈ）；７．８８（ｓ，１ Ｈ）；４．０８（ｓ，４ Ｈ）．

【0218】

二塩酸塩８（２．０８ｇ、８．２０ｍｍｏｌ）を水（２０ｍＬ）中に溶解した。その後 Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．７３ｍＬ、３２．９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）、および活性化エステル（３、５．９７ｇ、１６．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液によって酸性化した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（１．４０ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（３×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、生成物は、沈殿し始めた。シクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸（９）を白色粉末として得た。収率：４．１８ｇ（７５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．９６（ｂｓ，１ Ｈ）；９．２７（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２ Ｈ）；７．８２−７．６７（ｍ，６ Ｈ）；７．６４−７．５６（ｍ，２ Ｈ）；７．５３（ｓ，１ Ｈ）；４．５８−４．４４（ｍ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．

【0219】

上記の酸９（４．１７ｇ、６．２０ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、０．８５ｇ、７．４０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、次いでＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１．５３ｇ、７．４０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０°Ｃで３０分間、および室温で一晩撹拌した。不溶性副生成物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（２×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、生成物は、沈殿し始めた。シクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、Ｏ−スクシンイミジル３，５−ビス［［［３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル］アミノ］メチル］安息香酸塩（１０）を白色粉末として得た。収率：４．６２ｇ（９７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．３１（ｔ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，２ Ｈ）；７．９３（ｓ，２ Ｈ）；７．７９−７．６８（ｍ，５ Ｈ）；７．６３−７．５６（ｍ，２ Ｈ）；４．６０−４．５０（ｍ，４ Ｈ）；２．８７（ｓ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ， ２４ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ： ７７３．４（Ｍ＋Ｈ）^＋、計算値７７３．４。

【0220】

[実施例３ Ｏ−スクシンイミドＮ，Ｎ−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド−Ｌｙｓ−ベータ−Ａｌａ）

【化113】

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２−クロロトリチル樹脂１００〜２００メッシュ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ（５３．３ｇ、９６．０ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（３５０ｍＬ）中に２０分間放置して膨潤させた。次いで、樹脂を濾過し、ジクロロメタン（３００ｍＬ）で洗浄した。乾燥ジクロロメタン（２５０ｍＬ）中Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ（２４．９ｇ、８０．０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５５．７ｍＬ、３２０ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。その後、樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（４：１、２×５分、２×２５０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５０ｍＬ）の溶液で処理した。次いで、樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン溶液（１×５分、１×３０分、２×２５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。その後、樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。その後、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８０ｍＬ）中Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（５６．２ｇ、１２０ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、４２．７ｇ、１２０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３４．８ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を３時間振盪した。その後、樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン溶液（１×５分、１×３０分、２×３００ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。次いで、樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×３００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×３００ｍＬ）、メタノール（２×３００ｍＬ）、およびジクロロメタン（１０×３００ｍＬ）で洗浄した。２，２，２−トリフルオロエタノール（３００ｍＬ）で一晩処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）、２−プロパノール（２×２００ｍＬ）、およびジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で洗浄した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をジエチルエーテル（２×３００ｍＬ）中で粉砕した。濾過および乾燥後、我々は、Ｌ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ベータ−Ａｌａ（２）をオフホワイト色粉末として得た収率：１３．３ｇ（５６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ_４，δ_Ｈ）：４．２０（ｔ，Ｊ＝７．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．６６−３．４６（ｍ，２ Ｈ）；３．１７−３．００（ｍ，２ Ｈ）；２．６５（ｔ，Ｊ＝６．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．９７−１．８０（ｍ，２ Ｈ）；１．６０−１．３０（ｍ，１３ Ｈ）．

【0221】

９５％トリフルオロ酢酸水溶液（６０ｍＬ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）中２（１３．２ｇ、４１．６ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物全体を２時間撹拌した。次いで、溶媒を減圧下で除去し、残渣を真空下で乾燥させて、Ｌ−Ｌｙｓ−ベータ−Ａｌａ ＴＦＡ塩（３）を茶色油として得た。収率：１８．５ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ_４，δ_Ｈ）：４．２４（ｔ，Ｊ＝６．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．７１−３．４６（ｍ，２ Ｈ）；３．０９（ｔ，Ｊ＝７．５ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．６６（ｔ，Ｊ＝６．６ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．０１−１．８９（ｍ，２ Ｈ）；１．８５−１．６８（ｍ，２ Ｈ）；１．６０−１．４６（ｍ，２ Ｈ）．

【0222】

トリエチルアミン（１４．１ｍＬ、１０１ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル中３（１５．０ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）の溶液に添加して、オフホワイト色沈殿物を得た。濾過および乾燥後、Ｌ−Ｌｙｓ−ベータ−Ａｌａ（４）を白色吸湿性粉末として得た。収率：７．３０ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ_４，δ_Ｈ）：４．２１（ｔ，Ｊ＝６．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．７２−３．４５（ｍ，２ Ｈ）；３．０８（ｔ，Ｊ＝７．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．６５（ｔ，Ｊ＝６．０ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．００−１．８８（ｍ，２ Ｈ）；１．８３−１．６６（ｍ，２ Ｈ）；１．５９−１．４３（ｍ，２ Ｈ）．

【0223】

スクシンイミジル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩５（５．００ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトニトリル（８０ｍＬ）中４（３．００ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（７．７４ｍＬ、５５．５ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物全体を一晩撹拌した。次いで、溶媒を減圧下で除去し、トルエンで３回共蒸発させた。その後、酢酸エチル（７０ｍＬ）を添加し、混合物を水（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（２ｍＬ）中に溶解し、激しく撹拌したシクロヘキサン（１００ｍＬ）に滴下した。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、Ｎ，Ｎ−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド−Ｌｙｓ−ベータ−Ａｌａ（６）を白色粉末として得た。収率：２．３１ｇ（４７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ_４，δ_Ｈ）：７．８３−７．７３（ｍ，２ Ｈ）；７．７１−７．４５（ｍ，４ Ｈ）；４．７７（ｔ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．６１−３．３９（ｍ，４ Ｈ）；２．６４（ｔ，Ｊ＝６．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．００−１．８０（ｍ，２ Ｈ）；１．７７−１．４７（ｍ，４ Ｈ）；１．３７（ｓ，２４ Ｈ）．

【0224】

Ｎ−ヒドロキスクシンイミド（ＨＯＳｕ、０．９７ｇ、８．４１ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトニトリル（７０ｍＬ）中６（２．００ｇ、２．８０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を０℃に冷却し、続いてＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、０．８７ｇ、４．２０ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、反応混合物を室温まで温め、一晩撹拌した。不溶性副生成物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、１Ｍ塩酸水溶液（３×７０ｍＬ）、水（７０ｍＬ）、およびブライン（７０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をトルエン中のピナコールで５回共蒸発させた。次いで、残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、０．１Ｍ塩酸水溶液（７０ｍＬ）、水（７０ｍＬ）、およびブライン（７０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（３ｍＬ）中に溶解し、激しく撹拌したシクロヘキサン／ジエチルエーテル（１０：１、１１０ｍＬ）に滴下した。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させた。残渣シクロヘキサンを、ジクロロメタンと５回共蒸発させることによって除去した。乾燥後、Ｏ−スクシンイミドＮ，Ｎ−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド−Ｌｙｓ−ベータ−Ａｌａ（７）をオフホワイト色発泡体として得た。収率：１．１２ｇ（４８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ_Ｈ）：７．８３−７．７１（ｍ，２ Ｈ）；７．６２−７．４０（ｍ，４ Ｈ）；７．１９（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．０２（ｔ，Ｊ＝６．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；６．６８（ｔ，Ｊ＝５．６ Ｈｚ １ Ｈ）；４．６７（ｍ，１ Ｈ）；３．７３−３．６２（ｍ，２ Ｈ）；３．４４（ｑ，Ｊ＝６．２ Ｈｚ ２ Ｈ）；２．９０−２．７８（ｍ，６ Ｈ）；２．０７−１．６０（ｍ，４ Ｈ）；１．５３−１．３０（ｍ，２６ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ： ８１０．５ （Ｍ＋Ｈ）^＋、計算値８１０．４。

【0225】

[実施例４：Ｏ−スクシンイミドＮ，Ｎ−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ）

【化114】

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テトラヒドロフラン（９０ｍＬ）中２−フルオロ−４−カルボキシフェニルボロン酸（１、４．９５ｇ、２７．０ｍｍｏｌ）、ピナコール（３．２１ｇ、２７．２ｍｍｏｌ）、および硫酸マグネシウム（４５０ｇ）の混合物を、室温で一晩撹拌した。懸濁液をセライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させ、真空下で乾燥させて、３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸を（２）を黄色粉末として得た。収率：７．０６ｇ （９８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ_Ｈ）：７．９３−７．８０（ｍ，２ Ｈ）；７．７６（ｄ，Ｊ＝９．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；１．３９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0226】

カルボン酸２（７．０５ｇ、２６．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、６．１０ｇ、５３．０ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、１０．２ｇ、５３．０ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を、酢酸エチル（１１０ｍＬ）と０．１Ｍ塩酸水溶液（１１０ｍＬ）との間で分割した。有機層を０．１Ｍ塩酸水溶液（２×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（２０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（１２０ｍＬ）を添加することによって沈殿させた。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、スクシンイミジル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（３）を白色粉末として得た。収率：９．６０ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６，δ_Ｈ）：７．９６−７．８９（ｍ，２ Ｈ）；７．７９（ｄ，Ｊ＝９．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．９１（ｓ，４ Ｈ）；１．３３（ｓ，１２ Ｈ）．

【0227】

Ｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ ＴＦＡ塩４（２．６７ｇ、６．２０ｍｍｏｌ）を水（２０ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．３２ｍＬ、２４．８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）、および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（３、４．５０ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液によって酸性化した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（１．００ｇ、８．４６ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（３×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、冷たいシクロヘキサン（２００ｍＬ）に滴下した。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させた。固体をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解した。ジエチルエーテル（１０ｍＬ）およびシクロヘキサン（１５０ｍＬ）を添加した。溶媒をデカントし、残渣を真空下で乾燥させて、Ｎ，Ｎ’−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−Ｌ−リシルグリシン（５）をベージュ色固体として得た。収率：１．６０ｇ（３７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ_Ｈ）：７．９１−７．７９（ｍ，２ Ｈ）；７．７８−７．６４（ｍ，２ Ｈ）；７．５８−７．３４（ｍ，４ Ｈ）；７．１９−７．０７（ｍ，１ Ｈ）；４．８６−４．７２（ｍ，１ Ｈ）；４．１５−３．８８（ｍ，２ Ｈ）；３．４７−３．２５（ｍ，２ Ｈ）；２．００−１．７４（ｍ，２ Ｈ）；１．６６−１．５２（ｍ，２ Ｈ）；１．５０−１．３７（ｍ，２ Ｈ）；１．３４（ｓ，２４ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ： ６９９．３（Ｍ＋Ｈ）^＋、６１７．２（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）^＋、５３５．０（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）^＋。

【0228】

上記の酸５（１．５９ｇ、２．３０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（７０ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、０．３１ｇ、２．７０ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、０．６５ｇ、３．４０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で５時間撹拌した。混合物を、０．１Ｍ塩酸水溶液（２×８０ｍＬ）およびブライン（１×８０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、Ｏ−スクシンイミジルＮ，Ｎ−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（６）をベージュ色固体として得た。収率：１．２９ｇ（７０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６，δ_Ｈ）：８．７３−８．５３（ｍ，３ Ｈ）；７．７８−７．６１（ｍ，５ Ｈ）；７．５４（ｄ，Ｊ＝１０．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．５２−４．４０（ｍ，１ Ｈ）；４．３６−４．１７（ｍ，２ Ｈ）；３．２９−３．１７（ｍ，２ Ｈ）；２．８１（ｓ，４ Ｈ）；１．８７−１．６８（ｍ，２ Ｈ）；１．５９−１．４７（ｍ，２ Ｈ）；１．４６−１．３６（ｍ，２ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ： ７９６．４（Ｍ＋Ｈ）^＋、計算値７９６．４。

【0229】

[実施例５：２−（（２３−（３，５−ビス（（３−（３−アセトキシ−２，２−ビス（アセトキシメチル）プロポキシ）プロパンアミド）メチル）ベンズアミド）−７，１６−ジオキソ−３，９，１２，１８，２１−ペンタオキサ−６，１５−ジアザトリコシル）オキシ）−Ｎ−（４−ホルミルベンジル）アセトアミド]

【化115】

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ペンタエリトリトール（１３６ｇ、１．００ｍｏｌ）、水酸化ナトリウム（８．００ｇ、２００ｍｍｏｌ）、ジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）、および水（１８ｍＬ）の混合物を、透明な溶液が形成されるまで（一晩）８０°で加熱した。ｔｅｒｔ−アクリル酸ブチル（２、１７４ｍＬ、１．２０ｍｏｌ）を添加し、得られる混合物を８０°Ｃで２４時間加熱し、次いで室温まで冷却し、水（２００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（３×４００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を水（４００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。水性洗浄液が生成物（３）を含有していたため、それらを組み合わせ、酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で再抽出した。全ての酢酸エチル分画を組み合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール９９：１〜９０：１０）によって精製して、３−（３−ヒドロキシ−２，２−ビス（ヒドロキシメチル）プロポキシ）プロパノエート（３）を無色油として得た。収率：３９．７ｇ（１５％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール９：１）：０．３０。１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：３．６７（ｔ，Ｊ＝５．６ Ｈｚ，２ Ｈ）；３．６５（ｓ，６ Ｈ）；３．５２（ｓ，２ Ｈ）；２．７３（ｂｓ，３ Ｈ）；２．４９（ｔ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．４６（ｓ，９ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ： ２８７．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。

【0230】

無水酢酸（９５．６ｍＬ、３５０ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（６００ｍＬ）中の上記のｔｅｒｔ−ブチル３−（３−ヒドロキシ−２，２−ビス（ヒドロキシメチル）プロポキシ）プロパノエート（３、７４．５ｇ、２８１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８８．１ｍＬ、５０６ｍｍｏｌ）を０°Ｃで添加した。冷却浴を除去し、得られる溶液を室温で一晩撹拌した。揮発性物質を真空下で除去し、残渣を酢酸エチル（２Ｌ）中に再溶解し、水（６００ｍＬ）、０．５Ｍ水性塩酸（１．２Ｌ）、水（６００ｍＬ）、１０％炭酸水素カリウム水溶液（６００ｍＬ）、水（６００ｍＬ）、およびブライン（２３０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル９：１〜８：２）によって精製して、２−（アセトキシメチル）−２−（（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロポキシ）メチル）プロパン−１，３−ジイルジアセテート（４）を無色油として得た。収率：８６．７ｇ（７９％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル３：２）： ０．４０。^１Ｈ ＮＭＲ ｓｐｅｃｔｒｕｍ（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：４．１１（ｓ，６ Ｈ）；３．６５（ｔ，Ｊ＝６．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；３．４４（ｓ，２ Ｈ）；２．４５（ｔ，Ｊ＝６．３ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．０６（ｓ，９ Ｈ）；１．４６（ｓ，９ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ： ４１３．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。

【0231】

トリフルオロ酢酸（３００ｍＬ）を、ジクロロメタン（１００ｍＬ）中の上記の２−（アセトキシメチル）−２−（（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロポキシ）メチル）プロパン−１，３−ジイルジアセテート（４、８６．０ｇ、２２０ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。得られる溶液を室温で２時間撹拌し、次いで蒸発乾固させて、残渣をトルエン（３×１５０ｍＬ）から蒸発させた。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール１０：０〜９：１）によって精製し、生成物を含有する分画を蒸発させて、表題化合物（５）を薄茶色油として得た。収率：７０．４ｇ（９６％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル１：１）：０．２５。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δ）：４．１０（ｓ，６ Ｈ）；３．６９（ｔ，Ｊ＝６．１ Ｈｚ，２ Ｈ）；３．４６（ｓ，２ Ｈ）；２．６０（ｔ，Ｊ＝６．１ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．０６（ｓ，９ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：３５７．２（Ｍ＋Ｎａ）＋。

【0232】

２−クロロトリチル樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（１０．７ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）を無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中に２０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（２０ｍＬ）中｛２−［２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−酢酸（Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ、４．１２ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７．０７ｍＬ、４０．６ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を１６時間振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（２：８、２×５分、２×５０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．７２ｍＬ、２１．４ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン（１×５分、１×１０分、１×３０分、３×５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×５０ｍＬ）、およびジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中｛２−［２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−酢酸（Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ、６．１７ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、５．７０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．０２ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を１時間振盪した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン（１×５分、１×１０分、１×３０分、３×５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×５０ｍＬ）およびジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中｛２−［２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−エトキシ］−エトキシ｝−酢酸（Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ、６．１７ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、５．７０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．０２ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を１時間振盪した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン（１×５分、１×１０分、１×３０分、３×５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×５０ｍＬ）およびジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中３，５−ビス（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）メチル）安息香酸（１０．０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、５．７０ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．０２ｍＬ、２８．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を１時間振盪した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中２０％ピペリジン（１×５分、１×１０分、１×３０分、３×５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×５０ｍＬ）およびジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中３−（３−アセトキシ−２，２−ビス（アセトキシメチル）プロポキシ）プロピオン酸（５、１０．７ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）、エチルシアノ−グリオキシレート−２−オキシム（ＯＸＹＭＡ、４．５５ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）、２，４，６−コリジン（７．６８ｍＬ、６．９９ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ、４．９６ｇ、３２．０ｍｍｏｌ）を樹脂に添加し、混合物を１時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（４×５０ｍＬ）、メタノール（４×５０ｍＬ）、およびジクロロメタン（７×５０ｍＬ）で洗浄した。トリフルオロ酢酸／ジクロロメタン混合物（１：１、５０ｍＬ）で一晩処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を、カラムクロマトグラフィ（ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール１００：０〜９０：１０）によって精製して、メチルエステルおよび部分的に脱アセチル化された生成物で汚染された化合物（８）を得た。化合物（８）をジオキサン中に溶解し、水（１６０ｍＬ）中水酸化リチウム（３．４２ｇ、８１．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を３０分間撹拌し、次いで１Ｍ塩酸（８０ｍＬ）で中和し、凍結乾燥させた。脱アセチル化８を、ジクロロメタン（５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）の混合物中に溶解し、次いでピリジン（５０ｍＬ）および無水酢酸（３０．５ｍＬ）を添加した。混合物を７２時間撹拌し、次いでＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドから複数回蒸発させて、所望の化合物８を茶色油として得た。収率：１３．２ｇ（９９％）。ＬＣ−ＭＳ：１２４９（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0233】

上記の化合物（８、１５．６ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）、２，４，６−コリジン（１４．９ｍＬ、１１３ｍｍｏｌ）、［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−１−オール（ＨＯＡｔ、５．１０ｇ、３７．６ｍｍｏｌ）、およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＨＣｌ、７．８９ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１７０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中に溶解した。４−ホルミル−ベンジル−塩化アンモニウム（７．０８ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で４８時間撹拌し、真空下で蒸発させた。残渣を、ＨＰＬＣ（Ｄｅｌｔａｐａｋ、Ｃ１８、５ｍ、５０×５００ｍｍ、アセトニトリル／水、３０分間１５：８５〜２５：７５、１７０分間２５：７５〜５０：５０＋０．０５％ ＴＦＡ）によって精製して、表題化合物１０を茶色がかった油として得た。収率：１．９６ｇ（１２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：９．９８（ｓ，１ Ｈ）；７．８４（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．５６−７．４１（ｍ，３ Ｈ）；７．３９−７．３３（ｍ，１ Ｈ）；７．２５−７．１４（ｍ，２ Ｈ）；７．０９−７．００（ｍ，１ Ｈ）；４．５６（ｄ，Ｊ＝６．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；４．４６−４．４０（ｍ，４ Ｈ）；４．０９−３．９６（ｍ，１６ Ｈ）；３．９１（ｓ，２ Ｈ）；３．７３−３．５６（ｍ，２０ Ｈ）；３．５２（ｔ，Ｊ＝５．１ Ｈｚ，４ Ｈ）；３．４５−３．３２（ｍ，８ Ｈ）；２．４９（ｔ，Ｊ＝５．８ Ｈｚ，４ Ｈ）；２．０５（ｓ，１８ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：１３６６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0234】

[実施例６：Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＥＧ３−ベンズアルデヒド]

【化116】

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実施例６の化合物を、Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）からの実施例５の化合物と同様に調製した。

【0235】

[実施例７：ビス（ビス（４−ボロノ−３−フルオロベンゾイル）−３，５−アミノメチル安息香酸塩−イプシロン，アルファ−Ｌｙｓ−Ｎ−ベータ−Ａｌａ−ＯＳｕ＝（Ｓ）−３−（２，６−ビス（３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロパノエート]

【化117】

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３，５−ジメチル安息香酸（１、４５．１ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）をメタノール（１３０ｍＬ）中に懸濁し、濃縮硫酸（１３ｍＬ）で処理した。混合物を２日間還流させた。炭酸ナトリウム（８０ｇ）での中和後、混合物を水（２５０ｍＬ）中に溶解し、ジエチルエーテル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、３，５−ジメチル安息香酸メチル（２）を淡黄色油として得た。収率：４６．８ｇ（９５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．６７（ｓ，２ Ｈ）；７．１９（ｓ，１ Ｈ）；３．９１（ｓ，３ Ｈ）；２．３７（ｓ，６ Ｈ）．

【0236】

ギ酸メチル（５５０ｍＬ）中の上記の３，５−ジメチル安息香酸メチル（２、４６．７ｇ、２８４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、１７７ｇ、９９４ｍｍｏｌ）、および１スパチュラのアゾビスイソブチロニトリルの混合物を、２０時間加熱還流させながら、可視光で照射した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン（３００ｍＬ）中に溶解した。沈殿したスクシンイミドを濾過し、濾液を硫酸ナトリウムの飽和水溶液（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル１５：１）によって精製した。生成物を酢酸エチル／シクロヘキサン混合物（１：５、３６０ｍＬ）から結晶化し、３，５−ビス（ブロモメチル）安息香酸メチル（３）を白色固体として得た。収率：４６．５ｇ（５１％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．５０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．０３−７．９７（ｍ，２ Ｈ）；７．６２（ｓ，１ Ｈ）；４．５０（ｓ，４ Ｈ）；３．９４（ｓ，３ Ｈ）．

【0237】

乾燥アセトニトリル（２００ｍＬ）中の上記の臭化物（３、３５．２ｇ、１０９ｍｍｏｌ）およびジホルミルアミドナトリウム（２９．１ｇ、３０６ｍｍｏｌ）の懸濁液を、４時間還流させた。白色固体を濾過によって除去した後、溶媒を蒸発させた。酢酸エチル／シクロヘキサン混合物からの再結晶により、３，５−ビス（（Ｎ−ホルミルホルムアミド）メチル）安息香酸メチル（４）を白色粉末として得た。収率：３２．７ｇ（９８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．０８（ｓ，４ Ｈ）；７．７２（ｓ，２ Ｈ）；７．４４（ｓ，１ Ｈ）；４．７０（ｓ，４ Ｈ）；３．８４（ｓ，３ Ｈ）．

【0238】

安息香酸塩（４、３２．７ｇ、１０７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（３４０ｍＬ）および濃縮塩酸（４３０ｍＬ）の混合物中に溶解し、２時間加熱還流させた。室温まで冷却した後、空気の流れを溶液に通した。生成物は、沈殿し始めた。１時間後、溶媒を蒸発させ、生成物をメタノール／ジエチルエーテル混合物（３００ｍＬ）から再結晶化して、３，５−ビス（アミノメチル）安息香酸二塩酸塩（５）を白色粉末として得た。収率：２２．２ｇ（８２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，δＨ）：８．０８（ｓ，２ Ｈ）；７．７２（ｓ，１ Ｈ）；４．２６（ｓ，４ Ｈ）．

【0239】

二塩酸塩（５、６．３３ｇ、２５．０ｍｍｏｌ）を水（１１０ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１７．４ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１０ｍＬ）、および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（６、１８．２ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液によって中和した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（０．６０ｇ、５．００ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（３×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（５０ｍＬ）中に溶解し、生成物は、沈殿し始めた。シクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて、３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸（７）を白色粉末として得た。収率：１４．５ｇ（８６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．９６（ｂｓ，１ Ｈ）；９．３３−９．２３（ｍ，２ Ｈ）；７．８３−７．６７（ｍ，６ Ｈ）；７．６４−７．５７（ｍ，２ Ｈ）；７．５４（ｓ，１ Ｈ）；４．５５−４．４６（ｍ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５１２．０（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）＋。

【0240】

上記の酸（７、１４．４ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１００ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、２．９５ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、５．２８ｇ、２５．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。不溶性副生成物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水（２×１５０ｍＬ）およびブライン（１×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をアセトニトリル（１００ｍＬ）中に溶解した。残渣のＮ，Ｎ−ジシクロヘキシル尿素を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣をテトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（０．６０ｇ、５．００ｍｍｏｌ）および分子ふるいで一晩処理した。混合物をセライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させた。残渣をジクロロメタン（４０ｍＬ）中に溶解した。生成物をシクロヘキサン（１５０ｍＬ）の添加によって沈殿させた。沈殿物を濾過し、シクロヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸塩（８）を白色粉末として得た。収率：１３．３ｇ（７５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．３４−９．２１（ｍ，２ Ｈ）；７．９４（ｓ，２ Ｈ）；７．７９−７．６６（ｍ，５ Ｈ）；７．６５−７．５６（ｍ，２ Ｈ）；４．６２−４．５０（ｍ，４ Ｈ）；２．８８（ｓ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７７３．４（Ｍ＋Ｈ）＋、６９１．２（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）＋、６０９．１（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）＋。

【0241】

２−クロロトリチル樹脂１００〜２００メッシュ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ（９、１０．９ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（１４０ｍＬ）中に２０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（１２０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−ｂＡｌａ−ＯＨ、４．０８ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．６８ｍＬ、４９．９ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（１：４、１０分、１４０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．５７ｍＬ、２６．２ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をジクロロメタン（２×１３０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×１３０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×１５分、２×１３０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×１３０ｍＬ）、２−プロパノール（２×１３０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×１３０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×１３０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１１０ｍＬ）中Ｎ２，Ｎ６−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン（Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、９．０９ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、９．３３ｇ、２６．２ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．２３ｍＬ、４７．２ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を３時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×１３０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０×１３０ｍＬ）で洗浄した。２，２，２−トリフルオロエタノール（２２０ｍＬ）で一晩処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で洗浄した。溶液を組み合わせ、溶媒を蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール９０：１０）によって精製して、（Ｓ）−３−（２，６−ビス（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ヘキサンアミド）プロパン酸（１０）を白色固体として得た。収率：４．３０ｇ（７８％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール９０：１０）：０．４０。
^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，δＨ）：４．２７−３．９９（ｍ，１ Ｈ）；３．６５−３．４４（ｍ，２ Ｈ）；３．１７−３．００（ｍ，２ Ｈ）；２．７０−２．５６（ｍ，２ Ｈ）；１．８６−１．５８（ｍ，２ Ｈ）；１．５７−１．２６（ｍ，２２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４１７．５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0242】

上記の化合物（１０、４．３０ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）中に溶解し、１．５時間放置した。溶媒を蒸発させた。ジエチルエーテル（１００ｍＬ）を添加し、混合物を一晩撹拌した。溶媒をデカントし、残渣を真空下で乾燥させて、（Ｓ）−６−（（２−カルボキシエチル）アミノ）−６−オキソヘキサン−１，５−ジアミニウム２，２，２−トリフルオロアセテート（１１）を固い油として得た。収率：４．５０ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．５８ （ｔ，Ｊ＝５．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．１８（ｂｓ，２ Ｈ）；７．８７（ｂｓ，２ Ｈ）；３．７７−３．６２（ｍ，１ Ｈ）；３．３４−３．１８（ｍ，２ Ｈ）；２．８３−２．６５（ｍ，２ Ｈ）；１．７４−１．６０（ｍ，２ Ｈ）；１．６０−１．４４（ｍ，２ Ｈ）；１．３７−１．１９（ｍ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：２１７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0243】

上記の塩（１１、２．７０ｇ、６．０６ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（５．３０ｍＬ、３０．３ｍｍｏｌ）、水（５０ｍＬ）、および活性化エステル（８、９．３６ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液によって中和した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（０．５０ｇ、４．２３ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水（１×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。部分ピナコールエステル開裂が、ＮＭＲ分析によって観察された。材料を、テトラヒドロフラン（１１０ｍＬ）中ピナコール（０．０４ｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および硫酸マグネシウム（２０．０ｇ）で一晩処置した。混合物を濾過し、濾液を蒸発させた。生成物を、ジクロロメタン／シクロヘキサン混合物（１：５、１８０ｍＬ）から結晶化して、３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロピオン酸（１２）を淡茶色粉末として得た。収率：５．８６ｇ（６３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．３１−９．１３（ｍ，４ Ｈ）；８．５３−８．４３（ｍ，１ Ｈ）；８．４３−８．３５（ｍ，１ Ｈ）；８．１１−７．９８（ｍ，１ Ｈ）；７．７８−７．５５（ｍ，１６ Ｈ）；７．４８−７．３８（ｍ，２ Ｈ）；４．５５−４．４３（ｍ，８ Ｈ）；４．４３−４．３３（ｍ，１ Ｈ）；３．３１−３．１３（ｍ，４ Ｈ）；２．３８（ｔ，Ｊ＝６．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．７９−１．６４（ｍ，２ Ｈ）；１．５７−１．４４（ｍ，２ Ｈ）；１．４２−１．２１（ｍ，５０ Ｈ）．

【0244】

カルボン酸（１２、５．４６ｇ、３．５７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（５０ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、０．７０ｇ、６．０７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（１．４７ｇ、７．１４ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。副生成物を濾過によって除去した。濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（１×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（６０ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（０．０６ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）および分子ふるいで一晩処理した。混合物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１０ｍＬ）中に溶解し、ジエチルエーテル（９０ｍＬ）の添加後に沈殿させた。生成物を濾過によって収集し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（１３）を淡茶色粉末として得た。生成物は、微量のＮ，Ｎ−ジシクロヘキシル尿素を含有する。収率：１．５５ｇ（２７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．２８−９．１７（ｍ，３ Ｈ）；８．５２−８．３３（ｍ，２ Ｈ）；８．２５−８．１５（ｍ，１ Ｈ）；７．８０−７．５１（ｍ，１６ Ｈ）；７．４８−７．３５（ｍ，２ Ｈ）；４．５８−４．３２（ｍ，９ Ｈ）；３．４９−３．３５（ｍ，２ Ｈ）；３．２５−３．０９（ｍ，２ Ｈ）；２．９１−２．７２（ｍ，６ Ｈ）；１．８１−１．６５（ｍ，２ Ｈ）；１．５７−１．４２（ｍ，２ Ｈ）；１．４１−１．１２（ｍ，５０ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：１６３１．９（Ｍ＋Ｈ）＋、１５４９．０（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、７１５．０（Ｍ−２×Ｈ２Ｏ−２×ピナコール／２＋Ｈ）＋、１３８４．５（Ｍ−３×ピナコール＋Ｈ）＋、１３０２．３（Ｍ−４×ピナコール＋Ｈ）＋。

【0245】

[実施例８：（７Ｓ，１８Ｓ）−１８−（３−（（Ｓ）−２，６−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロパンアミド）−７−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）−１−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）−１，８，１２，１９−テトラオキソ−２，９，１３，２０−テトラアザトリコサン−２３−オイック酸]

【化118】

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テトラヒドロフラン（４００ｍＬ）中２−フルオロ−４−カルボキシフェニルボロン酸（１、１５．１ｇ、８２．０ｍｍｏｌ）、ピナコール（９．８１ｇ、８３．０ｍｍｏｌ）、および硫酸マグネシウム（１５０ｇ）の混合物を、室温で週末にわたって撹拌した。懸濁液をセライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させ、真空下で乾燥させて、３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸を（２）を淡黄色粉末として得た。収率：２１．５ｇ（９８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：７．９５−７．４２（ｍ，３ Ｈ）；１．３０（ｓ，１２ Ｈ）．

【0246】

カルボン酸（２、２１．４ｇ、８１．９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、１８．８ｇ、１６３ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、３１．３ｇ、１６３ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を０．５Ｍ塩酸水溶液（１×２００ｍＬ）、水（１×２００ｍＬ）、およびブライン（１×２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（６０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（２５０ｍＬ）を添加することによって沈殿させた。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（３）をベージュ色粉末として得た。収率：２７．８ｇ（９３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（４００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６， δＨ）：７．９８−７．８７（ｍ，２ Ｈ）；７．８０（ｄｄ，Ｊ＝９．２ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．９０（ｓ，４ Ｈ）；１．３３（ｓ，１２ Ｈ）．

【0247】

２−クロロトリチル樹脂１００〜２００メッシュ、１．８ｍｍｏｌ／ｇ（４、１６．４ｇ、２９．５ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（２３０ｍＬ）中に２０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（１８０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−ｂＡｌａ−ＯＨ、６．１３ｇ、１９．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１３．０ｍＬ、７４．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（１：４、１０分、２００ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．８６ｍＬ、３９．４ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をジクロロメタン（２×２００ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×１５分、２×２００ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、２−プロパノール（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１８０ｍＬ）中Ｎ２，Ｎ６−ビス（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、２３．３ｇ、３９．４ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、１４．０ｇ、３９．４ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１２．３ｍＬ、７０．９ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を２．５時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×１５分、２×２００ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、２−プロパノール（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２３０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−ｂＡｌａ−ＯＨ、２４．５ｇ、７８．７ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、２８．０ｇ、７８．７ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２４．７ｍＬ、１４２ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を３時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×１５分、２×２００ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、２−プロパノール（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２３０ｍＬ）中Ｎ２，Ｎ６−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−リジン（Ｂｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、２７．３ｇ、７８．７ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、２８．０ｇ、７８．７ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２４．７ｍＬ、１４２ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を３時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×１５分、２×２００ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）、２−プロパノール（２×２００ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２００ｍＬ）で洗浄した。２，２，２−トリフルオロエタノール（３５０ｍＬ）で一晩処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（２×３００ｍＬ）で洗浄した。溶液を組み合わせ、溶媒を蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール８５：１５）によって精製して、（１０Ｓ，２１Ｓ）−２１−（３−（（Ｓ）−２，６−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ヘキサンアミド）プロパンアミド）−１０−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−２，２−ジメチル−４，１１，１５，２２−テトラオキソ−３−オキサ−５，１２，１６，２３−テトラアザヘキサコサン−２６−オイック酸（５）を白色固体として得た。収率：１１．３ｇ（５６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，δＨ）：４．５２−４．４３（ｍ，１ Ｈ）；４．２２−３．９８（ｍ，２ Ｈ）；３．６４−３．４４（ｍ，６ Ｈ）；３．２７−３．１６（ｍ，２ Ｈ）；３．１５−３．０３（ｍ，４ Ｈ）；２．６９−２．４８（ｍ，６ Ｈ）；１．８４−１．５９（ｍ，６ Ｈ）；１．５８−１．２８（ｍ，４８ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：１０１６．２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0248】

上記の化合物（５、１１．３ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２００ｍＬ）中に溶解し、１．５時間放置した。次いで、混合物を濃縮し、ジエチルエーテル（２００ｍＬ）を添加した。一晩撹拌した後、沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて、（５Ｓ，１２Ｓ，２３Ｓ）−１２−（（２−カルボキシエチル）カルバモイル）−６，１０，１８，２２−テトラオキソ−７，１１，１７，２１−テトラアザヘプタコサン−１，５，２３，２７−テトラアミニウム２，２，２−トリフルオロアセテート（６）を白色粉末として得た。収率：９．２５ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．５６−８．４４（ｍ，２ Ｈ）；８．２７−７．７２（ｍ，１１ Ｈ）；４．２２−４．０８（ｍ，１ Ｈ）；３．７８−３．６０（ｍ，２ Ｈ）；３．３９−３．１７（ｍ，６ Ｈ）；３．０７−２．９２（ｍ，２ Ｈ）；２．８２−２．６６（ｍ，４ Ｈ）；２．４２−２．１９（ｍ，６ Ｈ）；１．７７−１．４３（ｍ，１０ Ｈ）；１．４２−１．１４（ｍ，８ Ｈ）．

【0249】

上記の塩（６、７．９１ｇ、９．３７ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１７０ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１４．７ｍＬ、８４．３ｍｍｏｌ）、水（０．５０ｍＬ）、および活性化エステル（３、１３．６ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液によって酸性化した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（１．００ｇ、８．４６ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（１×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、体積の１／３まで濃縮した。シクロヘキサン（１５０ｍＬ）を添加し、沈殿物を濾過し、シクロヘキサンで洗浄した。固体をアセトニトリル／ジエチルエーテル混合物（１：１、１５０ｍＬ）中に懸濁した。沈殿物を濾過し、アセトニトリルで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（７）の白色固体を得た。収率：４．１０ｇ（２７％）。
^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．６７−８．４３（ｍ，４ Ｈ）；８．０５−７．８３（ｍ，４ Ｈ）；７．８２−７．４７（ｍ，１３ Ｈ）；４．４６−４．２７（ｍ，２ Ｈ）；４．２０−４．０５（ｍ，１ Ｈ）；３．４２−３．１３（ｍ，１０ Ｈ）；３．０５−２．９０（ｍ，２ Ｈ）；２．４２−２．２７（ｍ，４ Ｈ）；２．２７−２．１７（ｍ，２ Ｈ）；１．８４−１．６６（ｍ，４ Ｈ）；１．６３−１．１０（ｍ，６２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：１２２６．４（Ｍ−３×Ｈ２Ｏ−４×ピナコール＋Ｈ）＋。

【0250】

[実施例９：２，５−ジオキソピロリジン−１−イルＮ−（２−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）エチル）−Ｎ−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシネート]

【化119】

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３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸（２、８．８５ｇ、３３．３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１００ｍＬ）中に溶解し、続いて１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾルロ［４，５−ｂ］ピリジン３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（ＨＡＴＵ、１２．３ｇ、３２．４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１４．５ｍＬ、８３．２ｍｍｏｌ）、およびｔｅｒｔ−ブチル（２−アミノエチル）グリシネート塩酸塩（１、４．１１ｇ、１６．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を周囲温度で１８時間撹拌させた。反応混合物を、１Ｍ塩酸水溶液（２×１００ｍＬ）、水（１×１００ｍＬ）、およびブライン（１×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物を乾燥テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中に溶解し、２，３−ジメチル−２，３−ブタンジオール（３．７０ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌させた。次いで、反応混合物を蒸発させ、粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／酢酸エチル５：２）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−（２−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）エチル）−Ｎ−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシネート（３）を白色発泡体として得た。収率：８．１３ｇ（７３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．７８−８．５５（ｍ，１ Ｈ）；７．７９−７．４４（ｍ，４ Ｈ）；７．１２−６．８８（ｍ，２ Ｈ）；４．１８−３．９０（ｍ，２ Ｈ）；３．６７−３．４７（ｍ，２ Ｈ）；３．４５−３．２９（ｍ，２ Ｈ）；１．４４（ｓ，９ Ｈ）；１．３０（ｓ，２４ Ｈ）．

【0251】

上記の調製化合物（３、８．１３ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１００ｍＬ）中に溶解し、２．５時間放置した。次いで、溶媒を蒸発させ、トルエンで２回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン（３０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（２５０ｍＬ）を添加した。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、Ｎ−（２−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラミチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）エチル）−Ｎ−（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシン（４）を白色粉末として得た。収率：６．９１ｇ（９３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，８０ Ｃ，δＨ）：８．４９−８．３８（ｍ，１ Ｈ）；７．７６−７．６８（ｍ，１ Ｈ）；７．６７−７．５９（ｍ，２ Ｈ）；７．５７−７．４５（ｍ，１ Ｈ）；７．１６−７．０９（ｍ，１ Ｈ）；７．０４−６．９４（ｍ，１ Ｈ）；４．２０−４．０３（ｍ，２ Ｈ）；３．５９−３．４０（ｍ，４ Ｈ）；１．３３（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４４９．９（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋、５３２．１（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、６１４．２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0252】

酸（４、６．９０ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン／テトラヒドロフラン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、続いて、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１．３６ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．２６ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。生成物をジクロロメタン／シクロヘキサン混合物（２５ｍＬ／２５０ｍＬ）から沈殿させた。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（５）を白色粉末として得た。収率：７．６２ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，８０ Ｃ，δＨ）：８．５１−８．３８（ｍ，１ Ｈ）；７．７７−７．５７（ｍ，３ Ｈ）；７．５５−７．４５（ｍ，１ Ｈ）；７．１８−７．１０（ｍ，１ Ｈ）；７．０６−６．９７（ｍ，１ Ｈ）；４．６２（ｂｓ，２ Ｈ）；３．６７−３．４１（ｍ，４ Ｈ）；２．８４（ｓ，４ Ｈ）；１．３３（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５４７．０（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋、６２９．１（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、７１１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0253】

[実施例１０：Ｎ−（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボニル）−Ｎ−（２−（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化120】

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６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボン酸（１、１０．０ｇ、５１．０ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（６．４６ｇ、５６．１ｍｍｏｌ）、およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（１０．８ｇ、５６．１ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２時間撹拌した後、揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）中に再溶解し、１Ｍ水性塩酸（２×１００ｍＬ）で洗浄した。有機部分を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発性物質を減圧下で蒸発させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボキシレート（２）を白色固体として得た。収率：１３．８ｇ（９２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．６５（ｓ，１ Ｈ）；８．１１（ｄ，Ｊ＝５．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．７１（ｄ，Ｊ＝１０．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．０８（ｓ，２ Ｈ）；２．９０（ｓ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：２９４．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0254】

（２−アミノエチル）グリシン（３、１．８１ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中に溶解し、トリエチルアミン（１２．８ｍＬ、９２．１ｍｍｏｌ）および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボキシレート（２、９．００ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）を室温で添加した。室温で１６時間撹拌した後、反応混合物を４０℃に加熱し、さらに７２時間撹拌した。次いで、揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）中に再溶解し、１Ｍ水性塩酸（１００ｍＬ）で洗浄した。有機部分を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、生成物をアセトニトリル／水混合物から沈殿させ、遠心分離機によって収集し、凍結乾燥させて、Ｎ−（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボニル）−Ｎ−（２−（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボキサミド）エチル）グリシン４をオフホワイト色固体として得た。収率：１．９９ｇ（２７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８７（ｂｓ，１ Ｈ）；９．５０−９．３７（ｍ，２ Ｈ）；８．５２−８．２２（ｍ，１ Ｈ）；７．６９−７．３０（ｍ，４ Ｈ）；５．０８−４．７０（ｍ，４ Ｈ）；４．２７−３．９６（ｍ，２ Ｈ）；３．７４−３．３５（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４７５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0255】

[実施例１１：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル（Ｓ）−３−（２，６−ビス（３，５−ビス（（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロパノエート]

【化121】

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２−クロロトリチル樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（１、２１．０ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（３００ｍＬ）中に２０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（２５０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−ｂＡｌａ−ＯＨ、６．５４ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１３．９ｍＬ、７９．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を週末にわたって振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（１：４、１×１５分、２５０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７．３２ｍＬ、４２．０ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×１０分、１×２０分、２×２５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５０ｍＬ）中Ｎ２，Ｎ６−ビス（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、１８．６ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、１１．２ｇ、３１．５ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（９．８７ｍＬ、５６．７ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）およびジクロロメタン（３×２５０ｍＬ）で洗浄した。

【0256】

樹脂の一部を除去した（２．００ｍｍｏｌ）。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×１０分、１×３０分、３×３０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４×３０ｍＬ）、ジクロロメタン（４×３０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４×３０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中の２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３，５−ビス（（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸塩（２、３．６５ｇ、４．７２ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．４０ｍＬ、８．００ｍｍｏｌ）を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４×３０ｍＬ）、ジクロロメタン（４×３０ｍＬ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４×３０ｍＬ）、およびジクロロメタン（１０×３０ｍＬ）で洗浄した。

【0257】

１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノール／ジクロロメタン混合物（１：２、３０ｍＬ）で２時間処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（３×３０ｍＬ）で洗浄した。溶液を組み合わせて、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタン（５ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（２５ｍＬ）の添加後に沈殿させた。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、（Ｓ）−３−（２，６−ビス（３，５−ビス（（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロピオン酸（３）を得た。収率：１．５３ｇ（５２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．２０−９．０３（ｍ，４ Ｈ）；８．５２−８．４２（ｍ，１ Ｈ）；８．３９−８．３２（ｍ，１ Ｈ）；８．０６−７．９９（ｍ，１ Ｈ）；７．９４−７．８０（ｍ，１０ Ｈ）；７．７８−７．６５（ｍ，１０ Ｈ）；７．４８−７．３９（ｍ，２ Ｈ）；４．５６−４．４３（ｍ，８ Ｈ）；４．４３−４．３２（ｍ，１ Ｈ）；３．２７−３．１４（ｍ，４ Ｈ）；２．４０−２．２９（ｍ，２ Ｈ）；１．７８−１．６４（ｍ，２ Ｈ）；１．５６−１．４３０（ｍ，３ Ｈ）１．３７−１．２１（ｓ，４９ Ｈ）．

【0258】

カルボン酸（３、１．５３ｇ、１．００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４０ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、１４８ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、２４２ｍｇ、１．３０ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（５０ｍＬ）の添加後に沈殿させた。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンおよびジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（４）を白色粉末として得た。収率：１．１６ｇ（７１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．２３−９．０１（ｍ，４ Ｈ）；８．５０−８．４２（ｍ，１ Ｈ）；８．４１−８．３５（ｍ，１ Ｈ）；８．２３−８．１６（ｍ，１ Ｈ）；７．９１−７．８１（ｍ，９ Ｈ）；７．７７−７．７０（ｍ，９ Ｈ）；７．７０−７．６４（ｍ，２ Ｈ）；７．４７−７．４０（ｍ，２ Ｈ）；４．５５−４．４３（ｍ，８ Ｈ）；４．４０−４．３４（ｍ，１ Ｈ）３．５０−３．３８（ｍ，２ Ｈ）；３．２６−３．１２（ｍ，２ Ｈ）；２．８８−２．７７（ｍ，６ Ｈ）；１．８２−１．６３（ｍ，２ Ｈ）；１．６０−１．４３（ｍ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，４８ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：１６３１．９（Ｍ＋Ｈ）＋、１５４９．０（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、７１５．０（Ｍ−２×Ｈ２Ｏ−２×ピナコール／２＋Ｈ）＋、１３８４．５（Ｍ−３×ピナコール＋Ｈ）＋、１３０２．３（Ｍ−４×ピナコール＋Ｈ）＋。

【0259】

[実施例１２：（Ｓ）−３−（２，６−ビス（３，５−ビス（（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロピオン酸]

【化122】

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３，５−ジメチル安息香酸（１、３００ｇ、２．００ｍｏｌ）をメタノール（９００ｍＬ）中に懸濁し、濃縮硫酸（９０ｍＬ）で処理した。混合物を３日間撹拌した。炭酸ナトリウム（４８０ｇ）との中和後、溶媒を蒸発させた。残渣を水（１Ｌ）中に溶解し、ジエチルエーテル（３×１Ｌ）で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、３，５−ジメチル安息香酸メチル（２）を淡黄色油として得た。収率：３０９ｇ（９４％） ^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．６５（ｓ，２ Ｈ）；７．１６（ｓ，１ Ｈ）；３．８８（ｓ，３ Ｈ）；２．３４（ｓ，６ Ｈ）．

【0260】

ギ酸メチル（２．７Ｌ）中の上記の３，５−ジメチル安息香酸メチル（２、３０７ｇ、１．８７ｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１．１７ｋｇ、６．５５ｍｏｌ）、および１スパチュラのアゾビスイソブチロニトリルの混合物を、２０時間加熱還流させながら、可視光で照射した。溶媒を蒸発させ、残渣をジクロロメタン（２Ｌ）中に溶解した。沈殿したスクシンイミドを濾過し、濾液を硫酸ナトリウムの飽和水溶液（２×１Ｌ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。高温の酢酸エチル／シクロヘキサン混合物からの複数回の結晶化、およびシクロヘキサンでの洗浄により、３，５−ビス（ブロモメチル）安息香酸メチル（３）を白色固体として得た。生成物を２つの２バッチで調製した。収率：２４３ｇ（４０％）ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．５０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．００（ｓ，２ Ｈ）；７．６２（ｓ，１ Ｈ）；４．５１（ｓ，４ Ｈ）；３．９４（ｓ，３ Ｈ）．

【0261】

乾燥アセトニトリル（９００ｍＬ）中の上記の臭化物（３、１２２ｇ、３８０ｍｍｏｌ）およびジホルミルアミドナトリウム（１０１ｇ、１．０６ｍｏｌ）の懸濁液を４時間還流させた。濾過により白色固体を除去した後、溶媒を酢酸エチルで共蒸発させ、真空下で乾燥させて、３，５−ビス（（Ｎ−ホルミルホルムアミド）メチル）安息香酸メチル（４）を淡黄色固体として得た。収率：１１６ｇ（１００％）^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．０７（ｓ，４ Ｈ）；７．７２（ｓ，２ Ｈ）；７．４３（ｓ，１ Ｈ）；４．７０（ｓ，４ Ｈ）；３．８２（ｓ，３ Ｈ）．

【0262】

安息香酸塩（４、１１６ｇ、３８０ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（４００ｍＬ）および濃酸塩酸（６００ｍＬ）の混合物中に溶解し、３時間加熱還流させた。室温まで冷却した後、空気の流れを溶液に通した。生成物は、沈殿し始めた。１時間後、溶媒を蒸発させ、生成物をメタノール／ジエチルエーテル混合物から再結晶化して、３，５−ビス（アミノメチル）安息香酸二塩酸塩（５）を白色粉末として得た。収率：８９．５ｇ（９２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，δＨ）：８．１０（ｓ，２ Ｈ）；７．７４（ｓ，１ Ｈ）；４．２８（ｓ，４ Ｈ）．

【0263】

塩酸塩（５、３０．０ｇ、１１８ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（１４．２ｇ、３５６ｍｍｏｌ）を水（２４０ｍＬ）中に溶解した。１，４−ジオキサン（４８０ｍＬ）中の二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（７７．６ｇ、３５６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加した。反応混合物を一晩撹拌し、次いで酢酸エチル（４００ｍＬ）および０．５Ｍ塩酸水溶液（４００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機層を水（２×３５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発させた。残渣を高温酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（４００ｍＬ）を添加した。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄して、３，５−ビス（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）安息香酸（６）を白色固体として得た。収率：３９．１ｇ（８７％） ^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：７．７０（ｓ，２ Ｈ）；７．４５−７．３６（ｍ，２ Ｈ）；７．３３（ｓ，１ Ｈ）；４．２１−４．０４（ｍ，４ Ｈ）；１．３９（ｓ，１８ Ｈ）．

【0264】

２−クロロトリチルクロリド樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（７、２１．２ｇ、３１．８ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（２８０ｍＬ）中に４０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（２２０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、６．６１ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１４．１ｍＬ、８０．７ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（１：４、１×２０分、１×２５０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７．４０ｍＬ、４２．５ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×２２０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２２０ｍＬ）中Ｎ２，Ｎ６−ビス（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、１８．８ｇ、３１．８ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、１１．３ｇ、３１．８ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（９．９８ｍＬ、５７．３ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を２．５時間振盪した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×２２０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×２５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×２５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２２０ｍＬ）中３，５−ビス（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）安息香酸（６、２４．２ｇ、６３．７ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、２２．６ｇ、６３．７ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２０．０ｍＬ、１１５ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を２．５時間振盪した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×２５０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０×２５０ｍＬ）で洗浄した。２，２，２−トリフルオロエタノール（４００ｍＬ）で一晩処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール９０：１０）によって精製して、（Ｓ）−３−（２，６−ビス（３，５−ビス（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）ベンズアミド）ヘキサンアミド）プロパン酸（８）を白色発泡体として得た。収率：１６．３ｇ（８２％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール９０：１０）： ０．３０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．７５−７．３５（ｍ，６ Ｈ）；７．２６−７．１９（ｍ，２ Ｈ）；７．１３（ｂｓ，１ Ｈ）；５．６１−５．３５（ｍ，４ Ｈ）；４．７６−４．６１（ｍ，１ Ｈ）；４．２５−４．０８（ｍ，８ Ｈ）；３．６０−３．２６（ｍ，４ Ｈ）；２．６０−２．４５（ｍ，２ Ｈ）；２．０２−１．８５（ｍ，１ Ｈ）；１．８５−１．６９（ｍ，１ Ｈ）；１．６２−１．５１（ｍ，２ Ｈ）；１．４６−１．３９（ｍ，３８ Ｈ）．
ＬＣ−ＭＳ：９４２．１（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0265】

上記の化合物（８、１６．１ｇ、１７．３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（８０ｍＬ）中に溶解し、３０分間放置した。溶媒を、体積の１／３まで濃縮し、ジエチルエーテル／シクロヘキサン混合物（１：１、３００ｍＬ）を添加した。得られる混合物を一晩撹拌した。沈殿物を濾過によって収集し、ジエチルエーテルで洗浄し、真空下で乾燥させて、（Ｓ）−（（（（６−（（２−カルボキシエチル）アミノ）−６−オキソヘキサン−１，５−ジイル）ビス（アザンジイル））ビス（カルボニル））ビス（ベンゼン−５，１，３−トリイル））テトラメタンアミニウム２，２，２−トリフルオロアセテート（９）を白色粉末として得た。収率：１６．５ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，δＨ）：８．０９（ｄｄ，Ｊ＝９．４ および１．５ Ｈｚ，４ Ｈ）；７．８４（ｄ，Ｊ＝１０．５ Ｈｚ，２ Ｈ）；４．７６（ｄｄ，Ｊ＝８．２および６．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．３６（ｓ，４ Ｈ）；４．３５（ｓ，４ Ｈ）；３．６０−３．４３（ｍ，４ Ｈ）；２．６４（ｔ，Ｊ＝６．５ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．００−１．８０（ｍ，２ Ｈ）；１．７７−１．６５（ｍ，２ Ｈ）；１．５７−１．４８（ｍ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５４１．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0266】

トルエン／エタノール混合物（１：１、４８０ｍＬ）中４−カルボキシ−３−フルオロフェニルボロン酸（１０、３０．０ｇ、１６３ｍｍｏｌ）およびピナコール（２１．２ｇ、１７９ｍｍｏｌ）の懸濁液を２４時間還流させた。次いで、溶媒を蒸発させ、ジクロロメタンで共蒸発させて、２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸（１１）を白色粉末として得た。収率：４３．３ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：７．６０（ｔ，Ｊ＝７．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．３９（ｄ，Ｊ＝７．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．２４（ｄ，Ｊ＝１０．６ Ｈｚ，１ Ｈ）；１．２９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0267】

酸（１１、３５．２ｇ、１３２ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１：１、６００ｍＬ）中に溶解し、次いで、１−ヒドロキシ−ピロリジン−２，５−ジオン（ＨＯＳｕ、２５．２ｇ、２１９ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、４２．０ｇ、２１９ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（４００ｍＬ）中に溶解し、水（２×３００ｍＬ）およびブライン（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。生成物を酢酸エチル／シクロヘキサン混合物（１：４、６００ｍＬ）から沈殿させた。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（１２）を白色粉末として得た。収率：４５．２ｇ（９４％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．０７（ｔ，Ｊ＝７．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．７１（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．６０（ｄ，Ｊ＝１０．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．９０（ｓ，４ Ｈ）；１．３２（ｓ，１２ Ｈ）．

【0268】

（Ｓ）−（（（（６−（（２−カルボキシエチル）アミノ）−６−オキソヘキサン−１，５−ジイル）ビス（アザンジイル））ビス（カルボニル））ビス（ベンゼン−５，１，３−トリイル））テトラメタンアミニウム２，２，２−トリフルオロアセテート（９、３．９１ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）を水／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド混合物（１：１、８０ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．１５ｍＬ、３５．３ｍｍｏｌ）および活性化エステル（１２、５．６９ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液によって酸性化した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（２×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をテトラヒドロフラン（７０ｍＬ）中のピナコール（０．０６ｇ、０．４９ｍｍｏｌ）で処理し、テトラヒドロフランから３回蒸発させた。残渣を真空下で乾燥させて、表題化合物（１３）をベージュ色固体として得た。収率：５．８２ｇ（９５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．０１−８．８３（ｍ，４ Ｈ）；８．５１−８．４２（ｍ，１ Ｈ）；８．３９−８．３０（ｍ，１ Ｈ）；８．１０−８．００（ｍ，１ Ｈ）；７．８０−７．３１（ｍ，１８ Ｈ）；４．５９−４．３３（ｍ，９ Ｈ）；３．３０−３．１９（ｍ，４ Ｈ）；２．３９（ｔ，Ｊ＝６．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．８０−１．６７（ｍ，２ Ｈ）；１．５９−１．４９（ｍ，２ Ｈ）；１．４１−１．２１（ｍ，５０ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５６６．６（Ｍ−４×ピナコール−４×Ｈ２Ｏ）／２＋Ｈ）＋。

【0269】

[実施例１３：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３，５−ビス（（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸塩]

【化123】

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３，５−ビス（アミノメチル）安息香酸二塩酸塩（２、１．８８ｇ、７．４３ｍｍｏｌ）を水（２０ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０．４ｍＬ、５９．５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）、および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（１、５．４０ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を添加した。

【0270】

混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液（２００ｍＬ）によって酸性化した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（１．２４ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、生成物は、沈殿し始めた。次いで、シクロヘキサン（１９０ｍＬ）を添加し、沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸（３）を白色粉末として得た。収率：４．３８ｇ（８７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．９５（ｂｓ，１ Ｈ）；９．０５−８．９７（ｍ，２ Ｈ）；７．８２（ｓ， ２ Ｈ）；７．６４（ｔ，Ｊ＝７．３ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．５６−７．４９（ｍ，３ Ｈ）；７．４４−７．３７（ｍ，２ Ｈ）；４．５５−４．４７（ｍ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ： ６７７．５（Ｍ＋Ｈ）＋、５９５．３（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）＋、５１３．３（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）＋。

【0271】

上記の酸（３、４．３７ｇ、６．４８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１００ｍＬ）中に溶解し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、０．８９ｇ、７．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、続いてＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１．６０ｇ、７．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０°Ｃで３０分間、および室温で一晩撹拌した。不溶性副生成物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（２×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄した。白色粉末をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中に溶解した。ピナコール（０．１９ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）および硫酸マグネシウム（１０ｇ）を溶液に添加し、得られる混合物を室温で一晩撹拌した。懸濁液をセライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、溶液にシクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（４）を白色粉末として得た。収率：３．９９ｇ（８０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．０７（ｔ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．９６（ｓ，２ Ｈ）；７．７５（ｓ，１ Ｈ）；７．６５（ｔ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．４１（ｄ，Ｊ＝１０．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；４．６１−４．４８（ｍ，４ Ｈ）；２．８９（ｓ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７７４．６（Ｍ＋Ｈ）＋、６９２．４（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）＋、６１０．３（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）＋。

【0272】

[実施例１４]

【化124】

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ベータ−Ａｌａ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ、およびピナコール４−カルボキシ−２−フルオロフェニルボロネートからの固相ペプチド合成によって調製した

【0273】

[実施例１５：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル（Ｒ）−３−（２，４−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）ブタンアミド）プロパノエート]

【化125】

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Ｌ−２，４−ジアミノ酪酸二塩酸塩（１、４．８１ｇ、２５．２ｍｍｏｌ）を、水（８０ｍＬ）中の重炭酸ナトリウム（１０．６ｇ、１２６ｍｍｏｌ）の溶液中に懸濁した。混合物を透明な溶液が形成されるまで加熱した。室温まで冷却した後、１，４−ジオキサン（８０ｍＬ）およびＮ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（２０．４ｇ、６０．４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌し、次いで５Ｍ塩酸水溶液で酸性化した。１，４−ジオキサンを蒸発させ、水相を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を水（３×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣を高温酢酸エチル／シクロヘキサン混合物から２回再結晶化した。生成物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、（Ｒ）−２，４−ビス（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）ブタン酸（２）を白色粉末として得た。収率：１３．３ｇ（９４％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．６２（ｂｓ，１ Ｈ）；７．９４−７．８３（ｍ，４ Ｈ）；７．７９−７．５５（ｍ，５ Ｈ）；７．４６−７．２６（ｍ，９ Ｈ）；４．３４−４．１３（ｍ，６ Ｈ）；４．０８−３．９４（ｍ，１ Ｈ）；３．１４−３．０２（ｍ，２ Ｈ）；１．９８−１．８４（ｍ，１ Ｈ）；１．８４−１．６５（ｍ，１ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５６２．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0274】

２−クロロトリチルクロリド樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（３、５．８４ｇ、８．７５ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（７０ｍＬ）中に２０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、１．８２ｇ、５．８４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．８６ｍＬ、２２．２ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（１：４、１×１０分、１×５０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．０３ｍＬ、１１．７ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をジクロロメタン（２×５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中（Ｒ）−２，４−ｂｉｓ（（（（９Ｈ−ｆｌｕｏｒｅｎ−９−ｙｌ）ｍｅｔｈｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌ）ａｍｉｎｏ）ｂｕｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ（２、６．５７ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）、エチルシアノ−グリオキシレート−２−オキシム（Ｏｘｙｍａ、１．６６ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ、１．８１ｍＬ、１１．７ｍｍｏｌ）、および２，４，６−コリジン（３．０９ｍＬ、２３．４ｍｍｏｌ）を樹脂に添加し、混合物を２．５時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×５０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）、２−プロパノール（２×５０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×５０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×５０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（４、８．４８ｇ、２３．４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７．３２ｍＬ、４２．０ｍｍｏｌ）を樹脂に添加し、混合物を２時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×６０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０×６０ｍＬ）で洗浄した。１，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノール／ジクロロメタン混合物（１：２、９０ｍＬ）で２時間処理することによって、生成物を樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（４×５０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、水（２×８０ｍＬ）およびブライン（１×８０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、（Ｒ）−３−（２，４−ビス（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）ブタンアミド）プロピオン酸（５）をベージュ色固体として得た。収率：３．２５ｇ（８１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：１２．１１（ｂｓ，１ Ｈ）；８．６９（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．６３−８．５２（ｍ，１ Ｈ）；８．１４−８．０３（ｍ，１ Ｈ）；７．８１−７．６１（ｍ，５ Ｈ）；７．５６（ｄ，Ｊ＝１０．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．５４−４．３９（ｍ，１ Ｈ）；３．４４−３．１７（ｍ，４ Ｈ）；２．４３−２．３３（ｍ，２ Ｈ）；２．１４−１．９９（ｍ，１ Ｈ）；１．９９−１．８５（ｍ，１ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５２１．０（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋、６０３．１（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、６８５．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0275】

酸（５、３．２４ｇ、４．７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）中に溶解し、続いてＮ−ヒドロキシスクシンイミド（０．６５ｇ、５．６７ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（１．０９ｇ、５．６７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩撹拌し、次いでジクロロメタン（５０ｍＬ）で希釈し、水（２×８０ｍＬ）およびブライン（１×８０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、表題化合物（６）を白色固体として得た。収率：３．４２ｇ（９２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．７２（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．５７（ｔ，Ｊ＝５．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．２２（ｔ，Ｊ＝５．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．７７−７．６２（ｍ，５ Ｈ）；７．５６（ｄ，Ｊ＝１０．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．５３−４．４０（ｍ，１ Ｈ）；３．４８−３．２７（ｍ，４ Ｈ）；２．８６（ｔ，Ｊ＝７．１ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．８０（ｓ，４ Ｈ）；２．１５−２．０２（ｍ，１ Ｈ）；２．０２−１．８８（ｍ，１ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：６１８．１（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋、７００．２（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、７８２．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0276】

[実施例１６：３−（３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸]

【化126】

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３−ブロモ−５−ヨード安息香酸（１、１６．４ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）をメタノール（１００ｍＬ）中に懸濁し、メタンスルホン酸（１ｍＬ）を添加した。得られる混合物を６０℃で１６時間撹拌した（油浴）。得られる透明な溶液を−２０°Ｃまで冷凍庫内で１６時間冷却し、得られる固体を濾過によって収集し、冷却した（−２０°Ｃ）メタノールで洗浄し、真空下で乾燥させて、３−ブロモ−５−ヨード安息香酸メチル（２）をオフホワイト色固体として得た。
収率：１３．９ｇ（８２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．３０（ｓ，１ Ｈ）；８．１４（ｓ，１ Ｈ）；８．０４（ｓ，１ Ｈ）；３．９３（ｓ，１ Ｈ）．

【0277】

１，３−ジブロモ−５−フルオロベンゼン（３、６．３０ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）を乾燥ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）中に溶解し、−７８Ｃまで冷却した。ヘキサン（２２．０ｍＬ、５２．５ｍｍｏｌ）中２．３５Ｍのｎ−ブチルリチウムを撹拌しながら滴下した。１５分後、乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（７．７０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）を添加し、得られる混合物を１５分間撹拌し、次いで周囲温度まで温めた。１時間後、反応混合物を１Ｍ塩酸水溶液（１５０ｍＬ）でクエンチした。層を分離し、有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発させて、３−ブロモ−５−フルオロベンズアルデヒド（４）を黄色がかった油としてを得て、これを冷凍庫内の保存で固化した。収率：１０．２ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：９．９２（ｓ，１ Ｈ）；７．８０（ｂｓ，１ Ｈ）；７．５０（ｂｓ，２ Ｈ）．

【0278】

３−ブロモ−５−ヨード安息香酸メチル（２、６．８０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で乾燥テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中に溶解し、−４０°Ｃまで冷却した。テトラヒドロフラン（１６．１ｍＬ、２１．０ｍｍｏｌ）中の１．３Ｍイソプロピルマグネシウムクロリド−リチウムクロリド錯体を、添加漏斗を介して滴下した。３０分後、３−ブロモ−５−フルオロベンズアルデヒド（４）（４．８７ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（５ｍＬ）を用いて添加した。得られる混合物を１時間にわたって室温まで温め、周囲温度で１時間撹拌した。０．５Ｍ塩酸水溶液（５０ｍＬ）を添加することによって反応をクエンチし、ジエチルエーテル（１×２００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣５を乾燥ジクロロメタン（１００ｍＬ）中に溶解し、クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ、６．４５ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、反応混合物を一晩（１６時間）撹拌し、その後２−プロパノール（３ｍＬ）でクエンチした。室温で１時間撹拌した後、反応混合物をセライトＳで覆われたシリカゲルプラグ（１００ｇ）を通して濾過し、ジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で洗浄した。溶媒を真空下で除去し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／ジクロロメタン６：１〜２：１）によって精製して、３−ブロモ−５−（３−ブロモ−５−フルオロベンゾイル）安息香酸メチル（６）を無色固体として得た。収率：７．１０ｇ（８５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．４３（ｓ，１ Ｈ）；８．３０（ｓ，１ Ｈ）；８．１１（ｓ，１ Ｈ）；７．７１（ｓ，１ Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝７．６ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．４１（ｄ，Ｊ＝８．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９７（ｓ，３ Ｈ）．
ＬＣ−ＭＳ：分子油もフラグメントも検出することができなかった。

【0279】

２５０ｍＬ反応槽を酢酸カリウム（６．７０ｇ、６８．４ｍｍｏｌ）で充填し、塩を真空下、１１０℃で１時間乾燥させた。室温まで冷却した後、反応槽を窒素で再充填し、３−ブロモ−５−（３−ブロモ−５−フルオロベンゾイル）安息香酸メチル（６、７．１０ｇ、４８１ｍｏｌ）、酢酸パラジウム（７７．０ｍｇ、３４２ｍｏｌ）、２−ジクロヘキシルホスフェニノ−２，４，６−トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ、３２５ｍｇ、６８４ｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（９．５３ｍｇ、３７．６ｍｍｏｌ）で充填した。次いで、反応槽を空にし、窒素で再充填し（この手順を２回繰り返した）、無水テトラヒドロフラン（３ｍＬ）を注射器で添加し、槽をプラスチック栓で密封し、６０Ｃに予熱した加熱浴に沈めた。４００ｒｐｍで１６時間（一晩）撹拌した後、反応混合物を周囲温度まで冷却し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、セライトＳで覆われたシリカの短いプラグ（７０ｇ）を通して、ジクロロメタン（３×７０ｍＬ）を用いて濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、生成物を黄色がかったろう状発泡体として得て、これを氷冷ｎ−ヘキサン（７０ｍＬ）で粉砕して、結晶化を引き起こした。得られる固体を濾過によって収集し、真空下で乾燥させて、３−（３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（７）を白色固体として得た。収率：７．１０ｇ（８８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．６９（ｓ，１ Ｈ）；８．４８（ｓ，１ Ｈ）；８．３８（ｓ，１ Ｈ）；７．９７（ｓ，１ Ｈ）；７．７２（ｄ，Ｊ＝８．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．５４（ｄ，Ｊ＝９．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９５（ｓ，３ Ｈ）；１．３６（ｓ，１２ Ｈ）；１．３５（ｓ，１２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５１１．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0280】

３−（３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（７、７．１０ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）をメタノール（４２ｍＬ）および水（１３ｍＬ）中に懸濁した。水酸化リチウム（２．９１ｇ、６９．５ｍｍｏｌ）を添加し、得られる混合物を周囲温度で１６時間激しく撹拌した。反応混合物を水（１２０ｍＬ）で希釈し、ジエチルエーテル（７０ｍＬ）で抽出した。エーテル層を廃棄し、水層を濃縮塩酸（１０ｍＬ）で酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物を高温酢酸エチル（８０ｍＬ）中に溶解し、透明な溶液が得られるまでピナコールを添加した。溶液を蒸発乾固させ、次いで、ジクロロメタン（２×４０ｍＬ）から２回蒸発させて、表題の３−（３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸
（８）を無色固体として得た。化合物は、除去することができなかった残渣のピナコールを含有する。
収率：６．８２ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．７７（ｓ，１ Ｈ）；８．５４（ｔ，Ｊ＝１．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．４４（ｄ，Ｊ＝１．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．９８（ｓ，１ Ｈ）；７．８０−７．６８（ｍ，１ Ｈ）；７．６３−７．５０（ｍ，１ Ｈ）；１．３７（ｓ，１２ Ｈ）；１．３５（ｓ，１２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４９７．５（Ｍ＋Ｈ）＋、４１５．４（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋。

【0281】

[実施例１７：（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）３，５−ビス［［［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル］アミノ］メチル］安息香酸塩]

【化127】

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３，５−ビス（（４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸（１、２．５７ｇ、４．００ｍｍｏｌ）をアセトニトリル／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド混合物（３：１、１００ｍＬ）中に溶解した。Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．５５ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、続いてＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．９９ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０°Ｃで３０分間、および室温で一晩撹拌した。不溶性副生成物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（２×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をトルエン（１０ｍＬ）中に溶解し、生成物は、沈殿し始めた。シクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（２）を白色粉末として得た。生成物は、微量のＮ，Ｎ−ジシクロヘキシル尿素を含有する。収率：２．８５ｇ（９７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．２４（ｔ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．９５−７．８３（ｍ，６ Ｈ）；７．７９−７．７０（ｍ，５ Ｈ）；４．６０−４．５２（ｍ，４ Ｈ）；２．８７（ｓ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７３７．４（Ｍ＋Ｈ）＋、６５５．２（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）＋、５７３．１（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール

【0282】

[実施例１８：Ｎ２，Ｎ６−ビス（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボニル）−Ｌ−リジン]

【化128】

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６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボン酸（１、６．００ｇ、３０．６ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（８０ｍＬ）中に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３．８７ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）、およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（６．４６ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）を室温で添加した。２時間撹拌した後、揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）中に再溶解し、１Ｍ水性塩酸（２×６０ｍＬ）で洗浄した。有機部分を無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させた。揮発性物質を減圧下で蒸発させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボキシレート（２）を白色固体として得た。収率：８．３５ｇ（９３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．６５（ｓ，１ Ｈ）；８．１１（ｄ，Ｊ＝５．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．７１（ｄ，Ｊ＝１０．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．０８（ｓ，２ Ｈ）；２．９０（ｓ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：２９４．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0283】

Ｌ−リジン塩酸塩（３、１．５６ｇ、８．５０ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）および水（２５ｍＬ）中に溶解した。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．９２ｍＬ、５１．２ｍｍｏｌ）および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボキシレート（２、５．００ｇ、１７．０ｍｍｏｌ）を室温で添加した。３時間撹拌した後、揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残渣を１Ｍ塩酸水溶液によって沈殿させた。沈殿物を水によって洗浄し、アセトニトリル／水混合物からの沈殿によって精製し、遠心分離によって収集し、凍結乾燥させて、Ｎ２，Ｎ６−ビス（６−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−５−カルボニル）−Ｌ−リジン（４）を白色固体として得た。収率：３．２５ｇ（７６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．６６（ｂｓ，１ Ｈ）；９．４１（ｄ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；８．５９（ｄ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．３９（ｔ，Ｊ＝５．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．６１−７．５３（ｍ，２ Ｈ）；７．５３−７．４４（ｍ，２ Ｈ）；４．９７（ｄ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．４１−４．３０（ｍ，１ Ｈ）；３．３０−３．２０（ｍ，２ Ｈ）；１．９０−１．７０（ｍ，２ Ｈ）；１．５９−１．３８（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５０３．５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0284】

[実施例１９：（Ｓ）−２，３−ビス（４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパン酸]

【化129】

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水（４００ｍＬ）中４−（ブロモメチル）−３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（１、２３．０ｇ、６１．７ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（１２．３ｇ、０．３１ｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で一晩撹拌した。６Ｍ塩酸水溶液（６０ｍＬ、６Ｍ）を反応混合物に添加して、白色沈殿物を生じた。沈殿物を有するフラスコを冷蔵庫内に１時間保持した。次いで、それを濾過し、濾過ケーキを水（２００ｍＬ）で洗浄し、凍結乾燥させて、４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（２）を白色固体として得た。収率：１２．１ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．２４（ｂｓ，１ Ｈ），９．５８（ｓ，１ Ｈ），８．２０（ｓ，１ Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝９．９ Ｈｚ，１ Ｈ），５．１４（ｓ，２ Ｈ）．

【0285】

４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（２、４．００ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（２．３５ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）、および１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（３．９１ｇ、２０．４ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１２０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中で周囲温度において３．５時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸（３×１５０ｍＬ）および１Ｍ塩酸水溶液（１５０ｍＬ）で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（３）を白色固体として得た。収率：５．６８ｇ（９７％）。
ＬＣ−ＭＳ：２９４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0286】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（３、５．１０ｇ、１７．４ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロパン酸塩酸塩（４、１．２２ｇ、８．７０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（９．２８ｍＬ、５２．２ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸エチル（２×２５０ｍＬ）および１Ｍ塩酸水溶液（１５０ｍＬ）で抽出し、有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、（Ｓ）−２，３−ビス（４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロピオン酸（５）を白色固体として得た。収率：３．５３ｇ（８８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８２（ｂｓ，１ Ｈ）；９．５４（ｄ，Ｊ＝６．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；８．８６（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．７８（ｔ，Ｊ＝６．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．１０（ｓ，１ Ｈ）；８．０４（ｓ，１ Ｈ）；７．８０−７．６３（ｍ，２ Ｈ）；５．１３（ｄ，Ｊ＝６．２ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．７７−４．６２（ｍ，１ Ｈ）；３．９１−３．７７（ｍ，１ Ｈ）；３．７７−３．６２（ｍ，１ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４６１．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0287】

[実施例２０：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（２，４−ジフルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩]

【化129-2】

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３−ブロモ−５−ヨード安息香酸（１、５．００ｇ、１５．３ｍｍｏｌ）を、無水ジクロロメタン（１００ｍＬ）中に溶解し、ｔｅｒｔ−ブタノール（１．５２ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（３．３１ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）、および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（１．９６ｍＬ、１６．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を、１Ｍ塩酸水溶液（２×５０ｍＬ）およびブライン（１×４０ｍＬ）で洗浄した。有機部分を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル１０：１）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−５−ヨード安息香酸塩（２）を白色固体として得た。収率：４．６７ｇ（８０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．２２（ｓ，１ Ｈ）；８．０６（ｓ，１ Ｈ）；８．００（ｓ，１ Ｈ）；１．５８（ｓ，９ Ｈ）．

【0288】

ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−５−ヨード安息香酸塩（２、４．３１ｇ、１１．３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）中に溶解し、−４０°Ｃまで冷却した。テトラヒドロフラン（９．５２ｍＬ、１２．４ｍｍｏｌ）中１．３Ｍイソプロピルマグネシウムクロリド−リチウムクロリド錯体をゆっくり滴下した。４０分後、５−ブロモ−２，４−ジフルオロベンズアルデヒド（３、２．８６ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（５ｍＬ）を用いて添加した。得られる混合物を室温まで一晩（１６時間）温めた。０．５Ｍ塩酸水溶液（１５ｍＬ）を添加することによって反応をクエンチし、酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（４０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。揮発性物質を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル１０：１）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−５−（（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）（ヒドロキシ）メチル）安息香酸塩（４）を白色固体として得た。収率：４．３８ｇ（８１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．０２（ｔ，Ｊ＝１．６ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．９２（ｓ，１ Ｈ）；７．７７−７．６５（ｍ，２ Ｈ）；６．８９（ｄｄ，Ｊ＝９．７および８．３，１ Ｈ）；６．０９（ｄ，Ｊ＝３．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．４３（ｄ，Ｊ＝４．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；１．６８−１．５８（ｍ，９ Ｈ）．

【0289】

ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−５−（（５−ブロモ−２，４−ジフルオロフェニル）（ヒドロキシ）メチル）安息香酸塩（４）を、乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）中に溶解し、クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ、２．９６ｇ、１３．７ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、反応混合物を一晩（１６時間）撹拌し、その後２−プロパノール（１．５ｍＬ）でクエンチした。室温で１時間撹拌した後、反応混合物をセライトの短いプラグ（５ｇ）を通して濾過し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で洗浄した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル２０：１）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゾイル）安息香酸塩（５）は無色固体として得た。収率：４．２０ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．３３（ｔ，Ｊ＝１．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．２８−８．２４（ｍ，１ Ｈ）；８．１０−８．０７（ｍ，１ Ｈ）；７．８６（ｔ，Ｊ＝７．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．０３（ｄｄ，Ｊ＝９．３および８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；１．６１（ｓ，９ Ｈ）．

【0290】

ｔｅｒｔ−ブチル３−ブロモ−５−（５−ブロモ−２，４−ジフルオロベンゾイル）安息香酸塩（５、４．２０ｇ、８．８２ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（５９．０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、２−ジシクロヘキシルホスフェニノ−２，４，６−トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ、２５２ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３．４６ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（４．７０ｇ、１８．５ｍｍｏｌ）を反応フラスコ内で混合し、得られる混合物を抜き、アルゴンで再充填した（この手順を２回繰り返した）。無水テトラヒドロフラン（６０ｍＬ）を注射器で添加し、槽をゴムセプタムで密封し、６０Ｃに予熱した加熱浴に沈めた。１６時間撹拌した後、反応混合物を周囲温度まで冷却し、シクロヘキサン（１００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）を用いてセライトの短いプラグを通して濾過した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル１０：１）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２，４−ジフルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（６）を黄色固体として得た。収率：４．７８ｇ（９５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．６１（ｓ，１ Ｈ）；８．４１（ｄ，Ｊ＝１．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．３４（ｓ，１ Ｈ）；８．０５（ｄｄ，Ｊ＝８．３および６．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；６．９６−６．８１（ｍ，１ Ｈ）；１．６１（ｓ，９ Ｈ）；１．３６（ｄ，Ｊ＝２．２ Ｈｚ，２４ Ｈ）．

【0291】

ｔｅｒｔ−ブチル３−（２，４−ジフルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（６、４．７８ｇ、８．３８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、トリフルオロ酢酸（４０ｍＬ）を室温で添加した。反応混合物を３時間撹拌した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をジクロロメタン（４×５０ｍＬ）と共蒸発させた。得られる３−（２，４−ジフルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸（７）を、さらなる精製なしで次のステップに使用した。収率：４．１０ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．７５（ｓ，１ Ｈ）；８．５０（ｔ，Ｊ＝１．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．４６（ｓ，１ Ｈ）；８．０９（ｄｄ，Ｊ＝８．４および６．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；６．９５−６．８３（ｍ，１ Ｈ）；１．３７（ｄ，Ｊ＝１．８ Ｈｚ，２４ Ｈ）．

【0292】

３−（２，４−ジフルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸（７、４．１０ｇ、８．００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５０ｍＬ）中に溶解し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１．２９ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．１４ｇ、１１．２ｍｍｏｌ）を室温で添加した。６時間撹拌した後、反応混合物を１０％二硫酸カリウム水溶液（２×１００ｍＬ）およびブライン（３０ｍＬ）で洗浄した。有機部分を無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させた。揮発性物質を減圧下で蒸発させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（２，４−ジフルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（８）を黄色固体として得た。収率：４．８４ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．８１−８．７５（ｍ，１ Ｈ）；８．５７−８．５１（ｍ，１ Ｈ）；８．４７（ｓ，１ Ｈ）；８．０８（ｄｄ，Ｊ＝８．５および６．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；６．８９（ｄｄ，Ｊ＝９．９および９．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．９２（ｂｓ，４ Ｈ）；１．３６（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４４８．４（Ｍ−２ピナコール＋Ｈ）＋。

【0293】

[実施例２１：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３，５−ビス（（２−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸塩]

【化130】

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３，５−ビス（アミノメチル）安息香酸二塩酸塩（２、１．８８ｇ、７．４３ｍｍｏｌ）を水（２０ｍＬ）中に溶解した。その後、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０．４ｍＬ、５９．５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）、および２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（１、５．４０ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を添加した。

【0294】

混合物を室温で一晩撹拌し、次いで１Ｍ塩酸水溶液（２００ｍＬ）によって酸性化した。溶媒をトルエンで３回共蒸発させた。残渣をジクロロメタン／トルエン混合物（１：１、１００ｍＬ）中に溶解し、ピナコール（１．２４ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）で処理した。混合物をトルエンから３回蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（３×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、生成物は、沈殿し始めた。次いで、シクロヘキサン（１９０ｍＬ）を添加し、沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、３，５−ビス（（３−フルオロ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド）メチル）安息香酸（３）を白色粉末として得た。収率：４．３８ｇ（８７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．９５（ｂｓ，１ Ｈ）；９．０５−８．９７（ｍ，２ Ｈ）；７．８２（ｓ，２ Ｈ）；７．６４（ｔ，Ｊ＝７．３ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．５６−７．４９（ｍ，３ Ｈ）；７．４４−７．３７（ｍ，２ Ｈ）；４．５５−４．４７（ｍ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：６７７．５（Ｍ＋Ｈ）＋、５９５．３（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）＋、５１３．３（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）＋。

【0295】

上記の酸（３、４．３７ｇ、６．４８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド混合物（４：１、１００ｍＬ）中に溶解し、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ、０．８９ｇ、７．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０℃に冷却し、続いてＮ，Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１．６０ｇ、７．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を０°Ｃで３０分間、および室温で一晩撹拌した。不溶性副生成物を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水で洗浄した（２×１５０ｍＬ）。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄した。白色粉末をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中に溶解した。ピナコール（０．１９ｇ、１．６０ｍｍｏｌ）および硫酸マグネシウム（１０ｇ）を溶液に添加し、得られる混合物を室温で一晩撹拌した。懸濁液をセライトパッドを通して濾過し、濾液を蒸発させた。残渣をジクロロメタン（１０ｍＬ）中に溶解し、溶液にシクロヘキサンを添加した（１７０ｍＬ）。沈殿物を濾過によって収集し、シクロヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させて、表題化合物（４）を白色粉末として得た。収率：３．９９ｇ（８０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．０７（ｔ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．９６（ｓ，２ Ｈ）；７．７５（ｓ，１ Ｈ）；７．６５（ｔ，Ｊ＝７．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．４１（ｄ，Ｊ＝１０．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；４．６１−４．４８（ｍ，４ Ｈ）；２．８９（ｓ，４ Ｈ）；１．３１（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７７４．６（Ｍ＋Ｈ）＋、６９２．４（Ｍ＋Ｈ−ピナコール）＋、６１０．３（Ｍ＋Ｈ−２×ピナコール）＋。

【0296】

[実施例２２：（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボローン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ベンゾイル）グリシン]

【化131】

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１，３−ジブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゼン（１、１３．１ｇ、４３．１ｍｍｏｌ）を、ジメチルスルホキシド／水の混合物（１０：１、７０ｍＬ）中硫酸銅（ＩＩ）五水和物（５４１ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（９．２４ｇ、２１６ｍｍｏｌ）の混合物に添加し、反応フラスコを窒素充填し、最後にセプタムを通して１，２−エタンジチオール（６．００ｍＬ、９０．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１１０℃まで一晩加熱した。次いで、混合物を１Ｍ塩酸水溶液を用いてｐＨ＝２に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン）によって精製して、３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゼンチオール（２）を白色油として得た。
収率：５．７６ｇ（５２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．６１（ｓ，１ Ｈ）；７．５６（ｓ，１ Ｈ）；７．４６（ｓ，１ Ｈ）；３．６６（ｓ，１ Ｈ）．

【0297】

３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゼンチオール（２、５．７６ｇ、２２．４ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−５−ヨード安息香酸メチル（３、５．０９ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２．９５ｇ、２４．８ｍｍｏｌ）、およびヨウ化銅（Ｉ）（４１０ｍｇ、２．４９ｍｍｏｌ）を乾燥ジメトキシエタン（４４ｍＬ）中に溶解した。反応フラスコを８０℃まで４８時間加熱した。この時間後、混合物を酢酸エチルで希釈し、セライトを通して濾過し、次いで溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル１：０〜２０：１）によって精製して、３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）チオ）安息香酸メチル（４）を黄色油として得た。収率：６．６４ｇ（６３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．８２（ｍ，１ Ｈ）；７．６８（ｍ，３ Ｈ）；７．５２（ｍ，１ Ｈ）；２．５４（ｓ，３ Ｈ）．

【0298】

３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）チオ）安息香酸メチル（４、６．６４ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）およびオキソン（８．２０ｇ、３５．３ｍｍｏｌ）をメタノール（３０ｍＬ）中に懸濁し、水（１０ｍＬ）を添加した。反応物を室温で一晩撹拌した。次いで、酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（１Ｌ）、次いでブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機相を減圧下で蒸発させ、残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル９：１〜３：１）によってクロマトグラフィにかけて、３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸メチル（５）を白色固体として得た。収率：５．４６ｇ（７７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５３（ｍ，１ Ｈ）；８．４３（ｍ，１ Ｈ）；８．２７（ｍ，２ Ｈ）；８．１５（ｍ，１ Ｈ）；８．００（ｍ，１ Ｈ）；４．００（ｓ，３ Ｈ）．

【0299】

３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸メチル（５、５．４６ｇ １０．９ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム一水和物（１．３３ｇ、３１．７ｍｍｏｌ）をメタノール／水／テトラヒドロフラン（４：２：５、３５ｍＬ）の混合物中に溶解し、反応混合物を室温で一晩撹拌した。この時間後、混合物を１Ｍ塩酸水溶液を用いてｐＨ２に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。全ての揮発性物質の蒸発後、３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸（６）を白色固体として得た。収率：５．１０ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６ δＨ）：１３．９１（ｂｓ，１ Ｈ）；８．６８（ｓ，２ Ｈ）；８．５０（ｓ，１ Ｈ）；８．４５（ｓ，１ Ｈ）；８．４１（ｓ，１ Ｈ）；８．３２（ｓ，１ Ｈ）．

【0300】

乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１３０ｍＬ）中の１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（Ｖ）（ＨＡＴＵ、４．４０ｇ、１１．６ｍｍｏｌ）と混合した３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸（６、５．１０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を３０分間撹拌し、次いでトリエチルアミン（７．５ｍＬ、５２．３ｍｍｏｌ）を添加し、グリシンｔｅｒｔ−ブチルエステル塩酸塩（３．５１ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）を添加し、一晩撹拌した。反応終了後、水を添加し、反応混合物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出し、全ての揮発性物質を減圧下で蒸発させた後、残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ；溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル３：１）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）グリシネート（７）を白色固体として得た。
収率：６．３０ｇ（９９％）。ＬＣ−ＭＳ：６０２．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0301】

１００ｍＬ反応フラスコを酢酸カリウム（５．１３ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）で充填し、塩を真空下、１１０℃で１時間乾燥させた。室温まで冷却した後、反応フラスコを窒素で再充填し、ｔｅｒｔ−ブチル（３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ベンゾイル）グリシネート（７、６．３０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（１２０ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）、２−ジクロヘキシルホスフェニノ−２，４，６−トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ、５００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（５．９ｇ、２３．０３ｍｍｏｌ）で充填した。次いで、反応フラスコを空にし、窒素で再充填し（この手順を２回繰り返した）、無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）を注射器で添加し、フラスコをプラスチック栓で密封し、６０Ｃに加熱した。反応混合物を一晩撹拌し、次いで周囲温度まで冷却し、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）で希釈し、セライトで覆われたシリカゲルの短いプラグを通して濾過し、ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ベンゾイル）グリシネート（８）を黒色ろう状発泡体として得た。収率：６．７０ｇ（９２％）。ＬＣ−ＭＳ：６４０．５（Ｍ＋Ｈ−ｔＢｕ）＋、５５８．４（Ｍ−ピナコール−ＴＢｕ＋Ｈ）＋、４７６．３（Ｍ−２ピナコール−ｔＢｕ＋Ｈ）＋。

【0302】

ｔｅｒｔ−ブチル（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ベンゾイル）グリシネート（８、６．７０ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２５ｍＬ）と混合し、室温で１時間撹拌し、この時間後、全ての揮発性物質を減圧下で蒸発させた。次いで、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）中に溶解し、セライトで覆われたシリカゲルの短いプラグを通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、橙色硬質発泡体を得て、これを破砕した。（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）ベンゾイル）グリシン（９）を淡橙色固体として得た。収率：３．８９ｇ（６３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５７（ｍ，３ Ｈ）；８．４７（ｓ，１ Ｈ）；８．３１（ｓ，１ Ｈ）；９．２６（ｓ，１ Ｈ）；７．２３（ｔ，１ Ｈ）；４．３５（ｄ，２ Ｈ）；１．３８（ｓ，１ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．６５（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：６４０．５（Ｍ＋Ｈ）＋、５５８．４（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、４７６．３（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋。

【0303】

[実施例２３：Ｎ−（５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化132】

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クロロ酢酸（１、１３．０ｇ、１３６ｍｍｏｌ）を予冷却した（０℃）エチレンジアミン（２、９０ｍＬ）に少量添加した。添加が完了した後、反応混合物を室温に一晩（１６時間）にわたって到達させた。エチレンジアミンを真空下で蒸発させ、残渣を一晩撹拌しながらジメチルスルホキシド（１４０ｍＬ）で粉砕した。沈殿物を濾過によって収集し、ジメチルスルホキシド（２×６０ｍＬ）、アセトニトリル（３×１００ｍＬ）、およびジエチルエーテル（３×１００ｍＬ）によって洗浄し、（２−アミノエチル）グリシン（３）を無色固体として得た。収率：１３．２ｇ（８３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，δＨ）：３．２７（ｓ，２ Ｈ）；３．０５−３．０１（ｍ，２ Ｈ）；２．９２−２．８８（ｍ，２ Ｈ）．

【0304】

アセトニトリル（３００ｍＬ）中２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェノール（９．３９ｇ、５１．０ｍｍｏｌ）、５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（４、１０．０ｇ、５１．０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１０．５ｇ、５１．０ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、アセトニトリルで洗浄し、蒸発させた。粗生成物５を、ジクロロメタン／ヘキサン（９：１、５００ｍＬ）の混合物からの結晶化によって精製して、ペンタフルオロフェニル５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（５）を白色固体として得た。収率：６．８０ｇ（３７％）。ＬＣ−ＭＳ：３６３．２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0305】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中ペンタフルオロフェニル５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（５、６．８０ｇ、１８．８ｍｍｏｌ）、（２−アミノエチル）グリシン（３、１．１０ｇ、９．３９ｍｍｏｌ）、およびトリエチレンアミン（１０．５ｍＬ、７５．１ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸エチル（２×５００ｍＬ）および１Ｍ塩酸水溶液（４００ｍＬ）で抽出し、有機層をブライン（３００ｍＬ）で洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物６を、フラッシュクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール／ギ酸１００：２：０．５〜１００：１０：０．５）によって精製し、凍結乾燥させて、Ｎ−（５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（５−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン（６）を白色固体として得た。収率：２．１６ｇ（４９％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール／ギ酸１００：２：０．５）：０．３０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８６（ｂｓ，１ Ｈ）；９．４５−９．１７（ｍ，２ Ｈ）；８．４８−８．１１（ｍ，１ Ｈ）；８．１１−７．８８（ｍ，１ Ｈ）；７．６５（ｄ，Ｊ＝７．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．４３−７．１５（ｍ，２ Ｈ）；４．９９（ｄ，Ｊ＝８．６ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．３６−３．９０（ｍ，２ Ｈ）；３．８０−３．３４（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４７５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0306】

[実施例２４：４−（（３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）ピロリジン−１−イル）−４−オキソブタン酸]

【化133】

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１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（１、１３．５ｇ、５４．９ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（６．３１ｇ、５４．９ｍｍｏｌ）、および１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（１０．５ｇ、５４．９ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２７０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中で周囲温度において４時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸（３×３００ｍＬ）および１Ｍ塩酸水溶液（２００ｍＬ）で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−ヒドロキシ−４（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２）を白色固体として得た。収率：１８．８ｇ（１００％）。ＬＣ−ＭＳ： ３４４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0307】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２４０ｍＬ）および水（６０ｍＬ）中４−（（３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ジアミノピロリジン−１−イル）−４−オキソブタン酸二塩酸塩（３、２．７４ｍｇ、１０．０ｍｍｏｌ）、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ヒドロキシベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２、６．８６ｍｇ、２０．０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１１．０ｍＬ、６０．０ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を蒸発させ、カラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール／ギ酸酸１００：２：０．５〜１００：１０：０．５）によって精製し、凍結乾燥させて、４−（（３Ｓ，４Ｓ）−３，４−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）ピロリジン−１−イル）−４−オキソブタン酸（４）を白色固体として得た。収率：２．５６ｇ（３９％）。Ｒｆ（ＳｉＯ２、ジクロロメタン／メタノール／ギ酸１００：１０：０．５）：０．３。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）１１．７３（ｂｓ，１ Ｈ）；９．６２（ｓ，２ Ｈ）；９．０１（ｄｄ，Ｊ＝１０．４および７．２ Ｈｚ，２ Ｈ）；８．４９（ｓ，２ Ｈ）；８．２４（ｓ，２ Ｈ）；５．２０（ｓ，４ Ｈ）；４．９４−４．５１（ｍ，２ Ｈ）；４．１６−３．９４（ｍ，１ Ｈ）；３．９５−３．８０（ｍ，１ Ｈ）；３．５６−３．４４（ｍ，１ Ｈ）；３．４１−３．３４（ｍ，１ Ｈ）；２．４９−２．４０（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：６５８．７（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0308】

[実施例２５：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（ジフルオロ（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩]

【化134】

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３−ブロモ−５−ヨード安息香酸メチル（１、６．８０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を乾燥テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）中に溶解し、−３０Ｃまで冷却した。テトラヒドロフラン（１６．２ｍＬ、２１．０ｍｍｏｌ）中イソプロピルマグネシウムクロリド−リチウムクロリド錯体の１．３Ｍ溶液を撹拌しながら滴下した。３０分後、３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（２、６．００ｇ、２４．０ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）を用いて添加した。得られる混合物を周囲温度まで温め、１Ｍ塩酸水溶液（４０ｍＬ）を添加することによって１時間後にクエンチした。反応混合物をジエチルエーテル（１５０ｍＬ）に取り込み、水（１５０ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物（３）を乾燥ジクロロメタン（８０ｍＬ）中に溶解し、クロロクロム酸ピリジニウム（６．４２ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加した。１７時間撹拌した後、反応混合物をセライトで覆われたシリカのプラグ（８０ｇ）を通して濾過し、床をジクロロメタン（３×１２０ｍＬ）で洗浄した。黄色がかった溶液を真空下で濃縮して、残渣をメタノール（５０ｍＬ）で１６時間撹拌した。沈殿した固体を濾過によって収集し、空気中で乾燥させて、３−ブロモ−５−（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル）安息香酸メチル（４）を無色固体として得た。収率：６．５２ｇ（７０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．４５（ｔ，Ｊ＝１．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．２９（ｍ，１ Ｈ）；８．１２（ｔ，Ｊ＝１．６ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．０８（ｂｓ，１ Ｈ）；８．０４（ｂｓ，１ Ｈ）；７．９５（ｂｓ，１ Ｈ）；３．９７（ｓ，３ Ｈ）．

【0309】

３−ブロモ−５−（３−ブロモ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾイル）安息香酸メチル（４、６．５０ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）およびＤｅｏｘｏ−Ｆｌｕｏｒ（１３．０ｍＬ）を１００ｍＬ反応槽に充填した。槽をバブラー（シリコン油で充填）によって密封し、窒素でパージし、９０℃（油浴）まで１６時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈した。得られる溶液を１Ｍ炭酸カリウム水溶液（１００ｍＬ）にゆっくり添加し、二相混合物を１時間撹拌して、過剰なフッ素化試薬を分解した。層を分離し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル３０：１〜１５：１）によって精製して、３−ブロモ−５−（（３ブロモ５（トリフルオロメチル）フェニル）ジフルオロメチル）安息香酸メチルを黄色がたった油として得た。収率：６９０２ｍｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．３０（ｓ，１ Ｈ）；８．０８（ｓ，１ Ｈ）；７．８８（ｓ，１ Ｈ）；７．８３（ｓ，１ Ｈ）；７．８１（ｓ，１ Ｈ）；７．７１（ｓ，１ Ｈ）；３．９６（ｓ，３ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．８７（ｓ，３ Ｈ）；−９０．００（ｓ，２ Ｈ）．

【0310】

５００ｍＬ反応槽を酢酸カリウム（６．８３ｇ、６９．７ｍｍｏｌ）で充填し、塩を真空下、１１０℃で１時間乾燥させた。室温まで冷却した後、反応槽を窒素で再充填し、３−ブロモ−５−（（３ブロモ５（トリフルオロメチル）フェニル）ジフルオロメチル）安息香酸塩（５、６．９０ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（６２．０ｍｇ、２７９ｍｏｌ）、２−ジクロヘキシルホスフェニノ−２，４，６−トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ、２６５ｍｇ、５５７ｍｏｌ）、およびビス（ピナコラート）ジボロン（８３８ｍｇ、３０．７ｍｍｏｌ）で充填した。次いで、反応槽を空にし、窒素で再充填した（この手順を２回繰り返した）。無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）を注射器で添加し、槽をプラスチック栓で密封し、６０Ｃに予熱した加熱浴に沈めた。４００ｒｐｍで１６時間撹拌した後、反応混合物を周囲温度まで冷却し、ジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（３×１２０ｍＬ）を用いて、セライトＳで覆われたシリカの短いプラグ（９０ｇ）を通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、３−ジフルオロ（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（６）を茶色がかった発泡体として得た。それをメタノール（５０ｍＬ）および水（１５ｍＬ）中に懸濁し、水酸化リチウム一水和物（２．９４ｇ、７０．０ｍｍｏｌ）を添加し、得られる混合物を室温で１６時間撹拌した。反応混合物を水（１５０ｍＬ）に取り込み、ジクロロメタン（２×３０ｍＬ）およびジエチルエーテル（３０ｍＬ）で洗浄した。水層を濃縮水性塩酸によってｐＨ＝２に酸性化し、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、黄色がかった発泡体を得た。ピナコール（４７２ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）を発泡体に添加し、アセトニトリル（５０ｍＬ）中で一晩放置して撹拌した。沈殿した固体を濾過によって収集し、氷冷アセトニトリル（２×２０ｍＬ）で洗浄し、空気中で乾燥させて、表題の３−（ジフルオロ（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸（７）を無色固体として得た。収率：５．９０ｇ（７７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．６４（ｓ，１ Ｈ）；８．２８（ｓ，１ Ｈ）；８．２２（ｓ，１ Ｈ）；８．１５（ｓ，２ Ｈ）；７．８５（ｓ，１ Ｈ）；１．３８（ｓ，１２ Ｈ）；１．３７（ｓ，１２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５６９．７（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0311】

３−（ジフルオロ（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸（７、５．１１ｇ、９．００ｍｍｏｌ）および炭酸ビス（スクシンイミジル）（３．２２ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）を、窒素下の無水アセトニトリル（４５ｍＬ）およびピリジン（１．００ｍＬ、１２．６ｍｍｏｌ）中に懸濁した。反応混合物をヒートガンで穏やかに加熱して、溶解をもたらした。１６時間撹拌した後、反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）に取り込み、０．５Ｍ炭酸水素カリウム水溶液（２×４０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、オフホワイト色固体を得た。ピナコール（３５４ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアセトニトリル（５０ｍＬ）中で一晩撹拌するために放置した。沈殿した固体を濾過によって収集し、氷冷アセトニトリル（２×２０ｍＬ）で洗浄し、空気中で乾燥させて、表題の２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（ジフルオロ（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸塩（８）を無色固体として得た。収率：５．３６ｇ（９０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．６７（ｓ，１ Ｈ）；８．２９（ｓ，１ Ｈ）；８．２６（ｓ，１ Ｈ）；８．１５（ｓ，１ Ｈ）；８．１０（ｓ，１ Ｈ）；７．８６（ｓ，１ Ｈ）；２．９２（ｓ，４ Ｈ）；１．３６（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：６４６．８（Ｍ−ＨＦ）＋。

【0312】

[実施例２６：（Ｓ）−２，３−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパン酸]

【化135】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）中２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（１、１４．４ｇ、４２．０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−２，３−ジアミノプロパン酸塩酸塩（２、２．８１ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２１．４ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を蒸発させ、カラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール／ギ酸１００：２：０．５〜１００：１０：０．５）によって精製した。所望の生成物を有する分画を蒸発させ、１Ｍ二硫酸カリウム水溶液（４００ｍＬ）で洗浄した。沈殿物を濾過し、アセトニトリおよびと水（２：１）の混合物中に溶解し、凍結乾燥させて、（Ｓ）−２，３−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパン酸（３）を白色固体として得た。収率：４．３２ｇ（３９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．５９（ｂｓ，１ Ｈ）；９．６２（ｄ，Ｊ＝６．１ Ｈｚ，２ Ｈ）；９．０９（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．９８（ｔ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．５０（ｄ，Ｊ＝１４．５ Ｈｚ，２ Ｈ）；８．２４（ｄ，Ｊ＝２１．６ Ｈｚ，２ Ｈ）；５．２０（ｄ，Ｊ＝５．７ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．８７−４．５８（ｍ，１ Ｈ）；４．０２−３．８０（ｍ，１ Ｈ）；３．７９−３．５４（ｍ，１ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５６１．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0313】

[実施例２７：（３−（（３−（ペンタフルオロ−６−スルファニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）スルホニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシン]

【化136】

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無水テトラヒドロフラン（４５０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（３−ブロモ−５−（（３−ブロモ−５−（ペンタフルオロ−６−スルファニル）フェニル）スルホニル）ベンゾイル）グリシネート（１、８．００ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（１３７ｍｇ、０．６１ｍｍｏｌ）、２−ジシクロへキシルホスフィノ−２，４，６−トリイソプロピルビフェニル（ＸＰｈｏｓ、５７７ｍｇ、１．２１ｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（６．７８ｇ、２６．７ｍｍｏｌ）、および酢酸カリウム（５．９５ｇ、６０．７ｍｍｏｌ）の混合物をアルゴン雰囲気で６０℃において２４時間加熱した。混合物を室温まで冷却し、セライトの短いプラグを通して濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／酢酸エチル１０：０〜６：４）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（３−（（３−（ペンタフルオロ−６−スルファニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）スルホニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシネート（２）をオフホワイト色発泡体として得た。収率：６．７０ｇ（７２％）。
^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５３−８．４９（ｍ，２ Ｈ）；８．４９−８．４６（ｍ，１ Ｈ）；８．４３（ｔ，Ｊ＝１．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．３９−８．３６（ｍ，１ Ｈ）；８．３２（ｄｄ，Ｊ＝２．１および０．６ Ｈｚ，１ Ｈ）；６．７６（ｔ，Ｊ＝５．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．１６（ｄ，Ｊ＝５．０ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．５１（ｓ，９ Ｈ）；１．３６（ｓ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７５４．９（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0314】

ジクロロメタン（１００ｍＬ）およびトリフルオロ酢酸（２００ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（３−（（３−（ペンタフルオロ−６−スルファニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）スルホニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシネート（２、６．６８ｇ、８．８７ｍｍｏｌ）の溶液を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を、真空下で乾燥する前にジクロロメタン（２５０ｍＬ）から１０回蒸発させた。（３−（（３−（ペンタフルオロ−６−スルファニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）フェニル）スルホニル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンゾイル）グリシン（３）をオフホワイト色固体として得た。収率：６．１５ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．３３（ｔ，Ｊ＝５．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．６５（ｔ，Ｊ＝１．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．５５（ｔ，Ｊ＝１．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．４７（ｓ，１ Ｈ）；８．４１−８．２９（ｍ，２ Ｈ）；８．２５−８．１６（ｍ，１ Ｈ）；３．９６（ｄ，Ｊ＝５．９ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．４１−１．２４（ｍ，２４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５３４．４（Ｍ−２ｘｐｉｎ＋Ｈ）＋。

【0315】

[実施例２８：Ｎ−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化137】

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１−ブロモピロリジン−２，５−ジオン（ＮＢＳ、３４．０ｇ、１９１ｍｍｏｌ）を濃縮硫酸（４００ｍＬ）中３−トリフルオロメチル−４−メチル安息香酸（１、３９．０ｇ、１９１ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、反応混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を氷水（２Ｌ）に注いだ。得られる沈殿物を濾過し、水（５００ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（４００ｍＬ）中に溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、３−ブロモ−４−メチル−５−トリフルオロメチル安息香酸（２）を白色固体として得た。収率：５３．４ｇ （９８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．７１（ｂｓ，１ Ｈ）；８．３５（ｄ，Ｊ＝０．４ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．１５（ｄ，Ｊ＝０．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．５６（ｓ，３ Ｈ）．

【0316】

濃縮硫酸（２４ｍＬ）をメタノール（５００ｍＬ）中の３−ブロモ−４−メチル−５−トリフルオロメチル安息香酸（２、３５．０ｇ、１２４ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、反応混合物を４時間還流下で、かつ周囲温度で１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で蒸発させ、ジエチルエーテル（２５０ｍＬ）中に溶解し、水（２×１００ｍＬ）、ならびに炭酸カリウムの飽和溶液（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）の混合物で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、３−ブロモ−４−メチル−５−トリフルオロメチル安息香酸メチル（３）を白色固体として得た。収率：３５．３ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．３６（ｄ，Ｊ＝１．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．１３（ｄ，Ｊ＝１．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９０（ｓ，３ Ｈ）；２．５５（ｄ，Ｊ＝１．３ Ｈｚ，３ Ｈ）．

【0317】

水（３００ｍＬ）中１−ブロモピロリジン−２，５−ジオン（ＮＢＳ、３１．７ｇ、１７８ｍｍｏｌ）および３−ブロモ−４−メチル−５−トリフルオロメチル安息香酸メチル（３、３５．３ｇ、１１９ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１００Ｗ電球下、８０℃で６時間撹拌した。反応混合物をジエチルエーテル（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、３−ブロモ−４−ブロモメチル−５−トリフルオロメチル安息香酸メチル（４）を黄色固体として得た。収率：４４．０ｇ（９８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．４７（ｄ，Ｊ＝１．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．３１（ｄ，Ｊ＝１．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．７５（ｓ，２ Ｈ）；３．９８（ｓ，３ Ｈ）．

【0318】

アセトニトリル（０．５Ｌ）中３−ブロモ−４−ブロモメチル−５−トリフルオロメチル安息香酸塩（４、４４．０ｇ、１１７ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（２２．９ｇ、２３４ｍｍｏｌ）の溶液を７５℃で一晩撹拌した。懸濁液を濾紙を通して濾過し、蒸発させた。粗生成物をジクロロメタン中に溶解し、再び濾過した。蒸発により、３−ブロモ−４−（アセトキシメチル）−５−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（５）を白色固体として得た。収率：３７．９ｇ（９１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．４９（ｄ，Ｊ＝１．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．３４（ｄ，Ｊ＝１．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．３７（ｓ，２ Ｈ）；３．９９（ｓ，３ Ｈ）；２．１１（ｓ，３ Ｈ）．

【0319】

乾燥テトラヒドロフラン（５００ｍＬ）中３−ブロモ−４−（アセトキシメチル）−５−トリフルオロメチル安息香酸メチル（５、３７．９ｇ、１０７ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（２９．８ｇ、１１７ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（３１．４ｇ、２９４ｍｍｏｌ）、および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（１．５７ｇ、１．９２ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で１３日間、７５℃で撹拌させた。次いで、反応混合物を周囲温度まで冷却し、濾過し、蒸発させた。粗生成物を、シリカゲルカラム（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル８：１）を通して濾過して、４−（アセトキシメチル）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）安息香酸塩（６）を得た。収率：３１．１ｇ（７２％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン／酢酸エチル８：１）： ０．４０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．６５（ｓ，１ Ｈ）；８．４３（ｓ，１ Ｈ）；５．４８（ｓ，２ Ｈ）；３．９７（ｓ，３ Ｈ）；２．０５（ｓ，３ Ｈ）；１．３６（ｓ，１２ Ｈ）．

【0320】

水（３００ｍＬ）中４−（アセトキシメチル）−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（６、３１．０ｇ、７７．１ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（１５．４ｇ、３８６ｍｍｏｌ）の溶液を、周囲温度で３時間撹拌した。次いで、水（１００ｍＬ）中塩酸（３５ｍＬ）の溶液を添加して、ｐＨを１に低下させた。反応混合物を一晩撹拌した。沈殿物を濾過し、乾燥させて、１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（７）を白色固体として得た。収率：１６．６ｇ（８６％）。
^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．４７（ｂｓ，１ Ｈ）；９．６６（ｓ，１ Ｈ）；８．６２（ｓ，１ Ｈ）；８．２４（ｓ，１ Ｈ）；５．２２（ｓ，２ Ｈ）．

【0321】

アセトニトリル（０．５Ｌ）中ペンタフルオロフェノール（７．４８ｇ、４０．７ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（７、１０．０ｍｇ、４０．７ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、８．３７ｍｇ、４０．７ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を濾過し、蒸発させ、アセトニトリル中に溶解し、再濾過し、蒸発させて、ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（８）を白色固体として得た。収率：１６．７ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．７９（ｓ，１ Ｈ）；８．８６（ｓ，１ Ｈ）；８．４６（ｓ，１ Ｈ）；５．３０（ｓ，２ Ｈ）．

【0322】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．５Ｌ）中ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（８、１６．７ｇ、４０．６ｍｍｏｌ）、（２−アミノエチル）グリシン（９、２．４０ｇ、２０．３ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（２８．４ｍＬ、２０３ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で３日間撹拌した。次いで、反応混合物を蒸発させ、粗生成物１０をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール／ギ酸１００：２：０．５〜１００：１０：０．５）によって精製して、Ｎ−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン（１０）を白色固体として得た。収率：７．７７ｇ（６７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８９（ｂｓ，１ Ｈ）；９．６８−９．４８（ｍ，２ Ｈ）；９．００−８．６７（ｍ，１ Ｈ）；８．５６−７．３６（ｍ，４ Ｈ）；５．２７−５．０３（ｍ，４ Ｈ）；４．３０−３．９５（ｍ，２ Ｈ）；３．７７−３．４８（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５７５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0323】

[実施例２９：（２Ｓ）−３−（２，３−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパンアミド）プロパン酸＝Ｎ−［Ｎ^α，Ｎ^β−ビス−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）−Ｌ−ジアミノプロピオニル］−β−アラニン]

【化137-2】

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アセトニトリル（４００ｍＬ）および水（４００ｍＬ）の混合物中Ｌ−ジアミノプロパン酸塩酸塩、別名（２Ｓ）−２，３−ジアミノプロパン酸塩酸塩（１、１５．０ｇ、１０７ｍｍｏｌ）、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（４６．６ｇ、２１４ｍｍｏｌ）、および重炭酸カリウム（３２．０ｇ、３２０ｍｍｏｌ）の溶液を一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をｐＨ１が達成されるまで硫酸水素カリウムの飽和水溶液で酸性化した。反応混合物を酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、（２Ｓ）−２，３−ビス（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸（２）をオフホワイト色固体として得た。収率：２８．２ｇ（８７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：５．８５（ｂｓ，１ Ｈ）；５．１７（ｂｓ，１ Ｈ）；４．３１（ｂｓ，１ Ｈ）；３．６４−３．４６（ｍ，２ Ｈ）；１．４６（ｓ，１８ Ｈ）．

【0324】

ジクロロメタン（３００ｍＬ）中（２Ｓ）−２，３−ビス（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパン酸（２、２７．９ｇ、９１．７ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル３−アミノプロパノエート（３、１６．７ｇ、９１．７ｍｍｏｌ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、２１．１ｇ、１１０ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ、１５．０ｇ、１１０ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６４．０ｍＬ、３６７ｍｍｏｌ）の溶液を一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル（６００ｍＬ）中に溶解し、１Ｍ塩酸水溶液（４×３００ｍＬ）および重炭酸ナトリウムの飽和水溶液（４×３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。溶媒を減圧下で除去して、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２，３−ビス（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）プロパノエート（４）をオフホワイト色固体として得た。収率：３６．１ｇ（９１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．０１（ｂｓ，１ Ｈ）；５．７５（ｂｓ，１ Ｈ）；５．１４（ｂｓ，１ Ｈ）；４．１５（ｂｓ，１ Ｈ）；３．５７−３．３９（ｍ，４ Ｈ）；２．４３（ｔ，Ｊ＝６．０ Ｈｚ，２ Ｈ）；１．４５（ｓ，２７ Ｈ）．

【0325】

ジクロロメタン（５０ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２，３−ビス（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）プロパンアミド）プロパノエート（４、３６．１ｇ、８３．７ｍｍｏｌ）を９５％トリフルオロ酢酸水溶液（３００ｍＬ）に添加し、溶液を３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をアセトニトリル（３×３００ｍＬ）で共蒸発させ、乾燥ジエチルエーテル（３００ｍＬ）中１Ｍ塩化水素溶液で処理した。沈殿物を濾過し、アセトニトリル（２×６００ｍＬ）で粉砕して、（２Ｓ）−３−（２，３−ジアミノプロパンアミド）プロパン酸二塩酸塩（５）を白色粉末として得た。
収率：２２．２ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，δＨ）：４．３５（ｔ，Ｊ＝５．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．６３−３．４６（ｍ，４ Ｈ）；２．６７（ｔ，Ｊ＝６．６ Ｈｚ，２ Ｈ）．

【0326】

アセトニトリル（１Ｌ）中ペンタフルオロフェノール（３５．１ｇ、１９１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（１、４０．８ｇ、１６６ｍｍｏｌ、実施例２８に記載のような調製物）、およびＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、３９．３ｇ、１９１ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で２４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、蒸発させ、アセトニトリル中に溶解し、再濾過し、蒸発させた。粗生成物をジクロロメタン（１Ｌ）中に沈殿させ、濾過して、ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロロ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（６）を白色固体として得た。収率：５２．８ｇ（７７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．７９（ｓ，１ Ｈ）；８．８６（ｓ，１ Ｈ）；８．４６（ｓ，１ Ｈ）；５．３０（ｓ，２ Ｈ）．

【0327】

水（５０ｍＬ）中（２Ｓ）−３−（２，３−ジアミノプロパンアミド）プロパン酸二塩酸塩（５、６．４１ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（３３．８ｍｍｏｌ、２４３ｍｍｏｌ）の溶液に、１，４−ジオキサン（１００ｍＬ）中ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドベンゾ［ｃ］［１，２オキサボロール−６−カルボキシレート（６、２０．０ｇ、４８．６ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、溶液を一晩撹拌した。反応混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）と１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液（１５００ｍＬ）との間で分割した。有機層を、１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液（１×３００ｍＬ）で洗浄し、溶媒を減圧下で除去した。残渣をジエチルエーテル（２×１５０ｍＬ）で粉砕し、濾過した。固体を７０％水性アセトニトリル（６００ｍＬ）中に溶解し、凍結乾燥させて、３−（２（Ｓ），３−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパンアミド）プロパン酸（７）を白色粉末として得た。収率：１２．１ｇ（８０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，δＨ）：８．５１（ｓ，１ Ｈ）；８．４７（ｓ，１ Ｈ）；８．２９（ｓ，１ Ｈ）；８．２７（ｓ，１ Ｈ）；５．２８（ｓ，４ Ｈ）；５．１５（ｔ，Ｊ＝６．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．１５−３．９９（ｍ，２ Ｈ）；３．６１（ｔ，Ｊ＝６．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．６７（ｔ，Ｊ＝６．３ Ｈｚ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：６３２．０（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0328】

[実施例３０：（Ｓ）−３−（２，３−ビス（４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパンアミド）プロパン酸]

【化138】

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４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（１、８．５６ｇ、４３．７ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（５．０３ｇ、４３．７ｍｍｏｌ）、および１−エチル−３−（３’−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（８．３８ｇ、４３．７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中で、周囲温度において３．５時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸（３×１５０ｍＬ）および１Ｍ塩酸水溶液（１５０ｍＬ）で抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２）を白色固体として得た。収量：１０．２ｇ（７９％）。ＬＣ−ＭＳ：２９４．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0329】

２−クロロトリチルクロリド樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（３、１０．５ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（８０ｍＬ）中に３０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（５０ｍＬ）中３−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、３．２６ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．９３ｍＬ、３９．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（４：１、２×５分、２×８０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３．６５ｍＬ、２０．９ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×８０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×８０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×８０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×８０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×８０ｍＬ）、２−プロパノール（２×８０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×８０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中（Ｓ）−２，３−ビス（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、８．６１ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）、５−クロロ−１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル）−１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール３−オキシドテトラフルオロボレート（ＴＣＴＵ、５．５８ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．９２ｍＬ、２８．２ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を２時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×８０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×８０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×８０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×３０分、２×８０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×８０ｍＬ）、２−プロパノール（２×８０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×８０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（８０ｍＬ）中２，５−ジオキソピロリジン−１−イル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２、９．１４ｇ、３１．４ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（９．８４ｍＬ、５６．５ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を１日振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４×８０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０×８０ｍＬ）で洗浄した。生成物を２，２，２−トリフルオロエタノール（８０ｍＬ）で１６時間処理することによって樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（４×８０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させ、粗生成物（４）を酢酸エチル（３００ｍＬ）で洗浄し、濾過し、真空下で乾燥させた。純生成物（４）をオフホワイト色固体として得た。収率：４．１０ｇ（７４％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．５７（ｂｓ，２ Ｈ）；８．７８−８．４９（ｍ，２ Ｈ）；８．１９−７．９３（ｍ，３ Ｈ）；７．７１（ｄｄ，Ｊ＝３０．８および１０．８ Ｈｚ，２ Ｈ）；５．１２（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．７４−４．５５（ｍ，１ Ｈ）；３．７２−３．６１（ｍ，２ Ｈ）；３．２９−３．１５（ｍ，２ Ｈ）；２．３６（ｔ，Ｊ＝６．９ Ｈｚ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５３２．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0330】

[実施例３１：４−（（３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ビス（７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）ピロリジン−１−イル）−４−オキソブタン酸]

【化139】

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Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）中４−（（３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ジアミノピロリジン−１−イル）−４−オキソブタン酸二塩酸塩（２、２．４６ｇ、１２．２ｍｍｏｌ）、ペンタフルオロフェニル７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（１、８．８６ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１７．０ｍＬ、１２２ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸エチルから沈殿させて、６．４０ｇの粗化合物３（６．４ｇ）を得て、これをＨＰＬＣ（ＹＭＣ、Ｃ１８、５ｍ、２５０×５０ｍｍ、アセトニトリル／水、３０分間２：９８、１８０分間２：９８〜３０：０）によって精製し、凍結乾燥させて、表題化合物４−（３Ｒ，４Ｒ）−３，４−ビス（７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）ピロリジン−１−イル）−４−オキソブタン酸（３）を白色固体として得た。収率：１．２３ｇ（１８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）９．３５（ｂｓ，２ Ｈ）；８．６８（ｔ，Ｊ＝８．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；７．８１−７．６２（ｍ，２ Ｈ）；７．３０（ｄ，Ｊ＝７．３ Ｈｚ，２ Ｈ）；５．０２（ｓ，４ Ｈ）；４．６６−４．４５（ｍ，２ Ｈ）；３．９４（ｄｄ，Ｊ＝１０．６および６．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．７７（ｄｄ，Ｊ＝１２．０および６．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．５４−３．４１（ｍ，１ Ｈ）；３．２７−３．１８（ｍ，１ Ｈ）；２．４７−２．３４（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５５８．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0331】

[実施例３２：Ｎ−（７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化140】

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ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．３８Ｍ、１０７ｍＬ、２５５ｍｍｏｌ）を、−６０℃未満の内部温度を維持するような速度で（約２０分）、無水テトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）中２，２，６，６−テトラメチルピぺリジン（４３．５ｍＬ、２５７ｍｍｏｌ）の撹拌した窒素パージ溶液にカニューレ挿入した。混合物を６０分間撹拌した（内部温度は−４０Ｃまで上昇）。混合物を−７８℃まで再冷却し、乾燥テトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中２−フルオロ−４−メチルベンゾニトリル（１、３０．０ｇ、２２２ｍｍｏｌ）の溶液を、−７０℃未満の内部温度を保持するような速度で（約４０分）、激しく撹拌した混合物に蠕動ポンプを介して滴下した。混合物を−５０℃まで温め、この温度で４５分間保持した。混合物を−７８℃まで再冷却し、乾燥テトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）中ヨウ素（６２．０ｇ、２４４ｍｍｏｌ）の溶液を、−７０Ｃ未満の内部温度を保持しながら、反応混合物に（蠕動ポンプを使用して）滴下した。残渣のヨウ素を乾燥テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）で洗浄し、混合物を−７０℃で１時間撹拌した。撹拌混合物を室温まで一晩温め、次いで水（７５０ｍＬ）中チオ硫酸ナトリウムの撹拌溶液（２０ｇ）に注ぐことによってクエンチした。反応混合物を１時間撹拌し、次いで酢酸エチル（３×３００ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル１０：１）によって精製し、次いでメタノールから再結晶化して、２−フルオロ−３−ヨード−４−メチルベンゾニトリル（２）を無色結晶固体として得た。収率：２９．６ｇ（５１％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン／酢酸エチル１０：１）：０．３５。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．４８（ｄｄ，Ｊ＝７．９および６．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．１７−７．１２（ｍ，１ Ｈ），２．５６（ｓ，３ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−８２．３４（ｓ）．

【0332】

７５％硫酸（６５ｍＬ）中２−フルオロ−３−ヨード−４−メチルベンゾニトリル（２、５２．７ｇ、２０２ｍｍｏｌ）のスラリーを１５０℃で３時間撹拌した。周囲温度まで冷却した後、混合物を氷／水混合物（５００ｇ）上に注いだ。沈殿したベージュ色固体を濾過し、大量の水で洗浄し、乾燥させて、２−フルオロ−３−ヨード−４−メチル安息香酸（３）をベージュ色固体として得た。収率：５１．２ｇ（９１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．３０（ｓ，１ Ｈ）；７．７５（ｔ，Ｊ＝７．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．２７（ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；２．４７（ｓ，３ Ｈ）．

【0333】

塩化アセチル（２３．０ｍＬ、３２１ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（３５０ｍＬ）中２−フルオロ−３−ヨード−４−メチル安息香酸（３、９０．０ｇ、３２１ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に０℃で滴下した。混合物を一晩還流させた。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル（１３００ｍＬ）に取り込んだ。重炭酸カリウムの飽和水溶液（２×１０００ｍＬ）およびブライン（１０００ｍＬ）で洗浄した後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空下で蒸発させた。残渣をカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル３０：１〜１５：１）によって精製して、２−フルオロ−３−ヨード−４−メチル安息香酸メチル（４）を無色固体として得た。収率：６７．６ｇ（７２％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン／酢酸エチル１５：１）： ０．４０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．８０（ｔ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．１０（ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９３（ｓ，３ Ｈ）；２．５２（ｓ，３ Ｈ）．

【0334】

無水ジメチルスルホキシド（５００ｍＬ）中ジクロロメタン（１．９４ｇ、２．３８ｍｍｏｌ）を有する、２−フルオロ−３−ヨード−４−メチル安息香酸塩（４、３５．０ｇ、１１９ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（５、３３．３ｇ、１３１ｍｍｏｌ）、無水酢酸カリウム（３５．０ｇ、３５７ｍｍｏｌ）、および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）錯体を、アルゴン雰囲気下で週末にわたって１１０℃において撹拌した。反応混合物を周囲温度まで冷却し、溶媒を真空下で蒸発させ、粗生成物６を酢酸エチル（４×５００ｍＬ）および水（１．０Ｌ）で抽出した。有機層を組み合わせ、セライトパッドを通して濾過し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）によって精製して、２−フルオロ−４−メチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（６）を無色固体として得た。収率：２９．４ｇ（８４％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．３０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．８４（ｔ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．００（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９０（ｓ，３ Ｈ）；２．４７（ｓ，３ Ｈ）；１．３９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0335】

ベンゾトリフルオリド（３００ｍＬ）中２−フルオロ−４−メチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（６、２７．５ｇ、９３．５ｍｍｏｌ）、１−ブロモピロリジン−２，５−ジオン（ＮＢＳ、１８．３ｇ、１０３ｍｍｏｌ）、および２，２−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）（ＡＩＢＮ、０．７７ｇ、４．６８ｍｍｏｌ）を８５℃で１６時間撹拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、残渣をジエチルエーテル（２×１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を水（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮して、４−（ブロモメチル）−２−フルオロ−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（７）を黄色固体として得た。収率：３３．５ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．９３（ｔ，Ｊ＝７．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．２１（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．７１（ｓ，２ Ｈ）；３．９１（ｓ，３ Ｈ）；１．４２（ｓ，１２ Ｈ）．

【0336】

アセトニトリル（１Ｌ）中４−（ブロモメチル）−２−フルオロ−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（７、３３．５ｇ、８９．８ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（１７．６ｇ、１８０ｍｍｏｌ）の溶液を７５℃で一晩撹拌した。懸濁液を脱脂綿を通して濾過し、蒸発させた。粗生成物をジクロロメタン中に溶解し、再び濾過した。溶媒を蒸発させて、４−（アセトキシメチル）−２−フルオロ−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（８）をベージュ色固体として得た。収率：３０．０ｇ（９５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：７．９６（ｔ，Ｊ＝７．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．２４（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．２５（ｓ，２ Ｈ）；３．９２（ｓ，３ Ｈ）；２．１１（ｓ，３ Ｈ）；１．３９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0337】

水（２５０ｍＬ）中メチル４−（アセトキシメチル）−２−フルオロ−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（８、３０．０ｇ、８５．２ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（１７．０ｇ、４２６ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で３時間撹拌した。その後、水（５０ｍＬ）中塩酸（３５％ｗ／ｗ、４５ｍＬ）の水溶液を添加して、ｐＨを１に低下させた。反応混合物を１６時間撹拌した。得られる沈殿物を濾過し、凍結乾燥させて、７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（９）をオフホワイト色固体として得た。収率：９．７６ｇ（５８％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．１７（ｂｓ，１ Ｈ）；９．３８（ｂｓ，１ Ｈ）；８．２９（ｄ，Ｊ＝７．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．３６（ｄ，Ｊ＝１１．２ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．０２（ｓ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：１９７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0338】

アセトニトリル（３００ｍＬ）およびジクロロメタン（２００ｍＬ）中２，３，４，５，６−ペンタフルオロフェノール（９．６１ｇ、５２．２ｍｍｏｌ）、７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（９、１０．２ｇ、５２．２ｍｍｏｌ）の溶液、およびＮ，Ｎ’−ジクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、１０．８ｇ、５２．２ｍｍｏｌ）を周囲温度で週末にわたって撹拌した。反応混合物を濾過し、真空下で蒸発させた。残渣をアセトニトリル中に溶解し、濾過し、再び真空下で蒸発させて、ペンタフルオロフェニル７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（１０）をベージュ色固体として得た。収率：１８．８ｇ（１００％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．５５（ｂｓ，１ Ｈ）；８．３２−８．２０（ｍ，１ Ｈ）；７．５１（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．１３（ｓ，２ Ｈ）．

【0339】

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）中ペンタフルオロフェニル７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（１０、９．４６ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）、（２−アミノエチル）グリシン（１１、１．５４ｇ、１３．１ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１４．５ｍＬ、１０５ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩（１６時間）撹拌した。反応混合物を蒸発させ、ＴＬＣを実施するためにそれをジクロロメタン中で溶解しようと試みた。粗生成物は、ジクロロメタン、酢酸エチル、およびアセトニトリルに不溶性であることが発見された。したがって、酢酸エチル（０．５Ｌ）から沈殿させ、固体を遠心分離によって収集した。第１の沈殿物（Ａ）を０．５Ｍ塩酸溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄し、第２の沈殿物（Ｂ）を得て、これを濾過し、保持した。濾液を凍結乾燥させて、塩で汚染された生成物１２を得た。塩をテトラヒドロフラン中の溶解および濾過によって除去した。残りの溶液を真空下で蒸発させて、生成物１２の第１の群を得た。沈殿物（Ｂ）をアセトニトリルおよび水（３：１）中に溶解し、濾過し、残りの溶液を凍結乾燥させた。得られる固体をテトラヒドロフラン中に溶解し、沈殿塩を濾過し、濾液を真空下で蒸発させて、Ｎ−（７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（７−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン（１２）の第２の部分をベージュ色固体として得た。収率：２．０９ｇ（３４％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．４１−９．３３（ｍ，２ Ｈ）；８．４２−８．１８（ｍ，１ Ｈ）；７．８１−７．６４（ｍ，１ Ｈ）；７．４３−７．１１（ｍ，３ Ｈ）；５．０７−４．９７（ｍ，４ Ｈ）；４．２２（ｓ，１ Ｈ）；３．９８（ｓ，１ Ｈ）；３．６８（ｔ，Ｊ＝６．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．６０−３．４０（ｍ，３ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：４７５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0340】

[実施例３３：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル ２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセテート]

【化141】

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ｔｅｒｔ−ブチル２−（（オキソビス（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセテート（１、２．０５ｇ、４．３８ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（２．７８ｇ、１１．０ｍｍｏｌ）、（１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（Ｉ）二量体（８７．０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、および４，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２−ジピリジル（ｄｔｂｐｙ、８２．０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を、アルゴン下で脱気テトラヒドロフラン（１２ｍＬ）中に溶解した。得られる混合物を６０℃まで温め、この温度で一晩加熱した。混合物を蒸発乾固させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／酢酸エチル１０：０〜４：１）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセテート（２）をオフホワイト色発泡体として得た。収率：２．９２ｇ（９３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５９（ｓ，２ Ｈ）；８．４２（ｓ，２ Ｈ）；８．２１（ｓ，２ Ｈ）；３．７６（ｓ，２ Ｈ）；１．５１（ｓ，９ Ｈ）；１．３６（ｓ，１２ Ｈ）；１．３５（ｓ，１２ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．５５（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：５５６．６（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋、６３８．８（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、７２１．０（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0341】

トリフルオロ酢酸（２４ｍＬ）をジクロロメタン（８ｍＬ）中ｔｅｒｔ−ブチル２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセテート（２、２．９１ｇ、４．０５ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を真空下で蒸発乾固させ、残渣をトルエン（３×２０ｍＬ）およびジクロロメタン（３×２０ｍＬ）から蒸発させた。残渣をジクロロメタン（２００ｍＬ）と０．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）との間で分割した。分離した水相をジクロロメタン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、１Ｍ塩酸（２００ｍＬ）で酸性化し、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた酢酸エチル抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で蒸発させて、２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）酢酸（３）をオフホワイト色発泡体として得た。収率：２．３０ｇ（８６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５５（ｓ，２ Ｈ）；８．３３（ｓ，２ Ｈ）；８．２９（ｓ，２ Ｈ）；３．８５（ｓ，２ Ｈ）；１．３９（ｓ，２４ Ｈ）． ^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．６９（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：５００．５（Ｍ−２×ピナコール＋Ｈ）＋、５８２．６（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、６６４．８（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0342】

乾燥アセトニトリル（１６．２ｍＬ）を２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）酢酸（３、２．１５ｇ、３．２４ｍｍｏｌ）および炭酸Ｎ，Ｎ−ジスクシンイミジル（ＤＳＣ、１．２５ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）にアルゴン下で添加した。ピリジン（３９２ｍＬ、４．８６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を超音波処理して、微細懸濁液を形成した。得られる懸濁液を４時間撹拌して、透明な溶液を得た。追加の量の炭酸Ｎ，Ｎ−ジスクシン意味ジル（ＤＳＣ、４１５ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）およびピリジン（１３１ｍＬ、１．６２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。ＬＣ／ＭＳ分析は、活性化エステルへの完全な変換を示した。混合物を蒸発乾固させて、残渣を、酢酸エチル（２００ｍＬ）と０．１Ｍ塩酸水溶液（１００ｍＬ）との間で分割した。相を分離し、有機相を０．１Ｍ塩酸水溶液（２×５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣をジクロロメタン（４０ｍＬ）中に溶解し、続いてピナコール（３８３ｍｇ、３．２４ｍｍｏｌ）を添加した。溶液を蒸発させ、残渣をジクロロメタン（３×４０ｍＬ）から蒸発させた。得られる発泡体をシクロヘキサン（２×５０ｍＬ）で洗浄し、ジクロロメタン（４０ｍＬ）中に再溶解し、蒸発させ、真空下で乾燥させて、表題化合物（４）をオフホワイト色発泡体として得た。収率：１．８２ｇ（７４％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５７（ｓ，２ Ｈ）；８．３７（ｓ，２ Ｈ）；８．２４（ｓ，２ Ｈ）；４．２０（ｓ，２ Ｈ）；２．８３（ｓ，４ Ｈ）；１．３６（ｓ，２４ Ｈ）． ^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．６６（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：７６１．９（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0343】

[実施例３４：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）メチル）スルホニル）安息香酸塩]

【化142】

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３−ヨード安息香酸メチル（２、１０．５ｇ、４０．０ｍｍｏｌ）、無水炭酸カリウム（１１．０ｇ、８０．０ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（１．５２ｇ、８．００ｍｍｏｌ）、および３−トリフルオロメチルベンゼンチオール（１、８．２２ｍＬ、６０．０ｍｍｏｌ）を、乾燥１，２−ジメトキシエタン（１００ｍＬ）中に懸濁させ、得られる懸濁液を８０°Ｃで４８時間撹拌した。周囲温度まで冷却した後、反応混合物をシクロヘキサン（３００ｍＬ）で希釈し、セライトで覆われたシリカゲルのパッド（１２５ｇ）を通して濾過し（酢酸エチル／シクロヘキサン１：１０、３×２００ｍＬで洗浄）、真空下で蒸発させた。残渣を酢酸（１２０ｍＬ）中に溶解し、３０％過酸化水素水溶液（１６．０ｍＬ、１５６ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した（発熱）。８０℃（油浴）で１６時間撹拌した後、反応混合物を真空下で蒸発させ、酢酸エチル（４００ｍＬ）に取り込み、水（４００ｍＬ）およびブライン（４００ｍＬ）で洗浄した。無水硫酸ナトリウムでの有機層の乾燥、濾過、および真空下での蒸発により、メチルエステル４を黄色油として得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ３００、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル４：１）に供して、３−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸メチル（４）を無色油として得た。収率：５．４０ｇ（３９％）。ＬＣ−ＭＳ：３４６．０（Ｍ＋Ｈ）＋．

【0344】

３−（（３−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸メチル（４、５．４０ｇ、１５．７ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（９．９７ｇ、３９．０ｍｍｏｌ）、（１，５−シクロオクタジエン）（メトキシ）イリジウム（Ｉ）二量体（３１０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、および４，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−２，２−ジピリジル（ｄｔｂｐｙ、２９５ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）を、窒素下で乾燥、脱気テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中に溶解した。反応混合物を５０℃（油浴）で１６時間撹拌した。周囲温度まで冷却した後、氷冷水（３０ｍＬ）をゆっくり添加して、ピナコールボランを分解した（水素ガス発生）。３０分後、水酸化リチウム一水和物（６．５９ｇ、１５７ｍｍｏｌ）を添加し、得られる混合物を周囲温度で３時間撹拌した後、水（３００ｍＬ）に取り込み、ジクロロメタン（３×６０ｍＬ）で抽出した。ジクロロメタン抽出物を廃棄し、水層を濃縮塩酸によってｐＨ２に酸性化した。水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出し、廃棄した。有機層をブライン（３×５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。得られる黄色がかった発泡体をピナコール（１１８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）で処理し、温かいアセトニトリル（２０ｍＬ）中に溶解した。溶液を冷凍庫内で一晩結晶化するために放置した。沈殿した生成物を濾過によって収集し、冷却したアセトニトリルで洗浄し、頂部の空気で乾燥させて、３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸（５）を無色固体として得た。収率：５．９０ｇ（６５％）。ＬＣ−ＭＳ：５８２．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0345】

３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸（５、５．９０ｇ、１０．１ｍｍｏｌ）および炭酸ビス（スクシンイミジル）（３．６３ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を、窒素下の無水アセトニトリル（４５ｍＬ）およびピリジン（１．１４ｍＬ、１４．２ｍｍｏｌ）中に懸濁した。反応混合物を加熱して、溶解をもたらした。１６時間撹拌した後、反応混合物を真空下で濃縮し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）に取り込み、ブライン（３×２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、オフホワイト色固体を得た。ピナコール（４７３ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアセトニトリル（３０ｍＬ）中で１時間撹拌するために放置した。アセトニトリルを真空下で蒸発させた。得られる白色発泡体をヘキサン（３０ｍＬ）中に溶解し、溶液を周囲温度で一晩結晶化するために放置して、２，５−ジオキソピロリジン−１−イル３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−トリフルオロメチル）フェニル）スルホニル）安息香酸塩（６）を白色固体として得た。収率：６．５０ｇ（９４％）。
^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．７６−８．７２（ｍ，２ Ｈ）；８．６７（ｓ，１ Ｈ）；８．５５（ｓ，１ Ｈ）；８．３２（ｓ，１ Ｈ）；８．２７（ｓ，１ Ｈ）；２．９２（ｓ，４ Ｈ）；１．３７（ｓ，１２ Ｈ）と重複している１．３７（ｓ，１２ Ｈ）．
^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：６２．６４（ｓ，３ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：６８０．６（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0346】

[実施例３５：Ｎ−（１−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（１−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化143】

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４−メチル−２−（トリフルオロメチル）安息香酸（１、２５．０ｇ、１２３ｍｍｏｌ）を硫酸（１８３ｍＬ）中に溶解し、続いてＮ−ヨードスクシンイミド（３３．１ｇ、１４７ｍｍｏｌ）を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌し、次いで氷上に注いだ。氷が完全に溶けたとき、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で抽出した。有機層を、５％チオ硫酸ナトリウム水溶液（２×２５０ｍＬ）および水（１×２５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて、５−ヨード−４−メチル−２−（トリフルオロメチル）安息香酸（２）をベージュ色粉末として得た。収率：３７．７ｇ（９３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．６８（ｂｓ，１ Ｈ）；８．２２（ｓ，１ Ｈ）；７．７６（ｓ，１ Ｈ）；２．４７（ｓ，３ Ｈ）．

【0347】

５−ヨード−４−メチル−２−（トリフルオロメチル）安息香酸（２、２２．２ｇ、６７．２ｍｍｏｌ）、オルトギ酸トリメチル（１４．７ｍＬ、１３５ｍｍｏｌ）、およびメタンスルホン酸（２．８ｍＬ）の混合物を、窒素雰囲気下で８０℃において一晩還流させた。溶媒を蒸発させた。残渣を５％炭酸ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）中に溶解し、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。組み合わせた有機層を水（１×３００ｍＬ）およびブライン（１×２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣を高速フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）によって精製して、５−ヨード−４−メチル−２−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（３）を白色結晶として得た。収率：３５．９ｇ（９１％）。ＲＦ（シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．５０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．２６（ｓ，１ Ｈ）；７．５７（ｓ，１ Ｈ）；３．９３（ｓ，３ Ｈ）；２．５３（ｓ，３ Ｈ）．

【0348】

ベンゾトリフルオリド（９５ｍＬ）中５−ヨード−４−メチル−２−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（３、３５．９ｇ、１０４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブロモスコシンイミド（２０．４ｇ、１１４ｍｍｏｌ）、および２，２−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）（ＡＩＢＮ、５．１２ｇ、３１．２ｍｍｏｌ）の混合物を８５Ｃで一晩撹拌した。完全変換は達成されなかったが、反応は徐々に増した。ジクロロメタン（１５０ｍＬ）を添加し、混合物を水（３×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をアセトニトリル（４４０ｍＬ）中に溶解し、酢酸カリウム（１０．２ｇ、１０４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を７５Ｃで一晩撹拌した。不溶性材料を濾過し、濾液を蒸発させた。残渣フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／ジクロロメタン４：１〜１：１．５）によって精製して、４−（アセトキシメチル）−５−ヨード−２−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（４）を白色粉末として得た。収率：１７．５ｇ（４２％）。ＲＦ（シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）： ０．３５。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．２８（ｓ，１ Ｈ）；７．７０（ｓ，１ Ｈ）；５．１６（ｓ，２ Ｈ）；３．９５（ｓ，３ Ｈ）；２．２０（ｓ，３ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−５９．９６（ｓ）．

【0349】

乾燥Ｎ，Ｎ−ジメチルスルホキシド（１１０ｍＬ）中４−（アセトキシメチル）−５−ヨード−２−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（４、１７．５ｇ、４３．５ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（１４．３ｇ、５６．５ｍｍｏｌ）、および乾燥酢酸カリウム（２１．３ｇ、２１７ｍｍｏｌ）の混合物を脱気し、次いで［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（１．５９ｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を９５℃において一晩、窒素雰囲気下で撹拌した。冷却後、ジエチルエーテル（５００ｍＬ）を添加し、沈殿物をセライトパッドを通して濾過した。濾液を５％塩化ナトリウム水溶液（３×５００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、４−（アセトキシメチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−２−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（５）を黒色油として得た。この油をさらなる精製なしで次のステップに使用した。
収率：２２．５ｇ。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．２２（ｓ，１ Ｈ）；７．７４（ｓ，１ Ｈ）；５．４４（ｓ，２ Ｈ）；３．９４（ｓ，３ Ｈ）；２．１４（ｓ，３ Ｈ）；１．３６（ｓ，１２ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６０．０７（ｓ）．

【0350】

４−（アセトキシメチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−２−（トリフルオロメチル）安息香酸メチル（５、１７．５ｇ、４３．５ｍｍｏｌ）を、水（１５０ｍＬ）中水酸化ナトリウム（８．７０ｇ、２１７ｍｍｏｌ）の溶液中に懸濁した。混合物を室温で６時間撹拌し、次いでジエチルエーテル（２×２００ｍＬ）で抽出した。水相を濃縮塩酸（１８．９ｍＬ）で酸性化し、得られる混合物を室温で一晩撹拌した。沈殿物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させて、１−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロロ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（６）を灰色粉末として得た。収率：７．６２ｇ（７１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．５０（ｂｓ，１ Ｈ）；９．５７（ｓ，１ Ｈ）；８．１６（ｓ，１ Ｈ）；７．９２（ｓ，１ Ｈ）；５．１１（ｓ，２ Ｈ）． ^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＦ）：−５７．９１（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：２４５．９（Ｍ−Ｈ）−。

【0351】

１−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（６、６．７１ｇ、２７．３ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン／ジクロロメタン混合物（１：１、５０ｍＬ）中に溶解し、続いて２，３，４，５，６−ペントラフルオロフェノール（５．０３ｇ、２７．３ｍｍｏｌ）およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（５．２３ｇ、２７．３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）中に溶解し、水（３×１００ｍＬ）およびブライン（１×１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をジエチルエーテル（１０ｍＬ）中に溶解し、ｎ−ヘキサン（２００ｍＬ）を添加した。沈殿物を濾過し、濾液を蒸発させた。同じ手順を沈殿物で２回繰り返した。全ての濾液を一緒に組み合わせ、蒸発乾固させて、ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（７）を黄色の固い油として得た。収率：９。７６ｇ（８７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．７４（ｓ，１ Ｈ）；８．５３（ｓ，１ Ｈ）；８．１６（ｓ，１ Ｈ）；５．１８（ｓ，２ Ｈ）．

【0352】

ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−５−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（７、９．５１ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中に溶解した。続いて、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１０．１ｍＬ、５７．７ｍｍｏｌ）、および水（３０ｍＬ）中（２−アミノエチル）グリシン塩酸塩（８、１．７８ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られる混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、溶媒を蒸発させた。残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）中に溶解し、塩酸水溶液（１×２００ｍＬ）、水（２×２００ｍＬ）、およびブライン（１×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をシクロヘキサンで処理した。沈殿物を濾過し、シクロヘキサンで洗浄し、フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：ジクロロメタン／メタノール／ギ酸１０：１：０．０５）によって精製した。生成物を含有する分画を組み合わせて、蒸発させた。残渣をシクロヘキサンで処理した。沈殿物を濾過し、シクロヘキサンで洗浄し、アセトニトリル（５０ｍＬ）中に溶解し、凍結乾燥させて、表題化合物（９）をベージュ色粉末として得た。収率：３．６３ｇ（５５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，８０ Ｃ，δＨ）：８．０４−７．６６（ｍ，４ Ｈ）；５．２８−５．０４（ｍ，４ Ｈ）；４．６３−４．３４（ｍ，１ Ｈ）；４．２２−３．７８（ｍ，３ Ｈ）；３．７２−３．４９（ｍ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５７４．０（Ｍ＋Ｈ）＋．

【0353】

[実施例３６：Ｎ−（４−クロロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（４−クロロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化144】

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Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、６．２０ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）を、ジクロロメタン（７０ｍＬ）中４−クロロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（１、４．９０ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）およびペンタフルオロフェニル（Ｐｆｐ−ＯＨ、５．５３ｇ、２３．１ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を蒸発乾固させた。残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）と１０％硫酸水素カリウム水溶液（２００ｍＬ）との間で分割した。有機層を分離し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で蒸発させた。残渣をジクロロメタン中に溶解し、冷蔵庫内に一晩配置した。固体を濾過し、酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を組み合わせ、蒸発乾固させた。シクロヘキサン（１００ｍＬ）を残渣に添加し、混合物を室温で１５分間撹拌した。混合物をデカントし、沈殿物を真空下で乾燥させて、ペンタフルオロフェニル４−クロロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２）をオフホワイト色固体として得た。収率：８．２９ｇ（９５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．８３（ｂｓ，１ Ｈ）；８．６１（ｓ，１ Ｈ）；８．２６（ｓ，１ Ｈ）；５．１３（ｓ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：３７７．４（Ｍ−Ｈ）−。

【0354】

トリエチルアミン（１０．０ｍＬ、１３１．６ｍｍｏｌ）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド／水（２：１、６０ｍＬ）中ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２、８．２９ｇ、２１．９ｍｍｏｌ）およびＮ−２−アミノエチルグリシン（３、１．３０ｇ、１．７０ｍｍｏｌ）の混合物に添加し、得られる溶液を室温で一晩撹拌した。その後、それを１Ｍ二硫酸カリウム溶液水溶液（２００ｍＬ）で酸性化し、酢酸エチル（３×２５０ｍＬ）で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。残渣をトルエン（３×１００ｍＬ）で共蒸留し、ジエチルエーテル（６０ｍＬ）で粉砕した。沈殿物を濾過し、ジエチルエーテル（２×５０ｍＬ）で洗浄し、空気乾燥させた。得られた粉末をアセトニトリル／水混合物（２：１、２０ｍＬ）中に溶解し、凍結乾燥させて、化合物４を無色固体として得た。収率：１．５０ｇ（１５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８７（ｂｓ，１ Ｈ）；９．５９−９．４１（ｍ，２ Ｈ）；８．７７−８．５４（ｍ，５ Ｈ）；５．０７−４．８８（ｍ，４ Ｈ）；４．２５−３．９２（ｍ，２ Ｈ）；３．６０−３．２４（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５０７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0355】

[実施例３７：（Ｓ）−４−（（２Ｓ）−２，３−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパンアミド）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸]

【化145】

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アセトニトリル（１Ｌ）中ペンタフルオロフェノール（３５．１ｇ、１９１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（１、４０．８ｇ、１６６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、３９．３ｇ、１９１ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で２４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、蒸発させ、アセトニトリル中に溶解し、再濾過し、蒸発させた。粗生成物をジクロロメタン（１Ｌ）中に沈殿させ、濾過して、ペンタフルオロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロロ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２）を白色固体として得た。収率：５２．８ｇ（７７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．７９（ｓ，１ Ｈ）；８．８６（ｓ，１ Ｈ）；８．４６（ｓ，１ Ｈ）；５．３０（ｓ，２ Ｈ）．

【0356】

２−クロロトリチルクロリド樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（３、４．４７ｇ、６．７１ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（３０ｍＬ）中に３０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（３０ｍＬ）中（２Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−｛［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］アミノ｝−５−オキソペンタン酸（Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、１．９０ｇ、４．４７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．９６ｍＬ、１７．０ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（４：１、２×５分、２×４０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．５６ｍＬ、８．９５ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×３０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×４０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×４０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×４０ｍＬ）、２−プロパノール（２×４０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中（２Ｓ）−２，３−ビス（（（（９Ｈ−フルオレン−９−ｙｌ）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロピオン酸（Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、３．６８ｇ、６．７１ｍｍｏｌ）、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、２．５５ｇ、６．７１ｍｍｏｌ）、および２，４，６−トリメチルピリジン（１．６０ｍＬ、１２．１ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を２時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×４０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×４０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×３０分、２×４０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×４０ｍＬ）、２−プロパノール（２×４０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中ペンタフルロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２、５．５３ｇ、１３．４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．９９ｍＬ、３５．８ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６×４０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０×５０ｍＬ）で洗浄した。生成物を、２，２，２−トリフルオロエタノール（６０ｍＬ）で１６時間処理することによって樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（４×５０ｍＬ）で洗浄した。粗生成物（４）を真空下で乾燥させ、酢酸エチル（２×７０ｍＬ）および１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液（５０ｍＬ）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。次いで、粗生成物をジエチルエーテル（２０ｍＬ）中で粉砕して、（Ｓ）−４−（（２Ｓ）−２，３−ビス（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）プロパンアミド）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸（４）をベージュ色固体として得た。収率：１．８９ｇ（５７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，δＨ）：８．５０（ｓ，１ Ｈ）；８．４６（ｓ，１ Ｈ）；８．２９（ｓ，１ Ｈ）；８．２６（ｓ，１ Ｈ）；５．２８（ｄ，Ｊ＝２．６ Ｈｚ，４ Ｈ）；５．２０（ｔ，Ｊ＝５．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．５５（ｄｄ，Ｊ＝８．５および５．２ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．０８（ｄｄ，Ｊ＝６．０および２．１ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．５７−２．４２（ｍ，２ Ｈ）；２．３４−２．１６（ｍ，１ Ｈ）；２．１７−２．０８（ｍ，１ Ｈ）；１．４７（ｓ，９ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７４６．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0357】

[実施例３８：Ｎ−（４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン]

【化146】

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濃縮硫酸（３５ｍＬ）をメタノール（１．２Ｌ）中３−ブロモ−５−ヨード−４−メチル安息香酸（１、５５．４ｇ、１６２ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、反応混合物を一晩還流下で撹拌させた。次いで、反応混合物を減圧下で蒸発させ、ジエチルエーテル（７００ｍＬ）中に溶解し、水（２×３００ｍＬ）で洗浄し、炭酸カリウム溶液の飽和溶液（１×３００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、３−ブロモ−５−ヨード−４−メチル安息香酸メチル（２）を白色固体として得た。収率：５０．０ｇ（８７％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：８．３２（ｄ，Ｊ＝１．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．０９（ｄ，Ｊ＝１．３ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．８６（ｓ，３ Ｈ）；２．６５（ｓ，３ Ｈ）．

【0358】

乾燥テトラヒドロフラン（２５０ｍＬ）中３−ブロモ−５−ヨード−４−メチル安息香酸メチル（２、３７．３ｇ、１０５ｍｍｏｌ）の溶液に、テトラヒドロフラン（８９．０ｍＬ、１１５ｍｍｏｌ）中イソプロピルマグネシウムクロリドリチウムクロリド錯体の１．３Ｍ溶液を、不活性雰囲気下で−３０Ｃにおいて滴下し、２０分間撹拌した。次いで、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１２．２ｍＬ、１５８ｍｍｏｌ）を−３０Ｃで添加した。反応混合物を周囲温度まで温め、１６時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で蒸発させ、酢酸エチル（３００ｍＬ）中に溶解し、水（２×２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過、蒸発させて、３−ブロモ−５−ホルミル−４−メチル安息香酸メチル（３）を白色固体として得た。収率：２４．９ｇ（９２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：１０．２７（ｓ，１ Ｈ）；８．５３−８．３４（ｍ，２ Ｈ）；３．９７（ｓ，３ Ｈ）；２．８２（ｓ，３ Ｈ）．

【0359】

ジクロロメタン（３００ｍＬ）中３−ブロモ−５−ホルミル−４−メチル安息香酸メチル（３、２４．８ｇ、９６．５ｍｍｏｌ）および（ジエチルアミノ）硫黄トリフルオリド（ＤＡＳＴ、２５．５ｍＬ、１９３ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で１６時間撹拌した。反応を水（２００ｍＬ）の添加によってクエンチし、ジクロロメタン（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、３−ブロモ−５−（ジフルオロメチル）−４−メチル安息香酸メチル（４）を白色固体として得た。収率：２３．３ｇ（８７％）。１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，Ｈ）：８．３５（ｄ，Ｊ＝１．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；８．１４（ｄ，Ｊ＝０．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；６．７８（ｔ，Ｊ＝５４．８ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９３ （ｓ，３ Ｈ）；２．５５（ｔ，Ｊ＝１．４ Ｈｚ，３ Ｈ）。

【0360】

トリフルオロトルエン（１２０ｍＬ）中Ｎ−ブロモスクシンイミド（１６．４ｇ、９１．９ｍｍｏｌ）、３−ブロモ−５−（ジフルオロメチル）−４−メチル安息香酸メチル（４、２３．３ｇ、８３．５ｍｍｏｌ）、および２，２−アゾビス（２−メチルプロピオニトリル）（ＡＩＢＮ、１．３６ｇ、８．３６ｍｍｏｌ）を８５Ｃで一晩撹拌した。反応混合物を蒸発させ、次いでジエチルエーテル（２×３００ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（１×１５０ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、粗い３−ブロモ−４−（ブロモメチル）−５−（ジフルオロメチル）安息香酸メチル（５）を得て、これをアセトニトリル（３００ｍＬ）中の酢酸カリウム（１６．４ｇ、１６７ｍｍｏｌ）と７５Ｃにおいて一晩撹拌した。懸濁液をセライトの短いパッドを通して濾過し、蒸発させた。粗生成物をジクロロメタン中に溶解し、再び濾過した。濾液を蒸発させ、カラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）によって精製して、４−（アセトキシメチル）−３−ブロモ−５−（ジフルオロメチル）安息香酸メチル（６）を白色固体として得た。収率：１７．１ｇ（６１％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．５０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．４０（ｓ，１ Ｈ）；８．２６（ｓ，１ Ｈ）；７．０２（ｔ，Ｊ＝５４．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．３８（ｓ，２ Ｈ）；３．９７（ｓ，３ Ｈ）；２．１１（ｓ，３ Ｈ）．

【0361】

乾燥ジオキサン（２００ｍＬ）中４−（アセトキシメチル）−３−ブロモ−５−（ジフルオロメチル）安息香酸メチル（６、１７．１ｇ、５０．７ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコラート）ジボロン（１４．２ｇ、５５．７ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１４．９ｇ、１５２ｍｍｏｌ）、および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（１．２４ｇ、１．５２ｍｍｏｌ）の溶液をアルゴン雰囲気下で２日間、７５°Ｃで撹拌させた。次いで、反応混合物を周囲温度まで冷却し、濾過し、蒸発させた。粗生成物を、シリカゲルカラム（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）を通して濾過して、４−（アセトキシメチル）−３−（ジフルオロメチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（７）を得た。収率：１６．３ｇ（８４％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）： ０．３０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５７（ｓ，１ Ｈ）；８．３８（ｓ，１ Ｈ）；７．０４（ｔ，Ｊ＝５５．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．５４（ｓ，２ Ｈ）；３．９７（ｓ，３ Ｈ）；２．０６（ｓ，３ Ｈ）；１．３９（ｓ，１２ Ｈ）．

【0362】

水（２００ｍＬ）中４−（アセトキシメチル）−３−（ジフルオロメチル）−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（７、１６．３ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）および水酸化ナトリウム（８．４５ｇ、２１２ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で３時間撹拌した。次いで、水（５０ｍＬ）中濃縮塩酸（２０ｍＬ）の溶液を添加して、ｐＨを１に低下させた。反応混合物を冷蔵庫内に一晩放置した。沈殿物を濾過し、乾燥させて、４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（８）を白色固体として得た。収率：８．５５ｇ（８９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１３．２５（ｂｓ，１ Ｈ）；９．５４（ｓ，１ Ｈ）；８．５１（ｓ，１ Ｈ）；８．２０（ｓ，１ Ｈ）；７．２２（ｔ，Ｊ＝５５．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．１９（ｓ，２ Ｈ）．

【0363】

ジクロロメタン（１００ｍＬ）中ペンタフルオロフェノール（８．２８ｇ、４５．０ｍｍｏｌ）、４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（８、８．５５ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）、およびＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ．ＨＣｌ、１０．１ｇ、５２．５ｍｍｏｌ）を周囲温度で３時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、酢酸エチル（２００ｍＬ）中に溶解し、１Ｍ塩酸水溶液（３×２００ｍＬ）およびブライン（１×２００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物９を高温シクロヘキサン（３００ｍＬ）および酢酸エチル（３０ｍＬ）から再結晶化して、ペンタフルオロフェニル４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（９）を白色固体として得た。収率：８．２０ｇ（５６％）。ＬＣ−ＭＳ：３９５．５（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0364】

テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）および水（２０ｍＬ）中ペルフルオロフェニル４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（９、８．２０ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）、（２−アミノエチル）グリシン（１０、１．２３ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）、およびトリエチルアミン（１４．５ｍＬ、１０４ｍｍｏｌ）の溶液を周囲温度で一晩撹拌した。次いで、テトラヒドロフランを蒸発させ、１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液（３０ｍＬ）を残渣に添加した。この混合物を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で抽出した。有機層を組み合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させた。粗生成物１１を酢酸エチル（１０ｍＬ）中に溶解し、シクロヘキサン（１００ｍＬ）で沈殿させた。沈殿物を濾過し、シクロヘキサン（５０ｍＬ）で洗浄し、凍結乾燥さえて、Ｎ−（４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニル）−Ｎ−（２−（４−（ジフルオロメチル）−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）グリシン（１１）を白色固体として得た。収率：４．５９ｇ（８２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８７（ｂｓ，１ Ｈ）；９．６６−９．３３（ｍ，２ Ｈ）；８．９５−６．６８（ｍ，７ Ｈ）；５．１５（ｄ，Ｊ＝１１．９ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．３９−３．９４（ｍ，２ Ｈ）；３．７６−３．３７（ｍ，４ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：５３９．１（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0365】

[実施例３９：１−（ｔｅｒｔ−ブチル）−５−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）−（２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセチル）−Ｌ−グルタメート]

【化147】

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続いて、乾燥ジクロロメタン（３７ｍＬ）およびトリエチルアミン（１．５３ｍＬ、１１．０ｍｍｏｌ）を、実施例３３で調製した２，５−ジオキソピロリジン−１−イル−２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アミノ）アセテート（１、２．７８ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）、および（Ｓ）−４−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソペンタン酸（２、Ｈ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、８９１ｍｇ、４．３９ｍｍｏｌ）に添加した。混合物を超音波処理して溶液を得て、これを室温で６時間撹拌した。揮発性物質を真空下で除去し、残渣を酢酸エチル（２００ｍＬ）中に再溶解した。得られる溶液を０．５Ｍ塩酸水溶液（３×５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）中に再溶解し、酢酸エチル（２０ｍＬ）中ピナコール（４３２ｍｇ、３．６６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。得られる溶液を真空下で蒸発させて、（Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソ−４−（２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセトアミド）ペンタン酸（３）を淡黄色発泡体として得た。収率：３．０７ｇ（９９％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５７（ｄ，Ｊ＝１２．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；８．４０（ｄｄ，Ｊ＝８．３および０．７ Ｈｚ，２ Ｈ）；８．２５（ｓ，２ Ｈ）；７．９６（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．５７（ｍ，１ Ｈ）；３．７１（ｄｄ，Ｊ＝２２．９および１７．４ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．５３−２．４３（ｍ，２ Ｈ）；２．３７−２．２４（ｍ，１ Ｈ）；２．１５−２．０２（ｍ，１ Ｈ）；１．４７（ｓ，９ Ｈ）；１．３７（ｓ，２４ Ｈ）．^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ Ｍｈｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．６４（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：６８３．４（Ｍ−２×ピナコール−Ｈ）−。

【0366】

続いて、炭酸Ｎ，Ｎ−ジスクシンイミジル（ＤＳＣ、１．８４ｇ、７．１９ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．５８ｍＬ、７．１９ｍｍｏｌ）を、乾燥アセトニトリル（１８ｍＬ）中（Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−５−オキソ−４−（２−（（オキソビス（３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル）−λ^６−スルファニリデン）アミノ）アセトアミド）ペンタン酸（３、３．０５ｇ、３．５９ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、混合物を超音波処理して、微細懸濁液を形成した。得られる懸濁液を室温で一晩撹拌して、透明な溶液を得た。溶液を蒸発乾固させて、残渣を、酢酸エチル（２５０ｍＬ）と０．５Ｍ塩酸水溶液（１００ｍＬ）との間で分割した。相を分離し、有機相を０．５Ｍ塩酸水溶液（４×１００ｍＬ）およびブライン（７０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣をジクロロメタン（４０ｍＬ）中に溶解し、続いてピナコール（６３６ｍｇ、５．３９ｍｍｏｌ）を添加した。溶媒を真空中で除去し、残渣をジクロロメタン（５０ｍＬ）から蒸発させた。得られる発泡体をシクロヘキサン（３×５０ｍＬ）で粉砕し、得られる半固体をデカントし、ジクロロメタン（５０ｍＬ）中に溶解し、真空下で蒸発乾固させた。残渣ジクロロメタン（３×５０ｍＬ）から蒸発させ、しん乾燥させて、表題化合物（４）を白色発泡体として得た。収率：２．８２ｇ（８３％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３，δＨ）：８．５７（ｓ，１ Ｈ）；８．５１（ｓ，１ Ｈ）；８．４３（ｓ，１ Ｈ）；８．３１（ｓ，１ Ｈ）；８．２５（ｓ，１ Ｈ）；８．２４（ｓ，１ Ｈ）；７．７７（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；４．６０（ｍ，１ Ｈ）；３．７３（ｄｄ，Ｊ＝３９．６および１７．３ Ｈｚ，２ Ｈ）；２．８２（ｓ，４ Ｈ）；２．７９−２．６２（ｍ，２ Ｈ）；２．４３−２．３０（ｍ，１ Ｈ）；２．２０−２．０６（ｍ，１ Ｈ）；１．４９（ｓ，９ Ｈ）；１．３６（ｓ，２４ Ｈ）．
^１９Ｆ ＮＭＲスペクトル（２８２ Ｍｈｚ，ＣＤＣｌ_３，δＦ）：−６２．６３（ｓ）．ＬＣ−ＭＳ：８６４．５（Ｍ−ピナコール＋Ｈ）＋、９４６．７（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0367】

[実施例４０：（Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−（２−（１−ヒドロキシ−Ｎ−（２−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）アセトアミド）−５−オキソペンタン酸]

【化148】

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２−クロロトリチルクロリド樹脂１００〜２００メッシュ、１．５ｍｍｏｌ／ｇ（１、４．３９ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）を、乾燥ジクロロメタン（３０ｍＬ）中に３０分間放置して膨潤させた。乾燥ジクロロメタン（３０ｍＬ）中（Ｓ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）ペンタン二酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、１．８７ｇ、４．３９ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．９１ｍＬ、１６．７ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、メタノール／ジクロロメタン混合物（４：１、２×５分、２×４０ｍＬ）中Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．５３ｍＬ、８．７８ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。次いで、樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×３０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×４０ｍＬ）、およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×２０分、２×４０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×４０ｍＬ）、２−プロパノール（２×４０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中Ｎ−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎ−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）エチル）グリシン（Ｆｍｏｃ−ＡＥＧ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、３．７１ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）、１−（（ジメチルアミノ）（ジメチルイミニオ）メチル−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、２．５０ｇ、６．５９ｍｍｏｌ）、および２，４，６−トリメチルピリジン（１．５７ｍＬ、１１．９ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を２時間振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×４０ｍＬ）、ジクロロメタン（２×４０ｍＬ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド中の２０％ピペリジン（１×５分、１×３０分、２×４０ｍＬ）で処理することによって、Ｆｍｏｃ基を除去した。樹脂をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３×４０ｍＬ）、２−プロパノール（２×４０ｍＬ）、およびジクロロメタン（３×４０ｍＬ）で洗浄した。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中ペンタフルロフェニル１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキシレート（２、５．４３ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．９０ｍＬ、３５．１ｍｍｏｌ）の溶液を樹脂に添加し、混合物を一晩振盪した。樹脂を濾過し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（６×４０ｍＬ）およびジクロロメタン（１０×５０ｍＬ）で洗浄した。生成物を、２，２，２−トリフルオロエタノール（６０ｍＬ）で１６時間処理することによって樹脂から開裂した。樹脂を濾過し、ジクロロメタン（４×５０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を蒸発させ、残渣を１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液（５０ｍＬ）および酢酸エチル（２×７０ｍＬ）で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を蒸発させた。粗生成物を酢酸エチル／シクロヘキサン（１：１０、４０ｍＬ）から沈殿させ、カラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０６３〜０．２００ｍｍ、溶離液：アセトニトリル／水１０：１）によって精製し、凍結乾燥させて、（Ｓ）−５−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−４−（２−（１−ヒドロキシ−Ｎ−（２−（１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボキサミド）アセトアミド）−５−オキソペンタン酸（３）を白色固体として得た。収率：１．５０ｇ（４５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＡｃＯＤ−ｄ４，δＨ）：８．４４（ｓ，１ Ｈ）；８．２４（ｓ，１ Ｈ）；８．０５（ｓ， １ Ｈ）；７．７７（ｓ，１ Ｈ）；５．２５（ｄ，Ｊ＝１７．１ Ｈｚ，４ Ｈ）；４．７０−４．２５（ｍ，３ Ｈ）；４．０３−３．６７（ｍ，４ Ｈ）；２．４９（ｂｓ，２ Ｈ）；２．２２（ｂｓ，１ Ｈ）；１．４９（ｓ，９ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ：７６０．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0368】

[実施例４１：１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸]

【化149】

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Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、８８．１ｇ、４９５ｍｍｏｌ）を、５０％水性硫酸（２７０ｍＬ）中４−メチルベンゾニトリル（５８．６ｇ、５００ｍｍｏｌ）の冷たい懸濁液（１０℃）に添加した。反応混合物を暗い状態で１０Ｃにおいて４０時間撹拌した。その後、懸濁液を濾過し、フィルターケーキを水（１００ｍＬ）で洗浄し、酢酸エチル（８００ｍＬ）中に溶解した。酢酸エチル中の粗生成物の溶液を、水（４００ｍＬ）、炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液（２×４００ｍＬ）、およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、粗い３−ブロモ−４−メチルベンゾニトリルを黄色結晶として得た。生成物を精製なしで次のステップに使用した。収率：９０．７０ｇ（９２％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．４５。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δＨ）：７．８２（ｄ，Ｊ＝１．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．５０（ｄｄ，Ｊ＝７．９および１．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．３４（ｄ，Ｊ＝７．９，１ Ｈ）；２．４７（ｓ，３ Ｈ）．

【0369】

過酸化ベンゾイル（１ｇ）およびＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、９６．３ｇ、５４１ｍｍｏｌ）を、テトラクロロメタン（１．００Ｌ）中３−ブロモ−４−メチルベンゾニトリル（９０．７ｇ、４６３ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を一晩還流させた。その後、反応混合物を冷却し、ジクロロメタン（５００ｍＬ）で希釈し、水（２×５００ｍＬ）で抽出した。有機溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、粗い３−ブロモ−４−（ブロモメチル）ベンゾニトリルを茶色油として得た。収率：１３５ｇ。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル９：１）：０．４５。

【0370】

酢酸カリウム（９８．１ｇ、１．００ｍｏｌ）を、アセトニトリル（７００ｍＬ）中の粗い上記の３−ブロモ−４−（ブロモメチル）ベンゾニトリル（１３５ｇ）の冷たい（４℃）溶液に添加した。混合物を７０℃で２４時間撹拌した。混合物を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）で希釈し、水（２×５００ｍＬ）で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６０ｍｍ、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル２０：１〜５：１）によって精製して、２−ブロモ−４−シアノベンジルアセテートを白色結晶として得た。収率：６０．９０ｇ（２ステップにわたって５２％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル４：１）：．０．３０。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δＨ）：７．８７（ｄ，Ｊ＝１．５ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．６４（ｄｄ，Ｊ＝８．１および１．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．２２（ｓ，２ Ｈ）；２．１９（ｓ，３ Ｈ）．

【0371】

アルゴン雰囲気下、ジクロロメタン（５ｇ）と共に、２−ブロモ−４−シアノベンジルアセテート（６０．０ｇ、２３６ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（４６．３ｇ、４７２ｍｍｏｌ）、ビス（ピナコタート）ジボロン（６５．９ｇ、２５９ｍｍｏｌ）、および［１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロメタン（ＩＩ）錯体を脱気１，４−ジオキサン（８００ｍＬ）中に溶解し、混合物を１８時間還流させた。その後、混合物を濾過し、濾液を蒸発させ、残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）中に再溶解した。溶液を水（２×４００ｍＬ）およびブライン（４００ｍＬ）で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。残渣を、カラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６０ｍｍ、溶離液：ヘキサン／酢酸エチル８：１）によって精製して、４−シアノ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンジルアセテートの白色結晶を得た。収率：４８．８０ｇ（６９％）。ＲＦ（ＳｉＯ２、ヘキサン／酢酸エチル４：１）： ０．３５。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δＨ）：８．１３（ｄ，Ｊ＝１．７ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．７１（ｄｄ，Ｊ＝７．９および１．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．４９（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．４２（ｓ，２ Ｈ）；２．１３（ｓ，３ Ｈ）．

【0372】

メタノール（３００ｍＬ）中の水酸化ナトリウム（１３．１ｇ、３２７ｍｍｏｌ）の溶液を、メタノール（３００ｍＬ）中４−シアノ−２−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−ｌｙ）ベンジルアセテート（４４．８ｇ、１４９ｍｍｏｌ）の溶液に３０Ｃで滴下した。反応混合物をさらに２時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をテトラヒドロフラン（２００ｍＬ）中に溶解した。２Ｍ水性塩酸（６６０ｍＬ）を添加し、得られる懸濁液を１０分間撹拌した。懸濁液を１０℃まで冷却し、濾過した。フィルターケーキを水（１００ｍＬ）およびｎ−ヘキサン（１００ｍＬ）で洗浄して、１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニトリルを白色粉末として得た。収率：２０．１５ｇ（８５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：９．５５（ｂｓ，１ Ｈ）；８．０９（ｓ，１ Ｈ）；７．９０（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．６３（ｄ，Ｊ＝７．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．０７（ｓ，２ Ｈ）．

【0373】

濃縮塩酸（１．５０Ｌ）中１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボニトリル（２０．１５ｇ、１２７ｍｍｏｌ）の懸濁液を２４時間還流させ、１０℃まで冷却した。懸濁液を濾過し、フィルターケーキを水（３００ｍＬ）で洗浄した。フィルターケーキを水（５００ｍＬ）中に懸濁し、凍結乾燥させた。残渣をジクロロメタン（５００ｍＬ）中に懸濁し、濾過した。フィルターケーキをジクロロメタン（２００ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸を白色粉末として得た。収率：１２．３０ｇ（５５％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．９２（ｓ，１Ｈ）；９．３６（ｓ，１ Ｈ）；８．３７（ｓ，１ Ｈ）；８．０４（ｄｄ，Ｊ＝７．９および０．９ Ｈｚ，１ Ｈ）；７．５２（ｄ，Ｊ＝８．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．０５（ｓ，２ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ ｍ／ｚ：１７８．２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0374】

[実施例４２：１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸]

【化150】

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１−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸を、実施例２８に記載されるように調製した。

【0375】

[実施例４３：４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸]

【化151】

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硫酸（９６％、４００ｍＬ）中３−フルオロ−４−メチル安息香酸（１、６１．７ｇ、４００ｍｍｏｌ）の徹底的に撹拌した溶液を外部氷水浴によって冷却し、Ｎ−ブロモスクシンイミド（７２．０ｇ、４０５ｍｍｏｌ）を２０分間にわたって３回に分けて添加した。混合物を室温で４時間撹拌し、次いでさらなる量のＮ−ブロモスクシンイミド（７２．０ｇ、４０５ｍｍｏｌ）を一度に添加し、混合物全体を室温で一晩撹拌した。得られる懸濁液を氷水（３．００Ｌ）で希釈し、１０分間撹拌した。固体を濾過し、水（２００ｍＬ）で洗浄し、水（３×６００ｍＬ）で粉砕し、可能な限り吸い出した。湿潤固体を水（４００ｍＬ）中に懸濁し、室温で撹拌し、水酸化ナトリウム溶液（２００ｍＬの水中５０．０ｇ、１．２５ｍｏｌ）を添加した。得られる溶液を４０^ｏＣまで一晩加熱した。わずかに濁った溶液の濾過により、透明な黄色がかった濾液を得て、これに二硫酸カリウムの溶液（４００ｍＬの水中１８０ｇ、１．３２ｍｏｌ）を添加した。白色沈殿物を、ジクロロメタン／テトラヒドロフラン４：１（２×５００ｍＬ）の混合物で抽出した。有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、白色固体残渣を得た。塩化チオニル（３０．０ｍＬ、４１３ｍｍｏｌ）を、無水メタノール（５００ｍＬ）中のこの残渣の撹拌した冷却（−７８℃）懸濁液に添加した。反応混合物を室温まで温め、次いで６０Ｃまで一晩加熱した。溶液を室温まで冷却し、４℃で一晩保持した。結晶材料を濾過し、メタノール（２×５０ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（２×５０ｍＬ）によってで洗浄し、真空下で乾燥させて、２，３−ジブロモ−５−フルオロ−４−メチル安息香酸メチル（２）を無色結晶として得た。収率：７８．２ｇ（６０％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δＨ）：７．３７（ｄ，Ｊ＝９．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．９４（ｓ，３ Ｈ）；２．４６（ｄ，Ｊ＝２．３ Ｈｚ，３ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ ｍ／ｚ：３２７．２（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0376】

プロピオン酸（１００ｍＬ）中の微粉銅（４４．０ｇ、６９２ｍｍｏｌ）および２，３−ジブロモ−５−フルオロ−４−メチル安息香酸メチル（２、７５．２ｇ、２３１ｍｍｏｌ）の懸濁液を撹拌し、８５〜９０℃まで６時間加熱し、室温まで冷却し、シクロヘキサン／トルエンの混合物（３：１、８００ｍＬ）で希釈した。反応混合物を水（３×２００ｍＬ）、１０％二硫酸カリウム水溶液（２×２００ｍＬ）、およびブライン（２×３００ｍＬ）で洗浄した。有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、黄色がかった油を得て、これをフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６０ｍｍ、溶離液：シクロヘキサン／トルエン３：１）によって精製して、３−ブロモ−５−フルオロ−４−メチル安息香酸メチル（３）を無色結晶として得た。収率：５２．５ｇ（９２％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，δＨ）：７．５１（ｓ，１ Ｈ）；７．３７（ｄ，Ｊ＝９．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．８６（ｓ，３ Ｈ）；２．３７（ｄ，Ｊ＝２．４ Ｈｚ，３ Ｈ）．ＬＣ−ＭＳ ｍ／ｚ：３４７．３（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0377】

３−ブロモ−５−フルオロ−４−メチル安息香酸メチル（３、５１．９ｇ、２１０ｍｍｏｌ）を、無水１，４−ジオキサン（４００ｍＬ）中に溶解し、無水酢酸カリウム（６５．３ｇ、６６６ｍｍｏｌ）およびビス（ピナコラート）ジボロン（４、７５．１ｇ、２９６ｍｍｏｌ）を室温で添加し、この混合物を脱気した。１，１−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）（１．８８ｇ、２．５７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をアルゴン雰囲気中７５℃まで４０時間加熱した。混合物を減圧下で濃縮し、トルエン（１．１Ｌ）中に溶解し、水（２×２００ｍＬ）で抽出した。有機溶液を無水硫酸ナトリウムを使用して乾燥させ、減圧下で蒸発させ、次いでフラッシュカラムクロマトグラフィ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ ６０、０．０４０〜０．０６３ｍｍ、溶離液：トルエン／エチルアセテート９：１）によって精製して、３−フルオロ−４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（５）を白色固体として得た。収率：５０．０ｇ（８１％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，ｄＨ）：８．２０（ｓ，１ Ｈ）；７．７０（ｄ，Ｊ＝１０．０ Ｈｚ，１ Ｈ）；３．８５（ｓ，３ Ｈ）；２．５０（ｓ，３ Ｈ）；１．３６（ｓ，１２ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ ｍ／ｚ：２９５．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0378】

アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ、０．８６ｇ、５．２０ｍｍｏｌ）およびＮ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ、２５．４ｇ、１４３ｍｍｏｌ）を、１，２−ジクロロエタン（２００ｍＬ）中３−フルオロ−４−メチル−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（５、４０．０ｇ、１３６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を一晩還流させた。反応混合物を室温まで冷却し、ジクロロメタン（５００ｍＬ）で希釈し、水（２×５００ｍＬ）で抽出した。有機溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、４−（ブロモメチル）−３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（６）を黄色がかった結晶として得た。生成物をさらなる精製なしで次のステップに使用した。収率：３５．５ｇ（７０％）。ＬＣ−ＭＳ ｍ／ｚ：３７３．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0379】

４−（ブロモメチル）−３−フルオロ−５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸メチル（６、７．４６ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を、２．５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（４０．０ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）と室温で一晩撹拌した。６Ｍ塩酸水溶液（２０．０ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３０分間撹拌し、４℃で一晩保持した。白色沈殿物を濾過によって収集し、水（２×１００ｍＬ）で洗浄し、空気乾燥させて、４−フルオロ−１−ヒドロキシ−１，３−ジヒドロベンゾ［ｃ］［１，２］オキサボロール−６−カルボン酸（７）を白色固体として得て、これをさらなる精製なしで次のステップに使用した。収率：３．７６ｇ（９６％）。^１Ｈ ＮＭＲスペクトル（３００ ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６，δＨ）：１２．８（ｓ，１ Ｈ）；９．５７（ｓ，１ Ｈ）；８．２０（ｓ，１ Ｈ）；７．７２（ｄ，Ｊ＝７．１ Ｈｚ，１ Ｈ）；５．１４（ｓ，２ Ｈ）． ＬＣ−ＭＳ ｍ／ｚ：１９７．４（Ｍ＋Ｈ）＋。

【0380】

インスリン誘導体の調製
Ｃ１８カラム、ならびに水中の０．１％ＴＦＡを緩衝液Ａとして、およびアセトニトリル中の０．１％ＴＦＡを緩衝液Ｂとして使用して、ＬＣＭＳ分析を実施した。
ホウ素−インスリン誘導体のＬＣＭＳは一般に、主ピークとして脱水種を示す。
イオン化状態に対して［Ｍ＋ｎＨ−２ｘ ｍ Ｍ_水］^ｎ＋「ｎ」および「ｍ」はボロン酸の数
イオン化状態に対して［Ｍ＋ｎＨ−１ｘ ｍ Ｍ_水］^ｎ＋「ｎ」および「ｍ」はボロキソールの数
例えば、４つのボロン酸を有する誘導体のペンタイオン状態に対して［Ｍ＋５Ｈ−２ｘ（４ｘ１８．０１５）］^５＋
［Ｍ＋４Ｈ−ｘ（水）］^４＋および［Ｍ＋５Ｈ−ｘ（水）］^５＋に対する測定値および計算値は、表２（実施例Ｂの下に示される）に示される。

【0381】

実施例におけるインスリン共役体は、アミノ酸に対する標準的な一文字略語を使用して描かれる。システイン残基の硫黄原子は、ジスルフィド架橋を図示するために具体的に描き出される。共役によって修飾される残基は、関連するアミノ酸において修飾が行われた正確な場所を示すために描き出される。ペプチド化学において標準的であるように、インスリンのＮ末端は、小さいフォントＨ−で示され、Ｃ端子は、小さいフォント−ＯＨで示される。Ｈ−および−ＯＨは、末端残基が共役によって修飾される場合には使用されず、その場合、残基は、上述のように拡大して描かれる。ヒトインスリンの置換は、場合によっては、小さいフォントのスター（＊）で示される。

【0382】

まだスクシンイミジルエステルではなかったビルディングブロックを、インスリンとの共役前にアセトニトリルまたはＴＨＦ中のＨＯＮＳＵ／ＤＩＣまたはＴＳＴＵを使用して活性化した。

【0383】

[実施例１０１]

【化152】

[この文献は図面を表示できません]

Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（５００ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）を０．１Ｍ炭酸ナトリウム（５ｍＬ）、ｐＨ１０．５中に溶解した。実施例２のビルディングブロック（１４６ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（５ｍＬ）中に溶解し、上記のインスリン溶液に添加した。ｐＨを監視し、１０．５近くにとどまった。３０分後、ＬＣＭＳは、所望の生成物の形成を示す。混合物を水（１１ｍＬ）中の２０％ＭｅＣＮで希釈し、ＴＦＡを使用してｐＨを１．５に調整した。生成物を、水中の０．１％ＴＦＡを緩衝液Ａとして、かつアセトニトリル中の０．１％ＴＦＡを緩衝液Ｂとして使用した、Ｃ１８カラム上の逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）によって精製した。生成物を凍結乾燥によって単離した。ＬＣＭＳの測定値１６７０．４［Ｍ＋４Ｈ−８ｘ水］^４＋、計算値１６７０．６、表２（実施例Ｂの下に示される）を参照。

【0384】

[実施例１０２]

【化153】

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実施例１０２のインスリン誘導体を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３のビルディングブロックから、実施例１０１インスリン誘導体と同様に調製した。生成物のＬＣＭＳの測定値１６８９．０［Ｍ＋４Ｈ−８ｘ水］^４＋、計算値１６８９．２。

【0385】

[実施例１０３]

【化154】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１０３のインスリン誘導体を、ＤＭＳＯ中にｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（２３２ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を溶解し、ＮＭＭ（１．２２ｍｍｏｌ、１３５．５ｕＬ）と共にＤＭＳＯ中に実施例４のビルディングブロック（３５．６ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）を添加することによって調製した。生成物を、水中の０．１％ＴＦＡを緩衝液Ａとして、かつアセトニトリル中の０．１％ＴＦＡを緩衝液Ｂとして使用した、Ｃ１８カラム上の逆相ＨＰＬＣ（ＲＰ−ＨＰＬＣ）によって精製し、凍結乾燥によって単離した。生成物のＬＣＭＳの測定値１６６３．０［Ｍ＋４Ｈ−４ｘ水］^４＋、計算値１６６４．１。

【0386】

[実施例１０４]

【化155】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１０４のインスリン誘導体を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、ならびに４−カルボキシ−ベンゾボロキソール、リジン、およびベータ−アラニンを使用して作製された実施例４のビルディングブロックの類似体から、実施例１０３のインスリン誘導体と同様に調製した。

【0387】

[実施例１０５]

【化156】

[この文献は図面を表示できません]

ＤｅｓＢ３０ヒトインスリン（４００ｍｇ）を０．１Ｍ ＡｃＯＨ（５ｍＬ）中に溶解し、０．１Ｎ ＮａＯＨを使用してｐＨを３．５に調整した。実施例６のアルデヒドリンカーの溶液（２００ｍｇ）をＤＭＦ（０．５ｍＬ）中に溶解し、添加した。３０分間撹拌した後、ＮＭＰ（０．５ｍＬ）中に溶解したピコリンボラン（４４ｍｇ）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。水（２０ｍＬ）を添加し、０１Ｍ ＨＣｌを使用してｐＨを１に調整し、生成物をＨＰＬＣによって精製した。伸長部のＬｙｓのＢｏｃ基を、ＴＦＡを使用して除去した。ビス−Ｌｙｓインスリン中間体（３３ｍｇ）を０．２Ｍ Ｎａ_２ＣＯ_３（０．４００ｍＬ）中に溶解し、ｐＨを１０．５に調整した。実施例２のジボロネートスクシンイミジルエステル（２．５当量、０．６ｍｇ）をアセトニトリル（３４０ｕＬ）中に溶解し、混合物に添加した。反応を１０分間撹拌し、反応の進行をＬＣＭＳによって監視し、生成物を実施例１０１と同様にＨＰＬＣによって単離した。ＬＣＭＳの測定値１８２７．３［Ｍ＋４Ｈ−４ｘ水］^４＋、計算値１８２７．３。

【0388】

[実施例１０６]

【化157】

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実施例１０６を、実施例７のビルディングブロックを使用して、実施例１０５と同様に作製した。ＬＣＭＳの測定値１７２４．３、計算値１７２４．２。

【0389】

[実施例１０７]

【化158】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１０７を、実施例７のビルディングブロックを使用して、実施例１０５と同様に作製した。ＬＣＭＳの測定値１６４０．８、計算値１６４０．９。

【0390】

[実施例１０８]

【化159】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１０９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例７のビルディングブロックから、実施例１０７と同様に作製した。ＬＣＭＳの測定値１９８７．５、計算値１９８７．５。

【0391】

[実施例１０９]

【化160】

[この文献は図面を表示できません]

Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（５００ｍｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）を０．２Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（６ｍＬ）、ｐＨ１０．８中に溶解した。実施例７のビルディングブロック（３０７ｍｇ、０．１８９ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（６ｍＬ）中に溶解した。１０分後のＬＣＭＳは、予想される生成物を示し、これをＨＰＬＣによって精製した。

【0392】

[実施例１１０]

【化161】

[この文献は図面を表示できません]

Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン（４３５ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）を０．２Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液（１０ｍＬ）、ｐＨ１０．８中に溶解した。スクシンイミジルエステルとして活性化した（ＭｅＣＮ中のＴＳＴＵ／ＤＩＥＡを使用して）実施例８のビルディングブロック（２７９ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を、ＭｅＣＮ（６ｍＬ）中に溶解した。１０分後のＬＣＭＳは、予想される生成物を示し、これをＨＰＬＣによって精製した。ＬＣＭＳの測定値１６４３．７［Ｍ＋５Ｈ−８ｘ水］^５＋、計算値１６４３．７。

【0393】

[実施例１１１]

【化162】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１１を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例７のビルディングブロックから、実施例１０３と同様に作製した。

【0394】

[実施例１１２]

【化163】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１２を、Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例７のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0395】

[実施例１１３]

【化164】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１３を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0396】

[実施例１１４]

【化165】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１４を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0397】

[実施例１１５]

【化166】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１５を、Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0398】

[実施例１１６]

【化167】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１６を、Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0399】

[実施例１１７]

【化168】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１７を、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0400】

[実施例１１８]

【化169】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１８を、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0401】

[実施例１１９]

【化170】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１１９を、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0402】

[実施例１２０]

【化171】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２０を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１１のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0403】

[実施例１２１]

【化172】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２１を、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0404】

[実施例１２２]

【化173】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２２を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0405】

[実施例１２３]

【化174】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２３を、Ｂ１−ＧＫＰＲＧＦＦＹＴＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0406】

[実施例１２４]

【化175】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２４を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0407】

[実施例１２５]

【化176】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２５を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0408】

[実施例１２６]

【化177】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２６を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0409】

[実施例１２７]

【化178】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２７を、最初にガンマ−アミノ酪酸を用いたインスリンのアシル化、続いて実施例１５のビルディングブロックによって、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンから、実施例１０１と同様に作製した。

【0410】

[実施例１２８]

【化179】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２８を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0411】

[実施例１２９]

【化180】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１２９を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0412】

[実施例１３０]

【化181】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３０を、Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0413】

[実施例１３１]

【化182】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３１を、最初にガンマ−アミノ酪酸を用いたインスリンのアシル化、続いて実施例９のビルディングブロックによって、Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンから、実施例１０１と同様に作製した。

【0414】

[実施例１３２]

【化183】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３２を、最初にガンマ−アミノ酪酸を用いたインスリンのアシル化、続いて実施例１５のビルディングブロックによって、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンから、実施例１０１と同様に作製した。

【0415】

[実施例１３３]

【化184】

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実施例１３３を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0416】

[実施例１３４]

【化185】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３４を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０および実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0417】

[実施例１３５]

【化186】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３５を、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0418】

[実施例１３６]

【化187】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３６を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0419】

[実施例１３７]

【化188】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0420】

[実施例１３８]

【化189】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１３８を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0421】

[実施例１３９]

【化190】

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実施例１３９を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0422】

[実施例１４０]

【化191】

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実施例１４０を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0423】

[実施例１４１]

【化192】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４１を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0424】

[実施例１４２]

【化193】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４２を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0425】

[実施例１４３]

【化194】

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実施例１４３を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0426】

[実施例１４４]

【化195】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４４を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0427】

[実施例１４５]

【化196】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４５を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0428】

[実施例１４６]

【化197】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４６を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0429】

[実施例１４７]

【化198】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0430】

[実施例１４８]

【化199】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４８を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0431】

[実施例１４９]

【化200】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１４９を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0432】

[実施例１５０]

【化201】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５０を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0433】

[実施例１５１：

【化202】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５１を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0434】

[実施例１５２]

【化203】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５２を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0435】

[実施例１５３]

【化204】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５３を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0436】

[実施例１５４]

【化205】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５４を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0437】

[実施例１５５]

【化206】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５５を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0438】

[実施例１５６]

【化207】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５６を、Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１５のビルディングブロックから、実施例１０３と同様に作製した。

【0439】

[実施例１５７]

【化208】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0440】

[実施例１５８]

【化209】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５８を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ Ｂ２７Ｐ Ｂ２８Ｇ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0441】

[実施例１５９]

【化210】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１５９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0442】

[実施例１６０]

【化211】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６０を、Ｂ１−ＴＹＦＦＧＲＫＰＤＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0443】

[実施例１６１]

【化212】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６１を、Ａ−２Ｋ Ａ−１Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0444】

[実施例１６２]

【化213】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６２を、Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0445】

[実施例１６３]

【化214】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６３を、Ａ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0446】

[実施例１６４]

【化215】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６４を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0447】

[実施例１６５]

【化216】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６５を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0448】

[実施例１６６]

【化217】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６６を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０および実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0449】

[実施例１６７]

【化218】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６７を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0450】

[実施例１６８]

【化219】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６８を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0451】

[実施例１６９]

【化220】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１６９を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0452】

[実施例１７０]

【化221】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７０を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0453】

[実施例１７１]

【化222】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７１を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例９のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0454】

[実施例１７２]

【化223】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７２を、Ａ２２Ｋ Ｂ２２Ｋ Ｂ２９Ｒ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0455】

[実施例１７３]

【化224】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７３を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0456】

[実施例１７４]

【化225】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７４を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0457】

[実施例１７５]

【化226】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７５を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0458】

[実施例１７６]

【化227】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７６を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0459】

[実施例１７７]

【化228】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７７を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０３と同様に作製した。

【0460】

[実施例１７８]

【化229】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７８を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０３と同様に作製した。

【0461】

[実施例１７９]

【化230】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１７９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0462】

[実施例１８０]

【化231】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８０を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0463】

[実施例１８１]

【化232】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８１を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0464】

[実施例１８２]

【化233】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８２を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0465】

[実施例１８３]

【化234】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８３を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0466】

[実施例１８４]

【化235】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８４を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0467】

[実施例１８５]

【化236】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８５を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0468】

[実施例１８６]

【化237】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８６を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0469】

[実施例１８７]

【化238】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0470】

[実施例１８８]

【化239】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８８を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0471】

[実施例１８９]

【化240】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１８９を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0472】

[実施例１９０]

【化241】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９０を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0473】

[実施例１９１]

【化242】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９１を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0474】

[実施例１９２]

【化243】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９２を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0475】

[実施例１９３]

【化244】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９３を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0476】

[実施例１９４]

【化245】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９４を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0477】

[実施例１９５]

【化246】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９５を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0478】

[実施例１９６]

【化247】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９６を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0479】

[実施例１９７]

【化248】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0480】

[実施例１９８]

【化249】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９８を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0481】

[実施例１９９]

【化250】

[この文献は図面を表示できません]

実施例１９９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0482】

[実施例２００]

【化251】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２００を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0483】

[実施例２０１]

【化252】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０１を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0484】

[実施例２０２]

【化253】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０２を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0485】

[実施例２０３]

【化254】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０３を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0486】

[実施例２０４]

【化255】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０４を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0487】

[実施例２０５]

【化256】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０５を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0488】

[実施例２０６]

【化257】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０６を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0489】

[実施例２０７]

【化258】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０７を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0490】

[実施例２０８]

【化259】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０８を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0491】

[実施例２０９]

【化260】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２０９を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0492】

[実施例２１０]

【化261】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１０を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0493】

[実施例２１１]

【化262】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１１を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０および実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0494】

[実施例２１２]

【化263】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１２を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0495】

[実施例２１３]

【化264】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１３を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０および実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0496】

[実施例２１４]

【化265】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１４を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0497】

[実施例２１５]

【化266】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１５を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0498】

[実施例２１６]

【化267】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１６を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0499】

[実施例２１７]

【化268】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１７を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0500】

[実施例２１８]

【化269】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１８を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0501】

[実施例２１９]

【化270】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２１９を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0502】

[実施例２２０]

【化271】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２０を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0503】

[実施例２２１]

【化272】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２１を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0504】

[実施例２２２]

【化273】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２２を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0505】

[実施例２２３]

【化274】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２３を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0506】

[実施例２２４]

【化275】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２４を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0507】

[実施例２２５]

【化276】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２５を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0508】

[実施例２２６]

【化277】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２６を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0509】

[実施例２２７]

【化278】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0510】

[実施例２２８]

【化279】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２８を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0511】

[実施例２２９]

【化280】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２２９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0512】

[実施例２３０]

【化281】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３０を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0513】

[実施例２３１]

【化282】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３１を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0514】

[実施例２３２]

【化283】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３２を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0515】

[実施例２３３]

【化284】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３３を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0516】

[実施例２３４]

【化285】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３４を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0517】

[実施例２３５]

【化286】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３５を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0518】

[実施例２３６]

【化287】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３６を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３１のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0519】

[実施例２３７]

【化288】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３７を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３１のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0520】

[実施例２３８]

【化289】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３８を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３１のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0521】

[実施例２３９]

【化290】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２３９を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0522】

[実施例２４０]

【化291】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４０を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0523】

[実施例２４１]

【化292】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４１を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0524】

[実施例２４２]

【化293】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４２を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0525】

[実施例２４３]

【化294】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４３を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0526】

[実施例２４４]

【化295】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４４を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0527】

[実施例２４５]

【化296】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４５を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0528】

[実施例２４６]

【化297】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４６を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0529】

[実施例２４７]

【化298】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0530】

[実施例２４８]

【化299】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４８を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0531】

[実施例２４９]

【化300】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２４９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0532】

[実施例２５０]

【化301】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５０を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0533】

[実施例２５１]

【化302】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５１を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0534】

[実施例２５２]

【化303】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５２を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0535】

[実施例２５３]

【化304】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５３を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0536】

[実施例２５４]

【化305】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５４を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0537】

[実施例２５５]

【化306】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５５を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0538】

[実施例２５６]

【化307】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５６を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0539】

[実施例２５７]

【化308】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５７を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0540】

[実施例２５８]

【化309】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５８を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0541】

[実施例２５９]

【化310】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２５９を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0542】

[実施例２６０]

【化311】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６０を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0543】

[実施例２６１]

【化312】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６１を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0544】

[実施例２６２]

【化313】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６２を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0545】

[実施例２６３]

【化314】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６３を、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０５と同様に作製した。

【0546】

[実施例２６４]

【化315】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６４を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0547】

[実施例２６５]

【化316】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６５を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0548】

[実施例２６６]

【化317】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６６を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓ Ｂ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0549】

[実施例２６７]

【化318】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６７を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0550】

[実施例２６８]

【化319】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６８を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0551】

[実施例２６９]

【化320】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２６９を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓ Ｂ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0552】

[実施例２７０]

【化321】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７０を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0553】

[実施例２７１]

【化322】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７１を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0554】

[実施例２７２]

【化323】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７２を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0555】

[実施例２７３]

【化324】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７３を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0556】

[実施例２７４]

【化325】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７４を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0557】

[実施例２７５]

【化326】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７５を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0558】

[実施例２７６]

【化327】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７６を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0559】

[実施例２７７]

【化328】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７７を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0560】

[実施例２７８]

【化329】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７８を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0561】

[実施例２７９]

【化330】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２７９を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0562】

[実施例２８０]

【化331】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８０を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0563】

[実施例２８１]

【化332】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８１を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0564】

[実施例２８２]

【化333】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８２を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0565】

[実施例２８３]

【化334】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８３を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０および実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0566】

[実施例２８４]

【化335】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８４を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0567】

[実施例２８５]

【化336】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８５を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０および実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0568】

[実施例２８６]

【化337】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８６を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0569】

[実施例２８７]

【化338】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８７を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0570】

[実施例２８８]

【化339】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８８を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0571】

[実施例２８９]

【化340】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２８９を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0572】

[実施例２９０]

【化341】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９０を、Ａ２２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0573】

[実施例２９１]

【化342】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９１を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0574】

[実施例２９２]

【化343】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９２を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0575】

[実施例２９３]

【化344】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９３を、実施例１０１の共役と同様にＢｏｃ−ＯＥＧをＡ２１Ｑ （ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンの２つのリジン残基に共役することによって、続いて９５％ＴＦＡを使用してＢｏｃ基を除去し、実施例１０１の共役と同様に実施例２９のビルディングブロックとＯＥＧのアミノ基を共役することによって作製した。

【0576】

[実施例２９４]

【化345】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９４を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0577】

[実施例２９５]

【化346】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９５を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0578】

[実施例２９６]

【化347】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９６を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）６Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３３のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0579】

[実施例２９７]

【化348】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９７を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0580】

[実施例２９８]

【化349】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９８を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0581】

[実施例２９９]

【化350】

[この文献は図面を表示できません]

実施例２９９を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0582】

[実施例３００]

【化351】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３００を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0583】

[実施例３０１]

【化352】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０１を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0584】

[実施例３０２]

【化353】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０２を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０および実施例１６のビルディングブロックから、実施例実施例１０１と同様に作製した。

【0585】

[実施例３０３]

【化354】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０３を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0586】

[実施例３０４]

【化355】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０４を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0587】

[実施例３０５]

【化356】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０５を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0588】

[実施例３０６]

【化357】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０６を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0589】

[実施例３０７]

【化358】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０７を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0590】

[実施例３０８]

【化359】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０８を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0591】

[実施例３０９]

【化360】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３０９を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0592】

[実施例３１０]

【化361】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１０を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0593】

[実施例３１１]

【化362】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１１を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２２のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0594】

[実施例３１２]

【化363】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１２を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例１６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0595】

[実施例３１３]

【化364】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１３を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0596】

[実施例３１４]

【化365】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１４を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0597】

[実施例３１５]

【化366】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１５を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0598】

[実施例３１６]

【化367】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１６を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0599】

[実施例３１７]

【化368】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１７を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0600】

[実施例３１８]

【化369】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１８を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３５のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0601】

[実施例３１９]

【化370】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３１９を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0602】

[実施例３２０]

【化371】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２０を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0603】

[実施例３２１]

【化372】

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実施例３２１を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0604】

[実施例３２２]

【化372-2】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２２を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0605】

[実施例３２３]

【化373】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２３を、Ｂ１−ＧＫＰＧ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３４のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0606】

[実施例３２４]

【化374】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２４を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0607】

[実施例３２５]

【化375】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２５を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0608】

[実施例３２６]

【化376】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２６を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0609】

[実施例３２７]

【化377】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３２７を、Ａ１４Ｅ Ｂ−１Ｇ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0610】

[実施例３２８]

【化378】

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実施例３２８を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0611】

[実施例３２９]

【化379】

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実施例３２９を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0612】

[実施例３３０]

【化380】

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実施例３３０を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0613】

[実施例３３１]

【化381】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３３１を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0614】

[実施例３３２]

【化382】

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実施例３３２を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0615】

[実施例３３３]

【化383】

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実施例３３３を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0616】

[実施例３３４]

【化384】

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実施例３３４を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0617】

[実施例３３５]

【化385】

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実施例３３５を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0618】

[実施例３３６]

【化386】

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実施例３３６を、Ｂ１−ＧＫＰＧ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例２９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0619】

[実施例３３７]

【化387】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３３７を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３６のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0620】

[実施例３３８]

【化388】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３３８を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0621】

[実施例３３９]

【化389】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３３９を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0622】

[実施例３４０]

【化390】

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実施例３４０を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0623】

[実施例３４１]

【化391】

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実施例３４１を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）１２Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0624】

[実施例３４２]

【化392】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３４２を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0625】

[実施例３４３]

【化393】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３４３を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0626】

[実施例３４４]

【化394】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３４４を、Ｂ１−ＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0627】

[実施例３４５]

【化395】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３４５を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0628】

[実施例３４６]

【化396】

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実施例３４６を、Ａ１４Ｅ Ｂ１Ｋ Ｂ２Ｐ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0629】

[実施例３４７]

【化397】

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実施例３４７を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0630】

[実施例３４８]

【化398】

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実施例３４８を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３９のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0631】

[実施例３４９]

【化399】

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実施例３４９を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0632】

[実施例３５０]

【化400】

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実施例３５０を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３７のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0633】

[実施例３５１]

【化401】

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実施例３５１を、Ｂ１−ＧＫＰＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例４０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0634】

[実施例３５２]

【化402】

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実施例３５２を、Ａ１４Ｅ Ａ２２Ｋ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ２７ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例４０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0635】

[実施例３５３]

【化403】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３５３を、Ａ２１Ｑ（ＧＥＳ）３Ｋ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例３８のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0636】

[実施例３５４]

【化404】

[この文献は図面を表示できません]

実施例３５４を、Ａ１４Ｅ ｄｅｓＢ１−Ｂ２ Ｂ３Ｇ Ｂ４Ｋ Ｂ５Ｐ ｄｅｓＢ３０ヒトインスリンおよび実施例４０のビルディングブロックから、実施例１０１と同様に作製した。

【0637】

[実施例Ａ：炭水化物およびジボロネート結合親和性、アリザリンインアッセイ（ＡＲＳ）]
アリザリンレッド結合アッセイは、ボロネート／ボロキソール化合物のグルコースに対する阻害親和性を決定するために使用される比色アッセイである。アッセイは、ボロネートへの結合時のアリザリンレッドの色シフトに基づき、このシフトには、３３０〜３４０ｎｍ領域の吸光度の変化が続く可能性がある。

【0638】

アリザリンについてのホウ素化合物の解離定数の決定（Ｋ_ｄ）の決定
アリザリンレッドナトリウム（ＡＲＳ）とボロネート化合物との間の解離定数（Ｋｄ）の決定については、２００μＭのＡＲＳを２０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．４中に溶解し、１、０．５、０．２５、０．１２５、６２．５、３１．２５、１５．６２５、７．８１２、３．９０６、１．９５３、０．９７６７、０．４８８、および０．２４４ｍＭのボロン酸で、９６ウェルプレートに３連で滴定する。４０００ｒｐｍで５分間遠心分離した後に、吸収検出のためにプレートをマルチウェル分光計（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）内に配置する。

【0639】

分析を、３３０、３４０、および５２０ｎｍのそれぞれの吸収読み取りで室温において実施する。次いで、ボロネートの吸収対濃度に関して得られたデータを、ボロネートおよびＡＲＳのＫｄ値を得るためにシグモイド関数で適合させる（Ｐｒｉｓｍ ７，ＧｒａｐｈＰａｄ）。

【0640】

ホウ素化合物についてのグルコースの変位定数（Ｋ_ｄ）の決定
ボロネートと炭水化物との間の阻害定数（Ｋｉ）の決定のために、４００μＭボロン酸を、穏やかな撹拌下で２０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．４中に溶解する。化合物が完全溶解すると、２００μＭアリザリンレッド（ＡＲＳ）を溶液に添加する。次いで、ＡＲＳ−ボロネート溶液を、適切な炭水化物と１：１で、９６マルチウェルプレート（黒色、平坦、かつ透明な底部）に等分する。具体的に、Ｄ−グルコースおよびＬ−ラクテート溶液をこれらの濃度：１０００、５００、２５０、１００、５０、２５、１０、５、２．５、１、０．２５、０．１ｍＭ、および２５００、１０００、５００、１００、５０、１０、５、１、０．５、０．１、０．０５、０．０１ｍＭのそれぞれにおいて、２０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．４中で調製する。炭水化物と混合したＡＲＳ−ボロネートを有するプレートを室温で２０分間インキュベートする。４０００ｒｐｍで５分間遠心分離した後に、吸収検出のためにプレートをマルチウェル分光計（ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）内に配置する。

【0641】

分析を、３３０、３４０、および５２０ｎｍのそれぞれの吸収読み取りで室温において実施する。次いで、炭水化物の吸収対濃度に関して得られたデータを、選択された炭水化物に対するボロネートのＫｉ値を得るために、ＡＲＳ−ボロネートについて得られたＫｄの値およびＡＲＳ （１００μＭ）の濃度に関して制約された１部位Ｋｉ方程式で適合させる（Ｐｒｉｓｍ ７，ＧｒａｐｈＰａｄ）。

【表1】

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【0642】

表１のデータは、本発明の化合物に使用されるジボロン化合物が、低ミリモル範囲（０．８〜４．２ｍＭ）のＫｄ値でグルコースに結合すること、および所与のジボロン化合物が、ラクテートに対するよりもグルコースに対してより高い親和性を有することを示す。表１のデータはまた、モノボロン（実施例４１、４２、４３）が、本発明の化合物に使用されるジボロン化合物よりもグルコースに対してより弱い親和性を有することも示す。モノボロンは、グルコース濃度の生理学的範囲の変動に対してよく応答しない。

【0643】

[実施例Ｂ：グルコースの非存在下または存在下でのヒトインスリン受容体（ｈＩＲ−Ａ）に対する親和性を決定するためのアッセイ]
インスリン受容体の調製
ヒトインスリン受容体Ａ（ｈＩＲ−Ａ）を過剰発現させるＢＨＫ細胞を、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、２ｍＭのＥＤＴＡ、および１０％グリセロール中に溶離させた。除去された細胞溶解物を、９０分間、コムギ胚芽凝集素（ＷＧＡ）−アガロース（コムギ胚芽由来レクチン−アガロース，Ｌ１３９４，Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ Ｓｔｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）とバッチ吸収した。受容体を２０体積の５０ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、および０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００で洗浄し、その後、受容体を５０ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ８．０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、０．５Ｍのｎ−アセチルグルコサミン、および１０％グリセロールで溶出した。全ての緩衝液は、Ａｎｄｅｒｓｅｎ ｅｔ ａｌ． ２０１７ ＰＬｏｓ Ｏｎｅ １２に記載されるように、Ｃｏｍｐｌｅｔｅ（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ ＧｍｂＨ，Ｍａｎｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を含有した。

【0644】

インスリン受容体シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）結合アッセイ
ＳＰＡ ＰＶＴ抗マウスビーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を、１００ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ７．４またはｐＨ７．８、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＭｇＳＯ_４、０．０２５％（ｖ／ｖ）Ｔｗｅｅｎ−２０からなるＳＰＡ結合緩衝液中で希釈した。ＳＰＡビーズをＩＲ特異性抗体８３−７（Ｓｏｏｓ ｅｔ ａｌ．１９８６ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．２３５，１９９−２０８）および可溶化半精製ＨＩＲ−Ａでインキュベートした。５０００ｃｐｍの^１２５Ｉ−（Ｔｙｒ３１）−インスリン（Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ Ａ／Ｓ）の１０％結合を達成するように受容体濃度を調整した。冷たいリガンドの希釈系列を９６ウェルＯｐｔｉｐｌａｔｅに添加し、続いてトレーサー（^１２５Ｉ−インスリン、５０００ｃｐｍ／ウェル）および最後に受容体／ＳＰＡ混合物を添加した。グルコース感受性を試験するために、結合実験を、２０ｍＭグルコースの非存在下または存在下で設定した。プレートを２２．５時間２２℃で穏やかに揺動させ、１０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、ＴｏｐＣｏｕｎｔｅｒ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で計数した。データポイントを、４パラメータロジスティックモデルに適合させ、それによりヒトインスリン（同一プレート内の）と比較した類似体の相対親和性を決定した。ヒトインスリンと比較した類似体の相対親和性を、倍率変化として決定し、０〜２０ｍＭグルコース（ＨＩＲグルコース係数）の相対親和性の増加は、類似体のグルコース感受性を反映した。実験を１．５％ＨＳＡの存在下で行った。データを表２に示す。

【表2】

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【0645】

表１のデータは、１．５％ＨＳＡの存在下での本発明のジボロンインスリン共役体が、グルコースが存在しない場合よりも２０ｍＭグルコースの存在下でより高いインスリン受容体親和性を有することを示す。グルコースは、アルブミンへの結合からジボロンインスリン共役体を移動させ、それにより非アルブミン結合ジボロンインスリン共役体のより高い遊離分画を得て、より高いインスリン受容体親和性をもたらすことができる。

【0646】

[実施例Ｃ：グルコース感受性シグナル伝達（低／高グルコースにおけるＡＫＴリン酸化）を決定するためのアッセイ、表３。]
インスリンがインスリン受容体（ＩＲ）に結合すると、下流シグナル伝達経路の活性化が誘発される。下流シグナル伝達分子のうちの１つがＡＫＴであり、したがって、ＡＫＴリン酸化は、インスリンシグナル伝達経路の活性化を監視するために使用され得る。

【0647】

ＡＫＴアッセイ
ＨＩＲ−Ａを過剰発現させるチャイニーズハムスター卵巣細胞を３７℃で培養し、３ｍＭまたは２０ｍＭグルコース濃度のいずれかで９６ウェルプレートに播種した。濃度応答曲線を生成するための増加する量の本発明のヒトインスリンまたはインスリン誘導体を添加し、１０分間インキュベートした。培地を廃棄し、細胞を氷上に配置した。ＡＫＴ活性化アッセイを、ＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）ＳｕｒｅＦｉｒｅ（登録商標）を使用して業者によって記載されたとおりに行った。シグナルをＥｎｖｉｓｉｏｎ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ （ＥｎＶｉｓｉｏｎ，Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で測定した。２０ｍＭと３ｍＭグルコース濃度におけるグルコース感受性類似体（ヒトインスリンに対する）の効力間の倍率変化を決定した。

【0648】

[実施例Ｄ：細胞における炭水化物感受性グルコース取り込みを決定するためのアッセイ（ラット脂質生成アッセイ）]
インスリンがインスリン受容体に結合すると、下流シグナル伝達経路の活性化が誘発される。インスリンシグナル伝達の１つの代謝エンドポイントは脂質代謝であり、インスリンの存在下で、細胞による^３Ｈ−グルコース取り込みが刺激され、脂質に組み込まれるため、脂質生成アッセイを使用してエンドポイント読み出しを測定した。

【0649】

ラット脂質生成アッセイ（ｒＦＦＣ）
Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットからの副睾丸脂肪パッドを、激しい振盪下で１〜１．５時間、３６．５℃においてＨｅｐｅｓ Ｋｒｅｂｓ Ｒｉｎｇｅｒ緩衝液中のコラゲナーゼで分解した。懸濁液を２層のガーゼを通して濾過した。相を室温に５分間置くことによって分離し、脂肪細胞が上相に集まることを可能にした。下相を注射器で除去した。脂肪細胞を２０ｍＬのＨｅｐｅｓ Ｋｒｅｂｓ Ｒｉｎｇｅｒ緩衝液で２回洗浄した。細胞を、１．５％ＨＳＡ、０．５ｍＭグルコース、０．１μＣｉ／ウェルのグルコース（Ｄ−［３−^３Ｈ］グルコース（２０．０Ｃｉ／ｍｍｏｌ） Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）、＋／−１０ｍＭソルビトールを含有するＨｅｐｅｓ Ｋｒｅｂｓ Ｒｉｎｇｅｒ緩衝液中、９６ウェルプレートに移した。濃度応答曲線を生成するための増加する量の本発明のヒトインスリンまたはインスリン誘導体を添加し、３６．５℃で２時間インキュベートした。反応を、１００μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｅｎｔ Ｅ（カタログ番号６０１３６６１ Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を添加することによって停止した。Ｔｏｐ ｃｏｕｎｔｅｒで計数する前に、プレートを３時間静止させた。グルコース感受性類似体のＥＣ５０ソルビトールなし／ＥＣ５０ １０ｍＭソルビトールの間の比率を決定した。

【表3】

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【0650】

表３のＡＫＴデータは、本発明のジボロンインスリン共役体が、より低いグルコース濃度（３ｍＭ）に対してより高いグルコース濃度（２０ｍＭ）の存在下で、より高いレベルのＡＫＴリン酸化をもたらすことを示す。表３の脂質生成データは、本発明のジボロンインスリン共役体が、糖の添加なし（０ｍＭソルビトール）と比較してより高いレベルの糖（１０ｍＭソルビトール）の存在下で、より高い高レベルの脂質生成（すなわち、グルコース輸送）をもたらすことを示す。

【0651】

細胞は生存するためにグルコースを必要とし、そのため３ｍＭグルコースをより低いレベルとして使用し、２０ｍＭをより高いレベルとして使用した。ｒＦＦＣアッセイは、それ自体がグルコースレベルに感受性があり、そのためソルビトール（それ自体ではグルコース輸送に影響を与えない）を糖として使用して、ｒＦＦＣアッセイにおいてＨＳＡからジボロンインスリン誘導体を移動させた。

【0652】

[実施例Ｅ： ＰＫおよびＰＤデータ]
６５〜１００ｋｇの実験に使われていない雌の家畜ブタで、正常血糖クランプおよび高血糖クランプを実施した。動物に、１つが注入用および１つが血液のサンプル抽出用の２つの静脈カテーテルを搭載した。ソマトスタチン、グルカゴン、およびヒトインスリンの持続注入によって、基礎補充を実施した。注入開始後、ｇグルコース注入を調整することによって、血漿グルコースレベルを１０ｍＭまたは３．５〜４ｍＭに変化させた。血漿グルコース定常状態（９０または１２０分）の後、インスリン類似体の静脈内ボーラスを送達した。薬物動態（ＰＫ）分析のために、３６０〜５１０分にわたる選択された時点で血漿をサンプル抽出し、特に類似体について分析した。薬力学的（ＰＤ）分析のために、定常状態からのグルコース注入速度の変化を使用した。

【0653】

３．５〜４または１０ｍＭグルコースにおいてクランプしたブタに静脈内投与することによる、本発明ならびに対照のインスリン誘導体のグルコース感受性ＰＫデータが図１〜９に示され、３．５〜４ｍＭグルコース対１０ｍＭグルコースにおけるクランプについてのベースライン調整グルコース注入速度曲線下面積としてのＰＤデータが図１０に示される。

【0654】

ブタＰＫデータは、本発明のジボロンインスリン共役体が、より低いグルコースレベル（３．５〜４ｍＭ）と比較してより高いグルコースレベル（１０ｍＭ）で、より速く除去されることを示す。グルコースによるアルブミン結合からのジボロンインスリン共役体の移動は、より大きい割合の未結合インスリンを引き起こし、したがってインスリン受容体結合および活性化に利用可能である。ブタＰＤデータは、本発明のジボロンインスリン共役体が、より低いグルコースレベルと比較してより高いグルコースレベルで、より多くのグルコース処理を引き起こすことを示す。対照的に、非グルコース感受性インスリン対照（インスリンアスパルトおよびインスリンデグルデク）は、高血糖値および低血糖値でクランプされたブタにおいて同じＰＫおよびＰＤを示す。

【0655】

本発明のある特定の特徴が本明細書に例示および記載されているが、ここで、多くの修正、置換、変更、および同等物が当業者に想到されるであろう。したがって、添付の特許請求の範囲が、本発明の真の趣旨の範囲内にあるそのようなすべての修正および変更を網羅することを意図していることが理解されるべきである。

【図1】

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【図2】

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【図3】

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【図4】

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【図5】

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【図6】

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【図7】

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【図8】

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【図9】

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【図10】

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【配列表】

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