特許 6796594 造影剤およびその用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6796594

(24)【登録日】2020年11月18日

(45)【発行日】2020年12月9日

(54)【発明の名称】造影剤およびその用途

(51)【国際特許分類】

   A61K 49/10 20060101AFI20201130BHJP

   A61K 49/04 20060101ALI20201130BHJP

   A61B 5/055 20060101ALN20201130BHJP

【ＦＩ】

   A61K49/10

   A61K49/04

   !A61B5/055 383

【請求項の数】5

【全頁数】36

(21)【出願番号】特願2017-549559(P2017-549559)

(86)(22)【出願日】2015年12月10日

(65)【公表番号】特表2018-502150(P2018-502150A)

(43)【公表日】2018年1月25日

(86)【国際出願番号】CA2015051304

(87)【国際公開番号】WO2016090491

(87)【国際公開日】20160616

【審査請求日】2018年12月10日

(31)【優先権主張番号】62/090,519

(32)【優先日】2014年12月11日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/189,414

(32)【優先日】2015年7月7日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】517204287

【氏名又は名称】アールエフ セラピューティクス インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100112335

【弁理士】

【氏名又は名称】藤本 英介

(72)【発明者】

【氏名】チャン， ジードン

(72)【発明者】

【氏名】カリー， ケン

【審査官】 池上 文緒

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１４−５１５７５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１０−５１５７３２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００６−５１８７２７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００１−５１８４７１（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ４９／

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象に投与するための造影剤であって、
ヒドラジド官能基を含むターゲティング部分、
金属錯形成可能部分に結合した金属イオン、および
前記造影剤のターゲティング部分と金属錯形成可能部分とを連結するリンカー
を含み、金属イオン「Ｍ」がＧｄ^３＋、Ｆｅ^３＋、Ｍｎ^２＋ならびに^９９ｍＴｃ、^１１１Ｉｎ、^６４Ｃｕ、^６７Ｇａ、^９０Ｙ、^１８８Ｒｅ、^１８６Ｒｅ，又は、^１６３Ｄｙのイオンであり、該造影剤は、下記で示される造影剤。

【化1】

【請求項2】

前記金属イオンがＧｄ^３＋である請求項１に記載の造影剤。

【請求項3】

請求項１又は２に記載の造影剤、および薬学的に許容される希釈剤または担体を含む、組成物。

【請求項4】

画像診断または画像化を利用する応用での用途に適した化合物および／または医薬品の製造における、請求項１又は２に記載の造影剤の使用。

【請求項5】

画像診断または画像化を利用する応用が、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、コンピュータ断層撮影法（ＣＴ）、単光子放射型コンピュータ断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）、陽電子放射断層撮影法（ＰＥＴ）、ＭＲＩ支援の応用、ＣＴ支援の応用、ＳＰＥＣＴ支援の応用、またはＰＥＴ支援の応用である、請求項４に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願への相互参照
本出願は、２０１４年１２月１１日に出願された米国特許仮出願第６２／０９０，５１９号、および２０１５年７月７日に出願された米国特許仮出願第６２／１８９，４１４号の優先権の利益を主張するものであり、それらは、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれている。

【0002】

本開示は、概して、造影剤およびそれを使用する方法に関する。

【背景技術】

【0003】

医療画像診断は、医療診断の重要な非侵襲的手段として進歩してきた。核磁気共鳴画像法（「ＭＲＩ」）およびコンピュータ化断層撮影法（「ＣＴ」）は、最も広く使用される画像検査法のうちの２つである。ＭＲＩは一般に、水の励起した水素原子核の緩和特性に依存する。画像化しようとする組織または臓器を強力で均一な磁場の中に置くと、組織または臓器中の水素のプロトンのスピンが、磁場の軸に沿って整列する。医療画像工学には、超音波、ＳＰＥＣＴ、または陽電子放射技術（ｐｏｓｉｔｒｏｎ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）（ＰＥＴ）スキャンも含まれる。

【0004】

画像診断は、治療上の意志決定および患者の総合的治療管理に不可欠な疾患の正確な位置特定および特定をしやすくするために、医療に重要な役割を果たしている。技術革新によって、画像技術は、はるかに強力で多彩になってきている。

【0005】

画像診断は造影剤を投与しなくても行うことができるが、内部構造、例えば、組織および臓器、ならびに体液の視覚化を向上することができることから、造影剤の使用が広く普及した。造影剤は、特定の領域を強調表示して、調査している領域の視認性を高めるために使用される。ＭＲＩ技術用の造影剤は、それが位置する組織および体腔の緩和時間を改変し、付近に位置するプロトンの緩和時間を短縮することによって作用する。

【0006】

画像化技法と併用する注射用造影剤の使用は、この１０年間で劇的に増加した。現在使用されるこれらの造影剤は一般に安全であるが、幾つかの望ましくない副作用を伴っている。これらの副作用は、４つの主な領域、すなわち、全身性反応、心臓への影響、腎臓への影響、および全身の血管への影響に分けられる。有害作用を低減することを主要目的として、新しい造影剤を開発する多くの試みが為されてきた。

【0007】

画像診断の空間および時間分解能の向上にもかかわらず、造影剤を使用してもあいまいさのない診断をすることは依然として難しい。この問題は、病理組織および正常組織の両方の間に画像信号のかなりの重なりが存在するという事実に帰結され得る。この問題を解決する一手法は、標的となる臓器または組織に特異的に濃縮する、より特異的な造影剤を開発することである。

【0008】

過去数十年にわたるポルフィリンの使用は、ターゲティング能力を示す新しい化合物の開発への関心を刺激した。しかし、多くのポルフィリン系造影剤に関する問題として、不安定性、変色、毒性、および遅いクリアランス速度が挙げられる。幾つかの特許出願、例えば、ＷＯ００／０９１６９およびＷＯ０２／３８５４６は、ある程度の「ターゲティング」能力を示す種々の非ポルフィリン造影剤について論じているが、これらの化合物の患者の体内での遅いクリアランス速度および長寿命と共に、化合物の再現性に関する問題が存在し続けている。

【0009】

したがって、クリアランス特性に関するより望ましい薬物動態、ならびに毒性および／または副作用が最小限化された造影剤を提供することが望ましい。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

本開示の目的は、以前の造影剤の少なくとも１つの欠点を除去または低減することである。

【課題を解決するための手段】

【0011】

第１の態様では、本開示は、ヒドラジド官能基を含むターゲティング部分が壊死組織を標的とすることができるという幾分予想外の発見に基づいている。

【0012】

本開示は、ある造影剤群であって、ヒドラジド官能基を含むターゲティング部分、金属錯形成可能部分（ｍｅｔａｌ−ｃｏｍｐｌｅｘａｂｌｅ ｐｏｒｔｉｏｎ）に結合した金属イオン、および該造影剤のターゲティング部分と金属錯形成可能部分とを連結するリンカーを含む、造影剤を提供する。ヒドラジド官能基は、対象にキレート剤を投与すると、壊死組織に局在する。

【0013】

ある実施形態では、造影剤の金属錯形成可能部分は、アミノカルボキシレート官能基を含む。

【0014】

ある実施形態では、造影剤のアミノカルボキシレート官能基は、ポリアミノカルボキシレート官能基である。

【0015】

ある実施形態では、構造Ｘ−Ｌ−Ｙ^＊Ｍを含む造影剤が提供され、式中、Ｘはターゲティング部分であり、Ｌはリンカーであり、Ｙ^＊Ｍは、該造影剤の金属錯形成可能部分（Ｙ）に結合した金属イオン（Ｍ）であり、ここでは、Ｘは、ヒドラジド官能基を含む。

【0016】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、治療薬および／または診断薬として有用である。

【0017】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、壊死および壊死に関連する病態が関与する医療用途に有用であり得る。

【0018】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、例えば、ＭＲＩ、ＣＴ、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ支援の応用、ＣＴ支援の応用、ＳＰＥＣＴ支援の応用、またはＰＥＴ支援の応用を含む、画像診断または画像化を利用する用途での使用に適した組成物および／または医薬品の製造に有用である。

【0019】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、薬学的に許容される担体と組み合わせて提供される。

【0020】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、進行中の治療的処置の有効性をモニタリングするのに有用であり得る。

【0021】

本開示の他の態様および特徴は、具体的な実施形態についての以下の説明を添付の図面と併せて精査すれば、当業者には明白となろう。

【0022】

本開示の実施形態を、ここから添付の図面を参照しながら例示として限って説明する。

【図面の簡単な説明】

【0023】

【図1】造影剤ＲＦ１３１１を投与する前のラットの肝臓の磁気共鳴画像を示す図である。

【図2】造影剤ＲＦ１３１１を４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与してから２４時間後のラットの肝臓の磁気共鳴画像を示す図である。

【図3】アルコール誘発性筋壊死を示すラットの磁気共鳴画像を示す図である。１列目のＭＲＩ画像は、ＲＦ１３１１を投与する前である。２列目のＭＲＩ画像は、ＲＦ１３１１投与してから１分後である。３列目のＭＲＩ画像は、ＲＦ１３１１を投与してから１０分後である。４列目のＭＲＩ画像は、ＲＦ１３１１を投与してから２４時間後である。

【図4】ラットの肝臓および筋肉中の梗塞組織におけるＲＦ１３１１のコントラスト比を示すグラフである。図４は、図１、図２、および図３の結果のグラフ表示である。

【図5】造影剤を３０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与したラットの血漿中の造影剤ＲＦ１３１１の経時的な濃度を示すグラフである。

【図6】ＲＦ１３１１で処置したラットにおける、異なる３種のＭＲＩ条件下での、２４時間にわたる梗塞組織と正常組織との間のコントラスト比を示すグラフである。

【図7】心筋梗塞を誘発してから２４時間後のｉｎ ｖｉｖｏでの冠状動脈組織であって、化合物ＲＦ１３１１で処理された組織のＭＲＩ画像を示す図である。

【図8】図７で画像化された組織に相当する、ｅｘ ｖｉｖｏでの冠状動脈組織のＭＲＩ画像を示す図である。

【図9】図８の組織の写真である。

【図10】塩化トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）で染色して壊死組織を白色領域として示した、図９の組織の写真である。

【発明を実施するための形態】

【0024】

概して、本開示は、造影剤であって、ヒドラジド官能基を含むターゲティング部分、金属錯形成可能部分に結合した金属イオン、および該造影剤のターゲティング部分と金属錯形成可能部分とを連結するリンカーを含む、造影剤を提供する。ターゲティング部分は、壊死組織に局在する。

【0025】

従来の造影剤は、Ｍａｇｎｅｖｉｓｔ（登録商標）（Ｇｄ−ＤＴＰＡ）、Ｄｏｔａｒｅｍ（登録商標）（Ｇｄ−ＤＯＴＡ）、Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標）（Ｇｄ−ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）、およびＰｒｏＨａｎｃｅ（登録商標）（Ｇｄ−ＨＰＤＯ３Ａ）などのように、単一のキレート剤が金属イオンに結合して錯体を形成する化学構造を有している。これらの従来の薬剤のうち、問題とする特定の臓器または組織を標的とするものは何もなく、しかも、これらは好ましくない薬物動態を伴うことが多い。これらのタイプの従来の非特異的な薬剤は、典型的には、血漿中半減期が極めて短く、コントラスト増強撮像の時間域が短いために、最適な撮像タイミングを推定することが困難である。

【0026】

本明細書において、「対象」という用語は、動物、例えば、鳥類または哺乳類を指す。具体的な動物として、ラット、マウス、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ウマ、ブタ、または霊長類が挙げられる。対象は、さらに、代替的に患者と呼ばれるヒトであってもよい。対象は、さらに遺伝子導入動物であってもよい。対象は、さらに齧歯類、例えば、マウスまたはラットであってもよい。

【0027】

キレート化は、多くの分野、例えば、金属錯体化学、有機および無機化学、ならびに生化学に一般に適用されている。キレート剤は、水性系において金属イオンを制御するために使用されるので、造影剤の分野において、それらは画像診断に使用する金属イオンと結合させるのに好まれて使用されている。キレート剤は、多価金属イオンと安定な水溶性錯体を形成し、金属イオンの通常の反応性を遮断することによって、望ましくない相互作用を防止する。本開示の造影剤は、結合されてキレート錯体となっている金属イオンを含む、Ｔ１緩和剤である。ＭＲＩ信号の強度は、組織の緩和速度の値と関連している。

【0028】

一般に、Ｔ１造影剤の緩和効率は、金属イオンの性質、ならびに金属−キレート錯体の大きさおよび構造を含む、いくつかの要因に依存する。Ｔ１緩和剤は、水のプロトンの緩和シンク（ｒｅｌａｘａｔｉｏｎ ｓｉｎｋ）として作用する。常磁性金属キレート、例えば、Ｇｄ（ＩＩＩ）、Ｆｅ（ＩＩＩ）、およびＭｎ（ＩＩ）錯体は、周囲の水のプロトンの緩和速度を改変させて、ＭＲＩコントラスト増強の有効性を上げることができる。キレート分子は、比較的大きく、金属イオンとの多数の結合を有する。金属イオンを取り囲む原子の層内には、配位圏として知られる、限られた量の自由空間しかない。このように自由空間が足りないと、一般に、より大きいキレート分子のプロトンは、効率的なエネルギー移動のために金属イオンに十分接近することができない。その結果、組織水が、金属イオンの配位圏の中に拡散してそのエネルギーを手放すことができ、次に、組織水が今度は交換することによって、さらなる水分子が配位圏に入ることが可能になる。この拡散交換は極めて迅速に起こり、その結果、造影剤付近の組織水は隣接する組織中の水より大きい巨視的磁化を有することになり、それによってＴ１強調画像における強い信号に寄与する。

【0029】

ヒドラジド官能基を含むターゲティング部分が、壊死組織を標的とし、そこに局在する能力を有するという驚くべき発見によって、本明細書に開示する造影剤が開発されるに至った。

【0030】

これらの造影剤は、ヒドラジド官能基を含むターゲティング部分、金属錯形成可能部分に結合した金属イオン、およびターゲティング部分と金属錯形成可能部分とを連結するリンカーを含む。当業者であれば、金属錯形成可能部分に結合した金属イオンが金属キレートとも呼ばれることがあることを理解するであろう。ターゲティング部分は、対象への造影剤の投与後に、造影剤を壊死組織に局在させる。

【0031】

ある実施形態では、造影剤は、式：Ｘ−Ｌ−Ｙ^＊Ｍによって表されてもよく、式中、Ｘはターゲティング部分、Ｌはリンカー、Ｙ^＊Ｍは金属錯形成可能部分（Ｙ）に結合した金属イオン（Ｍ）である。ターゲティング部分Ｘは、ヒドラジド官能基を含む。

【0032】

ある実施形態では、造影剤は、式：Ｘ−Ｌ−（Ｙ^＊Ｍ）_２によって表されてもよく、式中、Ｘは、ターゲティング部分であり、ヒドラジド官能基を含み、Ｌはリンカーであり、（Ｙ^＊Ｍ）_２は、２つの金属錯形成可能部分（Ｙ）に結合した２つの金属イオン（Ｍ）を表す。この式によって示されるように、造影剤に結合した２つの金属イオンが存在し、金属イオンおよび造影剤は２：１のモル比である。（Ｙ^＊Ｍ）_ｎ（式中、ｎは、２、３、４、または５）を有する造影剤も企図され、この場合、ターゲティング部分は、造影剤を対象に投与した後、造影剤を壊死組織に自由に局在させることができる。

【0033】

ある実施形態では、ターゲティング部分は、複数のヒドラジド官能基を含んでもよい。例えば、ターゲティング部分は、２、３、４、５、６、または７個のヒドラジド官能基を含んでもよい。ヒドラジド官能基は、造影剤の共通部分に直接結合されている必要はない。むしろ、造影剤は、複数のリンカーに結合された単一の金属錯形成可能部分を含んでもよく、この場合、各リンカーは、ヒドラジド官能基を含む化学基に結合される。かかる造影剤では、ターゲティング部分は、ヒドラジド官能基を含む複数の化学基を含むことが理解されよう。

【0034】

ある実施形態では、金属錯形成可能部分は、アミノカルボキシレート官能基であってもよい。一態様では、アミノカルボキシレート官能基は、ポリアミノカルボキシレート官能基であってもよい。

【0035】

定義
「リンカー」という用語は、本明細書において、２つ以上の他の化学基を連結する結合または化学基を意味する。例えば、化学基ＲとＲ’との連結において、リンカーは、ＲとＲ’とを直接結び付ける結合であってもよいし、例えば、アミド、エステル、エーテル、ヒドラジド、窒素、またはイオウ官能基を介してＲとＲ’とを結び付ける化学基であってもよい。

【0036】

リンカーは、アルキル、ヘテロアルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、アシル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルキルチオ、アルキルカルボニルアミノ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、またはヘテロアルコキシであってもよい。好ましくは、リンカーは、アルキル、アリール、ヘテロアルキル、またはヘテロアリールリンカーである。

【0037】

リンカー基となる化合物の２つの末端は、好ましくはヒドラジドである。これによって、ジヒドラジド化合物を金属錯形成可能な化合物の酸またはエステルと反応させ、それによって金属錯形成可能部分と結び付いたヒドラジドを含むターゲティング部分を有する造影剤を生成することが可能となる。

【0038】

リンカー基の例として、これらに限定されないが、Ｒ−Ｒ’、Ｒ−Ｃ_６Ｈ_４−Ｒ’、およびＲ−ＣＨ_２ＣＨ_２−Ｒ’が挙げられる。ここで、式中、ＲおよびＲ’は、互いに結び付けられた２つの化学基を表す。

【0039】

リンカー基の他の例として、以下が挙げられる：

【化1】

【0040】

例えば、化合物Ｘ−Ｌ−Ｙ^＊Ｍは、Ｌが結合であるとき、オキサリルジヒドラジドと、金属錯形成可能な化合物、例えば１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）とのエステルである縮合生成物であってもよい。

【0041】

「金属錯形成可能部分」という用語は、本明細書において、中心の金属原子と結合してキレート錯体を形成することができるリガンドを有する化学基を意味する。磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）の造影剤として作用するとき、キレート錯体は、水分子を配位するための配位部位を有する金属を与える。錯形成された水分子の緩和時間が改変し、ＭＲＩ画像においてより容易に識別することができる。金属錯形成可能部分の具体例として、以下が挙げられる：

【化2】

【0042】

１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）およびジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）は、特に好ましい金属錯形成可能部分の例である。

【0043】

「アルキル」という用語は、本明細書において、１〜２０個の炭素原子を含有する、非分枝または分枝鎖の飽和炭化水素残基を意味する。「低級アルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を含有する、直鎖または分枝鎖の炭化水素残基を意味する。「Ｃ_１−１０アルキル」は、本明細書において、１〜１０個の炭素から構成されるアルキルを指す。アルキル基の例として、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル、またはペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、およびオクチルを含む低級アルキル基が挙げられる。

【0044】

「アルキル」という用語が、「フェニルアルキル」または「ヒドロキシアルキル」中のように、別の用語に続く接尾語として使用されるとき、これは、他方の具体的に名前を挙げた基から選択される１〜２個の置換基で置換されている、上記で定義した通りのアルキル基を指すことを意図している。よって、例えば、「フェニルアルキル」は、Ｒ’Ｒ”−基であって、式中、Ｒ’がフェニル基であり、Ｒ”が本明細書で定義する通りのアルキレン基である基を意味しており、フェニルアルキル部分の結合点はアルキレン基上となることが理解される。アリールアルキル基の例として、これらに限定されないが、ベンジル、フェニルエチル、３−フェニルプロピルが挙げられる。「アリールアルキル」または「アラルキル」という用語は、Ｒ’がアリール基であることを除いて、同様に解釈される。「（ヘタ）アリールアルキル」または「（ヘタ）アラルキル」という用語は、Ｒ’が場合によってアリールまたはヘテロアリール基であることを除いて、同様に解釈される。

【0045】

「ヘテロアルキル」は、分枝アルキルを含む、本明細書で定義する通りのアルキル部分であって、１個または複数のヘテロ原子を含むアルキル部分を意味する。代表的なヘテロアルキル部分は、１個、２個、または３個の水素原子が、−ＯＲ^ａ、−ＮＲ^ｂＲ^ｃ、および−Ｓ（Ｏ）_ｎＲ^ｄ（式中、ｎは、０〜２の整数である）からなる群から独立に選択される置換基で置き換えられてもよく、式中、Ｒ^ａは、水素、アシル、アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキルアルキルであり；Ｒ^ｂおよびＲ^ｃは互いに独立に、水素、アシル、アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキルアルキルであり；ｎが０のとき、Ｒ^ｄは、水素、アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキルアルキルであり；ｎが１のとき、Ｒ^ｄは、アルキル、シクロアルキル、またはシクロアルキルアルキルであり；ｎが２のとき、Ｒ^ｄは、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アミノ、アシルアミノ、モノアルキルアミノ、またはジアルキルアミノである。他のヘテロアルキル部分は、炭素原子の間に挿入された１個または複数のヘテロ原子を有することができる。代表的な例として、これらに限定されないが、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−ヒドロキシ−１−ヒドロキシ−メチルエチル、２，３−ジヒドロキシプロピル、１−ヒドロキシ−メチルエチル、３−ヒドロキシブチル、２，３−ジヒドロキシブチル、２−ヒドロキシ−１−メチルプロピル、２−アミノエチル、３−アミノプロピル、２−メチルスルホニルエチル、アミノスルホニルメチル、アミノスルホニルエチル、アミノスルホニルプロピル、メチルアミノスルホニルメチル、メチルアミノスルホニルエチル、メチルアミノスルホニルプロピル、メチルエチルエーテル、ジメチルアミン、アジピン酸ジヒドラジドなどが挙げられる。

【0046】

「アルキレン」という用語は、本明細書において、他に示さない限り、炭素原子１〜２０個の二価の飽和直鎖状炭化水素基（例えば、（ＣＨ_２）_ｎ）、または炭素原子２〜２０個の二価の分枝飽和炭化水素基（例えば、−ＣＨＭｅ−または−ＣＨ_２ＣＨ（ｉ−Ｐｒ）ＣＨ_２−）を意味する。メチレンの場合を除き、アルキレン基の開いた原子価は、同じ原子に結合しない。アルキレン基の例として、これらに限定されないが、メチレン、エチレン、プロピレン、２−メチル−プロピレン、１，１−ジメチル−エチレン、ブチレン、２−エチルブチレンが挙げられる。

【0047】

「アルコキシ」という用語は、本明細書において、−Ｏ−アルキル基を意味し、ここで、アルキルは上で定義した通りであり、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、ｉ−プロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｉ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシであり、それらの異性体が含まれる。「低級アルコキシ」は、本明細書において、前に定義した通りの「低級アルキル」基を有するアルコキシ基を意味する。「Ｃ_１−_１０アルコキシ」は、本明細書において、アルキルがＣ_１−１０である−Ｏ−アルキルを指す。

【0048】

「アルコキシアルキル」という用語は、本明細書において、Ｒ’Ｒ”−基であって、式中、Ｒ’が本明細書で定義する通りのアルコキシ基であり、Ｒ”が本明細書で定義する通りのアルキレン基を指しており、アルコキシアルキル部分の結合点はアルキレン基上となることが理解される。Ｃ_１−６アルコキシアルキルは、アルキル部分が、その基のアルコキシ部分にある炭素原子を除いて、１〜６個の炭素原子から構成される基を意味する。Ｃ_１−３アルコキシ−Ｃ_１−６アルキルは、アルキル部分が１〜６個の炭素原子から構成され、アルコキシ基が１〜３個の炭素から構成される基を意味する。例は、メトキシメチル、メトキシエチル、メトキシプロピル、エトキシメチル、エトキシエチル、エトキシプロピル、プロピルオキシプロピル、メトキシブチル、エトキシブチル、プロピルオキシブチル、ブチルオキシブチル、ｔ−ブチルオキシブチル、メトキシペンチル、エトキシペンチル、プロピルオキシペンチルであり、それらの異性体が含まれる。

【0049】

「アシル」という用語は、本明細書において、式−Ｃ（＝Ｏ）Ｒの基であって、Ｒが水素または本明細書で定義する通りの低級アルキルである基を意味する。この用語または「アルキルカルボニル」は、本明細書において、式Ｃ（＝Ｏ）Ｒの基であって、Ｒが本明細書で定義する通りのアルキルである基を意味する。Ｃ_１−６アシルという用語は、６個の炭素原子を含有する−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ基を指す。「アリールカルボニル」という用語は、本明細書において、式Ｃ（＝Ｏ）Ｒの基であって、Ｒがアリール基である基を意味し；「ベンゾイル」という用語は、本明細書において、Ｒがフェニルである「アリールカルボニル」基を意味する。

【0050】

「シクロアルキル」は、単環式または二環式環から構成される飽和炭素環式部分を意味する。シクロアルキルは、場合によって、１個または複数の置換基で置換することができ、ここで、各置換基は独立に、他に特に示さない限り、ヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハロ、ハロアルキル、アミノ、モノアルキルアミノ、またはジアルキルアミノである。シクロアルキル部分の例として、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが挙げられ、これらの部分的に不飽和な誘導体も含まれる。

【0051】

「シクロアルキルアルキル」は、式−Ｒ^ａ−Ｒ^ｂの部分であって、Ｒ^ａが、本明細書で定義した通りのアルキレンであり、Ｒ^ｂが、本明細書で定義した通りのシクロアルキルである部分を意味する。

【0052】

「アリール」は、単環式、二環式、または三環式芳香族環から構成される環式芳香族炭化水素部分を意味する。アリール基は、場合によって、本明細書に定義する通りに置換されている。アリール部分の例として、これらに限定されないが、場合によって置換されている、フェニル、ナフチル、フェナントリル、フルオレニル、インデニル、ペンタレニル、アズレニル、オキシジフェニル、ビフェニル、メチレンジフェニル、アミノジフェニル、ジフェニルスルフィジル、ジフェニルスルホニル、ジフェニルイソプロピリデニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾフラニル、ベンゾジオキシリル、ベンゾピラニル、ベンゾオキサジニル、ベンゾオキサジノニル、ベンゾピペラジニル（ｂｅｎｚｏｐｉｐｅｒａｄｉｎｙｌ）、ベンゾピペラジニル（ｂｅｎｚｏｐｉｐｅｒａｚｉｎｙｌ）、ベンゾピロリジニル、ベンゾモルホリニル、メチレンジオキシフェニル、エチレンジオキシフェニルなどが挙げられ、それらの部分的に水素化された誘導体も含まれる。

【0053】

「ヘテロアリール」または「ヘテロ芳香族」という用語は、本明細書において、少なくとも１個の芳香族環を有する、単環式、二環式、または三環式の基であって、この芳香族環が、環当たりに４〜８個の原子を含有し、１個または複数のＮ、Ｏ、またはＳヘテロ原子を組み込んでおり、残りの環原子が炭素である基を意味しており、ヘテロアリール基の結合点は、芳香族環上となることが理解される。当業者には周知のように、ヘテロアリール環の芳香族性は、それらに相当する全て炭素のものよりも小さい。よって、本願において、ヘテロアリール基は、ある程度の芳香族性を有していれば十分である。ヘテロアリール部分の例として、５〜６個の環原子および１〜３個のヘテロ原子を有する単環式芳香族ヘテロ環が挙げられ、これらに限定されないが、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、トリアゾリン、チアジアゾール、およびオキサジアキソリン（ｏｘａｄｉａｘｏｌｉｎｅ）が挙げられ、これらは、ヒドロキシ、シアノ、アルキル、アルコキシ、チオ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロ、ハロアルキル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、およびジアルキルアミノアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニルおよびカルバモイル、アルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アルキルカルボニルアミノおよびアリールカルボニルアミノから選択される、１個または複数の、好ましくは１個または２個の置換基で場合によって置換されていてもよい。二環式部分の例として、これらに限定されないが、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾフリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾール、ベンズイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、およびベンズイソチアゾールが挙げられる。二環式部分は、いずれかの環上で場合によって置換されていてもよいが、結合点は、ヘテロ原子を含有する環上にある。

【0054】

「ヘテロシクリル」、「ヘテロ環」、または「ヘテロシクロアルキル」という用語は、本明細書において、１個または複数の環、好ましくは１〜２個の環から構成される飽和環式基であって、この環が、環当たり３〜８個の原子を有し、１個または複数の環ヘテロ原子（Ｎ、Ｏ、またはＳ（Ｏ）_０−２から選択される）を組み込んでいる基を意味しており、これは、他に示さない限り、ヒドロキシ、オキソ、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノから選択される１個または複数の、好ましくは１個または２個の置換基で独立に、場合によって置換されていてもよい。ヘテロ環式基の例として、これらに限定されないが、アゼチジニル、ピロリジニル、ヘキサヒドロアゼピニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、キヌクリジニル、およびイミダゾリニルが挙げられる。好ましくは、「ヘテロシクリル」、「ヘテロ環」、または「ヘテロシクロアルキル」は、モルホリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、またはテトラヒドロフラニルである。

【0055】

「ヒドロキシアルキル」という用語は、本明細書において、異なる炭素原子上の１〜３個の水素原子がヒドロキシル基によって置き換えられている、本明細書で定義する通りのアルキル基を意味する。

【0056】

「アルキルチオ」または「アルキルスルファニル」という用語は、アルキルが上で定義した通りである−Ｓ−アルキル基を指し、例えば、メチチオ（ｍｅｔｈｔｈｉｏ）、エチルチオ、ｎ−プロピルチオ、ｉ−プロピルチオ、ｎ−ブチルチオ、ヘキシルチオであり、それらの異性体が含まれる。「低級アルキルチオ」は、本明細書において、前に定義した通りの「低級アルキル」基を有するアルキルチオ基を意味する。「Ｃ_１−１０アルキルチオ」は、本明細書において、アルキルがＣ_１−１０である−Ｓ−アルキルを指す。「フェニルチオ」は、アリールがフェニルである「アリールチオ」部分である。

【0057】

「アルキルカルボニルアミノ」および「アリールカルボニルアミノ」という用語は、本明細書において、式−ＮＣ（＝Ｏ）Ｒの基であって、式中、Ｒがそれぞれアルキルまたはアリールであり、アルキルおよびアリールが本明細書で定義する通りである基を指す。

【0058】

「アルキルスルフィニル」および「アリールスルフィニル」という用語は、本明細書において、式−Ｓ（＝Ｏ）Ｒの基であって、式中、Ｒがそれぞれアルキルまたはアリールであり、アルキルおよびアリールが本明細書で定義する通りである基を指す。

【0059】

「アルキルスルホニル」および「アリールスルホニル」という用語は、本明細書において、式−Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒの基であって、式中、Ｒがそれぞれアルキルまたはアリールであり、アルキルおよびアリールが本明細書で定義する通りである基を指す。「ヘテロアルキルスルホニル」という用語は、本明細書において、式−Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒの基であって、式中、Ｒが本明細書で定義する通りの「ヘテロアルキル」である基を指す。

【0060】

「アルキルスルホニルアミノ」および「アリールスルホニルアミノ」という用語は、本明細書において、式−ＮＲ’Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒの基であって、式中、Ｒがそれぞれアルキルまたはアリールであり、Ｒ’が水素またはＣ_１−３アルキルであり、アルキルおよびアリールが本明細書で定義する通りである基を指す。

【0061】

「ヘテロアルコキシ」という用語は、本明細書において、ヘテロアルキルが本明細書で定義する通りである−Ｏ−（ヘテロアルキル）基を意味する。「Ｃ_１−１０ヘテロアルコキシ」は、本明細書において、アルキルがＣ_１−１０である−Ｏ−（ヘテロアルキル）を指す。代表的な例として、これらに限定されないが、２−ジメチルアミノエトキシおよび３−スルホンアミド−１−プロポキシが挙げられる。

【0062】

「ハロ」、「ハロゲン」、および「ハロゲン化物」という用語は、本明細書では互換的に使用され、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを指す。「ハロアルキル」は、１個または複数の水素が同じまたは異なるハロゲンで置き換えられている、本明細書で定義される通りのアルキルを意味する。代表的なハロアルキルとして、−ＣＨ_２Ｃｌ、−ＣＨ_２ＣＦ_３、−ＣＨ_２ＣＣｌ_３、−ＣＦ_２ＣＦ_３、−ＣＦ_３などが挙げられる。

【0063】

「場合によって置換されている」とは、低級アルキル、ハロ、ＯＨ、シアノ、アミノ、ニトロ、低級アルコキシ、またはハロ−低級アルキルから選択される０〜３個の置換基で独立に置換されている置換基を意味する。

【0064】

本明細書に記載する定義は、「ヘテロアルキルアリール」、「ハロアルキルヘテロアリール」、「アリールアルキルヘテロシクリル」、「アルキルカルボニル」、「アルコキシアルキル」など、付け加えて化学的に妥当な組合せを形成してもよい。「アルキル」という用語が、「フェニルアルキル」または「ヒドロキシアルキル」中のように、別の用語に続いて接尾語として使用されるとき、これは、他方の具体的に名前を挙げた基から選択される１〜２個の置換基で置換されている、上で定義した通りのアルキル基を指すことを意図している。よって、例えば、「フェニルアルキル」は、１〜２個のフェニル置換基を有するアルキル基を指し、よって、ベンジル、フェニルエチル、およびビフェニルを含む。「アルキルアミノアルキル」は、１〜２個のアルキルアミノ置換基を有するアルキル基である。「ヒドロキシアルキル」として、２−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、１−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピル、２−ヒドロキシブチル、２，３−ジヒドロキシブチル、２−（ヒドロキシメチル）、３−ヒドロキシプロピルなどが挙げられる。したがって、本明細書において、「ヒドロキシアルキル」という用語は、以下に定義するヘテロアルキル基のサブセットを定義するために使用される。−（アラ）アルキルという用語は、非置換のアルキル基またはアラルキル基のいずれかを指す。（ヘテロ）アリールまたは（ヘタ）アリールという用語は、アリール基またはヘテロアリール基のいずれかを指す。

【0065】

一般に使用される略語を以下に挙げる：アセチル（Ａｃ）、アゾ−ビス−イソブチリルニトリル（ＡＩＢＮ）、気圧（Ａｔｍ）、９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（９−ＢＢＮまたはＢＢＮ）、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルピロカルボネートまたはｂｏｃ無水物（ＢＯＣ_２Ｏ）、ベンジル（Ｂｎ）、ブチル（Ｂｕ）、ケミカルアブストラクツ登録番号（ＣＡＳＲＮ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺまたはＺ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）、三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）、ジベンジリデンアセトン（ｄｂａ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノナ−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジエチルアゾジカルボキシレート（ＤＥＡＤ）、ジ−イソ−プロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）、ジ−イソ−ブチル水素化アルミニウム（ＤＩＢＡＬまたはＤＩＢＡＬ−Ｈ）、ジ−イソ−プロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）エタン（ｄｐｐｅ）、１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（ｄｐｐｆ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、エチル（Ｅｔ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、２−エトキシ−２Ｈ−キノリン−１−カルボン酸エチルエステル（ＥＥＤＱ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ_２Ｏ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート酢酸（ＨＡＴＵ）、酢酸（ＨＯＡｃ）、１−Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、イソ−プロパノール（ＩＰＡ）、リチウムヘキサメチルジシラザン（ＬｉＨＭＤＳ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、融点（ｍｐ）、ＭｅＳＯ_２−（メシルまたはＭｓ）、メチル（Ｍｅ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）、質量スペクトル（ｍｓ）、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）、Ｎ−カルボキシ無水物（ＮＣＡ）、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＮＣＳ）、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ）、重クロム酸ピリジニウム（ＰＤＣ）、フェニル（Ｐｈ）、プロピル（Ｐｒ）、イソ−プロピル（ｉ−Ｐｒ）、ポンド／平方インチ（ｐｓｉ）、ピリジン（ｐｙｒ）、室温（ｒｔまたはＲＴ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルまたはｔ−ＢｕＭｅ_２Ｓｉ（ＴＢＤＭＳ）、トリエチルアミン（ＴＥＡまたはＥｔ_３Ｎ）、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン−１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）、トリフレートまたはＣＦ_３ＳＯ_２−（Ｔｆ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、１，１’−ビス−２，２，６，６−テトラメチルヘプタン−２，６−ジオン（ＴＭＨＤ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリメチルシリルまたはＭｅ_３Ｓｉ（ＴＭＳ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ＴｓＯＨまたはｐＴｓＯＨ）、４−Ｍｅ−Ｃ_６Ｈ_４ＳＯ_２−またはトシル（Ｔｓ）、Ｎ−ウレタン−Ｎ−カルボキシ無水物（ＵＮＣＡ）。接頭語であるノルマル（ｎ）、イソ（ｉ−）、第二級（ｓｅｃ−）、第三級（ｔｅｒｔ−）およびネオを含む従来の命名法は、アルキル部分と共に使用されるとき、それらの通例の意味を有する。（Ｊ．ＲｉｇａｕｄｙおよびＤ．Ｐ．Ｋｌｅｓｎｅｙ、Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、ＩＵＰＡＣ １９７９年 Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ、オックスフォード）。

【0066】

本開示の金属イオン（複数可）は、造影剤に結合される。ある実施形態では、金属イオンはガドリニウム（ＧｄＩＩＩ）である。ある実施形態では、金属イオンはテクネチウムである。ある実施形態では、金属イオンはインジウムである。当業者であれば、造影剤における使用に適した他の金属イオン、例えば、マンガン、銅、銅６４および鉄も、本開示の化合物に使用できることが理解されよう。

【0067】

造影剤の金属錯形成可能部分は、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン四酢酸（ＤＯＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）、またはそれらの多形であってもよい。金属キレートは当技術分野で周知であり、これらの化合物は、キーランツ（ｃｈｅｌａｎｔｓ）、キレーター（ｃｈｅｌｔｏｒ）、およびキレート剤と呼ばれることが多い。キレート剤の構造は、金属イオンと可溶性の錯体分子を形成し、金属イオンが他の元素またはイオンと反応して沈殿物を生成しないように金属イオンを不活性させるような構造である。当業者であれば、ヒトに投与するのに適していればどんなキレート剤であっても本開示による造影剤の調製に適するものとなることが理解されよう。一実施形態では、金属錯形成可能部分はＤＯＴＡである。別の実施形態では、金属錯形成可能部分はＤＴＰＡである。

【0068】

本開示の造影剤化合物の具体例として、以下が挙げられる：

【化3】

【0069】

本開示の造影剤化合物は、任意の従来の手段によって調製されてもよい。

【0070】

造影剤は、医療用途におけるそれらの特性に関して幾らか定量的相違を呈することがあり、それには、血中クリアランス（比較的高速から比較的低速に及ぶ）、身体からの排出（主として腎臓によって、または肝胆道分泌に移されて）、および血漿タンパク結合（低から高まで）などがある。造影剤の標識化／錯形成は、当技術分野で周知の方法を使用して、放射性または非放射性金属イオン、好ましくは、２１〜３２、３７〜３９、４２〜４４、４９、５０、または５７〜８３から選択される原子番号を有する元素、例えば：−Ｍｎ、Ｆｅ、またはＧｄ（非放射性金属に関して）、ならびに−９９ｍＴｃ、１１１ｉｎ、６４Ｃｕ、６７Ｇａ、９０Ｙ、１８８Ｒｅ、１８６Ｒｅ、および１６３Ｄｙ（放射性金属に関して）などのイオンとのキレート化によって、遂行されてもよい。

【0071】

金属イオンとのキレート化は、文献に十分に文書化された方法によって、造影剤の生成の任意の段階で行われてもよいが、ほとんどの場合、最終工程で行われる。化合物の金属錯形成可能部分に保護された官能基が存在するとき、それらは、金属キレート化の前に部分的にまたは完全に脱保護されてもよい。金属錯形成に関与しないイオン性基は、酸性もしくは塩基性の対イオンによって、またはイオン性の酸性および／もしくは塩基性基を有する（無機および／または有機）化合物によって、場合によって中和されてもよい。残った酸性プロトン、例えば、金属イオンによって置換されなかったものは、無機もしくは有機塩基、塩基性アミノ酸、またはアミノ酸アミドの陽イオンによって、場合によって完全にまたは部分的に置き換えることができる。適切な無機対イオンは、例えば、アンモニウムイオン、カリウムイオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオンであり、より好ましくはナトリウムイオンである。適切な有機塩基の陽イオンは、中でも、第一級、第二級、または第三級アミン、例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、グルカミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルグルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンなど、とりわけＮ−メチルグルカミンのものである。適切なアミノ酸の陽イオンは、例えば、リジン、アルギニン、およびオルニチン、ならびに任意の他の酸性または中性のアミノ酸のアミド、例えば、リジンメチルアミド、グリシンエチルアミド、またはセリンメチルアミドなどのものである。

【0072】

本開示の造影剤は、死組織とも呼ばれる、壊死組織に局在する。造影剤を、例えば静脈注射によって投与すると、造影剤は、血液プール剤（血管内造影剤とも呼ばれる）と同様に作用する。投与した後、投与した造影剤の一部分は壊死組織に局在し、投与した造影剤の一部分は血漿中に残留する。血漿中の造影剤の部分の方が、壊死組織に局在する部分よりはるかに多い。よって、造影剤は、血漿中の滞留時間、すなわち半減期と、壊死組織における滞留時間、すなわち半減期とを有する。本開示による造影剤は、従来の造影剤と比較して、同様の血漿中滞留時間を示す。例えば、従来の造影剤は、約３０〜約９０分の半減期を有し、これらの薬剤は２４約時間以内に事実上完全に排出される。本開示の造影剤は、約３０分〜１２０分、好ましくは３０〜６０分の血漿中半減期を有する。血漿中に残留する造影剤は、尿を介して排出される。壊死組織に局在する造影剤の部分は、最長約７２時間まで壊死組織に結合したままである。従来の非標的型造影剤は、９０分間にわたって対象から実質的に除去され、２４時間後にはほぼ完全に排除される。比較すると、本開示の造影剤は、約４８〜約７２時間の間という長期間、壊死組織に存在することが示される。壊死組織に局在する造影剤は、存在する壊死組織を強調表示し、その視認性を向上する。

【0073】

一実施形態では、本開示における造影剤が壊死組織に存在することによって、壊死組織の大きさおよび位置の両方を観察し、特定することが可能となる。

【0074】

虚血性障害を被った組織および癌組織は、健常組織と同様に見えるため、従来のＭＲＩ技術を使用して特定することができない。本開示の造影剤を用いれば、梗塞組織および／または癌組織の大きさおよび／または位置を観察するおよび／または特定することが可能となる。一態様では、該造影剤によって、癌組織の死滅の経時的なモニタリングが容易になる。別の態様では、該造影剤によって、向上した患者ケアが容易になり、より正確な医療診断が可能となる。

【0075】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏおよび／またはｅｘ ｖｉｖｏで使用されてもよく、診断薬および／または治療薬として、直接投与されても、造影剤を少なくとも１種の薬学的に許容される担体と組み合わせて含む薬学的組成物の形態で投与されてもよい。一態様では、本開示の造影剤は、例えば、ＭＲＩ、ＣＴ、ＳＰＥＣＴ、ＰＥＴ、ＭＲＩ支援の応用、ＣＴ支援の応用、ＳＰＥＣＴ支援の応用、またはＰＥＴ支援の応用を含めた、画像診断または画像化支援の応用での使用に適した組成物および／または医薬品の製造に有用である。別の態様では、本開示の造影剤は、上述の画像診断用途で使用するための画像診断用薬剤または画像化支援の薬剤（ｉｍａｇｉｎｇ−ａｉｄｅｄ ａｇｅｎｔ）の製造に有用である。さらなる態様では、造影剤は、臓器、臓器の部分、組織、組織の部分、例えば壊死組織を可視化するおよび／または特定するために、ならびに疾患および病態を可視化するおよび／または特定するために、ｉｎ ｖｉｖｏで使用されてもよい。本開示の造影剤は、壊死組織の存在に関連する疾患の診断に有用であり得る。特定することができるかかる疾患として、虚血侵襲、例えば、心筋梗塞または脳梗塞、および占拠性病変、例えば、固形臓器、例えば、肝臓、腎臓、脾臓、および副腎に存在し得る腫瘍または炎症性病変が挙げられる。本開示の造影剤は、良性、前癌性、または悪性腫瘍を区別するのに有用であり得る。これらの造影剤は、例えば壊死の進行またはさらなる進行を示すことにおいて、特定の医療処置の有効性の評価における診断ツールとしても有用であり得る。

【0076】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、壊死および壊死に関連する病態、例えば、治療切除、放射線療法および／もしくは化学療法、心筋梗塞および脳梗塞を含む、病的なもしくは治療的に誘発された虚血によって引き起こされた、または、外傷、放射線、および／もしくは化学物質に起因する、病理上のまたは治療上の壊死に関与する医療用途に有用であり得る。この場合、造影剤は一般に、静脈内に、経腸的に、または非経口的に、治療薬および／または診断薬として対象に投与される。一態様では、造影剤は、腫瘍切除療法の用途に、例えば、虚血性障害（すなわち、肺塞栓症、虚血性脳卒中、肝障害、腎障害）に使用して、患部組織に生じた損傷の程度を検出するために投与されてもよい。造影剤は、腫瘍の壊死組織に局在し、医師に腫瘍の大きさおよび位置を示し、次に継続的にモニタリングして腫瘍の大きさを追跡することを可能にし、医療的処置方法の有効性を示す。進行中の治療的処置の有効性をモニタリングできることから、対象が無効な医療処置を受けることを回避することが可能となり、結果的に、患者に特化した療法を開発する助けになる。これは、多様な有力な治療法が利用可能な分野において、例えば、豊富な数の化学療法剤が利用可能な癌治療において、特に価値がある。造影剤の使用を通して腫瘍の大きさを継続的にモニタリングすれば、特定の化学療法の有効性をより早く評価することが可能となり、その結果、対象が無効な治療方針に長期間従うことを回避することができる。造影剤は医療処置の無効性を示すことができるので、医師は、医療処置のコースを改変するまたは変更することができる。かかる診断ツールを用いれば、時間を節約する措置が可能となり、患者の総合的治療成績を向上させることができる。

【0077】

本開示の造影剤と混合して使用するための薬学的に許容される担体は、当技術分野で周知であり、造影剤を対象に投与する様式に基づいて選択される。一態様では、適切な製剤は生理学的に許容される液体製剤であり、好ましくは、ポリエチレングリコールなどの従来の界面活性剤を含む、水溶液または乳濁液もしくは懸濁液である。

【0078】

ある実施形態では、本開示の造影剤は、有効量の本発明の造影剤を対象に全身的にまたは局所的に投与した後に、対象の身体の少なくとも一部の診断画像を生成するための方法を提供する。好ましくは、本開示の造影剤は、静脈注射を含む非経口投与によって、低用量で、診断薬として全身的に使用される。例えば、造影剤の金属イオンがガドリニウムのとき、投薬量範囲は、治療しようとする対象の体重１ｋｇ当たりガドリニウム約１０〜約５００μモル、好ましくは体重１ｋｇ当たりガドリニウム約１０〜約２００μモル、より好ましくは体重１ｋｇ当たりガドリニウム約１０〜約１００μモル、さらにより好ましくは体重１ｋｇ当たりガドリニウム約１０〜約５０μモルであり、ここで、ガドリニウムは、造影剤の金属錯形成可能部分に結合しており、ターゲティング部分は、造影剤を対象に投与した後、造影剤を壊死組織に局在させることができるように開放されている。一態様では、用量は、約５μモル／ｋｇ〜約１０００μモル／ｋｇ（対象の重量に基づいて）、例えば、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１２０、１４０、１６０ １８０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、７５０、１０００μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量；または、約１μモル／ｋｇ〜約５００μモル／ｋｇもしくはその間の任意の量、例えば、１．０、２．０、５．０、１０．０、１５．０、２０．０、２５．０、３０．０、３５．０、４０．０、４５、５０．０、５５、６０．０、６５、７０．０、７５、８０．０、８５、９０．０、９５、１００、１２０、１４０、１６０ １８０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０ ５００μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量；または、約１０μモル／ｋｇ〜約１０００ｕｇ／ｋｇ、もしくはその間の任意の量、例えば、１０．０、１１．０、１２．０ １３．０、１４．０、１５．０、２０．０、２５．０、３０．０、３５．０、４０．０、４５、５０．０、５５、６０．０、６５、７０．０、７５、８０．０、８５、９０．０、９５、１００、１２０、１４０、１６０ １８０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、７５０、１０００μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量；または、約２０μモル／ｋｇ〜約１０００μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量、例えば、２０．０、２５．０、３０．０、３５．０、４０．０、４５、５０．０、５５、６０．０、６５、７０．０、７５、８０．０、８５、９０．０、９５、１００、１２０、１４０、１６０ １８０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、７５０、１０００μモル／ｋｇを含んでもよい。

【0079】

代替的に、本開示の造影剤は、局所投与にも有用であり得、例えば、心筋梗塞を有する対象の場合は冠状動脈内投与にも有用であり得る。具体的な症例に依存して、本開示の造影剤の有効な局所用量は、体重１ｋｇ当たりガドリニウム約０．１〜約１０μモル、好ましくは対象の体重１ｋｇ当たりガドリニウム約０．５〜約７．５μモル、より好ましくは治療しようとする体重１ｋｇ当たりガドリニウム約１〜約５μモルであってもよく、ここで、ガドリニウムは、造影剤の金属錯形成可能部分に結合しており、ターゲティング部分は、造影剤を対象に投与した後、造影剤を壊死組織に局在させることができるように開放されている。一態様では、用量は、約０．１μモル／ｋｇ〜約１０μモル／ｋｇ（対象の重量に基づいて）、例えば、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、１０．０μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量；または約０．５μモル／ｋｇ〜約７．５μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量、例えば、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量；または約１μモル／ｋｇ〜約５ｕｇ／ｋｇ、もしくはその間の任意の量、例えば、．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．１、３．２、３．３、３．４、３．５、３．６、３．７、３．８、３．９、４．０、４．１、４．２、４．３、４．４、４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０μモル／ｋｇ、もしくはその間の任意の量を含んでもよい。

【0080】

当業者であれば、対象の重量、薬学的組成物の濃度、個々の成分もしくはそれらの組合せ、または薬学的組成物、個々の成分、もしくはそれらの組合せの量を考慮して、その単位を必要に応じて所望の用途に適した形式に容易に相互変換できるであろう。

【0081】

本発明の薬学的組成物は、「有効量」、「治療的有効量」または「予防的有効量」の本発明の造影剤を含んでもよい。「治療的有効量」は、必要な用量で、必要な期間、所望の治療結果を達成するのに有効な量を指す。造影剤の治療的有効量は、当業者によって決定されてもよく、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに個体において所望の応答を引き出す造影剤の能力などの要因に従って変動し得る。治療的有効量はまた、造影剤のいずれの毒性または有害作用にも、治療的に有益な効果が勝るものである。「予防的有効量」は、必要な用量で、必要な期間、所望の予防結果を達成するのに有効な量を指す。典型的には、予防用量は疾患の前または初期段階に対象に使用されるために、予防的有効量は治療的有効量より少なくなるであろう。

【0082】

ある実施形態では、インジウム−１１１などの放射性錯形成金属が使用されるとき、造影剤は、約２０〜２００ＭＢｑ（メガベクレル）の範囲内の放射能で投与されてもよい。テクネチウム−９９などの放射性錯形成金属が使用されるとき、造影剤は、約３５０〜１，０００ＭＢｑの範囲内の放射能で投与されてもよい。

【0083】

本発明のさらなる態様は、本開示の実施形態についての以下の発明の詳細な説明を検討すれば明らかとなろう。当業者であれば、本発明の他の実施形態が可能であり、本発明の細部は、全て本発明の概念から逸脱することなく幾つもの点で修正できることが分かるであろう。よって、図面、発明の詳細な説明、および実施例は、本質的に例示的とみなすべきであり、限定的とみなすべきではない。

【実施例】

【0084】

本開示の化合物は、任意の従来の手段によって調製することができる。これらの化合物を合成するのに適したプロセスを、以下の実施例に提供する。

【0085】

試薬は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈまたは以下に示す他の供給業者から購入した。しかし、試薬は、他の供給業者から購入することもできる。反応は、以下に詳述する装置を使用して実施した。化合物の精製は、シリカゲルカラムの溶出など、当業者に公知の方法によって実施した。しかし、他の方法も使用してもよい。化合物の同一性を質量分析によって確認した。

【0086】

実施例１
ＲＦ１３１１の調製：この調製はスキーム１における工程を含む。

【化4】

【0087】

化合物２。インドール−２−カルボン酸エチル（１８．９ｇ、１００ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で２００ｍｌのエタノールに溶解させ、ベンズアルデヒド（５．３ｇ、５０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流温度に加熱した。濃ＨＣｌ（３．７ｍｌ）を添加し、そのまま２時間反応させた。冷却後、白色の生成物をろ別し、冷エタノールで十分に洗浄した。反応は、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ_３：ヘキサン＝１：１）で追跡できる。収率は９０％であった。

【0088】

化合物３。化合物３を、修正したＣｒｅｓｅｎｓ、Ｅｒｗｉｎら（ＰＣＴ／ＢＥ０１／００１９２）の手順に従って調製した。５．０ｇ（１０．７ｍｍｏｌ）の化合物２および１０ｇのヒドラジン一水和物を、６０ｍｌのピリジンと３０ｍｌのメタノールとの混合物に溶解させた。混合物を４８時間還流させた後、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、Ｈ_２Ｏ、Ｈ_２Ｏ／メタノール、次いでアセトニトリルを添加することによって処理し、それぞれを添加した後、溶媒を減圧下で除去した。最後に、ヒドラジドをアセトニトリルで洗浄し、沈殿物をろ過によって収集し、Ｐ_２Ｏ_５上で乾燥して、３．４ｇの所望の生成物３が生じた。その同定を１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって確認した。１Ｈ−ＮＭＲ （ＤＭＳＯ）： ４．５１ （ｂｒ ｓ， ＮＨＮＨ_２， ４Ｈ）， ６．５７−６．６８ （ｍ， ＡｒＨ３， ＡｒＨ４， ４Ｈ）， ６．９９−７．１１ （ｍ， ＡｒＨ２， ＡｒＨ， ４Ｈ）， ７．２１ （ｍ， ＡｒＨ， ３Ｈ）， ７．２７ （ｓ， ＣＨ， １Ｈ）， ７．４０ （ｄ， ＡｒＨ１， ２Ｈ）， ９．６２ （ｓ， ＣＯＮＨ， ２Ｈ）， １１．４０．

【0089】

化合物４。化合物４を、修正したＰｌａｔｚｅｋ、ＪｏｈａｎｎｅｓおよびＮｉｅｄｂａｌｌａ、Ｕｌｒｉｃｈ（ＰＣＴ国際出願第２００２０５９０７６号）の手順に従って調製した。３．５７ｇ（１０ｍｍｏｌ）のＤＴＰＡ二無水物を、２．６ｇ（３０ｍｍｏｌ）の臭化リチウムを添加しながら（穏やかな加熱下で）、３５ｍｌのジメチルスルホキシドに溶解させた。混合物を４０℃に放冷し、０．１８ｇ（１０ｍｍｏｌ）の水を添加し、混合物を１０分間撹拌した。この溶液を、４．３８ｇ（１０ｍｍｏｌ）の化合物３と２．０２ｇ（２０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンとの混合物に、３０分以内で滴下して添加した。反応混合物を４０℃で８時間撹拌した。それを室温に冷却した。この溶液に、２０ｍｌのアセトン／１８０ｍｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢ）の混合物を滴下して添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。析出した沈殿物をろ過し、わずかなアセトンで２回洗浄し、乾燥させた（真空中／５０℃）。精製するために、それをシリカゲルのクロマトグラフィーにかけた（溶出液：メタノール／クロロホルム／ギ酸＝２０：１０：１）。それをイソプロパノール／ギ酸（２０：１）と共に撹拌し、沈殿物を抽出し、真空中／６０℃で乾燥させた。収量：１．６５ｇ（理論値の２０％）の無色固体。その同定を１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって確認した。１Ｈ−ＮＭＲ （Ｄ２Ｏ）： ２．７ −３．４ メチレン水素 １８Ｈ； ６．６−７．５ 芳香族水素および−ＣＨ， １４Ｈ．

【0090】

ＲＦ１３１１：化合物４（１．０ｍｍｏｌ）を水（６０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（Ｇａｄｏｌｉｕｍ）（ＩＩＩ）（１．０ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を室温で一晩撹拌した。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0091】

実施例２
ＲＦ１４０１の調製：この調製はスキーム２における工程を含む。

【化5】

【0092】

化合物２：化合物１（０．８７６ｇ、２ｍｍｏｌ）、ＤＯＴＡ−ＮＨＳ−エステル（１．０ｇ、２ｍｍｏｌ、（Ｌｉ，Ｃ．；ＷｏｎｇおよびＷ．−Ｔ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、２００４年、６０、５５９５〜５５６０の手順に従って作製）、およびＤＩＰＥＡ（０．２８４ｇ、２．２ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（４０ｍＬ）に溶解させ、得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。水を添加した後、溶媒を減圧下で除去し、得られた白色粉末をアセトニトリル／Ｈ２Ｏ（１：１、ｖ／ｖ）の混合物に溶解させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。収量：０．５９ｇの白色固体（０．７２ｍｍｏｌ；３６％）。１Ｈ ＮＭＲ （Ｄ２Ｏ） ｄ ７．６−６．６， １４Ｈ， 芳香族水素および−ＣＨ； ３．７−３．０， ２４Ｈ， メチレン水素．

【0093】

ＲＦ１４０１：化合物２（０．５ｍｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（０．５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0094】

実施例３
ＲＦ１４０２を対照化合物として調製した。

【0095】

ＲＦ１４０２の調製：この調製はスキーム３における工程を含む。

【化6】

【0096】

化合物２：ＤＯＴＡ（２．２ｇ、５ｍｍｏｌ）を１００ｍｌの蒸留水に溶解させ、ＮａＯＨを使用してｐＨを４．８に調整した。この溶液を４℃に冷却し、撹拌した。Ｎ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ、１．９２ｇ １０ｍｍｏｌ）を添加し、続いてｐ−アミノアニリン（７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を４℃で１時間、次いで室温で２４時間撹拌した。精製を、分取Ｃ１８カラム（２００ｇ）にかけることによって実施した。カラムを水中１０％メタノールで溶出した。純粋な画分を合わせ、蒸発乾固させると、所望の生成物が白色固体として生じた。

【0097】

ＲＦ１４０２：化合物２（１．０ｍｍｏｌ）を水（６０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（１．０ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0098】

実施例４
ＲＦ１４０３を対照化合物として調製した。

【0099】

ＲＦ１４０３の調製：この調製はスキーム４における工程を含む。

【化7】

【0100】

ＤＴＰＡ−ジ−アンハイドレード（ａｎｈｙｄｒａｄｅ）：ジエチレントリアミン五酢酸（３９．３ｇ、０．１モル）をピリジン（５０ｇ）に懸濁させ、無水酢酸（４０．８ｇ、０．４モル）を添加した。混合物を６５℃で２４時間加熱した。生成物をろ過し、無水酢酸およびエーテルで洗浄し、乾燥させた。

【0101】

化合物２：ＤＴＰＡ二無水物（３．５７ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５ｍｌ）を含む４０ｍｌのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の溶液に、０．１８ｇの水（１０ｍｍｏｌ）を含む１０ｍｌの乾燥ＤＭＦを、２時間にわたってゆっくり添加した。ｐ−アミノアニリン（１０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を一晩撹拌した。蒸発乾固させた後、残留物を蒸発乾固させた。得られた白色粉末をアセトニトリル／Ｈ２Ｏ（１：１、ｖ／ｖ）の混合物に溶解させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。収量：０．５９ｇの白色固体（０．７２ｍｍｏｌ；３６％）。

【0102】

ＲＦ１４０３：化合物２（１．０ｍｍｏｌ）を水（６０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（１．０ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0103】

実施例５
ＲＦ１４０４の調製：この調製はスキーム５における工程を含む。

【化8】

【0104】

化合物２：４．４４ｇ（２０ｍｍｏｌ）のテレフタル酸ジエチルおよび１０ｇのヒドラジン一水和物を、８０ｍｌのピリジンと４０ｍｌのメタノールとの混合物に溶解させた。混合物を４８時間還流させた後、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、Ｈ_２Ｏ、Ｈ_２Ｏ／メタノール、次いでアセトニトリルを添加することによって処理し、それぞれを添加した後で、溶媒を減圧下で除去した。最後に、ヒドラジドをアセトニトリルで洗浄し、沈殿物をろ過によって収集し、Ｐ_２Ｏ_５上で脱水して、２．６２ｇの所望の生成物２が生じた。（１０．１６ｍｍｏｌ、５０％）。

【0105】

化合物３：ＤＴＰＡ二無水物（３．５７ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５ｍｌ）を含む４０ｍｌのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）の溶液に、０．１８ｇの水（１０ｍｍｏｌ）を含む１０ｍｌの乾燥ＤＭＦを、２時間にわたってゆっくり添加した。化合物２（１０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を一晩撹拌した。蒸発乾固させた後、残留物を蒸発乾固させた。得られた白色粉末をアセトニトリル／Ｈ２Ｏ（１：１、ｖ／ｖ）の混合物に溶解させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。収量：０．６８ｇの白色固体（１．１ｍｍｏｌ；１１％）。

【0106】

ＲＦ１４０４：化合物３（１．０ｍｍｏｌ）を水（６０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（１．０ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を室温で一晩撹拌した。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0107】

実施例６
ＲＦ１２１１の調製：この調製はスキーム６における工程を含む。

【化9】

【0108】

１，５−ジフタルイミド−３−アザペンタン（２）。化合物２を、以前に公表された手順（Ｊ．ＡＭ．ＣＨＥＭ．ＳＯＣ．２００４年、１２６、８２３〜８３３）によって調製した。すなわち、１，５−ジアミノ−３−アザペンタン（１０．３ｇ、０．１０モル）および無水フタル酸（３３．２ｇ、０．２０モル）を含む１６０ｍＬの氷酢酸の混合物を４時間還流させた。溶媒を減圧下で除去し、次いで１６０ｍＬの熱エタノールを添加し、固体が出現するまで撹拌した。生成物を収集し、冷エタノールで洗浄した。収量２３．９ｇ（８１％）、融点１８１〜１８３ Ｃ、１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６， ３００ ＭＨｚ）： ７．７９ （ｍ， ４Ｈ， Ｈ３’， ６’）， ７．７４ （ｍ， ４Ｈ， Ｈ４’， ５’）， ３．５９ （ｔ， Ｊ ） ６．３ Ｈｚ， ４Ｈ， Ｈ１，５）， ２．７６ （ｔ， ４Ｈ， Ｈ２，４）． １３Ｃ ＮＭＲ （７５ ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６）： １６７．８５ （ＣＯ）， １３４．１０ （Ｃ４’， ５’）， １３１．６３ （Ｃ１’， ２’）， １２２．７４ （Ｃ３’， ６’）， ４６．１６ （Ｃ２，４）， ３７．１８ （Ｃ１，５）． ＭＳ （ＥＳ＋， ＭｅＯＨ）： ｍ／ｚ ３６４ （ＭＨ^＋）．

【0109】

ｔ−ブチル１，７−ジナフトイル−４−ジエチレントリアミンアセテート（３） 化合物３を、以前に公表された手順（Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉ．８：６６３〜６７０、２００２年）によって調製した。すなわち、トリアミン誘導体（２）（１３．３ｍｍｏｌ、４．８ｇ）、２−ブロモ酢酸ｔ−ブチル（２１．８ｍｍｏｌ、３．５ｍｌ）、およびＤＩＰＥＡ（１３．３ｍｍｏｌ、２．３ｍｌ）を含むジクロロメタン（１００ｍｌ）の混合物を、窒素下で３６時間還流させた。次いでそれを、１０％クエン酸（５０ｍｌ）、炭酸水素ナトリウム（１Ｍ、５０ｍｌ）および蒸留水（５０ｍｌ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水し、ろ過し、蒸発乾固させた。得られた油状の生成物をエタノールから再結晶化させ、ろ過し、氷冷エタノールで洗浄して、ｔ−ブチル１，７−ジナフトイル−４−ジエチレントリアミンアセテート（３）を白色固体として得た（収率５１％）、融点１１９℃〜１２１℃。１Ｈ−ＮＭＲ： ＣＤＣｌ３ １．４２ （９Ｈ， ｓ， Ｃ（ＣＨ３）３）， ３．０１−３．０４ （４Ｈ， ｔ， Ｊ ６．５， ２ × ＣＨ２）， ３．４５ （２Ｈ， ｓ， ＣＨ２）， ３．７０−３．７４ （４Ｈ， ｔ， Ｊ ６．５， ２ × ＣＨ２ＮＰｈｔ）， ７．６４−７．７２ （８Ｈ， ｍ， ２ × Ｐｈｔ）； １３Ｃ−ＮＭＲ： ＣＤＣｌ３ ２１．２ （Ｂｕｔ ＣＨ３）， ３６．０， ５１．６ （ＣＨ２）， ８１．０ （Ｂｕｔ Ｃ）， １２３．０ （芳香環 ＣＨ）， １３２．１ （芳香環 Ｃ）， １３３．７ （芳香環 ＣＨ）， １６８．２， １７０．５ （ＣＯ）； ＦＡＢ−ｍ／ｚ ［Ｍ ＋ Ｈ］^＋ ＝ ４７８， ［Ｍ ＋ Ｎａ］^＋ ＝ ５００； Ｃ２６Ｈ２７Ｎ３Ｏ６は４７８．１９７８であることを要する。

【0110】

ｔ−ブチル−４−ジエチレントリアミンアセテート（４） ｔ−ブチル１，７−ジナフトイル−４−ジエチレントリアミンアセテート（３）（４．１９ｍｍｏｌ）を含む９５％アセトニトリル／水（４０ｍｌ）の溶液に、４ｍｍｏｌ当量のヒドラジン水和物を添加し、反応混合物を室温で、ＨＰＬＣ分析によって出発物質が存在しないことが示されるまで撹拌した（４０時間）。得られた白色の沈殿物をろ過し、アセトニトリルで洗浄し、合わせたろ液を、ロータリーエバポレーターを使用して、２５℃、高真空下で蒸発させて、ｔ−ブチル−４−ジエチレントリアミンアセテート（４）を無色固体として得た（収率８７％）；１Ｈ−ＮＭＲ， ｄ６ＤＭＳＯ， １．１０ （９Ｈ， ｓ， Ｃ （ＣＨ３）３）， ２．５９−２，７１ （４Ｈ， ｍ， ２ × ＣＨ２）， ２．９１ （２Ｈ， ｓ， ＮＣＨ２ＣＯ２）， ３．２６−３．４７ （４Ｈ， ｍ， ２ × ＣＨ２ＮＨ２）， ４．２０−４．７０ （４Ｈ， ｂｒ ｓ， ２ × ＮＨ２）； １３Ｃ−ＮＭＲ ｄ６ ＤＭＳＯ ２７．８ （Ｂｕｔ ＣＨ３）， ３７．３， ４８．７ （ＣＨ２）， ８０．４ （Ｂｕｔ Ｃ）， １６７．８ （ＣＯ）； ＣＩ−ｍ／ｚ ［Ｍ＋ Ｈ］^＋ ＝２１８．

【0111】

［ビス［２−ビス（エトキシカルボニルメチルアミノ）エチル］アミノ］酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５） 化合物５を、以前に公表された手順（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ２００４年、第１１号、１８３５〜１８４３）によって調製した。すなわち、化合物４（１．１ｇ、５．０ｍｍｏｌ）およびブロモ酢酸エチル（３．９ｇ、２５ｍｍｏｌ）を含む無水ＭｅＣＮ（３０ｍＬ）の氷冷溶液に、反応温度を０℃未満に維持しながら、ｉ−Ｐｒ２ＮＥｔ（１．２９ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した後、溶液を減圧で濃縮した。残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２×２５ｍＬ）および塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、蒸発させた。生成物を、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ、９８：２）の後に、無色油状物として回収した（１．５０ｇ、５１％）。ＩＲ （ＣＨＣｌ３）： １７３４， １３７２， １２０５ ｃｍ−１． １Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）： ｄ ＝ １．２４ （ｔ， １２ Ｈ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ４ × ＯＣＨ２ＣＨ３）， １．４２ ［ｓ， ９ Ｈ， （ＣＨ３）３Ｃ］， ２．８５ （ｓ， ８ Ｈ， ２ × ＮＣＨ２ＣＨ２Ｎ）， ３．３０ （ｓ， ２ Ｈ， ＣＨ２ＣＯ２Ｂｕ−ｔ）， ３．５０ （ｓ， ８ Ｈ， ４ × ＣＨ２ＣＯ２Ｅｔ）， ４．１６ （ｑ， ８ Ｈ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ＯＣＨ２ＣＨ３）． 元素分析 Ｃ２６Ｈ４７Ｎ３Ｏ１０での計算値： Ｃ， ５５．６０； Ｈ， ８．４３； Ｎ， ７．４８． 実測値： Ｃ， ５５．８２； Ｈ， ８．５９； Ｎ， ７．７６．

【0112】

［ビス［２−ビス（エトキシカルボニルメチルアミノ）エチル］アミノ］酢酸（６） ５（１．４６ｇ、２．６０ｍｍｏｌ）を含むＴＦＡ（２．０ｍＬ）の溶液を、室温で２時間放置した。ＴＦＡを減圧で蒸発させた後、残留物を無水Ｅｔ_２Ｏと繰り返し共蒸発させ、次いでシリカゲル（ＣＨＣｌ３−ｉ−ＰｒＯＨ、８０：２０）で精製した。生成物を無色油状物として回収した（６００ｍｇ、４６％）。ＩＲ （ＣＨＣｌ_３）： ２９５８， １７３７， １３８０， １２１１ ｃｍ^−１． １Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ３）： ｄ ＝ １．２１ （ｔ， １２ Ｈ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ４ × ＯＣＨ_２ＣＨ_３）， ３．１０ （ｓ， ８ Ｈ， ２ × ＮＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ）， ３．５５ （ｓ， ８ Ｈ， ４ × ＣＨ_２ＣＯ_２Ｅｔ）， ３．６２ （ｓ， ２ Ｈ， ＣＨ_２ＣＯ_２Ｈ）， ４．１２ （ｑ， ８ Ｈ， Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ， ＯＣＨ_２ＣＨ_３）， １１．２０ （ｓ， １ Ｈ， ＣＯ_２Ｈ）．

【0113】

化合物７：ＤＭＦ（５０ｍＬ）とトリエチルアミン（５ｍｍｏｌ）との混合物にビス−ヒドラジド１（３．３ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を含む分散液を１５分間超音波処理した。ＴＢＴＵ（１．９ｇ、６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を再び１５分間超音波処理した。生成物６（３．５ｇ、６．９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を３時間撹拌した。溶媒を除去した後、残留物を濃ＮａＨＣＯ_３溶液に溶解させた。ｐＨを５Ｎ ＮａＯＨで１２に調整し、２時間撹拌した。得られた混合物を蒸発させ、Ｃ１８逆相カラムに入れ、次いでそれを、３％メタノールを含有する酢酸アンモニウム蒸留水溶液（０．１ｍ）０．２Ｌ、５％メタノールを含有する溶液０．２Ｌ、最後に１０％メタノールを含有する溶液０．５Ｌで連続的に溶出した。生成物を５０ｍＬの画分で収集し、ＨＰＬＣを実施し、１１分で溶出するピークをモニタリングして、純度を調べた。収量：０．８２ｇの黄色固体；１Ｈ ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ， Ｄ２Ｏ）： ｄ＝３．０４ （ｍ， ４Ｈ）， ３．３０ （ｍ， ６Ｈ）， ３．５５ （ｓ， ４Ｈ）， ３．７０ （ｓ， ４Ｈ）， ６．６８ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２１ （ｍ， ４Ｈ）， ７．３２ （ｍ， ４Ｈ）， ７．５６ ｐｐｍ （ｍ， ２Ｈ）

【0114】

ＲＦ１２１１：化合物７（０．５ｍｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（０．５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0115】

実施例７
ＲＦ１２２１の調製：この調製はスキーム７における工程を含む。

【化10】

【0116】

１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４，５−ジヒドラジド（２）。メチル１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４，５−ジカルボキセート（ｄｉｃａｒｂｏｘａｔｅ）（３．７ｇ、２０ｍｍｏｌ）および１５ｇのヒドラジン一水和物を、６０ｍｌのピリジンと３０ｍｌのメタノールとの混合物に溶解させた。混合物を４８時間還流させた後、溶媒を減圧下で除去した。残留物を、Ｈ_２Ｏ、Ｈ_２Ｏ／メタノール、次いでアセトニトリルを添加することによって処理し、それぞれを添加した後、溶媒を減圧下で除去した。最後に、ヒドラジドをアセトニトリルで洗浄し、沈殿物をろ過によって収集し、Ｐ_２Ｏ_５上で乾燥して、２．４ｇの所望の生成物２を与えた。その同定を１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって確認した。

【0117】

化合物３ 化合物２（１．４ｇ、７．５ｍｍｏｌ）を含むＤＭＦ（５０ｍＬ）とトリエチルアミン（５ｍｍｏｌ）との混合物を、１５分間超音波処理した。ＴＢＴＵ（１．９ｇ、６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を再び１５分間超音波処理した。ＤＴＰＡ−テトラエステル（３．５ｇ、６．９ｍｍｏｌ、実施例６からのもの）を添加し、混合物を３時間撹拌した。溶媒を除去した後、残留物を濃ＮａＨＣＯ_３溶液に溶解させた。ｐＨを５Ｎ ＮａＯＨで１２に調整し、２時間撹拌した。得られた混合物を蒸発させ、Ｃ１８逆相カラムに入れ、次いでそれを、３％メタノールを含有する酢酸アンモニウム蒸留水溶液（０．１ｍ）０．２Ｌ、５％メタノールを含有する溶液０．２Ｌ、最後に１０％メタノールを含有する溶液０．５Ｌで連続的に溶出した。生成物を５０ｍＬの画分で収集し、ＨＰＬＣを実施することによって純度を調べた。収量：１．０５ｇの黄色固体（２５％）。その同定を１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって確認した。

【0118】

ＲＦ１２２１：化合物３（０．５ｍｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（０．５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0119】

実施例８
ＲＦ１２３１の調製：この調製はスキーム８における工程を含む。

【化11】

【0120】

化合物２：化合物２を、修正したＰｌａｔｚｅｋ，ＪｏｈａｎｎｅｓおよびＮｉｅｄｂａｌｌａ，Ｕｌｒｉｃｈ（ＰＣＴ国際出願第２００２０５９０７６号）の手順に従って調製した。３．５７ｇ（１０ｍｍｏｌ）のＤＴＰＡ二無水物を、２．６ｇ（３０ｍｍｏｌ）の臭化リチウムを添加しながら（穏やかな加熱下で）、３５ｍｌのジメチルスルホキシドに溶解させた。それを４０℃に冷却し、０．１８ｇ（１０ｍｍｏｌ）の水を添加し、混合物を１０分間撹拌した。この溶液を、１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４，５−ジヒドラジド（１．８５ｇ、１０ｍｍｏｌ）と２．０２ｇ（２０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンとの混合物に滴下して添加した。反応混合物を４０℃で８時間撹拌した。この溶液に、２０ｍｌのアセトン／１８０ｍｌのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢ）の混合物を滴下して添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。析出した沈殿物をろ過し、少量のアセトンで２回洗浄し、乾燥させた（真空中／５０℃）。精製するために、それをシリカゲルのクロマトグラフィーにかけた（溶出液：メタノール／クロロホルム／ギ酸＝２０：１０：１）。それをイソプロパノール／ギ酸（２０：１）と共に撹拌し、沈殿物を抽出し、真空中／６０℃で乾燥させた。収量：１．０１ｇ（理論値の１８％）の無色固体。その同定を１Ｈ−ＮＭＲ分光法によって確認した。

【0121】

ＲＦ１２３１：化合物２（０．５ｍｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（０．５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0122】

実施例９
ＲＦ１２４１の調製：この調製はスキーム９における工程を含む。

【化12】

【0123】

化合物２：１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４，５−ジヒドラジド（１．１１ｇ、６ｍｍｏｌ）、ＤＯＴＡ−ＮＨＳ−エステル（３．０ｇ、６ｍｍｏｌ、Ｌｉ，Ｃ．；ＷｏｎｇおよびＷ．−Ｔ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、２００４年、６０、５５９５〜５５６０の手順に従って作製）およびＤＩＰＥＡ（０．８５２ｇ、６．６ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。水を添加した後、溶媒を減圧下で除去し、得られた白色粉末をアセトニトリル／Ｈ２Ｏ（１：１、ｖ／ｖ）の混合物に溶解させ、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製した。収量：１．１３ｇの白色固体（３３％）。

【0124】

ＲＦ１２４１：化合物２（０．５ｍｍｏｌ）を水（３０ｍｌ）に溶解させ、酢酸ガドリウム（ＩＩＩ）（０．５ｍｍｏｌ）をゆっくり添加した。添加する間、ｐＨを水酸化ナトリウムで７．４に維持した。添加した後、混合物を一晩還流させた。脱塩のために、混合物をＣ１８−シリカゲルゲルカラムにかけ、それを蒸留水ですすいだ。溶媒を真空中で除去し、生成物を白色固体として得た。生成物の同一性を質量分析によって確認した。

【0125】

実施例１０−ｉｎ ｖｉｖｏでの造影剤のＭＲＩ分析
方法および材料

【0126】

上記実施例１で概説した方法に従って造影剤を調製した。ラット（２５０〜３００ｇ）を、以下に詳述する以降の研究に使用した。

【0127】

全ての処置および試験は、日中に行った。動物は、動物保護に対する欧州ガイドライン（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ ｆｏｒ Ａｎｉｍａｌ Ｗｅｌｆａｒｅ）に記載されるガイドラインに準拠して飼育し、試験した。全ての実験は、ルーバン大学によって指導され、承認された。

【0128】

ラットでのＭＲＩ

【0129】

ラットを、イソフルラン（導入５％、維持１〜２％）の投与によって麻酔し、動物保持具に配置した。ラットの血圧および心拍数を結紮前にモニタリングして、基準状態を得た。ラットを、無菌状態下で肝動脈の結紮に２時間供した。次いで結紮糸を除去して、梗塞を起こした肝組織に再灌流させた。結紮術に続いて、ブピバカインおよびＣｉｃａｔｒｉｎを切開部に施した。切開部を層状に閉じ、ケトプロフェン（５ｍｇ／ｋｇ）を皮下注射して炎症を処置した。

【0130】

加えて、筋壊死を、背部の側筋にエタノールを瞬時投与することによって誘発した。これを、肝壊死と同時にモニタリングした。

【0131】

造影剤を、再灌流の開始から４時間後に静脈注射した。血圧および心拍数を結紮術の間および造影剤を投与する間、モニタリングした。ラットの体温は直腸プローブでモニタリングし、温水を循環させることによって生理的レベルに維持した。ラットは、麻酔から回復した後、個々に飼育した。

【0132】

造影剤の投与後約４〜３６時間の間に、ラットをチオブタバルビタール（１００ｍｇ／ｋｇ）の筋肉内注射によって麻酔し、ルーバン大学のＭＲＩ施設に移した。

【0133】

総撮像時間は、およそ６０分であった。

【0134】

次いで、ラットを、ペントバルビタールの過量投与（＞１２０ｍｇ／ｋｇ）によって直ちに安楽死させた。

【0135】

結果

【0136】

ＲＦ１３１１の結果

【0137】

造影剤ＲＦ１３１１を、上の実施例１で概説した方法に従って調製した。上記述べた手順に従って、２つの群のラットに造影剤ＲＦ１３１１を４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与した。得られたＭＲ画像および対応する組織試料を図１、２、および３に示す。時間に対するコントラスト比の要約を図４に示す。これによって、健常組織から壊死組織を区別するＲＦ１３１１の明白な効果が実証される。

【0138】

結果は、ＭＲ画像中で壊死組織が可視であることを示している。これらの結果から、造影剤が組織試料の壊死組織部分に局在することが示される。

【0139】

実施例１１−薬物動態および毒性
造影剤ＲＦ１３１１を、上記実施例１で概説した方法に従って調製した。ラットに造影剤ＲＦ１３１１を３０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与した。ＲＦ１３１１の血漿濃度を経時的に計測した。それを図５に示す。各点は、異なる３回の判定からの結果の平均＋／−ＳＥである。

【0140】

３０ｍｇ／ｋｇの用量レベルでＲＦ１３１１を静脈内に単回投与をした後に、異常な観察は認められなかった。ラットの血漿からＲＦ１３１１が排出される半減期は１．３８時間であった。定常状態では、ＲＦ１３１１は、ラットの体重の１．５４倍の分布を有した。

【0141】

３０ｍｇ／ｋｇの単回投与で静脈内投与した造影剤ＲＦ１３１１に関する薬物動態パラメータを、下の表１に示す。

【表1】

【0142】

３０、６０、１２０、および３００ｍｇ／ｋｇのレベルでＲＦ１３１１を静脈内に単回投与した後に、異常な観察は認められなかった。臨床所見、体重および解剖検査の結果に基づくと、単回静脈内投与後の最大耐用量は、３００ｍｇ／ｋｇを上回っていた。

【0143】

実施例１２−ＲＦ１３１１で処置したラットにおける、異なる３種ＭＲＩ条件下での梗塞組織および正常組織との間のコントラスト比の２４時間にわたる経時的変化
体重３００〜４００グラムのラットを、ペントバルビタール（ネンブタール；Ｓａｎｏｆｉ Ｓａｎｔｅ Ａｎｉｍａｌｅ、ブリュッセル、ベルギー）を４０ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内注射して麻酔した。開腹術の下で、右肝葉の門部を３時間一時的にクランプすることによって、再灌流による部分的な肝梗塞（ＲＰＬＩ）を誘発した。クランプ解除による再灌流の後、腹腔を二層縫合で閉じ、ラットを外科手術後６時間放置して回復させ、続いてＭＲＩ研究を行った。各ラットは、梗塞肝組織および正常肝組織の両方が同じ動物内に共存していることから、個体内比較するためのそれ自体の対照として使用した。

【0144】

ＭＲＩ研究のために、ＲＦ１３１１を４０ｍｇ／ｋｇの用量で尾動脈を介する単回瞬時投与によって投与した。３種の異なるＭＲＩ条件下、すなわち、ターボスピンエコー（ＴＳＥ）、スピンエコー（ＳＥ）、および反復回転（ＩＲ）で、コントラスト比を２４時間にわたって計測した。図６に示す結果から分かるように、２４時間後のコントラスト比は１．２〜１．４の間であることから、正常組織に対して死滅組織を区別する化合物ＲＦ１３１１の能力が実証される。

【0145】

実施例１３−心筋梗塞
ウサギにおいて心筋梗塞（ＭＩ）を、開胸冠状動脈（ＣＡ）手術および閉胸ＣＡ再灌流によって誘発した。簡単に述べると、鎮静または麻酔から手技を開始し、気管内挿管および機械呼吸を行い、続いて左の第４−第５肋間開胸術を行った。心膜を開いた後、心臓をわずかに逆時計周りに回転させて、左回旋（ＬＣｘ）ＣＡを露出させた。２−０絹縫合糸を左心耳の端部の下３ｍｍのレベルでＬＣｘの下に入れ、縫合糸を単結紮で結ぶことによってＭＩを誘発し、取り外し可能な縫合糸の結び目からの端部を、閉じた傷口を通して胸部の外に出したままとした。ＣＡ閉塞から９０分後、閉胸状態で露出した縫合糸の端部を引き、それによって取り外し可能な結び目を再び開放することによって、再灌流ＭＩを誘発した。

【0146】

心筋虚血後の組織成分の死後の測定をさらに容易にするために、一針の縫合であるが２本の縫合糸を用いる手法を考案した。簡単に述べると、端部に２つのバネ穴を有する強弯の鋭利な三角針（Ｓｕｔｕｒａ，Ｉｎｃ．ファウンテンバレー、ＣＡ、米国）を使用した。２本の絹縫合糸は、別々の目に容易に通すことができた。すなわち、太い方の２−０縫合糸は、再灌流させる場合に除去できるＣＡ結紮に使用し、細い方の５−０のものは、死後の多機能分析を行うために、後でｅｘ ｖｉｖｏでＣＡ再閉塞を行うための予備とした。

【0147】

化合物ＲＦ１３１１を、４０ｍｇ／ｋｇで、瞬時投与によって５分間にわたって投与した。下に説明するような心臓組織のＭＲＩ画像（ｉｎ ｖｉｖｏおよびｅｘ ｖｉｖｏ）および写真を得た。

【0148】

化合物ＲＦ１３１１の試験の結果を図７〜１０に示す。図７は、ＲＦ１３１１を注射してから２４時間後にｉｎ ｖｉｖｏで撮った心臓のスライスを示すＭＲＩ画像である。心臓を取り出し、解剖して、図７の画像に対応する心臓組織のスライスを得た。図８は、ｅｘ ｖｉｖｏで撮った心臓組織のＭＲＩ画像である。図９は、図８のＭＲＩに使用された心臓組織の写真である。図１０は、組織を塩化トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）で染色して、壊死組織を白色の領域として示すようにした後の、図８および９に使用された心臓組織の写真である。壊死組織は矢印によって特定され、図７〜９の矢印は同じ位置を指し示す。図９に示す染色されていない組織では明白な心臓の損傷が分からないが、図７および８に示すように、壊死組織はＲＦ１３１１によって染色される。

【0149】

上述の実施形態は例に過ぎないことを意図している。当業者であれば、以下に添付の特許請求の範囲によってのみ定義される範囲から逸脱することなく、特定の実施形態に、改変、修正、および変形を行うことができる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】