特許 6799108 リンパ脈管筋腫症の処置のためのラパマイシン

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6799108

(24)【登録日】2020年11月24日

(45)【発行日】2020年12月9日

(54)【発明の名称】リンパ脈管筋腫症の処置のためのラパマイシン

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/436 20060101AFI20201130BHJP

   A61K 9/14 20060101ALI20201130BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20201130BHJP

   A61K 47/36 20060101ALI20201130BHJP

   A61K 47/18 20060101ALI20201130BHJP

   A61K 47/34 20170101ALI20201130BHJP

   A61K 47/10 20060101ALI20201130BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20201130BHJP

【ＦＩ】

   A61K31/436

   A61K9/14

   A61K47/26

   A61K47/36

   A61K47/18

   A61K47/34

   A61K47/10

   A61P35/00

【請求項の数】11

【全頁数】54

(21)【出願番号】特願2019-85325(P2019-85325)

(22)【出願日】2019年4月26日

(62)【分割の表示】特願2016-522006(P2016-522006)の分割

【原出願日】2014年10月7日

(65)【公開番号】特開2019-151649(P2019-151649A)

(43)【公開日】2019年9月12日

【審査請求日】2019年5月23日

(31)【優先権主張番号】61/888,066

(32)【優先日】2013年10月8日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】519060232

【氏名又は名称】エイアイ・セラピューティクス・インコーポレーテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100140109

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 新次郎

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100106208

【弁理士】

【氏名又は名称】宮前 徹

(74)【代理人】

【識別番号】100120112

【弁理士】

【氏名又は名称】中西 基晴

(74)【代理人】

【識別番号】100128750

【弁理士】

【氏名又は名称】廣瀬 しのぶ

(72)【発明者】

【氏名】アーマー，トーマス

(72)【発明者】

【氏名】メルヴィン，ローレンス・エス，ジュニア

(72)【発明者】

【氏名】ロスバーグ，ジョナサン・エム

(72)【発明者】

【氏名】リチェンステイン，ヘンリ

【審査官】 大西 隆史

(56)【参考文献】

【文献】 国際公開第２００８／１３７１４８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２００８／０６３５８１（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２００５／０１１９３３０（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 NEUROHR, C. et al.，IS SIROLIMUS A THERAPEUTIC OPTION FOR PATIENTS WITH PROGRESSIVE PULMONARY LYMPHANGIOLEIOMYOMATOSIS?，RESPIRATORY RESEARCH，２０１１年，Vol. 12, No.66，pp. 1-7

【文献】 KRISTOF, A. S.，mTOR SIGNALING IN LYMPHANGIOLEIOMYOMATOSIS，LYMPHATIC RESEARCH AND BIOLOGY，２０１０年，Vol. 8, No. 1，pp. 33-42

【文献】 McCORMACK, F. X. et al.，Efficacy and safety of sirolimus in lymphangioleiomyomatosis，The New england Journal of Medicine，２０１１年，Vol. 364, No. 17，pp. 1595-1606

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３１／００−３３／４４

Ａ６１Ｋ ９／００− ９／７２

Ａ６１Ｋ ４７／００−４７／６９

Ａ６１Ｐ １／００−４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ラパマイシンのマイクロ粒子であって１から５ミクロンまでの空気力学的質量中央直径(Mass Median Aerodynamic Diameter)（ＭＭＡＤ）を有する前記ラパマイシンのマイクロ粒子、およびキャリヤーの粒子を含む、肺送達のための医薬乾燥粉末組成物。

【請求項2】

ラパマイシンのマイクロ粒子が、２から３ミクロンまでのＭＭＡＤを有する、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

ラパマイシンが、５０マイクログラムから５００マイクログラムの量で存在する、請求項１又は２に記載の組成物。

【請求項4】

キャリヤーが、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、リジン、ロイシン、イソロイシン、ジパルミチルホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、または以上のいずれかの混合物からなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項5】

キャリヤーが、２種類の異なるキャリヤー、第１キャリヤーおよび第２キャリヤーのブレンドを含むかまたはそれからなる、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。

【請求項6】

キャリヤーが、２種類の異なるラクトースキャリヤーのブレンドからなる、請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

第１キャリヤーが約３０〜１００ミクロンの範囲の直径を有する粒子からなり、第２キ
ャリヤーが１０ミクロン未満の直径を有する粒子からなる、請求項５又は６に記載の組成物。

【請求項8】

２種類の異なるキャリヤーの比が３：９７から９７：３までの範囲である、請求項７に
記載の組成物。

【請求項9】

粉末中のキャリヤーに対するラパマイシンの割合が０．５％から２％（ｗ／ｗ）までで
ある、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項10】

組成物が、１〜１２か月間または１〜３６か月間の貯蔵後に、２０％を超える細粒分(f
ine particle fraction)（ＦＰＦ）をもち、対応する細粒量(fine particle dose)（ＦＰ
Ｄ）は１０マイクログラムから２ミリグラムまでの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未
満である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項11】

キャリヤーが２種類の異なるラクトースキャリヤーのブレンドからなり、第１キャリヤ
ーが約３０〜１００ミクロンの範囲の平均直径を有する粒子からなり、第２キャリヤーが
１０ミクロン未満の平均直径を有する粒子からなり、２種類の異なるキャリヤーの比が約
９７：３〜３：９７であり、および、ラパマイシンの量が２５マイクログラムから１４０
０マイクログラムまでである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

[01] 本発明は、リンパ脈管筋腫症(lymphangioleiomyomatosis)の予防および治療のための、好ましくは吸入による肺送達のための、ラパマイシン(rapamycin)を含む方法およ
び医薬組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

[02] リンパ脈管筋腫症（ＬＡＭ）は、結節性硬化症複合体(tuberous sclerosis complex)（ＴＳＣ）を伴なう女性の３０〜４０％を冒す多系統疾患、すなわち肺に異常増殖する異常な平滑筋様細胞の広範な増殖を特徴とする、しばしば致死的な疾患である。これらの細胞（ＬＡＭ細胞と呼ばれる）は、肺における嚢胞の形成、および軸リンパ管(axial lymphatic)における体液に満たされた嚢胞性構造体（リンパ脈管筋腫(lymphangioleiomyomas)と呼ばれる）の形成をもたらす。その結果、肺実質の進行性嚢胞破壊、リンパ管、気
道の閉塞、および進行性呼吸不全が生じる。さらに、ＬＡＭ細胞は腫瘍を形成する可能性がある。これらは血管筋脂肪腫と呼ばれる、一般に増殖の遅い過誤腫である。腎血管筋脂肪腫はＬＡＭ患者において腎不全をもたらす可能性がある。ＬＡＭ細胞の異常な増殖は、少なくとも一部は結節性硬化症複合体腫瘍抑制遺伝子のひとつであるＴＳＣ１またはＴＳＣ２における不活性化変異により引き起こされる。これらのＴＳＣ遺伝子は、ラパマイシンの哺乳動物ターゲット(mammalian target of rapamycin)（ｍＴＯＲ）の負の調節因子
である。このｍＴＯＲ経路は、細胞増殖、代謝および細胞生存にとって重要な制御ポイントである。ＴＳＣ遺伝子の不活性化の結果として、ＬＡＭ細胞は、ｍＴＯＲ、ならびにＡｋｔおよびＳ６Ｋを含めたｍＴＯＲ経路の他の多数のキナーゼの構成性活性化を示す。

【0003】

[03] ＬＡＭは一般に出産適齢期の女性に起きるが、男性に起きる可能性もある。それはＴＳＣを伴なう女性において最も優勢であるが、ＴＳＣの臨床発現をもたない者およびＴＳＣ１またはＴＳＣ２腫瘍抑制遺伝子における生殖系列変異をもたない者にも起きる可能性がある。これらの症例は散発性ＬＡＭと呼ばれる。よって、ＬＡＭは結節性硬化症複合体と関連して起きるだけでなく散発性非遺伝性形態として起きる可能性もある。

【0004】

[04] ＬＡＭは進行が遅い可能性があるが、それは最終的に呼吸不全および死に至る。症状の発現後１０年で、５５％の患者は呼吸困難になり、２０％は酸素吸入を受け、１０％は死亡する。たとえば、Johnson et al. 2004 Thorax. Survival and disease progression in UK patients with lymphangioleiomyomatosis。ＬＡＭの治療または予防用とし
て現在承認されている薬物はない。第１治療選択肢には、経口ラパマイシン（シロリムス(sirolimus)，FＤＡが臓器拒絶の予防用および腎移植用として承認，後記を参照）の適応外使用、または経口エベロリムス(everolimus)の適応外使用が含まれる。

【0005】

[05] ラパマイシンはストレプトマイセス・ハイグロスコピクス(Streptomyces hygroscopicus)により産生される大環状トリエン系抗生物質である。たとえば、U.S. Pat. No. 3,929,992を参照。ラパマイシンはｍＴＯＲの阻害薬である。ラパマイシンの免疫抑制お
よび抗炎症特性は、最初は移植分野および自己免疫疾患の処置における使用を指摘した。たとえば、それはアルブミンのアレルギー性攻撃に応答した体液性（ＩｇＥ様）抗体の形成を阻止し、ネズミＴ細胞活性化を阻害し、組織不適合げっ歯類において移植臓器の生存時間を延長することが示された。自己免疫疾患のげっ歯類モデルにおいて、それは全身性エリテマトーデス、コラーゲン誘導型関節炎、自己免疫性Ｉ型糖尿病、自己免疫性心筋炎、実験的アレルギー性脳脊髄炎、移植片対宿主疾患、および自己免疫性網膜ぶどう膜炎に関連する免疫仲介事象を抑制する。

【0006】

[06] ラパマイシンはそれの一般薬物名シロリムスによっても呼ばれる（たとえば、ＡＮＤＡ ＃２０１５７８参照，Ｄｒ．Ｒｅｄｄｙｓ Ｌａｂｓ Ｌｔｄ．による，２０１３年５月２８日承認）。シロリムスはＦＤＡにより承認され、米国で臓器拒絶の予防および腎移植用として商品名ＲＡＰＡＭＵＮＥでＷｙｅｔｈ（Ｐｆｉｚｅｒ）により市販されている。それは経口液剤（１ｍｇ／ｍｌ）または錠剤（多数の濃度）の形態である。Ｗｙｅｔｈ（Ｐｆｉｚｅｒ）はまた、誘導体を商品名ＴＯＲＩＳＥＬ（テムシロリムス(temsirolimus)）で進行性腎細胞癌の処置用として市販しており、それは静脈内投与される。テムシロリムスはシロリムスの水溶性プロドラッグである。Ｊｏｈｎｓｏｎ ＆ Ｊｏｈｎｓｏｎの部門であるＣｏｒｄｉｓは、シロリムス溶出型冠動脈ステントを商品名ＣＹＰＨＥＲで市販している。これに関して、シロリムスの抗増殖効果はバルーン血管形成術後の冠動脈における再狭窄を阻止する。US 2010/0305150, Berg et al. (Novartis)には、神
経皮膚障害、たとえばＴＳＣにより仲介されるもの（結節硬化症を含む）および神経線維腫症１型（ＮＦ−１）により仲介されるものを治療および予防するためのラパマイシン誘導体が記載されている。ラパマイシンおよびそれの誘導体は、さらにNishimura, T. et al. (2001) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 163:498-502、ならびにU.S. Pat. No. 6,384,046およびUS 6,258,823に記載されている。

【0007】

[07] ラパマイシンの臨床承認された概念での使用には幾つか有害作用が知られており、それには肺毒性（ＲＡＰＡＭＵＮＥのラベルには、それが肺移植患者には適用されないと警告してある）、癌リスク増大、および糖尿病様症状が含まれる。ラパマイシンは肺毒性の発生と関連し、それは通常は間質性肺炎の形態であるが、肺胞蛋白症も記載がある。たとえば、Nocera et al., Sirolimus Therapy in Liver Transplant Patients: An Initial Experience at a Single Center, Transplantation Proceedings (2008), 40(6), 1950-1952; Perez et al., Interstitial Pneumonitis Associated With Sirolimus in Liver Transplantation: A Case Report, Transplantation Proceedings (2007), 39(10), 3498-3499; Hashemi-Sadraei et al., Sirolimus-associated diffuse alveolar hemorrhage in a renal transplant recipient on long-term anticoagulation, Clinical Nephrology (2007), 68(4), 238-244; Pedroso et al., Pulmonary alveolar proteinosis - a rare pulmonary toxicity of sirolimus, Transplant International (2007), 20(3), 291-296を参照。ラパマイシン誘導による肺毒性の原因は分かっていない。

【0008】

[08] 重篤な呼吸器有害事象も、抗癌療法として長期投与下で循環血濃度１ナノグラム／ｍＬを超える範囲を生じるシロリムス使用と関連づけられている。たとえば、シロリムスのプロドラッグであるテムシロリムスの肺毒性は、２００９年の“間質性肺疾患は腎癌患者におけるテムシロリムス処置の稀な副作用である”と明記した報告に記載された。Aparicio et al., Clinical & Translational Oncology (2009), 11(8), 499-510; Vahid et al., Pulmonary complications of novel antineoplastic agents for solid tumors, Chest (2008) 133:528-538。さらに、２０１２のメタ解析は、テムシロリムスまたはエベロリムスを投与された癌患者の１０％が、クオリティ・オブ・ライフの悪化およびある症例では療法の中断を伴なう軽度の毒性を経験する可能性があると結論した。参照：Iacovelli et al., Incidence and risk of pulmonary toxicity in patients treated with mTOR inhibitors for malignancy. A meta-analysis of published trials, Acta oncologica (2012), 51(7), 873-879。さらに、ラットにおいてテムシロリムスについて実施され
た安全性薬理試験は、呼吸数減少ならびに肺胞マクロファージ浸潤および肺の炎症を示した(参照：Pharmacology Review for temsirolimus NDA 22088，US FDAウェブサイトから
入手できる)。これらの有害作用は、全身投与の結果として循環血体積における薬物濃度
が比較的高い条件下でみられた。

【0009】

[09] 経口投与ラパマイシンは、肺に対するそれの毒性の可能性にもかかわらず、潜在的ＬＡＭ療法としての予備的な有望性を示した。参照：New Eng. J. Medicine 364:1595-
1606 (2011)、およびHammes and Krymskaya, Horm. Cancer 4(2):70-7 (2013)による概説；同様にAndo et al. Respir Investig. 51(3):175-8 (2013) “The efficacy and safety of low-dose sirolims for treatment of lymphangioleiomyomatosis”も参照。しかし、臨床証拠は、これに関するラパマイシンの限界、ならびにＬＡＭの処置のための改善された療法および療法計画の必要性をも指摘する。ラパマイシンの主な限界は、その薬物を長期間使用する必要があること、そして最も重要なことはラパマイシンが他の有害事象（肺毒性の可能性に加えて）と関連することである。たとえば、２０人の患者で完了した２４か月間の非ランダム化オープンラベル試験において、経口投与シロリムスをそれが血管筋脂肪腫を軽減する能力について検査した；それは、ＴＳＣまたは散発性ＬＡＭを伴なう患者において腎不全をもたらす可能性がある増殖の遅い過誤腫である。Bissler et al. (2008) Sirolimus for angiomyolipoma in tuberous sclerosis complex or lymphangioleiomyomatosis. N Engl J Med 358(2):140-151。その試験において、血管筋脂肪腫は処置
期間中に“ある程度”退縮したが、療法停止後に増大する傾向があった。シロリムスに関連する重篤な有害事象には、下痢、肺炎、腎盂腎炎、蜂巣炎(cellulitis)（動物咬創から）、口内炎、および腎血管筋脂肪腫の出血が含まれていた。投薬は、腎移植患者における拒絶を阻止する血清中目標レベルを基準とし、１ｎｇ／ｍｌから１５ｎｇ／ｍｌ（血中シロリムスレベル）の範囲であった。他の類似の試験（第２相，非ランダム化オープンラベル試験）において、ＴＳＣまたは散発性ＬＡＭを伴なう１６人の患者が経口シロリムスで最大２年間処置された。Davies et al (2011) Sirolimus therapy for angiomyolipoma in tuberous sclerosis and sporadic lymphangioleiomyomatosis: a phase 2 trial. Clin Cancer Res 17(12):4071-4081。その試験において、シロリムスの定常状態血中レベル
は３〜１０ｎｇ／ｍｌであり、半数を超える患者が３〜６ｎｇ／ｍｌの維持レベルを維持した。シロリムス処置は腎血管筋脂肪腫の持続的退縮を示した。しかし、腫瘍応答は療法継続で維持されたけれども、処置２年目にはそれ以上の縮小はほとんど起きなかった。シロリムスに関連する有害事象には、口腔粘膜炎、呼吸器感染症、および蛋白尿症が含まれていた。進行が記録されている１０人のＬＡＭ患者の他の試験において、３人の患者で重篤な再発性の下気道感染症またはシロリムス誘導性間質性肺炎のためシロリムスは停止された。Neurohr et al., Is sirolimus a therapeutic option for patients with progressive pulmonary lymphangioleiomyomatosis ? Respiratory Research (2011), 12:66。
その試験は、“シロリムスは急激に衰退しつつあるＬＡＭ患者における療法選択肢とみなしてもよいかもしれない”と結論づけたが“投与は、ある患者においては処置停止を要求する重篤な呼吸器有害事象と関連する可能性がある”、また“肺移植前にはシロリムス中断が必須である”と指摘した。最後に、患者８９人の１２か月ランダム化二重盲検臨床試験（４６人の患者はＬＡＭを伴なう）を実施し、その後、１２か月間の観察期間をおいた。 McCormack et al (2011) Efficacy and safety of sirolimus in lymphangioleiomyomatosis. N Engl J Med 364:1595-1606。患者は血中シロリムスレベル５〜１５ｎｇ／ｍｌに維持された。この試験において、シロリムス処置は肺機能を安定化し、血清ＶＥＧＦ−Ｄレベルを低下させ、症状の軽減およびクオリティ・オブ・ライフの改善を伴なった。しかし、肺機能の安定化には継続処置が必要であった。重要なことに、これらの臨床試験はすべてシロリムスの経口配合物を用いていた。これは、前記に引用した文献により例示されるように、ラパマイシンの周知の肺毒性からみて肺に直接送達するためのラパマイシンのエアロゾル配合物は成功の可能性がきわめて少ないと考えられていたからである。

【0010】

[10] ２０１３年に公開されたＬｅｈｒｅｒによる米国特許出願は、“［ラ］パマイシン（シロリムス）は、十分な記載のあるそれの肺毒性、間質性肺炎のため、安全に吸入することができない”という見解を反映している。参照：US 20130004436, Chhajed et al.
(2006) 73:367-374を引用。Ｌｅｈｒｅｒ特許出願は、肺癌およびリンパ脈管筋腫症を治療および予防するための組成物および方法に関する。それ以前の幾つかの刊行物、たとえばU.S. Patent No. 5,080,899，Sturm et al. (1991年2月出願)およびUS Patent No. 5,635,161 (1995年6月出願)は、吸入による送達のために配合されたラパマイシンの一般的記
載を若干含むが、そのような一般的記載は何ら証拠により支持されておらず、またラパマイシン誘導による肺毒性の発生が多数報告される前になされたものである；肺毒性は、前記で考察した報文によって証明されるように、ラパマイシンが移植状況における免疫抑制薬として、また抗癌状況における細胞増殖阻害薬として、より広範に適用された後に現われた。

【0011】

[11] WO 2011/163600には、ラパマイシンと同様にマクロライド系ラクトンであるタクロリムス(tacrolimus)のエアロゾル配合物が記載されている。しかし、タクロリムスはシロリムスとは別個の化学物質であり、タクロリムスの分子ターゲットはカルシニューリン(calcineurin)であってｍＴＯＲではなく、ラパマイシンと異なりタクロリムスは肺毒性
を示さず、実際に肺移植後の拒絶を阻止するために適用されている。

【0012】

[12] ラパマイシン誘導による肺毒性の可能性が広範に認識されていたことからみて、ＬＡＭの処置におけるラパマイシンを含む肺送達用の医薬組成物はヒトにおいて実行可能な選択肢であるとはみなされていなかった。

【0013】

[13] 薬物を吸入により肺へ送達するのは、下記を含めた多様な状態を処置するための重要な手段である：一般的局所状態、たとえば嚢胞性線維症、肺炎、気管支喘息および慢性閉塞性肺疾患、ある種の全身性状態：ホルモン置換、疼痛管理、免疫不全、赤血球生成、糖尿病、肺癌などを含む。Yi et al. J. Aerosol Med. Pulm. Drug Deliv. 23:181-7 (2010)による総説を参照。吸入による肺癌の処置のために適用される薬剤には、シスプラ
チン(cisplatin)、カルボプラチン(carboplatin)、タキサン(taxane)類およびアントラサイクリン(anthracycline)類が含まれる。たとえば、U.S. Pat. No. 6,419,900; 6,419,901; 6,451,784; 6,793,912; ならびにU.S. Patent Application Publication No. US 2003/0059375 および US 2004/0039047を参照。さらに、吸入により投与されるドキソルビシ
ン(doxorubicin)およびテモゾロミド(temozolomide)が肺転移の処置に示唆されている。
たとえば、U.S. Pat. No. 7,288,243およびU.S. Patent Application Publication No. 2008/0008662を参照。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0014】

【特許文献1】U.S. Pat. No. 3,929,992

【特許文献2】US 2010/0305150

【特許文献3】U.S. Pat. No. 6,384,046

【特許文献4】US 6,258,823

【特許文献5】US 20130004436

【特許文献6】U.S. Patent No. 5,080,899

【特許文献7】US Patent No. 5,635,161

【特許文献8】WO 2011/163600

【特許文献9】U.S. Pat. No. 6,419,900

【特許文献10】U.S. Pat. No. 6,419,901

【特許文献11】U.S. Pat. No. 6,451,784

【特許文献12】U.S. Pat. No. 6,793,912

【特許文献13】U.S. Patent Application Publication No. US 2003/0059375

【特許文献14】US 2004/0039047

【特許文献15】U.S. Pat. No. 7,288,243

【特許文献16】U.S. Patent Application Publication No. 2008/0008662

【非特許文献】

【0015】

【非特許文献1】Johnson et al. 2004 Thorax. Survival and disease progression in UK patients with lymphangioleiomyomatosis

【非特許文献2】Nishimura, T. et al. (2001) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 163:498-502

【非特許文献3】Nocera et al., Sirolimus Therapy in Liver Transplant Patients: An Initial Experience at a Single Center, Transplantation Proceedings (2008), 40(6), 1950-1952

【非特許文献4】Perez et al., Interstitial Pneumonitis Associated With Sirolimus in Liver Transplantation: A Case Report, Transplantation Proceedings (2007), 39(10), 3498-3499

【非特許文献5】Hashemi-Sadraei et al., Sirolimus-associated diffuse alveolar hemorrhage in a renal transplant recipient on long-term anticoagulation, Clinical Nephrology (2007), 68(4), 238-244

【非特許文献6】Pedroso et al., Pulmonary alveolar proteinosis - a rare pulmonary toxicity of sirolimus, Transplant International (2007), 20(3), 291-296

【非特許文献7】Aparicio et al., Clinical & Translational Oncology (2009), 11(8), 499-510

【非特許文献8】Vahid et al., Pulmonary complications of novel antineoplastic agents for solid tumors, Chest (2008) 133:528-538

【非特許文献9】Iacovelli et al., Incidence and risk of pulmonary toxicity in patients treated with mTOR inhibitors for malignancy. A meta-analysis of published trials, Acta oncologica (2012), 51(7), 873-879

【非特許文献10】Pharmacology Review for temsirolimus NDA 22088

【非特許文献11】New Eng. J. Medicine 364:1595-1606 (2011)

【非特許文献12】Hammes and Krymskaya, Horm. Cancer 4(2):70-7 (2013)

【非特許文献13】Ando et al. Respir Investig. 51(3):175-8 (2013) “The efficacy and safety of low-dose sirolims for treatment of lymphangioleiomyomatosis”

【非特許文献14】Bissler et al. (2008) Sirolimus for angiomyolipoma in tuberous sclerosis complex or lymphangioleiomyomatosis. N Engl J Med 358(2):140-151

【非特許文献15】Davies et al (2011) Sirolimus therapy for angiomyolipoma in tuberous sclerosis and sporadic lymphangioleiomyomatosis: a phase 2 trial. Clin Cancer Res 17(12):4071-4081

【非特許文献16】Neurohr et al., Is sirolimus a therapeutic option for patients with progressive pulmonary lymphangioleiomyomatosis ? Respiratory Research (2011), 12:66

【非特許文献17】McCormack et al (2011) Efficacy and safety of sirolimus in lymphangioleiomyomatosis. N Engl J Med 364:1595-1606

【非特許文献18】Chhajed et al. (2006) 73:367-374

【非特許文献19】Yi et al. J. Aerosol Med. Pulm. Drug Deliv. 23:181-7 (2010)

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0016】

[14] 本発明は、一部は、動物試験においてラパマイシンを肺へ直接送達した際のそれの意外な薬物動態の知見に基づく。予想外に、肺への直接投与は血液と比較して肺組織においてより高いラパマイシン濃度を生じた。ラパマイシンのような高脂溶性小分子薬物は一般に肺から循環系中へ速やかに拡散し、次いで分布体積内で均一に再分布するので、これは予想されたものと対照的である。さらに、薬物は療法効果をもつのに十分なほど高い濃度で肺に存続した。最終的に、肺への直接投与は、ラパマイシンと肺毒性（特に間質性肺炎の形態のもの）の関連からみた気道における何らかの急性毒性または慢性毒性、他の予想外の結果を生じることもなかった。

【0017】

[15] 本明細書に記載するように、ＴＯＲシグナル伝達経路により罹患する疾患および障害の有効な局所的な治療および予防を提供するために、好ましくは吸入により肺へ直接送達するラパマイシン、それのプロドラッグ、誘導体およびアナログの医薬配合物が求められている。そのような局所処置は、薬物の全身送達から生じる高濃度の血中ラパマイシンに関連するものを含む毒性および有害事象を低減または排除する。本発明はこの要望に対処する。

【課題を解決するための手段】

【0018】

[16] 本発明は肺へ直接投与するためのラパマイシン組成物を提供し、それは肺組織に対して低毒性または無毒性で肺においてｍＴＯＲシグナル伝達を阻害するのに有効な量のラパマイシンを供給し、約１ｎｇ／ｍｌ未満の血中ラパマイシンレベルを生じる。本発明の組成物は、特にそれらの長期または持続的な使用に関して、１ｎｇ／ｍｌ〜１５ｎｇ／ｍｌの範囲の持続的血中濃度を生じる現在のラパマイシン投与形態と比較して改善された安全性プロファイルを示すと予期される。これが予期されるのは、本発明組成物の肺毒性が低く、それと併せて血中ラパマイシンレベルがきわめて低いことからみてラパマイシンへの全身曝露による有害事象が無いかまたは実質的により少ないという確率によるものである。したがって、本発明の組成物は、胃腸管経由または静脈内投与される既存の投与形態と比較して、より高い療法指数を示すと予期される。

【0019】

[17] 本発明は、肺送達、好ましくは吸入による送達のために設計されたラパマイシンを含む医薬組成物を用いてＬＡＭを治療および予防するための組成物および方法に関する。１態様において、本発明はそのような処置を必要とするヒト対象においてＬＡＭを治療および予防するための方法を提供し、本方法はラパマイシン（シロリムスとも呼ばれる）、またはそのプロドラッグもしくは誘導体を含むエアロゾル化可能な(aerosolizable)組
成物を対象に投与することを含む。本発明の組成物は単独で、またはＬＡＭの処置のための１種類以上の追加の療法もしくは療法計画との組み合わせで使用できる。さらに、本明細書中に提供する組成物は、組成物中の唯一の療法薬としてラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体を含むことができ、あるいはラパマイシンを１種類以上の追加療法薬と共に単一剤形中に配合することができる。

【0020】

[18] したがって、本発明は、ヒト対象においてリンパ脈管筋腫症を処置する際に使用するための、ある量の薬物のマイクロ粒子、キャリヤーの粒子、および１種類以上の任意選択的な賦形剤を含み、薬物がラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体から選択される、肺送達のための医薬乾燥粉末組成物を提供する。

【0021】

[19] １態様において、組成物中の薬物の量は５０マイクログラムから５００マイクログラムまで、５０マイクログラムから２５０マイクログラムまで、または５０マイクログラムから１５０マイクログラムまでである。

【0022】

[20] １態様において、薬物はラパマイシンである。１態様において、薬物はエベロリムス、テムシロリムス、リダホロリムス(ridaforolimus)、ウミロリムス(umirolimus)お
よびゾタロリムス(zotarolimus)からなる群から選択される。

【0023】

[21] １態様において、マイクロ粒子は、約０．１から１０ミクロンまでの平均直径または約１から５ミクロンまでの平均直径をもつ薬物粒子からなる。１態様において、粒子は、約１．５〜４ミクロン、約１．５〜３．５ミクロン、または約２〜３ミクロンの平均直径をもつ。

【0024】

[22] キャリヤーは、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノー
ス、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、リジン、ロイシン、イソロイシン、ジパルミチルホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、ならびに以上のいずれかの混合物からなる群から選択できる。１態様において、キャリヤーは２種類の異なるキャリヤーのブレンドを含むかまたはそれからなる。キャリヤーの粒子は、 から２００ミクロンまで、３０から１００ミクロンまでの範囲、または１０ミクロン未満の直径をもつことができる。キャリヤーが２種類の異なるキャリヤーのブレンドからなる場合、各キャリヤーは平均粒子直径として測定して異なるサイズ範囲の粒子からなる。１態様において、キャリヤーは２種類の異なるキャリヤー、第１キャリヤーおよび第２キャリヤーのブレンドからなる。第１キャリヤーは約３０〜１００ミクロンの範囲の直径を有する粒子からなり、第２キャリヤーは１０ミクロン未満の直径を有する粒子からなる。２種類の異なるキャリヤーの比は３：９７から９７：３までの範囲である。１態様において、キャリヤーは２種類の異なるラクトースキャリヤーのブレンドからなる。

【0025】

[23] 粉末中のキャリヤーに対する薬物の割合は０．５％から２％（ｗ／ｗ）までであってもよい。１態様において、粉末中のキャリヤーに対する薬物の割合は１％（ｗ／ｗ）である。

【0026】

[24] 組成物中の薬物の量は、組成物の総重量を基準として０．５％から２０％（ｗ／ｗ）までである。１態様において、薬物の量は約１％から２％（ｗ／ｗ）までである。
[25] １態様において、１種類以上の任意選択的な賦形剤が組成物中に存在し、リン脂質および脂肪酸金属塩ならびに以上の混合物から選択される。１態様において、リン脂質はジパルミチルホスファチジルコリンおよびレシチンから選択される。１態様において、脂肪酸金属塩はステアリン酸マグネシウムである。１態様において、賦形剤または賦形剤類は、大型キャリヤー粒子に対する賦形剤の重量割合０．０１％から０．５％までの範囲でキャリヤー粒子上にコートされている。

【0027】

[26] １態様において、組成物中の薬物の量は、ｍＴＯＲＣ１の生物活性を阻害するのに有効な量である。１態様において、薬物の量は、Ｓ６タンパク質のリン酸化を阻害するのに有効な量である。１態様において、薬物の量は、肺に送達される呼吸可能用量(respirable dose)５マイクログラムから４００マイクログラムを達成するのに有効な量である。１態様において、呼吸可能用量は約１０、約５０、約１００または約２５０マイクログラムである。１態様において、薬物の量は、対象において５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満の血中トラフレベル(blood trough level)を生じるのに有効な量である。１態様において、血中トラフレベルは１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満である。１態様において、薬物の量は、肺組織において１ｎｇ／ｇから１マイクログラム（ｕｇ）／ｇまでの薬物濃度を生じるのに有効な量である。１態様において、肺組織における薬物の濃度は、約１０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、約１００ｎｇ／ｇ、または約２００ｎｇ／ｇである。１態様において、薬物は、好ましくはヒトに投与した後、肺において約１ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、または約１００ｎｇ／ｇの療法レベルで、ある期間存続し、その期間は約６〜１０時間、約６〜１４時間、約６〜２４時間、および約６〜７２時間から選択される。１態様において、その期間は約１０時間、約１４時間、約２４時間、および約７２時間から選択される。

【0028】

[27] １態様において、組成物は、１〜１２か月間または１〜３６か月間の貯蔵後に、２０％を超える細粒分(fine particle fraction)（ＦＰＦ）をもち、対応する細粒量(fine particle dose)（ＦＰＤ）は１０マイクログラムから２ミリグラムまでの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。１態様において、送達量(delivered dose)（ＤＤ）または放出量(emitted dose)（ＥＤ）と呼ばれる、患者に送達される量は、２５マイクログラムから２．５ミリグラムまでの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。

【0029】

[28] １態様において、組成物はさらに１種類以上の追加療法薬を含む。１種類以上の追加療法薬は、エストロゲンアンタゴニスト（たとえば、レトロゾール(letrozole)、タ
モキシフェン(tamoxifen)）、スタチン（たとえば、シンバスタチン(simvastatin)）、ｓｒｃ阻害薬（たとえば、サラカチニブ(saracatinib)）、およびＶＥＧＦ−Ｒ阻害薬（た
とえば、パゾパニブ(pazopanib)）から選択される。１態様において、１種類以上の追加
療法薬はレトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、およびイマチニブ(imatinib)から選択される。

【0030】

[29] １態様において、組成物は、努力肺活量(forced vital capacity)（ＦＶＣ）お
よび努力呼気量(forced expiratory volume)（ＦＥＶ１）により測定した対象の肺機能を改善するのに有効な量の薬物を送達する。１態様において、組成物は、放射線検査により検出できる規模または量の胸膜滲出液を低減するのに有効な用量の薬物を送達する。

【0031】

[30] １態様において、組成物を１日１回投与に適合させる。
[31] １態様において、組成物は、薬物の水性懸濁液を調製し、その薬物懸濁液にマイクロフルイダイゼーションを施し、得られた粒子を噴霧乾燥して乾燥粉末を形成する工程を含む、湿式研磨法(wet polishing process)により製造される。

【0032】

[32] １態様において、薬物はラパマイシンであり、キャリヤーは２種類の異なるラクトースキャリヤーのブレンドからなり、第１キャリヤーは約３０〜１００ミクロンの範囲の平均直径を有する粒子からなり、第２キャリヤーは１０ミクロン未満の平均直径を有する粒子からなり、２種類の異なるキャリヤーの比は約９７：３〜３：９７であり、ラパマイシンの量は２５マイクログラムから１４００マイクログラムまでである。

【0033】

[33] 本発明はまた、請求項１〜３１のいずれか１項に記載の組成物を含み、薬物の量が約１５マイクログラムから２５００マイクログラムまで、２５マイクログラムから２５０マイクログラムまで、５０マイクログラムから１５０マイクログラムまでである、リンパ脈管筋腫症を処置するための単位剤形を提供する。１態様において、薬物の量は約５０マイクログラムから２５０マイクログラムまでである。１態様において、剤形はドライパウダーインヘラーデバイス中に使用するのに適したカプセルである。１態様において、カプセルは１ｍｇから１００ｍｇまで、または１０ｍｇから４０ｍｇまでの粉末を収容している。カプセルは、ＤＰＩデバイス中に使用するのに適したゼラチン、プラスチック、ポリマーまたはセルロース系のカプセルであり、あるいはホイル／ホイルまたはホイル／プラスチックブリスターの形態であってもよい。

【0034】

[34] 本発明はまた、本明細書に記載する組成物または単位剤形、および使用のための指示を含む、医薬パッケージまたはキットを提供する。
[35] 本発明はまた、本明細書に記載する組成物または単位剤形を収容したリザーバーを含む、乾燥粉末送達デバイスを提供する。リザーバーはデバイス内の一体チャンバー、カプセルまたはブリスターであってもよい。１態様において、デバイスは、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、ＸＣａｐｓ（登録商標）、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｆｌｏｗｃａｐｓ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、およびＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）から選択される。

【0035】

[36] 本発明はまた、そのような処置を必要とするヒト対象においてリンパ脈管筋腫症を処置するための方法であって、本明細書に記載する組成物または単位剤形を対象に吸入
により投与することを含む方法を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0036】

【図1】図１：マウス血液中のラパマイシン１０．６ｎｇ／ｍＬ（上）および内部標準（下）のＬＣ−ＭＳ／ＭＳクロマトグラム。

【図2】図２：マウス肺ホモジェネート中のラパマイシン１０．６ｎｇ／ｍＬ（上）および内部標準（下）の代表的クロマトグラム。

【図3】図３：マウス血液中のラパマイシンについての検量曲線。

【図4】図４：マウス肺ホモジェネート中のラパマイシンについての検量曲線。

【図5】図５：ラパマイシンをＯＰＡにより投与したマウス２−０７からの血液中のラパマイシン（上）および内部標準（下）の代表的クロマトグラム。

【図6】図６：ラパマイシンをＯＰＡにより投与したマウス２−０７からの肺ホモジェネート中のラパマイシン（上）および内部標準（下）の代表的クロマトグラム。

【図7】図７：ラパマイシンのＯＰＡおよび経口投与後のマウス肺におけるＳ６リン酸化。

【図8】図８：１日１回反復肺投与についての予測ラパマイシン血中濃度。

【発明を実施するための形態】

【0037】

[37] 本発明は、そのような処置を必要とするヒト対象においてＬＡＭを治療および予防するための方法および組成物を提供する。そのような処置を必要とするヒト対象は、ＬＡＭを伴なうと診断されている者である。１態様において、ヒト対象は女性である。１態様において、ヒト対象は男性である。１態様において、ヒト対象は結節性硬化症複合体を伴なうと診断されている。１態様において、ヒト対象は散発性ＬＡＭを伴なうと診断されている。１態様において、本方法は、適切なキャリヤー中のラパマイシン、および所望により１種類以上の添加剤を含む組成物を、吸入により対象に投与することを含む。用語“ラパマイシン”は、この開示内容全体を通して、ラパマイシンそのもの（シロリムスとも呼ばれる）ならびにそのプロドラッグ（たとえば、テムシロリムス）および誘導体を表わすために総称として用いられる。ラパマイシンの誘導体には、構造的にラパマイシンに類似する化合物、同じ化合物クラスの化合物、ラパマイシンアナログである化合物、またはラパマイシンもしくはその誘導体の医薬的に許容できる塩類である化合物が含まれる。ラパマイシン、それのプロドラッグ、および誘導体のさらなる記載および例を以下のセクションに提示する。

【0038】

[38] 本明細書に記載する組成物は、ラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体（“薬物”と総称する）を含有する呼吸可能な粒子を発生するのに適したエアロゾル化可能な組成物である。１態様において、薬物はシロリムス、エベロリムスおよびテムシロリムスから選択される。１態様において、薬物はシロリムスである。組成物は、薬物、キャリヤー、および所望により１種類以上の添加剤を含むことができる。組成物は、後記に“吸入用組成物”と題するセクションに詳細に記載するように、１種類以上の医薬的に許容できる噴射剤およびキャリヤーの水溶液、乾燥粉末、または混合物であってもよい。

【0039】

[39] 本発明はまた、そのような処置を必要とするヒト対象においてＬＡＭを治療および予防するための方法であって、本発明の組成物を対象に肺投与する工程を含む方法を提供する。１態様において、ラパマイシンの投与量は、対象において０．０１ｎｇ／ｍｌから０．１５ｎｇ／ｍｌまで、０．０７５ｎｇ／ｍｌから０．３５０ｎｇ／ｍｌまで、０．１５０ｎｇ／ｍｌから０．７５０ｎｇ／ｍｌまで、０．７５０ｎｇ／ｍｌから１．５ｎｇ／ｍｌまで、または１．５ｎｇ／ｍｌから５ｎｇ／ｍｌまでの薬物の血中トラフレベルを達成するのに十分である。１態様において、ラパマイシンの投与量は、対象において５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、または０．５ｎｇ／ｍｌ未満の薬物の血中トラフレベルを達成するのに十分である。１態様において、ラパマイシンの投与
量は、肺組織において１ｎｇ／ｇから１ｕｇ／ｇまでの範囲のラパマイシン濃度を生じるのに十分である。好ましくは、上記のラパマイシンの療法レベルは、本明細書に記載する組成物を１日１回投与することにより達成され、好ましくは、対象に投与するラパマイシンの総日用量は、１日当たり２ｍｇ未満または１ｍｇ未満である。併用療法を含めて、肺への送達および投与のさらなる観点を、後記の“肺への投与および投薬”と題するセクションに詳細に記載する。

【0040】

[40] 本発明の方法および組成物は、そのような処置を必要とする対象、好ましくはヒト対象において、ＬＡＭを処置するのに有効である。ＬＡＭを処置するのに有効な薬物量（“有効量”または“療法有効量”）は、ＬＡＭまたはＬＡＭの１以上の症状の進行、重症度および／または期間を低減または軽減し、ＬＡＭの進展を阻止し、ＬＡＭを退縮させ、あるいはＬＡＭに関連する１以上の症状の発現または発症を阻止し、あるいは他の療法（たとえば、予防薬または療法薬）の、ＬＡＭの１以上の症状の重症度もしくは発症に関する、またはＬＡＭの発現もしくは進行に関する、予防効果または療法効果を増強または改善するのに十分な、薬物（たとえば、ラパマイシン）の量を表わす。特定の態様において、ＬＡＭの処置に関する療法有効量は、ＬＡＭ細胞の増殖を阻害または低減し、ＬＡＭ細胞の拡散（転移）を阻害または低減し、あるいは腫瘍のサイズを縮小し、あるいはＦＶＣまたはＦＥＶ１を改善し、あるいは放射線検査により検出できる量の胸膜滲出液を低減する、療法（たとえば、療法薬）の量を表わす。好ましい態様において、療法（たとえば、療法薬）の療法有効量は、ＬＡＭ細胞の増殖または腫瘍のサイズを、対照（たとえば、リン酸緩衝化生理食塩水（“ＰＢＳ”））と対比して少なくとも５％、好ましくは少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減する。よって、本発明方法の概念において、用語“処置する(treat)”、“処置(treatment)”、および“処置すること(treating)”は、ＬＡＭまたは１以上のＬＡＭ関連症状の重症度、期間または進行の低減を表わす。特定の態様において、これらの用語は、ＬＡＭ細胞の増殖阻害または増殖低減、ＬＡＭ細胞の拡散（転移）またはＬＡＭ関連癌の発現もしくは進行の阻害または低減、あるいはＬＡＭ関連腫瘍のサイズの縮小、あるいは軸リンパ管の関与の低減を表わすことができる。

【0041】

[41] 本発明方法の１態様において、ラパマイシンは努力肺活量（ＦＶＣ）および努力呼気量（ＦＥＶ１）により測定した対象の肺機能を改善するのに有効な量で投与される。他の態様において、ラパマイシンは対象において放射線検査により検出できる規模または量の胸膜滲出液を低減するのに有効な用量で投与される。１態様において、ラパマイシンは下記のうち１以上を改善するのに有効な用量で投与される：機能的残気量(functional residual capacity)、血清ＶＥＧＦ−Ｄ、クオリティ・オブ・ライフおよび機能的動作、６分間歩行距離、および肺の一酸化炭素拡散能。１態様において、肺経路を介して送達されたラパマイシンは、肺および肺から離れた部位のＬＡＭ関連腫瘍の増殖を制限するのに有効な血中ラパマイシンレベルを達成する。１態様において、投与量のラパマイシンの有効性は上記のうちいずれか１以上により測定される。

【0042】

[42] ある態様において、本発明方法は、ＬＡＭを伴なう対象においてＬＡＭを管理するのに有効である。これに関して、用語“管理する(manage)”、“管理すること(managing)”、および“管理(management)”は、治癒をもたらさない療法から対象が得る有益な効果を表わす。１態様において、ＬＡＭは、本発明に従ったラパマイシンによる処置中にそれの進行が遅延または停止すれば、対象において管理されている。他の態様において、ＬＡＭは、ＬＡＭに関連する１以上の症状が改善または安定化すれば（すなわち、その症状が処置コース中に悪化しなければ）、対象において管理されている。

【0043】

[43] １態様において、本発明方法は、現在得られるＬＡＭ療法に対して“不応答性(non-responsive)”または“治療抵抗性(refractory)”である対象に向けられる。これに関して、用語“不応答性”または“治療抵抗性”は、療法に対する対象の応答がＬＡＭに関連する１以上の症状を軽減するのに適切でないものを表わす。用語“対象(subject)”お
よび“患者(patient)”は、本発明の開示において互換性をもって用いられる。これらの
用語は、動物、好ましくは哺乳動物を表わし、これには非霊長類（たとえば、ウシ、ブタ、ウマ、ネコ、イヌ、ラット、およびマウス）および霊長類（たとえば、チンパンジー、サル、たとえばカニクイザル(cynomolgous monkey)、およびヒト）、より好ましくはヒトが含まれる。好ましい態様において、対象はヒトである。

【0044】

[44] 用語“阻止する(prevent)”、“阻止すること(preventing)”および“阻止(prevention)”は、本発明方法に従って同定した１以上の化合物の投与、またはそのような化
合物と疾患または障害のための既知の療法との組合わせの投与から生じる、ＬＡＭの１以上の症状の再発、発現、進行または発症の阻止を表わす。

【0045】

[45] 本発明の医薬組成物に関して、“キャリヤー”は、たとえば送達のためにラパマイシンに配合する液体または固体材料、たとえば溶媒、希釈剤、安定剤、佐剤、賦形剤、助剤、噴射剤またはビヒクルを表わす。本発明の組成物中に使用するための医薬的に許容できるキャリヤーの例には、限定ではなく、乾燥粉末キャリヤー、たとえばラクトース、マンノース、アミノ酸、シクロデキストリン、ジパルミチルホスファチジルコリン、炭化水素およびフルオロカーボン噴射剤、圧縮ガス、無菌液体、水、緩衝塩類、エタノール、ポリオール（たとえば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）、油類、界面活性剤、懸濁化剤、炭水化物（たとえば、グルコース、ラクトース、スクロースまたはデキストラン）、抗酸化剤（たとえば、アスコルビン酸またはグルタチオン）、キレート化剤、低分子量タンパク質、またはその適切な混合物が含まれる。好ましくは、ラパマイシンの乾燥粉末エアロゾル配合物に関して、キャリヤーが存在する場合にはそれは糖類および糖アルコールからなる群から選択される。１態様において、キャリヤーが存在する場合にはそれはラクトースである。

【0046】

[46] 用語“医薬的に許容できる”は、動物、より特別にはヒトに使用するものとして連邦または州の政府の規制当局が承認したこと、または米国薬局方その他の一般的に認識されている薬局方、たとえば欧州薬局方に掲載されていることを示す。水に貧溶性または水に不溶性である薬物を可溶化するための１方法は、薬物の塩を形成すること、あるいはそれ自体がより可溶性であるプロドラッグまたはそれの水溶性塩を形成するために使用できるプロドラッグを製造することである。塩類および医薬的に許容できる塩形態を形成するための方法は当技術分野で既知であり、限定ではなく、目的とする薬物またはプロドラッグ中に存在する可能性のある酸性基または塩基性基の塩類が含まれる。塩基性である化合物は種々の無機酸および有機酸との多様な塩類を形成できる。そのような塩基性化合物の医薬的に許容できる酸付加塩を調製するために使用できる酸は、無毒性の酸付加塩、すなわち薬理学的に許容できるアニオンを含む塩類を形成するものである；下記のものが含まれるが、それらに限定されない：硫酸、クエン酸、マレイン酸、酢酸、シュウ酸、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロネート（glucaronate）、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、
メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、およびパモ酸塩（すなわち、１，１’−メチレン−ビス−（２−ヒドロキシ−３−ナフトエ酸塩））。酸性である化合物は、種々の薬理学的に許容できるカチオンとの塩
基塩を形成できる。そのような塩類の例には、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、特にカルシウム塩、マグネシウム塩、ナトリウム塩、リチウム塩、亜鉛塩、カリウム塩、および鉄塩が含まれる。

【0047】

[47] １態様において、本発明の方法および組成物はラパマイシンの水溶性プロドラッグまたは誘導体、好ましくはテムシロリムスまたは関連化合物を使用する。１態様において、本発明の方法および組成物はラパマイシン（シロリムス）を使用する。

【0048】

ラパマイシン
[48] ラパマイシンはストレプトマイセス・ハイグロスコピクス（Streptomyces hygroscopicus）により産生される大環状ラクトンである。それの化学（ＩＵＰＡＣ）名は（３Ｓ，６Ｒ，７Ｅ，９Ｒ，１０Ｒ，１２Ｒ，１４Ｓ，１５Ｅ，１７Ｅ，１９Ｅ，２１Ｓ，２３Ｓ，２６Ｒ，２７Ｒ，３４ａＳ）−９，１０，１２，１３，１４，２１，２２，２３，２４，２５，２６，２７，３２，３３，３４，３４ａ−ヘキサデカヒドロ−９，２７−ジヒドロキシ−３−［（１Ｒ）−２−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−３−メトキシシクロヘキシル］−１−メチルエチル］−１０，２１−ジメトキシ−６，８，１２，１４，２０，２６−ヘキサメチル−２３，２７−エポキシ−３Ｈ−ピリド［２，１−ｃ］［１，４］オキサアザシクロヘントリアコンチン−１，５，１１，２８，２９（４Ｈ，６Ｈ，３１Ｈ）−ペントンである。

【0049】

[49] それの分子式はＣ_５１Ｈ_７９ＮＯ_１３であり、それの分子量は９１４．１７２ｇ／ｍｏｌである。それの構造を下記に示す。

【0050】

【化1】

【0051】

[50] ラパマイシンは白色ないし灰白色粉末であり、わずか２．６μｇ／ｍｌのきわめて低い溶解度をもち、水に不溶性であるとみなされる。それはベンジルアルコール、クロロホルム、アセトンおよびアセトニトリルには易溶性である。ラパマイシンの水不溶性は、それの配合に特別な技術的問題を提起する。経口剤形としてのそれの配合に関して、それは固体分散液の形の経口液剤(WO 97/03654)およびナノサイズ（４００ｎｍ未満）粒子
を含有する錠剤(US 5,989,591)として製造されてきた。しかし、これらの操作は有効物質の溶解性、したがってそれの生物学的利用能の、実質的変動をもたらす。他の配合方法は結晶性粉末を利用する。当技術分野で認識されている方法によれば、低溶解性薬物の結晶質形態からそれの非晶質形態への転移はそれの溶解性を著しく高める可能性がある。これはラパマイシンにも当てはまるが、非晶質形態は化学的にきわめて不安定である。非晶質ラパマイシン（シロリムス）を含む医薬剤形はWO 06/039237およびWO 06/094507に記載されている（シロリムスおよびモノステアリン酸グリセリルを４９．２５％濃度で含む改良放出配合物）。ラパマイシンの改良された安定な経口剤形がUS 8,053,444に記載されてい
る。この剤形は、シロリムスの放出速度に有害な影響を及ぼすことなくそれの安定性を高めるために、脂肪酸エステルおよびポリマー（たとえば、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）またはヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ））を組成物中に用いている。US 8,053,444によれば、１０％ ｗ／ｗを超える脂肪酸エステル濃度は配合物からのシロリムスの放出速度を抑え、それにより胃腸管からの吸収が不十分になるので、避けるべきである。脂肪酸エステル（グリセロールエステル）の好ましい濃度は１％〜５％または５％〜９％である。１態様において、本発明のエアロゾルラパマイシン組成物は脂肪酸エステルをポリマーとの組合わせでは含有しない。１態様において、本発明のエアロゾルラパマイシン組成物は、組成物の１０％を超える、または１２重量％を超える濃度の脂肪酸エステルを含有する。

【0052】

[51] 本発明の組成物および方法に使用するのに適したラパマイシンおよびその誘導体（アナログを含む）ならびにプロドラッグには、ｍＴＯＲ細胞シグナル伝達経路の阻害薬であり、好ましくはｍＴＯＲ自体の阻害薬である、ラパマイシン（シロリムス）およびそのプロドラッグまたは誘導体が含まれる。１態様において、ラパマイシンの誘導体またはプロドラッグは、下記のものからなる群から選択されるｍＴＯＲ阻害薬である：エベロリムス(everolimus)（Ａｆｆｉｎｉｔｏｒ；ＲＡＤ００１）、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、リダホロリムス(ridaforolimus)（以前はデホロリムス(deforolimus)として知られていた；ＡＰ２３５７３）、ウミロリムス(umirolimus)（Ｂｉｏｌｉｍｕｓ Ａ９）、ゾタロリムス(zotarolimus)（ＡＢＴ−５７８）、ノボリムス(novolimus)、ミオリムス(myolimus)、ＡＰ２３８４１、ＫＵ−００６３７９４、ＩＮＫ−１２８、ＥＸ２０４４、ＥＸ３８５５、ＥＸ７５１８、ＡＺＤ０８０５５およびＯＳＩ０２７。さらなる誘導体が当業者に既知であり、たとえばシロリムスのシクロヘキシル環上のヒドロキシルが−ＯＲ_１により置換されたＯ−置換誘導体が含まれる；ここで、Ｒ_１は所望により、置換されたアルキル、アシルアミノアルキルまたはアミノアルキルである。

【0053】

[52] １態様において、本発明のエアロゾル配合物および方法に使用するための化合物は、エベロリムス、テムシロリムス、リダホロリムス、ウミロリムスおよびゾタロリムスからなる群から選択されるラパマイシン誘導体である。エベロリムス、テムシロリムス、リダホロリムス、ウミロリムスおよびゾタロリムスの化学構造を下記に示す。

【0054】

【化2】

【0055】

【化3】

【0056】

[53] １態様において、本発明のエアロゾル配合物および方法に使用するための化合物は、ＫＵ−００６３７９４、ＡＺＤ８０５５、ＩＮＫ１２８およびＯＳＩ−０２７からなる群から選択されるｍＴＯＲ阻害薬である。ｍＴＯＲ阻害薬 ＫＵ−００６３７９４、ＡＺＤ８０５５、ＩＮＫ１２８およびＯＳＩ−０２７の化学構造を下記に示す。

【0057】

【化4】

【0058】

[54] 本発明の方法および組成物に使用するのに特に好ましいものは、シロリムス、テムシロリムスおよびエベロリムスである。１態様において、本発明のエアロゾル配合物および方法に使用するための化合物は、シロリムス、テムシロリムスおよびエベロリムスからなる群から選択される。１態様において、化合物はシロリムスまたはエベロリムスである。

【0059】

吸入用組成物
[55] 本発明は、ラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体を含む、水溶液、乾燥粉末、または１種類以上の医薬的に許容できる噴射剤およびキャリヤーの混合物の形態の、吸入による投与に適合させた医薬組成物を提供する。１態様において、ラパマイシンは医薬的に許容できる化合物、材料またはマトリックスに封入される。１態様において、ラパマイシンはリポソーム配合物または非リポソーム配合物に封入される。

【0060】

[56] 本発明の組成物は、ヒト対象において吸入により肺に薬物送達するのに適した、ラパマイシンのエアロゾル化可能な配合物である。用語“エアロゾル”は、これに関して、分散した相が固体または液体粒子から構成され、分散媒体が気体である、コロイド系を意味するために用いられる。１態様において、気体は空気であり、配合物はネブライザーによる投与に適した溶液配合物、またはドライパウダーインヘラーデバイスによる投与に
適した乾燥粉末配合物である。一般に、呼吸可能な粒子または液滴は０．１０〜１０ミクロンの範囲の平均直径をもつであろう。粒子または液滴のサイズは、肺自体（すなわち、この場合は肺がターゲット組織である）または全身（この場合は、全身投与のための代替経路として肺が利用される）のいずれかへのターゲティッド送達を最大にするように選択される。サイズは、肺自体が療法ターゲットである場合は好ましくは約０．５〜５ミクロンの範囲であり、あるいは肺を介した全身送達については３ミクロン未満であろう。サイズは、当技術分野で既知の、たとえば米国薬局方、９０５および６０１章に記載されている方法に従って測定される。たとえば、それは空気力学的質量中央直径(Mass Median Aerodynamic Diameter)（ＭＭＡＤ）として測定される。１態様において、本明細書に記載する組成物を構成する粒子の平均直径(averageまたはmean diameter)はＭＭＡＤとして測定される。

【0061】

[57] １態様において、エアロゾルの分散相は液体粒子または液滴から構成される。これに関して、用語“液体粒子(liquid particle)”と“液滴(droplet)”は互換性をもって用いられる。この態様において、本発明の配合物は溶液配合物である。１態様において、エアロゾルの分散相は固体粒子から構成される。この態様において、本発明の配合物は乾燥粉末配合物である。このサイズの微細粒子は、当技術分野で既知の方法により、たとえば機械的摩砕（ミリング）、臨界未満または超臨界溶液からの沈殿、噴霧乾燥、凍結乾燥(freeze-dryingまたはlyophilization)により製造できる。

【0062】

[58] 一般に、吸入された粒子は２つのメカニズムのうちの１つにより沈着する：埋伏(impaction)、これは通常はより大きな粒子について優勢である；および沈降(sedimentation)、これは通常はより小さな粒子について優勢である。埋伏は、粒子が空気流に従わずに生体表面に衝突するほど吸入粒子の運動量(momentum)が十分に大きい場合に起きる。これに対し、沈降は、吸入された空気流と共に移動してきたきわめて小さな粒子が空気流内でのランダム拡散の結果として生体表面に衝突した際に、主に深部肺において起きる。本発明のエアロゾル配合物は、目的とする療法効果を達成するために、好ましくは埋伏（上気道に）または沈降（気胞に）のいずれかによるそれらの沈着を最大にするように適合される。

【0063】

[59] 送達デバイス、たとえばネブライザー、ｐＭＤＩまたはＤＰＩデバイスから患者へ送達される薬物の量は、送達量と呼ばれる。それは in vitro で模擬吸入法において送達デバイスから放出される薬物量を測定することにより推定できる。これは、当技術分野で既知の方法、たとえば米国および欧州薬局方、たとえばＵＳＰの６０１章および９０５章に述べられたものに従って測定した放出量（ＥＤ）と呼ばれる。したがって、“放出量”は送達量と同等であるとみなされる。

【0064】

[60] 送達デバイスから患者の肺へ送達される薬物の量は、呼吸可能用量(respirable dose)と呼ばれる。それは in vitro でカスケードインパクター(cascade impactor)、た
とえば次世代インパクター(Next Generation Impactor)（ＮＧＩ）を用い、当技術分野で既知の方法、たとえば米国および欧州薬局方、たとえばＵＳＰの６０１章および９０５章に述べられたものに従って細粒量（ＦＰＤ）を測定することにより推定できる。

【0065】

[61] 送達デバイスから微細な吸入可能な(inharable)粒子状で放出される薬物の量は
、配合物の細粒分（ＦＰＦ）と呼ばれる。ＦＰＦは、送達量中の潜在的に呼吸可能な(respirable)薬物の画分である。よって、ＦＰＦはＥＤ（放出量または送達量）に対するＦＰＤの割合である。配合物のこれらの特性は当技術分野で既知の方法、たとえば米国および欧州薬局方、たとえばＵＳＰの６０１章およびＰｈａｒｍ Ｅｕｒｏｐａのモノグラフ２．９．１８に述べられたものに従って測定される。

【0066】

[62] １態様において、本発明のエアロゾル化可能なラパマイシン配合物は、長期貯蔵
後、たとえば１〜１２か間後または１〜３６か間後ですら２０％を超えるＦＰＦをもち、対応するＦＰＤは１０マイクログラムから２ミリグラムまでの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。１態様において、患者へ送達される量、送達量（ＤＤ）または放出量（ＥＤ）は、２５マイクログラムから２．５ミリグラムまでの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である。

【0067】

[63] ある態様において、ラパマイシンはは医薬的に許容できる化合物、材料またはマトリックスに封入される。１態様において、ラパマイシンはリポソーム配合物または非リポソーム配合物に封入される。

【0068】

水溶液組成物
[64] １態様において、本発明のエアロゾル化可能な組成物は、ジェット、振動メッシュおよび静止メッシュを含むネブライザー、またはオリフィスネブライザーによる肺送達に適合させた、ラパマイシンの水溶液配合物である。よって、溶液配合物は前記のように約０．１ミクロンから１０ミクロンまでの呼吸可能な範囲の直径のエアロゾル液滴形成を可能にするように適合される。１態様において、組成物は、水、エタノールおよび低分子量ポリオールに溶解され、所望により界面活性剤を含む、ラパマイシン（シロリムス）またはそのプロドラッグもしくは誘導体からなる霧化可能な(nebulizable)水溶液配合物で
ある。１態様において、水溶液配合物は２０ｍＰａ−ｓ未満、１０ｍＰａ−ｓ未満、または５ｍＰａ−ｓ未満の粘度、および少なくとも４５ダイン／ｃｍ、好ましくは６０ダイン／ｃｍを超える表面張力をもつ。好ましくは、配合物は５ｍＰａ−ｓ未満の粘度および４５ダイン／ｃｍを超える表面張力をもつ。１態様において、組成物は２０ｍＰａ−ｓ未満の粘度、１０ｍＰａ−ｓ未満の粘度、または５ｍＰａ−ｓ未満の粘度、および少なくとも４５ダイン／ｃｍ、好ましくは６０ダイン／ｃｍを超える表面張力をもつ。

【0069】

[65] １態様において、水溶液配合物は、ラパマイシン、水、エタノール、ならびにグリセロールおよびプロピレングリコールから選択される低分子量ポリオールからなる。１態様において、水溶液配合物はラパマイシン、水、ならびにグリセロールおよびプロピレングリコールから選択される低分子量ポリオールからなり、エタノールは任意選択的である。配合物は所望により非イオン界面活性剤、好ましくはＰＥＧ １００、またはポリソルベート、好ましくはポリソルベート８０（“ＰＳ８０”）、リン脂質、好ましくは天然リン脂質、たとえばレシチン、好ましくは水素化ダイズレシチン、および抗酸化剤または安定剤、好ましくはＥＤＴＡ二ナトリウムを含有することもできる。１態様において、非イオン界面活性剤は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ） ＰＥＧ １００、ＰＥＧ １０００、およびポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ（商標） ８０、ソルビタンモノオエート、またはポリオキシエチレンソルビタンオレエートとも呼ばれる）、ならびにその混合物からなる群から選択される。

【0070】

[66] 水溶液中のラパマイシンの量は、溶液の総重量を基準として約０．００１％から０．０１重量％（％ ｗｔまたは％ ｗ／ｗ）までである。１態様において、ラパマイシンは溶液中に約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約０．１ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。１態様において、ラパマイシンの量は、溶液の総重量を基準として０．００１％から０．０１％ ｗ／ｗまでである。

【0071】

[67] １態様において、溶液中のラパマイシンの濃度は約０．０１ｍｇ／ｍｌから．１ｍｇ／ｍｌまでであり、低分子量ポリオールの量は５％ ｗ／ｗから３５％ ｗ／ｗまでであり、エタノールの量は５〜２０％ ｗ／ｗの量で存在し、非イオン界面活性剤の量は１〜２００百万分率（ｐｐｍ）ｗ／ｗである。好ましくは、非イオン界面活性剤の量は１００ｐｐｍ（ｗ／ｗ）未満である。任意選択的な抗酸化剤／安定剤の量はゼロから０．０１％ ｗ／ｗ未満までである。

【0072】

[68] １態様において、本発明の水溶液配合物はポリエチレングリコール、レシチン、ＥＤＴＡ、ブロックコポリマー、およびシクロデキストリンからなる群から選択される１以上の添加剤または賦形剤を含有しない。

【0073】

[69] 水溶液配合物は、ラパマイシンが完全に溶解した単相水溶液である。配合物中の主な補助溶媒は、エタノール、ならびにグリセロールおよびプロピレングリコールから選択される低分子量ポリオールである。ラパマイシンは懸濁液またはエマルジョン状ではなく、その溶液はコロイド溶液または分散液と記述することもできない。本発明の水溶液配合物はミセルまたはリポソームのようなコロイド構造をもたない。リン脂質が存在するとしても、それはリポソームを形成するには、またはラパマイシンを沈殿させるには少なすぎる。また、リン脂質と非イオン界面活性剤を合わせた量は、表面張力を変化させるには少なすぎる。その結果、リン脂質も非イオン界面活性剤も伝統的な意味での界面活性剤として作用するのに十分な量では存在しない。これに関して、界面活性剤という用語は、溶液の表面張力または溶液中の液体といずれかの固体薬物粒子の間の界面張力を低下させる作用をする剤を表わし、したがって界面活性剤はディタージェント、湿潤剤、乳化剤、または分散剤として作用する。これに対し、本発明の溶液配合物中の非イオン界面活性剤は、最終製品がパッケージされたポリエチレン容器への薬物の吸着をブロックする作用をし、それによって容器への吸着による薬物力価の損失を防止する。

【0074】

[70] したがって、１態様において、水溶液配合物はラパマイシンが完全に溶解した単相水溶液であり、この溶液はミセルまたはリポソームを含まず、この溶液はエマルジョン、分散液または懸濁液ではない。

【0075】

[71] １態様において、溶液配合物は無菌である。１態様において、溶液配合物は０．２ミクロンフィルターにより無菌濾過される。１態様において、溶液配合物は熱により、たとえば高圧蒸気滅菌法により、または放射線照射により滅菌されることはない。

【0076】

[72] １態様において、本発明は無菌水溶液配合物を充填した１以上の容器またはバイアル（これらの用語は互換性をもって用いられる）を収容したパッケージを提供する。好ましくは、容器は単位量容器である。１態様において、容器はポリマーバイアル、好ましくはポリエチレンバイアルである。１態様において、本発明の無菌水溶液配合物を充填した容器またはバイアルは、吹込み成形によりバイアルを作製し、その直後にバイアルに無菌濾過した本発明配合物を無菌条件下で充填し、続いてバイアルを充填直後にヒートシールする工程を含むプロセスにより製造される。

【0077】

[73] １態様において、本発明の水性エアロゾル配合物は下記のものを含むかまたはそれらからなる：
ラパマイシン（またはそのプロドラッグもしくは誘導体） 約０．００１％から０．０１％ ｗ／ｗまで；
プロピレングリコール 約５％から３５％ ｗ／ｗまで；
エタノール 約５％から２０％ ｗ／ｗまで；
ポリソルベート８０ 約１ｐｐｍから２００ｐｐｍ ｗ／ｗまで；
レシチン 約１ｐｐｍから１００ｐｐｍ ｗ／ｗまで；および
水；
ここで、水の量は０．０１〜０．１ミリグラム／ミリリットルのラパマイシン濃度を達成するのに十分なものである。所望により、安定性増強剤、たとえばＥＤＴＡ二ナトリウムを、０．０１％ ｗｔ／ｗｔ未満のレベルで添加することができる。

【0078】

[74] 水性および他の非加圧液体系について、配合物をエアロゾル化するために多様な
ネブライザー（小容積ネブライザーを含む）を入手できる。コンプレッサー駆動式ネブライザーはジェット手法を採用し、圧縮空気を用いて液体エアロゾルを発生させる。そのようなデバイスは、たとえば下記から市販されている：Ｈｅａｌｔｈｄｙｎｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．；Ｉｎｖａｃａｒｅ，Ｉｎｃ．；Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．；Ｐａｒｉ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．；Ｍａｄａ Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．；Ｐｕｒｉｔａｎ−Ｂｅｎｎｅｔ；Ｓｃｈｕｃｏ，Ｉｎｃ．，ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．；およびＨｏｓｐｉｔａｋ，Ｉｎｃ．。超音波ネブライザーは、呼吸可能な液滴を発生させるのに圧電結晶の振動の形の機械的エネルギーに依存し、たとえば下記から市販されている：Ｏｍｒｏｎ
Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｉｎｃ．およびＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．。

【0079】

[75] １態様において、本発明の水性エアロゾル配合物はＡｅｒｏｇｅｎ、Ｐａｒｉ、ＰｈｉｌｉｐｓまたはＯｍｒｏｎから入手できる振動式ネブライザーにより送達される。１態様において、本発明の水性エアロゾル配合物は、振動メッシュネブライザー、たとえばＡｅｒｏｎｅｂ（登録商標） Ｇｏ（Ａｅｒｏｇｅｎ，Ｐｈｉｌｉｐｓ Ｒｅｓｐｉｒｏｎｉｃｓにより販売）、Ｉ−Ｎｅｂ（登録商標）（Ｐｈｉｌｉｐｓ）、もしくはＥ−Ｆｌｏｗ（登録商標）（Ｐａｒｉ）、または類似のネブライザーで使用するのに適した容器にパッケージされる。１態様において、本発明の水性エアロゾル配合物は、オリフィスネブライザー、たとえばＲｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）（Ｂｏｅｒｉｎｇｈｅｒ−Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍから）により送達される。

【0080】

[76] よって、１態様において本発明は、ヒト対象への吸入による投与に適した霧化可能な水溶液の形態の医薬組成物を提供し、その水溶液は、ラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体、好ましくはシロリムス、エベロリムスおよびテムシロリムスから選択されるもの、水、エタノール、ならびに低分子量ポリオールからなる。１態様において、低分子量ポリオールはグリセロールもしくはプロピレングリコール、またはその混合物である。１態様において、組成物はさらに、ＰＥＧ １００、ＰＥＧ １０００およびポリソルベート８０ならびにその混合物からなる群から選択される非イオン界面活性剤を含む。１態様において、配合物中の非イオン界面活性剤の量は、配合物の重量を基準として１ｐｐｍから２００ｐｐｍ ｗ／ｗまで、好ましくは１００ｐｐｍ ｗ／ｗ未満である。１態様において、組成物はさらにリン脂質、抗酸化剤または化学的安定剤を含む。１態様において、配合物中の抗酸化剤または化学的安定剤の量は、配合物の重量を基準として０．０１％ ｗ／ｗ未満である。１態様において、抗酸化剤または化学的安定剤はＥＤＴＡである。１態様において、配合物中のラパマイシンの量は、配合物の重量を基準として０．００１％から０．０１％ ｗ／ｗまでである。

【0081】

[77] １態様において、組成物は、ポリエチレングリコール、レシチン、ＥＤＴＡ、ブロックコポリマーおよびシクロデキストリンからなる群から選択される１種類以上の添加剤または賦形剤を含有しない。

【0082】

[78] １態様において、組成物はミセルおよびリポソームから選択されるコロイド構造をもたない。
[79] １態様において、組成物は、ジェットネブライザー、振動メッシュネブライザー、静止メッシュネブライザーおよびオリフィスネブライザーのうちのいずれか１つによる投与に適切である。

【0083】

[80] １態様において、組成物は２０ｍＰａ−ｓ未満、好ましくは１０ｍＰａ−ｓ未満、最も好ましくは５ｍＰａ−ｓ未満の粘度、および少なくとも４５ダイン／ｃｍ、好ましくは少なくとも５０ダイン／ｃｍの表面張力をもつ。

【0084】

[81] 本発明はまた、霧化可能な水溶液の形態の本発明の医薬組成物の調製方法であって、０．２ミクロン以下のポアサイズをもつフィルターにより溶液を無菌濾過し、無菌濾液を採集容器に無菌条件下で採集することを含む方法を提供する。１態様において、調製方法はさらに、無菌濾液を容器クロージャー内へ無菌条件下で移すことを含む。１態様において、容器クロージャーは単位量ポリエチレンバイアルである。１態様において、バイアルは無菌濾液をバイアルへ移す直前に吹込み成形により製造される。１態様において、本方法はさらに、無菌濾液をバイアルに移した直後にバイアルをヒートシールする工程を含む。

【0085】

乾燥粉末組成物
[82] １態様において、本発明のエアロゾル化可能な組成物は、微細なラパマイシン粒子またはそのプロドラッグもしくは誘導体を療法薬（“薬物”とも呼ぶ）として含む乾燥粉末であり、それらの粒子は０．１ミクロンから１０ミクロンまでの直径、および約０．５〜４．５ミクロン、約１〜４ミクロン、約１〜３．５ミクロン、約１．５〜３．５ミクロン、または約２〜３ミクロンの平均直径をもつ。この乾燥粉末配合物はドライパウダーインヘラー(dry powder inhaler)（ＤＰＩ）デバイスまたは加圧メータードーズインヘラー(pressurized metered dose inhaler)（ｐＭＤＩ）のいずれかに使用するのに適切である。乾燥粉末中のラパマイシンの量は、粉末の総重量を基準として約０．５％から２０％（ｗ／ｗ）までである。１態様において、ラパマイシンの量は約１％または２％（ｗ／ｗ）である。

【0086】

[83] １態様において、微細なラパマイシンは後記のように湿式研磨またはジェットミリングにより約０．５〜４．５ミクロン、約１〜４ミクロン、または約２〜３ミクロンの範囲の直径を生じるように製造され、これらのラパマイシン粒子をラクトースキャリヤー粒子に薬物／キャリヤーの割合０．５〜２％ ｗ／ｗの範囲、好ましい１％の割合でブレンドする。

【0087】

[84] １態様において、脆いマトリックス中へ薬物粒子を軽く押し込み、それを送達デバイス（ドライパウダーインヘラー）に収容する。作動させると、送達デバイスは一部の薬物粒子をマトリックスから擦り取り(abrade)、それらを吸気に分散させて薬物粒子を気道へ送達する。あるいは、薬物粒子は送達デバイス（ドライパウダーインヘラー）のリザーバー内に収容されたさらさらした粉末であってもよい。リザーバーはデバイス内の一体チャンバーであってもよく、あるいは作動前にデバイスに挿入されるカプセル、ブリスターまたは類似の予備成形リザーバーであってもよい。作動させると、デバイスは一部の薬物粒子をリザーバーから分散させ、それらを吸気に分散させて薬物粒子を気道へ送達する。

【0088】

[85] １態様において、乾燥粉末組成物は、薬物粒子、ならびにアラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、ロイシン、リジン、イソロイシン、ジパルミチルホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、または以上のいずれかの混合物からなる群から選択されるキャリヤーからなる。１態様において、キャリヤーはラクトース、特に１水和物の形態のものである。１態様において、乾燥粉末組成物は２種類以上のキャリヤーのブレンドを含む。

【0089】

[86] １態様において、乾燥粉末組成物は、薬物、および少なくとも２種類の異なるキャリヤーのブレンドを含む。１態様において、キャリヤーに対する薬物の割合は約０．５％から２０％（ｗ／ｗ）までの範囲である。１態様において、薬物粒子は０．１ミクロン
から１０ミクロンまでの範囲の直径をもち、約１〜４、１〜３．５、または１．５〜３．５、または２〜３ミクロンの平均直径をもつ。キャリヤー粒子は２ミクロンから２００ミクロンまでの範囲の直径をもつことができる。

【0090】

[87] １態様において、組成物はブリスターパックまたはＤＰＩデバイスのリザーバーに収容される。１態様において、乾燥粉末組成物は、ＤＰＩデバイスに使用するのに適したゼラチン、デンプン、セルロースもしくはポリマー製のカプセル、またはホイル／ホイルもしくはホイル／プラスチックブリスター内に予め装填される。それぞれのカプセルまたはブリスターは１ミリグラムから１００ミリグラムまでの乾燥粉末組成物を収容することができる。カプセルまたはブリスターをドライパウダーインヘラー（ＤＰＩ）デバイス、たとえばＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ａｒｃｕｓ（登録商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）またはＭｉｃｒｏｄｏｓｅ（登録商標）に挿入することができる。ＤＰＩデバイスを作動させると、カプセルまたはブリスターが破壊されて粉末が吸気に分散し、薬物が気道へ送達される。

【0091】

[88] １態様において、乾燥粉末組成物は、Ａｃｃｕｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｏｎｉｘ（商標）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）、ＮｅｘｔＨａｌｅｒ（登録商標）、ＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｒｅｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、およびＡＲＣＵＳ（登録商標）インヘラー（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）から選択されるドライパウダーインヘラー（ＤＰＩ）デバイスに収容される。１態様において、本発明は本明細書に記載する乾燥粉末組成物を収容したＤＰＩデバイスを提供する。１態様において、デバイスは、ＸＣａｐｓ、ＦｌｏｗＣａｐｓ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ、ＴｗｉｎＣａｐｓ、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８からなる群から選択される。１態様において、組成物を収容したデバイスはＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）、およびＡＲＣＵＳ（登録商標） インヘラーからなる群から選択される。

【0092】

[89] キャリヤー粒子は、深部肺にキャリヤー材料が沈着するのを避けるために、好ましくは比較的大きいサイズのものである（５ミクロンより大きい）。１態様において、キャリヤー粒子は１ミクロンから２００ミクロンまで、３０ミクロンから１００ミクロンまでの範囲、または１０ミクロン未満の直径をもつ。１態様において、キャリヤー粒子は２種類のキャリヤー、一方は約３０〜１００ミクロンの粒子、他方は１０ミクロン未満の粒子のブレンドである。２種類の異なるキャリヤーの比は３：９７から９７：３までの範囲である。１態様において、乾燥粉末組成物はキャリヤーに対して０．５〜２０％（ｗ／ｗ）の割合の薬物からなり、薬物粒子は０．１ミクロンから１０ミクロンまでの直径および３．５ミクロン未満の平均直径をもつ。１態様において、キャリヤー材料は結晶性キャリヤー材料である。好ましくは、結晶性キャリヤー材料は少なくとも９０％、好ましくは９５％以上が結晶性のものであり、その際、相対湿度８０％以下、室温の条件下でキャリヤーは水を全く吸収しないかまたは実質的に吸収しない。そのような結晶性キャリヤーの例は、ラクトース１水和物およびグルコース１水和物である。キャリヤーの量は、粉末の乾燥重量で配合物の１％から９９．０％までまたはそれ以上、好ましくは５〜９９％、１０
〜９９％、２０〜９９％、３０〜９９％、４０〜９９％、または５０〜９９％である。

【0093】

[90] １態様において、乾燥粉末組成物は送達デバイス（乾燥粉末インヘラー）のリザーバー内に収容される。リザーバーはデバイス内の一体チャンバーであってもよく、あるいは作動前にデバイスに挿入されるカプセル、ブリスターまたは類似の予備成形リザーバーであってもよい。作動させると、デバイスは一部の薬物粒子をリザーバーから分散させ、それらを吸気に分散させて薬物粒子を気道へ送達する。

【0094】

[91] １態様において、薬物は微細な粉末として医薬的に許容できるキャリヤーと共に存在する。これに関して、用語“微細(fine)”は、前記で考察したように吸入可能な範囲の粒子サイズを表わす。好ましくは、薬物は粒子が１０ミクロン以下の範囲の平均直径をもつように微細化される。１態様において、本明細書に記載する乾燥粉末組成物中のラパマイシン（またはそのプロドラッグもしくは誘導体）粒子の平均直径（ＭＭＡＤまたはＤｖ５０）は、０．５ミクロンから１０ミクロンまで、０．５ミクロンから６ミクロンまで、１ミクロンから５ミクロンまで、１ミクロンから４ミクロンまで、１ミクロンから３ミクロンまで、または２ミクロンから３ミクロンまでである。ＭＭＡＤまたはＤｖ５０値は、その集団の体積の５０％がそのサイズ未満に含まれる粒子サイズである。

【0095】

[92] １態様において、ラパマイシンの乾燥粉末配合物はさらに、後記の添加剤から選択される１種類以上の添加剤を含む。１態様において、その１種類以上の添加剤はステアリン酸マグネシウムを含むかまたはそれからなる。この態様の１観点において、ステアリン酸マグネシウムは粉末の乾燥重量で０．００１〜１０％の量、好ましくは０．０１％から５％まで、または０．０１％から２％までの量で存在する。他の態様において、添加剤は、粉末の乾燥重量で０．１％〜１％、好ましくは０．２％〜０．６％の量のリン脂質、たとえばレシチン（それはホスファチジルコリンの混合物である）を含むかまたはそれからなる。この態様の１観点において、添加剤は、キャリヤーをラパマイシン粒子とブレンドする工程の前またはそれと同時にキャリヤー材料上にコートされる。これは、たとえばキャリヤーを添加剤でコートする高エネルギー混合工程により、あるいは長時間の低エネルギー混合、または低エネルギー混合と高エネルギー混合の組合わせを用いて達成でき、目的レベルのコートされたキャリヤー材料が得られる。乾燥粉末を混合してブレンドを調製するための低エネルギーデバイスは当技術分野で既知であり、たとえばＶ−ブレンダー、ダブルコーンブレンダー、スラントコーンブレンダー、キューブブレンダー、ビンブレンダー、水平または垂直ドラムブレンダー、スタティック連続ブレンダー(static continuous blender)、ダイナミック連続ブレンダー(dynamic continuous blender)が含まれる
。他のより高エネルギーのデバイスには、当業者に既知の高剪断ミキサーが含まれる。

【0096】

[93] ある態様において、乾燥粉末はカプセルに収容される。１態様において、カプセルはゼラチンカプセル、プラスチックカプセル、またはセルロースカプセルであり、あるいはホイル／ホイルまたはホイル／プラスチックブリスターの形態である。それぞれの場合、カプセルまたはブリスターはＤＰＩデバイスに使用するのに適切であり、好ましくは各カプセル内の粉末の総重量を１ｍｇから１００ｍｇまでにする量のキャリヤーと合わせた投与単位のものである。あるいは、乾燥粉末をマルチドーズＤＰＩデバイスのリザーバーに収容することができる。

【0097】

[94] ラパマイシンの粒子サイズは、常法により、たとえばエアジェットミル、ボールミルもしくはバイブレーターミルでの磨砕により、湿式研磨、ミクロ沈殿、噴霧乾燥、凍結乾燥、または臨界未満もしくは超臨界溶液からの再結晶により、目的とするマイクロ粒子レベルにまで低減できる。これに関してジェットミリングまたは磨砕は、機械的手段による乾燥薬物粒子の微細化を表わす。微細化法は、薬物の溶液、スラリーまたは懸濁液の調製を必要としない。代わりに、薬物粒子のサイズを機械的に低減する。微細化に使われ
るエネルギーが比較的高いため、特定の態様においてはラパマイシンと共に微細化する混合物にキャリヤー材料を含有させることが望ましい。これに関して、キャリヤー材料は、さもなければラパマイシンの構造に有害な影響を及ぼす可能性がある微細化エネルギーをある程度吸収する。１態様において、１ミクロンから４ミクロンまで、または２ミクロンから３ミクロンまでのサイズ範囲のラパマイシン粒子がジェットミリング法により製造される。

【0098】

[95] US2013/0203717に記載される湿式研磨は、懸濁液またはスラリー中の薬物粒子のサイズを低減するために高剪断の使用を伴なう。湿式研磨には、薬物粒子のみ、またはミリング媒体と呼ばれる追加粒子を含めることができる。１態様において、湿式研磨法を用いてラパマイシンの粒子サイズを目的レベルにまで低減でき、それには湿式ミリング、具体的には高圧でのキャビテーションによるものが含まれ、その際、ラパマイシンをそれが不溶性である水または他の溶媒に懸濁し、次いでその後、懸濁液を噴霧乾燥してラパマイシンを乾燥粉末として得る。１態様において、ラパマイシンの懸濁液を調製し、その懸濁液にマイクロフルイダイゼーションを施し、得られた粒子を噴霧乾燥して乾燥粉末を形成することを含む湿式研磨法により、１ミクロンから４ミクロンまで、または２ミクロンから３ミクロンまでのサイズ範囲のラパマイシン粒子が製造される。ラパマイシンをプロピルアルコールまたはブチルアルコール、水、および酢酸エチルからなる群から選択される逆溶媒(anti-solvent)に懸濁することができる。１態様において、懸濁液は水性懸濁液である。

【0099】

[96] 噴霧乾燥は一般に、薬物の溶液、スラリーまたは懸濁液を調製し、その溶液、スラリーまたは懸濁液を霧化して粒子を形成し、次いで溶液、スラリーまたは懸濁液の媒体を蒸発させて粒子を形成することを伴なう。溶液、スラリーまたは懸濁液は、臨界未満もしくは超臨界条件下で調製できる。蒸発工程は、その中へ霧化が行なわれる雰囲気の温度を高めることにより、もしくは圧力を低下させることにより、または両方の組合わせにより達成できる。１態様において、ラパマイシンを含む粉末配合物は、ラパマイシンの水性分散液を噴霧乾燥させて、前記のように肺送達に適したサイズをもつラパマイシンの凝集粒子からなる乾燥粉末を形成することにより調製される。凝集粒子サイズは、深部肺または上部呼吸器部位（たとえば、上気管支領域または鼻粘膜）のいずれかをターゲティングするように調整（増大または低減）できる。これは、たとえば噴霧乾燥分散液中のラパマイシンの濃度を高めることにより、または噴霧乾燥器により発生する液滴のサイズを増大させることにより達成できる。

【0100】

[97] あるいは、乾燥粉末は水性の薬物溶液、分散液もしくはエマルジョンの凍結乾燥(freeze-drying, lyophilization)により、または噴霧乾燥と凍結乾燥の組合わせにより
調製できる。

【0101】

[98] １態様において、乾燥粉末配合物はラパマイシンおよび１種類以上の任意選択的添加剤の水性分散液を凍結乾燥することにより調製できる。１態様において、粉末はラパマイシンおよび添加剤（存在するならば）の凝集物を含有し、その際、凝集物は前記のように呼吸可能なサイズ範囲内にある。

【0102】

[99] １態様において、ラパマイシンおよび１種類以上の任意選択的添加剤の水性分散液はさらに、溶解した希釈剤、たとえばラクトースまたはマンニトールを含み、したがって分散液を凍結乾燥すると呼吸可能な希釈剤粒子が形成され、それらはそれぞれ少なくとも１種類の埋め込まれた薬物粒子および存在するならば添加剤粒子を含有する。

【0103】

[100] １態様において、乾燥粉末はラパマイシンを装填したリポソームを含む。薬物
装填リポソームは当技術分野で既知の方法により、たとえばタクロリムスについてM. Cho
ugale, et al. Int. J. Nanomedicine 2:625-688 (2007)に記載された手法を用いて調製
できる。簡単に述べると、ラパマイシン、水素化ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）およびコレステロールをメタノールとクロロホルムの混合物に溶解し、次いでたとえば回転蒸発器(Rotaevaporator)で乾燥薄膜形成を施す。これらのリポソームを水和し、リポソーム分散液をサイズ低減のために高圧ホモジナイザーに通す。得られたペレットをベシクルサイズおよび薬物捕獲率について分析し、目的のラパマイシン量に等しいペレットを適切な媒体に分散させ、噴霧乾燥して、吸入のための目的サイズの粒子を得る。噴霧乾燥粉末を投与のためのカプセル、キャニスターまたはブリスターパックに充填することができる。

【0104】

[101] １態様において、乾燥粉末粒子は超臨界または臨界未満溶液からの沈殿により
調製できる。
[102] 乾燥粉末組成物は、適切なドライパウダーインヘラーデバイスに、またはその
ようなデバイスに使用するためのカプセルもしくはブリスターに収容することができる。そのようなデバイスの例は前記に示され、下記のものを含む：Ａｃｃｕｈａｌｅｒ（登録商標）、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１
Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、Ｃｏｎｉｘ（商標）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）、ＮｅｘｔＨａｌｅｒ（登録商標）、ＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｒｅｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、もしくはＤｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、または呼吸作動式(breath-actuated)ＡＲＣＵＳ（登録商標）インヘラー（Ｃｉｖｉｔ
ａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）。１態様において、本発明は本明細書に記載する乾燥粉末組成物を収容したＤＰＩデバイスを提供する。１態様において、デバイスはＸＣａｐｓ、ＦｌｏｗＣａｐｓ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ、ＴｗｉｎＣａｐｓ、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８からなる群から選択される。

【0105】

噴射剤ベースの配合物
[103] 本発明の他の態様において、ラパマイシンは噴射剤ベースの配合物中に配合さ
れ、それを本明細書中で“ｐＭＤＩ配合物”と総称することもできる。ｐＭＤＩ配合物は、たとえば加圧メータードーズインヘラー（ｐＭＤＩ）などのデバイスによる送達に適切である。１態様において、組成物はラパマイシン、噴射剤、および植物油または医薬的に許容できる植物油誘導体を含む。噴射剤は、好ましくは１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７）またはその混合物から選択される。１態様において、植物油はオリーブ油、サフラワー油およびダイズ油から選択される。ラパマイシンは噴射剤中に溶解または懸濁していてもよい。これに関して、“懸濁している”とは、ラパマイシンが噴射剤中に分散した粒子状で存在することを表わす。１態様において、ラパマイシンは微細化され、噴射剤中に懸濁した状態で存在する。１態様において、配合物はさらに湿潤剤または補助溶媒、たとえばエタノールを含む。１態様において、配合物はさらにポリヒドロキシアルコール、たとえばプロピレングリコールを含む。

【0106】

[104] 適切な噴射剤は当技術分野で既知であり、たとえばハロゲン置換炭化水素、た
とえばフッ素置換されたメタン、エタン、プロパン、ブタン、シクロプロパンまたはシクロブタン、特に１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７）、またはその混合物を含む。

【0107】

[105] １態様において、配合物は微細なラパマイシン、エタノール、適切な噴射剤、
たとえばＨＦＡ １３４ａ、ＨＦＡ ２２７、または適切な噴射剤の混合物、および所望により１種類以上の界面活性剤を含む。１態様において、配合物はさらに滑沢剤を含む。

【0108】

[106] １態様において、配合物はラパマイシン、噴射剤および植物油を含む。１観点
において、配合物は添加剤または界面活性剤を含まない。たとえば、配合物はエタノール、ポリヒドロキシアルコール（たとえば、プロピレングリコール）または界面活性剤（たとえば、トリオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタンまたはオレイン酸）を含まない。

【0109】

[107] １態様において、噴射剤ベースの配合物は、圧縮空気、二酸化炭素、窒素、あ
るいはｎ−プロパン、ｎ−ブタン、イソブタンもしくはその混合物、または１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ２２７）もしくはその混合物からなる群から選択される液化噴射剤を含み、極性補助溶媒、たとえばアルコール類を含むかまたは含まない。組成物は溶液または懸濁液であってもよい。懸濁液について、薬物粒子は０．１ミクロンから１０ミクロンまでの直径をもち、平均直径は３．５ミクロン未満である。

【0110】

[108] 噴射剤ベースの配合物は、当技術分野で既知の方法により、たとえば粗いラパ
マイシンおよび任意選択的な添加剤を、液体噴射剤中において周囲圧力または高圧条件下で湿式ミリングすることにより調製される。ある態様において、添加剤は界面活性剤であり、それは凝集（ケーキングまたは結晶化）を阻止し、均一な投薬を容易にし、かつ（あるいは）好ましい細粒分（ＦＰＦ）を提供するのに役立つ。１観点において、界面活性剤はトリオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ソルビタンまたはオレイン酸から選択される。あるいは、薬物粒子を含有する乾燥粉末は、前記のように薬物粒子の水性分散液を噴霧乾燥または凍結乾燥し、得られた粉末を一般的な加圧メータードーズインヘラー（ｐＭＤＩ）に用いるのに適した噴射剤に分散させることにより調製される。１態様において、吸入デバイスはＲｅｓｐｉｍａｔ（商標）である。

【0111】

[109] １態様において、本発明の噴射剤ベースのエアロゾルラパマイシン配合物は、
ラパマイシンの粒子サイズの生長または結晶形態の変化に対して長期間にわたって安定である。

【0112】

無菌単位剤形の製造方法
[110] １態様において、本発明の組成物は無菌組成物である。１態様において、無菌
組成物は無菌単位剤形である。１態様において、無菌単位剤形はネブライザーデバイスに使用するのに適したカプセルである。

【0113】

[111] １態様において、最終組成物をそれの容器クロージャー内で、熱、たとえば高
圧蒸気滅菌法により、または放射線照射により滅菌する。１態様において、組成物の成分部分をまず液体成分のための無菌濾過および固体または液体のための放射線照射または高圧蒸気滅菌法を含めた適切な方法により滅菌する；この方法はさらに、機密容器内にパッケージングすることにより無菌成分の無菌性を保持すること、適切な割合の成分を混合容器内で混和し、得られた製品を容器クロージャー内に充填することを含み、これらはすべて無菌スイートで実施される。この方法は経費がかかり、かつ難しい無菌的な取扱い法が必要であるという欠点をもつ。したがって、それは主に、滅菌のためにサブミクロンフィルターを通すことができない粒子懸濁液またはコロイド分散液、リポソーム配合物、またはエマルジョンを処理するために用いられる。最後に、１態様において、最終組成物をサブミクロンフィルター、好ましくは０．２ミクロンフィルターにより無菌濾過する。１態
様において、本発明の組成物は濾過滅菌プロセスにより滅菌された単相水溶液である。これに対し、エマルジョンおよびリポソーム配合物は一般に、濾過滅菌プロセスの高剪断条件下で必ずしも十分に安定ではないので、この方法には好ましくない。

【0114】

[112] １態様において、本発明の組成物は、容器−クロージャー、たとえばポリマー
製、好ましくはポリエチレン製のバイアル、またはガラスバイアルに充填された単相水溶液である。バイアルがポリマーバイアルである場合は、薬物および／または配合賦形剤ならびに容器に不安定性が生じる可能性が高いので、また望ましくない不純物の生成のため、高圧蒸気滅菌および放射線照射は適切ではない。１態様において、本発明の組成物は、熱（高圧蒸気滅菌法）または放射線照射を含まず、代わりに濾過滅菌プロセスを含む方法により滅菌される。好ましくは、この態様によれば、０．２ミクロン以下のポアサイズをもつフィルターを通した濾過によりラパマイシンの単相水溶液を滅菌する。１態様において、無菌濾液を無菌スイート内にある採集容器に採集する。１態様において、無菌スイート内で無菌濾液を採集容器から容器クロージャー内へ移す。好ましくは、容器クロージャーはポリマーバイアル、好ましくは単位量バイアル、最も好ましくはポリエチレン製の単位量バイアルである。１態様において、ポリマーバイアルはそれに充填する直前に吹込み成形により形成され、次いで充填直後にヒートシールされる。この手法を“フォーム・フィル・シール(form-fill-seal)”または“ブロー・フィル(blow-fill)”と呼ぶこともで
きる。この手法は、ラパマイシンの単相水溶液である本発明組成物に関して特に有利である；この方法は熱または放射線照射（これらは両方とも薬物自体、配合物賦形剤または容器クロージャーのいずれかを破壊する可能性がある）を必要としないからである。

【0115】

肺への投与および投薬
[113] 本発明は、ラパマイシンを気道に、好ましくは肺に吸入により投与することに
よってＬＡＭを治療および予防するための組成物および方法を提供する。肺送達は、好ましくは口および咽喉を経由して肺内へエアロゾルを吸入することにより達成されるが、鼻を経由したエアロゾル吸入によっても達成できる。よって、１態様において、エアロゾルは鼻腔内送達される。他の態様において、エアロゾルは経口送達される。

【0116】

[114] 本発明の組成物および方法は、療法有効量のラパマイシンの肺へのターゲティ
ッド送達を有利に提供し、一方では同時に血中および全身利用されるラパマイシンの量をきわめて低いレベルまたは検出できないレベルにまで低下させる。１態様において、単回量の本明細書に記載する乾燥粉末組成物中のラパマイシンの量は、約５マイクログラムから５００マイクログラムまで、または約１００マイクログラムから３００マイクログラムまで、または約５０マイクログラムから２５０マイクログラムまでである。全身曝露を最小限に抑えながら低用量ラパマイシンを肺へ直接にターゲティッド送達することは、経口剤形と比較して改善された療法指数を提供する。

【0117】

[115] １態様において、本発明に従った吸入によるラパマイシンの投与は、ラパマイ
シンの療法指数を増大させる。これに関して、ヒト対象に適用するものとしての療法指数は、集団の５０％において療法効果を生じる用量（ＥＤ_５０）と毒性を生じる用量（ＴＤ_５０）を比較する比である。この比をＴＤ_５０／ＥＤ_５０として示す。１態様において、本発明に従った吸入によるラパマイシンの投与は、経口投与したラパマイシンに付随する１以上の毒性を低減し、それによりラパマイシンの療法指数を増大させる。

【0118】

[116] 本発明は、溶液および粉末の形態のエアロゾル化可能な配合物を含む。したが
って、ラパマイシンは本発明方法に従って水性エアロゾル、乾燥粉末エアロゾル、または噴射剤ベースのエアロゾルの形態で投与できる。

【0119】

[117] １態様において、ラパマイシンの投与量は、対象において０．０１ｎｇ／ｍｌ
から０．１５ｎｇ／ｍｌまで、０．０７５ｎｇ／ｍｌから０．３５０ｎｇ／ｍｌまで、０．１５０ｎｇ／ｍｌから０．７５０ｎｇ／ｍｌまで、０．７５０ｎｇ／ｍｌから１．５ｎｇ／ｍｌまで、または１．５ｎｇ／ｍｌから５ｎｇ／ｍｌまでの血中トラフレベル達成するのに十分なものである。１態様において、ラパマイシンの投与量は、対象において５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、または０．５ｎｇ／ｍｌ未満の血中トラフレベル達成するのに十分なものである。

【0120】

[118] １態様において、ラパマイシンの投与量は、肺組織において１ｎｇ／ｇから１
ｕｇ／ｇまでの範囲のラパマイシン濃度を生じるのに十分なものである。
[119] １態様において、ラパマイシンの投与量は、１０マイクログラムから１００マ
イクログラムまで、５０マイクログラムから２５０マイクログラムまで、１００マイクログラムから５００マイクログラムまで（０．１〜０．５ミリグラム）、５００マイクログラムから１０００マイクログラムまで（０．５〜１ミリグラム）または１０００マイクログラムから２０００マイクログラムまで（１〜２ミリグラム）である。１態様において、ラパマイシンの投与量は、１ミリグラム未満、０．７５ミリグラム未満、０．５ミリグラム未満、または０．２５ミリグラム未満である。好ましくは、ラパマイシンの投与量は０．５ミリグラム未満である。

【0121】

[120] １態様において、ラパマイシンを１日１回投与する。
[121] １態様において、ラパマイシンの総日用量は１０マイクログラムから１００マ
イクログラムまで、５０マイクログラムから２５０マイクログラムまで、１００マイクログラムから５００マイクログラムまで（０．１〜０．５ミリグラム）、５００マイクログラムから１０００マイクログラムまで（０．５〜１ミリグラム）または１０００マイクログラムから２０００マイクログラムまで（１〜２ミリグラム）の範囲である。１態様において、ラパマイシンの総日用量は１ミリグラム未満、１００マイクログラム未満、５０マイクログラム未満、１０マイクログラム未満、または１マイクログラム未満である。１態様において、ラパマイシンの総日用量は５００ナノグラム未満、２５０ナノグラム未満、１００ナノグラム未満、５０ナノグラム未満、または１０ナノグラム未満である。１態様において、対象に投与するラパマイシンの総日用量は１日当たり２ｍｇ未満または１ｍｇ未満である。

【0122】

[122] １態様において、本発明の組成物を１日１回、対象に投与する。１態様におい
て、本発明の組成物を１日２回または３回投与する。好ましくは、組成物を１日１回もしくは２回、または１日１回より少なく投与する。

【0123】

[123] １態様において、本発明方法は、ラパマイシンを肺経路で、スタチン、プロゲ
ステロン、タモキシフェン、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニスト、ドキシサイクリン、ｓｒｃ阻害薬、オートファジー阻害薬（たとえば、ヒドロキシクロロキン(hydroxy chloroquine））、ＶＥＧＦ−Ｃまたは−Ｄ阻害薬、およびＶＥＧＦ受容体阻害薬からなる群から選択される１種類以上の追加療法薬と組み合わせて投与することを含む。１態様において、１種類以上の追加療法薬はスタチン、プロゲステロン、タモキシフェン、およびゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アゴニストから選択される。１態様において、１種類以上の追加療法薬はエストロゲンアンタゴニスト、スタチン、ｓｒｃ阻害薬、およびＶＥＧＦ−Ｒ阻害薬から選択される。１態様において、１種類以上の追加療法薬はレトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、イマチニブ、およびその組合わせからなる群から選択される。１種類以上の追加療法薬は、ラパマイシンと同一または異なる経路により投与することができる。たとえば、その薬剤を吸入、鼻腔内、経口または静脈内に投与できる。

【0124】

[124] １態様において、本発明方法はラパマイシンを肺経路で１以上の追加療法と組
み合わせて投与することを含む。１態様において、１以上の追加療法は抗エストロゲン療法、ホルモン療法、抗癌化学療法、および放射線療法から選択される。１態様において、本発明方法はラパマイシンを肺経路で抗エストロゲン療法またはホルモン療法と組み合わせて投与することを含む。

【0125】

[125] ある態様において、本方法は本発明組成物を主療法として肺投与することを含
む。他の態様において、本発明組成物の投与は補助療法である。いずれの場合も、本発明方法は、疾患または障害の処置のために本発明組成物を１以上の追加療法と組み合わせて投与することを考慮する。用語“療法（単数）”および“療法（複数）”は、疾患もしくは障害またはその１以上の症状の予防、治療、管理または改善に使用できるいずれかの方法、プロトコルおよび／または薬剤を表わす。ある態様において、療法は化学療法、放射線療法、ホルモン療法、および抗エストロゲン療法から選択される。

【0126】

[126] 好ましくは、本発明によるラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導
体を含む医薬組成物を１以上の追加療法と組み合わせて投与することにより、ＬＡＭを伴なう対象において相乗的応答が得られる。これに関して、用語“相乗的”は、組合わせの有効性がいずれかの単一療法のみの効果の相加効果より有効であることを表わす。１態様において、本発明によるラパマイシン併用療法の相乗効果によって、組合わせのうちの少なくとも１つの療法を、その組合わせ以外でのそれの投与量および／または頻度と比較して、より低い投与量で使用すること、および／またはより低い頻度で投与することが可能になる。他の態様において、相乗効果はその組合わせのいずれかの療法の単独使用に付随する有害または目的外の副作用が回避または低減されることに現われる。

【0127】

ネブライザー送達
[127] １態様において、ラパマイシンをネブライゼーションに適した水溶液として配
合し、ネブライザーにより送達する。水性および他の非加圧液体系について、配合物をエアロゾル化するための多様なネブライザー（小容量ネブライザーを含む）を入手できる。コンプレッサー駆動式ネブライザーは液体エアロゾルを発生させるためにジェット技術を採用し、圧縮空気を使用する。そのようなデバイスは、たとえばＨｅａｌｔｈｄｙｎｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．；Ｉｎｖａｃａｒｅ，Ｉｎｃ．；Ｍｏｕｎｔａｉｎ
Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ，Ｉｎｃ．；Ｐａｒｉ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ，Ｉｎｃ．；Ｍａｄａ Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．；Ｐｕｒｉｔａｎ−Ｂｅｎｎｅｔ；Ｓｃｈｕｃｏ，Ｉｎｃ．，ＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．；およびＨｏｓｐｉｔａｋ，Ｉｎｃ．から市販されている。超音波ネブライザーは、呼吸可能な液滴を発生させるために圧電結晶の振動の形の機械的エネルギーに依存しており、たとえばＯｍｒｏｎ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｉｎｃ．およびＤｅＶｉｌｂｉｓｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ，Ｉｎｃ．から市販されている。ネブライザーは、たとえば一般的な空気式(pneumatic)ネブライザー、たとえばエアジェットネブライザー、または超音波ネブライ
ザーであってもよく、それらはたとえば１ｍｌから５０ｍｌまで、一般に１ｍｌから１０ｍｌまでの溶液配合物を収容できる。

【0128】

[128] １態様において、本発明の水溶液配合物を、振動または固定メッシュを含むネ
ブライザーで投与するために適合させる。たとえば、ＡＥＲｘ（登録商標）（Ａｒａｄｉｇｍ）、ＲＥＳＰＩＭＡＴ（登録商標）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｉ−Ｎｅｂ（登録商標）（Ｐｈｉｌｉｐｓ）、またはＭｉｃｒｏＡｉｒｅ（登録商標）（Ｏｍｒｏｎ）などのデバイス；それらにおいて、薬剤溶液はピストンもしくは空気圧で、または圧電結晶で、オリフィスまたはメッシュを通して押し出される。あるいは振動メッシュネブライザー、たとえばＥ−Ｆｌｏｗ（登録商標）（Ｐａｒｉ）またはＡｅｒｏｎｅｂ（登録商標） Ｇｏ（Ａｅｒｏｇｅｎ）により溶液を押し出すことができる。これらのデバイスによって、一般的なネブライザーよりはるかに小さなネブライズ体積、たとえ
ば１０〜１００ｕｌ、およびより高い送達効率が可能である。

【0129】

乾燥粉末送達
[129] １態様において、本発明の乾燥粉末組成物は非噴射剤ベースのドライパウダー
インヘラー（ＤＰＩ）デバイスにより送達される。１態様において、粉末は、ＤＰＩデバイスに使用するのに適したゼラチンもしくはプラスチックのカプセル内、またはブリスター内に収容される。１態様において、粉末は単位剤形でカプセル当たり粉末５ｍｇから１００ｍｇまでの投与単位で供給される。他の態様において、乾燥粉末はマルチドーズ乾燥粉末吸入デバイスのリザーバー内に収容される。１態様において、インヘラーデバイスは、計量された用量、たとえば１０〜１００μｌ、たとえば２５〜５０μｌの組成物を送達するように適合させたバルブを備えたエアロゾルバイアル、すなわちメータードーズインヘラーとして知られるデバイスを含む。

【0130】

[130] １態様において、ＤＰＩデバイスはブリスターベースのデバイス、たとえばＧ
ｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）またはＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）（両方ともＶｅｃｔｕｒａから）、リザーバーベースのデバイス、たとえばＣｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）またはＤｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、およびＡＲＣＵＳ（登録商標）インヘラー（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。１態様において、ＤＰＩデバイスはＰｕｌｍａｔｒｉｘ（商標）ならびにＨｏｖｉｏｎｅ ＴｗｉｎｃａｐｓおよびＸＣａｐｓ（商標）から選択される。１態様において、デバイスはＸＣａｐｓ、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、およびＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８からなる群から選択される。

【0131】

[131] １態様において、ＤＰＩデバイスはＡｃｃｕｈａｌｅｒ（登録商標）、Ａｅｒ
ｏｌｉｚｅｒ（登録商標）、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、Ｃｏｎｉｘ（商標）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、ＸＣａｐｓ（登録商標）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）、ＮｅｘｔＨａｌｅｒ（登録商標）、ＣｙｃｌｏＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｒｅｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）、Ｓｐｉｎｈａｌｅｒ、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｍｉｃｒｏｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ、ＧｙｒｏＨａｌｅｒ（登録商標）、ＯｍｎｉＨａｌｅｒ（登録商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（登録商標）、もしくはＤｕｏｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｖｅｃｔｕｒａ）、または呼吸作動式ＡＲＣＵＳ（登録商標）インヘラー（Ｃｉｖｉｔａｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）からなる群から選択される。

【0132】

[132] １態様において、ＤＰＩデバイスはＡｒｃｕｓ（商標）、Ａｓｐｉｒａｉｒ（
商標）、Ａｘａｈａｌｅｒ（商標）、Ｂｒｅｅｚｈａｌｅｒ（商標）、Ｃｌｉｃｋｈａｌｅｒ（商標）、Ｃｏｎｉｘ Ｄｒｙ（商標）、Ｃｒｉｃｋｅｔ（商標）、Ｄｒｅａｍｂｏａｔ（商標）、Ｇｅｎｕａｉｒ（商標）、Ｇｅｍｉｎｉ（商標）、Ｉｎｓｐｉｒｏｍａｔｉｃ（商標）、ｉＳＰＥＲＳＥ（商標）、ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ（商標）、Ｎｅｘｔ ＤＰＩ（商標）、Ｐｒｏｈａｌｅｒ（商標）、Ｐｕｌｍｏｊｅｔ（商標）、Ｐｕｌｖｉｎａｌ（商標）、Ｓｏｌｉｓ（商標）、Ｔａｉｆｕｎ（商標）、Ｔａｐｅｒ Ｄｒｙ（商標）、Ｔｒｉｖａｉ（商標）、Ｎｏｖｏｌｉｚｅｒ（商標）、Ｐｏｄｈａｌｅｒ（商標）、Ｓｋｙｅｈａｌｅｒ（商標）、Ｓｐｉｒｏｍａｘ（商標）、Ｔｗｉｎｃａｐｓ／Ｆｌｏｗｃａｐｓ（商標）、およびＴｕｒｂｕｈａｌｅｒ（商標）からなる群から選択される。１態様において、ＤＰＩデバイスは、投与単位の乾燥粉末を収容したカプセルもしくはブリスターから、またはたとえば１作動当たり５〜２５ｍｇの乾燥粉末を送達するように適合させたマルチドーズ乾燥粉末吸入デバイスから、乾燥粉末を送達するように適合される。

【0133】

ｐＭＤＩ送達
[133] 他の態様において、ラパマイシンは噴射剤ベースの配合物に関して前記に述べ
た適切な噴射剤を収容した加圧された容器またはディスペンサーからエアロゾル化粒子の形態で送達される。１態様において、インヘラーは噴射剤駆動式インヘラー、たとえばｐＭＤＩデバイスであり、それは各作動に際して計量された用量のラパマイシンを放出する。典型的なｐＭＤＩデバイスは、薬物を収容するキャニスター、薬物計量バルブ、およびマウスピースを含む。この態様の１観点において、ラパマイシンは噴射剤中の懸濁液として配合される。この態様に関して、ラパマイシンを微細粉末状にし、液化した噴射剤または噴射剤ブレンドにそれを懸濁する。この懸濁液を次いで密閉キャニスター内に、噴射剤を液状に保持するのに十分な圧力下で保存する。他の態様において、ラパマイシンは溶液として配合される。この態様に関して、液化した噴射剤または噴射剤ブレンドにラパマイシンを溶解する。１態様において、配合物はさらに、配合物の撹拌後に再現性のあるラパマイシン投与を可能にするのに十分な時間、配合物を沈降、クリーミングまたはフロキュレーションに対して安定化するのに適した量の安定剤を含む。安定剤はエアロゾル配合物の総重量１００万部を基準として約１０重量部〜約５０００重量部の過剰量で存在してもよい。１態様において、液体キャリヤーは１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン、またはその混合物である。他の態様において、液体キャリヤーは炭化水素（たとえば、ｎ−ブタン、プロパン、イソペンタン、またはその混合物）である。組成物はさらに補助溶媒（たとえば、エタノール、または他の適切な補助溶媒）を含むことができる。

【0134】

[134] 本発明方法の１態様において、ラパマイシンを含むエアロゾル配合物は、さら
に追加薬物を含むことができる。この態様の１観点において、追加薬物はコルチコステロイド類、エストロゲン受容体アンタゴニスト、抗コリン作働薬、ベータ-アゴニスト、非
ステロイド系抗炎症薬、マクロライド系抗生物質、気管支拡張薬、ロイコトリエン受容体阻害薬、ムスカリンアンタゴニスト、硫酸クロモリン(cromolyn sulfate)、およびその組合わせからなる群から選択される。

【0135】

添加剤
[135] 本発明のエアロゾル組成物は、１種類以上の添加剤を、配合物中に存在するい
ずれかのキャリヤーまたは希釈剤（たとえば、ラクトースまたはマンニトール）のほかに含有することができる。１態様において、１種類以上の添加剤は１種類以上の界面活性剤を含むかまたはそれからなる。界面活性剤は一般に１以上の長い脂肪族鎖、たとえば脂肪酸をもち、それによりそれらは細胞の脂質構造体中へ直接挿入して薬物の透過および吸収を増強することができる。界面活性剤の相対的な親水性および疎水性を特徴づけるために一般に用いられる経験的パラメーターは、親水性−親油性バランス（“ＨＬＢ”価）である。低いＨＬＢ価をもつ界面活性剤ほどより疎水性であって油中でより大きな溶解度をもち、一方で高いＨＬＢ価をもつ界面活性剤ほどより親水性であって水溶液中でより大きな溶解度をもつ。よって、親水性界面活性剤は一般に約１０より大きいＨＬＢ価をもつ化合物であると考えられ、疎水性界面活性剤は一般に約１０未満のＨＬＢ価をもつものである。しかし、多くの界面活性剤についてＨＬＢ価はＨＬＢ価を決定するために選択する経験的方法に応じて約８ＨＬＢ単位も異なる可能性があるので、これらのＨＬＢ価は目安にすぎない。

【0136】

[136] 本発明のエアロゾル組成物中に用いる界面活性剤には、ポリエチレングリコー
ル（ＰＥＧ）−脂肪酸ならびにＰＥＧ−脂肪酸モノおよびジエステル、ＰＥＧグリセロールエステル、アルコール−油エステル交換生成物、ポリグリセリル脂肪酸、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ステロールおよびステロール誘導体、ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、糖およびそれの誘導体、ポリエチレングリコールアルキルフェノール、ポリオキシエチレン−ポリオキシ
プロピレン（ＰＯＥ−ＰＯＰ）ブロックコポリマー、ソルビタン脂肪酸エステル、イオン性界面活性剤、脂溶性ビタミンおよびそれらの塩類、水溶性ビタミンおよびそれらの両親媒性誘導体、アミノ酸およびそれらの塩類、ならびに有機酸およびそれらのエステルおよび無水物が含まれる。これらのそれぞれをより詳細に以下に記載する。

【0137】

ＰＥＧ脂肪酸エステル
[137] ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）自体は界面活性剤として機能しないが、多
様なＰＥＧ−脂肪酸エステルが有用な界面活性剤特性をもつ。ＰＥＧ−脂肪酸モノエステルのうち、ラウリン酸、オレイン酸およびステアリン酸のエステルが本発明の態様において最も有用である。好ましい親水性界面活性剤には、ＰＥＧ−８ラウレート、ＰＥＧ−８オレエート、ＰＥＧ−８ステアレート、ＰＥＧ−９オレエート、ＰＥＧ−１０ラウレート、ＰＥＧ−１０オレエート、ＰＥＧ−１２ラウレート、ＰＥＧ−１２オレエート、ＰＥＧ−１５オレエート、ＰＥＧ−２０ラウレートおよびＰＥＧ−２０オレエートが含まれる。ＨＬＢ価は４〜２０の範囲である。

【0138】

[138] ポリエチレングリコール脂肪酸ジエステルも、本発明の態様の組成物中に界面
活性剤として用いるのに適切である。最も好ましい親水性界面活性剤にはＰＥＧ−２０ジラウレート、ＰＥＧ−２０ジオレエート、ＰＥＧ−２０ジステアレート、ＰＥＧ−３２ジラウレートおよびＰＥＧ−３２ジオレエートが含まれる。ＨＬＢ価は５〜１５の範囲である。

【0139】

[139] 一般に、界面活性剤の混合物も本発明の態様に有用であり、それには２種類以
上の市販の界面活性剤の混合物および界面活性剤と他の添加剤または添加剤類の混合物が含まれる。幾つかのＰＥＧ−脂肪酸エステルが混合物またはモノ−およびジエステルとして市販されている。

【0140】

ポリエチレングリコールグリセロール脂肪酸エステル
[140] 好ましい親水性界面活性剤は、ＰＥＧ−２０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−
３０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−４０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−２０グリセリルオレエート、およびＰＥＧ−３０グリセリルオレエートである。

【0141】

アルコール−油エステル交換生成物
[141] 疎水度または親水度が異なる多数の界面活性剤を、アルコール類またはポリア
ルコールと多様な天然油および／または水素化油との反応により製造できる。最も一般的には、使用する油はヒマシ油もしくは水素化ヒマシ油、または食用植物油、たとえばトウモロコシ油、オリーブ油、ラッカセイ油、パーム核油、杏仁油、もしくはアーモンド油である。好ましいアルコール類には、グリセロール、プロピレングリコール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、およびペンタエリトリトールが含まれる。これらのアルコール−油エステル交換界面活性剤のうち、好ましい親水性界面活性剤はＰＥＧ−３５ ヒマシ油（Ｉｎｃｒｏｃａｓ−３５）、ＰＥＧ−４０ 水素化ヒマシ油（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＲＨ ４０）、ＰＥＧ−２５ トリオレエート（ＴＡＧＡＴ．ＲＴＭ．ＴＯ）、ＰＥＧ−６０ トウモロコシグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ Ｍ７０）、ＰＥＧ−６０ アーモンド油（Ｃｒｏｖｏｌ Ａ７０）、ＰＥＧ−４０ パーム核油（Ｃｒｏｖｏｌ ＰＫ７０）、ＰＥＧ−５０ ヒマシ油（Ｅｍａｌｅｘ Ｃ−５０）、ＰＥＧ−５０ 水素化ヒマシ油（Ｅｍａｌｅｘ ＨＣ−５０）、ＰＥＧ−８ カプリル酸／カプリン酸グリセリド（Ｌａｂｒａｓｏｌ）、およびＰＥＧ−６ カプリル酸／カプリン酸グリセリド（Ｓｏｆｔｉｇｅｎ ７６７）である。このクラスの好ましい疎水性界面活性剤には、ＰＥＧ−５ 水素化ヒマシ油、ＰＥＧ−７ 水素化ヒマシ油、ＰＥＧ−９ 水素化ヒマシ油、ＰＥＧ−６ トウモロコシ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ ２１２５ ＣＳ）、ＰＥＧ−６ アーモンド油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９６６ ＣＳ）、
ＰＥＧ−６ 杏仁油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９４４ ＣＳ）、ＰＥＧ−６
オリーブ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９８０ ＣＳ）、ＰＥＧ−６ ラッカセイ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ １９６９ ＣＳ）、ＰＥＧ−６ 水素化パーム核油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ ２１３０ ＢＳ）、ＰＥＧ−６ パーム核油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． Ｍ ２１３０ ＣＳ）、ＰＥＧ−６ トリオレイン（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ．ｂ Ｍ ２７３５ ＣＳ）、ＰＥＧ−８ トウモロコシ油（Ｌａｂｒａｆｉｌ．ＲＴＭ． ＷＬ ２６０９ ＢＳ）、ＰＥＧ−２０ トウモロコシグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ Ｍ４０）、およびＰＥＧ−２０ アーモンドグリセリド（Ｃｒｏｖｏｌ Ａ４０）が含まれる。

【0142】

ポリグリセリル脂肪酸
[142] 脂肪酸のポリグリセロールエステルも、本発明の態様に用いるのに適した界面
活性剤である。ポリグリセリル脂肪酸エステルのうち、好ましい疎水性界面活性剤にはポリグリセリルオレエート（Ｐｌｕｒｏｌ Ｏｌｅｉｑｕｅ）、ポリグリセリル−２ ジオレエート（Ｎｉｋｋｏｌ ＤＧＤＯ）、ポリグリセリル−１０ トリオレエート、ポリグリセリルステアレート、ポリグリセリルラウレート、ポリグリセリルミリステート、ポリグリセリルパルミテート、およびポリグリセリルリノレエートが含まれる。好ましい親水性界面活性剤には、ポリグリセリル−１０ ラウレート（Ｎｉｋｋｏｌ Ｄｅｃａｇｌｙｎ １−Ｌ）、ポリグリセリル−１０ オレエート（Ｎｉｋｋｏｌ Ｄｅｃａｇｌｙｎ １−０）、およびポリグリセリル−１０ モノ、ジオレエート（Ｃａｐｒｏｌ．ＲＴＭ．ＰＥＧ ８６０）、ポリグリセリル−１０ ステアレート、ポリグリセリル−１０ ラウレート、ポリグリセリル−１０ ミリステート、ポリグリセリル−１０ パルミテート、ポリグリセリル−１０ リノレエート、ポリグリセリル−６ ステアレート、ポリグリセリル−６ ラウレート、ポリグリセリル−６ ミリステート、ポリグリセリル−６ パルミテート、およびポリグリセリル−６ リノレエートが含まれる。ポリグリセリルポリリシノレエート（Ｐｏｌｙｍｕｌｓ）も好ましい界面活性剤である。

【0143】

プロピレングリコール脂肪酸エステル
[143] プロピレングリコールと脂肪酸のエステルは、本発明の態様に用いるのに適し
た界面活性剤である。この界面活性剤クラスにおいて、好ましい疎水性界面活性剤にはプロピレングリコールモノラウレート（Ｌａｕｒｏｇｌｙｃｏｌ ＦＣＣ）、プロピレングリコールリシノレエート（Ｐｒｏｐｙｍｕｌｓ）、プロピレングリコールモノオレエート（Ｍｙｖｅｒｏｌ Ｐ−０６）、プロピレングリコールジカプリレート／ジカプレート（Ｃａｐｔｅｘ．ＲＴＭ．２００）、およびプロピレングリコールジオクタノエート（Ｃａｐｔｅｘ．ＲＴＭ．８００）が含まれる。

【0144】

ステロールおよびステロール誘導体
[144] ステロールおよびステロール誘導体は、本発明の態様に用いるのに適した界面
活性剤である。好ましい誘導体にはポリエチレングリコール誘導体が含まれる。このクラスの好ましい界面活性剤はＰＥＧ−２４ コレステロールエーテル（Ｓｏｌｕｌａｎ Ｃ−２４）である。

【0145】

ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル
[145] 多様なＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステルを入手でき、それらは本発明の態様
において界面活性剤として用いるのに適切である。ＰＥＧ−ソルビタン脂肪酸エステルのうち、好ましい界面活性剤には、ＰＥＧ−２０ ソルビタンモノラウレート（Ｔｗｅｅｎ−２０）、ＰＥＧ−２０ ソルビタンモノパルミテート（Ｔｗｅｅｎ−４０）、ＰＥＧ−２０ ソルビタンモノステアレート（Ｔｗｅｅｎ−６０）、およびＰＥＧ−２０ ソルビタンモノオレエート（Ｔｗｅｅｎ−８０）が含まれる。

【0146】

ポリエチレングリコールアルキルエーテル
[146] ポリエチレングリコールとアルキルアルコールのエーテルは、本発明の態様に
用いるのに適した界面活性剤である。好ましいエーテルには、ＰＥＧ−３ オレイルエーテル（Ｖｏｌｐｏ ３）およびＰＥＧ−４ ラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ ３０）が含まれる。

【0147】

糖およびそれの誘導体
[147] 糖誘導体は、本発明の態様に用いるのに適した界面活性剤である。このクラスの好ましい界面活性剤には、スクロースモノパルミテート、スクロースモノラウレート、デカノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−デシル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−デシル−β−Ｄ−マルトピラノシド、ｎ−ドデシル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−ドデシル−β−Ｄ−マルトシド、ヘプタノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ヘプチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ｎ−ヘプチル−β−Ｄ−チオグルコシド、ｎ−ヘキシル−β−Ｄ−グルコピラノシド、ノナノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−ノニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、オクタノイル−Ｎ−メチルグルカミド、ｎ−オクチル−β−Ｄ−グルコピラノシド、およびオクチル−β−Ｄ−チオグルコピラノシドが含まれる。

【0148】

ポリエチレングリコールアルキルフェノール
[148] 幾つかのＰＥＧ−アルキルフェノール系界面活性剤、たとえばＰＥＧ−１０−
１００ ノニルフェノールおよびＰＥＧ−１５−１００ オクチルフェノールエーテル、チロキサポール(Tyloxapol)、オクトキシノール、ノノキシノールを入手でき、それらは
本発明の態様に用いるのに適切である。

【0149】

ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレン（ＰＯＥ−ＰＯＰ）ブロックコポリマー
[149] ＰＯＥ−ＰＯＰ ブロックコポリマーは特異なクラスのポリマー系界面活性剤
である。親水性ＰＯＥ部分と疎水性ＰＯＰ部分を明確に定義された比率および位置で含むこの界面活性剤の特異な構造は、本発明の態様に用いるのに適した広範な界面活性剤を提供する。これらの界面活性剤は種々の商品名で入手でき、それにはＳｙｎｐｅｒｏｎｉｃ
ＰＥシリーズ（ＩＣＩ）；Ｐｌｕｒｏｎｉｃ．ＲＴＭ．シリーズ（ＢＡＳＦ）、Ｅｍｋａｌｙｘ、Ｌｕｔｒｏｌ（ＢＡＳＦ）、Ｓｕｐｒｏｎｉｃ、Ｍｏｎｏｌａｎ、Ｐｌｕｒａｃａｒｅ、およびＰｌｕｒｏｄａｃが含まれる。これらのポリマーの一般名は“ポロキサマー(poloxamer)”（ＣＡＳ ９００３−１１−６）である。これらのポリマーは次式を
もつ：ＨＯ（Ｃ_２Ｈ_４Ｏ）_ａ（Ｃ_３Ｈ_６Ｏ）_ｂ（Ｃ_２Ｈ_４Ｏ）_ａＨ；ここで“ａ”および“ｂ”はそれぞれポリオキシエチレン単位およびポリオキシプロピレン単位の数を表わす。

【0150】

[150] このクラスの好ましい親水性界面活性剤には、ポロキサマー１０８、１８８、
２１７、２３８、２８８、３３８、および４０７が含まれる。このクラスの好ましい疎水性界面活性剤には、ポロキサマー１２４、１８２、１８３、２１２、３３１、および３３５が含まれる。

【0151】

ソルビタン脂肪酸エステル
[151] 脂肪酸のソルビタンエステルは本発明の態様に用いるのに適した界面活性剤で
ある。これらのエステルのうち、好ましい疎水性界面活性剤にはモノラウリン酸ソルビタン（Ａｒｌａｃｅｌ ２０）、モノパルミチン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ−４０）、モノオレイン酸ソルビタン（Ｓｐａｎ−８０）、モノステアリン酸ソルビタンが含まれる。

【0152】

[152] モノパルミチン酸ソルビタン、すなわちビタミンＣの両親媒性誘導体（ビタミ
ンＣ活性をもつ）は、可溶化系において２つの重要な機能を果たすことができる。第１に、それは微細環境を調節できる有効な極性基を備えている。これらの極性基は、入手でき
る最も水溶性の大きい有機固体化合物のひとつであるビタミンＣ自体（アスコルビン酸）を形成するものと同一の基である：アスコルビン酸は水に約３０ ｗｔ／ｗｔ％まで溶解できる（たとえば塩化ナトリウムの溶解度にきわめて近い）。第２に、ｐＨが上昇すると、それによりパルミチン酸アスコルビルの一部はより可溶性の塩、たとえばパルミチン酸アスコルビルナトリウムに変換される。

【0153】

イオン性界面活性剤
[153] カチオン性、アニオン性および双性イオン性界面活性剤を含めたイオン性界面
活性剤は、本発明の態様に用いるのに適した親水性界面活性剤である。好ましいイオン性界面活性剤には、第四級アンモニウム塩、脂肪酸塩および胆汁酸塩が含まれる。具体的には、好ましいイオン性界面活性剤には、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、セチルピリジニウムクロリド、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、ドデシル硫酸ナトリウム、ジアルキルメチルベンジルアンモニウムクロリド、エドロホニウムクロリド(edrophonium chloride)、ドミフェンブロミド(domiphen bromide)、スルホコハク酸ナトリウムのジアルキルエステル、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、コール酸ナトリウム、およびタウロコール酸ナトリウムが含まれる。これらの第四級アンモニウム塩は好ましい添加剤である。それらは有機溶媒（たとえば、エタノール、アセトンおよびトルエン）と水の両方に溶解できる。これは、調製とコーティングのプロセスを簡素化し、かつ良好な接着性をもつので、医療用デバイスのコーティングに特に有用である。水不溶性薬物は一般に有機溶媒に溶解される。

【0154】

脂溶性ビタミンおよびその塩類
[154] ビタミンＡ、Ｄ、ＥおよびＫは、それらの種々の形態およびプロビタミン形態
のものが脂溶性ビタミンとみなされ、これらのほか多数の他のビタミンおよびビタミン源または近縁物質も脂溶性であり、極性基および比較的高いオクタノール−水分配係数をもつ。明らかに、全般的クラスのそのような化合物が安全な使用歴および高いベネフィットリスク比をもち、それにより本発明の態様における添加剤として有用となる。

【0155】

[155] 以下の脂溶性ビタミン誘導体および／または供給源の例も添加剤として有用で
ある：アルファ−トコフェロール、ベータ−トコフェロール、ガンマ−トコフェロール、デルタ−トコフェロール、酢酸トコフェロール、エルゴステロール、１−アルファ−ヒドロキシコレカルシフェロール、ビタミンＤ２、ビタミンＤ３、アルファ−カロテン、ベータ−カロテン、ガンマ−カロテン、ビタミンＡ、フルスルチアミン(fursultiamine)、メ
チロールリボフラビン、オクトチアミン(octotiamine)、プロスルチアミン(prosultiamine)、リボフラビン、ビンチアモール(vintiamol)、ジヒドロビタミンＫ１、ジ酢酸メナジ
オール、ジ酪酸メナジオール、二硫酸メナジオール、メナジオール、ビタミンＫ１、ビタミンＫ１オキシド，ビタミンＫ２、およびビタミンＫ−Ｓ（ＩＩ）。葉酸もこのタイプであり、それは生理的ｐＨでは水溶性であるが、それを遊離酸形態で配合することができる。本発明の態様に有用な他の脂溶性ビタミン誘導体は、親水性分子との周知の化学反応によって容易に得ることができる。

【0156】

水溶性ビタミンおよびそれらの両親媒性誘導体
[156] ビタミンＢ、Ｃ、Ｕ、パントテン酸、葉酸、あるメナジオン関連ビタミン／プ
ロビタミンは、それらの多様な形態の多くが水溶性ビタミンとみなされる。これらを疎水性部分または多価イオンとコンジュゲートまたは錯体形成させて、比較的高いオクタノール−水分配係数および極性基をもつ両親媒性形態にすることもできる。この場合も、そのような化合物は低毒性および高いベネフィットリスク比のものである可能性があり、これによりそれらは本発明の態様における添加剤として有用である。これらの塩類も本発明の態様における添加剤として有用である。水溶性ビタミンおよび誘導体の例には、限定ではなく、アセチアミン(acetiamine)、ベンホチアミン(benfotiamine)、パントテン酸、セト
チアミン(cetotiamine)、シクロチアミン、デクスパンテノール(dexpanthenol), ナイア
シンアミド、ニコチン酸、ピリドキサール ５−リン酸、アスコルビン酸ニコチンアミド、リボフラビン、リン酸リボフラビン、チアミン、葉酸、二リン酸メナジオール、メナジオン亜硫酸水素ナトリウム、メナドキシム(menadoxime)、ビタミンＢ１２、ビタミンＫ５、ビタミンＫ６、ビタミンＫ６、およびビタミンＵが含まれる。同様に、前記に述べたように、葉酸は塩として、生理的ｐＨを含む広範なｐＨ範囲にわたって水溶性である。

【0157】

[157] アミノ基または他の塩基性基が存在する化合物は、疎水性基を含む酸、たとえ
ば脂肪酸（特に、ラウリン酸、オレイン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、または２−エチルヘキサン酸）、低溶解性アミノ酸、安息香酸、サリチル酸、または酸性脂溶性ビタミン（たとえば、リボフラビン）との単純な酸−塩基反応によって容易に修飾できる。他の化合物はそのような酸をビタミン上の他の基、たとえばヒドロキシル基と反応させてエステル結合などの連結を形成することにより得ることができる。酸性基を含む水溶性ビタミンの誘導体は、疎水性基を含む反応体、たとえばステアリルアミンまたはリボフラビンとの反応で本発明の態様に有用な化合物を作製することにより生成できる。ビタミンＣへのパルミテート鎖の連結によりパルミチン酸アスコルビルが得られる。

【0158】

アミノ酸およびそれらの塩類
[158] アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチ
ン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、プロリン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、およびそれらの誘導体は、本発明の態様に有用な他の添加剤である。

【0159】

[159] あるアミノ酸は、それらの双性イオン性形態および／または一価もしくは多価
イオンとの塩形態において、極性基、比較的高いオクタノール−水分配係数をもち、本発明の態様に有用である。本発明の開示に関して、“低溶解性アミノ酸”は、非緩衝化水中において約４％（４０ｍｇ／ｍｌ）未満の溶解度をもつアミノ酸を意味するものとする。これらには、シスチン、チロシン、トリプトファン、ロイシン、イソロイシン、フェニルアラニン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン酸、およびメチオニンが含まれる。

【0160】

有機酸ならびにそれらのエステルおよび無水物
[160] 例は、酢酸および無水物、安息香酸および無水物、アセチルサリチル酸、ジフ
ルニサル(diflunisal)、２−ヒドロキシエチルサリチル酸、ジエチレントリアミン五酢酸二無水物、エチレンジアミン四酢酸二無水物、マレイン酸および無水物、コハク酸および無水物、ジグリコール酸無水物、グルタル酸無水物、アスコルビン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、シュウ酸、アスパラギン酸、ニコチン酸、２−ピロリドン−５−カルボン酸、ならびに２−ピロリドンである。

【0161】

[161] これらのエステルおよび酸無水物は、有機溶媒、たとえばエタノール、アセト
ン、メチルエチルケトン、酢酸エチルに可溶性である。水不溶性薬物は、これらのエステルおよび酸無水物を含む有機溶媒に溶解すると医療用デバイスに容易にコートすることができ、次いで高ｐＨ条件下で加水分解することができる。加水分解された酸無水物またはエステルは水溶性の酸またはアルコール類であり、それらは薬物をデバイスから離して効果的に管壁内へ運ぶことができる。

【実施例】

【0162】

[162] 本発明を以下の実施例にさらに記載する；それらは特許請求の範囲に記載する本発明の範囲を限定しない。
実施例１：水性エアロゾル配合物
ラパマイシンの代表的な水性配合物を、下記の成分を用いて調製した。

【0163】

【表A】

【0164】

[163] ブレンディング法：１０００ｍｌのこはく色メスフラスコ内で、２５０のプロ
ピレングリコールと２５０のエタノールを均一になるまでブレンドする。次いでその後、まず１００ｍｇのラパマイシン、次いで２０ｍｇのポリソルベート８０を、プロピレングリコールおよびエタノールの溶液に順次溶解する。水を添加して体積を１０００ｍｌにし、すべてのラパマイシンが均一に溶解するまで撹拌または音波処理する。管理した温度で遮光下に保存する。

【0165】

実施例２：乾燥粉末配合物
[164] バッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８および０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９。
これら２配合物は、それぞれ微細な薬物（ラパマイシン）粒子のブレンドをラクトースキャリヤー粒子の表面に分散させたものである。各バッチの最終組成物は、それぞれ約２．６０ミクロンおよび３．００ミクロンの平均直径をもつ１％（ｗ／ｗ）の薬物粒子を含む。適切なサイズ範囲をもつ薬物粒子は、下記のように湿式研磨（０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８）またはジェットミリング（０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９）により製造される。この例は１％（ｗ／ｗ）のラパマイシンを用いたが、０．５〜２０％の範囲が実施可能である。キャリヤー粒子は２種類のキャリヤーのブレンドからなる：Ｒｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標） ＳＶ００３、すなわち９５．５％（ｗ／ｗ）で存在し、約３０〜１００ミクロン（同等な球体の直径）の粒子サイズをもつもの、およびＲｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標） ＬＨ３００（Ｌａｃｔｏｈａｌｅ ３００）、すなわち５．５％（ｗ／ｗ）で存在し、１０ミクロン（同等な球体の直径）未満の粒子サイズをもつもの。ブレンディング後に、ブレンドをアッセイして均質性および１％の薬物含量を確認した。

【0166】

[165] 薬物粒子の凝集を減らし、薬物粒子のエアロゾル化を補助するために、他の数
種類の賦形剤を所望により含有させる。任意選択的な賦形剤には、リン脂質、たとえばジパルミチルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）およびレシチン、ならびに脂肪酸の金属塩、たとえばステアリン酸マグネシウムが含まれる。これらをキャリヤー粒子上に、大型キャリヤー粒子に対する賦形剤の重量割合０．０１％から０．５％までの範囲でコートすることができる。

【0167】

[166] カプセル充填：バッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８およびバッチ０６ＲＰ６
８．ＨＱ００００９からの粉末ブレンド２０ミリグラムをサイズ＃３ ＨＰＭＣカプセルに装填して、医薬製品を製造した。これらのブレンドについて、５ミリグラムから３５ミリグラムまでの薬物を＃３サイズのカプセルに装填し、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標）
ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７またはＰｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８デバイスで作動させた際、装填したブレンドの９５％より多量を毎分６０リットルから１００リットルまでの範囲の流速でカプセルから放出することができた。

【0168】

実施例３：Ｃ５７ＢＬ６マウスに口腔咽頭吸引法（ＯＰＡ）および経口胃管投与により
投与した後の肺および血液中のラパマイシンの測定
[167] この試験は、きわめて高い目標用量１ｍｇ／ｋｇのラパマイシンを胃管投与お
よび口腔咽頭吸引法（ＯＰＡ）により投与した後の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスにおいてラパマイシンの濃度を評価するために実施された。マウスの血液および肺ホモジェネート中のラパマイシンの分析方法は、タンデム質量分析検出を伴なう液体クロマトグラフィー（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を用いて開発された。三重濃度を用いるラパマイシンの検量曲線を、マウス血液中において１ｎｇ／ｍＬ〜２０００ｎｇ／ｍＬ、マウス肺ホモジェネート中において２ｎｇ／ｍＬ〜２０，０００ｎｇ／ｍＬの間で分析した。正確度、精度および直線性は予想範囲内であった。

【0169】

[168] パイロット試験において、マウス当たり５０μＬの口腔咽頭吸引法による肺へ
のビヒクル送達の効率を、エバンスブルー色素の投与により評価した。肺のみに青色色素が存在するのが目視確認され、胃に青色色素が存在しないことは用いた方法で胃への送達が避けられたことを立証した。

【0170】

[169] ラパマイシンを雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス（Ｎ＝６）に胃管により１．０ｍｇ／
ｋｇの用量で経口投与またはＯＰＡ投与した。経口用量は医薬用経口液体配合物Ｒａｐａｍｕｎｅ Ｏｒａｌ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ）を用いて配合された。ＯＰＡ用ラパマイシンは、被験品を適宜な体積のエタノールに溶解し、次いで適宜な体積の水を添加して、１ｍｇラパマイシン／ｍＬの濃度の１０％エタノール溶液を調製することにより調製された。ラパマイシンを６匹の雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスの２グループにイソフルラン麻酔下でＯＰＡにより投与した。追加グループの６匹のマウスにビヒクルのみ（水中の１０％エタノール）を投与した。投与後１時間目に経口およびＯＰＡラパマイシン投与した６匹のマウスのグループを安楽死させ、心臓穿刺により血液を採取し、肺を摘出した。ラパマイシンまたはビヒクルのみをＯＰＡにより投与した各グループの残りのマウスを、さらに３日間観察した。７２時間目の剖検で、心臓穿刺により血液を採取し、肺を摘出した。投与後７２時間目に、ラパマイシン処理またはビヒクル処理したマウスに有害作用はみられなかった。

【0171】

[170] 採集した血液および肺ホモジェネートにおいてラパマイシン濃度をＬＣ−ＭＳ
／ＭＳにより測定した。ラパマイシンのＯＰＡ後、１時間目に、ラパマイシンの濃度は肺組織（３７９４±１２５９ｎｇ／ｇ 組織）の方が血液中（６４１±２２０ｎｇ／ｍｌ）より約６倍高かった。類似量のラパマイシンを経口投与した後、１時間目の肺および血液のラパマイシン濃度はそれぞれ７１±４３ｎｇ／ｇおよび２３±１６ｎｇ／ｍＬであった。ＯＰＡ後の肺ホモジェネート中の濃度は、同じ高い用量（１ｍｇ／ｋｇ）のラパマイシンを経口投与した後に測定したものより５３倍高かった。このデータは、より低い用量のラパマイシン（組織を飽和しない用量レベル）を肺へ送達すると、経口投与により達成できるラパマイシンレベルを肺において生じ、ただし血液中のラパマイシンは経口投与で起きるより有意に少ないであろうということを示唆する。

【0172】

材料および方法
[171] 被検体：シロリムス（Ｒａｐａｍｕｎｅ，ラパマイシン） ＭＷ ９１４．１
７２，Ｃ_５１Ｎ_７９ＮＯ_１２，ＣＡＳ番号：５３１２３−８８−９。供給業者（経口胃管投与用）：Ｒａｐａｍｕｎｅ Ｏｒａｌ（登録商標）（Ｐｆｉｚｅｒ）経口投与用，ロットＮｏ．：ＭＷＧＴ，有効期限：０７／１６。供給業者（ＯＰＡ用）：ラパマイシン（シロリムス）固体，ＬＣ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，マサチュセッツ州ウーバン，ロットＮｏ．：ＡＳＷ−１２７，有効期限：１２／２０２３。

【0173】

[172] 動物：雄Ｃ５７ＢＬ／６マウス，おおよそ８週齢，Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅ
ｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃから，ノースカロライナ州ローリー。動物にＣｅ
ｒｔｉｆｉｅｄ Ｐｕｒｉｎａ Ｒｏｄｅｎｔ Ｃｈｏｗ ＃５００２を与え、水道水を自由に摂取させた。各バッチの餌の栄養素レベルおよび可能性のある混入物の分析を供給業者が実施し、試験ディレクターが検査し、試験記録に残した。餌をおおよそ６０〜７０°Ｆに保存し、使用期間はミリング日から６か月を超えなかった。マウスを（ケージ当たり１匹）、水ボトルを収容するステンレススチールバーリッド付きのポリカーボネートケージ内で飼育した。ケージサイズはおおよそ１１．５”×７．５”×５”高さ（床スペース７０平方インチ）マウス用である。床敷(contact bedding)はＳａｎｉ−Ｃｈｉｐｓ硬
材チップ（Ｐ．Ｊ．Ｍｕｒｐｈｙ Ｆｏｒｅｓｔ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｃｏ．；ニュージャージー州モントビル）であった。マウスを試験に用いる前５日間、隔離した。動物を隔離から開放する前に獣医または資格をもつ被指定者が検査した。ＲＴＩ動物室の温度および相対湿度は、自動システム（Ｓｉｅｂｅ／Ｂａｒｂｅｒ−Ｃｏｌｍａｎ Ｎｅｔｗｏｒｋ ８０００ Ｓｙｓｔｅｍ，Ｒｅｖｉｓｉｏｎ ４．４．１ ｆｏｒ Ｓｉｇｎａｌ（登録商標）ソフトウェア付き［Ｓｉｅｂｅ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ Ｃｏｎｔｒｏｌｓ（ＳＥＣ）／Ｂａｒｂｅｒ−Ｃｏｌｍａｎ Ｃｏｍｐａｎｙ；イリノイ州ラヴズ・パーク］）を用いて継続的にモニター、管理および記録された。目標環境範囲は、温度については６４〜７９°Ｆ（１８℃〜２６℃）、相対湿度３０〜７０％、１日につき１２時間の明暗サイクルであった。存命期の終わりに二酸化炭素への過剰曝露によりマウスを安楽死させた。

【0174】

[173] 試験用化学物質の調製：エバンスブルーを無菌蒸留水中に０．５％ ｗ／ｖで
調製した。Ｒａｐａｍｕｎｅ Ｏｒａｌ（登録商標）を供給されたままで経口投薬用として投与した。ラパマイシン（固体）をエタノールに溶解し、無菌蒸留水で希釈して１０％エタノール中０．５ｍｇ／ｍＬの最終濃度を得た。

【0175】

[174] 投薬：各動物を投薬前に秤量して投与量を決定した。単回胃管用量を、先端ボ
ール付き(ball-tipped)２０−Ｇステンレススチール胃管投与針（Ｐｏｐｐｅｒ ＆ Ｓ
ｏｎｓ Ｉｎｃ．，ニューヨーク州ニューハイド・パーク）を備えた１００−μＬガラス注射器（Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ネバダ州リノ）を用いて投与した。各動物に投与した量を充填注射器の重さマイナス空の注射器の重さから決定した。投薬時間を記録した。動物への投薬は適宜な時点で血液を採集できるように間隔をおいた。各グループに投与した配合物量を以下に示す。

【0176】

[175] 口腔咽頭吸引グループの動物には、単回量のラパマイシン（５０μＬ）を各マ
ウスにイソフルラン麻酔下で先端ボール付き２０−Ｇステンレススチール胃管投与針（Ｐｏｐｐｅｒ ＆ Ｓｏｎｓ Ｉｎｃ．，ニューヨーク州ニューハイド・パーク）を備えた１００μＬガラス注射器（Ｈａｍｉｌｔｏｎ，ネバダ州リノ）を用いて投与した。マウスを投薬前に秤量し、投与したラパマイシンの重量を記録した。各マウスをイソフルランで麻酔し、口を開いた状態で拘束した。鉗子で舌を口の片側へ保持し、投与量を徐々に口腔の遠位部内へ注入した。確実に吸入させるために、２呼吸の間、鼻孔を指で覆った(Rao et al., 2003)。

【0177】

【表1】

【0178】

[176] 血液および肺試料の採集：試験終了時（投薬の１または７２時間後）、マウス
をＣＯ_２曝露により麻酔し、抗凝固剤としてＥＤＴＡ二カリウムを用いて心臓穿刺により血液を採集した。肺組織を切除し、右肺と左肺に分割した。左肺を分析に用い、右肺をさらなる分析用に液体窒素中で急速凍結して−７０℃に保存した。

【0179】

[177] ラパマイシンについてのＬＣ−ＭＳ／ＭＳによる試料分析：肺および血液中の
ラパマイシンの分析のためのＬＣ−ＭＳ／ＭＳ法を、公開されたWu et al. (2012)の方法に基づいて準備した。血液および肺の体積を公開された方法から実質的に減らした。トリアムシノロン(triamcinolone)を内部標準として用いた。

【0180】

[178] 秤量した肺試料をホモジナイザー内において２．８−ｍｍボールベアリングで
組織＋脱イオン水（１：３ ｗ／ｖ）を用いてＳＰＥＸ ＳａｍｐｌｅＰｒｅｐ ２０１０ Ｇｅｎｏ／Ｇｒｉｎｄｅｒでホモジナイズすることにより、肺ホモジェネートを調製した。

【0181】

[179] 各標準品が交互のストック標準品からのものになるように標準品の濃度を調整
した。それぞれ三重に作成した６点検量曲線を被検体定量に用いた。重み付きまたは重みなしの単純線形回帰モデルを曲線あてはめに用いた。測定した濃度範囲は血液では１〜２０００ｎｇ／ｍＬ、肺ホモジェネートでは２〜２０００ｎｇ／ｍＬであった。

【0182】

[180] 下記の方法性能パラメーターを許容できるとみなした；濃度−応答関係につい
て≧０．９８の決定係数(coefficient of determination)ｒ^２；公称値の≦±１５％（ＬＯＱを超える濃度について）または≦±２０％（ＬＯＱにおける濃度について）の正確度。ｒ^２はすべての分析において０．９９９より大きかった。

【0183】

[181] ３０μＬのマトリックス、３０μＬのスパイキング溶液（ブランクおよび試料
についてメタノール）、１０μＬの内部標準溶液（ＭｅＯＨ中）および９０μＬのＭｅＯＨをミクロ遠心チューブにピペットで入れ、短時間ボルテックス撹拌し、次いで１０，０００ＲＰＭ、約４℃で６分間遠心した。アリコート（９０μＬ）の上清をＬＣバイアルイ
ンサートへ移し、次いでＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析した（表２）。

【0184】

【表2】

【0185】

[182] データの収集およびレポーティング：Ｄｅｂｒａ（商標）システム バージョ
ン５．５．１０．７２（Ｌａｂｌｏｇｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｌｔｄ．，英国シェフィールド）で試験データを収集し、レポートした。これには、動物の体重、投与量、投与時間、および試料採集時間に関するデータが含まれる。投与量の計算および試料採集時間をＤｅｂｒａ（商標）システムでレポートした。

【0186】

結果
[183] ラパマイシン分析：ラパマイシンの分析を、血液および肺ホモジェネートの試
料体積３０μＬに設定した。クロマトグラム例を血液および肺中のラパマイシンおよび内部標準について示す（図１および２）。試験試料の調製前に、方法の性能を確認するために肺および血液について三重測定検量曲線を作成した。検量範囲は血液については１．０〜２０００ｎｇ／ｍＬ、肺ホモジェネートについては１〜２０，０００ｎｇ／ｍＬであった。３体積の水中でホモジナイズした肺組織１ｇを用いて肺ホモジェネートを調製して、１：４ホモジェネートを得た。血液、肺ホモジェネート、および溶媒について、検量曲線を図３および４に示す。

【0187】

[184] 口腔咽頭吸引法：ラパマイシンを口腔咽頭吸引法により投与する前に、ＯＰＡ
によりその用量が肺へ送達されたことを確認するためにエバンスブルーの投与を用いた。マウスをイソフルランで麻酔し、ブラントニードルを備えた注射器を用いてエバンスブルーをＯＰＡにより投与した。ＯＰＡ直後にマウスを安楽死させ、肺および胃を目視検査して、エバンスブルー色素が肺へ送達され、胃へは送達されなかったことを確認した。４匹のマウスに首尾よくエバンスブルーが投与されて、色素はすべて肺に存在すると思われ、胃には存在しなかった。

【0188】

[185] ラパマイシン投与：投与された投与溶液の重量は、投与溶液を装填した注射器
を投与前に秤量し、そして投与後に秤量することにより決定された。投与された投与溶液の重量を用いて、投与されたラパマイシンの量を計算した。投与時点を０として記録した。グループ２および３の動物を、投与後１時間目に安楽死させた。グループ４および５の
動物を投与後７２時間観察した。いずれのグループにも有意の臨床徴候はみられなかった。

【0189】

[186] 血液および肺のラパマイシン分析：採集したすべての試料においてマウスの血
液および左肺ホモジェネート中のラパマイシンを分析した（図６および７）。各動物からの右肺試料を可能性のあるさらなる分析のために残しておいた。試料の概要データを表３に示す。

【0190】

【表3】

【0191】

[187] すべての試料セットについて、標準品セット、重複測定試料１、標準品セット
、試料重複測定試料２、標準品セットの順で三重測定検量曲線を分析した。ラパマイシンのＯＰＡ後、１時間目に、ラパマイシンの濃度は肺組織（３７９４±１２５９ｎｇ／ｇ 組織）の方が血液中（６４１±２２０ｎｇ／ｍｌ）より約６倍高かった。類似量のラパマイシンを経口投与した後、１時間目の肺および血液のラパマイシン濃度はそれぞれ７１±４３ｎｇ／ｇおよび２３±１６ｎｇ／ｍＬであった。ＯＰＡ後の肺ホモジェネート中の濃
度は、同じ高い用量（１ｍｇ／ｋｇ）のラパマイシンを経口投与した後より５３倍高かった。

【0192】

考察
[188] この試験は、市販の経口配合物での胃管投与により、および１０％水性エタノ
ール中に調製した懸濁液としての口腔咽頭投与（ＯＰＡ）によりラパマイシンを投与した後の、血液および肺組織中のラパマイシンの濃度を調べた。ラパマイシン処理またはビヒクル処理したマウスに、ＯＰＡによる投薬の７２時間後まで有害作用はみられなかった。ラパマイシンの投与前に、分析法を開発し、ＯＰＡにより肺内へ色素が投与されることを確認した。ＯＰＡ後の肺におけるラパマイシンの濃度は血液中より６倍高かった。ＯＰＡ後７２時間目に、ラパマイシンは血液中では定量限界未満であったが、肺では検出可能であった。この試験は、ラパマイシンが肺投与後に全身に存在すること、および肺への送達後の初期および後期の時点で肺組織濃度が血液中の濃度を大幅に上回ることを示した。

【0193】

[189] これらの結果はさらに、肺へ直接送達されたラパマイシンは血液中と比較して
肺組織において予想外に高い局所薬物濃度を達成することを立証する。この結果は、ラパマイシンの薬理について知られていることからは全く予想されなかった；それによれば、ラパマイシンは身体組織全体に均一に分布し、それの高い親油性のため肺からは急速に消失するはずであることが知られているので、肺組織と血液中の濃度の薬物がほぼ等しいと予測される。したがって、これらの結果は、肺へのラパマイシンの直接投与は療法効果を得るのに十分なほど高い送達量を達成できるはずであり、一方で同時に、ほとんど検出できないほどの全身存在量を達成でき、それにより薬物の全身曝露によるものである経口投与に付随する毒性が排除されることを指摘する。以前の研究からみて肺自体に対する毒性も関心事であるが、ここでの結果はさらに予想外に、比較的高い量のラパマイシンが肺組織に対して急性毒性をもたなかったことを指摘する。

【0194】

参考文献
Crowe, A., Bruelisauer, A. & Duerr, L. (1999). Absorption and intestinal metabolism of SDZ-RAD and rapamycin in rats. Drug Metabolism and Disposition, 27, 627-632.
Rao, G. V. S., Tinkle, S., Weissman, D. N., Antonini, J. M., Kashon, M. L., Salmen, R., Hubbs, A. F. (2003). Efficacy of a technique for exposing the mouse lung to particles aspirated from the pharynx. Journal of Toxicology and Environmental Health. Part A, 66(15), 1441-52. doi:10.1080/15287390306417.
Wu, K., Cohen, E. E. W., House, L. K., Ramirez, J., Zhang, W., Ratain, M. J., & Bies, R. R. (2012). Nonlinear population pharmacokinetics of sirolimus in patients with advanced cancer. CPT: Pharmacometrics & Systems Pharmacology, 1(October), e17. doi:10.1038/psp.2012.18.
実施例４：ラパマイシンの経口およびＯＰＡ投与後のマウス肺におけるＳ６リン酸化
[190] 前記で考察したように、経口投与およびＯＰＡ後の肺および血液中におけるラ
パマイシンの組織分布を示す本発明者らの実験は、肺へのラパマイシンの直接投与は療法効果のために十分に高い送達量を達成できるはずであり、一方で同時に、きわめて低い全身薬物曝露が達成され、それにより同時に療法効果が改善されかつラパマイシンの経口投与に付随する毒性の多くが排除されることを立証した。この方法を確証するために、マウス肺組織におけるリン酸化されたＳ６タンパク質の存在をｍＴＯＲ活性のバイオマーカーとして利用した。用いたマウス系統（Ｃ５７ｂｌ／６）において、マウスの気道および肺胞上皮細胞は構成性活性（リン酸化された，“ｐ”）Ｓ６タンパク質をもつ。Ｓ６タンパク質は一般に、ｍＴＯＲＣ１の下流にあるＳ６Ｋによりリン酸化され、成長因子、たとえば上皮成長因子（ＥＧＦ）、ＡＫＴ、ＥＲＫおよびＲＳＫの下流で活性化される。ｍＴＯＲＣ１は、脂質、タンパク質およびオルガネラの生合成などの同化プロセスを刺激し、オ
ートファジーなどの異化プロセスを抑制することにより、細胞の成長および増殖を促進する。ｍＴＯＲＣ１経路は、タンパク質および脂質の合成ならびにオートファジーなどの広範なプロセスを調節するために、成長因子、酸素、アミノ酸およびエネルギー状態を含めた細胞内および細胞外シグナルを感知および統合する。ｍＴＯＲＣ１はラパマイシンに対して著しく感受性である。

【0195】

[191] この試験では、前記のようにビヒクル（ｎ＝６）、またはＯＰＡ（ｎ＝６）も
しくは経口胃管投与（ｎ＝６）により投与した１ｍｇ／ｋｇのラパマイシンで処理したＣ５７ｂｌ／６マウスから、投薬後の２時点、１時間目および７２時間目に肺組織を採取した。前記で考察したように、ＯＰＡ後１時間目に、ラパマイシンは血液中に６４１ｎｇ／ｍｌ、肺に３７９４ｎｇ／ｇ（組織）で検出され、７２時間目にもなお肺に１２．５ｎｇ／ｇで検出でき、一方、血液中にはその時点で検出できなかった。逆に、経口（胃管）投与後、１時間目にラパマイシンは血液中に２３ｎｇ／ｍｌ、肺に７１ｎｇ／ｇ（組織）で検出され、７２時間目には肺または血液のいずれにも検出できなかった。図１および２のデータにより示すように、リン酸化されたＳ６（ｐＳ６）のレベルはＯＰＡと経口投与の両方のラパマイシンによって１時間目には実質的に低下し、７２時間目にはＯＰＡについては抑制されたままであった。これらのマウスは構成性活性ｍＴＯＲシグナル伝達をもつので、ｐＳ６はビヒクル対照において最高であった。これらのデータは、肺において約７０ｎｇ／ｇの薬物を達成するのに十分なラパマイシンの送達量がｐＳ６タンパク質により測定した肺組織におけるｍＴＯＲシグナル伝達を実質的に無効にすること、および１２．５ｎｇ／ｇという低いレベルでｍＴＯＲシグナル伝達が抑制状態を維持することを示す。これらの結果は、吸入ラパマイシンは経口投与ラパマイシンよりはるかに低い用量で送達でき、同時に高い療法効果およびきわめて低い毒性を達成することを立証することにより、異常に高いｍＴＯＲ経路活性を特徴とする疾患および障害、たとえばＬＡＭの処置のために吸入ラパマイシンを利用する本発明者らの方法を確証する。

【0196】

実施例５：吸入可能な組成物を得るためのラパマイシンのサイズ低減
[192] 湿式研磨またはジェットミリング法を用いて、ラパマイシンの粒子サイズを２
．０μｍ＜Ｄｖ５０＜３．０μｍの目標範囲に低減した。ジェットミリングには、実験室規模のＭＣＯｎｅユニット（Ｊｅｔｐｈａｒｍａから）を下記の操作条件で用いた：ベンチュリ(venturi)圧力２〜４バール、ミリング圧力３〜５バール、供給速度９０ｇ／時。
湿式研磨のために、精製水を用いて供給材料懸濁液を調製した。マイクロフルイディクス高圧ホモジナイザー(microfluidics high pressure homogenizer)をサイズ低減工程に用
い、得られた懸濁液を噴霧乾燥した。湿式研磨法の詳細を以下に述べる。

【0197】

[193] 湿式研磨法のサイズ低減工程に用いた高圧ホモジナイザーは、補助加工モジュ
ール（２００ミクロン）を備えたパイロット規模のマイクロフルイディクス高圧ホモジナイザーであり、１００ミクロンのインタラクションチャンバーを用いた。このユニットを約４５５バール（増圧器モジュール液圧は約３０バール）で作動させた。マイクロフルイダイゼーションの後、流体を噴霧乾燥により除去して乾燥粉末を製造した。実験室規模の噴霧乾燥器ＳＤ４５（ＢＵＥＣＨＩ，モデルＢ−２９０ Ａｄｖａｎｃｅｄ）に２つの流体ノズル（キャップおよび直径は、それぞれ１．４および０．７ｍｍ）を取り付けた。直列の２つのサイクロン（第１は標準Ｂｕｃｈｉサイクロン、第２は高性能Ｂｕｃｈｉサイクロン）を用いて乾燥生成物を採集した。この噴霧乾燥ユニットを窒素で、シングルパスモードにおいて、すなわち乾燥用窒素の再循環なしに操作した。窒素を吹きとばすアスピレーターをそれの処理能力の１００％に設定した（最大処理能力における流速はおおよそ４０ｋｇ／時である）。霧化用窒素の流速をロータメーターにおける数値４０±５ｍｍに調整した。生成物懸濁液を供給する前に、噴霧乾燥器を精製水で安定化し、その間、流速を６ｍｌ／分（蠕動ポンプにおいて２０％）に調整した。目標とする出口温度（４５℃）に達するように入口温度を調整した。温度が安定化した後、噴霧乾燥器の供給材料を精製
水から生成物懸濁液に切り換え（安定化に際して用いたものと同じ流速を維持しながら）、目標とする出口温度に達するように入口温度を再び調整した。原料懸濁液が終わった時点で、供給ラインをすすいで制御下での運転停止を行なうために、供給材料を再び精製水に切り換えた。両サイクロン下の採集フラスコ内の乾燥生成物を秤量し、高圧ホモジナイザーに供給した懸濁液中の総固体に対する乾燥生成物の質量パーセントとして収率を計算した。

【0198】

[194] 粒度分布をレーザー回折により分析した。固相特性分析（多形および純度につ
いて）を高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、および示差走査熱量測定（ｍＤＳＣ）により実施した。含水率をカール−フィッシャー法により測定した。

【0199】

[195] ジェットミリングにより、下記の表に示すように１．５ミクロンのＤｖ１０、
２．７ミクロンのＤＶ５０、および４．９ミクロンのＤｖ９０をもつ単分散粒度分布の結晶性ラパマイシン粉末が製造された。

【0200】

[196] 湿式研磨により、１．０ミクロンのＤｖ１０、２．４ミクロンのＤＶ５０、お
よび５．０ミクロンのＤｖ９０をもつ単分散粒度分布の結晶性ラパマイシン粉末が製造された。

【0201】

[197] 両方法とも目標範囲内のラパマイシン粒子を製造し、いずれの方法もラパマイ
シンの多形および純度に対する影響を示さなかった。下記の表はジェットミリングおよび湿式研磨法についてのインプロセスコントロールデータを示す。このデータは、両方法ともＡＰＩ純度または多形に影響を及ぼすことなく目標範囲内のＡＰＩ粒子サイズを生成できたことを示す。

【0202】

【表4】

【0203】

【表5】

【0204】

実施例６：乾燥粉末組成物のエアロゾル性能試験
[198] 前記実施例で製造したカプセルを下記の表に示すデバイスに挿入して作動させ
た。デバイス／バッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８およびバッチ０６ＲＰ６８．ＨＱ００００９からのブレンドを収容したカプセルから送達されるエアロゾル性能を、ＵＳＰの９０５および６０１章に記載される方法に従って次世代インパクター（ＮＧＩ）を用いて特性分析した。エアロゾルを毎分６０および１００リットル（ＬＰＭ）の速度で試験した。細粒量（ＦＰＤ）および細粒分（ＦＰＦ）を次表に示す。空気力学的質量中央直径（ＭＭＡＤ）および幾何標準偏差(geometric standard deviation)（ＧＳＤ）をも示す。

【0205】

【表6】

【0206】

【表7】

【0207】

【表8】

【0208】

【表9】

【0209】

[199] これらのエアロゾル性能データに基づけば、湿式研磨した薬物粒子が好ましい
。それらは、より高い細粒量、より高い細粒分を生じ、中心および末梢の両方の肺領域内への侵入を示しかつ口腔沈着がより少ない粒度分布を生じる。

【0210】

実施例７：ラパマイシンの薬物動態モデリング
[200] 前記の０６ＲＰ６８．ＨＱ００００８（湿式研磨）＋Ｐｌａｓｉｔａｐｅ ＲＳ０１モデルのエアロゾル性能、および実施例３の動物実験の結果に基づいて、同様に吸入ラパマイシンのヒトの肺への直接送達は療法効果があるほど十分に高い持続的肺濃度をもたらし、ただし全身曝露は低く（低い血中濃度）、これにより全身曝露による副作用が効果的に抑えられると予想できる。反復ＱＤ（１日１回）投薬後のヒトの血液および肺における濃度を予測するために、表７の配合物およびＤＰＩインヘラーを用いる２コンパートメント薬物動態モデルを開発した。薬物動態モデルについて、Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標）（ＮＤＡ ２１−１１０、およびＮＤＡ ２１−０８３）承認審査概要(summary basis for approval)からのヒトＰＫパラメーターを用いた：分布体積を７８０リットルと推定し、クリアランスは０．０００３／分であり、排出半減期は４２．３時間であった（ラパマイシン静脈内投薬との同等性を推定）。肺からのラパマイシン吸収半減期を、肺吸収データを入手できる他の高親油性化合物、たとえばプロピオン酸フルチカゾンと同様におおよそ０．５時間と推定した。肺に沈着するラパマイシンの生物学的利用能をおおよそ１００％と推定した。口腔咽頭沈着により、または上気道からの粘液線毛クリアランス(mucociliary clearance)による離脱により胃腸経路で吸収されたラパマイシンの生物学的利用能を、Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標）承認審査概要にレポートされたように１４％と推定した。表７に示すように毎分６０リットルの流速での一般的なヒト呼吸動作について、細粒量は５７マイクログラムであり、細粒分は４０％であった。

【0211】

[201] このモデルは、図８に示すように１１日後に平均定常状態濃度に達すると予測
する。この図から、肺への１日１回、５７マイクログラムの反復投薬によりおおよそ０．１５０ナノグラム／ｍｌのトラフ血中濃度が生じることが分かる；これは、McCormack et
al. (2011), “Efficacy and safety of sirolimus in lymphangioleiomyomatosis”, N
Engl J Med 364:1595-1606に報告された５〜１５ｎｇ／ｍｌの濃度より実質的に低い。
肺組織質量は８５０グラムであり、肺における代謝はなく、肺吸収半減期は３０分である
と仮定して、肺へ送達された５７マイクログラムのラパマイシンは、肺組織においてラパマイシンの局所肺濃度おおよそ６０ｎｇ／グラムを伴なう療法レベルをもたらすであろう。

【0212】

均等物
[202] 当業者はルーティン程度の実験を用いて本明細書に記載する本発明の特定の態
様に対する多数の均等物を認識し、あるいは確認できるであろう。そのような均等物は特許請求の範囲に包含されるものとする。

【0213】

[203] 本明細書に引用したすべての参考文献は、個々の刊行物または特許もしくは特
許出願が具体的かつ個別にそれの全体をあらゆる目的で援用すると指示されたと同様に、それらの全体があらゆる目的で本明細書に援用される。

【0214】

[204] 本発明は本明細書に記載する特定の態様により範囲が限定されることはない。実際に、以上の記載および添付の図面から、本明細書に記載したもののほかに本発明の多様な改変が当業者に明らかになるであろう。そのような改変は特許請求の範囲に包含されるものとする。
一態様において、本発明は以下であってもよい。
［態様１］ ヒト対象においてリンパ脈管筋腫症を処置する際に使用するための、ある量の薬物のマイクロ粒子、キャリヤーの粒子、および１種類以上の任意選択的な賦形剤を含み、薬物がラパマイシンまたはそのプロドラッグもしくは誘導体から選択される、肺送達のための医薬乾燥粉末組成物。
［態様２］ マイクロ粒子が、０．１から１０ミクロンまでの直径および１から５ミクロンまでの平均直径を有する薬物粒子からなる、態様１に記載の組成物。
［態様３］ 粒子が、１．５から４ミクロンまで、１．５から３．５ミクロンまで、または２から３ミクロンまでの平均直径を有する、態様２に記載の組成物。
［態様４］ キャリヤーが、アラビノース、グルコース、フルクトース、リボース、マンノース、スクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、デンプン、デキストラン、マンニトール、リジン、ロイシン、イソロイシン、ジパルミチルホスファチジルコリン、レシチン、ポリ乳酸、ポリ（乳酸−ｃｏ−グルタミン酸）、およびキシリトール、または以上のいずれかの混合物からなる群から選択される、態様１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
［態様５］ キャリヤーの粒子が、１から２００ミクロンまで、３０から１００ミクロンまでの範囲、または１０ミクロン未満の直径を有する、態様１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
［態様６］ キャリヤーが、２種類の異なるキャリヤー、第１キャリヤーおよび第２キャリヤーのブレンドを含むかまたはそれからなる、態様１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
［態様７］ キャリヤーが、２種類の異なるラクトースキャリヤーのブレンドからなる、態様６に記載の組成物。
［態様８］ 第１キャリヤーが約３０〜１００ミクロンの範囲の直径を有する粒子からなり、第２キャリヤーが１０ミクロン未満の直径を有する粒子からなる、態様６または７に記載の組成物。
［態様９］ ２種類の異なるキャリヤーの比が３：９７から９７：３までの範囲である、態様８に記載の組成物。
［態様１０］ 粉末中のキャリヤーに対する薬物の割合が０．５％から２％（ｗ／ｗ）までである、態様１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１１］ 粉末中のキャリヤーに対する薬物の割合が１％（ｗ／ｗ）である、態様１０に記載の組成物。
［態様１２］ 薬物の量が、組成物の総重量を基準として０．５％から２０％（ｗ／ｗ）までである、態様１〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１３］ 薬物の量が約１％から２％（ｗ／ｗ）までである、態様１２に記載の組成物。
［態様１４］ １種類以上の任意選択的な賦形剤が存在し、リン脂質および脂肪酸金属塩から選択される、態様１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１５］ リン脂質が、ジパルミチルホスファチジルコリンおよびレシチンから選択される、態様１４に記載の組成物。
［態様１６］ 脂肪酸金属塩がステアリン酸マグネシウムである、態様１４に記載の組成物。
［態様１７］ 任意選択的な賦形剤または賦形剤類が、大型キャリヤー粒子に対する賦形剤の重量割合０．０１％から０．５％までの範囲でキャリヤー粒子上にコートされている、態様１４〜１６のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１８］ 薬物の量が、ｍＴＯＲＣ１の生物活性を阻害するのに有効な量である、態様１〜１７のいずれか１項に記載の組成物。
［態様１９］ 薬物の量が、Ｓ６タンパク質のリン酸化を阻害するのに有効な量である、態様１８に記載の組成物。
［態様２０］ 薬物の量が、肺に送達される呼吸可能用量５マイクログラムから４００マイクログラムを達成するのに有効な量である、態様１〜１９のいずれか１項に記載の組成物。
［態様２１］ 呼吸可能用量が約１０、約５０、約１００または約２５０マイクログラムである、態様２０に記載の組成物。
［態様２２］ 薬物の量が、対象において５ｎｇ／ｍｌ未満、２ｎｇ／ｍｌ未満、１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満の血中トラフレベルを生じるのに有効な量である、態様１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
［態様２３］ 血中トラフレベルが、１ｎｇ／ｍｌ未満、０．５ｎｇ／ｍｌ未満、または０．２５ｎｇ／ｍｌ未満である、態様２２に記載の組成物。
［態様２４］ 薬物の量が、肺組織において１ｎｇ／ｇから１ｕｇ／ｇまでの薬物濃度を生じるのに有効な量である、態様１〜２３のいずれか１項に記載の組成物。
［態様２５］ 肺組織における薬物の濃度が、約１０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、約１００ｎｇ／ｇ、または約２００ｎｇ／ｇである、態様２４に記載の組成物。
［態様２６］ 組成物中の薬物の量が、５０ｕｇから５００ｕｇまで、５０ｕｇから２５０ｕｇまで、または５０ｕｇから１５０ｕｇまでである、態様１〜２５のいずれか１項に記載の組成物。
［態様２７］ 薬物が投与後に肺において約１ｎｇ／ｇ、約１０ｎｇ／ｇ、約２５ｎｇ／ｇ、約５０ｎｇ／ｇ、または約１００ｎｇ／ｇの療法レベルで、ある期間存続し、その期間が約６〜１０時間、約６〜１４時間、約６〜２４時間、および約６〜７２時間から選択される、態様１〜２６のいずれか１項に記載の組成物。
［態様２８］ 期間が約１０時間、約１４時間、約２４時間、および約７２時間から選択される、態様２７に記載の組成物。
［態様２９］ 薬物がラパマイシンである、態様１〜２８のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３０］ 組成物が、１〜１２か月間または１〜３６か月間の貯蔵後に、２０％を超える細粒分（ＦＰＦ）を有し、対応する細粒量（ＦＰＤ）は１０マイクログラムから２ミリグラムまでの範囲、好ましくは０．５ミリグラム未満である、態様１〜２９のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３１］ さらに１種類以上の追加療法薬を含む、態様１〜３０のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３２］ １種類以上の追加療法薬が、エストロゲンアンタゴニスト、スタチン、ｓｒｃ阻害薬、およびＶＥＧＦ−Ｒ阻害薬から選択される、態様３１に記載の組成物。
［態様３３］ １種類以上の追加療法薬が、レトロゾール、タモキシフェン、シンバスタチン、サラカチニブ、パゾパニブ、イマチニブ、およびその組合わせからなる群から選択される、態様３１に記載の組成物。
［態様３４］ 組成物が、努力肺活量（ＦＶＣ）および努力呼気量（ＦＥＶ１）により測定した対象の肺機能を改善するのに有効な量の薬物を送達する、態様１〜３３のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３５］ 組成物が、放射線検査により検出できる規模または量の胸膜滲出液を低減するのに有効な量の薬物を送達する、態様１〜３４のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３６］ 組成物を１日１回投与に適合させる、態様１〜３５のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３７］ 薬物の水性懸濁液を調製し、その薬物懸濁液にマイクロフルイダイゼーションを施し、得られた粒子を噴霧乾燥して乾燥粉末を形成する工程を含む、湿式研磨法により製造された、態様１〜３６のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３８］ 薬物がラパマイシンであり、キャリヤーが２種類の異なるラクトースキャリヤーのブレンドからなり、第１キャリヤーが約３０〜１００ミクロンの範囲の平均直径を有する粒子からなり、第２キャリヤーが１０ミクロン未満の平均直径を有する粒子からなり、２種類の異なるキャリヤーの比が約９７：３〜３：９７であり、ラパマイシンの量が２５マイクログラムから１４００マイクログラムまでである、態様１〜３７のいずれか１項に記載の組成物。
［態様３９］ 態様１〜３８のいずれか１項に記載の組成物を含み、薬物の量が約１マイクログラムから２５００マイクログラムまで、２５マイクログラムから２５０マイクログラムまで、５０マイクログラムから１５０マイクログラムまでである、リンパ脈管筋腫症を処置するための単位剤形。
［態様４０］ 薬物の量が約５０マイクログラムから２５０マイクログラムまでである、態様３９に記載の単位剤形。
［態様４１］ 剤形が、ドライパウダーインヘラーデバイスに使用するのに適したカプセルである、態様３９または４０に記載の単位剤形。
［態様４２］ カプセルが１ｍｇから１００ｍｇまでの粉末を収容している、態様３９〜４１のいずれか１項に記載の単位剤形。
［態様４３］ カプセルが１０ｍｇから４０ｍｇまでの粉末を収容している、態様４２に記載の単位剤形。
［態様４４］ カプセルが、ゼラチン、プラスチック、ポリマーまたはセルロース系のカプセルであり、あるいはホイル／ホイルまたはホイル／プラスチックブリスターの形態である、態様３９〜４３のいずれか１項に記載の単位剤形。
［態様４５］ 態様１〜３８のいずれか１項に記載の組成物、または態様３９〜４４のいずれか１項に記載の単位剤形、および使用のための指示を含む、医薬パッケージまたはキット。
［態様４６］ 態様１〜３８のいずれか１項に記載の組成物、または態様３９〜４４のいずれか１項に記載の単位剤形を収容したリザーバーを含む、乾燥粉末送達デバイス。
［態様４７］ リザーバーが、デバイス内の一体チャンバー、カプセルまたはブリスターである、態様４６に記載の乾燥粉末送達デバイス。
［態様４８］ デバイスが、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ０１ Ｍｏｄｅｌ ７、Ｐｌａｓｔｉａｐｅ（登録商標） ＲＳ００ Ｍｏｄｅｌ ８、ＸＣａｐｓ（登録商標）、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）、Ｆｌｏｗｃａｐｓ（登録商標）、ＴｗｉｎＣａｐｓ（登録商標）、およびＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）から選択される、態様４６または４７に記載の乾燥粉末送達デバイス。
［態様４９］ そのような処置を必要とするヒト対象においてリンパ脈管筋腫症を処置するための方法であって、対象に態様１〜３８のいずれか１項に記載の組成物または態様３９〜４４のいずれか１項に記載の単位剤形を吸入により投与することを含む方法。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】