特許 6800968 セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用のモジュレーターおよびその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6800968

(24)【登録日】2020年11月27日

(45)【発行日】2020年12月16日

(54)【発明の名称】セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用のモジュレーターおよびその使用

(51)【国際特許分類】

   C07C 229/08 20060101AFI20201207BHJP

   A61K 31/198 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 25/08 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20201207BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20201207BHJP

   A61K 31/275 20060101ALI20201207BHJP

   C07C 229/20 20060101ALI20201207BHJP

【ＦＩ】

   C07C229/08CSP

   A61K31/198

   A61P3/10

   A61P25/08

   A61P25/00

   A61P37/02

   A61P21/00

   A61P35/00

   A61P43/00 105

   A61P43/00 111

   A61K31/275

   C07C229/20

【請求項の数】8

【全頁数】164

(21)【出願番号】特願2018-521294(P2018-521294)

(86)(22)【出願日】2016年10月21日

(65)【公表番号】特表2018-538248(P2018-538248A)

(43)【公表日】2018年12月27日

(86)【国際出願番号】US2016058188

(87)【国際公開番号】WO2017070518

(87)【国際公開日】20170427

【審査請求日】2019年10月18日

(31)【優先権主張番号】62/245,553

(32)【優先日】2015年10月23日

(33)【優先権主張国】US

(31)【優先権主張番号】62/336,219

(32)【優先日】2016年5月13日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】518138022

【氏名又は名称】ナビター ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】フェタルベロ， クリスティナ ミッチェル

(72)【発明者】

【氏名】ナラヤン， シュリダール

(72)【発明者】

【氏名】オニール， デイビッド ジョン

(72)【発明者】

【氏名】サイア， エディン

(72)【発明者】

【氏名】セングプタ， ショミット

【審査官】 前田 憲彦

(56)【参考文献】

【文献】 特表２００８−５３０１９８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第９９／０５５６８８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 米国特許出願公開第２００４／０１１０９８２（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特表２０１３−５４３８５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００３−５２１８９９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１０−５３６９２５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００９−５２７４６４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１２−５３０１１５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 Cell Reports，２０１４年，9，p.1-8

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｃ ２２９／００

Ａ６１Ｋ ３１／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉの化合物：

【化130】

または薬学的に許容されるその塩であって、
Ｒ^１は、Ｈであり、
Ｒ^２は、Ｈであり、
Ｒ^３は、−Ｃ（Ｏ）ＯＨであり、
Ｌは、

【化136】

であり、
Ｒ^４は、−ＣＦ_３、−ＣＨ_２Ｆまたは−ＣＨＦ_２であり、
Ｒ^５は、Ｈである、式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩。

【請求項2】

【化137】

から選択される、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。

【請求項3】

【化138】

から選択される、請求項１に記載の化合物または薬学的に許容されるその塩。

【請求項4】

【化139】

のうちのいずれか１つから選択される化合物または薬学的に許容されるその塩。

【請求項5】

請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物、および薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含む、薬学的に許容される組成物。

【請求項6】

追加の治療剤と組み合わせた、請求項５に記載の組成物。

【請求項7】

うつ病を処置することを必要とする患者において、うつ病を処置するための組成物であって、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物もしくは薬学的に許容されるその塩、または請求項５もしくは６に記載の組成物を含む、組成物。

【請求項8】

うつ病を処置することを必要とする患者において、うつ病を処置するための組成物であって、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物もしくは薬学的に許容されるその塩、または請求項５もしくは６に記載の組成物を含み、前記組成物が前記患者に投与されることを特徴とする、組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

発明の技術分野
本発明は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートし、これにより間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートするために有用な化合物および方法に関する。本発明はまた、本発明の化合物を含む薬学的に許容される組成物および様々な障害の処置において前記組成物を使用する方法も提供する。

【背景技術】

【0002】

発明の背景
ラパマイシン複合体１（ｍＴＯＲＣ１）タンパク質キナーゼの機構的標的は、増殖因子、細胞ストレス、ならびに栄養素およびエネルギーレベルなどの、多様な環境的合図を感じるマスター成長調節因子である。ｍＴＯＲＣ１は、活性化されると、ｍＲＮＡ翻訳および脂質合成などの同化作用を賦活する基質をリン酸化し、オートファジーなどの異化作用を制限する。ｍＴＯＲＣ１の調節異常は、とりわけ、糖尿病、てんかん、神経変性、免疫応答、骨格筋成長の抑制およびがんを含めた、幅広い範囲の疾患において発生する（Howellら、（２０１３年）Biochemical Society transactions ４１巻、９０６〜９１２頁；Kimら、（２０１３年） Molecules and cells ３５巻、４６３〜４７３頁；LaplanteおよびSabatini、（２０１２年） Cell １４９巻、２７４〜２９３頁）。

【0003】

増殖因子およびエネルギーレベルを含めた多数の上流での入力により、ＴＳＣ複合体を介して、ｍＴＯＲＣ１にシグナルが伝達され、このＴＳＣ複合体は、ｍＴＯＲＣ１の必須のアクチベータである小さなＧＴＰアーゼである、Ｒｈｅｂを調節する（Brugarolasら、（２００４年）Genes &amp；Development １８巻、２８９３〜２９０４頁；Garamiら、（２００３年）Molecular Cell １１巻、１４５７〜１４６６頁；Inokiら、（２００３年）Genes &amp；Development １７巻、１８２９〜１８３４頁；Longら、（２００５年）Current Biology １５巻、７０２〜７１３頁；Sancakら、（２００８年）Science(New York、NY) ３２０巻、１４９６〜１５０１頁；Saucedoら、（２００３年）Nature cell biology ５巻、５６６〜５７１頁；Stockerら、（２００３年）Nature cell biology ５巻、５５９〜５６５頁；Teeら、（２００２年）Proc Natl Acad Sci USA ９９巻、１３５７１〜１３５７６頁）。アミノ酸は、ＴＳＣ−Ｒｈｅｂ軸を介してｍＴＯＲＣ１にシグナル伝達しないように思われ、その代わりに、それぞれ、ＲａｇＣまたはＲａｇＤに結合しているＲａｇＡまたはＲａｇＢからなるヘテロ二量体Ｒａｇ ＧＴＰアーゼを介して作用する（Hiroseら、（１９９８年） Journal of cell science １１１巻（第１部）、１１〜２１頁；Kimら、（２００８年） Nature cell biology １０巻、９３５〜９４５頁；Nobukuniら、（２００５年） Proc Natl Acad Sci USA １０２巻、１４２３８〜１４２４３頁；Roccioら、（２００５年） Oncogene ２５巻、６５７〜６６４頁；Sancakら、（２００８年） Science（New York、NY）３２０巻、１４９６〜１５０１頁；Schuermannら、（１９９５年） The Journal of biological chemistry ２７０巻、２８９８２〜２８９８８頁；Sekiguchiら、（２００１年） The Journal of biological chemistry ２７６巻、７２４６〜７２５７頁；Smithら、（２００５年） The Journal of biological chemistry ２８０巻、１８７１７〜１８７２７頁）。Ｒａｇ ＧＴＰアーゼは、ｍＴＯＲＣ１の細胞内局在化を制御しており、アミノ酸は、Ｒｈｅｂ ＧＴＰアーゼがやはり生存しているリソソーム表面にｍＴＯＲＣ１の動員を促進する（Buergerら、（２００６年） Biochemical and Biophysical Research Communications ３４４巻、８６９〜８８０頁；Dibbleら、（２０１２年） Molecular cell ４７巻、５３５〜５４６頁；Saitoら、（２００５年） Journal of Biochemistry １３７巻、４２３〜４３０頁；Sancakら、（２００８年） Science（New York、NY）３２０巻、１４９６〜１５０１頁）。Ｒａｇ ＧＴＰアーゼの上流経路のいくつかの正の構成成分が特定されている。Ｒａｇｕｌａｔｏｒ複合体は、Ｒａｇ ＧＴＰアーゼをリソソーム表面に局在化させて、液胞型ＡＴＰアーゼと一緒になって、ＲａｇＡ／Ｂ上でのＧＤＰのＧＴＰへの交換を促進する（Bar-Peledら、（２０１２年） Cell １５０巻、１１９６〜１２０８頁；Sancakら、（２０１０年） Cell １４１巻、２９０〜３０３頁；Zoncuら、（２０１１年）Science Signaling ３３４巻、６７８〜６８３頁）。別個のＦＬＣＮ−ＦＮＩＰ複合体が、ＲａｇＣ／Ｄ上で作用し、ＧＴＰのＧＤＰへの加水分解を刺激する（Tsunら、２０１３年）。ＲａｇＡ／ＢがＧＴＰにロードされ、ＲａｇＣ／ＤがＧＤＰにロードされると、それらのヘテロ二量体が結合して、そのアクチベータであるＲｈｅｂ ＧＴＰアーゼに接触することができるようになる、リソソーム表面にｍＴＯＲＣ１を動員する。

【0004】

最近の研究により、アミノ酸のセンシング経路の主要な負の調節因子として、ＧＡＴＯＲ１多タンパク質複合体が特定され、その喪失により、ｍＴＯＲＣ１シグナル伝達がアミノ酸飢餓に対して完全に無応答となることを引き起こす（Bar-Peledら、（２０１３年）Science ３４０巻、１１００〜１１０６頁；Panchaudら、（２０１３年）Science Signaling ６巻、ｒａ４２）。ＧＡＴＯＲ１は、ＤＥＰＤＣ５、Ｎｐｒｌ２およびＮｐｒｌ３からなり、ＲａｇＡ／Ｂに対するタンパク質（ＧＡＰ）を活性化するＧＴＰアーゼである。ＧＡＴＯＲ２多タンパク質複合体は、５種の公知のサブユニット（ＷＤＲ２４、ＷＤＲ５９、Ｍｉｏｓ、Ｓｅｃ１３およびＳｅｈ１Ｌ）を有しており、ＧＡＴＯＲ１の経路およびその上流の、またはＧＡＴＯＲ１に並行する正の構成成分であるが、その分子機能は、最近まで未知であった（Bar-Peledら、（２０１３年）Science ３４０巻、１１００〜１１０６頁）。

【0005】

最近、１つまたは複数のセストリンにＧＡＴＯＲ２が結合していることが特定されたことによって、ｍＴＯＲＣ１経路に関する追加的な情報が明らかにされ、生じたセストリン−ＧＡＴＯＲ２複合体が、ｍＴＯＲＣ１の細胞内局在化および活性を調節することが実証された。特に、セストリン−ＧＡＴＯＲ２複合体が存在すると、ｍＴＯＲＣ１経路が阻害され、ｍＴＯＲＣ１のリソソーム膜への転座が阻止されることにより、ｍＴＯＲＣ１活性が低下する。ＧＡＴＯＲ２とセストリン、特にセストリン１およびセストリン２との相互作用は、アミノ酸、特にロイシンにより拮抗され、それほど高い程度ではないが、イソロイシン、メチオニンおよびバリンにより拮抗される。ロイシンの存在下では、ＧＡＴＯＲ２は、セストリン１またはセストリン２と相互作用をすることはなく、ｍＴＯＲＣ１は、ｍＴＯＲＣ１が活性な状態となるリソソーム膜に移動することができる。セストリン１およびセストリン２は、ロイシンに直接結合し、それほど高い程度ではないが、イソロイシンおよびメチオニンに直接結合する（Chantranupongら、（２０１４年） Cell Rep.；９巻（１号）：１〜８頁）。セストリン１または２によるロイシンの結合は、ＧＡＴＯＲ２との相互作用、およびその後のｍＴＯＲＣ１の活性化の撹乱に必要とされる。ロイシンに結合することができないセストリン２変異体は、ロイシンの存在をｍＴＯＲＣ１にシグナル伝達することができず、セストリン２およびそのホモログが欠損している細胞は、ｍＴＯＲＣ１をロイシンの非存在に対して無応答にする（Wolfsonら、（２０１５年） Science pii：ａｂ２６７４［印刷前のＥｐｕｂ］）。

【0006】

セストリンは、十分に特徴付けられていない分子機能の３種の関連タンパク質（セストリン１、２および３）である（Buckbinderら、（１９９４年）Proc Natl Acad Sci USA ９１巻、１０６４０〜１０６４４頁；Budanovら、（２００２年）Cell １３４巻、４５１〜４６０頁；Peetersら、（２００３年） Human genetics １１２巻、５７３〜５８０頁）。セストリン２は、ｍＴＯＲＣ１のシグナル伝達を阻害し、ＴＳＣの上流のＡＭＰＫを活性化して、ＴＳＣと相互作用する（BudanovおよびKarin、（２００８年） Cell １３４巻、４５１〜４６０頁）ことが提唱されているが、後の研究により、ＡＭＰＫの非存在下で、セストリン２によりｍＴＯＲＣ１が阻害されることが見出され（Pengら、（２０１４年） Cell １５９巻（１号）：１２２〜３３頁）、このことは、ＧＡＴＯＲ２複合体が、セストリン２に応答して、ｍＴＯＲＣ１をモジュレートする際に果たす重要な役割をさらに強調するものである。
セストリン−ＧＡＴＯＲ２複合体のモジュレートは、間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートするための潜在的な治療標的となる。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0007】

【非特許文献1】Howellら、（２０１３年）Biochemical Society transactions ４１巻、９０６〜９１２頁

【非特許文献2】Kimら、（２０１３年） Molecules and cells ３５巻、４６３〜４７３頁

【非特許文献3】LaplanteおよびSabatini、（２０１２年） Cell １４９巻、２７４〜２９３頁

【非特許文献4】Brugarolasら、（２００４年）Genes &amp；Development １８巻、２８９３〜２９０４頁

【非特許文献5】Garamiら、（２００３年）Molecular Cell １１巻、１４５７〜１４６６頁

【非特許文献6】Inokiら、（２００３年）Genes &amp；Development １７巻、１８２９〜１８３４頁

【非特許文献7】Longら、（２００５年）Current Biology １５巻、７０２〜７１３頁

【非特許文献8】Sancakら、（２００８年）Science(New York、NY) ３２０巻、１４９６〜１５０１頁

【非特許文献9】Saucedoら、（２００３年）Nature cell biology ５巻、５６６〜５７１頁

【非特許文献10】Stockerら、（２００３年）Nature cell biology ５巻、５５９〜５６５頁

【非特許文献11】Teeら、（２００２年）Proc Natl Acad Sci USA ９９巻、１３５７１〜１３５７６頁

【非特許文献12】Hiroseら、（１９９８年） Journal of cell science １１１巻（第１部）、１１〜２１頁

【非特許文献13】Kimら、（２００８年） Nature cell biology １０巻、９３５〜９４５頁

【非特許文献14】Nobukuniら、（２００５年） Proc Natl Acad Sci USA １０２巻、１４２３８〜１４２４３頁

【非特許文献15】Roccioら、（２００５年） Oncogene ２５巻、６５７〜６６４頁

【非特許文献16】Sancakら、（２００８年） Science（New York、NY）３２０巻、１４９６〜１５０１頁

【非特許文献17】Schuermannら、（１９９５年） The Journal of biological chemistry ２７０巻、２８９８２〜２８９８８頁

【非特許文献18】Sekiguchiら、（２００１年） The Journal of biological chemistry ２７６巻、７２４６〜７２５７頁

【非特許文献19】Smithら、（２００５年） The Journal of biological chemistry ２８０巻、１８７１７〜１８７２７頁

【非特許文献20】Buergerら、（２００６年） Biochemical and Biophysical Research Communications ３４４巻、８６９〜８８０頁

【非特許文献21】Dibbleら、（２０１２年） Molecular cell ４７巻、５３５〜５４６頁

【非特許文献22】Saitoら、（２００５年） Journal of Biochemistry １３７巻、４２３〜４３０頁

【非特許文献23】Sancakら、（２００８年） Science（New York、NY）３２０巻、１４９６〜１５０１頁

【非特許文献24】Bar-Peledら、（２０１２年） Cell １５０巻、１１９６〜１２０８頁

【非特許文献25】Sancakら、（２０１０年） Cell １４１巻、２９０〜３０３頁

【非特許文献26】Zoncuら、（２０１１年）Science Signaling ３３４巻、６７８〜６８３頁

【非特許文献27】Bar-Peledら、（２０１３年）Science ３４０巻、１１００〜１１０６頁

【非特許文献28】Panchaudら、（２０１３年）Science Signaling ６巻、ｒａ４２

【非特許文献29】Chantranupongら、（２０１４年） Cell Rep.；９巻（１号）：１〜８頁

【非特許文献30】Wolfsonら、（２０１５年） Science pii：ａｂ２６７４［印刷前のＥｐｕｂ］

【非特許文献31】Buckbinderら、（１９９４年）Proc Natl Acad Sci USA ９１巻、１０６４０〜１０６４４頁

【非特許文献32】Budanovら、（２００２年）Cell １３４巻、４５１〜４６０頁

【非特許文献33】Peetersら、（２００３年） Human genetics １１２巻、５７３〜５８０頁

【非特許文献34】BudanovおよびKarin、（２００８年） Cell １３４巻、４５１〜４６０頁

【非特許文献35】Pengら、（２０１４年） Cell １５９巻（１号）：１２２〜３３頁

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0008】

発明の要旨
本発明の化合物および薬学的に許容されるその組成物は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２モジュレーターとして有効であることが今や見出された。このような化合物は、一般式Ｉ：

【化1】

または薬学的に許容されるその塩を有しており、可変基はそれぞれ、本明細書に定義および記載されている通りである。

【0009】

本発明の化合物および薬学的に許容されるその組成物は、ｍＴＯＲＣ１に関連する、様々な疾患、障害または状態の処置に有用である。このような疾患、障害または状態には、本明細書に記載されているものなどの、糖尿病、てんかん、神経変性、免疫応答、骨格筋成長の抑制および細胞増殖性障害（例えば、がん）が含まれる。
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
式Ｉの化合物：

【化130】

または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｒ^１は、ＨまたはＣ_１〜６アルキルであり、
Ｒ^２は、Ｒ、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ_２Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２であり、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒはそれぞれ独立して、水素、−ＣＮ、あるいは飽和もしくは不飽和Ｃ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｒ^３は、環Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）環Ａ、−ＯＲまたは−Ｂ（ＯＲ）_２であり、この場合、同一ホウ素上の２つのＯＲ基はそれらの介在原子と一緒になって、前記ホウ素および２個の酸素に加えて、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜３個のヘテロ原子を有する、５〜８員の飽和もしくは部分不飽和の単環式環を形成するか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成し、
Ｌは、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖であり、
環Ａは、フェニル、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員のヘテロアリール環から選択される、任意選択で置換されている環であり、
Ｒ^４は、Ｒ、−ＣＦ_３、−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓｉ（Ｒ）_３もしくは−ＳＲであるか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成し、
Ｒ^５は、ＨまたはＣ_１〜４アルキルである）であって、
前記式Ｉの化合物は、表２に図示されているもの以外である、式Ｉの化合物。
（項目２）
Ｒ^１がＨである、項目１に記載の化合物。
（項目３）
Ｒ^１がＣ_１〜６アルキルである、項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｒ^２が、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニルである、項目１に記載の化合物。
（項目５）
Ｒ^２が、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ_２Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２である、項目１に記載の化合物。
（項目６）
Ｒ^２が、メチル、−（ＣＨ_２）−フェニルまたは−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３である、項目１に記載の化合物。
（項目７）
Ｒ^３が、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）環Ａ、−ＯＲまたは−Ｂ（ＯＲ）_２である、項目１から６のいずれかに記載の化合物。
（項目８）
前記化合物が、式ＩＩ：

【化131】

の化合物または薬学的に許容されるその塩である、項目１から６のいずれかに記載の化合物。
（項目９）
環Ａが、任意選択で置換されているフェニルである、項目８に記載の化合物。
（項目１０）
環Ａが、窒素、酸素または硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５員のヘテロアリール環である、項目８に記載の化合物。
（項目１１）
環Ａが、１〜２個の窒素原子を有する、任意選択で置換されている６員のヘテロアリール環である、項目８に記載の化合物。
（項目１２）
環Ａが、イミダゾリル、イソオキサゾリル、１Ｈ−ピロリル、ピラゾリル、オキサゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、ピリジルまたはピリミジニルから選択される、任意選択で置換されている環である、項目８に記載の化合物。
（項目１３）
Ｌが共有結合である、項目１から１２のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１４）
Ｌが、１〜４つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖または分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である、項目１から１２のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１５）
Ｌが、メチレン、ｎ−ブチレニル、エチレニルまたはｎ−プロピレニルである、項目１４に記載の化合物。
（項目１６）
Ｒ^４が、−ＣＦ_３、−ＯＲまたは−ＳＲである、項目１から１５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１７）
Ｒ^４が、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、シクロプロピル、シクロブチル、ｓｅｃ−ブチル、メトキシルまたはメチルチオイルである、項目１６に記載の化合物。
（項目１８）
Ｒ^５がＨである、項目１から１７のいずれか一項に記載の化合物。
（項目１９）
Ｒ^５がメチルである、項目１から１７のいずれか一項に記載の化合物。
（項目２０）
式ＩＩＩの化合物：

【化132】

または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｑが、−Ｃ（Ｒ’）_２−または−ＮＨ−であり、
Ｒ^ｘおよびＲ^ｙはそれぞれ、水素であるか、またはＲ^ｘとＲ^ｙは一緒になって、＝Ｏを形成し、

【化133】

は、二重結合または単結合であり、
Ｒはそれぞれ独立して、水素、−ＣＮ、あるいはＣ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｒ’はそれぞれ独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、あるいはＣ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｌは、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖であり、
Ｒ^４’は、Ｒ、−ＣＦ_３、−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓｉ（Ｒ）_３または−ＳＲであり、Ｒ^５’は、Ｈ、−ＯＲまたはＣ_１〜４アルキルである）。
（項目２１）
Ｑが、−ＮＨ−、−ＣＨ_２−または−ＣＨＦ−である、項目２０に記載の化合物。
（項目２２）
Ｒ^ｘおよびＲ^ｙがそれぞれ、水素であるか、またはＲ^ｘとＲ^ｙが一緒になって、＝Ｏを形成する、項目２０に記載の化合物。
（項目２３）
Ｒ^５’が、Ｈまたは−ＯＨである、項目２０から２２のいずれか一項に記載の化合物。
（項目２４）

【化134】

が単結合であるか、または

【化135】

が二重結合である、項目２０から２３のいずれか一項に記載の化合物。
（項目２５）
Ｌが、−ＣＨ_２−である、項目２０から２４のいずれか一項に記載の化合物。
（項目２６）
項目１から２５のいずれか一項に記載の化合物、および薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含む、薬学的に許容される組成物。
（項目２７）
追加の治療剤と組み合わせた、項目２６に記載の組成物。
（項目２８）
前記追加の治療剤が、抗増殖性化合物である、項目２７に記載の組成物。
（項目２９）
セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートして、これにより生物試料中で間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートする方法であって、前記生物試料を項目１から２５のいずれか一項に記載の化合物に接触させるステップを含む方法。
（項目３０）
セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートして、これにより患者において、間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートする方法であって、前記患者に項目２６に記載の組成物を投与するステップを含む方法。
（項目３１）
ｍＴＯＲＣ１によって媒介される障害を処置することを必要とする患者において、ｍＴＯＲＣ１によって媒介される障害を処置する方法であって、前記患者に項目２６に記載の組成物を投与するステップを含む方法。

【発明を実施するための形態】

【0010】

ある特定の実施形態の詳細な説明
１．本発明のある特定の実施形態の一般的な説明：
本発明の化合物およびその組成物は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２モジュレーターとして有用である。ある特定の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物：

【化2】

または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｒ^１は、ＨまたはＣ_１〜６アルキルであり、
Ｒ^２は、Ｒ、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ_２Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２であり、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒはそれぞれ独立して、水素、−ＣＮ、あるいは飽和もしくは不飽和Ｃ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｒ^３は、環Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）環Ａ、−ＯＲまたは−Ｂ（ＯＲ）_２であり、この場合、同一ホウ素上の２つのＯＲ基はそれらの介在原子と一緒になって、ホウ素および２個の酸素に加えて、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜３個のヘテロ原子を有する、５〜８員の飽和もしくは部分不飽和の単環式環を形成するか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成し、
Ｌは、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖であり、
環Ａは、フェニル、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員のヘテロアリール環から選択される、任意選択で置換されている環であり、
Ｒ^４は、Ｒ、−ＣＦ_３、−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓｉ（Ｒ）_３もしくは−ＳＲであるか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成し、
Ｒ^５は、ＨまたはＣ_１〜４アルキルである）
を提供する。
２．化合物および定義：

【0011】

本発明の化合物は、本明細書において一般に記載されているものを含み、本明細書において開示されているクラス、部分クラスおよび種によってさらに例示される。本明細書で使用する場合、特に示さない限り、以下の定義を適用するものとする。本発明の目的のため、化学元素は、ＣＡＳ版のHandbook of Chemistry and Physics、第７５版、元素周期表に従って特定される。さらに有機化学の一般原理は、「Organic Chemistry」、Thomas Sorrell、University Science Books、Sausalito：１９９９年、および「March's Advanced Organic Chemistry」、第５版、編：Smith, M.B.および March, J.、John Wiley & Sons、New York：２００１年に記載されており、それらの全内容が参照により本明細書に組み込まれている。

【0012】

用語「脂肪族」または「脂肪族基」は、本明細書で使用する場合、直鎖（すなわち、非分枝状）もしくは分枝状の、完全に飽和されているかまたは１つもしくは複数の不飽和単位を含有する置換または非置換の炭化水素鎖、あるいは完全に飽和されているかまたは１つもしくは複数の不飽和単位を含有するが芳香族ではない単環式炭化水素または二環式炭化水素（本明細書において、「炭素環」、「脂環式」または「シクロアルキル」とも称される）を意味し、これらは分子の残りに単一の結合点を有する。別段の指定がない限り、脂肪族基は、１〜６個の脂肪族炭素原子を含有する。一部の実施形態では、脂肪族基は、１〜５個の脂肪族炭素原子を含有する。他の実施形態では、脂肪族基は、１〜４個の脂肪族炭素原子を含有する。さらに他の実施形態では、脂肪族基は、１〜３個の脂肪族炭素原子を含有しており、さらに他の実施形態では、脂肪族基は、１〜２個の脂肪族炭素原子を含有する。一部の実施形態では、「脂環式」（または「炭素環」または「シクロアルキル」）とは、完全に飽和しているか、または１つもしくは複数の不飽和単位を含有するが、芳香族ではない単環式Ｃ_３〜Ｃ_６炭化水素であって、分子の残りに単一結合点を有する、単環式Ｃ_３〜Ｃ_６炭化水素を指す。好適な脂肪族基には、以下に限定されないが、線状または分枝状の、置換または非置換の、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、およびそれらの混成体（（シクロアルキル）アルキル、（シクロアルケニル）アルキルまたは（シクロアルキル）アルケニルなど）が含まれる。

【0013】

用語「ヘテロ原子」は、酸素、硫黄、窒素、リンまたはケイ素（窒素、硫黄、リンまたはケイ素の任意の酸化形態を含む）のうちの１個または複数；任意の塩基性窒素の四級化形態または；複素環式環の置換可能な窒素、例えば、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルにおけるような）、ＮＨ（ピロリジニルにおけるような）またはＮＲ^＋（Ｎ置換ピロリジニルにおけるような）を意味する。

【0014】

用語「不飽和の」は、本明細書で使用する場合、１つまたは複数の不飽和単位を有する部分を意味する。

【0015】

本明細書で使用する場合、用語「飽和または不飽和の直鎖または分枝状の二価Ｃ_１〜８（またはＣ_１〜６）炭化水素鎖」とは、本明細書において定義されている直鎖または分枝状の、二価のアルキレン鎖、アルケニレン鎖およびアルキニレン鎖を指す。

【0016】

用語「アルキレン」は、二価のアルキル基を指す。「アルキレン鎖」は、ポリメチレン基、すなわち−（ＣＨ_２）_ｎ−であり、ｎは、正の整数、好ましくは１〜６、１〜４、１〜３、１〜２または２〜３である。置換アルキレン鎖は、１個または複数のメチレン水素原子が置換基により置きかえられているポリメチレン基である。好適な置換基は、置換脂肪族基に関して以下に記載されているものを含む。

【0017】

用語「アルケニレン」とは、二価のアルケニル基を指す。置換アルケニレン鎖は、１個または複数の水素原子が置換基により置きかえられている、少なくとも１つの二重結合を含有するポリメチレン基である。好適な置換基は、置換脂肪族基に関して以下に記載されているものを含む。

【0018】

用語「ハロゲン」は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを意味する。

【0019】

単独で、または「アラルキル」、「アラルコキシ」もしくは「アリールオキシアルキル」にあるようなより大きな部分の一部として使用される用語「アリール」は、合計で５〜１４の環員を有する単環式または二環式環系であって、該系中の少なくとも１つの環が芳香族であり、該系中の各環が３〜７つの環員を含有する、単環式または二環式環系を指す。用語「アリール」は、用語「アリール環」と互換的に使用することができる。本発明のある特定の実施形態では、「アリール」とは、以下に限定されないが、１つまたは複数の置換基を有していてもよい、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラシルなどを含む、芳香族環系を指す。同様に、本明細書において使用されている用語「アリール」の範囲内には、芳香族環が、インダニル、フタルイミジル、ナフトイミジル、フェナントリジニルまたはテトラヒドロナフチルなどの１つまたは複数の非芳香族環に縮合している基も含まれる。

【0020】

単独で、またはより大きな部分、例えば「ヘテロアラルキル」もしくは「ヘテロアラルコキシ（heteroaralkoxy）」の一部として使用される用語「ヘテロアリール」および「ヘテロアル（heteroar）−」は、５〜１０個の環原子、好ましくは５個、６個または９個の環原子を有しており、環式配列中で共有される６個、１０個または１４個のπ電子を有しており、かつ炭素原子に加えて、１〜５個のヘテロ原子を有する基を指す。用語「ヘテロ原子」とは、窒素、酸素または硫黄を指し、窒素または硫黄の任意の酸化形態、および塩基性窒素の任意の四級化形態を含む。ヘテロアリール基には、非限定的に、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニルおよびプテリジニルが含まれる。用語「ヘテロアリール」および「ヘテロアル−」はまた、本明細書で使用する場合、複素芳香族環が１つまたは複数のアリール、脂環式環またはヘテロシクリル環に縮合している基であって、ラジカルまたは結合点が、複素芳香族環上にある基も含む。非限定例には、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ−キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、およびピリド［２，３−ｂ］−１，４−オキサジン−３（４Ｈ）−オンが含まれる。ヘテロアリール基は、単環式または二環式とすることができる。用語「ヘテロアリール」は、用語「ヘテロアリール環」、「ヘテロアリール基」または「複素芳香族」と互換的に使用することができ、これらのいずれも、任意選択で置換されている環を含む。用語「ヘテロアラルキル」とは、ヘテロアリールによって置換されているアルキル基を指し、この場合、アルキル部分およびヘテロアリール部分は、独立して、任意選択で置換されている。

【0021】

本明細書で使用する場合、用語「複素環」、「ヘテロシクリル」、「複素環式ラジカル」および「複素環式環」は、互換的に使用され、安定な５〜７員の単環式複素環部分または７〜１０員の二環式複素環式部分であって、炭素原子に加えて、１個または複数の、好ましくは上で定義されている１〜４個のヘテロ原子を有する、飽和または部分不飽和のどちらかである、複素環式部分を指す。複素環の環原子を参照して使用する場合、用語「窒素」は、置換されている窒素を含む。一例として、酸素、硫黄または窒素から選択される０〜３個のヘテロ原子を有する、飽和または部分不飽和の環では、窒素とは、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルにおけるような）、ＮＨ（ピロリジニルにおけるような）または^＋ＮＲ（Ｎ置換ピロリジニルにおけるような）であってもよい。

【0022】

複素環式環は、任意のヘテロ原子または炭素原子において、安定な構造をもたらすそのペンダント基に結合することができ、環原子のいずれも、任意選択で置換され得る。このような飽和または部分不飽和の複素環式ラジカルの例には、非限定的に、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル ピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニルおよびキヌクリジニルが含まれる。用語「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロシクリル環」、「複素環式基」、「複素環式部分」および「複素環式ラジカル」は、本明細書において互換的に使用され、ヘテロシクリル環が、インドリニル、３Ｈ−インドリル、クロマニル、フェナントリジニルまたはテトラヒドロキノリニルなどの、アリール、ヘテロアリールまたは脂環式環のうちの１つまたは複数に縮合している基も含む。ヘテロシクリル基は、単環式または二環式とすることができる。用語「ヘテロシクリルアルキル」は、ヘテロシクリルによって置換されているアルキル基を指し、この場合、アルキル部分およびヘテロシクリル部分は、独立して、任意選択で置換されている。

【0023】

本明細書で使用する場合、用語「部分不飽和の」とは、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む環部分を指す。用語「部分不飽和の」は、複数の不飽和部位を有する環を包含することが意図されているが、本明細書において定義されている、アリールまたはヘテロアリール部分は含まないことが意図されている。

【0024】

本明細書に記載されている通り、本発明の化合物は、「任意選択で置換されている」部分を含有していてもよい。一般に、用語「置換されている」とは、用語「任意選択で」が前に付いているか否かにかかわらず、指定部分の１個または複数の水素が好適な置換基により置きかえられていることを意味する。特に示さない限り、「任意選択で置換されている」基は、その基の置換可能な位置のそれぞれにおいて好適な置換基を有していてもよく、任意の所与の構造における１つより多くの位置が、指定されている基から選択される、１つより多くの置換基により置換されていてもよい場合、これらの置換基は、いずれの位置でも、同一であっても異なっていてもよい。本発明によって想定される置換基の組合せは、好ましくは、安定なまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものである。用語「安定な」とは、本明細書で使用する場合、本明細書において開示されている目的の１つまたは複数のため、その生成、検出、ならびに、ある特定の実施形態では、その回収、精製および使用を可能にする条件を施した場合に、実質的に改変しない化合物を指す。

【0025】

「任意選択で置換されている」基の置換可能な炭素原子上の好適な一価の置換基は、独立して、ハロゲン；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｒ°；−（ＣＨ_２）_０〜４ＯＲ°−；−Ｏ（ＣＨ_２）_０〜４Ｒ^ｏ、−Ｏ−（ＣＨ_２）_０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４ＣＨ（ＯＲ°）_２；−（ＣＨ_２）_０〜４ＳＲ°；Ｒ°により置換されていてもよい−（ＣＨ_２）_０〜４Ｐｈ；Ｒ°により置換されていてもよい−（ＣＨ_２）_０〜４Ｏ（ＣＨ_２）_０〜１Ｐｈ；Ｒ°により置換されていてもよい−ＣＨ＝ＣＨＰｈ；Ｒ°により置換されていてもよい−（ＣＨ_２）_０〜４Ｏ（ＣＨ_２）_０〜１−ピリジル；−ＮＯ_２；−ＣＮ；−Ｎ_３；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｎ（Ｒ°）_２；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）Ｒ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ°_２；−Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｓ）ＮＲ°_２；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＮＲ°_２；−Ｎ（Ｒ°）Ｎ（Ｒ°）Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｃ（Ｓ）Ｒ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｃ（Ｏ）ＳＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｃ（Ｏ）ＯＳｉＲ°_３；−（ＣＨ_２）_０〜４ＯＣ（Ｏ）Ｒ°；−ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ_２）_０〜４ＳＲ−、ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４ＳＣ（Ｏ）Ｒ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｃ（Ｏ）ＮＲ°_２；−Ｃ（Ｓ）ＮＲ°_２；−Ｃ（Ｓ）ＳＲ°；−ＳＣ（Ｓ）ＳＲ°、−（ＣＨ_２）_０〜４ＯＣ（Ｏ）ＮＲ°_２；−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°；−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ°；−Ｃ（ＮＯＲ°）Ｒ°；−（ＣＨ_２）_０〜４ＳＳＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｓ（Ｏ）_２Ｒ°；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｓ（Ｏ）_２ＯＲ°；−（ＣＨ_２）_０〜４ＯＳ（Ｏ）_２Ｒ°；−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ°_２；−（ＣＨ_２）_０〜４Ｓ（Ｏ）Ｒ°；−Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ°_２；−Ｎ（Ｒ°）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ°；−Ｎ（ＯＲ°）Ｒ°；−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ°_２；−Ｐ（Ｏ）_２Ｒ°；−Ｐ（Ｏ）Ｒ°_２；−ＯＰ（Ｏ）Ｒ°_２；−ＯＰ（Ｏ）（ＯＲ°）_２；−ＳｉＲ°_３；−（Ｃ_１〜４直鎖または分枝状アルキレン）Ｏ−Ｎ（Ｒ°）_２；または−（Ｃ_１〜４直鎖または分枝状アルキレン）Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｎ（Ｒ°）_２であり、Ｒ°はそれぞれ、以下に定義されている通り置換されていてもよく、独立して、水素、Ｃ_１〜６脂肪族、−ＣＨ_２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ_２）_０〜１Ｐｈ、−ＣＨ_２−（５〜６員のヘテロアリール環）、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環であるか、または上の定義であっても、Ｒ°の２つの独立した出現がそれらの介在原子（複数可）と一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する、３〜１２員の飽和、部分不飽和もしくはアリールの一環式または二環式環を形成し、これは、以下において定義されている通り置換されていてもよい。

【0026】

Ｒ°上の好適な一価の置換基（または、Ｒ°の２つの独立した出現がそれらの介在原子と一緒になって形成される環）は、独立してハロゲン、−（ＣＨ_２）_０〜２Ｒ^●、−（ハロＲ^●）、−（ＣＨ_２）_０〜２ＯＨ、−（ＣＨ_２）_０〜２ＯＲ^●、−（ＣＨ_２）_０〜２ＣＨ（ＯＲ^●）_２；−Ｏ（ハロＲ^●）、−ＣＮ、−Ｎ_３、−（ＣＨ_２）_０〜２Ｃ（Ｏ）Ｒ^●、−（ＣＨ_２）_０〜２Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−（ＣＨ_２）_０〜２Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、−（ＣＨ_２）_０〜２ＳＲ^●、−（ＣＨ_２）_０〜２ＳＨ、−（ＣＨ_２）_０〜２ＮＨ_２、−（ＣＨ_２）_０〜２ＮＨＲ^●、−（ＣＨ_２）_０〜２ＮＲ^●_２、−ＮＯ_２、−ＳｉＲ^●_３、−ＯＳｉＲ^●_３、−Ｃ（Ｏ）ＳＲ^●、−（Ｃ_１〜４直鎖または分枝状アルキレン）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●または−ＳＳＲ^●であり、Ｒ^●はそれぞれ、非置換であるか、または「ハロ」が前についている場合、１つまたは複数のハロゲンだけによって置換されており、およびＣ_１〜４脂肪族、−ＣＨ_２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ_２）_０〜１Ｐｈ、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環から独立して選択される。Ｒ°の飽和炭素原子上の好適な二価置換基は、＝Ｏおよび＝Ｓを含む。

【0027】

「任意選択で置換されている」基の飽和炭素原子上の好適な二価置換基は、以下：＝Ｏ、＝Ｓ、＝ＮＮＲ^＊_２、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）Ｒ^＊、＝ＮＮＨＣ（Ｏ）ＯＲ^＊、＝ＮＮＨＳ（Ｏ）_２Ｒ^＊、＝ＮＲ^＊、＝ＮＯＲ^＊、−Ｏ（Ｃ（Ｒ^＊_２））_２〜３Ｏ-または−Ｓ（Ｃ（Ｒ^＊_２））_２〜３Ｓ−を含み、Ｒ^＊のそれぞれ独立した出現は、水素、以下に定義されている通り置換されていてもよいＣ_１〜６脂肪族、あるいは窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環から選択される。「任意選択で置換されている」基の置換可能なビシナル炭素に結合している好適な二価置換基には、以下：−Ｏ（ＣＲ^＊_２）_２〜３Ｏ−が含まれ、Ｒ^＊のそれぞれ独立した出現は、水素、以下に定義されている通り置換されていてもよいＣ_１〜６脂肪族、あるいは窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する非置換の５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環から選択される。

【0028】

Ｒ^＊の脂肪族基上の好適な置換基には、ハロゲン、−Ｒ^●、−（ハロＲ^●）、−ＯＨ、−ＯＲ^●、−Ｏ（ハロＲ^●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ^●、−ＮＲ^●_２または−ＮＯ_２が含まれ、Ｒ^●はそれぞれ、非置換であるか、または「ハロ」が前に付いている場合、１つもしくは複数のハロゲンだけによって置換されており、および独立して、Ｃ_１〜４脂肪族、−ＣＨ_２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ_２）_０〜１Ｐｈ、あるいは窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環である。

【0029】

「任意選択で置換されている」基の置換可能な窒素上の好適な置換基には、−Ｒ^†、−ＮＲ^†_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^†、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^†、−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^†、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）Ｒ^†、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^†、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^†_２、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ^†_２、−Ｃ（ＮＨ）ＮＲ^†_２または−Ｎ（Ｒ^†）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^†が含まれ、Ｒ^†はそれぞれ、独立して、水素、以下に定義されている通り置換されていてもよいＣ_１〜６脂肪族、非置換−ＯＰｈ、あるいは窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する、非置換の５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環であるか、あるいは上の定義であっても、Ｒ^†の２つの独立した出現は、それらの介在原子（複数可）と一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する、非置換の３〜１２員の飽和、部分不飽和もしくはアリールの単環式環または二環式環を形成する。

【0030】

Ｒ^†の脂肪族基上の好適な置換基は、独立して、ハロゲン、−Ｒ^●、−（ハロＲ^●）、−ＯＨ、−ＯＲ^●、−Ｏ（ハロＲ^●）、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^●、−ＮＨ_２、−ＮＨＲ^●、−ＮＲ^●_２または−ＮＯ_２であり、Ｒ^●はそれぞれ、非置換であるか、または「ハロ」が前に付いている場合、１つもしくは複数のハロゲンだけによって置換されており、および独立して、Ｃ_１〜４脂肪族、−ＣＨ_２Ｐｈ、−Ｏ（ＣＨ_２）_０〜１Ｐｈ、あるいは窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の飽和環、部分不飽和環またはアリール環である。

【0031】

本明細書で使用する場合、用語「薬学的に許容される塩」とは、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などがなく、ヒトおよび下等動物の組織に接触させて使用するのに好適であり、合理的な利益／リスク比に見合う、そのような塩を指す。薬学的に許容される塩は、当技術分野において周知である。例えば、S. M. Bergeらは、参照により本明細書に組み込まれている、J. Pharmaceutical Sciences、１９７７年、６６巻、１〜１９頁に、薬学的に許容される塩を詳細に記載している。本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、好適な無機酸および有機酸ならびに無機塩基および有機塩基から誘導されるものを含む。薬学的に許容される非毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸により形成されるアミノ基の塩、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸またはマロン酸などの有機酸により形成されるアミノ基の塩であるか、あるいはイオン交換などの当技術分野において使用される他の方法を使用することによる。他の薬学的に許容される塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、二グルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが含まれる。

【0032】

適切な塩基に由来する塩には、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ^＋（Ｃ_１〜４アルキル）_４の塩を含む。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。さらなる薬学的に許容される塩には、好適な場合、非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、ならびにハロゲン化物イオン、水酸化物イオン、カルボン酸イオン、硫酸イオン、リン酸イオン、硝酸イオン、低級アルキルスルホン酸イオンおよびアリールスルホン酸イオンなどの対イオンを使用して形成されるアミン陽イオンが含まれる。

【0033】

特に明記しない限り、本明細書において図示されている構造は、該構造のすべての異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオマー異性体および幾何（または立体構造）異性体）、例えば、各不斉中心に関するＲおよびＳ立体配置、ＺおよびＥ二重結合異性体、ならびにＺおよびＥ立体構造異性体を含むことがやはり意図される。したがって、単一の立体化学異性体、ならびに本発明の化合物の鏡像異性体、ジアステレオマー異性体および幾何（または立体構造）異性体混合物が、本発明の範囲内にある。特に明記しない限り、本発明の化合物のすべての互変異性体が、本発明の範囲内にある。さらに、特に明記しない限り、本明細書において図示されている構造は、１個または複数の同位体富化原子が存在していることしか違いのない化合物も含まれることがやはり意図されている。例えば、ジュウテリウムもしくはトリチウムによる水素の置きかえ、または^１３Ｃもしくは^１４Ｃ富化炭素による炭素の置きかえを含めた、本発明の構造を有する化合物は、本発明の範囲内にある。このような化合物は、例えば、分析用手段として、生物アッセイにおけるプローブとして、または本発明による治療剤として有用である。

【0034】

本明細書で使用する場合、用語「ロイシン模倣体」は、ロイシンに比べて２５μＭにおいて、ＧＡＴＯＲ２に結合しているセストリン２の量が少なくとも約４０％低下させる化合物として定義される。ある特定の実施形態では、「ロイシン模倣体」は、ＧＡＴＯＲ２に結合しているセストリン２の量を少なくとも約１００％、少なくとも約１５０％または少なくとも約２００％低下させる。

【0035】

本明細書で使用する場合、用語「ロイシンアンタゴニスト」は、ロイシンに比べて２５μＭにおいて、ＧＡＴＯＲ２に結合しているセストリン２の量を少なくとも約４０％増加させる（ロイシン活性の−４０％として表される）化合物として定義される。ある特定の実施形態では、「ロイシンアンタゴニスト」は、ＧＡＴＯＲ２に結合しているセストリン２の量を少なくとも約１００％、少なくとも約１５０％または少なくとも約２００％増加させる。

【0036】

用語「測定可能な親和性」および「測定可能なほど阻害する」とは、本明細書で使用する場合、本発明の化合物またはその組成物、ならびにセストリン２、ＧＡＴＯＲ２およびロイシンを含む試料と、前記化合物またはその組成物の非存在下でセストリン２、ＧＡＴＯＲ２およびロイシンを含む等価な試料との間の、ＧＡＴＯＲ２に結合しているセストリン２の測定可能な変化を意味する。
３．例示的な実施形態の説明：

【0037】

ある特定の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物：

【化3】

または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｒ^１は、ＨまたはＣ_１〜６アルキルであり、
Ｒ^２は、Ｒ、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ_２Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２であり、
ｎは、０、１または２であり、
Ｒはそれぞれ独立して、水素、−ＣＮ、あるいは飽和もしくは不飽和Ｃ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｒ^３は、環Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）環Ａ、−ＯＲまたは−Ｂ（ＯＲ）_２であり、この場合、同一ホウ素上の２つのＯＲ基はそれらの介在原子と一緒になって、ホウ素および２個の酸素に加えて、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜３個のヘテロ原子を有する、５〜８員の飽和もしくは部分不飽和の単環式環を形成するか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成し、
Ｌは、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖であり、
環Ａは、フェニル、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員のヘテロアリール環から選択される、任意選択で置換されている環であり、
Ｒ^４は、Ｒ、−ＣＦ_３、−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓｉ（Ｒ）_３もしくは−ＳＲであるか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成し、
Ｒ^５は、ＨまたはＣ_１〜４アルキルである）を提供する。

【0038】

一部の実施形態では、以下の表２に図示されているそのような化合物以外の、式Ｉの化合物が提供される。

【0039】

上で一般に定義されている通り、Ｒ^１は、ＨまたはＣ_１〜６アルキルである。一部の実施形態では、Ｒ^１は、Ｈである。他の実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１〜６アルキルである。一部の実施形態では、Ｒ^１は、メチルである。一部の実施形態では、Ｒ^１は、イソブチルである。一部の実施形態では、Ｒ^１は、以下の表１に図示されているものから選択される。一部の実施形態では、Ｒ^１は、以下の表２に図示されているものから選択される。

【0040】

上で一般に定義されている通り、Ｒ^２は、Ｒ、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ_２Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２である。一部の実施形態では、Ｒ^２は、Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−ＳＯ_２Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２である。一部の実施形態では、Ｒ^２は、メチルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−（ＣＨ_２）−フェニルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３である。一部の実施形態では、Ｒ^２は、以下の表１に図示されているものから選択される。一部の実施形態では、Ｒ^２は、以下の表２に図示されているものから選択される。

【0041】

上で一般に定義されている通り、ｎは、０、１または２である。一部の実施形態では、ｎは０である。一部の実施形態では、ｎは１である。一部の実施形態では、ｎは２である。

【0042】

上で一般に定義されている通り、Ｒ^３は、環Ａ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２、−ＳＯ_３Ｈ、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓ（Ｏ）Ｒ、−Ｓ（Ｏ）環Ａ、−ＯＲまたは−Ｂ（ＯＲ）_２であり、この場合、同一ホウ素上の２つの−ＯＲ基はそれらの介在原子と一緒になって、ホウ素および２個の酸素に加えて、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜３個のヘテロ原子を有する、５〜８員の飽和もしくは部分不飽和の単環式環を形成するか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成する。

【0043】

一部の実施形態では、Ｒ^３は、−Ｃ（Ｏ）ＯＨである。一部の実施形態では、Ｒ^３は、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２である。一部の実施形態では、Ｒ^３は、−ＳＯ_３Ｈである。一部の実施形態では、Ｒ^３は、−ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２である。一部の実施形態では、Ｒ^３は、−Ｂ（ＯＲ）_２であり、この場合、同一ホウ素上の２つの−ＯＲ基はそれらの介在原子と一緒になって、ホウ素および２個の酸素に加えて、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される０〜３個のヘテロ原子を有する、５〜８員の単環式の飽和環、部分不飽和環または複素環式環を形成する。一部の実施形態では、Ｒ^３とＲ^４は一緒になって、窒素、酸素または硫黄から選択される、０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成する。

【0044】

一部の実施形態では、Ｒ^３は、環Ａである。上で一般に定義されている通り、環Ａは、フェニル、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員のヘテロアリール環から選択される、任意選択で置換されている環である。一部の実施形態では、環Ａは、任意選択で置換されているフェニルである。一部の実施形態では、環Ａは、窒素、酸素または硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５員のヘテロアリール環である。一部の実施形態では、環Ａは、イミダゾリル、イソオキサゾリル、１Ｈ−ピロリル（例えば、マレイミド）、ピラゾリル、オキサゾリル、テトラゾリル、チアゾリルおよびトリアゾリルから選択される、任意選択で置換されている５員のヘテロアリール環である。一部の実施形態では、環Ａは、１〜２個の窒素原子を有する、任意選択で置換されている６員のヘテロアリール環である。一部の実施形態では、環Ａは、ピリジルおよびピリミジニルから選択される、任意選択で置換されている６員環である。一部の実施形態では、環Ａは、以下の表１に図示されているものから選択される。

【0045】

一部の実施形態では、Ｒ^３は、（ピナコラト）ボロンである。一部の実施形態では、Ｒ^３は、以下の表１に図示されているものから選択される。一部の実施形態では、Ｒ^３は、以下の表２に図示されているものから選択される。

【0046】

上で一般に定義されている通り、Ｌは、共有結合、または１〜４つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である。一部の実施形態では、Ｌは、共有結合である。一部の実施形態では、Ｌは、１〜４つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖または分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である。一部の実施形態では、Ｌは、メチレンである。一部の実施形態では、Ｌは、ｎ−ブチレニルである。一部の実施形態では、Ｌは、エチレニルである。一部の実施形態では、Ｌは、ｎ−プロピレニルである。一部の実施形態では、Ｌは、以下の表１に図示されているものから選択される。一部の実施形態では、Ｌは、以下の表２に図示されているものから選択される。

【0047】

一部の実施形態では、Ｌは、１〜４つのフルオロ基により任意選択で置換されている分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である。ある特定の実施形態では、Ｌは、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−である。他の実施形態では、Ｌは、−Ｃ（ＣＨ_３）（ＣＦ_３）−である。

【0048】

上で一般に定義されている通り、Ｒ^４は、Ｒ、−ＣＦ_３、−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓｉ（Ｒ）_３もしくは−ＳＲであるか、またはＲ^３とＲ^４が一緒になって、窒素、酸素もしくは硫黄から選択される０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成する。一部の実施形態では、Ｒ^４は、Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、−ＣＦ_３である。一部の実施形態では、Ｒ^４は、−ＯＲである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、−Ｎ（Ｒ）_２である。一部の実施形態では、Ｒ^４は、−Ｓｉ（Ｒ）_３である。一部の実施形態では、Ｒ^４は、−ＳＲである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、イソプロピルである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、ｔｅｒｔ−ブチルである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、シクロプロピルである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、シクロブチルである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、ｓｅｃ−ブチルである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、メトキシルである。一部の実施形態では、Ｒ^４は、メチルチオイルである。一部の実施形態では、Ｒ^３とＲ^４は一緒になって、窒素、酸素または硫黄から選択される、０〜１個のヘテロ原子を有する、任意選択で置換されている５〜６員環を形成する。一部の実施形態では、Ｒ^４は、以下の表１に図示されているものから選択される。一部の実施形態では、Ｒ^４は、以下の表２に図示されているものから選択される。

【0049】

上で一般に定義されている通り、Ｒ^５は、ＨまたはＣ_１〜４アルキルである。一部の実施形態では、Ｒ^５は、Ｈである。一部の実施形態では、Ｒ^５は、Ｃ_１〜４アルキルである。一部の実施形態では、Ｒ^５は、メチルである。一部の実施形態では、Ｒ^５は、以下の表１に図示されているものから選択される。一部の実施形態では、Ｒ^５は、以下の表２に図示されているものから選択される。

【0050】

ある特定の実施形態では、本発明は、式ＩＩの化合物：

【化4】

または薬学的に許容されるその塩を提供し、各可変基は、どちらも単一でまたは組み合わせて、上で定義されている通りおよび本明細書において提示されている実施形態に記載されている通りである。

【0051】

ある特定の実施形態では、本発明は、式ＩＩＩの化合物：

【化5】

または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｑは、−Ｃ（Ｒ’）_２−または−ＮＨ−であり、
Ｒ^ｘおよびＲ^ｙはそれぞれ、水素であるか、またはＲ^ｘとＲ^ｙは一緒になって、＝Ｏを形成し、

【化6】

は、二重結合または単結合であり、
Ｒはそれぞれ独立して、水素、−ＣＮ、あるいはＣ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｒ’はそれぞれ独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、あるいはＣ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｌは、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖であり、
Ｒ^４’は、Ｒ、−ＣＦ_３、−ＯＲ、−Ｎ（Ｒ）_２、−Ｓｉ（Ｒ）_３または−ＳＲであり、
Ｒ^５’は、Ｈ、−ＯＲまたはＣ_１〜４アルキルである）を提供する。

【0052】

一部の実施形態では、Ｑは、−ＮＨ−である。一部の実施形態では、Ｑは、−ＣＨ_２−である。一部の実施形態では、Ｑは、−ＣＨＦ−である。

【0053】

一部の実施形態では、Ｌは、−ＣＨ_２−である。

【0054】

一部の実施形態では、Ｒ^ｘおよびＲ^ｙはそれぞれ、水素である。一部の実施形態では、Ｒ^ｘとＲ^ｙは、一緒になって＝Ｏを形成する。

【0055】

一部の実施形態では、Ｒ^５’は、Ｈである。一部の実施形態では、Ｒ^５’は、−ＯＨである。

【0056】

一部の実施形態では、

【化7】

は単結合である。一部の実施形態では、

【化8】

は二重結合である。

【0057】

ある特定の実施形態では、本発明は、式ＩＶ−ａ、ＩＶ−ｂまたはＩＶ−ｃの化合物：

【化9】

【化10】

または薬学的に許容されるその塩（式中、
Ｒ^１は、ＨまたはＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ^２は、Ｒ、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＳＯ_２Ｒまたは−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）_２であり、
Ｒ^４’’はそれぞれ、独立して、Ｒ、ハロゲンまたは−ＣＦ_３であり、
Ｒはそれぞれ独立して、水素、−ＣＮ、あるいは飽和もしくは不飽和Ｃ_１〜６脂肪族、フェニル、４〜７員の飽和もしくは部分不飽和の単環式炭素環式環、１〜４個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する４〜８員の飽和または部分飽和の複素環式環から選択される、任意選択で置換されている基であり、
Ｌ^１は、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である）
を提供する。

【0058】

一部の実施形態では、Ｒ^１は、Ｈである。一部の実施形態では、Ｒ^１は、Ｃ_１〜６アルキルである。

【0059】

一部の実施形態では、Ｒ^１は、以下の表１に図示されているものから選択される。

【0060】

一部の実施形態では、Ｒ^２は、Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−（ＣＨ_２）_ｎ−フェニルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、−Ｃ（Ｏ）Ｒである。

【0061】

一部の実施形態では、Ｒ^２は、以下の表１に図示されているものから選択される。

【0062】

一部の実施形態では、Ｒ^４’’はそれぞれ、独立して、Ｒ、ハロゲンまたは−ＣＦ_３である。一部の実施形態では、Ｒ^４’’は、Ｒである。一部の実施形態では、Ｒ^４’’は、ハロゲンである。一部の実施形態では、Ｒ^４’’は、−ＣＦ_３である。一部の実施形態では、Ｒ^４’’は、以下の表１に図示されているものから選択される。

【0063】

一部の実施形態では、Ｌ^１は、共有結合、または１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖もしくは分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である。一部の実施形態では、Ｌ^１は、共有結合である。一部の実施形態では、Ｌ^１は、１〜９つのフルオロ基により任意選択で置換されている直鎖または分枝状Ｃ_１〜６アルキレン鎖である。一部の実施形態では、Ｌ^１は、以下の表１に図示されているものから選択される。

【0064】

例示的な本発明の化合物は、以下の表１に説明されている。

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【表1-7】

【表1-8】

【表1-9】

【表1-10】

【表1-11】

【表1-12】

【表1-13】

【表1-14】

【表1-15】

【表1-16】

【表1-17】

【表1-18】

【表1-19】

【表1-20】

【表1-21】

【表1-22】

【表1-23】

【表1-24】

【0065】

例示的な本発明の化合物は、以下の表２に説明されている。

【表2-1】

【表2-2】

【0066】

一部の実施形態では、本発明は、上の表１に説明されている化合物、または薬学的に許容されるその塩を提供する。一部の実施形態では、本発明は、上の表２に説明されている化合物、または薬学的に許容されるその塩を提供する。
５．使用、製剤および投与
薬学的に許容される組成物

【0067】

別の実施形態によれば、本発明は、本発明の化合物または薬学的に許容されるその誘導体、および薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含む組成物を提供する。本発明の組成物中の化合物の量は、生物試料または患者において、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用を測定可能な程度に阻害または活性化するのに有効となるものである。ある特定の実施形態では、本発明の組成物中の化合物の量は、生物試料または患者において、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用を測定可能な程度に阻害または活性化するのに有効となるものである。ある特定の実施形態では、本発明の組成物は、このような組成物を必要とする患者に投与するために製剤化される。一部の実施形態では、本発明の組成物は、患者に経口投与するために製剤化される。

【0068】

用語「患者」は、本明細書で使用する場合、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。

【0069】

用語「薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクル」とは、一緒に製剤化される化合物の薬理学的活性を破壊しない、非毒性の担体、アジュバントまたはビヒクルを指す。本発明の組成物に使用され得る、薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルには、以下に限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（ヒト血清アルブミンなど）、緩衝物質（ホスフェート、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウムなど）、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（硫酸プロタミンなど）、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、マグネシウムトリシリケート、ポリビニルピロリドン、セルロースをベースとする物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれる。

【0070】

本発明の組成物は、経口により、非経口により、吸入スプレーにより、局所的に、直腸に、経鼻により、口腔により、経膣により、または埋込式リザーバーにより投与することができる。用語「非経口」には、本明細書で使用する場合、皮下、静脈内、筋肉内、関節内、滑膜内、胸骨内（intrasternal）、鞘内、肝臓内、病巣内および頭蓋内への注射または注入技法が含まれる。好ましくは、本組成物は、経口により、腹腔内にまたは静脈内に投与される。本発明の組成物の注射可能な滅菌形態は、水性または油性懸濁剤とすることができる。これらの懸濁剤は、好適な分散化剤、または湿潤剤および懸濁化剤を使用して、当技術分野において公知の技法に準拠して製剤化することができる。注射可能な滅菌調製物はまた、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の注射用滅菌溶液剤または懸濁剤とすることもできる。用いることができる許容可能なビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌の不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として、都合よく用いられる。

【0071】

この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含めた、任意の無刺激性の不揮発性油を用いてよい。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体などの脂肪酸が、注射剤の調製に有用であり、とりわけ、そのポリオキシエチル化型（polyoxyethylated version）の、オリーブ油またはヒマシ油などの天然の薬学的に許容される油も有用である。これらの油性溶液剤または懸濁剤はまた、カルボキシメチルセルロースなどの長鎖アルコール希釈剤もしくは分散剤、または乳剤および懸濁剤を含めた、薬学的に許容される剤形の製剤化において一般に使用される類似の分散化剤を含有していてもよい。Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎおよび他の乳化剤などの他の一般的に使用される界面活性剤、または薬学的に許容される固体、液体もしくは他の剤形の製造に一般に使用される生物学的利用能増強剤もまた、製剤化のために使用されてもよい。

【0072】

本発明の薬学的に許容される組成物は、以下に限定されないが、カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤または溶液剤を含めた、任意の経口として許容される剤形で、経口投与されてもよい。経口使用向け錠剤の場合、一般に使用される担体には、ラクトースおよびコーンスターチが含まれる。ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤もまた、通常、添加される。カプセル剤の形態での経口投与に関すると、有用な希釈剤には、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが含まれる。水性懸濁剤が経口使用に必要とされる場合、活性成分は、乳化剤および懸濁化剤と組み合わせられる。所望の場合、ある特定の甘味剤、香味剤または着色剤も添加されてもよい。

【0073】

あるいは、本発明の薬学的に許容される組成物は、直腸投与向けの坐剤の形態で投与されてもよい。これらは、薬剤と、室温で固体であるが、直腸温度で液体である、好適な非刺激性賦形剤とを混合することにより調製することができ、したがって、直腸内で溶解して薬物を放出する。このような物質には、カカオ脂、ビーワックスおよびポリエチレングリコールが含まれる。

【0074】

本発明の薬学的に許容される組成物はまた、とりわけ、処置の標的が、眼、皮膚または下部腸管の疾患を含めた、局所施用によって容易に接近可能な領域または器官を含む場合、局所的に投与されてもよい。これらの領域または器官の各々にとって好適な局所用製剤は、容易に調製される。

【0075】

下部腸管向けの局所施用は、直腸の坐剤製剤（上を参照されたい）または好適な浣腸製剤で行うことができる。局所経皮パッチ剤も使用されてもよい。

【0076】

局所施用に関すると、提供される薬学的に許容される組成物は、１つまたは複数の担体に懸濁または溶解した、活性構成成分を含有する好適な軟膏剤中に製剤化されてもよい。本発明の化合物の局所投与向け担体には、以下に限定されないが、鉱物油、液体ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化性ワックスおよび水が含まれる。あるいは、提供される薬学的に許容される組成物は、１種または複数の薬学的に許容される担体に懸濁または溶解されている活性構成成分を含有する好適なローション剤またはクリーム剤に製剤化することができる。好適な担体には、以下に限定されないが、鉱物油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリルアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水が含まれる。

【0077】

眼科的使用に関すると、提供される薬学的に許容される組成物は、ｐＨが調整された等張性滅菌食塩水中の微細化懸濁剤として、または好ましくは塩化ベンジルアルコニウムなどの保存剤を含むもしくは含まないのどちらか一方のｐＨが調整された等張性の滅菌食塩水中の溶液として製剤化されてもよい。あるいは、眼科的使用に関すると、薬学的に許容される組成物は、ワセリンなどの軟膏剤中で製剤化されてもよい。

【0078】

本発明の薬学的に許容される組成物はまた、経鼻エアゾールまたは吸入によって投与されてもよい。このような組成物は、医薬製剤の当技術分野において周知の技法に従って調製され、ベンジルアルコールまたは他の好適な保存剤、生物学的利用能を増強する吸収促進剤、フルオロカーボン、および／または他の慣用的な可溶化剤もしくは分散化剤を用いる、食塩水中の溶液剤として調製されてもよい。

【0079】

最も好ましくは、本発明の薬学的に許容される組成物は、経口投与向けに製剤化される。このような製剤は、食物と共に、または食物なしで投与されてもよい。一部の実施形態では、本発明の薬学的に許容される組成物は、食物なしで投与される。他の実施形態では、本発明の薬学的に許容される組成物は、食物と一緒に投与される。

【0080】

単回剤形の組成物を生成するために担体材料と組み合わされてもよい、本発明の化合物の量は、処置される宿主、特定の投与形式に応じて様々である。好ましくは、提供される組成物は、阻害剤が０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間となる投与量が、これらの組成物の投与を受ける患者に投与され得るよう製剤化されるべきである。

【0081】

任意の特定の患者のための具体的な投与量および処置レジメンは、用いられる具体的な化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康、性別、食事、投与時間、排出速度、薬物組合せ、ならびに処置医師の判断および処置を受けている具体的な疾患の重症度を含めた、様々な因子に依存することがやはり理解されるべきである。本組成物中の本発明の化合物の量はまた、該組成物中の具体的な化合物に依存する。
化合物および薬学的に許容される組成物の使用

【0082】

本明細書に記載されている化合物および組成物は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用の阻害または活性化に一般に有用である。一部の実施形態では、提供される化合物またはその組成物は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用のアクチベータである。

【0083】

セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用の阻害剤またはアクチベータとして本発明において利用される化合物の活性は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｉｎ ｖｉｖｏまたは細胞系においてアッセイすることができる。ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用の阻害または活性化を決定するアッセイを含む。代替的なｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイは、阻害剤またはアクチベータが、セストリンのＧＡＴＯＲ２への結合を低下させるまたは増加させる能力を定量するものである。セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用の阻害剤またはアクチベータとして本発明において利用される化合物をアッセイするための詳細条件は、以下の実施例に説明されている。

【0084】

本明細書で使用する場合、用語「処置」、「処置する」および「処置すること」とは、本明細書に記載されている通り、疾患もしくは障害の進行、またはその１つもしくは複数の症状の反転、緩和、それらの発症の遅延、または阻害を指す。一部の実施形態では、処置は、１つまたは複数の症状を発症した後に投与されてもよい。他の実施形態では、処置は、症状の非存在下で投与されてもよい。例えば、処置は、症状の発症前に、感受性の高い個体に投与されてもよい（例えば、症状歴に照らし合わせて、および／または遺伝的もしくは他の感受性因子に照らし合わせて）。処置はまた、例えば、それらの再発を予防または遅延させるために、症状が解消した後に継続してもよい。

【0085】

提供される化合物は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用の阻害剤またはアクチベータであり、したがって、ｍＴＯＲＣ１の活性に関連する、１つまたは複数の障害を処置するために有用である。したがって、ある特定の実施形態では、本発明は、ｍＴＯＲＣ１媒介性障害を処置することを必要とする患者に、本発明の化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む、ｍＴＯＲＣ１媒介性障害を処置するための方法を提供する。

【0086】

本明細書で使用する場合、用語「ｍＴＯＲＣ１媒介性」障害、疾患および／または状態は、本明細書で使用する場合、ｍＴＯＲＣ１がある役割を果たすことが公知である、任意の疾患または他の有害状態を意味する。したがって、本発明の別の実施形態は、ｍＴＯＲＣ１がある役割を果たすことが公知である、１つもしくは複数の疾患を処置する、またはその重症度を軽減することに関する。

【0087】

本明細書に記載されている方法は、被験体において、がんを処置するための方法を含む。本文脈において使用される場合、「処置する」こととは、がんの少なくとも１つの症状または臨床パラメータを改良または改善することを意味する。例えば、処置は、腫瘍サイズまたは成長速度の低下をもたらすことができる。処置は、すべての被験体において、がんの治癒を必要とすることはなく、または１００％寛解時間を引き起こす必要はない。

【0088】

本明細書に記載されている通り、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用を活性化させて、これによりｍＴＯＲＣ１活性を低下させる薬剤、例えば、阻害性核酸または低分子の施用により、がん細胞増殖が低減し、こうして被験体におけるがんが処置される。したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用を活性化させて、これにより、ｍＴＯＲＣ１経路を間接的に阻害する治療有効用量の１つまたは複数の薬剤を投与するステップを含む。

【0089】

本明細書で使用する場合、用語「がん」は、迅速な増殖性細胞成長を特徴とする、自律的成長、すなわち異常な状況または状態に関する能力を有する細胞を指す。この用語は、組織病理学的タイプまたは侵襲性段階に関わりなく、がん性成長または発がん性過程、転移性組織もしくは悪性に形質転換した細胞、組織、または器官のすべてのタイプを含む。用語「腫瘍」とは、本明細書で使用する場合、がん性細胞、例えばがん細胞の塊を指す。

【0090】

本明細書に記載されている方法を使用して処置または診断することができるがんは、肺、胸部、甲状腺、リンパ球、消化管および尿生殖路に罹患するものなどの様々な器官系の悪性腫瘍、ならびに大部分の結腸がん、腎細胞癌、前立腺がんおよび／または睾丸腫瘍、肺の非小細胞癌、小腸のがんおよび食道のがんなどの悪性腫瘍を含む腺癌を含む。

【0091】

一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法は、被験体における癌腫を処置または診断するために使用される。用語「癌腫（carcinoma）」は、当技術分野で認識されており、呼吸系の癌、胃腸系の癌、尿生殖器系の癌、睾丸癌、乳癌、前立腺癌、内分泌腺系の癌および黒色腫を含めた、上皮または内分泌腺組織の悪性腫瘍を指す。一部の実施形態では、がん（cancer）は、腎癌または黒色腫である。例示的な癌腫には、子宮頸部、肺、前立腺、胸部、頭頸部、結腸および卵巣の組織から形成されるものが含まれる。この用語はまた、例えば、癌性組織および肉腫組織からなる悪性腫瘍を含む、癌肉腫も含む。「腺癌」とは、腺組織から誘導される、または腫瘍細胞が認識可能な腺構造を形成する、癌腫を指す。

【0092】

用語「肉腫」は、当技術分野で認識されており、間葉の誘発物の悪性腫瘍を指す。

【0093】

一部の実施形態では、本明細書に記載されている方法により処置されるがんは、正常組織または同じ組織の他のがんに比べて、ｍＴＯＲＣ１のレベルが増加しているか、またはｍＴＯＲＣ１の発現もしくは活性が増加しているがんである。当技術分野において公知のおよび本明細書に記載されている方法は、それらのがんを特定するために使用することができる。一部の実施形態では、本方法は、がんの細胞を含む試料を得るステップ、該試料中のｍＴＯＲＣ１活性（activoty）を決定するステップ、および本明細書に記載されている処置剤（例えば、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用のモジュレーター）を投与するステップを含む。一部の実施形態では、がんは、ｍＴＯＲＣ１活性のレベルを増加させることが本明細書において示されているものである。

【0094】

一部の実施形態では、本発明は、１つまたは複数の障害、疾患および／または状態を処置するための方法を提供し、障害、疾患または状態には、以下に限定されないが、細胞増殖性障害が含まれる。
細胞増殖性障害

【0095】

本発明は、細胞増殖性障害（例えば、がん）の診断および予後のため、ならびにセストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートし、これにより間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートすることによる、これらの障害の処置のための方法および組成物を特徴としている。本明細書に記載されている細胞増殖性障害には、例えば、がん、肥満および増殖依存性疾患が含まれる。このような障害には、当技術分野において公知の方法を使用して診断することができる。
がん

【0096】

がんには、非限定的に、白血病（例えば、急性白血病、急性リンパ性白血病、急性骨髄性白血病、急性骨髄芽球性白血病、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、慢性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病）、真性多血症、リンパ腫（例えば、ホジキン病または非ホジキン病）、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、重鎖病および固形腫瘍（肉腫および癌腫（例えば、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫、脊索腫、血管肉腫、内皮肉腫（endotheliosarcoma）、リンパ管肉腫、リンパ管内皮種（lymphangioendotheliosarcoma）、滑液膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、膵臓がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭状癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、肝細胞腫、胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頚がん、子宮がん、精巣がん、肺癌、小細胞肺癌、膀胱癌、上皮性癌、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起神経膠腫、神経鞘腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫および網膜芽細胞腫）など）が含まれる。一部の実施形態では、がんは、黒色腫または乳がんである。
他の増殖性疾患

【0097】

他の増殖性疾患には、例えば、肥満、良性前立腺肥大症、乾癬、異常角質化、リンパ増殖性障害（例えば、リンパ系細胞の異常な増殖がある障害）、慢性関節リウマチ、動脈硬化症、再狭窄および糖尿病性網膜症が含まれる。参照により本明細書に組み込まれている増殖性疾患は、米国特許第５，６３９，６００号および同第７，０８７，６４８号に記載されている。
他の障害

【0098】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法は、リボソーム病（例えば、ダイアモンド−ブラックファン貧血、５ｑ症候群、シュワッハマン−ダイアモンド症候群、Ｘ連鎖先天性角化不全症、軟骨毛髪形成不全症およびトリーチャーコリンズ症候群）を処置するために使用される。（Payneら、（２０１２年）Blood.９月１３日；１２０巻（１１号）：２２１４〜２４頁；Efeyanら、（２０１２年）Trends Mol Med.９月；１８巻（９号）：５２４〜５３３頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、リボソーム病を処置することを必要とする患者において、リボソーム病を処置する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。ある特定の実施形態では、本発明は、リボソーム病を処置することを必要とする患者において、ダイアモンド−ブラックファン貧血、５ｑ症候群、シュワッハマン−ダイアモンド症候群、Ｘ連鎖先天性角化不全症、軟骨毛髪形成不全症またはトリーチャーコリンズ症候群から選択されるリボソーム病を処置する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0099】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１活性を活性化する方法を使用して、コヒーシン病（Cohesinopathy）（例えば、ロバーツ症候群およびコルネリアデランゲ症候群）を処置する。（Xuら、（２０１６年）BMC Genomics １７巻：２５頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、コヒーシン病（例えば、ロバーツ症候群およびコルネリアデランゲ症候群）を処置することを必要とする患者において、コヒーシン病（例えば、ロバーツ症候群およびコルネリアデランゲ症候群）を処置する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0100】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、ライフスタイル、整形外科手術により引き起こされる非活動、固定化、または被験体の年齢、あるいは被験体が有するかもしくは罹患している疾患または状態による、筋萎縮を反転させるか、または筋萎縮を阻止する。（Cuthbertsonら、（２００５年） FASEB J. ３月；１９巻（３号）：４２２〜４頁、Epub ２００４年１２月１３日；Rennie、（２００９年） Appl. Physiol. Nutr. Metab. ３４巻：３７７〜３８１頁；Hamら、（２０１４年）Clin Nutr. １２月；３３巻（６号）：９３７〜４５頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、筋萎縮を反転または阻止することを必要とする患者において、ライフスタイル、整形外科手術により引き起こされる非活動、固定化、または被験体の年齢、あるいは被験体が有するかもしくは罹患している疾患または状態による、筋萎縮を反転または阻止する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0101】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、骨折、重症な火傷、脊柱損傷、切断、変性疾患、被験体にとって回復にベッドでの療養を必要とする状態、集中ケアユニットでの滞在、または長期入院による、筋萎縮を反転させるか、または筋萎縮を阻止する。（Gordonら、（２０１３年）Int J Biochem Cell Biol. １０月；４５巻（１０号）：２１４７〜５７頁；Legerら、（２００９年） Muscle Nerve. ７月；４０巻（１号）：６９〜７８頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、筋萎縮を反転または阻止することを必要とする患者において、骨折、重症な火傷、脊柱損傷、切断、変性疾患、被験体にとって回復にベッドでの療養を必要とする状態、集中ケアユニットでの滞在、または長期入院による、筋萎縮を反転または阻止する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0102】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、サルコペニア、筋除神経、筋ジストロフィー、炎症性ミオパチー、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）または重症筋無力症などの骨格筋萎縮をもたらす疾患、状態または障害を処置する（Kyeら、（２０１４年） Hum Mol Genet. １２月１日；２３巻（２３号）：６３１８〜６３３１頁；Gurpurら、（２００９年） Am J Pathol. ３月；１７４巻（３号）：９９９〜１００８頁；Chauhanら、（２０１３年）Neurosci Res. ９月〜１０月；７７巻（１〜２号）：１０２〜９頁）；Chingら、（２０１３年） Hum Mol Genet. ３月１５日；２２巻（６号）：１１６７〜７９頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、疾患、状態または障害を処置することを必要とする患者において、サルコペニア、筋除神経、筋ジストロフィー、炎症性ミオパチー、脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）または重症筋無力症などの骨格筋萎縮をもたらす疾患、状態または障害を処置する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0103】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、それぞれ、宇宙旅行のための準備をしている被験体、宇宙旅行に参加している被験体、または宇宙旅行から最近戻ってきた被験体における、筋力低下を阻止する、そこからの回復を維持する、または増強する。（Steinら、（１９９９年） Am J Physiol.；２７６巻：Ｅ１０１４〜２１頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、筋力低下を阻止する、そこからの回復を維持するかまたは増強することを必要とする被験体において、それぞれ、宇宙旅行のための準備をしている被験体、宇宙旅行に参加している被験体、または宇宙旅行から最近戻ってきた被験体における、筋力低下を阻止する、そこからの回復を維持するかまたは増強する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0104】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、武力闘争もしくは軍事訓練のための準備している被験体、武力闘争もしくは軍事訓練に参加している被験体、または武力闘争もしくは軍事訓練から最近戻ってきた被験体における、過度な筋緊張および／または疲労からの回復を維持するまたは増強する（Pasiakosら、（２０１１年）Am J Clin Nutr. ９月；９４巻（３号）：８０９〜１８頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、過度な筋緊張および／または疲労からの回復を維持するまたは増強することを必要とする被験体において、武力闘争もしくは軍事訓練のための準備している被験体、武力闘争もしくは軍事訓練に参加している被験体、または武力闘争もしくは軍事訓練から最近戻ってきた被験体における、過度な筋緊張および／または疲労からの回復を維持するまたは増強する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0105】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、患者におけるオートファジーを阻止する。一部の実施形態では、前記患者は、オートファジーの誘発に依存性の治療抵抗性がんを有するか、またはそれに罹患している（KimおよびGuan、（２０１５年）J Clin Invest. １月；１２５巻（１号）：２５〜３２頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、オートファジーを予防することを必要とする患者において、オートファジーの誘発に依存性の治療抵抗性がんを有するか、またはそれに罹患している患者における、オートファジーを予防する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0106】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣを活性化する方法を使用して、うつ病を処置または予防する。（Ignacioら、（２０１５年）Br J Clin Pharmacol. １１月２７日を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、うつ病を処置または予防するを必要とする患者において、うつ病を処置または予防する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0107】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、迅速な抗うつ剤活性の開始を誘発させる。したがって、一部の実施形態では、本発明は、迅速な抗うつ剤活性の開始を誘発させることを必要とする患者において、迅速な抗うつ剤活性の開始を誘発させる方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0108】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、日中／光周期のシフトに応答する、日周挙動の再同調を加速することによる、時差ぼけを処置または防止する（Caoら、（２０１３年） Neuron. ８月２１日；７９巻（４号）：７１２〜２４頁、１０．１０１６を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、時差ぼけを処置または防止することを必要とする患者において、日中／光周期のシフトに応答する、日周挙動の再同調を加速することによる、時差ぼけを処置または防止する方法であって、前記患者に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0109】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、被験体における心筋萎縮を予防または反転させる。一部の実施形態では、前記被験体は、心臓発作、うっ血性心不全、心臓移植、心臓弁修復、アテローム性動脈硬化、他の主な血管疾患および心臓バイパス手術から選択される疾患もしくは状態を有するか、または有していたことがある（Songら、（２０１０年）Am J Physiol Cell Physiol. １２月；２９９巻（６号）：Ｃ１２５６〜Ｃ１２６６頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、心筋萎縮を予防または反転させることを必要とする被験体において、心臓発作、うっ血性心不全、心臓移植、心臓弁修復、アテローム性動脈硬化、他の主な血管疾患および心臓バイパス手術から選択される疾患または状態を有するか、または有していたことがある被験体における心筋萎縮を予防または反転させる方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0110】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、運動後の強化を増加する、および／または筋肉量を増加させる。一部の実施形態では、本方法は、非経口の全栄養素の一部として、または機能的な電気的刺激を促進するための、物理的治療法と併せて実施される（Nakamuraら、（２０１２年）Geriatr Gerontol Int. １月；１２巻（１号）：１３１〜９頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、運動後の強化を増加する、および／または筋肉量を増加させる方法を提供する。一部の実施形態では、本方法は、本方法を必要とする被験体において、非経口の全栄養素の一部として、または機能的な電気的刺激を促進するための、物理的治療法と併せて実施され、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む。

【0111】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、食物摂取を低減する。（Pedrosoら、（２０１５年）Nutrients. ５月２２日；７巻（５号）：３９１４〜３７頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、食物摂取を低減することを必要とする被験体において、食物摂取を低減する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0112】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、肥満を処置する。したがって、一部の実施形態では、本発明は、肥満を処置することを必要とする被験体において、肥満を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0113】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、バイオリアクターからの治療用組換えタンパク質の生産における生産性を向上する（McVeyら、（２０１６年）Biotechnol Bioeng. ２月１６日 ｄｏｉ：１０．１００２／ｂｉｔ．２５９５１を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、バイオリアクターからの治療用組換えタンパク質の製造における生産性を向上する方法であって、前記製造に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を添加するステップを含む方法を提供する。

【0114】

一部の実施形態では、免疫細胞におけるｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、その抗腫瘍活性を促進および／または維持する。これには、免疫細胞において、養子免疫伝達前にｉｎ ｖｉｔｒｏでｍＴＯＲＣ１を増加させるステップ、およびｉｎ ｖｉｖｏでの他の標的免疫療法戦略との共投与時に、免疫細胞におけるｍＴＯＲＣ１を増加させるステップを含む。一部の実施形態では、免疫細胞には、ナイーブなＴ細胞、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｔｈ１、Ｔｈ２、Ｔ_ＲｅｇおよびＴｈ１７細胞、樹状細胞、ＮＫ細胞およびマクロファージが含まれる（Yangら、（２０１１年）Nat Immunol.；１２巻：８８８〜８９７頁；O'Brienら（２０１１年）Eur J Immunol.；４１巻：３３６１〜３３７０頁；Delgoffeら、（２００９年）Immunity. ６月１９日；３０巻（６号）：８３２〜４４頁；Chi、（２０１２年）Nat Rev Immunol. ４月２０日；１２巻（５号）：３２５〜３３８頁；Pollizziら、（２０１５年）J Clin Invest.；１２５巻（５号）：２０９０〜２１０８頁；Aliら、（２０１５年）Front Immunol.；６巻：３５５頁；Katholnigら、（２０１３年）Biochem Soc Trans. ８月；４１巻（４号）：９２７〜３３頁；Wangら、（２０１３年）Proc Natl Acad Sci USA. １２月１０日；１１０巻（５０号）：Ｅ４８９４〜９０３頁；YangおよびChi、（２０１３年）J Clin Invest. １２月；１２３巻（１２号）：５１６５〜７８頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、免疫細胞におけるｍＴＯＲＣ１を活性化して、その抗腫瘍活性を促進および／または維持する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、養子免疫伝達前に、免疫細胞において、ｉｎ ｖｉｔｒｏでｍＴＯＲＣ１を増加させる方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、ｉｎ ｖｉｖｏで他の標的免疫療法戦略と共投与した場合に、免疫細胞においてｍＴＯＲＣ１を増加させる方法を提供する。ある特定の実施形態では、免疫細胞は、ナイーブなＴ細胞、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｔｈ１、Ｔｈ２、Ｔ_ＲｅｇおよびＴｈ１７細胞、樹状細胞、ＮＫ細胞およびマクロファージを含み、前記免疫細胞に、提供される化合物または薬学的を許容されるその組成物を添加するステップを含む。

【0115】

一部の実施形態では、網膜におけるｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、網膜色素変性および眼の神経変性の他の形態を処置する（Punzoら、（２００９年）Nat Neurosci. １月；１２巻（１号）：４４〜５２頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、網膜色素変性および眼の神経変性の他の形態を処置することを必要とする被験体において、網膜色素変性および眼の神経変性の他の形態を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0116】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、中枢または末梢軸索再生を増加させる（Namikoら、（２０１０年）J Biol Chem.２８５巻：２８０３４〜２８０４３頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、中枢または末梢軸索再生を増加させることを必要とする被験体において、中枢または末梢軸索再生を増加させる方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0117】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、多発性硬化症およびパーキンソン病などの脱髄を特徴とする、損傷後または疾患における、髄鞘再生およびニューロンの活性を促進する（Tylerら、（２００９年）J Neurosci. ５月１３日；２９巻（１９号）：６３６７〜７８頁；Norrmenら、（２０１４年）Cell Rep. １０月２３日；９巻（２号）：６４６〜６０頁；Love（２００６年） J Clin Pathol. １１月；５９巻（１１号）：１１５１〜１１５９頁を参照する）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、髄鞘再生およびニューロンの活性を促進する方法ことを必要とする被験体において、脱髄を特徴とする、損傷後または疾患における、髄鞘再生およびニューロンの活性を促進する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、多発性硬化症を処置することを必要とする被験体において、多発性硬化症を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、パーキンソン病を処置することを必要とする被験体において、パーキンソン病を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0118】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、多発性硬化症を処置する。したがって、一部の実施形態では、本発明は、多発性硬化症またはその異型を処置することを必要とする被験体において、多発性硬化症またはその異型を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、バロー同心円硬化症、シルダー病、急性（マールブルグ型）多発性硬化症、炎症性脱髄性多発根ニューロパチーまたは腫瘤様多発性硬化症（tumefactive multiple sclerosis）を処置することを必要とする被験体において、バロー同心円硬化症、シルダー病、急性（マールブルグ型）多発性硬化症、炎症性脱髄性多発根ニューロパチーまたは腫瘤様多発性硬化症（tumefactive multiple sclerosis）を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0119】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、デビック病、急性散在性脳脊髄炎、急性出血性白質脳炎およびニーマンピック病（Niemann-Pick）を処置する（Takikitaら、（２００４年）J Neuropathol Exp Neurol. ６月；６３巻（６号）：６６０〜７３頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、デビック病、急性散在性脳脊髄炎、急性出血性白質脳炎およびニーマンピック病を処置することを必要とする被験体において、デビック病、急性散在性脳脊髄炎、急性出血性白質脳炎およびニーマンピック病を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0120】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、自閉症の形態を処置または予防する（Novarinoら、（２０１２年）Science １０月１９日、３３８巻：６１０５号、３９４〜３９７頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、自閉症の形態を処置または予防することを必要とする被験体において、自閉症の形態を処置または予防する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0121】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、神経変性疾患を処置する。したがって、一部の実施形態では、本発明は、神経変性疾患を処置することを必要とする被験体において、神経変性疾患を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0122】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、シナプスの機能障害に関連する疾患を処置する。したがって、一部の実施形態では、本発明は、シナプスの機能障害に関連する疾患を処置することを必要とする被験体において、シナプスの機能障害に関連する疾患を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0123】

一部の実施形態では、中枢神経系におけるｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中および緑内障などの樹状突起棘の減少およびシナプスの喪失によって特徴付けられる神経変性疾患における樹状突起形成およびシナプス形成を増加させる（Di Poloら、（２０１５年）Neural Regen Res.４月；１０巻（４号）：５５９〜５６１頁を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、樹状突起形成およびシナプス形成を増加させることを必要とする被験体において、樹状突起棘の減少およびシナプスの喪失によって特徴付けられる神経変性疾患における樹状突起形成およびシナプス形成を増加させる方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中または緑内障を処置することを必要とする被験体において、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、脳卒中または緑内障を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0124】

一部の実施形態では、ｍＴＯＲＣ１を活性化する方法を使用して、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、統合失調症、レット症候群、脆弱Ｘ症候群、パーキンソン病、ハンチントン病、脳卒中および緑内障などの疾患を処置する（Linら、PLoS ONE ８巻（４号）：ｅ６２５７２頁、２０１３年；Leeら、（２０１５年）Neuron. １月２１日；８５巻（２号）：３０３〜３１５頁；Bowlingら、（２０１４年）Sci Signal. １月１４日；７巻（３０８号）：ｒａ４を参照されたい）。したがって、一部の実施形態では、本発明は、疾患を処置することを必要とする被験体において、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症、統合失調症、レット症候群、脆弱Ｘ症候群、パーキンソン病、ハンチントン病、脳卒中および緑内障などの疾患を処置する方法であって、前記被験体に、提供される化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法を提供する。

【0125】

本発明の薬学的に許容される組成物は、処置される感染の重症度に応じて、ヒトおよび他の動物に、経口用または鼻腔スプレー剤などとして、経口により、経腸により、非経口により、嚢内、膣内、腹腔内、局所的（散剤、軟膏剤または点剤（drop）によるような）、口腔に（bucally）投与することができる。ある特定の実施形態では、本発明の化合物は、所望の治療効果を得るため、１日に１回または複数回、１日あたり、被験体の体重あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ、および好ましくは約１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの投与量レベルで、経口または非経口投与することができる。

【0126】

経口投与向けの液体剤形には、以下に限定されないが、薬学的に許容される乳剤、マイクロエマルション剤（microemulsion）、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤およびエリキシル剤が含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、例えば、水または他の溶媒などの当技術分野において一般に使用される不活性希釈剤、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物などの可溶化剤および乳化剤を含有することができる。不活性な希釈剤に加えて、本経口用組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味剤、着香剤および芳香剤などのアジュバントを含むことができる。

【0127】

注射可能な調製物、例えば、注射可能な水性懸濁剤または油性懸濁剤は、好適な分散化剤、または湿潤剤および懸濁化剤を使用する公知技術に従って、製剤化することができる。注射可能な滅菌調製物はまた、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液として、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の注射用滅菌溶液剤、懸濁剤または乳剤とすることもできる。用いることができる許容可能なビヒクルおよび溶媒には、水、リンゲル液（米国薬局方）および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌の不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として、都合よく用いられる。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激性の不揮発性油を用いることができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が、注射剤の調製に使用される。

【0128】

注射可能な製剤は、例えば、細菌保持フィルターによるろ過によって、または使用前に滅菌水または他の滅菌の注射可能な媒体に溶解または分散することができる、滅菌の固形組成物の形態の滅菌剤を組み込むことによって滅菌することができる。

【0129】

本発明の化合物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅延させることが望ましいことが多い。これは、水溶解度に乏しい結晶性物質またはアモルファス性物質の液体懸濁剤の使用によって行われることができる。次に、化合物の吸収速度は、溶解速度に依存し、ひいては、結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口的に投与された化合物形態の吸収の遅延は、油性ビヒクル中に溶解または懸濁させることにより行われる。注射可能なデポ剤の形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成させることにより作製される。化合物とポリマーとの比、および用いられる特定のポリマーの性質に応じて、化合物の放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が含まれる。注射可能なデポ製剤はまた、身体組織と適合性があるリポソームまたはマイクロエマルション中に化合物を捕捉することによって調製される。

【0130】

直腸または膣投与向けの組成物は、好ましくは、本発明の化合物を、周囲温度では固体であるが、体温では液体であり、したがって直腸または膣腔において融解して、活性化合物を放出する、カカオ脂、ポリエチレングリコールまたは坐剤ワックスなどの好適な非刺激性賦形剤または担体と混合することにより調製することができる坐剤である。

【0131】

経口投与向け固形剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤および顆粒剤が含まれる。このような固形剤形では、活性化合物は、少なくとも１つの不活性な、薬学的に許容される賦形剤または担体（クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなど）、および／またはａ）充填剤もしくは増量剤（デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよびケイ酸など）、ｂ）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロースおよびアカシアなど）、ｃ）保湿剤（グリセロールなど）、ｄ）崩壊剤（寒天、炭酸カルシウム、バレイショデンプンまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある特定のシリケートおよび炭酸ナトリウムなど）、ｅ）溶解遅延剤（パラフィンなど）、ｆ）吸収促進剤（第四級アンモニウム化合物など）、ｇ）湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなど）、ｈ）吸収剤（カオリンおよびベントナイトクレイなど）、およびｉ）滑沢剤（タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）、およびそれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、これらの剤形はまた、緩衝化剤を含むことがある。

【0132】

類似したタイプの固形組成物はまた、ラクトースまたは乳糖、および高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中に充填剤として用いられてもよい。錠剤、ドラジェ剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の固形剤形は、腸溶コーティング剤および医薬調剤分野において周知の他のコーティング剤などの、コーティング剤およびシェルを用いて調製することができる。それらは、乳白剤を任意選択で含有していてもよく、消化管のある部分に、任意選択で遅延様式で、活性成分（複数可）をこれのみ、または優先的に放出する組成物とすることもできる。使用することができる埋め込み用組成物の例には、ポリマー物質およびワックスを含む。類似したタイプの固形組成物はまた、ラクトースまたは乳糖、および高分子量ポリエチレングリコール（polethylene glycol）などの賦形剤を使用して、軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中に充填剤として用いられてもよい。

【0133】

活性化合物はまた、上記の通り、１つまたは複数の賦形剤と一緒にマイクロ封入された形態とすることができる。錠剤、ドラジェ剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤の固形剤形は、腸溶コーティング剤、制御放出コーティング剤および医薬調剤分野において周知の他のコーティング剤などの、コーティング剤およびシェルを用いて調製することができる。このような固形剤形では、活性化合物は、スクロース、ラクトースまたはデンプンなどの少なくとも１種の不活性な希釈剤と混合されてもよい。このような剤形はまた、通常の実作業のように、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロースなどの錠剤用滑沢剤および他の錠剤用助剤を含んでもよい。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝化剤を含んでもよい。それらは、乳白剤を任意選択で含有していてもよく、消化管のある部分に、任意選択で遅延様式で、活性成分（複数可）をこれのみまたは優先的に放出する組成物とすることもできる。使用することができる埋め込み用組成物の例は、ポリマー物質およびワックスを含む。

【0134】

本発明の化合物の局所または経皮投与向け剤形には、軟膏剤、ペースト剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、散剤、溶液剤、噴霧剤、吸入剤またはパッチ剤が含まれる。活性構成成分は、滅菌条件下で薬学的に許容される担体と混合され、任意の必要な保存剤または緩衝剤が必要となることがある。眼科用製剤、点耳剤および点眼剤もまた、本発明の範囲内にあるものとして企図される。さらに、本発明は、経皮パッチ剤の使用を企図しており、経皮パッチ剤は、身体への化合物の制御送達を実現するという追加の利点を有する。このような剤形は、適切な媒体中で化合物を溶解または分注することによって作製することができる。吸収促進剤はまた、皮膚を通る化合物の流入を向上させるために使用することもできる。この速度は、速度制御膜を設けることによって、またはポリマーマトリックスもしくはゲル中に化合物を分散させることによってのどちらかで制御することができる。

【0135】

一実施形態によれば、本発明は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートして、これにより生物試料中で間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートする方法であって、前記生物試料を、本発明の化合物または前記化合物を含む組成物に接触させるステップを含む方法に関する。

【0136】

用語「生物試料」には、本明細書で使用する場合、非限定的に、細胞培養物またはその抽出物；哺乳動物またはその抽出物から得られる生検材料；および血液、唾液、尿、便、精液、涙液もしくは他の体液、またはそれらの抽出物が含まれる。

【0137】

本発明の別の実施形態は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートして、これにより患者において、間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートする方法であって、前記患者に、本発明の化合物または前記化合物を含む組成物を投与するステップを含む方法に関する。

【0138】

別の実施形態によれば、本発明は、セストリン−ＧＡＴＯＲ２相互作用をモジュレートして、これにより患者において、間接的に、ｍＴＯＲＣ１活性を選択的にモジュレートする方法であって、前記患者に、本発明の化合物または前記化合物を含む組成物を投与するステップを含む方法に関する。他の実施形態では、本発明は、ｍＴＯＲＣ１によって媒介される障害を処置することを必要とする患者において、ｍＴＯＲＣ１によって媒介される障害を処置する方法であって、前記患者に本発明による化合物または薬学的に許容されるその組成物を投与するステップを含む方法に関する。このような障害は、本明細書において、詳細に記載されている。

【0139】

具体的な処置される状態または疾患に応じて、そのような状態を処置するために通常、投与される追加の治療剤もまた、本発明の組成物中に存在していてもよい。本明細書で使用する場合、具体的な疾患または状態を処置するために通常、投与される追加の治療剤は、「処置される疾患または状態に適した」ものとして公知である。

【0140】

本発明の化合物はまた、他の抗増殖性化合物と組み合わせて使用されて、利点を発揮することがある。このような抗増殖性化合物には、以下に限定されないが、アロマターゼ阻害剤；抗エストロゲン薬；トポイソメラーゼＩ阻害剤；トポイソメラーゼＩＩ阻害剤；微小管活性化合物；アルキル化化合物；ヒストンデアセチラーゼ阻害剤；細胞分化過程を誘発する化合物；シクロオキシゲナーゼ阻害剤；ＭＭＰ阻害剤；ｍＴＯＲ阻害剤；抗腫瘍性代謝拮抗物質；プラチン化合物；タンパク質キナーゼ活性または脂質キナーゼ活性を標的とする／低下させる化合物、およびさらなる抗血管新生化合物；タンパク質ホスファターゼまたは脂質ホスファターゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ゴナドレリンアゴニスト；抗アンドロゲン薬；メチオニンアミノペプチダーゼ阻害剤；マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤；ビスホスホネート；生物学的応答調節剤；抗増殖性抗体；ヘパラナーゼ阻害剤；Ｒａｓ発がんアイソフォームの阻害剤；テロメラーゼ阻害剤；プロテアソーム阻害剤；血液悪性腫瘍の処置に使用するための化合物；Ｆｌｔ−３の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；Ｈｓｐ９０阻害剤（１７−ＡＡＧ（１７−アルキルアミノゲルダナマイシン、ＮＳＣ３３０５０７）、１７−ＤＭＡＧ（１７−ジメチルアミノエチルアミノ−１７−デメトキシ−ゲルダナマイシン、ＮＳＣ７０７５４５）、ＩＰＩ−５０４、ＣＮＦ１０１０、ＣＮＦ２０２４、ＣＮＦ１０１０（Ｃｏｎｆｏｒｍａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ製）など）；テモゾロミド（Ｔｅｍｏｄａｌ（登録商標））；キネシンスピンドルタンパク質阻害剤（ＳＢ７１５９９２またはＳＢ７４３９２１（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ製）など）またはペンタミジン／クロルプロマジン（ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ製）；ＭＥＫ阻害剤（ＡＲＲＹ１４２８８６（Ａｒｒａｙ ＢｉｏＰｈａｒｍａ製）など）、ＡＺＤ６２４４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ製）、ＰＤ１８１４６１（Ｐｆｉｚｅｒ製）およびロイコボリンが含まれる。用語「アロマターゼ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、エストロゲン生成、例えば、それぞれ基質であるアンドロステンジオンおよびテストステロンのエストロンおよびエストラジオールへの変換を阻害する化合物に関する。この用語には、以下に限定されないが、ステロイド、とりわけアタメスタン、エキセメスタンおよびフォルメスタン、および、特に非ステロイド、とりわけアミノグルテチミド、ログレチミド、ピリドグルテチミド、トリロスタン、テストラクトン、ケトコナゾール、ボロゾール、ファドロゾール、アナストロゾールおよびレトロゾールが含まれる。エキセメスタンは、商標名Ａｒｏｍａｓｉｎ（商標）で販売されている。フォルメスタンは、商標名Ｌｅｎｔａｒｏｎ（商標）で販売されている。ファドロゾールは、商標名Ａｆｅｍａ（商標）で販売されている。アナストロゾールは、商標名Ａｒｉｍｉｄｅｘ（商標）で販売されている。レトロゾールは、商標名Ｆｅｍａｒａ（商標）またはＦｅｍａｒ（商標）で販売されている。アミノグルテチミドは、商標名Ｏｒｉｍｅｔｅｎ（商標）で販売されている。アロマターゼ阻害剤である化学治療剤を含む本発明の組合せは、乳房腫瘍などのホルモン受容体陽性腫瘍の処置に、特に有用である。

【0141】

用語「抗エストロゲン」とは、本明細書で使用する場合、エストロゲン受容体レベルでエストロゲンの影響を拮抗する化合物に関する。この用語は、以下に限定されないが、タモキシフェン、フルベストラント、ラロキシフェンおよびラロキシフェン塩酸塩を含む。タモキシフェンは、商標名Ｎｏｌｖａｄｅｘ（商標）で販売されている。ラロキシフェン塩酸塩は、商標名Ｅｖｉｓｔａ（商標）で販売されている。フルベストラントは、商標名Ｆａｓｌｏｄｅｘ（商標）で投与され得る。抗エストロゲンである化学治療剤を含む本発明の組合せは、乳房腫瘍などのエストロゲン受容体陽性腫瘍の処置に、特に有用である。

【0142】

用語「抗アンドロゲン」は、本明細書で使用する場合、アンドロゲンホルモンの生物学的作用を阻害することが可能な任意の物質に関し、以下に限定されないが、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（商標））を含む。用語「ゴナドレリンアゴニスト」とは、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、アバレリックス、ゴセレリンおよび酢酸ゴセレリンが含まれる。ゴセレリンは、商標名Ｚｏｌａｄｅｘ（商標）で投与され得る。

【0143】

用語「トポイソメラーゼＩ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、トポテカン、ギマテカン、イリノテカン、カンプトテシアンおよびそのアナログ、９−ニトロカンプトテシン、ならびに巨大分子であるカンプトテシンコンジュゲートＰＮＵ−１６６１４８を含む。イリノテカンは、例えば、例えば商標Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（商標）で販売されている通りの形態で投与することができる。トポテカンは、商標名Ｈｙｃａｍｐｔｉｎ（商標）で販売されている。

【0144】

用語「トポイソメラーゼＩＩ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ドキソルビシン（Ｃａｅｌｙｘ（商標）などのリポソーム製剤を含む）、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシンおよびネモルビシン、アントラキノン系のミトキサントロンおよびロソキサントロン、ならびにポドフィロトキシン系のエトポシドおよびテニポシドなどのアントラサイクリンを含む。エトポシドは、商標名Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（商標）で販売されている。テニポシドは、商標名ＶＭ２６−Ｂｒｉｓｔｏｌで販売されている。ドキソルビシンは、商標名Ａｃｒｉｂｌａｓｔｉｎ（商標）またはＡｄｒｉａｍｙｃｉｎ（商標）で販売されている。エピルビシンは、商標名Ｆａｒｍｏｒｕｂｉｃｉｎ（商標）で販売されている。イダルビシンは、商標名Ｚａｖｅｄｏｓ（商標）で販売されている。ミトキサントロンは、商標名Ｎｏｖａｎｔｒｏｎ（商標）で販売されている。

【0145】

用語「微小管活性剤」は、以下に限定されないが、パクリタキセルおよびドセタキセルなどのタキサン；ビンブラスチンまたはビンブラスチン硫酸塩、ビンクリスチンまたはビンクリスチン硫酸塩、およびビノレルビンなどのビンカアルカロイド；ディスコデルモライド；コチシンおよびエポチロンおよびそれらの誘導体を含めた、微小管安定化化合物、微小管脱安定化化合物および微小管重合阻害剤に関する。パクリタキセルは、商標名Ｔａｘｏｌ（商標）で販売されている。ドセタキセルは、商標名Ｔａｘｏｔｅｒｅ（商標）で販売されている。ビンブラスチン硫酸塩は、商標名Ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎ Ｒ．Ｐ（商標）で販売されている。ビンクリスチン硫酸塩は、商標名Ｆａｒｍｉｓｔｉｎ（商標）で販売されている。

【0146】

用語「アルキル化剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、シクロホスファミド、イホスファミド、メルファランまたはニトロソ尿素（ＢＣＮＵまたはＧｌｉａｄｅｌ）を含む。シクロホスファミドは、商標名Ｃｙｃｌｏｓｔｉｎ（商標）で販売されている。イホスファミドは、商標名Ｈｏｌｏｘａｎ（商標）で販売されている。

【0147】

用語「ヒストンデアセチラーゼ阻害剤」または「ＨＤＡＣ阻害剤」は、ヒストンデアセチラーゼを阻害する化合物、および抗増殖活性を有する化合物に関する。これは、以下に限定されないが、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）を含む。

【0148】

用語「抗腫瘍性代謝拮抗物質」は、以下に限定されないが、５−フルオロウラシルまたは５−ＦＵ、カペシタビン、ゲムシタビン、ＤＮＡ脱メチル化化合物（５−アザシチジンおよびデシタビンなど）、メトトレキセートおよびエダトレキセート、および葉酸アンタゴニスト（ペメトレキセドなど）を含む。カペシタビンは、商標名Ｘｅｌｏｄａ（商標）で販売されている。ゲムシタビンは、商標名Ｇｅｍｚａｒ（商標）で販売されている。

【0149】

用語「プラチン（platin）化合物」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、カルボプラチン、シスプラチン、シスプラチナムおよびオキサリプラチンを含む。カルボプラチンは、例えば、例えば商標Ｃａｒｂｏｐｌａｔ（商標）で販売されている形態で投与することができる。オキサリプラチンは、例えば、例えば商標Ｅｌｏｘａｔｉｎ（商標）で販売されている形態で投与することができる。

【0150】

用語「タンパク質キナーゼ活性もしくは脂質キナーゼ活性；またはタンパク質ホスファターゼ活性もしくは脂質ホスファターゼ活性を標的とする／低下させる化合物；またはさらなる抗血管新生化合物」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、タンパク質チロシンキナーゼ阻害剤、および／またはセリンキナーゼ阻害剤、および／またはトレオニンキナーゼ阻害剤、または脂質キナーゼ阻害剤、例えば、（ａ）血小板由来増殖因子受容体（ＰＤＧＦＲ）の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物（ＰＤＧＦＲの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、とりわけイマチニブなどのＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体、ＳＵ１０１、ＳＵ６６６８およびＧＦＢ−１１１などのＰＤＧＦ受容体を阻害する化合物など）；ｂ）線維芽増殖因子受容体（ＦＧＦＲ）の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ｃ）インスリン様増殖因子受容体Ｉ（ＩＧＦ−ＩＲ）の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物（ＩＧＦ−ＩＲの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、とりわけ、ＩＧＦ−Ｉ受容体のキナーゼ活性を阻害する化合物など）、またはＩＧＦ−Ｉ受容体もしくはその増殖因子の細胞外ドメインを標的とする抗体；ｄ）Ｔｒｋ受容体チロシンキナーゼファミリーの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、またはエフリンＢ４阻害剤；ｅ）ＡｘＩ受容体チロシンキナーゼファミリーの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ｆ）Ｒｅｔ受容体チロシンキナーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ｇ）イマチニブなどのＫｉｔ／ＳＣＦＲ受容体チロシンキナーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ｈ）ｃ−Ｋｉｔ受容体チロシンキナーゼファミリーの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、とりわけイマチニブなどのｃ−Ｋｉｔ受容体を阻害する化合物などの、ＰＤＧＦＲファミリーの一部であるＣ−ｋｉｔ受容体チロシンキナーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ｉ）イマチニブまたはニロチニブ（ＡＭＮ１０７）などのＮ−フェニル−２−ピリミジン−アミン誘導体などのｃ−Ａｂｌファミリーメンバーおよびその遺伝子融合産物の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物などの、ｃ−Ａｂｌファミリーメンバー、その遺伝子融合産物（例えば、ＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼ）および変異体の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ＰＤ１８０９７０；ＡＧ９５７；ＮＳＣ６８０４１０；ＰａｒｋｅＤａｖｉｓ製のＰＤ１７３９５５；またはダサチニブ（ＢＭＳ−３５４８２５）；ｊ）タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）のメンバー、ならびにセリン／トレオニンキナーゼのＲａｆファミリー、ＭＥＫ、ＳＲＣ、ＪＡＫ／ｐａｎ−ＪＡＫ、ＦＡＫ、ＰＤＫ１、ＰＫＢ／Ａｋｔ、Ｒａｓ／ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＳＹＫ、ＴＹＫ２、ＢＴＫおよびＴＥＣファミリーのメンバー、ならびに／またはミドスタウリンなどのスタウロスポリン誘導体を含めたサイクリン依存性キナーゼファミリー（ＣＤＫ）のメンバーの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；さらなる化合物の例は、ＵＣＮ−０１、サフィンゴール、ＢＡＹ４３−９００６、ブリオスタチン１、ペリホシン；リモフォシン；ＲＯ３１８２２０およびＲＯ３２０４３２；ＧＯ６９７６；ｌｓｉｓ３５２１；ＬＹ３３３５３１／ＬＹ３７９１９６；イソキノリン化合物；ＦＴＩ；ＰＤ１８４３５２またはＱＡＮ６９７（Ｐ１３Ｋ阻害剤）またはＡＴ７５１９（ＣＤＫ阻害剤）を含む；ｋ）タンパク質−チロシンキナーゼ阻害剤の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物などの、タンパク質−チロシンキナーゼ阻害剤の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、メシル酸イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（商標））またはチルホスチン（tyrphostin）（チルホスチンＡ２３／ＲＧ−５０８１０；ＡＧ９９；チルホスチンＡＧ２１３；チルホスチンＡＧ１７４８；チルホスチンＡＧ４９０；チルホスチンＢ４４；チルホスチンＢ４４（＋）鏡像異性体；チルホスチンＡＧ５５５；ＡＧ４９４；チルホスチンＡＧ５５６、ＡＧ９５７など）、およびアダホスチン（４−｛［（２，５−ジヒドロキシフェニル）メチル］アミノ｝−安息香酸アダマンチルエステル；ＮＳＣ６８０４１０、アダホスチン）を含む；ｌ）上皮増殖因子受容体ファミリーの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物などの、受容体チロシンキナーゼの上皮増殖因子ファミリー（ホモまたはヘテロ二量体としての、ＥＧＦＲ_１ ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、ＥｒｂＢ４）およびその変異体の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、とりわけＥＧＦ受容体、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４などのＥＧＦ受容体チロシンキナーゼファミリーメンバーを阻害するか、またはＥＧＦもしくはＥＧＦ関連リガンドに結合する化合物、タンパク質または抗体、ＣＰ３５８７７４、ＺＤ１８３９、ＺＭ１０５１８０；トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（商標））、イレッサ、タルセバ、ＯＳＩ−７７４、Ｃｌ−１０３３、ＥＫＢ−５６９、ＧＷ−２０１６、Ｅ１．１、Ｅ２．４、Ｅ２．５、Ｅ６．２、Ｅ６．４、Ｅ２．１１、Ｅ６．３またはＥ７．６．３および７Ｈ−ピロロ−［２，３−ｄ］ピリミジン誘導体である；ｍ）ｃ−Ｍｅｔの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、とりわけｃ−Ｍｅｔ受容体のキナーゼ活性を阻害する化合物などのｃ−Ｍｅｔ受容体の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、またはｃ−Ｍｅｔの細胞外ドメインを標的とするかもしくはＨＧＦに結合する抗体、ｎ）以下に限定されないが、ＰＲＴ−０６２０７０、ＳＢ−１５７８、バリシチニブ、パクリチニブ、モメロチニブ、ＶＸ−５０９、ＡＺＤ−１４８０、ＴＧ−１０１３４８、トファシチニブおよびルキソリチニブを含めた、１つまたは複数のＪＡＫファミリーメンバー（ＪＡＫ１／ＪＡＫ２／ＪＡＫ３／ＴＹＫ２および／またはｐａｎ−ＪＡＫ）のキナーゼ活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、ｏ）以下に限定されないが、ＡＴＵ−０２７、ＳＦ−１１２６、ＤＳ−７４２３、ＰＢＩ−０５２０４、ＧＳＫ−２１２６４５８、ＺＳＴＫ−４７４、ブパルリシブ、ピクトレリシブ、ＰＦ−４６９１５０２、ＢＹＬ−７１９、ダクトリシブ、ＸＬ−１４７、ＸＬ−７６５およびイデラリシブを含めた、ＰＩ３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）のキナーゼ活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物、および；およびｑ）以下に限定されないが、シクロパミン、ビスモデギブ、イトラコナゾール、エリスモデギブおよびＩＰＩ−９２６（サリデギブ）を含めた、ヘッジホッグタンパク質（Ｈｈ）またはスムーズンド受容体（ＳＭＯ）経路のシグナル伝達作用を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物などを含む。

【0151】

用語「ＰＩ３Ｋ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ＰＩ３Ｋα、ＰＩ３Ｋγ、ＰＩ３Ｋδ、ＰＩ３Ｋβ、ＰＩ３Ｋ−Ｃ２α、ＰＩ３Ｋ−Ｃ２β、ＰＩ３Ｋ−Ｃ２γ、Ｖｐｓ３４、ｐ１１０−α、ｐ１１０−β、ｐ１１０−γ、ｐ１１０−δ、ｐ８５−α、ｐ８５−β、ｐ５５−γ、ｐ１５０、ｐ１０１およびｐ８７を含めた、ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼファミリーにおける、１つまたは複数の酵素に対する阻害活性を有する化合物を含むが、これらに限定されない。本発明において有用なＰＩ３Ｋ阻害剤の例は、以下に限定されないが、ＡＴＵ−０２７、ＳＦ−１１２６、ＤＳ−７４２３、ＰＢＩ−０５２０４、ＧＳＫ−２１２６４５８、ＺＳＴＫ−４７４、ブパルリシブ、ピクトレリシブ、ＰＦ−４６９１５０２、ＢＹＬ−７１９、ダクトリシブ、ＸＬ−１４７、ＸＬ−７６５およびイデラリシブを含む。

【0152】

用語「Ｂｃｌ−２阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ＡＢＴ−１９９、ＡＢＴ−７３１、ＡＢＴ−７３７、アポゴシポール、Ａｓｃｅｎｔａのｐａｎ−Ｂｃｌ−２阻害剤、クルクミン（およびそのアナログ）、二重Ｂｃｌ−２／Ｂｃｌ−ｘＬ阻害剤（Ｉｎｆｉｎｉｔｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ゲナセンス（Ｇ３１３９）、ＨＡ１４−１（およびそのアナログ；ＷＯ２００８１１８８０２を参照されたい）、ナビトクラックス（およびそのアナログ、ＵＳ７３９０７９９を参照されたい）、ＮＨ−１（Ｓｈｅｎａｙｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）、オバトクラックス（およびそのアナログ、ＷＯ２００４１０６３２８を参照されたい）、Ｓ−００１（Ｇｌｏｒｉａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、ＴＷシリーズの化合物（Ｕｎｉｖ． ｏｆ Ｍｉｃｈｉｇａｎ）およびベネトクラックスを含めた、Ｂ細胞リンパ腫２タンパク質（Ｂｃｌ−２）に対する阻害活性を有する化合物を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、Ｂｃｌ−２阻害剤は、低分子治療剤である。一部の実施形態では、Ｂｃｌ−２阻害剤は、ペプチド模倣薬である。

【0153】

用語「ＢＴＫ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ＡＶＬ−２９２およびイブルチニブを含めた、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）に対して阻害活性を有する化合物を含むが、それらに限定されない。

【0154】

用語「ＳＹＫ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ＰＲＴ−０６２０７０、Ｒ−３４３、Ｒ−３３３、エクセレア、ＰＲＴ−０６２６０７およびフォスタマチニブを含めた、脾臓チロシンキナーゼ（ＳＹＫ）に対する阻害活性を有する化合物であるが、これらに限定されない。

【0155】

ＢＴＫ阻害性化合物のさらなる例、および本発明の化合物と組み合わせて、このような化合物により処置可能な状態は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれている、ＷＯ２００８０３９２１８およびＷＯ２０１１０９０７６０に見出すことができる。

【0156】

ＳＫＹ阻害性化合物のさらなる例、および本発明の化合物と組み合わせて、このような化合物により処置可能な状態は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれている、ＷＯ２００３０６３７９４、ＷＯ２００５００７６２３およびＷＯ２００６０７８８４６に見出すことができる。

【0157】

ＰＩ３Ｋ阻害性化合物のさらなる例、および本発明の化合物と組み合わせて、このような化合物により処置可能な状態は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれている、ＷＯ２００４０１９９７３、ＷＯ２００４０８９９２５、ＷＯ２００７０１６１７６、ＵＳ８１３８３４７、ＷＯ２００２０８８１１２、ＷＯ２００７０８４７８６、ＷＯ２００７１２９１６１、ＷＯ２００６１２２８０６、ＷＯ２００５１１３５５４およびＷＯ２００７０４４７２９に見出すことができる。

【0158】

ＪＡＫ阻害性化合物のさらなる例、および本発明の化合物と組み合わせて、このような化合物により処置可能な状態は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれている、ＷＯ２００９１１４５１２、ＷＯ２００８１０９９４３、ＷＯ２００７０５３４５２、ＷＯ２０００１４２２４６およびＷＯ２００７０７０５１４に見出すことができる。

【0159】

さらなる抗血管新生化合物は、その活性の別の機序、例えば、タンパク質または脂質キナーゼ阻害、例えば、サリドマイド（Ｔｈａｌｏｍｉｄ（商標））およびＴＮＰ−４７０に関連しない機序を有する化合物を含む。

【0160】

本発明の化合物と組み合わせて使用するのに有用なプロテアソーム阻害剤の例には、以下に限定されないが、ボルテゾミブ、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガレート（ＥＧＣＧ）、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、ＯＮＸ−０９１２、ＣＥＰ−１８７７０およびＭＬＮ９７０８が含まれる。

【0161】

タンパク質ホスファターゼまたは脂質ホスファターゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、例えば、ホスファターゼ１、ホスファターゼ２Ａ、またはオカダ酸もしくはその誘導体などのＣＤＣ２５の阻害剤である。

【0162】

細胞分化過程を誘発する化合物には、以下に限定されないが、レチノイン酸、α−、γ−もしくはδ−トコフェロール、またはα−、γ−もしくはδ−トコトリエノールが含まれる。

【0163】

用語シクロオキシゲナーゼ阻害剤は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、Ｃｏｘ−２阻害剤、５−アルキル置換２−アリールアミノフェニル酢酸および誘導体（セレコキシブ（Ｃｅｌｅｂｒｅｘ（商標））、ロフェコキシブ（Ｖｉｏｘｘ（商標））、エトリコキシブ、バルデコキシブなど）、または５−アルキル−２−アリールアミノフェニル酢酸（５−メチル−２−（２’−クロロ−６’−フルオロアニリノ）フェニル酢酸、すなわちルミラコキシブなど）を含む。

【0164】

用語「ビスホスホネート」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、エトリドン酸、クロドロン酸、チルドロン酸、パミドロン酸、アレンドロン酸、イバンドロン酸、リセドロン酸およびゾレドロン酸を含む。エトリドン酸は、商標名Ｄｉｄｒｏｎｅｌ（商標）で販売されている。クロドロン酸は、商標名Ｂｏｎｅｆｏｓ（商標）で販売されている。チルドロン酸は、商標名Ｓｋｅｌｉｄ（商標）で販売されている。パミドロン酸は、商標名Ａｒｅｄｉａ（商標）で販売されている。アレンドロン酸は、商標名Ｆｏｓａｍａｘ（商標）で販売されている。イバンドロン酸は、商標名Ｂｏｎｄｒａｎａｔ（商標）で販売されている。リセドロン酸は、商標名Ａｃｔｏｎｅｌ（商標）で販売されている。ゾレドロン酸は、商標名Ｚｏｍｅｔａ（商標）で販売されている。用語「ｍＴＯＲ阻害剤」は、ラパマイシン（ｍＴＯＲ）の哺乳動物標的を阻害し、シロリムス（Ｒａｐａｍｕｎｅ（登録商標））、エベロリムス（Ｃｅｒｔｉｃａｎ（商標））、ＣＣＩ−７７９およびＡＢＴ５７８などの抗増殖活性を有する化合物に関する。

【0165】

用語「ヘパラナーゼ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、ヘパリン硫酸分解を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物を指す。この用語は、以下に限定されないが、ＰＩ−８８を含む。用語「生物学的応答調節剤」とは、本明細書で使用する場合、リンホカインまたはインターフェロンを指す。

【0166】

Ｈ−Ｒａｓ、Ｋ−ＲａｓまたはＮ−Ｒａｓなどの用語「Ｒａｓ発がんアイソフォームの阻害剤」は、本明細書で使用する場合、Ｒａｓの発がん活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；例えば、Ｌ−７４４８３２、ＤＫ８Ｇ５５７またはＲ１１５７７７（Ｚａｒｎｅｓｔｒａ（商標））などの「ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤」を指す。用語「テロメラーゼ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、テロメラーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物を指す。テロメラーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、とりわけ、テロメスタチンなどのテロメラーゼ受容体を阻害する化合物である。

【0167】

用語「メチオニンアミノペプチダーゼ阻害剤」は、本明細書で使用する場合、メチオニンアミノペプチダーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物を指す。メチオニンアミノペプチダーゼの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、以下に限定されないが、ベンガミドまたはその誘導体を含む。

【0168】

用語「プロテアソーム阻害剤」は、本明細書で使用する場合、プロテアソームの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物を指す。プロテアソームの活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、以下に限定されないが、ボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ（商標））およびＭＬＮ３４１を含む。

【0169】

用語「マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤」または（「ＭＭＰ」阻害剤）は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、コラーゲンペプチド模倣阻害剤およびコラーゲン非ペプチド模倣阻害剤、テトラサイクリン誘導体、例えばヒドロキサメートペプチド模倣阻害剤であるバチマスタットおよびその経口により生物学的に利用可能なアナログであるマリマスタット（ＢＢ−２５１６）、プリノマスタット（ＡＧ３３４０）、メタスタット（ＮＳＣ６８３５５１） ＢＭＳ−２７９２５１、ＢＡＹ１２−９５６６、ＴＡＡ２１１、ＭＭＩ２７０ＢまたはＡＡＪ９９６を含む。

【0170】

用語「血液悪性腫瘍の処置に使用される化合物」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ＦＭＳ様チロシンキナーゼ型受容体（Ｆｌｔ−３Ｒ）の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物であるＦＭＳ様チロシンキナーゼ阻害剤；インターフェロン、１−β−Ｄ−アラビノフランシルシトシン（ａｒａ−ｃ）およびビスルファン；および未分化リンパ腫キナーゼを標的とする、低下させるまたは阻害する化合物であるＡＬＫ阻害剤を含む。

【0171】

ＦＭＳ様チロシンキナーゼ型受容体（Ｆｌｔ−３Ｒ）の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、とりわけ、ＰＫＣ４１２、ミドスタウリン、スタウロスポリン誘導体、ＳＵ１１２４８およびＭＬＮ５１８などのＦｌｔ−３Ｒ受容体キナーゼファミリーメンバーを阻害する化合物、タンパク質または抗体である。

【0172】

用語「ＨＳＰ９０阻害剤」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、ＨＳＰ９０の内在性ＡＴＰアーゼ活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物；ＨＳＰ９０クライアントタンパク質をユビキチンプロテアソーム経路を介して分解する、標的とする、低下させるまたは阻害する化合物を含む。ＨＳＰ９０の内在性ＡＴＰアーゼ活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、とりわけ、１７−アリルアミノ，１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７ＡＡＧ）、ゲルダナマイシン誘導体などのＨＳＰ９０のＡＴＰアーゼ活性を阻害する化合物、タンパク質または抗体；他のゲルダナマイシン関連化合物；ラジシコールおよびＨＤＡＣ阻害剤である。

【0173】

用語「抗増殖抗体」は、本明細書で使用する場合、以下に限定されないが、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（商標））、トラスツズマブ−ＤＭ１、アービタックス（ｅｒｂｉｔｕｘ）、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（商標））、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標））、ＰＲＯ６４５５３（抗ＣＤ４０）および２Ｃ４抗体を含む。抗体とは、インタクトなモノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つのインタクトな抗体および抗体断片から形成される多重特異的抗体を意味し、それらが所望の生物活性を示すことに限る。

【0174】

急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の処置に関して、本発明の化合物は、とりわけ、ＡＭＬの処置に使用される治療法と組み合わせた、標準白血病治療法と組み合わせて使用することができる。特に、本発明の化合物は、例えば、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、および／またはダウノルビシン、アドリアマイシン、Ａｒａ−Ｃ、ＶＰ−１６、テニポシド、ミトキサントロン、イダルビシン、カルボプラチンおよびＰＫＣ４１２などのＡＭＬの処置に有用な他の薬物と組み合わせて投与することができる。

【0175】

他の抗白血病化合物は、例えば、デオキシシチジンの２’−アルファ−ヒドロキシリボース（アラビノシド）誘導体である、ピリミジンアナログであるＡｒａ−Ｃを含む。同様に、ヒポキサンチン、６−メルカプトプリン（６−ＭＰ）およびリン酸フルダラビンのプリン誘導体も含まれる。酪酸ナトリウムおよびスベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）などのヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤の活性を標的とする、低下させるまたは阻害する化合物は、ヒストンデアセチラーゼとして公知の酵素の活性を阻害する。具体的なＨＤＡＣ阻害剤には、ＭＳ２７５、ＳＡＨＡ、ＦＫ２２８（以前は、ＦＲ９０１２２８）、トリコスタチンＡ、および以下に限定されないが、Ｎ−ヒドロキシ−３−［４−［［［２−（２−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドまたは薬学的に許容されるその塩、およびＮ−ヒドロキシ−３−［４−［（２−ヒドロキシエチル）｛２−（１Ｈ−インドール−３−イル）エチル］−アミノ］メチル］フェニル］−２Ｅ−２−プロペンアミドまたは薬学的に許容されるその塩、とりわけ乳酸塩を含めた、ＵＳ６，５５２，０６５に開示されている化合物が含まれる。ソマトスタチン受容体アンタゴニストとは、本明細書で使用する場合、オクトレオチドおよびＳＯＭ２３０などのソマトスタチン受容体を標的とする、処置するまたは阻害する化合物を指す。腫瘍細胞を損傷する手法は、電離放射線などの手法を指す。上および本明細書のこれ以後に言及されている用語「電離放射線」は、電磁波（Ｘ線およびガンマ線など）または粒子（アルファおよびベータ粒子など）のどちらかとして発生する電離放射線を意味する。電離放射線は、以下に限定されないが、放射線療法において供給され、当技術分野において公知である。Hellman、Principles of Radiation Therapy, Cancer, in Principles and Practice of Oncology、Devitaら（編）、第４版、１巻、２４８〜２７５頁（１９９３年）を参照されたい。

【0176】

同様に、ＥＤＧ結合剤およびリボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤も含まれる。用語「ＥＤＧ結合剤」とは、本明細書で使用する場合、ＦＴＹ７２０などのリンパ球再循環をモジュレートする免疫抑制剤のクラスを指す。用語「リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤」とは、以下に限定されないが、フルダラビン、および／もしくはシトシンアラビノシド（ａｒａ−Ｃ）、６-チオグアニン、５−フルオロウラシル、クラドリビン、６−メルカプトプリン（とりわけ、ＡＬＬに対してａｒａ−Ｃと組み合わせて）、および／もしくはペントスタチンを含めた、ピリミジンまたはプリンヌクレオシドアナログを指す。リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤は、とりわけ、ヒドロキシ尿素または２−ヒドロキシ−１Ｈ−イソインドール−１，３−ジオン誘導体である。

【0177】

同様に、１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジンまたは薬学的に許容されるその塩、１−（４−クロロアニリノ）−４−（４−ピリジルメチル）フタラジンコハク酸塩などのＶＥＧＦのそのような化合物、タンパク質またはモノクローナル抗体；Ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ（商標）；Ｅｎｄｏｓｔａｔｉｎ（商標）；アントラニル酸アミド；ＺＤ４１９０；ＺＤ６４７４；ＳＵ５４１６；ＳＵ６６６８；ベバシズマブ；またはｒｈｕＭＡｂおよびＲＨＵＦａｂなどの抗ＶＥＧＦ抗体もしくは抗ＶＥＧＦ受容体抗体、マクゴンなどのＶＥＧＦアプタマー；ＦＬＴ−４阻害剤、ＦＬＴ−３阻害剤、ＶＥＧＦＲ−２ ＩｇＧＩ抗体、アンジオザイム（ＲＰＩ４６１０）およびベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（商標））が含まれる。

【0178】

光線力学療法は、本明細書で使用する場合、がんを処置または予防するための光感受性化合物として公知のある特定の化学品を使用する治療法を指す。光線力学療法の例は、Ｖｉｓｕｄｙｎｅ（商標）およびポルフィマーナトリウムなどの化合物による処置を含む。

【0179】

血管新生抑制性ステロイド（Angiostatic steroid）は、本明細書で使用する場合、例えば、アネコルタブ、トリアムシノロン、ヒドロコルチゾン、１１−α−エピヒドロコチゾール、コルテキソロン、１７α−ヒドロキシプロゲステロン、コルチコステロン、デスオキシコルチコステロン、テストステロン、エストロンおよびデキサタサゾンなどの血管新生を遮断または阻害する化合物を指す。

【0180】

コルチコステロイドを含有する埋込物（implant）は、フルオシノロンおよびデキサタサゾンなどの化合物を指す。

【0181】

他の化学治療用化合物は、以下に限定されないが、植物アルカロイド、ホルモン化合物およびアンタゴニスト；生物学的応答調節剤、好ましくはリンホカインまたはインターフェロン；アンチセンスオリゴヌクレオチドまたはオリゴヌクレオチド誘導体；ｓｈＲＮＡまたはｓｉＲＮＡ；あるいはその他の化合物または他のもしくは未知の作用機序を有する化合物を含む。

【0182】

コード番号、一般名または商標名によって特定される活性化合物の構造は、標準概説「The Merck Index」の現行版からまたはデータベース、例えばＰａｔｅｎｔｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（例えばＩＭＳ Ｗｏｒｌｄ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ）から入手することができる。

【0183】

本発明の化合物はまた、公知の治療的方法、例えばホルモン投与または放射線照射施用と組み合わせて使用されてもよい。ある特定の実施形態では、提供される化合物は、放射線増感剤として、とりわけ放射線治療に乏しい感受性を示す腫瘍の処置に使用される。

【0184】

本発明の化合物は、単独で、または１つもしくは複数の他の治療用化合物と組み合わせて投与することができ、可能な併用療法は、固定した組合せ形態、あるいは時間差を設けて、または互いに独立に投与される本発明の化合物と１つもしくは複数の他の治療用化合物との投与、あるいは固定した組合せと１つもしくは複数の他の治療用化合物の併用投与をとる。本発明の化合物は、その他に、または追加的に、とりわけ、化学療法、放射線治療、免疫療法、光線療法、外科的介入、またはこれらの組合せと組み合わせて、腫瘍治療のために投与することができる。長期治療法は、上記の通り、他の処置戦略の文脈では、アジュバント治療法と同等に可能である。他の可能な処置は、腫瘍退縮後の患者の状態を維持するための治療法であるか、または例えばリスクのある患者における化学的予防治療法にもなる。

【0185】

それらの追加剤は、複数の投与量レジメンの一部として、本発明の化合物を含有する組成物から、個別に投与されてもよい。あるいは、それらの剤は、単一組成物中の本発明の化合物と一緒に混合された、単回剤形の一部であってもよい。複数の投与量レジメンの一部として投与する場合、２種の活性剤は、同時に、逐次に、または通常、互いに５時間内の相互の期間内に投与することができる。

【0186】

本明細書で使用する場合、用語「組合せ」、「組み合わせた」および関連する用語は、本発明による治療剤の同時投与または逐次投与を指す。例えば、本発明の化合物は、別の治療剤と同時に、または個別の単位剤形で逐次、または単一単位剤形で一緒に投与されてもよい。したがって、本発明は、本発明の化合物、追加の治療剤、および薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを含む単一単位剤形を提供する。

【0187】

担体材料と組み合わせて単回剤形を生成するための、本発明の化合物と追加の治療剤（上記の追加の治療剤を含むそうした組成物中）の両方の量は、処置される宿主および特定の投与形式に応じて様々になる。好ましくは、本発明の組成物は、本発明の化合物が０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の間の投与量で投与され得るよう製剤化すべきである。

【0188】

追加の治療剤を含むそのような組成物では、そうした追加の治療剤および本発明の化合物は、相乗的に作用することがある。したがって、このような組成物中の追加の治療剤の量は、その治療剤しか利用しない単剤療法に必要とされる量未満である。このような組成物では、０．０１〜１，０００μｇ／ｋｇ体重／日の間の投与量の追加の治療剤が投与され得る。

【0189】

本発明の組成物に存在する追加の治療剤の量は、活性剤単独として治療剤を含む組成物中で、通常、投与される量以下である。好ましくは、開示されている組成物中の追加の治療剤の量は、その剤を含む組成物中に、治療活性剤単独として通常、存在している量の約５０％〜１００％の範囲である。

【0190】

本発明の化合物またはその医薬組成物はまた、補綴物、人工弁、脈管移植片、ステントおよびカテーテルなどの埋込式医療用デバイスをコーティングするための組成物に組み込まれてもよい。例えば、血管ステントは、再狭窄（損傷後の血管壁の再狭小化）を克服するために使用されてきた。しかし、ステントまたは他の埋込式デバイスを使用する患者は、凝血形成または血小板活性化というリスクがある。これらの望ましくない作用は、キナーゼ阻害剤を含む薬学的に許容される組成物によりデバイスを予めコーティングすることによって予防または軽減することができる。本発明の化合物によりコーティングされる埋込式デバイスは、本発明の別の実施形態である。

【実施例】

【0191】

例証
以下の実施例に図示されている通り、ある例示的な実施形態では、化合物は、以下の一般手順に従って調製する。一般方法は、本発明のある化合物の合成を図示しているが、以下の一般的な方法および当業者に公知の他の方法は、本明細書に記載されているすべての化合物、ならびにこれらの化合物のそれぞれの部分クラスおよび種に適用することができることが認識される。

【0192】

実験項目に使用されている略語の一覧表示。
４Ａ ＭＳ：４Åモレキュラーシーブ
ＡｃＯＨ：酢酸
ＡＣＮ：アセトニトリル
Ａｎｈｙｄ：無水
Ａｑ：水性、水溶液
Ｂｎ：ベンジル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ＣｂｚＣｌ：クロロギ酸ベンジル
Ｃｂｚ−ＯＳＵ：Ｎ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド
Ｃｕ（ＯＡｃ）_２：酢酸銅（ＩＩ）
ｄ：日数、日間
ＤＡＳＴ：三フッ化ジエチルアミノ硫黄
ＤＢＵ：１，８−ジアゾビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン
ＤＣＥ：１，２−ジクロロエタン
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＥＡ：ジエチルアミン
ＤＩＢＡＬ−Ｈ：水素化ジイソブチルアルミニウム
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＤＭＡＰ：４−ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ−ジメチルスルホキシド
ＤＰＰＡ：ジフェニルホスホリルアジド
ＥＤＣ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩
ｅｅ：鏡像異性体過剰率
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
Ｅｔ_３Ｎ：トリエチルアミン
Ｅｔ_２Ｏ：ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル
ＥｔＯＨ：エタノール
Ｆｍｏｃ：フルオレニルメチルオキシカルボニル
Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ：Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニルオキシ）スクシンイミド
ｈ：時間
ＨＡＴＵ：１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＣＯＯＮＨ_４：ギ酸アンモニウム
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＩＢＸ：２−ヨードオキシ安息香酸
ＩＰＡ：イソプロピルアルコール
ＫＯＡｃ：酢酸カリウム
Ｍ：モル濃度
Ｍｅ：メチル
ＭｅＯＨ：メタノール
ｍｉｎｓ：分
ｍＬ：ミリリットル
ｍＭ：ミリモル濃度
ｍｍｏｌ：ミリモル
ＭＴＢＥ：メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル
ＮａＢＨ_３ＣＮ：シアノ水素化ホウ素ナトリウム
Ｎａ_２ＣＯ_３：炭酸ナトリウム
ＮａＨＣＯ_３：炭酸水素ナトリウム
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリジン
ＮＭＲ：核磁気共鳴
^ｏＣ：摂氏度
ＰＢＳ：リン酸緩衝食塩水
Ｐｄ／Ｃ：パラジウム炭素
Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ：パールマン触媒
ＰＥ：石油エーテル
ＰｈＮＨ_２：アニリン
ＰＰｈ_３：トリフェニルホスフィン
Ｒｅｌ：相対
ｒｔ：室温
ｓａｔ：飽和
ＳＦＣ：超臨界流体クロマトグラフィー
ＳＯＣｌ_２：塩化チオニル
ＴＢＡＢ：臭化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム
ｔＢｕＯＫ：カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド
ＴＥＡ：トリエチルアミン
Ｔｆ：トリフルオロメタンスルホネート
ＴｆＡＡ：トリフルオロメタンスルホン酸無水物
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸（trifluoracetic acid）
ＴＩＰＳ：トリイソプロピルシリル
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＭＳＣＮ：シアン化トリメチルシリル
ｐＴＳＡ：パラ−トルエンスルホン酸
ＴｓＯＨ：ｐ−トルエンスルホン酸

【0193】

提供される化合物の代表的な非限定例の調製が、以下に記載されている。

【0194】

（実施例１）（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１］。

【化11】

合成スキーム：

【化12】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−４−メチルペンタン酸：

【0195】

（Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタン酸（２．０ｇ、１５．２４ｍｍｏｌ）の溶液にホルムアルデヒド（３８％、２４．０ｇ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５００ｍｇ）を加え、得られた溶液をろ過した（６０ｍＬ）。この混合物を室温で２日間、水素化し、ろ過して、触媒を除去した。このろ液を濃縮乾固して、この残留物にＥｔＯＨ（３０ｍＬ）を加えた。この混合物を１時間、撹拌してろ過した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−（ジメチルアミノ）−４−メチルペンタン酸（１．３ｇ、８．１６ｍｍｏｌ、５３％）が白色粉末として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１６０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (400 MHz, MeOD-d₄): δ 3.47 (dd, J = 4.4 Hz, 10.0 Hz, 1H), 2.85 (S, 6H), 1.89-1.74 (m, 2H), 1.62-1.55 (m, 1H), 1.00 (dd, J = 2.8 Hz, 6.8 Hz, 6H).

【0196】

（実施例２および３）（Ｓ）−２−アミノ−７，７，７−トリフルオロヘプタン酸塩酸塩［Ｉ−２］および（Ｒ）−２−アミノ−７，７，７−トリフルオロヘプタン酸塩酸塩［Ｉ−３］。

【化13】

合成スキーム：

【化14】

手順および特性決定：
ステップ１：１，１，１−トリフルオロ−５−ヨードペンタン：

【0197】

５，５，５−トリフルオロペンタン−１−オール（２．０ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）、イミダゾール（１．４８ｇ、２１．７ｍｍｏｌ）およびＰＰｈ_３（５．５ｇ、２１．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いてＩ_２（４．４５ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。上の混合物にＥｔ_２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、次に、１０分間、撹拌した。この混合物をろ過し、大気圧下で、ろ液を６５℃で蒸発させて溶媒を除去し、残留物をＥｔ_２Ｏ（３０ｍＬ）により希釈し、この混合物をろ過してろ液を次のステップに使用した。
ステップ２：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエートおよび（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート：

【0198】

トルエン（３５ｍＬ）およびＤＣＭ（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（２．０ｇ、６．７８ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＢ（１０９ｍｇ、０．３３９ｍｍｏｌ）の溶液に、−１０℃でＫＯＨ（５０％、２０ｍＬ）を加え、５分後に、上の１，１，１−トリフルオロ−５−ヨードペンタンのＥｔ_２Ｏ（３０ｍＬ）中溶液を５分間かけて滴下して加え、得られた混合物を−１０℃〜０℃で１時間、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（１００ｍＬ）により抽出した。有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／１０）、次に、キラル分取ＨＰＬＣ［カラム、Ｒ，Ｒ−ｗｈｅｌｋ−ｏｌ ４．６^＊２５０ｍｍ ５ｕｍ；溶媒、ＭｅＯＨ（０．２％のメタノールアンモニア）］により精製すると、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、７．１％）および（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、７．１％）が得られた。

【0199】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、７．１％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２４３．１［Ｍ＋Ｈ］＋．¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 8.64 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.43-7.46 (m, 3H), 7.38-7.39 (m, 1H), 7.31-7.34 (m, 2H), 7.15-7.17 (m, 2H), 3.91 (dd, J = 5.5 Hz, 7.5 Hz, 1H), 2.00-2.05 (m, 2H), 1.88-1.92 (m, 2H), 1.31-1.52 (m, 13H).

【0200】

（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、７．１％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋，ｍ／ｚ）：２４３．１［Ｍ＋Ｈ］＋。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 8.64 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.43-7.46 (m, 3H), 7.38-7.39 (m, 1H), 7.31-7.34 (m, 2H), 7.15-7.17 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 5.5 Hz, 7.5 Hz, 1H), 2.00-2.05 (m, 2H), 1.88-1.92 (m, 2H), 1.31-1.52 (m, 13H).

【0201】

ステップ３：（Ｓ）−２−アミノ−７，７，７−トリフルオロヘプタン酸塩酸塩［Ｉ−２］：

【0202】

６Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）およびジオキサン（５ｍＬ）中の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の溶液を１７時間、１００℃に加熱した。溶液をＥｔ_２Ｏ（１０ｍＬ×２）により抽出し、水相を濃縮乾固すると、（Ｓ）−２−アミノ−７，７，７−トリフルオロヘプタン酸塩酸塩（Ｉ−２）が白色固体（８２．７ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、７４％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２００．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H NMR (500 MHz, D₂O) δ 3.93 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.10-2.15 (m, 2H), 1.83-1.90 (m, 2H), 1.40-1.56 (m, 4H).

【0203】

ステップ４：（Ｒ）−２−アミノ−７，７，７−トリフルオロヘプタン酸塩酸塩［Ｉ−３］：

【0204】

６Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）およびジオキサン（５ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−７，７，７−トリフルオロヘプタノエート（２００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）の溶液を１７時間、１００℃に加熱した。溶液をＥｔ_２Ｏ（１０ｍＬ×２）により抽出し、水相を濃縮乾固すると、（Ｒ）−２−アミノ−７，７，７−トリフルオロヘプタン酸塩酸塩（Ｉ−３）が白色固体（９１．６ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ、８２％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２００．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H NMR (500 MHz, D₂O) δ 3.92 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.09 - 2.14 (m, 2H), 1.82 - 1.89 (m, 2H), 1.39 - 1.55 (m, 4H).

【0205】

（実施例４および５）（Ｓ）−２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸［Ｉ−４］および（Ｒ）−２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸［Ｉ−５］。

【化15】

合成スキーム：

【化16】

手順および特性決定：

【0206】

ステップ１：（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸

【0207】

２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸（１．０ｇ、６．３６ｍｍｏｌ）およびＮａＨＣＯ_３（５８９ｍｇ、７．０１ｍｍｏｌ）のアセトン（６０ｍＬ）中溶液に、Ｎ−（ベンジルオキシカルボニルオキシ）スクシンイミド（１．７５ｇ、７．０１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、得られた溶液（６０ｍＬ）を０℃でろ過した。この混合物を室温で１６時間、撹拌した。この反応混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（２×１００ｍＬ）により抽出し、水層をＨＣｌ（３Ｍ）により酸性にして約ｐＨ４にし、次に、ＥｔＯＡｃ（３×１５０ｍＬ）により抽出した。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、溶媒を真空下で蒸発させた。得られた粗生成物をキラル分取ＨＰＬＣ（カラム、ＡＹ−Ｈ ４．６^＊２５０ｍｍ ５ｕｍ；溶媒、ＥｔＯＨ）により精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸（７００ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ、３７．８％）および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸（７００ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ、３７．８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３１４．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。

【0208】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸。¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆): δ 13.20 (s, 1H), 7.84 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.40-7.30 (m, 5H), 5.06 (s, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 2.85-2.58 (m, 2H).

【0209】

（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸。¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 13.21 (s, 1H), 7.85 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 5H), 5.06 (s, 2H), 4.31-4.27 (m, 1H), 2.83-2.59 (m, 2H).

【0210】

ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸［Ｉ−４］。

【0211】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸（７００ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（２００ｍｇ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中混合物を水素雰囲気下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸（Ｉ−４）（２５０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ、６６．３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１５８．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6 + 1滴のTFA + 1滴のD2O): δ 4.32 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.03-2.82 (m, 2H).

【0212】

ステップ３：（Ｒ）−２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸［Ｉ−５］。

【0213】

（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４，４，４−トリフルオロブタン酸（７００ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（２００ｍｇ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中混合物を水素雰囲気下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｒ）−２−アミノ−４，４，４−トリフルオロブタン酸（Ｉ−５）（２５０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ、６６．３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１５８．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆ + 1滴のTFA + 1滴のD₂O): δ 4.31 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.03-2.83 (m, 2H).

【0214】

（実施例６および７）（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸［Ｉ−６］および（Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸［Ｉ−７］。

【化17】

合成スキーム：

【化18】

手順および特性決定：

【0215】

ステップ１：４，４，４−トリフルオロブタナール：

【0216】

４，４，４−トリフルオロブタン−１−オール（４．０ｇ、３１．３ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（８０ｍＬ）中溶液に、氷浴下、ＩＢＸ（１３．０ｇ、４６．９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。この反応混合物を水（２００ｍＬ）に注ぎ入れ、Ｅｔ２Ｏ（１００ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×３）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、この溶液を次のステップに使用した。

【0217】

ステップ２：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタンニトリル：

【0218】

上の４，４，４−トリフルオロブタナールのＥｔ２Ｏ（２００ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いてベンジルアミン（４ｍＬ）、ＡｃＯＨ（３．０ｍＬ）、次にＴＭＳＣＮ（３．５ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈してＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して真空で濃縮すると２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタンニトリル（６．７ｇ、粗製）が褐色固体として得られ、これを次のステップに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２４３．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0219】

ステップ３：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸：

【0220】

濃ＨＣｌ（８０ｍＬ）およびＡｃＯＨ（３０ｍＬ）中の２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタンニトリル（６．７ｇ、粗製）の溶液を１７時間、９５℃に加熱した。この溶液を濃縮乾固し、ＡＣＮ（５０ｍＬ）により希釈し、得られた溶液をろ過し（１００ｍＬ）、ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ_３溶液により３〜４に調整して、この混合物をろ過して乾燥すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（３．５ｇ、１３．４ｍｍｏｌ、３ステップで４３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２６２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0221】

ステップ４：２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸：

【0222】

２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（３．３ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２０％、４００ｍｇ）のＡｃＯＨ（６０ｍＬ）中混合物を、３０℃で１７時間、撹拌した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮乾固すると２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（３．０ｇ、粗製）が褐色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１７２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。＼

【0223】

ステップ５：（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸：

【0224】

飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）溶液およびアセトン（１００ｍＬ）中の２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（３．０ｇ、粗製）の溶液に、氷浴を用いてＣｂｚ−ＯＳｕ（３．４５ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を加え、２時間後、この混合物を６Ｍ ＨＣｌによりｐＨ３に調整してＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（５０ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、真空で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／２）、次に、キラル分取ＨＰＬＣ［カラム、ＡＹ−Ｈ ４．６^＊２５０ｍｍ ５ｕｍ；溶媒、ＭｅＯＨ（０．５％ ＮＨ_４ＯＨ）］によって精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（１．５０ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、２８％、２ステップ）および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（１．５０ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、２ステップ通算で２８％＼）が白色固体として得られた。

【0225】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（１．５０ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、２ステップで２８％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３２８．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 12.86 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31-7.39 (m, 5H), 5.05 (s, 2H), 4.05-4.10 (m, 1H), 2.34-2.41 (m, 1H), 2.21-2.29 (m, 1H), 1.84-1.97 (m, 2H).

【0226】

（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（１．５０ｇ、４．９２ｍｍｏｌ、２８％、２ステップ）ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３２８．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 12.85 (s, 1H), 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.30-7.39 (m, 5H), 5.05 (s, 2H), 4.05-4.10 (m, 1H), 2.34-2.41 (m, 1H), 2.21-2.29 (m, 1H), 1.84-1.97 (m, 2H).

【0227】

ステップ６：（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸［Ｉ−６］：

【0228】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（５００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中混合物を水素下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（Ｉ−６）（２００ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ、７１％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１７２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (400 MHz, DMSO-d₆): δ 8.38 (s, 3H), 4.05 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 2.34-2.55 (m, 2H), 1.95-20.9 (m, 2H).

【0229】

ステップ７：（Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸［Ｉ−７］：

【0230】

（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（５００ｍｇ、１．６４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中混合物を水素下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロペンタン酸（Ｉ−７）（１６０ｍｇ、０．９４ｍｍｏｌ、５７％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１７２．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.38 (s, 3H), 4.05 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 2.34-2.55 (m, 2H), 1.95-20.9 (m, 2H).

【0231】

（実施例８および９）（Ｓ）−２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸［Ｉ−８］および（Ｒ）−２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸［Ｉ−９］。

【化19】

合成スキーム：

【化20】

手順および特性決定：

【0232】

ステップ１：（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸

【0233】

２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（５５６ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）および１Ｍ ＮａＯＨ（２５ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）中溶液に、０℃でクロロギ酸ベンジル（５５４ｍｇ、３．２５ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、この混合物を室温で１６時間、撹拌した。この反応混合物をＤＣＭ（２×１００ｍＬ）により抽出し、水層をＨＣｌ（３Ｍ）により酸性にして約ｐＨ４にし、次に、ＥｔＯＡｃ（３×５０ｍＬ）により抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を真空下で蒸発させた。得られた粗生成物をキラル分取ＨＰＬＣ（カラム：ＡＹ−Ｈ（２５０^＊４．６ｍｍ ５ｕｍ）；移動相：ｎ−ヘキサン（０．１％ＤＥＡ）：ＥｔＯＨ（０．１％ＤＥＡ）＝９０：１０）により精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（２３２ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、２９％）および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（２５０ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ、３１．３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３４２．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。

【0234】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸、1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 12.68 (s, 1H), 7.66 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.38-7.32 (m, 5H), 5.04 (s, 2H), 4.00-3.96 (m, 1H), 2.28-2.19 (m, 2H), 1.80-1.51 (m, 4H).

【0235】

（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸、1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 12.68 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 5H), 5.04 (s, 2H), 4.00-3.96 (m, 1H), 2.33-2.15 (m, 2H), 1.82-1.51 (m, 4H).

【0236】

ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸［Ｉ−８］。

【0237】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（２００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中混合物を水素雰囲気下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（Ｉ−８）（５６．２ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、４８．２％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆ + 1滴のTFA + 1滴のD₂O): δ 3.99 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 2.32-2.30 (m, 2H), 1.91-1.83 (m, 2H), 1.70-1.57 (m, 2H).

【0238】

ステップ３：（Ｒ）−２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸［Ｉ−９］。

【0239】

（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（２５０ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中混合物を水素雰囲気下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（２０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｒ）−２−アミノ−６，６，６−トリフルオロヘキサン酸（Ｉ−９）（４８．８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ、３３．８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d₆ + 1滴のTFA + 1滴のD₂O): δ 3.98 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 3.33-2.28 (m, 2H), 1.93-1.81 (m, 2H), 1.71-1.54 (m, 2H).

【0240】

（実施例１１）（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１１］。

【化21】

合成スキーム：

【化22】

手順および特性決定：

【0241】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−（ベンジルアミノ）−４−メチルペンタノエート：

【0242】

撹拌したｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（８００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中溶液に、ベンズアルデヒド（０．２６ｇ、２．４ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．４ｇ、４．１ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で３０分間、撹拌し、次に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温でさらに５時間、撹拌した。この混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出し、ブライン（５０ｍＬ）により洗浄して、得られた溶液をろ過した（５０ｍＬ）。有機相を濃縮して、分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−（ベンジルアミノ）−４−メチルペンタノエート（２００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ、３２％）が無色油状物として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３１２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, , MeOD): δ 7.41~7.49 (m, 10H), 5.34 (dd, J = 12.0 Hz, 45.0 Hz, 2H), 4.23 (q, J = 12.0 Hz, 2H), 4.07~4.09 (m, 3H), 1.68~1.85 (m, 3H), 0.94 (dd, J = 8.5 Hz, 20.5 Hz, 6H).

【0243】

ステップ２：（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１１］：

【0244】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−（ベンジルアミノ）−４−メチルペンタノエート（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中溶液に１Ｍ ＮａＯＨ（０．５ｍＬ）を加えた。この反応物を室温で４時間、撹拌した。得られた溶液を濃縮して、残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−４−メチルペンタン酸（Ｉ−１１）（２１ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ、５８％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２２２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) : δ 9.32 (s, 1H), 7.43~7.50 (m, 5H), 4.17 (dd, J = 13.0 Hz, 44.0 Hz, 2H), 3.82 (t, J = 6.5 Hz, 1H), 1.68~1.76 (m, 3H), 0.85~0.90 (m, 6H).

【0245】

（実施例１２）（Ｓ）−４−メチル−２−（２−フェニルアセトアミド）ペンタン酸［Ｉ−１２］：

【化23】

合成スキーム：

【化24】

手順および特性決定：

【0246】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（２−フェニルアセトアミド）ペンタノエート：

【0247】

ｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、２−フェニル酢酸（２６０ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７２６ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＰＥＡ（４１０ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で２時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（２−フェニルアセトアミド）ペンタノエート（３００ｍｇ、０．８８ｍｍｏｌ、７０％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３４０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0248】

ステップ２：（Ｓ）−４−メチル−２−（２−フェニルアセトアミド）ペンタン酸［Ｉ−１２］：

【0249】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（２−フェニルアセトアミド）ペンタノエート（２５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、５０℃で３時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して濃縮すると、（Ｓ）−４−メチル−２−（２−フェニルアセトアミド）ペンタン酸（Ｉ−１２）（１００ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ、５４％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２５０．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 7.24-7.32 (m, 5H), 4.44 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.58 (s, 2H), 1.64-1.68 (m, 3H), 0.96 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.91 (d, J = 6.0 Hz, 3H).

【0250】

（実施例１３）（Ｓ）−２−（イソプロピルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１３］：

【化25】

合成スキーム：

【化26】

手順および特性決定：

【0251】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−（イソプロピルアミノ）−４−メチルペンタノエート：

【0252】

撹拌したｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（１．０ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中溶液に、アセトン（１７７ｍｇ、３．０５ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．５ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で３０分間、撹拌し、次に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．２４ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）を加えて、この混合物を室温でさらに３時間、撹拌した。この混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出し、ブライン（５０ｍＬ）により洗浄して、得られた溶液をろ過した（５０ｍＬ）。有機相を濃縮して、分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−（イソプロピルアミノ）−４−メチルペンタノエート（２００ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ、３０％）が無色油状物として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２６４．３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, , MeOD): δ 7.22~7.29 (m, 5H), 5.07 (dd, J = 11.5 Hz, 17.0 Hz, 2H), 3.33(dd, J = 6.5 Hz, 8.5 Hz, 1H), 2.54~2.59 (m, 1H), 1.30~1.48 (m, 3H), 0.72~0.94 (m, 12H).

【0253】

ステップ２：（Ｓ）−２−（イソプロピルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１３］：

【0254】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−（イソプロピルアミノ）−４−メチルペンタノエート（２００ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、室温で２４時間、撹拌した。得られた（result）溶液をろ過して、ろ過物（filtration）を濃縮すると、（Ｓ）−２−（イソプロピルアミノ）−４−メチルペンタン酸（Ｉ−１３）（１００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ、７６％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１７４．３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 3.56 (dd, J = 6.0 Hz, 8.5 Hz, 1H), 3.33~3.40 (m, 1H), 1.75~1.86 (m, 2H), 1.53~1.58 (m, 1H), 1.31~1.36 (m, 6H), 0.96~1.02 (m, 6H). 3.85 (dd, J = 5.5 Hz, 8.5 Hz, 1H), 2.87 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 2.68 (dd, J = 7.5 Hz, 12.0 Hz, 1H), 1.92~1.99 (m, 1H), 1.65~1.78 (m, 3H), 0.88~0.96 (m, 12H).

【0255】

（実施例１４）（Ｓ）−２−（イソブチルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１４］：

【化27】

合成スキーム：

【化28】

手順および特性決定：

【0256】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−（イソブチルアミノ）−４−メチルペンタノエート：

【0257】

撹拌したｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（１．０ｇ、２．５３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中溶液に、イソブチルアルデヒド（０．２２ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）および酢酸カリウム（０．５ｇ、５．０８ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で３０分間、撹拌し、次に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（０．２４ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温でさらに５時間、撹拌した。この混合物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液（５０ｍＬ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出し、ブライン（５０ｍＬ）により洗浄して、得られた溶液をろ過した（５０ｍＬ）。有機相を濃縮して、分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−（イソブチルアミノ）−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、５０％）が無色油状物として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２７８．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) : δ 9.16 (s, 1H), 9.14 (d, J = 17.5 Hz, 2H), 7.42-7.43 (m, 5H), 5.28 (q, J = 12.0 Hz, 2H), 4.08-4.09 (m, 1H), 2.87-2.89 (m, 1H), 2.65-2.66 (m, 1H), 1.91-1.95 (m, 1H), 1.62~1.71 (m, 3H), 0.88~0.94 (m, 12H).

【0258】

ステップ２：（Ｓ）−２−（イソブチルアミノ）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１４］：

【0259】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−（イソブチルアミノ）−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、室温で２４時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して、ろ過物を濃縮すると、（Ｓ）−２−（イソブチルアミノ）−４−メチルペンタン酸（Ｉ−１４）（１５０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ、７４％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１８８．３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 8.82 (s, 2H), 3.85 (dd, J = 5.5 Hz, 8.5 Hz, 1H), 2.87 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 2.68 (dd, J = 7.5 Hz, 12.0 Hz, 1H), 1.92~1.99 (m, 1H), 1.65~1.78 (m, 3H), 0.88~0.96 (m, 12H).

【0260】

（実施例１５）（Ｓ）−２−ベンズアミド−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１５］：

【化29】

合成スキーム：

【化30】

手順および特性決定：

【0261】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−ベンズアミド−４−メチルペンタノエート：

【0262】

ｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、安息香酸（２２３ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７２６ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＰＥＡ（４１０ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で２時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−ベンズアミド−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ、７３％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３２６．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0263】

ステップ２：（Ｓ）−２−ベンズアミド−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１５］：

【0264】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−ベンズアミド−４−メチルペンタノエート（１００ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、５０℃で３時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して濃縮すると、（Ｓ）−２−ベンズアミド−４−メチルペンタン酸（Ｉ−１５）（１００ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、６５％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２３６．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (400 MHz, MeOD): δ 7.87 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 7.47-7.57 (m, 3H), 4.69 (dd, J = 4.0 Hz, 11.0 Hz, 1H), 1.75-1.84 (m, 3H), 1.01 (dd, J = 6.5 Hz, 10.5 Hz, 6H).

【0265】

（実施例１６）（Ｓ）−２−イソブチルアミド−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１６］：

【化31】

合成スキーム：

【化32】

手順および特性決定：

【0266】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−イソブチルアミド−４−メチルペンタノエート：

【0267】

ｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、イソ酪酸（１６８ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７２６ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、ＤＩＰＥＡ（４１０ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で２時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−イソブチルアミド−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、８１％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２９２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0268】

ステップ２：（Ｓ）−２−イソブチルアミド−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１６］：

【0269】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンカルボキサミド）−４−メチルペンタノエート（２００ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、５０℃で３時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して濃縮すると、（Ｓ）−２−イソブチルアミド−４−メチルペンタン酸（１００ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ、７３％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２０２．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (400 MHz, MeOD): δ 4.43 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 2.49-2.56 (m, 1H), 1.60-1.74 (m, 3H), 1.12 (dd, J = 2.4 Hz, 6.8 Hz, 6H), 0.96 (dd, J = 6.4 Hz, 16.0 Hz, 6H).

【0270】

（実施例１７）（Ｓ）−２−（シクロヘキサンスルホンアミド）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１７］：

【化33】

合成スキーム：

【化34】

手順および特性決定：

【0271】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンスルホンアミド）−４−メチルペンタノエート：

【0272】

氷浴で冷却した、（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−４−メチルペンタノエート４−メチルベンゼンスルホネート（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（６４２．８９ｍｇ、６．３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に、塩化シクロヘキサンスルホニル（２７８．５３ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を２５℃で２時間、撹拌した。この溶液を酢酸エチル（１０ｍＬ）により希釈してブライン（１０ｍＬ）により洗浄し、得られた溶液をろ過し（１０ｍＬ×３）、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンスルホンアミド）−４−メチルペンタノエート（２００ｍｇ、０．５４４ｍｍｏｌ、９８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３６８．３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H -NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.70 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 5.14 (q, J = 12.5 Hz, 2H), 3.91 (td, J = 5.0 Hz, 9.5 Hz, 1H), 2.69-2.74 (m, 1H), 2.05 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.97 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.74 - 1.67 (m, 2H), 1.57 - 1.51 (m, 2H), 1.50 - 1.44 (m, 1H), 1.36 - 0.99 (m, 5H), 0.87 (dt, J = 10.5 Hz, J = 20.5 Hz, 6H).

【0273】

ステップ２：（Ｓ）−２−（シクロヘキサンスルホンアミド）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１７］：

【0274】

（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンスルホンアミド）−４−メチルペンタノエート（１９２ｍｇ、０．５５２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％）を加えた。この反応混合物を水素下、５０℃で４時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−（シクロヘキサンスルホンアミド）−４−メチルペンタン酸（Ｉ−１７）（２３．３ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ、１００％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３００．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋。¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.75 (s, 1H), 7.47 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.76 (td, J = 5.0 Hz, 9.5 Hz, 1H), 2.82 - 2.69 (m, 1H), 2.18 - 1.97 (m, 2H), 1.82 - 1.69 (m, 3H), 1.61 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.54 - 1.40 (m, 2H), 1.39 - 1.07 (m, 5H), 0.95 - 0.80 (m, 6H).

【0275】

（実施例１８）（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタン酸［Ｉ−１８］：

【化35】

合成スキーム：

【化36】

手順および特性決定：

【0276】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタノエート：

【0277】

氷浴で冷却した、（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−４−メチルペンタノエート４−メチルベンゼンスルホネート（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（６４２．８９ｍｇ、６．３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に、塩化フェニルメタンスルホニル（２９０．７１ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を２５℃で２時間、撹拌した。この溶液を酢酸エチル（１０ｍＬ）により希釈してブライン（１０ｍＬ）により洗浄し、得られた溶液をろ過し（１０ｍＬ×３）、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタノエート（１４９ｍｇ、０．３９６ｍｍｏｌ、９０％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３９８．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。1H -NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.81 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.52 - 7.18 (m, 9H), 5.15 (s, 2H), 4.28 (dd, J = 13.5 Hz, 44.5 Hz, 2H), 3.87 (dd, J = 8.0 Hz, 15.0 Hz, 1H), 1.57 - 1.15 (m, 4H), 0.82 (dd, J = 4.5 Hz, 6.0 Hz, 6H).

【0278】

ステップ２：（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタン酸［Ｉ−１８］：

【0279】

（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタノエート（１２１ｍｇ、０．３２２ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％）を加えた。この反応混合物を水素下、５０℃で４時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタン酸（Ｉ−１８）（４１．２ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ、１００％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３０８．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12.77 (s, 1H), 7.59 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 - 7.25 (m, 5H), 4.30 (dd, J = 13.5 Hz, 37.0 Hz, 2H), 3.75 (dd, J = 7.5 Hz, 15.5 Hz, 1H), 1.65 (dt, J = 6.5 Hz, 13.5 Hz, 1H), 1.45 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 0.85 (dd, J = 1.5 Hz, 6.5 Hz, 6H).

【0280】

（実施例１９）（Ｓ）−４−メチル−２−（メチルスルホンアミド）ペンタン酸［Ｉ−１９］：

【化37】

合成スキーム：

【化38】

手順および特性決定：

【0281】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（メチルスルホンアミド）ペンタノエート：

【0282】

氷浴で冷却した、（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−４−メチルペンタノエート４−メチルベンゼンスルホネート（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（６４２．８９ｍｇ、６．３５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に、塩化メタンスルホニル（２９０．７１ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を２５℃で２時間、撹拌した。この溶液を酢酸エチル（１０ｍＬ）により希釈してブライン（１０ｍＬ）により洗浄し、得られた溶液をろ過し（１０ｍＬ×３）、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（メチルスルホンアミド）ペンタノエート（１９２ｍｇ、０．６４１ｍｍｏｌ、９８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３２３．０［Ｍ＋Ｎａ］^＋。¹H -NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 7.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 4H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 5.16 (s, 2H), 3.97 (td, J = 6.0 Hz, 9.0 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H), 1.68 (dq, J = 6.5 Hz, 13.0 Hz, 1H), 1.54 - 1.46 (m, 2H), 0.91 - 0.82 (m, 6H).

【0283】

ステップ２：（Ｓ）−４−メチル−２−（メチルスルホンアミド）ペンタン酸［Ｉ−１９］：

【0284】

（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（メチルスルホンアミド）ペンタノエート（１４９ｍｇ、０．４９７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％）を加えた。この反応混合物を水素雰囲気下、５０℃で４時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−４−メチル−２−（メチルスルホンアミド）ペンタン酸（Ｉ−１９）（３１．４ｍｇ、０．１５０ｍｍｏｌ、１００％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２３２．１［Ｍ＋Ｎａ］^＋。¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.82 (s, 1H), 7.56 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.82 (dd, J = 8.0 Hz, 15.5 Hz, 1H), 2.88 (s, 3H), 1.72 (dt, J = 6.5 Hz, 13.0 Hz, 1H), 1.48 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 0.89 (t, J = 7.0 Hz, 6H).

【0285】

（実施例２０）（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−Ｎ−フェニルペンタンアミド［Ｉ−２０］：

【化39】

合成スキーム：

【化40】

手順および特性決定：

【0286】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−１−オキソ−１−（フェニルアミノ）ペンタン−２−イルカルバメート：

【0287】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（１．０ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に、室温でアニリン（７０２ｍｇ、７．５５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．７２ｇ、４．５２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１．１４ｇ、１１．３１ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、この溶液をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）により希釈し、ブライン（８０ｍＬ）により洗浄して、得られた溶液をろ過（８０ｍＬ×３）して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／３）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル４−メチル−１−オキソ−１−（フェニルアミノ）ペンタン−２−イルカルバメート（３５０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、２７％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３４１．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0288】

ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−Ｎ−フェニルペンタンアミド［Ｉ−２０］：

【0289】

（Ｓ）−ベンジル４−メチル−１−オキソ−１−（フェニルアミノ）ペンタン−２−イルカルバメート（３５０ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中混合物を水素下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−Ｎ−フェニルペンタンアミド（Ｉ−２０）（１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、４７％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２０７．２［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.86 (s, 1H), 7.63 (dd, J = 1.0 Hz, 8.5 Hz, 2H), 7.31-7.27 (m, 2H), 7.03 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.31 (dd, J = 5.0 Hz, 8.5 Hz, 1H), 1.80-1.71 (m, 1H), 1.50-1.44 (m, 1H), 1.35-1.29 (m, 1H), 0.90 (dd, J = 6.5 Hz, 14.0 Hz, 6H).

【0290】

（実施例２１）（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド［Ｉ−２１］：

【化41】

合成スキーム：

【化42】

手順および特性決定：

【0291】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−１−（メチルアミノ）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート：

【0292】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（１．０ｇ、３．７７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中溶液に、２５℃でＭｅＮＨ２・ＨＣｌ（５０９ｍｇ、７．５４ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．７２ｇ、４．５２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（１．１４ｇ、１１．３１ｍｍｏｌ）を加えた。２時間後、この溶液をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）により希釈し、ブライン（８０ｍＬ）により洗浄して、得られた溶液をろ過し（８０ｍＬ×３）して乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／３）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル４−メチル−１−（メチルアミノ）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（５５０ｍｇ、１．９８ｍｍｏｌ、５２％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２７９．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0293】

ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド［Ｉ−２１］：

【0294】

（Ｓ）−ベンジル４−メチル−１−（メチルアミノ）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（３００ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％）（５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中混合物を水素下、室温で２時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド（Ｉ−２１）（１５２ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ、９８％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１４５．３［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 7.80 (s, 1H), 3.10 (dd, J = 5.0 Hz, 9.0 Hz, 1H), 2.57 (dd, J = 3.0 Hz, 5.0 Hz, 3H), 1.81 (s, 2H), 1.66-1.69 (m, 1H), 1.34-1.39 (m, 1H), 1.16-1.22 (m, 1H), 0.81-0.87 (m, 6H).

【0295】

（実施例２２）（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタン酸［Ｉ−２２］：

【化43】

合成スキーム：

【化44】

手順および特性決定：

【0296】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンカルボキサミド）−４−メチルペンタノエート：

【0297】

ｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、シクロヘキサンカルボン酸（２４４ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７２６ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＰＥＡ（４１０ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で２時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンカルボキサミド）−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、０．９１ｍｍｏｌ、７１％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３３２．３［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0298】

ステップ２：（Ｓ）−２−（シクロヘキサンカルボキサミド）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−２２］：

【0299】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−（シクロヘキサンカルボキサミド）−４−メチルペンタノエート（２００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、５０℃で３時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して濃縮すると、（Ｓ）−２−（シクロヘキサンカルボキサミド）−４−メチルペンタン酸（Ｉ−２２）（１００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、６９％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２４２．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H-NMR (500 MHz, CD₃OD): δ 4.43 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 2.29 (td, J = 8.0 Hz, 11.0 Hz, 1H), 1.74-1.85 (m, 4H), 1.63-1.72 (m, 4H), 1.43-1.49 (m, 2H), 1.26-1.36 (m, 3H), 0.96 (dd, J = 6.0 Hz, 20.5 Hz, 6H).

【0300】

（実施例２５）（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルスルホンアミド）ペンタン酸［Ｉ−２５］：

【化45】

合成スキーム：

【化46】

手順および特性決定：

【0301】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルスルホンアミド）ペンタノエート：

【0302】

氷浴で冷却した、（Ｓ）−ベンジル２−アミノ−４−メチルペンタノエート４−メチルベンゼンスルホネート（３００ｍｇ、０．７６２ｍｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（３８５．７３ｍｇ、３．８１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）中溶液に、塩化ベンゼンスルホニル（１４８．１２ｍｇ、０．８３８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を２５℃で２時間、撹拌した。この溶液を酢酸エチル（１０ｍＬ）により希釈してブライン（１０ｍＬ）により洗浄し、得られた溶液をろ過し（１０ｍＬ×３）、無水硫酸ナトリウムにより乾燥し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物（２８０ｍｇ、純度：８５％、収率：７４％）を次のステップに直接、使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３８４．１［Ｍ＋Ｎａ］＋。

【0303】

ステップ２：（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルスルホンアミド）ペンタン酸［Ｉ−２５］：

【0304】

（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルスルホンアミド）ペンタノエート（２００ｍｇ、０．５５３ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３ｍＬ）中溶液に、Ｐｄ／Ｃ（２０ｍｇ、１０％）を加えた。この反応混合物を水素雰囲気下、５０℃で４時間、撹拌した。この混合物をろ過し、フィルターケーキをＭｅＯＨ（１０ｍＬ）により洗浄した。このろ液を濃縮すると、（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルスルホンアミド）ペンタン酸（Ｉ−２５）（６３．７ｍｇ、０．２３４ｍｍｏｌ、１００％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２９４．０［Ｍ＋Ｎａ］^＋。¹H- NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 12.61 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.79 - 7.73 (m, 2H), 7.62 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 3.63 (dd, J = 8.5 Hz, 14.5 Hz, 1H), 1.53 (td, J = 6.5 Hz, 13.5Hz, 1H), 1.41 - 1.31 (m, 2H), 0.79 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.66 (d, J = 6.5 Hz, 3H).

【0305】

（実施例２６）（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタン酸［Ｉ−２６］：

【化47】

合成スキーム：

【化48】

手順および特性決定：

【0306】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタノエート：

【0307】

ｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（１８６ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）およびＣｕ（ＯＡｃ）２（４６２ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中混合物に、４Ａ ＭＳ（１．０ｇ）およびＥｔ３Ｎ（１５５ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を室温で１８時間、撹拌した。この混合物をクエンチし、得られた溶液をろ過し（５０ｍＬ）、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出してブライン（５０ｍＬ）により洗浄して、得られた溶液をろ過した（５０ｍＬ）。有機相を濃縮して、クロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／２０）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタノエート（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、６６％）が無色油状物として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２９８．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0308】

ステップ２：（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタン酸［Ｉ−２６］：

【0309】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタノエート（１００ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、５０℃で２時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して濃縮すると、（Ｓ）−４−メチル−２−（フェニルアミノ）ペンタン酸（Ｉ−２６）（３０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、４３％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２０８．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.23 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 6.83 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.99 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.87 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 1.72~1.86 (m, 2H), 1.62~1.68 (m, 1H), 0.85~1.03 (m, 6H).

【0310】

（実施例３６）（Ｓ）−２−アセトアミド−４−メチルペンタン酸［Ｉ−３６］：

【化49】

合成スキーム：

【化50】

手順および特性決定：

【0311】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル２−アセトアミド−４−メチルペンタノエート：

【0312】

ｐ−トルエンスルホン酸Ｌ−ロイシンベンジルエステル（５００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）、酢酸（１１４ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（７２６ｍｇ、１．９１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＤＩＰＥＡ（４１０ｍｇ、３．１８ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で２時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ベンジル２−アセトアミド−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、８９％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２６４．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0313】

ステップ２：（Ｓ）−２−アセトアミド−４−メチルペンタン酸［Ｉ−３６］：

【0314】

撹拌した（Ｓ）−ベンジル２−アセトアミド−４−メチルペンタノエート（２５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に、触媒量のＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）を加えた。この反応物を水素雰囲気下、５０℃で３時間、撹拌した。得られた溶液をろ過して濃縮すると、（Ｓ）−２−アセトアミド−４−メチルペンタン酸（Ｉ−３６）（１００ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ、８１％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１７４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 4.43 (dd, J = 6.0 Hz, 9.5 Hz, 1H), 2.00 (s, 3H), 1.61-1.73 (m, 3H), 0.97 (dd, J = 6.0 Hz, 17.5 Hz, 6H).

【0315】

（実施例４５）（Ｓ，Ｅ）−２−（４−メトキシ−４−オキソブタ−２−エナミド）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−４５］：

【化51】

合成スキーム：

【化52】

手順および特性決定：

【0316】

ステップ１：（Ｓ，Ｅ）−２−（４−メトキシ−４−オキソブタ−２−エナミド）−４−メチルペンタン酸［Ｉ−４５］：

【0317】

（Ｅ）−４−メトキシ−４−オキソブタ−２−エン酸（１．０ｇ、７．６９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３０ｍＬ）中溶液に、ＳＯＣｌ２（１．８３ｇ、１５．３８ｍｍｏｌ）、次にＤＭＦ（０．１ｍＬ）を加えた。この溶液を４時間、４０℃に加熱した。この溶液を濃縮乾固すると、油状物が得られた。この油状物をＤＣＭ（１０ｍＬ）により希釈した。氷浴により冷却した、（Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタン酸（１．０ｇ、７．６２ｍｍｏｌ）のアセトン（２０ｍＬ）および飽和Ｎａ_２ＣＯ_３（２０ｍＬ）中溶液を滴下して加えた。１時間後、この溶液を６Ｍ ＨＣｌ溶液によりｐＨ２に調整し、ＥｔＯＡｃ（４０×２）により抽出して、ブライン（８０ｍＬ）により洗浄し、得られた溶液をろ過（８０ｍＬ×３）して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ＝１／２０）により精製すると、（Ｓ，Ｅ）−２−（４−メトキシ−４−オキソブタ−２−エナミド）−４−メチルペンタン酸（Ｉ−４５）（１．０ｇ、４．１１ｍｍｏｌ、５３％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２４４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.32 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 6.85-6.89 (m, 2H), 7.30-7.46 (m, 1H), 3.82 (s, 1H), 1.63-1.78 (m, 3H), 0.97 (d, J = 4.8 Hz, 6H).

【0318】

（実施例４６および４７）：（Ｒ）−２−アミノ−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−４６］および（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−４７］：

【化53】

合成スキーム：

【化54】

手順および特性決定：

【0319】

ステップ１：エチル２，２−ジフルオロ−３−メチルブタノエート：

【0320】

エチル３−メチル−２−オキソブタノエート（１０ｇ、０．０６９ｍｏｌ）およびＤＡＳＴ（１６．８ｇ、０．１０ｍｏｌ）の混合物を室温で１２時間、撹拌した。ＴＬＣによって確認した後、この反応混合物を冷飽和炭酸水素ナトリウム水溶液にゆっくりと滴下して加えた。この混合物をＥｔ２Ｏ（３００ｍＬ×２）により抽出し、有機層をブラインにより洗浄して乾燥し、濃縮すると粗製エチル２，２−ジフルオロ−３−メチルブタノエート（８．３ｇ）が得られ、これを次のステップに直接、使用した。

【0321】

ステップ２：２，２−ジフルオロ−３−メチルブタナール：

【0322】

粗製エチル２，２−ジフルオロ−３−メチルブタノエート（８．３ｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）中溶液に、アルゴン下、−７８℃でＤＩＢＡＬ−Ｈのヘキサン溶液（１．０Ｍ、６９ｍＬ、６９．０ｍｍｏｌ）を滴下して加え、この混合物を−７８℃で３０分間、撹拌した。ＴＬＣによって確認した後に、この反応物を飽和クエン酸によりクエンチし、Ｅｔ_２Ｏにより抽出した。抽出物を飽和クエン酸、ブラインにより洗浄してＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮すると、油状のアルデヒドである２，２−ジフルオロ−３−メチルブタナール（４．２ｇ）が得られ、これを精製することなく、次のステップに直ちに使用した。

【0323】

ステップ３：２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタンニトリル：

【0324】

粗製２，２−ジフルオロ−３−メチルブタナール（４．２ｇ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中溶液を０℃に冷却した。約０℃の温度に維持しながら、酢酸（氷酢酸、２．１ｍＬ）を加え、次いで、シアン化トリメチルシリル（４．２ｍＬ）を１５分間かけて、滴下して加えた。この反応混合物を２５℃まで温め、一晩、撹拌した。得られた冷溶液をろ過し（２００ｍＬ）、反応混合物に投入し、この反応混合物をジクロロメタン（２^＊２００ｍＬ）により抽出した。ジクロロメタン層を次いでブライン（２＊５０ｍＬ）により洗浄し、得られた溶液をろ過した（２＊１００ｍＬ）。ジクロロメタン層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮すると、粗製２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタンニトリル（２．８ｇ）が得られ、これを精製することなく、次のステップに直ちに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２３８．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0325】

ステップ４：２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸：

【0326】

濃塩酸（５０ｍＬ）およびＨＯＡｃ（１０ｍＬ）中の粗製２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタンニトリル（２．８ｇ）の溶液を９０℃で２４時間、撹拌し、濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣにより精製すると、２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（５１３ｍｇ）が白色固体として得られた。純粋な生成物をキラルＨＰＬＣにより精製すると、（Ｒ）−２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（８０ｍｇ）および（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（６３ｍｇ）が得られ、これらはどちらも白色固体であった。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２５８．２［Ｍ＋Ｈ］＋。

【0327】

ステップ５−Ａ：（Ｒ）−２−アミノ−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−４６］：

【0328】

（Ｒ）−２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（８０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中溶液に、室温でＨＣＯＯＮＨ４（９８ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を加えた。この混合物を６０℃で２時間、撹拌した。反応混合物をろ過して濃縮すると、粗生成物が得られ、これを逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、（Ｒ）−２−アミノ−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（Ｉ−４６）（２３ｍｇ、４４％）が白色固体として得られた。1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 4.27 (dd, J = 24.0, 3.5 Hz, 1 H), 2.55-2.42 (m, 1 H), 1.04 (d, J = 7.0 Hz, 3 H), 0.993 (d, J = 6.5 Hz, 3 H).

【0329】

ステップ５−Ｂ：（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−４７］：

【0330】

（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（６３ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中溶液に、室温でＨＣＯＯＮＨ４（７７ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ）を加えた。この混合物を６０℃で２時間、撹拌した。反応混合物をろ過して濃縮すると、粗生成物が得られ、これを逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、（Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（Ｉ−４７）（１４ｍｇ、３４％）が白色固体として得られた。1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 4.27 (dd, J = 24.0, 3.5 Hz, 1 H), 2.55-2.42 (m, 1 H), 1.04 (d, J = 7.0 Hz, 3 H), 0.993 (d, J = 6.5 Hz, 3 H).

【0331】

（実施例１４７）（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１４７］。

【化55】

合成スキーム：

【化56】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−１−（メチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート：

【0332】

（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（１．０ｇ、４．３２ｍｍｏｌ）、メタンスルホンアミド（４５２ｍｇ、４．７５ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１．８ｇ、４．７５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）中溶液に、ＴＥＡ（１．３ｇ、１２．９ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で１７時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−１−（メチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（１３０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、８．９％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ−、ｍ／ｚ）：３０７．０［Ｍ−Ｈ］⁻。
ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１４７］：

【0333】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−メチル−１−（メチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（１３０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（１５ｍＬ）中溶液に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（５ｍＬ）を加え、室温で３時間、撹拌した。この固体をろ過すると、（Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１４７］が白色固体として得られた（３２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、３１％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２０９．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 3.96 (t, J = 3.0 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 1.74-1.79 (m, 3H), 1.02-1.05 (m, 6H).

【0334】

（実施例１９３）（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，４，４−トリメチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１９３］。

【化57】

合成スキーム：

【化58】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４，４−ジメチル−１−（Ｎ−メチルメチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート：

【0335】

（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４−ジメチルペンタン酸（５００ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（６０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（９００ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間、撹拌した。次に、この混合物にＣｓ_２ＣＯ_３（１．９２ｇ、５．９１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルメタンスルホンアミド（３２２ｍｇ、２．９５ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）により抽出した。有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／５）によって精製すると、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４，４−ジメチル−１−（Ｎ−メチルメチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（４２０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ、６３％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３５９．１［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，４，４−トリメチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１９３］：

【0336】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４，４−ジメチル−１−（Ｎ−メチルメチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（４２０ｍｇ、１．２５ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（２０ｍＬ）中溶液に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を加え、室温で１７時間、撹拌した。この固体をろ過すると、（Ｓ）−２−アミノ−Ｎ，４，４−トリメチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１９３］が白色固体として得られた（２５０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、７１％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２３７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.55 (s, 3H), 4.59 (s, 1H), 3.50 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 1.81-1.85 (m, 1H), 1.63-1.67 (m, 1H), 0.95 (s, 9H).

【0337】

（実施例１９２）２−アミノ−４−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１９２］。

【化59】

合成スキーム：

【化60】

手順および特性決定：
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル４−フルオロ−４−メチル−１−（メチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート：

【0338】

ｔｅｒｔ−ブチル４−フルオロ−４−メチル−１−（メチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（２７０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（４５１ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間、撹拌した。次に、この混合物にＣｓ_２ＣＯ_３（１．０６ｇ、３．２４ｍｍｏｌ）、メタンスルホンアミド（２０６ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）により抽出した。有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／５）によって精製すると、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４，４−ジメチル−１−（Ｎ−メチルメチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（２００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、５５％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３４４．１［Ｍ＋ＮＨ４］^＋。
ステップ２：２−アミノ−４−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１９２］。

【0339】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル４，４−ジメチル−１−（Ｎ−メチルメチルスルホンアミド）−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（２００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（２０ｍＬ）中溶液に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を加え、室温で１７時間、撹拌した。この固体をろ過すると、２−アミノ−４−フルオロ−４−メチル−Ｎ−（メチルスルホニル）ペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−１９２］が白色固体として得られた（８９．８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、５７％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２２７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.44 (s, 3H), 4.02 (s, 1H), 3.25 (s, 3H), 2.16-2.25 (m, 1H), 2.03-2.10 (m, 1H), 1.43 (s, 3H), 1.38 (s, 3H).

【0340】

（実施例１９０）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１９０］。

【化61】

合成スキーム：

【化62】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート：

【0341】

（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４−ジメチルペンタン酸（５００ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８０ｍＬ）中溶液に、ＨＡＴＵ（９００ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間、撹拌した。次に、この混合物にＣｓ_２ＣＯ_３（１．９５ｇ、６．０ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−メチル２−アミノ−４−メチルペンタノエート塩酸塩（５５５ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で一晩、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）により抽出した。有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／５）によって精製すると、（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（５００ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ、６７％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３１７．２［Ｍ−５６］^＋。
ステップ２：（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１９０］。

【0342】

（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（５００ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（２０ｍＬ）中溶液に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を加え、室温で１７時間、撹拌した。固体をろ過すると、（Ｓ）−メチル２−（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１９０］が白色固体（３００ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ、７３％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２７３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 9.07-9.09 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 8.42 (s, 3H), 4.29-4.34 (m, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 1.72-1.83 (m, 2H), 1.50-1.62 (m, 3H), 0.86-0.91 (m, 15H).

【0343】

（実施例１２２）（Ｓ）−メチル２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート
塩酸塩［Ｉ−１２２］。

【化63】

合成スキーム：

【化64】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−メチル２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１２２］：

【0344】

（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタン酸（１００ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中溶液に４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を加え、８０℃で２４時間、撹拌した。この混合物を濃縮し、残留物をＥｔ_２Ｏにより激しくかき混ぜると、（Ｓ）−メチル２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１２２］が白色固体（２３．６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、２０％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１６０．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 4.02-4.04 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 1.97-2.02 (m, 1H), 1.64-1.68 (m, 1H), 1.03-1.05 (d, 9H),.

【0345】

（実施例１２３）（Ｒ）−メチル２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１２３］。

【化65】

合成スキーム：

【化66】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｒ）−メチル２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１２３］：

【0346】

（Ｒ）−２−アミノ−４，４−ジメチルペンタン酸（５０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の乾燥ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中混合物にＳＯＣｌ_２（０．５ｍＬ）を加え、室温で１７時間、撹拌した。この混合物を濃縮し、残留物をＥｔ_２Ｏにより激しくかき混ぜると、（Ｒ）−メチル２−アミノ−４，４−ジメチルペンタノエート塩酸塩［Ｉ−１２３］が白色固体（３４．２ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、５０％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１６０．１［Ｍ＋Ｈ］＋。1H-NMR (500 MHz, CD3OD): δ 4.02-4.04 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 1.97-2.02 (m, 1H), 1.64-1.68 (m, 1H), 1.03 (s, 9H).

【0347】

（実施例２０５）２−アミノ−Ｎ−シアノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−２０５］。

【化67】

合成スキーム：

【化68】

手順および特性決定：
ステップ１：２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸：

【0348】

２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（２５０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ_２Ｏ（３５３ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、ＮａＯＨ（８０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の混合物をジオキサン（１０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（２ｍＬ）に溶解した。この混合物を室温で３時間、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＤＣＭ（５０ｍＬ）により抽出した。有機相を水（２０ｍＬ×２）およびブライン（１０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して濃縮すると、粗製２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（３８５ｍｇ）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３０７．９［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
ステップ２：２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタノエート：

【0349】

２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（３８５ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシピロリジン−２，５−ジオン（１９７ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）、ＤＣＣ（３５３ｍｇ、１．７１ｍｍｏｌ）の混合物をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解した。この混合物を室温で１７時間、撹拌した。ろ過して、ろ液をブライン（２０ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して濃縮すると、粗製２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタノエート（４００ｍｇ）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２８２．９［Ｍ−１００］^＋。
ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル１−シアナミド−５，５，５−トリフルオロ−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート：

【0350】

２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタノエート（３００ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）、シアナミド（６６ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）、ＮａＯＨ（１５６ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）の混合物をＴＨＦ（１６ｍＬ）に溶解した。この混合物を０℃で０．５時間、および室温で１７時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル１−シアナミド−５，５，５−トリフルオロ−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（４５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３１０．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ４：２−アミノ−Ｎ−シアノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−２０５］：

【0351】

ｔｅｒｔ−ブチル１−シアナミド−５，５，５−トリフルオロ−４−メチル−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（４５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のＥｔ_２Ｏ（２０ｍＬ）中溶液に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を加え、室温で２４時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、２−アミノ−Ｎ−シアノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタンアミド塩酸塩［Ｉ−２０５］が白色固体として得られた（１２．３ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、２７％）。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２１０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 4.06-4.09 (m, 1H), 2.43-2.65 (m, 1H), 1.67-1.85 (m, 2H), 1.18-1.22 (m, 3H).

【0352】

（実施例２０６）２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸［Ｉ−２０６］。

【化69】

合成スキーム：

【化70】

手順および特性決定：
ステップ１：Ｎ−メトキシ−Ｎ，１−ジメチルシクロブタンカルボキサミド：

【0353】

１−メチルシクロブタンカルボン酸（１１．６ｇ、０．１ｍｏｌ）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１９．５ｇ、０．２ｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（４２ｇ、０．１１ｍｏｌ）のＤＭＦ（３００ｍＬ）中溶液に、ＴＥＡ（３０．３ｇ、０．３ｍｏｌ）を加え、この溶液を室温で１７時間、撹拌した。この溶液を水（６００ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（４００ｍＬ×２）により抽出した。有機相を１Ｎ ＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ_３およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、Ｎ−メトキシ−Ｎ，１−ジメチルシクロブタンカルボキサミド（１２．２ｇ、０．０７ｍｏｌ、７５％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１５８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ２：１−メチルシクロブタンカルバルデヒド：

【0354】

Ｎ−メトキシ−Ｎ，１−ジメチルシクロブタンカルボキサミド（２．０ｇ、１２．７ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液に、Ｎ_２下、０℃で１Ｍ ＬｉＡｌＨ_４（１９ｍＬ、１９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この混合物を室温まで温め、２時間、撹拌した。この溶液を飽和セニエット塩によりゆっくりとクエンチし、Ｅｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して次のステップに使用した。
ステップ３：（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）アクリレート：

【0355】

ウィッティヒ試薬（２．１５ｇ、５．８６ｍｍｏｌ）の乾燥ＴＨＦ（８０ｍＬ）溶液に、０℃でｔ−ＢｕＯＮａ（８４４ｍｇ、８．７９ｍｍｏｌ）を加え、１時間、撹拌した。次に、１−メチルシクロブタンカルバルデヒドの溶液を加え、室温で１７時間、撹拌した。この溶液をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）により抽出した。有機相をブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／３０）により精製すると、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）アクリレート（７００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２００．２［Ｍ−５６^＊２］^＋。
ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパノエート：

【0356】

（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）アクリレート（７００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、１００ｍｇ）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中混合物を、３０℃で１７時間、撹拌した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮乾固すると、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパノエート（６００ｍｇ、粗製）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１５８．２［Ｍ−１５６］^＋。
ステップ５：２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸［Ｉ−２０６］：

【0357】

ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパノエート（６００ｍｇ、粗製）のＥｔ_２Ｏ（２０ｍＬ）中溶液に、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０ｍＬ）を加え、室温で１７時間、撹拌した。この溶液を濃縮すると、２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸が得られた。ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１５８．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。
¹H NMR (500 MHz, D₂O) δ 3.91 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 2.06-2.02 (m, 1H), 1.88-1.64 (m, 7H), 1.15 (s, 3H).

【0358】

（実施例９３）Ｓ−２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸［Ｉ−９３］。

【化71】

合成スキーム：

【化72】

手順および特性決定：
２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸の手順は、実施例８と同じとした。
ステップ６：２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸：

【0359】

２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸（３００ｍｇ、粗製）、ＣｂｚＯＳｕ（７１４ｍｇ、２．８ｍｍｏｌ）のアセトン（１０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３（３ｍＬ）中混合物を室温で５時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸（１６０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２９２．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ７：（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸：

【0360】

２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸（１６０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）をキラルＨＰＬＣにより精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２９２．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ８：（Ｓ）−２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸［Ｉ−９３］：

【0361】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、１０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中混合物を室温で１時間、撹拌した。この溶液を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、（Ｓ）−２−アミノ−３−（１−メチルシクロブチル）プロパン酸［Ｉ−９３］（２ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２９２．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, D₂O) δ 3.76-3.79 (t, 1H), 1.96-2.00 (m, 1H), 1.61-1.86 (m, 7H), 1.11 (s, 3H).

【0362】

（実施例２０４）２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２０４］

【化73】

合成スキーム：

【化74】

手順および特性決定：
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（トリメチルシリル）プロパノエート：

【0363】

ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（２．５ｇ、８．４７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液を−７８℃に冷却し、次に、Ｎ_２下、ＬｉＨＭＤＳ（８．４７ｍＬ、８．４７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この溶液を−７８℃で１時間、撹拌した。（ヨードメチル）トリメチルシラン（１．８ｇ、８．４７ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この溶液を−７８℃〜室温で、一晩、撹拌した。この溶液をブライン（２５ｍＬ^＊２）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濃縮してクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／３０）により精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（トリメチルシリル）プロパノエート（２．３ｇ、６．０４ｍｍｏｌ、７１％）が黄色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３８２．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ２：２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２０４］：

【0364】

ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（トリメチルシリル）プロパノエート（５００ｍｇ、１．３１ｍｍｏｌ）の４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（６ｍＬ）中溶液を室温で１７時間、撹拌した。ＤＣＭ（８０ｍＬ）を加えた。この固体をろ過すると、２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２０４］が白色固体として得られた（１１３ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ、４４％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 13.78 (br, 1H), 8.33 (br, 1H), 3.75 (m, 1H), 1.00-1.14 (m, 2H), 0.06 (s, 9H).

【0365】

（実施例２０１）（Ｓ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２０１］。

【化75】

合成スキーム：

【化76】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２０１］：

【0366】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（トリメチルシリル）プロパノエート（３００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）の４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）中溶液を室温で１７時間、撹拌した。ＤＣＭ（４０ｍＬ）を加えた。この固体をろ過すると、（Ｓ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２０１］が白色固体として得られた（９２ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ、６２％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 13.76 (br, 1H), 8.38 (br, 1H), 3.76 (m, 1H), 1.02-1.16 (m, 2H), 0.06 (s, 9H).

【0367】

（実施例２００）（Ｒ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２００］。

【化77】

合成スキーム：

【化78】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｒ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２００］：

【0368】

（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−３−（トリメチルシリル）プロパノエート（３００ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）の４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（３ｍＬ）中溶液を室温で１７時間、撹拌した。ＤＣＭ（４０ｍＬ）を加えた。この固体をろ過すると、（Ｒ）−２−アミノ−３−（トリメチルシリル）プロパン酸塩酸塩［Ｉ−２００］が白色固体として得られた（８０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ、５２％）。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 13.77 (br, 1H), 8.33 (br, 1H), 3.76 (m, 1H), 1.02-1.14 (m, 2H), 0.06 (s, 9H).

【0369】

（実施例１９４）（Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１９４］。

【化79】

合成スキーム：

【化80】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１９４］：

【0370】

（Ｓ）−エチル２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタノエート塩酸塩（６５ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、ＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（２９ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）のＨ_２Ｏ（２ｍＬ）中混合物を室温で２．５時間、撹拌した。次に、１Ｎ ＨＣｌを加えて、ｐＨ＝３に調整した。この混合物を逆ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により直接、精製すると、（Ｓ）−２−アミノ−４−フルオロ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１９４］（４０ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、８７％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１５０．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.10 (br, 2H), 3.79 (m, 1H), 2.19-2.26 (m, 1H), 1.97-2.05 (m, 1H), 1.42 (d, Jz=3.5 Hz, 3H), 1.37 (d, Jz=4.0 Hz, 3H).

【0371】

（実施例９４）（Ｓ）−３，３−ジメチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン［Ｉ−９４］。

【化81】

合成スキーム：

【化82】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−シアノ−３，３−ジメチルブチルカルバメート：

【0372】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−アミノ−４，４−ジメチル−１−オキソペンタン−２−イルカルバメート（５００ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、塩化シアヌル（４５０ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で２時間、撹拌した。次に、この混合物をブライン（１００ｍＬ）により希釈して酢酸エチル（５０ｍＬ）により抽出し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）して濃縮すると、粗製（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−シアノ−３，３−ジメチルブチルカルバメート（５００ｍｇ）が黄色ドープ（yellow dope）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２４９．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
ステップ２：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３，３−ジメチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブチルカルバメート：

【0373】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル１−シアノ−３，３−ジメチルブチルカルバメート（粗製５００ｍｇ）、ＺｎＢｒ_２（９００ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）、ＮａＮ_３（２６０ｍｇ、４．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）中混合物を１００℃で１７時間、撹拌した。次に、この混合物をブライン（２００ｍＬ）により希釈して酢酸エチル（６０ｍＬ）により抽出し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）して濃縮すると、粗製（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３，３−ジメチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブチルカルバメート（４００ｍｇ）が黄色ドープとして得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２１４．３［Ｍ＋Ｈ−５６］^＋。
ステップ３：（（Ｓ）−３，３−ジメチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン［Ｉ−９４］：

【0374】

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３，３−ジメチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブチルカルバメート（粗製３００ｍｇ）の４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（３．５ｍＬ）中溶液を室温で１７時間、撹拌した。次に、この溶液を濃縮し、逆相ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により直接、精製すると、（Ｓ）−３，３−ジメチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン２，２，２−トリフルオロ酢酸塩［Ｉ−９４］が白色固体として得られた（３０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、９％、３ステップ）。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１７０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.18 (br, 3H), 4.48 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 1.73 (dd, Jz=3.5, 16.5 Hz 1H), 0.72 (s, 9H).

【0375】

（実施例１７５）２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタン酸［Ｉ−１７５］の合成：

【化83】

合成スキーム：

【化84】

手順および特性決定：

【0376】

ステップ１：（Ｓ）−ベンジル４−メチル−２−（フェニルメチルスルホンアミド）ペンタノエート：

【0377】

３−（ベンジルオキシ）プロパン−１−オール（１０．０ｇ、６０．２４ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１００ｍＬ）中溶液に、氷浴下、ＩＢＸ（２０．２ｇ、７２．２９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、この温度で１７時間、撹拌した。この反応混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ入れ、ＥＡ（２００ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（２００ｍＬ×３）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、この溶液を濃縮して、粗製物をＳＧＣにより精製すると、明黄色液体（８．０ｇ、８１％）が得られた。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.77 (s, 1H), 7.36-7.26 (m, 5H), 4.53 (s, 2 H), 3.8-3.83 (m, 2H), 2.71-2.68 (m, 2H).

【0378】

ステップ２：（４−（ベンジルオキシ）−１，１，１−トリフルオロブタン−２−イルオキシ）トリメチルシラン：

【0379】

３−（ベンジルオキシ）プロパナール（４．０ｇ、２４．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、室温でトリメチル（トリフルオロメチル）シラン（１０．４ｇ、７３．２ｍｍｏｌ）を加え、次いでＣｓＦ（０．３７ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を室温で２時間、撹拌した。次に、水（１００ｍｌ）によりクエンチして、ＥＡ（１００ｍｌ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して濃縮した。この粗製物をＩＳＣＯバイオタージ（ｂｉｏｔａｇｅ）により精製すると、（４−（ベンジルオキシ）−１，１，１−トリフルオロブタン−２−イルオキシ）トリメチルシランが無色液体として得られた（４．５ｇ、６０％）。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.29 (m, 5H), 4.51 (t, J= 12 Hz, 2 H), 4.23-4.19 (m, 1H), 3.59-3.57 (m, 2H), 2.04-2.01 (m, 1H), 1.78-1.73 (m, 1H), 0.13 (s, 9H).

【0380】

ステップ３：４−（ベンジルオキシ）−１，１，１−トリフルオロブタン−２−オール：

【0381】

４−（ベンジルオキシ）−１，１，１−トリフルオロブタン−２−オール（４．５ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）のＨＣｌ溶液（ＭｅＯＨ中の３Ｍ、５０ｍｌ）中溶液を室温で２時間、撹拌した。次に、濃縮して、ＩＳＣＯバイオタージにより精製すると、４−（ベンジルオキシ）−１，１，１−トリフルオロブタン−２−オール（２．７５ｇ、８０％）が無色液体として得られた。

【0382】

ステップ４：（（４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブトキシ）メチル）ベンゼン：

【0383】

４−（ベンジルオキシ）−１，１，１−トリフルオロブタン−２−オール（２．７５ｇ、１１．７５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍｌ）中溶液に、０℃でｔ−ＢｕＯＫ（１．５８ｇ、１４．１ｍｍｏｌ）を加え、この温度で３０分間、撹拌した。次に、ＭｅＩ（２．１７ｇ、１５．２８ｍｍｏｌ）を加え、室温でさらに１時間、撹拌した。この反応物を水（１００ｍｌ）によりクエンチして、ＥＡ（１００ｍｌ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して濃縮した。粗製物をＩＳＣＯ バイオタージにより精製すると、（（４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブトキシ）メチル）ベンゼン（２．０４ｇ、７０％）が無色液体として得られた。
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.29 (m, 5H), 4.53 (t, J= 12 Hz, 2 H), 3.78-3.74 (m, 1H), 3.66-3.57 (m, 2H), 3.5 (s, 3H), 2.03-1.96 (m, 1H), 1.78-1.57 (m, 1H).

【0384】

ステップ５：４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブタン−１−オール：

【0385】

（（４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブトキシ）メチル）ベンゼン（２．０４ｇ、８．２３ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（０．５ｇ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中溶液を室温で２時間、撹拌し、次に、ろ過して濃縮すると、４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブタン−１−オールが無色液体として得られた。この粗製物を次のステップに直接、使用した。

【0386】

ステップ６：４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブタナール：

【0387】

４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブタン−１−オール（１．３ｇ、最後のステップからの粗製物）のＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中溶液に、氷浴下、ＩＢＸ（２．７６ｇ、９．８８ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、この温度で１７時間、撹拌した。この反応混合物を水（８０ｍＬ）に注ぎ入れ、Ｅｔ_２Ｏ（８０ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（８０ｍＬ×３）およびブライン（８０ｍＬ）により洗浄し、この溶液を次のステップに直接、使用した。

【0388】

ステップ７：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタンニトリル：

【0389】

上の４，４，４−トリフルオロ−３−メトキシブタナールのＥｔ_２Ｏ（１６０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いてベンジルアミン（２ｍＬ）、ＡｃＯＨ（２．０ｍＬ）、次に、ＴＭＳＣＮ（３ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温め、この温度で１７時間、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（１００ｍＬ）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタンニトリル（２．０ｇ、粗製）が褐色の濃厚な油状物として得られ、これを次のステップに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：

【0390】

ステップ８：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタン酸：

【0391】

濃ＨＣｌ（３０ｍＬ）およびＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中の２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタンニトリル（２．０ｇ、粗製）の溶液を１７時間、１００℃に加熱した。この溶液を濃縮乾固し、Ｈ_２Ｏ（１００ｍＬ）およびＡＣＮ（５０ｍＬ）により希釈し、ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ_３溶液により３〜４に調整して、この混合物をろ過して乾燥すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタン酸（０．８ｇ、４ステップで３５％）が褐色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0392】

ステップ９：２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタン酸［Ｉ−１７５］：

【0393】

２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタン酸（３００ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）およびＨＣＯＯＮＨ_４（６５０ｍｇ、１０．３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中溶液を６０℃で２時間、撹拌し、次に、ろ過して濃縮した。この粗製物を逆相バイオタージにより精製すると、２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メトキシペンタン酸［Ｉ−１７５］が白色固体として得られた。
1H NMR (500 MHz, メタノール-d4) δ 4.23-4.19 (m, 1H), 3.96-3.88 (m, 1H), 3.64-3.6 (m, 3H), 2.29-2.22 (m, 1H), 2.04-1.97 (m, 1H).

【0394】

（実施例１７６）２−アミノ−４，４，５−トリメチルヘキサン酸［Ｉ−１７６］：

【化85】

合成スキーム：

【化86】

手順および特性決定：

【0395】

ステップ１：ジエチル２−（２，３−ジメチルブタン−２−イル）マロネート：

【0396】

ジエチル２−（プロパン−２−イリデン）マロネート（２ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）中溶液を０℃に冷却し、次いで、ヨウ化銅（Ｉ）（２．９ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で０．５時間、撹拌した。次に、臭化イソプロピルマグネシウム（１ｍｏｌ／Ｌ、３０．０ｍＬ、３０．０ｍｍｏｌ）を上の混合物に０℃で滴下して加えた。この混合物を０℃で２時間、撹拌した。この混合物をＨＣｌ（１ｍｏｌ／Ｌ）によりクエンチし、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ^＊２）により抽出した。有機相を分離して、水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１３０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、ジエチル２−（２，３−ジメチルブタン−２−イル）マロネート（２．４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、９８％）が黄色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２４５．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0397】

ステップ２：２−（２，３−ジメチルブタン−２−イル）マロン酸：

【0398】

ジエチル２−（２，３−ジメチルブタン−２−イル）マロネートアセトアミド（２．４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）および水酸化リチウム水和物（２．１ｇ、５０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）中混合物を９８℃まで加熱し、２０時間、保持した。この混合物を冷却し、ＨＣｌ（１ｍｏｌ／Ｌ）により酸性にして、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）と水（３０ｍＬ）との間に分配した。有機相を分離して、水（５０ｍＬ×２）およびブライン（５０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、２−（２，３−ジメチルブタン−２−イル）マロン酸（１．８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、９５％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２１２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0399】

ステップ３：３，３，４−トリメチルペンタン酸：

【0400】

２−（２，３−ジメチルブタン−２−イル）マロン酸（１．８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（３０ｍＬ）中溶液を１２０℃に加熱し、１２時間、保持した。この混合物を冷却して、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（６０ｍＬ）との間に分配した。有機相を分離して、水（６０ｍＬ×２）およびブライン（６０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、３，３，４−トリメチルペンタン酸（１．４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ、９５％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ−、ｍ／ｚ）：１４３．２［Ｍ−Ｈ］^＋。

【0401】

ステップ４：Ｎ−メトキシ−Ｎ，３，３，４−テトラメチルペンタンアミド：

【0402】

３，３，４−トリメチルペンタン酸（１．４ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３０ｍＬ）中溶液に、２０℃でＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１．２ｇ、１２．０ｍｍｏｌ）、次いでＤＩＥＡ（３．８ｇ、３０．０ｍｍｏｌ）を加えた。次に、ＨＡＴＵ（５．８ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を撹拌しながら２５℃まで加熱し、１８時間、保持した。この反応混合物を水、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５０ｍＬ^＊２）によりクエンチした。相分離して、有機層をブライン（８０ｍＬ^＊３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、ろ過して真空で濃縮すると、Ｎ−メトキシ−Ｎ，３，３，４−テトラメチルペンタンアミド（１．５ｇ、９０％）が褐色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0403】

ステップ４：３，３，４−トリメチルペンタナール：

【0404】

Ｎ−メトキシ−Ｎ，３，３，４−テトラメチルペンタンアミド（１．９ｇ、０．０１ｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）中溶液に、０℃でＬｉＡｌＨ４（１ｇ、０．０３ｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で１時間、撹拌した。この反応混合物を水、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５０ｍＬ^＊２）によりクエンチした。層分離して、有機層をブライン（８０ｍＬ^＊３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥してろ過した。ろ液には３，３，４−トリメチルペンタナール（１．３ｇ、９５％）が無色溶液として含有され、これを次のステップに、直接、使用した。

【0405】

ステップ５：２−（ベンジルアミノ）−４，４，５−トリメチルヘキサンニトリル：

【0406】

上の３，３，４−トリメチルペンタナールのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１２０ｍＬ）溶液に、氷浴を用いてベンジルアミン（１．６ｍＬ）、ＡｃＯＨ（１．０ｍＬ）、次に、ＴＭＳＣＮ（１．８ｍＬ）を加えた。この混合物を２５℃まで温め、一晩、撹拌した。この溶液を水（６０ｍＬ）により希釈してＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）により抽出し、有機相を水（５０ｍＬ×２）およびブライン（５０ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、２−（ベンジルアミノ）−４，４，５−トリメチルヘキサンニトリル（２ｇ、粗製）が褐色油状物として得られ、これを次のステップに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２４５．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0407】

ステップ６：２−（ベンジルアミノ）−４，４，５−トリメチルヘキサン酸：

【0408】

２−（ベンジルアミノ）−４，４，５−トリメチルヘキサンニトリル（２ｇ、粗製）の濃ＨＣｌ（６０ｍＬ）およびＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中溶液を１８時間、９５℃に加熱した。この溶液を１５℃に冷却し、ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ_３溶液により３〜４に調整して、この混合物をろ過して乾燥すると、２−（ベンジルアミノ）−４，４，５−トリメチルヘキサン酸（０．６ｇ、２．３ｍｍｏｌ、３ステップで３０％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２６４．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0409】

２−アミノ−４，４，５−トリメチルヘキサン酸［Ｉ−１７６］：

【0410】

２−（ベンジルアミノ）−４，４，５−トリメチルヘキサン酸（７８ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（８ｍＬ）中溶液に、室温でＨＣＯＯＮＨ４（０．１３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ）を加えた。この混合物を６０℃で２時間、撹拌した。反応混合物をろ過して濃縮すると、粗生成物が得られ、これを逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、２−アミノ−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸［Ｉ−１７６］（４０ｍｇ、９０％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１７４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋；1H NMR (500 MHz, MeOD) δ 3.56 (dd, J = 7.2, 4.9 Hz, 1H), 2.12 (dd, J = 14.7, 4.9 Hz, 1H), 1.66 - 1.51 (m, 2H), 0.97 (d, J = 14.9 Hz, 6H), 0.92 (dd, J = 6.8, 3.6 Hz, 6H).

【0411】

（実施例１７８）２−アミノ−４，４−ジメチルヘプタン酸［Ｉ−１７８］

【化87】

合成スキーム：

【化88】

手順および特性決定：

【0412】

この手順は、実施例１７６において使用したものと同じとした。

【0413】

２−アミノ−４，４−ジメチルヘプタン酸［Ｉ−１７８］：¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ 3.77 (t, J = 6 Hz, 1H), 2.09-2.05 (m, 1H), 1.6-1.56 (m, 1H), 1.37-1.26 (m, 4H), 1.01-0.92 (m, 9 H).

【0414】

（実施例１９５）２−アミノ−４，４−ジメチルヘキサン酸［Ｉ−１９５］、（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルヘキサン酸［Ｉ−１２０］、（Ｒ）−２−アミノ−４，４−ジメチルヘキサン酸［Ｉ−１９１］。

【化89】

合成スキーム：

【化90】

手順および特性決定：

【0415】

この手順は、実施例１７６において使用したものと同じとした。

【0416】

２−アミノ−４，４−ジメチルヘプタン酸［Ｉ−１９５］：¹H NMR (500 MHz, D₂O) δ 3.87 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.93 (dd, J = 15.0 Hz, J = 5.5 Hz, 1H), 1.57 (dd, J = 15.0 Hz, J = 6.5 Hz, 1H), 1.22-1.26 (m, 2H), 0.86 (d, (dd, J = 2.0 Hz, 6H), 0.76 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

【0417】

（Ｓ）−２−アミノ−４，４−ジメチルヘキサン酸［Ｉ−１２０］：¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ 3.43 (dd, J = 7.0 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 1.95 (dd, J = 15.0 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 1.42 (dd, J = 15.0 Hz, J = 7.0 Hz, 1H), 1.23-1.28 (m, 2H), 0.87 (d, (dd, J = 4.5 Hz, 6H), 0.80 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

【0418】

（Ｒ）−２−アミノ−４，４−ジメチルヘキサン酸［Ｉ−１９１］：¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ 3.43 (dd, J = 7.0 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 1.95 (dd, J = 15.0 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 1.42 (dd, J = 15.0 Hz, J = 7.0 Hz, 1H), 1.23-1.28 (m, 2H), 0.87 (d, (dd, J = 4.5 Hz, 6H), 0.80 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

【0419】

（実施例１７７）２−アミノ−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸［Ｉ−１７７］：

【化91】

合成スキーム：

【化92】

手順および特性決定：

【0420】

ステップ１：Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニル−ｌ５−ホスファニリデン）アセトアミド：

【0421】

（２−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（１３．７ｇ、０．１ｍｏｌ）およびトリフェニルホスファン（２６．２ｇ、０．１ｍｏｌ）のアセトニトリル（２００ｍＬ）中混合物を８０℃まで加熱し、２０時間、保持した。この混合物を冷却し、４０℃未満で濃縮して溶媒を除去した。残留物をジクロロメタン（２００ｍＬ）、次いで２Ｎ ＫＯＨ（１００ｍＬ）に溶解した。得られた混合物を２０℃で１時間、撹拌した。層分離して、有機層をブライン（２００ｍＬ^＊３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥してろ過した。ろ液を真空で濃縮すると、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニル−ｌ５−ホスファニリデン）アセトアミド（３６ｇ、０．１ｍｏｌ、９８％）が黄色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３６４．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0422】

ステップ２：（Ｅ）−５，５，５−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタ−２−エナミド：

【0423】

Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニル−ｌ５−ホスファニリデン）アセトアミド（３６．３ｇ、０．１ｍｏｌ）および４，４，４−トリフルオロブタン−２−オン（２５．２ｇ、０．２ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）中混合物を７０℃に加熱し、７日間、保持した。この混合物を冷却し、４０℃未満で真空で濃縮して溶媒を除去した。石油エーテル中、０〜３５％の酢酸エチルにより溶出するシリカゲルカラム（２００ｇ、２００〜３００メッシュ、ＵＶ２５４ｎｍ）により、残留物を精製すると、（Ｅ）−５，５，５−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタ−２−エナミド（６ｇ、０．０３ｍｏｌ、２８％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２１２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0424】

ステップ３：５，５，５−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタンアミド：

【0425】

（Ｅ）−５，５，５−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタ−２−エナミド（６ｇ、０．０３ｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、４００ｍｇ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中混合物を、３０℃で１８時間、撹拌した。この混合物をろ過し、ろ液を真空で濃縮乾固すると、５，５，５−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタンアミド（６ｇ、０．０３ｍｏｌ、９８％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２１４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0426】

ステップ４：５，５，５−トリフルオロ−３−メチルペンタナール：

【0427】

５，５，５−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルペンタンアミド（６ｇ、０．０３ｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）中溶液に、０℃でＬｉＡｌＨ４（１ｇ、０．０３ｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で１時間、撹拌した。この反応混合物を水、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（６０ｍＬ^＊２）によりクエンチした。層分離して、有機層をブライン（８０ｍＬ^＊３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥してろ過した。ろ液を含有すると、５，５，５−トリフルオロ−３−メチルペンタナール（４．５ｇ、９５％）が無色溶液として得られ、これを次のステップに、直接、使用した。

【0428】

ステップ５：２−（ベンジルアミノ）−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサンニトリル：

【0429】

上の５，５，５−トリフルオロ−３−メチルペンタナールのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いてベンジルアミン（５ｍＬ）、ＡｃＯＨ（４．０ｍＬ）、次に、ＴＭＳＣＮ（５ｍＬ）を加えた。この混合物を２０℃まで温め、一晩、撹拌した。この溶液を水（１００ｍＬ）により希釈してＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、２−（ベンジルアミノ）−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサンニトリル（６ｇ、粗製）が褐色油状物として得られ、これを次のステップに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２７１．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0430】

ステップ６：２−（ベンジルアミノ）−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸：

【0431】

２−（ベンジルアミノ）−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサンニトリル（３ｇ、粗製）の濃ＨＣｌ（１００ｍＬ）およびＡｃＯＨ（２０ｍＬ）中溶液を１７時間、１００℃に加熱した。この溶液を１５℃に冷却し、ｐＨを飽和ＮａＨＣＯ_３溶液により３〜４に調整して、この混合物をろ過して乾燥すると、２−（ベンジルアミノ）−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸（１ｇ、１３．４ｍｍｏｌ、３ステップで３３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２９０．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0432】

２−アミノ−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸［Ｉ−１７７］：

【0433】

２−（ベンジルアミノ）−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸（８８ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（８ｍＬ）中溶液に、室温でＨＣＯＯＮＨ_４（０．１３ｇ、２．０ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ）を加えた。この混合物を６０℃で２時間、撹拌した。反応混合物をろ過して濃縮すると、粗生成物が得られ、これを逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、２−アミノ−６，６，６−トリフルオロ−４−メチルヘキサン酸［Ｉ−１７７］（４５ｍｇ、８４％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２００．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；1H NMR (500 MHz, DMSO) δ 3.15 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 2.39 - 2.24 (m, 1H), 2.19 - 1.96 (m, 2H), 1.82 - 1.66 (m, 1H), 1.63 - 1.35 (m, 1H), 0.98 (dd, J = 16.5, 6.2 Hz, 3H).

【0434】

（実施例１７９）（Ｓ）−２−アミノ−５−フルオロ−４−（フルオロメチル）ペンタン酸［Ｉ−１７９］

【化93】

合成スキーム：

【化94】

手順および特性決定：
ステップ１：５−（ベンジルオキシメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン：

【0435】

（２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン−５−イル）メタノール（０．２９ｇ、２．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に０℃でＮａＨ（油中６０％、０．１２ｇ、３．０ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で０．２時間、撹拌した。次に、（ブロモメチル）ベンゼン（０．４５ｇ、２．６ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を３時間、１０℃まで温め、１８時間、保持した。この反応混合物を氷水、次いでＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）によりクエンチした。層分離して、有機層をブライン（６０ｍＬ^＊３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥してろ過した。ろ液を濃縮し、残留物をシリカゲルカラム（２０ｇ、ＵＶ２５４ｎｍ、ＰＥ中、１０％から５０％のＥｔＯＡｃにより溶出）により精製すると、５−（ベンジルオキシメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン（１）（０．４６ｇ、０．２ｍｏｌ、９５％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２３７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ２：２−（ベンジルオキシメチル）プロパン−１，３−ジオール：

【0436】

５−（ベンジルオキシメチル）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキサン（９３０ｍｇ、３．９４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中溶液に、３ＮＨＣｌ水溶液（２ｍＬ）を加えた。この混合物を５０℃で２時間、撹拌した。この反応混合物を濃縮して、ＤＣＭ（２０ｍＬ）により希釈し、ブライン（１５ｍＬ）により洗浄して乾燥し、蒸発させると、粗製無色油状物（７８０ｍｇ、１００％）が得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１９７［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ３：（（３−フルオロ−２−（フルオロメチル）プロポキシ）メチル）ベンゼン：

【0437】

予め冷却した２−（ベンジルオキシメチル）プロパン−１，３−ジオール（７８０ｍｇ、３．９４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、−７８℃でＤＡＳＴ（１．９ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この混合物を２０℃で２４時間、撹拌した。この反応混合物を−７８℃で飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１０ｍＬ）によりクエンチした。ＤＣＭ相を分離し、ブラインにより洗浄してＭｇＳＯ_４により乾燥し、短いシリカゲルパッドによりろ過して、次に、濃縮すると粗製無色油状物（８００ｍｇ、１００％）が得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２２３［Ｍ＋Ｎａ］^＋。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.37 - 7.28 (m, 5H), 4.65 - 4.57 (m, 2H), 4.55 - 4.48 (m, 4H), 3.57 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.50 - 2.34 (m, 1H).
ステップ４：３−フルオロ−２−（フルオロメチル）プロパン−１−オール：

【0438】

予め冷却した（（３−フルオロ−２−（フルオロメチル）プロポキシ）メチル）ベンゼン（８００ｍｇ、３．９４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、−７８℃でＢＣｌ_３／トルエン（１Ｍ、６ｍＬ、６．０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この混合物を−７８〜０℃で２時間、撹拌した。この反応混合物を−７８℃でＨ_２Ｏ（０．５ｍＬ）によりクエンチした。ＤＣＭ相をＭｇＳＯ_４によって乾燥してろ過し、この溶液（約２０ｍＬ）を次のステップに直接、使用した。
ステップ５：３−フルオロ−２−（フルオロメチル）プロピルトリフルオロメタンスルホネート：

【0439】

３−フルオロ−２−（フルオロメチル）プロパン−１−オール（ステップ４からの８ｍＬの溶液、１．６ｍｍｏｌ）の予め冷却した溶液に、−４０℃でピリジン（３８０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）、次に、Ｔｆ_２Ｏ（１．３６ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この混合物を−３０℃で１時間、撹拌した。この反応混合物を−４０℃でブライン（２０ｍＬ）によりクエンチした。ＤＣＭ相を分離し、ＭｇＳＯ_４により乾燥してろ過し、次に、濃縮すると、粗製黄褐色油状物（２００ｍｇ、５１％）が得られ、これを次のステップに直接、使用した。
ステップ６：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−５−フルオロ−４−（フルオロメチル）ペンタノエート：

【0440】

予め冷却した、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（９４４ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）中溶液に、−７８℃で２５分間で、ＬＤＡ（ＴＨＦ／トルエン／ヘキサン中の２．５Ｍ、１．２８ｍＬ、３．２ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物をこの温度で１０分間、撹拌した。３−フルオロ−２−（フルオロメチル）プロピルトリフルオロメタンスルホネート（２００ｍｇ、０．８２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２ｍＬ）中溶液を−７８℃で滴下して加えた。この反応混合物を直前の冷却浴に入れ、さらに１時間、撹拌した。この反応混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）によりクエンチしてＭＴＢＥ（３０ｍＬ^＊２）により抽出し、Ｈ_２Ｏ、ブライン（各５０ｍＬ）により洗浄し、乾燥して濃縮すると、粗製物が得られ、これをクロマトグラフィー（chorography）（シリカゲル、ＰＥから５％ＥＡ／ＰＥ）により２回、精製すると、所望の生成物（２２ｍｇ、６．９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３８８［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.56 - 7.45 (m, 6H), 7.41 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 4.50 - 4.17 (m, 4H), 3.91 (dd, J = 7.7, 5.5 Hz, 1H), 2.11 - 1.97 (m, 1H), 1.87 (dd, J = 12.7, 5.5 Hz, 2H), 1.38 (s, 9H).
ステップ７：（Ｓ）−２−アミノ−５−フルオロ−４−（フルオロメチル）ペンタン酸塩酸塩：

【0441】

ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−５−フルオロ−４−（フルオロメチル）ペンタノエート（５５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）の３Ｎ ＨＣｌ／ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中溶液を室温で２０時間、撹拌した。この反応混合物を濃縮し、Ｅｔ_２Ｏにより洗浄すると、粗製固体が得られ、これをＤＣＭ／ＴＦＡ（１：１、２ｍＬ）に溶解して室温で２０時間、撹拌した。この反応混合物を蒸発させて、Ｅｔ_２Ｏにより洗浄すると、粗製固体が得られ、これを６Ｎ ＨＣｌ（１ｍＬ）に溶解して８０℃で２時間、撹拌した。この反応混合物を蒸発させて、凍結乾燥すると、粗生成物が得られ、これを３ｍＭ ＨＣｌ／Ｈ_２Ｏを使用してＲＰ−バイオタージによって精製すると、所望の生成物（８．３ｍｇ、２９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１６８［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H NMR (500 MHz, DMSO) δ 7.85 (bs, 3H), 4.48 (dd, J = 48.3, 14.2 Hz, 4H), 3.46 - 3.36 (m, 1H), 2.47 - 2.26 (m, 1H), 1.78 (dt, J = 14.3, 7.3 Hz, 1H), 1.63 - 1.53 (m, 1H).

【0442】

（実施例１８７）（Ｓ）−３−アミノ−５，５−ジメチル−ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン［Ｉ−１８７］：

【化95】

合成スキーム：

【化96】

手順および特性決定：
ステップ１：（Ｓ）−３−アミノ−５，５−ジメチル−ジヒドロフラン−２（３Ｈ）−オン［Ｉ−１８７］：

【0443】

（Ｓ）−２−アミノ−４−メチルペンタ−４−エン酸（１００ｍｇ）を含む丸底フラスコに、濃ＨＣｌ（１ｍＬ）およびＳＯＣｌ_２（０．２ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で４時間、撹拌した。この反応混合物を濃縮してＥｔ_２Ｏにより洗浄すると、粗製固体が得られ、これを０．０２５％ ＴＦＡ／Ｈ_２Ｏ／ＭｅＣＮを使用して、ＲＰ−バイオタージによって精製すると、所望の生成物（２０．２ｍｇ、１１．４％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１３０．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H NMR (500 MHz, DMSO) δ 8.80 (bs, 3H), 4.58 (dd, J = 11.2, 9.3 Hz, 1H), 2.53 - 2.48 (m, 1H), 2.13 (t, J = 11.7 Hz, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.40 (s, 3H).

【0444】

（実施例９０）（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸［Ｉ−９０］の合成：

【化97】

合成スキーム：

【化98】

手順および特性決定：

【0445】

ステップ１：ジエチル２−（１，１，１−トリフルオロプロパン−２−イリデン）マロネート：

【0446】

氷浴を用いたＴＨＦ（１Ｌ）に、２０分間かけてＴｉＣｌ_４（６５．８ｍＬ、６００ｍｍｏｌ）を滴下して加え、ＣＣｌ_４（３０ｍＬ）を加えた。この混合物にマロン酸ジエチル（４８．０ｇ、３００ｍｍｏｌ）および１，１−ジフルオロプロパン−２−オン（５６．４ｇ、６００ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。氷浴を用いてピリジン（２００ｍＬ）を２０分かけて滴下して加え、この反応混合物を水（２Ｌ）に注ぎ入れてろ過し、このろ液をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（６００ｍＬ）、１Ｍ ＨＣｌ（６００ｍＬ×２）、水（６００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ_３（６００ｍＬ）およびブライン（６００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、クロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテルを０％から５％）によって精製すると、ジエチル２−（１，１−ジフルオロプロパン−２−イリデン）マロネート（６０．９ｇ、２５８ｍｍｏｌ、８６％）が無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２３７．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6.97 (t, J = 55.5 Hz, 1H), 4.25-4.33 (m, 4H), 2.03 (s, 3H), 1.29-1.34 (m, 6H).

【0447】

ステップ２：ジエチル２−（１，１−ジフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）マロネート：

【0448】

ジエチル２−（１，１−ジフルオロプロパン−２−イリデン）マロネート（１０．０ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（１２．１ｇ、６３．５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）およびＴＨＦ（２５ｍＬ）中混合物に、−２０℃で１時間かけて、ＭｅＭｇＩ（４２．３ｍＬ、１３０．５ｍｍｏｌ）を加え、この溶液を氷水（２００ｍＬ）に注ぎ入れて、飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液（１００ｍＬ）により処理し、この混合物を３０分間、撹拌してろ過し、ろ液をＤＣＭ（１００ｍＬ）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、ジエチル２−（１，１−ジフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）マロネート（１０．１ｇ、４０．２ｍｍｏｌ、９５％）が褐色液体として得られ、これを次のステップに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 6.05 (t, J = 57.5 Hz, 1H), 4.17-4.23 (m, 4H), 3.49 (s, 1H), 1.22-1.28 (m, 6H) , 1.20 (s, 6H).

【0449】

ステップ３：４，４−ジフルオロ−３，３−ジメチルブタン酸：

【0450】

ジエチル２−（１，１−ジフルオロ−２−メチルプロパン−２−イル）マロネート（６．１ｇ、２４．２ｍｍｏｌ）およびＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（５．１ｇ、１２１ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（５０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（０．５ｍＬ）中混合物を１７時間、９０℃まで加熱した。この混合物を水（２００ｍＬ）により希釈してＤＣＭ（１００ｍＬ）により抽出し、水相のｐＨを６Ｍ ＨＣｌ溶液により３〜４に調整し、ＤＣＭ（１００ｍＬ×２）により抽出して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、４，４−ジフルオロ−３，３−ジメチルブタン酸（３．６ｇ、粗製）が褐色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１５１．１［Ｍ−Ｈ］⁻。

【0451】

ステップ４：４，４−ジフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３，３−トリメチルブタンアミド：

【0452】

４，４−ジフルオロ−３，３−ジメチルブタン酸（３．６ｇ、粗製）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（４．６ｇ、４７．４ｍｍｏｌ）およびＨＡＴＵ（１０．８ｇ、２８．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）中溶液に、Ｅｔ_３Ｎ（７．１８ｇ、７１．１ｍｍｏｌ）を加え、その後、室温で１７時間、撹拌した。この混合物をろ過し、ろ液を水（２００ｍＬ）により希釈してＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ×２）により抽出し、水（１００ｍＬ）、１Ｍ ＨＣｌ（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、４，４−ジフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３，３−トリメチルブタンアミド（３．１ｇ、１５．９ｍｍｏｌ、６６％、２ステップ）が褐色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１９６．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 5.95 (t, J = 57.5 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.51 (s, 2H) , 1.12 (s, 6H).

【0453】

ステップ５：４，４−ジフルオロ−３，３−ジメチルブタナール：

【0454】

４，４−ジフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３，３−トリメチルブタンアミド（３．１ｇ、１５．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ＬｉＡｌＨ_４（２４ｍＬ、２４ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。１時間後、この混合物をクエン酸溶液（１００ｍＬ）によりクエンチし、この溶液をＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ×２）により抽出し、有機相をブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、この溶液を次のステップに使用した。

【0455】

ステップ６：２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンニトリル：

【0456】

上の４，４−ジフルオロ−３，３−ジメチルブタナールのＥｔ_２Ｏ（２００ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ベンジルアミン（３ｍＬ）、ＡｃＯＨ（３ｍＬ）、次に、ＴＭＳＣＮ（３ｍＬ）を加え、この溶液を０〜室温で１７時間、撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により希釈した。この溶液をＨ_２Ｏ（１００ｍＬ×２）により洗浄し、次に、濃縮すると２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンニトリル（３．２ｇ、粗製）が褐色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0457】

ステップ７：２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸：

【0458】

２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンニトリル（１．８ｇ、粗製）の濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）およびＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中溶液を６４時間、１００℃に加熱した。この混合物を濃縮して溶媒を除去し、１Ｍ ＮａＯＨ溶液によりｐＨを１２に調整して、ＰＥ（１００ｍＬ）により抽出し、水相を６Ｍ ＨＣｌを用いてｐＨを５〜６に調整した。白色固体が形成し、ろ過してフィルターケーキを水（５０ｍＬ）により洗浄し、真空で乾燥すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１．３ｇ、４．８０ｍｍｏｌ、５４％、３ステップ）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２７２．０。

【0459】

ステップ８：２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸：

【0460】

２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１．３ｇ、４．８０ｍｍｏｌ）、ＨＣＯＯＮＨ_４（１．５１ｇ、２４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、２００ｍｇ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中混合物を１時間、６０℃に加熱した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮すると２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１．０ｇ、粗製）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８２．０。

【0461】

ステップ９：２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸

【0462】

２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１．０ｇ、粗製）およびＮａＨＣＯ_３（１．２７ｇ、１４．４ｍｍｏｌ）のアセトン（３０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（３０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ＣｂｚＯＳｕ（２．３９ｇ、９．６ｍｍｏｌ）を加えた。１７時間、撹拌した後、この混合物のｐＨを１Ｍ ＨＣｌ溶液により３〜４に調整し、この溶液をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出してブライン（５０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、粗生成物を逆相シリカゲルクロマトグラフィー、次に、キラル分取ＨＰＬＣ［カラム、ＣＣ４ ４．６^＊２５０ｍｍ ５ｕｍ；溶媒、ＭｅＯＨ（０．２％メタノールアンモニア）］によって精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（４００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ、２６％、２ステップ）および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（３８０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ、２５％、２ステップ）が２つの無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３１６．０。

【0463】

ステップ１０：（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸：

【0464】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（４００ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５０ｍｇ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中溶液に、水素下、室温で２時間、撹拌し、この混合物をろ過して真空で濃縮し、逆相シリカゲルクロマトグラフィーによって精製すると、（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１１５．７ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ、５０％）が得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８２．０ ¹H-NMR (500 MHz, MeOD-d4): δ 5.60 (t, J = 56.5 Hz, 1H), 3.97 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 2.07 (dd, J = 15.5 Hz, J = 5.5 Hz, 1H), 1.77 (dd, J = 15.5 Hz, J = 6.5 Hz, 1H), 0.96 (d, J = 9.5 Hz, 6H).

【0465】

（実施例８８）（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸［Ｉ−８８］の合成：

【化99】

合成スキーム：

【化100】

手順および特性決定：

【0466】

ステップ１：（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド：

【0467】

２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンニトリル（１．２ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（２０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて５分間かけて濃Ｈ_２ＳＯ_４（１０ｍＬ）を滴下して加え、この混合物を室温まで温めて、６時間、撹拌した。この混合物を氷水（１００ｍＬ）に注ぎ入れ、この溶液のＰＨを１０％ＮａＯＨ溶液を用いて８〜９に調整し、次に、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、クロマトグラフィー（ＭｅＯＨ／ＤＣＭを０％から５％）、次に、キラル分取ＨＰＬＣ［カラム、ＣＣ４ ４．６^＊２５０ｍｍ ５ｕｍ；溶媒、ＭｅＯＨ（０．２％メタノールアンモニア）］により精製すると、（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド（４００ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、３１％）および（Ｒ）−２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド（３８０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ、３０％）が２つの無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0468】

ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド：

【0469】

（Ｓ）−２−（ベンジルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド（２００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ＨＣＯＯＮＨ_４（２３３ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、４０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中混合物を１時間、６０℃に加熱した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮して、逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミドトリフルオロ酢酸（１２８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ、５９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８１．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, MeOD-d4): δ 5.66 (t, J = 56.5 Hz, 1H), 3.95 (dd, J = 8.0 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 2.14 (dd, J = 10.0 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 1.83 (dd, J = 14.5 Hz, J = 5.5 Hz, 1H), 1.12 (d, J = 15.0 Hz, 6H).

【0470】

（実施例１８５）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート［Ｉ−１８５］の合成：

【化101】

合成スキーム：

【化102】

手順および特性決定：

【0471】

２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸の手順は、実施例９０と同じとした。

【0472】

ステップ１：（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート：

【0473】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１５０ｍｇ、０．４７６ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１９９ｍｇ、０．５２４ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−メチル２−アミノ−４−メチルペンタノエート塩酸塩（１０４ｍｇ、０．５７１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１２３ｍｇ、０．９５２ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間、撹拌し、次に、氷水（２０ｍｌ）によりクエンチし、ＥＡ（２×３０ｍｌ）により抽出して乾燥し、ろ過して濃縮した。この粗製物を逆相シリカゲルクロマトグラフィーのバイオタージにより精製すると、（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（９５ｍｇ、４５％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：４４３．０。

【0474】

ステップ２：（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート：

【0475】

（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（９５ｍｇ、０．２１５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ）のＴＨＦ（５ｍｌ）中溶液を室温で２時間、撹拌し、次に、ろ過して濃縮した。この粗製物を逆相シリカゲルクロマトグラフィーのバイオタージにより精製すると、（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（４５ｍｇ、６９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３０９．０。
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9.11 (d, J = 7 Hz, 1H), 8.41 (s, 3H), 5.81 (t, J = 56.5 Hz, 1H), 4.34-4.31 (m, 1H), 3.89-3.81 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 1.98-1.93 (m, 1H), 1.76-1.73 (m, 1H), 1.65-1.54 (m, 3H), 0.93-0.81 (m, 12H).

【0476】

（実施例１８４）（Ｓ）−メチル２−（（Ｒ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート［Ｉ−１８４］の合成：

【化103】

この手順は、実施例９０および１８５と同じとした。

【0477】

（Ｓ）−メチル２−（（Ｒ）−２−アミノ−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート：ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３０９．０。
¹H-NMR (500 MHz, DMSO-d6): 9.18 (d, J = 7 Hz, 1H), 8.38 (s, 3H), 5.79 (t, J = 56.5 Hz, 1H), 4.37-4.32 (m, 1H), 3.85-3.78 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 1.97-1.92 (m, 1H), 1.77-1.72 (m, 1H), 1.61-1.51 (m, 3H), 0.94-0.82 (m, 12H).

【0478】

（実施例１４５）（２Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸、（２Ｒ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸、（２Ｒ，４Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸および（２Ｓ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸の合成：［３ｄ；Ｉ−１４５］；［３ｃ；Ｉ−１４６］；［３ａ；Ｉ−１６７］；［３ｂ；Ｉ−２５０］

【化104】

合成スキーム：

【化105】

手順および特性決定：

【0479】

ステップ１：（２Ｓ，４Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸、（２Ｒ，４Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸、（２Ｒ，４Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸および（２Ｓ，４Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸の合成：

【0480】

２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（６００ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）のアセトン（１０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液（１０ｍＬ）中溶液に、ＣｂｚＯＳｕ（９７０ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温で３時間、撹拌した。次に、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（２０ｍＬ）を加え、この水を分離して、ＥｔＯＡｃ（２^＊２０ｍＬ）によりさらに抽出し、抽出物を合わせてブライン（２０ｍＬ）により洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４により乾燥し、ろ過して濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣにより精製すると、２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（７５０ｍｇ）が白色固体として得られた。純粋な生成物をキラルＨＰＬＣにより精製すると、４つの異性体が得られた：（２Ｓ，４Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（１５０ｍｇ、１５％）、（２Ｒ，４Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（４０ｍｇ、３．９％）、（２Ｒ，４Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（５０ｍｇ、４．９％）および（２Ｓ，４Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（８０ｍｇ、７．８％）であり、これらはいずれも白色固体であった。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３４２．０［Ｍ＋Ｎａ］＋。

【0481】

ステップ２−Ａ：（２Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸の合成：

【0482】

（２Ｓ，４Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（１５０ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（７５ｍｇ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中溶液を、室温で３時間、撹拌した。この反応混合物をろ過して濃縮すると、（２Ｓ，４Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（５１．７ｍｇ、５９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 3.64-3.60 (m, 1H), 2.77-2.71 (br, 1H), 2.24-2.18 (m, 1H),1.76-1.69 (m, 1H),1.25 (d, J = 7.0 Hz, 3 H).

【0483】

ステップ２−Ｂ：（２Ｒ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸の合成：

【0484】

（２Ｒ，４Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（４０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２０ｍｇ）のＭｅＯＨ（４ｍＬ）中溶液を、室温で３時間、撹拌した。この反応混合物をろ過して濃縮すると、（２Ｒ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（１３．３ｍｇ、６０％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 3.51-3.47 (m, 1H), 2.64-2.58 (br, 1H), 2.12-2.06 (m, 1H),1.63-1.57 (m, 1H),1.13 (d, J = 7.0 Hz, 3 H).

【0485】

ステップ２−Ｃ：（２Ｒ，４Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸の合成：

【0486】

（２Ｒ，４Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（５０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（２５ｍｇ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中溶液を、室温で３時間、撹拌した。この反応混合物をろ過して濃縮すると、（２Ｒ，４Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（１８．０ｍｇ、６１％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 3.51-3.47 (m, 1H), 2.46-2.44 (br, 1H), 1.95-1.87 (m, 2H), 1.11 (d, J = 7.0 Hz, 3 H).

【0487】

ステップ２−Ｄ：（２Ｓ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸の合成：

【0488】

（２Ｓ，４Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（８０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（４０ｍｇ）のＭｅＯＨ（８ｍＬ）中溶液を、室温で３時間、撹拌した。この反応混合物をろ過して濃縮すると、（２Ｓ，４Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタン酸（３８．１ｍｇ、８２％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 3.51-3.47 (m, 1H), 2.46-2.44 (br, 1H), 1.95-1.87 (m, 2H), 1.11 (d, J = 7.0 Hz, 3 H).

【0489】

（実施例１２８）（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（Ｉ−１２８）：

【化106】

合成スキーム：

【化107】

手順および特性決定：
使用した手順は、実施例１８７において使用されているものと同じとした。

【0490】

（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸：ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２００．１ ¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 3.94 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 2.23 (dd, J = 15.5 Hz, J = 5.5 Hz, 1H), 1.90 (dd, J = 15.5 Hz, J = 6.0 Hz, 1H), 1.13 (d, J = 8.5 Hz, 6H).

【0491】

（実施例１８８）（Ｓ）−メチル２−（（Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート［Ｉ−１８８］：

【化108】

合成スキーム：

【化109】

手順および特性決定：

【0492】

２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸の手順は、実施例９０と同じとした。

【0493】

ステップ１：（Ｓ）−メチル２−（（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート：

【0494】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸（１５０ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１８８ｍｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−メチル２−アミノ−４−メチルペンタノエート塩酸塩（１２３ｍｇ、０．６７５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（１７５ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１時間、撹拌し、次に、氷水（２０ｍｌ）によりクエンチし、ＥＡ（２×３０ｍｌ）により抽出して乾燥し、ろ過して濃縮した。この粗製物を逆相シリカゲルクロマトグラフィーであるバイオタージにより精製すると、（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（１２０ｍｇ、５８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：４６１．０。

【0495】

ステップ２：（Ｓ）−メチル２−（（Ｒ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート：

【0496】

（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−ジフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（１２０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）中溶液を室温で２時間、撹拌し、次に、ろ過して濃縮した。この粗製物を逆相シリカゲルクロマトグラフィーのバイオタージにより精製すると、（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート（４９ｍｇ、５７％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３２６．０。
¹H-NMR (500 MHz, MeOD-d4): 4.47 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.99-3.97 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 2.33-2.28 (m, 1H), 1.95-1.91 (m, 1H), 1.69-1.68 (m, 3H), 1.24-1.17 (m, 6H), 1.00-0.94 (m, 6H).

【0497】

（実施例１８９）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート［Ｉ−１８９］：

【化110】

合成スキーム：
使用した手順は、実施例１８８において使用されているものと同じとした。
手順および特性決定：
（実施例１８９）（Ｓ）−メチル２−（（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４，４−ジメチルペンタンアミド）−４−メチルペンタノエート［Ｉ−１８９］：¹H-NMR (500 MHz, MeOD-d4): 4.52 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 4.02-3.99 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 2.35-2.30 (m, 1H), 1.95-1.91 (m, 1H), 1.78-1.67 (m, 3H), 1.25 (s, 3H), 1.17 (s, 3H), 1.01-0.97 (m, 6H).

【0498】

（実施例１０８）（Ｓ）−２−アミノ−６−フルオロヘキサン酸［Ｉ−１０８］。

【化111】

【0499】

（実施例１０９）（Ｒ）−２−アミノ−６−フルオロヘキサン酸［Ｉ−１０９］。

【化112】

合成スキーム：

【化113】

手順および特性決定：
ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−６−フルオロヘキサノエート：

【0500】

１−フルオロ−４−ヨードブタン（２．０ｇ、９．９０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）アセテート（２．４３ｇ、８．２５ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＢ（２６６ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ）およびＫＯＨ（水性５０％）（１０ｍＬ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）およびトルエン（２５ｍＬ）中混合物を５０℃で１６時間、撹拌した。この溶液をＳＧＣ（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／５）により精製すると、（ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−６−フルオロヘキサノエート（０．９１ｇ、２．４７ｍｍｏｌ、３０％）が無色油状物として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３７０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ２：（Ｓ）−２−アミノ−６−フルオロヘキサン酸［Ｉ−１０８］：

【0501】

ジオキサン（１０ｍＬ）およびＨＣｌ（水性６Ｍ）中の（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−６−フルオロヘキサノエート（３６０ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で１６時間、撹拌した。この混合物をエーテルおよび水により抽出した。ｐＨを３〜４に調整した後、水層をＥＡにより抽出した。有機層を濃縮すると、（Ｓ）−２−アミノ−６−フルオロヘキサン酸［Ｉ−１０８］が白色固体（１２５ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ、８６％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１５０．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.469 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.351 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.950 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.904-1.820 (m, 2H), 1.690-1.588 (m, 2H) , 1.456-1.388 (m, 2H).
ステップ２：（Ｒ）−２−アミノ−６−フルオロヘキサン酸［Ｉ−１０９］：

【0502】

（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ジフェニルメチレンアミノ）−６−フルオロヘキサノエート（３００ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）のジオキサン（１０ｍＬ）およびＨＣｌ（水性６Ｍ）中溶液を、室温で１６時間、撹拌した。この混合物をエーテルおよび水により抽出した。ｐＨを３〜４に調整した後、水層をＥＡにより抽出した。有機層をＨＰＬＣにより精製すると、（Ｒ）−２−アミノ−６−フルオロヘキサン酸［Ｉ−１０９］が白色固体（３５ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、２９％）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：１５０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。1H NMR (500 MHz, D2O) δ 4.505 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.410 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.823 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.906-1.827 (m, 2H), 1.722-1.639 (m, 2H) , 1.485-1.399 (m, 2H).

【0503】

（実施例１９８）メチル２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタノエート（Ｉ−１９８）：

【化114】

合成スキーム：

【化115】

手順および特性決定：

【0504】

ステップ１：４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（トリフルオロメチル）ブタ−２−エナミド：

【0505】

ヘキサフルオロアセトン三水和物（３０ｇ、１３６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１時間かけてゆっくりとＨ_２ＳＯ_４（１００ｍＬ、濃）を滴下して加え、気体のヘキサフルオロアセトンをＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニルホスホラニリデン）−アセトアミド（１０ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）中溶液に導入した。この混合物を室温において１６時間、撹拌した。次に、石油エーテル（２００ｍＬ）を加え、白色沈殿物をろ別した。このろ液を濃縮して、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５／１〜３／１）により精製すると、４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（トリフルオロメチル）ブタ−２−エナミド（６．２ｇ、２４．７ｍｍｏｌ、９０％）が少量の油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５２．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃): δ 7.15 (s, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.26 (s, 3H).

【0506】

ステップ２：４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（トリフルオロメチル）ブタンアミド：

【0507】

４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（トリフルオロメチル）ブタ−２−エナミド（４．５ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＨ）_２／Ｃ（６２０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中混合物を、水素雰囲気下、室温で１６時間、撹拌した。次に、ろ過して濃縮すると、４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（トリフルオロメチル）ブタンアミド（１．８ｇ、７．１ｍｍｏｌ、４０％）が少量の油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0508】

ステップ３：４，４，４−トリフルオロ−３−（トリフルオロメチル）ブタナール：

【0509】

４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−３−（トリフルオロメチル）ブタンアミド（１．８ｇ、７．１ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いてＬｉＡｌＨ_４（８．５ｍＬ、８．５ｍｍｏｌ）を滴下して加え、１時間後、この混合物をクエン酸溶液（１００ｍＬ）によりクエンチし、この溶液をＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ×２）により抽出し、有機相をブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、この溶液を次のステップに使用した。

【0510】

ステップ４：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタンニトリル：

【0511】

上の４，４，４−トリフルオロ−３−（トリフルオロメチル）ブタナールのＥｔ_２Ｏ（２００ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ベンジルアミン（２ｍＬ）、ＡｃＯＨ（２ｍＬ）、次に、ＴＭＳＣＮ（２ｍＬ）を加え、この溶液を０〜室温で１７時間、撹拌し、次に、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により希釈した。この溶液をＨ_２Ｏ（１００ｍＬ×２）により洗浄し、次に、濃縮すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタンニトリル（２．１ｇ、粗製）が褐色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３１１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0512】

ステップ５：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸：

【0513】

２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタンニトリル（２．１ｇ、粗製）の濃ＨＣｌ（５０ｍＬ）およびＡｃＯＨ（１０ｍＬ）中溶液を４０時間、１００℃に加熱した。この混合物を濃縮して溶媒を除去し、１Ｍ ＮａＯＨ溶液によりｐＨを１２に調整し、ＰＥ（１００ｍＬ）により抽出し、６Ｍ ＨＣｌを用いて水相のｐＨを５〜６に調整すると白色固体が形成し、ろ過してフィルターケーキを水（５０ｍＬ）により洗浄し、真空で乾燥すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（１．０ｇ、３．０ｍｍｏｌ、４２％、３ステップ）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２７２．０。

【0514】

ステップ６：メチル２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタノエート：

【0515】

２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（８００ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）のＨＣｌ／ＭｅＯＨ（５０ｍＬ、２Ｍ）中溶液を、１７時間、７５℃に加熱した。この溶液を濃縮して、分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０｜Ｉｍ移動相：Ａ：０．１％ ＴＦＡ；Ｂ：ＡＣＮ）により精製すると、メチル２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタノエート（１２０ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ、１５％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３４４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0516】

ステップ７：メチル２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタノエートトリフルオロ酢酸：

【0517】

メチル２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタノエート（１００ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）、ＨＣＯＯＮＨ_４（９２ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中混合物を１時間、６５℃に加熱した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮して、逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、メチル２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタノエートトリフルオロ酢酸（７６ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ、７０％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ 4.26 (dd, J = 7.5 Hz, J = 6.0 Hz, 1H), 3.91 (m, 4H), 2.49 (dd, J = 8.5 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 2.33-2.37 (m, 1H).

【0518】

（実施例１６４）（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（Ｉ−１６４）：

【化116】

合成スキーム：

【化117】

手順および特性決定：

【0519】

ステップ１：２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸：

【0520】

２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（４８０ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）_２／Ｃ（２０％、１００ｍｇ）のＡｃＯＨ（１５ｍＬ）溶液を、水素下、３５℃で１７時間、撹拌した。この混合物をろ過し、ろ液を真空で濃縮すると、２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（４６０ｍｇ、粗製）が白色固体（solild）として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２４０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0521】

ステップ２：（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸：

【0522】

２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（４６０ｍｇ、粗製）およびＮａＨＣＯ_３（３６８ｍｇ、４．３８ｍｍｏｌ）のアセトン（３０ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（３０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ＣｂｚＯＳｕ（７２７ｍｇ、２．９２ｍｍｏｌ）を加えた。１７時間後、この反応（raction）混合物のｐＨを１Ｍ ＨＣｌ溶液により３〜４に調整し、この溶液をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出してブライン（５０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）して、ろ過して真空で濃縮し、粗生成物を逆相シリカゲルクロマトグラフィー、次に、キラル分取ＨＰＬＣ［カラム、ＣＣ４ ４．６^＊２５０ｍｍ ５ｕｍ；溶媒、ＭｅＯＨ（０．２％メタノールアンモニア）］によって精製すると（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（２７ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ、５％、２ステップ）および（Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（２２ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ、４％、２ステップ）が２つの無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（Ｅ^Ｉ＋、ｍ／ｚ）：３９６．０［Ｍ＋Ｎａ］^＋。

【0523】

ステップ３：（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸：

【0524】

（Ｓ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸（２７ｍｇ、０．０７２ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、５ｍｇ）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中混合物を室温で１時間、撹拌した。この溶液をろ過し、逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、（Ｓ）−２−アミノ−５，５，５−トリフルオロ−４−（トリフルオロメチル）ペンタン酸［Ｉ−１６４］（８．５ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ、４９％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２４０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H NMR (500 MHz, D₂O) δ 3.74-3.80 (m, 2H), 2.88-2.31 (m, 1H), 1.91-2.20 (m, 1H).

【0525】

（実施例２０３）２−アミノ−４−シクロペンチルブタン酸［Ｉ−２０３］：

【化118】

合成スキーム：

【化119】

【0526】

手順および特性決定：

【0527】

ステップ１：２−シクロペンチルアセトアルデヒド：

【0528】

３−シクロペンチルプロパン−１−オール（２．０ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（４０ｍＬ）中溶液に、氷浴下、ＩＢＸ（７．３５ｇ、２６．３ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。この反応混合物を水（２００ｍＬ）に注ぎ入れ、Ｅｔ_２Ｏ（１００ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×３）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、この溶液を次のステップに使用した。

【0529】

ステップ２：（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シクロペンチルブタ−２−エノエート：

【0530】

ウィッティヒ試薬（２．５ｇ、６．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ＮａＯｔ−Ｂｕ（７８５ｍｇ、８．２ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、上の２−シクロペンチルアセトアルデヒドのＥｔ_２Ｏ（２００ｍＬ）中溶液を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＥＡ（１００ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、クロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／２０）によって精製すると、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シクロペンチルブタ−２−エノエート（１．０ｇ、３．１ｍｍｏｌ、４５％、２ステップ）が無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３２６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0531】

ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シクロペンチルブタノエート：

【0532】

（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シクロペンチルブタ−２−エノエート（２４０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、ＨＣＯＯＮＨ_４（２３３ｍｇ、３．７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、３０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中混合物を、４時間、加熱して還流した。この混合物をろ過して濃縮し、Ｅｔ_２Ｏ（５０ｍＬ）により希釈し、水（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シクロペンチルブタノエート（２２４ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ、９３％）が無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３２８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0533】

ステップ４：２−アミノ−４−シクロペンチルブタン酸：

【0534】

ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−シクロペンチルブタノエート（２２４ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）の６Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ）およびジオキサン（１０ｍＬ）中溶液を２時間、７０℃に加熱した。この混合物を真空で濃縮し、水（３０ｍＬ）により希釈し、Ｅｔ_２Ｏ（２０ｍＬ×２）により抽出して、ろ液を濃縮乾固すると、２−アミノ−４−シクロペンチルブタン酸（１１４．９ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ、８１％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１７２．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 3.91 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.82-1.89 (m, 2H), 1.66-1.72 (m, 3H), 1.28-1.52 (m, 6H), 1.00-1.01 (m, 2H).

【0535】

（実施例２０２）２−アミノ−５−シクロペンチルペンタン酸［Ｉ−２０２］：

【化120】

合成スキーム：

【化121】

手順および特性決定：

【0536】

ステップ１：３−シクロペンチルプロパナール：

【0537】

３−シクロペンチルプロパン−１−オール（１．０ｇ、７．８ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（２０ｍＬ）中溶液に、氷浴下、ＩＢＸ（３．２８ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。この反応混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ入れ、Ｅｔ_２Ｏ（６０ｍＬ×２）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×３）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、この溶液を次のステップに使用した。

【0538】

ステップ２：（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロペンチルペンタ−２−エノエート：

【0539】

ウィッティヒ試薬（５００ｍｇ、１．３６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いて、ＮａＯｔ−Ｂｕ（１５７ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ）を加えた。１時間後、上の３−シクロペンチルプロパナールのＥｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）中溶液を加えた。この混合物を室温まで温め、一晩、撹拌した。この溶液を水（２００ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）により抽出し、有機相を水（１００ｍＬ×２）およびブライン（１００ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮し、クロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／２０）によって精製すると、（Ｅ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロペンチルペンタ−２−エノエート（２５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ、９．５％、２ステップ）が無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３４０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0540】

ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロペンチルペンタノエート：

【0541】

２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロペンチルペンタ−２−エノエート（２５０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、３０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中混合物を、水素下、室温で１７時間、撹拌した。この混合物をろ過して濃縮すると、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロペンチルペンタノエート（２５０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、９９％）が無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３４２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0542】

ステップ４：２−アミノ−５−シクロペンチルペンタン酸：

【0543】

６Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ）およびジオキサン（１０ｍＬ）中の２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−シクロペンチルペンタノエート（２５０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の溶液を５時間、８０℃に加熱した。この混合物を真空で濃縮し、水（３０ｍＬ）により希釈し、Ｅｔ_２Ｏ（２０ｍＬ×２）により抽出して、ろ液を濃縮乾固すると、２−アミノ−５−シクロペンチルペンタン酸（１１５ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ、７１％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１８６．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (400 MHz, D₂O): δ 3.84 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 1.79-1.84 (m, 2H), 1.61-1.67 (m, 3H), 1.25-1.49 (m, 8H), 0.95-0.99 (m, 2H.

【0544】

（実施例１９７）２−アミノ−Ｎ−シクロペンチル−３，３−ジフルオロ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド［Ｉ−１９７］の合成：

【化122】

合成スキーム：

【化123】

手順および特性決定：

【0545】

ステップ１：２−（ベンジルアミノ）−Ｎ−シクロペンチル−３，３−ジフルオロ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド：

【0546】

２−（ベンジルアミノ）−３，３−ジフルオロ−４−メチルペンタン酸（８０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルシクロペンタンアミン（６２ｍｇ、０．６２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１４１ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）およびＥｔ_３Ｎ（９４ｍｇ、０．９３）のＤＭＦ（２ｍＬ）中混合物を、室温で３時間、撹拌した。この混合物を分取ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０｜Ｉｍ 移動相：Ａ：０．１％ＴＦＡ；Ｂ：ＡＣＮ）により精製すると、２−（ベンジルアミノ）−Ｎ−シクロペンチル−３，３−ジフルオロ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド（４５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、４３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３３９．０。

【0547】

ステップ２：２−アミノ−Ｎ−シクロペンチル−３，３−ジフルオロ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド：

【0548】

２−（ベンジルアミノ）−Ｎ−シクロペンチル−３，３−ジフルオロ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド（４５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＨＣＯＯＮＨ_４（４１ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、１０ｍｇ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中混合物を１時間、６０℃に加熱した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮して、逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、２−アミノ−Ｎ−シクロペンチル−３，３−ジフルオロ−Ｎ，４−ジメチルペンタンアミド（１６．３ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ、４９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２４９．２ 1H NMR (500 MHz, MeOD-d₄) δ 5.26 (dd, J = 15.5 Hz, J = 6.0 Hz, 0.5H), 5.08 (dd, J = 16.5 Hz, J = 5.0 Hz, 1H), 4.28-4.31 (m, 0.5H), 2.97 (d, J = 48.5 Hz, 3H), 2.38 (m, 1H), 1.65-1.99 (m, 8H), 11.16 (dt, J = 6.5 Hz, J = 3.0 Hz, 6H).

【0549】

（実施例１９６）２−アミノ−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸［Ｉ−１９６］。

【化124】

合成スキーム：

【化125】

手順および特性決定：
ステップ１：３−ヒドロキシ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，２，２−トリメチルプロパンアミド：

【0550】

３−ヒドロキシ−２，２−ジメチルプロパン酸（１０ｇ、８４．７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１６．４ｇ、１０１．７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２４．４ｇ、１２７．１ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（１７．２ｇ、１２７．１ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２８ｍＬ、１６９．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）中混合物を、室温で１６時間、撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ×３）および水（１００ｍＬ）により抽出し、有機層を合わせて１Ｎ ＨＣｌ（３０ｍＬ^＊２）、１Ｎ ＮａＨＣＯ_３（３０ｍＬ×２）およびブライン（５０ｍＬ）により洗浄し、乾燥して濃縮すると残留物が得られ、これをクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／２）により精製すると、３−ヒドロキシ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，２，２−トリメチルプロパンアミド（６．９ｇ、５０％）が無色（corlorless）油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１６２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ２：３−フルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，２，２−トリメチルプロパンアミド：

【0551】

−７８℃に冷却した３−ヒドロキシ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，２，２−トリメチルプロパンアミド（４．５ｇ、２７．９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４０ｍＬ）中混合物に、ＤＡＳＴ（７．４ｍＬ、５５．９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。次に、室温で１〜２時間、撹拌し、再度−７８℃まで冷却して、ＤＡＳＴ（４ｍＬ、２７．９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。この反応混合物を室温でさらに１時間、撹拌した。この反応混合物を−７８℃に冷却し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ（１５ｍＬ）をゆっくりと加え、ＤＣＭ（５０ｍＬ）を加え、有機層を分離し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ×２）により洗浄して乾燥し、濃縮すると残留物が得られ、これをクロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／４）により精製すると、３−フルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，２，２−トリメチルプロパンアミド（１．９ｇ、２８％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１６４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。
ステップ３：３−フルオロ−２，２−ジメチルプロパナール：

【0552】

０℃に冷却した３−フルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，２，２−トリメチルプロパンアミド（１．０ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）中混合物に、ＬｉＡｌＨ_４（６．１ｍＬ、６１．３ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１Ｍ）を滴下して加えた。次に、この温度で０．５〜１時間、撹拌した。ＮＨ_４Ｃｌ（１０ｍＬ）をゆっくりと加え、Ｅｔ_２Ｏ（２０ｍＬ×３）により抽出し、水（１５ｍＬ×２）およびブライン（１５ｍＬ）により洗浄して乾燥し、次のステップに直接、使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：ＭＳはなし。
ステップ４：（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタ−２−エノエート：

【0553】

３−フルオロ−２，２−ジメチルプロパナール（約６３０ｍｇ、６．１ｍｍｏｌ、上のステップからのＥｔ_２Ｏ溶液）、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−ジエトキシホスホリル−アセテート（２．２５ｇ、６．１ｍｍｏｌ）およびｔ−ＢｕＯＮａ（１．２ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）中混合物を、室温で１６時間、撹拌した。飽和ＮＨ_４Ｃｌ（１５ｍＬ）を加え、ＥＡ（３０ｍＬ×３）により抽出し、有機相を合わせて、水（１５ｍＬ）およびブライン（１５ｍＬ）により洗浄し、乾燥して濃縮すると、残留物が得られ、これをクロマトグラフィー（シリカ、石油エーテルからＤＣＭ）によって精製すると、（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタ−２−エノエート（１９０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：２０６［Ｍ−１１１］^＋。
ステップ５：ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタノエート：
（Ｚ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタ−２−エノエート（１９０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、３０ｍｇ）のＩＰＡ（１５ｍＬ）中混合物を、水素下、室温で１７時間、撹拌した。この混合物をろ過して濃縮すると、ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタノエート（２００ｍｇ、粗製）が無色液体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３４２．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋。
ステップ６：２−アミノ−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタン酸トリフルオロ酢酸：
ｔｅｒｔ−ブチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−５−フルオロ−４，４−ジメチルペンタノエート（２００ｍｇ、粗製）の６Ｍ ＨＣｌ（２０ｍＬ）およびジオキサン（１０ｍＬ）中溶液を１７時間、５０℃に加熱した。この混合物を真空で濃縮し、水（３０ｍＬ）により希釈し、Ｅｔ_２Ｏ（２０ｍＬ×２）により抽出して、ろ液を真空で濃縮し、逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、２−アミノ−５−シクロペンチルペンタン酸トリフルオロ酢酸塩（３１．７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、１９％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１６４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。¹H-NMR (500 MHz, D₂O): δ 4.16 (d, J = 47.5 Hz, 1H), 3.97 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 2.03 (dd, J = 15.5 Hz, J = 5.5 Hz, 1H), 1.71 (dd, J = 15.5 Hz, J = 6.0 Hz, 1H), 0.91 (dd, J = 15.0 Hz, J = 2.0 Hz, 6H).

【0554】

（実施例１８６）２，４−ジアミノ−４−メチルペンタン酸［Ｉ−１８６］の合成：

【化126】

合成スキーム：

【化127】

【0555】

手順および特性決定：

【0556】

ステップ１：ｔｅｒｔ−ブチル４−（メトキシ（メチル）アミノ）−２−メチル−４−オキソブタン−２−イルカルバメート：

【0557】

３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルブタン酸（１ｇ、４．６１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（５３６ｍｇ、５．５３ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２．２６ｇ、５．９９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）中溶液に、ＤＩＰＥＡ（１．４９ｇ、１１．５３ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を室温で２時間、撹拌し、次に、この混合物をブライン（１００ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）により抽出した。合わせた有機層を濃縮して、クロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／３）により精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル４−（メトキシ（メチル）アミノ）−２−メチル−４−オキソブタン−２−イルカルバメート（１．０ｇ、３．８ｍｍｏｌ、８２％）が無色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２６１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0558】

ステップ２：ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル−４−オキソブタン−２−イルカルバメート：

【0559】

ｔｅｒｔ−ブチル４−（メトキシ（メチル）アミノ）−２−メチル−４−オキソブタン−２−イルカルバメート（３．８ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中溶液に、室温でＬｉＡｌＨ_４（１６ｍＬ、ＴＨＦ中の１Ｍ）を加えた。この溶液を室温で２時間、撹拌し、Ｎａ_２ＳＯ_４．１０Ｈ_２Ｏによりクエンチしてろ過し、ＴＨＦにより洗浄すると、ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル−４−オキソブタン−２−イルカルバメートが黄色溶液（ＴＨＦ（１１０ｍＬ）中、約１４ｍｍｏｌ）として得られた。ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１４６．３［Ｍ＋Ｈ−５６］^＋。

【0560】

ステップ３：ｔｅｒｔ−ブチル４−（ベンジルアミノ）−４−シアノ−２−メチルブタン−２−イルカルバメート：

【0561】

ｔｅｒｔ−ブチル２−メチル−４−オキソブタン−２−イルカルバメート（粗製、ＴＨＦ（１１０ｍＬ中、約１４ｍｍｏｌ）溶液に、ＢｎＮＨ_２（２．２ｍＬ）およびＡｃＯＨ（２．２ｍＬ）を加えた。この溶液を室温で１０分間、撹拌した。ＴＭＳＣＮ（２．２ｍＬ）を加えた。この混合物を室温で１７時間、撹拌した。次に、この反応混合物を濃縮して、クロマトグラフィー（シリカ、酢酸エチル／石油エーテル＝１／４）により精製すると、ｔｅｒｔ−ブチル４−（ベンジルアミノ）−４−シアノ−２−メチルブタン−２−イルカルバメート（６７０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ、１５％）が黄色ドープとして得られた。ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３１８．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0562】

ステップ４：ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（ベンジルアミノ）−２−メチル−５−オキソペンタン−２−イルカルバメート：

【0563】

ｔｅｒｔ−ブチル４−（ベンジルアミノ）−４−シアノ−２−メチルブタン−２−イルカルバメート（６４０ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（５５０ｍｇ、３．９８ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（１６ｍＬ）中混合物に、３０％Ｈ_２Ｏ_２（０．６４ｍＬ、５．６７ｍｍｏｌ）を加え、室温で１７時間、撹拌した。次に、この反応混合物をＨ_２Ｏ（２００ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ×２）により抽出した。合わせた有機層を濃縮すると、２−（ベンジルアミノ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（粗製８９０ｍｇ）が黄色ドープとして得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３３６．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0564】

ステップ５：２−（ベンジルアミノ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸：

【0565】

ｔｅｒｔ−ブチル５−アミノ−４−（ベンジルアミノ）−２−メチル−５−オキソペンタン−２−イルカルバメート（粗製８９０ｍｇ、約２．０ｍｍｏｌ）、ＫＯＨ（４０６ｍｇ、７．２５ｍｍｏｌ）のエタン−１，２−ジオール（９ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（９ｍＬ）中混合物を、１００℃で５時間、撹拌した。次に、この反応混合物をブライン（２００ｍＬ）により希釈して、ＴＨＦ／ＥＡ＝２：１（９０ｍＬ×５）により抽出し、有機層を合わせ、濃縮して逆ＨＰＬＣ（Ｂｏｓｔｏｎ Ｃ１８ ２１^＊２５０ｍｍ １０μｍ、移動相：Ａ：０．１％トリフルオロ酢酸；Ｂ：アセトニトリル）により精製すると、２−（ベンジルアミノ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（１２０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ、１８％）が白色固体として得られた。ＭＳ（ＥＩ＋、ｍ／ｚ）：３３７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0566】

ステップ６：２−アミノ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸：

【0567】

２−（ベンジルアミノ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（１４０ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、ＨＣＯＯＮＨ_４（１３２ｍｇ、２．１ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、２０ｍｇ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中混合物を１時間、６０℃に加熱した。この混合物をろ過し、ろ液を濃縮して、逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、２−アミノ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（６０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、５８％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２４７．２。

【0568】

ステップ７：２，４−ジアミノ−４−メチルペンタン酸：

【0569】

６Ｍ ＨＣｌ（１０ｍＬ）およびジオキサン（０ｍＬ）中の２−アミノ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−４−メチルペンタン酸（６０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１７時間、撹拌した。この溶液を真空で濃縮すると、２，４−ジアミノ−４−メチルペンタン酸（５１．８ｍｇ、０．２３６ｍｍｏｌ、９７％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１４７．１ 1H NMR (500 MHz, D₂O) δ 4.04 (dd, J = 9.5 Hz, J = 3.5 Hz, 1H), 2.32 (dd, J = 15.0 Hz, J = 9.5 Hz, 1H),1.94 (dd, J = 15.0 Hz, J = 3.0 Hz, 1H), 1.38 (dd, J = 9.5 Hz, J = 5.0 Hz, 6H).

【0570】

（実施例１９９）４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン［Ｉ−１９９］の合成：

【化128】

合成スキーム：

【化129】

手順および特性決定：

【0571】

ステップ１：Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニル−ｌ５−ホスファニリデン）アセトアミド：

【0572】

アセトニトリル（２００ｍＬ）中の２−クロロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチルアセトアミド（１３．７ｇ、０．１ｍｏｌ）およびトリフェニルホスファン（２６．２ｇ、０．１ｍｏｌ）の混合物を８０℃まで加熱し、２０時間、保持した。この混合物を冷却し、４０℃未満で濃縮して溶媒を除去した。残留物をジクロロメタン（２００ｍＬ）、次いで２Ｎ ＫＯＨ（１００ｍＬ）に溶解した。得られた混合物を２０℃で１時間、撹拌した。有機層をブライン（２００ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥してろ過した。ろ液を真空で濃縮すると、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニル−ｌ５−ホスファニリデン）アセトアミド（３６ｇ、０．１ｍｏｌ、９８％）が黄色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３６４．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0573】

ステップ２：（Ｅ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルブタ−２−エナミド：

【0574】

テトラヒドロフラン（５００ｍＬ）中のＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−２−（トリフェニル−ｌ５−ホスファニリデン）アセトアミド（３６．３ｇ、０．１ｍｏｌ）および１，１，１−トリフルオロプロパン−２−オン（２２．４ｇ、０．２ｍｏｌ）の混合物を２０℃に加熱し、２０時間、保持した。この混合物を冷却し、４０℃未満で真空で濃縮して溶媒を除去した。石油エーテル中、０から２５％の酢酸エチルにより溶出するシリカゲルカラム（２００ｇ、２００〜３００メッシュ、ＵＶ２５４ｎｍ）により、残留物を精製すると、（Ｅ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルブタ−２−エナミド（１９．５ｇ、０．１ｍｏｌ、９８％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：１９８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0575】

ステップ３：４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド：

【0576】

（Ｅ）−４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルブタ−２−エナミド（２ｇ、０．０１ｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（１０％、２００ｍｇ）のＴＨＦ（５０ｍＬ）中混合物を、２６℃で１８時間、撹拌した。この混合物をろ過し、ろ液を真空で濃縮乾固すると、４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（２ｇ、０．０１ｍｏｌ、９８％）が黄色油状物として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２００．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0577】

ステップ４：４，４，４−トリフルオロ−３−メチルブタナール：

【0578】

４，４，４−トリフルオロ−Ｎ−メトキシ−Ｎ，３−ジメチルブタンアミド（２ｇ、０．０１ｍｏｌ）のＴＨＦ（４０ｍＬ）中溶液に、０℃でＬｉＡｌＨ_４（０．４ｇ、０．０１ｍｏｌ）を加えた。この混合物を０℃で１時間、撹拌した。この反応混合物を水、次いでメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３０ｍＬ×２）によりクエンチした。有機層をブライン（５０ｍＬ×３）により洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥してろ過した。ろ液を含有すると、４，４，４−トリフルオロ−３−メチルブタナール（１．４ｇ、粗製）が無色溶液として得られ、これを次のステップに直接使用した。

【0579】

ステップ５：２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタンニトリル：

【0580】

上の４，４，４−トリフルオロ−３−メチルブタナールのメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１００ｍＬ）中溶液に、氷浴を用いてベンジルアミン（１．５ｍＬ）、ＡｃＯＨ（１．０ｍＬ）、次に、ＴＭＳＣＮ（１．５ｍＬ）を加えた。この混合物を２０℃まで温め、一晩、撹拌した。この溶液を水（３０ｍＬ）により希釈し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）により抽出した。有機相を水（３０ｍＬ×２）およびブライン（５０ｍＬ）により洗浄して乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタンニトリル（２．６ｇ、粗製）が褐色油状物として得られ、これを次のステップに使用した。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２５７．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0581】

ステップ６：Ｎ−ベンジル−４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン：

【0582】

２−（ベンジルアミノ）−５，５，５−トリフルオロ−４−メチルペンタンニトリル（０．３ｇ、粗製）のＤＭＦ（１０ｍＬ）中溶液に、ＮＨ_４Ｃｌ（０．１５ｇ、０．００３ｍｏｌ）およびＮａＮ_３（０．２１ｇ、０．００３ｍｏｌ）を加え、１８時間、９５℃に加熱した。この溶液を１５℃に冷却して、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）により抽出し、有機相を水（２０ｍＬ×２）およびブライン（２０ｍＬ）により洗浄し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、ろ過して真空で濃縮すると、Ｎ−ベンジル−４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン（０．１ｇ、０．５ｍｍｏｌ、３ステップで３３％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：３００．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0583】

４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミントリフルオロ酢酸：

【0584】

Ｎ−ベンジル−４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミン（１６０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中溶液に、室温でＨＣＯＯＮＨ_４（０．１７ｇ、２．７ｍｍｏｌ）およびＰｄ／Ｃ（３０ｍｇ）を加えた。この混合物を６０℃で２時間、撹拌した。この反応混合物をろ過して濃縮すると、粗生成物が得られ、これを逆相シリカゲルクロマトグラフィーにより精製すると、４，４，４−トリフルオロ−３−メチル−１−（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）ブタン−１−アミントリフルオロ酢酸（７２．８ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、４２％）が白色固体として得られた。ＥＳＩ−ＭＳ（ＥＩ^＋、ｍ／ｚ）：２１０．２［Ｍ＋Ｈ］^＋；1H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 4.67-4.93 (m, 1H), 2.31 - 2.41 (m, 1H), 2.00-2.12 (m, 2H), 0.99 (dd, J = 16.8, J = 6.4 Hz, 6H).

【0585】

（実施例２１０）ウエスタンブロットアッセイ

【0586】

このスクリーニングアッセイは、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞から安定して発現されたＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４の免疫沈降によって精製したＧＡＴＯＲ２／セストリン２複合体に対して、試験化合物の活性をｉｎ ｖｉｔｒｏで測定した。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞（２９３Ｔ）は、レンチウイルスよる形質導入によって、Ｎ−末端にタグ付けされたＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４を安定して発現するよう遺伝子工学的に操作した。レンチウイルスは、ＸＴｒｅｍｅＧｅｎｅ９トランスフェクト試薬（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して、レンチウイルス導入ベクターｐＬＪＭ６０をΔＶＰＲエンベロープおよびＣＭＶ ＶＳＶ−Ｇパッケージングプラスミドと共に、ＨＥＫ−２９３Ｔ細胞に共トランスフェクトすることにより生成した。培地はトランスフェクトの２４時間後に、３０％の不活性化ウシ血清を補給したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に変更した。ウイルス含有上澄み液をトランスフェクトの４８および７２時間後に採集し、０．４５μｍフィルターに通して、細胞を取り除いた。６ウェルの組織培養プレートにおける標的細胞を、８μｇ／ｍＬのポリブレンを含有する培地中で感染させて、２，２００ｒｐｍで１時間の遠心分離によって、スピン感染を行った。感染の２４時間後、ウイルスを除去し、適切な抗生物質を用いて細胞を選択した。次に、１０％のウシ胎児血清および抗生物質を補給したＤＭＥＭ中で、細胞を成長させた。

【0587】

ロイシン模倣体化合物をスクリーニングするため、２，０００，０００個のＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４発現２９３Ｔ細胞を、１０ｃｍの組織培養プレートでプレート培養した。７２時間後、アミノ酸を配合しておらず、かつ５ｍＭグルコース（−ＡＡ ＲＰＭＩ、ＵＳ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を補給した標準ＲＰＭＩ培地中に細胞を１時間置き、次に、続いて、溶解緩衝液（４０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１％Ｔｒｉｔｏｎ、１０ｍＭ β−グリセロリン酸ナトリウム、１０ｍＭピロリン酸ナトリウム、２．５ｍＭ ＭｇＣｌ２およびプロテアーゼ阻害剤）に溶解した。ＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４／内在性セストリン２複合体を単離するため、１ｍｌの分量の粗製溶解物（全タンパク質２〜４ｍｇに等価）に、抗ｆｌａｇ樹脂（ＳＩＧＭＡ）３０μｌを用いる免疫沈降を４℃で２時間、施し、冷溶解緩衝液および０．５Ｍ ＮａＣｌ中で２回、洗浄し、１ｍｌの冷細胞質緩衝液（４０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．４、１４０ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭ ＮａＣｌ、２．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００）に再懸濁させた。次に、試験化合物または対照（得られた溶液をろ過したか、またはロイシン）を、様々な濃度の免疫沈降試料のそれぞれに加え、４℃で６０分間、回転しながらインキュベートした。インキュベート期間の後、試料を遠心分離にかけて、抗ｆｌａｇ樹脂に結合したＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４／内在性セストリン２複合体をペレットにし、上澄み液を完全に除去して、樹脂をＳＤＳ−ＰＡＧＥ試料緩衝液中で再懸濁し、５分間、煮沸した。次に、試料をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより処理し、L. Chantranupongら、Cell Reports ９巻：１〜８頁（２０１４年）に記載されている通り、抗ＦＬＡＧ（ＳＩＧＭＡ）および抗セストリン２（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）抗体を用いてウエスタンブロットを行った。

【0588】

得られたウエスタンブロットを走査し、ＬＩ−ＣＯＲ（登録商標）イメージングプラットフォームを使用して、セストリン２およびＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４に対応するバンド強度を定量した。各条件に関して、ＧＡＴＯＲ２に結合したセストリン２の量を決定するため、セストリン２のバンド強度をＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４のバンド強度に正規化した。試験化合物の各回分に関して、ネガティブ対照（得られた溶液をろ過した）およびポジティブ対照（ロイシン、２５μＭ、ＳＩＧＭＡ）も行った。ロイシンによってＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４に結合した内在性セストリン２の欠損が、１００％活性を表すように正規化した。化合物は、２連でアッセイし、各化合物の活性は、ロイシン活性の割合として定量し、平均した。アッセイを繰り返して試みると、水と比べて、ロイシンの平均活性は２０％の標準偏差となった。したがって、２連で、２５μＭにおいて、ＧＡＴＯＲ２に結合したセストリン２の量が少なくとも４０％低下したことは、統計的に有意と見なされ、ロイシン模倣体として特徴付けられた。一部の化合物では、ＦＬＡＧ−ＷＤＲ２４に結合したセストリン２の量が増加した。ＧＡＴＯＲ２に結合したセストリン２の量を４０％より多く増加させた化合物（ロイシン活性の−４０％未満として表される）は、ロイシンアンタゴニストとして特徴付けられた。

【0589】

（実施例２１１）セストリン２およびセストリン２／ＧＡＴＯＲ２相互作用時における、ロイシンの活性を模倣するまたは拮抗する化合物を特定する方法

【0590】

導入

【0591】

セストリン１およびセストリン２は、不十分なロイシンレベル下では、ＧＡＴＯＲ２構成成分であるＷＤＲ２４およびＳｅｈ１Ｌにより、ＧＡＴＯＲ２と相互作用する。ロイシンが十分にある条件下では、ロイシンは、セストリン２に直接、結合し、ＧＡＴＯＲ２からセストリン２の解離を引き起こす。以下の方法の目的は、セストリン２への結合およびセストリン２／ＧＡＴＯＲ２の撹乱における、ロイシンの作用を模倣する化合物を特定することである。さらに、この方法は、セストリン２へのロイシンの結合を拮抗する化合物、およびロイシンに応答して、ＧＡＴＯＲ２からセストリン２が解離するの阻止する化合物を特定する。

【0592】

方法１（ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＰＰＩアッセイ）

【0593】

このスクリーニングアッセイは、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞から安定して発現されたＦｌａｇ−ＷＤＲ２４の免疫沈降によって精製したＧＡＴＯＲ２／セストリン２複合体に対して、化合物の活性をｉｎ ｖｉｔｒｏで測定した。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞（２９３Ｔ）は、レンチウイルスよる形質導入によって、Ｎ−末端にタグ付けされたＦｌａｇ−ＷＤＲ２４を安定して発現するよう遺伝子工学的に操作した。レンチウイルスは、ＸＴｒｅｍｅＧｅｎｅ９トランスフェクト試薬を使用して、レンチウイルス導入ベクターｐＬＪＭ６０をΔＶＰＲエンベロープおよびＣＭＶ ＶＳＶ−Ｇパッケージングプラスミドと共に、ＨＥＫ−２９３Ｔ細胞に共トランスフェクトすることにより生成した。培地はトランスフェクトの２４時間後に、３０％の不活性化ウシ血清を補給したダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）に変更した。ウイルス含有上澄み液をトランスフェクトの４８および７２時間後に採集し、０．４５μｍフィルターに通して、細胞を取り除いた。６ウェルの組織培養プレートにおける標的細胞を、８μｇ／ｍＬのポリブレンを含有する培地中で感染させて、２，２００ｒｐｍで１時間の遠心分離によって、スピン感染を行った。感染の２４時間後、ウイルスを除去し、適切な抗生物質を用いて細胞を選択した。次に、１０％のウシ胎児血清および抗生物質を補給したＤＭＥＭ中で、細胞を成長させる。

【0594】

ロイシン模倣体化合物をスクリーニングするため、２，０００，０００個のＦｌａｇ−ＷＤＲ２４発現２９３Ｔ細胞を、１０ｃｍの組織培養プレートでプレート培養する。７２時間後、アミノ酸を配合しておらず、かつ５ｍＭグルコース（−ＡＡ ＲＰＭＩ、ＵＳＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を補給した標準ＲＰＭＩ培地中に細胞を１時間、置き、次に、続いて、溶解緩衝液（４０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１％Ｔｒｉｔｏｎ、１０ｍＭベータ−グリセロリン酸ナトリウム、１０ｍＭピロリン酸ナトリウム、２．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２およびプロテアーゼ阻害剤）に溶解した。Ｆｌａｇ−ＷＤＲ２４／内在性セストリン２複合体は、以下の通り単離した：１ｍｌの分量の粗製溶解物（全タンパク質２〜４ｍｇに等価）に、抗ｆｌａｇ樹脂（ＳＩＧＭＡ）３０μｌを用いる免疫沈降（ＩＰ）を４℃で２時間、施し、冷溶解緩衝液および０．５Ｍ ＮａＣｌ中で２回、洗浄し、１ｍｌの冷細胞質緩衝液（４０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ７．４、１４０ｍＭ ＫＣｌ、１０ｍＭ ＮａＣｌ、２．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００）に再懸濁させた。次に、化合物を２５μＭの所与の濃度で各試料に加え、４℃で３０分間、回転しながらインキュベートした。インキュベート期間の後、試料を遠心分離にかけて、抗ｆｌａｇ樹脂に結合したＦｌａｇ−ＷＤＲ２４／内在性セストリン２複合体をペレットにし、上澄み液を完全に除去して、樹脂をドデシル硫酸ナトリウム−ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）試料緩衝液中に再懸濁し、５分間、煮沸した。次に、試料をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより処理し、L. Chantranupongら、Cell Reports ９巻：１〜８頁（２０１４年）に記載されている通り、抗Ｆｌａｇ（ＳＩＧＭＡ）および抗セストリン２（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）抗体を用いてウエスタンブロットを行う。

【0595】

得られたウエスタンブロットを走査し、ＬＩ−ＣＯＲ（登録商標）イメージングプラットフォームを使用して、セストリン２およびＦｌａｇ−ＷＤＲ２４に対応するバンド強度を定量した。各条件に関して、ＧＡＴＯＲ２に結合したセストリン２の量を決定するため、セストリン２のバンド強度をＦｌａｇ−ＷＤＲ２４のバンド強度に正規化した。試験化合物の各回分に関して、ネガティブ対照（水）およびポジティブ対照（ロイシン、２５μＭ、ＳＩＧＭＡ）も行った。ロイシンによってＦｌａｇ−ＷＤＲ２４に結合した内在性セストリン２の欠損は、１００％活性を表すように正規化する。化合物は、２連でアッセイし、各化合物の活性は、ロイシン活性の割合として定量し、平均する。試験化合物から定量したデータの一覧表示を表３に示す。アッセイを繰り返して試みると、水と比べて、ロイシンの平均活性は２０％の標準偏差となった。したがって、２５μＭにおいて、２連のどちらもＧＡＴＯＲ２に結合したセストリン２の量が少なくとも４０％低下した化合物は、統計的に有意と見なされ、ロイシン模倣体と称した。一部の化合物では、Ｆｌａｇ−ＷＤＲ２４に結合したセストリン２の量が増加した（表３中のロイシンのネガティブ活性率として示す）。−４０％未満のロイシン活性を示した化合物もやはり、適合した（hits）と見なされ、ロイシンアンタゴニストと称した。

【0596】

方法２（細胞をベースとするｍＴＯＲＣ１活性化）

【0597】

インタクトな細胞における、ロイシン模倣体として特定した化合物の有効性を実証するため、ロイシン飢餓後に化合物処置に応答したｍＴＯＲＣ１のシグナル伝達を、ウエスタンブロット法によって測定した。ロイシン飢餓時に、外因性ロイシンを添加すると、Wang, S.、Tsun, Z.ら、Science ３４７巻（６２１８号）：１８８〜１９４頁（２０１５年）に記載されている通り、ロイシンの添加の１０〜９０分後にシグナル伝達を測定すると、ｍＴＯＲＣ１が活性化される。したがって、ロイシン模倣体として特定された化合物が、同様の様式で、ｍＴＯＲＣ１を活性化するかどうかを試験する同様のアッセイを設計した。簡潔に言うと、１０％ウシ胎児血清および抗生物質を補給したＤＭＥＭ中で、８００，０００個のＨＥＫ２９３Ｔ細胞を６ウェルプレートの各ウェルでプレート培養した。翌日、細胞をロイシンを含まない改変ＤＭＥＭ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）または血清を含まない改変ＤＭＥＭに１時間、置き、次いで、１０分間より長いある期間、所与の濃度でロイシン模倣体を添加（ｎ＝３）した。次に、細胞を溶解して、ＳＤＳ−ＰＡＧＥの処理を行い、Kang,S.A.ら、Science ３４１巻（６１４４号）：３６４〜３７４頁（２０１３年）に記載されている通り、ｍＴＯＲＣ１基質であるリン酸化Ｓ６キナーゼ（Ｔｈｒ３８９）、およびリン酸化４ＥＢＰ１（Ｔｈｒ３７／４６）（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、および負荷対照（ベータ−アクチン、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を対象とする抗体を用いてウエスタンブロット法を行った。次に、ＬＩ−ＣＯＲ（登録商標）イメージングプラットフォームを使用して、リン酸化基質に対応するバンドの強度を、アクチンのバンドに対して正規化した。化合物により処置されていないロイシン飢餓細胞に対して、ｍＴＯＲＣ１シグナル伝達を著しく増加させる（スチューデントｔ検定、ｐ＜０．０５）化合物は、細胞において活性があると見なした。ポジティブ対照として、ロイシン飢餓細胞に、ロイシンを６０分間、１００μＭで加えた。

【0598】

方法３（細胞をベースとするｍＴＯＲＣ１活性化）

【0599】

ロイシンアンタゴニストとして特定した化合物の有効性を実証するため、または弱いロイシン模倣体がインタクトな細胞においてロイシンの活性を増強するかどうか決定するため、上記と同じ枠組みであるが、以下を変更して繰り返した：細胞を、ＤＭＥＭ培地のないロイシン中で６０分間（方法３に記載されている通り）、次いで、化合物中で、６０分より長いまたはそれに等しいある期間の間（ｎ＝３）、置いた。化合物処置の後、細胞を６０分間、３０および１００μＭのロイシンにより刺激した。ｍＴＯＲＣ１シグナル伝達を、方法２に記載されているウエスタンブロット法によって測定した。３０μＭまたは１００μＭのどちらかで、ロイシンに応答したｍＴＯＲＣ１の、アクチンで正規化したリン酸化基質のレベルを、統計的に有意な様式で（スチューデントｔ検定、ｐ＜０．０５）低下させた化合物は、細胞において活性であると見なした。３０μＭまたは１００μＭのどちらかで、ロイシンに応答したｍＴＯＲＣ１の、アクチンで正規化したリン酸化基質のレベルを、統計的に有意な様式で（スチューデントｔ検定、ｐ＜０．０５）増加させた化合物は、細胞においてロイシン増強剤であると見なした。対照として、ロイシンを添加する前に、ロイシン飢餓細胞を予め水により処置した。あるいは、潜在的なロイシンアンタゴニストは、上記と同じであるが、ロイシン飢餓および刺激のない方法で、ＨＥＫ２９３Ｔ細胞においてアッセイした。十分量の培養条件下で、化合物を処置した際に、ｍＴＯＲＣ１のシグナル伝達のベースラインが減衰するかどうかを決定するため、ウエスタンブロットを行った。

【0600】

方法４。

【0601】

細胞において、化合物が、セストリン２とＧＡＴＯＲ２との間の相互作用をモジュレートすることができる能力を、方法２および３に記載されているが、１０ｃｍの組織培養用皿中でプレート培養した、安定的に発現したＦｌａｇ−ＷＤＲ２４に遺伝子工学的に操作したＨＥＫ２９３Ｔ細胞において、アッセイを繰り返すことにより測定した。内因性セストリン２とＦｌａｇ−ＷＤＲ２４との間の相互作用は、方法１に記載されている化合物の処置（ｎ＝３）後に、細胞から得た溶解物から測定した。簡潔に言うと、細胞処置後に、Ｆｌａｇ−ＷＤＲ２４に結合した内在性セストリン２の量を測定するため、抗ｆｌａｇ樹脂を用いて免疫沈降を行い、Ｆｌａｇ−ＷＤＲ２４に結合した内在性セストリン２の量を測定するため、得られた試料にＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびウエスタンブロット法の処理を行った。統計的に有意な様式で（スチューデントｔ検定、ｐ＜０．０５）、ＧＡＴＯＲ２に結合したセストリン２の量をモジュレートする化合物は、適合したと見なした。

【0602】

方法５（ＡＬＰＨＡＬｉｓａ細胞ベースアッセイ）

【0603】

プレートベースのフォーマットで、インタクトな細胞において、ロイシン模倣体として特定した化合物の有効性を実証するため、ロイシン飢餓後に化合物処置に応答したｍＴＯＲＣ１のシグナル伝達を、ＡｌｐｈａＬＩＳＡによって測定した。簡潔に言うと、Ｔ−７５細胞培養フラスコ中、１０％ウシ胎児血清を補給したＤＭＥＭで１，０００，０００個のＨＥＫ２９３Ｔ細胞をプレート培養した。細胞が集密度に達した後、それらの細胞を、ロイシン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含まず、１０％の透析済みウシ胎児血清を含む、改変ＤＭＥＭに、１時間、置いた。次に、細胞にトリプシン処理を施し、ロイシンを含まず、１０％の透析済みウシ胎児血清を含むＤＭＥＭ中、５０，０００個の細胞／ウェルで、９６ウェルの黒色クリアボトムプレートに再度、プレート培養した。細胞を、２時間、プレートに接着させて、次いで、１時間より長いある期間、所与の濃度で化合物を添加（ｎ＝４）した。時間点に到達した後、細胞を溶解し、ｐ−ｐ７０ Ｓ６Ｋ（Ｔｈｒ３８９）ＳｕｒｅＦｉｒｅ Ｕｌｔｒａ ＡｌｐｈａＬＩＳＡキットにより、製造業者の指示書（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ.ｐｅｒｋｉｎｅｌｍｅｒ．ｃｏｍ／ＣＭＳＲｅｓｏｕｒｃｅｓ／Ｉｍａｇｅｓ／４４−１７６２８３ＭＡＮ＿ＳｕｒｅＦｉｒｅ＿ＴＧＲ７０Ｓ＿ｐ７０＿ｐＴ３８９.ｐｄｆ）に従ってアッセイした。化合物により処置されていないロイシン飢餓細胞に対して、ｍＴＯＲＣ１のシグナル伝達を著しく増加させる（スチューデントｔ検定、ｐ＜０．０５）化合物は、ｍＴＯＲＣ１アクチベータであると見なした。化合物により処置されていないロイシン飢餓細胞に対して、ｍＴＯＲＣ１のシグナル伝達を著しく低下させる（スチューデントｔ検定、ｐ＜０．０５）化合物は、細胞において阻害剤であると見なした。ポジティブ対照として、ロイシンは、化合物処置と等しい期間、ロイシン飢餓細胞に１００ｕＭで添加した。

【0604】

方法６、サーマルシフトプロトコル（Ｔｍシフト）：

【0605】

完全長の、コドン最適化ヒトセストリン２を、Ｈｉｓ−ＭＢＰタグと共にＮ末端で融合し、ｐＭＡＬ６Ｈ−Ｃ５ＸＴ細菌発現ベクターにクローニングした。このベクターは、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ＬＯＢＳＴＲ（ＤＥ３）細胞（Ｋｅｒａｆａｓｔ）に形質転換させた。細胞を３７℃で、０．６ＯＤまで成長させて、次に、１８℃で１２〜１４時間、０．２ｍＭ ＩＰＴＧによりタンパク質産生を誘発させた。６，０００ｇで遠心分離することにより細胞を採集し、溶解緩衝液（５０ｍＭリン酸カリウム、ｐＨ８．０、５００ｍＭ ＮａＣｌ、３０ｍＭイミダゾール、１ｍＭ ＤＴＴ、１０μｇ／ｍｌ ベンゾナーゼおよび１ｍＭ ＰＭＳＦ）に再懸濁し、音波照射により溶解した。この溶解物を１０，０００ｇで２０分間、遠心分離することにより清澄化した。可溶化画分からセストリン２タンパク質を単離し、Ｈｉｓタグの親和性捕捉、次いで、イオン交換およびサイズ排除クロマトグラフィーによりほぼ１００％の純度にした。サーマルシフトアッセイに関しては、セストリン２タンパク質を希釈緩衝液（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ ｐＨ７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＤＴＴ、０．１ｍＭ ＥＤＴＡ）中で、２ｍｇ／ｍｌまで希釈した。サーマルシフトアッセイを行う前に、２μｌのセストリン２タンパク質を、９６ウェルプレートのウェルあたり、８μｌのＲＯＸ色素（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）、１μＬのビヒクルまたは化合物、および１４μＬの希釈緩衝液と合わせ、化合物を結合させるため、１時間、氷の上でインキュベートした。次に、Ａｇｉｌｅｎｔ ＭＸ３００５ｐでサーマルシフトアッセイを行い、各化合物を、１０μＭ、１００μＭおよび１０００μＭの３連でアッセイした。ロイシンとのインキュベートにより、セストリン２の溶融温度が、用量依存様式で、２．１６から１１．６１摂氏度にシフトした。ビヒクルと共にインキュベートしたセストリン２の、サーマルシフトの繰り返し測定値のＣＶ％変動に基づいて、２度またはそれより多い正方向へのシフトを、統計的に有意であると見なす。

【0606】

方法７、間接的リガンド結合アッセイ（ＩＬＢＡ）

【0607】

セストリン２のロイシンまたは他のリガンドへの結合は、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＣＳＴ、カタログ番号８４８７）からのウサギモノクローナル抗セストリン２抗体を用いた、免疫検出により、インタクトな細胞においてｉｎ ｖｉｔｒｏで、または精製タンパク質においてのどちらかで検出した。ＣＳＴ抗体の生来の（非変性）セストリン２への結合は、この抗体の親和性がロイシンに結合すると低下するよう、ロイシンの結合によってモジュレートされた。同様に、生来のセストリン２に対するＣＳＴ抗体の親和性は、ロイシンと同様に、化合物が生来のセストリンに結合すると低下した。反対に、サーマルシフトアッセイによって測定すると、セストリン２を脱安定化する化合物は、非変性セストリン２に対するＣＳＴ抗体の親和性を増加させた。その結果、ロイシンまたは化合物が結合した後に、ＣＳＴ抗セストリン２抗体の親和性を測定する、間接リガンド結合アッセイ（ＩＬＢＡ）の多重フォーマットを開発した。一つの型では、このアッセイは、アミノ酸飢餓期間の１時間後に、ヒト細胞系から産生した粗製溶解物を用いて行った（細胞は、１％ Ｔｒｉｔｏｎ、１０ｍＭ リン酸ベータ−グリセロール、１０ｍＭ ピロリン酸ナトリウム、４０ｍＭ ＨＥＰＥＳ［ｐＨ７．４］、１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび２．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２に溶解する）。次に、溶解物を、ロイシンまたは他の化合物と、１時間、氷上でまたは室温でインキュベートした。L. Chantranupongら、Cell Reports ９巻：１〜８頁（２０１４年）に記載されている通り、化合物のインキュベート後に、試料に、１．５時間、ＣＳＴ抗セストリン２抗体を用いた免疫沈降を施し、次いで、プロテインＡ−セファロースと共に、３０分間のインキュベートした。セファロースコンジュゲート抗体−タンパク質複合体を遠心分離により沈殿させて、試料間の全セストリン２タンパク質レベルが等しいことを決定するため、ウサギポリクローナル抗セストリン２抗体（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈ、＃１０７９５−１−ＡＰ）を用いて、フロースルーに２回の免疫沈降を施した。免疫沈降試料に、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、次いで、ＳＩＧＭＡ（カタログ番号ＷＨ００８３６６７Ｍ３）からのマウスモノクローナル抗セストリン２抗体を用いるウエスタンブロットを行った。ＣＳＴに由来する抗セストリン２抗体により免疫沈降させた試料を用いる免疫ブロットの場合、ロイシン結合により、セストリン２に対応するバンドの強度が５０％またはそれより大きな、かなりの低下が誘発されたが、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈ抗体により免疫沈降した試料を用いた免疫ブロットの場合、セストリン２の変化はもたらされなかった。やはり測定されたこの型のアッセイにより、化合物とのインキュベートにより誘発されるセストリン２の不安定性が増加した。このアッセイは、同じ方法で行ったが、セストリン２を脱安定化する（サーマルシフトアッセイによって測定される）化合物は、ＣＳＴ抗体を使用して免疫沈降させたセストリン２に対応する免疫ブロットバンド強度の増加をもたらした。

【0608】

このアッセイはまた、ＦｌａｇタグにＮ末端で融合しているセストリン２を過剰発現している培養ヒト細胞でも行った。この型のアッセイでは、手順は、同じままであったが、免疫ブロット法は、マウス抗Ｆｌａｇ抗体（＃Ｆ３１６５、ＳＩＧＭＡ）を用いて行った。ロイシンに結合することができないセストリン２の点変異体形態を用いてＩＬＢＡを行った場合、ロイシンまたはγ−メチルロイシンに対するＣＳＴ抗体の親和性の低下は観察されなかった。

【0609】

アッセイの別の型では、培養したヒト細胞に、１時間、アミノ酸飢餓のいくつかの組合せを施し、次いで、ロイシンまたは化合物により刺激した。刺激の１時間後、細胞を溶解し、１時間のリガンド結合ステップを除いて、上記の通り処理した。

【0610】

間接リガンド結合アッセイもまた、ＡＬＰＨＡｌｉｓａ技法（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用して、多重ウェルフォーマットで行った。この型のアッセイは、ビオチン化抗セストリン２抗体、過剰発現したＦｌａｇ−セストリン２の検出用の抗Ｆｌａｇ受容体ビーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）またはマウス抗セストリン２抗体（ＳＩＧＭＡ）のどちらかに結合したストレプトアジピンドナービーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）、および内在性セストリン２の検出用の抗マウス受容体ビーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を必要とした。

【0611】

このアッセイは、上記の通りであるが、以下の改変で行った：アッセイのロイシンまたは化合物の結合部分に関しては、アミノ酸飢餓の１時間後に、ヒトＦｌａｇ−セストリン２を一過的にまたは安定的に過剰発現した細胞から産生した粗製溶解物を、溶解緩衝液中で０．８ｍｇ／ｍｌの全タンパク質となるように希釈し、９６ウェルプレートなどの多重ウェルプレートに配列した。内在性セストリン２の検出に関しては、粗製溶解物を、溶解緩衝液中で４ｍｇ／ｍｌの全タンパク質となるよう希釈した。ロイシンまたは化合物を各ウェルに加え、このプレートを穏やかに撹拌しながら、氷上または室温で１時間、インキュベートした。リガンド結合ステップの間に、ビオチン化抗セストリン２抗体（ＣＳＴ）を、ＡＬＰＨＡｌｉｓａ免疫アッセイ緩衝液（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）および５ｎＭのマウス抗セストリン２抗体（内在性セストリン２を検出するアッセイの場合、ＳＩＧＭＡ製のものを抗マウス受容体ビーズ（４０μｇ／ｍｌ）の４Ｘ保存溶液と合わせた）中、５ｎＭまで希釈した。Ｆｌａｇ−セストリン２の検出に関すると、免疫アッセイ緩衝液中で抗Ｆｌａｇ受容体ビーズの４Ｘ保存溶液（４０μｇ／ｍｌ）を調製した。リガンド結合ステップの後に、５μＬの溶解物を、ビオチン化抗セストリン２抗体１０μＬ、マウスセストリン２抗体／抗マウス受容体ビーズミックスまたは抗Ｆｌａｇ受容体ビーズ１２．５μＬ、およびＡＬＰＨＡｌｉｓａ免疫アッセイ緩衝液１０μＬと合わせ、室温で１時間、インキュベートした。最後に、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーでプレートを読み取る前に、ストレプトアビジンドナービーズ１２．５μＬ（免疫アッセイ緩衝液中１６０μｇ／ｍｌ）を、暗室でさらに１時間、加えた。

【0612】

ＡＬＰＨＡｌｉｓａアッセイも記載した通り行ったが、免疫アッセイ緩衝液中で希釈した３ｎｇ／ｍｌの最終反応濃度の精製セストリン２タンパク質を用いて行った。

【0613】

最後に、溶解前に、アミノ酸の飢餓条件下で、ロイシンまたは化合物により処置した細胞に由来する溶解物を用いて、ＡＬＰＨＡｌｉｓａを行った。細胞をベースとする処置は、多重ウェルプレートで行い、ＡＬＰＨＡｌｉｓａ反応あたり、１５μＬの溶解物（１ｍｇ／ｍｌの全タンパク質）を、ビオチン化抗体１０μＬ、抗体／受容体ビーズミックス１２．５μＬおよびストレプトアジピンドナービーズミックス１２．５μＬと組み合わせて使用した。

【0614】

当技術分野において行われるサンドイッチＥＬＩＳＡなどの、捕捉をベースとする方法を用いて、間接リガンド結合アッセイも行った。アッセイの一つの型では、ＩＬＢＡは、Ｍｅｓｏ−Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）によって開発された、ＭＵＬＴＩ−ＡＲＲＡＹ（登録商標）技法を使用して行った。ＭＳＤシステムは、分析物に結合している抗体の電気化学発光の検出に基づくものであった。ＩＬＢＡは、内在性セストリン２を発現する、またはＦｌａｇ−セストリン２を過剰発現する粗製溶解物を用いて行い、ロイシン処置は、溶解前に、ｉｎ ｖｉｔｒｏでまたは細胞でのどちらか一方で行った。内在性セストリン２によるｉｎ ｖｉｔｒｏでのＩＬＢＡに関しては、粗製溶解物（０．８ｍｇ／ｍｌの全タンパク質）を調製し、ロイシン結合は、ＡＬＰＨＡｌｉｓａ ＩＬＢＡに関して記載したものと同じ様式で行った。リガンド結合が完了した後、ＣＳＴに由来するビオチン化抗セストリン２抗体を、最終濃度０．２５μｇ／ｍｌになるまで各ウェルに加え、穏やかに撹拌しながら、４℃で１時間、インキュベートした。９６ウェルプレートのウェルへの各試料の捕捉は、以下の方法の一つ：ストレプトアビジンをコーティングしたＭＳＤプレート、またはＳＩＧＭＡからのマウス抗セストリン２抗体によりコーティングされている露出しているＭＳＤプレートで行った。捕捉は、試料をウェルあたり２５μＬ、次いで、３５０ｒｐｍで震とうしながら、１時間のインキュベートを必要とした。試料の捕捉後、０．１％ Ｔｗｅｅｎ（ＴＢＳ−Ｔ）を含むＴｒｉｓ緩衝化食塩水により、ウェルを３回、洗浄した。試料がストレプトアビジンコーティングプレートに捕捉されている場合、次に、３５０ｒｐｍで震とうしながら、１時間、マウスモノクローナル抗セストリン２抗体（ＳＩＧＭＡ）を加えて１μｇ／ｍｌの最終濃度とした。ウェルを再度、ＴＢＳ−Ｔ中で洗浄し、３５０ｒｐｍで震とうしながら、１μｇ／ｍｌの最終濃度の抗マウス二次ＳＵＬＦＯ−タグ抗体（ＭＳＤ）を１時間、加えた。最後に、ウェルをＴＢＳ−Ｔにより３回、洗浄して、２Ｘの読み取り緩衝液（ＭＳＤ）を加え、プレートをＭＳＤ機器で直ちに読み取った。試料がマウス抗セストリン２抗体によりコーティングされている露出プレートにより捕捉された場合、洗浄後、震とうしながら、１時間、１μｇ／ｍｌの最終濃度でストレプトアビジン二次ＳＵＬＦＯ−タグ抗体（ＭＳＤ）を加え、次いで洗浄し、分析前に読み取り緩衝液と共にインキュベートした。

【0615】

このアッセイの別の型では、Ｆｌａｇ−セストリン２を過剰発現する粗製溶解物を分析し、上記と同じＭＳＤをベースとするプロトコルを使用して、マウスモノクローナル抗Ｆｌａｇ抗体（ＳＩＧＭＡ）を用いて捕捉または検出した。

【0616】

すべてのアッセイについて、セストリン２の免疫反応性に対応するシグナルを有意な様式で低下させた化合物は、ロイシン模倣体と見なした一方、上記のシグナルを有意な様式で増加させた化合物は、潜在的なロイシンアンタゴニストと見なした。

【0617】

表３は、本発明の選択された化合物の活性を示している。化合物番号は、表１および２の化合物番号に相当する。「Ａ」と表示されている活性を有する化合物は、ロイシンに対して、≧４０％の％活性を実現しており、「Ｂ」と表示されている活性を有する化合物は、ロイシンに対して、≦−４０％の％活性を実現しており、「Ｃ」と表示されている活性を有する化合物は、ロイシンに対して、−４０〜４０％の間の％活性を実現した。表示濃度において、「Ｄ」と表示されている活性を有する化合物は、ＤＭＳＯ対照に対して、０．５〜２倍のシフトを実現し、「Ｅ」と表示されている活性を有する化合物は、ＤＭＳＯに対して、２．１〜５倍のシフトを実現し、「Ｆ」と表示されている活性を有する化合物は、ＤＭＳＯに対して、５．１〜１０倍のシフトを実現し、「Ｇ」と表示されている活性を有する化合物は、ＤＭＳＯに対して、１０．１〜１４倍のシフトを実現した。

【0618】

ロイシンアッセイに対する％活性に関する活性は、アッセイ方法１を使用して決定した。細胞をベースとするｍＴＯＲＣ１活性化アッセイに関する活性は、アッセイ方法２を使用して決定した。

【表3-1】

【表3-2】

【0619】

表４は、ＡＬＰＨＡＬｉｓａ細胞ベースアッセイ（方法５）において活性な、本発明の選択された化合物を示している。化合物番号は、表１および２の化合物番号に相当する。表４に一覧表示されている化合物は、ｍＴＯＲＣ１アクチベータであり、ポジティブロイシン対照に対して＞２倍の活性を有している。

【表4-1】

【表4-2】

【0620】

表５は、サーマルシフトアッセイ（方法６）において活性な、本発明の選択された化合物を示している。化合物番号は、表１および２の化合物番号に相当する。表５に一覧表示されている化合物は、２度またはそれより大きな正方向へのシフトを示した。

【表5-1】

【表5-2】