特許 6802232 ホスフィン遷移金属錯体、その製造方法及び抗がん剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6802232

(24)【登録日】2020年11月30日

(45)【発行日】2020年12月16日

(54)【発明の名称】ホスフィン遷移金属錯体、その製造方法及び抗がん剤

(51)【国際特許分類】

   C07F 9/50 20060101AFI20201207BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20201207BHJP

   A61K 33/24 20190101ALI20201207BHJP

   C07F 1/12 20060101ALN20201207BHJP

【ＦＩ】

   C07F9/50CSP

   A61P35/00

   A61K33/24

   !C07F1/12

【請求項の数】11

【全頁数】20

(21)【出願番号】特願2018-188266(P2018-188266)

(22)【出願日】2018年10月3日

(65)【公開番号】特開2020-55782(P2020-55782A)

(43)【公開日】2020年4月9日

【審査請求日】2020年10月16日

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】000230593

【氏名又は名称】日本化学工業株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110002170

【氏名又は名称】特許業務法人翔和国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】中對 一博

(72)【発明者】

【氏名】小野 千明

(72)【発明者】

【氏名】大原 宣彦

(72)【発明者】

【氏名】今本 恒雄

(72)【発明者】

【氏名】小西 宏明

(72)【発明者】

【氏名】油谷 輝

【審査官】 奥谷 暢子

(56)【参考文献】

【文献】 特開２００７−３２０９０９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許第５８４３９９３（ＵＳ，Ａ）

【文献】 BAKER,R.T. et al.，Coinage metal-catalyzed hydroboration of imines，Journal of Organometallic Chemistry，１９９５年，Vol.498, No.2，p.109-17

【文献】 SALEM,G. et al，Rearrangements of tetrahedral copper(I) and silver(I) complexes containing chelating bis(tertiary arsines and phosphines)，Inorganic Chemistry，１９８８年，Vol.27, No.17，p.3029-32

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｆ ９／５０

Ａ６１Ｋ ３３／２４

Ａ６１Ｐ ３５／００

Ｃ０７Ｆ １／１２

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記一般式（１）で表される、ホスフィン遷移金属錯体。

【化1】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素原子数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^５及びＲ^１０は、それぞれ独立に、一価の置換基を示す。ｎ及びｙはそれぞれ独立に、０〜４の整数を示す。Ｍは、金、銅及び銀の群から選ばれる遷移金属原子を示す。Ｘ⁻は、アニオンを示す。ただし、Ｒ^１及びＲ^２が互いに異なる基であり、Ｒ^３及びＲ^４が互いに異なる基であり、Ｒ^６及びＲ^７が互いに異なる基であり、Ｒ^８及びＲ^９が互いに異なる基である。）

【請求項2】

Ｒ^１とＲ^６とが同じ基であり、Ｒ^２とＲ^７とが同じ基であり、Ｒ^３とＲ^８とが同じ基であり、Ｒ^４とＲ^９とが同じ基であり、Ｒ^５とＲ^１０とが同じ基であり、ｎとｙとが同じ数である、請求項１に記載のホスフィン遷移金属錯体。

【請求項3】

Ｒ^１及びＲ^２と、Ｒ^３及びＲ^４とが同じ２種の基の組み合わせであり、Ｒ^６及びＲ^７と、Ｒ^８及びＲ^９とが同じ２種の基の組み合わせである、請求項１に記載のホスフィン遷移金属錯体。

【請求項4】

Ｒ^１及びＲ^２の一方がメチル基であり、他方が置換されていてもよい炭素原子数３以上１０以下の分岐状アルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基であり、
Ｒ^３及びＲ^４の一方がメチル基であり、他方が置換されていてもよい炭素原子数３以上１０以下の分岐状アルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基であり、
Ｒ^６及びＲ^７の一方がメチル基であり、他方が置換されていてもよい炭素原子数３以上１０以下の分岐状アルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基であり、
Ｒ^８及びＲ^９の一方がメチル基であり、他方が置換されていてもよい炭素原子数３以上１０以下の分岐状アルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基である、請求項１〜３の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体。

【請求項5】

一般式（１）の式中のＲ^１とＲ^２、Ｒ^３とＲ^４、Ｒ^６とＲ^７、及びＲ^８とＲ^９がいずれも、ｔ−ブチル基とメチル基の組み合わせである、請求項１〜４の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体。

【請求項6】

一般式（１）の式中の４つのリン原子上に不斉中心を有しており、
Ｒ^１とＲ^２が結合するリン原子上の絶対配置、Ｒ^３とＲ^４が結合するリン原子上の絶対配置、Ｒ^６とＲ^７が結合するリン原子上の絶対配置、及び、Ｒ^８とＲ^９が結合するリン原子上の絶対配置が全て同じである、請求項１〜５の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体。

【請求項7】

一般式（１）の式中のＭは金原子である、請求項１〜６の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体。

【請求項8】

下記一般式（２）

【化2】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、及びＲ^４は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素原子数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基、又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^５は一価の置換基を示す。ｎは０〜４の整数を示す。ただし、Ｒ^１及びＲ^２が互いに異なる基であり、Ｒ^３及びＲ^４が互いに異なる基である。）で表されるホスフィン誘導体と、下記一般式（３）

【化3】

（式中、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素原子数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^１０は一価の置換基を示す。ｙは０〜４の整数を示す。ただし、Ｒ^６及びＲ^７が互いに異なる基であり、Ｒ^８及びＲ^９が互いに異なる基である。）
で表されるホスフィン誘導体と、金、銅又は銀の遷移金属塩とを、反応させて、下記一般式（１）

【化4】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素原子数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^５及びＲ^１０は、それぞれ独立に、一価の置換基を示す。ｎ及びｙはそれぞれ独立に、０〜４の整数を示す。Ｍは、金、銅及び銀の群から選ばれる遷移金属原子を示す。Ｘ⁻は、アニオンを示す。ただし、Ｒ^１及びＲ^２が互いに異なる基であり、Ｒ^３及びＲ^４が互いに異なる基であり、Ｒ^６及びＲ^７が互いに異なる基であり、Ｒ^８及びＲ^９が互いに異なる基である。）
で表されるホスフィン遷移金属錯体を得る、請求項１〜７の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体の製造方法。

【請求項9】

請求項１〜７の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体を有効成分とする医薬。

【請求項10】

請求項１〜７の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体を含有する抗がん剤。

【請求項11】

抗がん剤の製造のための、請求項１〜７の何れか１項に記載のホスフィン遷移金属錯体の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、新規なホスフィン遷移金属錯体、その製造方法及び抗がん剤に関するものである。

【背景技術】

【0002】

従来より、がん細胞に対して高い抗がん活性を有する物質として、シスプラチンがよく知られており、現在、主要な抗がん剤となっている。

【0003】

また、１，２−ビス（ジフェニルホスフィノ）エタンを初めとして種々のホスフィン遷移金属錯体は、シスプラチンに匹敵する抗がん活性を有する化合物であることが知られている（例えば、特許文献１〜２等参照）。

【0004】

また、本出願人は先に、以下の式（ａ）で表されるホスフィン遷移金属錯体を含有する抗がん剤を提案した（特許文献３参照）。式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４はアルキル基等である。またＭは、金、銅又は銀であり、Ｘ⁻はアニオンである。この抗がん剤は、従来用いられてきた抗がん剤であるシスプラチン等の白金製剤やタキソール（登録商標）に比較して、高い抗がん活性を有するものである。

【化1】

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特表平１０−５０９９５７号公報

【特許文献2】特開昭６１−１０５９４号公報

【特許文献3】特開２００７−３２０９０９号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

前記特許文献３のホスフィン遷移金属錯体は水に対して溶解性が低い。このため、薬剤溶液を生体に投与した場合に、体内でホスフィン遷移金属錯体の析出や、また抗がん効果が損なわれる可能性があるため、生体への投与形態もかなり限られたものになるという問題がある。
上述の現況に鑑み、本発明の課題は、水系溶媒に対する溶解性に優れた新規なホスフィン遷移金属錯体、その工業的に有利な製造方法及び抗がん活性に優れた抗がん剤を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明は、下記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体を提供するものである。

【化2】

（式中、Ｒ^１_、Ｒ^２_、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６_、Ｒ^７、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^５及びＲ^１０は、それぞれ独立に、一価の置換基を示す。ｎ及びｙはそれぞれ独立に、０〜４の整数を示す。Ｍは、金、銅及び銀の群から選ばれる遷移金属原子を示す。Ｘ⁻は、アニオンを示す。）

【0008】

また、本発明は、下記一般式（２）

【化3】

（式中、Ｒ^１_、Ｒ^２_、Ｒ^３、及びＲ^４は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^５は一価の置換基を示す。ｎは０〜４の整数を示す。）で表されるホスフィン誘導体と、下記一般式（３）

【化4】

（式中、Ｒ^６_、Ｒ^７、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^１０は一価の置換基を示す。ｙは０〜４の整数を示す。）で表されるホスフィン誘導体と、金、銅又は銀の遷移金属塩とを、反応させて、下記一般式（１）

【化5】

（式中、Ｒ^１_、Ｒ^２_、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^６_、Ｒ^７、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立に、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。Ｒ^５及びＲ^１０は、それぞれ独立に、一価の置換基を示す。ｎ及びｙはそれぞれ独立に、０〜４の整数を示す。Ｍは、金、銅及び銀の群から選ばれる遷移金属原子を示す。Ｘ⁻は、アニオンを示す。）
で表されるホスフィン遷移金属錯体を得る、ホスフィン遷移金属錯体の製造方法を提供するものである。

【0009】

本発明は更に、前記ホスフィン遷移金属錯体を含有する抗がん剤を提供するものである。

【発明の効果】

【0010】

本発明のホスフィン遷移金属錯体は、水系溶媒に対する溶解性に優れ、従来知られている抗がん剤であるシスプラチンよりも抗がん活性が高い抗がん剤を提供することができる。本発明のホスフィン遷移金属錯体の製造方法は、本発明のホスフィン遷移金属錯体を工業的に有利に製造できる。

【発明を実施するための形態】

【0011】

以下、本発明を好ましい実施形態に基づき説明する。
本発明のホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体である。

【化6】

【0012】

前記一般式（１）中、Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９は、置換されていてもよい直鎖状若しくは分岐状の炭素数１〜１０のアルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基を示す。また、Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９は、それぞれが同一の基であっても異なる基であってもよい。

【0013】

Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９に係るアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、イソプロピル基、ｎ−プロピル基、イソブチル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、イソヘプチル基、ｎ−ヘプチル基、イソヘキシル基、ｎ−ヘキシル基等が挙げられる。また、Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９に係るシクロアルキル基としては、炭素数３〜１０のものが好ましく、特に炭素原子数５〜６のものがより好ましい。このようなシクロアルキル基としては、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。また、Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９の何れかが、置換基を有するシクロアルキル基、置換基を有するアダマンチル基の場合、該置換基としては、アルキル基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、ヨード基等が挙げられる。置換基としてのアルキル基は上記のＲ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９に係るアルキル基と同様のものが挙げられる。また置換基としてのアルコキシ基はＲ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９に係るアルキル基に酸素原子が結合したものが挙げられる。Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９の何れかが、置換基を有するアルキル基である場合、当該置換基としては、トリフルオロメチル基等が挙げられる。

【0014】

前記Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９は、互いに異なる基であっても同一の基であってもよい。例えばＲ^１〜Ｒ^４の組み合わせについては、
Ｒ^１〜Ｒ^４が全て同一の基である（ｉ）、
Ｒ^１及びＲ^２が同一の基で、Ｒ^３及びＲ^４が互いに異なる基である（ｉｉ）、
Ｒ^１及びＲ^２がそれぞれ異なる基で、Ｒ^３及びＲ^４も互いに異なる基である（ｉｉｉ）、
Ｒ^１及びＲ^２が同一の基で、Ｒ^３及びＲ^４も同一の基である（但し、Ｒ^１及びＲ^２と、Ｒ^３及びＲ^４は同一の基となることはない）（ｉｖ）等の組み合わせが挙げられる。
本発明において、特にＲ^１及びＲ^２が互いに異なる基で、Ｒ^３及びＲ^４も互いに異なる基である（ｉｉｉ）ことが、対称性が崩れることにより結晶性が下がり、水などの溶媒に対して溶解性に優れるという観点から好ましい。

【0015】

特に、Ｒ^１及びＲ^２が互いに異なる基で、Ｒ^３及びＲ^４も互いに異なる基である（ｉｉｉ）場合、Ｒ^１及びＲ^２の一方が、メチル基で他方が置換されていてもよい炭素数３以上１０以下の分岐状アルキル基、シクロアルキル基又はアダマンチル基であり、Ｒ^３及びＲ^４の一方がメチル基で、他方が置換されていてもよい炭素数３以上１０以下の分岐状アルキル基、シクロアルキル基又はアダマンチル基であることが好ましい。Ｒ^１及びＲ^２が互いに異なる基で、Ｒ^３及びＲ^４も互いに異なる基である（ｉｉｉ）場合、特にＲ^１及びＲ^２と、Ｒ^３及びＲ^４とが同じ２種の基の組み合わせである（ｉｉｉ＋）ことが、目的とする化合物を製造しやすい点、錯体化した時に異性体数が減り、組成の特定が容易になる点等から好ましい。

【0016】

同様に、Ｒ^６〜Ｒ^９についても、
Ｒ^６〜Ｒ^９が全て同一の基である（Ｉ）、
Ｒ^６及びＲ^７が同一の基で、Ｒ^８及びＲ^９が互いに異なる基である（ＩＩ）、
Ｒ^６及びＲ^７がそれぞれ異なる基で、Ｒ^８及びＲ^９も互いに異なる基である（ＩＩＩ）、
Ｒ^６及びＲ^７が同一の基で、Ｒ^８及びＲ^９も同一の基である（但し、Ｒ^６及びＲ^７と、Ｒ^８及びＲ^９は同一の基となることはない）（ＩＶ）等の組み合わせが挙げられる。
本発明において、特にＲ^６及びＲ^７が互いに異なる基で、Ｒ^８及びＲ^９も互いに異なる基である（ＩＩＩ）ことが、対称性が崩れることにより結晶性が下がり、水などの溶媒に対して溶解性に優れるという観点から好ましい。

【0017】

特に、Ｒ^６及びＲ^７が互いに異なる基で、Ｒ^８及びＲ^９も互いに異なる基である（ＩＩＩ）場合に、Ｒ^６及びＲ^７の一方がメチル基で、他方が置換されていてもよい炭素数３以上１０以下の分岐状アルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基であり、Ｒ^３及びＲ^４の一方がメチル基で、他方が置換されていてもよい炭素数３以上１０以下の分岐状アルキル基、置換されていてもよいシクロアルキル基又は置換されていてもよいアダマンチル基であることが好ましい。Ｒ^６及びＲ^７が互いに異なる基で、Ｒ^８及びＲ^９も互いに異なる基である（ｉｉｉ）場合、Ｒ^６及びＲ^７と、Ｒ^８とＲ^９とが同じ２種の基の組み合わせ（ＩＩＩ＋）であることが、目的とする化合物を製造しやすい点、錯体化した時に異性体数が減り、組成の特定が容易になる点等から好ましい。

【0018】

更に一般式（１）の化合物の中でも、Ｒ^１とＲ^６とが同じ基であり、Ｒ^２とＲ^７とが同じ基であり、Ｒ^３とＲ^８とが同じ基であり、Ｒ^４とＲ^９とが同じ基であり、Ｒ^５とＲ^１０とが同じ基であるものが、目的とする化合物を製造しやすい点から好ましい。

【0019】

本発明において一般式（１）におけるＲ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９の好ましい組み合わせは、下記のものが挙げられる。
（１）Ｒ^１とＲ^２、Ｒ^３とＲ^４、Ｒ^６とＲ^７、及びＲ^８とＲ^９がいずれも、イソプロピル基とメチル基の組み合わせである。
（２）Ｒ^１とＲ^２、Ｒ^３とＲ^４、Ｒ^６とＲ^７、及びＲ^８とＲ^９がいずれも、ｔ−ブチル基とメチル基の組み合わせである。
（３）Ｒ^１とＲ^２及びＲ^６とＲ^７がいずれもシクロヘキシル基とメチル基の組み合わせであり、Ｒ^３とＲ^４及びＲ^８とＲ^９がいずれもアダマンチル基とメチル基の組み合わせである。
（４）Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９の全てがイソプロピル基である。
（５）Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^６及びＲ^７がメチル基であり、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^８及びＲ^９がｔ−ブチル基の組み合わせである。

【0020】

本発明において、前記一般式（１）の式中、Ｒ^１〜Ｒ^４、Ｒ^６〜Ｒ^９の組み合わせは、特に前記（２）のＲ^１とＲ^２、Ｒ^３とＲ^４、Ｒ^６とＲ^７、及びＲ^８とＲ^９がいずれも、ｔ−ブチル基とメチル基の組み合わせであるものが対応するホスフィン部位の立体選択的合成法が確立されており、異性体の混じりがなく高純度の錯体が得られる点と、水系の溶解度が高く、しかも目的とする化合物を製造しやすいという観点から好ましい。

【0021】

前記一般式（１）の式中のＲ^５及びＲ^１０は、それぞれ独立に一価の置換基を示す。Ｒ^５及びＲ^１０で表される一価の置換基としては、例えば、直鎖状又は分岐状であり且つ炭素数が１〜６のアルキル基、シクロアルキル基、ニトロ基、アミノ基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、ヨード基、シリル基等が挙げられる。シクロアルキル基の炭素数は３以上８以下であることが好ましく、アルコキシ基の炭素数は１以上８以下であることが好ましい。Ｒ^５で表される一価の置換基は有機基が好ましく、特に炭素数１以上１０以下の有機基がより好ましい。Ｒ^５及びＲ^１０は同じ基であることがホスフィン遷移金属錯体の製造しやすさの点で好ましい。

【0022】

一般式（１）の式中のｎ及びｙはそれぞれ独立に、０〜４の整数を示し、０〜２の整数であることが好ましい。ｎ及びｙは同じ数であることが、ホスフィン遷移金属錯体の製造しやすさの点で好ましい。

【0023】

前記一般式（１）中のＭは、金、銅及び銀の群から選ばれる遷移金属原子を示し、抗がん剤として用いる観点から金原子であることが好ましい。

【0024】

前記一般式（１）中、Ｘ⁻は、アニオンを示し、例えば、塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン、四フッ化ホウ素イオン、六フッ化リン酸イオン、過塩素酸イオン等が挙げられる。これらのうち、Ｘ⁻が塩素イオン、臭素イオン又はヨウ素イオンであることが水系の溶解度が高くなる観点から好ましい。

【0025】

本発明において、特に好ましい前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体は、合成上の観点から、式中の４つのリン原子上に不斉中心を有する化合物である。このような化合物として、とりわけ、下記一般式（１’）で表されるリン原子上に不斉中心を有する化合物が好ましい。

【化7】

【0026】

前記一般式（１’）中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、ｎ及びＸ⁻は前記一般式（１）と同義である（但し、Ｒ^１とＲ^２がお互いに異なる基であり、Ｒ^３とＲ^４がお互いに異なる基である）。アスタリスク（＊）は、不斉リン原子を示す。

【0027】

前記一般式（１’）で表されるホスフィン遷移金属錯体を含め、不斉なリン原子を４個有する一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体には、数多くの異性体が存在するが、本発明においては、これらの異性体の種類については、特に制限されるものではない。具体的には、これらの異性体は、リン原子上の立体が、（Ｒ，Ｒ）（Ｒ，Ｒ）や、（Ｓ，Ｓ）（Ｓ，Ｓ）のように、単一のエナンチオマーから構成されていてもよく、また、（Ｒ，Ｓ）（Ｓ，Ｒ）のように、お互いにメソ体から構成されていてもよく、また、（Ｒ，Ｒ）（Ｓ，Ｒ）のように、一つのエナンチオマーとそのメソ体から構成されていてもよい。また（Ｒ，Ｒ）（Ｓ，Ｓ）のように、リン原子上の絶対配置が異なるエナンチオマーから構成されていてもよい。

【0028】

不斉なリン原子を４個有する一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体としては、とりわけ、Ｒ^１とＲ^２が結合するリン原子上の絶対配置とＲ^６とＲ^７が結合するリン原子上の絶対配置とが同じであり、且つＲ^３とＲ^４が結合するリン原子上の絶対配置と、Ｒ^８とＲ^９が結合するリン原子上の絶対配置とが同じものが、目的とする化合物を製造しやすい点で好ましい。
とりわけ上記の（Ｒ，Ｒ）（Ｒ，Ｒ）や、（Ｓ，Ｓ）（Ｓ，Ｓ）のように、式（１）中のＲ^１とＲ^２が結合するリン原子上の絶対配置とＲ^３とＲ^４が結合するリン原子上の絶対配置、Ｒ^６とＲ^７が結合するリン原子上の絶対配置、及び、Ｒ^８とＲ^９が結合するリン原子上の絶対配置が全て同じであるものが目的とする化合物の製造しやすさや錯体化したときに異性体が事実上存在せず、純度が向上する点で好ましい。

【0029】

前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、下記一般式（３）で表されるホスフィン誘導体と、金、銅又は銀の遷移金属塩と、を反応させることにより製造される。

【化8】

【化9】

【0030】

前記一般式（２）中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５及びｎは、前記一般式（１）中のＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５及びｎと同義である。すなわち、前記一般式（２）中のＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５及びｎは、前記一般式（１）中のＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５及びｎにそれぞれ相当する。
同様に、一般式（３）中、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０及びｙは、前記一般式（１）中のＲ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０及びｙと同義である。すなわち、前記一般式（３）中のＲ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０及びｙは、前記一般式（１）中のＲ^６、Ｒ^７、Ｒ^８、Ｒ^９、Ｒ^１０及びｙにそれぞれ相当する。

【0031】

式（２）で表されるホスフィン誘導体と、式（３）で表されるホスフィン誘導体とが同一の化合物である場合、上記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体は、下記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、金、銅又は銀の遷移金属塩と、を反応させることにより製造される。この場合、一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体として、Ｒ^１とＲ^６とが同じ基であり、Ｒ^２とＲ^７とが同じ基であり、Ｒ^３とＲ^８とが同じ基であり、Ｒ^４とＲ^９とが同じ基であり、Ｒ^５とＲ^１０とが同じ基であり、ｎ及びｙが同じ数であるホスフィン遷移金属錯体（以下「対称体」ともいう。）が得られる。
式（２）で表されるホスフィン誘導体と、式（３）で表されるホスフィン誘導体とが異なる化合物である場合、式（２）で表されるホスフィン誘導体及び式（３）で表わされるホスフィン誘導体を同時に金、銅又は銀の遷移金属塩と反応させてもよいが、式（２）で表されるホスフィン誘導体と金、銅又は銀の遷移金属塩とを反応させ、得られた反応物を式（３）で表わされるホスフィン誘導体と反応させることが反応効率の点で好ましい。

【0032】

前記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体及び前記一般式（３）で表されるホスフィン誘導体は、公知の化合物であり、公知の製造方法により製造することができる（例えば、特開２０００−３１９２８８号公報、特開２０１２−１７２８８号公報、ＯＲＧＡＮＩＣ ＬＥＴＴＥＲＳ，２００６，Ｖｏｌ．８，Ｎｏ．２６，６１０３−６１０６等参照）。

【0033】

また式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体として、４つのリン原子上に不斉中心を有する該ホスフィン遷移金属錯体の光学活性体を得るには、前記ホスフィン遷移金属錯体の製造方法において、Ｒ^１とＲ^２が互いに異なり、Ｒ^３とＲ^４が互いに異なる前記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体と、Ｒ^６とＲ^７が互いに異なり、Ｒ^８とＲ^９が互いに異なる前記一般式（３）で表されるホスフィン誘導体を用いればよい。

【0034】

前記ホスフィン遷移金属錯体の光学活性体として例えば前記一般式（１’）で表されるホスフィン遷移金属錯体を得るためには、前記一般式（２）で表されるホスフィン誘導体の光学活性体である下記一般式（２’）で表されるホスフィン誘導体の光学活性体を用いればよい。

【化10】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５及びｎは前記一般式（１’）と同義。アスタリスク（＊）は、不斉リン原子を示す。）

【0035】

前記ホスフィン誘導体の光学活性体（２’）を得るには、例えば、下記反応スキーム（１）に従って製造することができる。光学活性体（２’）以外の式（２）で表されるホスフィン誘導体及び式（３）で表されるホスフィン誘導体も、得ようとする化合物に応じて、適宜ホスフィン−ボラン化合物（３）、式（６）の化合物又は式（８）の化合物を異ならせる等して同様に製造できる。

【化11】

（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、ｎ及び＊は前記一般式（１’）と同義。Ｚ、Ｘ’及びＸ’’は、ハロゲン原子を示す。）
ホスフィン−ボラン化合物（３）を１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）等で脱ボラン化した後、ブチルリチウム等のリチオ化剤でリチオ化し、次いでその反応生成物（５）を、一般式（６）：Ｒ^３ＰＸ’_２（式中、Ｒ^３は前記と同義。Ｘ’は、ハロゲン原子を示す）で表されるジハロゲノホスフィンと反応させ反応生成物（７）を得る。次いで、その反応生成物（７）と、一般式（８）：Ｒ^４ＭｇＸ’’（式中、Ｒ^２は前記と同義。Ｘ’’は、ハロゲン原子を示す）で表されるグリニャール試薬と反応させる方法が挙げられる（特開２０１２−１７２８８号公報参照）。ホスフィン−ボラン化合物（３）は特開２０１２−１７２８８号公報記載の方法にて製造することができる。

【0036】

本発明のホスフィン遷移金属錯体の製造方法に係る遷移金属塩は、金イオン、銅イオン又は銀イオンと、アニオンとの塩であり、金、銅又は銀のハロゲン化物、硝酸塩、過塩素酸塩、四フッ化ホウ素酸塩、六フッ化リン酸塩等が挙げられる。また、金、銅又は銀の遷移金属塩は、遷移金属種又はアニオンのいずれか一方又は両方が異なる２種以上の遷移金属塩であってもよい。

【0037】

好ましい金の遷移金属塩としては、例えば、塩化金（Ｉ）酸、塩化金（Ｉ）、あるいはテトラブチルアンモニウムクロリド・塩化金（Ｉ）等（「第５版 実験化学講座２１」、編者 社団法人日本化学会、発行所 丸善、発行日 平成１６年３月３０日、ｐ３６６〜３８０、Ａｕｓｔ． Ｊ． Ｃｈｅｍｍ．， １９９７， ５０， ７７５−７７８頁参照）が挙げられる。また、好ましい銅の遷移金属塩としては、例えば、塩化銅（Ｉ）、臭化銅（Ｉ）、ヨウ化銅（Ｉ）等（「第５版 実験化学講座２１」、編者 社団法人日本化学会、発行所 丸善、発行日 平成１６年３月３０日、ｐ３４９〜３６１）が挙げられる。また、好ましい銀の遷移金属塩としては、例えば、塩化銀（Ｉ）、臭化銀（Ｉ）、ヨウ化銀（Ｉ）等（「第５版 実験化学講座２１」、編者 社団法人日本化学会、発行所 丸善、発行日 平成１６年３月３０日、ｐ３６１〜３６６）が挙げられる。なお、本発明のホスフィン遷移金属錯体の製造方法に係る遷移金属塩は、無水物であっても含水物であってもよい。

【0038】

式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体として、前記対称体を得る場合、金、銅又は銀の遷移金属塩の遷移金属に対する前記一般式（２）で表わされるホスフィン誘導体のモル比が、１〜５倍モル、好ましくは１．８〜２．２倍モル量で、前記一般式（２）で表わされるホスフィン誘導体と、金、銅又は銀の遷移金属塩とを、アセトン、アセトニトリル、メタノール、エタノール、ジクロロメタン等の溶媒中で、反応温度−２０〜６０℃、好ましくは０〜２５℃、反応時間 ０．５〜４８時間、好ましくは １〜３時間で反応させることにより、前記対称体が得られる。反応中は窒素等の不活性雰囲気下とすることが好ましい。そして、反応終了後、必要に応じて、常法の精製を行うことができる。対称体以外の式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体を得る場合には、金、銅又は銀の遷移金属塩の遷移金属と、式（２）で表わされるホスフィン誘導体とをモル比１：１近傍、例えば１：０．９〜１．１倍モル比で反応させた後、得られた反応物と式（３）で表わされるホスフィン誘導体とモル比１：１近傍、例えば１：０．９〜１．１倍モル比で反応させて製造できる。

【0039】

また、本発明のホスフィン遷移金属錯体の製造方法により得られた前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体のアニオンを、他のアニオンに変換して、所望のアニオンを有する前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体を製造することができる。

【0040】

例えば、先ず、本発明のホスフィン遷移金属錯体の製造方法により、前記一般式（１）中のＸ⁻が、ハロゲンイオンであるホスフィン遷移金属錯体を合成し、次いで、前記一般式（１）中のＸ⁻が、ハロゲンイオンであるホスフィン遷移金属錯体と、所望のアニオンを有する無機酸、有機酸又はそれらのアルカリ金属塩とを、適切な溶媒中で反応させることにより、前記一般式（１）中のＸ⁻が、所望のアニオンであるホスフィン遷移金属錯体を得ることができる（特開平１０−１４７５９０号公報、特開平１０−１１４７８２号公報、特開昭６１−１０５９４号公報参照）。

【0041】

前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体は、従来の上記式（ａ）で表されるホスフィン遷移金属錯体に比べ、水系溶媒に対する溶解性に優れている。本発明のホスフィン遷移金属錯体は、後述するように高い抗がん活性を有するので、抗がん剤として利用され得る。なお、上記水系溶媒としては、水、緩衝液、生理的塩類溶液のほか、これらに各種添加剤を添加したものが挙げられる。緩衝液や生理食塩類溶液の例としては、液状製剤に用いる緩衝液や生理食塩類溶液として後述するものが挙げられるが、これに限定されない。また添加剤としては固形製剤や液状製剤に用いる添加剤として後述するものが挙げられるが、これに限定されない。

【0042】

すなわち、本発明の抗がん剤は、前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体の１種又は２種以上を含有する。

【0043】

また、前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体のうち、リン原子上に不斉中心を有するホスフィン遷移金属錯体、すなわち、光学活性体である場合は、数多くの異性体が存在するが、本発明の抗がん剤は、それらの異性体のうちの１種又は２種以上のいずれでもよい。

【0044】

本発明の抗がん剤が適用される癌の種類は、特に限定されるものではなく、例えば、悪性黒色腫、悪性リンパ腫、消化器癌、肺癌、食道癌、胃癌、大腸癌、直腸癌、結腸癌、尿管腫瘍、胆嚢癌、胆管癌、胆道癌、乳癌、肝臓癌、膵臓癌、睾丸腫瘍、上顎癌、舌癌、口唇癌、口腔癌、咽頭癌、喉頭癌、卵巣癌、子宮癌、前立腺癌、甲状腺癌、脳腫瘍、カポジ肉腫、血管腫、白血病、真性多血症、神経芽腫、網膜芽腫、骨髄腫、膀胱腫、肉腫、骨肉腫、筋肉腫、皮膚癌、基底細胞癌、皮膚付属器癌、皮膚転移癌等が挙げられ、さらに悪性腫瘍ばかりでなく良性腫瘍にも適用され得る。また、本発明の抗がん剤は、癌転移を抑制するために使用されることができ、特に、術後の癌転移抑制剤としても有用である。

【0045】

本発明の抗がん剤の使用においては、種々の形態でヒト又は動物に、本発明の抗がん剤を投与することができ、本発明の抗がん剤の投与形態としては、経口投与でもよいし、静脈内、筋肉内、皮下又は皮内等への注射、直腸内投与、経粘膜投与等の非経口投与でもよい。経口投与に適する製剤形態としては、例えば、錠剤、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤などを挙げることができ、非経口投与に適する医薬組成物としては、例えば、注射剤、点滴剤、点鼻剤、噴霧剤、吸入剤、坐剤、あるいは、軟膏、クリーム、粉状塗布剤、液状塗布剤、貼付剤等の経皮吸収剤等が挙げられる。さらに、本発明の抗がん剤の製剤形態としては、埋め込み用ペレットや公知の技術により持続性製剤が挙げられる。ヒト以外の動物としては、哺乳類が好ましく挙げられる。

【0046】

上述したうち、好ましい投与形態や製剤形態等は、患者の年齢、性別、体質、症状、処置時期等に応じて、医師によって適宜選択される。

【0047】

本発明の抗がん剤が、錠剤、丸剤、散剤、粉剤、顆粒剤等の固形製剤の場合、これらの固形製剤は、前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体を、常法に従って適当な添加剤、例えば、乳糖、ショ糖、Ｄ−マンニトール、トウモロコシデンプン、合成もしくは天然ガム、結晶セルロース等の賦形剤、デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アラビアゴム、ゼラチン、ポリビニルピロリドン等の結合剤、カルボシキメチルセルーロースカルシウム、カルボシキメチルセルーロースナトリウム、デンプン、コーンスターチ、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム等の滑沢剤、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム等の充填剤又は希釈剤等と適宜混合して製造される。錠剤等は、必要に応じて、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、白糖、ポリエチレングリコール、酸化チタン等のコーティング剤を用いて、糖衣、ゼラチン、腸溶被覆、フイルムコーティング等が施されても良い。

【0048】

本発明の抗がん剤が、注射剤、点眼剤、点鼻剤、吸入剤、噴霧剤、ローション剤、シロップ剤、液剤、懸濁剤、乳剤等の液状製剤である場合、これらの液状製剤は、前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体を、精製水、リン酸緩衝液等の適当な緩衝液、生理的食塩水、リンゲル溶液、ロック溶液等の生理的塩類溶液、カカオバター、ゴマ油、オリーブ油等の植物油、鉱油、高級アルコール、高級脂肪酸、エタノール等の有機溶媒等に溶解して、必要に応じて各種添加剤、例えばコレステロール等の乳化剤、アラビアゴム等の懸濁剤、分散助剤、浸潤剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油系、ポリエチレングリコール系等の界面活性剤、リン酸ナトリウム等の溶解補助剤、糖、糖アルコール、アルブミン等の安定化剤、パラベン等の保存剤、塩化ナトリウム、ブドウ糖、グリセリン等の等張化剤、緩衝剤、無痛化剤、吸着防止剤、保湿剤、酸化防止剤、着色剤、甘味料、フレーバー、芳香物質等を適宜添加することにより、滅菌された水溶液、非水溶液、懸濁液、リポソーム又はエマルジョン等として調整される。この際、注射剤は、生理学的なｐＨを有することが好ましく、室温（２５℃）にて６〜８の範囲内のｐＨを有することが特に好ましい。

【0049】

本発明の抗がん剤が、ローション剤、クリーム剤、軟膏等の半固形製剤の場合、これらの半固形製剤は、前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体を脂肪、脂肪油、ラノリン、ワセリン、パラフィン、蝋、硬膏剤、樹脂、プラスチック、グリコール類、高級アルコール、グリセリン、水、乳化剤、懸濁化剤等と適宜混和することにより製造される。

【0050】

本発明の抗がん剤中の前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体の含有量は、投与形態、重篤度や目的とする投与量などによって様々であるが、一般的には、本発明の抗がん剤の全質量に対して０．００１〜８０質量％、好ましくは０．１〜５０質量％である。

【0051】

本発明の抗がん剤の投与量は、例えば患者の年齢、性別、体重、症状、及び投与経路などの条件に応じて適宜医師により決定されるものであるが、一般的には、成人一日あたりの有効成分の量として１μｇ／ｋｇから１，０００ｍｇ／ｋｇ程度の範囲であり、好ましくは１０μｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇ程度の範囲である。上記投与量の抗がん剤は、一日一回で投与されてもよいし、数回（例えば、２〜４回程度）に分けて投与されてもよい。

【0052】

本発明の抗がん剤の使用においては、既知の化学療法、外科的治療法、放射線療法、温熱療法や免疫療法などと組み合わせて、本発明の抗がん剤を用いることもできる。

【0053】

前記一般式（１）で表されるホスフィン遷移金属錯体は、特許文献３で提案されているホスフィン遷移金属錯体に比べ、水溶性が高いので、抗がん剤にした場合、投与形態や製剤形態を選ぶことなく、少量で、患部に効果的に作用するため、用量を少なくすることができるという利点を有する。

【実施例】

【0054】

以下、本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

【0055】

〔製造例１〕
＜（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼンの合成＞
（Ｒ）−２−（ボラナト（ｔ−ブチル）メチルホスフィノ）ブロモベンゼンの合成
下記反応式に従い以下の手順で（Ｒ）−２−（ボラナト（ｔ−ブチル）メチルホスフィノ）ブロモベンゼンを合成した。

【0056】

【化12】

【0057】

２００ｍＬの４つ口フラスコに濃塩酸９．５ｍＬ、純水６５ｍＬ、２−ブロモアニリン６．０ｇ（３５ｍｍｏｌ）を仕込み、加熱して溶解させた。０℃に冷却した後、予め純水７．５ｍＬに溶解させた亜硝酸ナトリウム２．４６ｇ（３５．１ｍｍｏｌ）の溶液を約１０分かけて滴下した。初め、かゆ状であった反応液は３０分撹拌を行うことで淡黄色透明液となった。次いで、４２質量％ＨＢＦ_４水溶液１２．５ｇ（５９．８ｍｍｏｌ）を約５分かけて滴下したところ、直ちに淡黄色結晶が析出した。３０分撹拌した後、グラスフィルターにてろ過、純水３０ｍＬで洗浄し、さらにメタノール８ｍＬとエーテル３２ｍＬの混合溶液にて洗浄した。その後、減圧乾燥を行い２−ブロモベンゼンジアゾニウムテトラフルオロホウ酸塩４．５ｇ（収率４８％）を得た。

【0058】

よく乾燥した３０ｍＬシュレンク管に（Ｓ）−ｔ−ブチルメチルホスフィン−ボラン２３６ｍｇ（２．００ｍｍｏｌ）を仕込み、Ａｒ置換した後に脱水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）６ｍＬを加え撹拌して溶解させた。−７８℃に冷却した後、ｎＢｕＬｉのヘキサン溶液（１．６ｍｏｌ／Ｌ）１．５ｍＬ（２．４ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。２０分撹拌した後、前記の２−ブロモベンゼンジアゾニウムテトラフルオロホウ酸塩６５０ｍｇ（２．４０ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。暗赤紫色透明液を２時間かけて室温へ昇温し、さらに室温で２時間撹拌を行った。食塩水と酢酸エチルを加えて有機層を分液し、食塩水で洗浄した。ＭｇＳＯ_４で乾燥後、溶媒を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製を行い、（Ｒ）−２−（ボラナト（ｔ−ブチル）メチルホスフィノ）ブロモベンゼンを６０ｍｇ（収率１１％）得た。得られた化合物の分析結果を以下に示す。

【0059】

（分析結果）
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 0.20-1.05 (m, 3H), 1.19 (d, J=14.3 Hz, 9H), 1.91 (d, 9.7 Hz, 3H), 7.32 (t, 8.7 Hz, 1H), 7.40 (t, 7.5 Hz, 1H), 7.64 (d, 9.0 Hz, 1H), 8.06 (dd, 12.6,12.9 Hz, 1H);
³¹P NMR (202 MHz, CDCl₃) δ:38.3.
APCI-MS:m/z 275, 273 (M⁺+H).

【0060】

（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン（ＢｅｎｚＰ＊）の合成
下記反応式に従い、以下の手順で（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼンを合成した。

【0061】

【化13】

よく乾燥した５０ｍＬの２口フラスコに、前記の手順で得られた（Ｒ）−２−（ボラナト（ｔ−ブチル）メチルホスフィノ）ブロモベンゼン１．３６５ｇ（５．００ｍｍｏｌ）と１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）５８９ｍｇ（５．２５ｍｍｏｌ）を仕込み、Ａｒ置換した後に脱水テトラヒドロフラン１０ｍＬを加え撹拌して溶解させた。この溶液を穏やかな還流の元で約７０℃にて２時間反応させた。その後−７８℃へ冷却し、ｓ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（１．０３ｍｏｌ／Ｌ）５．１０ｍＬをシリンジでゆっくり加えた。３０分後、ｔ−ブチルジクロロホスフィン８７５ｍｇ（５．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液３ｍｌを一度に加えた。次いで１時間かけて室温へ昇温し、さらに１時間撹拌を行った。その後０℃へ冷却し、メチルマグネシウムブロミドのＴＨＦ溶液（０．９６ｍｏｌ／Ｌ）１２．５ｍｌをシリンジで加えた後、室温へ昇温し、さらに１時間撹拌を行った。次いで大部分の溶媒を濃縮し、脱気したヘキサン２５ｍｌと１５質量％ＮＨ_４Ｃｌ水溶液１０ｍｌを加えた。ヘキサン層を分離した後、飽和食塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。その後溶媒を濃縮し、残渣の油状物に脱気したメタノールを加えた。生じた結晶をろ過し、少量の冷やしたメタノールで洗浄した後、減圧乾燥し、無色の結晶として、（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン５３９ｍｇ（収率３８％）を得た。得られた化合物の分析結果を以下に示す。

【0062】

（分析結果）
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 0.96 (t, J = 6.0 Hz, 18H), 1.23 (t, J = 3.2 Hz, 6H), 7.26-7.35 (m, 2H), 7.48-7.50 (m, 2H)
¹³C NMR (125 MHz, CDCl₃) δ: 5.69 (t, J = 6.0 Hz), 27.24 (t, 8.4 Hz), 30.37 (t, 7.2 Hz), 127.75 (S), 131.47 (S), 144.86 (t, 6.0 Hz)
³¹P NMR (202 MHz, CDCl₃) δ: -25.20 (s).
APCI-MS:m/z 283 (M⁺+H).
HRMS(TOF): Calcd.for C₁₆H₂₈NaP₂: 305.1564, Found: 305.1472
Mp. 125~126℃
[α]_D²⁴:+222.9 (c, 0.535, EtOAc)

【0063】

｛実施例１｝
＜ビス［（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド（１’−１）の合成＞
撹拌子を入れた２５ｍＬの二口フラスコに（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン（３１１ｍｇ，１．１ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウム金（Ｉ）ジクロリド（２５５ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）を加え、減圧と窒素導入を数回繰り返して、系内を窒素置換した。ジクロロメタン（５ｍＬ）を加え２時間撹拌した後、エバポレーターで溶媒を留去し、残渣を少量の水で洗浄した。さらに、酢酸エチルで洗浄し、減圧乾燥することにより下記式（１’−１）で表されるビス［（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリドを淡黄色粉末として得た（３８３ｍｇ，粗収率９６％）。
この生成物を約８０℃の水（７．５ｍＬ）に溶解し、ゆっくり室温まで冷却したところ、細かい針状結晶が析出した。さらに冷蔵庫中で一晩冷却後、析出した結晶をろ取、冷水で洗浄、デシケーター中で真空乾燥することにより式（１’−１）の化合物２３４ｍｇを得た（収率５９％）。

【化14】

（式（１’−１）の化合物の分析結果）
¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ: 1.128 (m, 36H), 1.842 (s, 12H), 7.62-7.63 (m, 4H), 7.94-7.95 (m, 2H)
¹³C NMR (125 MHz, CDCl₃) δ: 13.6 , 27.4, 32.5, 127.75 (S), 130.6, 131.7, 141.7-141.9(m)
³¹P NMR (202 MHz, CDCl₃) δ: 20.6 (s).
DART-MS:m/z 761 (C₃₂H₅₆Au⁺P₄), 515 (C₁₆H₂₈AuClP₂H⁺), 479 (C₁₆H₂₈Au⁺P₂)

【0064】

｛実施例２｝
＜ビス［（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド（１’−２）の合成＞
（Ｒ）−２−（ボラナト（ｔ−ブチル）メチルホスフィノ）ブロモベンゼンの合成において、（Ｓ）−ｔ−ブチルメチルホスフィン−ボランに代えて（Ｒ）−ｔ−ブチルメチルホスフィン−ボランを用いた以外は、製造例１と同様な操作で（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼンを得た。
次いで撹拌子を入れた２５ｍＬの二口フラスコに（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン（１９１ｍｇ，０．６７５ｍｍｏｌ）とテトラブチルアンモニウム金（Ｉ）ジクロリド（１６４ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）を加え、減圧と窒素導入を数回繰り返して、系内を窒素置換した。以後、実施例１と同様の操作を行い、式（１’−２）の化合物１４３ｍｇを淡黄色結晶として得た（１４３ｍｇ，５６％）。

【化15】

（式（１’−２）の化合物の分析結果）
^１Ｈ ＮＭＲ 、^１３Ｃ ＮＭＲ 、^３１Ｐ ＮＭＲ、ＤＡＲＴ−ＭＳ分析は実施例１の立体のものと同等の結果が得られた。

【0065】

｛比較例１｝
（１）＜（Ｒ，Ｒ）−２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルメチルホスフィノ）キノキサリンの合成＞
本出願人の先の出願に係る特開２００７−５６００７号公報における実施例１の記載に従い、（Ｒ，Ｒ）−２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルメチルホスフィノ）キノキサリンを得た。

【0066】

（２）＜ビス（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルメチルホスフィノ）キノキサリン）金（Ｉ）クロリドの合成＞
窒素ガスで置換した５００ｍｌ二口フラスコに、前記の方法で得られた（Ｒ，Ｒ）−２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルメチルホスフィノ）キノキサリン５．５０ｇ（１６．４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ２２０ｍｌに溶かした。ここにテトラブチルアンモニウム金ジクロリド４．１９ｇ（８．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で５時間撹拌した。生成した褐色沈殿をろ別し、次いでジクロロメタン４２ｍｌに溶かして水５０ｍｌで洗浄し、更に硫酸ナトリウムで乾燥した。これをろ過したのち溶液を乾固させた。この固体をジクロロメタン５０ｍｌに溶解し、ジエチルエーテル２７０ｍｌを加え、０℃にしたところ固体が析出し、ビス（２，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブチルメチルホスフィノ）キノキサリン）金（Ｉ）クロリドを得た。この化合物は、式（ａ−１）で表される化合物から構成されていた。

【化16】

（式（ａ−１）の化合物の分析結果）
・^３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）；１３．６
・［α］^Ｄ＝＋１９５．３（ｃ＝０．５、メタノール、２５℃）

【0067】

＜溶解性試験＞
実施例１〜２及び比較例１で得られたホスフィン遷移金属錯体試料について界面活性剤水溶液に対する溶解性を評価した。溶解度の決定には下記のＨＰＬＣ分析を用いた。
［分析装置］
ＨＰＬＣの分析装置には、Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ＨＰＬＣシステム（ＬＣ−２０ＡＤ、島津製作所）を用いた。検出器には、ＵＶ検出器ＳＰＤ−２０Ａ（島津製作所、検出波長２４９ｎｍ）を、カラムには島津製 ＸＲ−ＯＤＳ（３ｍｍ ｉ．ｄ．×１００ｍｍ、粒子径２．２μｍ）を用いた。移動相は、メタノール：水：ＴＦＡ＝９０：１０：０．０５（ｖ／ｖ）、カラム温度４０℃、流速０．５ｍＬ／分とした。
［試料調製］
実施例１〜２によって得られたサンプルについては４０．０１ｍｇ、５０．０４ｍｇ、１００．０２ｍｇ、比較例１によって得られたサンプルについて、１０．０１ｍｇ、２０．０２ｍｇ及び３０．０８ｍｇをそれぞれ正確に秤量した。秤量したサンプルそれぞれについて、界面活性剤１５０μＬ中に投入し十分に撹拌した後、５％グルコース水溶液（重量） ８５０μＬを投入し室温（２５℃）でさらに撹拌した。界面活性剤として、Ｔｗｅｅｎ８０とプロピレングリコールの質量比２：１の混合物を用いた。
この液を０．２μｍメンブレンフィルターに通じ、ろ液をメタノール：水（９：１）を用いて５０体積倍希釈し、ＨＰＬＣ用分析用調製液とした。
［分析］
調製した試料をバイアル瓶に移し、オートサンプラーにセットし、それぞれ１μＬ注入することで分析を実施した。
［結果］
秤量したサンプル重量と、得られたクロマトグラム中の当該ピークの面積との関係から、ホスフィン遷移金属錯体の溶解度を評価し、その結果を表１に示した。

【表1】

【0068】

＜抗がん活性の評価＞
上記のようにして得られたビス［（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド（実施例１）及びビス［（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド（実施例２）の腫瘍細胞に対する活性評価を下記のように実施した。また、比較対象としてシスプラチンについても同様な試験を実施した。

【0069】

癌細胞としてＡ５４９（ヒト肺癌細胞）、ＮＣＩ−Ｈ４６０（ヒト肺癌細胞）、ＭＫＮ４５（ヒト胃癌細胞）、ＮＣＩ−Ｎ８７（ヒト胃癌細胞）、Ａ２７８０（ヒト卵巣癌細胞）、Ａ２７８０ｃｉｓ（ヒト卵巣癌細胞、シスプラチン耐性細胞）を使用し、１０体積％ウシ胎児血清及び１００Ｕｎｉｔｓ／ｍＬペニシリン及び１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを補足したＲｏｓｗｅｌｌ Ｐａｒｋ Ｍｅｍｏｒｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ培地（ＲＰＭＩ１６４０）中で、５体積％二酸化炭素雰囲気下、湿潤インキュベーション中、３７℃で培養した。

【0070】

細胞はリン酸塩緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、細胞数を算定後、同じ培地を用いて５×１０^４細胞／ｍｌ懸濁液を調製した。滅菌９６ウエルのマイクロプレートに前記の懸濁液を２５００細胞／ウエルの密度となるように加えた。

【0071】

次に、ジメチルスルホキシドに完全に溶解させたビス［（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド（実施例１）、ビス［（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド（実施例２）又はシスプラチン溶液を加え、引き続き４８時間インキュベータ内で培養した。

【0072】

その後、生存細胞数をＷＳＴ−８アッセイにより評価した。即ち、水溶性テトラゾリウム塩ＷＳＴ−８溶液を加え、１時間インキュベータ内で培養した。細胞内のミトコンドリアの酵素活性により生成した水溶性ホルマザンの４５０ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａ Ｍａｘ ＰＬＵＳ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて測定した。これを生存細胞数として評価し、５０％細胞発育抑制濃度（ＩＣ_５０）を算出した。なお、ＩＣ_５０値の算出に当たっては、同様に実施した３回の実験値の平均値を採用した。この結果を表２に示す。

【0073】

【表2】

【0074】

表２の結果から明らかなように、ビス［（Ｒ，Ｒ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリド及びビス［（Ｓ，Ｓ）−１，２−ビス（ｔ−ブチルメチルホスフィノ）ベンゼン］金（Ｉ）クロリドはシスプラチンよりも高い抗がん活性を有することが分かった。