特許 6833811 荷電イオンチャネル遮断薬及び使用方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6833811

(24)【登録日】2021年2月5日

(45)【発行日】2021年2月24日

(54)【発明の名称】荷電イオンチャネル遮断薬及び使用方法

(51)【国際特許分類】

   C07D 207/16 20060101AFI20210215BHJP

   C07D 295/15 20060101ALI20210215BHJP

   C07D 211/60 20060101ALI20210215BHJP

   A61K 31/40 20060101ALI20210215BHJP

   A61K 31/452 20060101ALI20210215BHJP

   A61K 31/401 20060101ALI20210215BHJP

   A61K 31/167 20060101ALI20210215BHJP

   A61K 31/166 20060101ALI20210215BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20210215BHJP

   A61P 25/02 20060101ALI20210215BHJP

   A61P 17/04 20060101ALI20210215BHJP

【ＦＩ】

   C07D207/16CSP

   C07D295/15

   C07D211/60

   A61K31/40

   A61K31/452

   A61K31/401

   A61K31/167

   A61K31/166

   A61P43/00 111

   A61P25/02 101

   A61P17/04

【請求項の数】5

【全頁数】72

(21)【出願番号】特願2018-506119(P2018-506119)

(86)(22)【出願日】2016年8月3日

(65)【公表番号】特表2018-530518(P2018-530518A)

(43)【公表日】2018年10月18日

(86)【国際出願番号】US2016045354

(87)【国際公開番号】WO2017024037

(87)【国際公開日】20170209

【審査請求日】2019年7月24日

(31)【優先権主張番号】62/200,205

(32)【優先日】2015年8月3日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】507044516

【氏名又は名称】プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ

(73)【特許権者】

【識別番号】596115687

【氏名又は名称】ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション

(74)【代理人】

【識別番号】110002572

【氏名又は名称】特許業務法人平木国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ビーン，ブルース，ピー．

(72)【発明者】

【氏名】ウールフ，クリフォード，ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】リー，ジンボ

(72)【発明者】

【氏名】ジョ，スヨン

(72)【発明者】

【氏名】ロバーソン，デイビッド

(72)【発明者】

【氏名】タルボット，セバスチアン

【審査官】 松澤 優子

(56)【参考文献】

【文献】 特開昭５２−０７８８４０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１０／０７８３００（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特公昭２７−００４３２５（ＪＰ，Ｂ１）

【文献】 特表２００３−５１６９６６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００３−５１６９８２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００２−５１７４３８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１１−５１３４８４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第９８／０２４４２８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 英国特許出願公開第００８６６６０４（ＧＢ，Ａ）

【文献】 Nature. New Biology(London)，１９７１年，Vol.230，No.17，pp.274-275

【文献】 European Journal of Pharmaceutical Sciences ，２００５年，Vol.24, No.1，pp.85-93

【文献】 European Journal of Medicinal Chemistry，２０１３年，Vol.63，pp.144-150

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式(I)

【化1】

[式中、
R^1F及びR^1Gは一緒に、非置換のピペリジン環又はピロリジン環を形成し、
R^1A及びR^1Bは、メチルであり、
R^1Cは、水素であり、
X¹は、-NHC(O)-であり、
R^1Dは、エチルであり、
R^1Eは、H、メチル又はエチルから選択され、及び
R^1Hは、メチル又はエチルである]
を有する第4級アミン化合物。

【請求項2】

【化2】

である、請求項1に記載の化合物。

【請求項3】

【化3】

である、請求項1に記載の化合物。

【請求項4】

請求項１〜３のいずれか一項に記載の第4級アミン化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む、組成物。

【請求項5】

経口、静脈内、筋内、直腸、皮膚、皮下、局所、経皮、舌下、経鼻、吸入、膣内、鞘内、硬膜外、又は眼内投与用に製剤化される、請求項４に記載の組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、痛み及び痒みを感じるニューロン(侵害受容器及び掻痒受容器(pruriceptor))を選択的に阻害する組成物及び方法並びに痛みを感じないニューロン又は他のタイプの細胞への影響を最小限に抑えながら、低分子量の薬物分子で侵害受容器を標的化することによる神経性炎症の治療を特徴とする。本発明の方法によれば、親水性薬物低分子は、痛み及び痒みを感じるニューロンに存在するが、他のタイプのニューロン又は他のタイプの組織内には僅かしか存在しない又は全く存在しない大型孔受容体(large pore receptor)/イオンチャネルを通る入口を介して、痛みを感じるニューロンの細胞内区画にアクセスする。

【背景技術】

【0002】

リドカイン及びアルチカイン等の局部麻酔薬は、ニューロン中の電位依存性ナトリウムチャネルを阻害することによって作用する。これらの麻酔薬は、ナトリウムチャネルを遮断し、それにより痛みを感じるニューロン(侵害受容器)のみではなく、全てのニューロン(心臓血管系中の興奮細胞)の興奮性を遮断する。したがって、表面麻酔薬又は局所麻酔薬の目標は、侵害受容器中のシグナル伝達を遮断して傷みを防止することであるが、局部麻酔薬の投与は、低限界圧力及び触覚の受容体の遮断による全身性無感覚、運動性軸索の遮断による運動障害及び自律神経線維の遮断による他の合併症等の不要な又は有害な効果も生む。局部麻酔薬は、細胞膜中へ又は細胞膜を通して拡散することによってナトリウムチャネルの遮断部位にアクセスする、比較的疎水性の分子である。膜に浸透しない、これらの化合物の電荷誘導体(QX-314、リドカインの第4級窒素誘導体等)は、神経細胞膜の外面に適用されたとき、ニューロンのナトリウムチャネルへの影響がないが、何らかの形で、例えば単離ニューロンからの全細胞の電気生理学的記録に使用されたマイクロピペットから拡散することによって細胞内に導入された場合、ナトリウムチャネルを遮断することができる。痛み及び痒みを感じるニューロンは、痛みを伴う熱によって又は唐辛子の成分である、カプサイシンによって活性化される、TRPV1受容体/チャネルを発現する他種のニューロン(ほとんどの場合)とは異なる。様々なタイプの痛みを感じる及び痒みを感じる(掻痒受容器)ニューロン中で選択的に発現される他種の受容体には、TRPA1及びP2X(2/3)受容体が挙げられるが、これらに限定されない。

【0003】

神経因性、炎症性、及び侵害受容性の疼痛は、それらの病因、病態生理学、診断、及び治療において異なる。侵害受容性疼痛は、強力な又は有害な刺激による侵害受容性である高閾値末梢感覚ニューロンの特定サブセットの活性化に応答して生じる。これは、一般に、急性かつ自己限定的であり、潜在的又は進行中の組織傷害の警戒徴候として作用することによって生物学的保護機能として働く。典型的には、極めて限局されている。侵害受容性疼痛の例としては、外傷又は術後疼痛、陣痛、捻挫、骨折、火傷、こぶ、打撲、充血、歯科処置、皮膚生検、及び閉塞が挙げられるが、これらに限定されない。

【0004】

炎症性疼痛は、術後、外傷後疼痛、関節痛(リウマチ又は変形性関節症)、軸性腰痛において見られるような関節、筋、及び腱への損傷に関連する疼痛を含めた組織傷害又は炎症の存在下で生じる痛みであり、侵害受容性の激痛は、関連組織外傷がある場合、炎症性疼痛に移行し得る。

【0005】

神経因性疼痛は、一般的なタイプの慢性良性疼痛であり、末梢又は中枢神経系における傷害又は機能不全の結果であり、生物学的保護機能として働くものではない。米国人口中160万人超が罹患していると推定される。神経因性疼痛は、多数の異なる病因があり、例えば、外傷、手術、椎間板ヘルニア、脊髄損傷、糖尿病、帯状疱疹(herpes zoster)の感染(帯状疱疹(shingles))、HIV/AIDS、末期癌、切断術(乳房切除術を含む)、手根管症候群、慢性アルコール使用、放射線照射への曝露、並びに特定の抗HIV剤及び化学療法薬等の神経毒性治療薬の非意図的副作用として生じ得る。

【0006】

神経因性疼痛は、性質上、よく「灼熱痛」、「電撃痛」、「打診痛」、又は「刺痛」として説明される。多くの場合、慢性動的アロディニア(軽い触覚等、普通は疼痛反応を誘発しない移動刺激からもたらされる痛みとして定義される)及び痛覚過敏(通常の疼痛刺激に対する感受性増加として定義される)を特徴とし、任意の損傷組織の見掛けの治癒より数カ月又は数年長く持続し得る。

【0007】

痛みは、癌患者に生じ得、複数の原因、炎症、圧迫、浸潤、骨又は他の組織への転移拡散に起因し得る。

【0008】

有害刺激、組織損傷又は神経系の病変(機能不全による痛みと呼ばれる)の不在下で痛みが生じる条件がいくつかあり、これらに限定されないが、線維筋痛、緊張型頭痛、及び過敏性腸障害が挙げられる。

【0009】

偏頭痛は、脳の髄膜を神経支配する知覚線維の活性化に関連する頭痛である。

【0010】

痒み(掻痒)は、局在化及び全身化し得る皮膚病変であり、皮膚損傷(発疹、アトピー性湿疹、膨疹)に関連し得る。痒みは、これらに限定されないが、ストレス、不安、太陽の紫外線、代謝及び内分泌障害 (例えば、肝又は腎疾患、甲状腺機能亢進症)、癌(例えば、リンパ腫)、薬物又は食物への反応、寄生虫及び真菌感染症、アレルギー反応、血液疾患(例えば、真性赤血球増加症)、並びに皮膚病変を含めた多くの状態を伴う。痒みは、TRPV1チャネルの発現を含むがこれらに限定されない侵害受容器ニューロンの多くの特徴を共有する、掻痒受容器である小径の一次知覚性ニューロンサブセットによって媒介される。特定の掻痒メディエーター、例えばエイコサノイド、ヒスタミン、ブラジキニン、ATP、及び様々なニューロトロフィンは、エンドバニロイド機能を有する。局所カプサイシンは、ヒスタミン誘発性の痒みを抑制する。したがって侵害受容器のような掻痒受容器は、このイオンチャネル遮断薬の送達方法に適した標的である。

【0011】

神経性炎症は、感覚ニューロンの遠心(運動)機能によって媒介される炎症様式であり、痛みを感じるニューロン(侵害受容器)によって末梢中に放出される炎症性メディエーター分子が両方とも、免疫細胞中の多種多様な炎症経路を活性化し、脈管系にも作用して血流及び毛細血管透過性を変化する。

【0012】

神経性炎症は、様々な組織における組織傷害、自己免疫疾患、感染症、アレルギー、刺激物への曝露によって誘発される末梢性炎症の一因となり、数々の障害(例えば、偏頭痛、関節炎、鼻炎、胃炎、大腸炎、膀胱炎、及び日焼け)の原因において重要な役割を果たすと考えられている。神経性炎症を低減する一方法として、侵害受容器中の興奮性を遮断し、それによって侵害受容末梢端の活性化及び炎症性化学物質の放出を防止するものがある。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0013】

痛み、痒み、及び神経性炎症に対する様々な療法の発達にもかかわらず、さらなる薬剤が必要とされている。

【課題を解決するための手段】

【0014】

第1の態様において、本発明は、式(I)

【0015】

【化1】

[式中、
R^1F及びR^1Gは一緒に、少なくとも1個の窒素原子を有する複素環を完成し、
R^1A、R^1B、及びR^1Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、OR^1I、NR^1JR^1K、NR^1LC(O)R^1M、S(O)R^1N、SO₂R^1OR^1P、SO₂R^1QR^1R、SO₃R^1S、CO₂R^1T、C(O)R^1U、及びC(O)NR^1VR^1Wから選択され、R^1I、R^1J、R^1K、R^1L、R^1M、R^1N、R^1O、R^1P、R^1Q、R^1R、R^1S、R^1T、R^1U、R^1V、及びR^1Wのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
X¹は、-CR^1XR^1Y-、-NR^1ZC(O)-、-OC(O)-、-SC(O)-、-C(O)NR^1AA-、-CO₂-、及び-OC(S)-から選択され、R^1X、R^1Y、R^1Z、及びR^1AAのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
R^1D及びR^1Eのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択され、又はR^1D及びR^1Eは一緒に、3〜6員の複素環又はヘテロアルキル環を形成し、
R^1Hは、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される]を有する第4級アミン化合物を特徴とする。

【0016】

一部の実施形態では、X¹は-NHC(O)-である。一部の実施形態では、R^1A及びR^1Bのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びNR^1JR^1Kから選択され、R^1J及びR^1Kのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択されるか、又は少なくとも1つのR^1Cが存在する。他のある特定の実施形態では、R^1Dは、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリールであるか、R^1Eは、H及び場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリールであるか、又はR^1Hは、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリールである。

【0017】

一部の実施形態では、化合物は、表1の化合物である。一部の実施形態では、化合物は、以下である。

【0018】

【化2】

【0019】

第2の態様において、本発明は、式(II)

【0020】

【化3】

[式中、
mは0又は1であり、
R^2A、R^2B、及びR^2Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、CF₃、OR^2H、NR^2IR^2J、NR^2KC(O)R^2L、S(O)R^2M、SO₂R^2NR^2O、SO₂NR^2PR^2Q、SO₃R^2R、CO₂R^2S、C(O)R^2T、及びC(O)NR^2UR^2Vから選択され、R^2H、R^2I、R^2J、R^2K、R^2L、R^2M、R^2N、R^2O、R^2P、R^2Q、R^2R、R^2S、R^2T、R^2U、及びR^2Vのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
nは、0、1、2、3、4、5、6、7、8、又は9であり、各R^2Fは、独立に、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、CF₃、OR^2H、NR^2IR^2J、NR^2KC(O)R^2L、S(O)R^2M、SO₂R^2NR^2O、SO₂NR^2PR^2Q、SO₃R^2R、CO₂R^2S、C(O)R^2T、及びC(O)NR^2UR^2Vから選択され、R^2H、R^2I、R^2J、R^2K、R^2L、R^2M、R^2N、R^2O、R^2P、R^2Q、R^2R、R^2S、R^2T、R^2U、及びR^2Vのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
R^2D及びR^2Eのそれぞれは、独立に、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される]を有する第4級アミン化合物を特徴とする。

【0021】

一部の実施形態では、R^2D及びR^2Eのそれぞれは、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリールである。別の実施形態では、R^2A、R^2B、及びR^2Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、及びCF₃から選択されるか、又は少なくとも1つのR^2Cが存在するか、又は少なくとも1つのR^2Fが存在する。ある特定の実施形態では、化合物は、表2の化合物である。一部の実施形態では、化合物は、以下である。

【0022】

【化4】

【0023】

第3の態様において、本発明は、一般式

【0024】

【化5】

[式中、
nは、0、1、2、又は3であり、
R^3A、R^3B、及びR^3Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、OR^3I、NR^3JR^3K、NR^3LC(O)R^3M、S(O)R^3N、SO₂R^3OR^3P、SO₂NR^3QR^3R、SO₃R^3S、CO₂R^3T、C(O)R^3U、及びC(O)NR^3VR^3Wから選択され、R^3I、R^3J、R^3K、R^3L、R^3M、R^3N、R^3O、R^3P、R^3Q、R^3R、R^3S、R^3T、R^3U、R^3V、及びR^3Wのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
X³は、-NHC(O)-及び-C(O)NHから選択され、
R^3D及びR^3Eのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択され得、又はR^1D及びR^1Eは一緒に、3〜6員の複素環又はヘテロアルキル環を形成することができ、
R^3F、R^3G、及びR^3Hのそれぞれは、独立に、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される]を有する第4級アミン化合物を特徴とする。

【0025】

特定の実施形態では、X³は-NHC(O)-である。他の実施形態では、nは0又は1である。一部の実施形態では、R^3A、R^3B、及びR^3Cのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、及びNR^3JR^3Kから選択され、R^3J及びR^3Kのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択される。さらに別の実施形態では、R^3E、R^3F、及びR^3Gのそれぞれは、独立に、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される。特定の実施形態では、化合物は、表3の化合物番号21〜24のいずれか1つである。さらに別の実施形態では、化合物は、以下である。

【0026】

【化6】

【0027】

第4の態様において、本発明は、表1〜3の化合物又は式I〜IIIの化合物のいずれか1つの第4級アミン化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む組成物も特徴とする。組成物は、経口、静脈内、筋肉内、直腸、皮膚、皮下、局所、経皮、舌下、経鼻、吸入、膣内、鞘内、硬膜外、又は眼内投与用に製剤化することができる。

【0028】

第5の態様において、本発明は、患者における痛み、痒み、又は神経性炎症性障害を治療するための方法であって、表1〜3の化合物又は式I〜IIIの化合物のうちのいずれか1つの第4級アミン化合物を含む組成物を患者に投与することを含み、チャネルの内側面に適用されたとき、化合物は、侵害受容器及び/又は掻痒受容器中に存在する1つ以上の電位依存性イオンチャネルを阻害するが、チャネルの外側面に適用されたときは、チャネルを実質的に阻害せず、受容体が活性化されると、化合物がチャネル形成受容体を通って侵害受容器又は掻痒受容器に入ることができ、侵害受容器中に存在する1つ以上の電位依存性イオンチャネルを阻害する、方法を特徴とする。

【0029】

ある特定の実施形態では、チャネル形成受容器は、一時的受容器電位イオンチャネル(TRPチャネル形成受容体)である。他の実施形態では、TRPチャネル形成受容体は、外因性又は内因性アゴニストによって活性化される。さらに他の実施形態では、TRPチャネル形成受容器は、TRPA1又はTRPV1である。特定の実施形態では、受容器が活性化されると、化合物は、TRPA1又はTRPV1受容器を通って侵害受容器又は掻痒受容器に入ることができる。さらに他の実施形態では、化合物は、電位依存性ナトリウムチャネルを阻害する。さらに別の実施形態では、痛みは、神経因性疼痛、炎症性疼痛、侵害受容性疼痛、感染症による痛み、及び処置痛からなる群から選択され、又は神経性炎症性障害は、アレルギー性炎症、ぜんそく、慢性咳、結膜炎、鼻炎、乾癬、炎症性腸疾患、及び間質性膀胱炎、アトピー性皮膚炎からなる群から選択される。特定の実施形態では、本発明の組成物は、以下からなる群から選択される第4級アミン化合物を含む。

【0030】

【化7】

【0031】

定義
「生物学的に活性な」とは、核酸、ペプチド、ポリペプチド、及びタンパク質等の生体分子を含めた分子が、それ自体に又は他の分子に物理的又は化学的作用を発揮することを意味する。例えば、「生物学的に活性な」分子は、例えば、酵素活性、タンパク質結合活性(例えば、抗体相互作用)、又は細胞毒性(例えば、抗癌特性)を有し得る。本明細書に記載の方法及びキットの中で使用することができる生物活性物質には、これらに限定されないが、抗体又は抗体フラグメント、抗生物質、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、タンパク質、抗癌剤、増殖因子、及びワクチンが挙げられる。

【0032】

「炎症」とは、免疫系によって生じるもの(免疫介在性炎症)及び神経系によって生じるもの(神経性炎症)等の任意のタイプの炎症、並びに潮紅、熱、腫脹、痛み、及び/又は機能喪失を含めた任意の炎症症状を意味する。

【0033】

「神経性炎症」とは、ニューロン(例えば侵害受容器)又は中枢もしくは末梢神経系の他の任意の構成要素によって媒介された又は寄与された任意のタイプの炎症を意味する。

【0034】

用語「痛み」は、本明細書において広義で使用され、急性及び慢性の痛み、例えば侵害受容疼痛、例えば体性痛及び内臓痛、炎症性疼痛、機能不全による痛み、特発性疼痛、神経因性疼痛、例えば中枢に生じた痛み及び末梢に生じた痛み、偏頭痛、並びに癌性疼痛を含めた、全てのタイプの痛みを指す。

【0035】

用語「侵害受容性疼痛」は、これらに限定されないが、切り傷、打撲傷、骨折、圧挫、火傷等によって体内組織を損傷する恐れがあるか又は実際に損傷する有害刺激によって生じる全ての疼痛を挙げるために使用される。組織傷害の痛覚受容体(侵害受容器)は、大部分が、皮膚、筋骨格系、又は内蔵器官中に位置する。

【0036】

用語「体性痛」は、骨、関節、筋肉、皮膚、又は結合組織から発生する痛みを指すために使用される。このタイプの痛みは典型的には、極めて限局している。

【0037】

用語「内臓痛」は、本明細書において、呼吸器、胃腸管及び膵臓、尿路、並びに生殖器等の内臓から発生する痛みを指すために使用される。内臓痛は、臓器被膜(organ capsule)の腫瘍浸潤によって生じる痛みを含む。典型的に中空臓器の閉塞によって生じる、別のタイプの内臓痛は、間欠性痙攣及び局在のはっきりしない痛みを特徴とする。内臓痛は、膀胱炎又は逆流性食道炎等の炎症に関連し得る。

【0038】

炎症性疼痛という用語は、外傷、手術、感染症及び自己免疫疾患によって生じ得る活動性炎症に関連した痛みを含む。

【0039】

用語「神経因性疼痛」は、本明細書において、末梢又は中枢神経系による感覚の入力の異常処理を起源とし、結果としてこれらの系に病変を生む痛みを指すために使用される。

【0040】

用語「処置痛」は、医療、歯科又は外科的処置から発生する痛みを指し、処置は通常、計画されているか又は急性外傷に関連する。

【0041】

用語「痒み」は、本明細書において広義で使用され、全てのタイプの痒み並びに局所及び全身の、急性間欠性及び持続性の刺すような感覚を指す。痒みは、特発性、アレルギー性、代謝性、感染性、薬物性であってよく、肝、腎疾患、又は癌に起因するものでよい。「掻痒」は、重篤な痒みである。

【0042】

「患者」とは、任意の動物を意味する。一実施形態では、患者はヒトである。本発明の方法、組成物、及びキットを使用して治療することができる他の動物には、これらに限定されないが、非ヒト霊長類(例えば、サル、ゴリラ、チンパンジー)、家畜(例えば、ウマ、ブタ、ヤギ、ウサギ、ヒツジ、畜牛、ラマ)、及びコンパニオンアニマル(例えば、テンジクネズミ、ラット、マウス、トカゲ、ヘビ、イヌ、ネコ、サカナ、ハムスター、及びトリ)が挙げられる。

【0043】

本発明において有用な化合物は、これらに限定されないが、本明細書に記載の化合物のジアステレオマー及び鏡像異性体等の異性体、それらの塩、エステル、アミド、チオエステル、溶媒和物、及び多形体、並びにラセミ混合物及び純粋な異性体を含めた、それらの薬学的に許容される形態のいずれかの本明細書に記載のものが挙げられる。

【0044】

「低分子量」とは、約500ダルトン未満を意味する。

【0045】

用語「薬学的に許容される塩」は、過度の毒性、刺激、アレルギー応答等がなく、適切な医学的良識の範囲内で、ヒト及び下等動物の組織との接触における使用に適し、妥当な損益比に対応する、塩を表す。薬学的に許容される塩は、当技術分野において周知である。塩は、本発明の化合物の最終的な単離及び精製の間、インサイチュで調製することができるか、又は遊離塩基官能基を好適な有機酸と反応させることによって分離することができる。代表的な酸付加塩には、これらに限定されないが、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプトン酸塩、ヘキサン酸塩、臭化水素酸付加塩、塩酸塩、ヨウ化水素酸塩、2-ヒドロキシ-エタンスルホン酸塩、イセチオン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシレート、メタンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモエート、ペクチン酸塩、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩等が挙げられる。代表的なアルカリ又はアルカリ土類金属塩には、これらに限定されないが、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム等、並びに非毒性アンモニウム、第4級アンモニウム、アミンカチオン(アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミン等を含むが、これらに限定されない)が挙げられる。

【0046】

本発明の化合物の一般的記述において、置換基中の特定の種類の原子の数は一般に、例えば、1〜4個の炭素原子を含有するアルキル基又はC_1〜4アルキルが、範囲で挙げられる。このような範囲への言及は、それぞれの原子の数が特定の範囲内の整数で含まれる基への特定の言及を含むことが意図される。例えば、炭素原子が1〜4個のアルキル基は、C₁、C₂、C₃、及びC₄のそれぞれを含む。例えば、C_1〜12ヘテロアルキルは、1個以上のヘテロ原子に加えて1〜12個の炭素原子を含む。他の原子数及び他の種類の原子も同様のやり方で指示され得る。

【0047】

本明細書で使用する場合、用語「アルキル」及び接頭語「alk-」は、直鎖及び分枝鎖基の両方並びに環状基、すなわちシクロアルキルを含める。環状基は、単環式でも多環式でもよく、好ましくは、両端を含めた3〜6個の環炭素原子を有する。例示的な環状基には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシル基が挙げられる。

【0048】

「C_1〜4アルキル」とは、1〜4個の炭素原子を有する分枝又は非分枝炭化水素基を意味する。C_1〜4アルキル基は、置換でも非置換でもよい。例示的な置換基には、アルコキシ、アリールオキシ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン化合物、ヒドロキシル、フルオロアルキル、ペルフルオロアルキル、アミノ、アミノアルキル、二置換アミノ、第4級アミノ、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、及びカルボキシル基が挙げられる。C_1〜4アルキルには、限定されないが、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、及びシクロブチルが挙げられる。

【0049】

「C_2〜4アルケニル」とは、1つ以上の二重結合を含有し、2〜4個の炭素原子を有する分枝又は非分枝炭化水素基を意味する。C_2〜4アルケニルは、場合により、単環又は多環を含んでよく、各環は、3〜6員を有することが望ましい。C_2〜4アルケニル基は、置換でも非置換でもよい。例示的な置換基には、アルコキシ、アリールオキシ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン化合物、ヒドロキシル、フルオロアルキル、ペルフルオロアルキル、アミノ、アミノアルキル、二置換アミノ、第4級アミノ、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、及びカルボキシル基が挙げられる。C_2〜4アルケニルには、限定されないが、ビニル、アリル、2-シクロプロピル-1-エテニル、1-プロペニル、1-ブテニル、2-ブテニル、3-ブテニル、2-メチル-1-プロペニル、及び2-メチル-2-プロペニルが挙げられる。

【0050】

「C_2〜4アルキニル」とは、1つ以上の三重結合を含み、2〜4個の炭素原子を有する分枝又は非分枝炭化水素基を意味する。C_2〜4アルキニルは、場合により、単環、二環、又は三環を含んでよく、各環は、5又は6員を有することが望ましい。C_2〜4アルキニル基は、置換でも非置換でもよい。例示的な置換基には、アルコキシ、アリールオキシ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン化合物、ヒドロキシ、フルオロアルキル、ペルフルオロアルキル、アミノ、アミノアルキル、二置換アミノ、第4級アミノ、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、及びカルボキシル基が挙げられる。C_2〜4アルキニルには、限定されないが、エチニル、1-プロピニル、2-プロピニル、1-ブチニル、2-ブチニル、及び3-ブチニルが挙げられる。

【0051】

「C_2〜6ヘテロシクリル」とは、飽和、部分的に不飽和、又は不飽和(芳香族)で、2〜6個の炭素原子並びにN、O、及びSから独立に選択される1、2、3又は4個のヘテロ原子からなり、上で定義したの複素環のいずれかがベンゼン環と融合している任意の二環式基を含む、安定性の5〜7員単環式又は7〜14員二環式複素環を意味する。ヘテロシクリル基は、置換でも非置換でもよい。例示的な置換基には、アルコキシ、アリールオキシ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン化合物、ヒドロキシ、フルオロアルキル、ペルフルオロアルキル、アミノ、アミノアルキル、二置換アミノ、第4級アミノ、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、及びカルボキシル基が挙げられる。窒素及び硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されてもよい。複素環は、任意のヘテロ原子又は炭素原子を介して共有結合することができ、結果として安定性の構造をもたらし、例えば、イミダゾリニル環は、環炭素原子位置又は窒素原子のいずれかで連結し得る。複素環中の窒素原子は、場合により四級化されてよい。好ましくは、複素環中のS及びO原子の総数が1を超えると、これらのヘテロ原子は互いに隣接しなくなる。複素環には、限定されないが、1H-インダゾール、2-ピロリドニル、2H,6H-1,5,2-ジチアジニル、2H-ピロリル、3H-インドリル、4-ピペリドニル、4aH-カルバゾール、4H-キノリジニル、6H-1,2,5-チアジアジニル、アクリジニル、アゾシニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズトリアゾリル、ベンズテトラゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンズイミダザロニル、カルバゾリル、4aH-カルバゾリル、b-カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、2H,6H-1,5,2-ジチアジニル、ジヒドロフロ[2,3-b]テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、1H-インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、1,2,3-オキサジアゾリル、1,2,4-オキサジアゾリル、1,2,5-オキサジアゾリル、1,3,4-オキサジアゾリル、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニルペリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナルサジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、プテリジニル、ピペリドニル、4-ピペリドニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、4H-キノリジニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、カルボリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、6H-1,2,5-チアジアジニル、1,2,3-チアジアゾリル、1,2,4-チアジアゾリル、1,2,5-チアジアゾリル、1,3,4-チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニル、トリアジニル、1,2,3-トリアゾリル、1,2,4-トリアゾリル、1,2,5-トリアゾリル、1,3,4-トリアゾリル、キサンテニルが挙げられる。好ましい5〜10員複素環には、これらに限定されないが、ピリジニル、ピリミジニル、トリアジニル、フラニル、チエニル、チアゾリル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、インドリル、ベンゾイミダゾリル、1H-インダゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、オキシンドリル、ベンゾオキサゾリニル、キノリニル、及びイソキノリニルが挙げられる。好ましい5〜6員複素環には、限定されないが、ピリジニル、ピリミジニル、トリアジニル、フラニル、チエニル、チアゾリル、ピロリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、及びテトラゾリルが挙げられる。

【0052】

「C_6〜12アリール」とは、共役π電子を有する炭素原子で構成される環系(例えば、フェニル)を有する芳香族基を意味する。アリール基は、6〜12個の炭素原子を有する。アリール基は、場合により、単環、二環、又は三環を含んでよく、各環が5又は6員を有することが望ましい。アリール基は、置換でも非置換でもよい。例示的な置換基には、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン化合物、フルオロアルキル、カルボキシル、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、アミノ、アミノアルキル、一置換アミノ、二置換アミノ、及び第4級アミノ基が挙げられる。

【0053】

「C_7〜14アルカリル」とは、7〜14個の炭素原子を有するアリール基(例えば、ベンジル、フェネチル、又は3,4-ジクロロフェネチル)で置換されているアルキルを意味する。

【0054】

「C_3〜10アルクヘテロシクリル」とは、1個以上のヘテロ原子に加えて3〜10個の炭素原子を有するアルキル置換複素環式基(例えば、3-フラニルメチル、2-フラニルメチル、3-テトラヒドロフラニルメチル、又は2-テトラヒドロフラニルメチル)を意味する。

【0055】

「C_1〜7ヘテロアルキル」とは、N、O、S、及びPからなる群から独立に選択される1、2、3又は4個のヘテロ原子に加えて1〜7個の炭素原子を有する分枝又は非分枝アルキル、アルケニル、又はアルキニル基を意味する。ヘテロアルキルには、限定されないが、第3級アミン、第2級アミン、エーテル、チオエーテル、アミド、チオアミド、カルバメート、チオカルバメート、ヒドラゾン、イミン、リン酸ジエステル、アミド亜リン酸エステル、スルホンアミド、及びジスルフィドが挙げられる。ヘテロアルキルは、場合により、単環、二環、又は三環を含んでよく、各環は3〜6員を有することが望ましい。ヘテロアルキル基は、置換でも非置換でもよい。例示的な置換基には、アルコキシ、アリールオキシ、スルフィドリル、アルキルチオ、アリールチオ、ハロゲン化合物、ヒドロキシル、フルオロアルキル、ペルフルオロアルキル、アミノ、アミノアルキル、二置換アミノ、第4級アミノ、ヒドロキシアルキル、カルボキシアルキル、及びカルボキシル基が挙げられる。C_1〜7ヘテロアルキルの例としては、限定されないが、メトキシメチル及びエトキシエチルが挙げられる。

【0056】

「ハロゲン化合物」とは、臭素、塩素、ヨウ素、又はフッ素を意味する。

【0057】

「フルオロアルキル」とは、フッ素原子で置換されているアルキル基を意味する。

【0058】

「ペルフルオロアルキル」とは、炭素及びフッ素原子のみからなるアルキル基を意味する。

【0059】

「カルボキシアルキル」とは、式-(R)-COOH(式中、Rは、C_1〜7アルキル、C_2〜7アルケニル、C_2〜7アルキニル、C_2〜6ヘテロシクリル、C_6〜12アリール、C_7〜14アルカリル、C_3〜10alkヘテロシクリル、又はC_1〜7ヘテロアルキルから選択される)を有する化学部分を意味する。

【0060】

「ヒドロキシアルキル」とは、式-(R)-OH(式中、Rは、C_1〜7アルキル、C_2〜7アルケニル、C_2〜7アルキニル、C_2〜6ヘテロシクリル、C_6〜12アリール、C_7〜14アルカリル、C_3〜10alkヘテロシクリル、又はC_1〜7ヘテロアルキルから選択される)を有する化学部分を意味する。

【0061】

「アルコキシ」とは、式-OR(式中、Rは、C_1〜7アルキル、C_2〜7アルケニル、C_2〜7アルキニル、C_2〜6ヘテロシクリル、C_6〜12アリール、C_7〜14アルカリル、C_3〜10alkヘテロシクリル、又はC_1〜7ヘテロアルキルから選択される)の化学置換基を意味する。

【0062】

「アリールオキシ」とは、式-OR(式中、Rは、C_6〜12アリール基である)の化学置換基を意味する。

【0063】

「アルキルチオ」とは、式-SR(式中、Rは、C_1〜7アルキル、C_2〜7アルケニル、C_2〜7アルキニル、C_2〜6ヘテロシクリル、C_6〜12アリール、C_7〜14アルカリル、C_3〜10alkヘテロシクリル、又はC_1〜7ヘテロアルキルから選択される)の化学置換基を意味する。

【0064】

「アリールチオ」とは、式-SR(式中、Rは、C_6〜12アリール基である)の化学置換基を意味する。

【0065】

「第4級アミノ」とは、式-(R)-N(R')(R'')(R''')⁺(式中、R、R'、R''、及びR'''は、それぞれ独立に、アルキル、アルケニル、アルキニル、又はアリール基である)の化学置換基を意味する。Rは、置換基として第4級アミノ窒素原子を別の部分と連結させるアルキル基でよい。窒素原子Nは、アルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリール、及び/又はアリール基の4個の炭素原子に共有結合し、結果として窒素原子に正電荷を持たせる。

【0066】

「荷電部分」とは、生理的pHでプロトンを得ることによって正電荷になる部分(例えば、アンモニウム、グアニジニウム、又はアミジニウム)又はプロトン化なしで有効形式正電荷(net formal positive charge)を含む部分(例えば、第4級アンモニウム)を意味する。荷電部分は、永久的に荷電されていても、一時的に荷電されていてもよい。

【0067】

本明細書で使用する場合、用語「親」は、親化合物中に存在するアミン窒素原子の四級化又はグアニル化によって修飾可能なチャネル遮断化合物を指す。四級化又はグアニル化化合物は、親化合物の誘導体である。本明細書に記載のグアニジル誘導体は、非荷電塩基形態で存在する。これらの化合物は、塩として(すなわち、酸付加塩)又は非電荷塩基形態で投与することができ、インサイチュでプロトン化を経て荷電部分を形成する。

【0068】

「治療に有効な量」とは、所望の結果、例えば、完全に又は部分的に神経性炎症によって生じる状態、疾患、病気(例えば、ぜんそく、関節炎、大腸炎、接触性皮膚炎、糖尿病、湿疹、膀胱炎、胃炎、偏頭痛、乾癬、鼻炎、しゅさ、又は日焼け)に罹患する患者(例えば、ヒト)における痛み、痒み、又は神経性炎症の軽減又は除去、をもたらすために充分な量を意味する。

【0069】

本発明の他の特徴及び利点は、以下の詳細な説明及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0070】

【図1A】ナトリウムチャネルを通る電流を、増大する周波数で印加した電圧パルスを脱分極することによって誘導し、間に休止期間を設けて使用依存性からの回復をアッセイする全細胞パッチクランプ記録において、細胞内に適用された100μM QX-314(中央のトレース)又はナトリウムチャネル遮断薬化合物BW 8186(化合物6)(下のトレース)によるNa_v1.7ナトリウムチャネルの使用依存性遮断を示す図である。上のトレースは、薬物抜きで同じプロトコールを適用したときに、有意な遮断が欠如していたことを示す。

【図1B】外部から適用した化合物6(中央のトレース)は、同じプロトコールで試験したときに、ごく僅かな効果しかなかった(薬物抜きの場合と同等)ことを示す図である。

【図2A】荷電ナトリウムチャネル遮断薬によるCFA誘発温熱性痛覚過敏の逆転を示す図である。図2A及び2Cは、20μL(左後足に注射)のCFA(50%エマルション)及び生理食塩水で併用処置したマウスの後足の底面に適用した一定放射熱源に対する応答待ち時間(秒)として測定した温熱性侵害受容感度における経時的(0、1、6、及び24時間)変化を示し、またCFAをQX-314(1%、白色の四角)、N-エチルエチドカイン(化合物21、1%、黒色の四角)、又はACS8180-3B(化合物3、1%、黒色の三角)と一緒に併用して適用した場合も示す。図2B及び2Dは、CFA処置の前及びCFA注射の1時間後に行った異なる化合物による処置の後の侵害温痛覚応答時間を示す。データは、1群当たり8〜16匹のマウスの平均±SEMである。CFA前(^*)及びCFA+ビヒクル(+)との統計比較を、+P<0.05、++P<0.01及び+++、^***P<0.001で示す。

【図2B】荷電ナトリウムチャネル遮断薬によるCFA誘発温熱性痛覚過敏の逆転を示す図である。図２Ａと同様。

【図2C】荷電ナトリウムチャネル遮断薬によるCFA誘発温熱性痛覚過敏の逆転を示す図である。図２Ａと同様。

【図2D】荷電ナトリウムチャネル遮断薬によるCFA誘発温熱性痛覚過敏の逆転を示す図である。図２Ａと同様。

【図3A】荷電ナトリウムチャネル遮断薬による、足の切り傷から誘発された温熱性痛覚過敏の逆転を示すデータのグラフ図である。図3Aは、生理食塩水、QX-314(0.5%)、又はN-エチルエチドカイン(化合物21)(0.5%)の急性足底内注射(50μl)を受けた(試験の1時間前)ラットの反対側の足と同側の足の間で観察された温熱性侵害受容閾値を示す。図3Bは、反対側の足と比較して、生理食塩水、QX-314、又はN-エチルエチドカイン(化合物21)を注射した後、左後足に外科的切開を受けたラットで観察された温熱性侵害受容閾値を示す。データは、1群当たり8匹のラットの平均±SEMである。反対側の足との統計比較(^*)を、^***P<0.001で示す。

【図3B】荷電ナトリウムチャネル遮断薬による、足の切り傷から誘発された温熱性痛覚過敏の逆転を示すデータのグラフ図である。図３Ａと同様。

【図4】N-エチルエチドカイン(化合物21)が、神経毒性を誘発しないことを示す結果の画像である。マウスの後根神経節スライス中のATF3発現の代表的な画像(ダークシェーディング、図4A〜4C)は、CFA+N-エチルエチドカイン(化合物21)(1%、20μl)の急性後足注射の8週前に曝露した。

【図5A】N-エチルエチドカイン(化合物21)による肺の感覚ニューロンへのサイレンシングが、アレルギー性気道炎症を低減することを示す結果の図である。OVAに曝露されたマウス(21日目)は、BALF合計(図5A)、並びに好酸球(図5C)、マクロファージ(図5D)及びT細胞(図5E)計数を含めたCD45+細胞(図5B)を増加させる。ビヒクル処置と比較して、エアロゾル化QX-314(100μM、白色の四角)又はN-エチルエチドカイン(化合物21)(100μM、黒色の四角)を使用した感覚ニューロンのサイレンシングは、これらのレベルを減少させた。N-エチルエチドカイン(化合物21)は、QX-314と比べて大きく減少する傾向を示す。データは、平均±SEMで表した(両側の独立スチューデントt-検定(n=8〜16頭の動物/群、1〜2のコホート))。

【図5B】N-エチルエチドカイン(化合物21)による肺の感覚ニューロンへのサイレンシングが、アレルギー性気道炎症を低減することを示す結果の図である。図５Ａと同様。

【図5C】N-エチルエチドカイン(化合物21)による肺の感覚ニューロンへのサイレンシングが、アレルギー性気道炎症を低減することを示す結果の図である。図５Ａと同様。

【図5D】N-エチルエチドカイン(化合物21)による肺の感覚ニューロンへのサイレンシングが、アレルギー性気道炎症を低減することを示す結果の図である。図５Ａと同様。

【図5E】N-エチルエチドカイン(化合物21)による肺の感覚ニューロンへのサイレンシングが、アレルギー性気道炎症を低減することを示す結果の図である。図５Ａと同様。

【発明を実施するための形態】

【0071】

本発明者らは、侵害受容器及び/又は掻痒受容器で発現するが、細胞内に適用するとイオンチャネル遮断薬としてQX-314より強力な運動ニューロンでは発現しない開口TRPチャネル形成受容体を通過することができる新規の第4級アンモニウム化合物を同定した。正電荷を帯びているため、本発明のイオンチャネル遮断薬は膜透過性ではなく、したがってTRPチャネル形成受容体を発現しない細胞には入ることができない。内因性リガンドの放出又は温熱刺激による活性化に起因して、TRPチャネル形成受容体は、多くの場合、痛みに関連する組織状態(炎症等)でより活性である。痛み、痒み、又は神経性炎症を効果的に治療(例えば、除去又は緩和)するために、本発明のイオンチャネル遮断薬を単独で使用して、選択的に活性化侵害受容器を標的化することができる。痛み、痒み、又は神経性炎症を効果的に治療(例えば、除去又は緩和)するために、本発明のイオンチャネル遮断薬を、1つ以上の外因性TRPチャネル形成受容体アゴニストと組み合わせて使用して、選択的に侵害受容器を標的化することもできる。

【0072】

痛みを感じるニューロン中の電位依存性イオンチャネルは、現在、痛みを治療する薬物の開発において非常な関心を持たれている。痛みを感じるニューロン中の電位依存性ナトリウムチャネルの遮断は、活動電位の開始及び伝達を中断することによって痛みのシグナルを遮断することができ、カルシウムチャネルの遮断は、脊髄中の二次ニューロンへの痛みのシグナルの神経伝達を防止することができる。その上、侵害受容器中の電位依存性ナトリウムチャネルの遮断は、侵害受容器末梢端の活性化及びその炎症性化学物質の放出を防止することによって神経性炎症を低減又は除去することができる。

【0073】

従来、ナトリウムチャネル又はカルシウムチャネルを遮断する有機低分子の設計における限度は、標的細胞に外部から適用したときに活性にならなければならない程度である。このような外部から適用される分子の大部分は、疎水性であり、膜を通過することができる。このため、これらの分子は全ての細胞に入り、したがって侵害受容器のみに影響を与える選択性はない。

【0074】

カチオン性リドカイン誘導体QX-314等の一部の阻害剤は、膜に非透過性であり、侵害受容器細胞の内部に存在する場合のみ有効であり、そのため効果を生むには、一時的受容体電位イオンチャネル(TRPチャネル、例えば、TRPAV1、TRPA1、及びP2X(2/3))等のチャネル又は受容体を介して細胞膜を通過する必要がある。普通の状況下で、侵害受容器中のほとんどのTRPチャネルは活性でないが、これらを活性化するために有害性の温熱、機械的、又は化学的刺激を必要とする。例えば、侵害受容器中のTRPチャネルは、TRPV1チャネルを開口するカプサイシン等の外因性TRPリガンド(すなわちTRPアゴニスト)によって活性化することができる。したがって、侵害受容器を選択的に標的化する一手法は、膜に非透過性のイオンチャネル阻害剤と、TRPチャネルを通って細胞内に入る阻害剤の経路を可能にする外因性TRPリガンドとを同時投与するものである。カプサイシンに加えて、外因性TRPリガンドは、別のカプサイシノイド、カラシ油、又はリドカインであってもよい。別の例では、TRPチャネルは、煙又は催眠ガス等の化学兵器由来の吸入アクロレイン等の外因性刺激活性化剤に応答して活性化し得る。

【0075】

特定の状況下で、TRPチャネルは、外因性TRPアゴニスト /リガンドがなくても、組織傷害、感染症、自己免疫、アトピー、虚血、低酸素症、細胞ストレス、免疫細胞活性化、免疫メディエーター生成、及び酸化ストレスによって発生する内因性炎症活性化剤によって活性化することができる。このような条件下で、内因性分子(例えば、プロトン、脂質、及び活性酸素種)は、侵害受容器で発現したTRPチャネルを活性化することができ、膜に非透過性の電位依存性イオンチャネル遮断薬が、内因的に活性化されたTRPチャネルを通して侵害受容器の内部にアクセスすることを可能にする。TRPチャネルの内因性炎症活性化剤には、例えば、プロスタグランジン、酸化窒素(NO)、過酸化物(H₂O₂)、システイン反応性炎症メディエーター様4-ヒドロキシノネナール、内因性アルケニルアルデヒド、内在性カンナビノイド、及び免疫メディエーター(例えば、インターロイキン1(IL-1)、神経成長因子(NGF)、及びブラジキニン(これらの受容体はTRPチャネルに結合される))が挙げられる。

【0076】

本発明を、以下でより詳細に説明する。

【0077】

荷電イオンチャネル遮断薬
本発明の組成物、キット、及び方法の中で使用することができる化合物には、次式(I)の化合物が挙げられる。

【0078】

【化8】

【0079】

式(I)中、R^1F及びR^1Gは一緒に、少なくとも1個の窒素原子を有する複素環を完成する。好ましい実施形態では、複素環は、6員環又は5員環である。加えて、R^1A、R^1B、及びR^1Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、OR^1I、NR^1JR^1K、NR^1LC(O)R^1M、S(O)R^1N、SO₂R^1OR^1P、SO₂R^1QR^1R、SO₃R^1S、CO₂R^1T、C(O)R^1U、及びC(O)NR^1VR^1Wから選択することができ、R^1I、R^1J、R^1K、R^1L、R^1M、R^1N、R^1O、R^1P、R^1Q、R^1R、R^1S、R^1T、R^1U、R^1V、及びR^1Wのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択することができる。好ましい実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも1つの独立したR^1Cを有する。X¹は、-CR^1XR^1Y-、-NR^1ZC(O)-、-OC(O)-、-SC(O)-、-C(O)NR^1AA-、-CO₂-、及び-OC(S)-から選択することができる。好ましい実施形態では、X¹は-NHC(O)-である。R^1X、R^1Y、R^1Z、及びR^1AAのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択することができる。R^1D及びR^1Eのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択することができるか、又はR^1D及びR^1Eは一緒に、3〜6員環(環状アルキル又は複素環)を形成することができる。R^1Hは、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択することができる。例示的な式(I)の化合物には、表1に列挙したものが挙げられる。これらの化合物は、実施例1〜6に記載の方法と同様の方法を使用して調製することができる。

【0080】

【表1】

【0081】

本発明の組成物、キット、及び方法の中で使用できる化合物には、式(II)の化合物が挙げられる。

【0082】

【化9】

【0083】

式(II)中、mは0又は1でよく、R^2A、R^2B、及びR^2Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、CF₃、OR^2H、NR^2IR^2J、NR^2KC(O)R^2L、S(O)R^2M、SO₂R^2NR^2O、SO₂NR^2PR^2Q、SO₃R^2R、CO₂R^2S、C(O)R^2T、及びC(O)NR^2UR^2Vから選択することができ、R^2H、R^2I、R^2J、R^2K、R^2L、R^2M、R^2N、R^2O、R^2P、R^2Q、R^2R、R^2S、R^2T、R^2U、及びR^2Vのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択することができる。nは、0、1、2、3、4、5、6、7、8、又は9であってよく、各R^2Fは、独立に、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、CF₃、OR^2H、NR^2IR^2J、NR^2KC(O)R^2L、S(O)R^2M、SO₂R^2NR^2O、SO₂NR^2PR^2Q、SO₃R^2R、CO₂R^2S、C(O)R^2T、及びC(O)NR^2UR^2Vから選択することができ、R^2H、R^2I、R^2J、R^2K、R^2L、R^2M、R^2N、R^2O、R^2P、R^2Q、R^2R、R^2S、R^2T、R^2U、及びR^2Vのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択することができる。好ましい実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも1つの独立したR^2Cを有する。別の実施形態では、本発明の化合物は、少なくとも1つのR^2F及び9つまでのR^2Fを有する。R^2D及びR^2Eは、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択することができる。例示的な式(II)の化合物には、表2に列挙したものが挙げられる。これらの化合物は、実施例7〜10に記載の方法と同様の方法を使用して調製することができる。

【0084】

【表2】

【0085】

本発明の組成物、キット、及び方法の中で使用できる化合物には、式(III)の化合物が挙げられる。

【0086】

【化10】

【0087】

式(III)中、nは、0、1、2、又は3であってよく、R^3A、R^3B、及びR^3Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、OR^3I、NR^3JR^3K、NR^3LC(O)R^3M、S(O)R^3N、SO₂R^3OR^3P、SO₂NR^3QR^3R、SO₃R^3S、CO₂R^3T、C(O)R^3U、及びC(O)NR^3VR^3Wから選択することができ、R^3I、R^3J、R^3K、R^3L、R^3M、R^3N、R^3O、R^3P、R^3Q、R^3R、R^3S、R^3T、R^3U、R^3V、及びR^3Wのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択することができる。X³は、-NHC(O)-及び-C(O)NHから選択することができる。R^3D及びR^3Eのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択することができるか、又はR^3D及びR^3Eは一緒に、3〜6員環(環状アルキル又は複素環)を形成することができる。R^3F、R^3G、及びR^3Hのそれぞれは、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択することができる。例示的な式(III)の化合物には、表3に列挙したものが挙げられる。これらの化合物は、実施例11〜14に記載の方法と同様の方法を使用して調製することができる。

【0088】

【表3】

【0089】

合成
荷電改変イオンチャネル遮断薬の合成は、親イオンチャネル遮断薬、リンカー、巨大な基、及び/又は荷電基のアルコール、アミン、ケトン、スルフヒドリル又はカルボキシル官能基の選択的な保護及び脱保護が関与し得る。例えば、通常使用されるアミンの保護基には、カルバメート、例えばtert-ブチル、ベンジル、2,2,2-トリクロロエチル、2-トリメチルシリルエチル、9-フルオレニルメチル、アリル、及びm-ニトロフェニルが挙げられる。他の通常使用されるアミンの保護基には、アミド、例えばホルムアミド、アセトアミド、トリフルオロアセトアミド、スルホンアミド、トリフルオロメタンスルホニルアミド、トリメチルシリルエタンスルホンアミド、及びtert-ブチルスルホニルアミドが挙げられる。通常使用されるカルボキシルの保護基の例としては、エステル、例えばメチル、エチル、tert-ブチル、9-フルオレニルメチル、2-(トリメチルシリル)エトキシメチル、ベンジル、ジフェニルメチル、O-ニトロベンジル、オルト-エステル、及びハロ-エステルが挙げられる。通常使用されるアルコールの保護基の例としては、エーテル、例えばメチル、メトキシメチル、メトキシエトキシメチル、メチルチオメチル、ベンジルオキシメチル、テトラヒドロピラニル、エトキシエチル、ベンジル、2-ナフチルメチル、O-ニトロベンジル、P-ニトロベンジル、P-メトキシベンジル、9-フェニルキサンチル、トリチル(メトキシトリチルを含む)、及びシリルエーテルが挙げられる。通常使用されるスルフヒドリルの保護基の例としては、ヒドロキシルに使用されるものと同じ保護基の多くが挙げられる。加えて、スルフヒドリルは、還元型(例えば、ジスルフィドとして)又は酸化型(例えば、スルホン酸、スルホン酸エステル、又はスルホンアミドとして)で保護することができる。保護基は、分子中の他の保護基を除くそれぞれを除去するために選択的条件(例えば、酸性条件、塩基性条件、求核剤による触媒作用、ルイス酸による触媒作用、又は水素化)が必要とされるように、選択することができる。アミン、アルコール、スルヒドリル、及びカルボキシル官能基への保護基の追加に必要とされる条件並びにこれらの除去のために必要とされる条件は、T.W. Green及びP.G.M. Wuts、Protective Groups in Organic Synthesis (第2版)、John Wiley & Sons、1991並びにP.J. Kocienski、Protecting Groups、Georg Thieme Verlag、1994に詳細に記載されている。

【0090】

荷電改変イオンチャネル遮断薬は、当業者によく知られている技術を使用して調製することができる。改変は、例えば、J. March、Advanced Organic Chemistry: Reactions、Mechanisms and Structure、John Wiley & Sons, Inc.、1992、617頁に記載の技術を使用して、親イオンチャネル遮断薬をアルキル化することによって行うことができる。アミノ基からグアニジン基への変換は、標準合成プロトコールを使用して達成することができる。例えば、Mosherは、アミノイミノメタンスルホン酸とアミンとの反応による一置換グアニジンの一般的な調製方法を記載した(Kimら、Tetrahedron Lett. 29:3183 (1988))。第1級及び第2級アミンのグアニル化のより好都合な方法は、Bernatowiczによって、1H-ピラゾール-1-カルボキサミジン塩酸塩、1-H-ピラゾール-1-(N,N'-ビス(tert-ブトキシカルボニル)カルボキサミジン)、又は1-H-ピラゾール-1-(N,N'-ビス(ベンジルオキシカルボニル)カルボキサミジン)を用いて開発された。これらの試薬は、アミンと反応して一置換グアニジンを生成する(Bernatowiczら、J. Org. Chem. 57:2497 (1992)、及びBernatowiczら、Tetrahedron Lett. 34:3389 (1993)を参照)。加えて、チオ尿素及びS-アルキル-イソチオ尿素は、置換グアニジンの合成において有用な中間体であることが示されている(Possら、Tetrahedron Lett. 33:5933 (1992))。

【0091】

荷電改変イオンチャネル遮断薬は、スキーム1に示す親化合物中のアミン窒素のアルキル化によって調製することができる。

【0092】

【化11】

【0093】

あるいは、荷電改変イオンチャネル遮断薬は、グアニジン基を導入することによって調製することができる。親化合物は、シアナミド、例えば、メチルシアナミド又はピラゾール-1-カルボキサミジン誘導体と反応させることができる。あるいは、親化合物は、スキーム2に示すように、臭化シアンと反応した後、メチルクロロアルミニウムアミドと反応することができる。試薬、例えば2-(メチルチオ)-2-イミダゾリンも、好適に官能化された誘導体の調製に使用することができる(スキーム3)。

【0094】

【化12】

【0095】

【化13】

【0096】

アミン窒素原子を含有する任意のイオンチャネル遮断薬を、スキーム1〜5に示すように改変することができる。本発明の特定の荷電イオンチャネル遮断薬についての例示的な合成スキームを、実施例1〜14でさらに詳述する。

【0097】

外因性TRPチャネル形成受容体アゴニスト
本発明の方法及びキットの中で用いることができるTRPV1アゴニストには、侵害受容器でTRPV1受容体を活性化し、電位依存性イオンチャネルの少なくとも1つの阻害剤の侵入を可能にする任意のものが挙げられるが、これに限定されない。好適なTRPV1アゴニストは、カプサイシン又は別のカプサイシノイドであり、これらはバニロイドファミリーの分子の一員である。天然カプサイシノイドは、カプサイシン自体、ジヒドロカプサイシン、ノルジヒドロカプサイシン、ホモジヒドロカプサイシン、ホモカプサイシン、及びノニバミドである。本発明の組成物及び方法において使用される他の好適なカプサイシノイド並びにカプサイシノイド類似体及び誘導体には、天然及び合成カプサイシン誘導体及び類似体が挙げられ、例えば、バニロイド(例えば、N-バニリル-アルカンジエナミド、N-バニリル-アルカンジエニル、及びN-バニリル-シス-単不飽和アルケンアミド)、カプシェイト、ジヒドロカプシェイト、ノルジヒドロカプシェイト及び他のカプシノイド、カプシコニエート、ジヒドロカプシコニエート及び他のコニフェリルエステル、カプシコニノイド、レシニフェラトキシン、チニアトキシン、シバミド、N-フェニルメチルアルケンアミドカプサイシン誘導体、オルバニル、N-[(4-(2-アミノエトキシ)-3-メトキシフェニル)メチル]-9Z-オクタ-デカンアミド、N-オレイル-ホモバニルアミド、トリプレニルフェノール(例えば、スクチゲラール)、ジンゲロール、ピペリン、ショウガオール、グアヤコール、オイゲノール、ジンゲロン、ヌバニル、NE-19550、NE-21610、及びNE-28345が含まれる。追加のカプサイシノイド、それらの構造、及びそれらの製造方法は、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第7,446,226号及び同第7,429,673号に記載されている。

【0098】

追加の好適なTRPV1アゴニストには、これらに限定されないが、オイゲノール、アルバニル(N-アラキドノイルバニルアミン)、アナンドアミド、ホウ酸2-アミノエトキシジフェニル(2APB)、AM404、レシニフェラトキシン、ホルボール12-フェニルアセテート13-アセテート20-ホミバニレート(PPAHV)、オルバニル(NE 19550)、OLDA(N-オレオイルドーパミン)、N-アラキドニルドーパミン(NADA)、6'-ヨードレシニフェラトキシン(6'-IRTX)、C18 N-アシルエタノールアミン、リポキシゲナーゼ誘導体、例えば12-ヒドロペルオキシエイコサテトラエン酸、インヒビターシステインノット(ICK)ペプチド(バニロトキシン)、ピペリン、MSK195 (N-[2-(3,4-ジメチルベンジル)-3-(ピバロイルオキシ)プロピル]-2-[4-(2-アミノエトキシ)-3-メトキシフェニル]アセトアミド)、JYL79 (N-[2-(3,4-ジメチルベンジル)-3-(ピバロイルオキシ)プロピル]-N'-(4-ヒドロキシ-3-メトキシベンジル)チオ尿素)、ヒドロキシ-アルファ-サンショオール、ホウ酸2-アミノエトキシジフェニル、10-ショウガオール、オレイルジンゲロール、オレイルショウガオール、及びSU200 (N-(4-tert-ブチルベンジル)-N'-(4-ヒドロキシ-3-メトキシベンジル)チオ尿素)が挙げられる。さらに他のTRPV1アゴニストには、アミロカイン、アルチカイン、ベンゾカイン、ブピバカイン、カルボカイン、カルチカイン、クロロプロカイン、シクロメチカイン、ジブカイン(シンコカイン)、ジメトカイン(ラロカイン)、エチドカイン、ヘキシルカイン、レボブピバカイン、リドカイン、メピバカイン、メプリルカイン(オラカイン)、メタブトキシカイン、ピペロカイン、プリロカイン、プロカイン(ノバカイン)、プロパラカイン、プロポキシカイン、リゾカイン、ロピバカイン、テトラカイン(アメトカイン)、及びトリメカインが挙げられる。

【0099】

本発明の方法、組成物、及びキットの中で用いることができるTRP1Aアゴニストには、侵害受容器又は掻痒受容器でTRP1A受容体を活性化し、電位依存性イオンチャネルの少なくとも1つの阻害剤の侵入を可能にする任意のものが挙げられる。好適なTRP1Aアゴニストには、これらに限定されないが、シンナムアルデヒド、アリル-イソチオシアネート(カラシ油)、二硫化ジアリル、イシリン、桂皮油、冬緑油、丁子油、アクロレイン、ヒドロキシ-アルファ-サンショオール、ホウ酸2-アミノエトキシジフェニル、4-ヒドロキシノネナール、p-ヒドロキシ安息香酸メチル、及び3'-カルバモイルジフェニル-3-イルシクロヘキシルカルバメート(URB597)が挙げられる。

【0100】

本発明の方法、組成物、及びキットの中で用いることができるP2Xアゴニストには、侵害受容器又は掻痒受容器でP2X受容体を活性化し、電位依存性イオンチャネルの少なくとも1つの阻害剤の侵入を可能にする任意のものが挙げられる。好適なP2Xアゴニストには、これらに限定されないが、2-メチルチオ-ATP、2'及び3'-O-(4-ベンゾイルベンゾイル)-ATP及びATP5'-O-(3-チオトリホスフェート)が挙げられる。

【0101】

追加の薬剤
典型的には神経性炎症の治療に使用される1種以上の追加の生物活性剤を、所望に応じて、本明細書に記載の本発明の組成物と組み合わせて使用してよい。生物活性剤には、これらに限定されないが、アセトアミノフェン、NSAID、グルココルチコイド、麻薬(例えば、オピオイド)、三環系抗うつ薬、アミン輸送体阻害剤、抗痙攣薬、抗増殖剤、及び免疫調節剤が挙げられる。生物活性剤は、治療に有効な当技術分野で公知の任意の製剤化、用量、又は投与を使用して、本発明の組成物の投与の前に、同時に、又は後に投与することができる。

【0102】

神経性炎症に罹患している患者(例えば、ヒト)に、本発明の組成物と組み合わせて投与することができる非ステロイド性抗炎症薬(NSAID)には、これらに限定されないが、アセチルサリチル酸、アモキシプリン、ベノリレート、ベノリラート、サリチル酸コリンマグネシウム、ジフルニサル、エテンザミド、ファイスラミン、サリチル酸メチル、サリチル酸マグネシウム、サリチル酸サリチル、サリチルアミド、ジクロフェナク、アセクロフェナク、アセメタシン、アルクロフェナク、ブロムフェナク、エトドラク、インドメタシン、ナブメトン、オキサメタシン、プログルメタシン、スリンダク、トルメチン、イブプロフェン、アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、カルプロフェン、デクスイブプロフェン、デクスケトプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルノキサプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロキサム、インドプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラク、ロキソプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸、メフェナム酸、フルフェナム酸、メクロフェナム酸、トルフェナム酸、フェニルブタゾン、アンピロン、アザプロパゾン、クロフェゾン、ケブゾン、メタミゾール、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、フェナゾン、スルフィンピラゾン、ピロキシカム、ドロキシカム、ロルノキシカム、メロキシカム、テノキシカム、及びCOX-2阻害剤セレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、並びにこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。

【0103】

神経性炎症に罹患している患者(例えば、ヒト)に、本発明の組成物と組み合わせて投与することができるグルココルチコイドには、これらに限定されないが、ヒドロコルチゾン、酢酸コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニソロン、デキサメタゾン、ベータメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、酢酸フルドロコルチゾン、酢酸デオキシコルチコステロン、アルドステロン、及びこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。

【0104】

神経性炎症に罹患している患者(例えば、ヒト)に、本発明の組成物と組み合わせて投与することができる麻薬には、これらに限定されないが、トラマドール、ヒドロコドン、オキシコドン、モルヒネ、及びこれらの薬学的に許容される塩が挙げられる。

【0105】

神経性炎症に罹患している患者(例えば、ヒト)に、本発明の組成物と組み合わせて投与することができる抗増殖剤及び免疫調節剤には、これらに限定されないが、アルキル化剤、白金剤(platinum agents)、代謝拮抗物質、トポイソメラーゼ阻害剤、ジヒドロ葉酸還元酵素阻害剤、抗腫瘍性抗生物質、抗有糸分裂剤、アロマターゼ阻害剤、チミジル酸シンターゼ阻害剤、DNAアンタゴニスト、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ポンプ阻害剤、ヒストンアセチルトランスフェラーゼ阻害剤、メタロプロテイナーゼ阻害剤、リボヌクレオシド還元酵素阻害剤、TNF-アルファアゴニスト、TNF-アルファアンタゴニスト又はスカベンジャー、インターロイキン1(IL-1)アンタゴニスト又はスカベンジャー、エンドセリンA受容体アンタゴニスト、レチノイン酸受容体アゴニスト、ホルモン剤、抗ホルモン剤、光力学剤(photodynamic agents)、及びチロシンキナーゼ阻害剤が挙げられる。

【0106】

組成物の製剤化
本発明の化合物の投与は、標的領域で感知された痛覚の低減をもたらす任意の好適な手段によるものでよい。本発明の化合物は、任意の好適なキャリア物質中に任意の適切な量で含有され得、一般に、組成物の総重量の1〜95重量%の合計量で存在する。組成物は、経口、非経口(例えば、静脈内、筋内)、直腸、皮膚、皮下、局所、経皮、舌下、経鼻、膣内、鞘内、硬膜外、又は眼内投与に適した剤形で、あるいは注射、吸入、又は鼻もしくは口腔粘膜との直接的接触によって提供され得る。

【0107】

したがって、組成物は、例えば、錠剤、カプセル剤、丸剤、粉末剤、顆粒剤、懸濁剤、エマルション剤、液剤、ゲル剤(ヒドロゲル剤を含む)、ペースト剤、軟膏剤、クリーム剤、硬膏剤、飲薬剤、浸透送達器具(osmotic delivery devices)、坐薬、浣腸剤、注入物質、インプラント、噴霧液剤、又はエアロゾルの形態でよい。組成物は、従来の薬務に従って製剤化してよい(例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy、第20版、2000、A.R. Gennaro編、Lippincott Williams & Wilkins、Philadelphia、並びにEncyclopedia of Pharmaceutical Technology、J. Swarbrick及びJ.C. Boylan編、1988〜1999、Marcel Dekker、New Yorkを参照)。

【0108】

各化合物は、当技術分野で公知の様々な方法で製剤化することができる。例えば、第1及び第2の薬剤を一緒に製剤化してもよい、又は別々に製剤化してもよい。望ましくは、第1及び第2の薬剤は、同時又はほぼ同時に投与するように一緒に製剤化する。

【0109】

個別に又は別々に製剤化した薬剤は、キットとして一緒にパッケージ化してよい。非限定的な例として、これらに限定されないが、例えば、2つの丸剤、丸剤及び粉末剤、坐薬及び液剤(バイアル中)、2種の局所クリーム剤等を含有するキットが挙げられる。キットは、患者への単位用量の投与を助ける任意の構成要素、例えば粉末形態を再構成するためのバイアル、注射用のシリンジ、カスタマイズされたIV送達システム、吸入器(inhaler)等を含んでよい。さらに、単位用量キットは、組成物の調製及び投与の説明書を備えてよい。

【0110】

キットは、一患者用の使い捨ての単位用量として製造されたもの、特定の患者用に複数回使用するもの(一定容量で又は療法の進行に伴い個々の化合物で効力が異なり得る)、又は複数の患者への投与に適した複数用量を含有するもの(「バルク包装」)でよい。キットの構成要素は、カートン、ブリスターパック、びん、管等の中にまとめられてよい。

【0111】

放出制御製剤
単独の又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせた、本発明の各化合物は、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第2003/0152637号及び同第2005/0025765号に記載されるように、放出制御(例えば、持続された又は測定された)投与のために製剤化することができる。例えば、単独の又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせた、本発明の化合物は、炎症部位に投与されるカプセル剤又は錠剤の中に組み込むことができる。

【0112】

治療される部位(例えば、痛みをもたらす外科切開、傷、又は関節)への局所浸潤又は注射に適した、本発明の化合物を持続放出させることが可能な、単独の又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせた、任意の薬学的に許容されるビヒクル又は製剤を、必要に応じて用いて、長時間の炎症の除去又は緩和をもたらすことができる。当技術分野で公知の徐放製剤は、特殊なコーティングを施したペレット剤、外科的挿入用のポリマー製剤又はマトリックス、又は、移植、挿入、注入もしくは注射用の持続放出性微粒子、例えば微小球もしくはマイクロカプセルを含み、活性薬剤の徐放性は、マトリックスからの持続もしくは制御された拡散、及び/又は調合薬のコーティングの選択的な分解、もしくはポリマーマトリックスの選択的分解を通してもたらされる。患者の中の好ましい局所部位へ薬剤を持続的に又は即座に送達するための他の製剤又はビヒクルには、例えば、懸濁液、エマルション、ゲル、リポソーム、及び任意の他の好適な当技術分野で公知の、皮下又は筋内投与に許容される送達ビヒクル又は製剤が挙げられる。

【0113】

様々な生体適合性材料が、単独で又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせて、本発明の化合物の放出制御をもたらす放出制御キャリアとして利用できる。当技術分野で公知の任意の薬学的に許容される生体適合性ポリマーを利用してもよい。生体適合性放出制御材料は、in vivoで、約1年以内、好ましくは約3カ月以内、より好ましくは約2カ月以内で分解することが好ましい。より好ましくは、放出制御材料は、1〜3カ月以内に有意に分解し、少なくとも50%の材料が非毒性残留物に分解して、身体から除去され、100%の本発明の化合物が、約2週以内、好ましくは約2日〜約7日以内の期間に放出される。分解性放出制御材料は、好ましくは、表面浸食又は内部浸食のいずれかによる加水分解によって分解すべきであり、したがって放出は持続的であるだけでなく、所望の放出速度も得られる。しかし、これらの製剤の薬物動態放出プロファイルは、所望の期間にわたって所望の可逆性局部麻酔効果をもたらすために、一次、ゼロ次、二相又は多相であってよい。

【0114】

好適な生体適合性ポリマーを、放出制御材料として利用することができる。ポリマー材料は、生体適合性かつ生分解性のポリマーを含んでよく、ある特定の好ましい実施形態では、好ましくは、乳酸及びグリコール酸のコポリマーである。本発明の製剤に有用な好ましい放出制御材料には、ポリ無水物、ポリエステル、乳酸及びグリコール酸のコポリマー(好ましくは、乳酸のグリコール酸に対する重量比が4:1以下、すなわち80重量%以下の乳酸と20重量%以上のグリコール酸である)、及び触媒又は分解促進化合物を含有する、例えば少なくとも1重量%の無水物触媒、例えば無水マレイン酸を含有するポリオルトエステルが挙げられる。ポリエステルの例としては、ポリ乳酸、ポリグリコール酸及びポリ乳酸-ポリグリコール酸コポリマーが挙げられる。他の有用なポリマーには、タンパク質ポリマー、例えばコラーゲン、ゼラチン、フィブリン及びフィブリノゲン並びに多糖類、例えばヒアルロン酸が挙げられる。

【0115】

ポリマー材料は、当業者に公知の任意の方法によって調製してよい。例えば、ポリマー材料が、乳酸及びグリコール酸のコポリマーで構成される場合、このコポリマーは、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第4,293,539号に記載の手順によって調製することができる。あるいは、乳酸及びグリコール酸のコポリマーは、当業者に公知の他の任意の手順によって調製してもよい。他の有用なポリマーには、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ無水物、ポリオルトエステル、ポリカプロラクトン、ポリホスファゼン、ポリホスホエステル、多糖類、タンパク性ポリマー、多糖類の可溶性誘導体、タンパク性ポリマーの可溶性誘導体、ポリペプチド、ポリエステル、及びポリオルトエステル又はこれらのいずれかの混合物もしくはブレンドが挙げられる。本発明において有用な薬学的に許容されるポリ無水物は、水に不安定な無水物結合を有する。薬物放出の速度は、利用される特定のポリ無水物ポリマー及びその分子量によって制御することができる。多糖類は、ポリ-1,4-グルカン、例えば、デンプングリコーゲン、アミロース、アミロペクチン、及びこれらの混合物でよい。生分解性の親水性又は疎水性ポリマーは、加水分解アミロペクチン、加水分解アミロペクチンのヒドロキシアルキル誘導体、例えばヒドロキシエチルデンプン(HES)、ヒドロキシエチルアミロース、ジアルデヒドデンプン等を含めた、ポリ-1,4-グルカンの水溶性誘導体でよい。ポリ無水物ポリマーは、分枝でも直鎖状でもよい。本発明において有用なポリマーの例としては、(ポリ(乳酸)及び/又はポリ(グリコール酸)のホモポリマー及びコポリマーに加えて)ポリ[ビス(p-カルボキシフェノキシ)プロパン無水物](PCPP)、ポリ[ビス(p-カルボキシ)メタン無水物](PCPM)、オリゴマー化不飽和脂肪族酸のポリ無水物、改変されて追加のカルボン酸に含まれるアミノ酸から調製されるポリ無水物ポリマー、芳香族ポリ無水物組成物、及びポリ無水物と他の物質、例えば脂肪酸末端ポリ無水物、例えば不飽和脂肪酸又は不飽和脂肪族酸の二量体及び/又は三量体のモノマーから重合されるポリ無水物とのコポリマーが挙げられる。ポリ無水物は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第4,757,128号に記載の方法に従って調製することができる。ポリオルトエステルポリマーは、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第4,070,347号に記載の通りに調製してよい。ポリホスホエステルは、それぞれ参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第6,008,318号、同第6,153,212号、同第5,952,451号、同第6,051,576号、同第6,103,255号、同第5,176,907号、及び同第5,194,581号に記載の通りに、調製し使用してよい。

【0116】

タンパク性ポリマーも使用してよい。タンパク性ポリマー及びそれらの可溶性誘導体には、ゼラチン生分解性合成ポリペプチド、エラスチン、アルキル化コラーゲン、アルキル化エラスチン等が挙げられる。生分解性合成ポリペプチドには、ポリ-(N-ヒドロキシアルキル)-L-アスパラギン、ポリ-(N-ヒドロキシアルキル)-L-グルタミン、N-ヒドロキシアルキル-L-アスパラギン及びN-ヒドロキシアルキル-L-グルタミンのコポリマーと他のアミノ酸が挙げられる。示唆されるアミノ酸には、L-アラニン、L-リシン、L-フェニルアラニン、L-バリン、L-チロシン等が挙げられる。

【0117】

追加の実施形態では、実質上、単独の又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせる、本発明の化合物のキャリアとして作用する放出制御材料は、生体接着ポリマー、例えばペクチン(ポリガラクツロン酸)、ムコ多糖(ヒアルロン酸、ムチン)もしくは非毒性レクチンをさらに含むことができるか、又はポリマー自体が、生体接着性、例えばポリ無水物又は多糖類、例えばキトサンでもよい。

【0118】

生分解性ポリマーがゲルを含む実施形態では、このような有用な一ポリマーは、熱的にゲル化するポリマー、例えば、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシド(PEO-PPO)ブロックコポリマー、例えばBASF Wyandotte製のPluronic(商標)F127である。このような場合、局部麻酔製剤は、30℃超で急速にゲル化する(例えば、患者の内部に注射されて入ったとき)流動性液体として注射器を介して注射できる。次いでゲル系は、単独の又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせた本発明の化合物の一定容量を、投与部位で放出する。

【0119】

経口用の固体剤形
経口用の製剤には、非毒性の薬学的に許容される賦形剤を有する混合物中の有効成分を含有する錠剤が挙げられる。これらの賦形剤は、例えば、不活性希釈剤又は充填剤(例えば、スクロース、ソルビトール、糖、マンニトール、微結晶性セルロース、ジャガイモデンプンを含めたデンプン、炭酸カルシウム、塩化ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、又はリン酸ナトリウム)、造粒剤及び崩壊剤(例えば、微結晶性セルロースを含めたセルロース誘導体、ジャガイモデンプンを含めたデンプン、クロスカルメロースナトリウム、アルギネート、又はアルギン酸)、結合剤(例えば、スクロース、グルコース、ソルビトール、アカシア、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、デンプン、アルファ化デンプン、微結晶性セルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ポリビニルピロリドン、又はポリエチレングリコール)、並びに平滑剤、流動促進剤、及び粘着防止剤(例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸、シリカ、硬化植物油、又はタルク)であってよい。他の薬学的に許容される賦形剤には、着色料、香味剤、可塑剤、保湿剤、緩衝剤等があり得る。

【0120】

2種以上の化合物を、錠剤、カプセル剤、もしくは他のビヒクル中に一緒に混合してもよく、又は分割してもよい。一例では、第1の化合物を錠剤の内部に含有し、第2の化合物が外側にあり、第2の化合物の大部分が放出された後で、第1の化合物が放出される。

【0121】

経口用の製剤はまた、チュアブル錠、又は硬ゼラチンカプセル剤(有効成分は、不活性固体希釈剤(例えば、ジャガイモデンプン、ラクトース、微結晶性セルロース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム又はカオリン)と混合される)、もしくは軟ゼラチンカプセル剤(有効成分は、水又は油媒体、例えばラッカセイ油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油と混合される)として調製することもできる。粉末剤、顆粒剤、及びペレット剤は、従来の様式での錠剤及びカプセル剤に用いた上記成分を使用し、例えばミキサー、流動床装置又は噴霧乾燥機を使用して調製することができる。

【0122】

溶解又は拡散放出制御は、化合物の錠剤、カプセル剤、ペレット剤、又は顆粒製剤の適当なコーティングによって、又は化合物を適当なマトリックスに組み込むことによって実現することができる。放出制御コーティングは、上記のコーティング物質、並びに/又は、例えば、シェラック、蜜蝋、グリコワックス、キャスターワックス、カルナウバ蝋、ステアリルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセロール、エチルセルロース、アクリル樹脂、ジポリ乳酸、酢酸酪酸セルロース、ポリ塩化ビニル、ポリ酢酸ビニル、ビニルピロリドン、ポリエチレン、ポリメタクリレート、メチルメタクリレート、2-ヒドロキシメタクリレート、メタクリレートヒドロゲル、1,3ブチレングリコール、エチレングリコールメタクリレート、及び/もしくはポリエチレングリコールのうちの1つ以上を含んでよい。放出制御マトリックス製剤中、マトリックス材料は、例えば、水和メチルセルロース、カルナウバ蝋及びステアリルアルコール、カーボポール934、シリコーン、トリステアリン酸グリセリル、メチルアクリレート-メチルメタクリレート、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、及び/又はハロゲン化フルオロカーボンも含んでよい。

【0123】

本発明の化合物及び組成物が経口投与用に導入され得る液体形態には、水溶液、好適に風味付けされたシロップ、水性又は油懸濁液、及び風味付けされたエマルションと食用油、例えば綿実油、ゴマ油、ヤシ油、又はラッカセイ油、並びにエリキシル剤及び同様の薬用ビヒクルが含まれる。

【0124】

一般に、ヒトに投与するとき、本発明の組み合わせの化合物のいずれかの経口用量は、化合物の性質によって決まり、当業者によって容易に決定することができる。典型的には、このような用量は、通常、1日当たり約0.001mg〜2000mg、望ましくは1日当たり約1mg〜1000mg、より望ましくは1日当たり約5mg〜500mgである。1日当たり200mgまでの用量が必要なこともある。

【0125】

本明細書に記載の、併用療法における各薬物の投与は、独立に、1日〜1年間、毎日1〜4回であってよく、患者の寿命が続く限りであることもある。慢性の長期投与が、多くの事例で指定される。

【0126】

非経口製剤
非経口投与(例えば、注射による)に適した製剤は、化合物が溶解しているか、懸濁しているか、又はそうでなければ加えられている(例えば、リポソーム又は他の微粒子中に)、水性又は非水性の等張ピロゲン非含有滅菌液(例えば、溶液、懸濁液)を含む。このような液体は、他の薬学的に許容される成分、例えば酸化防止剤、緩衝剤、防腐剤、安定剤、静菌薬、懸濁化剤、増粘剤、及び溶質をさらに含有してよく、これらは、製剤を、所定のレシピエントの血液(又は他の関連した体液)で等張性にする。賦形剤の例としては、例えば、水、アルコール、ポリオール、グリセロール、植物油等が挙げられる。このような製剤における使用に好適な等張キャリアの例としては、塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、又は乳酸加リンゲル注射液が挙げられる。典型的には、液体中の化合物の濃度は、約1ng/ml〜約10μg/ml、例えば約10ng/ml〜約1μg/mlである。製剤は、単回投与又は多回投与用密封容器、例えば、アンプル及びバイアル中に存在してよく、フリーズドライした(凍結乾燥した)条件下で保管してよく、使用直前に、滅菌液キャリア、例えば注射用の水を添加する必要があるだけである。即席の注射液及び懸濁液を、滅菌粉末剤、顆粒剤、及び錠剤から調製することができる。

【0127】

局所製剤
単独の又は本明細書に記載の1種以上の生物活性剤と組み合わせた、本発明の組成物は、0.0001%〜25%(w/w)以上の間の有効成分を含有する局所ビヒクルで局所使用に適合することもできる。

【0128】

好ましい組み合わせにおいて、有効成分はそれぞれ、好ましくは0.0001%〜10%(w/w)の間、より好ましくは0.0005%〜4%(w/w)の間の活性剤である。必要に応じて、クリーム剤を毎日1〜4回塗布してもよい。本明細書に記載の方法を実行するにあたり、本発明の組成物を含有する局所ビヒクル、又は本発明の組成物を含有する併用療法を、好ましくは、患者の炎症部位に適用する。例えば、クリーム剤を、関節炎の指に悩む患者の手に塗布してよい。

【0129】

組成物は、任意の皮膚科学的に許容されるキャリアを使用して製剤化することができる。例示的なキャリアには、固体キャリア、例えばアルミナ、粘土、微結晶性セルロース、シリカ、もしくはタルク、及び/又は液体キャリア、例えばアルコール、グリコール、もしくは水-アルコール/グリコールブレンドが挙げられる。治療薬は、治療薬が皮膚に入るようにするリポソーム製剤でも投与することができる。このようなリポソーム製剤は、米国特許第5,169,637号、同第5,000,958号、同第5,049,388号、同第4,975,282号、同第5,194,266号、同第5,023,087号、同第5,688,525号、同第5,874,104号、同第5,409,704号、同第5,552,155号、同第5,356,633号、同第5,032,582号、同第4,994,213号、同第8,822,537号、及びPCT公開第WO96/40061号に記載されている。他の適当なビヒクルの例は、米国特許第4,877,805号、同第8,822,537号、及び欧州特許公開第0586106(A1)号に記載されている。本発明の好適なビヒクルには、鉱油、ペトロラタム、ポリデセン、ステアリン酸、ミリスチン酸イソプロピル、ステアリン酸ポリオキシル40、ステアリルアルコール、又は植物油も挙げることができる。

【0130】

組成物は、皮膚浸透促進剤、例えば「Percutaneous Penetration enhancers」、(Smith EW and Maibach HI.編 CRC Press 1995)に記載のものをさらに含むことができる。例示的な皮膚浸透促進剤には、アルキル(N,N-二置換アミノアルカノエート)エステル、例えば、両方とも参照により本明細書に組み込まれる米国特許第6,083,996号及び同第6,118,020号に記載されているドデシル2-(N,Nジメチルアミノ)プロピオネート(DDAIP)、水分散性酸系ポリマー、例えばポリアクリル酸系ポリマー、カルボマー(例えば、B.F. Goodrich Company(Akron, Ohio)製のCarbopol(商標)又はCarbopol 940P(商標))、ポリアクリル酸のコポリマー(例えば、B.F. Goodrich Company製のPemulen(商標)又はA.H. Robbins(Richmond, Va)製のPolycarbophil(商標))、多糖類樹脂、例えば寒天ガム、アルギネート、カラギーナンガム、ガティガム、カラヤゴム、カダヤゴム、ラムザンガム、キサンタンガム、及びガラクトマンナンガム(例えば、グアーガム、カロブガム、及びローカストビーンガム)、並びに他の当技術分野に公知のガム(例として、Industrial Gums: Polysaccharides & Their Derivatives、Whistler R. L., BeMiller J. N. (編),第3版Academic Press (1992)及びDavidson, R. L., Handbook of Water-Soluble Gums & Resins, McGraw-Hill, Inc., N.Y. (1980)を参照)、又はこれらの組み合わせが挙げられる。

【0131】

他の好適なポリマー皮膚浸透促進剤は、セルロース誘導体、例えばエチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースである。さらに、公知の経皮性浸透促進剤も、所望に応じて添加してよい。実例としては、ジメチルスルホキシド(DMSO)及びジメチルアセトアミド(DMA)、2-ピロリドン、N,N-ジエチル-m-トルアミド(DEET)、1-ドデシルアザシクロヘプタン-2-オン(Nelson Researchの登録商標のAzone(商標))、N,N-ジメチルホルムアミド、N-メチル-2-ピロリドン、チオグリコール酸カルシウム、並びに他の促進剤、例えばジオキソラン、環状ケトン、及びこれらの誘導体等がある。

【0132】

また、実例として、生分解性吸収促進剤の群があり、これらは、両方とも参照により本明細書に組み込まれる米国特許第4,980,378号及び同第5,082,866号に記載されるアルキルN,N-2-(二置換アミノ)アルカノエートであり、(N,N-ジメチルアミノ)酢酸テトラデシル、(N,N-ジメチルアミノ)酢酸ドデシル、(N,N-ジメチルアミノ)酢酸デシル、(N,N-ジメチルアミノ)酢酸オクチル、及び(N,N-ジエチルアミノ)酢酸ドデシルが挙げられる。

【0133】

特に好ましい皮膚浸透促進剤には、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ジメチルスルホキシド、デシルメチルスルホキシド、中鎖脂肪酸のジメチルアラニンアミド、2-(N,N-ジメチルアミノ)プロピオン酸ドデシル又はその塩、例えばその有機塩(例えば、塩酸付加塩、臭化水素酸付加塩、硫酸付加塩、リン酸付加塩、及び硝酸付加塩)及びその無機塩(例えば、酢酸付加塩、安息香酸付加塩、サリチル酸付加塩、グリコール酸付加塩、コハク酸付加塩、ニコチン酸付加塩、酒石酸付加塩、マレイン酸付加塩、リンゴ酸付加塩、パモン酸付加塩、メタンスルホン酸付加塩、シクロヘキサンスルファミン酸付加塩、ピクリン酸付加塩、及び乳酸付加塩)(米国特許第6,118,020号に記載されている)、並びにアルキル2-(N,N-二置換アミノ)-アルカノエート(米国特許第4,980,378号及び同第5,082,866号に記載されている)が挙げられる。

【0134】

この組成物中の皮膚浸透促進剤は、重量で、0.5%〜10%(w/w)の範囲である。最も好ましい範囲は、1.0%〜5%(w/w)である。別の実施形態では、皮膚浸透促進剤は、組成物の0.5%〜1%、1%〜2%、2%〜3%、3%〜4%、又は4%〜5%(w/w)の間を占める。

【0135】

組成物は、任意の有用な形態で提供することができる。例えば、本発明の組成物は、液剤、エマルション剤(マイクロエマルション剤を含む)、懸濁液、クリーム剤、フォーム剤、ローション剤、ジェル剤、粉末剤、又は他の典型的な固体、半固体、もしくは組成物が使用され得る皮膚もしくは他の組織への適用に使用される液体(例えば、局所スプレー)の組成物として製剤化することができる。このような組成物は、このような製品に典型的に使用される他の成分、例えば着色料、香料、増粘剤(例えば、キサンタンガム、脂肪酸、脂肪酸塩もしくはエステル、脂肪アルコール、変性セルロース、変性無機物質、Krisgel 100(商標)、又は合成ポリマー)、抗菌剤、溶媒、界面活性剤、洗剤、ゲル化剤、酸化防止剤、充填剤、染料、粘度調整剤、防腐剤、保湿剤、皮膚軟化剤(例えば、天然もしくは合成油、炭化水素油、ワックス、又はシリコーン)、水和剤、キレート剤、鎮痛剤、可溶化賦形剤、補助剤、分散剤、皮膚浸透促進剤、可塑剤、安定剤、乳化破壊剤、湿潤剤、日焼け止め剤、乳化剤、モイスチャライザー、収斂剤、脱臭剤を含有してよく、また場合により、麻酔剤、痒み止め活性剤、植物抽出物、調整剤、暗色化又は明色化剤、光沢剤、マイカ、鉱物、ポリフェノール、シリコーン又はその誘導体、サンブロック、ビタミン、及び植物医薬(phytomedicinal)を含んでもよい。

【0136】

組成物は、さらに利益を生み、局所製剤の感触及び/又は見た目を改善するために、他の同様の成分を含むこともできる。これらの製剤に一般に使用される特定のクラスの添加剤には、ミリスチン酸イソプロピル、ソルビン酸NF粉末、ポリエチレングリコール、ホスファチジルコリン(ホスファチジルコリンの混合物、例えばホスフォリポンGを含む)、Krisgel 100(商標)、蒸留水、水酸化ナトリウム、デシルメチルスルホキシド(皮膚浸透促進剤)、メントール結晶、ラベンダー油、ブチル化ヒドロキシトルエン、エチルジグリコール試薬、及び95%(190 proof)エタノールが挙げられる。

【0137】

眼内投与用の製剤
本発明の化合物はまた、有効量の活性化合物(1種以上)を眼の視神経部位に送達するために、充分な濃度の眼科的に許容されるキャリアを用いて製剤化することもできる。好ましくは、眼科用治療液は、約0.0001%〜約1%(容量による重量)、より好ましくは約0.0005%〜約0.1%(容量による重量)の範囲の濃度で1種以上の活性化合物を含有する。

【0138】

眼科的に許容されるキャリアは、眼に大きな刺激を与えず、荷電ナトリウムチャネル遮断薬の薬理活性及び特性を無効にしない。眼科的に許容されるキャリアは、一般に無菌であり、本質的に異物を含まず、一般に5〜8の範囲のpHを有する。好ましくは、pHは、可能な限り涙液のpH(7.4)に近い。眼科的に許容されるキャリアは、例えば、無菌等張液、例えば等張食塩液又はホウ酸液である。このようなキャリは、典型的には、塩化ナトリウム又はホウ酸を含有する水溶液である。また、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)も有用である。

【0139】

種々の防腐剤を、眼科用調合薬に使用してもよい。好ましい防腐剤には、これらに限定されないが、ベンザルコニウムカリウム、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、及び硝酸フェニル水銀が挙げられる。同様に、種々の好ましいビヒクルを、このような眼科用調合薬に使用してもよい。これらのビヒクルには、これらに限定されないが、ポリビニルアルコール、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロキサマー、カルボキシメチルセルロース及びヒドロキシエチルセルロースが挙げられる。

【0140】

緊張力調整剤を、必要に応じて又は好都合に添加してもよい。これらに限定されないが、塩、特に塩化ナトリウム、塩化カリウム等、マンニトール及びグリセリン、又は他の任意の好適な眼科的に許容される緊張力調整剤が挙げられる。

【0141】

種々の緩衝液及びpHを調節する手段を、結果として得られる調合薬が眼科的に許容される限り、使用してよい。これに応じて、緩衝液には、これらに限定されないが、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、及びホウ酸緩衝液が挙げられる。必要に応じて、これらの製剤のpHの調節に酸又は塩基を使用してもよい。眼科的に許容される酸化防止剤も含むことができる。酸化防止剤は、これらに限定されないが、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール、及びブチル化ヒドロキシトルエンが挙げられる。

【0142】

経鼻及び吸入投与用の製剤
本発明の医薬組成物は、経鼻又は鼻腔内投与用に製剤化することができる。キャリアが固体のとき、経鼻投与に適した製剤は、例えば、約20〜500マイクロメートルの範囲の粒径を有する粗粉末剤を含み、これが、鼻道を通って急速に吸入されることによって投与される。キャリアが液体、例えば、鼻腔用スプレー又は点鼻薬のとき、1種以上の製剤を水溶液又は油性溶液中に混ぜ、鼻道中へ吸入又はスプレーすることができる。

【0143】

吸入による投与の場合、好適な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の好適なガスを使用して、加圧パック又はネブライザから出るエアロゾルスプレーの形態で、有効成分を好都合に送達することができる。圧搾エアロゾルの場合において、単位剤形は、計測した量を送達するバルブを設けることによって決定することができる。例えば、吸入器又は吹送器(insufflator)の使用向けのゼラチンのカプセル剤及びカートリッジに、化合物及び好適な粉状塩基、例えばラクトース又はデンプンの粉状混合物を含有して製剤化することができる。

【0144】

徴候
本発明の方法、組成物、及びキットを使用して、背痛及び頸痛、癌性疼痛、婦人科痛及び陣痛、線維筋痛、関節炎痛及び他のリウマチ性疼痛、整形外科痛、帯状疱疹後神経痛及び他の神経因性疼痛、鎌状赤血球クライシス、間質性膀胱炎、尿道炎及び他の泌尿器痛、歯痛、頭痛、術後疼痛、並びに処置痛(すなわち、注射、膿瘍の排出、手術、歯科処置、眼の処置、眼の刺激、結膜炎(例えば、アレルギー性結膜炎)、眼の赤み、ドライアイ、関節鏡検査及び他の医療器具の使用、美容整形手術、皮膚科手術、接骨(setting fractures)、生検等に関連する痛み)を含めた、多数の状態のいずれに関連する痛み又は痒みを治療することができる。

【0145】

サブクラスの侵害受容器は掻痒感を媒介するため、本発明の方法、組成物、及びキットを、皮膚炎、感染症、寄生虫、昆虫刺傷、妊娠、代謝障害、肝又は腎不全、薬物反応、アレルギー反応、湿疹、及び癌のような状態にある患者の痒みの治療にも使用することができる。

【0146】

本発明の方法、組成物、及びキットは、熱病(発熱)、異常高熱症、悪性高熱症、又は高体温を特徴とする状態の治療にも使用することができる。

【0147】

本発明の方法、組成物、及びキットは、神経性炎症及び神経性炎症性障害の治療にも使用することができる。炎症は、有害な刺激に対する複合的な応答であり、局所的な赤み、腫れ、及び痛みをもたらす。炎症は、先天性又は順応性であり得、順応性は抗原によって決まり、免疫細胞によって媒介される(免疫介在性炎症)。神経性炎症は、痛感ニューロン(侵害受容器)の遠心機能からもたらされ、前炎症性メディエーターである神経ペプチド及び他の化学物質は、活性化されたときに侵害受容器の末梢端から放出される。この放出プロセスは、カルシウム流入及び小胞体を含有するペプチドのエクソサイトーシスによって媒介され、前炎症性神経ペプチドには、サブスタンスP、ニューロキニンA及びB(ひとまとめにタキキニンとして知られる)、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、及び血管活性腸管ポリペプチド(VIP)が挙げられる。

【0148】

末梢端化学物質の放出は、種々の炎症応答を刺激する。第一に、サブスタンスPの放出が、毛細血管透過性を増強し、血漿タンパク質が血管内コンパートメントから細胞外空間に漏れ(血漿の浸出)、浮腫をもたらし得る。これは、膨疹(皮膚の、硬い隆起性の腫れ)として検出することができ、これは、ルイス3相応答として知られる、膨疹、赤斑、及び発赤の3組の炎症応答の一構成要素である。第二に、CGRPの放出が、血管拡張をもたらし、血流の増加につながる。これは、発赤として検出することができ、別のルイス3相応答の構成要素である。

【0149】

サブスタンスPは、ニューロキニン-1(NK1)受容体を介して免疫細胞(例えば、マクロファージ、T細胞、肥満細胞、及び樹枝状細胞)で前炎症作用も有する。この効果は、アレルギー性鼻炎、胃炎、及び大腸炎において実証されており、炎症の神経性構成要素と免疫介在性構成要素との間の境界面を表す。一侵害受容器から放出されたサブスタンスPは、隣接する侵害受容器のNK1受容体にも作用して、それらを感作又は活性化し得、活性化及び求心性/遠心性機能の広がりをもたらす。侵害受容器のこれらの遠心性機能は、1)終端へ加えられた末梢適刺激(例えば、つまみ)による侵害受容器末端の直接的活性化、2)軸索反射による非刺激侵害受容器末端の間接的逆行性活性化(侵害受容器の一端から入力された活動電位が、末梢中の収束軸索枝点に達すると、分岐点から下って非刺激末端の末梢端まで移動する活動電位になる)、及び3)末梢へ移動するCNS中の侵害受容器中央末端における活動の結果生じる活性化(例えば、GABAによって生じる中央末端の一次求心性線維脱分極は、「間違った方向」へ移動する活動電位を開始するのに充分であり得る)によって引き起こされ得る。

【0150】

肺常在性ILC2細胞のゲノム解析は、SP、CGRP及びVIPを含めた感覚ニューロンによって放出されたいくつかの神経ペプチドに対する受容体の発現が、侵害受容器にこれらの細胞と直接連絡させる機会を与えることを明らかにした。特に、VIPは、OVAに曝露したマウスにおける肺求心性を含め、NaV1.8+節状神経節ニューロン中で発現することが判明している。カプサイシン又はIL5で刺激した培養節状神経節ニューロンもVIPを放出したが、OVA曝露マウス由来のBALFは、ビヒクル接種したマウスより多くのVIPを含有していた(Talbotら、Neuron 2015、印刷中)。これらのデータは、VIPが、炎症を起こした肺の中で放出され、本発明の荷電ナトリウムチャネル遮断薬でニューロンをサイレンシングすることによって遮断され得ることを示す。加えて、T_H2スキューイング(skewing)条件下で培養されたCD4+ T細胞が、組み換えマウスVIPに曝露されたとき、IL-13及びIL-5の転写レベルが増加し、VIPが、T_H2細胞がこれらのII型調節サイトカインを転写する反応能に貢献することを示唆する。

【0151】

免疫細胞から放出される免疫メディエーターも、侵害受容器を活性化することができる。肥満細胞は、一次侵害受容ニューロンの近くに存在し、多くの侵害受容器感作に貢献する。分泌促進化合物48/80の注射は、硬膜中の肥満細胞の脱顆粒を促進し、髄膜侵害受容器の励起につながる。肥満細胞の脱顆粒は、神経成長因子誘発温熱性痛覚過敏の急激な発症の一因にもなる。マクロファージは、いくつかの可溶性メディエーターを放出することによって侵害受容器感作に貢献する。ケモカインマクロファージ炎症タンパク質1α(MIP-1α)並びにその受容体CCR1及びCCR5の発現は、坐骨神経の部分的な結紮の後にマクロファージ及びシュワン細胞内で増加し、神経因性疼痛の進行に寄与する。リンパ球は、末梢侵害受容器の感作に寄与する。神経損傷後、T細胞は、坐骨神経及び後根神経節(DRG)に浸潤する。神経損傷によって誘発される痛覚過敏及び異痛は、T細胞が不足している齧歯類において著しく減衰し又は無効になり、免疫抑制剤ラパマイシンは、部分的にT細胞の効果に起因して、ラットの神経因性疼痛を減衰する。T細胞サブセットのうち、1型及び2型ヘルパーT細胞(T_H1及びT_H2細胞)は、神経因性疼痛において異なる役割を持つことが示されている。T_H1細胞は、炎症性サイトカイン(IL-2及びインターフェロンγ(IFNγ))を放出することによって神経因性疼痛挙動を促進するが、T_H2細胞は、抗炎症性サイトカイン(IL-4、IL-10及びIL-13)を放出することによって阻害する。補体系も、炎症性痛覚過敏及び神経因性疼痛において役割を有する。アナフィラトキシンC5aは、補体活性化経路の重要なエフェクターであり、好中球のC5aR1受容体に結合すると、強力な好中球誘引物質になる(Ren & Dubner、Nat. Med. 16:1267〜1276頁(2010))。

【0152】

細菌感染は、侵害受容器を直接活性化することが示されており、TLR2、MyD88、T細胞、B細胞、並びに好中球及び単球を通って媒介される免疫応答は、マウスの黄色ブドウ球菌(staphylococcus aureus)誘発疼痛には必要とされない(Chiuら、Nature 501:52〜57頁(2013))。マウスにおける機械的及び温熱性痛覚過敏は、組織腫脹又は免疫活性化よりも生細菌負荷に相関する。細菌は、独特な機構を通して、細菌性N-ホルミル化ペプチド及び孔形成毒素α-溶血素を部分的に介して侵害受容器ニューロンにおけるカルシウム流出及び活動電位を誘発する。侵害受容器を含むNav1.8-系統ニューロンの特定アブレーションは、細菌感染の間の痛みを無効にしたが、同時に局所免疫浸潤及び流入領域リンパ節のリンパ節症を進行させた。したがって、細菌性病原体は、宿主病原体相互作用における予想外の神経系の役割である、炎症を調節する感覚ニューロンを直接活性化することによって痛みを生み出す。Talbotら、Neuron 2015(印刷中)のデータは、侵害受容器が、感作動物におけるアレルゲンへの曝露の間に活性化されることも示唆している。

【0153】

ある特定の障害において、神経性炎症は、軟組織、皮膚、呼吸器系、関節、尿生殖器及び消化管、肝臓、並びに脳における、組織損傷、自己免疫疾患、感染症、並びに刺激物への曝露によって誘発される末梢性炎症の一因となる。神経性炎症性障害には、本本明細書に記載の、ぜんそく、鼻炎、結膜炎、関節炎、大腸炎、接触性皮膚炎、糖尿病、湿疹、膀胱炎、胃炎、偏頭痛、乾癬、鼻炎、酒さ、及び日焼けの他、膵臓炎、慢性咳、慢性鼻副鼻腔炎、外傷性脳損傷、複数菌による敗血症、腱障害、慢性じんましん、リウマチ性疾患、急性肺損傷、刺激物への曝露、刺激物、汚染物質、又は化学兵器の吸入が挙げられる。

【0154】

痛み、痒み、及び神経性炎症の評価
本発明の方法、組成物、又はキットのいずれの有効性を測定するために、測定指標を使用してよい。筋骨格、免疫性炎症性及び神経障害に関連する痛みの測定のための本発明の方法、組成物、及びキットの中で有用な指標には、視覚的アナログ尺度(VAS)、リッカート尺度、カテゴリー別痛み尺度、記述子、Lequesne指標、WOMAC指標、及びAUSCAN指標が挙げられる、それぞれ、当技術分野において周知である。このような指標を使用して、痛み、痒み、機能、剛性、又は他の変数を測定することができる。

【0155】

視覚的アナログ尺度(VAS)は、一次元の量の測定を提供する。VASは一般に、距離の図、例えば一定の距離間隔(例えば10個の1cm間隔)でハッシュマークを付けた線の描画を利用する。例えば、患者は、線の一端が「痛み無し」(0cmのスコア)又は「痒み無し」に対応し、線の他端が「耐え難い痛み」又は「耐え難い痒み」(10cmのスコア)に対応するものとして、痛み又は痒みの感覚に最も対応する線の箇所を選択することによる痛み又は痒みの感覚のランク付けを求められることがある。この手順は、患者が経験する傷み又は痒みの程度についての定量的な情報を得るための簡易かつ迅速な手法を提供する。VAS尺度及びそれらの使用については、例えば、米国特許第6,709,406号及び同第6,432,937号に記載されている。

【0156】

リッカート尺度も、同様に、一次元の量の測定を提供する。一般に、リッカート尺度は、低値(例えば、痛みがないことを意味する0)から高値(極度の痛みがあることを意味する7)までの範囲で飛び飛びの整数値を有する。傷みを経験している患者は、経験している傷みの程度を表す低値から高値の間の数を選択するように求められる。リッカート尺度及びそれらの使用については、例えば、米国特許第6,623,040号及び同第6,766,319号に記載されている。

【0157】

Lequesne指標及びウェスタンオンタリオ大学及びマックマスター大学(WOMAC)変形性関節症指標は、自己記入質問表を使用してOA患者の膝及び腰の痛み、機能、及び剛性を評価する。膝及び腰の両方がWOMACに包含さるが、一Lequesne質問表は膝に関し、別の一つは腰に関する。これらの質問表は、VAS又はリッカートより多くの情報量を含有するいう理由で有用である。WOMAC指標及びLequesne指標の質問表は両方とも、手術状況(例えば、膝及び腰の関節形成術)を含めたOAにおいて広範に有効である。それらの測定規準の特性は大きく異ならない。

【0158】

AUSCAN(オーストラリア-カナダにおける手の関節炎(Australian-Canadian hand arthritis))指標は、有効かつ信頼性のあるレスポンス型患者自己記録質問表を用いる。一例では、この質問表は、3つの面(痛み-5問、剛性-1問、及び身体機能-9問)の範囲内で15個の質問を含有する。AUSCAN指標は、例えば、リッカート又はVAS尺度を利用し得る。

【0159】

痛みの測定のために、本発明の方法、組成物、及びキットにおいて有用である指標には、疼痛記述子尺度(Pain Descriptor Scale)(PDS)、視覚的アナログ尺度(VAS)、口頭記述子尺度(Verbal Descriptor Scales)(VDS)、数的疼痛強度尺度(Numeric Pain Intensity Scale)(NPIS)、神経因性疼痛尺度(NPS)、神経因性疼痛症候群一覧表(Neuropathic Pain Symptom Inventory)(NPSI)、現在の疼痛一覧表(Present Pain Inventory)(PPI)、高齢者の疼痛基準(Geriatric Pain Measure)(GPM)、マクギル疼痛質問表(MPQ)、平均疼痛強度(記述子識別尺度 (Descriptor Differential Scale))、数的疼痛尺度(numeric pain scale)(NPS)、包括的評価スコア(global evaluation score)(GES)、簡易版マクギル疼痛質問表、ミネソタ多面的人格目録、疼痛プロファイル及び多面的疼痛一覧表(Pain Profile and Multidimensional Pain Inventory)、小児健康質問票(Child Heath Questionnaire)、及び小児評価質問票(Child Assessment Questionnaire)が挙げられる。

【0160】

痒みは、主観的測定によって測定することができる(VAS、リッカート、記述子)。別の手法は、振動変換器又は移動-感度計器(movement-sensitive meters)を使用して、痒みの客観的相関である引っ掻きを測定するものである。

【0161】

以下の実施例は、本発明を説明することを意図するものであり、これに限定することを意図しない。

【実施例】

【0162】

実験方法
In vitro電気生理学
ホールセル記録を、ヒトNav1.7チャネルを安定発現するHEK293細胞中の電位活性化チャネルによって運ばれる電流で作製した。記録は、パッチピペット(patch pipettes)を使用して行い、CsOHでpHを7.2に調節した、61mM CsF、61mM CsCl、9mM NaCl、1.8mM MgCl₂、9mM EGTA、14mMクレアチンリン酸(トリス塩)、4mM MgATP、及び0.3mM GTP(トリス塩)、9mM HEPESからなる内液で充填したとき、抵抗は2〜3.5MΩだった。電極のシャンクをパラフィルムで覆い、キャパシタンスを低減し、振動なしで最適直列抵抗補償を可能にした。シールを得て、タイロード液(155mM NaOH、3.5mM KCl、1.5mM CaCl₂、1mM MgCl₂、10mM HEPES、10mMグルコース、pHをNaOHで7.4に調節した)中の細胞と10mM TEAClでホールセル構成を確立した。ピペット液による完全な透析を確保するために、ホールセル構成が確立してから5〜10分後に記録を開始した。

【0163】

Axopatch 200増幅器を用いて室温(21〜23℃)で電流を記録し、低域Besselフィルターを用いて5kHzで濾過した。増幅器を、直列抵抗の部分的補償のために整調した(典型的には全直列抵抗4〜10MΩの70〜80%)。pClamp9.2ソフトウェアによって制御されたDigidata 1322Aデータ収集インターフェース(Axon Instruments)を使用して電流をデジタル化し、Igor Pro 4.0(Wavemetrics, Lake Oswego, OR)で記述されたプログラムを使用して分析した。電流を直線容量性電流及び漏洩電流に対して補正し、これらは、静止電位(通常-80又は-100mV)から送達され、次いで適切にスケール調整し、引き算した5mVの過分極を使用して決定された。

【0164】

ナトリウム電流は、-100mVから-20mVまでの30msecの脱分極によって誘発した。使用-頻度依存性遮断を分析するために、一連の増加速度:1分間に0.05Hz、1分間に0.33Hz、1分間に1Hz、1分間に3Hz、30秒間に5Hz、30秒間に10Hzでパルスを送達し、各一連パルス間で1分停止した。一連のパルスで使用-頻度依存性遮断を誘発した後、0.1Hz(2分)及び0.05Hz(1分)で送達されたパルスを使用して回復の経時変化を追跡した。

【0165】

動物
全ての手順は、動物実験委員会(Institutional Animal Care and Use Committees)によって承認されたものである。マウス及びラットは、実験動物ケア評価認証協会(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care)によって認可された設備の標準的環境条件(12時間の明暗サイクル、23℃、餌及び水による不断給餌)に収容した。8週齢の雄のBALB/c(ストックナンバー:001026)及びC57BL/6J(ストックナンバー000664)のマウスをJackson Laboratoryから購入し、それぞれアレルギー性気道炎症(図5)及び痛覚過敏モデル(図2A〜2D)に使用した。6週齢の雄のSprague-Dawley(ストックナンバー:400)ラット(150±25グラム)をCharles River研究室から購入し、痛覚過敏の評価に使用した(図3)。

【0166】

免疫蛍光法
採取時、後根神経節を、4%パラ-ホルムアルデヒド中に終夜固定し、PBS中で洗浄し、連続スクロース浸漬によって凍結保護した(PBS 10〜30%スクロース、終夜)。神経節をO.C.T.(Tissue-tek)中にマウントし、クライオスタットを用いて連続的に20μm冠状切片にカットした。切片を、Fisherbrand superfrost顕微鏡のスライド上に解凍マウント(thaw-mount)し、-80℃で維持した。実験日に、切片を室温で10分間解凍した。切片をPBS中で5分間洗浄し、室温で1時間遮断し(PBS、0.1% Triton X-100、5% BSA)、一次抗体、すなわちウサギ抗マウスATF3(Sigma、#HPA001562)に曝露した(終夜、4℃)。次いで切片をPBS中で3回洗浄し(5分)、二次抗体及びDAPI(1:2000、Sigma、#D9542)に曝露し(2時間、暗所)、洗浄し、Vectashield(Vector Labs)でカバースリップし、共焦点顕微鏡(Leica、LSM-710)下で観察した。

【0167】

オボアルブミン感作及び気道負荷
アレルギー性気道炎症を、オボアルブミン(OVA)系モデルで研究した。0日目及び7日目に、マウスを、1mg/mlのオボアルブミン(Sigma-Aldrich)及び5mg/mlの水酸化アルミニウム(Sigma-Aldrich, Boston, MA)を含有する溶液200μlを腹腔内注射することによって感作した。14〜17日目(10:00am)に、マウスを6% OVAエアロゾルに25分間曝露して、気道アレルギー性炎症を誘発させた。18日目(10:00am)に薬物を噴霧化し、炎症(BALF細胞含有物)/気道過敏応答性を21日目(10:00am)に評価した。

【0168】

気管支肺胞洗浄(BAL)
21日目に、ウレタン(用量)を腹腔内注射した後、マウスを麻酔し、20G滅菌カテーテルを気管中へ縦方向に挿入した。2mlのよく冷えたPBS含有プロテアーゼ阻害剤(Roche)を肺に注射し、採取し、氷上で貯蔵した。BAL液を400g遠心分離(15分、4℃)にかけ、上澄みを捨て、細胞を200μl中で再懸濁した。

【0169】

気道炎症性及び差次的細胞計数
気管支肺胞洗浄液(BALF)細胞をFACS緩衝液(PBS、2% FCS、EDTA)中で再懸濁し、Fcブロックでインキュベートした(0.5mg/ml、10分、BD Biosciences)。次いで細胞をモノクローナル抗体(FITC抗マウスCD45、BD Biosciences、カタログ番号553079、PE抗マウスSyglec-F、BD Biosciences、カタログ番号552126、APC抗マウスGR-1、e Biosciences、カタログ番号17-593-81、PE-Cy7抗マウスCD3e、カタログ番号25-0031-81、PerCP抗マウスF4/80、BioLegend、カタログ番号123125、PE抗マウス、BD Bioscience、カタログ番号552126、45分、氷上4℃)で染色した後、FACS Canto II(BD Biosciences)でデータを取得した。白血球分画計数は、通常の白血球抗原CD45(BD Pharmigen、カタログ番号553079)を発現する細胞のフローサイトメトリー分析中に決定した。特定の細胞集団を以下:F4/80Hi-Ly6gNegとしてのマクロファージ、F4/80Int-Ly6gLo-SiglecFHiとしての好酸球、F4/80Lo-Ly6gHi-SiglecFNegとしての好中球、及びF4/80Neg-Ly6gNeg-CD3Posとしてのリンパ球のように同定した。総BAL細胞計数は、標準の血球計を使用して実施し、絶対細胞数を、総BAL細胞数とFACSで決定した細胞亜種のパーセンテージを乗じて計算した。

【0170】

温度過敏症
各動物の右後足の底面に10μl(マウス)又は50μl(ラット)容積の完全フロインドアジュバント(CFA)1:1エマルション中の化合物を注射した。Ugo Basile Plantar Test(Hargreaves)装置を使用して足底面に適用された放射熱の集束ビームから後足を引っ込めるまでの待ち時間を測定することによって温熱性痛覚過敏を調べた。3日間連続、8週齢のSprague Dawley雄ラットをHargreaves装置に60分間慣らす。4日目、それらの温熱性侵害受容閾値を評価した。1時間後、ラットをイソフルラン(3%誘導、2%維持)下で軽度麻酔し、試験化合物の存在下又は不在下でCFAの足底内注射を受けさせた。処置の衝撃を、処置の1時間前並びに1、3、6及び24時間後に分析した。開始した足を5分間隔で交代して各足に対して実証試験を3回実施した。陽性疼痛反応は、突然に足を引っ込めること、たじろぐこと、及び/又は足をなめることで定義した。各読み取りで、中断時間が32秒になるように装置を設定した。

【0171】

[実施例1]
塩化1-(1-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)-1-メチルピロリジニウム(化合物1)の合成

【0172】

【化14】

工程1: 2の調製

【0173】

【化15】

30mL SOCl₂中1(5.0g、32.86mmol、1.0当量)の溶液を8℃で2時間還流した。競合後、反応混合物を直接、真空中で濃縮し、さらなる精製をせずに残留物を得た(7.8g、y=120%)。
工程2: 3の調製

【0174】

【化16】

DCM(10mL)及びTEA(4.6g、45.8mmol、1.2当量)中2,6-ジメチルアニリン(4.6g、38.2mmol、1.0当量)の溶液に、氷浴中で、DCM(20mL)中2(7.8g、45.8mmol、1.2当量)の溶液をゆっくり添加した。次いで反応混合物を2時間かけて室温まで温めた。競合後、2N HClで反応混合物をpH=5〜6に調節し、EAで抽出(150mL×2)した。合わせた有機相をブライン(100mL)で洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、真空中で濃縮して残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、灰色の固体の所望の生成物(4.8g、収率50%)を得た。
工程3: 4の調製

【0175】

【化17】

トルエン(15mL、c=0.5)中3(2g、7.68mmol、1.0当量)の溶液に、ピロリジン(1.17g、16.5mmol、2.0当量)を添加した。反応混合物を110℃で30分間還流した。競合後、反応混合物を真空中で直接濃縮して残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、黄色の油状物の所望の生成物(1.8g、95%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0176】

【化18】

DCM(20mL、c=0.1)中4(500mg、2.03mmol、1.0当量)の溶液に、Mel(721mg、5.08mmol、2.5当量)を室温で終夜かけて添加した。反応混合物を真空中で直接濃縮して残留物を得た。残留物をEAで洗浄して、所望の生成物(233mg、30%収率)を得た。
工程5: 化合物1の調製

【0177】

【化19】

H₂O(1.6mL、c=0.37)中5(233mg、0.602mmole、1.0当量)の溶液に、AgCl(172mg、2.0当量)を添加した。反応混合物を60℃で終夜加熱した。競合後、反応混合物を濾過した。濾液を凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(62mg、35%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO): δ7.18〜7.09 (m, 3H), 4.31 (q, J=7.2 Hz, 1H), 3.65〜3.57 (m, 4H), 3.16 (s, 3H), 2.15〜2.25 (m, 4H), 2.08 (s, 6H), 1.74 (d, J=6.9 Hz,3H) ppm. HPLC純度: 220nmで100%; 質量: m/z = 261.5 (M+1, ESI+).

【0178】

[実施例2]
塩化1-(1-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-2-メチル-1-オキソプロパン-2-イル)-1-メチルピロリジニウム(化合物2)の合成

【0179】

【化20】

工程1: 2の調製

【0180】

【化21】

60mlのSOCl₂中1(10.0g、59.88mmol、1.0当量)の溶液を80℃で2時間還流した。競合後、反応混合物を真空中で直接濃縮し、さらなる精製をせずに残留物(15.0g、y=132%)を得た。
工程2: 3の調製

【0181】

【化22】

DCM(50ml)及びTEA(8.18g、80.86mmol、1.2eq)中2,6-ジメチルアニリン(8.16g、67.38mmol、1.0当量)の溶液に、DCM(50mL)中2(15.0g、80.86mmol、1.2eq)を氷浴でゆっくり添加した。次いで、反応混合物を2時間、室温まで温めた。競合後、反応混合物を2N HClでpH=5〜6に調節して、EA(200mL×2)で抽出した。合わせた有機相をブライン(150mL)で洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮して残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、固体の所望の生成物(14.8g、82%収率)を得た。

【0182】

工程3: 4の調製

【化23】

THF(32mL、c=0.2)中3(1.7g、6.32mmol、1.0当量)の溶液に、THF(32mL、c=0.2)中ピロリジン(539mg、7.58mmol、1.2当量)及びNaH(303mg、12.64mmol、2.0当量)を添加した。反応混合物を室温で30分間攪拌した。競合後、30mLのH₂Oをゆっくり添加し、EA(50mL×2)で抽出した。合わせた有機相をブライン(30mL)で洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、真空中で濃縮して残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色の固体の所望の生成物(680g、68%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0183】

【化24】

MeCN(5.7mL、c=0.1)中4(150mg、0.577mmol、1.0当量)の溶液に、Mel(245mg、1.73mmol、3.0当量)を添加した。反応混合物を終夜還流した。競合後、反応混合物を真空中で直接濃縮して残留物を得た。残留物をEAで洗浄し、白色の固体の所望の生成物(170mg、73%収率)を得た。
工程5: 6の調製

【0184】

【化25】

H₂O(1.4mL、c=0.3)中5(170mg、0.423mmol、1.0当量)の溶液に、AgCl(121mg、2.0当量)を添加した。反応混合物を60℃で終夜加熱した。競合後、反応混合物を濾過した。濾液を凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(82mg、63%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO): δ7.15〜7.09 (m, 3H), 3.95〜3.85 (m, 2H), 3.53〜3.49 (m, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.11〜2.10 (m, 4H), 2.08 (s, 6H), 1.85 (s, 6H) ppm. HPLC純度: 220nmで95.6%; 質量: m/z = 261.5 (M+1, ESI+).

【0185】

[実施例3]
塩化1-(1-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-1-オキソブタン-2-イル)-1-エチルピロリジニウム(化合物3)の合成

【0186】

【化26】

工程1: 2の調製

【0187】

【化27】

60mLのSOCl₂中1(10.0g、60.2mmol、1.0当量)の溶液を80℃で2時間還流した。競合後、反応混合物を真空中で直接濃縮して、さらなる精製をせずに、残留物(15.0g、y=132%)を得た。
工程2: 3の調製

【0188】

【化28】

DCM(200mL)及びTEA(8.25g、81.56mmol、1.2当量)中2,6-ジメチルアニリン(8.2g、67.97mmol、1.0当量)の溶液に、DCM(50mL)中2(15.0g、80.86mmol、1.2当量)を氷浴でゆっくり添加した。次いで、反応混合物を2時間、室温まで温めた。競合後、反応混合物を2N HClでpH=5〜6に調節して、EA(200mL×2)で抽出した。合わせた有機相をブライン(150mL)で洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、真空中で濃縮して残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、固体の所望の生成物(3.0g、17%収率)を得た。
工程3: 4の調製

【0189】

【化29】

トルエン(22mL、c=0.5)中3(3.0g、11.15mmol、1.0当量)の溶液に、ピロリジン(1.66g、23.42mmol、1.2当量)を添加した。反応混合物を110℃で3時間還流した。競合後、反応混合物を真空中で直接濃縮して残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色の固体の所望の生成物(1.2g、41%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0190】

【化30】

4(500mg、1.921mmol、1.0当量)のMeCN(20mL、c=0.1)溶液に、Etl(749mg、4.802mmol、2.5当量)を添加した。反応混合物を終夜還流した。競合後、反応混合物を真空中で直接濃縮して残留物を得た。残留物をEAで洗浄して、白色の固体の所望の生成物(423mg、50%収率)を得た。
工程5: 6の調製

【0191】

【化31】

5(423mg、1.016mmol、1.0当量)のH₂O(4mL、c=0.3)溶液に、AgCl(291mg、2.033mmol、2.0当量)を添加した。反応混合物を60℃で終夜加熱した。競合後、反応混合物を濾過した。濾液を凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(83mg、63%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO): δ10.30(br,1H), 7.26〜7.19 (m, 3H), 4.23(q,J=6.15,1H), 3.95〜3.80 (d, J=3.12, 2H), 3.70〜3.55 (m, 4H), 3.22 (s, 6H), 2.15〜2.11 (m, 6H), 1.47〜1.44(d,J=4.23, 3H), 1.22〜1.19 (d, J=4.40, 3H) ppm. HPLC純度: 220nmで98%; 質量: m/z = 289.5 (M+1, ESI+).

【0192】

[実施例4]
塩化1-(1-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)-1-メチルピペリジニウム(化合物4)の合成

【0193】

【化32】

工程1: 3の調製

【0194】

【化33】

1(0.5g、1.95mmol、1.0当量)のトルエン(10ml、c=0.2)溶液に、2(0.35g、4.1mmol、2.1)を添加した。添加後、混合物を加熱還流した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、固体の所望の生成物(0.4g、収率=78.9%)を得た。
工程2: 4の調製

【0195】

【化34】

3(162mg、0.62mmol、1.0当量)のMeCN(6mL、c=0.1)溶液に、Mel(220mg、2.5当量)を添加した。添加後、反応混合物を5時間加熱還流した。完了後、反応溶液を減圧下で濃縮して、固体の生成物(184mg、収率=73.8%、HPLC:93%)を得た。
工程3: 5の調製

【0196】

【化35】

4(122.7mg、0.3mmole、1.0当量)の脱イオン水(2ml、c=0.15)溶液に、AgCl(86mg、2.0eq)を添加した。添加後、反応混合物を60℃で終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を使用して凍結乾燥し、固体の生成物(89.6mg、収率=96.1%)を得た。HPLC純度: 220nmで95%; 質量: M+: M-35.5=275.5; 2M-35.5=585.8; M-: M=310.5; M+35.5=345.5. ¹H NMR (500 MHz, D₂O): δ 7.1400〜7.1981 (m; 3H), 4.4345 (s; 1H), 3.6625 (s; 1H), 3.5410 (s; 1H), 3.4610 (s; 2H), 3.2348 (s; 3H), 2.1289 (s; 6H), 1.9253 (d, J=28.3 Hz, 4H), 1.7403 (t, 4H), 1.6225 (s; 1H). ppm.

【0197】

[実施例5]
塩化1-(1-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-2-メチル-1-オキソプロパン-2-イル)-1-メチルピペリジニウム(化合物5)の合成

【0198】

【化36】

工程1: 2の調製

【0199】

【化37】

1(10.0g、59.88mmol)の混合物に、SOCl₂(60ml、c=1.0)を添加した。混合物を加熱還流した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮して、黄色の油状物の所望の生成物(14.8g、収率=128.8%)を得た。
工程2: 4の調製

【0200】

【化38】

DCM(100ml、c=0.5)中3(6.0g、50mmol、1.0eq)の混合物に、TEA(10.1g、100mmol、2当量)を添加した。次いで、2(14.3g、77.1mmol、1.5当量)のDCM(50ml、c=1)溶液を添加した。反応混合物を室温で終夜攪拌した。次いで水(60ml)混合物を添加して層状にした。有機相をブラインで洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、混成試料をn-ヘキサンで洗浄した。固体を合わせ、生成物(5.7g、収率=42.2%、HPLC:99.5%)を得た。
工程3: 6の調製

【0201】

【化39】

MeCN(98ml、c=0.2)中4(5.3g、19.6mmol、1.0当量)及びK₂CO₃(2.7g、19.6mmol、1.0当量)の溶液に、5(2.5g、29.4mmol、1.5当量)を添加した。添加後、混合物を加熱還流した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、固体の所望の生成物(1.7g、収率=31.6%、HPLC:96.4%)を得た。
工程4: 7の調製

【0202】

【化40】

6(1.6g、5.8mmol、1.0当量)及びMeCN(30mL、c=0.2)を密封管に添加した。この溶液に、Mel(5mL、14.0当量)を添加した。添加後、反応混合物を90℃で32時間攪拌した。完了後、反応溶液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、EA(5ml×2)で洗浄し、固体の生成物(557mg、収率=23%、HPLC:99.6%)を得た。
工程4: 8の調製

【0203】

【化41】

脱イオン水(4ml、c=0.12)中7(200mg、0.48mmol、1.0当量)の溶液に、AgCl(137.8mg、2.0当量)を添加した。添加後、反応混合物を室温で6時間攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を使用して凍結乾燥し、固体の生成物(152mg、収率=97%)を得た。HPLC純度: 220nmで100%; 質量: M+:M-35.5=289.5;2M-35.5=613.8; ¹H NMR (500 MHz, D₂O): δ 7.0842〜7.1578 (m, 3H), 3.5323 (d, J=7.85 Hz, 4H), 3.1250 (s, 3H), 2.0620 (s, 6H), 1.9314 (m, 2H), 1.7323〜1.8119 (m, 9H), 1.3277〜1.3543 (m, 2H)ppm.

【0204】

[実施例6]
1-(1-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-1-オキソブタン-2-イル)-1-エチルピペリジニウム(化合物6)の合成

【0205】

【化42】

工程1: 2の調製

【0206】

【化43】

1(10.0g、59.88mmol)の混合物に、SOCl₂(60ml、c=1.0)を添加した。混合物を加熱還流した。完了後、反応混合物を減圧下で濃縮して、黄色の油状物の所望の生成物(9.2g、収率=82.8%)を得た。
工程2: 4の調製

【0207】

【化44】

DCM(100ml、c=0.5)中3(5.0g、41.3mmole、1.0当量)の混合物に、ピリジン(4.9g、61.95mmole、1.5当量)を添加した。次いで2(9.2g、49.59mmol、1.2当量)のDCM(40ml、c=1.2)溶液を添加した。反応混合物を室温で終夜攪拌した。次いで水(50ml)溶液を添加して層状にした。有機相をブラインで洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をn-ヘキサンで洗浄した。固体を合わせて、生成物(7.8g、収率=70%、HPLC:98.6%)を得た。
工程3: 6の調製

【0208】

【化45】

THF(37mL、c=0.4)中NaH(0.35g、14.8mmol、2.0当量)の溶液に、5(0.75g、8.8mmol、1.2当量)を添加した。次いで4(2.0g、7.4mmol、1.0当量)のTHF(20mL、c=0.37)溶液を添加した。添加後、混合物を室温で終夜攪拌した。完了後、水(20mL)及びEA(50mL)の懸濁液を添加して層状にした。有機相を水(50mL×2)で洗浄した。次いで有機相のpHを2に調節し、EA(40mL×2)で抽出した。水相のpHを9に調節し、次いでEA(40×2)で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物をn-ヘキサンで洗浄して、固体の所望の生成物(0.48g、収率=24%、HPLC:99.3%)を得た。
工程4: 7の調製

【0209】

【化46】

6(0.48g、1.75mmol、1.0当量)及びMeCN(9mL、c=0.2)を密封管に添加した。この溶液に、Etl(2mL、14.0当量)を添加した。添加後、反応混合物を90℃で10時間攪拌した。完了後、反応溶液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、固体の生成物(470mg、収率=62.6%、HPLC:99%)を得た。
工程4: 8の調製

【0210】

【化47】

脱イオン水(3ml、c=0.15)7(200mg、0.465mmol、1.0当量)の溶液に、AgCl(133mg、0.93mmol、2.0当量)を添加した。添加後、反応混合物を室温で終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を使用して凍結乾燥し、固体の生成物(141mg、収率=89.8%)を得た。HPLC純度: 220nmで; 質量: M+1=339.4. ¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 7.117 (m, 3H), 4.056 (dd, J=8.1 Hz, 1H), 3.712〜3.808 (m, 1H), 3.656 (m, J=13.2 Hz, 2H), 3.510〜3.582 (m, 1H), 3.344 (m, 2H), 2.117 (s, 6H), 1.984〜2.070 (m, 2H), 1.818 (m, 4H), 1.660 (m, 1H), 1.455 (m, 1H), 1.278 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.107 (t, 3H) ppm.

【0211】

[実施例7]
塩化2-(2,6-ジメチルフェニルカルバモイル)-1,1-ジメチルピロリジニウム(化合物13)の合成

【0212】

【化48】

工程1: 2の調製

【0213】

【化49】

DCM(189mL、c=0.46)中1(10g、86.9mmol、1当量)の混合物に、TEA(35.2g、347.6mmol、4eq)を添加し、次いで(Boc)₂O(12.57g、99.03mmol、1.2当量)を0℃で滴下した。添加後、反応混合物を室温までゆっくり温かめ、3時間攪拌した。反応混合物を真空中で直接濃縮し、さらなる精製をせずに白色の油状物の残留物(18g、98.36%収率)を得た。
工程2: 3の調製

【0214】

【化50】

THF(106.5ml、c=0.4)中2(9g、42.6mmol、1当量)の混合物に、ClCO₂Et(5g、46.86mmol、1.1当量)を添加し、次いで0℃で2,6-ジメチルアニリン(5.16g、42.6mmol、1当量)を滴下した。反応混合物を60℃で攪拌し、終夜還流した。完了後、反応混合物を室温に戻した。次いで混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、純粋な生成物(10.4g、74%収率)を得た。
工程3: 4の調製

【0215】

【化51】

MeOH(53mL)中3(3.4g、10.68mmol、1当量)の溶液に、4N HCl/MeOH(5.34mL、21.36mmol、2当量)を0℃で添加した。添加後、反応混合物を室温で3時間攪拌した。完了後、反応混合物を真空中で濃縮した。油をEAで洗浄し、次いで濾過して、白色の固体(2.02g、74.6%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0216】

【化52】

MeCN(6.35mL、c=0.37)中4(600mg、2.35mmol、1当量)の溶液に、K₂CO₃(0.83g、5.99mmol、2.55当量)及びMel(333mg、235mol、1当量)を添加し、次いで室温で終夜攪拌した。混合物を真空中で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって予め精製して、純粋な生成物(262mg、43.16%収率)を得た。
工程5: 6の調製

【0217】

【化53】

MeCN(4.3mL、c=0.1)中5(91mg、0.43mmol、1当量)の溶液に、Mel(152mg、1.075mmol、2.5当量)を添加した。添加後、反応混合物を室温で2時間攪拌した。完了後、反応混合物を真空中で濃縮して、白色の固体(140mg、87.5%収率)を得た。
工程6: 7の調製

【0218】

【化54】

水(0.78mL、c=0.37)中6(140mg、0.288mmol、1当量)の溶液に、AgCl(81mg、0.576mmol、2当量)を添加した。添加後、反応混合物を60℃で終夜攪拌した。完了後、反応混合物を濾過し、0℃で凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(92mg、80%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 7.155〜7.098 (m, 3H), 4.500〜4.446 (t, J=8.1 Hz, 1H), 3.807〜3.768 (m, 1H), 3.621〜3.582 (m, 1H), 3.265(s, 3H), 3.182(s,3H), 2.799〜5.512(m, 3H), 2.465〜2.437(m, 1H), 2.294〜2.242(m, 1H), 2.094 (s, 6H)ppm. HPLC純度: 220nmで99.07%; 質量: m/z = 247.5(M, ESI+).

【0219】

[実施例8]
塩化2-(2,6-ジメチルフェニルカルバモイル)-1,1-ジエチルピロリジニウム(化合物14)の合成

【0220】

【化55】

工程1: 2の調製

【0221】

【化56】

DCM(189mL、c=0.46)中1(10g、86.9mmol、1当量)の混合物に、TEA(35.2g、347.6mmol、4当量)を添加し、次いで(Boc)₂O(12.57g、99.03mmol、1.2当量)を0℃で滴下した。添加後、反応混合物を室温までゆっくり温め、3時間攪拌した。反応混合物を真空中で直接濃縮して、さらなる精製をせずに白色の油状物の残留物(18g、98.36%収率)を得た。
工程2: 3の調製

【0222】

【化57】

THF(106.5ml、c=0.4)中2(9g、42.6mmol、1当量)の混合物に、ClCO₂Et(5g、46.86mmol、1.1当量)を添加し、次いで2,6-ジメチルアニリン(5.16g、42.6mmol、1当量)を0℃で滴下した。反応混合物を60℃で攪拌し、終夜還流した。完了後、反応混合物を室温に戻した。次いで、混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、純粋な生成物(10.4g、74%収率)を得た。
工程3: 4の調製

【0223】

【化58】

MeOH(53mL)中3(3.4g、10.68mmol、1当量)の溶液に、4N HCl/MeOH(5.34mL、21.36mmol、2当量)を0℃で添加した。添加後、反応混合物を室温で3時間攪拌した。完了後、反応混合物を真空中で濃縮した。油をEAで洗浄し、次いで濾過して、白色の固体2.02g(74.6%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0224】

【化59】

MeCN(16mL、c=0.37)中4(1.5g、5.9mmol、1当量)の溶液に、K₂CO₃(2g、5.99mmol、2.55eq)及びEtl(1.84g、11.8mmol、2eq)を添加し、次いで60℃で終夜攪拌した。2日目に、混合物を真空中で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製して、純粋な生成物(262mg、43.16%収率)を得た。
工程5: 6の調製

【0225】

【化60】

水(0.78mL、c=0.37)中6(230mg、0.57mmol、1eq)の溶液に、AgCl(163mg、1.14mmol、2eq)を添加した。添加後、反応混合物を60℃で終夜攪拌した。完了後、反応混合物を濾過し、0℃で凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(190mg、80%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 7.162〜7.090 (m, 3H), 4.529〜4.511 (m, 1H), 3.710〜3.358 (m, 6H), 2.682〜2.534 (m, 1H), 2.382〜2.183(m, 3H), 2.089 (s, 6H), 1.361〜1.273(m, 6H)ppm. HPLC純度: 220nmで96.5%; 質量: m/z = 275.5(M, ESI+).

【0226】

[実施例9]
塩化2-(2,6-ジメチルフェニルカルバモイル)-1,1-ジエチルピぺリジニウム(化合物15)の合成

【0227】

【化61】

工程1: 2の調製

【0228】

【化62】

THF(109ml、c=0.4)中1(10g、43.6mmol、1当量)の溶液に、ClCO₂Et(5.2g、47.9mmol、1.1当量)を添加し、次いで0℃で2,6-ジメチルアニリン(5.8g、47.9mmol、1当量)を滴下した。反応混合物を60℃で攪拌し、終夜還流した。完了後、反応混合物を室温に戻した。次いで混合物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、純粋な生成物(7.71g、53%収率)を得た。
工程2 3の調製

【0229】

【化63】

MeOH(116mL、c=0.2)中2(7.71g、23.2mmol、1当量)の溶液に、4N HCl/MeOH(11.6mL、46.4mmol、2当量)を0℃で添加した。添加後、反応混合物を室温で3時間攪拌した。完了後、反応混合物を真空中で濃縮した。油をEAで洗浄し、次いで濾過して、5.1gの白色の固体(81.86%収率)を得た。
工程3: 4の調製

【0230】

【化64】

MeCN(25mL、c=0.37)中3(2.5g、9.3mmol、1当量)の溶液に、K₂CO₃(3.3g、23.7mmol、2.55当量)及びEtI(1.45g、9.3mmol、1当量)を添加し、次いで室温で終夜攪拌した。混合物を真空中で濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィーによって予め精製し、純粋な生成物(2g、80%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0231】

【化65】

MeCN(25mL、c=0.37)中4(0.5g、1.92mmol、1当量)の溶液に、EtI(749mg、4.8mmol、2.5当量)を添加し、次いで60℃で終夜攪拌した。混合物を真空中で濃縮した。粗生成物をPEで洗浄して、純粋な生成物(200mg、38.75%収率)を得た。
工程5: 6の調製

【0232】

【化66】

水(1.4mL、c=0.37)中6(217mg、0.52mmol、1当量)の溶液に、AgCl(149mg、1.04mmol、2当量)を添加した。添加後、反応混合物を60℃で終夜攪拌した。完了後、反応混合物を濾過し、0℃で凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(110mg、65%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 7.127〜7.107 (m, 3H), 4.292 (t, 1H), 3.896〜3.765 (m, 1H),3.733〜3.412 (m, 4H), 3.365〜3.254(d, 1H), 2.457〜2.310 (m, 1H), 2.283〜2.231(m, 1H), 2.083(s, 6H), 1.875〜1.526(m, 4H), 1.290(t, J=4.5, J=3, 6H) ppm. HPLC純度: 220nmで96.4%; 質量: m/z = 289.5(M, ESI+).

【0233】

[実施例10]
塩化2-(4-フルオロ-2,6-ジメチルフェニルカルバモイル)-1,1-ジメチルピぺリジニウム(化合物16)の合成

【0234】

【化67】

工程1: 5-フルオロ-1,3-ジメチル-2-ニトロベンゼンの調製

【0235】

【化68】

1(6g、48.3mmol、1eq)を-10℃まで冷却し、それに硝酸(9g、143.78mmol、3eq)を滴下で20分間添加した。混合物を-15℃で1時間攪拌し、次いで注意深く室温にさせ、攪拌しながら3時間維持した。混合物を氷に注ぎ入れ、黄色の沈殿物を得、濾過し、フィルターケーキをDCMで溶解した。有機相をブラインで洗浄し、Na₂SO₄上で乾燥し、濃縮して白色粉末の所望の生成物2(6.8g、83%収率)を得た。
工程2: 4-フルオロ-2,6-ジメチルアニリンの調製

【0236】

【化69】

MeOH(236mL)中2(16g、94.65mmol、1eq)の溶液に、Pd/C(1.6g、10%w/w)及び数滴の濃HClをH₂下で添加した。混合物を室温で5時間攪拌し、次いで濾過し、濾液を濃縮した。残留物を氷に注ぎ入れ、2N NaOHでpHを10に調節し、EAで抽出した。有機相をブライン(150mL)で洗浄し、無水Na₂SO₄で脱水し、濾過した。ロータリーエバポレーションした後の残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物3(5g、38.4%収率)を得た。
工程3: N-(4-フルオロ-2,6-ジメチルフェニル)-1-メチルピペリジン-2-カルボキサミドの調製

【0237】

【化70】

DCM(46mL、c=0.25)中1-メチルピペリジン-2-カルボン酸塩酸塩(2.27g、12.65mmol、1.1eq)の溶液に、窒素下でTEA(5.12g、50.6mmol、4.4eq)を添加し、室温で30分間攪拌した。混合物を氷浴で0℃まで冷却し、次いでClCO₂Etを20分の間、でゆっくり滴下添加した。上記の混合物に、DCM(2mL)中3(1.6g、11.5mmol、1.0eq)を滴下で添加し、終夜攪拌した。ロータリーエバポレーションした後の混合物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物4(0.5g、16%収率)を得た。
工程4:ヨウ化2-(4-フルオロ-2,6-ジメチルフェニルカルバモイル)-1,1-ジメチルピペリジニウムの調製

【0238】

【化71】

MeCN(35.8mL)中4(0.5g、1.89mmol、1.0eq)の溶液に、Mel(1.025g、7.225mmol、2.5eq)を添加し、90℃で75mLの密封管中で2時間攪拌した。完了後、溶媒を除去し、所望の生成物5(760g、99%収率)を得た。
工程5:塩化2-(4-フルオロ-2,6-ジメチルフェニルカルバモイル)-1,1-ジメチルピペリジニウムの調製

【0239】

【化72】

脱イオン水(2.5mL)中5(0.3g、0.739mmol、1.0eq)の溶液に、AgCl(212mg、1.48mmol、2.0eq)を添加し、60℃で30分間攪拌した。完了後、反応物を濾過し、濾液を凍結乾燥して6(160g、73%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, D2O-d₆):δ6.90 (d, J = 9.6Hz, 2H), 4.21〜4.11 (m, 1H), 3.69〜3.60 (m, 1H), 3.48〜3.35 (m, 1H), 3.27 (d, J = 11.1Hz, 6H), 2.30〜2.18 (m, 2H), 2.17〜2.00 (m, 6H), 1.95〜1.55 (m, 5H) ppm.

【0240】

[実施例11]
2-(4-アミノフェニルアミノ)-N,N,N-トリエチル-2-オキソエタンアミニウム(化合物22)の合成

【0241】

【化73】

工程1: 3の調製

【0242】

【化74】

2(240mL、7.2eq)の混合物に、1(30g、1.0eq)をバッチで添加した。混合物を30℃で終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、フィルターケーキをEA(30mL×2)で洗浄し、150mLのEAをフィルターケーキに添加して30℃で30分間攪拌した。次いで、懸濁液を濾過し、フィルターケーキをEA(30mL×2)で洗浄し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物を90mLのアセトニトリル/アセトン(1:2)に添加し、室温で終夜攪拌した。懸濁液を濾過し、フィルターケーキを減圧下で乾燥して生成物(9.7g、収率=23.3%)を得た。
工程2: 5の調製

【0243】

【化75】

THF(19ml、c=0.4)中3(1.0g、7.6mmol、1.0eq)及びTEA(1.5g、15.2mmol、2.0eq)の混合物に、ClCO₂Et(0.9g、8.36mmol、1.1eq)を添加した。次いで4(1.15g、8.36mmol、1.1eq)溶液を添加した。反応混合物を終夜還流させ、攪拌した。次いで懸濁液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をEAで溶解し、酸塩基で洗浄して生成物(0.35g、収率=20%)を得た。¹HNMR (300MHz DMSO): δ 10.2268 (s, 1H), 8.2159 (d, J=9.18 Hz, 2H), 7.9377 (d, J=9.15 Hz, 2H), 3.2379 (s, 2H), 2.5458〜2.6470 (dd, 4H), 1.0139 (t, 6H).
工程3: 6の調製

【0244】

【化76】

MeCN(12ml、c=0.1)中5(300mg、1.19mmol、1.0eq)の混合物に、Etl(651.5mg、4.18mmol、3.5eq)を添加した。反応混合物を終夜加熱還流した。完了後、反応溶液を減圧下で濃縮して生成物(200mg、収率=41%、HPLC:98%)を得た。
工程4: 7の調製

【0245】

【化77】

脱イオン水(4mL、c=0.12)中5(200mg、0.49mmol、1.0eq)の溶液に、AgCl(140.8mg、0.98mmol、2.0eq)を添加した。次いで溶液を60℃まで加熱して終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を次の工程のために使用した。
工程5: 8の調製

【0246】

【化78】

工程3の濾液に、Pd/C(30mg、m/m=0.2)及び2滴の2N HClを添加した。溶液をH₂で置き換えた。次いで溶液を35℃で終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、凍結乾燥し、残留物をEAで洗浄して生成物(92.4mg、収率=66%)を得た。HPLC純度: 220nmで98.8%，254nmで99%; 質量:M+: M-35.5=250.5;M-:M=285.5;M+35.5=321.4. ¹H NMR (300MHz, D₂O): δ 7.4742 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.2281 (d, J=8.79 Hz, 2H), 4.1406 (s, 2H), 3.5985 (dd, J=7.2 Hz, 6H), 1.3526 (t, J=7.2 Hz, 9H). ppm.

【0247】

[実施例12]
塩化2-(4-アミノ-2,6-ジメチルフェニルアミノ)-N,N,N-トリエチル-2-オキソエタンアミニウム(化合物23)の合成

【0248】

【化79】

工程1: N-(2,6-ジメチルフェニル)-4-メチルベンゼンスルホンアミドの調製

【0249】

【化80】

ピリジン(334mL、c=0.37)中1(15g、123.8mmol、1eq)の溶液に、TsCl(28g、148.54mmol、1.2eq)を添加し、115℃で4時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却し、溶媒を除去し、2N HClでpHを6に調節し、水で洗浄し、EAで抽出し、ブラインで洗浄し、濃縮し、残留物を高温エタノールから再結晶して、白色粉末の所望の生成物2(19.8g、56%収率)を得た。
工程2: N-(2,6-ジメチル-4-ニトロフェニル)-4-メチルベンゼンスルホンアミドの調製

【0250】

【化81】

AcOH:H₂O(150ml:100ml)中2(19.8g、71.9mmol、1eq)の懸濁液に、攪拌しながら窒素下でNaNO₂を添加した。濃HNO₃(9g、194mmol、2eq)を10分間滴下添加し、110℃で5時間還流した。完了後、反応物をH₂O(150mL)で希釈し、EA(200mL)で抽出し、1N NaOHでpHを8に調節した。有機相をブライン(150mL)で洗浄し、無水Na₂SO₄で脱水した。濾液を真空中で蒸発させ、粉末の3(16g、70%収率)を得た。
工程3: 2,6-ジメチル-4-ニトロアニリンの調製

【0251】

【化82】

濃H₂SO₄(232mL、c=0.3)中3(23g、72mmol、1.0eq)の溶液を60℃で1時間攪拌しながら加熱した。完了後、反応物を氷(1000mL)に注ぎ入れ、20% NaOHでpH=8に調節し、EA(200mL)で抽出した。有機相をブライン(15mL)で洗浄し、無水Na₂SO₄で脱水し、濾過した。ロータリーエバポレーションした後の残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物4(8g、66%収率)を得た。
工程4: 2-クロロ-N-(2,6-ジメチル-4-ニトロフェニル)アセトアミドの調製

【0252】

【化83】

DCM(30mL、c=0.8)中4(4g、24mmol、1.0eq)の混合物に、ピリジン(2.28g、28.8mmol、1.2eq)、塩化2-クロロアセチル(3.25g、28.8mmol、1.2eq)を0℃で滴下添加し、室温で終夜攪拌した。完了後、反応物を濾過し、ケーキを水に入れ、2N HClでpHを4に調節し、濾過し、ケーキを乾燥して所望の生成物5(4.4g、76%収率)を得た。
工程5: 2-(ジエチルアミノ)-N-(2,6-ジメチル-4-ニトロフェニル)アセトアミドの調製

【0253】

【化84】

ジエチルアミン(46.7mL、639mmol、38.8eq)中5(4g、16.48mmol、1.0eq)の混合物を55℃で5時間加熱還流し、溶媒を除去し、水に注ぎ入れ、EA(100mL×3)で抽出した。有機相をブライン(15mL)で洗浄し、無水Na₂SO₄で脱水し、濾過した。ロータリーエバポレーションした後の残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、所望の生成物6(2.17g、47%収率)を得た。
工程6:ヨウ化2-(2,6-ジメチル-4-ニトロフェニルアミノ)-N,N,N-トリエチル-2-オキソエタンアミニウムの調製

【0254】

【化85】

MeCN(35.8mL)中6(1g、3.58mmol、1.0eq)の溶液に、Etl(1.4g、8.95mmol、2.5eq)を添加し、90℃で75mLの密封管中で3日間攪拌した。完了後、溶媒を除去して、所望の生成物7(1.48g、95%収率)を得た。
工程7:塩化2-(2,6-ジメチル-4-ニトロフェニルアミノ)-N,N,N-トリエチル-2-オキソエタンアミニウムの調製

【0255】

【化86】

脱イオン水(2mL)中7(0.5g、1.15mmol、1.0eq)の溶液に、AgCl(329mg、2.3mmol、2.0eq)を添加し、60℃で終夜攪拌した。完了後、反応物を濾過し、濾液8を得た。
工程8: N-(4-アミノ-2,6-ジメチルフェニル)-2-(ジエチルアミノ)アセトアミドの調製

【0256】

【化87】

上記の8の混合物に、Pd/C(39.5mg、10%w/w)を添加し、懸濁液を真空下で脱気し、H₂で数回パージし、室温で6時間攪拌した。完了後、反応物を濾過し、ケーキをEA(1.5mL)で洗浄し、濾過し、所望の生成物9(250mg、74%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, D₂O-d₆): δ7.05 (s, 2H), 4.22 (s, 2H), 3.53〜3.50 (m, 6H), 2.11 (s, 6H), 1.30〜1.25 (m, 9H) ppm.

【0257】

[実施例13]
塩化3-(2,6-ジメチルフェニルアミノ)-N,N,N-トリエチル-3-オキソプロパン-1-アミニウム(化合物24)の合成

【0258】

【化88】

工程1: 2の調製

【0259】

【化89】

DCM(50mL、c=1.6)中1(10g、82.52mmol、1eq)の混合物に、TEA(10.02g、99.03mmol、1.2eq)を添加し、0℃でDCM(50mL、c=1.6)中塩化3-クロロプロパノイル(12.57g、99.03mmol、1.2eq)を滴下した。添加後、反応混合物を室温までゆっくり温め、2時間攪拌した。完了後、反応溶液を1N HClでpH=3〜4に調節し、DCM(2×50mL)で抽出した。合わせた有機相を飽和NaHCO₃でpH=7〜8に調節した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、25℃で真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、白色の固体の所望の生成物(12.46g、71.3%収率、46%のN-(2,6-ジメチルフェニル)アクリルアミドを含む)を得た。
工程2: 3の調製

【0260】

【化90】

2(8g、37.79mmol、1eq)に、ジエチルアミン(107.24g、1466.29mmol、38.8eq)を添加した。反応混合物を55℃で終夜攪拌した。完了後、反応混合物を真空中で濃縮した。次いで残留物を水(150mL)で希釈し、EA(3×100mL)で抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、Na₂SO₄で脱水し、濾過し、真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、黄色の油状物の所望の生成物(5.75g、61%収率)を得た。
工程3: 4の調製

【0261】

【化91】

ACN(121Ml、c=0.1)中3(3g、12.08mmol、1eq)の溶液に、Etl(5.65g、36.24mmol、3eq)を添加した。添加後、反応混合物を85℃で終夜攪拌した。完了後、反応混合物を真空中で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、白色の固体の所望の生成物(3.6g、74%収率)を得た。
工程4: 5の調製

【0262】

【化92】

水(1.2mL、c=0.6)中4(300mg、0.74mmol、1eq)の溶液に、新鮮なAgCl(212mg、1.48mmol、2eq)を6〜7℃で添加した。添加後、反応混合物を6〜7℃で4分間攪拌した。完了後、反応混合物を濾過し、0℃で凍結乾燥して、白色の固体の所望の生成物(133mg、57%収率)を得た。¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 7.063〜7.128 (m, 3H), 3.495 (t, J=7.8 Hz, J=8.1 Hz, 2H), 3.220〜3.293 (m, 4H), 2.909 (t, J=7.8 Hz, J=8.1 Hz, 2H), 2.100(d, J=22.5 Hz, 6H), 1.212 (t, J=7.2 Hz,, 6H)ppm. HPLC純度: 220nmで99.7%.

【0263】

[実施例14]
塩酸塩化2-(4-アミノベンズアミド)-N,N,N-トリエチルエタンアミニウム(化合物26)の合成

【0264】

【化93】

工程1: 3の調製

【0265】

【化94】

THF(25mL、c=0.37)中1(1.6g、9.46mmol、1.1eq)及びTEA(1.7g、17.2mmol、2eq)の混合物に、ClCO₂Et(1.0g、9.46mmol、1.1eq)をゆっくり添加した。次いで2(1.0g、8.6mmol、1eq)を混合物に添加した。混合物を室温で5時間攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をカラムクロマトグラフィーによって精製し、NaOHで洗浄し、生成物(1.0g、収率=43.8%、HPLC:99.8%)を得た。
工程2: 4の調製

【0266】

【化95】

MeCN(7.5ml、c=0.1)中3(200mg、0.75mmol、1.0eq)の混合物に、Etl(293mg、1.88mmol、2.5eq)を添加した。反応混合物を終夜加熱還流した。完了後、反応溶液を減圧下で濃縮して、生成物(313.8mg、収率=99.3%、LCMS:100%)を得た。
工程3: 5の調製

【0267】

【化96】

脱イオン水(4mL、c=0.1)中4(195.7mg、0.46mmol、1.0eq)の溶液に、AgCl(133mg、0.93mmol、2.0eq)を添加した。次いで溶液を60℃まで加熱し、終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、濾液を次の工程のために使用した。
工程4: 6の調製

【0268】

【化97】

工程3の濾液に、MeOH(4mL)、Pd/C(15mg、m/m=0.1)、2滴の2N HClを添加した。溶液をH₂で置き換えた。次いで溶液を35℃で終夜攪拌した。完了後、懸濁液を濾過し、4N HCl/MeOH(0.5mL)を溶液に添加して30分間攪拌した。次いで溶液を凍結乾燥し、残留物をEAで洗浄し、生成物(55mg、収率=36%)を得た。HPLC純度: 220nmで95.9%; 254nmで96.7%; 質量: M+:M-35.5=264.5,M-:M+35.5=334.5;¹H NMR (300 MHz, D₂O): δ 7.8252 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.4115 (d, J=8.4 Hz, 2H), 3.7562 (t, J=6.6 Hz, 2H), 3.3613 (m, 9H), 1.2785 (t, J=7.5 Hz, 10H) ppm.

【0269】

[実施例15]
細胞内に適用されたとき、ナトリウムチャネルを阻害する上で、化合物6は、QX-314より高い有効性を有する
図1Aは、100マイクロモルのQX-314又は100マイクロモルのBW8186(化合物6)のいずれかで透析し、-100mVから-20mVの保持電位での連続30ミリ秒の脱分極で刺激した細胞の時間の関数としてのピークナトリウム電流の経時変化を示す。使用-頻度依存性遮断を誘発するために、増加速度:1分間に0.05Hz、1分間に0.33Hz、1分間に1Hz、1分間に3Hz、30秒間に5Hz、30秒間に10Hz(各連続パルスの間に1分の休止がある)によって脱分極をもたらした。連続パルスが、使用-頻度依存性遮断を誘発した後、0.1Hz(2分)及び0.05Hz(1分)で送達されたパルスを使用して回復の経時変化を追跡した。ピークナトリウム電流を、実験時間(時間軸上で目盛りごとに1分)の関数としてプロットした。

【0270】

図1Aで見ることができるように、QX-314及び化合物6は両方とも、1〜10Hzの刺激頻度で強力な使用頻度依存性遮断蓄積を示し、1分の休止間隔の間に軽度の回復があるのみである。QX-314は、3分かけてゆっくり刺激を与えた後、初期値の約20%までのナトリウム電流の使用-頻度依存性阻害をもたらし、後続して初期値の約40%まで部分的回復をした。化合物6は、初期ナトリウム電流の約3%までの、さらに完全な使用-頻度依存性遮断をもたらし、3分かけてゆっくり刺激を与える間に、初期値の約5%までごく僅か回復した。したがって、QX-314と比べて、化合物6は、さらに多い使用-頻度依存性遮断の蓄積を示し、また、刺激無しの期間又は遮断が確立してからゆっくり刺激(0.05Hz)が与えられた長時間の間の回復は驚くほど少なかった。これは、化合物6が細胞内に閉じ込められ、in vivoでより長時間の鎮痛効果をもたらすことができることを示す。

【0271】

図1Bは、化合物6が、細胞内に適用されたとき(ホールセル記録中、記録ピペット内に存在し、細胞が透析された)、細胞外に適用されたときよりさらにより効果的であることを示す。これは、QX-314と同様に、化合物6が、痛み及び痒みを媒介するニューロン中に選択的に存在する活性化TRPV1、TRPA1、又は他の大孔チャネルを通ってニューロンに入ることがない限り、ニューロン活動に与える効果は弱いものでしかないという考えを支持する。

【0272】

[実施例16]
足の切り傷から誘発された温熱性痛覚過敏を遮断する上で、化合物21は、QX-314と同等に有効だった
QX-314と比較したN-エチルエチドカイン(「NEE」、化合物２１)の効果を、温熱性痛覚過敏のマウス及びラットモデルで試験した。マウスにおけるCFAの足底内注射によって誘発される炎症関連痛覚過敏は、化合物21(NEE)又はQX-314(図2A〜2D)により好転する。ラット(図3A)では、反対側(未処置)の足と、生理食塩水、QX-314(0.5%)又はN-エチルエチドカイン(化合物21)(0.5%)の急性足底内注射(50μl)を受けた後足との間で観察された温熱性侵害受容閾値に差はなかった。一週間後、ラットの左側後足に外科的切開を施した。1時間後、ラットは、化合物21又はQX-314の急性足底内注射を、外科創傷に直接受けた。ラットの未処置の反対側の足と比べたとき、生理食塩水を受けた動物は、処置後1及び3時間で有意な温熱性痛覚過敏を示した(図3B)。この効果は、QX-314又は化合物21で処置した動物にはなく、温熱性痛覚過敏の状態における痛覚感受性を減少する上で化合物21はQX-314と同等に効果的であることを示唆する。

【0273】

[実施例17]
化合物3、6、及び21は、単独で注射されたとき、温痛覚応答待ち時間に影響を与える。
いくつかの文献中のデータは、QX-314が、神経周囲に注射されると、処置後8週で神経毒性を誘発することができることを示唆している。このような毒性がNEE(化合物21)で生じるかを評価するために、DRG抽出の8週前に、マウスにCFA+NEE(1%)の組み合わせを注射した。これらのマウスから抽出されたDRGを、損傷したニューロンで特異的に増加する転写因子ATF3用に染色した。CFA+NEE(1%)で処置したマウスにおいて、ATF3発現は観察されなかった(図4B及び図4C)。染色の信憑性を確実にするために、坐骨神経損傷を経たATF3-GFPレポーターマウス由来のDRGスライスを並行して標識化し、ATF3抗体の共局在化(ダークシェーディング)が、ATF3レポーター染色(ライトシェーディング)と共に観察された(図4A)。

【0274】

QX-314は、痛覚ニューロンと免疫系との間の相互作用を中断させることによって、アレルギー性気道炎症を好転することが知られている。NEE(化合物21)が同じ機構によって働くかを決定するために、NEE(化合物21)が気道炎症に与える効果を評価した。噴霧状のNEE(化合物21)(100uM、6%、20分、18日目)は、オボアルブミンによって誘発されたアレルギー性気道炎症のマウスモデルにおける、特にCD45+細胞(好酸球、マクロファージ、及びT細胞を含む)の、気管支肺胞洗浄液の免疫細胞内流入(21日目)を遮断した(図5A〜5E)。

【0275】

QX-314を上回って改善されたin vitroでのNaV1.7使用-頻度依存性遮断を示す5種の新規化合物のうち、ACS-3B(化合物3)及びN-エチルエチドカイン(化合物21)は、ナイーブ動物において、長時間持続する無痛覚なしに、CFA誘発温熱性痛覚過敏の強力な遮断を示した。さらに、N-エチルエチドカイン(化合物21)は、肺のアレルギー性気道炎症を強力に好転した。

【0276】

他の実施形態
本発明の記載した方法及びシステムの様々な修正及びバリエーションが、本発明の範囲及び趣旨から逸脱することなく当業者には明らかであろう。本発明は、特定の所望の実施形態に関連して記載したものであるが、特許請求の範囲にある本発明が、このような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解されたい。実際、本発明を実施するために記載された様式の様々な修正が、医学、免疫学、薬理学、内分泌学の分野、又は関連分野における当業者には明白であり、これらは、本発明の範囲内に属することが意図される。

【0277】

本明細書の中で挙げられた全ての刊行物は、それぞれの独立した刊行物が参照により特別にかつ個別に組み込まれるのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、以下の実施形態を包含する。
（実施形態１）
式(I)

【化98】

[式中、
R^1F及びR^1Gは一緒に、少なくとも1個の窒素原子を有する複素環を完成し、R^1A、R^1B、及びR^1Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、OR^1I、NR^1JR^1K、NR^1LC(O)R^1M、S(O)R^1N、SO₂R^1OR^1P、SO₂R^1QR^1R、SO₃R^1S、CO₂R^1T、C(O)R^1U、及びC(O)NR^1VR^1Wから選択され、R^1I、R^1J、R^1K、R^1L、R^1M、R^1N、R^1O、R^1P、R^1Q、R^1R、R^1S、R^1T、R^1U、R^1V、及びR^1Wのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
X¹は、-CR^1XR^1Y-、-NR^1ZC(O)-、-OC(O)-、-SC(O)-、-C(O)NR^1AA-、-CO₂-、及び-OC(S)-から選択され、R^1X、R^1Y、R^1Z、及びR^1AAのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
R^1D及びR^1Eのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択され、又はR^1D及びR^1Eは一緒に、3〜6員の複素環又はヘテロアルキル環を形成し、
R^1Hは、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される]
を有する第4級アミン化合物。
（実施形態２）
X¹が-NHC(O)-である、実施形態１に記載の化合物。
（実施形態３）
R^1A及びR^1Bのそれぞれが、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びNR^1JR^1Kから選択され、R^1J及びR^1Kのそれぞれが、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択されるか、又は少なくとも1つのR^1Cが存在する、実施形態１又は２に記載の化合物。
（実施形態４）
R^1Dが、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリールである、実施形態１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態５）
R^1Eが、H又は場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリールである、実施形態１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態６）
R^1Hが、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、C_3〜8環状アルキル、アリール、又はヘテロアリールである、実施形態１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態７）
表1中の化合物である、実施形態１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態８）

【化99】

である、実施形態７に記載の化合物。
（実施形態９）

【化100】

である、実施形態７に記載の化合物。
（実施形態１０）
式(II)

【化101】

[式中、
mは0又は1であり、
R^2A、R^2B、及びR^2Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、CF₃、OR^2H、NR^2IR^2J、NR^2KC(O)R^2L、S(O)R^2M、SO₂R^2NR^2O、SO₂NR^2PR^2Q、SO₃R^2R、CO₂R^2S、C(O)R^2T、及びC(O)NR^2UR^2Vから選択され、R^2H、R^2I、R^2J、R^2K、R^2L、R^2M、R^2N、R^2O、R^2P、R^2Q、R^2R、R^2S、R^2T、R^2U、及びR^2Vのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
nは、0、1、2、3、4、5、6、7、8、又は9であり、各R^2Fは、独立に、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、CF₃、OR^2H、NR^2IR^2J、NR^2KC(O)R^2L、S(O)R^2M、SO₂R^2NR^2O、SO₂NR^2PR^2Q、SO₃R^2R、CO₂R^2S、C(O)R^2T、及びC(O)NR^2UR^2Vから選択され、R^2H、R^2I、R^2J、R^2K、R^2L、R^2M、R^2N、R^2O、R^2P、R^2Q、R^2R、R^2S、R^2T、R^2U、及びR^2Vのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
R^2D及びR^2Eのそれぞれは、独立に、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される]
を有する第4級アミン化合物。
（実施形態１１）
R^2D及びR^2Eのそれぞれが、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリールである、実施形態１０に記載の化合物。
（実施形態１２）
R^2A、R^2B、及びR^2Cのそれぞれが、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、及びCF₃から選択されるか、又は少なくとも1つのR^2Cが存在するか、又は少なくとも1つのR^2Fが存在する、実施形態１０又は１１に記載の化合物。
（実施形態１３）
表2中の化合物である、実施形態１０〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態１４）

【化102】

である、実施形態１３に記載の化合物。
（実施形態１５）
一般式(III)

【化103】

[式中、
nは、0、1、2、又は3であり、
R^3A、R^3B、及びR^3Cのそれぞれは、独立に、H、ハロゲン、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、OR^3I、NR^3JR^3K、NR^3LC(O)R^3M、S(O)R^3N、SO₂R^3OR^3P、SO₂NR^3QR^3R、SO₃R^3S、CO₂R^3T、C(O)R^3U、及びC(O)NR^3VR^3Wから選択され、R^3I、R^3J、R^3K、R^3L、R^3M、R^3N、R^3O、R^3P、R^3Q、R^3R、R^3S、R^3T、R^3U、R^3V、及びR^3Wのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択され、
X³は、-NHC(O)-及び-C(O)NHから選択され、
R^3D及びR^3Eのそれぞれは、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、もしくはヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択することができるか、又はR^1D及びR^1Eは一緒に、3〜6員の複素環又はヘテロアルキル環を形成することができ、
R^3F、R^3G、及びR^3Hのそれぞれは、独立に、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、場合によりハロゲンで置換されたC_2〜4ヘテロアルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される]
を有する第4級アミン化合物。
（実施形態１６）
X³が-NHC(O)-である、実施形態１５に記載の化合物。
（実施形態１７）
Nが0又は1である、実施形態１５又は１６に記載の化合物。
（実施形態１８）
R^3A、R^3B、及びR^3Cのそれぞれが、独立に、H、C_1〜4アルキル、及びNR^3JR^3Kから選択され、R^3J及びR^3Kのそれぞれが、独立に、H、C_1〜4アルキル、C_2〜4アルケニル、C_2〜4アルキニル、及びC_2〜4ヘテロアルキルから選択される、実施形態１５〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態１９）
R^3E、R^3F、及びR^3Gのそれぞれが、独立に、場合によりハロゲンで置換されたC_1〜4アルキル、環状アルキル、アリール、又はヘテロアリール、及びC_3〜6シクロアルキルから選択される、実施形態１５〜１８のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態２０）
表3中の化合物番号21〜24のいずれか1つである、実施形態１５〜１９のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態２１）

【化104】

である、実施形態１５〜２０のいずれか一項に記載の化合物。
（実施形態２２）
実施形態１〜２１のいずれか一項に記載の第4級アミン化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む、組成物。
（実施形態２３）
経口、静脈内、筋内、直腸、皮膚、皮下、局所、経皮、舌下、経鼻、吸入、膣内、鞘内、硬膜外、又は眼内投与用に製剤化される、実施形態２１に記載の組成物。
（実施形態２４）
患者における痛み、痒み、又は神経性炎症性障害の治療方法であって、前記患者に、実施形態１〜２１のいずれか一項に記載の第4級アミン化合物を含む組成物を投与することを含み、前記化合物が、侵害受容器及び/又は掻痒受容器に存在する1つ以上の電位依存性イオンチャネルの内面に適用されたとき、前記チャネルを阻害するが、前記チャネルの外面に適用されたとき、前記チャネルを実質的に阻害せず、チャネル形成受容体が活性化されると前記受容体を通って侵害受容器又は掻痒受容器に入り、前記侵害受容器中に存在する前記1つ以上の電位依存性イオンチャネルを阻害することができる、方法。
（実施形態２５）
前記チャネル形成受容体が、一時的受容体電位イオンチャネル(TRPチャネル形成受容体)である、実施形態２４に記載の方法。
（実施形態２６）
前記TRPチャネル形成受容体が、外因性又は内因性アゴニストによって活性化される、実施形態２４又は２５に記載の方法。
（実施形態２７）
前記TRPチャネル形成受容体がTRPA1又はTRPV1である、実施形態２５又は２６に記載の方法。
（実施形態２８）
前記化合物が、前記TRPA1又はTRPV1受容体が活性化されると、前記受容体を通って侵害受容器又は掻痒受容器に入ることができる、実施形態２７に記載の方法。
（実施形態２９）
前記化合物が、電位依存性ナトリウムチャネルを阻害する、実施形態２４に記載の方法。
（実施形態３０）
前記痛みが、神経因性疼痛、炎症性疼痛、侵害受容性疼痛、感染症による痛み、及び処置痛からなる群から選択される、実施形態２４に記載の方法。
（実施形態３１）
前記神経性炎症性障害が、アレルギー性炎症、ぜんそく、慢性咳、結膜炎、鼻炎、乾癬、炎症性腸疾患、及び間質性膀胱炎、アトピー性皮膚炎からなる群から選択される、実施形態２４に記載の方法。
（実施形態３２）
前記組成物が、

【化105】

からなる群から選択される第4級アミン化合物を含む、実施形態２４に記載の方法。

【図1A】

【図1B】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図3A】

【図3B】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図5D】

【図5E】