知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】6873223
(24)【登録日】2021年4月22日
(45)【発行日】2021年5月19日
(54)【発明の名称】抗腫瘍活性を有するベンゾ−Ｎ−ヒドロキシアミド化合物
(51)【国際特許分類】
C07C 259/10 20060101AFI20210510BHJP
C07D 209/20 20060101ALI20210510BHJP
C07D 213/56 20060101ALI20210510BHJP
C07D 213/643 20060101ALI20210510BHJP
C07D 215/12 20060101ALI20210510BHJP
C07D 233/64 20060101ALI20210510BHJP
C07D 317/60 20060101ALI20210510BHJP
C07D 405/12 20060101ALI20210510BHJP
C07D 409/12 20060101ALI20210510BHJP
C07D 417/12 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/166 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/167 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/277 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/36 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/381 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/405 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/4164 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/427 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/44 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/4406 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/443 20060101ALI20210510BHJP
A61K 31/47 20060101ALI20210510BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20210510BHJP
A61P 35/04 20060101ALI20210510BHJP
【ＦＩ】
C07C259/10CSP
C07D209/20
C07D213/56
C07D213/643
C07D215/12
C07D233/64 106
C07D317/60
C07D405/12
C07D409/12
C07D417/12
A61K31/166
A61K31/167
A61K31/277
A61K31/36
A61K31/381
A61K31/405
A61K31/4164
A61K31/427
A61K31/44
A61K31/4406
A61K31/443
A61K31/47
A61P35/00
A61P35/04
【請求項の数】13
【全頁数】36
(21)【出願番号】特願2019-502731(P2019-502731)
(86)(22)【出願日】2017年7月14日
(65)【公表番号】特表2019-522674(P2019-522674A)
(43)【公表日】2019年8月15日
(86)【国際出願番号】EP2017067850
(87)【国際公開番号】WO2018015292
(87)【国際公開日】20180125
【審査請求日】2020年2月18日
(31)【優先権主張番号】102016000074606
(32)【優先日】2016年7月18日
(33)【優先権主張国】IT
(73)【特許権者】
【識別番号】591279294
【氏名又は名称】イタルファルマコ ソシエタ ペル アチオニ
【氏名又は名称原語表記】ＩＴＡＬＦＡＲＭＡＣＯ ＳＯＣＩＥＴＡ ＰＥＲ ＡＺＩＯＮＩ
(74)【代理人】
【識別番号】110001243
【氏名又は名称】特許業務法人 谷・阿部特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】アンドレア スティブナッツィ
(72)【発明者】
【氏名】ジョバンニ サンドローネ
(72)【発明者】
【氏名】ダニエラ モデーナ
(72)【発明者】
【氏名】ピエトロ サムエレ ポッツィ
(72)【発明者】
【氏名】バルバラ ヴェルガーニ
(72)【発明者】
【氏名】マリア ラッタンツィオ
(72)【発明者】
【氏名】パオロ マスカーニ
(72)【発明者】
【氏名】クリスチャン ステインクーラー
(72)【発明者】
【氏名】ジャンルカ フォッサーティ
【審査官】
神谷 昌克
(56)【参考文献】
【文献】
中国特許出願公開第１０２１８０８２６（ＣＮ，Ａ）
【文献】
中国特許出願公開第１０３１７２５４０（ＣＮ，Ａ）
【文献】
特表２０１３−５０８３４９（ＪＰ，Ａ）
【文献】
Bioorganic & Medicinal Chemistry，２０１５年，Vol.23，pp.6258-6270
(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）
Ｃ０７Ｃ
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｋ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）
（式中、
ｎは、０、１または２であり、
Ａは、Hであるか、または単環式もしくは二環式の炭素環基であり、前記炭素環基は、任意選択で部分的にまたは完全に不飽和であり、炭素原子を含み、任意選択でＮ、ＳまたはＯから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を含み、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＣＮ、−ＮＨ2、−ＮＯ2、−Ｃｌ、−ＣＯＯＨ、−ハロゲン、−ＣＦ3、−Ｎ（Ｒａ）2、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ4アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、アルコキシ、アリールオキシ基、スルホニルアミノおよび−ＣＨ2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含む群から選択され、ただし、ＡがＨの場合、Ｒ1およびＲ2は存在せず、
Ｒａは、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ3アルキル基であり、
Ｘは、ＣまたはＮであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、−ＯＭｅ、−ＯＰｈ、−ＮＯ2、−ＮＭｅ2、−ＮＨ2、−ハロゲン、−ＣＦ3、−Ｎ（Ｒａ）2、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ4アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、アルコキシ、アリールオキシ基およびスルホニルアミノを含む群から選択されるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成している）
の化合物ならびにその薬学的に許容される塩および立体異性体から選択される化合物。
【化1】
ｎは、０、１または２であり、
Ａは、Hであるか、または単環式もしくは二環式の炭素環基であり、前記炭素環基は、任意選択で部分的にまたは完全に不飽和であり、炭素原子を含み、任意選択でＮ、ＳまたはＯから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を含み、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＣＮ、−ＮＨ2、−ＮＯ2、−Ｃｌ、−ＣＯＯＨ、−ハロゲン、−ＣＦ3、−Ｎ（Ｒａ）2、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ4アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、アルコキシ、アリールオキシ基、スルホニルアミノおよび−ＣＨ2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含む群から選択され、ただし、ＡがＨの場合、Ｒ1およびＲ2は存在せず、
Ｒａは、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ3アルキル基であり、
Ｘは、ＣまたはＮであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、−ＯＭｅ、−ＯＰｈ、−ＮＯ2、−ＮＭｅ2、−ＮＨ2、−ハロゲン、−ＣＦ3、−Ｎ（Ｒａ）2、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ4アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、アルコキシ、アリールオキシ基およびスルホニルアミノを含む群から選択されるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成している）
の化合物ならびにその薬学的に許容される塩および立体異性体から選択される化合物。
【請求項2】
ｎは、０、１または２であり、
Ａは、Hであるか、または単環式もしくは二環式の炭素環基であり、前記炭素環基は、任意選択で部分的にまたは完全に不飽和であり、炭素原子を含み、任意選択でＮ、ＳまたはＯから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を含み、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＣＮ、−ＮＨ2、−ＮＯ2、−Ｃｌ、−ＣＯＯＨ、および−ＣＨ2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含む群から選択され、
Ｘは、ＣまたはＮであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、−ＯＭｅ、−ＯＰｈ、−ＮＯ2、−ＮＭｅ2、および−ＮＨ2を含む群から選択されるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成している、請求項１に記載の化合物。
Ａは、Hであるか、または単環式もしくは二環式の炭素環基であり、前記炭素環基は、任意選択で部分的にまたは完全に不飽和であり、炭素原子を含み、任意選択でＮ、ＳまたはＯから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を含み、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＣＮ、−ＮＨ2、−ＮＯ2、−Ｃｌ、−ＣＯＯＨ、および−ＣＨ2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含む群から選択され、
Ｘは、ＣまたはＮであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、−ＯＭｅ、−ＯＰｈ、−ＮＯ2、−ＮＭｅ2、および−ＮＨ2を含む群から選択されるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成している、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
ｎは１であり、ＸはＣであり、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−Ｃｌまたは−ＯＭｅであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、ＮＭｅ2であるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成している、請求項１または２に記載の化合物。
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−Ｃｌまたは−ＯＭｅであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、ＮＭｅ2であるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成している、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項4】
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド（１Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（４Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド（７Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−２−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−１−インダン−２−イル−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−４−フェニル−ブタンアミド（９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（１０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（２−ナフチル）プロパンアミド（１１Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−［２−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（１２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１３Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−キノリル）プロパンアミド（１４Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（１５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ニトロフェニル）プロパンアミド（１６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−アミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（１７Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１８Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−シアノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１９Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−２−［［（Ｅ）−３−（４−ニトロフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−フェニル−プロパンアミド（２０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンアミド（２１Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２３Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２４Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（ベンゾチオフェン−３−イル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（２５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−チアゾール−４−イル−プロパンアミド（２６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−４−フェニル−ブタンアミド（２７Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（２８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（４−シアノフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（２９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパンアミド（３０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパンアミド（３１Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ニトロフェニル）プロパンアミド（３２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（４−クロロフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３３Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３４Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３５Ｄ）；
− ４−［（２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−３−オキソ−プロピル］安息香酸（３６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（３，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３７Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（３８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（３９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４０Ｄ）；
− （Ｅ）−Ｎ−［２−［［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］メチルアミノ］−２−オキソ−エチル］−３−フェニル−プロパ−２−エンアミド（４１Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−Ｎ−［２−［［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］メチルアミノ］−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（４３Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−［４−（ジエチルアミノメチル）フェニル］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−［４−（ジエチルアミノメチル）フェニル］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４６Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（２−ナフチル）−２−［［（Ｅ）−３−（６−フェノキシ−３−ピリジル）プロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（４７Ｄ）
のうちから選択される、化合物。
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（４Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド（７Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−２−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−１−インダン−２−イル−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−４−フェニル−ブタンアミド（９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（１０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（２−ナフチル）プロパンアミド（１１Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−［２−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（１２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１３Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−キノリル）プロパンアミド（１４Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（１５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ニトロフェニル）プロパンアミド（１６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−アミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（１７Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１８Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−シアノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１９Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−２−［［（Ｅ）−３−（４−ニトロフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−フェニル−プロパンアミド（２０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンアミド（２１Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２３Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２４Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（ベンゾチオフェン−３−イル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（２５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−チアゾール−４−イル−プロパンアミド（２６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−４−フェニル−ブタンアミド（２７Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（２８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（４−シアノフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（２９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパンアミド（３０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパンアミド（３１Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ニトロフェニル）プロパンアミド（３２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（４−クロロフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３３Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３４Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３５Ｄ）；
− ４−［（２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−３−オキソ−プロピル］安息香酸（３６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（３，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３７Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（３８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（３９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４０Ｄ）；
− （Ｅ）−Ｎ−［２−［［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］メチルアミノ］−２−オキソ−エチル］−３−フェニル−プロパ−２−エンアミド（４１Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−Ｎ−［２−［［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］メチルアミノ］−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（４３Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−［４−（ジエチルアミノメチル）フェニル］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−［４−（ジエチルアミノメチル）フェニル］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４６Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（２−ナフチル）−２−［［（Ｅ）−３−（６−フェノキシ−３−ピリジル）プロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（４７Ｄ）
のうちから選択される、化合物。
【請求項5】
立体異性体型はｔｒａｎｓ型である、請求項１から４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項6】
請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物を有効成分として含む医薬。
【請求項7】
がんの予防および／またはがんの処置のための、請求項６に記載の医薬。
【請求項8】
結腸直腸がん、肺がん、脳がん、前立腺がん、もしくは婦人科がん、または血液悪性腫瘍の予防および／または処置のための、請求項７に記載の医薬。
【請求項9】
転移性疾患、再発性疾患および薬剤耐性疾患の予防および／または処置のための、請求項６に記載の医薬。
【請求項10】
治療有効量の少なくとも１つの請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物を、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤と共に含む、医薬組成物。
【請求項11】
経腸経路、非経口経路、経口経路、局所経路、または吸入経路による投与に適切な、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項12】
液剤または固形剤の形態の、請求項１０または１１に記載の医薬組成物。
【請求項13】
カプセル剤、錠剤、コーティング錠剤、散剤、顆粒剤、クリーム剤または軟膏剤の形態の、請求項１２に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、アミノ基にα，β−不飽和カルボニル部分を担持するα−アミノ酸性スキャホールドを有する、新規のベンゾ−Ｎ−ヒドロキシアミド化合物およびその医薬組成物に関する。
【0002】
分子は抗腫瘍活性を有し、特にがん幹細胞に対して活性となる。
【背景技術】
【0003】
現在のがん処置を受けた一部の患者において、部分的または完全ながんの退縮は達成できる。しかし、このような初期応答は、ほとんどの場合再発を伴い、再発性のがんはさらなる処置に対する耐性を有する。したがって、再発に対抗する治療アプローチの発見が、がんの薬を進歩させるために必須である。悪性度、薬物感受性、ならびに転移の可能性および再発の原因に関して、がん細胞は個々の患者においてさえ極めて不均質である。実際に、腫瘍誘発性および転移性が高いがん幹細胞または腫瘍始原細胞と称される超悪性がん細胞は、様々な腫瘍型のがん患者から単離されている。さらに、このような幹細胞性が高いがん細胞は、従来の化学療法および放射線に対する耐性を有する。
【0004】
したがって、がん幹細胞を標的とする特異的な療法の開発は、がん患者の生存および生活の質の改善にとって、特に転移性疾患を有する患者にとっての頼みの綱である。
【0005】
特許文献１は、α−アミノアシル部分を含有し、炎症誘発性サイトカイン産生、特にＴＮＦαに対する阻害活性を有する、ヒドロキサム酸誘導体を開示する。このような化合物は、炎症性疾患、およびＴＮＦαまたは他の炎症誘発性サイトカインの過剰産生を特徴とする他の障害の処置に有用である。さらに化合物は、ヒト肝細胞癌の細胞株Ｈｅｐ−Ｇ２のインビトロ試験において細胞傷害活性を呈する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】米国特許第７６３５７８８号明細書
【非特許文献】
【0007】
【非特許文献1】Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｓａｌｔｓ， Ｐ． Ｓｔａｈｌ， Ｃ． Ｗｅｒｍｕｔｈ， ＷＩＬＥＹ− ＶＣＨ， １２７−１３３， ２００８
【非特許文献2】Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ， ｓｉｘｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ ２００９
【非特許文献3】Ｐｒｏｄｒｕｇ ａｐｐｒｏａｃｈ： ａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｔｏ ｏｖｅｒｃｏｍｅ ｓｉｄｅ−ｅｆｆｅｃｔｓ， Ｐａｔｉｌ Ｓ．Ｊ．， Ｓｈｉｒｏｔｅ Ｐ．Ｊ．， Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， ２０１１，１−１３
【非特許文献4】Ｃａｒｂａｍａｔｅ Ｐｒｏｄｒｕｇ Ｃｏｎｃｅｐｔ ｆｏｒ Ｈｙｄｒｏｘａｍａｔｅ ＨＤＡＣ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ， Ｊｕｎｇ， Ｍａｎｆｒｅｄ ｅｔ ａｌ．， ＣｈｅｍＭｅｄＣｈｅｍ， ２０１１， １１９３−１１９８
【非特許文献5】Ｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ． “Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ ｓａｌｔｓ”， Ｊ． Ｐｈａｒｍ． Ｓｃｉ．， １９７７， ６６， １−１９
【非特許文献6】Ｂｏｔｃｈｋｉｎａ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍ Ｐｒｏｔｅｏｍ ６， １９−３０， ２００９
【非特許文献7】Ｙｅｕｎｇ ＰＮＡＳ １０７， ３７２２−３７２７， ２０１０
【発明の概要】
【0008】
定義別段定義されない限り、本明細書で使用される技術分野の全ての用語、表記および他の専門用語は、本開示が属する当業者により一般的に理解される意味を有するように意図されている。いくつかの場合、一般的に理解される意味を有する用語は、明確にするため、および／または容易に参照するため本明細書で定義される。ゆえに、本明細書でのこのような定義に含まれるものは、当技術分野で一般に理解されることと実質的な差を提示すると解釈されるべきではない。
【0009】
本明細書の用語「ハロゲン」は、フッ素（Ｆ）、塩素（Ｃｌ）、臭素（Ｂｒ）またはヨウ素（Ｉ）を指す。
【0010】
本明細書の用語「Ｃ1〜Ｃ4アルキル」は、１つから４つの炭素原子を含有する分岐または直鎖の炭化水素を指す。Ｃ1〜Ｃ4アルキル基の例としては、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチルが挙げられる。
【0011】
用語「アリール」は、本明細書で芳香族の単環式および多環式炭素環を指し、多環式炭素環の個別の炭素環は、縮合していてもよいし、または単結合を介して互いに結合していてもよい。適切なアリール基としては、限定されないが、フェニル、ナフチルおよびビフェニルが挙げられる。
【0012】
本明細書の用語「アリールオキシ」は、Ｏ−アリール基を指し、「アリール」は上で定義される。
【0013】
本明細書の用語「アルコキシ」は、Ｏ−アルキル基を指し、「アルキル」は上で定義される。
【0014】
本明細書の用語「アリールアルキル」は、本明細書で定義されるアルキルラジカルに結合した本明細書で定義されるアリールラジカルを指す。
【0015】
本明細書の用語「アリールカルボニル」は、−Ｃ（Ｏ）−アリールを指し、「アリール」は上で定義される。
【0016】
本明細書の用語「複素環」は、飽和または不飽和であり、炭素原子およびＮ、ＯおよびＳから選択される１つまたは複数のヘテロ原子からなる４、５、６、７または８員の単環を指し、ここで窒素および硫黄ヘテロ原子が任意選択で酸化されていてもよく、任意選択で窒素ヘテロ原子が四級化されていてもよい。複素環は、結合により安定な構造が生じるのであれば、いずれのヘテロ原子または炭素原子と結合していてもよい。この用語はまた、上述の複素環のいずれかがアリールまたは他の複素環と縮合されたあらゆる二環系も含む。複素環が芳香族の複素環である場合、それは「ヘテロ芳香環」と定義することができる。
【0017】
用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」は、オープンエンドな用語（すなわち、「含むが、限定されない」を意味する）として解釈することができ、「から本質的になる」、「から本質的になること」、「からなる」または「からなること」という用語を担保するものとしても考慮され得る。
【0018】
用語「から本質的になる」、「から本質的になること」は、本発明の基礎となる新規の特性に実質的に影響する他の成分および／またはステップを含まない（つまり任意選択の賦形剤を含み得る）ことを意味する、セミクローズドな用語として解釈され得る。
【0019】
用語「からなる」、「からなること」はクローズドな用語として解釈され得る。
【0020】
本明細書の用語「薬学的に許容される塩」は、塩を形成した化合物の生物学的効果および特性を有し、哺乳動物、好ましくはヒトに投与する場合に副作用を起こさないこれらの塩を指す。薬学的に許容される塩は、無機または有機の塩であってもよく、薬学的に許容される塩の例としては、限定されないが、炭酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硫酸水素塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、パモ酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、およびパラトルエンスルホン酸塩が挙げられる。薬学的に許容される塩のさらなる情報は、本明細書に参照として組み込まれる非特許文献１において見出すことができる。
【0021】
本明細書の用語「生理学的に許容される賦形剤」は、それ自身のいかなる薬理学的効果を欠き、哺乳動物、好ましくはヒトに投与した場合に副作用を起こさない物質を指す。生理学的に許容される賦形剤は当技術分野で周知であり、例えば本明細書に参照として組み込まれる非特許文献２において開示される。
【0022】
本明細書の用語「異性体」は、構造異性体（ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｉｓｏｍｅｒ）（または構造異性体（ｃｏｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ ｉｓｏｍｅｒ））（すなわち、互変異性体）、ならびに立体異性体（または空間異性体）、すなわちジアステレオ異性体およびエナンチオマーを指す。
【発明を実施するための形態】
【0023】
ここで、アミノ基にα，β−不飽和カルボニル部分を担持するα−アミノ酸性スキャホールドを有する、ベンゾ−Ｎ−ヒドロキシアミド化合物が、腫瘍細胞およびスタミナル腫瘍細胞の増殖に対する高い阻害活性を示すことが見出されている。これらの化合物は、特に、がん幹細胞に対して活性であり、ヒトの新生物の処置に有用となる。
【0024】
本発明は、式（Ｉ）：
【0025】
【化1】
【0026】
（式中、ｎは、０、１または２であり、
Ａは、存在しないか、または単環式もしくは二環式の炭素環基であり、前記炭素環基は、任意選択で部分的にまたは完全に不飽和であり、炭素原子を含み、任意選択でＮ、ＳまたはＯから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を含み、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＣＮ、−ＮＨ2、−ＮＯ2、−Ｃｌ、−ＣＯＯＨ、−ハロゲン、−ＣＦ3、−Ｎ（Ｒａ）2、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ4アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、アルコキシ、アリールオキシ基、スルホニルアミノおよび−ＣＨ2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含む群から選択され、
Ｒａは、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ3アルキル基であり、
Ｘは、ＣまたはＮであってもよく、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、−ＯＭｅ、−ＯＰｈ、−ＮＯ2、−ＮＭｅ2、−ＮＨ2、−ハロゲン、−ＣＦ3、−Ｎ（Ｒａ）2、直鎖または分岐のＣ1〜Ｃ4アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールカルボニル、アルコキシ、アリールオキシ基およびスルホニルアミノを含む群から選択されるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成していてもよい）
の化合物ならびにその薬学的に許容される塩、異性体およびプロドラッグを提供する。
【0027】
本発明の化合物は、異なる異性体型：ｃｉｓ型およびｔｒａｎｓ型で存在し得る。
【0028】
好ましい異性体型はｔｒａｎｓ型である。
【0029】
本発明の化合物は、１つまたは複数のキラル中心（不斉炭素原子）を含有し、ゆえにエナンチオマー型および／またはジアステレオ異性体型として存在することができ、単独でまたは互いに混合したあらゆる光学異性体は、本発明の範囲内にある。
【0030】
式（Ｉ）の化合物のプロドラッグは本発明に含まれる。このようなプロドラッグは、化合物（Ｉ）の生体可逆性誘導体である。それらは薬理学的に不活性な誘導体であり、インビボでの代謝的変換を受けて、本発明の一般式において含まれる活性化合物をもたらし得る。多くの異なるプロドラッグは当技術分野で公知である［非特許文献３、非特許文献４］。
【0031】
式（Ｉ）の一部の化合物は、１つまたは複数の塩基性部分または酸性部分を提示し、これは、従来の化学的方法、有機酸もしくは無機酸、有機塩基もしくは無機塩基による化合物の一般的な処置、またはイオン交換クロマトグラフィーにより、塩が形成され得る。薬学的に許容される塩の例としては、限定されないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸などの無機酸、または酢酸、マレイン酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸などの有機酸から誘導されるものが挙げられる。薬学的に許容される塩のさらなる例としては、限定されないが、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第二鉄、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩基から誘導されるものが挙げられる。薬学的に許容される塩は、当技術分野で周知である。これらの調製は、Ｂｅｒｇらによって、非特許文献５に詳細に記載されている。
【0032】
好ましい化合物の１つのクラスは、ｎは、０、１または２であり、
Ａは、存在しないか、または単環式もしくは二環式の炭素環基であり、前記炭素環基は、任意選択で部分的にまたは完全に不飽和であり、炭素原子を含み、任意選択でＮ、ＳまたはＯから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を含み、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＭｅ、−ＣＮ、−ＮＨ2、−ＮＯ2、−Ｃｌ、−ＣＯＯＨ、および−ＣＨ2Ｎ（ＣＨ2ＣＨ3）2を含む群から選択され、
Ｘは、ＣまたはＮであってもよく、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、−ＯＭｅ、−ＯＰｈ、−ＮＯ2、−ＮＭｅ2、および−ＮＨ2を含む群から選択されるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成していてもよい、式（Ｉ）の化合物、ならびにその薬学的に許容される塩、異性体およびプロドラッグを含む。
【0033】
好ましくは、Ａは、存在しないか、またはフェニル、ナフチル、ピリジル、インダニル、キノリル、イミダゾリル、インドリル、チアゾリル、ベンゾチオフェニルを含む群から選択される単環式または二環式の炭素環基である。【0034】
より好ましい別のクラスの化合物は、ｎは１であり、ＸはＣであり、
Ｒ1およびＲ2は、独立して、−Ｈ、−Ｃｌまたは−ＯＭｅであり、
Ｒ3およびＲ4は、独立して、−Ｈ、ＮＭｅ2であるか、またはＲ3およびＲ4は、ヘテロ五環部分（−ＯＣＨ2Ｏ−）を共に形成していてもよい、式（Ｉ）の化合物、ならびにその薬学的に許容される塩、異性体およびプロドラッグを含む。
【0035】
以下の式（Ｉ）の化合物は、特に好ましい：− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド（１Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（４Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド（７Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−［（１Ｒ）−２−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−１−インダン−２−イル−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−４−フェニル−ブタンアミド（９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（１０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（２−ナフチル）プロパンアミド（１１Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）−Ｎ−［２−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（１２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１３Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−キノリル）プロパンアミド（１４Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（１５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ニトロフェニル）プロパンアミド（１６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−アミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（１７Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１８Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−シアノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（１９Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−２−［［（Ｅ）−３−（４−ニトロフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−フェニル−プロパンアミド（２０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−イミダゾール−５−イル）プロパンアミド（２１Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，５−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２３Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（３−ピリジル）プロパンアミド（２４Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（ベンゾチオフェン−３−イル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（２５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−チアゾール−４−イル−プロパンアミド（２６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−４−フェニル−ブタンアミド（２７Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（２８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（４−シアノフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（２９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパンアミド（３０Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）プロパンアミド（３１Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−ニトロフェニル）プロパンアミド（３２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（４−クロロフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３３Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（３，４−ジメトキシフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３４Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−（４−アミノフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３５Ｄ）；
− ４−［（２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−［４−（ヒドロキシカルバモイル）アニリノ］−３−オキソ−プロピル］安息香酸（３６Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−（３，４−ジクロロフェニル）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド（３７Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（３８Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（３９Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（４−ジメチルアミノフェニル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４０Ｄ）；
− （Ｅ）−Ｎ−［２−［［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］メチルアミノ］−２−オキソ−エチル］−３−フェニル−プロパ−２−エンアミド（４１Ｄ）；
− （Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−Ｎ−［２−［［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］メチルアミノ］−２−オキソ−エチル］プロパ−２−エンアミド（４３Ｄ）；
− （２Ｓ）−３−［４−（ジエチルアミノメチル）フェニル］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４５Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−３−［４−（ジエチルアミノメチル）フェニル］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］プロパンアミド；２，２，２−トリフルオロ酢酸（４６Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（２−ナフチル）−２−［［（Ｅ）−３−（６−フェノキシ−３−ピリジル）プロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（４７Ｄ）
以下の式（Ｉ）の化合物は、なお特に好ましい：
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド（１Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−（４−メトキシフェニル）−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（２Ｄ）；
− （２Ｓ）−２−［［（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エノイル］アミノ］−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−プロパンアミド（４Ｄ）；
− （２Ｓ）−Ｎ−［４−（ヒドロキシカルバモイル）フェニル］−３−フェニル−２−［［（Ｅ）−３−フェニルプロパ−２−エノイル］アミノ］プロパンアミド（５Ｄ）
【0036】
本発明の化合物は、当業者に公知の方法を使用して調製し得る。
【0037】
本発明の化合物を合成するために使用する全ての出発物質、構成要素、試薬、酸、塩基、溶媒および触媒は、市販されている。
【0038】
式（Ｉ）の化合物は、固相合成法（スキーム１）および溶液合成法（スキーム２）の両方により調製し得る。いくつかの場合、保護種において化合物を合成する必要があり、脱保護のために１つまたは複数のステップを追加する必要がある。
【0039】
反応は、ＨＰＬＣまたはＬＣ−ＭＳ解析によりモニタリングする。
【0040】
最終生成物は、一般に、分取ＨＰＬＣ−ＭＳクロマトグラフィー、または充填済みの逆相カートリッジでのＳＰＥにより精製される。
【0041】
固相合成法（Solid Phase Synthesis）式（Ｉ）の化合物は、スキーム１にしたがうＳＰＳにより合成できる。
【0042】
ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔおよびＤＩＰＥＡでの古典的な活性化の後、Ｎ−ｆｍｏｃ−４−アミノ安息香酸をヒドロキシルアミンワン樹脂（Wang resin）に充填する。樹脂をＤＭＦ中ピペリジン２０％の溶液で１５分間、処置することにより、Ｆｍｏｃ脱保護を実施する。次いで、ＨＡＴＵ、ＨＯＡｔおよびＤＩＰＥＡでの活性化の後、ｆｍｏｃ−アミノ酸を芳香族アミンにカップリングする。別のｆｍｏｃ脱保護ステップに続いて、活性化した桂皮酸誘導体で樹脂を処置することにより、最終的にアミノ基をアシル化する。ＤＣＭ中ＴＦＡ５０％の溶液で処置することにより、樹脂からの生成物を切断する。
【0043】
最終生成物は、通常、分取ＬＣ−ＭＳクロマトグラフィー、または充填済みのＣ18カートリッジでのＳＰＥにより精製される。
【0044】
【化2】
【0045】
溶液相合成法式（Ｉ）の化合物はまた、スキーム２に示される、古典的な溶液の合成方法により調製される。当業者に公知の方法の１つを使用して、アミドの製造を実施できる。例えば、ＨＡＴＵおよびＤＩＰＥＡでのカルボキシ部分の活性化の後、Ｆｍｏｃ−アミノ酸は、４−アミノ安息香酸エチルと反応させる。得られる化合物Ａは、ＤＭＦ中のピペリジン２０％で処置することにより脱保護し、次いで、活性化した桂皮酸誘導体と反応することでアシル化して、中間体Ｂを得る。最終のヒドロキサム酸化合物は、以下の異なる合成経路で得ることができる。エステル中間体をヒドロキシルアミンおよびメタノール中のＮａＯＨで処置することにより、直接的なヒドロキシルアミノリシスを実施することが可能である。
【0046】
さもなければ、エステル基をＮａＯＨで加水分解し、次いで、ＨＡＴＵを介する活性化の後、ヒドロキシルアミンと反応することにより、得られたカルボン酸をヒドロキサム酸に変換することが可能である。
【0047】
いくつかの場合、取扱いがより容易な化合物の精製を実施するために、カルボン酸をヒドロキサメートの保護形態に変換するのが好ましい。この場合、最終化合物は、メタノール中のＴＦＡ溶液で脱保護することにより得られる。
【0048】
【化3】
【0049】
（式中、Ａ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4およびＸは上で報告された同じ意味を有する）分取ＨＰＬＣ−ＭＳクロマトグラフィー
【0050】
質量分析計検出器（ＺＱ２００）を搭載したＷａｔｅｒｓ社の分取ＨＰＬＣシステムを使用して精製を実施した。Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基の性質に応じて、３つの異なる方法を精製に使用する。
【0051】
粗生成物をＤＭＳＯ中に溶解した。溶液を０．４５μｍＰＴＦＥ薄膜を通してろ過し、分取システムに注入した。予想される分子イオン（［Ｍ＋Ｈ］+）に関連するピークに応じた画分を収集し、乾燥するまで濃縮した。
【0052】
試験条件：・カラム：Ｗａｔｅｒｓ社のＳｕｎＦｉｒｅ（商標）Ｐｒｅｐ Ｃ１８ ＯＢＤ（商標）５□ｍ、１９×１００ｍｍ
・溶媒Ａ Ｈ2Ｏ
・溶媒Ｂ ＡＣＮ
・溶媒Ｃ Ｈ2Ｏ中の１％ギ酸
【0053】
【表1】
【0054】
【表2】
【0055】
【表3】
【0056】
ＭＳ法：・セントロイドＥＳ＋イオン化、
・スキャン時間 ３０分
・ｍ／ｚスキャン １００〜１０００
・コーン電圧 １５Ｖ
・ソース温度 １５０℃
・脱溶媒温度 ２８０℃
【0057】
固相抽出法事前に充填済みの逆相ＳＰＥカートリッジ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｔｒａｔａ Ｃ１８−Ｅ、５５ｍｍ、７０Ａ）で精製を実施する。
【0058】
粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、カートリッジに充填した。Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4基の性質に応じて、異なる割合でＡＣＮ／水の混合物に生成物を溶出した。ＨＰＬＣ純度域が８５％超を示す溶出画分を収集し、乾燥するまで濃縮した。
【0059】
本発明の化合物は、ナノモルオーダーのＩＣ50値で、インビトロでのがん幹細胞の増殖に対する高い阻害活性を示した。
【0060】
また、インビボ研究を行って、例えば実施例７に記載されるように腫瘍のサイズおよび重量を低減する化合物の能力をモニタリングした。
【0061】
これらの化合物は、したがって、がんの予防および／またはがんの処置において、単独で、または他の抗腫瘍薬と共に使用され得る。
【0062】
本発明の化合物は、好ましくは、結腸直腸がん、肺がん、脳がん、前立腺がん、もしくは婦人科がんなどの固形腫瘍、または血液悪性腫瘍の予防および／または処置に有用である。
【0063】
本発明の化合物は、特にがん幹細胞に対して活性である。したがって、化合物は、好ましくは、転移性疾患、再発性疾患および薬剤耐性疾患の予防および／または処置に有用である。
【0064】
本発明は、したがって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩、異性体およびプロドラッグを、少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤と共に含む、医薬組成物も提供する。
【0065】
このような組成物は、経腸もしくは非経口投与に適切な液剤、または固形剤であってもよく、例えば、経口投与のためのカプセル剤、錠剤、コーティング錠剤、散剤もしくは顆粒剤の形態であってもよいし、または例えばクリーム剤もしくは軟膏剤などの皮膚投与、または吸入投与に適切な形態であってもよい。
【0066】
本発明により提供される医薬組成物は、公知の方法を使用して調製され得る。
【0067】
以下の実施例は、しかしそれを限定することなく、本発明をさらに説明することを目的とする。
【実施例】
【0068】
下記の略語を、以下の実施例において使用する。ＡＣＮ アセトニトリル
Ｂｏｃ ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＥＡ ジエチルアミン
ＤＩＰＥＡ Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＥｔＯＨ エタノール
Ｅｔ２Ｏ ジエチルエーテル
ＥＳ エレクトロスプレー
Ｆｍｏｃ フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＡＴＵ Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート
ＨＯＡｔ １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高圧縮液体クロマトグラフィー
ＬＣ−ＭＳ 質量分析計を搭載したＨＰＬＣシステム
ＭｅＯＨ メタノール
ＰＴＦＥ ポリテトラフルオロエチレン
ＲＴ 室温
ＳＰＥ 固相抽出法
ＳＰＳ 固相合成法
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
【実施例1】
【0069】
（化合物４Ｄ）（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−フェニルプロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミドの合成
【0070】
【化4】
【0071】
ステップＡ：（Ｓ）−４−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0072】
【化5】
【0073】
３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン（７．７４ｍｍｏｌ、１当量）を１５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（３．８４ｇ、１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．７５ｍｌ、１．３当量）を添加し、反応混合物を３０分間撹拌した。次いで、４−アミノ安息香酸エチル（１．４０ｇ、１当量）を添加し、混合物をＲＴで１時間撹拌した。ＨＰＬＣ解析により反応をモニタリングした。反応が完了した場合、溶液を水（１５０ｍｌ）中に注いだ。沈殿した白色の固体をろ過し、乾燥した。４ｇの純生成物を得た。
【0074】
ステップＢ：（Ｓ）−４−（２−アミノ−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0075】
【化6】
【0076】
ステップＡで得られた化合物を、Ｆｍｏｃ保護を除去するために、ＴＨＦ中、ＲＴで一晩、４．６ｍｌのＤＥＡ（６当量）で処置した。ＴＨＦを除去し、固体が生成されるまで残渣をｎ−ヘキサン中に溶解した。溶媒を除去し、生成物を新しいｎ−ヘキサンで２回洗浄した。２．２ｇの生成物を得た。
【0077】
ステップＣ：（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0078】
【化7】
【0079】
（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エン酸（４３０ｍｇ、１当量）を、５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、０℃まで冷却し、ＨＡＴＵ（１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３当量）を添加した。３０分後、ステップＢで得られた７００ｍｇの化合物を添加した。反応混合物をＲＴにし、１時間撹拌した。次いで、溶液を水（５０ｍｌ）中に注ぎ、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。酸性化後、溶媒を蒸発し、粗生成物をシリカゲルカラムで精製した。
【0080】
ステップＤ：（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸
【0081】
【化8】
【0082】
ステップＣで得られた６００ｍｇの化合物を、３０ｍｌのＥｔＯＨ／ＴＨＦ１：２中に溶解した。ＮａＯＨ １Ｎ（３当量）を溶液に添加し、反応混合物を還流で４時間撹拌した。溶媒を除去し、粗製物を水中に溶解した。溶液をＨＣｌ ６Ｎで酸性化し、生成物の沈殿を観察した。ろ過した固体をＥｔ2Ｏで縣濁し、ろ過した。
【0083】
ステップＥ：（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−フェニルプロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド
【0084】
【化9】
【0085】
ステップＤで得られた４００ｍｇの化合物（１当量）を２．５ｍｌのＤＭＦを溶解した。氷浴で冷却後、ＨＡＴＵ（１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３当量）を添加し、混合物を１時間撹拌した。最終的に、ＮＨ2ＯＨ ３ＭのＤＭＦ（３当量）中溶液を添加し、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。次いで、混合物を水中に注ぎ、沈殿した固体をろ過し、ジオキサン中に懸濁し、混合物を撹拌し、加温した。最終生成物をろ過により得た。
【実施例2】
【0086】
（化合物５Ｄ）（Ｓ）−４−（２−シンナムアミド−３−フェニルプロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミドの合成
【0087】
【化10】
【0088】
ステップＡ：（Ｓ）−４−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0089】
【化11】
【0090】
３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン（７．７４ｍｍｏｌ、１当量）を１５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（３．８４ｇ、１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．７５ｍｌ、１．３当量）を添加し、反応混合物を３０分間撹拌した。次いで、４−アミノ安息香酸エチル（１．４０ｇ、１当量）を添加し、混合物をＲＴで１時間撹拌した。ＨＰＬＣ解析により反応をモニタリングした。反応が完了した場合、溶液を水（１５０ｍｌ）中に注いだ。沈殿した白色の固体をろ過し、乾燥した。４ｇの純生成物を得た。
【0091】
ステップＢ：（Ｓ）−４−（２−アミノ−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0092】
【化12】
【0093】
ステップＡで得られた化合物を、Ｆｍｏｃ保護を除去するために、ＴＨＦ中、ＲＴで一晩、４．６ｍｌのＤＥＡ（６当量）で処置した。ＴＨＦを除去し、固体が生成されるまで残渣をｎ−ヘキサン中に溶解した。溶媒を除去し、生成物を新しいｎ−ヘキサンで２回洗浄した。２．２ｇの生成物を得た。
【0094】
ステップＣ：（Ｓ）−４−（２−シンナムアミド−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0095】
【化13】
【0096】
ステップＢで得られた９００ｍｇの生成物（１当量）をＤＣＭ（２５ｍｌ）中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＴＥＡ（１当量）を添加した。最終的に、塩化シンナモイルの溶液を添加した。反応混合物を室温で１時間撹拌した。反応が完了した後、水、ＨＣｌ １Ｎおよび水中のＮａＨＣＯ3５％で溶液を洗浄した。有機相をＣａＣｌ2で乾燥、ろ過し、蒸発した。トルエン／ＥｔＯＨの混合物を移動相として使用して、粗製物をシリカゲルカラムで精製した。
【0097】
ステップＤ：（Ｓ）−４−（２−シンナムアミド−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸
【0098】
【化14】
【0099】
ステップＣで得られた（Ｓ）−４−（２−シンナムアミド−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル（４００ｍｇ、１当量）をＴＨＦ／ＥｔＯＨの混合物中に溶解し、ＮａＯＨ １Ｎ（３当量）で１時間処置した。溶媒を除去し、粗製物を水中に溶解した。溶液を濃ＨＣｌで酸性化した。固体を形成、ろ過し、次のステップで使用した。
【0100】
ステップＥ：４−（（Ｓ）−２−シンナムアミド−３−フェニルプロパンアミド）−Ｎ−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンズアミド
【0101】
【化15】
【0102】
ステップＤで得られた４００ｍｇの化合物（１当量）を２．５ｍｌのＤＭＦを溶解した。氷浴で冷却後、ＨＡＴＵ（１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３当量）を添加し、混合物を１時間撹拌した。最終的に、Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）ヒドロキシルアミン（３当量）を添加し、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。次いで、混合物を水中に注ぎ、沈殿した固体をろ過し、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ3２５：１：０．１の混合物を移動相としてシリカゲルカラムで精製した。
【0103】
ステップＦ：（Ｓ）−４−（２−シンナムアミド−３−フェニルプロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド
【0104】
【化16】
【0105】
ステップＥで得られた化合物（２００ｍｇ、１当量）をＭｅＯＨ（５０ｍｌ）中に溶解し、ＴＦＡ（１．５ｍｌ）で処置した。反応混合物をＲＴで終夜、撹拌した。溶媒および過度のＴＦＡを蒸発により除去し、粗製物をＥｔ2Ｏ中に懸濁し、ろ過した。１２０ｍｇの純生成物を得た。
【実施例3】
【0106】
（化合物５ＤＺ）（Ｓ，Ｚ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−２−（３−フェニルアクリルアミド）プロパンアミド）ベンズアミドの合成
【0107】
【化17】
【0108】
ステップＡ：（Ｓ）−４−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−フェニルアクリルアミド）安息香酸エチル
【0109】
【化18】
【0110】
３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン（７．７４ｍｍｏｌ、１当量）を１５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（３．８４ｇ、１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．７５ｍｌ、１．３当量）を添加し、反応混合物を３０分間撹拌した。次いで、４−アミノ安息香酸エチル（１．４０ｇ、１当量）を添加し、混合物をＲＴで１時間撹拌した。ＨＰＬＣ解析により反応をモニタリングした。反応が完了した場合、溶液を水（１５０ｍｌ）中に注いだ。沈殿した白色の固体をろ過し、乾燥した。４ｇの純生成物を得た。
【0111】
ステップＢ：（Ｓ）−４−（２−アミノ−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0112】
【化19】
【0113】
ステップＡで得られた化合物を、Ｆｍｏｃ保護を除去するために、ＴＨＦ中、ＲＴで終夜、４．６ｍｌのＤＥＡ（６当量）で処置した。ＴＨＦを除去し、固体が生成されるまで残渣をｎ−ヘキサン中に溶解した。溶媒を除去し、生成物を新しいｎ−ヘキサンで２回洗浄した。２．２ｇの生成物を得た。
【0114】
ステップＣ：（Ｓ，Ｚ）−４−（３−フェニル−２−（３−フェニルアクリルアミド）プロパンアミド）安息香酸エチル
【0115】
【化20】
【0116】
（Ｚ）−３−フェニルアクリル酸（１当量）を５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３当量）を添加し、反応混合物を１時間撹拌した。次いで、ステップＢで得られた（Ｓ）−４−（２−アミノ−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル（１当量）を添加し、混合物をＲＴで終夜、撹拌した。ＨＰＬＣ解析により反応をモニタリングした。反応が完了した場合、溶液を水中に注いだ。粗製物をＥｔＯＡｃで抽出し、トルエン／ＥｔＯＡｃ６：４の混合物を移動相として使用してシリカゲルカラムで精製した。
【0117】
ステップＤ：（Ｓ，Ｚ）−４−（３−フェニル−２−（３−フェニルアクリルアミド）プロパンアミド）安息香酸
【0118】
【化21】
【0119】
ステップＣで得られた（Ｓ，Ｚ）−４−（３−フェニル−２−（３−フェニルアクリルアミド）プロパンアミド）安息香酸エチル（２５０ｍｇ、１当量）をＴＨＦ／ＥｔＯＨの混合物中に溶解し、ＮａＯＨ １Ｎ（３当量）で２４時間処置した。溶媒を除去し、粗製物を水中に溶解した。粗生成物をシリカゲルカラムで精製し、トルエン／ＥｔＯＡｃの混合物で溶出した。
【0120】
ステップＥ：４−（（Ｓ）−３−フェニル−２−（（Ｚ）−３−フェニルアクリルアミド）プロパンアミド）−Ｎ−（（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）ベンズアミド
【0121】
【化22】
【0122】
ステップＤで得られた２００ｍｇの化合物（１当量）を１ｍｌのＤＭＦを溶解した。氷浴で冷却後、ＨＡＴＵ（１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３当量）を添加し、混合物を１時間撹拌した。最終的に、Ｏ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）ヒドロキシルアミン（１当量）を添加し、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。次いで、混合物を水中に注ぎ、沈殿した固体をろ過し、ＥｔＯＡｃ／トルエン７：３の混合物を移動相としてシリカゲルカラムで精製した。
【0123】
ステップＦ：（Ｓ，Ｚ）−Ｎ−ヒドロキシ−４−（３−フェニル−２−（３−フェニルアクリルアミド）プロパンアミド）ベンズアミド
【0124】
【化23】
【0125】
ステップＥで得られた化合物（１１０ｍｇ、１当量）をＭｅＯＨ（２５ｍｌ）中に溶解し、ＴＦＡ（１ｍｌ）で処置した。反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。溶媒および過度のＴＦＡを蒸発により除去し、粗製物をＥｔ2Ｏ中に懸濁し、ろ過した。８０ｍｇの純生成物を得た。
【実施例4】
【0126】
（化合物１Ｄ）（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミドの合成
【0127】
【化24】
【0128】
ステップＡ：（Ｓ）−４−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0129】
【化25】
【0130】
３ｇのＦｍｏｃ−Ｌ−フェニルアラニン（７．７４ｍｍｏｌ、１当量）を１５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＨＡＴＵ（３．８４ｇ、１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．７５ｍｌ、１．３当量）を添加し、反応混合物を３０分間撹拌した。次いで、４−アミノ安息香酸エチル（１．４０ｇ、１当量）を添加し、混合物をＲＴで１時間撹拌した。ＨＰＬＣ解析により反応をモニタリングした。反応が完了した場合、溶液を水（１５０ｍｌ）中に注いだ。沈殿した白色の固体をろ過し、乾燥した。４ｇの純生成物を得た。
【0131】
ステップＢ：（Ｓ）−４−（２−アミノ−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0132】
【化26】
【0133】
ステップＡで得られた化合物を、Ｆｍｏｃ保護を除去するために、ＴＨＦ中、ＲＴで終夜、４．６ｍｌのＤＥＡ（６当量）で処置した。ＴＨＦを除去し、固体が生成されるまで残渣をｎ−ヘキサン中に溶解した。溶媒を除去し、生成物を新しいｎ−ヘキサンで２回洗浄した。２．２ｇの生成物を得た。
【0134】
ステップＣ：（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−フェニルプロパンアミド）安息香酸エチル
【0135】
【化27】
【0136】
（Ｅ）−３−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）プロパ−２−エン酸（４３０ｍｇ、１当量）を、５ｍｌのＤＭＦ中に溶解し、０℃まで冷却し、ＨＡＴＵ（１．３当量）およびＤＩＰＥＡ（１．３当量）と反応した。３０分後、ステップＢで得られた７００ｍｇの化合物を添加した。反応混合物をＲＴにし、１時間撹拌した。次いで、溶液を水（５０ｍｌ）中に注ぎ、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。酸性化後、溶媒を蒸発し、粗生成物をシリカゲルカラムで精製した。
【0137】
ステップＤ：（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（ベンゾ［１，３］ジオキソール−５−イル）アクリルアミド）−３−（４−メトキシフェニル）プロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド
【0138】
【化28】
【0139】
ＭｅＯＨ中、ステップＤで得られた化合物の溶液を氷浴で冷却した。ヒドロキシルアミン５０％の水（１５当量）およびＮａＯＨ １Ｎ（１０当量）中溶液を添加し、反応混合物をＲＴで１時間撹拌した。次いで、溶液をＨＣｌ １Ｎで中和した。沈殿を観察した。純生成物を単純ろ過により得た。
【実施例5】
【0140】
（化合物７Ｄ）（Ｓ，Ｅ）−４−（２−（３−（２，５−ジメトキシフェニル）アクリルアミド）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパンアミド）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミドの合成
【0141】
【化29】
【0142】
ステップＡ：ヒドロキシルアミンワン樹脂への（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（４−ヒドロキシカルバモイル）フェニル）カルバメートの充填
【0143】
【化30】
【0144】
Ａｃｔｉｖｏｔｅｃ社のＰＬＳ４×６有機合成装置を使用して空のＳＰＥプラスチックフィルターチューブ中で反応を実施した。
【0145】
ＤＣＭおよびＤＭＦでの樹脂の膨潤後、４−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）安息香酸（４当量）、ＨＡＴＵ（４当量）、ＨＯＡｔ（４当量）およびＤＩＰＥＡ（８当量）のＤＭＦ中溶液を添加した。反応混合物をＲＴで終夜、振とうした。次いで、樹脂をろ過し、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【0146】
ステップＢ：第１のカップリング
【0147】
【化31】
【0148】
ステップＡからの樹脂（２００ｍｇ、１当量）をＤＭＦで膨潤し、次いでろ過した。ＤＭＦ中ピペリジン２０％の溶液での３０分間の樹脂の二重処置によりＦｍｏｃ脱保護を行った。溶液をろ別し、樹脂をＤＭＦで洗浄した。（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−（（ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）オキシ）フェニル）プロパン酸（４当量）、ＨＡＴＵ（４当量）、ＨＯＡｔ（４当量）およびＤＩＰＥＡ（８当量）のＤＭＦ中溶液を樹脂に添加した。反応混合物をＲＴで終夜、振とうした。樹脂をろ過し、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【0149】
ステップＣ：第２のカップリング
【0150】
【化32】
【0151】
ステップＢからの樹脂（１当量）をＤＭＦで膨潤し、次いでろ過した。ＤＭＦ中ピペリジン２０％の溶液での３０分間の樹脂の二重処置によりＦｍｏｃ脱保護を実施した。溶液をろ別し、樹脂をＤＭＦで洗浄した。ＤＭＦ中の（Ｅ）−３−（２，５−ジメトキシフェニル）アクリル酸（４当量）、ＨＡＴＵ（４当量）、ＨＯＡｔ（４当量）およびＤＩＰＥＡ（８当量）の溶液を樹脂に添加した。反応混合物をＲＴで終夜、振とうした。樹脂をろ過し、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【0152】
ステップＤ：切断
【0153】
【化33】
【0154】
ＤＣＭ中のＴＦＡ５０％で、ＲＴで３０分処置することにより、樹脂から生成物を切断した。本ステップの間、Ｂｏｃ保護もまた除去した。
【0155】
粗生成物をＳＰＥカートリッジで精製した。
【実施例6】
【0156】
実施例５に記載された手順を使用して以下の化合物を調製した。
【0157】
【表4-1】
【0158】
【表4-2】
【実施例7】
【0159】
インビトロ細胞傷害活性本発明の化合物は、金属キレート部分、ベンゾヒドロキサメート、α−アミノ酸性のＮ−アシル化中心コア、およびアシル部分でのα，β−不飽和の存在を特徴とする、式（Ｉ）の小分子である。この特定の構造的な特徴は、がん幹細胞株、ならびにインビトロおよびインビボの両方でがん生物学において広く使用されるようされるヒト結腸直腸癌の細胞株であるＨＣＴ１１６細胞（ＡＴＣＣ ＣＣＬ−２４７）に対して高い阻害活性の要因となり得る（非特許文献６、非特許文献７）。
【0160】
細胞傷害活性を以下の通り評価した：− Ｐｒｅ−Ｂ白血病の細胞株６９７を細胞２×１０5個／ウェルで播種した。
− 結腸癌の細胞株のＨＣＴ１１６、ＨＴ２９およびＣＯＬＯ２０１５を、それぞれ４×１０3、４×１０3および細胞１０×１０3個／ウェルで播種した。
− ヒトの一次腎細胞を２つの別々の実験で１．５×１０3および６．５×１０3で播種した。
− ヒトＰＢＭＣを細胞５×１０5個／ウェルで播種した。
− 結腸がんの幹細胞（ＣＳＣ）を３×１０3で播種した。
【0161】
試験する化合物を２４時間後に添加し、７２時間（６９７細胞株では４８時間）インキュベーションした。分子の濃度を１００００ｎＭから１．５ｎＭまで（６９７細胞株では１００００から１ｎＭまで）の範囲とした。製造者の指示にしたがってミトコンドリアの機能性を測定する、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）Ａｑｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を使用して、化合物の細胞傷害活性を評価した。結腸がんの幹細胞に対して、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｃｅｌｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）で生存性を決定した。
【0162】
６９７細胞株で実施した細胞傷害性の一次スクリーニングにおいて、化合物Ｄの活性は、飽和化合物と同様か、飽和化合物より高かった。
【0163】
ＨＣＴ１１６細胞での本発明の不飽和化合物の増殖阻害活性は、先行技術、特許文献１の飽和類似体により呈されるものより３０から８０倍であるが、幹細胞と少なくとも同様か幹細胞より３．５から４０倍である（表１を参照）。特に、本発明の化合物は全て、ＨＣＴ１１６細胞での先行技術の飽和類似体より活性となる。
【0164】
２つの他の結腸がんの細胞株、ＨＴ２９（ＡＴＣＣ ＨＴＢ３８）およびＣｏｌｏ２０５（ＡＴＣＣ ＣＣＬ２２２）での、ならびに結腸がんの幹細胞（ＣＳＣ）でのさらなるアッセイにより、化合物の細胞傷害性を確定した（表２および３を参照）。健康なドナーから単離したヒトの一次腎細胞および末梢血の単核細胞（ＰＢＭＣ）に対する細胞傷害活性は、腫瘍細胞の細胞傷害性と比較して低かったことに価値がある（表４を参照）。
【0165】
実施例３にしたがって調製したｃｉｓ型は、ＨＣＴ１１６細胞でのｔｒａｎｓ型より弱くなる。
【0166】
さらに、ｃｉｓ型は、化学的にｔｒａｎｓより安定しない。力劣化試験において、ｔｒａｎｓ型での化合物は全て、高温（８０℃で１５日間）で、低いｐＨ（ｐＨ２で１５日間）であっても高い安定性を示すが、ｃｉｓ類似体は８０℃でより安定せず、ｐＨ２で確実により安定しなかった。
【0167】
【表5】
【0168】
【表6】
【0169】
任意の用量での化合物の活性を、阻害対ビヒクル処置対照（＝０）の百分率として計算する。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍプログラムを使用して阻害用量／応答曲線からＩＣ５０を外挿する。
【0170】
【表7】
【0171】
【表8】
【0172】
インビボ抗腫瘍活性本発明の化合物はまた、ヒトＨＴＣ１１６結腸直腸癌の細胞株をＣＤ１ヌード雌マウスに皮下注射（ｓｃ）した、結腸がんの異種移植モデルにおいてインビボ活性を示した（表５を参照）。
【0173】
雌のＣＤ−１ヌードマウス（５週齢、体重２０から２２ｇ）を、Ｉｔａｌｆａｒｍａｃｏ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｒｅの動物舎で飼育した。マイクロアイソレーターケージでマウスを維持し、標準条件下で無菌食および水を供給した。
【0174】
動物の右側腹部における７×１０6ＨＣＴ１１６細胞のｓｃ注射により異種移植片を生成した。
【0175】
ノギスでの測定により腫瘍サイズを決定し、以下の式にしたがって腫瘍体積を計算した：腫瘍体積（ｍｍ3）＝（ｗ２×ｌ）／２
（式中、「ｗ」は癌の幅であり、「ｌ」は癌の長さであり、単位はｍｍである）
【0176】
腫瘍の成長は、週に３回の体積の測定で分かった。
【0177】
処置が開始した時である移植の後、３週間で腫瘍塊は測定できるサイズに達した。
【0178】
２つの基準化合物、桂皮ヒドロキサム酸のパノビノスタットおよび５−ＦＵもまた、実験に使用した。先の実験にしたがって、または文献に記載される通り、ＭＴＤで化合物を投与した。表５に示す通り、本発明の化合物は腫瘍のサイズおよび体積を低減することができ、それらの活性は２つの基準化合物のそれと比較できた。
【0179】
注目すべきは、基準化合物５−ＦＵでの処置は、処置の終わりに著しい白血球減少（７０．４％）を引き起こし、一方で化合物４Ｄは、同等の有効性（腫瘍の低減が５−ＦＵで得られた６１％と比較して５４％）を示したが、顕著な白血球減少（２３．７％）ははるかに少なかった。
【0180】
さらに、血小板減少および体重減少は、処置の終わりに観察されなかったが、これは効果的な用量で、本発明の化合物の対象が本動物モデルにおいて有利な治療域を呈したことを示した。
【0181】
本発明の化合物は、ヒトＳ９画分をヒト血漿中でインキュベーションした場合、良好なインビトロ代謝安定性を示す。それらはまた、前臨床種における予備研究において良好な薬物動態プロファイルを示す。
【0182】
【表9】