特許 6886085 麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料により魚肉の不快臭を低減する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6886085

(24)【登録日】2021年5月18日

(45)【発行日】2021年6月16日

(54)【発明の名称】麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料により魚肉の不快臭を低減する方法

(51)【国際特許分類】

   A23K 10/12 20160101AFI20210603BHJP

   A23K 10/22 20160101ALI20210603BHJP

   A23K 10/30 20160101ALI20210603BHJP

【ＦＩ】

   A23K10/12

   A23K10/22

   A23K10/30

【請求項の数】9

【全頁数】15

(21)【出願番号】特願2018-187443(P2018-187443)

(22)【出願日】2018年10月2日

(65)【公開番号】特開2019-62893(P2019-62893A)

(43)【公開日】2019年4月25日

【審査請求日】2019年10月21日

(31)【優先権主張番号】特願2017-192979(P2017-192979)

(32)【優先日】2017年10月2日

(33)【優先権主張国】JP

(73)【特許権者】

【識別番号】595068232

【氏名又は名称】マルコメ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110002572

【氏名又は名称】特許業務法人平木国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】白濱 陽一郎

(72)【発明者】

【氏名】関 昭生

(72)【発明者】

【氏名】王 媛媛

(72)【発明者】

【氏名】伊藤 暁

(72)【発明者】

【氏名】北川 学

(72)【発明者】

【氏名】山田 南実

【審査官】 竹中 靖典

(56)【参考文献】

【文献】 特開２０１４−０３０３８５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平１０−２２９８３０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１５−０４７１６２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０４−０６３５７３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００６−１９７８５７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００６−０２５７０６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１５−１７２０１９（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平１１−２８５３４８（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０９−１０３２５２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０５−１９２０８７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０１−１６８２４５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００５−１４３４８０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００５−２０６５６６（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１６−０６７２４０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 米国特許出願公開第２００２／００１２６５９（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特開昭６３−３０１７５７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開平０５−２６８８８１（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１０−０５７５０５（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ２３Ｋ １０／００ − ５０／９０

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭を低減するための飼料。

【請求項2】

麹菌発酵物または大豆発酵物が、麹または味噌である、請求項１記載の飼料。

【請求項3】

麹菌発酵物または大豆発酵物が、米味噌、豆味噌、麦味噌、または調合味噌である、請求項１または２に記載の飼料。

【請求項4】

魚肉中の、フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンからなる群から選択される物質を増加させることにより魚肉の不快臭を低減する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の飼料。

【請求項5】

麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭の低減剤。

【請求項6】

麹菌発酵物または大豆発酵物が、麹または味噌である、請求項５記載の低減剤。

【請求項7】

魚肉中の、フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンからなる群から選択される物質を増加させることにより魚肉の不快臭を低減する、請求項５または６に記載の低減剤。

【請求項8】

請求項１〜４のいずれか１項に記載の飼料、または請求項５〜７のいずれか１項に記載の低減剤を魚類に給餌することを含む、魚肉の不快臭が低減された魚類の養殖方法。

【請求項9】

請求項１〜４のいずれか１項に記載の飼料、または請求項５〜７のいずれか１項に記載の低減剤を魚類に給餌することを含む、魚肉の不快臭を低減させる方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、魚肉の不快臭を低減する方法、および魚肉の不快臭を低減するための飼料に関する。

【背景技術】

【0002】

養殖魚等の魚介類の可食部を生のまま保存して鮮度が低下してくると特有の不快臭を発するようになり、この魚介類の不快臭は消費者から敬遠されている。この不快臭は、生臭さや鮮度低下臭とも呼ばれる。また、元来魚介類の生食文化のない国や地域では、生鮮魚介類の生臭さに抵抗を感じる者が多く、このため日本から海外市場への生食用生鮮魚介類の輸出拡大の障害となっていた。

【0003】

従来、魚肉の洗浄により不快臭を減少させ、あるいは香辛料、柑橘類、ハーブ（香草）や燻煙等により不快臭を減少させていたが、生のままの生鮮魚類の不快臭を減少させる決定的な方法はなかった。

【0004】

大豆や米、麦などを蒸したものに食塩と麹を混ぜて発酵させて製造する調味料である味噌は日本の食文化には欠かせない存在である。

【0005】

味噌は大量に製造され、味噌製造会社において、過剰に生産された味噌が年間数トン単位で廃棄されている。

【0006】

味噌等の発酵物を飼料に添加することにより不快なにおいを低減し得ることが報告されている（特許文献１〜６および非特許文献１を参照）。しかしながら、これらはペットまたは牛、豚等の産業動物の糞便臭低減効果についての報告であり、魚肉の不快臭の低減効果については記載されていない。

【0007】

また、未利用味噌を飼料に添加し、養殖魚介類に投与することにより免疫賦活効果を発揮し得ることが報告されているが（特許文献７〜９および非特許文献２を参照）、魚介類の不快臭の低減効果については記述されていない。

【0008】

さらに、味噌等の発酵物を調味料として畜肉または魚肉の調理時に加えることで、畜肉または魚肉の臭みを低減する効果があることが報告されている（特許文献１０および１１ならびに非特許文献３および４）。しかしながら、これは調味料としての効果であり、飼料に添加して魚介類に与えているのではない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】特開平11-285348号公報

【特許文献2】特開平09-103252号公報

【特許文献3】特開平05-192087号公報

【特許文献4】特公平07-112406号公報

【特許文献5】特開平05-192087号公報

【特許文献6】特開平01-168245号公報

【特許文献7】特開2015-172019号公報

【特許文献8】特開2005-143480号公報

【特許文献9】特開2005-206566号公報

【特許文献10】特開2016-067240号公報

【特許文献11】特開2015-043749号公報

【非特許文献】

【0010】

【非特許文献1】小林桂他、生理学技術研究会報告・生物学技術研究会報告合同技術研究会報告、Vol.2005、Page 110-111

【非特許文献2】谷川昭夫、養殖、38(6)、60-62(2006)

【非特許文献3】黒野寿久他、畜産物需要開発調査研究事業報告書、335-359、(1998)

【非特許文献4】宮崎泰幸他、日本水産学会誌、82(5)、763-770、(2016)

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0011】

本発明は、養殖魚の魚肉の不快臭を低減する方法の提供を目的とする。

【課題を解決するための手段】

【0012】

本発明者らは、大量に廃棄されている未利用資源としての味噌を有効活用できないか検討を行った。未利用味噌を魚類用飼料に添加し、ブリへ３ヵ月間投与したところ、QDAによる官能評価でブリ魚肉の臭みが低減されるという効果を見出した。また、ガスクロマトグラフィー質量分析法(GC-MS)によるブリ魚肉のにおい成分の分析の結果、味噌添加飼料を魚類に給餌することによってフルフラール、酢酸エチル、αクベベン等の香気成分物質であって魚類の不快臭をマスキングし得る香気成分物質が魚肉中に増加することを見出し、本発明を完成させるに至った。

【0013】

すなわち、本発明は以下のとおりである。
[１] 麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭を低減するための飼料。
[２] 麹菌発酵物または大豆発酵物が、麹または味噌である、[１]の飼料。
[３] 麹菌発酵物または大豆発酵物が、米味噌、豆味噌、麦味噌または調合味噌である、[１]または[２]の飼料。
[４] 魚肉中の、フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンからなる群から選択される物質を増加させることにより魚肉の不快臭を低減する、[１]〜[３]のいずれかの飼料。
[５] 麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭の低減剤。
[６] 麹菌発酵物または大豆発酵物が、麹または味噌である、[５]の低減剤。
[７] 魚肉中の、フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンからなる群から選択される物質を増加させることにより魚肉の不快臭を低減する、[５]または[６]の低減剤。
[８] [１]〜[４]のいずれかの飼料、または[５]〜[７]のいずれかの低減剤を魚類に給餌することを含む、魚肉の不快臭が低減された魚類の養殖方法。
[９] [１]〜[４]のいずれかの飼料、または[５]〜[７]のいずれかの低減剤を魚類に給餌することを含む、魚肉の不快臭を低減させる方法。

【発明の効果】

【0014】

本発明者らが見出した知見によって、味噌等の発酵物を飼料に添加することで魚肉の不快臭を低減することができる。本発明において使用し得る味噌は廃棄予定の未利用資源であり、産業廃棄物として処理されていた未利用味噌を飼料添加物として利用することで、処理に費やしていた人件費、産廃費用等のコストの削減、さらには環境負荷の低減にも効果が期待される。また、近年、日本食の世界無形文化遺産登録によって、日本食が世界的に普及し、それに伴い魚介類の生食も受け入れられるようになってきた。しかし、元来魚介類の生食文化のない国や地域では、生鮮魚介類の生臭さに抵抗を感じる者が多い。そこで、本発明により魚介類の不快臭を低減することで、海外市場への生食用生鮮魚介類の輸出拡大が望める。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】味噌添加飼料を給餌したブリ肉と味噌を添加しない飼料を給餌したブリ肉の不快臭のQDA法による官能評価の結果を示す図である。

【図2】味噌添加飼料を給餌したブリ肉と味噌を添加しない飼料を給餌したブリ肉の臭い成分のGC-MSのトータルイオンクロマトを示す図である。

【図3】味噌添加飼料を給餌したブリ肉の臭い成分のGC-MSによる主成分分析による解析の結果を示す図である。

【図4】味噌添加飼料を給餌したブリ肉の臭い成分のローディングプロットデータを示す図であり、第一主成分分軸上で0.6以上の47個をプロットにより表示した図である。

【発明を実施するための形態】

【0016】

以下、本発明を詳細に説明する。

【0017】

本発明は麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭を低減するための飼料、および該試料を魚類に給餌することにより魚肉の不快臭を低減する方法である。ここで、魚肉とは魚の筋肉、肝臓や心臓などの内臓、眼球、皮、脳等をいい、好ましくは筋肉をいう。筋肉としては、背側筋、腹側筋、背側竜骨筋、腹側竜骨筋、血合筋等が挙げられる。

【0018】

魚肉の不快臭とは、生臭さ、魚臭さ、あるいは鮮度低下臭ともいい、磯の香りや血合いの香りが混ざった臭いとも認識される。魚肉の不快臭の成分は複雑であり、種々のアミンやアンモニアの他、揮発性カルボニル、低級脂肪酸、揮発性含硫黄化合物等が含まれる。

【0019】

本発明において不快臭を低減する魚の種類は限定されず、海水魚、淡水魚のあらゆる食用魚が対象となる。麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を用いるため、対象魚は好ましくは養殖魚、蓄養魚である。ここで、養殖魚とは卵の孵化から育てた魚をいい、蓄養魚とは天然の魚を捕獲してきた後、生簀などで一定期間成長させた魚をいう。蓄養魚を養殖魚と表示することがあり、本発明において、養殖魚という場合、蓄養魚も含む。また、単に飼育魚ということもできる。具体的な魚種として、アジ科、サバ科、タイ科、ハタ科、メバル科、スズキ科、サケ科、キュウリウオ科、ウナギ科、ナマズ科、ドジョウ科、コイ科、ヒラメ科、フグ科等に属する魚が挙げられ、ブリ（ハマチ）、カンパチ、ヒラマサ、ヒレナガカンパチ、シマアジ、マアジ、ビンナガ、クロマグロ、ミナミマグロ、タイセイヨウマグロ、タイセイヨウクロマグロ、キハダ、メバチ、コシナガ、ハガツオ、スマ、マダイ、クロソイ、アカハタ、キジハタ、アオハタ、クエ、タマカイ、マハタ、ユカタハタ、サラサハタ、スジアラ、チダイ、マサバ、イワナ（アメマス）、ニジマス、ヤマメ(サクラマス)、アマゴ(サツキマス)、カラフトマス、サケ、ギンザケ、マスノスケ、ベニザケ、イトウ、アユ、ウナギ、ナマズ、ドジョウ、コイ、フナ、ヒラメ、トラフグ等が挙げられる。

【0020】

本発明においては、上記の魚類の飼料に、麹菌発酵物または大豆発酵物を添加し、魚類に給餌する。

【0021】

麹菌発酵物または大豆発酵物として、例えば、味噌が挙げられる。麹菌発酵物は米、麦、大豆などの穀物にコウジカビなどの食品発酵に有効なカビ等の微生物を繁殖させた発酵物をいう。原料により、米麹、大豆麹、麦麹（大麦麹、小麦麹）等がある。微生物としては、Aspergillus oryzae、Aspergillus sojae等の黄麹菌などが挙げられる。味噌は、大豆、米、麦等の穀物に塩および麹を添加して発酵させて製造する発酵物である。味噌は、大豆と米麹の発酵物である米味噌、大豆と大豆麹の発酵物である豆味噌、大豆と麦麹（大麦）の発酵物である麦味噌、調合味噌を含む。ここで、調合味噌とは、米味噌、豆味噌または麦味噌を混合したもの、米麹に麦麹または豆麹を混合したものを使用したもの等、米味噌、麦味噌および豆味噌以外の味噌をいう。また、味噌は味噌の原料を混合し発酵させた発酵中の製造中のものでよい。このような製造中の味噌として、味噌の原料の仕込み混合物であって熟成前のものや天地返し（味噌の上部と下部を入れ替えて空気に触れさせる作業）をした熟成中のものが挙げられる。この中でも熟成後のもの、または熟成途中のものが好ましい。本発明においては、製造中の味噌も味噌という。味噌の色は限定されず、赤味噌でも、白味噌でも、淡色味噌でもよい。

【0022】

これらの麹菌発酵物または大豆発酵物を魚類の飼料に添加し、魚類に給餌すればよい。魚類の飼料は限定されず、例えば、養殖魚の飼料として用いられている飼料ならばいかなる飼料も用いることができる。飼料の形状も限定されず、顆粒状飼料、ペレット状飼料、クランブル（ペレット状飼料をクランブラーで粉砕した形状の飼料）等がある。この中でもペレット状飼料が好ましい。ペレット状飼料には、フィッシュミール（魚粉）等を乾燥した固形タイプのドライペレット（DP)、生餌と魚粉と魚油などを混合した半生の固形タイプのモイストペレット（MP)、エクストルーダーと呼ばれる造粒機械で高温高圧加工して成型したエクストルーダーペレット（EP)等がある。

【0023】

上記の飼料を製造するときに麹菌発酵物または大豆発酵物を添加すればよい。ペレット状の飼料の場合には、ペレットを製造するための混合物に麹菌発酵物または大豆発酵物を添加し、ペレット状飼料として成形すればよい。

【0024】

飼料に添加する麹菌発酵物または大豆発酵物の含量は、麹菌発酵物または大豆発酵物を添加した飼料に対する最終含量で、３〜２０質量％、好ましくは３〜１０質量％、さらに好ましくは５〜１０質量％である。飼料は通常の給餌スケジュール（ブリであれば1日1回以上、魚体重の１〜３％程度の飼料を給餌）により魚に与えればよく、魚種等により異なる。飼料を給餌する養殖期間は、魚種によるが、１〜６ヶ月、好ましくは２〜４ヶ月であり、好ましくは魚の出荷の直前まで与える。養殖は海面の生簀で行う場合も、人工海水等を用いる陸上養殖も、淡水魚を対象とする内水面養殖も含む。

【0025】

本発明はさらに、麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭の低減剤を包含する。該低減剤は、例えば、麹菌発酵物または大豆発酵物を粉末状、顆粒状、ペレット状に成形したものである。該低減剤をサプリメントとして魚用飼料と同時に魚に給餌してもよいし、魚用飼料とは別に魚に給餌してもよい。また、該低減剤を魚の飼料に添加し、上記の麹菌発酵物または大豆発酵物を含む飼料を調製することもできる。

【0026】

麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を魚に投与して摂食させることにより魚肉の不快臭をマスキングする物質の量が魚体内で増加する。ここで、マスキングとは、香気成分により不快臭が抑制されることをいう。

【0027】

魚肉の不快臭をマスキングする香気成分物質として、フルフラール（2-フランカルボキシアルデヒド）（C₅HO₂)、酢酸エチル（C₄H₈O₂）およびαクベベン（C₁₅H₂₄)が挙げられる。本発明においては、魚に麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を与えることにより、これらの物質が魚肉中に増加し、魚の不快臭がマスキングされ、低減する。

【0028】

フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンは飼料に含まれているものが魚肉中で増加すると考えられる。麹菌発酵物または大豆発酵物以外の物質にも含まれており、麹菌発酵物または大豆発酵物を添加しない飼料を給餌し飼料を摂食した魚類の魚肉中にフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンは存在するが、麹菌発酵物または大豆発酵物には比較的多くのフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの少なくとも１つが含まれており、麹菌発酵物または大豆発酵物を給餌した魚類の魚肉中に比較的多量のフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの少なくとも１つが増加し得る。

【0029】

魚肉の不快臭を低減するためには、フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの全ての物質が魚肉内で増加する必要は必ずしもなく、３種類の物質の少なくとも１種類が増加すればよい。あるいは、少なくとも２種類が増加すればよい。好ましくは３種類が増加すればよい。

【0030】

魚肉中のフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの含有量はGC/MS分析により測定することができる。この際、ポリジメチルシロキサン（PDMS)を用いてフルフラール、酢酸エチルまたはαクベベンを抽出すればよく、ガラス撹拌子にPDMSをコーティングしたTwister PDMS（Gerstel社）を用いることができる。具体的には、例えば、魚肉を密閉した容器中に入れ、ヘッドスペース中にTwister PDMSを設置し、一定時間静置し、Twister PDMSに揮発成分を吸着した上でガスクロマトグラフィー質量分析(GC-MS)計へ導入し測定すればよい（HSSE（Headspace Sorptive Extraction)法）。その他、Twister PDMSを用いる場合、SBSE（Stir Bar Sorptive Extraction)法やPassive法により測定することもできる。

【0031】

この際、魚肉中に普遍的に恒常的に存在し、個体間の含有量に差がなく、かつ麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料の投与によっても魚肉中の含量が変動しないデカナール（デシルアルデヒド）（C₁₀H₂₀O)を内部標準物質として用い、デカナールに対する相対値に基づいて、それぞれの物質の含有量を算出することができる。ガスクロマトグラフィー質量分析(GC-MS)により測定した場合、クロマトグラム上の各物質のピーク面積値を用いて算出すればよい。
また、ビフェニル（C₁₂H₁₀)を内部標準物質として試料に添加して用いてもよい。

【0032】

このように、デカナールまたはビフェニルを内部標準物質として魚肉中のフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの相対濃度を測定した場合、魚類に麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を給餌することにより、魚肉中のフルフラール含有量は、麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を投与しない魚類の魚肉中のフルフラール濃度に対して増加する。増加率は、２％以上、好ましくは４％以上、さらに好ましくは５％以上さらに好ましくは10％以上、さらに好ましくは15％以上、特に好ましくは20％以上である。また、魚類に麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を給餌することにより、魚肉中の酢酸エチル濃度は、麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を給餌しない魚類の魚肉中の酢酸エチル濃度に対して増加する。増加率は、10％以上、好ましくは15％以上、さらに好ましくは20％以上、さらに好ましくは25％以上、特に好ましくは30％以上である。また、魚類に麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を給餌することにより、魚肉中のαクベベン濃度は、麹菌発酵物または大豆発酵物添加飼料を給餌しない魚類の魚肉中のαクベベン濃度に対して増加する。増加率は、３％以上、好ましくは４％以上、さらに好ましくは５％以上、さらに好ましくは７％以上、さらに好ましくは10％以上である。なお、フルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンはガスクロマトグラフィー質量分析(GC-MS)により測定しているので、魚肉中のフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの濃度は、魚肉から揮発するフルフラール、酢酸エチルおよびαクベベンの濃度ということもできる。

【0033】

さらに、本発明の養殖魚、該養殖魚の可食部、該可食部の加熱食品および非加熱食品において、魚肉１ｇ当たり、0.8ng以上、好ましくは１ng以上の酢酸エチルが含まれ、0.4ng以上、好ましくは0.5ng以上のフルフラールが含まれる。

【0034】

実際に魚肉の不快臭が低減されたか否かは、官能評価により判断することができる。具体的な官能評価の方法は限定されないが、例えば、定量的記述分析法（QDA法）により行うことが好ましい。QDA法とは、ヒトを分析型パネルとし、自らが作成した特性用語に基づいてその特性を定量化する方法をいう。本発明の効果を判定する官能評価法における特性用語としては、「生臭いフレーバー」、「生臭い香り」、「磯の香り」、「血合いの香り」等が挙げられ、これらの特性のスコアが低いほど、魚肉の不快臭が低減されていると判断できる。
その他、カテゴリー尺度法や２点識別法により官能評価を行ってもよい。

【0035】

本発明は、麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭を低減するための飼料、または麹菌発酵物または大豆発酵物を含む、魚肉の不快臭の低減剤を魚に給餌することにより、魚肉の不快臭が低減された魚類の養殖方法を包含し、さらに魚肉の不快臭を低減する方法を包含する。

【実施例】

【0036】

本発明を以下の実施例によって具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。

【0037】

実施例１ 味噌添加飼料による魚類の不快臭の軽減
（１）官能評価（QDA法）
未利用味噌の有効な活用方法を検討するため、飼料100kg対して味噌を７kgの割合で添加して、１日１回以上、魚体重の１〜３質量％程度の飼料をブリへ３ヶ月間投与した。養殖は１枠が15m×15mの金網で作った生簀に２歳魚のブリを１枠当たり約10000尾入れて行った。また味噌を添加しない飼料を投与したブリを対照区とした。飼育後のブリ魚肉をQDA法（定量的記述分析法）による官能評価を実施した。QDAはパネル８名による２回繰り返し評価を行い、ブリ切身は容器に入れ氷上に置いて評価に供した。結果を図１に示した。図１中、＊を付した特性は有意の差（ｐ＜０．０５）が認められた特性である。
図１に示すように、味噌添加飼料を投与した魚肉においては、味噌を添加しない飼料を投与した魚肉と比べて生臭さ等の臭みが低減された。

【0038】

（２）におい成分分析
ブリ普通肉（血合を除いた部分）を約３cm角に細断したものを流水で解凍した。解凍したブリ普通肉７０gを５００mL容量のガラス瓶に入れ、瓶底から約２／３の高さのところでTwister PDMS（ガラス製撹拌子にPDMS（ポリジメチルシロキサン）をコーティングしたもの）（Gerstel社）を２個、瓶の外側から磁石で固定することで内包した。室温（２０℃前後）で１８０分間静置し、ヘッドスペース（上部の空間）中の揮発性成分をTwister PDMSに吸着させ、GC／MSに供した。試験区で増加していた３成分についてはライブラリー（NIST０．８）を用いた検索により化合物名をそれぞれ酢酸エチル、フルフラール、αクベベンと推定した。これらの３成分について、それぞれ主要なm/z（４３、９６、１０５）のイオンピーク面積値と、ブリ魚肉に普遍的に含まれ、恒常性が高く、個体間の変動が少ないデカナールの主要なm/z（５７）のイオンピーク面積値に対する比を求めた。さらに試験区、対照区それぞれ２尾ずつ３回繰り返し測定を行い、各平均値を求めた。

【0039】

＜GC-MSメソッド＞
カラムの種類： Inert Cap Pure Wax, length 60m, I.D. 0.25mm, df 0.25μm
カラム昇温条件： 40℃ 10min, 40〜230℃（5℃/min）、230℃ 20min
カラム流量：線速度 28cm/sec, 流量1.7181mL/min, 圧力200.2kPa, コンスタントフローモード
GC-MS分析によるトータルイオンクロマトを確認したところ、試験区と対照区は細かいピークでは差異は見られるが、似ている波形を示した（図２）。

【0040】

次に細かいピークの差異を検出するために、「Mass Profiler Professional（アジレント・テクノロジー（株）製）」を用いて全ピークを対象とした主成分分析を行った。結果、味噌添加飼料を投与した試験区と対照区では、第一主成分の軸（寄与率３３．６９％）において明瞭に識別された（図３）。次に味噌添加飼料を投与した試験区を牽引している主要な成分として、ローディングプロットデータの第一主成分軸上０．６以上の４７成分について、ライブラリを用いた同定解析を行った（図４）。

【0041】

４７成分の化合物名の推定を行った結果、魚臭低減／マスキング効果を有している可能性がある成分として酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分が検出された。これら３成分のピーク面積値を比較したところ、試験区では対照区と比べて、酢酸エチルは１．３３倍、フルフラールは１．０６倍、クベベンは１．１２倍増加していることが判明した（表１）。

【0042】

【表1】

【0043】

フルフラールは芳香族アルデヒドの一種で、味噌の香気に多く含まれていることが報告されている（柴崎一雄,岩渕せつ子.「味噌の香気成分に関する研究（第1報）揮発性カルボニル化合物について」, １９７０）。また、フルフラールは魚特有の生臭さを消す調味液に含まれていることが報告されている（特開2009-171983号公報）。酢酸エチルもフルフラールと同様に味噌からよく検出され、また魚臭マスキング効果のある調味液に含まれていることが報告されている。αクベベンはセスキテルペン類の一種で、セスキテルペン類はかまぼこの杉板に含まれており、スケトウダラすり身の臭みをマスキングする効果があると報告されている（達家清明,小浜正江,末兼幸子,森大蔵．「かまぼこおよびかまぼこ板の揮発性成分のGC-MSによる同定定量」日本農芸化学会誌., ６１, ５, ５８７−５９８, １９８７）。

【0044】

従って、味噌添加飼料投与ブリの魚肉中で多く検出されたこれらにおい成分が、少なくとも一つ以上含まれていたことで、ブリ魚肉中に含まれる臭みをマスキングしたと考えられた。

【0045】

実施例２ 各種味噌、麹等の効果
次に、ブリ魚肉から検出された上記３成分が原料の異なる味噌（米味噌、豆味噌、麦味噌）についても普遍的に含まれているか解析した。また併せてそれらの麹、米味噌の製造中の産物（仕込み混合物、天地返し（味噌の上部と下部を入れ替えて空気に触れさせる作業）をしたもの）についても調べた。
表２の試料を分析対象とした。

【0046】

【表2】

【0047】

（１）におい成分分析
各サンプル１０gを２００mL容量のガラス瓶に入れ、瓶底から約２／３の高さのところでTwister PDMS（Gerstel社）を２個、瓶の外側から磁石で固定することで内包した。６０℃で４５分間温浴し、ヘッドスペース中の揮発性成分をTwister PDMSに吸着させ、GC／MSに供した。酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分について、それぞれ主要なm/z（４３、９６、１０５）のイオンピーク面積値を求めた。

【0048】

解析の結果、酢酸エチルは全てのサンプルに含まれており、特に米味噌に多く含まれ、発酵が進むにつれ酢酸エチル含量は増加した（表３）。

【0049】

【表3】

【0050】

フルフラールは大豆麹および大麦麹以外の全サンプルに含まれていること、特に米麹に多く含まれていることが判明した（表４）。

【0051】

【表4】

【0052】

αクベベンについては米味噌（熟成途中）および米味噌（製品）にのみ含まれており、その他のサンプルからは検出できなかった（表５）。

【0053】

【表5】

【0054】

以上のことから、原料が異なる味噌（米味噌、豆味噌、麦味噌）においても、酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの内、少なくとも一種類は普遍的に含まれていることが推察された。また併せてそれらの味噌原料、麹、米味噌の製造中の産物（仕込み混合物、天地返し）においても、上記３成分が少なくとも一種類は含まれていることが分かった。

【0055】

従って、原料の種類を問わず、味噌やそれらの原料、麹、米味噌の製造中の産物をブリの餌に混ぜることで、ブリ魚肉中の酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分いずれかの含量を高めることができ、ブリ魚肉の魚臭さをマスキングにより抑えることができることを見出した。

【0056】

実施例３ 味噌添加飼料による魚類の不快臭の軽減（カンパチに対する試験）
（１）官能評価（尺度法）
飼料１００kgに対して未利用味噌（米味噌）を７kgの割合で添加して、３日間で２日以上、魚体重１〜３質量％程度の飼料を２歳魚のカンパチ（約４kg）へ２ヶ月間投与した。また味噌を添加しない飼料を投与したカンパチを対照区とした。飼育後のカンパチ普通肉（血合を除いた部分）を約６〜７ｍｍ幅に細断し、刺身として喫食した。魚肉の「生臭いフレーバー」について、尺度法（７段階）にて評価した。すなわち対照区を標準とし（中央４点）、それと比較したときの試験区の強度を７段階の中から選択した。パネル１３名による３回繰り返し評価を行い、刺身は容器に入れ氷上に置いて評価に供した。

【0057】

結果、強度は３．９となり、味噌添加飼料を投与した魚肉においては味噌を添加しない飼料を投与した魚肉と比べて低減されていることが示された。

【0058】

（２）官能評価（２点識別法）
被験者２１名に対し、試験区と対照区それぞれの刺身を喫食させ、「設問（１）魚臭さをより強く感じた」「設問（２）よりおいしいと感じた」の２設問について「試験区」、「対照区」、「分からない」、のいずれかを選択させた。なお、それぞれのサンプルは試験区と対照区のいずれか分からないようブラインド試験とした。結果はχの二乗検定を用い、有意水準をｐ＝０．０５に設定して有意差の解析を行った。結果を表６に示した。

【0059】

味噌添加飼料を投与した魚肉においては、設問（１）において対照区が有意に多く選択され、設問（２）においては味噌投与区が有意に多く選択された。味噌添加飼料を投与した魚肉においては、味噌を添加しない飼料を投与した魚肉と比べ、魚臭さが低減され、よりおいしくなっていることが示された。

【0060】

【表6】

【0061】

（３）におい成分分析
カンパチ普通肉（血合を除いた部分）を約６〜７ｍｍ幅に細断後、凍結して保管したものを分析直前に流水解凍した。身はミンチにして、１０gを５０mL容量のガラス瓶に入れ、瓶の蓋裏側にTwister PDMS（ガラス製撹拌子にPDMS（ポリジメチルシロキサン）をコーティングしたもの）（Gerstel社）を２個、外側から磁石で固定することで内包した。４０℃雰囲気下で９０分間静置し、ヘッドスペース（上部の空間）中の揮発性成分をTwister PDMSに吸着させ、GC／MSに供した。酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分について、それぞれ主要なm/z（４３、９６、１６１）のイオンピーク面積値を求めた。さらに試験区、対照区それぞれ３尾ずつ測定を行い、各平均値を求めた。

【0062】

＜GC-MSメソッド＞
実施例１と同様の方法で行った。
酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分が検出された。これら３成分のピーク面積値を比較したところ、試験区では対照区と比べて、酢酸エチルについて１．０６倍に増加していた。フルフラール、クベベンは増加しなかった（表７）。

【0063】

【表7】

【0064】

（４）におい成分の含量値
上述の官能評価（尺度法）において用いた試験区、対照区のカンパチ切り身について、酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分について含量値を測定した。ミンチ状の切り身１００ｇを１００ｇのジクロロメタンに浸漬し、２５℃雰囲気下で３時間振盪した。上澄み液を採取し、固形物に再び１００ｇのジクロロメタンに浸漬させ２時間振盪後、上澄みを採取し、先の上澄みと足し合わせ、香気成分抽出液とした。窒素還流によりジクロロメタンを揮発させ適当量まで濃縮した。濃縮した抽出液をGC／MSにより分析した。酢酸エチル、フルフラール、αクベベンともに主要なm/z（４３、９６、１６１）のイオンピーク面積値を得た。なお、分析間誤差を補正するため、試験区、対照区いずれの抽出物においても内部標準としてビフェニルを添加した。すなわち上記の酢酸エチル、フルフラール、αクベベンのイオンピーク面積値を、ビフェニルの主要なm/z（１５４）のイオンピーク面積値で除した値を検出値として用いた。定量は外部標準添加法を用いた。検量線は一点検量線とし、各標準品５ｐｐｂの調製物を測定し基準値を得た。なお、αクベベンについては標品を入手することが出来なかったため、主要なm/z（１６１）のイオンピーク面積値の比率を算出した。

【0065】

＜GC-MSメソッド＞
実施例１と同様の方法で行った。
結果を表８、および表９に示す。切り身中の成分含量は、酢酸エチルについて対照区０．７６ｎｇ／ｇであるのに対し、試験区は１．０７ｎｇ／ｇであった。フルフラールについて対照区０．４０ｎｇ／ｇであることに対し、０．５２ｎｇ／ｇであった。また、αクベベンについては対照区と比べて１．０４倍含量が増加した。従って、少なくとも酢酸エチルが１．０７ｎｇ／ｇ以上、またはフルフラールが０．５２ｎｇ／ｇ以上、またはαクベベンが対照区に対し１．０４倍の濃度で含まれるとき、魚肉切り身は魚臭さが低減されることが示された。

【0066】

【表8】

【0067】

【表9】

【0068】

実施例４ 味噌添加飼料による酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの増加（フナの仲間である金魚に対する試験）
（１）におい成分分析
飼料１００gに対して未利用味噌（米味噌）を７gの割合（７質量％味噌添加試験区）、または３．５ｇの割合（３．５質量％味噌添加試験区）で添加して、一週間に５日以上、魚体重３．５〜１０質量％の飼料をワキン（小赤）（５〜１０ｇ程度）へ４４日間投与した。また味噌を添加しない飼料を投与したワキンを対照区とした。飼育後、筋肉部分を切り出し、２尾分を一つにした後にミンチ状にした。これを２ｇずつ１０ｍＬ容量のガラス瓶に入れ、瓶の蓋裏側にTwister PDMS（ガラス製撹拌子にPDMS（ポリジメチルシロキサン）をコーティングしたもの）（Gerstel社）を２個、外側から磁石で固定することで内包した。４０℃雰囲気下で２時間静置し、ヘッドスペース（上部の空間）中の揮発性成分をTwister PDMSに吸着させ、GC／MSに供した。酢酸エチル、フルフラール、αクベベンの３成分について、それぞれ主要なm/z（４３、９６、１６１）のイオンピーク面積値を求めた。さらに７質量％味噌添加試験区、３．５質量％味噌添加試験区、対照区それぞれ３回（各区６尾）ずつ測定を行い、各平均値を求めた。

【0069】

結果を表１０に示す。αクベベンのみ７質量％味噌添加試験区において２．５３倍に増加していた。３．５質量％味噌添加試験区においては増加していなかった。また、酢酸エチル、フルフラールについては７質量％、３．５質量％味噌添加試験区いずれにおいても増加していなかった。

【0070】

【表10】

【産業上の利用可能性】

【0071】

本発明により、養殖魚の不快臭を低減することにより、養殖魚の価値を向上させることができる。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】