6899993 複素環化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6899993

(24)【登録日】2021年6月18日

(45)【発行日】2021年7月7日

(54)【発明の名称】複素環化合物

(51)【国際特許分類】

   C07K 5/062 20060101AFI20210628BHJP

   A61K 38/05 20060101ALI20210628BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20210628BHJP

【ＦＩ】

   C07K5/062ZNA

   A61K38/05

   A61P35/00

【請求項の数】4

【全頁数】172

(21)【出願番号】特願2016-196803(P2016-196803)

(22)【出願日】2016年10月4日

(65)【公開番号】特開2018-58787(P2018-58787A)

(43)【公開日】2018年4月12日

【審査請求日】2019年10月4日

(73)【特許権者】

【識別番号】597128004

【氏名又は名称】国立医薬品食品衛生研究所長

(74)【代理人】

【識別番号】110001427

【氏名又は名称】特許業務法人前田特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】内藤 幹彦

(72)【発明者】

【氏名】大岡 伸通

(72)【発明者】

【氏名】柴田 識人

(72)【発明者】

【氏名】奥平 桂一郎

(72)【発明者】

【氏名】長 展生

(72)【発明者】

【氏名】永井 克典

(72)【発明者】

【氏名】伊東 昌宏

(72)【発明者】

【氏名】宮本 直樹

(72)【発明者】

【氏名】森田 陽子

(72)【発明者】

【氏名】奈良 洋

(72)【発明者】

【氏名】藤森 郁男

(72)【発明者】

【氏名】宇治川 治

(72)【発明者】

【氏名】本間 実咲

(72)【発明者】

【氏名】前▲崎▼ 博信

(72)【発明者】

【氏名】森下 奈央

(72)【発明者】

【氏名】下川 賢一郎

【審査官】 野村 英雄

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１６−５２３８７５（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２０１３−０５６８３７（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２０１４／１０８４５２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１５／０００８６７（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１５／０００８６８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 国際公開第２０１３／１０６６４３（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 特表２００９−５４５６１３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２００７−５３２５０４（ＪＰ，Ａ）

【文献】 YANG, C., et al.，"LCL161 increases paclitaxel-induced apoptosis by degrading cIAP1 and cIAP2 in NSCLC."，J. EXP. CLIN. CANCER RES.，２０１６年 ９月３０日，Vol.35, No.1，158(pp.1-17)，DOI: 10.1186/s13046-016-0435-7

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｋ １／００−１９／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

ＰｕｂＭｅｄ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

下式（Ｉ）
［Ｚ］−［Ｌ］−［Ｘ］ (Ｉ)
[式中、［Ｚ］は、細胞内タンパク質に特異的に結合するリガンドを示し;
［Ｌ］は、その内部に下式（ＩＩ）

【化1】

（式中、Ｌ^１、Ｌ^２およびＬ^３は、それぞれ独立して、炭素原子、酸素原子、窒素原子および硫黄原子からなる群から選択される無置換の原子を示し、
−−は、それぞれ独立して、単結合、二重結合または三重結合を示す。）で示される直鎖状リンカーを含むリンカーを示し；
［Ｘ］は、

【化2】

である。］
で表される化合物またはその塩。

【請求項2】

請求項１記載の化合物またはその塩を含有してなる医薬。

【請求項3】

蛋白分解誘導薬である、請求項２記載の医薬。

【請求項4】

癌の予防または治療薬である、請求項２記載の医薬。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、特定のIAPリガンドと細胞内タンパク質リガンドとをリンカーを介して結合させた化合物に関する。
[発明の背景]

【0002】

病態関連タンパク質の低減による治療を目的として、Ｅ３リガーゼ（具体的にはInhibitor of Apoptosis Protein（ＩＡＰ））による標的タンパク質のユビキチン化とプロテアソーム分解を誘導する化合物（Specific and Nongeneticic IAP-dependent Protein Eraserを略記してＳＮＩＰＥＲ、もしくはProteolysis Targeting Chimerasを略記してＰＲＯＴＡＣと称されることがある。本明細書では、ＳＮＩＰＥＲ化合物と称することがある。）の開発が試みられている。例えば、Ｅ３リガーゼに結合するリガンドとして、ＭＶ１、ＭｅＢＳ、Ｎｕｔｌｉｎ−３、ＩкＢαペプチド、ＨＩＦ−１αペプチド、又はＶＨＬリガンドを含み、標的タンパクをＣＲＡＢＰ２、ＲＩＰＫ２、ＥＲα、ＴＡＣＣ３、ＡＲ、ＥＲＲα、ＦＲＳ２α、又はＰＩ３Ｋ等とするＳＮＩＰＥＲ化合物等が提案されている（非特許文献１〜１０、１２及び１３、特許文献１〜９）。また、種々のＩＡＰ阻害剤又はＩＡＰ阻害剤のダイマーが開示されている（特許文献１０、１１、１２及び１３）。
また、ユビキチンリガーゼ複合体に結合するリガンドとしてのサリドマイド誘導体の使用が開示されている（非特許文献１１）
また、ＬＣＬ１６１を有効成分とする進行性固形癌を適応症とする医薬が開示されている（非特許文献１４）

【先行技術文献】

【特許文献】

【0003】

【特許文献1】特開2013-056837号公報

【特許文献2】国際公開第2014/108452号

【特許文献3】国際公開第2015/000867号

【特許文献4】国際公開第2015/000868号

【特許文献5】国際公開第2013/106643号

【特許文献6】米国特許出願公開第2002/0068063号明細書

【特許文献7】国際公開第2013/170147号

【特許文献8】国際公開第2016/0022642号

【特許文献9】米国特許出願公開第2015/0291562号明細書

【特許文献10】中国特許出願公開第104558102号明細書

【特許文献11】国際公開第2011/104266号

【特許文献12】国際公開第2010/015090号

【特許文献13】国際公開第2008/134679号

【非特許文献】

【0004】

【非特許文献1】J. Am. Chem. Soc. 132(2010) 5820-5826

【非特許文献2】Bioorg. Med. Chem. Lett. 19(2011) 3229-3241

【非特許文献3】FEBS Lett. 585(2011) 1147-1152

【非特許文献4】Bioorg. Med. Chem. 19(2011) 6768-6778

【非特許文献5】Cancer Sci. 104(2013), 1492-1498

【非特許文献6】Bioorg. Med. Chem. Lett. 22 (2011)1793-1796

【非特許文献7】Cell Death Dis. 5(2014) e1513

【非特許文献8】Org. Biomol. Chem. 13(2015), 9746-9750

【非特許文献9】Bioorg. Med. Chem. Lett. 22(2012) 4453-4457

【非特許文献10】Curr. Cancer Drug Targets 16(2016) 136-146

【非特許文献11】Science. 348 （2015）1376-1381

【非特許文献12】Nat. Chem. Biol. 11(2015) 611-617

【非特許文献13】Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 113(2016) 7124-7129

【非特許文献14】J. Clin. Oncol. 32(2014) 3103-3110

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本発明の目的は、標的タンパク質の分解を誘導する活性（本明細書中、「ノックダウン（ＫＤ）活性」と称することがある）に優れた新規ＳＮＩＰＥＲ化合物を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明者らは、鋭意研究の結果、特定のＩＡＰリガンドと、標的となる細胞内タンパク質に特異的に結合するリガンドを、リンカーを介して結合させたＳＮＩＰＥＲ化合物が、標的タンパク質の分解を誘導する活性に優れることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は以下のとおりである。
［１］下式（Ｉ）

【化1】

[式中、［Ｚ］は、細胞内タンパク質に特異的に結合するリガンドを示し;
［Ｌ］は、その内部に下式（ＩＩ）

【化2】

（式中、Ｌ^１、Ｌ^２およびＬ^３は、それぞれ独立して、炭素原子、酸素原子、窒素原子および硫黄原子からなる群から選択される無置換の原子を示し、
−−は、それぞれ独立して、単結合、二重結合または三重結合を示す。）で示される直鎖状リンカーを含むリンカーを示し；
［Ｘ］は、下式（ＩＩＩ）

【化3】

（式中、
Ｒは、置換されていてもよいアルキル基または置換されていてもよいシクロアルキル基を示し、
環Ａは、さらに置換されていてもよい複素環を示し、
環Ｂは、さらに置換されていてもよい環を示す。）、
下式（ＩＶ）

【化4】

（式中、各記号は前記と同意義を示す。）、
下式（Ｖ）

【化5】

（式中、
Ｂ^１は、さらに置換されていてもよい縮合環を示し、
その他の記号は前記と同意義を示す。）、または
下式（ＶＩ）

【化6】

（式中、Ｙは、結合手またはカルボニル基を示し、
その他の記号は前記と同意義を示す。）を示す。]
で表される化合物またはその塩（本明細書中、「化合物（Ｉ）」と略記することがある）。

【0007】

［２］［Ｘ］が、
下式（ＩＩＩ）

【化7】

（式中、
Ｒは、置換されていてもよいアルキル基または置換されていてもよいシクロアルキル基を示し、
環Ａは、さらに置換されていてもよい複素環を示し、
環Ｂは、さらに置換されていてもよい環を示す。）である、上記［１］記載の化合物またはその塩。

【0008】

［３］［Ｘ］が、下式（ＶＩＩ）

【化8】

（式中、
環Ａは、さらに置換されていてもよい複素環を示し、
環Ｂは、さらに置換されていてもよい環を示す。）である、上記［１］記載の化合物またはその塩。

【0009】

［４］［Ｘ］が、下式（ＶＩＩＩ）

【化9】

（式中、
環Ｂは、さらに置換されていてもよい環を示す。）である、上記［１］記載の化合物またはその塩。

【0010】

［５］［Ｘ］が、下式（ＩＸ）

【化10】

である、上記［１］記載の化合物またはその塩。

【0011】

［６］［Ｘ］が、下式（Ｘ）

【化11】

である、上記［１］記載の化合物またはその塩。
［７］ 上記［１］〜［６］の何れかに記載の化合物またはその塩を含有してなる医薬。
［８］ 蛋白分解誘導薬である、上記［７］記載の医薬。
［９］ 癌の予防または治療薬である、上記［７］記載の医薬。

【発明の効果】

【0012】

本発明化合物は、標的とする細胞内タンパク質の分解を誘導する活性を有し得、当該標的タンパク質が関与する疾患（例えば、癌）の予防または治療に有効と成り得る。

【図面の簡単な説明】

【0013】

【図1】図１Ａは、ＭＣＦ７ヒト乳癌細胞でのＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のＥＲαタンパク質ノックダウン（ＫＤ）活性を示す。棒グラフのデータは、３つの独立した実験の平均値±ＳＤを示す。アスタリスクは、ビークルコントロールと比較した際のｐ＜０．０５を示す。図１Ｂは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７又はＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８８が１時間以内にＥＲαタンパク質を減少させ、その活性は４８時間以上続くことを示す。図１Ｃは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７よりも短いリンカーを有するＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８９ではノックダウン活性が減弱することを示す。図１Ｄは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７が、ヒト乳癌Ｔ４７Ｄ及びＺＲ７５−１細胞でもＥＲαを分解することを示す。

【図2】図２Ａ及び図２Ｂは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のＥＲαタンパク質ＫＤ活性がプロテアソーム阻害剤ＭＧ１３２によってキャンセルされる事を示す。図２Ａはウエスタンブロット、図２Ｂは免疫細胞染色によってＥＲαタンパク質を検出した（図２Ｂにおけるスケールバーは20 μmを示す。）。図２Ｃは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７によるＥＲαのユビキチン化を示す。図２Ｄは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のＫＤ活性に対する各種阻害剤の効果を示す。ボルテゾミブ（プロテアソーム阻害剤）とＭＬＮ７２４３（ＵＡＥ阻害剤）はＫＤ活性を抑制したが、ＭＬＮ４９２４（Ｎｅｄｄ８阻害剤）は抑制しないことを示す。この結果は、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のＫＤ活性にはユビキチン化とプロテアソームが必要であるが、Ｎｅｄｄ８修飾を必要とするＣｕｌｌｉｎを含むユビキチンリガーゼは関与しないことを示す。

【図3】図３は、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７が標的タンパク質であるＥＲαをノックダウンするが、他のタンパク質をノックダウンせず、標的タンパク質に対して選択的であることを示す。

【図4】図４Ａ及び図４Ｂは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７は、ＥＲαタンパク質にＸＩＡＰとｃＩＡＰ１を結合させること、またこの両者を比較するとｃＩＡＰ１よりＸＩＡＰを優先的にＥＲαと結合させる事を示す。図４Ｃは、細胞内のＸＩＡＰ発現量を低下させると、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７によってＥＲαと結合するｃＩＡＰ１が増加する事を示す。ＸＩＡＰパネルのアスタリスクは、ＩｇＧ重鎖バンドを示す。

【図5】図５Ａは、細胞内のＸＩＡＰ発現量を低下させると、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７誘導性ＥＲα分解が抑制されるが、ｃＩＡＰ１発現量を低下させてもＥＲα分解はほとんど抑制されないことを示す。図５Ｂは、予めＸＩＡＰ発現量を低下させた細胞に野生型（ＷＴ）ＸＩＡＰを戻すとＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のノックダウン活性は回復するが、ＲＩＮＧ変異型ＸＩＡＰ（Ｈ４６７Ａ及びΔＲＩＮＧ）を戻してもノックダウン活性は回復しない結果を示す。図５Ｃは、ＲＩＮＧ変異型ＸＩＡＰ（ΔＲＩＮＧ）を過剰発現するとＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７によるＥＲα分解が抑制されることを示す。図５Ｂ及び図５Ｃは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のノックダウン活性にはＸＩＡＰ ＲＩＮＧドメインの機能が必須であることを示している。図５Ｄは、ＸＩＡＰの発現量低下は、フルベストラント及びβエストラジオールによるＥＲα分解を抑制しないことから、これらによるＥＲαタンパク質の分解機構はＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７とは異なることを示す。

【図6】図６Ａは、マウス卵巣におけるＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のインビボＫＤ活性を示す（ｎ＝３、２、２：６時間、ｎ＝４、３、３：２４時間）。図６Ｂ及び図６Ｃは、ヌードマウス乳腺にヒト乳癌細胞ＭＣＦ−７を移植した担癌マウスモデルで、卵巣（図６Ｂ）及び腫瘍（図６Ｃ）におけるＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７のインビボＫＤ活性を示す（図６Ｂ：ｎ＝５、図６Ｃ：ｎ＝１２、両側スチューデントｔ検定において^＊ｐ＜０．０００１）。

【図7】図７Ａは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７によるエストロゲン依存性遺伝子発現の抑制を示す。データは、平均値±ＳＤ（ｎ＝３）を表す。図７Ｂは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７処理によるＥＲα陽性ヒト乳がん細胞の増殖抑制を示す。データは、平均値±ＳＤ（ｎ＝３）を表す。図７Ｃ及び図７Ｄは、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７をマウスに腹腔内投与した時の薬物動態試験結果を示す。投与８時間後では十分な血中濃度を示すが、２４時間後にはＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７が血中からほぼ消失していることを示す。図７Ｅは、ヌードマウス乳腺にヒト乳癌細胞ＭＣＦ−７を移植した異種乳癌同所移植モデルで、ＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７はＭＣＦ−７腫瘍の増殖を抑制することを示す（マウス：両群ともｎ＝９、腫瘍：両群ともｎ＝１８、両側スチューデントｔ検定において^＊ｐ＜０．００１）。図７Ｆは、１４日間のＳＮＩＰＥＲ（ＥＲ）−０８７投与はマウスの体重に影響を与えず、顕著な毒性が見られなかったことを示す。

【図8】図８Ａ及び図８Ｂは、ＳＮＩＰＥＲ（ＡＢＬ）−０３８、ＳＮＩＰＥＲ（ＢＲＤ４）−００１及びＳＮＩＰＥＲ（ＰＤＥ４）−００９が、それぞれの標的タンパク質をノックダウンする活性を示す。棒グラフのデータは、３つの独立した実験の平均値±ＳＤを示す。アスタリスクは、ビークルコントロールと比較した際のｐ＜０．０５を示す。図８Ｃは、ＳＮＩＰＥＲ（ＡＢＬ）−０３８、ＳＮＩＰＥＲ（ＢＲＤ４）−００１及びＳＮＩＰＥＲ（ＰＤＥ４）−００９のＫＤ活性に対するプロテアソーム阻害剤ＭＧ１３２及びユビキチン活性化酵素（ＵＡＥ）阻害剤ＭＬＮ７２４３の効果を示す。

【0014】

（発明の詳細な説明）
以下、本発明化合物、これらの製造方法および用途について説明する。

【0015】

以下、本明細書中で用いられる各置換基の定義について詳述する。特記しない限り各置換基は以下の定義を有する。
本明細書中、「ハロゲン原子」としては、例えば、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_１−６アルキル基」としては、例えば、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ヘキシル、イソヘキシル、１，１−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、３，３−ジメチルブチル、２−エチルブチルが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１−６アルキル基が挙げられる。具体例としては、メチル、クロロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、トリフルオロメチル、エチル、２−ブロモエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、プロピル、２，２―ジフルオロプロピル、３，３，３−トリフルオロプロピル、イソプロピル、ブチル、４，４，４−トリフルオロブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、５，５，５−トリフルオロペンチル、ヘキシル、６，６，６−トリフルオロヘキシルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_２−６アルケニル基」としては、例えば、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、３−ブテニル、３−メチル−２−ブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、４−ペンテニル、４−メチル−３−ペンテニル、１−ヘキセニル、３−ヘキセニル、５−ヘキセニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_２−６アルキニル基」としては、例えば、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、３−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−ペンチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、３−ヘキシニル、４−ヘキシニル、５−ヘキシニル、４−メチル−２−ペンチニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_３−１０シクロアルキル基」としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ビシクロ［２．２．２］オクチル、ビシクロ［３．２．１］オクチル、アダマンチルが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_３−１０シクロアルキル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_３−１０シクロアルキル基が挙げられる。具体例としては、シクロプロピル、２，２−ジフルオロシクロプロピル、２，３−ジフルオロシクロプロピル、シクロブチル、ジフルオロシクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_３−１０シクロアルケニル基」としては、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_６−１４アリール基」としては、例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、１−アントリル、２−アントリル、９−アントリルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_７−１６アラルキル基」としては、例えば、ベンジル、フェネチル、ナフチルメチル、フェニルプロピルが挙げられる。

【0016】

本明細書中、「Ｃ_１−６アルコキシ基」としては、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１−６アルコキシ基が挙げられる。具体例としては、メトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、エトキシ、２，２，２−トリフルオロエトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシ、４，４，４−トリフルオロブトキシ、イソブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_３−１０シクロアルキルオキシ基」としては、例えば、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロヘプチルオキシ、シクロオクチルオキシが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_１−６アルキルチオ基」としては、例えば、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、ｓｅｃ−ブチルチオ、ｔｅｒｔ−ブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキルチオ基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１−６アルキルチオ基が挙げられる。具体例としては、メチルチオ、ジフルオロメチルチオ、トリフルオロメチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ブチルチオ、４，４，４−トリフルオロブチルチオ、ペンチルチオ、ヘキシルチオが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基」としては、例えば、アセチル、プロパノイル、ブタノイル、２−メチルプロパノイル、ペンタノイル、３−メチルブタノイル、２−メチルブタノイル、２，２−ジメチルプロパノイル、ヘキサノイル、ヘプタノイルが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキル−カルボニル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１−６アルキル−カルボニル基が挙げられる。具体例としては、アセチル、クロロアセチル、トリフルオロアセチル、トリクロロアセチル、プロパノイル、ブタノイル、ペンタノイル、ヘキサノイルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基」としては、例えば、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、イソブトキシカルボニル、ｓｅｃ−ブトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、ペンチルオキシカルボニル、ヘキシルオキシカルボニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基」としては、例えば、ベンゾイル、１−ナフトイル、２−ナフトイルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基」としては、例えば、フェニルアセチル、フェニルプロピオニルが挙げられる。
本明細書中、「５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基」としては、例えば、ニコチノイル、イソニコチノイル、テノイル、フロイルが挙げられる。
本明細書中、「３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基」としては、例えば、モルホリニルカルボニル、ピペリジニルカルボニル、ピロリジニルカルボニルが挙げられる。

【0017】

本明細書中、「モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基」としては、例えば、メチルカルバモイル、エチルカルバモイル、ジメチルカルバモイル、ジエチルカルバモイル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルカルバモイルが挙げられる。
本明細書中、「モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基」としては、例えば、ベンジルカルバモイル、フェネチルカルバモイルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_１−６アルキルスルホニル基」としては、例えば、メチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、ブチルスルホニル、ｓｅｃ−ブチルスルホニル、ｔｅｒｔ−ブチルスルホニルが挙げられる。
本明細書中、「ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキルスルホニル基」としては、例えば、１ないし７個、好ましくは１ないし５個のハロゲン原子を有していてもよいＣ_１−６アルキルスルホニル基が挙げられる。具体例としては、メチルスルホニル、ジフルオロメチルスルホニル、トリフルオロメチルスルホニル、エチルスルホニル、プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、ブチルスルホニル、４，４，４−トリフルオロブチルスルホニル、ペンチルスルホニル、ヘキシルスルホニルが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_６−１４アリールスルホニル基」としては、例えば、フェニルスルホニル、１−ナフチルスルホニル、２−ナフチルスルホニルが挙げられる。

【0018】

本明細書中、「置換基」としては、例えば、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、置換されていてもよい炭化水素基、置換されていてもよい複素環基、アシル基、置換されていてもよいアミノ基、置換されていてもよいカルバモイル基、置換されていてもよいチオカルバモイル基、置換されていてもよいスルファモイル基、置換されていてもよいヒドロキシ基、置換されていてもよいスルファニル（ＳＨ）基、置換されていてもよいシリル基が挙げられる。
本明細書中、「炭化水素基」（「置換されていてもよい炭化水素基」における「炭化水素基」を含む）としては、例えば、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_３−１０シクロアルケニル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基が挙げられる。

【0019】

本明細書中、「置換されていてもよい炭化水素基」としては、例えば、下記の置換基群Ａから選ばれる置換基を有していてもよい炭化水素基が挙げられる。
［置換基群Ａ］
（１）ハロゲン原子、
（２）ニトロ基、
（３）シアノ基、
（４）オキソ基、
（５）ヒドロキシ基、
（６）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基、
（７）Ｃ_６−１４アリールオキシ基（例、フェノキシ、ナフトキシ）、
（８）Ｃ_７−１６アラルキルオキシ基（例、ベンジルオキシ）、
（９）５ないし１４員芳香族複素環オキシ基（例、ピリジルオキシ）、
（１０）３ないし１４員非芳香族複素環オキシ基（例、モルホリニルオキシ、ピペリジニルオキシ）、
（１１）Ｃ_１−６アルキル−カルボニルオキシ基（例、アセトキシ、プロパノイルオキシ）、
（１２）Ｃ_６−１４アリール−カルボニルオキシ基（例、ベンゾイルオキシ、１−ナフトイルオキシ、２−ナフトイルオキシ）、
（１３）Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニルオキシ基（例、メトキシカルボニルオキシ、エトキシカルボニルオキシ、プロポキシカルボニルオキシ、ブトキシカルボニルオキシ）、
（１４）モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイルオキシ基（例、メチルカルバモイルオキシ、エチルカルバモイルオキシ、ジメチルカルバモイルオキシ、ジエチルカルバモイルオキシ）、
（１５）Ｃ_６−１４アリール−カルバモイルオキシ基（例、フェニルカルバモイルオキシ、ナフチルカルバモイルオキシ）、
（１６）５ないし１４員芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、ニコチノイルオキシ）、
（１７）３ないし１４員非芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、モルホリニルカルボニルオキシ、ピペリジニルカルボニルオキシ）、
（１８）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキルスルホニルオキシ基（例、メチルスルホニルオキシ、トリフルオロメチルスルホニルオキシ）、
（１９）Ｃ_１−６アルキル基で置換されていてもよいＣ_６−１４アリールスルホニルオキシ基（例、フェニルスルホニルオキシ、トルエンスルホニルオキシ）、
（２０）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキルチオ基、
（２１）５ないし１４員芳香族複素環基 、
（２２）３ないし１４員非芳香族複素環基 、
（２３）ホルミル基、
（２４）カルボキシ基、
（２５）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキル−カルボニル基、
（２６）Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、
（２７）５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、
（２８）３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、
（２９）Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、
（３０）Ｃ_６−１４アリールオキシ−カルボニル基（例、フェニルオキシカルボニル、１−ナフチルオキシカルボニル、２−ナフチルオキシカルボニル）、
（３１）Ｃ_７−１６アラルキルオキシ−カルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル、フェネチルオキシカルボニル）、
（３２）カルバモイル基、
（３３）チオカルバモイル基、
（３４）モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基、
（３５）Ｃ_６−１４アリール−カルバモイル基（例、フェニルカルバモイル）、
（３６）５ないし１４員芳香族複素環カルバモイル基（例、ピリジルカルバモイル、チエニルカルバモイル）、
（３７）３ないし１４員非芳香族複素環カルバモイル基（例、モルホリニルカルバモイル、ピペリジニルカルバモイル）、
（３８）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキルスルホニル基、
（３９）Ｃ_６−１４アリールスルホニル基、
（４０）５ないし１４員芳香族複素環スルホニル基（例、ピリジルスルホニル、チエニルスルホニル）、
（４１）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキルスルフィニル基、
（４２）Ｃ_６−１４アリールスルフィニル基（例、フェニルスルフィニル、１−ナフチルスルフィニル、２−ナフチルスルフィニル）、
（４３）５ないし１４員芳香族複素環スルフィニル基（例、ピリジルスルフィニル、チエニルスルフィニル）、
（４４）アミノ基、
（４５）モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキルアミノ基（例、メチルアミノ、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジブチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ）、
（４６）モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリールアミノ基（例、フェニルアミノ）、
（４７）５ないし１４員芳香族複素環アミノ基（例、ピリジルアミノ）、
（４８）Ｃ_７−１６アラルキルアミノ基（例、ベンジルアミノ）、
（４９）ホルミルアミノ基、
（５０）Ｃ_１−６アルキル−カルボニルアミノ基（例、アセチルアミノ、プロパノイルアミノ、ブタノイルアミノ）、
（５１）（Ｃ_１−６アルキル）（Ｃ_１−６アルキル−カルボニル）アミノ基（例、Ｎ−アセチル−Ｎ−メチルアミノ）、
（５２）Ｃ_６−１４アリール−カルボニルアミノ基（例、フェニルカルボニルアミノ、ナフチルカルボニルアミノ）、
（５３）Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニルアミノ基（例、メトキシカルボニルアミノ、エトキシカルボニルアミノ、プロポキシカルボニルアミノ、ブトキシカルボニルアミノ、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）、
（５４）Ｃ_７−１６アラルキルオキシ−カルボニルアミノ基（例、ベンジルオキシカルボニルアミノ）、
（５５）Ｃ_１−６アルキルスルホニルアミノ基（例、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ）、
（５６）Ｃ_１−６アルキル基で置換されていてもよいＣ_６−１４アリールスルホニルアミノ基（例、フェニルスルホニルアミノ、トルエンスルホニルアミノ）、
（５７）ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキル基、
（５８）Ｃ_２−６アルケニル基、
（５９）Ｃ_２−６アルキニル基、
（６０）Ｃ_３−１０シクロアルキル基、
（６１）Ｃ_３−１０シクロアルケニル基、及び
（６２）Ｃ_６−１４アリール基。

【0020】

「置換されていてもよい炭化水素基」における上記置換基の数は、例えば、１ないし５個、好ましくは１ないし３個である。置換基数が２個以上の場合、各置換基は同一であっても異なっていてもよい。
本明細書中、「複素環基」（「置換されていてもよい複素環基」における「複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子をそれぞれ含有する、(i)芳香族複素環基、(ii)非芳香族複素環基および(iii)７ないし１０員複素架橋環基が挙げられる。

【0021】

本明細書中、「芳香族複素環基」（「５ないし１４員芳香族複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし１４員（好ましくは５ないし１０員）の芳香族複素環基が挙げられる。
該「芳香族複素環基」の好適な例としては、チエニル、フリル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、１，２，４−チアジアゾリル、１，３，４−チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニルなどの５ないし６員単環式芳香族複素環基；
ベンゾチオフェニル、ベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾトリアゾリル、イミダゾピリジニル、チエノピリジニル、フロピリジニル、ピロロピリジニル、ピラゾロピリジニル、オキサゾロピリジニル、チアゾロピリジニル、イミダゾピラジニル、イミダゾピリミジニル、チエノピリミジニル、フロピリミジニル、ピロロピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、オキサゾロピリミジニル、チアゾロピリミジニル、ピラゾロトリアジニル、ナフト［２，３−ｂ］チエニル、フェノキサチイニル、インドリル、イソインドリル、１Ｈ−インダゾリル、プリニル、イソキノリル、キノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニルなどの８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環基が挙げられる。

【0022】

本明細書中、「非芳香族複素環基」（「３ないし１４員非芳香族複素環基」を含む）としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する３ないし１４員（好ましくは４ないし１０員）の非芳香族複素環基が挙げられる。
該「非芳香族複素環基」の好適な例としては、アジリジニル、オキシラニル、チイラニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロフラニル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、テトラヒドロイソチアゾリル、テトラヒドロオキサゾリル、テトラヒドロイソオキサゾリル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピリジニル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロピリダジニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、アゼピニル、オキセパニル、アゾカニル、ジアゾカニルなどの３ないし８員単環式非芳香族複素環基；
ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロベンゾチアゾリル、ジヒドロベンゾイソチアゾリル、ジヒドロナフト［２，３−ｂ］チエニル、テトラヒドロイソキノリル、テトラヒドロキノリル、４Ｈ−キノリジニル、インドリニル、イソインドリニル、テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジニル、テトラヒドロベンゾアゼピニル、テトラヒドロキノキサリニル、テトラヒドロフェナントリジニル、ヘキサヒドロフェノチアジニル、ヘキサヒドロフェノキサジニル、テトラヒドロフタラジニル、テトラヒドロナフチリジニル、テトラヒドロキナゾリニル、テトラヒドロシンノリニル、テトラヒドロカルバゾリル、テトラヒドロ−β−カルボリニル、テトラヒドロアクリジニル、テトラヒドロフェナジニル、テトラヒドロチオキサンテニル、オクタヒドロイソキノリルなどの９ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）非芳香族複素環基が挙げられる。

【0023】

本明細書中、「７ないし１０員複素架橋環基」の好適な例としては、キヌクリジニル、７−アザビシクロ［２．２．１］ヘプタニルが挙げられる。
本明細書中、「含窒素複素環基」としては、「複素環基」のうち、環構成原子として少なくとも１個以上の窒素原子を含有するものが挙げられる。
本明細書中、「置換されていてもよい複素環基」としては、例えば、前記した置換基群Ａから選ばれる置換基を有していてもよい複素環基が挙げられる。
「置換されていてもよい複素環基」における置換基の数は、例えば、１ないし３個である。置換基数が２個以上の場合、各置換基は同一であっても異なっていてもよい。

【0024】

本明細書中、「アシル基」としては、例えば、「ハロゲン原子、ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルコキシ基、ヒドロキシ基、ニトロ基、シアノ基、アミノ基およびカルバモイル基から選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_３−１０シクロアルケニル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、５ないし１４員芳香族複素環基および３ないし１４員非芳香族複素環基から選ばれる１または２個の置換基」をそれぞれ有していてもよい、ホルミル基、カルボキシ基、カルバモイル基、チオカルバモイル基、スルフィノ基、スルホ基、スルファモイル基、ホスホノ基が挙げられる。
また、「アシル基」としては、炭化水素−スルホニル基、複素環−スルホニル基、炭化水素−スルフィニル基、複素環−スルフィニル基も挙げられる。
ここで、炭化水素−スルホニル基とは、炭化水素基が結合したスルホニル基を、複素環−スルホニル基とは、複素環基が結合したスルホニル基を、炭化水素−スルフィニル基とは、炭化水素基が結合したスルフィニル基を、複素環−スルフィニル基とは、複素環基が結合したスルフィニル基を、それぞれ意味する。
「アシル基」の好適な例としては、ホルミル基、カルボキシ基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_２−６アルケニル−カルボニル基（例、クロトノイル）、Ｃ_３−１０シクロアルキル−カルボニル基（例、シクロブタンカルボニル、シクロペンタンカルボニル、シクロヘキサンカルボニル、シクロヘプタンカルボニル）、Ｃ_３−１０シクロアルケニル−カルボニル基（例、２−シクロヘキセンカルボニル）、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリールオキシ−カルボニル基（例、フェニルオキシカルボニル、ナフチルオキシカルボニル）、Ｃ_７−１６アラルキルオキシ−カルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル、フェネチルオキシカルボニル）、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_２−６アルケニル−カルバモイル基（例、ジアリルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_３−１０シクロアルキル−カルバモイル基（例、シクロプロピルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−カルバモイル基（例、フェニルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基、５ないし１４員芳香族複素環カルバモイル基（例、ピリジルカルバモイル）、チオカルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−チオカルバモイル基（例、メチルチオカルバモイル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_２−６アルケニル−チオカルバモイル基（例、ジアリルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_３−１０シクロアルキル−チオカルバモイル基（例、シクロプロピルチオカルバモイル、シクロヘキシルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−チオカルバモイル基（例、フェニルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−チオカルバモイル基（例、ベンジルチオカルバモイル、フェネチルチオカルバモイル）、５ないし１４員芳香族複素環チオカルバモイル基（例、ピリジルチオカルバモイル）、スルフィノ基、Ｃ_１−６アルキルスルフィニル基（例、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル）、スルホ基、Ｃ_１−６アルキルスルホニル基、Ｃ_６−１４アリールスルホニル基、ホスホノ基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキルホスホノ基（例、ジメチルホスホノ、ジエチルホスホノ、ジイソプロピルホスホノ、ジブチルホスホノ）が挙げられる。

【0025】

本明細書中、「置換されていてもよいアミノ基」としては、例えば、置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基、Ｃ_１−６アルキルスルホニル基およびＣ_６−１４アリールスルホニル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいアミノ基が挙げられる。
置換されていてもよいアミノ基の好適な例としては、アミノ基、モノ−またはジ−（ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキル）アミノ基（例、メチルアミノ、トリフルオロメチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、プロピルアミノ、ジブチルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_２−６アルケニルアミノ基（例、ジアリルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_３−１０シクロアルキルアミノ基（例、シクロプロピルアミノ、シクロヘキシルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリールアミノ基（例、フェニルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキルアミノ基（例、ベンジルアミノ、ジベンジルアミノ）、モノ−またはジ−（ハロゲン化されていてもよいＣ_１−６アルキル）−カルボニルアミノ基（例、アセチルアミノ、プロピオニルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−カルボニルアミノ基（例、ベンゾイルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニルアミノ基（例、ベンジルカルボニルアミノ）、モノ−またはジ−５ないし１４員芳香族複素環カルボニルアミノ基（例、ニコチノイルアミノ、イソニコチノイルアミノ）、モノ−またはジ−３ないし１４員非芳香族複素環カルボニルアミノ基（例、ピペリジニルカルボニルアミノ）、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニルアミノ基（例、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）、５ないし１４員芳香族複素環アミノ基（例、ピリジルアミノ）、カルバモイルアミノ基、（モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル）アミノ基（例、メチルカルバモイルアミノ）、（モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル）アミノ基（例、ベンジルカルバモイルアミノ）、Ｃ_１−６アルキルスルホニルアミノ基（例、メチルスルホニルアミノ、エチルスルホニルアミノ）、Ｃ_６−１４アリールスルホニルアミノ基（例、フェニルスルホニルアミノ）、（Ｃ_１−６アルキル）（Ｃ_１−６アルキル−カルボニル）アミノ基（例、Ｎ−アセチル−Ｎ−メチルアミノ）、（Ｃ_１−６アルキル）（Ｃ_６−１４アリール−カルボニル）アミノ基（例、Ｎ−ベンゾイル−Ｎ−メチルアミノ）が挙げられる。

【0026】

本明細書中、「置換されていてもよいカルバモイル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基およびモノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいカルバモイル基が挙げられる。
置換されていてもよいカルバモイル基の好適な例としては、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_２−６アルケニル−カルバモイル基（例、ジアリルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_３−１０シクロアルキル−カルバモイル基（例、シクロプロピルカルバモイル、シクロヘキシルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−カルバモイル基（例、フェニルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルボニル−カルバモイル基（例、アセチルカルバモイル、プロピオニルカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−カルボニル−カルバモイル基（例、ベンゾイルカルバモイル）、５ないし１４員芳香族複素環カルバモイル基（例、ピリジルカルバモイル）が挙げられる。

【0027】

本明細書中、「置換されていてもよいチオカルバモイル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基およびモノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいチオカルバモイル基が挙げられる。
置換されていてもよいチオカルバモイル基の好適な例としては、チオカルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−チオカルバモイル基（例、メチルチオカルバモイル、エチルチオカルバモイル、ジメチルチオカルバモイル、ジエチルチオカルバモイル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_２−６アルケニル−チオカルバモイル基（例、ジアリルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_３−１０シクロアルキル−チオカルバモイル基（例、シクロプロピルチオカルバモイル、シクロヘキシルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−チオカルバモイル基（例、フェニルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−チオカルバモイル基（例、ベンジルチオカルバモイル、フェネチルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルボニル−チオカルバモイル基（例、アセチルチオカルバモイル、プロピオニルチオカルバモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−カルボニル−チオカルバモイル基（例、ベンゾイルチオカルバモイル）、５ないし１４員芳香族複素環チオカルバモイル基（例、ピリジルチオカルバモイル）が挙げられる。

【0028】

本明細書中、「置換されていてもよいスルファモイル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基およびモノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基から選ばれる１または２個の置換基」を有していてもよいスルファモイル基が挙げられる。
置換されていてもよいスルファモイル基の好適な例としては、スルファモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−スルファモイル基（例、メチルスルファモイル、エチルスルファモイル、ジメチルスルファモイル、ジエチルスルファモイル、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルスルファモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_２−６アルケニル−スルファモイル基（例、ジアリルスルファモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_３−１０シクロアルキル−スルファモイル基（例、シクロプロピルスルファモイル、シクロヘキシルスルファモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−スルファモイル基（例、フェニルスルファモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−スルファモイル基（例、ベンジルスルファモイル、フェネチルスルファモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルボニル−スルファモイル基（例、アセチルスルファモイル、プロピオニルスルファモイル）、モノ−またはジ−Ｃ_６−１４アリール−カルボニル−スルファモイル基（例、ベンゾイルスルファモイル）、５ないし１４員芳香族複素環スルファモイル基（例、ピリジルスルファモイル）が挙げられる。

【0029】

本明細書中、「置換されていてもよいヒドロキシ基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環カルボニル基、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニル基、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニル基、５ないし１４員芳香族複素環基、カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_１−６アルキル−カルバモイル基、モノ−またはジ−Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイル基、Ｃ_１−６アルキルスルホニル基およびＣ_６−１４アリールスルホニル基から選ばれる置換基」を有していてもよいヒドロキシ基が挙げられる。
置換されていてもよいヒドロキシ基の好適な例としては、ヒドロキシ基、Ｃ_１−６アルコキシ基、Ｃ_２−６アルケニルオキシ基（例、アリルオキシ、２−ブテニルオキシ、２−ペンテニルオキシ、３−ヘキセニルオキシ）、Ｃ_３−１０シクロアルキルオキシ基（例、シクロヘキシルオキシ）、Ｃ_６−１４アリールオキシ基（例、フェノキシ、ナフチルオキシ）、Ｃ_７−１６アラルキルオキシ基（例、ベンジルオキシ、フェネチルオキシ）、Ｃ_１−６アルキル−カルボニルオキシ基（例、アセチルオキシ、プロピオニルオキシ、ブチリルオキシ、イソブチリルオキシ、ピバロイルオキシ）、Ｃ_６−１４アリール−カルボニルオキシ基（例、ベンゾイルオキシ）、Ｃ_７−１６アラルキル−カルボニルオキシ基（例、ベンジルカルボニルオキシ）、５ないし１４員芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、ニコチノイルオキシ）、３ないし１４員非芳香族複素環カルボニルオキシ基（例、ピペリジニルカルボニルオキシ）、Ｃ_１−６アルコキシ−カルボニルオキシ基（例、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルオキシ）、５ないし１４員芳香族複素環オキシ基（例、ピリジルオキシ）、カルバモイルオキシ基、Ｃ_１−６アルキル−カルバモイルオキシ基（例、メチルカルバモイルオキシ）、Ｃ_７−１６アラルキル−カルバモイルオキシ基（例、ベンジルカルバモイルオキシ）、Ｃ_１−６アルキルスルホニルオキシ基（例、メチルスルホニルオキシ、エチルスルホニルオキシ）、Ｃ_６−１４アリールスルホニルオキシ基（例、フェニルスルホニルオキシ）が挙げられる。

【0030】

本明細書中、「置換されていてもよいスルファニル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基、Ｃ_７−１６アラルキル基、Ｃ_１−６アルキル−カルボニル基、Ｃ_６−１４アリール−カルボニル基および５ないし１４員芳香族複素環基から選ばれる置換基」を有していてもよいスルファニル基、ハロゲン化されたスルファニル基が挙げられる。
置換されていてもよいスルファニル基の好適な例としては、スルファニル（−ＳＨ）基、Ｃ_１−６アルキルチオ基、Ｃ_２−６アルケニルチオ基（例、アリルチオ、２−ブテニルチオ、２−ペンテニルチオ、３−ヘキセニルチオ）、Ｃ_３−１０シクロアルキルチオ基（例、シクロヘキシルチオ）、Ｃ_６−１４アリールチオ基（例、フェニルチオ、ナフチルチオ）、Ｃ_７−１６アラルキルチオ基（例、ベンジルチオ、フェネチルチオ）、Ｃ_１−６アルキル−カルボニルチオ基（例、アセチルチオ、プロピオニルチオ、ブチリルチオ、イソブチリルチオ、ピバロイルチオ）、Ｃ_６−１４アリール−カルボニルチオ基（例、ベンゾイルチオ）、５ないし１４員芳香族複素環チオ基（例、ピリジルチオ）、ハロゲン化チオ基（例、ペンタフルオロチオ）が挙げられる。

【0031】

本明細書中、「置換されていてもよいシリル基」としては、例えば、「置換基群Ａから選ばれる１ないし３個の置換基をそれぞれ有していてもよい、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_３−１０シクロアルキル基、Ｃ_６−１４アリール基およびＣ_７−１６アラルキル基から選ばれる１ないし３個の置換基」を有していてもよいシリル基が挙げられる。
置換されていてもよいシリル基の好適な例としては、トリ−Ｃ_１−６アルキルシリル基（例、トリメチルシリル、tert-ブチル（ジメチル）シリル）が挙げられる。

【0032】

本明細書中、「Ｃ_１−６アルキレン基」としては、例えば、−ＣＨ_２−、−（ＣＨ_２）_２−、−（ＣＨ_２）_３−、−（ＣＨ_２）_４−、−（ＣＨ_２）_５−、−（ＣＨ_２）_６−、−ＣＨ（ＣＨ_３）−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−、−ＣＨ（Ｃ_２Ｈ_５）−、−ＣＨ（Ｃ_３Ｈ_７）−、−ＣＨ（ＣＨ（ＣＨ_３）_２）−、−（ＣＨ（ＣＨ_３））_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ（ＣＨ_３）−、−ＣＨ（ＣＨ_３）−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ（ＣＨ_３）_２−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ（ＣＨ_３）_２−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−が挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_２−６アルケニレン基」としては、例えば、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（ＣＨ_３）_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ＝ＣＨ−が挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_２−６アルキニレン基」としては、例えば、−Ｃ≡Ｃ−、−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−、−Ｃ（ＣＨ_３）_２−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ（ＣＨ_３）_２−、−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−が挙げられる。

【0033】

本明細書中、「炭化水素環」としては、例えば、Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環、Ｃ_３−１０シクロアルカン、Ｃ_３−１０シクロアルケンが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環」としては、例えば、ベンゼン、ナフタレンが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_３−１０シクロアルカン」としては、例えば、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタンが挙げられる。
本明細書中、「Ｃ_３−１０シクロアルケン」としては、例えば、シクロプロペン、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘプテン、シクロオクテンが挙げられる。
本明細書中、「複素環」としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子をそれぞれ含有する、芳香族複素環および非芳香族複素環が挙げられる。

【0034】

本明細書中、「芳香族複素環」としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし１４員（好ましくは５ないし１０員）の芳香族複素環が挙げられる。該「芳香族複素環」の好適な例としては、チオフェン、フラン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、１，２，４−オキサジアゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、１，３，４−チアジアゾール、トリアゾール、テトラゾール、トリアジンなどの５ないし６員単環式芳香族複素環；
ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、ベンゾイミダゾール、ベンゾオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイソチアゾール、ベンゾトリアゾール、イミダゾピリジン、チエノピリジン、フロピリジン、ピロロピリジン、ピラゾロピリジン、オキサゾロピリジン、チアゾロピリジン、イミダゾピラジン、イミダゾピリミジン、チエノピリミジン、フロピリミジン、ピロロピリミジン、ピラゾロピリミジン、オキサゾロピリミジン、チアゾロピリミジン、ピラゾロピリミジン、ピラゾロトリアジン、ナフト［２，３−ｂ］チオフェン、フェノキサチイン、インド−ル、イソインドール、１Ｈ−インダゾール、プリン、イソキノリン、キノリン、フタラジン、ナフチリジン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、カルバゾール、β−カルボリン、フェナントリジン、アクリジン、フェナジン、フェノチアジン、フェノキサジンなどの８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環が挙げられる。

【0035】

本明細書中、「非芳香族複素環」としては、例えば、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する３ないし１４員（好ましくは４ないし１０員）の非芳香族複素環が挙げられる。該「非芳香族複素環」の好適な例としては、アジリジン、オキシラン、チイラン、アゼチジン、オキセタン、チエタン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロフラン、ピロリン、ピロリジン、イミダゾリン、イミダゾリジン、オキサゾリン、オキサゾリジン、ピラゾリン、ピラゾリジン、チアゾリン、チアゾリジン、テトラヒドロイソチアゾール、テトラヒドロオキサゾール、テトラヒドロイソオキサゾール、ピペリジン、ピペラジン、テトラヒドロピリジン、ジヒドロピリジン、ジヒドロチオピラン、テトラヒドロピリミジン、テトラヒドロピリダジン、ジヒドロピラン、テトラヒドロピラン、テトラヒドロチオピラン、モルホリン、チオモルホリン、アゼパニン、ジアゼパン、アゼピン、アゾカン、ジアゾカン、オキセパンなどの３ないし８員単環式非芳香族複素環；
ジヒドロベンゾフラン、ジヒドロベンゾイミダゾール、ジヒドロベンゾオキサゾール、ジヒドロベンゾチアゾール、ジヒドロベンゾイソチアゾール、ジヒドロナフト［２，３−ｂ］チオフェン、テトラヒドロイソキノリン、テトラヒドロキノリン、４Ｈ−キノリジン、インドリン、イソインドリン、テトラヒドロチエノ［２，３−ｃ］ピリジン、テトラヒドロベンゾアゼピン、テトラヒドロキノキサリン、テトラヒドロフェナントリジン、ヘキサヒドロフェノチアジン、ヘキサヒドロフェノキサジン、テトラヒドロフタラジン、テトラヒドロナフチリジン、テトラヒドロキナゾリン、テトラヒドロシンノリン、テトラヒドロカルバゾール、テトラヒドロ−β−カルボリン、テトラヒドロアクリジン、テトラヒドロフェナジン、テトラヒドロチオキサンテン、オクタヒドロイソキノリンなどの９ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）非芳香族複素環が挙げられる。
本明細書中、「含窒素複素環」としては、「複素環」のうち、環構成原子として少なくとも１個以上の窒素原子を含有するものが挙げられる。
本明細書中「置換されてもよい環」としては、例えば、置換されていてもよい炭化水素環及び置換されていてもよい複素環が挙げられる。

【0036】

本明細書中、式（Ｉ）において［Ｚ］で示される「細胞内タンパク質に特異的に結合するリガンド」とは、化合物（Ｉ）の一部を構成し、生体の細胞内に存在する任意のタンパク質への特異的な結合活性（本明細書中、「細胞内タンパク質に対するリガンド活性」と称することがある）を有する構造単位を意味する。前記構造単位を構成する物質は細胞内タンパク質に特異的結合する物質であればよく、その例として、ＤＮＡ、ＲＮＡ，ヌクレオシド、ヌクレオチド、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂質、アルカロイド、テルペンおよびそれらの誘導体、補酵素、低分子化合物（特に、低分子化合物）が挙げられる。
本明細書において「細胞内タンパク質」とは、化合物（Ｉ）において[Ｚ]で示される原子団に結合するタンパク質を示す。「細胞内タンパク質」は、少なくともその一部が細胞内に存在するタンパク質であればよく、細胞種は限定されない。細胞としては哺乳動物（例、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒト）の細胞が好ましい。細胞内タンパク質としては、病態に関連した細胞内タンパク質（特に、ヒトの病態に関連した細胞内タンパク質）が好ましい。上記病態関連細胞内タンパク質としては、例えば、ＡＢＬ、ＡＲ、ＥＲ(特に、ＥＲα)、ＢＲＤ４、Ｒａｓ、ＦＲＳ２α、ＣＲＡＢＰ２、ＴＡＣＣ３、ＰＩ３Ｋ、ＰＤＥ４が挙げられ、なかでもＡＢＬ、ＡＲ、ＥＲ(特に、ＥＲα)、ＢＲＤ４、ＰＤＥ４、Ｒａｓが好ましい。

【0037】

本明細書中、「リンカー」とは、２個の原子団（具体的には、式（Ｉ）における［Ｚ］および［Ｘ］）を連結するために当該２個の原子団の間に介在する原子団を示す。化合物（Ｉ）の一部を構成するリンカーは、その内部に下式（ＩＩ）

【化12】

（式中、Ｌ^１、Ｌ^２およびＬ^３は、それぞれ独立して、炭素原子、酸素原子、窒素原子および硫黄原子からなる群から選択される無置換の原子を示し、
−−は、それぞれ独立して、単結合、二重結合または三重結合を示す。）で示される直鎖状リンカーを含む。Ｌ^１、Ｌ^２およびＬ^３は、リンカー内部に存在する当該リンカーを構成する原子を示し、Ｌ^１及び／又はＬ^３が［Ｚ］又は［Ｘ］と直接に結合してもよい。式（ＩＩ）で示されるリンカーは、置換基を持たない炭素、酸素、窒素、および硫黄からなる群から選択される１種以上の原子が複数連結した直鎖を含む。この直鎖を構成する原子であるＬ^１、Ｌ^２およびＬ^３は、互いに単結合、二重結合または三重結合で結合していてもよい。Ｌ^１、Ｌ^２およびＬ^３で表される原子およびその原子の結合の具体例としては、−ＣＨ_２−、−ＣＨ＝、＝ＣＨ−、−Ｃ≡、≡Ｃ−、−ＮＨ−、−Ｎ＝、＝Ｎ−、−Ｏ−、及び−Ｓ−が挙げられる。
「リンカー」は、上記直鎖の何れかの端部又は両端に他の基を有してもよく、そのような基としては、例えば、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｓ）−、−Ｃ（ＮＨ）−および−ＣＨ＝Ｎ−（これらは、置換可能な位置で１ないし３個のハロゲン原子で置換されていてもよい）が挙げられる。
なお、リガンド［Ｚ］にリンカー［Ｌ］が結合した化合物（Ｉ）の一部を構成する構造単位は、細胞内タンパク質に対するリガンド活性を有し得る。また、ＩＡＰリガンドであるリガンド［Ｘ］にリンカー［Ｌ］が結合した化合物（Ｉ）の一部を構成する構造単位はＩＡＰに対するリガンド活性を有し得る。

【0038】

式（Ｉ）における［Ｚ］、［Ｌ］、および［Ｘ］の好ましい例を説明する。
式（Ｉ）における［Ｚ］は、病態に関連した細胞内タンパク質に対するリガンドであることが好ましい。例えば、特許文献１〜９及び１４〜１７及び非特許文献１〜１０、１２、１３、１５〜１８で記載する病態関連タンパク質に特異的に結合するリガンドを挙げることができる。具体的には、ＡＢＬ（慢性骨髄性白血病などに関与）、ＡＲ（前立腺癌などに関与）、ＥＲ（特に、ＥＲα）（乳癌などに関与）、ＢＲＤ４（多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病などに関与）、Ｒａｓ（大腸癌、膵臓癌などに関与）、ＣＲＡＢＰ２（ビタミンＡ欠損症に関与）、ＴＡＣＣ３、ＦＲＳ２α（癌）、ＰＩ３Ｋ（炎症）、及びＰＤＥ４（炎症、特に気管支喘息、アトピー性皮膚炎に関与）に特異的に結合するリガンドを挙げることができる。
［Ｚ］は、より好ましくは、ＡＢＬ、ＡＲ、ＥＲ（特に、ＥＲα）、ＢＲＤ４、Ｒａｓ、又はＰＤＥ４に特異的に結合するリガンドである。

【0039】

ＡＢＬに対するリガンドとしては、例えば

【化13】

【化14】

【化15】

【化16】

【化17】

【化18】

【化19】

を挙げられる。

【0040】

ＡＲに対するリガンドとしては、例えば

【化20】

【化21】

【化22】

【化23】

【化24】

が挙げられる。

【0041】

ＥＲαに対するリガンドとしては、例えば

【化25】

【化26】

が挙げられ、ＢＲＤ４に対するリガンドとしては、例えば

【化27】

が挙げられ、ＰＤＥ４に対するリガンドとしては、例えば

【化28】

が挙げられる。

【0042】

Ｒａｓに対するリガンドとしては、例えば、以下の文献に記載されたリガンドが挙げられる；Nature, 2013, 503, 548-551; 国際公開2013/155223号；Science, 2016, 351, 604-608; 国際公開WO2014152588号；国際公開2015/054572号；国際公開2016/049524号；Nat. Rev. Drug Discov., 2014, 13, 828-851; Chem. Soc. Rev., 2016, advance article (DOI: 10.1039/C5CS00911A)。
Ｒａｓに対するリガンドとしては、例えば、

【化29】

【化30】

【化31】

【化32】

【化33】

が挙げられる。

【0043】

式（Ｉ）における［Ｌ］は、好ましくは、少なくとも、式:−（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）_ｎ−（式中、ｎは１〜２０（好ましくは１〜１０、より好ましくは１〜５、さらに好ましくは２〜５）を示す。）で表されるエチレングリコール単位で形成されている直鎖を含むリンカーである。
リンカーは、この直鎖の何れかの端部又は両端部に他の基を有してもよく、このような基の好ましい例として、−ＣＨ_２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｏ−、−ＣＨ_２−、−Ｃ≡Ｃ−、及び−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−から選択される基又はこれらが２つ以上連結した基を挙げることができる。
式（Ｉ）の化合物の［Ｘ］が式（ＩＩＩ）の構造の場合、［Ｌ］は、好ましくは、式:−（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）_ｎ−（式中のｎは、１〜５であり、好ましくは３〜５である）で表されるエチレングリコール単位で形成されている直鎖を含み、［Ｚ］側に−ＣＨ_２−Ｏ−、−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＣＨ_２−、−Ｃ≡Ｃ−、又は−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−が付加されていてもよい、リンカーである。式（Ｉ）の化合物の［Ｘ］が式（ＩＶ）、（Ｖ）又は（ＶＩ）で表される構造の場合（または、後述の式（Ｖ’）で表される構造の場合）、［Ｌ］は、好ましくは、式:−（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）_ｎ−（式中のｎは、２〜５であり、好ましくは３〜５である）で表されるエチレングリコール単位で形成されている直鎖を含み、当該直鎖の何れか一端又は両端に−ＣＨ_２、−ＣＨ_２−Ｏ−又は−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｓ−が付加されていてもよい、リンカーである。

【0044】

式（Ｉ）における［Ｘ］は、上記式（ＩＩＩ）〜（ＶＩ）のいずれかで表される構造であり、好ましくは、上記式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）または（ＶＩ）のいずれかで表される構造であり、より好ましくは上記式（ＩＩＩ）で表される構造（さらに好ましくは上記式（ＶＩＩ）で表される構造、さらにより好ましくは上記（ＩＸ）で表される構造、とりわけ好ましくは上記（Ｘ）で表される構造）である。
また、式（Ｉ）における［Ｘ］は、下式（Ｖ’）

【化34】

（式中、各記号は前記と同意義を示す。）
で表される構造であってもよい。

【0045】

Ｒは、好ましくはＣ_３−１０シクロアルキル基（特に、シクロヘキシル）、Ｃ_１−６アルキル基（特に、イソプロピル、tert-ブチル）、または１ないし３個（特に、１個）のＣ_６−１４アリール基（特に、フェニル）で置換されたＣ_１−６アルキル基（特に、メチル）であり、より好ましくはＣ_３−１０シクロアルキル基（特に、シクロヘキシル）である。

【0046】

環Ａは、好ましくは、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環及びピリジン環）又は環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環（特に、チアゾロピリジン環）であり、より好ましくは、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環、ピリジン環）である。

【0047】

Ｘが上記式（ＩＩＩ）、及び（ＩＶ）の場合、環Ａは、好ましくは、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環及びピリジン環）であり、より好ましくは環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし３個のヘテロ原子を含有する５員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環）である。
Ｘが上記式（ＶＩ）の場合、環Ａは、好ましくは、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、ピリジン環）又は８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環（特に、チアゾロピリジン環）であり、より好ましくは環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし３個のヘテロ原子を含有する６員単環式芳香族複素環（特に、ピリジン環）又は８ないし１４員縮合２または３環式芳香族複素環（特に、チアゾロピリジン環）である。

【0048】

環Ｂは、好ましくは、１ないし３個のハロゲン原子（特に、フッ素原子）で置換されてもよいＣ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環、ナフタレン環）、より好ましくはＣ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環）である。
Ｘが上記式（ＩＩＩ）の場合、環Ｂは、好ましくはＣ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環）である。
Ｘが上記式（ＩＶ）の場合、環Ｂは、好ましくは１ないし３個のハロゲン原子（特に、フッ素原子）で置換されたＣ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環）である。
Ｘが上記式（ＶＩ）の場合、環Ｂは、好ましくは１ないし３個のハロゲン原子（特に、フッ素原子）で置換されてもよいＣ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環）である。

【0049】

化合物（１）の好適な具体例としては、以下が挙げられる：
化合物（Ａ）
［Ｚ］が、ＡＢＬ、ＡＲ、ＥＲ（特に、ＥＲα）、ＢＲＤ４、Ｒａｓ、又はＰＤＥ４に特異的に結合するリガンドであり；
［Ｌ］が、少なくとも式: −（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）_ｎ−（式中のｎは、１〜５である）で表されるエチレングリコール単位で形成されている直鎖を含むリンカーであり；
［Ｘ］が、前記式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）又は（ＶＩ）であり、
Ｒが、Ｃ_３−１０シクロアルキル基（特に、シクロヘキシル）、Ｃ_１−６アルキル基（特に、イソプロピル、tert-ブチル）又は１ないし３個（特に、１個）のＣ_６−１４アリール基（特に、フェニル）で置換されたＣ_１−６アルキル基（特に、メチル）であり、
環Ａが、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環、ピリジン環）又は環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環（特に、チアゾロピリジン環）であり、 環Ｂが、１ないし３個のハロゲン原子（特に、フッ素原子）で置換されてもよいＣ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環、ナフタレン環）であり、
Ｙが、結合手またはカルボニル基である、
式（Ｉ）の化合物。

【0050】

化合物（Ｂ）
［Ｚ］が、ＡＢＬ、ＡＲ、ＥＲ（特に、ＥＲα）、ＢＲＤ４、Ｒａｓ、又はＰＤＥ４に特異的に結合するリガンドであり；
［Ｌ］が、式: −（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）ｎ−（式中のｎは１〜５である）で表されるエチレングリコール単位で形成されている直鎖を含むリンカーであり；
［Ｘ］が、式（ＩＩＩ）であり、
Ｒが、Ｃ_３−１０シクロアルキル基（特に、シクロヘキシル）、Ｃ_１−６アルキル基（特に、イソプロピル基、tert-ブチル基）、または１ないし３個（特に、１個）のＣ_６−１４アリール基（特に、フェニル）で置換されたＣ_１−６アルキル基（特に、メチル基）であり、
環Ａが、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環、ピリジン環）又は環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する８ないし１４員縮合多環式（好ましくは２または３環式）芳香族複素環（特に、チアゾロピリジン環）であり、
環Ｂが、Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環）である、
式（Ｉ）の化合物。

【0051】

化合物（Ｃ）
［Ｚ］が、ＡＢＬ、ＡＲ、ＥＲ（特に、ＥＲα）、ＢＲＤ４、Ｒａｓ、又はＰＤＥ４に特異的に結合するリガンドであり；
［Ｌ］が、式: −（ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｏ）ｎ−（式中のｎは１〜５（特に、２〜５）である）で表されるエチレングリコール単位で形成されている直鎖を含むリンカーであり；
［Ｘ］が、下式（ＶＩＩ）

【化35】

（式中、環Ａは、環構成原子として炭素原子以外に窒素原子、硫黄原子および酸素原子から選ばれる１ないし４個のヘテロ原子を含有する５ないし６員単環式芳香族複素環（特に、チアゾール環、ピリジン環）で示される部分構造を示し、
環Ｂが、Ｃ_６−１４芳香族炭化水素環（特に、ベンゼン環）を示す。）である、
式（Ｉ）の化合物。

【0052】

化合物（Ｉ）における塩としては、薬理学的に許容される塩が好ましく、例えば、無機塩基との塩、有機塩基との塩、無機酸との塩、有機酸との塩、塩基性または酸性アミノ酸との塩が挙げられる。
無機塩基との塩の好適な例としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、アンモニウム塩が挙げられる。
有機塩基との塩の好適な例としては、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン［トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン］、ｔｅｒｔ−ブチルアミン、シクロヘキシルアミン、ベンジルアミン、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミンとの塩が挙げられる。
無機酸との塩の好適な例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸との塩が挙げられる。
有機酸との塩の好適な例としては、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フタル酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸との塩が挙げられる。
塩基性アミノ酸との塩の好適な例としては、アルギニン、リジン、オルニチンとの塩が挙げられる。
酸性アミノ酸との塩の好適な例としては、アスパラギン酸、グルタミン酸との塩が挙げられる。

【0053】

本発明化合物の製造法について以下に説明する。
以下の製造方法における各工程で用いられた原料や試薬、ならびに得られた化合物は、それぞれ塩を形成していてもよい。このような塩としては、例えば、前述の本発明化合物の塩と同様のもの等が挙げられる。

【0054】

各工程で得られた化合物が遊離化合物である場合には、自体公知の方法により、目的とする塩に変換することができる。逆に各工程で得られた化合物が塩である場合には、自体公知の方法により、遊離体または目的とする他の種類の塩に変換することができる。

【0055】

各工程で得られた化合物は反応液のままか、または粗生成物として得た後に、次反応に用いることもできる、あるいは、各工程で得られた化合物を、常法に従って、反応混合物から濃縮、晶出、再結晶、蒸留、溶媒抽出、分溜、クロマトグラフィーなどの分離手段により単離および／または精製することができる。

【0056】

各工程の原料や試薬の化合物が市販されている場合には、市販品をそのまま用いることができる。
各工程の反応において、反応時間は、用いる試薬や溶媒により異なり得るが、特に記載の無い場合、通常１分〜４８時間、好ましくは１０分〜８時間である。

【0057】

各工程の反応において、反応温度は、用いる試薬や溶媒により異なり得るが、特に記載が無い場合、通常−７８℃〜３００℃、好ましくは−７８℃〜１５０℃である。

【0058】

各工程の反応において、圧力は、用いる試薬や溶媒により異なり得るが、特に記載が無い場合、通常１気圧〜２０気圧、好ましくは１気圧〜３気圧である。

【0059】

各工程の反応において、例えば、Ｂｉｏｔａｇｅ社製ＩｎｉｔｉａｔｏｒなどのＭｉｃｒｏｗａｖｅ合成装置を用いることがある。反応温度は、用いる試薬や溶媒により異なり得るが、特に記載がない場合、通常室温〜３００℃、好ましくは５０℃〜２５０℃である。反応時間は、用いる試薬や溶媒により異なり得るが、特に記載の無い場合、通常１分〜４８時間、好ましくは１分〜８時間である。

【0060】

各工程の反応において、試薬は、特に記載が無い場合、基質に対して０．５当量〜２０当量、好ましくは０．８当量〜５当量が用いられる。試薬を触媒として使用する場合、試薬は基質に対して０．００１当量〜１当量、好ましくは０．０１当量〜０．２当量が用いられる。試薬が反応溶媒を兼ねる場合、試薬は溶媒量が用いられる。

【0061】

各工程の反応において、特に記載が無い場合、これらの反応は、無溶媒、あるいは適当な溶媒に溶解または懸濁して行われる。溶媒の具体例としては、実施例に記載されている溶媒、あるいは以下が挙げられる。
アルコール類：メタノール、エタノール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、２−メトキシエタノールなど；
エーテル類：ジエチルエーテル、ジフェニルエーテル、テトラヒドロフラン、１，２−ジメトキシエタン、ジオキサン、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルなど；
芳香族炭化水素類：クロロベンゼン、トルエン、キシレンなど；
飽和炭化水素類：シクロヘキサン、ヘキサンなど；
アミド類：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−アセトアミド、Ｎ−メチルピロリドンなど；
ハロゲン化炭化水素類：ジクロロメタン、四塩化炭素など；
ニトリル類：アセトニトリルなど；
スルホキシド類：ジメチルスルホキシドなど；
芳香族有機塩基類：ピリジンなど；
酸無水物類：無水酢酸など；
有機酸類：ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸など；
無機酸類：塩酸、硫酸など；
エステル類：酢酸エチルなど；
ケトン類：アセトン、メチルエチルケトンなど；
水。
上記溶媒は、二種以上を適宜の割合で混合して用いてもよい。

【0062】

各工程の反応において塩基を用いる場合、例えば、以下に示す塩基、あるいは実施例に記載されている塩基が用いられる。
無機塩基類：水酸化ナトリウム、水酸化マグネシウム、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸カリウムなど；
有機塩基類：トリエチルアミン、ジエチルアミン、ピリジン、４−ジメチルアミノピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、１，４−ジアザビシクロ［２.２.２］オクタン、１，８−ジアザビシクロ［５.４.０］−７−ウンデセン、イミダゾール、ピペリジンなど；
金属アルコキシド類：ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなど；
アルカリ金属水素化物類：水素化ナトリウムなど；
金属アミド類：ナトリウムアミド、リチウムジイソプロピルアミド、リチウムヘキサメチルジシラジドなど；
有機リチウム類：ｎ−ブチルリチウムなど。

【0063】

各工程の反応において酸または酸性触媒を用いる場合、例えば、以下に示す酸や酸性触媒、あるいは実施例に記載されている酸や酸性触媒が用いられる。
無機酸類：塩酸、硫酸、硝酸、臭化水素酸、リン酸など；
有機酸類：酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、１０−カンファースルホン酸など；
ルイス酸：三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体、ヨウ化亜鉛、無水塩化アルミニウム、無水塩化亜鉛、無水塩化鉄など。

【0064】

各工程の反応は、特に記載の無い限り、自体公知の方法、例えば、第５版実験化学講座、１３巻〜１９巻（日本化学会編）；新実験化学講座、１４巻〜１５巻（日本化学会編）；精密有機化学 改訂第２版（Ｌ． Ｆ． Ｔｉｅｔｚｅ，Ｔｈ． Ｅｉｃｈｅｒ、南江堂）；改訂 有機人名反応 そのしくみとポイント（東郷秀雄著、講談社）；ＯＲＧＡＮＩＣ ＳＹＮＴＨＥＳＥＳ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｖｅ Ｖｏｌｕｍｅ Ｉ〜ＶＩＩ（Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ ＳｏｎｓＩｎｃ）；Ｍｏｄｅｒｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ｊｉｅ Ｊａｃｋ Ｌｉ著、ＯＸＦＯＲＤ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ出版）；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ＩＩＩ、Ｖｏｌ．１〜Ｖｏｌ．１４（エルゼビア・ジャパン株式会社）；人名反応に学ぶ有機合成戦略（富岡清監訳、化学同人発行）；コンプリヘンシブ・オーガニック・トランスフォーメーションズ（ＶＣＨ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ Ｉｎｃ．）１９８９年刊などに記載された方法、あるいは実施例に記載された方法に準じて行われる。

【0065】

化合物（Ｉ）は、例えば、以下の反応式１〜２１に示す方法により、製造することができる。

【化36】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。］

【0066】

化合物（４）は、化合物（２）またはその反応性誘導体と、化合物（３）またはその反応性誘導体を、アミド化反応、Ｎ−アルキル化反応、Ｏ−アルキル化反応、Ｓ−アルキル化反応もしくはカップリング反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（Ｉ）は、化合物（４）またはその反応性誘導体と、化合物（５）またはその反応性誘導体を、アミド化反応、Ｎ−アルキル化反応、Ｏ−アルキル化反応、Ｓ−アルキル化反応もしくはカップリング反応に付すことにより、製造することができる。

【0067】

また、化合物（Ｉ）は、化合物（５）またはその反応性誘導体と、化合物（３）またはその反応性誘導体を、アミド化反応、Ｎ−アルキル化反応、Ｏ−アルキル化反応、Ｓ−アルキル化反応もしくはカップリング反応に付すことにより、化合物（６）を製造し、続いて化合物（６）またはその反応性誘導体と、化合物（２）またはその反応性誘導体を、アミド化反応、Ｎ−アルキル化反応、Ｏ−アルキル化反応、Ｓ−アルキル化反応もしくはカップリング反応に付すことによっても、製造することができる。
各工程で得られた生成物において、アミノ基、水酸基またはカルボキシル基が保護されている場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0068】

化合物（Ｉ）および化合物（２）〜（６）は、それぞれ独立して塩を形成していてもよい。
化合物（２）〜（６）の反応性誘導体としては、例えばハロゲン化アシル体、酸無水物、スルホン酸エステル体、ハロゲン化アルキル体などが挙げられる。
各工程で得られた生成物が、アジド基を有する場合は、所望により自体公知の還元反応に付すことによりアミノ基へ誘導することができる。
上記還元反応に使用される還元剤としては、水素化アルミニウムリチウム、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ）、水素化ホウ素ナトリウムなどの金属水素化物類；ボランテトラヒドロフラン錯体などのボラン類；トリフェニルホスフィンなどのホスフィン類；トリエチルシランなどが挙げられる。また、上記還元反応として、水素雰囲気下、パラジウム−カーボンやＬｉｎｄｌａｒ触媒などの触媒を用いる接触水素還元法を用いることができる。
各工程で得られた生成物が、水酸基を有する場合には、所望によりスルホン酸エステル体もしくはハロゲン化アルキル体へ誘導した後、アンモニアとの反応、ガブリエル反応などの自体公知の方法によっても、アミノ基へ誘導することができる。
各工程で得られた生成物が、カルボキシル基を有する場合には、所望によりクルチウス転位反応、カルバモイル基へ誘導した後のホフマン転位反応などの自体公知の方法によっても、アミノ基へ変換することができる。

【0069】

上記スルホン酸エステル体は、ヒドロキシ基のスルホン酸エステル化反応により製造することができる。上記スルホン酸エステル化反応に使用されるスルホニル化剤としては、メタンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホニルクロリド、メタンスルホン酸無水物、ｐ−トルエンスルホン酸無水物、トリフルオロメタンスルホン酸無水物などが挙げられる。

【0070】

上記ハロゲン化アルキル体は、ヒドロキシ基のハロゲン化反応により製造することができる。上記ハロゲン化反応に使用されるハロゲン化剤としては、ハロゲン化水素酸と無機酸の酸ハロゲン化物（具体的には、塩素化では、塩酸、塩化チオニル、オキシ塩化リンなど、臭素化では、４８％臭化水素酸）などが挙げられる。また、トリフェニルホスフィンと四塩化炭素または四臭化炭素などとの作用により、アルコールからハロゲン化アルキル体を製造することもできる。あるいは、前記スルホン酸エステルを臭化リチウム、塩化リチウムまたはヨウ化ナトリウムなどのハロゲン化アルカリ金属と反応させることによってもハロゲン化アルキル体を製造することもできる。

【0071】

アミド化反応を行う場合、ハロゲン化アシル体、酸無水物、および活性エステル体、硫酸エステル体など活性化されたカルボン酸類を使用して製造することができる。カルボン酸の活性化剤としては、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＷＳＣＤ）などのカルボジイミド系縮合剤；４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロライド−ｎ−ハイドレート（ＤＭＴ−ＭＭ）などのトリアジン系縮合剤；１，１−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）などの炭酸エステル系縮合剤；ジフェニルリン酸アジド（ＤＰＰＡ）；ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ-トリスジメチルアミノホスホニウム塩（ＢＯＰ試薬）；ヨウ化２−クロロ−１−メチル−ピリジニウム（向山試薬）；塩化チオニル；クロロギ酸エチルなどのハロギ酸低級アルキル；Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロリン酸塩（ＨＡＴＵ）；あるいはこれらの組み合わせなどが挙げられる。カルボジイミド系縮合剤を用いる場合、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（ＨＯＳｕ）、ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などの添加剤をさらに反応に加えてもよい。

【0072】

Ｎ−アルキル化反応、Ｏ−アルキル化反応もしくはＳ−アルキル化反応は、前記スルホン酸エステル体、ハロゲン化アルキル体などを使用し、塩基および、所望によりヨウ化ナトリウムまたはヨウ化カリウム等のヨウ化アルカリ金属、相関移動触媒またはクラウンエーテル等の存在下、行うことができる。
Ｏ−アルキル化反応は、光延反応を行うことでも製造することができる。試薬としては、アゾジカルボン酸エステル類（例、アゾジカルボン酸ジエチル（ＤＥＡＤ）、アゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）など）およびトリフェニルホスフィンが挙げられる。

【0073】

カップリング反応で使用される金属触媒としては、酢酸パラジウム（ＩＩ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、ジクロロビス（トリエチルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、塩化１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）、［２−（２−アミノフェニル）フェニル］−クロロ−パラジウム ジシクロヘキシル−［３−（２，４，６−トリイソプロピルフェニル）フェニル］ホスファンなどのパラジウム化合物；テトラキス（トリフェニルホスフィン）ニッケル（０）などのニッケル化合物；塩化トリス（トリフェニルホスフィン）ロジウム（ＩＩＩ）などのロジウム化合物；コバルト化合物；酸化銅、ヨウ化銅（Ｉ）などの銅化合物；白金化合物などが挙げられる。さらに反応に塩基を加えてもよく、このような塩基としては、無機塩基類などが挙げられる。

【0074】

官能基の保護または脱保護反応は、自体公知の方法、例えば、Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ社２００７年刊「Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Ed.」(Theodora W. Greene, Peter G. M. Wuts著);Thieme社2004年刊「Protecting Groups 3rd Ed.」（P.J.Kocienski著）などに記載された方法、例えば、酸、塩基、紫外光、ヒドラジン、フェニルヒドラジン、Ｎ−メチルジチオカルバミン酸ナトリウム、テトラブチルアンモニウムフルオリド、酢酸パラジウム、トリアルキルシリルハライド（例えば、トリメチルシリルヨージド、トリメチルシリルブロミド）を使用する方法や還元法、パラジウム−カーボンなどの触媒を使用する接触還元法、あるいは実施例に記載された方法に準じて行われる。

【0075】

アルコールなどの水酸基やフェノール性水酸基の保護基としては、例えば、メトキシメチルエーテル、ベンジルエーテル、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテルなどのエーテル型保護基；酢酸エステルなどのカルボン酸エステル型保護基；メタンスルホン酸エステルなどのスルホン酸エステル型保護基；ｔｅｒｔ−ブチルカルボネートなどの炭酸エステル型保護基などが挙げられる。
チオールの保護基としては、例えば、ベンジルチオエーテルなどのエーテル型保護基；チオ酢酸エステル、チオカルボネート、チオカルバメートなどのエステル型保護基などが挙げられる。

【0076】

アミノ基や、イミダゾール、ピロール、インドールなどの芳香族ヘテロ環の保護基としては、例えば、ベンジルカルバメートなどのカルバメート型保護基；アセトアミドなどのアミド型保護基；Ｎ−トリフェニルメチルアミンなどのアルキルアミン型保護基、メタンスルホンアミドなどのスルホンアミド型保護基などが挙げられる。
カルボキシル基の保護基としては、例えば、メチルエステル、ベンジルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどのエステル型保護基；Ｎ，Ｎ−ジメチルアミドなどのアミド型保護基などが挙げられる。

【0077】

反応式２
化合物（６）に含まれる化合物（６Ａ−１）または化合物（６Ａ−２）は、以下の方法で製造することができる。

【化37】

［式中、Ｒ^１は水素原子、ハロゲン原子、保護基で置換されていてもよい水酸基、もしくは保護基で置換されていてもよいカルボキシル基を示し、Ｒ²は水素原子、保護基で置換されていてもよい水酸基、保護基で置換されていてもよいアミノ基、もしくは保護基で置換されていてもよいチオール基を示し、Ｐ^１はアミノ基の保護基を示し、Ｐ^２はカルボキシル基の保護基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0078】

化合物（１２）は、化合物（１０）またはその塩と、化合物（１１）またはその反応性誘導体をアミド化反応に付し、続いて自体公知の脱保護反応を行うことにより、製造することができる。
化合物（５Ａ）は、化合物（１２）またはその塩と、化合物（１３）またはその反応性誘導体より、前記化合物（１２）の製造法と同様に行い、製造することができる。
化合物（５Ａ）は、以下の方法によっても製造できる。化合物（１４）またはその塩と、化合物（１３）またはその反応性誘導体より前記化合物（１２）の製造法と同様に行い、化合物（１５）を製造し、続いて化合物（１５）またはその反応性誘導体と、化合物（１０）またはその塩より前記化合物（１２）の製造法と同様に行い、化合物（５Ａ）を製造する。
化合物（６Ａ−１）および化合物（６Ａ−２）は、化合物（５Ａ）と化合物（３）を、それぞれ独立して、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。

【0079】

反応式３
化合物（６）に含まれる化合物（５Ｂ−１）または化合物（５Ｂ−２）は、以下の方法で製造することができる。

【化38】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0080】

化合物（５Ｂ）は、化合物（２０）またはその塩より、前記化合物（５Ａ）の製造法と同様に行い、製造することができる。
化合物（５Ｂ−１）および化合物（５Ｂ−２）は、化合物（５Ｂ）より、前記化合物（６Ａ−１）および化合物（６Ａ−２）の製造法と同様に行い、製造することができる。

【0081】

反応式４
化合物（６）に含まれる化合物（６Ｃ）は、以下の方法で製造することができる。

【化39】

［式中、Ｐ^３はＰ^１とは異なるアミノ基の保護基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0082】

化合物（３１）は、化合物（３０）またはその塩と、化合物（１１Ａ）またはその反応性誘導体より前記化合物（１２）の製造法と同様に行い、製造することができる。
化合物（５Ｃ）は、化合物（３１）またはその塩より、前記化合物（５Ａ）の製造法と同様に行い、製造することができる。
化合物（６Ｃ）は、化合物（５Ｃ）より、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。

【0083】

反応式５
反応式２で使用する化合物（１０）は、以下の方法で製造することができる。

【化40】

［式中、Ｌ^４はハロゲン原子を示し、Ｒ^３はＣ_１−６アルキル基を示し、Ｍは金属（例えば、リチウム、マグネシウム、銅、水銀、亜鉛、ホウ素、スズなどを示し、これらは錯化していてもよい）を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0084】

化合物（４２）は、化合物（４０）に化合物（４１）を反応させることにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（４１）として、好適には、メチルリチウム、ｎ−ブチルリチウム、フェニルリチウムなどの有機リチウム類；臭化メチルマグネシウム、塩化エチルマグネシウム、臭化フェニルマグネシウムなどのグリニャール試薬類などが挙げられる。
化合物（４２）は、化合物（４０）に、自体公知の方法、例えばエーテルあるいはテトラヒドロフランを溶媒として、金属マグネシウムとを反応させることにより、製造することもできる。
化合物（４４）は、化合物（４２）に化合物（４３）を反応させることにより、製造することができる。
化合物（４５）は、化合物（４４）を酸化反応に付すことにより、製造することができる。
使用される酸化剤としては、ｍ−クロロ過安息香酸（ｍＣＰＢＡ）、過酸化水素、ｔｅｒｔ−ブチルヒドロペルオキシドなどの過酸類；過塩素酸テトラブチルアンモニウムなどの過塩素酸塩類；塩素酸ナトリウムなどの塩素酸塩類；亜塩素酸ナトリウムなどの亜塩素酸塩類；過ヨウ素酸ナトリウムなどの過ヨウ素酸類；ヨードシルベンゼンなどの高原子価ヨウ素試薬；二酸化マンガン、過マンガン酸カリウムなどのマンガンを有する試薬；四酢酸鉛などの鉛類；クロロクロム酸ピリジニウム（ＰＣＣ）、二クロム酸ピリジニウム（ＰＤＣ）、ジョーンズ試薬などのクロムを有する試薬；Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）などのハロゲン化合物類；酸素；オゾン；三酸化硫黄・ピリジン錯体；四酸化オスミウム；二酸化セレン；２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（ＤＤＱ）などが挙げられる。
化合物（４７）は、化合物（４５）と、化合物（４６）もしくはその塩を、自体公知の還元アミノ化反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用される還元剤としては、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム、水素化シアノホウ素ナトリウム、水素、ギ酸などが挙げられる。
化合物（４８）は、化合物（４７）より、前記化合物（４２）の製造法と同様に行い、製造することができる。

【0085】

化合物（１０）は、化合物（４８）と化合物（４９）を反応させ、続いて自体公知の脱保護反応を行うことにより、製造することができる。
本反応では、市販の化合物（４９）を使用するか、もしくは対応する公知のカルボン酸またはその反応性誘導体とＮ,Ｏ-ジメチルヒドロキシルアミンまたはその塩より自体公知のアミド化反応により製造した化合物（４９）を使用することができる。
化合物（１０）は、以下の反応式６に示す方法によっても、製造することができる。

【0086】

反応式６
反応式２で使用する化合物（１０）は、以下の方法で製造することができる。

【化41】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0087】

化合物（５１）は、化合物（５０）より、前記化合物（４２）の製造法と同様に行い、製造することができる。
化合物（５３）は、化合物（５２）またはその反応性誘導体と、Ｎ,Ｏ-ジメチルヒドロキシルアミンまたはその塩を、自体公知のアミド化反応に付し、製造することができる。
化合物（１０）は、化合物（５１）と化合物（５３）を反応させ、続いて自体公知の脱保護反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（１０）は、以下の方法によっても、製造することができる。
化合物（５４）は、化合物（５３）を還元反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（５５）は、化合物（５４）と化合物（５５）を反応させることにより、製造することができる。
化合物（１０）は、化合物（５５）を還元反応に付し、続いて自体公知の脱保護反応に付すことにより、製造することができる。

【0088】

反応式７
反応式６で使用する化合物（５２）に含まれる化合物（５２Ａ）は、以下の方法で製造することができる。

【化42】

［式中、Ｒ^４はＣ_１−６アルキル基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0089】

化合物（５２Ａ）は、WO2008016893A1に記載された方法に準じて、化合物（６０）より製造することができる。
化合物（６１）は、化合物（６０）と五硫化二リンもしくはローソン試薬とを反応させることにより、製造することができる。
化合物（５２Ａ）は、化合物（６１）と化合物（６２）を反応させ、続いて加水分解反応に付すことにより、製造することができる。

【0090】

反応式８
反応式３で使用する化合物（２０）、化合物（２０）に含まれる化合物（２０Ａ）および化合物（２０Ｂ）は以下の方法で製造することができる。

【化43】

［式中、環Ａ２は置換されていてもよい複素環を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0091】

化合物（２０）は、化合物（７０）と化合物（５１）を、カップリング反応に付し、続いて自体公知の脱保護反応を行うことにより、製造することができる。
化合物（２０Ａ）は、化合物（６１）と化合物（７１）を反応させ、続いて自体公知の脱保護反応を行うことにより、製造することができる。
化合物（７４）は、化合物（７２）に自体公知の化合物（７３）をアミド化反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（２０Ｂ）は、化合物（７４）と五硫化二リンもしくはローソン試薬を反応させ、続いて自体公知の脱保護反応を行うことにより、製造することができる。

【0092】

反応式９
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ａ）は以下の方法で製造することができる。

【化44】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0093】

化合物（３）がアミノ基を有する場合、化合物（４Ａ）は、自体公知の化合物（２Ａ）またはその反応性誘導体と化合物（３）をアミド化反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（２Ａ）は、ジャーナル オブ メディシナル ケミストリー（Journal of medicinal chemistry）2010年，53巻，6934-6946項に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ａ）は、化合物（４Ａ）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0094】

反応式１０
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｂ）は以下の方法で製造することができる。

【化45】

［式中、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0095】

化合物（４Ｂ）は、自体公知の化合物（２Ａ）またはその塩と、化合物（３）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（２Ｂ）は、ジャーナル オブ メディシナル ケミストリー（Journal of medicinal chemistry）2010年，53巻，6934-6946項に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ｂ）は、化合物（４Ｂ）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0096】

反応式１１
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｃ−１）および化合物（１Ｃ−２）は以下の方法で製造することができる。

【化46】

［式中、Ｒ^４は水素原子、置換されていてもよいアルキルカルボニル基、置換されていてもよいシクロアルキルカルボニル基もしくは置換されていてもよいアルコキシカルボニル基を示し、Ｌ^５はハロゲン原子もしくは置換されていてもよい水酸基を示し、Ｒ^４−Ｌ^５自体が酸無水物を示していてもよく、Ｒ^５は水素原子、エチル基もしくはtert-ブトキシカルボニル基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0097】

化合物（８２）は、自体公知の化合物（８０）またはその塩と、化合物（８１）を、所望により塩基の存在下、反応させることにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（８０）は、ブラッド（Blood）2010年，115巻，4206-4216項に記載の方法に準じて、製造することができる。また、本反応で使用する化合物（８１）の好適な例としては、シクロプロピルカルボニルクロリド、二炭酸ジ-tert-ブチルなどが挙げられる。
化合物（８３）は、化合物（８２）を酸もしくは塩基を用い、自体公知の加水分解反応に付することにより、製造することができる。
化合物（２Ｃ）は、化合物（８３）またはその反応性誘導体と、自体公知の化合物（８４）またはその塩を、アミド化反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（８４）は、ブラッド（Blood）2010年，115巻，4206-4216項もしくはWO2007067444A1に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（２Ｃ）のＲ^４もしくはＲ^５が、tert-ブトキシカルボニル基を示す場合、所望により酸を用い、脱保護反応に付すことにより、除去することができる。
Ｒ^４が水素の場合、化合物（１Ｃ−１）は、化合物（２Ｃ）またはその塩と化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
Ｒ^５が水素の場合、化合物（１Ｃ−２）は、化合物（２Ｃ）またはその塩と化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0098】

反応式１２
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｄ）は以下の方法で製造することができる。

【化47】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0099】

化合物（１Ｄ）は、自体公知の化合物（２Ｄ）またはその塩と化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（２Ｄ）は、ジャーナル オブ メディシナル ケミストリー（Journal of medicinal chemistry）2006年，49巻，6819-6832項もしくはジャーナル オブ メディシナル ケミストリー（Journal of medicinal chemistry）2007年，50巻，5853-5857項に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ｄ）が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0100】

反応式１３
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｅ）は以下の方法で製造することができる。

【化48】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0101】

化合物（１Ｅ）は、自体公知の化合物（２Ｅ）またはその塩と化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する公知化合物（２Ｅ）は、ジャーナル オブ ニュークレアー メディシン（Journal of Nuclear Medicine）2011年，52巻，1301-1307項に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ｅ）が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0102】

反応式１４
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｆ−１）、化合物（１Ｆ−２）および化合物（１Ｆ−３）は以下の方法で製造することができる。

【化49】

［式中、Ｒ^１０およびＲ^１１はそれぞれ独立してハロゲン原子、シアノ基もしくはトリフルオロメチル基を示し、Ｒ^１２はハロゲン原子、置換されていてもよい水酸基もしくは置換されていてもよいカルボキシル基を示し、Ｙ^１およびＹ^２はそれぞれ独立して炭素原子もしくは窒素原子を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0103】

化合物（２Ｆ）は、化合物（９０）と化合物（９１）、もしくは化合物（９２）と化合物（９３）を反応させることにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（９０）および化合物（９２）は、自体公知の原料化合物を使用し、バイオオーガニック アンド メディシナル ケミストリー（Bioorganic & Medicinal Chemistry）2012年，20巻，422-434項もしくはバイオオーガニック アンド メディシナル ケミストリー（Bioorganic & Medicinal Chemistry）2012年，20巻，2338-2352項に記載の方法に準じて、製造することができる。化合物（９１）および化合物（９３）は、市販の原料化合物を使用し、自体公知の方法により製造することができる。また、化合物（９１）および化合物（９３）が市販されている場合には、市販品をそのまま用いることもできる。

【0104】

化合物（１Ｆ−１）は、化合物（２Ｆ）またはその反応性誘導体と、化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
Ｒ^１２がハロゲン原子の場合、化合物（４Ｆ−１）は、化合物（２Ｆ）と化合物（３−１）を、アミン類の有機塩基存在下、自体公知の園頭カップリング反応に付することにより、製造することができる。
園頭カップリング反応で使用される金属触媒としては、酢酸パラジウム（ＩＩ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、ジクロロビス（トリエチルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）、塩化１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）などのパラジウム化合物；酸化銅、ヨウ化銅（Ｉ）などの銅化合物が挙げられる。
化合物（１Ｆ−２）は、化合物（４Ｆ−１）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（４Ｆ−２）は、化合物（４Ｆ−１）を水素雰囲気下、パラジウム−カーボンやリンドラー触媒などの触媒を用いる接触還元反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（１Ｆ−３）は、化合物（４Ｆ−２）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0105】

反応式１５
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｇ−１）、および化合物（１Ｇ−２）は以下の方法で製造することができる。

【化50】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。］

【0106】

化合物（４Ｇ−１）は、自体公知の化合物（２Ｇ）またはその塩を、自体公知の保護反応に付し、続いて化合物（３）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（２Ｇ）は、WO2005034856A2に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ｇ−１）は、化合物（４Ｇ−１）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（４Ｇ−２）は、化合物（４Ｇ−１）と化合物（９９）を、所望により塩基の存在下、反応させることにより、製造することができる。
化合物（５）がアミノ基を有する場合、化合物（１Ｇ−２）は、化合物（４Ｇ−２）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、アミド化反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0107】

反応式１６
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｈ）は以下の方法で製造することができる。

【化51】

［式中、Ｐ^４は水酸基の保護基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0108】

化合物（４Ｈ−２）は、WO2013106643A2に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（４Ｈ−１）は、化合物（２Ｈ）と化合物（３）またはその反応性誘導体を、所望により塩基存在下、反応させることにより、製造することができる。
本反応で使用する公知化合物（２Ｈ）は、WO2003004515A1に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（４Ｈ−２）は、化合物（４Ｈ−１）還元反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用される還元剤としては、水素化アルミニウムリチウム、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウム、水素化シアノホウ素ナトリウム、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ−Ｈ）、水素化ホウ素ナトリウム、水素化トリアセトキシホウ素テトラメチルアンモニウムなどの金属水素化物類；ボランテトラヒドロフラン錯体などのボラン類；ラネーニッケル；ラネーコバルト；水素；ギ酸；ヒドラジン；トリエチルシランなどが挙げられる。
化合物（１Ｈ）は、化合物（４Ｈ−２）またはその反応性誘導体と化合物（５）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付し、続いて、自体公知の脱保護反応に付すことにより、製造することができる。

【0109】

反応式１７
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｊ）は以下の方法で製造することができる。

【化52】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0110】

化合物（１Ｊ）は、化合物（２Ｊ）またはその反応性誘導体と、化合物（６）またはその塩を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する公知化合物（２Ｊ）は、WO2008006051A2もしくはバイオオーガニック アンド メディシナル ケミストリー レターズ（Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters）2010年，20巻，2928-2932項に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ｊ）が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0111】

反応式１８
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｋ）は以下の方法で製造することができる。

【化53】

［式中、各記号は前記と同意義を示す。]

【0112】

化合物（２Ｋ−２）は、自体公知の化合物（２Ｋ−１）を、酸もしくは塩基の存在下、加水分解反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（１Ｋ）は、化合物（２Ｋ−２）またはその反応性誘導体と化合物（６）またはその塩を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（２Ｋ−１）は、ネイチャー（Nature）2010年，468巻，1067-1073項に記載の方法に準じて、製造することができる。
化合物（１Ｋ）が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0113】

反応式１９
化合物（Ｉ）に含まれる化合物（１Ｌ−１）および化合物（１Ｌ−２）は以下の方法で製造することができる。

【化54】

［式中、Ｒ^６はハロゲン原子で置換されていてもよいアルキル基もしくはハロゲン原子で置換されていてもよいアルコキシ基を示し、Ｒ^７は置換されていてもよい水酸基もしくは置換されていてもよいカルボキシル基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0114】

化合物（２Ｌ）は、WO213171639A1に記載の製造方法に準じて、製造することができる。
化合物（１０２）は、化合物（１００）と化合物（１０１）またはその塩を、所望により塩基存在下、反応させることにより製造することができる。
化合物（２Ｌ）は、化合物（１０２）と化合物（１０３）をカップリング反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（１Ｌ−１）は、化合物（２Ｌ）またはその反応性誘導体と、化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付し、続いて脱保護反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（１Ｌ−２）は、化合物（２Ｌ）を脱保護反応に付し、続いて化合物（６）またはその反応性誘導体を、前記の反応式１で示した反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0115】

反応式２０
化合物（３）に含まれる化合物（３Ｃ）は以下の方法で製造することができる。

【化55】

［式中、Ｒ^８は水素原子もしくはＣ_１−６アルキル基を示し、Ｌ^６はハロゲン原子もしくはスルホニルオキシ基を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0116】

化合物（３Ｂ）は、化合物（３Ａ）と化合物（１１０）を、所望により塩基の存在下、反応させることにより、製造することができる。
化合物（３Ｃ）は、化合物（３Ｂ）を脱保護反応に付し、続いて反応式１で示したスルホニル化もしくはハロゲン化反応に付すことにより、製造することができる。
各工程で得られた生成物が、保護されたアミノ基、水酸基またはカルボキシル基を有している場合には、自体公知の脱保護反応を行うことにより、遊離のアミノ基、水酸基またはカルボキシル基へ誘導することが可能である。

【0117】

反応式２１
反応式２などで使用する化合物（１１）に含まれる化合物（１１Ａ）は以下の方法で製造することができる。

【化56】

［式中、Ｐ^５は水素原子もしくはＰ^１と同意義を示し、Ｐ^６は水素原子もしくはＰ^２と同意義を示し、他の各記号は前記と同意義を示す。]

【0118】

化合物（１３１）は、WO2003010130A1に記載の製造方法に準じて、化合物（１３０）を還元反応に付すことにより、製造することができる。
本反応で使用する化合物（１３０）は、バイオオーガニック アンド メディシナル ケミストリー（Bioorganic & Medicinal Chemistry）2012年，20巻，3551-3564項に記載の製造方法に準じて、製造することができる。また、化合物（１３０）が市販されている場合には、市販品をそのまま用いることもできる。
化合物（１１Ａ）は、自体公知の保護反応および脱保護反応に付すことにより、製造することができる。
化合物（１１Ａ）は、所望により光学活性体へ分割することができる。
光学分割法としては、キラルカラムを用いるクロマトグラフィーによる方法、ジアステレオマー塩を形成し、再結晶させる方法などが挙げられる。

【0119】

化合物（Ｉ）が、光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体等の異性体を有する場合には、いずれか一方の異性体も混合物も化合物（Ｉ）に包含される。例えば、化合物（Ｉ）に光学異性体が存在する場合には、ラセミ体から分割された光学異性体も化合物（Ｉ）に包含される。これらの異性体は、自体公知の合成手法、分離手法（例、濃縮、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィー、再結晶）によりそれぞれを単品として得ることができる。

【0120】

化合物（Ｉ）は、結晶であってもよく、結晶形が単一であっても結晶形混合物であっても化合物（Ｉ）に包含される。結晶は、自体公知の結晶化法を適用して、結晶化することによって製造することができる。
また、化合物（Ｉ）は、薬学的に許容され得る共結晶または共結晶塩であってもよい。ここで、共結晶または共結晶塩とは、各々が異なる物理的性質（例、構造、融点、融解熱、吸湿性、安定性）を持つ、室温で二種またはそれ以上の独特な固体から構成される結晶性物質を意味する。共結晶または共結晶塩は、自体公知の共結晶化法に従い製造することができる。
化合物（Ｉ）は、水和物であっても、非水和物であっても、溶媒和物であっても、無溶媒和物であってもよく、いずれも化合物（Ｉ）に包含される。
同位元素（例、^２Ｈ、^３Ｈ、^１1Ｃ、^１４Ｃ、^１８Ｆ、^３５Ｓ、^１２５Ｉ）等で標識された化合物も、化合物（Ｉ）に包含される。同位元素で標識または置換された化合物（Ｉ）は、例えば、陽電子断層法（Positron Emission Tomography：PET）において使用するトレーサー（PETトレーサー）として用いることができ、医療診断などの分野において有用である。

【0121】

化合物（Ｉ）はプロドラッグであってもよい。
化合物（Ｉ）のプロドラッグとは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により化合物（Ｉ）に変換する化合物、すなわち酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こして化合物（Ｉ）に変化する化合物、胃酸等により加水分解等を起こして化合物（Ｉ）に変化する化合物をいう。

【0122】

化合物（Ｉ）のプロドラッグとしては、例えば、
（１）化合物（Ｉ）のアミノがアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物（例えば、化合物（Ｉ）のアミノが、エイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、ｔｅｒｔ−ブチル化、エトキシカルボニル化、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル化、アセチル化、シクロプロピルカルボニル化された化合物等）；
（２）化合物（Ｉ）のヒドロキシが、アシル化、アルキル化、リン酸化、ホウ酸化された化合物（例えば、化合物（Ｉ）のヒドロキシが、アセチル化、パルミトイル化、プロパノイル化、ピバロイル化、スクシニル化、フマリル化、アラニル化、ジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物等）；
（３）化合物（Ｉ）のカルボキシが、エステル化、アミド化された化合物（例えば、化合物（Ｉ）のカルボキシが、エチルエステル化、フェニルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ジメチルアミノメチルエステル化、ピバロイルオキシメチルエステル化、エトキシカルボニルオキシエチルエステル化、フタリジルエステル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メチルエステル化、シクロヘキシルオキシカルボニルエチルエステル化、メチルアミド化された化合物等）；
が挙げられる。これらの化合物は、自体公知の方法によって化合物（Ｉ）から製造することができる。

【0123】

また、化合物（Ｉ）のプロドラッグは、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３頁から１９８頁に記載されているような生理的条件で化合物（Ｉ）に変化するものであってもよい。

【0124】

化合物（Ｉ）またはそのプロドラッグ（本明細書中、これらをまとめて「本発明化合物」と略記することがある）は、標的とする細胞内タンパク質（特に、病態と関連する細胞内タンパク質）の分解を誘導する活性を有し、標的とする細胞内タンパク質が関与する疾患の予防または治療剤として有用である。本発明のＳＮＩＰＥＲ化合物は、その作用機序に照らして、標的となる細胞内タンパク質が関与するあらゆる疾患の予防または治療に有効で有り得る。中でも、癌、炎症性疾患、自己免疫性疾患、および骨・関節変性疾患の治療又は予防に有効であることが期待される。

【0125】

癌の治療又は予防剤としては、例えば、大腸癌（例、結腸癌、直腸癌、肛門癌、家族性大腸癌、遺伝性非ポリポーシス大腸癌、消化管間質腫瘍）、肺癌（例、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、悪性中皮腫）、中皮腫、膵臓癌（例、膵管癌、膵内分泌腫瘍）、咽頭癌、喉頭癌、食道癌、胃癌（例、乳頭腺癌、粘液性腺癌、腺扁平上皮癌）、十二指腸癌、小腸癌、乳癌（例、浸潤性乳管癌、非浸潤性乳管癌、炎症性乳癌）、卵巣癌（例、上皮性卵巣癌、性腺外胚細胞腫瘍、卵巣性胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍）、精巣腫瘍、前立腺癌（例、ホルモン依存性前立腺癌、ホルモン非依存性前立腺癌、去勢療法抵抗性前立腺癌）、肝臓癌（例、肝細胞癌、原発性肝癌、肝外胆管癌）、甲状腺癌（例、甲状腺髄様癌）、腎臓癌（例、腎細胞癌（例、淡明細胞型腎細胞癌）、腎盂と尿管の移行上皮癌）、子宮癌（例、子宮頚部癌、子宮体部癌、子宮肉腫）、妊娠性絨毛癌、脳腫瘍（例、髄芽細胞腫、神経膠腫、松果体星細胞腫瘍、毛様細胞性星細胞腫、びまん性星細胞腫、退形成性星細胞腫、下垂体腺腫）、網膜芽細胞腫、皮膚癌（例、基底細胞腫、悪性黒色腫）、肉腫（例、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、軟部肉腫、紡錘細胞肉腫）、悪性骨腫瘍、膀胱癌、血液癌（例、多発性骨髄腫、白血病、悪性リンパ腫、ホジキン病、慢性骨髄増殖性疾患）、原発不明癌等の予防剤または治療剤、癌の増殖阻害剤、癌の転移抑制剤、アポトーシス促進剤、前癌病変（例、骨髄異型性症候群）の治療剤等が挙げられる。

【0126】

炎症性疾患、自己免疫性疾患、又は骨・関節変性疾患の治療又は予防剤としては、例えば、以下の疾患の治療又は予防剤が挙げられる。
（１）炎症性疾患（例、関節リウマチ、急性膵炎、慢性膵炎、喘息、気管支喘息、成人呼吸困難症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症性骨疾患、炎症性肺疾患、炎症性腸疾患、セリアック病、ベーチェット病、肝炎、アルコール性肝線維症、アルコール性肝炎、アルコール性肝硬変、B型肝炎ウイルス性肝障害、原発性胆汁性肝硬変(PBC)、原発性硬化性胆管炎(PSC)、一過性脳虚血発作(TIA)、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、ドライアイ、緑内障、ぶどう膜炎、眼窩蜂巣炎、突発性眼窩炎症、加齢黄斑変性、手術または外傷後の炎症、肝障害、肺炎、腎炎、髄膜炎、膀胱炎、咽喉頭炎、胃粘膜損傷、脊椎炎、関節炎、皮膚炎、慢性肺炎、気管支炎、肺梗塞、珪肺症、肺サルコイドーシス、自己免疫性貧血、グッド・バスチャー症候群、グレーブス病、橋本甲状腺炎、血管炎、バセドウ病、副鼻腔炎、アレルギー性鼻炎、慢性肥厚性鼻炎）、
（２）自己免疫性疾患（例、関節リウマチ、強直性脊椎炎、乾癬、多発性硬化症（ＭＳ）、多発性筋炎、視神経脊髄炎(NMO)、慢性炎症性脱髄性多発神経炎(CIDP)、皮膚筋炎（ＤＭ）、結節性多発性動脈炎（ＰＮ）、混合性結合性組織症（ＭＣＴＤ）、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、ギランバレー症候群、重症筋無力症、パーキンソン病、脊髄性筋萎縮症、脊髄小脳萎縮症、進行性核上性麻痺、フィッシャー症候群、中枢神経ルーパス、急性散在性脳脊髄炎、多系統萎縮症、ハンチントン病、アルツハイマー病、脳血管認知症、び慢性レビィ小体病、脳血管障害、脳梗塞、一過性脳虚血発作、脳出血、脊髄血管障害、脊髄梗塞、多発神経炎、ランパート・イートン症候群、筋ジストロフィー、代謝性ミオパシー、炎症性ミオパシー、封入体筋炎、脳炎、髄膜炎、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス、強皮症、天庖瘡、深在性紅斑性狼瘡、慢性甲状腺炎、グレーブス病、自己免疫性胃炎、Ｉ型およびＩＩ型糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活動性肝炎、重症筋無力症、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、クローン病、移植片対宿主疾患、アジソン病、異常免疫応答、関節炎、皮膚炎、放射線皮膚炎、サルコイドーシス、タイプ1糖尿病）、
（３）骨・関節変性疾患（例、関節リウマチ、骨粗鬆症、変形性関節症）

【0127】

なかでも、本発明化合物は、癌（特に、慢性骨髄性白血病、前立腺癌、乳癌、多発性骨髄腫、急性骨髄性白血病、大腸癌、膵臓癌）および炎症性疾患（特に、気管支喘息、アトピー性皮膚炎）に有効である。
なお、本発明化合物は、哺乳動物（例、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、ネコ、イヌ、ウシ、ヒツジ、サル、ヒト）に対して、上記疾患を治療または予防するために用いることができる。

【0128】

本発明化合物は、そのままあるいは薬理学的に許容される担体を配合し、医薬として、哺乳動物（好ましくは、ヒト）に経口的または非経口的に投与することができる。
以下、本発明化合物を含有してなる医薬（「本発明の医薬」と略記する場合がある）について詳述する。本発明の医薬の剤形としては、例えば、錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠、舌下錠、バッカル錠、口腔内速崩錠を含む）、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤（ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤を含む）、シロップ剤、乳剤、懸濁剤、フィルム剤（例、口腔内崩壊フィルム、口腔粘膜貼付フィルム）等の経口剤が挙げられる。また、本発明の医薬の剤形としては、例えば、注射剤、点滴剤、経皮剤（例、イオントフォレシス経皮剤）、坐剤、軟膏剤、経鼻剤、経肺剤、点眼剤等の非経口剤も挙げられる。また、本発明の医薬は、速放性製剤、徐放性製剤（徐放性マイクロカプセルを含む）などの放出制御製剤であってもよい。

【0129】

本発明の医薬は、製剤技術分野で一般的に用いられている公知の製造方法（例、日本薬局方に記載の方法）により製造することができる。また、本発明の医薬には、必要に応じて、製剤分野において通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤、着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤等の添加剤を適宜、適量含有させることができる。
前記した薬理学的に許容される担体としては、これらの添加剤が挙げられる。

【0130】

例えば、錠剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を用いて製造することができ、丸剤及び顆粒剤は、賦形剤、結合剤、崩壊剤を用いて製造することができる。また、散剤及びカプセル剤は賦形剤等を、シロップ剤は甘味剤等を、乳剤または懸濁剤は懸濁化剤、界面活性剤、乳化剤等を用いて製造することができる。

【0131】

賦形剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、でんぷん、蔗糖、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウムが挙げられる。
結合剤の例としては、５ないし１０重量％デンプンのり液、１０ないし２０重量％アラビアゴム液またはゼラチン液、１ないし５重量％トラガント液、カルボキシメチルセルロース液、アルギン酸ナトリウム液、グリセリンが挙げられる。
崩壊剤の例としては、でんぷん、炭酸カルシウムが挙げられる。
滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、精製タルクが挙げられる。
甘味剤の例としては、ブドウ糖、果糖、転化糖、ソルビトール、キシリトール、グリセリン、単シロップが挙げられる。
界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ソルビタンモノ脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシル４０が挙げられる。
懸濁化剤の例としては、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ベントナイトが挙げられる。
乳化剤の例としては、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ポリソルベート８０が挙げられる。

【0132】

例えば、本発明の医薬が錠剤である場合、該錠剤は、自体公知の方法に従い、本発明化合物に、例えば、賦形剤（例、乳糖、白糖、デンプン）、崩壊剤（例、デンプン、炭酸カルシウム）、結合剤（例、デンプン、アラビアゴム、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース）または滑沢剤（例、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール６０００）を添加して圧縮成形し、次いで必要により、味のマスキング、腸溶性あるいは持続性の目的のため自体公知の方法でコーティングすることにより製造することができる。コーティングに用いられるコーティング剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリオキシエチレングリコール、ツイーン８０、プルロニックＦ６８、セルロースアセテートフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシメチルセルロースアセテートサクシネート、オイドラギット（ローム社製、ドイツ、メタアクリル酸・アクリル酸共重合体）および色素（例、ベンガラ、二酸化チタン）が用いられる。

【0133】

前記注射剤としては、静脈注射剤のほか、皮下注射剤、皮内注射剤、筋肉注射剤、腹腔内注射剤、点滴注射剤等が含まれる。

【0134】

かかる注射剤は、自体公知の方法、すなわち、本発明化合物を無菌の水性液もしくは油性液に溶解、懸濁または乳化することによって調製される。水性液としては、生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウム）等が挙げられる。該水性液は適当な溶解補助剤、例えば、アルコール（例、エタノール）、ポリアルコール（例、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例、ポリソルベート８０、ＨＣＯ−５０）を含んでいてもよい。油性液としては、ゴマ油、大豆油等が挙げられる。該油性液は適当な溶解補助剤を含んでいてもよい。該溶解補助剤としては、安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等が挙げられる。また、該注射剤には緩衝剤（例、リン酸緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカイン）、安定剤（例、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコール）、保存剤（例、ベンジルアルコール、フェノール）等を配合してもよい。調製された注射液は、通常、アンプルに充填される。

【0135】

本発明の医薬中の本発明化合物の含有量は、製剤の形態に応じて相違するが、通常、製剤全体に対して約０．０１ないし約１００重量％、好ましくは約２ないし約８５重量％、さらに好ましくは約５ないし約７０重量％である。

【0136】

本発明の医薬中の添加剤の含有量は、製剤の形態に応じて相違するが、通常、製剤全体に対して約１ないし約９９．９重量％、好ましくは約１０ないし約９０重量％である。

【0137】

本発明化合物は、安定かつ低毒性で安全に使用することができる。本発明化合物の１日の投与量は患者の状態や体重、化合物の種類、投与経路等によって異なるが、例えば、癌の治療目的で患者に経口投与する場合には、成人（体重約６０ｋｇ）１日当りの投与量は、本発明化合物として約１ないし約１０００ｍｇ、好ましくは約３ないし約３００ｍｇ、さらに好ましくは約１０ないし約２００ｍｇであり、これらを１回または２ないし３回に分けて投与することができる。

【0138】

本発明化合物を非経口的に投与する場合は、通常、液剤（例、注射剤）の形で投与する。本発明化合物の１回投与量は、投与対象、対象臓器、症状、投与方法等によっても異なるが、例えば、通常体重１ｋｇあたり約０．０１ないし約１００ｍｇ、好ましくは約０．０１ないし約５０ｍｇ、より好ましくは約０．０１ないし約２０ｍｇの本発明化合物を静脈注射により投与することが好ましい。

【0139】

本発明化合物は、他の薬物と併用して用いることができる。具体的には、本発明化合物を各種癌の治療又は予防剤として用いる場合には、ホルモン療法剤、化学療法剤、免疫療法剤または細胞増殖因子ならびにその受容体の作用を阻害する薬剤等の薬物と併用することができる。以下、本発明化合物と併用し得る薬物を併用薬物と略記する。

【0140】

「ホルモン療法剤」としては、例えば、ホスフェストロール、ジエチルスチルベストロール、クロロトリアニセン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、酢酸クロルマジノン、酢酸シプロテロン、ダナゾール、アリルエストレノール、ゲストリノン、メパルトリシン、ラロキシフェン、オルメロキシフェン、レボルメロキシフェン、抗エストロゲン（例、クエン酸タモキシフェン、クエン酸トレミフェン）、ピル製剤、メピチオスタン、テストロラクトン、アミノグルテチイミド、ＬＨ−ＲＨアゴニスト（例、酢酸ゴセレリン、ブセレリン、酢酸リュープロレリン）、ドロロキシフェン、エピチオスタノール、スルホン酸エチニルエストラジオール、アロマターゼ阻害薬（例、塩酸ファドロゾール、アナストロゾール、レトロゾール、エキセメスタン、ボロゾール、フォルメスタン）、抗アンドロゲン（例、フルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、エンザルタミド）、５α−レダクターゼ阻害薬（例、フィナステリド、エプリステリド、デュタステリド）、副腎皮質ホルモン系薬剤（例、デキサメタゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、トリアムシノロン）、アンドロゲン合成阻害薬（例、アビラテロン）、レチノイドおよびレチノイドの代謝を遅らせる薬剤（例、リアロゾール）、甲状腺ホルモン、およびそれらのＤＤＳ（Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍ）製剤が用いられる。

【0141】

「化学療法剤」としては、例えば、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗癌性抗生物質、植物由来抗癌剤が用いられる。

【0142】

「アルキル化剤」としては、例えば、ナイトロジェンマスタード、塩酸ナイトロジェンマスタード−Ｎ−オキシド、クロラムブチル、シクロフォスファミド、イホスファミド、チオテパ、カルボコン、トシル酸インプロスルファン、ブスルファン、塩酸ニムスチン、ミトブロニトール、メルファラン、ダカルバジン、ラニムスチン、リン酸エストラムスチンナトリウム、トリエチレンメラミン、カルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン、ピポブロマン、エトグルシド、カルボプラチン、シスプラチン、ミボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、アルトレタミン、アンバムスチン、塩酸ジブロスピジウム、フォテムスチン、プレドニムスチン、プミテパ、リボムスチン、テモゾロミド、トレオスルファン、トロフォスファミド、ジノスタチンスチマラマー、アドゼレシン、システムスチン、ビゼレシンおよびそれらのＤＤＳ製剤が用いられる。

【0143】

「代謝拮抗剤」としては、例えば、メルカプトプリン、６−メルカプトプリンリボシド、チオイノシン、メトトレキサート、ペメトレキセド、エノシタビン、シタラビン、シタラビンオクフォスファート、塩酸アンシタビン、５−ＦＵ系薬剤（例、フルオロウラシル、テガフール、ＵＦＴ、ドキシフルリジン、カルモフール、ガロシタビン、エミテフール、カペシタビン）、アミノプテリン、ネルザラビン、ロイコボリンカルシウム、タブロイド、ブトシン、フォリネイトカルシウム、レボフォリネイトカルシウム、クラドリビン、エミテフール、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシカルバミド、ペントスタチン、ピリトレキシム、イドキシウリジン、ミトグアゾン、チアゾフリン、アンバムスチン、ベンダムスチンおよびそれらのＤＤＳ製剤が用いられる。

【0144】

「抗癌性抗生物質」としては、例えば、アクチノマイシンＤ、アクチノマイシンＣ、マイトマイシンＣ、クロモマイシンＡ３、塩酸ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、硫酸ペプロマイシン、塩酸ダウノルビシン、塩酸ドキソルビシン、塩酸アクラルビシン、塩酸ピラルビシン、塩酸エピルビシン、ネオカルチノスタチン、ミスラマイシン、ザルコマイシン、カルチノフィリン、ミトタン、塩酸ゾルビシン、塩酸ミトキサントロン、塩酸イダルビシンおよびそれらのＤＤＳ製剤（例、ドキソルビシン内包ＰＥＧリポソーム）が用いられる。

【0145】

「植物由来抗癌剤」としては、例えば、エトポシド、リン酸エトポシド、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、硫酸ビンデシン、テニポシド、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、ビノレルビンおよびそれらのＤＤＳ製剤が用いられる。

【0146】

「免疫療法剤」としては、例えば、ピシバニール、クレスチン、シゾフィラン、レンチナン、ウベニメクス、インターフェロン、インターロイキン、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球コロニー刺激因子、エリスロポイエチン、リンホトキシン、ＢＣＧワクチン、コリネバクテリウムパルブム、レバミゾール、ポリサッカライドＫ、プロコダゾール、抗ＣＴＬＡ４抗体（例、イピリムマブ、トレメリムマブ）、抗ＰＤ-1抗体（例、ニボルマブ、ペムブロリズマブ）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体が用いられる。

【0147】

「細胞増殖因子ならびにその受容体の作用を阻害する薬剤」における「細胞増殖因子」としては、細胞の増殖を促進する物質であればどのようなものでもよく、通常、分子量が２０，０００以下のペプチドで、受容体との結合により低濃度で作用が発揮される因子が挙げられ、具体的には、（１）ＥＧＦ（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）またはそれと実質的に同一の活性を有する物質〔例、ＴＧＦα〕、（２）インシュリンまたはそれと実質的に同一の活性を有する物質〔例、インシュリン、ＩＧＦ（ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）−１、ＩＧＦ−２〕、（３）ＦＧＦ（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）またはそれと実質的に同一の活性を有する物質〔例、酸性ＦＧＦ、塩基性ＦＧＦ、ＫＧＦ（ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＦＧＦ−１０〕、（４）その他の細胞増殖因子〔例、ＣＳＦ（ｃｏｌｏｎｙ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）、ＥＰＯ（ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ）、ＩＬ−２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２）、ＮＧＦ（ｎｅｒｖｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＰＤＧＦ（ｐｌａｔｅｌｅｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＴＧＦβ（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ β）、ＨＧＦ（ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ＶＥＧＦ（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ）、ヘレグリン、アンジオポエチン〕が用いられる。

【0148】

「細胞増殖因子の受容体」としては、上記の細胞増殖因子と結合能を有する受容体であればいかなるものであってもよく、具体的には、ＥＧＦ受容体、ヘレグリン受容体（例、ＨＥＲ３）、インシュリン受容体、ＩＧＦ受容体−１、ＩＧＦ受容体−２、ＦＧＦ受容体−１またはＦＧＦ受容体−２、ＶＥＧＦ受容体、アンジオポエチン受容体（例、Ｔｉｅ２）、ＰＤＧＦ受容体等が用いられる。

【0149】

「細胞増殖因子ならびにその受容体の作用を阻害する薬剤」としては、ＥＧＦ阻害剤、ＴＧＦα阻害剤、ハーレギュリン阻害剤、インシュリン阻害剤、ＩＧＦ阻害剤、ＦＧＦ阻害剤、ＫＧＦ阻害剤、ＣＳＦ阻害剤、ＥＰＯ阻害剤、ＩＬ−２阻害剤、ＮＧＦ阻害剤、ＰＤＧＦ阻害剤、ＴＧＦβ阻害剤、ＨＧＦ阻害剤、ＶＥＧＦ阻害剤、アンジオポエチン阻害剤、ＥＧＦ受容体阻害剤、ＨＥＲ２阻害剤、ＨＥＲ４阻害剤、インシュリン受容体阻害剤、ＩＧＦ−１受容体阻害剤、ＩＧＦ−２受容体阻害剤、ＦＧＦ受容体−１阻害剤、ＦＧＦ受容体−２阻害剤、ＦＧＦ受容体−３阻害剤、ＦＧＦ受容体−４阻害剤、ＶＥＧＦ受容体阻害剤、Ｔｉｅ−２阻害剤、ＰＤＧＦ受容体阻害剤、ＡＢＬ阻害剤、Ｒａｆ阻害剤、ＦＬＴ３阻害剤、ｃ−Ｋｉｔ阻害剤、Ｓｒｃ阻害剤、ＰＫＣ阻害剤、Ｓｍｏ阻害薬、ＡＬＫ阻害薬、ＲＯＲ１阻害薬、Ｔｒｋ阻害剤、Ｒｅｔ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、Ａｕｒｏｒａ阻害剤、ＰＬＫ阻害剤、ＭＥＫ（ＭＥＫ１／２）阻害剤、ＭＥＴ阻害剤、ＣＤＫ阻害剤、Ａｋｔ阻害剤、ＥＲＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤等が用いられる。より具体的には、抗ＶＥＧＦ抗体（例、Ｂｅｖａｃｉｚｕｍａｂ、Ｒａｍｕｃｕｒｕｍａｂ）、抗ＨＥＲ２抗体（例、Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ、Ｐｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、抗ＥＧＦＲ抗体（例、Ｃｅｔｕｘｉｍａｂ、Ｐａｎｉｔｕｍｕｍａｂ、Ｍａｔｕｚｕｍａｂ、Ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、抗ＨＧＦ抗体、Ｉｍａｔｉｎｉｂ、Ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ、Ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ、Ｓｏｒａｆｅｎｉｂ、Ｓｕｎｉｔｉｎｉｂ、ダサチニブ、Ｌａｐａｔｉｎｉｂ、Ｖａｔａｌａｎｉｂ、、Ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ、Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ、Ｃａｂｏｚａｎｔｉｎｉｂ、Ｃｒｉｚｏｔｉｎｉｂ、Ａｌｅｃｔｉｎｉｂ、Ｖｉｓｍｏｄｅｇｉｂ、Ｃｅｄｉｒａｎｉｂ、Ｔｉｖａｎｔｉｎｉｂ、Ｑｕｉｚａｒｔｉｎｉｂ、Ｄｏｖｉｔｉｎｉｂ、、Ａｘｉｔｉｎｉｂ、Ｍｏｔｅｓａｎｉｂ、Ｎｉｌｏｔｉｎｉｂ、６−［４−（４−エチルピペラジン−１−イルメチル）フェニル］−Ｎ−［１（Ｒ）−フェニルエチル］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−アミン（ＡＥＥ−７８８）、Ｖａｎｄｅｔａｎｉｂ、Ｔｅｍｓｉｒｏｌｉｍｕｓ、Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ、Ｅｎｚａｓｔａｕｒｉｎ、Ｔｏｚａｓｅｒｔｉｂ、リン酸 ２−［Ｎ−［３−［４−［５−［Ｎ−（３−フルオロフェニル）カルバモイルメチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ］キナゾリン−７−イルオキシ］プロピル］−Ｎ−エチルアミノ］エチル エステル（ＡＺＤ−１１５２）、４−［９−クロロ−７−（２，６−ジフルオロフェニル）−５Ｈ−ピリミド［５，４−ｄ］［２］ベンズアゼピン−２−イルアミノ］安息香酸、Ｎ−［２−メトキシ−５−［（Ｅ）−２−（２，４，６−トリメトキシフェニル）ビニルスルホニルメチル］フェニル］グリシン ナトリウム塩（ＯＮ−１９１０Ｎａ）、Ｖｏｌａｓｅｒｔｉｂ、Ｓｅｌｕｍｅｔｉｎｉｂ、Ｔｒａｍｅｔｉｎｉｂ、Ｎ−［２（Ｒ），３−ジヒドロキシプロポキシ］−３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヨードフェニルアミノ）ベンズアミド（ＰＤ−０３２５９０１）、Ｂｏｓｕｔｉｎｉｂ、Ｒｅｇｏｒａｆｅｎｉｂ、Ａｆａｔｉｎｉｂ、Ｉｄｅｌａｌｉｓｉｂ、Ｃｅｒｉｔｉｎｉｂ、Ｄａｂｒａｆｅｎｉｂ等が用いられる。

【0150】

上記の薬物の他に、Ｌ−アスパラギナーゼ、Ｌ−アルギナーゼ、アルギニンデイミナーゼ、アセグラトン、塩酸プロカルバジン、プロトポルフィリン・コバルト錯塩、水銀ヘマトポルフィリン・ナトリウム、トポイソメラーゼＩ阻害薬（例、イリノテカン、トポテカン、ｉｎｄｏｔｅｃａｎ、Ｉｎｄｉｍｉｔｅｃａｎ）、トポイソメラーゼＩＩ阻害薬（例、ソブゾキサン）、分化誘導剤（例、レチノイド、ビタミンＤ類）、血管新生阻害薬（例、フマギリン、さめ抽出物、ＣＯＸ−２阻害薬）、α−ブロッカー（例、塩酸タムスロシン）、ビスホスホン酸（例、パミドロネート、ゾレドロネート）、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、５アザシチジン、デシタビン、プロテアソーム阻害薬（例、ボルテゾミブ、カルフィゾミブ、イクサゾミブ）、ＮＥＤＤ８阻害薬（例、Ｐｅｖｏｎｅｄｉｓｔａｔ）、ＵＡＥ阻害薬、ＰＡＲＰ阻害薬（例、Ｏｌａｐａｒｉｂ、Ｎｉｒａｐａｒｉｂ、Ｖｅｌｉｐａｒｉｂ）、抗ＣＤ２０抗体（例、Ｒｉｔｕｘｉｍａｂ、Ｏｂｉｎｕｔｕｚｕｍａｂ）、抗ＣＣＲ４抗体（例、Ｍｏｇａｍｕｌｉｚｕｍａｂ）等の抗腫瘍性抗体、抗体薬物複合体（例、トラスツマブ エムタンシン、ブレンキシマブ ベドチン）等も併用薬物として用いることができる。

【0151】

本発明化合物を炎症性疾患、自己免疫性疾患、又は骨・関節変性疾患の治療又は予防剤として用いる場合には、以下（１）〜（１９）に示す薬物と併用することができる。
（１）非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）
（ｉ）Ｃｌａｓｓｉｃａｌ ＮＳＡＩＤｓ
アルコフェナク、アセクロフェナク、スリンダク、トルメチン、エトドラク、フェノプロフェン、チアプロフェン酸、メクロフェナム酸、メロキシカム、テオキシカム、ロルノキシカム、ナブメトン、アセトアミノフェン、フェナセチン、エテンザミド、スルピリン、アンチピリン、ミグレニン、アスピリン、メフェナム酸、フルフェナム酸、ジクロフェナックナトリウム、ロキソプロフェンナトリウム、フェニルブタゾン、インドメタシン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、フルルビプロフェン、フェンブフェン、プラノプロフェン、フロクタフェニン、ピロキシカム、エピリゾール、塩酸チアラミド、ザルトプロフェン、メシル酸ガベキサート、メシル酸カモスタット、ウリナスタチン、コルヒチン、プロベネシド、スルフィンピラゾン、ベンズブロマロン、アロプリノール、金チオリンゴ酸ナトリウム、ヒアルロン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、塩酸モルヒネ、サリチル酸、アトロピン、スコポラミン、モルヒネ、ペチジン、レボルファノール、オキシモルフォンまたはその塩等。
（ｉｉ）シクロオキシゲナーゼ抑制薬（ＣＯＸ−１選択的阻害薬、ＣＯＸ−２選択的阻害薬等）
サリチル酸誘導体（例、セレコキシブ、アスピリン）、エトリコキシブ、バルデコキシブ、ジクロフェナック、インドメタシン、ロキソプロフェン等。
（ｉｉｉ）Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ遊離型 ＮＳＡＩＤｓ

【0152】

（２）疾患修飾性抗リウマチ薬（ＤＭＡＲＤｓ）
（ｉ）金製剤
Ａｕｒａｎｏｆｉｎ等。
（ｉｉ）ペニシラミン
Ｄ−ペニシラミン。
（ｉｉｉ）アミノサリチル酸製剤
スルファサラジン、メサラミン、オルサラジン、バルサラジド。
（ｉｖ）抗マラリア薬
クロロキン等。
（ｖ）ピリミジン合成阻害薬
レフルノミド等。
（ｖｉ）タクロリムス

【0153】

（３）抗サイトカイン薬
（Ｉ）タンパク質製剤
（ｉ）ＴＮＦ阻害薬
エタナーセプト、インフリキシマブ、アダリムマブ、セルトリズマブ ペゴール、ゴリムマブ、ＰＡＳＳＴＮＦ−α、可溶性ＴＮＦ−α受容体、ＴＮＦ−α結合蛋白、抗ＴＮＦ−α抗体等。
（ｉｉ）インターロイキン−１阻害薬
アナキンラ（インターロイキン−１受容体拮抗薬）、可溶性インターロイキン−１受容体等。
（ｉｉｉ）インターロイキン−６阻害薬
トシリズマブ（抗インターロイキン−６受容体抗体）、抗インターロイキン−６抗体等。
（ｉｖ）インターロイキン−１０薬
インターロイキン−１０等。
（ｖ）インターロイキン−１２／２３阻害薬
ウステキヌマブ、ブリアキヌマブ（抗インターロイキン−１２／２３抗体）等。
（ｖｉ）Ｂ細胞活性化阻害薬
リツキサン、ベンリスタ等。
（ｖｉｉ）共刺激分子関連タンパク質製剤
アバダセプト等。
（ＩＩ）非タンパク質製剤
（ｉ）ＭＡＰＫ阻害薬
ＢＭＳ−５８２９４９等。
（ｉｉ）遺伝子調節薬
ＮＦ−κ、ＮＦ−κＢ、ＩＫＫ−１、ＩＫＫ−２、ＡＰ−１等シグナル伝達に関係する分子の阻害薬等。
（ｉｉｉ）サイトカイン産生抑制薬
イグラチモド、テトミラスト等。
（ｉｖ）ＴＮＦ−α変換酵素阻害薬
（ｖ）インターロイキン−１β変換酵素阻害薬
ベルナカサン（Ｂｅｌｎａｃａｓａｎ）等。
（ｖｉ）インターロイキン−６拮抗薬
ＨＭＰＬ−００４等。
（ｖｉｉ）インターロイキン−８阻害薬
ＩＬ−８拮抗薬、ＣＸＣＲ１ ＆ ＣＸＣＲ２拮抗薬、レパレキシン等。
（ｖｉｉｉ）ケモカイン拮抗薬
ＣＣＲ９拮抗薬（バーシルノン（Ｖｅｒｃｉｒｎｏｎ ｓｏｄｉｕｍ）、ＣＣＸ０２５、Ｎ−｛４−クロロ−２−［（１−オキシドピリジン−４−イル）カルボニル］フェニル｝−４−（プロパン−２−イルオキシ）ベンゼンスルホンアミド）、ＭＣＰ−１拮抗薬等。
（ｉｘ）インターロイキン−２受容体拮抗薬
デニロイキン、ディフチトックス等。
（ｘ）Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｖａｃｃｉｎｅｓ
ＴＮＦ−αワクチン等。
（ｘｉ）遺伝子治療薬
インターロイキン−４、インターロイキン−１０、可溶性インターロイキン−１受容体、可溶性ＴＮＦ−α受容体等抗炎症作用を有する遺伝子の発現を亢進させることを目的とした遺伝子治療薬。
（ｘｉｉ）アンチセンス化合物
ＩＳＩＳ−１０４８３８等。

【0154】

（４）インテグリン阻害薬
ナタリズマブ、ベドリズマブ、ＡＪＭ３００、ＴＲＫ−１７０、Ｅ６００７等。
（５）免疫調節薬（免疫抑制薬）
メトトレキサート、シクロフォスファミド、ＭＸ−６８、アチプリモド ディハイドロクロライド、アバタセプト（Ａｂａｔａｃｅｐｔ）、ＣＫＤ−４６１、リメクソロン、シクロスポリン、タクロリムス、グスペリムス、アザチオプリン、抗リンパ血清、乾燥スルホ化免疫グロブリン、エリスロポイエチン、コロニー刺激因子、インターロイキン、インターフェロン等。
（６）プロテアソーム阻害薬
ベルケード等。
（７）ＪＡＫ阻害薬
トファシチニブ等。
（８）ステロイド薬
デキサメサゾン、ヘキセストロール、メチマゾール、ベタメタゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、酢酸コルチゾン、ヒドロコルチゾン、フルオロメトロン、プロピオン酸ベクロメタゾン、エストリオール等。
（９）アンジオテンシン変換酵素阻害薬
エナラプリル、カプトプリル、ラミプリル、リシノプリル、シラザプリル、ペリンドプリル等。

【0155】

（１０）アンジオテンシンＩＩ受容体拮抗薬
カンデサルタンシレキセチル、バルサルタン、イルベサルタン、オルメサルタン、エプロサルタン等。
（１１）利尿薬
ヒドロクロロチアジド、スピロノラクトン、フロセミド、インダパミド、ベンドロフルアジド、シクロペンチアジド等。
（１２）強心薬
ジゴキシン、ドブタミン等。
（１３）β受容体拮抗薬
カルベジロール、メトプロロール、アテノロール等。
（１４）Ｃａ感受性増強薬
カルダレット一水和物（Ｃａｌｄａｒｅｔ ｈｙｄｒａｔｅ）等。
（１５）Ｃａチャネル拮抗薬
ニフェジピン、ジルチアゼム、ベラパミル等。
（１６）抗血小板薬、抗凝固薬
ヘパリン、アスピリン、ワルファリン等。
（１７）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害薬
アトルバスタチン、シンバスタチン等。

【0156】

（１８）避妊薬
（ｉ）性ホルモンまたはその誘導体
黄体ホルモンまたはその誘導体（プロゲステロン、１７α−ヒドロキシプロゲステロン、メドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ノルエチステロン、ノルエチステロンエナンタート、ノルエチンドロン、酢酸ノルエチンドロン、ノルエチノドレル、レボノルゲストレル、ノルゲストレル、二酢酸エチノジオール、デソゲストレル、ノルゲスチメート、ゲストデン、プロゲスチン、エトノゲストレル、ドロスピレノン、ジエノゲスト、トリメゲストン、ネストロン、酢酸クロマジノン、ミフェプリストン、酢酸ノメゲストロル、トサゲスチン（Ｔｏｓａｇｅｓｔｉｎ）、ＴＸ−５２５、エチニルエストラジオール／ＴＸ５２５（Ｅｔｈｉｎｙｌエストラジオール／ＴＸ５２５））あるいは黄体ホルモンまたはその誘導体と卵胞ホルモンまたはその誘導体（エストラジオール、安息香酸エストラジオール、エストラジオールシピオネート、エストラジオールジプロピオナート、エストラジオールエナンタート、エストラジオールヘキサヒドロベンゾアート、エストラジオールフェニルプロピオナート、エストラジオールウンデカノアート、吉草酸エストラジオール、エストロン、エチニルエストラジオール、メストラノール）との合剤等。
（ｉｉ）抗卵胞ホルモン薬
オルメロキシフェン、ミフェプリストン、Ｏｒｇ−３３６２８等。
（ｉｉｉ）殺精子薬
ウシェルセル等。

【0157】

（１９）その他
（ｉ）Ｔ細胞阻害薬
（ｉｉ）イノシン一リン酸脱水素酵素（ＩＭＰＤＨ）阻害薬
マイコフェノレート モフェチル等。
（ｉｉｉ）接着分子阻害薬
アリカフォルセンナトリウム（Ａｌｉｃａｆｏｒｓｅｎ ｓｏｄｉｕｍ）、セレクチン阻害薬、ＥＬＡＭ−１阻害薬、ＶＣＡＭ−１阻害薬、ＩＣＡＭ−１阻害薬等。
（ｉｖ）サリドマイド
（ｖ）カテプシン阻害薬
（ｖｉ）マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）阻害薬
Ｖ−８５５４６等。
（ｖｉｉ）グルコース−６−リン酸脱水素酵素阻害薬
（ｖｉｉｉ）Ｄｉｈｙｄｒｏｏ回転脱水素酵素（ＤＨＯＤＨ）阻害薬
（ｉｘ）ホスホジエステラーゼＩＶ（ＰＤＥＩＶ）阻害薬
ロフルミラスト、アプレミラスト、ＣＧ−１０８８等。
（ｘ）ホスホリパーゼＡ２阻害薬
（ｘｉ）ｉＮＯＳ阻害薬
ＶＡＳ２０３等。
（ｘｉｉ）Ｍｉｃｒｏｔｕｂｌｅ刺激薬
パクリタキセル等。
（ｘｉｉｉ）Ｍｉｃｒｏｔｕｂｌｅ阻害薬
リューマコン等。
（ｘｉｖ）ＭＨＣクラスＩＩ拮抗薬
（ｘｖ）Ｐｒｏｓｔａサイクリン作働薬
イロプロスト等。
（ｘｖｉ）ＣＤ４拮抗薬
ザノリムマブ等。
（ｘｖｉｉ）ＣＤ２３拮抗薬
（ｘｖｉｉｉ）ＬＴＢ４受容体拮抗薬
ＤＷ−１３５０等。
（ｘｉｘ）５−リポキシゲナーゼ阻害薬
ジリュートン等。
（ｘｘ）コリンエステラーゼ阻害薬
ガランタミン等。
（ｘｘｉ）チロシンキナーゼ阻害薬
Ｔｙｋ２阻害薬（ＷＯ２０１０／１４２７５２）等。
（ｘｘｉｉ）カレプシンＢ阻害薬
（ｘｘｉｉｉ）Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｄｅａｍｉｎａｓｅ阻害薬
ペントスタチン等。
（ｘｘｉｖ）骨形成刺激薬
（ｘｘｖ）ジペプチジルペプチダーゼ阻害薬
（ｘｘｖｉ）コラーゲン作働薬
（ｘｘｖｉｉ）Ｃａｐｓａｉｃｉｎクリーム
（ｘｘｖｉｉｉ）ヒアルロン酸誘導体
シンビスク（ｈｙｌａｎ Ｇ−Ｆ ２０）、オルソビスク等。
（ｘｘｉｘ）硫酸グルコサミン
（ｘｘｘ）アミプリローゼ
（ｘｘｘｉ）ＣＤ−２０阻害薬
リツキシマブ、イブリツモマブ、トシツモマブ、オファツマブ等。
（ｘｘｘｉｉ）ＢＡＦＦ阻害薬
ベリムマブ、タバルマブ、アタシセプト、ブリシビモド（Ｂｌｉｓｉｂｉｍｏｄ）等。（ｘｘｘｉｉｉ）ＣＤ５２阻害薬
アレムツズマブ等。

【0158】

本発明化合物と併用薬物とを組み合わせることにより、（１）本発明化合物または併用薬物を単独で投与する場合に比べて、その投与量を軽減することができる、（２）患者の症状（軽症、重症等）に応じて、本発明化合物と併用する薬物を選択することができる、（３）治療期間を長く設定することができる、（４）治療効果の持続を図ることができる、（５）本発明化合物と併用薬物とを併用することにより、相乗効果が得られる、等の優れた効果を得ることができる。

【0159】

以下、本発明化合物と併用薬物を併用する場合を「本発明の併用剤」と称する。
本発明の併用剤の使用に際しては、本発明化合物と併用薬物の投与時期は限定されず、本発明化合物と併用薬物とを、投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。時間差をおいて投与する場合、時間差は投与する有効成分、剤形、投与方法により異なるが、例えば、併用薬物を先に投与する場合、併用薬物を投与した後１分ないし３日以内、好ましくは１０分ないし１日以内、より好ましくは１５分ないし１時間以内に本発明化合物を投与すればよい。本発明化合物を先に投与する場合、本発明化合物を投与した後、１分ないし１日以内、好ましくは１０分ないし６時間以内、より好ましくは１５分から１時間以内に併用薬物を投与すればよい。併用薬物の投与量は、臨床上用いられている投与量に準ずればよく、投与対象、投与ルート、疾患、組み合わせ等により適宜選択することができる。

【0160】

本発明化合物と併用薬物を併用する場合の投与形態としては、例えば、（１）本発明化合物と併用薬物とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与、（２）本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、（３）本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での時間差をおいての投与、（４）本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、（５）本発明化合物と併用薬物とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での時間差をおいての投与（例えば、本発明化合物→併用薬物の順序での投与、あるいは逆の順序での投与）が挙げられる。
併用薬物の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、本発明化合物と併用薬物との配合比は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状、組み合わせ等により適宜選択することができる。例えば、投与対象がヒトである場合、本発明化合物１重量部に対し、併用薬物を０．０１ないし１００重量部用いればよい。

【0161】

さらに、本発明化合物または本発明の併用剤は、非薬剤療法と併用することができる。具体的には、本発明化合物または本発明の併用剤は、例えば、（１）手術、（２）アンジオテンシンＩＩ等を用いる昇圧化学療法、（３）遺伝子療法、（４）温熱療法、（５）凍結療法、（６）レーザー焼灼法、（７）放射線療法の非薬剤療法と組み合わせることもできる。

【0162】

例えば、本発明化合物または本発明の併用剤を前記手術等の前または後に、あるいはこれら２、３種を組み合わせた治療前または後に使用することによって、耐性発現の阻止、無病期（Ｄｉｓｅａｓｅ−Ｆｒｅｅ Ｓｕｒｖｉｖａｌ）の延長、癌転移あるいは再発の抑制、延命等の効果が得られる。

【0163】

また、本発明化合物または本発明の併用剤による治療と、支持療法〔（ｉ）各種感染病の併発に対する抗生物質（例えば、パンスポリン等のβ−ラクタム系、クラリスロマイシン等のマクロライド系）の投与、（ｉｉ）栄養障害改善のための高カロリー輸液、アミノ酸製剤、総合ビタミン剤の投与、（ｉｉｉ）疼痛緩和のためのモルヒネ投与、（ｉｖ）悪心、嘔吐、食欲不振、下痢、白血球減少、血小板減少、ヘモグロビン濃度低下、脱毛、肝障害、腎障害、ＤＩＣ、発熱等のような副作用を改善する薬剤の投与および（ｖ）癌の多剤耐性を抑制するための薬剤の投与等〕を組み合わせることもできる。

【実施例】

【0164】

本発明は、更に以下の実施例、試験例および製剤例によって詳しく説明されるが、これらは本発明を限定するものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
以下の実施例中の「室温」は通常約１０℃ないし約３５℃を示す。混合溶媒において示した比は、特に断らない限り容量比を示す。％は、特に断らない限り重量％を示す。
シリカゲルカラムクロマトグラフィーにおいて、ＮＨと記載した場合は、アミノプロピルシラン結合シリカゲル、Ｄｉｏｌと記載した場合は、３−（２，３−ジヒドロキシプロポキシ）プロピルシラン結合シリカゲル、ＤｉＮＨと記載した場合は、Ｎ−（２−アミノエチル）−３−アミノプロピルシラン結合シリカゲルを用いた。ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）において、Ｃ１８と記載した場合は、オクタデシル結合シリカゲルを用いた。溶出溶媒の比は、特に断らない限り容量比を示す。
以下の実施例においては下記の略号を使用する。
ｍｐ：融点
ＭＳ：マススペクトル
［Ｍ＋Ｈ］^＋、［Ｍ−Ｈ］⁻：分子イオンピーク
Ｍ：モル濃度
Ｎ：規定
ＣＤＣｌ_３：重クロロホルム
ＣＤ_３ＯＤ：重メタノール
ＤＭＳＯ−ｄ_６：重ジメチルスルホキシド
^１Ｈ ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴
ＬＣ／ＭＳ：液体クロマトグラフ質量分析計
ＥＳＩ：エレクトロスプレーイオン化
ＡＰＣＩ：大気圧化学イオン化
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＭＥ：１，２−ジメトキシエタン
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＭＯＭＣｌ：クロロメチルメチルエーテル
ｔ−ＢｕＯＫ：カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド
ＬＤＡ：リチウムジイソプロピルアミド
ＤＭＴＭＭ：４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリドＮ−水和物
ＨＡＴＵ：２−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＷＳＣ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル
ｔ−Ｂｕ：ｔｅｒｔ−ブチル

【0165】

^１ＨＮＭＲはフーリエ変換型ＮＭＲで測定した。解析にはＡＣＤ／ＳｐｅｃＭａｎａｇｅｒ（商品名）などを用いた。水酸基やアミノ基などのプロトンが非常に緩やかなピークについては記載していない。
ＭＳは、ＬＣ／ＭＳにより測定した。イオン化法としては、ＥＳＩ法、または、ＡＰＣＩ法を用いた。データは実測値（ｆｏｕｎｄ）を記載した。通常、分子イオンピークが観測されるが、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を有する化合物の場合、フラグメントイオンとして、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基あるいはｔｅｒｔ−ブチル基が脱離したピークが観測されることもある。また、水酸基を有する化合物の場合、フラグメントイオンとして、Ｈ_２Ｏが脱離したピークが観測されることもある。塩の場合は、通常、フリー体の分子イオンピークもしくはフラグメントイオンピークが観測される。
旋光度（［α］_Ｄ）における試料濃度（ｃ）の単位はｇ／１００ｍＬである。
元素分析値（Ａｎａｌ．）は、計算値（Ｃａｌｃｄ）と実測値（Ｆｏｕｎｄ）を記載した。

【0166】

実施例１
N-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)-3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド

【0167】

A) 6-クロロ-N-(4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)ピリミジン-4-アミン
4,6-ジクロロピリミジン (3.62 g)、4-(トリフルオロメトキシ)アニリン (4.3 g)とエタノール (10 mL)の混合物にトリエチルアミン (5.08 mL)を室温で加えた。混合物を80 ℃で終夜撹拌した。混合物を室温まで冷却し、水を加えた。生じた固形物をろ取して標題化合物 (5.52 g)を得た。
MS: [M+H]⁺290.2.

【0168】

B) 3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)安息香酸
6-クロロ-N-(4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)ピリミジン-4-アミン(4.0 g)、3-(ジヒドロキシボリル)安息香酸 (2.3 g)、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）(797 mg)、炭酸ナトリウム (5.9 g)とアセトニトリル-水 (1:1, 200 mL)の混合物を窒素雰囲気下、90 ℃で16時間撹拌した。混合物を熱時ろ過した後、ろ液を室温まで冷却し、6N塩酸でpHを4に調整した。生じた固体をろ取し、標題化合物(3.11 g)を得た。
MS: [M+H]⁺376.1.

【0169】

C) N-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エチル)-3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド
3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)安息香酸 (1.0 g)、2-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)エタノール (0.72 g)、DIPEA (0.70 mL)と無水DMF(10 mL)の混合物に、0℃にてHATU (1.22 g)を加え、室温にて3時間撹拌した。反応混合物を水中に注ぎ、酢酸エチルにて抽出した。有機層を水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (1.06 g)を得た。
MS: [M+H]⁺507.3.

【0170】

D) 2-(2-(2-((3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
N-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エチル)-3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド (660 mg)の無水DMF (13.2 mL)溶液に4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (497 mg)を0℃にて加え、室温で3時間撹拌した。混合物に室温で１N 塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、1N塩酸と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン)で精製し、標題化合物 (567 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺ 661.4.

【0171】

E) tert-ブチル (2S)-2-カルバモイルピロリジン-1-カルボキシラート
1-(tert-ブトキシカルボニル)-L-プロリン (10.0 g)、HOBt (9.00 g)、およびアセトニトリル (200 mL)の混合物にWSC (13.1 g) を加え、室温で3時間撹拌した。アンモニア水 (30 mL) を0 ℃で加え、室温で12時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、水を加えて酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (10.2 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.34-1.39 (9H, m), 1.70-1.83 (3H, m), 2.01-2.11 (1H, m), 3.23-3.29 (1H, m), 3.34-3.38 (1H, m), 3.96-4.00 (1H, m), 6.86-6.90 (1H, m), 7.26-7.30 (1H, m).

【0172】

F) tert-ブチル (2S)-2-カルバモチオイルピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-カルバモイルピロリジン-1-カルボキシラート (4.78 g)、ローソン試薬 (9.47 g)、および無水THF (130 mL)の混合物を60 ℃で2時間撹拌した。反応混合物を冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(NH、酢酸エチル/ヘキサン、メタノール/酢酸エチル)で精製し、標題化合物 (4.21 g)を得た。
MS: [M+H-Boc+H]⁺131.2.

【0173】

G) エチル 2-((2S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-カルバモチオイルピロリジン-1-カルボキシラート (2.32 g)、ブロモピルビン酸エチル (1.7 mL)、およびエタノール (50 mL)の混合物を60 ℃で3時間撹拌した。反応液を冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液 (5 mL)を加えて減圧下濃縮した。残渣をTHF (30 mL)-飽和炭酸水素ナトリウム水溶液 (20 mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル (2.4 mL)を0 ℃で加えた。混合物を室温で3時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (2.93 g)を得た。
MS: [M+H-Boc+H]⁺227.2.

【0174】

H) 2-((2S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボン酸
エチル 2-((2S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボキシラート (2.92 g)、メタノール (36 mL)、および1N 水酸化ナトリウム水溶液 (18 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に1N 塩酸 (18 mL)を加え、有機溶媒を減圧下留去した。沈殿物を濾取した後、水で洗浄、乾燥し、標題化合物 (2.48 g)を得た。
MS: [M+H-Boc+H]⁺199.2.

【0175】

I) tert-ブチル (2S)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
2-((2S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボン酸 (1.2 g)、DIPEA (2.1 mL)、N,O-ジメトキシヒドロキシアミン塩酸塩 (0.471 g)、HOBt (0.652 g)、WSC (0.85 mL)、およびDMF (16 mL)の混合物を、室温で終夜撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (1.33 g)を得た。
MS: [M+H]⁺342.2.

【0176】

J) tert-ブチル (2S)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート (640 mg)と無水THF (18 mL)の混合物に0.5M (3-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)マグネシウムブロミドTHF溶液 (11.3 mL)を-55 ℃で加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、-55 ℃で30分間撹拌し、50分間かけて-10 ℃に昇温した。反応液を再び-55 ℃に冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液 (15 mL)を滴下した。反応液を酢酸エチル− 水で分配し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (847 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 1.30-1.56 (9H, m), 1.57-2.13 (8H, m), 2.19-2.51 (2H, m), 3.32-3.74 (3H, m), 3.82-3.98 (1H, m), 5.12-5.38 (1H, m), 5.44-5.54 (1H, m), 7.23-7.33 (1H, m), 7.34-7.45 (1H, m), 7.71-7.88 (2H, m), 8.08 (1H, s).

【0177】

K) (3-ヒドロキシフェニル)(2-((2S)-ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)メタノン二塩酸塩
tert-ブチル (2S)-2-(4-(3-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート (840 mg)と2M 塩化水素メタノール溶液 (4.5 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をトルエン (10 mL)で希釈し、減圧下濃縮して標題化合物を得た。得られた化合物は、さらなる精製を行うことなく、次の反応に用いた。
MS: [M+H]⁺275.1.

【0178】

L) tert-ブチル ((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)カルバマート
(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸 (1.42 g)、HOBt(0.75 g)、WSC (0.96 mL)、およびTHF(4.5 mL)の混合物を0 ℃で1時間撹拌した。得られた反応混合物を、(3-ヒドロキシフェニル)(2-((2S)-ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)メタノン 二塩酸塩 (0.635 g)と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液 (4.5 mL)の混合物中に0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌した後、酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をメタノール (15 mL)に溶解し、炭酸カリウム(0.38 g)の水溶液 (3.8 mL)を0 ℃で加え、0 ℃で2時間撹拌した。反応液に1N塩酸(5 mL)と酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (935 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺514.3.

【0179】

M) (2S)-2-アミノ-2-シクロヘキシル-1-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エタノン二塩酸塩
tert-ブチル ((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)カルバマート(935 mg)、メタノール(1 mL)-THF (3 mL)、および4M 塩化水素シクロペンチルメチルエーテル溶液 (4.5 mL)の混合物を室温で4時間撹拌した。反応混合物をトルエン (10 mL)で希釈し、減圧下濃縮して標題化合物を得た。得られた化合物は、さらなる精製を行うことなく、次の反応に用いた。
MS: [M+H]⁺414.2.

【0180】

N) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2S)-2-アミノ-2-シクロヘキシル-1-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エタノン 二塩酸塩 (0.89 g)、DIPEA (0.96 mL)、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン (1.11 g)、HOBt(0.74 g)、WSC (0.96 mL)、およびDMF (6 mL)の混合物を、室温で2時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をメタノール (15 mL)に溶解し、炭酸カリウム (0.38 g)水溶液 (3.8 mL)を0 ℃で加え、0 ℃で2時間撹拌した。反応液に1N 塩酸(6 mL)と酢酸エチルを加え、飽和食塩水で３回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン)、およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (458 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺599.4.

【0181】

O) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (231 mg)、2-(2-(2-((3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (283 mg)と無水DMF(5.6 mL)の混合物に 炭酸カリウム(71 mg)を加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、60 ℃で５時間撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物(274 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1087.8.

【0182】

P) N-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)-3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド
tert-ブチル ((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート(271 mg)とTFA(1.92 mL)の混合物を室温で30分間撹拌した。混合物にトルエン(5 mL)を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、有機層を分離した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール／酢酸エチル)で精製し、標題化合物(168 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0.83-1.01 (3H, m), 1.01-1.29 (7H, m), 1.47-1.77 (6H, m), 1.91-2.12 (2H, m), 2.12-2.27 (4H, m), 2.96 (1H, q, J = 6.6 Hz), 3.42-3.52 (2H, m), 3.54-3.66 (6H, m), 3.73-3.83 (4H, d, J = 5.0 Hz), 4.10-4.16 (2H, m), 4.45-4.52 (1H, m), 5.38 (1H, dd, J = 7.9, 3.0 Hz), 7.21 (1H, dd, J = 7.8, 2.3 Hz), 7.32-7.46 (4H, m), 7.58-7.68 (3H, m), 7.82-7.92 (3H, m), 7.98 (1H, d, J = 7.6 Hz), 8.17 (1H, d, J = 8.1 Hz), 8.47 (1H, s), 8.52 (1H, s), 8.67-8.73 (1H, m), 8.77 (1H, s), 9.92 (1H, s).

【0183】

実施例２
N-(2-(2-(2-(4-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)-3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド

【0184】

A) tert-ブチル(2S)-2-(4-(4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(640 mg)の無水THF(18 mL)溶液に0.5M (4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)マグネシウムブロミド(11.3 mL)を-55 ℃で加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、-55 ℃で30分間撹拌した後、40分間かけて-10 ℃まで昇温した。反応混合物を再び-55 ℃まで冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液(15 mL)を滴下した。反応混合物を酢酸エチル、水で分配し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (817 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺459.3.

【0185】

B) (4-ヒドロキシフェニル)(2-((2S)-ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)メタノン二塩酸塩
tert-ブチル (2S)-2-(4-(4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート (812 mg)、2M 塩化水素メタノール溶液(4.5 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をトルエン(10 mL)で希釈し、減圧下濃縮し、標題化合物(615 mg)を得た。得られた化合物はさらなる精製を行うことなく次の反応に用いた。
MS: [M+H]⁺275.1.

【0186】

C) tert-ブチル ((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)カルバマート
(4-ヒドロキシフェニル)(2-((2S)-ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)メタノン二塩酸塩 (0.62 g)、DIPEA (0.95 mL)、(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸 (1.37 g)、HOBt (0.72 g)、WSC (0.93 mL)、およびDMF (6 mL)の混合物を、室温で2時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をメタノール (25 mL)に溶解し、炭酸カリウム (0.75 g)と水 (7.5 mL)の混合物を加え、室温で1時間撹拌した。反応混合物に1N 塩酸 (12 mL)と酢酸エチルを加え、飽和食塩水で3回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (845 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺514.3.

【0187】

D) (2S)-2-アミノ-2-シクロヘキシル-1-((2S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エタノン二塩酸塩
tert-ブチル ((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)カルバマート(840 mg)と2M 塩化水素メタノール溶液(6 mL)の混合物を室温で終夜 撹拌した。反応液をトルエン(10 mL)で希釈し、減圧下濃縮することにより、粗標題化合物を得た。得られた化合物はさらなる精製を行うことなく次の反応に用いた。
MS: [M+H]⁺414.3.

【0188】

E) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2S)-2-アミノ-2-シクロヘキシル-1-((2S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エタノン二塩酸塩 (1.84 g)、DIPEA (2.0 mL)、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン (2.31 g)、HOBt (1.56 g)、WSC (2.0 mL)、およびDMF (12 mL)の混合物を、室温で2時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣をメタノール (50 mL)に溶解し、炭酸カリウム (1.0 g)と水(10 mL)の混合物を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で20分間撹拌した。反応液に1N 塩酸(16 mL)と酢酸エチルを加え、飽和食塩水で3回洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (1.57 g)を得た。
MS: [M+H]⁺599.5.

【0189】

F) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(2-(2-((3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-((3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (283 mg)とtert-ブチル ((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-((S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート(231 mg)の無水DMF(5.6 mL)溶液に、室温にて炭酸カリウムを加えて、アルゴン雰囲気下、60 ℃で5時間撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール／酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (298 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1087.8.

【0190】

G) N-(2-(2-(2-(4-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)-3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド
tert-ブチル ((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((S)-2-(4-(4-(2-(2-(2-(3-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)ベンズアミド)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート (291 mg)とTFA (2.06 mL)の混合物を室温で30分間撹拌した。混合物にトルエン（5 mL）を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、有機層を分離した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール／酢酸エチル)で精製して標題化合物 (195 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0.84-1.25 (10H, m) 1.48-1.78 (6H, m), 1.93-2.11 (2H, m), 2.12-2.28 (4H, m), 2.96 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.42-3.53 (2H, m), 3.55-3.66 (6H, m), 3.73-3.85 (4H, m), 4.15-4.21 (2H, m), 4.46-4.53 (1H, m), 5.39 (1H, dd, J = 8.0, 3.0 Hz), 7.04 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.33 (2H, s, J = 3.8 Hz), 7.37 (1H, s, J = 6.9 Hz), 7.62 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.82-7.92 (3H, m), 7.99 (1H, d, J = 7.7 Hz), 8.12-8.20 (3H, m), 8.38-8.42 (1H, m), 8.53 (1H, s), 8.68-8.77 (2H, m), 9.92 (1H, s).

【0191】

実施例７
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0192】

A) 2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エタノール
6-(1H-ピラゾール-4-イル)-N-(4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)ピリミジン-4-アミン (200 mg)、2-(2-(2-クロロエトキシ)エトキシ)エタノール (157 mg)、ヨウ化ナトリウム (103 mg)の無水DMF(4.0 mL)溶液に炭酸セシウム(264 mg)を室温で加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、80 ℃で終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (208 mg)を得た。
上記6-(1H-ピラゾール-4-イル)-N-(4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)ピリミジン-4-アミンは自体公知の方法 (例えば、ジャーナル オブ メディシナル ケミストリー (Journal of Ｍedicinal Chemistry) 2010, 53, 6934-6946に記載された方法)で合成することができる。
MS: [M+H]⁺454.3.

【0193】

B) 2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エタノール (1.01 g)のピリジン (20 mL)溶液に4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (0.85 g)を氷冷下で加えた。混合物を室温にて3時間撹拌した。混合物に室温で１N 塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、１N 塩酸と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (1.05 g)を得た。
MS: [M+H]⁺608.3.

【0194】

C) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (255 mg)とtert-ブチル ((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-((S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート (190 mg)の無水DMF (3.8 mL)溶液に炭酸カリウム (68.5 mg)を加えて、混合物をアルゴン雰囲気下、60 ℃で5時間 撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (256 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1034.8.

【0195】

D) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート (253 mg)とTFA (2.0 mL)の混合物を室温にて20分撹拌した。混合物にトルエン（5 mL）を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、有機層を分離した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (154 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0.83-1.00 (3H, m), 1.00-1.26 (7H, m), 1.46-1.77 (6H, m), 1.91-2.12 (2H, m), 2.12-2.27 (4H, m), 2.96 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.57 (4H, s), 3.69-3.86 (6H, m), 3.99-4.14 (2H, m), 4.33 (2H, t, J = 5.2 Hz), 4.45-4.52 (1H, m), 5.38 (1H, dd, J = 7.9, 3.1 Hz), 6.90 (1H, s), 7.19 (1H, dd, J = 8.0, 2.3 Hz), 7.29-7.45 (3H, m), 7.60-7.67 (2H, m), 7.78 (2H, d, J = 8.1 Hz), 7.89 (1H, d, J = 9.0 Hz), 7.98 (1H, s), 8.33 (1H, s), 8.46 (1H, s), 8.55 (1H, s), 9.71 (1H, s).

【0196】

実施例８
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0197】

A) 2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エタノール (688 mg)のピリジン(14 mL)溶液に4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (527 mg)を氷冷下加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、室温で3時間 撹拌した。混合物に室温で１N 塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、１N 塩酸と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (614 mg)を得た。
上記2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エタノールは自体公知の方法 (例えば、WO2015106292に記載された方法)で合成することができる。
MS: [M+H]⁺652.4.

【0198】

B) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート(239 mg)とtert-ブチル((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-((S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート(200 mg)のDMF (4.0 mL)溶液に炭酸カリウム (60 mg)を加え、アルゴン雰囲気下、60 ℃で5時間 撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (235 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1078.9.

【0199】

C) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((S)-1-(((S)-1-シクロヘキシル-2-オキソ-2-((S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(6-((4-(トリフルオロメトキシ)フェニル)アミノ)ピリミジン-4-イル)-1H-ピラゾール-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)(メチル)カルバマート(230 mg)とTFA (2.4 mL)の混合物を室温にて20分撹拌した。混合物にトルエン（5 mL）を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、有機層を分離した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (141 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0.83-1.02 (3H, m), 1.02-1.28 (7H, m), 1.47-1.75 (6H, m), 1.96-2.13 (2H, m), 2.13-2.27 (4H, m), 2.99 (1H, q, J = 6.7 Hz), 3.46-3.58 (8H, m), 3.69-3.85 (6H, m), 4.09-4.16 (2H, m), 4.32 (2H, t, J = 5.3 Hz), 4.45-4.52 (1H, m), 5.38 (1H, dd, J = 7.8, 3.1 Hz), 6.91 (1H, d, J = 0.9 Hz), 7.21 (1H, dd, J = 7.7, 2.2 Hz), 7.31 (2H, d, J = 8.3 Hz), 7.44 (1H, t, J = 7.9 Hz), 7.61-7.68 (2H, m), 7.75-7.82 (2H, m), 7.90-7.99 (2H, m), 8.31 (1H, s), 8.47 (1H, s), 8.57 (1H, s), 9.72 (1H, s).

【0200】

実施例９
3-(2-(((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド

【0201】

A) メチル 1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-オアート
2-(2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エトキシ)エタノール (5 g) および THF (60 mL) の混合物に60%水素化ナトリウム (1.248 g) を氷冷下にて加え、氷冷下で5分間撹拌した。反応混合物に、氷冷下にてブロモ酢酸メチル (2.76 mL) と THF (20 mL) の混合物を滴下し、氷冷下で２時間撹拌した。反応混合物に氷冷下にて、酢酸 (4 mL) および メタノール (1 mL) を加えた後、減圧下濃縮した。残渣をヘキサン/酢酸エチルに溶解し、ろ過して不溶物を除去した。ろ液を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (6.0 g) を得た。
MS: [M+H]⁺313.3.

【0202】

B) メチル (2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
メチル 1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-オアート (1.0 g)および10%パラジウム炭素 (170 mg)のメタノール (30 mL)の混合物を常圧の水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮して標題化合物 (680 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 2.24 (1H, brs), 3.58-3.80 (15H, m), 4.18 (2H, s).

【0203】

C) メチル (2-(2-(2-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
メチル (2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (680 mg)とピリジン (12 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (583 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮して得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、1N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (670 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺377.2.

【0204】

D) メチル(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
メチル (2-(2-(2-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (320 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (509 mg)、炭酸カリウム (235 mg)、およびDMSO (3 mL)の混合物を、50 ℃で終夜撹拌した。反応混合物を冷却後、酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (506 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺803.7.

【0205】

E) (2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
メチル (2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (506 mg)とTHF (5 mL)-メタノール (5 mL)-水 (5 mL)の混合物に４N 水酸化リチウム水溶液（0.5 mL)を室温で加えた。混合物を室温で30分間撹拌した。混合物に1N 塩酸(2.5 mL)を加え、酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮して標題化合物 (486 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺789.6.

【0206】

F) エチル 3-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアート
エチル 3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアート(4.00 g)と二炭酸ジ-tert-ブチル(50 mL)の混合物を、120 ℃で16時間撹拌した。反応混合物から固体をろ取した後、石油エーテルで洗浄し、乾燥して標題化合物(3.85 g)を得た。
上記 エチル 3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアートは自体公知の方法 (例えば、WO2010144909に記載された方法)で合成することができる。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.34 (3H, t, J = 7.06 Hz), 1.51 (9H, s), 4.36 (2H, q, J = 7.20 Hz), 7.64 (1H, t, J = 7.72 Hz), 7.99 (1H, dt, J = 7.83, 1.38 Hz), 8.05-8.12 (2H, m), 8.33-8.37 (1H, m), 8.65 (1H, t, J = 1.76 Hz).

【0207】

G) 3-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)安息香酸
エチル 3-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアート(3.80 g)とメタノール-THF-水(1:1:1、90 mL)の混合物に4N水酸化ナトリウム水溶液(4.75 mL)を加えた。混合物を30 ℃で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、塩酸で中和して生じた固体をろ取し、乾燥して標題化合物(2.60 g)を得た。
MS: [M+H]⁺372.1.

【0208】

H) tert-ブチル (5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)カルバマート
3-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)安息香酸 (371 mg)、4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)アニリン (287 mg)、WSC (221 mg)、HOBt (189 mg)と無水DMF (6 mL)の混合物室温で終夜撹拌し、さらに50 ℃で3時間撹拌した。反応混合物を冷却後、酢酸エチルで希釈し、5%飽和炭酸ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (497 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺641.5.

【0209】

I) 3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド
tert-ブチル (5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)カルバマート (508 mg)とTFA (6 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮した後、酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた固体をトルエンから結晶化し、標題化合物 (388 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺541.3.

【0210】

J) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド (92 mg)、(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (150 mg)、トリエチルアミン(0.07 mL)、N,N-ジメチルアミノピリジン(21 mg)、無水DMF (1.5 mL)、および2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物(118 mg)の混合物を、室温で終夜撹拌した。反応液にトリエチルアミン(0.07 mL)と2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物 (118 mg)を追加し、さらに室温で1時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (170 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1311.9.

【0211】

K) 3-(2-(((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (165 mg)とTFA (3 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物にトルエン (5 mL)を加え、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル/) で精製し、標題化合物 (123 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.95-1.27 (12H, m), 1.48-1.81 (6H, m), 2.03-2.35 (7H, m), 2.40-2.74 (9H, m), 3.13 (1H, q, J = 6.9 Hz), 3.66 (2H, s), 3.71-3.99 (12H, m), 4.12-4.19 (2H, m), 4.29 (2H, s), 4.44-4.57 (1H, m), 5.37-5.62 (1H, m), 7.11 (1H, ddd, J = 8.3, 2.5, 0.9 Hz), 7.25-7.37 (1H, m), 7.55-7.69 (3H, m), 7.76 (1H, d, J = 8.6 Hz), 7.89-8.05 (4H, m), 8.14-8.29 (3H, m), 8.60 (1H, t, J = 1.7 Hz).

【0212】

実施例１１
14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-N-(5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド

【0213】

A) メチル 1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサヘキサデカン-16-オアート
1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-オール (10 g) および THF (160 mL) の混合物に60%水素化ナトリウム (2.11 g) を氷冷下にて加え、氷冷下で5分間撹拌した。反応混合物に、氷冷下にてブロモ酢酸メチル (4.66 mL) と THF (20 mL) の混合物を滴下し、氷冷下で２時間撹拌した。反応混合物に氷冷下にて、酢酸 (4 mL) および メタノール (1 mL) を加えた後、減圧下濃縮した。残渣をヘキサン/酢酸エチルに溶解し、ろ過して不溶物を除去した。ろ液を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン)で精製して標題化合物 (9.10 g) を得た。
MS: [M+H]⁺357.3.

【0214】

B) メチル 14-ヒドロキシ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オアート
メチル 1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサヘキサデカン-16-オアート (1.0 g)および10％パラジウムカーボン (170 mg)のメタノール (30 mL)の混合物を常圧の水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮して標題化合物 (826 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 2.05 (1H, brs), 3.57-3.82 (19H, m), 4.17 (2H, s).

【0215】

C) メチル 14-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オアート
メチル14-ヒドロキシ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オアート (747 mg)とピリジン (12 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (2.14 g)を0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、１N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (613 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺421.2.

【0216】

D) メチル14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オアート
メチル14-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オアート (300 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (427 mg)、炭酸カリウム(148 mg)、および無水DMF (3 mL)の混合物を50 ℃で2日間撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (376 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺847.7.

【0217】

E) 14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-酸
メチル14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オアート (376 mg)とTHF (3.5 mL)-メタノール (3.5 mL)-水 (3.5 mL)の混合物に4N 水酸化リチウム水溶液(0.35 mL)を室温で加えた。混合物を室温で30分間撹拌した。混合物に１N 塩酸(1.7 mL)を加え、酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮して標題化合物 (335 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺833.7.

【0218】

F) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((14-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド (107 mg)、14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-酸 (165 mg)、トリエチルアミン(0.11 mL)、N,N-ジメチルアミノピリジン(24 mg)、および無水DMF (1.5 mL)の混合物に2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物(204 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で1時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (161 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1355.9.

【0219】

G) 14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-N-(5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((14-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (155 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物をトルエン(5 mL)で希釈し、減圧下濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル)で精製し、標題化合物 (124 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.95-1.36 (11H, m), 1.47-1.81 (6H, m), 2.03-2.35 (7H, m), 2.39-2.78 (10H, m), 3.14 (1H, q, J = 6.9 Hz), 3.59-4.01 (18H, m), 4.08-4.16 (2H, m), 4.28 (2H, s), 4.44-4.57 (1H, m), 5.37-5.63 (1H, m), 7.08-7.18 (1H, m), 7.33 (1H, t, J = 8.2 Hz), 7.55-7.68 (3H, m), 7.76 (1H, d, J = 8.6 Hz), 7.88-8.08 (4H, m), 8.13-8.28 (3H, m), 8.55-8.65 (1H, m).

【0220】

実施例１２
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-(4-((2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペラジン-1-イル)-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド

【0221】

A) 2-クロロ-N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
2-クロロ-1,3-チアゾール (2.92 g)と無水THF (60 mL)の混合物に1.6 M n-ブチルリチウムヘキサン溶液(16 mL)を-78 ℃で滴下した。混合物を-78 ℃で15分間撹拌後、1-クロロ-2-イソシアナト-3-メチルベンゼン (4.5 g)の無水THF (30 mL)溶液を滴下し、-78 ℃で2時間撹拌した。混合物に-78 ℃で飽和塩化アンモニウム水溶液(60 mL)を加え、酢酸エチルと水で分配した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた固体を酢酸エチル/ヘキサンから結晶化し、標題化合物 (5.43 g)を得た。
MS: [M+H]⁺287.1.

【0222】

B) 2-クロロ-N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-N-(4-メトキシベンジル)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
2-クロロ-N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (5.43 g)と無水DMF (36 mL)の混合物に60%水素化ナトリウム (0.91 g)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で30分間撹拌後、1-(クロロメチル)-4-メトキシベンゼン (3.58 g)とヨウ化テトラブチルアンモニウム (1.4 g)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (6.03 g)を得た。
MS: [M+H]⁺407.1.

【0223】

C) N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-クロロ-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-N-(4-メトキシベンジル)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
60％水素化ナトリウム (2.66 g)と無水THF (50 mL)の混合物に6-クロロ-2-メチルピリミジン-4-アミン(3.19 g)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で30分間撹拌後、2-クロロ-N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-N-(4-メトキシベンジル)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (6.03 g)の無水THF (20 mL)溶液を加えた。混合物を70 ℃で4時間撹拌した。反応混合物を0 ℃まで冷却し、水(2 mL)を加えた。混合物を0 ℃にて１N 塩酸で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、１N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣をエーテルで固化することにより、標題化合物 (6.99 g)を得た。
MS: [M+H]⁺514.2.

【0224】

D) N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-クロロ-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-クロロ-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-N-(4-メトキシベンジル)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (2.1 g)、TFA (16 mL)、およびトリフルオロメタンスルホン酸 (1.3 mL)の混合物を室温で3時間撹拌した。反応混合物を砕いた氷に注ぎ、8N 水酸化ナトリウム水溶液で中和した。沈殿物を濾取し、水、エーテルで洗浄し、乾燥することにより、標題化合物 (1.68 g)を得た。
MS: [M+H]⁺394.1.

【0225】

E) N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((2-メチル-6-(ピペラジン-1-イル)ピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-クロロ-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (750 mg)、ピペラジン (1.64 g)、DIPEA (0.066 mL)、DMSO (6 mL)の混合物を60 ℃で3時間撹拌した。水(12 mL)を加え冷却した。沈殿物を濾取した後、水で洗浄、乾燥し、標題化合物 (776 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺444.2.

【0226】

F) メチル (2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エタノール (5.47 g) および THF (80 mL) の混合物に60％水素化ナトリウム (1.672 g) を氷冷下にて加え、氷冷下で10分間撹拌した。反応混合物に、氷冷下にてブロモ酢酸メチル (3.69 mL) を滴下し、氷冷下で２時間撹拌した。反応混合物に氷冷下にて、酢酸 (4 mL) および メタノール (1 mL) を加えた後、減圧下濃縮した。残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (5.47 g) を得た。
MS: [M+H]⁺269.2.

【0227】

G) メチル (2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)アセタート
メチル (2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (1.0 g)および10%パラジウム炭素 (170 mg)のメタノール (30 mL)の混合物を常圧の水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮して標題化合物 (672 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 2.57 (1H, brs), 3.58-3.66 (2H, m), 3.68-3.81 (9H, m), 4.17 (2H, s).

【0228】

H) メチル (2-(2-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
メチル (2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)アセタート (667 mg)とピリジン (16 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (2.85 g)を0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、1N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (606 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺333.2.

【0229】

I) メチル (2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
メチル (2-(2-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (200 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (360 mg)、炭酸カリウム(125 mg)、および無水DMF (3 mL)の混合物を50 ℃で2日間撹拌した。反応混合物を冷却後、酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (306 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺759.5.

【0230】

J) (2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
メチル(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (306 mg)とTHF (3 mL)-メタノール (3 mL)-水 (3 mL)の混合物に4N 水酸化リチウム水溶液(0.3 mL)を室温で加えた。混合物を室温で30分間撹拌した。混合物に1N 塩酸(1.4 mL)を加え、酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮し、標題化合物 (308 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺745.5.

【0231】

K) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(4-(6-((5-((2-クロロ-6-メチルフェニル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)アミノ)-2-メチルピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((2-メチル-6-(ピペラジン-1-イル)ピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (89 mg)、(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (149 mg)、HOBt (38 mg)、WSC (0.05 mL)、およびDMF (1.5 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (197 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1170.8.

【0232】

L) N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-(4-((2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペラジン-1-イル)-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(4-(6-((5-((2-クロロ-6-メチルフェニル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)アミノ)-2-メチルピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (189 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を、室温で10分間撹拌した。反応液をトルエン(5 mL)で希釈し、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (163 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.35 (8H, m), 1.50-1.85 (6H, m), 2.05-2.48 (13H, m), 3.13 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.49-4.03 (16H, m), 4.20 (2H, dd, J = 5.2, 3.6 Hz), 4.28 (2H, s), 4.50-4.59 (1H, m), 5.40-5.66 (1H, m), 5.87 (1H, s), 7.14-7.41 (5H, m), 7.61-7.74 (2H, m), 8.15 (1H, s), 8.21-8.29 (1H, m).

【0233】

実施例１３
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-(4-((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペラジン-1-イル)-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド

【0234】

A) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(6-((5-((2-クロロ-6-メチルフェニル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)アミノ)-2-メチルピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((2-メチル-6-(ピペラジン-1-イル)ピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (89 mg)、(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (158 mg)、HOBt (38 mg)、WSC (0.05 mL)、およびDMF (1.5 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (250 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1214.8.

【0235】

B) N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-(4-((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペラジン-1-イル)-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(6-((5-((2-クロロ-6-メチルフェニル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)アミノ)-2-メチルピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (242 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を、室温で10分間撹拌した。反応混合物をトルエン(5 mL)で希釈し、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (168 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.95-1.36 (8H, m), 1.51-1.85 (6H, m), 2.04-2.54 (13H, m), 3.14 (1H, q, J = 6.9 Hz), 3.51-3.77 (16H, m), 3.80-4.03 (4H, m), 4.14-4.21 (2H, m), 4.27 (2H, s), 4.50-4.60 (1H, m), 5.42-5.68 (1H, m), 5.93 (1H, s), 7.12-7.42 (5H, m), 7.63-7.73 (2H, m), 8.14 (1H, s), 8.23-8.30 (1H, m).

【0236】

実施例１４
3-(2-(((2-(2-(2-(3-((5-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド

【0237】

A) ベンジル (2S)-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)(シクロヘキシル)アセタート
ベンジル (2S)-アミノ(シクロヘキシル)アセタート一塩酸塩 (11.0 g)、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニンとHATU(14.8 g)とジクロロメタン(200 mL)の混合物にDIPEA(15.0 g)を加え、混合物を室温で16時間撹拌した。混合物に水を加え、有機層を抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(14.0 g)を得た。
上記ベンジル (2S)-アミノ(シクロヘキシル)アセタート一塩酸塩は自体公知の方法 (例えば、WO2008040934に記載された方法)で合成することができる。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.92-1.25 (5H, m), 1.34-1.35 (3H, m), 1.50 (9H, s), 1.66-1.82 (6H, m), 2.80-2.82 (3H, m), 4.54-4.58 (1H, m), 4.59-4.61 (1H, m), 5.14-5.22 (2H, m), 6.45-6.75 (1H, m), 7.33-7.41 (5H, m).

【0238】

B) (2S)-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸
ベンジル (2S)-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)(シクロヘキシル)アセタート(14.0 g)および10%パラジウムカーボン(2.0 g)のエタノール(300 mL)の混合物を15 psiの水素雰囲気下、室温で16時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮して標題化合物(11.4 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.0-1.45 (8H, m), 1.50 (9H, s), 1.55-1.87 (6H, m), 2.82 (3H ,s), 4.51-4.53 (1H, m), 4.54-4.81 (1H, m), 6.60-7.01 (1H, m), 7.79 (1H, brs).

【0239】

C) 3-ブロモ-5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン
4-(5-ブロモピリジン-3-イル)-4-オキソブタナール(109 g)のジクロロメタン(2.00 L)溶液に、-78℃で酢酸(50 mL)およびナトリウム トリアセトキシボロヒドリド(224 g)を加えた後に、R-(+)-1-(4-メトキシフェニル)エチルアミン(84.6 g)を撹拌しながら徐々に加えた。-70℃で1時間撹拌した後に、室温でさらに2時間撹拌した。反応混合物をジクロロメタン(200 mL)で希釈し、水(500 mL)、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(200 mL)および水(1 L)で二度洗浄した。分離した有機層を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物(106 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 1.40 (3H, d, J = 6.62 Hz), 1.58-1.72 (1H, m), 1.86-1.95 (1H, m), 1.99-2.05 (1H, m), 2.27 (1H, dq, J = 12.79, 8.67 Hz), 2.69 (1H, td, J = 9.37, 7.28 Hz), 3.30 (1H, d, J = 1.32 Hz), 3.38-3.46 (1H, m), 3.58 (1H, q, J = 6.62 Hz), 3.69 (3H, s), 6.57 (2H, d, J = 8.82 Hz), 6.97 (2H, s), 7.50-7.55 (1H, m), 8.09-8.15 (1H, s), 8.20-8.28 (1H, s).

【0240】

D) メチル5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ニコチナート
3-ブロモ-5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン(16.0 g)、[1,1-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン]ジクロロパラジウム(II)(3.3 g)、トリエチルアミン(50 mL)およびメタノール(250 mL)の混合物を一酸化炭素雰囲気下(50 psi)、80 ℃で16時間撹拌した。不純物を濾去し、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(13.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.35 (3H, d, J = 6.4 Hz), 1.60-1.66 (1H, m), 1.73-1.96 (2H, m), 2.20-2.26 (1H, m), 2.58-2.61 (1H, m), 3.18-3.20 (1H, m), 3.57-3.59 (1H, m), 3.68-3.83 (4H, m), 3.96 (3H, s), 6.18 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.04 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.0 (1H, t, J = 2.0 Hz), 8.57 (1H, d, J = 2.0 Hz), 9.94 (1H, d, J = 2.0 Hz).

【0241】

E) N-メトキシ-5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)-N-メチルニコチンアミド
メチル 5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ニコチナート(12.0 g)、水酸化リチウム一水和物(4.5 g)およびメタノール(150 mL)-水(50 mL)の混合物を室温で3時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗標題化合物を得た。得られた残渣、N,O-ジメトキシヒドロキシアミン塩酸塩(6.8 g)、HATU(14.7 g)、トリエチルアミン(14.3 g)およびDMF(100 mL)の混合物を室温で16時間撹拌した。混合物に水を加え、酢酸エチルで三度抽出した。合わせた有機層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(10.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ1.32 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.55-1.65 (1H, m), 1.73-1.89 (2H, m), 2.20-2.24 (1H, m), 2.58-2.62 (1H, m), 3.05-3.09 (1H, m), 3.38 (3H, s), 3.53 (3H, s), 3.55-3.65 (1H, m), 3.73-3.78 (4H, m), 6.67 (2H, d, J = 8.8 Hz), 7.11 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.90 (1H, s), 8.50 (1H, d, J = 2.0 Hz), 8.70 (1H, d, J = 1.6 Hz).

【0242】

F) (5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)(3-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)メタノン
2-(3-ブロモフェノキシ)テトラヒドロ-2H-ピラン(2.08 g)、マグネシウム(1.95 g)および無水THF(50 mL)の混合物に触媒量の1,2-ジブロモエタンを窒素雰囲気下、室温で加えた。2-(3-ブロモフェノキシ)テトラヒドロ-2H-ピラン(18.7 g)の無水THF(150 mL)溶液を滴下した後、還流条件下1時間撹拌した。室温に冷却した後に、N-メトキシ-5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)-N-メチルニコチンアミド(10.0 g)の無水THF(50 mL)溶液を滴下した。反応混合物を室温で16時間撹拌し、混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで三度抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(12.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.37 (3H, d, J = 6.4 Hz), 1.60-2.07 (9H, m), 2.20-2.30 (1H, m), 2.58-2.62 (1H, m), 3.15-3.24 (1H, m), 3.60-3.75 (6H, m), 3.85-3.92 (1H, m), 5.55 (1H ,dd, J = 6.4, 3.2 Hz), 6.63 (2H, dd, J = 8.4, 2.0 Hz), 7.06 (2H, dd, J = 8.8, 2.4 Hz), 7.33-7.35 (2H, m), 7.40-7.45 (1H, m), 7.50 (1H, s), 7.82-7.84 (1H, m), 8.62 (1H, t, J = 2.8 Hz), 8.69 (1H, t, J = 2.0 Hz).

【0243】

G) (3-ヒドロキシフェニル)(5-((2S)-ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)メタノン 塩酸塩
(5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)(3-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)メタノン(10.0 g)およびTFA(30 mL)の混合物を100 ℃で30分間マイクロウェーブ照射した。反応混合物を濃縮した。得られた残渣、トリエチルアミン(5.0 g)およびジクロロメタン(120 mL)の混合物に二炭酸ジ-tert-ブチル (5.65 g)を室温で加えた。室温で 5時間撹拌後、反応混合物を水および飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣および4N塩化水素酢酸エチル溶液(50 mL)の混合物を室温で3時間撹拌した。固体を濾取し、減圧下乾燥し、標題化合物(7.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺269.0.

【0244】

H) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-ヒドロキシベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2S)-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸(1.3 g)、(3-ヒドロキシフェニル)(5-((2S)-ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)メタノン 塩酸塩(2.2 g)、DIPEA(2.2 g)およびジクロロメタン(100 mL)の混合物にHATU(2.43 g)を室温で加え、16時間撹拌後、反応混合物を濃縮した。残渣にメタノール(80 mL)および飽和水酸化リチウム水溶液(20 mL)を加え、2時間撹拌し、反応混合物を濃縮した。残渣を水で希釈し、1N塩酸でpHを6に調整した。アンモニア水でpHを8に調整した後に、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(1.1 g)を得た。
MS: [M+H]⁺593.3.

【0245】

I) メチル (2-(2-(2-(3-((5-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-ヒドロキシベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (297 mg)、メチル(2-(2-(2-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (189 mg)、炭酸カリウム (138 mg)、およびDMSO (1.5 mL)の混合物を、60 ℃で終夜撹拌した。反応混合物を冷却後、酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (220 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺797.4.

【0246】

J) (2-(2-(2-(3-((5-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
メチル (2-(2-(2-(3-((5-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (213 mg)とTHF (2 mL)-メタノール (2 mL)-水 (2 mL)の混合物に4N 水酸化リチウム水溶液(0.20 mL)を室温で加えた。混合物を室温で30分間撹拌した。反応液に1N 塩酸(0.84 mL)を加え、酢酸エチルで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮し、標題化合物 (209 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺783.4.

【0247】

K) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-(2-(2-(2-(2-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド (115 mg)、(2-(2-(2-(3-((5-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (200 mg)、トリエチルアミン (0.09 mL)、N,N-ジメチルアミノピリジン (26 mg)、および無水DMF (2 mL)の混合物に2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物 (147 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で1時間撹拌した。反応液を濃縮して得られた残渣を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (213 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1305.4.

【0248】

L) 3-(2-(((2-(2-(2-(3-((5-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-(2-(2-(2-(2-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (207 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (165 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.94-1.38 (11H, m), 1.43-1.79 (6H, m), 1.82-2.20 (5H, m), 2.30-2.90 (11H, m), 3.12 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.66 (2H, s), 3.71-3.92 (11H, m), 4.01-4.20 (4H, m), 4.29 (2H, s), 4.53 (1H, d, J = 7.1 Hz), 5.06-5.49 (1H, m), 7.11-7.40 (4H, m), 7.61 (1H, t, J = 7.7 Hz), 7.77 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.85-8.09 (5H, m), 8.17 (1H, s), 8.23 (1H, d, J = 7.3 Hz), 8.52-8.72 (3H, m).

【0249】

実施例１５
N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)-3-(2-(((2-(2-(2-(4-((1S)-1-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンズアミド

【0250】

A) 4-フェニル-2-((2S)-ピロリジン-2-イル)[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン塩酸塩
ベンジル (2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート (3.60 g)とTFA (20 mL)の混合物にチオアニソール(8.2 mL)を加え、40 ℃で16時間撹拌した。反応液を濃縮後、残渣を石油エーテルで洗浄した。洗浄後の残渣に4N塩化水素酢酸エチル溶液 (30 mL)を加え、0 ℃で30分間撹拌した。生じた残渣を酢酸エチルで洗浄し、粗標題化合物(2.10 g)を得た。
上記ベンジル (2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラートは自体公知の方法 (例えば、WO2008134679に記載された方法)で合成することができる。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 2.06-2.13 (2H, m), 2.26-2.28 (1H, m), 2.48-2.56 (1H, m), 3.37-3.44 (2H, m), 5.31-5.34 (1H, m),7.56-7.58 (3H, m), 8.38-8.45 (3H, m), 8.70 (1H, d, J = 5.6 Hz), 9.71 (1H, brs), 10.74 (1H, brs).

【0251】

B) tert-ブチル (2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
4-フェニル-2-((2S)-ピロリジン-2-イル)[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン 塩酸塩(10.0 g)、ジクロロメタン (85 mL)の混合物に4-ジメチルアミノピリジン (8.30 g)と二炭酸ジ-tert-ブチル (7.70 g)を加えた。混合物を20 ℃で16時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣を分取HPLC で精製し、標題化合物 (3.50 g)を得た。
MS: [M+H]⁺ 382.2.

【0252】

C) 4-フェニル-2-((2S)-ピロリジン-2-イル)[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン二塩酸塩
tert-ブチル (2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(1.0 g)と2M 塩化水素メタノール溶液(20 mL)の混合物を、室温で終夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチル (40 mL)で洗浄し、標題化合物 (0.90 g)を得た。
MS: [M+H]⁺282.1.

【0253】

D) エチル (2-E/Z)-(ヒドロキシイミノ)(ピリジン-4-イル)アセタート
金属ナトリウム (50.2 g)を無水エタノール (2 L)に窒素雰囲気下、少量ずつ加え、金属ナトリウムが完全に溶解するまで2時間窒素雰囲気下で攪拌した。混合物にエチル ピリジン-4-イルアセタート (240 g)を0 ℃で添加した。15 ℃で30分間攪拌した後、アミル亜硝酸 (170 g)を添加し、15 ℃で終夜攪拌した。混合物に水 (200 mL)を加え酢酸を添加しpH 5に調整した。沈殿物を濾取した後、エタノールで洗浄し、標題化合物 (225 g)を得た。
MS: [M+H]⁺ 195.1.

【0254】

E) エチル 2-アミノ(ピペリジン-4-イル)アセタート
エチル (2-E/Z)-(ヒドロキシイミノ)(ピリジン-4-イル)アセタート (225 g)、5%パラジウム炭素 (40 g)、エタノール(6 L)の混合物を50 psiの水素雰囲気下、50 ℃で終夜攪拌した。濃塩酸 (20 mL)を混合物に加え、さらに50 psiの水素雰囲気下、60 ℃で16時間攪拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮し標題化合物 (220 g)を得た。
MS: [M+H]⁺187.1.

【0255】

F) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-(1-アミノ-2-エトキシ-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート
エチル 2-アミノ(ピペリジン-4-イル)アセタート (253 g)、炭酸水素ナトリウム (114 g)、1, 4-ジオキサン(3 L)、水 (1 L)の混合物にN-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニルオキシ)スクシンイミド (458 g)の1, 4-ジオキサン(5 L)溶液を0-5 ℃で3日間掛けて滴下した。混合物を酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。水層にN-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニルオキシ)スクシンイミド(50 g)を1日間掛けて加えた。混合物を酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮した。残渣をあわせて、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製し標題化合物 (120 g)を得た。
¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ = 7.95 (2H, d, J=7.5 Hz), 7.67 (2H, d, J=7.9 Hz), 7.47 (2H, t, J=7.2 Hz), 7.41 - 7.36 (2H, m), 4.52 - 4.29 (4H, m), 4.15 (2H, dq, J=3.1, 7.1 Hz), 3.47 - 3.41 (2H, m), 2.71 (2H, brd, J=11.5 Hz), 1.76 - 1.41 (3H, m), 1.30 - 1.15 (5H, m).

【0256】

G) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-(1-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-(1-アミノ-2-エトキシ-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート(120 g)、二炭酸ジ-tert-ブチル (51.3 g)、1, 4-ジオキサン (2 L)の混合物を終夜加熱還流した。反応液を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル)で精製し標題化合物 (85 g)を得た。
1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 7.84 (2H, d, J=7.3 Hz), 7.65 (2H, brd, J=7.5 Hz), 7.38 - 7.32 (2H, m), 7.28 (3H, t, J=7.3 Hz), 4.18 - 4.02 (4H, m), 3.95 - 3.84 (2H, m), 3.06 (2H, brd, J=8.2 Hz), 2.04 - 1.93 (2H, m), 1.75 - 1.46 (5H, m), 1.38 (9H, s), 1.20 - 1.13 (3H, m).

【0257】

H) (2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(1-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)ピペリジン-4-イル)酢酸
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-(1-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-エトキシ-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート (85 g)、水酸化リチウム一水和物 (13.4 g)、THF (500 mL)、メタノール (500 mL)、水 (500 mL)の混合物を15 ℃で終夜攪拌し、さらに80 ℃で終夜攪拌した。混合物を石油エーテルで洗浄し有機層を除去した後、水層に炭酸水素ナトリウムを添加しpH 8となる様に調整し、N-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニルオキシ)スクシンイミド (56.1 g)のTHF (2 L)溶液を0 ℃で1日掛けて滴下した。混合物を酢酸エチルで抽出し、減圧下濃縮し、残渣をHPLC (Phenomenex Luna(2) C18, 移動相：水/アセトニトリル（0.09％ TFA含有系）) で精製して、2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(1-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)ピペリジン-4-イル)酢酸(75 g)を得た。2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(1-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)ピペリジン-4-イル)酢酸 (75 g)をHPLC (Chiralcel OJ-H、30 mmID×250 mm、移動相：二酸化炭素、メタノール)にて光学分割し、保持時間の小さい方を減圧下濃縮し標題化合物(20 g)を得た。
¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ = 7.89 (2H, d, J=7.5 Hz), 7.62 (2H, d, J=7.3 Hz), 7.44 - 7.39 (2H, m), 7.36 - 7.31 (2H, m), 7.03 (1H, brd, J=8.4 Hz), 4.33 (2H, brs), 4.29 - 4.24 (1H, m), 4.06 - 3.75 (3H, m), 2.81 - 2.56 (3H, m), 1.85 (1H, brs), 1.58 - 1.43 (2H, m), 1.39 (9H, s), 1.22 - 1.00 (2H, m).

【0258】

I) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-カルボキシラート
4-フェニル-2-((2S)-ピロリジン-2-イル)[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン 二塩酸塩 (354 mg)、(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(1-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)ピペリジン-4-イル)酢酸 (480 mg)、HATU (456 mg)、DMF (10 mL)の混合物にDIPEA (0.70 mL)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で1時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (598 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺744.6.

【0259】

J) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-アミノ-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-カルボキシラート二塩酸塩
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-カルボキシラート(593 mg)と2M塩化水素メタノール溶液 (10 mL)の混合物を、室温で終夜撹拌した。反応液を濃縮し標題化合物 (571 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺644.3.

【0260】

K) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-カルボキシラート
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-アミノ-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-カルボキシラート二塩酸塩 (592 mg)、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン (194 mg)、HATU (364 mg)、DMF (10 mL)の混合物にDIPEA (0.70 mL)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で1時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル) で精製し、標題化合物(549 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺829.4.

【0261】

L) tert-ブチル メチル((2S)-1-オキソ-1-(((1S)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-(ピペリジン-4-イル)エチル)アミノ)プロパン-2-イル)カルバマート
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-カルボキシラート (543 mg)とメタノール (8 mL)の混合物に2M ジメチルアミンメタノール溶液(16 mL)を室温で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。減圧下反応液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (369 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺607.4.

【0262】

M) (2-(2-(2-(4-((1S)-1-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
tert-ブチル メチル((2S)-1-オキソ-1-(((1S)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-(ピペリジン-4-イル)エチル)アミノ)プロパン-2-イル)カルバマート (160 mg)、2,2'-(オキシビス(エタン-2,1-ジイルオキシ))二酢酸 (176 mg)、HOBt (50 mg)、WSC(0.07 mL)、およびTHF (3 mL)-DMF (0.6 mL)の混合物を、室温で1時間撹拌した。反応混合物に1N 水酸化ナトリウム水溶液(1.5 mL)を加え、室温で10分間撹拌した。5%硫酸水素ナトリウム水溶液を加えて反応液のpHを3-4に調整し、食塩を飽和させて酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (142 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺811.2.

【0263】

N) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-(1-((2-(2-(2-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペリジン-4-イル)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2-(2-(2-(4-((1S)-1-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (136 mg)、3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド (91 mg)、トリエチルアミン (0.07 mL)、N,N-ジメチルアミノピリジン (21 mg)と無水DMF (2 mL)の混合物に2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物 (116 mg)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で2時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (135 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺ 1333.5.

【0264】

O) N-(4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)-3-(2-(((2-(2-(2-(4-((1S)-1-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンズアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-(1-((2-(2-(2-((5-(3-((4-((4-エチルピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)カルバモイル)フェニル)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-2-イル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペリジン-4-イル)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (128 mg)とTFA (3 mL)の混合物を、室温で10分間撹拌した。減圧下反応混合物を濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (88 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.80-1.38 (8H, m), 1.54-1.76 (2H, m), 1.83-2.92 (20H, m), 3.10 (1H, q, J = 6.7 Hz), 3.59-4.02 (13H, m), 4.06-4.42 (5H, m), 4.59 (1H, t, J = 8.4 Hz), 5.41-5.83 (1H, m), 7.40-7.52 (3H, m), 7.59 (1H, t, J = 7.9 Hz), 7.75 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.86-8.10 (5H, m), 8.12-8.29 (4H, m), 8.42 (1H, d, J = 5.4 Hz), 8.61 (1H, d, J = 6.4 Hz).

【0265】

実施例１６
N-(4-((4-(2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)ピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)-3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンズアミド

【0266】

A) 2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (599 mg)、オキシビス(エタン-2,1-ジイルオキシエタン-2,1-ジイル) ビス(4-メチルベンゼンスルホナート) (1.51 g)、炭酸カリウム (277 mg)、およびDMF (5 mL)の混合物を、50 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルで希釈し、水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (584 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.93-1.37 (8H, m), 1.42-1.50 (9H, m), 1.52-1.84 (6H, m), 2.06-2.51 (7H, m), 2.66-2.90 (3H, m), 3.48-3.74 (10H, m), 3.81-4.02 (4H, m), 4.08-4.15 (2H, m), 4.20 (2H, dd, J = 5.4, 3.8 Hz), 4.45-4.69 (2H, m), 5.42-5.67 (1H, m), 7.19-7.28 (1H, m), 7.36-7.48 (3H, m), 7.66-7.82 (4H, m), 8.28-8.34 (1H, m).

【0267】

B) エチル 3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアート
エチル 3-(2-アミノ[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアート (300 mg)とDMA (1.5 mL)の混合物にシクロプロパンカルボニル クロリド (0.78 mL)を0 ℃で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を5%炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (344 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺368.2.

【0268】

C) 3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)安息香酸
エチル 3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾアート (339 mg)、THF (1.5 mL)-エタノール (1.5 mL)、および1N 水酸化ナトリウム水溶液 (3 mL)の混合物を、室温で終夜撹拌した。反応液を1N 塩酸(3 mL)で中和し、酢酸エチルとTHFで希釈し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮し、標題化合物 (347 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺340.1.

【0269】

D) tert-ブチル 4-(4-ニトロ-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル ピペラジン-1-カルボキシラート (393 mg)、トリエチルアミン (0.30 mL)、および無水THF (3 mL)の混合物に1-(ブロモメチル)-4-ニトロ-2-(トリフルオロメチル)ベンゼン (300 mg)の無水THF (1 mL)溶液を0 ℃で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (401 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺390.2.

【0270】

E) tert-ブチル 4-(4-アミノ-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル 4-(4-ニトロ-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート (357 mg)、鉄粉 (256 mg)、塩化カルシウム (51 mg)、およびエタノール (8 mL)-水 (2 mL)の混合物を、70 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、セライト濾過し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (241 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺360.3.

【0271】

F) tert-ブチル 4-(4-((3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾイル)アミノ)-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル 4-(4-アミノ-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート (237 mg)、3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)安息香酸 (269 mg)、トリエチルアミン (0.28 mL)、N,N-ジメチルアミノピリジン (81 mg)、および無水DMF (5 mL)の混合物に2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物(454 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (413 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺681.0.

【0272】

G) 3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-(ピペラジン-1-イルメチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド
tert-ブチル 4-(4-((3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾイル)アミノ)-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート (413 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を、室温で20分間撹拌した。減圧下反応液を濃縮して得られた残渣に酢酸エチルとTHFを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (340 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺581.2.

【0273】

H) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(4-((3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾイル)アミノ)-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)-N-(4-(ピペラジン-1-イルメチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)ベンズアミド (100 mg)、2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (192 mg)、炭酸カリウム (48 mg)、および無水DMF (1.5 mL)の混合物を、50 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (56 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1337.6.

【0274】

I) N-(4-((4-(2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)ピペラジン-1-イル)メチル)-3-(トリフルオロメチル)フェニル)-3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンズアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(4-((3-(2-((シクロプロピルカルボニル)アミノ)[1,3]チアゾロ[5,4-b]ピリジン-5-イル)ベンゾイル)アミノ)-2-(トリフルオロメチル)ベンジル)ピペラジン-1-イル)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (56 mg)とTFA (3 mL)の混合物を、室温で10分間撹拌した。減圧下反応液を濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (38 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.27 (12H, m), 1.50-1.82 (6H, m), 1.87-2.00 (1H, m), 2.04-2.39 (6H, m), 2.43-2.71 (9H, m), 3.14 (1H, q, J = 6.9 Hz), 3.52-3.75 (14H, m), 3.78-4.03 (4H, m), 4.14-4.22 (2H, m), 4.47-4.58 (1H, m), 5.40-5.64 (1H, m), 7.15-7.23 (1H, m), 7.39 (1H, t, J = 8.2 Hz), 7.57-7.78 (4H, m), 7.89-8.18 (5H, m), 8.22-8.31 (2H, m), 8.59-8.69 (1H, m).

【0275】

実施例１９
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-(4-(14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オイル)ピペラジン-1-イル)-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド

【0276】

A) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-(6-((5-((2-クロロ-6-メチルフェニル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)アミノ)-2-メチルピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル)-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((2-メチル-6-(ピペラジン-1-イル)ピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド (150 mg)、14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-酸 (281 mg)、WSC (63 mg)、HOBt (55 mg)とDMF (1.5 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル)及びシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (307 mg)を得た。
MS: [M+Na]⁺1280.3.

【0277】

B) N-(2-クロロ-6-メチルフェニル)-2-((6-(4-(14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-オイル)ピペラジン-1-イル)-2-メチルピリミジン-4-イル)アミノ)-1,3-チアゾール-5-カルボキサミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-(6-((5-((2-クロロ-6-メチルフェニル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)アミノ)-2-メチルピリミジン-4-イル)ピペラジン-1-イル)-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (190 mg)とTFA (3 mL)の混合物を、室温で10分間撹拌した。反応液を濃縮した後、得られた残渣を酢酸エチル−2-プロパノール(4:1)に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (100 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.86-1.19 (8H, m), 1.44-1.74 (6H, m), 1.98-2.38 (13H, m), 3.02-3.16 (1H, m), 3.48-3.62 (20H, m), 3.73-3.94 (4H, m), 4.04-4.12 (2H, m), 4.13-4.21 (2H, m), 4.42-4.51 (1H, m), 5.28-5.43 (1H, m), 5.89 (1H, s), 7.01-7.19 (3H, m), 7.22-7.36 (2H, m), 7.53-7.67 (2H, m), 8.05 (1H, s), 8.19 (1H, s).

【0278】

実施例２０
4-((4-((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペラジン-1-イル)メチル)-N-(4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)ベンズアミド

【0279】

A) tert-ブチル 4-(4-(エトキシカルボニル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート
エチル 4-(クロロメチル)ベンゾアート (2.0 g)、tert-ブチル ピペラジン-1-カルボキシラート (1.88 g)、炭酸カリウム (1.67 g)、とエタノール (25 mL)の混合物を60 ℃で終夜撹拌した。混合物を室温に戻した後、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (3.4 g)を得た。
MS: [M+H]⁺349.2.

【0280】

B) 4-((4-(tert-ブトキシカルボニル)ピペラジン-1-イル)メチル)安息香酸
tert-ブチル 4-(4-(エトキシカルボニル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート (1.65 g)、1N水酸化ナトリウム水溶液 (7 mL)、エタノール (7 mL)とTHF (14 mL)の混合物を雰囲気下、室温で終夜撹拌した。混合物を１N塩酸で中和し、減圧下濃縮した。残渣を濾取した後、水で洗浄し、乾燥して標題化合物(1.40 g)を得た。
MS: [M+H]⁺321.2.

【0281】

C) tert-ブチル 4-(4-((4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)カルバモイル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート
4-メチル-N³-(4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)ベンゼン-1,3-ジアミン (878 mg)、4-((4-(tert-ブトキシカルボニル)ピペラジン-1-イル)メチル)安息香酸 (1.22 g)、トリエチルアミン (944 mg)、N,N-ジメチルアミノピリジン (387 mg)と無水DMF (20 mL)の混合物に2-メチル-6-ニトロ安息香酸 無水物(2.18 g)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で1時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、5%炭酸ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチルで洗浄し、標題化合物 (1.87 g)を得た。
MS: [M+H]⁺580.3.

【0282】

D) N-(4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)-4-(ピペラジン-1-イルメチル)ベンズアミド四塩酸塩
tert-ブチル 4-(4-((4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)カルバモイル)ベンジル)ピペラジン-1-カルボキシラート (930 mg)と2M塩化水素メタノール溶液 (30 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。生じた固体を濾取した後、メタノールで洗浄し、乾燥して標題化合物 (947 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 2.24 (3H, s), 3.50 (4H, brs), 4.50 (2H, s), 4.98 (7H, brs), 7.24 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.49 (1H, d, J = 8.5 Hz), 7.62 (1H, d, J = 5.1 Hz), 7.84 (2H, d, J = 8.1 Hz), 8.01-8.13 (3H, m), 8.17 (1H, s), 8.65 (1H, d, J = 5.1 Hz), 8.98 (1H, d, J = 5.4 Hz), 9.12 (1H, d, J = 8.3 Hz), 9.26 (1H, s), 9.52 (1H, s), 9.95 (2H, brs), 10.39 (1H, s).

【0283】

E) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(4-((4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)カルバモイル)ベンジル)ピペラジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
N-(4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)-4-(ピペラジン-1-イルメチル)ベンズアミド四塩酸塩 (79 mg)、(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (100 mg)、WSC (24 mg)，HOBt (21 mg)とDMF (1.5 mL)の混合物にトリエチルアミン (51 mg)を室温で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (118 mg)を得た。
MS: [M+Na]⁺1272.4.

【0284】

F) 4-((4-((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)ピペラジン-1-イル)メチル)-N-(4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)ベンズアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-(4-((4-メチル-3-((4-(ピリジン-3-イル)ピリミジン-2-イル)アミノ)フェニル)カルバモイル)ベンジル)ピペラジン-1-イル)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (105 mg)とTFA (3 mL)の混合物を、室温で10分間 撹拌した。反応液を濃縮した後、得られた残渣を酢酸エチル−2-プロパノール(4:1)に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (65 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.87-1.06 (5H, m), 1.12 (3H, d, J = 6.9 Hz), 1.43-1.71 (6H, m), 1.94-2.25 (10H, m), 2.34 (4H, t, J = 4.9 Hz), 3.04 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.36-3.61 (14H, m), 3.71-3.92 (4H, m), 4.04-4.09 (2H, m), 4.11 (2H, s), 4.45 (1H, d, J = 7.2 Hz), 5.36 (1H, dd, J = 7.6, 3.3 Hz), 7.07-7.12 (1H, m), 7.15 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.25 (1H, d, J = 5.2 Hz), 7.26-7.38 (4H, m), 7.44 (1H, dd, J = 8.0, 4.9 Hz), 7.56-7.65 (2H, m), 7.75-7.82 (2H, m), 8.10 (1H, d, J = 2.0 Hz), 8.17 (1H, s), 8.36 (1H, d, J = 5.2 Hz), 8.46-8.51 (1H, m), 8.53 (1H, dd, J = 4.9, 1.6 Hz), 9.13-9.20 (1H, m).

【0285】

実施例２１
4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)-N-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)ベンズアミド

【0286】

A) メチル 2-アセチル-4-オキソペンタノアート
メチル 3-オキソブタノアート (300 g)、ヨウ化カリウム (85.7 g)、およびアセトン (2.0 L)の懸濁液に、炭酸カリウム (713 g)をいちどに加えた。5分後、1-クロロアセトン (278 g)を滴下した。混合物を60 ℃で3時間撹拌した。反応液を冷却後、濾過し、アセトンで洗浄した。アセトン溶液を減圧下濃縮し、粗生成物を蒸留し、粗標題化合物 (242 g)を得た。得られた化合物は、さらなる精製を行うことなく次の反応に用いた。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 2.12 (3H, s),2.25 (3H, s),2.90-3.11 (2H, m),3.65 (3H, s),3.98 (1H,t, J = 7.20 Hz).

【0287】

B) メチル 2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボキシラート
メチル 2-アセチル-4-オキソペンタノアート (242 g)とエタノール (2.5 L)の混合物に酢酸アンモニウム (543 g) とモレキュラーシーブ4A (280 g)を加え、80 ℃で2時間撹拌した。反応液を濾過し、濾液を濃縮した。残渣を酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮し、標題化合物 (160 g)を得た。
MS: [M+H]⁺154.0.

【0288】

C) 1-tert-ブチル 3-メチル 2,5-ジメチル-1H-ピロール-1,3-ジカルボキシラート
メチル 2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボキシラート (147 g)、N,N-ジメチルアミノピリジン (5.9 g)、およびアセトニトリル (1.5 L)の混合物に二炭酸ジ-tert-ブチル (230 g)をゆっくり加えた。混合物を室温で16時間撹拌した。反応液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (200 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.60 (9H, s), 2.33 (3H, s), 2.70 (3H, s), 3.78 (3H, s) , 6.21 (1H, s).

【0289】

D) 1-tert-ブチル 3-メチル 4-ブロモ-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1,3-ジカルボキシラート
1-tert-ブチル 3-メチル 2,5-ジメチル-1H-ピロール-1,3-ジカルボキシラート (100 g)、トリエチルアミン(120 g)とジクロロメタン (2 L)の混合物にピリジニウムブロミドペルブロミド (264 g)を少量ずつ0 ℃で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を飽和食塩水に注ぎ、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (100 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 1.60 (9H, s), 2.37 (3H, s), 2.63 (3H, s), 3.84 (3H, s).

【0290】

E) メチル 4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボキシラート
1-tert-ブチル 3-メチル 4-ブロモ-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1,3-ジカルボキシラート (70.0 g)、(4-シアノフェニル)ボロン酸 (34.3 g)、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム(0) (12.2 g)、炭酸ナトリウム (66.8 g)、およびDMF (1.12 L)-水 (280 mL)の混合物を窒素雰囲気下、130 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチル−水で分配し、有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (20.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 2.09 (3H, s), 2.48 (3H, s), 3.62 (3H, s), 7.30 - 7.38 (2H, d,J = 7.94 Hz), 7.59 (2H, d, J = 8.60), 8.72 (1H, brs).

【0291】

F) 4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボン酸
メチル 4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボキシラート (40.0 g)とジクロロメタン (400 mL)の混合物に1M 三臭化ホウ素ジクロロメタン溶液 (945 mL)を0 ℃で滴下した。混合物を0 ℃で1時間撹拌した。反応液を飽和食塩水に注ぎ、沈殿物を濾取した。濾液を酢酸エチルで抽出し、抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣と濾取した沈殿物とを合わせ、酢酸エチルから結晶化し、標題化合物 (30.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 2.03 (3H, s), 2.37 (3H, s), 7.34 (2H, d, J = 7.94 Hz), 7.70 (2H, d, J = 8.38 Hz), 11.25 (1H, brs).

【0292】

G) 4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボキサミド
4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボン酸 (30.0 g)とTHF (500 mL)の混合物に塩化チオニル (36.0 mL)を0 ℃で滴下した。混合物を室温で1時間撹拌し、減圧下濃縮した。残渣をTHF (200 mL)に溶解し、2M アンモニアTHF溶液 (1.0 L)を0 ℃で加えた。室温で1時間撹拌後、反応液を減圧下濃縮した。得られた固体を酢酸エチルから再結晶し、標題化合物 (25.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 2.11 (3H, s), 2.26 (3H, s), 6.56 (1H, brs), 6.79 (1H, brs), 7.34 (2H, d, J = 7.94 Hz), 7.72 (2H, d, J = 7.94 Hz), 10.96 (1H, brs).

【0293】

H) 4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボキサミド(25.0 g)、ピリジン(13.0 mL)、およびDMF(300 mL)の混合物に塩化オキサリル (11.0 mL)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で30分間撹拌した。反応液を飽和食塩水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮し、標題化合物 (18.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 2.31 (3H, s), 2.43 (3H, s), 7.50-7.55 (2H, d, J = 8.40 Hz), 7.67-7.72 (2H, d, J = 8.80 Hz), 8.37 (1H, brs).

【0294】

I) メチル 4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)ベンゾアート
4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル(4.20 g)と無水DMF (120 mL)の混合物に60%水素化ナトリウム (0.84 g)を0 ℃で加えた。混合物を窒素雰囲気下、0 ℃で20分間撹拌した。反応液に4-(ブロモメチル)安息香酸メチル(4.57 g)を加え、室温で18時間撹拌した。混合物に0 ℃で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた固体を酢酸エチル/ヘキサンから結晶化し、標題化合物 (5.93 g)を得た。
MS: [M+H]⁺370.3.

【0295】

J) 4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)安息香酸
メチル 4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)ベンゾアート (3.2 g)とTHF (30 mL)の混合物に2N 水酸化ナトリウム水溶液(4.33 mL)を室温で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に2N 水酸化ナトリウム水溶液(4.33 mL)を室温で追加し、室温で終夜撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ジイソプロピルエーテルで洗浄した。水層を1N 塩酸で酸性にし、酢酸エチル-THFで抽出した。分離した有機層を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣にジイソプロピルエーテルを加えて撹拌し、濾取することにより標題化合物 (3.03 g)を得た。
MS: [M+H]⁺356.2.

【0296】

K) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
トリフェニルホスフィン (425 mg)と無水THF (1.5 mL)の混合物に40% ジエチルアゾジカルボキシラートトルエン溶液 (0.71 mL)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で10分間撹拌後、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (194 mg)、無水THF (3 mL)、および0.5M 2-(2-(2-アジドエトキシ)エトキシ)エタノールのt-ブチルメチルエーテル溶液(3.3 mL)の混合物を加えた。混合物を室温で5時間撹拌後、反応液に水(0.4 mL)とトリフェニルホスフィン (850 mg)を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (308 mg)を得た。得られた化合物を、さらなる精製を行うことなく次の反応に用いた。
MS: [M+H]⁺730.6.

【0297】

L) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (234 mg)、4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)安息香酸 (341 mg)、HOBt(130 mg)、WSC (0.17 mL)、およびTHF (3 mL)-DMF (1 mL)の混合物を、室温で3時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル)、および シリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (125 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1067.9.

【0298】

M) 4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)-N-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)ベンズアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)ベンゾイル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (120 mg)、THF (3 mL)、および4N 塩化水素シクロペンチルメチルエーテル溶液(3 mL) の混合物を、室温で4時間撹拌した。反応液をトルエン(5 mL)で希釈し、減圧下濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル-THF(1:1)に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (82 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.95-1.35 (8H, m), 1.52-1.83 (6H, m), 2.07-2.42 (13H, m), 2.86-3.19 (1H, m), 3.50-4.04 (12H, m), 4.13 (2H, t, J = 4.5 Hz), 4.47-4.62 (1H, m), 5.26 (2H, s), 5.41-5.70 (1H, m), 7.03 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.16 (1H, dd, J = 8.3, 1.7 Hz), 7.38 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.50-7.86 (8H, m), 8.25-8.32 (1H, m).

【0299】

実施例２２
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0300】

A) (4-(トリチルオキシ)フェニル)メタノール
4-ヒドロキシベンズアルデヒド (5 g)、塩化トリチル (22.8 g)、炭酸カリウム (11.3 g)、およびDMF (100 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を氷水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣をメタノール (150 mL)に溶解し、水素化ホウ素ナトリウム (1.86 g)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で3時間撹拌後、室温で終夜撹拌した。減圧下反応液を濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (12.7 g)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 1.59 (1H, brs), 4.47 (2H, s), 6.59-6.73 (2H, m), 6.91-7.03 (2H, m), 7.17-7.35 (9H, m), 7.39-7.52 (6H, m).

【0301】

B) 4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1-(4-(トリチルオキシ)ベンジル)-1H-ピロール-3-カルボニトリル
(4-(トリチルオキシ)フェニル)メタノール (6.35 g)、トリエチルアミン (4.8 mL)、およびTHF (100 mL)の混合物にメタンスルホニル クロリド (1.6 mL)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で1時間撹拌した。減圧下反応液を濃縮後、残渣をアセトン(100 mL)に溶解し、ヨウ化ナトリウム (5.19 g)を加え、室温で1時間撹拌した。減圧下反応液を濃縮後、残渣にヘキサンを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、5%チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。得られた溶液にトルエン(10 mL)を加え、減圧下約10 mLまで濃縮し、1-(ヨードメチル)-4-(トリチルオキシ)ベンゼンのトルエン溶液を得た (得られた化合物は極めて不安定なため、さらなる精製を行うことなく、ただちに次の反応に用いた)。
60%水素化ナトリウム (414 mg)と無水DMF (30 mL)の混合物に4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル(1.91 g)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で20分間撹拌後、前述の1-(ヨードメチル)-4-(トリチルオキシ)ベンゼンのトルエン溶液(10 mL)を加えた。混合物を0 ℃で1時間撹拌した。反応液を5%炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (2.72 g)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 2.11 (3H, s), 2.26 (3H, s), 4.90 (2H, s), 6.50-6.60 (2H, m), 6.62-6.71 (2H, m), 7.16-7.34 (9H, m), 7.37-7.54 (8H, m), 7.64-7.73 (2H, m).

【0302】

C) 4-(4-シアノフェニル)-1-(4-ヒドロキシベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1-(4-(トリチルオキシ)ベンジル)-1H-ピロール-3-カルボニトリル (2.72 g)、p-トルエンスルホン酸一水和物 (91 mg)とTHF (50 mL)-メタノール (50 mL)の混合物を室温で３日間撹拌した。反応液を5%炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (1.30 g)を得た。
MS: [M+H]⁺328.2.

【0303】

D) 4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-ヒドロキシベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (392 mg)、テトラエチレングリコール (1.28 mL)、トリフェニルホスフィン (960 mg)、および無水THF (12 mL)の混合物にジエチルアゾジカルボキシラート (3.2 mL)を0 ℃で滴下した。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (440 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺504.4.

【0304】

E) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (263 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(4-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (313 mg)、トリフェニルホスフィン (205 mg)、および無水THF (3 mL)の混合物にジエチルアゾジカルボキシラート (0.34 mL)を0 ℃で滴下した。混合物を0 ℃で4時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (433 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1084.9.

【0305】

F) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(4-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (423 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応液にトルエン(10 mL)を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (320 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.39 (8H, m), 1.52-1.88 (6H, m), 2.04-2.40 (13H, m), 3.14 (1H, d, J = 6.9 Hz), 3.58-3.72 (8H, m), 3.76-4.09 (8H, m), 4.16-4.24 (2H, m), 4.50-4.61 (1H, m), 5.12 (2H, s), 5.43-5.69 (1H, m), 6.86-6.94 (4H, m), 6.97-7.07 (2H, m), 7.55 (2H, d, J = 8.5 Hz), 7.75 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.13-8.22 (2H, m), 8.24 (1H, s).

【0306】

実施例２３
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0307】

A) 2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (210 mg)とピリジン (3.0 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (239 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。反応混合物に酢酸エチルを加え、1N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (208 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺658.4.

【0308】

B) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (208 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (189 mg)、炭酸カリウム (87 mg)、および無水DMF (1.5 mL)の混合物を50 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (299 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1084.8.

【0309】

C) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (291 mg)とTFA (3 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応液をトルエン(10 mL)で希釈し、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、5%炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (217 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.98-1.38 (8H, m), 1.49-1.84 (6H, m), 2.03-2.42 (13H, m), 3.14 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.59-3.73 (8H, m), 3.75-4.02 (6H, m), 4.02-4.08 (2H, m), 4.15 (2H, dd, J = 5.4, 3.8 Hz), 4.45-4.61 (1H, m), 5.12 (2H, s), 5.41-5.67 (1H, m), 6.83-6.92 (4H, m), 7.19 (1H, ddd, J = 8.2, 2.5, 0.9 Hz), 7.34-7.44 (1H, m), 7.51-7.59 (2H, m), 7.65-7.72 (2H, m), 7.73-7.82 (2H, m), 8.25-8.30 (1H, m).

【0310】

実施例２５
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((1-(3-クロロ-4-シアノフェニル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0311】

A) 3-(4-ヒドロキシベンジリデン)ペンタン-2,4-ジオン
4-ヒドロキシベンズアルデヒド (8.00 g)、ペンタン-2,4-ジオン (6.74 mL)、酢酸 (0.938 mL)、ピペリジン (0.13 mL)、無水トルエン (50 mL)の混合物をディーン-スターク管を用いて終夜還流後、反応液を濃縮した。得られた残渣をジエチルエーテルで洗浄し、粗標題化合物を得た。得られた化合物は、さらなる精製を行うことなく次の反応に用いた。
MS: [M+H]⁺205.2.

【0312】

B) 3-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)ベンジリデン)ペンタン-2,4-ジオン
3-(4-ヒドロキシベンジリデン)ペンタン-2,4-ジオン (1.00 g)と無水DMF (25 mL)の混合物に炭酸カリウム (0.81 g)と(2-(クロロメトキシ)エチル)(トリメチル)シラン (1.04 mL)を加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (1.16 g)を得た。
MS: [M+H]⁺335.3.

【0313】

C) 3,5-ジメチル-4-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)ベンジル)-1H-ピラゾール
3-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)ベンジリデン)ペンタン-2,4-ジオン (1.16 g)および10%パラジウム炭素 (211 mg)のエタノール (20 mL)の混合物を常圧の水素雰囲気下、室温で終夜撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮した。得られた残渣 (1.07 g)、ヒドラジン一水和物 (0.19 g)、エタノール (16 mL)の混合物を2時間還流後、反応液を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (973 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺333.3.

【0314】

D) 2-クロロ-4-(3,5-ジメチル-4-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)ベンジル)-1H-ピラゾール-1-イル)ベンゾニトリル
3,5-ジメチル-4-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)ベンジル)-1H-ピラゾール (970 mg)と無水DMF (15 mL)の混合物に60%水素化ナトリウム (140 mg)を0 ℃で加えた。反応混合物を0 ℃で10分間撹拌した後、2-クロロ-4-フルオロベンゾニトリル (908 mg)を加え、室温で終夜撹拌した。混合物に0 ℃で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (1.28 g)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ -0.04 (9H, s), 0.82-0.91 (2H, m), 2.09 (3H, s), 2.39 (3H, s), 3.63-3.73 (4H, m), 5.17 (2H, s), 6.89-6.95 (2H, m), 7.04-7.12 (2H, m), 7.74 (1H, dd, J = 8.6, 2.1 Hz), 7.93 (1H, d, J = 2.1 Hz), 8.07 (1H, d, J = 8.6 Hz).

【0315】

E) 2-クロロ-4-(4-(4-ヒドロキシベンジル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-1-イル)ベンゾニトリル
2-クロロ-4-(3,5-ジメチル-4-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)ベンジル)-1H-ピラゾール-1-イル)ベンゾニトリル (1.28 g)、1M テトラブチルアンモニウムフルオリド THF溶液 (13.6 mL)、無水THF (10 mL)の混合物を9時間還流した。混合物に1M テトラブチルアンモニウムフルオリド THF溶液 (13.6 mL)を加え、さらに終夜還流した。反応液を水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) 、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製した。得られた固体を酢酸エチル/ヘキサンから結晶化し、標題化合物 (378 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺338.2.

【0316】

F) 2-クロロ-4-(4-(4-(2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンジル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-1-イル)ベンゾニトリル
2-クロロ-4-(4-(4-ヒドロキシベンジル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-1-イル)ベンゾニトリル (348 mg)、2,2'-テトラエチレングリコール (1.07 mL)
、トリフェニルホスフィン (1.62 g)、無水THF (10 mL)の混合物にアゾジカルボン酸ビス(2-メトキシエチル) (1.45 g)を0 ℃で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物に0 ℃で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (368 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺514.4.

【0317】

G) 2-(2-(2-(2-(4-((1-(3-クロロ-4-シアノフェニル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
2-クロロ-4-(4-(4-(2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンジル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-1-イル)ベンゾニトリル (368 mg)とピリジン (4 mL)の混合物に4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (205 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌した。混合物に0 ℃で１N 塩酸を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、1N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (316 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺668.4.

【0318】

H) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((1-(3-クロロ-4-シアノフェニル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (214 mg)、2-(2-(2-(2-(4-((1-(3-クロロ-4-シアノフェニル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート(310 mg)、無水DMF (2 mL)の混合物に炭酸カリウム (66 mg)を室温で加えた。混合物を60 ℃で5時間 撹拌した。混合物に0 ℃で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (353 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1094.8.

【0319】

I) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((1-(3-クロロ-4-シアノフェニル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(2-(4-((1-(3-クロロ-4-シアノフェニル)-3,5-ジメチル-1H-ピラゾール-4-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (353 mg)とTFA (2 mL)の混合物を室温で20分間撹拌した。混合物を0 ℃にて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (262 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.32 (8H, m), 1.51-1.84 (6H, m), 2.05-2.42 (13H, m), 3.10-3.38 (1H, m), 3.58-3.71 (10H, m), 3.72-4.16 (10H, m), 4.49-4.61 (1H, m), 5.41-5.65 (1H, m), 6.78 (2H, d, J = 7.1 Hz), 7.00 (2H, d, J = 7.8 Hz), 7.16 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.36 (1H, t, J = 7.4 Hz), 7.58 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.64-7.72 (2H, m), 7.77 (1H, brs), 7.85 (1H, dd, J = 8.4, 3.0 Hz), 8.26 (1H, s).

【0320】

実施例２７
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0321】

A) 1-(4-ブロモベンジル)-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
60%水素化ナトリウム (0.41 g)と無水DMF (30 mL)の混合物に4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル(1.88 g)を0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で10分間撹拌後、1-ブロモ-4-(ブロモメチル)ベンゼン (2.56 g)を加えた。混合物を0 ℃で2時間撹拌した。反応液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル) で精製し、酢酸エチル/ヘキサンから再結晶し、標題化合物 (2.70 g)を得た。
MS: [M+H]⁺390.2.

【0322】

B) 2-(2-(2-(プロパ-2-イン-1-イルオキシ)エトキシ)エトキシ)エタノール
t-ブトキシカリウム(2.57 g)と無水THF (150 mL)の混合物に2,2'-(エタン-1,2-ジイルビス(オキシ))ジエタノール (5.56 g)を加えた。混合物を室温で30分間撹拌後、80% 3-ブロモプロパ-1-イン トルエン溶液 (2.12 mL)と無水THF (60 mL)の混合溶液を滴下した。混合物を室温で終夜撹拌し、反応液をセライト濾過して得られた濾液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (3.20 g)を得た。
MS: [M+H]⁺189.2.

【0323】

C) 4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロパ-1-イン-1-イル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
1-(4-ブロモベンジル)-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (780 mg)、2-(2-(2-(プロパ-2-イン-1-イルオキシ)エトキシ)エトキシ)エタノール (752 mg)、トリエチルアミン (1.2 mL)、ヨウ化銅(I) (38 mg)、ビストリフェニルホスフィンパラジウム ジクロリド (140 mg)、およびDMF (6 mL)の混合物をアルゴン雰囲気下、60 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (320 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺498.4.

【0324】

D) 2-(2-(2-((3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロパ-1-イン-1-イル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (320 mg)とピリジン (4.5 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (184 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で4時間撹拌後、p-トルエンスルホニルクロリド (184 mg)を追加し、さらに室温で1時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、1N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (302 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺652.5.

【0325】

E) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-((3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (302 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (277 mg)、炭酸カリウム (77 mg)、および無水DMF (2 mL)の混合物を室温で3日間撹拌後、50 ℃で24時間撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン)、およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (334 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1078.8.

【0326】

F) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (334 mg)とTFA (3 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応液をトルエン(5 mL)で希釈し、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (239 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.35 (8H, m), 1.49-1.84 (6H, m), 2.04-2.45 (13H, m), 2.87-3.20 (1H, m), 3.63-3.76 (8H, m), 3.83-4.04 (4H, m), 4.14-4.21 (2H, m), 4.38 (2H, s), 4.49-4.62 (1H, m), 5.23 (2H, s), 5.43-5.67 (1H, m), 6.94 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.16-7.24 (1H, m), 7.34-7.45 (3H, m), 7.53-7.61 (2H, m), 7.65-7.73 (2H, m), 7.77 (2H, d, J = 8.5 Hz), 8.25-8.31 (1H, m).

【0327】

実施例２８
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(3-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0328】

A) 1-(3-ブロモベンジル)-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
60%水素化ナトリウム (0.41 g)と無水DMF (30 mL)の混合物に4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル(1.88 g)を少しずつ0 ℃で加えた。混合物を0 ℃で10分間撹拌後、1-ブロモ-3-(ブロモメチル)ベンゼン (2.56 g)を加えた。混合物を0 ℃で2時間撹拌した。反応液を5%炭酸水素ナトリウム水溶液に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル) で精製し、得られた固体を酢酸エチルから再結晶し、標題化合物 (2.56 g)を得た。
MS: [M+H]⁺390.2.

【0329】

B) 4-(4-シアノフェニル)-1-(3-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロパ-1-イン-1-イル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
1-(3-ブロモベンジル)-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (390 mg)、2-(2-(2-(プロパ-2-イン-1-イルオキシ)エトキシ)エトキシ)エタノール (376 mg)、トリエチルアミン (0.56 mL)、ヨウ化銅(Ｉ) (19 mg)、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム(０) (116 mg)、およびDMF (3 mL)の混合物をアルゴン雰囲気下、60 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、飽和塩化アンモニウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (425 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺498.4.

【0330】

C) 2-(2-(2-((3-(3-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
4-(4-シアノフェニル)-1-(3-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロパ-1-イン-1-イル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (425 mg)とピリジン (4.5 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (489 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で2時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、1N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (447 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺652.7.

【0331】

D) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(3-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-((3-(3-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (447 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (342 mg)、炭酸カリウム (111 mg)、および無水DMF (2 mL)の混合物を、室温で3日間撹拌後、50 ℃で4時間撹拌した。反応液を冷却後、酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) 、およびシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (410 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1078.9.

【0332】

E) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(3-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((3-(3-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロパ-2-イン-1-イル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (410 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応液にトルエン (5 mL)を加え、減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (312 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.37 (8H, m), 1.48-1.88 (6H, m), 2.04-2.58 (13H, m), 2.87-3.20 (1H, m), 3.60-3.76 (8H, m), 3.81-4.02 (4H, m), 4.14-4.23 (2H, m), 4.37 (2H, s), 4.49-4.61 (1H, m), 5.21 (2H, s), 5.42-5.68 (1H, m), 6.97 (1H, dd, J = 5.7, 1.9 Hz), 7.01 (1H, s), 7.16-7.24 (1H, m), 7.27-7.44 (3H, m), 7.57 (2H, d, J = 8.4 Hz), 7.65-7.72 (2H, m), 7.76 (2H, d, J = 8.4 Hz), 8.24-8.32 (1H, m).

【0333】

実施例２９
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロポキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0334】

A) 4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロピル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロパ-1-イン-1-イル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (365 mg)および10%パラジウム炭素 (73 mg)の酢酸エチル (3 mL)の混合物を常圧の水素雰囲気下、室温で2時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル) で精製し、標題化合物(310 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺502.4.

【0335】

B) 2-(2-(2-(3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロポキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-(3-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)プロピル)ベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (310 mg)とピリジン (4.5 mL)の混合物にp-トルエンスルホニルクロリド (353 mg)を0 ℃で加えた。混合物を室温で3時間撹拌した。反応液に酢酸エチルを加え、1N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (338 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺656.5.

【0336】

C) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロポキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (299 mg)、2-(2-(2-(3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロポキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (338 mg)、炭酸カリウム (97 mg)、および無水DMF (2 mL)の混合物を、60 ℃で終夜撹拌した。反応液を冷却し、酢酸エチルを加え、5%炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) 、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (387 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1082.9.

【0337】

D) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロポキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(3-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェニル)プロポキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (387 mg)とTFA (4.5 mL)の混合物を室温で10分間撹拌した。反応液をトルエン(5 mL)で希釈し、減圧下濃縮した。得られた残渣に酢酸エチルを加え、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (303 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.39 (8H, m), 1.50-1.93 (8H, m), 2.02-2.42 (13H, m), 2.64 (2H, t, J = 7.6 Hz), 3.14 (1H, q, J = 6.9 Hz), 3.42 (2H, t, J = 6.3 Hz), 3.50-3.76 (8H, m), 3.81-4.03 (4H, m), 4.17 (2H, dd, J = 5.5, 3.9 Hz), 4.47-4.64 (1H, m), 5.17 (2H, s), 5.42-5.68 (1H, m), 6.87 (2H, d, J = 8.2 Hz), 7.10-7.23 (3H, m), 7.33-7.44 (1H, m), 7.52-7.60 (2H, m), 7.66-7.81 (4H, m), 8.24-8.31 (1H, m).

【0338】

実施例３１
N-((1S)-2-((2S,4S)-4-(((2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)-2-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
A) tert-ブチル (2S,4S)-2-カルバモイル-4-(((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)アミノ)ピロリジン-1-カルボキシラート
(4S)-1-(tert-ブトキシカルボニル)-4-(((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)アミノ)-L-プロリン (106 g)、HATU (116 g), HOBt (41.1 g)、DIPEA (302 g) および ジクロロメタン (1.6 L) の混合物を室温で30分間撹拌した。反応混合物に、重炭酸アンモニウム (55.5 g) を加え、室温で終夜撹拌した。
混合物を水に加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (100 g) を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.32-1.39 (9H, m), 1.69-1.72 (1H, m), 2.26-2.39 (1H, m), 3.07-3.11 (1H, m), 3.59-3.63 (1H, m), 3.95-4.04 (2H, m), 4.20-4.31 (3H, m), 7.03-7.10 (1H, m), 7.32-7.35 (2H, m), 7.40-7.44 (2H, m), 7.47-7.58 (2H, m), 7.67 (2H, d, J = 7.6 Hz), 7.90 (2H, d, J= 7.6 Hz).

【0339】

B) tert-ブチル (2S,4S)-2-カルバモチオイル-4-(((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)アミノ)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S,4S)-2-カルバモイル-4-(((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)アミノ)ピロリジン-1-カルボキシラート (30.0 g)、 ローソン試薬 (32.3 g)、トルエン (200 mL) およびジクロロメタン (200 mL) の混合物を室温で終夜撹拌した。前述の反応を計3回実施し、得られた反応混合物を合わせて濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (70.0 g) を得た。
MS: [M+H]⁺468.2.

【0340】

C) 9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマートトリフルオロ酢酸塩
tert-ブチル (2S,4S)-2-カルバモチオイル-4-(((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)アミノ)ピロリジン-1-カルボキシラート (35.0 g) とエタノール (300 mL) の混合物に2-ブロモ-1-(4-フルオロ-1-ナフチル)エタノン (24.0 g) を加え、80 ℃で終夜撹拌した。前述の反応を繰り返し、得られた２つの反応混合物を合わせて濃縮した。得られた残渣を水で希釈し、飽和炭酸ナトリウム水溶液を加えて、pHを9-10に調整し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル、メタノール/ジクロロメタン) で精製した。得られた化合物 (65.0 g) 、TFA (23.3 g)とジクロロメタン (500 mL) の混合物を室温で終夜 撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮して標題化合物 (66 g) を得た。
MS: [M+H]⁺536.2.

【0341】

D) 9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-1-((2S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート
(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸 (26.1 g)、HATU (77.2 g)、HOBt (27.4 g)、DIPEA (52.4 g) およびDMF (650 mL) の混合物を室温で30分撹拌し、9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート トリフルオロ酢酸塩 (66.0 g) を加え、室温で終夜撹拌した。混合物を室温で水に加えて生じた析出物をろ取して、水およびヘキサンで洗浄後、乾燥した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (61.0 g) を得た。
MS: [M+H]⁺775.6.

【0342】

E) 9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-1-((2S)-2-アミノ-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート
9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-1-((2S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート (61.0 g) とTFA (40 mL) の混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を濃縮し、得られた残渣に氷水を加えた後、飽和炭酸ナトリウム水溶液を加えてpHを9に調整し、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/ジクロロメタン) で精製し、標題化合物 (38.6 g) を得た。
MS: [M+H]⁺675.3.

【0343】

F) 9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-1-((2S)-2-(((2S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)プロパノイル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート
N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン (13.9 g)、HATU (43.5 g)、HOBt (15.4 g)、DIPEA (22.1 g) およびDMF (300 mL) の混合物を室温で30分撹拌し、9H-フルオレン-9-イルメチル((3S,5S)-1-((2S)-2-アミノ-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート (38.6 g) を加え、室温で終夜撹拌した。混合物を室温で水に加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/ジクロロメタン）で精製して標題化合物 (35.0 g) を得た。
MS: [M+H]⁺860.4.

【0344】

G) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4S)-4-アミノ-2-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
9H-フルオレン-9-イルメチル ((3S,5S)-1-((2S)-2-(((2S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)プロパノイル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルバマート (157 mg)とメタノール (4 mL) の混合物に2Mジメチルアミン メタノール溶液 (3.70 mL)を室温で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応液を濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (100 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺638.6.
H) メチル (2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-ヒドロキシベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (100 mg)、メチル (2-(2-(2-(((4-メチルフェニル)スルホニル)オキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (138 mg)、炭酸カリウム (135 mg)とDMF (3 mL) の混合物を60 ℃で終夜撹拌した。混合物に室温で飽和塩化アンモニウム溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (143 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺532.5.

【0345】

I) (2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
メチル (2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (1.95 g)、THF (30 mL) および メタノール (15 mL) の混合物に2N水酸化ナトリウム水溶液 (7.34 mL) を室温で加えた。混合物を室温で1時間撹拌した。混合物に室温で1N塩酸を加えて酸性に調整し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物(1.88 g) を得た。
MS: [M+H]⁺518.5.

【0346】

J) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4S)-4-(((2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)-2-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (89 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4S)-4-アミノ-2-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (100 mg)、DIPEA (0.08 mL)、HOBt一水和物 (48.0 mg)、WSC (0.06 mL) とTHF (3 mL) の混合物を室温で6時間 撹拌した。混合物を室温で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (150 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺1137.9.

【0347】

K) N-((1S)-2-((2S,4S)-4-(((2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)-2-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4S)-4-(((2-(2-(2-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)アセチル)アミノ)-2-(4-(4-フルオロ-1-ナフチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (150 mg) と TFA (5.08 mL) の混合物を室温で15分間撹拌した。混合物を濃縮した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) および HPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（0.1％ TFA含有系）で精製し、標題化合物 (70 mg) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.93-1.21 (5H, m), 1.25 (3H, d, J = 6.89 Hz), 1.47-1.83 (6H, m), 2.19 (3H, s), 2.33 (3H, s), 2.35 (3H, s), 2.46 (1H, dt, J = 13.41, 5.19 Hz), 2.69-2.81 (1H, m), 3.13-3.27 (5H, m), 3.41-3.47 (2H, m), 3.50-3.58 (2H, m), 3.67-3.82 (5H, m), 3.98-4.06 (2H, m), 4.37 (1H, dd, J = 10.76, 6.80 Hz), 4.50 (1H, d, J = 7.27 Hz), 4.60-4.72 (1H, m), 5.14 (2H, s), 5.57 (1H, dd, J = 8.59, 4.91 Hz), 6.87 (4H, d, J = 3.30 Hz), 7.22 (1H, dd, J = 10.43, 7.98 Hz), 7.52-7.65 (6H, m), 7.76 (2H, d, J = 8.59 Hz), 8.09-8.21 (2H, m)

【0348】

実施例３３
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0349】

A) 1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-酸
メチル 1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-オアート (6 g)、THF (80 mL) およびメタノール (40 mL) の混合物に2M水酸化ナトリウム水溶液 (19.2 mL) を加え、室温で2時間撹拌した。反応混合物に室温で1N塩酸を加えて酸性に調整した後、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (4.96 g) を得た。
MS: [M+H]⁺299.3.

【0350】

B) (2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-酸 (1.84 g)、10% パラジウム炭素 (1.313 g)、エタノール (60 mL) の混合物を水素雰囲気下、室温にて3時間撹拌した。反応混合物をろ過して不溶物を除き、ろ液を減圧下濃縮して標題化合物 (1.28 g) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 3.59-3.81 (12H, m), 4.15 (2H, s), 4.96 (2H, brs).

【0351】

C) 1-(4-(2-クロロエトキシ)フェニル)-2-フェニルブタン-1-オン
(2-クロロエトキシ)ベンゼン (4.3 g)、塩化アルミニウム (4.39 g) およびクロロベンゼン (15 mL) の混合物に、2-フェニルブタノイル クロリド (5.01 g) とクロロベンゼン (10 mL) の混合物を氷冷下で加え、室温で1時間撹拌した。混合物を室温で飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (7.6 g) を得た。
MS: [M+H]⁺303.0.

【0352】

D) 1-(4-(2-クロロエトキシ)フェニル)-2-フェニル-1-(4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)ブタン-1-オール
1-(4-(2-クロロエトキシ)フェニル)-2-フェニルブタン-1-オン(7.6 g)およびジエチルエーテル (100 mL) の混合物に、 0.5M (4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)マグネシウム ブロミドのTHF溶液 (100 mL) を氷冷下で滴下した後、アルゴン雰囲気下50℃にて30分撹拌した。混合物を室温で飽和塩化アンモニウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (12.5 g) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 0.73 (3H, t, J = 7.32 Hz), 1.57-1.74 (4H, m), 1.74-1.91 (4H, m), 1.93-2.05 (1H, m), 3.49 (1H, brs), 3.63 (1H, brs), 3.69-3.76 (2H, m), 3.87-3.99 (1H, m), 4.05-4.16 (2H, m), 5.21-5.46 (1H, m), 6.57-6.69 (2H, m), 6.98-7.19 (9H, m), 7.43 (2H, dd, J = 8.88, 1.13 Hz)

【0353】

E) 4-((1-(E/Z))-1-(4-(2-クロロエトキシ)フェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノール
1-(4-(2-クロロエトキシ)フェニル)-2-フェニル-1-(4-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)フェニル)ブタン-1-オール (12.5 g) およびメタノール (100 mL) の混合物に、室温で濃塩酸 (10.8 mL) を加えた後、1時間加熱還流した。混合物を室温で飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (9.70 g) を得た。
MS: [M-H]^-377.0.

【0354】

F) 4-((1-(E/Z))-1-(4-(2-(メチルアミノ)エトキシ)フェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノール塩酸塩
4-((1-(E/Z))-1-(4-(2-クロロエトキシ)フェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノール (13.0 g)、7.6Mメチルアミンメタノール溶液 (36.4 mL)、トリエチルアミン (19.1 mL)、メタノール (80 mL) の混合物を封管して、130℃にて6時間撹拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム水溶液を室温で加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール/ジクロロメタン)で精製して粗生成物を得た。得られた粗生成物をジクロロメタン/メタノールから結晶化し、フリー体(58 g) を得た。得られた結晶をメタノール (50 mL) に溶解し、混合物に6M塩酸 (100 mL) を加えて、60℃で6時間撹拌した。混合物を減圧下濃縮して標題化合物 (60 g) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 0.94 (3H, t, J = 7.2 Hz), 2.46-2.52 (2H, m), 2.82 (3H, d, J= 27.2 Hz), 3.39 (1H, t, J= 4.4 Hz), 3.49 (1H, t, J= 4.8 Hz),4.16 (1H, t, J= 4.8 Hz), 4.33 (1H, t, J= 4.8 Hz), 6.42 (1H, d, J = 8.4 Hz), 6.65-6.67 (2H, m), 6.77-6.84 (2H, m), 7.02-7.20 (8H, m).

【0355】

G) ベンジル(2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)メチルカルバマート
4-((1-(E/Z))-1-(4-(2-(メチルアミノ)エトキシ)フェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノール塩酸塩 (2.5 g) およびTHF (25 mL) の混合物に2M 水酸化ナトリウム水溶液 (9.15 mL) を氷冷下にて加え、氷冷下で5分間撹拌した。反応混合物にクロロギ酸ベンジル (1.05 mL) を氷冷下で加え、室温にて終夜撹拌した。混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (2.4 g) を得た。
MS: [M+H]⁺508.5.

【0356】

H) ベンジル メチル(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)カルバマート
ベンジル (2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)メチルカルバマート (2.4 g)、60%水素化ナトリウム (0.21 g)、DMF (25 mL) の混合物を氷冷下にて5分間撹拌した。反応混合物に (2-(クロロメトキシ)エチル)(トリメチル)シラン (0.87 g)を氷冷下で加え、室温で終夜撹拌した。混合物を室温で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製して標題化合物 (2.93 g) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ -0.06-0.02 (9H, m), 0.84-1.01 (5H, m), 2.40-2.53 (2H, m), 2.98-3.10 (3H, m), 3.52-3.62 (1H, m), 3.64-3.72 (2H, m), 3.74-3.82 (1H, m), 3.88-4.03 (1H, m), 4.04-4.19 (1H, m), 5.09 (2H, d, J = 4.72 Hz), 5.14 (1H, s), 5.23 (1H, s), 6.42-6.56 (1H, m), 6.65 (1H, d, J = 8.70 Hz), 6.70-6.89 (3H, m), 7.00 (1H, d, J = 8.70 Hz), 7.04-7.20 (7H, m), 7.27-7.40 (5H, m).

【0357】

I) N-メチル-2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エタンアミン
ベンジル メチル(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)カルバマート (400 mg)、トリエチルアミン (0.52 mL)、塩化パラジウム(II)(222 mg) および酢酸エチル (10 mL) の混合物にトリエチルシラン (1.80 mL) を加え、室温にて1時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、不溶物をろ過して取り除いた。ろ液を水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、酢酸エチル/ヘキサン）で精製して標題化合物 (250 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺504.5.

【0358】

J) 2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド
N-メチル-2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エタンアミン (250 mg)、(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (114 mg)、HOBt一水和物 (114 mg)、DIPEA (0.26 mL)、WSC (0.13 mL) およびTHF (10 mL) の混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を室温で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物(250 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺694.6.

【0359】

K) 12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート
2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (250 mg) およびピリジン (5 mL) の混合物に4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (275 mg) を氷冷下で加えた後、室温で6時間撹拌した。混合物を減圧下濃縮し、トルエン共沸した。得られた残渣に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (259 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺848.7.

【0360】

L) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (255 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (180 mg)、炭酸カリウム (50 mg) および無水DMF (3 mL) の混合物を60℃で終夜撹拌した。反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (347 mg) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ -0.07-0.00 (9H, m), 0.81-2.56 (32H, m), 2.68-3.13 (10H, m), 3.57-4.03 (15H, m), 4.09-4.38 (5H, m), 4.46-4.65 (2H, m), 5.07 (1H, s), 5.23 (1H, s), 5.42-5.52 (1H, m), 6.47-6.56 (1H, m), 6.58-6.67 (1H, m), 6.69-6.80 (2H, m), 6.84-6.92 (1H, m), 6.96-7.46 (9H, m), 7.63-7.77 (2H, m), 7.97 (1H, s), 8.23-8.30 (1H, m)

【0361】

M) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (340 mg) およびTHF (1 mL) の混合物に、4M 塩化水素シクロペンチルメチルエーテル溶液 (3.33 mL) を室温で加え、室温にて2時間撹拌した。反応液を濃縮した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル)、HPLC (L-Column2 ODS、移動相:水/アセトニトリル (0.1% トリフルオロ酢酸含有系)) およびHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（10 mM 重炭酸アンモニウム系）) で精製して、標題化合物 (90 mg) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.82-1.34 (11H, m), 1.51-1.84 (6H, m), 1.96-2.53 (9H, m), 2.88-3.19 (4H, m), 3.52-4.38 (20H, m), 4.48-4.62 (1H, m), 5.43-5.51 (1H, m), 6.38 (1H, d, J = 7.36 Hz), 6.48-6.56 (1H, m), 6.59-6.65 (1H, m), 6.69-6.78 (2H, m), 6.83-6.93 (1H, m), 6.97-7.25 (8H, m), 7.35-7.45 (1H, m), 7.67-7.73 (2H, m), 8.21-8.32 (1H, m)

【0362】

実施例３４
14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-N-(2-(4-((1-(E/Z))1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-N-メチル-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド

【0363】

A) 1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサヘキサデカン-16-酸
メチル 1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサヘキサデカン-16-オアート (3 g)、THF (40 mL) およびメタノール (20 mL) の混合物に2M水酸化ナトリウム水溶液 (8.42 mL) を加え、室温で2時間撹拌した。反応混合物に室温で1N塩酸を加えて酸性に調整した後、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (2.46 g) を得た。
MS: [M+H]⁺343.4.

【0364】

B) 14-ヒドロキシ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-酸
1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサヘキサデカン-16-酸 (2.46 g)、10% パラジウム炭素 (0.38 g)、メタノール (80 mL) の混合物を水素雰囲気下、室温にて6時間撹拌した。反応混合物をろ過して不溶物を除き、ろ液を減圧下濃縮して標題化合物 (1.81 g) を得た。¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 3.52-3.76 (16H, m), 4.12 (2H, s)

【0365】

C) 14-ヒドロキシ-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド
N-メチル-2-(4-((1-(E/Z)-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エタンアミン (350 mg)、14-ヒドロキシ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-酸 (210 mg)、HOBt一水和物(160 mg)、DIPEA (0.36 mL)、WSC (0.18 mL) およびTHF (10 mL) の混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を室温で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (471 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺738.7.

【0366】

D) 15-メチル-14-オキソ-17-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート
14-ヒドロキシ-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド (471 mg) およびピリジン (5 mL) の混合物に氷冷下で、4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (487 mg) を加え、室温で6時間撹拌した。反応混合物をトルエン共沸した後、酢酸エチルで希釈し、室温で飽和塩化アンモニウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/酢酸エチル）で精製し、標題化合物 (463 mg) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ -0.08-0.03 (9H, m), 0.80-1.03 (5H, m), 2.36-2.54 (5H, m), 2.86-3.17 (3H, m), 3.44-3.83 (18H, m), 3.97-4.42 (6H, m), 5.08 (1H, s), 5.24 (1H, s), 6.52-6.59 (1H, m), 6.64 (1H, d, J = 7.65 Hz), 6.72-6.80 (2H, m), 6.92 (1H, t, J = 5.83 Hz), 7.01 (1H, d, J = 7.65 Hz), 7.04-7.19 (7H, m), 7.41 (2H, d, J = 7.53 Hz), 7.78 (2H, d, J = 7.53 Hz)

【0367】

E) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((15-メチル-14-オキソ-17-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
15-メチル-14-オキソ-17-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (463 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (311 mg)、炭酸カリウム(86 mg) および DMF (3 mL) の混合物を60℃で終夜撹拌した。混合物に室温で飽和塩化アンモニウム水溶液を加えて中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (444 mg) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ -0.11-0.07 (9H, m), 0.81-2.55 (35H, m), 2.66-3.19 (6H, m), 3.52-4.04 (20H, m), 4.07-4.41 (5H, m), 4.45-4.69 (2H, m), 5.08 (1H, s), 5.24 (1H, s), 5.48 (1H, d, J = 7.40 Hz), 6.50-6.57 (1H, m), 6.64 (1H, d, J = 7.78 Hz), 6.72-6.80 (2H, m), 6.86-6.95 (1H, m), 6.97-7.34 (9H, m), 7.39-7.48 (1H, m), 7.66-7.79 (2H, m), 8.23-8.32 (1H, m)

【0368】

F) 14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-N-(2-(4-((1-(E/Z))1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-N-メチル-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((15-メチル-14-オキソ-17-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (200 mg)、THF (3 mL) の混合物に6N塩酸 (3.29 mL) を室温にて加え、室温で4時間撹拌した。混合物を室温で飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) およびHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（10mM 重炭酸アンモニウム)) で精製して、標題化合物 (100 mg) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 0.89 (3H, t, J = 6.96 Hz), 0.96-1.35 (8H, m), 1.54-1.83 (6H, m), 1.98-2.52 (9H, m), 2.88-3.20 (4H, m), 3.53-4.03 (19H, m), 4.12-4.39 (5H, m), 4.56 (1H, d, J = 6.90 Hz), 5.43-5.51 (1H, m), 6.39 (1H, d, J= 7 .40 Hz), 6.49-6.56 (1H, m), 6.63 (1H, d, J = 7.40 Hz), 6.71-6.79 (2H, m), 6.86-7.24 (9H, m), 7.37-7.45 (1H, m), 7.71 (2H, brs), 8.27 (1H, brs)

【0369】

実施例３５
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)(メチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0370】

A) (2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸
メチル (2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エトキシ)アセタート (3 g)、THF (40 mL) およびメタノール (20 mL) の混合物に2N水酸化ナトリウム水溶液 (11.2 mL) を加え、室温で2時間撹拌した。反応混合物に室温で1N塩酸を加えて酸性に調整した後、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(メタノール/酢酸エチル)で精製して標題化合物 (2.62 g) を得た。
MS: [M+Na]⁺277.3.

【0371】

B) (2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)酢酸
(2-(2-(ベンジルオキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸 (2.62 g)、10% パラジウム炭素 (0.55 g) およびメタノール (100 mL) の混合物を水素雰囲気下、室温にて6時間撹拌した。反応混合物をろ過して不溶物を除き、ろ液を減圧下濃縮して標題化合物 (1.69 g) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 3.49-3.82 (9H, m), 4.13 (2H, s)

【0372】

C) 2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド
N-メチル-2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エタンアミン (350 mg)、(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)酢酸 (137 mg)、HOBt一水和物(160 mg)、DIPEA (0.36 mL)、WSC (0.18 mL) およびTHF (10 mL) の混合物を室温で終夜撹拌した。混合物を室温で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物(316 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺650.6.

【0373】

D) 2-(2-(2-(メチル(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (316 mg) およびピリジン (5 mL) の混合物に氷冷下で、4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (371 mg) を加え、室温で6時間撹拌した。反応混合物をトルエン共沸した後、酢酸エチルで希釈し、室温で飽和塩化アンモニウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（メタノール/酢酸エチル）で精製し、標題化合物 (331 mg) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ -0.13-0.06 (9H, m), 0.79-1.01 (5H, m), 2.34-2.52 (5H, m), 2.89-3.19 (3H, m), 3.44-3.86 (10H, m), 3.95-4.39 (6H, m), 5.08 (1H, s), 5.24 (1H, s), 6.52-6.58 (1H, m), 6.64 (1H, d, J = 8.03 Hz), 6.72-6.80 (2H, m), 6.88-6.94 (1H, m), 7.01 (1H, d, J = 7.40 Hz), 7.04-7.19 (7H, m), 7.36-7.43 (2H, m), 7.73-7.80 (2H, m)

【0374】

E) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(メチル(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (246 mg)、2-(2-(2-(メチル(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (330 mg)、炭酸カリウム (68 mg) および無水DMF (3 mL) の混合物を60℃で終夜撹拌した。混合物を室温で飽和塩化アンモニウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (370 mg) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ -0.09-0.05 (9H, m), 0.82-2.51 (32H, m), 2.78-3.17 (10H, m), 3.56-4.02 (11H, m), 4.05-4.40 (5H, m), 4.52 (2H, d, J = 7.28 Hz), 5.07 (1H, s), 5.23 (1H, s), 5.46 (1H, brs), 6.45-6.56 (1H, m), 6.62 (1H, d, J = 8.16 Hz), 6.67-6.79 (2H, m), 6.84-7.45 (9H, m), 7.70 (2H, brs), 7.98 (2H, s), 8.19-8.36 (1 H, m)

【0375】

F) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-((2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)(メチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(メチル(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (185 mg) およびTHF (3 mL) の混合物に6M塩酸 (3.26 mL) を室温にて加え、室温で4時間撹拌した。混合物を室温で飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(NH、メタノール/酢酸エチル)およびHPLC(L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（5 mM 酢酸アンモニウム))で精製して、標題化合物 (80 mg) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 0.81-0.94 (3H, m), 1.00-1.41 (8H, m), 1.54-1.85 (6H, m), 1.93-2.54 (10H, m), 2.86-3.14 (3H, m), 3.47-4.41 (16H, m), 4.50-4.60 (1H, m), 5.46 (1H, d, J = 6.53 Hz), 6.38 (1H, d, J = 8.03 Hz), 6.48-6.56 (1H, m), 6.58-6.66 (1H, m), 6.69-6.79 (2H, m), 6.84-7.25 (9H, m), 7.33-7.45 (1H, m), 7.69 (2H, brs), 8.26 (1H, d, J = 11.80 Hz)

【0376】

実施例３６
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((16-((7alpha,17beta)-3,17-ジヒドロキシエストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0377】

A) (17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン
(17beta)-エストラ-1,3,5(10)-トリエン-3,17-ジオール (60 g)、DIPEA (230 mL) および THF (600 mL) の混合物に、MOMCl (83.4 mL) および THF (200 mL) の混合物を氷冷下で滴下した。反応混合物を室温まで昇温し、室温で1時間撹拌した後、15時間加熱還流した。反応混合物に室温で飽和塩化アンモニウム溶液を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (石油エーテル/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (66 g) を得た。
MS: [M-H]^-359.1.

【0378】

B) (17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オール
t-BuOK (37.2 g) とTHF (300 mL) の混合物に2MLDA/THF溶液 (166 mL) を-78 ℃で加えた。混合物を-78 ℃で30分間撹拌した。反応混合物に(17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン (30 g) とTHF (150 mL) の混合物を加え、-78 ℃で3時間撹拌した。反応混合物にトリメトキシボラン (114 mL) を加え、0 ℃に昇温して2時間撹拌した。反応混合物に過酸化水素水 (129 mL) を加え、室温で1時間撹拌した。氷冷下にて混合物に10%チオ硫酸ナトリウム水溶液 (510 mL) を加え、室温で2時間撹拌した。混合物を酢酸エチルで抽出して有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (28.8 g) を得た。
MS: [M+Na]⁺399.1.

【0379】

C) (17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オン
塩化オキサリル (7.8 mL) およびジクロロメタン (200 mL) の混合物に-78℃にて、DMSO (13.1 mL) を滴下し、4分間撹拌した。反応混合物に(17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オール (28.8 g) およびジクロロメタン (150 mL) の混合物を滴下し、-78℃で25分間撹拌した。反応混合物にトリエチルアミン (54 mL) を加え、-78℃で5分間撹拌した後、室温まで昇温して15時間撹拌した。混合物に水に加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (25 g) を得た。
MS: [M+H]⁺375.1.

【0380】

D) 18-ブロモ-1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン
60%水素化ナトリウム (4.22 g) および DMF (50 mL) の混合物に 1-フェニル-2,5,8,11-テトラオキサトリデカン-13-オール (20 g) および DMF (150 mL) の混合物を氷冷下にて加え、25分間撹拌した。反応混合物に1,4-ジブロモブタン (68.3 g) およびDMF (50 mL) の混合物を加え、窒素雰囲気下、室温にて2.5時間撹拌した。反応混合物に氷冷下にて、60%水素化ナトリウム (4.22 g) を加え、氷冷下で30分撹拌し、室温で30分撹拌した。反応混合物にさらに60%水素化ナトリウム (4.22 g) を加え、15時間撹拌した。反応混合物に氷冷下にて、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (18 g) を得た。
MS: [M+H]⁺ 442.9.

【0381】

E) 18-ヨード-1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン
18-ブロモ-1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン (18 g) およびアセトン (150 mL) の混合物にヨウ化ナトリウム (12.8 g) を加え、3時間加熱還流した。反応混合物をろ過して不溶物を除去し、ろ液を減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (19 g) を得た。
MS: [M+Na]⁺489.0.

【0382】

F) (7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オン
t-BuOK (5.87 g) およびTHF (50 mL) の混合物に(17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オン (9.8 g) および THF (100 mL) の混合物を氷冷下にて滴下した。反応混合物を氷冷下で45分間撹拌した後、-78℃まで冷却した。反応混合物に18-ヨード-1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン (19g) および THF (50 mL) の混合物を加え、-78℃で2分間撹拌した。反応混合物を0℃まで昇温し、室温で1.5時間撹拌した。混合物に水に加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (14.0 g) を得た。
MS: [M+H]⁺713.3.

【0383】

G) (7alpha,17beta)-3,17-ジヒドロキシ-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オン
(7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オン (14.0 g) およびTHF (120 mL) の混合物に6N塩酸 (150 mL) を加え、室温で20時間撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮して粗標題化合物 (13.2 g) を得た。
MS: [M+H]⁺625.3.

【0384】

H) (7alpha,17beta)-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン-3,17-ジオール
(7alpha,17beta)-3,17-ジヒドロキシ-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン-6-オン (13.2 g) およびTFA (133 mL) の混合物にトリエチルシラン (31.8 mL) を加え、窒素雰囲気下にて室温で16時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと食塩水で分配し、有機層を分離した。得られた有機層を飽和食塩水および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をメタノール (150 mL) に溶解し、2N水酸化ナトリウム水溶液 (150 mL) を加え、室温で2時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、酢酸エチルと1N塩酸で分配し、有機層を分離した。得られた有機層を1N塩酸および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (9.5 g) を得た。
MS: [M+H]⁺611.3.

【0385】

I) (7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン
(7alpha,17beta)-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン-3,17-ジオール (9.5 g)、DIPEA (49 mL) およびTHF (200 mL) の混合物に、氷冷下にてMOMCl (18.6 g) を滴下した。反応混合物を室温にて1時間撹拌し、15時間加熱還流した。混合物に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/石油エーテル）で精製して標題化合物 (8.76 g) を得た。
MS: [M+Na]⁺721.3.

【0386】

J) 16-((7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカン-1-オール
(7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)-7-(1-フェニル-2,5,8,11,14-ペンタオキサオクタデカン-18-イル)エストラ-1(10),2,4-トリエン (8.76 g)、10%パラジウム炭素 (1 g) およびエタノール (150 mL) の混合物を水素雰囲気下、室温にて15時間撹拌した。反応混合物をろ過して不溶物を除き、エタノールで洗浄した後、ろ液を減圧下濃縮して標題化合物 (7 g) を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 0.819 (3H, s), 0.96-1.14 (1H, m), 1.21-1.64 (11H, m), 1.78-1.724 (1H, m), 1.93-2.13 (2H, m), 2.35-2.30 (2H, m), 2.48 (2H, brs.), 2.70-2.80 (1H, m), 2.85-2.95 (1H, m), 3.39 (3H, s), 3.44 (2H, t, J = 6.5 Hz), 3.50 (3H, s), 3.56-3.71 (15H, m), 3.72-3.76 (2H, m), 4.68 (2H, d, J = 2.0 Hz), 5.16 (2H, s), 6.76 (1H, d, J = 2.4 Hz), 6.84 (1H, dd, J = 8.4, 2.4 Hz), 7.21 (1H, d, J = 8.4 Hz).

【0387】

K) 16-((7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート
16-((7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカン-1-オール (440 mg) およびピリジン (5 mL) の混合物に氷冷下で、4-メチルベンゼンスルホニル クロリド (551 mg) を加え、室温で6時間撹拌した。反応混合物を濃縮してトルエン共沸した後、飽和塩化アンモニウム水溶液を室温で加えて中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル/ヘキサン）で精製し、標題化合物 (441 mg) を得た。
MS: [M+Na]⁺785.6.

【0388】

L) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((16-((7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
16-((7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (432 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (339 mg)、炭酸カリウム (94 mg) および DMF (5 mL) の混合物を60℃で終夜撹拌した。混合物を室温で飽和塩化アンモニウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）で精製して標題化合物 (471 mg) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 0.74-0.84 (3H, m), 0.91-1.81 (35H, m), 1.90-2.54 (9H, m), 2.68-2.95 (5H, m), 3.31-3.50 (8H, m), 3.53-3.93 (18H, m), 4.13-4.24 (2H, m), 4.55-4.71 (4H, m), 5.09-5.19 (2H, m), 5.55 (1H, dd, J = 7.6, 2.5 Hz), 6.74 (1H, d, J = 2.5 Hz), 6.78-6.86 (1H, m), 7.12-7.23 (2H, m), 7.37 (1H, t, J = 8.0 Hz), 7.65-7.71 (1H, m), 7.79 (1H, d, J = 7.7 Hz), 8.10 (1H, s).

【0389】

M) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((16-((7alpha,17beta)-3,17-ジヒドロキシエストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((16-((7alpha,17beta)-3,17-ビス(メトキシメトキシ)エストラ-1(10),2,4-トリエン-7-イル)-3,6,9,12-テトラオキサヘキサデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (471 mg) およびTHF (3 mL) の混合物に6M塩酸 (2.97 mL) を加え、室温で6時間撹拌した。混合物を室温で飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（NH、メタノール/酢酸エチル）およびHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（10 mM 重炭酸アンモニウム)) で精製して、標題化合物 (160 mg) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.75 (3H, s), 0.90-2.43 (39H, m), 2.58-2.86 (2H, m), 3.10-3.22 (1H, m), 3.37-3.74 (15H, m), 3.79-4.04 (4H, m), 4.12-4.21 (2H, m), 4.56 (1H, d, J = 7.18 Hz), 5.47 (1H, dd, J = 7.60, 3.45 Hz), 6.45 (1H, d, J = 2.45 Hz), 6.53 (1H, dd, J = 8.45, 2.50 Hz), 7.06 (1H, d, J = 8.40 Hz), 7.18-7.26 (1H, m), 7.38-7.46 (1H, m), 7.68-7.75 (2H, m), 8.26-8.31 (1H, m).

【0390】

実施例４１
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0391】

A) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (611 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-ヒドロキシベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (356 mg)、炭酸カリウム (207 mg)および無水DMF(3 mL)の混合物をアルゴン雰囲気下、60 ℃で6日間撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで三度抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (607 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1268.8.

【0392】

B) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(5-(3-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (877 mg)とTHF (2.5 mL)の混合物に６N塩酸 (2.5 mL)を室温で加え、混合物を室温で6時間撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで二度抽出した。合わせた有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル)およびHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（5 mM 酢酸アンモニウム系）で精製した。得られた画分に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離して、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮し、標題化合物 (374 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0.76-1.11 (11H, m), 1.42-1.95 (9H, m), 2.15 (3H, s), 2.23-2.47 (4H, m), 2.78-3.05 (4H, m), 3.43-3.90 (15H, m), 4.09-4.27 (5H, m), 4.49 (1H, t, J = 7.5 Hz), 5.05-5.47 (1H, m), 6.38 (1H, d, J = 8.3 Hz), 6.57 (2H, d, J = 5.4 Hz), 6.65-6.77 (2H, m), 6.86-7.22 (8H, m), 7.23-7.56 (4H, m), 7.75-7.91 (2H, m), 8.60-8.77 (2H, m), 9.11-9.49 (1H, m).

【0393】

実施例４２
14-(4-((1S)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-1-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソエチル)ピペリジン-1-イル)-N-(2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-N-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド

【0394】

A) tert-ブチル 15-メチル-14-オキソ-17-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-オアート
2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (2.60 g)と無水DMF (30 mL) の混合物に60%水素化ナトリウム (0.235 g)を0 ℃で加えた。反応混合物を0 ℃で10分間撹拌した後、 tert-ブチル 2-ブロモアセタート (0.760 mL)を0 ℃で加えた。混合物を室温で20時間撹拌した後、60%水素化ナトリウム(0.22 g) とtert-ブチル 2-ブロモアセタート (0.74 mL)を0 ℃で加えた。混合物を室温で3時間撹拌した後、混合物に0 ℃で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (2.30 g)を得た。
MS: [M+H-tBu+H]⁺752.6.

【0395】

B) 17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-酸
tert-ブチル 15-メチル-14-オキソ-17-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-オアート(2.30 g)とTHF (10 mL)の混合物に6規定塩酸 (10 mL)を室温で加え、室温で6時間撹拌した。混合物を0 ℃で水に加え、酢酸エチルとTHFの混合溶媒で抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (1.65 g) を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 0.92 (3H, t, J = 7.4 Hz), 2.47 (2H, quin, J = 7.0 Hz), 2.90-3.13 (3H, m), 3.54-3.80 (14H, m), 3.92-4.36 (6H, m), 6.43-6.54 (2H, m), 6.63-6.88 (4H, m), 7.01-7.21 (7H, m).

【0396】

C) (4-フルオロフェニル)(5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)メタノン
3-ブロモ-5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン(38.0 g)のジエチルエーテル(1.0 L)溶液に2.5 M n-ブチルリチウム ヘキサン溶液(46.6 mL)を-70 ℃で加えた。反応混合物を-70 ℃で1時間撹拌した後、4-フルオロ-N-メトキシ-N-メチルベンズアミド(29.0 g)とジチルエーテル(15 mL)の混合物を加えた。反応混合物を-70 ℃で1.5時間撹拌した後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物(12.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 1.37 (3H, d, J = 6.62 Hz), 1.54-1.67 (1H, m), 1.82-1.94 (1H, m), 1.94-2.04 (1H, m), 2.23-2.36 (1H, m), 2.53-2.66 (1H, m), 3.33-3.42 (1H, m), 3.51 (1H, q, J = 6.62 Hz), 3.60 (3H, s), 3.71 (1H, dd, J = 9.26, 5.73 Hz), 6.48-6.55 (2H, m), 6.93-7.00 (2H, m), 7.24-7.33 (2H, m), 7.64-7.69 (1H, m), 7.74-7.82 (2H, m), 8.43-8.49 (2H, m).
D) (4-フルオロフェニル)(5-((2S)-ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)メタノン
(4-フルオロフェニル)(5-((2S)-1-((1R)-1-(4-メトキシフェニル)エチル)ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)メタノン(20.0 g)とTFA (200 mL)の混合物を100 ℃で10時間撹拌後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をジクロロメタン−飽和炭酸ナトリウム水溶液で分配し、有機層を減圧下濃縮し標題化合物(10 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 2.18-2.40 (3H, m), 2.52-2.66 (1H, m), 3.47-3.55 (3H, m), 7.32 (2H, s), 7.86-8.00 (2H, m), 8.28-8.36 (1H, m), 8.87-8.92 (1H, s), 8.92-8.98 (1H, s).

【0397】

E) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート
(4-フルオロフェニル)(5-((2S)-ピロリジン-2-イル)ピリジン-3-イル)メタノン(2.43 g)、(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(1-((9H-フルオレン-9-イルメトキシ)カルボニル)ピペリジン-4-イル)酢酸(3.60 g)、DIPEA (3.87 mL)、DMTMM (3.07 g)およびジクロロメタン(100 mL)の混合物を14 ℃で10時間 撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物(3.20 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 1.18 - 1.28 (1H, m), 1.39 (1H, brs), 1.46 (9H, brs), 1.93-2.02 (1H, m), 2.05-2.19 (1H, m), 2.42-2.56 (1H, m), 2.65 (1H, d, J = 5.29 Hz), 2.86 (1H, s), 2.99 (1H, s), 3.25 (1H, s), 3.34 (2H, s), 3.91 (1H, brs), 4.00 (4H, s), 4.03-4.12 (1H, m), 4.18-4.31 (2H, m), 5.13-5.22 (1H, m), 7.31 (4H, t, J = 7.28 Hz), 7.38 (2H, brs), 7.59 (2H, d, J = 7.50 Hz), 7.80 (2H, d, J = 7.50 Hz), 7.88 (2H, dd, J = 8.60, 5.51 Hz), 7.98 (1H, d, J = 4.41 Hz), 8.67-8.73 (2H, m).

【0398】

F) 9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート(3.2 g)、TFA(25 mL)およびジクロロメタン(25 mL)の混合物を15 ℃で20分間 撹拌した。反応液を濃縮して得られた残渣(2.76 g)、(S)-2-((tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ) プロパン酸(1.33 g)、DIPEA (2.25 mL)、DMTMM (1.79 g)およびジクロロメタン(100 mL)の混合物を14 ℃で10時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を分取HPLCで精製し、標題化合物(1.10 g)を得た。
MS: [M+H]⁺818.5.

【0399】

G) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソ-1-(ピペリジン-4-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
9H-フルオレン-9-イルメチル 4-((1S)-1-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)ピペリジン-1-カルボキシラート (200 mg)とメタノール (4 mL)の混合物に2Mジメチルアミンメタノール溶液 (8 mL)を室温で加えた。混合物を室温で5時間撹拌した後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (127 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺596.4.

【0400】

H) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-1-(1-(17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-酸 (152 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソ-1-(ピペリジン-4-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (127 mg)、WSC (0.06 mL)、HOBt (43 mg)、無水DMF (3 mL)の混合物を室温で18時間撹拌した。混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (215 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1199.8.

【0401】

I) 14-(4-((1S)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-1-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソエチル)ピペリジン-1-イル)-N-(2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-N-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(5-(4-フルオロベンゾイル)ピリジン-3-イル)ピロリジン-1-イル)-1-(1-(17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (215 mg)とTHF (1 mL)の混合物にTFA (1 mL)を0 ℃で加え、0 ℃で1時間、室温で2時間撹拌した。混合物を0 ℃にて飽和炭酸水素ナトリウム溶液で中和し、酢酸エチルとTHFの混合溶媒で抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) 、HPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（0.1％ TFA含有系）)で精製した。得られた画分に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離して、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (79 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.84-1.03 (4H, m), 1.09-1.44 (5H, m), 1.61 (2H, t, J = 13.3 Hz), 1.86-2.18 (4H, m), 2.28 (2H, s), 2.38-2.63 (4H, m), 2.82-3.18 (5H, m), 3.52-4.71 (25H, m), 5.10-5.52 (1H, m), 6.34-6.42 (1H, m), 6.50-6.58 (1H, m), 6.63 (1H, d, J = 8.7 Hz), 6.74 (2H, dt, J = 8.5, 2.4 Hz), 6.86-6.94 (1H, m), 6.95-7.18 (7H, m), 7.30 (2H, t, J = 8.7 Hz), 7.84-8.06 (3H, m), 8.57-8.76 (2H, m).

【0402】

実施例４３
N-(2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-N-メチル-14-(4-((1S)-1-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-イル)-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド

【0403】

A) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-(1-(17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-イル)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-酸 (143 mg)、tert-ブチル メチル((2S)-1-オキソ-1-(((1S)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-(ピペリジン-4-イル)エチル)アミノ)プロパン-2-イル)カルバマート (116 mg)、WSC (0.05 mL)、HOBt (39 mg)と無水DMF (3 mL)の混合物を室温で19時間撹拌した。混合物に0 ℃で水を加え、酢酸エチルとTHFの混合溶媒で抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/メタノール) で精製し、標題化合物 (205 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1210.8.

【0404】

B) N-(2-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)-N-メチル-14-(4-((1S)-1-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)ピペリジン-1-イル)-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1-アミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-(1-(17-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-15-メチル-14-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカン-1-オイル)ピペリジン-4-イル)-2-オキソ-2-((2S)-2-(4-フェニル[1,3]チアゾロ[4,5-c]ピリジン-2-イル)ピロリジン-1-イル)エチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (205 mg)とTFA (1 mL)の混合物を室温で20分間撹拌した。混合物を0 ℃にて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルとTHFの混合溶媒で抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/メタノール)、HPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル (5 mM 酢酸アンモニウム系))、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル、0.5% v/v トリエチルアミン添加)で精製し、標題化合物 (16 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.88 (3H, td, J = 7.3, 2.6 Hz), 1.07-1.37 (7H, m), 1.54-1.75 (2H, m), 1.88-2.76 (12H, m), 2.89-3.12 (3H, m), 3.37-3.79 (15H, m), 3.89-4.39 (8H, m), 4.66 (1H, t, J = 6.7 Hz), 5.49-5.78 (1H, m), 6.38 (1H, d, J = 8.4 Hz), 6.48-6.67 (2H, m), 6.70-7.18 (10H, m), 7.45-7.60 (3H, m), 7.93-8.01 (1H, m), 8.23-8.35 (2H, m), 8.50 (1H, dd, J = 5.4, 1.3 Hz).

【0405】

実施例４４
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0406】

A) tert-ブチル (2S)-2-(4-ホルミル-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(1.0 g)とTHF(20 mL)の混合物に水素化リチウムアルミニウム(55 mg)を室温で加え1時間撹拌した。反応混合物に硫酸ナトリウム十水和物を加え、不純物を濾去した。濾液を減圧下留去し、水で希釈した後に、酢酸エチルで三度抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮して標題化合物(600 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺282.9.

【0407】

B) tert-ブチル(2S)-2-(4-((2-(ベンジルオキシ)フェニル)(ヒドロキシ)メチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-(4-ホルミル-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(4.36 g)とTHF(20 mL)の混合物に(2-(ベンジルオキシ)フェニル)(ブロモ)マグネシウム(2.86 g)を室温で加え、反応混合物を終夜撹拌した。混合物に水を加え、酢酸エチルで三度抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(4.6 g)を得た。
MS: [M+H]⁺466.9.

【0408】

C) tert-ブチル(2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S)-2-(4-((2-(ベンジルオキシ)フェニル)(ヒドロキシ)メチル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(4.60 g)、二酸化マンガン(8.57 g)およびジクロロメタン(100 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。不純物を濾去し、濾液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でおよび飽和食塩水で洗浄した。分離した有機層を減圧下留去し標題化合物(4.40 g)を得た。
MS: [M+H]⁺465.2.

【0409】

D) (2-(ベンジルオキシ)フェニル)(2-((2S)-ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)メタノントリフルオロ酢酸塩
tert-ブチル (2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(4.40 g)、TFA(8 mL)およびジクロロメタン(50 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、標題化合物(2.50 g)を得た。
MS: [M+H]⁺365.2.

【0410】

E) tert-ブチル ((1S)-2-((2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)カルバマート
(2-(ベンジルオキシ)フェニル)(2-((2S)-ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)メタノントリフルオロ酢酸塩(2.10 g)とジクロロメタン(50 mL)の混合物に(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸(1.78 g)、DIPEA(2.23 g)およびHATU(3.28 g)を室温で加え、終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、得られた残渣を水で希釈した後に、酢酸エチルで三度抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(3.00 g)を得た。
MS: [M+H]⁺604.4.

【0411】

F) (2S)-2-アミノ-1-((2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-2-チエニル)ピロリジン-1-イル)-2-シクロヘキシルエタノントリフルオロ酢酸塩
tert-ブチル ((1S)-2-((2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)カルバマート(3.00 g)、TFA(6 mL)およびジクロロメタン(50 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、標題化合物(2.40 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ1.07-1.24 (4H, m), 1.62-1.70(7H, m), 1.80-1.95 (3H, m), 2.14-2.19 (1H, m), 3.62-3.65 (1H, m), 3.69-3.72 (1H, m), 4.02-4.06 (1H, m), 5.09-5.13 (2H, m), 5.33-5.35 (1H, m), 7.06-7.11 (3H, m), 7.24-7.32 (4H, m), 7.41-7.45 (1H, m), 7.52-7.57 (1H, m), 8.12 (2H, brs), 8.35 (1H, s).

【0412】

G) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2S)-2-アミノ-1-((2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-2-チエニル)ピロリジン-1-イル)-2-シクロヘキシルエタノントリフルオロ酢酸塩(2.40 g)とジクロロメタン(40 mL)の混合物にN-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン(1.16 g)、DIPEA(1.85 g)およびHATU(2.72 g)を室温で加え、終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、得られた残渣を水で希釈した後に、酢酸エチルで三度抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物(2.20 g)を得た。
MS: [M+H]⁺688.9.

【0413】

H) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミドトリフルオロ酢酸塩
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(2-(ベンジルオキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート(1.6 g)、メタンスルホン酸(10 mL) およびジクロロメタン(40 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、標題化合物(0.8 g)を得た。
MS: [M+H]⁺499.3.

【0414】

I) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド トリフルオロ酢酸塩(1.3 g)、二炭酸ジ-tert-ブチル(0.57 g)およびTHF(20 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。残渣をHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル(10 mM 酢酸アンモニウム含有系))で精製し、標題化合物(0.53 g)を得た。
MS: [M+H]⁺599.3.

【0415】

J) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (153 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (90 mg)、炭酸カリウム (52mg)および無水DMF(1 mL)の混合物をアルゴン雰囲気下、60 ℃で終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで二度抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (138 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1274.7.

【0416】

K) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(2-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (138 mg)と無水THF (1.5 mL)の混合物に6N塩酸 (1.5 mL)を室温で加え、混合物を室温で 2時間撹拌した。混合物を0 ℃にて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル(5 mM 重炭酸アンモニウム含有系)で精製した。得られた画分を減圧下濃縮し、標題化合物 (69 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0.80-1.21 (12H, m), 1.64 (6H, d, J = 10.9 Hz), 1.91-2.07 (3H, m), 2.11-2.26 (4H, m), 2.39 (2H, t, J = 7.8 Hz), 2.79-3.02 (4H, m), 3.34-3.57 (12H, m), 3.60-3.80 (3H, m), 4.01-4.25 (5H, m), 4.44-4.54 (1H, m), 5.21-5.32 (1H, m), 6.39 (1H, d, J = 8.4 Hz), 6.54-6.63 (2H, m), 6.68-6.79 (2H, m), 6.94 (2H, dd, J = 15.1, 8.0 Hz), 7.01-7.23 (8H, m), 7.37 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.49 (1H, t, J = 7.7 Hz), 7.89 (1H, d, J = 8.7 Hz), 8.24 (1H, brs), 9.11-9.47 (1H, m).

【0417】

実施例４５
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0418】

A) tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモイルピロリジン-1-カルボキシラート
(4R)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)-L-プロリン(255 g)、WSC(182 g)、HOBt(129 g)およびアセトニトリル(2.5 L)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に0 ℃で、25%アンモニア水(300 mL)を加え、0 ℃で、30分間、次いで室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を0.5 N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびと飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。
残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(メタノール/ジクロロメタン)にて精製し、標題化合物(180 g)を得た。
MS: [M+H-Boc+H]⁺221.2.

【0419】

B) tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモチオイルピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモイルピロリジン-1-カルボキシラート(180 g)、ローソン試薬(227 g)およびTHF(1.8 L)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(ジクロロメタン/メタノール)で精製し、標題化合物(165 g)を得た。
MS: [M+H-Boc+H]⁺237.2.

【0420】

C) エチル 2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボキシラート
tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモチオイルピロリジン-1-カルボキシラート(165 g)、ブロモピルビン酸エチル(191 g)およびエタノール(1.5 L)の混合物を60 ℃で3時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣にTHF (1.5 L)、水 (1.5 L)および 炭酸水素ナトリウム(82.3 g)を加えて0 ℃に冷却し、二炭酸ジ-tert-ブチル(107 g)を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮後、酢酸エチルで希釈し、水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(130 g)を得た。
MS: [M+H]⁺432.9.

【0421】

D) 2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボン酸
エチル 2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボキシラート(130 g)、1N 水酸化ナトリウム水溶液(602 mL)およびメタノール(1 L)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に0 ℃で0.33 Nクエン酸水溶液を加えてpH を6に調整した後、濃縮し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去し、標題化合物(110 g)を得た。
MS: [M+H]⁺404.9.

【0422】

E) tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボン酸(110 g)、DIPEA (105 g)、HOBt (47.8 g)、WSC (67.9 g)およびDMF (900 mL)の混合物を0 ℃で30分間撹拌し、N,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(34.5 g)を0 ℃で加えた。室温で終夜撹拌し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を5%炭酸水素ナトリウム水溶液、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(100 g)を得た。
MS: [M+H]⁺447.9.

【0423】

F) tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(メトキシ(メチル)カルバモイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(100 g)のTHF(1 L)溶液に室温で1M ブロモ(4-フルオロフェニル)マグネシウムTHF溶液(669 mL)を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(50.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺483.2.

【0424】

G) (2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)(4-フルオロフェニル)メタノン一塩酸塩
tert-ブチル (2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(50.0 g)の酢酸エチル(250 mL)溶液に4N塩化水素酢酸エチル溶液(260 mL)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、標題化合物(24.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺383.1.

【0425】

H) tert-ブチル((1S)-2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)カルバマート
(2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)(4-フルオロフェニル)メタノン一塩酸塩(24.0 g)、(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸(17.7 g)、DIPEA (29.5 g)、HOBt (15.4 g)、WSC (13.7 g)およびDMF (170 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(29.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺ 622.3

【0426】

I) (2S)-2-アミノ-1-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-シクロヘキシルエタノン一塩酸塩
tert-ブチル ((1S)-2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)カルバマート(24.0 g)の酢酸エチル(250 mL)溶液に4N塩化水素酢酸エチル溶液(250 mL)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、標題化合物(20.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺522.2.

【0427】

J) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2S)-2-アミノ-1-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-シクロヘキシルエタノン一塩酸塩(20.0 g)、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン(9.45 g)、DIPEA (18.4 g)、HOBt (6.28 g)、WSC (8.91 g)およびDMF (200 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(25.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺707.3.

【0428】

K) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート(25.0 g)、メタンスルホン酸(68.0 g)およびジクロロメタン(125 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて中和し、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をジクロロメタン(125 mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(11.6 g)と炭酸水素ナトリウム (7.43 g)を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(メタノール/ジクロロメタン)にて精製し、標題化合物(19.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺617.3.

【0429】

L) S-((3S,5S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル) エタンチオアート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4R)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート(3.00 g)、トリエチルアミン(915 mg)およびジクロロメタン(50 mL)の混合物にメタンスルホニルクロリド(1.11 g)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を10% 炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣、チオ酢酸カリウム(2.72 g)およびDMF (30 mL)の混合物を40 ℃で終夜撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(1.60 g)を得た。
MS: [M+H]⁺675.2.

【0430】

M) 2-(2-(2-(2-ヨードエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド
2-(2-(2-(2-ヒドロキシエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (1.43 g)、トリエチルアミン (1.15 mL)およびTHF (20 mL)の混合物にメタンスルホニル クロリド (0.32 mL)のTHF (2 mL)溶液を0 ℃で、20分間かけて加えた。 0 ℃で 30分間撹拌後、混合物に氷水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣とアセトン (20.0 mL)の混合物にヨウ化ナトリウム (1.54 g)を加え、40 ℃で2時間、撹拌した。不溶物を濾去し、濾液を減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (1.66 g)を得た。
MS: [M+H]⁺803.8.

【0431】

N) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
S-((3S,5S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル) エタンチオアート(71.4 mg)、2-(2-(2-(2-ヨードエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (85 mg)、炭酸カリウム (29.2 mg)およびメタノール(4 mL)の混合物を室温で、終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (121 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1308.6.

【0432】

O) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (225 mg)、6N塩酸 (4 mL)およびTHF (4 mL)の混合物を、室温で終夜 撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (116 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.79-1.40 (13H, m), 1.45-1.85 (6H, m), 2.18-2.55 (6H, m), 2.59-3.21 (7H, m), 3.47-3.70 (13H, m), 3.76 (1H, t, J = 5.0 Hz), 3.92-4.06 (1H, m), 4.10-4.41 (3H, m), 4.44-4.62 (1H, m, J = 7.2 Hz), 4.68-4.82 (1H, m), 5.34-5.51 (1H, m), 6.39 (1H, d, J = 8.5 Hz), 6.48-6.58 (1H, m), 6.63 (1H, d, J = 8.4 Hz), 6.69-6.81 (2H, m), 6.85-7.32 (10H, m), 8.15-8.36 (3H, m).

【0433】

実施例４６
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4R)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0434】

A) tert-ブチル (2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモイルピロリジン-1-カルボキシラート
(4S)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)-L-プロリン(200 g)、WSC (131 g)、HOBt (92.4 g)およびアセトニトリル(2 L)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に0 ℃で25%アンモニア水(240 mL)を加え、0 ℃で30分間、次いで室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を0.5 N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(メタノール/ジクロロメタン)にて精製し、標題化合物(140 g)を得た。
MS: [M+H]⁺321.3.

【0435】

B) tert-ブチル (2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモチオイルピロリジン-1-カルボキシラート
tert-ブチル (2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモイルピロリジン-1-カルボキシラート(140 g)、ローソン試薬(177 g)およびTHF(1 L)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(120 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 1.34-1.40 (9H, m), 2.00-2.30 (1H, m), 3.35-3.48 (2H, m), 3.58-3.63 (1H, m), 4.00-4.11 (1H, m), 4.42-4.44 (3H, m), 7.27-7.35 (5H, m), 8.99-9.07 (1H, m), 9.62 (1H, s).

【0436】

C) エチル 2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボキシラート
tert-ブチル (2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-カルバモチオイルピロリジン-1-カルボキシラート(120 g)、ブロモピルビン酸エチル(83.5 g)およびエタノール(2 L)の混合物を60 ℃で3時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣にTHF (1 L)、水 (1 L)および 炭酸水素ナトリウム(90.0 g)を加えて0 ℃に冷却し、二炭酸ジ-tert-ブチル(156 g)を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮後、酢酸エチルで希釈し、水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(72.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺433.2.

【0437】

D) 2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボン酸
エチル 2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボキシラート(72.0 g)、1N 水酸化ナトリウム水溶液(332 mL)およびメタノール(1 L)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物に0 ℃で0.33 Nクエン酸水溶液を加えてpHを6に調整した後、濃縮し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去し、標題化合物(59.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺405.1.

【0438】

E) (2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)(4-フルオロフェニル)メタノン
2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-1-(tert-ブトキシカルボニル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-カルボン酸(59.0 g)、DIPEA (75.5 g)、HOBt (39.5 g)、WSC (56.0 g)およびDMF (500 mL)の混合物を0 ℃で30分間撹拌し、N,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(29.1 g)を0 ℃で加えた。室温で終夜撹拌し、水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を5% 炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(45.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺448.2.

【0439】

F) tert-ブチル (2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート
(2-((2S,4R)-4-(ベンジルオキシ)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)(4-フルオロフェニル)メタノン(45.0 g)のTHF(1 L)溶液に室温で1Mブロモ(4-フルオロフェニル)マグネシウムTHF溶液(303 mL)を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、0 ℃で水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(32.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺483.0.

【0440】

G) (2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)(4-フルオロフェニル)メタノン一塩酸塩
tert-ブチル (2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-カルボキシラート(32.0 g)の酢酸エチル(100 mL)溶液に4N塩化水素酢酸エチル溶液(166 mL)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、標題化合物(20.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺383.1.

【0441】

H) tert-ブチル((1S)-2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)カルバマート
(2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)(4-フルオロフェニル)メタノン一塩酸塩(20.0 g)、(2S)-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)(シクロヘキシル)酢酸(14.7 g)、DIPEA (18.5 g)、HOBt (9.67 g)、WSC (13.7 g)およびジクロロメタン (500 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を0.5N 塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(20.1 g)を得た。
MS: [M+H]⁺622.3.

【0442】

I) (2S)-2-アミノ-1-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-シクロヘキシルエタノン一塩酸塩
tert-ブチル((1S)-2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)カルバマート(15.0 g)および4N塩化水素酢酸エチル溶液(100 mL)を加え、室温で2日間撹拌した。析出物をろ取、酢酸エチルで洗浄後、乾燥し、標題化合物(12.5 g)を得た。
MS: [M+H]⁺522.2.

【0443】

J) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
(2S)-2-アミノ-1-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-シクロヘキシルエタノン一塩酸塩(15.0 g)、N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニン(7.03 g)、DIPEA (11.2 g)、HOBt (8.90 g)、WSC (6.63 g)およびジクロロメタン (200 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を0.5N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(15.1 g)を得た。
MS: [M+H]⁺707.0.

【0444】

K) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S,4S)-4-(ベンジルオキシ)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート(13.0 g)、メタンスルホン酸(50.0 g)およびジクロロメタン(200 mL)の混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて中和し、ジクロロメタンで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をTHF (200 mL)に溶解し、二炭酸ジ-tert-ブチル(12.0 g)と 飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(100 mL)を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌し、酢酸エチルで抽出した。抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(10.0 g)を得た。
MS: [M+H]⁺617.3.

【0445】

L) S-((3R,5S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル) エタンチオアート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート(1.80 g)、トリエチルアミン(590 mg)およびジクロロメタン(50 mL)の混合物にメタンスルホニルクロリド(669 mg)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物に10% 炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣、チオ酢酸カリウム(1.67 g)およびDMF (30 mL)の混合物を40 ℃で終夜撹拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)にて精製し、標題化合物(901 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺675.3.

【0446】

M) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4R)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
S-((3R,5S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)-5-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-3-イル) エタンチオアート (200 mg)、2-(2-(2-(2-ヨードエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (240 mg)、炭酸カリウム (82 mg)および メタノール(6mL)の混合物を室温で、終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (214 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ -0.05-0.04 (9H, m), 0.85-1.39 (14H, m), 1.49 (9H, s), 1.59-1.79 (6H, m), 2.19-2.36 (1H, m, J = 11.6 Hz), 2.40-2.55 (2H, m), 2.72-2.86 (6H, m), 2.92-3.18 (3H, m), 3.52-4.38 (21H, m), 4.52-4.76 (2H, m), 5.09 (1H, s), 5.24 (1H, s), 5.62 (1H, d, J = 5.8 Hz), 6.45-7.22 (15H, m), 8.20 (1H, s), 8.24-8.36 (2H, m).

【0447】

N) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4R)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4R)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)スルファニル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (214 mg)、6N塩酸 (4 mL)およびTHF (4 mL)の混合物を、室温で終夜 撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (118 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.80-1.35 (13H, m), 1.46-1.84 (6H, m), 2.19-2.84 (9H, m), 2.87-3.22 (4H, m), 3.42-4.06 (16H, m), 4.10-4.39 (4H, m), 4.52 (1H, d, J = 7.6 Hz), 5.43-5.75 (1H, m), 6.33-7.31 (15H, m), 8.14-8.39 (3H, m).

【0448】

実施例４７
N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-(3-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)フェノキシ)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0449】

A) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-(3-ヒドロキシフェノキシ)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4R)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-ヒドロキシピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (300 mg)、トリフェニルホスフィン (255 mg)、3-ヒドロキシフェニル ベンゾアート (208 mg)とTHF (10 mL)の混合物にジイソプロピル アゾジカルボキシラート (0.51 mL)を室温で加えた。混合物を室温で 2時間、撹拌後、反応液を濃縮した。得られた残渣とメタノール (10 mL)の混合物に2N 水酸化ナトリウム水溶液 (0.49 mL) を室温で加えた。混合物を室温で終夜 撹拌した。混合物を10%クエン酸水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (164 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺709.3.

【0450】

B) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-(3-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)フェノキシ)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-(3-ヒドロキシフェノキシ)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (164 mg), 2-(2-(2-(2-ヨードエトキシ)エトキシ)エトキシ)-N-メチル-N-(2-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)エチル)アセトアミド (205 mg), 炭酸カリウム (96 mg) および DMF (3 mL) の混合物を 60 ℃ で、終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (288 mg) を得た。
MS: [M+H]⁺1384.7.

【0451】

C) N-((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-(3-((14-(4-((1-(E/Z))-1-(4-ヒドロキシフェニル)-2-フェニルブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-12-メチル-11-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)フェノキシ)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S,4S)-2-(4-(4-フルオロベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)-4-(3-((12-メチル-11-オキソ-14-(4-((1-(E/Z))-2-フェニル-1-(4-((2-(トリメチルシリル)エトキシ)メトキシ)フェニル)ブタ-1-エン-1-イル)フェノキシ)-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)フェノキシ)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (288 mg)、6N塩酸 (4 mL) および THF (4 mL) の混合物を室温で終夜、撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (94 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.82-0.95 (3H, m), 1.00-1.41 (9H, m), 1.49-2.03 (6H, m), 2.17-2.67 (6H, m), 2.79-3.24 (5H, m), 3.50-4.40 (20H, m), 4.57 (1H, d, J = 6.4 Hz), 4.86-4.91 (1H, m), 5.06-5.26 (1H, m), 5.47-5.74 (1H, m, J = 8.8 Hz), 6.03-7.20 (19H, m), 7.88-8.09 (2H, m, J = 8.3, 5.7 Hz), 8.29-8.37 (1H, m).

【0452】

実施例４９
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0453】

A) 14-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート
4-(4-シアノフェニル)-1-(4-ヒドロキシベンジル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-3-カルボニトリル (213 mg)、3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1,14-ジイル ビス(4-メチルベンゼンスルホナート) (0.85 mL)、炭酸カリウム (124 mg)、無水DMF (3 mL)の混合物を50 ℃で16時間撹拌した。反応液を0 ℃で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (208 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺702.4.

【0454】

B) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
14-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (205 mg)、tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (195 mg)、無水DMF (2 mL)の混合物に炭酸カリウム (55.5 mg)を加え、50 ℃で24時間撹拌した。反応液を0 ℃で水に加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン、メタノール/酢酸エチル) 、シリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (220 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1128.7.

【0455】

C) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-(4-((3-シアノ-4-(4-シアノフェニル)-2,5-ジメチル-1H-ピロール-1-イル)メチル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (220 mg)とTFA (1 mL)の混合物を室温で15分間撹拌した。混合物に0 ℃で飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルとTHFの混合溶媒で抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (181 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.99-1.26 (8H, m), 1.54-1.82 (6H, m), 2.06-2.41 (13H, m), 3.14 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.59-3.71 (12H, m), 3.76-4.03 (6H, m), 4.07 (2H, dd, J = 5.5, 3.7 Hz), 4.17 (2H, dd, J = 5.4, 3.8 Hz), 4.49-4.59 (1H, m), 5.14 (2H, s), 5.43-5.65 (1H, m), 6.88-6.93 (4H, m), 7.17-7.23 (1H, m), 7.37-7.44 (1H, m), 7.53-7.59 (2H, m), 7.67-7.73 (2H, m), 7.73-7.80 (2H, m), 8.27-8.31 (1H, m).

【0456】

実施例５０
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-13-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
A) ((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)酢酸
(S)-tert-ブチル 2-(4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)アセタート(70 mg)とTFA(10 mL)の混合物を0℃で1時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮した。得られた固体をエーテル/ヘキサンから結晶化し、標題化合物 (49 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺401.2.

【0457】

B) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-13-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (342 mg)および28%アンモニア水 (3 mL)およびエタノール (3 mL)の混合物を100 ℃で20分間マイクロウェーブ照射した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣、((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)酢酸 (148 mg)、DIPEA (0.13 mL)とアセトニトリル (3 mL)の混合物にHATU (280 mg)を室温で加えた。室温で 1時間撹拌後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣シリカゲルカラムクロマトグラフィー(NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (211 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1156.3.

【0458】

C) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-13-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((14-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-13-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザテトラデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (211 mg)、6 N塩酸(2 mL)およびTHF(6 mL)の混合物を、室温で5時間撹拌した。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (121 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 1.23 (9H, d, J = 6.9 Hz), 1.51-1.84 (9H, m), 2.03-2.38 (6H, m), 2.43 (3H, s), 2.68 (3H, s), 3.15 (1H, q, J = 6.8 Hz), 3.37-3.76 (14H, m), 3.82-4.04 (4H, m), 4.13-4.24 (2H, m), 4.51-4.66 (2H, m), 5.47 (1H, dd, J = 7.6, 3.3 Hz), 7.18 (1H, dd, J = 8.2, 1.7 Hz), 7.34-7.48 (5H, m), 7.63-7.73 (2H, m), 8.30 (1H, s).

【0459】

実施例５１
N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((17-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-16-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド

【0460】

A) 14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート(0.90 g)、3,6,9,12-テトラオキサテトラデカン-1,14-ジイル ビス(4-メチルベンゼンスルホナート) (1.65 g)と炭酸カリウム (0.42 g)の混合物を50 ℃で終夜撹拌した。混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (0.80 g)を得た。
MS: [M+H]⁺973.3.

【0461】

B) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((17-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-16-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
14-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)-3,6,9,12-テトラオキサテトラデカ-1-イル 4-メチルベンゼンスルホナート (390 mg)および28%アンモニア水 (3 mL)およびエタノール (3 mL)の混合物を100 ℃で20分間マイクロウェーブ照射した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣、((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)酢酸 (160 mg)、DIPEA (0.14 mL)とアセトニトリル (3 mL)の混合物にHATU (305 mg)を室温で加えた。室温で 1時間撹拌後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣シリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (307 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺1200.3.

【0462】

C) N-((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((17-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-16-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)-N²-メチル-L-アラニンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-((17-((6S)-4-(4-クロロフェニル)-2,3,9-トリメチル-6H-チエノ[3,2-f][1,2,4]トリアゾロ[4,3-a][1,4]ジアゼピン-6-イル)-16-オキソ-3,6,9,12-テトラオキサ-15-アザヘプタデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (307 mg)とトリフルオロ酢酸(2.96 g)の混合物を、室温で1時間撹拌した。反応液を濃縮した。得られた残渣を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をHPLC (L-Column 2 ODS, 移動相：水/アセトニトリル（0.1％ TFA含有系）)で精製した。得られた画分に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離して、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮し、標題化合物 (66 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.93-1.36 (9H, m), 1.45-1.84 (9H, m), 2.05-2.51 (7H, m), 2.68 (3H, brs), 3.07-3.60 (19H, m), 3.66-4.24 (8H, m), 4.46-4.69 (2H, m), 5.47 (1H, d, J = 3.8 Hz), 7.20 (1H, d, J = 7.2 Hz), 7.42 (5H, d, J = 8.9 Hz), 7.68 (2H, brs), 8.31 (1H, brs).

【0463】

実施例５２
N-(2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)-7-((4-((3,5-ジクロロピリジン-4-イル)アミノ)-7-メトキシ-2-オキソ-2H-クロメン-8-イル)オキシ)ヘプタンアミド

【0464】

A) tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((19-((4-((3,5-ジクロロピリジン-4-イル)アミノ)-7-メトキシ-2-オキソ-2H-クロメン-8-イル)オキシ)-13-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザノナデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (68 mg)および28%アンモニア水溶液 (1.5 mL)およびエタノール (1.5 mL)の混合物を100 ℃で20分間マイクロウェーブ照射した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣、7-((4-((3,5-ジクロロピリジン-4-イル)アミノ)-7-メトキシ-2-オキソ-2H-クロメン-8-イル)オキシ)ヘプタン酸 (35 mg)、HATU (42 mg)とアセトニトリル (3 mL)の混合物にDIPEA (0.02 mL)を室温で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (61 mg)を得た。
上記7-((4-((3,5-ジクロロピリジン-4-イル)アミノ)-7-メトキシ-2-オキソ-2H-クロメン-8-イル)オキシ)ヘプタン酸は自体公知の方法(例えば、バイオオーガニック アンド メディシナル ケミストリー レターズ (Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters) 2010, 20, 2928-2932に記載された方法)で合成することができる。
MS: [M+H]⁺1258.1.

【0465】

B) N-(2-(2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)-7-((4-((3,5-ジクロロピリジン-4-イル)アミノ)-7-メトキシ-2-オキソ-2H-クロメン-8-イル)オキシ)ヘプタンアミド
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-((19-((4-((3,5-ジクロロピリジン-4-イル)アミノ)-7-メトキシ-2-オキソ-2H-クロメン-8-イル)オキシ)-13-オキソ-3,6,9-トリオキサ-12-アザノナデカ-1-イル)オキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (61 mg)とTFA (3 mL)の混合物を、室温で30分間撹拌した。反応液を濃縮した後、得られた残渣を酢酸エチル−2-プロパノール(4:1)に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣を残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (38 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.96-1.29 (9H, m), 1.34-1.45 (2H, m), 1.46-1.87 (13H, m), 2.31 (9H, s), 3.08-3.24 (1H, m), 3.46-3.74 (11H, m), 3.77-4.00 (7H, m), 4.06 (2H, t, J = 6.4 Hz), 4.19 (2H, dd, J = 5.2, 4.0 Hz), 4.55 (1H, d, J = 7.2 Hz), 5.47 (1H, dd, J = 7.7, 3.3 Hz), 7.13 (1H, d, J = 9.2 Hz), 7.17-7.24 (1H, m), 7.41 (1H, t, J = 8.2 Hz), 7.66-7.75 (2H, m), 7.82 (1H, d, J = 9.1 Hz), 8.30 (1H, s), 8.67 (2H, s).

【0466】

実施例５３
N-(4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)-6-(3-((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)カルバモイル)ピロリジン-1-イル)-5-(1H-ピラゾール-5-イル)ニコチンアミド

【0467】

A) 2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート
tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-1-シクロヘキシル-2-((2S)-2-(4-(3-ヒドロキシベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (299 mg)、エタン-1,2-ジイルビス(オキシエタン-2,1-ジイル) ビス(4-メチルベンゼンスルホナート) (1.38 g)、炭酸カリウム (111 mg)とDMF (3 mL)の混合物を50 ℃で終夜撹拌した。混合物を室温に戻した後、酢酸エチルで希釈した。5%炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/ヘキサン) で精製し、標題化合物 (336 mg)を得た。
MS: [M+H]⁺885.6.

【0468】

B) 5-ブロモ-6-クロロ-N-(4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)ニコチンアミド
5-ブロモ-6-クロロ-ピリジン-3-カルボン酸(20.0 g)とトルエン(175 mL)の懸濁液にDMF(26 mL)と塩化チオニル(30.2 g)を滴下した。混合物を80 ℃で2時間撹拌した後、減圧下50 ℃で濃縮した。得られた残渣をTHF(160 mL)とDIPEA (21.9 g)に溶解した後、4-[クロロ(ジフルオロ)メトキシ]アニリン(18.0 g)のTHF(160 mL)溶液を-15 ℃で30分かけて滴下した。混合物を室温で1時間撹拌した後、減圧下50 ℃で濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解させ、1N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル/石油エーテル) で精製し、標題化合物 (9.3 g)を得た。
MS: [M+H]⁺410.9, 412.9.

【0469】

C) メチル 1-(3-ブロモ-5-((4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)カルバモイル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボキシラート
5-ブロモ-6-クロロ-N-(4-(クロロジフルオロメトキシ)フェニル)ニコチンアミド(5.0 g)と2-プロパノール (24 mL)の混合物にDIPEA (7.8 g)とメチル ピロリジン-3-カルボキシラート塩酸塩 (2.6 g)を室温で加え、封管した。混合物を130 ℃にて10時間撹拌した。反応混合物を室温に戻した後、氷水に注ぎ、1N塩酸でpHを5-6に調整した。水層を酢酸エチルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)で精製して標題化合物 (4.0 g)を得た。
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 2.18-2.32 (2H, m), 3.10-3.23 (1H, m), 3.75 (3H, s), 3.82-3.96 (2H, m), 3.99-4.06 (2H, m), 7.19-7.25 (2H, m), 7.63-7.69 (2H, m), 8.02 (1H, s), 8.16 (1H, d, J = 2.0 Hz), 8.55 (1H, s).

【0470】

D) メチル 1-(5-((4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)カルバモイル)-3-(1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-ピラゾール-5-イル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボキシラート
メチル 1-(3-ブロモ-5-((4-(クロロジフルオロメトキシ)フェニル)カルバモイル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボキシラート (4.0 g)、1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-5-(4,4,5,5-テトラメチル-1,3,2-ジオキサボロラン-2-イル)-1H-ピラゾール (3.3 g)、水 (10 mL)とTHF (100 mL)の混合物にリン酸三カリウム (3.4 g)とクロロ(2-ジシクロヘキシルホスフィノ-2',4',6'-トリイソプロピル-1,1'-ビフェニル)[2-(2'-アミノ-1,1'-ビフェニル)]パラジウム(II) (623 mg)を窒素雰囲気下、室温で一度に加えた。混合物を100 ℃で16時間撹拌した後、減圧下50 ℃で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル/石油エーテル)で精製して標題化合物 (4.2 g)を得た。
MS: [M+H]⁺ 576.1.

【0471】

E) 1-(5-((4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)カルバモイル)-3-(1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-ピラゾール-5-イル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボン酸
メチル 1-(5-((4-(クロロジフルオロメトキシ)フェニル)カルバモイル)-3-(1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-ピラゾール-5-イル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボキシラート(4.0 g)、メタノール(100 mL)、水(10 mL)の混合物に、水酸化リチウム一水和物(874 mg)を室温で一度に加えた。室温で16時間撹拌した後、減圧下50 ℃で濃縮した。残渣を氷水に注ぎ、50%クエン酸水溶液でpHを6-7に調整した。水層を酢酸エチルで抽出し、得られた有機層を飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣をHPLC (Phenomenex Gemini, 移動相：水/アセトニトリル（0.05%アンモニア含有系)) で精製して、標題化合物 (4.0 g) を得た。
MS: [M+H]⁺562.2.

【0472】

F) tert-ブチル ((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(((1-(5-((4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)カルバモイル)-3-(1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-ピラゾール-5-イル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルボニル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート
2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)-N-メチル-L-アラニル)アミノ)-2-シクロヘキシルアセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル 4-メチルベンゼンスルホナート (70 mg)および28%アンモニア水溶液 (1.5 mL)およびエタノール (1.5 mL)の混合物を100 ℃で20分間マイクロウェーブ照射した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。得られた残渣、1-(5-((4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)カルバモイル)-3-(1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-ピラゾール-5-イル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-カルボン酸 (44 mg)、HATU (45 mg)とアセトニトリル (3 mL)の混合物にDIPEA (0.02 mL)を室温で加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。混合物に室温で水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (40 mg)を得た。
MS: [M+Na]⁺1295.4.

【0473】

G) N-(4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)-6-(3-((2-(2-(2-(3-((2-((2S)-1-((2S)-2-シクロヘキシル-2-((N-メチル-L-アラニル)アミノ)アセチル)ピロリジン-2-イル)-1,3-チアゾール-4-イル)カルボニル)フェノキシ)エトキシ)エトキシ)エチル)カルバモイル)ピロリジン-1-イル)-5-(1H-ピラゾール-5-イル)ニコチンアミド
tert-ブチル((2S)-1-(((1S)-2-((2S)-2-(4-(3-(2-(2-(2-(((1-(5-((4-(クロロ(ジフルオロ)メトキシ)フェニル)カルバモイル)-3-(1-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)-1H-ピラゾール-5-イル)ピリジン-2-イル)ピロリジン-3-イル)カルボニル)アミノ)エトキシ)エトキシ)エトキシ)ベンゾイル)-1,3-チアゾール-2-イル)ピロリジン-1-イル)-1-シクロヘキシル-2-オキソエチル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)メチルカルバマート (40 mg)とTFA (1 mL)の混合物を、室温で30分間撹拌した。反応液を濃縮した後、得られた残渣を酢酸エチル−2-プロパノール(4:1)に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (NH、メタノール/酢酸エチル) で精製し、標題化合物 (17 mg)を得た。
¹H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 0.84-1.19 (5H, m), 1.22 (3H, d, J = 6.8 Hz), 1.48-1.85 (7H, m), 2.02-2.42 (8H, m), 2.82-2.97 (1H, m), 3.13 (1H, q, J = 6.9 Hz), 3.21-3.29 (1H, m), 3.35 (3H, d, J = 5.7 Hz), 3.44 (2H, d, J = 7.9 Hz), 3.49-3.57 (2H, m), 3.58-3.66 (2H, m), 3.68-3.78 (2H, m), 3.84-4.02 (4H, m), 4.17-4.26 (2H, m), 4.55 (1H, d, J = 7.2 Hz), 5.46 (1H, dd, J = 7.7, 3.3 Hz), 6.43 (1H, d, J = 2.1 Hz), 7.17-7.31 (3H, m), 7.36-7.46 (1H, m), 7.65-7.82 (5H, m), 8.04 (1H, d, J = 2.5 Hz), 8.29 (1H, s), 8.70 (1H, d, J = 2.5 Hz).

【0474】

上記の実施例に示した方法、またはそれらに準じた方法に従って、以下の表中の実施例3〜6、10、17、18、24、26、30、32、38〜40、48の化合物を製造した。実施例化合物を以下の表に示す。表中のMSは実測値を示す。

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

【表1-5】

【表1-6】

【表1-7】

【表1-8】

【表1-9】

【表1-10】

【表1-11】

【表1-12】

【表1-13】

【表1-14】

【表1-15】

【表1-16】

【表1-17】

【表1-18】

【0475】

（試験例１：In vitroにおける標的タンパクの分解誘導活性）
実施例化合物のIn vitroにおける標的タンパクの分解誘導活性は以下の試験にて評価した。
［評価方法］
(A) MCF-7細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞をDMSOコントロールと実施例33に示す化合物（本明細書中、SNIPER(ER)-087と称することがある）（1、3、10、30、100、300、1000もしくは3000 nM）で処理し、6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値で表記した。3回の独立した実験の結果を棒グラフに示した（図１Ａ）。
(B) 6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞をDMSOコントロール、SNIPER化合物（具体的には、SNIPER(ER)-087および実施例34に示す化合物（本明細書中、SNIPER(ER)-088と称することがある））（10もしくは100 nM）もしくはLCL161誘導体と4-OHTの混合（各100 nM）で処理し、1、3、6、24、48もしくは72時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した（図１Ｂ）。
(C) 6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞をDMSOコントロール、SNIPER化合物（具体的には、SNIPER(ER)-087、SNIPER(ER)-088および実施例35に示す化合物（本明細書中、SNIPER(ER)-089と称することがある））（3、10、 30もしくは100 nM）もしくはLCL161誘導体と4-OHTの混合（各3、10もしくは30 nM）で処理し、6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した（図１Ｃ）。
(D) T47D細胞、ZR75-1細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したT47D細胞、ZR75-1細胞をDMSOコントロールもしくはSNIPER(ER)-087（10もしくは100 nM）で処理し、3時間もしくは6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー(pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、cIAP1（R&D systems #AF8181）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した（図１Ｄ）。

【0476】

［結果］
ERαを発現しているヒト乳がん細胞MCF-7を様々な化合物濃度で6時間処理し、ERαタンパク量をウエスタンブロッティング法により分析することで活性評価を行ったところ、実施例33で示す化合物は最小有効濃度3 nMでERαタンパク質量を効果的に減少させた（図1A）。実施例33で示す化合物のポリエチレングリコール（PEG）リンカーの長さを変えた実施例34で示す化合物、実施例35で示す化合物を合成し、KD活性を比較したところ、SNIPER(ER)-088はSNIPER(ER)-087と同等のKD活性を示したが、PEGユニットが一つ少ない実施例35で示す化合物ではKD活性が減弱した（図1C）。実施例33で示す化合物、実施例34で示す化合物のKD活性は化合物処理後1時間より認められ、48時間まで効果が持続した（図1B）。また、ERリガンド(4-OHT)、IAPリガンド(LCL161誘導体)を混合して処理したときには、ERα量の減少が見られなかったことから、両リガンドをリンカーで繋ぐことがKD活性には重要であることが示唆された（図1B、1C）。MCF-7とは異なるヒト乳癌細胞T-47DやZR75-1においても同様に実施例33で示す化合物によるKD効果が確認された（図1D）。

【0477】

（試験例２：In vitro標的タンパク低下作用評価）
実施例化合物のIn vitroにおける標的タンパク分解活性は以下のように測定した。
1. ＢＣＲ−ＡＢＬタンパク低下作用評価法
K562細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したK562細胞をDMSOコントロールとSNIPER化合物（1、3、10、30、100、300、1000、3000もしくは10000 nM）で処理し、4、6もしくは24時間培養した。細胞を回収し、Triton X-100 溶解バッファー (pH 7.5の0.1 M Tris-HCl、150 nM NaCl、0.5% Triton X-100、1 x 完全プロテアーゼインヒビターカクテル (Roche)) で溶解、もしくはSDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解後直ちに10分間ボイルした。細胞抽出液を清澄するために、20,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ABL（Cell Signaling #2862）、GAPDH (Santa Cruz sc-25778)、β-チューブリン（Abcam ab6046）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、BCR-ABLの値を内部標準であるGAPDH、β-チューブリンもしくはβ-アクチンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値で評価した（表２−１および表２−２）。

【0478】

2. ARタンパク低下作用評価法
22Rv1細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種した22Rv1細胞をDMSOコントロールとSNIPER化合物（1、3、10、30、100、300、1000、3000、10000もしくは30000 nM）で処理し、6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー(pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、AR（Cell Signaling #5153）、GAPDH (Santa Cruz sc-25778)もしくはβ-チューブリン（Abcam ab6046）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ARの値を内部標準であるGAPDHもしくはβ-チューブリンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値で評価した（表２−１および表２−２）。

【0479】

3. ERタンパク低下作用評価法
MCF-7細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞をDMSOコントロールとSNIPER化合物（1、3、10、30、100、300、1000もしくは3000 nM）で処理し、3、4、6、24もしくは48時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー(pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値で評価した（表２−１および表２−２）。

【0480】

4. BRD4タンパク低下作用評価法
LNCaP細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma）を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したLNCaP細胞をDMSOコントロールとSNIPER化合物（3、10、30、100、300もしくは1000 nM）で処理し、6もしくは24時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、BRD4（Cell Signaling #13440）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、BRD4の値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値で評価した（表２−２）。

【0481】

5. PDE4タンパク低下作用評価法
HT1080細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたDMEM（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したHT1080細胞をDMSOコントロールとSNIPER化合物（1, 3、10、30、100、300もしくは1000 nM）で処理し、6もしくは24時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、PDE4（Santa Cruz #sc-25810）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、PDE4の値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値で評価した（表２−２）。

【0482】

【表2-1】

【表2-2】

【0483】

（試験例３：分子メカニズム−ユビキチン-プロテアソーム系依存性試験）
［試験方法］
(A) 6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞を10 μMのMG132の存在下、非存在下において、DMSOコントロール、SNIPER(ER)-087（100 nM）もしくはLCL161誘導体と4-OHTの混合（各100 nM）で処理し6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した（図２Ａ）。
(B) 3.5 cm ガラスボトムディッシュに播種したMCF-7細胞を10 μMのMG132の存在下、非存在下において、DMSOコントロールもしくは100 nM のSNIPER(ER)-087で処理し3時間培養した。細胞を氷上にて100%メタノールで固定し、PBSで4回洗浄後、3% BSA、0.1％Triton X-100を含むPBSで1時間室温にてブロッキングし、以下に記す免疫染色（スタンダードプロトコール）で解析した。ERα（Cell Signaling #8644）もしくはα-チューブリン（Sigma #T-5168）に対する抗体を1次抗体として2時間、Alexa Fluor 488-コンジュゲート抗ウサギIgGもしくはAlexa Fluor 568-コンジュゲート抗マウスIgGを2次抗体としてHoechst33342と共に1時間処理した。蛍光イメージはBZ-9000（Keyence）にて解析した（図２Ｂ）。
(C) 10 cm ディッシュに播種したMCF-7細胞に、リポフェクタミン 2000（Life Technologies）を用いてpcDNA3-HA-ubiquitin発現プラスミドをスタンダードプロトコールにて一過性にトランスフェクションした。24時間後、細胞を10 μM のMG132存在下で、DMSOコントロール、SNIPER(ER)-087（10もしくは100 nM）、フルベストラント（10もしくは100 nM）もしくはLCL161誘導体と4-OHTの混合（各100 nM）で処理し3時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清を0.1 M Tris-HCl（pH 7.5）で10倍量に希釈し、anti-HA アガロースコンジュゲートビーズ（Sigma #E6779）で免疫沈降した。沈降物をIP 溶解バッファー（pH 7.4の10 mM Hepes , 142.5 mM KCl, 5 mM MgCl₂, 1 mM EGTA 及び 0.1% Triton X-100）で4回洗浄後、沈降物（IP）と全細胞抽出物（total lysate）をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した（図２Ｃ）。
(D) 6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞をボルテゾミブ（10 μM）、MLN7243（1 μM）もしくはMLN4924（1もしくは10 μM）の存在下、非存在下において、DMSOコントロールもしくはSNIPER(ER)-087（30 nM）で処理し6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値（残存率）で表記した（図２Ｄ）。

【0484】

［結果］
SNIPER(ER)-087によるERαタンパク質の減少がユビキチン-プロテアソーム系（UPS）による分解を介しているか調べるために、UPS阻害剤共処理の影響を検討した。プロテアソーム阻害剤であるMG132存在下では、SNIPER(ER)-087によるERαの減少が完全に阻害されることがウエスタンブロッティングや蛍光免疫染色法により示された（図2A、2B）。また、別のプロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブやユビキチン活性化酵素(UAE)阻害剤であるMLN7243で処理したときにも、同様の結果が得られたことから、SNIPER(ER)-087はUPS依存的にERαを分解していることが示唆された（図2D）。NEDD8活性化酵素(NAE)阻害剤であるMLN4924で処理したときにはSNIPER(ER)-087によるERαの分解に影響がなかったことから、カリンベースユビキチンリガーゼ（cullin-based ubiquitin ligases）はこの分解に関与しない（図2D）。次に、ユビキチン化アッセイを行った。HAタグで標識したユビキチン遺伝子をトランスフェクションしたMCF-7細胞に、MG132存在下でSNIPER(ER)-087もしくはコントロール化合物を処理し、HA（ユビキチン）に対する抗体で免疫沈降した後、ユビキチン化されたERαをウエスタンブロッティングで検出した（図2C）。その結果、臨床承認されたERα分解誘導剤であるフルベストラントと同様にSNIPER(ER)-087は高度なERαのユビキチン化を誘導することが示された。以上の結果から、SNIPER(ER)-087はERαのユビキチン化とプロテアソームによる分解を誘導することが明らかになった。

【0485】

（試験例４：SNIPER化合物の標的選択性）
SNIPER化合物の標的選択性について検討するため、以下の試験を行った。
［試験方法］
6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞をDMSOコントロール、SNIPER(ER)-087（10 nM）もしくはシクロヘキシミド (CHX)（10 μg/ml）で処理し、0、3もしくは6時間培養した。各時間に細胞を回収し、SDS溶解バッファー(pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、MCL1（BD #559027）、p53（Santa Cruz #sc-126）、cFLIP（AdipoGen Life Science #AG-20B-0005-C100）、サイクリンB（Santa Cruz #sc-245）、サイクリンA（Santa Cruz #sc-751）、TACC3（Santa Cruz #sc-22773）、p27（BD #610242）、p21（Santa Cruz #sc-6246）、AR（Cell Signaling #5153）、AhR（Cell Signaling #13790）、VDR（Cell Signaling #12550）、CRABP2（Bethyl Laboratories #A300-809A）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した（図３）。

【0486】

［結果］
SNIPER(ER)-087の標的タンパク質（ERα）に対する選択性を検討するために、MCF-7細胞をSNIPER(ER)-087で処理したときの様々なタンパク質の発現レベルを調べた。SNIPER(ER)-087はERαの発現を減少させたが、様々な短寿命タンパク質、細胞周期依存的に分解されるタンパク質の発現量には影響を与えなかった（図3）。一方、タンパク合成阻害剤であるシクロヘキシミド（CHX）はこれらのタンパク質量を速やかに減少させた。また、SNIPER(ER)-087は別の核内受容体（AR、AhR、VDR）や別のSNIPER標的分子であるCRABP2の分解も誘導しなかった。この結果は、SNIPER(ER)-087がERαを選択的に分解できることを示唆している。

【0487】

（試験例５：分子メカニズム−利用するIAP分子の同定試験（3者複合体形成））
［試験方法］
(A) 10 cm ディッシュに播種したMCF-7細胞を10 μM のMG132の存在下で、DMSOコントロール、SNIPER(ER)-087（1、10、100 nM）もしくはLCL161誘導体と4-OHTの混合（各100 nM）で処理し3時間培養した。細胞を回収し、プロテアーゼインヒビターのカクテルを含んだIP溶解バッファー (pH 7.4の10 mM Hepes、142.5 mM KCl、5 mM MgCl₂、1 mM EGTA、及び0.1% Triton X-100)を加えて溶解した（4℃, 15分間, 回転）。細胞抽出液を清澄するために、16,000 gで10分間、4℃にて遠心分離した。上清を未処理のプロテインG-セファロースで前処理して非特異的吸着タンパク質を除去した後、ERα抗体（Santa Cruz #sc-543）とプレインキュベートしたプロテインG-セファロースにより2時間、4℃にて免疫沈降した。沈降物をIP 溶解バッファーで4回洗浄後、沈降物（IP）と全細胞抽出物（total lysate）をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、XIAP（Cell Signaling #2042）もしくはcIAP1（R&D systems #AF8181）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した（図４Ａ）。
(B) 10 cm ディッシュに播種したMCF-7細胞を10 μM のMG132存在下で、DMSOコントロールもしくは10 nM のSNIPER(ER)-087で処理し3時間培養した。細胞を回収し、プロテアーゼインヒビターのカクテルを含んだ IP溶解バッファー (pH 7.4の10 mM Hepes、142.5 mM KCl、5 mM MgCl₂、1 mM EGTA、及び0.1% Triton X-100)を加えて溶解した（4℃、15分間、回転）。細胞抽出液を清澄するために、16,000 gで10分間、4℃にて遠心分離した。上清を未処理のプロテインG-セファロースで前処理して非特異的吸着タンパク質を除去した後、XIAP抗体（MBL #M044-3）とプレインキュベートしたプロテインG-セファロースにより2時間、4℃にて免疫沈降した。沈降物をIP 溶解バッファーで4回洗浄後、沈降物（IP）をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）もしくはXIAP（Cell Signaling #2042）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した（図４Ｂ）。
(C) 10 cm ディッシュのMCF-7細胞に、リポフェクタミン RNAi MAX（Life Technologies）を用いて、陰性コントロールsiRNA（QIAGEN）、cIAP1もしくはXIAPに対するsiRNA（Life Technologies）をスタンダードプロトコールにて一過性にトランスフェクションした。42時間後、細胞を10 μM のMG132存在下で、DMSOコントロールもしくは10 nM のSNIPER(ER)-087で処理し3時間培養した。細胞を回収し、プロテアーゼインヒビターのカクテルを含んだIP溶解バッファー(pH 7.4の10 mM Hepes、142.5 mM KCl、5 mM MgCl₂、1 mM EGTA、及び0.1% Triton X-100)を加えて溶解した（4℃、15分間、回転）。細胞抽出液を清澄するために、16,000 gで10分間、4℃にて遠心分離した。上清を未処理のプロテインG-セファロースで前処理して非特異的吸着タンパク質を除去した後、ERα抗体（Santa Cruz #sc-543）とプレインキュベートしたプロテインG-セファロースにより2時間、4℃にて免疫沈降した。沈降物をIP 溶解バッファーで4回洗浄後、沈降物（IP）と全細胞抽出物（total lysate）をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、XIAP（Cell Signaling #2042）、cIAP1（R&D systems #AF8181）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した（図４Ｃ）。
使用したsiRNAの配列は試験例６(A)に記載のうち以下の通り。
human cIAP1＃2 (5′- GCUGUAGCUUUAUUCAGAAUCUGGU -3′) （配列番号２）
human XIAP＃3 (5′- CCAGAAUGGUCAGUACAAAGUUGAA -3′) （配列番号６）

【0488】

［結果］
SNIPER(ER)-087が細胞内でERαとIAPを架橋するか（3者複合体を形成するか）免疫沈降法により調べた。MCF-7細胞にMG132存在下でDMSOコントロールもしくはSNIPER(ER)-087を3時間処理した後、細胞抽出液をERαに対する抗体で免疫沈降し、共沈してくるIAPをウエスタンブロッティングにより検出した（図4A）。SNIPER(ER)-087で処理したときにのみERαとXIAPもしくはERαとcIAP1の結合が検出されたことから、これらのIAPがSNIPER(ER)-087依存的にERαと結合していることが明らかになった。一方で、これらIAPとERαの結合は4-OHTとLCL161誘導体を混合して処理したときには全く見られず、化合物による架橋が重要であることが示唆された。また、細胞内の全体量（total lysate）に対してSNIPER(ER)-087依存的にERαと共沈してくる各IAPの量を相対的に比較すると、XIAPの方がcIAP1より効率良くERαと共沈していることが分かる（図4A）。SNIPER(ER)-087によるXIAPとERαの結合はXIAPに対する抗体で免疫沈降したときにも確認された（図4B）。SNIPER(ER)-087依存的なXIAPとERαの結合量はcIAP1をsiRNAでノックダウンしても全く変化しないが、XIAPをノックダウンするとcIAP1とERαの結合量は顕著に増加したことから、通常状態ではSNIPER(ER)-087は主にXIAPとERαを架橋していることが示唆される（図4C：レーン2とレーン3及び4の比較）。

【0489】

（試験例６：分子メカニズム−利用するIAP分子の同定試験（IAPノックダウン等））
［試験方法］
(A) 6ウェルプレートのMCF-7細胞に、リポフェクタミン RNAi MAX（Life Technologies）を用いて陰性コントロール siRNA（QIAGEN）、cIAP1もしくはXIAPに対するsiRNA（Life Technologies）をスタンダードプロトコールにて一過性にトランスフェクションした。42時間後、細胞をDMSOコントロールもしくは10 nM のSNIPER(ER)-087で処理し3時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、XIAP（Cell Signaling #2042）、cIAP1（R&D systems #AF8181）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値（残存率）で表記した（図５Ａ）。
使用したsiRNAの配列は以下の通り。
human cIAP1＃1 (5′- UCUAGAGCAGUUGAAGACAUCUCUU -3′)（配列番号１）
human cIAP1＃2 (5′- GCUGUAGCUUUAUUCAGAAUCUGGU -3′) （配列番号２）
human cIAP1＃3 (5′- GGAAAUGCUGCGGCCAACAUCUUCA -3′) （配列番号３）
human XIAP＃1 (5′- ACACUGGCACGAGCAGGGUUUCUUU -3′) （配列番号４）
human XIAP＃2 (5′- GAAGGAGAUACCGUGCGGUGCUUUA -3′) （配列番号５）
human XIAP＃3 (5′- CCAGAAUGGUCAGUACAAAGUUGAA -3′) （配列番号６）
(B) 遺伝子発現レンチウイルスを用意するために、10 cm ディッシュに播種した293T細胞にレンチウイルス発現プラスミドpCSII-EF-MCS-IRES-Venus-mockもしくはpCSII-EF-MCS-IRES-Venus-XIAP siRNA#3-resistant Myc-XIAP（WT、H467A、ΔRing、各々）をパッケージングプラスミド（pCAG-HIVgp）とVSV-G-/Rev発現プラスミド（pCMV-VSV-G-RSV-Rev）と一緒にリン酸カルシウム法にてトランスフェクションした。48時間後、レンチウイルスが産生された培地を回収し、フィルターに通した。さらにPEG-itを混合した後、遠心分離することで濃縮精製した。6ウェルプレートのMCF-7細胞に、リポフェクタミン RNAi MAX（Life Technologies）を用いて陰性コントロール siRNA（QIAGEN）もしくはXIAPに対するsiRNA（Life Technologies）をスタンダードプロトコールにて一過性にトランスフェクションした。24時間後、10 μg/ml ポリブレンと混合した遺伝子発現レンチウイルス（mock、XIAP WT、XIAP H467A、XIAP ΔRing）を遠心法（2,500 rpm, 90分）でインフェクションした。45時間後、細胞をDMSOコントロールもしくは10 nM のSNIPER(ER)-087で処理し3時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、XIAP（Cell Signaling #2042）、cIAP1（R&D systems #AF8181）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値をDMSOコントロールを100とした相対値（残存率）で表記した（図５Ｂ）。
使用したsiRNAの配列は試験例６(A)に記載のうち以下の通り。
human XIAP＃3 (5′- CCAGAAUGGUCAGUACAAAGUUGAA -3′) （配列番号６）
(C) 6ウェルプレートに播種したMCF-7細胞に、10 μg/ml ポリブレンと混合した遺伝子発現レンチウイルス（mockもしくはXIAP ΔRing）を遠心法（2,500 rpm, 90分）でインフェクションした。45時間後、細胞をDMSOコントロールもしくは10 nM のSNIPER(ER)-087で処理し3時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、Myc-tag（Cell Signaling #2276）、GFP（BD #632375）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した(図５Ｃ)。
(D) 6ウェルプレートのMCF-7細胞に、リポフェクタミン RNAi MAX（Life Technologies）を用いて陰性コントロール siRNA（QIAGEN）もしくはXIAPに対するsiRNA（Life Technologies）をスタンダードプロトコールにて一過性にトランスフェクションした。42時間後、細胞をDMSOコントロール、SNIPER(ER)-087（10 nM）、フルベストラント（10 nM）もしくはβ-エストラジオール（10 nM）で処理し3時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、ERα（Cell Signaling #8644）、XIAP（Cell Signaling #2042）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した(図５Ｄ)。
使用したsiRNAの配列は試験例６(A)に記載のうち以下の通り。
human XIAP＃3 (5′- CCAGAAUGGUCAGUACAAAGUUGAA -3′) （配列番号６）

【0490】

［結果］
siRNAにより各IAPの発現を抑制し、SNIPER(ER)-087によるERαのKD効果への影響を検討したところ、XIAPの発現を抑制したときには効果的に、cIAP1を抑制しときには若干、SNIPER(ER)-087によるERαの減少が抑制された（図5A）。一方、XIAPの抑制はフルベストラントやβ-エストラジオールによるERαの分解にはほとんど影響を与えなかった（図5D）。以上の結果から、SNIPER(ER)-087によるERαの分解機構はフルベストラントやβ-エストラジオールよるERα分解機構とは異なっており、SNIPER(ER)-087依存的なERαの分解には主にXIAPが必要であることが示唆された。
XIAPの発現抑制により阻害されるSNIPER(ER)-087依存的なERαの分解は、レンチウイルス発現系により野生型XIAPの発現を復活させると回復するが、RINGドメイン機能欠失型変異体であるXIAP H467A（触媒ドメインのRing finger領域の点変異体）やXIAP ΔRing（触媒ドメインのRing finger領域を欠失した変異体）では回復しなかった（図5B）。また、XIAP ΔRingを過剰発現させるとSNIPER(ER)-087依存的なERαの分解は阻害され、XIAP ΔRingがドミナントネガティブに作用する事が示された（図5C）。以上の結果は、SNIPER(ER)-087がXIAPのRINGドメインの活性依存的にERαの分解を誘導していることを強く示唆している。

【0491】

（試験例７：In vivoにおけるノックダウン活性の評価）
［評価方法］
(A) マウスは国立医薬品食品衛生研究所の動物実験管理区域（病原フリー、12時間明暗周期）で齧歯類用食餌及び飲用水を自由摂取の環境下にて飼育し、以降全ての実験は国立医薬品食品衛生研究所において承認された動物実験等の実施に関する基本指針を遵守して実施された。17匹の6週齢メスBalb/cマウス（CLEA）をランダマイズし6グループに分けた。各グループは以下の通り。(1): ビークル処理6時間（n=3）、(2): 10 mg/kg SNIPER(ER)-087処理6時間（n=2）、(3): 30 mg/kg SNIPER(ER)-087処理6時間（n=2）、(4): ビークル処理24時間（n=4）、(5): 10 mg/kg SNIPER(ER)-087処理24時間（n=3）、(6): 30 mg/kg SNIPER(ER)-087処理24時間（n = 3）。化合物処理は腹腔内投与により行った。各投与時間後、マウスを安楽死させ解剖し、卵巣組織を切除した。卵巣組織はSDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解し、SDS-PAGEにて分離後、ERα（Santa Cruz #sc-542）、cIAP1（Enzo Life Sciences #1E1-1-10）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値のビークルコントロールの平均を100とした相対値（各グループの平均）で表記した（図６Ａ）。
(B、C) HBSSで懸濁した1x10⁷のMCF-7細胞（50 μL）を等量のマトリゲル（Corning Life Sciences）と混合し、10匹の6週齢メスBalb/cヌードマウス（CLEA）の左右乳腺脂肪帯に注入した（1カ所各100 μL, 計24カ所）。細胞接種後まもなく、β-エストラジオール溶液を頸部皮下に投与し、7日後再度同様に投与した。2回目の投与から14日後、がん移植マウスをランダマイズし５匹ずつ2グループに分け、1グループはビークル処理を、もう1グループは30 mg/kg SNIPER(ER)-087処理を腹腔内投与により行った。投与24時間後、マウスを安楽死させ解剖し、卵巣組織（n=5）及び移植がん組織（n=12）を切除した。これらの組織は各々SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解し、SDS-PAGEにて分離後、ERα（Santa Cruz #sc-542: (B)、Cell Signaling #8644: (C)）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値のビークルコントロールの平均を100とした相対値で評価した（図６Ｂおよび図６Ｃ）。

【0492】

［結果］
SNIPER(ER)-087によるin vivo KD活性の評価を行った。まず、メスのBalb/cマウスにSNIPER(ER)-087を腹腔内投与し、卵巣組織におけるERαの発現量を測定したところ、10 mg/kgもしくは30 mg/kgのSNIPER(ER)-087投与により顕著なERαの減少が確認された（図6A）。ヒトがん細胞移植モデルにおけるIn vivo KD活性を評価するために、メスのBalb/cヌードマウスの乳腺脂肪帯にMCF-7細胞を移植したゼノグラフトモデルを作製した。このモデルマウスにおいても、30 mg/kgのSNIPER(ER)-087投与により卵巣組織におけるERαの効果的な減少が見られ（図6B）、さらに生着したがん組織においても約50%のERαの減少が見られた（図6C）。以上の結果から、SNIPER(ER)-087は卵巣及び移植乳がん細胞においてin vivo KD活性を示すことが明らかになった。

【0493】

（試験例８：エストロゲンシグナル阻害活性およびin vivo抗腫瘍作用評価）
［評価方法］
(A) 24 well platesにcharcoal/dextran処理したFBSを4%含んだフェノールレッドフリーの培地で播種したMCF-7細胞に、リポフェクタミン LTX（Life Technologies）を用いて、3つタンデムに繋いだエストロゲン応答配列を含んだホタル由来ルシフェラーゼレポータープラスミドとSV40プロモーターを含んだウミシイタケ由来ルシフェラーゼコントロールプラスミドをスタンダードプロトコールにて一過性にトランスフェクションした。24時間後、charcoal/dextran処理したFBSを0.2%含んだphenol-red freeの培地にて、DMSOコントロール、SNIPER(ER)-087（1, 3、10、30、100、300, 1000 nM）もしくはβ-エストラジオール（0.1 nM）で処理した。さらに24時間後、ERα依存的な転写活性をルシフェラーゼアッセイ（スタンダードプロトコール）により測定した。細胞抽出液におけるホタルルシフェラーゼ活性の値はウミシイタケルシフェラーゼ活性の値により補正した（図７Ａ）。
(B) MDA-MB-231細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma） を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。96ウェルプレートに播種したMCF-7細胞、T47D細胞もしくはMDA-MB-231細胞に、SNIPER(ER)-087（0, 0.1, 0.3, 1, 3、10、30、100、300, 1000 nM）で処理した。72時間後、1%エタノールを含んだ0.1%クリスタルバイオレット溶液により生存細胞を15分間室温で染色した。細胞を精製水により十分に洗浄した後、1%SDS溶液にて溶解した。細胞抽出液の吸光度（600 nm）をEnVision Multilabel Plate Reader（PerkinElmer）で測定した（図７Ｂ）。
(C、D)雌性BALB/Cマウス（日本チャールス・リバー社）を6週齢で入荷し、12時間ずつの明暗サイクル下、CE-2固形飼料（日本クレア社）および給水自由摂取下で飼育した。1週間の馴化の後、SNIPER(ER)-87を10% DMSO/10% Cremophor EL/20% PEG 400/60% DWに溶解し、10 mg/kgの投与量で腹腔内投与を行った。投与0.5、1、2、4、8、24時間後に2.5-5%イソフルラン麻酔下において採血しヘパリン存在下で回収した。遠心分離後（12,000 rpm, 5 min）、血漿を回収した。回収した血漿にアセトニトリルを加え、除タンパク処理を実施した。遠心分離後、上清をLC/MS/MSに注入し、血漿中濃度を測定した。PKパラメータはモーメント解析により算出した（図７ＣおよびＤ）。
(E, F) HBSSで懸濁した1 x 10⁷のMCF-7細胞（50 μl）を等量のマトリゲル（Corning Life Sciences）と混合し、18匹の6週齢メスBalb/cヌードマウス（CLEA）の左右乳腺脂肪帯に注入した（1カ所各100 μL, 計36カ所）。細胞接種後まもなく、β-エストラジオールペレットを頸部皮下に埋め込んだ。移植したがんが生着し、 約100 mm³に到達した4日後、がん移植マウスをランダマイズし2グループに分け、1グループ（n=9）はビークル処理を、もう1グループ（n=9）は30 mg/kg SNIPER(ER)-087処理を24時間毎に腹腔内投与により14日間行った。がんのサイズを2日毎にカリパスを用いて測定し、スタンダード式（(長さx幅²)/2）で体積を算出しグラフ化した（図７Ｅ）。14日後、マウスを安楽死させ解剖し、生着増殖した移植がん組織を単離して撮影し、代表例（写真）を図に示した（図７Ｅ）。ビークル処理もしくはSNIPER(ER)-087処理の前及び14日間の投与後に各マウスの体重を測定しグラフ化した（図７Ｆ）。

【0494】

［結果］
ERαはエストロゲンによる増殖シグナルを伝達し、ERα陽性乳癌細胞の増殖に重要な役割を果たすので、エストロゲン依存的な遺伝子発現やがん増殖へのSNIPER(ER)-087の効果を試験した。SNIPER(ER)-087はエストロゲン（β-エストラジオール）によるERα依存的な転写活性化を阻害したが、この活性はERαのKD活性と良く相関しており10 nM程度から顕著な阻害活性が見られた（図7A）。また、SNIPER(ER)-087は10 nM程度からERα依存的に増殖する乳がん細胞株（MCF-7, T47D）の増殖を強く抑制したが（IC50 values: 15.6 nM in MCF7 and 9.6 nM in T47D）、ERαを発現していない乳がん細胞株（MDA-MB-231）の増殖には影響を与えなかった（図7B）。またこれらの知見のin vivoでの重要性を試験するために、MCF-7がん細胞移植マウスモデルにおけるSNIPER(ER)-087のin vivo抗腫瘍活性の評価を行った。薬物動態試験において、腹腔内投与したSNIPER(ER)-087は活性を期待できる十分な血中濃度を８時間以上維持したが、24時間以内に血液中からほぼ消失したことから（図7C, D）、連日投与（24時間毎）を行うこととした。MCF-7細胞をヌードマウスに移植し生着後、24時間毎にSNIPER(ER)-087を30 mg/kgで14日間連続投与したところ、コントロール群に比べて有意に移植がん細胞の大きさ及び重量が抑制された（図7E）。一方で、2週間のSNIPER(ER)-087投与はマウスの体重にはほとんど影響を与えず、顕著な毒性は見られなかった（図7F）。これらの結果は、SNIPER(ER)-087のERα陽性乳癌治療における有効性を示唆している。

【0495】

（試験例９：他の標的タンパク質に対するSNIPER開発へのLCL161誘導体の適用）
［評価方法］
(A、B)K562細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma）を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。LNCaP細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma）を加えたRPMI-1640（Sigma）で培養した。HT1080細胞はATCCから購入し、10% FBS（MBL）と100 μg/mL カナマイシン（Sigma）を加えたDMEM（Sigma）で培養した。6ウェルプレートに播種したK562細胞（BCR-ABL）、LNCaP細胞（BRD4）もしくはHT1080細胞（PDE4）をDMSOコントロール、実施例12に示す化合物（本明細書中、SNIPER(ABL)-038と称することがある）（1、3、10、30、100、300、1000もしくは3000 nM）、実施例50に示す化合物（本明細書中、SNIPER(BRD4)-001と称することがある）（3、10、30、100、300もしくは1000 nM）もしくは実施例52に示す化合物（本明細書中、SNIPER(PDE4)-009と称することがある）（1、3、10、30、100、300、もしくは1000 nM）で処理し、6時間(A)もしくは24時間(B)培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー (pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、c-ABL（Cell Signaling #2862）、BRD4（Cell Signaling #13440）、PDE4（Santa Cruz #sc-25810）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、BCR-ABL、BRD4もしくはPDE4の値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した。3回の独立した実験の結果を棒グラフに示した（図８ＡおよびＢ）。
(C) 6ウェルプレートに播種したK562細胞（BCR-ABL）、LNCaP細胞（BRD4）もしくはHT1080細胞（PDE4）をMG132（10 μM）もしくはMLN7243（10 μM）の存在下、非存在下において、DMSOコントロール、SNIPER(ABL)-038（30, 100 nM）、SNIPER(BRD4)-001（30, 100 nM）もしくはSNIPER(PDE4)-009（10, 30 nM）で処理し6時間培養した。細胞を回収し、SDS溶解バッファー(pH 8.0の0.1 M Tris-HCl、10%グリセロール、1% SDS)で溶解した。細胞抽出液を清澄するために、直ちに10分間ボイルし、16,000 gで10分遠心分離した。上清をSDS-PAGEにて分離し、c-ABL（Cell Signaling #2862）、BRD4（Cell Signaling #13440）、PDE4（Santa Cruz #sc-25810）もしくはβ-アクチン（Sigma #A5316）に対する抗体を用いてウエスタンブロッティング（スタンダードプロトコール）で解析した。バンド（発光強度）はLAS-3000ルミノイメージアナライザー（Fuji）で定量化し、ERαの値を内部標準であるβ-アクチンの値で補正し、補正値を、DMSOコントロールを100とした相対値で表記した（図８Ｃ）。

【0496】

［結果］
LCL161誘導体にダサチニブ、JQ-1、公知PDE4阻害薬 [(1) WO2008006051A2, (2) Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 2928-2932]リガンドを繋いだSNIPER(ABL)-038、SNIPER(BRD4)-001、SNIPER(PDE4)-009はどれも1 nM〜10 nMという低濃度域から標的タンパク質を効果的に分解するKD活性を示した（図8A、B）。また、これらのKDはMG132やMLN7243で抑制されることから、UPSを介していることが示された（図8C）。これらの結果から、LCL161誘導体は様々な標的タンパク質を分解するSNIPERの開発に有用なIAP ligandであることが示唆された。

【0497】

製剤例１
本発明化合物を有効成分として含有する医薬は、例えば、次のような処方によって製造することができる。
１．カプセル剤
（１）実施例１で得られた化合物 ４０ｍｇ
（２）ラクトース ７０ｍｇ
（３）微結晶セルロース ９ｍｇ
（４）ステアリン酸マグネシウム １ｍｇ
１カプセル １２０ｍｇ
（１）、（２）、（３）および（４）の１／２を混和した後、顆粒化する。これに残りの（４）を加えて全体をゼラチンカプセルに封入する。

【0498】

２．錠剤
（１）実施例１で得られた化合物 ４０ｍｇ
（２）ラクトース ５８ｍｇ
（３）コーンスターチ １８ｍｇ
（４）微結晶セルロース ３．５ｍｇ
（５）ステアリン酸マグネシウム ０．５ｍｇ
１錠 １２０ｍｇ
（１）、（２）、（３）、（４）の２／３および（５）の１／２を混和した後、顆粒化する。残りの（４）および（５）をこの顆粒に加えて錠剤に加圧成型する。

【0499】

製剤例２
日局注射用蒸留水５０ｍＬに実施例１で得られた化合物５０ｍｇを溶解した後、日局注射用蒸留水を加えて１００ｍＬとする。この溶液を滅菌条件下でろ過し、次にこの溶液１ｍＬずつを取り、滅菌条件下、注射用バイアルに充填し、凍結乾燥して密閉する。

【産業上の利用可能性】

【0500】

本発明化合物は、標的とする細胞内タンパク質を特異的に分解することができる。従って、標的タンパクが関与する疾患の予防又は治療に有効な薬物を提供する事が期待される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]