特許 6903577 皮膚におけるｃ−Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼの阻害の測定方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6903577

(24)【登録日】2021年6月25日

(45)【発行日】2021年7月14日

(54)【発明の名称】皮膚におけるｃ−Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼの阻害の測定方法

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/53 20060101AFI20210701BHJP

   A61K 31/505 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 25/32 20060101ALI20210701BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20210701BHJP

【ＦＩ】

   G01N33/53 Y

   A61K31/505

   A61P43/00 111

   A61P1/16

   A61P3/06

   A61P11/00

   A61P35/00

   A61P31/04

   A61P37/06

   A61P25/32

   A61P29/00

【請求項の数】14

【全頁数】37

(21)【出願番号】特願2017-532050(P2017-532050)

(86)(22)【出願日】2015年12月15日

(65)【公表番号】特表2018-500560(P2018-500560A)

(43)【公表日】2018年1月11日

(86)【国際出願番号】US2015065767

(87)【国際公開番号】WO2016100308

(87)【国際公開日】20160623

【審査請求日】2018年11月30日

(31)【優先権主張番号】62/092,531

(32)【優先日】2014年12月16日

(33)【優先権主張国】US

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】504135550

【氏名又は名称】シグナル ファーマシューティカルズ，エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100097456

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 徹

(72)【発明者】

【氏名】ゲラルド スコット バーデン ホラン

(72)【発明者】

【氏名】イング イエ

【審査官】 北条 弥作子

(56)【参考文献】

【文献】 米国特許出願公開第２０１２／０１２９８０７（ＵＳ，Ａ１）

【文献】 特表２０１４−５１４３２２（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特表２０１２−５１７４３９（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｇ０１Ｎ ３３／４８〜３３／９８

Ａ６１Ｋ ３１／３３〜３３／４４

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

患者におけるＪＮＫの阻害の評価方法であって、前記患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第１部分から得られたサンプルを使用して、前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物が前記患者に投与された後に、前記患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第２部分から得られたサンプルを使用して、前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することによって、患者におけるＪＮＫの阻害を測定することを含み、前記患者の皮膚の前記第１部分と比較した前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す、前記方法。

【請求項2】

前記皮膚を最小紅斑量（ＭＥＤ）の２倍のＵＶＢ照射に曝露する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の約２時間後に、ＵＶＢ照射への皮膚の第２部分の曝露を行う、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

ＵＶＢ照射に曝露する皮膚の部分が患者の臀部にある、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記第２の照射した皮膚のサンプルが、ＵＶＢ照射への皮膚の第２部分の曝露の約８時間後に得られたサンプルである、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量の測定が免疫組織化学分析を含み、一次抗体が前記リン酸化ｃ−Ｊｕｎに対するものであって抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体を形成し、発色酵素と結合した二次抗体とのインキュベーションにより着色して前記皮膚における前記一次抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体の場所を標示する、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

前記着色標示の主観的スコアリングまたはレーザー走査型サイトメーターを用いた定量分析をさらに含む、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

患者におけるＪＮＫの阻害の評価方法であって、
１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、
２）２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物が前記患者に投与された後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに
３）前記第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較すること、
を含み、前記第１皮膚サンプルに対する前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す、前記方法。

【請求項9】

前記皮膚サンプルの前記皮膚が最小紅斑量（ＭＥＤ）の２倍のＵＶＢ照射に曝露されている、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記第２皮膚サンプルの前記皮膚が、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の約２時間後にＵＶＢ照射で照射されている、請求項８または９に記載の方法。

【請求項11】

前記皮膚サンプルが前記患者の臀部のＵＶＢ照射で照射した皮膚の部分から得られた、請求項８〜１０のいずれかに記載の方法。

【請求項12】

前記第２皮膚サンプルが前記皮膚のＵＶＢ照射への曝露の約８時間後に得られる、請求項８〜１１のいずれかに記載の方法。

【請求項13】

皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量の測定が免疫組織化学分析を含み、一次抗体が前記リン酸化ｃ−Ｊｕｎに対して向けられ、抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体を形成し、発色酵素と結合した二次抗体でのインキュベーションにより着色して前記皮膚サンプルにおける前記一次抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体の場所を標示する、請求項８〜１２のいずれかに記載の方法。

【請求項14】

前記着色標示の主観的スコアリングまたはレーザー走査型サイトメーターを用いた定量分析をさらに含む、請求項１３に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は２０１４年１２月１６日に出願された米国仮出願第６２／０９２，５３１号の利益を主張し、その全内容を参照により本明細書に援用する。

【0002】

１．技術分野
本明細書では、免疫組織化学を用いて皮膚におけるｃ−Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）の阻害を測定する方法を提供する。さらに本明細書では、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドの用量反応関係の評価、ならびに２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドに感受性または非感受性の患者集団の特定及び選別に有用な、ＵＶＢ照射及びホスホｃ−Ｊｕｎ（またはリン酸化ｃ−Ｊｕｎ）免疫反応性の測定に基づくアッセイも提供する。

【背景技術】

【0003】

２．背景技術
異常なタンパク質リン酸化と疾患の原因または結果との間の関係が２０年間以上知られている。したがって、タンパク質キナーゼが非常に重要な薬剤標的群となっている（Ｃｏｈｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ，１：３０９−３１５（２００２），Ｇａｅｓｔｅｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１４：２２１４−２２３（２００７）；Ｇｒｉｍｍｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃ．９（１２）：９５６−９７０（２０１０）を参照）。様々なタンパク質キナーゼインヒビターが、多様な疾患、例えば癌ならびに関節リウマチ及び乾癬をはじめとした慢性炎症性疾患などの治療において臨床的に用いられている（Ｃｏｈｅｎ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２６８：５００１−５０１０（２００１）；Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ：Ｔｈｅ Ｐｒｏｍｉｓｅ ａｎｄ ｔｈｅ Ｐｒｏｂｌｅｍｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｂｅｒｌｉｎ Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ，１６７（２００５）を参照）。

【0004】

ＪＮＫは普遍的に発現されるセリン／スレオニンキナーゼであり、ＥＲＫ（細胞外調節キナーゼ）及びｐ３８とともに分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）のファミリーに属する。Ｋｙｒｉａｋｉｓ ＪＭ，Ｓｃｉ．ＳＴＫＥ（４８）：ｐｅ１（２０００）；Ｗｈｉｔｍａｒｓｈ ＡＪ，ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉ．ＳＴＫＥ（１）：ｐｅ１（１９９９）；Ｓｃｈｒａｍｅｋ Ｈ，Ｎｅｗｓ Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｓｃｉ．１７：６２−７（２００２）；Ｉｃｈｉｊｏ Ｈ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ１８（４５）：６０８７−９３（１９９９）。ＭＡＰＫは細胞表面から核へのシグナル伝達の重要な媒介物であり、リン酸化カスケードを用いて、転写因子をはじめとする選択された細胞内タンパク質のリン酸化によって、外部刺激に対して細胞による調和のとれた反応を引き起こす。加えて、ＪＮＫは非核タンパク質、例えばＩＲＳ−１及びＢｃｌ−２ファミリーメンバーもリン酸化する。Ｄａｖｉｓ ＲＪ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．９（１１）：４７０−４７３（１９９４）；Ｓｅｇｅｒ Ｒ ｅｔ ａｌ．，ＦＡＳＥＢ Ｊ．；９（９）：７２６−３５（１９９５）；Ｆａｎｇｅｒ ＧＲ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｇｅｎｅｔ．Ｄｅｖ．；７（１）：６７−７４（１９９７）。

【0005】

分裂促進因子活性化タンパク質（ＭＡＰ）キナーゼは細胞外刺激に反応した細胞核へのシグナルの伝達に関与する。ＥＲＫ、ｐ３８及びＪＮＫアイソフォームからのＭＡＰキナーゼの例としては、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ１（ＥＲＫ２）、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ８（ＪＮＫ１）、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ９（ＭＡＰＫ９またはＪＮＫ２）、分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ１０（ＭＡＰＫ１０またはＪＮＫ３）及び分裂促進因子活性化タンパク質キナーゼ１４（ＭＡＰＫ１４またはｐ３８α）が挙げられるが、これらに限定されない。ＭＡＰキナーゼは、細胞外受容体または熱ショック、浸透圧ストレス、反応性酸化種（ＲＯＳ）もしくはＵＶ照射からのシグナル伝達を媒介するプロリン指向性セリン／スレオニンキナーゼのファミリーである。Ｓｒｉｄｈａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１７：１１ １３４５−１３５３（２０００）を参照。ＭＡＰキナーゼは、ＭＫＫ及びＭＥＫＫキナーゼをはじめとする上流の二重特異性タンパク質キナーゼによるセオニン（ｔｈｅｏｎｉｎｅ）及びチロシンのリン酸化を介して活性化される。細胞増殖及び分化は複数のＭＡＰキナーゼカスケードの調節制御下にあることが証明されている。Ｓｒｉｄｈａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１７：１１ １３４５−１３５３（２０００）を参照。そのため、ＭＡＰキナーゼ経路は多くの病状において重要な役割を果たす。例えば、ＭＡＰキナーゼの活性の欠陥が異常細胞増殖及び発癌をもたらすことが証明されている。Ｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ Ｇｒｏｗｔｈ Ｄｉｆｆｅｒ．１１：１９１−２００（２０００）；及びＤａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．Ｔｒｅａｔ．４０：１４１（１９９６）を参照。さらに、ＭＡＰキナーゼ活性は、２型糖尿病及び肥満に関連するインスリン抵抗性にも関係があるとされている。Ｖｉｒｋａｍａｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１０３：９３１−９４３（１９９９）を参照。インスリン抵抗性の変化は肝臓におけるグルコース及び脂質の代謝に対して直接影響を及ぼす場合があり、肝繊維症に進行し得る脂肪症の発症の一因となる。Ｖａｌｌｅｒｉｅ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２（６０）：１−７（２０１０）を参照。

【0006】

脂肪症は、飽和または不飽和いずれかの遊離脂肪酸（ＦＦＡ）の存在下で発症し得る。ＦＦＡは肝臓における強力なＪＮＫ活性化を促進し、過剰な濃度のＦＦＡは肝細胞アポトーシスをもたらし得る。ＪＮＫ２−／−マウスは、不飽和ＦＦＡではなく飽和ＦＦＡ（例えばステアリン酸）による脂肪症及びアポトーシスから部分的に保護されることが報告されている。Ｍａｌｈｉ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１：１２０９３−１２１０１（２００６）。ＪＮＫ１−／−マウスはＦＦＡ誘発障害から保護されなかった。ＪＮＫ１及びＪＮＫ２の役割は、脂肪症から脂肪肝炎、肝線維症へと進行したＣＤＡＡ給餌マウスにおいて試験されている。Ｋｏｄａｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １３７：１４６７−１４７７（２００９）。ＪＮＫ１−／−及びＪＮＫ２−／−マウスの両方とも脂肪症を発症したが、ＪＮＫ２−／−マウスではなくＪＮＫ１−／−マウスは肝炎及び線維症への進行に著しい耐性を示した。ＪＮＫ１−／−欠失を骨髄細胞に限定したキメラマウスも同様に肝炎及び線維症に耐性があり、活性化されたクッパー細胞を脂肪症の先の疾患進行の主要な引き金として関係しているとされた。実際に、ＪＮＫ１−／−マクロファージではＬＰＳに反応したＩＬ−１、ＩＬ−６、ＴＮＦ及びＮＯの発現はなく、ＪＮＫ１−／−マウスまたはＪＮＫインヒビターＳＰ６００１２５で治療した野生型マウスに由来するクッパー細胞は、ＬＰＳに反応するＴＮＦ、ＩＬ−６及びＩＬ−１発現の減少を示す。Ｓａｎｃｈｅｚ−Ｔｉｌｌｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２８２（１７）：１２５６６−７３（２００７）；Ｋｏｄａｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １３７：１４６７−１４７７（２００９））。

【0007】

以前の試験では、特定のインヒビターを用いてまたは用いずにＵＶＢ照射に曝露した細胞内のＩＬ−１０、ＴＮＦ−α及びＮＯのレベルが以前の試験で測定されており、ｐ３８ ＭＡＰＫシグナル伝達経路の活性化を介して、ＵＶＢがこれらの炎症誘発性媒介物の産生を誘発したと考えられることを示している。Ｍｕｔｏｕ Ｙ，Ｔｓｕｋｉｍｏｔｏ Ｍ，Ｈｏｍｍａ Ｔ，Ｋｏｊｉｍａ Ｓ，Ｉｍｍｕｎｅ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｐａｔｈｗａｙｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ（ＨａＣａｔ）Ｃｅｌｌｓ ａｒｅ Ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ Ｂ ｖｉａ ｐ３８ Ｍｉｔｏｇｅｎ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ，Ｊ．Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２０１０；５６（６）：６７５−８３。加えて、ヒト皮膚のＵＶ照射後のｃ−Ｊｕｎタンパク質及びリン酸化の誘発が報告されている。Ｆｉｓｈｅｒ Ｇ，Ｔａｌｗａｒ Ｈ，Ｌｉｎ Ｊ，Ｌｉｎ Ｐ，ＭｃＰｈｉｌｌｉｐｓ Ｆ，Ｗａｎｇ Ｚ，Ｌｉ Ｘ，Ｗａｎ Ｙ，Ｋａｎｇ Ｓ，ａｎｄ Ｖｏｏｒｈｅｅｓ Ｊ，Ｒｅｔｉｎｏｉｃ Ａｃｉｄ Ｉｎｈｉｂｉｔｓ Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃ−Ｊｕｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ ｂｙ Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ Ｒａｄｉａｔｉｏｎ Ｔｈａｔ Ｏｃｃｕｒｓ Ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ Ｔｏ Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ Ｏｆ Ｍｉｔｏｇｅｎ−Ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｐａｔｈｗａｙｓ Ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ Ｉｎ Ｖｉｖｏ，Ｊ．Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．１９９８；１０１（６）：１４３２−４０及びＥｉｎｓｐａｈｒ Ｊ，Ｂｏｗｄｅｎ Ｔ，Ａｌｂｅｒｔｓ Ｄ，ＭｃＫｅｎｚｉｅ Ｎ，Ｓａｂｏｄａ Ｋ，Ｗａｒｎｅｋｅ Ｊ，Ｓａｌａｓｃｈｅ Ｓ，Ｒａｎｇｅｒ−Ｍｏｏｒｅ Ｊ，Ｌｅｗａｎｄｒｏｗｓｋｉ Ｃ，Ｎａｇｌｅ Ｒ，Ｎｉｃｋｏｌｏｆｆ Ｂ，Ｂｒｏｏｋｓ，Ｃ，Ｄｏｎｇ Ｚ，ａｎｄ Ｓｔｒａｔｔｏｎ Ｓ，Ｃｒｏｓｓ−Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｕｒｉｎｅ ＵＶ Ｓｉｇｎａｌ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ Ｐａｔｈａｗａｙｓ ｉｎ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ，Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ．Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．２００８；８４（２）：４６３−７６。

【0008】

薬剤候補の生物学的効果を評価するために臨床マーカーが必要とされている。本明細書に記載の方法は、例えば、ＪＮＫインヒビターのインビボ活性に従った、ＪＮＫインヒビター、特に経口ＪＮＫインヒビターによる治療に対する特定の患者集団の感受性を評価する直接的な手段を提供することなどによって、ＪＮＫインヒビターの生物学的効果の評価を可能とし、それゆえに臨床現場において有用である。

【0009】

本出願の第２節における任意の参照文献の引用または指定も、その参照文献が本出願の先行技術であることを認めるものと解釈されるべきではない。

【発明の概要】

【0010】

３．発明の概要
本明細書では、患者における２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物（「化合物１」）の効果の評価方法を提供し、この方法は患者の皮膚のＵＶＢ照射、化合物１の投与、及び免疫組織化学を用いた皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現の測定を含む。いくつかの実施形態において、化合物１を経口投与する。本明細書では、患者における２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物（「化合物１」）の効果の評価方法であって、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現を測定すること、２）患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含む、該方法も提供する。測定は免疫組織化学を用いた皮膚サンプルにおいて行われ得る。ＵＶＢ照射は最小紅斑量の（ＭＥＤ）２倍のものであり得る。第２皮膚サンプルの皮膚は、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の約２時間後にＵＶＢ照射で照射され得る。皮膚サンプルは患者の臀部のＵＶＢ照射で照射した皮膚の部分から得られ得る。第２皮膚サンプルは皮膚のＵＶＢ照射への曝露の約８時間後に得られ得る。皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量の測定は、免疫組織化学分析を含むことができ、一次抗体がリン酸化ｃ−Ｊｕｎに対して向けられ、抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体を形成し、発色酵素と結合した二次抗体とのインキュベーションにより着色して皮膚サンプルにおける一次抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体の場所を標示する。測定は、着色標示の主観的スコアリングまたはレーザー走査型サイトメーターを用いた定量分析をさらに含む。化合物１は経口投与され得る。

【0011】

一実施形態において、化合物１に感受性のある患者（または患者集団）の特定方法を本明細書で提供し、この方法は、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者に有効量の化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、該患者が化合物１に感受性があることを示す。化合物１に感受性のある患者（または患者集団）の特定方法も本明細書で提供し、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、該患者が化合物１に感受性があることを示す。レベルの減少は少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％以上とすることができる。

【0012】

別の実施形態では、患者の皮膚のＵＶＢ照射、化合物１の投与、及び免疫組織化学を用いた皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現の測定を含む、患者における化合物１の効果の評価方法を本明細書で提供する。患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した皮膚サンプルにおいて免疫組織化学を用いてリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現を測定することを含む、患者における化合物１の効果の評価方法も本明細書で提供する。

【0013】

別の実施形態では、患者の皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎを測定することによって患者におけるＪＮＫの阻害を評価する方法を本明細書で提供する。一実施形態において、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者に化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することによって、患者におけるＪＮＫの阻害を測定する方法を本明細書で提供するが、この方法では、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す。

【0014】

別の実施形態では、患者における化合物１の投与のための用量反応関係を決定する方法を提供する。この方法は、該患者への様々な用量（例えば約１ｍｇ〜１０００ｍｇ）の化合物１の投与と、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者にある用量の化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含む、各用量の化合物１に起因する該患者におけるＪＮＫ阻害の量の決定とを含み、該患者の皮膚の該第１部分に対する該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少がＪＮＫの阻害に比例する。化合物１の投与の用量反応関係の決定方法も本明細書で提供し、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者に様々な用量の化合物１（例えば約１ｍｇ〜１０００ｍｇ）を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少はＪＮＫの阻害に比例する。レベルの減少は少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％以上であり得る。

【0015】

他の実施形態において、患者におけるＪＮＫに関連する疾患または病態の治療または管理のための化合物１の有効量の決定方法を提供し、この方法は、該患者への様々な用量（例えば約１ｍｇ〜１０００ｍｇ）の化合物１の投与と、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者にある用量の化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含む、各用量の化合物１に起因する該患者におけるＪＮＫ阻害の量の決定とを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの５０％の減少が、有効量の化合物１の投与を示す。化合物１の有効量の決定方法も本明細書で提供し、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者に様々な用量の化合物１（例えば約１ｍｇ〜１０００ｍｇ）を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの５０％の減少が有効量の化合物１の投与を示す。

【0016】

さらに別の実施形態では、化合物１による治療に対する患者のコンプライアンスの監視方法を提供する。この方法は、患者の皮膚のサンプル中で発現したリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルを測定すること、及び対照非治療サンプルでの発現レベルと比較して、患者の皮膚のサンプルにおいて発現レベルが増加または減少しているかどうかを判定することを含み、発現の減少が、化合物１による治療に対する患者のコンプライアンスを示す。

【0017】

本明細書に提供される方法において有用なＪＮＫインヒビターは、以下：

【化1】

【0018】

（代替名２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドもしくは２−［（１，１−ジメチルエチル）アミノ］−４−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシル］アミノ］−５−ピリミジンカルボキサミドを有する）、または薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物（本明細書では「化合物１」と総称する）である。化合物１は、２０１３年１月３１日に公開された米国特許出願公開第２０１３／００２９９８７号、及び国際公開第ＷＯ２０１２／１４５５６９号に開示されており、それぞれの全内容を参照により本明細書に援用する。

【図面の簡単な説明】

【0019】

４．図面の簡単な説明

【図1】ドナー１のＨＥｋａ細胞における、５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射線によるｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３における活性化及び化合物１での阻害を示す（ウェスタンイムノブロッティングによって決定された）。

【0020】

【図2】ドナー２のＨＥｋａ細胞における、５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射線によるｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３における活性化及び化合物１での阻害を示す（ウェスタンイムノブロッティングによって決定された）。

【0021】

【図3】ドナー３のＨＥｋａ細胞における、５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射線によるｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３における活性化及び化合物１での阻害を示す（ウェスタンイムノブロッティングによって決定された）。

【0022】

【図4】ドナー４のＨＥｋａ細胞における、５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射線によるｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３における活性化及び化合物１での阻害を示す（ウェスタンイムノブロッティングによって決定された）。

【0023】

【図5】ＨＥｋａ細胞における、５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射線によって誘発されるｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３におけるリン酸化の阻害を示す。

【発明を実施するための形態】

【0024】

５．詳細な説明
５．１．定義
用語「ＪＮＫ」はＪＮＫ１、ＪＮＫ２、またはＪＮＫ３遺伝子によって発現されるタンパク質またはそのアイソフォームを意味する（Ｇｕｐｔａ，Ｓ．，Ｂａｒｒｅｔｔ，Ｔ．，Ｗｈｉｔｍａｒｓｈ，Ａ．Ｊ．，Ｃａｖａｎａｇｈ，Ｊ．，Ｓｌｕｓｓ，Ｈ．Ｋ．，Ｄｅｒｉｊａｒｄ，Ｂ．ａｎｄ Ｄａｖｉｓ，Ｒ．Ｊ．Ｔｈｅ ＥＭＢＯ Ｊ．１５：２７６０−２７７０（１９９６））。

【0025】

本明細書で用いる場合、用語「薬学的に許容可能な塩（複数可）」は、無機酸及び無機塩基ならびに有機酸及び有機塩基を含めた薬学的に許容可能な非毒性の酸または塩基から調製される塩のことをいう。式（Ｉ）の化合物の好適な薬学的に許容可能な塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム及び亜鉛から調製される金属塩、またはリシン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）及びプロカインから調製される有機塩が挙げられるが、これらに限定されない。好適な非毒性酸としては、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、Ｌ−アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、フロ酸、ガラクツロン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グリコール酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸、及びｐ−トルエンスルホン酸などの無機酸及び有機酸が挙げられるが、これらに限定されない。具体的な非毒性酸としては、塩酸、臭化水素酸、マレイン酸、リン酸、硫酸、及びメタンスルホン酸が挙げられる。したがって、具体的な塩の例としては、塩酸塩及びメシル酸塩が挙げられる。その他のものが当該技術分野において公知であり、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８^ｔｈ ｅｄｓ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ（１９９０）またはＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，１９^ｔｈ ｅｄｓ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｅａｓｔｏｎ ＰＡ（１９９５）を参照されたい。

【0026】

本明細書で用いる場合、別途示されない限り、用語「立体異性体」または「立体異性的に純粋な」は、式（Ｉ）の化合物の１つの立体異性体であって、その化合物の他の立体異性体を実質的に含まないものを意味する。例えば、１つのキラル中心を有する立体異性的に純粋な化合物は、その化合物の反対のエナンチオマーを実質的に含まないことになる。２つのキラル中心を有する立体異性的に純粋な化合物は、その化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まないことになる。典型的な立体異性的に純粋な化合物は、約８０重量％超のその化合物の１つの立体異性体及び約２０重量％未満のその化合物の他の立体異性体、約９０重量％超のその化合物の１つの立体異性体及び約１０重量％未満のその化合物の他の立体異性体、約９５重量％超のその化合物の１つの立体異性体及び約５重量％未満のその化合物の他の立体異性体、または約９７重量％超のその化合物の１つの立体異性体及び約３重量％未満のその化合物の他の立体異性体を含む。式（Ｉ）の化合物はキラル中心を有することができ、ラセミ体、個々のエナンチオマーまたはジアステレオマー、及びこれらの混合物として存在することができる。すべてのそのような異性体型が、それらの混合物を含め、本明細書に開示の実施形態の範囲内に含まれる。

【0027】

そのような式（Ｉ）の化合物の立体異性的に純粋な形態の使用及びそれらの形態の混合物の使用は、本明細書に開示の実施形態に包含される。例えば、式（Ｉ）の特定の化合物の等量または不等量のエナンチオマーを含む混合物が本明細書に開示の方法及び組成物に用いられ得る。こうした異性体は、不斉合成してもよく、またはキラルカラムもしくはキラル分割剤などの標準的な技術を用いて分割してもよい。例えば、Ｊａｃｑｕｅｓ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ（Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８１）；Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ３３：２７２５（１９７７）；Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．Ｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃａｒｂｏｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ，ＮＹ，１９６２）；及びＷｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．，Ｔａｂｌｅｓ ｏｆ Ｒｅｓｏｌｖｉｎｇ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｏｐｔｉｃａｌ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｐ．２６８（Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ，Ｅｄ．，Ｕｎｉｖ．ｏｆ Ｎｏｔｒｅ Ｄａｍｅ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｏｔｒｅ Ｄａｍｅ，ＩＮ，１９７２）を参照。

【0028】

式（Ｉ）の化合物は、Ｅ異性体及びＺ異性体またはこれらの混合物、ならびにシス及びトランス異性体またはこれらの混合物を含むことができることにも留意すべきである。ある実施形態において、式（Ｉ）の化合物はＥ異性体またはＺ異性体のいずれかとして単離されている。ある実施形態において、式（Ｉ）の化合物はＥ異性体とＺ異性体との混合物である。

【0029】

用語「互変異性体」は、互いに平衡状態にある化合物の異性体型のことをいう。異性体型の濃度は化合物が存在する環境に依存することになり、例えば化合物が固体であるか、または有機溶液もしくは水溶液中にあるかに応じて異なり得る。例えば、水溶液中では、ピラゾールは互いに互変異性体と称される以下の異性体型を示し得る。

【化2】

【0030】

化合物１は１つ以上のキラル中心を含み、エナンチオマーのラセミ混合物、ジアステレオマーの混合物または鏡像異性的もしくは光学的に純粋な化合物として存在することができる。そのような化合物の立体異性的に純粋な形態の使用及びそれらの形態の混合物の使用は、本明細書に開示の実施形態に包含される。非限定例として、化合物１の等量または不等量のエナンチオマーを含む混合物が本明細書に開示の方法及び組成物に用いられ得る。こうした異性体は、不斉合成してもよく、またはキラルカラムもしくはキラル分割剤などの標準的な技術を用いて分割してもよい。例えば、Ｊａｃｑｕｅｓ，Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ ａｎｄ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ （Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８１）；Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ３３：２７２５（１９７７）；Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．Ｌ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｃａｒｂｏｎ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（ＭｃＧｒａｗ Ｈｉｌｌ，ＮＹ，１９６２）；及びＷｉｌｅｎ，Ｓ．Ｈ．，Ｔａｂｌｅｓ ｏｆ Ｒｅｓｏｌｖｉｎｇ Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ｏｐｔｉｃａｌ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ｐ．２６８（Ｅ．Ｌ．Ｅｌｉｅｌ，Ｅｄ．，Ｕｎｉｖ．ｏｆ Ｎｏｔｒｅ Ｄａｍｅ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｏｔｒｅ Ｄａｍｅ，ＩＮ，１９７２）を参照。

【0031】

本明細書で用いる場合、用語「治療」は、障害、疾患もしくは病態の、または障害、疾患もしくは病態に関連する１つ以上の症状の全体的なまたは部分的な緩和、またはこうした症状のさらなる進行もしくは悪化の遅延もしくは停止、または障害、疾患もしくは病態の原因（複数可）そのものの緩和もしくは根治を意味する。一実施形態において、障害は肝臓線維性障害、例えば非アルコール性脂肪肝炎、脂肪症（すなわち脂肪肝）、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、肝炎、肝細胞癌、またはアルコールの慢性摂取もしくは反復摂取（アルコール性肝炎）、感染（例えばＨＣＶなどのウイルス感染）、肝臓移植、もしくは薬物性肝障害（例えばアセトアミノフェン中毒）に伴う肝繊維症などである。いくつかの実施形態において、「治療」は、肝臓線維性障害、例えば非アルコール性脂肪肝炎、脂肪症（すなわち脂肪肝）、肝炎もしくは肝硬変などをもたらす糖尿病もしくは代謝症候群に関連する障害、疾患もしくは病態、または症状の全体的なもしくは部分的な緩和、またはこうした症状のさらなる進行もしくは悪化の遅延もしくは停止を意味する。一実施形態において、症状は黄疸である。別の実施形態では、「治療」は、ＪＮＫ経路の阻害によって治療可能なまたは予防可能な疾患に関連する障害、疾患もしくは病態、または症状の全体的なまたは部分的な緩和を意味する。

【0032】

用語「予防」は、本明細書で用いる場合、障害、疾患もしくは病態の発症、再発もしくは蔓延を全体的にもしくは部分的に遅延及び／または防止する；対象が障害、疾患もしくは病態に罹患するのを阻止する；または対象が障害、疾患もしくは病態に罹患する対象リスクを減少させる方法を意味する。一実施形態において、障害は本明細書に記載の肝臓線維性障害、もしくは肝臓線維性障害をもたらす糖尿病もしくは代謝症候群、またはこれらの症状である。一実施形態において、障害は肝臓線維性障害、例えば非アルコール性脂肪肝炎、脂肪症（すなわち脂肪肝）、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、肝炎、肝細胞癌、またはアルコールの慢性摂取もしくは反復摂取（アルコール性肝炎）、感染（例えばＨＣＶなどのウイルス感染）、肝臓移植、もしくは薬物性肝障害（例えばアセトアミノフェン中毒）に伴う肝繊維症などである。別の実施形態では、障害はＪＮＫ経路の阻害によって治療可能なまたは予防可能な疾患である。

【0033】

治療に関して用いられる場合の用語「感受性」及び「感受性のある」は、治療されている疾患の症状の軽減または減少における化合物１の有効性の程度をいう相対語である。例えば、細胞または患者の治療に関して用いられる場合の用語「感受性の増加」は、当該技術分野において広く認められているまたは本明細書に開示の任意の方法を用いて測定した場合の、ＪＮＫに関連する疾患または病態の症状の軽減または減少における有効性の少なくとも５％以上の増加のことをいう。

【0034】

化合物１に関連する用語「有効量」は、本明細書に開示の障害、疾患もしくは病態、またはこれらの症状を治療または予防することが可能な量を意味する。

【0035】

本明細書で用いる場合、「ＵＶＢ」は、約２８０ｎｍ〜約３２０ｎｍにわたる紫外線スペクトルの領域にある電磁放射線のことをいう。

【0036】

用語「可能性」は一般に、ある事象の確率の増加をいう。患者反応の有効性に関して用いられる場合の用語「可能性」は一般に、ＪＮＫに関連する疾患または病態の症状が軽減または減少される確率の増加を企図する。

【0037】

用語「予測する」は一般に、事前に判断することまたは伝えることを意味する。化合物１による治療の有効性を「予測する」と用いる場合、例えば、用語「予測する」は、最初に、治療を開始する前に、または治療期間が実質的に進行する前に治療のアウトカムの可能性を判断できることを意味し得る。

【0038】

本明細書で用いる場合、用語「監視する」は一般に、活動の監視、管理、規制、観察、追跡、または監督のことをいう。例えば、用語「ＪＮＫ」に関連する疾患または病態に対する治療の効果の監視」は、患者の治療における有効性の追跡のことをいう。同様に、個別または臨床試験のいずれかにおける患者のコンプライアンスに関連して用いられる場合の用語「監視」は、患者が実際に試験中の治療計画に処方されたように従っていることを追跡または確認することをいう。

【0039】

本明細書で用いる場合、用語「判定」、「測定」、「評価（ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ）」、「評価（ａｓｓｅｓｓｉｎｇ）」及び「アッセイ」は一般に、任意の形態の測定のことをいい、ある要素が存在するか否かの判定を含む。これらの用語は定量的及び／または定性的判定の両方を含む。評価は相対的なものまたは絶対的なものであり得る。「の存在の評価」は、存在するものの量を判定すること、及びあるものが存在するかまたは存在しないかを判定することを含むことができる。

【0040】

「患者」または「対象」は本明細書では、動物、例えば哺乳類などを含むと定義し、限定はしないが霊長類（例えばヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、サル、ニワトリ、シチメンチョウ、ウズラ、またはモルモットなどを含み、ある実施形態では哺乳類であり、別の実施形態ではヒトである。一実施形態において、対象は、間質性肺線維症、全身性硬化症、強皮症、慢性移植腎症、抗体関連型拒絶反応、または狼瘡を有するか、またはそれらを有するリスクがあるヒトである。別の実施形態では、対象は、肝臓線維性障害、または肝臓線維性障害をもたらす糖尿病もしくは代謝症候群、またはＪＮＫ経路の阻害によって治療可能なもしくは予防可能な疾患、またはこれらの症状を有するか、あるいはそれらを有するリスクがあるヒトである。一実施形態において、対象は絶食している。一実施形態において、対象は摂食している。

【0041】

５．２．ｃ−Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼのバイオマーカーとしての使用
本明細書で提供される方法は、患者皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの存在及びレベルを、ＪＮＫの阻害を追跡するバイオマーカーとして利用することができるという発見に一部基づいている。特に、これらのバイオマーカーを用いて、患者における化合物１による治療、特に化合物１での経口治療の有効性を予測、評価、及び追跡する、または処方された化合物１による治療のレジメンに対する患者のコンプライアンスを監視することができる。

【0042】

健康なヒト皮膚におけるベースラインのリン酸化ｃ−Ｊｕｎ免疫反応性はＵＶＢ曝露無しでは低い。ＵＶＢ照射は、組織切片におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎ免疫反応性の増加に反映されるように、リン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルを確実に増加させる。増加はＵＶＢ曝露後およそ８時間でプラトーになり始める。ＪＮＫの阻害は用量依存性である。ＵＶＢ照射によって誘発されるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの増加は、用量−反応の評価を含む、化合物１の評価を行うための、及び化合物１に感受性のある患者集団の特定を行うためのモデルとして用いることができる。

【0043】

ＵＶＢ照射によって誘発されるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの、化合物１の有効性を評価するバイオマーカーとしての使用に関する方法を本明細書で提供する。リン酸化ｃ−Ｊｕｎ及びｃ−Ｊｕｎのレベルを用いて、ＪＮＫに関連する疾患または病態において治療が成功する可能性があるかどうか判定することができる。

【0044】

ある実施形態において、本明細書で提供される方法により、化合物１の投与に起因するＪＮＫのインビボ阻害の量の測定が可能となる。ある実施形態において、本明細書で提供されるアッセイは、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの量を免疫組織化学的に測定すること、該患者に化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの量を免疫組織化学的に測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す。患者におけるＪＮＫの阻害を評価するための方法も本明細書で提供され、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少がＪＮＫの阻害を示す。いくつかの実施形態において、減少は少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％以上である。ある実施形態において、本明細書で提供されるアッセイはヒト皮膚モデル組織の使用を含む。そのような実施形態において、該アッセイは、該組織の第１サンプルをＵＶＢ照射に曝露すること、該組織の該第１部分のサンプルを得ること、該組織の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの量を免疫組織化学的に測定すること、該組織に化合物１を投与すること、該組織の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該組織の該第２部分のサンプルを得ること、該組織の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎの量を免疫組織化学的に測定すること、ならびに該組織の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルと該組織の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該組織の該第１部分と比較した該組織の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少がＪＮＫの阻害を示す。いくつかの実施形態において、減少は少なくとも約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％以上である。

【0045】

そのような実施形態において、ＥｐｉＤｅｒｍＦＴなどのヒト皮膚モデル組織が用いられ得る。ＥｐｉＤｅｒｍＦＴは再構成ヒト皮膚等価物であり、ヒト皮膚に類似した形態的特徴及び成長特徴を示し、ヒト皮膚に関連する研究においてモデル組織系として広く用いられている（例えば、Ｚｈａｏ ＪＦ，Ｚｈａｎｇ ＹＪ，Ｋｕｂｉｌｕｓ Ｊ，Ｊｉｎ ＸＨ，Ｓａｎｔｅｌｌａ ＲＭ，Ａｔｈａｒ Ｍ，Ｗａｎｇ ＺＹ，Ｂｉｃｋｅｒｓ ＤＲ．Ｒｅｃｏｎｓｔｉｔｕｔｅｄ ３−Ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ ａｓ ａ Ｎｏｖｅｌ ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｍｍｓ．１９９９；２５４：４９−５３；Ｍａｈｎｓ Ａ，Ｗｏｌｂｅｒ Ｒ，Ｓｔａｂ Ｆ，Ｋｌｏｔｚ ＬＯ，Ｓｉｅｓ Ｈ，Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ｏｆ ＵＶＢ ａｎｄ ＵＶＡ ｔｏ ＵＶ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｃｌｏｏｘｙｇｅｎａｓｅ−２ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ａｒｔｉｃｆｉｃａｌ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ，Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍ．Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．２００４；３：２５７−６２；Ｓｅｄｅｌｎｉｋｏｖａ ＯＡ，Ｎａｋａｍｕｒａ Ａ，Ｋｏｖａｌｃｈｕｋ Ｏ，Ｋｏｔｕｒｂａｓｈ Ｉ，Ｍｉｔｃｈｅｌｌ ＳＡ，Ｍａｒｉｎｏ ＳＡ，Ｂｒｅｎｎｅｒ ＤＪ，Ｂｏｎｎｅｒ ＷＭ，ＤＮＡ Ｄｏｕｂｌｅ−Ｓｔｒａｎｄ Ｂｒｅａｋｓ Ｆｏｒｍ ｉｎ Ｂｙｓｔａｎｄｅｒ Ｃｅｌｌｓ ａｆｔｅｒ Ｍｉｃｒｏｂｅａｍ Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｈｒｅｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ Ｈｕｍａｎ Ｔｉｓｓｕｅ Ｍｏｄｅｌｓ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００７；６７（９）：４２９５−４３０２；Ｈａｙｄｅｎ ＰＪ，Ｂｕｒｎｈａｍ Ｂ，Ｋｌａｕｓｎｅｒ Ｍ，Ｋｕｂｉｌｕｓ Ｊ，Ｓｈｅａｓｇｒｅｅｎ ＪＥ，Ｗｏｕｎｄ Ｈｅａｌｉｎｇ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ＥｐｉＤｅｒｍ Ｆｕｌｌ Ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ（ＥｐｉＤｅｒｍ−ＦＴ）Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｓｋｉｎ Ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ａｆｔｅｒ Ｓｏｌａｒ ＵＶ Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ，Ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ａｔ ｔｈｅ ５^ｔｈ Ｗｏｒｌｄ Ｃｏｎｇｒｅｓｓ，Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ，Ａｕｇｕｓｔ ２００５及びＴｈｅ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ Ｍｅｅｔｉｎｇ，Ｐｒｏｖｉｄｅｎｃｅ，ＲＩ，Ａｐｒｉｌ−Ｍａｙ ２００４，ＴＲ−３２８：１−１０を参照）。ＥｐｉＤｅｒｍＦＴサンプルはＭａｔＴｅｋ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ａｓｈｌａｎｄ，ＭＡ）から得られ得る。

【0046】

いくつかの実施形態において、本明細書の方法によって提供される、ＪＮＫ活性を評価するための皮膚生検の免疫組織化学的評価は、標的リン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎを対象とする一次抗体、及び発色酵素と結合した二次抗体を用いる二抗体ＩＨＣアッセイを含む。そのような実施形態において、二次抗体−レポーター結合体は基質反応混合物とともにインキュベートされた場合に赤色を沈着させ、これにより一次抗体標的複合体の場所をマーキングする。その後、例えばＮｉｋｏｎの顕微鏡を用いた標準的な明視野照明でこの赤色を記録する。その後、顕微鏡画像を撮影し、電子画像は独立した熟練のスコアラによって、実施例で例示するようなガイドラインを用いてスコアリング（盲検）され得る。ある実施形態において、レーザー走査型サイトメーターを用いて探索的定量ＩＨＣ分析が実施され得る。そのような実施形態において、上皮ケラチノサイトの核区画を画定するためにスライドをさらに処理する。そのような実施形態において、同じＩＨＣスライドをヘマトキシリンで対比染色して核区画を標識し、その後、ＤＡＢ染色（リン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎを対象とする一次抗体を標示する）には４８８ｎｍ、ヘマトキシリン染色には６３３ｎｍの２つのフォトダイオードチャネルを用いて走査して、ヘマトキシリンシグナルに基づいて核を計数し、次いで上皮中の各核についてＤＡＢシグナルを積分する。

【0047】

いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法により、化合物１の投与の前後のリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの測定が可能となり、これを患者における化合物１によるＪＮＫの阻害を測定するためのバイオマーカーとして用いることができる。

【0048】

本明細書で提供される方法のいくつかの実施形態において、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、化合物１によるＪＮＫの阻害を示す。

【0049】

本明細書で提供される方法のいくつかの実施形態において、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、化合物１によるＪＮＫの阻害に比例する。

【0050】

いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法により、化合物１の投与の前後のリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの測定が可能となり、これを患者が化合物１に感受性があるかどうか判定するためのバイオマーカーとして用いることができる。

【0051】

本明細書で提供される方法のいくつかの実施形態において、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、該患者が化合物１に感受性があることを示す。

【0052】

いくつかの実施形態において、本明細書で提供される方法により、化合物１の投与の前後のリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの測定が可能となり、これを用いて患者におけるＪＮＫに関連する疾患または病態の治療または予防のための化合物１の有効量を決定することができる。

【0053】

本明細書で提供される方法のいくつかの実施形態において、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、有効量の化合物１の投与を示すことと関連する。

【0054】

５．３．化合物１
本明細書で提供される方法において有用なＪＮＫインヒビターは以下：である。

【化3】

【0055】

（代替名２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドもしくは２−［（１，１−ジメチルエチル）アミノ］−４−［［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシル］アミノ］−５−ピリミジンカルボキサミドを有する）または薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物（本明細書では「化合物１」と総称する）である。化合物１は、２０１３年１月３１日に公開された米国特許出願公開第２０１３／００２９９８７号、及び国際公開第ＷＯ２０１２／１４５５６９号に開示されており、それぞれの全内容を参照により本明細書に援用する。

【0056】

一実施形態において、化合物１は遊離塩基である。ある実施形態において、遊離塩基は固体である。ある実施形態において、遊離塩基は非晶質固体である。さらに別の実施形態では、遊離塩基は結晶質である。

【0057】

別の実施形態では、化合物１は遊離塩基の薬学的に許容可能な溶媒和物である。一実施形態において、溶媒和物は水和物である。別の実施形態では、水和物は結晶形態である。

【0058】

描写された構造とその構造に与えられた名称との間に相違がある場合、描写された構造が重視されるものとすることに留意すべきである。さらに、構造のまたは構造の一部の立体化学が例えば太線または破線で示されていない場合、構造または構造の一部はその立体異性体をすべて包含すると解釈するものとする。

【0059】

５．４．化合物１の作製方法
化合物１は、当該技術分野において公知の試薬及び方法を用いた従来の有機合成を用いて作製することができ、それには、２０１３年１月３１日に公開された米国特許出願公開第２０１３／００２９９８７号、２０１４年１月３０日に出願された米国仮特許出願第６１／９３３，６３６号、２０１４年７月１６日に出願された米国仮特許出願第６２／０２５，１６１号、及び国際公開第ＷＯ２０１２／１４５５６９号に記載されている方法が挙げられ、それぞれの全内容を参照により本明細書に援用する。

【0060】

５．５．投与方法及び用量
化合物１は、従来の調製形態、例えばカプセル、マイクロカプセル、錠剤、顆粒、粉末、トローチ、丸薬、座薬、注入、懸濁液、シロップ、パッチ、クリーム、ローション、軟膏、ゲル、スプレー、溶液及び乳濁液などで経口的に、局所的に、または非経口的に対象に投与することができる。好適な製剤は、一般に採用される方法によって、従来の有機または無機添加剤、例えば賦形剤（例えばスクロース、デンプン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、グルコース、セルロース、タルク、リン酸カルシウムまたは炭酸カルシウム）、結合剤（例えばセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ポリプロピルピロリドン、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、スクロースまたはデンプン）、崩壊剤（例えばデンプン、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルデンプン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウムまたはクエン酸カルシウム）、滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、軽質無水ケイ酸、タルクまたはラウリル硫酸ナトリウム）、着香剤（例えばクエン酸、メントール、グリシンまたはオレンジ粉末）、保存剤（例えば安息香酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、メチルパラベンまたはプロピルパラベン）、安定剤（例えばクエン酸、クエン酸ナトリウムまたは酢酸）、懸濁化剤（例えばメチルセルロース、ポリビニルピロリクロン（ｐｙｒｒｏｌｉｃｌｏｎｅ）またはステアリン酸アルミニウム）、分散剤（例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース）、希釈剤（例えば水）、及びベースワックス（例えばカカオバター、白色ワセリンまたはポリエチレングリコール）などを用いて調製することができる。医薬組成物中の化合物１の有効量は所望の効果を発揮することになるレベルであり得るが、例えば、経口投与及び非経口投与の両方について単位用量で、対象の体重に対して約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重に対して約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0061】

対象に投与される化合物１の用量はかなり広範にわたって変化し、医療従事者の判断に依存し得る。一般に、化合物１は、ある対象において対象の体重に対して約０．００５ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重に対して約１０ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回〜４回投与することができるが、上記の用量は対象の年齢、体重、及び医学的状態、ならびに投与の種類に応じて適切に変更され得る。一実施形態において、用量は対象の体重に対して約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重に対して約５ｍｇ／ｋｇ、対象の体重に対して約０．０５ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重に対して約１ｍｇ／ｋｇ、対象の体重に対して約０．１ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重に対して約０．７５ｍｇ／ｋｇ、または対象の体重に対して約０．２５ｍｇ／ｋｇ〜対象の体重に対して約０．５ｍｇ／ｋｇである。一実施形態において、投与が１日１回行われる。いかなる場合においても、投与される化合物１の量は、有効成分の溶解性、用いられる製剤、及び投与経路などの要因に依存することになる。一実施形態において、局所濃度を適用することにより、約０．０１〜１０μＭの細胞内曝露または濃度がもたらされる。

【0062】

別の実施形態では、疾患または障害の治療または予防のための方法であって、それを必要としている対象に約０．３７５ｍｇ／日〜約７５０ｍｇ／日、約０．７５ｍｇ／日〜約３７５ｍｇ／日、約３．７５ｍｇ／日〜約７５ｍｇ／日、約７．５ｍｇ／日〜約５５ｍｇ／日または約１８ｍｇ／日〜約３７ｍｇ／日の化合物１を投与することを含む、該方法を本明細書で提供する。

【0063】

別の実施形態では、疾患または障害の治療または予防のための方法であって、それを必要としている対象に約１ｍｇ／日〜約１２００ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日〜約１２００ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日〜約１２００ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日〜約１２００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日〜約１２００ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日〜約７２０ｍｇ／日、約２４０ｍｇ／日〜約７２０ｍｇ／日または約６００ｍｇ／日〜約８００ｍｇ／日の化合物１を投与することを含む、該方法を本明細書で提供する。

【0064】

別の実施形態では、化合物１の投与を含む、疾患または障害の治療または予防のための方法を本明細書で提供する。さらに別の実施形態では、１日あたり約１０ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約１２０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約２４０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４８０ｍｇ／日、または約７２０ｍｇ／日の化合物１の投与を含む、疾患または障害の治療及び予防のための方法を本明細書で提供する。特定の実施形態において、本明細書に開示の方法は、約４００ｍｇ／日、約６００ｍｇ／日または約８００ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む。特定の実施形態において、本明細書に開示の方法は、約６０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日または約４００ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む。

【0065】

別の実施形態では、約１０ｍｇ／日〜約７２０ｍｇ／日、約１０ｍｇ／日〜約４８０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日〜約７２０ｍｇ／日または約２４０ｍｇ／日〜約７２０ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む、疾患または障害の治療または予防のための方法を本明細書で提供する。

【0066】

一実施形態において、約１０ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約１２０ｍｇ／日、約２４０ｍｇ／日、約４８０ｍｇ／日、または約７２０ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む、疾患または障害の治療または予防のための方法を本明細書で提供する。一実施形態において、約６０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日、または約４００ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む、疾患または障害の治療または予防のための方法を本明細書で提供する。別の実施形態では、約２００ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む、疾患または障害の治療または予防のための方法を本明細書で提供する。一実施形態において、約１０ｍｇ／日、約３０ｍｇ／日、約６０ｍｇ／日、約１２０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約２４０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約４８０ｍｇ／日、または約７２０ｍｇ／日の化合物１の投与を、それを必要とする対象に対して行うことを含む、疾患または障害の治療または予防のための方法を本明細書で提供する。

【0067】

別の実施形態では、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１ｍｇ〜約２００ｍｇ、約３０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約３５ｍｇ〜約１４００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約１０００ｍｇ、または約５００ｍｇ〜約１０００ｍｇの化合物１を含む単位用量製剤を本明細書で提供する。

【0068】

別の実施形態では、約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５６０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７２０ｍｇ、約７５０ｍｇ、約１０００ｍｇまたは約１４００ｍｇの化合物１を含む単位用量製剤を本明細書で提供する。

【0069】

別の実施形態では、約３０ｍｇ、約１００ｍｇまたは約２００ｍｇの化合物１を含む単位剤形を本明細書で提供する。

【0070】

医薬組成物、及び様々な剤形の化合物１は、毎日１回、２回、３回、４回またはそれより多く投与することができる。一実施形態において、医薬組成物、及び様々な剤形の化合物１は、１日１回１４日間投与することができる。

【0071】

化合物１は簡便性の理由から経口投与することができる。一実施形態において、経口投与する場合、食事及び水とともに化合物Ａを投与する。別の実施形態では、化合物１（例えば顆粒または分散性錠剤）を水またはジュース（例えばリンゴジュースまたはオレンジジュース）中に分散させ、懸濁液として経口投与する。

【0072】

化合物１は、皮内、筋肉内、腹腔内、経皮、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、舌下、大脳内、膣内、経皮、経直腸、経粘膜、吸入によって、または耳、鼻、目、もしくは皮膚に局所投与することもできる。投与様式は医療従事者の裁量に委ねられ、部分的に内科的疾患の部位によって決定され得る。

【0073】

一実施形態において、追加の担体、賦形剤または媒体を含まずに化合物１を含有するカプセルを本明細書で提供する。

【0074】

別の実施形態では、有効量の化合物１及び薬学的に許容可能な担体または媒体を含む組成物を本明細書で提供し、薬学的に許容可能な担体または媒体は、賦形剤、希釈剤、またはこれらの混合物を含むことができる。一実施形態において、組成物は医薬組成物である。

【0075】

組成物は、錠剤、咀嚼錠、カプセル、溶液、非経口液、トローチ、座薬及び懸濁液などの形態とすることができる。組成物は、投与単位中に１日用量を含有するように、または１日用量の一部を好都合に含有するように製剤化することができ、単一の錠剤もしくはカプセルまたは都合の良い量の液体であり得る。一実施形態において、溶液は、水溶性塩、例えば塩酸塩などから調製される。一般に、すべての組成物は薬化学において公知の方法に従って調製される。カプセルは、化合物１と好適な担体または希釈剤とを混合し、適量の混合物をカプセル中に充填することによって調製することができる。通常の担体及び希釈剤としては、不活性粉末状物質、例えば多様な種類のデンプン、粉末状セルロース、特に結晶及び微結晶セルロース、糖、例えばフルクトース、マンニトール及びスクロースなど、穀粉及び類似の食用粉末などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0076】

錠剤は、直接圧縮、湿式造粒、または乾式造粒によって調製することができる。その製剤は通常、希釈剤、結合剤、滑沢剤、及び崩壊剤、ならびに化合物を包含する。典型的な希釈剤としては、例えば、様々な種類のデンプン、ラクトース、マンニトール、カオリン、リン酸カルシウムまたは硫酸カルシウム、無機塩（例えば塩化ナトリウムなど）、及び粉糖が挙げられる。粉末状セルロース誘導体も有用である。典型的な錠剤結合剤は、デンプン、ゼラチン及び糖、例えばラクトース、フルクトース、グルコースなどの物質である。天然ガム及び合成ガムも都合がよく、これには、アカシア、アルギネート、メチルセルロース、ポリビニルピロリジンなどが挙げられる。ポリエチレングリコール、エチルセルロース及びワックスも結合剤の役割を果たすことができる。

【0077】

錠剤及びパンチがダイ中に付着するのを防止するために、錠剤製剤には滑沢剤が必要である場合もある。滑沢剤はタルク、ステアリン酸マグネシウム及びステアリン酸カルシウム、ステアリン酸、ならびに水素添加植物油などの滑りやすい固体から選択することができる。錠剤崩壊剤は、濡れた際に膨潤して錠剤を崩壊させ、化合物を放出する物質である。これには、デンプン、粘土、セルロース、アルギン及びガムが挙げられる。より具体的には、例えば、トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、木材セルロース、粉末状天然海綿、カチオン交換樹脂、アルギン酸、グアーガム、シトラスパルプ、ならびにカルボキシメチルセルロース、さらにラウリル硫酸ナトリウムを用いることができる。錠剤は、フレーバー及びシーラントとして糖でコーティングするか、または被膜形成保護剤でコーティングして錠剤の溶出特性を調整することができる。組成物は、例えばマンニトールなどの物質を製剤で用いることによって咀嚼錠として製剤化することもできる。

【0078】

化合物１を座薬として投与することが望ましい場合、典型的な基剤を用いることができる。カカオバターは従来の座薬基剤であり、ワックスの添加によって改質して融点をわずかに上昇させることができる。特に様々な分子量のポリエチレングリコールを含む水混和性座薬基剤が広く用いられている。

【0079】

化合物１の効果は適切な製剤によって遅延または延長させることができる。例えば、化合物１の徐溶解性ペレットを調製し、錠剤もしくはカプセル中に、または徐放性埋め込み型デバイスとして包含することができる。この技術は、複数の異なる溶出速度のペレットを作製し、カプセルにこれらのペレットの混合物を充填することも含む。錠剤またはカプセルは、予測可能な時間にわたって溶出を阻止する被膜でコーティングすることができる。非経口製剤であっても、化合物１を血清中に徐々に分散させる油性または乳化媒体中に化合物１を溶解または懸濁させることによって、長時間作用させることができる。

【0080】

５．６．使用方法
ヒト及び他の患者における化合物１の効果を判定するモデルとしての、皮膚のＵＶＢ照射及び免疫組織化学を用いたリン酸化ｃ−Ｊｕｎの測定の使用方法を本明細書で提供する。このモデルにより、問題となっている化合物が患者においてＪＮＫ標的を捉えるかどうかが示され、また、臨床開発における用量選択の指針となる患者における用量−反応の評価が可能となるため、本明細書で提供される方法は化合物１の臨床開発を加速させることができる。

【0081】

健康なヒト皮膚におけるベースラインのリン酸化ｃ−Ｊｕｎ免疫反応性はＵＶＢ曝露無しでは低い。ＵＶＢ照射はリン酸化ｃ−Ｊｕｎ免疫反応性を確実に増加させる。増加はＵＶＢ曝露後およそ８時間でプラトーになり始める。ＪＮＫの阻害は用量依存性である。したがって、ＵＶＢ照射及びリン酸化ｃ−Ｊｕｎは、用量−反応の評価を含む、化合物１の評価を行うための、及び化合物１に感受性のある患者集団の特定を行うためのモデルとして用いることができる。

【0082】

一実施形態において、化合物１に感受性のある患者（または患者集団）の特定方法を本明細書で提供し、この方法は、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者に有効量の化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、該患者が化合物１に感受性のあることを示す。ある実施形態において、この方法は、疾患の治療または予防に有効な量の化合物１の投与による本明細書で提供される疾患の治療または予防をさらに含む。化合物１に感受性のある患者の特定方法も本明細書で提供され、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、該患者が化合物１に感受性のあることを示す。本明細書に開示の疾患の治療または予防の方法に用いるための化合物１も本明細書で提供し、この方法は、化合物１に感受性のある患者を特定するための該方法を含む。

【0083】

ある実施形態において、患者の皮膚のＵＶＢ照射、化合物１の投与、及び免疫組織化学を用いた皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現の測定を含む、患者における化合物１の効果の評価方法を本明細書で提供する。患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した皮膚サンプルにおいて免疫組織化学を用いてリン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現を測定することを含む、患者における化合物１の効果の評価方法も本明細書で提供する。一実施形態において、ＭＡＰキナーゼのインヒビター（複数可）と併せて化合物１を投与する。一実施形態において、化合物１の効果は、患者における化合物１の用量反応関係である。いくつかの実施形態において、化合物１を経口投与する。ある実施形態において、この方法は、疾患の治療または予防に有効な量の化合物１の投与による本明細書で提供される疾患の治療または予防をさらに含む。本明細書に開示の疾患の治療または予防の方法に用いるための化合物１も本明細書で提供し、この方法は患者における化合物１の効果を評価するための該方法を含む。

【0084】

さらに、患者の皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎを測定することによって患者におけるＪＮＫの阻害を評価する方法を本明細書で提供する。一実施形態において、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者に化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することによって、患者におけるＪＮＫの阻害を測定する方法を本明細書で提供するが、この方法では、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少がＪＮＫの阻害を示す。ある実施形態において、この方法は、疾患の治療または予防に有効な量の化合物１の投与による本明細書で提供される疾患の治療または予防をさらに含む。患者におけるＪＮＫの阻害を評価するための方法も本明細書で提供され、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者に化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す。本明細書に開示の疾患の治療または予防の方法に用いるための化合物１も本明細書で提供し、この方法は患者におけるＪＮＫの阻害を評価するための該方法を含む。

【0085】

別の実施形態では、患者における化合物１の投与のための用量反応関係を決定する方法を提供する。この方法は、該患者への様々な用量（例えば約１ｍｇ〜１０００ｍｇ）の化合物１の投与と、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者にある用量の化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含む、各用量の化合物１に起因する該患者におけるＪＮＫ阻害の量の決定とを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、化合物１によるＪＮＫの阻害に比例する。ある実施形態において、この方法は、疾患の治療または予防に有効な量の化合物１の投与による本明細書で提供される疾患の治療または予防をさらに含む。化合物１の投与の用量反応関係の決定方法も本明細書で提供され、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者にある用量の化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少はＪＮＫの阻害に比例する。本明細書に開示の疾患の治療または予防の方法に用いるための化合物１も本明細書で提供し、この方法は、化合物１の投与における用量反応関係を決定するための該方法を含む。

【0086】

他の実施形態において、患者におけるＪＮＫに関連する疾患または病態の治療または管理のための化合物１の有効量の決定方法を提供し、この方法は、該患者への様々な用量（例えば約１ｍｇ〜１０００ｍｇ）の化合物１の投与と、該患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第１部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、該患者にある用量の化合物１を投与すること、該患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、該患者の皮膚の該第２部分のサンプルを得ること、該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに該患者の皮膚の該第１部におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含む、各用量の化合物１に起因する該患者におけるＪＮＫ阻害の量の決定とを含み、該患者の皮膚の該第１部分と比較した該患者の皮膚の該第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの５０％の減少が、有効量の化合物１の投与を示す。ある実施形態において、この方法は、疾患の治療または予防に有効な量の化合物１の投与による本明細書で提供される疾患の治療または予防をさらに含む。化合物１の有効量の決定方法も本明細書で提供され、この方法は、１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、２）該患者にある用量の化合物１を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに３）該第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、該第１皮膚サンプルに対する該第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの５０％の減少が、有効量の化合物１の投与を示す。本明細書に開示の疾患の治療または予防の方法に用いるための化合物１も本明細書で提供し、この方法は化合物１の有効量を決定するための該方法を含む。

【0087】

さらに別の実施形態では、化合物１による治療に対する患者のコンプライアンスの監視方法を提供する。この方法は、患者の皮膚のサンプル中で発現したリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルを測定すること、及び対照非治療サンプルでの発現レベルと比較して、患者の皮膚のサンプルにおいて発現レベルが増加または減少するかどうか判定することを含み、発現の減少が、化合物１による治療に対する患者のコンプライアンスを示す。ある実施形態において、この方法は、疾患の治療または予防に有効な量の化合物１の投与による本明細書で提供される疾患の治療または予防をさらに含む。

【0088】

別の実施形態では、化合物１に反応する可能性を有すると判定されている、または感受性があると判定されている患者（または患者集団）への化合物１の投与を含む、患者（または患者集団）の治療方法を本明細書で提供する。

【0089】

本明細書で提供される方法によって治療可能または予防可能な疾患としては、肝臓線維性障害、例えば非アルコール性脂肪肝炎、脂肪症（すなわち脂肪肝）、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、肝炎、肝細胞癌など、及びアルコールの慢性摂取もしくは反復摂取（アルコール性肝炎）、感染（例えばＨＣＶなどのウイルス感染）、肝臓移植、もしくは薬物性肝障害（例えばアセトアミノフェン中毒）に伴う肝繊維症が挙げられる。いくつかのそのような態様において、本明細書で提供される方法によって治療可能または予防可能な疾患としては、肝臓線維性障害、例えば非アルコール性脂肪肝炎、脂肪症（すなわち脂肪肝）、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、及び肝炎などをもたらす糖尿病または代謝症候群が挙げられる。

【0090】

別の態様では、本明細書で提供される方法によって治療可能または予防可能な疾患としては、間質性肺線維症、全身性硬化症、強皮症、慢性移植腎症、抗体関連型拒絶反応、または狼瘡が挙げられる。いくつかのそのような実施形態において、狼瘡は紅斑性狼瘡（例えば円板状紅斑性狼瘡、もしくは皮膚紅斑性狼瘡など）または全身性狼瘡である。

【0091】

別の態様では、本明細書で提供される方法によって治療可能または予防可能な疾患または病態としては、ＪＮＫ１及び／またはＪＮＫ２の阻害によって治療可能または予防可能なものが挙げられる。そのような疾患の例としては、関節リウマチ；リウマチ性脊椎炎；骨関節炎；喘息、気管支炎；アレルギー性鼻炎；慢性閉塞性肺疾患；嚢胞性線維症；炎症性腸疾患；過敏性腸症候群；粘液性大腸炎；潰瘍性大腸炎；クローン病；ハンチントン病；肝炎；膵炎；腎炎；多発性硬化症；紅斑性狼瘡；２型糖尿病；肥満症；アテローム性動脈硬化症；血管形成術後の再狭窄；左心室肥大；心筋梗塞；卒中；心臓、肺、腸、腎臓、肝臓、膵臓、脾臓及び脳の虚血性障害；急性または慢性臓器移植拒絶反応；移植のための臓器の保存；臓器不全または四肢喪失（例えば限定はしないが虚血再灌流障害、外傷、全身性障害、自動車事故、圧挫損傷または移植不全に起因するものを含む）；移植片対宿主病；エンドトキシンショック；多臓器不全；乾癬；火、化学物質または放射線への曝露による熱傷；湿疹；皮膚炎；皮膚移植；虚血；手術または外傷性損傷（例えば車両事故、銃創、四肢挫傷）に関連する虚血状態；癲癇；アルツハイマー病；パーキンソン病；細菌またはウイルス感染に対する免疫反応；悪液質；血管新生疾患及び増殖性疾患；固形腫瘍；ならびに結腸、直腸、前立腺、肝臓、肺、気管支、膵臓、脳、頭、首、胃、皮膚、腎臓、子宮頚部、血液、喉頭、食道、口、咽頭、膀胱、卵巣または子宮などの様々な組織の癌が挙げられる。

【実施例】

【0092】

６．実施例
以下の実施例は、別途詳細に記載する場合を除いて標準的な技術を用いて実施した。実施例は単に例示的なものであることを意図する。

【0093】

６．１．ＵＶ照射方法
成人正常ヒト新生児ケラチノサイト（ＨＥＫａ）をＳｃｉｅｎＣｅｌｌから入手した。細胞を１０ｃｍディッシュに播種し、インキュベートして付着させ、その後、一晩血清飢餓にした。細胞に５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢを照射する１時間前に化合物１を添加した。ＵＶＢ照射後さらに３０分間、細胞を化合物１でインキュベートした。その後、Ａｃｔｉｖｅ Ｍｏｔｉｆの核抽出キットを用いて細胞を溶解させ、核及び細胞質タンパク質を単離した。タンパク質を１０％トリス・グリシンゲルで泳動させ、ニトロセルロース膜に転写した。ブロットを１時間ブロッキングした。全ｃ−Ｊｕｎ一次抗体及びリン酸化ｃ−Ｊｕｎ一次抗体を添加して一晩インキュベートした。Ｌｉｃｏｒ二次抗体を添加してブロットをＬｉ−Ｃｏｒ Ｏｄｙｓｓｅｙで読み取った。４ドナーからのＨＥＫａ細胞についての結果を図１〜５に示す。５０ｍＪ／ｃｍ^２のＵＶＢ放射線によるｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３におけるリン酸化の増加、及び化合物１による阻害が認められた（図１〜５）。核及び細胞質タンパク質の分離も良好であった（ｃ−Ｊｕｎは核内のみにある）（図１〜４）。化合物１は用量に依存する形でｃ−ＪｕｎのＳｅｒ６３におけるリン酸化を阻害する（図５）。

【0094】

６．２．臨床試験実施計画書：健康な被検者における化合物１の複数回投与の薬物動態及び薬力学ならびに食物及び製剤が化合物１の単回投与の薬物動態に及ぼす影響を評価する２部構成第１相試験
主要目的：

【0095】

第１部：ヒト皮膚の紫外線（ＵＶ）照射後の化合物１の複数回経口投与がＪＮＫ活性に及ぼす影響の評価

【0096】

第２部：食物の存在下における製剤化した化合物１錠剤の薬物動態、及び単回経口投与後の製剤化した化合物１錠剤のカプセル中有効成分（ＡＩＣ）製剤と比較した相対的生物学的利用能の評価。

【0097】

副次的目的：

【0098】

第１部：化合物１の単回及び複数回経口投与の安全性の評価

【0099】

第２部：食物とともに投与した場合の製剤化した化合物１錠剤の安全性及び忍容性の評価

【0100】

試験デザイン：本試験は、健康な被検者における化合物１の複数投与の薬物動態及び薬力学ならびに食物及び製剤が化合物１の単回投与の薬物動態に及ぼす影響を評価する２部構成第１相試験である。

【0101】

第１部：第１部は、ＵＶ照射後のＪＮＫ活性に対する化合物１の効果を評価するための非盲検複数回投与３期固定順序試験である。

【0102】

本試験は、スクリーニング段階（−２１〜−２日目）、投与前の最小紅斑量（ＭＥＤ）決定、ベースライン（−１日目）、化合物１の用量を増加させて投与する３つの治療／評価期間、及び追跡調査来院からなる。期間中に休薬期間はないものとする。

【0103】

投与後第１日目（ベースライン）、及び各投与期間の第６日目（６、１２、及び１８日目）に、ＭＥＤ強度の２倍のＵＶ光を被検者の臀部の線引きした部位に照射する。ベースライン（−１日目）の照射は、６、１２、及び１８日目に予定される照射の時間とほぼ同じ時間、すなわち投与の２時間前に行うこと。ＵＶ照射の８時間後、ＵＶ曝露部位から皮膚パンチ生検を採取する。入院は１９日目に終了する。期間３の最後の投与の７〜１０日後（すなわち２５日目〜２８日目）に、追跡調査委来院を実施する。中止の日から１０日以内に、早期中止（ＥＴ）来院を実施する。

【0104】

ＭＥＤは期間１の投与の１０日以内に決定する。ＭＥＤが最初の試行で失敗する場合に備えて、ＭＥＤを−２日目よりも早く行うことが推奨される。ＭＥＤ評価には入院を必要としない。

【0105】

ＭＥＤが適正である１６名の健康で適格なスクリーニングされた被検者が、ベースライン評価（生検を２倍のＭＥＤで照射することを含む）について期間１の−１日目に試験実施施設に報告し、入院を開始するものとする。

【0106】

予定されたチェックイン処置後、被検者のベルトラインと臀裂との間の右側上臀部の皮膚試験部位に線引きする。試験部位は最低３ｃｍ×３ｃｍとし、被検者をうつ伏せにさせてインクで（皮膚マーカーを用いて）輪郭を描く。被検者は臀部の一方の部位に２倍のＭＥＤのＵＶ照射を受けることになる。ＵＶ照射の８時間（＋／−１０分）後、ＵＶ曝露部位から１つのベースライン皮膚パンチ生検を採取する。

【0107】

１日目に、最低８時間の絶食後、被検者はおよそ８ＡＭに試験薬の最初の投与を受ける。

【0108】

すべての被検者は、以下の用量の化合物１を以下の固定順序で投与される。

【0109】

治療Ａ：カプセル中有効成分（ＡＩＣ）としての６０ｍｇの化合物１、１日１回６日間、その後

【0110】

治療Ｂ：ＡＩＣとしての１６０ｍｇの化合物１、１日１回６日間、その後

【0111】

治療Ｃ：ＡＩＣとしての４００ｍｇの化合物１、１日１回６日間

【0112】

各期間中、−１日目から（またはベースラインの２倍のＭＥＤが−１日目の日の早くに予定されている場合には早くも２日目から）、被検者を試験実施施設に居住させてもよく、安全性を十分に検討した上で試験に関する処置が完了した後、１９日目に退院させる。

【0113】

試験薬（ＡＩＣとして）はおよそ２４０ｍＬの無炭酸水（室温）で経口投与する。各投与期間の第６日目朝の投与後の最初の食事は、投与の４時間後に実施することとする。すべて他の投与日には、投与後最低２時間の絶食の後、次の食事／軽食を出すことができる。

【0114】

ベースライン（−１日目）、６、１２、及び１８日目に、被検者のベルトラインと臀裂との間の右側上臀部の皮膚試験部位に線引きする。臀部右側を３つの異なる試験部位に分け、ベースライン及び３つの期間のそれぞれ（６日目、１２日目、及び１８日目）での２倍のＭＥＤ照射に対して位置を決めた部位１つを割り当てる。各試験部位は可能な限り大きくする（最低３ｃｍ×３ｃｍ）。被検者をうつ伏せにしてインクで（皮膚マーカーを用いて）試験部位領域に輪郭を描く。

【0115】

被検者は、６、１２、及び１８日目の試験薬投与の２時間（＋／−１０分）後に、臀部の一方の部位に２倍のＭＥＤのＵＶ照射を受けることになる。ベースラインでの紫外線照射は、１日目に計画されている投与時間のおよそ２時間後に実施すること。ＵＶ曝露部位は左端開始して右端へと移行する順番（すなわちベースラインでは曝露部位１、期間３では曝露部位４）で実施することが推奨される。

【0116】

ＵＶ照射の８時間（＋／−１０分）後、ＵＶ曝露部位から１つの皮膚パンチ生検を採取する。試験全体を通して４つの生検を採取することになる、すなわち、ベースライン及び１期間につき１つの生検である。生検は、Ｃｅｌｇｅｎｅによって指定される第三者によって組織スライドへと処理され、免疫組織化学（ＩＣＨ）によって分析される。この第三者は治療期間（ベースライン及び投与）に対して盲検化されることとなる。

【0117】

すべての予定された処置が完了した後、１９日目に被検者を臨床施設から退院させる。

【0118】

安全性評価のために指定された時点で、有害事象（ＡＥ）監視、理学的検査、バイタルサイン、心電図（ＥＣＧ）、安全性臨床検査評価、及び創傷治癒の評価を行う。

【0119】

化合物１レベルの分析のために、血液サンプルを所定の時点（６、１２、及び１８日目：投与前、投与０．５、２、４、６、１０、１２、及び２４時間後）で連続して収集する。すべての評価は、事象及び処置の表に従って行う。

【0120】

処置（治療における変更を除く）は、３つの期間全体を通して一貫したものとする。

【0121】

治療期間の間の活動、環境、食物、処置、及びスケジュールは、可能な限り一貫性を維持するべきである。

【0122】

第２部：第２部は３つの期間による非盲検無作為化クロスオーバー試験である。この試験は、スクリーニング段階（−２１〜−２日目）、ベースライン（−１日目）、３つの治療／評価期間、及び電話による追跡調査からなる。

【0123】

１２名の適格な被検者がベースライン評価のために期間１の１日目に試験実施施設にチェックインすることとする。期間１の１日目に、引き続き試験への参加に適格であるとされた被検者を３つの投与順序の１つに無作為に割り当て、その間、被検者は以下の投与レジメンの１つを受けることとなる。

【0124】

治療Ｄ：ＡＩＣとして１００ｍｇの化合物１（×２）の単回経口投与を絶食状態の下で行う。

【0125】

治療Ｅ：２００ｍｇの化合物１（×１）（製剤化錠剤（複数可））の単回経口投与を絶食状態の下で行う。

【0126】

治療Ｆ：２００ｍｇの化合物１（×１）（製剤化錠剤（複数可））の単回経口投与を摂食状態（標準的な高脂肪朝食）の下で行う。

【0127】

【表1】

【0128】

すべての被検者は投与前の少なくとも１０時間一晩絶食する。治療Ｄ及びＥ（絶食）を受ける被検者は投与後少なくとも４時間絶食を継続する。

【0129】

治療Ｆについては、投与前３０分以内に被検者は標準的な高脂肪（食事の総カロリー含有量のおよそ５０％）、高カロリー（およそ８００〜１０００カロリー）の朝食を摂取する（ＦＤＡ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｏｄ Ｅｆｆｅｃｔ Ｇｕｉｄａｎｃｅ，（ＦＤＡ，２００２）に基づく）。食事は、タンパク質、炭水化物、及び脂質からそれぞれおよそ１５０、２５０、及び５００〜６００カロリーが得られるものとすべきである。被検者は食事を提供されてから３０分以内にすべての食事を摂取しなければならない。投与は食事を提供されてから３０分（±５分）後に行わなければならない。

【0130】

各試験期間中、被検者は−１日目に試験実施施設に入院する。最後の期間の５日目に試験処置が完了した時点で被検者を試験実施施設から退院させる。最後の化合物１投与から次の予定されている投与まで、少なくとも７日〜１０日未満のウォッシュアウト期間によって各治療期間を区切る。各期間中、投与前、投与０．５、１、１．５、２、２．５、３、５、８、１２、２４、３６、４８、７２、及び９６時間後に血液サンプルを連続して収集し、血漿中の化合物１のレベルを測定する。

【0131】

必要であれば、予定された処置の後、期間１及び／または２の５日目の朝に被検者は施設を退院して、次の期間に戻ってきてもよい。ある場合において、互いに合意の上で、より長いウォッシュアウトが許容され得る。

【0132】

試験対象集団：健康な男性及び女性被検者。１６名の被検者が第１部に登録する。１２名の志願者が第２部に登録する。被検者は第１部または第２部のいずれかのみに参加することができる。

【0133】

試験の期間：第１部：およそ７週間（スクリーニングを含む）。第２部：およそ６週間（スクリーニングを含む）。

【0134】

試験の終了は、試験実施計画書及び／または統計解析計画書に予め規定されるように、試験が完了する最後の被検者の最後の来院日、または最後の被検者から一次、二次及び／または探索的分析に必要な最後のデータポイントを受け取った日のいずれか遅い日と定義する。

【0135】

試験薬：ＡＩＣ（３０ｍｇ及び１００ｍｇの用量含量）及び製剤化錠剤（２００ｍｇ）としての化合物１はＣｅｌｇｅｎｅによりバルク容器で供給される。

【0136】

第１部：治療Ａ（６０ｍｇ）：ＡＩＣとしての３０ｍｇの化合物１（×２）、１日１回６日間；治療Ｂ（１６０ｍｇ）：ＡＩＣとしての３０ｍｇの化合物１（×２）＋１００ｍｇの化合物１（×１）、１日１回６日間；治療Ｃ（４００ｍｇ）：ＡＩＣとしての１００ｍｇの化合物１（×４）、１日１回６日間

【0137】

第２部：治療Ｄ：ＡＩＣとしての１００ｍｇの化合物１（×２）（２００ｍｇ）、絶食状態で１日１回投与；治療Ｅ：製剤化錠剤としての化合物１（１×２００ｍｇ）、絶食状態で１日１回投与；治療Ｆ：製剤化錠剤としての化合物１（１×２００ｍｇ）、摂食状態で１日１回投与

【0138】

安全性評価の概要：試験全体を通して安全性を監視する。安全性評価は、有害事象（ＡＥ）報告、ＰＥ、バイタルサイン、１２誘導ＥＣＧ、安全性臨床検査（標準的な臨床化学、血液学、及び尿検査に加えて肝機能検査（ＬＦＴ）、総コレステロール、トリグリセリド、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、及び低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）を含む）、併用薬／処置の検討、創傷治癒の評価、ならびに女性被検者に対する妊娠検査を含む。

【0139】

同意文書（ＩＣＦ）に署名した時点から試験が完了するまでの試験全体を通して、かつ化合物１の最後の投与の後２８日以内に試験責任医師が知るところとなった場合に、すべてのＡＥ（及びその後のあらゆる時点で試験責任医師が知るところとなった、ＩＰに関連すると疑われる重篤な有害事象（ＳＡＥ））を監視して記録する。被検者がＩＣＦに署名した時点から研究が完了するまで、すべての併用薬及び処置を検討して記録する。追跡調査来院（第１部）または電話による追跡調査（第２部）をすべての被検者に対して計画する。被検者が何らかの理由で試験を中止した場合、ＥＴ来院を実施する。

【0140】

薬物動態評価の概要：試験の両方の部において、指定の時間に血液サンプルを収集して化合物１の血漿レベルを測定する。

【0141】

第１部：６、１２、及び１８日目の投与前、投与０．５、２、４、６、１０、１２、及び２４時間後に血液／血漿を収集する。

【0142】

定常状態における血漿ＰＫパラメータとしては、次のＡＵＣ_τ（時間ゼロからタウまでの血漿中濃度−時間曲線下面積、ここでタウは投与間隔である）；Ｃ_ｍａｘ（観察された最高血中濃度）、Ｃ_ｍｉｎ（観察された最低血中濃度）、Ｔ_ｍａｘ（Ｃ_ｍａｘに到達するまでの時間）が挙げられるがこれらに限定されない。

【0143】

第２部：各期間において投与前、投与０．５、１、１．５、２、２．５、３、５、８、１２、２４、３６、４８、７２、及び９６時間後に血液／血漿を収集する。

【0144】

定常状態におけるＰＫパラメータとしては、次のＡＵＣ_０−ｔ（時間ゼロから定量化可能な最終濃度までの血漿中濃度−時間曲線下面積）；ＡＵＣ_∞（時間ゼロから無限大時間まで外挿した血漿中濃度−時間曲線下面積）；ＣＬ／Ｆ（経口投与した場合の見かけの総血漿クリアランス）；Ｖ_ｚ／Ｆ（終末相に基づく、経口投与した場合の見かけの総分布容積）；ｔ_１／２（終末相排泄半減期）；Ｃ_ｍａｘ（観察された最高血中濃度）；及びＴ_ｍａｘ（Ｃ_ｍａｘに到達するまでの時間）が挙げられるが、これらに限定される。

【0145】

薬力学評価の概要：ＭＥＤ決定のための個別の紫外線Ｂ（ＵＶＢ）曝露：

【0146】

期間１の最初の投与の１０日以内のＵＶＢ曝露はＵＶ強度を漸増させたＵＶＢに左臀部の６部位を曝露することからなる。

【0147】

ＵＶＢ曝露のおよそ２４時間後にＭＥＤ決定。

【0148】

個別のＵＶＢ曝露（２倍のＭＥＤ）：

【0149】

ベースライン（−１日目）、ならびに６、１２、及び１８日目：化合物１投与の２時間後に上臀部の単一部位を２倍のＭＥＤのＵＶＢに曝露。

【0150】

生検の収集：ベースライン（−１日目）、ならびに６、１２、及び１８日目：ＵＶＢ照射の８時間後に各試験部位から１つのパンチ生検（直径およそ３ｍｍ、深さおよそ０．８ｍｍ）を収集する（全部で４つのパンチ生検）。

【0151】

生検サンプルの分析：免疫組織化学（ＩＨＣ）アッセイによって生検を分析し、リン酸化ｃ−Ｊｕｎ発現を分析する。同一の皮膚生検を用いて、他のバイオマーカー、例えば限定はしないがｃ−Ｊｕｎなどを調査してよく、別々に報告してよい。

【0152】

リン酸化ｃ−ＪｕｎのＩＨＣデータは、治療に対して盲検化した熟練者による、アナログスコアリングシステムまたは積分光学密度の自動測定のいずれによっても分析され得る。第１部についてのみ、治療に対して盲検化した熟練者が、組織切片内の染色された表皮ケラチノサイト核の強度及び数に基づいてリン酸化ｃ−ＪｕｎのＩＨＣデータを０〜４段階で主観的スコアリングを行う。

【0153】

６．３．ＵＶ照射の処置
この節は第１部の被検者にのみ適用される。

【0154】

紫外線源：

【0155】

Ｋｏｄａｃｅｌフィルターを備えたＤｅｒｍａＰａｌ（Ｄａａｖｌｉｎ製）（ＵＶランプ）をこの試験において紫外線源として用いる。このランプは、選択する理由は、ＪＮＫの活性化を実証している有効な先行試験において用いられたランプと類似するスペクトルを発生させるためである。

【0156】

試験中はすべての被検者のＵＶ照射で同一の紫外線源を用いるべきである。

【0157】

限局された領域のみを確実に曝露するための装置をＵＶランプに取り付ける。さらに、皮膚の他の領域の不必要な曝露を回避するために適切なシールドを用いる。この装置は原資料に記録する。

【0158】

ＵＶランプの光学的出力のスペクトル分布は試験開始前に（第三者によって）較正されるべきであり、こうした報告書は試験ファイルに保管する。こうした報告書のコピーを試験ファイル中に入れて、試験報告書中で参照すべきである。

【0159】

紫外線源の詳細を原資料及び試験報告書に記録する。

【0160】

非保護皮膚の最小紅斑量（ＭＥＤ）の決定：

【0161】

期間１への登録の７日以内（すなわち−７〜−１日目）に、ＵＶ強度を漸増させたＵＶＢに左臀部の６つの非保護部位を曝露する。

【0162】

ＵＶ強度の測定：

【0163】

ＭＥＤ決定のためのＵＶ曝露の前に、かつ６日目の２倍のＭＥＤでのＵＶ照射の前に、較正したＵＶランプから強度測定値（複数可）を取得する。

【0164】

ランプは使用前に少なくとも１５分間暖機すべきである。

【0165】

曝露中の被検者の皮膚と同じだけランプから離れた距離で測定値を取得する。強度測定値を原資料に記録して、症例報告書（ＣＲＦ）に記録する。

【0166】

曝露中は被検者をうつ伏せにするべきである。

【0167】

ＤｅｒｍａＰａｌに直接取り付けられた照射プレートに、吸光度：０．０、０．１、０．２、０．３、０．４、及び０．５の６つの直径１２．５ｍｍの中性濃度フィルターを装着する。この装置は皮膚に一連のＵＶ強度（例えば１００．０％、８０．０％、６４．０％、５１．２％、４１．０％及び３２．８％）を与える。この装置により、１回の曝露で各被検者の臀部に６つの異なるＵＶＢ線量を同時に送達することが可能となる。

【0168】

曝露の継続時間は、フィッツパトリック皮膚タイプに基づいて試験開始前に決定し、Ｅ分として試験記録及びＣＲＦに記録する。

【0169】

曝露の開始及び終了時間を原資料及びＣＲＦに各試験部位について記録する。被検者からのランプの距離は一定とする。この距離を測定して原資料及びＣＲＦに記録する。

【0170】

照射のおよそ２４時間（±１時間）後、１００ワット白熱白色電球で部位を照らし、適格な評価者が紅斑を目視で評価する。

【0171】

ＭＥＤは、最小限に認識可能な皮膚発赤を引き起こす（すなわち最小線量のエネルギーを用いて曝露部位の境界の均一な発赤、紅斑等級１を生じる）最低ＵＶ線量である。

【0172】

例えば、ＭＥＤが第３曝露部位で決定された場合、ＭＥＤは総曝露量の６４％（または０．６４×Ｅ分）となる。この例では、２倍のＭＥＤ曝露は２×０．６４×Ｅ分となる。これがこの被検者の残りの曝露に用いられる曝露の継続時間となる。

【0173】

最初の曝露後にＭＥＤの決定が不可能であった場合、被検者は最初の曝露から１週間以内に臀部の未処置の部位が再曝露され得る。新たな曝露の継続時間は、最初の曝露の継続時間の±３５％以内とすべきである。

【0174】

被検者を再スクリーニングする場合（例えばその後の投与コホートのため）、少なくとも１週間の間隔を空けて追加の曝露が実施され得る。

【0175】

ＭＥＤが適正なものとなるために：

【0176】

ａ．６つの曝露部位のうち少なくとも１つが最小限に認識可能な紅斑の定義を満たさなければならず、かつ

【0177】

ｂ．この部位が最低強度のＵＶが曝露される場所であってはならない。

【0178】

２倍の曝露中は中性濃度フィルターを用いない。各被検者のＭＥＤ及び曝露の時間を原資料及びＣＲＦに記録する。

【0179】

ＭＥＤ決定のために被検者を入院させてもよい。

【0180】

紅斑等級段階：

【0181】

以下の段階に従ってＵＶ曝露の２４時間（±１時間）後に紅斑を評価する。

【0182】

【表2】

【0183】

いくつかの参照文献を引用したが、その開示全体を参照により本明細書に援用する。
本件出願は、以下の構成の発明を提供する。
（構成１）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物に感受性のある患者の特定方法であって、前記患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第１部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、前記患者に有効量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与すること、前記患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第２部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含み、前記患者の皮膚の前記第１部分と比較した前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、前記患者が２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物に感受性があることを示す、前記方法。
（構成２）
患者におけるＪＮＫの阻害の評価方法であって、前記患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第１部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、前記患者に２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与すること、前記患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第２部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することによって、患者におけるＪＮＫの阻害を測定することを含み、前記患者の皮膚の前記第１部分と比較した前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す、前記方法。
（構成３）
患者における２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の用量反応関係の決定方法であって、前記患者に様々な用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与することと、前記患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第１部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、前記患者にある用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与すること、前記患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第２部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルを比較することを含む、各用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物に起因する前記患者におけるＪＮＫ阻害の量を決定することと、を含み、前記患者の皮膚の前記第１部分と比較した前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少は、ＪＮＫの阻害に比例する、前記方法。
（構成４）
患者におけるＪＮＫに関連する疾患または病態の治療または管理のための、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の有効量の決定方法であって、前記患者に様々な用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与することと、前記患者の皮膚の第１部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第１部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、前記患者にある用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与すること、前記患者の皮膚の第２部分をＵＶＢ照射に曝露すること、前記患者の皮膚の前記第２部分のサンプルを得ること、前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに前記患者の皮膚の前記第１部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較することを含む、各用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物に起因する前記患者におけるＪＮＫ阻害の量を決定することと、を含み、前記患者の皮膚の前記第１部分と比較した前記患者の皮膚の前記第２部分におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの５０％の減少が、有効量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与を示す、前記方法。
（構成５）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物による治療に対する患者のコンプライアンスの監視方法であって、前記患者の皮膚のサンプル中で発現したリン酸化ｃ−Ｊｕｎまたはｃ−Ｊｕｎのレベルを測定すること、及び対照非治療サンプルでの発現レベルと比較して、前記患者の皮膚の前記サンプルにおいて発現レベルが増加または減少しているかどうかを判定することを含み、発現の減少が、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物による治療に対する患者のコンプライアンスを示す、前記方法。
（構成６）
ＪＮＫに関連する疾患もしくは病態またはその症状の治療のための、有効量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与をさらに含む、構成１〜５のいずれかに記載の方法。
（構成７）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を１日約１０ｍｇ〜約１２００ｍｇの量で投与する、構成６に記載の方法。
（構成８）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を約６０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日または約４００ｍｇ／日の量で投与する、構成７に記載の方法。
（構成９）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を経口投与する、構成８に記載の方法。
（構成１０）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物をカプセルまたは錠剤の形態で投与する、構成９に記載の方法。
（構成１１）
前記皮膚を最小紅斑量（ＭＥＤ）の２倍のＵＶＢ照射に曝露する、構成１に記載の方法。
（構成１２）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の約２時間後に、ＵＶＢ照射への皮膚の第２部分の曝露を行う、構成１１に記載の方法。
（構成１３）
ＵＶＢ照射に曝露する皮膚の部分が患者の臀部にある、構成１２に記載の方法。
（構成１４）
ＵＶＢ照射への皮膚の第２部分の曝露の約８時間後に、前記第２の照射した皮膚のサンプルを得る、構成１３に記載の方法。
（構成１５）
前記皮膚におけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量の測定が免疫組織化学分析を含み、一次抗体が前記リン酸化ｃ−Ｊｕｎに対するものであって抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体を形成し、発色酵素と結合した二次抗体とのインキュベーションにより着色して前記皮膚における前記一次抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体の場所を標示する、構成１４に記載の方法。
（構成１６）
前記着色標示の主観的スコアリングまたはレーザー走査型サイトメーターを用いた定量分析をさらに含む、構成１５に記載の方法。
（構成１７）
ＪＮＫに関連する前記疾患または病態が、肝臓線維性障害、脂肪症、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、肝炎、肝細胞癌、またはアルコールの慢性摂取もしくは反復摂取、感染、肝臓移植、もしくは薬物性肝障害に伴う肝繊維症である、構成６に記載の方法。
（構成１８）
２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物に感受性のある患者の特定方法であって、
１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、
２）前記患者に２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに
３）前記第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較すること、
を含み、前記第１皮膚サンプルに対する前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、前記患者は２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物に感受性があることを示す、前記方法。
（構成１９）
患者におけるＪＮＫの阻害の評価方法であって、
１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、
２）前記患者に２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに
３）前記第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較すること、
を含み、前記第１皮膚サンプルに対する前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少が、ＪＮＫの阻害を示す、前記方法。
（構成２０）
患者における２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の用量反応関係の決定方法であって、
１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、
２）前記患者にある用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに
３）前記第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較すること、
を含み、前記第１皮膚サンプルに対する前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの減少がＪＮＫの阻害に比例する、前記方法。
（構成２１）
患者におけるＪＮＫに関連する疾患または病態の治療または管理のための、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の有効量の決定方法であって、
１）ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第１部分から得た第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、
２）前記患者にある用量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与した後、ＵＶＢ照射で照射した患者の皮膚の第２部分から得た第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量を測定すること、ならびに
３）前記第１皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルと前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルとを比較すること、
を含み、前記第１皮膚サンプルに対する前記第２皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎのレベルの５０％の減少が、有効量の２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与を示す、前記方法。
（構成２２）
前記皮膚サンプルの前記皮膚が最小紅斑量（ＭＥＤ）の２倍のＵＶＢ照射に曝露されている、構成１８〜２１のいずれかに記載の方法。
（構成２３）
前記第２皮膚サンプルの前記皮膚が、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物の投与の約２時間後にＵＶＢ照射で照射されている、構成１８〜２２のいずれかに記載の方法。
（構成２４）
前記皮膚サンプルが前記患者の臀部のＵＶＢ照射で照射した皮膚の部分から得られた、構成１８〜２３のいずれかに記載の方法。
（構成２５）
前記第２皮膚サンプルが前記皮膚のＵＶＢ照射への曝露の約８時間後に得られる、構成１８〜２４のいずれかに記載の方法。
（構成２６）
皮膚サンプルにおけるリン酸化ｃ−Ｊｕｎの量の測定が免疫組織化学分析を含み、一次抗体が前記リン酸化ｃ−Ｊｕｎに対して向けられ、抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体を形成し、発色酵素と結合した二次抗体でのインキュベーションにより着色して前記皮膚サンプルにおける前記一次抗体／リン酸化ｃ−Ｊｕｎ複合体の場所を標示する、構成１８〜２５のいずれかに記載の方法。
（構成２７）
前記着色標示の主観的スコアリングまたはレーザー走査型サイトメーターを用いた定量分析をさらに含む、構成２６に記載の方法。
（構成２８）
構成１８〜２７のいずれか１項に記載の方法を含むＪＮＫに関連する疾患もしくは病態またはその症状の治療方法において用いるための、２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物。
（構成２９）
前記方法が１日約１０ｍｇ〜約１２００ｍｇの量の前記化合物または前記薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与することを含む、構成２８に記載の使用のための２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物。
（構成３０）
前記方法が約６０ｍｇ／日、約１６０ｍｇ／日または約４００ｍｇ／日の量の前記化合物または前記薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を投与することを含む、構成２９に記載の使用のための２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物。
（構成３１）
前記方法が前記化合物または前記薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物を経口的に投与することを含む、構成２９または３０に記載の使用のための２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物。
（構成３２）
前記方法が前記化合物または前記薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物をカプセルまたは錠剤の形態で投与することを含む、構成３１に記載の使用のための２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物。
（構成３３）
ＪＮＫに関連する前記疾患または病態が、肝臓線維性障害、脂肪症、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、原発性胆汁性肝硬変、肝炎、肝細胞癌、またはアルコールの慢性摂取もしくは反復摂取、感染、肝臓移植、もしくは薬物性肝障害に伴う肝繊維症からなる群から選択される、構成２９〜３２のいずれかに記載の使用のための２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）−４−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ヒドロキシ−４−メチルシクロヘキシルアミノ）−ピリミジン−５−カルボキサミドまたは薬学的に許容可能なその立体異性体、互変異性体、固体形態、多形体、塩、水和物、クラスレート、もしくは溶媒和物。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】