特許 6941352 特定の波長域を有する光を照射して栽培したエキナセアの抽出物を含有するグルタチオン産生促進剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6941352

(24)【登録日】2021年9月8日

(45)【発行日】2021年9月29日

(54)【発明の名称】特定の波長域を有する光を照射して栽培したエキナセアの抽出物を含有するグルタチオン産生促進剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/28 20060101AFI20210916BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20210916BHJP

   A61P 39/02 20060101ALI20210916BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20210916BHJP

   A61K 8/9789 20170101ALI20210916BHJP

   A61Q 90/00 20090101ALI20210916BHJP

   A01G 7/00 20060101ALI20210916BHJP

   A01H 3/02 20060101ALI20210916BHJP

   A23L 33/105 20160101ALN20210916BHJP

【ＦＩ】

   A61K36/28ZNA

   A61P1/16

   A61P39/02

   A61P43/00 111

   A61K8/9789

   A61Q90/00

   A01G7/00 601C

   A01H3/02

   !A23L33/105

【請求項の数】2

【全頁数】8

(21)【出願番号】特願2017-125156(P2017-125156)

(22)【出願日】2017年6月27日

(65)【公開番号】特開2019-6722(P2019-6722A)

(43)【公開日】2019年1月17日

【審査請求日】2020年4月9日

(73)【特許権者】

【識別番号】592262543

【氏名又は名称】日本メナード化粧品株式会社

(72)【発明者】

【氏名】山羽 宏行

(72)【発明者】

【氏名】田所 修平

(72)【発明者】

【氏名】田中 浩

【審査官】 原口 美和

(56)【参考文献】

【文献】 特開２０１５−１７８４９０（ＪＰ，Ａ）

【文献】 特開２００１−０９８２６３（ＪＰ，Ａ）

【文献】 国際公開第２００３／０３２９６６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】 生物環境調節，2002年，Vol.40, No.2，p.207-213

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ａ６１Ｋ ３６／２８

Ａ６１Ｐ １／１６

Ａ６１Ｐ ４３／００

Ａ６１Ｋ ８／９７８９

Ａ６１Ｑ １９／００

Ａ０１Ｇ ７／００

Ａ０１Ｈ ３／０２

Ａ２３Ｌ ３３／１０５

Ｃ１２Ｑ １／６８

Ｃ１２Ｎ １５／０９

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

波長域５７０〜７３０ｎｍと４００〜５１５ｎｍとの光合成光量子束密度（ＰＰＦＤ）比が４：１〜２：１の光を照射して栽培したエキナセアの水による抽出物を含有することを特徴とするグルタチオン産生促進剤。

【請求項2】

波長域５７０〜７３０ｎｍと４００〜５１５ｎｍとの光合成光量子束密度（ＰＰＦＤ）比が４：１〜２：１の光を照射して栽培したエキナセアの水による抽出物を含有することを特徴とする急性肝臓機能障害の予防及び／又は治療剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、グルタチオン産生促進、急性肝臓機能障害の予防及び治療に有効な新規な医薬品、医薬部外品、化粧品、食品に関する。

【背景技術】

【0002】

肝臓は、タンパク質、糖質及び脂質の代謝や貯蔵に関与する重要な臓器である。一方で、食品や大気、飲料水、飲酒、喫煙、投薬等を通して日常的に体内に取り込まれる有害物質を代謝、無毒化して体外に排出する重要な働きがある。多くの薬物や毒物は、グルタチオン抱合によって解毒化される。しかしながら、これらの薬物や毒物のレベルが肝臓に存在するグルタチオン量を超えると、それらの成分により肝臓機能障害が引き起こされる。

【0003】

急性肝臓機能障害(急性肝炎)は、医薬品の摂取、急激なアルコール摂取やウィルス感染等により発熱などの初期症状を生ずる急性の肝臓機能障害であり、重篤な症状となることもある。とくに、薬物の代謝は肝臓で行われることがほとんどであり、さらに薬物代謝により様々な代謝物も発生するため、医薬品の副作用として肝臓機能障害が起こる割合が高い。

【0004】

肝臓機能障害の予防や治療には、種々の化学合成医薬品が処方されるのが一般的であるが、これらの医薬品自体も副作用の危険性があり、又は効果が十分でないものもあるため、一般的に食事療法との併用などが必要となることがあった。

【0005】

このような理由から、肝臓内の解毒機能に重要な成分であるグルタチオン量を増やすことで、急性肝臓機能障害を予防・治癒することが検討されている（特許文献１、２）。

【0006】

エキナセアの医薬品、医薬部外品、化粧品、食品への利用方法については、細胞増殖促進効果などが報告されている（特許文献３）。また、エキナセアのエタノール抽出物及びその加水分解物がグルタチオン産生促進効果を有することが報告されている（特許文献４）。

【0007】

植物の栽培方法によって植物の薬効を高めるために、エキナセアに特定の波長の光を当てて生育させることにより、従来の太陽光や蛍光灯で栽培した植物よりも抗酸化効果、コラーゲン生成促進効果、マトリックスメタロプロテアーゼ阻害効果、美白効果、細胞増殖促進効果、セラミド産生促進効果及び抗炎症効果が高まることが報告されている（特許文献５）。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】特開２００５−５２０７８７号公報

【特許文献2】特開２０１１−９３８６１号公報

【特許文献3】特開２００３−３４６３１号公報

【特許文献4】ＷＯ２００３／３２９６６号

【特許文献5】特開２０１５−１７８４９０号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

本発明は、安全性の高い天然の植物由来成分を含有する急性肝臓機能障害に有効な予防及び／又は治療剤を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0010】

本発明者らは、この問題点を解決すべく、鋭意研究を重ねた結果、特定の波長域を有する２種の光を同時に照射して栽培したエキナセアの水抽出物に、グルタチオン産生促進効果が優れていることを発見し、本発明を完成するに至った。

【0011】

すなわち、本発明は、以下の（１）〜（３）からなる。

【0012】

（１）波長域５７０〜７３０ｎｍと４００〜５１５ｎｍとの光合成光量子束密度（ＰＰＦＤ）比が８:１〜１：１の光を照射して栽培したエキナセアの水による抽出物を含有することを特徴とするグルタチオン産生促進剤。
（２）波長域５７０〜７３０ｎｍと４００〜５１５ｎｍとの光合成光量子束密度（ＰＰＦＤ）比が８:１〜１：１の光を照射して栽培したエキナセアの水による抽出物を含有することを特徴とする急性肝臓機能障害の予防及び／又は治療剤。
（３）波長域５７０〜７３０ｎｍと４００〜５１５ｎｍとの光合成光量子束密度（ＰＰＦＤ）比が８:１〜１：１の光を照射して栽培することによって、太陽光で栽培したエキナセアと比較して、グルタチオン産生促進効果を高めることを特徴とするエキナセア。

【発明の効果】

【0013】

本発明のエキナセア又はその抽出物は、優れたグルタチオン産生促進効果を有しており、急性肝臓機能障害の予防及び治療に有効な医薬品、医薬部外品、化粧品、食品の分野において貢献できるものである。

【発明を実施するための形態】

【0014】

以下に、本発明について詳細に述べる。

【0015】

本発明に用いるエキナセアの抽出物とは、キク科ムラサキバレンギク属のエキナセア（学名：Ｅｃｈｉｎａｃｅａ ｐｕｒｐｕｒｅａ）の花、実、種子、茎、葉、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものである。その抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱抽出したものであっても良いし、常温抽出したものであっても良い。また、本発明においては、抽出物の代わりに、植物体のまま使用することもでき、生のままでも、乾燥して用いることもでき、目的によって使い分けることができる。さらには、抽出物と植物体を併用することもできる。

【0016】

栽培方法としては、土を用いた栽培や水耕栽培で行うことができる。水耕栽培で行う場合には、種子を播種後、出根した状態で、水耕栽培に供することができる。栽培は、温度、光、二酸化炭素濃度が制御された施設で栽培することが好ましい。栽培温度は、１５〜３０℃、好ましくは２０〜２５℃である。栽培期間は、照射する条件によって異なるが、概ね１０〜３０日で収穫できる。これ以上栽培することも可能である。

【0017】

光源は、植物の栽培施設で用いる光源等を使用することができ、発光ダイオード（ＬＥＤ）、レーザーダイオード等の光半導体素子があげられるが、特定の範囲の波長域が選択的に照射できる光源であれば特に限らない。

【0018】

エキナセアの栽培において、照射する光としては、波長域４００〜５１５ｎｍの青色光、５７０〜７３０ｎｍの赤色光であることが好ましく、波長域４３０〜４６０ｎｍ、６３０〜６８０ｎｍの光がさらに好ましい。これらの光は、同時に照射することが最も好ましい。このときの波長は、照射スペクトルの極大波長（ピーク波長）のことをいう。このような波長のピークを有する光源であれば、独自に作成したものや市販のものを使用することもできる。また、上記波長を選択的に照射できるように、光学フィルタを用いても良い。上記の２種の範囲の光に加え、太陽光や蛍光灯等の光源を使用することもできる。

【0019】

照射する光量としては、光合成光量子束密度（ＰＰＦＤ）として表される。発光体を２種組み合わせて照射する場合には、その合計の光量を意味する。その光量は、発芽後は１０〜３００μｍｏｌ・ｍ^−２ｓ^−１が好ましく、５０〜２００μｍｏｌ・ｍ^−２ｓ^−１がさらに好ましい。この範囲外の光強度の場合は、生育障害、生育不良になる場合がある。照射は、エキナセアの上部１０〜５０ｃｍの位置から照射することが好ましい。照射時間は、植物の特性や目的に応じて適宜変更できるが、６時間以上が好ましく、１２〜２４時間がより好ましい。

【0020】

赤色と青色の光量比においては、それぞれのＰＰＦＤの比を意味しており、収量や有効性など目的に応じて選択が可能である。

【0021】

中でも、植物体の収量を高めるには、赤色と青色の光量比が８：１〜１：１が好ましく、その中でも特に赤色と青色の光量比が４：１〜２：１に高いグルタチオン産生促進効果が認められるので好ましく、さらに好ましくは赤色と青色の光量比が４：１〜３：１がよい。

【0022】

抽出溶媒としては、水が挙げられ、必要に応じて、加熱処理をしてもよい。抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈及び濾過処理、活性炭等による脱色、脱臭処理等をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。また、サラダ等、生で食することもできる。

【0023】

本発明の内用剤又は外用剤には、上記植物体及び／又は抽出物をそのまま使用しても良く、これらの効果を損なわない範囲内で、医薬品、医薬部外品、化粧品又は食品等に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤、賦形剤、皮膜剤、甘味料、酸味料等の成分を配合することもできる。

【0024】

本発明は、医薬品、医薬部外品、化粧品、食品に用いることができ、その剤型としては、例えば、散剤、丸剤、錠剤、注射剤、坐剤、乳剤、カプセル剤、顆粒剤、液剤（チンキ剤、流エキス剤、酒精剤、懸濁剤、リモナーデ剤等を含む）、化粧水、クリーム、マッサージクリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤、ペースト剤、プラスター剤、エッセンス、錠菓、飲料、ティーバッグ、スパイス、サラダ等の生鮮食品等が挙げられる。

【0025】

本発明に用いる上記抽出物の配合量は、内用の場合、投与量は年齢、体重、症状、治療効果、投与方法、処理時間等により異なるが、通常、成人１人当たりの１日の量としては、５ｍｇ以上が好ましく、１０ｍｇ〜５ｇがより好ましい。さらに、１００ｍｇ〜１ｇが最も好ましい。一方、外用の場合、全量に対し、固形物に換算して０．０００１重量％以上が好ましく、０．００１〜１０重量％がより好ましい。さらに、０．０１〜５重量％が最も好ましい。０．０００１重量％未満では十分な効果は望みにくい。１０重量％を越えて配合した場合、効果の増強は認められにくく不経済である。

【0026】

次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いるエキナセアの抽出物の製造例、実験例及び処方例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。製造例に示す％とは重量％を、実施例に示す配合量の部とは重量部を示す。

【実施例1】

【0027】

（１）実験材料及び生育条件
水分を含んだメッシュにエキナセアの種子を播種し、温度２２〜２４℃・暗所で発芽させ、これをスポンジに包み、２２〜２４℃で２４時間白色蛍光灯下で栽培し、育苗した。その後、水耕栽培装置を用いて、室温２１〜２３℃で２４時間、植物の真上３０ｃｍの位置から、青色ＬＥＤ（ピーク波長４５０ｎｍ）及び赤色ＬＥＤ（ピーク波長６６０ｎｍ）を同時に照射し、赤色と青色ＬＥＤの合計光合成光量子束密度１００μｍｏｌ・ｍ^−２ｓ^−１であり、かつ赤色と青色の光量比を８：１〜１：１にして、栽培を行った。また、比較例として太陽光下で栽培を行った。なお、栽培中は光量比を変えなかった。４週間栽培した後、収穫し、生エキナセアを得た。これを約６０℃で温風乾燥させることで、エキナセアの乾燥物を得た。

【0028】

（２）抽出
製造例 熱水抽出物
エキナセアの乾燥物１０ｇに精製水２００ｍＬを加え、９５〜１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して熱水抽出物を得た（表１）。

【0029】

製造例６ 水抽出物
エキナセアの乾燥物１０ｇに精製水２００ｍＬを加え、常温で２４時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥して水抽出物０．１ｇを得た。

【0030】

比較製造例 エタノール抽出物
エキナセアの乾燥物１０ｇにエタノール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、エタノール抽出物を得た（表１）。

【0031】

【表1】

【実施例2】

【0032】

実験例２ グルタチオン産生促進効果
エキナセア抽出物のグルタチオン産生促進効果を、表皮角化細胞におけるグルタチオン合成酵素ＧＳＳ（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ）の遺伝子発現量を指標に測定した。
ヒト表皮角化細胞を６０ｍｍ ｄｉｓｈに１×１０^５個播種し、１０％ＦＢＳを含むＤＭＥＭ培養液にて、３７℃、５％ＣＯ_２条件下で培養した。コンフルエントな状態になったところで、各試料を最終濃度１０μｇ／ｍＬとなるように添加し、２４時間培養した後、細胞にＲＮＡｉｓｏ（Ｔａｋａｒａ）を加え、定法によりＲＮＡを抽出した。Ｃｏｎｔｒｏｌとして、試料未添加の細胞を用いた。得られた総ＲＮＡを基にＲＴ−ＰＣＲ法により、ＧＳＳ、内部標準遺伝子としてＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現量を測定した。ＲＴ−ＰＣＲ法には、ＳＹＢＲ Ｓｅｌｅｃｔ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ （Ｌｉｆｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いた。９５℃２分の初期変性を行った後、ＰＣＲ反応として９５℃１５秒、６０℃３０秒を１ｃｙｃｌｅとして４０ｃｙｃｌｅ行った。ＧＳＳ発現量を内部標準であるＧＡＰＤＨ発現量に対する割合として求めた。
尚、各遺伝子の発現量の測定に使用したプライマーは次の通りである。

【0033】

ＧＳＳ用のプライマーセット
ＴＡＣＧＧＣＴＣＡＣＣＣＡＡＴＧ（配列番号１）
ＴＧＧＣＡＣＧＣＴＧＧＴＣＡＡＡＴＡ（配列番号２）
ＧＡＰＤＨ用のプライマーセット
ＴＧＣＡＣＣＡＣＣＡＡＣＴＧＣＴＴＡＧＣ（配列番号３）
ＴＣＴＴＣＴＧＧＧＴＧＧＣＡＧＴＧＡＴＧ（配列番号４）

【0034】

これらの実験結果を表２に示した。その結果、本発明の抽出物には、優れたＧＳＳ発現促進効果（グルタチオン産生促進効果）が認められた。特に、赤色と青色の光量比が４：１〜２：１の熱水抽出物に、太陽光を照射した抽出物よりも高い効果が認められた。その中でも特に、赤色と青色の光量比が４：１〜３：１に高い効果が認められ、さらに３：１の効果が最も高かった。一方、エタノール抽出物では、赤色と青色の光量比が４：１〜２：１及び太陽光照射のいずれも同等の効果が認められた。赤色と青色の光量比が４：１〜２：１の抽出物では、エタノールよりも熱水抽出物の方が効果が高かった。

【0035】

【表2】

【実施例3】

【0036】

処方例１ 散剤
処方 配合量（部）
１．製造例３の抽出物 ２０．０
２．乾燥コーンスターチ ３０．０
３．微結晶セルロース ５０．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、散剤とする。

【0037】

処方例２ 錠剤
処方 配合量（部）
１．製造例２の抽出物 ３．０
２．乾燥コーンスターチ ２７．０
３．カルボキシメチルセルロースカルシウム ２０．０
４．微結晶セルロース ４０．０
５．ポリビニルピロリドン ７．０
６．タルク ３．０
［製造方法］成分１〜４を混合し、次いで成分５の水溶液を結合剤として加えて顆粒成形する。成形した顆粒に成分６を加えて打錠する。１錠０．５２ｇとする。

【0038】

処方例３ 錠菓
処方 配合量（部）
１．製造例４の抽出物 ０．５
２．乾燥コーンスターチ ５０．０
３．エリスリトール ４０．０
４．クエン酸 ５．０
５．ショ糖脂肪酸エステル ３．０
６．香料 適量
７．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜４及び７を混合し、顆粒成形する。成形した顆粒に成分５及び６を加えて打錠する。１粒１．０ｇとする。

【0039】

処方例４ 飲料
処方 配合量（部）
１．製造例３の抽出物 ２．０
２．果糖ブドウ糖液糖 １２．５
３．クエン酸 ０．１
４．香料 ０．０５
５．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１〜５を混合し、飲料とする。

【0040】

処方例５ ハーブティ
処方 配合量（部）
１．エキナセア乾燥物（太陽光を除く実施例１のエキナセア） ５０．０
２．ペパーミント ２５．０
３．ローズヒップ ２５．０
［製造方法］成分１〜３を混合し、ティーバッグに２ｇを封入してハーブティーとする。

【0041】

処方例６ クリーム
処方 配合量（部）
１．製造例６の抽出物 ０．５
２．スクワラン ５．５
３．オリーブ油 ３．０
４．ステアリン酸 ２．０
５．ミツロウ ２．０
６．ミリスチン酸オクチルドデシル ３．５
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ベヘニルアルコール １．５
９．モノステアリン酸グリセリン ２．５
１０．香料 ０．１
１１．パラオキシ安息香酸メチル ０．２５
１２．１，３‐ブチレングリコール ８．５
１３．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２〜９を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１及び１１〜１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１０を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

【産業上の利用可能性】

【0042】

以上のことから、特定の波長域を有する光を照射して栽培したエキナセアやその抽出物は、優れたグルタチオン産生促進効果を示し、これらを含有する内用剤又は外用剤は急性肝臓機能障害の予防及び治療に有効である。

【配列表】

[この文献には参照ファイルがあります.J-PlatPatにて入手可能です(IP Forceでは現在のところ参照ファイルは掲載していません)]