【図1】金属触媒酸化からの主要なカルボニル化産物を示す。

【図2A】ＬＹ−ＣＨとカルボニル基との間の誘導体化反応を示す。

【図2B】ＣＡＬＹのワークフローを示す。

【図3】図３Ａは、ＬＹ−ＣＨ由来のｍＡｂ試料（ピーク積分の開始及び終了を示す矢印）及び緩衝液ブランク（より低いプロファイル）の２８０ｎｍでの吸光度による、サイズ排除クロマトグラムを示す。図３Ｂは、ＬＹ−ＣＨ由来のｍＡｂ試料（ピーク積分の開始及び終了を示す矢印）及び緩衝液ブランク（より低いプロファイル）の４２８ｎｍでの吸光度による、サイズ排除クロマトグラムを示す。

【図4-1】図４Ａは、２８０ｎｍにおけるポリペプチド及びＬＹ−ＣＨの標準曲線を示す。標準曲線の線形回帰フィット後、ｍ１＝４８１３．９、ｂ１＝−１２５．９８、ｍ３＝３５．５０７、ｂ３＝１．４３２８。図４Ｂは、４２８ｎｍにおけるポリペプチド及びＬＹ−ＣＨの標準曲線を示す。標準曲線の線形回帰フィット後、ｍ２＝１０．０８５、ｂ２＝３．２４５８、ｍ４＝１８．７３５、ｂ４＝１．３９３７。

【図4-2】図４Ａは、２８０ｎｍにおけるポリペプチド及びＬＹ−ＣＨの標準曲線を示す。標準曲線の線形回帰フィット後、ｍ１＝４８１３．９、ｂ１＝−１２５．９８、ｍ３＝３５．５０７、ｂ３＝１．４３２８。図４Ｂは、４２８ｎｍにおけるポリペプチド及びＬＹ−ＣＨの標準曲線を示す。標準曲線の線形回帰フィット後、ｍ２＝１０．０８５、ｂ２＝３．２４５８、ｍ４＝１８．７３５、ｂ４＝１．３９３７。

【図5】１８時間の反応時間での、ＬＹ−ＣＨ対ｍＡｂモル比に関する誘導体化反応条件の最適化を示す。

【図6】８０００：１のＬＹ−ＣＨ対ｍＡｂモル比での、反応時間に関する誘導体化反応条件の最適化を示す。

【図7-1】図７Ａは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のｍＡｂ濃度を示す。図７Ｂは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のモル比を示す。図７Ｃは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のｐＨ値を示す。図７Ｄは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に（濾過による）緩衝液交換ステップの数を示す。図７Ｅは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に注入体積を示す。図７Ｆは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に冷凍／解凍サイクルの数に対する試料の安定性を示す。

【図7-2】図７Ａは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のｍＡｂ濃度を示す。図７Ｂは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のモル比を示す。図７Ｃは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のｐＨ値を示す。図７Ｄは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に（濾過による）緩衝液交換ステップの数を示す。図７Ｅは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に注入体積を示す。図７Ｆは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に冷凍／解凍サイクルの数に対する試料の安定性を示す。

【図7-3】図７Ａは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のｍＡｂ濃度を示す。図７Ｂは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のモル比を示す。図７Ｃは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に誘導体化反応のｐＨ値を示す。図７Ｄは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に（濾過による）緩衝液交換ステップの数を示す。図７Ｅは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に注入体積を示す。図７Ｆは、ＣＡＬＹアッセイの頑強性評価、特に冷凍／解凍サイクルの数に対する試料の安定性を示す。

【図8】オートサンプラー内で２〜８℃で１５時間まで貯蔵されたＬＹ−ＣＨ由来のｍＡｂ試料の安定性に関する頑強性評価を示す。

【図9】３日間、２つの異なるＨＰＬＣ器具上での２名の分析者による共混合試料の分析による、アッセイ線形性及びアッセイ精度に関する方法の性能を示す。

【図10】共混合試料の分析による、アッセイ線形性及びアッセイ精度に関するＤＮＰＨ方法の性能を示す。

【図11】ＰＮＧａｓｅ Ｆ処理を伴う場合と伴わない場合の、酸化ｍＡｂ試料の総タンパク質カルボニル化レベルを示す。

【図12A】結果として生じる総カルボニル化レベルとＦｅ（ＩＩ）との間の関係を示す。

【図12B】結果として生じる総カルボニル化レベルと、金属触媒酸化に使用された過酸化水素濃度との間の関係を示す。

【図12C】総カルボニル化レベルと、金属触媒酸化に使用されたＦｅ（ＩＩ）及び過酸化水素濃度との間の関係を示す。

【図13】様々な量のＦｅ（ＩＩ）（０．１μＭ及び０．８μＭ）ならびにＰＳ２０（０．０２％及び０．１６％、ｗ／ｖ）を含有し、暗所において室温で４、８、及び１６週間貯蔵されたｍＡｂ試料の総タンパク質カルボニル化レベルを示す。条件Ｂ５：０．８μＭ Ｆｅ（ＩＩ）及び０．１６％ ＰＳ２０、条件Ｂ３：０．１μＭ Ｆｅ（ＩＩ）及び０．１６％ ＰＳ２０、条件Ｂ４：０．８μＭ Ｆｅ（ＩＩ）及び０．０２％ ＰＳ２０、条件Ｂ２：０．１μＭ Ｆｅ（ＩＩ）及び０．０２％ ＰＳ２０、条件Ｂ１：Ｆｅ（ＩＩ）またはＰＳ２０なし（対照）。