特許 6987798 癌の治療に変異体ＩＤＨ１阻害剤として有用なチアゾール誘導体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】6987798

(24)【登録日】2021年12月3日

(45)【発行日】2022年1月5日

(54)【発明の名称】癌の治療に変異体ＩＤＨ１阻害剤として有用なチアゾール誘導体

(51)【国際特許分類】

   C07D 417/04 20060101AFI20211220BHJP

   C07D 417/14 20060101ALI20211220BHJP

   C07D 471/08 20060101ALI20211220BHJP

   A61K 31/497 20060101ALI20211220BHJP

   A61K 31/4995 20060101ALI20211220BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20211220BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20211220BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20211220BHJP

【ＦＩ】

   C07D417/04

   C07D417/14CSP

   C07D471/08

   A61K31/497

   A61K31/4995

   A61P35/00

   A61P35/02

   A61K45/00

【請求項の数】18

【全頁数】71

(21)【出願番号】特願2018-567108(P2018-567108)

(86)(22)【出願日】2017年6月21日

(65)【公表番号】特表2019-518770(P2019-518770A)

(43)【公表日】2019年7月4日

(86)【国際出願番号】US2017038549

(87)【国際公開番号】WO2017223202

(87)【国際公開日】20171228

【審査請求日】2020年6月19日

(31)【優先権主張番号】62/353,298

(32)【優先日】2016年6月22日

(33)【優先権主張国】US

(73)【特許権者】

【識別番号】508285606

【氏名又は名称】ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ

(73)【特許権者】

【識別番号】509110851

【氏名又は名称】ザ ユニバーシティー オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒル

(74)【代理人】

【識別番号】110001210

【氏名又は名称】特許業務法人ＹＫＩ国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ボクサー マシュー ブライアン

(72)【発明者】

【氏名】ワン シャオドン

(72)【発明者】

【氏名】ブリマコンブ カイル ライアン

(72)【発明者】

【氏名】エミリー デイビス ミンディ アイリーン

(72)【発明者】

【氏名】ファン ユーホン

(72)【発明者】

【氏名】ホール マシュー

(72)【発明者】

【氏名】ジャドハブ アジット

(72)【発明者】

【氏名】カラヴァディ スレンドラ

(72)【発明者】

【氏名】リウ リー

(72)【発明者】

【氏名】マルティネス ナタリア

(72)【発明者】

【氏名】マクアイヴァー アンドリュー ルイス

(72)【発明者】

【氏名】プラガニ ラジャン

(72)【発明者】

【氏名】ローデ ジェイソン マシュー

(72)【発明者】

【氏名】シメオノフ アントン

(72)【発明者】

【氏名】ヂャオ ウェイ

(72)【発明者】

【氏名】シェン ミン

【審査官】 松澤 優子

(56)【参考文献】

【文献】 特表２０１８−５００３６０（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】（Int.Cl.，ＤＢ名）

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式ＩＩ−Ａの化合物、

【化1】

（ＩＩ−Ａ）
又はその薬学的に許容される塩
（式中、ＣｙＮは、窒素原子を介して結合される環式のアミン基であり、独立して、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_２アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって、任意に置換されてもよく、
Ｘは、Ｃ又はＮであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＨ_２Ｆ、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ基、ジ（Ｃ_１−Ｃ_５アルキル）アミノ基であり、
ｍ及びｎは、各々独立して、１、２又は３であり、及び
少なくとも１つのＲ^１基がオルト置換基であり、式ＩＩ−Ａのアトロプ異性体が、その対応するエナンチオマより過剰に存在する）。

【請求項2】

式ＩＩ−Ｂの化合物、

【化2】

（ＩＩ−Ｂ）
又はその薬学的に許容される塩
（式中、ＣｙＮは、窒素原子を介して結合される環式のアミン基であり、独立して、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_２アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって、任意に置換されてもよく、
Ｘは、Ｃ又はＮであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＨ_２Ｆ、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ基、ジ（Ｃ_１−Ｃ_５アルキル）アミノ基であり、
ｍ及びｎは、各々独立して、１、２又は３であり、及び
少なくとも１つのＲ^１基がオルト置換基であり、式ＩＩ−Ｂのアトロプ異性体が、その対応するエナンチオマより過剰に存在する）。

【請求項3】

式ＩＩ−Ｃの化合物、

【化3】

（ＩＩ−Ｃ）
又はその薬学的に許容される塩
（式中、ＣｙＮは、窒素原子を介して結合される環式のアミン基であり、独立して、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_２アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって、任意に置換されてもよく、
Ｘは、Ｃ又はＮであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＨ_２Ｆ、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ基、ジ（Ｃ_１−Ｃ_５アルキル）アミノ基であり、
ｍ及びｎは、各々独立して、１、２又は３であり、及び
少なくとも１つのＲ^１基がオルト置換基であり、式ＩＩ−Ｃのアトロプ異性体が、その対応するエナンチオマより過剰に存在する）。

【請求項4】

式ＩＩ−Ｄの化合物、

【化4】

（ＩＩ−Ｄ）
又はその薬学的に許容される塩
（式中、ＣｙＮは、窒素原子を介して結合される環式のアミン基であり、独立して、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_２アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって、任意に置換されてもよく、
Ｘは、Ｃ又はＮであり、
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＨ_２Ｆ、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ基、ジ（Ｃ_１−Ｃ_５アルキル）アミノ基であり、
ｍ及びｎは、各々独立して、１、２又は３であり、及び
少なくとも１つのＲ^１基がオルト置換基であり、式ＩＩ−Ｄのアトロプ異性体が、その対応するエナンチオマより過剰に存在する）。

【請求項5】

前記アトロプ異性体が、実質的に対応するエナンチオマを含まない、請求項１から４のいずれか一項に記載のアトロプ異性体化合物又は塩。

【請求項6】

ｍが１であり、Ｒ^２が４−置換基である、または、
Ｒ^２が４−Ｃｌ、４−ＣＦ_３、４−ＣＨＦ_２、４−ＣＨ_３Ｏもしくは４−ＣＮである、または、
ＸがＣであり、Ｒ^２が４−Ｃｌ、４−ＣＦ_３、４−ＣＨＦ_２もしくは４−ＮＣである、または、
ＸがＮであり、Ｒ^２が４−ＣＦ_３、４−ＣＨＦ_２もしくは４−ＣＨ_３Ｏである、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物又は塩。

【請求項7】

ｎが２であり、Ｒ^１が２−Ｃ_２Ｈ_５、５−ＣＨ_３Ｏであるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５、５−Ｃｌであるか、又は２−Ｃｌ、５−（ＣＨ_３）_２Ｎであるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５Ｏ、５−Ｃ_２Ｈ_５Ｏであるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５Ｏ、５−Ｃｌであるか、又は３−Ｃ_２Ｈ_５Ｏ、５−ＮＣであるか、又はジ−２，６−Ｃ_２Ｈ_５である、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物又は塩。

【請求項8】

ＣｙＮ−が以下の通り

【化5】

である、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物又は塩。

【請求項9】

前記アトロプ異性体化合物が、以下の化合物：

【化6】

【化7】

【化8】

【化9】

【化10】

【化11】

【化12】

【化13】

【化14】

【化15】

または

【化16】

の１つである、請求項１に記載のアトロプ異性体化合物又はその塩。

【請求項10】

前記アトロプ異性体化合物が、以下の化合物

【化17】

【化18】

【化19】

【化20】

【化21】

【化22】

【化23】

【化24】

【化25】

【化26】

または

【化27】

の１つである、請求項２に記載のアトロプ異性体化合物又はその塩。

【請求項11】

前記アトロプ異性体化合物が、以下の化合物

【化28】

【化29】

【化30】

の１つである、請求項３に記載のアトロプ異性体化合物又はその塩。

【請求項12】

前記アトロプ異性体化合物が、以下の化合物

【化31】

【化32】

【化33】

の１つである、請求項４に記載のアトロプ異性体化合物又はその塩。

【請求項13】

請求項１〜１２のいずれか１つの化合物又は塩を、薬学的に許容される担体と共に含む、医薬組成物。

【請求項14】

ＩＤＨ１変異の存在を特徴とする癌の治療のための医薬組成物であって、該ＩＤＨ１変異が、患者においてＮＡＤＰＨ依存的なα−ケトグルタレートのＲ（−）−２−ヒドロキシグルタレートへの還元を触媒する酵素の新規な能力をもたらし、前記医薬組成物が請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物又は塩を含む、医薬組成物。

【請求項15】

前記ＩＤＨ１変異が、ＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈ又はＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｃ変異である、請求項１４に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記癌が、膠腫（グリア芽細胞腫）、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、脊髄形成異常／骨髄増殖性の新生物、肉腫、慢性骨髄単球性白血病、非ホジキンリンパ腫、星細胞腫、黒色腫、非小細胞性肺癌、胆管癌、軟骨肉腫又は大腸癌から選択される、請求項１４に記載の医薬組成物。

【請求項17】

Ｏｌｌｉｅｒ病またはＭａｆｕｃｃｉ症候群の治療のための医薬組成物であって、前記医薬組成物が請求項１から１２のいずれか一項に記載の化合物又はその塩を含む、医薬組成物。

【請求項18】

１つ以上の更なる治療剤を更に含む、請求項１４から１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、癌の治療に変異体ＩＤＨ１阻害剤として有用なチアゾール誘導体に関する。

【0002】

（関連出願の相互参照）
本願は、２０１６年６月２２日に出願された米国仮特許出願第６２／３５３，２９８号の優先権を主張し、その全開示内容を本願明細書に援用する。

【背景技術】

【0003】

イソクエン酸脱水素酵素１（ＩＤＨ１、タンパク質登録番号ＮＰ＿００５８８７．２）は、イソシトレートをα−ケトグルタレートに変換する機能を通常有する酵素である。この酵素の変異型（最も一般にはＩＤＨ１（Ｒ１３２Ｈ）、すなわちアルギニン１３２がヒスチジンに変異したもの）は、神経膠腫、胆管癌、軟骨肉腫及びＡＭＬなどの様々な癌において共通に存在する。ＩＤＨ１（Ｒ１３２Ｈ、Ｒ１３２Ｃ、Ｒ１３２Ｓ）変異及び類似のＩＤＨ１変異は、機能獲得変異であり、その結果、該酵素はＮＡＤＰＨ依存的なα−ケトグルタル酸のＲ−２−ヒドロキシグルタル酸エステル（２ＨＧ）への還元を触媒する能力を獲得する。高い２ＨＧのレベルは、ヒトの脳腫瘍のリスクを高めることが示されている。２ＨＧは腫瘍代謝産物と言われ、提唱された作用様式は、過剰なヒストンのメチル化、及び細胞分化の抑制を引き起こすこと、及び癌細胞の分化である。

【0004】

変異体ＩＤＨ１は、抗癌治療のための魅力的な標的である。変異体ＩＤＨ１の阻害は、２ＨＧのレベルを低減する。低い２ＨＧレベルは、未分化の癌細胞の形成を低減すると考えられる。さらに、非癌細胞は、典型的な細胞毒性抗癌剤の毒性を低下させてしまうＩＤＨ１変異を発現しないため、変異ＩＤＨ１の阻害は、これらの細胞にはほとんど影響を及ぼさないと考えられる。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

これらの理由により、変異体ＩＤＨ１阻害剤は、抗癌治療において必要とされている。本開示は、変異体ＩＤＨ１阻害剤を提供するものであり、以下の詳細な説明に記載される更なる利点を有するものである。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本開示は、式ＩＩの化合物

【化1】

又は、その薬学的に許容される塩を包含し、式中、

【0007】

ＣｙＮは、窒素原子を介して結合される環式のアミン基であり、独立して、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_２アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって、任意に置換されてもよく、

【0008】

Ｘは、Ｃ又はＮであり、

【0009】

Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＨ_２Ｆ、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ基、ジ（Ｃ_１−Ｃ_５アルキル）アミノ基であり、

【0010】

ｍ及びｎは、各々独立して、１、２又は３であり、及び

【0011】

【化2】

は、単結合又は二重結合を表し、

【0012】

但し、３−（４−（４−クロロフェニル）チアゾール−２−イル）−１−（２−エチル−５−メトキシフェニル）−６−（２−メチルプロプ−１−エン−１−イル）−５−（ピペラジン−１−カルボニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンアトロプ異性体のラセミ混合物は除く。

【0013】

また、薬学的に許容される担体と共に式ＩＩの化合物又は塩を含む医薬組成物も開示される。

【0014】

また、ＩＤＨ１変異の存在を特徴とする癌の治療方法であって、該ＩＤＨ１変異が、患者においてＮＡＤＰＨ依存的なα−ケトグルタレートのＲ（−）−２−ヒドロキシグルタレートへの還元を触媒する酵素の新規な能力をもたらし、該方法を必要とする患者に、式ＩＩの化合物又はその塩を、投与するステップを含む方法も開示される。

【0015】

幾つかの実施形態では、ＩＤＨ１変異は、ＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈ又はＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｃ変異である。

【0016】

また、ＩＤＨ１変異の存在を特徴とする癌の治療方法であって、該癌が、例えば膠腫（グリア芽細胞腫）、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、脊髄形成異常／骨髄増殖性新生物、肉腫、慢性骨髄単球性白血病、非ホジキンリンパ腫、星細胞腫、黒色腫、非小細胞性肺癌、胆管癌、軟骨肉腫又は大腸癌であり、かかる治療を必要とする患者に対し、本開示に係る化合物又は塩を、治療上有効量で投与することを含む方法も開示される。本開示はまた、Ｏｌｌｉｅｒ病及びＭａｆｕｃｃｉ症候群を治療する方法を包含し、該方法は、かかる治療を必要とする患者に対し、本開示に係る化合物を、治療上有効量で投与することを含む。

【発明を実施するための形態】

【0017】

［用語］
化合物は、標準的な命名法を使用して記載される。別段定義されない限り、本願明細書において使用する全ての専門的及び科学用語は、一般に本発明が帰属する当業者により理解されているのと同じ意味を有する。

【0018】

用語「ａ」及び「ａｎ」は、量の限定を意味せず、参照された項目の少なくとも１つの存在をむしろ意味する。用語「又は」は「及び／又は」を意味する。用語「含む」、「有する」、「包含する」及び「含有する」は、オープンエンドな用語として解釈されるものとする（すなわち「含むがこれに限定されるものではない」ことを意味する）。

【0019】

数値範囲の記載は、本願明細書において別段示されない限り、個々に範囲の中に含まれる各々の値に関連する略記方法として用いることを単に意図するのみであり、またあたかもそれらが本願明細書において個々に記載されるかのように、各々の数値は明細書に組み込まれる。全ての範囲のエンドポイントは範囲の中に含まれて、またそれぞれに組み合わせ可能である。

【0020】

本願明細書において記載される全ての方法は、特に明記しない限り、又は、文脈により明らかに否定されうる限り、本願明細書において、いかなる適切な順序においても実施することができる。特許請求されない限り、全ての例又は例示的語法（例えば「例えば」）の使用は、説明を目的とするものであり、開示の範囲に対する限定を加えるものではない。明細書の用語はいずれも、本発明の実施に対する本質的事項としての特許請求されない要素を示すものとして解釈されてはならない。別段定義されない限り、本願明細書において使用する技術的及び科学的用語は、一般にこの開示の当業者により理解されているのと同じ意味を有する。

【0021】

更に、本開示は、全ての変動、組合せ、順列を包含し、列記された１つ以上の請求項からの１つ以上の限定、要素、用語、及び説明的用語は、他の請求項にも導入されうる。例えば、他の請求項に依存するいかなる請求項も、同じ基礎となる請求項に依存する他のいかなる請求項に存在する１つ以上の限定を含むよう修飾されうる。要素がリストとして示される場合、例えばマーカッシュ形式による場合、要素の各サブグループも開示され、いかなる要素もその群から除去されうる。

【0022】

全ての化合物は、化合物に存在する原子の全ての考えられる同位元素を含むものとして理解される。同位元素は、異なる質量数を有する以外、同じ原子番号を有する原子を包含する。一般的な例としては、限定されないが、水素の同位元素にはトリチウム及びジュウテリウムが含まれ、炭素の同位元素には^１１Ｃ、^１３Ｃ及び^１４Ｃが含まれる。

【0023】

式Ｉには、式Ｉの全ての薬学的に許容される塩が包含される。

【0024】

式ＩＩには、式ＩＩ及び全ての下位式（例えば式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂ）の全ての薬学的に許容される塩が包含される。

【0025】

オープンエンドな用語「含む」は、「基本的に〜からなる」及び「〜からなる」という、中間的及びクローズドエンドな用語を包含する。

【0026】

用語「置換される」とは、指定された原子上の１つ以上の任意の水素又は基が、示される基から選択されるもので置き換えられることを意味するが、ただし指定された原子の通常の原子価を越えることはない。置換基がオキソ基（すなわち＝Ｏ）であるとき、原子上の２つの水素が置換される。芳香族部分がオキソ基により置換されるとき、芳香環は対応する部分的に不飽和な環で置き換えられる。例えば、オキソにより置換されたピリジル基はピリドンである。かかる組合せが安定な化合物又は有用な合成中間体をもたらす場合にのみ、置換基及び／又は可変部の組合せは許容できる。安定化合物又は安定構造は、反応混合物からの単離及び有効な治療薬への更なる製剤化において保持されるのに十分な程の頑強な化合物を意味するものとする。

【0027】

２つの文字又は記号の間で用いるのではないダッシュ（「−」）は、置換基の結合位置を示すために用いる。

【0028】

「アルキル」は、指定された炭素原子数を有する、分岐状及び直鎖状の脂肪族飽和炭化水素基を包含し、一般には１〜８つ程度の炭素原子を含む。本明細書で用いられる用語Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、１、２、３、４、５又は６つの炭素原子を有するアルキル基を示す。他の実施形態は、１〜８つの炭素原子、１〜４つの炭素原子、又は１つもしくは２つの炭素原子を有するアルキル基（例えばＣ_１−Ｃ_８アルキル、Ｃ_１−Ｃ_４アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルキル）を包含する。Ｃ_０−Ｃ_ｎアルキルが他の基、例えば−Ｃ_０−Ｃ_２アルキル（フェニル）に関連して本願明細書において使用されるとき、示される基、この場合フェニル基は、単一の共有結合（Ｃ_０アルキル）によって直接結合されこともあり、又は、指定された炭素原子数（この場合１、２、３又は４炭素原子）を有するアルキル鎖が結合する。アルキルはまた、例えば−Ｏ−Ｃ_０−Ｃ_４アルキル（Ｃ_３−Ｃ_７シクロアルキル）のように、ヘテロ原子などの他の基を介して結合することもある。アルキルの例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、３−メチルブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、及びｓｅｃ−ペンチルが含まれるが、これらに限定されない。

【0029】

「アルケニル」は、指定された炭素原子数を有する鎖に沿っていかなる安定な位置で生じてもよい、１つ以上の炭素−炭素間二重結合を有する分岐状又は直鎖状脂肪族炭化水素基である。アルケニルの例には、限定されないが、エテニル及びプロペニルが包含される。

【0030】

「アルキニル」は、指定された炭素原子数を有する鎖に沿っていかなる安定な位置で生じてもよい、１つ以上の二重の炭素−炭素間三重結合を有する分岐状又は直鎖状脂肪族炭化水素基である。

【0031】

「アルコキシ」は、酸素架橋（−Ｏ−）を介してそれが置換する基に共有結合する、示された炭素原子数を有する上記のアルキル基である。アルコキシの例には、限定されないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、２−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、２−ペントキシ、３−ペントキシ、イソペントキシ、新ペントキシ、ｎ−ヘキソキシ、２−ヘキソキシ、３−ヘキソキシ及び３−メチルペントキシが包含される。同様に、「アルキルチオ」又は「チオアルキル」基は、硫黄架橋（−Ｓ−）を介してそれが置換する基に共有結合する、示された炭素原子数を有する上記のアルキル基である。

【0032】

「ハロ」又は「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素モ又はヨウ素を意味する。

【0033】

「環状アミン」（ＣｙＮ）は、窒素含有ヘテロ環であり、それは示された数の環原子を有する、飽和、不飽和又は芳香族環基であり、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される１〜約３個の更なるヘテロ原子と、炭素である残りが環原子と、を含むものである。環状アミン基には、架橋された環状アミン基（例えば３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン）が包含される。環状アミン基の例には、ピペラジン、ピペリジン、チアゾール、及び架橋された環状アミン基（例えば３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン基）が包含される。

【0034】

「医薬組成物」は、少なくとも１つの活性薬剤（例えば式（Ｉ）の化合物又は塩）と、少なくとも１つの他の物質（例えば担体）と、を含む組成物を意味する。医薬組成物は、米国ＦＤＡによるヒト又はヒト以外の薬剤のためのＧＭＰ（優良製造規範）基準を満たす。

【0035】

「担体」は、活性体の投与に伴い投与される希釈剤、賦形剤又はビヒクルを意味する。「薬学的に許容される担体」は、一般的に安全で、無毒性で、生物学的にもそれ以外においても望ましくないものではない医薬組成物を調製する際に有用な物質（例えば賦形剤、希釈液又はビヒクル）を意味し、ヒト用の医薬のみならず獣医学的な使用においても許容できる担体が含まれる。「薬学的に許容される担体」には、かかる１つ以上の担体が含まれる。

【0036】

「患者」とは、医療的処置を必要とするヒト又はヒト以外の動物を意味する。医療的処置には、既存の症状条件（例えば疾患又は障害）の治療、又は診断的処置が含まれうる。幾つかの実施形態では、患者はヒト患者である。

【0037】

「提供する」とは、与え、投与し、販売し、分配し、（利益又はその他を）移転し、製造し、化合させ、又は配布することを意味する。

【0038】

「治療」又は「治療すること」とは、いずれかの癌症状を測定可能に低下させ、癌の進行を遅延させ、癌を後退させるのに十分な量の活性化合物を患者に提供することを意味する。特定の実施形態において、患者が疾患の症状を提示する前に、癌の治療を開始してもよい。

【0039】

医薬組成物の「治療上有効量」は、患者に投与したときに、症状を改善し、癌の進行を低減し、又は癌を後退させるなどの治療的利益を提供するのに有効な量を意味する。

【0040】

顕著な変化とは、統計的有意差（例えばＳｔｕｄｅｎｔのＴ検定におけるｐ＜０．０５）の標準的なパラメトリック検定において、統計的に有意であるいかなる検出可能な変化であってもよい。

【0041】

［化学構造の説明］
式Ｉ又は式ＩＩの化合物は、１つ以上の非対称要素（例えば立体中心）、対称軸等（例えば不斉炭素原子）を含むことがあり、その結果、該化合物は異なる立体異性体形で存在しうる。これらの化合物は、例えばラセミ化合物又は光学活性形でありうる。２以上の非対称要素を有する化合物の場合、これらの化合物は更にジアステレオマ混合物でありえる。不斉中心を有する化合物の場合、純粋形態及びそれらの混合物を含む全ての光学異性体が包含される。これらの状況では、単一のエナンチオマ（すなわち光学活性形）は、不斉合成（光学的に純粋な前駆体からの合成）によって、又は、ラセミ化合物の光学分割によって得ることができる。ラセミ化合物の光学分割は、例えば分割剤の存在下での結晶化、又は（例えばキラルＨＰＬＣカラムによる）クロマトグラフィなどの従来法によって実施できる。それらを得るために用いる方法に関係なく、全ての形が本願明細書において包含される。

【0042】

活性薬剤の全ての形（例えば溶媒和化合物、光学異性体、鏡像異性体、互変異性体、多形体、フリー体化合物及び塩）は、単独又は組み合わせで使用できる。

【0043】

用語「キラル」は、重ね合わせることができない特性を有する鏡像パートナーの分子を指す。

【0044】

用語「アトロプ異性体」は、分子の他の部分との立体的な相互作用の結果として、分子の単結合についての回転が非常に遅くなるか、又は妨害されるときに発生し、単結合の両端の置換基が非対称である（すなわち、それらは立体中心を必要としない）、立体配座における異性体を意味する。単結合についての回転障害が十分に大きく、またコンフォメーション間の相互転換が十分に遅い場合には、異性体種の分離及び単離が可能になることもある。アトロプ異性体は、単一の不斉原子のないエナンチオマであってもよい。

【0045】

本明細書において、対応するエナンチオマが「実質的にない」アトロプ異性体とは、組成物が、１つのアトロプ異性体を少なくとも９０重量％含み、またその立体異性アトロプ異性体を１０重量％以下で含むことを意味する。いくつかの実施形態では、前記組成物は、１つのアトロプ異性体を少なくとも９５重量％含み、またその立体異性体を５重量％以下で含む。いくつかの実施形態では、前記組成物は、１つのアトロプ異性体を少なくとも９８重量％含み、またその立体異性体を２重量％以下で含む。あるいは、優勢な異性体と少数のエナンチオマとの相対量は、少なくとも９：１、又は少なくとも１９：１、又は少なくとも９８：２である。いくつかの実施形態では、前記組成物は、１つのアトロプ異性体を少なくとも９９重量％含み、またその立体異性体を１重量％以下で含む。いくつかの実施形態では、前記組成物は、１つのアトロプ異性体を少なくとも９９．５重量％含み、またその立体異性体を０．５重量％以下で含む。

【0046】

アトロプ異性体がその対応するエナンチオマよりも「過剰に」存在する、又は「エナンチオ強化混合物」とは、アトロプ異性体がそのエナンチオマより多量に存在し、アトロプ異性体混合物を光学活性にしていることを意味する。これは典型的には、「過剰に」存在する化合物が、そのエナンチオマに対して少なくとも６０／４０の比率で優勢であることを意味する。

【0047】

アトロプ異性体の熱ラセミ化に対するエネルギー障壁は、キラル軸を形成する１つ以上の結合の自由回転における立体障害により測定できる。特定のビアリール化合物では、Ｃ２対称性を欠く環間結合の周囲の回転が制限されたアトロプ異性体状態を示す。異性化（エナンチオマ化）のための自由エネルギー障壁は、回転に関する環間結合の安定性の度合いを表す。光学的及び熱的励起は、電子的及び立体化学的要因に依存し、かかる異性体のラセミ化を促進しうる。

【0048】

２つの芳香環又は偽芳香環を含むオルト置換化合物は、この種の立体配座的回転異性化を示し得る。かかる化合物は、ｓｐ^２−ｓｐ^２炭素−炭素の環間結合、又はｓｐ^２−ｓｐ^２炭素−窒素の環間結合の自由回転を妨害するのに十分な高いエネルギー障壁を有するため、鏡像異性的、キラルアトロプ異性体であり、その部位において、芳香環又は偽芳香環のオルト置換基により分子が非対称となる。

【0049】

異なる環のオルト置換基間の立体相互作用は、平面の構造エネルギーを最大化するのに十分大きい。２つの非平面的な軸方向にキラルなエナンチオマは、それらの相互変換が十分に遅いときにはアトロプ異性体として存在し、他のものが無い状態で単離されうる。１つの定義では、異性体が少なくとも１，０００秒の半減期（ｔ_１／２）であり、３００Ｋにおいて２２．３ｋｃａｌ／モルの自由エネルギー障壁である（９３．３ＫＪ／モル）とき、アトロプ異性体状態が存在すると定義される（Ｏｋｉ，Ｍ．”Ｒｅｃｅｎｔ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ａｔｒｏｐｉｓｏｍｅｒｉｓｍ，”Ｔｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９８３）１４：１）。上記の図の太線及び点線は、それらの部分又は分子の部分を示し、それは回転エネルギー障壁のため立体的に制限される。太字の部分は、ページの面より上に直交して存在し、破線の部分は、ページの面の下に直交して存在する。分子の「平坦な」部分は、ページの平面上に存在する。

【0050】

本発明では、アトロプ異性体は好ましくは、相当な熱的相互変換なしに保存安定性を有し、また安定に使用される。典型的には、アトロプ異性体は、室温で、固体の状態において１週間超の半減期を有する。

【0051】

用語「立体異性体」は、同一の化学構造を有するが、原子又は基の空間配置に関して異なる化合物を指す。

【0052】

用語「ジアステレオマ」は、２以上のキラリティー中心を有し、分子が互いに鏡像でない立体異性体を指す。ジアステレオマは、異なる物性（例えば融点、沸点、分光特性及び反応性）を有する。ジアステレオマの混合物は、高分解能解析手順（例えば電気泳動）、分解剤の存在下での結晶化、又はクロマトグラフィ（例えばキラルＨＰＬＣカラムの使用）により分離できる。

【0053】

用語「エナンチオマ」は、互いに重ね合わせることができない鏡像関係である、２つの化合物の立体異性体を指す。エナンチオマの５０：５０混合物は、ラセミ混合物又はラセミ化合物と呼ばれ、化学反応又はプロセスの立体選択性又は立体特異性がない場合に生じうる。

【0054】

本願明細書において使用する立体化学的定義及び慣例は、Ｓ．Ｐ．Ｐａｒｋｅｒ，Ｅｄ．，ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｒｍｓ（１９８４）ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ Ｂｏｏｋ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、及び、Ｅｌｉｅｌ，Ｅ．ａｎｄ Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．，Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ（１９９４）Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋに従う。多くの有機化合物は光学活性形で存在し、すなわちそれらは平面偏光の平面を回転させる能力を有する。光学活性化合物を記載する際、接頭辞Ｄ及びＬ、又はＲ及びＳは、そのキラル中心に対する分子の絶対配置を示すために用いる。接頭辞ｄ及びｌ、又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光の回転の方向を示すために使用し、（−）又はｌは、化合物が左旋性であることを意味する。（＋）又はｄの接頭辞を有する化合物は右旋性である。

【0055】

「ラセミ混合物」又は「ラセミ化合物」とは、２つの鏡像異性的種の等モル（又は５０：５０）混合物である、光学活性を欠くものである。化学反応又はプロセスの立体選択性又は立体特異性がない場合、ラセミ混合物は生じうる。

【0056】

「互変異性体」又は「互変異性型」とは、通常、単結合及び二重結合のスイッチと連動した水素原子の移動により容易に転換する構造異性体である。

【0057】

「薬学的に許容される塩」は、親化合物が、無機及び有機の、非中毒性の、酸又は塩基付加塩を形成することにより修飾された、本開示に係る化合物の誘導体を包含する。本発明の化合物の塩は、従来の化学的方法によって、塩基性又は酸性部分を含む親化合物から合成できる。一般に、かかる塩は、これらの遊離の酸性型の化合物と、化学当量の適切な塩基（例えばＮａ、Ｃａ、Ｍｇ又は水酸化カリウム、炭酸塩、重炭酸塩等）との反応により、又は、これらの化合物の遊離の塩基型の化合物と、化学当量の適切な酸との反応により調製できる。かかる反応は典型的には、水中で、又は有機溶媒中で、又はそれら２つの混合液中で実施される。通常、使用可能な場合、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリルなどの非水性溶媒が使用される。本発明の化合物の塩には更に、該化合物及び該化合物の塩の溶媒和化合物が包含される。

【0058】

薬学的に許容される塩の例には、限定されないが、アミンなどの塩基性残基の無機又は有機酸塩、カルボキシル酸などの酸性残基のアルカリ又は有機塩が包含される。薬学的に許容される塩には、従来公知の無毒性塩、及び、例えば無毒性の無機又は有機酸から形成される親化合物の第四級アンモニウム塩が包含される。例えば、従来公知の無毒性の酸塩には、塩酸、臭素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸などの無機酸に由来する塩、ならびに、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、ステアリン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、パモ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、フェニル酢酸、グルタミン酸、安息香酸、サリチル酸、メシル酸、エシル酸、ベシル酸、スルファニル酸、２−アセトキシ安息香酸、フマル酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンジスルホン酸、シュウ酸、イセチオン酸、ｎが０〜４であるＨＯＯＣ−（ＣＨ_２）ｎ−ＣＯＯＨ、などの有機酸に由来する塩が包含される。更なる適切な塩のリストは、例えば、Ｇ．Ｓｔｅｆｆｅｎ Ｐａｕｌｅｋｕｈｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２００７，５０，６６６５、及びＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ Ｓａｌｔｓ： Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ Ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２に記載されている。

【0059】

［化学構造の説明］
本願明細書において、変異体ＩＤＨ１を阻害する分子を開示する。

【0060】

発明の概要に示す式Ｉ、式ＩＩの化合物に加えて、本開示にはまた、可変部分（例えばＡ、Ｂ、Ｘ^１、Ｘ^２、Ｙ、Ｚ、Ｒ^１〜Ｒ^２６）が以下のとおり定義される化合物が包含される。安定化合物が得られる限り、本開示はこれらの定義の全ての組合せを包含する。本開示は、式（Ｉ）の以下の具体実施形態を包含する。

【化3】

【0061】

幾つかの実施形態では、式Ｉの化合物は式（ＩＡ）の化合物である。

【化4】

【0062】

Ｒ^１は、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、ニトロ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルチオ、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_２ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_２ハロアルコキシ、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル、−（Ｃ_０−Ｃ_２アルキル）フェニル、−Ｏ−（Ｃ_０−Ｃ_２アルキル）フェニル、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）ＣＯ_２Ｒ^５、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^５Ｒ^６、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル）ＯＲ^５、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）ＮＲ^５Ｒ^６、及び−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）ＮＲ^５Ｃ（Ｏ）Ｒ^６から独立に選択される０〜３個の置換基により置換されるフェニル又はピリジルである。

【0063】

Ｒ^２は、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル又は−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキルである。

【0064】

Ｒ^３は、Ｃ（Ｏ）ＮＲ^７Ｒ^８である。

【0065】

Ｒ^４は、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルである。

【0066】

Ａは、独立にＮ、Ｏ及びＳから選択される１〜４つの環原子を有する５員又は６員の単環のヘテロアリールであり、Ａは、ハロゲン、シアノ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及びＣ_１−Ｃ_６ハロアルコキシ、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキル、−Ｏ（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキル、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）ＣＯ_２Ｒ^５及び−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^５Ｒ^６から独立に選択される０〜２個の置換基により置換される。

【0067】

Ｂは、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルコキシ、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキル、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）フェニル、−Ｏ−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）フェニル、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキル、−Ｏ（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）シクロアルキル、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）ＣＯ_２Ｒ^９、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^９Ｒ^１０、−（Ｃ_０−Ｃ_６アルキル）ＮＲ^９Ｒ^１０及び−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル）ＯＲ^９から独立に選択される０〜３個の置換基により置換されるフェニル又はピリジルである。

【0068】

幾つかの実施形態では、式Ｉの化合物は、式（ＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である。

【化5】

【0069】

ＣｙＮは、窒素原子を介して結合される環式のアミン基であり、独立して、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_２アルキル及びＣ_１−Ｃ_２アルコキシから選択される１つ以上の置換基によって、任意に置換されてもよい。特定の実施形態において、ＣｙＮは非置換である。特定の実施形態において、ＣｙＮは１つのメチル基により置換される。

【0070】

Ｘは、Ｃ又はＮである。

【0071】

Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ_３、ＣＨＦ_２、ＣＨ_２Ｆ、Ｃ_１−Ｃ_１０アルキル基、Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ基、ジ（Ｃ_１−Ｃ_５アルキル）アミノ基である。

【0072】

ｍ及びｎは、各々独立して、１、２又は３である。

【0073】

【化6】

は、単結合又は二重結合を表す。

【0074】

幾つかの実施形態では、式Ｉの化合物は、式ＩＩ−Ａのアトロプ異性体である。

【化7】

【0075】

式ＩＩ−Ａにおいて、少なくとも１つのＲ^１基は、オルト置換基である。

【0076】

式ＩＩ−Ａのアトロプ異性体は、その対応するエナンチオマが過剰に存在する。

【0077】

一部の他の実施形態において、式Ｉの化合物は、式ＩＩ−Ｂのアトロプ異性体である。

【化8】

【0078】

式ＩＩ−Ｂにおいて、少なくとも１つのＲ^１基は、オルト置換基である。

【0079】

式ＩＩ−Ｂのアトロプ異性体は、その対応するエナンチオマが過剰に存在する。

【0080】

幾つかの実施形態では、式Ｉの化合物は、式ＩＩ−Ｃのアトロプ異性体である。

【化9】

【0081】

式ＩＩ−Ｃのアトロプ異性体は、その対応するエナンチオマが過剰に存在する。

【0082】

幾つかの実施形態では、式Ｉの化合物は、式ＩＩ−Ｄのアトロプ異性体である。

【化10】

【0083】

式ＩＩ−Ｄのアトロプ異性体は、その対応するエナンチオマが過剰に存在する。

【0084】

式ＩＩ−ＡからＩＩ−Ｄのアトロプ異性体化合物又は塩は、実質的に対応するエナンチオマを含まない。

【0085】

式ＩＩ及びＩＩ−Ａ〜ＩＩ−Ｄにおいて、ｍは１であり、Ｒ^２は４−置換基である。

【0086】

Ｒ^２は、４−Ｃｌ、４−ＣＦ_３、４−ＣＨＦ_２、４−ＣＨ_３Ｏ又は４−ＣＮである。

【0087】

ＸはＣであり、Ｒ^２は４−Ｃｌ、４−ＣＦ_３、４−ＣＨＦ_２又は４−ＮＣである。

【0088】

ＸはＮであり、Ｒ^２は４−ＣＦ_３、４−ＣＨＦ_２又は４−ＣＨ_３Ｏである。

【0089】

ｎは２であり、Ｒ^１は２，２−Ｃ_２Ｈ_５であるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５、５−ＣＨ_３Ｏであるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５、５−Ｃｌであるか、又は２−Ｃｌ、５−（ＣＨ_３）_２Ｎであるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５Ｏ、５−Ｃ_２Ｈ_５Ｏであるか、又は２−Ｃ_２Ｈ_５Ｏ、５−Ｃｌであるか、又は３−Ｃ_２Ｈ_５Ｏ、５−ＮＣであるか、又はジ−２，６−Ｃ_２Ｈ_５である。
ＣｙＮ−は、以下の通りである。

【化11】

【0090】

式ＩＩ−Ａのアトロプ異性体は、以下の化合物の１つである。

【化12】

【化13】

【化14】

【化15】

【化16】

【化17】

【化18】

【化19】

【化20】

【化21】

【化22】

【0091】

式ＩＩ−Ｂのアトロプ異性体は、以下の化合物の１つである。

【化23】

【化24】

【化25】

【化26】

【化27】

【化28】

【化29】

【化30】

【化31】

【化32】

【化33】

【0092】

式ＩＩ−Ｃのアトロプ異性体は、以下の化合物の１つである。

【化34】

【化35】

【化36】

【0093】

式ＩＩ−Ｄのアトロプ異性体は、以下の化合物の１つである。

【化37】

【化38】

【化39】

【0094】

本開示は、表１に示される構造を有する化合物又はその薬学的に許容される塩を包含する。

【0095】

［治療方法］
式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物、又はそれらの塩、ならびに該化合物を含む医薬組成物は、インビボで腫瘍を後退させることを含む、癌の治療において有用である。癌を治療して、又は腫瘍を後退させる方法は、患者に対し式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物を有効量で提供することを含む。一実施形態では、前記患者は、哺乳動物、より具体的にはヒトである。本開示はまた、ヒト以外の患者（例えばネコ、イヌ及び家畜などのコンパニオンアニマル）を治療する方法を提供する。医薬組成物の有効量は、癌又は癌腫の進行を阻害するか、又は、癌又は癌腫の後退を引き起こすのに十分な量であってもよい。

【0096】

本願明細書に記載される化合物又は医薬組成物の有効量はまた、患者に投与されたとき、式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物を十分な濃度で提供する。十分な濃度とは、障害と戦うのに必要な、患者体内での前記化合物の濃度である。かかる量は、例えば化合物の血中濃度のアッセイによって、又は理論的にバイオアベイラビリティを算出することによって、実験的に確認することができる。

【0097】

治療方法は、式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物の特定の投与量を患者に提供すること含む。約０．１ｍｇ〜約１４０ｍｇ／ｋｇ体重／日（１患者あたり１日約０．５ｍｇ〜約７ｇ）の各化合物の投与量レベルは、上記で示した症状条件の治療において有用である。担体物質との組み合わせで単一投与形態を製造できる前記化合物の量は、治療を受ける宿主や特定の投与方法に依存し変化すると考えられる。薬剤の単位投与形態は一般に、活性化合物を約１ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲で含有すると考えられる。特定の実施形態では、２５ｍｇ〜５００ｍｇ、又は２５ｍｇ〜２００ｍｇの式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物が、患者に毎日提供される。使用する化合物及び治療される具体的疾患に応じて、投与の頻度は変化しうる。しかしながら、ほとんどの疾患及び障害の治療のためには、１日４回以下の投与計画を採用でき、特定の実施形態では、１日１回又は２回の投与計画が採用される。

【0098】

式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物は、癌の治療、及び癌腫を含む腫瘍の後退に使用しうる。ある種の実施形態では、患者は、細胞増殖障害又は疾患に罹患している。細胞増殖障害は、癌、腫瘍（悪性又は良性）、新生物、血管新生又は黒色腫でありえる。治療を受ける癌には、固形癌及び播種性癌が包含される。本願明細書において提供される方法により治療できる例示的な固形癌（腫瘍）としては、例えば肺癌、前立腺癌、胸部癌、肝臓癌、大腸癌、乳癌、腎臓癌、膵臓癌、脳癌、悪性黒色腫を含む皮膚癌、及びカポシ肉腫、精巣又は卵巣癌、腫瘍、腎臓癌（腎細胞）及び肉腫が挙げられる。式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物で治療できる癌にはまた、膀胱癌、乳癌、大腸癌、子宮内膜癌、肺癌、気管支癌、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、血液癌、膵癌、前立腺癌、甲状腺癌、脳又は脊髄癌及び白血病が含まれる。典型的な播種性癌としては、白血病又はホジキン病を含むリンパ腫、多発性骨髄腫及びマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、Ｔ細胞白血病、多発性骨髄腫及びバーキットリンパ腫が挙げられる。特に、癌が固形腫瘍又は播種性癌である患者に対して、式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物を提供することによる癌の治療方法が、本発明に包含される。

【0099】

更に、患者に対して式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物を提供することによる癌の治療方法が包含され、該癌は、膠腫（グリア芽細胞腫）、急性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、脊髄形成異常／骨髄増殖性の新生物、肉腫、慢性骨髄単球性白血病、非ホジキンリンパ腫、星細胞腫、黒色腫、非小細胞性肺癌、胆管癌、軟骨肉腫又は大腸癌から選択される。

【0100】

本開示に係る化合物はまた、内軟骨腫（例えばＯｌｌｉｅｒ’ｓ病及びＭａｆｆｕｃｃｉ症候群）を引き起こす障害の治療にも有用である。

【0101】

しかしながら、いかなる特定の患者のための特定の投与レベルはまた、使用される具体的な化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食事、投与時間、投与経路、排出速度、薬剤の組合せ、及び治療を受ける特定の疾患の重症度などの様々な要因に依存すると理解される。

【0102】

式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物は、疾患及び症状（例えば望ましくない細胞増殖、癌、及び／又は腫瘍増殖）を治療するために、単独で（すなわちレジメンにおける唯一の治療薬として）投与してもよく、又は、他の活性薬剤との組合せで投与してもよい。式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物の１つ以上を、抗悪性腫瘍剤、例えばアルキル化剤（例えばメクロロエタミン、クロランブシル、シクロホスファミド、メルファラン又はイホスファミド）、抗代謝剤（例えばメトトレキサートなどの葉酸アンタゴニスト）、プリンアンタゴニスト（例えば６−メルカプトプリン）、又はピリミジンアンタゴニスト（例えば５−フルオロウラシル）などの、他の１つ以上の化学療法剤のレジメンとの組合せで投与してもよい。その他、限定されないが、式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物の１つ以上と組合わせて使用しうる化学療法剤の例としては、タキサン及びトポイソメラーゼ阻害剤が包含される。加えて、他の活性治療剤の非限定的な例としては、癌と関連するシグナル伝達経路の受容体又はリガンドに特異的に結合することによりそれらの治療効果を奏する、例えばモノクローナル抗体又はＩｇＧキメラ分子などの生物学的薬剤（例えばＣＤ２０に対しては例えばリツキシマブ、又はＶＥＧＦに対しては例えばベバシズマブなどの治療用抗体）が包含される。

【0103】

本願明細書において提供される治療方法はまた、ヒト以外の哺乳動物の（獣医学用途を含む）治療、例えばウマ及び家畜（例えば牛、ヒツジ、ウシ、ヤギ、ブタ等）ならびにペット（例えばイヌ及びネコなどのコンパニオンアニマル）の治療においても有用である。

【0104】

診断又は研究用途においては、齧歯動物（例えばマウス、ラット、ハムスター）、ウサギ、霊長類及びブタ（例えば近交系のブタ）等を含む多様な哺乳動物が適切な被験者であると考えられる。さらに、例えばインヴィトロ診断及び研究などのインヴィトロ用途においては、上記の被験者の体液（例えば血液、血漿、血清、細胞間質液、唾液、排泄物及び尿）ならびに細胞及び組織サンプルが使用に適する。

【0105】

一実施形態では、本発明は、癌障害の治療が必要と診断された患者の、該障害の治療方法を提供し、該方法は、該患者に式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物を有効量で提供することを含む。本発明において提供される式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩ−Ａ及びＩＩ−Ｂの化合物、ならびにそれらの塩は、単独で、又は１つ以上の他の活性薬剤との組合せで投与することができる。

【0106】

一実施形態では、治療される前記癌は、変異したＩＤＨ１の対立遺伝子を有することを特徴とし、すなわちＩＤＨ１の変異の結果、被験者においてα−ケトグルタレートのＲ（−）−２−ヒドロキシグルタレートへのＮＡＤＰＨ依存的な還元反応を触媒する新たな酵素能力を備えるに至ったものである。この実施形態の一態様において、変異体ＩＤＨ１は、Ｒ１３２Ｘ変異を有する。この実施形態の一態様において、Ｒ１３２Ｘ変異は、Ｒ１３２Ｈ、Ｒ１３２Ｃ、Ｒ１３２Ｌ、Ｒ１３２Ｖ、Ｒ１３２Ｓ及びＲ１３２Ｇから選択される。別の態様においては、Ｒ１３２Ｘ変異は、Ｒ１３２Ｈ又はＲ１３２Ｃである。さらに他の態様では、Ｒ１３２Ｘ変異は、Ｒ１３２Ｈである。

【0107】

この実施形態の一態様において、癌治療の有効性を、被験者の２ＨＧのレベルを測定することによりモニターする。典型的には、２ＨＧのレベルを治療前に測定し、高いレベルは、式Ｉの化合物を使用して癌を治療する必要性を表す。高いレベルであると確認した後、治療の途中及び／又は終了後に２ＨＧのレベルを測定し、有効性を確認する。ある種の実施形態では、２ＨＧのレベルを、治療の途中及び／又は終了後にのみ測定する。治療の途中及び治療後における２ＨＧレベルの低減は効果があったことを表す。同様に、２ＨＧレベルが治療の途中又はその後に上昇しないという測定結果もまた、効果的であったことを表す。典型的には、これらの２ＨＧ測定は、例えば、腫瘍及び／又は他の癌関連の病変の数及びサイズの低減、被験者の一般的な健康状態の改善、及び癌治療有効性に関連する他のバイオマーカーの変動など、癌治療の有効性を測定するための他の公知の方法と共に利用される。異なる実施形態において、２ＨＧは、サンプル中で直接測定することによって、又は、例えば高速液体クロマトグラフィ法により誘導体又は代謝産物を測定することによって検出することができる。

【実施例】

【0108】

［略語］
ＢＳＡ ウシ血清アルブミン
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＭＦ ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィ／質量スペクトロメトリー
ＮＡＤＰＨ ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸、還元型
ＮＭＲ 核磁気共鳴法
ＲＰＭＩ Ｒｏｓｗｅｌｌ Ｐａｒｋ記念研究所培地（細胞培地）
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸

【0109】

［一般的方法］
全ての空気又は水分感受性の反応を、オーブン乾燥ガラス容器における窒素の陽圧下で実施した。無水溶媒又は試薬（例えばジクロロメタン、Ｎ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル、メタノール及びトリエチルアミン）は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社から購入した。調製的精製は、Ｗａｔｅｒｓ半調製的ＨＰＬＣシステムにて実施した。カラムはＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８（５ミクロン、３０×７５ｍｍ）を４５ｍＬ／分の流速で使用した。アセトニトリル及び水（各々０．１％のトリフルオロ酢酸を含む）からなる溶液を移動相とした。精製の間、８分にわたる１０％〜５０％のアセトニトリル勾配を使用した。フラクション回収は、ＵＶ検出（２２０ｎＭ）により起動させた。サンプルの分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ ＬＣ／ＭＳ（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社、Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ、ＣＡ）で実施した。純度分析は、１ｍＬ／分の流速で、４％〜１００％アセトニトリル勾配（０．０２５％のトリフルオロ酢酸を含む）で７分間のラン、及び水（０．０５％のトリフルオロ酢酸を含む）で８分間のラン、により測定した。Ａｇｉｌｅｎｔ Ｄｉｏｄｅ Ａｒｒａｙ Ｄｅｔｅｃｔｏｒを用い、５０℃の温度で、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ１８カラム（３ミクロン、３×７５ｍｍ）を用いた。質量測定は、ポジティブモードにて、エレクトロスプレーイオン化に基づき、Ａｇｉｌｅｎｔ ６１３０質量分析装置を用いて実施した。１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、Ｖａｒｉａｎ ４００ ＭＨｚの分光測定装置に記録した。異性体シフトは、ＤＭＳＯ−ｄ６溶液の場合、内標準として非重水素化溶媒（２．５０ｐｐｍのＤＭＳＯ−ｈ６）を用い、ｐｐｍにて示す。バイオアッセイにおいて試験した全てのアナログは、ＬＣＭＳ分析に基づき純度９５％超を有する。高分解能質量分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ ６２１０ Ｔｉｍｅ−ｏｆ−ｆｌｉｇｈｔ ＬＣ／ＭＳシステムに記録した。１ｍＬ／分の流速、４．５分間のラン時間で、４％〜１００％のアセトニトリル勾配（０．０２５％のトリフルオロ酢酸を含む）及び水（０．０５％のトリフルオロ酢酸を含む）を用いた。Ａｇｉｌｅｎｔ Ｄｉｏｄｅ Ａｒｒａｙ Ｄｅｔｅｃｔｏｒを用い、５０℃の温度で、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｘｔｅｎｄ−Ｃ１８カラム（３．５ミクロン、４．６×１００ｍｍ）を用いた。分子式の確認は、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｍａｓｓｈｕｎｔｅｒソフトウェア（バージョンＢ．０２）を用い、ポジティブモードのエレクトロスプレーイオン化に基づき行った。

【0110】

＜実施例１：選択された化合物の合成＞

【化40】

方法１−ニトリル１（ｎｉｔｒｉｌｅ １）
２−ブロモ−１−（４−クロロフェニル）エタノン（２．３３ ｇ、１０ｍｍｏｌ）のエタノール（２５ｍＬ）溶液に、２−シアノエタンチオアミド（１ｇ、１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１５．５時間還流加熱した。反応混合物を０℃に冷却した。生じた沈殿物を濾過により除去し、ヘキサンで洗浄し、真空下で乾燥させた。生産物（２−（４−（４−クロロフェニル）チアゾール−２−イル）アセトニトリル（ニトリルＮ１）は褐色の粉末である。LCMS:m/z(M+H)⁺=235.0、m/z (M+H)⁺= 235.0; 1H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.88 - 7.77 (m, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 2H), 4.17 (s, 2H）

【0111】

【化41】

ニトリル７（ｎｉｔｒｉｌｅ ７）
開始材料として２−ブロモ−１−（４−トリフルオロメチルフェニル）エタノンで置き換え、方法１により合成した。反応後、混合物をシリカゲルクロマトグラフィ（０〜４０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により濃縮し、精製した。LCMS:m/z(M+H)⁺=269.0。

【0112】

【化42】

ニトリル２４（ｎｉｔｒｉｌｅ ２４）
開始材料として２−ブロモ−１−（４−（ジフルオロメチル）フェニル）エタノンで置き換え、方法１により合成した。LCMS:m/z(M+H)⁺=251.0。

【0113】

【化43】

ニトリル２５（ｎｉｔｒｉｌｅ ２５）
開始材料として２−ブロモ−１−（６−（ジフルオロメチル）ピリジン−３−イル）エタノンで置き換え、方法１により合成した。LCMS:m/z(M+H)⁺=252.0

【0114】

【化44】

ニトリル２６（ｎｉｔｒｉｌｅ ２６）
開始材料として２−ブロモ−１−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）エタノンで置き換え、方法１により合成した。LCMS:m/z(M+H)⁺=270.0

【0115】

【化45】

ニトリル３７
開始材料として４−（２−ブロモアセチル）ベンゾニトリルで置き換え、方法１により合成した。LCMS:m/z(M+H)⁺=226.0

【0116】

【化46】

ニトリル３８
２−（４−ブロモチアゾール−２−イル）アセトニトリル（１．４７ｇ、７．２４ｍｍｏｌ）及び（６−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸（２．２１４ｇ、１４．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（体積：２０ｍｌ）の混合物を、炭酸ナトリウム（１０．８６ｍｌ、２１．７２ｍｍｏｌ）２Ｍ溶液及びＰｄ（Ｐｈ_３Ｐ）_４（０．４１８ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を４時間１２５℃でシールしたチューブにおいて加熱し、室温に冷却し、次に酢酸エチルでセライト濾過した。濃縮した濾液をクロマトグラフィ（ヘキサン〜１０：９０のＥＡ／ヘキサン）で精製し、９０％の収率（１．５１ｇ）でニトリル３８を得た。LCMS:m/z(M+H)⁺=232.0

【0117】

【化47】

【化48】

アニリン２（ａｎｉｌｉｎｅ ２）
ステップ１
５ｍｌの５５％硫酸及び４−エチル−３−ニトロアニリン（１．２ｇ、７．２２ｍｍｏｌ）の混合物を懸濁し、次に０℃で２ｍｌの２０％の亜硝酸ナトリウムによりジアゾ化した。次にこのジアゾニウム塩溶液を、沸騰している２５ｍｌの５５％硫酸溶液に徐々に添加した。添加終了後、混合物を３０分間沸騰させ、冷却し、次にエーテルにより抽出した。エーテル溶液を水で洗浄し、希釈した水酸化ナトリウム溶液により抽出し、酸性化し、フェノール化合物を得た。これをエーテルにより抽出し、エーテル溶液を硫酸ナトリウム上で脱水し、蒸留した。

【0118】

ステップ２
４−エチル−３−ニトロフェノール（４６０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）をアセトン（２５ｍｌ）に溶解させ、Ｋ_２ＣＯ_３（１１４１ｍｇ、８．２６ｍｍｏｌ）及びＭｅＩ（０．３４４ｍｌ、５．５０ｍｍｏｌ）を添加し、１２時間還流し、溶媒を濃縮し、４−メトキシ−１−エチル−２−ニトロベンゼンを更に精製せずに次のステップに用いた。

【0119】

ステップ３
４−メトキシ−１−エチル−２−ニトロベンゼンのＴＨＦ（体積：１０ｍｌ）及び水（体積：３．３３ｍｌ）中の懸濁液に、塩化アンモニウム（２９４ｍｇ、５．５０ｍｍｏｌ）、続いて鉄（７６８ｍｇ、１３．７６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を一晩８０℃で撹拌した。冷却後、ＥｔＯＡｃを添加し、反応混合物をセライトで濾過した。有機層を乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィにより精製し、アニリン２（３ステップで２０％）を得た。

【0120】

【化49】

アニリン４（ａｎｉｌｉｎｅ ４）
ステップ１
４−エチルアニリン（１．８ｍｌ、１４．５ｍｍｏｌ）を、０℃で徐々に硫酸（１１ｍｌ）に添加した。材料を凝集させ、濃い褐色混合物を形成させた。これを超音波で破壊し、大部分を溶解させた。混合物を０℃に維持し、そこに硝酸（０．７ｍｌ）更に硫酸（１．７５ｍｌ）を添加した。反応液を１５分間撹拌し、超音波で破壊し材料の残りを溶解させた。混合物を０℃で１時間撹拌し、氷上にその後注入し、茶色の沈殿物を形成させた。沈殿物を濾過により除去し、少量の水により洗浄した。固体を再懸濁し、水酸化アンモニウム溶液により中和した。固体を濾過し、乾燥させた。一部の生成物を水酸化アンモニウムに溶解させ、この層を最初の沈殿物の洗浄液（酸性）と混合し、続いて水酸化ナトリウムペレットで塩基性化した。固体をこの水溶液中で再融解させた。混合した水層をＤＣＭ（４×）により抽出し、硫酸マグネシウム（次に濾過）により脱水し、濃縮し、茶色の油状物（４−エチル−３−ニトロアニリン）を得た。それを更に精製せずに次の工程において用いた（２．１４ｇ、８９％）。LCMS:m/z(M+H)⁺=167.1

【0121】

ステップ２
４−エチル−３−ニトロアニリン（１ｇ、６ｍｍｏｌ）を、濃ＨＣｌ（２０ｍｌ）に溶解させた。化合物は最初に凝固していたが、大部分の材料を最終的に溶解させた。０℃に混合物を冷却した。亜硝酸ナトリウム（０．５７ｇ、８．３ｍｍｏｌ）の水溶液（２．３ｍｌ）を添加し、ガスを発生させた。混合物を超音波で破壊し、更に材料を溶解させた（＊＊この材料は起爆性であるため、再現してはならない！）。混合物を１時間この温度で撹拌した。ジアゾニウム中間体が視認された（ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ（Ｍ）＋＝１７８．０）。塩化銅（Ｉ）（１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）を混合物に添加し、大量のガスを発生させた。反応混合物が濃緑色に変化した。ガス発生が３分以内に終了したが、撹拌を１．５時間室温で継続させた。混合物をＤＣＭ（３ｘ）／水により抽出し、硫酸マグネシウム（次に濾過）により脱水し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（０〜２０％のＥｔＯＡｃ勾配／ヘキサン）によりその後精製し、淡黄色の油状物（４−クロロ−１−エチル−２−ニトロベンゼン（０．９ｇ、８１％）を得た。

【0122】

ステップ３
４−クロロ−１−エチル−２−ニトロベンゼン（２ｇ、１０．７８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）及び水（５ｍＬ）中の混合物に、塩化アンモニウム（１．７２９ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）、続いて鉄（１．７２９ｇ、３２．３ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を１２時間８０℃で加熱した。反応混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃを添加し、反応混合物をセライトで濾過した。有機層を水及び塩水で洗浄した。有機層を乾燥させ、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（１０：９０のＥＡ／ヘキサン〜１００％のＥＡ）で精製し、茶色の油状の生成物として５−クロロ−２−エチルアニリンを得た。LCMS:m/z(M+H)+=156.0。収率〜９０％。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.86 (dd, J = 8.0, 0.7 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 6.44 (dd, J = 8.0, 2.2 Hz, 1H), 5.11 (s, 2H), 2.43 - 2.31 (m, 2H), 1.06 (t, J = 7.5 Hz, 3H)

【0123】

【化50】

アニリン５（ａｎｉｌｉｎｅ ５）
工程２の開始材料として４−エチル−３−ニトロアニリンで置き換え、アニリン２と同様の方法を用いて合成した（２ステップで９０％の収率）。

【0124】

【化51】

アニリン１０（ａｎｉｌｉｎｅ １０）
ステップ１
臭化エチル（１０９ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）及び３−クロロ−２−ニトロフェノール（１７３ｍｇ、１ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４：１、体積：２．５ｍｌ）中の混合物を炭酸カリウム（２７６ｍｇ、２ｍｍｏｌ）で処理した。混合物を２時間室温で撹拌した。反応液を水によりクエンチし、水層を酢酸エチルにより抽出した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で脱水し、濃縮した。粗生成物をクロマトグラフィ（ヘキサン〜１０：９０のＥＡ／ヘキサン）で精製し、生成物を得た。

【0125】

ステップ２
アニリン１の合成におけるステップ２と同様の操作を行い、油状物としてアニリン１０を得た（２ステップで１５％）。

【0126】

【化52】

アニリン１４（ａｎｉｌｉｎｅ １４）
ステップ１の開始材料として４−クロロ−３−ニトロフェノールで置き換え、アニリン１０と同様の方法を用いて合成した（２ステップで３０％の収率）。

【0127】

【化53】

アニリン１８（ａｎｉｌｉｎｅ １８）
ステップ１の開始材料として臭化エチルで置き換え、アニリン１０と同様の方法を用いて合成した（２ステップで８７％の収率）。

【0128】

【化54】

アニリン１９（ａｎｉｌｉｎｅ １９）
ステップ１の開始材料としてヨードエタンで置き換え、アニリン２と同様の方法を用いて合成した（２ステップで９０％の収率）。

【0129】

【化55】

アニリン２０（ａｎｉｌｉｎｅ ２０）
ステップ１の開始材料としてヨードエタンで置き換え、アニリン２と同様の方法を用いて合成した（２ステップで７５％の収率）。

【0130】

【化56】

アニリン２１（ａｎｉｌｉｎｅ ２１）
ステップ１の開始材料として臭化エチルで置き換え、アニリン１０と同様の方法を用いて合成した（２ステップで８０％の収率）。

【0131】

【化57】

方法Ｓ（Ｍｅｔｈｏｄ Ｓ）−化合物２６８
ステップ１
バイアルにおいて、メチル３−オキソブタノエート（０．３８５ｍＬ、３．５７ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ−ＤＭＡ（０．４７４ｍＬ、３．５７ｍｍｏｌ）を１５分間混合し、約１００℃で加熱した。反応混合物が赤色の油状物となった。

【0132】

ステップ２
混合物に、ｉ−ＰｒＯＨ（４０ｍＬ）、２−（４−（４−クロロフェニル）チアゾール−２−イル）アセトニトリル（８３７ｍｇ、３．５７ｍｍｏｌ）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４００ｍｇ、３．５７ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を２時間室温で撹拌し、次に溶媒を除去した。

【0133】

ステップ３
得られた残余物に、酢酸（３０ｍＬ）及び２，６−ジメチルアニリン（６４６μＬ、３．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応液を１５分間撹拌し、混合物を水で希釈し、抽出した（ＥｔＯＡｃ×２）。有機層を混合し（硫酸マグネシウムにより脱水せず）、濃縮した。残余物をＤＭＦ（４０ｍＬ）に添加し、１．５時間１２５℃で加熱した。反応混合物を水及びＥｔＯＡｃで希釈し、抽出し（２×）、有機層を混合し、硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィ（０〜２５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン）（ドライロード）により精製し、メチル５−（４−（４−クロロフェニル）チアゾール−２−イル）−１−（２，６−ジエチルフェニル）−２−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボキシレート（化合物２６８、１．０５ｇ、６０％）を得た。LCMS:m/z(M+H)⁺=493.0

【0134】

【化58】

方法Ｕ（Ｍｅｔｈｏｄ Ｕ）−化合物２６５
５−（４−（４−クロロフェニル）チアゾール−２−イル）−１−（２，６−ジエチルフェニル）−２−メチル６−オキソ−１，６−ジヒドロピリジン−３カルボン酸酸（４０ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）及びシクロパンアミン（０．００９ｍＬ、０．１２５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１．３ｍＬ）中の混合物に、ジイソプロピルエチルアミン（０．０４４ｍＬ、０．２５ｍｍｏｌ）及びＨＡＴＵ（３８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で２時間１５分攪拌し、気流により部分的に濃縮した。残余物をＤＭＳＯに添加し、次に逆相クロマトグラフィにより精製し、化合物２６５を得た。

【0135】

【化59】

方法Ｖ（Ｍｅｔｈｏｄ Ｖ）−化合物１５４
ステップ（ｓｔｅｐ）１〜３
６，６−ジメチルジヒドロ−２Ｈ−ピラン−２，４（３Ｈ）−ジオン（０．５３０ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）及び１，１−ジメトキシ−Ｎ，Ｎ−ジメチルメタンアミン（０．４９５ｍｌ、３．７３ｍｍｏｌ）の混合物を室温で１５分間撹拌した。混合物をＩＰＡ（体積：１０ｍｌ）で希釈し、２−（２−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）チアゾール−５−イル）アセトニトリル（１．０ｇ、３．７３ｍｍｏｌ）及びＫｔＯＢｕ（０．８３７ｇ、７．４６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３時間５０℃で撹拌した。溶媒を除去した。残余物に、２，６−ジエチルアニリン（０．６６５ｍｌ、４．１０ｍｍｏｌ）及び酢酸（１０．７ｍＬ、１８６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を２時間７０℃で撹拌し、室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。有機層を脱水し、濃縮し、カラムクロマトグラフィにより精製した。生成物、１−（２，６−ジエチルフェニル）−７，７−ジメチル−３−（２−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）チアゾール−４−イル）−７，８−ジヒドロ−１Ｈ−ピラノ［４，３−ｂ］ピリジン−２，５−ジオンを得た。LCMS:m/z(M+H)⁺=553.0

【0136】

ステップ４
１−（２，６−ジエチルフェニル）−７，７−ジメチル−３−（２−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）チアゾール−４−イル）−７，８−ジヒドロ−１Ｈ−ピラノ［４，３−ｂ］ピリジン−２，５−ジオン（１ｇ、１．８１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）及びＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中の溶液に水酸化リチウム（０．３０３ｇ、１２．６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物が黄色に変化した。７０℃で１時間撹拌した。気流により濃縮し、ＤＣＭで希釈した。水層のｐＨを１Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ７に調整し、２×２５ｍＬのＤＣＭで抽出し、硫酸マグネシウム上で有機層を脱水し、濃縮した。生成物１−（２，６−ジエチルフェニル）−２−（２−メチルプロプ−１−エン−１−イル）−６−オキソ−５−（２−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）チアゾール−４−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３−カルボン酸を得た。LCMS:m/z(M+H)⁺=553.0。粗製の油状物を更に精製せずに次のステップにおいて用いた。

【0137】

ステップ５及び６
１−（２，６−ジエチルフェニル）−２−（２−メチルプロプ−１−エン−１−イル）−６−オキソ−５−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）チアゾール−２−イル）−１，６−ジヒドロピリジン−３カルボン酸酸（１．０ｇ、１．８１０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（体積：５ｍｌ）溶液に、２−（３Ｈ−［１，２，３］トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−３−イル）−１，１，３，３−テトラメチルイソウロンイウムヘキサフルオロホスフェイト（Ｖ）（１．３７６ｇ、３．６２ｍｍｏｌ）及びＮ−エチル−Ｎ−イソプロピルプロパン−２−アミン（０．７４０ｍｌ、４．５２ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボキシレート（０．６７４ｇ、３．６２ｍｍｏｌ）の混合物を添加し、黄色に変色させ、反応混合物を室温で２時間撹拌し、水で希釈し、３×１０ｍＬのＤＣＭで抽出し、塩水で洗浄した。有機層を脱水し、濃縮した。粗製の油状物を更に精製せずに次のステップにおいて用いた。粗製の油状物をＤＣＭ（５ｍｌ）で希釈し、２，２，２−トリフルオロ酢酸（１．４ｍＬ、１８．１０ｍｍｏｌ）で処理し、反応混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を濃縮し、カラムクロマトグラフィにより精製した。生成物１−（２，６−ジエチルフェニル）−６−（２−メチルプロプ−１−エン−１−イル）−５−（ピペラジン−１−カルボニル）−３−（４−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）チアゾール−２−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（化合物１５４）を得た。LCMS:m/z(M+H)⁺=621.0

【化60】

【0138】

＜実施例２：酵素アッセイ＞
９μＬの最終アッセイ体積で、１５３６ウェルの黒色底プレートにおいてアッセイを実施した。変異体ＩＤＨ１酵素による補因子ＮＡＤＰＨの減少を、第２の酵素ジアフォラーゼ及びその対応する基質レサズリンにカップリングさせた。

【0139】

具体的には、ＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈの場合、３μＬの酵素（４ｍＭのβ−ＭＥ、０．０００５ｍｇ／ｍＬのＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのトリス（ｐＨ７．５）、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．０５％のＢＳＡ）をプレートに添加し、続いて２３ｎＬのＤＭＳＯ中の試験化合物を添加した。プレートの蓋を閉じ、３０分間室温でインキュベートし、３μＬの基質（０．０１６ｍＭのＮＡＤＰＨ、２ｍＭのα−ＫＧ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのトリス（ｐＨ７．５）、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．０５％のＢＳＡ）を添加した。この反応液を６０分間室温でインキュベートし、検出用混合液（０．０６ｍｇ／ｍＬのジアフォラーゼ、０．０３６ｍＭのレサズリン、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２０ｍＭのトリス（ｐＨ７．５）、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．０５％のＢＳＡ）を添加した。５分間のインキュベートの後、レサズリンのレゾルフィンへの転換により発生する蛍光を検出した（励起５４４ｎｍ、放出５９０ｎｍ）。

【0140】

ＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｃの場合、３μＬの酵素（０．０００３２ｍｇ／ｍＬのＩＤＨ１ Ｒ１３２Ｈ、１０％のグリセリン、５０ｍＭのリン酸カリウム（ｐＨ６．５）、５ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．０３％のＢＳＡ）をプレートに添加し、続いて２３ｎＬのＤＭＳＯ中の試験化合物を添加した。プレートの蓋を閉じ、３０分間室温でインキュベートし、３μＬの基質（０．０１２ｍＭのＮＡＤＰＨ、０．６ｍＭのα−ＫＧ、１０％のグリセリン、５０ｍＭのリン酸カリウム（ｐＨ６．５）、５ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．０３％のＢＳＡ）を添加した。この反応液を１０５分間室温でインキュベートし、検出用混合液（０．０３ｍｇ／ｍＬのジアフォラーゼ、０．０３ｍＭのレサズリン、１０％のグリセリン、５０ｍＭのリン酸カリウム（ｐＨ６．５）、５ｍＭのＭｇＣｌ_２、０．０３％のＢＳＡ）を添加した。５分間のインキュベートの後、レサズリンのレゾルフィンへの転換により発生する蛍光を検出した（励起５４４ｎｍ、放出５９０ｎｍ）。

【0141】

＜実施例３：細胞ベースのアッセイ＞
細胞ベースの２ＨＧ定量アッセイを、１００μＬの最終アッセイ体積で、９６ウェルの透明なプレートにおいて実施した。培養細胞の２ＨＧレベルを、ＬＣ／ＭＳベースの検出を用いて測定した。

【0142】

簡潔には、４，０００個細胞／ウェル（変異体Ｒ１３２Ｈ ＩＤＨ１を発現する遺伝子導入Ｕ８７細胞、又はＲ１３２Ｃ変異体ＩＤＨ１を内因的に発現するＨＴ１０８０細胞）で、９６ウェルの透明な細胞培養プレートにプレーティングし、３７℃で一晩接着させた。次に覆っている培地を除去し、滴定量の化合物を含む１００μＬの新しいＲＰＭＩ（１０％のＦＢＳ、フェノールレッドなし）と置き換え、３７℃で４８時間インキュベートした。インキュベート後、覆っている７５μＬの培地を除去して２ＨＧ解析に供するため、ドライアイスで瞬間凍結させた。

【0143】

サンプルを解凍し、２倍量の１００％アセトニトリルと混合し、４℃で１５分間、４，０００ｒｍｐで遠心分離した。得られた上清を回収し、ＲＦ−ＭＳシステムにおける２−ヒドロキシグルタレートレベルの評価に供した。ＡＰＩ４０００質量分析装置（ＡＢ Ｓｃｉｅｘ社、Ｆｏｓｔｅｒ Ｃｉｔｙ、ＣＡ）と連結したＲａｐｉｄＦｉｒｅ ＲＦ２００システム（Ａｇｉｌｅｎｔ社、Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ、ＣＡ）でＲＦ型−ＭＳシステムを構成した。標準的なマイクロタイタープレートの操作用にＺｙｍａｒｋ Ｔｗｉｓｔｅｒロボットアームが装着されている。全システムはＲａｐｉｄＦｉｒｅソフトウェアにより、一方ＲＦ２００システム及び質量分析装置はＡｎａｌｙｓｔソフトウェアにより、それぞれ作動する。移動相を、１００％アセトニトリル（溶媒Ａ）中の０．１％ギ酸、及び水（溶媒Ｂ）中の０．１％ギ酸から構成した。サンプルを３８４ウェルプレートから直接１０μＬサンプルループに吸引し、１秒間、１．５ｍＬ／分の流速で、溶媒Ａにより、グラファイトカーボンカートリッジ（Ａｇｉｌｅｎｔ社）を備えるインライン精製ＳＰＥシステムで濾過した。脱塩ステップの後、カートリッジに保持された検体を、８秒間、０．４ｍＬ／分の流速で、溶媒Ｂにより、質量分析装置へ溶出させた。０．５秒間、１．５ｍＬ／分の流速で、溶媒Ａにより再度カートリッジを平衡化した。全体で、全てのサンプリングサイクルは１ウェルあたり１０秒間であった。各代謝産物は、注入された代謝産物の標準溶液に関して最適化されたＭＳパラメータに基づき、複数の反応モニタリングモード（ＭＲＭ）で操作されるＡＰＩ４０００ ３重項−４重項質量分析における、ネガティブエレクトロスプレーイオン化によりモニターできる。代謝産物は、既知濃度の純粋な代謝産物スタンダードとのピーク面積の比較により定量化できる。

【0144】

次に２ＨＧ代謝産物レベルを測定し、２ＨＧ標準曲線を使用して定量化し、２ＨＧ生成の％阻害を、ビヒクル処理群及び培地のみのコントロール群を使用して算出した。

【0145】

＜実施例４：更なる化合物＞
表１は、実施例１の化合物を生物学的データ及び他のデータとともに示し、また実施例１に示す方法により調製した更なる化合物を示す。回転障害及び溶媒ピーク（ＤＭＳＯ及び水）はいずれも、ＮＭＲシグナルを複雑にし、多くのスペクトルにおいて一部の陽子共鳴が障害を受ける。表２は、実施例１に示す方法により調製できる更なる化合物を示す。開始材料及び反応条件の、当業者にとり明らかなルーチン的変更を適宜行い、表１に開示する具体的な化合物を調製した。「Ａ」は、０．３μＭ未満のＩＣ_５０を有する化合物を意味し、「Ｂ」は、０．３μＭ〜１．０μＭの間のＩＣ_５０を有する化合物を示し、「Ｃ」は、１．０μＭ〜５．０μＭの間のＩＣ_５０を有する化合物を意味し、「Ｄ」は、５．０μＭ〜２０μＭの間のＩＣ_５０を有する化合物を意味し、「Ｅ」は、２０μＭ超のＩＣ_５０を有する化合物を意味する。標準的な酵素阻害アッセイ（例えば実施例２のアッセイ）を用い、化合物のＩＣ_５０を測定した。

【0146】

【表1】

【0147】

【表2】

【0148】

【表3】

【0149】

【表4】

【0150】

【表5】

【0151】

【表6】

【0152】

【表7】

【0153】

【表8】

【0154】

【表9】

【0155】

【表10】

【0156】

【表11】

【0157】

【表12】

【0158】

【表13】

【0159】

【表14】

【0160】

【表15】

【0161】

【表16】

【0162】

【表17】

【0163】

【表18】

【0164】

【表19】

【0165】

【表20】

【0166】

【表21】

【0167】

【表22】

【0168】

【表23】

【0169】

【表24】

【0170】

【表25】

【0171】

【表26】

【0172】

【表27】

【0173】

【表28】

【0174】

【表29】

【0175】

【表30】