特開 2022-116432 細胞培養容器

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2022116432

(43)【公開日】2022-08-10

(54)【発明の名称】細胞培養容器

(51)【国際特許分類】

   C12M 3/00 20060101AFI20220803BHJP

【ＦＩ】

C12M3/00 Z

【審査請求】未請求

【請求項の数】9

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2021012592

(22)【出願日】2021-01-29

(71)【出願人】

【識別番号】519092200

【氏名又は名称】グラドコフ・アレクセイ

(71)【出願人】

【識別番号】519092211

【氏名又は名称】グラドコワ・ニナ

(74)【代理人】

【識別番号】100108442

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 義孝

(72)【発明者】

【氏名】グラドコフ・アレクセイ

(72)【発明者】

【氏名】グラドコワ・ニナ

【テーマコード（参考）】

4B029

【Ｆターム（参考）】

4B029AA08

4B029BB11

4B029GB06

(57)【要約】

【課題】細胞の定着及び増殖を容易に観察することができ、所定面積の培養面を有して多量の細胞を増殖させることができる細胞培養容器を提供する。
【解決手段】細胞培養容器１０Ａは、キャップ１２によって開閉される注入口１８を有する頂壁１３と、頂壁１３から長さ方向の反対側に位置する底壁１４と、頂底壁１３，１４の間に延びる所定面積の周壁１５とを備えている。周壁１５は、頂壁１３と底壁１４との間に位置して長さ方向へ平坦に延びていて細胞培養容器１０Ａの収容スペース１６（内部）において培養される細胞の培養状態を観察可能な所定面積の第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄと、第１～第ｎ観察窓部２２ａ～２２ｄの間に位置して周壁１５の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶとともに、周壁１５の周り方向へ円弧を画いて延びる所定面積の第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｄとを有する。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

内部に細胞培養液が注入されて培養中の細胞の培養状態を観察しつつ該細胞を培養する細胞培養容器において、
前記細胞培養容器が、キャップによって開閉される注入口を有する頂壁と、前記頂壁から長さ方向の反対側に位置する底壁と、前記頂底壁の間に延びる所定面積の周壁とを備え、
前記周壁が、前記頂壁と前記底壁との間に位置して長さ方向へ平坦に延びていて前記細胞培養容器の内部において培養される細胞の培養状態を観察可能な所定面積の観察窓部を有することを特徴とする細胞培養容器。

【請求項2】

前記周壁が、該周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶ複数の第１～第ｎ観察窓部と、前記第１～第ｎ観察窓部の間に位置して前記周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶとともに、該周壁の周り方向へ円弧を画いて延びる所定面積の複数の第１～第ｎ湾曲部とを有する請求項１に記載の細胞培養容器。

【請求項3】

前記第１～第ｎ観察窓部が、前記周壁において径方向へ対向するように対を成して形成され、それら観察窓部の間に位置する前記第１～第ｎ湾曲部が、前記周壁において径方向へ対向するように対を成して形成され、前記周壁では、一方の観察窓部の外面から該一方の観察窓部に対向して該周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部の内面を観察可能である請求項２に記載の細胞培養容器。

【請求項4】

前記第１～第ｎ湾曲部の内周面には、径方向外方へ凹む複数の凹部と径方向内方へ凸となる複数の凸部とのうちの少なくとも一方が形成されている請求項２又は請求項３に記載の細胞培養容器。

【請求項5】

前記第１～第ｎ湾曲部の内周面には、長さ方向又は周り方向の少なくとも一方へに延びる複数の凸条と複数の凹溝とのうちの少なくとも一方が形成されている請求項２又は請求項３に記載の細胞培養容器。

【請求項6】

前記キャップが、所定面積の頂端壁と、前記頂端壁の外周縁から長さ方向へ延びていて内周面にネジが作られた周側壁とを有し、前記キャップの頂端壁には、一端部を中心として前記キャップの径方向へ旋回可能な旋回プレートが設置され、前記細胞培養容器では、前記旋回プレートが径方向外方へ旋回して該旋回プレートの他端部が接地したときに、横臥するように載置された該細胞培養容器が径方向外方へ旋回した旋回プレートによって前記頂壁から前記底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される請求項１ないし請求項５いずれかに記載の細胞培養容器。

【請求項7】

前記旋回プレートが、一方の観察窓部の側から該一方の観察窓部に対向して前記周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部の側に向かって径方向外方へ旋回する請求項６に記載の細胞培養容器。

【請求項8】

前記キャップが、所定面積の頂端壁と、前記頂端壁の外周縁から長さ方向へ延びていて内周面にネジが作られた周側壁とを有し、前記キャップの頂端壁には、該キャップの径方向へスライド可能なスライドプレートが設置され、前記細胞培養容器では、前記スライドプレートが径方向外方へスライドして該スライドプレートの先端部が接地したときに、横臥するように載置された該細胞培養容器が径方向外方へスライドしたスライドプレートによって前記頂壁から前記底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される請求項１ないし請求項５いずれかに記載の細胞培養容器。

【請求項9】

前記スライドプレートが、一方の観察窓部から該一方の観察窓部に対向して前記周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部に向かって径方向外方へスライドする請求項８に記載の細胞培養容器。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、内部に細胞培養液が注入されて培養中の細胞の培養状態を観察しつつ該細胞を培養する細胞培養容器に関する。

【背景技術】

【0002】

生体環境に近い人工的な環境下において生体から分離した細胞を培養し、培養した細胞を用いて各種疾患の治療が行われている。そのような細胞の一例としては、足場となる箇所に定着して増殖する繊維芽細胞や間葉系細胞、間葉系幹細胞等の定着性細胞がある。定着性細胞は、培養面を有する細胞培養容器を利用して増殖させる。細胞培養容器の一例が特許文献1に開示されている。特許文献1に開示の細胞培養容器は、一端に開口部を有して内部に細胞を収容可能な容器本体と、開口部に取り付けられて開口部を開閉するキャップとを備えている。容器本体は、透明な合成樹脂又はガラスから作られ、所定面積の略矩形の底面（培養面）を有する。容器本体に生体から分離した細胞と培養液とを注入し、容器本体の底面に細胞を定着させて細胞を増殖させる。細胞を培養する過程では、容器本体の底面に細胞が定着したかを観察するとともに、定着した細胞が増殖かつ活性化したかを観察する。

【特許文献1】特開２０１５－１７１３４４号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0003】

特許文献1に開示の細胞培養容器は、その略矩形の頂面から略矩形の底面（培養面）を観察することができ、観察に適している反面、その培養面が底面のみに限られ、培養面の面積が小さく、細胞を多量に増殖させることができず、細胞を効率よく培養することができない。この細胞培養容器を利用して細胞を多量に増殖させるには、容器サイズを大きくする必要があるとともに、多数の容器を用いる必要があるが、容器サイズには限界があり、多数の容器を用いる場合、その培養過程における管理が困難になる。

【0004】

本発明の目的は、細胞の定着及び増殖を容易に観察することができ、所定面積の培養面を有して多量の細胞を増殖させることができるとともに、細胞を効率よく培養することができる細胞培養容器を提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0005】

前記課題を解決するための本発明の前提は、内部に細胞培養液が注入されて培養中の細胞の培養状態を観察しつつ該細胞を培養する細胞培養容器である。

【0006】

前記前提における本発明の特徴としては、細胞培養容器が、キャップによって開閉される注入口を有する頂壁と、頂壁から長さ方向の反対側に位置する底壁と、頂底壁の間に延びる所定面積の周壁とを備え、周壁が、頂壁と底壁との間に位置して長さ方向へ平坦に延びていて細胞培養容器の内部において培養される細胞の培養状態を観察可能な所定面積の観察窓部を有することにある。

【0007】

本発明の一例としては、周壁が、周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶ複数の第１～第ｎ観察窓部と、第１～第ｎ観察窓部の間に位置して周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶとともに、周壁の周り方向へ円弧を画いて延びる所定面積の複数の第１～第ｎ湾曲部とを有する。

【0008】

本発明の他の一例としては、第１～第ｎ観察窓部が、周壁において径方向へ対向するように対を成して形成され、それら観察窓部の間に位置する第１～第ｎ湾曲部が、周壁において径方向へ対向するように対を成して形成され、周壁では、一方の観察窓部の外面から一方の観察窓部に対向して周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部の内面を観察可能である。

【0009】

本発明の他の一例として、第１～第ｎ湾曲部の内周面には、径方向外方へ凹む複数の凹部と径方向内方へ凸となる複数の凸部とのうちの少なくとも一方が形成されている。

【0010】

本発明の他の一例として、第１～第ｎ湾曲部の内周面には、長さ方向又は周り方向の少なくとも一方へに延びる複数の凸条と複数の凹溝とのうちの少なくとも一方が形成されている。

【0011】

本発明の他の一例としては、キャップが、所定面積の頂端壁と、頂端壁の外周縁から長さ方向へ延びていて内周面にネジが作られた周側壁とを有し、キャップの頂端壁には、一端部を中心としてキャップの径方向へ旋回可能な旋回プレートが設置され、細胞培養容器では、旋回プレートが径方向外方へ旋回して旋回プレートの他端部が接地したときに、横臥するように載置された細胞培養容器が径方向外方へ旋回した旋回プレートによって頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される。

【0012】

本発明の他の一例としては、旋回プレートが、一方の観察窓部の側から一方の観察窓部に対向して周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部の側に向かって径方向外方へ旋回する。

【0013】

本発明の他の一例としては、キャップが、所定面積の頂端壁と、頂端壁の外周縁から長さ方向へ延びていて内周面にネジが作られた周側壁とを有し、キャップの頂端壁には、キャップの径方向へスライド可能なスライドプレートが設置され、細胞培養容器では、スライドプレートが径方向外方へスライドしてスライドプレートの先端部が接地したときに、横臥するように載置された細胞培養容器が径方向外方へスライドしたスライドプレートによって頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される。

【0014】

本発明の他の一例としては、スライドプレートが、一方の観察窓部から一方の観察窓部に対向して周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部に向かって径方向外方へスライドする。

【発明の効果】

【0015】

本発明に係る細胞培養容器によれば、頂壁と底壁との間に位置して長さ方向へ平坦に延びていて細胞培養容器の内部において培養される細胞の培養状態を観察可能な所定面積の観察窓部が周壁に形成されているから、培養中の細胞の培養状態を観察窓部から観察することができ、周壁への細胞の定着及び増殖を容易に観察することができる。細胞培養容器は、観察窓部を含む所定面積の周壁（培養面）に細胞を定着させるとともに周壁（培養面）において細胞を増殖させるから、所定面積の培養面（周壁）を有して多量の細胞を増殖させることができ、細胞を効率よく培養することができる。

【0016】

周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶ複数の第１～第ｎ観察窓部と、第１～第ｎ観察窓部の間に位置して周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並ぶとともに、周壁の周り方向へ円弧を画いて延びる所定面積の複数の第１～第ｎ湾曲部とを有する細胞培養容器は、複数の第１～第ｎ観察窓部を利用して培養中の細胞の培養状態をそれら観察窓部から観察することができ、第１～第ｎ観察窓部及び第１～第ｎ観察窓部（周壁）への細胞の定着及び増殖を容易に観察することができる。細胞培養容器は、第１～第ｎ観察窓部及び第１～第ｎ観察窓部からなる周壁（培養面）に細胞を定着させるとともに周壁（培養面）において細胞を増殖させるから、所定面積の培養面（周壁）を有して多量の細胞を増殖させることができ、細胞を効率よく培養することができる。

【0017】

第１～第ｎ観察窓部が周壁において径方向へ対向するように対を成して形成され、それら観察窓部の間に位置する第１～第ｎ湾曲部が周壁において径方向へ対向するように対を成して形成され、一方の観察窓部の外面から一方の観察窓部に対向して周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部の内面を観察可能である細胞培養容器は、一方の観察窓部の外面から他方の観察窓部の内面を観察することができるから、周壁（培養面）への細胞の定着及び増殖を容易に観察することができ、第１～第ｎ観察窓部のうちの一方の観察窓部から他方の観察窓部を観察することで定着かつ増殖する培養中の細胞の培養状態を正確に観察かつ把握することができる。

【0018】

径方向外方へ凹む複数の凹部と径方向内方へ凸となる複数の凸部とのうちの少なくとも一方が第１～第ｎ湾曲部の内周面に形成されている細胞培養容器は、複数の凹部と複数の凸部とのうちの少なくとも一方を第１～第ｎ湾曲部の内周面に形成することで、第１～第ｎ湾曲部の内周面の表面積を大きくすることができ、表面積を大きくした第１～第ｎ湾曲部（培養面）において多量の細胞を増殖させることができるとともに、細胞を効率よく培養することができる。

【0019】

長さ方向又は周り方向の少なくとも一方へに延びる複数の凸条と複数の凹溝とのうちの少なくとも一方が第１～第ｎ湾曲部の内周面に形成されている細胞培養容器は、長さ方向又は周り方向の少なくとも一方へに延びる複数の凸条と複数の凹溝とのうちの少なくとも一方を第１～第ｎ湾曲部の内周面に形成することで、第１～第ｎ湾曲部の内周面の表面積を大きくすることができ、表面積を大きくした第１～第ｎ湾曲部（培養面）において多量の細胞を増殖させることができるとともに、細胞を効率よく培養することができる。

【0020】

キャップが所定面積の頂端壁と頂端壁の外周縁から長さ方向へ延びていて内周面にネジが作られた周側壁とを有し、一端部を中心としてキャップの径方向へ旋回可能な旋回プレートがキャップの頂端壁に設置され、旋回プレートが径方向外方へ旋回して旋回プレートの他端部が接地したときに、横臥するように載置された細胞培養容器が径方向外方へ旋回した旋回プレートによって頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される細胞培養容器は、横臥した細胞培養容器の頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態を旋回プレートによって保持することで、細胞及び細胞培養液が底壁の側に集中し、注入された細胞培養液が底壁の側に偏って細胞培養液の圧力が底壁の側で大きくなり、それによって細胞の活性を高めることができ、細胞を確実かつ効率的に増殖させることができる。

【0021】

旋回プレートが一方の観察窓部の側から一方の観察窓部に対向して周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部の側に向かって径方向外方へ旋回する細胞培養容器は、横臥した細胞培養容器の頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態を旋回プレートによって保持しつつ、傾斜した細胞培養容器の一方の観察窓部の外面から他方の観察窓部の内面を観察することができ、第１～第ｎ観察窓部のうちの一方の観察窓部から他方の観察窓部を観察することで定着かつ増殖する培養中の細胞の培養状態を正確に観察かつ把握することができるとともに、傾斜した細胞培養容器を利用することで細胞を確実かつ効率的に増殖させることができる。

【0022】

キャップが所定面積の頂端壁と頂端壁の外周縁から長さ方向へ延びていて内周面にネジが作られた周側壁とを有し、キャップの径方向へスライド可能なスライドプレートがキャップの頂端壁に設置され、スライドプレートが径方向外方へスライドしてスライドプレートの先端部が接地したときに、横臥するように載置された細胞培養容器が径方向外方へスライドしたスライドプレートによって頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される細胞培養容器は、横臥した細胞培養容器の頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態をスライドプレートによって保持することで、細胞及び細胞培養液が底壁の側に集中し、注入された細胞培養液が底壁の側に偏って細胞培養液の圧力が底壁の側で大きくなり、それによって細胞の活性を高めることができ、細胞を確実かつ効率的に増殖させることができる。

【0023】

スライドプレートが一方の観察窓部から一方の観察窓部に対向して周壁の径方向の対向側に位置する他方の観察窓部に向かって径方向外方へスライドする細胞培養容器は、横臥した細胞培養容器の頂壁から底壁に向かって下り勾配に傾斜した状態をスライドプレートによって保持しつつ、傾斜した細胞培養容器の一方の観察窓部の外面から他方の観察窓部の内面を観察することができ、第１～第ｎ観察窓部のうちの一方の観察窓部から他方の観察窓部を観察することで定着かつ増殖する培養中の細胞の培養状態を正確に観察かつ把握することができるとともに、傾斜した細胞培養容器を利用することで細胞を確実かつ効率的に増殖させることができる。

【図面の簡単な説明】

【0024】

【図1】一例として示す細胞培養容器の斜視図。

【図2】図１の細胞培養容器の正面図及び側面図。

【図3】第１～第４湾曲部の内周面に形成された凹部及び凸部の一例を示す図。

【図4】一例として示すキャップの拡大斜視図。

【図5】図４のキャップの拡大側面図。

【図6】旋回プレートによって傾斜した状態で示す細胞培養容器の側面図。

【図7】他の一例として示すキャップの拡大斜視図。

【図8】図７のキャップの拡大側面図。

【図9】スライドプレートによって傾斜した状態で示す細胞培養容器の側面図。

【図10】他の一例として示す細胞培養容器の斜視図。

【図11】図１０の細胞培養容器の正面図及び側面図。

【図12】第１～第８湾曲部の内周面に形成された凸条及び凹溝の一例を示す図。

【発明を実施するための形態】

【0025】

一例として示す細胞培養容器１０Ａの斜視図である図１等の添付の図面を参照し、本発明にかかる細胞培養容器の詳細を説明すると、以下のとおりである。尚、図２は、図１の細胞培養容器１０Ａの正面図及び側面図であり、図３は、第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７に形成された凹部２４及び凸部２５の一例を示す図である。図１，２では、キャップ１２に設置された旋回プレート２９及びスライドプレート３３の図示を省略している。図1では、長さ方向を矢印Ａ、周り方向を矢印Ｂで示し、径方向を矢印Ｃで示す。

【0026】

細胞培養容器１０Ａ（細胞培養容器１０Ｂを含む）は、その収容スペース１６（内部）に細胞培養液が注入されるとともに生体から分離した細胞が収容され、培養中の細胞の培養状態を観察しつつ細胞を培養する。細胞培養容器１０Ａは、容器本体１１及びキャップ１２（蓋体）を備えている。容器本体１１及びキャップ１２は、無色透明な合成樹脂、無色透明なガラス、無色透明な石英のいずれかから作られている。合成樹脂としては、ポリエチレンテレフタレート樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリエステル樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、ＡＢＳ樹脂、ナイロン、アクリル樹脂、フッ素樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリウレタン樹脂、メチルペンテン樹脂、フェノール樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、塩化ビニル樹脂等を使用することができる。

【0027】

容器本体１１は、径方向へ延びる所定面積の頂壁１３と、頂壁１３から長さ方向の反対側に位置して径方向へ延びる所定面積の底壁１４と、頂底壁１３，１４の間に位置して長さ方向へ延びる所定面積の周壁１５とを備えている。容器本体１１には、頂底壁１３，１４と周壁１５とに囲繞された長さ方向へ長い筒状の所定容積の収容スペース１６（内部）が形成されている。容器本体１１の内周面１７には、表面親水化処理が施されている。

【0028】

頂壁１３は、容器本体１１の収容スペース１６に細胞培養液や細胞を注入するとともに収容スペース１６から細胞培養液や細胞を排出する円形の注入口１８（開口）と、注入口１８を囲繞する首部１９と、首部１９が繋がる肩部２０とを有する。頂壁１３は、周壁１５の後記する第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄの頂縁が繋がる第１～第４直状外周縁と、周壁１５の後記する第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの頂縁が繋がる第１～第４湾曲外周縁とを有する。首部１９の外周面には、ネジ（雄ネジ又は雌ネジ）が作られているとともに、径方向外方へ延出するフランジ２１が作られている。注入口１８（開口）は、キャップ１２（蓋体）によって開閉される。底壁１４は、周壁１５の第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄの底縁が繋がる第１～第４直状外端縁と、周壁１５の第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの底縁が繋がる第１～第４湾曲外端縁とを有する。

【0029】

周壁１５は、頂底壁１３，１４と略直交し、その頂縁が頂壁１３（肩部２０）の外周縁（第１～第４直状外周縁及び第１～第４湾曲外周縁）に連接され、その底縁が底壁１４の外周縁（第１～第４直状外周縁及び第１～第４湾曲外周縁）に連接されている。周壁１５には、頂壁１３と底壁１４との間に位置して長さ方向へ平坦に延びる所定面積の複数の第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ（第１～第ｎ観察窓部）が形成されているとともに、頂壁１３と底壁１４との間に位置して長さ方向へ延びる所定面積の複数の第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄ（第１～第ｎ湾曲部）が形成されている。第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄからは、収容スペース１６において培養される細胞の培養状態を観察可能である。

【0030】

第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ（第１～第ｎ観察窓部）は、第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの間に位置して周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並んでいる。第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄでは、第１観察窓部２２ａが第４湾曲部２３ｄと第１湾曲部２３ａとの間に位置し、第２観察窓部２２ｂが第１湾曲部２３ａと第２湾曲部２３ｂとの間に位置しているとともに、第３観察窓部２２ｃが第２湾曲部２３ｂと第３湾曲部２３ｃとの間に位置し、第４観察窓部２２ｄが第３湾曲部２３ｃと第４湾曲部２３ｄとの間に位置している。

【0031】

第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄは、その平面形状が同形同大であって長さ方向へ長い平坦な略四角形に成形されている。第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄは、周壁１５において径方向へ対向するように対を成して形成されている。第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄでは、第１観察窓部２２ａに対して第３観察窓部２２ｃが径方向に対向し、第１観察窓部２２ａと第３観察窓部２２ｃとが径方向へ対を成し、第２観察窓部２２ｂに対して第４観察窓部２２ｄが径方向に対向し、第２観察窓部２２ｂと第４観察窓部２２ｄとが径方向へ対を成している。

【0032】

第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄ（第１～第ｎ湾曲部）は、第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄの間に位置して周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並んでいる。第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄでは、第１湾曲部２３ａが第１観察窓部２２ａと第２観察窓部２２ｂとの間に位置し、第２湾曲部２３ｂが第２観察窓部２２ｂと第３観察窓部２２ｃとの間に位置しているとともに、第３湾曲部２３ｃが第３観察窓部２２ｃと第４観察窓部２２ｄとの間に位置し、第４湾曲部２３ｄが第４観察窓部２２ｄと第１観察窓部２２ａとの間に位置している。

【0033】

第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄは、その平面形状が同形同大であって周壁１５の周り方向へ円弧を画いて延びている。第１湾曲部２３ａは、第１観察窓部２２ａと第２観察窓部２２ｂとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画き、第２湾曲部２３ｂは、第２観察窓部２２ｂと第３観察窓部２ｃとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画いている。第３湾曲部２３ｃは、第３観察窓部２２ｃと第４観察窓部２２ｄとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画き、第４湾曲部２３ｄは、第４観察窓部２２ｄと第１観察窓部２２ａとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画いている。

【0034】

第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄは、周壁１５において径方向へ対向するように対を成して形成されている。第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄでは、第１湾曲部２３ａに対して第３湾曲部２３ｃが径方向に対向し、第１湾曲部２３ａと第３湾曲部２３ｃとが径方向へ対を成し、第２湾曲部２３ｂに対して第４湾曲部２３ｄが径方向に対向し、第２湾曲部２３ｂと第４湾曲部２３ｄとが径方向へ対を成している。第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７には、図３に示すように、径方向外方へ凹む複数の凹部２４と径方向内方へ凸となる複数の凸部２５とが形成されている。第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７に凹部２４及び凸部２５を形成することで、第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７が平坦な場合と比較し、第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７の表面積が増加する。

【0035】

第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄは、その周り方向の長さが第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄの周り方向の長さより長く、その面積が第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄの面積よりも大きい。尚、複数の凹部２４と複数の凸部２５とのうちのいずれか一方が第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７に形成されていてもよい。又、長さ方向又は周り方向のいずれか一方へに延びる複数の凸条と複数の凹溝とのうちの少なくとも一方が第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７に形成されていてもよい。

【0036】

細胞培養容器１０Ａの周壁１５では、第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）の外面から第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第３観察窓部２２ｃ（他方の観察窓部）の内面を観察可能であり、第３観察窓部２２ｃ（一方の観察窓部）の外面から第３観察窓部２２ｃ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第１観察窓部２２ａ（他方の観察窓部）の内面を観察可能である。更に、第２観察窓部２２ｂ（一方の観察窓部）の外面から第２観察窓部２２ｂ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第４観察窓部２２ｄ（他方の観察窓部）の内面を観察可能であり、第４観察窓部２２ｄ（一方の観察窓部）の外面から第４観察窓部２２ｄ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第２観察窓部２２ｂ（他方の観察窓部）の内面を観察可能である。

【0037】

尚、容器本体１１の内周面１７（第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ及び第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７）には、ゼラチンや細胞外基質、ポリカチオン類が塗布されていてもよい。細胞外基質には、コラーゲンやラミニン、フィブロネクチン等を使用することができ、ポリカチオン類には、ポリリジン、ポリエチレンイミン、ポリオルチニン等を使用することができる。容器本体１１の内周面１７（培養面）にゼラチンや細胞外基質、ポリカチオン類を塗布することで、容器本体１１の内周面１７における細胞の付着性を向上させることができる。

【0038】

キャップ１２は、所定面積の頂端壁２６と、頂端壁２６の外周縁から長さ方向へ延びる周側壁２７とを有する。周側壁２７の内周面には、ネジ（雄ネジ又は雌ネジ）が作られている。周側壁２７の内周面に作られたネジに首部１９の外周面に作られたネジを螺着することで、容器本体１１の注入口１８（開口）を塞ぐことができる。

【0039】

図４は、一例として示すキャップ１２の拡大斜視図であり、図５は、図４のキャップ１２の拡大側面図である。図６は、旋回プレート２９によって傾斜した状態で示す細胞培養容器１０Ａの側面図である。図４，５では、旋回プレート２９の旋回前及び旋回後を示す。キャップ１２の頂端壁２６には、径方向へ延びる設置溝２８が形成されている。頂端壁２６の設置溝２８には、旋回プレート２９が設置されている。

【0040】

旋回プレート２９は、径方向へ長い四角形に成形され、一端部３０と一端部３０の反対側に位置する他端部３１とを有する。旋回プレート２９では、その一端部３０が設置溝２８の端部に軸を介して回転可能に連結されている。旋回プレート２９は、図４，５に示すように、一端部３０を中心として他端部３１が頂端壁２６（キャップ１２）の径方向外方と径方向内方とへ旋回する。旋回プレート２９の他端部３１は、第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）の側から第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第３観察窓部２２ｃ（他方の観察窓部）の側に向かって径方向外方へ旋回する。

【0041】

旋回プレート２９の他端部３１が径方向外方へ旋回した状態では、旋回プレート２９がキャップ１２の上方へ向かって登り勾配に傾斜し、旋回プレート２９の他端部３１が容器本体１１の周壁１５の外側に位置する。旋回プレート２９の他端部３１が頂端壁２６の径方向内方へ旋回した状態では、旋回プレート２９が頂端壁２６の設置溝２８に位置し、旋回プレート２９の外面が頂端壁２６の頂面と面一になり、旋回プレート２９が設置溝２８に収容される。

【0042】

キャップ１２に設置された旋回プレート２９の他端部３１を径方向外方へ旋回させ、細胞培養容器１０Ａ（細胞培養容器１０Ｂを含む）（容器本体１１）を所定の箇所に横臥するように載置すると、旋回プレート２９の他端部３１が接地し、細胞培養容器１０Ａ（容器本体１１）の頂壁１３が旋回プレート２９によって上方へ持ち上げられ、細胞培養容器１０Ａ（容器本体１１）の底壁１４及び底壁１４の側の第３観察窓部２２ｃが設置し、図６に示すように、横臥するように載置された細胞培養容器１０Ａ（容器本体１１）が径方向外方へ旋回した旋回プレート２９によって頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される。

【0043】

図７は、他の一例として示すキャップ１２の拡大斜視図であり、図８は、図７のキャップ１２の拡大側面図である。図９は、スライドプレート３３によって傾斜した状態で示す細胞培養容器の側面図である。図７，８では、スライドプレート３３のスライド前及びスライド後を示す。キャップ１２の頂端壁２６には、径方向へ延びるスライド溝３２が形成されている。頂端壁２６のスライド溝３２には、スライドプレート３３が設置されている。スライド溝３２の両側部には、図示はしていないが、スライドレール（スライド凹部）が形成されている。

【0044】

スライドプレート３３は、径方向へ長い四角形に成形され、基端部３４と、基端部３４の反対側に位置する先端部３５と、基端部３４及び先端部３５の間に延びる両側縁部３６とを有する。スライドプレート３３は、その両側縁部３６がスライド溝３２のスライドレール（スライド凹部）に摺動可能に嵌入している。スライドプレート３３は、図７，８に示すように、キャップ１２のスライドレール（スライド凹部）において径方向外方と径方向内方とへスライドする。スライドプレート３３の先端部３５は、第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）の側から第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第３観察窓部２２ｃ（他方の観察窓部）の側に向かって径方向外方へスライドする。

【0045】

スライドプレート３３がキャップ１２のスライドレール（スライド凹部）において径方向外方へスライドした状態では、スライドプレート２２が頂端壁２６の外周縁から径方向外方へ延出し、スライドプレート３３の先端部３５が容器本体１１の周壁１５の外側（径方向外側）に位置する。スライドプレート３３がキャップ１２のスライドレール（スライド凹部）において径方向内方へスライドした状態では、スライドプレート３３の全域がスライド溝３２に位置し、スライドプレート３３の外面が頂端壁２６の頂面と面一になり、スライドプレート３３がスライド溝３２に収容される。

【0046】

キャップ１２に設置されたスライドプレート３３を径方向外方へスライドさせ、細胞培養容器１０Ａ（細胞培養容器１０Ｂを含む）（容器本体１１）を所定の箇所に横臥するように載置すると、スライドプレート３３の先端部３５が接地し、細胞培養容器１０Ａ（容器本体１１）の頂壁１３がスライドプレート３３によって上方へ持ち上げられ、細胞培養容器１０Ａ（容器本体１１）の底壁１４及び底壁１４の側の第３観察窓部２２ｃが設置し、図９に示すように、横臥するように載置された細胞培養容器１０Ａ（容器本体１１）が径方向外方へ旋回したスライドプレート３３によって頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される。尚、細胞培養容器１０Ａ（細胞培養容器１０Ｂを含む）では、キャップ１２に旋回プレート２９やスライドプレート３３が設置されていなくてもよい。

【0047】

図１０は、他の一例として示す細胞培養容器１０Ｂの斜視図であり、図１１は、図１０の細胞培養容器１０Ｂの正面図及び側面図である。図１２は、第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に形成された凸条及び凹溝の一例を示す図である。図１０，１１では、キャップ１２に設置された旋回プレート２９及びスライドプレート３３の図示を省略している。図１０では、長さ方向を矢印Ａ、周り方向を矢印Ｂで示し、径方向を矢印Ｃで示す。

【0048】

細胞培養容器１０Ｂは、容器本体１１及びキャップ１２（蓋体）を備えている。容器本体１１及びキャップ１２は、細胞培養容器１０Ａのそれらと同様に、無色透明な合成樹脂、無色透明なガラス、無色透明な石英のいずれかから作られている。容器本体１１は、径方向へ延びる所定面積の頂壁１３と、頂壁１３から長さ方向の反対側に位置して径方向へ延びる所定面積の底壁１４と、頂底壁１３，１４の間に位置して長さ方向へ延びる所定面積の周壁１５とを備えている。容器本体１１には、頂底壁１３，１４と周壁１５とに囲繞された長さ方向へ長い筒状の所定容積の収容スペース１６（内部）が形成されている。容器本体１１の内周面１７には、表面親水化処理が施されている。

【0049】

頂壁１３は、容器本体１１の収容スペース１６に細胞培養液や細胞を注入するとともに収容スペース１６から細胞培養液や細胞を排出する円形の注入口１８（開口）と、注入口１８を囲繞する首部１９と、首部１９が繋がる肩部２０とを有する。頂壁１３は、周壁１５の後記する第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈの頂縁が繋がる第１～第８直状外周縁と、周壁１５の後記する第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの頂縁が繋がる第１～第８湾曲外周縁とを有する。首部１９の外周面には、ネジ（雄ネジ又は雌ネジ）が作られているとともに、径方向外方へ延出するフランジ２１が作られている。注入口１８（開口）は、キャップ１２（蓋体）によって開閉される。底壁１４は、周壁１５の第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈの底縁が繋がる第１～第８直状外端縁と、周壁１５の第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの底縁が繋がる第１～第８湾曲外端縁とを有する。

【0050】

周壁１５は、頂底壁１３，１４と略直交し、その頂縁が頂壁１３（肩部２０）の外周縁（第１～第８直状外周縁及び第１～第８湾曲外周縁）に連接され、その底縁が底壁１４の外周縁（第１～第８直状外周縁及び第１～第８湾曲外周縁）に連接されている。周壁１５には、頂壁１３と底壁１４との間に位置して長さ方向へ平坦に延びる所定面積の複数の第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ（第１～第ｎ観察窓部）が形成されているとともに、頂壁１３と底壁１４との間に位置して長さ方向へ延びる所定面積の複数の第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈ（第１～第ｎ湾曲部）が形成されている。第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈからは、収容スペース１６において培養される細胞の培養状態を観察可能である。

【0051】

第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ（第１～第ｎ観察窓部）は、第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの間に位置して周壁１５の周り方向へ等間隔離間して断続的に並んでいる。第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈでは、第１観察窓部２２ａが第８湾曲部２３ｈと第１湾曲部２３ａとの間に位置し、第２観察窓部２２ｂが第１湾曲部２３ａと第２湾曲部２３ｂとの間に位置しているとともに、第３観察窓部２２ｃが第２湾曲部２３ｂと第３湾曲部２３ｃとの間に位置し、第４観察窓部２２ｄが第３湾曲部２３ｃと第４湾曲部２３ｄとの間に位置している。第５観察窓部２２ｅが第４湾曲部２３ｄと第５湾曲部２３ｅとの間に位置し、第６観察窓部２３ｆが第５湾曲部２３ｅと第６湾曲部２３ｆとの間に位置しているとともに、第７観察窓部２２ｇが第６湾曲部２３ｆと第７湾曲部２３ｇとの間に位置し、第８観察窓部２２ｈが第７湾曲部２３ｇと第８湾曲部２３ｈとの間に位置している。

【0052】

第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈは、その平面形状が同形同大であって長さ方向へ長い平坦な略四角形に成形されている。第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈは、周壁１５において径方向へ対向するように対を成して形成されている。第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈでは、第１観察窓部２２ａに対して第５観察窓部２２ｅが径方向に対向し、第１観察窓部２２ａと第５観察窓部２２ｅとが径方向へ対を成し、第２観察窓部２２ｂに対して第６観察窓部２２ｆが径方向に対向し、第２観察窓部２２ｂと第６観察窓部２２ｆとが径方向へ対を成している。第３観察窓部２２ｃに対して第７観察窓部２２ｇが径方向に対向し、第３観察窓部２２ｃと第７観察窓部２２ｇとが径方向へ対を成し、第４観察窓部２２ｄに対して第８観察窓部２２ｈが径方向に対向し、第４観察窓部２２ｄと第８観察窓部２２ｈとが径方向へ対を成している。

【0053】

第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈ（第１～第ｎ湾曲部）は、第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈの間に位置して周壁の周り方向へ等間隔離間して断続的に並んでいる。第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈでは、第１湾曲部２３ａが第１観察窓部２２ａと第２観察窓部２２ｂとの間に位置し、第２湾曲部２３ｂが第２観察窓部２２ｂと第３観察窓部２２ｃとの間に位置しているとともに、第３湾曲部２３ｃが第３観察窓部２２ｃと第４観察窓部２２ｄとの間に位置し、第４湾曲部２３ｄが第４観察窓部２２ｄと第５観察窓部２２ｅとの間に位置している。第５湾曲部２３ｅが第５観察窓部２２ｅと第６観察窓部２２ｆとの間に位置し、第６湾曲部２３ｆが第６観察窓部２２ｆと第７観察窓部２２ｇとの間に位置しているとともに、第７湾曲部２３ｇが第７観察窓部２２ｇと第８観察窓部２２ｈとの間に位置し、第８湾曲部２３ｈが第８観察窓部２２ｈと第１観察窓部２２ａとの間に位置している。

【0054】

第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈは、その平面形状が同形同大であって周壁１５の周り方向へ円弧を画いて延びている。第１湾曲部２３ａは、第１観察窓部２２ａと第２観察窓部ああｂとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画き、第２湾曲部２３ｂは、第２観察窓部２２ｂと第３観察窓部２２ｃとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画いている。第３湾曲部２３ｃは、第３観察窓部２２ｃと第４観察窓部２２ｄとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画き、第４湾曲部２３ｄは、第４観察窓部２２ｄと第５観察窓部２２ｅとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画いている。第５湾曲部２３ｅは、第５観察窓部２２ｅと第６観察窓部２２ｆとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画き、第６湾曲部２３ｆは、第６観察窓部２２ｆと第７観察窓部２２ｇとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画いている。第７湾曲部２３ｇは、第７観察窓部２２ｇと第８観察窓部２２ｈとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画き、第８湾曲部２３ｈは、第８観察窓部２２ｈと第１観察窓部２２ａとの間において周壁１５の周り方向へ円弧を画いている。

【0055】

第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈは、周壁１５において径方向へ対向するように対を成して形成されている。第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈでは、第１湾曲部２３ａに対して第５湾曲部２３ｅが径方向に対向し、第１湾曲部２３ａと第５湾曲部２３ｅとが径方向へ対を成し、第２湾曲部２３ｂに対して第６湾曲部２３ｆが径方向に対向し、第２湾曲部２３ｂと第６湾曲部２３ｆとが径方向へ対を成している。第３湾曲部２３ｃに対して第７湾曲部２３ｇが径方向に対向し、第３湾曲部２３ｃと第７湾曲部２３ｇとが径方向へ対を成し、第４湾曲部２３ｄに対して第８湾曲部２３ｈが径方向に対向し、第４湾曲部２３ｄと第８湾曲部２３ｈとが径方向へ対を成している。第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７には、図１２に示すように、長さ方向へ一連に延びる複数の凸条３７と長さ方向へ一連に延びる複数の凹溝３８とが形成されている。第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に凸条３７及び凹溝３８を形成することで、第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７が平坦な場合と比較し、第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７の表面積が増加する。

【0056】

第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈは、その周り方向の長さが第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈの周り方向の長さより短く、その面積が第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈの面積よりも小さい。尚、長さ方向へ一連に延びる複数の凸条３７と複数の凹溝３８とのうちのいずれか一方が第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に形成されていてもよい。又、周り方向へ一連に延びる複数の凸条３７と複数の凹溝３８とのうちの少なくとも一方が第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に形成されていてもよく、長さ方向と周り方向とへ一連に延びる複数の凸条３７と複数の凹溝３８とのうちの少なくとも一方が第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に形成されていてもよい。更に、複数の凹部２４と複数の凸部２５とのうちの少なくとも一方が第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に形成されていてもよい。

【0057】

細胞培養容器１０Ｂの周壁１５では、第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）の外面から第１観察窓部２２ａ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第５観察窓部２２ｅ（他方の観察窓部）の内面を観察可能であり、第５観察窓部２２ｅ（一方の観察窓部）の外面から第５観察窓部２２ｅ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第１観察窓部２２ａ（他方の観察窓部）の内面を観察可能である。第２観察窓部２２ｂ（一方の観察窓部）の外面から第２観察窓部２２ｂ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第６観察窓部２２ｆ（他方の観察窓部）の内面を観察可能であり、第６観察窓部２２ｆ（一方の観察窓部）の外面から第６観察窓部２２ｆ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第２観察窓部２２ｂ（他方の観察窓部）の内面を観察可能である。

【0058】

第３観察窓部２２ｃ（一方の観察窓部）の外面から第３観察窓部２２ｃ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第７観察窓部２２ｇ（他方の観察窓部）の内面を観察可能であり、第７観察窓部２２ｇ（一方の観察窓部）の外面から第７観察窓部２２ｇ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第３観察窓部２２ｃ（他方の観察窓部）の内面を観察可能である。第４観察窓部２２ｄ（一方の観察窓部）の外面から第４観察窓部２２ｄ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第８観察窓部２２ｈ（他方の観察窓部）の内面を観察可能であり、第８観察窓部２２ｈ（一方の観察窓部）の外面から第８観察窓部２２ｈ（一方の観察窓部）に対向して周壁１５の径方向の対向側に位置する第４観察窓部２２ｄ（他方の観察窓部）の内面を観察可能である。尚、容器本体１１の内周面１７（第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ及び第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７）には、ゼラチンや細胞外基質、ポリカチオン類が塗布されていてもよい。

【0059】

キャップ１２は、細胞培養容器１０Ａのそれと同一である。キャップ１２の頂端壁２６の設置溝２８には、旋回プレート２９が設置され（図４参照）、又は、キャップ１２の頂端壁２６のスライド溝３２には、スライドプレート３３が設置されている（図７参照）。尚、細胞培養容器１０Ｂでは、キャップ１２に旋回プレート２９やスライドプレート３３が設置されていなくてもよい。

【0060】

細胞培養容器１０Ｂでは、キャップ１２に設置された旋回プレート２９の他端部３１を径方向外方へ旋回させ、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）を所定の箇所に横臥するように載置すると、旋回プレート２９の他端部３１が接地し、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）の頂壁１３が旋回プレート２９によって上方へ持ち上げられ、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）の底壁１４及び底壁１４の側の第５観察窓部２２ｅが設置し、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）が径方向外方へ旋回した旋回プレート２９によって頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される（図６参照）。

【0061】

細胞培養容器１０Ｂでは、キャップ１２に設置されたスライドプレート３３を径方向外方へスライドさせ、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）を所定の箇所に横臥するように載置すると、スライドプレート３３の先端部３５が接地し、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）の頂壁１３がスライドプレート３３によって上方へ持ち上げられ、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）の底壁１３及び底壁１３の側の第５観察窓部２２Ｅが設置し、細胞培養容器１０Ｂ（容器本体１１）が径方向外方へ旋回したスライドプレート３３によって頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜した状態に保持される（図９参照）。

【0062】

細胞培養容器１０Ａ及び細胞培養容器１０Ｂを利用して細胞を培養する手順の一例は、以下のとおりである。キャップ１２を容器本体１１の首部１９から取り外し、その収容スペース１６（内部）に細胞培養液を注入するとともに生体から分離した細胞を収容し、キャップ１２を容器本体１１の首部１９に螺着する。細胞培養液には、ペニシリン（約１００Ｕ／ｍｌ）、アムホテリシン（約１００ｎｇ／ｍｌ）、ストレプトマイシン（約１００ｍｋｇ／ｍｌ）、Ｌ－グルタミン（約２～４ｍｌ）、２０％ウシ胎児血清を添加したミネラル塩溶液およびアミノ酸が含まれる。尚、細胞培養液には、Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）、Ｇｒａｓｇｏｗ Ｍｉｎｉｍｕｍ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｍｅｄｉｕｍ（ＧＭＥＭ）、ＲＰＭＩ６４０等を使用することもできる。細胞培養液には、インスリン、トランスフェリン、エタノールアミン、セレニウム、２－メルカプトエタノール、Ｌ—アラニル－Ｌ－グルタミン、ピルビン酸ナトリウム、Ｌ－アラニン、Ｌ－アスパラギン、Ｌ－アスパラチン酸、グリシン、Ｌ－プロリン、Ｌ－セリン等を添加することもできる。

【0063】

細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂを横臥させた状態で例えば体温と略同一の温度（約３５～３７℃）に保持しつつ、１２～４８時間静的に放置（動かすことなく静かに放置）する。細胞培養容器１０Ａの第３観察窓部２２ｃ又は第４観察窓部２２ｄを下にした状態で細胞培養容器１０Ａを水平に保持し、又は、細胞培養容器１０Ａの第３観察窓部２２ｃを下にした状態で旋回プレート２９又はスライドプレート３３によって細胞培養容器１０Ａを頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜させた状態に保持する。細胞培養容器１０Ｂの第５観察窓部２２ｅや第６観察窓部２２ｆ、第７観察窓部２２ｇ、第８観察窓部２２ｈのいずれかを下にした状態で細胞培養容器１０Ｂを水平に保持し、又は、細胞培養容器１０Ｂの第５観察窓部２２ｅを下にした状態で旋回プレート２９又はスライドプレート３３によって細胞培養容器１０Ｂを頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜させた状態に保持する。細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの傾斜角度は、２～５°の範囲にあり、好ましくは、２～３°の範囲にある。

【0064】

細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂに収容（注入）された細胞は、時間の経過とともに細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの容器本体１１の内周面１７（第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ及び第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７、第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ及び第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７）に定着しつつ、細胞培養液によって培養され、容器本体１１の内周面１７（第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ及び第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７、第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ及び第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７）において次第に増殖（分化）してコロニーを形成する。

【0065】

細胞培養容器１０Ａの第１観察窓部２２ａの外面（又は第２観察窓部２２ｂの外面）から第３観察窓部２２ｃの内面（又は第４観察窓部２２ｄの内面）を肉眼で観察し、又は、第１観察窓部２２ａの外面（又は第２観察窓部２２ｂの外面）から第３観察窓部２２ｃの内面（又は第４観察窓部２２ｄの内面）を電子顕微鏡（ディスプレイ）で観察し、細胞の定着や細胞の増殖（変形）を観測する。

【0066】

細胞培養容器１０Ｂの第１観察窓部２２ａの外面（又は第２観察窓部２２ｂ、第３観察窓部２２ｃ、第４観察窓部２２ｄの外面）から第５観察窓部２２ｅの内面（又は第６観察窓部２２ｆ、第７観察窓部２２ｇ、第８観察窓部２２ｈの内面）を肉眼で観察し、又は、第１観察窓部２２ａの外面（又は第第２観察窓部２２ｂ、第３観察窓部２２ｃ、第４観察窓部２２ｄの外面）から第５観察窓部２２ｅの内面（又は第６観察窓部２２ｆ、第７観察窓部２２ｇ、第８観察窓部２２ｈの内面）を電子顕微鏡（ディスプレイ）で観察し、細胞の定着や細胞の増殖（変形）を観測する。

【0067】

細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂにおいて細胞が十分に増殖し、細胞の培養が完了した場合、細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂに注入されている細胞培養液を細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂから排出し、細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの収容スペース１６（内部）をりん酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄した後、トリプシン液を細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの収容スペース１６に注入する。収容スペース１６にトリプシン液を注入すると、容器本体１１の内周面１７（第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ及び第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７、第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ及び第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７）に定着・増殖した細胞がトリプシン液によって容器本体１１の内周面１７から剥離し、トリプシン液の水面に浮上し、浮上した細胞をピペットを利用して吸引する。

【0068】

細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂは、頂壁１３と底壁１４との間に位置して長さ方向へ平坦に延びていて細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの内部において培養される細胞の培養状態を観察可能な所定面積の第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄや第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ（第１～第ｎ観察窓部）が周壁１５に形成されているから、それら第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄや第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈを利用して培養中の細胞の培養状態をそれら観察窓部２２ａ～２２ｄ，２２ａ～２２ｈから観察することができ、容器本体１１の内周面１７（第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ及び第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７、第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ及び第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７）への細胞の定着及び増殖を容易に観察することができる。

【0069】

細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂは、第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄ及び第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄや第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈ及び第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈ（第１～第ｎ観察窓部及び第１～第ｎ観察窓部）からなる容器本体１１の内周面１７（培養面）に細胞を定着させるとともに容器本体１１の内周面１７（培養面）において細胞を増殖させるから、所定面積の培養面（周壁）を有して多量の細胞を増殖させることができ、細胞を効率よく培養することができる。

【0070】

細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂは、横臥した細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜した状態を旋回プレート２９やスライドプレート３３によって保持しつつ、傾斜した細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの一方の観察窓部の外面から他方の観察窓部の内面を観察することができ、第１～第４観察窓部２２ａ～２２ｄや第１～第８観察窓部２２ａ～２２ｈのうちの一方の観察窓部から他方の観察窓部を観察することで定着かつ増殖する培養中の細胞の培養状態を正確に観察かつ把握することができる。細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂは、横臥した細胞培養容器１０Ａ，１０Ｂの頂壁１３から底壁１４に向かって下り勾配に傾斜した状態を旋回プレート２９やスライドプレート３３によって保持することで、細胞及び細胞培養液が底壁１４の側に集中し、注入された細胞培養液が底壁１４の側に偏って細胞培養液の圧力が底壁１４の側で大きくなり、それによって細胞の活性を高めることができ、細胞を確実かつ効率的に増殖させることができる。

【0071】

細胞培養容器１０Ａは、径方向外方へ凹む複数の凹部２４と径方向内方へ凸となる複数の凸部２５とが第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７に形成され、第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄの内周面１７の表面積を大きくすることができ、表面積を大きくした第１～第４湾曲部２３ａ～２３ｄ（培養面）において多量の細胞を増殖させることができるとともに、細胞を効率よく培養することができる。細胞培養容器１０Ｂは、長さ方向へに延びる複数の凸条３７と長さ方向へに延びる複数の凹溝３８とが第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７に形成され、第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈの内周面１７の表面積を大きくすることができ、表面積を大きくした第１～第８湾曲部２３ａ～２３ｈ（培養面）において多量の細胞を増殖させることができるとともに、細胞を効率よく培養することができる。

【符号の説明】

【0072】

１０Ａ 細胞培養容器
１０Ｂ 細胞培養容器
１１ 容器本体
１２ キャップ（蓋体）
１３ 頂壁
１４ 底壁
１５ 周壁
１６ 収容スペース（内部）
１７ 内周面
１８ 注入口（開口）
１９ 首部
２０ 肩部
２１ フランジ
２２ａ～２２ｈ 第１～第８観察窓部
２３ａ～２３ｈ 第１～第８湾曲部
２４ 凹部
２５ 凸部
２６ 頂端壁
２７ 周側壁
２８ 設置溝
２９ 旋回プレート
３０ 一端部
３１ 他端部
３２ スライド溝
３３ スライドプレート
３４ 基端部
３５ 先端部
３６ 両側縁部
３７ 凸条
３８ 凹溝

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】