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特開2022-123878抗菌活性を有するプレウロムチリン馬尿酸エステルおよびその製造方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022123878
(43)【公開日】2022-08-24
(54)【発明の名称】抗菌活性を有するプレウロムチリン馬尿酸エステルおよびその製造方法
(51)【国際特許分類】
C07C 233/83 20060101AFI20220817BHJP
C07C 231/12 20060101ALI20220817BHJP
C07C 231/24 20060101ALI20220817BHJP
C07B 61/00 20060101ALN20220817BHJP
【ＦＩ】
C07C233/83 CSP
C07C231/12
C07C231/24
C07B61/00 300
【審査請求】有
【請求項の数】4
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2022019843
(22)【出願日】2022-02-10
(31)【優先権主張番号】17/175,575
(32)【優先日】2021-02-12
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】522056404
【氏名又は名称】シーアン・タイコメッド・ファーマシューティカル・テクノロジー・カンパニー・リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＸＩ’ＡＮ ＴＡＩＫＯＭＥＤ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＣＯ．， ＬＴＤ．
【住所又は居所原語表記】６ＴＨ ＦＬＯＯＲ， ＢＬＯＣＫ Ｂ， ＮＯ． ６９ ＪＩＮＹＥ ＲＯＡＤ， ＸＩ’ＡＮ ＨＩＧＨ‐ＴＥＣＨ ＺＯＮＥ， ＸＩ’ＡＮ， ＳＨＡＡＮＸＩ ７１００７７， ＣＨＩＮＡ
(74)【代理人】
【識別番号】110001818
【氏名又は名称】特許業務法人Ｒ＆Ｃ
(72)【発明者】
【氏名】ヨンホン・タン
(72)【発明者】
【氏名】フアフェン・チー
(72)【発明者】
【氏名】ペイユー・チョウ
(72)【発明者】
【氏名】チュアンメイ・ユアン
(72)【発明者】
【氏名】ダン・ヤン
(72)【発明者】
【氏名】ジンイ・リ
(72)【発明者】
【氏名】リァン・シン
【テーマコード（参考）】
4H006
4H039
【Ｆターム（参考）】
4H006AA01
4H006AA02
4H006AC48
4H006AD16
4H006AD17
4H006BA14
4H006BA30
4H006BA33
4H006BA51
4H006BB11
4H006BB12
4H006BB20
4H006BB24
4H006BC10
4H006BC19
4H006BC31
4H006BN20
4H006BR70
4H006BT12
4H006BT14
4H006BV72
4H039CA66
4H039CL25
(57)【要約】 （修正有）
【課題】優れた抗菌活性および抗薬剤耐性菌活性を有する化合物及び該化合物の調製方法を提供する。
【解決手段】下記式（Ｉ）を有する抗薬剤耐性菌活性を有する化合物を開示する。
【選択図】なし
【解決手段】下記式（Ｉ）を有する抗薬剤耐性菌活性を有する化合物を開示する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（Ｉ）を有する化合物。
【化1】
【請求項2】
式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させて式（Ｉ）の化合物を得ることを含む、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、
ここで、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物を、１：１～１：１．３のモル比で反応器に入れる工程、
窒素雰囲気下で、有機溶媒および触媒量の４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）を添加して反応混合物を得る工程、
前記反応混合物を０℃で５分間撹拌した後、前記反応混合物にＮ，Ｎ´－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を添加する工程、
前記反応混合物を２５～７０℃で３～７時間反応させる工程、
前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して粗生成物を得る工程、および、
１：１～４：１の比を有する石油エーテルと酢酸エチルを溶離剤として用いたシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーカラムにより前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、を含む、若しくは、
ここで、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物の反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物、触媒、および、イオン性液体を窒素雰囲気下の反応器に入れる工程であって、前記触媒は１２－モリブドケイ酸水和物（Ｈ６Ｍｏ１２Ｏ４１Ｓｉ）である工程、
前記式（ＩＩＩ）の化合物を前記反応器に添加して反応混合物を形成する工程、
前記反応混合物を２０～６０℃で４～８時間加熱する工程、
前記反応混合物を分液漏斗に入れて粗生成物を分離する工程、
メタノール中で再結晶して前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、および、前記イオン性液体を再循環する工程、を含む、方法。
【化2】
前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物を、１：１～１：１．３のモル比で反応器に入れる工程、
窒素雰囲気下で、有機溶媒および触媒量の４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）を添加して反応混合物を得る工程、
前記反応混合物を０℃で５分間撹拌した後、前記反応混合物にＮ，Ｎ´－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を添加する工程、
前記反応混合物を２５～７０℃で３～７時間反応させる工程、
前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して粗生成物を得る工程、および、
１：１～４：１の比を有する石油エーテルと酢酸エチルを溶離剤として用いたシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーカラムにより前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、を含む、若しくは、
ここで、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物の反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物、触媒、および、イオン性液体を窒素雰囲気下の反応器に入れる工程であって、前記触媒は１２－モリブドケイ酸水和物（Ｈ６Ｍｏ１２Ｏ４１Ｓｉ）である工程、
前記式（ＩＩＩ）の化合物を前記反応器に添加して反応混合物を形成する工程、
前記反応混合物を２０～６０℃で４～８時間加熱する工程、
前記反応混合物を分液漏斗に入れて粗生成物を分離する工程、
メタノール中で再結晶して前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、および、前記イオン性液体を再循環する工程、を含む、方法。
【請求項3】
前記有機溶媒はトルエン、１，２－ジクロロエタン、または、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）であり、前記有機溶媒は１，２－ジクロロエタンであり、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物のモル比は１ ： １．１であり、前記反応混合物を６０℃で加熱し、前記反応混合物を５時間反応させ、前記溶離剤は石油エーテル：酢酸エチル＝３：１である、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記イオン性液体は１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートであり、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物は１：１～１：１．３のモル比を有し、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物のモル比は１ ： １．１であり、前記反応混合物を３０℃で加熱し、前記反応混合物を６時間加熱する、請求項２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は医薬化学の分野に関し、特に、抗菌活性を有するプレウロムチリン馬尿酸エステルおよびその調製方法に関する。
【背景技術】
【0002】
近年、さまざまなタイプの薬剤耐性菌が急速に出現し、薬剤耐性率や感染問題がより深刻になっている。細菌耐性は世界が直面する深刻な公衆衛生上の課題となっており、抗菌薬の広範な使用が多数の耐性菌の主な理由である。多剤耐性菌（ＭＤＲＯ）の感染率と患者の死亡率は年々増加している。細菌の薬剤耐性はますます深刻になってきている。優れた抗菌活性、ユニークな抗菌メカニズムおよび新しい構造を有する化合物を見出すことが特に重要である。
【0003】
馬尿酸（化合物式ＩＩＩ）は草食動物（ウマなど）の尿中に天然に存在し、ヒトの尿中にも少量存在する。馬尿酸は安息香酸とグリシンに容易に加水分解される。馬尿酸は、一定の範囲内で尿のｐＨ値を低下させ、細菌の生息環境を変化させ、相乗的な殺菌効果を果たすことができる。
【0004】
プレウロムチリン（式ＩＩの化合物）は、ニオイヒラウラベニタケ（Clitopilus pinsitus）の深部発酵によって産生される三環式ジテルペノイド獣医用抗生物質である。グラム陽性菌およびマイコプラズマに対して抗菌活性を有する。その抗菌効果に関する主な構造は化合物中の三環式骨格であり、これは、細菌リボソームの５０Ｓサブユニットのペプチドアシルトランスフェラーゼ活性中心（ＰＴＣ）と誘導適合効果を形成することができる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
本発明では、プレウロムチリンを馬尿酸と組み合わせて、プレウロムチリン馬尿酸エステルを得る。予備的なin vitro抗菌活性実験は、化合物が優れた抗菌活性および抗薬剤耐性菌活性を有することを示す。
【課題を解決するための手段】
【0006】
一実施形態において、本発明は、以下の式（Ｉ）を有する化合物（プレウロムチリン馬尿酸エステル）を提供する。
【化1】
【0007】
別の実施形態において、式（Ｉ）の化合物を調製する方法は、式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させて、式（Ｉ）の化合物を得ることを含む。
【化2】
【0008】
別の実施形態において、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物を、１：１～１：１．３のモル比で反応器に入れる工程、窒素雰囲気下で、有機溶媒および触媒量の４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）を添加して反応混合物を得る工程、反応混合物を０℃で５分間撹拌した後、前記反応混合物にＮ，Ｎ´－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を添加する工程、前記反応混合物を２５～７０℃で３～７時間反応させる工程、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して粗生成物を得る工程、および、１：１～４：１の比を有する石油エーテルと酢酸エチル溶離剤として用いたシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーカラムにより前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、とを含む。
前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物を、１：１～１：１．３のモル比で反応器に入れる工程、窒素雰囲気下で、有機溶媒および触媒量の４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）を添加して反応混合物を得る工程、反応混合物を０℃で５分間撹拌した後、前記反応混合物にＮ，Ｎ´－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を添加する工程、前記反応混合物を２５～７０℃で３～７時間反応させる工程、前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して粗生成物を得る工程、および、１：１～４：１の比を有する石油エーテルと酢酸エチル溶離剤として用いたシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーカラムにより前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、とを含む。
【0009】
別の実施形態において、前記有機溶媒は、トルエン、１，２－ジクロロエタン、またはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）である。
【0010】
別の実施形態において、前記有機溶媒は、１，２－ジクロロエタンである。
【0011】
別の実施形態において、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物とのモル比は、１ ： １．１である。
【0012】
別の実施形態において、前記反応混合物を６０℃に加熱する。
【0013】
別の実施形態において、前記反応混合物を５時間反応させる。
【0014】
別の実施形態において、前記溶離剤は、石油エーテル：酢酸エチル＝３：１である。
【0015】
別の実施形態において、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物、触媒、および、イオン性液体を窒素雰囲気下の反応器中に入れる工程であって、前記触媒は１２－モリブドケイ酸水和物（Ｈ６Ｍｏ１２Ｏ４１Ｓｉ）である工程、前記式（ＩＩＩ）の化合物を前記反応器に添加して反応混合物を形成する工程と、前記反応混合物を２０～６０℃で４～８時間加熱する工程、前記反応混合物を分液漏斗に入れて粗生成物を分離する工程、メタノール中で再結晶して前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、前記イオン性液体を再循環する（recycle）工程、とを含む。
前記式（ＩＩ）の化合物、触媒、および、イオン性液体を窒素雰囲気下の反応器中に入れる工程であって、前記触媒は１２－モリブドケイ酸水和物（Ｈ６Ｍｏ１２Ｏ４１Ｓｉ）である工程、前記式（ＩＩＩ）の化合物を前記反応器に添加して反応混合物を形成する工程と、前記反応混合物を２０～６０℃で４～８時間加熱する工程、前記反応混合物を分液漏斗に入れて粗生成物を分離する工程、メタノール中で再結晶して前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、前記イオン性液体を再循環する（recycle）工程、とを含む。
【0016】
別の実施形態において、前記イオン性液体は、１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェート（Ｃ１２Ｈ２３Ｆ６Ｎ２Ｐ）、１－ヘキシル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートまたは１－ブチル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートである。
【0017】
別の実施形態において、前記イオン性液体は、１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートである。
【0018】
別の実施形態において、前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物は、１：１～１：１．３のモル比を有する。
【0019】
別の実施形態において、前記式（ＩＩ）の前記化合物と式（ＩＩＩ）の化合物とのモル比は、１ ： １．１である。
【0020】
別の実施形態において、前記反応混合物を３０℃に加熱する。
【0021】
別の実施形態において、前記反応混合物を６時間加熱する。
【0022】
前述した一般的な説明と、以下の詳細な説明とは、どちらも例示的および説明的であり、特許請求される本発明のさらなる説明を提供するように意図されていることを理解されたい。
【0023】
本発明のさらなる理解を提供するために含まれ、本明細書に組み込まれ、その一部を構成する添付の図面は本発明の実施形態を示し、説明と共に本発明の原理を説明するのに役立つ。
【図面の簡単な説明】
【0024】
【発明を実施するための形態】
【0025】
次に、本発明の実施形態を詳細に参照し、その例を添付の図面に示す。以下の実施例は本発明を説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【0026】
実施例１
式（Ｉ）の化合物（３ａＳ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ，１２Ｒ）－５－ヒドロキシ－４，６，９，１２－テトラメチル－１－オキソ－６－ビニルデカヒドロ－３ａ，９－プロパノシクロペンタ［８］アニュレン－８－イル２－（２－ベンズアミドアセトキシ）アセテートの調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を６０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３９１．４ｍｇ（収率７２．５３％）を得た。
式（Ｉ）の化合物（３ａＳ，４Ｒ，５Ｓ，６Ｓ，８Ｒ，９Ｒ，９ａＲ，１２Ｒ）－５－ヒドロキシ－４，６，９，１２－テトラメチル－１－オキソ－６－ビニルデカヒドロ－３ａ，９－プロパノシクロペンタ［８］アニュレン－８－イル２－（２－ベンズアミドアセトキシ）アセテートの調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を６０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３９１．４ｍｇ（収率７２．５３％）を得た。
【0027】
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム－ｄ）δ（ｐｐｍ）：７．８６（２Ｈ、ｄ）、７．５８（１Ｈ、ｄ）、７．５０（２Ｈ、ｄ）、６．７３（１Ｈ、ｓ）、６．５２（１Ｈ、ｍ）、５．８５（１Ｈ、ｄ）、５．４１（１Ｈ、ｄ）、５．２８（１Ｈ、ｄ）、４．７３（２Ｈ、ｍ）、４．４２（２Ｈ、ｄ）、３．５２（１Ｈ、ｓ）、３．４１（１Ｈ、ｄ）、２．３８（１Ｈ、ｓ）、２．２５（４Ｈ、ｍ）、１．８０－１．３６（１１Ｈ、ｍ）、１．２２（３Ｈ、ｓ）、０．９４（３Ｈ、ｄ）、０．８１（３Ｈ、ｄ）；１３Ｃ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム－ｄ）δ（ｐｐｍ）：２１６．７、１６９．５、１６７．４、１６６．１、１３８．７、１３１．９、１２８．６、１２７．１、１１７．４、７４．６、７０．１、５８．０、５０．８、４５．４、４４．６、４４．０、４１．８、３６．６、３６．１、３４．４、３０．４、２６．８、２６．４、２４．８、１６．５、１４．７、１１．４。
【0028】
実施例２
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を４０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３８０．４ｍｇ（収率７０．４９％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を４０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３８０．４ｍｇ（収率７０．４９％）を得た。
【0029】
実施例３
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。２１５．０ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を５０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３６９．５ｍｇ（収率６８．４７％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。２１５．０ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を５０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３６９．５ｍｇ（収率６８．４７％）を得た。
【0030】
実施例４
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を３０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝２：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３２１．７ｍｇ（収率５９．６１％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を３０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝２：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３２１．７ｍｇ（収率５９．６１％）を得た。
【0031】
実施例５
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を２５℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３１３．６ｍｇ（収率５８．１１％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を２５℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３１３．６ｍｇ（収率５８．１１％）を得た。
【0032】
実施例６
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのトルエンに溶解した。馬尿酸２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）をトルエン１５ｍＬに溶解し、分液漏斗で反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を６０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３３８．５ｍｇ（収率６２．７３％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのトルエンに溶解した。馬尿酸２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）をトルエン１５ｍＬに溶解し、分液漏斗で反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を６０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３３８．５ｍｇ（収率６２．７３％）を得た。
【0033】
実施例７
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのトルエンに溶解した。馬尿酸２２０．４ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）をトルエン１５ｍＬに溶解し、分液漏斗で反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を７０℃で６時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝４：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３６９．３ｍｇ（収率６７．３２％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのトルエンに溶解した。馬尿酸２２０．４ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）をトルエン１５ｍＬに溶解し、分液漏斗で反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を７０℃で６時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝４：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３６９．３ｍｇ（収率６７．３２％）を得た。
【0034】
実施例８
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのトルエンに溶解した。２１５．０ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのトルエンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を５０℃で４時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝２：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３２９．８ｍｇ（収率６１．１１％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのトルエンに溶解した。２１５．０ｍｇ（１．２０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのトルエンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を５０℃で４時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝２：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３２９．８ｍｇ（収率６１．１１％）を得た。
【0035】
実施例９
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。馬尿酸１７９．１７ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１５ｍＬに溶解し、分液漏斗で反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を７０℃で７時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３５９．３ｍｇ（収率６６．５８％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。馬尿酸１７９．１７ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１５ｍＬに溶解し、分液漏斗で反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を７０℃で７時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝３：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３５９．３ｍｇ（収率６６．５８％）を得た。
【0036】
実施例１０
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を６０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝４：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３５１．２ｍｇ（収率６５．０８％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬのＤＭＦに溶解した。２３２．９ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬのＤＭＦに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を６０℃で３時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝４：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３５１．２ｍｇ（収率６５．０８％）を得た。
【0037】
実施例１１
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を３０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝１：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３３５．０ｍｇ（収率６２．０７％）を得た。
式（Ｉ）の化合物の調製
１００ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリンおよび３．７ｍｇ（０．０３ｍｍｏｌ）の４－ＤＭＡＰを、窒素雰囲気下で２０ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解した。１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸を１５ｍＬの１，２－ジクロロエタンに溶解し、分液漏斗によって反応混合物に滴下した。滴下終了後、反応混合物を０℃で５分間撹拌し、２０６．３ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のカップリング剤ＤＣＣを添加した。氷浴を除去し、反応物を３０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡した。反応混合物を濃縮し、水で洗浄し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを乾燥し、濃縮して、粗生成物を得た。石油エーテル：酢酸エチル＝１：１を溶離剤として用いたシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製し、溶離剤を減圧濃縮し、乾燥して標記化合物３３５．０ｍｇ（収率６２．０７％）を得た。
【0038】
実施例１２
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸（silicomolybdic acid）を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を３０℃で６時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４６１．０ｍｇ（収率８５．４３％）を得た。１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートを回収した。
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸（silicomolybdic acid）を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を３０℃で６時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４６１．０ｍｇ（収率８５．４３％）を得た。１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートを回収した。
【0039】
実施例１３
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－ブチル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を４０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４４５．６ｍｇ（収率８２．５７％）を得た。１－ブチル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートを回収した。
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－ブチル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を４０℃で５時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４４５．６ｍｇ（収率８２．５７％）を得た。１－ブチル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートを回収した。
【0040】
実施例１４
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－ヘキシル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を６０℃で４時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４５１．６ｍｇ（収率８３．６８％）を得た。１－ヘキシル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートを回収した。
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－ヘキシル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を６０℃で４時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４５１．６ｍｇ（収率８３．６８％）を得た。１－ヘキシル－３－メチルイミダゾリウムテトラフルオロボレートを回収した。
【0041】
実施例１５
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を３５℃で４時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４４１．１ｍｇ（収率８１．７３％）を得た。１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートを回収した。
式（Ｉ）の化合物の調製
２５０ｍＬの三つ口フラスコ中で、３７８．５ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）のプレウロムチリン、１９７．１ｍｇ（１．１０ｍｍｏｌ）の馬尿酸および２０．３ｍｇ（０．０１１ｍｍｏｌ）のケイモリブデン酸を、窒素雰囲気下で１００ｍＬの１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートに溶解した。完全に溶解した後、反応混合物を３５℃で４時間加熱した。薄層クロマトグラフィーを用いて反応を完了まで追跡し、加熱を停止し、保護装置を取り外した。反応混合物系を層に分離させて、粗生成物を得た。粗生成物を５０ｍＬのメタノールで再結晶して標記化合物４４１．１ｍｇ（収率８１．７３％）を得た。１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートを回収した。
【0042】
実施例１６
本発明の化合物の抗菌活性試験
抗菌効果はペーパー拡散法による薬剤感受性試験により測定した。
本発明の化合物の抗菌活性試験
抗菌効果はペーパー拡散法による薬剤感受性試験により測定した。
【0043】
実験菌株：
多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス１７１（Staphylococcus aureus 171）、多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス５７５（Staphylococcus aureus 575）、多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス５９６（Staphylococcus aureus 596）。実験菌株は、華山病院（Huashan Hospital）、復旦大学（Fudan University）（復旦大学抗生物質研究所：Institute of Antibiotic of Fudan University）により同定された。
多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス１７１（Staphylococcus aureus 171）、多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス５７５（Staphylococcus aureus 575）、多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス５９６（Staphylococcus aureus 596）。実験菌株は、華山病院（Huashan Hospital）、復旦大学（Fudan University）（復旦大学抗生物質研究所：Institute of Antibiotic of Fudan University）により同定された。
【0044】
薬剤感受性ペーパー：
薬剤感受性ペーパーは、直径６．３５ｍｍ、吸水量０．０２ｍＬの特殊薬剤感受性ペーパーであった。対照薬はバンコマイシン（３０μｇ／錠）であり、試験薬はプレウロムチリン（３０μｇ／錠）、馬尿酸（３０μｇ／錠）およびプレウロムチリン馬尿酸エステル（３０μｇ／錠）であった。
薬剤感受性ペーパーは、直径６．３５ｍｍ、吸水量０．０２ｍＬの特殊薬剤感受性ペーパーであった。対照薬はバンコマイシン（３０μｇ／錠）であり、試験薬はプレウロムチリン（３０μｇ／錠）、馬尿酸（３０μｇ／錠）およびプレウロムチリン馬尿酸エステル（３０μｇ／錠）であった。
【0045】
試薬:
ＬＢ寒天培地、ＬＡブロス培地、０．５％のＤＭＳＯ溶液。
ＬＢ寒天培地、ＬＡブロス培地、０．５％のＤＭＳＯ溶液。
【0046】
装置：
ウルトラクリーン ワークベンチ、高圧滅菌ポット、ガス浴恒温振盪インキュベーター。
ウルトラクリーン ワークベンチ、高圧滅菌ポット、ガス浴恒温振盪インキュベーター。
【0047】
細菌懸濁液の調製：
実験菌株を非選択培地に接種し、３７℃の空気中に２４時間置いた。良好に増殖し、ブロス培地に接種したシングルコロニーを３５℃±２℃で６時間培養し、ＬＡブロス培地を用いて細菌溶液の濃度を０．５ミー（Ｍｉｅ）比濁管（１．５×１０８ＣＦＵ／ｍＬ）にキャリブレーションした。細菌懸濁液を得た。
実験菌株を非選択培地に接種し、３７℃の空気中に２４時間置いた。良好に増殖し、ブロス培地に接種したシングルコロニーを３５℃±２℃で６時間培養し、ＬＡブロス培地を用いて細菌溶液の濃度を０．５ミー（Ｍｉｅ）比濁管（１．５×１０８ＣＦＵ／ｍＬ）にキャリブレーションした。細菌懸濁液を得た。
【0048】
ペーパー拡散法薬剤感受性試験：
ＬＢ乾燥粉末を秤量し、１０３．４Ｋｐａ、１２１．３℃の高圧蒸気で１５分間滅菌した後、４０～５０℃の水浴に入れた。無菌の空のプレート（内径９ｃｍ）をウルトラクリーンなテーブルウォーターテーブルの表面に置き、ＬＢ乾燥粉末をプレートに注いだ。各プレートの厚さは３ｍｍ～４ｍｍであった。このプレートを室温で冷却した後、２℃～８℃の冷蔵庫に保管した。滅菌綿棒を使用して、細菌溶液を浸漬し、ＬＢプレートの表面を均一に３回被覆した。細菌懸濁液の接種後、ＬＢプレートを室温で３分間～５分間乾燥させた。滅菌鉗子を使用して、抗菌薬剤ペーパーをディッシュに密着させた。ディッシュを逆さまにし、３７℃のインキュベーターに２４時間置いた。その結果は、直径を測定することによって観察された。陰性対照として０．５％ＤＭＳＯ溶液を取り、抗菌活性は阻止域の直径によって表される。阻止域≧１７ｍｍを感受性、阻止域１５ｍｍ～１６ｍｍを中間、阻止域≦１４ｍｍを薬剤耐性とした。
ＬＢ乾燥粉末を秤量し、１０３．４Ｋｐａ、１２１．３℃の高圧蒸気で１５分間滅菌した後、４０～５０℃の水浴に入れた。無菌の空のプレート（内径９ｃｍ）をウルトラクリーンなテーブルウォーターテーブルの表面に置き、ＬＢ乾燥粉末をプレートに注いだ。各プレートの厚さは３ｍｍ～４ｍｍであった。このプレートを室温で冷却した後、２℃～８℃の冷蔵庫に保管した。滅菌綿棒を使用して、細菌溶液を浸漬し、ＬＢプレートの表面を均一に３回被覆した。細菌懸濁液の接種後、ＬＢプレートを室温で３分間～５分間乾燥させた。滅菌鉗子を使用して、抗菌薬剤ペーパーをディッシュに密着させた。ディッシュを逆さまにし、３７℃のインキュベーターに２４時間置いた。その結果は、直径を測定することによって観察された。陰性対照として０．５％ＤＭＳＯ溶液を取り、抗菌活性は阻止域の直径によって表される。阻止域≧１７ｍｍを感受性、阻止域１５ｍｍ～１６ｍｍを中間、阻止域≦１４ｍｍを薬剤耐性とした。
【0049】
図１～３において、プレウロムチリン馬尿酸エステルは文字Ａで表され、図１は、ＭＲＳＡ－１７１に対するプレウロムチリン馬尿酸エステルの抗菌効果を示す。図２は、サルモネラに対するプレウロムチリン馬尿酸エステルの抗菌効果を示す。図３は、大腸菌に対するプレウロムチリン馬尿酸エステルの抗菌作用を示す。その結果を表１に示す。
【0050】
【表1】
【0051】
図１～３および表１の結果は、プレウロムチリンおよび馬尿酸が薬剤耐性菌に対して阻害効果を持たないことを示す。プレウロムチリン馬尿酸エステルは多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス１７１、５７５、５９６に対して強い阻害作用を有し、多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス５９６に対する静菌帯の直径は最大２５ｍｍであった。要約すると、本発明のプレウロムチリン馬尿酸エステルは多剤耐性スタフィロコッカス・アウレウス（黄色ブドウ球菌）の抗菌薬剤候補として使用することができ、さらなる前臨床試験が行われる。
【図1】
【図2】
【図3】
【手続補正書】
【提出日】2022-06-16
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（Ｉ）を有する化合物。
【化1】
【請求項2】
式（ＩＩ）の化合物を式（ＩＩＩ）の化合物と反応させて式（Ｉ）の化合物を得ることを含む、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、
ここで、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物との反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物を、１：１～１：１．３のモル比で反応器に入れる工程、
窒素雰囲気下で、有機溶媒および触媒量の４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）を添加して反応混合物を得る工程、
前記反応混合物を０℃で５分間撹拌した後、前記反応混合物にＮ，Ｎ´－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を添加する工程、
前記反応混合物を２５～７０℃で３～７時間反応させる工程、
前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して粗生成物を得る工程、および、
１：１～４：１の比を有する石油エーテルと酢酸エチルを溶離剤として用いたシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーカラムにより前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、を含む、若しくは、
ここで、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物の反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物、触媒、および、イオン性液体を窒素雰囲気下の反応器に入れる工程であって、前記触媒は１２－モリブドケイ酸水和物（Ｈ６Ｍｏ１２Ｏ４１Ｓｉ）である工程、
前記式（ＩＩＩ）の化合物を前記反応器に添加して反応混合物を形成する工程、
前記反応混合物を２０～６０℃で４～８時間加熱する工程、
前記反応混合物を分液漏斗に入れて粗生成物を分離する工程、
メタノール中で再結晶して前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、および、前記イオン性液体を再循環する工程、を含む、方法。
【化2】
前記式（ＩＩ）の化合物および前記式（ＩＩＩ）の化合物を、１：１～１：１．３のモル比で反応器に入れる工程、
窒素雰囲気下で、有機溶媒および触媒量の４－ジメチルアミノピリジン（４－ＤＭＡＰ）を添加して反応混合物を得る工程、
前記反応混合物を０℃で５分間撹拌した後、前記反応混合物にＮ，Ｎ´－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）を添加する工程、
前記反応混合物を２５～７０℃で３～７時間反応させる工程、
前記反応混合物を濃縮し、酢酸エチルで抽出して粗生成物を得る工程、および、
１：１～４：１の比を有する石油エーテルと酢酸エチルを溶離剤として用いたシリカゲルフレッシュクロマトグラフィーカラムにより前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、を含む、若しくは、
ここで、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物の反応は、以下の工程、
前記式（ＩＩ）の化合物、触媒、および、イオン性液体を窒素雰囲気下の反応器に入れる工程であって、前記触媒は１２－モリブドケイ酸水和物（Ｈ６Ｍｏ１２Ｏ４１Ｓｉ）である工程、
前記式（ＩＩＩ）の化合物を前記反応器に添加して反応混合物を形成する工程、
前記反応混合物を２０～６０℃で４～８時間加熱する工程、
前記反応混合物を分液漏斗に入れて粗生成物を分離する工程、
メタノール中で再結晶して前記粗生成物を精製し、前記式（Ｉ）の化合物を得る工程、および、前記イオン性液体を再循環する工程、を含む、方法。
【請求項3】
前記有機溶媒はトルエン、１，２－ジクロロエタン、または、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）であり、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物のモル比は１ ： １．１であり、前記反応混合物を６０℃で加熱し、前記反応混合物を５時間反応させ、前記溶離剤は石油エーテル：酢酸エチル＝３：１である、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記イオン性液体は１－オクチル－３－メチルイミダゾリウムヘキサフルオロホスフェートであり、前記式（ＩＩ）の化合物と前記式（ＩＩＩ）の化合物は１：１～１：１．３のモル比を有し、前記反応混合物を３０℃で加熱し、前記反応混合物を６時間加熱する、請求項２に記載の方法。
【外国語明細書】