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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022132375
(43)【公開日】2022-09-08
(54)【発明の名称】ペプチド送達のための医薬組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 38/02 20060101AFI20220901BHJP
A61K 38/28 20060101ALI20220901BHJP
A61K 38/08 20190101ALI20220901BHJP
A61K 38/16 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/08 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/10 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/18 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20220901BHJP
A61K 47/42 20170101ALI20220901BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20220901BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20220901BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20220901BHJP
【ＦＩ】
A61K38/02
A61K38/28
A61K38/08
A61K38/16
A61K47/02
A61K47/08
A61K47/10
A61K47/18
A61K47/22
A61K47/26
A61K47/42
A61K9/48
A61K9/08
A61K9/20
【審査請求】有
【請求項の数】14
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022111628
(22)【出願日】2022-07-12
(62)【分割の表示】P 2019528818の分割
【原出願日】2018-09-19
(71)【出願人】
【識別番号】519187414
【氏名又は名称】アニヤ バイオファーム インク．
(71)【出願人】
【識別番号】519187425
【氏名又は名称】グシュリエッサー ジーグフリート
(71)【出願人】
【識別番号】519187436
【氏名又は名称】デサイ ブシャン ドゥルブクマール
(74)【代理人】
【識別番号】100124431
【弁理士】
【氏名又は名称】田中 順也
(74)【代理人】
【識別番号】100174160
【弁理士】
【氏名又は名称】水谷 馨也
(74)【代理人】
【識別番号】100175651
【弁理士】
【氏名又は名称】迫田 恭子
(72)【発明者】
【氏名】グシュリエッサー ジーグフリート
(72)【発明者】
【氏名】デサイ ブシャン ドゥルブクマール
(57)【要約】
【課題】 本発明はペプチド送達のための医薬組成物を提供する。
【解決手段】 本発明は、薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態である少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる医薬組成物に関する。
【選択図】 図１
【解決手段】 本発明は、薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態である少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる医薬組成物に関する。
【選択図】 図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び
薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態である少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、
前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物。
薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態である少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、
前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物。
【請求項2】
前記少なくとも１種類の金属はバナジウムであり、前記医薬組成物はバナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０１ｍｇ～約１５ｍｇの範囲の量で含有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項3】
前記バナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれかは、酸化バナジウム（Ｖ）、バナジン酸ナトリウム、硫酸バナジウム、硫酸バナジル、バナジウムビグアナイド、ビス（マルトラト）オキソバナジウム（ＩＶ）、酢酸バナジウム、ピコリン酸バナジル及びクエン酸バナジルを含む群から独立して選択される、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項4】
前記少なくとも１種類の金属はクロムであり、前記医薬組成物はクロムの塩及びクロムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０２ｍｇ～約０．５ｍｇの範囲の量で含有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項5】
前記クロムの塩及びクロムの錯体のいずれかは、ピコリン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、ニコチン酸クロム、塩化クロム及び酢酸クロムを含む群から独立して選択される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記少なくとも１種類の金属はマンガンであり、前記医薬組成物はマンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．１ｍｇ～約１０ｍｇの範囲の量で含有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項7】
前記マンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれかは、グルコン酸マンガン、硫酸マンガン、過マンガン酸カリウム及び塩化マンガンを含む群から独立して選択される、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記少なくとも１種類のペプチドは６０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記少なくとも１種類のペプチドは、インスリン、インスリンアナログ、インスリンリスプロ、インスリンペグリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、プロタミン含有中間型（ＮＰＨ）インスリン、インスリンデグルデク、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ｈｕ
ｍａｎ ｉｎｓｕｌｉｎ、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、ＧＬＰ－１、ＧＬＰ－１アナログ、アシル化ＧＬＰ－１アナログ、ジアシル化ＧＬＰ－１アナログ、セマグルチド、リラグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、 ＧＬＰ－１受容体及びグルカゴン受容体のデュアルアゴニスト、アミリン、アミリンアナログ、プラムリンチド、ソマトスタチンアナログ、オクトレオチド、ランレオチド、パシレオチド、ゴセレリン、ブセレリン、レプチン、レプチンアナログ、メトレレプチン、ペプチドＹＹ、ペプチドＹＹアナログ、グラチラマー、リュープロレリン、テリパラチド、デスモプレシン、ヒト成長ホルモン、ヒト成長ホルモンアナログ、グリコペプチド系抗生物質、グリコシル化の環状又は多環非リボソームペプチド系抗生物質、バンコマイシン、テイコプラニン、テラバンシン、ブレオマイシン、ラモプラニン、デカプラニン、ボルテゾミブ、コシントロピン、絨毛性ゴナドトロピン、メノトロピン、セルモレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトロピン、カルシトニン、サケカルシトニン、ペンタガストリン、オキシトシン、ネシリチド、アナキンラ、エンフビルチド、ペグビソマント、ドルナーゼアルファ、レピルジン、アニデュラフンギン、エプチフィバチド、インターフェロンアルファコン－１、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンβ－１ａ、インターフェロンβ－１ｂ、インターフェロンγ－１ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ、ペグインターフェロンα－２ｂ、ペグインターフェロンβ－１ａ、フィブリノリジン、バソプレシン、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンデルタ、エポエチンオメガ、エポエチンゼータ、フィルグラスチム、インターロイキン－１１、シクロスポリン、グルカゴン、ウロキナーゼ、バイオマイシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン、サブスタンスＰ、副腎皮質刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン、又はそれらの薬学的に許容可能な塩を含む群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
ｍａｎ ｉｎｓｕｌｉｎ、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、ＧＬＰ－１、ＧＬＰ－１アナログ、アシル化ＧＬＰ－１アナログ、ジアシル化ＧＬＰ－１アナログ、セマグルチド、リラグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、 ＧＬＰ－１受容体及びグルカゴン受容体のデュアルアゴニスト、アミリン、アミリンアナログ、プラムリンチド、ソマトスタチンアナログ、オクトレオチド、ランレオチド、パシレオチド、ゴセレリン、ブセレリン、レプチン、レプチンアナログ、メトレレプチン、ペプチドＹＹ、ペプチドＹＹアナログ、グラチラマー、リュープロレリン、テリパラチド、デスモプレシン、ヒト成長ホルモン、ヒト成長ホルモンアナログ、グリコペプチド系抗生物質、グリコシル化の環状又は多環非リボソームペプチド系抗生物質、バンコマイシン、テイコプラニン、テラバンシン、ブレオマイシン、ラモプラニン、デカプラニン、ボルテゾミブ、コシントロピン、絨毛性ゴナドトロピン、メノトロピン、セルモレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトロピン、カルシトニン、サケカルシトニン、ペンタガストリン、オキシトシン、ネシリチド、アナキンラ、エンフビルチド、ペグビソマント、ドルナーゼアルファ、レピルジン、アニデュラフンギン、エプチフィバチド、インターフェロンアルファコン－１、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンβ－１ａ、インターフェロンβ－１ｂ、インターフェロンγ－１ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ、ペグインターフェロンα－２ｂ、ペグインターフェロンβ－１ａ、フィブリノリジン、バソプレシン、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンデルタ、エポエチンオメガ、エポエチンゼータ、フィルグラスチム、インターロイキン－１１、シクロスポリン、グルカゴン、ウロキナーゼ、バイオマイシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン、サブスタンスＰ、副腎皮質刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン、又はそれらの薬学的に許容可能な塩を含む群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属とは、医薬組成物中で物理的に分けられた状態で存在している、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属は、分けられた区画に存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項12】
前記医薬組成物はカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型又はタブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項13】
前記少なくとも１種類の還元剤は、アスコルビン酸、還元型グルタチオン、システイン、尿酸、還元糖、グリセルアルデヒド、α－トコフェロール、ビタミンＡ、α－リポ酸、ジヒドロ－α－リポ酸、グルコース、ガラクトース、ラクトース、マルトース、チオール含有化合物、チオマー、及びそれらの薬学的に許容可能な塩のいずれか又はそれらの組み合わせから選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項14】
前記医薬組成物は、少なくとも１種類の還元剤を単位用量あたり約１ｍｇ～約１０００
ｍｇの範囲の量で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
ｍｇの範囲の量で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項15】
前記医薬組成物は、さらに少なくとも１種類の吸収促進剤を含み、前記吸収促進剤は単位用量あたり約１０ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項16】
前記医薬組成物は、経口固体剤又は経口液体剤のいずれかの形態に調製され、且つ前記医薬組成物が経口液体剤の形態に調製されている場合には、前記医薬組成物は水分を約５％未満（ｖ／ｖ）の量で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は一般的には薬剤分野に関し、具体的には、本発明はペプチドと金属塩／錯体及び還元剤の組み合わせを含み、少なくとも部分的に、ペプチドを摂取の際にタンパク質的分解から保護できるようにする医薬組成物である。
【背景技術】
【0002】
本明細書の背景資料には本発明を理解するために助けとなる情報が含まれている。但し、本明細書の背景資料は、本発明が周知技術であると断言するものではないか、又は本発明の保護範囲とは関連性がないものである。また、本明細書の背景資料で開示する何らかの資料又は文献は、明示的であれ暗示的であれ、その内容のいずれも本発明が周知技術であることを表すものではない。
【0003】
タンパク質及びペプチドは、長い間治療薬、診断薬などの薬剤に用いられてきた。また関連技術は現在に至るまで迅速に発展を続けている。しかし、タンパク質及びペプチドの発展可能性は未だ完全には理解されていないため、応用においては非経口注射での使用に留まっている。
【0004】
経口は、簡単で便利な最良の投与経路である。しかし、ペプチドは消化管で消化後に分解されるため、完全に吸収することは難しい。よって、タンパク質及びペプチドの経口での生物学的利用能の低さは、消化管中の酵素分解及び上皮細胞の低浸透圧性が主な要因である。
【0005】
タンパク質及びペプチドの経口での生物学的利用能の低さという問題を如何に改善するかに関して、これまで多くの方法が提出されてきており、例えば大豆トリプシンインヒビター、アプロチニン、ボウマン・バーク（Ｂｏｗｍａｎ－Ｂｉｒｋ）型トリプシンインヒビター、バシトラシン、 カモスタットメシル酸塩（ｃａｍｏｓｓｔａｔｅ ｍｅｓｉｌａｔｅ）、阻害剤アマスタチン（ａｍａｓｔａｔｉｎ）（Ｒｅｎｕｋｕｎｔｌａ Ｊ ｅｔ
ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ．２０１３，４４７，７５～９３；米国出願公開特許ＵＳ２００７００８７９５７Ａ１）などがあり、いずれにおいても各種様々な吸収促進薬及びプロテアーゼインヒビターが使用されている。しかし、毒性及び多くの副作用の要因を有するため、ペプチド送達用としてプロテアーゼインヒビターをポリペプチド薬中で用いることが可能な添加剤は、商業的な応用において今のところ存在しない。
ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ．２０１３，４４７，７５～９３；米国出願公開特許ＵＳ２００７００８７９５７Ａ１）などがあり、いずれにおいても各種様々な吸収促進薬及びプロテアーゼインヒビターが使用されている。しかし、毒性及び多くの副作用の要因を有するため、ペプチド送達用としてプロテアーゼインヒビターをポリペプチド薬中で用いることが可能な添加剤は、商業的な応用において今のところ存在しない。
【0006】
以下はペプチド送達に用いることが可能なプロテアーゼインヒビターの数少ない具体例である。（ａ）大豆（即ち大豆トリプシンインヒビター）：アレルゲンの１つと広く見なされており、１９８０年以降、大豆アレルギーに悩まされる人々が徐々に増加し、利用が制限されている（Ｍｏｒｏｚ ＬＡ ｅｔ ａｌ．，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．１９８０，３０２，１１２６～８；Ｆｏｕｃａｒｄ Ｔ ｅｔ ａｌ．， Ａｌｌｅｒｇｙ，１９９９，５４，２６１～５；Ｒａｍｅｓｈ Ｓ，Ｃｌｉｎ Ｒｅｖ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００８，３４，２１７～３０）。大豆によって生じる急性アレルギー反応には、咳、くしゃみ、鼻水、蕁麻疹、下痢、顔面腫脹、呼吸促迫、舌腫脹、嚥下障害、血圧降下、発汗過多、失神、アナフィラキシーショックを含み、死に至る場合もある。（ｂ）Ｂｏｗｍａｎ（即ちＢｏｗｍａｎ－Ｂｉｒｋ型トリプシンインヒビター）：経口で高い生物学的利用能を有する大豆誘導体であり、吸収促進薬なしでも経口で高い生物学的利用能を有することができる。但し、Ｂｏｗｍａｎを内服後、時に不必要な全身性のプロテアーゼ阻害作用（例えばプラスミンなど、全身性のセリンプロテアーゼ阻害により血栓形成リスクが増加する可能性がある）を生じると報告されている。また、Ｂｏｗｍａｎは自己に対する抗体を形成する可能性もある（Ｗａｎ ＸＳ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｔｒ Ｃａｎｃｅｒ，２００２，４３，１６７～７３）。（ｃ）アプロチニン（ａｐｒｏｔｉｎｉｎ）：初回に１：２００の割合で使用した場合、アレルギー反応を引き起こすことが知られており（Ｍａｈｄｙ ＡＭ ｅｔ ａｌ．，２００４，９３，８４２～５８）、且つアプロチニンは心臓病／手術患者に急性腎不全、心筋梗塞、心不全、脳卒中及び脳症を生じるリスク関連性が報告されている（Ｍａｎｇａｎｏ ＤＴ ｅｔ ａｌ．，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ，２００６，３５４，３５３～６５）。
【0007】
プロテアーゼインヒビターが有する上記の潜在的な健康危害リスクにより、通常ではプロテアーゼインヒビターの使用が避けられている。上述の制限以外にも、プロテアーゼインヒビターには製造コストの高さ、異質性、規制面での障壁、選択的阻害における難しさといった課題に加え、投与量を多くしてなければ有効な活性が得られないといった問題が広範な応用を難しくしている（Ｒｅｎｕｋｕｎｔｌａ Ｊ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ．２０１３，４４７）。またバシトラシン（抗生物質活性）、カモスタットメシル酸塩（膵炎の治療に有効）又は阻害剤アマスタチン（抗菌活性）（Ｒｅｎｕｋｕｎｔｌａ Ｊ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｐｈａｒｍ．２０１３，４４７，７５～９３；米国出願公開特許ＵＳ２００７００８７９５７Ａ１）などの他のプロテアーゼインヒビターについても、上述と類似の副作用がある。
【0008】
欧州登録特許ＥＰ ３００６０４５Ｂ１は微量元素（銅や亜鉛など）及び医薬的に許容可能な還元剤の組成物を開示しているが、それには選択的に経粘膜吸収促進薬を添加することができ、その組成物は意外にも様々なペプチド又はタンパク質性医薬に対し、経口での有益且つ高い生物学的利用能を有することが分かっている。しかし、銅又は亜鉛と哺乳動物の代謝経路には関連性があるため、長期治療においてこの組成物を使用した場合には、マイナスの相互作用を招く可能性がある。
【0009】
従って、本技術分野では、ペプチドの摂取の際に、少なくとも部分的に、タンパク質的分解から保護しながらペプチドを送達できる、簡単、安全、有効且つ費用対効果のある医薬組成物の研究開発が必要とされている。本開示は、現状及びその他のニーズに適合し、従来の医薬組成物及びその送達における技術的欠点を低減させることができる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0010】
本開示は、背景技術で報告されている組成物の関係する欠点を克服できる医薬組成物を提供することを目的としている。
【0011】
本開示の別の目的は、効果的にペプチドを送達する医薬組成物を提供することである。
【0012】
本開示の別の目的は、経口でペプチドを送達する医薬組成物を提供することである。
【0013】
本開示の別の目的は、少なくとも部分的に、摂取されるペプチドをタンパク質的分解から保護する医薬組成物を提供することである。
【0014】
本開示の別の目的は、ペプチドの経口での生物学的利用能を増加させる医薬組成物を提供することである。
【0015】
本開示の別の目的は、安全な医薬組成物を提供することである。
【0016】
本開示の別の目的は、製造において経済効率を備えた医薬組成物を提供することである。
【0017】
本開示の別の目的は、調製が容易な医薬組成物を提供することである。
【0018】
本開示の別の目的は、保存期間が長い医薬組成物を提供することである。
【0019】
本開示は一般的には薬剤分野に関し、具体的には、本発明はペプチドと金属塩／錯体（ｃｏｍｐｌｅｘ）及び還元剤の組み合わせを含み、少なくとも部分的に、摂取の際にペプチドをタンパク質的分解から保護する医薬組成物に関する。
【0020】
本開示の一面として、
薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び
薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、
前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物を提供する。
薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び
薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、
前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物を提供する。
【0021】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の金属はバナジウムであり、前記医薬組成物はバナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０１ｍｇ～約１５ｍｇの範囲の量で含有する。１つの実施形態では、前記バナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれかは、酸化バナジウム（Ｖ）、バナジン酸ナトリウム、硫酸バナジウム、硫酸バナジル、バナジウムビグアナイド、ビス（マルトラト）オキソバナジウム（ＩＶ）、酢酸バナジウム、ピコリン酸バナジル及びクエン酸バナジルを含む群から独立して選択される。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の金属はクロムであり、前記医薬組成物はクロムの塩及びクロムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０２ｍｇ～約０．５ｍｇの範囲の量で含有する。１つの実施形態では、前記クロムの塩及びクロムの錯体のいずれかは、ピコリン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、ニコチン酸クロム、塩化クロム及び酢酸クロムを含む群から独立して選択される。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の金属はマンガンであり、前記医薬組成物はマンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．１ｍｇ～約１０ｍｇの範囲の量で含有する。１つの実施形態では、前記マンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれかは、グルコン酸マンガン、硫酸マンガン、過マンガン酸カリウム及び塩化マンガンを含む群から独立して選択される。
【0022】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドは６０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドは、インスリン、インスリンアナログ、インスリンリスプロ、インスリンペグリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、プロタミン含有中間型（ＮＰＨ）インスリン、インスリンデグルデク、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ｈｕｍａｎ ｉｎｓｕｌｉｎ、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、ＧＬＰ－１、ＧＬＰ－１アナログ、アシル化ＧＬＰ－１アナログ、ジアシル化ＧＬＰ－１アナログ、セマグルチド、リラグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、 ＧＬＰ－１受容体及びグルカゴン受容体のデュアルアゴニスト、アミリン、アミリンアナログ、プラムリンチド、ソマトスタチンアナログ、オクトレオチド、ランレオチド、パシレオチド、ゴセレリン、ブセレリン、レプチン、レプチンアナログ、メトレレプチン、ペプチドＹＹ、ペプチドＹＹアナログ、グラチラマー、リュープロレリン、テリパラチド、デスモプレシン、ヒト成長ホルモン、ヒト成長ホルモンアナログ、グリコペプチド系抗生物質、グリコシル化の環状又は多環非リボソームペプチド系抗生物質、バンコマイシン、テイコプラニン、テラバンシン、ブレオマイシン、ラモプラニン、デカプラニン、ボルテゾミブ、コシントロピン、絨毛性ゴナドトロピン、メノトロピン、セルモレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトロピン、カルシトニン、サケカルシトニン、ペンタガストリン、オキシトシン、ネシリチド、アナキンラ、エンフビルチド、ペグビソマント、ドルナーゼアルファ、レピルジン、アニデュラフンギン、エプチフィバチド、インターフェロンアルファコン－１、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンβ－１ａ、インターフェロンβ－１ｂ、インターフェロンγ－１ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ、ペグインターフェロンα－２ｂ、ペグインターフェロンβ－１ａ、フィブリノリジン、バソプレシン、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンデルタ、エポエチンオメガ、エポエチンゼータ、フィルグラスチム、インターロイキン－１１、シクロスポリン、グルカゴン、ウロキナーゼ、バイオマイシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン、サブスタンスＰ、副腎皮質刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン、又はそれらの薬学的に許容可能な塩を含む群から選択される。
【0023】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属とは、医薬組成物中で物理的に分けられた状態で存在している。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属は、分けられた区画に存在する。１つの実施形態では、前記医薬組成物はカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型又はタブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型で存在する。
【0024】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の還元剤は、アスコルビン酸、還元型グルタチオン、システイン、尿酸、還元糖、グリセルアルデヒド、α－トコフェロール、ビタミンＡ、α－リポ酸、ジヒドロ－α－リポ酸、グルコース、ガラクトース、ラクトース、マルトース、チオール含有化合物、チオマー、及びそれらの薬学的に許容可能な塩のいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、前記医薬組成物は、少なくとも１種類の還元剤を単位用量あたり約１ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で含む。
【0025】
１つの実施形態では、前記医薬組成物は、さらに少なくとも１種類の吸収促進剤を含み、前記吸収促進剤は単位用量あたり約１０ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で存在する。１つの実施形態では、前記医薬組成物は、経口固体剤又は経口液体剤のいずれかの形態に調製され、且つ前記医薬組成物が経口液体剤の形態に調製されている場合には、前記医薬組成物は水分を約５％未満（ｖ／ｖ）の量で含む。
【0026】
以下、本開示の好ましい実施形態と図に基づいて本開示の内容を詳細に説明し、本開示の各種部材、技術特徴、側面及び利点を明確に開示するが、図中で部材符号が同じ部材は同一部材である。
【図面の簡単な説明】
【0027】
【図1】明細書の実施形態に基づき、異なる製剤からのインスリングラルギン（ｍＵ／Ｌ）の濃度と時間の比較を表したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0028】
以下、本開示を詳細に説明するため、図と合わせて本開示の具体的な実施形態を詳細且つ明確に説明する。実施形態は、本開示を明確に伝達するように詳細に記載されている。但し、提供される詳細な量は実施形態の予測される変形に限定することを意図していない。反対に、その意図は、添付の特許請求の範囲によって定義される本開示の主旨及び範囲に含まれるすべての変形形態、均等物、及び代替物を包含するものである。
【0029】
添付の特許請求の範囲それぞれは、本発明それぞれを定義し、侵害目的は特許請求の範囲に特定された様々な要素又は限定の均等物を含むとして認識される。以下の明細書の文脈に応じ、本明細書で述べる「本発明」という用語は、ある場合では本開示の特定の実施形態のみを指すことができ、他の場合では「本発明」という用語は、特許請求の範囲に記載された、必ずしも全てではないが、１又は複数の主題を指すことができる。
【0030】
本明細書及び特許請求の範囲中、文脈で別段の明確な定義がない限り、「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は複数を含むことを指す。同様に、本明細書で用いられるように、文脈で別段の明確な定義がない限り、「～の中（ｉｎ）」という用語には「～の中（ｉｎ）」及び「～の上（ｏｎ）」という意味を含む。
【0031】
本明細書で別段の説明又は文脈の内容に明らかな矛盾がない限り、本開示が述べる方法は何らかの適切な順序方式で行うことができる。本明細書が提供する何らかの若しくは全ての実施例における例示又は例示的用語、即ち「例えば」という用語は、本開示の良好な方案を記述しているに過ぎず、本開示の保護範囲を限定するものではない。本明細書中のいかなる言語も、特許請求の範囲に記載されていないあらゆる要素を本開示の実施に必須と解釈されるべきではない。
【0032】
以下で使用される様々な用語については以下に示す。特許請求の範囲中で使用されている用語が以下に定義されていない限り、関連分野の当業者が出願時に印刷出版物および発行された特許に反映されているようにその用語を解釈する最も最も広義の意味に解釈するものとする。
【0033】
本開示は一般的には薬剤分野に関し、具体的には、本発明はペプチドと金属塩／錯体及び還元剤の組み合わせを含み、摂取の際に少なくとも部分的にペプチドをタンパク質的分解から保護する医薬組成物である。
【0034】
セリンプロテアーゼは真核生物中に普遍的に存在してペプチド結合を切断するが、その主な触媒三残基はセリン、ヒスチジン、アスパラギン酸である。本開示で特定されるセリンプロテアーゼには、トリプシン、キモトリプシン、カルボキシペプチダーゼＢ及びアミノペプチダーゼＭを含む。セリンプロテアーゼは体の生理機能、とりわけ消化（タンパク質的分解）つまりペプチド結合及びアミノ酸の加水分解において役割を果たしている。本開示は、ペプチドと金属塩／錯体及び還元剤の組み合わせを含むことで、摂取の際に少なくとも部分的にペプチドをタンパク質的分解から保護することができる医薬組成物を提供することを目的としている。
【0035】
これに基づき、本開示の一面として、薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、前記少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物を提供する。
【0036】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の金属はバナジウムであり、前記医薬組成物はバナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０１ｍｇ～約１５ｍｇの範囲の量で含有する。１つの実施形態では、前記バナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれかは、酸化バナジウム（Ｖ）、バナジン酸ナトリウム、硫酸バナジウム、硫酸バナジル、バナジウムビグアナイド、ビス（マルトラト）オキソバナジウム（ＩＶ）、酢酸バナジウム、ピコリン酸バナジル及びクエン酸バナジルを含む群から独立して選択される。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の金属はクロムであり、前記医薬組成物はクロムの塩及びクロムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０２ｍｇ～約０．５ｍｇの範囲の量で含有する。１つの実施形態では、前記クロムの塩及びクロムの錯体のいずれかは、ピコリン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、ニコチン酸クロム、塩化クロム及び酢酸クロムを含む群から独立して選択される。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の金属はマンガンであり、前記医薬組成物はマンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．１ｍｇ～約１０ｍｇの範囲の量で含有する。１つの実施形態では、前記マンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれかは、グルコン酸マンガン、硫酸マンガン、過マンガン酸カリウム及び塩化マンガンを含む群から独立して選択される。
【0037】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドは６０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドは、インスリン、インスリンアナログ、インスリンリスプロ、インスリンペグリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、プロタミン含有中間型（ＮＰＨ）インスリン、インスリンデグルデク、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ｈｕｍａｎ ｉｎｓｕｌｉｎ、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、ＧＬＰ－１、ＧＬＰ－１アナログ、アシル化ＧＬＰ－１アナログ、ジアシル化ＧＬＰ－１アナログ、セマグルチド、リラグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、 ＧＬＰ－１受容体及びグルカゴン受容体のデュアルアゴニスト、アミリン、アミリンアナログ、プラムリンチド、ソマトスタチンアナログ、オクトレオチド、ランレオチド、パシレオチド、ゴセレリン、ブセレリン、レプチン、レプチンアナログ、メトレレプチン、ペプチドＹＹ、ペプチドＹＹアナログ、グラチラマー、リュープロレリン、テリパラチド、デスモプレシン、ヒト成長ホルモン、ヒト成長ホルモンアナログ、グリコペプチド系抗生物質、グリコシル化の環状又は多環非リボソームペプチド系抗生物質、バンコマイシン、テイコプラニン、テラバンシン、ブレオマイシン、ラモプラニン、デカプラニン、ボルテゾミブ、コシントロピン、絨毛性ゴナドトロピン、メノトロピン、セルモレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトロピン、カルシトニン、サケカルシトニン、ペンタガストリン、オキシトシン、ネシリチド、アナキンラ、エンフビルチド、ペグビソマント、ドルナーゼアルファ、レピルジン、アニデュラフンギン、エプチフィバチド、インターフェロンアルファコン－１、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンβ－１ａ、インターフェロンβ－１ｂ、インターフェロンγ－１ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ、ペグインターフェロンα－２ｂ、ペグインターフェロンβ－１ａ、フィブリノリジン、バソプレシン、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンデルタ、エポエチンオメガ、エポエチンゼータ、フィルグラスチム、インターロイキン－１１、シクロスポリン、グルカゴン、ウロキナーゼ、バイオマイシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン、サブスタンスＰ、副腎皮質刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン、又はそれらの薬学的に許容可能な塩を含む群から選択される。
【0038】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属とは、医薬組成物中で物理的に分けられた状態で存在している。１つの実施形態では、前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属は、分けられた区画に存在する。１つの実施形態では、前記医薬組成物はカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型又はタブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型で存在する。
【0039】
１つの実施形態では、前記少なくとも１種類の還元剤は、アスコルビン酸、還元型グルタチオン、システイン、尿酸、還元糖、グリセルアルデヒド、α－トコフェロール、ビタミンＡ、α－リポ酸、ジヒドロ－α－リポ酸、グルコース、ガラクトース、ラクトース、マルトース、チオール含有化合物、チオマー、及びそれらの薬学的に許容可能な塩のいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、前記医薬組成物は、少なくとも１種類の還元剤を単位用量あたり約１ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で含む。
【0040】
１つの実施形態では、前記医薬組成物は、さらに少なくとも１種類の吸収促進剤を含み、前記吸収促進剤は単位用量あたり約１０ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で存在する。１つの実施形態では、前記医薬組成物は、経口固体剤又は経口液体剤のいずれかの形態に調製され、且つ前記医薬組成物が経口液体剤の形態に調製されている場合には、前記医薬組成物は水分を約５％未満（ｖ／ｖ）の量で含む。
【0041】
１つの実施形態では、ペプチドは、治療薬、診断薬として使用されるのに適したペプチド又はタンパク質のいかなるものでもある。１つの実施形態では、ペプチドは直鎖状ペプチド又は環状ペプチドである。１つの実施形態では、ペプチドはＰＥＧ化ペプチド、脂肪酸アシル化ペプチド若しくは二脂肪酸アシル化ペプチドなどの修飾又は誘導体化ペプチドである。ペプチドは、ヒスチジン残基を含まない、及び／又はシステイン残基を含まないことができる。通常、ペプチドは水溶性であるのが好ましく、特に中性ｐＨ（即ちｐＨ約７）において少なくとも１つのセリンプロテアーゼ切断部位を有するのが好ましく、即ちそのペプチドはセリンプロテアーゼ（特にトリプシン、キモトリプシン、アミノペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼ、エラスターゼ及び／又はジペプチジルペプチダーゼ４などの腸由来セリンプロテアーゼ）によって切断されるのに適するか又は切断されやすい１又は複数のアミノ酸残基などを含んでいる。
【0042】
１つの実施形態では、ペプチドはインスリン（好ましくはヒトインスリン）、限定されないが持効型基礎インスリンアナログ、安定化プロテアーゼ持効型基礎インスリンアナログ、インスリンリスプロ、インスリンペグリスプロ、Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ｅｐｓ）オクタデカンジオイル－ｇＧｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ）のようなインスリン誘導体、ｄｅｓＢ３０ヒトインスリン、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、プロタミン含有中間型（ＮＰＨ）インスリン、インスリンデグルデク、及び米国出願公開特許ＵＳ２０１４００５６９５３Ａ１が開示するインスリンアナログ／誘導体などのインスリン誘導体、ＧＬＰ－１、ＧＬＰ－１アナログ（アシル化ＧＬＰ－１アナログ又はジアシル化ＧＬＰ－１アナログ）、セマグルチド、リラグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、 ＧＬＰ－１受容体及びグルカゴン受容体のデュアルアゴニスト、アミリン、アミリンアナログ、プラムリンチド、ソマトスタチンアナログ（オクトレオチド、ランレオチド又はパシレオチド）、ゴセレリン、ブセレリン、レプチン、レプチンアナログ（メトレレプチン）、ペプチドＹＹ（ＰＹＹ）、ＰＹＹアナログ、グラチラマー（グラチラマー酢酸塩）、リュープロレリン、テリパラチド、アバロパラチド、テトラコサクチド、コルチコレリン、エテルカルセチド、エルカトニン、デスモプレシン、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、ヒト成長ホルモンアナログ、グリコペプチド系抗生物質（バンコマイシン、テイコプラニン、テラバンシン、ブレオマイシン、ラモプラニン、デカプラニンなど、グリコシル化の環状又は多環非リボソームペプチド系抗生物質）、ボルテゾミブ、コシントロピン、絨毛性ゴナドトロピン、メノトロピン、セルモレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ、性腺刺激ホルモン放出ホルモンとも呼ばれる）、ソマトロピン、カルシトニン（サケカルシトニン）、ペンタガストリン、オキシトシン、ネシリチド、アナキンラ、エンフビルチド、ペグビソマント、ドルナーゼアルファ、レピルジン、アニデュラフンギン、エプチフィバチド、インターフェロンアルファコン（ａｌｆａｃｏｎ）－１、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンβ－１ａ、インターフェロンβ－１ｂ、インターフェロンγ－１ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｆａ－２ａ）、ペグインターフェロンα－２ｂ（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ａｌｆａ－２ｂ）、ペグインターフェロンβ－１ａ（ｐｅｇｙｌａｔｅｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ｂｅｔａ－１ａ）、フィブリノリジン、バソプレシン、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンデルタ、エポエチンオメガ、エポエチンゼータ、フィルグラスチム、インターロイキン－１１、シクロスポリン、グルカゴン、ウロキナーゼ、バイオマイシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン、サブスタンスＰ（ＣＡＳ番号３３５０７－６３－０）、副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）などのインスリンアナログ、又はそれらの薬学的に許容可能な塩のいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。但し、当業者に知られている又は認識されているいかなる他のペプチド分子も、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用することができる。
【0043】
１つの実施形態では、ヒト対象ペプチドは、インスリン又はグルカゴンなどの内生ペプチドのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。好ましい実施形態では、組み換え発現又は化学合成によって得たペプチド対応するヒトアイソフォームを使用する。但し、しかし、当業者に公知であるかまたは当業者によって認識されるようないかなる他のヒトアイソフォームペプチドも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用され得る。
【0044】
１つの実施形態では、ペプチドはインスリンアナログである。１つの実施形態では、インスリンアナログは、インスリンデテミル、インスリングラルギン、インスリンデグルデク、及びその他のヒト、ブタ、魚由来のインスリンアナログのいずれか又はそれらの組み合わせから選択する。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる他のインスリン類似体／誘導体も、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0045】
１つの実施形態では、２種類以上のペプチドの混合物を使用することができる。１つの実施形態では、ヒトインスリン及びＧＬＰ－１アゴニスト（例えばリラグルチド、セマグルチド、エキセナチド又はリキシセナチド）の混合物を使用することができる。但し、しかし、当業者に知られているかまたは認識されているいかなる２つ以上のペプチド（上記のペプチドを含む）の混合物も、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0046】
１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドは６０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドは４０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドは３０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドは２０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドは１０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドは３００Ｄａまたはそれ以上～５０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する。但し、しかしながら、当業者に知られているかまたは認識されているいかなる範囲の分子量を有するペプチドも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0047】
１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチドの分子量は、例えば質量分析法（例えばエレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ－ＭＳ）又はマトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析法（ＭＡＬＤＩ－ＭＡ））、ゲル電気泳動法（例えばドデシル硫酸ナトリウム－ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ））、流体力学的方法（例えばゲルろ過クロマトグラフィー又は勾配沈降（ｇｒａｄｉｅｎｔ ｓｅｄｉｍｅｎｔａｔｉｏｎ））又は静的光散乱法（例えば多角度光散乱検出器（ＭＡＬＳ））、当業者に知られているかまたは認識されている方法など、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすため如何なる方法でも測定することができる。
【0048】
１つの実施形態では、少なくとも１種類の金属はバナジウムであり、医薬組成物はバナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを含む。１つの実施形態では、バナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせは、バナジウム（ＩＶ）、バナジル（Ｖ０２）塩錯体のようなバナジウム（Ｖ）、及びバナジン酸塩／錯体におけるアニオンとしてのバナジウムを含む群から独立して選択される。１つの実施形態では、バナジウム塩及びバナジウム錯体は、酸化バナジウム（Ｖ）、五酸化バナジウム、二酸化バナジウム、バナジン酸ナトリウム、硫酸バナジウム、硫酸バナジル、メタバナジン酸ナトリウム、四塩化バナジウム、オキシ塩化バナジウム（Ｖ）、オキシ三塩化バナジウム、塩化バナジル、三塩化酸化バナジウム、バナジン酸アンモニウム、酸化アンモニウムバナジウム、一硫化バナジウム、硫化バナジウム、塩化バナジウム（ＩＶ）、バナジウムビグアナイド、ビス（マルトラト）オキソバナジウム（ＩＶ）、酢酸バナジウム、バナジルピコリン酸、バナジルクエン酸などのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、バナジウムの塩及びバナジウムの錯体はバナジウム（Ｖ）である。バナジウム（Ｖ）の塩および錯体を使用することは、それらの良好な水溶性及びより良好な酸化状態安定性のため、バナジウム（ＩＶ）の塩及び錯体と比較して有利である。１つの実施形態では、バナジウムの塩及び錯体は、バナジウムがバナジン酸塩（ｖａｎａｄａｔｅ）としてのアニオンの一部、またはバナジル（ｖａｎａｄｙｌ）としてのカチオンの一部である、バナジウム（ＩＶ）塩及び／又は錯体である。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなるバナジウムの塩及び錯体またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0049】
１つの実施形態では、医薬組成物はバナジウムの塩及びバナジウムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０１ｍｇ～約１５ｍｇの範囲の量で含有する。
【0050】
１つの実施形態では、クロムの塩及びクロムの錯体は、クロム（ＩＩＩ）の塩及び／又は錯体から選択されるのが好ましい。１つの実施形態では、クロムの塩及びクロムの錯体のいずれか又はその組み合わせは、ピコリン酸クロム、塩化クロム、ニコチン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、酢酸クロム、三価クロム、高クロム酵母、ピリジン－２－カルボン酸クロム、トリピコリン酸クロム、２－ピリジンカルボン酸クロム塩、トリス(ピコリ
ナト)クロムなどから選択される。１つの実施形態では、クロムの塩及びクロムの錯体は
、ピコリン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、ニコチン酸クロム、塩化クロム、酢酸クロムなどから選択されるのがより好ましい。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなるクロムの塩および錯体またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
ナト)クロムなどから選択される。１つの実施形態では、クロムの塩及びクロムの錯体は
、ピコリン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、ニコチン酸クロム、塩化クロム、酢酸クロムなどから選択されるのがより好ましい。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなるクロムの塩および錯体またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0051】
１つの実施形態では、医薬組成物はクロムの塩及びクロムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０２ｍｇ～約０．５ｍｇの範囲の量で含有する。
【0052】
１つの実施形態では、マンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせは、マンガン（ＩＩ）塩及び／又は錯体、マンガン（ＩＩＩ）塩及び／又は錯体、過マンガン酸塩（Ｖ０２）としてのマンガン塩及び／又は錯体から選択される。１つの実施形態では、マンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか及びそれらの組み合わせは、硫酸マンガン（ＩＩ）（ＭｎＳＯ４）、塩化マンガン（ＩＩ）（ＭｎＣｌ２）、酢酸マンガン（ＩＩＩ）、過マンガン酸カリウム、過マンガン酸ナトリウム、グルコン酸マンガンなどから選択される。１つの実施形態では、マンガンの塩のいずれか及びマンガンの錯体は、マンガン（ＩＩＩ）塩及び／又は錯体から選択されるのがより好ましい。１つの実施形態では、マンガン（ＩＩＩ）塩及び／又は錯体は、グルコン酸マンガン、硫酸マンガン、塩化マンガンなどのいずれか又はそれらの組み合わせである。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなるクロムの塩および錯体またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0053】
１つの実施形態では、医薬組成物はマンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか又はその組み合わせを、単位用量あたり約０．０１ｍｇ～約５０ｍｇ、好ましくは約０．１ｍｇ～約１０ｍｇの範囲の量で含有する。
【0054】
１つの実施形態では、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなるバナジウム、クロム、マンガンの塩及び錯体も、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0055】
１つの実施形態では、バナジウムの塩及び錯体がペプチドの経口での生物学的利用能を有意に増加させることができるため、バナジウムの塩及び錯体は、クロム及びマンガンの塩及び錯体よりも好ましい。１つの実施形態では、クロムの塩及びクロムの錯体は、マンガンの塩並びに錯体よりも好ましい。１つの実施形態では、クロムの塩及び錯体の使用は、毒性が低いという点で有利である。１つの実施形態では、マンガンの塩及びマンガンの錯体の使用は、マンガンの塩及び複合物は投与量が多くても人に安全であるという点でバナジウム及びクロムの塩及び錯体よりも優れている。
【0056】
１つの実施形態では、還元剤は、アスコルビン酸（好ましくはアスコルビン酸ナトリウムなどのアスコルビン酸塩）、還元型グルタチオン（ＧＳＨ）、システイン、尿酸、還元糖（グルコース、グリセルアルデヒド若しくはガラクトースなどの還元性単糖又はラクトース若しくはマルトースなどの還元性二糖）、マンニトール、α－トコフェロール、ビタミンＡ、α－リポ酸、ジヒドロ－α－リポ酸（ＤＨＬＡ）、チオール含有化合物、チオマー（Ｌａｆｆｌｅｕｒ Ｆ ｅｔ ａｌ．，Ｆｕｔｕｒｅ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ，２０１２，４，２２０５～１６の文献が開示するチオマーを含む）などのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、２種類以上の還元剤の混合物を使用することができ、アスコルビン酸塩及び還元型グルタチオンが好ましい。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる還元剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0057】
１つの実施形態では、医薬組成物は、還元剤を、単位用量あたり約１．０ｍｇ～約１０００ｍｇ、好ましくは約５０ｍｇ～約５００ｍｇの範囲の量で含有する。
【0058】
１つの実施形態では、医薬組成物はさらに少なくとも１種類の吸収促進剤（又は透過促進剤）を含む。注意すべき点として、本開示中、交換可能且つ同義で用いられる用語「吸収促進剤」及び「透過促進剤」は、当業者に知られているかまたは認識されている吸収促進剤及び透過促進剤の意味を含む。１つの実施形態では、少なくとも１種類の吸収促進剤又は透過促進剤の投与は、特にペプチドのサイズが大きい場合に消化管中のペプチドの粘膜吸収率を改善又は促進する。１つの実施形態では、少なくとも１種類の吸収促進剤又は透過促進剤は、双性イオン性の吸収促進剤又は非イオン性の吸収促進剤のいずれか又はおそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、少なくとも１種類の促進剤は、Ｃ８～Ｃ２０のアルカノイルカルニチン（好ましくは例えばラウロイルカルニチン塩化物、ミリストイルカルニチン塩化物又はパルミトイルカルニチン塩化物などのラウロイルカルニチン、ミリストイルカルニチン又はパルミトイルカルニチン）、サリチル酸（好ましくは例えばサリチル酸ナトリウムなどのサリチル酸塩）、サリチル酸誘導体（例えば３－メトキシサリチル酸、５－メトキシサリチル酸又はホモバニール酸）、Ｃ８～Ｃ２０のアルカノン酸（好ましくはＣ８～Ｃ２０のアルカノエート、より好ましくは例えばカプリン酸ナトリウム、カプリル酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム又はステアリン酸ナトリウムなどのカプリン酸塩、カプリル酸塩、ミリスチン酸塩、パルミチン酸塩又はステアリン酸塩）、クエン酸（好ましくはクエン酸ナトリウムなどのクエン酸塩）、脂肪酸アシル化アミノ酸（米国出願公開特許ＵＳ２０１４００５６９５３Ａ１が開示する脂肪酸アシル化アミノ酸の、ナトリウムラウロイルアラニネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－アラニン、ナトリウムラウロイルアスパラギネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－アスパラギン、ラウロイルアスパラギン酸、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－アスパラギン酸、ナトリウムラウロイルシステイネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－システイン、ナトリウムラウロイルグルタミン酸、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－グルタミン酸、ラウロイルグルタミン酸ナトリウム、Ｎ－ドデカノイルＬ－グルタミン、ナトリウムラウロイルグリシネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－グリシン、ナトリウムラウロイルヒスチジネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－ヒスチジン、ナトリウムラウロイルイソロイシネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－イソロイシン、ナトリウムラウロイルロイシネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－ロイシン、ナトリウムラウロイルメチオニネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－メチオニン、ナトリウムラウロイルフェニルアラニネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－フェニルアラニン、ナトリウムラウロイルプロリネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－プロリン、ナトリウムラウロイルセリネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－セリン、ナトリウムラウロイルトレオニネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－トレオニン、ナトリウムラウロイルトリプトファネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－トリプトファン、ナトリウムラウロイルチロシネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－チロシン、ナトリウムラウロイルバリネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－バリン、ナトリウムラウロイルサルコシネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－サルコシン、ナトリウムカプリックアラニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－アラニン、ナトリウムカプリックアスパラギネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－アスパラギン、カプリックアスパラギン酸ナトリウム、Ｎ－デカノイル－Ｌ－アスパラギン酸、ナトリウムカプリックシステイネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－システイン、カプリックグルタミン酸ナトリウム、Ｎ－デカノイル－Ｌ－グルタミン酸、ナトリウムカプリックグルタミネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－グルタミン、ナトリウムカプリックグリシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－グリシン、ナトリウムカプリックヒスチジネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－ヒスチジン、ナトリウムカプリックイソロイシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－イソロイシン、ナトリウムカプリックロイシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－ロイシン、ナトリウムカプリックメチオニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－メチオニン、ナトリウムカプリックフェニルアラニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－フェニルアラニン、ナトリウムカプリックプロリネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－プロリン、ナトリウムカプリックセリネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－セリン、ナトリウムカプリックトレオニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－トレオニン、ナトリウムカプリックトリプトファネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－トリプトファン、ナトリウムカプリックチロシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－チロシン、ナトリウムカプリックバリネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－バリン、ナトリウムカプリックサルコシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－サルコシン、ナトリウムオレオイルサルコシネート、ナトリウムＮ－デシルロイシン、ナトリウムステアロイルグルタメート（Ａｍｉｓｏｆｔ ＨＳ－１１ Ｐ）、ナトリウムミリストイルグルタメート（Ａｍｉｓｏｆｔ ＭＳ－１１）、ナトリウムラウロイルグルタメート（Ａｍｉｓｏｆｔ ＬＳ－１１）、ナトリウムココイルグルタメート（Ａｍｉｓｏｆｔ ＣＳ－１１）、ナトリウムココイルグリシネート（Ａｍｉｌｉｔｅ ＧＣＳ－１１）、ナトリウムＮ－デシルロイシン、ナトリウムココイルグリシン、ナトリウムココイルグルタメート、ナトリウムラウロイルアラニネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－アラニン、ナトリウムラウロイルアスパラギネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－アスパラギン、ラウロイルアスパラギン酸ナトリウム、Ｎ－ドデカノイルＬ－アスパラギン酸、ナトリウムラウロイルシステイネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－システイン、ラウロイルグルタミン酸ナトリウム、Ｎ－ドデカノイルＬ－グルタミン酸、ナトリウムラウロイルグルタミネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－グルタミン、ナトリウムラウロイルグリシネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－グリシン、ナトリウムラウロイルヒスチジネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－ヒスチジン、ナトリウムラウロイルイソロイシネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－イソロイシン、ナトリウムラウロイルロイシネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－ロイシン、ナトリウムラウロイルメチオニネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－メチオニン、ナトリウムラウロイルフェニルアラニネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－フェニルアラニン、ナトリウムラウロイルプロリネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－プロリン、ナトリウムラウロイルセリネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－セリン、ナトリウムラウロイルトレオニネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－トレオニン、ナトリウムラウロイルトリプトファネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－トリプトファン、ナトリウムラウロイルチロシネート、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－チロシン、ナトリウムラウロイルバリネート、Ｎ－ドデカノイルＬ－バリン、Ｎ－ドデカノイル－Ｌ－サルコシン、ナトリウムカプリックアラニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－アラニン、ナトリウムカプリックアスパラギネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－アスパラギン、カプリックアスパラギン酸ナトリウム、Ｎ－デカノイル－Ｌ－アスパラギン酸、ナトリウムカプリックシステイネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－システイン、カプリックグルタミン酸ナトリウム、Ｎ－デカノイル－Ｌ－グルタミン酸、ナトリウムカプリックグルタミネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－グルタミン、ナトリウムカプリックグリシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－グリシン、ナトリウムカプリックヒスチジネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－ヒスチジン、ナトリウムカプリックイソロイシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－イソロイシン、ナトリウムカプリックロイシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－ロイシン、ナトリウムカプリックメチオニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－メチオニン、ナトリウムカプリックフェニルアラニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－フェニルアラニン、ナトリウムカプリックプロリネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－プロリン、ナトリウムカプリックセリネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－セリン、ナトリウムカプリックトレオニネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－トレオニン、ナトリウムカプリックトリプトファネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－トリプトファン、ナトリウムカプリックチロシネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－チロシン、ナトリウムカプリックバリネート、Ｎ－デカノイル－Ｌ－バリン、ナトリウムカプリックサルコシネート、ナトリウムオレオイルサルコシネート、及びＣ８～Ｃ２０のアルカノイルサルコシネート（ナトリウムラウロイルサルコシネートなどのラウロイルサルコシネート）など上述の化合物の薬学的に許容可能な塩、又はタンパク質を構成する２０種類の標準的なα－アミノ酸のうち１つのアミノ酸がＣ８～Ｃ２０のアルカノン酸とアシル化した化合物のいずれか、但しこれらに限らない）、アルキルサッカライド（例えばＣ８～Ｃ１０のアルキルポリサッカライド、具体的にはＭｕｌｔｉｔｒｏｐｅTM１６２０－ＬＱ－（ＭＶ）、ｎ－オクチル－β－Ｄ－グルコピラノシド又はｎ－ドデシル－β－Ｄ－マルトシドなどのＣ１～Ｃ２０のアルキルサッカライド）、シクロデキストリン（α－シクロデキストリン、β－シクロデキストリン、γ－シクロデキストリン、メチル－β－シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン又はスルホブチルエーテル－β－シクロデキストリン）、Ｎ－［８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノ］カプリル酸ナトリウム（ＳＮＡＣ）、チオマー（Ｌａｆｆｌｅｕｒ Ｆ ｅｔ．ａｌ．，Ｆｕｔｕｒｅ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０１２，４，２２０５～１６が開示するチオマーを含む）、カルシウムキレート剤化合物（エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、グリコールエーテルジアミン四酢酸（ＥＧＴＡ）、クエン酸ナトリウム及びポリアクリル酸）、クレモフォールＥＬ（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ ＥＬ； ＣＡＳｎｏ．６１７９１－１２－６）、キトサン、Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルキトサン、塩化ベンザルコニウム、ベスタチン、塩化セチルピリジニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、Ｃ２～Ｃ２０のアルカノール（エタノール、デカノール、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、又はパルミチルアルコールなど）、Ｃ８～Ｃ２０のアルケノール（オレイルアルコールなど）、Ｃ８～Ｃ２０のアルケン酸（オレイン酸など）、デキストラン硫酸、ジエチレングリコールモノエチルエーテル（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）、１－ドデシルアザシクロ－ヘプタン－２－オン（ＡｚｏｎｅR）、カプリル酸エチル、グリセリルモノラウレート、リソホスファ
チジルコリン、メントール、Ｃ８～Ｃ２０のアルキルアミン、Ｃ８～Ｃ２０のアルケニルアミン（オレイルアミンなど）、ホスファチジルコリン、ポロキサマー、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレン、モノラウリン酸ポリプロピレングリコール、ポリソルベート（ポリソルベート８０）、デオキシコール酸（デオキシコール酸ナトリウム）、グリココール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、タウロコール酸（タウロコール酸ナトリウムなど）、タウロデオキシコール酸（タウロデオキシコール酸ナトリウムなど）、スクロースラウレート、スルホキシド（デシルメチルスルホキシド又はジメチルスルホキシドなどのＣ１～Ｃ１０のアルキル－Ｃ１～Ｃ１０のアルキル－スルホキシド）、シクロペンタデカラクトン、８－（Ｎ－２－ヒドロキシ－５－クロロ－ベンゾイル）－アミノ－カプリル酸（５－ＣＮＡＣ）、ドデシル－２－Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノプロピオン酸（ＤＤＡＩＰ）、Ｄ－α－トコフェリルポリエチレングリコール１０００サクシネート（ＴＰＧＳ）、及び上述の化合物の薬学的に許容可能な塩などのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、上述の吸収促進剤を含む任意の２種類以上の吸収促進剤の混合物を使用することができる。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる吸収促進剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
チジルコリン、メントール、Ｃ８～Ｃ２０のアルキルアミン、Ｃ８～Ｃ２０のアルケニルアミン（オレイルアミンなど）、ホスファチジルコリン、ポロキサマー、ポリエチレングリコールモノラウレート、ポリオキシエチレン、モノラウリン酸ポリプロピレングリコール、ポリソルベート（ポリソルベート８０）、デオキシコール酸（デオキシコール酸ナトリウム）、グリココール酸ナトリウム、グリコデオキシコール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、タウロコール酸（タウロコール酸ナトリウムなど）、タウロデオキシコール酸（タウロデオキシコール酸ナトリウムなど）、スクロースラウレート、スルホキシド（デシルメチルスルホキシド又はジメチルスルホキシドなどのＣ１～Ｃ１０のアルキル－Ｃ１～Ｃ１０のアルキル－スルホキシド）、シクロペンタデカラクトン、８－（Ｎ－２－ヒドロキシ－５－クロロ－ベンゾイル）－アミノ－カプリル酸（５－ＣＮＡＣ）、ドデシル－２－Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノプロピオン酸（ＤＤＡＩＰ）、Ｄ－α－トコフェリルポリエチレングリコール１０００サクシネート（ＴＰＧＳ）、及び上述の化合物の薬学的に許容可能な塩などのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、上述の吸収促進剤を含む任意の２種類以上の吸収促進剤の混合物を使用することができる。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる吸収促進剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0059】
１つの実施形態では、医薬組成物が、選択的に、単位用量あたり約１０ｍｇ～約１０００ｍｇ、好ましくは約５０ｍｇ～約５００ｍｇの範囲の量で吸収促進剤又は透過促進剤を含む。
【0060】
１つの実施形態では、医薬組成物の組成は、医薬組成物が５％の塩酸溶液１０ミリリットルに添加された場合、酸は中和されて約６より高いｐＨをもたらすように構成される。１つの実施形態では、医薬組成物の組成は、医薬組成物が水溶液１０ミリリットルに添加された場合、６～９の範囲のｐＨをもたらすように構成される。
【0061】
１つの実施形態では、薬学的に有効な用量の５０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する少なくとも１種類のペプチド、バナジウム塩及びバナジウム錯体の少なくともいずれか又はそれらの組成物、少なくとも１種類の還元剤、場合により吸収促進剤を含む医薬組成物は、経口投与され、少なくとも１種類のペプチドを、摂取する際に、少なくとも部分的に、タンパク質的分解から保護することができる。
【0062】
１つの実施形態では、薬学的に有効な用量の分子量が５０ｋＤａまたはそれ以下である少なくとも１種類のペプチド、クロム塩及びクロム錯体の少なくともいずれか又はそれらの組み合わせ、少なくとも１種類の還元剤、場合により吸収促進剤を含む医薬組成物は、経口投与され、少なくとも１種類のペプチドを、摂取する際に、少なくとも部分的に、タンパク質的分解から保護することができる。
【0063】
１つの実施形態では、薬学的に有効な用量の分子量が５０ｋＤａまたはそれ以下である少なくとも１種類のペプチド、マンガン塩及びマンガン錯体の少なくともいずれか又はそれらの組み合わせ、少なくとも１種類の還元剤、場合により吸収促進剤を含む医薬組成物は、経口投与され、少なくとも１種類のペプチドを、摂取する際に、少なくとも部分的に、タンパク質的分解から保護することができる。
【0064】
１つの実施形態では、医薬組成物は、場合により、更に、担体、希釈剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、結合剤、着色剤、顔料、安定剤、防腐剤、酸化防止剤及び／又は溶解性増強剤などの薬学的に許容可能な賦形剤のいずれか又は１以上の組み合わせを含む。１つの実施形態では、医薬組成物は、場合により、更に、ビタミンＥ、ヒスチジン、微結晶セルロース（ＭＣＣ）、マンニトール、澱粉、ソルビトール及び／又はラクトースなどの薬学的に許容可能な添加剤の１以上を含む。１つの実施形態では、医薬組成物は、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる技術によっても、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために調整されることができる。
【0065】
１つの実施形態では、少なくとも１種類の溶解性増強剤は、有する分子量の範囲が約２００～５，０００Ｄａのポリエチレングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコール、非イオン界面活性剤、チロキサポール、ポリソルベート８０、マクロゴール－１５－ヒドロキシステアレート、リン脂質、レシチン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリン、シクロデキストリン、α－シクロデキストリン、β－シクロデキストリン、γ－シクロデキストリン、ヒドロキシエチル－β－シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン、ヒドロキシエチル－γ－シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル－γ－シクロデキストリン、ジヒドロキシプロピル－β－シクロデキストリン、スルホブチルエーテル－β－シクロデキストリン、スルホブチルエーテル－γ－シクロデキストリン、グルコシル－α－シクロデキストリン、グルコシル－β－シクロデキストリン、ジグルコシル－β－シクロデキストリン、マルトシル－α－シクロデキストリン、マルトシル－β－シクロデキストリン、マルトシル－γ－シクロデキストリン、マルトトリオシル－β－シクロデキストリン、マルトトリオシル－γ－シクロデキストリン、ジマルトシル－β－シクロデキストリン、メチル－β－シクロデキストリン、カルボキシアルキルチオエーテル、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、酢酸ビニル共重合体、ビニルピロリドン、ラウリル硫酸ナトリウム又はジオクチルスルホコハク酸ナトリウムなどのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる溶解促進剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0066】
１つの実施形態では、医薬組成物は経口投与（ｏｒａｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）用、好ましくは経口投与（ｐｅｒｏｒａｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）用に調製されるのが好ましい。１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチド、金属の塩の形態及び金属の錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせの少なくとも１種類の金属、少なくとも１種類の還元剤、及び場合により吸収促進剤は、経口投与される。
【0067】
１つの実施形態では、経口（ｏｒａｌ）医薬組成物の剤形は、錠剤（コーティングを備えるか又はコーティングを備えていない錠剤）、カプセル（ソフトゼラチンカプセル、ハードゼラチンカプセル、ＨＰＭＣカプセル又はＨＰＭＣＰカプセル）、カプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）、タブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）、トローチ剤（ｌｏｚｅｎｇｅｓ／ｔｒｏｃｈｅｓ）、腔坐剤、溶液、乳液、懸濁液、シロップ、エリキシル剤、再溶解用粉末及び顆粒、分散性粉末及び顆粒、薬用ガム、チュアブル錠、発泡性錠剤、マルチ粒子剤形などのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる医薬組成物の剤形またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0068】
１つの実施形態では、錠剤は、限定されないが、微結晶セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウム、グリシン、崩壊剤（例えば澱粉であり、トウモロコシ、ジャガイモ又はタピオカの澱粉が好ましい）、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム並びに特定複合ケイ酸塩、及び造粒促進材（ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、スクロース、ゼラチン、アカシアゴムなど）、潤滑剤（ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリン、タルク粉など）などの賦形剤のいずれか又はそれらの組み合わせを含むことができる。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる賦形剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0069】
１つの実施形態では、カプセルは、限定されないが、ラクトース、澱粉、セルロース又は高分子量ポリエチレングリコールなどの賦形剤のいずれか又はそれらの組み合わせを含むことができる。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる賦形剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0070】
１つの実施形態では、水性懸濁液及び／又はエリキシル剤は、限定されないが、甘味料又は調味料、着色剤又は染料、乳化剤及び／又は懸濁剤、及び希釈剤（水、エタノール、プロピレングリコール及びグリセリンなど）などの賦形剤のいずれか又はそれらの組み合わせを含むことができる。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる賦形剤またはそれらの組み合わせも、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱することなくその意図する目的を果たすために利用できる。
【0071】
１つの実施形態では、医薬組成物は経口固体剤形又は経口液体剤形のいずれかの形態に調製され、且つ医薬組成物が経口液体剤形の形態に調製されている場合には、その医薬組成物が水分を約５％未満（ｖ／ｖ）、好ましくは３％未満（ｖ／ｖ）、より好ましくは１％未満（ｖ／ｖ）、さらにより好ましくは０．５％未満（ｖ／ｖ）、さらにより好ましくは０．１％未満（ｖ／ｖ）の量で含み、さらにより好ましくは水を含まない。１つの実施形態では、経口液体剤形は保存安定性を増強可能である点で特に有利である。１つの代替的な実施形態では、経口液体剤形は服用前に素早く調製されることができ、且つ長期保存は避けるべきである。
【0072】
本開示の実施形態に基づいて利用されるバナジウム、クロム及び／又はマンガンの量は、これらの微量元素の１日当たりの推奨摂取量よりもはるかに低いため、安全であると見なすことができる。また、バナジウム、クロム及び／又はマンガンと還元剤との組み合わせは、消化管内のセリンプロテアーゼの作用を阻害する効果を発揮するだけでなく、全身性の作用が生じないため、上記背景技術で述べたプロテアーゼインヒビターと比較すると、安全性の一層の改善をもたらす。さらに、上記背景技術で述べたペプチド又はタンパク質薬物の経口送達について提案されているプロテアーゼインヒビターと比較すると、バナジウム、クロム及び／又はマンガン、並びに、アスコルビン酸又は還元型グルタチオンなどの還元剤は、かなり低い製造コストで提供することができる。
【0073】
通常、医師は患者個体別に実際の最適な用量を決定する。いかなる患者個体の薬剤の具体的な用量及び服薬回数も、違いがあり、使用する特定のペプチド又はタンパク質の活性、特定のペプチド又はタンパク質の化合物の代謝安定性及び反応時間、さらには患者個体の年齢、体重、健康状態、性別、飲食、投与方法及び時間、排泄率、医薬組成方法、特殊な状況における重症度及び患者個体の治療状況を含め、様々な要素に依存する。精確な用量は、最終的に、主治医又は獣医師の裁量による。治療又は予防を必要とする個体又は患者などの治療されるべき個体又は患者は、動物（非ヒト動物など）、脊椎動物、哺乳動物、齧歯動物（モルモット、ハムスター、ラット又はマウスなど）、ネズミ科（マウスなど）、イヌ科（犬など）、ネコ科（猫など）、イノシシ科（豚など）、ウマ科（馬など）、霊長類動物、猿類（サル又は類人猿など）、サル（ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザルなど）又は人間でよい。本発明では、の経済的又は農業的に重要な動物を治療することも考えられる。農業的に重要な動物の非限定的な例は、ヒツジ、ウシおよびブタであるが、例えば、ネコおよびイヌは経済的に重要な動物として考慮され得る。個体／患者は好ましくは哺乳類であり、より好ましくは個体／患者は人間又は非ヒトの哺乳類（モルモット、ハムスター、ラット、マウス、ウサギ、イヌ、ネコ、ウマ、サル、類人猿、マーモセット、ヒヒ、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル、ヒツジ、ウシ又はブタなど）であり、さらに好ましくは患者／個体は人間である。
【0074】
１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチド、金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、少なくとも１種類の還元剤、及び場合による吸収促進剤は、同時（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ）投与、併用（ｃｏｎｃｏｍｉｔａｎｔｌｙ）投与又は逐次（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）投与が可能である。１つの実施形態では、逐次（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）投与は、金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、少なくとも１種類の還元剤を最初に投与し、次に少なくとも１種類のペプチド及び場合による吸収促進剤を投与する（例えば、最初の投与から少なくとも約５分後であり、好ましくは最初の投与から約５分～約３時間後であり、より好ましくは最初の投与から約１０分～１約時間後である）が、これは、ペプチドがインスリン（ヒトインスリン）である場合に特に有利である。１つの実施形態では、金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、少なくとも１種類の還元剤、及び場合による吸収促進剤を投与し、次にペプチドを投与する（例えば最初の投与から少なくとも約５分後であり、好ましくは最初の投与から約５分～３時間後であり、より好ましくは最初の投与から約１０分～１時間後である）が、これは、ペプチドがインスリン（ヒトインスリン）である場合、同様に有利である。１つの実施形態では、少なくとも１種類の金属は、バナジウム、クロム及びマンガンのいずれか１つ又はそれらの組み合わせから選択される。
【0075】
１つの実施形態では、同時（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｌｙ）投与においては、同じ医薬組成物か、又は２つ以上の異なる／分かれた医薬組成物か、又は同じ医薬剤形の２つ以上の異なる／分かれた区画（ｃｏｍｐａｒｔｍｅｎｔ）において、金属の塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態の少なくとも１種類の金属、少なくとも１種類の還元剤を最初に投与し、次に少なくとも１種類のペプチド及び場合による吸収促進剤を投与することができる。１つの実施形態では、少なくとも１種類の金属はバナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせである。
【0076】
１つの実施形態では、少なくとも１種類のペプチド及び塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属は、医薬組成物中で物理的に隔たれて存在している。
【0077】
１つの実施形態では、医薬剤形は少なくとも２つの分かれた、互いに物理的に分かれている（例えば物理学的分離層を介するなど）区画を含む。１つの実施形態では、医薬剤形は、少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属との間に存在する物理的分離層を含む。１つの実施形態では、医薬剤形中、少なくとも１種類のペプチドは第１区画だけに存在し、金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属は第２区画だけに存在する。１つの実施形態では、医薬剤形中、還元剤はいずれも第１区画内、又は第２区画内、又は第１区画内及び第２区画内の両方に存在するか、又は第３区画内に存在することができる。１つの実施形態では、少なくとも１種類の金属はバナジウム、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択される。
【0078】
１つの実施形態では、医薬組成物はカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型又はタブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型であり、医薬組成物は、医薬剤形の第１区画に存在する、分子量は５０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する少なくとも１種類のペプチド；剤形の第２区画に存在する金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属；剤形の第１区画及び／又は第２区画に存在する還元剤を含む。
【0079】
１つの実施形態では、本発明は、医薬剤形の第１区画に存在する、６０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する少なくとも１種類のペプチド；剤形の第２区画に存在する少なくとも１種類の還元剤；及び剤形の第３区画に存在する金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属を含む医薬剤形（例えば、マルチ粒子医薬剤形など）を提供する。１つの実施形態では、医薬剤形はカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型又はタブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型である。１つの実施形態では、医薬剤形がカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型である場合、より大きい外側カプセル（この内容物が先に放出される）には金属の塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属と還元剤とが含まれ、小さい内側カプセル（この内容物が遅れて放出される）にはペプチドが含まれる。１つの実施形態では、少なくとも１種類の金属はバナジウム、クロム及びマンガンのいずれか１またはそれらの組み合わせから選択される。１つの実施形態では、医薬剤形は、修飾放出剤形（腸溶性コーティングを有する剤形（カプセル、マルチ粒子又は錠剤など）など）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ Ｌ３０Ｄ５５又はＥｕｄｒａｇｉｔ ＦＳ３０Ｄがコーティングされた剤形（カプセル、マルチ粒子又は錠剤など）、ＨＰＭＣＰカプセル（商業的にＡＲ Ｃａｐ(R)として知られている）などの耐酸性カプセルなどのいずれか又はそれらの組み
合わせから選択される。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる他の剤も、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱する
合わせから選択される。但し、当業者に知られているかまたは認識されているようないかなる他の剤も、本開示で提示されているように、本発明の範囲および主旨から逸脱する
【実施例0080】
セリンプロテアーゼ：トリプシン、キモトリプシン、カルボキシペプチダーゼＢ及びアミノペプチダーゼＭ。セリンプロテアーゼはペプチド結合及びアミノ酸のタンパク質的分解を担っている。本実験は、異なる金属イオン及び還元剤の組み合わせの下で、セリンプロテアーゼの酸化的不活性化（ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎ）をテストした。
【0081】
酵素活性試験：特定波長下で紫外分光器を使用し、特定の基質中において異なる種類の酵素の酵素活性を測定した。この試験結果を陰性対照（ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ）とした。酵素活性の計算式は以下の通りである。
【数1】
【0082】
酵素阻害試験：各酵素の阻害剤の存在下でインキュベートを行い、この試験結果を陽性対照（ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃｏｎｔｒｏｌ）とした。
【0083】
金属イオン及び還元剤の存在下におけるインキュベーション：９６ウェルマイクロタイタープレートで、酵素、金属塩及び還元剤の組み合わせを酵素と一定時間インキュベートし、基質の存在下における酵素の酸化的不活性化をテストした。金属イオン及び還元剤の存在下における酵素の不活性化について、基質の存在下で陰性対照とした元の酵素活性と、阻害剤の存在下での陽性対照との比較を行った。
【0084】
ｐＨ測定：ハンナコンビネーションｐＨ電極（Ｈａｎｎａ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐＨ ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ）を使用し、金属イオン及び還元剤の組み合わせにおいて酵素をインキュベートした後のｐＨ値の変化を観察した。
【0085】
ザイモグラフィー：テストした酵素のザイモグラフィーを行った。ザイモグラフィーは電気泳動技術の１つで、酵素の基質のレパートリーに基づき加水分解酵素の検出を行うものであり、即ちアクリルアミドゲルを調製した場合、分析する層のゲル中に酵素の基質が組み込まれることで酵素による基質の消化を観察するというものである。
【0086】
キットによる分析：プロテアーゼ蛍光測定キット及びトリプシン活性測定キットを使用し、酵素の不活性化を検証した。
【0087】
材料：
【0088】
下記表１Ａは異なる金属及び金属錯体（場合によって、１つ以上の還元剤を組み合わせ
ることができる）のセリンプロテアーゼ活性に対する阻害効果を評価するための試験材料である。
ることができる）のセリンプロテアーゼ活性に対する阻害効果を評価するための試験材料である。
【表1A】
【0089】
下記表１Ｂは異なる金属塩／金属錯体及び還元剤の組み合わせであり、セリンプロテアーゼに対する阻害効果を評価したものである。
【表1B】
【0090】
Ｎα－ベンゾイル－Ｌ－アルギニンエチルエステル（ＢＡＥＥ）を使用したトリプシン酵素活性の測定
【0091】
２００単位／ｍＬのトリプシンの冷たいＨＣｌ溶液と０．２５ｍＭのＢＡＥＥ基質溶液をそれぞれ調製し、インキュベートした。上記の調製溶液を倒置攪拌して反応混合物を形成した。ブランク溶液（酵素なし）及び試験溶液（反応混合物）のＡ253での吸光の増加
を測定且つ記録した（1分間に最低４つのデータポイントを使用）。最大線形速度（ｍａ
ｘｉｍｕｍ ｌｉｎｅａｒ ｒａｔｅ）を用いてブランク溶液及び試験溶液の両者のＡ253／分を得た。
トリプシン３ｍｌ試験の計算式は以下の通りである。
式中、ｄｆは希釈係数であり、３は測定したトリプシンの総容積（ｍｌ）であり、０．１は酵素の総容積（ｍｌ）であり、０．８０８は２５３ｎｍ下におけるＮα－ベンゾイル－Ｌ－アルギニンエチルエステル（ＢＡＥＥ）の吸光係数である。
を測定且つ記録した（1分間に最低４つのデータポイントを使用）。最大線形速度（ｍａ
ｘｉｍｕｍ ｌｉｎｅａｒ ｒａｔｅ）を用いてブランク溶液及び試験溶液の両者のＡ253／分を得た。
トリプシン３ｍｌ試験の計算式は以下の通りである。
【数2】
【0092】
阻害剤の存在下におけるトリプシン不活性化の測定：トリプシン１ｍＭ／Ｌを特定（既知）の阻害剤（表１Ａに記載）、及び金属塩／還元剤の組み合わせ（下記表２に記載）とそれぞれインキュベートした。阻害剤による不活性化を陽性対照とした。
【表2】
【0093】
金属イオンと還元剤の組合せの存在下でのトリプシンの酸化的不活性化（活性及びｐＨ）の決定
【0094】
２００μｌの反応混合物について、約１０μｌのトリプシンを９６ウェルマイクロタイタープレート中３７℃でそれぞれの濃度で金属塩および還元剤の組み合わせ（表２のシリアル番号１から３１に記載）と共に緩衝液中で（下記表３は、表２の通し番号１から３１で提供されるものからの特定の組み合わせの利用に関する詳細を提供する。）５分、１５分および３０分インキュベートし、その後にそれぞれ９０μｌの基質（表１Ａに記載）を加えた。酵素活性をマイクロプレートリーダーで分光光度的に測定し、そして元の活性アッセイと比較した。ｐＨは、Ｈａｎｎａ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐＨ電極（酵素との反応は３回行った）により測定した。下記表４は、評価中の金属塩／錯体と還元剤との組み合わせで処理した後、特定の期間が経過した後のトリプシンの酵素活性を示す。
【表3】
【表4】
【0095】
下記表５Ａ～５Ｃはトリプシンを異なる時間間隔（即ち５分間、１５分間、３０分間）で測定したｐＨ値である。
【表5A】
【表5B】
【表5C】
【0096】
Ａｌａ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－７－アミド－４－メチルクマリンを使用したキモトリプシンの酵素活性測定
【0097】
約２単位のキモトリプシンの冷たいＨＣｌ溶液、１．１８ｍＭの基質溶液、２Ｍの塩化カルシウム及び８０ｍＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ緩衝液をそれぞれ調製した。３ｍＬの緩衝液中に基質溶液及び塩化カルシウム溶液を添加し、約２５℃下で混合物を倒置攪拌し、ブランク反応混合物及び試験反応混合物（表６）を調製した。さらに、ブランク反応混合物中にＨＣｌ溶液を添加し、試験反応混合物中に酵素溶液を添加し、すぐに倒置攪拌して、Ａ256での増加した吸光度を３～５分間記録した。１分間超の間隔での少なくとも４つの吸
光度の最大線形速度（ｍａｘｉｍｕｍ ｌｉｎｅａｒ ｒａｔｅ）を用いてブランク反応混合物及び試験反応混合物両方のＡ256／分を得た。
式中、３は反応混合物の容積（ｍｌ）である。ｄｆは希釈係数である。８３．４は２５６ｎｍにおける基質のミリモル吸光係数である。０．１０は試験試料の容積（ｍｌ）である。
光度の最大線形速度（ｍａｘｉｍｕｍ ｌｉｎｅａｒ ｒａｔｅ）を用いてブランク反応混合物及び試験反応混合物両方のＡ256／分を得た。
【表6】
【数3】
【0098】
阻害剤の存在下におけるキモトリプシン不活性化の測定：キモトリプシン１ｍＭ／Ｌを特定の既知の阻害剤（上記表１に記載）、及び金属塩及び還元剤の組み合わせ（上記表２に記載）とそれぞれインキュベートした。阻害剤で不活性化したものを陽性対照とした。
【0099】
金属イオン及び還元剤の組み合わせの存在下におけるキモトリプシンの酸化的不活性化（活性及びｐＨ）の測定
【0100】
２００μｌの反応混合物について、約１０μｌのキモトリプシンを９６ウェルマイクロタイタープレート中３７℃でそれぞれの濃度で金属塩および還元剤の組み合わせ（表２のシリアル番号１から３１に記載）と共に緩衝液中で（下記表３は、表２の通し番号１から３１で提供されるものからの特定の組み合わせの利用に関する詳細を提供する。）５分、１５分および３０分インキュベートし、その後にそれぞれ９０μｌの基質（表１Ａに記載）を加えた。酵素活性をマイクロプレートリーダーで分光光度的に測定し、そして元の活性アッセイと比較した。ｐＨは、Ｈａｎｎａ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐＨ電極（酵素との反応は３回行った）により測定した。下記表７は、評価中の金属塩／錯体と還元剤との組み合わせで処理した後、特定の期間が経過した後のキモトリプシンの酵素活性を示す。
【表7】
【0101】
下記表８Ａ～８Ｃはキモトリプシンを異なる時間間隔（即ち５分間、１５分間、３０分間）で測定したｐＨ値である。
【表8A】
【表8B】
【表8C】
【0102】
ヒプリルアルギニンを使用したカルボキシペプチダーゼBの酵素活性
【0103】
約４単位のカルボキシペプチダーゼＢの冷たい脱イオン水溶液、及び塩化ナトリウム１００ｎｍを含む２５ｎＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ緩衝液（ｐＨは７．６５）中の１ｍｍヒプリルアルギニン溶液をそれぞれ約２５℃で調製した。表９に従って、上記で調製された溶液を用いて、２５℃下で３ｍＬの反応混合物（試験及びブランク混合物）を調製した。
計算式：
式中、３は反応混合物の容積（ｍｌ）である。ｄｆは希釈係数である。０．３６は波長２５４ｎｍにおける基質のミリモル吸光係数である。０．１０は分析した試験試料の容積（ｍｌ）である。
計算式：
【数4】
【表9】
【0104】
阻害剤の存在下におけるカルボキシペプチダーゼＢ不活性化の測定：カルボキシペプチダーゼＢ（１ｍＭ／Ｌ）を特定の既知の阻害剤（上記表１Ａに記載）、及び金属塩／還元剤の組み合わせ（上記表２に記載）とそれぞれインキュベートした。阻害剤で不活性化したものを陽性対照とした。
【0105】
金属イオン及び還元剤の組み合わせの存在下におけるカルボキシペプチダーゼＢの酸化的不活性化（活性及びｐＨ）の測定
【0106】
２００μｌの反応混合物について、約１０μlのカルボキシペプチダーゼを９６ウェル
マイクロタイタープレート中３７℃でそれぞれの濃度で金属塩および還元剤の組み合わせ（表２のシリアル番号１から３１に記載）と共に緩衝液中で（下記表３は、表２の通し番号１から３１で提供されるものからの特定の組み合わせの利用に関する詳細を提供する。）５分、１５分および３０分インキュベートし、その後にそれぞれ９０μｌの基質（表１Ａに記載）を加えた。酵素活性をマイクロプレートリーダーで分光光度的に測定し、そして元の活性アッセイと比較した。 ｐＨは、Ｈａｎｎａ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐＨ電
極（酵素との反応は３回行った）により測定した。以下の表１０は、評価中の金属塩／錯体および還元剤の組み合わせでの処理後の特定の期間経過後のカルボキシペプチダーゼの酵素活性を示す。
マイクロタイタープレート中３７℃でそれぞれの濃度で金属塩および還元剤の組み合わせ（表２のシリアル番号１から３１に記載）と共に緩衝液中で（下記表３は、表２の通し番号１から３１で提供されるものからの特定の組み合わせの利用に関する詳細を提供する。）５分、１５分および３０分インキュベートし、その後にそれぞれ９０μｌの基質（表１Ａに記載）を加えた。酵素活性をマイクロプレートリーダーで分光光度的に測定し、そして元の活性アッセイと比較した。 ｐＨは、Ｈａｎｎａ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐＨ電
極（酵素との反応は３回行った）により測定した。以下の表１０は、評価中の金属塩／錯体および還元剤の組み合わせでの処理後の特定の期間経過後のカルボキシペプチダーゼの酵素活性を示す。
【表10】
【0107】
下記表１１Ａ～１１Ｃはカルボキシペプチダーゼを異なる時間間隔（即ち５分間、１５分間、３０分間）で測定したｐＨ値である。
【表11A】
【表11B】
【表11C】
【0108】
Ｌ－ロイシン－Ｐ－ニトロアニリドを使用したアミノペプチダーゼＭの酵素活性
【0109】
１ｍＭのトリシン溶液（１００ｍＬの脱イオン水中で調製、試薬Ａ）、及び５０ｍＭのＬ－ロイシン－Ｐ－ニトロアニリドの純メタノール溶液（試薬Ｂ）をそれぞれ調製した。約１０ｍＭのＬ－ロイシン－Ｐ－ニトロアニリド溶液（試薬Ｃ）を、０．１ｍＬの試薬Ｂを４．９ｍＬの試薬Ａ中に添加して調製した。脱イオン水中２００ｍＭのトリシン緩衝液（試薬Ｄ）及び０．０５％（ｗ／ｖ）のＢＳＡが含まれた２００ｍＭのトリシン緩衝液、２５℃でのｐＨ８．０（試薬Ｅ）をそれぞれ調製した。試薬Ｅ中の０．０４単位／ｍＬのアミノペプチダーゼ（酵素溶液、試薬Ｆ）を調製した。試薬Ｃ、（Ｌｅｕ －ＮＡ、２．
０ｍｌ）、試薬Ｄ（２００ｍＭトリシン緩衝液、１．０ｍｌ）および脱イオン水（７．０ｍｌ）をピペットでとり、容器内で旋回混合して反応カクテル（試薬Ｇ）を得た。試薬Ｇ、試薬Ｅ及び試薬Ｆをすぐに倒置攪拌し、表１２の通り試験溶液及びブランク溶液を調製し、攪拌混合してから約５分間ΔＡ405ｎｍを記録した。且つ最大線形速度（ｍａｘｉｍ
ｕｍ ｌｉｎｅａｒ ｒａｔｅ）を用いてブランク溶液及び試験溶液のＡ４０５／分を得た。
計算式：
式中、１は測定溶液の総容積（ｍｌ）である。ｄｆは希釈係数である。１０．８はＡ４０５ｎｍにおけるＰ－ニトロアニリドのミリモル吸光係数である。０．１は酵素の容積（ｍｌ）である。
０ｍｌ）、試薬Ｄ（２００ｍＭトリシン緩衝液、１．０ｍｌ）および脱イオン水（７．０ｍｌ）をピペットでとり、容器内で旋回混合して反応カクテル（試薬Ｇ）を得た。試薬Ｇ、試薬Ｅ及び試薬Ｆをすぐに倒置攪拌し、表１２の通り試験溶液及びブランク溶液を調製し、攪拌混合してから約５分間ΔＡ405ｎｍを記録した。且つ最大線形速度（ｍａｘｉｍ
ｕｍ ｌｉｎｅａｒ ｒａｔｅ）を用いてブランク溶液及び試験溶液のＡ４０５／分を得た。
計算式：
【数5】
【表12】
【0110】
阻害剤の存在下におけるアミノペプチダーゼ不活性化の測定：１ｍＭ／Ｌのアミノペプチダーゼを特定の既知の阻害剤（上記表１に記載）、及び金属塩／還元剤の組み合わせ（上記表２に記載）とそれぞれインキュベートした。阻害剤で不活性化したものを陽性対照とした。
【0111】
金属イオン及び還元剤の組み合わせの存在下におけるアミノペプチダーゼの酸化的不活性化（活性及びｐＨ）の測定
【0112】
２００μｌの反応混合物について、約１０μｌのアミノペプチダーゼを９６ウェルマイクロタイタープレート中３７℃でそれぞれの濃度で金属塩および還元剤の組み合わせ（表２のシリアル番号１から３１に記載）と共に緩衝液中で（下記表３は、表２の通し番号１から３１で提供されるものからの特定の組み合わせの利用に関する詳細を提供する。）５分、１５分および３０分インキュベートし、その後にそれぞれ９０μｌの基質（表１Ａに記載）を加えた。酵素活性をマイクロプレートリーダーで分光光度的に測定し、そして元の活性アッセイと比較した。ｐＨは、Ｈａｎｎａ Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｐＨ電極（酵素との反応は３回行った）により測定した。下記表１３に、評価中の金属塩／錯体と還元剤との組み合わせで処理後の特定期間経過後のアミノペプチダーゼの酵素活性を示す。
【表13】
【0113】
下記表１４Ａ～１４Ｃはアミノペプチダーゼを異なる時間間隔（即ち５分間、１５分間、３０分間）で測定したｐＨ値である。
【表14A】
【表14B】
【表14C】
【0114】
実施した実験および上記の実験に基づいて、酵素活性の最高レベルの阻害（タンパク質分解）は、以下の還元剤および金属塩の組み合わせを利用することによって観察されたと結論付けることができた。アスコルビン酸ナトリウム－酸化バナジウム、ベンゾヒドロキサム酸－硫酸バナジウム、マンニトール－硫酸バナジウム、尿酸－グルコン酸マンガン、還元型グルタチオン－塩化クロム、及び還元型グルタチオン－酸化バナジウム。
【0115】
生物学的利用能試験
【0116】
胃部の酸性ｐＨ環境からプロテアーゼ分解に対して保護できるようにするため、腸溶性コーティングカプセルはペプチドを胃部環境から保護することができ、外側に存在するＭＩＲＡ顆粒はタンパク質的分解酵素を不活性化させることができ、透過促進薬はペプチドの腸透過による上皮膜への吸収を促進／増加させることができる、カプセルインカプセルの製剤を調製した。
【0117】
カプセルインカプセルの剤形製剤の調製
【0118】
還元剤及び金属塩が含まれた顆粒の調製
【0119】
下記表１５Ａ～１５Ｆは、生物学的利用能を試験するために調製された、異なる還元剤及び金属塩が含まれた顆粒製剤（ここではＭＩＲＡ顆粒と称する）を示す。
【表15A】
【表15B】
【表15C】
【表15D】
【表15E】
【表15F】
【0120】
ＭＩＲＡ顆粒の調製方法
【0121】
以下はＭＩＲＡ顆粒の調製工程である。
【0122】
Ａ）結合剤溶液の調製：７５．０ｍｇのＨＰＭＣ Ｅ－５を２５．０ｍＬの脱イオン（Ｄ．Ｉ．）水に溶解することで、０．３％ ｗ／ｖのＨＰＭＣ Ｅ－５溶液を調製した。Ｂ）粉末混合物の調製：すべての成分を適切な容器に一つ一つ入れ、ポリ袋を使用して十分に混合し、混合物の均一性を確保した。Ｃ）顆粒の調製：２．０ｍＬの結合剤溶液を少しずつ滴下し、手作業で造粒して顆粒を調製した（粉末混合物２．５ｇｍの造粒に２ｍＬの結合剤を要した）。Ｄ）顆粒の乾燥：上記の顆粒を熱風炉内に入れ、４０℃で１２時間乾燥させた。（Ｅ）顆粒の篩い分け：ステンレス金網の４０＃メッシュを使用して乾燥させた顆粒を篩過し、篩過後の顆粒を適切なガラス容器に収集して室温下で保存した。（全造粒工程において、温度は２３℃、湿度は３９％ＲＨであることに注意した）
【0123】
ペプチドが含まれた顆粒の調製
【0124】
下記表１６Ａ～１６Ｉは生物学的利用能を試験するために調製された異なるペプチドが含まれた顆粒製剤（ここではＰＡ顆粒と称する）を示す。
【表16A】
【表16B】
【表16C】
【表16D】
【表16E】
【表16F】
【表16G】
【表16H】
【表16I】
【0125】
ペプチド顆粒の造粒方法
【0126】
Ａ．結合剤溶液の調製：７５．０ｍｇのＨＰＭＣ Ｅ－５を２５ｍＬの脱イオン（Ｄ．Ｉ．）水中に溶解することで、０．３％ｗ／ｖのＨＰＭＣ Ｅ－５溶液を調製した。Ｂ．粉末混合物の調製：液体賦形剤以外のすべての成分を正確に秤量し、ポリ袋を使用して５分間混合した。Ｃ．結合剤の添加：秤量した液体賦形剤及びペプチドを０．３％ｗ／ｖのＨＰＭＣ Ｅ－５結合剤溶液に添加た。得られた混合物を少しずつ滴下して湿式造粒を行った。Ｄ．顆粒の乾燥：造粒により調製した顆粒を真空デシケーターのシリカゲル床の上に置き、一晩乾燥させた。Ｅ．顆粒の篩い分け：ステンレス金網の４０＃メッシュを使用して乾燥させた顆粒を篩過し、篩過後の顆粒を適切なガラス容器に収集して室温下で保存した。（全造粒工程において、温度は２２℃、湿度は３５％ＲＨであるよう注意した）
【0127】
カプセル充填
【0128】
ＭＩＲＡおよびペプチド顆粒を、秤量天秤を使用して手動でカプセルに充填した。下記の表１７Ａおよび１７Ｂは、それぞれラット研究およびイヌ研究用のカプセル充填に使用したカプセルのサイズを示す。
【表17A】
【表17B】
【0129】
カプセルの包装及び保存
【0130】
ポリ袋でカプセルを包装した後に、包装したカプセルを、湿度制御のためのシリカ袋を備えたＨＤＰＥ（高密度ポリエチレン）容器内に移した。
【0131】
バッチ試験用プラセボ顆粒の調製
【0132】
カプセルからの顆粒の崩壊および放出を（視覚的に）理解するために、プラセボバッチをサンセットイエローおよび青色を用いて調製した。乾燥させた顆粒をカプセルサイズが３のカプセル中に充填し、且つ崩壊試験器（Ｅｌｅｃｔｒｏｌａｂ）のガイドディスクを用いて崩壊時間を測定した。測定の結果、３７±０．２℃の水及びリン酸緩衝液（ｐＨは６．８）中での崩壊時間は３±１分であった。
【0133】
プラセボ顆粒の溶出試験（カプセルインカプセル）
【0134】
外側カプセル：カプセルサイズは０、黄色顆粒。
【0135】
内側カプセル：カプセルサイズは４、青色顆粒。
【0136】
３７±０．５℃で、９００ｍＬの０．１Ｎ ＨＣｌ溶液中（２時間）及びｐＨ６．８のリン酸緩衝液中で、壊試験装置（Ｅｌｅｃｔｒｏｌａｂ Ｍｕｍｂａｉ）を使用して溶出試験を行った。
【0137】
外側の腸溶性コーティングカプセルは０．１Ｎ ＨＣｌ溶液中で完全に保たれていた（即ち胃基質中で安定可能）が、ｐＨ６．８のリン酸緩衝液に入れてから３分後に崩壊が始まったのを視覚的に観察した。
【0138】
内側カプセルは８分で崩壊が始まり、且つ１３分以内に完全に溶解した。同様の方法で、ＭＩＲＡ顆粒はアルカリ性リン酸緩衝液に暴露してから３分後に溶出が始まり、且つ１３分以内にペプチドが完全に溶出された。
【0139】
カプセルの評価
【0140】
インスリングラルギン、酢酸オクトレオチド及びテリパラチドのラット試験測定－５０ｍｇ／３０ｍｇの顆粒（１つのカプセル中から取り出した）を正確に秤量した後、移動相へ溶解した。分散液を５分間超音波処理した後に０．２２μｍのシリンジフィルターを使用して濾過し、且つＨＰＬＣに注入した。すべてのＡＰＩの検量線は、ＵＳＰ２０１７で推奨されているそれぞれの移動相で複数の希釈液を使用してプロットした。アッセイを行
い、薬物含有率を、検量線を用いて計算した。
い、薬物含有率を、検量線を用いて計算した。
【表18】
【0141】
インスリングラルギンカプセルの安定性試験
【表19】
【0142】
カプセル充填－モード：手作業充填；カプセルサイズ：２；顆粒充填重量：上記が示す各処方と同様。
【0143】
カプセル及び顆粒の保存－温度：２５±３℃。湿度：35±5％RH。容器：カプセル用HDPE 60 cc /顆粒用ゴム栓付き透明ガラスバイアル。
【0144】
分析結果：式（ＨＰＬＣデータから得られたｙ ＝ ３０．９７７ｘ － ２９２．２６）から、製剤中に存在するインスリングラルギンの含有量は、バッチＩおよびバッチＩＩについてそれぞれ１０５．２％および１１５．８％であることがわかった。
【0145】
７５日間の安定性試験：両バッチを２５℃下で８５日間保存した後に再び分析を行った。
【0146】
分析結果：式（ＨＰＬＣデータから得られたｙ ＝ ３０．９７７ｘ － ２９２．２６）から、製剤中に存在するインスリングラルギンの含有量は、下記の表２０から分かるように、バッチＩおよびバッチＩＩについてそれぞれ９７．２５％および９１．６３％であることがわかった。
【表20】
【0147】
テリパラチド安定性試験
【表21】
【0148】
カプセル充填－モード：手作業充填；カプセルサイズ：２；顆粒充填重量：上記が示す各処方と同様。
【0149】
カプセル及び顆粒の保存－温度：２５±３℃。湿度：35±5％RH。容器：カプセル用HDPE 60 cc /顆粒用ゴム栓付き透明ガラスバイアル
【0150】
分析結果：式（ＨＰＬＣデータから得られたｙ ＝ １８．９２４ｘ － ２２．５３９）から、配合物中に存在する酢酸テリパラチドの含有量は、バッチＩおよびバッチＩＩについてそれぞれ９８．０２％および１０６％であることがわかった。
【0151】
７５日間の安定性試験：２つのバッチを２５℃下で７５日間保存した後に再び分析を行った。
【0152】
式（ＨＰＬＣデータから得られたｙ ＝ １８．９２４ｘ －２２．５３９）から、配合
物中に存在する酢酸テリパラチドの含有量は、バッチＩおよびバッチＩＩについてそれぞれ９２．８８％および８９．７６％であることがわかった。
物中に存在する酢酸テリパラチドの含有量は、バッチＩおよびバッチＩＩについてそれぞれ９２．８８％および８９．７６％であることがわかった。
【表22】
【0153】
酢酸リュープロレリンのラット試験測定
【0154】
酢酸リュープロレリンＨＰＬＣ検量線の作成－約１１２ｍｇ及び１０４ｍｇの顆粒（１００μｇに相当）を精確に秤量し、且つ１ｍＬの移動相を用いて希釈を行った；この分散液における酢酸リュープロレリンの理論濃度は１００μｇ／ｍＬであることが分かった。分散液を２分間ボルテックスした後、０．２μｍのシリンジでフィルタリングした。２０．０μＬの濾過液をＨＰＬＣシステムに注射してペプチド含有量を測定した。分析結果：ペプチドについてのＨＰＬＣから得られた公式ｙ＝４２．６７ｘ－７６．４４７から、酢酸リュープロレリンの含有量％ペプチド量は、（Ａ）酢酸リュープロレリン＋ラブラソールＡＬＦ顆粒（ＰＡ２）：９７．４５％、及び（Ｂ）酢酸リュープロレリン＋ラブラソールＡＬＦ＋ピペリン顆粒（ＰＡ２＋３）：１０５．１１％であった。
【0155】
酢酸リュープロレリンカプセルの溶出試験
【0156】
分析結果に基づき、ラブラソールＡＬＦ及び酢酸リュープロレリンが含まれた顆粒（ＰＡ２）製剤の溶解試験を行った。
【0157】
設定１：透析膜の使用－基質：ｐＨ６．８０のリン酸塩緩衝液；容積：１０ｍＬ；排出容積：４００μｌ；攪拌速度：１００ＲＰＭ；充填顆粒：１４０ｍｇ（１つのカプセルに相当）；透析膜規格：ＨＩＭＥＤＩＡ ＬＭ３９５－３０ＭＴ；ポアサイズ：２５ｎｍ；平均平面幅：２９．３１ｍｍ；平均直径：１７．５ｍｍ。
【表23】
【0158】
設定２：回転バスケットの使用（ＵＳＰ ＴＹＰＥ １）－基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：２５ｍＬ；排出体積：４００μｌ；攪拌速度：１００ＲＰＭ；充填顆粒：ゼラチンカプセルに１４０ｍｇ。
【表24】
【0159】
設定３：回転バスケットの使用（ＵＳＰ ＴＹＰＥ １）
【0160】
基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：３０ｍＬ；排出容積：４００μｌ；攪拌速度：５００ＲＰＭ；充填顆粒：ゼラチンカプセルに１４０ｍｇ。
【表25】
【0161】
設定４：回転バスケットの使用（ＵＳＰ ＴＹＰＥ １）
【0162】
基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：３０ｍＬ；排出容積：４００μｌ；攪拌速度：５００ＲＰＭ；充填顆粒：ヒプロメロースカプセル（サイズは０）に１４０ｍｇを含む。
【表26】
【0163】
設定５：回転バスケットの使用（ＵＳＰ ＴＹＰＥ １）
【0164】
基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：３０ｍＬ；排出容積：５００μｌ；攪拌速度：１００ＲＰＭ；充填顆粒：カプセルに調製せず、顆粒１４０ｍｇを回転バスケット内に直接入れた。
【表27】
【0165】
設定６：マグネチックスターラーの使用
【0166】
基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：３０ｍＬ；排出容積：５００μｌ；攪拌速度：２００ＲＰＭ；充填顆粒：ゼラチンカプセルに１４０ｍｇを調製（カプセルサイズは２）。
【表28】
【0167】
設定７：マグネチックスターラーの使用
【0168】
基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：３０ｍＬ；排出容積：５００μｌ；攪拌速度：２００ＲＰＭ；充填顆粒：ゼラチンカプセルに１４０ｍｇを調製（カプセルサイズは２）。
【表29】
【0169】
表２４～２９のデータによると、酢酸リュープロレリンは顆粒から溶出して透析膜を通過することがなかった点に注目できた（設定１）。設定２では回転バスケット（ＵＳＰ ＴＹＰＥ １）を使用し、バスケットの回転が材料を基質中で移動／回転させるのに十分な回転力を生み出すことができなかったため、材料がゼラチンと共に沈降し、最終的には溶出に影響が出た。設定３ではバスケットのＲＰＭを増加させて（１００から５００まで）行ったが、バスケットのｒｐｍが増加してもＣＤＲ％は２４．７５％であった。設定４では回転バスケットのＲＰＭを増加させさらにゼラチンカプセルの代わりにヒプロメロースカプセルを使用し、ＣＤＲ％は２９．９７％であった；設定５ではカプセルを無くして回転バスケットで行い、ＣＤＲ％は９０％であり、材料（ゼラチン／ヒプロメロース）が粘度を増加させ、且つ顆粒からの酢酸リュープロレリンの溶出を遅延し得ることが証明できたことが確認された；設定６及び７では分析を通じて基質を良好に回転させるためマグネチックスターラーを使用して試験を行い、ＣＤＲ％はそれぞれ１０８．８％及び１０２．６％であった；実験はすべて３７℃の設定下で行ったが、温度が変化した場合にはカプセルの崩壊に影響する。２５℃での崩壊時間は１２分であり、３７℃での崩壊時間は２分未満であった。
【0170】
ＨＰＬＣを用いたリラグルチドナトリウムの測定
【0171】
試験１：手順：顆粒ＰＡ２（表１６Ｆ）及び顆粒ＰＡ３＋４（表１６Ｇ）約１０．０ｍｇを１０．０ｍＬのＨＰＬＣ希釈剤中で希釈した（Ｄ．Ｉ．水中１０％ＡＣＮ）。この分散液が有するリラグルチドナトリウムの理論濃度は７４μｇ／ｍＬであることが分かった。超音波浴を使用して分散液を５．０分間超音波処理した後、０．２μｍのシリンジでフィルタリングし、２０．０μＬの濾過液をＨＰＬＣシステムに注射してペプチド含有量を測定した。分析結果：ペプチドに関するＨＰＬＣから得られた公式ｙ＝７９．２８３ｘ－５７１．７２から、ラブラソールＡＬＦを有するリラグルチドナトリウム製剤（ＰＡ２）の含有量は４４．４％であり、ピペリン及びソルトールＨＳ１５を有するリラグルチドナトリウム製剤（ＰＡ３＋４）の含有量は２５．４％であった。（ａ）２分間のボルテックスにおいて、ピペリン及びソルトールＨＳ１５を有するリラグルチドナトリウム製剤の分析結果は６７．３９％であった；（ｂ）２分間のボルテックスにおいて、ラブラソールＡＬＦを有するリラグルチドナトリウム顆粒製剤の分析結果は８０．４３％であった；（ｃ）５分間のボルテックスにおいて、ピペリン及びソルトールＨＳ１５を有するリラグルチドナトリウム製剤の分析結果は９５．６６％であった；（ｄ）５分間のボルテックスにおいて、ラブラソールＡＬＦを有するリラグルチドナトリウムの顆粒の分析結果は９６．９９％であった。
【0172】
リラグルチド溶解試験
【0173】
基質：ｐＨ６．８０のリン酸緩衝液；容積：３０ｍＬ；排出容積：５００μｌ；攪拌速度：２００ＲＰＭ；
【表30】
【表31】
【0174】
分析結果：リラグルチド顆粒ＰＡ及びＰＡ３＋４のＣＤＲ％はそれぞれ１１２．８５％及び９３．６４％であった。５０％を上回るリラグルチドナトリウムが５～７分の間に溶出した。
【0175】
ＳＴＺ誘発糖尿病ラット血漿中のグルコース及びインスリングラルギン含有量の定量分析
【0176】
ＳＴＺ誘発糖尿病ラットの空腸中部にインスリングラルギン製剤を投与した後、その血漿中のグルコース及びインスリングラルギン含有量を定量した。
【0177】
試験製剤Ｉ：インスリングラルギン（Ｌａｎｔｕｓ(R)）－外観：予備充填用のペン型注
射器（ｐｒｅｆｉｌｌｅｄ ｐｅｎ）中の注射溶液；濃度：１００ＩＵ／ｍｌ；保存条件：２～８℃；用量：０．２Ｕ／ｋｇ；投与経路：ＳＣ．。
射器（ｐｒｅｆｉｌｌｅｄ ｐｅｎ）中の注射溶液；濃度：１００ＩＵ／ｍｌ；保存条件：２～８℃；用量：０．２Ｕ／ｋｇ；投与経路：ＳＣ．。
【0178】
試験製剤ＩＩ：インスリングラルギン製剤－顆粒ＭＩＲＡ１（表１５Ａの還元型グルタチオン／ピコリン酸クロム）＋透過促進薬１（表１のＰＡ１）（ＴＲＩＳ緩衝液中の経口液）－用量：１．７Ｕ／動物；投与経路：空腸中部。
【0179】
試験製剤ＩＩＩ：インスリングラルギン製剤－ＰＡ２（表１６Ｂの通り）及びＭＩＲＡ２（表１５Ｂのアスコルビン酸ナトリウム／酸化バナジウム）（緩衝液中の経口液）－用量：１．７Ｕ／動物；投与経路：空腸中部。
【0180】
試験結果：皮下注射及び空腸中部投薬のいずれにおいてもラットの死亡はなかった。臨床的症状は正常であった。サンプリング時点に関して、投薬中、採血時点は投与後０、２０、４０、６０、１２０および１５０分であった。後眼窩洞穿刺から、約１００μｌの血液を予め充填されたＮａ－ＥＤＴＡエッペンドルフに集めた。血液を５０００ｒｐｍ、５分間、４℃で遠心分離して血漿を得た。採血直後に血糖計を用いて測定した。
【表32】
【表33】
【0181】
ＥＬＩＳＡ試験
【0182】
試験材料：インスリングラルギンＥＬＩＳＡキット（Ｉｎｖｉｔｒｏｎ Ｌｔｄ，Ｃａｔ．Ｎｏ．ＭＢＳ４９５３６９）。
【0183】
原理：このグラルギンＥＬＩＳＡはｔｗｏ－ｓｉｔｅイムノアッセイであり、微量滴定プレートのウェルに固定されたモノクローナル抗体、及びホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）標識された可溶性抗体を用いて測定を行うものである。血漿試料をマイクロタイタープレートのウェル中で一緒にインキュベートし、洗浄した後にＨＲＰ共役抗体液を添加した。測定前に未結合のＨＲＰ共役抗体を洗浄除去してから二次インキュベートを行った。マイクロタイタープレートの各ウェル中に酵素基質を添加し、しばらくインキュベートしてからさらなる試薬を添加して反応を停止させた。各ウェルで発色した色の強度は、４５０ｎｍの波長の透過光を記録するように設定されたマイクロタイタープレートリーダーで定量される（キットプロトコル：製造業者が推奨するカタログ番号MBS495369のプロトコルを用いた）。
【0184】
手順：使用前にすべてのキット内容及び試料を室温下で放置する。必要な数量のコーティングされたストリップをプレートホルダーに固定した。すぐに使用しないストリップはすべてシリカゲル乾燥剤を入れたポリエチレン製密封バッグに保存する。プレートホルダー上の残りのスペースがコーティングされていないストリップで埋まっていることを確認して、インキュベート時に熱が均一に伝わることを確保する。１００μｌの試料緩衝液を各ウェル中にピペッティングする。２５μｌの標準品又は試料をそれぞれのウェル中にピペッティングする。標準品及び試料の各試験は重複して行うことを推奨する。プレートホルダーのカバーを被せてから、室温（１８～２２℃）下で２時間インキュベートする。プレートホルダーカバーを取り外し、自動プレートホルダー洗浄機を使用し、作動強度に冷却＊したｗｏｒｋｉｎｇ ｓｔｒｅｎｇｔｈ洗浄緩衝液（各サイクルで３００μｌ）を組み合わせて洗浄サイクルを３回行う。ｗｏｒｋｉｎｇ ｓｔｒｅｎｇｔｈ共役抗体１００μｌを各ウェル中にピペッティングする。プレートシーラーを被せてから、４℃（２～８℃）で４時間インキュベートする。プレートシーラーを除去し、自動プレートホルダー洗浄機を使用し、冷却＊したｗｏｒｋｉｎｇ ｓｔｒｅｎｇｔｈ洗浄緩衝液で洗浄サイクルを３回行う。次に、１００μｌの基質溶液を各ウェル中に添加し、室温（１８～２２℃）下の暗所で１５分インキュベートする。１００μｌの停止液を各ウェル中に添加する。４５０ｎｍに設定されたマイクロタイタープレートリーダーで、可能であれば、６２０ ／ ６５０ｎｍのＯＤで測定されたバックグラウンド減算を用いて、光透過率を測定する。図１は、異なる製剤からのインスリングラルギン（ｍＵ／Ｌ）の濃度対時間のプロファイルを描いたグラフを示す。
【0185】
試験製剤インスリングラルギン－ＭＩＲＡ１（還元型グルタチオン／ピコリン酸クロム）＋透過促進剤１（ＰＡ１）は９．２５％の相対バイオアベイラビリティーを示し、試験製剤インスリングラルギン－ＰＡ２およびＭＩＲＡ２（アスコルベートナトリウム／酸化バナジウム） ）は２８．８６％の相対バイオアベイラビリティーを示すことがわかった
。
。
【0186】
ＥＬＩＳＡキットによるイヌ血漿中の酢酸リュープロレリン含有量の定量分析
【0187】
標準試験製剤：酢酸リュープロレリン：ＬＵＰＲＯＤＥＸ；Ｄｅｐｏｔ）－濃度：バイアル毎に３．７５ｍｇの酢酸リュープロレリンを含有；製造日：２０１７年１１月；有効期限：２０２０年１０月；保存環境：室温（２５℃未満）で保存し、冷凍しないこと；バイアル数：希釈剤付き１バイアル。
【0188】
試験製剤ＦＢ：ＭＩＲＡ５（表１５Ｅ）＋ＰＡ２（表１６Ｈ）－外観：白色のカプセルキャップ及び白色のカプセルボディーを有するハードゼラチンカプセル；濃度：各カプセルは３００ｍｇ、且つ１．２５ｍｇの酢酸リュープロレリンを含有；製造日：２０１８年４月２１日；有効期限：提供なし；保存環境：室温（２５℃未満）で保存；試験項目カプセル数：１容器７０カプセル。
【0189】
試験製剤Ｈ：ＭＩＲＡ２（表１５Ｆ）＋ＰＡ２＋３（表１６Ｉ）－外観：白色のキャップ及び白色のカプセルボディーを有するハードゼラチンカプセル；濃度：各カプセルは３００ｍｇ、且つ１．２５ｍｇの酢酸リュープロレリンを含有；製造日：２０１８年４月１９日；有効期限：なし；保存環境：室温（２５℃未満）で保存；試験項目カプセル数：１容器７０カプセル。
【表34】
【0190】
投薬期間中、イヌ（イヌ科；犬種；ビーグル）は投薬の１２時間前から投薬の４時間後の間夜間絶食した（水は許容した）。投薬の７２０時間後、イヌの有害事象の有無を観察した。各イヌの体重は投与前に測定し記録した。
【0191】
試料のサンプリング時間
【0192】
０時間、１時間、２時間、６時間、１２時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１２０時間、２４０時間、３１２時間、３６０時間、４８０時間及び７２０時間後（計１５のサンプリング時間ポイント）に、皮下及び経口投与した各イヌの頚静脈から約２ｍＬの血液試料をＫ２ＥＤＴＡコーティングとラベリングされた試料採取管に採取した。
【0193】
ＥＬＩＳＡ試験条件
【0194】
試験材料：カタログ番号Ｓ －１１７４（Ｄｅｓ－Ｇｌｙ１０、Ｄ－Ｌｅｕ６、Ｐｒｏ－ＮＨＥｔ９）－ＬＨＲＨ（ロイプロリド）。キットプロトコル：使用されている製造元が推奨するプロトコル（カタログ番号Ｓ１１７４）
【0195】
試験結果：試験製剤ＦＢが有する相対的生物学的利用能は５６．５３％であり、試験製剤Ｈが有する相対的生物学的利用能は１６％であった。
【0196】
ＥＬＩＳＡキットを使用したイヌ血漿中のリラグルチド含有量の定量
【0197】
試験製剤Ｉ：リラグルチド－外観：ペン型注射器（ｐｒｅｆｉｌｌｅｄ ｐｅｎ）中に予備充填された注射溶液；濃度：６ｍｇ／ｍｌ；製造日：２０１７年２月；有効期限：２０１９年７月；保存環境：２～８℃；用量：イヌ毎に０．６ｍｇ；投与経路：ＳＣ
【0198】
試験製剤ＩＩ（ＦＡ）：ＭＩＲＡ５（表１５Ｅ）＋ＰＡ２（表１６Ｆ）－用量：１２ｍｇ（１カプセル）／イヌ；投与経路：経口。
【0199】
試験製剤ＩＩＩ（Ｇ）：ＭＩＲＡ５（表１５Ｅ）＋ＰＡ３＋４（表１６Ｇ）－用量：１２ｍｇ（１カプセル）／イヌ；投与経路：経口。
【表35】
【0200】
皮下及び経口にリラグルチドを投与後、イヌの死亡はなかった。臨床的症状は正常であった。各イヌの体重は試験前に測定し記録した。投薬期間中、イヌ（イヌ科；犬種；ビーグル）は投薬の１２時間前から投薬の４時間後の間夜間絶食した（水は許容した）。投与期間中、イヌの血液試料の収集時間ポイントは投薬してから０分、２０分、３０分、６０分、１２０分、１８０分、２４０分及び４８０分後とし、頚静脈から２ｍＬの血液試料をＫ２ＥＤＴＡコーティングとラベリングされた試料採取管に採取した。グルコースは血液試料のサンプリング後すぐに血糖計で測定した。
【0201】
ＥＬＩＳＡ試験条件
【0202】
試験材料：ＥＬＩＳＡキット（Ｋｒｉｓｈｇｅｎ ＢｉｏＳｙｓｔｅｍｓ，Ｃａｔ．Ｎｏ．ＫＢＩ５０２０ Ｖｅｒ２．０）。
【0203】
キットプロトコル：製造会社推奨のプロトコルを使用した（Ｃａｔ．Ｎｏ．ＫＢＩ５０２０ Ｖｅｒ２．０）。（１）希釈した標準品、ブランク対照及び試料のウェルを定め、５つのウェルを標準品、１つのウェルをブランク対照用として準備する。５０μＬの標準品（読み取り試薬調製）、ブランク対照及び試料をそれぞれ適切なウェル中に添加する。すぐに５０μＬのリラグルチド－ビオチンを上述の各ウェル中にそれぞれ添加した。プレートを軽く振る（プレートシェーカーの使用が推奨される）。プレートカバーを被せた。３７℃下で１時間インキュベートする。リラグルチド－ビオチンは混濁状を呈することがある。室温で放置した後、溶液が均一となるまでゆっくりと混合する。（２）マイクロプレート中の溶液を吸引してから、スプレーボトル、マルチチャンネルピペット、マニホールドディスペンサー及び自動洗浄機を使用し、３５０μＬの１×洗浄液で各ウェルを洗浄し、１～２分静置する。プレートを吸水紙に倒置して圧印し、残った液体を除去する。３回繰り返す。最後の洗浄後、液体を吸引又は注ぎ出す方法で残りの洗浄液をすべて除去し、マイクロプレートを吸水紙に倒置する。（３）各ウェル中に１００μＬのストレプトアビジンＨＲＰ試料を添加する。プレートシーラーを被せたのち３７℃で３０分インキュベートする。（４）手順（２）で行ったように吸引／洗浄手順を全５回繰り返す。（５）各ウェル中に９０μＬの基質溶液を添加する。新しいプレートシーラーでカバーする。３７℃で１０～２０分インキュベートする（３０分を超えない）。光から保護する。基質溶液を添加することで溶液は青色に変化する。（６）各ウェル中に５０μＬの停止液を添加する。停止液を添加することで溶液は黄色に変化する。プレートの側面を叩いて混合液を混合させる。溶液の色変化が不均一であった場合は、マイクロプレートを軽く叩いて溶液の十分な混合を確保する。（７）マイクロプレート底部の水滴又は指紋を除去し、且つウェル内の液体表面に気泡がないことを確保する。マイクロプレートリーダーを用いて４５０ｎｍで測定を行う。
【0204】
試験製剤ＦＡ（Ｍｉｒａ５及びリラグルチド＋ラブラソール）の相対的生物学的利用能は３．８２％であり、試験製剤Ｇ（Ｍｉｒａ５及びリラグルチド＋ソルトールＨＳ１５＋ピペリン）の相対的生物学的利用能は３．５７％であることが分かった。
【0205】
ＥＬＩＳＡによるラット血漿中のオクトレオチド含有量の定量分析
【0206】
試験製剤Ｉ：オクトレオチド－外観：注射溶液；濃度：０．１ｍｇ／ｍｌ；保存条件：２～８℃；用量：１０μｇ／ｋｇ；投与経路：ＳＣ
【0207】
試験製剤ＩＩ：ＭＩＲＡ３（表１５Ｃ）＋ＰＡ１（表１６Ｃ）を麻酔後のＳ．Ｄ．ラットの遠位小腸（回腸）；用量：１４４μｇ／動物；投与経路：遠位小腸（回腸）注射。試験時、ラットは非絶食である。
【表36】
【0208】
皮下及び遠位小腸（回腸）にオクトレオチドを投与後、ラットの死亡はなかった。臨床的症状は正常であった。投与期間中、イヌの血液試料の収集時間ポイントは投薬してから０分、７分、１５分、３０分、４５分、６０分及び９０分後とした。血液試料は後眼窩静脈叢穿刺により採取し、約１００μｌの血液をＮａ－ＥＤＴＡを予備充填したエッペンドルフに収集した。血液試料を４℃、５０００ｒｐｍで５分間遠心分離にかけて血漿を得た。
【0209】
ＥＬＩＳＡ試験
【0210】
試験器材：ＥＬＩＳＡキット（ＰｅｎｉｎｓｕｌａＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，Ｉｎｃ，Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｓ－１３４１．０００１）。
【0211】
キットプロトコル：製造会社が推奨するプロトコルを使用した（Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｓ－１３４１．０００１）－イムノプレートの各ウェル中に抗血清２５μｌ（ＥＩＡ緩衝液中）を添加する。ブランクのウェルには２５μｌのＥＩＡ緩衝液を添加し；室温で１時間インキュベートを行う。；標準品又は試料（希釈剤中）をそれぞれ５０μｌ添加する。添加前にプレートを洗浄してはならない。５０μｌの希釈剤をブランクのウェルに添加し；室温で２時間インキュベートする。短い予備インキュベートの場合、感度が低くなることがある；Ｂｔ－トレーサー（ＥＩＡ緩衝液中）をリハイドレートし各ウェル中に２５μｌ添加し；且つ４℃で一晩インキュベートする。良好な結果を得たい場合には、操作前にＲＴに戻しておく；イムノプレートの洗浄を３００μｌ／ウェルのＥＩＡ緩衝液で５回繰り返す。１回目の洗浄／分注時には、ウェル間でのクロスコンタミネーションに十分注意する。各洗浄サイクルにおいて、手首を素早く軽く動かしながらプレートの内容物を空にしてから、プレートの上部をペーパータオル上で静かに吸い取って乾かす。各ウェル中に３００μｌのＥＩＡ緩衝液を分注した後、マイクロプレートを少なくとも何秒間か軽く揺らす。洗浄手順は必要不可欠である。各ウェル中に１００μｌのストレプトアビジンＨＲＰを添加する。ＳＡＨＲＰ管を叩くか遠心分離にかけて底部のすべての液体成分を収集し、その内部の液体をＥＩＡ緩衝液中に１／２００（６０μｌ／１２ｍＬ）に希釈し、ボルテックスする。ブランクを含む全ウェル中１００μｌを添加する。室温で１時間インキュベートする。イムノプレートを５回洗浄する（手順（７）参照）。ＴＭＢ溶液を１００μｌ／ウェル添加する。ブランクを含む全ウェル中に添加する。室温で（時間は通常３０～６０分）インキュベートする。６５０ｎｍにおいて青色の発生を読み取り、且つデータを用いて計算を行う。各ウェル中に１００μｌの２Ｎ ＨＣｌを添加して反応を停止させる。１０分以内に４５０ｎｍ下の吸光度を読み取る。
【0212】
試験製剤ＭＩＲＡ３（尿酸：バナジン酸ナトリウム）＋ＰＡ１が有する生物学的利用能は０．４１％であった。
【0213】
ＥＬＩＳＡによるラット血漿中のテリパラチド含有量の定量
【0214】
試験製剤Ｉ：テリパラチド；外観：注射用溶液；濃度：６００μｇ／２．４ｍｌ；保存条件：２～８℃；用量：１０μｇ／動物；投与経路：ＳＣ
【0215】
試験製剤ＩＩ：ＭＩＲＡ４（表１５Ｄ）及びＰＡ１（表１６Ｄ）を麻酔後のラットの遠位小腸（回腸）に２４０μｇ／動物の用量で投与した；用量：２４０μｇ／動物；投与経路：遠位小腸（回腸）。
【0216】
試験製剤ＩＩＩ：ＭＩＲＡ１（表１５Ａ）及びＰＡ３（表１６Ｅ）を麻酔後のＳ．Ｄ．ラットの遠位小腸（回腸）に２４０μｇ／動物の用量で投与した；用量：２４０μｇ／動物；投与経路：遠位小腸（回腸）。
【表37】
【0217】
実験期間中、動物は非絶食である。皮下及び遠位小腸（回腸）にテリパラチドを投与後、ラットの死亡はなかった。臨床的症状は正常であった。投与期間中、イヌの血液試料の収集時間ポイントは投薬してから０分、７分、１５分、３０分、４５分、６０分及び９０分後とした。血液試料は後眼窩静脈叢穿刺により採取し、約１００μｌの血液をＮａ－ＥＤＴＡを予備充填したエッペンドルフに収集した。血液試料を４℃下において５０００ｒｐｍで５分間遠心分離にかけてから血漿を得た。
【0218】
ＥＬＩＳＡ試験
【0219】
試験材料：ＥＬＩＳＡキット（Ｉｍｍｕｔｏｐｉｃｓ Ｃａｔ．Ｎｏ．６０－３９００．）
【0220】
キットプロトコル：製造会社が推奨するプロトコルを使用した（Ｃａｔ．Ｎｏ．６０－３９００）－十分な数のストレプトアビジンコーティングを有するストリップをホルダーに入れ、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）標準品、コントロール及び未知の試料の試験を行う；１５０μｌの標準品、コントロール及び試料をそれぞれ指定又はマッピングされたウェル中にピペッティングする。標準品及びコントロール試料は使用後すぐに冷凍する。１部のＨＲＰ抗体及び１部のビオチン化抗体からなるワーキング抗体希釈液５０μｌを各ウェル中にピペッティングし；プレートシーラーでカバーし、アルミ箔でカバーして遮光し；１８０～２００ｒｐｍに設定した水平ローターで、室温でプレートを３時間インキュベートする。アルミ箔及びプレートシーラーを取り除き、自動マイクロプレート洗浄機で各ウェル中の内容物を吸引する。３５０μＬのワーキング洗浄用希釈液を分注しながら各ウェルの洗浄を５回繰り返し、各ウェル中の内容物を完全に吸引する。適切な吸引装置を用いることができる；２００μｌのＥＬＩＳＡ ＨＲＰ基質を各ウェル中にピペッティングし；プレートシーラー及びアルミ箔でプレートを再びカバーする。１８０～２００ｒｐｍに設定した水平ローターで、室温で３時間インキュベートし；アルミ箔及びプレートシーラーを取り除く。５分以内にマイクロプレートリーダーで、０ｐｇ／ｍＬの標準ウェルをブランクとして６２０ｎｍ（注着参照）の吸光度を読み取り；すぐに５０μＬのＥＬＩＳＡ停止液を各ウェル中にピペッティングする。水平ローターで１分間の混合を行い；１０分以内に、マイクロプレートリーダーを使用し、２００μＬの基質及び５０μＬの停止溶液を試薬ブランクとして波長４５０ｎｍの吸光度を読み取る；二重波長補正が可能な場合は、測定波長を４５０ｎｍに、参照波長を手順＃９で用いた吸光度に設定する。
【0221】
ＭＩＲＡ４（アスコルビン酸ナトリウム：グルコン酸マンガン）及びＰＡ１の試験製剤が有する相対的生物学的利用能は０．８９％であった。ＭＩＲＡ１（還元型グルタチオン／ピコリン酸クロム）及びＰＡ３の試験製剤が有する生物学的利用能は０．８９％であった。
【0222】
以上、本発明の様々な実施形態について説明を記したが、本発明の他の及びさらなる実施形態は、その基本的な範囲から逸脱することなくなされ得る。本発明の範囲は特許請求の範囲によって決定される。本発明は、記載された実施形態、変形例または実施例に限定されず、当業者に利用可能な情報および知識と組み合わせたときに、当業者が本発明を製造および使用することを可能にするものも含まれる。
【0223】
本開示は、背景技術で報告されている組成物の関係する欠点を克服することができる医薬組成物を提供する。
【0224】
本開示は効果的にペプチドを送達するための医薬組成物を提供する。
【0225】
本開示は、経口でペプチドを送達するための医薬組成物を提供する。
【0226】
本開示は、経口摂取の際に、少なくとも部分的に、ペプチドをタンパク質的分解から保護する医薬組成物を提供する。
【0227】
本開示は、ペプチドの生物学的利用能を増加させる医薬組成物を提供する。
【0228】
本開示は、安全性を備えた医薬組成物を提供する。
【0229】
本開示は、費用対効果があり、調製容易で、保存期間が長い医薬組成物を提供する。
【図1】
【手続補正書】
【提出日】2022-07-14
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
薬学的に有効な用量の少なくとも１種類のペプチド、及び
薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態である少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、
前記少なくとも１種類の金属は、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物。
薬学的に許容可能な用量の、（ａ）塩及び錯体のいずれか又はそれらの組み合わせの形態である少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせを含み、
前記少なくとも１種類の金属は、クロム及びマンガンのいずれか又はそれらの組み合わせから選択され、且つ前記（ａ）塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである少なくとも１種類の金属、及び（ｂ）少なくとも１種類の還元剤との組み合わせは、前記少なくとも１種類のペプチドを、摂取の際に、タンパク質的分解から少なくとも部分的に保護することができる、医薬組成物。
【請求項2】
前記少なくとも１種類の金属はクロムであり、前記医薬組成物はクロムの塩及びクロムの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．０２ｍｇ～約０．５ｍｇの範囲の量で含有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項3】
前記クロムの塩及びクロムの錯体のいずれかは、ピコリン酸クロム、ポリニコチン酸クロム、ニコチン酸クロム、塩化クロム及び酢酸クロムを含む群から独立して選択される、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項4】
前記少なくとも１種類の金属はマンガンであり、前記医薬組成物はマンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれか又はそれらの組み合わせを、単位用量あたり約０．１ｍｇ～約１０ｍｇの範囲の量で含有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項5】
前記マンガンの塩及びマンガンの錯体のいずれかは、グルコン酸マンガン、硫酸マンガン、過マンガン酸カリウム及び塩化マンガンを含む群から独立して選択される、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記少なくとも１種類のペプチドは６０ｋＤａまたはそれ以下の分子量を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項7】
前記少なくとも１種類のペプチドは、インスリン、インスリンアナログ、インスリンリスプロ、インスリンペグリスプロ、インスリンアスパルト、インスリングルリジン、インスリングラルギン、インスリンデテミル、プロタミン含有中間型（ＮＰＨ）インスリン、インスリンデグルデク、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ｈｕｍａｎ ｉｎｓｕｌｉｎ、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）ヘキサデカンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）エイコサンジオイル－γ－Ｌ－Ｇｌｕ－ＯＥＧ－ＯＥＧ） Ａ１４Ｅ Ｂ１６Ｈ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、Ｂ２９Ｋ（Ｎ（ε）オクタデカンジオイル） Ａ１４Ｅ Ｂ２５Ｈ ｄｅｓＢ３０ ヒトインスリン、ＧＬＰ－１、ＧＬＰ－１アナログ、アシル化ＧＬＰ－１アナログ、ジアシル化ＧＬＰ－１アナログ、セマグルチド、リラグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、 ＧＬＰ－１受容体及びグルカゴン受容体のデュアルアゴニスト、アミリン、アミリンアナログ、プラムリンチド、ソマトスタチンアナログ、オクトレオチド、ランレオチド、パシレオチド、ゴセレリン、ブセレリン、レプチン、レプチンアナログ、メトレレプチン、ペプチドＹＹ、ペプチドＹＹアナログ、グラチラマー、リュープロレリン、テリパラチド、デスモプレシン、ヒト成長ホルモン、ヒト成長ホルモンアナログ、グリコペプチド系抗生物質、グリコシル化の環状又は多環非リボソームペプチド系抗生物質、バンコマイシン、テイコプラニン、テラバンシン、ブレオマイシン、ラモプラニン、デカプラニン、ボルテゾミブ、コシントロピン、絨毛性ゴナドトロピン、メノトロピン、セルモレリン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、ソマトロピン、カルシトニン、サケカルシトニン、ペンタガストリン、オキシトシン、ネシリチド、アナキンラ、エンフビルチド、ペグビソマント、ドルナーゼアルファ、レピルジン、アニデュラフンギン、エプチフィバチド、インターフェロンアルファコン－１、インターフェロンα－２ａ、インターフェロンα－２ｂ、インターフェロンβ－１ａ、インターフェロンβ－１ｂ、インターフェロンγ－１ｂ、ペグインターフェロンα－２ａ、ペグインターフェロンα－２ｂ、ペグインターフェロンβ－１ａ、フィブリノリジン、バソプレシン、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、ダルベポエチンアルファ、エポエチンベータ、エポエチンデルタ、エポエチンオメガ、エポエチンゼータ、フィルグラスチム、インターロイキン－１１、シクロスポリン、グルカゴン、ウロキナーゼ、バイオマイシン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン、サブスタンスＰ、副腎皮質刺激ホルモン、副甲状腺ホルモン、又はそれらの薬学的に許容可能な塩を含む群から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属とは、医薬組成物中で物理的に分けられた状態で存在している、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記少なくとも１種類のペプチドと、塩の形態及び錯体の形態のいずれか又はそれらの組み合わせである前記少なくとも１種類の金属は、分けられた区画に存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記医薬組成物はカプセルインカプセル（ｃａｐｓｕｌｅ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型又はタブレットインカプセル（ｔａｂｌｅｔ－ｉｎ－ｃａｐｓｕｌｅ）の剤型で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記少なくとも１種類の還元剤は、アスコルビン酸、還元型グルタチオン、システイン、尿酸、還元糖、グリセルアルデヒド、α－トコフェロール、ビタミンＡ、α－リポ酸、ジヒドロ－α－リポ酸、グルコース、ガラクトース、ラクトース、マルトース、チオール含有化合物、チオマー、及びそれらの薬学的に許容可能な塩のいずれか又はそれらの組み合わせから選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項12】
前記医薬組成物は、少なくとも１種類の還元剤を単位用量あたり約１ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項13】
前記医薬組成物は、さらに少なくとも１種類の吸収促進剤を含み、前記吸収促進剤は単位用量あたり約１０ｍｇ～約１０００ｍｇの範囲の量で存在する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項14】
前記医薬組成物は、経口固体剤又は経口液体剤のいずれかの形態に調製され、且つ前記医薬組成物が経口液体剤の形態に調製されている場合には、前記医薬組成物は水分を約５％未満（ｖ／ｖ）の量で含む、請求項１に記載の医薬組成物。