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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2022162385
(43)【公開日】2022-10-24
(54)【発明の名称】ウイルス吸着材
(51)【国際特許分類】
B01J 20/24 20060101AFI20221017BHJP
C07K 16/10 20060101ALN20221017BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20221017BHJP
C12N 7/02 20060101ALN20221017BHJP
C07K 17/12 20060101ALN20221017BHJP
【ＦＩ】
B01J20/24 C
C07K16/10 ZNA
C12N15/13
C12N7/02
C07K17/12
【審査請求】未請求
【請求項の数】4
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2021067208
(22)【出願日】2021-04-12
(71)【出願人】
【識別番号】000000918
【氏名又は名称】花王株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100104215
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 純一
(74)【代理人】
【識別番号】100196575
【弁理士】
【氏名又は名称】高橋 満
(74)【代理人】
【識別番号】100160989
【弁理士】
【氏名又は名称】関根 正好
(74)【代理人】
【識別番号】100197398
【弁理士】
【氏名又は名称】千葉 絢子
(72)【発明者】
【氏名】中村 水都
(72)【発明者】
【氏名】吉川 祐樹
(72)【発明者】
【氏名】熊本 吉晃
(72)【発明者】
【氏名】吉田 穣
(72)【発明者】
【氏名】熊谷 啓
(72)【発明者】
【氏名】松村 佑太
【テーマコード（参考）】
4B065
4G066
4H045
【Ｆターム（参考）】
4B065AA95X
4B065BD14
4B065CA44
4G066AA02D
4G066AC02B
4G066AC02C
4G066AC03B
4G066AC13C
4G066AC17C
4G066AC37B
4G066BA16
4G066BA20
4G066CA20
4G066DA07
4H045AA11
4H045AA30
4H045BA61
4H045CA40
4H045DA76
4H045EA34
4H045FA74
(57)【要約】
【課題】ウイルス吸着性の高いウイルス吸着材の提供に関する。
【解決手段】本発明の一形態に係るウイルス吸着材は、アニオン性基を有するセルロースを含む。本発明の他の形態に係るウイルス吸着材は、基材本体と、アニオン性基を有するセルロースと、を含む改質基材と、前記改質基材に固定された、抗体又は金属の少なくとも一方と、を含む。
【選択図】図３
【解決手段】本発明の一形態に係るウイルス吸着材は、アニオン性基を有するセルロースを含む。本発明の他の形態に係るウイルス吸着材は、基材本体と、アニオン性基を有するセルロースと、を含む改質基材と、前記改質基材に固定された、抗体又は金属の少なくとも一方と、を含む。
【選択図】図３
【特許請求の範囲】
【請求項1】
アニオン性基を有するセルロースを含む
ウイルス吸着材。
ウイルス吸着材。
【請求項2】
抗体をさらに含む
請求項１に記載のウイルス吸着材。
請求項１に記載のウイルス吸着材。
【請求項3】
金属をさらに含む
請求項１又は２に記載のウイルス吸着材。
請求項１又は２に記載のウイルス吸着材。
【請求項4】
基材本体と、アニオン性基を有するセルロースと、を含む改質基材と、
前記改質基材に固定された、抗体又は金属の少なくとも一方と、を含む
ウイルス吸着材。
前記改質基材に固定された、抗体又は金属の少なくとも一方と、を含む
ウイルス吸着材。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ウイルスを吸着することが可能なウイルス吸着材に関する。
【背景技術】
【0002】
ウイルスや細菌など微生物由来の有害物質を除去する方法として、各種のフィルターを用いた濾過によるものや吸着剤を用いた物理吸着によるものなどが知られている。
【0003】
特許文献１には、シアル酸、シアル酸誘導体、これらを含む糖、糖タンパク質、糖脂質の少なくとも一種類をウイルス捕捉体としたウイルス除去フィルターが開示されている。同文献には、通常の居住空間において使用でき、インフルエンザ等のウイルスを効率よく除去することができる、と記載されている。
【0004】
特許文献２には、高度に微細繊維化された複数の撚り糸を含む繊維素材であって、ウイルスを捕捉する目的でウイルスに対する天然の受容体又はその一部又はその類似体を付着させるため、少なくとも１本の糸が臭化シアンで誘導体化されているものが開示されている。
【0005】
特許文献３には、茶の抽出成分を添着した不織布と耳に止める紐で構成された抗ウイルスマスクが開示されている。茶の抽出成分を添着した不織布は、緑茶あるいは紅茶成分から分離精製した抽出成分を純水に溶かし、軽く脱水後乾燥したものであることが開示されている。そして、これによれば、茶の抽出成分を不織布に添着したマスクで、工業的に容易に製造ができ、高い捕集性能を維持し、ウイルスを不活化し、再飛散を防止することができる、と記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】特開平９－２３４３１７号公報
【特許文献2】特表２００１－５２７１６６号公報
【特許文献3】特開平８－３３３２７１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
近年、ＣＯＶＩＤ－１９等のウイルスによる感染症の拡大の防止が急務となっている。これに伴い、よりウイルス吸着性の高いウイルス吸着材が求められている。
【0008】
本発明の課題は、ウイルス吸着性の高いウイルス吸着材の提供に関する。
【課題を解決するための手段】
【0009】
本発明の一形態に係るウイルス吸着材は、アニオン性基を有するセルロースを含む。
本発明の他の特徴は、特許請求の範囲及び以下の説明から明らかになるであろう。
本発明の他の特徴は、特許請求の範囲及び以下の説明から明らかになるであろう。
【発明の効果】
【0010】
本発明によれば、ウイルス吸着性の高いウイルス吸着材を得ることが可能である。
【図面の簡単な説明】
【0011】
【図1】本発明の一実施形態に係るウイルス吸着材を示す模式的な斜視図及びその一部を拡大した拡大図である。
【図2】本発明の他の実施形態に係るウイルス吸着材を示す模式的な正面図及びその一部を拡大した拡大図である。
【図3】（Ａ）～（Ｃ）は、それぞれ、本発明のウイルス吸着材の構成例を示す図であり、ウイルス吸着材を拡大して模式的に示す図である。
【図4】（Ａ）～（Ｃ）は、それぞれ、本発明のウイルス吸着材の構成例を示す図であり、ウイルス吸着材を拡大して模式的に示す図である。
【図5】（Ａ）は、本発明の一実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図であり、（Ｂ）は、他の実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図であり、（Ｃ）は、さらに他の実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図である。
【図6】（Ａ）は、本発明の一実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図であり、（Ｂ）は、他の実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図である。
【図7】（Ａ）は、本発明の一実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図であり、（Ｂ）は、他の実施形態に係るウイルス吸着材の製造方法を示すフロー図である。
【図8】本発明の一実施形態に係るウイルス吸着材の製造に用いられる製造装置を示す模式的な図である。
【図9】本発明の実施例における、各サンプルに固定された抗体量の測定結果を示すグラフであり、横軸が各サンプル、縦軸が抗体（ＶＨＨ）の量を示す。
【図10】本発明の実施例に係る結果を示すグラフであり、各サンプルに対するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスの吸着率の結果を示すグラフである。同グラフにおいて、横軸は各サンプル、縦軸はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスの吸着率を示す。
【発明を実施するための形態】
【0012】
本明細書において、数値の限界値や範囲が記載されている場合には、その端点を含む。また、数値的な限界又は範囲に含まれるすべての値及びサブレンジは、明示的に書き出す場合と同様に、具体的に記載しているものとする。
本明細書において、単数で記載されている名詞は、「１つ以上」の意味を包含するものとする。
本発明の多数の修正および変形は、明らかに、以下の教示に照らして可能である。したがって、添付の特許請求の範囲の範囲内で、本発明は、本明細書に具体的に記載されている以外の方法で実施され得ることが理解される。
本明細書に記載の全ての特許文献及び参考文献は、長々と記載されている場合と同様に、この参照により本明細書に完全に組み込まれる。
本明細書において、単数で記載されている名詞は、「１つ以上」の意味を包含するものとする。
本発明の多数の修正および変形は、明らかに、以下の教示に照らして可能である。したがって、添付の特許請求の範囲の範囲内で、本発明は、本明細書に具体的に記載されている以外の方法で実施され得ることが理解される。
本明細書に記載の全ての特許文献及び参考文献は、長々と記載されている場合と同様に、この参照により本明細書に完全に組み込まれる。
【0013】
［ウイルス吸着材］
本発明のウイルス吸着材は、アニオン性基を有するセルロースを含むことで、後述する実施例において示すように、高いウイルス吸着性を有する。本発明のウイルス吸着材は、例えば、ウイルス検査における検体などのウイルス含有液の濃縮や、ウイルスの捕捉及び／又は除去等に用いることができる。本発明のウイルス吸着材によれば、高いウイルス吸着性を有することで、これらの操作を高い効率で行うことができる。
なお、本発明において、ウイルスの「吸着」とは、ウイルス及び／又はその断片を選択的に結合することを意味する。ウイルスの断片は、例えば、ウイルスのタンパク質を含む。
また、「ウイルス吸着性」とは、ウイルスを吸着できる性質を意味し、例えば、ウイルスタンパク質の結合量や、ウイルスの吸着量により評価することができる。
本発明のウイルス吸着材は、アニオン性基を有するセルロースを含むことで、後述する実施例において示すように、高いウイルス吸着性を有する。本発明のウイルス吸着材は、例えば、ウイルス検査における検体などのウイルス含有液の濃縮や、ウイルスの捕捉及び／又は除去等に用いることができる。本発明のウイルス吸着材によれば、高いウイルス吸着性を有することで、これらの操作を高い効率で行うことができる。
なお、本発明において、ウイルスの「吸着」とは、ウイルス及び／又はその断片を選択的に結合することを意味する。ウイルスの断片は、例えば、ウイルスのタンパク質を含む。
また、「ウイルス吸着性」とは、ウイルスを吸着できる性質を意味し、例えば、ウイルスタンパク質の結合量や、ウイルスの吸着量により評価することができる。
【0014】
［アニオン性基を有するセルロース］
本発明のアニオン性基を有するセルロースは、セルロース中にアニオン性基を含むようにアニオン変性されたセルロースである。なお、以下の説明において、「アニオン性基を有するセルロース」を、「アニオン変性セルロース」とも称する。
本発明のアニオン性基を有するセルロースは、セルロース中にアニオン性基を含むようにアニオン変性されたセルロースである。なお、以下の説明において、「アニオン性基を有するセルロース」を、「アニオン変性セルロース」とも称する。
【0015】
アニオン変性セルロースは、例えば、セルロースＩ型結晶構造を有することが好ましい。アニオン変性セルロースの結晶化度は、安定した構造のセルロースを得る観点から、好ましくは１０％以上、より好ましくは１５％以上、更に好ましくは２０％以上である。また、原料入手性の観点から、好ましくは９０％以下、より好ましくは８５％以下、更に好ましくは８０％以下、更に好ましくは７５％以下である。なお、本明細書において、セルロースの結晶化度は、Ｘ線回折法による回折強度値から算出したセルロースＩ型結晶化度であり、例えば後述の方法に従って測定することができる。なお、セルロースＩ型とは天然セルロースの結晶形のことであり、セルロースＩ型結晶化度とは、セルロース全体のうち結晶領域量の占める割合のことを意味する。セルロースＩ型結晶構造の有無は、Ｘ線回折測定において、２θ＝２２．６°にピークがあることで判定することができる。
【0016】
＜セルロースの結晶化度の測定方法＞
セルロースの結晶構造は、回折計（リガク社製、商品名：ＭｉｎｉＦｌｅｘＩＩ）を用いて以下の条件で測定することにより確認する。
測定ペレット調製条件：打錠機を用いて直径７ｍｍ（約０．０２１ｇ）のサイズの円板試験片を調製し、測定ペレットとする。
Ｘ線回折分析条件：ステップ角０．０１°、スキャンスピード１０°／ｍｉｎ、測定範囲：回折角２θ＝５～４０°
Ｘ線源：Ｃｕ／Ｋα－radiation、管電圧：１５ｋｖ、管電流：３０ｍＡ
ピーク分割条件：バックグラウンドノイズを除去した後、２θ＝１３－２３°の間の誤差が５％以内に収まるようにガウス関数でフィッティングする。
セルロースＩ型結晶構造の結晶化度は、上述のピーク分割により得られたＸ線回折ピークの面積を用いて以下の式（１）に基づいて算出する。
セルロースＩ型結晶化度（％）＝［Ｉｃｒ／（Ｉｃｒ＋Ｉａｍ）］×１００ …（１）
（式中、Ｉｃｒは、Ｘ線回折における格子面（００２面）（回折角２θ＝２２－２３°）の回折ピークの面積、Ｉａｍはアモルファス部（回折角２θ＝１８．５°）の回折ピークの面積を示す。）
セルロースの結晶構造は、回折計（リガク社製、商品名：ＭｉｎｉＦｌｅｘＩＩ）を用いて以下の条件で測定することにより確認する。
測定ペレット調製条件：打錠機を用いて直径７ｍｍ（約０．０２１ｇ）のサイズの円板試験片を調製し、測定ペレットとする。
Ｘ線回折分析条件：ステップ角０．０１°、スキャンスピード１０°／ｍｉｎ、測定範囲：回折角２θ＝５～４０°
Ｘ線源：Ｃｕ／Ｋα－radiation、管電圧：１５ｋｖ、管電流：３０ｍＡ
ピーク分割条件：バックグラウンドノイズを除去した後、２θ＝１３－２３°の間の誤差が５％以内に収まるようにガウス関数でフィッティングする。
セルロースＩ型結晶構造の結晶化度は、上述のピーク分割により得られたＸ線回折ピークの面積を用いて以下の式（１）に基づいて算出する。
セルロースＩ型結晶化度（％）＝［Ｉｃｒ／（Ｉｃｒ＋Ｉａｍ）］×１００ …（１）
（式中、Ｉｃｒは、Ｘ線回折における格子面（００２面）（回折角２θ＝２２－２３°）の回折ピークの面積、Ｉａｍはアモルファス部（回折角２θ＝１８．５°）の回折ピークの面積を示す。）
【0017】
アニオン変性セルロースにおけるアニオン性基の含有量としては、安定的な微細化及び修飾基導入の観点から、好ましくは０．１ｍｍｏｌ／ｇ以上、より好ましくは０．４ｍｍｏｌ／ｇ以上、更に好ましくは０．６ｍｍｏｌ／ｇ以上である。同様の観点から、その上限は、好ましくは３．０ｍｍｏｌ／ｇ以下、より好ましくは２．５ｍｍｏｌ／ｇ以下、更に好ましくは２．０ｍｍｏｌ／ｇ以下である。
アニオン変性セルロース中に含まれるアニオン性基は、カルボキシ基、スルホン酸基又はリン酸基であることが好ましく、セルロースへの導入効率の観点から、カルボキシ基であることがより好ましい。
アニオン変性セルロース中に含まれるアニオン性基は、カルボキシ基、スルホン酸基又はリン酸基であることが好ましく、セルロースへの導入効率の観点から、カルボキシ基であることがより好ましい。
【0018】
＜アニオン変性セルロースのカルボキシ基含有量の測定方法＞
乾燥質量０．５ｇの測定対象のセルロースを１００ｍＬビーカーにとり、イオン交換水又はメタノール／水＝２／１の混合溶媒を加えて全体で５５ｍＬとし、そこに０．０１Ｍ塩化ナトリウム水溶液５ｍＬを加えて分散液を調製する。測定対象のセルロースが十分に分散するまで該分散液を撹拌する。この分散液に０．１Ｍ塩酸を加えてｐＨを２．５～３に調整し、自動滴定装置（東亜ディーケーケー社製、商品名「ＡＵＴ－７０１」）を用い、０．０５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を待ち時間６０秒の条件で該分散液に滴下し、１分ごとの電導度及びｐＨの値を測定する。ｐＨ１１程度になるまで測定を続け、電導度曲線を得る。この電導度曲線から水酸化ナトリウム滴定量を求め、次の式（２）により、測定対象のセルロースのカルボキシ基含有量を算出する。
カルボキシ基含有量（ｍｍｏｌ／ｇ）＝水酸化ナトリウム滴定量×水酸化ナトリウム水溶液濃度（０．０５Ｍ）／測定対象のセルロースの質量（０．５ｇ） …（２）
乾燥質量０．５ｇの測定対象のセルロースを１００ｍＬビーカーにとり、イオン交換水又はメタノール／水＝２／１の混合溶媒を加えて全体で５５ｍＬとし、そこに０．０１Ｍ塩化ナトリウム水溶液５ｍＬを加えて分散液を調製する。測定対象のセルロースが十分に分散するまで該分散液を撹拌する。この分散液に０．１Ｍ塩酸を加えてｐＨを２．５～３に調整し、自動滴定装置（東亜ディーケーケー社製、商品名「ＡＵＴ－７０１」）を用い、０．０５Ｍ水酸化ナトリウム水溶液を待ち時間６０秒の条件で該分散液に滴下し、１分ごとの電導度及びｐＨの値を測定する。ｐＨ１１程度になるまで測定を続け、電導度曲線を得る。この電導度曲線から水酸化ナトリウム滴定量を求め、次の式（２）により、測定対象のセルロースのカルボキシ基含有量を算出する。
カルボキシ基含有量（ｍｍｏｌ／ｇ）＝水酸化ナトリウム滴定量×水酸化ナトリウム水溶液濃度（０．０５Ｍ）／測定対象のセルロースの質量（０．５ｇ） …（２）
【0019】
アニオン変性セルロースにおけるアニオン性基の対となるイオン（カウンターイオン）としては、例えば、Ｓブロック元素イオン及びＤブロック元素イオンが挙げられる。Ｓブロック元素イオンとしては、製造時のアルカリ存在下で生じるナトリウムイオン、カリウムイオン等のアルカリ金属イオンが挙げられる。Ｄブロック元素イオンとしては、第４周期に属する元素イオンが挙げられ、より具体的にはニッケル（ＩＩ）イオンが挙げられる。なお、上記カウンターイオンは、後述する本発明の金属のイオンであることが好ましい。
【0020】
本発明において、アニオン変性セルロースは、ウイルス吸着材の基材として用いられてもよく、あるいは、後述するように、別の基材の表面改質処理に用いられ、当該基材の表面に固定されていてもよい。
【0021】
アニオン変性セルロースがウイルス吸着材の基材として用いられる場合、アニオン変性セルロースの繊維が集合体を構成していることが好ましい。
この場合のアニオン変性セルロースの平均繊維長は、良好な保形性を有する観点から、好ましくは１μｍ以上、より好ましくは５μｍ以上、更に好ましくは１０μｍ以上、更に好ましくは２５μｍ以上である。また、当該平均繊維長は、アニオン変性セルロースを微細化して比表面積を高め、ウイルスの吸着性を高める観点から、好ましくは１０００μｍ以下、より好ましくは８００μｍ以下、更に好ましくは５００μｍ以下、更に好ましくは４００μｍ以下である。アニオン変性セルロースの平均繊維長は、後述する測定方法によって測定することができる。
この場合のアニオン変性セルロースの平均繊維長は、良好な保形性を有する観点から、好ましくは１μｍ以上、より好ましくは５μｍ以上、更に好ましくは１０μｍ以上、更に好ましくは２５μｍ以上である。また、当該平均繊維長は、アニオン変性セルロースを微細化して比表面積を高め、ウイルスの吸着性を高める観点から、好ましくは１０００μｍ以下、より好ましくは８００μｍ以下、更に好ましくは５００μｍ以下、更に好ましくは４００μｍ以下である。アニオン変性セルロースの平均繊維長は、後述する測定方法によって測定することができる。
【0022】
本発明においては、原料のセルロースやアニオン変性セルロースに、例えば、生化学的処理及び／又は化学処理等を行って、前記の平均繊維長を有するように長さを調整することができる。化学処理としては、例えば塩酸や硫酸などによる酸加水分解処理、過酸化水素やオゾンなどによる酸化処理、水酸化ナトリウム等のアルカリによるアルカリ加水分解処理が挙げられる。アルカリ加水分解処理の条件や酸加水分解処理の条件は、例えば、特開２０１９－１１９９８３号公報の段落００３４～００３５を参考にすることができる。
【0023】
アニオン変性セルロースの平均繊維径は、生産効率の観点から、好ましくは１μｍ以上、より好ましくは５μｍ以上、更に好ましくは１５μｍ以上であり、アニオン変性セルロースを微細化してウイルスの吸着性を高める観点から、好ましくは３００μｍ以下、より好ましくは１００μｍ以下、更に好ましくは６０μｍ以下である。アニオン変性セルロースの平均繊維径は、後述する測定方法によって測定することができる。
【0024】
一方で、アニオン変性セルロースが基材の表面に固定される場合は、アニオン変性セルロースがさらに微細化処理されることが好ましい。この微細化されたアニオン変性セルロースを、「微細改質セルロース」とも称する。微細化処理の詳細については、後述する。
微細改質セルロースを基材の表面に固定することで、基材の表面が親水性の高い状態に改質され、ウイルスの吸着性が高まるものと考えられる。
微細改質セルロースを基材の表面に固定することで、基材の表面が親水性の高い状態に改質され、ウイルスの吸着性が高まるものと考えられる。
【0025】
微細改質セルロースの平均繊維径は、取扱い性、入手性、及びコストの観点から、好ましくは１ｎｍ以上、より好ましくは２ｎｍ以上であり、取扱い性、寸法安定性及び溶媒分散性の観点から、好ましくは５００ｎｍ以下、より好ましくは３００ｎｍ以下、更に好ましくは２００ｎｍ以下、更に好ましくは１５０ｎｍ以下、より更に好ましくは１２０ｎｍ以下である。微細改質セルロースの平均繊維径は、後述する測定方法によって測定することができる。
【0026】
微細化改質セルロースの平均繊維長としては、分散性の観点から、好ましくは５０ｎｍ以上、より好ましくは８０ｎｍ以上、さらに好ましくは１００ｎｍ以上である。また、同様の観点から、好ましくは１μｍ以下、より好ましくは５００ｎｍ以下、更に好ましくは３００ｎｍ以下である。微細改質セルロースの平均繊維長は、後述する測定方法によって測定することができる。
【0027】
＜セルロースの平均繊維径及び平均繊維長の測定方法＞
測定対象のセルロースの平均繊維径が数百ナノメートル～数千マイクロメートルであると見込まれる場合、次のようにしてセルロースの平均繊維径を求めることができる。
測定対象のセルロースに脱イオン水を加えて、その含有量が０．０１質量％の分散液を調製する。該分散液を湿式分散タイプ画像解析粒度分布計（ジャスコインターナショナル社製、商品名：IF-3200）を用いて、フロントレンズ：２倍、テレセントリックズームレンズ：１倍、画像分解能：０．８３５μｍ／ピクセル、シリンジ内径：６５１５μｍ、スペーサー厚み：５００μｍ、画像認識モード：ゴースト、閾値：８、分析サンプル量：１ｍＬ、サンプリング：１５％の条件で測定する。セルロースを１００本測定し、それらの平均ＩＳＯ繊維径を平均繊維径をとして、平均ＩＳＯ繊維長を平均繊維長として算出する。
また、測定対象のセルロースの平均繊維径が数ナノメートル～数百ナノメートルであると見込まれる場合、次のようにしてセルロースの平均繊維径を求めることができる。
測定対象のセルロース、又はセルロース分散体に適切な溶媒を加えて、その濃度が０．０００１質量％の分散液を調製し、該分散液をマイカ（雲母）上に滴下して乾燥したものを観察試料として、原子間力顕微鏡(AFM)（Digital instrument社製、Nanoscope III Tapping mode AFM、プローブはナノセンサーズ社製、Point Probe (NCH)を使用）を用いて、該観察試料中のセルロースの繊維高さ（繊維のあるところとないところの高さの差）を測定する。適切な溶媒とは、測定対象のセルロースが膨潤する溶媒であればよく、セルロースの場合は水やエタノールが好ましく、アニオン変性セルロース又は微細改質セルロースの場合はＤＭＦやＭＥＫ、トルエンなどが好ましい。その際、該セルロースが確認できる顕微鏡画像において、セルロースを１００本以上抽出し、それらの繊維高さから平均繊維径を算出する。繊維方向の距離より、平均繊維長を算出する。一般に、高等植物から調製されるセルロースナノファイバーの最小単位は６×６の分子鎖がほぼ正方形の形でパッキングされていることから、ＡＦＭによる画像で分析される高さを繊維の幅とみなすことができる。
測定対象のセルロースの平均繊維径が数百ナノメートル～数千マイクロメートルであると見込まれる場合、次のようにしてセルロースの平均繊維径を求めることができる。
測定対象のセルロースに脱イオン水を加えて、その含有量が０．０１質量％の分散液を調製する。該分散液を湿式分散タイプ画像解析粒度分布計（ジャスコインターナショナル社製、商品名：IF-3200）を用いて、フロントレンズ：２倍、テレセントリックズームレンズ：１倍、画像分解能：０．８３５μｍ／ピクセル、シリンジ内径：６５１５μｍ、スペーサー厚み：５００μｍ、画像認識モード：ゴースト、閾値：８、分析サンプル量：１ｍＬ、サンプリング：１５％の条件で測定する。セルロースを１００本測定し、それらの平均ＩＳＯ繊維径を平均繊維径をとして、平均ＩＳＯ繊維長を平均繊維長として算出する。
また、測定対象のセルロースの平均繊維径が数ナノメートル～数百ナノメートルであると見込まれる場合、次のようにしてセルロースの平均繊維径を求めることができる。
測定対象のセルロース、又はセルロース分散体に適切な溶媒を加えて、その濃度が０．０００１質量％の分散液を調製し、該分散液をマイカ（雲母）上に滴下して乾燥したものを観察試料として、原子間力顕微鏡(AFM)（Digital instrument社製、Nanoscope III Tapping mode AFM、プローブはナノセンサーズ社製、Point Probe (NCH)を使用）を用いて、該観察試料中のセルロースの繊維高さ（繊維のあるところとないところの高さの差）を測定する。適切な溶媒とは、測定対象のセルロースが膨潤する溶媒であればよく、セルロースの場合は水やエタノールが好ましく、アニオン変性セルロース又は微細改質セルロースの場合はＤＭＦやＭＥＫ、トルエンなどが好ましい。その際、該セルロースが確認できる顕微鏡画像において、セルロースを１００本以上抽出し、それらの繊維高さから平均繊維径を算出する。繊維方向の距離より、平均繊維長を算出する。一般に、高等植物から調製されるセルロースナノファイバーの最小単位は６×６の分子鎖がほぼ正方形の形でパッキングされていることから、ＡＦＭによる画像で分析される高さを繊維の幅とみなすことができる。
【0028】
［抗体］
本発明のウイルス吸着材は、標的のウイルスをより効率的に吸着する観点から、抗体をさらに含むことが好ましい。
本明細書において、抗体の「標的」又は「標的ウイルス」とは、抗体が吸着可能なウイルスを意味する。
抗体は、ヒト及び家畜への感染が報告されている病原性のウイルスを標的とすることが好ましい。具体的には、ウイルスは、コロナウイルス、インフルエンザウイルス、ノロウイルス、ロタウイルス、アデノウイルス、及びサポウイルスから選ばれる一種又は二種以上であることが好ましい。
本発明のウイルス吸着材は、標的のウイルスをより効率的に吸着する観点から、抗体をさらに含むことが好ましい。
本明細書において、抗体の「標的」又は「標的ウイルス」とは、抗体が吸着可能なウイルスを意味する。
抗体は、ヒト及び家畜への感染が報告されている病原性のウイルスを標的とすることが好ましい。具体的には、ウイルスは、コロナウイルス、インフルエンザウイルス、ノロウイルス、ロタウイルス、アデノウイルス、及びサポウイルスから選ばれる一種又は二種以上であることが好ましい。
【0029】
特に、抗体は、コロナウイルスに属するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を標的ウイルスとすることがより好ましい。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、急性呼吸器疾患（ＣＯＶＩＤ－１９）の原因となるウイルスである。上記構成のウイルス吸着材によって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を吸着及び除去することができるとともに、不活化させることが可能となる。したがって、上記構成のウイルス吸着材により、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染が防止され、ＣＯＶＩＤ－１９の拡大防止に貢献できる。
【0030】
本発明の抗体は、典型的には、標的ウイルスの一部と特異的に吸着することが可能なＣＤＲを含む構造ドメインを有する。ＣＤＲ（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｒｉｔｙ Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｇｉｏｎ；相補性決定領域）とは、配列可変な抗原認識部位又はランダム配列領域を含み、超可変領域とも言われる。ＣＤＲのアミノ酸配列等により、標的ウイルスへの吸着性が制御される。
【0031】
抗体は、具体的には、ＩｇＧ抗体、重鎖抗体、及びフラグメント抗体から選ばれる一種又は二種以上であることが好ましい。
ＩｇＧ抗体は、重鎖（ＶＨ）及び軽鎖（ＬＨ）からなり、重鎖及び軽鎖がそれぞれＣＤＲ１，ＣＤＲ２，ＣＤＲ３の３つのＣＤＲを有する。
重鎖抗体は、重鎖のみからなり、ＣＤＲ１，ＣＤＲ２，ＣＤＲ３の３つのＣＤＲを有する。
フラグメント抗体は、酵素や遺伝子工学的な手法を用いて断片化された抗体であり、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ'）２、Ｆｖ、ＶＨＨ抗体等を含む。
特に、抗体としてフラグメント抗体を用いることで、ＩｇＧ抗体よりも抗体の分子量を小さくことができ、よりウイルス吸着材における抗体の含有量を向上させることができる。したがって、ウイルス吸着材における標的ウイルスの吸着量を向上させることができる。
ＩｇＧ抗体は、重鎖（ＶＨ）及び軽鎖（ＬＨ）からなり、重鎖及び軽鎖がそれぞれＣＤＲ１，ＣＤＲ２，ＣＤＲ３の３つのＣＤＲを有する。
重鎖抗体は、重鎖のみからなり、ＣＤＲ１，ＣＤＲ２，ＣＤＲ３の３つのＣＤＲを有する。
フラグメント抗体は、酵素や遺伝子工学的な手法を用いて断片化された抗体であり、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ'）２、Ｆｖ、ＶＨＨ抗体等を含む。
特に、抗体としてフラグメント抗体を用いることで、ＩｇＧ抗体よりも抗体の分子量を小さくことができ、よりウイルス吸着材における抗体の含有量を向上させることができる。したがって、ウイルス吸着材における標的ウイルスの吸着量を向上させることができる。
【0032】
さらに、抗体は、フラグメント抗体の中でもＶＨＨ抗体であることがより好ましい。ＶＨＨ抗体は、重鎖抗体のフラグメント抗体であって、ラクダ科動物の血清中から見出されたシングルドメイン抗体である。ＶＨＨ抗体は、ＣＤＲ１，ＣＤＲ２，ＣＤＲ３の３つのＣＤＲを含む構造ドメインを有する。当該構造ドメインにおいて、３つのＣＤＲは、例えば、Ｎ末端側からＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３の順で存在する。
また、ＩｇＧ抗体は動物培養細胞を用いて生産する必要があるが、ＶＨＨ抗体は大腸菌や酵母で生産できる。また、ＶＨＨ抗体は、遺伝子工学的に改変が容易であり、上述のタグ（ペプチド）の導入等が容易である。さらに、ＶＨＨ抗体は、熱などに対しても耐性が高く、安定した吸着活性を維持できる。これらの特徴から、抗体としてＶＨＨ抗体を用いることで、安定したウイルス吸着性を有するウイルス吸着材を高い生産性で得ることができる。
また、ＩｇＧ抗体は動物培養細胞を用いて生産する必要があるが、ＶＨＨ抗体は大腸菌や酵母で生産できる。また、ＶＨＨ抗体は、遺伝子工学的に改変が容易であり、上述のタグ（ペプチド）の導入等が容易である。さらに、ＶＨＨ抗体は、熱などに対しても耐性が高く、安定した吸着活性を維持できる。これらの特徴から、抗体としてＶＨＨ抗体を用いることで、安定したウイルス吸着性を有するウイルス吸着材を高い生産性で得ることができる。
【0033】
抗体の標的ウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である場合、抗体は、ＣＤＲ１，ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む下記１）、２）又は３）の構造ドメインを１つ以上有することが好ましい。
１）の構造ドメインは、配列番号１で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ１と、
配列番号２で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ２と、
配列番号３で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ３と、を含む。
ここで、配列番号１で示されるアミノ酸配列はＧＳＴＦＳＤＹＶＭＡであり、配列番号２で示されるアミノ酸配列はＴＩＳＲＮＧＧＴＴＴであり、配列番号３で示されるアミノ酸配列はＶＧＧＤＧＤＳである。これらのＣＤＲ配列を有する抗体としてはＣｏＶＨＨ１（配列番号４）がある。
２）の構造ドメインは、配列番号５で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ１と、
配列番号６で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ２と、
配列番号７で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ３と、を含む。
ここで、配列番号５で示されるアミノ酸配列はＤＱＩＦＤＮＹＮＭＡであり、配列番号６で示されるアミノ酸配列はＡＬＳＷＧＤＳＮＴＧであり、配列番号７で示されるアミノ酸配列はＶＴＷＬＲＧＤＹである。これらＣＤＲを有する抗体としてはＣｏＶＨＨ－Ｅ５（配列番号８）がある。
３）の構造ドメインは、配列番号９で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ１と、
配列番号１０で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ２と、
配列番号１１で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ３と、を含む。
ここで、配列番号９で示されるアミノ酸配列はＧＴＩＦＳＴＮＡＭＳであり、配列番号１０で示されるアミノ酸配列はＡＩＴＳＧＧＮＴＮであり、配列番号１１に示されるアミノ酸配列はＰＧＶＶＴＧＳＹＤＶＲＮＹである。これらＣＤＲを有する抗体としてはＣｏＶＨＨ－Ｅ９（配列番号１２）がある。
１）の構造ドメインは、配列番号１で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ１と、
配列番号２で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ２と、
配列番号３で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ３と、を含む。
ここで、配列番号１で示されるアミノ酸配列はＧＳＴＦＳＤＹＶＭＡであり、配列番号２で示されるアミノ酸配列はＴＩＳＲＮＧＧＴＴＴであり、配列番号３で示されるアミノ酸配列はＶＧＧＤＧＤＳである。これらのＣＤＲ配列を有する抗体としてはＣｏＶＨＨ１（配列番号４）がある。
２）の構造ドメインは、配列番号５で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ１と、
配列番号６で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ２と、
配列番号７で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ３と、を含む。
ここで、配列番号５で示されるアミノ酸配列はＤＱＩＦＤＮＹＮＭＡであり、配列番号６で示されるアミノ酸配列はＡＬＳＷＧＤＳＮＴＧであり、配列番号７で示されるアミノ酸配列はＶＴＷＬＲＧＤＹである。これらＣＤＲを有する抗体としてはＣｏＶＨＨ－Ｅ５（配列番号８）がある。
３）の構造ドメインは、配列番号９で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ１と、
配列番号１０で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ２と、
配列番号１１で示されるアミノ酸配列又は当該アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲ３と、を含む。
ここで、配列番号９で示されるアミノ酸配列はＧＴＩＦＳＴＮＡＭＳであり、配列番号１０で示されるアミノ酸配列はＡＩＴＳＧＧＮＴＮであり、配列番号１１に示されるアミノ酸配列はＰＧＶＶＴＧＳＹＤＶＲＮＹである。これらＣＤＲを有する抗体としてはＣｏＶＨＨ－Ｅ９（配列番号１２）がある。
【0034】
上記配列番号１～３、配列番号５～７、及び配列番号９～１１で示される各アミノ酸配列において１個のアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるＣＤＲは、配列番号１～３、配列番号５～７、及び配列番号９～１１で示されるアミノ酸配列からなるＣＤＲに変異が導入されたＣＤＲを意味する。また、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３に変異が導入されていても、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する吸着性を有している限り、本発明の抗体のＣＤＲに包含される。
ここで、好ましい置換として、極性や大きさが類似のアミノ酸への置換が挙げられる。上記好ましい置換の例としては、スレオニン残基のアスパラギン残基、イソロイシン残基またはメチオニン残基への置換、フェニルアラニン残基のイソロイシン残基への置換、セリン残基のアルギニン残基またはアスパラギン残基への置換、アラニン残基のスレオニン残基への置換、アルギニン残基のセリン残基への置換、アスパラギン残基のチロシン残基への置換、グリシン残基のセリン残基への置換、バリン残基のフェニルアラニン残基またはイソロイシン残基への置換、アスパラギン酸残基のグリシン残基またはバリン残基への置換、が挙げられる。
置換されるアミノ酸の位置及び置換後のアミノ酸の種類は、特に限定されないが、以下に好ましい例を挙げる。
１）の構造ドメインにおいて、アミノ酸が置換される好ましい位置として、ＣＤＲ１においては３、４、５又は１０番目が挙げられ、ＣＤＲ２においては３、４、５、６、７、８、９又は１０番目が挙げられ、ＣＤＲ３においては１、２、３又は４番目が挙げられる。
１）の構造ドメインにおいて、置換されるアミノ酸の位置及び置換後のアミノ酸の種類は、特に以下の組み合わせが好ましい。
ＣＤＲ１においては、３番目のスレオニン残基のアスパラギン残基への置換、４番目のフェニルアラニン残基のイソロイシン残基への置換、５番目のセリン残基のアルギニン残基への置換、１０番目のアラニン残基のスレオニン残基への置換、が好ましい。
ＣＤＲ２においては、３番目のセリン残基のアスパラギン残基への置換、４番目のアルギニン残基のセリン残基への置換、５番目のアスパラギン残基のチロシン残基への置換、６番目のグリシン残基のセリン残基への置換、７番目のグリシン残基のセリン残基への置換、８番目のスレオニン残基のメチオニン残基への置換、９番目のスレオニン残基のイソロイシン残基への置換、１０番目のスレオニン残基のメチオニン残基への置換、が好ましい。
ＣＤＲ３においては、１番目のバリン残基のフェニルアラニン残基またはイソロイシン残基への置換、２番目のグリシン残基のアルギニン残基への置換、３番目のグリシン残基のバリン残基への置換、４番目のアスパラギン酸残基のグリシン残基またはバリン残基への置換、が好ましい。
ここで、好ましい置換として、極性や大きさが類似のアミノ酸への置換が挙げられる。上記好ましい置換の例としては、スレオニン残基のアスパラギン残基、イソロイシン残基またはメチオニン残基への置換、フェニルアラニン残基のイソロイシン残基への置換、セリン残基のアルギニン残基またはアスパラギン残基への置換、アラニン残基のスレオニン残基への置換、アルギニン残基のセリン残基への置換、アスパラギン残基のチロシン残基への置換、グリシン残基のセリン残基への置換、バリン残基のフェニルアラニン残基またはイソロイシン残基への置換、アスパラギン酸残基のグリシン残基またはバリン残基への置換、が挙げられる。
置換されるアミノ酸の位置及び置換後のアミノ酸の種類は、特に限定されないが、以下に好ましい例を挙げる。
１）の構造ドメインにおいて、アミノ酸が置換される好ましい位置として、ＣＤＲ１においては３、４、５又は１０番目が挙げられ、ＣＤＲ２においては３、４、５、６、７、８、９又は１０番目が挙げられ、ＣＤＲ３においては１、２、３又は４番目が挙げられる。
１）の構造ドメインにおいて、置換されるアミノ酸の位置及び置換後のアミノ酸の種類は、特に以下の組み合わせが好ましい。
ＣＤＲ１においては、３番目のスレオニン残基のアスパラギン残基への置換、４番目のフェニルアラニン残基のイソロイシン残基への置換、５番目のセリン残基のアルギニン残基への置換、１０番目のアラニン残基のスレオニン残基への置換、が好ましい。
ＣＤＲ２においては、３番目のセリン残基のアスパラギン残基への置換、４番目のアルギニン残基のセリン残基への置換、５番目のアスパラギン残基のチロシン残基への置換、６番目のグリシン残基のセリン残基への置換、７番目のグリシン残基のセリン残基への置換、８番目のスレオニン残基のメチオニン残基への置換、９番目のスレオニン残基のイソロイシン残基への置換、１０番目のスレオニン残基のメチオニン残基への置換、が好ましい。
ＣＤＲ３においては、１番目のバリン残基のフェニルアラニン残基またはイソロイシン残基への置換、２番目のグリシン残基のアルギニン残基への置換、３番目のグリシン残基のバリン残基への置換、４番目のアスパラギン酸残基のグリシン残基またはバリン残基への置換、が好ましい。
【0035】
さらに、抗体は、上記アミノ酸配列のＣＤＲ１，ＣＤＲ２及びＣＤＲ３を含む構造ドメインを有するＶＨＨ抗体であることがより好ましい。これにより、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する特異的な吸着活性を有しつつ、ＶＨＨ抗体の上記利点を有する抗体が得られる。したがって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して高い吸着性を有するウイルス吸着材を、高い生産効率で得ることができる。
【0036】
ウイルス吸着材の１ｇ当たりにおける抗体の含有量は、ウイルス吸着材の抗体の含有量を十分に確保する観点から、好ましくは１ｍｇ／ｇ以上、より好ましくは１．５ｍｇ／ｇ以上、さらに好ましくは３ｍｇ／ｇ以上である。また、ウイルス吸着材における抗体の密度を適切に制御し、抗体の標的ウイルスとの吸着活性を確保する観点や製造コストの観点から、ウイルス吸着材の１ｇ当たりにおける抗体の含有量は、好ましくは６０ｍｇ／ｇ以下、より好ましくは３０ｍｇ／ｇ以下、さらに好ましくは１５ｍｇ／ｇ以下である。
抗体の含有量は、以下のように測定することができる。ウイルス吸着材から抗体を界面活性剤溶液等の公知のタンパク質溶出液で溶出し、溶出された抗体溶液中の抗体濃度を測定することで求めることができる。抗体濃度は、公知のタンパク質濃度測定法で求めることができるが、抗体特異的な測定法である、抗体測定用ＥＬＩＳＡキットや電気泳動後にタンパク質染色液で染色後、抗体のバンドの量を定量することで求めることが好ましい。
抗体の含有量は、以下のように測定することができる。ウイルス吸着材から抗体を界面活性剤溶液等の公知のタンパク質溶出液で溶出し、溶出された抗体溶液中の抗体濃度を測定することで求めることができる。抗体濃度は、公知のタンパク質濃度測定法で求めることができるが、抗体特異的な測定法である、抗体測定用ＥＬＩＳＡキットや電気泳動後にタンパク質染色液で染色後、抗体のバンドの量を定量することで求めることが好ましい。
【0037】
［金属］
本発明のウイルス吸着材は、ウイルスの吸着性を高める観点から、金属をさらに含むことが好ましい。
本発明の金属は、アニオン変性セルロースとの親和性を高める観点から、イオン化していることが好ましい。つまり、本発明のウイルス吸着材は、金属のイオンを含むことが好ましい。
特に、本発明のウイルス吸着材は、ウイルスの吸着性を高めるとともに、抗体を含む場合の抗体の配向性を高める観点から、Ｄブロック元素を含むことが好ましく、Ｄブロック元素イオンを含むことがより好ましい。Ｄブロック元素イオンは、アニオン変性セルロースに対するカウンターイオンとして、アニオン性基に結合することが好ましい。
Ｄブロック元素イオンは、Ｈｉｓタグ等の特定のタグペプチドと結合されやすい。このため、抗体の一部（例えばＣ末端）に上記タグペプチドを導入することにより、Ｄブロック元素イオンが結合されたアニオン変性セルロースに、抗体を所望の配向で固定しやすくなる。これにより、セルロースの表面における抗体の配向が、標的ウイルスを吸着可能な配向に制御され、抗体の標的ウイルスに対する吸着性がより高められると考えられる。
本発明のウイルス吸着材は、ウイルスの吸着性を高める観点から、金属をさらに含むことが好ましい。
本発明の金属は、アニオン変性セルロースとの親和性を高める観点から、イオン化していることが好ましい。つまり、本発明のウイルス吸着材は、金属のイオンを含むことが好ましい。
特に、本発明のウイルス吸着材は、ウイルスの吸着性を高めるとともに、抗体を含む場合の抗体の配向性を高める観点から、Ｄブロック元素を含むことが好ましく、Ｄブロック元素イオンを含むことがより好ましい。Ｄブロック元素イオンは、アニオン変性セルロースに対するカウンターイオンとして、アニオン性基に結合することが好ましい。
Ｄブロック元素イオンは、Ｈｉｓタグ等の特定のタグペプチドと結合されやすい。このため、抗体の一部（例えばＣ末端）に上記タグペプチドを導入することにより、Ｄブロック元素イオンが結合されたアニオン変性セルロースに、抗体を所望の配向で固定しやすくなる。これにより、セルロースの表面における抗体の配向が、標的ウイルスを吸着可能な配向に制御され、抗体の標的ウイルスに対する吸着性がより高められると考えられる。
【0038】
Ｄブロック元素としては、以下の元素が挙げられる。
第４周期に属する元素としては、スカンジウム（Ｓｃ）、チタン（Ｔｉ）、バナジウム（Ｖ）、クロム（Ｃｒ）、マンガン（Ｍｎ）、鉄（Ｆｅ）、コバルト（Ｃｏ）、ニッケル（Ｎｉ）、銅（Ｃｕ）、亜鉛（Ｚｎ）が挙げられる。
第５周期に属する元素としては、イットリウム（Ｙ）、ジルコニウム（Ｚｒ）、ニオブ（Ｎｂ）、モリブデン（Ｍｏ）、テクネチウム（Ｔｃ）、ルテニウム（Ｒｕ）、ロジウム（Ｒｈ）、パラジウム（Ｐｄ）、銀（Ａｇ）、カドミウム（Ｃｄ）が挙げられる。
第６周期に属する元素としては、ランタン（Ｌａ）、ルテチウム（Ｌｕ）、ハフニウム（Ｈｆ）、タンタル（Ｔａ）、タングステン（Ｗ）、レニウム（Ｒｅ）、オスミウム（Ｏｓ）、イリジウム（Ｉｒ）、白金（Ｐｔ）、金（Ａｕ）、水銀（Ｈｇ）が挙げられる。
第７周期に属する元素としては、アクチニウム（Ａｃ）、ローレンシウム（Ｌｒ）、ラザホージウム（Ｒｆ）、ドブニウム（Ｄｂ）、シーボーギウム（Ｓｇ）、ボーリウム（Ｂｈ）、ハッシウム（Ｈｓ）、マイトネリウム（Ｍｔ）、ダームスタチウム（Ｄｓ）、レントゲニウム（Ｒｇ）、コペルニシウム（Ｃｎ）が挙げられる。
Ｄブロック元素としては、上記の中から選ばれる一種又は二種以上を用いることができる。
第４周期に属する元素としては、スカンジウム（Ｓｃ）、チタン（Ｔｉ）、バナジウム（Ｖ）、クロム（Ｃｒ）、マンガン（Ｍｎ）、鉄（Ｆｅ）、コバルト（Ｃｏ）、ニッケル（Ｎｉ）、銅（Ｃｕ）、亜鉛（Ｚｎ）が挙げられる。
第５周期に属する元素としては、イットリウム（Ｙ）、ジルコニウム（Ｚｒ）、ニオブ（Ｎｂ）、モリブデン（Ｍｏ）、テクネチウム（Ｔｃ）、ルテニウム（Ｒｕ）、ロジウム（Ｒｈ）、パラジウム（Ｐｄ）、銀（Ａｇ）、カドミウム（Ｃｄ）が挙げられる。
第６周期に属する元素としては、ランタン（Ｌａ）、ルテチウム（Ｌｕ）、ハフニウム（Ｈｆ）、タンタル（Ｔａ）、タングステン（Ｗ）、レニウム（Ｒｅ）、オスミウム（Ｏｓ）、イリジウム（Ｉｒ）、白金（Ｐｔ）、金（Ａｕ）、水銀（Ｈｇ）が挙げられる。
第７周期に属する元素としては、アクチニウム（Ａｃ）、ローレンシウム（Ｌｒ）、ラザホージウム（Ｒｆ）、ドブニウム（Ｄｂ）、シーボーギウム（Ｓｇ）、ボーリウム（Ｂｈ）、ハッシウム（Ｈｓ）、マイトネリウム（Ｍｔ）、ダームスタチウム（Ｄｓ）、レントゲニウム（Ｒｇ）、コペルニシウム（Ｃｎ）が挙げられる。
Ｄブロック元素としては、上記の中から選ばれる一種又は二種以上を用いることができる。
【0039】
このうち、Ｄブロック元素としては、ウイルスの吸着性をより高めるとともに、抗体の配向性をより確実に制御する観点から、第４周期に属する元素が好ましく、鉄（Ｆｅ）、コバルト（Ｃｏ）、ニッケル（Ｎｉ）、銅（Ｃｕ）、亜鉛（Ｚｎ）の中から選ばれる一種以上を使用することが好ましく、ニッケル（Ｎｉ）を使用することがさらに好ましい。
【0040】
［両親媒性重合体］
本発明のウイルス吸着材は、アニオン変性セルロースによるウイルス吸着性の向上作用をより確実に得る観点から、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体の一種以上をさらに含んでいてもよい。本明細書において、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体とは、アニオン性又はカチオン性の重合体であって、親水基と疎水基とを有するものを意味する。本明細書にいうアニオン性又はカチオン性の重合体とは、常にアニオン性又はカチオン性を帯びた重合体のみならず、ｐＨの変化によりイオン性を帯びることがある重合体も含む。
本明細書において、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体を、「両親媒性重合体」とも称する。
本発明のウイルス吸着材は、アニオン変性セルロースによるウイルス吸着性の向上作用をより確実に得る観点から、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体の一種以上をさらに含んでいてもよい。本明細書において、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体とは、アニオン性又はカチオン性の重合体であって、親水基と疎水基とを有するものを意味する。本明細書にいうアニオン性又はカチオン性の重合体とは、常にアニオン性又はカチオン性を帯びた重合体のみならず、ｐＨの変化によりイオン性を帯びることがある重合体も含む。
本明細書において、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体を、「両親媒性重合体」とも称する。
【0041】
本発明の両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体は、具体的には、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下で非イオン性のモノマーの一種以上に由来する構成単位と、アニオン性又はカチオン性モノマーの一種以上に由来する構成単位と、を有する共重合体の一種以上を含むことが好ましい。両親媒性重合体は、二種以上の上記共重合体を含んでいてもよい。
本明細書において、上記共重合体を、「両親媒性共重合体」とも称する。
本明細書において、上記共重合体を、「両親媒性共重合体」とも称する。
【0042】
本明細書にいう溶解パラメーターδとは、ＰＯＬＹＭＥＲ ＨＡＮＤＢＯＯＫ（Ｊ．Ｂｒａｎｄｒｕｐ ａｎｄ Ｅ．Ｈ．Ｉｍｍｅｒｇｕｔ、ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ）のＶＩＩ／５１９に記載される方法で計算された値である。すなわち、溶解パラメーターδは、以下の式（３）で表される。
δ＝（（Ｈ－Ｒ×２９８．１５）／Ｖ）１／２ 〔単位：（ｃａｌ／ｍ３）１／２又は×２．０４６（ＭＰａ）１／２〕 …（３）
Ｈ：蒸発エンタルピー 〔単位：（ｃａｌ／ｍｏｌ）又は（×４．１８６Ｊ／ｍｏｌ）〕
Ｒ：気体定数 〔単位：（１．９８７１９ｃａｌ／Ｋ・ｍｏｌ）又は（１．９８７１９×４．１８６Ｊ／Ｋ・ｍｏｌ）〕
Ｖ：ｍｏｌ体積（ｃｍ３／ｍｏｌ）
なお、本明細書においては、Ｈは、以下の式（４）で経験的にあらわされることを利用して、標準沸点Ｔｂより求めた。
Ｈ＝－２９５０＋２３．７Ｔｂ＋０．０２０Ｔｂ ２ 〔単位：（ｃａｌ／ｍｏｌ）又は（×４．１８６Ｊ／ｍｏｌ）〕 …（４）
Ｔｂ：標準沸点〔単位：Ｋ〕
モノマーの標準沸点ＴｂはＡｌｄｒｉｃｈ（２０００－２００１：ＪＡＰＡＮ）試薬カタログ記載の値を使用し、沸点が減圧下で記載されている場合は同書の付表の圧力－温度計算表より常圧での沸点を求めた。また同書に記載ないモノマーおよび沸点の記載がないモノマーについてはＧｒｏｕｐ Ｃｏｎｔｒｂｕｔｉｏｎ法を用い、式（５）により２５℃での溶解パラメーターδを求めた。
δ＝ΣＦｉ／Ｖ …（５）
Ｆ：モル吸引定数 〔単位：（ｃａｌ／ｍ３）１／２ｃｍ３／ｍｏｌ又は×２．０４６（ＭＰａ）１／２ｃｍ３／ｍｏｌ〕
なお、本明細書においてＦはＨｏｙの値を用い求めた。以下に、モノマーの溶解パラメーターδの計算例を示す。
δ＝（（Ｈ－Ｒ×２９８．１５）／Ｖ）１／２ 〔単位：（ｃａｌ／ｍ３）１／２又は×２．０４６（ＭＰａ）１／２〕 …（３）
Ｈ：蒸発エンタルピー 〔単位：（ｃａｌ／ｍｏｌ）又は（×４．１８６Ｊ／ｍｏｌ）〕
Ｒ：気体定数 〔単位：（１．９８７１９ｃａｌ／Ｋ・ｍｏｌ）又は（１．９８７１９×４．１８６Ｊ／Ｋ・ｍｏｌ）〕
Ｖ：ｍｏｌ体積（ｃｍ３／ｍｏｌ）
なお、本明細書においては、Ｈは、以下の式（４）で経験的にあらわされることを利用して、標準沸点Ｔｂより求めた。
Ｈ＝－２９５０＋２３．７Ｔｂ＋０．０２０Ｔｂ ２ 〔単位：（ｃａｌ／ｍｏｌ）又は（×４．１８６Ｊ／ｍｏｌ）〕 …（４）
Ｔｂ：標準沸点〔単位：Ｋ〕
モノマーの標準沸点ＴｂはＡｌｄｒｉｃｈ（２０００－２００１：ＪＡＰＡＮ）試薬カタログ記載の値を使用し、沸点が減圧下で記載されている場合は同書の付表の圧力－温度計算表より常圧での沸点を求めた。また同書に記載ないモノマーおよび沸点の記載がないモノマーについてはＧｒｏｕｐ Ｃｏｎｔｒｂｕｔｉｏｎ法を用い、式（５）により２５℃での溶解パラメーターδを求めた。
δ＝ΣＦｉ／Ｖ …（５）
Ｆ：モル吸引定数 〔単位：（ｃａｌ／ｍ３）１／２ｃｍ３／ｍｏｌ又は×２．０４６（ＭＰａ）１／２ｃｍ３／ｍｏｌ〕
なお、本明細書においてＦはＨｏｙの値を用い求めた。以下に、モノマーの溶解パラメーターδの計算例を示す。
【0043】
＜計算例－１＞
モノマー：アクリルアミド 分子量：７１．０８ Ｔｂ：２３５℃ 比重：１．１２
Ｈ＝－２９５０＋２３．７×５０８．１５＋０．０２０×（５０８．１５）２
＝１４２５７．９
Ｖ＝７１．０８／１．１２＝６３．４
δ＝（（Ｈ－１．９８７１９×２９８．１５）／Ｖ）１／２
＝１４．７（ｃａｌ／ｍ３）１／２＝３０．１（ＭＰａ）１／２
モノマー：アクリルアミド 分子量：７１．０８ Ｔｂ：２３５℃ 比重：１．１２
Ｈ＝－２９５０＋２３．７×５０８．１５＋０．０２０×（５０８．１５）２
＝１４２５７．９
Ｖ＝７１．０８／１．１２＝６３．４
δ＝（（Ｈ－１．９８７１９×２９８．１５）／Ｖ）１／２
＝１４．７（ｃａｌ／ｍ３）１／２＝３０．１（ＭＰａ）１／２
【0044】
＜計算例－２＞
モノマー：ラウリルメタクリレート 分子量：２５４．４ 比重：０．８６８
モノマー：ラウリルメタクリレート 分子量：２５４．４ 比重：０．８６８
【表1】
【0045】
δ＝（１４８．３×２＋１３１．５×１１＋３２．０３＋１２６．５４＋３２６．５８＋１３５．１）／（２５４．４／０．８６８）＝８．１（ｃａｌ／ｍ３）１／２＝１６．６（ＭＰａ）１／２
【0046】
本明細書にいう非イオン性のモノマーとは、ｐＨの変化によりアニオン性又はカチオン性を帯びることがないモノマーである。また、本明細書にいうアニオン性又はカチオン性モノマーとは、常にアニオン性又はカチオン性を帯びたモノマーのみならず、ｐＨの変化によりイオン性を帯びることがあるモノマーも含む。
【0047】
両親媒性共重合体の重合に使用される非イオン性モノマーの溶解パラメーターは、好ましくは２０．５（ＭＰａ）１／２以下、より好ましくは２０．０（ＭＰａ）１／２以下、特に好ましくは１８．０（ＭＰａ）１／２以下、更に好ましくは１７．０（ＭＰａ）１／２以下である。
【0048】
溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマーは、不飽和モノマーが好ましく、（メタ）アクリル酸の炭素数１～４０、好ましくは炭素数２～２４のアルキルエステル；炭素数１～４０、好ましくは炭素数２～２４の脂肪酸のアルケニルエステル（好ましくはビニルエステル）；炭素数２～４０、好ましくは３～２４のアルキル変性（メタ）アクリルアミド；炭素数２～４０、好ましくは３～２４のアルコキシ変性（メタ）アクリルアミド；マレイン酸の炭素数１～４０のモノ又はジアルキルエステル；フマル酸の炭素数１～４０のモノ又はジアルキルエステル；スチレン、ビニルトルエン、α－メチルスチレン、エチレン、プロピレン、ブタジエン、イソブチレン、ジイソブチレン、ポリアルキレングリコール（メタ）アクリレート、アルコキシポリアルキレングリコール（メタ）アクリレート、ポリアルキレングリコールアルケニルエーテル、アルコキシポリアルキレングリコールアルケニルエーテル等が挙げられる。
【0049】
カチオン性モノマーは不飽和モノマーが好ましく、ジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート、ジエチルアミノエチル（メタ）アクリレート、ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、ジエチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、アリルアミン、ジアリルアミン及びトリアリルアミンや、これらの塩類及び四級アンモニウム塩が好ましい。これらの塩類として塩酸、硫酸、酢酸、燐酸等の無機酸及び有機酸の塩類が挙げられる。これらの四級アンモニウム塩としてメチルハライド（クロライド、ブロマイド等）、エチルハライド（クロライド、ブロマイド等）、ベンジルハライド（クロライド、ブロマイド等）、ジアルキル（メチル、エチル等）硫酸、ジアルキル（メチル、エチル等）炭酸、エピクロロヒドリン等の四級化剤との反応により得られる四級アンモニウム塩が挙げられる。
【0050】
なお、ジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート、ジエチルアミノエチル（メタ）アクリレート、ジメチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、ジエチルアミノプロピル（メタ）アクリルアミド、アリルアミン、ジアリルアミン、トリアリルアミンは共重合した後、塩酸、硫酸、酢酸、燐酸等の無機酸、有機酸の塩類で処理したものも用いることができる。
【0051】
両親媒性共重合体の重合には、上記した溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマー及びアニオン性又はカチオン性モノマーと共に、前記の各モノマーに属さないモノマーを用いることができる。これらのモノマーの割合は、全モノマーに対して０～５０モル％が好ましく、０～３０モル％がより好ましく、０～１０モル％が特に好ましい。また、必要に応じて架橋性モノマーを用いることができる。架橋性モノマーは、前記の各モノマーに属するものであってもよく、属さない他のモノマーであってもよい。
【0052】
両親媒性共重合体が、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマー単位とカチオン性モノマー単位からなる場合、各構成単位の割合（原料を基準とした割合）は、次のとおりである。
溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマー単位は、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマーとアニオン性又はカチオン性モノマーの合計に対して、好ましくは０．５～６０モル％、より好ましくは５～５０モル％、より好ましくは７～４０モル％、更に好ましくは１０～３０モル％である。この範囲は、上記非イオン性モノマー単位がラウリルメタクリレート、ジイソブチレン、スチレンである場合に特に好ましい。
溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマー単位は、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマーとアニオン性又はカチオン性モノマーの合計に対して、好ましくは０．５～６０モル％、より好ましくは５～５０モル％、より好ましくは７～４０モル％、更に好ましくは１０～３０モル％である。この範囲は、上記非イオン性モノマー単位がラウリルメタクリレート、ジイソブチレン、スチレンである場合に特に好ましい。
【0053】
カチオン性又はアニオン性モノマー単位は、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下である非イオン性モノマーとアニオン性又はカチオン性モノマーの合計に対して、好ましくは５０～９９．５モル％、より好ましくは５０～９５モル％、より好ましくは６０～９３モル％、更に好ましくは７０～９０モル％である。この範囲は、上記非イオン性モノマー単位がラウリルメタクリレートの場合に特に好ましい。
【0054】
両親媒性共重合体の重量平均分子量は、１０００～１００万が好ましく、３０００～５０万がより好ましく、１万～２０万が特に好ましい。
両親媒性共重合体の重量平均分子量は、下記の条件でゲルパーミエーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）にて測定したものである。換算分子量には、ポリエチレングリコール（ＧＰＣ用の標準試料）を用いることができる。
＜測定条件＞
カラム：α－Ｍ×２（東ソー）
溶離液：５０ｍＭ ＬｉＢｒ、１％酢酸／エタノール＝７０／３０（体積比）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出器：ＲＩ
試料濃度：４ｍｇ／ｍＬ
注入量：１００μＬ
両親媒性共重合体の重量平均分子量は、下記の条件でゲルパーミエーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）にて測定したものである。換算分子量には、ポリエチレングリコール（ＧＰＣ用の標準試料）を用いることができる。
＜測定条件＞
カラム：α－Ｍ×２（東ソー）
溶離液：５０ｍＭ ＬｉＢｒ、１％酢酸／エタノール＝７０／３０（体積比）
流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出器：ＲＩ
試料濃度：４ｍｇ／ｍＬ
注入量：１００μＬ
【0055】
両親媒性共重合体の重合方法は特に限定されず、溶媒、重合開始剤を用いての溶液重合や塊状重合等の公知の重合方法を適用し、回分式又は連続式で行うことができる。
【0056】
両親媒性共重合体の重合に用いる溶媒としては、水；メタノール、エタノール、イソプロパノール等のアルコール類；ベンゼン、トルエン、キシレン、シクロヘキサン、ｎ－ヘプタン等の芳香族又は脂肪族炭化水素類；酢酸エチル等のエステル類；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類；プロピレングリコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、フェニルグリコール類等のグリコール系溶剤等が挙げられる。これらの中でも、各モノマー及び生成する両親媒性共重合体の溶解性が良いことから、グリコール系溶剤、水及び炭素数１～４の低級アルコールから選ばれる一種又は二種以上が好ましい。
【0057】
両親媒性共重合体の重合に用いる重合開始剤としては、過硫酸アンモニウム、過硫酸ナトリウム、過硫酸カリウム等の過硫酸塩；過酸化水素；アゾビス－２メチルプロピオンアミジン塩酸塩、アゾイソブチロニトリル等のアゾ化合物；ベンゾイルパーオキシド、ラウロイルパーオキシド、クメンヒドロパーオキシド等のパーオキシド等が挙げられる。これらは一種又は二種以上を用いることができる。
この際、促進剤として、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、モール塩、ピロ重亜硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドナトリウムスルホキシレート、アスコルビン酸等の還元剤、エチレンジアミン、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム、グリシン等のアミン化合物から選ばれる一種又は二種以上を併用することもできる。
この際、促進剤として、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、モール塩、ピロ重亜硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドナトリウムスルホキシレート、アスコルビン酸等の還元剤、エチレンジアミン、エチレンジアミン四酢酸ナトリウム、グリシン等のアミン化合物から選ばれる一種又は二種以上を併用することもできる。
【0058】
また、重合反応時には、必要に応じて連鎖移動剤を用いることができる。連鎖移動剤としては、メルカプトエタノール、メルカプトグリセリン、メルカプトコハク酸、メルカプトプロピオン酸、メルカプトプロピオン酸２－エチルヘキシルエステル、オクタン酸２－メルカプトエチルエステル、１，８－ジメルカプト－３，６－ジオキサオクタン、デカントリチオール、ドデシルメルカプタン、ヘキサデカンチオール、デカンチオール、四塩化炭素、四臭化炭素、α－メチルスチレンダイマー、ターピノレン、α－テルピネン、γ－テルピネン、ジペンテン、２－アミノプロパン－１－オール等が挙げられる。これらは一種又は二種以上を用いることができる。
【0059】
重合温度は、重合方法、溶媒、重合開始剤、連鎖移動剤の種類に応じて決められるが、通常、０～１５０℃の範囲内である。重合反応終了後、減圧乾燥、粉砕等の公知の精製処理をすることができる。
【0060】
なお、本発明のウイルス吸着材は、上記両親媒性重合体の一種以上に加えて、両親媒性重合体以外の一種以上の他の重合体をさらに含んでいてもよい。
【0061】
［改質基材を含むウイルス吸着材］
本発明のウイルス吸着材は、以下のような構成を有していてもよい。
すなわち、ウイルス吸着材は、改質基材と、改質基材に固定された、抗体又は金属の少なくとも一方と、を含む。
改質基材は、基材本体と、上記アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）と、を含む。つまり、改質基材は、基材の表面がアニオン変性セルロースによって改質された構成を有する。これにより、基材の表面がウイルスの吸着に適した状態に改質され、ウイルスの吸着性が高まるものと考えられる。
本発明のウイルス吸着材は、以下のような構成を有していてもよい。
すなわち、ウイルス吸着材は、改質基材と、改質基材に固定された、抗体又は金属の少なくとも一方と、を含む。
改質基材は、基材本体と、上記アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）と、を含む。つまり、改質基材は、基材の表面がアニオン変性セルロースによって改質された構成を有する。これにより、基材の表面がウイルスの吸着に適した状態に改質され、ウイルスの吸着性が高まるものと考えられる。
【0062】
（改質基材）
本発明の改質基材２は、一実施形態において、繊維Ｆとして構成され、全体として、繊維Ｆの集合体として構成される。この例は、図１又は図２に示される。
なお、図１の拡大図には、抗体５が繊維集合体としての改質基材２の表面に密に配置されている態様を示しているが、図２に示すように、抗体５が固定されていなくてもよい。あるいは、図２においても、図１と同様に、抗体５が固定されていてもよい。
繊維集合体として構成された改質基材２は、成形を容易にする観点から、繊維Ｆが塊状となった綿状、又はシート状であることが好ましい。シート状の繊維集合体としての改質基材２の例は、図１に示される。綿状の繊維集合体としての改質基材２の例は、図２に示される。
改質基材２が綿状の場合、改質基材２は、例えば、球体、楕円体若しくはこれらに類する形状、多面体若しくはこれに類する形状、錐体若しくはこれに類する形状、又はその他の形状から選択される任意の形状を有する。改質基材２は、これらのうち２以上の形状の構造体が組み合わされた構成を有していてもよい。
改質基材２がシート状の場合は、例えば、不織布、織布、編み地又はそれらの積層体で構成され、後述する改質基材２の比表面積を高める観点から、好ましくは不織布又はその積層体で構成される。シート状の改質基材２は、例えば、円形、楕円形若しくはこれらに類する形状、多角形状若しくはこれに類する形状、又はその他の形状から選択される任意の平面形状を有する。シート状の改質基材２は、広げた状態で用いられてもよく、あるいは、折り曲げ等によって変形された状態で用いられてもよい。
改質基材２のサイズは、ウイルス吸着材１の用途に応じて適宜決定できる。
本発明の改質基材２は、一実施形態において、繊維Ｆとして構成され、全体として、繊維Ｆの集合体として構成される。この例は、図１又は図２に示される。
なお、図１の拡大図には、抗体５が繊維集合体としての改質基材２の表面に密に配置されている態様を示しているが、図２に示すように、抗体５が固定されていなくてもよい。あるいは、図２においても、図１と同様に、抗体５が固定されていてもよい。
繊維集合体として構成された改質基材２は、成形を容易にする観点から、繊維Ｆが塊状となった綿状、又はシート状であることが好ましい。シート状の繊維集合体としての改質基材２の例は、図１に示される。綿状の繊維集合体としての改質基材２の例は、図２に示される。
改質基材２が綿状の場合、改質基材２は、例えば、球体、楕円体若しくはこれらに類する形状、多面体若しくはこれに類する形状、錐体若しくはこれに類する形状、又はその他の形状から選択される任意の形状を有する。改質基材２は、これらのうち２以上の形状の構造体が組み合わされた構成を有していてもよい。
改質基材２がシート状の場合は、例えば、不織布、織布、編み地又はそれらの積層体で構成され、後述する改質基材２の比表面積を高める観点から、好ましくは不織布又はその積層体で構成される。シート状の改質基材２は、例えば、円形、楕円形若しくはこれらに類する形状、多角形状若しくはこれに類する形状、又はその他の形状から選択される任意の平面形状を有する。シート状の改質基材２は、広げた状態で用いられてもよく、あるいは、折り曲げ等によって変形された状態で用いられてもよい。
改質基材２のサイズは、ウイルス吸着材１の用途に応じて適宜決定できる。
【0063】
比表面積を高めてウイルスの吸着性を高める観点から、繊維Ｆのメジアン繊維径は、２０μｍ未満であることが好ましい。
より詳細に、繊維Ｆのメジアン繊維径は、十分な比表面積を得てよりウイルス吸着性を高める観点から、好ましくは２μｍ以下、より好ましくは１μｍ以下、さらに好ましくは０．８μｍ以下である。
繊維Ｆのメジアン繊維径は、改質基材２の強度を高め、改質基材２の構造を維持することで、改質基材２の細孔構造の容積・表面積を高く維持し、より多くの標的ウイルスを吸着しやすくする観点から、好ましくは０．０１μｍ以上、より好ましくは０．０５μｍ以上、さらに好ましくは０．１μｍ以上である。
本発明の繊維Ｆにおける「繊維径」とは、円相当直径を意味し、「メジアン繊維径」とは、以下の方法で算出した繊維径を意味する。
より詳細に、繊維Ｆのメジアン繊維径は、十分な比表面積を得てよりウイルス吸着性を高める観点から、好ましくは２μｍ以下、より好ましくは１μｍ以下、さらに好ましくは０．８μｍ以下である。
繊維Ｆのメジアン繊維径は、改質基材２の強度を高め、改質基材２の構造を維持することで、改質基材２の細孔構造の容積・表面積を高く維持し、より多くの標的ウイルスを吸着しやすくする観点から、好ましくは０．０１μｍ以上、より好ましくは０．０５μｍ以上、さらに好ましくは０．１μｍ以上である。
本発明の繊維Ｆにおける「繊維径」とは、円相当直径を意味し、「メジアン繊維径」とは、以下の方法で算出した繊維径を意味する。
【0064】
繊維Ｆの繊維径は、例えば走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）の観察による二次元画像から繊維の塊、繊維の交差部分、ポリマー液滴といった欠陥を除いた繊維を任意に５００本選び出し、繊維の長手方向に直交する線を引いたときの長さを繊維径として直接読み取ることで測定することができる。測定した５００本の繊維径の分布からメジアン繊維径を求めることができる。
【0065】
本発明の繊維Ｆは、確実に比表面積を高める観点から、均一性の高い繊維径を有することが好ましい。このような観点から、改質基材２に含まれる繊維Ｆの繊維径の分散値は、好ましくは０．５以上、より好ましくは１以上であり、好ましくは２．５以下、より好ましくは２以下である。
本発明の繊維径の分散値は、上述のように５００本の繊維の繊維径を測定し、これらの測定値から以下の式（６）に基づいて算出することができる。
分散値＝｜累積頻度９０％径－累積頻度１０％径｜÷メジアン径（累積頻度５０％径）
…（６）
本発明の繊維径の分散値は、上述のように５００本の繊維の繊維径を測定し、これらの測定値から以下の式（６）に基づいて算出することができる。
分散値＝｜累積頻度９０％径－累積頻度１０％径｜÷メジアン径（累積頻度５０％径）
…（６）
【0066】
繊維Ｆの比表面積は、ウイルスの吸着可能な表面の面積を十分に得る観点から、好ましくは０．５ｍ２/ｇ以上、好ましくは１ｍ２/ｇ以上、好ましくは１．５ｍ２/ｇ以上、より好ましくは２ｍ２/ｇ以上である。
繊維Ｆの比表面積は、製造上の観点、及び抗体５を表面に固定しやすい構成を得る観点から、好ましくは３００ｍ２/ｇ以下、好ましくは５０ｍ２/ｇ以下、好ましくは３０ｍ２/ｇ以下、より好ましくは１０ｍ２/ｇ以下である。
繊維Ｆの比表面積とは、細孔径０．１μｍ～１００μｍにおける細孔容量から算出される改質基材２の単位質量あたりの表面積を意味する。
繊維Ｆの比表面積を高めることで、単位質量あたりの改質基材２の表面積が高められる。これにより、改質基材２のウイルス吸着可能な領域が大きくなり、ウイルス吸着材１のウイルス吸着量を高めることができると考えられる。また、ウイルス吸着材１が抗体５を含む場合には、改質基材２により多くの抗体５を固定することができ、これによってもウイルス吸着量を高めることができると考えられる。
繊維Ｆの比表面積は、製造上の観点、及び抗体５を表面に固定しやすい構成を得る観点から、好ましくは３００ｍ２/ｇ以下、好ましくは５０ｍ２/ｇ以下、好ましくは３０ｍ２/ｇ以下、より好ましくは１０ｍ２/ｇ以下である。
繊維Ｆの比表面積とは、細孔径０．１μｍ～１００μｍにおける細孔容量から算出される改質基材２の単位質量あたりの表面積を意味する。
繊維Ｆの比表面積を高めることで、単位質量あたりの改質基材２の表面積が高められる。これにより、改質基材２のウイルス吸着可能な領域が大きくなり、ウイルス吸着材１のウイルス吸着量を高めることができると考えられる。また、ウイルス吸着材１が抗体５を含む場合には、改質基材２により多くの抗体５を固定することができ、これによってもウイルス吸着量を高めることができると考えられる。
【0067】
繊維Ｆの比表面積は、ＪＩＳ Ｒ １６５５に規定される水銀圧入法に準じて、以下の方法で測定することができる。詳細には、測定対象から０．０２ｇの繊維集合体を測定サンプルとして切り出す。該測定サンプルを入れた測定セルを水銀ポロシメーター（オートポアＩＶ９５００、マイクロメリティックス社製）にセットし、測定環境２２℃、６５％ＲＨ、水銀の表面張力γ：４８０ｄｙｎ／ｃｍ、接触角θ：１４０°、水銀注入圧力Ｐの測定範囲：０ｐｓｉａ（０ＭＰａ）以上６００００ｐｓｉａ（４１３．６８５ＭＰａ）以下の条件で、水銀注入圧力Ｐを所定の範囲内で上昇させていったときの該測定サンプルの累積細孔容積Ｖ（ｍＬ／ｇ）を測定する。次いで、下記の式（７）に従って換算した換算細孔径Ｑ（μｍ）を横軸に、ｌｏｇ微分細孔容積（ｄＶ／ｄ（ｌｏｇＱ）；ｍＬ／ｇ）との関係を縦軸にプロットし、細孔容積分布を得る。つまり、換算細孔径Ｑを横軸にとり、累積細孔容積Ｖを細孔径Ｑの対数値で微分した細孔容積を縦軸にとって、細孔容積分布を得る。
Ｑ＝４γｃｏｓθ／Ｐ …（７）
（γ：水銀の表面張力、θ：接触角、Ｐ：水銀注入圧力）
ここで得られた換算細孔径と該換算細孔径における細孔容量から該換算細孔径における細孔形状を円柱近似して表面積を求め、各換算細孔径ごとの表面積の積分値を測定サンプル重量で除した値を比表面積とする。
Ｑ＝４γｃｏｓθ／Ｐ …（７）
（γ：水銀の表面張力、θ：接触角、Ｐ：水銀注入圧力）
ここで得られた換算細孔径と該換算細孔径における細孔容量から該換算細孔径における細孔形状を円柱近似して表面積を求め、各換算細孔径ごとの表面積の積分値を測定サンプル重量で除した値を比表面積とする。
【0068】
（基材本体）
本発明の基材本体２ａは、改質基材２の表面改質されていない本体部分である。基材本体２ａは、樹脂を主体として含む。当該樹脂は、改質基材２を繊維集合体として形成する場合に、繊維Ｆを形成可能な樹脂であることが好ましく、製造上の観点から合成繊維であることが好ましい。
当該合成樹脂は、熱可塑性樹脂又はその他の樹脂から選ばれる一種又は二種以上を含む。
熱可塑性樹脂としては、ポリオレフィン系樹脂、ポリエステル系樹脂、ポリアミド系樹脂、ビニル系樹脂、アクリル系樹脂、ポリイミド系樹脂、芳香族ポリエーテルケトン系樹脂、ポリカーボネート樹脂等が挙げられる。これらの樹脂は一種を単独で、又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
ポリオレフィン系樹脂としては、ポリプロピレン、ポリエチレン、エチレン－α－オレフィンコポリマー、エチレン－プロピレンコポリマー等が挙げられる。
ポリエステル系樹脂としては、ポリエチレンテフタレート、ポリテトラメチレンテフタレート、ポリブチレンテフタレート、ポリエチレンナフタレート、ポリブチレンナフタレート、ポリヒドロキシ酪酸、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリカプロラクトン、ポリブチレンサクシネート、ポリ乳酸及び乳酸－ヒドロキシカルボン酸コポリマー等のポリ乳酸系樹脂、ポリブチレンナフタレート、液晶ポリマー等が挙げられる。
ポリアミド系樹脂としては、ナイロン６及びナイロン６６、アラミド等が挙げられる。
ビニル系樹脂としては、ポリ塩化ビニル樹脂、ポリ塩化ビニリデン樹脂、酢酸ビニル樹脂、塩化ビニリデン樹脂、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセタール、ポリビニルブチラール等が挙げられる。
アクリル系樹脂としては、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリル酸エステル、及びポリメタクリル酸エステル等が挙げられる。
ポリイミド系樹脂としては、ポリイミド樹脂、ポリアミドイミド樹脂、ポリエーテルイミド樹脂等が挙げられる。
芳香族ポリエーテルケトン系樹脂としては、ポリエーテルケトン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエテーテルエーテルケトンケトン等が挙げられる。
ニトリル系樹脂としては、ポリアクリロニトリル樹脂等が挙げられる。
基材本体２ａが熱可塑性樹脂を含むことで、熱融着によりバインダー等を使うことなく接着、賦形が可能となる等の効果を有する。
本発明の基材本体２ａは、改質基材２の表面改質されていない本体部分である。基材本体２ａは、樹脂を主体として含む。当該樹脂は、改質基材２を繊維集合体として形成する場合に、繊維Ｆを形成可能な樹脂であることが好ましく、製造上の観点から合成繊維であることが好ましい。
当該合成樹脂は、熱可塑性樹脂又はその他の樹脂から選ばれる一種又は二種以上を含む。
熱可塑性樹脂としては、ポリオレフィン系樹脂、ポリエステル系樹脂、ポリアミド系樹脂、ビニル系樹脂、アクリル系樹脂、ポリイミド系樹脂、芳香族ポリエーテルケトン系樹脂、ポリカーボネート樹脂等が挙げられる。これらの樹脂は一種を単独で、又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
ポリオレフィン系樹脂としては、ポリプロピレン、ポリエチレン、エチレン－α－オレフィンコポリマー、エチレン－プロピレンコポリマー等が挙げられる。
ポリエステル系樹脂としては、ポリエチレンテフタレート、ポリテトラメチレンテフタレート、ポリブチレンテフタレート、ポリエチレンナフタレート、ポリブチレンナフタレート、ポリヒドロキシ酪酸、ポリヒドロキシアルカノエート、ポリカプロラクトン、ポリブチレンサクシネート、ポリ乳酸及び乳酸－ヒドロキシカルボン酸コポリマー等のポリ乳酸系樹脂、ポリブチレンナフタレート、液晶ポリマー等が挙げられる。
ポリアミド系樹脂としては、ナイロン６及びナイロン６６、アラミド等が挙げられる。
ビニル系樹脂としては、ポリ塩化ビニル樹脂、ポリ塩化ビニリデン樹脂、酢酸ビニル樹脂、塩化ビニリデン樹脂、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセタール、ポリビニルブチラール等が挙げられる。
アクリル系樹脂としては、ポリアクリル酸、ポリメタクリル酸、ポリアクリル酸エステル、及びポリメタクリル酸エステル等が挙げられる。
ポリイミド系樹脂としては、ポリイミド樹脂、ポリアミドイミド樹脂、ポリエーテルイミド樹脂等が挙げられる。
芳香族ポリエーテルケトン系樹脂としては、ポリエーテルケトン、ポリエーテルエーテルケトン、ポリエテーテルエーテルケトンケトン等が挙げられる。
ニトリル系樹脂としては、ポリアクリロニトリル樹脂等が挙げられる。
基材本体２ａが熱可塑性樹脂を含むことで、熱融着によりバインダー等を使うことなく接着、賦形が可能となる等の効果を有する。
【0069】
基材本体２ａは、容易に繊維Ｆを細径化する観点から、熱可塑性樹脂を主体として含むことが好ましい。さらに、熱可塑性樹脂を用いて溶融電界紡糸法により繊維Ｆを形成すると、更に繊維Ｆを細径化させることができ、好ましい。
溶融電界紡糸法とは、高電圧が印加されている状態で繊維の原料となる樹脂を含む溶融液を電界中へ吐出することによって、吐出された溶融液が細長く引き伸ばされ、繊維径が細い繊維を形成することができる方法である。溶融電界紡糸法の詳細については後述する。
基材本体２ａの原料（樹脂組成物）として熱可塑性樹脂を用いることで、加熱によって上記樹脂を含む溶融液が生成され、溶融電界紡糸法を用いて細径化した繊維Ｆが形成され得る。
溶融電界紡糸法とは、高電圧が印加されている状態で繊維の原料となる樹脂を含む溶融液を電界中へ吐出することによって、吐出された溶融液が細長く引き伸ばされ、繊維径が細い繊維を形成することができる方法である。溶融電界紡糸法の詳細については後述する。
基材本体２ａの原料（樹脂組成物）として熱可塑性樹脂を用いることで、加熱によって上記樹脂を含む溶融液が生成され、溶融電界紡糸法を用いて細径化した繊維Ｆが形成され得る。
【0070】
＜樹脂組成物中の熱可塑性樹脂の含有量の測定方法＞
樹脂組成物中の熱可塑性樹脂の含有量は、以下の方法で測定することができる。具体的には、樹脂組成物をＮＭＲ（核磁気共鳴）分析、ＩＲ（赤外分光）分析等の各種分析に供して、これらの分析によって得られる各シグナル、スペクトルの位置に基づいて、分子骨格の構造及び分子構造の末端の官能基構造を同定する。これによって、含有する樹脂の種類を同定し、各種熱可塑性樹脂に相当する分子構造を示す測定値の強度から各種樹脂組成部中に含まれる熱可塑性樹脂の量を算出する。そして、該算出値を合計することにより樹脂組成物に含まれる熱可塑性樹脂の含有量を測定することができる。
樹脂組成物中の熱可塑性樹脂の含有量は、以下の方法で測定することができる。具体的には、樹脂組成物をＮＭＲ（核磁気共鳴）分析、ＩＲ（赤外分光）分析等の各種分析に供して、これらの分析によって得られる各シグナル、スペクトルの位置に基づいて、分子骨格の構造及び分子構造の末端の官能基構造を同定する。これによって、含有する樹脂の種類を同定し、各種熱可塑性樹脂に相当する分子構造を示す測定値の強度から各種樹脂組成部中に含まれる熱可塑性樹脂の量を算出する。そして、該算出値を合計することにより樹脂組成物に含まれる熱可塑性樹脂の含有量を測定することができる。
【0071】
基材本体２ａが熱可塑性樹脂を含む場合、溶融電界紡糸法を安定的に実施する観点から、改質基材２の総質量に対する熱可塑性樹脂の含有量は、好ましくは８０質量％以上、より好ましくは９０質量％以上、さらに好ましくは９３質量％以上である。
また、後述する添加剤等を添加してより細径化及び／又は安定化した繊維Ｆを形成する観点から、改質基材２の総質量に対する熱可塑性樹脂の含有量は、好ましくは１００質量％以下、より好ましくは９９質量％以下、さらに好ましくは９７質量％以下である。
また、後述する添加剤等を添加してより細径化及び／又は安定化した繊維Ｆを形成する観点から、改質基材２の総質量に対する熱可塑性樹脂の含有量は、好ましくは１００質量％以下、より好ましくは９９質量％以下、さらに好ましくは９７質量％以下である。
【0072】
さらに、基材本体２ａは、溶融電界紡糸法において安定した繊維形成性を得る観点から、融点を有する樹脂を含むことが好ましく、ポリオレフィン樹脂を含むことがより好ましい。ポリオレフィン樹脂は、融点を有する樹脂である。「融点を有する」樹脂とは、示差走査熱量測定法（ＤＳＣ法）において、測定対象の樹脂を加熱していったときに、該樹脂が熱分解する前に、固体から液体へ相変化することに起因する吸熱ピークを示す樹脂のことである。
ポリオレフィン樹脂の重量平均分子量は、好ましくは１万以上、さらに好ましくは４万以上、また、好ましくは１５万以下、さらに好ましくは１０万以下である。重量平均分子量は、例えば特開２０１４－１２９６１４号公報に記載の高温サイズ排除型クロマトグラフィー（高温ＳＥＣ）法又は高温ゲルパーミエーションクロマトグラフィー（高温ＧＰＣ）法を用い、重量平均分子量が既知であり且つ重量平均分子量がそれぞれ異なるポリスチレン標準試料（例えば、東ソー株式会社製の単分散ポリスチレン（型番：Ｆ４５０、Ｆ２８８、Ｆ１２８、Ｆ８０、Ｆ４０、Ｆ２０、Ｆ１０、Ｆ４、Ｆ１、Ａ５０００、Ａ２５００、Ａ１０００、Ａ５００及びＡ３００））を前記高温ＳＥＣ法又は高温ＧＰＣ法に供して分子量較正曲線を予め作成し、該較正曲線と測定試料の結果とを比較することによって測定することができる。なお、ポリオレフィン樹脂の重量平均分子量の測定には、ポリオレフィン樹脂の溶離液にオルソジクロロベンゼンを用い、溶解温度を１４０～１５０℃として溶解したポリプロピレン樹脂の溶解液を用いて測定を行う。
ポリオレフィン樹脂の重量平均分子量は、好ましくは１万以上、さらに好ましくは４万以上、また、好ましくは１５万以下、さらに好ましくは１０万以下である。重量平均分子量は、例えば特開２０１４－１２９６１４号公報に記載の高温サイズ排除型クロマトグラフィー（高温ＳＥＣ）法又は高温ゲルパーミエーションクロマトグラフィー（高温ＧＰＣ）法を用い、重量平均分子量が既知であり且つ重量平均分子量がそれぞれ異なるポリスチレン標準試料（例えば、東ソー株式会社製の単分散ポリスチレン（型番：Ｆ４５０、Ｆ２８８、Ｆ１２８、Ｆ８０、Ｆ４０、Ｆ２０、Ｆ１０、Ｆ４、Ｆ１、Ａ５０００、Ａ２５００、Ａ１０００、Ａ５００及びＡ３００））を前記高温ＳＥＣ法又は高温ＧＰＣ法に供して分子量較正曲線を予め作成し、該較正曲線と測定試料の結果とを比較することによって測定することができる。なお、ポリオレフィン樹脂の重量平均分子量の測定には、ポリオレフィン樹脂の溶離液にオルソジクロロベンゼンを用い、溶解温度を１４０～１５０℃として溶解したポリプロピレン樹脂の溶解液を用いて測定を行う。
【0073】
ポリオレフィン樹脂としては、例えばポリエチレン樹脂、ポリプロピレン樹脂、エチレン－α－オレフィンコポリマー樹脂、エチレン－プロピレンコポリマー等が挙げられる。これらの樹脂は一種を単独で、又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
特に、基材本体２ａは、ポリプロピレン樹脂を含むことがより好ましい。これにより、溶融電界紡糸法による繊維Ｆの形成を効率よく行うことができる。
特に、基材本体２ａは、ポリプロピレン樹脂を含むことがより好ましい。これにより、溶融電界紡糸法による繊維Ｆの形成を効率よく行うことができる。
【0074】
上記熱可塑性樹脂に加えて、基材本体２ａは、添加剤として、下記成分（ａ）及び下記成分（ｂ）から選ばれる一種又は二種以上を含むことが好ましい。これにより、詳細を後述するように、例えば、溶融電界紡糸法を用いてより細径化した繊維Ｆを形成することができる。
（ａ）アニオン性界面活性剤
（ｂ）成分（ａ）以外の可塑剤、ポリオレフィンワックス及び石油ワックスから選ばれる一種又は二種以上
上記添加剤の好ましい組み合わせとして、基材本体２ａは、下記成分（ａ）及び下記成分（ｂ）を含む。これにより、成分（ａ）及び成分（ｂ）のそれぞれが協働し、より細径化及び均一化した繊維Ｆが形成され得る。
なお、本明細書において、「基材本体２ａの添加剤」とは、基材の表面を改質する材料ではなく、原料である樹脂組成物に添加される添加剤を意味する。
（ａ）アニオン性界面活性剤
（ｂ）成分（ａ）以外の可塑剤、ポリオレフィンワックス及び石油ワックスから選ばれる一種又は二種以上
上記添加剤の好ましい組み合わせとして、基材本体２ａは、下記成分（ａ）及び下記成分（ｂ）を含む。これにより、成分（ａ）及び成分（ｂ）のそれぞれが協働し、より細径化及び均一化した繊維Ｆが形成され得る。
なお、本明細書において、「基材本体２ａの添加剤」とは、基材の表面を改質する材料ではなく、原料である樹脂組成物に添加される添加剤を意味する。
【0075】
成分（ａ）は、一般的に疎水性であるポリオレフィン樹脂等の熱可塑性樹脂を改質して、電場中で高い帯電量を発現させて細径の繊維を電界紡糸可能にするために用いられる。熱可塑性樹脂の帯電量をより向上させて紡糸性を高める観点から、成分（ａ）は、その融点が、併用される熱可塑性樹脂の融点以下であることが好ましい。
【0076】
本発明に用いられる成分（ａ）の中では、硫酸エステル塩やスルホン酸塩が特に好ましい。硫酸エステル塩とは、分子構造中の末端にアルキル基を有し、且つ分子構造中の任意の位置に硫酸基を有する有機化合物の塩を意味する。このような硫酸エステル塩としては、例えば、高級アルコール硫酸エステル塩（Ｒ－Ｏ－ＳＯ３Ｍ）等のアルキル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩（Ｒ－Ｏ－（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ－ＳＯ３Ｍ）等のアルキルエーテル硫酸塩等が挙げられる。これらは単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
【0077】
スルホン酸塩とは、分子構造の任意の位置にスルホン酸基を有する塩を意味する。
本発明におけるスルホン酸塩は、有機スルホン酸塩であることが好ましい。有機スルホン酸塩とは、分子構造中の末端にアルキル基又は芳香環の少なくともいずれか１つを有する、及び／又は、分子構造中の一部にアルキレン基を有するスルホン酸塩である。
さらに、有機スルホン酸塩は、分子構造中の末端にアルキル基を有する、及び／又は、分子構造中の一部にアルキレン基を有することが好ましい。加えて、有機スルホン酸塩は、分子構造中に塩構造をもったスルホン酸基を有することがより好ましい。
本発明におけるスルホン酸塩は、有機スルホン酸塩であることが好ましい。有機スルホン酸塩とは、分子構造中の末端にアルキル基又は芳香環の少なくともいずれか１つを有する、及び／又は、分子構造中の一部にアルキレン基を有するスルホン酸塩である。
さらに、有機スルホン酸塩は、分子構造中の末端にアルキル基を有する、及び／又は、分子構造中の一部にアルキレン基を有することが好ましい。加えて、有機スルホン酸塩は、分子構造中に塩構造をもったスルホン酸基を有することがより好ましい。
【0078】
本発明に用いられる有機スルホン酸塩としては、例えば、アルキルスルホン酸塩（Ｒ－ＳＯ３Ｍ）、アルキルベンゼンスルホン酸塩（Ｒ－Ｐｈ－ＳＯ３Ｍ）、アルキルナフタレンスルホン酸塩（Ｒ－Ｎｐ－ＳＯ３Ｍ）、オレフィンスルホン酸塩（Ｒ－ＣＨ＝ＣＨ－（ＣＨ２）ｎ－ＳＯ３Ｍ及びＲ－ＣＨ（－ＯＨ）（ＣＨ２）ｎ－ＳＯ３Ｍ）、アルキルスルホこはく酸塩（Ｒ－ＯＯＣ－ＣＨ２－ＣＨ（－ＳＯ３Ｍ）－ＣＯＯＭ）、ジアルキルスルホこはく酸塩（Ｒ－ＯＯＣ－ＣＨ２－ＣＨ（－ＳＯ３Ｍ）－ＣＯＯ－Ｒ）、α－スルホ脂肪酸エステル塩（Ｒ－ＣＨ（－ＳＯ３Ｍ）－ＣＯＯ－ＣＨ３）、アシルイセチオン酸塩（Ｒ－ＣＯ－Ｏ－（ＣＨ２ＣＨ２）－ＳＯ３Ｍ）、アシルタウリン塩（Ｒ－ＣＯ－ＮＨ－（ＣＨ２）２－ＳＯ３Ｍ）、アシルアルキルタウリン塩（Ｒ－ＣＯ－Ｎ（－Ｒ'）－（ＣＨ２）２－ＳＯ３Ｍ）等のＮ‐アルキル‐Ｎ‐アシルアミノアルキルスルホン酸塩、β‐ナフタレンスルホン酸塩ホルマリン縮合物（Ｍ－Ｏ３Ｓ－Ｎｐ－（ＣＨ２－Ｎｐ（－ＳＯ３Ｍ））ｎ－Ｈ）等が挙げられる。これらは単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
【0079】
上述した硫酸エステル塩及びスルホン酸塩において、Ｒは、直鎖又は分枝鎖のアルキル基を表し、その炭素数は好ましくは８以上、より好ましくは１０以上、さらに好ましくは１２以上であり、好ましくは２２以下、より好ましくは２０以下、さらに好ましくは１８以下である。Ｒ'は、直鎖又は分枝鎖のアルキル基を表し、その炭素数は好ましくは５以下である。Ｐｈは、置換されていてもよいフェニル基を表す。Ｎｐは、置換されていてもよいナフチル基を表す。Ｍは一価の陽イオンを表し、好ましくは金属４イオンであり、さらに好ましくはナトリウムイオンである。ｎは、好ましくは６以上、より好ましくは８以上、さらに好ましくは１０以上の数であり、好ましくは２４以下、より好ましくは２２以下、さらに好ましくは２０以下の数を表す。これらの硫酸エステル塩及びスルホン酸塩は、これらのうち一種を単独で用いてもよく、二種以上を組み合わせた混合物として用いてもよい。
【0080】
これらの硫酸エステル塩及びスルホン酸塩のうち、アルキル硫酸塩、アルキルエーテル硫酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、オレフィンスルホン酸塩、及びＮ‐アルキル‐Ｎ‐アシルアミノアルキルスルホン酸塩のうち少なくとも一種を用いることが好ましく、アシルアルキルタウリン塩を用いることがさらに好ましい。成分（ａ）としてこのような成分を用いることによって、細い繊維径を有する繊維Ｆを一層効率よく溶融電界紡糸することができるとともに、紡糸された繊維Ｆに親水性を付与することができる。加えて、繊維径が均一化され、改質基材２の比表面積がより効果的に向上する。
【0081】
成分（ａ）として有機スルホン酸塩を用いる場合、有機スルホン酸塩の改質基材２の総質量に対する含有量は、電場中で高い帯電量を発現させて細径の繊維Ｆを電界紡糸可能にするとともに、紡糸された繊維Ｆの物性を親水化することが可能となる観点から、好ましくは０質量％超、より好ましくは３質量％以上、さらに好ましくは４質量％以上である。
また、細径の繊維Ｆの形成を可能とする観点から、上記含有量は、好ましくは１５質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは８質量％以下である。
また、細径の繊維Ｆの形成を可能とする観点から、上記含有量は、好ましくは１５質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは８質量％以下である。
【0082】
成分（ａ）以外の可塑剤、ポリオレフィンワックス及び石油ワックスから選ばれる一種又は二種以上である成分（ｂ）は、上記熱可塑性樹脂を溶融して電界紡糸に供するときに、溶融した熱可塑性樹脂の流動性を高めて、より細径の繊維Ｆを製造可能にするために用いられるものである。
成分（ｂ）は、その重量平均分子量がポリオレフィン樹脂等の熱可塑性樹脂よりも小さいものであることが好ましく、特に成分（ｂ）としてポリオレフィンワックスを用いる場合には、好ましくは６００以上、より好ましくは１０００以上、さらに好ましくは１０００超、一層好ましくは２０００以上、また、好ましくは２００００以下、より好ましくは１００００以下、さらに好ましくは９０００以下、一層好ましくは８０００以下のものである。重量平均分子量は、ポリオレフィンワックスについては例えば上述したポリオレフィン樹脂と同様の方法で測定することができる。
石油ワックスの重量平均分子量も、ポリオレフィン樹脂等の熱可塑性樹脂よりも小さいものであり、好ましくは１００以上、より好ましくは２００以上、更に好ましくは２５０以上、一層好ましくは３００以上、また、好ましくは１０００以下、より好ましくは１０００未満、更に好ましくは９００以下、一層好ましくは８００以下のものである。石油ワックスの重量平均分子量は、例えばガスクロマトグラフィー質量分析（ＧＣ－ＭＳ）法（ＧＣ－ＭＳ装置、日本電子株式会社製、型番：ＪＭＳ－Ｔ１００ＧＣ）で測定することができる。
成分（ｂ）は、その重量平均分子量がポリオレフィン樹脂等の熱可塑性樹脂よりも小さいものであることが好ましく、特に成分（ｂ）としてポリオレフィンワックスを用いる場合には、好ましくは６００以上、より好ましくは１０００以上、さらに好ましくは１０００超、一層好ましくは２０００以上、また、好ましくは２００００以下、より好ましくは１００００以下、さらに好ましくは９０００以下、一層好ましくは８０００以下のものである。重量平均分子量は、ポリオレフィンワックスについては例えば上述したポリオレフィン樹脂と同様の方法で測定することができる。
石油ワックスの重量平均分子量も、ポリオレフィン樹脂等の熱可塑性樹脂よりも小さいものであり、好ましくは１００以上、より好ましくは２００以上、更に好ましくは２５０以上、一層好ましくは３００以上、また、好ましくは１０００以下、より好ましくは１０００未満、更に好ましくは９００以下、一層好ましくは８００以下のものである。石油ワックスの重量平均分子量は、例えばガスクロマトグラフィー質量分析（ＧＣ－ＭＳ）法（ＧＣ－ＭＳ装置、日本電子株式会社製、型番：ＪＭＳ－Ｔ１００ＧＣ）で測定することができる。
【0083】
可塑剤とは、高分子や合成樹脂に流動性を与え成形しやすくしたり、成形品に柔軟性を与えたりするために添加される物質を言い、嵩高い側鎖を有し、極性部と非極性部を有する化合物が用いられる。本発明に用いられる可塑剤は、例えば脂肪酸エステル、アルキルグリセリド、フタル酸エステル、トリメリット酸エステル、リン酸エステル、クエン酸エステル、エポキシ化植物油、低分子ポリエステルから選ばれる一種又は二種以上を含むことが好ましい。中でも脂肪酸エステル、アルキルグリセリド、クエン酸エステルから選ばれる一種又は二種以上を含むことがより好ましい。このうち脂肪酸エステルは炭素数１４から２２までの飽和脂肪酸のいずれかと炭素数１４から２２までを有するアルコールのいずれかで形成されるものを含むことが更に好ましい。アルキルグリセリドは炭素数１４から２２までの飽和脂肪酸のいずれかとのトリグリセリドを含むことが更に好ましい。クエン酸エステルは炭素数１４から２２までを有するアルコールとのトリエステルを含むことが更に好ましい。
【0084】
本発明に用いられるポリオレフィンワックスは、直鎖若しくは分枝鎖又は環式若しくは非環式の脂肪族飽和炭化水素の一種以上からなる合成物を指すものであり、好ましくは直鎖又は分枝鎖であり且つ非環式のアルカンである。ポリオレフィンワックスとしては、例えば、Ｈ－（ＣＨ２－ＣＨ２）ｑ－Ｈで表されるポリエチレンワックス、Ｈ－（ＣＨ２－ＣＨ（ＣＨ３））ｑ－Ｈで表されるポリプロピレンワックス、Ｈ－（ＣＨ２－ＣＨ２）ｒ－（ＣＨ２－ＣＨ（ＣＨ３））ｓ－Ｈ、Ｈ－（ＣＨ２－ＣＨ（ＣＨ３））ｓ－（ＣＨ２－ＣＨ２）ｒ－Ｈ及びＨ－（ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ（ＣＨ３））ｔ－Ｈで表されるエチレン‐プロピレン共重合ワックス等が挙げられる。これらは単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
【0085】
上述したポリオレフィンワックスの各化学式において、ｑは、好ましくは２４以上、より好ましくは４８以上、さらに好ましくは１００以上の数であり、また好ましくは５００以下、より好ましくは２５０以下、さらに好ましくは２２０以下の数を表す。ｒ及びｓは、それぞれ正の数であり、ｒ及びｓの総和として、好ましくは２４以上、より好ましくは４８以上、さらに好ましくは１００以上の数であり、また好ましくは５００以下、より好ましくは２５０以下、さらに好ましくは２２０以下の数を表す。ｔは、好ましくは１２以上、より好ましくは２４以上、さらに好ましくは５０以上の数であり、また好ましくは２５０以下、より好ましくは１２５以下、さらに好ましくは１１０以下の数を表す。
【0086】
本発明に用いられる石油ワックスは、常温で固体の炭化水素であり、好ましくは直鎖若しくは分枝鎖又は環式若しくは非環式の脂肪族飽和炭化水素の一種以上から構成されおり、例えば、ＪＩＳ Ｋ２２３５－１９９１で規定される石油ワックス等が挙げられる。その中でも、直鎖の脂肪族飽和炭化水素を主として含むパラフィンワックス、直鎖、分枝鎖及び環式の脂肪族飽和炭化水素をそれぞれ含むマイクロクリスタリンワックス等から選ばれる一種又は二種以上を含むことが好ましい。これらは単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
【0087】
これらのポリオレフィンワックス及び石油ワックスのうち、ポリエチレンワックス、ポリプロピレンワックス、エチレン‐プロピレン共重合ワックス、エチレンワックス、パラフィンワックスのうち少なくとも一種を用いることが好ましく、ポリプロピレンワックス又はエチレン‐プロピレン共重合ワックス、の少なくとも一種を用いることがさらに好ましい。成分（ｂ）としてこのような成分を用いることによって、繊維Ｆの原料を溶融して溶融電界紡糸に用いるときに、溶融液の流動性を高めて吐出及び延伸を効率よく行うことができ、その結果、より細径化かつ均一化された繊維を高い生産効率で製造することができる。
【0088】
上記添加剤に替えて又は上記添加剤に加えて、基材本体２ａは、繊維Ｆの添加剤として、ヒンダードアミン系化合物及び／又はトリアジン系化合物を含んでいることが好ましい。ヒンダードアミン系化合物及び／又はトリアジン系化合物は、光安定剤として、製造後の繊維Ｆの品質の安定化に寄与する。
ヒンダードアミン系化合物は、２，２，６，６，－テトラメチル－４－ピペリジンを基本骨格とする化合物であり、熱や光に安定で，高分子化合物を着色しないという利点を有する。ヒンダードアミン系化合物としては、テトラキス（１，２，２，６，６－ペンタメチル－４－ピペリジル）ブタン－１，２，３，４－テトラカルボキシレート等が挙げられる。
トリアジン系化合物は、複素環式化合物の一種で、３個の窒素を含む不飽和の６員環構造を有する化合物である。トリアジン系化合物としては、１，２，３－トリアジン、１，２，４－トリアジン、１，３，５－トリアジン等が挙げられる。
ヒンダードアミン系化合物は、２，２，６，６，－テトラメチル－４－ピペリジンを基本骨格とする化合物であり、熱や光に安定で，高分子化合物を着色しないという利点を有する。ヒンダードアミン系化合物としては、テトラキス（１，２，２，６，６－ペンタメチル－４－ピペリジル）ブタン－１，２，３，４－テトラカルボキシレート等が挙げられる。
トリアジン系化合物は、複素環式化合物の一種で、３個の窒素を含む不飽和の６員環構造を有する化合物である。トリアジン系化合物としては、１，２，３－トリアジン、１，２，４－トリアジン、１，３，５－トリアジン等が挙げられる。
【0089】
ヒンダードアミン系化合物及び／又はトリアジン系化合物の改質基材２の総質量に対する含有量は、製造後の繊維Ｆの品質の安定化を実現できる観点から、好ましくは０質量％超、より好ましくは３質量％以上、さらに好ましくは５質量％以上である。
また、細径の繊維Ｆを形成可能とする観点から、上記含有量は、好ましくは１５質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは８質量％以下である。
また、細径の繊維Ｆを形成可能とする観点から、上記含有量は、好ましくは１５質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは８質量％以下である。
【0090】
基材本体２ａは、上記以外の添加剤をさらに含んでいてもよい。当該添加剤としては、例えば酸化防止剤、上記以外の光安定剤、紫外線吸収剤、及び金属不活性剤などが挙げられる。酸化防止剤としては、フェノール系酸化防止剤、フォスファイト系酸化防止剤及びチオ系酸化防止剤などが例示できる。光安定剤及び紫外線吸収剤としては、ニッケル錯化合物、ベンゾトリアゾール類、ベンゾフェノン類などが例示できる。金属不活性剤としては、フォスフォン類、エポキシ類、トリアゾール類、ヒドラジド類、オキサミド類等が挙げられる。これらの添加剤は、単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。基材本体２ａがこれらの添加剤を含む場合、改質基材２に含まれる上記添加剤の含有量は、０．０１質量％以上であることが好ましく、０．０５質量％以上であることがより好ましく、また、１０質量％以下であることが好ましく、１質量％以下であることがより好ましい。
【0091】
なお、繊維Ｆが含む樹脂や添加剤の含有量や分子構造は、ＮＭＲ、各種クロマトグラフィー、ＩＲ分析等の公知の技術やその組み合わせによって分子構造を特定し同定することができる。また、添加物の含有量は、上記の測定手段によって、上記の分子構造を示す部分の測定値の強度で測定することができる。
また添加剤については、測定対象となる繊維から添加剤を各種溶剤でソックスレー抽出・濃縮し、該濃縮液に対して熱分解ガスクロマトグラフ（ＧＣ－ＭＳ）分析を行うこともできる。ここで得られたマススペクトルより添加剤の化合物を同定するとともに、添加剤の含有量を算出することもできる。
また添加剤については、測定対象となる繊維から添加剤を各種溶剤でソックスレー抽出・濃縮し、該濃縮液に対して熱分解ガスクロマトグラフ（ＧＣ－ＭＳ）分析を行うこともできる。ここで得られたマススペクトルより添加剤の化合物を同定するとともに、添加剤の含有量を算出することもできる。
【0092】
（アニオン性基を有するセルロース）
本発明において、改質基材２は、上述のアニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）３を含む。アニオン変性セルロース３は、基材本体２ａの表面に固定されていることが好ましい。この例は、図３及び図４の各図に示されている。これにより、基材本体２ａの表面が親水性の高い状態に改質され、ウイルスの吸着性が高まるものと考えられる。
なお、図３及び図４において、ウイルス吸着材１の各部を斜線のハッチングで示しているが、このハッチングは各部の配置例を模式的に示すものであって、各部の分子構造等を示しているものではない。
なお、「アニオン変性セルロース３又は重合体が基材本体２ａの表面に固定されている」とは、通常の保管状態及び使用状態において、その多くが基材本体２ａの表面から脱落せずに固定された状態を維持していることを意味する。また、「基材本体２ａの表面に固定されている」という表現は、基材本体２ａの表面に直接接している態様のみならず、基材本体２ａの表面に、他の材料を介して間接的に固定されている態様も含む。
本発明において、改質基材２は、上述のアニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）３を含む。アニオン変性セルロース３は、基材本体２ａの表面に固定されていることが好ましい。この例は、図３及び図４の各図に示されている。これにより、基材本体２ａの表面が親水性の高い状態に改質され、ウイルスの吸着性が高まるものと考えられる。
なお、図３及び図４において、ウイルス吸着材１の各部を斜線のハッチングで示しているが、このハッチングは各部の配置例を模式的に示すものであって、各部の分子構造等を示しているものではない。
なお、「アニオン変性セルロース３又は重合体が基材本体２ａの表面に固定されている」とは、通常の保管状態及び使用状態において、その多くが基材本体２ａの表面から脱落せずに固定された状態を維持していることを意味する。また、「基材本体２ａの表面に固定されている」という表現は、基材本体２ａの表面に直接接している態様のみならず、基材本体２ａの表面に、他の材料を介して間接的に固定されている態様も含む。
【0093】
アニオン変性セルロース３は、基材本体２ａの表面に直接固定されていてもよい。この例は、図３（Ａ）及び図４（Ａ）に示されている。
あるいは、アニオン変性セルロース３は、後述する両親媒性重合体６を介して基材本体２ａに固定されていてもよい。つまり、アニオン変性セルロース３は、両親媒性重合体６上に固定されていてもよい。この例は、図３（Ｂ）及び（Ｃ）、並びに図４（Ｂ）及び（Ｃ）に示されている。
あるいは、アニオン変性セルロース３は、後述する両親媒性重合体６を介して基材本体２ａに固定されていてもよい。つまり、アニオン変性セルロース３は、両親媒性重合体６上に固定されていてもよい。この例は、図３（Ｂ）及び（Ｃ）、並びに図４（Ｂ）及び（Ｃ）に示されている。
【0094】
（両親媒性重合体）
本発明において、改質基材２は、アニオン変性セルロース３の他、上述の両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体（両親媒性重合体）６の一種以上をさらに含んでいてもよい。両親媒性重合体６は、基材本体２ａに固定されていることが好ましく、基材本体２ａの表面に直接固定されていることがより好ましい。この例は、図３（Ｂ）及び（Ｃ）、並びに図４（Ｂ）及び（Ｃ）に示されている。
改質基材２が両親媒性重合体６を含むことで、基材本体２ａの表面が疎水性の状態であっても、基材本体２ａの表面を親水性の状態に改質でき、基材本体２ａにアニオン変性セルロース３をより効果的に固定できるものと考えられる。
本発明において、改質基材２は、アニオン変性セルロース３の他、上述の両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体（両親媒性重合体）６の一種以上をさらに含んでいてもよい。両親媒性重合体６は、基材本体２ａに固定されていることが好ましく、基材本体２ａの表面に直接固定されていることがより好ましい。この例は、図３（Ｂ）及び（Ｃ）、並びに図４（Ｂ）及び（Ｃ）に示されている。
改質基材２が両親媒性重合体６を含むことで、基材本体２ａの表面が疎水性の状態であっても、基材本体２ａの表面を親水性の状態に改質でき、基材本体２ａにアニオン変性セルロース３をより効果的に固定できるものと考えられる。
【0095】
（金属）
本発明のウイルス吸着材１は、改質基材２に固定された金属４を含むことが好ましい。この例は、図３（Ａ）及び（Ｂ）並びに図４（Ａ）及び（Ｂ）の各図に示されている。
本明細書において、「抗体５又は金属４が改質基材２に固定されている」とは、通常の保管状態及び使用状態において、抗体５又は金属４の多くが改質基材２の表面から脱落せずに固定された状態を維持していることを意味する。また、「改質基材２に固定されている」という表現は、改質基材２の表面に直接接している態様のみならず、改質基材２に、他の材料を介して間接的に固定されている態様も含む。
金属４は、イオン化していることが好ましく、電気的な親和性によって改質基材２に固定されていることが好ましい。
例えば、金属４は、上述のように、Ｄブロック元素イオンであることが好ましく、アニオン変性セルロース３のアニオン性基と結合していることが好ましい。なお、図３（Ａ）及び（Ｂ）並びに図４（Ａ）及び（Ｂ）では、金属４による層がアニオン変性セルロース３による層上に積層されているように示しているが、実際には、金属４のイオン等がアニオン変性セルロース３に局所的に結合されて存在していてもよい。
本発明のウイルス吸着材１は、改質基材２に固定された金属４を含むことが好ましい。この例は、図３（Ａ）及び（Ｂ）並びに図４（Ａ）及び（Ｂ）の各図に示されている。
本明細書において、「抗体５又は金属４が改質基材２に固定されている」とは、通常の保管状態及び使用状態において、抗体５又は金属４の多くが改質基材２の表面から脱落せずに固定された状態を維持していることを意味する。また、「改質基材２に固定されている」という表現は、改質基材２の表面に直接接している態様のみならず、改質基材２に、他の材料を介して間接的に固定されている態様も含む。
金属４は、イオン化していることが好ましく、電気的な親和性によって改質基材２に固定されていることが好ましい。
例えば、金属４は、上述のように、Ｄブロック元素イオンであることが好ましく、アニオン変性セルロース３のアニオン性基と結合していることが好ましい。なお、図３（Ａ）及び（Ｂ）並びに図４（Ａ）及び（Ｂ）では、金属４による層がアニオン変性セルロース３による層上に積層されているように示しているが、実際には、金属４のイオン等がアニオン変性セルロース３に局所的に結合されて存在していてもよい。
【0096】
（抗体）
本発明のウイルス吸着材１において、抗体５は、改質基材２に固定されていることが好ましい。この例は、図３の各図に示されている。
なお、図３では、抗体５を模式的に円形で示しているが、実際の形状は、図示の例に限定されず、分子構造に応じた種々の形状を採り得る。
例えば、抗体５は、アニオン変性セルロース３に直接固定されていてもよい。この例は、図３（Ｃ）に示されている。あるいは、抗体５は、アニオン変性セルロース３に固定された金属４等を介して改質基材２に固定されていてもよい。この例は、図３（Ａ）及び（Ｂ）に示されている。
本発明のウイルス吸着材１において、抗体５は、改質基材２に固定されていることが好ましい。この例は、図３の各図に示されている。
なお、図３では、抗体５を模式的に円形で示しているが、実際の形状は、図示の例に限定されず、分子構造に応じた種々の形状を採り得る。
例えば、抗体５は、アニオン変性セルロース３に直接固定されていてもよい。この例は、図３（Ｃ）に示されている。あるいは、抗体５は、アニオン変性セルロース３に固定された金属４等を介して改質基材２に固定されていてもよい。この例は、図３（Ａ）及び（Ｂ）に示されている。
【0097】
標的ウイルスの吸着活性を有する多くの抗体５を改質基材２に固定する観点から、抗体５は、抗体５の分子と、改質基材２に含まれる分子又は金属４と、の親和性を利用して改質基材２に固定されることが好ましい。当該親和性を利用した抗体５と改質基材２との固定方法としては、例えば、共有結合、疎水結合、水素結合、静電結合、その他の分子間力（ファン・デル・ワールス力）による結合が挙げられる。
【0098】
抗体５は、標的ウイルスへの吸着活性が高い状態で改質基材２に固定されることが好ましい。このような観点から、抗体５は、ＣＤＲが標的ウイルスと吸着可能な配向で改質基材２に固定されることが好ましい。このため、抗体５は、ＣＤＲから立体構造上離れているＣ末端側で改質基材２に固定されることがより好ましい。
【0099】
抗体５の改質基材２に対する配向性を制御する観点から、抗体５は、タグペプチドを介して改質基材２に固定されていることが好ましい。当該タグペプチドは、抗体５のアフィニティタグとして機能し、改質基材２又は金属４と親和性の高いアミノ酸配列を有することが好ましい。当該タグペプチドは、抗体５をより好ましい配向に制御する観点から、抗体５のＣ末端に結合していることがより好ましい。これにより、抗体５のＣ末端側がタグペプチドを介して改質基材２に固定され、ＣＤＲが外側を向き、抗体５が標的ウイルスを吸着しやすい配向となる。
より具体的に、当該タグペプチドは、配列番号１３（ＨＨＨＨＨＨ）で示されるアミノ酸配列を有するＨｉｓタグであることが好ましい。Ｈｉｓタグは、上述のＤブロック元素イオンとの親和性が高いため、改質基材２に金属４としてＤブロック元素イオンが固定されている場合に、抗体５の配向性がより確実に制御される。
抗体５をより好ましい配向に制御する観点から、タグペプチドはヒンジペプチドを介して抗体５のＣ末端に結合していることが好ましい。より具体的に、当該ヒンジペプチドは、配列番号１４～１６で示されるアミノ酸配列から選ばれる一種又は二種以上のアミノ酸配列を含んでいることが好ましい。ここで、配列番号１４で示されるアミノ酸配列はＥＰＫＴＰＫＰＱＳである。配列番号１５で示されるアミノ酸配列はＧＧＧである。配列番号１６で示されるアミノ酸配列はＧＧＧＳである。
より具体的に、当該タグペプチドは、配列番号１３（ＨＨＨＨＨＨ）で示されるアミノ酸配列を有するＨｉｓタグであることが好ましい。Ｈｉｓタグは、上述のＤブロック元素イオンとの親和性が高いため、改質基材２に金属４としてＤブロック元素イオンが固定されている場合に、抗体５の配向性がより確実に制御される。
抗体５をより好ましい配向に制御する観点から、タグペプチドはヒンジペプチドを介して抗体５のＣ末端に結合していることが好ましい。より具体的に、当該ヒンジペプチドは、配列番号１４～１６で示されるアミノ酸配列から選ばれる一種又は二種以上のアミノ酸配列を含んでいることが好ましい。ここで、配列番号１４で示されるアミノ酸配列はＥＰＫＴＰＫＰＱＳである。配列番号１５で示されるアミノ酸配列はＧＧＧである。配列番号１６で示されるアミノ酸配列はＧＧＧＳである。
【0100】
［ウイルス吸着材の製造方法］
本発明のウイルス吸着材の製造方法は、実施形態１として、
基材を形成する工程（Ｓ１）と、
形成された基材の表面を、アニオン性基を有するセルロースによって改質することで、改質基材を形成する工程（Ｓ３）と、を含む。この製造方法の例は、図５（Ａ）及び（Ｂ）に示されている。
実施形態２として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、上記工程Ｓ１及びＳ３に加えて、改質基材に抗体を固定する工程（Ｓ５）をさらに含んでいてもよい。この製造方法の例は、図５（Ｃ）に示されている。
実施形態３として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１、Ｓ３及びＳ５に加えて、工程Ｓ１の後であって工程Ｓ３の前に、両親媒性重合体の一種以上によって基材の表面を改質する工程（Ｓ２）をさらに含んでいてもよい。この製造方法の例は、図６（Ａ）に示されている。
実施形態４として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１，Ｓ２，Ｓ３，及びＳ５に加えて、工程Ｓ３の後であって工程Ｓ５の前に、改質基材に金属を固定する工程（Ｓ４）をさらに含んでいてもよい。この製造方法の例は、図６（Ｂ）に示されている。
実施形態５として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１，Ｓ２及びＳ３を含んでいてもよい。この製造方法の例は、図７（Ａ）に示されている。
さらに、実施形態６として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１，Ｓ２、Ｓ３及びＳ４を含んでいてもよい。この製造方法の例は、図７（Ｂ）に示されている。
なお、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、上記実施形態１～６に限定されるものではない。
以下、各工程について説明する。
本発明のウイルス吸着材の製造方法は、実施形態１として、
基材を形成する工程（Ｓ１）と、
形成された基材の表面を、アニオン性基を有するセルロースによって改質することで、改質基材を形成する工程（Ｓ３）と、を含む。この製造方法の例は、図５（Ａ）及び（Ｂ）に示されている。
実施形態２として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、上記工程Ｓ１及びＳ３に加えて、改質基材に抗体を固定する工程（Ｓ５）をさらに含んでいてもよい。この製造方法の例は、図５（Ｃ）に示されている。
実施形態３として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１、Ｓ３及びＳ５に加えて、工程Ｓ１の後であって工程Ｓ３の前に、両親媒性重合体の一種以上によって基材の表面を改質する工程（Ｓ２）をさらに含んでいてもよい。この製造方法の例は、図６（Ａ）に示されている。
実施形態４として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１，Ｓ２，Ｓ３，及びＳ５に加えて、工程Ｓ３の後であって工程Ｓ５の前に、改質基材に金属を固定する工程（Ｓ４）をさらに含んでいてもよい。この製造方法の例は、図６（Ｂ）に示されている。
実施形態５として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１，Ｓ２及びＳ３を含んでいてもよい。この製造方法の例は、図７（Ａ）に示されている。
さらに、実施形態６として、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、工程Ｓ１，Ｓ２、Ｓ３及びＳ４を含んでいてもよい。この製造方法の例は、図７（Ｂ）に示されている。
なお、本発明のウイルス吸着材の製造方法は、上記実施形態１～６に限定されるものではない。
以下、各工程について説明する。
【0101】
（基材の形成工程（Ｓ１））
基材の形成方法は、特に限定されないが、以下では、基材が上述の樹脂を主体とする繊維集合体として構成される場合の基材の形成方法について説明する。
上記繊維集合体における繊維は、細径の繊維を形成するための公知の紡糸法によって形成され、例えば、電界紡糸法（エレクトロスピニング）又は溶融電界紡糸法によって形成されることが好ましい。当該繊維は、細径の繊維をより生産性高く、且つ安定的に形成する観点から、溶融電界紡糸法によって形成されることがより好ましい。溶融電界紡糸法は、繊維の原料となる樹脂の溶融液を電場中に吐出して電界紡糸法により紡糸する方法であり、例えば特開２０２０－１０５４５８号公報の段落００４８～００５８に記載の方法を適用することができる。
基材の形成方法は、特に限定されないが、以下では、基材が上述の樹脂を主体とする繊維集合体として構成される場合の基材の形成方法について説明する。
上記繊維集合体における繊維は、細径の繊維を形成するための公知の紡糸法によって形成され、例えば、電界紡糸法（エレクトロスピニング）又は溶融電界紡糸法によって形成されることが好ましい。当該繊維は、細径の繊維をより生産性高く、且つ安定的に形成する観点から、溶融電界紡糸法によって形成されることがより好ましい。溶融電界紡糸法は、繊維の原料となる樹脂の溶融液を電場中に吐出して電界紡糸法により紡糸する方法であり、例えば特開２０２０－１０５４５８号公報の段落００４８～００５８に記載の方法を適用することができる。
【0102】
以下、溶融電界紡糸法によって繊維を形成する例について説明する。
図８に模式的に示すように、繊維製造装置１０は、例えば、原料供給部１０Ａと、電極部１０Ｂと、流体噴射部１０Ｃと、捕集部１０Ｄと、を備える。同図には、相互に直交するＸ軸及びＹ軸が記載されている。
原料供給部１０Ａと電極部１０Ｂとは、Ｘ軸方向に相互に対向して配置される。原料供給部１０Ａと電極部１０Ｂとの間の領域は、電場が発生する電場発生領域となる。
流体噴射部１０Ｃと捕集部１０Ｄとは、電場発生領域を挟んでＹ軸方向に相互に対向して配置される。
図８に模式的に示すように、繊維製造装置１０は、例えば、原料供給部１０Ａと、電極部１０Ｂと、流体噴射部１０Ｃと、捕集部１０Ｄと、を備える。同図には、相互に直交するＸ軸及びＹ軸が記載されている。
原料供給部１０Ａと電極部１０Ｂとは、Ｘ軸方向に相互に対向して配置される。原料供給部１０Ａと電極部１０Ｂとの間の領域は、電場が発生する電場発生領域となる。
流体噴射部１０Ｃと捕集部１０Ｄとは、電場発生領域を挟んでＹ軸方向に相互に対向して配置される。
【0103】
原料供給部１０Ａは、熱可塑性樹脂等を含む原料組成物を供給するホッパー１９と、ホッパー１９に接続された溶融液生成部１１と、生成された溶融液を吐出する吐出ノズル１２と、を有する。
なお、溶融電界紡糸法による原料組成物の変質は実質的にないので、原料である原料組成物の組成と、製造物である繊維の組成とは実質的に同一である。つまり、原料組成物の組成は、繊維によって形成される上述の基材本体の組成と同一の組成を有していればよい。
溶融液生成部１１は、ホッパー１９から供給された原料組成物を加熱溶融して、原料組成物の溶融液Ｒを生成する。溶融液Ｒは、スクリュー等によって吐出ノズル１２に供給される。
吐出ノズル１２は、溶融液Ｒを電場中に吐出する部材であり、ノズルベース１３と吐出ノズル先端部１４とを有する。ノズルベース１３と吐出ノズル先端部１４は、例えば金属などの導電性材料によって構成され得るが、溶融液生成部１１への電圧の印加を防止するため、図示しない絶縁性部材によって電気的に絶縁されていてもよい。吐出ノズル先端部１４は、接地されている。吐出ノズル先端部１４は、溶融液Ｒの流動性を維持するために、ヒータ（図示せず）等によって加熱されていてもよい。
なお、溶融電界紡糸法による原料組成物の変質は実質的にないので、原料である原料組成物の組成と、製造物である繊維の組成とは実質的に同一である。つまり、原料組成物の組成は、繊維によって形成される上述の基材本体の組成と同一の組成を有していればよい。
溶融液生成部１１は、ホッパー１９から供給された原料組成物を加熱溶融して、原料組成物の溶融液Ｒを生成する。溶融液Ｒは、スクリュー等によって吐出ノズル１２に供給される。
吐出ノズル１２は、溶融液Ｒを電場中に吐出する部材であり、ノズルベース１３と吐出ノズル先端部１４とを有する。ノズルベース１３と吐出ノズル先端部１４は、例えば金属などの導電性材料によって構成され得るが、溶融液生成部１１への電圧の印加を防止するため、図示しない絶縁性部材によって電気的に絶縁されていてもよい。吐出ノズル先端部１４は、接地されている。吐出ノズル先端部１４は、溶融液Ｒの流動性を維持するために、ヒータ（図示せず）等によって加熱されていてもよい。
【0104】
電極部１０Ｂは、吐出ノズル１２とＸ軸方向に対向して配置された帯電電極２１と、これに接続された高電圧発生装置２２と、を含む。
高電圧発生装置２２によって帯電電極２１に高電圧が印加されると、電極部１０Ｂと吐出ノズル１２との間に電場が発生する。これにより、この電場中に吐出された溶融液Ｒが帯電し得る。
高電圧発生装置２２によって帯電電極２１に高電圧が印加されると、電極部１０Ｂと吐出ノズル１２との間に電場が発生する。これにより、この電場中に吐出された溶融液Ｒが帯電し得る。
【0105】
流体噴射部１０Ｃは、電場に対してＹ軸方向に空気流Ａを噴射することが可能な流体噴射装置２３を有する。空気流Ａは、例えば所定の温度以上に加熱されていてもよい。
【0106】
捕集部１０Ｄは、空気流Ａによって搬送され引き伸ばされた繊維Ｆを捕集することが可能に構成される。捕集部１０Ｄは、流体噴射装置２３とＹ軸方向に対向して配置された捕集シート２４と、捕集シート２４に接続された捕集電極２７と、捕集電極２７に接続された高電圧発生装置２６と、捕集シート２４を搬送する搬送コンベア２５と、を有している。
高電圧発生装置２６は、捕集電極２７に対して高電圧を印加する。これにより、捕集電極２７が負に帯電する。なお、捕集部１０Ｄは、高電圧発生装置２６を有さず、捕集電極２７が接地されていてもよい。
捕集シート２４は、捕集電極２７に引き寄せされた繊維Ｆを表面に堆積させる。捕集シート２４は、例えば長尺の樹脂製シートであり、原反ロール２４ａから繰り出されて搬送コンベア２５に搬送される。
高電圧発生装置２６は、捕集電極２７に対して高電圧を印加する。これにより、捕集電極２７が負に帯電する。なお、捕集部１０Ｄは、高電圧発生装置２６を有さず、捕集電極２７が接地されていてもよい。
捕集シート２４は、捕集電極２７に引き寄せされた繊維Ｆを表面に堆積させる。捕集シート２４は、例えば長尺の樹脂製シートであり、原反ロール２４ａから繰り出されて搬送コンベア２５に搬送される。
【0107】
以上の構成の繊維製造装置１０を用いた繊維Ｆの形成方法について説明する。
まず、ホッパー１９に充填された原料組成物が溶融液生成部１１において溶融し、溶融液Ｒが生成される。生成された溶融液Ｒは、吐出ノズル１２から電場に向けて吐出される。
まず、ホッパー１９に充填された原料組成物が溶融液生成部１１において溶融し、溶融液Ｒが生成される。生成された溶融液Ｒは、吐出ノズル１２から電場に向けて吐出される。
【0108】
電極部１０Ｂには高電圧が印加され、吐出ノズル１２が接地されていることで、電極部１０Ｂと吐出ノズル１２との間に電場が発生する。電場に溶融液Ｒが吐出されることで、溶融液Ｒが帯電する。帯電した溶融液Ｒは、溶融液Ｒ自体に発生した自己反発力によって延伸されるとともに、帯電電極２１に向けて電気的引力によって引き寄せされる。その際に、溶融液Ｒは、引力と自己反発力とによる延伸を繰り返して細い径の繊維状となり得る。
【0109】
さらに流体噴射部１０Ｃの流体噴射装置２３が、電場に吐出された溶融液Ｒに向けてＹ軸方向に空気流Ａを吹き付ける。これにより、電場に吐出された溶融液Ｒがさらに延伸され、さらに細い径の繊維を形成しながらＹ軸方向に搬送される。この過程で引き伸ばされた繊維状の溶融液Ｒが固化し、繊維Ｆが形成される。形成された繊維Ｆは、捕集部１０Ｄの捕集シート２４に捕集される。
【0110】
以上のような方法により、非常に細い径の繊維Ｆを形成することができる。なお、溶融電界紡糸法による繊維製造装置１０は、図８に示す例に限定されず、例えば、特開２０１９－４９０７８号公報の図２、特開２０１６－２０４８１６号公報の図１～６等に記載の構成を有していてもよい。
【0111】
本発明では、上述のように、繊維Ｆの原料組成物が熱可塑性樹脂、好ましくはポリオレフィン樹脂、より好ましくはポリプロピレン樹脂を含むことで、溶融電界紡糸法の適用に適した溶融液Ｒが生成されやすくなり、繊維Ｆがより細径化される。
また、原料組成物が硫酸エステル塩及び／又はスルホン酸塩等のアニオン性界面活性剤（成分（ａ））を含むことで、電場中に吐出された溶融液Ｒの帯電量が高められ、電界紡糸によって繊維Ｆがより一層細径化される。
また、原料組成物が成分（ａ）以外の可塑剤、ポリオレフィンワックス及び石油ワックスから選ばれる一種又は二種以上（成分（ｂ））を含むことで、溶融液Ｒの流動性が高められ、繊維Ｆがより一層細径化される。
また、原料組成物がヒンダードアミン系化合物及び／又はトリアジン系化合物を含むことで、製造後の繊維Ｆの光安定性が高められる。
また、原料組成物が硫酸エステル塩及び／又はスルホン酸塩等のアニオン性界面活性剤（成分（ａ））を含むことで、電場中に吐出された溶融液Ｒの帯電量が高められ、電界紡糸によって繊維Ｆがより一層細径化される。
また、原料組成物が成分（ａ）以外の可塑剤、ポリオレフィンワックス及び石油ワックスから選ばれる一種又は二種以上（成分（ｂ））を含むことで、溶融液Ｒの流動性が高められ、繊維Ｆがより一層細径化される。
また、原料組成物がヒンダードアミン系化合物及び／又はトリアジン系化合物を含むことで、製造後の繊維Ｆの光安定性が高められる。
【0112】
捕集部１０Ｄによって捕集された繊維Ｆは、捕集シート２４等に堆積された堆積物の状態で、綿状又はシート状の繊維集合体として用いられてもよい。あるいは、繊維Ｆの堆積物は、加熱、プレス又は積層の少なくとも１つの方法によって、綿状又はシート状に成形され、繊維集合体が形成されてもよい。また、繊維Ｆを用いて公知の方法により織布や不織布を形成することで、シート状の繊維集合体が成形されてもよい。
以上のように、繊維集合体としての基材が形成される。
以上のように、繊維集合体としての基材が形成される。
【0113】
（アニオン変性セルロースによる表面改質処理（Ｓ３））
続いて、形成された基材の表面を、アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）によって改質する。これにより、表面がアニオン変性セルロースによって改質された、改質基材を形成することができる。改質基材の表面は、アニオン変性セルロースによって、親水性の高い状態となり得る。
続いて、形成された基材の表面を、アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）によって改質する。これにより、表面がアニオン変性セルロースによって改質された、改質基材を形成することができる。改質基材の表面は、アニオン変性セルロースによって、親水性の高い状態となり得る。
【0114】
本工程では、例えば、形成された基材を、アニオン変形セルロースを含む分散液に接触させる。接触方法としては、基材全体をセルロース分散液と十分に接触させる観点から、基材をセルロース分散液に浸漬させることが好ましく、あるいは、基材にセルロース分散液を噴霧等してもよい。
なお、アニオン変性セルロースの処理後には、基材を脱水及び／又は脱イオン水等で洗浄することが好ましい。
なお、アニオン変性セルロースの処理後には、基材を脱水及び／又は脱イオン水等で洗浄することが好ましい。
【0115】
一実施形態において、本工程（Ｓ３）は、例えば、アニオン変性セルロースを調製する工程（Ｓ３－１）と、アニオン変性セルロースを微細化する工程（Ｓ３－２）と、微細化されたアニオン変性セルロース（微細改質セルロース）と基材とを接触させる工程（Ｓ３－３）と、を含んでいることが好ましい。この例は、図５（Ａ）に示されている。なお、図５（Ｂ）及び（Ｃ）、図６並びに図７の各図に例示する製造方法においても、工程Ｓ３が上記工程Ｓ３－１～Ｓ３－３を含んでいてもよい。
このような方法により、微細改質セルロースを基材上に付与することができ、基材におけるアニオン変性セルロースのコーティング性を高めることができる。
このような方法により、微細改質セルロースを基材上に付与することができ、基材におけるアニオン変性セルロースのコーティング性を高めることができる。
【0116】
（アニオン変性セルロースの調製工程（Ｓ３－１））
まず、原料のセルロースに酸化処理又はアニオン性基の付加処理を施して、少なくとも１つ以上のアニオン性基を導入してアニオン変性させることで、アニオン変性セルロースを調製する。
アニオン変性セルロースの原料であるセルロースとしては、セルロースＩ型結晶構造を有する観点及び環境負荷の観点から、天然セルロースを用いることが好ましい。天然セルロースとしては、例えば、針葉樹系パルプ、広葉樹系パルプ等の木材パルプ；コットンリンター、コットンリントのような綿系パルプ；麦わらパルプ、バガスパルプ等の非木材系パルプ；バクテリアセルロース等が挙げられ、これらの一種を単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
原料のセルロースの平均繊維径としては、例えば、入手容易性の観点から、好ましくは１μｍ以上であり、同様の観点から、好ましくは１００μｍ以下である。平均繊維長としては、例えば、入手容易性の観点から、好ましくは１０００μｍ以上であり、同様の観点から、好ましくは１００００μｍ以下である。
まず、原料のセルロースに酸化処理又はアニオン性基の付加処理を施して、少なくとも１つ以上のアニオン性基を導入してアニオン変性させることで、アニオン変性セルロースを調製する。
アニオン変性セルロースの原料であるセルロースとしては、セルロースＩ型結晶構造を有する観点及び環境負荷の観点から、天然セルロースを用いることが好ましい。天然セルロースとしては、例えば、針葉樹系パルプ、広葉樹系パルプ等の木材パルプ；コットンリンター、コットンリントのような綿系パルプ；麦わらパルプ、バガスパルプ等の非木材系パルプ；バクテリアセルロース等が挙げられ、これらの一種を単独で又は二種以上を組み合わせて用いることができる。
原料のセルロースの平均繊維径としては、例えば、入手容易性の観点から、好ましくは１μｍ以上であり、同様の観点から、好ましくは１００μｍ以下である。平均繊維長としては、例えば、入手容易性の観点から、好ましくは１０００μｍ以上であり、同様の観点から、好ましくは１００００μｍ以下である。
【0117】
原料のセルロースに導入されるアニオン性基としては、カルボキシ基、スルホン酸基又はリン酸基が挙げられるが、特にカルボキシ基が好ましい。
セルロースにカルボキシ基を導入する方法としては、例えばセルロースのヒドロキシ基を酸化してカルボキシ基に変換する方法や、セルロースのヒドロキシ基に、カルボキシ基を有する化合物、カルボキシ基を有する化合物の酸無水物及びそれらの誘導体からなる群から選ばれる一種又は二種以上を反応させる方法が挙げられる。
セルロースのヒドロキシ基を酸化処理する方法としては、例えば、特開２０１５－１４３３３６号公報又は特開２０１５－１４３３３７号公報に記載の、２，２，６，６－テトラメチル－１－ピペリジン－Ｎ－オキシル（ＴＥＭＰＯ）を触媒として、次亜塩素酸ナトリウム等の酸化剤及び臭化ナトリウム等の臭化物を原料のセルロースと反応させる方法が挙げられる。ＴＥＭＰＯを触媒としてセルロースの酸化処理を行うことによって、セルロース構成単位のＣ６位のヒドロキシメチル基（－ＣＨ２ＯＨ）が選択的にカルボキシ基に変換される。従って、本発明におけるアニオン変性セルロースは、セルロース構成単位のＣ６位がカルボキシ基であるセルロースが挙げられる。本明細書において、かかるセルロースを「酸化セルロース」という場合がある。
セルロースにカルボキシ基を導入する方法としては、例えばセルロースのヒドロキシ基を酸化してカルボキシ基に変換する方法や、セルロースのヒドロキシ基に、カルボキシ基を有する化合物、カルボキシ基を有する化合物の酸無水物及びそれらの誘導体からなる群から選ばれる一種又は二種以上を反応させる方法が挙げられる。
セルロースのヒドロキシ基を酸化処理する方法としては、例えば、特開２０１５－１４３３３６号公報又は特開２０１５－１４３３３７号公報に記載の、２，２，６，６－テトラメチル－１－ピペリジン－Ｎ－オキシル（ＴＥＭＰＯ）を触媒として、次亜塩素酸ナトリウム等の酸化剤及び臭化ナトリウム等の臭化物を原料のセルロースと反応させる方法が挙げられる。ＴＥＭＰＯを触媒としてセルロースの酸化処理を行うことによって、セルロース構成単位のＣ６位のヒドロキシメチル基（－ＣＨ２ＯＨ）が選択的にカルボキシ基に変換される。従って、本発明におけるアニオン変性セルロースは、セルロース構成単位のＣ６位がカルボキシ基であるセルロースが挙げられる。本明細書において、かかるセルロースを「酸化セルロース」という場合がある。
【0118】
（微細化処理工程（Ｓ３－２））
続いて、調製されたアニオン変性セルロースを微細化処理する。これにより、微細改質セルロースが形成される。
続いて、調製されたアニオン変性セルロースを微細化処理する。これにより、微細改質セルロースが形成される。
【0119】
微細化処理工程で使用できる装置としては、公知の分散機が好適なものとして挙げられる。例えば、平均繊維径がナノメートルサイズの微細改質セルロースを得る場合は、マスコロイダー等の磨砕機を用いた処理や溶媒中で高圧ホモジナイザー等を用いた処理を行うことで微細化することができる。
【0120】
微細化処理工程における分散媒としての溶媒は、例えば水及び親水性溶媒からなる群より選ばれる一種又は二種以上が挙げられる。親水性溶媒とは、水に混和する溶媒であり、メタノール、エタノール、２－プロパノール等の親水性モノアルコール；エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール等の親水性グリコール；グリセリン；アセトン等の親水性ケトン；Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）；Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド；ジメチルスルホキシド：コハク酸とトリエチレングリコールモノメチルエーテルとのジエステル等が例示される。これらは、単独で又は二種以上を混合して用いることができる。また、当該溶媒には、アニオン変性セルロースにおけるアニオン性基の対となるイオン（カウンターイオン）が含まれていてもよい。当該カウンターイオンとしては、上述のＳブロック元素イオン及びＤブロック元素イオンが挙げられる。
溶媒の使用量は、アニオン変性セルロースを分散できる有効量であればよく、アニオン変性セルロースに対して、好ましくは１質量倍以上、より好ましくは２質量倍以上、好ましくは５００質量倍以下、より好ましくは２００質量倍以下とすることができる。
微細化処理工程における、アニオン変性セルロースの固形分濃度は５０質量％以下が好ましい。
溶媒の使用量は、アニオン変性セルロースを分散できる有効量であればよく、アニオン変性セルロースに対して、好ましくは１質量倍以上、より好ましくは２質量倍以上、好ましくは５００質量倍以下、より好ましくは２００質量倍以下とすることができる。
微細化処理工程における、アニオン変性セルロースの固形分濃度は５０質量％以下が好ましい。
【0121】
（微細改質セルロースと基材との接触処理工程（Ｓ３－３））
続いて、微細化されたアニオン変性セルロース（微細改質セルロース）と基材とを接触させる。具体的には、例えば、微細化処理後の、微細改質セルロースを含む分散液を基材に接触させる。あるいは、当該分散液をさらに調製した分散液を基材に接触させてもよい。
接触方法としては、基材をセルロース分散液に浸漬させることが好ましく、あるいは、基材にセルロース分散液を噴霧等してもよい。
続いて、微細化されたアニオン変性セルロース（微細改質セルロース）と基材とを接触させる。具体的には、例えば、微細化処理後の、微細改質セルロースを含む分散液を基材に接触させる。あるいは、当該分散液をさらに調製した分散液を基材に接触させてもよい。
接触方法としては、基材をセルロース分散液に浸漬させることが好ましく、あるいは、基材にセルロース分散液を噴霧等してもよい。
【0122】
本工程における分散媒としての溶媒は、例えば水及び親水性溶媒からなる群より選ばれる一種又は二種以上が挙げられる。親水性溶媒は、上述の微細化処理と同様の親水性溶媒を用いることができる。また、当該溶媒には、アニオン変性セルロースにおけるカウンターイオンが含まれていてもよい。当該カウンターイオンとしては、上述のＳブロック元素イオン及びＤブロック元素イオンが挙げられる。
当該分散液における微細改質セルロースの固形分濃度は、基材上に十分な量の微細改質セルロースを付与する観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．５質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは０．１質量％以下、より好ましくは０．０１質量％以下である。
当該分散液における微細改質セルロースの固形分濃度は、基材上に十分な量の微細改質セルロースを付与する観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．５質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは０．１質量％以下、より好ましくは０．０１質量％以下である。
【0123】
微細改質セルロース分散液に基材を浸漬させる場合の浸漬時間は、基材上に十分な量の微細改質セルロースを付与する観点から、好ましくは１分間以上、より好ましくは１０分間以上、更に好ましくは３０分間以上である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは１０時間以下、より好ましく３時間以下、更に好ましくは２時間以下である。
本工程における微細改質セルロース分散液の温度は、基材に対して微細改質セルロースを効率よく付与するとともに、基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは１０時間以下、より好ましく３時間以下、更に好ましくは２時間以下である。
本工程における微細改質セルロース分散液の温度は、基材に対して微細改質セルロースを効率よく付与するとともに、基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
【0124】
（アニオン変形セルロースへの金属の固定化処理工程（Ｓ３－４））
さらに、一実施形態において、本工程（Ｓ３）は、アニオン変性セルロースに金属を固定する工程（Ｓ３－４）を含んでもよい。この例は、図５（Ｂ）に示されている。なお、図５（Ａ）及び（Ｃ）、図６並びに図７の各図に例示する製造方法においても、工程Ｓ３が工程Ｓ３－４を含んでいてもよい。また、後述するように、工程Ｓ３－４は、図５（Ａ）に例示する工程Ｓ３－１～Ｓ３－３に組み合わせて実施されてもよい。
工程Ｓ３－４の後、例えば、当該金属が固定化されたアニオン変性セルロースと基材とを接触させることで、当該金属が固定化されたアニオン変性セルロースによる、基材の表面改質処理を行うことができる。
さらに、一実施形態において、本工程（Ｓ３）は、アニオン変性セルロースに金属を固定する工程（Ｓ３－４）を含んでもよい。この例は、図５（Ｂ）に示されている。なお、図５（Ａ）及び（Ｃ）、図６並びに図７の各図に例示する製造方法においても、工程Ｓ３が工程Ｓ３－４を含んでいてもよい。また、後述するように、工程Ｓ３－４は、図５（Ａ）に例示する工程Ｓ３－１～Ｓ３－３に組み合わせて実施されてもよい。
工程Ｓ３－４の後、例えば、当該金属が固定化されたアニオン変性セルロースと基材とを接触させることで、当該金属が固定化されたアニオン変性セルロースによる、基材の表面改質処理を行うことができる。
【0125】
本工程では、アニオン変性セルロースに金属を接触させることで、アニオン変性セルロースに金属を固定することができる。例えば、アニオン変性セルロースを、金属を含有する金属含有液に浸漬させることが好ましい。
一実施形態において、金属含有液は、金属イオンの溶液であることが好ましく、Ｄブロック元素イオン溶液であることがより好ましい。
金属イオンの溶液は、水、又は水溶性の液状の媒体に金属イオンを溶解させた液であることが好ましい。金属イオンの溶液としては、例えば、脱イオン水等の精製水又は緩衝液に金属イオンを溶解させた液を用いることができる。
例えば、金属含有液がＤブロック元素イオン溶液である場合、Ｄブロック元素イオン溶液におけるＤブロック元素イオンの濃度は、アニオン変性セルロースに十分な量のＤブロック元素イオンを固定させる観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
一実施形態において、金属含有液は、金属イオンの溶液であることが好ましく、Ｄブロック元素イオン溶液であることがより好ましい。
金属イオンの溶液は、水、又は水溶性の液状の媒体に金属イオンを溶解させた液であることが好ましい。金属イオンの溶液としては、例えば、脱イオン水等の精製水又は緩衝液に金属イオンを溶解させた液を用いることができる。
例えば、金属含有液がＤブロック元素イオン溶液である場合、Ｄブロック元素イオン溶液におけるＤブロック元素イオンの濃度は、アニオン変性セルロースに十分な量のＤブロック元素イオンを固定させる観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
【0126】
一例として、微細化処理工程（Ｓ３－２）の前に、アニオン変性セルロースに金属を固定化する処理（Ｓ３－４）を行ってもよい。
この場合、微細化処理における分散媒として、上記金属含有液を用いることができる。
この例の工程Ｓ３－４では、アニオン変性セルロースを、金属含有液に、好ましくは１時間以上、より好ましくは６時間以上、浸漬させる。これにより、セルロースのアニオン性基と金属とが相互作用し、アニオン変形セルロースに金属を固定することができる。この浸漬時には、上記相互作用を促進するため、液中のアニオン変性セルロースを攪拌することが好ましい。
この場合、微細化処理における分散媒として、上記金属含有液を用いることができる。
この例の工程Ｓ３－４では、アニオン変性セルロースを、金属含有液に、好ましくは１時間以上、より好ましくは６時間以上、浸漬させる。これにより、セルロースのアニオン性基と金属とが相互作用し、アニオン変形セルロースに金属を固定することができる。この浸漬時には、上記相互作用を促進するため、液中のアニオン変性セルロースを攪拌することが好ましい。
【0127】
他の例として、微細化処理工程（Ｓ３－２）後であって、微細改質セルロースと基材との接触工程（Ｓ３－３）前の、微細改質セルロース分散液に金属を添加することで、アニオン変性セルロースに金属を固定化する処理（Ｓ３－４）を行ってもよい。この場合、例えば、金属含有液を微細改質セルロース分散液に添加してもよい。
この例の工程Ｓ３－４では、好ましくは１時間以上、より好ましくは３時間以上、金属が添加された微細改質セルロース分散液を攪拌してもよい。これにより、セルロースのアニオン性基と金属との相互作用を促進することができる。
この例の工程Ｓ３－４では、好ましくは１時間以上、より好ましくは３時間以上、金属が添加された微細改質セルロース分散液を攪拌してもよい。これにより、セルロースのアニオン性基と金属との相互作用を促進することができる。
【0128】
なお、本発明の製造方法においては、工程Ｓ３の工程Ｓ３－４において金属を固定化処理する方法の他、工程Ｓ３の表面改質処理を行った改質基材に対して、金属を固定化処理することもできる。これについては、工程Ｓ４において説明する。
【0129】
（両親媒性重合体による表面改質処理（Ｓ２））
一実施形態において、工程Ｓ１の後であって工程Ｓ３の前に、両親媒性重合体の一種以上によって基材の表面を改質してもよい。これにより、基材の表面が親水性の高い状態に改質され、アニオン変性セルロースがより固定されやすい状態となる。
上述のように、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体は、具体的には、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下で非イオン性のモノマーの一種以上に由来する構成単位と、アニオン性又はカチオン性モノマーの一種以上に由来する構成単位とを有する両親媒性共重合体の一種以上を含むことが好ましい。両親媒性共重合体は、二種以上を使用してもよい。
一実施形態において、工程Ｓ１の後であって工程Ｓ３の前に、両親媒性重合体の一種以上によって基材の表面を改質してもよい。これにより、基材の表面が親水性の高い状態に改質され、アニオン変性セルロースがより固定されやすい状態となる。
上述のように、両親媒性を有するアニオン性又はカチオン性重合体は、具体的には、溶解パラメーターが２０．５（ＭＰａ）１／２以下で非イオン性のモノマーの一種以上に由来する構成単位と、アニオン性又はカチオン性モノマーの一種以上に由来する構成単位とを有する両親媒性共重合体の一種以上を含むことが好ましい。両親媒性共重合体は、二種以上を使用してもよい。
【0130】
本工程では、例えば、形成された基材を、両親媒性重合体の溶液に接触させる。接触方法としては、基材を両親媒性重合体溶液に浸漬させることが好ましく、あるいは、基材に両親媒性重合体溶液を噴霧等してもよい。
なお、両親媒性重合体の処理後には、基材を脱水及び／又は脱イオン水等で洗浄することが好ましい。
なお、両親媒性重合体の処理後には、基材を脱水及び／又は脱イオン水等で洗浄することが好ましい。
【0131】
両親媒性重合体溶液は、水、又は水溶性の液状の媒体に両親媒性重合体を溶解させた液であり、例えば脱イオン水等の精製水又は緩衝液に両親媒性重合体を溶解させた液とすることができる。
両親媒性重合体溶液における両親媒性重合体の濃度は、基材上に十分な量の両親媒性重合体を付与する観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
両親媒性重合体溶液における両親媒性重合体の濃度は、基材上に十分な量の両親媒性重合体を付与する観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
【0132】
両親媒性重合体溶液に基材を浸漬させる場合の浸漬時間は、基材上に十分な量の両親媒性重合体を付与する観点から、好ましくは１分間以上、より好ましくは３分間以上である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは１０時間以下、より好ましく３時間以下である。
本工程における両親媒性重合体溶液の温度は、基材に対して両親媒性重合体を効率よく付与するとともに、基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは１０時間以下、より好ましく３時間以下である。
本工程における両親媒性重合体溶液の温度は、基材に対して両親媒性重合体を効率よく付与するとともに、基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
【0133】
（金属の固定化処理（Ｓ４））
一実施形態において、工程Ｓ３の後であって工程Ｓ５の前に、改質基材に金属を固定してもよい。
本工程では、改質基材に金属を接触させることで、改質基材に金属を固定することができる。例えば、改質基材を、金属を含有する金属含有液に浸漬させてもよい。あるいは、改質基材に金属含有液を噴霧等することで、改質基材を金属と接触させてもよい。なお、本工程の前に、改質基材を脱水及び／又は脱イオン水等で洗浄することが好ましい。
一実施形態において、工程Ｓ３の後であって工程Ｓ５の前に、改質基材に金属を固定してもよい。
本工程では、改質基材に金属を接触させることで、改質基材に金属を固定することができる。例えば、改質基材を、金属を含有する金属含有液に浸漬させてもよい。あるいは、改質基材に金属含有液を噴霧等することで、改質基材を金属と接触させてもよい。なお、本工程の前に、改質基材を脱水及び／又は脱イオン水等で洗浄することが好ましい。
【0134】
一実施形態において、金属含有液は、金属イオンの溶液であることが好ましく、Ｄブロック元素イオン溶液であることがより好ましい。
金属イオンの溶液は、水、又は水溶性の液状の媒体に金属イオンを溶解させた液であり、例えば脱イオン水等の精製水又は緩衝液に金属イオンを溶解させた液とすることができる。
一例として、金属含有液がＤブロック元素イオン溶液である場合、Ｄブロック元素イオン溶液におけるＤブロック元素イオンの濃度は、改質基材上に十分な量のＤブロック元素イオンを固定させる観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
金属イオンの溶液は、水、又は水溶性の液状の媒体に金属イオンを溶解させた液であり、例えば脱イオン水等の精製水又は緩衝液に金属イオンを溶解させた液とすることができる。
一例として、金属含有液がＤブロック元素イオン溶液である場合、Ｄブロック元素イオン溶液におけるＤブロック元素イオンの濃度は、改質基材上に十分な量のＤブロック元素イオンを固定させる観点から、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上である。
また、コストを抑える観点から、当該濃度は、好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下である。
【0135】
金属含有液に改質基材を浸漬させる場合の浸漬時間は、改質基材上に十分な量の金属を固定させる観点から、好ましくは１分間以上、より好ましくは３分間以上である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは１０時間以下、より好ましく３時間以下である。
本工程における金属含有液の温度は、改質基材に対して金属を効率よく固定させるとともに、改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは１０時間以下、より好ましく３時間以下である。
本工程における金属含有液の温度は、改質基材に対して金属を効率よく固定させるとともに、改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
【0136】
（抗体の固定化処理（Ｓ５））
一実施形態において、工程Ｓ３の後、又は工程Ｓ３の後で、かつ工程Ｓ４の後に、改質基材に抗体を固定してもよい。
本工程では、改質基材を抗体に接触させることで、改質基材に抗体を固定することができる。具体的には、改質基材を、抗体を含有する抗体含有液に浸漬させてもよい。あるいは、改質基材に抗体含有液を噴霧等することで、改質基材を抗体と接触させてもよい。
なお、工程Ｓ５の前に、必要に応じて、改質基材を脱水及び／又は脱イオン水等の精製水によって洗浄してもよい。また、工程Ｓ５の前に、必要に応じて、改質基材を乾燥してもよい。乾燥方法としては、例えば、風乾、加熱による乾燥、自然乾燥等から選ばれる１又は２以上の公知の乾燥方法を用いることができる。このうち、改質基材の変性を防止しつつ、生産性を高める観点から、風乾が好ましく用いられる。乾燥温度は、改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
一実施形態において、工程Ｓ３の後、又は工程Ｓ３の後で、かつ工程Ｓ４の後に、改質基材に抗体を固定してもよい。
本工程では、改質基材を抗体に接触させることで、改質基材に抗体を固定することができる。具体的には、改質基材を、抗体を含有する抗体含有液に浸漬させてもよい。あるいは、改質基材に抗体含有液を噴霧等することで、改質基材を抗体と接触させてもよい。
なお、工程Ｓ５の前に、必要に応じて、改質基材を脱水及び／又は脱イオン水等の精製水によって洗浄してもよい。また、工程Ｓ５の前に、必要に応じて、改質基材を乾燥してもよい。乾燥方法としては、例えば、風乾、加熱による乾燥、自然乾燥等から選ばれる１又は２以上の公知の乾燥方法を用いることができる。このうち、改質基材の変性を防止しつつ、生産性を高める観点から、風乾が好ましく用いられる。乾燥温度は、改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
【0137】
抗体含有液は、好ましくは、水、又は水溶性の液状の媒体と抗体とを含む液であり、例えば緩衝液に抗体を分散させた液とすることができる。
抗体は、例えば、共有結合、疎水結合、水素結合、静電結合、その他の分子間力（ファン・デル・ワールス力）による結合等によって、改質基材上に固定される。上述のように、抗体は、配向性を制御する観点から、改質基材と親和性の高いペプチド（アフィニティタグ）を介して改質基材の表面に固定されることがより好ましい。
抗体含有液は、改質基材の親疎水性を制御して抗体と改質基材との親和性を高める観点から、抗体の他、界面活性剤、エタノール、緩衝液から選ばれる一種又は二種以上を含んでいてもよい。界面活性剤としては、抗体機能を低下させない観点から、非イオン界面活性剤が好ましく、アルキルグリコシドやポリオキシエチレンアルキルエーテル等が挙げられる。
抗体含有液における抗体の濃度は、改質基材上に十分な量の抗体を固定させる観点から、好ましくは０．０１ｍｇ／Ｌ以上、より好ましくは０．１ｍｇ／Ｌ以上である。
また、コストを抑える観点から、抗体含有液における抗体の濃度は、好ましくは１０ｍｇ／Ｌ以下、より好ましくは１ｍｇ／Ｌ以下である。
抗体は、例えば、共有結合、疎水結合、水素結合、静電結合、その他の分子間力（ファン・デル・ワールス力）による結合等によって、改質基材上に固定される。上述のように、抗体は、配向性を制御する観点から、改質基材と親和性の高いペプチド（アフィニティタグ）を介して改質基材の表面に固定されることがより好ましい。
抗体含有液は、改質基材の親疎水性を制御して抗体と改質基材との親和性を高める観点から、抗体の他、界面活性剤、エタノール、緩衝液から選ばれる一種又は二種以上を含んでいてもよい。界面活性剤としては、抗体機能を低下させない観点から、非イオン界面活性剤が好ましく、アルキルグリコシドやポリオキシエチレンアルキルエーテル等が挙げられる。
抗体含有液における抗体の濃度は、改質基材上に十分な量の抗体を固定させる観点から、好ましくは０．０１ｍｇ／Ｌ以上、より好ましくは０．１ｍｇ／Ｌ以上である。
また、コストを抑える観点から、抗体含有液における抗体の濃度は、好ましくは１０ｍｇ／Ｌ以下、より好ましくは１ｍｇ／Ｌ以下である。
【0138】
抗体含有液中に改質基材を浸漬させる場合の浸漬時間は、改質基材上に十分な量の抗体を固定させる観点から、好ましくは１５分間以上、より好ましくは１時間以上、更に好ましくは３時間以上、より一層好ましくは６時間以上である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは３６時間以下、より好ましくは２４時間以下、更に好ましくは１８時間以下、より一層好ましくは１２時間以下である。
本工程における抗体含有液の温度は、改質基材に対して抗体を効率よく固定させるとともに、抗体及び改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
また、生産性を高める観点から、当該浸漬時間は、好ましくは３６時間以下、より好ましくは２４時間以下、更に好ましくは１８時間以下、より一層好ましくは１２時間以下である。
本工程における抗体含有液の温度は、改質基材に対して抗体を効率よく固定させるとともに、抗体及び改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
【0139】
なお、抗体含有液と反応させた後の基材を、必要に応じて、脱水及び／又は乾燥してもよい。乾燥方法としては、例えば、風乾、加熱による乾燥、自然乾燥等から選ばれる１又は２以上の公知の乾燥方法を用いることができる。このうち、抗体及び改質基材の変性を防止しつつ、生産性を高める観点から、風乾が好ましく用いられる。乾燥温度は、抗体及び改質基材の変性を防止する観点から、好ましくは４℃以上４０℃以下である。
【0140】
抗体は、市販品であってもよく、あるいは公知の方法により作製されてもよい。例えば、ＶＨＨ抗体の作製方法としては、ペプチド固相合成法とネイティブ・ケミカル・リゲーション（Ｎａｔｉｖｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｌｉｇａｔｉｏｎ；ＮＣＬ）法を組み合わせて作製することや遺伝子工学的に作製することができるが、本発明の抗体をコードする核酸を適当なベクターに組み込んで、これを宿主細胞に導入し、組換え抗体として産生させる方法が好ましい。
【0141】
組換え抗体として産生において使用される宿主細胞としては、例えば、大腸菌、枯草菌、カビ、動物細胞、植物細胞、バキュロウイルス／昆虫細胞又は酵母細胞等が挙げられる。抗体を発現させるための発現ベクターは、各種宿主細胞に適したベクターを用いることができる。発現ベクターとしては、例えば、ｐＢＲ３２２、ｐＢＲ３２５、ｐＵＣ１２、ｐＵＣ１３等の大腸菌由来のベクター；ｐＵＢ１１０、ｐＴＰ５、ｐＣ１９４等の枯草菌由来のベクター；ｐＨＹ３００ＰＬＫ等の大腸菌と枯草菌で共用することができるシャトルベクター；ｐＳＨ１９、ｐＳＨ１５等の酵母由来ベクター；λファージ等のバクテリオファージ；アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、レンチウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス等のウイルス；及びこれらを改変したベクター等を用いることができる。
これらの発現ベクターは、各々のベクターに適した、複製開始点、選択マーカー及びプロモーターを有しており、必要に応じて、エンハンサー、転写集結配列（ターミネーター）、リボソーム結合部位及びポリアデニル化シグナル等を有していてもよい。
さらに、発現ベクターには、上述の改質基材と親和性の高いタグペプチド（アフィニティタグ）を発現させるための塩基配列が挿入されていてもよい。
また、発現ベクターには、発現したポリペプチドの精製を容易にするため、ＦＬＡＧタグ、Ｈｉｓタグ（例えば配列番号１３）、ＨＡタグ及びＧＳＴタグなどを融合させて発現させるための塩基配列が挿入されていてもよい。なお、上述のように、Ｈｉｓタグは、アフィニティタグとして用いられてもよい。
さらに、発現ベクターには、タグペプチドを抗体のＣ末端に結合されるためのヒンジペプチド（例えば、配列番号１４～１６）を発現させるための塩基配列が挿入されていてもよい。
これらの発現ベクターは、各々のベクターに適した、複製開始点、選択マーカー及びプロモーターを有しており、必要に応じて、エンハンサー、転写集結配列（ターミネーター）、リボソーム結合部位及びポリアデニル化シグナル等を有していてもよい。
さらに、発現ベクターには、上述の改質基材と親和性の高いタグペプチド（アフィニティタグ）を発現させるための塩基配列が挿入されていてもよい。
また、発現ベクターには、発現したポリペプチドの精製を容易にするため、ＦＬＡＧタグ、Ｈｉｓタグ（例えば配列番号１３）、ＨＡタグ及びＧＳＴタグなどを融合させて発現させるための塩基配列が挿入されていてもよい。なお、上述のように、Ｈｉｓタグは、アフィニティタグとして用いられてもよい。
さらに、発現ベクターには、タグペプチドを抗体のＣ末端に結合されるためのヒンジペプチド（例えば、配列番号１４～１６）を発現させるための塩基配列が挿入されていてもよい。
【0142】
発現させた本発明の抗体を培養菌体又は培養細胞から抽出する際には、培養後、公知の方法で菌体又は培養細胞を集め、これを適当な緩衝液に懸濁し、超音波、リゾチーム及び／又は凍結融解などによって菌体又は細胞を破壊したのち、遠心分離や濾過により、可溶性抽出液を取得する。得られた抽出液から、公知の分離・精製法を適切に組み合わせて目的の抗体を取得することができる。また抗体を細胞外へ分泌生産する宿主を用いた場合は、培養液より遠心分離や濾過により培養上清を取得する。得られた培養上清から公知の分離・精製法を適切に組み合わせて目的の抗体を取得することができる。
公知の分離、精製法としては、塩析や溶媒沈澱法などの溶解度を利用する方法、透析法、限外ろ過法、ゲルろ過法、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等の主として分子量の差を利用する方法、イオン交換クロマトグラフィーなどの電荷の差を利用する方法、アフィニティークロマトグラフィーなどの特異的親和性を利用する方法、逆相高速液体クロマトグラフィーなどの疎水性の差を利用する方法又は等電点電気泳動法などの等電点の差を利用する方法などが用いられる。
公知の分離、精製法としては、塩析や溶媒沈澱法などの溶解度を利用する方法、透析法、限外ろ過法、ゲルろ過法、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ等の主として分子量の差を利用する方法、イオン交換クロマトグラフィーなどの電荷の差を利用する方法、アフィニティークロマトグラフィーなどの特異的親和性を利用する方法、逆相高速液体クロマトグラフィーなどの疎水性の差を利用する方法又は等電点電気泳動法などの等電点の差を利用する方法などが用いられる。
【0143】
以上、本発明の実施形態について説明したが、本発明は上述の実施形態にのみ限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲内において種々変更を加え得ることは勿論である。
例えば、改質基材の形状は、図１～２に示すものに限定されず、種々の形状を採り得る。
例えば、改質基材の形状は、図１～２に示すものに限定されず、種々の形状を採り得る。
【実施例0144】
［アニオン変性セルロース（ＴＣＮＦ）の準備］
（アニオン変性セルロースの合成）
アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）を、以下のように合成した。
針葉樹の漂白クラフトパルプ繊維１００ｇを９，９０ｇの脱イオン水で十分に攪拌した後、該パルプ質量１００ｇに対し、ＴＥＭＰＯ １．２５ｇ、臭化ナトリウム１２．５ｇ、次亜塩素酸ナトリウム２８．４ｇをこの順で添加する。ｐＨスタッドを用い、０．５Ｍ水酸化ナトリウムを滴下してｐＨを１０．５に保持する。反応を１２０分間、２０℃で行った後、水酸化ナトリウムの滴下を停止し、酸化セルロースを得る。０．０１Ｍの塩酸及び脱イオン水を用いて、得られた酸化セルロースを十分に洗浄し、次いで脱水処理を行うことで、アニオン変性セルロース（ＴＣＮＦ）を得ることができる。
このようにして得られたＴＣＮＦは、カルボキシ基含有量が１．４８ｍｍｏｌ／ｇ、平均繊維径が２２μｍ、平均繊維長が７２０μｍであった。これらの各値は、上述の測定方法に基づいて測定された。
（アニオン変性セルロースの合成）
アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）を、以下のように合成した。
針葉樹の漂白クラフトパルプ繊維１００ｇを９，９０ｇの脱イオン水で十分に攪拌した後、該パルプ質量１００ｇに対し、ＴＥＭＰＯ １．２５ｇ、臭化ナトリウム１２．５ｇ、次亜塩素酸ナトリウム２８．４ｇをこの順で添加する。ｐＨスタッドを用い、０．５Ｍ水酸化ナトリウムを滴下してｐＨを１０．５に保持する。反応を１２０分間、２０℃で行った後、水酸化ナトリウムの滴下を停止し、酸化セルロースを得る。０．０１Ｍの塩酸及び脱イオン水を用いて、得られた酸化セルロースを十分に洗浄し、次いで脱水処理を行うことで、アニオン変性セルロース（ＴＣＮＦ）を得ることができる。
このようにして得られたＴＣＮＦは、カルボキシ基含有量が１．４８ｍｍｏｌ／ｇ、平均繊維径が２２μｍ、平均繊維長が７２０μｍであった。これらの各値は、上述の測定方法に基づいて測定された。
【0145】
（Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）の調製）
アニオン変性セルロース１質量部を、９９質量部の１００ｍＭの塩化ニッケル（ＩＩ）水溶液に浸漬し、室温で６時間撹拌した。その後、得られた混合物を、ホモミキサーを用いて、５０００ｒｐｍで処理した。解砕後の混合物１質量部に対して、１質量部の脱イオン水を添加し、高圧ホモジナイザーを用いて、１００ＭＰａで１回、続いて１５０ＭＰａで５回処理し、ＴＣＮＦ濃度が０．５質量％のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）を得た。
アニオン変性セルロース１質量部を、９９質量部の１００ｍＭの塩化ニッケル（ＩＩ）水溶液に浸漬し、室温で６時間撹拌した。その後、得られた混合物を、ホモミキサーを用いて、５０００ｒｐｍで処理した。解砕後の混合物１質量部に対して、１質量部の脱イオン水を添加し、高圧ホモジナイザーを用いて、１００ＭＰａで１回、続いて１５０ＭＰａで５回処理し、ＴＣＮＦ濃度が０．５質量％のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）を得た。
【0146】
（ＴＣＮＦ分散液（Ｄ）の調製）
アニオン変性セルロースを水酸化ナトリウム水溶液によって中和し、Ｎａ型の変性セルロースの混合物を得た。混合物中のＮａ型の変性セルロースの濃度が１質量％になるように脱イオン水を添加し、高圧ホモジナイザーを用いて、１５０ＭＰａで５回処理し、Ｎａ型のＴＥＭＰＯセルロースナノファイバー（ＴＣＮＦ）の濃度が１質量％のゲルを得た。得られたゲル１質量部に対して９質量部の脱イオン水で希釈して、ＴＣＮＦ分散液（Ｄ）を得た。
アニオン変性セルロースを水酸化ナトリウム水溶液によって中和し、Ｎａ型の変性セルロースの混合物を得た。混合物中のＮａ型の変性セルロースの濃度が１質量％になるように脱イオン水を添加し、高圧ホモジナイザーを用いて、１５０ＭＰａで５回処理し、Ｎａ型のＴＥＭＰＯセルロースナノファイバー（ＴＣＮＦ）の濃度が１質量％のゲルを得た。得られたゲル１質量部に対して９質量部の脱イオン水で希釈して、ＴＣＮＦ分散液（Ｄ）を得た。
【0147】
（Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）の調製）
前記ＴＣＮＦ分散液（Ｄ）に対して、分散液中の塩化ニッケル（ＩＩ）の濃度が２．２２ｍＭとなるように塩化ニッケル（ＩＩ）六水和物を添加し、室温で３時間撹拌し、ＴＣＮＦ濃度が０．１質量％のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）を得た。
前記ＴＣＮＦ分散液（Ｄ）に対して、分散液中の塩化ニッケル（ＩＩ）の濃度が２．２２ｍＭとなるように塩化ニッケル（ＩＩ）六水和物を添加し、室温で３時間撹拌し、ＴＣＮＦ濃度が０．１質量％のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）を得た。
【0148】
［両親媒性重合体の準備］
（両親媒性共重合体の合成）
両親媒性重合体として、９０ｍｏｌ％のジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート（ＤＭＥＭＡ）と、１０ｍｏｌ％のラウリルメタクリレート（ＬＭＡ）とを構成単位とする、共重合体の塩酸塩を合成した。当該共重合体の塩酸塩を、以下、「両親媒性共重合体」と称する。
両親媒性共重合体の合成方法は、次の方法に準じて行った。
温度計、撹拌機、滴下ロート、窒素導入管、及び還流冷却器を備えたガラス製反応容器に、溶媒として７１８質量部のジエチレングリコールモノメチルエーテル（ＭＤＧ）を仕込み、反応容器内を窒素置換した。その後窒素雰囲気下で反応容器内を７５℃まで昇温した。第１滴下ロートに、２１１９質量部のＤＭＥＭＡと３８１質量部のＬＭＡを混合し仕込んだ。第２滴下ロートに２，２'－Ａｚｏｂｉｓ（２，４－ｄｉｍｅｔｈｙｌｖａｌｅｒｏｎｉｔｒｉｌｅ）（Ｖ－６５）を４８８質量部のＭＤＧで溶解し仕込んだ。第１滴下ロート及び第２滴下ロートを６時間かけて反応容器に滴下し、７５℃にて滴下重合を行った。滴下終了後に７８℃に昇温し６時間熟成反応を行った。その後７８７質量部のＭＤＧを添加し、室温まで冷却した。１０２４質量部の０．１Ｍ塩酸を添加し混合後、共重合体有効分３６．５％の両親媒性共重合体を得た。
なお、原料の使用量から算出されたモノマー単位のモル比（ＤＭＥＭＡ／ＬＭＡ）は９０／１０である。
両親媒性共重合体の分子量は約１５０００、非イオン性モノマーの溶解パラメーターδは、１６．６（ＭＰａ）１／２であった。
（両親媒性共重合体の合成）
両親媒性重合体として、９０ｍｏｌ％のジメチルアミノエチル（メタ）アクリレート（ＤＭＥＭＡ）と、１０ｍｏｌ％のラウリルメタクリレート（ＬＭＡ）とを構成単位とする、共重合体の塩酸塩を合成した。当該共重合体の塩酸塩を、以下、「両親媒性共重合体」と称する。
両親媒性共重合体の合成方法は、次の方法に準じて行った。
温度計、撹拌機、滴下ロート、窒素導入管、及び還流冷却器を備えたガラス製反応容器に、溶媒として７１８質量部のジエチレングリコールモノメチルエーテル（ＭＤＧ）を仕込み、反応容器内を窒素置換した。その後窒素雰囲気下で反応容器内を７５℃まで昇温した。第１滴下ロートに、２１１９質量部のＤＭＥＭＡと３８１質量部のＬＭＡを混合し仕込んだ。第２滴下ロートに２，２'－Ａｚｏｂｉｓ（２，４－ｄｉｍｅｔｈｙｌｖａｌｅｒｏｎｉｔｒｉｌｅ）（Ｖ－６５）を４８８質量部のＭＤＧで溶解し仕込んだ。第１滴下ロート及び第２滴下ロートを６時間かけて反応容器に滴下し、７５℃にて滴下重合を行った。滴下終了後に７８℃に昇温し６時間熟成反応を行った。その後７８７質量部のＭＤＧを添加し、室温まで冷却した。１０２４質量部の０．１Ｍ塩酸を添加し混合後、共重合体有効分３６．５％の両親媒性共重合体を得た。
なお、原料の使用量から算出されたモノマー単位のモル比（ＤＭＥＭＡ／ＬＭＡ）は９０／１０である。
両親媒性共重合体の分子量は約１５０００、非イオン性モノマーの溶解パラメーターδは、１６．６（ＭＰａ）１／２であった。
【0149】
（共重合体水溶液（Ｃ）の調製）
両親媒性共重合体の有効分濃度が１質量％になるように、前記両親媒性共重合体を緩衝液（４７．３５ｍＭリン酸水素二ナトリウム＋２．６５ｍＭリン酸水素二ナトリウム）で希釈して、２５℃でのｐＨが８である水溶液を得た。この両親媒性共重合体の水溶液を、「共重合体水溶液（Ｃ）」とも称する。
両親媒性共重合体の有効分濃度が１質量％になるように、前記両親媒性共重合体を緩衝液（４７．３５ｍＭリン酸水素二ナトリウム＋２．６５ｍＭリン酸水素二ナトリウム）で希釈して、２５℃でのｐＨが８である水溶液を得た。この両親媒性共重合体の水溶液を、「共重合体水溶液（Ｃ）」とも称する。
【0150】
［基材（繊維集合体）の作製］
基材として、樹脂を主体とする繊維集合体を作製した。
図８に示す繊維製造装置１０を用いて、原料の熱可塑性樹脂として、９５質量％のポリプロピレン（ＰＰ；ＰｏｌｙＭｉｒａｅ社製、ＭＦ６５０Ｙ）と、５質量％のアシルアルキルタウリン塩（Ｎ－ステアロイル－Ｎ－メチルタウリンナトリウム（ＮＳＭＴ）；日光ケミカルズ株式会社製、ニッコールＳＭＴ）とを溶融液生成部１１内に供給し、これらを溶融液生成部１１内で加熱溶融混練した後、繊維を製造した。製造条件は以下のとおりとした。
基材として、樹脂を主体とする繊維集合体を作製した。
図８に示す繊維製造装置１０を用いて、原料の熱可塑性樹脂として、９５質量％のポリプロピレン（ＰＰ；ＰｏｌｙＭｉｒａｅ社製、ＭＦ６５０Ｙ）と、５質量％のアシルアルキルタウリン塩（Ｎ－ステアロイル－Ｎ－メチルタウリンナトリウム（ＮＳＭＴ）；日光ケミカルズ株式会社製、ニッコールＳＭＴ）とを溶融液生成部１１内に供給し、これらを溶融液生成部１１内で加熱溶融混練した後、繊維を製造した。製造条件は以下のとおりとした。
【0151】
・製造環境：２７℃、５０％ＲＨ
・溶融液生成部１１内の加熱温度：２２０℃
・溶融液Ｒの吐出量：１ｇ／ｍｉｎ
・吐出ノズル先端部１４（ステンレス製）への印加電圧：０ｋＶ（アースに接地されている。）
・帯電電極２１（８０ｍｍ×８０ｍｍ、厚さ１０ｍｍ、ステンレス製）への印加電圧：－４０ｋＶ
・吐出ノズル先端部１４と捕集部１０Ｄとの間の距離：６００ｍｍ
・流体噴射部１０Ｃから噴出される空気流の温度：３５０℃
・流体噴射部１０Ｃから噴出される空気流の流量：３２０Ｌ／ｍｉｎ
・溶融液生成部１１内の加熱温度：２２０℃
・溶融液Ｒの吐出量：１ｇ／ｍｉｎ
・吐出ノズル先端部１４（ステンレス製）への印加電圧：０ｋＶ（アースに接地されている。）
・帯電電極２１（８０ｍｍ×８０ｍｍ、厚さ１０ｍｍ、ステンレス製）への印加電圧：－４０ｋＶ
・吐出ノズル先端部１４と捕集部１０Ｄとの間の距離：６００ｍｍ
・流体噴射部１０Ｃから噴出される空気流の温度：３５０℃
・流体噴射部１０Ｃから噴出される空気流の流量：３２０Ｌ／ｍｉｎ
【0152】
捕集された繊維は、２１０ｍｍ×２９７ｍｍ（ＪＩＳ Ａ４サイズ）に回収した。回収した繊維を、ハンドプレス機を用いて常温で１０ＭＰａ、１０秒間プレスすることで、不織布シート状の繊維集合体を作製した。この繊維集合体の坪量は１０ｇ／ｍ２、厚みは５０μｍであった。
【0153】
繊維集合体の繊維のメジアン繊維径を以下のように測定した。
走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテク製Ｓ－４３００ＳＥ／Ｎ）を用いて繊維集合体を観察し、繊維の塊、繊維の交差部分といった欠陥を除いた繊維を任意に５００本選び出した。画像処理ソフト（三谷商事株式会社製ＷｉｎＲＯＯＦ２０１３）を用いて各繊維の長手方向に直交する線を引いたときの長さを繊維径として測定した。測定した５００本の繊維径の分布から、平均繊維径（メジアン繊維径）を算出した。
その結果、繊維集合体のメジアン繊維径は、０．５μｍであった。
走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテク製Ｓ－４３００ＳＥ／Ｎ）を用いて繊維集合体を観察し、繊維の塊、繊維の交差部分といった欠陥を除いた繊維を任意に５００本選び出した。画像処理ソフト（三谷商事株式会社製ＷｉｎＲＯＯＦ２０１３）を用いて各繊維の長手方向に直交する線を引いたときの長さを繊維径として測定した。測定した５００本の繊維径の分布から、平均繊維径（メジアン繊維径）を算出した。
その結果、繊維集合体のメジアン繊維径は、０．５μｍであった。
【0154】
［抗体（ＣｏＶＨＨ１）の作製］
抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体であるＶＨＨ抗体（Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１）を作製した。ＣｏＶＨＨ１は、標的として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（２０１９－ｎＣｏＶ）Ｓｐｉｋｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｓ１ Ｓｕｂｕｎｉｔ，Ｈｉｓ Ｔａｇ）（Ｈｉｓタグ付きＳ１タンパク質、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）を用い、ｃＤＮＡディスプレイを用いてスクリーニングされたものである。
抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体であるＶＨＨ抗体（Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１）を作製した。ＣｏＶＨＨ１は、標的として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（２０１９－ｎＣｏＶ）Ｓｐｉｋｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ（Ｓ１ Ｓｕｂｕｎｉｔ，Ｈｉｓ Ｔａｇ）（Ｈｉｓタグ付きＳ１タンパク質、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）を用い、ｃＤＮＡディスプレイを用いてスクリーニングされたものである。
【0155】
（遺伝子人工合成）
Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１をコードする塩基を人工合成した。合成されるＣｏＶＨＨ１のアミノ酸配列は、配列番号４のＣ末端側に配列番号１４のヒンジ配列を介したＨｉｓタグ配列（配列番号１３）が付与された配列番号１７となる。そのため、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１発現用の人工合成遺伝子は、配列番号１７をコードする塩基配列の３'末端に終止コドンが付与された配列番号１８となる。さらに、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１発現用の人工合成遺伝子をプラスミドベクターに挿入するための配列として、配列番号１８に対して、ＧＣＡＧＣＴＣＴＴＧＣＡＧＣＡ（配列番号１９）が５'末端に、ＴＣＴＡＴＴＡＡＡＣＴＡＧＴＴ（配列番号２０）が３'末端に付加されたものをユーロフィン社で人工合成し、実験に供した。
Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１をコードする塩基を人工合成した。合成されるＣｏＶＨＨ１のアミノ酸配列は、配列番号４のＣ末端側に配列番号１４のヒンジ配列を介したＨｉｓタグ配列（配列番号１３）が付与された配列番号１７となる。そのため、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１発現用の人工合成遺伝子は、配列番号１７をコードする塩基配列の３'末端に終止コドンが付与された配列番号１８となる。さらに、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１発現用の人工合成遺伝子をプラスミドベクターに挿入するための配列として、配列番号１８に対して、ＧＣＡＧＣＴＣＴＴＧＣＡＧＣＡ（配列番号１９）が５'末端に、ＴＣＴＡＴＴＡＡＡＣＴＡＧＴＴ（配列番号２０）が３'末端に付加されたものをユーロフィン社で人工合成し、実験に供した。
【0156】
（Ｈｉｓタグ付きＶＨＨ発現用プラスミドの構築）
ｐＨＹ３００ＰＬＫをベースとして作製された組換えプラスミドｐＨＹ－Ｓ２３７（特開２０１４－１５８４３０）をテンプレートとし、５'－ＧＡＴＣＣＣＣＧＧＧＡＡＴＴＣＣＴＧＴＴＡＴＡＡＡＡＡＡＡＧＧ－３'（配列番号２１）と５'－ＡＴＧＡＴＧＴＴＡＡＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＡＡＧＣＡＧ－３'（配列番号２２）のプライマーセットとＰｒｉｍｅＳＴＡＲ Ｍａｘ ＤＮＡポリメラーゼ（ＴａＫａＲａ）を用いたＰＣＲによりプラスミド配列を増幅した。１６８株のゲノムをテンプレートとし、５'－ＧＡＡＴＴＣＣＣＧＧＧＧＡＴＣＴＡＡＧＡＡＡＡＧＴＧＡＴＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧ－３'（配列番号２３）と５'－ＣＴＴＴＣＴＴＡＡＣＡＴＣＡＴＡＧＴＡＧＴＴＣＡＣＣＡＣＣＴＴＴＴＣＣＣ－３'（配列番号２４）のプライマーセットを用いたＰＣＲによりｓｐｏＶＧ遺伝子由来のプロモーターＤＮＡを増幅した。得られたプロモーターＤＮＡを、Ｉｎ－Ｆｕｓｉｏｎ ＨＤ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｔａｋａｒａ）を用いてプラスミド配列に組み込み、ｓｐｏＶＧプロモーターと連結されたＶＨＨ発現用プラスミドを構築した。５'－ＴＧＣＴＧＣＡＡＧＡＧＣＴＧＣＣＧＧＡＡＡＴＡＡＡ－３'（配列番号２５）及び５'－ＴＣＴＡＴＴＡＡＡＣＴＡＧＴＴＡＴＡＧＧＧ－３'（配列番号２６）のプライマーセットとＰｒｉｍｅＳＴＡＲ Ｍａｘ ＤＮＡポリメラーゼ（ＴａＫａＲａ）を用いたＰＣＲによりプラスミド配列を増幅した。得られたＰＣＲ断片に、上記人工合成遺伝子を含むＤＮＡをＩｎ－Ｆｕｓｉｏｎ ＨＤ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｔａｋａｒａ）を用いて組み込み、人工合成ＶＨＨ遺伝子を含むＶＨＨ発現用プラスミドを構築した。このＨｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ発現用プラスミドをＣｏＶＨＨ１－Ｈｉｓ－ｐＨＹと呼ぶ。
ｐＨＹ３００ＰＬＫをベースとして作製された組換えプラスミドｐＨＹ－Ｓ２３７（特開２０１４－１５８４３０）をテンプレートとし、５'－ＧＡＴＣＣＣＣＧＧＧＡＡＴＴＣＣＴＧＴＴＡＴＡＡＡＡＡＡＡＧＧ－３'（配列番号２１）と５'－ＡＴＧＡＴＧＴＴＡＡＧＡＡＡＧＡＡＡＡＣＡＡＡＧＣＡＧ－３'（配列番号２２）のプライマーセットとＰｒｉｍｅＳＴＡＲ Ｍａｘ ＤＮＡポリメラーゼ（ＴａＫａＲａ）を用いたＰＣＲによりプラスミド配列を増幅した。１６８株のゲノムをテンプレートとし、５'－ＧＡＡＴＴＣＣＣＧＧＧＧＡＴＣＴＡＡＧＡＡＡＡＧＴＧＡＴＴＣＴＧＧＧＡＧＡＧ－３'（配列番号２３）と５'－ＣＴＴＴＣＴＴＡＡＣＡＴＣＡＴＡＧＴＡＧＴＴＣＡＣＣＡＣＣＴＴＴＴＣＣＣ－３'（配列番号２４）のプライマーセットを用いたＰＣＲによりｓｐｏＶＧ遺伝子由来のプロモーターＤＮＡを増幅した。得られたプロモーターＤＮＡを、Ｉｎ－Ｆｕｓｉｏｎ ＨＤ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｔａｋａｒａ）を用いてプラスミド配列に組み込み、ｓｐｏＶＧプロモーターと連結されたＶＨＨ発現用プラスミドを構築した。５'－ＴＧＣＴＧＣＡＡＧＡＧＣＴＧＣＣＧＧＡＡＡＴＡＡＡ－３'（配列番号２５）及び５'－ＴＣＴＡＴＴＡＡＡＣＴＡＧＴＴＡＴＡＧＧＧ－３'（配列番号２６）のプライマーセットとＰｒｉｍｅＳＴＡＲ Ｍａｘ ＤＮＡポリメラーゼ（ＴａＫａＲａ）を用いたＰＣＲによりプラスミド配列を増幅した。得られたＰＣＲ断片に、上記人工合成遺伝子を含むＤＮＡをＩｎ－Ｆｕｓｉｏｎ ＨＤ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｋｉｔ（Ｔａｋａｒａ）を用いて組み込み、人工合成ＶＨＨ遺伝子を含むＶＨＨ発現用プラスミドを構築した。このＨｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ発現用プラスミドをＣｏＶＨＨ１－Ｈｉｓ－ｐＨＹと呼ぶ。
【0157】
（組換え枯草菌の作製）
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉＳ１４８株から、特開２００６－１７４７０７号公報の段落００４３から００４８に記載されている方法に従って、細胞外プロテアーゼ遺伝子（ｅｐｒ、ｗｐｒＡ、ｍｐｒ、ｎｐｒＢ、ｂｐｒ、ｎｐｒＥ、ｖｐｒ及びａｐｒＥ）を欠損させ、さらに特許第４３３６０８２の段落００２６から００２９に記載されている方法に従い、胞子形成に関与するｓｉｇＦ遺伝子を欠損させた。得られた細胞外プロテアーゼ多重欠損株をＤｐｒ８ΔｓｉｇＦと記載する。枯草菌株Ｄｐｒ８ΔｓｉｇＦへのプラスミド導入は以下に示すプロトプラスト法によって行った。１ｍＬのＬＢ液体培地にグリセロールストックした枯草菌を植菌し、３０℃、２１０ｒｐｍで一晩振とう培養した。翌日、新たな１ｍＬのＬＢ液体培地にこの培養液を１０μＬ植菌し、３７℃、２１０ｒｐｍで約２時間振とう培養した。この培養液を１．５ｍＬチューブに回収し、１，２０００ｒｐｍで５分間遠心し、上清を除去したペレットをＬｙｓｏｚｙｍｅ（ＳＩＧＭＡ）４ｍｇ／ｍＬを含むＳＭＭＰ５００μＬに懸濁し、３７℃で１時間インキュベートした。次いで、３，５００ｒｐｍで１０分間遠心し、上清を除去したペレットをＳＭＭＰ４００μＬに懸濁した。この懸濁液３３μＬをプラスミドと混合し、さらに４０％ＰＥＧを１００μＬ添加してボルテックスした。この液にＳＭＭＰを３５０μＬ加えて転倒混和し、３０℃、２１０ｒｐｍで１時間振とうした後、ＤＭ３寒天培地プレートに全量塗布し、３０℃で２～３日間インキュベートした。
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉＳ１４８株から、特開２００６－１７４７０７号公報の段落００４３から００４８に記載されている方法に従って、細胞外プロテアーゼ遺伝子（ｅｐｒ、ｗｐｒＡ、ｍｐｒ、ｎｐｒＢ、ｂｐｒ、ｎｐｒＥ、ｖｐｒ及びａｐｒＥ）を欠損させ、さらに特許第４３３６０８２の段落００２６から００２９に記載されている方法に従い、胞子形成に関与するｓｉｇＦ遺伝子を欠損させた。得られた細胞外プロテアーゼ多重欠損株をＤｐｒ８ΔｓｉｇＦと記載する。枯草菌株Ｄｐｒ８ΔｓｉｇＦへのプラスミド導入は以下に示すプロトプラスト法によって行った。１ｍＬのＬＢ液体培地にグリセロールストックした枯草菌を植菌し、３０℃、２１０ｒｐｍで一晩振とう培養した。翌日、新たな１ｍＬのＬＢ液体培地にこの培養液を１０μＬ植菌し、３７℃、２１０ｒｐｍで約２時間振とう培養した。この培養液を１．５ｍＬチューブに回収し、１，２０００ｒｐｍで５分間遠心し、上清を除去したペレットをＬｙｓｏｚｙｍｅ（ＳＩＧＭＡ）４ｍｇ／ｍＬを含むＳＭＭＰ５００μＬに懸濁し、３７℃で１時間インキュベートした。次いで、３，５００ｒｐｍで１０分間遠心し、上清を除去したペレットをＳＭＭＰ４００μＬに懸濁した。この懸濁液３３μＬをプラスミドと混合し、さらに４０％ＰＥＧを１００μＬ添加してボルテックスした。この液にＳＭＭＰを３５０μＬ加えて転倒混和し、３０℃、２１０ｒｐｍで１時間振とうした後、ＤＭ３寒天培地プレートに全量塗布し、３０℃で２～３日間インキュベートした。
【0158】
（ＶＨＨ産生）
作製した組換え枯草菌を１ｍＬの５０ｐｐｍテトラサイクリンを含むＬＢ培地に植菌し、３２℃で一晩往復振とうし、前培養液とした。Ｄｐｒ８ΔｓｉｇＦは、前培養液をひだ付き三角フラスコに入れた２０ｍＬの２×Ｌ－ｍａｌ培地に１％接種し、３０℃で７２時間振とう培養した。培養終了時の培養液をマイクロチューブにて４℃、１５，０００ｒｐｍ、５分間遠心し、上清を回収した。ＶＨＨについてはＮｉ－ＮＴＡアガロースビーズ（富士フィルム和光純薬）を用い、キットのプロトコルに従って精製した。溶出液にはＰＢＳ（３０ｍＭ イミダゾール）を用いた。また、ＳＤＳ－ＰＡＧＥにより目的タンパク質を検出した。
その結果、ＣｏＶＨＨ１が合成されていることが確認された。
作製した組換え枯草菌を１ｍＬの５０ｐｐｍテトラサイクリンを含むＬＢ培地に植菌し、３２℃で一晩往復振とうし、前培養液とした。Ｄｐｒ８ΔｓｉｇＦは、前培養液をひだ付き三角フラスコに入れた２０ｍＬの２×Ｌ－ｍａｌ培地に１％接種し、３０℃で７２時間振とう培養した。培養終了時の培養液をマイクロチューブにて４℃、１５，０００ｒｐｍ、５分間遠心し、上清を回収した。ＶＨＨについてはＮｉ－ＮＴＡアガロースビーズ（富士フィルム和光純薬）を用い、キットのプロトコルに従って精製した。溶出液にはＰＢＳ（３０ｍＭ イミダゾール）を用いた。また、ＳＤＳ－ＰＡＧＥにより目的タンパク質を検出した。
その結果、ＣｏＶＨＨ１が合成されていることが確認された。
【0159】
［実施例及び比較例のサンプルの作製］
繊維集合体に対して異なる処理を行い、実施例１～１２及び比較例１のサンプルを作製した。なお、比較例２のサンプルは、後述するように、いずれの処理も行っていない繊維集合体とした。
繊維集合体に対して異なる処理を行い、実施例１～１２及び比較例１のサンプルを作製した。なお、比較例２のサンプルは、後述するように、いずれの処理も行っていない繊維集合体とした。
【0160】
［実施例１］
（ＴＣＮＦ分散液による処理工程）
繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）に浸漬し、室温で６０分間撹拌した。その後、Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）から繊維集合体を取り出し、脱イオン水で濯いだ後、キムタオルで挟んで脱水し、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
（ＴＣＮＦ分散液による処理工程）
繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）に浸漬し、室温で６０分間撹拌した。その後、Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）から繊維集合体を取り出し、脱イオン水で濯いだ後、キムタオルで挟んで脱水し、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
【0161】
（抗体固定化処理工程）
４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）バッファーを溶媒とした、濃度が１．０ｍｇ／ｍＬのＨｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１溶液を調製した。
前記表面改質処理がなされた繊維集合体を１．２５ｃｍ角に切断し、２００μＬの前記Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１溶液に浸漬し、室温で６０分間静置した。その後、溶液を取り除き、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１溶液から繊維集合体を取り出し、１ｍＬイオン交換水を加えて転倒混和した。この操作を合計３回行った。溶液を取り除いた後、ピペットでシート内の余計な水分を吸い取り、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１（抗体）を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）バッファーを溶媒とした、濃度が１．０ｍｇ／ｍＬのＨｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１溶液を調製した。
前記表面改質処理がなされた繊維集合体を１．２５ｃｍ角に切断し、２００μＬの前記Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１溶液に浸漬し、室温で６０分間静置した。その後、溶液を取り除き、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１溶液から繊維集合体を取り出し、１ｍＬイオン交換水を加えて転倒混和した。この操作を合計３回行った。溶液を取り除いた後、ピペットでシート内の余計な水分を吸い取り、Ｈｉｓタグ付きＣｏＶＨＨ１（抗体）を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0162】
［実施例２］
（ＴＣＮＦ分散液による処理工程）
繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）に浸漬した以外は、実施例１に記載のＴＣＮＦ分散液による処理工程と同様の操作により、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
（ＴＣＮＦ分散液による処理工程）
繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）に浸漬した以外は、実施例１に記載のＴＣＮＦ分散液による処理工程と同様の操作により、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
【0163】
（抗体固定化処理工程）
実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作により、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作により、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0164】
［実施例３］
（共重合体水溶液（Ｃ）による処理工程）
繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍の共重合体水溶液（Ｃ）に浸漬し、室温で６０分間撹拌した。その後、前記水溶液から繊維集合体を取り出し、脱イオン水で濯いだ後、キムタオルで挟んで脱水し、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
（共重合体水溶液（Ｃ）による処理工程）
繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍の共重合体水溶液（Ｃ）に浸漬し、室温で６０分間撹拌した。その後、前記水溶液から繊維集合体を取り出し、脱イオン水で濯いだ後、キムタオルで挟んで脱水し、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
【0165】
（ＴＣＮＦ分散液による処理工程）
続いて、共重合体水溶液（Ｃ）による表面改質処理がなされた繊維集合体を用いた以外は、実施例１に記載のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）による処理工程と同様の操作を行った。
続いて、共重合体水溶液（Ｃ）による表面改質処理がなされた繊維集合体を用いた以外は、実施例１に記載のＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）による処理工程と同様の操作を行った。
【0166】
（抗体固定化処理工程）
続いて、実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
続いて、実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0167】
［実施例４］
Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）の代わりにＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）を用いた以外は実施例３と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）の代わりにＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）を用いた以外は実施例３と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0168】
［実施例５］
（共重合体水溶液（Ｃ）による処理工程）
実施例３に記載の共重合体水溶液（Ｃ）による処理工程と同様の操作を行った。
（共重合体水溶液（Ｃ）による処理工程）
実施例３に記載の共重合体水溶液（Ｃ）による処理工程と同様の操作を行った。
【0169】
（ＴＣＮＦ分散液による処理工程）
続いて、Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）の代わりにＴＣＮＦ分散液（Ｄ）を用いた以外は、実施例１に記載のＴＣＮＦ分散液による処理工程と同様の操作を行った。
続いて、Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）の代わりにＴＣＮＦ分散液（Ｄ）を用いた以外は、実施例１に記載のＴＣＮＦ分散液による処理工程と同様の操作を行った。
【0170】
（塩化ニッケル（ＩＩ）による処理工程）
前記ＴＣＮＦ分散液による処理工程によって得られた繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍の１００ｍＭの塩化ニッケル（ＩＩ）水溶液（Ｅ）に浸漬し、室温で１０分間撹拌した。その後、前記水溶液から繊維集合体を取り出し、脱イオン水で濯いだ後、キムタオルで挟んで脱水し、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
前記ＴＣＮＦ分散液による処理工程によって得られた繊維集合体を、当該繊維集合体に対して１００質量倍の１００ｍＭの塩化ニッケル（ＩＩ）水溶液（Ｅ）に浸漬し、室温で１０分間撹拌した。その後、前記水溶液から繊維集合体を取り出し、脱イオン水で濯いだ後、キムタオルで挟んで脱水し、表面改質処理がなされた繊維集合体を得た。
【0171】
（抗体固定化処理工程）
続いて、実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
続いて、実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0172】
［実施例６］
塩化ニッケル（ＩＩ）による処理工程を行わなかった以外は、実施例５と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
塩化ニッケル（ＩＩ）による処理工程を行わなかった以外は、実施例５と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0173】
［比較例１］
いずれの表面改質処理を行っていない繊維集合体に対して、実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
いずれの表面改質処理を行っていない繊維集合体に対して、実施例１に記載の抗体固定化処理工程と同様の操作を行い、抗体を固定化処理した繊維集合体のサンプルを得た。
【0174】
［実施例７］
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例１に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例１に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
【0175】
［実施例８］
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例２に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例２に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
【0176】
［実施例９］
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例３に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例３に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
【0177】
［実施例１０］
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例４に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例４に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
【0178】
［実施例１１］
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例５に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例５に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
【0179】
［実施例１２］
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例６に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
抗体固定化処理工程を行わなかったこと以外は、実施例６に記載と同様の操作を行い、繊維集合体のサンプルを得た。
【0180】
［比較例２］
表面改質処理及び抗体固定化処理工程のいずれの処理も行っていない繊維集合体のサンプルを、比較例２のサンプルとした。
表面改質処理及び抗体固定化処理工程のいずれの処理も行っていない繊維集合体のサンプルを、比較例２のサンプルとした。
【0181】
［固定化された抗体量の評価］
ブラッドフォード法を用いて、各サンプルに固定されたＣｏＶＨＨ１の抗体（以下、ＶＨＨとも称する）の量を測定した。
ＳＤＳ－ＰＡＧＥサンプルバッファーを調製し、各サンプル１枚に、５０μＬの当該バッファーを添加した。当該バッファーは、ＬＤＳ Ｓａｍｐｌｅ Ｂｕｆｆｅｒ（４Ｘ）（Ｔｈｅｒｍｏ）と、Ｓａｍｐｌｅ Ｒｅｄｕｃｉｎｇ Ａｇｅｎｔ（１０ｘ）（Ｔｈｅｒｍｏ）と、蒸留水と、を混合して調製した。これらの混合比率（体積比率）は、２．５：１：６．５とした。９０℃で５分、室温でインキュベートし、サンプルに吸着したＶＨＨを溶出させた。その後、その上清を回収した。２０ｍＬのＰｉｅｒｃｅ ６６０ｎｍ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ（ｔｈｅｒｍｏ）に１ｇのＩｏｎｉｃ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ Ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｒｅａｇｅｎｔ（ｔｈｅｒｍｏ）を溶解し、測定試薬を調製した。上清１０μＬと調製した測定試薬１５０μＬを混合し、室温で５分インキュベートした。この混合液の６６０ｎｍにおける吸光度を測定した。検量線用のＢＳＡスタンダードから上清中のＶＨＨ量を算出した。
そして、ＶＨＨを固定化処理していないサンプルのＶＨＨ量をネガティブコントロールとして、ＶＨＨを固定化処理したサンプルのＶＨＨ量を算出した。具体的には、ＶＨＨの固定化処理以外は同一の処理を行った、実施例１及び７、実施例２及び８、実施例３及び９、実施例４及び１０、実施例５及び１１、実施例６及び１２、比較例１及び２をそれぞれ比較した。実施例１の実測値から実施例７の実測値を減じた値を、実施例１のＶＨＨ量とした。実施例２の実測値から実施例８の実測値を減じた値を、実施例２のＶＨＨ量とした。実施例３の実測値から実施例９の実測値を減じた値を、実施例３のＶＨＨ量とした。実施例４の実測値から実施例１０の実測値を減じた値を、実施例４のＶＨＨ量とした。実施例５の実測値から実施例１１の実測値を減じた値を、実施例５のＶＨＨ量とした。実施例６の実測値から実施例１２の実測値を減じた値を、実施例６のＶＨＨ量とした。比較例１の実測値から比較例２の実測値を減じた値を、比較例１のＶＨＨ量とした。
ブラッドフォード法を用いて、各サンプルに固定されたＣｏＶＨＨ１の抗体（以下、ＶＨＨとも称する）の量を測定した。
ＳＤＳ－ＰＡＧＥサンプルバッファーを調製し、各サンプル１枚に、５０μＬの当該バッファーを添加した。当該バッファーは、ＬＤＳ Ｓａｍｐｌｅ Ｂｕｆｆｅｒ（４Ｘ）（Ｔｈｅｒｍｏ）と、Ｓａｍｐｌｅ Ｒｅｄｕｃｉｎｇ Ａｇｅｎｔ（１０ｘ）（Ｔｈｅｒｍｏ）と、蒸留水と、を混合して調製した。これらの混合比率（体積比率）は、２．５：１：６．５とした。９０℃で５分、室温でインキュベートし、サンプルに吸着したＶＨＨを溶出させた。その後、その上清を回収した。２０ｍＬのＰｉｅｒｃｅ ６６０ｎｍ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ Ｒｅａｇｅｎｔ（ｔｈｅｒｍｏ）に１ｇのＩｏｎｉｃ Ｄｅｔｅｒｇｅｎｔ Ｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｒｅａｇｅｎｔ（ｔｈｅｒｍｏ）を溶解し、測定試薬を調製した。上清１０μＬと調製した測定試薬１５０μＬを混合し、室温で５分インキュベートした。この混合液の６６０ｎｍにおける吸光度を測定した。検量線用のＢＳＡスタンダードから上清中のＶＨＨ量を算出した。
そして、ＶＨＨを固定化処理していないサンプルのＶＨＨ量をネガティブコントロールとして、ＶＨＨを固定化処理したサンプルのＶＨＨ量を算出した。具体的には、ＶＨＨの固定化処理以外は同一の処理を行った、実施例１及び７、実施例２及び８、実施例３及び９、実施例４及び１０、実施例５及び１１、実施例６及び１２、比較例１及び２をそれぞれ比較した。実施例１の実測値から実施例７の実測値を減じた値を、実施例１のＶＨＨ量とした。実施例２の実測値から実施例８の実測値を減じた値を、実施例２のＶＨＨ量とした。実施例３の実測値から実施例９の実測値を減じた値を、実施例３のＶＨＨ量とした。実施例４の実測値から実施例１０の実測値を減じた値を、実施例４のＶＨＨ量とした。実施例５の実測値から実施例１１の実測値を減じた値を、実施例５のＶＨＨ量とした。実施例６の実測値から実施例１２の実測値を減じた値を、実施例６のＶＨＨ量とした。比較例１の実測値から比較例２の実測値を減じた値を、比較例１のＶＨＨ量とした。
【0182】
【表2】
【0183】
表２及び図９に示すように、Ｎｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）による処理を行った実施例１、共重合体水溶液（Ｃ）による処理及びＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ａ）による処理を行った実施例３、並びに、共重合体水溶液（Ｃ）による処理及びＮｉ－ＴＣＮＦ分散液（Ｂ）による処理を行った実施例４のサンプルに、多くのＶＨＨが固定されていることがわかった。
【0184】
［ウイルスの吸着率の評価］
実施例１～１２及び比較例１～２のサンプルを用いて、以下のようにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスの吸着率を測定した。
実施例１～１２及び比較例１～２のサンプルを用いて、以下のようにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスの吸着率を測定した。
【0185】
（ウイルス含有溶液への繊維集合体の浸漬）
１．２５ｃｍ角に切断された各サンプルを１．５ｍＬチューブ（Ｐｒｏｔｅｉｎ ＬｏＢｉｎｄ ｔｕｂｅ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）に入れ、ＰＢＳで１００００倍に希釈したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２＿Ｓ ｐｓｅｕｄｏｔｙｐｅｄ ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ（Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）、Ｖｅｃｔｏｒ Ｂｕｉｌｄｅｒ）溶液を５００μＬ加え、室温でインキュベートした。その後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス溶液を加えてから１０分後及び３０分後の溶液の上清を回収した。
１．２５ｃｍ角に切断された各サンプルを１．５ｍＬチューブ（Ｐｒｏｔｅｉｎ ＬｏＢｉｎｄ ｔｕｂｅ、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）に入れ、ＰＢＳで１００００倍に希釈したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２＿Ｓ ｐｓｅｕｄｏｔｙｐｅｄ ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ（Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ）、Ｖｅｃｔｏｒ Ｂｕｉｌｄｅｒ）溶液を５００μＬ加え、室温でインキュベートした。その後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス溶液を加えてから１０分後及び３０分後の溶液の上清を回収した。
【0186】
（吸着率の測定）
各サンプルとの接触前後の溶液中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス量を定量することにより、各サンプルのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスに対する吸着率を求めた。各溶液中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス量を測定するため、Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｄｉｇｉｔａｌ ＰＣＲ（ｄｄＰＣＲ）を用いて、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス内の遺伝子コピー数の定量を行った。ｄｄＰＣＲにはＱＸ２００ ＡｕｔｏＤＧ Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｄｉｇｉｔａｌ ＰＣＲ ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いた。まず、ドロップレットを作成した。１サンプルあたり１１μＬのｄｄＰＣＲ ＥｖａＧｒｅｅｎ Ｓｕｐｅｒｍｉｘ（ｘ２）（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）、０．３μＬの１０μＭ Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ、０．３μＬの１０μＭ Ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｒｉｍｅｒ、９．３μＬのＮｕｃｌｅａｓｅ ｆｒｅｅ ｗａｔｅｒ、１．１μＬのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス溶液を混合し、ドロップレット反応液を調製した。プライマーはＬｕｃｉ１Ｆ（５'－ＣＧＡＣＡＡＧＧＡＴＡＴＧＧＧＣＴＣＡＣ－３'：配列番号２７）とＬｕｃｉ１Ｒ（５'－ＴＴＣＧＣＣＴＣＴＣＴＧＡＴＴＡＡＣＧＣ－３'：配列番号２８）を用いた。Ｂｕｆｆｅｒ Ｃｏｎｔｒｏｌは、１１μＬのｄｄＰＣＲ Ｂｕｆｆｅｒ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｋｉｔ ｆｏｒ ＥｖａＧｒｅｅｎ（ｘ２）（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）、そして１１μＬのＮｕｃｌｅａｓｅ ｆｒｅｅ ｗａｔｅｒを混合し調製した。反応液を２２μＬずつ９６ｗｅｌｌプレートに添加後、ＰＸ１ ＰＣＲ Ｐｌａｔｅ Ｓｅａｌｅｒ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて１８０℃、５秒間の設定でホイルヒートシールによりシーリングし、ＡｕｔｏＤＧ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いてドロップレットを作製した。全ドロップレットの作製が完了後、３０分以内にドロップレットプレートにホイルヒートシールでシーリングした。次のＰＣＲサイクリングは、シーリング後３０分以内に実施した。ＰＣＲは、ＰｒｏＦｌｅｘ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｌｉｆｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、９５℃で５分間の後、９５℃で３０秒間と５８℃で１分間を４０サイクル、その後４℃で５分間、９０℃で５分間、４℃でインキュベートの条件で行った。Ｒａｍｐ ｒａｔｅは２℃／秒に設定した。ＰＣＲ後、ドロップレットプレートをプレートホルダーにセットし、Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｒｅａｄｅｒ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて陽性および陰性ドロップレットをカウントした。データ解析にはＱｕａｎｔａＳｏｆｔ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いた。Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄは５，０００に設定した。
なお、図１０には、１０分後に上清を回収したサンプルの結果を「１０ｍｉｎ接触」（斜線のバー）、３０分後に上清を回収したサンプルの結果を「３０ｍｉｎ接触」（白いバー）として示している。表２には、３０分後に上清を回収したサンプルの結果を示している。
各サンプルとの接触前後の溶液中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス量を定量することにより、各サンプルのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルスに対する吸着率を求めた。各溶液中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス量を測定するため、Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｄｉｇｉｔａｌ ＰＣＲ（ｄｄＰＣＲ）を用いて、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス内の遺伝子コピー数の定量を行った。ｄｄＰＣＲにはＱＸ２００ ＡｕｔｏＤＧ Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｄｉｇｉｔａｌ ＰＣＲ ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いた。まず、ドロップレットを作成した。１サンプルあたり１１μＬのｄｄＰＣＲ ＥｖａＧｒｅｅｎ Ｓｕｐｅｒｍｉｘ（ｘ２）（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）、０．３μＬの１０μＭ Ｆｏｒｗａｒｄ ｐｒｉｍｅｒ、０．３μＬの１０μＭ Ｒｅｖｅｒｓｅ ｐｒｉｍｅｒ、９．３μＬのＮｕｃｌｅａｓｅ ｆｒｅｅ ｗａｔｅｒ、１．１μＬのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードウイルス溶液を混合し、ドロップレット反応液を調製した。プライマーはＬｕｃｉ１Ｆ（５'－ＣＧＡＣＡＡＧＧＡＴＡＴＧＧＧＣＴＣＡＣ－３'：配列番号２７）とＬｕｃｉ１Ｒ（５'－ＴＴＣＧＣＣＴＣＴＣＴＧＡＴＴＡＡＣＧＣ－３'：配列番号２８）を用いた。Ｂｕｆｆｅｒ Ｃｏｎｔｒｏｌは、１１μＬのｄｄＰＣＲ Ｂｕｆｆｅｒ Ｃｏｎｔｒｏｌ Ｋｉｔ ｆｏｒ ＥｖａＧｒｅｅｎ（ｘ２）（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）、そして１１μＬのＮｕｃｌｅａｓｅ ｆｒｅｅ ｗａｔｅｒを混合し調製した。反応液を２２μＬずつ９６ｗｅｌｌプレートに添加後、ＰＸ１ ＰＣＲ Ｐｌａｔｅ Ｓｅａｌｅｒ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて１８０℃、５秒間の設定でホイルヒートシールによりシーリングし、ＡｕｔｏＤＧ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いてドロップレットを作製した。全ドロップレットの作製が完了後、３０分以内にドロップレットプレートにホイルヒートシールでシーリングした。次のＰＣＲサイクリングは、シーリング後３０分以内に実施した。ＰＣＲは、ＰｒｏＦｌｅｘ ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｌｉｆｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いて、９５℃で５分間の後、９５℃で３０秒間と５８℃で１分間を４０サイクル、その後４℃で５分間、９０℃で５分間、４℃でインキュベートの条件で行った。Ｒａｍｐ ｒａｔｅは２℃／秒に設定した。ＰＣＲ後、ドロップレットプレートをプレートホルダーにセットし、Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｒｅａｄｅｒ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いて陽性および陰性ドロップレットをカウントした。データ解析にはＱｕａｎｔａＳｏｆｔ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を用いた。Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄは５，０００に設定した。
なお、図１０には、１０分後に上清を回収したサンプルの結果を「１０ｍｉｎ接触」（斜線のバー）、３０分後に上清を回収したサンプルの結果を「３０ｍｉｎ接触」（白いバー）として示している。表２には、３０分後に上清を回収したサンプルの結果を示している。
【0187】
（吸着率の結果）
表２及び図１０に示すように、実施例１～１２のサンプルは、繊維集合体にＴＣＮＦによる処理をしていない比較例１及び２と比較して、多くのウイルスを吸着できることがわかった。これらのうち、実施例３～６、実施例９～１２のサンプルは、特に、多くのウイルスを吸着できることがわかった。
表２及び図１０に示すように、実施例１～１２のサンプルは、繊維集合体にＴＣＮＦによる処理をしていない比較例１及び２と比較して、多くのウイルスを吸着できることがわかった。これらのうち、実施例３～６、実施例９～１２のサンプルは、特に、多くのウイルスを吸着できることがわかった。
【符号の説明】
【0188】
１…ウイルス吸着材
２…改質基材
２ａ…基材本体
３…アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）
４…金属
５…抗体
２…改質基材
２ａ…基材本体
３…アニオン性基を有するセルロース（アニオン変性セルロース）
４…金属
５…抗体
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【配列表】